CN102297926B - 一种止咳片的快速薄层鉴别方法 - Google Patents
一种止咳片的快速薄层鉴别方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102297926B CN102297926B CN 201110192953 CN201110192953A CN102297926B CN 102297926 B CN102297926 B CN 102297926B CN 201110192953 CN201110192953 CN 201110192953 CN 201110192953 A CN201110192953 A CN 201110192953A CN 102297926 B CN102297926 B CN 102297926B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- medicinal material
- solution
- control medicinal
- chromatogram
- methyl alcohol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000000954 anitussive effect Effects 0.000 title abstract 2
- 229940124584 antitussives Drugs 0.000 title abstract 2
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract 2
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 title 1
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 158
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 claims abstract description 12
- 235000006753 Platycodon grandiflorum Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 240000003582 Platycodon grandiflorus Species 0.000 claims abstract description 12
- 241000050051 Chelone glabra Species 0.000 claims abstract 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 142
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 89
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 82
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N EtOH Substances CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 30
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 26
- 241001465251 Ephedra sinica Species 0.000 claims description 25
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 claims description 20
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 20
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 241000244269 Peucedanum Species 0.000 claims description 17
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 claims description 16
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 14
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 13
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 13
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 8
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 7
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims description 6
- PJWKAIDLIGVSCP-UHFFFAOYSA-N OC=O.CCOC(C)=O.C1CCCCC1 Chemical compound OC=O.CCOC(C)=O.C1CCCCC1 PJWKAIDLIGVSCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000012850 discrimination method Methods 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 6
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 6
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 6
- DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxomolybdenum Chemical compound O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.OP(O)(O)=O DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JXQGGZBUGUHLEJ-UHFFFAOYSA-N butyl acetate formic acid hydrate Chemical compound O.OC=O.CCCCOC(C)=O JXQGGZBUGUHLEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- SKCNIGRBPJIUBQ-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethyl acetate Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O SKCNIGRBPJIUBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 12
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 abstract description 4
- 241000218671 Ephedra Species 0.000 abstract 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 abstract 2
- 244000061508 Eriobotrya japonica Species 0.000 abstract 1
- 235000009008 Eriobotrya japonica Nutrition 0.000 abstract 1
- 244000018633 Prunus armeniaca Species 0.000 abstract 1
- 235000009827 Prunus armeniaca Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 abstract 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 49
