DE2012167A1 - Pf 17.03.69 V.St.v.Amerika 807929 Neue Steroide und Verfahren zu ihrer Herstellung - Google Patents

Description

RECHTSANWÄLTE

DR. JUR. DIPL-CHEM. WALTER BEIt ALFRED HOEPPENER DR. JUR. DIPL-CHEM. H.-J. WOLFP DR. JUR. HANS CHR. BEIL

623 FRANKFURTAM AAAIN-HOCMST

ADEIONSTRASSE 58

Unsere Nr. 16100

_kl3. März 1970

The Upjohn Company
Kalamazoo, Mich., V.St.A.

Neue Steroide und Verfahren zu ihrer Herstellung .

Die Erfindung betrifft neue, physiologisch aktive Steroide, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie neue Zwi schenprodukte für ihre Herstellung. Sie betrifft insbeson dere die Herstellung von Steroiden der allgemeinen Formel

H₁ (OH₂J_n - Ος- OR₅

CH,

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in der R-, und R₂ gleich oder verschieden sein können und Wasserstoffatome, Alkylgruppen mit weniger als 9 Kohlenstoffatomen oder Phenylgruppen, R, und R^ Wasserstoff atome oder niedere Acylgruppen bedeuten, η 2, 3 oder 4 und χ 0, 1/2, 1, 1 1/2 oder 2 darstellt.

Mit Ausnahme des 25-Hydroxycalciferols, bei dem R, und R₂ Methylgruppen sind, η = 3 und χ = ο bedeutet und R, sowie Rc Wasserstoffatome sind, sind alle Verbin düngen gemäß obiger Formel neu. Von den neuen Verbindungen besitzen die Hydrate sowie andere strukturelle Derivate die nachstehend beschriebenen Wirksamkeiten und Verwen dungszwecke sowie die aus der nachfolgenden Beschreibung hervorgehenden, ihnen eigentümlichen Vorteile gegenüber 25-Hydroxyealciferol.

Als Acylreste werden solche von Kohlenwasserstoffcarbonsäuren mit weniger als 12 Kohlenstoffatomen, z.B. von niederen Alkancarbonsäuren wie Essigsäure, Propionsäure, Buttersäure und tert.-Pentancarbonsäure, der niederen Alkancarbonsäuren, der monocyelischen Arylcarbon säuren, wie z.B. Benzoesäure und Toluylsäure, der mono cyclischen Aryl-niedrig-alkancarbonsäuren, wie z.B. Phenylessigsäure und ß-Phenylpropionsäure, der Cycloalkan- und der Cycloalkenearbonsäuren bevorzugt. DLe Alkylreste sind Kohlenwasserstoffalkylreste mit weniger als 9 Kohlenstoffatomen, z.B. als niedere Alkylreste wie Methyl-, Äthyl-, Propyl-, Isopropyl-, Butyl - oder Octylreste und als niedere Cycloalkylreste wie Cyclopropyl-, Cyclopentyl-, Cyclohexylreste.

Die erfindungsgetnäßen Enurredukte stellen p^l -:lologisch aktive Steroide mit Vitamin-B--artiger Wir*·, jtjn

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IU M Ib/

dar, d.h. sie fördern die intestinale Wiederaufnahme von Calcium sowie die Freigabe von Calcium aus den Knochen. Bei der Behandlung von Krankheiten wie chronisches Versagen der Nieren, Hypoparathyreose, sekundäre Hyperparathyreose, Knochenerweichung, Rachitis, durch Corticoid herbeigeführte Osteoporose, Osteoporose nach der Menopause od. dgl., können die erfindungsgemäßen Endprodukte an die Stelle von Vitamin-D-Substanzen treten und diese ersetzen. Des. weiteren werden erfindungsgemäß Zusammensetzungen zur Verhütung von Osteoporose während der Behandlung mit Corticosteroiden unter Verwendung der vorliegenden Endprodukte bereitgestellt.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können ent sprechend den nachstehenden Gleichungen, ausgehend vri einer 3-Hydroxychola-5,7-diensäure (I) und ihren funktioneilen Derivaten hergestellt werden. Die Choladien säuren (I) können gegebenenfalls aus den entsprechenden Cnol-5-en-säuren (VII) durch Bromierung und Bromwasser stoffabspaltung gemäß Fieser und Fieser, "Steroids", Reinhold Publishing Corporation, New York, (1959) Seite 157-161, hergestellt werden. Die Bromierung erfolgt gewöhnlich in einem inerten Lösungsmittel (zt-B. Tetrachlorkohlenstoff, Chloroform, Methylenchlorid, Benzol, Petroläther) mittels eines Allyl-Bromlerungsmittels wie N-Broa¹.-succinimid, N-Bromacetamid, l,3-Dibrom-5,5-dimethylhydäntoin usw.. Die Bromwasserstoffabspaltung kann mit Hilfe einer organischen Base wie Collidin oder mit einem Trialkylphosphit wie Trimethylphosphit in einem inerten hochsiedenden Lösungsmittel wie Xylol vollzogen werden., Vorzugsweise erfolgen Bromierung und Bromwasserstoffabspaltung nach dem in HeIv. Chim.Acta, Bd. 41, S. 70 (I9!?ö) beschriebenen Verfahren.

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Die erfindungsgemäßen Verfahren können durch folgende Grleichungen dargestellt werden:

(CH₂J_n-OO₂R₄

OR

R3O

IV

(CH₂)_n-CO_A

,l CH₂J_n-O- OR₅

R₂

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^Rl

III

In den Verbindungen gemäß Formeln I-III ist R. ein Was s erst off atom oder eine Alkylgruppe mit weniger als 9

Kohlenstoffatomen, während x,
genannte Bedeutungen besitzen.

R₂

R, und Ec vor-

In der ersten Stufe des erfindungsgemäßen Verfahrens wird eine funktionell substituierte 3-Hydroxychola-5,7-diensäure (I) vorzugsweise in Form ihres Methylesteracetats oder Methylester-3-tetrahydropyranyläthere mit Alkylmagnesium-halogenid (R₁MgX), wobei X Chlorid, Bromid oder Jodid (z.B» Methylmagnesiumbromid, Äthylmagneaium chlorid, Propylmagnesiumjodid) bedeutet, oder mit niedrig-Alkyllithium (z.B. Methyllithium) zu einer Verbindung

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der Struktur IV umgesetzt, in der R. und Rp gleich sind. Eine Verbindung der Struktur IV wird nach bekannten Verfahren zur Umwandlung von 7-Dehydrocholesterin in Vitamin D, und von Ergosterin in Vitamin ^ unter Anwendung aktinischer Strahlung einschl. Wellenlängen von nahezu 280 Jhu, unter Bildung von 9»10-8eco-3teroid-trien der Struktur (V) bestrahlt. Vorzugsweise, und dann, wenn Verbindung V in relativ reiner Form anfallen soll, wird die Temperatur der Bestrahlungsumsetzung unter 50° gehalten. Anschließend erwärmt man das 9,10-Seeo-steroidtrien der Struktur V auf über 50°c, vorzugsweise auf 60-90 C, wodurch die Doppelbindung in V isomeriert wird und ein Gleichgewichtsgemisch aus V und VI entsteht. Das G-leichgewiehtsgemisch V und VI besteht zu mindestens 50 #, günstigenfalls zu 75 $> oder mehr aus Verbindung VI.

Die Verbindung der Struktur VI wird gereinigt und von der Verbindung V sowie von anderen Doppelbindungsisomeren durch Kristallisation ihres Hydrates und durch Chromatographie abgetrennt. Als Adsorbtionsmittel für die Chromatographie können u.a. Magnesiumsilikat, Ton erde_f Kieselsäure oder Silicagel verwendet werden. Diejenigen chromatographischen Fraktionen, die die Verbindung der Struktur VI in von Verunreinigungen relativ freier Form enthalten, werden vereinigt und aus einem wasserhaltigen Lösungsmittel umkristallisiert. Einem wesentlichen Teil der Erfindung liegt die Entdeckung zugrunde, daß sich 25-Hydroxychol«calciferol sowie andere Verbindungen der Struktur VI in Foim ihrer Hydrate kristallisieren und durch Kristallisation reinigen lassen, wohingegen das wasserfreie, durch Blunt et al. (Biochem. T_x 3317 1968) isolierte 25-Hydroxyeholecalciferol eine Reinigung mit Hilfe einer komplizierten Kieselsäure-

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Adsorptionsehtromatograpitie /"vgl. J. Lxpid Res. Bd. 7j. S. 739s 1966) J erforderlich machte und in Form eines Öles anfiel.

Ss wurde gefunden, daß Verbindungen der Struktur VI als wasserfreie Stoffe sehr schwer kristallisieren, in Form ihrer Hydrate aber rasch kristallisiert und gereinigt werden können. Das 25-Hydroxycholecalciferol (VI) kann also nicht in kristalliner Form aus wasserfreien Lösungsmitteln wie wasserfreiem Methanol, wasserfreiem Äthanol, Äther, -Methylenchlorid, wasserfreiem Aceton, Petroläther, Äthylacetat und dergl. gewonnen werden. Doch ist das 25-Hydroxycholecalciferolhydrat nach Zusetä von Wasser au mit Wasser mischbaren wie auch niehtmisehbaren Lösungsmitteln leicht erhältlich. Kristallines 25-Hydroxyeholecalciferol-Hydrat sowie andere Hydrate von Verbindungen der Struktur VI enthalten 0,5 bis 2,0 Mole Wasser; sie lassen sieh .— bei gleichen biologischen Eigenschaften wie die wasserfreien Verbindungen der Struktur VI - rascher reinigen und sind beständiger und weniger empfindlich gegen Autoxydation.

Wasserfreies 25-Hydroxycholecalciferol (Vl) sowie andere Verbindungen der Struktur VI lassen sich aus ihren Hydraten gewinnen. Eine Lösung von 25-Hydroxycholecalciferol-Hydrat und anderen Hydraten von Verbindungen der Struktur VI in einem organischen Lösungsmittel (wie z.B. Methylenchlorid, Äther, Äthylacetat, Benzol und dergl.) wird mit Hilfe eines Trockenmittels (z.B. Hatriumsulfat, Magnesiumsulfat, Calciumcarbonat, Molekular sieben) getrocknet, filtriert und bei Temperaturen unte:.. 80⁰C zu einem nielrfckristallinen Rückstand der wasser freien Verbindungen gemäß Struktur VI eingedampft. Man kann

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aber auch Hydrate von Verbindungen der Struktur VI da durch trocknen, daß man sie längere Zeit unter einem Hochvakuum auf Temperaturen unter 85 C hält, wonach nichtkristalline Rückstände der wasserfreien Verbindungen der Struktur VI anfallen. Hydrate von Verbindungen VI können auch durch verlängerte Trocknung in einem Exsikkator, der ein Trockenmittel, vorzugsweise ein nicht-saures Trockenmittel (z.B. Kaliumhydroxyd) enthält, unter Er halt der nichtkristallinen, wasserfreien Verbindungen der Struktur VI getrocknet werden.

In Ausführung des erfindungsgemäßen Verfahrens muß die Seitenkette der Verbindung VI entwickelt und das 5,7-Dien-System der Verbindung I in das umgelagerte 9,10-Secotrien-System der Struktur VI übergeführt werden, "reckmäßigerweise und in einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung geht man wie folgt vor: I ?>

IV » V —» VI. Doch ist die Reihenfolge nicht kritisch,

sie kann durchaus verändert werden. Dementsprechend können 3-Hydroxychola-5,7-diensäure (I) wie auch ihre funktionellen Derivate (I) als erstes bei Temperaturen von nicht mehr als 50⁰C in beschriebener Weise unter Bildung von 9il0-Secotrien der Struktur II bestrahlt werden. Durch Erwärmung auf über 50 C entstehen die umgelagerten 9,10-Secotriene der Struktur III. Die Umsetzung von Verbindungen der Struktur III mit Alkyl- oder Arylmagnesiumhalogenid oder Alkyllithium - wie vorstehend im Hinblick aui die Umwandlung I j> IV beschrieben - führt zu Verbinungen VI, die sich durch Chromatographie und durch Überführung in ihre Hydrate reinigen lassen. Man kann abar auch die 9fl0-Secotriene der Struktur II mit Alkyl oder Arylmagnesiumhalogenid oder Alkyllithium wie be -

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bei f tfflperaturen v©n nieht mehr als §Ö^ÖÖ unter Bildung v©n 9#I0-Seeotri©n der Struktur V behandeln, dag gieh in fcegehriebener Weise in Verbindungen der Struktur VI und deren entgpreehende Hydrate überfuhren läßt. Verbindungen der Strukturen IV - Vl, in denen R^ « Hg»! igt, erhält »an aug Verbindungen der Strukturen 1 - III dureh Reduktion mittels Lithiumaluminiumhydrid. Des weiteren werden Verbindungen der Struktur IV aus Verbin düngen der Struktur VII b dureh Broaierung und Breaiwagser* stoffabspaltung, wie hinsiehtiieh I beschrieben, herge stellt.

In obigen Verfahren führt die Entwicklung der Seiten« kette in Verbindungen der Strukturen IV - Vl (z.B. I —^ IV, υ —4 v, III —4 VI) au solohen Verbin düngen, in denen die beiden Gruppen R^ und H₂ gleioh gind und alg niedere Alkyl-, oder Phenylgruppen oder als Waggereteffateme vorliegen.

