CZ191695A3

CZ191695A3 - Biologically compatible contrast agent, process of its preparation and representation method by ultrasound

Info

Publication number: CZ191695A3
Application number: CZ951916A
Authority: CZ
Inventors: Steven Carl Quay
Original assignee: Sonus Pharma Inc
Priority date: 1993-01-25
Filing date: 1994-01-19
Publication date: 1996-05-15
Also published as: US5558853A; HU9502163D0; CN1068230C; CA2154590C; ES2158892T3; SK93095A3; JP3621413B2; NO952819L; AU680652B2; ATE200985T1; PL176116B1; EP0680341B1; US5707607A; NZ262237A; JPH08508977A; DE69427185T2; FI953546A0; CA2154590A1; US5876696A; HUT72323A

Description

Biologicky kompatibilní :kontras^ní prostředek-·; způsob' jeho výroby a koloidní disperze --Oblast^i££Í!2i3S

Vynález ae týká kontrastních agens pro biome1% dicinské použití, zahrnujících vodní koloidní disI perze. Při bližší specifikaci týká ae předložený vynález emulzí tvořených kapalinou v kapalině, ve kterých probíhá v dispergované kapalině teplem nebo tlakem aktivovaný poaun z dispergované kapaliny na dispergovaný. plyn, který působí prostřednictvím reflexní ultrazvukové energie způsobem, který je diagnosticky použitelný.

Dosavadní stav techniky

Byla popsána různá kontrastní agens vhodná pro ultrazvukové diagnostické použití, včetně echokardiogtafie. Přehled týkající se této problematiky byl publikován v časopise Ultrasound in Med. and. Biol.ý 15 : 319-333/1989/í autoři Ophir a Parker. Akustický zpětný odraz indukovaný těmito agens, vykazujícími vlastnosti typické pro kontrastní efekt, lze připsat unikátním vlastnostem, které se projevují jak u pevných látek, tak i kapalin nebo plynů. Zatímco pevÍné látky a kapaliny odrážejí zvuk s podobnou intenzitou, o plynech je známo, že jsou mnohem účinnější a jsou při vývoji ultrazvukových kontrastních agens zvýhodňovanými medii.

Známá.kapalná agens pro ultrazvukové použití zahrnují emulze a vodné roztoky, o kterých autoři výše zmíněného článku prohlásili, že ,,myšlenka o použití kapalné emulze určitých lipidů ve vodném prostředí byla experimentálně prověřována Pinkem se sp., (1985)» Bohužel žádné zintenzivnění zpětného odra-- -zu asbylo v těchto experimentech pozorováno,

Známá pevná agens zahrnují kolagenové mikročástice, ale slabý akustický zpětný odraz fázového rozhrání systému'pevná látka-kapalina, zabraňuje je-jich Širšímu uplatněni.

Známá plynná agens zahrnují mikrobublinky stabilizované. přídavkem různých amfifilních materiálů k vodnému prostředí, t,j. materiály, které zvyšují viskozitu a fungují jako plynné prekursory, bu3 ve formě pevných částic nebo liposomů. Ačkoliv liposomy mohou obsahovat jen ve vodě rozpustné plyny ^a j*“ jich použití je tedy limitováno stabilitou mikrobublinek, které mohou vytvářet, protože jedna z charakteristických fyzikálních vlastností řady chemikálií,, které produkují zvláště stabilní., mikrobublinky, je jejich nemísitelnost s vodou,“Pevné*částice musi-být— rekonstituovány bezprostředně před “použitíih^Jpomocí ” značně náročné přípravy a musí být použity rychle, protože mikrobublinky po úplném rozpuštění částic brzy mizí. Moje vlastní.U.S. patentová přihláška S,N,

........ 07/7.61,311. je směrována na poetupy stanovení relativní použitelnosti plynů jako ultrazvukových kontrastních agens s identifikací zvláště použitelných . plynů pro tento účel, .

Byla zjištěna jedna studie, v rámci které byla za účelem zesílení ultrazvukového Dopplerova signálu ( Ziskin M,C,_r Bonakdarpour A., Weinstein D,P,,

Lynch P.B,,: Contrast Agenta for Diagnostic Ultrasound,_ř Investigative Radiology, 7 : 500-505,1972 ) použita injekční aplikace kapaliny vroucí při teplotě nižší než b.y byla teplota varu ve studovaném organismu» V této studii byla řada roztoků nebo kapalin aplikována psům injekčně intrsarteriálně a Dopplerův signál byl detegován 5 cm pod místem injekčního vpichu.

Ve jmenované studii je publikováno i zjištěni, Že ,,ether,, který je zdrojem největšího kontrastního účinku kteréhokoliv ze zkoumaných agens, vře intenzivně při tělesné teplotě a funguje tedy jako vysoce aktivní zdroj bublinek.

V této zprávě se dále praví, že ,,ether je však při injekční aplikaci většího množství toxická látka. Injekce 20 ml etheru ukázala se být v našich po, kusech fatální. Zmíněný referát nediskutuje stabilizační postupy jakýchkoliv materiálů vhodných pro pozdější použití jako ultrazvuková agens. Nekoloidní ether je při intrsvenózní aplikaci také toxický v případě, kde je větší potřeba použitelného kontras* ního agens.

Biokompabilita emulzí, které zahrnují fluorované uhlovodíky, představuje z hlediska bezpečnosti závažnou hrozbu. Na př. Clark se sp., ( Clark L.C.; Becattini F., Kaplan S.Can fluorcerbon emulsion be ušed as srteficial bloOd?; Triangle, 11:115-122, 1972) při diskuzi o volbě.fluorovaných uhlovodíků prohlašují, , ,že jejich tenze par se pohybuje od nuly do 85,33 KPa a nelze tedy použít páry nad 53,33 KPa vzhledem ktomu, že by mohly vřít už při infúzi do krevního řečiště.

. . V další části jmenovaného článku stejní autoři prohlašují: ,,Jestliže fluorované uhlovodíky s tenzí par nad 6,67 KPa jsou aplikovány intravenózně, nastává v několika «hodinách smrt a v případě otevření hrudníku, plíce nezkolabují. ,

Stejný autor, L.C.Clark, informuje o podobných závěrech přesně, o 20 let později: ,,V případě, že nebyly vyvinuty praktické postupy, které preventivně zabraňují nebo eliminují HNCL ( dokonale vzduchem ' zásobené nezkolsbovatelné plíce) a jestliže se HNCL objevuje i u jiných savčích druhů, poté lze považovat za bezpečné pouze fluorované uhlovodíky vroucí výše než je teplota 15O^WC; Clark C.L., Hoxfménn R.E.,

Davis S.L.Response of the rabbit lung as a criterion of safe ty for fluorcarbon breathing and blood ..... ......- -.-...,...1 substitutesj Biomat.,Art.Cells and Immob.Biotech.,

20: 1085-1099(1992).

Jiný problém představuje stabilita emulzí kapalina-kapalina. Podstatná část poznatků se týká sts- í bility emulzí a předvídání stability z rozpustnosti; _f ή

tato theorie je nezývana Ostwaldova theorie dozrávání ( Kabalnov A»S., Shchukin E.D.,Ostwald Ripening Theory: Applications To Fluorcarbon Emulsion Stability; Advances in Colloid and Interface Science; 38 : 69-97,1972).·

Tato publikace jednoduše konstatuje, že čím . rozpustnější je dispergovaná kapalná fáze emulze v

--------kon-tinuální-fázi.,tím .méně stabilní je emulze.

Stejní autoři testovali stabilitu dodekafluorpentanové emulze při teplotě 25°C ( Kabalnov A.S,,

Makarov K.N,, Shcherbakova O.V,: Solubility of fluorocsrbons in water as a key parameter determining fluorcarbon emulsion stability,: J.Eluorine Che- ......

mistry, 50:271-284,1990). Zmínění autoři zjistili, že jejich emulze vykazovala Ostwaldovu rychlost do- . zrávání v hodnotách 1,4 x 10* cm^J/s. Při převodu této rychlostní konstanty do použitelných časových úseků se prokázalo, že dodekafluorpentanová emulze |

Kabalnowa a jeho spolupracovníků, které měla původ- } ní průměrnou velikost 211 nm, by mohla vykazovat průměrnou rychlost nárůstu částic 11 nm/sek. nebo 660 nm/minuta. Při této rychlosti nárůstu částic může tento typ emulze vykazovat dobu Životnosti kratší než jednu minutu a tedy z aspektů praktické zpracovatelnosti je jako komerční produkt nepoužitelná.

Je tedy zapotřebí účinné ultrazvukové kontrastní 'kompozitní agens 3 delší životnosti, které lze relativně’ snadno vyrobit a kteréjje biokompatibilní a vhodné pro praktické použiti,

I

PodstatQ-V^nólezu

Aby mohly být splněny výše zmíněné požadavky, je cílem předloženého vynálezu příprava stabilních koloidních disperzí typu kapalina v kapalině, Tyto koloidy jsou,složeny z kapalné disperzní fáze, která vykazuje teplotu varu nižší než je teplota organismu, se kterým má být ultrazvuková kontrastní studie prováděna, převážně kolem teploty 37 - 40°C, Tyto emulze mají výhodnější složení disperzní kapalné fáze, která má teplotu varu mezi minus 2O°C a +37°C.

Výhodnější .je volba disperzní tekuté fáze ze skupiny chemikálií obsahujících alifatické uhlovodíky, organické halogeny nebo ethery, nebo kombinace obou, které se skládají ze 6 nebo méně uhlíkových ato mů a mají horní hranici molekulové hmotnosti okolo 300. Mezi organickými halogeny jsou výhodnější fluor obsahující chemikálie, protože vytvářejí stabilní emulze a jsou relativně netoxické, Zvláště výhodné jsou n-pentan, isopentan, neopentan,cyklopentan,.butan,cyklobutan, dekafluorbutan,dodekafluorpentan.,dodekafluorneopentan, perfluorcyklopentan a jejich směsi.

Je výhodnější, když koloidní disperze obsahuje dispergovanou fázi v koncentraci 0,05 až 5,0% (hmotnost/objem) .Optimální koncentrace se pohybuje v rozmezí O',5% až 3,5%( hmotnost/objem).,

Koloidní disperze může být stabilizována přidáním různých amfifilních materiálů, včetně aniontových, neiontových, kationtových a obojetně iontových ( zwiterionových) povrchově aktivních látek, které * o typicky snižují mezifázové napětí mezi dispergovanou kapalinou s vodou,®*-pod=26 dynů/cm.. Je_T optimální, když tyto materiály jsou neiontové smlíivpoHcSŽ-ⁿvě aktivních látek s obsahem fluor obsahující povrchově aktivní složky, jako jsou na' př.’ známkové -serie Zonyl a pólyoxypropylen-polyoxyethylenglykolový neiontový blokový kopolymer. _#

Kapalná kontinuální fáze koloidní disperze.obsahuje vodné prostředí. Toto prostředí může obsahovat různé přísady, které přispívají ku stabilitě disperzní fáze nebo.usnadňují zpracování na biokompa•tibilní aplikační formu.

Přijatelné přídadyt aditiva) zahrnují okyselující agens, alkalizační agens, antimikrobiální konzervační látky, antioxidanty, ústojná (pufrovací) agens, chelata.ční agens, tvorbu suspenzí stimulující a/nebo^ viskozitu zvyšující* agens; včetně derivátů -----...

trijodbenzenu, jako je jodhexói~ňébo ’’jópamidůr'8 rz ' tonicitní agens. Výhodnější jsou agens, která mají schopnost udržovat pE, tonicitu a zvyšovat viskozitu. Optimální je případ,kdy tonicitu o hodnotě nejméně 250 mOsm lze docílit s agens, které spučasně zvyšuje viskozitu, jako jsou na př. sorbitol a sacharosa.

Koloidní disperze lze typicky vytvořit rozmělněním suspenze dispergované fáze v kontinuální fázi

H. za použití mechanické, ruční nebo ak-ustibké energie.* Akceptovatelné je také zahuštění dispergované fáze do kontinuální fáze.Výhodnější je způsob použití vysokotlakého rozmělnění, * ’

Vynález se vztahuje na agens, která zvyšují.kontrast při vytvořeném ultrazvukovém zobrazení určenému pro použití v diagnostice humánní a veterinární medicíny. Tato agens se skládají z biokompatibilních koloidních disperzí, ve kterých disperzní fáze je

e.

Ί kapalina použitelná v podmínkách výrobního procesu a u které v důsledku fázového posunu dochází v okamžiku aplikace nebo v jejím průběhu do studovaného organismu ku vzniku dispergovaného plynu nebo pěnových kuliček·

V zágmu jasného a logického pochopení předloženého vynálezu a nároků,* včetně porozumnění použíΛ váných termínů, jsou dále uvedeny definice, týkající se předloženého vynálezu.

Koloidní disperze • T

Jedná se o systém, obsahující alespoň jednu substanci, jako je na př. kapalina'něbo plyn( disperzní fáze), která je^Jmísitelná a jemně rozděleně a stejnoměrně rozptýlená v alespon^edné další druhé látce,která tvoří disperzní prostředí nebo spuvislou kapalinovou fázi.

Kapalina

Je to stav hmoty, ve kterém látl® nebo látky - , vykazuji charakteristickou schopnost téci, malou nebo žádnou tendenci se dispergovat a relativně vysokou odolnost vůči stlačítelnosti, ( Plyn í Je to stav hmoty, ve kterém se látk® nebo látky liší od pevného nebo kapalného stavu velmi nízkou , hustotou a viskozitou, relativně vysokou rozpínavosti a kontrakcí v důsledku změn teploty a tlaku a spontánní ten^dencí rozprostírat se rovnoměrně v nějaké nádobě.

Fázový posufe

Změna stavu mezikapalinou a plynem-v důsledku změn teploty a/nebo tlaku.

Pěna ve formě kuliček

Pěna ve formě kuliček je jedna ze dvou forem pěn dle klasifikace Manegolda ( Manegold E,,Schaum, StraasenbaUjChemie und Technik, Heidelberg,1953?. Název publikace je také zařazen mezi odkazy na odbornou literaturu a uváděných v předloženém vynálezu. Podrobněji popaána, skládá se pěna ve formě, kuliček nebo jinak* sféricky tvarovaná pěna, ze sférických, od sebe značně vzdálených bublinek, které se liší od polyedrických pěn,, které, obsahují bublinky, které j3ou sice téměř polyedrického tvaru, mající tenký.lamelární film. o.velmi mírném zakřivění, oddělů jícím' d isper zní“ fázi.· “ - ---------------- — —— ~..'ll_______

Nízkovroucí kapalina

Je to kapalina, vykazující za standardních tlakových podmínek-teplotu varu nižší, jak 4Q°C,Nízko* vroucí kapaliny použitelné v rámci vynálezu, zahrnují uhlovodíky, na které ae ale neomezují, organické halogeny a ethery, u kterých má molekula v každém případě 6 nebo mén& uhlíkových atomů.

Alifatické uhlovodíky ...

Skupina alkaau_řr alkenu, alkynu, cyklóalkanu, a cykloalkenových organických sloučenin. Z nich pouze sloučeniny o teplotě varu pod cca 40°C ( na př.takové, které mají 6 nebo méně uhlíkových atomů) a které mohou proto přecházet,po působení látekuvedených v části tohoto vynálezu, z kapalné do plynné fáze.

Alifatické uhlovodíky použitelné v rámci vynálezu zahrnují, nikoliv ale - nutněpyšechny, sloučeniny zvolené z následující chemické skupiny:·

Isobutan \ isobutylenj 1-butenJ 1,3-butadienJ n-butan;

2-butenítrans); 2-buten(cis)\ vinylacetylenj 1-butynJ neopentan ; butsdiynj 1,2-butadien;. cyklobutan; 3methy1-1-buten; 1,1-dimethyl-cyklopropan; 4-methyl1,3-dioxolan-2-on; 4-fenyl(trans)-3-buten-2-on; 1,5heptadiyn ; 1,4-pentadien; 2-butynJ 2-methylbutan; trans-d,l-1,1-dimethylcyklopropan} 3-methy1-1-butyn;

1-penten; 2-methy1-1-buten; 2-methy1-1,3-butadien} 2methyl-1-buten-3-yn; isoprenj ethylcyklopropanj npentanj methylcyklobutan; 2-penten( trans);^2-penten (cis); cis-1,2-dimethylcyklopropan; l-nonen-3-yn.

L

Organické halogeny ·,

Jedná se o skupinu sloučenin obsahujících alespoň jeden atom uhlíku nebo síry a alespoň jeden atom halogenu, t.j. chlor,brom,fluor nebo jod,2 nich, pouze členové skupiny mající teplotu varu nižší jak

O cca 40 C( na př, se 6 nebo méně uhlíkovými atomy), z nichž jen ty, které jsou schopné fázového přechodu po aplikaci do organismu s tělesnou teplotou do

40°0, tvoří Část předloženého vynálezu.

Příklady takových organických halogenů zahrnují:

tetrafluormethan; chlortrifluormethen; hexafluorethan*, perfluorethan; fluormethan; tetrafluorethylenj hexafluorid sírový} bromtrifluormethan; difluormethan;

a podobné sloučeniny. , ¹ *

Ethery

Jedná se o skupinu organických sloučeniny, u kterých jsou dvé uhlóvodíkové skupiny nebo jejich derivázy 3pojeny a atomem kyslíku* Pro účely předloženého vynálezu jsou· uvedeny některé příklady slou- . čenin tohoto typu, nikoliv ale nezbytně všechny* Ethery, které mohou být použity:

MetxhyletherJ ethylmethyletherj methylvinyletherj methylisopropylether; 1,2-epoxypropylether* diethylether; ethylvinyletherj a vinylether.

Fluor obsahující sloučeniny

Jedná se o sloučeniny obsahující alespoň jeden atom 'fluoru. Uěkteré použitelné, fluor obsahující sloučeniny, jsou uvedeny výše mezi organickými halogeny. Viz také příklady uvedené dále,

Koloidní disperze, týkající se vynálezu, mohou být emulze nebo mikroemulze,.

Emulze * »

Je to koloidní disperze jedněmi si telné kapaliny dispergované v jiné kapalině ve formě kapiček,jejichž průměr se obecně pohybuje mezi 100 až 3000 nm a které jsou typické optickou neprůsvitností,pokud není u dispergovaných kontinuálních fázi upraven index lomu. Takové systémy vykazují jen omezenou stabilitu, obecně určenou dle aplikace nebo příslušného referenčního systému, která může být zvýšena přídavkem amfifilních složek nebo aktivátory působícími zvýšení l

viskozity. ^;

Mikroemulze %

Je to stabilní kapalná,monofázická a opticky isotropní, koloidní disperze vody a s vodo^mísitelných kapalin, stabilizovaných amfifilními složkami, ve kterých disperze vykazují příslušné vlastnosti pro rozptyl světla ( to znamená, že se mohou projevovat jako opticky průhlednéΪ nebo zakalené a které 'Ví při pozorování procházejícím světlem se projevují začervenalým nebo zažloutlým nádechem)a jejich průmě?^elikosti částic se pohybují obecně mezi 5 a přibližně 140 nm.

Ve zvýhodněném začlenění v rámci předloženého vynálezu obsehuje koloidní disperze jednu nebo více amřifilních složek s cílem zlepšení stability aplikační formy. .

Λ

Amfifilní materiál

Je to látka silně absorbovaná v mezifázi\^terá normálně dramaticky snižuje mezifázové napětí, jen s malými výkyvy v celkové koncentraci fáze·.

Jako příklady lze uvést synthetické^povrchově aktivní látky, přírodní materiály, jako na př. biokompatibilní proteiny, lipidy, steroly, algináty,deriváty celulosy a jemně rozmělněné částice organických nebo anorganických pevných látek.

$ .r &

Organické pevné částice *

Zahrnují cukry, proteiny,aminokyseliny, lipidy,nukleinové kyseliny a další složky.

Anorganické pevné částice

Zahrnují hlinitany, uhličitany, hydrogenuhličitany, silikáty, hlinitokřemičitany, fosfáty a další složky.

Mézifáze

Jf

Je to oblast nebo hraniční oblast fyzikálních disciplin) která se nalézá mezi dvěma odlišnými a identifikovatelnými fázemi hmoty, v tomto případě ome z e-né na soustavy.kapalina-kapalina, kapalina pevná látka, pevná látka-plyn a kapoalina-plyn.

Stabilita

Je to časový interval, který uplyne mezi zahájením přípravy a zabalením, kíy koloidní disperze stále ještě splňuje všechny chemické a fyzikální apecifi~ kace vzhledem k její identitě,kvalitě a čistotě,požadovaných v zásadách Správné výrobní praxe, které oyly stanoveny příslušnými vládními schvalovacími orgány.

f

Povrchově 8ktivní látky Je to skupina amfifilnich materiálů,vyráběných che J _t. „ u.

— ...mic.kými^postupy nebo~přečištěním’z'přírodních zdro-· · jů,nebo procesů, které mohou být aniontové, kationtové, neiontové a obojetně iontové( zwiterionové)' a jejichž zpracování je v odborných profesích velmi dobře známo. Tyto sloučeniny jsou popsány v publikaci Emulsi ons:- The ory and. Frac.ticeJ Paul Becher,

Robert E.Krieger Pub.lishing, Malabar,Florida, zařazené také mezi odkazy na odbornou literaturu a uváděných v předloženém vynálezu.·

Kontinuální fáze koloidní disperze je v předloženém vynálezu uvažována ve vodném prostředí.

Vodné prostředí

Je to vodu obsahující kapalina, která může obsahovat farmaceuticky vhodné pomocné složky, jako na př, okyselujíci agens, alkalizační agens,antimikrobiální konzervační látky, antioxidanty, tlumivá(pufrovací) agens, chelatační agens, komplexní agens, ztekucovsdla, smáčedla, rozpouštědla, agens zvyšující tvorbu suspenzí a/nebo viskozitu, tonizační agens, zvlhčovadla nebo jiné biokompatibilní materiály.

Seznam pomocných složek výše jmenovaných kategorií lze nalézt v publikaci U.S. Pharmacopeia National Formulary,1990, strany 1857-1359 a zařazené také mezi odkazy na odbornou literaturu a uváděných v předloženém vynálezu.

Zvýhodněné využití v rámci předloženého vynálezu zahrnuje použití alespoň jedné amfifilní látky ze, skupin obsahujících biokompatibilní proteiny, fluor obsahující povrchově aktivní látky, polyoxy» propylen-polyoxyethylenglykokolové neiontové blokové kopolymery a povrchově aktivní složky.

Polyoxypropylen-polyoxyethylenglykolové neiontové blokové kopolymery ’

Jedná se o komerčně dostupné povrchově aktiv...

ní látky od firmy BAS? Performance Chemicals, Parsippany, New Jersey, dodávaných pod obchodním názvem Pluronic,, které se skládají ze skupiny povtchově aktivních látek označených názvy CFTA* poloxamer 108, <188, 217,. 237, 238, 288, 338, 407, 101, 105,

122, 123, 124, 181, 182, 183, 184, 212, 231, 282,

331, 401, 402, 185, 215, 234, 235, 284, 333, 334,335 a 403.

