CZ298552B6 - Farmaceutický prostredek a použití tohoto prostredku pro prípravu léciva - Google Patents

Farmaceutický prostredek a použití tohoto prostredku pro prípravu léciva Download PDF

Info

Publication number
CZ298552B6
CZ298552B6 CZ0174299A CZ174299A CZ298552B6 CZ 298552 B6 CZ298552 B6 CZ 298552B6 CZ 0174299 A CZ0174299 A CZ 0174299A CZ 174299 A CZ174299 A CZ 174299A CZ 298552 B6 CZ298552 B6 CZ 298552B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
compound
platelet
pharmaceutical composition
heparin
enoxaparin
Prior art date
Application number
CZ0174299A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ174299A3 (cs
Inventor
Uzan@Andre
H. Curaudeau@Alain
J. Leadley@Robert
I. Dunwiddie@Christopher
H. Perrone@Mark
Original Assignee
Aventis Pharmaceuticals Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=21861879&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ298552(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Aventis Pharmaceuticals Inc. filed Critical Aventis Pharmaceuticals Inc.
Publication of CZ174299A3 publication Critical patent/CZ174299A3/cs
Publication of CZ298552B6 publication Critical patent/CZ298552B6/cs

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05Dipeptides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Farmaceutický prostredek obsahující farmaceutickyprijatelnou nosicovou látku a farmaceuticky úcinné množství slouceniny mající anti-Xa úcinnost, kterou je heparinoidní sloucenina nebo nízkomolekulární heparin, a antagonistové slouceniny pusobící proti srážení desticek. Tento prostredek je vhodný pro ošetrování nebo prevenci trombogenických stavu spojených s trombózou v souvislosti s ischemickou poruchou, a pro prípravu farmaceutických prostredku pro takové ošetrování. Do rozsahu vynálezu rovnež náleží použití tohoto farmaceutického prostredkupro prípravu léciva pro lécení nebo prevenci fyziologického stavu souvisejícího s ischemickou poruchou spojenou s trombózou.