Zur Herstellung von Verbindungen der Struktur VI, in denen E₁ ■ R₂ ist, artigβen Funktionen R₁ und B₂ in getrennten Stufen und nieht in einem einzigen Verfahrene gohritt eingeführt werden. Demzufolge wird

(OHg)_n-OO₂H

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(CH₂J_n-COX

Vila

(CH₂J_n-COR₁

Ia

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_ 11 _

eine 3ß-Hydroxychol-5-en-säure (VII) und eine 3ß-Hydroxyehola-5,7-diensäure (I), die am in 3-Stellung "befindlichen Kohlenstoffatom durch niedere Alkyl- oder Aryl carbonsäure (oder ggbf. Tetrahydropyranyläther oder Trimethylsilylätiier) funktionell substituiert ist, mit Thionylchlorid, Thionylbromid, Phosphortrichlorid, Phosphortribromid, Phosphoroxyehlorid, Oxalylchlorid und dergl. (vgl. Wagner und Zook, "Synthetic Organic Chemistry", John Wiley and Sons, !Tew York, 1953» Seiten 546 - 557) unter Bildung des Säureehlorids oder Säure bromids (VII¹ und I¹) von VII bzw. I umgesetzt. An schließend wird das Säurechlorid oder Säurebromid (VII¹ und I¹ ) mit Dialkyl cadmium £ (R-^₂CdJ nach dem in J. Am. Chem. Soc. Bd.66^ S. 723 (1944) beschriebenen Verfahr , zu den entsprechenden Alkylketonen VIIa "bz-w. Ia umge setzt. Die Behandlung der Verbindungen VIIa und Ia mit Alkyl- oder Phenylmagnesiumhalogenid (E₂MgX), mit Alkyllithium (z.B. CH₅Li) oder mit Lithiumaluminiumhydrid wie in Zusammenhang mit Verbindungen I, II und III beschrieben - führt zu den entsprechenden Verbindungen VIIb bzw. IV. Durch entsprechende Wahl der aufeinanderfolgenden Alkylierungsmittel entstehen aus VIIb und IV _ü Verbindungen, in denen R-, und R_ verschiedenartig sind.

Liegt R^, als niederes Acylat (z.B. Acetat) vor, so setzt· sich bei diesen Umwandlungen die Acylatgruppe mit dem Alkyl- oder Arylmagnesiumhalogenid, Alkyllithium oder Lithiumaluminiumhydrid um, so daß nach ihrer Entfernung Verbindungen der Strukturen IV, V bzw. VI entstehen, in denen R, ein Wasserstoff atom darstellt. Liegt hingegen bei dieser Umwandlung R^ als H oder als eine Ätherfunktion, z.B. als Tetrahydropyranyl- oder Trimethylsilylrest vor, dann bleibt R^ unverändert.

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Liegt R, als Tetrahydropyranyl- oder Trimethylsilylrest vor, so verringert sich die Menge Alkyl- oder Arylmagnesiumhalogenid oder Alkyllithium, die zur Erzielung brauchbarer Überführungen von I —ϊ IV, II —* V und

III > VI erforderlich ist, um 50 % gegenüber der je -

nigen Menge, axe notwendig ist, wenn R-* eine niedere Acylgruppe ist, und um 33»3 % gegenüber derjenigen Menge, die bei R., = H nötig ist. Diese funktioneile Variante von R~ eignet sich insbesondere für die Herstellung von Verbindungen der Struktur VI, in der die Gruppe R₁ , R₀ oder

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beide mit C oder mit H markiert sind, wie z.B. dann, wenn R^ und R₂ die Bedeutung CL haben, was z.B. bei 25,26- 025-Hydroxycholecalciferol (VI) der Fall ist. Die derart hergestellten Äther der Verbindungen mit den Strukturen IV₅ V und VI werden zu den entsprechenden Verbindungen IV, V und VI, in denen R^ = H ist, solvoly -

;srt, indem :nan sie in Lösung in einem organischen Hydroxyl-Lösungsmittel (z.B. Methanol) mit einer schwa chen dänre wie Essigsäure, Ameisensäure, p-Toluolsulfonsäure behandelt, bis die Äthergruppe entfernt ist. Eventuell kann auch Wasser oder eine Lewis-Base (z.B. Dimethylformamid) zugegen sein. Obgleich obige Äther unter Verwendung einer starken Säure auch in Alkohole (IV, V und VI), in denen R-* = H ist, überführbar sind, so muß doch dafür Sorge getragen werden, daß die tertiäre Hydroxylgruppe in der Seitenkette nicht dehydratisiert -.,;d die Kerndoppelbindungen nicht umgelagert werden. Die Sol-vül^se wird daher vorzugsweise bei niedrigeren Temperaturen (z.B. nicht über 40 C) vollzogen, und sie soll beendet werden, sobald die Analyse (z.B. Dünnschicht-Chromnt^graphie) ergibt, daß die Solvolyse im wesentlichen rollständig ist.

Verbindungen I - VI, in denen R, ein Wasserstoff-

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atom darstellt, können durch Umsetzung mit überschüssigeni niedrig-Acylanhydrid oder niedrig-Acylhalogenid (z.B. Acetylanhydrid, AcetylChlorid, Propionsäure anhydrid, Octansäureanhydrid, Cyclopentyl-propionyl chlorid und dergl.) vorzugsweise in Gegenwart einer tertiären organischen Base (z.B. Pyridin, Triäthylamin) und bei einer Temperatur von 0 bis 60 C zu Verbindungen der Strukturen I bis VI, in denen R-. eine niedere Acylgruppe ist, verestert werden. Gewünsehtenfalls kann die nach bekannten Verfahren erfolgende Veresterung in einem inerten Lösungsmittel durchgeführt werden. Verbindungen der Struktur IV - VI, in denen R-, und R₁- Wasserst off atome sind, enthalten zwei Hydroxylgruppen; sind nun R₁ und R« niedere Alkyl- oder Phenylreste, so wird durch obige Veresterung lediglich R, in die Estergruppe übergeführt. Wird jedoch hierbei die Veresterungstemperatur auf 65 bis 100 C erhöht, dann werden sowohl R^ als auch Rc.in die Estergruppe übergeführt, und zwar auch dann, wenn R-, und R₂ niedere Alkyl- oder Phenylreste darstellen. Wenn eine oder mehrere der Gruppen R₁ und Rg Wasserstoffatome sind, dann werden durch obige Veresterung ebenfalls beide Gruppen R~ und R^ in die Estergruppe übergeführt. Wird aber anstelle eines Überschusses etwa ein Äquivalent Acylanhydrid oder Acylhalogenid eingesetzt, so entstehen Verbindungen der Struktur IV-VI, in denen eine der Gruppen R, und Rc als Wasserstoffatom und eine als Acylgruppe, d.h. in Form des Monoesters, vorliegt. Diese Produkte lassen sich durch Chromatographie über Florisil (Magnesiumsilikat) oder Kieselgel trennen .und reinigen. Die hierbei anfallenden Stoffe verteilen sich gewöhnlieh recht gleichmäßig zwischen dem 3-Monoester und dem 25-Monoester.

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U I Z. I U /"

Verbindungen der Strukturen l - YI, in denen R^ eine niedere Acylgruppe bedeutet, werden nach bekannten Verfahren zu Verbindungen der Struktur I-VI, wobei _f R, ein Wasserstoffatom bedeutet, hydrolysiert. Verbin düngen der Strukturen I-VI sind etwas säureempfind lieh und können sich zersetzen, wenn übermäßig Säure verwendet oder bei zu hohen Temperaturen gearbeitet wird. Daher verfährt man vorzugsweise unter Anwendung der bekannten Bedingungen für basische Hydrolyse. Demgemäß werden Verbindungen der Strukturen I-VI, in denen IU eine niedere Acylgruppe bedeutet, durch Behandlung mit einer starken Base in einem organischen Hydroxyllösungsmittel in Verbindungen der Struktur I-VI übergeführt, in denen R, ein Wasserstoffatom bedeutet. Geeignete Basen sind z.B. Natriummethoxid, Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid, Bariumhydroxid, Natriumcarbonat, Kaliumbicarbonat und dergl..

Beispiele geeigneter Lösungsmittel sind Methanol, Äthanol, Isopropanol, wässriges Tetrahydrofuran, wässriger tert.-Butylilkohol od. dgl.. Für die Umwandlung von Verbindungen der Strukturen I-III, in denen R* eine niedere Acyl- und R. eine niedere Alkylgruppe bedeuten, in Verbindungen der^Struktur I-III, wobei R, = H ist, verwendet man als Base vorzugsweise das Natriumsalz des Alkohols R4OH und als Lösungsmittel den Alkohol R^OH, um eine Modifizierung der Seitenkette zu verhindern. Sind in den Verbindungen der Strukturen IV-VI sowohl R* als auch Rc niedere Acylgruppen und R₁ sowie R₂ niedere Alkyl- oder Phenylgruppen, dann kann das Ausmaß der Hydrolyee durch DUnnschloht-Ghromatographie verfolgt und jene unterbrochen werden, sobald R* in H übergeführt ist, wobei R5 als niedere Acylgruppt verbleibt. Zu diesem Zweck

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werden als Basen Natrium- oder Kaliumbicarbonat und Natrium- oder Kaliumcarbonat bevorzugt.

Die letrahydropyranyläther und Irimethylsilyläther der Verbindungen I - III werden aus den entsprechenden Verbindungen I - III, in denen IU Wasserstoff darstellt, so hergestellt, daß man bekannte Verätherungs umsetzungen unter Verwendung von Dihydropyran und eines sauren Katalysators bei milden Bedingungen durchführt und diese abbricht, sobald die Verätherung vollständig ist. Unter Verwendung obiger Stoffe entstehen dabei die Tetrahydropyranyläther, während bei Einsatz von Tri methylsilylchlorid und einem Amin oder Hexamethyldis? ".«,aan die Trimethylsilyläther anfallen.

Die Überführung von Säuren der Struktur I-III (R. » Hi in Ester der Struktur I - III (R*= niedere Alkylgruppe) erfolgt nach bekannten Verfahren, insbesondere durch Umsetzung der Säure mit einem Diazoalkan oder mit einem Alkohol in Gegenwart eines Veresterungsmittels, wobei dis Ester in vorstehend beschriebener Weise aus dem Reaktionsgemisch gewonnen und durch chromatographische Verfahren abgetrennt -werden können.

Die erfindungsgemäßen Produkte, d.h. Verbindungen, der Struktur VI und ihre Hydrate stellen nützliche Vitamin- und Ernährungsfaktoren für den Menschen und für alle Arten in tierärztlicher Sicht dar und können bei Vitamjn- und Ernährungsbehandlungen von Vögeln, Säugetieren und des Menschen anstelle von und in Verbindung mit Vitamin Dp₃ D-, und D. verwendet werden. Vögel können mit Vitamin D₂ und D^ nicht wirksam behandelt werden. Verbindungen VI und ihre Hydrate zeichnen sich daher bei Vögeln durch eine

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viel größere Wirksamkeit als die Vitamine D* und D, aus. Die Wirksamkeit der Verbindungen VI und ihre kristallinen Hydrate wird nach dem Linientest-Verfahren (U.S. Pharmacopeia, 1955» XV, 14. revidierte Ausgabe, Eaton, Pa., Mack, Seite 889) ermittelt und in Internationalen Einheiten (I.U.) ausgedrückt. Verbindungen VI und ihre Hydrate ersetzen Vitamine D₀ , D-, und D. bei Vögeln, Säugetieren und beim Menschen auf der Basis vergleich barer internationaler Einheiten in den Formen üblicher Einheitsdosierung wie Kompretten, dragierte Tabletten, harte oder weiche elastische ßelatinekapseln, in Pro pylenglycollösung, Öllösung, wässriger Suspension, in mit Stärkungsmitteln versehenen Nahrungsmitteln und dergl.. Des weiteren können unter Verwendung von Verbin düngen VI und ihrer Hydrate Vormischung en für stärkende Nahrungsmittel für Vögel, Säugetiere und für den Menschen hergestellt werden. Eine zweckmäßige Verabreichung ist z.B. der orale, bukkale und parenterale Weg (intramuskulär, subkutan und intravenös).

Die Entdeckung der Hydratformen der Dihydroxy-Verbindungen der Struktur VI sowie die Auffindung von Verfahren zu ihrer Herstellung stellen einen nützlichen Erfindungsaspekt dar. Wie in den nachstehenden Beispielen dargetan wird, sondern sich diese kristallinen Formen rasch von Reaktionsgemischen und von Lösungen ab. Man hat somit die Möglichkeit, derartige Verbindungen VI zu reinigen und sauber von Gemischen abzutrennen, die sehr verschiedene organische oder anorganische Verunreini gungen enthalten. Die genannten Stoffe sind in allen wesentlichen Hauptzügen in gleicher Weise wirksam wie die wasserfreien Verbindungen, z.B. wasserfreies 25-Hydroxycholecalciferol, und können als vollständiger Ersat«

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dafür verwendet werden.

Als weiteren Vorteil ermöglichen sie damit eine Umgehung langwieriger, kostspieliger und auch sonst nachteiliger Verfahren zur Abtrennung und Reinigung der Produkte in wasserfreier Form. Ferner bilden sie eine Zwischenproduktform von Dihydroxy-Verbindungen VI₁ aus denen die entsprechenden wasserfreien Verbindungen VI wie beschrieben, gewonnen werden können.

Verbindungen VI sowie ihre Hydrate eignen sich insbesondere für die Behandlung von Krankheiten, die sich durch niedrige 25-Hydroxycholecalciferolspiegel im Serum auszeichnen, und zwar insbesondere in den Fällen, in denen diese niedrigen Spiegel durch Unfähigkeit oder ge störte Fähigkeit, das Vitamin D, in seinen biologisch wirksamen Metabolit, nämlich 25-Hydroxycholecalciferol (VI) zu überführen, bedingt sind. Krankheiten dieser Art sind u.a. Vitamin-D-resistente Rachitis mit Phosphat-,jajflnut, des Bluts, chronische Nierenerkrankung, durch Gorticoid ausgelöste Verminderung der Calciumabsorption, durch Corticoid ausgelöste Osteoporose, altersbedingte Verringerung der Calciumabsorption, Hyperparathyreose, Alkoholismus und dergl..

