CN112710797B - 一种用于止咳平喘药物组合物的质量检测方法 - Google Patents

一种用于止咳平喘药物组合物的质量检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种用于止咳平喘药物组合物的质量检测方法，所述药物组合由松塔、棉花根、枇杷叶组成，检测方法包括对活性成分松塔、棉花根、枇杷叶的鉴别，枇杷叶中齐墩果酸、熊果酸含量测定。本发明在原有质量标准的基础上，对鉴别方法进行优化，减少检测周期，节约检测成本，得出了用同一薄层板同时检测松塔、棉花根、枇杷叶的鉴别；增加了重金属及有害元素的检测；增加了枇杷叶中齐墩果酸、熊果酸含量测定，使得药物的有效成份从定性检测到定性和定量检测的控制，该检测方法准确度高，稳定性好，可以有效用于用于止咳平喘药物组合的质量控制，提高和完善质量标准。

Description

一种用于止咳平喘药物组合物的质量检测方法
技术领域
本发明涉及医药发明领域，具体涉及一种用于止咳平喘药物组合物的质量检测方法。
背景技术
本品由松塔、棉花根、枇杷叶组成；对治疗肺热痰嗽，咳血，衄血，胃热呕哕有较好的作用。
申请号CN201811293181.6，发明名称为一种治疗咳喘胸满药物组合的质量检测方法，公开的质量检测方法包括了棉花根和松塔的鉴别、枇杷叶的鉴别，其中棉花根和松塔的鉴别方法为取所述药物4～6g，研细，加比例为4:1的乙酸乙酯﹣乙醇15～25ml使溶解，水浴加热回流30～40min，滤过，滤液置水浴蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；分别取棉花根对照药材1.3～1.7g，松塔对照药材1.5～2.5g，各加水30～50ml，煮沸25～35分钟，滤过，滤液用比例为4:1的乙酸乙酯﹣乙醇溶液10ml振摇提取，提取液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，滤过，即得；取上述三种溶液各5～10μl，分别点于同一高效薄层板上，以比例为3:1:1的乙酸丁酯﹣甲醇﹣水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同一个或一个以上相同颜色的荧光斑点。枇杷叶的鉴别方法为取所述药物4.5～5.5g，研细，加水饱和的正丁醇振摇提取2～3次，每次10～20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过内径1.0～2.0cm，长6～10cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水40～60ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取枇杷叶对照药材1.5～2.5g，加水90～110ml，煎煮30～60分钟，滤过，滤液加水饱和的正丁醇振摇提取2～3次，每次10～20ml，合并正丁醇液，蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过内径1.0～2.0cm，长6～10cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水40～60ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一高效薄层板上，以4～6：1.6～2.4的甲苯～丙酮为展开剂，展开，取出，晾干；喷以15～25％磷钼酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与枇杷叶对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。然而，我们在长期实验过程中发现该方法目标斑点模糊，重现性差，操作复杂，且所述物质量检测标准中缺少重金属及有害元素测定、缺少齐墩果酸、熊果酸的含量测定，故难以对整个药品的质量进行有效控制。
为了保证产品的质量，提升所述物的质量标准，本发明增加了重金属及有害元素测定，增加了齐墩果酸、熊果酸含量测定，同时为了克服棉花根、松塔和枇杷叶的鉴别中目标斑点模糊，重现性差，操作复杂，探索出了用同一薄层板同时鉴别棉花根、松塔和枇杷叶的方法，且操作简单，斑点清晰，重现性好。
本发明的目的是克服现有检测方法中：
1)棉花根、松塔和枇杷叶鉴别项目操作复杂，且目标斑点模糊、重现性差；
2)缺少对重金属及有害元素测定；
3)缺少对枇杷叶中齐墩果酸、熊果酸的含量测定；
提供一种用于止咳平喘药物组合的质量检测方法，在大量的实验中，探索出一种用同一薄层板同时检测所述物中棉花根、松塔和枇杷叶鉴别的鉴别方法，增加对所述药物中重金属及有害元素检测和对枇杷叶中齐墩果酸、熊果酸的含量测定，使所述药物组合的质量检测方法更科学完善，药品质量得到更好的控制，提升了质量检测标准。
发明内容
本发明提供一种用于止咳平喘药物组合的质量检测方法，所述药物组合由松塔、棉花根、枇杷叶组成，其特征在于所述质量检测方法为：对棉花根、松塔和枇杷叶的鉴别；检查；重金属及有害元素测定；齐墩果酸、熊果酸含量测定。
所述棉花根和松塔鉴别方法为：取所述药物细粉4.5～5.5g，加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇15～25ml，超声处理20～30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇4～6ml使溶解，作为供试品溶液；(2)对照药材溶液的制备：分别取棉花根对照药材1.0～2.0g，松塔对照药材1.0～2.0g，枇杷叶对照药0.8～1.2g，各加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇15～25ml，超声处理15～25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇4～6ml使溶解，作为对照药材溶液；(3)对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；(4)薄层色谱法鉴别：吸取上述五种溶液各8～12μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以比例为5:3:1的乙酸乙酯-乙醇-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8～12％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
