CZ137199A3 - Substituované tricyklické sloučeniny - Google Patents

Description

Oblast techniky

Vynález se nových substituovaných tricyklických organických sloučenin použitelných pro inhibici sPLA₂ mediovaného uvolňování mastných kyselin za podmínek jako je septický šok.

Dosavadní stav techniky

Struktura a fyzikální vlastnosti lidské nepankreatické sekreční fosfolipázy A₂ (nadále označované jako, SPLA2) byly podrobně popsány ve dvou článcích, konkrétně Cloning a Recombinant Expression of Phospholipase A₂ Present v Rheumatoid Arthritic Synovial Fluid autorů Seilhamer, Jeffrey J.; Pruzanski, Waldemar; Vadas Peter; Plant, Shelley; Miller, Judy A.; Kloss, Jean; a Johnson, Lorin K.; The Journal of Biological Chemistry, Vol·. 264, No. 10, vyšlo 5. dubna, str. 5 3 3 5-5338, 1989; a Structure and Properties of a Human Non-pancreatic Phospholipase A₂ autorů Kramer, Ruth M.; Hession, Catherine; Johansen, Berit; Hayes, Gretchen; McGray, Paula; Chow, E. Pingchang; Tizard, Richard; a Pepinsky, R. Blake; The Journal of Biological Chemistry, Vol. 264, No. 10, vyšlo 5. dubna, str. 5168-5115,1989; jejichž objevy jsou zde zahrnuty jako reference.

Předpokládá se, že sPLA₂ je enzym, omezující rychlost v kaskádě arachidonové kyseliny, která hydrolýzuje membránové fosfolipidy. Je proto důležité vyvinout sloučeniny, které jsou schopné iiihibice sPJ.A,· mediovaného uvolňování mastných kyselin • · · · (například arachidonové kyseliny). Takové sloučeniny by byly užitečné obecně při léčbě stavů indukovaných a/nebo udržovaných nadprodukcí sPLA₂, jako je septický šok, respirační distres syndrom dospělých osob, pankreatitida, traumatický šok, bronchiální astma, alergická rinitida, revmatická artritida a podobně.Je žádoucí vyvinout nové sloučeniny a způsoby léčení pro onemocnění indukované sPLA₂.

Alexander a kol., US patenty č. 3,939,177 a 3,979,391, popisují 1,2,3,4-tetrahydrokarbazoly, použitelné jako antibakteriálni činidla.

Podstata vynálezu

Vynález se týká tricyklických sloučenin popsaných níže podaným obecným vzorcem (I):

R

R ve kterém;

A představuje fenyl nebo pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 5, 6, 7 nebo 8;

jeden z atomů B nebo D představuje atom dusíku a druhý z nich atom uhlíku;

Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyklický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4;

. představuje dvojnou nebo jednoduchou vazbu;

R^2C je zvolen ze souborů (a), (b) a (c), ve kterých;

(a) představuje - (C₅-C₂₀) alkyl, - (C₅-C₂₀) alkenyl, (C₅Cbo) alkinyl, karbocyklická zbytky nebo heterocyklická zbytky, nebo (b) je prvek souboru (a) , substituovaný jedním nebo více nezávisle zvolenými neinterferujícími substituenty; nebo (c) představuje skupinu -(L)-R⁸⁰; kde —(L)— představuje dvouvaznou vazebnou skupinu 1 až 12 atomů zvolených ze souboru, který zahrnuje atom uhlíku, atom vodíku, atom kyslíku, atom dusíku a atom síry; přičemž kombinace atomů v — (L)— jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího (i) pouze atomy uhlíku a atomy vodíku, (ii) pouze jeden atom síry, (iii) pouze jeden atom kyslíku, (iv) pouze jeden nebo dva atomy dusíku a atomy vodíku, (v) atomy uhlíku, atomy vodíku a pouze jeden atom síry a (vi) pouze atomy uhlíku, atomy vodíku a atomy kyslíku; a kde R⁸⁰ představuje skupinu, zvolenou ze souborů (a) nebo (b);

R‘^! představuje neinterferující substituent;

R' představuje -NHNH₂, -NH₂ nebo -CONH_?;

R^! je zvolen ze souboru, zahrnujícího -OH a -O(CH2)lr'’', kde R^; představuje H, -CN, -NH?, -CONH.? -CONR⁹R^!0 -NHSOpR¹⁸;

-CONHSCjR¹⁵, kde R¹⁵ představuje - (Cj-C₆) al kyj nebo -CF₃; fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CCpH nebo -CO₂ (C1-C₄)a 1kyi; a

- (h,J - (kyselinotvorná skupina), kde - (LJ - představuje

vazebnou skupinu kyseliny, která má délku od 1 do 7 a t je rovno 1—5;

R³' je zvolen ze souboru, zahrnujícího neinterferu j lei substituent, karbocyklické zbytky, karbocyklické zbytky substituované neinterferujícími substituenty, heterocyklické zbytky a heterocyklické zbytky substituované neinterferujícími substituenty;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné racemáty, solváty, tautomery, optické isomery, prekurzorové deriváty nebo soli; za předpokladu, že jeden ze substituentů A nebo Z představuje heterocyklický kruh; a pokud D je atom dusíku, heteroatom Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom síry atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4.

Tyto substituované tricyklické sloučeniny jsou účinné pro inhibici sPLA₂ mediovaného uvolňování mastných kyselin u člověka.

Předložený vynález se také týká farmaceutických přípravků, obsahujících sloučeninu obecného vzorce I spolu s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými ředidly, nosiči a excipienty.

Předložený vynález se také týká způsobu inhibice sPLAj, zahrnující podávání savci, který má potřebu takové léčby, terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I.

Vynález se také dále týká způsobu selektivní inhibice sPLA₂ u savce, který má potřebu takové léčby, zahrnující podávání uvedenému savci terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I

4

4*· 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4 4 4 4

444444 44 44 444

4 4 4 4 4 4

4444 4 44 44 ··

Předložený vynález také přináší způsob zmírnění patologických účinků sepse, septického šoku, respiračního distres syndromu dospělých osob, pankreatitidy, traumatického šoku, bronchiálního astmatu, alergické rinitidy, revmatické artritidy, cystické fibrózy, mrtvice, akutní bronchitidy, chronické bronchitidy, akutní bronchiolitidy, chronické bronchiolitidy, osteoartritidy, dny, spondylartropatie, ankylosující spondylitidy, Reiterova syndromu, psoriatické artropatie, enterapatrické spondylitidy, juvenilní artropatie nebo juvenilní ankylosující spondylitidy, reaktivní artropatie, infekční nebo post-infekční artritidy, gonokokové artritidy, tuberkulózní artritidy, virální artritidy, fungální artritidy, syfilitické artritidy, Lymské nemoci, artritidy související s vaskulitickými syndromy, nodózní polyarteritidy, hypersensitivní vaskulitidy, Luegenecovy granulomatózy, revmatické polymyalgie, velkobuněčné arteritidy, artropatie z ukládání vápníkových krystalů, pseudo dny, neartikulárního revmatismu, bursitidy, tenosynovitidy, epikondylitidy (tenisový loket), syndromu karpálního tunelu, poškození opakovanou činností (psaní na stroji), různých forem artritidy, neuropatických kloubních onemocnění (Charcotův kloub), hemartrózy (hemartrózní), Henoch-Schonleinovy purpury, hypertrofní osteoartropatie, multicentrální retikulohistiocytózy, artritidy související s jistými onemocněními, surkoilózy, hemochromatózy, srpkovitosti a dalších hemoglobinopatií, hyperlipoproteinémie, hypogamaglobulinémie, hyperparatyreoidismu, akromegalie, familiální středomořské horečky, Behatovy nemocí, systemického lupus erythrematodes nebo recidivujících polychondritid; a vztahujících se nemocí, přičemž tento způsob zahrnuje podávání savci, který má potřebu takové léčby, terapeuticky

444 441

4 · 4 účinného množství sloučeniny obecného vzorce I v množství dostatečném k inhibici sPLA₂ mediovaného uvolňování mastných kyselin a tím k inhibici nebo prevenci kaskády arachidonové kyseliny a jejich škodlivých produktů.

Další předměty, rysy a výhody předloženého vynálezu se stanou zřejmými z následujícího popisu a přiložených patentových nároků.

Definice:

Jak je zde používán, výraz alkyl sám o sobě nebo nebo jako část jiného substituentu znamená, pokud není uvedeno jinak, monovalentní uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem jako je methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, terc.-butyl, isobutyl, sek.-butyl tert butyl, n-pentyl, ísopentyl, neopentyl, heptyl, hexyl, oktyl, nonyl, decyl, undecyl, dodecyl, tridecyl, tetradecyl a podobně. Výraz alkyl zahrnuje - (Ci-C₂) alkyl, - (C!-C₄) al kyl, - (Ci~C₆) alkyl, -(C₅C₁₄)alkyl a - (Ci-Cio) alkyl.

Výraz alkenyl jak je zde používán, představuje olefinicky nenasycenou rozvětvenou nebo lineární skupinu, která obsahuje alespoň jednu dvojnou vazbu. Příklady takových skupin zahrnují zbytky jako je vinyl, allyl, 2-butenyl, 3-butenyl,2-pentenyl, 3-pentenyl, 4-pentenyl, 2-hexenyl, 3-hexenyl, 4-hexenyl, 5hexenyl, 2-heptenyl, 3-heptenyl, 4-heptenyl, 5-heptenyl, 6heptenyl, stejné tak jako dieny a trieny s přímým a rozvětveným řetězcem. Výraz alkinyl označuje takové zbytky, jako je ethinyl, propinyl, butinyl, pentinyl, hexinyl, heptinyl, stejně tak jako di -and t r i - i ny.

flfl

I * • « flflfl flflflfl fl • fl fl • flfl _1 flfl a

··· • fl

Výraz halo znamená atom chloru, atom fluoru, atom jódu.

atom bromu nebo

Výraz (Cx-C^) alkoxy, jak je zde používán, označuje skupiny jako je methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, n-butoxy, tbutoxy a podobné skupiny, připojené ke zbytku molekuly atomem kysli ku.

Výraz fenyl (C1-C4) alkyl se vztahuje k alkylové skupině s přímým nebo rozvětveným řetězcem, která má od jednoho do čtyř atomů uhlíku, vázaných k fenylovému kruhu a tento řetězec je připojen ke zbytku molekuly. Typické fenylalkylové skupiny zahrnují benzyl, fenylethyl, fenylpropyl, fenylisopropyl a fenylbutyl.

Výraz -(C1-C4)alkylthio definuje přímý nebo rozvětvený alkylový řetězec, který má od jednoho do čtyř atomů uhlíku, připojených ke zbytku molekuly atomem síry. Typické -(CxC₄)alkylthiové skupiny zahrnují methylthio, ethylthio, propylthio, butylthio a podobně.

Výraz -(C3-CX4) cykloalkyl zahrnuje skupiny jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklooktyl, cyklononyl, cyklodecyl, cykloundecyl, cyklododecyl, cyklotridecyl., cyklotetradecyl a podobně. Výraz -(C3C;,J cyk loal kyl zahrnuje a -(C3-CI) cykloalkyl.

Výraz, hct.erocykl ický zbytek, se vztahuje ke zbytkům, odvozeným od monocyk1ických nebo polycykl. ických, nasycených nebo nenasycených, substituovaných nebo nesubstiLuovaných

heterocyklických jader, majících 5 až 14 atomů v kruhu a obsahujících od 1 do 3 heteroatomů, zvolených ze souboru, zahrnujícího atom dusíku, atom kyslíku nebo atom siry heterocykiické zbytky jsou pyridyl, thíenyl, pyrrolyl, furanyl, thiofenyl, pyrazolyl, fenylimidazolyl, triazolyl, isoxazolyl, oxazolyl, thiadiazolyl, índolyl, karbazolyl, norharmanyl, benzofuranyl, dibenzo furanyl, thianaftenyl, dibenzothiofenyl, indazolyl, imidazo (1,2-A) pyridinyl, benzotriazolyl, anthranilyl, 1,2-benzisoxazolyl, benzoxazolyl, benzothiazolyl,

Typické fluorenyl, imidazolyl, thiazoly1, azaindolyl, purínyl, pyridinyl, dipyridylyl, fenylpyridinyl, benzylpyridinyl, pyrimidinyl, fenylpyrimidinyl, pyrazinyl, 1,3,

5-triazinyl, chinoxa1inyl.

chinolinyl, ftalazinyl, quinazolinyl

Výraz karbocyklický zbytek se vztahuje ke zbytkům, odvozeným od a nasycený nebo nenasycený, substituovaný nebo nesubstituovaný 5 do 14 členných organických jader, jejichž atomy vytvářející jádra (jiné než atom vodíku) jsou výhradně atomy uhlíku. Typické karbocyklické zbytky jsou cykloalkyl, cykloalkenyl·, fenyl, naftyl, norbornanyl, bicykloheptadienyl, tolulyl, xylenyl, indenyl, stilbenyl, terfenylyl, difenylethylenyl, fenylcyklohexyl, acenaftylenyl a anthracenyl, bifenyl, bibenzylyl a vztahující se bibenzylylové homology, reprezentované obecným vzorcem (bb), .θ • · · ·

kde η je celé číslo v rozmezí od 1 do 8.

- (C₂-C₆) alkinyl, (C₃—Cg) cykloalkyl, xylenyl, bifenyl, (C₂—Ce) alkinyloxy,

- (C?~ -(C₃~

- (C_x- (CiVýraz, neinterferující substituentse vztahuje ke zbytkům, vhodným pro substituci v polohách 1,2, 3,7 a/nebo 8 na tricyklických jádrech (jak je znázorněno v obecném vzorci III) a zbytek nebo zbytky vhodné pro substituci na heterocyklických zbytcích a karbocyklických zbytcích, jak byly definovány výše.Ilustrativní neinterferující zbytky jsou atom vodíku,

- (Ci-C₁₄) alkyl, - (C₂-C₆) alkenyl,

Ci₂)aralkyl, - {C7-C12) al karyl,

C₈)cykloalkenyl, fenyl, tolulyl,

Cg) alkoxy, - (C₂-C₆) alkenyloxy,

C₁₂) alkoxyalkyl, - (C^C^) alkoxyalkyloxy, - (C_x-C₁₂) alkylkarbonyl,

- (Ci-C₁₂) alkylkarbonylamino, - (Ci-C_i2) alkoxyamíno, —(C_t —

C₁₂) alkoxyaminokarbonyl, - (C_L-C₁₂) alkylamino, - (Ci-C₆) alkylthio,

- (Ci-Ci₂) alkylthiokarbonyl, - (Ci-C₆) alkylsulf inyl, - (C_xC₆)alkylsulfonyl, - (Ci-Cg)haloalkoxy, - (Ci—Ce) haloalkylsulfonyl,

- (Ci-C₆) haloalkyl, - (Ci-C₆) hydroxyalkyl, - (CH₂) _nCN, - (CH₂) _nNR⁹R¹⁰,

-C(O)O(Ci-C₆ alkyl), - (CH₂) _n0 (Ci-C₆ alkyl), benzyloxy, fenoxy, fenylthio; - (CONHSO₂) R¹⁵, kde R¹⁵ představuje - (C_x-C₆) a 1 kyl; -CF₃ , naftyl nebo - (CH₂) _sfenyl, kde s se rovná 0-5; -CHO, -CF₃, -QCF-j, pyridyl, amino, amidino, atom halogenu, karbamyl, karboxyl, karbalkoxy, -(CH₂)_nCO₂H, kyano, kyanoguanidinyl, guanidino, hydrazid, hydrazino, hydrazido, hydroxy, hydroxyamino, nitro, fosfono, -SO₄H, thioacetal, thiokarbonyl, • * furyl, thiofenyl -COR⁹, -CONR⁹R¹⁰, -NR⁹R¹⁰, -NCHCOR⁹, -SO2R⁹, -OR⁹, -SR⁹, CH2SO₂R⁹, tetrazolyl nebo tetrazolyl substituovaný skupinou - (Ci-C_É) alkyl, fenyl nebo - (Ci~C₄) alkylfenyl , -(CH₂)_nOSi (Ci-C₆) alkyl a (Ci~C₆) alkylkarbonyl; kde n se rovná 1 až 8 a R⁹ a R¹⁰ jsou nezávisle na sobě atom vodíku, -CF₃, fenyl, - (C_x — C₄) alkyl, - (C1-C4) alkylfenyl nebo -fenyl (Cý-Cq) alkyl

Výraz, kyselinotvorná skupina znamená organickou skupinu, která je vázána k tricyklickému jádru, prostřednictvím vhodných vazebných atomů (dále označovanou jako vazebná skupina kyseliny), působící jako protonový donor schopný vodíkové vazby. Ilustrativní kyselinotvorné skupiny jsou následující:

ii:.:.

• · ·· · · · ♦ ♦ ·· • · » · «··

-CO₂H,

-5-tetrazolyl,

-so₃h,

O

OH

O í

-O—P—OH

I

OH

O

4I

Γ (CHJ_o—N~R„

O

(CH,)_;i ^99 'N—P.„

R,

Α·2ί *·· r

ο

ΌΗ

ΗΟ

£

Ν :Ν \

kde η se rovná 1 až 8, R₈g představuje atom kovu nebo - (Ci — C₁₀)aikyl, a

R₉₉ představuje atom vodíku nebo - (C1-C10) alkyl.

Slova vazebná skupina kyseliny se vztahují k dvojvazné vazebné skupině symbolizované jako -(L_a)-, která má funkci připojení polohy 5 nebo 6 tricyklického jádra ke kyselinotvorné skupině v následujícím obecném vztahu:

(tricyklické jádro)-(L_a)- kyselinotvorná skupina

Slova délka vazebné skupiny kyseliny, se vztahují k počtu atomů (nepočítaje v to atom vodíku) v nejkratším řetězci vazebné skupiny -(L_a)- který spojuje polohy 5 nebo 6 tricyklického jádra s kyselinotvornou skupinou. Přítomnost karbocyklického kruhu v -(L_a)- dává počet atomů přibližně ekvivalentní vypočtenému průměru karbocyklického krutni. Proto benzenový nebo cyklohexanový kruh v vazebné skupině kyseliny se započítává jako 2 atomy při výpočtu délky -(L_d)-. ilustrativní vazebné skupiny kyseliny jsou;

• e ·φ φ « · — * φ « φ φ • · · φ • · φ ** · • φ · • φ φ φ φ · φ • φ φ φ · φ <

φφ > ·

kde t je rovno 1 až 5, Q je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny -(CH₂)-, -0-, -NH- a -S- a R⁸⁴ a R⁸⁵ jsou nezávisle na sobě zvolené ze souboru, který zahrnuje atom vodíku, -{CjCmíalkyl, aryl, - (C1-C10) alkaryl, - (Ci-C_l0) ara 1 kyl, karboxy, karbalkoxy a atom halogenu, kde t je rovno jedné (1), skupiny (a), (b), (c) a (d) mají délku vazebné skupiny kyseliny 3, 3, 2 respektive 2.

• 4 4 *

t

4

4 4

4

I

4 4 Β

4

Odborníkovi je zřejmé, členných kruhů závisí znázorněno dále:

že poloha na poloze dvojné vazby v centru 5dusíkového atomu, jak je

Soli výše uvedených tricyklických sloučenin představují další předmět předloženého vynálezu. V případech, kdy sloučeniny podle předloženého vynálezu mají funkční skupinu kyseliny, mohou být vytvořeny různé soli, které jsou více rozpustné ve vodě a fyziologicky vhodnější než výchozí sloučenina. Představitelé farmaceuticky přijatelných solí zahrnují, aniž by tím byly omezeny, soli alkalických kovů a kovů alkalických zemin jako jsou soli lithia, sodíku, draslíku, vápníku, hořčíku, hliníku a podobně. Soli jsou výhodně připraveny z volné kyseliny zpracováním kyseliny v roztoku báze nebo vystavením kyseliny iontoměničové pryskyřici.

Do definice farmaceuticky přijatelných solí spadají jsou relativně netoxické, anorganické a organické bázické adiční soli sloučenin předloženého vynálezu, například s amoniovými, kvarterními amoniovými a aminovými kationty, odvozené od dusíkatých bází dostatečné bazicity a tím se vytvoří soli se sloučeninami podle předloženého vynálezu (viz například S. M.

**♦ ♦

Berge a kol·., Pharmaceuti ca 1 Salts, J. Phar. Sci., 66: 1-19 (1 977) ) .

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou mít chirální centra a existovat v opticky aktivních formách. R- a S-isomery a racemické směsi spadají do rozsahu předloženého vynálezu. Konkrétní stereoisomery mohou být připraveny známými způsoby použitím stereospecifických reakcí s výchozími materiály, obsahujícími asymetrická centra již oddělenými nebo alternativně následným rozdělením směsi stereoisomerů použitím známých způsobů.

Výraz ochranná skupina kyseliny je zde používán, tak jako je často používán v syntetické organické chemii, pro označování skupiny, která ochrání funkční skupinu kyseliny od účasti v reakci, prováděné na některých dalších funkčních skupinách v molekule, ale která může být odstraněna, pokud je to požadováno. Takové skupiny jsou diskutovány V monografii T. W. Greene: Protective Groups in Organic Synthesis v kapitole 5, John Wiley a Sons, New York, 1981, která je zde celá zahrnuta jako reference.

Příklady ochranných skupin zahrnují esterové nebo amidové deriváty funkční skupiny kyseliny, jako je methyl, methoxymethyl, methyl-thiomethyl, tetrahydropyraný1, methoxyethoxymethyl, benzyloxymethyl, fenyl, aryl, ethyl, 2,2,2-trichlorethyl, 2-methylthioethyl, terč.-butyl, cyklopentyl, t r i feny 1 methyl., difeny1 methyl, benzy]., tr i methy1s11y1, N,N-dimethy1, pyrrolidinyl, pipcridínyl nebo on i t. roan i 1 ide . Výhodnou ochrannou skupinou kyseliny je methyl.

• · Λ

Prekursory jsou deriváty sloučenin podie předloženého vynálezu, které mají chemicky nebo metabolicky odštěpítelné skupiny a stávají se účinkem solvolýzy nebo za fyziologických podmínek sloučeninami podle předloženého vynálezu, které jsou farmaceuticky aktivní in vivo. Deriváty sloučenin podle předloženého vynálezu jsou účinné jak ve formě kyselých, tak i bazických derivátů, ale kyselé deriváty často přinášejí výhody rozpustnosti, tkáňové slučitelnosti nebo zpožděného uvolňování v savčím organismu (viz Bundgard, H., Design of Prodrugs, str.

7-9,21-24, Elsevier, Amsterdam 1985). Prekursory zahrnují deriváty kyselin, jako jsou estery připravené reakcí výchozí kyselé sloučeniny s vhodným alkoholem nebo amidy připravené reakcí výchozí kyselé sloučeniny s vhodným aminem. Jednoduché alifatické estery (například methylester, ethylester, propylester, isopropylester, butylester, sek.-butylester, terč.-butylester} nebo aromatické estery odvozené od kyselých skupin nacházejících se na sloučeninách podle předloženého vynálezu. Další výhodné estery zahrnují morfolinoethyloxy, diethyLglykolamid a díethylaminokarbonylmethoxy. V některých případech je žádoucí připravit prekurzory typu dvojitého esteru jako jsou (acyloxy)alkyl estery nebo ((alkoxykarbonyl)oxy)alkyl estery.

Výhodné podskupiny sloučenin obecného vzorce (I) :

Podtřída sloučenin obecného vzorce (I) jsou ty, ve kterých P¹ je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny atom vodíku, atom halogenu, - (C,-C3) a 1 ky 1, - (C 4-C.,) cyki oa 1 ky 1 , -(C,· i ¹ cyk 1 od I keny 1., -0 (C i-C?) a 1 ky i a -S (C;-C.·) alky I .

444444 · 4 · * · · 4 4 4 4

4 4 * 4 4 4 β

4444 4 44 «4 44 <4

Další výhodné podtřídy sloučenin obecného vzorce (I) jsou jsou ty, kde ve významu R²', -(L)- představuje alkylový řetězec s 1 nebo 2 atomy uhlíku.

Další výhodné podtřídy sloučenin obecného vzorce (I) jsou jsou ty, kde ve významu R²⁰, skupina R_so je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny cykloalkyl, cykloalkenyl, fenyl, naftyl, norbornanyl, bicykloheptadienyl, tolulyl, xylenyl, indenyl, stilbenyl, terfenylyl, difenylethylenyl, fenyl-cyklohexenyl, acenaftylenyl a anthracenyl, bifenyl, bibenzylyl a vztahující se bibenzylylové homology, reprezentované obecným vzorcem (bb),

kde je rovno číslu od 1 do 8. Obzvláště výhodné jsou sloučeniny kde R^2l) je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny

-(CH_;)

• « • ♦ * « kde R¹' představuje zbytek, nezávisle zvolený ze souboru zahrnujícího atom halogenu, skupiny - (C1-C10) alkyl, — (Ci — C₁₀)alkoxy, -S-(Ci-C₁₀ alkyl) a - (Ci-C₁₀) haloalkyl a w je číslo od 0 do 5.