Verbindungen und Hydrate der Struktur VI eignen sich auch für Patienten, die unterschiedlich und oft übermäßig auf Vitamin D, ansprechen und manchmal sogar eine Kalkspiegelerhöhung im Blut aufweisen, dort wo die endogene Produktion an 25-Hydroxycholecalciferol unter schiedlich oder übermäßig verläuft. Bei solshen Patienten gewähren die Verbindungen der Struktur VI und ihre Hydrate wiederholbares und vorhersagbares Ansprechen.

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Verbindungen und Hydrate der Struktur VI eignen sieh insbesondere zur Verhütung und Umkehrung einer durch Corticosteroid ausgelösten Herabsetzung der Calcium absorption im Darm. Tiere wie auch Menschen, die längere Zeit mit Corticosteroiden in pharmakologischen Dosen behandelt wurden, zeigen gewöhnlich ein negatives Kalk gleichgewicht und bekommen Osteoporose. Werden gleich zeitig mit den Corticosteroiden Verbindungen VI und deren Hydrate verordnet, und zwar entweder durch getrennte

" Verabreichung jedes Mittels in einheitsdosierter Form oder durch Verabreichung einer pharmazeutischen Zusammensetzung mit beiden Mitteln in einer einzigen Einheitendosierungsform, dann werden die unerwünschte Schwächung der Calciumabsorption und die nachteiligen Folgeerscheinungen einer übermäßigen Nebenschilddrüsen-Hormonproduktion herabgesetzt oder verhütet. Eine lang andauernde Verabreichung von Corticosteroiden ist von besonderen Wert für Patienten, die an Arthritis und anderen Entzündungskrankheiten leiden, und diese Erkrankungen werden gewöhnlich bei Alterspatienten angetroffen, die einem weiteren Verlust an bereits gefährdeter Calciumabsorption am

\ wenigsten zu widerstehen vermögen. In diesem Zustand können der durch Corticoid gestörte Kalkhaushalt und die durch Corticoid ausgelöste Osteoporose durch Verbindungen VI oder ihre Hydrate spezifisch gemildert werden.

Bei einem Verfahren aar Verhütung von corticosteroidbedingten Änderungen der Calciumabsorption können folgende Dosierungen aufgestellt werdens Ein Patient wird mit Vitamin D unter Anwendung einer Dosierung behandelt, die einem normalen Calciumtransport im Darm entspricht. Zu vorgeschriebener Zeit werden 25-Hydrnxychalecalclfr*al-

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spiegel im Blutserum ermittelt, (z.B. nach, den Verfahren gemäß Avioli, ".J. Clin. Inv." Bd. 46, S. 983, (1968) und J.Clin. Endocrinol". Bd. 28, S. 1341 (1968). Anschließend wird ein Gorticosteroid in einer Dosierung gegeben, die zur Bewirkung des angestrebten Corticosteroideffektes erforderlich ist. Man "verabreicht dann Verbin dung VI oder ihr Hydrat und ermittelt gleichzeitig er neut deren Serumspiegel. Die Dosis der Verbindung VI oder deren Hydrat, die wirksame Serumspiegel, die den vor der Corticosteroidtherapie aufgestellten Spiegeln vergleichbar sind, ergeben würde, läßt sich dann errechnen. Corticosteroid und Verbindung VI oder deren Hydrat werden danach in den auf diese Weise aufgestellten Dosierungen entweder als getrennte Größen oder als geeignetes, vergleichbares, festdosiertes Stoffgemisch derselben verabreicht. Anstatt die geeignete Dosis für Verbindung VI oder deren Hydrat durch Messung der Konzentrationen an 25-Hydroxy~ cholecalciferol (VI) im Blutserum auf die oben beschriebene Weise festzustellen, kann man die Dosierung auch durch bekannte Calciumgleichgewiehts- oder Strontium Untersuchungen oder durch Messung der Serumkonzentrationen an Nebenschilddrüsenhormon nach derzeit bekannten immunologischen Methoden ermitteln.

Auch Zusammensetzungen aus Corticosteroiden und Verbindung VI oder deren Hydrat, insbesondere 25-Hydroxycholecaleiferol oder dessen Hydrat, können angewandt werden. Geeignete Corticosteroide sind u.a.: Hydrocortison,* Cortison, Prednisolon, Prednison, Methylprednisolon, Fluorprednisolon und deren 9 α-Fluor-Derivate, 9 a-Fluor-16a-methylprednisolon, 9A-I¹IuOr-16ß-methylprednisol on, 9oc-Pluor-l 6a-hy droxypredni sol on, 6a-Methyl-9a-f luor-lö ahydroxyprednisolon, 6a,9«-Difluor-l6a-hydroxyprednisolon

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sowie deren entsprechende Aeetonide, bekannte 21-Acetate und 21-Acylate obiger Corticosteroide, 9<*-Fluor-16ßmethylprednisolon-17-calerat und dergl..Geeignete Arzneimengen umfassen das 1/2-2-Fache derjenigen Dosen, die normalerweise systemisch bei Mensch und Tier angewendet werden und die einer Prednisolon-Dosierung von 2,5 - 100 mg/ Tag oral beim Menschen im allgemeinen als gleichwertig erachtet werden. Verbindung VI oder ihr Hydrat kann zwischen 200 und 20.000 I.U. dosiert werden, wobei die höheren Dosen gewöhnlich für die Korrektion eines festgestellten gestörten Kalziumhaushaltes und die niedrigeren Dosen zur Verhütung eines solchen angewendet werden.

Verbindungen VI oder deren Hydrate lösen bei einer Molkonzentration von 10~ bis 10" die Freigabe von Calcium aus Knochen aus, die nach bekannten Verfahren in Organkultur (in vitro) gehalten werden. Die auf diese Weise bewirkte Freisetzung von Knochenkalk in das Medium der Organkultur kann durch Messung der Konzentrations zunähme an löslichem Calcium quantitativ bestimmt werden. Potentielle Verbindungen, die eine derart herbeigeführte CaI ciumf reisetzung verhindern, sind für Forschung und klinische Zwecke von Interesse, da sie die Möglichkeit einer Osteolyse-Verhütung böten. Somit eignen sich Verbin düngen VI oder deren Hydrate für eine von Verbindungen auf anti-osteolytische Wirksamkeit.

Die folgenden Beispiele dienen der Erläuterung der Erfindung. Hierbei sind Temperaturen durchweg in Grad Celsius und die durch magnetische Kernresonanz ermittelten Daten, zu deren Bestimmung ein 60-Megahertz-Gerät und Tetramethylsilari als innerer Standard verwendet wurde, in ö -Einheiten angegeben. Die in Klammern gesetzten

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Zahlen verweisen auf beispielhafte Arten, die von den allgemeinen Formeln I bis VII erfaßt werden.

Beispiel 1;
3ß-Hydroxychol-5~en-säure-3-acetat (VIl).

Eine Lösung von 95«8 g 3ß-Hydroxychol-5-en-säure (VII) in 600 ecm Pyridin wird im Bisbad gekühlt. Unter Rühren werden langsam 100 ecm Essigsäureanhydrid züge setzt, wobei man die Temperatur auf 10°C oder darunter hält. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und mit 25 ecm Wasser verdünnt. Nach etwa 1 Stunde gießt man das Gemisch in 750 ecm konzentrierte, mit gestoßenem Eis auf 2500 ecm verdünnte Salzsäure. Das Rohprodukt filtriert man, wäscht es gut und trocknet es. Man erhält 104,3 g Rohacetat, wovon man 90 g in 450" ecm warmer Essigsäure plus 100 ecm Methylenchlorid löst und filtriert. Man läßt die Lösung langsam auf Raumtemperatur abkühlen, so daß große Kristalle entstehen. Das Produkt wird filtriert, auf dem Saugfilter getrocknet und mit Wasser gewaschen; man erhält 49 g 3ß-Hydroxychol-5-ensäure-3-acetat (VII) als kristallinen Peststoff mit einem Schmelzpunkt von 178-186⁰C.

In gleicher Weise erhält man bei Verwendung von Propionsäureanhydrid, Isobuttersäureanhydrid, Capronaäureanhydrid, Benzoesäureanhydrid, Cyclohexylessigsäureanhydrid und dergl. anstelle von Eesigeäureanhydrid die folgenden Produktes 3ß-Hydroxyohol-5-en-säure-3-pro pionat, 3ß-Hydroxyehol-5~en-säure-3-isobutyrat, 3Q-Hydroxychol-5-en-saure-3-capronat, 3ß-Hydroxychol-5-en-> säure-3-benzoat bzw. .3ß-Hydroxyohol-5-en-eäure-3-cyclo-

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hexylacetat und dergl..
Beispiel 2:

3ß-Hydroxychol-5-en-säurechlorid-3-acetat (VII').

60 g in 1,13 1 Benzol und 2,3 ecm pyridin auf ge schlemmtes 3ß-Hydroxychol-5-en-säure-3-acetat (VII) werden 1/2 Stunde lang im Eisbad gekühlt. Während dieser Zeit werden 60 ecm Thionylchlorid tropfenweise zugegeben. Nach 2 1/2 Stunden wird die Lösung nahezu zur Trockne eingeengt und nach der Zugabe von Benzol wiederum konzentriert. Zur vollständigen Entfernung von Thionylchlorid und Salzsäure wird diese Behandlung mehrmals wiederholt, wobei man als Rückstand 3ß-Hydroxychol-5-en-säurechlorid-3-acetat (VII¹) erhält.

In gleicher Weise wird unter Verwendung von 3Ö-Hydroxychol-5-en-säure-3-propionat (VII), 3ß-Hydroxy chol-5-en-säure-3-isobutyrat (VII), 3Ö-Hydroxychol-5-ensäure-capronat (VIl), 3ß-Hydroxychol-5-en-säure-3-benzoat (VII), 3ß-Hydroxychol-5-en-säure-3-eyclohexylacetat (VII), 3ß-Hydroxy-25-homochol-5-en-säure-3-acetat (VII) und dergl. anstatt 3ß-Hydroxychol-5-en-säure-3-acetat (VII) dem entsprechend 3ß-Hydroxyehol-5-en-säurechlorid-3-propionat (VII¹), 3ß-Hydroxychol-5-en-säurechlorid-3-isobutyrat (VII«), 3ß-Hydroxychol-5-en-aäurechlorid-3-capronat (VII'), 3ß-H,ydroxychol-5-en-säureehlorid-3-ben2ioat (VII¹), 3ß-Hydroxychol-5-en-säurechlorid-3-cycloheiylacetat (VII' ) bzw. 3ß-Hyrdroxy-25~homoohol-5-en~säurechlorid-3-acetat (VII¹) und dergl. hergestellt.

Beispiel 3t

(VII).

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400 ecm einer 22,5 #-igen wässrigen Kaliumhydroxidlösung werden nach Kühlung im Eisbad 600 ecm Äther und anschließend in kleinen Portionen unter Aufwirbelung 50 g N-Nitro-N-nitroso-N'-methylguanidin zugesetzt. Man trennt die Ätherphase ab und wäscht die alkalische Phase mit 300 ecm Äther. Die kombinierten Ätherschichten, die Diazomethan enthalten, werden über Kaliumhydroxid getrocknet. Man führt das Verfahren dreimal durch und vereinigt die Diazomethanlösungen.

Das als Rückstand gemäß Beispiel 2 gewonnene 3ß-Hydroxychol-5-en-säureehlorid-3-aeetat (VII¹) wird in 600 ecm Benzol gelöst, durch Glaswolle filtriert und tropfenweise unter Rühren der eiskalten Lösung aus Diazomethan und Äther zugesetzt. Nach beendeter Zugabe läßt man die Lösung 30 Minuten stehen, dann engt man sie mit einem Rotationsverdampfer zu einem Bück stand ein. Dieser Bückstand (78 g), der das erwartete Diazoketon (V^2100 cm" ) enthält, wird in 700 ecm Methylenchlorid und 935 ecm Methanol gelöst und bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem Verfahren von Newman und Beal, J.Am. Chem. Soe. 72, 5163 (1950) wird eine Lösung von 5 g Silberbenzoat in 50 ecm Triäthylamin in Teilmengen von etwa 0,5 ecm so oft zugegeben, daß die.Entwicklung von Gas aufrechterhalten wird. Wenn gemäß der Dünnschichtanalyse die Umsetzung vollzogen ist (nach Zugabe etwa der Hälfte der Silberbenzoatlösung), setzt man Wasser zu und extrahiert das Produkt mit Methylenchlorid. Man wäscht den Extrakt mit verdünnter Salzsäure, Wasser, Natriumbicarbonatlösung und wiederum mit Wasser, trocknet ihn über Natriumsulfat, filtriert ihn und engt ihn zu einem Feststoff ein, der den Rohester VII enth*Ib. Der Rohester wird auf einer Säule mit 3 kg Plorisil chroma-

0 0 9 8 U 0 / 2 1 0 8

tographisch getrennt. Die Säule wurde mit Hexankohlenwasserstoffen (Skellysolve B) und mit 10 $> Äthylacetat/ Hexankohlenwasserstoffen stufenweise eluiert, wozu etwa 65 1 Lösungsmittel gebraucht werden. Fraktionen, die reines Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII) /7= 3ß-Hydroxy-25-homochol-5-ensäure-methylester-3-acetat_7" enthalten, werden vereinigt und aus Methylen chlorid/Methanol umkristallisiert. Die Ausbeute beträgt 44 g, der Schmelzpunkt liegt bei 110-112,5°C; /~a_7_D-45° (CHCl₃).