优选的，所述棉花根和松塔鉴别方法为：取所述药物细粉4.8～5.2g，加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇18～23ml，超声处理23～27分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇4.5-5.5ml使溶解，作为供试品溶液；(2)对照药材溶液的制备：分别取棉花根对照药材1.2～1.8g，松塔对照药材1.2～1.8g，枇杷叶对照药0.9～1.1g，各加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇18～23ml，超声处理18～22分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇4.5～5.5ml使溶解，作为对照药材溶液；(3)对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；(4)薄层色谱法鉴别：吸取上述五种溶液各9～11μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以比例为5:3:1的乙酸乙酯-乙醇-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以9～11％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
进一步优选的，所述棉花根和松塔鉴别方法为：(1)供试品溶液的制备：取所述药物细粉5g，加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇20ml，超声处理25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇5ml使溶解，作为供试品溶液；(2)对照药材溶液的制备：分别取棉花根对照药材1.5g，松塔对照药材1.5g，枇杷叶对照药1g，各加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇5ml使溶解，作为对照药材溶液；(3)对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；(4)薄层色谱法鉴别：吸取上述五种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以比例为5:3:1的乙酸乙酯-乙醇-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
所述检查为：照粒度和粒度分布测定法即通则0982第二法双筛分法测定，不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过15％；照水分测定法即通则0832测定，水分不得超过8.0％；照干燥失重测定法即通则0831测定，于80℃干燥至恒重，减失重量不得超过2.0％；照下述方法检查，溶化性应符合规定，取本药物1袋，加70～80℃水200ml，搅拌5分钟，立即观察，可溶颗粒应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物，不得有焦屑；取本药物10袋，除去包装，分别精密称定每袋内容物的重量，求出每袋内容物的装量与平均装量。每袋装量与标示装量比较，超出装量差异限度的颗粒剂不得多于2袋，并不得有1袋超出装量差异限度1倍，平均装量或标示装量装量差异限度士5％；照非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法通则1105和控制菌检法通则1106及非无菌药品微生物限度标准通则1107检查，应符合规定。
所述重金属及有害元素测定为：照铅、镉、砷、汞、铜测定法，依据通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。
所述齐墩果酸、熊果酸含量测定的测定方法为：(1)色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.3～0.5％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；(2)供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇30～40ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理28～32分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3)对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
优选的，所述齐墩果酸、熊果酸含量测定的测定方法为：(1)色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.35～0.45％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；(2)供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇32～38ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理29～31分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3)对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
进一步优选的，所述齐墩果酸、熊果酸含量测定的测定方法为：(1)色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.4％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；(2)供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇35ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(3)对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
所述用于止咳平喘药物组合为咳宁颗粒、咳宁糖浆或以其活性成分棉花根、松塔、枇杷叶为原料制成的其他药物组合制剂。
注：本发明所述的通则指2015年版中国药典第四部通则。
本发明具有以下优点：
1、在薄层色谱鉴别实验中，同一薄层板同时检测棉花根、松塔、枇杷叶的鉴别，缩短了检测周期，节约了检测成本，且色谱中目标斑点更清晰、重现性好、操作简单。
2、申请号CN201811293181.6，缺少对有效成分枇杷叶中齐墩果酸、熊果酸的含量检验，难以对整个药品的质量进行有效控制，为了更好的检测枇杷叶质量，本发明增加了枇杷叶的含量测定。使所述药物组合的质量检测方法更科学完善，药品质量得到更好的控制。
3、申请号CN201811293181.6，缺少对所述药物重金属及有害元素测定，难以保证用药造成和身体危害。