I»

Povrchově aktivní látky s obsahem fluoru *

Jedná se o povrchově aktivní' látky s jednou nebo více molekulami fluoru.Některé, nikoliv ale nutně všechny fluor obsahující povrchově aktivní látky, použitelné v rámci předloženého vynálezu, < mohou být zvoleny ze skupiny obsahující::

Telomer B obsahující fluorované povrchově aktivní látky, komerčně dostupné od firmy Dupont, “ Wilmington, DE, pod obchodním názvem Zonyl ( včetně

-- Zony.lu. F.SA,. .FSP.,. .FSE,. UR.,__FSJ,_ FSN,'FSO, FSC, FSK. a TBS)J fluorované povrchově aktivní látky od firmy 3M Industrial Chemical Products Division, St.Paul,

MN, pod obchodním názvem Fluorad ( včetně FC-95,

FC-98, FC-143, PC-170 C, FC-I7I, FC-430, EC-99, FC. j

- 100, EC-120, FC-129, EC-135, FC-431, FC-740); perfluorslkylpoly(oxyethylen) povrchově aktivní látky popsané Mathiasem se spolupracovníky v časopise J.Am.Chem.Soc.J 106, 6162-6171 (1984) a zařazeného mezi odkazy na odbornou literaturu a uváděných v předloženém vynálezu ; fluoralkylthioetherpcly(oxyethylen) povrchově aktivní látky, popsané Serratricem se^spolupracOvníkv v časopise J.Chim.Phys.,87,1969—-1980(1-990-)--8 -zařazeném»-me-z.i.,o.dkazy_na...oďbprnou__lÁJ'.?^T_ raturu a uváděných v předloženém vynálezu J perfluor-. alkylované pólyhydroxylováné povrchově aktivní, látky popsané Zarifem se spolupracovníky v časopise J.Am, , Oil Chem.Soc,, 66, 1515 -.1523 (1989) a zařazeném mezi odkazy'na odbornou literaturu a-uváděných v před-. . ......

loženém vynálezu J fluorované povrchově aktivní látky, komerčně dostupné od firmy Atochem North America, Philadelphia, PA,_Zpod obchodním názvem Forofac,

L * ' * ΐ t

Biokompatibilní proteiny' * $

Jedná se o skupinu proteinů bez ohledu na půvoď, t.j. zda byly získány extrakcí ze zvířecích, rostlinných neDo mikrobiálnicn tkání, nebo připraveny postupy genetického inženýrství; a‘‘které jsou schopné fungovat přijatelným způsobem jako stabilizační faktory koloidních disperzí v rámci předloženého vynálezu, aniž se projeví nežádoucí toxické nebo fyziologické nebo farmakologické efekty»

Některé přijatelné biokompatibilní proteiny mohou být zvoleny ze akupiny obsahující albumin, alfa-l-antitrypsin, alfa-fetoprotein, aminotransferázy, amylázu, C-reaktivní protein, karcinoemryální antigen, ceruplasmin, komplement, kreatinovou fosfokinázu, ferritin, fibrinogen, fibrin, transpeptidázu/gaatrin, sérové globuliny, hemoglobin, myoglobin, immunoglobuliny, laktátovou dehydrogenázu, lipázu, lipoproteiny, kyaelou fosfatázu, alkalickou fosfatázu, frakci alfa-1-sérového proteinu,frakci alfa-2-3érového proteinu, beta-proteinovou frakci, gamma-proteinovou frakci, gamma-glutamylovou trans ferázu a dj^iší proteiny. , ¹ '

Zvýhodněný postup oro přípravu koloidních disperzí tohoto sdělení spočívá v rozmělňování.Alternativní postup přípravy je zahuštění.

·* *

Rozmělňování ’

Jedná se o postup přípravy koloidní disperze vzájemným smícháním dispergované kapaliny a kontinuálních fází a poté zmenšením velikostí částic dispergované fáze z velkých částic na částice požadované velikosti za použití mechanmké energie produkované ručním v

mícháním, mechanicky nebo působením ultrazvuku.

Příslušné míšení může být prováděno v mikrofluidnim přístroji firmy Microfluid,Mbdel 110,který je popsán v U.S..Patentu číslo 4,533.254, zařazeném mezi odkazy na odbornou literaturu.a uváděných v předloženém vynálezu. Přijatelnou alternativou je vysokotlaký laboratorní homogenizátor (Rannie), Mečel

Mini-Lab._f Typ δ.30 H, nebo podobné zařízení.

Zahuštění . Jedná se o postup přípravy koloidni’disperze zahájením a disperzní fá2Í ve formě plynu, umístěnou tak,

- -aby· -byla -v. kontaktu..s_kapalínovou kontinuální fází a poté zvětšováním velikosti částic disperzní fáze <

z molekulárního souboru na požadovanou velikost,obecně indukcí fázových přeměn dispergovaného plynu na kapalinu v teplotním, nebo tlakovém systému, nebo v obou.

Vynálezu lze lépe porozumět prostřednictvím následujících Příkladů:

D..ř~í_k_l_a_d_y_~_2~r_o_y^e_d_e~n_í___ £ f f 1 fl (j “ ^,k

Postup zhodnocení, zda nízkovroucí kapalina je přítomna ve formě jemně rozptýlené disperze, spíše než v čisté kapalné formě, tak jak bylo popsáno Ziskinem.se spolupracovníky ( odkaz uveden výše), sestává z měření akustického zpětného odrazu dvou stavů· ‘ Dva roztoky byly připraveny s cílem realizace modelové aplikace do organismu ,· bu3 koloidní dis_r perze nízkovroucí kapaliny nebo čisté kapaliny bez příměsí, které 'byly hodnoceny při 5,0 Hz ultrazvukovým záznamovým přístrojem (' model Hewlett Packard 77020) a záznam byl registrován na pásce. VHS Sony ES· Analogové záznamy z pásky bylý-poté převedeny do digitální formy za použití softwarové soupravy Global Lab<Image Software ( Data Translation, Marlboro,MA)· Intenzita škály šedi v oblasti 4900 pix-elů ( velikost pixelu 70 x 70) ve sledované oblasti₍byla'poté měřena před a po injekční aplikaci koloidní disperze z Příkladu 19 nebo množstvím čistého dodekafluorpentanu v kádince o obsahu 1000 ml^vytemperováné vodou na teplotu 37°C>

Měření bylo provedeno ve škále šedi v rozmezí od 2 do 254. Intenzita zobrazení před injekční aplikací 0,1 ml alikvotního množství emulze z Příkladu 19, uvedeného dále ( obsahujícího 3,4 mikromoly dodekafluorpentanu), byla 4,27· Injekce 0,1 ml této emulze vyvolala změny intenzity až na 236 za pět minut po injekci a na 182 padesátdvě sekundy po injekci.

Stejný experiment byl proveden s 0,2 ml injekčně aplikovaného čistého dodekafluorpentanu, odpovídajících 1111 mikromolům dodekafluorpentanu, t.j. 300násobné množství ve srovnání s experimentem popsaným výše. Intenzita zobrazení před injekcí byla

4,9. P© 5,0 sekundách bylo zaznamenáno zvýšení na

7,7 a 52 sekundy po injekci na 5,0.

s.

Porovnání uvedených dvou experimentů( intenzita/množství) naznačuje, Že koloidní disperze je 27·000χ účinejší při difrakci ultrazvukového paprsku než při prosté aplikaci kapaliny, která prochází také přeměnou z kapalné na plynou fázi.

Příklad 2

Výběr vhodné chemikálie pro kapalnou disperzní fázi je posuzován, alespoň zčásti, tělesnou teplotou organismu, který má být použit v rámci ultrazvukových studií. Na přiklad, vzhledem ktomu, že tělesná teplota liďí je 37°C, kapaliny, které přecházejí z kapalné na plynnou fázi, na př, vřou při těplotě 37°C nebo nižší, jsou zvláště vhodné pro použití v koloidních disperzích týkajících se vynálezu. Podobným způsobem byla sestavena dále uvedená Tabulka,» jako vodítko pro výběr kapalinové disperzní fáze v závislosti ne organismu, který má být studován.

Ó r g 8 n i.s m u s :.....

Prase ( Sus scrofa)

Ovce ( Ovis sp.)

Králík ( Oryctolaqus cuniculus

Potkan ( Tattus morvegicus)

Opice ( Macaca mulatta)

MyŠ ( Mus musculua)

Koza ( Capra hircus )

Morče- -( Cavia-porcellus).,. ...

«

Křeček ( Mesocricetus ap.) Člověk ( Homo sapiens)

Kůn ( Equus sp. )

Pe.s_. Cenin familiaris) Pavián ( Papio )

Kočka ( Felis catus )

Skot ( Bos tauřus )

Šimpanz( Pan )

Rektální teplota ( stupně °C )

38.6 - 39,2 38,3 - 39,4 38,9 - 39,7

37.5 - 38,1 38,3 - 38,9

36.7 - 38,3 38,3 - 39,4

- 38,9-40,0______ ~*38,'3'-“3'9', 4' ·/ Λ .37,0 - 38,0 38,3 - 39,2 38,3 - 38,9 36,7 - 37,8 38,3 - 38,9

38.6 - 39,2

35.6 - 37,8

P ř í’k 1 a d 3

Kolidní suspenze byla připravena z organického halogenu rozmělněním^za použití postupu a podmínek uvedených v Příkladu 45, publikovaném dále.

Při podrobném rozepsání obsahovalo množství 100 ml připravené aplikační formy následující složky: poloxamer 488 J 2,5%(objem/objem); fluor..obsahující povrchově aktivní látka Zonyl PSN, 2,5%ní ( objem/ objem); perfluoroktenoát sodný, pH 7,0J 0,l%ní (hmotnost/objem) ; chlorid sodný, 0,9%ní ( hmotno3t/objem) a dodekafluorpentan, 2%ní (ob jem/objem).

Po promísení v nískootáčkovém nůžkovém mísícím zařízení byly ,uveděné složky při teplotě 4°C rozmělněny v mikrofluidním přístroji, Model 110 Y, tak, že . jednotlivá operace byla 8x opakována. Zakalená emulze byla rozdělena stejným dílem do sérových ampulek a zatavena.

Během 72 hodin byla stanovena při teplotě 19°C velikost částic a jejich distribucepomocí přístroje , Hicomp, Model 370 C firma Nicomp Particle Sizing, ·

Ϊ

Santa Barbara, CA) J vážený střední průměr částic byl při Gaussově analyse u emulze 90,1 nm. se standardní odchylkou 48%. Vážený «objemový střední průměr byl 316 nm.

Přiklad 4

Velikost-částic e, je jich distribuce byla stanovena v různých stupních nebo za odlišných podmínek během přípravy aplikační formy emulze♦

Bylo připraveno 20 ml emulze·, která obsahovala perfluoroktenoát sodný, pH 7,2,,2’5%ní( hmotnost/ objem) a dodekafluorpentan, 2%ní (hmotnost/objem ).

Tyto přísady byly,přidány do vody a suspenze byla ochlazena na teplotu 4°C. Pro ,,předběžné rozmíchání roztoku před konečným rozmělněním byl.použit přístroj Emulsiflex-1.000 ( fi.rma Ave stiň lne., Ottawa, Kanada ).

Po.20násobných operacích provedených mezi ιΊΤΤΛΠ aoustavouYfnjekčních stříkalek o obsafíu~TÓ7ů“mi7byla bílá, zakalená suspenze,předložena do přístro-\ je Nicomp 370 za účelem stanovení velikosti částic, ,,Předrníchsná suspenze vykazovala průměrnou velikost částic ( vážený střední průměr) 452 nm a vážený objemový střední průměr 2398 nm.

Finální forma emulze byla připravena rozmělněním s osminásobnými operacemi za .použití přístroje Emulsiflex-1.000 ( firma Avestin lne., Ottawa,Kanada) při ruční manipulaci za tlaku až 7 MPa. Částice v emulzi byly mnohem menší, s váženým 3tredním průměrem 201 nm a s váženým objemovým středním průměrem 434 nm.

Aseptické plnění tohoto:; materiálu bylo provedeno pomocí filtrace přes sterilní filtr ( 0,45 mikronů)-- ( -firma--Ge-lman Acrodisc,. Ann.ArborJ MI. )._____

Finální firma sterilní koloidní disperze vykazovala vážený střední průměr 160 nm.

4.

Příklad 5

Měření průměrné velikosti částic emulze bezprostředně po rozmělnění je použitelný test pro stanovní konečné stability aplikační formy.

Tuto problematiku názorně demonstruje příprava následující emulze:

Byla připravena emulze dodekafluorpentanu ( 2%ní/objem/objem), obsahující 2% Pluoronicu P-123 a 2,6% Zónylu FSO, dle postupu popsaného v Příkladu 19/a uvedeného dále. Střední hodnota průměru částic byla 151 nm se standardní 35%ní úchylkou. Tato emulze byla stálá přinejmenším 6 týdnů, jak bylo možno také posoudit na základě fyzikálního vzhledu a rozměru částic.

K takto připravené aplikační formě byl přidán 0,25$ní perfluoroktonoát sodný. I když;se vyskytly úvahy o další možné stabilizaci tohoto přípravku, vzhledem ktomu, Se přídavek perfluoroktonoátu sodného snižuje mezifázové napětí, může vysoká hustota aniontového náboje zmíněné povrchově aktivní látky, která se projevuje v mezifázích emulze, zabránit ve skutečnosti vzniku malých Částic,

Skutečně také při bezprostředním měření velikosti částic byla zjištěna střední průměrná hodnota velikosti částic 1060 nm, se standardní úchylkou 106$

Emulze se rozložila na (pevnou) hmotu během několika dní.

Příklad 6

Rozložení částic v emulzi dle velikosti může být zjištěno centrifugací. Vzorek emulze z dále uvedeného Příkladu 19, byl umístěn v analyzátoru Částic Horibe CAPA-700Í firma Hoři ba Instruments,Irvine,CA)«.

Rozložení částic dle velikosti, založené na předpokládané hustotě částic l,66g/cm^, bylo následující:

Rozmezí velikosti částic v mikronech	Objemová procenta
0,0 - 0,50	12
0,5 - 1,00	26
1,0 1,50	22
1,5 - 2,00	15
2,0 - 2,50	7
2_r5 - i;oo	0

Příklad 7

Byla stanovena dlouhodobá stabilita emulzí uváděných v předloženém vynálezu.

.....Emulze -popsaná- v- dále uvedeném -Příkladu., 19, byla skladována při teplotě 19°C a velikost částic byla stanovena v určitých Časových intervalech za použití přístroje Nicomp 370.

Výsledky jsou uvedeny v následujícíTabulce:

Čas Střední hodnota průměru částic

( dny )	nm k
5	194
13	216
19	245
--27-------------- ---	~~258
33	289 * -5
41	283
47	306
61 ..............	.......... 335 ’ - .....
89	305

V průběhu prvého měsíce tato emulze rychle narůstala ze 194 nm na 289 nm. Od té doby. byl nárůst emulze z velké části zastaven. Extrapolace průběhu » křivky ne grafu průměr versus čas, podporuje u jmenované emulze předpoklad pro dosažení alespoň jednoroční stability.

Pří klaď 8

X testování zobrazovací účinnosti koloidních disperzi byla použita emulze připravená v rámci Příkladu 42, uvedeného dále, aplikovSž’ různými způsoby, Pes smíšené rasy o hmotnosti přibližen^ 20 kg byl anestheziován barbiturátem sodným a byl připraven pro vyšetření ultrazvukem dle poetupu popsaného v Příkladu 38,

Intravenozní injekce 0,2 ml/kg vyvolala během prvé minuty po injekční aplikaci silný kontrastní signál v pravé a levé srdeční komoře. Dávka 0,5 ml/kg vyvolává silný Dopplerův signál ve všech testovaných orgánech, včetně vaskulámího systému, jater,ledvin, myokardu a cév centrálního nervového systému

Injekce 0,5 ml_/aplikovaná bu3 intradermálně,intrakutánně nebo intramuskulárně, vyvolává lokální kontrast, umožňující vyšetření muskoskeletárního systému.

Roztok o objemu 1000 ml, připravený zředěním 50 ml emulze, popsané v Příkladu 42,. s 950 ml fyziologického roztoku, byl aplikován orálně, účinejší byla. ale aplikace nitroŽalude.ční a intraduodenálně intraluminální, Lumen gastrointestinálníno. systému

ř.

byl zvětšen a tím bylo dosaženo lepší zviditelnění

Ϊ jater, sleziny a vnitřních reprodukčních orgánů. .

Intracystická aplikace emulze z dále uvedeného Příkladu 42 umožňuje silnější zviditelnění močového měchýře.

Výše uvedené specifikované příklady by mohly být využity pro docílení použitelného ultrazvukového kontrastu koloidních disperzí,uvedených v předloženém vynálezu,dalšími formami aplikace.

Výslovně by emulze mohly být aplikovány někte- , rými z následujících způsobů, mezi jinýmij:’ intraabdominálně, intraartsriálně, intreartikulárně, intrakapsžlárně, intracervikálně, intrakraniálně, intraduktálně, intradurálně, přímo do lézí,intraokuiárně, intralumbálně, intramurálně, přímo do operačního pole, intraperietálně, intraperitoneálně,intrapleurálně, intrapulmonárně, intraapinálně, intraathorálně, intratracheálně, intratymapanově, intrauerinárněj a' intraventrikulárně.

Formy zmíněných aplikací lze nalézt v rámci standardních publikací zabývajících se radiologií,jako na př. ,jPharmaceuticals in Medicel Imaging, redakčně zpracovanou Q.P.Swansonem, H.M.Chiltonem a J.H.Thrallemj McMillen Publishing Co., Inc., 1990, zařazené mezi odkazy na odbornou literaturu a uváděných v předloženém vynálezu.

Kromě výše uvedených orgánů nebo studovaných orgánových systémů, lze známými postupy studovat i plíce, prsa, prostatu á endokrinní systémy. Existuje

-.-řada...typů...zdrayotníph stavů'vhodných 'pro^studia^s^agens* týkajících se předloženého vynálezu,které zahrnují metabolické, traumatické, kongenitální,neoplastické^Tnebo infekční Onemocnění.

Popis použití ultrazvukového zobrazení při uvedených stavech lze-nalézt. v publika.ci.,Dia.gnostic Ultrasound, kterou redakčně zpracoval C.M.Rumack, S.S.Wilson a J.W.CharboneauJ Mosby Year SookJ Boston, 19.91 a zařazené mezi odkazy na odbornou literaturu a uvedenou v předloženém vynálezur

Příklad 9

Kolidní disperze týkající se^xpředloženého vynálezu mohou vykazovat kontrastní efekty ultrazvukového signálu v rozmezích koncentrací od 0,00001^ ( hmotnost/objem) až do 166% ( hmotnost/objem).

V případě, že je l%ní emulze (na př. emulze 2, Příkladu 42) zředěna 10x ( přidáním 1,0 ml ku ispxnSxx snoanbeuou jo uoxTQxnsdsoouoxoi uxajq^j ) majjBTSUXúO 3 ‘δ'χ ma^oxxsng guesdod Ádnjsod jCbajzuáa b ÁuÁxd aznod jpnqesqo puaiy ⁴g£6·>££*> e CCVQTZ/fr OTSJ3 qoasxds qoÁAOjua^ed sn δ qoÁugppAn *sue2e qojujSBj;uox qopio^nAZBUTXn po ;§τχ as 9^34^1 * ·(· ώ[οχχβά£3ΐο.ΐ3[χτιι *C*4 )xmBUxx8de^ xm^upOAau qo^íuguxd -bu χ92.τιη3(0.ιχτπι qo^ueAOuxaToud azuadsns yUpOA jsa -ozxíaqjuÁe azx ajxzuajux o^osjCa o ηχπΔΖ344χη j4T3

-notí Θ2 'ÁXixajOjd jjgnod azx nzaxpuÁA mguazoxpaud a qo^UBAOjBAn jzu:adsxp qojupxoxo3{ χοβζχχχςβτε ηχ οτ p β τ π j •gTXXxqGTeau 3 aouapauaT t?m £ia%q ‘^aAsixd -yjd p3[XUZA qojo3jq.u3ouo3( qópggÁA pud ajó^oud ‘nxpxu -ajsm oq^UBAoSjadsxp azgj aoeJTuaouo^ xoxusuq jggÁA -Csu aCnAejspaud jAjs^oum ^uapaAfl •jeBjq.uoq ÁaoXuaz -Β^τχη jojCb^xuía xb^sjz as Áqe *^34 9UX9UO pexxpqd su‘8U9A03ixxdB gupajTeojdzaq 4Áq 93301 94:94:( ‘ažxnma (UiaCqo/TsouTomq ) %ggx as 9^sjz npex^juj a oqgussd -od ndnTsod βχρ Tnuxm ζ maqaq Buguxgnzou aC azuadsns 9 ^2 npeiTOd n^uapaAn ax9p a cu^edod aC ^eC* 394

-91 qojUAxjxa aAoqouAOd sgms jojCnqesqo ÁpOA χοι o‘£ nq miBjuaGjonxjBxapop χαι ο*ζ ougpxud τχ-ap ·% 10000*0 Ápa^ aC nx9xjajaoi oq^usA -o^uadsxp azpj xoBajuaouoq oud aapueuq ;gzx^ »jpsz -od po Áuxajsuzojau zgupo ^U4§d2 aC jugpauz mxgjaA T4<£ *S*6 su 2,‘2 z puppxud mpuapaAn ag^A od Ájnuxm

9^C maqaq J§ÁA2 as'^zi npsxyjjj; a oq^uesdod ndnjsod axp guaugm nx9uSxs ajxzaajux az *?uaui3uz guaAOXsÁA 300 ‘nzBúpo oq^Uisdz ju^gÁAz 9u4.BT.epod as jAaCoud *nX9u2is oqýAO^nAZ BTXzuaxux eua.jamz aC 3 0_oLC Π4 -οχάβτ eu guBAOuadinaTÁA ÁpOA χοι OOOX Μ pm χ*ο toa

-χχχβ U9pxud xÁq 940tí 3 {u^otzoj oqpuCoTep xm 0*5

- 52 26 / J.Amer.Chem.Soc., 112,7807—7809,1990 /).Tento odkaz popisuje použití pouze vysokovroucích nevolných kapalin ( které jsou jako ultrazvukové kontrast n-í—agens-nevfeóiflťxiřle nezmiňuji se o použití bučí ní z- .

kovroucích kapalin obecně nebo organických halogenů, zejména ve formě nevodných kapalin.

Proteinové mikrokuličky mohou být připraveny * pomocí vysocevýkonného ultrazvukového zdroje (Heat Systems, W375, 20 kHz, 0,5 palce, Ti čidlo) z lidského sérového albuminu nebo hemoglobinu.

Na př. 5%n£ pentan nebo 3%ní diethylether a 5% albuminu se při teplotě 23°0 a pH 7,0 vystaví působení akustické energie o intenzitě cca 150 W/čtver, cm·(cm ). Vzniklá disperze odpovídá rozložení dle Gaussovy křivky a středním hodnotám průměru částic

-------cca. .2,3 jnikronu. Ve zmíněné disperzi si uvedený typ ‘ Λ’ Wi, ·, -t- _ ’—částic-zachovó-při--teplotě^4,..C__.sypji_velikost po_v.do- ’ bu až 2 měsíců.

A.

