CN104749313B - 一种治疗风热感冒的中药组合物的质量检测方法 - Google Patents
一种治疗风热感冒的中药组合物的质量检测方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于中药制剂领域，具体涉及一种用于治疗风热感冒的中药组合物的质量检测方法。所述质量检测方法利用TLC法对处方中的牡荆根、三叉苦、山甘草和薄荷油实现定性鉴别，并选择性的以TLC法对方中金银花进行定性鉴别和/或通过HPLC法对绿原酸进行含量检测。本发明所述方法准确度、灵敏度高，检测范围广，实现了对药品质量的有效控制。试验证明，可作为所述药物制剂质量检测的常规方法。
Description
技术领域
本发明属于中药制剂领域，具体涉及一种用于治疗风热感冒的中药组合物的质量检测方法。
背景技术
中医按病症的表徵和身体反应分类，大致分「风寒感冒」和「风热感冒」。风热感冒症状表现为：恶寒发热、鼻塞流涕(浓稠、黄绿色)、有浓痰，或并伴有头身疼痛、咳嗽、咽喉肿痛等。分析其发病机理，风热之邪多从口鼻而侵入人体，其初期表现为表热症。因太阳主表，太阳经输不利，卫气与之抗争，卫阳之气不能畅于外，故见恶寒发热、鼻塞流涕、咽痛咳嗽等肺卫之证。太阳经脉运行不利，则头痛身重，关节酸痛。肺主皮毛，开窍于鼻，外邪犯肺，则见鼻塞；肺气上逆则咳嗽；鼓邪外出则喷嚏；邪温液出则流涕。咽喉为肺气出入之门户，受风热则痛。若正不胜邪，由卫及气，即为“气分热证”，也就是阳明经症和腑症。由此，中医治法当以“疏风解表”，使表邪外出，并以“清热解毒”，使邪热从里而解。二者同时应用，结合辨证施治，治疗此病效果良好。中国专利CN1213766A公开的金牡感冒片即有此疗效。
所述的主治风热感冒的中药组合物，由金银花、牡荆根、贯众、葫芦茶、三叉苦、山甘草、薄荷油等七味中药组成，具有疏风解表，清热解毒之功能，用于外感风热，发热恶寒，头痛咳嗽，咽喉肿痛。然而该中药组合物的原制剂标准只有金银花的显微鉴别，无法准确的控制产品质量。
发明内容
为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种适用于治疗风热感冒的中药组合物的质量检测方法。
为解决上述技术问题，本发明提供了一种治疗风热感冒的中药组合物的质量检测方法，所述药物组合物的原料药组成为：金银花200-250重量份、牡荆根350-450重量份、贯众200-250重量份、三叉苦200-250重量份、葫芦茶200-250重量份、山甘草200-250重量份、薄荷油0.5-5体积份；
所述重量份与体积份的关系为g/ml的关系；
所述质量检测方法包括如下鉴别方法中的至少一种：
A、牡荆根的TLC鉴别
取所述中药组合物5-10g，加入甲醇40-60ml，超声20-30min，滤过，减压回收至滤液无醇味，加水20-30ml溶解后加于D101大孔吸附树脂，以水洗至水洗液近无色，用30-50%乙醇40-60mL洗涤后，再用70-90%乙醇40-60mL洗脱，收集70-90%乙醇洗脱液，蒸干，加8-12mL甲醇使之溶解，作为供试品溶液；
另取牡荆根4-6g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述牡荆根的阴性样品组合物，另取缺牡荆根的阴性样品5-10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取上述3种溶液各4-6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1-3∶1-3∶0.5-2∶0.5-2的氯仿-乙酸乙酯-苯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；
B、三叉苦的TLC鉴别
取所述中药组合物5-10g，加50-70%乙醇32-48mL，加热提取0.5-2h，滤过，滤液回收至无醇味，残渣用8-12mL水溶解，再用醋酸乙酯萃取2-3次，每次16-24mL，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇2.4-3.6mL使溶解，作为供试品溶液；
另取三叉苦药材1g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述三叉苦的阴性样品组合物，另取缺三叉苦阴性样品5-10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液8-12μL，阴性对照溶液、对照品溶液各4-6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为10-20∶5-15∶0.05-0.2的苯-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置302nm紫外光灯下检视；
C、山甘草的TLC鉴别
取所述中药组合物5-10g，加无水乙醇40-60mL，回流提取0.5-2h，滤过，滤液蒸至近2.4-3.6mL，作为供试品溶液；
另取山甘草药材2g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述山甘草的阴性样品组合物，另取缺山甘草阴性样品5-10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各4-6μL，阴性对照溶液8-12μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1-5：0.5-2的甲苯-乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；
D、薄荷油的TLC鉴别
取所述中药组合物1-5g，加石油醚3.5-7ml，密塞振摇数分钟，放置20-30min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取薄荷素油对照品0.3mL，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
另取薄荷脑对照品，加石油醚制成每1mL含20mg的溶液作为对照品溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述薄荷油的阴性样品组合物，另取缺薄荷油阴性样品1-5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各8-12μL，对照药材溶液、阴性对照溶液各4-6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15-25∶0.5-2的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰。
优选的，所述质量检测方法包括如下鉴别方法中的至少一种：
A、牡荆根的TLC鉴别
取所述中药组合物5g，加入甲醇50ml，超声30min，滤过，减压回收至滤液无醇味，加水25ml溶解后加于D101大孔吸附树脂，以水洗至水洗液近无色，用40%乙醇50mL洗涤后，再用80%乙醇50mL洗脱，收集80%乙醇洗脱液，蒸干，加10mL甲醇使之溶解，作为供试品溶液；