- DBOVHQOUSDWAPQ-UHFFFAOYSA-N (4aS)-6c-[O2-(3,5,3'-trihydroxy-biphenyl-2-carbonyl)-beta-D-glucopyranosyloxy]-5t-vinyl-(4ar)-4,4a,5,6-tetrahydro-3H-pyrano[3,4-c]pyran-1-one Natural products OC1C(O)C(CO)OC(OC2C(C3C(C(OCC3)=O)=CO2)C=C)C1OC(=O)C1=C(O)C=C(O)C=C1C1=CC=CC(O)=C1 DBOVHQOUSDWAPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- BZXINCMCFVKGKB-UHFFFAOYSA-N Amarogentin Natural products OCC1OC(OC2OC=C3C(CCOC3=O)C2C=C)C(OC(=O)c4cc(O)cc(O)c4c5cccc(O)c5)C(O)C1O BZXINCMCFVKGKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- DBOVHQOUSDWAPQ-WTONXPSSSA-N amarogentin Chemical compound O([C@H]1[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H]3C(C(OCC3)=O)=CO2)C=C)O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O)O)CO)C(=O)C1=C(O)C=C(O)C=C1C1=CC=CC(O)=C1 DBOVHQOUSDWAPQ-WTONXPSSSA-N 0.000 description 29
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 27
- BALXUFOVQVENIU-GNAZCLTHSA-N Ephedrine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 BALXUFOVQVENIU-GNAZCLTHSA-N 0.000 description 26
- KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N d-ephedrine Natural products CNC(C)C(O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 229960002534 ephedrine hydrochloride Drugs 0.000 description 25
- 239000000047 product Substances 0.000 description 20
- 241000207929 Scutellaria Species 0.000 description 19
- KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N (-)-ephedrine Chemical compound CN[C@@H](C)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-WPRPVWTQSA-N 0.000 description 18
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 14
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 14
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 11
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 229960002179 ephedrine Drugs 0.000 description 9
- BALXUFOVQVENIU-KXNXZCPBSA-N pseudoephedrine hydrochloride Chemical compound [H+].[Cl-].CN[C@@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 BALXUFOVQVENIU-KXNXZCPBSA-N 0.000 description 9
- 229960003447 pseudoephedrine hydrochloride Drugs 0.000 description 9
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 8
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 8
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 8
- 229960003908 pseudoephedrine Drugs 0.000 description 8
- KWGRBVOPPLSCSI-WCBMZHEXSA-N pseudoephedrine Chemical compound CN[C@@H](C)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 KWGRBVOPPLSCSI-WCBMZHEXSA-N 0.000 description 8
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 7
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 7
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 6
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 5
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 5
- CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 3-O-Caffeoylquinic acid Natural products O[C@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-FWCWNIRPSA-N 0.000 description 4
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SCULJPGYOQQXTK-OLRINKBESA-N Cinobufagin Chemical compound C=1([C@@H]2[C@@]3(C)CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C[C@H]5CC[C@H]4[C@@]43O[C@@H]4[C@@H]2OC(=O)C)C=CC(=O)OC=1 SCULJPGYOQQXTK-OLRINKBESA-N 0.000 description 4
- SCULJPGYOQQXTK-UHFFFAOYSA-N Cinobufagin Natural products CC(=O)OC1C2OC22C3CCC4CC(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1C=1C=CC(=O)OC=1 SCULJPGYOQQXTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N Neochlorogenin-saeure Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O CWVRJTMFETXNAD-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N chlorogenic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-JUHZACGLSA-N 0.000 description 4
- 229940074393 chlorogenic acid Drugs 0.000 description 4
- FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N chlorogenic acid Natural products O[C@@H]1C[C@](O)(C[C@@H](CC(=O)C=Cc2ccc(O)c(O)c2)[C@@H]1O)C(=O)O FFQSDFBBSXGVKF-KHSQJDLVSA-N 0.000 description 4
- 235000001368 chlorogenic acid Nutrition 0.000 description 4
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 4
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 4