Description

Vynález se týká farmaceutického prostředku obsahujícího sloučeninu mající anti-Xa účinnost a sloučeninu působící proti srážení destiček, který vykazuje neočekávanou účinnost při léčení a prevenci fyziologického stavu pacienta s ischemickou poruchou související s trombózou. Vynález se rovněž týká použití tohoto prostředku pro léčení nebo prevenci fyziologického stavu souvisejícího s ischemickou poruchou spojenou s trombózou.
Dosavadní stav techniky
Z dosavadního stavu techniky je známo, že antagonisty receptoru destičkového fíbrinogenu jsou účinnými činidly k inhibici vytváření trombu závislého na destičkách v modelech koronární trombózy u zvířat. Podobně výsledky z klinických studií ukázaly, že antagonisty receptoru destičkového fíbrinogenu snižují dopad hlavních ischemických příhod při jejich podávání vysoce ohroženým pacientům prodělávajícím perkutánní transluminámí koronární angioplastiku. Avšak terapeutický rozsah je pro tuto třídu sloučenin velmi úzký, částečně proto, že vysoký stupeň inhibice srážení destiček ex vivo požadovaný pro antitrombotickou účinnost je často spojen s výrazným zvětšením doby krvácení matrice, což je znak komplikací nežádoucího krvácení.
Heparinů s nízkou molekulovou hmotností (low molecular weight heparins LMWH) a heparinoidních sloučenin (HC) bylo účinně používáno v posledních několika letech k prevenci a k léčení trombózy žil a souvisejících tromboembolismu. Tyto látky, LMWH a HC tedy postupně pronikaly do léčebných programů při indikacích arteriální trombózy. Předběžné výsledky favorizující používání LMWH a HC oproti nefrakcionovanému heparinů při arteriálních trombotických indikacích jsou podporovány několika farmakodynamickými, farmakokinetickými a mechanickými rozdíly mezi těmito dvěma skupinami sloučenin. Například spolehlivé a bezpečné antikoagulace lze dosáhnout s látkami LMWH a HC subkutánním dávkováním bez monitorování. V porovnání s heparinem mají látky LMWH a HC vyšší biologickou dostupnost, poměrně dlouhý poločas životnosti a zdá se, že mají bezpečnější profil. Ktomu jsou látky LMWH odolnější než heparin vůči neutralizaci destičkovým faktorem 4, který je uvolňován z aktivovaných destiček, pravděpodobně v místě arteriální trombózy.
Hemostáze, biochemie koagulace krve, je extremně složitým jevem, při kterém normální plná krev a tělesná tkáň spontánně zastavení krvácení z poškozených cév. Účinná hemostáze vyžaduje kombinovanou činnost cévních, destičkových a plazmových faktorů a rovněž tak kontrolního mechanismu zabraňujícího nadměrnému srážení. Porucha, nedostatečnost nebo nadbytek kterékoli z těchto složek může vést k hemoragickým nebo trombotickým následkům.
Adheze destiček, rozprostření a srážení na extrabuněčných matricích jsou hlavními jevy při vytváření trombu. Tyto jevy jsou zprostředkovány skupinou adhezivních glukoproteinů, tedy fibrinogenem, fíbronektinem a von Willebrandovým faktorem. Fibrinogen je spolupůsobící faktor pro srážení destiček, zatímco fibrinektin je spolupůsobící faktor pro srážení destiček, zatímco fíbrinektin podporuje reakce k zachycení a rozprostření a von Willebrandův faktor je významný pro zachycení a rozprostření na subendotheliálních matricích. Vazební míst pro fibrinogen, fibronektin a von Willebrandův faktor byla lokalizována na proteinovém komplexu membrán destiček známém pod označením glykoprotein Ilb/IIIa.
Adhezivní glykoproteiny, podobně jako fibrinogen, se nevážou na normální klidové destičky. Jestliže je však destička aktivována agonistem, jako je trombin nebo adenosindifosfát, změní destička svůj tvar a pravděpodobně vytvoří vazební místo GPIIb/IIIa přístupné fíbrinogenu. Blokování receptoru fíbrinogenu tudíž zabraňuje srážení destiček a následnému vytváření trombu a
-1 CZ 298552 B6 je užitečné pro prevenci a léčení patologických trombogenických stavů, jako jsou mrtvice, periferní arteriální okluzivní porucha, roztroušená intravaskulámí koagulace a akutní koronární syndromy, jako je nestabilní angína a infarkt myokardu.
Podstata vynálezu
Vynález se týká farmaceutického prostředku, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku a farmaceuticky účinné množství sloučeniny mající anti-Xa účinnost, kterou je heparinoidní sloučenina nebo nízkomolekulámí heparin, a antagonistové sloučeniny působící proti srážení destiček.
Ve výhodném provedení je sloučeninou mající anti-Xa účinnost nízkomolekulámí heparin. Tento nízkomolekulámí heparin je ve výhodném provedení tohoto farmaceutického prostředku podle vynálezu zvolen ze skupiny zahrnující enoxaparin, nadroparin, dalteparin, certroparin, pamaparin, reviparin, ardeparin/RD heparin/RDH nebo tinzaparin. Nej výhodněji je tímto nízkomolekulámí heparinem enoxaparin.
Podle dalšího výhodného provedení tohoto farmaceutického prostředku podle předmětného vynálezu je sloučeninou mající anti-Xa účinnost je heparinoidní sloučenina. Touto heparinoidní sloučeninou je výhodně denaparoid.
Podle dalšího výhodného provedení tohoto farmaceutického prostředku podle předmětného vynálezu je antagonistem srážení destiček abciximab, N-[N-(4-(piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]aspartyl]-L-P-cyklohexylalanin, N-[N-[N-(4-piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]aspartyl]-L-[3-cyklohexylalaninamid nebo N-(n-butylsulfonyl)-4-(piperidin-4-ylbutyloxy)-Lfenylalanin.
Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží použití výše definovaného farmaceutického prostředku pro přípravu léčiva pro léčení nebo prevenci fyziologického stavu souvisejícího s ischemickou poruchou spojenou s trombózou.
Tento fyziologický stav je vybrán ze skupiny zahrnující mrtvici, aterosklerózu, angiogeneze, trombózu, tromboembolické stavy, roztroušenou intravaskulámí koagulaci, periferní arteriální okluzní nemoc, hemodialýzu, potřebu mimotělního oběhu při chirurgickém zákroku, poškození tkání fosfolipázami A2, akutní koronární syndrom nebo tromboembolický syndrom spojený s rakovinou, sepsí nebo porodními komplikacemi.
Nej výhodněji se použití podle předmětného vynálezu uplatní v případě, kdy je fyziologickým stavem akutní koronární syndrom, a v tomto případě je výhodné použití podle předmětného vynálezu kdy je akutním koronárním syndromem nestabilní angína nebo infarkt myokardu.
Dále je výhodné podle předmětného vynálezu výše definované použití, při kterém léčení nebo prevence probíhá při chirurgickém zákroku koronárního arteriámího bypasu nebo transluminální koronární angioplastice nebo při perkutánní transluminální angioplastice.
Farmaceutický prostředek podle předmětného vynálezu tedy obvykle obsahuje farmaceuticky vhodnou nosičovou látku a farmaceuticky účinné množství sloučeniny mající anti-Xa účinek a antagonistovou sloučeninu proti srážení destiček.
Výše definovaný farmaceutický prostředek a použití je možno uplatnit při léčení a prevenci trombogenického stavu spojeného s ischemickou poruchou, vyvolanou trombózou u pacienta, přičemž se při tomto léčení nebo prevenci pacientovo podává farmaceuticky účinné množství sloučeniny uvedeného farmaceutického prostředku.
-2CZ 298552 B6
Vynález objasňuje, nijak však neomezuje následující podrobný popis s připojenými obrázky.
V popisu předmětného vynálezu mají použití pojmy následující význam:
Výrazem „pacient“ se míní je člověk nebo jiný savec.
Výrazem „účinné množství“ se míní množství sloučeniny podle vynálezu, způsobilé vyvolat žádoucí terapeutický účinek.
Výrazem „sloučenina působící proti srážení destiček“ (PAAC) se míní sloučenina, která se váže na receptor GPIIb/IIIa destiček (antagonist receptoru GPIIb/IIIa) a konkurenčně brání vázání fibrinogenu, fironektinu a von Willebrandova faktoru, přičemž také inhibuje srážení aktivovaných destiček.
Výrazem „sloučenina s anti-Xa účinkem“ se míní heparinoidní sloučenina nebo heparin s nízkou molekulovou hmotností (LMWH), nebo její syntetický derivát.
Ve výhodném provedení podle předmětného vynálezu popisují dále uvedené publikace vhodné PAAC: Lynch a kol., J. Pharm. Expt. Thera 272 (1) 20, (1995); Kereiakes a kol. JACC 27 (3) str. 536, 1996; Peerlinck a kol., Circulation 88(4) str. 1512, 1993; Barrett a kol., Clin. Pharmacol, Ther. 56 (4), str. 377; 1994; Cook a kol., Thromb. Haemostas. 70 (5), str. 838, 1993; Plow a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA 82, str. 8057 až 8061 (1985); Ruggeri a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA str. 5708-5712 (1986); Ginsberg a kol., J. Biol. Chem. 260, str. 3931 až 3936 (1985); a Gartner a ko. J. Biol. Chem. 260, 11 str. 891 až 894 (1987); Plow E.F. a kol. Proč. Nati. Acad. Sci. USA 79, str. 3711 AŽ 3715 (1982); Tjoeng a kol., patenty Spojených států amerických US 5 037 808; US 4 879313; a US 4 992 463; Adams a kol, patent Spojených států amerických US 4 857 508; Haverstick, D.M. a kol., Blood 66 (4), str. 946-952 (1985); Topol a kol., The Lancet 343, str. 881 (1994); francouzská přihláška vynálezu číslo 86/17507; Zimmerman a kol., Patent Spojených států amerických US 4 683 291; evropská zveřejněná přihláška vynálezu číslo 0 319 506; patenty Spojených států amerických US 5 023 233; a US 4 952 562; mezinárodní zveřejněná přihláška vynálezu číslo WO 91/04746; patent Spojených států amerických US 5 086 069; mezinárodní zveřejněné přihláška vynálezu číslo WO 92/13117; patenty Spojených států amerických US 5 053 392; US 5 064 814; US 5 051 405; evropská zveřejněná přihláška vynálezu číslo 0 479 481; a číslo 0 478 362; patent Spojených států amerických US 5 292 756; mezinárodní zveřejněná přihláška vynálezu číslo WO 95/10295; a WO 89/11538. Výhodnější PAAC jsou popsány v mezinárodních zveřejněných přihláškách vynálezu číslo WO 89/11538; WO 95/10295; nebo v patentu Spojených států amerických US 5 292 756; přičemž jako konkrétní výhodné sloučeniny jsou: jak již bylo uvedeno, ReoproR (abciximab), N[N-[N-(4-piperin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]asparagyl]-L-3-cyklohexylalanin, N-[N-[N(4-(piperidin^l-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]asparagyl]-L-p-cyklohexylalaninamid (PBGACA) nebo N-(n-butylsulfonyl)-4-(piperidin-4-ylbutyloxy)-L-fenylalanin (BSPBPA).
Ve výhodném provedení podle předmětného vynálezu jsou v následujících publikacích uvedeny vhodné LMWH pro účely předmětného vynálezu a způsoby přípravy LMWH pro účely předmětného vynálezu a způsoby přípravy LMWH: evropský patent 0014184; Medicinal Research Reviews 12(4), str. 373 (1992); Drugs of the Future 12 (1), str. 45 (1987)·, mezinárodní zveřejněná přihláška vynálezu číslo WO 92/19249; patent Spojených států amerických US 4 492 435, Barrowcliffe, Tromb. Res. 12, str. 27 až 36 (1977); evropská zveřejněná přihláška vynálezu číslo 37319 a 76279; patent Spojených států amerických US 4 804 652; mezinárodní zveřejněná přihláška vynálezu číslo WO 81/3276; evropská zveřejněná přihláška vynálezu číslo 244235 a 244236; patenty Spojených států amerických US 4 486 420; US 4 692 435; US 4 826 827; US 3 766 167; evropská zveřejněná přihláška vynálezu číslo 40144; 347588; a 380943, patenty Spojených států amerických US 4 533 549; US 4 629 699; a evropská zveřejněná přihláška vynálezu číslo 269981. Například se může sloučenina s anti-Xa účinkem vyrobit následujícím způsobem: obohacením frakcionací za použití ethanolu a/nebo molekulového síta, například gelovou filtrací
-3CZ 298552 B6 nebo membránovou filtrací LMWH obsaženým ve standardním heparinu a kontrolovanou chemickou (za pomocí kyseliny dusité, β-eliminací nebo oxidací jodistanem) nebo enzymatickou (heparinázami) depolymeracíl. Podmínky depolymerace se pečlivě kontrolují k získání produktu o požadované molekulové hmotnosti. Všeobecně se používá depolymerace za použití kyseliny dusitá. Rovněž se používá depolymerace benzylesteru heparinu β-eliminací, která poskytuje tentýž typ fragmentů jako enzymatická depolymerace pomocí heparináz. LMWH s nízkou antisrážlivou aktivitou a zachovávají se základní chemickou struktur se připraví depolymerací za použití oxidace jodistanem nebo odstraňováním frakce LMWH vázající antitrombin, nebo se připraví jinými způsoby, použitím imobilizovaného antitrombinu k absorpci.
Dále je třeba uvést, že je výhodný LMWH mající průměrnou molekulovou hmotnost přibližně 3000 až přibližně 6500. Obchodně dostupné LMWH, vhodné k použití podle předmětného vynálezu, zahrnují následující produkty: ClexaneE/KlexaneR/Lovenox8 (Enoxaparin (ENOX)) s průměrnou molekulovou hmotností 4500 + 1000 a s rozdělením molekulové hmotnosti: složky < 2000 (16,0 ± 4,0%) a 2000 až 8000 (78,0 ± 10,0%), anti-Xa účinek (IU/mg vztaženo na sušinu) 90 až 125 a poměr anti-Xa/anti-IIa 3,3 až 5,3; FlexiparinR (Nardroparin) mající průměrnou molekulovou hmotnost 4300 ± 700, a s rozdělením molekulové hmotnosti: složky <2000 (<15%), 2000 až 4000 (45 ± 10%) a 2000 a 8000 (85 ± 10%), anti-Xa účinek (IU/mg vztaženo na sušinu) 95 až 130 a poměr anti-Xa/-anti-IIa 2,5 až 4,0; FragminR (Dalteparin) mající průměrnou molekulovou hmotnost 6000 ± 400, s rozdělením molekulové hmotnosti: složka <3000 (5,0 až 13,0%) a >8000 (15,0 až 25,0%), anti-Xa účinek (IU/mg vztaženo na sušinu) 110 až 210 a poměr anti-Xa/anti-IIa 1,9 až 3,2; EmbolexR/MonoempolexR (Certroparin) mající průměrnou molekulovou hmotnost 5200 ± 1000, s rozdělením molekulové hmotnosti: složky <2000 (10 až 25 %) a <8000 (75 až 90%), anti-Xa účinek (IU/mg vztaženo na sušinu) 80 až 120 a poměr antiXa/anti-IIa 1,5 až 2,5; FluxumR/MinidaltonR/LowhepaR (Pamaparin) mající průměrnou molekulovou hmotnost 5000 ± 1000, rozdělení molekulové hmotnosti: složky <3000 (20 až 30%) a 300 až 8000 (50 až 60 %), anti-Xa účinek (IU/mg vztaženo na sušinu) 75 až 110 a poměr antiXa/anti-IIa 2,0 až 3,0; LogiparinR (Tinzaparin) mající průměrnou molekulovou hmotnost 3400 až 5600, rozdělení molekulové hmotnosti: složky <2000 (2,0 až 16%) a 2000 až 4000 (66 ± 6,0 %) a >8000 (12,0 až 38,0%), anti-Xa účinek (IU/mg vztaženo na sušinu) >70 a poměr anti-Xa/antiIla 1,5 až 2,5; ClivarinR (Reviparin) aNormifloR (ardeparin/RD heparin/RDH). Výhodný LMWH podle vynálezu se připraví způsobme podle patentů Spojených států amerických US 4 486 420 a US 4 692 435, výhodnější je však enoxaparin.
