CZ382799A3 - Použití hyaluronátu zinku proti peptickým vředům - Google Patents

Použití hyaluronátu zinku proti peptickým vředům Download PDF

Info

Publication number
CZ382799A3
CZ382799A3 CZ19993827A CZ382799A CZ382799A3 CZ 382799 A3 CZ382799 A3 CZ 382799A3 CZ 19993827 A CZ19993827 A CZ 19993827A CZ 382799 A CZ382799 A CZ 382799A CZ 382799 A3 CZ382799 A3 CZ 382799A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
zinc
hyaluronate
zinc hyaluronate
gastric
molecular weight
Prior art date
Application number
CZ19993827A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ297317B6 (cs
Inventor
Lészló Szporny
János Illés
Judit Matúz
Erzsébet Neszmélyi
Gáborné Forrai
Béla Stefkó
Katalin Sághy
Original Assignee
Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt. filed Critical Richter Gedeon Vegyészeti Gyár Rt.
Publication of CZ382799A3 publication Critical patent/CZ382799A3/cs
Publication of CZ297317B6 publication Critical patent/CZ297317B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

Oblast vynálezu
Vynález popisuje farmaceutické kompozice, které aktivně působí proti peptickým vředům a obsahují komplex zinku kyseliny hyaluronové, způsob její přípravy a způsob léčby a prevence uvedeného onemocnění.
Dosavadní stav techniky
Vynález popisuje farmaceutické kompozice, které aktivně působí proti peptickým vředům a obsahují komplex zinku kyseliny hyaluronové a způsob její přípravy.
Vynález dále popisuje použití komplexu zinku a kyseliny hyaluronové, to znamená hyaluronátu zinku při přípravě farmaceutických kompozic, které vykazují aktivitu proti peptickým vředům a způsob jejich léčby a prevence. Vynález dále popisuje použití hyaluronátu zinku při prevenci opakované infekce po zhojení peptických vředů.
Makromolekula známá jako kyselina hyaluronové se obvykle vyskytuje ve formě sodíkové soli, která je známa víc jak 50 let. V publikaci Meyer et al., J. Biol. Chem. 107, 629 (1934) se uvádí, že kyselina hyaluronové je vysoce viskózní, přirozený glukozaminoglykan obsahující upravenou kyselinu β1-3-glukuronovou a části p-l-4glukosaminu, její molekulová hmotnost je v intervalu 50 000 až několik miliónů. Kyselina hyaluronové se vyskytuje v pojivové tkáni všech savců, ve velkém množství se vyskytuje v kůži, ve sklivci oka, v synoviální tekutině, v pupeční šňůře a ve tkáni chrupavek.
V posledních letech se kyselina hyaluronové ve formě sodné soli používala při léčbě především v oftalmologii, dermatologii, chirurgii a při léčbě kloubů a v kosmetice.
Sole kyseliny hyaluronové tvořené alkalickými kovy, kovy alkalických zemin, hořčíkem, hliníkem, amoniakem a ·, ) substituovanými amonnými ionty mohou sloužit jako nosiče (popisuje se v publikaci Sole těžkých kovů a kyseliny podporující absorpci léčiv belgického patentu č. 904 547) hyaluronové, zvláště pak sole stříbra, se uplatňují jako fungicidy, zatímco sůl zlata se používají při léčbě revmatoidní artritidy (popisuje se v patentu č. WO 87/05517). V případě solí stříbra a zlata je však známo několik nežádoucích účinků. Negativně působí na imunitní systém, haematopoietické orgány a nervový systém (popisuje se v publikaci M. Shinogi, S. Maeizumi: „Effect of preinduction of metallothionein on tissue distribution of silver and hepatic lipid peroxidation,,, Biol. Pharm. Bull. (Japan), Apr. 1993 16 (4), p. 372-374; C. Masson et al. , Rev. Med. Interne (France) May-June 1992, 13 (3) p. 225-232 (1992)).
Komplexy deprotonatované kyseliny hyaluronové s třetími kovovými ionty čtvrté periody v periodické tabulce, jako jsou hyaluronáty zinku a kobaltu, které vykazují léčebný účinek na bércové vředy, proleženiny a podobně, se popisují v maďarském patentu č. 203,372 (kterému odpovídá WO-A-9010020). Jsou vhodné pro vnější použití.
Nyní se zjistilo, že komplex zinku a kyseliny hyaluronové, to znamená hyaluronát zinku, vykazuje podstatnou aktivitu při ochraně trávicího traktu. Může se použít při profylaxi a léčbě peptických vředů, které zahrnují vředy vyvolané bakterií Helicobacter pylori.
Onemocnění peptickými vředy je komplexní a multifaktoriální onemocnění, kterým trpí velká část populace. Ve vztahu ke skutečné patogenezi tohoto onemocnění existuje řada nevyřešených otázek. Během posledních pěti let se ve výzkumu bakterií Helicobacter pylori objevily nové přístupy. Je obecně zřejmé, že vývoj onemocnění peptických vředů u lidí se spojuje s infekcí bakteriemi Helicobacter pylori, ale na druhou stranu uvedené bakterie neodpovídají za vznik všech peptických vředů. Do dnešní doby se léčba peptických vředů v podstatě nezměnila. Stále jsou při terapii nejdůležitější zbraní blokátory H2 a inhibitory protonových pump, což jsou v literatuře převládající možné terapeutické metody usmrcení bakterií H. pylori. Navíc do centra zájmu se dostává léčba gastro-duodenálního poškození způsobeného nesteroidními protizánětlivými léky.
Peptické vředy vyvinuté libovolným způsobem se mohou charakterizovat tím, že neexistuje rovnováha mezi agresivními faktory, které zahrnují vývoj vředů, a obrannými faktory, které chrání žaludek proti indukci vředů, jako u zdravého jedince. Vřed v každém případě vznikne, jestliže se agresivní faktory dostanou za určité limity a/nebo obranné faktory se zeslabí. Obranné faktory zahrnují rezistenci sliznice žaludku, dostatečné prokrvení sliznice žaludku a tvoření sliznice (popisuje se v publikaci H. Shay, Etiology of peptic ulcer, Am. J. Dig. Dis. 6, 29-49 (1961)). Mezi vedoucí agresivní faktory patří vylučování kyseliny chlorovodíkové a pepsinu stejně jako faktory stimulující vylučování libovolné z obou substancí. Vylučování kyseliny může být zesíleno patologickými vagovými stimuly nebo zvýšenou tvorbou gastrinu, autoimunitním mechanizmem a v některých případech účinkem hormonů. Navíc rovnováha mezi agresivními a obrannými faktory se může také porušit poraněním, které ovlivňuje celé tělo. Peptické vředy jsou multifaktoriálním onemocněním. Činidla používaná při léčbě vředů omezují působení agresivních faktorů a/nebo posilují úlohu ochranných faktorů. Do určitých let cílem farmaceutického výzkumu bylo oslabit účinky agresivních faktorů. Primárním cílem bylo upravit aktivitu kyseliny-pepsinu. Cílem léků používaných při léčbě vředů bylo nejdříve neutralizovat kyselinu (jsou to antacidy, jako je hydrogenuhličitan sodný nebo hydroxid hlinitý) nebo inhibovat její vylučování (používají se blokátory H2, například cimetidin, famotidin, inhibitory protonových pump například omeprazol). V současné době se pozornost soustředí na výzkum těch činidel, které posilují úlohu obranných • · 4 · · ·· 44···· · 4 4 4 4 4
4444 4 4·· ·· ·· ·· faktorů, na rozdíl od vývoje monoterapie použitelné při usmrcení bakterií Helicobacter pylori.
Kompozice posilující obranné faktory jsou však dostupné pouze v omezeném počtu a vykazují některé vedlejší účinky. Takovými kompozicemi jsou koloidní subcitrát vismutu (CBS, DeNol), sukralfát a misoprostol. CBS obsahuje vizmut, který odpovídá za toxikologické účinky. Sukralfát, což je základní hliníková sůl sulfatované sacharózy vykazuje některé nežádoucí účinky, to znamená například nevolnost, zvracení, intoxikaci hliníkem atd. a misoprostol, což je syntetický analog prostaglandinu, indukuje zvýšenou aktivitu střev nebo nevolnost.
Z informací uvedených shora v textu je patrné, že pro léčbu vředů je nutné vyvinout účinný a bezpečný lék, jehož aplikaci nedoprovází zvýšené uvolnění kyseliny. Takové kompozice se mohou úspěšně použít v případě,’ že cílem je předejít vzniku lézí v žaludku působením dráždivých a poškozujících účinků například nesteroidních protizánětlivých léčiv, jako je indometacin, aspirin tím, že se posílí obranný mechanizmus sliznice. Jestliže bereme do úvahu data, která ukazují, že denně se na světě spotřebuje více než deset miliónů tablet nesteroidních protizánětlivých léků, které tvoří skupinu dnes nejpoužívanějších léků, pak v budoucnosti poroste počet pacientů trpící peptickými vředy vzniklými podáváním NSAID (nesteroidními protizánětlivými léky).
Posílení obranného mechanizmu může být důležité v případě vředů způsobených infekcí bakterií Helicobacter pylori, protože bakterie produkují řadu toxinů a enzymů (ureáza, proteáza, kataláza, lipáza), které poškozují žaludeční sliznici a uvolňují cestu kyselině a pepsinu k epitelu žaludku.
Za účelem uspokojit shora uvedený požadavek se náš cíl zaměřil na léčbu peptického vředu testováním předpokládané gastroprotektivní aktivity hyaluronátu zinku, což je komplex zinku a kyseliny hyaluronové. Podle našich experimentálních • · · ·
výsledků hyaluronát zinku vykazuje aktivitu ochrany žaludku a je velmi vhodný pro použití při profylaxi tvoření peptických vředů a/nebo při léčbě vytvořených vředů.
Vynález se týká farmaceutických kompozic vykazujících účinek působící proti peptickým vředům. Tyto kompozice obsahují jako aktivní látku komplex zinku a kyseliny hyaluronové, to znamená hyaluronát zinku. Dále vynález popisuje způsob produkce, kdy se smíchá aktivní složka hyaluronátu zinku (připraveného známým způsobem) s terapeuticky použitelnými nosiči a/nebo s přísadami a směs se přemění na farmaceutickou kompozici.
Vynález se dále týká použití komplexu zinku a kyseliny hyaluronové při přípravě farmaceutických kompozic, které vykazují aktivitu proti peptickým vředům, a způsobu léčby a prevence peptických vředů.