Analyse: Für C₂₉H^O₄:

berechnet: C 96 75,63; H <f> 9,97; gefunden: CJt 75,45; H Jt 9,83.

Bei Verwendung von 3ß-Hydroxychol-5-en-säure chlorid-3-propionat (VII'), 3fl-Hydroxychol-5-en~eäurechlorid-3-isobutyrat (VII¹), 3ß-Hydroxychol-5-en-säurechlorid-3-capronat (VII¹)» 3ß-Hydroxychol-5-en-aäurechlorid-3-benzoat (VII¹)» 3ß-Hydroxychol-5-en-säurechlorid-3-cyclohexylacetat (VII¹)» 3ß-Hydroxy-25-homo chol-5-en-säurechlorid-3-acetat (VII') und dergl. an stelle von 3ß-Hydroxychol-5-en-säurechlorid-3-acetat (VII¹) lassen sich in gleicher Weise Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-propionat (VII), Methyl-3ß-llydroxy-25-homochol«5-enat-3-isot> utyrat (VII), Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-capronat (VII), Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-benzoat (VII), Methyl-3ß-hydroxy-25-homocnol-5~enat-3-cyclohexylacetat, Methyl-3ß-hydroxy-25,26-bis-homochol-5-enat-3-acetat (VII) und dergl.herstellen.

Wenn man bei gleicher Verfahrensweise anstatt Methanol

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Äthanol, Isopropanol, Propanol, n-Butanol, Iaooctanol, Cyclohexanol und dergl. verwendet, erhält man Äthyl-3ßhydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII), Isopropyl-3ßhydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII), Propyl-3ßhydroxy-25-homochol-5-enat-3-butyrat (VII), n-Butyl-3ßhydroxy-25-homochol-5-enat-3-capronat (VII), Cyclohexyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VIl), Äthyl-3ßhydroxy-25,26-bishomochol-5-enat-3-acetat (VII) und der

Beispiel 4:

Methyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5,7-dienat-3-acetat

Eine Lösung von 2,22 g 3ß-Hydroxy-25-homochol-5-en-3-acetat (VIl) in 20 ecm Petroläther und 15 ecm Benzol wird unter Rückfluß erhitzt und mit 0,82 g 1,3-Dibrom-5,5-dimethylhydantoin vereinigt. Man hält die Lösung 1/2 Stunde unter Rückfluß, kühlt sie und filtriert den Niederschlag aus 5»5-Dimethylhydantoin. Durch Konzentrieren des Filtrate unter vermindertem Druck erhält man eine 7-Brom-Verbindung in Rohform als schweres Öl. Das Öl wird in 8 ecm Xylol (über Molekularsieb getrocknet) gelöst und tropfenweise einer unter Rückfluß gehaltenen Lösung von 2 ecm Trimethylphosphit in 10 ecm Xylol züge setzt. Man erhitzt die Lösung 1 Stunde lang unter Stickstoff und erhält durch Entfernen des Lösungsmittels einen Rückstand, den man über 200 g Florisil öhromatographisch trennt und mit 5 1 Hexankohlenwasserstoffen (Skellysolve B) und mit 5 1 eines Gemisches aus 10 "fo Äthylacetat und Hexankohlenwasserstoffen (Skellysolve B) stufenweise eluiert. Man erhält Fraktionen von 400 ecm, die durch Dünnschi cht Chromatographie* auf mit Silbernitrat getränk-

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ten Kieselgelplatten untersucht werden. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und aus Methylenchlorid/Methanol umkristallisiert. Die Ausbeute beträgt 260 mg Methyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5i7-dienat-3-acetat (I), Schmelzpunkt: 130-134°C. A ίίϊ* 271 ( f = 10,450), 282 (^= 11,000), 293 m^t ( £ = 6,250); I.R. 1735 (G=O), 1650, 1600 cm"¹ (G=C), MR (CDCl₅), £ 0,62 (0-18-H₅), 0,96 (0-19-H₅), 0,98 (d, 0-21-H₅), 2,08 (COGH₅), 3,67 (OCH₅), 5,52 (q, J=6 Hz, C-6 und 0-7-H₂).

Analyse: Für G₂₈H₄₂O₄ (432,54)

berechnet: C# 75,97; H# 9,56; gefunden: C# 75,73; H 96 9,47.

Verwendet man anstelle von Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII) Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-propionat (VII), Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-isobutyrat (VII), Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-hexanoat (VII), Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat~3-benzoat (VII), Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-cyc],ohexylacetat (VII), Methyl-3ßhydroxy-25,26-bishomochol-5-enat-3-acetat (VII), Methyl-3ß-hydroxychol-5-enat-3-acstat (VII), Äthyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII), Isopropyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII), Propyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-butyrat (VII), n-Butyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-benzoat (VII), Isooctyl--3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-hexanoat (VII), Cyclohexyl-3ßhydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII), Äthyl-?ßhydroxy-25,26-bishomochol-5-enat-^ac^tat (VII) und dergl., erhält man in gleicher Weis* Föth.yl-3ß^l ,',"·. y-25-

00 S840/21Oi

homochola-5,7-dienat-3-propionat (I), Methyl-3ß-hydroxy-25-hqmochola-5»7-dienat-3-isobutyrat (I), Methyl-3ßhydroxy-25-homocIiola-5i7-dienat-3-hexanoat (I), Methyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5 ₁ 7-di enat-3-benzoat (I), Methyl-3ß-hydroxy-25-lioiiiochola-5»7-dienat-3-cyc3.ohexylacetat (I), Methyl-3ß-hydroxy-25126-bishomochola-5,7-dienat-3-acetat (I), Äthyl-3ß-hydroxy-25-liomocliola-5,7-dienat-3-aeetät (I), Isöpropyl-3ß-hydroxy-25-liomo chola-5»7-dienat-3-acetat (I), Propyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5,7-dienat-3-butyrat (I), n-Butyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5t.7-dienat-3-i3enssoat (I), Isooctyl-3ßhydroxy-25-honiochola-5»7-dienat-3-hexanoat (I), Cyclohexyl-3ß-hydroxy-25-lianiochola-5,7-dienat-3~acetat (I) Äthyl-3ß-hydroxy-25i26-l)iBhomochola-5,7-dienat~3-acetat

(I) und dergl..

Beispiel 5:

Me-fchyl-3ß-hydroxy-25-liomoohola-5,7-dienat-3-acetat

In einem mit Rührwerk, Stickstoffzuleitung und Euckflußkondeneator versehenen Rundkolben mit einem Volumen von 500 ecm «erden 75 ecm Benzol xur Trocknung des Systems unter Rückfluß auf ein Volumen von 67 ecm eingeengt. Man kühlt das Benzol gerade nur unter Rückfluß temperatur ab und gibt nacheinander 10 g Methyl-3ßhydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII), 67,5 ecm Petroläther (über Molekularsieb getrocknet), 50 mg Benzoylperoxid und 3»59 g l,3-Dibrom-5,5-dimethylhydantoin zu. Die Lösung -wird etwa 12 Minuten gerührt und unter Rückfluß gehalten, bis der Stärkejodid-Test negativ ausfällt. Dann setzt man nochmals 0,36 g Dibromhydantoin zu,

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hält die Lösung 5 Minuten unter Rückflui3 und kühlt sie bis unter Raumtemperatur ab. Ein Niederschlag von Di methylhydantoin wird abfiltriert und das FiItrat unter vermindertem Druck eingeengt und zu einem teilweise kristallinen Rückstand getrocknet, der in 36 ecm Xylol (über Molekularsieb getrocknet) aufgenommen und im Laufe von 10 Minuten tropfenweise einer unter Rückfluß gehaltenen Lösung aus 45 ecm Xylol und 9 ecm Trimethylphosphit zugegeben wird. Man hält die Lösung 1 1/2 Stunden unter Rückfluß und engt sie in einem Rotationsverdampfer zu einem Rückstand ein, den man etwa 2 Stunden lang unter Hochvakuum trocknet. Durch Zerreiben mit 50 ecm kaltem Methanol werden aus dem Rückstand Kristalle gebildet, die nach dem Filtrieren und Waschen mit Methanol 4,0 g Rohprodukt I mit einer Reinheit von etwa 90 % ergeben.

Eine durch mehrmalige Wiederholung des oben beschriebenen Verfahrens hergestellte Menge von 15 g des Rohproduktes I wird zur Chromatographie über eine Säule aus 750 g mit Silbernitrat getränktem Kieselsäuregel geführt, das aus 1 kg Kieselsäuregel und 1 kg Silbernitrat in 2 1 Wasser mit einer Temperatur von 90 C hergestellt und 24 Stunden bei einer Temperatur von 100°C getrocknet wurde. Die Säule wird mit Hexankohlenwasserstoffen (Skellysolve B) und mit 30 # Äthylacetat in Hexankohlenwasserstoffen unter Auffangen von 400 ecm Fraktionen stufenweise eluiert. Produkthaitige Fraktionen werden ver einigt und aus Methylenchlorid/Methanol umkristallisiert. Man erhält 6,1 g Methyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5,7-

dienat-3-acetat (I) vom Schmelzpunkt 133-137°C; Af

max ·

Ä m LL ( t = 12,000).

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- 29 Beispiel 6;

Cholesta-5,7-dien-3ß,25-diol (IV).

Eine Lösung aus 2,0 g Methyl-3ß-hydroxy-25-h.omochola-5,7-dienat-3-acetat (I) und 100 ecm trockenem Äther wird.mit einer Suspension von 20 ecm 3 m ätherischem Methylmagnesiumbromid versetzt und über Nacht gerührt. Man gibt Ammoniumchloridlösung zu, trennt den Äther, ab lind verdampft ihn unter einem Kp-Strom und erhält einen kristallinen Rückstand. Der Rückstand wird in einem Filter aufgefangen, gut mit Wasser gewaschen, getrocknet und aus Methylenchlorid/Methanol umkristallisiert. Man erhält Cholesta-5,7-dien-3ß,25-diol. (IV) als Hydrat in einer Ausbeute von 1,15 g· Schmelzpunkt 185 ¹⁸⁷°» Λ max* ²⁷¹ ( £ - 9'⁸⁵OO' 281 (£= 10,450), 293 ημ ( (- = 6,100), I.R. 3310, 3360 (OH),. 1600, 1650 cm"¹ (C=C); WIR (CDCl₅); ξ 0,66 (C-18, H₅), 0,98 (C-19, H₃), 1,0 (d, 0-21, H₅), 1,21 (C-25, 0-26,H₆), 5,50 (q, J = 6 Hz C-6 und O-7-Hg).

Analyse; Mir C₃₇H₄₄O₂»1/2 H₂O

berechnet: 0 <fo 79,16; Kfi 11,07; gefunden : C <f» 79,08; H $> 11,09.

Gegebenenfalls wird aus dem Hydrat durch Trocknung die wasserfreie Verbindung IV hergestellt, indem es entweder unter Hochvakuum auf 60-80⁰C erwärmt oder in einem Lösungsmittel *ie Methylenchlorid gelöst,, mit Natriumsulfat getrocknet und durch Verdampfen unter wassarfraien Bedingungen vom Lösungsmittel befreit wird.

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Wenn anstelle von Methyl-3ß-iiydrox_ry-25-homochola-5,7-dienat-3-acetat (I) Methyl-3ß-hydroxy-25-honiochola-5,7-dienat-3-propionat (I)» Methyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5»7-dienat-3-isobutyrat (I), Methyl-3ß-hydroxy-. 25-homochola-5j7-dienat-3-hexanoat (I)» Methyl-3ßhydroxy-25-homochola-5,7-dienat-3-benzoat (l), Methyl-3ßhydroxy-25-homochola-5,7-dienat-3-cyclohexylacetat (I), Äthyl-3ß-hydroxy-25--komochola-5*7-dienat-3-acetat (I), Isopropyl-3ß-liydroxy-25-homochola-5»7-dienat-3-acetat (I), Propyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5,7-dienat-3-butyrat (I), n-Butyl-3ß-hydroxy-25-homoohola-5»7-dienat-3-benzoat (I), IsooGtyl-3ß-hydroxy-25-houiochola-5,7-dienat-3-hexanoat (I), Gyclohexyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5»7-dienat-3-acetat (I) und dergl. verwendet wird, erhält man in gleicher Weise Gholesta-5,7-dien-3ß,25-diol (IV).

Verwendet man anstelle von Methyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5,7-dienat-3-acetat (I) die Verbindungen Methyl-

3ß-hydroxy-25»26-bishomochola-^l?,7-dienat-3-acetat (I), Äthyl-3ß-hydroxy-2^l3,26-bishomochola-5,7-dienat-3-acetat (I) bzw. Methyl-3ß-hydroxyGhola-¹?,7-dienat-3-acetat (I), so erhält man in gleicher Weise 24-Hoinocholesta-5»7-dien-. 3ß,25-diol (IV, η = 4), 24-Homocholesta-^,7-dien-3ß,25-

diol (IV, η s 4) bzw. ' 24~Norcholesta-^l>,7-dien-3ß,25-diol (IV, η = 2).

Beispiel 7;

9»10-Secocholesta-5(10),b-cis,8-trien-3ß»2^t>-diol (V) (25-Hydroxyprecholecaloiferol).