4、经方法学验证试验，结果表明本方法在不同薄层板、温度、湿度条件下，色谱图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，不同条件下均能得到较好的鉴别色谱,验证试验表明重现性好、耐用性好。
5、按本发明检测方法学验证:齐墩果酸的线性方程为y＝344.21x+960.67，R2＝0.9998；平均回收率93.07％,RSD为2.57％(n＝6)。熊果酸的线性方程为y＝872.7x+367.85，R2＝0.9995；平均回收率93.67％,RSD为2.02％(n＝6)；所述物重复性试验中齐墩果酸和熊果酸总和的平均含量为0.0520mg/kg，RSD为2.91％；所以该方法符合药品质量标准分析方法验证要求，在10小时内齐墩果酸和熊果酸含量平均值为0.0525mg/kg，RSD为2.42％，十批样品含量检测结果平均值为0.0524mg/kg。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
【性状】本品为颗粒剂，内容物为浅棕色颗粒；味甜，微涩。
【鉴别】取所述药物细粉5g，加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)20ml，超声处理25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)5ml使溶解，作为供试品溶液；
分别取棉花根对照药材1.5g，松塔对照药材1.5g，枇杷叶对照药1g，各加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)5ml使溶解，作为对照药材溶液；
取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
吸取上述五种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-丙酮(5:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】粒度和粒度分布不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过15％；(通则0982第二法双筛分法)
干燥失重不得超过2.0％(通则0831)
装量差异不得过5.0％(通则0942)
溶化性应取本药物1袋，加70℃水200ml，搅拌5分钟，立即观察，可溶颗粒应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物，不得有焦屑；(通则0921)
微生物限度应符规定(通则1105)(通则1106)(通则1107)。
【重金属及有害元素测定】照铅、镉、砷、汞、铜测定法，依据通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。
【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.4％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；
供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇35ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
实施例2
【性状】本品为颗粒剂，内容物为浅棕色颗粒；味甜，微涩。
【鉴别】取所述药物研细后，取细粉4.5g，加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)15ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)4ml使溶解，作为供试品溶液；
分别取棉花根对照药材1.0g，松塔对照药材1.0g，枇杷叶对照药0.8g，各加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)15ml，超声处理15分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)4ml使溶解，作为对照药材溶液；
取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液；
吸取上述五种溶液各8μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-丙酮(5:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】粒度和粒度分布不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过15％；(通则0982第二法双筛分法)
干燥失重不得超过2.0％(通则0831)
装量差异不得过5.0％(通则0942)
溶化性应取本药物1袋，加70℃水200ml，搅拌5分钟，立即观察，可溶颗粒应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物，不得有焦屑；(通则0921)
微生物限度应符规定(通则1105)(通则1106)(通则1107)。
【重金属及有害元素测定】照铅、镉、砷、汞、铜测定法，依据通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。
【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.3％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；
供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇30ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理28分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
实施例3
【性状】本品为颗粒剂，内容物为浅棕色颗粒；味甜，微涩。
【鉴别】取所述药物研细后，取细粉5.5g，加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)25ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)4ml使溶解，作为供试品溶液；
分别取棉花根对照药材2.0g，松塔对照药材2.0g，枇杷叶对照药1.2g，各加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)25ml，超声处理25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)6ml使溶解，作为对照药材溶液；