Z literatury jsou známy strukturálně podobné sloučeniny chránící žaludek. Účinek solí zinku kyselých polysacharidů a mukopolysacharidů proti žaludečním vředům se popisuje v publikované přihlášce japonského patentu č. 6-48950, kde se na seznamu jako kyselé polysacharidy uvádějí algaderivovaného agarového agaropektinu mořského původu, karaginin, kyselina alginová. Jako mukopolysacharidy se zde uvádějí kyselina hyaluronová, heparin, chondroitinsulfát. Dále se zde uvádějí jiné sloučeniny rostlinného původu jako je dextransulfát, karboxymetylcelulóza a kyselina pektinová. Podle uvedené přihlášky se molekulové hmotnosti kyselých polysacharidů pohybují okolo několika tisíců, přednostně okolo 20 000. Sůl zinku kyseliny hyaluronové a její farmaceutická aktivita nejsou uvedeny v příkladech.
V publikaci US patentu č. 5 514 660 se popisuje účinek farmaceutických kompozic, které obsahují aktivní látku oligosacharidového typu. Dále se zde popisují příklady zkoumání účinků látek na vředy indukované bakterií
Helicobakter pylori. V této publikaci se nezmiňuje ani • · 444 · kyselina hyaluronová ani její komplex se zinkem ani účinek na hojení ran.
Ochranné účinky žaludku hyaluronátu zinku se ověřily různým farmakologickým zkoumáním. Při uvedeném testování se použily roztoky hyaluronátu zinku podle maďarského patentu č. 203 372. Také se zkoumaly hyaluronát sodný a chlorid zinečnatý, což jsou sloučeniny, ze kterých se připravuje hyaluronát zinečnatý.
Ve farmaceutických experimentech, které se používají pro prokázání ochranného účinku hyaluronátu zinku na žaludek, se zkoumá, jak se mění účinnost se změnou molekulové hmotnosti a na základě různých stupňů čistoty. Z tohoto důvodu se testovaly roztoky hyaluronát zinku (I), hyalorunát zinku (II) a hyaluronát zinku (III) s molekulovými hmotnostmi 750 000, 900 000 a 1 200 000, které vykazují stupeň nejvyšší čistoty („purissimum) . Hyaluronát zinku (M) stupně čistoty „purum,, se připravuje z materiálu s nízkou kvalitou. Náš poslední cíl je provedení porovnání hyaluronátu zinku a jedné z nejvíce používané sloučeniny, která chrání žaludek, sukralfátu.
Pro odborníky v oboru je zřejmé, že v případě směsí molekul s různými stupni polymerizace a s molekulovými hmotnostmi ve velmi širokém rozmezí, jako jsou sloučeniny kyseliny hyaluronové, se nemohou tyto molekuly charakterizovat přesnou hodnotou molekulové hmotnosti. V případě hyaluronátu zinku podobně jako u všech jiných sloučenin kyseliny hyaluronové, molekulová hmotnost znamená průměrnou hodnotu molekulových hmotností, které vykazuje směs molekul s různými stupni polymerizace, měřené danou metodou pro stanovení molekulové hmotnosti.
Komplexy hyaluronátu zinku rozpuštěním vytvořily 1,0 % vodný roztok, který se použije ve farmakologických experimentech. Následující příklad popisuje postup přípravy
1,0 % roztoku hyaluronátu zinku. Jestliže není uvedeno jinak procenta se uvádějí jako % hmotnost/objem.
• · · 0 « · ί
•0 ·· ·· • · · « · ·
0 0 0 0 0
00 00· 000 · · · • 0 0 · · ·
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1: Příprava 1,0 % roztoku hyaluronátu zinku.
Hyaluronát sodný (v množství 1 ng) se ponoří do 30 ml vody za konstantního míchání. Po přidání 18,75 ml 0,1 molárního roztoku chloridu zinečnatého se objem doplní destilovanou vodou na 100 ml.
Charakteristiky hyaluronátu sodného, které se používají při přípravě roztoků hyaluronátu zinku s různými molekulovými hmotnostmi a stupni čistoty ve farmaceutických experimentech, jsou souhrnně uvedeny v následující tabulce.
Charakteristiky hyaluronátu sodného užívaného při přípravě roztoků obsahujících
Hyaluronát zinku(I) Hyaluronát zinku(II) Hyaluronát zinku(III) Hyaluronát zinku(M)
Obsah hyaluronátu sodného 97,77 97,50 99, 07 96,25
Molekulová hmotnost 750 000 900 000 1 200 000 982 000
Obsah proteinu 0,018 % 0,032 % 0,019 % 0,16
Viskozita 140 ml/g 160 ml/g 190 ml/g 170 ml/g
UV absorpce 7\ θ/ 2% A 260 nm 0,017 0,018 0,016 0,045
Při testování se použily dávky roztoků obsahující hyaluronát zinku s různými molekulovými hmotnostmi a stupni čistoty. Roztoky hyaluronátu sodného a chloridu zinečnatého se ředily destilovanou vodou a aplikovaly se v objemu 10 ml/kg tělesné hmotnosti. Dávky sukralfátu, který se používá jako referenční látka, stejně jako indometacin a práškové aktivní uhlí se suspendovaly v 1 až 2 kapkách Tween 80 a ředily se fyziologickým roztokem na koncentraci 5 ml/kg φφφ ·
Φ φ · · · φ • · · φ · · • « · φφ* φφφ tělesné hmotnosti (0,9 % (hmotnost/objem) chloridu sodného). Dávky používané v případě N-etylmaleimidu a NG-nitro-Largininmetylester (L-NAME) se ředily na objem 5 ml/kg tělesné hmotnosti. Destičkový aktivační faktor (PAF) se rozpustil v 0,25 % (hmotnost/objem) albuminu bovinního séra připraveného s 0,9 % (hmotnost/objem) roztokem chloridu sodného. Zdroje použitých substancí jsou následující:
hyaluronát zinku (I) , (II), (III) a (M) a hyaluronát sodný (Gedeon Richter); chlorid zinečnatý (Merck); sukralfát (UlcerlminR Chugai); indometacin (Sigma); N-etylmaleimid (Fluka); NG-nitro-L-argininmetylester (Sigma); L-arginin (volná báze) (Sigma); D-arginin (volná báze) (Sigma); albumin bovinního séra (Sigma); aktivní uhlí (Sigma).
Farmakologická aktivita komplexu hyaluronátu zinku se studoval za použití následujících metod.
1. Inhibice žaludečních lézí způsobených· okyseleným etanolem
Použily se samice krys RG-Wistar, jejichž hmotnost se pohybuje mezi 120 až 150 g. Před experimentem zvířata hladověla po dobu 24 hodin , ale dostala vodu podle potřeby.
Experimenty se provedly způsobem, který je podobný metodě popsané v publikaci A. Robert, Gastroenterology 77, 7661 (1979)).
Za účelem silného dráždění se použil okyselený etanol (směs 50 ml absolutního etanolu a 1 ml koncentrované HC1) . Dávka okyseleného etanolu je 0,5 ml/100 g tělesné hmotnosti, aplikuje se do žaludku. Testovací látky se podaly orálně 30 minut před aplikací okyseleného etanolu. Když se studovala doba působení testované látky, testovaný materiál se aplikoval o 60 až 120 minut dříve, aby se vyvolal účinek indukovaný okyseleným etanolem. Hodinu po ošetření okyseleným etanolem se krysy usmrtily krční dislokací. Z těla se vyňaly žaludky a otevřely se podél velkého zakřivení a mírně se promyly. U podélných haemoragických lézí se stanovovala jejich délka.
·· ·♦«· · ·· ·· ♦ » · · ···· 9 9 9 9 ·· · · · 9 9 9 9
9 · · · 99 999999
Q · · « · · 9 9
J 9999 9 999 9· 9· 9·
Hodnota EDS0 se definuje jako dávka, která poskytuje 50 % snížení indexu vředu.
Za účelem studie mechanizmu působení testovaných sloučenin se také studoval vliv endogenního NO na vývoj poškození žaludku vyvolaného okyseleným etanolem tak, že se intraperitoneálně aplikoval L-NG-nitroargininmetylester (LNAME). L-NAME v dávce 25 mg/kg se aplikoval injekcí 15 minut před zavedením testované sloučeniny. V následných experimentech se testované sloučeniny (p.o.) L-NAME (25 mg/kg i.p.), L-arginin (400 mg/kg i.v.) aplikovaly 30, 45 nebo 60 minut před orální aplikací okyseleného etanolu.
Výsledky jsou uvedeny v následujících tabulkách. Kontrolní skupina obdržela místo hyaluronátu zinku pouze vehikl (destilovanou vodu).
94 49
4 4 4 4 4
4 9 4 4 9
4 9 994 444
9 9 9
4 4 4 9 4 4 ·· ♦·*· • · · • · • · • ·
9444 ·
Φ i—I O c
+j
Φ
Tabulka č. 1
Účinek hyaluronátu zinku (I) na žaludeční léze vyvolané okyseleným o\°
O υ
•H
Λ •H
Λ a
H a
<d
Ό r—1 (Ú >N
Ή
N 'Φ (0 a i—i 'Φ
Q m
t—1 (—I +1 ςρ
CN
OO i—I +1
CO
LO cn
LO co co co
LT co cn *
co r~ +1 co co
LO *
co r+1 rCN *
o <N +1 =T
LO
O
Q.
tn a:
tn g
ctí a
>
a
CN i—I co co
O
LO
G o
G •H
Oj w
ctí I—I o
G
P
G
O
W
-P 'Ctí G o G G r—I ctí iU co
Ή o
G •
i—1 ÍA
o
G i—Í
P g
G
o o
A r-1
W ctí
G
G tn
'Ctí A
G
> σί
o G
G
cn tn
g
Φ
> cn
LO LO
O t—1
K.
o II
V o
ÍX LO
o
* w
99 ·· 99
9 9 9 9 9 9
9· 9 9 9 9
9 99 99 9 999
9 9 9 9
999 99 99 99 ·· ···· · · • 9
9 9
9
9999 9 «—I o
q (ΰ +J
Φ
Tabulka č. 2
Účinek hyaluronátu zinku (II) na žaludeční léze vyvolané okyseleným
Inhibice % 1 42,7 co rr- 84,1 98,1
Délka lézí/žaludek mm ± S.E.M. 83,7 ± 7,3 48,0 ± 10,9* 19,0 ± 4,4* 13,3 ± 4,8* * LO O +1 kO 1—1
Dávka mg/kg p.o. 1 10 25 50 o o ϊ—1
21 13 kD 00 co
Kontrola Hyaluronát zinku(II)
O q
•H
Id
P λ:
co
Ή q
i—i o
q •P q
o
Λί co
Ή q
'(O q
>
O q
co <D >
LO
O o
V &
*
O (ď
Γ—1 6 o i—I cd £
Cn
Λί rd
C
Cn ε
r~l t—I rH
O lD
Q
W • fc fcfcfcfc « · • · • · • · ···· · ·· ·· ·· • · · 9 · · • · fc · · · fc fcfc ·· · fcfc· • · · · • fcfc fc· ·· e
o
I—I o
c (ti +J
Φ
Tabulka č. 3
Účinek hyaluronátu zinku (III) na žaludeční léze vyvolané okyseleným o\°
Φ
O •H •H
H
ΙΟ
Γ-~
Γ00
CO
ΓLf)
CO a;
o
Ό ι—I (ti >N
Ή N 'Φ i—I (ti Al I—I 'Φ
Q oo
CM rH +1 v
O uo rCM i—I +1 •v
CTi r~ [+1
Γ— co v
*
LO +1 cn *
Lf) +1
CD k
CD
O ď
tn
A!
tn e
(0
Al >
'(ti
Q
V)
CM o
LO
O
O rH co
Γ00 (0 i—i O 3 -p 3 o
4-1 '(d
O
Γ—| fd >1
M
M
M
Λί α
♦Η
Ν
O
3
•H
d
3
a;
ω •
o
•
3 d
o l—1
3 e
4-1
3 o
O τ—!
Al
tti
ω 3
tn
3 Al
'fd
3 (ti
> 3
O
3 tn
ω S
Φ CO
> r—1
K.
LO co
O co
o II
v O
d m
Q
* H
• «· ·* ·· ·· » · · · · · • · · · »· · • * ·· ·· · · · · • · · · · • ·· ·· · · ·» ·· ···· g
ω i—i o
G (ti +J
O
Tabulka č. 4
Účinek hyaluronátu zinku (M) na žaludeční léze vyvolané okyseleným
Inhibice % 1 L ' Lv 69, 9 88,3 K. Γ ΟΊ
Délka lézí/žaludek mm ± S.E.M. 110,7 ± 16,0 57,9 ± 8,2* 33, 6 ± 7,7* 13,0 ± 3,0* * 1—1 +1 l> C\]
Dávka mg/kg p.o. 1 10 25 50 100
53 18 18 <x>
Kontrola Hyaluronát zinku(M)
β
O
G •G h
a:
Cti
Ή
G
H
O
G
4-1
G
O
Aí cti
Ή
G '(ti
G >
O
G cti
1) >
LD
O
*.
o
V d
*
4-1
G
G
H g
O cn i
o ď
(ti
G tn
Aí (ti
G tn g
K o
r—1 o
m
Q ω
99 99 • 9 · · · · · *
9 9 · · · · « 9 99 999 999