Eine Lösung von 125 mg Choleot^-^t>,7~dien-3ij_l?^t)-diol (IV) in 125 ecm Benzol und 10 com abr? Ιυΐ=:^ Äthanol vixd in

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einen mit einer wassergekühlt en Quarztauchlampe und einer S ti ck st off zuführung versehenen Photoreaktor gebracht. Durch das auf etwa 16⁰C gekühlte Reaktionsgemisch wird Np geblasen. Eine im Zentrum der Tauchlampe und in einem Abstand von 2,5 cm von der Innenfläche des Reaktions gemisches angeordnete Lichtquelle Hanovia 8A36, 100 W, wird 15 Minuten lang eingeschaltet (diese Dauer gilt einschließlich der 5-6 Minuten, die verstreichen, ehe die Lampe ihre volle Helligkeit erreicht). Diese Lampe ist eine charakteristische, für die Bestrahlungsphase bei der bekannten Vitamin .D-Synthese geeignete Quelle für aktinische Energie und ist durch jede andere verfügbare Lampe dieser Art ersetzbar. Die hier verwendete Lampe ist ein^· Quecksilberdaiapf-Hochdruckquarzlampe 100 W, die insgesamt annähernd 11,5 W abgestrahlte, über einen Bereich von 220-1400 m*t gestreute Energie erzeugt. Ein rascher Wasserstrom ist erforderlich,' um die Wasseraustrittstemperatur unter 20 C zu halten. Man engt das Reaktionsgemisch in einem Rotationsverdampfer unterhalb Raumtemperatur zur Trockne ein. Der Rückstand in halbfester Form wird mit 5 ecm eines zu. 35 # aus Äthylacetat und zu 65 $ aus Hexankohlenwasserstoffen (Skellysolve B) bestehenden Gemisches verrieben und filtriert. Nochmals 5 ecm des gleichen Lösungsmittels werden zum Waschen verwendet. Der Feststoff enthält nicht umgesetztes Ausgangsmaterial, die Flüssigkeit das Produkt. Man gießt letztere auf eine 40 g schwere, mit einem Gemisch aus 35 # Äthylacetat und Hexan kohlenwasserstoffen (Skellysolve B) naß gepackte Säule aus für die Dünnsehichtchromatographie geeignetem Florisil einer lichten Maschenweite von 0,074 - 0,104 mm. Die Produkte werden mit dem gleichen Lösungsmittelgemisch eluiert und in Fraktionen von 10 ecm aufgefangen. Die gemäß Prü-

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201216?

fung auf einer Dünnschichtchromatographie-Platte produkthaltigen Fraktionen werden vereinigt und unterhalt Raumtemperatur zur Trockne eingedampft. Es fällt ein öliger Rückstand an, dem einige Tropfen absoluter Äther zugesetzt werden, die man unter Vakuum wieder entfernt. Es entsteht 25-Hydroxyprecholecalciferol (V) als flocki-

■\ Alk ger Schaum in einer Ausbeute von 60 mg. Λ _max* 256 m/*.

(6= 8,300), m.s. m/e 400 (M⁺), 385, 382, 380, 376, 154, 136, 118; MR (ODGl₅), S 0,71 (0-18-CH₅), 0,97 (d, C-21-H₃), 1,20 (C-25 und C-26-H₆),. 1,63 (C-I9-H3), 3,90 (m, C-3-H), 5,54 (C-9-H), 5,54, 5,78, 5,89 und 6,10 (q, G-6 und G-7-H₂); bei der GasChromatographie (OV-I7-Säule, 1,83 m ( 6 ft), Temp. 230⁰C, Einspritzöffnung: 240⁰C erhält man 2 Peaks mit für die "Pyro"- und'*Isopyro"-Umbildungsprodukte charakteristischen Retentions zeiten von 49 und 58 Minuten.

Beispiel 8;

25-Hydroxycholecalciferolhydrat (VI-Hydrat).

Eine Lösung von etwa 300 mg des nach Beispiel 7 hergestellten 25-Hydroxyprecholecalciferols (V) in 5 ecm Chloroform wird 3 1/2 Stunden in einem verschlossenen Kolben unter Np auf einer Temperatur von 70-75 C gehalten. Man verdampft das Lösungsmittel und führt den Rückstand zwecks Chromatographie über eine 60 g wiegende Säule aus für DUnnschichtchromatographie geeignetem, mit einem Gemisch aus 35 i» Äthylacetat und Hexankohlenwasserstoffen (Skellysolve B) naß gepacktem Plorisil von 0,074-0,104 mm lichter Maschenweite. Man eluiert die. Säule mit dem gleichen Lösungsmittelgemisch und fängt Fraktionen von 10 com auf. Die beim Zerreiben mit wässrigem Methanol

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kristallisierenden Fraktionen werden vereinigt und zweimal aus wässrigem Methanol umkristallisiert. Die Ausbeute beträgt 120 mg 25-Hydroxycholecalciferolhydrat (VI-Hydrat) mit einem Schmelzpunkt von 81-83 C (Sinterung: 75°C), UV-Maximum 264 m^ (a, 41,69). Massenspectrum: in Übereinstimmung mit den von Blunt und Mitarbeitern (Biochem. Bd. 7j_ S. 3317, 1968) berichteten Ergebnissen. HlVlR (CDGl₃), S 0,55 (C-18-H^), 0,96 (d, 0-21-H₃), 1,0 (C-25 und C-26, H₆), 3,93 (m, C-3-H), 4,83 und 5,07 (C-19-H₂), 6,09 (d, J=Il, C6 oder 7-H), 6,23 (d, J = 11, C6 oder 7-H); bei der GasChromatographie (OV-17-Säule, 1,83 m, Temp. 23O⁰C, Einspritzöffnung: 240⁰C) erhält man 2 Peaks mit für die "Pyro"- und "Isopyro"-Umbildung charakteristischen Retentionszeiten von 49 und 58 Minuten.

Analyse: Für C₂-H^Q₂-H₂O

berechnet: C i» 77,46; H °/o 11,08; H₂O #. 4,32; gefunden: C# 76,73; H# 11,13; H₂O % 4,95.

Beispiel 9:

Methyl-3ß-hydroxy-9,10-seco-25-homochola-5(lO),6-cis,8-trienat-3-acetat (II).

0,25 g in 125 ecm Benzol gelöstes Methyl-3ß-hydroxy-25-homochola-5,7-dienat-3-acetat (I) werden gemäß Beispiel 7 bestrahlt. Der nach Verdampfen des Lösungsmittels verbleibende Rückstand aus zwei solchen Bestrahlungen wird vereinigt, in mit 8 ^ Äthylacetat gemischten Hexankohlenwasserstoffen (Skellysolve B) gelöst und zur Chromatographie über eine 60 g schwere Säule aus Dunnschichtchromato-

graph!e-Florisil einer Teilchengröße von 0,074 - 0,104 mm lichte Maschenweite unter Verwendung von mit 8 ^ Äthylacetat gemischten Hexankohlenwasserstoffen geführt. Man vereinigt die laut DünnschichtChromatographie produkt-¹ haltigen Fraktionen und erhält nach dem Verdampfen Methyl-3ß-hydroxy-9,10-seco-25-homochola-5(l0),6-cis,8-trienat-3-acetat (II) in Form eines Öles. A- max. 258 m^( fc= 11,800); IR 1740 (C=O), 1435, 1375, 1360 (C-H), 1245, 1165, 1030 cm"¹ (C-O); MR (CDCl₃), S 0,66 (s, C-18-H^), 0,95 (d, (3-21-H₃), 1,61 (s, 0-19-H₃), 1,98 (s, COCH₃), 3,62 (s, OCH₃), 4,93 (m, C-3-H), 5,50 (s, C-9-H), 5,7 (d = etwa 11), 5,9 (d, J = etwa 11).

Beispiel 10:

Methyl-3ß-hydroxy-9,lO-seco-25-homochola-5-cis, 7,10(19)-trienat-3-acetat (III).

Eine Lösung von 0,22 g Methyl-3ß-hydroxy-9,10-seco-25-homochola-5(20),5-cis,8-trienat-3-acetat (II) in 5 ecm Chloroform wird im verschlossenen Rohr 3 1/2 Stunden auf 7O-75°C gehalten. Der nach dem Verdampfen verbleibende Rückstand wird in mit 8 #.Äthylacetat gemischten Hexan " kohlenwasserstoffen gemischt und zur Chromatographie durch

eine 60 g schwere Säule aus Dünnschichtchromatographie-Florisil von 0,074 - 0,104 mm lichter Maschenweite unter Verwendung von mit 8 # Äthylacetat gemischten Hexankohlenwasserstoffen geführt. Von den aufgefangenen Fraktionen mit einem Volumen von 25 ecm werden diejenigen, die laut Ergebnis der DünnschichtChromatographie auf mit Silber nitrat getränkten und mit einem %\x I*> JL aus Äthylacetat und zu 85 # aus Hexankohl enwae a β rstoiff an bestehenden Gemisch entwickelten Kieselsäuregel--Platten das Produkt ent-

halten, vereinigt. MTach dem Verdampfen erhält man 90 mg Methyl-3ß-hydroxy-9,10-seco-25-homochola-5-cis-7,10(19)-trienat-3-acetat (ill) in Form eines Öles. Daten: λ ^t' 264 ILt (6= 14,450), IR 1740 (C = 0), 1645, .1630 (C=C), 910, 890 caT^ ( =CH₂); KMR (CHCl₅), S 0,52 (s, C-18-H₅), 0,93 (d, 0-21-H₅), 2,00 (s, CH₅CO) 3,58 (s," OCH₅), 4,71 und 4,96 (d, = CH₂), 4,85 (m, C-3-H), 6,0 (d* J = 11, C-6 oder C-7, H), 6,2 (d, J = 11, C-6 oder C-6, H).

Beispiel 11:
25-Hydroxycholecalciferolhydrat (VI-Hydrat).

Etwa 20 mg in 2 ecm 3 ^ ätherischem Methylmagnesiumbromid gelöstes Methyl-3ß-hydroxy-9(lO)-seco-25-homochola-5-cis-7,10(19)-trienat-3-acetat werden über Nacht auf Raumtemperatur gehalten. Ammoniumchloridlösung wird zugegeben und die Ätherschicht wird abgetrennt und mit einem Ätherextrakt der wässrigen Schicht vereinigt. Man trocknet die vereinigte Ätherlösung und dampft sie zu einem Öl ein, das man in mit 35 f° Äthylaeetat gemischten Hexankohlenwasserstoffen löst und gemäß Beispiel 8 durch für Dünnschicht Chromatographie ,geeignetes Floiisil leitet. Die beim Verreiben mit wässrigem Methanol kristallisierenden Fraktionen werden vereinigt und aus wässrigem Methanol umkristallisiert. Man erhält 4 mg 25-Hydroxycholecalciferolhydrat (VI-Hydrat), das mit dem Produkt aus Bei spiel 8 identisch ist.

Verwendet man bei gleicher Verfahrensweise anstelle von Methylmagnesiumbromid Octylmagnesiumbromid, Butylmagnesiumbromid, Isopropylmagnesiumjodid, Cyclopentyl-

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magnesiumbromid, Piienylmagnesiuinbromid und dergl., erhält man 26,27-Bisnor-25»25»dioctyl-3ß-nydroxycholesta-5-eis,7,10(19)-trien-3ß,25-diol-hydrat (VI-Hydrat); 26,27-Bisnor-25,25-dibutyl-3ß~hydroxycholesta-5-cis,7,10(l9)-trien-3ß,25-diol-hydrat (VI-Hydrat); 26,27-Bisnor-25,25-diisopropyl-3ß-iiydroxy-cholesta-5-cis,7,10(19)-trien-3ß, 25-diol-hydrat (VI-Hydrat); 26,27-Bisnor-25,25-dicyclopentyl-3ß-hydroxycholesta-5-cis,7,10(l9)-trien-3ß,25-diolhydrat (VI-Hydrat) bzw. 26,27-Bisnor-25,25-diphenyl-3ßhydroxycholesta-5-cis,7,10(19)-trien-3ß»25-diol-hydrat (VI-Hydrat) und dergl..

Beispiel 12:
25-Hydroxycholeealciferol (VI).

Eine Lösung von 20 mg des nach Beispiel 8 herge stellten 25-Hydroxy-cholecalciferolhydrats (VI-Hydrats) in 20 ecm Methylenchlorid wird mit 200 mg wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Das Piltrat dampft man zu im wesentlichen wasserfreiem 25-Hydroxycholecalciferol (VI) in Form eines amorphen Öles ein.

Beispiel 13:

25-Hydroxycholecalciferol (VI).

Eine Lösung von 116 mg des in Beispiel 8 hergestellten 25-Hydroxycholecalciferolhydrats (VI-Hydrats) in 15 ecm Benzol wird 3 Minuten lang bei Atmosphärendruck unter Rückfluß gehalten und dann unter vermindertem Druck zu im wesentlichen wasserfreiem 25-Hydroxycholecalciferol (VI)

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- 37 -in der Form amorphen Öles eingeengt.

Beispiel 14:
25-Hydroxycholecalciferol (VI).

Man erhitzt einen Rundkolben mit 80 mg kristallinem 25-Hydroxycholecalciferolhydrat (VI-Hydrat) unter Hochvakuum (0,1 - 2 mm Hg) 3 Stunden lang auf 8O⁰C und erhält im wesentlichen wasserfreies 25-Hydroxycholecal ciferol (VI) als amorphes Öl. Der Gewichtsverlust beträgt 4,02 $> (berechnet 4,31 ^).

Analyse: Für C^H^Or,

berechnet: C $> 80,94; H# 11,07; gefunden: C# 80,15; H# 10,92.

Beispiel 15:

25-Hydroxycholecalciferolhydrat (VI-Hydrat).