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 4
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 4
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- IWYDHOAUDWTVEP-ZETCQYMHSA-N (S)-mandelic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 IWYDHOAUDWTVEP-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 3
- 241000269420 Bufonidae Species 0.000 description 3
- ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N Isomatrine Natural products C1CCC2CN3C(=O)CCCC3C3C2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N Matrine Chemical compound C1CC[C@H]2CN3C(=O)CCC[C@@H]3[C@@H]3[C@H]2N1CCC3 ZSBXGIUJOOQZMP-JLNYLFASSA-N 0.000 description 3
- 240000000249 Morus alba Species 0.000 description 3
- 235000008708 Morus alba Nutrition 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000008326 Trichosanthes anguina Nutrition 0.000 description 3
- 244000078912 Trichosanthes cucumerina Species 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N acetone Substances CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 229940126678 chinese medicines Drugs 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000003760 hair shine Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 229930014456 matrine Natural products 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 238000011003 system suitability test Methods 0.000 description 3
- 239000002435 venom Substances 0.000 description 3
- 210000001048 venom Anatomy 0.000 description 3
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 3
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000723281 Ephedra equisetina Species 0.000 description 2
- 240000007163 Livistona chinensis Species 0.000 description 2
- 244000131316 Panax pseudoginseng Species 0.000 description 2
- 235000003181 Panax pseudoginseng Nutrition 0.000 description 2
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 2
- -1 filter Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 description 1
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 description 1
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 238000006424 Flood reaction Methods 0.000 description 1
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N N,N-Diethylethanamine Substances CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000283966 Pholidota <mammal> Species 0.000 description 1
- 240000004980 Rheum officinale Species 0.000 description 1
- 235000008081 Rheum officinale Nutrition 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- AEQDJSLRWYMAQI-UHFFFAOYSA-N Tetrahydropalmatine Natural products C1CN2CC(C(=C(OC)C=C3)OC)=C3CC2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 AEQDJSLRWYMAQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UDLBSRQHKWDKQA-UHFFFAOYSA-N acetyl acetate;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.CC(=O)OC(C)=O UDLBSRQHKWDKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- QMNWISYXSJWHRY-YLNUDOOFSA-N astragaloside IV Chemical compound O1[C@H](C(C)(O)C)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@]2(C)CC[C@]34C[C@]4(CC[C@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)CO4)O)C4(C)C)[C@H]4[C@@H](O[C@H]4[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)C[C@H]3[C@]2(C)C[C@@H]1O QMNWISYXSJWHRY-YLNUDOOFSA-N 0.000 description 1
- QMNWISYXSJWHRY-BCBPIKMJSA-N astragaloside IV Natural products CC(C)(O)[C@@H]1CC[C@@](C)(O1)[C@H]2[C@@H](O)C[C@@]3(C)[C@@H]4C[C@H](O[C@@H]5O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]5O)[C@H]6C(C)(C)[C@H](CC[C@@]67C[C@@]47CC[C@]23C)O[C@@H]8OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]8O QMNWISYXSJWHRY-BCBPIKMJSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 description 1
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- PFKIBRPYVNVMRU-UHFFFAOYSA-N cyclosieversioside F Natural products CC(C)(O)C1COC(C)(C1)C2C(O)CC3(C)C4CC(OC5OC(CO)C(O)C(O)C5O)C6C(C)(C)C(CCC67CC47CCC23C)OC8OCC(O)C(O)C8O PFKIBRPYVNVMRU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007888 film coating Substances 0.000 description 1