9 9 9 9
999 99 99 99
9999 «9 · • · « · • ·
999 · · e
ω
I—I o
G (tí
-P
Φ
Tabulka č. 5
Účinek hyaluronátu sodného na žaludeční lézi vyvolanou okyseleným
Inhibice % I LQ 1—1 35, 9
/žaludek n *
Ή £ 00 o
N o
'Φ W Ϊ—i <Ti
ι—1 • ω +1 +1 +1
(0 44 +l 00 r- cn
1—I s. K K
'Φ £ Γ' Lí~) Oh
o E Γ- kO
Dávka mg/kg p.o. i 1 50 100
£3 18 18 18
Kontrola Hyaluronát sodný
O
G •H a
ω c
rH o
G +J
G
O
O
Ή a
'fd c
>
o
W ω
>
LO
O
O
V
Λ *
999 9 ·· ··
9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
99 99 9 99 9
9 9 9
99 99 φ
I—I o
(ti +j φ
(ti
Λί
I—I d
(ti
EH chloridu zinečnatého na žaludeční léze vyvolané okyseleným d
φ o
-H >o o
Inhibice % 1 rco 52,0 O ΓΟΟ
d Φ Ό d rp (ti >N Ή S co o *
N co
'Φ ω i—1 r-
i—1 · ω Φ d +1 5 ± + 0 7 ± ± 1
1—1 K r-
'φ ε i—1 09 •ŠT
q ε U0 CM CM k£>
Dávka mg/kg p.o. 1 3,2 sř MO 12,8
Ss o i— 10 10 10
Kontrola Chlorid zinečnatý
o c
•H d
d ω
Ή o
i—1 o
p
-P c
o d
ω
Ή c
'(0 c
i>
o
P w
Φ >
LD
O »K o
v d
* d
d •H ε
o co
I o
ď
I-1 ε
o (ti
C tn d
Φ
C tn ε
LD
K o
Lf)
Q ω
• · • * · • · ···· · • *· ·· 9·
9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9
9 99 999 999
9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9
I—I
Λ
H sucralfátu na žaludeční nekrózy vyvolané okyseleným etanolem <D
G
H >o O
Inhibice % 1 O CO LO Γ' l> K. ΓΟΟ
/ žaludek co 0Ί *
sH 2 LO *
N LD o
Ό w T—l CM LD
1—1 rO ± s. +1 CO + 0 +1 O ± 3
H *» LO
'(1) £ O LO K
Q E kO kO t—1 r~~
Dávka mg/kg p.o. 1 50 100 400
53 xT M1
Kontrola sukralfát
O c
•H d
λ;
w mH c
Γ—| o
P c
o
X w
Ή c
'3 c
>
o tn
Φ >
LO o
o
V a
* o
á
Ln
X tn
E
CM
CM T—I i—1 o
LC
Q
M ·· ···· ·· ·· • · * · • · « · ··· ··« »·· ·« «* ··
Γ .—I >ϋ β
λ:
ι—I Β Ρ β
Η
Ή β
Φ >Ν
Ο
Ή
Ό
Ο β
(X
Ή >β (X £ Φ I—ι ο β φ Ρ φ β
φ
1-1 φ
β >1
Ρ ο
'φ β (0 ι—I ο
>
>1 >
Φ
Ν 'Φ
Ή β
>υ φ
Ό β
rp β
>Ν β
ρ β
-Η
Ν β Ρ 'Φ β Ο β β I—I β Ρ ρ
φ β
Ή >υ ο
Inhibice % 1 28,7 kO LO 93,4
Délka lézí/žaludek mm ± S.E.M. i—1 +1 rσ> kO CTi LO +1 Γ ΟΊ 37,9 ± 12,2* * r~~ r-1 +1 kO 'xT
Dávka mg/kg p.o. 1 25 50 o o i—1
18 11 12 CM i—1
Kontrola Hyaluronát zinku (M)
β ο
β
-Η
Λ β
Ρ
Μ
Ρ β
Γ—1
Ο β
Ρ β
ο
Ρ β
Ή β
'β β
>
Ο β
β
Φ >
ΙΟ
Ο ο
V (X *
Ρ β
β β
£ ο
I ο
ίΧ β
β
Ο>
Ρ β
β
Cn £
'ίΓ ο
m
Q
Η ·· · ·· · • · • · · ·
Tabulka č. 9
Účinek hyaluronátu zinku (M) na žaludeční léze vyvolané okyseleným etanolem při prodlouženi doby úpravy na 120 minut.
Inhibice % 1 12,2 6 'st 83,0
Délka lézí/žaludek mm ± S.E.M. +1 CO K o <0 r~ t +1 OJ (O Lf) 32,8 ± 7,5* 10,3 ± 4,6*
Dávka mg/kg p.o. 1 lf) OJ o lf) 100
CN i—1 CN ϊ—1 CN i—1 CN ,—|
Kontrola Hyaluronát zinku (M)
o β
-H •a o
n
Ή β
Γ—I o
β p
c o
O
Ή β
oj β
>
ο β
ο φ
>
Lf) ο
κ ο
V a
*
Ρ β
β
-Η e
ο <Ν ,—I I ο
a
I—ι ε
ο t—I £
tn
Λί (ΰ £
tn £
ο (Ό
ΙΌ ο
ιΓ)
Q
Η • · · · • · · • · · ··· ··· ·· ·· ··
Tabulka č. 10
Účinek NG-nitro-L-argininmetylester (L-NAME) na ochranné působení hyaluronátu zinku(Μ) (ZH/M) proti poškození žaludku vyvolaném okyseleným etanolem
Inhibice %a 1 CO CTi co 31,9 60,2 48,4
Délka léze/žaludek mm ± S.Ε.M. 60,5 ± 6,8 18,4 ± 2,3* Λ * co +1 CN t—1 'šT ϋ * K. +1 l—1 K CN •o * LD CO +1 CN K. r~1 cn
Dávka mg/kg p.o. 0 + 0 0 + 50 25 + 50 400 +25+50 400 +25+50
3 O CN O CN O CN τ—1 CN i—1 CN
Vehikl + vehikl Vehikl + ZH/M L-NAME + ZH/M + w is 1 +1 + tr 1 w 31 N + w s 1 + tr l ffi Q N
1-1
•H A φ > £ to a A to £ A tq
1—1 -(- + + +
a:
•H rH i—1 H 1-1
A A A! 2 A
Φ •iH -d d
> A A £ A
Φ Φ. 1 Φ
+ > i> A >
i—1 3 3 3 3
a: 0 O O O
d 3 3 3 3
Λ Ή •H d Ή
φ CL CL CL CL
> 3 3 3 3
a Ai Ai A
3 co co 3 3
o
c φ Φ Φ Φ
•d CO CO 3 CO
CL
3 '3 '3 '3 '3
A > > > >
CO '3 '3 '3 '3
3 3 3 3
Φ > > > >
CO O O O O
3 3 3 3
'3 3 co 3 3
>
'3 Lf) LD LO LO
3 O O O O
> K K.
o o O o O
3 v V V V
CO & CL CL CL
RJ * Λ 0 Ό
• · • 9 • · » · · ·
I · · · · 999
9
9 9 9
Tabulka č. 11
Účinek NG-nitro-L-argininmetylester (L-NAME) na ochranné působení chloridu zinečnatého proti poškození žaludku vyvolaném okyseleným etanolem
(0 o\° Φ 0 H b -H b G 1-1 1 CM K. CTi 00 73,2
Délka léze/žaludek mm ± S . E .M. 74,3 ± 13,5 8,0 ± 2,6* 19,9 ± 5,5*
Dávka mg/kg p.o. 0 + 0 0 + 25 25 + 25
co CM CM CM CM CM
Vehikl + vehikl Vehikl + chlorid zinečnatý L-NAME + chlorid zinečnatý
a:
H
Λ
Φ >
+ i—i Aí •H
Λ
Φ >
o o
G
-H a
o a:
w φ
w oj >
oj
G >
O ω
LD o
K, o
V
Ol *
• · · · ► » · ·
I · · · • ·· 99 · • · • · · ·
Z výsledků uvedených v tabulkách č. 1, 2, 3 a 4 je zřejmé, že hyaluronát zinku s různými molekulovými hmotnostmi a různého stupně čistoty podstatně chrání žaludek: po orální aplikaci tyto sloučeniny inhibují, v závislosti na dávce, poškození žaludku vyvolané kyselým etanolem. Hodnoty ED50 pro různé hyaluronáty zinku jsou: hyaluronát zinku (I): 15,9 mg/kg;
hyaluronát zinku (II): 11,1 mg/kg; hyaluronát zinku (III):
32,2 mg/kg a hyaluronát zinku (M) : 10,4 mg/kg. Oproti komplexům hyaluronátu zinku (I), (II), (III) a (Μ), hyaluronát sodný aplikovaný orálně v dávce 100 mg/kg vykazuje ochranu pouze ve 36 % případů žaludečních lézí vyvolaných okyseleným etanolem (Tabulka č. 5). Hodnota ED50 vztažená k chloridu zinečnatému je po orální aplikaci 4,5 mg/kg (Tabulka č. 6). Sukralfát, který je známým cytoprotektivním činidlem, které se používá jako referenční látka, vykazuje ve srovnání s testovanými hyaluronáty zinku (Tabulka č. 7) slabší aktivitu (hodnota ED50 je 112 mg/kg) .
V případě komplexu hyaluronátu zinku(M) se zkoumalo trvání účinku. Když se prodlužuje doba předchozího ošetření, hodnoty ED5o rostou (Tabulka č. 8 a hyaluronát zinku (M) způsobem.
Studovalo se spojení mezi hyaluronátu zinku a endogenním NO tak, že se použil inhibitor biosyntézy oxidu dusnatého, NG-nitro-L-argininmetylester (LNAME) . Jestliže se uvažuje, že hyaluronát zinku(II) a hyaluronát zinku (M) vykazuje stejnou aktivitu v testu s okyseleným etanolem, pak se v testu použil pouze hyaluronát zinku (M).
Z výsledků (tabulka č. 10) je zřejmé, že předcházející ošetření L-NAME podstatně snižuje gastroprotektivní aktivitu hyaluronátu zinku(M). Tento jev se dá odstranit předchozím ošetřením L-argininem, ale ne D-argininem. Na druhou stranu ochranný účinek chloridu zinečnatého není ovlivněn předchozím
Z výsledků vyplývá, že
9) se váže na sliznici žaludku vratným cytoprotektivním účinkem ··· · · · · · • · · · · · · • · ·· ··· ··· • · · · · • · · ·· · · ·· ošetřením s L-NAME (tabulka č. 11). Hyaluronát sodný se netestoval proti L-NAME, protože ochranný účinek na žaludek byl velmi mírný (tabulka č. 5) a nedal se z výsledků přesně hodnotit. Jev, že ochranný účinek hyaluronátu zinku se podstatně snižuje pomocí L-NAME, zatímco chlorid zinečnatý ochranný účinek v podstatě neovlivňuje, ukázal, že NO může mít jistou úlohu při vývoji cytoprotektivního účinku hyaluronátu zinku(M).
2. Inhibice žaludečních lézí vyvolaných indometacinem.
Použily se samice krys RG Wistar, jejichž hmotnost je 120 až 150 g. Před experimenty zvířata po dobu 24 hodin hladověla, ale dostávaly vodu podle potřeby orálně. O 30 minut později indometacin v dávce 40 mg/kg.
aplikaci indometacinu se zvířata dislokací. Žaludky se vyňaly z těla
Testované látky se podávaly by se podkožně aplikoval Čtyři hodiny po dráždící usmrtila cervikální a otevřely se podél delšího zakřivení a na glandulárním žaludku se spočítaly hemoragické léze.
Hodnota ED50 reprezentuje dávku, která chrání žaludek z 50 % před poškozením indometacinem.
Výsledky jsou uvedeny v následujících tabulkách. Kontrolní skupině uvedené v tabulkách se místo hyaluronátu zinku aplikoval pouze vehikl (destilovaná voda).
·· ·· • · · ·· · ··· • · ·· ·· o\°
Φ
O •d b
•H b
G
H •xT co
Lítí
LD g
Φ
G •H o
(ti
-P
Φ g
o
Ό
G
-H b
Φ
Ό g
rd (tí >N 'd
N 'Φ
I-1 b
Φ >O
O
CM
Tabulka č. 12
Účinek hyaluronátu zinku(I) na žaludeční léze vyvolané w
ca +1
CN +1 cn
K
CM +1 rcn τ—1 +1
I— co *
O +1
K o
O
CL
Cn b
Cn g
o *»
Γ—| co co co b
'(0
G o
P
G
Γ—I (tí >1
G b
G
Ή
N
G
O
G d
CL
G b
co
Ή
G
I-1
O
P b
G
O b
(tí '(ti >
'(tí
G >
O
P
Ctí
LO o
o
V
CL
O
CL (tí
G
Cn b
(tí
G
Cn g
co
CN
• · · · · · • · · fc fc * • · · · · · • fcfc fcfcfc fcfcfc • · · · fcfc «· ·· o\°
Φ υ
•H
Λ
Ή b
G
H ra η—I 00
ΙΌ
LO
ΙΟ
Γe
Φ
G
H o
(tí +J φ
£ o
Ό
G
-H
AJ φ
Ό
G
Γ—) (0 >N >rd
N •Φ
Tabulka č. 13
Účinek hyaluronátu zinku(II) na žaludeční léze vyvolané +J
Φ >Ο Ο
Ρ-ι +1 (tí
Α4 >
'Φ
Q (Λ
Γ
CN +1 σι
CN
C-J +1 •fc +1 ο
ί-~ *
σ
κ.
τ—I +1 •fc.
Γ' *
•fc ο
+1 γ-~ κ
Ο ά
en α:
en £
Γ+J '(tí
G
Ο
G
G γ-4 (0 >,
Ε
G
Αί
C
-Η
Ν (0 I—I ο
G
4-J
C
Ο
Ε £>ί ·Η Ε Ν
G ο
G •Η α
G α
Ctí
Ή G r—1 Ο G +J G Ο α m
'(0 >
'(tí
G >
Ο
G ctí
UO
O •fc o
V
0, (tí
G en
Ai (tí
C en £
σ r•fc
LÍ0
II o
in
Q
W ft ft • · · · · · • · • ♦ • · • ftft · ft • ft ftft ♦ ftft · • · · ft • « · · · · • · • · ftft
Q)
G
H o
ft
4->
<1>
β o
Ό
G
Tabulka č. 14
Účinek hyaluronátu zinku(III) na žaludeční léze vyvolané
Inhibice % 1 k£> Γ kO *. Γ LT) 83,7
počet lézí/žaludek ± S.E.M. ω +1 00 t—1 17,0 ±4,5 * LO CM +1 (Ti K, l> 3,0 ± 1,4*
Dávka mg/kg p.o. 1 O rd 10, 0 100,0
£ r*· Γ
Kontrola Hyaluronát zinku(III)
O c
•H cr o
ro
Ή g
i—I o
P
-P
G
O ro '(6 >
'(ti
G >
O
P ro to o
K o
V cr *
o cř
I—I β
o (ti
G
Cn (ti
G
Cn β
CM
K.
o o
to
Q
W ·· ·**·
00 ► 0 · 0 ft 0 0 0
0·« 000
0
00 o\° <L>
O
H •G •H rG
G rLf)
CD
CN co (1) tí •H υ
(tí
4-) ω
£
O
Ό
G r4
A! Φ TS 0 r—i (ti >N
N <L>
Tabulka č. 15
Účinek hyaluronátu zinku(M) na žaludeční léze vyvolané
4-) ω
>o o
d ω
<Ό +1 (ti tn Aí Aí >
'(ti O tn ε
σι
C\l +1
LT)
CN
CD +1
CD
K,
Lf)
O
K rd
CN +1 κ
LD *
Oh o
+1
O
CN
CN «Ρ '(ti £
O £ £ — £ £ H (ti £ ►>i Ή K N
CD
•H
d
0
a:
ω o
Ή d ď
t—1
o d ε
4-) O
c
0
Aí (ti
ω d
'(ti > tn
a:
'(ti d > (0 d
0 Li cn tn ε
Lf) CN
o <D
o
v
d m
Q
* W
·» ···· · ·· ·· ·· • 9 « · * · · · ♦ » · • · Φ · · · « · * « « · * · · · ··«··« « · · · * · · ·«·· · ··· ·· ·* ·· rd 44 i—I rQ (d