另取牡荆根5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述牡荆根的阴性样品组合物，另取缺牡荆根的阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为2.4∶2∶1∶1的氯仿-乙酸乙酯-苯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；
B、三叉苦的TLC鉴别
取所述中药组合物5g，加60%乙醇40mL，加热提取1h，滤过，滤液回收至无醇味，残渣用10mL水溶解，再用醋酸乙酯萃取3次，每次20mL，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇3mL使溶解，作为供试品溶液；
另取三叉苦药材1g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述三叉苦的阴性样品组合物，另取缺三叉苦阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液10μL，阴性对照溶液、对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶10∶0.1的苯-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置302nm紫外光灯下检视；
C、山甘草的TLC鉴别
取所述中药组合物5g，加无水乙醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液蒸至近3mL，作为供试品溶液；
另取山甘草药材2g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述山甘草的阴性样品组合物，另取缺山甘草阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各5μL，阴性对照溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为3：1的甲苯-乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；
D、薄荷油的TLC鉴别
取所述中药组合物3g，加石油醚5ml，密塞振摇数分钟，放置30min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取薄荷素油对照品0.3mL，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
另取薄荷脑对照品，加石油醚制成每1mL含20mg的溶液作为对照品溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述薄荷油的阴性样品组合物，另取缺薄荷油阴性样品3g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μL，对照药材溶液、阴性对照溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为19∶1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
进一步的，所述质量检测方法还包括下述金银花的TLC鉴别和/或金银花的HPLC含量检测方法；
E、金银花的TLC鉴别
取所述中药组合物0.4-0.6g，加甲醇4-6mL，密塞振摇数分钟，放置20-40min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取金银花对照药材0.3-0.5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成金银花对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述金银花的阴性样品组合物，另取缺金银花阴性样品0.4-0.6g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；
照TLC法试验，吸取上述4种溶液各8-12μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6-8∶2-3∶2-3的乙酸丁酯-甲酸-水静置后的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；
F、金银花的HPLC含量检测
精密称取绿原酸对照品适量，加40-60%甲醇制成每1ml含30-60μg的溶液，作为对照品溶液；
取所述中药组合物0.4-0.6g，置具塞锥形瓶中，精密加入40-60%甲醇20-30mL，超声处理20-40min，放冷，再称定重量，用40-60%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；
色谱条件如下：
色谱柱：依利特ODS-BP色谱柱；
流动相：体积比为10-15：85-90的乙腈-0.1%磷酸溶液；
柱温：20-30℃；
流速：1-1.5mL·min-1；
进样量：5-10μL；
检测波长：327nm；
理论塔板数按绿原酸色谱峰计应不低于5000。
更优的，所述质量检测方法还包括下述金银花的TLC鉴别和/或金银花的HPLC含量检测方法；
E、金银花的TLC鉴别
取所述中药组合物0.5g，加甲醇5mL，密塞振摇数分钟，放置30min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取金银花对照药材0.4g，按照所述供试品溶液的制备同法制成金银花对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述金银花的阴性样品组合物，另取缺金银花阴性样品0.5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；
照TLC法试验，吸取上述4种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为7∶2.5∶2.5的乙酸丁酯-甲酸-水静置后的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；
F、金银花的HPLC含量检测
精密称取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成每1ml含43.20μg的溶液，作为对照品溶液；
取所述中药组合物0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，超声处理30min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；
色谱条件如下：
色谱柱：依利特ODS-BP色谱柱；
流动相：体积比为11：89的乙腈-0.1%磷酸溶液；
柱温：25℃；
流速：1.2mL·min-1；
进样量：5μL；
检测波长：327nm；
理论塔板数按绿原酸色谱峰计应不低于5000。
进一步的，所述药物组合物的原料药组成为：
金银花240重量份、牡荆根420重量份、贯众240重量份、三叉苦240重量份、葫芦茶240重量份、山甘草240重量份、薄荷油4体积份；或者
金银花220重量份、牡荆根380重量份、贯众220重量份、三叉苦220重量份、葫芦茶220重量份、山甘草220重量份、薄荷油2体积份；或者
金银花234重量份、牡荆根390重量份、贯众234重量份、三叉苦234重量份、葫芦茶234重量份、山甘草234重量份、薄荷油2体积份。