Podle jiného výhodného provedení vynálezu je sloučeninou s anti-Xa účinností heparinoidní sloučenina. V dále uvedených publikacích jsou uvedeny výhodné heparinoidní sloučeniny vhodné pro účely předmětného vynálezu a způsoby výroby této vhodné heparinoidní sloučeniny: patent Spojených států amerických US 4 438 108; evropský patentový spis číslo EP 66908; Zammit a kol., Tromb. Haemostas. 71(6) 759 (1994); a Gent a kol., Circulation 93, str. 80 (1996). Výhodnou obchodně dostupnou heparinoidní sloučeninou podle vynálezu je Orgaran(R) (Danaparoid) mající průměrnou molekulovou hmotnost přibližně 6500, anti-Xa účinek (IU/mg vztaženo na sušinu) přibližně 10 a průměr anti-Xa/anti-IIa přibližně 28.
Výhodnými trombogenickými stavy pro léčení a prevenci podle vynálezu jsou mrtvice, ateroskleróza, angiogenese, trombóza, tromboembolické stavy, jako je trombóza hlubokých žil, plicní embolie nebo tromboflbitis, roztroušená intavaskulámí koagulace nebo tromboembolické příznaky spojené s rakovinou, sepsí nebo s porodními komplikacemi, okluzivní onemocnění periferálních artérií a akutní koronární příznaky, jako je nestabilní angína a infarkt myokardu, hemodialýza nebo potřeby mimotělního oběhu při chirurgickém zákroku nebo při poškození tkání fosfolipázou A2 (PLA2), nej výhodnějším stavy pro léčení jsou nestabilní angíny a infarkt myokardu.
Vynálezu se s výhodou využívá při léčení, kdy je potenciální možnost výskytu patologického trombogenického stavu, jako jsou případy, které se mohou vyskytnout během chirurgie bypasu koronární artérie nebo perkutánní transluminámí koronární angioplastice s případným umístěním
-4CZ 298552 B6 intrakoronámího stentu; výhodnější aplikací vynálezu je použití při perkutánní transluminámí angioplastika s případným umístěním intrakoronámího stentu.
Jiným výhodným využitím vynálezu je použití farmaceuticky účinného množství sloučeniny s anti-Xa účinností a sloučeniny působící proti srážení destiček v přípravě léčiv k ošetřování a k prevenci fyziologických stavů spojených s ischemickou chorobou související s trombózou.
Při léčení a prevenci se mohou sloučeniny s anti-Xa aktivitou a sloučeniny působící proti srážení destiček podávat různým způsobem, jako je například kombinovaná terapie s případnými léčebnými postupy. Například sloučeniny s anti-Xa účinkem a sloučeniny působící proti srážení destiček se mohou podávat pacientovi současně nebo v různých časech s tou podmínkou, že se podávají tak, aby v určeném časovém intervalu byly v těle pacienta přítomny farmaceuticky účinná množství obou sloučenin a aby výsledkem byl terapeutický účinek podle vynálezu.
Při provádění výše uvedeného postupu léčení nebo prevence je možno použít kitu k léčení a k prevenci fyziologických stavů spojených s ischemickou chorobou související s trombózou, přičemž tento kit (souprava) obsahuje jednotlivé jednotky, z nichž alespoň jedna obsahuje sloučeninu s anti-Xa účinkem a alespoň jedna jiná obsahuje sloučeninu působící proti srážení destiček a uvedené jednotky obsahují farmaceutický nosič, přičemž je tento kit možno využít k účinnému provádění kombinovaných terapií podle vynálezu. Tento kit může dále obsahovat alespoň jednu jednotku se sloučeninou s anti-Xa účinkem bez sloučeniny působící proti srážení destiček a alespoň jednu jednotku se sloučeninou působící proti srážení destiček bez přítomnosti sloučeniny s anti-Xa účinkem.
V praxi mohou být sloučenina s anti-Xa účinkem a sloučenina působící proti srážení destiček podávány parenteráíně, topicky, rektálně, transdermálně, intrapulmonámě nebo perorálně, s výhodou se však podávají parenteráíně a/nebo orálně.
Vhodné prostředky obsahující sloučeniny podle vynálezu se mohou připravovat obvyklými způsoby. Například sloučeniny použité podle vynálezu mohou být suspendovány nebo rozpuštěny ve vhodném nosičovém materiálu.
Prostředky podle vynálezu mají formy umožňující nej vhodnější podávání a vynález se proto také týká farmaceutického prostředku obsahujícího sloučeniny podle vynálezu, který je vhodný k použití v humánní a ve veterinární medicíně. Tyto prostředky se mohou připravovat obvyklými způsoby za použití jednoho nebo několika vhodných nosičů, pomocných činidel nebi excipientů. Jako příklady pomocných činidel je možno uvést ředidla, sterilní vodné prostředky a různá netoxická organická rozpouštědla. Farmaceutické prostředky mohou být ve formě tablet, pilulek, kapslí, pastilek, tabletek, tvrdých bonbónů, granulí, prášků, vodných roztoků nebo suspenzí, roztoků pro injekce, elixírů nebo sirupů, roztoků nebo suspenzí v intrapulmonámímu podávání, přičemž mohou obsahovat jedno nebo několik činidel ze souboru zahrnujícího sladidla, ochucovadla, barviva nebo stabilizátory, tak aby byl získán farmaceuticky přijatelný přípravek.
Volba vehikula a obsahu sloučenin použitých podle vynálezu se řídí rozpustností a chemickými vlastnostmi sloučenin, zvláště způsobem podávání a farmaceutickou praxí. Například je možno k výrobě tablet použít excipientů jako jsou sterilní voda, Ringerů roztok, laktóza, citrát sodný, isotonické solné roztoky (fosforečnan monosodný nebo dvoj sodný, chlorid sodný, draselný, vápenatý nebo horečnatý nebo směsi takovýchto solí), uhličitan sodný a dezintegrační činidla, jako je škrob, kyselina alginová a některé komplexní silikáty v kombinaci s mazivy, jako je stearát horečnatý, laurylsulfát sodný a mastek. K přípravě kapslí je výhodné použít laktózu a polyethylenglykoly s vysokou molekulovou hmotností. Vodné suspenze mohou obsahovat emulgátory nebo činidla usnadňující suspendování. Použít lze také ředidel jako je sacharóza, ethanol, polyethylenglykol, propylenglykol, glycerol a chloroform nebo jejich směsi.
-5CZ 298552 B6
K parenterálnímu podávání se hodí emulze, suspenze nebo roztoky sloučenin podle vynálezu v rostlinném oleji, například v sezamovém, podzemnicovém nebo olivovém oleji nebo ve vodněorganických roztocích jako je voda a propylenglykol, injektovatelné organické estery jako je ethyloleát i sterilní vodné roztoky farmaceuticky vhodných solí.Roztoky solí sloučenin použitých podle vynálezu se obzvláště hodí k podávání intramuskulámími, intravenózními, intraarteriálními nebo subkutánními injekcemi nebo infúzemi. Vodné roztoky, zahrnující také roztoky solí v čisté destilované vodě, se mohou používat k intravenóznímu podávání za předpokladu, že je jejich hodnota pH vhodně nastavena a jsou vyváženě pufrovány nebo isotonizovány vhodným množstvím glukózy nebo chloridu sodného a jsou sterilizovány teplem, ozářením nebo mikrofíltrací.
Sloučeniny s anti-Xa účinností a sloučeniny působící proti srážení destiček podle vynálezu mohou být formulovány způsobem, který zabraňuje rychlému uvolňování zvaskulámí (tepelné nebo žilné) stěny konvexí a/nebo difúzí, čímž se prodlouží doba setrvání prostředku v místě žádaného účinku. Uložení je možno provést do kopolymemí matrice, jako je ethylenvinylacetát nebo polyvinylakoholový gel obalený povlakem Silasticu. Alternativně mohou být sloučenina s anti-Xa účinkem a sloučenina působící proti srážení destiček uvolňovány lokálně z implantovaného silikonového polymeru.
Alternativním přístupem k minimalizaci vymývání sloučeniny s anti-Xa účinkem a sloučeniny působící proti srážení destiček během perkutánního, transvaskulámího uvolňování je použití nedifundovatelných, léčivo uvolňujících mikročástic. Tyto mikročástice mohou obsahovat nejrůznější syntetické polymery například polyaktid, nebo přírodní látky, včetně proteinů nebo polysacharidů. Takové mikročástice umožňují upravovat takové faktory jako je celková dávka léčiva a kinetika jejího uvolňování. Mikročástice mohou být účinně injektovány do arteriální nebo žilné stěny porézním balonovým katétrem nebo balonovým stentem a zadržovány ve stěně žíly a v periadventiciální tkáni po dobu nejméně dvou týdnů. Formulace a metodologie pro lokální intravaskulámí uvolňování terapeutických činidel na specifickém místě jsou popsány v publikaci Reissen a kol. (J. Am. Col. Cardiol. 23, str. 1234 až 1244 (1994).
Jako médium pro sloučeninu s anti-Xa účinkem a sloučeninu působící proti srážení destiček je rovněž možno použít hydrogel, který je připraven z jakéhokoli biokompatibilního necytotoxického homopolymeru nebo heteropolymeru, jako je hydrofilní polymer na bázi polyakrylové kyseliny, který může působit jako houba absorbující léčivo. Takové polymery byly popsány například v mezinárodní zveřejněné patentové přihlášce č. WO 93/08845. Některé z nich, jako zejména média na bázi ethylenoxidu a/nebo propylenoxidu jsou obchodně dostupné.
Kromě toho sloučeniny s anti-Xa účinkem a sloučenina působící proti srážení destiček lze dodávat přímo do stěny krevní cévy pomocí angiplastového balonu, který je povlečen hydrofilním filmem (například hydrogelem) nebo pomocí jiného katétru obsahujícího infuzní komůrku pro sloučeninu, která tak může být aplikována přesným způsobem do ošetřovaného místa.
Procento sloučeniny s anti-Xa účinkem a sloučeniny působící proti srážení destiček, použitých podle vynálezu, lze měnit. Tyto sloučeniny mají být v takovém vzájemném poměru, aby bylo dosaženo vhodné dávky. Je ovšem možno podávat několik jednotkových dávek. Použitou dávku určuje lékař v závislosti na požadovaném terapeutickém účinku, na cestě podávání, na trvání ošetřování a na stavu pacienta. V každém jednotlivém případě se dávka určuje podle charakteristik ošetřovaného jedince, jako je věk, hmotnost, celkový zdravotní stav a jiné charakteristiky, které mohou ovlivnit účinnost léčiva.
U dospělých jsou dávky PAAC obvykle přibližně 0,0001 až přibližně 50, s výhodou přibližně 0,0001 až přibližně 5 mg/kg tělesné hmotnosti denně při inhalaci, přibližně 0,001 až přibližně 100, s výhodou přibližně 0,01 až 70, výhodněji přibližně 0,05 až přibližně 10 mg/kg tělesné hmotnosti denně při orálním podání a přibližně 0,0001 až přibližně 10, výhodně 0,001 až 1 mg/kg tělesné hmotnosti denně při intravenózním podání.
-6CZ 298552 B6
U dospělých jsou dávky sloučeniny s anti-Xa aktivitou podle vynálezu obzvláště přibližně 10 až přibližně 25000 mezinárodních jednotek anti-Xa účinnosti.
Sloučeniny s anti-Xa účinkem a sloučeniny působící proti srážení destiček, použité podle vynálezu, lze podávat tak často, jak je to potřeba k dosažení žádoucího terapeutického účinku. Dávkovači režimy podle vynálezu jsou takové, aby byla zaručena maximální terapeutická odezva, dokud se nedostaví zlepšení, a udržena minimální účinná hladina, která přináší úlevu. Někteří pacienti mají rychlejší odezvu na vyšší nebo nižší dávku a stačí jim udržování značně nižších dávek. Použití podle vynálezu zahrnuje jak krátkodobé tak dlouhodobé režimy. Používá se přibližně jedna až přibližně čtyři dávky denně podle fyziologických potřeb každého jednotlivce, přičemž se volba přiměřených dávek v každém specifickém případě řídí hmotností pacienta, jeho všeobecným zdravotním stavem, věkem a ostatními okolnostmi, které mohou ovlivňovat odezvu na toto léčivo. Proto se pro některé pacienty předepisuje jen jedna nebo nejvýše dvě dávky denně.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být také formulovány pro použití spolu s jinými terapeutickými činidly nebo pro využití terapeutických technik zaměřených na farmakologické podmínky, které mohou být vylepšeny aplikací sloučeniny obecného vzorce I, například je možno použít následující režimy.
Sloučenin podle vynálezu lze použít k ošetřování stavu po angioplastice pomocí jakéhokoli zařízení jako je technika využívající balonu, ablace nebo laseru. Sloučenin podle vynálezu lze použít při ošetřování restenózy následující po umístění stentu do vaskulatury jako 1) primární léčení vaskulámí blokády, 2) v případě, kdy angioplastika pomocí jakéhokoli zařízení nevede k arteriální průchodnosti. Sloučenin podle vynálezu může být použito buď perorálně, parenterálně, nebo může být sloučenina aplikována zevně pomocí specifického zařízení nebo vhodně formulovat povlakem na stentu.
Sloučenin podle vynálezu lze použít při ošetřování restenózy ve spojení s antikoagulačním, antidestičkovým, antitrombotickým nebo profibrolytickým činidlem, často jsou pacienti léčení souběžně před intervenčními procesy, během nich nebo po nich činidly těchto tříd k bezpečnému provedení intervenčního zásahu nebo k prevenci škodlivých účinků vytváření trombu. Některé příklady tříd činidel o nichž je známo, že jsou antikoagulačními, antidestičkovými, antitrombickými nebo profibrinolytickými činidly zahrnují jakoukoli formulaci inhibitorů trombinu nebo inhibitorů fakturu Vila. Jako příklady tříd činidel s antikoagulačními, antidestičkovými, antitrombotickými nebo profibrinolytickými vlastnostmi je možno vést jakékoli formulace spirinu, přímých inhibitorů trombinu, přímých inhibitorů faktoru Xa nebo faktoru Vila.