H hyaluronátu sodného a chloridu zinečnatého na žaludeční léze vyvolané indometacinem <D G H >O 'to
Inhibice % 1 36,2 1 O
í/žaludek r-1 co r-
N *»
'Φ co co co co
H 2 +1 +1 +1 +1
+j ω ω cn LQ CM i—1
>ο ω K K
ο CM CM LO
íá +1 CM r-·1 rH i—1
Dávka mg/kg p.o. 1 O o rH 1 25
3 CO í—1 18 12 11
Kontrola Hyaluronát sodný Kontrola Chlorid zinečnatý
9999 •9 99 99 · 9 9 9 9
9 9 9 9 9 • · · ··· *·· • · · · • ·· ·· ··
Tabulka č. 17
Účinek sukralfátu na žaludeční léze vyvolané indometacinem
Inhibice % 1 14,8 62,1 CO CxJ co
í/žaludek 00 * *
N K CM
Ό • oo -tr
1—1 •P E.M +1 +1 ± 2 i—I +1
O >O co CTi *=r σι
O CD K
Q. +1 rd r_1 CD CM
nJ a: > 'tri g/kg p.o. o O 60
Q £ 1 00 rd
S 11 11 11 11
Kontrola Sukralfát
G λ:
ω
Ή O I—I o
G +J
G
O
Cfl 'f0 >
'05
G >
O
G ω
ir>
o
K
O v
*
O ά
tn λ:
tn e
σ %
ro m
Q
W ····
4
4 4
4444 • 44 4 4 4*44 • 4 4 · 4 4 4 4 • 4 4 4 4 4 44 4444 • 4 4 · 4 4 • 444 44 44 44
Z výsledků je možné vidět, že hyaluronáty zinku (I), (II), (III) a (M) jsou v případě žaludečních lézí vyvolané indometacinem (tabulka č. 12, 13, 14 a 15) účinné. Z výsledků také vyplývá, že hyaluronáty zinku inhibují vývoj žaludečních lézí vyvolaných indometacinem způsobem závislým na dávce. Po orální aplikaci jejich hodnoty ED50 jsou 2,8 mg/kg, 5,8 mg/kg,
10,2 mg/kg a 6,2 mg/kg (uvedeno v tabulkách č. 12, 13, 14 a
15) .
Z dat uvedených v tabulce č. 16 je zřejmé, že hyaluronát sodný a chlorid zinečnatý nevykazují žádný ochranný účinek na žaludeční sliznici proti poškození indometacinem. Z vyšší hodnoty ED5o (74,9 mg/kg) vyplývá (Tabulka č. 17), že ochranný účinek hyaluronátu sodného je vyšší než u sukralfátu.
3. Inhibice žaludečních lézí vyvolaných stresem.
Použily se samice krys RG Wistar, jejichž hmotnost je 120 až 150 g. Před experimenty se zvířata nechala vyhladovět po dobu 24 hodin, ale dostávala vodu podle potřeby. Experimenty se prováděly způsobem, který je podobný způsobu popsanému v publikaci Senay et al., Proč. Soc. Exp. Med. 124, 1221, (1967)) .
Na základě výsledků testů s okyseleným etanolem, kde se prokázalo, že hyaluronát zinku (I) a (M) mají stejnou aktivitu, se ve stresovém modelu testoval pouze hyaluronát zinku (M).
Testované sloučeniny se aplikovaly orálně. O 30 minut později se zvířata imobilizovala v plastikových boxech a pak se umístily do chladničky s teplotou 4 až 8 °C. O čtyři hodiny později se zvířata vyňala z chladničky a z boxů a o hodinu později se usmrtila cervikální dislokací. Žaludky se vyňaly z těla a otevřely se podél většího zakřivení. Hemoragické léze se hodnotily čísly v rozmezí 0 až 3. Žaludek bez poškození se hodnotil číslem 0, žaludek pouze s několika hemoragickými lézemi se hodnotil číslem 1, žaludky s počtem lézí vyšším jak ·· ··♦· • · • 9 9 · *
* ·
9 9 • « 9 ·
999 999 • · 99 se hodnotil číslem 2 a žaludky s velkým počtem lézí se charakterizovaly číslem 3.
ED50 se definuje jako dávka potřebná ke snížení skóre žaludečních lézí o 50 %. Výsledky jsou uvedeny v následujících tabulkách.
99
9 9 · 9
9 9 9
9 9
999 99 ·« ♦·♦·
9 9
9
9 9
9
999 9 9
99
9 9 9
9 9 9
999 999
9
99
Tabulka č. 18
Účinek hyaluronátu zinku(M) na žaludeční léze vyvolané e
Cl) cti
O
G
4->
Cti
Inhibice % 1 41,2 76,5 O o í—1
Skóre lézí/žaludek ± S.E.M. 1,7 ± 0,4 CO O +1 O T—1 0,4 ± 0,2* 0*
Dávka mg/kg p.o. 1 25 O LD 100
52 10 LD Lf) cn
Kontrola Hyaluronát zinku(M)
G
O
G •H d
G
Aí
Cti
Ή
G i—I o
G
P
G
O
Aí cti '(ti >
'(ti
G >
O
G (ti
LO o
o
V d
* +J
G
G
-G £
o <n i
o ď
r—I £ o (ti
G tn
Aí (ti
G tn £
on
CN
II o
lO
Q
H
Účinek hyaluronátu sodného a chloridu zinečnatého na žaludeční léze vyvolané stresem
Inhibice % 1 0 Ot O o
zí/žaludek CM 2* 2*
o * K K.
l—1 £ o o o
Φ W +1 +1 +1
G Ό ca LO Oh kD
44
Ctí +1 i—1 O O
ávka o á tm 44 tm O o ΙΌ
Q E 1 i—1 CM
£ 30 29 29
Kontrola Hyaluronát sodný Chlorid zinečnatý
• 9 ····
• 99 99 9 999
9 9 9
99 99
Různé stresové situace, jako je chlad a podstatné omezení pohybu, vyvolávají u krys akutní poškození žaludku. Z výsledků je patrné, že stresu způsobeným chladem se předchází použitím hyaluronátu zinku(M) v závislosti na dávce. V případě orální aplikace je hodnota ED50 29, 4 mg/kg (tabulka č. 18). Na druhé straně hyaluronát sodný a chlorid zinečnatý vykazuje pouze slabé ochranné účinky proti poškození žaludku vyvolané stresem (tabulka č. 19).
4. Inhibice poškození žaludku vyvolané destičkovým aktivačním faktorem (PAF).
Použily se samci krys RG-Wistar, jejichž hmotnost je 200 až 250 g. Před experimenty zvířata hladověla po dobu 24 hodin, ale dostávala vodu podle potřeby. Experimenty se provedly způsobem, který je podobný způsobu popsaném v publikaci Wallace and Whittle, Br. J. Pharmac., 89, 415, (1986). Zvířata se uspala intraperitonální aplikací uretanu v dávce 1 g/kg v objemu 10 ml/kg. Připravila se femorální céva a zavedla se do ní kanyla pro aplikaci látky PAF, která vyvolává vředy. Po chirurgickém zákroku se aplikoval intravenózní infúzí PAF rychlostí 0,1 ml/min. po dobu deseti minut v dávce 200 ng/kg/min. Testované sloučeniny se aplikovaly 30 minut před zavedením PAF. Jednu hodinu po infúzi PAF se zvířata usmrtila cervikální dislokací. Z těla se vyňaly jejich žaludky a otevřely se podél nejdelšího zakřivení. Hemoragické eroze se hodnotily skórovacím systémem od 0 do 3. Žaludky bez poškození se ohodnotily nulou, žaludky pouze s několika malými změnami se hodnotily 1, žaludky s mírným poškozením se charakterizovaly 2 a žaludky s těžkou difúzní hyperémií a/nebo. hemoragií se hodnotily 3.
PAF (destičkový aktivační faktor) je endogenním fosfolipidem, který se v současné době popisuje jako nej silnější činidlo způsobující tvorbu žaludečních vředů. Jeho ·* ►»·· • ft · · • »« »· ·· • · · · · r · · • * · · * · · • · · · ··· ··· • · · · · * » · · 9 » · * * endogenní uvolnění má důležitou úlohu při vývoji jistých forem peptického vředu (Rosám et al. (1986); Wallace et al. (1986)).
Výsledky jsou uvedeny v tabulce č. 20.
·» ·« • · · · • · · · ··· ··· • « • e ·* ·· «*··· . ·· ·· · · • · · • · · • · « ·»· ·»
LO
CO
Φ
Ν
'Φ
ι—1
Ή
β
>Ο
Φ
Ό
Ρ
Γ—i
(ti
>Ν
(0
β
ο
Ρ
'φ
Ρ
(ti
β
>υ
φ
β
•Η
Ν
Ρ
Ό
-Ρ
Ρ
ο
I—1
Ρ
ϋ
(ti
Ρ
Ρ
Ή
Ό
ο S
ϋ) Id
ΡΜ
Ρ —'
Ρ
'(ti ε
β φ
ο Ρ
Ρ ο
Ρ Ρ
Γ-i Ρ
(ti φ
>1 Ρ
Ρ ε
Ρ
- β
S >ϋ (ti
Ρ Ρ > -Ρ Ρ
β Ρ
•Η Ν (ti
ο\° φ
ϋ
Ή
Ρ •Η
Ρ β
Η
CO
Γ'
ΟΙ σι ο
θ’
Γ~
ΟΙ
ΟΙ o
C\1 >o (ti p
1—ι
Ρ
P (ti
Η
Ρ
Ρ 'Φ β
ο
Ρ
Ρ
Γ—1 (ti '>ι >
Ο
Ρ >υ •Η +J ω
φ >, Ό 'Φ
Ρ (ΰ
Ρ φ
β •Η >υ ο
ο >
>1 >
ρ φ
Ό
Ρ
Γ—1 (ti >Ν \
Ρ
Ν 'Φ
Φ
Ρ '0
Ρ
CO (ti ρ
>
'Φ
Q ω
Μ +1
Λ tn
Ρ tn ε
ο +1
ΟΙ
ΟΙ θ’ ο
+1
LO
Ο
ΙΟ
ΟΙ
CO
LO (ti ι—I Ο Ρ Ρ β ο
Ρ '(ti β ο Ρ Ρ Γ—I (ti Ρι Ρ *
ΟΙ
Ο +1
CO ϊ—I
Λ)
ΟΙ
Ο +1
LD
ΟΙ *
ΟΙ κ
ο +1
ΓLO
LO ιο t—I
ΙΟ
ΟΙ
σ> Ρ ÍT ε ο ο γΗ
S ο
Ρ
Ρ 'φ
Ρ β
β Ό
•Η 0
Ν Φ
Ρ Ρ
Ρ Ρ
'(ti '(ti
Ρ β β
ο ο 0
β Ρ Ρ
Ρ Ρ
íd Γ—I Γ—1
2 (0 σι
Ρ ί>Ί >Ί
ω Ρ Ρ
Ρ Ρ
β ο 0
β β
ο •Η •Η
Ρ id id
Ρ Ρ Ρ
β Ρ Ρ
ο Φ φ
Ρ CD CD
ω Φ Φ
'^Ί β
Ό
Ο (0
Ρ '(ti β
ο
Ρ
Ρ γ-Η (ti
Οι
Ρ 'ί>ϊ
Ρ (ti β
>ο φ
β
Ή
Ν
Ό
Ρ
Ρ ο
1-1
Ρ ο
'(ΰ >
'(0 β
>
ο
Ρ (0 '(ti ί>
'(ti β
>
ο
Ρ φ
ΙΟ Ρ> Ο Ο ο
V id ο
V (d '(0 >
'(ti β
>
ο
Ρ
Φ
LO ο
ο
V id <ti Λ
Podle skutečností, které se uvádějí v souvislosti se stresovým modelem, se v modelu indukovaném PAF testoval pouze hyaluronát zinku(M). Hyaluronát zinku(M) silně redukuje účinek PAF při tvorbě vředů, zatímco hyaluronát sodný nevykazuje uvedený účinek. Chlorid zinečnatý vykazuje chrání žaludek proti působení PAF. Tento účinek je však daleko menší ve srovnání s komplexem hyaluronátu zinku (tabulka č. 20).
5. Inhibice chronických žaludečních vředů vyvolaných kyselinou octovou.
Použily se samice krys RG-Wistar, jejichž hmotnost je 120 až 150 g. Před experimenty zvířata hladověla po dobu 24 hodin, ale dostávala vodu podle potřeby.
Chronický žaludeční vřed se vyvolal aplikací injekce o objemu 25 μΐ 20 % (objem/objem) kyseliny octové do stěny žaludku. Injekce se' zavedla při slabé anestezii provedené za použití éteru podle způsobu, který je podobný postupu popsanému v publikaci Takagi et al., (1969). Orální aplikace testovaných sloučenin se začala pět dní po chirurgickém zákroku a pokračovala v režimu jedenkrát za den po dobu až 14 dní. Zvířata se usmrtila 15-tý den a z těla se vyňal jejich žaludek. Obtížnost ulcerace se hodnotila měřením průměru vředů a vypočítala se poškozená plocha.
Účinek hojení se vyjádřil jako procentuální rozdíly mezi hodnotami kontrolní a testované skupiny.
Kyselina octová dráždí stěnu žaludku a způsobuje dobře definovaný vřed, který je velmi podobný lidskému vředu, jak svým mikroskopickým obrazem tak i způsobem tvoření. Výsledky se uvádějí v následujících tabulkách.
• ·· · · • · · • · · · • · · • · · · • · · • · · · · • · · · • · · • · · ·· · ··· • ·
9 ·
Tabulka č. 21
Účinek hyaluronátu zinku(II) na chronický žaludeční vřed vyvolaný kyselinou octovou
Účinek hojení % 1 30,3Ť 34,8Ť 00 LT)
Oblast zasažená vředem mm2 ± S . Ε . M. CM ϊ—1 Ή cn K OO 6,2 ± 1,0 5,8 ± 1,1 * M0 O +1 Γco
Dávka mg/kg p.o. 1 0,01 t—I o 1,0
£ rCN O i—1 o 5—1 o t—1
Kontrola Hyaluronát zinku(II)
d o
d •H d
d d
o
Ή G I—I O P d d o d ω
'd >
'(ti c
>
o
P ω
LD o
o v
d *
i a a a ► a a a aa a a a a
CO CO
CM
CM >0
X i—I 3 X 3 H a
a a aa a 'X
3 i—I O > >1 >
Ό
Φ >3 >
'•H >υ φ
Ό
X >N 'X
X
O •H
O
X υ
E
P
O
P
O
E
X
E 'X >
O i—I 3 X Φ
I—1 o
E
E 'X
N
X •3
N
P '3
O
X >1
X
X
Φ
Ή >υ ο
O >
O
P
O
O
O 3 •H ι—I Φ 3 >1 X o\°
Φ ro
O
X
X
Φ >U
3>
co <co
Ka
V
LO <LO
CM '3
Φ >N
N
P 3 3 i—I X o
E
Φ
X
Φ >3 >
£
W co +1
LO *» t—I +1
CM
K.
σ co
Ka
CM +1
O o
CM ϊ—I +1 σι co *
LO a
O +1 co
LO a
t3 +1
CM a
σ
CO »a
O +1 co a
LO
O
ď
3 tP
X X
> O
'3 tn K.
Q E 1 r~i