Další výhodné podtřídy sloučenin obecného vzorce (I) jsou ty, ve kterých R²' představuje substituent mající vazebnou skupinu kyseliny s délkou vazebné skupiny kyseliny 2 nebo 3. Nej výhodnější jsou sloučeniny kde kyselinotvorná skupina je zvolena ze souboru, zahrnujícího

-CO₂H,

-5-tetrazolyl,

-so₃h, o

I

P—OH

I

OR o

Ό —

OR

HO =N \

x^£

N kde n je číslo v rozmezí od 1 do 8,

Rb', představuje atom kovu nebo - (C_L-Ci₀) a 1. kyl, a R_ri představuje atom vodíku nebo ( C i-C₁₀) a 1. ky 1 .

• ·

Obzvláště výhodné jsou sloučeniny, kde kyselinotvorná skupina substituentu R je zvolena ze souboru, zahrnujícího;

-co₂h

-SO₃H

-P(O)(OH)₂, nebo sůl a prekurzorový (například esterový) derivát.

Další výhodné podtřídy sloučenin obecného vzorce (I) jsou ty, ve kterých R²' představuje substituent mající vazebnou skupinu kyseliny s délkou vazebné skupiny kyseliny 2 nebo 3 a vazebná skupina kyseliny skupina, - (L_a)-, pro substituent R²' je zvolena ze souboru, zahrnujícího skupinu, reprezentovanou obecným vzorcem;

kde Q je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny -(CH₂)-, -0-,

-NH- a -S- a R^a4 a R⁸⁵ jsou nezávisle na sobě zvolené ze souboru, který zahrnuje atom vodíku, - (Ci-C₁₀) aíkyí, aryl, -(Ci~ C10) al kylary 1, -aryl (Ci-C₁₀) alkyl, karboxy, karbal koxy a atom halogenu. Nejvýhodnější jsou sloučeniny, kde vazebná skupina kyseliny -(LJ- pro substituent R²' je zvolena ze souboru, zahrnujícího specifické skupiny • · • · ftft·· · ftft ft* ftft · *

Další výhodné podtřídy sloučenin obecného vzorce (I) jsou ty, ve kterých R² představuje substituent mající vazebnou skupinu kyseliny s délkou vazebné skupiny kyseliny 3 až 8 atomů a vazebná skupina kyseliny skupina, -(L_a)-, pro substituent R²' je zvolena ze souboru, zahrnujícího * * · · * 4 · · 4 _· · * · · · · 4 4 >4 · « »44444 ·· 44 ♦ 4 «44

4 4*44 4 4

kde r je číslo od 2 do 7, s je 0 nebo 1, a

Q je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny -(CH₂)~, -0-, -NHa -S-, a

R⁸⁴ a R⁸⁵ jsou nezávisle na sobě zvolené ze souboru, který zahrnuje atom vodíku, - (Cí-Cjo) alkyl, aryl, - (Ci-C₁₀) al kylaryl, -aryl (Cx-Cio) alkyl, karboxy, karbalkoxy a atom halogenu.

Nejvýhodnější jsou sloučeniny, kde vazebná skupina kyseliny - (L_a)- pro substituent R²’ je zvolena ze souboru, zahrnujícího specifické skupiny;

Φ φ φ φ ♦ ·

“1

(CH, (CHJ ,.

-ΝΗ (CH-J and

H.C' (CH,) ·· ·« • · · · • * ♦ · ·· »·Φ · 9 9 • ···♦·· • 99 9 «»

99 99 ve kterém R⁸⁴ a R⁸⁵ jsou nezávisle na sobě zvolené ze souboru, který zahrnuje atom vodíku, - (Ci-Cio) al kyl, aryl, -(C_;C₁₀)alkaryl, - (Ci-C₁₀) aralkyl, karboxy, karbalkoxy a atom halogenu.

Další výhodné podtřídy sloučenin obecného vzorce (III) jsou ty, ve kterých R³ je zvolen ze souboru, který zahrnuje atom vodíku a ne interferující substituenty, přičemž neinterferující substituenty jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího skupiny atom vodíku, - (Ci-C₆) alkyl, - (C₂-Cg) alkenyl, - (C₂-C₆) alkinyl, - (C₇Ci₂)aralkyl, - (C₇-C_L2) alkaryl, - (C₃-C₈) cykloa 1 kyl, -(C₃C_a)cykloa1kenyl, fenyl, tolulyl, xylenyl, bifenyl, -(C,C₆)alkoxy, - (C₂-C₆) alkenyloxy - (C₂-C₆) al kinyloxy, —(Ci —

C ) alkoxyalkyl, - (Ci-Ci₂) alkoxyalkyloxy, - (Ci~Ci₂) a 1 kyl kar bony 1,

- (C₁-C₁₂) al kylkarbonylamíno, - (Ci-C₁₂) alkoxyamino, - (C₃Cj₂) alkoxyaminokarbonyl, - (Ci—C_i2) alkylamino, - (C_L-C₆) alkylthio,

- (C,-C₁₂) alkylthiokarbonyl, - (Ci-Cg) alkylsulfinyl, — (Ci~

Cg)alkylsuifonyl, - (Ci~C₆) haloalkoxy, - (Ci-C₆) haloalkylsulfonyl,

- (Cj-C₆} ha loa 1 kyl, - (Ci-C₆) hydroxyalkyl, -C(O)O(Ci~C₆ alkyl),

- (CH₂) _n0 (C i-C_s alkyl), benzyloxy, atom halogenu, fenylthio;

fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C₆) alkyl, atomem halogenu nebo -CF₃; furyl, thiofenyl, -(CH₂)_nCN, - (C K₂) _n R^e, kde R⁸ představuje H, -CONH₂, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R^:u představují nezávisle na sobě - (Ci-CJ alkyl nebo -fenyl ;

-CHO, amino, amidíno, karbamyl, karboxyl, karbalkoxy,

- (CK₂) _nCO₂H, kyano, kyanoguanidinyl, guanidino, hydrazid, hydrazino, hydrazido, hydroxy, hydroxyami no, nitro, fosfono, -SCbH, Lhioacetal, thiokarbonyl a - (C_;-Cg) al kyl. karbonyl; kde n s<:; rovná Ί až 8 .

·· · ·· ·· • ftft * · · · _··· · ·*· « • ······ ·· ·· • ft ··*· ·«·· ft ftft «ft ··

Další výhodná skupina substituentů R³' zahrnuje H, -0(CLC-jJalkyl, atom halogenu, - (Ci-Cg) alkyl, fenyl, —(Cl — C4)alkylfenyl; fenyl substituovaný skupinou - (Ci-Cg) alkyl, atomem halogenu nebo -CF3; -CH2OSi (Cx-Cg) alkyl, furyl, thiofenyl, - (Ci-Cg) hydroxyalkyl; nebo -(CH2)nR⁸, kde R^a představuje H, -CONH2, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představují nezávisle na sobě - (C1-C4) alkyl nebo -fenyl (C_xC₄) alkyl a n je rovno 1 až 8;

Ještě další výhodné skupiny zahrnují H, -O (C1-C4) alkyl, atom halogenu, - {C_x-Cg) al kyl, fenyl, - {C1-C4) alkylfenyl; fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C₆) alkyl, atom halogenu nebo -CF₃; -CH₂OSi (C!-Cg) alkyl, furyl, thiofenyl, - (Ci~C₆) hydroxyalkyl ; nebo -(CH₂)_nR^e, kde R⁸ představuje H, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představují nezávisle na sobě - (C1-C4) alkyl nebo -fenyl· (C1-C4) alkyl a n je rovno 1 až 8.

Výhodné sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou sloučeniny, které mají obecný vzorec (II)

COR¹

(II)

4 4 4 · 4 4 9« · 4 _· » ♦ 4 4 4 · 4 4 « · α « ··«· « · * *

4 · · 4 4 · · 4 ·· ·· · » · • 4 4444 · «

4 4 4 4 44 4« ·· 4*3 ve kterém:

R¹ představuje -NHNH₂ nebo -NH₂;

R: je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny -OH a -O(CH₂) _mR⁵, kde

R⁵ představuje H, -CO₂H, -CO₂ (Ci-C₄ alkyl);

O

-P (R^éR⁷) kde R⁶ a R⁷ představují nezávisle na sobě -OH nebo -O(CiC4) alkyl; -SO3H, -SO3 (Ci~C4 alkyl), tetrazolyl, -CN, -NH2, -NHSO2R¹⁵; -CONHSO2R¹⁵, kde R¹⁵ představuje - (Ci-Cg) alkyl nebo -CF3, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO2H nebo -CO2 (Ci-C4) alkyl·, kde m je rovno 1-3;R³ představuje H, -0{Ci~ C4) alkyl, atom halogenu, - (Ci-Cg) alkyl, fenyl, - (C_xC₄)alkylfenyl; fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C₆) alkyl, atom halogenu nebo -CF₃; ~CH₂OSi (Ci-Cg) al kyl, furyl, thiofenyl, -{Ci-C₆) hydroxyalkyl; nebo -(CH₂)_nR⁸, kde R⁸ představuje H, -CONH2, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představují nezávisle na sobě - (C2-C₄) al kyl nebo -fenyl (Ci-C₄} alkyl a n je rovno 1 až 8 ;

R⁴ představuje H, -{C₅~Ci₄) alkyl, -(C₃-C_L4) cykloalkyl, pyridyl, fenyl nebo -fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C₆) alkyl, atom halogenu, -CF₃, -OCF₃ , - (C₃-C₄) alkoxy, -CN, - (C_L-C₄) alkylthio, fenyl (Ci~C₄) alkyl, - (Ci-C₄) alkylfenyl, fenyl, fenoxy nebo naf tyl;

A představuje fenyl nebo pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 5, 6, 7 nebo 8;

Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku je v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyk1ický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený ze souboru, zahrnujícího ·· t • 4

4

4

atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4, nebo ve kterém jeden atom uhlíku na heterocyklickém kruhu je případně substituovaný skupinou = 0 nebo jejích farmaceuticky přijatelný racemát, solvát, tautomer, optický isomer, prekurzorový derivát nebo sůl;

za předpokladu, že jeden ze substituentů A nebo Z představuje heterocyklický kruh.

Výhodné substituenty sloučenin obecného vzorce I a II zahrnují nás leduj icí :

(a) R¹ představuje -NH₂, -NHNH₂;

(b) R¹ představuje -NH₂;

(c) R² představuje -O(CH2)mR⁵, kde R⁵ představuje -H, -CO2H nebo

O

-P (R⁶R⁷) kde R⁶ a R⁷ jsou -OH; (d) R² představuje -OH;

(e) R² představuje -O(CH2)mR⁵, kde R⁵ představuje -Η, -CO2(C,-C₄ alkyl), fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO₂H nebo -C0₂ (Ci-C₄ alkyl) ;

(f) R² představuje -O(CH₂)_mR⁵, kde R⁵ představuje

O

II

-P (R^ť'R ) a R^D a R' jsou -O(CL-C4 alky]) nebo když jeden z R^b a R^z je -O(Ci-C4 alkyl), druhý z nich je -OH;

(g) R^J představuje -Η, -O(Ci-C₄ alkyl) nebo - (OH,.) ,,R'^!, kde n -- 2 a R^ri představuje H nebo fenyl;

1·· «» *4 4« * + t 4 · · · — ♦ * 4 · · · * · · * · · • ··«·*! « · » » · · ·«· (h) R³ představuje H nebo -O(C_;-C₄ alkyl);

(i) R³ představuje -{CH2)_nR⁸, kde R⁸ představuje -NR⁹R¹⁰,

-CNH2 nebo -CN, kde R⁹ a R¹⁰ představují - (Ci—C₄) alkyl;

(j) R⁴ představuje fenyl;

(k) R⁴ představuje fenyl substituovaný v poloze 2 a 6 fenylového kruhu substituentem -(Ci-C₄)alkyl, (Ci-C₄}a 1koxy, atom halogenu nebo fenyl;

(l) R⁴ představuje fenyl substituovaný v poloze 2 nebo 6 fenylového kruhu - (Ci~C₄) alkylem, - (Ci-C₄) alkoxy, atomem halogenu nebo fenylem;

(m) R⁴ představuje fenyl substituovaný v poloze 3 nebo 5 fenylového kruhu - (Ci-C₄) alkylem, - {Ci~C₄) alkoxy, atomem halogenu nebo fenylem;

(n) R⁴ představuje - (C₆-Ci₄) alkyl nebo - (C₆-Ci₄) cykloal kyl ;

(o) Z představuje cyklohexenyl;

(p) R⁵ představuje H, -CO₂H, -C0₂ (Ci~C₄ alkyl) ,

O

-P <R⁶R⁷)

-NHSO2 (Ci-Cé) alkyl, -CONHSOj (Ci-C₆) alkyl, tetrazolyl, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO_;.H nebo -CO.JCi-C., alkyl) kde ť a R^; představují nezávisle na sobě -OH nebo -O(C]-C₄ alkyl) a m je rovno 1-3;

(q) R' představuje H, -CO₂H, -CO₂(Ci-C₄ alkyl), ««a *· · * ·

4 I ««4 ¢444 — » 4 4 4 4444 4 *· « 4444 4 4 • «Φ< 4 44 44 44 44

-p (R^R¹) fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO₂H nebo -CO₂(Ci~ C₄ alkyl) kde R⁶ a R⁷ představuji nezávisle na sobě -OH nebo -O(Ci-C₄ alkyl) a m je rovno 1 — 3;

(r) Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku je v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyklický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4 kde jeden atom uhlíku heterocyklickém kruhu je případně substituovaný skupinou

-C (s) Z představuje cyklohexenyl nebo fenyl;

nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl, racemát nebo optický isomer;

za předpokladu, že pokud R³ představuje H, R⁴ představuje fenyl, m je rovno 1 nebo 2 a R² je substituován v poloze 6, R⁵ nemůže být H; a pokud R¹ představuje NHNH₂, R⁸ nemůže být

-CNH2 o ) A představuje fenyl;

'u ; Λ představuje pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 5, 6, 7 nebo 3;

(v) R' představuje H, -CO₂H, -CO₂(Ci-C₄ alkyl);

• · · · · • fc • fc f · á

-P (R⁶R⁷) kde R⁶ a R⁷ představují nezávisle na sobě -OH nebo -O(CiC4) alkyl; -SO3H, -SO3(Ci-C4 alkyl), tetrazolyl, -CN, -NH2, -NHSO2R¹⁵; -CONHSO2R¹⁵, kde R¹⁵ představuje - (CL-C₆) alkyl nebo —CF₃, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO₂H nebo -C0₂ (C1-C4)alkyl, kde m je rovno 1-3; a (w) R³ představuje H, -O (C1-C4) alkyl, atom halogenu, - (C₃C₆) alkyl, fenyl, - (C1-C4) alkylf enyl; fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C₆) alkyl, atomem halogenu nebo -CF₃; -CH₂OSi (Ci~C₆) alkyl, furyl, thiofenyl, - (Ci-C₆) hydroxyalkyl

- (Ci-C₆) alkoxy (Ci-C₆) alkyl, - (Ci~C₆) alkoxy (Ci-C₆) al kenyl,

- (Ci-C₆) alkoxy (Ci-C₆) alkyl, - (Ci-Cď) alkoxy, - (Ci-C₆) alkenyl;

nebo -(CH₂)_nR⁸, kde R⁸ představuje H, -CONH2, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představují nezávisle na sobě atom vodíku, -CF3, fenyl, - (C1-C4) alkyl, - (C1-C4) al kyl fenyl nebo -fenyl (C1-C4) alkyl a n je rovno 1 až 8.

Další typické příklady sloučenin obecného vzorce I, použitelné podle předloženého vynálezu zahrnují následující sloučeniny:

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2-methylbenzyl) -9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

-[4-oxo-5-ka rboxamido-9-(3-methylbenzyl)-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4-methylbenzyl)-9H-pyrido[3,4 b| 1ndo1y1]oc tová kysel 1 na;

* · v * · j Φ · · · — · · 4 ·ϊ ··· · · · · • φφφφφ* · « *« * · * ··· • · · » « » * # • * · · Φ «ν « φ · · ΦΦ

2- [ 4-οχο-5-karboxamido-9- ( 4 - terč . -butyl benzyl )-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

2- [4-oxo-5-karboxamido-9-pentafluorbenzyl-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2-fluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3-fluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4-fluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2,6-difluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3,4-difluorbenzyl}-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2,5-di fluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3,5-difluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2,4 - d if1uorbenzy1)-9H-pyrido[3,4 bI indo1y1]octová kyselina;

«Φ* ta *· 9 «

* · Φ · a a « * • · φ φ φ φ* Φ· φφ «φ

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2,3-difluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-S-karboxamido-9-[2-(trifluormethyl)benzyl]-9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[3-(trifluormethyl) benzyl]-9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[4 -(trifluormethyl) benzyl] -9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[3,5-bis (trifluormethyl) benzyl]-9H pyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[2,4-bis(trifluormethyl)benzyl]-9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octové kyselina;

-[4-oxo-5-karboxamido-9-(a-methylnaftyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

-[4-oxo-5-karboxamido-9-(b-methylnaftyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-i 4-oxo-5-karboxamido-9-(3,5-dimethylbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2,4-dimethylbenzy1)-9H-pyrido[3,4b]indoly1]octová kyselina;

• * · • · • »

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2-fenylbenzyl)-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-(3-fenylbenzyl)-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4-fenylbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(1-fluorenylmethyl)-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2-fluor-3-methylbenzyl)-9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3-benzoylbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2-fenoxybenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3-fenoxybenzyl)-9H-pyrido[3,Ιό] indolyl ] octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4 -fenoxybenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[3-[2-(íluorfenoxy)benzyl]]-9Hpy r i do [3, 4-b] indo Ly 1. ] octová kyselina;

·♦ 9

9 · · 4· a A • * ♦ · · * • aaa * * a * •v · · · · · ·* • · a · a • a a a a· a·

- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-( 3-[4-(fluorfenoxy)benzyl]]-9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

- ( 4-oxo-5-karboxamido-9-[2-fluor-3-(tri fluormethyl)benzyl]-9H pyrido[3, 4-b]indolyl]octová kyselina;

-[4-oxo-5-karboxamido-9-[2-fluor-4-(trifluormethyl)benzyl]-9H pyrido[3, 4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[2-fluor-5-(trifluormethyl)benzyl]-9H pyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-[3-fluor-5-(trifluormethyl)benzyl]-9H pyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-[4-fluor-2-(trifluormethyl)benzyl]-9H pyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[4-fluor-3-(trifluormethyl)benzyl]-9H pyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-[2-fluor-6-(trifluormethyl)benzyl]-9H pyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-(2,3, 6-trifluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4 b] indo1yl]octová kyselina;

2-[4 -oxo-5-karboxamido-9-(2,3,5-1 r ifluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4 b]indo1yl]octová kyselina;

*4 · » · · * · tt * « · _ · « 4 ♦ 4··· · • * • · · · Λ

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2,4, 5-trifluorben2yl)-9H-pyrido [3,4 b]indolyl]octová kyselina;

- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-(2,4,6-trifluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4bJindolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2,3,4-trifluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3,4,5-trifluorbenzyl)-9H-pyrido[3,4b] indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[3-(trifluormethoxyl)benzyl]-9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[4 -(trifluormethoxyl}benzyl]-9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[4-methoxy(tetrafluor)benzyl]-9Hpyrido(3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2-methoxybenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3-methoxybenzy1)-9H-pyrido[3,4 b]indo1yl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4-methoxybonzyi)-9H-pyrIdo[3,4b ] indolyl |octová kyselina;

·* φ • φ

2- [4-oxo-5-karboxamido-9-(4-ethylbenzyl)-9H-pyrido[3,4b] indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4-isopropylbenzyl)-9H-pyrido[3, 4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3,4,5-trimethoxybenzyl) — 9H— pyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3,4-methylenedioxybenzyl) -9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4-methoxy-3-methylbenzyl) -9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3,5-dimethoxybenzyl}-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2,5-dimethoxybenzyl)-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4-ethoxybenzyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(cyklohexylmethyl)-9H-pyrido[3,4b] indo1yl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(cyklopentylmethyl)-9H-pyrido[3,Ιό ]indolyl]octová kyselina;

2- [4-oxo-5-karboxamido-9-ethyl-9H-pyrido[3, 4—b]indolyl]octová kyselina;

- [4-oxo-5-karboxamido-9-(1-propyl)-9H-pyrido[3,4b]indolylJoctová kyselina;

2- [4-oxo-5-karboxamido-9-(2-propyl)-9H-pyrido[3,4b] indolyl]octová kyselina;

2- [4-oxo-5-karboxamido-9-(1-butyl)“9H-pyrido[3, 4b] indolyl]octová kyselina;

2- [4-oxo-5-karboxamido-9-(2-butyl)-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-isobutyl-9H-pyrido[3,4b] indolyl]octová kyselina;

2-[ 4-oxo-5-karboxamido-9-[2-(1-fenylethyl)]-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-[3-(1-fenylpropyl}]-9H-pyrido[3,4b]indolyl]octová kyselina;

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-[4-{1-fenylbutyl)]-9H-pyrido[3,4 bl indolyl]octová kyselina;

- [ 4-oxo-5-karboxamido-9-(1-pentyl)-9H-pyrído[3,4b 1 indo1yl]octová kyselina; a flfl* « · ·* flfl • fl · · · · · — a · · « flflfl* · φ »····· fl a «a *·· v·» « · · · a » fl* • flflfl * · · · · flfl

-[4-oxo-5-karboxamido-9-(1-hexyl)-9H-pyrido[3,4 b]indolyl]octová kyselina;

nebo jejich farmaceuticky přijatelné racemáty, solváty, tautomery, optické isomery, prekurzorové deriváty nebo soli.

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých kruh A je fenyl a heteroatom v Z představuje atom síry, atom kyslíku nebo atom dusíku mohou být připraven jak bylo popsáno v Schématech I (a) (f) uvedených dále.

Schéma I(a) • ♦ 4 · · · «*·« · · · ♦ • · * * *· · «·« φ « · ·

O..PG

MeO

_XNH ,

(107)

(109)

BF,

MeClAlNH,

BBrNaH

X(CH-) „R^,?

1. NaOH 2 . HCl

MeO

R^J

NH

O(CH ,) R

R

NH • · · » ♦ β

PG představuje ochrannou skupinu kyseliny.

X představuje atom halogenu.

R'^iS' představuje H, -O (C1-C4) alkyl, atom halogenu, - <CiCJalkyl, fenyl, -(C1-C4)alkylfenyl; fenyl substituovaný skupinou - (Cl-Ce) alkyl, atom halogenu nebo -CF₃; -CH₂OSi (Ci — C_Ě) alkyl, furyl, thiofenyl, - (Ci-C₆) hydroxyalkyl; nebo - {CH₂) _nR^fl, kde R⁸ představuje H, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představují nezávisle na sobě - (C1-C4) alkyl nebo -fenyl (C1-C4) alkyl a n je rovno 1 až 8;

Ester kyseliny indol-3-octové (101), Ref 10, se alkyluje zpracováním amidem alkalického kovu a benzyloxymethylchloridem a tím se dostane (102) , která se přemění na alkohol (103) katalytickou hydrogenací. Alkohol se alkyluje pro získání formaídehydacetalu (104), který se cyklizuje Lewisovou kyselinou pro vytvoření pyrano[3,4-b]indolu (105). Ester se přeměnění na amid (106) methylchloraluminum amidem a potom na fenol (107) bromidem boritým. Fenol se O-alkyluje a tím se dostane (108), která se hydrolyzuje na kyselinu (109).

10) Dillard, R. et al., J, Med Chem. Vol 39, No. 26,5119-5136.

··

4 • · · * · 4 * 4 ♦·4 4 4 4

44 4 4 4 444

4 4

Λ

1. Η-.

Pd/cf . R^;iCHO ,

BF

K.CCg

EtOH

PCi představuje ochrannou skupinu kyseliny,

W představuje atom halogenu, alkyl nebo aryl sullonyl

R’^,J' představuje H, -O (C1-C4) alkyl, atom halogenu, — (C: — CJalkyl, fenyl, - (Ci~C4) alkylfenyl; fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C6) alkyl, atomem halogenu nebo -Clý; -ClhOSi. (CýC6) alkyl, furyl, thiofenyl, - (Cx-C5) hydroxyalkyl; nebo -(CH2)nR⁸, kde R⁸ představuje H, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představují nezávisle na sobě - (Cx-CJ alkyl nebo -fenyl (CTCJalkyl a n je rovno 1 až 8.

Reakce tohoto alkoholu (103) aldehydem a kyselinou vytvoří pyranoindol (110). Přeměna hydroxylové funkce (103) na halogenidovou nebo sulfátovou zpracováním trifenylfosfinem a CH₃X (kde X je halogen) (111), kde X triethylaminem funkční skupinu se dosáhne pro atom a

vytvoření sloučeniny obecného vzorce halogenu; nebo zpracováním methansulfonylchloridem pro vytvoření sulfonátu. Přemístění sodnou solí kyseliny thioloctové dává sloučeninu (114), která se hydrolyzuje bází na thiol (115), který reaguje s vhodně substituovaným aldehydem a kyselinou a vytvoří thiopyranoindoly (116) .