取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液；
吸取上述五种溶液各12μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-丙酮(5:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以12％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】粒度和粒度分布不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过15％；(通则0982第二法双筛分法)
干燥失重不得超过2.0％(通则0831)
装量差异不得过5.0％(通则0942)
溶化性应取本药物1袋，加70℃水200ml，搅拌5分钟，立即观察，可溶颗粒应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物，不得有焦屑；(通则0921)
微生物限度应符规定(通则1105)(通则1106)(通则1107)。
【重金属及有害元素测定】照铅、镉、砷、汞、铜测定法，依据通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。
【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.5％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；
供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇40ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理32分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
实施例4
【性状】本品为颗粒剂，内容物为浅棕色颗粒；味甜，微涩。
【鉴别】取所述药物研细后，取细粉4.8g，加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)18ml，超声处理24分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)4.5ml使溶解，作为供试品溶液；
分别取棉花根对照药材1.2g，松塔对照药材1.2g，枇杷叶对照药1.1g，各加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)18ml，超声处理18分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)5.5ml使溶解，作为对照药材溶液；
取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.8mg的溶液，作为对照品溶液；
吸取上述五种溶液各11μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-丙酮(5:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以11％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
【检查】粒度和粒度分布不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过15％；(通则0982第二法双筛分法)
干燥失重不得超过2.0％(通则0831)
装量差异不得过5.0％(通则0942)
溶化性应取本药物1袋，加70℃水200ml，搅拌5分钟，立即观察，可溶颗粒应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物，不得有焦屑；(通则0921)
微生物限度应符规定(通则1105)(通则1106)(通则1107)。
【重金属及有害元素测定】照铅、镉、砷、汞、铜测定法，依据通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。
【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.45％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；
供试品溶液的制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇38ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理31分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
实验例：为证明本发明的科学性与合现性，进行了以下方法学实验研究：
实验例1：
1材料、设备及试剂
1.1材料
咳宁颗粒样品，批号：200801、200802、200803、200804、200805、200806、200807、200808、200809、200810共10批。
对照品：熊果酸对照品
对照品来源：中国食品药品检定研究院
对照药材：棉花根对照药材；松塔对照药材；枇杷叶对照药材
对照药材来源：中国药品生物制品检定所
1.2设备
薄层板：青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板(规格：200×100mm青岛海洋化工厂分厂高效薄层板(规格：200×100mm)
数显恒温水浴锅：常州普天仪器制造有限公司
超声机:常州普天仪器制造有限公司
电热恒温干燥箱:型号HPD-101-3A，常州市华普达教学仪器有限公司
电子天平：型号FA2-204-N，上海菁海仪器有限公司
1.3试剂
乙酸乙酯：成都市科隆化学品有限公司
甲醇：重庆川东化工(集团)有限公司
乙醇：重庆川东化工(集团)有限公司
丙酮：重庆川东化工(集团)有限公司
硫酸：重庆川东化工(集团)有限公司
2检测
2.1.棉花根、松塔和枇杷叶的鉴别
2.1.1供试品溶液的制备：
方法一：取所述药物细粉5g，加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)20ml，超声处理25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)5ml使溶解，作为供试品溶液；
方法二(对比例)：采用CN201811293181.6中棉花根和松塔鉴别方法，取所述药物细粉5g，加乙酸乙酯﹣乙醇(4:1)15～25ml使溶解，水浴加热回流30～40min，滤过，滤液置水浴蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；
