CN103076403A

CN103076403A - 一种治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法

Info

Publication number: CN103076403A
Application number: CN2012103741143A
Authority: CN
Inventors: 程吉祥
Original assignee: YUANCHEN PHARMACEUTICAL CO Ltd GUIZHOU PROV
Current assignee: YUANCHEN PHARMACEUTICAL CO Ltd GUIZHOU PROV
Priority date: 2012-10-07
Filing date: 2012-10-07
Publication date: 2013-05-01
Anticipated expiration: 2032-10-07
Also published as: CN103076403B

Abstract

本发明公开了一种治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，包括色谱条件与系统适用性实验：对照品溶液的制备：供试品溶液的制备：取本品约2g，精密加入甲醇25ml，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置50ml圆底烧瓶中，挥去甲醇，加2.5mol/L硫酸溶液10ml，超声处理5分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，分取三氯甲烷液，酸液用三氯甲烷振摇提取2次，合并三氯甲烷液，脱水，挥去三氯甲烷，残渣精密加甲醇10ml，微热使溶解，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明既能保证产品的药效，又能使产品质量稳定。

Description

一种治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法

技术领域

本发明属于中药技术领域，特别涉及治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法。

背景技术

治疗下尿路感染胶囊，处方重量配比：栀子18～30 、黄芪18～30、白花蛇舌草15～26、麦冬15～26 、苦木8～20、冬葵果15～26，制法：以上六味，栀子、白花蛇舌草、苦木用60%乙醇加热回流提取二次，每次2小时，滤过，合并滤液（药渣备用），滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.30～1.35（60℃）的清膏，备用；黄芪、冬葵果、麦冬与上述药渣混合加水煎煮二次，每次2小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩至相对密度为1.10～1.15（60℃），加入乙醇使含醇量达60%，静置24小时后滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.30～1.35（60℃）的清膏，与上述栀子、白花蛇舌草、苦木醇提清膏混匀，干燥，粉碎成细粉，加入适量淀粉，用乙醇制软材，制粒，干燥，加入适量硬脂酸镁，混匀，装胶囊，制成1000粒，即得。

具清热利湿，利尿通淋，益气养阴的功效；用于下焦湿热兼气阴两虚型淋症。症见小便短赤，淋沥涩痛，尿黄浑浊，小腹疼痛，腰膝酸软，神疲乏力，反复发作。下尿路感染见上述证候者。方中君药栀子苦、寒，归心、肺、三焦经，功能泻火除烦、清热利湿、凉血解毒。臣药有黄芪、白花蛇舌草、麦冬，黄芪甘、微温，功擅益气升阳、利水消肿，可治一切气虚血亏之证，且能利小便；白花蛇舌草，味苦、甘，性寒，功能清热解毒，利湿，通淋；麦冬，味甘，微苦，性微寒，功能养阴生津；方中苦木具清热利湿解毒功能。

现有的治疗下尿路感染胶囊，没有质量标准，不利于生产中的质量控制。

发明内容

本发明的目的在于克服上述缺点而提供的一种方法准确、可靠、易于操作、重现性好，既能保证产品的药效，又能使产品质量稳定的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法。

本发明的一种治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，包括如下步骤：

（1）色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-冰醋酸(14∶86∶0.2)为流动相；检测波长为238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于3000；

（2）对照品溶液的制备：精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.04mg的溶液，即得；

（3）供试品溶液的制备：取本品内容物，研细，精密称取约0.1g，置25ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理(功率250W，频率40kHz)20分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含栀子以栀子苷(C₁₇H₂₄O₁₀)计，不得少于2.5mg。

上述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中栀子鉴别方法为：取本品内容物2g，加溶剂（50%甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯）20ml，超声处理或加热回流40分钟，滤过，蒸干滤液，残渣加溶剂（50%甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯）2ml使溶解，作为供试品溶液。另取栀子对照药材1g，加溶剂（50%甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯）10ml，同法制成对照药材溶液。再取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙腈-甲醇-浓氨试液（20-5：10-2：10-2：2-0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

上述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中黄芪鉴别方法为：取本品内容物5g，加水30ml，超声处理15分钟，水溶液连同残渣一起移置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，分取正丁醇液（水液备用），用溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）饱和的水洗涤2次，每次20ml，分取溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）液（水洗液与上述水液合并，留作麦冬鉴别用），蒸干，残渣加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）15ml使溶解，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100～120目，10g，内径10～15mm）上，用溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）30ml洗脱，收集洗脱液，滤过，滤液蒸干，残渣加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材3g，加入溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）20ml，超声处理或加热回流1小时，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100～120目，5g，内径10～15mm）上，用40%甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）振摇提取2次，每次20ml，合并溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）液，用溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，蒸干，残渣加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。再取黄芪甲苷对照品，加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（30-10：10-5：5-2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