Meziprodukt (111) může také být ponechán reagovat s azidem sodným a tím se dostane azidový derivát (112), který se redukuje katalyticky vodíkem a tím se dostane amin, který se přemění na karbolin (113) aldehydem a kyselinou. Meziprodukty (113), (110) a (116) mohou být N-alkylovány použitím hydridu sodného a vhodné substituovaného alkylhalogenidu XCH^R⁴.

• · flfl flfl • · · fl · * fl··· — ·fl · · ···· · fl· fl • ······ ·· flfl ··· ··· fl · · · · · · · flflflfl fl flfl flfl ·· fl·

Schéma I(c)

BnBr

(120)

ROH * « 4·

(128) (127)

BBr,

(131) «· ·

PG představuje ochrannou skupinu kyseliny, má význam definovaný výše.

4-Methoxyindol (117) se přemění derivát kyseliny indoloctové (118)a ikylací s epoxypropionátem, Zpracování kyseliny (118) brominačním reagentem dává směs bromových isomerů (119) a (120), které dají spiro sloučeninu (121) po zpracováni bází. Zahřívání (121) s benzylbromidem dává směs isomerových sloučenin bromu (122) a (123), které reagují s thioacetátem draselným a tím se dostane směs isomerů, ze které může být separována sloučenina (124). Solvolýza thioesteru dává thiol a tím se dostane (126). Lewisova na thiopyrano[3,4-b]indol (127).

Esterová funkce se přemění na amid použitím methylchloraluminum amidu, methyiether se štěpí bromidem boritým a produktový fenol se O-alkyluje esterem kyseliny bromoctové a tím se dostane (130), která se hydrolyzuje na (131).

(125), který se alkyluje kyselina přemění (126)

HO

(132)

TBSO.

CO,Et

Schéma I (d)

THF

TBSCl

V

1) II-BuLi 21 ZnClj 3) X s''''

R CH.X

K-N(TMS ), THF (134)

·« fl* ·» fl* *·

THF

CO.Et

K- N (TMS | 2

TMSC 1

CH.CH.

TBSO

CH3C1A1NH2

CO_?Et

X představuje atom halogenu,

Κ^ίιϋ' má význam definovaný ve Schématu I(a) výše; a R představuje - (Cín ; _irR '.

4 4 *

4 · 4

444444 —4 4 4444 4 4

44·4 4 44 44 44 »4

Ochrana atomu kyslíku zpracováním (132) terc.butyldimethylsilylchloridem a imidazolem v aprotickém polárním rozpouštědle jako je tetrahydrofuran nebo methylenchlorid poskytne (133).

Alkylace v poloze 3 indolu (133) se dosáhne zpracováním n~ butyllithiem a potom chloridem zinečnatým při teplotách začínajících při asi 10 °C a zvyšujících se na teplotu okolí, následovaným reakcí s vhodným haloalkylesterem jako je methyl nebo ethyl-bromacetát. Reakce se výhodně provádí při teplotě okolí ve vhodném aprotickém polárním rozpouštědle jako je tetrahydrofuran.

Alkylace indolového dusíku může být potom dosažena reakcí (134)

s vhodným	alkylhalogenidem	v	přítomnosti
bis(trimethylsilyl)	amidu draselného pro	přípravu	(135).
Esterová funkční	skupina (135)	se	přemění na
trimethylsilylketen	acetal	(136)	zpracováním

bis(trimethylsilyl)amidem draselným a trimethylsilylchloridem. Zpracování keten acetalu (136) bis(chLormethyl)sulfidem a bromidem zinečnatým v methylenchloridu poskytne cyklizovaný produkt (137). Přeměna na amid (138) může být dosažena Weinrebovou reakcí methylchloraluminum amidem. Odstranění kyslíkové ochranná skupiny fluoridovým zdrojem jako je tetrabutylamonium fluorid (TBAF) a současnou reakcí výsledného aniontu například s ethyl-brornacetátem přinese ester (139). Deprotekce esteru dává požadovanou kyselinu (140).

• · ·« « *· • · * · · · · • ···* * « · · • «« ·· ··» ··· • * · · * * • · · · ·· ··

O MeClAlNH..

(136)

TBAF

XR acetonitril

1)LiOH

2) HCl (1«)

R^,|al má význam popsaný ve Schématu I(a) a R má význam popsaný ve Schématu III(b).

Zpracování keten acetalu (136) bis (chlormethyl)etherem a bromidem zinečnatým v methylenchloridu vede k cyklízovanému produktu (141). Přeměna na amid (142) může být dosažena Weinrebovou reakci s methylchloralumínum amidem. Odstranění kyslíkové ochranné skupiny fluoridovým zdrojem jako je tetrabutylamonium fluorid a současnou reakcí výsledného aniontu s ethyl.-bromacetátem dává ester (143). Deprotekce esteru dává požadovanou kyselinu (i 44) .

• · * ·· ·« ft· «· • · · · · · * · · · ··· · «··· · ·· · • **· « · · · · · ·»· ···

-♦ · · · · · · · ···· · »· · ·· ··

Schéma I (f)

(231) (232)

(236)

(242)

N-alkylace komerčně dostupného 4-methoxyindolu (231) za bazických podmínek použitím alkylhalogenidu dává N-alkylindol (232). Acylace vhodným acylchloridem vytvoří glyoxalátový esterový produkt (233), který může být redukován řadou hydridových redukčních činidel a tím se dostane meziproduktový alkohol (234). Přeměna alkoholu na vhodnou odštěpíte1nou skupinu a přemístění sírovým nukleofilem dává thioetherovy produkt (235). Přeměna na acylchloride a spontánní cyklLzace dává thioketonový produkt (236). Odštěpení, esteru může byt provedeno za bazických podmínek a tím se dostane odpovídající ·· φ kyselina, která po vytvoření chloridu kyseliny a reakci s vhodným aminem dá amidový produkt (237). Odštěpení methyletheru vede k vytvoření fenolu (238), který může být alkylován za bázických podmínek použitím alkylhalogenidů a tím se dostane 0alkylovaný produkt (239) . Odštěpení esteru za bázických podmínek dává požadovaný produkt (240). Alternativně dává redukce benzylového ketonu s hydridovým redukčním činidlem a následná deoxygence výsledného alkoholu deoxygenovaný produkt (244). Odštěpení oxyoctového esteru probíhá za bázických podmínek a tím se dostane požadovaná oxyoctová kyselina (242).

Sloučeniny kde Z představuje aromatický nebo heterocyklický kruh, obsahující atom dusíku, mohou být připraveny jak bylo popsáno v Schématech II (a)-(e), uvedených níže.

·*

CH ,0

Schéma II (a)

(145) (146)

a) XCH-.R,. NaH

b)H.O, 0H-

a) XR

b) OH->

C) H,0+ (148)

Substituovaný haloanilin (145) se kondenzuje s N-benzyl-3piperidonem pro získání enaminu (146). Uzavření kruhu se provede zpracováním (146) octanem paladnatým a výsledný produkt se přemění na (147) zpracováním kyanobromidem. Alkylace (147) se provádí zpracováním vhodným alkylbromidem použitím hydridu sodného jako báze. Hydrolýza tohoto N-a1kylováného produktu bazickým peroxidem vodíku standardních podmínek vede k vytvoření (148). Demethyíace (148) se provádí zpracováním bromidu boritého v methylenchloridu. Výsledný fenol (149) se přemění standardní posloupností O-alkylace methyl-bromacetátem v přítomnosti báze, hydrolýzou hydroxidem pro získání meziproduktové soli, která se potom protonuje ve vodné kyselině pro získání požadovaného δ-karbolinu (150).

TBSO

Schéma II(b) ,3 (a)

(136)

ΟΤΜΞ |T 'T N_ 0' och₂ch₃

CH.R

cn ?

TBSO

,.Ίλ

EtO„C

(151) (152)

KHMDS

XR

2) HC1

1)LiOH

Pd {C)

Karbitol

Δ (155)

CH..R⁴ (156) ·· · • »

X představuje atom halogenu,

R má význam, jaký byl definován ve Schématu I(d), a

R^3!al má význam definovaný ve Schématu I (a) .

Keten acetal (136), připravený jak bylo popsáno ve Schématu I(d) , reaguje s benzyl bis(methoxymethyl)aminem v přítomnosti chloridu zinečnatého a tím se dostane tetrahydro-beta-karbolin (151) .

Zpracování (151) hydroxidem lithným, neutralizace kyselinou chlorovodíkovou a následné zpracování hydrochloridem l—(3— dimethylaminopropyl}-3-ethylkarbodiimidu a čpavkem vede k desilylovanému amidu (152), kde R²⁰ představuje atom vodíku, který může být alkylován například ethylbromacetátem a tím se dostane ester (153).

Alternativně zpracování (115) vhodným Weinrebovým reagentem vytvoří amid (152) (R²⁰ je terč.-butyldimethylsilyl), který se desilyluje tetra-n-butylamonium fluoridem a alkyluje například ethyl-bromacetátem a tím se dostane ester (153). Hydroxidem lithným mediovaná hydrolýza dává kyselinu (154), která může být hydrogenována na vhodném katalyzátoru v přítomnosti hydrochloridu kyseliny a tím se dostane tetrahydro-betakarbolin ve formě hydrochloridové soli (155). Sloučenina (155) může být aromatizována zahříváním na teplotu zpětného toku v karbitolu s paladiem na uhlí pro získání beta-karbolinu (156).

Schéma II (c)

TBSO

NO, (157)

2) líaír,

NO,

He,N (158)

(160)

1) F2 ) XR

(164)

Pd (C)

Karbito1

Δ

X představuje atom halogenu,

R má význam, jaký byl definován ve Schématu I (d) ; a iná význam definovaný ve Schématu I (a) .

• ·

V reakci v jedné reakční nádobě se indol (133) postupně zpracovává jedním ekvivalentem n-butyllithia, plynným oxidem uhličitým, jedním ekvivalentem terč.-butyllithia a 1dimethylamino-2-nitroethenem a tím se dostane (157). Nitroalken (157) se redukuje hydridem hlinito-lithným na amin (158), který se cyklizuje methyl glyoxylátem (Ret. 9) v ethanol zahřívaném na teplotu zpětného toku a tím se dostane tetrahydrokarbolin (159). Alkylace obou atomů dusíku sloučeniny (159) vede k vytvořeni meziproduktu (160), který se zpracovává vhodným Weinrebovým reagentem pro získání amidu (161). Fluoridově podporovaná desilylace a alkylace například ethyl-jodoacetátem dá ester (162), který může být hydrogenován na vhodném katalyzátoru a bazicky hydrolyzován a tím se dostane kyselina (163). Aromatizace (163) na karbolin (164) se dosáhne zahříváním na teplotu zpětného toku v karbitolu v přítomnosti paladia na uhlí.

Reference 9:

Kelley, T. R. ; Schmidt, T. E. ; Haggerty, J. G. A convenient preparation of methyl a ethyl glyoxylate, Synthesis, 1912,5445.

• 4 *4 44 44 • 4 « 4 4« * 4 4 · · 4 4 4 »44» ·

4» 44 4· 44

Schéma II (d)

(173) (172)

OTBS

H₂/Pd(C) (175)

OTBS

(178)

COOEt

0 • 0 0 0 «4 » ·· ·· • «* * «*0·

MeAlClNHI

MeAlClNH,

V

Komerčně dostupná kyselina (170) se redukuje hydridem hl lithným, oxiduje pyridiniumchlorchromátem a siiyluje 1 i n 1.1. o e r c . ftft · butyldimethylsilylchloridem a tím se dostane (111). Zpracováni azídem sodným vede k azidu (172), který reaguje s nitromethanem a hydroxidem draselným v ethanolu, následovaným zpracováním acetanhydridem a pyridinem a tím se dostane nitroolefin (173). Zahřívání v xylenu indukuje cyklizaci, která vytvoří indol (174) . Alkylace například benzyljodidem a hydridem sodným dává (175) , který se hydrogenuje v přítomnosti paladia na uhlí a tím se dostane amin (116). Acylace kyselým chloridem komerčně dostupného monoethylesteru oxaloctové kyseliny dává (177), který se tepelně cyklizuje na laktam (178). Selektivní redukce laktamkarbonylu může být provedena zpracováním NaBH₂S₃ pro získání aminu (179).

Ochrana aminu (179) di-terc.-butyldikarbonátem a pyridinem vytvoří (180), který se přemění vhodným Weinrebovým reagentem na amid (181). Fluoridově podporovaná desilylace, alkylace například ethyl-jodoacetátem a uhličitanem draselným, bazická hydrolýza a kyselá hydrolýza vedou k vytvoření tetrahydro-alfakarbolinu (182) .

Alternativně amin (179) může být aromatizován zahříváním na teplotu zpětného toku v karbitolu nebo v dalším vhodném rozpouštědle s vysokou teplotou varu a tím se dostane alfakarbolin (183), který se přemění vhodným Weinrebovým reagentem na amid (184). Fluoridově podporovaná desilylace, alkylace ethyl-jodoacetát a uhličitanem draselným a bázická hydrolýza, jak bylo popsáno výše, vede k vytvoření a 1fa-karbo1 inu (Í85).

• 4 ♦ 4 » 4« φ *»···» 44

Schéma II (e)

BnBr

co,Me

LiAlH, Et: O

CH,R (191)

Mno.

CHO (193)

Y CH.OH CH-.R¹

1)BTCEAD/Et.O

2IZn/HOAC

(196)

DBeryCH-Cl.

2) XR

1) NaOI [/MeOH - THF 4) H,O·

(197) ·* · · • · ·

X představuje atom halogenu

R^3íd) má význam definovaný výše.

Schéma II (e) ukazuje přípravu δ-karbolinu (198) uvedenou posloupností reakcí. N-alkylace 2-karboethoxyindolu (190), následovaná standardní dvouuhlíkovou homologační sekvencí dává 2-(3-propenová kyselina)indoly (194). V této sekvenci kondenzace aldehydu (193) s malonovou kyselinou používá směs pyridinu a piperidinu jako báze. Po vytvoření methylesteru a hydrogenaci (195) se provede uzavření kruhu (196) zpracováním bis (2,2,2-trichlorethyl)azodikarboxylátem (BTCEAD) následovaným zinkem v kyselině octové. Redukce cyklického amidu hydridem hlinito-lithným následovaná zpracováním trimethylsilylisokyanátem vytvoří močovinu (197). Přeměna na požadovaný d-karbolin (198) se dosáhne za obvyklých podmínek demethylace a následné alkylace a krokem hydrolýzy esteru.

Reverzní indoly, to jest sloučeniny ve kterých B představuje atom uhlíku a D atom dusíku mohou být připraveny tak, jak je popsáno ve Schématu III níže.

* · · ···· · ·

Schéma III

But ,SnH nebo

A1C1,

Arylové hydraziny (200) se kondenzují se substituovanými propionaldehydy pro vytvoření hydrazonů, které se cyklizují na indoly (201) zpracováním chloridem fosforitým při teplotě okolí (Ref 1). Indoly se N-alkylují reakční bází jako je hydrid sodný a alfa-bromester a tím se dostanou indoly (202), které se cyklizují na tetrahydrokarbazoly (203) Lewisovými kyselinami (například chloridem hlinitým) nebo radikálovými (například tributylcín hydridem). Sloučeniny (203 přeměněny na karbazoly například zahříváním na teplotu zpětného toku v rozpouštědle jako je karbitol v přítomnosti Pd/C.

iniciátory mohou být

Sloučeniny obecného vzorce I ve kterém A představuje pyridyl. mohou být připraveny jak bylo popsáno ve Schématech IV(a)-(b), uvedených níže.

4

Schéma IV(a)

(210)

1) 3 ekv- t-8uLi

2) CO,

3) 1 ekv n-BuLi )

5) H+/teplo <

COOH

(211)

COOCH,

CH,OH/H+

(214)

O ,N

Η,/Pd(C)

N

I

CH.R’ (213)

CH R (215)

(218) « · · ·

4 4 ·

X představuje atom halogenu a

R představuje (CH₂)_mR₅.

Komerčně dostupný 4-chlorindol (210} se zpracovává 3 ekvivalenty terč.-butyllithia následovaného oxidem uhličitým, 1 ekvivalentem n-butyllithia, l-dímethylamino-2-nitroethenem a kyselinou pro získání karboxylové kyselina (211}, která může být esterifikována a tím se dostane (212) . Alkylace v poloze 1 následovaná hydrogenací vede k vytvoření aminoethylindolu (214). Cyklizace fosgenem na (215) následovaná aromatizací dává karbolin (216). Zpracování (216) vhodným Weinrebovým reagentem vytvoří amid (217), který může být alkylovaný například ethylbrornacetátem a saponifikován hydroxidem sodným a tím se dostane karbolin (218) .

Schéma IV(b) φ· «· » φ >

» « φ e *

(220) (221)

Pd (OAc)₂ (o-tol) ₃P triethylamin nebo

Pd(Ph₃P)

HMPA Ref:1

-► nebo

NaH, Cul HMPA Ref:₂

(222)

1)HOAc/Pd (σ)Δ

2)H_;(Pd) (c)

CsCO,

XR

(226)

1)LiOH ) HCl

(227) ♦ · **

I « · > · ··· > · · « k » · « « · M ··<

I ·♦

R^3la) má význam definovaný ve Schématu I(a),

X představuje atom halogenu, a

R představuje (CH₂)_TOR⁵.

1,3-dionové struktury (228) jsou buď komerčně dostupné nebo snadno přepravitelné známými technikami z komerčně dostupných výchozích materiálů.

Příprava anilinových derivátů (220) (X = Cl, Br nebo I) je provedena redukcí vhodně substituovaných derivátů kyseliny benzoové na odpovídající anilin zpracováním redukčním činidlem jako je SnCl₂ v kyselině chlorovodíkové v inertním rozpouštědla jako je ethanol nebo hydrogenací použitím plynného vodíku a sulfidované platiny na uhlí nebo paladia na uhlí. Aminová skupina (228) se chrání vhodnou ochrannou skupinou, jako je karboethoxyl, benzyl, CBZ (benzyloxykarbonyl) nebo BOC (terc.butoxykarbonyl) ochranná skupina a podobně.

Dione (228) a anilinový derivát (220) se kondenzují postupem podle obecného způsobu, který popsal Chen a kol., (Ref 10) nebo Yang a kol., (Ref 11), s použitím nebo bez použití neinterferujícího rozpouštědla jako je methanol, toluen nebo methylenchlorid, s použitím nebo bez použití kyseliny jako je kyselina p-toluensulfonová nebo kyselina trifluoroctová, s použitím nebo bez použití N-chlorsukcinimidu a dimethylsulfidu a to poskytlo kopulovaný produkt (221).

Sloučenina (221) se cyklizuje za bázických podmínek s měďnou solí v inertním rozpouštědle postupem podle obecného způsobu, který popsal Yang a kol., (Ref 8). Derivát (221) se zpracovává bází jako je hydrid sodný, v inertním rozpouštědle jako je «» · • «4♦« 9 «« ** a 9 · * « ·* 9 ·

9

HMPA, při teplotě v rozmez! od 0 do 25 °C. Měďná sůl jako jodid měďný, se přidá a výsledná směs se míchá při teplotě v rozmezí od 25 do 150 °C po 1 až 48 hodin a to poskytne sloučeninu (222) .

Sloučenina (221) může také být cyklizovéna postupem podle obecného způsobu, který popsal Chen a kol., (Ref 10) . Derivát (221) se zpracovává bází jako je hydrogenuhličitan sodný a paladiovým katalyzátorem jako je Pd(PPh₃)₄, v inertním rozpouštědle jako je HMPA, při teplotě v rozmezí od 25 do 150 °C a to vede k vytvoření sloučeniny (222) .

Ve výhodném způsobu se meziprodukt (171) zpracovává katalyzátorem přechodového kovu jako je Pd(OAc)₂(O-tol)₃P v přítomnosti báze jako je triethylamin použitím korozpouštědla DMF/acetonitril pro přípravu (222).

Sloučenina (222) se N-alkyluje vhodně substituovaným benzylhalogenidem v přítomnosti báze jako je hydrid sodný nebo uhličitan draselný, v neinterferujícím rozpouštědle jako je dimethylformamid nebo dimethylsulfoxid a to poskytne keton (223) . V reakci o dvou krocích, prováděné v jedné reakční nádobě se (222) aromatizuje zpracováním kyselinou octovou a paladíem na uhlí v neinterferujícím rozpouštědle jako je karbitol nebo cymen, následovaným zpracováním plynným vodíkem a paladíem na uhlí pro odštěpení dusíkové ochranné skupiny a vytvoření fenolového derivátu (224).

Ester (224) se přemění na odpovídající amid (225) za standardních podmínek s čpavkem (výhodně) nebo amoniovou solí jako je octan amonný, v inertním rozpouštědle jako je voda nebo *69·· alkohol, výhodně methanol nebo s MeClAlNH₂ v inertním rozpouštědle jako je toluen, při teplotě v rozmezí od 0 do 110 °C. Alkylace fenolové kyslíkaté sloučeniny 38 s vhodným haloesterem jako je methyl-bromacetát, v přítomnosti báze, jako je uhličitan česný, uhličitan sodný nebo draselný, v inertním rozpouštědle jako je dimethylformamid nebo dimethylsulfoxid dává ester-amid (226). Další haloestery, jako je ethylbromacetát, propyl bromacetát, butyl bromacetát a podobně mohou také být použity pro přípravu odpovídajících esterů.

Saponifikace sloučeniny (226) hydroxidem lithným v inertním rozpouštědle jako je methanol-voda, vede k vytvoření (227). Meziprodukty a konečné produkty mohou být isolovány a čištěny pomocí konvenčních technik jako je chromatografie nebo rekrystalizace. Regioisomerické produkty a meziprodukty mohou být separovány standardními metodami jako je rekrystalizace nebo chromatografie.

Reference:

10) L.-C. Chen et al., Synthesis 385 (1995)

11) S.-C. Yang et al., Heterocykles, 32,2399 (1991) a · • * « ·

• · »

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady dále ilustrují přípravu sloučenin podle předloženého vynálezu. Příklady jsou pouze ilustrativní a není jejich cílem omezit rozsah předmětu předloženého vynálezu jakýmkoli způsobem.

Příklad 1

Příprava (R,S)-(9-benzyl-4-karbamoyl-l-oxo-3-thia-l_r 2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctové kyseliny

A. l-Benzyl-4-methoxyindol • fc

TI·»· · ···· · ' -I* «»*»«· * * · · fc · •«fc *·· • · « « » *

NaH (7,7 g, 191,7 mmol) byl přidán po částech do roztoku o teplotě 0 °C 4-methoxyindolu (21,7 g, 147 mmol) v 750 ml bezvodého DMF. Po uplynutí 15 min byla suspenze zpracována benzylbromidem (17,5 ml, 147 mmol). Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a byla míchána přes noc. Reakční směs byla vlita do 1 1 H₂O. Vrstvy byly separovány a vodná fáze byla extrahována EtOAc (2 x 200 ml) . Sloučené organické vrstvy byly promývány H₂0 (4 x 500 ml) , sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surové residuum bylo čištěno mžikovou chromatografii (SiO₂; hexany) a tím se dostalo

32,9 g (138,6 mmol; 94%) sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky.

Elekt.rospray MS 238 (M+l);

Elementární analýza pro CiéHisNO:

Vypočteno: C, 80,98; H, 6,37; N, 5,90.

Nalezeno: C, 81,20; H, 6,09; N, 5,83.

B. Methyl-(l-benzyl-4-methoxyindol-3-yl)oxoacetát o * a · · ···· f Z. φ < *Τ· i t · · ⁴

Roztok o teplotě 0 °C l-benzyl-4-methoxyindolu (31,9 g, 134,4 mmol) v 500 ml CH₂C1₂ a pyridinu (21,7 ml, 268,8 mmol) byl zpracován methyloxalylchloridem (13,6 ml, 147,9 mmol). Po uplynutí 1,5 hodin při teplotě 0 °C bylo přidáno 500 ml nasyceného roztoku NaHCO₃, Vodná vrstva byla extrahována CHC1₃ (1 x 200 ml, 2 x 50 ml). Sloučené organické vrstvy byly koncentrovány za sníženého tlaku na snědou pevnou látku, která byla rozetřena s EtOAc/hexany a tím se dostalo 29,8 g (92,1 mmol; 69%) sloučeniny z názvu ve formě bělavého prášku.

Elektrospray MS 324 (M+l);

Elementární analýza pro C19H17NO4:

Vypočteno: C, 70,58; H, 5,30; N, 4,33.

Nalezeno: C, 70,86; H, 5,42; N, 4,49.

C. Methyl (R, S)-(1-benzyl-4-methoxyindol-3-yl)hydroxyacetát * ·

73.’

Roztok methyl-(l-benzyl-4-methoxyindol-3-yl)oxoacetátu (10 g,

30,9 mmol) v 300 ml MeOH byl zpracován NaBH₄ (1,46 g, 38,6 mmol) . Po míchání přes noc byly přidány EtOAc a H₂O (20 ml každý) . Vodná vrstva byla extrahována EtOAc (2 x 25 ml) . Sloučené organické vrstvy byly sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surové residuum bylo rekrystalizováno s EtOAc/hexany a tím se dostalo 9,1 g (28,0 mmol; 91%) sloučeniny z názvu ve formě bílého prášku.