Sloučenin podle vynálezu je možno použít v kombinaci s kterýmkoli činidlem působícím proti vysokému tlaku nebo činidlem regulujícím cholesterol nebo lipid při léčení restenóz nebo aterosklerózy souběžně s léčením vysokého krevního tlaku nebo aterosklerózy. Jako některé příklady činidel, která se hodí k léčení vysokého krevního tlaku je možnou uvést sloučeniny následujících tříd: β-blokátory, inhibitory ACE, antagonisty vápníkových kanálků a agonisty a-receptoru. Jako některé příklady činidel, která se hodí k léčení zvýšené hladiny cholesterolu nebo neřízené úrovně lipidu, je možno uvést sloučeniny známé pod označením inhibitoru HMGCoA reduktázy, sloučeniny fibrátové třídy.
Přehled obrázků na výkresech
Na obr. 1 jsou graficky znázorněny informace týkající se uspořádání vzorků krve při hemodynamických měření během podávání různých koncentrací sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, N-(n-butylsulfonyl)-4-(piperidin-4-ylbutyloxy)-L-fenylalaninu (BSPBPA) a prostředku který je obsahuje, v závislosti na čase.
-7CZ 298552 B6
Vysvětlivky: Diagram se týká enoxaparinu, heparinu nebo nosiče (bolus + infúze); šipka platí pro
BSPBPA nebo nosič.
Odběr krve/hemodynamika;
Arteriální vzorky při -5, 5, 10, 30, 60 minutách;
Ošetřované skupiny (n=5 na skupinu);
plus BSPBPA (30 pg/kg);
plus BSPBPA (30 pg/kg).
Obr. 2 představuje graf počtu redukcí cyklických průtoků (CFR) pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinností, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu a heparinu s BSPBPA na CFR;
Na ose y je CFR za 20 minut, na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min); ENOX + BSPBA (30 pg/kg); heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + BSPBPA (30 pg/kg);
* p < 0,05 VS ENOXAPARIN + BSPBPA;
Prázdný sloupek kontrola, pravé šrafování 0-20', plný sloupek 20-40', levé šrafování 40-60'.
Na obr. 3 je graf aktivovaného parciálního tromboplastinového času (APTT) pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxafarinu, sloučeniny působící proti srážení destiček a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na APTT;
Na ose y je ATPP (sdružený nárůst) a na ose x jsou : BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0?5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg//min), heparin + BSPBPA (30 pg/kg);
* P < 0,05 vs enoxaparin + BSPBPA;
Tečkovaný sloupek O', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 4 je graf protrombinového času (PT) pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA s prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na PT;
Na ose y je PT (sdružený nárůst) a na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOX + BSBA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + BSPBPA (30 pg/kg);
Tečkovaný sloupek O, prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
-8CZ 298552 B6
Na obr. 5 je graf znázorňující závislost účinku sloučeniny s anti-Xa účinností pro různé koncentrace této sloučeniny s anti-Xa účinností, enoxafarinu, sloučeniny působící proti srážení destiček,
BSPBPA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na účinnost sloučeniny s anti-Xa účinkem. Na ose y je sloučenina s anti-Xa účinností (IU/ml) a na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBPA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + BSPBPA (30 pg/kg); * p < 0,05 vs enoxaparin + BSPBPA;
Tečkovaný sloupek O', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 6 je graf závislosti anti-IIa účinku pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparin, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na účinnost sloučeniny s anti-IIa účinkem. Na ose y je sloučenina s anti-IIa účinkem (IU/ml) a na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBPA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + BSPBPA (30 pg/kg), * p < 0,05 vs enoxaparin + BSPBPA;
Tečkovaný sloupek O', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 7 je graf doby krvácení matrice pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na dobu krvácení matrice;
Na ose y je doba krvácení matrice a na ose x jsou:
BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBPA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + BSPBPA (30 pg/kg); * p < 0,05 vs enoxaparin + BSPBPA;
Tečkovaný sloupec O', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 8 je graf počtu destiček pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinností, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA s prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na počtu destiček.
Na ose y je počet destiček (% změny) a na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + BSPBPA (30 pg/kg).
-9CZ 298552 B6
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', prázdné šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 9 je graf kolagenem vyvolaného srážení destiček ex vivo pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na kolagenem vyvolané srážením destiček ex vivo;
Na ose y je srážení destiček vyvolané kolagenem (% změny) a na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/k), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + BSPBPA (30 pg/kg).
* p < 0,05 vs enoxaparin + BSPBPA
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 10 je graf ADP vyvolaného srážení destiček ex vivo pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na ADP-vyvolané srážení destiček ex vivo.
Na ose y je srážení destiček vyvolané ADP (% změny) a na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min); heparin + BSPBPA (30 pg/kg).
* p < 0,05 vs enoxaparin + BSPBPA;
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', prázdné šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 11 je graf srážení destiček ex vivo vyvolaného kyselinou arachidonovou pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagram je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na srážení destiček ex vivo vyvolané kyselinou arachidonovou.
Na ose y je srážení destiček vyvolané kyselinou arachidonovou (% změny) a na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg+ 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min); heparin + BSPBPA (30 pg/kg).
* p < 0,05 vs enoxaparin + BSPBPA;
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 12 je graf srážení destiček ex vivo vyvolaného trombinem pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, BSPBPA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na srážení destiček EX VIVO vyvolané trombinem.
-10CZ 298552 B6
Na ose y je srážení destiček vyvolané trombinem (% změny) a na ose x jsou: BSPBPA (30 pg/kg), BSPBPA (300 pg/kg), ENOX (0,5 mg/kg+ 5 pg/kg/min), ENOX + BSPBA (30 pg/kg), heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min); heparin + BSPBPA (30 pg/kg).
* p < 0,05 vs enoxaparin + BSPBPA;
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 13 jsou graficky znázorněny informace týkající se uspořádání vzorků krve při hemodynamických měření během podávání různých koncentrací sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)butanoyl)-nethylglycyl]asparagyl]-L~P-cyklohexylalaninamidu (PBGACA) a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Diagram se týká enoxaparinu, heparinu nebo nosiče (bolus + infuze);
PBGACA nebo nosič (Bolus + infúze);
Odběr krve/hemodynamika;
Arteriální vzorky při -5, 5, 10, 30, 60 minut;
Ošetřované skupiny (n=5 na skupinu);
plus PBGACA nízká;
plus PBGACA nízké;
Obr. 14 představuje graf počtu redukcí cyklického průtoku (CFR) pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu a heparinu s PBGACA na CRF;
Na ose y je CFR za 20 minut, na ose x jsou: vehikulum, PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
Prázdný sloupek kontrola, pravé šrafování 0-20', plný sloupek 20^40', levé šrafování 40-60'.
Na obr. 15 je graf aktivovaného parciálního tromboplastického času (APTT) pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxafarinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxafarinu nebo heparinu s PBGACA na APTT. Na ose y je APTT (sdružený nárůst) a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
Tečkovaný sloupek 0', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 16 je graf protrombinového času (PT) pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxafarinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, v závislosti na čase.
-11 CZ 298552 B6
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s BSPBPA na PT;
Na ose y je PT (sdružený nárůst) a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízké, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká.
Tečkovaný sloupek 0', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrotování 60'.
Na obr. 17 je graf závislosti anti-Xa účinku pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s PBGACA na účinnost sloučeniny s anti-Xa účinkem. Na ose y je sloučenina s anti-Xa aktivitou (IU/ml) na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
Tečkovaný sloupek 0', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 18 je graf závislosti anti-lla účinku pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxafarinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s PBGACA a účinnost sloučeniny s anti-IIa účinkem. Na ose y je sloučenina s anti-IIa účinkem (IU/ml) a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
Tečkovaný sloupek 0', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 19 je graf závislosti doby krvácení matrice pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa aktivitou, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Účinek současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s PBGACA na drobu krvácení matrice;
Na ose y je doba krvácení matrice a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
- 12CZ 298552 B6
Tečkovaný sloupek 0', prázdný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 20 je graf závislosti času destiček pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Na diagram je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s PBGACA na počet destiček.
Na ose y je počet destiček (% změny) a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká.
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 21 je graf závislosti kolagenem vyvolaného srážení destiček ex vivo pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinzu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s PBGACA na kolagenem vyvolané srážení destiček ex vivo.
Na ose y je srážení destiček vyvolané kollagenem (% změny) a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 22 je graf závislosti ADP-vyvolaného srážení destiček ex vivo pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Účinek současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s PBGACA na ADPvyvolané srážení destiček ex vivo.
Na ose y e srážení destiček vyvolané ADP (% změny) a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 23 je graf závislosti srážení destiček ex vivo vyvolaného kyselinou arachidonovou pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Na diagramu je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s PBGACA na srážení destiček ex vivo vyvolané kyselinou arachidonovou;
- 13CZ 298552 B6
Na ose y je srážení destiček vyvolané kyselinou arachidonové (% změny) a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min),
ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Na obr. 24 je graf závislosti srážení destiček ex vivo vyvolaného trombinem pro různé koncentrace sloučeniny s anti-Xa účinkem, enoxaparinu, sloučeniny působící proti srážení destiček, PBGACA a prostředku, který je obsahuje, na čase.
Vysvětlivky: Na diagram je vliv současného podávání enoxaparinu nebo heparinu s PBGACA na srážení destiček ex vivo vyvolané trombinem.
Na ose y je srážení destiček vyvolané trombinem (% změny) a na ose x jsou: vehikulum PBGACA nízká, PBGACA vysoká, ENOXAPARIN (0,05 mg/kg + 5 pg/kg/min), ENOXAPARIN + PBGACA nízká, heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min), heparin + PBGACA nízká;
* p < 0,05 vs enoxaparin + PBGACA;
Prázdný tučně orámovaný sloupek 5', pravé šrafování 10', plný sloupek 30', levé šrafování 60'.
Sloučeniny s anti-Xa účinkem a sloučeniny působící proti srážení destiček, použité podle vynálezu, vykazují výrazné farmakologické působení na základě testů popsaných v literatuře, přičemž výsledky těchto testů se vztahují na farmakologickou účinnost u lidí a ostatních savců. Následující výsledky farmakologických testů jsou typickými charakteristikami sloučenin s anti-Xa účinkem a sloučenin působících proti srážení destiček použitých podle vynálezu.
Následující farmakologické testy vyhodnocují účinnost sloučenin s anti-Xa účinkem a sloučenin působících proti srážení destiček podle vynálezu. Tyto testy zahrnují hemodynamická měření během podávání různých koncentrací sloučenin s anti-Xa účinkem a sloučenin působící proti srážení destiček a prostředků připravených za použití těchto látek v závislosti na čase (obr. 1 až 13). Při těchto testech se měřilo snížení cyklického průtoku (obr. 2 a 14), doba aktivovaného parciálního tromboplastinu (obr. 3 a 15), protrombinový čas (obr. 4 až 16), anti-Xa účinek (obr. 5 a 17), antilla účinek (obr. 6 a 18), doba krvácení matrice (obr. 7 a 19) počet destiček (obr. 8 a 20), srážení destiček vyvolané kolagenem ex-vivo (obr. 9 a 21), srážení destiček vyvolané ADP ex-vivo (obr. 10 a 22), srážení destiček vyvolané kyselinou arachidonovou ex-vivo (obr. 11 a 23) a srážení destiček vyvolané trombinem ex-vivo (obr. 12 a 24).