CM i—I O 3 P 3 O
P '3
O
X
X -3 3 N
P '3
O
X >,
X •3
N ι—ι o 3 P 3 O
P
H 3 H O H 3 —
3 i—I X 3 3
X -3 EU N '3
Φ •ΓΊ
O
X 'Φ
Φ rH
X
O
X
N '3
Φ
-ro
O
X 'Φ
Φ i—I 3 S O d N <- X>
• · ·· ·· • · · · • · · · * ·· · ··· • · «· · · o\°
G tt)
-ro
O
X!
tt)
C •rd >o o
O <r~
O co
140 'Cti
C tt) >N rd co <d
N
Tabulka č. 23
Účinek sukralfátu na žaludeční vřed vyvolaný kyselinou octovou £ ω X ω
XI >g o >
o
d
cti Cn
44 44
> \
'Cd tn
Q 6
w ω
+i
CM τ—I +1 r-~
K
LC
ΟΊ uo
K.
rd +1
K
CO
4-1 '(d m
i—i (d
G
G
CO co
K
1—I +1
CM cn (tí i—I O G 4-1 G O 3 *
co +1.
co šT o
o
140
4-> '(tí M-l i—I (d G 44 G CO
'rd Ή
G G
(1) 0)
•ΓΊ Ό
o o
X X
'tt) 'tt)
G G
tt) CD
rd r-d
X cd
o £
o
G d
N N
<- ->
G
O c
Ή d
G co
Ή
G
H
O
G
4->
G
O
CO '(tí >
'(d
O
G co
140 o
o v
d *
··· • ·
Tabulka č. 24
Účinek hyaluronátu zinku(M) na chronický žaludeční vřed vyvolaný kyselinou octovou
Účinek hojení % I <,—I ΓCM <i—1 i—( vrt
Oblast zasažená vředem mm2 ± S.E.M. 12, 9 ± 2,5 (O K CM +1 . σ) Vrt ϊ—í +1 kO r-
Dávka mg/kg p.o. 1 0,1 o i—1
10 10 Oh
Kontrola Hyaluronát zinku(M)
• · · · ·» ft· ·· • · · ···· ·«·· • · ··· ···· • · « ·· ·· ······ ·· · · · · ♦
-L ···· ft ··· ·· »· · ·»
Hyaluronát zinku(II) zrychluje hojení chronického žaludečního vředu, který je vyvolán kyselinou octovou (tabulka č. 21). Podstatná změna (p<0,005) se pozorovala při dávce 1 mg/kg. Nezanedbatelný léčebný účinek se zjistil dokonce při dávce 0,01 mg/kg. Ani hyaluronát zinku(I) ani hyaluronát zinku(III) neovlivnil hojení chronického vředu při dávce 1,0 mg/kg (tabulka č. 22).
Referenční sukralfát byl také méně účinný při zrychleném hojení žaludečního vředu ve srovnání s hyaluronátem zinku(II), jak ukazuje tabulka č. 23. Aby se dosáhlo zesílení léčebného účinku o 53 %, musela se dávka sukralfátu zvýšit na 500 mg/kg.
Hyaluronát zinku(M) také zrychluje hojení vředu vyvolaného kyselinou octovou, avšak zrychlení léčby ve srovnání s účinkem hyaluronátu zinku(II)je méně patrné. Hyaluronát zinku(M) vykazuje také svou nejvyšší aktivitu . při dávce 1 mg/kg, přičemž výsledek potvrzuje naše pozorování uvedené shora v textu, že účinky hyaluronátů zinku různého původu se od sebe podstatně neliší (tabulka č. 24 a obrázek č. 1).
6. Inhibice íntestinálního vředu vyvolaného indometacinem.
V uvedeném experimentu se použily samice krys RG-Wistar, jejichž hmotnost je 120 až 150 g. Tyto krysy před experimenty nehladověly. Intestinální vřed se vyvolal orální aplikací 15 mg/kg indometacinu. Testovaná sloučenina se podávala zvířatům orálně 3-krát za 48 hodin ve 24-hodinových intervalech. První aplikace testované sloučeniny se podala 60 minut před aplikací indometacinu. Zvířata se usmrtila 72 hodin po první aplikaci testované sloučeniny. Kontrolní zvířata místo testované sloučeniny dostala pouze vehikl. Termín „normální krysy znamená krysy, které nehladověly a nebyly ošetřeny.
Z těla se vyňal malý segment střeva od vrátníku ke slepému střevu, umístil se do 0,9 % (hmotnost/objem) roztoku chloridu sodného při teplotě 37 °C a spojil se s BP záznamníkem prostřednictvím jednoho jeho konce pomocí polyetylenové «4 4 · 4 « »4 4 · · »4 · 4 4
I 4 4 4 · · ·<
• · · 4 kanyly. Po spojení obou konců se uvnitř střeva zvyšoval tlak až se začaly objevovat bubliny na slabých místech stěny střeva. Tento tlak se vyjadřuje v mm rtuťového sloupce a označuje se jako pevnost v tahu (TS) . Výsledky jsou uvedeny v následující tabulce č. 25.
• 9 «· f • 99 9 9 · · · · 9 9 · 9 9 • · 9 · · · 9 999 • · · · · • 99 99 «9 9 9
G
-H
O (fl +J φ
ε o
Ό
G •H
Tabulka č. 25
Účinek hyaluronátu zinku(II) na intestinální vřed vyvolaný
Pevnost v tahu stěny střeva jako index ulcerace Hgmm ± S.E.M. 227,1± 7,6 16,7 ± 6,0 σι K 00 +1 Oh K rOJ 41,3 ± 10,9* 48,8 ± 11,3*
Dávka mg/kg p.o.. 1 Vehikl 3x1 3x10 3 x 100
Γ~~ 18 CO CO
Normální Kontrola Hyaluronát zinku(II)
G
O
C
Ή a
ω
Ή
G r—1
O
G
4->
G
O
Ctí
Φ «
'(fl >
'(fl
C >
O
G ω
LO o
o o
V e * · « · · * • · • · ♦ • · «·· · · · • · · · · » • · ♦ * 9 · ♦ · 9 9··
9 9 999 999
9 9 9
9 9 ·«
Z experimentálních výsledků je patrné, že hyaluronát zinku(II) chrání stěnu střeva před ulcerací, která se vyvolává indometacinem. Při dávkách 10 mg/kg a 100 mg/kg se pevnost v tahu střevní stěny ve srovnání s kontrolní skupinou zvýší skoro třikrát. Zvýšení pevnosti v tahu stěny střev není doprovázena podstatným snížením ulcerace (Tabulka č. 25).
7. Inhibice gastrointestinální pohyblivosti v testu, kde propulzí je aktivního uhlí.
Vedle testování hyaluronátů zinku v různých akutních a chronických modelech, se studovalo, zda uvedená substance vykazuje libovolný účinek na gastrointestinální pohyblivost.
V experimentech se použily samice krys RG-Wistar, jejichž hmotnost je 120 až 140 g. Krysy hladověly po dobu 24 hodin, ale vodu dostaly podle potřeby. Experimenty se provedly podle postupu, který je podobný jako způsob popsaný v publikaci P. A. Janssen and A. J. Jageneau, J. Pharm. Pharmacol. 9, 381 (1957).
Testované sloučeniny se aplikovaly orálně v dávce 100 mg/kg. Kontrolním zvířatům se aplikoval místo testovaných sloučenin fyziologický roztok. O 30 minut později se orálně aplikovala 5 % (hmotnost/objem) suspenze aktivního uhlí v objemu 0,5 ml na jedno zvíře. 60 minut po aplikaci aktivního uhlí se zvířata usmrtila cervikální dislokací. Z těla se vyňalo střevo od vrátníku k tenkému střevu a měřila se jeho délka spolu se vzdáleností, kterou urazilo aktivní uhlí.
Pohyblivost se vyjádřila jako poměr vzdálenosti, kterou urazilo aktivní uhlí, ku délce celého střeva. Výsledky jsou uvedeny v následujících tabulkách.
• · · ♦ »·
Tabulka č. 26
Účinek hyaluronátů zinku(I), (II) a (III) na gastrointestinální pohyblivost
Poměr** o o 4-1 σ\ ** o 0,79 ± 0,07 o o +1 O ro 0,89 ± 0,03*
Posun suspenze aktivního uhlí mm ±S.E.M. 604 ± 3,1 718 ±5,6 610 ±3,9 68 ± 2,5
Délka střeva Mm ±S.E.M. 766 ± 2,0 916 ± 3,4 r+1 OJ cn r- 768 ±3,8
Dávka mg/kg p.o. 1 100 100 O o ,—I
LO LO LO LO
Kontrola Hyaluronát zinku(I) Hyaluronát zinku(II) Hyaluronát zinku(III)
G
O
G
G ϋ
G
A ω
Ή G r—I O G P G O A co
Ή
G 'Ctí
G >
O
G
CO (1) >
LO
O o
v * · · » ♦ · · · • · · · • · · · · · ♦ · « · ·· (tí >
Φ >G
P (0
G
P
CO '(ti >0 'CD i—I CD O
G
A
Ή i—I
A
G
O
A
Ή
G >
•G
P
A (tí
Φ
N
G
Φ &
co
G co.
ctí rG
-G
N (tí
G
G
G
O
G
Φ
P
A •H
P co o
G
Φ
H 'Ctí
Ό
N >
G >φ o
SX *
*
99 9
Tabulka č. 27
Účinek hyaluronátu zinku(M) na gastrointestinální pohyblivost
Poměr** cn o K. o +1 co 00 o cn o o +1 CO co o
Posun suspenze aktivního uhlí mm ±S.E. M. 688 ± 4,0 655 ± 3,9
Délka střeva Mm ±S.E.M. 782 ± 2,3 788 ± 2,5
Dávka mg/kg p.o. 1 100
CO co
Kontrola Hyaluronát zinku(M)
·· • · ♦ * · 9
9 9 9 · 9
99 999 999 • 9 9 9
999 99 99 «i >
ω >P b
ω
-d b
co '(tí >o 'Φ rd ω
o
G b
'd i—I b
G o
b 'd
G >
•d b
b (ti
Φ
N
G
Φ
CL
Ctí
G
Ctí (tí i—I •d N (tí P G
G
O
P
Φ b
b •H b Ctí o G Φ I—I oj
Ό
N >
í-l >Φ ε
o fcfc ···· •fc ** ·* fc fc fc fcfcfcfc fcfcfc fc • fc ♦·· fc··· fc · * fcfc ·· ···♦·· • · fc fc ♦ fcfc
..... ....... ··
Z výsledku pozorování je patrné (tabulka 26 a 27), že ani hyaluronát zinku(I), (II) ani hyaluornát zinku(M) nevykazuje žádný účinek na intetsinální pohyblivost. Absence změny aktivity ukazuje, že se uvedené látky na žaludeční sliznici zachycují vratně a na druhé straně že nedráždí střevo, aby bylo hyperaktivní.
Při porovnání účinnosti hyaluronátu zinku s různými molekulovými hmotnostmi v různých testech se překvapivě zjistilo, že existuje definovaný vztah mezi ochranou žaludku a molekulovou hmotností. Z různých experimentů vyplývá, že nejvyšší účinnost hyaluronátů zinku s různými molekulovými hmotnostmi v rozmezí 700 000 a 1 200 000 je spojená s molekulovou hmotností okolo 900 000. Další zvýšení molekulové hmotnosti není doprovázeno zvýšením účinku. Závěr z tohoto experimentálního pozorování je, že' molekulová hmotnost má důležitou úlohu při dosažení optimálního účinku.
Studium účinnosti působení proti bakteriím Helicobacter pylori
Tyto experimenty se provedly s kmeny Helicobacter pylori vykultivovanými ze vzorků biopsie žaludku pacientů, kteří trpí různým druhem vředů. Jako referenční látka se použil 1 % (hmotnost/hmotnost) roztok De-Nol (koloidní subcitrát vizmutu). Pro kultivaci se použilo agarové médium doplněné 10 % bovinní krví. Plotny, které neobsahují žádné testované látky, se použily jako kontrola. Inokulované plotny se inkubovaly při teplotě 37 °C v atmosféře plynu, který obsahuje 5 % kyslík a 7 až 8 % oxid uhličitý, po dobu 3 až 5 dní.
Za hodnotu minimální inhibiční koncentrace (MIC) se považuje nejnižší koncentrace látek, které úplně inhibují růst (množení) dobře se množících bakterií na kontrolních plotnách. Hodnoty MIC komplexů hyaluronátu zinku a De-Nol testovaných na určitých kmenech jsou uvedeny v následující tabulce.
Μ »**♦
4 4» 4*
4 44 44 4444
4 4» · 4 4 4
4 * 4 · 44 444494
4 4 · 4 4 9
44444 44444 4· 44
zinku ^g/ml) (gg/ml)
822/96 500 500
Z dat obsažených ve shora uvedené tabulce je patrné, že aktivita in vitro hyaluronátu zinku proti Helicobacter pyroli srovnatelná s aktivitou De-Nol používaného v lézích. Tato skutečnost stojí za povšimnutí, protože De-Nol je sloučenina obsahují vizmut s nezanedbatelnými vedlejšími účinky (problém toxicity; jeho užívání není pro pacienta příjemné). Při použití komplexů hyaluronátu se nepředpokládají žádné vedlejší účinky.
Závěry
Studie ukazuje, že hyaluronáty zinku s různými molekulovými hmotnostmi mají neopomenutelné gastroprotektivní aktivity. Jejich účinky proti vředům se zkoumaly na několika akutních a chronických modelech žaludečních vředů a porovnávaly se ve většině případů s dobře známým gastroprotektivním lékem sukralfátem.