所述药物组合物添加常规辅料按照常规工艺直接或间接制成临床上可接受的片剂、口服液、胶囊、颗粒剂或注射剂。
优选的，所述药物组合物为片剂，其制备方法为：除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2-3次，每次加6-10倍量水，煎煮1-3小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成浸膏，加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，混匀，压片，即得。
更优的，所述药物组合物为片剂，其制备方法为：除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成浸膏，加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，混匀，压片，即得。
本发明所述的质量检测方法采用TLC法对方中的金银花、牡荆根、山甘草、三叉苦、薄荷油进行定性鉴别，并采用HPLC法对处方中有效成分绿原酸的含量进行了测定，实现了对药品质量的有效控制。试验证明，该方法准确度、灵敏度高，检测范围广，可作为所述药物制剂质量检测的常规方法。
实验例
1、样品与试剂
金牡感冒片，由漳州片仔癀公司提供（按照实施例1所述方法制备得到），样品批号分别为1211017、1209015、1208010；
缺金银花阴性样品、缺牡荆根阴性样品、缺山甘草阴性样品、缺三叉苦阴性样品、缺薄荷油阴性样品，由漳州片仔癀公司提供；
金银花（产地山东）、牡荆根（产地福建）、山甘草（产地福建）、三叉苦（产地福建）、薄荷油（由黄山天目薄荷药业有限公司提供）
甲醇、乙腈、磷酸为色谱纯，其他试剂为分析纯。
2、仪器
高效液相色谱系统，美国戴安有限公司，戴安Ultimate3000；
KQ5200DE型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；
DHG-9023A型台式电热恒温鼓风干燥箱，上海精宏实验设备有限公司；
XS105型电子分析天平，梅特勒-托利多国际股份有限公司；
2F1-I多功能紫外分析仪，上海佳鹏科技有限公司；
薄层层析用硅胶G板，青岛海洋化工厂。
3、实验方法
3.1牡荆根的TLC鉴别
取供试样品（批号1211017）20片，研细称取5g，加入甲醇50mL，超声30min，滤过，减压回收至滤液无醇味，加水25mL溶解后加于D101大孔吸附树脂（内经1.5cm，柱高15cm，湿法装柱），以水洗至水洗液近无色，用40%乙醇50mL洗涤后，再用80%乙醇50mL洗脱，收集80%乙醇洗脱液，蒸干，加10mL甲醇使之溶解，作为供试品溶液。
另取缺牡荆根阴性样品5g，照供试品同法制成阴性对照溶液。
另取牡荆根5g，照供试品同法制成对照药材溶液。
照TLC法试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿–乙酸乙酯-苯-甲醇（2.4∶2∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
TLC图谱结果见图1，供试品色谱中在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
3.2三叉苦的TLC鉴别
取供试样品20片，研细称取5g，加60%乙醇40mL，加热提取1h，滤过，滤液回收至无醇味，残渣用水10mL溶解，用醋酸乙酯萃取3次，每次20mL，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇3mL使溶解，作为供试品溶液。
另取缺三叉苦阴性样品5g，照供试品同法制成阴性对照溶液。
另取三叉苦药材1g，照供试品同法制成对照药材溶液。
照TLC法试验，吸取供试品溶液10μL，阴性对照溶液、对照药材溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯–乙酸乙酯–甲醇（15∶10∶0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，置302nm紫外光灯下检视。
TLC图谱结果见图2，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
3.3山甘草的TLC鉴别
取供试样品20片，研细，称取5g，加无水乙醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液蒸至近3mL，作为供试品溶液。
另取缺山甘草阴性样品5g，照供试品同法制成阴性对照溶液。
另取山甘草2g，照供试品同法制成对照药材溶液。
照TLC法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5μL，阴性对照溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯–乙醇（3∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
TLC图谱结果见图3，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
3.4薄荷油的TLC鉴别
取供试样品20片，研细，称取3g，加石油醚5ml，密塞振摇数分钟，放置30min，滤过，滤液作为供试品溶液。
另取缺薄荷阴性样品3g，照供试品同法制成阴性对照溶液。
另取薄荷素油对照品0.3mL，照供试品同法制成对照药材溶液。
再取薄荷脑对照品，加石油醚制成每1mL含20mg的溶液，作为对照品溶液。
照TLC法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μL，对照药材溶液、阴性对照溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯–乙酸乙酯（19∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
TLC图谱结果见图4，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。
3.5金银花的TLC鉴别
取供试样品5片，研细，取0.5g，加甲醇5mL，密塞振摇数分钟，放置30min，滤过，滤液作为供试品溶液。
另取缺金银花阴性样品0.5g，照供试品同法制成阴性对照溶液。
另取金银花对照药材0.4g，照供试品同法制成对照药材溶液。
再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。
照TLC法试验，吸取上述4种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸丁酯-甲酸–水（7∶2.5∶2.5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
TLC图谱结果见图5，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
3.6金银花的HPLC含量测定
取供试样品5片，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，称定重量，超声（功率200w，频率40KHz）处理30分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。