Man löst 25-Hydroxycholecalciferol (VI) , hergestellt nach Beispiel 12-14, in warmem Methylenchlorid, so daß sich eine Konzentration von 10 rag/ccm ergibt. Man läßt das Lösungsmittel langsam verdampfen und versucht, durch Kratzen aus der konzentrierten Lösung Kristalle herzustellen. Bei allen Konzentrationen jedoch ist eine Kristallbildung nicht zu erreichen, und man gewinnt Produkt VI nur in öliger Form. Nach Zugabe eines Tropfen Wassers zu einer Lösung des Produktes VI in Methylenchlorid erhält man Kristalle von 25-Hydroxycholecal -

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ciferolhydrat (VI-Hydrat) mit einem Schmelzpunkt von 81-83⁰G.

Ebenso sind auch aus einer Lösung von 25-Hydroxy cholecalciferol (Vl) in Benzol keine Kristalle zu ge winnen, schöne Kristalle von 25-Hydroxycholecalciferol-'hydrat (VI-Hydrat) jedoch entstehen durch Zugabe eines Tropfen Wassers zu einer konzentrierten Lösung von 25-Hydroxy chole calciferol (VI) in Benzol. Auch bei Verwendung von Äther anstelle von Benzol erhält man kristallines 25-Hydroxycholecalciferolhydrat (VI-Hydrat).

Ebenso kristallisiert 25-Hydroxycholecalciferol (Vl) nicht aus wasserfreiem Methanol, wasserfreiem Äthanol oder wasserfreiem Aceton aus. Versetzt man diese konzentrierten Lösungen mit einem l'ropfen Wasser, so bilden sich Kristalle aus 25-Hydroxycholecalciferol-hydrat (VI-Hydrat).

Beispiel 16;

25-Hydroxycholecalciferol-3-acetat (VI).

Man löst 100 mg 25-Hydroxycholecalciferol in 0,5 ecm Pyridin und 0,2 ecm Essigsäureanhydrid und läßt die Lösung 16 Stunden bei etwa "25 G stehen. Die Lösung wird mit Wasser verdünnt und mit Methylenchlorid extrahiert. Die Methylenchloridschicht wird mit verdünnter Salzsäure, verdünntem Natriuinbicarbonat und Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter verringertem Druck zu einem Rückstand eingeengt, der gemäß Beispiel 8 chromatographiert wird. Diejenigen Fraktionen, die eine DUnnschicht-Ghromatographie als produkthaltig ausweist, werden vereinigt und zu einem Rückstand aus 25-Hydroxy-

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cholecalciferol-3-acetat (Vl) eingeengt.

Wird obiges Verfahren unter Verwendung von Acetylchlorid anstelle von Essigsäureanhydrid durchgeführt und führt man dabei die Veresterung in einem inerten Lösungsmittel, nämlich in 5 ecm Methylenchlorid, durch, so fällt als Produkt 25-Hydroxycholecalciferol-3-acetat (VI) an.

Ersetzt man das als Veresterungsmittel eingesetzte Essigsäureanhydrid oder Acetylchlorid durch Propion säureanhydrid, Isobuttersäureanhydrid, Capronsäure anhydrid, Cyclopentylpropionsäurechlorid, Capr&nsäurechlorid, Gyclohexancarbonsäureehlorid, Benzoylchlorid oder dergl., so erhält man in gleicher Weise 25-Hydroxycholecalcif erol-3-propionat (VI), 25-Hydroxycholecal eiferol-3-isobutyrat (Vl), 25-Hydroxycholecalciferol-3-capronat (VI), 25-Hydroxycholecalciferol-3-cyclopentylpropionat (VI), 25-Hydroxycholecalciferol-3-caprinat (VI), 25-Hydroxycholeealeiferol-3-cyclohexancarboxylat (VI), 25-Hydroxycholecalciferol-3-benzoat (VI) und dergl..

Desgleichen erhält man bei Verwendung von 25-Hydroxycholecalcif erol-hydrat (VI-Hydrat) anstelle von 25-Hydroxycholecal cif erol (VI) das entsprechende" 3-Acylät des 25-Hydroxycholecalciferols (Vl).

Beispiel 17:
Chole8ta-5,7-dien-3ß,25-diol-3-acetat (IV).

Wird in das Verfahren des Beispiels 16 Cholesta-5,7-dien-3ß,25-diol (IV), 24-Homocholesta-5,7-dien-3ß, 25-diol (IV) oder 24-Norcholesta-5,7-dien-3ß,25-diol (IV)

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oaer 24-iioretiülesta-5»7-dien- 3ß , 25-diol (IV) anstelle von 23-Hvarox/cnolecalciferol i/li eingesetzt, darm fallen Cciulesta- -,/~dien~5ß_f25-^·1·'.·1- >-acfc'tat (IV). 24-iioino cuioleetii -3 i ;-ί"..Ϊ8α-3ΰ j 2ij-o._....:.- -5 -icetat (IV) bzw. 24-l\'orcholesta~5,V-<lien-3li>25-ciiDi."3-fi-cetat (IV) an.

Desgi "-.I ciien erhält Bjar. nach Ersatz des Essigsäureanhydrieis dur ca Propionsäureanhydriα, Isobuttei'ssur earj.f.i",^rdrj.a, -.. ipronEaureanhyciaa., renzoesaureanhydrid, Cycloi:-.ftA.;/j.'?!.>:-i.<s'du.reanhydr:'.:. eier der/;:!, die Produkte ™ Gholes ta-5/;-dien-3j3,25-dioI~5-pror;ionat (IY), Cholesta-

5,7-dien--3;.;. a^-üiol-3-isobu.tyrat (IV ) , Gholesta-5,7-uien-3-3, 23 -iioi-J- oapronat (ΙΌ , Oholes ta-^ri>, 7-dien-3i3» ^¹)-aiol-5-oeni:';-jf (IV; , Cholest-!.--ⁱ;._s7-dien""ii3,2^!?-diol-3-cyclohexylaeetat (IV; una der^l.

Soens^ 1'älj.t bei Vbi-we^aarig von 24-Iiomocholestab , 7-üxen-3ώ , 23 -d.:.ol (IV) oae c 'j-i -No.rcnol es? ta- 3 ,7-dien- ^,23-"UgI (17) anstelle von Ciiolesta-3 , 7-dieii-3ß ,25-aiol (IVj als Produkt das 24-honiocnolesta-5,7-dien-3ß ,25-ciiol-3-acet':it (IV) bzw. 24~JMorctiolesta-3,7~üien-3i3,25-diol-3-aoetat O-V) ar.

Beispiel 16:

3i.i,25-diacf;tat (IV).

Eine Lösung von 500 nu; 0nolesta-5,7-dien-3J3,25-diol (IV) in 5 com Pyridin und 3 com Essigsäureanhydrid wird unter einer Stickstoffatmosphäre drei Stunden auf 100 gehalten, woraufhin sich gemäß einer Dünnschicht -Chroma tographie die Acet;yIierung al» praktisch vollständig er-

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weist. Die Lösung wird gekühlt_a mit Wasser verdünnt, extraniert und zu einem Hackstand eingeengt, wobei nach Beispiel 15 verfahren wird. Der Bückstand wird gemäß Beispiel 8 chromatographiert. Diejenigen Fraktionen^ die im wesentlichen aus reinem 0*ιο1β8ΪΒ-5,7-αίΘη-3βϊ25-~άϊο1-diacetat bestehen, werden vereinigt und zu einem Mick stand eingedampft, der aus Cholesta-5,7-dien-3ßs-25-dioldiacetat besteht.

Wird Essigsäureanhydrid durch Propionsäureanhydrid, Isobuttersäureanhydrid, Capronsäureanhydrid, Benzoe säureanhydriu, Cyclohexylessigsäureanhydrid oder dergl. substituiert, so erhält man in gleicher Weise Cholesta-5,7-dien-3ß,25-diol-dipropionat (IV), Cholesta-5,7-dien-3ß,25-diol-diisobutyrat (IV), Gholesta-5_f7-dien-~3ß_s25-dicapronat (IV)₃ Cholesta-5,7-dien-3ß»25-diol-drbenzoat (IVj, Cholesta-5s7-dien-3^»2^l?-iüol-dicyelohexylacetat (IVj und dgl..

Ebenso gewinnt man bei Verwendung von 24-Homo cholesta-5,7-dien-3ßj25-diol (IV) oder 24-Worcholesta-5,7-aien-3ß,25-diol (IV) anstelle von Cholesta-5*7-dien-3ß,2>-diol (IV) als Produkt 24-Homocholesta-5,7-dien-3ß,25-diol-diaeetat (IV) bzw. 24-Morcholesta-5,7-dien-3ß,25-diol-diacetat (IV).

Beispiel 19;

Gholesta-5,7-dien-3ß,25"diol~25--acetat

Eine Lösung von 50 mg Cholesta-5»7-dien-3ß»25-diQldiacetat in 1 ecm Methanol, enthaltend 0,2 cem trjasser 20 mg Natriumbicarbonat, wird unter einer Stickstoffatmosphäre 16 Stunden lang bei etwa 25 C abgestellt,-Man

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ji;·:.; ■.;■; ■; looting :n±z 10 ecm Wasser und extrahiert sie mit ε\,};γ^· · η..Λ1 .·.·■;■;■ ./.1. DIs MethyienciiloridIÖ3ung wira gewä er\:^, g'-itroak.net und zu einem Rückstand -aus Gholesta ,7-c ^r-3ü, ,:5-diol--25-acetat ein^ecajapft. Du roh Chroma- ■>:■ ?!--■ i ■_.'. asfi-ätt Beispiel 4 kann ßötigenfalls eine Reini-

Χ', gleicher Weise führt die Verwendung von Cholesta^t;,7-aie.u-3.2,25-ci.io.I-d:Loropionat 'IV), Gfrolestu-bjT-dien-" 7-i-si.^;;-.fri.o.,--:i:^:.isobut.vr:⁴.t (IVj, Oholesta-^3 »7-dien-3i3,25-

dicl-niaa.Oronat ^?'IV), Gholes ua-5 »7-dien-3ß, 25-diol-dib^r_;:;,':a: !,Γ".'/). Oxidest;a-5»7-dip;i:—oü,25-d.iol-;3icyclohexvly/.'fit:.T, (i /',), 24-iiooio::nolesta-t>_t7"-dr.eri-3Jd ,25-diol-di aoi":¹ ■..".' .'), 24-Kor::holesta-5i»7-clien-3i3 ,2^-ciiji-diaceta-i (.!'/} ca?,-.- dergi. aasteile des C'iiolesta-5,7-dien-3i3,25 di -r.'.j.-1::.^c-¹ tats zu Cholesta-^./-dlea-3^»25-diol~25-pro p:\o:r;--t ;.:■<), Choi en ta-¹?* 7-α.1οτι--3ΰ _f 25~diol-2^t>-isobutyrat (I^T-; _: i.; . ;ieKta»b_J7~di3n-3ß,25-axjl-25-aapronaL (IV), 0:^.1 ei: ,κ 2:₃7-iiien~3i3, 25-diol--2^-':eiu_Joa·; (IV) , 24-Hoinocrioli:;. .;;·■■ j»7--dien-^i3,25--dicl«25---'cerat (".lV) bzw. 24-Norcrio"".... vi,.-;.. 3» 7~diea-5Ji ,2^l>-.diol-;:5~üofttat (IV).

24-·Ί·-'" r- ■..■>,10-secocholeata-5(lC)

'■■■"Lra in de.'-^r- Vorfahren dyr. i'.oii.-piels 7 das Choles '■'·'- ;-; -;.-«3i^ ;/;~dlui. ;I7) durch 2- -Noi'ch ... : . ■!.·_■;::. (17) erye:zt,so ia\l ;: 24-Mor ,(1'.'2 : :Y±3,ti-trter.-i.2,25-dic L iv) an,

Beispiel 21:

24-Homo-9,10-secocliolesta-5(lO), 6-cis,8-trien-3ß s25-diol (Y).

Bei Verwendung von 24-Homocholesta-5,7~dien-3ßs2.5~ diol (IY) anstelle von Cholesta-5_s7-dien-3ß_s25-diol (I?) erhält man nach dem Verfahren des Beispiels 7 als Produkt 24-Homo-9»10-secocholesta-5{10),6-cia,8-trien-3ß»25-diol (V).

Beispiel 22:

9,10-Secocholesta-5(lO),6-cis,8-trien-3ß_I25-diol-=diaeetat (V).

Verfährt man wie in Beispiel Ί, ersetzt aber das Cholesta~5₅7~dien-3ß_s25~-diol (IY) durch Cholesta-5_s7~dien~ 3ß,25-dioldiacetat (IV)_S so entsteht als Produkt 9_s10-Secocholesta-5(1),6-cis,8-trien-3ß*25-diol-diacetat (V).