Sloučeniny podle vynálezu vykazovaly význačný účinek v těchto testech, a proto se pokládají za užitečné při prevenci a léčení trombózy spojené s určitými chorobnými stavy. Antitrombotické působení v testu srážení destiček psů ex-vivo předvídá stejné chování u lidí (viz například Catalfamo, J. L. a Dodds, W. Jean, „Isolation of Platelet from Laboratory Animals“, Methods Enzymol. 169, díl A, str. 27 (1989)).
Materiály a metody
Všechny postupy v této studii byly provedeny v souladu se zákony na ochranu zvířat Animal w elf are Act Regulations a Guide for Care and Use of Laboratory Animal (Dhew publikace číslo NIH 85-23, 1985).
Následující protokol je experimentální model nestabilní angíny.
- 14CZ 298552 B6
Psi Mongred různého pohlaví (15 až 21 kg) se uspí pentobarbitalem sodným (30 mg/kg i.v., s doplňky podle potřeby), intubují se a zavede se dýchání Harvardovým respirátorem (Harvard Apparatus, S. Natick, MAA). Do pravé femorální žíly se zavede trojcestný katétr (SAFEDWELLplus, Becton Dickinson, Sandy, UT), k podávání testovaných činidel a k doplňující anestesii. Pravá femorální artérie se opatří kanylou k měření arteriálního tlaku krve a k odběru krevních vzorků.
Provede se thorakotomie v 5. mezižebemím místě a srdce se zavěsí do perikardiální kolébky. Levá obvodová koronární artérie (LCX) se izoluje a otevře se v délce 2 cm s podvázáním bočních ramen podle potřeby. Na cévu se nasadí eletromagnetická průtoková sonda (Carolina Medical Electronics, 50ID) ke sledování koronárního průtoku krve a na distální část cévy se nasadí očko k vytvoření dočasné mechanické okluze, které se použije k nastavení stupně stenózy a k napomoci vyhodnocení měření nulového průtoku.
K vytvoření kritické stenózy, kteráje potvrzena vymizením hyperemické odezvy na 10 sekundovou mechanickou okluzi cévy se nasadí distálně od průtokové sondy LexanR okluzor. Endothelium a buňky hladkého svalstva cévy se poškodí sevřením cévy cévní svorkou. Výsledkem tohoto stavu je ulpívání a srážení krevních destiček v poškozené oblasti, což vyvolá postupný pokles koronárního průtoku krve. Když průtok dosáhne nuly, pohybuje se s okluderem zpět a dopředu přes poškozenou oblast k mechanickému přemístění trombu bohatého na destičky, čímž se obnoví průtok krve. Tento opakovači model snižování průtoku krve, který je obnovován mechanickým rozrušením destičkového trombu, se označuje jako cyklické snižování průtoku (cyclic flow reduction, CFR). Protitrombický účinek testovaných činidel se kvantifikuje porovnáváním počtu CFR, ke kterému dojde ve 20-minutové kontrolní periodě, s počtem CFR za 20 minut pro tři po sobě následující 20-minutové periodě po podání léčiva. Významné snížení počtu CFR se považuje za reprezentanta antitrombického účinku.
Experimentální protokol
a. Protokol za použití PBPBPA
Třicet psů bylo určeno do jedné z pomocných šesti ošetřovaných skupin. Sloučeniny byly podávány pouze jako intravenózní bolus (pro N-(n-butylsulfonyl)-4-(piperidin-4-ylbutyloxy)-Lfenylalanin (BSPBPA) nebo solný roztok jako vehikulum) nebo jako intravenózní bolus plus konstantní intravenózní infúze (pro heparin, enoxaparin (ENOX), nebo solný roztok jako vehikulum. Ošetřovanými skupinami byly: (I) BSPBPA (30 pg/kg); (II) BSPBPA (300 pg/kg); (III) ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min); (IV) ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min) plus BSPBA (30 pg/kg); (V) heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min); a (VI) heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min) plus BSPBPA (30 pg/kg). Všechny sloučeniny byly zředěné solným roztokem a bolus byl injekčně aplikován v objemu 5 ml, přičemž konstantní infúze byly prováděny použitím objemu 22 ml.
a. Protokol používající PBGACA
Třicet psů bylo určeno do jedné z pomocných šesti ošetřovaných skupin. Použití sloučenin pro tyto pokusy zahrnovalo podávání následujících činidel jako bolus a jako konstantní infúze (pro N-[N-[N-(4-(piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]asparagyl]-L-[3-cyklohexylalanmamid (PBGACA) nebo solný roztok jako vehikulum) nebo jako intravenózní bolus plus konstantní intravenózní infúze (pro heparin, enoxaparin (ENOX), nebo solný roztok jako vehikulum. Ošetřovanými skupinami byly: (I) PBGAPA (10 pg/kg + 0,15 pg/kg/min; (II) PBGACA (30 pg/kg + 0,15 pg/kg/min; (III) ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min; (IV) ENOX (0,5 mg/kg + 5 pg/kg/min) plus PBGACA (10 pg/kg + 0,15 pg/kg/min); (V) heparin (60 U/kg + 0,7 U/kg/min); a (VI) heparin (60 U/kg) plus PBGACA (10 pg/kg + 0,15 pg/kg/min). Všechny sloučeniny byly zředěné
- 15 CZ 298552 B6 solným roztokem a bolus byl injekčně aplikován v objemu 5 ml, přičemž konstantní infúze byly prováděny použitím objemu 22 ml.
Po nastavení CFR na alespoň dobu 20 minut byly podávány sloučeniny shora popsaným způsobem, přičemž byl monitorován průtok krve po dobu jedné hodiny infúzní periody. Odebrány byly vzorky arteriální krve před podáváním zkoušených činidel (kontrolní vzorek) a 5, 10, 30 a 60 minut po podání testované sloučeniny. Vzorky krve byly odebrány do 1/10 objemu 3,8% trinatriumcitrátu a použity pro stanovení ex vivo agregace destiček, počtu destiček, hladiny natiXa, hladiny anti-IIa a testu doby koagulace (aktivovaný parciální tromboplastinový čas, APTT a protrombinový čas, PT). Vzorky krve (4,5 ml), získané pro analýzu hladiny anti-Xa a anti-IIa, byly shromážděny do chlazené stříkačky obsahující 0,5 ml trinatriumcitrátu a ihned byly umístěny na led. Zaznamenán byly střední arteriální tlak krve, tep srdce a EKG po dobu trvání testu (polygraf Grass, Model 7D, Grass Instruments, MA).
Doby koagulace a doba krvácení matrice. Měřena byla aktivovaná parciální tromboplastinová doba (APTT) a protrombinová doba (PT) za použitá analyzátoru Microsample Coagulation Analyzer (MCA210, Bio Data Corp, Horsham, PA) a činidel DadeR (Thromboplastin-C Plus a ActinR FS aktivované PTT činidlo, Baxter Diagnostics, lne., Deerfield, IL).
APTT je nejčastěji používaným způsobem pro monitorování intravenózní heparinové antikoagulační terapie. Je také základním screeningovým testem pro deficit nebo abnormalitu vnitřních koagulačních faktorů: VII, IX, XI, XII a faktorů společných pro vnitřní a vnější dráhy: I (fibrinogen), II, V, X. Při použití spolu s deficitním substrátem plazmy poskytuje APTT základ pro kvantifikaci specifických koagulačních faktorů.
Vnitřní schopnost krve vytvářet fibrinové sraženiny vyžaduje koagulační faktory XII, XI, VIII, X, V, II (protrombin), fibrinogen, destičkový lipid a vápník.
Přidáním sloučeniny k aktivaci faktorů XII a XI, kontaktních faktorů se parciální tromboplastinová doba stane „aktivovanou“ parciální tromboplastinovou dobou (APTT). Jelikož jsou konečné koagulační body kratší a ostřejší než s PTT, označuje se APTT jako jednoduché a vysoce spolehlivé měření vnitřního koagulačního mechanizmu.
Testovací postup
1. Předběžně se inkubuje se 0,025 M chlorid vápenatý při teplotě 37 °C.
2. Odpipetuje se ,1 ml rekonstituovaného APTT reakčního činidla do testovací kyvety.
3. Přidá se 0,1 ml testované nebo kontrolní plazmy.
4. Inkubuje se při 37 °C přesně 5 minut.
5. Přidá se 0,1 ml předinkubovaného chloridu vápenatého současně s nastartováním časoměřiče.
6. Zaznamenává se doba srážení.
Protrombinová doba je způsob monitorování orální antikoagulační terapie. Je to také základní screeningový test na deficit nebo abnormalitu vnějšího koagulačního faktoru VII a faktorů společných pro vnitřní a vnější hemostatické dráhy: fibrinogen II, V a X. Při použití spolu s deficitní substrátovou plazmou poskytuje PT základ pro kvantifikaci specifických koagulačních faktorů.
Schopnost krve vytvářet fibrinovou sraženinu vnější hemostatickou cestou vyžaduje tkáňový tromboplastin, vápník, faktor VII, faktor V, faktor X, faktor II (protrombin) a faktor 1 (fíbrino- 16CZ 298552 B6 gen). Jestliže se přidají tkáňový tromboplastin a vápník do vzorku citrátové plazmy, vnitřní faktory se obejdou a reakce se stane specifická pro koagulační faktory zapojené ve vnější a běžné cestě.
Testovací postup
1. Předběžně se inkubuje rekonstituované činidlo při 37 °C.
2. Odpipetuje se 0,1 ml testované nebo kontrolní plazmy do testovací kyvety.
3. Inkubuje se při 37 °C po dobu alespoň dvou minut nikoliv však déle než 10 minut.
4. Injikuje se 0,1 ml předinkubovaného reakčního činidla současně s nastartováním časoměřiče.
6. Zaznamenává se doba srážení.
Naměřené hodnoty doby krvácení matrice se získají ve stejných časových bodech jako v případě krevních vzorků, jak shora uvedeno. Měření doby krvácení matrice se provádí po rovnoměrném naříznutí svalové membrány na vnitřním horním pysku automatickým zařízením SurgicuttR (ITC, Edison NJ). Krev se odsává savým papírem Surgicutt(R) každých 30 sekund, přičemž se dbá na to, aby se narušilo místo řezu. Měří se doba krvácení matrice od chvíle říznutí až do chvíle, kdy krev již nezabarví savý papír. Doba krvácení 10 minut se považuje za maximální.
Anti-Xa a anti-Ila účinek
Vzorky byly odstřeďovány při 1500 g po dobu 10 minut při teplotě 4 °C. Plazma byla odstraněna a uchovávána při teplotě -70 °C až do doby testu. Analyzována byl anti-Xa a anti-Ila účinek chromogenickými způsoby za použití kitu (Američan Diagnostica, antichrome(R) Heparin and antichrome(R) Heparin anti IIA, Geenwich, CT]) s malými modifikacemi. Inkubace a reakce byly prováděny při teplotě 37 °C. Amidolytická aktivita (jednotky „millioptical“ neboli mOD) byla stanovena za použití spektrofotometru s mikrotitrovacím platem SPECTRAmax a software Sopftmax Pro (Molecular Devices Corp. Sunnyvale CA). K vytvoření standardních křivek pro měření heparinu a ENOX anti-Xa a anti-Ila účinku byl použit lst IntesrnationalLMWHStandard (National Institute far Biological Standards and Contrl, London; anti-Xa účinek 168 IU/mg aanti-IIA účinek 66,4 IU/mg). Křivky byly zkonstruovány za použití čtyř parametrů modelu křivka-zkouška (Softmax Pro, Molecular Devices, Sunyvale, CA). Hodnoty pro anti-Xa a anti-Ila účinek heparinu a ENOX se uvádějí v mezinárodních jednotkách.
Agregace destiček
Test na inhibici ex-vivo agregace destiček se provedl podle metody popsané v publikaci Zucker „Platelet Aggregation Measu-red by the Photoelectric Method“, Methods in Enzymology 169, str. 117 až 133 (1989).
Plazma obohacená destičkami (PRC) byla připravena odstřeďováním vzorků krve při 150 x g po dobu 10 minut. Po odstranění supematantu obsahujícího RPP byla plazma chudá na destičky (PPP) připravena odstřelování zbylého vzorku při 1000 x g po dobu 10 minut. Počet destiček byl stanoven za použití čítače částic Coulter ZM nebo Coulter ZBI (Coulter Instruments, Hialeah, FL). V případě potřeby byl počet destiček nastaven na 3 x 108 destiček/ml za použití PPP. PRP (250 μΐ) byl inkubován při teplotě 37 °C za míchání při 1200 otáčkách/minutu. Po předinkubaci epinefrinem po dobu jedné minuty (1 μΜ, Chrono-par 393, Chrono-log Corp. Havertown, PA) byla vyvolána agregace destiček adenosindifosfátem (ADP, 10 μΜ, Chrono-par 384, Chrono-log Corp., Havertown, PA), kolagenem (ze šlachy koně, 10 μg/ml, Chrono-par 384, Chrono-log Corp., Havertown, PA), arachidonovou kyselinou (1 mM, Biodata Corp. Horsham, PA) nebo
- 17CZ 298552 B6 trombinem (4 jednotky/ml, Enzyme Research Institute, Southe Bend, IN; plus Gly-Pro-Arg-Pro, inhibitor polymerace fíbrinu, 2 mM, Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). Agregace destiček byla monitorována spektrofotometricky za použití agregátoru destiček PAP-4C (Bio Data Corp.
Horsham, PA). Výsledky byly vyjádřeny jako procento inhibice míry srážení ve srovnání s odezvou na srážení provedeného předběžně léčivem.
Statistika
Hodnoty získané při všech testech byly analyzovány dvakrát opakovaným měřením s přihlédnutím k odchylkám. Dodatečné porovnání průměrů s kontrolními hodnotami v rámci ošetřované skupiny a srovnání hodnot ENOX s jinými ošetřovanými skupinami bylo provedeno za použití diferenčního testu. Za významnou byla považována p-hodnota menší než 0,5.
Výsledky
Kombinované použití anti-Xa sloučeniny a antagonisty agregace destiček podle vynálezu v dávkách, které by byly při použití jednotlivých sloučenin neúčinné, efektivně brání opakovanému vytváření destičkových trombů ve stejné míře, jako vysoké dávky antagonisty srážení destiček bez výrazného vzrůstu doby krvácení matrice (ve srovnání s více než pětinásobným vzrůstem doby krvácení matrice způsobeným vysokou dávkou antagonisty srážení destiček BSPBPA a přibližně trojnásobným vzrůstem doby krvácení matrice způsobeným vysokou dávkou antagonisty srážení destiček PBGACA).
Kombinace nízké dávky antagonisty srážení destiček s heparinem v dávce, která zvyšuje APTT 2,0 až 2,5krát oproti základní hodnotě, neinhibovalo opakované vytváření trombu destiček.
Předmětný vynález je možno využít i v jiných specifických provedeních, aniž by to znamenalo odchýlení se od postaty předmětného vynálezu.