- 238000009501 film coating Methods 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N formic acid Substances OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- XYKIUTSFQGXHOW-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;toluene Chemical compound CC(C)=O.CC1=CC=CC=C1 XYKIUTSFQGXHOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- XDQITMCFPPPMBC-TUANDBMESA-N scutelloside Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@@H]2O[C@@H]3C[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@@](O)(CO3)[C@@H]24)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O XDQITMCFPPPMBC-TUANDBMESA-N 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000010414 supernatant solution Substances 0.000 description 1
- AEQDJSLRWYMAQI-KRWDZBQOSA-N tetrahydropalmatine Chemical compound C1CN2CC(C(=C(OC)C=C3)OC)=C3C[C@H]2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 AEQDJSLRWYMAQI-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Cosmetics (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
本发明涉及一种止咳片的快速薄层鉴别方法。其特征在于:用薄层色谱法,在5块薄层板上对制剂中的前胡、黄芩、麻黄、枇杷叶、金银花、苦杏仁和桔梗进行了鉴别。前6项鉴别只需样品2g,甲醇23ml,展开剂40ml,时间2小时,其简便性、快捷性、高效性、无污染性,是目前传统鉴别方法都不具备的。其中,在三种不同的检视条件下,检视前胡、黄芩和麻黄的薄层鉴别以及桔梗脂溶性水解提取液中偏水溶性成分的专属鉴别方法为首次报道。
Description
技术领域
本发明涉及一种止咳片的快速薄层鉴别方法。
背景技术
在防病治病方面,中药复方提取制剂占据着重要的位置,中药提取之后,其植物组织已不符存在,显微鉴别亦无能为力,所以其质量控制方法都是以各种有效成分为指标,进行薄层鉴别与含量测定。但在各类国家质量标准中,薄层鉴别多是处理一个样品溶液,一块薄层板,展开一次,一种显色剂,鉴别一味药材。为排除干扰,样品的前处理程序多复杂、烦琐,需用大量的有机试剂反复纯化处理,费力、费时、费试剂、污染环境,危害健康,检测周期长。这样,一个含6~7项薄层鉴别和二项含量测定的质量标准检测完成,一般要花费一周的时间,如遇复试,时间翻倍,检测速度严重制约着中药现代化生产速度。所以寻找简便、快捷的检测方法、提高检测效率、降低检测成本,成为中药质量控制必须突破的难关。以中国药典2010年版一部收载的金蒲胶囊质量标准为例剖析如下。该标准项下收载了7项薄层鉴别和两项含量测定。具体方法如下:
【鉴别】(1)取本品内容物4g,加甲醇20ml,浸渍10分钟,滤过,取滤液10ml,蒸干,残渣加水10ml使溶解,再加盐酸1ml,置水浴中加热回流30分钟,立即冷却,用乙醚振摇提取2次,每次10ml,合并乙醚液,蒸干,残渣加三氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液。另取大黄对照药材0.1g,同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为15∶5∶1的30~60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同的五个橙黄色荧光斑点;置氨蒸气中熏后,斑点变成红色。
(2)取本品内容物4g,加浓氨试液1ml与三氯甲烷20ml,浸渍1小时,时时振摇,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇5ml使溶解,作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品,加乙醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。吸取供试品溶液20μl、对照品溶液1μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为10∶6∶1的正己烷-三氯甲烷-甲醇为展开剂,展开,取出,晾干,置碘蒸气中熏至斑点显色清晰,挥尽薄层板上吸附的碘,置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
(3)取本品内容物3g,加三氯甲烷25ml,加热回流5小时,滤过,滤液中加活性炭0.3g,振摇,放置30分钟,滤过,滤液浓缩至干,残渣加三氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液。另取华蟾酥毒基对照品,加三氯甲烷制成每1ml含2mg的溶液,作为对照品溶液。吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为4∶3∶3的环己烷-三氯甲烷-丙酮为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(4)取本品内容物6g,加80%丙酮溶液20ml,超声处理30分钟,静置,取上清液,作为供试品溶液。另取红花对照药材0.5g,同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为7∶0.4∶2∶3的乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂,展开,取出,晾干。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(5)取本品内容物6g,加甲醇50ml,加热回流1小时,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加水30ml使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取2次,每次30ml,合并正丁醇液,加1%氢氧化钠溶液洗涤2次,每次20ml,取正丁醇液,用正丁醇饱和的水洗至中性,取正丁醇液,蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为13∶7∶2的三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色斑点;置紫外光灯365nm下检视,显相同颜色的荧光斑点。
(6)取本品内容物5g,加三氯甲烷20ml,超声处理30分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取胆酸对照品,加乙醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。吸取供试品溶液10μl、对照品溶液4μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为15∶7∶5的异辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
(7)取本品内容物10g,加三氯甲烷30ml,加热回流4小时,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加三氯甲烷1ml使溶解,作为供试品溶液。另取穿山甲对照药材2g,同法制成对照药材溶液。吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为20∶1的甲苯-丙酮为展开剂,展开,取出,晾干。喷以体积比为9∶1的醋酐-硫酸的混合溶液,80℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
[0009]苦参含量测定
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以体积比为18∶18∶70∶0.1的乙腈-甲醇-pH6.8的磷酸盐缓冲液-三乙胺为流动相,检测波长为220nm,理论板数,按苦参碱峰计算不低于8000。