Výsledky potvrzují, že všechny typy hyaluronátu zinku jsou silná cytoprotektivní činidla a že chrání žaludeční sliznici před poškozením okyseleným etanolem. Z těchto výsledků je možné udělat závěr, že hyaluronáty zinku, které mají molekulovou hmotnost mezi 700 000 a 1 200 000, jsou účinnými cytoprotektanty bez ohledu na kvalitu surového materiálu (purum nebo puriss), jenž se používá na jejich přípravu. Maximální účinnost vykazuje hyaluronát zinku s molekulovou hmotností 900 000.
Při prodloužení doby předcházející úpravy se cytoprotektivní účinek sníží pouze na malý rozsah. Tato skutečnost ukazuje, že prodloužená aktivita není doprovázena nežádoucími nevratnými změnami. Provedené experimenty umožňují objasnit mechanizmus působení. Provedly se s hyaluronátem zinku vykazujícím pouze kvalitu „purum. Zdá se, že ·· 99
9 9 · • 9 9 · • · 9 · φ · 9
9
99 s hyaluronátem zinku vykazujícím pouze kvalitu „purum. Zdá se, že experimenty potvrzují, že hyaluronát zinku chrání žaludek mechanizmem, který není charakteristický pro chlorid zinečnatý ani pro hyaluronát sodný. Cílem je objasnit uvedený mechanizmus testováním úlohy endogenního NO. Experimenty ukazují, že NO pravděpodobně má určitou úlohu při vývoji cytoprotektivního účinku hyaluronátu zinku. To je důležité, protože rostoucí pozornost se v současné době věnuje možnému vztahu mezi vývojem ochrany žaludku a endogenním NO. Podle určitých názorů (Konturek et al. , 1994) NO, který se biologicky syntetizuje z L-argininu (Moncada et al., 1991), podmiňuje ochranné účinky žaludku různých anti-vředových léků, například antacidů obsahujících hliník. Vedle toho se ukázalo, že endogenní NO reguluje krevní tok v žaludeční sliznici (Lippe et al., 1992) a reaktivitu žírných buněk (Salvemini et al·., 1994).
Z předchozích experimentů je také zřejmé, že stupeň gastroprotektivního působení hyaluronátů zinku převyšuje o jeden řád účinek sukralfátu, který reprezentuje léčivo proti vředům.
Nesteroidní protizánětlivé léky (NSAID) způsobují žaludeční léze nebo ve vážnějších případech žaludeční vředy, které jsou způsobeny jejich přímým poškozením žaludeční sliznice, povrchovému dráždění a jejich nepřímému účinku, který vzniká ze systémové inhibice syntézy prostaglandinu. Prokázalo se, že hyaluronát zinku (I), (II), (III) a (M) je účinný proti poškození žaludku, které vyvolává indometacin. Srovnáním účinnosti hyaluronátu zinku (II) s účinností hyaluronátu zinku(M) je možné vyvodit, že hodnoty ED50 jsou téměř stejné (5,8 mg/kg a 6,2 mg/kg), což naznačuje, že spolu s pozorováním v testu žaludečních lézí vyvolaných kyselým etanolem, hyaluronáty zinku bez ohledu na zdroj, ze kterého se mohou připravit (purum nebo puriss), mají stejné gastroprotektivní aktivity.
·
9 »9 9999
99 • 9 9 9 · 9 ·
999 999 ♦ 9
99
Výsledky testů s indometacinem také podporují myšlenku, že hyaluronát zinku se jeví být více než právě fyzikálněchemická bariéra mezi žaludečním lumenem a žaludeční sliznicí, protože jeho působení se projeví ne pouze při orální aplikaci (uvedeno v testu s kyselým alkoholem), ale také po podkožní aplikaci.
Dále je možné říci, že hyaluronáty zinku chrání sliznicí žaludku proti poškození indometacinem. Ochranný účinek hyaluronátů zinku předčí působení sukralfátu.
Výsledky zkoumání ve stresovém modelu poskytují další důkaz gastroprotektivního účinku hyaluronátu zinku. Tyto experimenty jsou velmi důležité, protože jedním z hlavních faktorů, které se podílejí na vzniku vředů ze stresu je uvolnění nadbytku histaminu z žíravých buněk a nelze vyloučit, že gastroprotektivní účinek hyaluronátu zinku proti lézím vyvolaným stresem je spojen se stabilizačním účinkem žíravých buněk.
Výsledky poškození žaludku indukovaného PAF dále podporuje pozorování prokázané na akutních modelech, že hyaluronát zinku vykazuje výjimečné gastroprotektivní působení, protože hyaluronát zinku chrání sliznicí žaludku od poškození PAF. Navíc výsledky zkoumání poskytují další důkazy, že hyaluronát zinku nereprezentuje pouze fyzikálněchemickou bariéru žaludeční sliznice, aby ji ochránila před poškozením lokálně působícími chemikáliemi, ale aktivuje ochranné mechanizmy žaludeční sliznice.
Nejdůležitějšími výsledky získanými v modelu chronických vředů vyvolaných kyselinou octovou je prokázat pozorování , že není pravděpodobné, aby například blokátory H2, kterým je hyaluronát zinku, vykazovaly aktivitu ne pouze v akutních modelech, ale také v modelech chronických vředů. Na základě uvedených výsledků se předpokládá, že hyaluronát sodný stimuluje tvorbu nového epitelu a tak vyvolává hojení vředu.
Z výsledků shora uvedeného modelu je možné vidět, že mezi hyaluronáty zinku s rozdílnými molekulovými hmotnostmi
44 44 ··
4 4 4 4 4 4
4 4 4 4 4 4
44 444 444
4 4 4 4
444 *4 44 4·
4··· • 4 *
4
4
444 4 · existují podstatné rozdíly v účinnosti. Prokázalo se, že hyaluronát zinku s molekulovou hmotností 900 000 je účinnější než hyaluronát zinku s nižší nebo vyšší molekulovou hmotností. Jde o jev, který demonstruje vztah mezi molekulovou hmotností a aktivitou.
Výsledky experimentů na modelu intestinálního vředu vyvolaného indometacinem ukazují, že hyaluronát vedle jeho gastroprotektivních účinků vykazuje ochranu střev, zatímco sukralfát je v testech zcela neúčinný. Existence takového účinku dále posiluje naši představu, že hyaluronát zinku je více než fyzikálněchemickou bariérou mezi sliznicí a intestinálním lumenem.
Vedle zkoumání účinností hyaluronátů zinku v různých akutních a chronických žaludečních modelech bylo naším cílem zjistit, zda má nějaké nežádoucí vedlejší účinky. Proto se zkoumala střevní pohyblivost.
Z experimentálních výsledků je zřejmé, že hyaluronát zinku nemění intestinální pohyblivost. Tato vlastnost spolu se zvýšením hodnoty ED50 pro model žaludečního vředu vyvolaného okyseleným etanolem . po prodloužení doby předcházející úpravy naznačuje, že hyaluronát zinku se nezachytil na žaludeční sliznicí nevratně a na druhé straně nedráždí střevo, aby bylo hyperaktivní.
Shrnutí
Na základě výsledků diskutovaných a vysvětlených shora v textu, je možné prokázat, že hyaluronát zinku se může považovat za silné činidlo chránící žaludek a jeho účinnost předčí účinek sukralfátu, který se obvykle používá při terapii peptických vředů.
Ze zkoumání in vitro je možné zjistit, že hyaluronát zinku inhibuje růst bakterií Helicobacter pylori. Je možné říci, že hyaluronát zinku se může použít při léčbě vředů vyvolaných bakteriemi Helicobacter pylori.
• 0 ► 0 I
0 0 · ·
»000 0
00 » 0 0 0 » 0 0 0
000 000
0
00
Na základě ochranného účinku žaludku a současného působení proti bakteriím Helicobacter pylori se může hyaluronát zinku použít jako doplněk terapie při léčbě vředů vyvolaných bakterií Helicobacter pylori nebo při profylaktické léčbě proti opětné infekci. Na základě tohoto použití je možné snížit množství antibiotik užívaných při terapii Helicobacter pylori, stejně jako je možné nahradit činidla působící proti uvedeným bakteriím, která vykazují několik vedlejších účinků.
Hyaluronát zinku se může převést na farmaceutické kompozice smícháním s netoxickými, inertními nebo kapalnými nosiči a/nebo s jinými pomocnými činidly, které se běžně používají během terapie při enterální aplikaci. Vhodnými nosiči je voda, želatina, laktóza, škrob, pektin, stearát hořečnatý, talek, rostlinné oleje, jako je olej z burských oříšků a olivový olej a podobně. Aktivní složka se může použít v libovolné obvyklé orální farmakologické kompozici, která vzniká z prášku připraveného známým způsobem. Kompozice mohou být ve formě tablet, pelety, kapsulí, roztoku a podobně. Aktivní složka se může s výhodou připravit způsobem, který se popisuje v příkladech 1 až 4. Výhodou vodných roztoků formulací je, že není nutný žádná doba, aby se aktivní substance rozpustila v žaludečních šťávách, přičemž se kompozice může připravit bez přísada a může se přesně určit denní dávka.
Kompozice se mohou připravit známým způsobem obvyklými farmaceutickými postupy a je-li to nutné, mohou se provést další obvyklé operace, jako je sterilizace.
Následující příklady popisují kompozice podle vynálezu a jejich přípravu.
Příklad 2:
Tablety o hmotnosti 200 mg obsahující 10 mg aktivní látky
53 • 0 0·* · 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0000 0 • 00 0* 00 00 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 · • 00 00 00· 0·· 0 0 0 0 0 000 ♦· ·· »·
* Hyaluronát zinku 10 mg
9 Laktóza, bezvodá 106 mg
Předem zgelovatěný škrob (Lycatos PGS) 6 mg
Kukuřičný škrob (Amylum maydis) 4 0 mg
Mikrokrystalícká celulóza (Avicel PH102, 30 mg
Aerosil 200 1 mg
Talek 6 mg
Stearát hořečnatý 1 mg
Po obvyklé vlhké granulací aktivní složky a přísad se směs stlačí do 200 miligramových tablet.
Příklad 3:
Farmaceutická kompozice o hmotnosti 200 mg obsahující 1Ó mg aktivní látky ve formě pelety vhodná pro použití ve váčcích, ampulích nebo v kapslích.
Hyaluronát zinku 10 mg
Laktóza, bezvodá 95 mg
Mikrokrystalícká celulóza (Avicel PH101) 95 mg.
Aerosil 200 1 mg
Pelety se připravují známým způsobem z aktivní látky a z přísad, například mícháním granulátu na vortexu.' Pelety se produkují ve formě váčků, ampulí nebo kapslí.
Příklad 4:
Farmaceutická kompozice ve formě 100 ml vodného roztoku, který obsahuje 1,0 g aktivní složky.
Hyaluronát zinku Destilovaná voda q.s.
1,0 g 100 ml
© · · © <·
• © © · • *· · «