Kromě albuminu a hemoglobinu mohou být použity' následující proteiny: ' eifβ-l-antitrypsin; alfa-fetoprotein; aminotransferázy; amylózaj reaktivní C-protein; ksrcinoembryální antigenj ceřil^lasmin; komplement; kreatinová fosfokináza; ferritinjfibřinogenf fibrin; transpeptidáza; gastrin; sérové g-lobuliny; my.oglob.in ; immunoglobulinyj laktázová dehydrogenáza; lipáza; lipoproteiny; kyselá fosfatáza; alkalická fosfatáza; alfa-1-sérová proteinová frakceJ elfa-2-sérová proteinová frakce; beta-· proteinová frakce; gamma-proteinové frakce; gamma - glutamylová transferáza.

Kromě pentanu nebo diethyletheru mohou být použity další alifatické uhlovodíky, organické halogeny a ethery stejným postupem,. který je popsán u pentanu.

*,·

Příklad 11

Vztahy mezi velikostí částic koloidní disperze ve formě emulze, nebo mikroemulze e velikostí mikrobublinek^vzniklých po fázovém posunu, lze stanovit.

Alikvotní podíl emulze popsané v dále uvedeném Příkladu 27, byl umístěn do přístroje Nicomp 370, používaném při teplotě 19°C a střední hodnota velikosti částic kapalné emulze byla stanovena na 231,7 nm. Thermostet přístroje byl nastavěn ris teplotu 37°C a po vytemperování ,které trvalo cca 5 minut, byle velikost částic stanovena znovu. Střední hodnota velikosti Částic vzniklé disperze mikrobublinek byla . stenovena na 1701,5 nm, t.j. zvýšení velikosti 7,34x.

Lze také uvažovat s očekávanými změnami velikosti disperze, jestliže je známa relativní hustota dispergované kapaliny ve formě plynu e kapaliny,*Na příklad, publikace Gas Data Eook, ( sútoři^Brsker W. a A.Mossman, Matheson,), takové údaje obsahuje.

Při studiu oktafluorcyklobutanu bylo zjištěno,* že 1,0 litr kapaliny vyprodukuje 188,0 litrů plynu při tlaku 96,226 KPa a teplotě 15°C, Protože objem kuliček je ve vztahu k průměru kuliček vyjádřený třetí odmocninou objemu, fázová přeměna částic oktafluorbutanové emulze způsobí 5,7 násobné zvýšení průměru.

Příklad 12

Bezpečnost použití emulzí uváděných v předloženém vynálezu je dramatickým' způsobem demonstrována u mini-prasat. Nově vyvíjené známkové ultrazvukové kontrastní agens Albunex, chráněné US patenty číslo 4,718.433 β 4,774.958, vykazuje u prasat závažné hemodynamické efekty ( Ostensen J., Hede Ε.,

Myreng Y., Ege Τ., Holtz £.)_# Intravenózní injekce mikrokuliček Albunexu je příčinou thromboxanem vyvolené plicní hypertenze u prasat, nikoliv ele u opic nebo králíků (Acta Physiol.Scand., 144; 307315|/1992/). Hypotenze se už projevuje při dávkách nižších jak 0,001 - 0,05 ml/kg. Jedno mini-prase uhynulo po pomalé infúzi 0,05 mlAg.

Byl proveden experiment u mini-prasete o hmotnosti 30 kg, anestheziovsném halothanem, za použití postupu, uvedeného ve výše zmíněném odkaze.

Výsledky jsou shrnuty v následující Tabulce, publikované na další straně.

U všech dávek byl zjištěn dobrý kontrast na .myokardu. Dávky vyšší jak 0,4 ml/kg vyvolávaly stejné zvýšení Dopplerove efektu také ne játrech.

..Souhrnně...lze konstatovat, že injekční aplikace emulzí uvedených v předloženém vynálezu ve 40násobné lethální. dávce elbuminových mikročástic, vykazuje U mini-prasat minimální přechodné efekty. Prahová koncentrace dávky postačující pro vyvolání působení Albunexu je 0,001 ml/kg elbuminových mikrokuliček nebo 200Qx nižší podprahová dávka pro vyvolání účinků koloidních disperzí uvedených v předloženém vy•f nálezu.

Oávks/ml/kg	Souhrnná dávka (ml/kg )	Hemodynámi efekt
0,01	0,01 r	žádný
0,02	0,03	žádný
0,05	0,08	Žádný
0,10	0,18	Žádný
0,20	0,38	žádný
0,30	0,68	Žádný
0,40	1,08	Žádný
0,50	1,58	žádný
0,60	2,18	žádný
0,60	2,78	žádný *
0,80	3,58	žádný
0,30	3,88	žádný
2,00	5,88	namáhBvé dýchání

Příklad 13

Volba amfifilnich materiálů s příslušným hydrofilnim-lipofilním číslem rovnováhy ( HLB) pro zvolenou disperzní fázi je pro stabilitu koloidní disperze důležitá. Jeden způsob stanovení HLB čísla spočívá v měření mezifázového napětí různých směsí povrchově aktivních látek ( vhodný celkový přehled metod pro stanovení HLB lze nalézt v publikaci: EmuisionS; The ory and Prsctise^ Paul Becher* zmíněné už výše ( strany 232 - 252).

Připravené směs z přípravků Pluronic P-123 a Pluronic F-127 poskytuje l^ní^řbzTok^í^bbjěm/bVjem)' s postupně se zvyšujícími čísly HLB a mezifózovým napětím (MN) roztoků ve srovnání s dodekafluorpsntenem, stanoveným při teplotě 4°C, za použití Krussova kapkového objemového tenziometru DVT-10* firma Kruss USA, CherlotteJ N.C.).

Zjištěné výsledky jsou uvedeny v následující

Tabulce:
P - 123..	F- 127	HLB	MN (dyny/cm)
.. 1,00........	0,00 ' ’ - - V .1 K	8	27,07
0,86	0,14	To ’	” ~~'^_23,9'4^
0,75	0,25.	12	23,58
0,60	0,40 . ’	14	22,48 '
0,50	0,50	15	22,ŠO
0,40	0,60	16	23,16
0,25	0,75	19	23,61
0,00	1,00	22	26,36

V případě grafického vyjádření výše uvedených dat lze zjistit, že HLB dodekafluorpentanu je cca 15. Použití amfifilních materiálů ,jako na př, aniontových, neiontových, kationtových nebo zwitterionových povrchově aktivních látek s číslem HLB 14, zajistí vyšší stabilitu emulzí výše uvedené kapalné disperzní fáze.

Příklad 14

Mezifázové napětí mezi kapalnou disperzní fází a kapalnou kontinuální fází může být využito při vývoji aplikačníclj forem vzhledem ktocu, že tato vlastnost významně ovlivňuje stabilitu koloidní disperze.

Ostweldova theorie dozrávání předpokládá silnou závislost stability velikosti částic na mezifézovém napětí (/ Přehledně uvedeno ve článku:

Ostwald ripening theory: Application to fluorcarbon emulsion stability ; autoři Kebalnov A.S.Shchukin ·’ E.P.J Časopis Advances in Colloid and Interface Scien ce; 36, 69-97/1992/), zařazeném mezi odkazy na odbornou literaturu a předložených v tomto vynálezu.

Theorie předpokládá, že stabilita a mezifázové napětí jsou vzájemně nepřímo' úměrné. Ns příklad při přidání amfifilních materiálů, které snižují mezifézofeé napětí 5x, došili se pětinásobné zvýšení stability.

Mezifázové napětí různých amfifilních materiálů ve vodných roztocích (všechny jsou vyjádřeny jako roztoky objem/objem ) byly ve srovnání s dodekafluorpentánem měřeny při teplotě 4°U a byly připraveny z jednotlivých přípravků emulze tak, jak je uvedeno v Příkladu 13.

Pluronic P-123 (l%ní) a dodekafluorpentan,vykazují mezifázové napětí 27,1 dynu/cm e nevytvářejí stabilní emulzi,

Pluronic F-127 (l%ní) a dodekafluorpentan, vykazují mezifázové napětí 26,4 dynu/cm a nevytvářejí stabilní emulzi.

Zonyl FSO (l%ní) a dodekafluorpentan, vykazují mezifézoví napětí 5,8 dynu/cm a vytvářejí stabilní emulzi.

Pluronic F-123 (O,33Tní), Pluronic P-127 ( 0,33Tni) á Zoňyl FŠN (O,33Tní) a dadekafluorpen^ tan, vykazují mezifázové napětí 14,1 dynu/cm a vy₌.tvářejí stabilní emulzi.

Pluronic P-123 (l%ní), Zony^L FS.O (Ι,ΟΤηί),chlorid sodný (lTní)a perfluorokton^So°^vf0,5Tní) a dodekafluorpentan^vykazují mezifázové napětí 2,71 dynu/cm a vytvářejí stabilní emulzi.

Pro přípravu stabilních emulzí jsou tedy zapotřebí -amfifilni materiály s hodnotami mezifázových napětí nižšími jak' 26 dynu/cm, Podobné výsledky by bylo možné dosílit s ostatními organickými halogeny nebo alifatickými uhlovodíky nebo ethery,.

·-* >-·— * · ....._¥

-P.-ř_.í._kíl_e_d,

1.5,

Při vývoji aplikačních forem lze využít viskositu kapalné kontinuální fáze, protože tato vlastnost významně ovlivňuje stabilitu koloidní disperze,

Ostweldova théorie ůcíJsrávání předpokládá silnou závislost na stabilitě velikosti částic a viskositě ( viz Kabalnov A.S. se sp., v Příkladu 14). Tato theorie předpokládá, že stabilita a viskozita jsou , vzájemně přímo úměrné.. Na příklad, jestliže se přidají viskogeny ( agens zvyšující viskositu), které zvyšují parametry viskozity 5x, lze. obecně docílit pětinásobné zvýšení stability.

Příklady viskogenů,- které nejsou však limitovány, zahrnují karboxymethylcelulosu, sorbitol, jodhexol, ostatní jodované rtg,kontrastní látky,dextrosu, polyethylenglykoly^

Emulze popisovaná^dále- uvedeném Příkladu 38 byla.připravena za přítomnosti nebo absence 5% polyethylenglykolu (PEG) 200, který vytváří viskozitu o hodnotě 1,1 cP a zmíněnou stabilitu.

kýlo zjištěno, že emulze obsahující 5&ní PEG

200 vykazují větší stabilitu.

Příklad 16 ί’

Ultrazvukový zpětný odraz disperze z emulzí, popisovaných v dále uvedeňých Příkladech 44 a 18, byl zaznamenán ultrazvukovým snímacím přístrojem Hewlett Packard, Model 77020, za účelem zjištění relativní účinnosti fázového posunu koloidů uváděných v předloženém vynálezu, které při teplotě místnosti představují emulzní disperze kapalina-kepalina a které ale přecházejí v. mikrobublinky po eplikaci bučí stabilních emulzí ,popsaných na př. Longem a dalšími autory ( U.S.^patenty čísla 7,767.610 J 4,987.154 a japonský patent ČÍ3I0 2196730) J Da.vis a ostatní ( Evropský patent číslo 245019) a japonský patent číslo 1,609.986 a japonský patent Číslo 63060943), „nebo s pravými vzduchovými bublinkami , popsanými v Evropském patentu číslo 467.031, Evropskéqi patentu 458,745, Mezinárodní patentová přihláška 9115244,

US patent číslo 5,088.499*, číslo 5,123.414*, US patent číslo 4,844.882$ US patent číslo 4,832,941$

US patent číslo 4,466,442 a US patent číslo 4,276.885, které jsou všechny zařetehy jednotlivě v odkazech na odbornou literaturu a uvedených v předloženém vynálezu.

Vzduchové mikrobublinky byly připraveny následujícím postupem:

Do injekční stříkačky o obsahu 10,0 ml se nasaje 0,5 ml vzduchu a do další injekční stříkačky, také o obsahu 10,0 ml,která je spojena s prvou injekční stříkačkou trojcestným kohoutem, se nasaje

10,0 ml 1%ní ( ob jem/ob jem) roztoku přípravku Pluronic F-68. Kapalině a vzduch se rychle promisi rychlým protažením sem e tem mezi oběme stříkačksmi s „po - pátém-promísení. _jsou_vzduch. i kapalina promíchány a je připraven bíle zbarvený, zakalený roztok.

Výše uvedená operace se opakuje tak, že vzájemné promísení se provede celkem 20x. VzoreK0,l ml plynové disperze, přidaný ku 250 ml vody, poskytuje ultrazvukové zobrazení o intenzitě podobné jako v jaterní tkáni ( čtyřnásobné zesílení).

Je překvapující, Že intemzita zpětného odrazu vyvolaného vzduchovými mikrobublinkemi rychle klesá, takže během 5 minut se zpětný odraz ustálí opět na základní linii. Nedostatečná časová stabilita diagnostické použití vzduchových mikrobublinek.tedy omezuje.

__________ Ale,.naopak, 1,0 až 10,0 ml perfluorhexanové emulze

------ve--250 -ml -vody - -vykazuje -při, .teplotě. .3.7.°C. ultra zvu- , kové zobrazení podobné jako u prodící krve v řečišti ( 0 - jednonásobné zesílení), které naznačuje,že tyto aplikační formy mohou vykazovat ultrazvukový kontrast pouze v extrémně vysokých mitují je jich obecné’ použití, Vzorek 1,0 ml dodekafluorpentanové emulze zředě. .né při teplotě 37°C ve 250 ml vody poskytuje ultrazvukové zobrazení v intemzitě roztoku mikrobublinek ( Čtyřnásobné zesílení), které přetrvává po dobu 10 minut,, tedy Čas, pro diagnostické účely přijatelný.

i

Poznámka: Všechny tři experimentální roztoky byly vizuálně zakalené s téměř stejnou turbiditou.Tyto experimenty dokazují, Že ultrazvuková kontrastní * agens uváděná v předloženém vynálezu, vykazují větší stabilitu v čase a/nebo účinnost.vhodnou pro rozsá' hlejší diagnostické využití, než dřívější typy ultrazvukových kontrastních agens.

dávkáchtjikteré ale li35

Příklad 17 ’

Vzorek 1,0 ml kontrastního agens z Příkladu 19 byl nassát z ampulky injekční stříkačkou o obsahu 1,0 ml, opatřenou s 21-kslibřecí jehly a přibližně 0,2 ml bylo umístěno na skleněné podložní sklič ko. Krycí sklíčko bylo poté položeno ne kapalinu a vzorek byl umístěn na podložku optického mikroskopu opatřeného okulérním mikrometrem, komůrkou s možností teméjperace, kamerou 35 mm a. Pa na a oni ckou video'* kamerou.

* * Emulze byla pozorována v olejové immerzi při teplotě 20°C, při které se.emulze skládala z částic o velikosti 0,2 - 0,3 mikronů, které rychle reagovaly i ₄ ' na základě. Brownova pohybu.

Po vytemperování na teplotu 37°C, byla emulze pozorována a současný stav byl zaregistrován,Tak, jŠk; se teplota zvyšovala, částice ae náhle individuálně zvětšovaly až do teploty 37°C, kdy se emulze transformovala do souboru bublinek o velikosti 1-3 mikronŮ. Na rozdíl od kapalné emulze se bublinky snadno deformovaly, ale,zřejmě nesplývaly. Po 40 minutovém průběhu tohoto experimentu zůstaly mikrobublinky nedotčené a stabilní. '

Příklad 18 .» *

Pro posouzení, zda určitá část kapalné disperzní fáze přechází při tělesné teplotě-organismu vyšetřovaného ultrazvukovým zobrazením do plynné fáze, byla v tomto případě použita modelová teplota 37°C, při které byla testována použitelnost ultrazvukového kontrastního agens pro ultrazvukové zobrazení při teplotě 37°C takj že kontrastní ultrazvukové agens bylo vystaveno vlivu sérií emulzí, z nichž každá vykazovala odlišné kapalinové disperzní íázě.

Dále uvedené emulze byly bu3 připraveny nebo získány z jiných zdrojů e byly použity alikvotní podíly po 1,0 ml, které byly'naředěny při teplote......'

37°C v 1000 ml vody,

Z 1-jodperfluoroktanu byla připravena emulze postupem dle Longa a dalších ( U.S, patenty číslo 4,767.610J číslo 4,987.154 a japonský patent číslo 2,196.730).

* » ΐ *

Z perfluordekelinu byle připravena emulze ále postupu uvedeného v japonských patentech číslo 1,609.986 a číslo 63060943.

Emulze a trioleanem byla připravena dle postupu vypracovaném Dsvisem a dalšími ( Evropský patent číslo 254.019) .

—ÍLL- Ob_sahý každéhozě“zmíněných 'patentů ' jsou za- — 'řazeny mezi odkazy odborné literatury a uvedených v předloženém vynálezu.

Ultrazvuková zobrazení byla získána pomocí * ,· ’ roztoku před a po přidání uvedených .agens a výsledky

- byly- vyjádřený j.ako_..proc_entické. zvýšení pronásobené časem, během kterého bylo zvýšení registrováno, jak je uvedeno v následující Tabulce, publikované na další straně.

Jak-je už uvedeno výše, výhodnějšími přípravky jsou emulze, u kterých dochází k úplnému fázovému posunu při teplotě 37°Cj nebo nižší.

Kapaliny o vysoké tenzi per, perfluorhexan a perfluoroktan, vykazující při teplotě místnosti tenzi par okolo 2666 Pa , poskytovaly při srovnání s promíchávaným fyziologickým roztokem nebo perfluordekalinem-, vykazujícím při teplotě místnosti tenzi par okolo, 2666 Pa·.stejný kontrast, což může naznačovat určité výhody z hledisek použití uvedených sloučenin

O
XP	o
At	o
o vt •rt β	rd	(A	o	DO
P ro	X	AJ	X-	r-
β xo		VO	c-	iP
Sf-	>> P
O t5	β
β	β
04	*rť

oj

CO O

	co	o	O	O	O	o	o
ro	«V		*	«*	eb	«k	*
P β	IA	cn	Ov	co	rd	O	tA
OLO		c\j	IA	Ch	tJ-	VO	n
«Ρ CD O					rd	rd	AI
0. >	- I
C
E-t

i-t .

XO •rt k ·

DU P ·

CO Q 8 co

v) TJ β vt i-l >k rf P <P •rt <P

X i—I O X •

c •rt

Θ ' >>o O P C β Ό O CO -rt P P At (0 o Af

I

T3 •r(

P.

V

N

X«

Disperzní f β

ro

P β

J3 k

O β

<k β

At o

Ό

O

&	X P
o	XO
N	«Η
1	P
k '>s
D >	B í>
B o	H 0
CO P	>>P
X c	O β
0 o	V O
H -rt	Ό-rl
O v	O β
0.C	Ό m

β

ro
p
C
w	c
o.	CD
k «·	X
o	φ
β	X
r-l	k
<k	o
ro	β
AI	iP
v	«Η
Ό	0
O	V
	04

CO P X β o o r-t -rf O v β

CD

P

At o'&

<P O W XD

ΟΉ <M B	x£	'>> X >
1 ro	Ό O	Ό o
k	rt β	•r) β
d\	0.0	0.0
B	•rl -H	•rl -rf
ro i	(P k	r-f 0
X p	O f	0 V
θ'®	<H P	Ch P
H ro	ra -rl	ro-κ
O i—t	O £ ·	o ϊ
0. 0	ch n	«Η N

0	β ro P At O
•H	0
<P	o
CO	β
Aí	i—1
v	<k

o	Ό	k
k	k	V	β
o	O	0.	ro
β	β	Ό	ro
ip	iP	O	rP
<P	<P	Ό	O
k	k		•P
«	ro	\|	k
Ol	04		řt

Fyziologický roztok nesplikovetelný míchání jako ultrazvukových agens, i když mechanismus zmíněného zvýšení uvedenými materiály není zcela objasněn a není, uvažováno sni praktické využití těchto materiálů vzhl^em k jejich teplotě varu okolo 40°C_/ nebo nižší, ........ -......- - -Příklad 19 ·

Ultrazvuková kontrastní agens uváděná v předloženém vynálezu lze připravovat pomocí následujícího přístrojového vybavení a následujícími postupy:

Mikrofluidní přístroj; Model Π0 Y; interakční tlaková komora ( .); tlakové nádoby, ocel 316, objem 5 litrů a 12 litrů’, filtr z acetátové celulosy 0,22 mikronů; držáky filtračního zařízení 142 mm.

””Bý2ypfipřšve’ny následující roztoky:——--------25%ní ( hmotnost/objem) sorbitol; 12 litrů;

2,5%ní ( hmotnost/objem) perfluoroktonoét sodný *

( firma PCR Inc,, Gainsville, PL); · g Pluronic P-123 g Zonyl ESO - ... -.....

7,0 ml 2,5#ní perfluoroktonoát sodný,

1,0 litr ,sonikovaný pro usnadněný disoluce í zásobní roztok povrchově aktivních látek ), vypláchnut

Mikrofluidní přístroj byl roztokem sorbitolu, Interaktivní komora, soustava hadiček a chladící spirále jsou během rozmělňovacího procesu,po* ' kryty drceným ledem, ' '

Dojtlakové nádoby, opatřené míchadlem a umístěné v ledové lážni., se postupně přidá:

500,0 ml roztoku sorbitolu

500,0 ml zásobního roztoku povrchově aktivních látek 800,0 ml vody

200,0 g dodekafluorpentanu

Tlaková nádoba se naplní dusíkem při tlaku 10 Psi v časovém úseku 45 minut. Suspenze ee zpracovávají v mikrofluidním přístroji při 14.000 Psi po dobu 45 minut. Poté byla emulze přemístěna do nádoby obsahující 8,0 litrů 25%ního sorbitolu, vychlazeného ne teplotu 4°C a byla důkladně promíchána. Poté byla emulze za přetlaku přemístěna do ampulek o obsahu 100 ml a během této operace byla přefiltrována přes filtr o velikosti 0,22 mikronů. Poté byly ampulky uzavřeny a zataveny.

Amfifilní materiál uváděný v tomto Příkladě,včetně fluor obsahujících povrchově aktivních látek a polyoxypropylen-polyoxyethylenglykolových neiontových blokových kopolymerů, poskytne přípravek přijatelné stability.

Příklad 20

Ku 2,0 ml vody, vychlazené na teplotu 4°C,bylo přidáno 0,4 ml n-pentenu ( firma Aldrich Chemical, Milwaukee ,WI). Vznikly dvě zřetelně oddělené fáze. Poté byl celkový objem doplněn na 2,8 ml s 0,4 ml 10%ního ( hmotnost/objem) roztoku chloridu sodného.

K takto připravenému roztoku bylo za míchání přidáno přibližně 135 mg fosfatidyllecithinu (firma Sigma Chemical, St,Louis,MO ) a výsledná směs kašovité konzistence byla intemzivně,vířivě míchána.

Ku zakalenému, bíle zbarvenému roztoku, který se po stání v klidu během 5 minut rozdělil na dvě fáze, byl za stálého míchání přidáván po 0,1 ml ethanol, až se celkový objem zvýšil ne 1,74 ml.

Ve vzhledu dvojfázové směsi nenastaly žádné změny. Zmíněný přípravek z tohoto Příkladu vykazoval in vitro dobré charakteristiky ultrazvukového zpětného odrazu a prokázal tak použitelnost alifatických uhlovodíků se 6 nebo menším počtem uhlíkových atomů v molekule a s celkovým počtem 17 atomů.

aPříklad 21

Zakalená suspenze byla připravena smícháním 1,80 ml vody

0,20 ml 10%ního roztoku chloridu sodného

0,10 ml ethanolu a

100,0 mg lecithinu 'V

Poté bylo přidáno

0,10 ml dodekafluorpentsnu ( firma PCR,Gsinsville,FL) a po následném smíchání byly získány dvě fáze, ku kterým bylo přidáno

0,10 ml n-pentanu a poté ještě

0,20 ml alikvotních podílů dodekafluorpentanu tak, aby celkový obsah dodekafluorpentanu se upravil na 20% ( objem/objem).