精密称取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成每1ml含43.20μg的溶液，作为对照品溶液。
色谱条件如下：
色谱柱：依利特ODS-BP色谱柱（5μm，4.6mmΧ250mm）；
流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（11∶89）；
柱温：25℃；
流速：1.2mL·min-1；
进样量：5μL；
检测波长：327nm；
理论塔板数按绿原酸色谱峰计应不低于5000，其余组分的色谱峰能达到基线分离，分离度大于1.5。
HPLC色谱图见图6，供试品与绿原酸对照品在相同时间点出现同一色谱峰，阴性对照未出现色谱峰。
4、HPLC法的方法学验证
4.1线性关系考察
取绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成浓度为481.60μg.mL-1的溶液。精密量取0.3、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mL分别置于10mL棕色量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，制成系列浓度标准品溶液，按照上述色谱条件进样测定。以峰面积积分值（Y）为纵坐标，检测浓度（X，μg·mL-1）为横坐标，进行线性回归，得回归方程为Y=0.131X-0.672，r=0.9996。结果表明，绿原酸检测浓度在14.448～168.56μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系。
4.2精密度试验
取绿原酸对照品溶液（C=72.24μg·mL-1），照上述色谱条件重复进样6次，测定绿原酸的峰面积。结果，绿原酸峰面积积分值的RSD=0.32%（n=6），表明仪器精密度良好。
4.3稳定性试验
取同一供试品溶液，在上述色谱条件下，分别于0，1，2，4，8，12，24h进样，测定绿原酸的峰面积。结果，绿原酸峰面积积分值的RSD=0.68%（n=7），表明供试品溶液在24h内稳定。
4.4重复性试验
取同一批样品6份，各约0.5g，精密称定，按上述“3.6”项下的方法制成供试品溶液，照上述色谱条件测定绿原酸含量。结果，绿原酸的平均含量为4.67mg·g-1，RSD=1.2%（n=6），表明本方法重复性良好。
4.5加样回收率试验
取已知绿原酸含量（4.705mg·g-1）的金牡感冒片9份，每份约0.25g，精密称定，于25mL具塞量瓶中，3份为一组，每组分别精密加入绿原酸对照品溶液（浓度C=1.018mg·mL-1）0.8、1.0、1.2mL，各按上述“3.6”项下的方法制成供试品溶液，照上述色谱条件测定绿原酸峰面积，计算加样回收率，结果见下表1。
表1加样回收率试验结果（n=9）
4.6样品测定
分别取3批金牡感冒片（批号1211017，1209015，1208010）按上述“3.6”项下方法制备供试品溶液，照上述色谱条件测定绿原酸峰面积。结果，3批样品中绿原酸含量分别为4.57mg·g-1、4.07mg·g-1、5.17mg·g-1，检测结果见表2。
表2三批样品含量测定结果
5、条件筛选
在绿原酸的HPLC含量测定中，对液相条件进行单因素法考察：磷酸浓度（0.1、0.2、0.3、0.4、0.6%）、乙腈-磷酸溶液比例（10:90、11:89、12:88、13:87、15:85）、进样量（5、10、15μL）、流速（0.6、0.8、1.0、1.2、1.5mL·min-1）的影响。
结果表明以乙腈-0.1%磷酸（11：89）为流动相，进样量5μL，流速1.2mL·min-1时HPLC图谱的绿原酸峰形好，分离度好，出峰时间适宜，且阴性对照无干扰。
在供试品处理方法考察中，基于绿原酸属小分子有机酸类成分而易溶于水、乙醇和丙酮的性质，分别对水、50%甲醇、甲醇、70%乙醇4种提取溶剂进行考察：4种溶剂提取液中绿原酸含量分别为3.759、3.768、1.761、3.562mg·g-1。其中，水和50%甲醇提取效果较好，但考虑到水提取液中极性成分较大多，HPLC色谱峰多，容易影响主峰信号，因此采用50%甲醇作为提取溶剂，其提取效果好、色谱信号稳定。
同时考察超声时间（20、30、40min）和溶剂用量（20、30、50、60、70mL），结果表明超声30min即可提取完全，而溶剂用量在20-70mL内对提取率影响不大，因此选用25mL。
附图说明
为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合附图，对本发明作进一步详细的说明，其中
图1为牡荆根的TLC图谱，其他1-3为供试品、4为对照药材、5为阴性对照；
图2为三叉苦的TLC图谱，其他1-3为供试品、4-6为对照药材、7为阴性对照；
图3为山甘草的TLC图谱，其他1-3为供试品、4-6为对照药材、7为阴性对照；
图4为薄荷油的TLC图谱，其他1-3为供试品、4-5为对照药材、6为对照品、7为阴性对照；
图5为金银花的TLC图谱，其他1-3为供试品、4为对照药材、5为绿原酸对照品、6为阴性对照；
图6为含量检测的HPLC图谱，其中图6-A为绿原酸对照品图谱、6-B为供试品图谱、6-C为阴性对照图谱，1为绿原酸出峰。
具体实施方式
实施例1片剂制备
[处方]金银花234g、牡荆根390g、贯众234g、三叉苦234g、葫芦茶234g、山甘草234g、薄荷油2ml。
[制备方法]以上七味，除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成稠膏（d=1.15-1.25，95℃），加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，混匀，压片，即得。
[检测方法]包括如下步骤：
A、牡荆根的TLC鉴别
取所述片剂5g，加入甲醇40ml，超声20min，滤过，减压回收至滤液无醇味，加水20ml溶解后加于D101大孔吸附树脂，以水洗至水洗液近无色，用30%乙醇40mL洗涤后，再用70%乙醇40mL洗脱，收集70%乙醇洗脱液，蒸干，加8mL甲醇使之溶解，作为供试品溶液；
另取牡荆根4g，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述牡荆根的阴性样品组合物，另取缺牡荆根的阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取上述3种溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1∶1∶0.5∶0.5的氯仿-乙酸乙酯-苯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
C、山甘草的TLC鉴别
取所述片剂5g，加无水乙醇40mL，回流提取0.5h，滤过，滤液蒸至近2.4mL，作为供试品溶液；
另取山甘草药材2g，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述山甘草的阴性样品组合物，另取缺山甘草阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各4μL，阴性对照溶液8μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1：0.5的甲苯-乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