方法三(对比例)：采用CN201811293181.6中枇杷叶的鉴别方法，取所述药物细粉5g，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过内径1.5cm，长8cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
2.1.2对照药材溶液的制备：
方法一：分别取棉花根对照药材1.5g，松塔对照药材1.5g，枇杷叶对照药1g，各加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯-异丙醇(5:3)5ml使溶解，作为对照药材溶液；
方法二(对比例)：采用CN201811293181.6中棉花根和松塔的鉴别方法，分别取棉花根对照药材1.5g，松塔对照药材1.5g，枇杷叶对照药1g，各加水30ml，煮沸30分钟，滤过，滤液用比例为4:1的乙酸乙酯﹣乙醇溶液10ml振摇提取，提取液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加乙酸乙酯0.5ml使溶解，滤过，作为对照药材溶液；
方法三(对比例)：采用CN201811293181.6中枇杷叶的鉴别方法，分别取棉花根对照药材1.5g，松塔对照药材1.5g，枇杷叶对照药1g，各加水100ml，煎煮45分钟，滤过，滤液加水饱和的正丁醇振摇提3次，每次15ml，合并正丁醇液，蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过内径1.5cm，长8cm的D101型大孔吸附树脂柱，以水50ml洗脱，弃去水液，再用稀乙醇洗脱至无色，收集洗脱液，蒸干，蒸干环境为排空气的负压环境，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。
2.1.3测定结果:取上述由2.1.1“方法一”，“方法二(对比例)”、“方法三(对比例)”处理供试品溶液及对照药材溶液2.1.2“方法一”的四种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-丙酮(5:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，2.1.1“方法一”斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，且在与2.1.2对照药材溶液“方法一”色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2.1.1“方法二(对比例)”、“方法三(对比例)”均斑点暗淡，颜色浅，不清晰，Rf值适中，在与2.1.2对照药材溶液“方法一”色谱相应的位置上，部分斑点显相同颜色的斑点。
取上述由2.1.1“方法一”，“方法二(对比例)”、“方法三(对比例)”处理供试品溶液及对照药材溶液2.1.2“方法二(对比例)”的四种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-丙酮(5:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，2.1.1“方法一”，“方法二(对比例)”、“方法三(对比例)的斑点均模糊，分离度不符合要求，Rf值适中，且在与2.1.2对照药材溶液“方法二(对比例)”色谱相应的位置上，部分斑点显不同颜色的斑点。
取上述由2.1.1“方法一”，“方法二(对比例)”、“方法三(对比例)”处理供试品溶液及对照药材溶液2.1.2“方法三(对比例)”的四种溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-乙醇-丙酮(5:3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，2.1.1“方法一”，“方法二(对比例)”、“方法三(对比例)的斑点均模糊，分离度不符合要求，Rf值适中，且在与2.1.2对照药材溶液“方法三(对比例)”色谱相应的位置上，显不同颜色的斑点。
结论：在处理供试品时，2.1.1“方法一”同时处理了棉花根、松塔和枇杷叶，缩短的检测时间，实验结果显示2.1.1“方法一”斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中，且在与对照药材溶液2.1.2“方法一”色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2.1.1“方法二(对比例)、方法三(对比例)”斑点暗淡，颜色浅，不清晰，Rf值适中，说明回流操作步骤影响棉花根、松塔影响实验结果、加水饱和的正丁醇振摇提取枇杷叶并通过大孔吸附树脂柱易造成有效成分流失。本发明能有效缩短检测时间，且同时检测三个药材的薄层鉴别，操作方便简化，节约时间，能达到检测效果，证明本发明的方法更适合咳宁颗粒中棉花根、松塔和枇杷叶的鉴别。
2.2为了验证本发明试验方法、条件及重现性，做如下实验：
用上述“方法一”处理10批不同批次的样品，同时与对比例的方法进行实验比较，按规定的方法展开，结果见表1。
表1试验方法、条件及重现性试验结果表1试验方法、条件及重现性试验结果
Figure BDA0002895454650000121
Figure BDA0002895454650000131
2.2.1耐用性
2.2.1.1不同薄层板的比较
取2.1.1“方法一”项下的供试品溶液，比较了青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板和高效硅胶G商品板(各10批次的样品)，结果见表2。
表2：不同薄层板耐用性结果表
批号 青岛海洋化工厂分厂硅胶G商品板 高效硅胶G商品板
200801 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200802 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200803 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200804 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200805 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200806 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200807 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200808 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200809 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