Vzniklá výsledné suspenze se po míchání rozdělila na 3 fáze, z nichž 2 byly zakalené fáze a jedna menší fáze byla čirá.

Poté byl přidán další chlorid sodný, aby koncentrace v roztoku byle upravena ne 7% a po přidání alikvotního podílu 1,0 ml ethanolu nenastaly v charakteristice suspenze žádné změny.

Přípravek z tohoto stupně vykazoval in vitro dobré charakteristiky zpětného odrszu s dokazuje tak použitelnost směsí uhlovodíků a fluorovaného uhlovodíku.

Příklad 22 ? ' Ku 2,0 ml dodekafluorpentanu bylo přidáno .

330,0 mg lecithinu. Po následném promíchání bylo přidáno 1,.0 ml vody a vzniklá suspenze byla dále míchána.

Vytvořila se zskalená koloidní disperze,která dokazuje použitelnost jednotlivé povrchově aktivní látky jako amfifilní složky, v tomto případě přírodně se vyskytující zwiterionové povrchově aktivní látky. _Použiteíná kontrastní'agens by mohla*být-v-této- ----formě připravena nahražením dodekafluorpentanové slož-”^-'’ ky etherem.

Bylo zjištěno, že zejména diethylether poskytuje použitelný kontrastní signál.

--- Lze předpokládat,, že. podobné, sloučeniny, jako_ na př. methylether a vinylether, by mohly být stejně, dobře použitelné.

Příklad

Ku 0,72 ml vody a 8,0 ml dočekánu bylo přidáno 0,46 g dodecylsulfátu sodného (SDS) a poté byl pomalu přidán elikvot 1,47 ml pentanolu.

Z počátku suspenze obsahovala bíle zbarvený ,,vláknitý SDS v čiré tekutině. Po přidání 1,0 ml pentanolu a šetrném míchání, nastalo.podstatné rozpouštění SDS. Po přidání dalších 0,5 ml pentanolu^yla za míchání získáne během 10 7 15 minut při teplotě místnosti čirá, monofázic^v^Slze, která vytváří poněkud slabší akustický zpětný odraz kapalinové disperzní fáze o teplotě varu vyšší jak cca 40°C,’ v tomto případě dokumentovaném dodekenem ( teplota varu 216°C),

Z hledisek předloženého vynálezu je tato forma jako ultrazvukové kontrastní agens nevhodná.

Příklad

Směs vody, pentanolu, dodekanu, mikroemulze dodecylsulfátu sodného z Příkladu 23, byla z hle. . ^mikroemulze disek stanovení kompozičních hraničních parametrtrv'' —‘ variabilní* 1

Následující směsi byly připraveny při teploř· tě místností a po 30 minutovém míchání byl-zaznamenán jejich vzhled, uvedený v Tabulce, publikované ns další straně.

Mikroemulze z experimentu 5-9 se zakalily po zahřátí ( vyšším jek cca 45°C) a opět se po ochlazení na teplotu místnosti vyčerily s modrým nádechem.

Tato reverzibilní změna vzhledu mohla být opakována přinejmenším při 6 posunech teplotních cyklů.

Přiklad 25

Ku 1,0 ml vody bylo přidáno 0,51 ml oktylaminu ( firma Sigma Chemical Corp*, St.Louis,· MO) a vznikl čirý roztok, který se po přidání 1,0 ml oktanu zakalil. Po dalším přidání 0,49 ml kyseliny oktanové ku zmíněnému roztoku vznikl gel, který se po přidání 0,17 ml'alikvotu 3,6M roztoku hydroxidu draselného rozpustil na čirou mikroemulzi.

Tabulka údajů z Příkladu 24 uvedeného nepředcházejících strénách a

v

T5

O

M tí

t) >n >

v H '		- 1? V	<7	£ t)	X as «
/5					i—1	H	H	XU
			>>	:	as	a>	(0	£>
N	k				X	Xi	X	03
	•rl	•H	•rl	-H	as	0)	as	rd
>» ’	xj-	*K>	‘ XJ	’XJ	• N	' N		n

	U)	bfl	60	bfl	b0	feO	bO	to
co	e	_# £3	e	e	ε	fr	E	e
ft	OJ	'OJ	r\l	C\J	oj	OJ	OJ	OJ
	Γ-	[—	Γ-	Γ-	Γ-	Γ-	Γ-	Γ-
co	ΡΟ	PO	ΓΟ	γο	η	ΡΟ	ρο	ΓΟ
	...		V-T-					.. w

H

O

Č ffl

P c

ts

o	O	o	o	O	o	O	ó
o	O	o	o	O	o	o	o
0t	k	«k	*»	•k	e*	*	*
H	rd	rd	H	rd	rd	rd	rd

,uo

O . *>

rd

o	o	O	o	o	O	o	o
o	o	O	o	o	rd	PO	IA
	0k	«k	•k	*k	•k	«k	•k
rd	rd	rd	rd	rd	rd	pd	rd

o

KO rd

<D	O	o	o
Ό	o	rd	OJ
O		e»	«k
>	rd	rd	rd

	rd	OJ	PO
o			1
3	1	1
X			LA
o	IA	IA

Í4

O	o	o	o	o
PO	LA	lA	LA	LA
«k	Vk	«k	«k	Vk
rd	rd	rd	rd ¹	rd

Μ^-	LA	KO	r—	CO
1	1	1	l	1
IA	LA	LA	IA	IA

372 mg čirý,modrý nádech o

IA «I rd

OK

I

LA

Pateronásobné přidání po 0,1 ml vody za míchání vedlo ku vzniku čiré mikroemulze. Po šestinásobném přidání se čirá emulze konvertovala na zakalenou koloidní disperzi.

Tento Příklad demonstruje přípravu emulze obsahující alifatický uhlovodík s amfifilním materiálem, obsahujícím kationtové povrchově aktivní látky.

Příklad 26

Po přidání 1,0 ml dodekafluorheptanolu (PCR) ku 1,0 ml dodekafluorpentanu,vznikl čirý, homogenní roztok. Stejná množství oktafluorpentanolu-v dodekafluorpentenu poskytla dvě čiré, němísitelné fáze, ' Přidání 2,0 až 4,0 ml vody ku směsi dodekafluor heptanol-dočekafluorheptanu poskytlo dvě nemísitelné fáze. Po ochlazení na teplotu 4°C se dvě čiré fáze rozdělily na tři Čiré fáze.⁴

Příklad 27

Roztok lO%ního ( objem/objem) Fluoradu FC-430 ( firmě 3M Chemical, St.Psul, MN) ve vodě byl připraven za míchání při teplotě místnosti po přidání*

10,0 ml FC-430 ku 100,0 ml vody.

Ku 5,0 ml tohoto roztoku byl přidán 1,0 ml dodekafluorpentanu a 1,0 ml oktafluorpentanolu a byla získána emulze.

F ř í k 1 a d 28

Po přidání dávky 2,0 ml 10%ního (objem/objem) roztoku FC-430 ku 2,0 ml dodekafluorpentanu se vytvořily dvě fáze.

Po přidání 0,3 ml dodeksfluorheptenolu vznikla zakalená, bíle zbarvená emulze.

Příklad 2S

Dávka 1,0 ml 1,26M 2-Bmino-2-methyl-1-propenolu ( AMP) perfluoroktonoátu byla přidána ku 1,0 ml dodekafluorpentanu a po přidání 1,0 ml 25% Pluronicu-F-68 vzniklá dvoufázová^zakalená kapalina, Pg přidání 0,05 ml dodekafluorheptanolu vznikla jednofázová koloidní disperze,

---------- p-p-í--k-l-a-d------30-_______________________7 Í72L7 Z.

Dávka 2,0 ml 15%ního ( objem/ob jem) roztoku Pluronicu F-68 byla ze chlazení ledem postupně přidá'W ne ku 2,0 ml dodekafluorheptanolu.

Tato směs byla převedena do skleněné injekční stříkačky o obsahu 5 ml nespojené ňa třícestný kohout' a druhou skleněnou injekční, stříkačku o obsahu 5 ml . e po intenzivním promíchání sem a tem mezi oběma stříkačkami byle z-í-sk-áns- hustá, bíle zberve.ná, emulze.

P ř í k 1 a d 31 *

Dále uvedená směs byla připravena při teplotě 4°C postupným smícháním následujících složek:

2,0 ml 5%ní Pluronic F-6S

2,0 ml dodekafluorpentan

2,0 ml 0,2M AMP perfluoroktonoét

0,1 ml dodekafluorheptanol . Uvedená směs byla nasáta do skleněné injekční stříkačky o obsahu 5,0 ml, opatřené trojcestným kohoutem s spojené s další skleněnou injekční stříkačkou o obsahu 5,0 ml a po intenzivním promíchání sem a tam mezi oběma stříkačkami, byla získána hustá,bíle zbarvená emulze.

Příklad 32

Pále uvedená směs byla připravena při teplotě 4°C postupným smícháním následujících složek:

.2,0 ml 15.%ní Pluronic .F-68 ... ...........

0,42 g O-sorbitol (Sigma), rozpuštěny v 0,5 ml vody 0,20 ml dodekafluorheptanol

2,0 ml dodekafluorpentan

Uvedená směs byla nassáta do skleněné injekční stříkačky o obsahu 5,0 ml, opatřené trojcestným kohoutem a spojené s další skleněnou injekční stříkačkou o obsahu 5,0 ml a po intenzivním promíchání sem a tam mezi oběma stříkačkami, byla získána hustá,bíle zbarvená emulze.

Příklad 33 ’ .

Dále uvedená směs byla připravena při teplotě 4°C postupným smícháním náá^tíujících složek:

2,0 ml 15%ní (objem/objem) Pluronic F-68

0,4 ml O,1M trisí hydroxymetbyl)aminomethan (tris)- perfluoroktonoát, pH 7,2

2,0 ml dodekafluorpentan

Uvedená směs byla nassáta do skleněné injekční r stříkačky o obsahu 5,0 ml opatřené trojcestným kohoutem a spojené s delší skleněnou injekční stříkačkou o obsahu 5,0 ml e po intenzivním promíchání sem s tam mezi oběma'stříkačkami byla získánabíle zbarvená, koloidní disperze.

Příklad 34

Dále uvedené směs byla připravena při 'teplotě . ......4°_C postupným smícháním následujících složek:

. —-θ-Q·-Q- 25'%ní^_Plur onic-F-6S---------------——---------------:.

24,0 ml 1,1,7H- dodekafluorheptanol 75,8 g dodekafluorpentan

Tato směs byle homogenizována'po várkách míse--—ním-pomocí . sous.tayy injekčních stříkaček o obsahu

30,0 cm^, opatřených trojcestným kohoutem a to celkem Styricetinásobným opakovaným;manuálním promícháním.

Poté byla směs postupně neředěna 1 : 10 dvakrát^ s roztokem následujícího složení:

8,0’ ml 25%ní Pluronic FS-68 2,0 ml 50%ní sorbitol

1,0 ml O,1M tris perfluoroktonoát, pH 7,2 a dalším rpzmělněním pomocí zmíněných operací s injekčními stříkačkami.

Tento přípravek byl aplikován intravenozně myším o hmotnosti 20-30 g do ocasní žíly a pokusná zvířata byla po dobu 7 dní pozorována.

Zjištěné výsledky jsou uvedeny v následující Tsbulce:

Dávka (ml/kg)	Závěry pozorování:
20	přežití
25	morbidita,ale přežití
30	morbidita, ale přežit
40	uhynutí

Tato biokompatibilní koloidní disperze byla stálá nejméně dva týdny po ukončení přípravy.

Bále uvedená aplikační forma byla připravena za použití následujících složek:

1,0 ml 25%ní pólyethylenglykol 3550

1,0 ml _j 50%ní sorbitol

3,0 ml 15%ní ( hmotnost/objem) Pluronic F-68

3,0 ml 20%ní ( hmotnost/objem) fluorovaný, povrchově aktivní přípravek FC 430 0,40ml 0,1 tris perfluoroktonoát a

1,0% ( ob jem/ob jem ) doďekafluorpentan

Uvedená směs byla rozmělněna při teplotě 4°C ve vodní lázni za použití akustické energie sonizaČním přístrojem operací trávnici 10 minut.

Byla získána zakalená, koloidní disperze.

Příklad 36

Byla připravena a otestována serie roztoků vodného prostředí, z nichž každý roztok obsahoval různý poměr amfifilních materiálně které tvoří základ pro další přípravky.

Roztok A

Čirý roztok, obsahující následující složky:

6,0 ml 25&ní roztok Pluronic F-68

6,0 ml 50%ní roztok polyethylenglykolu 3350

0,60 ml tris-perfluoroktonoát a

2,40 ml voda

R o z t o k B.

čirý roztok obsahující následující složky:

l.,J.8_.ml-25.%ní jro^.ztpk_PÍ.urpnic F-68_J”

6,0 ml 50%ní roztok polyethylenglykolu 3350

0,12 ml tris- perfluoroktonoátu a

7,7 ml vody

Roztok C......... ............... . ... -......- ........

Zakalený roztok, obsahující sraženinu ve formě gelu, byl připraven smícháním následujících složek:

6,0 ml 50%ní póly ethy lenglykol 33-50

0,75 ml tris-perfluoroktonoát

1,50 ml vody *

Tento roztok není biokompatibilní při intrar· vaskulérní aplikaci, ale je biokompatibilní při orální, intraperitoneální, rektální a nitroděložní aplikaci

Roztok D

Čirý roztok byl připraven smícháním následujících, složek::

6,0 ml 25%ní(hmotnost/objem)^Pluronic F-68

6,0 ml 50%ní(hmotnost/objem) pólyethylenglykol 3350

0,6 ml tris*perfluoroktonoát(O,1 í.í)

2,4 ml vody

Roztok E čirý roztok byl připraven smícháním následujících

složek:
5,0 ml	50%ní (hmotnost/objem)	pólyethylenglykol 3350
7,5 ml	20%ní (hmotnost/objem)	FC-430
0,75ml	tris-perfluoroktonoát	8
0,75ml	vody

Roztok F čirý roztok byl připraven smícháním následujících složek:

1,8 ml 25%ní ( hmotnost/objem) Pluronic F-68

6,0 ml 50%ní (hmotnost/objem) pólyethylenglykol 3350

0,12ml tris-perfluoroktonoát( O-jl K) a

7,7 ml vody

Roztok G

Čirý roztok, obsahující drobnou sraženinu, byl připraven smícháním následujících složek:

3,0 ůil Pluronic F-68

3.75 ml (hmotnost/objem) FC-430 6,0 ml polyethyiengiykol 3350'

0,68 ml tris-perfluoroktonoát a

1.75 ml vody

Ku 7,0 ml roztoků A- G byla při teplotě 4°C přidána dávka 0,14 ml dodekafluorpentanu, Koloidní disperze vznikly po 40 operacích.mezi dvěma injekčními stříkačkami za použití trojcestného kohoutu.

Přípravek D byl aplikován myČím injekcí do ocasní žíly a byla zjištěna LD50 - 20,0 ml/kg.

Přípravky F a G byly toxické v koncentracích .10 ml/kg.

P ’ ř Ϊ' k 1 ε T 37 ‘ '-rj?:Emulze uvedená v tomto Příkladě byla připravena smícháním následujících složek:

45,0 ml polyethyiengiykol 3350

237,0 mg Pluíoňič F-66 ' ‘ - - -- 0,225 ml Fluorad FC-171 2,25 ml 0,1M tris-perfluoroktonoát a .2,25 ml 10%ní (ob. jem/ob jem) dodekafluorpentan

Zmíněné směs byla rozmělněna smícháním v zařízení sestávajícím ze soustavy dvou injekčních stříkaček opatřených trojcestným kohoutem,

V testu hemolýzy byl výše zmíněný přípravek biokompatibilní, Krev., byla odebrána potkanům intrakerdiální punkcí (2,0 ml) do evakuované, sběrné.zkumavky, obsahující EDTA.

Alikvoťní/podíl 0,10 ml krve byl přidán ku alikvotnímu podílu 0,20 ml výše zmíněného přípravku za účelem namodelování maximálních hladin v krvi po předchozí intravenózní aplikaci dávky 100 ml/kg.

Krev byla promíchávána s výše .uvedeným-přípravkem po dobu 2,0 minut a poté byl vzorek centrifugován,

Supernstsnt byl Čirý a kuličky sraženiny byly temně rudé a tím byla prokázána absence hemolýzy i při této extremně vysoké dávce.

i

Zmíněný přípravek byl také biokompatibilní při testu akutní toxicity a vyvolával u myší po intravenózní aplikaci dávky 20 ml/kg jen menší, namáhavé dýchání, k

Příklad *38

Přípravek obsahující dodekafluorpentan a amfifilní materiály ve vodném prostředí, byl testován z ' aspektů biokómpatibiíity. a- použitelnosti jako kontrastní ultrazvukové sgens. Zásobní roztok byl při, praven z následujících složek*: *

90,0 ml 20%ní pólyethylenglykol 3350

747 mg Pluronic F-68

0,45 ml Fluorad FC-171

4,50 ml tris-perfluoroktonoát ( ο,ΙΜ )

Výše uvedené složky byly smíchány a byl získán širý roztok, z něhož bylo odděleno 9,0 ml a k tomuto podílu bylo přidáno 0,18 ml dodekafluorpentanu,

Koloidní disperze byla připravena rozmělněním ♦ mezi dvěma injekčními stříkačkami o obsahu 5,0 ml.

Studie ultrazvukového vyšetření myokardu byla *

provedena u pse o hmotnosti 32 kg,dle postupu popsaného Kellerem M.W., Feinsteinem S.B., Watsonem D.D, ve článku ,,Succesful left ventricular opacification following peripheral venous injection on sonicated contrast: An experimente!*evaluation, publikovaném v časopise Am.Heart J.,114, 570d /1987/) a zařazeném mezi odkazy na odbornou literaturu a uváděných v předloženém vynálezu.

Bylo realizováno celkem ΊΊ intrevenózních apli- .....

kácí výše uvedeného přípravku v dávkách od 0,05 do 0,75 ml/kg.

Dávka 0,05 ml/kg vykázala bezprostředně po injekci jen slabé zesílení kontrastu pravé a levé komo-. ry. Všechny dávky v rozmezí od 0,10 do 0,75 ml/kg vykazovaly diagnosticky použitelné zvýraznění srdečních komor·» Injekce ovlivňovaly jen minimálně hemodynamické parametry. ►. ·

Příprava 10%ní dodekafluorpentánové emulze byl8 provedena ve výše zmíněném vodném prostředí a kontrastní zvýraznění bylo srovnatelné s 2%ním přípravkem.

'Při ‘žřávce 0,20 8-0/25 ml/kg-uvedeného-přípravku, se______ ... __ , po intrsvenózní a pííkscF· prd je vi IV 'inťe nzi vní -opa cite --------------srdeční komory s minimálními hemodynamickými změnami.

« » t

---P ř í k 1- a d.....35 -............ ..... ..... .............._

Byla připravena emulze obsahující jako kontinuální fázi vodné prostředí o vysoké hustotě,viskozitě a biokompa tibi.li tě.,. následujícího složení:

0,06 ml 15%ní Pluronic F-68 0,06 ml Zonyl FSC-100 0,12 ml 5%ní Zonyl F3N-100 *

0,146 ml 0,1M tris-perfluoroktonoát, pH 7,2 4,47 ml 76%ní (hmotnost/objem) jodhexol ( Omnipaque 350, firma Sterling Winthrop, New York), 8

0,6 ml dodekafluorpentan

I.

Stabilní přípravek byl připraven následujícím rozmělněním mezi dvěma injekčními stříkačkami.

' Další, jodované rtg,kontrastní materiály o vysoké hustotě, jako jopamidol, jodversol, jodpentol, jodiximol a ostatní podobné sloučeniny, by mohly jodhexol nahradit.

Použití samotné vody jako kontinuálního fázového prostředí poskytovalo kontrastní agens, která se po přípravě rychle v nádobě usazovala.

Tento příklad dokazuje použitelnost vodného prostředí o vysoké hustotě, vysoké viskozitě a biokompatibilitě, jako kontinuální fáze.

Příklad 40

V rámci testování použitelnosti amfifilních materiálů.. př.i~.s.te.bilizacL..př.íprevků~s obsahem- dodekafluorpentánových emulzí typu kapelina-kapelina,byla použita serie pólyoxypropylen-polyoxyethylglykolových neiontových blokových kopolymerů.

a »-a a

a

Byly připraveny následující roztoky:

B.

C.

D.

1,90 ml 25%ní Pluronic F-68 0,04 ml' dodekafluorpentan

1,90 ml Pluronic L-121 0,04 ml dodekafluorpentan

1,90 ml Pluronic L-122 0,04 ml dodekafluorpentan

1,50' ml Pluronic L-121 0,04 ml dodekafluorpentan

1,90 ml Pluronic L-101 0,04 ml dodekafluorpentan

I /89*<í n^eadjjd glH/^39JJ + (T9*T n^ejdxjd qth/ ^τ9λϊ

9ΊΗ : aoxuAou jojCnpaxspu·

3χρ ggu Aqoupoq ^ujgmijjd /fuaxjoop X?[Aq a Aupqojois ΑχΑς (62 3ΊΗ) 89“á e (O‘C Θ7Κ ) 19-T oiuojnxg £jrz°H •ηζθχριιΑΔ m^ua^oxpaad δ m?uap3An Aonqajaqxx ^ujoqpo.,nui3uzes λ uazBjaz aC xoesíxxqnd nouaujaiz θ§Αλ eu zasípo a Azexpc χ^χβρ x Auep -3ΛΠ nosp apJ[ J tj ‘aeqsxaw ‘AuedmoQ Suxqexxqng ua^axua •'g^jaqog ‘gg^x ‘uaqoag τη eg í„aoxqoajg pue Ajoax& luoxsynmj*‘ xoe^xxqnd λ aupsdod §uqoupod aC a

Aqxxxqaqe xgqgApau qxxpop szx nojaq^ *3iaqpX qo>UAXq3[a pAoqojAOd *qoAAOquoxau njfoqzoj xoazxxemxqdo ojd eupoqA spoqam ap( gxg ýpouexeq oxxxqdodrx-oxxxqdoupAu θαχτ

-3I3J)SXíPA0UA0a’7UXXj0dXT-XUXXJOJpAlT-‘XUAXqBIBa·· - rv pnu í.xi •aoxqspg jguamCau xaAoqaeqo ; t ^Λ

H 3ioqzou_ · ΕπιχρηζχΛ qeAOjozod ouzom oxAq azpj pAOUp^uad -jonXja^apop puz^adexp oxqepg jAqejoum a qso3txx&^ •pnuxm οχ nqop od

O.ý gqoxdaq x^d Aupqopm paxjja a qoa^Apmn^z qoAupusx^s

O * ⁽ ’ ^Λ φ

qojpusAeqsz a Aupqsjmn	ΑχΑς A^oqzoj ^napsAU
a	uequadjonxjB3{3pop pa C2W oxuojoxj xm	to‘o 06‘τ ·η
a	uequaduonxja^apop χ® Χ8-Ί oyuojnxj pa	vo‘o 06‘τ ·ο
a	uaqusdjonxjeíispop xm 26-Ί oxuounxg pa	to‘o 06‘τ ’á

ss

Použité roztoky, kalkulace hodnot HLB a stabilita finálních přípravků ( a 2% objem/objem emulze dodekafluorhexanu) jsou uvedeny v Tabulce publikované na delší straně.