对照品溶液制备取苦参碱对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含60μg的溶液,即得。
供试品溶液制备取装量差异项下的本品内容物,研细,取约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加浓氨溶液2ml使湿润,再加三氯甲烷25ml,以功率250w,频率33kHz,超声处理20分钟,滤过,取滤液,再用三氯甲烷洗涤残渣、容器及滤器4次,每次5ml,滤过,合并滤液,置水浴上蒸干,残渣用甲醇溶解并转移至10ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含苦参以苦参碱C16H24N2O计,不得少于0.16mg。
蟾酥含量测定
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以体积比为43.5∶56.5的乙腈-水为流动相,检测波长为292nm,理论板数,按华蟾酥毒基峰计算应不低于4000。
对照品溶液制备取华蟾酥毒基对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含0.16mg的溶液,即得。
供试品溶液制备取本品40粒的内容物,精密称定,混匀,研细,取约5g,精密称定,置索氏提取器中,加三氯甲烷适量,加热回流5小时,滤过,滤液加活性炭0.3g,振摇,放置5分钟,滤过,用三氯甲烷10ml,分次洗涤滤器及滤渣,合并滤液,蒸干,残渣加甲醇适量使溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含蟾酥以华蟾酥毒基C26H34O6计,不得少于25μg。
上述例子中的7项薄层鉴别,粗略地计算一下,7项薄层鉴别仅样品前处理时间,就要花费20小时,样品38g,有机溶剂370ml,加上展开剂70ml与展开时间14小时,1批样品的薄层鉴别,就要花去约5天的时间与440ml有机溶剂。加上苦参与蟾酥的定量测定时间3天,样品处理溶剂165ml,流动相中的有机相330ml,一批样品的薄层鉴别和定量测定完成,需时间8天,有机试剂770ml。如遇复试,得到检测结果,就需半月时间,检测速度无法与机械化大生产相匹配。提高检测效率、降低检测成本、减少环境污染,成了检测人员刻不容缓的奋斗目标,我们就是在该背景条件下,发明了一种止咳片的快速薄层鉴别与盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和苦杏仁苷的定量测定方法。
该止咳片,由黄芩、蜜炙枇杷叶、蜜炙麻黄、苦杏仁、前胡、桑白皮、瓜蒌、苦杏仁、金银花、竹茹十味中药组成,配比如下:
黄芩150-190份 蜜炙枇杷叶280-350份 蜜炙麻黄150-200份
苦杏仁150-200份 前胡250-320份 桑白皮250-320份
瓜蒌280-310份 桔梗160-200份 金银花250-300份
竹茹250-320份
上述处方中的十味中药,蜜炙枇把叶、蜜炙麻黄、苦杏仁、前胡用8-10倍量40-70%乙醇提取1-3次,每次1-3小时,合并提取液,滤过,滤液回收乙醇至无醇味,备用;桑白皮、竹茹、瓜蒌、桔梗、金银花,加8-10倍量水煎煮至沸,加入黄芩,煎煮1-3次,每次1-3小时,合并提取液,滤过,滤液浓缩至在60℃测定相对密度为1.05-1.10清膏,加乙醇,使含醇量达70-75%,冷藏放置20-24小时,滤过,滤液回收乙醇至无醇味,与醇提液合并,浓缩至在60℃测定相对密度为1.10-1.18清膏,喷雾干燥。取喷雾粉与10-30%淀粉,混匀,制粒,加0.1-0.5%的硬脂酸镁,压片,包薄膜衣,即得。
发明内容
本发明就是针对检测速度无法与机械化大生产相匹配的难点,发明了采用同一供试品溶液与甲醇超声的各药材的上清溶液,在4块薄层板上,简便、快捷地完成前胡、黄芩、麻黄、枇杷叶、金银花、苦杏仁六味药材鉴别。为排除干扰,采用另一种供试品溶液,完成桔梗药材的鉴别。并用同一非缓冲盐流动相,以等度洗脱的方式,20分钟内同时测定盐酸麻黄碱、伪麻黄碱与苦杏仁苷。
该发明7味药材的薄层鉴别,三种有效成分的定量测定,一共需用供试样品5.5g,前处理时间2小时,加上薄层展开与定量测定的时间、溶剂,总花费溶剂220ml,时间2天,与上述的金蒲胶囊比较,都是7味药材的薄层鉴别与2-3种成分的定量测定,本发明可提高检测效率4倍,节约供试品86%、有机溶剂74%,是一套简便、快捷、高效、低耗、低污染、多指标控制药品质量的现代化标准。其中前胡、黄芩、麻黄和苦杏仁的薄层鉴别以及盐酸麻黄碱、伪麻黄碱和苦杏仁苷的同时定量测定为首次报道。
本研究中样品以含水甲醇提取后,吸取一定量,通过氧化铝柱除杂,含水甲醇洗脱,滤过,续滤液进样的程序,去除了绿原酸、黄芩苷等酸性成分的干扰,使供试品溶液成为近无色的澄清溶液。首次以普通的反相色谱柱,非缓冲盐体系,体积比为4.5∶9∶86.5的乙腈-甲醇-0.1%磷酸为流动相,进行了盐酸麻黄碱、伪麻黄碱和苦杏仁苷的同时定量测定,待测成分波峰分离良好,色谱柱耐用性广。
通过方法学考察,盐酸麻黄碱进样量在0.0505~0.505μg,与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为:Y=2294941.7X+1112,γ=0.999997(见表1、图8);苦杏仁苷进样量在0.1488~1.488μg,与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为:Y=728603X+3142,γ=0.99996(见表2、图9)。采用加样回收实验,结果表明:盐酸麻黄碱9次测定的平均回收率为100.14%,RSD为1.99%(见表3);苦杏仁苷9次测定的平均回收率为97.88%,RSD为1.64%(见表4)。精密度(见表5)、稳定性(见表6)、重复性(见表7)、专属性(见图10、11、12、13)与柱耐用性(见表8、图14、15、16)实验均符合方法学要求。适用于止咳片中盐酸麻黄碱和苦杏仁苷的同时定量测定。
本发明解决其技术问题所采用的方案为:
(1)快速薄层鉴别方法
①取止咳片,研细,称取2g,加甲醇4ml,超声处理10分钟,滤过,滤液作为供试品溶液。另取前胡、黄芩和麻黄对照药材各0.1~0.3g,分别加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液。吸取供试品溶液8~10μl,对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为20∶4∶0.5的氯仿-甲醇-浓氨为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与前胡对照药材色谱相应的位置上,至少显三个相同的荧光斑点(见图1);置紫外光灯254nm下检视,在与黄芩对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点(见图2);喷以2%的茚三酮无水乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与麻黄对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点(见图3)。经空白对照,空白样品(不含前胡或黄芩或麻黄的样品)不干扰测定,鉴别专属。
②取枇杷叶对照药材0.1~0.3g,分别加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液。吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为7.5∶2.5∶0.15的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点(见图4)。经空白对照,空白样品(不含枇杷叶的样品)不干扰测定,鉴别专属。
③取金银花对照药材0.1~0.2g,加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液。吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为15∶5∶5的乙酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,100℃烘烤约5分钟,置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光主斑点(见图5)。经空白对照,空白样品(不含金银花的样品)不干扰测定,鉴别专属。
④取苦杏仁对照药材0.2~0.5g,加甲醇2~4ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液。吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5~8μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为15∶2∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%磷钼酸乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,至少显2个相同颜色斑点(见图6)。经空白对照,空白样品(不含苦杏仁的样品)不干扰测定,鉴别专属。