实施例2片剂制备
[处方]金银花240g、牡荆根420g、贯众240g、三叉苦240g、葫芦茶240g、山甘草240g、薄荷油4ml。
[制备方法]以上七味，除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2次，第一次加6倍量水，煎煮2小时，第二次加10倍量水，煎煮1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成稠膏（d=1.15-1.25，95℃），加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，混匀，压片，即得。
[检测方法]所述检测方法包括如下步骤：
B、三叉苦的TLC鉴别
取所述片剂5g，加50%乙醇32mL，加热提取0.5h，滤过，滤液回收至无醇味，残渣用8mL水溶解，再用醋酸乙酯萃取2次，每次16mL，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇2.4mL使溶解，作为供试品溶液；
另取三叉苦药材1g，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述三叉苦的阴性样品组合物，另取缺三叉苦阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液8μL，阴性对照溶液、对照品溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为10∶5∶0.05的苯-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置302nm紫外光灯下检视。
D、薄荷油的TLC鉴别
取所述片剂1g，加石油醚3.5ml，密塞振摇数分钟，放置20min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取薄荷素油对照品0.3mL，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成对照药材溶液；
另取薄荷脑对照品，加石油醚制成每1mL含20mg的溶液作为对照品溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述薄荷油的阴性样品组合物，另取缺薄荷油阴性样品1g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各8μL，对照药材溶液、阴性对照溶液各4μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶0.5的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰。
实施例3颗粒剂的制备
[处方]金银花220g、牡荆根380g、贯众220g、三叉苦220g、葫芦茶220g、山甘草220g、薄荷油2ml。
[制备方法]以上七味，除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成稠膏（d=1.15-1.25，95℃），加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，经常规得颗粒剂。
[检测方法]所述检测方法包括如下步骤：
A、牡荆根的TLC鉴别
取所述颗粒剂10g，加入甲醇60ml，超声20min，滤过，减压回收至滤液无醇味，加水30ml溶解后加于D101大孔吸附树脂，以水洗至水洗液近无色，用50%乙醇60mL洗涤后，再用90%乙醇60mL洗脱，收集90%乙醇洗脱液，蒸干，加12mL甲醇使之溶解，作为供试品溶液；
另取牡荆根6g，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述牡荆根的阴性样品组合物，另取缺牡荆根的阴性样品10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取上述3种溶液各6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为3∶3∶2∶2的氯仿-乙酸乙酯-苯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
B、三叉苦的TLC鉴别
取所述颗粒剂10g，加70%乙醇48mL，加热提取2h，滤过，滤液回收至无醇味，残渣用12mL水溶解，再用醋酸乙酯萃取2-3次，每次24mL，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇3.6mL使溶解，作为供试品溶液；
另取三叉苦药材1g，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述三叉苦的阴性样品组合物，另取缺三叉苦阴性样品10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液12μL，阴性对照溶液、对照品溶液各6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20∶15∶0.2的苯-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置302nm紫外光灯下检视。
E、金银花的TLC鉴别
取所述颗粒剂0.4g，加甲醇4mL，密塞振摇数分钟，放置20min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取金银花对照药材0.3g，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成金银花对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述金银花的阴性样品组合物，另取缺金银花阴性样品0.4g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；
照TLC法试验，吸取上述4种溶液各8μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6∶2∶2的乙酸丁酯-甲酸-水静置后的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
实施例4胶囊剂制备
[处方]金银花200g、牡荆根450g、贯众200g、三叉苦250g、葫芦茶200g、山甘草250g、薄荷油0.5ml。
[制备方法]以上七味，除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2次，第一次加9倍量水，煎煮2小时，第二次加9倍量水，煎煮1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成稠膏（d=1.15-1.25，95℃），加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，经常规得胶囊。
[检测方法]所述检测方法包括如下步骤：