Relativní HLB pro perfluorhexan stanovená tímto postupem je 6-8. Nejvyšší stabilitu perfluorhexanových emulzí lze docílit použitím amfifilnich materiálů s relativními HLB hodnotami v oblasti 6-8, bez ohledu na jejich chemickou strukturu.

Příklad 42

Široká škála způsobů přípravy ultrazvukových kontrastních agens uváděných v předloženém vynálezu · zahrnuje následující přístrojové vybavení a.postupy:

Mikrofluidní'přístroj, Model 110 YJ interakční tlakogou komoru o tlaku 84 MPa )J tiskové nádoby,ocel '316,'¹ objem 5”Litrůá 12 litrůj filtr z ace tátové celulózy 0,22 mikronůj držáky filtrečního zařízení 142 mm. 3yly připraveny následující roztoky z téchto složek:

litrů ,25%ní ( hmotnost/objem) sorbitol g Pluronic P-123 g Zonyl FSO,

1,0 litr, který byl sonifikován ze účelem snadnější- . ho rozpouštění ( zásobní roztok povrchově aktivních látek).

Mikrofluidní přístroj byl'Vypláchnut roztoke^sorbitolu. Interakční komora, soustava hadiček a chladící spirála jsou během rozmělňování pokryty drceným.ledem.

i

Do tlakové nádoby s vířivým míchadlem umístěné v ledové lázni byly přidány následující složky:

Tabulka údajů z Příkladu 41 uvedeného na předcházejících stranách ro ρ

Ή r-l •P

XI ro p

W +

4+

Ή β

>

•Η

Ρ

C0 νθ

I

X ο

Η β

Ο νο

Ο •Η β

Ο £

VO 00 Ο ΑΙ

Η Η , νο ω i—t Η

•H ·	..__...	_ ...			.....__
s
	AJ	Ch	c-		AJ Ó	00
*	rov	«b	V	rob	k ·*	«b
o	H	H	AJ		p- IA

ro . . Ρ ____ »rt

-------γΗ—— •rt

X) ro ρ

ro

XD P .

•P >o k

. . ₃. ..

Η

Ρ

Ό σ>

οο η la co Ο aj *·»»«** — οο 00 f \Ο ΙΛ Irt* ’ *

II ro + p P H •P • — XI ro ro P P •p » H •Ρ M p xn , ro +* p xu ro >

•o XC i)

·. β β « Ό Λ XB B xQ II X» β

N II + O +

X o +

500,0	ml	roztok sorbitolu
500,0	ml	zásobní roztok povrchově aktivních látek
800,0	ml	voda
200,0	S	dodekafluorpentan

Tisková nádoba byla naplněna dusíkem při tlaku 10 Psi v časovém úseku 45 minut. Suspenze se zpracovávají v mikrofluidním přístroji při '84 MPa po dobu.45 minut. Poté se emulze přemístí do nádoby vychlazené na teplotu 4°C, ve které bylo předloženo 5,0 litrů 25%ního sorbitolu a směs se při teplotě 4°C důkladně promícná.

Poté se emul2e přefiltruje za přetlaku filtrem o velikosti 0,22 mikronů do ampulek, které se uzavřou s zataví,

I

Příklad 43

......Příprava ďá'le' uvedené “emulze', 'zahřňuté' do předloženého vynálezu, vyžaduje následující přístrojové vybavení a následující postupy:

Mikrofluidní přístroj, Model 110 YJ interakční tlaková komora (84 MPa), tlakové nádoby, ocel 316, objem 5 litrů a 12 litrů$ filtr z acetátové celulosy, 0,22 rnikrcm.$ držáky filtračního zařízení,142 mm.

Byly připraveny následující roztoky:

10,0 litrů 62,5%ní ( hmotno3t/objem) sorhitol

41,75 g Pluronic P-123

41,75 g Sonyl F3£í, .

2,5 litru, který byl sonifikován za účelem snadnějšího rozpouštění ( zásobní roztok povrchově aktivních látek).

Mikrofluidní přístroj byl vypláchnut roztokem sorhitolu. Interaktivní komora, soustava hadiček a z 2 přetlaku₇ i11 r uje^V⁷? i1tr ve liko s t i 0,22 mikronů) chladící spirála jsou během rozmělňovacího procesu pokryty drceným ledem.

Do tlakové nádoby o obsahu 5,0 litrů, opatřené míchací tyčinkou, se v lázni chlazené ledem ,postupně vnese:.

1800,0 ml zásobního roztoku povrchově aktivních látek a

200,0 g dodekafluorpentanu

Tlaková nádoba byls za současného míchání naplněna při tlaku0,07MPá v časovém, úseku 45 minut/dusíkem.

Poté se suspenze zpracovává ns mikrbfluidním přístroji po dobu 30 minut při tlaku 35 MPa a po dobu 60 minut při tlaku 84 MPa.

Poté se emulze převede při teplotě 4°C do nádoby s před loženými' 8,0' litry-62,5%ního- sorbitolu-s-důklad^· - ně se promíchá.

Poté se přef do ampulek o obsahu 100,0 ml, které se uzavřou a zataví.

Příklad 44 ...... ................. — '

Příprava dále. uvedeného prostředku vyžaduje následující přístrojové vybavení a postupy; mikrofluidizační přístroj model 110Y, interakční tlaková komora při tlaku 84 MPa, .tlakové nádoby z oceli 316 s objemem 5 litrů a 12 litrů, filtry z acetátu celulózy, 0,22 mikrometrů, držáky filtru 142 mm.

Byly připraveny' následující roztoky: 20 litrůroztoku s obsahem 33,3 g sacharozy/100 ml, 2,5 litru roztoku s·obsahem 150,0 g Pluronic P-123 a 150,0 g Zonyl F50, roztok byl zpracován ultrazvukem k dosažený úplného rozpuštění, čímž byl získán zásobní roztok smáčedel. Mikrofluidizační přístroj byl vypláchnut roztokem sacharozy. Komora, potrubí chladicí spirála byly v průběhu drcení pokryty drceným ledem. Do tlakové nádoby s objemem 5 litrů s míchadlem bylo do lázně, chlazené ledem postupně přidáno 1800 ml zásobního roztoku smáčedla a 333 g dodekařluorpentanu. Pak byla tlaková nádoba naplněna za míchání na 60 minut dusíkem při tlaku 0,07 MPa. Suspenze procházela mikrofluidizačním přístrojem při tlaku 84 MPa celkem 160 minut, přičemž komora byla chlazena obíhající chladicí lázní na -3 °C. Pak byla emulze přenesena do nádoby s obsahem 18 litrů sacharosy o koncentraci 33,3 % hmotnostních při teplotě 4 °C a směs byla míchána celkem 45 minut. Pak byla emulze přenesena ΐ

do předchlazených nádobek s objemem 20 ml při použití pozitivního tlaku, materiál byl zfiltrován v průběhu postupu otvorů 0,22 mikrometru. Pak byly nádoba uzavřeny.

•.'•ý

filtrem s průměrem ky opatřeny víčkem

Příklad 45

Dispergovaná kýkoliv biologicky fáze podle vynálezu by měla obsahovat jakompatibilní chemický materiál s teplotou varu nejvýše rovnou teplotě organismu, kterému má být prostředek podán a na němž má být provedeno ultrazvukové vyšetření tak, aby se dostatečné množství chemické látky změnilo na disperzi plynu a bylo tak možno zajistit diagnosticky příznivou změnu údajů, získaných pomocí ultrazvuku v průběhu vyšetření. V příkladu 2 je uvedena tabulka teploty těla různých čeledí tak, aby bylo možno zvolit příslušně dispergovanou fázi pro přípravu příslušného prostředku.

Za určitých podmínek, například v případě vysoké horečky nebo v případě, že se vyšetření provádí ve speciálních odborných zařízeních, v nichž je možno zajistit snížení tlaku vzduchu, je možno použít chemické látky s teplotou varu až 18 °C nad normální teplotou těla vyšetřeného organismu v případě ultrazvukového vyšetření.

Zatímco horní teplotní hranice pro volbu fáze, dispergované v kapalině s nízkou teplotou varu je určena svrchu uvedenými hledisky, spodní hranice je obvykle určována způšobem zpracování.' Vpřípadě-, že dostupné zařízení-obsahuja . pouze uzavřené nádoby a není možno zvýšit v reakční nádobě tlak v průběhu tvorby koloidní disperze, je možno použít“ pouze dispergované fáze s teplotou varu, rovnou teplotě tuhnutí kontinuální fáze nebo vyšší. Například kontinuální fáze s obsahem 25 % ionexolu má teplotu tuhnutí přibližně -6 °C. Při použití takové kontinuální fáze je tedy možno použít ja koukoliv kapalinu, jejíž₍teplota varu je vyšší než 6 °C vzhledem k tomu, že takovou kapalinu je možno zkapalnit pomocí pouhého zchlazení.

Avšak v případě, že je možno užít v reakční nádobě '“'zvýšený' tlak ,· například při -použití tanku, -který, .může, pra- ________ cdvat pod tlakem dusíku^_přxbrižhe~O70'2r'MPaT''j'emožn-o^zka--------palnit a pak dispergovat jakoukoliv kapalinu s nízkou 'teplotou varu i v případě, že teplota varu této kapaliny leží pod teplotou tuhnutí kontinuální fáze.

Příklad 44 popisuje způsob výroby emulze s kapalnou dispergovanou fází a s teplotou varu nad teplotou tuhnutí kontinuální fáze, kdežto příklad 48 popisuje způsob tvorby emulze při použití tlaku- a chlazení, přičemž kapalná, dispergovaná fáze má teplotu varu nižší než je teplota tuhnutí kontinuální kapalné fáze. Je zřejmé, ž,e jakoukoliv chemiea kou látku je možno účinněji dispergovat při použití pozitivního tlaku tak, aby bylo možno snížit odpařování těchto materiálů-za tlaku par, který se zvyšuje se.snižováním teploty varu.

Dále budou uvedeny některé chemické látky typu kapalín s nízkou teplotou varu, které je možno použít, tyto látky jsou seřazeny podle teploty varu.

Chemický název	molekulová hmotnost	teplota varu	chemická skupina
neon	20,13	-246,0	11
dusík (N2)	28,01	-196,0	11
argon	39,98	-189,4	10
kyslík (02)	32	-183,0	.11
methan	16,04 .	-164,0	1
krypton	83.8'	-153,0	11
oxid dusičný	30,01	-151,6	11
tetrafluormethan .	88	-129,0	3
xenon	131,29	-108,0	11
ethylen	28,05	-103,7	1
ethan	30,07	-88,6.	1
oxid dusný	44,01	-88,5'	11
acetylen	26,04	-84,0	1
nitrosotrifluormethan	99,01	-84,0	3
trifluormethan........	, 70-,-02......		... _₃------ ...
fluoridkarbonyl	66,01	-83,0	9
1,2-difiuorethylen	64	-83,0	3
1,1-difluorethylen	64,04	-83,0	3
trifluormethan *	70,01	-82,2	3
chlortrifluormethan	104,46	-81,4	.3
hexafluorethan	138,01	-79,0	3
perfluorethan	138,01	-79,0	3
fluormethan	34,03	-79,0	' 3
oxid uhličitý	44,01	-78,6	11
fluormethan	34,03	-78,4	3
butylnitril	103,12	-77,8	11
tetrafluorethylen	100,02	. -76,3	3
fluorid sírový	146,05	-64,0	11
trifluoracetonitrii	95,02	-64,0	10
bromtrifluormethan	148,91	-57,9	3
difluormethan	52,02	-51,6	3

chemický název	molekulová	teplota	chemická
	hmotnost	varu	skupina
trifluorethylen	82,03	-51,0	n J
karbonylsulfid	' 60,08	-50,0 -	- 11. . .
3,3,3-trifluorpropin	94,04	-48,3	3
pentafluorethan	120	-48,0	3
propen	42,08	-47,4	1
1,1,1-trifluorethan	84,04	-47,3 .	3 .
propan	44,1 '	' -42,1	1
nitrosopentafluorethan	149,02	-42,0	3
chlordifluormethan	36,47	-40,8	3
1,1,1,2,3,3-hexafluor-2,3-
difluorpropan	221	-39,03	3
tetrafiuorallen	112,03	-33,0	3

1-chlor-l,1,2,2,2-pentafluorLetlSn'“ '7....... ' ' ' ~'í54.47· -......38,0------3.

chlorpentafluorethan	154,47	-36ζ 0’	—~3——-
fluorethan '	48,06	-37,7	3
perfluordímethylamin	171,02	-37,0	' 10
perfluorpropan	188,02	-26,0	3
p e r f l uo re thy. 1 ami n	171,02 ..... -í:.....	-25,0	10
allen	40 ,'06	-34,5	1
cyklopropan	' 42,08	-22,7	1
trifluormethylperoxid	170.,01	-32,0	11
hexafluorazomethan	166,03	-21,6	11
nitrotrifluormethan	115,01	-21,1	3
chloracetylen	60,48,	-20,0	3
dichlordifluormethan	120,91	-29,8	3
perfluorpropylen	150,02	-29,4	3
hexafluoraceton	166,02	-23,0	3
1,1,2,2-tetrafluorethan	102,03	-27,0	3
1,1,1,2-tetrafluorethan	102,03	-25,5	3 ·
1-chlor-l,2,2-trifluorethylen	116,47	-25,2	3
chlortrifluorethylen	116,47	-25,2	3
methylether	46,07	-25,0	6

chemická skuoina

chemický název molekulová teplota hmotnost varu

1,1-difluorethan	66,05*	-24,7	3
perfluor-2-butin	162,03	-24,6	3
1-chlor-l-fluorethylen	• 80,5	-24,0	3
propin	40,06	-23,2	1
jodtrifluormethan	195,91 »	-22,5	3
trifluormethylsulfid	170,07	-22,2	11
trifluormethansulfony1fluorid	152,06	-21,7	3
3,3,3-trifluorpropen	96,05	-21,0	3
1,1, 1,3,3-pentafluorpropen	132,04	-21,0 '	3
(pentafluorthio)trifluormethan	196,06'	-20,0	3
1,1,2,2-tetrafluorethan	102,04	-19,7	3
2-chlor-l,1-difluorethylen	98,5	-17,7	3
2-H-heptafluorpropan	170,03	-15,0	3
1,1,1-trifluorpropan	98,07	-13,0	3
bromdif luornitrosome.than	159,92	-12,0 _ - '	. 3
nitrilmethyl	61,04	-12,0	11
heptanfluor-l-nitrosopropan	199,03	-12,0	3
2-chlor-1,1,1,2-tetrafluorethan	136,48	-12,0	3
isobutan	58,12 .	-11,5	1
1-chlor-l,1,2,2-tetrafluorethan	136,48	-10,0	3,-
2-f luorpropan	62,09	-10,0	.3
chlorfluormethan	68,48	-9,1	3
isobutylen	56,11	-6,9 .	1
hexafluordimethylamin ·	153,03	-6,7	10
1-buten	56,11	-6,3	1
_frnitrosylchlorid	65,47	-5,5	11
1,3-butadien	54,09	-4,4	1
oktafluorcyklobutan	200,03	-4,0 .	3
3-fluorpropylen	60,07	-3,0	3
dimethyloxoniumchlorid	82,53	—2,0	3
2-chlorheptafluorpropan	204,47	-2,0	3
1,1,1,2,2,3-hexafluorpropan	152,04	-1,4	3
1,1,1,3,3,3-hexafluorpropan	152,05	-1,1	3

chemický název molekulová teplota chemická hmotnost varu skupina

trifluormethansulfenylchlorid	136,52	-0,7	3
n-butan’' -	58,1.2. .	-0,5	..¹
2,2-difluorpropan	80,08	-0,4	3
2-chlor-l,1-difluorethan	100	-o,i	3
nitropentanfluořethan	165,02	0,0	3
perfluor-2-buten	200-,03	0,0	3
isopropylácetylen	68	0,0	1
2-buten (trans)	56,11	0,9	1
4-methyl-lj2-benzanthraceň	242,32	1,0	2
1,1,1,2,2,3-hexafluorpropan	152,04	1,2	3'
oktafluor-2-buten	200,04	1,2	3
azomethan	58,08	1,5	11
kyselina tetrachlorftalová	303,91	2,0	3
- trimethylamin-— ~------	59.,11..	-2,9, „„	10
perfluorcyklobuteň	-1-62-,03 -	----3·,Ό—— -	—^3——
3,3,4,4,4 pentafluor-l-buten	146	3,0	, 3
1,2-dichlor-l,1,2,2-tetrafluor-
ethan	170,92	3,0	3
1,1-dichlor-l,2,2,2-tetrafluor-	'170, '92
ethan	3,o	3'.......
2-buten (cis)	56,11	3,7-	1
1,2-dichlortetrafluorethan	170,92	3,8	3
dekaf1uorb u t an	2.38.,03	4,0	3
methylcyklopropan	56,11	4,0	1
dichlortrifluorethan	152	<0	3
bromacetylen	104,93	4,7	3 1»
perfluor-l-buten	200,03	4,3	3
pentachlorbenzoylchlorid	312,79	5,0	3
1,1,2-trifluorethan	84,04	5,0 '	3
vinyláce tylen	52,08	'. 5,1	1
hexaf luor-1 ,'3-butadien	162,03	6,0	3
2-trifluormethylpropen	110,08	6,0	3

chemický název	molekulová hmotnost	teplota varu	chemická skupina
methanthíol	48,1	6,2	11
1,1,1,2,3,3-hexafluorpropan	152,04	6,5	3
oxid uhelnatý	68,03	6,8	11
2-chlor-l,1,1-trifluonethan	118,49	6,9	3
fulven	78,11	7,0	11
dimethylamin	45,08	7,4	10
2-chlor-l,3-difluorpropan	114,51	8,0	3
1-butin	54,09	8,1	•1
dichlorfluormethan	102,92	9,0	3
neopentan	72,15	9,5	1
l-chlor-2-fluorethylen	80,5	10,0	3
butadiyn	50,06	10,3	1
1 ,.2-butadien	54,09	10,8'	1
ethylmethylether	60,1	10,8	6
2-fluor-l, 3-butadierr	72,08	.12,0 __
krotonnitril	67,09	12,0	11 .
cyklobutan	56,11	12,0	1
1,2-epoxyisobutan	106,55	12,0	3
methy1vinyLe ther	58,08 .	12,0	6
1-bromheptafluorpropan	248,9	12,0	3
diopentafluorethan	245,9	12,0	3 '
2-(trifluormethyl)-1,1,1,3,3,3-hexafluorpropan	211	12,03
chlorethan	64.,51	12,3	3
1,1,1-trif luordiazoethan.	110,04	13,0	3
3-methyl-2-buten	68	14,0	1
disilanmethan'	76,25	14’, 7	11
ethylnitrit	75,07	16, Ό	11
ethylamin	45,08	16,6	10 ·
hexafluorid wolfram	298	17,5	11
2,3-dimethyl-2-norborbab	140,23	19,0	11
1,1-dichlor-2,2-difluorethylen	133	19,0	3
bromfluormethan	112,93	19,0	3

chemický název	molekulová	teplota	chemická
	hmotnost	varu	skupina
3-methyl-l-buten	70,13	20,0	1
trimethylbor	55,91	20,0	. .11
Fluorinert, FC-87 (3M)	neuvedeno	20,0	3
1,1-dimethylcyklopropan	70,13	20,6	1
acetyldehyd	44,05	20,8	7
fluoridacetyl	62,04.	20,8	Q
dimethylmethoxybor	71,19	21,0 '	. 11'
1,2-dichlor-l,2-difluorethylen	132,92	21,1	o
dichlordifluorethylen	132,92	21,1	3
difluorjodmethan	177,92	21,6	3'
diacetylen	50,08	22,0 '	1
2-chlorpropylen	76,53	22,6	3
Carvone- (d)	150,22	23,0	11
trichlorf luormethan - -........	137,37 - —	23 „7. .	3
4-methyl-l,3-dioxoían	102 -.Or“”*--	-24₇2-------	~-i——~~
dibromúifluormethan	209,82	24,5	3
4-amino—4-m.ethyl-2-pentanon	115,18	25,0	10
chlordifiuornitromethan	131,47	25,0	•5 •^1
heptafluor-1-nitropropan	215,03	25,0	3 .
3-chlorcyklopenten	102,56	25,Ó	3
1,4-pentadien	68,12	26,0	1
1,5-hept.adiyn	92,14	26,0	1
4-f eny 1( trans.) 3-buten-2-on	146,19	2.6 ,0	2
1,1,2,2,3-péntafluorpropan	134,06	26,0	3
2-butin	54,09	27,0	1
2 2-dichlor-l, 1,1-trifluorethan	152,9	27,0	. 3
oktafluorcyklopenten	211,05	27,0	3
l-nonen-3-in	122,21	27,0	1
2-methylbutan	72,15	27,8	1
1,2-dichlortrifluorethan	152,9	28,0	3
difluormethy1-2,2,2-trifluor-
ethylether	150,05	28,0	* . 3
1,2-dimethylcyklopropan
(trans, 1)	70,13	28,0	1

chemický název	molekulová hmotnost	teplota varu	chemická skupina
vinylether	70	28,0	6
1,2-dimethylcyklopropan
(trans, dl)	70,13	29,0	*1 '
2,4-diaminotoluen	122,17	29,0	* 2
perfluor-l-periten	250,04	29,0	3
3-methyl-l-butin	68,12	29,5	1
1-penten	70,13	30,0	1
3,3,4,4,5,5,5-heptafluór-
-1-penten	196	30,0	3
jodtrifluorethylen	207,9	30,0	3
3-fluorstyren	122,,14	30,0	11
3-brom-1-penten	149,03	30,5	3
perfluorpentan	288,04 ·	30,5	3
1,2-difluorethan	66,05	30,7	3
3-methyl-l,1,1-trifluorbutan	126,12	31,0	______3 __
2-methy1-1-buten	70, L3	31,2	1
methylester kyseliny mravenčí	60,05	31,5	9
trifluormethansulfonylehlorid	168,52	31,6	3
1,1-dichlor-l-fluorethan	116,95	32,0	3
1-fluorpentan	90,14	32,0	'3
dijodacetylen	277,83	32,0	3 ,
2-aminopropan	59,11	32,4	10
1-fluorbutan	76,11	32,5	- 3
methy1 isopropy1ether	74,12	32,5	^?6
1-chlorpropylen	76,53	32,8	3
2-brombutylaldehyd	151	33,0	3
2-chlor-l,1,1,4,4,4-hexafluor-
-2-buten ¹	198,5	33,0	3
1,2,3-trichlor-l,3-butadien	157,43	33,0	3
2-chlor-l,1,1,4,4,4-hexafluor-
buten	199	33,0	3
bis-(dimethylfosfin)amin	137,1	33,5	10
2-methyl-l,3-butadien	68,12 . .	34,0	1

chemický název

2-methyl-4-buten-3-in isopren' chlordinitromethan r

1.2- epoxypropan ethvlcyklopropan

I* L ethylether hexafluordimethýldisulfid

1.2- dichlor-l-fluorethylen

1.2- dichlorhexafluorpropan ethylvinylether 2-chlorpropan bromchlorfluormethan

2,3,5-trimethylpiperidin kyseliny '2-hyďroxy-l·-,2,3-·· -nonadekantrikarboxylové dimethylethylamin n-pentan

2-pen,ten (trans) me t hy1cyklobu tan e thýlmethylamin

2-penten (cis)

1.2- di'methylcyklopropan (cis)

1.1- dichloretnylen

1-chlorpropylen (trans)

1.1- dichlor-2-fluorethylen dichlormethan jodmethan.

