CN104825872B - 一种清瘟败毒超微粉的常温制备及薄层鉴别方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种清瘟败毒超微粉的常温制备及薄层鉴别方法。先将各组分原料进行称取，用粉碎机进行粗粉碎，混合之后用双向气流超微粉筛机进行超微粉碎，即得到清瘟败毒超微粉，此工艺生产的清瘟败毒超微粉耗时短，产品得率高。用乙醇加热回流提取芒果苷，以芒果苷为对照品，聚酰胺薄膜为薄层板，乙醇‑丙酮‑水‑乙酸乙酯为展开剂，在365nm下检视，可见供试品在对照品的位置出现相同颜色的斑点。该方法可以作为清瘟败毒超微粉中知母的质量控制方法。

Description

一种清瘟败毒超微粉的常温制备及薄层鉴别方法

技术领域

本发明涉及一种清瘟败毒超微粉的制备工艺和薄层鉴别方法，特别是涉及一种清瘟败毒超微粉的常温制备工艺和方中知母成分芒果苷的薄层鉴别方法。

背景技术

清瘟败毒散临床主要用于畜禽流行性出血热、败血症、毒血症、尿毒症等。但现有记载的该方在应用于家禽养殖时，起效慢，药效还不够理想，急需研制一种新型的清氲败毒散。

超微粉粉碎技术是为适应现代技术要求而发展起来的新的粉碎技术，中药经超微粉碎后，具有极小的体积，因而它极易吸附于动物肠壁而增加吸收率，生物利用度得到极大提高。常规的超微粉碎方法是通过球磨机、棒磨机等机械力通过剪切、碰撞、挤压等方式将药物颗粒粉碎至40μm以下，但该方法效率低、耗能大、且产生大量热量，影响药物稳定性。低温超微粉碎方法是将药物置于超低温条件下将物料冷冻至脆化或玻璃体温度之下，使其成为脆性状态，然后通过机械粉碎或气流粉碎方式进行超微粉碎。这种方法优点是粉碎速度快，可以最大限度地保留药材有效成分，但是成本较高，不符合养殖业的实际情况。本发明采用的双向气流粉筛机，属于气流式超微粉碎的一种，通过喷嘴产生的高速气流作为颗粒的载体，颗粒与颗粒之间或颗粒与固定板之间发生冲击性积压、磨擦和剪切等作用，从而达到粉碎的目的。由于是循环式双气流设计，没有达到粒径要求的颗粒会再次被吹至粉碎仓进行粉碎，因此不会产生大量热量，常温即可进行大规模生产。

清瘟败毒超微粉是将清瘟败毒散进一步粉碎得到的超微粉体，可以增加药物疗效，减少药物用量，更加安全环保，在兽医临床上有巨大的应用潜力。此外，目前关于清瘟败毒超微粉的质量标准研究较少，即使有一些鉴别方法，由于薄层色谱鉴别长时间测定结果存在偏差以及显色不明显等缺陷而实际应用效果不佳。对此，本发明还同时研究了一种知母成分芒果苷的薄层鉴别方法，为其质量标准建立提供依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一种清瘟败毒超微粉的常温制备方法，以及清瘟败毒超微粉中知母成分芒果苷的薄层鉴别方法。本发明的目的通过以下过程实现。

本发明的清瘟败毒超微粉的常温制备工艺包括如下步骤：

步骤1、将各原料按以下重量份数进行称取：石膏110～120、地黄20～25、膨化处理后的水牛角50～60、黄连15～20、栀子22～30、牡丹皮15～20、黄芩20～25、赤芍20～22、玄参20～25、知母25～30、连翘25～30、桔梗20～25、甘草12～15、淡竹叶25～30；

步骤2、将称取后的上述原料用粉碎机进行粗粉碎，于70～80℃烘干至水分质量百分比在6％以下，然后用双向气流超微粉筛机在常温下进行超微粉碎，将通过250～300目筛网筛分的药物进行收集，再混合之后即得到清瘟败毒超微粉。

步骤3、取少量步骤2制备的清瘟败毒超微粉，加入乙醇，配成清瘟败毒超微粉浓度为5～6g/mL的乙醇溶液，加热回流1小时，放冷，过滤，取续滤液作为供试品溶液。

步骤4、取芒果苷对照品，加稀乙醇制成1mL含0.5mg芒果苷对照品的溶液，作为对照品溶液。

步骤5、薄层色谱鉴别方法：吸取供试品溶液和对照品溶液各4μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙醇-丙酮-水-乙酸乙酯为展开剂，其中四者质量比为1～1.5：1：1～1.5：1，展开，取出，晾干，其中薄层色谱板上喷以质量浓度为3～6％的硫酸甲醇溶液作为荧光增强剂。