FDMS 325 (M+);

Elementární analýza pro Ci₉Hi₉NO₄:

Vypočteno: C, 70,14; H, 5,89; N, 4,30.

Nalezeno: C, 70,42; H, 5,93; N, 4,41.

D. (R, S)-[(l-Benzyl-4-methoxyindol-3-yl) (karbomethoxy)methyl] thiooctová kyselina

-} Λ · · · * / 4 » · ·▼· * ·

CO.Me

Suspenze o teplotě 0 °C methyl (R,Ξ)-(l-benzyl-4-methoxyindol3-yl)hydroxyacetátu (3,5 g, 10,8 mmol) a K₂CO₃ (2,2 g, 16,1 mmol) v 50 ml CH₂C1₂ byla zpracována TEA (0,075 ml, 0,54 mmol). Po uplynutí 15 min byl přidán MsCl (1,25 ml, 16,1 mmol). Po míchání po dobu 2 hodiny při teplotě 0 °C byla přidána merkaptoctová kyselina (3 ml, 43 mmol) a reakční směs byla zahřívána při teplotě zpětného toku přes noc. Reakční směs byla vlita do 25 ml nasyceného roztoku NaHCO₃. Vodná vrstva byla extrahována 25 ml CHC1₃, okyselena pomocí 1 N HCl a extrahována znovu pomocí CHC1₃ (3 x 25 ml). Okyselené extrakty byly sloučeny, sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Olejovité residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (SiO₂; gradient 0% až 2% ledové kyseliny octové ve směsi 1:1 EtOAc/hexany) a tím se dostalo 2,58 g (6,46 mmol; 60%) sloučeniny z názvu ve formě čirého oleje, který v klidu tuhnul .

FDMS 399 (M+) ;

Elementární analýza pro Ο₂ιΗ₂ιΝΟ₅ . 0,2H₂O:

Vypočteno: C, 62,58; H, 5,35; N, 3,48.

Nalezeno: C, 62,57; H, 5,26; N, 3,55.

E. Methyl-(R,S)-(9-benzy1- 5-methoxy-l-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)karboxylát

Roztok karboxylové kyseliny z části D výše (2,32 g, 5,81 mmol) v 50 ml 1,2-dichlorethanu byl zpracován oxalylchloridem (2,0 ml, 22,9 mmol) a 1 kapkou DMF. Výsledná směs byla ponechána za míchánípři teplotě okolí po dobu 3 hodiny, potom byla koncentrována za sníženého tlaku. Surové residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (SíO₂; gradient 0% až 5% až 10% EtOAc/hexany) a tím se dostalo 1,39 g (3,64 mmol; 63%) sloučeniny z názvu ve formě bledě žlutého prášku.

FDMS 381 (M+);

Elementární analýza pro C2iH₁₉NO₄S:

Vypočteno: C, 66,12; H, 5,02; N, 3,67.

Nalezeno: C, 66,00; H, 5,26; N, 3,63.

F. Methyl (R,S)-(9-Benzyl-5-methoxy-l-oxo-3-thia~l,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl) karboxamid • · φ • · ·» ·» * ·

Roztok methyl ( R, S)-{9-benzyl-5-methoxy-1-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazoi-5-yl) karboxylátu (1,1 g, 2,88 mmol) v 25 ml THF/MeOH/H₂O (3:1:1) byl zpracován LiOH (83 mg, 3,46 mmol) a ponechán za mícháni při teplotě okolí přes noc. Vodná vrstva byla extrahována 25 ml CH₂C1₂, okyselena pomocí 1 N HCl a extrahován znovu CH₂C1₂ (2 x 25 ml). Okyselené extrakty byly sloučeny, sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surová meziproduktová kyselina byla rozpuštěna v 20 ml 1,2 dichlorethanu a zpracována (COC1)₂ (0,77 ml, 8,82 mmol). Po uplynutí 4 hodin byla reakční směs koncentrována za sníženého tlaku a resuspendována v 20 ml 1,2 dichlorethanu. Čpavek byl probubláván roztokem po přibližně 10 minut, potom reakční směs byla uzavřena a ponechána v klidu po dobu 1,5 hodin. Surový amid byl koncentrován za sníženého tlaku a rekrystalizován z EtOAc/hexany a tím se dostalo 780 mg (2,13 mmol; 74%) sloučeniny z názvu ve formě slabě snědé pevné látky. FDMS 366 (M+);

Elementární analýza pro C₂₀Hi₈N₂O₄S . 0,2H₂O:

Vypočteno: C, 64,92; H, 5,01; N, 7,57.

Nalezeno; C, 64,95; H, 5,04; N, 7,78.

G. (R,S)-(9-Benzyl-5-hydroxy-1-oxo-3-th ia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl) karboxamid .· :.-í.

Roztok o teplotě 0 °C methyl-(R, S)-(9-benzyl-5-methoxy-l-oxo3-thia-l,2,3,4-tetrahydrokarbazol-5-yl) karboxamidu v 10 ml 1,2 dichlorethanu byl zpracován BBr₃ (2,4 ml, 24,9 mmol). Po uplynutí 3 hodin byla reakce zastavena studeným MeOH a reakční směs byla vlita do 20 ml nasyceného roztoku NaHCO₃. Vodná vrstva byla extrahována CHC1₃ (4 x 50 ml). Sloučené organické vrstvy byly sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Čištěním surového residua radiální chromatografií (SiO₂; gradient 0% až 2% MeOH/CHCl₃) se dostalo 162 mg (0,46 mmol; 28%) sloučeniny z názvu ve formě hnědé pěny. FDMS 352 (M+);

Elementární analýza pro C19H115N2O3S . 0,8H₂O:

Vypočteno: C, 62,21; H, 4,84; N, 7,64.

Nalezeno: C, 62,57; H, 4,50; N, 7,27.

H. ethyl-(R,S)-(9-benzyl-4-karbamoyl-1-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyacetát

78,

Suspenze {R, S)-(9-benzyl-5-hydroxy-l-oxo-3-thia-l,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl) karboxamidu (145 mg, 0,411 mmol) a CS2CO3 (400 mg, 1,23 mmol) v 5 ml DMF byla zpracována ethylbromacetátem (0,046 ml, 0,411 mmol). Po míchání přes noc byla reakční směs vlita do 20 ml H₂O. Vodná vrstva byla extrahována EtOAc (4 x 50 ml). Sloučené organické vrstvy byly promývány H₂O (3 x 100 ml), sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Čištění surového residuum radiální chromatografií (SiO₂; gradient 0% až 0,5% MeOH/CHCl₃) poskytlo 120 mg (0,274 mmol; 67%) sloučeniny z názvu ve formě světle snědé pěny.

FDMS 438 (M+);

Elementární analýza pro C23H₂₂N₂O₅S . 0,3H₂O . 0,4CHCl₃:

Vypočteno: C, 57,16; H, 4,72; N, 5,70.

Nalezeno: C, 57,18; H, 4,61; N, 5,68.

I· (R, S)-(9-Benzyl-4-karbamoyl-l-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctová kyselina

Roztok ethyl (R,S)-(9-benzyl-4-karbamoyl-l-oxo-3-Lhia-l,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyacetátu (20 mg, 0,0456 mmol) v 0,5 ml THF'/MeOH/H₂O (3:1:1) byl zpracován LiOH (1,3 mg, 0,0547 mmol). Roztok rychle změnil barvu najasně oranžovou a po

7'9 uplynutí 45 min byla vodná vrstva extrahována 10 ml CHC1₃, okyselena pomoci 1 N HCl a extrahována znovu CHC1₃ (3 x 20 ml). Okyselené extrakty byly sloučeny, sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku na oranžovou pevnou látku. Surová kyselina byla čištěna v pipetové koloně (SiO₂; gradient 0 až 2% MeOH/CHCl₃, stopy ledové kyseliny octové) a to poskytlo 10 mg (0,0244 mmol; 53%) sloučeniny z názvu ve formě slabě snědé pevné látky.

FAB HRMS: m/e pro C₂₁Hi₉N₂O₅S: 411,1015.

Nalezeno: 411,1010 (M+l).

Příklad 2

Příprava (R,S)-(9-Benzyl-4-karbamoyl-1-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctové kyseliny

A. Ethyl-(R,S)-(9-benzy1-4-karbamoyl-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyacetát • ·

80.·:.

Suspenze ethyl- (R, Ξ) - (9-benzyl-4-karbamoyl-l-oxo-3-thia1,2,3,4-tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyacetátu (75 mg, 0,171 mmol) v 1 ml MeOH a 1,5 ml THF (pro rozpustnost) byla zpracován NaBH^ (8 mg, 0,214 mmol). Po uplynutí 20 min byla reakce zastavena 10 ml H₂O. Vrstvy byly separovány a vodná vrstva byla extrahována EtOAc (3 x 20 ml) . Sloučené organické vrstvy byly sušeny nad K₂CO₃, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surový meziproduktový alkohol byl okamžitě rozpuštěn v 2 ml 1,2dichlorethanu. Výsledný roztok byl zpracován Et₃SiH (0,19 ml,

1,2 mmol). Po ochlazení na teplotu 0 °C byl přidán po kapkách TFA (0,13 ml, 1,7 mmol). Po uplynuti 1 hodiny byla reakční směs vlita do 25 ml nasyceného vodného NaHCO₃. Vrstvy byly separovány a vodná vrstva byla extrahována EtOAc (3 x 25 ml). Sloučené organické vrstvy byly sušeny nad Na₂SO<,, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Čištěni surového residua mžikovou chromatografii (SiO₂; gradient 0% až 0,5% MeOH/CHCl₃) poskytlo 38 mg (0,0895 mmol, 52%) sloučeniny z názvu ve formě bělavé pevné látky.

FDMS 424 (M+);

Elementární analýza pro C₂₃H_2í)N₂O₄S . 0, 3Η-Ό . 0,6CHClj:

»· a a a a » ! la ··♦· · · · · · · ·* a a a a a aaaa a *· ·«

Vypočteno: C, 56,51; H, 5,06; N, 5,59.

Nalezeno: C, 56,61; H, 4,87; N, 5,60.

B. (R,S) -(9-Benzyl-4-karbamoyl-1-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctová kyselina.

Roztok ethyl-(R,S)-(9-benzyl-4-karbamoyl-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyacetátu (28 mg, 0,066 mmol) v 0,5 ml THF/MeOH/H₂O (3:1:1) byl zpracován LiOH (1,9 mg, 0,079 mmol). Po uplynutí 1 hodiny byla vodná vrstva extrahována 10 ml CHC1₃, okyselena pomocí 1 N HCl a extrahována znovu CHC1₃ (3 x 20 ml). Organické látky byly sloučeny, sušeny nad Na₂SO₄, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku. Surová kyselina byla čištěna v pipetové koloně (SiO₂; gradient 0 až 1% Me0H/CHCl₃, stopy ledové kyseliny octové) a to poskytlo 18 mg (0,045 mmol; 69%) sloučeniny z názvu ve formě bělavé pevné látky.

FAB HRMS: m/e,

Vypočteno pro C₂iH₂iN₂O₄S: 397,1222.,

Nalezeno: 397,1216 (m+l).

Příklad 3

2- ( 4-oxo-5-karboxamido-9-benzyl-9H-pyrido[3,4-b]indolyl)octová kyselina, hydrochlorid

ftft ft ftft ftft » · ·

I · « · · » ftft «

I » <

ftft ftft • ·

I <

» 4 • · I

A. Příprava N-[5-(l-benzyl-3-oxo-l,2,3,6-tetrahydropyridinyl)]2-brom-3-karbomethoxyanilinu

Do směsi 2-brom-3-karbomethoxyanilinu (12,0 g, 52,2 mmol) a pyridinium p-toluensulfonátu (13,8 g, 54,9 mmol) v 2:1 toluenu/dioxanu (300 ml) byl přidán l-benzyl-3,5-piperidindion (13,0 g, 70,2 mmol, Chen, L.-C.; Yang, S.-C. Heterocykles 1990,31,911-916). Přístroj byl opatřen Dean-Starkovým lapačem a směs byla zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 10 hodin. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo rozpuštěno v chloroform. Tento roztok byl promýván třikrát vodou, jednou nasyceným roztokem chloridu sodného, sušen (síran sodný), filtrován a koncentrován za sníženého tlaku pro získání tmavého oleje. Chromatografie (silikagel, chloroform až 4% methanol/96% chloroform) dala 2,0 g (9%) produktu z názvu ve formě pěny, která mohla být krystalizována z acetonítrilu. Teplota tání 156-158 °C.

NMR (CDC1₃) δ 7,55 (m, 2 H), 7,40 (m, 6 H) , 5,55 (s, 1 H), 3,94 (s, 3 H), 3,85 (m, 2 H), 3,56 (m, 2 H), 3,30 (bs, 2 H);

MS -1 ES + m/e 414,9 (p) , 416,9 (p) ;

IR (KBr, cm'¹) 3185, 2944, 1728, 1603, 1544, 1306.

Elementární analýza pro C₂oH₁9BrN₂0₃:

Vypočteno: C, 57,84; H, 4,61; N, 6,75.

Nalezeno: C, 58,13; H, 4,49; N, 6,91.

• 0 *00 • o*

B. Příprava 2-benzyl-4-oxo-5-karbomethoxy-l, 2,3, 4-tetrahydro9H-pyrido [3,4-b] indolu.

Směs N-[5-(1-benzyl-3-oxo-1,2,3,6-tetrahydropyridinyl)]-2-brom3-karbomethoxyanilinu {2,07 g, 4,98 mmol), octanu paladnatého (0,112 g, 0,499 mmol), tri-o-tolylfosfinu (0,304 g, 0,999 mmol), triethylaminu (1,3 ml, 9,3 mmol) a N,N-dimethylformamídu (3 ml) v acetonitrilu (12 ml) byla umístěna v trubici a propláchnuta argonem. Trubice byla uzavřena a zahříván na teplotu 100 °C po dobu 16 hodin. Směs byla ochlazena na teplotu okolí, zředěna ethylacetátem, filtrována a filtrát byl sníženého tlaku a tím se dostal tmavý olej. (silikagel, chloroform až 4% methanolu/96% chloroformu) dala 1,28 g (77%) oleje, který krystalizoval po uchovávání při teplotě 10 °C: rekrystalizován ze směsi

EtOAc/hexan.

Teplota tání 174-176 °C.

‘H NMR (CDC1₃) δ 9,25 (bs, 1 H) , 7,38 (d, J = 9 Hz, 2 H), 7,30 (m, 5H), 7,23 (t, J = 8 Hz, 1H) , 3,97 (s, 3H) , 3,75 (s, 2 H) , 3,72 (s, 2 H) , 3,61 (s, 2 H) ;

MS ES i m/e 335 (p ( 1 ) ;

IR (KBr, cm'¹) 3080, 1721, 1 628, 1476, 1294, 1 1 38, koncentrován za Chromatografie

II 00 00 ·· • · 0 0 · · 0

0 ♦ · 0 · 00 · • 00 00 000 0·· • 0 0 0 > * • 0 00 0· *0

0·00 0 «

0 0 0 0

Elementární analýza pro C20H18N2O3: Vypočteno: C, 71,84; H, 5,43; N, 8,38. Nalezeno: C, 72,06; H, 5,31; N, 8,31.

C. Příprava 2,9-dibenzyl-4-oxo-5-karbomethoxy-l,2,3,4tetrahydro-9H-pyrido[ 3,4-t]indolu.

Do roztoku 2-benzyl-4-oxo-5-karbomethoxy-l,2,3,4-tetrahydro-9Hpyrido[3,4-t]indolu (0,928 g, 2,78 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (5 ml) byl přidán 60% hydrid sodný v oleji (111 mg). Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí dokud vývin plynu neustal. Do reakční směsi byl přidán roztok benzyljodidu (0,606 g, 2,78 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (5 ml) a výsledný roztok byl míchán při teplotě okolí po dobu 60 hodin. Směs byla zředěna pomocí methylenchloridu a promývána dvakrát nasyceným roztokem roztok chloridu sodného. Organická vrstva byla sušena (síran hořečnatý), filtrována a koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo rozetřeno s ethylacetátem což vedlo k žlutému precipitátu (163 mg). Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a chromatografován (silikagel, 5% methanolu/95% methylenchloridu) pro získáni dalších 580 mg sloučeniny z názvu (743 mg celkově, 63%) ve formě krystalické pevné látky.

Teplota tání 198-199 °C.

85.· • ob ** · « · » • 9 9 ··

9 · 9 • ·9 9 «· 9 +

9 9 9 • 9 9 ·

999 999

Β

99

	NMR (CDCI3) δ 7,43 (d, J =	7 Hz, 1H),	7,36	(d, J = 8 Hz,
1H)	, 7,25 (m, 9 H) , 6,95 (m,	2 H), 5,24	(s, 2	H) , 4,01 (s, 3
H) ,	3,78 (m, 4 H), 3,40 (bs, 2	H) ;
MS	EI+ m/e 425 (p + 1) ;
IR	(KBr, cm'1) 726, 1648, 1449,	1291, 1134,	1107 .

Elementární analýza pro C27H24N2O3: Vypočteno: C, 76,40; H, 5,70; N, 6,60. Nalezeno: C, 76,11; H, 5,45; N, 6,54.

D. Příprava 4-hydroxy-5-karbomethoxy-9-benzyl-9H-pyrido [3,4-b] indolu.

Směs 2,9-dibenzyl-4-oxo-5-karbomethoxy-l,2,3,4-tetrahydro-9Hpyrido[3,4-b]indolu (521 mg, 1,23 mmol) a 10% paladia na uhlí (250 mg) v kyselině octové (15 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 4 hodiny. Reakce nádoba byla ochlazena na teplotu okolí a propláchnuta dusíkem. Nádoba byla umístěna pod positivní tlak vodíku a zahřívána na teplotu 75 °C po dobu 16 hodin. Směs byla ochlazena na teplotu okolí, filtrována a koncentrována za sníženého tlaku pro získání oranžové pevné látky. Chromatografie (silikagel, 4% methanol/96% methylenchlorid) dala 271 mg (60%) sloučeniny z názvu ve formě mono-hydratovaného žlutého prášku.

• ·

Teplota tání >250 °C.

NMR (CDC1₃) δ 8,46 (s, 1 H) , 8,22 (

Hz, 1H) , 7,70 (d, J = 8 Hz, 1H) , 7,56 (m, 3 H) , 7,08 {m, 2 H) , 5,60 (s, 2 H) , MS ES+ m/e 333 (p + 1) .

Elementární analýza pro C₂₀Hi₆N2O3 . H₂O: Vypočteno: C, 68,60; H, 4,98; N, 7,91. Nalezeno: C, 68,56; H, 5,18; N, 8,00.

s, 1 H), 8,09 (t, J = 8 Hz, 4,11 (s, 3 H)

• fc ♦ · ·* <d, J = 8 1H), 7,23

E. Příprava 4-hydroxy-5-karboxamido-9-benzyl-9H-pyrido [3,4b]indolu.

4-Hydroxy-5-karbomethoxy-9-benzyl-9H-pyrido[3,4-b]indol (200 mg, 0,618 mmol) byl rozpuštěn v roztoku 2M methanolového čpavku (10 ml) a umístěny v otevřené trubici. Roztok byl nasycen plynným čpavkem po dobu 10 minut. Trubice byla uzavřena a zahřívána na teplotu 60-65 “C po dobu 8 hodin. Reakční směs byla ochlazena na teplotu okolí a výsledný precipitát byl shromážděn za sníženého tlaku a tak se získalo 0,12 g (61%) sloučeniny z názvu ve formě žluté pevné látky.

Teplota tání >250 °C.

^lH NMR (DMSO-d₆) δ 10,99 (s, 1 H, -OH), 8,99 (bs, 1 H, -NH), 8,59 (s, 1H), 8,55 (bs, 1H,-NH), 7,96 (d, J = 7 Hz, 1H), 7,94 (s, 1 Η) , 7, 64 (t, J = (m, 3 Η), 7,12 (d, J = MS ES+ m/e 318 (p + 1). Elementární analýza pro Vypočteno: C, 71,91; H, Nalezeno: C, 72,20; H,

Hz, 1H) , 7,57

Hz, 2 Η), 5,80

C19H15N3O2:

4,76; N, 13,24. 4,57; N, 13,48.

(d, (s,

Hz, 1H) ,

7,22

F. Příprava 2-(4-oxo-5-karboxamido-9-benzyl-9H-pyrido[3,ΙΕ] indolyl ) octové kyseliny, hydrochloridu.

Směs 4-hydroxy-5-karboxamido-9-benzyl-9H-pyrido[3,4-b]indolu (57 mg, 0,18 mmol), methyl-bromacetátu (51 ml, 0,54 mmol) a uhličitanu česného (114 mg, 0,349 mmol) v N,N-dimethylformamidu (2 ml) byla míchána při teplotě okolí po dobu 45 minut. Směs byla zpracována minimem vody a methanolu a koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno v 1M vodném hydroxidu lithném (0,5 ml) a mícháno při teplotě okolí po dobu 1 hodin. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo rozpuštěno ve zředěné vodné kyselině chlorovodíkové a a čištěna HPLC s obrácenými fázemi, následovanou lyofilizací, pro získáni 28,5 mg (38%) produktu z názvu.

’H NMR (DMSO-de) δ 12,85 (bs, 1 H), 9,41 (s, 1 Η) , 9,11. (_s, 1H) , 8,66 (s, 1H), 8,30 (s, 1H), 8,10 (d, J - 8 Hz, lH), 7,85

(t, J - 8 Hz, IH), 7,76 (d, J = 7 Hz, IH) , 7,27 (m, 3 Η) , 7,19 (m, 2 H), 5,88 (s, 2 Η), 5,37 (s, 2 H) ;

MS ES+ m/e 375 (p + 1} .

Elementární analýza pro C₂iHnN₃O₄ . HC1 . 0,5H₂O:

Vypočteno: C, 60,58; H, 4,47; N, 10,09.

Nalezeno: C, 60,39; H, 4,35; N, 9,69.

Příklad 4

Příprava [N-benzyl-l-karbamoyl-l-aza-1,2, 3, 4tetrahydrokarbazol-8-yl]oxyoctové kyseliny

A. Příprava methyl N-benzyl-4-methoxyindol-2-karboxylátu

6,15 g methyl 4-methoxy indol-2-karboxylát bylo rozpuštěno v 30 ml dimethylformamidu, přidáno do suspenze 12 g uhličitanu česného v 20 ml dimethylformamidu a zahříváno na teplotu 45-50 °C po dobu 1 hodiny. Po ochlazení byl přidán benzylbromid v témže rozpouštědle a směs byla míchána přes noc při teplotě zpětného toku. Závěrečné zpracování bylo provedeno přidáním směsi ledu a vody a extrakcí dvakrát etherem. Etherová vrstva byla promývána vodou, solankou, sušena nad síranem hořečnatým, filtrována a koncentrován do sucha. 8,6 g (97%).

MS : M* + l (296) .

Teplota tání 104-5 °C

B. Příprava N-benzyl-2-hydroxymethyl-4-methoxyindolu

Do suspenze 0,319 hydridu hlinito-lithného (8,2 mmol) v 25 ml etheru při teplotě 0-10 °C byl přidán methyl N-benzyl-4-methoxy indo1-2-karboxylát (2,959) rozpuštěný v 10 ml stejného rozpouštědla. Směs byla míchán pří teplotě zpětného toku po dobu 2 hodiny, reakce zakončena standardní procedurou Fieser a • · * ·

Fieser, směs filtrována přes vrstvu celitu a koncentrována do sucha a tím se dostalo 2,8 g alkoholu.

MS M⁺ + l (268 ) .

Teplota tání 142-3 °C

C. Příprava N-benzyl-4-methoxyindol-2-karboxaldehydu

Směs 3,2 g N-benzyl-2-hydroxymethyl-4-methoxyindolu (12 mmol) a 15 g oxidu manganičitého (172 mmol) v 50 cm³ bezvodého dichlormethanu byla zahřívána pří teplotě zpětného toku po dobu 6 hodin, ochlazena na teplotu zpětného toku a filtrována přes celit. Koncentrace do sucha poskytla 3,6 g žluté pevné látky. Teplota tání 130-31 °C

D. Příprava methyl N-benzyl-4-methoxyindol-2-propionátu

3, 1 g (11,7 mmol) N-benzyl-4-methoxyindol-2-karboxaldehydu bylo sloučeno v 20 ml pyridinu s 3,65 g (35,1 mmol) kyseliny malonové a 0,4 g piperidinu; směs byla zahřívána na teplotu 100 °C po dobu 2 hodiny, koncentrována za sníženého tlaku na třetinový objem a okyselena pomocí IN HCl. Pevná látka byla odfiltrována, promývána vodou a sušena za sníženého tlaku a tím se dostalo 3,0 g produktu. (85%).

MS :M⁺tl(308).

Teplota tání 208-10 °C.

Tento materiál byl rozpuštěn v 30 ml methanolu a 1 ml kyseliny sírové, zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin, ochlazen na teplotu zpětného toku a koncentrován na malý objem. Výsledná pevná látka byla isolována filtrací. Tento materiál byl hydrogenován v methanolu-tetrahydrofuranu s 5% Pd na uhlí a to poskytlo sloučeninu z názvu (2,59) v 66% celkovém výtěžku.