1.1- dichiorethan

molekulová hmotnost	teplota varu	chemická skupina
66,1	34.0	1
68,-1-2	34,0	.. 1
140,48	34,0	3
58,08	34,3	. 6 '
70,13	34,5	1
74,12	34,5 ,	.6
202 ,13'	34,6	11
115	35,0	3
220,93	35,0 '	3.. ,
72,11	35,0	6
78,54	35,7	' 3
147,37	36,0	3
127,23	36,0	11 '

500,7'2-------3-6-ϊ-Θ— ------⁹' ------

73,14	36,0	1.0
' 72,15'	36,1	1
70,13	36,3	1
70,13	36,3	1 -1
59,11	36,7” '	-10 - -.....
70,13	36,9	1
70,13	37,0	1
96.,.9.4	37,0	3
76,53	37,4	3
114,93	37,5	3
84,93	40,0	3
141,94.	42·, 4'	3
98	57,3	3

j

Označení chemických skupin:

alifatické uhlovodíky a/nebo jejich deriváty.

aromatické uhlovodíky a/nebo jejich deriváty organické halogenidy a/nebó jejich deriváty ethery a/nebo jejich deriváty aldehydy a/nebo jejich deriváty karboxylové kyseliny a/nebo jejich deriváty aminy a/nebo jejich deriváty různé.

Příklad 46

Dispergovanou fázi je možno vybírat také z azeotropních směsí na základě principů a hledisek, uvedených v příkladu 45. Dále budou uvedeny některé binární azeotropní směsi a jejich teploty varu:

% acetonu a 79 % pentanu, 32°C, 48 % ethyletheru a 52 % isoprenu, 33 °C, 44 % ethyletheru a 56 % methylmravenčanu, 28 °C , 98,8 % ethyletheru a 1,2 % vody, 34 °C, % isoprenu; a 14 % 2-methyl-2-butanu, 34 °C, 99 % isopropylchloridu a 1 % vody, 35 °C, 99,1 % methylvinylchloridu a 0,9 % vody, 33 °C, 98,6 % pentanu a 1,4 % vody, 34 °C a

98,5 % vinylethyletheru a 1,5 % vody, 34 °C.

Dále budou uvedeny ještě některé ternární azeotropní směsi a jejich teploty varu:

7,6 % acetonu, 92 % isprenu a 0,4 % vody, 32 °C, směs sirouhlíku, methanolu a methylacetátu, 37 °C, 55 % sirouhlíku, 7 % methanolu a 38 % methylalu, 35 °C.

Příklad 47 ' Koloidní disperze podle vynálezu se odlišují od známých emulzí ,· užívaných pro zobrazování ultrazvukem v tom smyslu, že alespoň podíl dispergované fáze se vyskytuje v plynné formě nebo se odpaří po podání do organismu. Přítomnost dispergovaného materiálu se zřetelným rozhraním mezi >

kapalinou a plynem způsobuje silný odraz zvukových vln.

Zkouškou na přítomnost emulze s dispergovanou plynnou fází je odpověď na odraz ultrazvukových vln disperzí při změně tlaku. Pravé kapalné disperze nejsou na působení tlaku citlivé, avšak u koloidních disperzí s obsahem plynu dojde k poklesu.odrazu zvukových vln při zvýšení tlaku vzhledem ke stlačení plynné fáze a zmenšení' plochy, na níž může dojít k-účinnému-odrazu. , _____

Při použití pokusného systému z příkladu 1 byl.y^prcvedeny zkoušky na odraz zvukových vln-v uzavřené nádobě' při použití akustického okénka. Pak byl' v systému zvýšen tlak a znovu byl zaznamenán odraz akustických vln. Vzhledem k tomu, že se tento odraz významným’ způsobem· změnil -po - zv.ýšení tlaku systému, je možno uzavřít, že určitý podíl dispergované fáze se nachází v plynném stavu.

Příklad 48

Prostředek podle vynálezu je možno připravit kondenzací dispergované fáze z plynného stavu při použití následujícího zařízení a postupu. Ze zařízení se užije mikro- \ fluičizační zařízení, model 110Y, interakční tlaková komora při tlaku 84 MPa, tlakové nádoby z oceli 316 s objemem 5 litrů a 12 litrů·, filtry z acetátu celulosy s otvory 0,22 mikrometrů a držáky filtrů 142 mm.

Byly připraveny následující roztoky: 10 litrů 36%. iohexolu, 2,5 litrů roztoku s obsahem 41,75 g Pluronic_tP-123 a 41,75 g Zonyl FSO, roztok se zpracuje ultrazvukem k dosažení úplného rozpuštění, získá se zásadní roztok smáčedla. Pak se mikroflUidizační zařízení propláchne roztokem iohexolu a zchladí na -6 °C. Interakční tlaková komora, potrubí a chladicí spirála jsou v průběhu kondenzace překryty drceným ledem. Do tlakové nádoby s objemem 5 litrů a s míchadlem v ledové lázni se přidá 1800 ml zásobního roztoku smáčedla. Na tlakovou komoru se napojí nádrž s propanem (teplota'varu -45 °C) pomocí plynotěsného příslušenství a do komory se přivede 200 g propanu. Tlaková nádoba se uvede na tlak dusíku 0,07 MPa a na tomto tlaku se udržuje za míchání 45 minut. Pak se suspenze nechá 30 minut procházet , . mikrofluidizačním zařízením při tlaku 35 MPa a pak 60 minut při tlaku 84 MPa. Pak se emulze přenese do nádoby s obsahem 8 litrů vody s teplotou,4 °C, směs se důkladně promíchá a

-------- —-pak--se- -přene-se~za--pos--it-i-vn-í-h.O -tl-a-ku-do-nádobek-s- Objemem'100 ml, materiál se v průběhu postupu zfiltruje přes filtr s prů měrem otvorů 0,22 mikrometrů. Nádobky se opatří uzávěrem a uzavřou.

Další emulze, obsahující jiný materiál s nízkou teplotou- varu z příkladu 45 je možno připravit obdobným způsobem tak, že se mění povaha .dispergované fáze, přičemž je nutno ·* dbát toho, aby bylo použito dostatečného tlaku a dostatečné teploty pro zkapalnění materiálu v dispergované fázi.

Příklad 49

Dispergovaná fáze může'být obecně tvořena jakoukoliv chemickou látkou, jejíž teplota varu je při běžných tlakových podmínkách nižší než tělesná teplota organismu, jemuž má být prostředek podáván' a který pak má být podroben vyšetření ultrazvukem. V příkladu 45 je podrobně rozebráno-, jakým způsobem je možno volit vhodné chemické látky pro . dispergovanou fázi na bázi teplotního rozmezí, přičemž je nutno brát v úvahu teplotu varu zvolené chemické látky á podmínky při výrobě.

Jakmile bylo stanoveno, že teplota varu má být při běžných tlakových podmínkách.s výhodou nižší než 37-⁰C, bylo prokázáno, že je možno podrobit chemické látky selekci také na bázi celkového počtu přítomných atomů vzhledem k tomu, že i tento postup vede k výběru materiálů, vhodných pro použití jako kontrastní látky při vyšetření ultrazvukem, V následující tabulce bude uveden seznam vhodných chemických látek., které jsou v tomto případě seřazeny podle celkového počtu přítomných atomů. Je zřejmé, že výhodné chemické lát~ ky_obs_ahují__celkem 4 až 17_3Λο^ύ^_ _ - '

název	počet atomů	molekulový’ molekulová teplot
vzorec	hmotnost	varu
bromme-than--	. . 4 . .	- .CH₃.B.r.......	. ..94,.94	_ 3,2 .
bromdifluormethan	5	CHBrF₂	130,92	-14,15
chlorfluormethan	5	CHpCIF	68,48	-.9,15
bromtrideuteriomethan	5	CD₃Br	12	2,8 * '
propandiendion	5'	^C3°2	68,03	* 6,8
dichlorfluormethan	5	CHC1₂F	102,92	8,9
methanselenol	5	CH^Se	95	12
difluorjodmethan	5	CHF₂I	177,92	2.1,6
dibromdifluormethan	5	CBr_?F_?	209,82	22,79
tríchlorfluormethan	5	'^CC1.3^F	137,7	23,65
bromchlorfluormethan	5	CHBrClF	147,37	36,11
2-chlor-l,1-difluorethen	, 6	C_?HC1F_? .	98,48	-18,6
trifluormethanselenol	6	CHF₃Se	148,97	-14,5
chlorethen	6	^C2^H3^C1	62,5	-13,9

název	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnost	teplota varu
oxalylfluorid	6	^C2^F2°2	94,02	-2,7
formamid	6	CH NO	45,04	2,18
2-brom-l,1-difluorethen	6	CpHSrFp	142,93	5,7
methanthiol	6	CH₄S	48,1 '	5,9
butadiyn	6	^C4^H2	50,06	9
bromethen	6	C₂H₃ ^Br	106,95	15,6
1,l-dichlor-2,2-difluor-	-
ethen	6	^c2^cl2^Fa	132,92	18,9
trans-l-brom-2-fluor-
ethylen	' 6	CpHpBrF	124,94 '	19,8
brommethan	4	CH^Br	94,94	3,2
1,l-dichlor-2,2-difluor-
ethen	6	^C2^C12^F2	132,92	20
1,1-čichlorethen	6	^C2^H2^C12	96,94	31,8
trans.1,2-dichlorfluor-
-e.th.ylen. . - - --------	6- -	C-_?HC-1_TF-------	- -1-14,-9-3--	37--------
cis dichlorfluorethylen	6	CpHClpF	114,93	37
1,l-dichlor-2-fluorethen	6	CpHCl^F	114,93	37
methyldifluoramin	7	ch₃f₂n	67,02	-16 ¹
methylester kyseliny
difluorfosforečné	7	ch₃f₂op	100	-15,5
methylamin	7	CH_cN . 5	31,06	-6,5
dichlormethylboran	7	CH₃3C1_?	96,75	11,5
tetrachlor-1,2-difluor-
ethan	8	^C2^C1d^F2	203,83	-37,5
1,1,2-třichlorethan	8	^C2^H3^C13	133,4	-24
1,1,1,2-tetrachlorethan	8	^C2^H2^C14	167,85	-16,3
1-chlor-l,1-difluorethan	8	c₂h₃oif₂	100,5	-9,8
1,2-dibrom-l, l-dichlo-r-
e than	8	CpH^BrpClp	256,75	1,78
1,1-dichlo.rtetrafluorethan 8	^C2^C12^F4	170,92	3
1,1,2-trifluorethan	8	^C2^H3^F3	84,04	3
1,2-dichlortetrafluor-
ethan	8	^C2^C12F-₄	170,92	3,5

název	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnost	teplota varu
tetrafluor-(methylmethyl	-
amin)	8	C HF N	115,03	5
butenin	8	‘Λ	52, 03	5,11
2-chlor-l,1,l-trifluor-
ethan	8	C_?H_?C1F^	118,43	6
fluorkarbonyltrifluor-
methylsulfan	8	c₂f₄°s	148,03	. 8
chlormethylsilan	8	CH^lSi	80,89 -	8
1,2-difluorethan	8-	^C2^H4^F2	66,05	10
chlorethan	8	C D Cl	64,51	12
pentanfluorjodethan	8		245,92	12,5
2-diazo-l,1,l-trifluor-
i ethan	8	C_?HF.^N_?	110,04	13
1-chlor-l-fluorethan	8	C₂H₄C1F	82,21	16
1,1,2-tetrachlorethan	8	^C2^H2^CL4	’ 167,55	16,3
1,1,2-trichlorethan	8	^C2^H3^C13	133,4	24
2-brom-l,1,1-trifluorethan 8	^C2^H2^BrF3	162,94	25
chlormethyltrifluorsilan	8	CH_pClF_?SÍ ·	134,56	25 ^:
1,2-difluorethan	8	^C2^H4^F2 '	66,05	30,7
2-chlor-l,1-difluorethan	8	^C2^H3^C1F2	100,05	35,1
tetrachlor-1,2-difluor-
ethan	8	^C2^C14^F2	203,53	37,5
brompentadeuterioethan	8	C₂BrD₅	114	38
dimethylsilan	9	C₂H_aSi	60,1	-20
pentafluorcyklopropan	9	^C3^HF5	132,03	-9
difluormethy1trifluor-	-
methylsulfid	9	C„HFS 2 5	152,18	0,8
1,1,2,3,3-pentafluorpropan 9	^C3^HF5	132,13	1,8
chlorpentafluorcyklo-
p ropan	9	^C3^C1F5	166,43	Q
germylacetylen	9	C₂H₄Ge	100,54	3,85
trans-1,1,2,3-tetrafluor	-
cyklopropan '	9	^C3^H2^F4	114,14	6

název	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnost	teplo- varu
2-chlorpentafluorpropen-	9	^C3^C1F5	166,48	6,7
3-chlorpentaf-luorpropen·	.9	^C3^Clí5 -	166,48	7,3
1-chlorpentafluorpropen	9	C^CIF^	166,48	8
fluormethylmethy1ether	9	^C2^H5^F0	64,06	19
brompentafluorcyklopropan 9	C₃8rF₅	210,93	20,5
vinylox.yacetylen	9	^C4^H4°	68,08	22
'-2-chlorpropen	9	^C3^H5^C1	76,5-3	22,6.,

cis-trans-l-chlor-1,2,2,3-

-tetrafluorcyklopropan	9 C₃HC1F₄	148,49	24,5
3-brompentaluorpropeh	9 C_o3rF_ 3 5	210,93	26,5

2,2-dichlor-l,1,1-trifluor-

ethan	9	c₂hci₃f₃	152,93	27
furan	9	^C4^H4°	68,08	31
1-chiorpropen	9.	^C3^H5^qi	76,53	32,1
2-chlo rv iny11 ri f luo r s idran'	9	C * H C Ί.	> -i— -1.46-,.5.7-	33
cis-1,1,2,3-tetrafluor-		2 2 3	f	T
c.yklopropan	9	^C3^H2^E4	114,04	34
3-brom-l., 1,3-tetraf luor-
propen	9	C₃HBrF₄	192,94	34
ethanthiol	9	C_oH_cSi 2 6	62,13	35
dimethylsulfid	9	C-H_S 2 6	62,13	36
(chlorfluormethy1)tri-
fluormethylsulfid	9	C_OHC1F„S	168,54	37
1-terc.chlorpropan	9	c₃H₅ ^cl	76,53	37J2
buta-1,3-dien	10	^C4^H6	54,09	-4,6
1,5-dikar’oaclostriboran	10	c₂h₅b₃	61,49	-3,7
omega-nitrosoperfluorpro-,
pionnitril	10	c₃f₄n₂0	155,04	2
pentafluorpropionaldehyd	10	^C3^HF5°	148,03	2
1,1-difluorouta-1,3-dien	10 ·,	^C4^H4^F2	90,07	3,5
methy1viny1ether	10	^C3^H6°	58,08	5
hexafluorbuta-1,3-dien	10	^C4^F6	162,03	5,8
but-l-in	10	^C4^H6	54,09	7,9

název	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnnost	teplota varu
1-deutero-l-butan	10	^C4^H5°	55,1	8
methylencyklopropan	10	^C4^H6	54,09	8,8
buta-1,2-dien	10	^C4^H6	54,09	10,84
2-fluorbuta-1,3-dien	10	^C4^H5^F	72,08	11,5
ΙΗ-pentafluor-but-l-yn	10	^C4*^F5	144,04	12
pentafluoraceton	10	C-HFr-0 3 5	148,03	13,5
difluoraminoethan	10 C	^:2^H5^F2^N	81,07	14,9
tetra-B-fluor-B,B'-
-ethendiy1-bis-boran	10 C	^:2^H2³2^F4	123,55	15
cis-l-fluor-1,3-butaóien	10	^C4^H5^F	72,08	15,6
trans-l-fluor-1,3-butadienlO	^C4«5^F	72,08	16
e thylamin	10	c w i\f 27	45,08	16,5'
dimethylfosfln	10	C w p ^Ό27	62 ,'05	20
N-methy1iminothiotetra-
fluorid	10	CH F_dNS	137,1	21,8
methylthiopentáfluorid	10	ch₃f₅s	142,09	' 26
but-2-in	10	^CA	54,09	26,97
brompentafluoraceton	10	C„3rF_c0	226,93	31
bromóimethylboran	10	C ~ π _c 3 Β P 2 o	120,78	31,75
l-chlor-2,3,3,4-penta-
fluorcyklobuten	10	^C4^C1F5	178,49	33
bis—trifluormethaldisulfič	1 10	^C2^F6^S2	202,13	·' 34
(±)(1)1,2-epoxypropan	10	^C3^H6°	58,08	34,23
ethylsilan	11	^c2-n₈Sl·	60,17	-14
1,1,1-trifluorpropan	11	0 P F 35 3	98,07	-13
2-fluorpropan	11	c₃h₇f	52,09	’ -11
perfluormethoxyacetyl-
fluorid	11	^C3^F5°2	182,02	-9,7
ethy1trifluorsilan	11	C_?H_c.F₃Sí	114,14	-4,4
1-fluorpropan	11	^C3^H7^F	62,09	-3
2,2-difluorpropan	11	^C3^H6^F2	80,08	-0,6
1,1,1,3,3,3-hexafluor-
propan	11	^E3^H2^F6	152,04	-0,5

název	počet	molekulový	molekulová	teplo'
,	atomů	vzorec	hmotnost	varu
perfíuorcyklobutanon	11	^C4^F6°	178,03	1
1,1,1,2,2 ,.3-hexaf.luor-:. .
propan	1.1	^C3^H2^F6	152,04	1,2
2-chlorheptafluorpropan	11	^C3^C1F7	204,47	2,2
dideuteriodimethylgerman	11	C₂ ^H5D₂Ge	105,69	6,5
1,1-difluorpropan	11	Ws	80,08	7
ethyltrideuteriogerrnan	1:1 . - .	^C2«5^D3^0e	107-,69 '	11,3 ·
disilanylmethan¹	11	^CH8^S12	76,25	14
1-chlor-l,1,2,2-tetrafluor-
propan	11	^C3^H3^C1F4	150,5	19,93
trifluorosilydimethylamin	11	C,H_cF_NSi 2 b o	129,16	21
ethylidenmethylamin ₍	, 11	,^C3^H7^N	57,1	27,5
didilanylmethan	11	ch₃sí₂	76,25	28
divinylether ...	,11	^C4^H6°	70,09	28
1“, 1,1,3‘- tetraf-l-uorp-ropan—	-1-1	•W₄—	1.1.6.,.0.6	2.9_, 4
l-sila-3-germapropan	n	CH_aGeSI O	120,75	30
2-chlor-l,1,1-trifluor-
propan	11	c₃k₄cif₃	132,51	30
2-methylbut-l-en-3-in	11	^C5^K6	66,1	32
bis-trifluorsilyldichlor-
methan	11	Cd₂F₆Si₂	253,08	34
1,2-dichlorhexafluor-
propan	11	^C3^C12^F6	220,93	34,8
2-chlorpropan	11	c₃ ^h7ci	78,54	34,8
ethylvinylether	11	W	. 72,11	³⁵
3-methylenoxetan	11	^C4^H6°	70,09	35
2-chlor-2-fLuorpropan	11	dh’ C1F 3 6	, 86,53	35,2
bis-trifluorsilylmethan	11	^CHA^Si?	184,19	35,5
ch1ordímethyIsilan	11	C₂H₇G1Sí	94,62.	35,7
1,3-díchlorhexafluorpropan 11	^C3^C12^F6	220,93	36,-1
bis-trifluorsilylchlor-
methan	. 11	CHClF,Si„ 6 2	218,63	37
heptafluor-l-nitrosopropan 12	c₃F₇N0	199,03	-9,5

název	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnost	teplo varu
1,1,2,2,3-pentafluor-3-
-trifluormethylcyklo-
propan	12	^C4^F8	200,03	-9
2-methylpropen	12	^C4^H8	56,11	-6,9
oktafluorcyklobutan	12 .	^C4^F8	200,03	-6,42
but-l-en	12	•^C4^H8	56,11	-5,3
1,1,2,2-tetrafluor-2-
-trifluormethoxyethan	12	^C3^HF7°	136,03	-2
cis-oktafluorbuten-(2)-
-methylcyklopropan	12	^C4^H8	'56,11	0,7
but-2-terc.en	12	^C4^H8	56,11	0,88
buten-(2)	12	^C4^H8	56,11	1 '
heptafluorbutyronitril	12	^C4^F7^N	195,04	1
oktafluor-but-2-en	12	^C4^F8	200,33	1,2
1,1-difluor-but-l-en	12	^C4^H6^F2	92,09	3,71
but-2-en	12	^C4^H8	56,11	3,72
oktafluor-but-l-en	12	^4^F8	200,33	4,8
1,1,1,4,4,4-hexafluor-
-2-buten ' b	12	^C4^H2^F6	164,35	5,4
trifluormethyiethy1ether	12	^C3^H5^F3°	114,37	5,5
2H,3K-hexafluor-but-2-en	12	4 2 6	164,35	6
3,3,3-trifluor-2-methyl-
propen	12	^C4^H5^F3	110,38	6
ethyImethy1ether	12	^C3^H8°	60,1	6,6
2H-heptafluorbuten-(1)	12	c₄hf₇	182,34	10
cykLobutan	12	^C4^H8	56,11	12
pentafluor-2-methy1propen	12	^C4^H3^F5	146,06	12,8
methy1vinyIsilan	12	^C3^H8^S1	72,18	13,7
1,1,1-trifluor-but-2-en	12	^C4^H5^F3	110,38	20
allyltrifluorsilan	12	^C3^H5^F3^SÍ	126,15	21
1,1,2-trifluor-2-trifluor-
methylcyklopropan	12	^C4^H2^F6	164,05	21,5

název	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnost	teplota varu
1,1 ,-2-trif luor-l-chlor-2-
,-tr.if luo rmet ho xy ethan.....	12	?3^HC1F6°- -	202,48	23 .. . ··- . ·,.
heptafluorpropan-l-thiol	12	^C3^HF7^S	202,9	23,7
(2-brom-l,1,2,2-tetra-
fluorethyl)trifluor-
methylether	12	C^Brr?0		24
cyklopropylsiian	A 12	C₃HgSi	72,18	.26,8.....,...
3,3-difiuor-2-methylproper	i 12	^C4^H6^F2	92,09	28,1
•1,1,2,2-tetraf luore thy ldi-
fluormethylether	12	^C3^H2^F6°	168,04	.28,5