Claims (7)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY (změněrréj*
    1. Farmaceutická kompozice vhodná pro orální použití proti peptickému vředu, vyznačující se tím, že obsahuje jako aktivní složku komplex hyaluronátu zinku s molekulovou hmotností v rozmezí 500 000 až 1 200 000 ve směsi s nosičem a/nebo s jinými přísadami, které se běžně používají ve farmaceutických kompozicích.
  2. 2. Farmaceutická kompozice vhodná pro orální použití podle nároku 1, vyznačující.se tím, že hyaluronát zinku má molekulovou hmotnost 900 000.
  3. 3. Způsob přípravy farmaceutické kompozice vhodné pro orální použití proti peptickému vředu, vyznačující se tím, že zahrnuje smíchání komplexu hyaluronátu zinku s molekulovou hmotností v rozmezí 500 000 až 1 200 000 jako aktivní složky s nosičem a/nebo s jinými přísadami, které se běžně používají ve farmaceutickém průmyslu a přeměnu směsi na farmaceutickou kompozici vhodnou pro orální použití.
  4. 4. Použití komplexu hyaluronátu zinku s molekulovou hmotností v rozmezí 500 000 až 1 200 000 při přípravě farmaceutických kompozic pro orální použití proti peptickému vředu.
  5. 5. Použití komplexu hyaluronátu zinku s molekulovou hmotností v rozmezí 500 000 až 1 200 000 při léčbě peptických vředů stejně jako při prevenci jejich tvoření.
  6. 6. Použití komplexu hyaluronátu zinku s molekulovou hmotností v rozmezí 500 000 až 1 200 000 při prevenci opětné infekce po zahojení peptického vředu, které zahrnuje aplikaci léčené osobě terapeuticky účinného množství komplexu hyaluronátu zinku s molekulovou hmotností v rozmezí 500 000 až 1 200 000 ·» ··«« » » 9 99 9 9 9 9 9 9
    9 9 9 9 9 9 9 9
    9 9 9 9 9 9 999 999
    9 9 9 9 9 9 ···* * *“ *’ ·* *’ ve formě samotného komplexu nebo formě farmaceutické kompozice vhodné pro orální použití.
  7. 7. Způsob léčby peptických vředů a prevence tvoření vředů, vyznačující se tím, že zahrnuje aplikaci léčené osobě terapeuticky účinné množství komplexu hyaluranátu zinku s molekulovou hmotností v rozmezí 500 000 až 1 200 000 ve formě samotného komplexu nebo ve formě farmaceutické kompozice vhodné pro orální použití.
    <r
    4-) 'fd
    I—i fd L Ad β w (%) fuoCoq eu >purofi tn
    Ad tn e
    fd
    Ad >
    '(ti
    Q (ti β 4-1 '(ti Ψ4 1—I (ti L Ad 3 M (ti
    Zn-hyaluronát(II) Zn-hyaluronát (Μ)
    I——-'—·—n-· l ’—i—·—i > ri—|i ./Ο O O O O O O O, O O . r> v© in m pj »- 7 Qf (%) TusCoq eu >[9UTon
    S β
    4->
    '(ti β
    O
    L β
    rH (ti >1
    Ad
    I β
    co β
    o >
    o
    4~>
    υ o
    β o
    β •H rH
    Φ ω
    >1
    Ad 'Φ β
    β
    Π—| tn
    Ad tn e
    >o
    H I—I β
    4-) '(ti β
    O
    L β
    r—I (ti >1
    Ad
    I β
    to to un < n - γ ro (%) TUOCoq UU 5[DUTQ.Q «3
    Ad >
    '(ti
    Q
    Ad ω
    N '(ti
    L
    Λ
    O
    Ad
    Cl) β
    •H >o
    O >1 >
    >1
    Ό φ
    >L >
    Ή β >υ φ Ό β Γ—ι β >Ν 'Φ
    Ad υ
    -Η β
    ο
    L
    Ad υ
CZ0382799A 1997-04-29 1998-04-28 Farmaceutická kompozice pro orální pouzití proti peptickému vredu CZ297317B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU9700826A HU225991B1 (en) 1997-04-29 1997-04-29 Use of the zinc hyaluronate associate (complex) for the preparation of pharmaceutical compositions for oral use against peptic ulcer