200810 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中 斑点清晰，分离度符合要求，Rf值适中
结果高效硅胶板和商品板均为斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中；硅胶G商品板斑点清晰，分离达到要求,Rf值适中，故本方法耐用性好。
2.2.1.2不同湿度的比较
比较了低湿度(30％)和高湿度(75％)环境下高效薄层板展开效果，结果见表3。
表3：低湿度(30％)和高湿度(75％)环境下高效薄层板展开效果表
Figure BDA0002895454650000132
Figure BDA0002895454650000141
结果：斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，两个条件下均能得到较好的鉴别色谱。
经上述方法学验证试验，结果表明不同湿度条件下，用高效薄层板和硅胶G商品板进行试验，色谱图斑点清晰，分离符合要求，Rf值适中，验证试验表明重现性好、耐用性好。
3.【检查】
依据《中国药典》相关内容，结合本品特性，研究制定了相应的检查项目。
3.1干燥失重不得超过2.0％
照干燥失重测定法(通则0831)测定，取供试品1.0g，置于80℃减压干燥至恒重，减失重量不得超过2.0％，结果见表4。
表4干燥失重测定结果表
Figure BDA0002895454650000142
3.2粒度和粒度分布测定法即通则0982第二法双筛分法测定，不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过15％。实测十个不同批次样品各1批，结果见表5。
表5粒度和粒度分布结果表
Figure BDA0002895454650000143
Figure BDA0002895454650000151
3.3装量差异取本药物10袋，除去包装，分别精密称定每袋内容物的重量，求出每袋内容物的装量与平均装量。每袋装量与标示装量比较，超出装量差异限度的颗粒剂不得多于2袋，并不得有1袋超出装量差异限度1倍，平均装量或标示装量装量差异限度士5％；结果见表6。
表6装量差异测定结果表
Figure BDA0002895454650000152
4【含量测定】
仪器与试药
高效液相色谱仪：安捷伦1260；
色谱柱：Sepax sapphire C18，
安捷伦ZORBAX SB-C18
电子天平：梅特勒托利多ME203TE，赛多利斯QUINTIX125D-1CN
甲醇：美国天地(色谱纯)
磷酸：重庆川东化工(集团)有限公司
三乙胺：重庆川东化工(集团)有限公司
齐墩果酸对照品：中国食品药品检定研究院
熊果酸对照品：中国食品药品检定研究院
对照品来源：中国食品药品检定研究院
HS-10260D型超声波清洗机(功率250W，频率50KHZ)；
水为超纯水；其它试剂为分析纯。
4.1方法一
方法来源：参照(高效液相色谱法《中国药典》2015年版四部通则0512)测定的方法结合本公司的仪器设备而拟定的.
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.4％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；
对照品制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；
供试品制备：取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇35ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
4.2方法二:方法二为对比文件
方法来源：参照《中国药典》2015年版一部枇杷叶含量检测；
色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-0.5％醋酸铵溶液(67：12：21)为流动相；检测波长为210nm。理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备:取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加乙醇制成每1ml含齐墩果酸50μg、熊果酸0.2mg的混合溶液，即得。
供试品溶液的制备:取本品粗粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，加乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
结论：用此方法测齐墩果酸和熊果酸的含量，其杂质峰多，目标峰响应值低，分离差，不再进行此方法的研究。故不载入正文。
针对4.1方法一，进行如下实验
4.2.1线性试验
精密吸取齐墩果酸对照品溶液25.00μg/ml、50.23μg/ml、124.88μg/ml、251.36μg/ml、626.84μg/ml、1253.01μg/ml和2504.22μg/ml以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到线性方程为y＝344.21x+960.67，R2＝0.9998，表明齐墩果酸进样浓度在25.00μg/ml～2504.22μg/ml范围内呈良好的线性关系，结果见表7。
表7齐墩果酸线性试验结果
Figure BDA0002895454650000171
精密吸取熊果酸对照品溶液1.00mg/ml、2.03mg/ml、5.10mg/ml、10.06mg/ml、24.88mg/ml、50.19mg/ml和101.63mg/ml以标准工作液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到线性方程为y＝872.7x+367.85，R2＝0.9995，表明熊果酸进样浓度在1.00μg/L～101.63μg/L范围内呈良好的线性关系，结果见表8。
表8熊果酸线性试验结果
Figure BDA0002895454650000172
4.2.2仪器精密度试验
取4.1项下制备的对照品溶液，在上述色谱条件下，重复进样6次，测定熊果酸峰面积，计算RSD％(熊果酸)值为1.22％，表明仪器精密度好，测定结果见表9。
表9仪器精密度试验结果
编号 1 2 3 4 5 6 平均值 RSD％
面积(A) 889.23 891.36 877.45 910.56 888.69 896.23 892.25 1.22％
4.2.3重复性试验