Wird als 0holesta-5,7-dien-3ß,25~diol-diacetat (IV) durch 0holesta-5,7-dien-3ß,25-aiol-dipropionat (IV)₅ Cholesta-5»7-dien-3ß»25~diol--diisolDutyrat (IV), Choiesta-5,7-dieri-3ß_i25-diol-dihexanoat (IV), Cholesta-5f7-dien- , 3ß,25-diol~dihenzoat (IV), Cholesta-5,7-dien-3ß»25~dioldicyclohexylacetat (IY), 24-HoiBocholesta-5_s7-dien~3ß_i 25-diol-diaeetat (IV), 24~Iforcholesta-5,7--dien-3ß_s25~diol-. diacetat (IV), Cholesta-5,7-dien-3ß,25~diol-25~acetat (IV), Gholesta-5,7-dien-3ß,25-diol-25-propionat (IV), Cholesta-5₃7-dien-3ß,25-diol-25-i3obutyrat (IV), Gholesta-5,7-dien-3ß,25-diol-25-hexanoat (IV), Cholesta-5_s7-dien~ 3ß,25-diol-25-benzoat (IV), Gholesta-5,7-dien-3ß,25-diol~ 25-cyclohexylacetat (IV), 24~Homocholesta-5,7-dien-3ß,25~

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diol-25-aceta¹: (IY), 24-Norcholesta-5,7-dien-3ß,25-diol-25-acetat (I»')» uh.olesta-5»7-o.ien~3ß,25-diol-3-acetat (TV), CholeF.ta«5_J7-dien-3ß_f2^l5-diol~3-propionat (IV), Cholesta-^i ;- ■'.*.■■ r-3ß,25-diol- -^-isobatyrat (IV), Choi estate ,7-di e r- 3ώ, 2:. - di ο I - 3-hexarioa t (IV), Choi e s ta- 5,7- di en-Ίΰ,25-diol-'-5-t enxoat (IV), Cholesta-5_f7-dien-3ß ,25-diol-3-cyclohexyl;"cetat (XV), 24-Homocholest?.-5,7-dien-3ß»25-diol-3-aeetat (IV), 24-Norciiolesta-5,7~dien-3ö,25-diol-3-acetat (IV) ;: ;.r dsrgl. ersetzt, ,so erhält man 9,10-Secocholestr-3(10),6-cis,8-trien-3ß,25~diol-dipropionat (V), 9,10-f?ecocholesta-5(10) ,6~cis,8-trien-3ß,25-diol-diisobutyrat (V1„ 9,IO-Secocholesta-5(lO),6-cis,8-trienlß, 25-di ol-i.ib-?xanoat (V), 9,10-Secocholesta-5(10), 6-cis,8-trien-3S,25-diol-dibenzoat (V), 9,10-Secocholesta-5(10),6-CiSjS-trien-3ß»25-diol-dicyclohexylacetat (V), 9,10-Seoo-24-r.caiocholesta-5(10) ,6-cis,8-trien-3Ö,25-dioldiacetat (V), 9,10-Seco-24-Korcholesta-5(l0)^6-eis,8-trien-3ß,25-dio3-diacetat (V), 9,10~Secocholesta-5(lO),6-cis,8-trien-3ö,25-diol~25-propionat (V), 9,10-Secocholesta-5(10),6-cis,a-trie:>i-3ß»25-diol-25-isobutyrat (V), 9,10-Secochol esta-5 (10) ,6-cis,8-trien-3ß,25-diol-25-hexanoat (V), 9,10-aecccholssta-5(10),o-cis,8-trien-3ß,25-diol-25-benoat (V), g.lO-Secocholesta-SUOho-cis^-trien-3ß,25-diol-25-cyclohsxylacetat (Y)₉ 9,10-Seco-24-homo cholesta-5(l0).6-ci3,8-trien-3ß,25-diol-25-acetat (V), 9,10-8eco-24-norcholesta-5(lO),6-cis,8-trien~3ß,25-diol-25-acetat (V), 9»10-Secocholesta-5(10),6-ciB,8-trien-3ßt25-diol-3-propionat (V), 9,10-becocholesta-5(10),6-cis,8-trien-3u,25-diol-3-isobutyrat (V), 9,10-Secocholesta-5 (10),6-cis,8-trien-3ß,25-diol-3-hexanoat (V), 9,10-Secocholesta-5(10),6-cls,8-trien-3ß,25-diol-3-benzoat (V), 9,10-Secocholesta-5(10),6-cis,8-trien-3ß,25-diol-3-cyclohexylacetat (V), 9»10-Seco-24-liomocholesta-5(10)_t6-eie,8-

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trien-3ß,25-diol-3-acetat (V) baw. 9->10-Seco~24-nor cholesta-5(10)_i6-eis_i8-trien-3ß»25~diol-;f-acetat (V).

Beispiel 23;

hydrat (VI-Hydrat).

Wird in dem Verfahren des Beispiels 8 das 9._?10-Secocholesta-5(10)_J6~eis_J8-trien-3ß_s25-diol (V) durch 9,10-Seco-24-norcholesta-5(10),6-cis_s8=»trien-3ß_s25-diol (V) ersetzt, so fällt 9,10-Seeo-24-norcholesta-5-cis_J7»10(l9)-trien-3ß,25-diol-hydrat (VI-Hydrat) an.

Beispiel 24:

9,10-Seeo-24-homooholeBta-5-cis,7,10(1.9)-triei>-3߻25-diolhydrat (VI-Hydrat).

Wird in dem· Verfahren des Beispiels 8 9₉10-Seco cholesta-5(10),6-eis,8-trien-3ß.25-diol (V) durch 9,10-Seco-24-homocholesta-5(10) ,6->cis,8-trien-3ß»25-diol (V) ersetzt, so entstellt 9jlO~Seco-24-homocholesta-5-cis,7,10 (19)-trien-3ß,25-ciiol~hydrat (VI-Hydrat).

Beispiel 25:

9tlO-SecocholeBta-5-cis,7,10(19)-tr±en-3ß»25-diol- di acetat (Vl).

Nach Ersatz des 9«10-Seoocsholesta-5(l0)₉6-oi8j8<trien-3ß,25-diol (V) durch 9_O10-Seeochol@sta«=5(10)^ö-cis 8-trien-3ß»25-diol-diacetat (V) ©rgibt das Verfahren des

/210©

Beispiels 8 9»10-Secochölesta-5-eis,7,10(19)-trien-3i3,25 di ol-diaeetat ^VI)·

Ersetzt raan das 9ilO-Secocholesta-5(lO),6-cis,8-tr±eTi~3'.;,25-diGl~diaceta.t (V) durch 9»lQ-Secocholesta-5 (10) .6-ü:Ls_f8-trien-3ß_t25-diol-dipropionat (V), 9,10-Seoocho";..ci,tu-5(10) ,6~ois,8-»irien-3ß,25--diol-diisobutyrat (V), 9,'i.O~.^c3ecocholei?ta-5(10),6-cis_t8-trien-3ßi25-diol-dihexanoac (V), 9,10-Secochclesta-5(lO),6-cis,8-trien-3ß,25-diol-diüenzoat (V), 9,10~Secocholesta«5(10),6-cis,8-crien-?i: ,25-diol-dicydohexylacetat (V), 9,10-Seco-24— hoiiioc'holesta-5(10),b--cis,8-trien-3ii »25-diol-diacetat (V), 9.10-öeco-24--riorcholesta.-5(10),6-cis,8~trien-3l3,2t)-dioldiacetat (V), 9,10-Secocholesta-5(10) ,6-cis,8-trien-3ß,2^l5-diol-'j>-propionat (V), 9*10-Secocholesta-5(10) ,6-cis,8-triei>-)^»25-diol-25-isobutyrat (V), 9,10-Secocholesta-S (10) _;o-,v;.a»8-trien-3ß,25-diol-25-hexanoat (V), 9,10-öecocho'ibi-ta-SdO) ,6-cis,8-trien-3ß,25-diol-25-benzoat (V), 9,10 s:ii,richolesta-^c)(10),6-ais,3-trien-3ß,25-diol--25-cyclohes/xaceuat (V), 9,10~Secc-24-homeehüIesta-^t5(lü),6~cis,8-trlen-3:;.25-diol-25-acetat (V) _f 9, lO-üeco-24-nor cholt'i .a-5(10),6-cis,8-tritiii-3ß.25-diol-25-aeetat (V), 9„I0~Sf ':;ceJriolesta-5(10) ,6-ciSj8-trien-3!i,25-diol-3-propiona t (7), ^,I0-Secocholesta-5(10)_f6-cia,8-trien-3ß»25-diol-3-isobut-yrat (V), 9,10-Secocholesta-^C3(10),6-cis,8-trien-3ß,25«diol-3-hexanoat (V), 9,10~Seoocholesta-5(10,6-cis, 8-trien-3ö_t25-diol-3-benaoat (V), 9,10~Secocholesta-5 (10) ,6-eis,8-trien~3ß,25-diol-3-e,yelühexylacetat (V), 9,10-y£iGo-:?4-hoinocholesta-5(lü) ,6-cis,8-trien-3ß,25-diol-3-acebat (V) oder 9,lÜ-öeco-24-norcholesta-5(10),6-cis,8-trien->ii,25-diol-3-acetat (V) und dergl., so erhält man in gleicher Weise 9»lü-£jecocholesta-5-eis,7,10(19)-trieL~

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3ß,25-dial-dipropionat (VI), gilO
7,10(19i-trien-Sß^S-diol-diisobutyrat (VI), 9,10-Seeo cholesta-S-cis,7,10(19)-trien~3ß,25-diol-dihexanoat, (VI)_s 9, lÜ-Secocholesta-^-ci s, 7 ,-10 (19) -trien-3ß ,^-diol-di-. benzoat (VI), 9,lÖ-Secöehölesta-5-oi3,7₉lOCl9)--tiien-3ß,25-diol-dicyclohexylacetat (Vl), 9,10-Seco-24~homochQlesta^-5-cis,7,10(19)-trien-3ß, 2.5-diol-diacetat (VI), 9,10-Seco-24-norcholesta-5~e±s, 7,10(19.-)-tri en«3ß, 25-dioldiaceta-t (Vl), 9,10~Secocliolesta-5-cis,7,10(l9)-trien~ 3ß,25~diol-25-propionat (Vl), 9,10-Secodaolesta~5'--cis_i,7, 10(19)-trierx-3ß_s25-diol-25»isobutyrat "(VI)-,- 9,10-Secoaiiolesta-5-Gis,7_slC(19)-trien-3ß₅25-diol-25-hexanoat (VI), 9_slQ~Secociiolesta-.5--cls,7,10(l9)-trien~3ß,25~dxol-25^J-benzoat (VI), 9,10-Secocholesta~5-cis,7,10(l9)-trien-3ß*25-diol-25-cyclohexylaeetat (Vl), -9»lÖ-Seco-24-homocholesta~ -5-cis,7,10(19)-trisn~3ß,25~diol-25-aeetat (Vl)₄ 9_s10-Seco-24-noreholesta-5-cis,7,10(i9)--brien_3ß_i25-diol-25--acetat (Vl), 9,10-SecQcholeeta-5-ciB,7,iO(19)-tiien.-3ß,25-diol-3-propionat (VI), 9,10-Secocliolesta-5-cis_s7, 10(19)-trien-3ß_s25-diol-3-isobutyrat (Vl), 9,10-Seeo ciiolesta-5-cis,7,10(19)-trien-3ß,25-diol-3-hexanoat (Vl)₉ 9 ,lÖ-Seeoeholesta-5-cis, 7,10(19 )-irien-3ß > 25-diol-3-"ben-2öat (VI), -9*10-8βοοο1αο1ββΐΒ-5-βΐΒ,7,10(19-)-ΐ3*ΐΘηΓ-3β,25-· diol-*3-Gyclohexylaeetat (VI}, 9,10-Seco-24-homocholesta--5-"äis,-7,10(19)-trIen^5ß-i25-cliol-5-acetat (VI) "bzw. 9,10-Seco-24-norcholesta-5-ois,7,10(19)-trien-3ß,25-(iiol-3-acetat (VI). ..

Beispiel 26:

9,10-Secoeiiolesta-5(10) ,,6-cIs,8,24-tetraen~3ß'-ol.

- Wird in dem Verfahren des Beispiels 7 das Oholesta-

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5,7-dien-3ß,25-diol (IV) durch Cholesta-5,7,24-trien-3ß-ol oder durch Acylate desselben ersetzt, dann gewinnt man 9,10-Secocholesta-5(10),6-cis,8,24-tetraen-3ß-ol bzw. dessen Acylate.

Aber auch die Acylierung von 9,10-üecocholesta-5(lO), 6-cis,8,24-tetraen-3^-ol nach dem Verfahren des Beispiels 16 beispielsweise mit Essigsäureanhydrid führt zu dem entsprechenden 3-Acylät, z.B. zu 9»10-Seeocholesta-5(lü),6-cis,8,24-tetraen-3ß-ol-acetat.

Beispiel 27;

9,10-Secocholesta-5-cis,7,10(l9),24-tetraen-3ii-ol(24-I)ehydrocholecalciferol).

Setzt man in das Verfahren des Beispiels 8 9,10-Secocholesta-5(10)_t6-cis,8,24-tetraen-3ß-ol oder dessen 3-Acylate (z.B. Acetat) anstelle des 9»10-Secocholesta-5(lÖ), 6-cis,8-trien-3ß»25-diol (V) ein, dann erhält man 9,10-öecoeholesta-5-cis,7,10(19),24-tetraen-3ß-ol (24-Dehydrocholecalciferol) bzw. dessen 3-Acylr-te (z.B. Acetat). üas derart hergestellte 24-Dehydrocnolecalciferol sowie dessen so gewonnenen Acylate weisen starke, Calcium freimachende Wirkungen auf und führen eine erhöhte Calcium absorption im Darm bei Vögeln, beim Menschen und bei anderen Säugetieren herbei. Sie können anstelle des 25-Hydroxycholecalciferols (VI) in den vorstehend angegebenen Einheitsdosierungsformen für die dort genannten Zwecke verwendet werden.

Beispiel 28;
9»10-Secocholesta-5-trans,7-trans-dien-3ßt"25-diol.