Claims (17)

1. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku a farmaceuticky účinné množství sloučeniny mající anti-Xa účinnost, kterou je heparinoidní sloučenina nebo nízkomolekulámí heparin, a antagonistové sloučeniny působící proti srážení destiček.
2. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že sloučeninou mající anti-Xa účinnost je nízkomolekulámí heparin.
3. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vy z n a č uj í c í se tím, že nízkomolekulámí heparin je zvolen ze skupiny zahrnující enoxaparin, nardroparin, delteparin, certroparin, pamaparin, reviparin, ardeparin/RD heparin/RDH nebo tinzaparin.
4. Farmaceutický prostředek podle nároku 1,vyznačující se tím, že nízkomolekulámím heparinem je enoxaparin.
5. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že sloučeninou mající anti-Xa účinnost je heparinoidní sloučenina.
6. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že heparinoidní sloučeninou je denaparoid.
-18CZ 298552 B6
7. Farmaceutický prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že antagonistou srážení destiček je abciximab, N-[N-[N-(4-piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]aspartyl]L-p-cyklohexylalanin, N-[N-[N-(4-piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]aspartyl]-L-pcyklohexylalaninamid nebo N-(n-butylsulfonyl)-4-(piperidin-4-ylbutyloxy)-L“fenylalanin.
8. Farmaceutický prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že antagonistou srážení destiček je abciximab.
9. Farmaceutický prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že antatonistou srážení destiček je N-[N-[N-(4-piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]aspartyl]-L-|3-cyklohexylalanin
10. Farmaceutický prostředek podle nároku 7, vyznačující se tím, že antagonistou srážení destiček je N-[N-[N-(4-piperidin-4-yl)butanoyl)-N-ethylglycyl]aspartyl]-L-3-cyklohexylalaninamid.
11. Farmaceutický prostředek podle nároku 7, vyznaču j í cí se tím, že antagonistou srážení destiček je N-(n-butysulfonyl)-4-(piperidin-^l-ylbutyloxy)-L-fenylalanin.
12. Použití farmaceutického prostředku podle nároku 1, pro přípravu léčiva pro léčení nebo prevenci fyziologického stavu souvisejícího s ischemickou poruchou spojenou s trombózou.
13. Použití podle nároku 12, při kterém je fyziologický stav vybrán ze skupiny zahrnující mrtvici, aterosklerózu, angiogenezi, trombózu, tromboembolické stavy, roztroušenou intravaskulámí koagulaci, periferní arteriální okluzní nemoc, hemodialýzu, potřebu mimotělního oběhu při chirurgickém zákroku, poškození tkání fosfolipázami A2, akutní koronární syndrom nebo tromboembolický syndrom spojený s rakovinou, sepsí nebo porodními komplikacemi.
14. Použití podle nároku 12, při kterém je fyziologickým stavem akutní koronární syndrom.
15. Použití podle nároku 14, při kterém je akutním koronárním syndromem nestabilní angína nebo infarkt myokardu.
16. Použití posle nároku 12, při kterém léčení nebo prevence probíhá při chirurgickém zákroku koronárního arteriámího bypasu nebo transluminální koronární angioplastice.
17. Použití podle nároku 12, při kterém léčení nebo prevence probíhá při perkutánní transluminální angioplastice.
CZ0174299A 1996-11-27 1997-11-24 Farmaceutický prostredek a použití tohoto prostredku pro prípravu léciva CZ298552B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3187896P 1996-11-27 1996-11-27