精密称取同一批样品(批号202003)6份，同时按4.1项方法一、4.2方法二所述方法测定样品中齐墩果酸和熊果酸的总含量，4.1项方法一平均总含量为0.0520(mg/kg)，RSD值2.91％，表明此齐墩果酸和熊果酸的测定方法具有良好的重复性；4.2方法二响应值低，含量偏低，结果见表10。
表10重复性试验结果
Figure BDA0002895454650000181
4.2.4稳定性试验
按4.1项和4.2项下方法各制备供试品溶液一份，室温放置，按拟定色谱条件下于0，2，4，6，8，10h分别进样，测定峰面积。计算RSD％为9.846％，表明4.1方法一项齐墩果酸和熊果酸总含量在10h内相对稳定。4.4方法二项齐墩果酸和熊果酸总含量在10h内稳定性不好，稳定性试验结果见表11。
表11稳定性试验结果
峰面积(A) 0h 2h 4h 6h 8h 10h 平均值 RSD％
方法一 0.0530 0.0520 0.0528 0.0518 0.0546 0.0509 0.0525 2.42
方法二(对比例) 0.0420 0.0460 0.0419 0.0386 0.0409 0.0451 0.0424 6.45
4.2.5回收试验
采用加样回收法。取已知含量的样品(齐墩果酸含量：0.0160mg/kg)6份，每份精密称取约1.0g，分别加入齐墩果酸对照品溶液(0.0250mg/ml)1ml，按照4.1方法一项下制备方法制备。在上述色谱条件下测定，测得其平均回收率为93.07％，RSD％为2.57％，4.2方法二同时做对比实验，回收率为65.60％，低于4.1方法一的结果，说明方法一优于方法二。结果见表12。
Figure BDA0002895454650000182
表12加样回收试验结果表
Figure BDA0002895454650000183
Figure BDA0002895454650000191
采用加样回收法。取已知含量的样品(熊果酸含量：0.0356mg/kg)6份，每份精密称取约1.0g，分别加入熊果酸对照品溶液(0.1010mg/ml)1ml，按照4.1方法一项下制备方法制备。在上述色谱条件下测定，测得其平均回收率为93.67％，RSD％为2.20％，4.2方法二同时做对比实验，回收率为67.52％，低于4.1方法一的结果，说明方法一优于方法二。结果见表13。
Figure BDA0002895454650000192
表13加样回收试验结果表
Figure BDA0002895454650000193
4.2.6样品含量测定
按4.1方法一的方法的方法对十批样品进行含量测定，同时对比4.2方法二进行含量检测，结果见表14。
表14十批样品含量结果表
Figure BDA0002895454650000194
Figure BDA0002895454650000201
结论：采用本发明的检测方法，齐墩果酸的线性方程为y＝344.21x+960.67，R2＝0.9998，平均回收率93.07％,RSD为2.57％(n＝6)，回收率优于对比例；熊果酸的线性方程为y＝872.7x+367.85，R2＝0.9995，平均回收率93.67％,RSD为2.02％(n＝6)，回收率优于对比例。采用本发明方法供试品的响应值高，结果准确可靠，该方法简便、重复性好,可有效地控制咳宁颗粒、咳宁糖浆的质量。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作出一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种用于止咳平喘药物组合物的质量检测方法，所述药物组合物由棉花根、松塔、枇杷叶组成，其特征在于所述质量检测方法为：棉花根、松塔和枇杷叶的鉴别；粒度、水分、干燥失重、溶化性、装量差异和微生物限度的检查；重金属及有害元素测定；齐墩果酸、熊果酸含量测定；所述棉花根、松塔和枇杷叶鉴别方法为：
(1)供试品溶液的制备：取药物细粉4.5～5.5g，加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇15～25ml，超声处理20～30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇4～6ml使溶解，作为供试品溶液；
(2)对照药材溶液的制备：分别取棉花根对照药材1.0～2.0g，松塔对照药材1.0～2.0g，枇杷叶对照药材0.8～1.2g，各加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇15～25ml，超声处理15～25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇4～6ml使溶解，作为对照药材溶液；
(3)对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(4)薄层色谱法鉴别：吸取上述供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各8～12μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以比例为5:3:1的乙酸乙酯-乙醇-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以8～12％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述棉花根、松塔和枇杷叶鉴别方法为：
(1)供试品溶液的制备：取药物细粉4.8～5.2g，加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇18～23ml，超声处理23～27分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇4.5-5.5ml使溶解，作为供试品溶液；
(2)对照药材溶液的制备：分别取棉花根对照药材1.2～1.8g，松塔对照药材1.2～1.8g，枇杷叶对照药材0.9～1.1g，各加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇18～23ml，超声处理18～22分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇4.5～5.5ml使溶解，作为对照药材溶液；
(3)对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(4)薄层色谱法鉴别：吸取上述供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各9～11μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以比例为5:3:1的乙酸乙酯-乙醇-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以9～11％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1或2所述的质量检测方法，其特征在于，所述棉花根、松塔和枇杷叶鉴别方法为：