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2012187

100 mg 25-Hydroxycholecalciferol (YI) werden in 10 ecm absol. Äther gelöst und 50 ecm flüssigem Ammoniak zugesetzt. Etwa 100 mg Lithium werden in kleinen Stücken . unter Rühren zugegeben, bis die Lösung 10 Minuten lang eine blaue Farbe zeigt. Man läßt das Ammoniak abdampfen, gibt Wasser zu und extrahiert das Produkt mit Äther, Der Äther wird gewaschen, getrocknet und zu einem Bückstand eingedampft, der unter Hochvakuum weiter getrocknet wird. Der Rückstand wird in Äthyläcetat/Hexankohlenwasserstoffen gelöst und wie in Beispiel 8 chromatographiert. Diejenigen Fraktionen, deren Ultraviolett-Absorption nahe 251 m/t liegt und die eine Dünnschicht-Chromatographie als praktisch rein erscheinen läßt, werden vereinigt und zu 9*10-Secocholesta-5-trans,7-trans-di en-3ß,25-diol.(25-Hydroxydihydrotachysterols) eingedampft. Das 9,10-Seeoeholesta~5-trans,7-trans-dien-3ß,25-diol stellt ein wirksames Mittel für die Calciuni-Absorption bei Vögeln, beim Menschen und .bei anderen Säugetieren dar und kann anstelle von 25-Hydroxy-cholecalciferol in den vorstehend angegebenen linheitsdosierungsformen für die dort genannten Zwecke verwendet werden. .

Beispiel 29; ■

25-Hydroxycholecalciferol (VI),

Anstatt die Temperatur auf unter 20 G zu halten, läßt man diese in dem Verfahren des Beispiels 7 während der Bestrahlung auf naheau Bückflußtemperatur des Lösungsmittels ansteigen. Das daraus hervorgehende Bestrahlungeprodukt wird durch Chromatographie gemäß Beispiel 7 gereinigt und man' erhalt direkt 25-Hyaroxycholecalcif erol (VI).

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50 --

In gloi-ouar Weise werden andere Verbindungen der Struktur 1 u.n^r·. ZV bei erhöhten Temperaturen unter direkter Bildung der entsprechenden Produkte der Struktur ΓΙΙ bzw. Vi bestrahlt.

25-Hydroxych.olecalcif erol-hydrat (VI-Hydrat).

Eine Lösung von 20Ü mg ^lO-Seeocholesta-^lO),ö-cis, 8-trien-3H,25-diol (V) in 5 ecm Äthanol und 0,5 ecm Wasser wird mehrere Stunden unter einer Stickstoffatmosphäre unter mij.dem Rückfluß gehalten und eingeengt, bis die Lösung nach Abkühlung auf Raumtemperatur gerade trüb ist. Man fügt I :.pfKristalle von 25-Hydroxycholecaleif erol-hydrat (Vl-hydrat) hinüu und läßt dxe geimpfte Lösung mehrere Stca>.oU;r. unter E'riatallahsoheidung stehen. Die Kristalle weraen abi'iltriert und mit wässrigem Äthanol unter Ge- \ii.nv\vjr von 25-ßydroxycij.oieciilciferol-nydrat (VI-Hyarat) fov/asoLen, In gleicher Weise werden andere Verbindungen eier sr.vuktur V in einen, wässrigen Lcsungijmittel unter di-Touter 'BIl.dung der Hydrate von Verbindungen VI isooieriert.

2'/-Nor--3ß-hydroxycholest-5-en-25-on~>-acetat (VIIa).

Werden in eiern Verfahren nach Riegel und Kave, J. Am. Cheffi, Soc. Bd. 6b, S. 723 (1944) das 3ß-Hydroxychol-S-ensäurotⁱhiorid--3~acetat (VlI¹ } durch 3ü-Hydroxy-2b-homocholij-en-i.i-iurechlorid-o-acetat (VII¹) und das Diiaopropylt't durch Dimethyl cadmium eraetiit, so entsteht 27-Nor-

(VIIa).

0 0 9 8 4 0/2108

In gleicher Weise, jedoch unter ¥erwendtmg von. Di ο etyl cadmium, Dibutyl cadmium, Biisopropyl cadmium,, Dieyelopentylcadmium oder Diphenylcadmium anstelle von Dimethyl cadmium usw., erhält man 26,27~Bisnor-25-octyl-3ß~ hydroxycholest-5-en~25~on-5-acetat (YIIa), 26,27-Bisnor-25-butyl-3ß-hydroxycholest-5-en-25-on-5-acetat (VIIa), 26,27-Bisnor-25-isopropyl-3ß-hydroxycliol est-5-en-25-on-3-aeetat (VIIa), 26*27-Bisnor-25~cyclopentyl-3ß-hydroxy.-cholest-5-en-25-on-3-acetat (VIIa), 26_s27-Bisnor-25-phenyl-3ß-hydroxyeholest-5-en-25-on-3-acetat (VIIa) usw..

Beispiel 32:
27-Nor-25-phenylcholest-5-en-3ß,25-diol

Bei Verwendung von 27-Hor-3ß~hydroxyeholest-5-en~25-on~3-acetat (VIIa) anstelle von Methyl-3ß-hydroxy-25-hoiaochola-5j7-dienat-3-acetat (I) und von Phenylmagnesiuni "bromid anstelle von Methylmagnesiuiabromid führt das Verfahren des Beispiels 6 zur Bildung von 27-Hor-25-phenylcholest-5-en-3ß_J25-diol (VIIb).

In gleicher Weise erhält man bei Verwendung von Octylmagnesiumbromid, Butylmagnesiumbromids, Isopropylmagnesiumbromid, Cyclopentylmagnesiumbromid und dergl. anstelle von Phenylmagnesiumbromid 27-Nor-25~octylcholest-5-en-3ß,25-diol (VIIb), 27-Nor-25-butylcliolest-5-en~3ß,25-4LqI (VIIb), 27-Nor-25-isOpropylcholest-5-en-3ß_s25-diöl (VIIb), 27-Nor-25-cyclopentyl2holest-5-en-3ß,25~diol (VIIb) und dergl«.

In ebensolcher Weise ergeben 26,27-Bisnor-25-phenyl-3ß-hydroxycholest-5-en-25-on-3-acetat (VIIa) und die oben-

Q098A0/2108

genannten Alkylmagnesiumhalogenide nach dem Verfahren des Beispiels 6 26,27-318^^25-0^:^1-25^116^10110163^5-6^ 3ß,25-diol (VIIb), 2ö,27-Bisnor-25-butyl-25-phenylcholest-5-en-5Ü,25-diol (VUb), 26,27-Bisnor-25-isopropyl-25-phen,ylcholest-5-en-3l3,25-diol (VIIb), 26,27-Bisnor-25-cyclopentyl-25-phenylcholest-5-en-3i3,25-diol (VIIb) und dergl..

Beispiel 53:

27-Norcholest-5-en-3ß,25-diol (VHb).

Eine Lösung von 2Ü0 mg 27-Nor-3ß-hydroxycholest-5-en-25-on-3-acetat (VIIa) in 10 ecm Tetrahydrofuran wird mit etwa IbU mg Litliiumaluminiuinhydrid unter Rückfluß gehalten. Man setzt wässriges Ammoniumchiοrid zu, trennt die Ätherschicht ab und wäscht diese. Nach Abdampfung der Ätherschicht erhält man, einen Rückstand aus 27-Norcholest-5-en-3ß,25-diol (VIl), der gegebenenfalls durch Chromatographie und Kristallisierung gereinigt werden kann. In gleicher Weise können andere Verbindungen der Struktur VlIa und Ia zu Verbindungen der Struktur VIIb bzw. IV reduziert werden.

Beispiel 34:
27-toor-25-phenylcholesta-5,7-dien-3ß,25-diol (IV).

In das Verfahren des Beispiels 4 wird 27-Nor-25-phenylcholett-5-en-3ß»25-diol (VIIb) oder dessen Acetat anstelle von Methyl-3ß-hydroxy-25-homochol-5-enat-3-acetat (VII) unter Gewinnung von 27-Nor-25-phenylcholesta-5f7-dien-3ß,25-diol (IV) eingesetzt. Ebenso erhält man bei Verwendung von

009840/2108

ChOlest-5--en-3ß,25-diol (VIITa) Cholesta~5_s7-dien-3ß_f2.5-diol (IV) und bei Verwendung anderer Substanzen der Struktur VIIb und VII die entsprechenden Verbindungen der Struktur IV bzw. I.

"·;..>. j.Ofit"-V

009840/21 ÖS

Claims (1)

1. Patentansprüche

   1. Verbindungen der allgemeinen Formel

   -R-

   CtL

   in der R₁ und Rp gleich oder verschieden sein können und Wansera toffatome, Alkylgruppen mit weniger als Λ Kohlenstoffatomen oder Phenylgruppen Bind, IK und R₁. gleich oder verschieden sein können und Wasserstoffa tome oder Aoylgruppen einer Kohlenwasserstoffcarbonsäuren mit weniger als 12 Kohlenstoffatomen und η -- 2, 3 oder 4 bedeuten, wobei, wenn K-, und R_r Wasserstoff atome sind, die Verbindungen in Form ihrer Hydrate * xiL>0 vorlie^fin, worin χ eine ganze oder· eine einfache gebrochene Zahl von \/λ blij 2 bezeich.net.

   2. Kris fcallineo 25-Hydroxycholooalci forol-hydrat,

   3. 24-Nor-9, lO-secocholesfca^-o Lu, Y, IO( 19)-Lricn-3ß,25-'-liol.

   009840/2108

   4. 25-Hydroxycholecalelferol-25-acetat 5» 25-Hydroxycholecalciferol-3-acetat.

   6. Isomere Verbindungen der allgemeinen Formeln

   i · t

   (A)

   R^

   n-\- ^G%

   R₂

   (B)

   worin R. und R_? Viasserstoi'fatome, Alicylgruppen mit -weniger als 9 Kohlenstoffatomen oder Phenylgnxppen sind, R, Una R₁- Wasserstofi'atome oder Acylreste einer Kohlen wasserstoffcarbonsäure mit weniger als 12 Kohlenstoff atomen und η die ganze Zahl 2, 3 oder 4 bedeuten.

   7. 9,lö-Secocholesta-5(10),6-cis₅8-trien-3ß,25-diol, eine Verbindung gemäß Anspruch 6, Pormei Δ.

   8. 0holesta-5,7-dien-3ß,25-diol, eine Verbindung gemäß Anspruch 6, Formel B.

   9. Isomere Verbindungen der allgemeinen Formeln:

   09840/ 2 1 0 8

   ORIGINAL

   ν-

   CH,

   (CH₂)_nC0₂R₄ (A) Y

   (B)

   in denen R~, ein Wasserstoff atom oder einen Acylrest einer Kohlenwasserstofi'carbonsäure mit weniger als 12 Kohlenstoffatomen, R. ein Wasserstoffatom oder eine Alkyl gruppe mit weniger als 9 Kohlenstoffatomen und η die ganze Zahl 3 oder 4 bedeuten.

   10. Meth.vl-3ß-hydroxy-9,lü-seco-2^t)-honiochola-5-cJ s, 7,10(19)-trienat-3-aeetat, eine Verbindung gemäß An spruch 9 j Formel A.

   11. Meth,yl-3ß-hydroxy-9,10-sece-25-homochola-5(lü), 6-cis,8-trienat-3-aeetat, eine Verbindung gemäß An spruch 9» Formel B.

   12. Verfahren zur Herstellung von kristallinem 25-Hydroxycholecalciferol-hydrat, der Verbindung gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß wasserfreies 25-

   Q09840/2108

   ⁸^⁰ Original

   Hydroxychol ecal cii'erol mit Wasser versetzt und das kristalline Hydrat gewonnen wird.

   13· Verfahren zur Herstellung von Verbindungen gemäß Anspruch 1 der.allgemeinen Formel

   R_xO

   dadurch gekennzeichnet, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel ■

   (GH₂) -C -

   in der R-^ und R₂ Wasserstoffatome, Alkylgruppen mib weniger als 9 Kohlenstoff atomen oder Phenylgruppen, R-^ und Rj. Wasserstoffatome oder Acylgruppen einer Kohlenwasserstoffcarbonsäure mit weniger als 12 Kohlenstoffatomen bedeuten, und η die ganze Zahl 2, '5 oder 4 bezeichnet, in einem

   ^009840/2108 BAOO_RIQINAL

   inerten Reakti onsraedi urn erwärmt und das Produkt hieraus abtrennt.

   14. Verfahren nach Anspruch 15» dadurch gekennzeichnet, daiS man von einer Verbindung ausgeht, bei der R„ und R_c Wassers toffatome sind, als Reakti onsmediiim

   3 5
   Wasser verwendet und das Produkt als Hydrat gewinnt.

   15· Verfahren zur Herstellung von Verbindungen gemäß Anspruch 1 der allgemeinen Forml***- ^.

   - OH

   CH₀

   HÜ

   dadurch gekennzeichnet, _tdaü man

   (a) eine Verbindung der allgemeinen Formel

   !I

   0098A0/2 108

   BAD ORIGINAL

   in derR-. ein Wasserstoffatom oder einen Acylrest einer Kohlenwasserstoffcarbonsäure mit weniger als 12 Kohlenstoff atomen, R. ein. Wasserstoff atom oder eine niedere Alkylgruppe^ und η die ganze Zähl 2,3 oder 4 darstellenj in einem inerten Reaktionsmedium mit Alkyl- oder Phenyl magnesiuiiüiälogenid^oder Alkyllithium umsetzt und das Produkt daraus isoliert, oder daß man

   ti'' ■ *

   (b) eine Verbindung der allgemeinen Formel

   in der R..^ R. und η die vorgenannte Bedeutung besitzen^ mit Alkyl- oder Hienylmagnesiianihalogenid oder Alkyllithium behandelt, dieses Material erwärmt und. die Verbindung abtrennt.

   16. Verfahren nach Anspruch 15 a, dadurch gekennzeichnet, daß während der Isolierung des Produktes Wasser zugesetzt und das Produkt als Hydrat gewonnen wird.

   Für

   The Upjohn Company Ealamazob, Mich* ,_{i =} V.St.A,

   (Dr. H.J. Wolff) Rechtsanwalt

   009840/2108