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ382799A3 true CZ382799A3 (cs) 2000-03-15
CZ297317B6 CZ297317B6 (cs) 2006-11-15

Family

ID=89995068

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0382799A CZ297317B6 (cs) 1997-04-29 1998-04-28 Farmaceutická kompozice pro orální pouzití proti peptickému vredu

Country Status (27)

Country Link
US (1) US6656921B1 (cs)
EP (1) EP1017403B1 (cs)
JP (1) JP2001522361A (cs)
KR (1) KR100572190B1 (cs)
CN (1) CN1126548C (cs)
AT (1) ATE320814T1 (cs)
BG (1) BG64458B1 (cs)
BR (1) BR9809354A (cs)
CA (1) CA2286756C (cs)
CZ (1) CZ297317B6 (cs)
DE (1) DE69833937T2 (cs)
DK (1) DK1017403T3 (cs)
EA (1) EA002134B1 (cs)
EE (1) EE04953B1 (cs)
ES (1) ES2259813T3 (cs)
HK (1) HK1025250A1 (cs)
HU (1) HU225991B1 (cs)
IL (1) IL132214A0 (cs)
NO (1) NO328313B1 (cs)
NZ (1) NZ500978A (cs)
PL (1) PL189526B1 (cs)
PT (1) PT1017403E (cs)
SK (1) SK284864B6 (cs)
TW (1) TW501927B (cs)
UA (1) UA62964C2 (cs)
WO (1) WO1998048815A1 (cs)
ZA (1) ZA983626B (cs)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU225991B1 (en) 1997-04-29 2008-02-28 Richter Gedeon Nyrt Use of the zinc hyaluronate associate (complex) for the preparation of pharmaceutical compositions for oral use against peptic ulcer
ITPD980168A1 (it) * 1998-07-06 2000-01-06 Fidia Advanced Biopolymers Srl Composizioni biocompatibili e biodegradabili comprendenti acido ialuronico e suoi derivati per il trattamento delle ulcere dell'appara
HUP0303779A2 (en) * 2003-11-20 2006-02-28 Richter Gedeon Vegyeszet Pharmaceutical compositions containing hyaluronan complex for the treatment of sclerosis multiplex
WO2007030733A2 (en) * 2005-09-09 2007-03-15 Wms Gaming Inc. Wagering game system with community gaming system
CN100355790C (zh) * 2005-11-04 2007-12-19 山东福瑞达生物化工有限公司 一种透明质酸锌的制备方法
CN1329414C (zh) * 2005-12-02 2007-08-01 凌沛学 透明质酸铋钾及其制备方法和应用
CN100348621C (zh) * 2005-12-02 2007-11-14 凌沛学 透明质酸铋及其制备方法和应用
CN101023961B (zh) * 2006-02-23 2010-07-21 山东省生物药物研究院 一种含透明质酸钠和锌盐的药物组合物
ITMI20061132A1 (it) * 2006-06-13 2007-12-14 Sinclair Pharmaceuticals Ltd Composizioni topiche antimicrobiche comprendenti lattoferrina, acido ialuronico o suoi sali ed estratti vegetali
TWI516269B (zh) * 2009-08-14 2016-01-11 禾伸堂生技股份有限公司 使用於炎症性腸疾病（ｉｂｄ）治療和預防之透明質酸混合物
TWI383796B (zh) * 2009-08-14 2013-02-01 Holy Stone Healthcare Co Ltd Use of hyaluronic acid mixture for the treatment and prevention of peptic ulcer and duodenal ulcer
HUP0900717A3 (en) 2009-11-18 2012-02-28 Richter Gedeon Nyrt Pharmaceutical composition for urological use containing zinc hyaluronate
US20110166099A1 (en) * 2010-01-04 2011-07-07 Wu Tsung-Chung Mixture of hyaluronic acid for treating and preventing peptic ulcer and duodenal ulcer
US8722644B2 (en) 2010-01-04 2014-05-13 Holy Stone Healthcare Co., Ltd. Mixture of hyaluronic acid for treating and preventing peptic ulcer and duodenal ulcer
ES2388281B1 (es) * 2010-12-27 2013-10-01 Laboratorios Viñas S.A. Composición farmacéutica que comprende ácido hialurónico y un compuesto de zinc y pastilla con palito y procedimiento para preparación correspondientes
US20150209384A1 (en) * 2012-03-01 2015-07-30 Kewpie Corporation Oral preparation for promoting expression of tgf-beta, oral preparation for inhibiting production of pain-mediating substance, and oral preparation for preventing edema
US20160287627A1 (en) * 2013-11-22 2016-10-06 Kewpie Corporation Method for suppressing onset of gastric ulcer as adverse effect of drug, oral pharmaceutical composition for suppressing onset of gastric ulcer and method for producing the same
CN104262499A (zh) * 2014-09-03 2015-01-07 佐源集团有限公司 一种低聚果糖锌及含有低聚果糖锌的口服液
CN108051553A (zh) * 2017-12-29 2018-05-18 武汉轻工大学 一种仔猪肠道功能保护剂的筛选方法

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1229075B (it) * 1985-04-05 1991-07-17 Fidia Farmaceutici Medicamenti per uso topico, ottenuti tramite l'impiego dell'acido ialuronico
EP0259485A4 (en) * 1986-03-14 1988-07-29 Bio Technology General Corp HEAVY METAL SALTS OF HYALURONIC ACID FOR USE AS AN ANTIMICROBIAL AGENT.
US6458774B1 (en) * 1989-02-24 2002-10-01 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt. Compositions containing hyaluronic acid associates and a process for preparing same
US5472950A (en) 1989-02-24 1995-12-05 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt. Compositions containing cobalt hyaluronic acid complex
HU203372B (en) 1989-02-24 1991-07-29 Richter Gedeon Vegyeszet Process for producing hyaluronic associates and pharmaceutical compositions and cosmetics comprising such active ingredient
JPH0648950A (ja) 1992-07-30 1994-02-22 Taito Kk 抗潰瘍剤
HU225991B1 (en) 1997-04-29 2008-02-28 Richter Gedeon Nyrt Use of the zinc hyaluronate associate (complex) for the preparation of pharmaceutical compositions for oral use against peptic ulcer
HU225329B1 (en) * 1996-09-12 2006-09-28 Richter Gedeon Vegyeszet Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity

Also Published As

Publication number Publication date
NZ500978A (en) 2001-05-25
EE9900470A (et) 2000-06-15
KR100572190B1 (ko) 2006-04-18
SK146899A3 (en) 2000-06-12
CA2286756A1 (en) 1998-11-05
HU9700826D0 (en) 1997-06-30
SK284864B6 (sk) 2006-01-05
US6656921B1 (en) 2003-12-02
BR9809354A (pt) 2000-07-04
EP1017403A1 (en) 2000-07-12
HU225991B1 (en) 2008-02-28
HUP9700826A1 (hu) 1998-12-28
BG64458B1 (bg) 2005-03-31
EP1017403B1 (en) 2006-03-22
CN1254285A (zh) 2000-05-24
PT1017403E (pt) 2006-07-31
NO995229D0 (no) 1999-10-26
BG103822A (en) 2000-04-28
WO1998048815A1 (en) 1998-11-05
IL132214A0 (en) 2001-03-19
EA199900983A1 (ru) 2000-08-28
EE04953B1 (et) 2008-02-15
ATE320814T1 (de) 2006-04-15
PL189526B1 (pl) 2005-08-31
CZ297317B6 (cs) 2006-11-15
ES2259813T3 (es) 2006-10-16
DE69833937D1 (de) 2006-05-11
PL336482A1 (en) 2000-06-19
ZA983626B (en) 1998-11-05
KR20010020413A (ko) 2001-03-15
JP2001522361A (ja) 2001-11-13
TW501927B (en) 2002-09-11
DE69833937T2 (de) 2007-06-06
CA2286756C (en) 2008-02-19
CN1126548C (zh) 2003-11-05
NO328313B1 (no) 2010-01-25
NO995229L (no) 1999-12-22
EA002134B1 (ru) 2001-12-24
UA62964C2 (en) 2004-01-15
DK1017403T3 (da) 2006-07-31
HK1025250A1 (en) 2000-11-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ382799A3 (cs) Použití hyaluronátu zinku proti peptickým vředům
EP0645143B1 (en) Antiulcer agent and adhesion inhibitor for Helicobacter pylori
US4316888A (en) Method and composition of reducing pain
GB2221390A (en) Antihyperlipidemic composition comprising niacin and guar gum.
MX2008009647A (es) Cisteamina recubierta entéricamente, cistamina y derivados de ella.
JPH0930987A (ja) 難治性の潰瘍、胃炎及び皮膚炎の治療乃至予防用製剤
AU749757B2 (en) Use of zinc hyaluronate against peptic ulcer
EP0207505A2 (en) Use of a prenyl ketone in the preparation of a medicament against gastritis
EP1132083B1 (en) Use of zinc tranexamate in the treatment of diabetes
MXPA99009943A (en) Use of zinc hyaluronate against peptic ulcer
EP1024807B1 (en) Use of the compound 2-methoxyphenyl-1-methyl-5p-methylbenzoyl-pyrrol-2-acetamido acetate for the production of an anti-inflammatory drug with prevention of gastric hypersecretion and renal impairment
US5135925A (en) Use of zinc acexamate in the prophylaxis of gastropathy induced by non-steroidal anti-inflammatory drugs
WO1995001784A1 (en) H2 antagonist-sucralfate-antiflatulent combinations
US6815419B1 (en) Antiulcer agent
JPH0132804B2 (cs)
JP2670081B2 (ja) 尿路結石抑制剤
Turner para-Aminosalicylic acid (PAS). Syn-thetic anti-tuberculous agent, usually given
WO1994005292A1 (en) Gastrointestinal treatment compositions containing allopurinol or oxypurinol and a sulphydryl group releasing agent
WO1992004894A1 (en) Antirheumatic
Turner Ichthammol Dermatological preparation, with slight antibacterial effects. Used in creams and ointments for chronic skin conditions. Idoxuridine Antiviral agent used in local treatment of herpes infections. Ifosfamide Cytotoxic drug, with uses and adverse effects similar to Cyclophosphamide.
JPH11147822A (ja) 消化性胃腸疾患の予防又は治療方法
CA2165141A1 (en) Use of suleparoide in the prevention of endothelitis and other endothelial reactions induced by therapeutic intravenous infusions

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20170428