MS: M‘ + l (324 ) .

E. Příprava N-benzyl-1-aza-(3,4-dihydro)-8-methoxykarbazol-2onu

2,5 g methyl N-benzyl-4-methoxyindol-2-propionátu (7,7 mmol) bylo rozpuštěno v 25 ml etheru a 2 ekvivalentech (5,86 g) bis(2,2,2-trichlorethyl)azodikarboxylátu bylo přidáno po částech v průběhu půl hodiny, směs byla míchána při teplotě zpětného toku přes noc, filtrována a koncentrována do sucha. Tato sloučeninu byla rozpuštěna v malém množství etheru a filtrována a tím se dostalo 3,2 g zelené pevné látky. 1 g tohoto komplexu byl redukován v 5 ml kyseliny octové s 1 g aktivovaného Zn. Teplota byla udržována na 10 °C po dobu 1 hodiny, ponechán vzrůst na teplotu zpětného toku a směs byla míchána přes noc. Byla přidána voda a směs byla alkalizována IN hydroxidem sodným. Extrakce tetrahydrofuranem a ethylacetátem, promýván!, sušení a koncentrace daly hnědý olej, který krystalizoval z isopropylalkoholu. Bylo získáno 300 mg surové látky a 130 mg po krystalizaci.

MS : M⁺+l(307).

Teplota tání 206-8 °C.

Wiley a Sons, NY 1967, koncentrováním do sucha

F. Příprava N-benzyl-l-karbamoyl-l-aza-8-methoxy-l,2,3,4tetrahydrokarbazolu

500 mg N-benzy1-1-aza-(3,4-dihydro)-8-methoxykarbazol-2-onu v tetrahydrofuranu bylo zpracováno 82 mg hydridu hi ini to-1 ithného při teplotě zpětného toku a potom zahříváno na teplotu 50 °C. Závěrečné zpracování bylo provedeno procedurou Fieser a Fieser, (The Agents for Organic Synthesis, Fieser, I,, et al,, John str. 58 3) filtrováním přes ce 1 i t a a získalo se 4 20 mg surového produktu.Tento produkt byl bez dalšího čištění zpracováván trimethylsilyl isokyanátem v tetrahydrofuran po dvě hodiny a potom koncentrován do sucha. Byl přidán ether a amorfní pevná látka byla isolována filtrací, získalo se 360 mg sloučeniny.

MS: M’ + l (336)

G. Příprava [N-benzyl-l-karbamoyl-l-aza-1,2,3,4tetrahydrokarbazoi-8-yl]oxyoctové kyseliny, methylesteru.

300 mg N-benzyl-l-karbamoyl-l-aza-8-methoxy-l,2,3,4tetrahydrokarbazolu bylo rozpuštěno v 10 ml dichlormethanu a ochlazeno na teplotu -20 °C. Po kapkách bylo přidáno 10 ml 1M roztoku bromidu boritého v témže rozpouštědle. Směs byla míchána při teplotě zpětného toku po tři hodiny a vlita na 1 N HCl-led. Tento materiál byl extrahován v ethylacetátu, promýván vodou, solankou, sušen nad síranem hořečnatým, filtrován a koncentrován do sucha a tím se dostalo 190 mg sloučeniny. Tento materiál byl rozpuštěn v 5 ml dimethylformamidu a byl přidán mírný přebytek uhličitanu česného. Po zahříváni na teplotu 35 °C po dobu 10 minut byl přidán methyl-bromacetát a směs byla míchána při teplotě zpětného toku přes noc. Byla přidána voda, směs byla extrahována ethylacetátem, promývána, sušena nad síranem hořečnatým, filtrována a koncentrována do sucha. Mžikové čištění použitím směsi 3:1 chloroform-ethylacetát poskytlo 45 mg produktu.

MS: M* + l(394)

NMR (CDC1₃) 7,3 (rn, 5 H) , 7,0 (m, 1 H), 6,95 (d, 1H) 6,4 (d, 1H)

5,25 (s,2H) 5,2 (b,2H) 4,8 (s,2H), 3,8 (s,3H), 2,75 (b,2H), 2,1 (b,2H), 1,25 (2,2H).

H. Příprava [N-benzy1-1-karbamoy1-1-aza-l,2,3,4 tetrahydroka rba zol-8-yl]oxyoctové kyseliny.

** mg (N-benzyl-l-karbamoyl-l-aza-1,2,3,4-tetrahydrokarbazol-8yl]oxyoctové kyseliny, methylesteru, bylo rozpuštěno v 10 ml směsi 7:1 tetrahydrofuranu:methanolu a bylo přidáno 0,5 ml IN hydroxidu sodného. Po míchání pří teplotě zpětného toku přes noc byla rozpouštědla odpařena, residuum okyseleno pomocí IN HCl a pevná látka byla filtrována, potom byla promývána vodou a sušena za sníženého tlaku.

MS : M⁺+l(380)

Příklad 5

Příprava 4-methoxy-6-methoxykarbonyl-10-fenylmethyl-6,7,8,9tetrahydropyrido[1,2-a]indolu

A. Příprava 3-fenylmethyl-7-methoxyindolu.

Směs 15 g (0,086 mol) hydrochloridu 2-methoxyfenylhydraz inu a 12 ml (0,09 mol) 3-f enylpropiona ldehydu v 300 ml toluenu byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 1,5 hodin s azeotropním odstraňováním vody. Suspenze byla ochlazena, odpařena za sníženého tlaku a residuum bylo rozpuštěno v 500 ml dichlormethanu a mícháno s 9 ml (0,09 mol) chloridu fosforitého po dobu 18 hodin. Roztok byl vlit do směsi led-voda, dobře míchán a alkalizován hydrogenuhličitanem sodným. Organická fáze byla promývána nasyceným chloridem sodným, sušena nad síranem • · ·* *

» ♦ * · • · · · · sodným a odpařena za sníženého tlaku. Residuum bylo chromatografováno na silikagelu s vymýváním gradientem hexanu/5-15% ethyletheru a tím se získal produkt, 8,0 g, 40%, ve formě viskózního oleje.

^lH NMR (CDC1₃) 5: 3,95 (s, 3H) , 4,10 (s, 2H) , 6,65 (d, 1H) ,

6,90 (s, 1H), 7,00 (t, 1H), 7,10 (d, 1H), 7,20 (m, 1H) , 7,30(m, 4H), 8,20 (br s, 1H)B. Příprava methyl 2-[3-fenylmethyl-7methoxyindol-l-yl]-5-chlorpentanoátu.

Roztok 2,1 g (11 mmol) produktu z části A v 15 ml dimethylsulfoxidu a několika mililitrech tetrahydrofuranu byl zpracováván po částech 480 mg hydridu sodného (60% v minerálním oleji, 12 mmol), míchán po dobu 10 minut a potom po 16,5 hodin po přidání 0,3 g 18-koruna-6 a 1,7 g (13 mmol) methyl-2-brom-5Roztok byl zředěn ethylacetátem a vodou, byla promývána vodou, promývána nasyceným chloridem sodným, sušena nad síranem sodným a odpařena za sníženého tlaku. Residuum bylo chromatografováno na silikagelu s vymýváním gradientem hexanu/10-25% ethyletheru a tím se získal produkt, 1,7 g, 40% ve formě oleje.

ch]orpentanoátu. Organická fáze

	NMR (DMSO-dg) δ:	1, 35	(m, 1H),	1, 60	(m,	1H) ,	2, 10	(m, 1H),
2,	20 (m, 1H), 3,55	(t,	2H) , 3,60	(s,	3H) ,	3,80	(s,	3H), 4,00
(s	, 2H), 6,60 (d,	1H) ,	6,85 (t,	1H) ,	7,00	<d,	1H) ,	7,10 (m,
1H	) , 7,15 (s, 1H),	7,20	(m, 4H).

C. Příprava 4-methoxy-6-methoxykarbonyl-10-fenylmethyl-6,7,8,9tet rahydropyrido[1,2-a]indolu.

Roztok 1,8 g (4,7 mmol) produktu z části B a 4 ml (15 mmol) hydridu tri-n-butylcínu v 50 ml toluenu byl zahříván na teplotu zpětného toku a zpracován po kapkách pomocí roztoku 85 mg (0,5 mmol) 2,2 '-azobis (2-methylpropi onit r i. lu) . Roztok byl zahříván na teplotu zpětného toku 1 hodinu po adici, ochlazen, odpařen *· · • · za sníženého tlaku, vyjmut v ethylacetátu, protřepáván s vodným fluoridem draselným a filtrován. Organická fáze byla promývána nasyceným chloridem sodným, sušena nad síranem sodným a odpařena za sníženého tlaku a tím se dostala směs 4-methoxy-6methoxykarbonyl-10-fenylmethyl-6, 7,8,9,9a,10hexahydropyrido[1,2-a]indolu a methyl 2-[3-fenylmethyl-7methoxyindol-l-yl]pentanoátu, která byla rozpuštěna v 25 ml dioxanu a míchána s 450 mg (2 mmol) dichlordikyanochinonu po dobu 30 minut. Ro2tok byl odpařen za sníženého tlaku, vyjmut v dichlormethanu, filtrován přes florisil a odpařen za sníženého tlaku. Residuum bylo chromatografováno na silikagelu s vymýváním gradientem hexanu/10-20% ethyletheru a tím se dostal sloučenina z názvu, 75 mg, 5%, ve formě amorfní pevné látky.

;H NMR (CDC13)	δ:	1, 10	(m, 1H),	1,85	(m, 1H),	2,20	(m, 1H),
2, 35 (m, 1H) ,	2, 10	(m,	1H), 3,00	(m,	1H) , 3,10	(s,	3H), 3,80
(s, 3H) , 4,00	<Π/	2H) ,	5,65 (m,	1H) ,	6,50 (d,	1H) ,	6,90 (t,
1H), 7,00 (d,	1H) ,	7, 10	(m, 1H), 7	,20	(m, 4H).

Příklad 6

Příprava (4-karboxamido-9-fenylmethyl-4,5dihydrothíopyrano[3,4-b]indol-5-yl)oxyoctové kyseliny ·· ·*

I ♦ · · ··· *♦· • ¥ ··

I ¥ » ¥ ¥ ¥ « ¥

A. Příprava methyl 3-( 4-methoxyindol-3-yl) laktátu.

Do roztoku 4-methoxyindolu (200 mg, 1,36 mmol) a methyl 2,3epoxypropionátu (258 mg, 2,22 mmol) v 40 ml tetrachlormethanu byl přidán chlorid cínatý (0,16 ml, 1,39 mmol) po kapkách při teplotě -5 až -10 °C. Reakční směs byla míchána při této teplotě po dobu 1 hodiny a zahřívána pomalu na teplotu okolí s nepřetržitým mícháním. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a roztokem hydrogenuhličitanu sodného, promývána solankou, sušena nad síranem sodným a odpařena za sníženého tlaku a tím se dostalo 210 mg žlutého oleje, který byl vystaven mžikové sloupcové chromatografii (2:1 až 1:1 hexany:ethylacetát) a tím se získal produkt, 157 mg, 44%, ve formě žluté pěny.

^ΧΗ NMR (CDC1₃) δ: 1,20 (t, 3H) , 3,15(dd, 1H) , 3,49 (dd, 1H), 3,95(s, 3H), 4,12 (q, 2H), 4,49(dd, 1H) , 5,27 (s, 2H), 6,50(d, 1H), 6,83 (d, 1H), 7,08 (m, 2H) , 7,31(m, 5H) .

B. Příprava y1)propionátu y 1 )acetátu.

směsi methyl-2-brom-3- (4-methoxyindol.-3methyl-2-brommethyl-3-(4-methoxyindo1 - 396 fc· * • 4 4

4 * • 4« ·· ·

*·** · ·

4 »

4

4 • 4 4

4 »

44

4 4 « • 4 4 4

444 444

4

44

Do roztoku produktu z části A (29 mg, 0,11 mmol) a trifenylfosfi nu (57,7 mg, 0,22 mmol) v 2 ml 1,2-dichlorethanu byl přidán roztok 1,2-dibromtetrachlorethanu (71,6 mg, 0,22 mmol) v 1 ml 1,2-dichlorethanu při teplotě -10 °C. Reakční směs byla zahřívána na teplotu okolí a míchána po dalších 10-15 minut. Byla potom koncentrována za sníženého tlaku a vystavena mžikové sloupcová chromatografii (2:1 hexany:ethylether) a tím se dostalo 31 mg, 86%, směsi methyl-2-brom-3-(4-methoxyindol-3yl)propionátu a methyl-2-brommethyl-3-(4-methoxyindol-3yl)acetátu ve formě žlutého oleje.

NMR (CDC1₃) δ: 1,20 (t, 3H) , 3,15(dd, 1H) , 3,49 (dd, 1H) , 3,95(s, 3H), 4,12 (q, 2H) , 4,49(dd, 1H) , 5,27 (s, 2H) , 6,50(d, 1H), 6,83 (d, 1H), 7,08 (m, 2H), 7,31(m, 5H).

C. Příprava směs methyl-2-brom-3-(l-fenylmethyl-4-methoxyindol3-yl)propionátu a methyl-2-brommethyl-3-(l-fenylmethyl-4methoxyindol-3-yl)acetátu.

Směs produktu z části B byla rozpuštěna v 5 ml acetonitril a byl přidán přibližně 1 ekvivalent uhličitanu draselného. Tato směs byla zahříván na teplotu zpětného toku přes noc pro vytvoření methyl 2-[4-methoxyindol-3,3-yl]spirocyklopropan karboxylátu. Do této reakční směsi byly přidány 2 ekvivalenty benzylbromidu a směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku přes noc. Směs byla filtrována a koncentrována. Residuum bylo čištěno pomocí mžikové sloupcová chromatografie (91:1 hexany:ether) a tím se dostalo 29 mg , 66%, směsi přibližně 1:9 methyl-2-brom-3-(1-fenylmethy1-4-methoxyindol -3-yl)propionátu a inethyl-2-brommethyl-3 - (1-fenylmethyl-4-methoxyindo1- 3y 1)acetátu.

*»· n NMR (CDC1₃) δ. 1,28 (t, 3Η) , 3,82 (d, 2Η) , 3,96 (s, 3Η) ,

4,26 (q, 2Η) , 4,81 (t, 1Η) , 5,25 (s, 2H) , 6,53 (d, 1H) , 6,89 (d, 1H) , 7,02-7,18 (m, 7H) .

D. Příprava methyl 2-acetylthiomethyl-3-(1-fenylmethyl-4methoxyindol-3-yl)acetátu.

Do roztoku směsi produktů z části C (2,879,7,0 mmol) v 15 ml tetrahydrofuranu a 40 ml dimethylformamidu byl přidán 18koruna-6 (0,31 g) a thioacetát draselný (12,2 g, 0,11 mol) a potom míchán při teplotě 50 °C po dobu 2 hodiny. Směs byla zředěna ethylacetátem a solankou. Organická fáze byla promývána, sušena a koncentrována. Residuum bylo čištěno pomocí HPLC a poskytlo 1,8 g , 64,2%, produktu.

(CDC13)	δ	1,19 (t, 3H), 2,28	(s,	3H), 3,54	(dd, 2H),
3H) ,	4,	52 (t, 1H), 5,22 (s,	2H)	, 6,53 (d,	1H), 6,82
7,00	(s,	1H), 7,11 (m, 3H), 7,	28	(m, 3H) .

E. Příprava methyl 2-merkaptomethyl~3-(l-fenylmethyl-4methoxyindol-3-yl)acetátu.

Do roztoku produktu z části D (0,849,2,0 mmol) v ethanolu (70

ml) byl	přidán	uhličitan	draselný (4,19,30	mmol)	. Reakční	směs
byla míchán při teplotě	okolí po dobu 1,5	hodir	1. Reakce	byla
zastavena kyselinou	chlorovodíkovou	a	extrahována
ethylacetátem,	sušena, koncentrována a tím	se dostal produkt,
0, 74 9 g,	98% .
Ή NMR 1	:cdci3)	δ: 1,21	(t, 3H), 1,55 (t,	1H) ,	3,03 (m,	2H) ,
3,91 (s,	1H) ,	4,19 (q,	2H) , 4,50 (t, 1H) ,	5, 22	(a, 3H),	6, 48
(d, 1H),	6,83	(d, 1H),	6,98 (s, 1H) , 7,10	(m,	3H), 7,27	(m,

3H) , «*** 4 v« 4 4 ·* · *

F. Příprava methyl 2-methoxymethylmerkaptomethyl-3-(lfenylmethyl-4-methoxyíndol-3-yl)acetátu.

Do roztoku produktu z části E (0,719,1,92 mmol) v tetrahydrofuranu (45 ml) bylo přidáno několik miligramů 18koruna-6 a hexamethyldisilazidu draselného (4,54 ml, 0,5M v toluenu) při teplotě -75 °C. Roztok byl míchán při teplotě -75 °C po dobu 3 minuty a potom byl přidán jodomethyl methylether (0,28 ml, mmol) a míchán po dobu 20 minut při teplotě -75 °C. Reakčni směs byla vlita do směsi ethylacetátu a solanky. Organická vrstva byla promýván solankou, sušena nad síranem sodným a koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo čištěno sloupcovou chromatografií (3:1 hexany:ethylacetát) a

tím se získal produkt, 650 mg, 82%,	ve formě	světle žlutého
oleje.
XH NMR (CDC13) δ: 1,23 (t, 3H) , 3,14	(m, 2H),	3,35 (s , 3H ) ,
3,91 (s, 3H), 4,22 (q, 2H) , 4,65 (d,	1H), 4,66	(t, 1H), 4,75
(d, 1H), 5,22 (s,2H), 6,51 (d, 1H) , 6,	90 (d, 1H),	7,00 (s, 1H),
7,07 (m, 3H), 7,28 (m, 3H).

G. Příprava 4-methoxykarbonyl-5-methoxy-9-fenylmethyl-4,5dihydrothiopyrano[3,4-b]indolu.

Do roztoku produktu z části F (518 mg, 1,25 mmol) v dichlormethanu (10 ml) byla rychle přidána jedna lžička bromidu zinečnatého. Směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 4,5 hodin. Směs byla vlita do roztoku ethylacetátu a hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva byla promývána solankou, sušena nad síranem sodným a koncentrovánu za sníženého tlaku. Residuum bylo čištěno sloupcovou chromatografi i (3:1 hexany: ethylacetát) a tím se dostalo 269 mg, 56,4%, produktu ve formě žlutého oleje.

· « * · * · · · , « · « · * ·· » β ·«»··· · ♦ · ··· · · » • · · · · · · · • « · · ·* · · ·· **

NMR (CDCI3)	δ: :	1,22 (t, 3H),	3,20	(dd, 1H), 3,59	(d, 1H),
3,72 (d, 1H) ,	3, 83	(s, 3H), 4,21	(m 3H)	, 4,53 (t, 1H),	5,18 (d,
1H), 5,24 (d,	1H) ,	6,43 (d, 1H)	, 6,82	(d, 1H) , 6,98	(d, 1H) ,
7,09 (t, 1H),	7,22	(m 4H).

Η. Příprava 4-karboxamido-5-methoxy-9-fenylmethyl-4,5dihydrothiopyrano [3,4-b]indolu .

Do roztoku produktu z části G (120 mg, 0,31 mmol) v benzenu (15 ml) byl přidán čerstvě připravený methylchloraluminum amid (0,67 M, 9,3 ml). Směs byla míchána při teplotě 50 °C přes noc, byla ochlazena, přidána do IN kyseliny chlorovodíkové a zředěna ethylacetátem a solankou. Organická vrstva byla promývána solankou, sušena nad síranem sodným a koncentrována. Residuum bylo čištěno sloupcovou chromatografií(3:1 hexany: ethylacetát až ethylacetát až 1% methanolu v dichlormethanu) a tím se získal produkt, 49,3 mg, 45%.

MS PIA 353,4 (M+l)

Elementární analýza pro C20H2ON2O2S:

Vypočteno: C 68,16; H 5,72; N 7,95

Nalezeno: C 68,31; H 5,83; N 8,05

I. Příprava ethyl [4-karboxamido-9-fenylmethyl-4,5dihydrothiopyrano[3,4-b]indol-5-yl]oxyacetátu.

Do roztoku produktu z části H (210 mg, 0,60 mmol) v dichlormethanu (30 ml) byl přidán bromid boritý (10 ml, 1M v dichlormethanu). Směs byla míchána po dobu 0,5 hodin. Reakční směs byla vlita do směsi ledu a vody, extrahována 1% methanolu v dichlormethanu, promývána solankou, sušena a koncentrována. Surový 4-karboxamido-5-hydroxy-9-fenyImethy1-4 ,5dr hydrothiopyrano [ 3, 4-b] i ndol byl rozpuštěn v 13 ml DMI’ a výsledný roztok byl zpracováván hydridem sodným (50 mg, 60% v

100 minerálním oleji, 1,25 mmol) po dobu 5 minut a potom ethylbromacetátem (0,09 ml, 1,2 mmol) po dobu 1,5 hodin. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a solankou. Organická vrstva byla promývána, sušena a koncentrována. Residuum bylo čištěno pomocí sloupcové chromatografie (1%—2% methanolu v dichlormethanu) a tím se získal produkt 79 mg, 31%, ve formě žluté pěny.

MS FIA 425,2 (M+l)

Elementární analýza pro C23H₂₄N₂O₄S:

Vypočteno: C 65,07; H 5,57; N 6,47

Nalezeno: C 65,88; H 5,57; N 6,47

J. Příprava (4-karboxamído-9-fenylmethyl-4,5díhydrothiopyrano[3,4-b]indol-5-yl)oxyoctové kyseliny.

Do roztoku produktu z části I (53,7 mg, 0,13 mmol) ve směsi rozpouštědel (5 ml, tetrahydrofuran: methanol: voda, 3:1:1) byl přidán hydroxid lithný (přibližně 2,5 ekvivalentů). Roztok byl míchán přes noc, okyselen na pH -2 a extrahován ethylacetátem. Organic roztok byl sušen nad síranem sodným a odpařen za sníženého tlaku a tím se dostala sloučenina z názvu, 37 mg, 74%, ve formě žluté pevné látky.

MS FIA 397,1 (M+l).

Elementární analýza pro C₂iH₂₀N2C>4S :

Vypočteno: C 63,62; H 5,08; N 7,07

Nalezeno: C 63,83; H 5,33; N 6,87

Přiklad 7

3,4-dihydro-4-ka rboxami dol-5-methoxy-9-fenylmethylpyránof 3,4 b]indol η * *4

101

444 4 4 * « 4 4 444 444

4 4 4 · 4 ·

44 «4 44 *4

A. Příprava ethyl [4-methoxyindol-3-yl] acetátu.

Do roztoku 2,94 g (20 mmol) 4 -methoxyindolu v 150 ml tetrahydrofuranu bylo přidáno pomalu 13 ml n-butyllithia (1,6M v hexanu; 20 mmol) následovaného pomalou adicí 20 ml chloridu zinečnatého (1,0 M v ethyletheru; 20 mmol) při teplotě 0-5 °C. Chladicí lázeň byla odstraněna a roztok byl míchán po dobu 2 hodiny a potom zpracováván 2,1 ml (25 mmol) ethyl-bromacetátu po dobu 19 hodin, zředěn ethylacetátem, promýván vodou, promýván solankou, sušen nad síranem sodným a odpařen za sníženého tlaku. Residuum bylo chromatografováno na silikagelu s vymýváním gradientem hexanu/10-50% ethyletheru a tím se dostal výchozí materiál (40%) a potom produkt, 2,39 g, 50% ve formě oleje.

^[H NMR (CDC1₃) 6: 1,25 (t, 3H) , 3,85 (s, 3H) , 3,90 (s, 2H) ,

4,10 (q, 2H), 6,45 (d, 1H) , 6,90 (d, 1H) , 6,95 (s, 1H) , 7,05 (t, 1H), 8,00 (br s, 1H).

B. Příprava ethyl [4-methoxy-l-fenylmethylindol-3-yl) acetátu. Roztok 1,6 g (6,9 mmol) produktu z části A v 7.5 ml dimethylformamidu a 10 ml tetrahydrofuranu byl zpracováván po částech 300 mg hydridu sodného (60% v minerálním oleji; 7,5 mmol) a potom 1,0 ml (8,4 mmol) benzylbromidu po dobu 4 hodiny • φ

102 a potom zředěn ethylacetátem a vodou. Organická fáze byla promývána vodou, promývána solankou, sušena nad síranem sodným a odpařena za sníženého tlaku. Residuum bylo chromatografováno na silikagelu s vymýváním gradientem hexanu/10-20% ethyletheru a tím se získal produkt, 1,09 g, 45% ve formě oleje.

NMR (CDC1₃) δ: 1,25 (t, 3H) , 3,85 (s, 3H) , 3,90 (s, 2H),

4,10 (q, 2H) , 5,25 (s, 2H) , 6,50 (d, IH) , 6,85 (d, IH) , 6,95 (s, IH), 7,05 (t, IH), 7,10 (d, 2H) , 7,25 (m, 3H).

MS ES + 324,0 (M+l).