上述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中白花蛇舌草方法为：取本品内容物5g，加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）40ml，加热回流或超声处理40分钟，滤过，取滤液，加盐酸2ml，加热回流或超声处理1小时后浓缩至约5ml，加水20ml，用石油醚（60～90℃）30ml提取，提取液蒸干，残渣加溶剂（甲醇、乙醇或正丁醇）2ml使溶解，作为供试品溶液。再取白花蛇舌草对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述二种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷--甲醇（50-20：5-0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸试液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

上述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中麦冬鉴别方法为：取黄芪鉴别项下溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）提取后的水液，浓缩至约20ml，加盐酸1ml，加热回流或超声处理1小时，放冷，用溶剂（三氯甲烷、甲醇或乙醇）振摇提取2次，每次20ml，分取溶剂（三氯甲烷、甲醇或乙醇），浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材1g，加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）20ml，加热回流或超声处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）振摇提取3次，每次20ml，弃去溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）液，水液加盐酸1ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮（10-5：5-1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

上述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中苦木鉴别方法为：取本品内容物5g，研细，加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）30ml，浸渍过夜或加热回流或超声处理1小时，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取苦木对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(20-10：5-1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。

本发明与现有技术相比，具有明显的有益效果，由以上技术方案可知：建立栀子、黄芪、麦冬、苦木、白花蛇舌草五味药材的定性鉴别方法，同时建立了栀子中栀子苷（C17H24O10）的含量测定方法，并确定每粒含栀子以栀子苷（C17H24O10）计，不得少于2.5mg的定量指标。本发明对处方中君、臣、佐药均进行定性鉴别，对君药栀子还进行了定量测定，以保证产品的内在质量，从而保证药品疗效。以更好的指导生产，使工艺控制更加严格合理，从而有效地控制产品质量。

具体实施方式

以下通过具体实验例来进一步说明本发明方法的有益效果。

实验例：

（一）栀子、黄芪、白花蛇舌草、麦冬、苦木的定性鉴别方法如下：

（1）栀子及栀子苷的薄层色谱鉴别：栀子主含栀子苷（gardenoside）、去羟栀子苷等。故采用加溶剂（甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯）20ml，摇匀，超声处理或加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加溶剂（50%甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯）2ml使溶解，作为供试品溶液。另取缺栀子的阴性模拟制剂2g，同法制成阴性对照溶液。再另取栀子对照药材1g，加溶剂（50%甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯）10ml，同法制成对照药材溶液。再取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-乙腈-甲醇-浓氨试液（20-5：10-2：10-2：2-0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性对照无干扰。

（2）黄芪及黄芪甲苷的薄层色谱鉴别：黄芪含多糖、黄芪甲苷等成分。采用水30ml，超声处理15分钟或加热回流30分钟，水溶液连同残渣一起移置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，分取正丁醇液（水液备用），用溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）饱和的水洗涤2次，每次20ml，分取溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）液（水洗液与上次水液合并，留作[鉴别]（4）用），蒸干，残渣加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）15ml，溶解，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100～120目，10g，内径10～15mm）上，用溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）30ml洗脱，收集洗脱液，滤过，滤液蒸干，残渣加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）1ml使溶解，作为供试品溶液。另取缺黄芪的阴性模拟制剂5g，同法制成阴性对照溶液。再取黄芪对照药材3g，加甲醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100～120目，5g，内径10～15mm）上，用40%甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）振摇提取2次，每次20ml，合并溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）液，用溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，蒸干，残渣加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。再取黄芪甲苷对照品，加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（30-10：10-5：5-2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。阴性对照无干扰。

（3）白花蛇舌草的薄层色谱鉴别：取本品内容物5g，加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）40ml，加热回流或超声处理40分钟，滤过，取滤液，加盐酸2ml，加热回流或超声处理1小时后浓缩至约5ml，加水20ml，用石油醚（60～90℃）30ml提取，提取液蒸干，残渣加溶剂（甲醇、乙醇、正丁醇）2ml使溶解，作为供试品溶液。另取缺白花蛇舌草药材的阴性模拟制剂5g，同法制成阴性对照溶液。再取白花蛇舌草对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录VI B）试验，吸取上述二种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷--甲醇（50-20：5-0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸试液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰。