2,2,2-trifluorethyldifluor-

methylether 1,1,1-trifluor-2-methoxy-	12	^C3.W	150,05	29
ethan	12	c_Af₃o _	114,.07	31
-2 - e-h-l-o-r he o-t a-f 1-uo-r —bu-t-
-2-en	12	^C4^C1F7	216,49	32,2
pentafluornitroaceton	12	^C3^F5^N03	193,03	32,6
2H,3H-hexafluor-but-2-en	12	^C4^H2^F6	164,05	33,2
2-chlor-3H-hexafluor-
-but-2-en	12	^C4^HC1F6 -	198,5	34-,4
tetra-B-fluor-B,B -ethan-
diyl-bis-boran	12	c₂h₄b₂f₄	125,67	. 35
ethyltrifluormethy1sulfid	12	C^F^S G J	130,13	35

methyl-(1,1,2,2-tetrafouor-

ethyl)ether	12	^C3^H4^F4°	132,06	36,5
(chlordif luorimethyl)-( 2 ,	2,2-
-trifluorethyl)ether	12	c₃h₂cif₅o	.184,49	37
1,1,2-trifluor-1,2-di-
chlor-2-trifluormethoxy-
ethan	12	^C3^C12^F6°	236,93	37
l-nitroso-2-trifluor-
methoxyzetrafluorethan	13	^C3^F7^N02	215,03	-10
nonafluor-2-azabutan	13	^C3^F9^N	221,03	-3,8
	. . — φ.		φφ.φΗ» ......

název	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnost	teplot; varu
trimethylamin	13	C3H9N	59,11	3,5
3,3-dimethylcyklopropen	13	^C5^H8	58,12	18
penta-1,4-dien	13	^C5^H8	58,12	24
3-methylbut-l-i'n	13	^C5^H8	68,12	26
3-methylcyklobuten	13	^C5^H8	68,12	27,5
trifluormethanazo-2,2,2- *
-trifluorethan	13	^C9^H2^FA^N2	180,05	28
2-methylbuta-l,3-dien	13	^C5^H8	58,12	30
alfa-nitrosoperfluoriso-
butyronitril	13	^C4^F6^N2° '	206,05	31
isopropylamin	13	^C3^H9^N	59,11	31,7
2-methoxyperfluorpropen	13	^C4^H3^F5°	162,05	32 ' .
dimethylethinylsilan	13	W¹	84,19	32

1,1,2,2-tetradeuterospiro-

pentan	13	^C5^H4^D4	72,14	33
dimethoxy silan.	13	c₂h₈o₂sí	92,17	33,5
isopropenylmethylether	13	^C4^H8°	72,11	34
terč.butylsilan -	13	c₄Hi₂si	88,22	34,4
.spiropentan	13	“ ^C5^H8	68,12	35
3,4,4-trifluorisopren	13	^5^5^F3	122,09	35
1-methylcyklobuten	13	^C5^H8	68,12	' 37
2-methylpropáh	14	^C4^H10	58,12	'-13,3
dekafluorbutan	14	^C4^F10	238,03	-1,7
1-deuteriobutan	14	c₄h₉d .	59,13	-0,5
butan	14	^C4^H10		-0,5
pe rfluorethoxyacety1-		4
fluorid	14	‘^C4^F8°2	232,3	0
trlmethylsilan	14	^C3^H10^SÍ	74,2	6,7
trifluormethylpěntafluor-
-2-ixapropylketon	14	^C4^F8°2	232,03	8
2-fluor-2-methylpropan ·	14	W	76,11	11
pentaf luore thy Ite traf luor-
ethylidenamin	14	^C4^F9^N	233,04	12,8

název	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnost	teplo^- varu
2-trifluormethylpropan	14	^C4^H7^F3	112,09	13
perf luor-2-azapenten-( 2)	14	C₄ ^F9^N_______	233,04	13,2
fluortrimethy1silan	14	c₃h₉fsí	92,19	16
1,1,1-trifluorbutan	14	^cá^H7^F3	112,09	16,74
dimethylvínylboran	14	A₉b	67,93	17,1
tris-(trifluormethy1)-
germaniumfluorid	14-	^t-C3^F'10^Ge	298,61 -	'19 -, Ϊ
fluortrimethy1silan	14	C^HqFSi	92,19	20
propylsilan	14	c.₃ ^hi₀sí .	74,2.	21,3
1,1,1,3,3,3-hexafluor-2-
-methylpropan	14	^C4^H4^F6	166,07	21,5
2-f luorbutan.	14	^C4^H9^FF	76,11	24
1,1,1,4,4,4-hexafluor-
butan	14	C.H .F_ 4-4 6	166,07	24,5
m p-t.hnxy-hi rnp.thy-l-hn.ran	1 4	C_H_BO	71.91	24,6
trifluorpropylsilan	14	^G3^7^F3^G·''	128,17	25
deuteriotrimethylgerman	14	^C3^H9^DGe	119,71	26
trimethylgerman	14	^C3^H10^Ge	118,7	26
trimethy1hydroxylamin	14	c₃h₉N0	75,11'	3°
2,2-difluorbutan	14	^C4^H8^F2	94,1	30,92
1-fluorbutan	14	W	76,11	31
tris-(trifluormethyl)-
gérmaniumchlorid	14	C^ClFqGe	315,06	³⁷
nonafluor-l-nitrosobutan	15	C/₉N0	249,04	16
3-methylbut-l-en	15	^C5^H10	70,13	20
1,1-dimethylcyklopropan	15	^C5^H10	70,13	20
3-methylbut-l-en	15	^C5^H10	70,13	20
1,1-dimethylcyklopropan	15	^C5^H10	70,13	20,5
dekafluorcyklopentan	15	VlO	250,04	22,48
1,1,1,3,3,3-hexáfluor-2-
-ni t.roso-2-t rif luormethyl-	-15	c/₉no	. 249,04	24
propan
±-trans-l,2-dimethylcyklo-
propan	15	^C5^H10	70,13	28,2

	název ,	počet atomů	molekulový vzorec	molekulová hmotnost	teplota varu
		1,2-čLimethylcyklopropan -	15	^C5^H10	70,13	28,8
		pent-l-en	15	^CS^H10	70,13	29
		l-nitroso-4-monohydrookta-
		f luorbutan	15	c₄hf₈no'	231,05,	30
γ		(bis-trifluormethylamid)-
	kyseliny trifluoroctová	15	c₄f₉no	. 294,04	30
^Γ . .*.·		isopropylmethylether	15	^C4^H1O° ’	74,12	30,77
		2-methylbut-l-en	15	^C5^H10	70,13	30,95
		pérfluorpropylmethylether	15	^C4^H3^F7°	200,06	34
		diethylether	15	^C4^H10°	74,12	34,6
		ethylcyklopropan	15	^C5^HL0	70,13	35,8
		methylcyklobutan	15	Γ P □ “10	70,13	36
-	-	pent-2-en	15	^&5»W	70,13 -	36,15 “ ' -· -=·
		pent-2-en cis-1,2-dimethylcyklo-	15	^C5b0	70,13	36,55 -
		propan	15	^C5^H10	70,13	37,03
		2-methyl-but-2-en	15	^C5^H10 ·	70,13	3.7,2-· --L
		beta-nitrosononafluor-			- '
ft		diethylether ethylester kyseliny	16	^C4^F9^NO2	265,04	15
		dusité	16	c₂H N0₂	75,07	17,4
		perfluordiethylamin	16	^C4^FU^N	271,03	23', 9
		perfluor-2-azapentan	16	^C4^FU^N	271,03	24,3
		nitril kyseliny 4-methyl- pent-4-enkarboxylové	15	W	95,14 ·	30
u		butyldifluorboran	1 Λ . .k. 'w*	r u ·ργ 4^ilg^2	i nc o o . _L L/ j 5 C,	□ c
		ethyldimethylamin	16	^C4^K11^N	73,14	36,4
		3,3-dimethylbut-l-in	16	^C6^H10	82,15	37
		2,2-dimethylpropan (—) (S)-1-fluor-2-methyl-	17	^C5^H12	72,15	0,95
		butan	17	^C5^HH^F	90,14	14,1

název	počet atomů	molekulový cvzorec >	molekulová hmotnost	teplota varu
(-)(R)-2-chlorpentain	17	C-H,,C1 b 11	106,59	24,7
tetrámethylstannan	17	^C4^H12^Sn	178,83	26^J
2-methylbutan	Ϊ7 '	^CS^H12	72·; 1-5-· ---	-2-7-,-85. -

nonafluor-2-trifluormethyl-

butan tetrakis(trifluormethyl)-	17	^C4^F12	288,04	30,12
german	17	CJ₁₂Ge	384,61	31,7
pentan	17	^C5«12	72,15	36 '

Příklad 50

Ve výhodném provedení může být dispergovaná fáze tvořena jakoukoliv chemickou látkou, jejíž teplota varu je za běž-n-ý-e-h—t-L-a-k o-v-ý-ch —p.o.dmín.e.k_ nižší než teplota ,těla; organisrnu, jemuž má být prostředek podán a který pak má být vyšetřen pomocí ultrazvuku, V příkladu 45 je rozebráno, jak je- možno volit vhodné chemické látky pro dispergovanou fázi na bázi teplotního rozmezí, získaného v závislosti na teplotě varu zvolené chemické látky a na parametrech způsobu výroby.

'Teplota varu pentanu (dodekahydropentanu) a perfluorpentanu (dodekafluorpentanu) je 36 až 37 °C v prvním případě a 28 až 23 °C ve druhém případě. .Jde o velmi výhodné teplotní rozmezí pro chemické látky, které se při této teplotě mohou nacházet v dispergované fázi. Chemické látky s obsahem 5 atomů uhlíku a různého počtu atomů vodíku a fluoru budou mít teploty tání v rozmezí 28 a 37 °C a budou vytvářet vhodnou dispergovanou fázi. Dále uvedený seznam.vhodných chemických látek obsahuje některé chemické látky s obsahem 5 atomů uhlíku a různým počtem atomů vodíku a fluoru, jde tedy o látky, které je všechny možno vyjádřit obecným vzorcem

5.5- difluor-l,3-cyklopentadien, 1-fluor-3-methylencyklobutan, 2H-fluorinium, fluormethylencyklobutan, cyklobutylfluormethylen, 2-fluor-2,4-cyklopentadien-l-yl,

2H-fluoriniový ion (-1), (deloc-2,3,4,5,6)-2H-fluorinium, 6-fluoriniabicyklo(3.1.O)hexan, ' 6-fluoriniabicyklo(3.1.0)hex-2-en, vnitřní sůl ve formě hydroxidu, 1,3-pentadien-l-yl-5-ylidenfluor (2+), komplex 1,3-pentadienu a fluoru, fluoranium, 4-fluorcyklopentin, 3-('trif luormethy 1) cyklobuten,

1.1.2.2.3- ,3-hexafluorcyklopentan, . fluortricyklo( 1.1.1.01,3)pentan, ion (1-), fluorspiro(2,2-pentan- ion (-1), fluortricykloí1.1.1.01,3)pentan, 1,2-difluortranscyklopentan,

1,1-difluor-3-methylencyklobutan, 2-fluor-l,3-cyklopentadien, 1-fluór-1,3-cyklopentadien, 1,3-difluor-bicyklo(1.1.1)pentan,

1.2.3.4.5- pentafluor-1,3-cyklopentadien ve formě dimeru,

1,2,3,4-tetrafluor-1,3-cyklopentadien, 1,2,3,4,5-pentafluor-1,3-cyklopentadien, 1,2,3,3,4,5-hexafluorcyklopenten,

1.1.2.2.3- pentafluor-3-(trifluormethy1)cyklobutan, 3,3,4,4-tetrafíuor-l-meťhylcyklobuten, 1-fluor-1-methylcyklobutan,

2.2.3.3- tetrafluorbicyklo(2.1.0)pentan, 3,3-difluorcyklopenten, 5-fluor-1,3-cyklopentadien, 2-(difluormethylen)-1,1,3,3-tetrafluorcyklobutan, 1,1,2,2,4,4-hexafluorspiro(2.2)pentan, 1-fluor-bicyklo-(1,1,1)pentan, 4,4-difluorcyklopenten, (difluormethylen)cyklobutan, 1,1-difluor-2-methylencyklobutan, 1,1-difluorspiro(2.2)pentan, 1,1,3,3-tetrafluor-2-methylencyklobutan, 2-(difluormethylen)-1,1-difluorcyklobutan, 1,1,4,4-teťrafluorspiro(2.2)pentan,

1,1,bis(triflucrmethyl)cyklopropan, ‘ 1,1,2,2-tetrafluorspiro(2.2)pentan, (trifluormethyl)tricyklo(1.1.0.02.4)- .

butan, 1,4-difluorspiro(2.2)pentan, 1,2-difluorspiro(2.2)pentan, fluorspiro(2.2)pentan, i-(trifluormethyl)bicyklo(l.l.Dbutan, 1,2-difluorciscyklopentan, (1,1,2-trifluorethyl)cyklopropan, (1,1-difluorethyl)cyklopropan, (1,2,2-trifluorethyl)cyklopropan, (2,2-difluorethyl)cyklopropan, (2-fluorethyl·)cyklopropan, l-fluor-2,2-dimethvlcyklopropan, l-fluor-2,3-dimethylcis-cyklopropan, (trifluormethyl)cyklobutan, trimethylfluoriranium, 1-fluorcyklopentilium,

1,1-difluor-2-methy1-2-(trifluormethyl)cyklopropan,

1-f luor-2,3-dime thy l-{ 1 -alfa, '2al fa, 3'al'f á)'cyklopropan l-fluor-2,2-dimethyl-(talfa,2beta,3beta)cyklopropan, l-ethyl-2-fluorcyklopropan, l-ethyl-2-fluor-transcyklopropan, l-fluor-2,3-dimethyl-(lalfa,2alfa,3beta)cyklopropan,

Γ, 1,2-trifluor-2-(trifluormethyl)cyklobutan, l-(difluormethyl)-1-f luor-2-methyl-třanš-cýkró'própan, l-(difluormethyl)-l-fluor-2-methyl-ciscyklopropan, 1,1,2*2,3-pentafluor-3-methylcyklobutan, 1,1,2,3-tetrafluor-2-trifluormethyl )cyklobutan, (2-fluorethenyl)cyklopropan, (1-fluorethenyl)cyklopropan, 5,5-difluorbicyklo(2.1.0)pentán,

Γ,4,4-trifluor-3—methylencyklobuten, 2-ethinyl-l-difluorcyklopropan ve formě homopolymeru, 3-(difluormethylen)-1,1-difluorcyklobutan, 1,1,2-třif luoř-2-(trif luorvinyl) cyklopropan, 1,fluorcyklopenten, 2-ethyl-l, 1-dif luo.rcyklopropan, 3,3-dif luor-1-(pentaf luorethyl) cyklopropen., l-me.thyl-2-( trifluormethyl)ciscyklopropan, l-methyl-2-{trifluormethyl)transcyklopropan, 1-methylen-2-(trifluormethyl )cyklopropan, 1,1,2,2,3,3,4,5-oktafluorcyklopentan,

1-(dif luormethyl) -1-f luor-2-methyl-ciscyklopropan, l-( dif luormethyl )-1-fluor-2-methyl-transcyklopropan, 1,1,2,2,3,3,4oktafluorcyklopentan, dimer l,2,4,5,5-pentafluor-l,3-cyklopentadienu, dimer 1,2,3_, 5,5-pentaf luor-1,3-cyklopentadienu,

1,2,3,5,5-pentafluor-1,3-cyklopentadien, 1,2,4,5,5-pentafluorcyklopentadien, stereoisomer 1,2,3,4,5-pentafluorcyklopentanu, stereoisomer 1,1,2,3,4,5-hexafluorcyklopentanu, 3-fluor-l-methylcyklobuten,· 1/4,5,5-tetrafluorcyklopenten, 3,3,4,4-ťetrafluorcyklopenten, 3,3,4,4,5-pentafluorcyklopenten,

1, 4,4,5',-5-pentafluorcyklopenten, 1,3,3,4,4,5-hexafluorcyklo penten, (2,2,2-trifluorethyl)cyklopropan, 1,1,2,3,.3/4,5-heptafluorcyklopentan, 2,3,3-trif luor-l-( trif luormethyl ).cyklobuten, 1,2,3,3,4,5,5-heptafluorcyklopenten, 1,2,3,3,4,4,5-heptafluorcyklopenten, 3,3,4,4-tetrafluor-1-(trifluormethyl)87 cyklobuten, 1,3,3,4,4,5,5-heptafluorcyklopenten, 2-fluor-1,1-dimethyIcyklopropan, 1,1,2,2,3,4,5-heptafluorcyklopentan, 1,1,2,2-tetrafluor-3-(trifluormethy1)cyklobutan, fluorcyklopentan, 1,2,3,3,4,5-hexafluortranscyklopenten,

1,1-difluorcyklopentan, stereoisomer 1,1,2,3,3,4,5-heptafluorcyklopentanu, stereoisomer 1,1,2,3,3,4,5-heptafluorcyklopentanu, cis,cis-1,1,2,3,3,4,5-heptafluorcyklopentan,

1.3.3.4.5.5- hexafluorcyklopenten, cis-1,2,3,3,4,5-hexafluorcyklopenten, stereoisomer 1,1,2,3,4,5-hexafluorcyklopentanu, (2-alfa,3-alfa,4-beta,5-alfa)-1,1,2,3,4,5-hexafluorcyklopentan, stereoisomer 1,1,2,3,4,5-hexafluorcyklopentanu, 1,3,4,4,5,5-hexafluorcyklopenten, 3,3,4,4,5,5-hexafluorcyklopenten, 1,2,3,4,5-pentafluorcyklopenten, i 3,4,5,5-pentafluorcyklopenten, 1,1,2,2,3,3,4,5-oktaf luor- tt cyklopentan, 1,1,2,2,3,4,4,5-oktaf luorcyklopentan, 1,1,2,-3, S'

4.5- hexafluorcyklopentan, 2-ethenyl 1,1-difluorcyklopropan, ·'*

1, l-difluor-2,3-dimethyl'-transcyklopropan, 1,1-dif luor-2,3-dimethyl-ciscyklopropan, 1,1,2,2-tetrafluo.r-3-methylen- ' cyklobutan, 1,1,2,2,3,4-hexafluor-3-(trifluormethyl)-cyklo- *í butan, nonafluorcyklopentan, 1,1,2,2-tetrafluor-3-methy 1? Γ cyklobutan, 1,2-bis(trifluormethyl)cyklopropan, 1,3,3,4,4-pentafluor-2-methylcyklobuten, 1,1-difluor-2,3-dimethylcyklopropan, 1-methyl-l-(trifluormethyl)cyklopropan, 1,1-difluor-2,2-dimethy1cyklopropan, 1,3,4,4,4-pentafluor-3(trifluormethyl)-l-butin, 1,1,2,3,4,5,5,5-oktafluor-1,3-pentadien, 1,2,3,3,4-pantafluor-4-(trifluormethyl)cyklo•I buten, 1,1,2,3,4,5,5,5-oktafluor-1,3-pentadien, oktafluorspiro(2,2)oentan, oktafluorpentadien, 1,1,4,4;4-pentafluor-3-(trifluormethy1)-1,2-butadien, 1,1,3,4,4,5,5,5-oktafluor-1,2-pentadien, pentafluor-(trifluorvinyl)cyklopropan,

1.1.2.3.4.5.5.5- oktafluor-1,3-pentadien, 1,1,2,3,3,4,5,5-oktafluor-1,4-pentadien, - 3,3-difluor-1,2-bis(trifluormethyl)cyklopropen, oktafluorcyklopenten, 1,1,2,4,4-pentafluor-3-(trifluormethyl)-l,3-butadien, 1,3,3,4,4-pentafluor-288

-(trifluormethyl)cyk1obuten, 1,1,1,4,4,5,5,5-oktafluor-2-pentin, 1,1,1,2,3,4,4,5,5,5-dekafluor-2-penten,

1-, 1,3,3,4,4,4-heptafluor-2-(trifluormethyl)-l-buten,

1, 1,27'3-tetraf luor-2,3-bi's('trif luormethylIciscyklopropan·,· · 1.1.2.3- tetrafluor-2,3-bis(trifluormethyl)transcyklopropan,

1.1.1.2.3.4.4.5.5.5- dekafluor-2-penten, pentafluor(pentafluorethvl)cyklopropan, 1,1,2,3-tetrafluor-2,3-bis(trifluormethyl)cyklopropan, l,l,2-,2-tetrafluor-3,3-biš-(trifluormethyl)cyklopropan, dekafluorcyklopentan ve formě iontového radikálu (-1), 1,1,1,2,3,4,4,5,5,5-dekafluor-2-pent^n,

1,1,1,2,4,4,4-heptafluor-3-(trifluormethyl)-2-buten,

1.2.2.3.3.4.4.5.5.5- dekafluorpentyliden, 1,1,2,3,4,4,4-heptafluor-3-(trÍfluormethyl)-l-buten, dekafluorpenten, heptafluor(trifluormethyl)cyklobutan, 1,1,2,3,3,4,4,5,5,5-deka- fluor-l-penten, dekafluorcyklopentan, 2,3,4,4-tetrafluor-2-cyklobuten-l-on,· tetraf luorfuran, tetrakis( trif luormethyl)sílán, trifluor (nonafluorbutyl)silan, ϊ, 1,1,2727/1(757^7^⁷ ”

-nonafluorpentan, 1,1,1,2,2,3,5,5,5-nonafluorpentany

1.1.1.2.2.3.3.4.5- nonafluorpentan, 1,1,1,2,3,3,5,5,5-nonaf luorpentan, 1., 1,1,3,3,3-hexaf l.uor-2-methyl-2-( trif luormethyl) propan, 1,1,1,2,4,4-hexafluor-2-(trifluormethyl)butan, .

1.1.2.2.3.3.4.4.4.5- nonafluorpentan, 1,1,1,4,4,4-hexafluor-2-(trifluormethyl)butan, 1,1,1,3,3,3-hexafluor-2,2-dimethylpropan, 1,1,3,3,5,5-hexafluorpentan,. 1,1,1,2,3,3-hexafluor-2-methylbutan, hexafluorpentan, 1,2,3,3,4, δΐ-hexaf luorpentan, 2-(difluormethyl)-l,1,1,2-tetrafluorbutan, 1,1,1-trifluor-2-(trifluormethyl)-butan, 4,4,4-trifluor-3-(trifluormethyl)butan-l (^F^C), 1,1,1,5,5,5-hexafluorpentan,

1.1.1.2.3.3- hexafluorpentan, 2,2,3-trifluorpentan, 2,2,4-trif luorpentan, ..1,1,1-trif luor-2-methylbutan, 1,2,2-trifluor-3-methylbutan, 1,3,3-trifluor-2-methylbutan, 2,2,3-trifluor-3-methylbutan,. 1,1,1-trifluor-2-methylbutan,_

1·, 1,2-trifluor-3-methylbutan, 1,1,2-trif luorpentan, 1,1,1-trifluor-2,2-dimethylpropan, 1,1,1-trifluorpentan,'

J4 .. νιΊ

1.1.1- třifluor-3-methylbutan, (nonafluorbutyl)silan, ďimethylbis(trifluormethyl)silan, (difluormethy1)(fluormethy1) methyl(trifluormethy1)silan, bis(difluormethy1)bis(fluorme thy 1 )silan, (3,3,3-trifluor-2-(trifluormethy1)propyl)silan, trimethy1(trifluormethyl)silan, trifluor(1-methylpropyl)silan, (difluormethyl)(fluormethyl)dilmethylsilan, tris(fluormethyl)methylsilan, (1,1-dimethylethyl)trifluoršilan, trifluor{2-methylpropyl)silan, methyl-(3,3,3-trifluorporpyl)silan, a butyltrifluorsilan.