C. Příprava ethyl 2-[4-methoxy-l-fenylmethylindol-3-yl]-3fenylmethoxypropionátu.

Do míchaného roztoku produktu z části B (1,49,4,3 mmol) v 50 ml tetrahydrofuranu byl přidán hexamethyldisilazid draselný (9,54 ml, 0,5M v toluenu; 4,17 mmol) pomalu při teplotě -75 °C pod dusíkovou atmosférou. Výsledná reakční směs byla míchán po několik minut a zpracována chlormethyl-benzyletherem, (1,19,8,6 mmol) při teplotě -75 °C. Reakční směs byla míchána při teplotě -75 °C po dobu 0,5 hodin a vlita do směsi solanky a ethylacetátu. Organická vrstva byla promývána solankou, sušena a koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo čištěno pomocí mžikové sloupcová chromatografie (3:1 hexany:

ethylacetát)	a tím se	získal produkt	ve	formě	žlutého	oleje,
1,349,70,3%.
lH NMR (CDClý	1 Ó : 1,22	(t, 3H),	3,88	(s,	3H) ,	3,94 (dd	, IH) ,
4,21 (m, 3H),	4,56 (s,	2H), 4,15	(dd,	IH)	, 5,20	(s, 2H)	, 6, 40
(d, IH), 6,81	(d, IH),	7,02-7,34	(m, 7H).

D. Příprava ethyl hydroxypropíonátu.

2-[4-methoxy-l-fenylmethyl i ndol-3-y1]-3• *

103 • 0

Do míchaného roztoku produktu z části C (0,339) v ethylacetátu (50 ml) bylo přidáno 5% Pd/C (0,179) a 1 ml IN kyseliny chlorovodíkové. Reakční směs byla míchána pod tlakem přibližně 1 atmosféry vodíku při teplotě okolí přes noc. Reakční směs byla filtrována, neutralizována roztokem hydrogenuhličitanu sodného a promývána solankou. Organická vrstva byla sušena nad síranem sodným a koncentrována za sníženého tlaku a tím se získal produkt, 0,23 g, 89%,ve formě žlutého oleje.

NMR (CDC1₃) δ : l,21(t, 3H) , 3,87 (s, 3H) , 3,92 (dd, 1H) , 4,20 (m, 3H), 4,44 (dd, 1H) , 5,21 (s, 2H) , 6,43 (d, 1H) , 6,84 (d, 1H), 6,98 (s, 1H), 7,00 (m, 3H), 7,30 (m, 3H).

E. Příprava ethyl 2-[4-methoxy-l-fenylmethylindol-3~yl]-3methoxypropionátu.

Do míchaného roztoku produktu z části D (0,269,0,74 mmol) v 18 ml tetrahydrofuranu byl přidán hexamethyldisilazid draselný (1,63 ml, 0,5M v toluenu, 0,815 mmol) pomalu při teplotě -75 °C. Do reakční směsi byl přidán jodomethyl methylether (0,13 ml, 1,48 mmol) při teplotě -75 °C po uplynutí 2 minut míchání při téže teplotě. Směs byla zředěna solankou a ethylacetátem po uplynutí 15 minut při teplotě -75 “C. Organická vrstva byla promývána solankou, sušena nad síranem sodným a koncentrována

za sníženého	tlaku.	Residuum	bylo čištěno	sloupcovou
chromatografii	(4 : 1	až 3	:1 hexany:	ethylacetat) a tím	se získal
produkt, 0,239	, 79, 3	%, ve	formě žlutého oleje.
‘H NMR (CDClb	δ :	1,21	(t, 3H),	3,3 5 (s, 3H), 3,91	(s, 3 H) ,
9,95 (m, 2 H ) ,	4,22	(q, 2H), 4,65	(s, 2H), 4,72 (dd,	lfi), 5,21
(s, 2H), 6,4 1	(d,	1H) ,	6,82 (d,	1H) , 7,04 (m, 411) ,	7,2.4 (m,

3H) .

« « · »

104 *· »

F. Příprava 3,4-dihydro-4-ethoxykarbonyl-5-methoxy-9fenylmethylpyráno[3,4-b]indolu.

Do míchaného roztoku etherátu fluoridu boritého (0,071 ml, 0,55 mmol) v dichlormethanu (6 ml) byl pomalu přidán roztok produktu z části E (148 mg, 0,37 mmol) v dichlormethanu (4 ml) při teplotě 0-5 °C. Reakční směs byla zahříván na teplotu okolí a míchána po dobu 0,5 hodin pro ukončení reakce. Reakční směs byla zředěna ethylacetátem a solankou. Organická vrstva byla promývána solankou, sušena nad síranem sodným a koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo chromatografováno na silikagelu (1:1 hexany:ethylether) a tím se získal produkt,

49,3 mg, 36,2%, ve formě bílé pevné látky.

NMR (CDC13)	δ :	1,21	(t,	3H) ,	3,88(s, 3H) , 4,05	(dd,	1H) ,
4,15 (m, 1H) ,	4,24	(m,	3H) ,	4, 60	(d, 1H), 4,78 (d,	1H) ,	5, 04
(d, 1H) , 5, 18	(d,	1H) ,	6, 44	(d,	1H) , 6,82 (d, 1H) ,	7,01	(m,
3H), 7,22 (m,	3H) .

G. Příprava 3,4-dihydro-4-karboxamidol-5-methoxy-9fenylmethylpyráno[3,4-b]indolu.

Do roztoku produktu z části F (490 mg, 1,34 mmol) v benzenu (60-80 ml) byl přidán čerstvě připravený methylchloraluminum amid (0,67M, 60 ml·, 40 mmol·). Reakční směs byla míchána při teplotě 50 °C po dobu 24 hodin, ochlazena, dekomponována adicí IN kyseliny chlorovodíkové a zředěna ethylacetátem a solankou. Organická vrstva byla promývána solankou, sušena nad síranem sodným a koncentrována. Residuum bylo čištěno sloupcovou chromatografií na silikagelu s vymýváním gradientem dichlormethan/ 1-2% methanol a tím se získal produkt, 335 mg, 74,6% .

MS PIA 337,2 (M+l)

Elementární analýza pro C₂₀H₂oN₂0_}:

-

105

-

• * to to to· • · »

to · to· to *« • to to to «

·· · · to toto to to · to to

« « to · · · 9 « · to · to · · ** * “ ··

Vypočteno: C, 71,41; H, 5,99; N, 8,33
Nalezeno:	C, 71,51;	H, 6,19; N, 8,26
Příklad 8
Příprava	2-((2,9	bis-benzyl-4-karbamoyl-l,2, 3,4-tetrahydro-

beta-karbolin-5-yl}oxy]kyseliny octové

A. Příprava 4-(tertbutyldimethylsilyl}oxyindolu.

Imidazol (15,3 g, 225 mmol) byl přidán do roztoku 4hydroxyindolu (20 g, 150 mmol) v 300 ml bezvodého methylenchloridu při teplotě okolí. Výsledný směs byla zpracována terč.-butyldimethylsilylchloridem (25 g, 165 mmol). Po míchání přes noc při teplotě okolí byla reakční směs vlita do 300 ml vody. Vrstvy byly separovány a vodná fáze byla extrahována methylenem (2 x 100 ml) . Sloučené organické vrstvy byly sušeny nad síranem sodným, filtrovány a koncentrovány za sníženého tlaku na černý olej. Surové residuum bylo čištěno na Prep 500 (silikagel; 0% až 5% ethylacetátu/hexanů) a tím se dostala sloučenina z názvu ve formě světle purpurové voskovité pevné látky s kvantitativním výtěžkem.

MS (iontový spray, NH₄OAc) m/e [M+l]⁺ 248, [M-l]*246.

Elementární analýza pro CnHíiNOSi:

Vypočteno: C 67,96; H 8,55; N 5,66

Nalezeno: C 69,10; H 8,79; N 5,70

B. Příprava ethyl-[4-(terč.-H-butyldimethylsilyl)oxyindol]-3octové kyseliny

Roztok indolu (78) (247 mg, 1,00 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (2 ml) pod dusíkovou atmosférou byl ochlazen na teplotu -10 °C potom bylo přidáno po kapkách během 30 vteřin stříkačkou n-butyllithium (0,625 ml, 1,00 mmol), 1,6 M v • ·

106 ·* · · hexanech. Výsledný roztok byl míchán 15 minut a najednou byl přidán chlorid zínečnatý (1,0 ml, 1,0 mmol), 1 M v etheru. Roztok byl míchán 2 hodiny za zahřívání na teplotu okolí. Do tohoto roztoku byl najednou přidán ethyljodoacetát (0,118 ml, 1,00 mmol) . Reakční směs ztmavla, ale zůstala čirá. Směs byla míchána 3 hodin při teplotě okolí, koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo čištěno přímo na silikagelu (kolona 30 x 35 mm) s vymýváním methylenchloridem. Koncentrace odpovídající frakce dala 192 mg (57,8%) produktu z názvu ve formě bílé pevné látky.

MS (iontový spray, NH₄OAc) m/e [M+l]⁺ 334 , [M-l]“ 332.

Elementární analýza pro CibH2₇NO₃Sí:

Vypočteno: C 64,86; H 8,11; N 4,20

Nalezeno: C 65,11; H 8,02; N 4,24

C. Příprava ethyl-[2,9-bis-benzyl-5-(terc.butyldimethylsilyl)oxy-1,2,3,4-tetrahydro-beta-karbolin]-4-

octové kyseliny
Roztok esteru	(79)	(5, 08	g, 15,2	mmol) v bezvodém
tetrahydrofuranu	(100	ml) byl	ochlazen	na teplotu -18 °C a
potom zpracován	po	kapkách 0	, 5 M bis |	Jtrimethylsilyl)amidem
draselným v toluenu	(32 ml,	1 6 mmol} .	Výsledný roztok byl
míchán 10 min	a potom byl	najednou	přidán benzyljodíd
(3,329,15,2 mmol	) ·	Chladicí	lázeň byla odstraněna, smčs
zahřívána rychle	na	teplotu 0	°C, potom pomalu na teplotu

okolí. Po míchání 15 minut při teplotě okolí byla směs koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo vyjmuto v ether a promýváno postupně 10% vodnou kyselinou citrónovou, vodou a nasyceným roztokem hydrogenuh1iči tanu sodného. Etherický roztok byl sušen nad síranem hořečnatým a koncentrován za sníženého

107 tlaku. Residuum bylo čištěno na silikagelu (kolona 70 x 130 mm) s vymýváním 500 ml 1:1 směsi methylenchlorid/hexany a potom 500 ml methylenchloridu. Odpovídající frakce byly sloučeny a koncentrovány za sníženého tlaku a tím se získalo 5,90 g (91%) ethyl [l-benzyl-4-(terč.-butyldimethylsilyl)oxyindole]-3-octové kyseliny ve formě hnědého oleje. Benzylamin (2,14 g, 20,0 mmol) a paraformaldehyd (1,80 g, 120 mmol) byly sloučeny a zahřívány na teplotu zpětného toku v bezvodém methanolu (10 ml) po dobu 2 hodiny. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a sušena za sníženého tlaku po dobu 30 minut a tím se získal surový benzyl bis(methoxymethyl)amin ve formě vodnatého bílého oleje. Tento materiál byl používán okamžitě bez čištění. Do ochlazeného roztoku ethyl [l-benzyl-4-(terč.-butyldimethylsilyl)oxyindole]3-octové kyseliny (190 mg, 0,45 mmol) v bezvodém tetrahydrofuranu (2 ml) byl přidán bis(trimethylsilyl)amid draselný (0,98 ml, 0,49 mmol), 0,5 M v toluenu, po kapkách a stříkačkou. Po míchání směsi po 10 minut byl najednou přidán trimethylsilylchlorid (0,057 ml, 0,45 mmol). Směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a potom byla koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo sušeno 30 minut za sníženého získal trimethylsilyiketen acetal (81).

81) byl okamžitě rozpuštěn v do kterého byl přidán čerstvě připraveny benzyl-bis(methoxymethyl)amin (175 mg, 0,90 mmol). Směs byla ochlazena na teplotu -78 °C a zpracována 1 M chlorid zinečnatý v ether(0,9 ml, 0,9 mmol). Směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí a míchána po dalších 45 minut. Směs byla promývána nasyceným roztokem hydrogenuhličítanu sodného a ponechána procházet vrstvou silikagelu s vymýváním 1:4 směsí ethylacetátu/hexanu. Požadované frakce tlaku a tím se Residuální keten acetal methylenchloridu (30 ml), byly sloučeny koncentrovány za sníženého tlaku potom dále čištěny v SCX

108 patroně (1 g, Varian) s methanolem a čpavkem. Požadované frakce byly sloučeny, koncentrovány a čištěny na silikagelu s vymýváním methylenchloridem a tím se získalo 34 mg (14%) tricyklického indolu z názvu.

MS (iontový spray, NH₄OAc) m/e [M+l]⁺ 555.

Elementární analýza pro C34H42N2O3SÍ:

Vypočteno: C 73,64; H 7,58; N 5,05

Nalezeno: C 73,42; H 7,61; N 5,15

D. Příprava ethyl 2-[(2,9-bis-benzyl-4-karbamoyl-1,2,3,4 tetrahydro-beta-karbolin-5-yl)oxy]kyseliny octové Roztok 565 mg (1,02 mmol) sloučeniny z části C v 10 ml 1:1 směsi methanolu/tetrahydrofuranu byl zpracováván 5 ml (5 mmol) 1 N hydroxidem lithným pod dusíkovou atmosférou. Směs byla rychle zahřívána, ponechána za míchání při teplotě okolí po dobu 2 hodiny a potom koncentrována za sníženého tlaku na asi 5 ml. pH roztoku bylo upraveno na přibližně 5 až 6 1 N kyselinou chlorovodíkovou. Výsledný precipitát byl shromážděn a sušen a tím se získalo 430 mg (102%) hydroxykyseliny. Tento produkt byl suspendován v hydroxybenzotriazolu (160 mg, 1,19 mmol) a hydrochloridu 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimídu (940 mg, 2,30 mmol) v 30 ml 1:1 směsi tetrahydrofuranu/methylenchloridu. Směs byla intenzivně míchána po dobu 10 minut, nasycena plynným čpavkem, intenzívně míchána po dobu 1 hodiny, potom koncentrována za sníženého tlaku. Residuum bylo rozděleno mezi ethylacetát a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného. Ethylacetátový roztok byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým, filtrován a koncentrován za sníženého tlaku. Residuum bylo ponecháno procházet přes vrstvu silikagelu s vymýváním ethylacetátem. Vymývací rozpouštědlo bylo odpařeno a tím se získalo 175 mg (43%) karboxamidu.

109

BB « ·» ·· ·· ·· • « * * · 4 Β * β*· · · · · · · · * • ♦♦·· 4 4 4 4 4 Β 444 ««·

Β Β · · Β · ·*

Β Β Β · · · 4 4 4 4 « ·

Tato sloučeninu byla rozpuštěna v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu, ochlazena na teplotu -10 °C a zpracována 0,5 M bis(trimethylsilyl)amidem draselným v toluenu (0,85 ml, 0,425 mmol). Roztok byl míchán 10 minut a potom byl najednou přidán ethyl-bromacetát. Reakční směs byla míchána 6 hodin za zahřívání na teplotu okolí. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a residuum bylo čištěno na silikagelu vymýváním ethylacetátem a tím se získalo 86 mg (41%) sloučeniny z názvu. MS (iontový spray, NH₄OAc) m/e [M+l]⁺ 498.

Elementární analýza pro C₃₀H3iN₃O₄:

Vypočteno: C 12,43; H 6,24; N 8,45

Nalezeno: C 12,54; H 6,36; N 8,64

E. Příprava 2-[(2,9-bis-benzyl-4-karbamoyl-l,2,3,4-tetrahydrobeta-karbol-5-yí)oxy]kyseliny octové

Roztok sloučeniny z části D (78 mg, 0,16 mmol) v 2 ml 1:1 směsi tetrahydrofuranu/methanolu byl· míchán s 1 M hydroxidem lithným (0,63 ml, 0,63 mmol) po dobu 3 hodiny. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a tím se dostala bílá pevná látka. Pevná látka byla suspendován v 2 ml vody a pH bylo upraveno na hodnotu přibližně 5 až 6 přidáním 1 N kyseliny chlorovodíkové a tím se vytvořila poněkud jinak bílá pevná látka. Nová pevná látka byla shromážděn filtrací a sušena za sníženého tlaku a Lim se získalo 68 mg (93%) sloučeniny z názvu.

MS (iontový spray, NH₄OAc) m/e [M+l]l+ 470.

Elementární analýza pro C23H2/N3O4 . 0,8 H₂O:

Vypočteno: C 69,49; H 5,96; N 8,68

Nalezeno: C 69,50; H 5,64; N 8,54

110

4 4 »4* 4 4··

4* 4 · · 4 4 4 4 4 4 • 4444 44 4 « 4 · 444 ···

4 44·* 4 ·

4*4 * 44 44 4« 44

F. Příprava 2-[(9-benzyl-4-karbamoyl-l,2,3,4-tetrahydro-betakarbo1 in-5-yl)oxy] kyseliny octové, hydrochloridu Suspenze sloučeniny z části E (68 mg, 0,14 mmol) byla zpracován 3-4 kapkami IN HC1 pro ovlivnění roztoku. Do roztoku bylo přidáno 10% paladium na uhlí (70 mg). Baňka byl vhodným způsobem propláchnuta dusíkem a vodíkem a směs byla potom míchána pod vodíkovou atmosférou po dobu 18 hodin. Směs byla filtrována a pevné složky pečlivě promývány methanolem. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a tím se získala směs kyseliny a methylesteru. Směs byla zpracovávána vodným LiOH (0,3 ml) v přibližně 2 ml methanolu po dobu 2 hodin. Směs byla koncentrována za sníženého tlaku a residuum okyseleno na hodnotu pH = 5 pomocí 1 N HC1, což iniciovalo vytváření precipitátu. Precipitát byl shromážděn filtrací. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku a zanechal residuum.

Shromážděné pevné látky a residuum byly čištěny pomocí chromatografie s obrácenými fázemi a tím se získalo 31 mg (68%) sloučeniny z názvu ve formě HC1 soli.

MS (iontový spray) m/e [M+l]⁺ 380.

IR (KBr, cm'¹) 3393 (br) , 3100-2500 (COOH) , 1735, 1671, 1638,

1615, 1445, 1263, 1133, 731, 722.

111 • · · · * ·

4 4 · 4 4 · 4 4 4

444 4 4«44 * 4« 4

4444 44 4 4 · · *44 444

4 444« *

4444 · ·* ♦· ·· 4*

Terapeutické použiti tricyklických sloučenin

Předpokládá se, že sloučeniny popsané v předložené přihlášce vynálezu dosahují svého příznivého terapeutického účinku přímou inhibici lidské sPLA₂ a nikoliv působením jako antagonisté arachidonové kyseliny nebo dalších aktivních činidel, nacházejících se pod arachidonovou kyselinou v kaskádě arachidonové kyseliny, jako jsou 5-lipoxygenázy, cyklooxygenázy a podobně.

Způsob podle předloženého vynálezu pro inhibici sPLA₂ mediovaného uvolňování mastných kyselin zahrnuje kontakt sPLA₂ s terapeuticky účinným množstvím sloučeniny obecného vzorce (I) nebo její soli.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být použity při způsobu léčení savce (například člověka) pro zmírněni patologických účinků septického šoku, respiračního distres syndromu dospělých osob, pankreatitidy, traumatických stavů, bronchiálního astmatu, alergické rinitidy a revmatické artritidy; způsob přitom zahrnuje podávání savci sloučeniny obecného vzorce (I) v terapeuticky účinném množství. Terapeuticky účinné množství je množství dostatečné pro inhibici sPLA₂ mediovaného uvolňováni mastných kyselin a tím k inhibici nebo prevenci kaskády arachidonové kyseliny a jejich škodlivých produktů. Terapeutické množství sloučeniny podle předloženého vynálezu, které je třeba pro inhibici sPLA₂ může být snadno určeno odebráním vzorků tělesné tekutiny a její analýzou na obsah sPLA₂ konvenčními způsoby.

112

V této přihlášce jsou osoba nebo zvíře, kteří mají být léčeni, popisováni jako savec a je zřejmé, že nejvýhodnější subjekt je člověk. Musí však být uvedeno, že studium nepříznivých stavů centrálního nervového systému u zvířat je teprve v počátcích a v některých případech se s léčením podobného typu začíná. V souladu s tím se předpokládá použití popisovaných sloučenin u živočichů jiných než je člověk. Je samozřejmé, že rozsah dávek pro jiné živočichy je nutně zcela odlišný od dávek, podávaných člověku a v souladu s tím je nutné znovu provést výpočet rozsahu dávek. Například malý pes může být pouze velikosti 1/10 typické velikosti člověka a proto bude nutné použít daleko menších dávek. Výpočet účinného množství pro některé živočichy jiné než je člověk se provádí stejným způsobem, jaký je popsán níže pro případ použití u člověka a veterinární lékaři jsou dobře seznámeni s takovými způsoby výpočtů.

Farmaceutické přípravky podle vynálezu

Jak bylo uvedeno výše, sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou použitelné pro inhibici sPLA? mediovaného uvolňování mastných kyselin jako je arachidonové kyselina. Výrazem inhibice se míní prevence nebo terapeuticky významné snížení uvolňování sPLA₂ iniciovaných mastných kyselin použitím sloučenin podle předloženého vynálezu. Výrazem farmaceuticky přijatelný se míní že nosič, ředidlo nebo excipient musí být slučitelný s dalšími složkami přípravku a nesmí být škodlivý jejich p ň i j emc i.

Obecně jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu nejvýhodněji podávány v dávkách, které obecně dovoluji dosáhnout efekt, ivnich výsledků, aniž by způsobovaly závažné vedlejší účinky ,1 mohou

113 • « · · · · · 0 · • •0 0 0 0 0* * · · 0 • 0000 0 * 0 0 0 0 000 000 0 0 0000 0 0

0000 0 00 00 0· 00 být podávány buď jako jednotlivá jednotková dávka nebo, je-li to požadováno, může být dávka rozdělena do obvyklých částí, podávaných ve vhodných časových okamžicích během dne.

Specifické dávky sloučeniny podávané podle předloženého vynálezu pro dosažení terapeutických nebo profylaktických účinků budou pochopitelně určeny konkrétními okolnostmi případu, které zahrnují například způsob podávání, věk, hmotnost a odezvu individuálního pacienta, stav který má být léčen a závažnost pacientových symptomů. Typické denní dávky budou obsahovat netoxické dávkové úrovně účinné sloučeniny podle předloženého vynálezu od asi 0, 01 mg/kg do asi 50 mg/kg tělesné hmotností.

Farmaceutický přípravek je výhodně jednotková dávková forma. Jednotková dávková forma může být kapsle nebo tableta podaná jednotlivě nebo v libovolném počtu. Množství účinné složky v jednotkové dávce kompozice se může měnit nebo být nastaveno v rozmezí od asi 0,1 do asi 1000 miligramů nebo více v závislosti na konkrétním druhu léčení. Je zřejmé, že může být nutné provádět rutinní variace dávkování v závislosti na věku a stavu pacienta. Dávkování také závisí na způsobu podávání.

Chronický stav znamená zhoršující se stav, kde je pozorován pomalý postup a dlouhé trvání. Jako takový je léčen poté, kdy byl diagnostikován a léčení pokračuje po dobu trvání nemoci. Akutní stav je exacerbace o krátkém trvání, následovaná obdobím ústupu symptomů, V případě akutní události je sloučenina podávána po vypuknutí symptomů a léčení je přerušeno, pokud symptomy vymizí.

• Φ * · * φ » φ φ · · » Φ · <

» Φ φ a

114

Pankreatitida, traumatický šok, bronchiálni astma, alergická rinitida a revmatická artritida se mohou nacházet v akutním stavu nebo v chronickém stavu. Léčba těchto stavů tedy předpokládá jak léčbu akutní formy nemoci, tak i léčbu chronické formy. Na druhé straně septický šok a respiračmí distres jsou akutní stavy, které jsou léčeny poté, kdy jsou diagnostikovány.

intranasální. vynálezu jsou

Sloučenina může být podávána řadou způsobů, které zahrnují podávání cestou orální, aerosolovou, rektální, transdermální, subkutánní, intravenózní, intramuskulární a

Farmaceutické přípravky podle předloženého připraveny kombinací (například smísením) terapeuticky účinného množství sloučenin podle předloženého vynálezu spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem. Farmaceutické přípravky podle předloženého vynálezu jsou připraveny známými způsoby použitím dobře známých a snadno dostupných složek.

Při vytváření kompozic předloženého vynálezu se účinná složka obvykle smíchá s nosičem nebo zředí nosičem nebo obalí nosičem, který může být ve formě kapsle, sáčku, papírového nebo jiného obalu. Pokud nosič slouží jako ředidlo, může jím být pevný, polotuhý nebo kapalný materiál, který slouží jako vehikulum nebo může být ve formě tablet, pilulek, prášků, pastilek, elixírů, suspenzí, emulzí, roztoků, sirupů, aerosolů (s pevným nebo kapalným médiem) nebo mastí, které obsahují například až do 10% hmotnostních účinné sloučeniny. Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou výhodně upraveny před použitím do formy farmaceutického přípravku.