C、山甘草的TLC鉴别
取所述胶囊剂10g，加无水乙醇60mL，回流提取2h，滤过，滤液蒸至近3.6mL，作为供试品溶液；
另取山甘草药材2g，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述山甘草的阴性样品组合物，另取缺山甘草阴性样品10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各6μL，阴性对照溶液12μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5：2的甲苯-乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
D、薄荷油的TLC鉴别
取所述胶囊剂5g，加石油醚7ml，密塞振摇数分钟，放置20min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取薄荷素油对照品0.3mL，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成对照药材溶液；
另取薄荷脑对照品，加石油醚制成每1mL含20mg的溶液作为对照品溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述薄荷油的阴性样品组合物，另取缺薄荷油阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各12μL，对照药材溶液、阴性对照溶液各6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为25∶2的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰。
F、金银花的HPLC含量检测
精密称取绿原酸对照品适量，加40%甲醇制成每1ml含30μg的溶液，作为对照品溶液；
取所述中药组合物0.4g，置具塞锥形瓶中，精密加入40%甲醇20mL，超声处理20min，放冷，再称定重量，用40%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；
色谱条件如下：
色谱柱：依利特ODS-BP色谱柱；
流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（10：90）；
柱温：20℃；
流速：1mL·min-1；
进样量：5μL；
检测波长：327nm；
理论塔板数按绿原酸色谱峰计应不低于5000。
实施例5片剂制备
[处方]金银花250g、牡荆根350g、贯众250g、三叉苦200g、葫芦茶250g、山甘草200g、薄荷油5ml。
[制备方法]以上七味，除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成稠膏（d=1.15-1.25，95℃），加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，混匀，压片，即得片剂。
[检测方法]所述检测方法包括如下步骤：
A、牡荆根的TLC鉴别
取所述片剂5g，加入甲醇50ml，超声30min，滤过，减压回收至滤液无醇味，加水25ml溶解后加于D101大孔吸附树脂，以水洗至水洗液近无色，用40%乙醇50mL洗涤后，再用80%乙醇50mL洗脱，收集80%乙醇洗脱液，蒸干，加10mL甲醇使之溶解，作为供试品溶液；
另取牡荆根5g，同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述牡荆根的阴性样品组合物，另取缺牡荆根的阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为2.4∶2∶1∶1的氯仿-乙酸乙酯-苯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
B、三叉苦的TLC鉴别
取所述片剂5g，加60%乙醇40mL，加热提取1h，滤过，滤液回收至无醇味，残渣用10mL水溶解，再用醋酸乙酯萃取3次，每次20mL，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇3mL使溶解，作为供试品溶液；
另取三叉苦药材1g，同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述三叉苦的阴性样品组合物，另取缺三叉苦阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液10μL，阴性对照溶液、对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶10∶0.1的苯-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置302nm紫外光灯下检视。
C、山甘草的TLC鉴别
取所述片剂5g，加无水乙醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液蒸至近3mL，作为供试品溶液；
另取山甘草药材2g，同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述山甘草的阴性样品组合物，另取缺山甘草阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各5μL，阴性对照溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为3：1的甲苯-乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
E、金银花的TLC鉴别
取所述片剂0.6g，加甲醇6mL，密塞振摇数分钟，放置40min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取金银花对照药材0.5g，按照所述供试品溶液的制备，按比例取各试剂同法制成金银花对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述金银花的阴性样品组合物，另取缺金银花阴性样品0.6g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；
照TLC法试验，吸取上述4种溶液各12μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为8∶3∶3的乙酸丁酯-甲酸-水静置后的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。
F、金银花的HPLC含量检测
精密称取绿原酸对照品适量，加60%甲醇制成每1ml含60μg的溶液，作为对照品溶液；
取所述片剂0.6g，置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇30mL，超声处理40min，放冷，再称定重量，用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；
色谱条件如下：
色谱柱：依利特ODS-BP色谱柱；
流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（15：85）；