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ174299A3 CZ174299A3 (cs) 1999-09-15
CZ298552B6 true CZ298552B6 (cs) 2007-10-31

Family

ID=21861879

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0174299A CZ298552B6 (cs) 1996-11-27 1997-11-24 Farmaceutický prostredek a použití tohoto prostredku pro prípravu léciva

Country Status (27)

Country Link
US (2) US6103705A (cs)
EP (1) EP0946185B2 (cs)
JP (1) JP4498471B2 (cs)
KR (1) KR100512671B1 (cs)
CN (1) CN1121224C (cs)
AP (1) AP1390A (cs)
AT (1) ATE283062T1 (cs)
AU (1) AU754936B2 (cs)
BG (1) BG64542B1 (cs)
BR (1) BR9713141A (cs)
CA (1) CA2272317C (cs)
CZ (1) CZ298552B6 (cs)
DE (1) DE69731763T3 (cs)
DK (1) DK0946185T4 (cs)
EA (1) EA002475B1 (cs)
ES (1) ES2230624T5 (cs)
HU (1) HUP9903496A3 (cs)
IL (1) IL129877A (cs)
NO (1) NO327740B1 (cs)
OA (1) OA11049A (cs)
PL (1) PL189116B1 (cs)
PT (1) PT946185E (cs)
SI (1) SI0946185T2 (cs)
SK (1) SK286024B6 (cs)
UA (1) UA63929C2 (cs)
WO (1) WO1998023279A1 (cs)
ZA (1) ZA9710691B (cs)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK0946185T4 (da) * 1996-11-27 2010-08-30 Aventis Pharma Inc Farmaceutisk præparat, som omfatter en forbindelse med anti-Xa-aktivitet og en blodpladeaggregations antagonistforbindelse
FR2764511B1 (fr) 1997-06-13 2000-09-08 Sanofi Sa Compositions pour le traitement et la prevention de la thrombose arterielle et utilisation d'un inhibiteur du facteur xa seul et/ou en combinaison avec un antiagregant plaquettaire
US6136794A (en) * 1998-02-02 2000-10-24 Merck & Co., Inc. Platelet aggregation inhibition using low molecular weight heparin in combination with a GP IIb/IIIa antagonist
AU1712700A (en) * 1998-11-18 2000-06-05 G.D. Searle & Co. Restoration of platelet aggregation by antibody administration after gpiib/iiia antagonist treatment
EP1192187A1 (en) * 1999-06-30 2002-04-03 Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. Heparin compositions that inhibit clot associated coagulation factors
ES2161615B1 (es) * 1999-07-23 2003-03-16 Rovi Lab Farmaceut Sa Composiciones de heparinas de muy bajo peso molecular.
US6969705B2 (en) * 2000-07-21 2005-11-29 Aventis Pharma S.A. Compositions of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
HK1052315A1 (zh) * 2000-09-08 2003-09-11 Leo Pharma A/S 抗血栓形成合成物
US6982251B2 (en) * 2000-12-20 2006-01-03 Schering Corporation Substituted 2-azetidinones useful as hypocholesterolemic agents
DK1413331T3 (da) 2001-01-26 2007-12-10 Schering Corp Kombinationer af peroxisomproliferatoraktiveret receptor (PPAR)-aktivatoren fenofibrat og sterolabsorptionsinhibitoren ezetimib til vaskulære indikationer
IL156422A0 (en) 2001-01-26 2004-01-04 Schering Corp The use of substituted azetidinone compounds for the treatment of sitosterolemia
US7071181B2 (en) 2001-01-26 2006-07-04 Schering Corporation Methods and therapeutic combinations for the treatment of diabetes using sterol absorption inhibitors
DE10141106A1 (de) * 2001-08-22 2003-03-13 Aventis Pharma Gmbh Verwendung von Heparinoid-Derivaten zur Behandlung und Diagnose von mit Heparinoiden behandelbaren Erkrankungen
US7053080B2 (en) 2001-09-21 2006-05-30 Schering Corporation Methods and therapeutic combinations for the treatment of obesity using sterol absorption inhibitors
ATE345793T1 (de) 2001-09-21 2006-12-15 Schering Corp Behandlung von xanthom mittels azetidinon- derivate als hemmer der sterol absorption
US20040171819A1 (en) * 2002-10-10 2004-09-02 Aventis Pharma S.A. Mixtures of polysaccharides derived from heparin, their preparation and pharmaceutical compositions containing them
EP1560579A1 (en) 2002-11-06 2005-08-10 Schering Corporation Cholesterol absorption inhibitors for the treatment of autoimmune disorders
CA2517571C (en) * 2003-03-07 2011-07-05 Schering Corporation Substituted azetidinone compounds, processes for preparing the same, formulations and uses thereof
CA2517573C (en) 2003-03-07 2011-12-06 Schering Corporation Substituted azetidinone compounds, formulations and uses thereof for the treatment of hypercholesterolemia
US7208486B2 (en) 2003-03-07 2007-04-24 Schering Corporation Substituted azetidinone compounds, processes for preparing the same, formulations and uses thereof
US7459442B2 (en) 2003-03-07 2008-12-02 Schering Corporation Substituted azetidinone compounds, processes for preparing the same, formulations and uses thereof
US7956046B2 (en) * 2003-07-24 2011-06-07 Aventis Pharma S.A. Oligosaccharide mixtures derived from heparin, preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
EP1537871A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-08 Aventis Pharma S.A. Enoxaparin for the treatment of cancer
TWI396686B (zh) 2004-05-21 2013-05-21 Takeda Pharmaceutical 環狀醯胺衍生物、以及其製品和用法
KR100601429B1 (ko) * 2004-07-09 2006-07-14 주식회사 대우일렉트로닉스 기계식 전자렌지의 댐퍼 구동회로
AR067345A1 (es) * 2007-07-10 2009-10-07 Paion Deutschland Gmbh Uso de trombomodulina para la preparacion de un medicamento trombolitico
EP2014296A1 (en) * 2007-07-10 2009-01-14 PAION Deutschland GmbH Novel strategies for increasing the reperfusion in obstructed blood vessel
CN101783857B (zh) * 2009-05-12 2011-11-30 上海海事大学 一种基于fpga在高分辨率成像系统中的图像矩阵化预处理方法
IT1400232B1 (it) * 2010-05-07 2013-05-24 Advance Holdings Ltd Composizione farmaceutica topica comprendente eparina
WO2011149110A1 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Daiichi Sankyo Company, Limited Novel composition for the prevention and/or treatment of thromboembolism
EP2508892A1 (de) * 2011-04-04 2012-10-10 Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH Kontrollen und Kit für Thrombozytenaktivitätsteste
RU2554803C1 (ru) * 2014-06-26 2015-06-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ профилактики развития послеоперационных венозных тромбоэмболических осложнений у пациентов с колоректальным раком