115

4* 4 »4 44 ·· 41 «44 · 4 · 4 4 4 • 44 4 444« · 4 4 · « 4444 · 4 44 44 444 444

4 4 · 4 * ·

4·«4 · ·· ·· ·· ··

Pro farmaceutické přípravky mohou být použity libovolné nosiče, které jsou známy z oboru. V takových přípravcích nosič může být pevná látka, kapalina nebo směs pevné látky a kapaliny. Přípravky v pevné formě zahrnují prášky, tablety a kapsle. Pevný nosič se může skládat z jedné nebo více látek, které také mohou působit jako chuťová činidla, lubrifikanty, rozpouštěcí činidla, suspenzní činidla, vazebná činidla, činidla pro desintegraci tablet a obalovaci látky.

Tablety pro orální podávání mohou obsahovat vhodné excipienty jako je uhličitan vápenatý, uhličitan sodný, laktóza, fosforečnan vápenatý spolu s desintegračnímí činidly, jako je kukuřice, škrob nebo kyselina alginová a/nebo vazebná činidla, například želatinu nebo arabskou gumu a lubrifikační činidla jako je stearan hořečnatý, kyselina stearová nebo talek.

V prášcích je nosič jemně rozdělená pevná látka, která je smíchána s jemně rozdělenou účinnou složkou. V tabletách je aktivní složka smíchána s nosičem, který má nutné vazebné vlastnosti, ve vhodném poměru a je lisována do požadovaného tvaru a velikosti. Prášky a tablety výhodně obsahují od asi 1 do asi 99 hmotnostních procent účinné složky, kterou je nová sloučenina podle předloženého vynálezu. Vhodné pevné nosiče jsou uhličitan hořečnatý, stearan hořečnatý, talek, cukrová laktóza, pektin, dextrin, škrob, želatina, tragacanth, methylcelulóza, sodná karboxymethylcelulóza, vosky s nízkou teplotou tání a kakaové máslo.

Přípravky ve sterilní kapalné formě zahrnují suspenze, emulze, sirupy a elixíry.

• · » ·

116

Účinná složka může být rozpuštěna nebo suspendována ve farmaceuticky přijatelném nosiči jako je sterilní voda, sterilní organické rozpouštědlo nebo jejich směs. Účinná složka často může být rozpuštěna ve vhodném organickém rozpouštědle, například ve vodném propylenglykolu. Další kompozice mohou být vytvořeny dispergováním jemně rozdělené účinné složky v roztoku vodného škrobu nebo sodné karboxymethylcelulózy nebo ve vhodném oleji.

Následující farmaceutické přípravky 1 až 8 jsou pouze ilustrativní a nemají za cíl žádným způsobem omezit rozsah předloženého vynálezu. Účinná složka, se vztahuje k sloučenině obecného vzorce (III) nebo její farmaceuticky přijatelné soli, solvátu nebo prekurzoru.

Přípravek 1

Tvrdé želatinové kapsle jsou připraveny použitím následujících ingredientů:

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4-	Množství ( mg/kapsle) 250
methylbenzyl)-9H-pyrido(3,4-b] indolyl]octová kyselina Škrob, sušený	200
Stearan horečnatý	10
Ce1kově	4 60 mg

117 flfl*· fl

Přípravek 2

Tablety byly připraveny použitím následujících složek:

Množství (mg/tableta}

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(4- 250 (trifluoromethyl)benzyl)-9Hpyrido[3,4-b]indolyl]octová kyselina

Celulóza, mikrokrystalická 400

Oxid křemičitý, žíhaný 10

Kyselina stearová 5

Celkově 665 mg

Komponenty jsou smíchány a lisovány do tablet, z nichž váží 665 mg.

Přípravek 3

Aerosolový roztok je připraven z následujících složek:

každá

Hmotnost

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(3- 0,25 benzoylbenzyl)-9H-pyrido[3,4-b] indoly1]octová kyselina

Ethanol 25,75

Propelent 22 (Chlordifluormethan) 74,00

Celkově 100,00

Účinná sloučenina se smíchá s ethanolem a směs se přidá k části propelentu 22, ochladí na teplotu -30 °C a přenese do plnicího září zení.Požadované množství je potom plněno do nádob z to ·

118 toto «· nerezové oceli a zředěno zbytkem propelentu. K nádobám jsou připevněny ventilové jednotky.

Přípravek 4

Tablety, každá obsahující 60 mg účinné složky, jsou vyrobeny následujícím způsobem:

2-[4-oxo-5-karboxamido-9- 60 mg (2,4,6-trifluorobenzyl)-9H-pyrido[3, 4-b] indolyl]octová kyselina

Škrob 45 mg

Mikrokrystalická celulóza 35 mg

Polyvinylpyrrolidon (jako 10% roztok ve vodě) 4 mg

Sodný karboxymethylškrob 4,5 mg

Stearan hořečnatý 0,5 mg

Talek 1 mg

Celkově 150 mg

Účinná složka, škrob a celulóza jsou prosáty přes síto o velikosti ok 45 U.S. mesh a důkladně promíchány. Vodný roztok obsahující polyvinylpyrrolidon se smíchá s výsledným práškem a směs se potom prosívá přes síto s velikostí ok 14 U.S. mesh. Takto vzniklé granule se suší při teplotě 50 °C a prosívají přes síto s velikostí ok 18 U.S. mesh. Sodný karboxymethylškrob, stearan hořečnatý a talek, předem prosáté přes síto s velikostí ok 60 U.S. mesh, jsou potom přidány ke granulím, které jsou po smíchání lisovány na tabletovacím stroji na tablety, z nichž každá váží 150 mg.

• ·

119

Přípravek 5

Kapsle, z nichž každá obsahuje 80 mg účinné složky, jsou vyrobeny následujícím způsobem:

2-[4-oxo-5-karboxamido-9-(2- 80 mg fiuorbenzyl)-9H-pyrido[3,4-b] indolyl]octová kyselina tetrahydro-4-karbazol-4-karboxamid

Škrob 59 mg

Mikrokrystalická celulóza 59 mg

Stearan horečnatý 2 mg

Celkově 200 mg

Účinná složka, celulóza, škrob a stearan horečnatý jsou smíchány, prosáty přes síto s velikostí ok 45 U.S. mesh a plněny do tvrdých želatinových kapslí v množství 200 mg.

Přípravek 6

Čípky, z nichž každý obsahuje 225 mg účinné složky, jsou vyrobeny následujícím způsobem:

2-[ 4-oxo-S-karboxamido-9- 225 mg pentafluorbenzyl-9H-pyrido[3,4-b] indolyl]octová kyselina

Glyceridy nasycených mastných kyselin 2,000 mg

Celkově 2,225 mg

Účinná složka se prosívá přes síto s velikostí ok 60 U.S. mesh a suspenduje v glyceridech nasycených mastných kyselin, které byly předtím roztaveny užitím minimálního množství tepla. Směs

120 se potom vlije do čípkové formy o nominální kapacitě 2 g a ponechá vychladnout.

Přípravek i

Suspenze, z nichž každá obsahuje 50 mg účinné složky na dávku 5 ml, jsou vyrobeny následujícím způsobem:

2-[4-oxo-5-karboxamido-9- 50 mg (3,4,5-trimethoxybenzyl)-9H-pyrido [ 3,4-b]indolyl]octová kyselina

Sodná karboxymethylcelulóza 50 mg

Sirup 1,25 ml

Roztok kyseliny benzoové 0,10 ml

Chuťové činidlo q.v.

Barvivo q.v.

Čistá voda do celkově 5 ml

Účinná složka se prosívá přes síto s velikostí ok 45 U.S. mesh a smíchá se sodnou karboxymethylcelulózou a sirupem a vytvoří vláčnou pastu. Roztok kyseliny benzoové, chuťové činidlo a barvivo se zředí částí vody a za míchání přidají. Nakonec se přidá dostatečné množství vody pro dosažení požadovaného obj emu.

Přípravek 8

Intravenózní přípravek může být připraven následujícím způsobem:

•» · « * ♦ · ·* ·« φ * · » * « « · φ

121 3 ·««· · φ • ·« » 4 ·« « · 3« «·

2-[4-oxo-5-karboxamido-9- 100 mg (3,5-di fluorbenzyl)-9H-pyrido [3,4-b]indolyl]octová kyselina

Isotonický fyziologický roztok 1,000 ml

Roztok výše uvedených složek se obecně podává subjektu intravenózně rychlosti 1 ml za minutu.

Testovací příklad 1

Následující chromogenické testovací procedury byly používány pro identifikaci a hodnocení inhibitorů rekombinantní lidské sekreční fosfolipázy A₂. Test zde popsaný byl modifikován pro vysokovýkonné testování používající mikrotitračních destiček s 96 jamkami. Obecný popis této testovací metody lze nalézt v článku Analysis of Human Synovial Fluid Phospholipase A₂ on Short Chain Phosphatidylcholine-Mixed Micelles: Development of a Spectrophotometric Assay Suitable for a Microtiterplate Reader, autorů Laure J. Reynolds, Lori L. Hughes a Edward A Dennis, Analytical Biochemistry, 204, str. 190-197,1992 (tento článek je zde zahrnut jako reference):

Reagenty:

Reakční pufr

CaCi₂ . 2H₂O (1,47 g/1)

KC1 (7,455 g/1)

Hovězí sérový albumin (prostý mastných kyselin) (1 g/1) (Sigma A-7030, produkt společnosti Sigma Chemical Co. St. Louis MO, USA) TRIS HCI (3,94 g/1) pH 7,5 (upraveno pomocí NaOH)

122

Enzymový pufe

0,05 NaOAc . 3H₂O, 0,2 NaCl pH 4,5 Opraven na pH 4,5 kyselinou octovou

DTNB

5,5'-dithiobis-2-nitrobenzoová kyselina

Racemický diheptanoyl THIO - PC racemický 1,2-bis(heptanoylthio)-1,2-dideoxy-sn-glycero-3fosforylchoiin

TRITON X-100™ připravený v 6,249 mg/ml v reakčním pufru na hodnotu 10 μΜ

TRITON X-100™ je polyoxyethylenový neionický detergent dodávaný společností Pierce Chemical Company, 3747 N. Meridian Road, Rockford, Illinois 61101.

Reakční směs

Měřený objem racemického diheptanoyl thio PC dodaný v chloroformu s koncentrací 100 mg/ ml se vysuší a znovu rozpustí v 10 milimolárním TRITON X-100™ neionickém detergentovém vodném roztoku. Do roztoku se přidá reakční pufr a potom DTNB, čímž se získá reakční směs.

Takto získaná reakční směs obsahuje 1 mM diheptanoyl thio-PC substrát, 0,29 mm detergentu Triton X-100™ a 0,12 mm DTMB v pufrovaném vodném roztoku při pH 7,5.

• fc «

123 • · · · P * · » » · · fc

Testovací procedura:

1. Přidat 0,2 ml reakční směsi do všech jamek;

2. Přidat 10 μΐ testované sloučeniny (nebo čistého rozpouštědla) do odpovídajících jamek, míchat 20 vteřin;

3. Přidat 50 nanogramů SPLA2 (10 mikrolitrů) do odpovídajících j ame k;

4. Inkubovat destičku při teplotě 40 °C po dobu 30 minut;

5. Číst absorbanci destiček při 405 nanometerech automatickou čtečkou destiček.

Všechny sloučeniny byly testovány trojnásobným způsobem.

Typicky byly sloučeniny testovány v konečných koncentracích 5 pg/ml. Sloučeniny byly považovány za účinné, když vykazovaly 40% inhibice nebo více ve srovnání s neinhibovanými kontrolními reakcemi, pokud byly měřeny při 405 nanometerech. Chybějící vývin zabarvení při vlnové délce 405 nanometerů prokazoval inhibici. Sloučeniny, u kterých byla zjištěna účinnost, byly znovu testovány, aby se jejich účinnost potvrdila a pokud byly dostatečně účinné, byly určeny hodnoty IC50· Typicky byly hodnoty IC₅₀ (viz tabulka I uvedená níže) určeny napřed zředěním testovaných sloučenin postupně dvojnásobně, tak aby konečná koncentrace byla v rozmezí od 45 μg/ ml do 0,35 pg/ ml. Silnější inhibitory vyžadovaly významně vyšší zředění. Ve všech případech bylo určeno procento % inhibice měřené při vlnové délce 405 nanometerů generované enzymovými reakcemi za obsahu inhibitorů ve srovnání s neinhibovanými kontrolními reakcemi. Každý vzorek byl titrován třikrát a výsledné hodnoty byly průměrovány pro vynášení do grafu a výpočet hodnot rc₅₀· IC₈₀ · ·

124 • · 4 4 * ·

byly určeny vynesením logaritmické koncentrace v závislosti na hodnotách inhibice v rozmezí inhibice 10-90%.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu (Příklad 1 - 19) byly testovány v Testovacím příkladu 1 a bylo zjištěno, že jsou účinné v koncentracích menších než 100 μΜ.

Testovací přiklad 2

Metoda:

Samci morčat kmene Hartley (500-700 g) byly usmrceny cervikální dislokaci a jejich srdce a plíce byly neporušené vyjmuty a umístěny v provzdušňovaném (95% 0₂ : 5% CO₂) Krebsově pufru.

Dorsální pleurální pruhy (4 x 1 x 25 mm) byly disektovány z neporušených parenchymálních oblastí (8 x 4 x 25 mm) vyříznutých rovnoběžně s vnější hranou spodních plicních laloků. Dva sousední pleurální pruhy, získané z jediného laloku a reprezentující vzorek jedné tkáně, byly ovázány na obou koncích a nezávisle připevněny ke kovové nosné tyčince. Jedna tyčinka byla připevněn k převodníku síly Grass Model FT03C, (výrobku společnosti Grass Medical Instruments Co., Quincy, MA, USA). Změny isometrického napětí byly znázorňovány na monitoru teplotního záznamníku (výrobek společnosti Modular Instruments, Malvern, PA) . Všechny tkáně byly umístěny do 10 ml vnořené tkáňové Lázně, udržované při teplotě 37 °C. Tkáňové lázně byly nepřetržitě provzdušňovány a obsahovaly modifikovaný Krebsův roztok následujícího složení (milimolárně) NaCl, 118,2; KCl, 4,6; CaCl₂ . 2H₂O, 2,5; MgSO₄ . 7H₂O, 1,2; NaHCO₃, 24,8; KH₂PO₄,

1,0; a dextróza, 10,0. Pleurální pruhy z opačných laloků plic byly používány pro párované experimenty. Předběžná data získaná »· *

125 ♦» ·« φ φ φ ftft · · · · · · φ • · · · φ « · « · · » φ ,··♦!· » · Φφ * · φ · φ· φ · φ φ φ · * litr « φφ ·Φ «φ ·· z křivek napětí/odezvy dokázaly, že testovací napětí 800 mg bylo optimální. Tkáně byly ponechány ekvilibrovat po dobu 45 minut, zatímco tekutina v lázni byla periodicky měněna.

Kumulativní křivky koncentrace-odezvy:

Výchozí tkáně byly zkoušeny třikrát pomocí KC1 (40 mM) , aby byla otestována životaschopnost tkáně a aby byla získána konzistentní odezva. Po zaznamenání maximální odezvy na KC1 byly tkáně promývány a ponechány vrátit se do původního stavu před dalším drážděním.Kumulativní křivky koncentrace-odezvy byly získány z pleurálních pruhů zvyšováním koncentrace agonisty (sPLA₂) v tkáňové lázni s přírůstky poloviny log₁₀, zatímco předchozí koncentrace zůstávala v kontaktu s tkání (Ref.l, uvedená výše.). Koncentrace agonisty byla zvětšována po dosažení koncentrace odpovídající plateau a určené předcházející koncentrací. Pro každou tkáň byla získána jedna křivka koncentrace-odezvy. Pro minimalizaci variability mezi tkáněmi, získanými od různých zvířat byly kontraktilní odezvy vyjádřeny jako procento maximální odezvy získané z posledního dráždění KC1. Při studiu účinku různých látek na kontraktilní účinky sPLA₂ byly sloučeniny a jejich odpovídající vehikula přidávány ke tkáním 30 minut před začátkem měření sPLA₂ křivek končent race-odezva.

Statistická analýza:

Data z různých experimentů byla shromážděna a vyjádřena jako procento maximální KC1 odezvy (střední hodnota ± směrodatná odchyLka). Pro odhad posunu křivek končenirace-odezva vpravo, způsobený testovanou látkou, byly křivky analyzovány současně

126

použitím nelineárních statistických modelovacích metod, podobných metodám, které popsal Waud (1976), rovnice 26, str. 163, (Ref.2). Model zahrnuje čtyři parametery: maximální odezvu tkáně, která byla předpokládána stejná pro všechny křivky, ED₅₀

PA₂₍ koncentrací pro kontrolní křivku, strmost křivek ; antagonisty, která vyžaduje dvojnásobný vzrůst agonisty pro dosažení ekvivalentní odezvy. Schildova strmost byla určena rovna 1 použitím nelineárních statistických modelovacích metod, podobných metodám, které popsal Waud (1976), rovnice 27, str. 164, (Ref.2). Schildova strmost rovná 1 indikuje, že model je s předpokladem kompetitivního antagonisty; pA₂ být interpretováno jako zjevná K_B, disociační konsistentní proto může konstanta inhibitoru.

Pro odhad potlačení maximální odezvy, indukované testovanou látkou, byly určeny sPLA₂ odezvy (10 pg/ ml) v přítomnosti a nepřítomnosti látky a bylo vypočteno procento potlačení pro každý pár tkání. Representativní příklady účinků inhibitorů jsou popsány v tabulce 2 uvedené níže.

Ref. 1 -Van, J.M.: Cumulative dose-response curves. II. Technique for making of dose-response curves in isolated organs a the evaluation of drug parameters. Arch. Int. Pharmacodyn. Ther., 143: 299-330,1963.

Ref. 2 -Waud, D. : Analysis of dose-response re 1ationships. v Advances in General a Cellular Pharmacology, editoři Narahashi, Bianchi 1 : 145-178, 1 976.

φ · + ·

127

Sloučeniny podle předloženého vynálezu (Příklad 1 - 19) byly testovány v Testovacím příkladu 2 a byly zjištěno, že jsou účinné v koncentracích pod 20 μΜ.

Testovací příklad 3

Test s sPLA₂ transgenními myšmi

Materiály a metody

Myši používané v těchto studiích byly dospělé, 6-8 měsíců staré, ZnSCq-stimulované transgenní myši hemizygotní linie 2608^a (Fox a kol. 1996). Transgenní myši této linie exprimu j í Lidskou sPLA₂ v játrech a dalších tkáních a typicky dosahují úrovně lidské sPLA₂ v jejich krevním oběhu přibližně 173 ± 10 ng/ ml, pokud jsou maximálně stimulovány pomocí ZnSO₄ (Fox a kol. 1996). Myši byly umístěny v prostoru s konstantní vlhkostí a teplotou a dostávaly potravu a vodu ad libitum. Osvětlováni prostoru, ve kterém se zvířata nacházela, bylo udržováno v cyklu 12-hodin světlo/tma a všechny experimenty byly prováděny ve stejnou denní dobu během periody světla brzo ráno.

Pro intravenózní testování byly sloučeniny nebo vehikulum podávány jako intravenózní dávka ocasní cévou v objemu 0,15 ml. Vehikulum sestávalo z 1-5% dimethylsulfoxidu, 1-5% ethanolu a

10-30% polyethylenglykolu 300 v H₂0; koncentrace těchto složek byly upraveny podle rozpustnosti sloučeniny. Myším byla rctroorbitálně odebírána krev před podáváním testované Látky nebo vehikula a 30 minut, 2 a 4 hodiny potom. Tři až šest myší bylo použito pro každou dávku. PLA_? katalytická aktivita v séru byla zkoumána modifikovaným fosfatidylcholin/ deoxycholinovým smíšeným micelovým testem (Fox a kol. 1996, Schadlich a kol,,

128 • ·

1987) s použitím 3 mM deoxycholátu sodného a 1 mM 1-paímitoyl2-oleoyl-sn-glycero-3-fosfocholinu.

Pro orální testování byly sloučeniny rozpuštěny ve směsi 1-5% ethanolu/10-30% polyethylenglykolu 300 v H₂0 nebo byly suspendovány v 5% dextróze v H₂O a podávány orální sondou. Sérum bylo připraveno z retro-orbitální krve a testováno na PLA₂ katalytickou aktivitu výše uvedeným způsobem.

Reference: Fox, N., M. Song, J. Schrementi, J. D. Sharp, D. L. Bílý, D. W. Snyder, L. W. Hartley, D. G. Carlson, N. J. Bach, R. D. Dillard, Ξ. E. Draheim, J. L. Bobbitt, L. Eisher a E. D. Mihelich. 1996. Eur, J. Pharmacol. 308: 195.Schadlich, H.R., M. Buchler a H. G. Beger, 1987, J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 25,505.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu byly testovány v Testovacím příkladu 3 a bylo zjištěno, že jsou účinné.

I když byl předložený' vynález ilustrován výše uvedenými popisy jistých konkrétních provedení, není zamýšleno, že by tyto specifické příklady omezovaly jakýmkoli způsobem rozsah předmětu předloženého vynálezu, který je popsán v následujících patentových nárocích.

Zas tupu j e:

Dr. Otakar Svorčik • 9

JUDr. O. Švorčík advokát

Hálkova 2, 120 00 Praha 2

129 * V * 9 9 9 9 • « · 9 · 9 » 9 · * 9 9 9 9 • ·«·«·· · · • 9 9 9 9 9 «999 9 9 9 «·

Claims (1)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Sloučenina obecného vzorce (I) ve kterém;

   A představuje fenyl nebo pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 5, 6, 7 nebo 8;

   jeden z atomů B nebo D představuje atom dusíku a druhý z nich atom uhlíku;

   Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyklický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze

   1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4;

   —— představuje dvojnou nebo jednoduchou vazbu;

   R²⁰ je zvolen ze souborů (a), (b) a (c) , ve kterých;

   *«

   130 (a) představuje - (C₅-C₂o) alkyl, - (C5-C20) alkenyl, - (C₅C₂o) alkinyl, karbocyklické zbytky nebo heterocyklické zbytky, nebo (b) je prvek souboru (a), substituovaný jedním nebo více nezávisle zvolenými neinterferujícími substituenty; nebo (c) představuje skupinu -(L)-R⁸⁰; kde — (L) — představuje dvouvaznou vazebnou skupinu 1 až 12 atomů zvolených ze souboru, který zahrnuje atom uhlíku, atom vodíku, atom kyslíku, atom dusíku a atom síry; přičemž kombinace atomů v — (L) — jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího (i) pouze atomy uhlíku a atomy vodíku, (ii) pouze jeden atom síry, (iii) pouze jeden atom kyslíku, (iv) pouze jeden nebo dva atomy dusíku a atomy vodíku, (v) atomy uhlíku, atomy vodíku a pouze jeden atom síry a (vi) pouze atomy uhlíku, atomy vodíku a atomy kyslíku; a kde R⁸⁰ představuje skupinu, zvolenou ze souborů (a) nebo (b) ;

   R²¹ představuje neinterferující substituent;

   R^r představuje -NHNH₂, -NH₂ nebo -CONH₂;

   R²' je zvolen ze souboru, zahrnujícího -OH a -O(CH2)tR⁵', kde R⁵' představuje H, -CN, -NH2, -CONH₂, -CONR⁹R¹⁰, -NHSO₂R¹⁵;

   -CONHSO2R¹⁵, kde R¹⁵ představuje - (C_x-C₆) alkyl nebo -CF₃; fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO₂H nebo -CO₂(CiCJalkyl; a -(L_a)-(kyselinotvorná skupina), kde - (L_a) představuje vazebnou skupinu kyseliny, která má délku od 1 do 7 a t je rovno 1-5;

   R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího neinterferující substituent, karbocyklické zbytky, karbocyklické zbytky substituované neinterferujícími substituenty, hetero• ft ·

   131 • « « · · · · ft · ftft* · ftft · * ftft ft* ·♦ · · · · ft ♦ ft * · · • · ·· ·· · · cyklické zbytky a heterocyklické zbytky substituované neinterferujíčími substituenty;

   nebo její farmaceuticky přijatelný racemát, solvát, tautomer, optický isomer, prekurzorový derivát nebo sůl; za předpokladu, že jeden ze substituentů A nebo Z představuje heterocyklický kruh; a pokud D je atom dusíku, heteroatom Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4.