柱温：30℃；
流速：1.5mL·min-1；
进样量：10μL；
检测波长：327nm；
理论塔板数按绿原酸色谱峰计应不低于5000。
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种治疗风热感冒的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述药物组合物的原料药组成为：金银花200-250重量份、牡荆根350-450重量份、贯众200-250重量份、三叉苦200-250重量份、葫芦茶200-250重量份、山甘草200-250重量份、薄荷油0.5-5体积份；
所述质量检测方法包括如下鉴别方法：
A、牡荆根的TLC鉴别
取所述中药组合物5-10g，加入甲醇40-60ml，超声20-30min，滤过，减压回收至滤液无醇味，加水20-30ml溶解后加于D101大孔吸附树脂，以水洗至水洗液近无色，用30-50%乙醇40-60mL洗涤后，再用70-90%乙醇40-60mL洗脱，收集70-90%乙醇洗脱液，蒸干，加8-12mL甲醇使之溶解，作为供试品溶液；
另取牡荆根4-6g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述牡荆根的阴性样品组合物，另取缺牡荆根的阴性样品5-10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取上述3种溶液各4-6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1-3∶1-3∶0.5-2∶0.5-2的氯仿-乙酸乙酯-苯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365 nm紫外光灯下检视。
2.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，还包括如下鉴别方法中的至少一种：
B、三叉苦的TLC鉴别
取所述中药组合物5-10g，加50-70%乙醇32-48mL，加热提取0.5-2h，滤过，滤液回收至无醇味，残渣用8-12mL水溶解，再用醋酸乙酯萃取2-3次，每次16-24mL，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇2.4-3.6mL使溶解，作为供试品溶液；
另取三叉苦药材1g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述三叉苦的阴性样品组合物，另取缺三叉苦阴性样品5-10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液8-12μL，阴性对照溶液、对照药材溶液各4-6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为10-20∶5-15∶0.05-0.2的苯-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置302 nm紫外光灯下检视；
C、山甘草的TLC鉴别
取所述中药组合物5-10g，加无水乙醇40-60mL，回流提取0.5-2h，滤过，滤液蒸至近2.4-3.6mL，作为供试品溶液；
另取山甘草药材2g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述山甘草的阴性样品组合物，另取缺山甘草阴性样品5-10g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各4-6μL，阴性对照溶液8-12μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为1-5：0.5-2的甲苯-乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365 nm紫外光灯下检视；
D、薄荷油的TLC鉴别
取所述中药组合物1-5g，加石油醚3.5-7ml，密塞振摇数分钟，放置20-30min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取薄荷素油对照品0.3mL，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
另取薄荷脑对照品，加石油醚制成每1mL含20mg的溶液作为对照品溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述薄荷油的阴性样品组合物，另取缺薄荷油阴性样品1-5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各8-12μL，对照药材溶液、阴性对照溶液各4-6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15-25∶0.5-2的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰。
3.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述鉴别方法具体如下：
A、牡荆根的TLC鉴别
取所述中药组合物5g，加入甲醇50ml，超声30min，滤过，减压回收至滤液无醇味，加水25ml溶解后加于D101大孔吸附树脂，以水洗至水洗液近无色，用40%乙醇50mL洗涤后，再用80%乙醇50mL洗脱，收集80%乙醇洗脱液，蒸干，加10mL甲醇使之溶解，作为供试品溶液；
另取牡荆根5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述牡荆根的阴性样品组合物，另取缺牡荆根的阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取上述3种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为2.4∶2∶1∶1的氯仿-乙酸乙酯-苯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365 nm紫外光灯下检视。
4.根据权利要求2所述的质量检测方法，其特征在于，所述鉴别方法具体如下：
B、三叉苦的TLC鉴别
取所述中药组合物5g，加60%乙醇40mL，加热提取1h，滤过，滤液回收至无醇味，残渣用10mL水溶解，再用醋酸乙酯萃取3次，每次20mL，合并萃取液，蒸干，残渣加甲醇3mL使溶解，作为供试品溶液；
另取三叉苦药材1g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述三叉苦的阴性样品组合物，另取缺三叉苦阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液10μL，阴性对照溶液、对照药材溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15∶10∶0.1的苯-乙酸乙酯-甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置302 nm紫外光灯下检视；
C、山甘草的TLC鉴别
取所述中药组合物5g，加无水乙醇50mL，回流提取1h，滤过，滤液蒸至近3mL，作为供试品溶液；