⑤取止咳片,除去包衣,研细,称取3g,加热水25ml,超声使溶解,棉花滤过,滤液加盐酸2ml,沸水浴中加热30分钟,冷却,加乙酸乙酯20~25ml,萃取,乙酸乙酯层蒸干,残留物加甲醇1ml,使溶解,作为供试品溶液;另取桔梗对照药材0.5~0.8g,加热水20ml、盐酸2ml,沸水浴中加热30分钟,冷却,棉花滤过,滤液加乙酸乙酯15~20ml,萃取,乙酸乙酯层蒸干,残留物加甲醇1ml,使溶解,作为对照药材溶液;吸取供试品溶液5~8μl,对照药材溶液8~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为4∶1∶4∶1的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-浓氨为展开剂,展开,取出,晾干,喷以体积比为1∶6的5%香草醛硫酸溶液∶乙醇的混合溶液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色主斑点(见图7)。经空白对照,空白样品(不含桔梗的样品)不干扰测定,鉴别专属。
麻黄与苦杏仁含量测定
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以体积比为4.5∶9∶86.5的乙腈-甲醇-0.1%磷酸为流动相;检测波长207nm;理论板数按苦杏仁苷峰计算不低于1500。
对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱和苦杏仁苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成储备液,再取储备液适量,加70%甲醇制成每1ml含盐酸麻黄碱12μg、苦杏仁苷35μg的混合溶液,作为对照品溶液。再取盐酸伪麻黄碱适量,加70%甲醇制成每1ml含盐酸伪麻黄碱5μg的溶液,作为定位溶液。
供试品溶液的制备取止咳片20片,除去包衣,精密称定,研细,取0.3~0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加70%甲醇15~25ml,密塞,称定重量,以功率250w、频率40kHz,超声处理15分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置装有100-120目中性氧化铝1~1.5g的内径1cm的色谱柱上,用70~80%甲醇洗脱至10ml的量瓶中至约9ml,加1滴磷酸,用70~80%的甲醇稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液与定位溶液各8~10μl、供试品溶液10~15μl,注入液相色谱仪,以盐酸伪麻黄碱确认保留时间与盐酸麻黄碱一致,以盐酸麻黄碱计算含量。
本品每片含麻黄以盐酸麻黄碱计,盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱总量不得低于0.7mg,含苦杏仁以苦杏仁苷计不得低于2.7mg。
本发明的原理如下:
1.根据中药各有效成分的化学结构和极性不同,随着展开剂的移动,在薄层板上的吸附、解吸附的能力而不一样,使各有效成分的斑点得以分离。又借助各成分极性大小,选取极性近似的有效成分,在不同的检视条件下,呈现不同的斑点颜色,在同一块薄层板上可同时互不干扰地检测数种有效成分,同一供试品溶液,供多项鉴别应用。
2.通过调整流动相的组分、比例以及检测波长,使性质不同的有效成分能在同一流动相中,同一检测波长下,都能呈现一定的波峰面积,而且其波峰面积与含量呈良好线性关系,而得以定量测定。
本发明的创新点及有益效果如下:
(1)突破了一个样品溶液,一块薄层板,展开一次,检测一种中药的传统鉴别方式,创新了采用同一供试品溶液与甲醇超声的各对照药材上清液,在4块薄层板上,完成6味中药的快速薄层鉴别检测。6项鉴别只需样品2g,甲醇23ml,展开剂40ml,时间2小时,其简便性、快捷性,是目前传统鉴别方法都不具备的。
(2)在同一块薄层板上,三种不同的检视条件下,同时检出前胡、黄芩和麻黄的薄层鉴别、苦杏仁磷钼酸乙醇溶液显色的低毒性显色技术以及桔梗脂溶性水解提取液中偏水溶性成分的专属鉴别方法为首次报道,拓宽了鉴别思路,具创新性与实用性。
(3)本处方由十味中药组成,成分复杂,既有酸性的绿原酸、苦杏仁苷、黄芩苷类,又有碱性的麻黄碱类,而且黄芩苷类在反相色谱柱上,具有很强的保留性质。通过调酸碱性的萃取方式,无法使酸性的苦杏仁苷与碱性的麻黄碱共存,亦无法同时测定,而且导致前处理繁琐、费时。本发明正是针对该问题,利用生物碱和苦杏仁苷都能溶于含水甲醇的特性,用含水甲醇提取,再通过氧化铝小柱,巧妙地使强酸性的绿原酸和黄芩苷类被吸附,而弱酸性的苦杏仁苷和碱性麻黄碱类不被吸附的酸碱度之差,排除了绿原酸和黄芩苷类的干扰,得到近于无色的供试品溶液,保证了测定图谱基线平稳、待测定波峰重现性良好。配以优选的流动相组分与比例,使麻黄碱和苦杏仁苷在20分钟内同时测定完毕,麻黄碱保留时间约6分钟,苦杏仁苷的保留时间约12分钟,波峰分离良好。
(4)中国药典2010年版一部收载的麻黄有三个品种,即木贼麻黄、草麻黄和中麻黄。文献报道其麻黄碱含量差异较大,在木贼麻黄和草麻黄中以麻黄碱为主,伪麻黄碱含量较少;中麻黄中伪麻黄碱含量较高,麻黄碱含量较少。因此目前在国家各类中药质量标准中,都是以麻黄碱和伪麻黄碱分别测定的含量相加控制产品质量。鉴于盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱二者为同分异构体,其光谱图和单位浓度的波峰面积都相同,又都是止咳有效成分,所以调整为保留时间相同的同一波峰,以盐酸麻黄碱计二者的总量,解决了以普通的等度洗脱,同一流动相无法同时测定苦杏仁苷的难题,方法简便、快捷、准确,成本低,效率高。
(5)本发明与传统的质量检测方法相比,提高检测效率3~4倍,节省检测时间80%,降低检测成本80%,减少环境污染90%,为一部具有推广应用前景的示范性检测方法。
附图说明
图1为前胡的薄层鉴别。
图2为黄芩的薄层鉴别。
图3为麻黄的薄层鉴别。
图4为枇杷叶薄层鉴别。
图5为金银花薄层鉴别。
图6为苦杏仁薄层鉴别。
图7为桔梗薄层鉴别。
图8盐酸麻黄碱对照品线性关系图
图9苦杏仁苷对照品线性关系图
图10盐酸麻黄碱和苦杏仁苷对照品HPLC色谱图
图11止咳片样品的HPLC色谱图。
图12缺苦杏仁的空白样品HPLC色谱图
图13缺麻黄的空白样品HPLC色谱图
图14Grace Smart色谱柱(5μm,4.6×250mm)止咳片样品的HPLC色谱图。
图15迪马dimonsil色谱柱(5μm,4.6×150mm)止咳片样品的HPLC色谱图。
图16日本岛津SP-ODS色谱柱(5μm,4.6×150mm)止咳片样品的HPLC色谱图。
图1,图2和图3为同一块薄层板,图1是在紫外灯365nm下检视前胡的荧光斑点,图2是在紫外灯254nm下检视黄芩的斑点,图3是显色后在日光下检视麻黄的斑点,图1、图2和图3的样品标号一样,1为黄芩对照药材,2为黄芩空白,3、4、5为样品,6为前胡对照药材,7为麻黄对照药材,8为前胡空白,9为麻黄空白。
图4中,1空白,2为枇杷叶对照药材,3、4、5为样品。
图5中,1为金银花对照药材,2、3、4为样品,5为空白。
图6中,1、2、3为样品,4为苦杏仁对照药材,5为空白。
图7中,1为空白,2为桔梗对照药材,3、4、5为样品。
图8、图9中,横坐标为进样量μg,纵坐标为峰面积。
图10、图11、图12、图13、图14、图15、图16中,1为盐酸麻黄碱,2为苦杏仁苷。
本发明具体实施方式如下:
①取止咳片,研细,称取2g,加甲醇4ml,超声处理10分钟,滤过,滤液作为供试品溶液。另取前胡、黄芩和麻黄对照药材各0.1~0.3g,分别加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液。吸取供试品溶液8~10μl,对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为20∶4∶0.5的氯仿-甲醇-浓氨为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与前胡对照药材色谱相应的位置上,至少显三个相同的荧光斑点;置紫外光灯254nm下检视,在与黄芩对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点;喷以2%的茚三酮无水乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与麻黄对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点。