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3766167A (en) * 1971-03-26 1973-10-16 Research Corp Orally active anticoagulant
FR2478646A2 (fr) * 1980-03-20 1981-09-25 Choay Sa Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir
US4692435A (en) * 1978-11-06 1987-09-08 Choay, S.A. Mucopolysaccharide composition having a regulatory action on coagulation, medicament containing same and process of preparation
SE449753B (sv) * 1978-11-06 1987-05-18 Choay Sa Mukopolysackaridkomposition med reglerande verkan pa koagulation, lekemedel innehallande densamma samt forfarande for framstellning derav
FR2440376A1 (fr) * 1978-11-06 1980-05-30 Choay Sa Composition mucopolysaccharidique ayant une activite regulatrice de la coagulation, medicament la contenant et procede pour l'obtenir
CA1136620A (en) * 1979-01-08 1982-11-30 Ulf P.F. Lindahl Heparin fragments having selective anticoagulation activity
US4826827A (en) * 1979-10-05 1989-05-02 Choay S.A. Short chained oligosaccharides having biological properties, a process for making the same and the use thereof as drugs
FR2482611B1 (fr) * 1980-05-14 1986-03-07 Pharmindustrie Nouveaux polysaccharides sulfates, procedes pour leur preparation et leur utilisation comme medicaments
US4351938A (en) * 1980-05-19 1982-09-28 Riker Laboratories, Inc. Anticoagulant substance
FR2503714B1 (fr) * 1981-04-10 1986-11-21 Choay Sa Procede d'obtention de mucopolysaccharides biologiquement actifs, de purete elevee, par depolymerisation de l'heparine
DE3265781D1 (en) * 1981-05-21 1985-10-03 Akzo Nv New anti-thromboticum based on polysacharides, method for its preparation and pharmaceutical compositions
US4533549A (en) * 1983-01-04 1985-08-06 Lasker Sigmund E Antithrombotic agent
IT1195497B (it) * 1983-03-08 1988-10-19 Opocrin Spa Procedimento per la preparazione di frazioni oligosaccaridiche dotate di proprieta' farmacologiche per degradazione chimica di eparina
US4683291A (en) * 1985-10-28 1987-07-28 Scripps Clinic And Research Foundation Platelet binding inhibitors
DK196986D0 (da) * 1986-04-30 1986-04-30 Novo Industri As Fremstilling af polysaccharider
DK196886D0 (da) * 1986-04-30 1986-04-30 Novo Industri As Fremstilling af polysaccharider
US4833155A (en) * 1986-11-25 1989-05-23 Syntex (U.S.A.) Inc. 3-(ω-(3,5,-di-t-butyl-4-hydroxyphenyl)-alkanoyl)pyrroles, and anti-inflammatory uses thereof
CA1311583C (en) * 1986-12-15 1992-12-15 Gerard Armand Marguerie De Rotrou Peptide derivatives and their application, in particular in therapy
US4857508A (en) * 1987-12-03 1989-08-15 Monsanto Company Novel platelet-aggregation inhibitor peptide derivatives
KR940009084B1 (ko) * 1988-05-18 1994-09-29 체크 포인트 시스템스, 인코오퍼레이티드 자기 및 공명회로 검출용 안테나 시스템
IT1234508B (it) * 1988-06-10 1992-05-19 Alfa Wassermann Spa Derivati eparinici e procedimento per la loro preparazione
US5037808A (en) * 1988-07-20 1991-08-06 Monsanto Co. Indolyl platelet-aggregation inhibitors
US4879313A (en) * 1988-07-20 1989-11-07 Mosanto Company Novel platelet-aggregation inhibitors
US4992463A (en) * 1988-07-20 1991-02-12 Monsanto Company Thienyl peptide mimetic compounds which are useful in inhibiting platelet aggregation
IT1234826B (it) * 1989-01-30 1992-05-29 Alfa Wassermann Spa Derivati eparinici e procedimento per la loro preparazione
US5023233A (en) * 1989-07-28 1991-06-11 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
US4952562A (en) * 1989-09-29 1990-08-28 Rorer Pharmaceutical Corporation Anti-thrombotic peptides and pseudopeptides
CA2066047A1 (en) * 1989-09-29 1991-03-30 Scott I. Klein Anti-thrombotic peptides and pseudopeptides
US5051405A (en) * 1989-10-10 1991-09-24 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Anti-thrombotic peptides and pseudopeptides
US5053392A (en) * 1989-12-01 1991-10-01 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Novel arginine, glycine, aspartic acid derivatives as platelet-aggregation inhibitors
US5086069A (en) * 1990-02-05 1992-02-04 Rorer Pharmaceutical Corporation Anti-thrombotic peptide and pseudopeptide derivatives
US5064814A (en) * 1990-04-05 1991-11-12 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Anti-thrombotic peptide and pseudopeptide derivatives
IL99539A0 (en) * 1990-09-27 1992-08-18 Merck & Co Inc Fibrinogen receptor antagonists and pharmaceutical compositions containing them
NZ239846A (en) * 1990-09-27 1994-11-25 Merck & Co Inc Sulphonamide derivatives and pharmaceutical compositions thereof
NZ239876A (en) * 1990-09-27 1993-12-23 Merck & Co Inc Glycyl-b-alanine derivatives and pharmaceutical compositions thereof.
JPH0747832B2 (ja) * 1991-01-24 1995-05-24 アエロジェット―ジェネラル コーポレイション 電気化学的鈍性化方法
WO1992019249A1 (en) * 1991-05-02 1992-11-12 Yeda Research And Development Co. Ltd. Compositions for the prevention and/or treatment of pathological processes
WO1993008845A1 (en) * 1991-11-08 1993-05-13 Massachusetts Institute Of Technology Localized oligonucleotide therapy
AU6415894A (en) * 1993-03-29 1994-10-24 Du Pont Merck Pharmaceutical Company, The Cyclic compounds useful as inhibitors of platelet glycoprotein iib/iiia
SK47796A3 (en) * 1993-10-15 1997-03-05 Rhone Poulenc Rorer Pharma Antithrombotic azacycloalkylalkanoyl peptides and pseudopeptides
US5639469A (en) * 1994-06-15 1997-06-17 Minnesota Mining And Manufacturing Company Transmucosal delivery system
US5763427A (en) * 1995-03-31 1998-06-09 Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. Compositions and methods for inhibiting thrombogenesis
US5721214A (en) * 1995-06-07 1998-02-24 Cor Therapeutics, Inc. Inhibitors of factor Xa
WO1997035592A1 (en) * 1996-03-28 1997-10-02 G.D. Searle & Co. Iib/iiia antagonists co-administered with aspirin and/or heparin
DK0946185T4 (da) * 1996-11-27 2010-08-30 Aventis Pharma Inc Farmaceutisk præparat, som omfatter en forbindelse med anti-Xa-aktivitet og en blodpladeaggregations antagonistforbindelse

Also Published As

Publication number Publication date
DE69731763T3 (de) 2010-12-30
SI0946185T2 (sl) 2010-08-31
ATE283062T1 (de) 2004-12-15
CA2272317C (en) 2001-01-30
CN1121224C (zh) 2003-09-17
WO1998023279A1 (en) 1998-06-04
KR100512671B1 (ko) 2005-09-07
PL189116B1 (pl) 2005-06-30
AU754936B2 (en) 2002-11-28
NO327740B1 (no) 2009-09-14
KR20000057265A (ko) 2000-09-15
CN1238693A (zh) 1999-12-15
BG64542B1 (bg) 2005-07-29
EP0946185A4 (en) 2001-06-27
NO992555D0 (no) 1999-05-27
ES2230624T3 (es) 2005-05-01
IL129877A (en) 2004-08-31
US20020032214A1 (en) 2002-03-14
AP9901517A0 (en) 1999-06-30
EP0946185B2 (en) 2010-05-05
EA002475B1 (ru) 2002-06-27
SI0946185T1 (en) 2005-06-30
BR9713141A (pt) 2000-02-08
ZA9710691B (en) 1998-06-12
HUP9903496A3 (en) 2001-03-28
OA11049A (en) 2002-02-18
EP0946185A1 (en) 1999-10-06
PT946185E (pt) 2005-02-28
AU5454698A (en) 1998-06-22
UA63929C2 (uk) 2004-02-16
DE69731763D1 (de) 2004-12-30
EA199900499A1 (ru) 2000-04-24
DE69731763T2 (de) 2005-06-30
HK1023504A1 (en) 2000-09-15
AP1390A (en) 2005-04-15
JP2001506603A (ja) 2001-05-22
NO992555L (no) 1999-05-27
JP4498471B2 (ja) 2010-07-07
US6103705A (en) 2000-08-15
BG103372A (en) 2000-01-31
ES2230624T5 (es) 2010-10-25
CZ174299A3 (cs) 1999-09-15
SK286024B6 (sk) 2008-01-07
DK0946185T4 (da) 2010-08-30
DK0946185T3 (da) 2005-03-21
EP0946185B1 (en) 2004-11-24
IL129877A0 (en) 2000-02-29
HUP9903496A2 (hu) 2000-10-28
SK67399A3 (en) 2000-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ298552B6 (cs) Farmaceutický prostredek a použití tohoto prostredku pro prípravu léciva
Sniecinski et al. Anticoagulation management associated with extracorporeal circulation
JP2003526617A (ja) 種々の血栓塞栓性障害の予防および治療のための併用療法を提供する低分子量へパリンと血小板凝集阻害剤との相乗効果
Young et al. Argatroban as an alternative to heparin in extracorporeal membrane oxygenation circuits
US20090238852A1 (en) Methods for controlling intracellular calcium levels associated with an ischemic event
EP2480237A1 (en) Methods of treatment with a low molecular weight heparin composition
Salta et al. Comparison of antithrombin‐dependent and direct inhibitors of factor Xa or thrombin on the kinetics and qualitative characteristics of blood clots
Avecilla Transfusion Management of Patients Receiving Antithrombotic Therapy
JP3838680B2 (ja) 抗凝血物質に対する解毒剤として用いるのに適した医薬およびその使用
Freudenberger et al. Antithrombotic effect of FK506 vs cyclosporine in cardiac transplant recipients: potential implications in transplant arteriopathy
MXPA99005008A (en) PHARMACEUTICAL COMPOSITION COMPRISING A COMPOUND HAVING ANTI-Xa ACTIVITY AND A PLATELET AGGREGATION ANTAGONIST COMPOUND
HK1023504B (en) Pharmaceutical composition comprising a compound having anti-xa activity and a platelet aggregation antagonist compound
Cella et al. Heparin neutralizing activity (HNA) and antithrombin III in coronary artery disease
Aguejouf et al. The arterial antithrombotic activity of thioxylosides in a rat model of laser-induced thrombosis
Strekerud et al. Heparin and low molecular weight heparin prolong prothrombin times in patients on warfarin treatment
Curto Aguilera et al. Dental management of patients taking novel oral anticoagulants (NOAs): dabigatran
WO2014033551A2 (en) The use of direct thrombin inhibitors in critically ill patients

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20121124