（4）麦冬的薄层色谱鉴别：取[鉴别]（2）项下溶剂（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）提取后的水液，浓缩至约20ml，加盐酸1ml，加热回流或超声处理1小时，放冷，用溶剂（三氯甲烷、甲醇或乙醇）振摇提取2次，每次20ml，分取溶剂（三氯甲烷、甲醇或乙醇），浓缩至约1ml作为供试品溶液。另取缺麦冬的阴性模拟制剂5g，同法制成阴性对照溶液。再取麦冬对照药材1g，加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）20ml，加热回流或超声处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）振摇提取3次，每次20ml，弃去（正丁醇、醋酸乙酯或乙醚）液，水液加盐酸1ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮（10-5：5-1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。阴性对照无干扰。

（5）苦木的薄层色谱鉴别：取本品内容物5g，研细，加溶剂（甲醇、乙醇、水或正丁醇）30ml，浸渍过夜（加热回流或超声处理1小时），滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取缺苦木的阴性模拟制剂5g，同法制成阴性对照溶液。再取苦木对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(20-10：5-1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。阴性对照无干扰。

（二）栀子含量测定：

（1）仪器与试药

仪器高效液相色谱仪：日本岛津LC-10ATvp单元高压泵，SPD-10Avp紫外-可见检测器，7725i手动进样器，南宁威玛龙色谱科技有限公司WML-2010LC色谱数据工作站，十万分之一电子分析天平。

试药栀子苷对照品（由中检所提供，批号：0749-9806，110749-200410）；甲醇为色谱纯；10批成品样品(由本单位提供)。

（2）色谱条件的选择

色谱柱：迪马钻石C18色谱柱，4.6×200mm，5um，带菲罗门C18保护柱芯，4×3mm，5um；流动相：乙腈-水-冰醋酸(14：86：0.2)；柱温：35℃；流速1ml/min；检测波长：239nm。在此色谱条件下，栀子苷与样品中其它组分分离良好，理论板数按栀子苷对照品峰计大于3000。

（3）对照品溶液的制备

精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.04mg的溶液，即得。

（4）供试品溶液的制备

取胶囊内容物，研细，精密称取约0.1g，置25ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理20min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃取初滤液，取续滤液作为供试品溶液。

（5）线性关系的考察

精密称取栀子苷对照品10.05mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取10ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得浓度为0.0402mg/ml的对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液2ml、4ml、8ml、10ml、12ml、16ml，分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定栀子苷峰面积，以对照品进样量X(mg)为横座标、峰面积值Y(mv.s)为纵座标，绘制标准曲线，结果见表1。

Figure 2012103741143100002DEST_PATH_IMAGE002

测定结果表明，栀子苷对照品在进样量0.0804μg~0.6432μg范围内呈良好的线性关系。

（6）空白试验

精密吸取缺栀子的阴性样品，按供试品溶液制备方法操作，依法进样测定，记录色谱图。结果，在对照品相同保留时间处无吸收峰。表明样品中无干扰栀子苷的成分存在。

（7）样品测定

取胶囊内容物（10个批号），精密称取约0.1g，置25ml量瓶中，加溶剂（甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯）适量，超声处理或加热回流20min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃取初滤液，取续滤液作为供试品溶液。分别精密吸取供试品溶液10 ml，按上述色谱条件测定，计算样品中栀子苷的含量。结果见表2

上述测定结果表明，实施例1-10胶囊中栀子苷(C17H24O10)含量均大于2.5mg/粒。

得到本发明的栀子含量测定方法，该方法包括下列步骤：

色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-冰醋酸(14∶86：0.2)为流动相；检测波长为238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.04mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取装量差异项下的内容物，研细，精密称取约0.1g，置25ml量瓶中，加甲醇适量，超声处理(功率250W，频率40kHz)20分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品每粒含栀子以栀子苷(C₁₇H₂₄O₁₀)计，不得少于2.5mg。

实施例：

一种治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，包括以下步骤：

（一）栀子、黄芪、白花蛇舌草、麦冬、苦木鉴别：

（1）取本品内容物2g，加50%甲醇20ml，超声处理40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取栀子对照药材1g，加50%甲醇10ml，同法制成对照药材溶液。再取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷-乙腈-甲醇-浓氨试液（7：3：2：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

（2）取本品内容物5g，加水30ml，超声处理15分钟，水溶液连同残渣一起移置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，分取正丁醇液（水液备用），用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，分取正丁醇液（水洗液与上次水液合并，留作[鉴别]（4）用），蒸干，残渣加甲醇15ml使溶解，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100～120目，10g，内径10～15mm）上，用甲醇30ml洗脱，收集洗脱液，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪对照药材3g，加甲醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液加于中性氧化铝柱（100～120目，5g，内径10～15mm）上，用40%甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。再取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下及紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