另取山甘草药材2g，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述山甘草的阴性样品组合物，另取缺山甘草阴性样品5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5μL，阴性对照溶液10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为3：1的甲苯-乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，置365 nm紫外光灯下检视；
D、薄荷油的TLC鉴别
取所述中药组合物3g，加石油醚5ml，密塞振摇数分钟，放置30min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取薄荷素油对照品0.3mL，按照所述供试品溶液的制备同法制成对照药材溶液；
另取薄荷脑对照品，加石油醚制成每1mL含20mg的溶液作为对照品溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述薄荷油的阴性样品组合物，另取缺薄荷油阴性样品3g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
照TLC法试验，吸取供试品溶液和对照品溶液各10μL，对照药材溶液、阴性对照溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为19∶1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
5.根据权利要求1或2所述的质量检测方法，其特征在于，还包括下述金银花的TLC鉴别和/或金银花的HPLC含量检测方法；
E、金银花的TLC鉴别
取所述中药组合物0.4-0.6g，加甲醇4-6mL，密塞振摇数分钟，放置20-40min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取金银花对照药材0.3-0.5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成金银花对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述金银花的阴性样品组合物，另取缺金银花阴性样品0.4-0.6g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；
照TLC法试验，吸取上述4种溶液各8-12μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6-8∶2-3∶2-3的乙酸丁酯-甲酸-水静置后的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365 nm紫外光灯下检视；
F、金银花的HPLC含量检测
精密称取绿原酸对照品适量，加40-60%甲醇制成每1ml含30-60μg的溶液，作为对照品溶液；
取所述中药组合物0.4-0.6g，置具塞锥形瓶中，精密加入40-60%甲醇20-30mL，超声处理20-40min，放冷，再称定重量，用40-60%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；
色谱条件如下：
色谱柱：依利特ODS-BP色谱柱；
流动相：体积比为10-15：85-95的乙腈-0.1%磷酸溶液；
柱温：20-30℃；
流速：1-1.5mL·min-1；
进样量：5-10μL；
检测波长：327nm；
理论塔板数按绿原酸色谱峰计应不低于5000。
6.根据权利要求5所述的质量检测方法，其特征在于，还包括下述金银花的TLC鉴别和/或金银花的HPLC含量检测方法；
E、金银花的TLC鉴别
取所述中药组合物0.5g，加甲醇5mL，密塞振摇数分钟，放置30min，滤过，滤液作为供试品溶液；
另取金银花对照药材0.4g，按照所述供试品溶液的制备同法制成金银花对照药材溶液；
按所述药物组合物的原料药处方配制不含所述金银花的阴性样品组合物，另取缺金银花阴性样品0.5g，按照所述供试品溶液的制备同法制成阴性对照溶液；
再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液；
照TLC法试验，吸取上述4种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为7∶2.5∶2.5的乙酸丁酯-甲酸-水静置后的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365 nm紫外光灯下检视；
F、金银花的HPLC含量检测
精密称取绿原酸对照品适量，加50%甲醇制成每1ml含43.20μg的溶液，作为对照品溶液；
取所述中药组合物0.5g，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，超声处理30min，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；
色谱条件如下：
色谱柱：依利特ODS-BP色谱柱；
流动相：体积比为11：89的乙腈-0.1%磷酸溶液；
柱温：25℃；
流速：1.2mL·min-1；
进样量：5μL；
检测波长：327nm；
理论塔板数按绿原酸色谱峰计应不低于5000。
7.根据权利要求1或2所述的质量检测方法，其特征在于，所述药物组合物的原料药组成为：
金银花240重量份、牡荆根420重量份、贯众240重量份、三叉苦240重量份、葫芦茶240重量份、山甘草240重量份、薄荷油4体积份；或者
金银花220重量份、牡荆根380重量份、贯众220重量份、三叉苦220重量份、葫芦茶220重量份、山甘草220重量份、薄荷油2体积份；或者
金银花234重量份、牡荆根390重量份、贯众234重量份、三叉苦234重量份、葫芦茶234重量份、山甘草234重量份、薄荷油2体积份。
8.根据权利要求1或2所述的质量检测方法，其特征在于，所述药物组合物添加常规辅料按照常规工艺直接或间接制成临床上可接受的片剂、口服液、胶囊、颗粒剂或注射剂。
9.根据权利要求8所述的质量检测方法，其特征在于，所述药物组合物为片剂，其制备方法为：除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2-3次，每次加6-10倍量水，煎煮1-3小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成浸膏，加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，混匀，压片，即得。
10.根据权利要求9所述的质量检测方法，其特征在于，所述药物组合物为片剂，其制备方法为：除薄荷油外，金银花粉碎成细粉，其余牡荆根、贯众、三叉苦、葫芦茶和山甘草加水煎煮2次，第一次加10倍量水，煎煮2小时，第二次加8倍量水，煎煮1小时，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成浸膏，加上述金银花细粉及辅料适量，制成颗粒，干燥，喷加薄荷油，混匀，压片，即得。
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