②取枇杷叶对照药材0.1~0.3g,分别加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液。吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为7.5∶2.5∶0.15的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点。
③取金银花对照药材0.1~0.2g,加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液。吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为15∶5∶5的乙酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,100℃烘烤约5分钟,置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光主斑点。
④取苦杏仁对照药材0.2~0.5g,加甲醇2~4ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液。吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5~8μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为15∶2∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%磷钼酸乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,至少显2个相同颜色斑点。
⑤取止咳片,除去包衣,研细,称取3g,加热水25ml,超声使溶解,棉花滤过,滤液加盐酸2ml,沸水浴中加热30分钟,冷却,加乙酸乙酯20~25ml,萃取,乙酸乙酯层蒸干,残留物加甲醇1ml,使溶解,作为供试品溶液;另取桔梗对照药材0.5~0.8g,加热水20ml、盐酸2ml,沸水浴中加热30分钟,冷却,棉花滤过,滤液加乙酸乙酯15~20ml,萃取,乙酸乙酯层蒸干,残留物加甲醇1ml,使溶解,作为对照药材溶液;吸取供试品溶液5~8μl,对照药材溶液8~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为4∶1∶4∶1的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-浓氨为展开剂,展开,取出,晾干,喷以体积比为1∶6的5%香草醛硫酸溶液∶乙醇的混合溶液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色主斑点。
麻黄与苦杏仁含量测定
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以体积比为4.5∶9∶86.5的乙腈-甲醇-0.1%磷酸为流动相;检测波长207nm;理论板数按苦杏仁苷峰计算不低于1500。
对照品溶液的制备取盐酸麻黄碱和苦杏仁苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成储备液,再取储备液适量,加70%甲醇制成每1ml含盐酸麻黄碱12μg、苦杏仁苷35μg的混合溶液,作为对照品溶液。再取盐酸伪麻黄碱适量,加70%甲醇制成每1ml含盐酸伪麻黄碱5μg的溶液,作为定位溶液。
供试品溶液的制备取止咳片20片,除去包衣,精密称定,研细,取0.3~0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加70%甲醇15~25ml,密塞,称定重量,以功率250w、频率40kHz,超声处理15分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置装有100-120目中性氧化铝1~1.5g的内径1cm的色谱柱上,用70~80%甲醇洗脱至10ml的量瓶中至约9ml,加1滴磷酸,用70~80%的甲醇稀释至刻度,摇匀,用0.45μm的微孔滤膜,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品溶液与定位溶液各8~10μl、供试品溶液10~15μl,注入液相色谱仪,以盐酸伪麻黄碱确认保留时间与盐酸麻黄碱一致,以盐酸麻黄碱计算含量。
本品每片含麻黄以盐酸麻黄碱计,盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱总量不得低于0.7mg,含苦杏仁以苦杏仁苷计不得低于2.7mg。制剂中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和苦杏仁苷的含量测定结果(见表9)。
表1盐酸麻黄碱进样量与峰面积
表2苦杏仁苷进样量与峰面积
表3样品中盐酸麻黄碱的回收率试验结果
表4样品中苦杏仁苷的回收率试验结果
表5精密度实验结果(峰面积)
表6稳定性实验结果(峰面积)
表7重复性试验结果
表8不同色谱柱耐用性试验结果
表9止咳片中盐酸麻黄碱和苦杏仁苷含量测定结果
Claims (1)
1.一种止咳片的快速薄层鉴别方法,其特征在于:
①取止咳片,除去包衣,研细,称取2g,加甲醇4ml,超声处理10分钟,滤过,滤液作为供试品溶液;另取前胡、黄芩和麻黄对照药材各0.1~0.3g,分别加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液;吸取供试品溶液8~10μl,对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为20∶4∶0.5的氯仿-甲醇-浓氨为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与前胡对照药材色谱相应的位置上,至少显三个相同的荧光斑点;置紫外光灯254nm下检视,在与黄芩对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点;喷以2%的茚三酮无水乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与麻黄对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点;
②取枇杷叶对照药材0.1~0.3g,分别加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液;吸取鉴别①项下的供试品溶液和枇杷叶对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为7.5∶2.5∶0.15的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的主斑点;
③取金银花对照药材0.1~0.2g,加甲醇1~3ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液;吸取鉴别①项下的供试品溶液和金银花对照药材溶液各5~6μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为15∶5∶5的乙酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,100℃烘烤约5分钟,置紫外光灯365nm下检视,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光主斑点;
④取苦杏仁对照药材0.2~0.5g,加甲醇2~4ml,超声处理10分钟,上清液作为对照药材溶液;吸取鉴别①项下的供试品溶液和苦杏仁对照药材溶液各5~8μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以体积比为15∶2∶0.1的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%磷钼酸乙醇溶液,100℃烘烤至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,至少显2个相同颜色斑点;