（3）取本品内容物5g，加乙醇40ml，加热回流40分钟，滤过，取滤液，加盐酸2ml，加热回流1小时后浓缩至约5ml，加水20ml，用石油醚（60～90℃）30ml提取，提取液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。再取白花蛇舌草对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VI B）试验，吸取上述二种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷--甲醇（40：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸试液，在110℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

（4）取[鉴别]（2）项下正丁醇提取后的水液，浓缩至约20ml，加盐酸1ml，加热回流1小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml，分取三氯甲烷溶液，浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材1g，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，弃去正丁醇液，水液加盐酸1ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-丙酮（4：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

（5）取本品内容物5g，研细，加甲醇30ml，浸渍过夜，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取苦木对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(17：3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。

（二）栀子的含量测定

照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录Ⅵ D)测定。

测定结果：本品每粒含栀子以栀子苷(C₁₇H₂₄O₁₀)计，大于2.5mg。

Claims

1. 一种治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，包括如下步骤：

（1）色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈∶水∶冰醋酸=14∶86∶0.2为流动相；检测波长为238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于3000；

（3）供试品溶液的制备：取本品内容物，研细，精密称取约0.1g，置25ml量瓶中，加甲醇适量，功率250W，频率40kHz超声处理20分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，本品每粒含栀子以栀子苷计，不得少于2.5mg。

2.如权利要求1所述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中栀子鉴别方法为：取本品内容物2g，加50%甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯溶剂20ml，超声处理或加热回流40分钟，滤过，蒸干滤液，残渣加50%甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯溶剂2ml使溶解，作为供试品溶液；另取栀子对照药材1g，加50%甲醇、乙醇、正丁醇或醋酸乙酯溶剂10ml，同法制成对照药材溶液；再取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含4mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以三氯甲烷：乙腈：甲醇：浓氨试液=20-5：10-2：10-2：2-0.2为展开剂，展开，取出，晾干，置254nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3.如权利要求1所述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中黄芪鉴别方法为：取本品内容物5g，加水30ml，超声处理15分钟，水溶液连同残渣一起移置分液漏斗中，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，分取正丁醇液，水液备用；用正丁醇、醋酸乙酯或乙醚溶剂饱和的水洗涤2次，每次20ml，分取正丁醇、醋酸乙酯或乙醚溶剂液蒸干，水洗液与上述水液合并，留作麦冬鉴别用；残渣加甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂15ml使溶解，滤过，滤液加于100～120目、10g、内径10～15mm中性氧化铝柱上，用甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂30ml洗脱，收集洗脱液，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪对照药材3g，加入甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂20ml，超声处理或加热回流1小时，滤过，滤液加于100～120目、5g、内径10～15mm中性氧化铝柱上，用40%甲醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇、醋酸乙酯或乙醚溶剂振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇、醋酸乙酯或乙醚溶剂液，用正丁醇、醋酸乙酯或乙醚溶剂饱和的水洗涤2次，每次20ml，弃去水液，蒸干，残渣加甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂0.5ml使溶解，作为对照药材溶液；再取黄芪甲苷对照品，加甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇：水=30-10：10-5：5-2的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下及365nm紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。

4.如权利要求1所述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中白花蛇舌草方法为：取本品内容物5g，加甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂40ml，加热回流或超声处理40分钟，滤过，取滤液，加盐酸2ml，加热回流或超声处理1小时后浓缩至约5ml，加水20ml，用60～90℃石油醚30ml提取，提取液蒸干，残渣加甲醇、乙醇或正丁醇溶剂2ml使溶解，作为供试品溶液；再取白花蛇舌草对照药材2g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述二种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇=50-20：5-0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸试液，在110℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

5.如权利要求1所述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中麦冬鉴别方法为：取黄芪鉴别项下正丁醇、醋酸乙酯或乙醚溶剂提取后的水液，浓缩至约20ml，加盐酸1ml，加热回流或超声处理1小时，放冷，用三氯甲烷、甲醇或乙醇溶剂振摇提取2次，每次20ml，分取三氯甲烷、甲醇或乙醇溶剂，浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1g，加甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂20ml，加热回流或超声处理1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇、醋酸乙酯或乙醚溶剂振摇提取3次，每次20ml，弃去正丁醇、醋酸乙酯或乙醚溶剂液，水液加盐酸1ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：丙酮=10-5：5-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。

6.如权利要求1所述的治疗下尿路感染胶囊的质量检测方法，其中苦木鉴别方法为：取本品内容物5g，研细，加甲醇、乙醇、水或正丁醇溶剂30ml，浸渍过夜或加热回流或超声处理1小时，滤过，滤液浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取苦木对照药材1g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷：甲醇=20-10：5-1为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。