   2. Sloučenina obecného vzorce (II) ve kterém:

   R¹ představuje -NHNH₂ nebo -NH₂;

   R' je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny -OH a -O (CH_?) _mR^b, kde

   Ri představuje H, -CO₂H, -CO^CŮ-Cd alkyl);

   -P(R^feRd kde R⁶ a

   C₄) alkyl;

   -NHSO₂R¹⁵;

   132 «· · ·· ·· • · · · · · — · · · · · ··· • «»«· · · · · « · · · · 4·4· · ·* ·* ·· • ·

   R⁷ představují nezávisle na sobě -OH nebo -O(Ci~ -SO3H, -SO3(CX-C4 alkyl), tetrazolyl, -CN, -NH2, -CONHSO2R¹⁵, kde R¹⁵ představuje - (Ci-CĚ) alkyl nebo — CF₃, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO₂H nebo -C0₂ (Ci—C₄) alkyl, kde m je rovno 1-3;

   R³ představuje H, -O (Cx-C4) alkyl, atom halogenu, - (Cx-C6) alkyl, fenyl, - (Cx-C4) alkylfenyl; fenyl substituovaný skupinou - (Ci-Cg) alkyl, atomem halogenu nebo -CF3; -CH2OSi (CxC6)alkyl, furyl, thiofenyl, -(Cx-C6) hydroxyalkyl; nebo -(CH2)nR⁸, kde R⁸ představuje H, -CONH2, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představují nezávisle na sobě - (C_xC₄) alkyl nebo -fenyl (C₁-C₄)alkyl a n je rovno 1 až 8;

   R⁴ představuje H, - (C₅-C_X4) alkyl, -(C₃-C_X4) cykloalkyl, pyridyl, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou - (C_x-C₆) alkyl, atom halogenu, skupinou -CF₃, -OCF₃, - (C_x-C₄) alkoxy, -CN, - (C_xC₄) alkylthio, fenyl (C_x-C₄) alkyl, - (C_x-C₄) alkylfenyl, fenyl, fenoxy nebo naftyl;

   A představuje fenyl nebo pyridyl, kde dusíkový atom je v poloze 5, 6, 7 nebo 8;

   Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku je v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyklický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4, nebo ve kterém jeden atom uhlíku v heterocyklickém kruhu je případně substituovaný skupinou =0;

   nebo její farmaceuticky přijatelný racemát, solvát, tautomer, optický isomer, prekurzorový derivát nebo sůl;

   133 za předpokladu, že jeden ze substituentu A nebo Z představuje heterocyklický kruh.

   3. Sloučenina podle nároku 2, která je zvolena ze souboru, zahrnujícího sloučeniny {R,S)-(9-benzyl-4-karbamoyl-l-oxo-3-thia-l,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctová kyselina;

   (R,S)-(9-benzy1-4-karbamoyl-l-oxo-3-thia-l,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctová kyselina;

   [N-benzyl-l-karbamoyl-l-aza-1,2,3,4-tetrahydrokarbazol-8yl]oxyoctová kyselina;

   4- methoxy-6-methoxykarbonyl-10-fenylmethyl-6,7,8,9tetrahydropyrido[1,2-a]indol;

   (4-karboxamido-9-fenylmethyl-4,5-dihydrothiopyrano[3,4-b]indol5- yl)oxyoctová kyselina;

   3,4-dihydro-4-karboxamidol-5-methoxy-9-fenylmethylpyrano[3,4b]indol;

   2-[(2,9-bis-benzyl-4-karbamoyl-l,2,3,4-tetrahydro-betakarbolin-5-yl)oxy]octová kyselina nebo její farmaceuticky přijatelný racemát, solvát, tautomer, optický isomer, prekurzorový derivát nebo sůl.

   4. Farmaceutický přípravek obsahující sloučeninu obecného vzorce I podle nároku 1 spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

   5. Farmaceutický přípravek obsahující sloučeninu obecného vzorce II podle nároku 2 spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

   • · • · ♦ • ·

   134 • * * v · * — · · * * · · · ·

   6. Farmaceutický přípravek připravený pro léčbu stavu spojeného s inhibici sPLA₂, obsahující sloučeninu obecného vzorce I podle nároku 1 spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

   1. Farmaceutický přípravek připravený pro léčbu stavu spojeného s inhibici SPLA2, obsahující sloučeninu obecného vzorce II podle nároku 2 spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.

   8. Způsob selektivní inhibice sPLA₂ u savce, který má potřebu takové léčby, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání uvedenému savci farmaceuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce (I) ve kterém;

   A představuje fenyl nebo pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 5, 6, 7 nebo 8;

   jeden z atomů B nebo D představuje atom dusíku a druhý z nich atom uhlíku;

   135 « ·

   Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyklický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4;

   .·.;·· · představuje dvojnou nebo jednoduchou vazbu;

   R²⁰ je zvolen ze souborů (a), (b) a (c) , ve kterých;

   (a) představuje - (C₅-C₂o) alkyl, - (C₅-C₂₀) alkenyl, - (C₅C₂₀) alkinyl, karbocyklické zbytky nebo heterocyklické zbytky, nebo (b) je prvek souboru (a), substituovaný jedním nebo více nezávisle zvolenými neinterferujícími substituenty; nebo (c) představuje skupinu -{L)-R⁸⁰; kde - (L) - představuje dvouvaznou vazebnou skupinu 1 až 12 atomů zvolených ze souboru, který zahrnuje atom uhlíku, atom vodíku, atom kyslíku, atom dusíku a atom síry; přičemž kombinace atomů v — (L) — jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího (i) pouze atomy uhlíku a atomy vodíku, (ii) pouze jeden atom síry, (iii) pouze jeden atom kyslíku, (iv) pouze jeden nebo dva atomy dusíku a atomy vodíku, (v) atomy uhlíku, atomy vodíku a pouze jeden atom síry a (vi.) pouze atomy uhlíku, atomy vodíku a atomy kyslíku; a kde R⁸⁰ představuje skupinu, zvolenou ze souborů (a) nebo (b) ;

   R²¹ představuje neinterferující substituent;

   .R¹ představuje -NHNH?, -NH₂ nebo -CONH₂;

   R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího -OH a -0 (CH2) tR⁵', kde R^J představuje H, -CN, -NH2, -C0NH_?, -CONR⁹R¹⁰, -NHSO_::R¹⁵;

   -CONHSO₂r’ ’, kde R¹⁵ představuje - (C,-C_f,) a 1 ky 1 nebo -Cf-b; fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO₂H nebo -CO₂(Cj• fl *

   136 · ·· • flfl · • * fl · • «flfl flflfl • «

   C₄) alkyl; a - (L_a) -(kyselinotvorná skupina), kde - (LJ představuje vazebnou skupinu kyseliny, která má délku od 1 do 7 a t je rovno 1-5;

   R³ je zvolen ze souboru, zahrnujícího neinterferující substituent, karbocyklické zbytky, karbocyklické zbytky substituované neinterferujícími substituenty, heterocyklické zbytky a heterocyklické zbytky substituované neinterferujícími substituenty;

   nebo jejího farmaceuticky přijatelného racemátu, solvátu, tautomeru, optického isomeru, prekurzorového derivátu nebo soli;

   za předpokladu, že jeden ze substituentu A nebo Z představuje heterocyklický kruh; a pokud D je atom dusíku, heteroatom Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4.

   9. Způsob selektivní inhibice sPLA₂ u savce, který má potřebu takové léčby, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání uvedenému savci farmaceuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce (II) podle nároku 2 • A

   A A A

   A A A

   A

   A a r ·

   A

   A*

   137

   A A *

   A _ · ·

   A A * · · A A

   4AAA *

   AA A ·

   A A ·

   A · AA®

   A A A A « A A A

   A* ·*

   AA ve kterém:

   R¹ představuje -NHNH₂ nebo -NH₂;

   R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny -OH a -O(CH₂)_mR⁵, kde

   R⁵ představuje H, -CO₂H, -CO₂(Ci-C₄ alkyl);

   -P <R⁶R⁷) kde R⁶ a R⁷ představují nezávisle na sobě -OH nebo -0(C]C4)alkyl; -SO3H, -S03 (C1-C4 alkyl), tetrazolyl, -CN, -NH2, -NHS02R¹⁵; -C0NHS02R¹⁵, kde R¹⁵ představuje - (Ci—C₆} alkyl nebo -CF₃, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO₂H nebo -CO₂ (C1-C4)alkyl, kde m je rovno 1-3;

   R³ představuje H, -O(Cj-CJ alkyl, atom halogenu, - (Ci-Cg)alkyl, fenyl·, -(C1-C4)alkylfenyl; fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C6) al kyl, atomem halogenu nebo -CF3; -CH2OSi (Cj — C6)aikyl, furyl, thiofenyl, -(Ci~C6) hydroxyalkyl; nebo -(CH2)nR⁸, kde R⁸ představuje H, -CONH2, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo

   Ο

   138 fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představuji nezávisle na sobě -(C!C₄)alkyl nebo -fenyl (Ci-C₄)alkyl a n je rovno 1 až 8;

   R⁴ představuje H, - (C5-C14) alkyl, -(C3-C14) cykloalkyl, pyridyl, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C₆) alkyl, atom halogenu, skupinou -CF₃, -OCF₃, - (CŮ-C4) alkoxy, -CN, - (Ci — C₄) alkylthio, fenyl (C1-C4) alkyl, - (C_x-C4) alkylf enyl, fenyl, fenoxy nebo naftyl;

   A představuje fenyl nebo pyridyl, kde dusíkový atom je v poloze 5, 6, 7 nebo 8;

   Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku je v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyklický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4, nebo ve kterém jeden atom uhlíku v heterocyklickém kruhu je případně substituovaný skupinou =0;

   nebo jejího farmaceuticky přijatelného racemátu, solvátu, tautomeru, optického isomeru, prekurzorového derivátu nebo soli;

   za předpokladu, že jeden ze substituentů A nebo Z představuje heterocyklický kruh.

   10. Způsob podle nároku 8, vyznačující se tím, že savec je č1ověk.

   11. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že savec je člově k,

   12. Způsob zmírněni patologických účinků nemocí vztahujících se k sPLAj, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání savci, který má potřebu takové léčby, sloučeniny obecného vzorce I podle

   139 nároku 1 v množství dostatečném k inhibici sPLA₂ mediovaného uvolňování mastných kyselin a tím k inhibici nebo prevenci kaskády arachidonové kyseliny a jejích škodlivých produktů.

   13. Způsob zmírnění patologických účinků nemocí vztahujících se k SPLA2, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání savci, který má potřebu takové léčby, sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 2 v množství dostatečném k inhibici sPLA₂ mediovaného uvolňováni mastných kyselin a tím k inhibici nebo prevenci kaskády arachidonové kyseliny a jejích škodlivých produktů.

   14. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro zmírnění patologických účinků nemocí vztahujících se k sPLA₂, které zahrnuje podávání savci, který má potřebu takové Léčby, terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I.

   15. Způsob podle nároku 8, vyznačující se tím, že sloučenina je zvolena ze souboru, zahrnujícího sloučeniny (R,S)-{9-benzyl-4-karbamoyl-1-oxo-3-thia-l, 2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctová kyselina;

   (R,S)-(9-benzyl-4-karbamoyl-1-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctová kyselina;

   [N-benzyl-1-karbamoyl-i-aza-1,2,3,4-tetrahydrokarbazol-8-y1] oxyoctová kyselina;

   4- methoxy-6-methoxykarbonyl-10-fenylmethyl-6,7, 8,9tetrahydropyrido[1,2-a]indol;

   (4-karboxamido-9-fenylmethyl-4,5-dihydrothiopyrano[3,4 -b] indo 15- yl)oxyoctová kyše lina;

   3, 4-dihydro-4-karboxamidol-5-methoxy-9-fenylmethylpyrano [3, 4b]indol;

   - [ (2,9 bis-benzyl-4-karbamoyl-1,2,3,4-tetrahydro-betakarbolin-5-yl)oxy]octová kyselina nebo jejich farmaceuticky přijatelné racemáty, solváty, tautomery, optické isomery, prekurzorové deriváty nebo soli.

   16. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že sloučenina je je zvolen ze souboru, zahrnujícího sloučeniny (R, S)-(9-benzyl-4-karbamoyl-l-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctová kyselina;

   (R,S)-(9-benzyl-4-karbamoyl-1-oxo-3-thia-1,2,3,4tetrahydrokarbazol-5-yl)oxyoctová kyselina;

   [N-benzyl-l-karbamoyl-l-aza-1,2,3,4-tetrahydrokarbazol-8-yl] oxyoctová kyselina;

   4- methoxy-6-methoxykarbonyl-10-fenylmethyl-6,7,8,9tetrahydropyrido[1,2-a]indol;

   (4-karboxamido-9-fenylmethyl-4,5-dihydrothiopyrano[3,4-b]indol5- yl)oxyoctová kyselina;

   3,4-dihydro-4-karboxamidol-5-methoxy-9-fenylmethylpyrano[3,4b]indol;

   2-[(2,9-bis-benzyl-4-karbamoyl-1,2,3,4-tetrahydro-betakarbolin-5-yl) oxy]octová kyselina nebo jejich farmaceuticky přijatelné racemáty, solváty, tautomery, optické isomery, prekurzorové deriváty nebo soli.

   17. Způsob inhibice sPLA₂, vyznačující se tím, že zahrnuje kontakt sPLA₂ se sloučeninou obecného vzorce I podle nároku 1.

   141

   18. Způsob inhibice sPLA₂, vyznačující se tím, že zahrnuje kontakt sPLA₂ se sloučeninou obecného vzorce II podle nároku 2.

   19. Způsob léčby sepse, septíckého šoku, revmatické artritidy, osteoartritidy, mrtvice, apoptózy, astmatu, chronické bronchitidy, akutní bronchitidy, cystické fibrózy, zánětlivého střevního onemocnění nebo pankreatidy, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má potřebu takové léčby, terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I ve kterém;

   A představuje fenyl nebo pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 5, 6, 7 nebo 8;

   jeden z atomů B nebo D představuje atom dusíku a druhý z nich atom uhlíku;

   Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku se nachází v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyklický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený • fc ·

   142 ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4;

   ....... představuje dvojnou nebo jednoduchou vazbu;

   R²⁰ je zvolen ze souborů (a), (b) a (c) , ve kterých;

   (a) představuje - (C₅-C₂o) alkyl, - (C5-C20} alkenyl, - (C₅C20)alkinyl, karbocyklické zbytky nebo heterocyklické zbytky, nebo (b) je prvek souboru (a), substituovaný jedním nebo více nezávisle zvolenými neinterferujícími substituenty; nebo (c) představuje skupinu - (L) -R⁸⁰; kde -(L)- představuje dvouvaznou vazebnou skupinu 1 až 12 atomů zvolených ze souboru, který zahrnuje atom uhlíku, atom vodíku, atom kyslíku, atom dusíku a atom síry; přičemž kombinace atomů v — (L)— jsou zvoleny ze souboru, zahrnujícího (i) pouze atomy uhlíku a atomy vodíku, (ii) pouze jeden atom síry, (iii) pouze jeden atom kyslíku, (iv) pouze jeden nebo dva atomy dusíku a atomy vodíku, (v) atomy uhlíku, atomy vodíku a pouze jeden atom síry a (vi) pouze atomy uhlíku, atomy vodíku a atomy kyslíku; a kde R⁸⁰ představuje skupinu, zvolenou ze souborů (a) nebo (b) ;

   R²¹ představuje neinterferující substituent;

   R¹ představuje -NHNH₂, -NH₂ nebo -CONH₂;

   R²' je zvolen ze souboru, zahrnujícího -OH a -O(CH₂)_tR⁵', kde R⁵' představuje H, -CN, -nh₂, -conh₂, -CONR⁹R¹⁰, -NHSO₂R¹⁵; -CONHSO2R¹⁵, kde Rⁱ⁵ představuje ~(C₁ —Cg) alkyl nebo -CF₃;

   fenyl nebo fenyl· substituovaný skupinou -CO₂H nebo -CO₂(C)C₄)alkyl; a - (L_a) - (kyselinotvorná skupina), kde -nepředstavuj e do 7 a t je vazebnou skupinu kyseliny, která má délku od 1 rovno 1-5;

   ♦·*· · * • 9

   143

   R³' je zvolen ze souboru, zahrnujícího neinterferující substituent, karbocyklické zbytky, karbocyklické zbytky substituované neinterferujícími substituenty, heterocyklické zbytky a heterocyklické zbytky substituované neinterferujícími substituenty;

   nebo jejího farmaceuticky přijatelného racemátu, solvátu, tautomeru, optického isomeru, prekurzorového derivátu nebo soli;

   za předpokladu, že jeden ze substituentů A nebo Z představuje heterocyklický kruh; a pokud D je atom dusíku, heteroatom Z je zvolen ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4.

   20. Způsob léčby sepse, septického šoku, revmatické artritidy, osteoartritidy, mrtvice, apoptózy, astmatu, chronické bronchitidy, akutní bronchitidy, cystické fibrózy, zánětlivého střevního onemocnění nebo pankreatidy, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který má potřebu takové léčby, terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce

   144 (II) ve kterém:

   R¹ představuje -NHNH₂ nebo -NH₂;

   R² je zvolen ze souboru, zahrnujícího skupiny -OH a -O(CH₂)_mR⁵, kde

   R⁵ představuje H, -CO₂H, -C0₂(Ci-C₄ alkyl);

   -P (R⁶R⁷) kde R⁶ a R⁷ představuji nezávisle na sobě -OH nebo -O(CiCJalkyl; -SO3H, -S03(Ci-C4 alkyl), tetrazolyl, -CN, -NH2, -NHSO2R^1j; -CONHSO2R¹⁵, kde R¹⁵ představuje - (C_L-C₆) alky 1 nebo -CP₃, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CO₂H nebo -C0_? (C; -C₄)a 1kyl, kde m je rovno 1-3;

   R³ představuje H, -0 (C_T-C₄) a 1 kyl, atom halogenu, - (Ci-C₆) al ky 1 , íenyí, -(C ,-C₄)a 1ky1feny1; fenyl substituovaný skupinou - (C,-Cg) alky1, atomem halogenu nebo -CP₃; -CH₂OSi (C|C_Ě)alkyl, furyl, thiofenyl, - (C,-C₆) hydroxya1kyl; nebo • * «** • · · ·

   145

   -(CH₂)_nR⁸, kde R⁸ představuje H, -CONH2, -NR⁹R¹⁰, -CN nebo fenyl, kde R⁹ a R¹⁰ představují nezávisle na sobě -(CLCJalkyl nebo -fenyl (Cj-C₄)alkyl a n je rovno 1 až 8 ;

   R⁴ představuje H, - (C₅-Ci₄) alkyl, - (C₃-Ci₄) cykloalkyl, pyridyl, fenyl nebo fenyl substituovaný skupinou - (Ci-C₆) alkyl, atom halogenu, skupinou -CF₃, ~OCF₃, - (C1-C4) alkoxy, -CN, - (CjC₄) alkylthio, fenyl (Ci-C₄) alkyl, - (Ci-C₄) alkylfenyl, fenyl, fenoxy nebo naftyl;

   A představuje fenyl nebo pyridyl, kde dusíkový atom je v poloze 5, 6, 7 nebo 8;

   Z představuje cyklohexenyl, fenyl, pyridyl, kde atom dusíku je v poloze 1, 2 nebo 3 nebo 6-členný heterocyklický kruh, obsahující jeden heteroatom, zvolený ze souboru, zahrnujícího atom síry a atom kyslíku v poloze 1, 2 nebo 3 a atom dusíku v poloze 1, 2, 3 nebo 4, nebo ve kterém jeden atom uhlíku v heterocyklickém kruhu je případně substituovaný skupinou =0;

   nebo jejího farmaceuticky přijatelného racemátu, solvátu, tautomeru, optického isomeru, prekurzorového derivátu nebo soli;

   za předpokladu, že jeden ze substituentu A nebo Z představuje heterocyklický kruh.

   21. Způsob podle nároku 8 pro zmírnění patologických účinků sepse, septického šoku, respiračního distres syndromu dospělých osob, pankreatitidy, traumatického šoku, bronchiálního astmatu, alergické rinitidy, revmatické artritidy, cystické fibrózy, mrtvice, akutní bronchitidy, chronické bronchitidy, akutní bronchiolitidy, chronické bronchiolitidy, osteoartritidy, dny, spondylartropatie, ankylosující spondylitidy, Reiterova syndromu, psoriatické artropatie, entcrapatrické spondylitidy, • ·

   146

   Isyndromu, psoriatické artropatie, enterapatrické spondylitidy, juvenilní artropatie nebo juvenilní ankylosující spondylitidy, reaktivní artropatie, infekční nebo post-infekční artritidy, gonokokové artritidy, tuberkulózní artritidy, virální artritidy, fungální artritidy, syfilitické artritidy, Lymské nemoci, artritidy související s vaskulitickými syndromy, nodózní polyarteritidy, hypersensitivní vaskulitidy, Luegenecovy granulomatózy, revmatické polymyalgie, velkobuněčné arteritidy, artropatie z ukládání vápníkových krystalů, pseudo dny, neartikulárního revmatismu, bursitidy, tenosynovitidy, epikondylitidy (tenisový loket), syndromu karpálního tunelu, poškození opakovanou činností (psaní na stroji), různých forem artritidy, neuropatických kloubních onemocnění (Charcotův kloub), hemartrózy (hemartrózní), Henoch-Schonleinovy purpury, hypertrofní osteoartropatie, multicentrální retikulohistiocytózy, artritidy související s jistými onemocněními, surkoilózy, hemochromatózy, srpkovitosti a dalších hemoglobinopatií, hyperlipoproteinémie, hypogamaglobulinémie, hyperparatyreoidismu, akromegalie, familiální středomořské horečky, Behatovy nemocí, systemického lupus erythrematodes nebo recidivujících polychondritid; a vztahujících se nemocí, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání savci, který má potřebu takové léčby, terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I.

   22. Způsob podle nároku 9 pro zmírnění patologických účinků sepse, septického šoku, respiračního distres syndromu dospělých osob, pankreatitidy, traumatického šoku, bronchiáiního astmatu, alergické rinitidy, revmatické artritidy, cystické fibrózy, mrtvice, akutní bronchitidy, chronické bronchitidy, akutní bronchiolitidy, chronické bronchiolitidy, osteoartritidy, dny,

   147 spondylartropatie, ankylosující spondylitidy, Reiterova syndromu, psoriatické artropatie, enterapatrické spondylitidy, juvenilní artropatie nebo juvenilní ankylosující spondylitidy, reaktivní artropatie, infekční nebo post-infekční artritidy, gonokokové artritidy, tuberkulózní artritidy, virální artritidy, fungální artritidy, syfilitické artritidy, Lymské nemoci, artritidy související s vaskulitickými syndromy, nodózní polyarteritidy, hypersensitivní vaskulitidy, Luegenecovy granulomatózy, revmatické polymyalgie, velkobuněčné arteritidy, artropatie z ukládání vápníkových krystalů, pseudo dny, neartikulárního revmatismu, bursitidy, tenosynovitidy, epikondylitidy (tenisový loket), syndromu karpálního tunelu, poškození opakovanou činností (psaní na stroji), různých forem artritidy, neuropatických kloubních onemocnění (Charcotův kloub), hemartrózy (hemartrózní) , Henoch-Schonleinovy purpury, hypertrofní osteoartropatie, multicentrální retikulohistíocytózy, artritidy související s jistými onemocněními, surkoilózy, hemochromatózy, srpkovitosti a dalších hemoglobinopatií, hyperlipoproteinémie, hypogamaglobulinémie, hyperparatyreoidismu, akromegalie, familiální středomořské horečky, Behatovy nemocí, systemíckého lupus erythrematodes nebo recidivujících polychondritid; a vztahujících se nemocí, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání savci, který má potřebu takové léčby, terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce II.

   23. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 pro výrobu léčiva pro léčbu sepse, septického šoku, respiračni ho distres syndromu dospělých osob, pankreatitidy, traumatického šoku, bronchiálního astmatu, alergické rinitidy, revmatické artritidy, cystické fibrózy, mrtvice, akutní bronchitidy, ·· ·

   I · · • Φ · *· ·

   Φ Φ

   Φ Φ ·♦

   148 chronické bronchitidy, akutní bronchiolitidy, chronické bronchiolitidy, osteoartritidy, dny, spondylartropatie, ankylosující spondylitidy, Reiterova syndromu, psoriatické artropatie, enterapatrické spondylitidy, juvenilní artropatie nebo juvenilní ankylosující spondylitidy, reaktivní artropatie, infekční nebo post-infekční artritidy, gonokokové artritidy, tuberkulózní artritidy, virální artritidy, fungální artritidy, syfilitické artritidy, Lymské nemocí, artritidy související s vaskulitickými syndromy, nodózní polyarteritidy, hypersensitivní vaskulitidy, Luegenecovy granuiomatózy, revmatické polymyalgie, velkobuněčné arteritidy, artropatie z ukládání vápníkových krystalů, pseudo dny, neartikulárního revmatismu, bursitidy, tenosynovitidy, epikondylitidy (tenisový loket), syndromu karpálního tunelu, poškození opakovanou činností (psaní na stroji), různých forem artritidy, neuropatických kloubních onemocnění (Charcotův kloub), hemartrózy (hemartrózní), Henoch-Schonleinovy purpury, hypertrofní osteoartropatie, rnuiticentrální retikulohistiocytózy, artritidy související s jistými onemocněními, surkoilózy, hemochromatózy, srpkovitosti a dalších hemoglobinopatií, hyperlipoproteinémie, hypogamaglobulinémie, hyperparatyreoidismu, akromegalie, familiální středomořské horečky, Behatovy nemocí, systemického iupus erythrematodes nebo recidivujících polychondritid; a vztahujících se nemocí, které zahrnuje podávání savci, který má potřebu takové léčby, terapeuticky účinného množství sloučeniny obecného vzorce I.

   -&a-s-brtpu_iej ~ utakar S v oTč-rk