⑤取止咳片,除去包衣,研细,称取3g,加热水25ml,超声使溶解,棉花滤过,滤液加盐酸2ml,沸水浴中加热30分钟,冷却,加乙酸乙酯20~25ml,萃取,乙酸乙酯层蒸干,残留物加甲醇1ml,使溶解,作为供试品溶液;另取桔梗对照药材0.5~0.8g,加热水20ml、盐酸2ml,沸水浴中加热30分钟,冷却,棉花滤过,滤液加乙酸乙酯15~20ml,萃取,乙酸乙酯层蒸干,残留物加甲醇1ml,使溶解,作为对照药材溶液;吸取供试品溶液5~8μl,对照药材溶液8~10μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以体积比为4∶1∶4∶1的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-浓氨为展开剂,展开,取出,晾干,喷以体积比为1∶6的5%香草醛硫酸溶液∶乙醇的混合溶液,热风吹至斑点显色清晰,供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色主斑点。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201110192953 CN102297926B (zh) | 2011-07-12 | 2011-07-12 | 一种止咳片的快速薄层鉴别方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201110192953 CN102297926B (zh) | 2011-07-12 | 2011-07-12 | 一种止咳片的快速薄层鉴别方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102297926A CN102297926A (zh) | 2011-12-28 |
CN102297926B true CN102297926B (zh) | 2013-08-28 |
Family
ID=45358486
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 201110192953 Active CN102297926B (zh) | 2011-07-12 | 2011-07-12 | 一种止咳片的快速薄层鉴别方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102297926B (zh) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102608250B (zh) * | 2012-03-13 | 2014-07-23 | 承德燕峰药业有限责任公司 | 一种金防感冒颗粒的快速检测方法 |
CN104749313B (zh) * | 2013-12-30 | 2017-12-22 | 漳州片仔癀药业股份有限公司 | 一种治疗风热感冒的中药组合物的质量检测方法 |
CN104777249B (zh) * | 2015-04-07 | 2017-03-01 | 湖北端正药业股份有限公司 | 测定止咳枇杷糖浆中有效成分苦杏仁苷含量的方法 |
CN105954086A (zh) * | 2016-04-20 | 2016-09-21 | 广西壮族自治区梧州食品药品检验所 | 萃取理肺丸中盐酸麻黄碱的方法 |
CN106124686A (zh) * | 2016-08-31 | 2016-11-16 | 天津中新药业研究中心 | 一种清肺化痰止嗽药物的质量控制方法 |
CN106950292A (zh) * | 2017-01-17 | 2017-07-14 | 天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂 | 一种清肺消炎丸质量标准检测方法 |
CN109061029B (zh) * | 2018-08-22 | 2020-07-28 | 承德燕峰药业有限责任公司 | 一种镇静安神颗粒改辅料和规格前后多信息梯度薄层质量对比方法 |
CN109856270A (zh) * | 2019-01-29 | 2019-06-07 | 浙江医药高等专科学校 | 一种用高效液相色谱法同时测定华盖散配方颗粒中7个指标成分的方法 |
CN112051353B (zh) * | 2020-09-23 | 2022-10-11 | 浙江金大康动物保健品有限公司 | 一种前胡药材的梯度全信息薄层鉴别方法 |
CN112326846A (zh) * | 2020-12-07 | 2021-02-05 | 葵花药业集团(襄阳)隆中有限公司 | Hplc法检测小儿柴桂退热颗粒中黄芩苷含量的方法 |
CN112710797B (zh) * | 2021-01-13 | 2023-04-07 | 贵州大隆药业有限责任公司 | 一种用于止咳平喘药物组合物的质量检测方法 |
CN113834895B (zh) * | 2021-08-28 | 2023-02-24 | 海南葫芦娃药业集团股份有限公司 | 小儿肺热咳喘颗粒中苦杏仁苷的质量控制方法 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100510885B1 (ko) * | 2002-08-12 | 2005-08-26 | (주) 한약마을 | 아미그달린과 네오아미그달린의 역상 고성능 액체크로마토그래피 분리법 개발 및 아미그달린의 라세미화억제를 위한 최적 조건을 얻는 방법 |
KR20060038027A (ko) * | 2004-10-29 | 2006-05-03 | (주) 한약마을 | 도인 또는 행인으로부터 아미그달린을 효과적으로 얻는추출방법 및 hplc를 이용한 분리방법 |
CN1695712B (zh) * | 2005-03-10 | 2012-09-26 | 四川升和药业股份有限公司 | 一种止咳化痰平喘的药物的鉴别检查方法 |
CN100432670C (zh) * | 2007-04-04 | 2008-11-12 | 西安碑林药业股份有限公司 | 一种中药制剂金嗓开音丸的质量检测方法 |
-
2011
- 2011-07-12 CN CN 201110192953 patent/CN102297926B/zh active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102297926A (zh) | 2011-12-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102297926B (zh) | 一种止咳片的快速薄层鉴别方法 | |
CN102854281B (zh) | 一种无糖型强力枇杷露的检测方法 | |
CN105259295A (zh) | 参枝苓口服液的质量检测方法 | |
CN102269751B (zh) | 六味能消制剂的检测方法 | |
CN101028388B (zh) | 一种治疗眼疾近视及视疲劳中药制剂的质量检测方法 | |
CN105301168B (zh) | 通络化痰胶囊的检测方法 | |
CN101829266A (zh) | 牛黄蛇胆川贝液的质量检测方法 | |
CN100437112C (zh) | 一种治疗中老年眼部疾病中药制剂的质量检测方法 | |
CN104833736A (zh) | 一种二十五味珊瑚丸的一测多评快速定性与定量检测方法 | |
CN101244240B (zh) | 四味姜黄汤制剂的定性定量分析方法 | |
CN104407092A (zh) | 一种具有开胃健脾功效的中药组合物的质量检测方法 | |
CN101204434A (zh) | 一种消栓滴丸质量标准及检验方法 | |
CN100367987C (zh) | 治疗高血压症的杜仲降压制剂的质量控制方法 | |
CN1785281B (zh) | 一种安神口服液体制剂的检测方法 | |
CN101926889B (zh) | 芍杞颗粒剂的检测方法 | |
CN104034838A (zh) | 罗汉果止咳糖浆的质量检测方法 | |
CN103454374A (zh) | 骨康药物的质量控制方法 | |
CN106680414A (zh) | 一种复方矮地茶片的检测方法 | |
CN110927322A (zh) | 一种藿香正气合剂的检测方法 | |
CN105616946A (zh) | 一种治疗咳嗽的制剂及其制备和质量控制方法 | |
CN103293261A (zh) | 白及药材的含量测定方法 | |
CN103063792B (zh) | 小儿化痰止咳颗粒的检测方法 | |
CN102166264A (zh) | 一种肾石通的质量控制方法 | |
CN101912522B (zh) | 六味生脉片剂的检测方法 | |
CN102735787B (zh) | 一种新健胃片及其相关制剂的质量检测方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20220725 Address after: 068350 Da Tan Zhen Er Dao he Cun, Fengning Manchu Autonomous County, Chengde City, Hebei Province Patentee after: Fengning Manchu Autonomous County seventh ring Tourism Development Co.,Ltd. Address before: 300000 Tianjin City, Hexi District Meijiang Road No. 12 building 4 fangshuiyuan No. 301 Patentee before: Liu Jinling |
|
TR01 | Transfer of patent right |