(1)供试品溶液的制备：取药物细粉5g，加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇20ml，超声处理25分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇5ml使溶解，作为供试品溶液；
(2)对照药材溶液的制备：分别取棉花根对照药材1.5g，松塔对照药材1.5g，枇杷叶对照药材1g，各加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加比例为5:3的乙酸乙酯-异丙醇5ml使溶解，作为对照药材溶液；
(3)对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
(4)薄层色谱法鉴别：吸取上述供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各10μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以比例为5:3:1的乙酸乙酯-乙醇-丙酮为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述检查为：照粒度和粒度分布测定法即通则0982第二法双筛分法测定，不能通过一号筛与能通过五号筛的总和不得超过15％；照水分测定法即通则0832测定，水分不得超过8.0％；照干燥失重测定法即通则0831测定，于80℃干燥至恒重，减失重量不得超过2.0％；照下述方法检查，溶化性应符合规定，取本药物1袋，加70～80℃水200ml，搅拌5分钟，立即观察，可溶颗粒应全部溶化或轻微浑浊，不得有异物，不得有焦屑；取本药物10袋，除去包装，分别精密称定每袋内容物的重量，求出每袋内容物的装量与平均装量，每袋装量与标示装量比较，超出装量差异限度的颗粒剂不得多于2袋，并不得有1袋超出装量差异限度1倍，平均装量或标示装量的装量差异限度士5％；照非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法通则1105和控制菌检法通则1106及非无菌药品微生物限度标准通则1107检查，应符合规定。
5.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述重金属及有害元素测定为：
照铅、镉、砷、汞、铜测定法，依据通则2321原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法测定，铅不得过5mg/kg；镉不得过0.3mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。
6.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，齐墩果酸、熊果酸含量测定的测定方法为：
(1)色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.3～0.5％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；
(2)供试品溶液的制备：取本品1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇30～40ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理28～32分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(3)对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；
(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
7.根据权利要求1或6所述的质量检测方法，其特征在于，齐墩果酸、熊果酸含量测定的测定方法为：
(1)色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.35～0.45％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；
(2)供试品溶液的制备：取本品1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇32～38ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理29～31分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(3)对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；
(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
8.根据权利要求1或6所述的质量检测方法，其特征在于，齐墩果酸、熊果酸含量测定的测定方法为：
(1)色谱条件与系统适用性实验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以比例为85:15:0.04:0.03的甲醇-水-0.4％磷酸-三乙胺溶液为流动相，检测波长为254nm，理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000；
(2)供试品溶液的制备：取本品1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇35ml，称定重量，以功率250W，频率50kHz超声处理30分钟，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
(3)对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品、熊果酸对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸25μg、熊果酸0.1mg的混合溶液，即得；
(4)测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
9.根据权利要求1所述的用于止咳平喘药物质量检测方法，其特征在于，所述用于止咳平喘药物组合为咳宁颗粒、咳宁糖浆或以其活性成分棉花根、松塔、枇杷叶为原料制成的其他药物组合制剂。
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