Příklad 51

Ve výhodném provedení může být dispergovaná fáze tvo- řena jakoukoliv chemickou látkou, kťe-rá má za běžných tlako--™ ·_Τ;.vých podmínek teplotu varu nižší než teplota těla organismu, kterému má být prostředek, podán a který pak má být vyšetřen pomocí ultrazvuku. V příkladu 45 je popsána možnost volby této chemické látky na základě teplotního rozmezí, získaného · na bázi teploty varu chemické látky a parametrů způsobu vý- . roby.

Fluorované uhlovodíky jsou zvláště vhodnými chemickými! látkami pro toto použití vzhledem ke své nízké toxicitě, dobré emulgovatelnosti a nízké rozpustnosti ve vodě. Na základě uvedených vlastností vytvářejí uvedené látky přetrvávající mikrobublinky. Dále budou uvedeny zvláště vhodné fluorované uhlovodíky pro toto použiti.

1,2 * 2-tris(trifluormethyl)propan, 2,2-bis(trofluormethyl)propan, 2-methyl~2-trifluormethylpropan, tetrakis(trifluormethyl)silan, methyltris(trifluormethyl)silan, bis(trifluormethyl)dimethylsilan, trifluormethyltrímethylsilan,

1.1- bis(trifluormethyl)-2,2,3,3-tetrafluorcyklopropan, 1,1bis(trifluormethyl)cyklopropan, 1,l-bis(trifluormethyl)-2,2-difluorcyklopropan, 1,1-dimethyl(2,2,3,3)tetrafluor90 cyklopropan, 2,2-difluor-l-methy1-1-trifluormethylcyklopropan , 1,2-bis(difluormethyl)-l,2,3,3-tetrafluorcyklopropan (cis i trans), 1,2-bis(trifluormethyl)-1,2-difluorcyklopropan (cis i trans), 1,2-bis(trifluormethyl)-3,3-difluorcyklopropan, 1,2-bis)trifluormethyl)cyklopropan (cis i trans), 1,1,2,2,4,4,5,5-oktafluorspiro-(2,2)pentan,

1,1,2,2-tetrafluorspiroí2,2)pentan, 1,1,4,4-tetrafluorspiro(2.2)pentan, 1,1,5,5-tetrafluorspiroí2.2)pentan, 3,3,4,5-tetrafluorfuran, tris(trifluormethyl)fosfin, 1,1,2,2,3,34,4,5,5-dekafluorcyklopentan, 1,2,2,3,4,4,5,5-oktafluorbicyklo (-1 .Ί. 1 Jpentan, 2,2,4,4,5,5-hexaf luorbicyklo( 1.1.1)pentan, 1,2,2,3,4,4-hexafluorbicyklo(1.1.1)pentan, 1,2,2,3-tetrafluorbicyklo(1,1.1)pentan, 2/2,3,3-tetrafluorbicyklo(1.1.1)pentan, 1,2,2,3,3,4,4-pentafluor-l-trifluormethylcyklobutan, 2,2,3,4,4-pentafluor-l-trifluormethylbicyklo(1.1.0)butan, 2,2,4,4-tetrafluor-1-trifluormethylbicykloί 1 1 Λ \ k, ? 4 n»-, ti \ X. i · V / kj U L di i « Cl L· 1 Λ X V \ d » X * V J V 4 1 L· Cli 4 Příklad 52

Následující emulze byly vytvořeny a podrobeny zkouškám způsobem podle příkladu 18.

Všechny roztoky byly připraveny jako 2% roztoky ve fyziologickém roztoku chloridu sodného.· 0,1 ml každé chemické látky· bylo důkladně promícháno s 5 ml fyziologického roztoku 25 průchody třícestným kohoutem. Pak byl okamžitě 1 ml této směsi vstřiknut pomocí injekční stříkačky přes filtr s průměrem ok 1,2 mikrometru do míchané vodní lázně s obsahem 1000 ml vody s teplotou 37 °C. Pak byl výsledný zpětný odraz zaznamenáván ultrazvukovým zařízením (Hewlett-Packard 77020A) při 5,0 mHz.

chemická látka teplota tlak par mol. poměr poměr varu C kPa hmot. persis- intensity tence fyziologický roztok

+ vzduch·	1	0,0
nonan	151	1,33 20 °C	128,3	9	0,5
1,2-dichlorethan	83	10,6 25⁴C	98,9	6	0,25
halothan	50	40,0 25⁴C -	197,4	6	0-,25
perfluordekalin	141	0,88 . 25⁴C '	462,1	- 9	2,0 '
dodekafluorpentan	29	86_a0	288,1	24	5,0

Je zřejmé, že chemická látka s nejnižší teplotou varu a nejvysším tlakem par, dodekafluorpentan, vyvolávala nejvyšší zpětný odraz a tím i největší kontrast, který také měl nejdelší trvání a pomalu vymizel v průběhu 4 až 5 minut. Sloučeniny s vyšší teplotou varu a nižším tlakem par, nonan a perfluordekalin sice vyvolaly určitý méně výrazný' odraz,, tento odraz však rychle vymizel v průběhu 1,5 minuty, přičemž perfluordekalin vyvolal vyšší odraz než nonan. Ethanové deriváty dichlorethan a halothan rovněž vyvolaly malý odraz, který však vymizel v průběhu 1 minuty. Při použití fyziolo_iT. gického roztoku chloridu sodného se vzduchem došlo k nejměnší míře odrazu, který přetrvával pouze 5 až 10 sekund.

V případě, že se přetrvávání účinku směsi fyziologického roztoku se vzduchem považuje za hodnotu 1, bude účinek dodekafluorpentanu 24x větší. V případě, že se intensita zpětného odrazu hodnotí podle stupnice 0 až5, pak je nutné přiřadit směsi fyziologického roztoku se vzduchem 0 a dodekaf luorpentanu hodnotu 5, přičemž odpovídající hodnoty pro nonan, 1,2-čichlorethan, hal 61 han’'a perfíuorďěkálin budou' 0,5, 0,25, 0,25 a 2,0.

«

Příklad 55 . Předmětem další zkoušky bylo vyhodnotit po nitrožilním podání emulze podle vynálezu kontrast, vzniklý při vyšetřeníultrazvukem. Použiti byli bílí králíci (New Zealand) se syndromem převzdušněných plic s nemožností jejich kolapsu (syndrom HNCL). Syndrom HNCL byl vyvolán řadou emulzí s -fluorovánými uhlovodíky včetně prostředku Fluosol , který byl ve formě 25% roztoku podávám nitrožilně, účinná látka je doporuČe____na_p.ro—t.y_to.^zko.uŠky-.F_..D-..A___.a byla .popsána v japonském patentovém spisu č. JP 1 509 986. Dále je možno použít emulze s obsahem perfluoroktylbromidu (US 4 987 154), nebo také další emulze s obsahem fluorovaných uhlovodíků, tak jak byly popsány v patentových spisech č. EP 231 091, JP 63060943, US 4 859 363, US 5 171 755, a JP 21-196730. Mechanismus vzniku syndromu HNCL, jeho potenciální reversibilita ani klinický význam nejsou známy. Syndrom je charakterizován plícemi'se zvětšeným celkovým objemem a sníženou hustotou, plíce ani po vyjmutí nekolabují a obsahují prokazatelná množství podaného fluorovaného uhlovodíku ve tkáni. V publikaci objevitele tohoto syndromu, Clark L.C., a další, Biomat., Art. Cells and Immob. Biotech., 20, 1085 - 1099, 1992 se uvádí, že v případě, še syndrom HNCL vzniká u jiných druhů, například u člověka, je možno považovat za bezpečné pouze fluorované uhlovodíky s teplotou varu nad 150 °C.

Pokus byl prováděn tím způsobem, že čtyřem skupinám bílých králičích samců (tři králíci ve skupině) byla nitrožilně podána emulze z příkladu 44 v dávce 0,2 nebo 1,0 ml/kg.

Jako účinná látka byl podán Fluosol (Alpha Therapeutic Corp.) v celkové dávce 24 ml/kg nebo fyziologický roztok've stejné dávce. Dávky byly zvoleny v závislosti na dávkách, při nichž je možno vyvolat kontrast při vyšetření ultrazvukem. U králíků byla sledována hmotnost a spotřeba krmivá a ihned po vyšetření byl zaznamenán jejich stav. 24 hodin po pokusu byli králíci usmrceni, plíce byly vyjmuty, zváženy, byl stanoven jejich objem a stupeň naplnění plynem, mimoto byla plynovou chromatografii s analyzátorem stanovena přítomnost perfluorovaných uhlovodíků ve tkáni.

Plíce králíků, jimž byl podán fyziologický roztok nebo emulze z příkladu 44, byly normální a po vyjmutí z dutiny, hrudní zkolabovaly. Plíce králíků, jimž, byl podán Fluosol,

-*»Wt*· byly v různé míře naplněny plynem.

Nebylo možno pozorovat žádné změny, způsobené pokusem mezi skupinami, pokud jde o hmotnost plic a o poměr této hmotnosti k celkové tělesné hmotnosti. Objem plic, poměr objemu plic k tělesnému objemu a hustota plic u králíků, jimž byla podána emulze z příkladu 44, byly nezměněny ve srovnání s kontrolami. Po podání Fluosolu však došlo ke 175% zvýšení objemu plic, 185% zvýšení 'poměru hmotnosti plic k hmotnosti celého těla a ke 45% snížení hustoty plic ve srovnání s kontrolami, přičemž všechny tyto změny byly statisticky vysoce významné (p=0,001).

A

V průběhu vyšetření nebylo možno prokázat přítomnost dodekafluorpentanu u žádného ze zvířat, jimž byla podána emulze z příkladu 44. Fluosol vytváří při analýze plynovou chromatografii Čtyři hlavní vrcholy a jeden menší. Všech pět vrcholů bylo prokázáno ve vzorcích tkáně zvířat, jimž byl* podán Fluosol. »

Za podmínek, při nichž byl pokus prováděn, nemělo.jediné,podání emulze z příkladu 44 v dávkách, schopných zajistit výjimečně dobrý kontrast při vyšetřeni ultrazvukem žádný vliv na hmotnost, hustotu nebo provzdušnění plic, ani nebylo možno prokázat zjistitelné množství dodekafluorpentanu * ¹ v plicní tkáni, takže je možno uzavřít, že v případě podání uvedené emulze nedošlo ke vzniku syndromu HNCL u králíků.

Na druhé straně^ dříve známé emulze vyvolávaly uvedený syndrom v dávkách, potřebných pro vyvolání kontrastu při vyšetření ultrazvukem. Skutečnost, že emulze fluorovaných uhlovodíků s teplotou varu 29 °C podle vynálezu uvedený syndrom nevyvolávaly.

Příklad 54

Farmakokinetické zkoušky byly prováděny na malých stavěčích psech, jimž byla podána nitrožilně jediná dávka emulze z příkladu 44 v průběhu 5 až 8 sekund, celková dávka byla 0,05, 0,10 nebo 0,15 ml/kg. Pak byly v různých časových úsecích odebírány vzorky krve a množství dodekafluorpentanu bylo stanoveno plynovou 'chromatografii. Bylo užito 24 psů, samců a 12 samic ve· třech skupinách podle velikosti dávky.

Údaje byly statisticky zpracovány a nebylo možno pozorovat žádný statisticky významný rozdíl mezi samci a samicemi žádné z použitých dávek.

Fáze distribuce trvala 0,9 až 1,3 minut. Vylučovací fáze trvala 30 až 48 minut. Doba t (doba do dosažení mamax ximální’koncentrace) se měnila v rozmezí 5,1 až 6,6 minut.. Tyto doby vylučování byly srovnávány s časovými údaji pro emulze známých fluorovaných uhlovodíků, které je však'nutno měřit v měsících (podle svrchu uvedené publikace). Je zcela zřejmé, že výhodné jsou látky, které organismus opustí do několika hodin.

> . H

Příklad 55

Byly vytvořeny emulze dodekafluorpentanu s teplotou »

varu 28 až 29 °C, směsi dodekafluorpentanu a dekafluorbutanu s teplotou varu 20,0 °C a perfluorcyklopentanu s teplotou varu 22,5 °C a pak byly emulze podrobeny zkouškám na odraz ultrazvuku. Emulze obsahovaly jako smáčedlo Fluorad 170C a byly vytvořeny ve vodní lázni zpracováním ultrazvukem. Pak bylo přenoeseno 0,2 ml každé emulze do 1000 ml vody s teplotou 37 °C přes filtr s průměrem ok 1,2 mikrometrů a kontrast byl měřen způsobem podle příkladu. 1. Emulze s obsahem dodekafluorpentanu vytvořila po podání 58,5 jednotek (pozadí 2,9) šedý kontrast, při použití směsi uhlovodíku došlo ke vzestupu 3,0 až 133,3 za stejných podmínek, nejlepšího výsledku “ T· bylo dosaženo při použití perfluorcyklopentanu, v rozmezí

3,6 až 158,9. Je zřejmé, že při použití fluorovodíků s'nízkou teplotou varu bylo možno dosáhnout lepších výsledků než při použití uhlovodíků s vyšší teplotou varu.

Příklad 56

Použitelné prostředky pro kontrastní znázornění působením ultrazvuku je možno vytvořit tím způsobem, že se disperze chemické látky s nízkou teplotou varu stabilizuje emulzi s obsahem dispergované fáze, tvořené chemickými látkami, které se samy o sobě nemění ve větším rozsahu na páry při tělesné teplotě organismu, který má být vyšetřen s použitím ultrazvuku. Například emulze, tvořené fluorovanými uhlovodíky nebo obsahující tyto uhlovodíky s dispergovanou fází s vysokou teplotou varu, tak jak byly popsány například v patentových spisech č. US 4 767 410, US 4 987 154, JP 2196730, JP 1609986, JP 63060943 a EP 245 019 mohou tvořit základ pro prostředky, jejichž schopnost odrazu ultrazvuku je možno podstatně zvýšit přidáním chemické látky s vysokým tlakem; par.

Například emulze perfluoroktylbromidu, stabilizované lecithinem mají zvýšenou schopnost kontrastu po přidání perfluorcyklopentanu s teplotou varu 22 °C k dispergované fázi před eniúlgácíl· Další hálogénidy, uhlovodíky nebo ' etherynízkou- teplotou varu mají stejný účinek.

Přestože byl vynález popsán v souvislosti s některými specifickými výhodnými provedeními, je zřejmé, že by bylo možno navrhnout' ještě řadu variací a modifikací, rovněž spadající do oboru vynálezu. Je, tedy zřejmé, že popsaná provedení byla uvedena pouze pro ilustraci a nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.

Claims

1. Biologicky kompatibilní kontrastní prostředek, tvořený stálou koloidní disperzí, vyznačující se t í m, že obsahuje kapalnou dispergovanou fázi a kontinuální vodnou fázi, přičemž dispergovaná fáze obsahuje kapalinu s teplotou varu nižší než 40 °C.

í.Jř i

2. ' Koloidní disperze podle nároku 1, vyznačující se t í m, že kapalná dispergovaná fáze se volí ze skupiny, alifatických uhlovodíků, organických halogenidů a etherů o nejvýše 6 atomech uhlíku.

^ř 3. Koloidní disperze podle nároku 1, vyznačují c í se ΐ í m, še kapalná dispergovaná fáze- je tvořena sloučeninou s obsahem fluoru.

4. Koloidní disperze podle nároku 1, vyznačuj í c_t í se ΐ í m, že kapalná dispergovaná fáze je tvořena sloučeninou s obsahem fluoru s molekulovou hmotností nižší než 300.

5; Koloidní disperze podle nároku 2, vyznačující se ť í m, že se kapalná dispergovaná fáze volí

-¾ ze skupiny n-pentan, isopentan, neopentan, cyklopentan, butan, cyklobutan, dekafluorbutan, dodekafluorpentan, dodekafluor-*} neopentan nebo perfluorcyklopentan.

6. Koloidní disperze podle nároku 1, vyznačující se t ím, že dále obsahuje amfifilní materiál.

7. Koloidní disperze podle nároku 6, vyznačující se t í m , že jako amfifilní materiál obsahuje HLB, odpovídající kapalné dispergované fázi.

8. Koloidní disperze podle nároku 6, vyznačující se tím, že jako amfifilní materiál obsahuje biologicky kompatibilní bílkovinu,

9. Koloidní disperze podle nároku 6, vyznačující se tím, že jako amfifilní materiál obsahuje alespoň jedno smáčedlo.

10. Koloidní disperze podle nároku 8, v y z n á Č u - jící. se tím, že obsahuje bílkoviny ze skupiny albumin, fibrinogen, fibrin, sérové globuliny, hemoglobin, myoglobin a imunoglobuliny.

11. Koloidní disperze podle nároku 6, v y z n, a č ující se tím, že jako amfifilní materiál obsahuje , 'neiontový sledový kopolymer polyoxypropylenu a polyoxy- ethylenglykolu. . ⁷ ^: ~~~ ~ ' i

12. Koloidní disperze podle nároku 7, vyznačující se tím, že jako amfifilní materiál obsahuje

-t smáčedlo s obsahem fluoru.

*

13. Koloidní disperze podle nároku 7, vyznačující se tím, že se amfifilní materiál volí ze. skupiny aniontových, kationtových, -neiontových smáčedel nebo amfoterních molekul.

14. Koloidní disperze podle nároku 7, vyznačující se tím, že amfifilní materiál je tvořen alespoň jedním smáčedlem ze skupiny smáčedel, která jako hydrofilní skupinu obsahuje jednu nebo větší počet chemických skupin ze skupiny sulfonáty, sulfáty, karboxyláty, fosfáty, amonné nebo kvarterní amoniové soli, betainy, silfobetainy, polyoxyethyleny, polyoly, alkoholy, ethery, polypeptidy nebo polyglycidylové skupiny a jako hydrofobní skupiny obsahují mastné kyseliny, parafiny, olefiny, alkylbenzeny, alkoholy, alkylfenoly, polyoxypropyleny, polypeptidy, fluorované-uhlo* * vodíky nebo silikony.

15. Koloidní disperze podle nároku 7, v y z n a č u- . jící se tím, že obsahují amfifilní materiál v koncentraci, při níž je napětí na rozhraní mezi vodou a kapalnou dispergovanou fází nižší než 26 dyn/cm.

16. Koloidní disperze podle nároku 7, vyzná č/ující s e tí m , že obsahuje amfifilní materiál v koncentraci vyšší než 0,001' g/100 ml.

• 17. Koloidní disperze podle nároku 1, vyznačují cí se t í m, že dále obsahuje viskogen.

18. Koloidní disperze podle nároku 17, vyznačující se tím, že jako viskogen obsahuje’glukosu, iohexol, iopamidol, iopentol, sorbitol, sacharosu nebo polyethylenglykol.

v

19. Koloidní disperze podle nároku 17, vyznačující se tím, že obsahuje viskogen v koncentraci ’ _ pro zajištění viskosity vyšší než 1,1 cP.

20. Koloidní disperze podle nároku 17, v y z n a _ £

čující se tím, že obsahuje viskogen v množství Ό , UU J. Λύ /0 g/ιυυ m± .

*1

21. Koloidní disperze podle nároku 1, vyznačující s e t í m, že dispergovaná kapalná fáze je tvořena částicemi se středním průměrem menším než 1000 nm.

22. Koloidní disperze podle nároku 1 , vyznačující se t í m, že obsahuje kapalnou disperovanou fázi v množství 0,00001 až 166 g/100 ml.

100

23. Koloidní disperze podle nároku ^vyznačující se tím, že vodné prostředí obsahuje přísady ze skupiny látek, sloužících k okyselení nebo alkalizaantimikřóbiáíních'konzervačních prostředků,' áhtióxiďáčních látek, pufrů, chelatačních činidel, činidel pro tvorbu komplexů,, solubilizačních činidel, zvlhčujících látek, rozpouštědel, činidel, napomáhajících vzniku suspenze, látek zvyšujících viskositu a látek, které zvyšují osmotický tlak.

24. Koloidní disperze podle nároku 23, vyzná, - ..č.-u-j-.-ί -c»·! s e -t i m , že-se .přísada: přidává do končen,- .... trace, při níž je osmotický tlak vodného prostředí nejméně 250 mOm.

¹ *

25. Koloidní disperze podle nároku 1, v y z n a ’c uj ící s e ‘ t í m, že ’dispergovaná kapalná'fáze obsahuje chemickou látku s obsahem 4 až 17 atomů.;

25. Koloidní disperze'podle nároku 1, vyzná-,, čující se tím, že dispergovaná kapalná fáze ob-, sáhuje chemickou látku obecného vzorce COH^Fy,

27. Stabilní biologicky kompatibilní koloidní disperze. pro použití při zobrazování ultrazvukem u živočicha s tělesnou · teplotou T, vyznačující se tím, že je tvořena dispergovanou kapalnou fází a kontinuální vodnou fází, přičemž dispergovaná fáze obsahuje chemickou látku, jejíž tlak par-je takový, že Část chemické.látky se při teplotě T nachází v plynné formě.

-tra zvukem pro použitý e » Způsob zobyrazováj

A /Y ..

cíchu, v/y\z n a.,c ui c i ^Γ / \ ^Z \ . , , ,, , ₄ , připr^ví^SjtáXá-ryílológick^ kompatibilní /koloidní dis/perzbAs· dispergováno^ kapalnou) fází a kontinuální jvodnou fá^í ,; přičemKďispergo^má .^že...je- -tvářena' kapali-

101 .ώί·

4,- 'frotr-s; tepTotóu varu nižší než je^teprlota ΐ'ΰνοčibha, který má být^vyšgirén?

2íT disperze's.e apiikvfje' žívóčichovi'”^“vyČk-á^sjg^ó^Pbu, -v. průběhu níž^s^ z dispergované_kapal-né-fážě vyřvoří ^mikrobub-íTnky, naca-ž.^se···'

3) ‘'^ohřazi 'pomoc v-ultřazvu^tr^ta část tě'ia-ž.ivoČicha, v /fi_ž_„do-š 1 b” k distribuc'i'mikrobbb.linekl b

x\

29. Způsob podle nároku 2.8.,- _:ν-:··ν'^,-::ζ^,'η’ a„txr~7r i c jé ti m'·'·,· ·ζθ .sej^^p^g^^^^^palrá^fáze volí^g^sku-.

pihy alifatických uhlovodíků,’ organiokýGh---h'áTbgenidů a>athe-s’hějvýše 6 atomy uhlíku,

-28 Způsob výroby a skladování stálého kontrastního prostředku, vyznačující se tím, že se

a) smísí alespoň jeden amfifilní materiál s vodou za vzniku kontinuální vodné fáze',

b) . k této kontinuální fázi se přidá kapalina s teplotou varu nižší než·40 °C,

c) směs se ručně důkladně promísí nebo se promísí mechanicky nebo působením ultrazvuku po dobu dostatečnou pro tvorbu kapalné disperze částic se středním průměrem nižším než 5000 nm.

Způsob výroby a skladování stálého kontrastního prostředku, vyznačující se tím, že se

a) smísí alespoň jeden amfifilní materiál s·vodou za vzniku kontinuální vodné fáze,

b) ke kontinuální fázi se přidá plyn s teplotou varu nižší než 40- °C a *

102 tento plyn se kondenzuje za vzniku kapalné koloidní disperze, v níž mají částice dispergované fáze střední průměr nižší než 5000 nm.