步骤6、将置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，当显相同颜色的荧光斑点，则清瘟败毒超微粉合格。

进一步地，原料重量百分比为石膏120、地黄25、膨化处理后的水牛角60、黄连20、栀子30、牡丹皮15、黄芩25、赤芍20、玄参25、知母30、连翘30、桔梗25、甘草12、淡竹叶25。

进一步地，用粉碎机进行粗粉碎后混合，80℃烘干至水分质量百分比在6％以下。

进一步地，用双向气流超微粉筛机进行超微粉碎，过300目筛网进行收集。

进一步地，步骤3中配成清瘟败毒超微粉浓度为5g/mL的乙醇溶液。

进一步地，乙醇-丙酮-水-乙酸乙酯为展开剂，其中四者质量比为1：1：1：1。

结果显示，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，而阴性样品则无。

其中，双向气流超微粉筛机特征在于：其特征在于：包括机壳(1)，在所述机壳(1)内腔中部设置有开口向下的筛筒(2)，所述筛筒(2)的筒口与设置在机壳(1)下部的漏斗(3)上开口相衔接；机壳(1)内腔通过上部的负压室(4)与外设引风机(5)相连通；在位于筛筒(2)与机壳(1)之间的区域设置有由横管(6)和立管(7)构成的门字形旋转喷气管，所述门字形旋转喷气管的横管(6)中部与驱动电机(8)传动联接；在筛筒(2)中间位置垂直设置有鼓风管(9)，所述鼓风管(9)的出风口穿过筛筒(2)与门字形旋转喷气管的横管(6)中部相连通，并通过滚动轴承(10)与门字形旋转喷气管的横管(6)滚动连接；鼓风管(9)的进风口延伸出所述漏斗(3)侧壁之外与外设鼓风机(11)的鼓风口相连通；在筛筒(2)内设置有进料管(12)，在所述进料管(12)的出料口上方设置有缓冲伞(13)，进料管(12)的进料口延伸出漏斗(3)侧壁之外；所述门字形旋转喷气管的喷气口为沿所述横管(6)、立管(7)轴向开设在其管壁上的通槽(14)，所述通槽(14)的槽口朝着所述筛筒(2)方向开设；或者所述门字形旋转喷气管的喷气口为沿所述横管(6)、立管(7)轴向间隔排列开设在其管壁上的条形孔(15)；所述条形孔(15)的孔口朝着所述筛筒(2)方向开设。

本发明的优点在于：

1、本发明在现有清瘟败毒配方的基础上对各种方剂进行加减，从而摸索出了针对家禽快速、有效的清瘟败毒超微粉配方。

2、本发明可以在常温下对清瘟败毒超微粉进行规模化生产，效率高，成本低。建立的薄层鉴别方法简单快速、稳定好，无阴性干扰，可以有效控制清瘟败毒超微粉中的芒果苷。

3、为了有效控制清瘟败毒超微粉的质量，本发明同时对其有效成分芒果苷的薄层进行鉴别研究，提供了快速鉴别方法，保证了工业生产中清瘟败毒超微粉的质量。本发明制备的超微粉粒径较细，在薄层色谱鉴别时，有利于有效成分的提取，更加确保了鉴别结果的精确性。

4、本发明为了避免薄层色谱鉴别长时间测定结果存在偏差以及显色不明显，对薄层色谱板进行了改进，在G薄层色谱板上喷以质量浓度为3～6％的硫酸甲醇溶液作为荧光增强剂。

5、本发明针对芒果苷在清瘟败毒超微粉中的特性，采用了特定配比的乙醇-丙酮-水-乙酸乙酯的混合溶液作为展开剂，从而使得其展开效果清晰有效，有利于对芒果苷的薄层进行鉴别研究。

附图说明

图1左边起第1斑点为芒果苷对照品，第2个斑点为知母单药，第3-4个斑点为清瘟败毒超微粉

图2批次为20130807的清瘟败毒超微粉薄层图，第1个斑点为芒果苷对照品，第2-4个斑点为样品

图3批次为20130814的清瘟败毒超微粉薄层图，第1斑点为芒果苷对照品，第2-5个斑点为样品

图4是双向气流超微粉筛机的结构示意图。

具体实施方式

下面结合实施例和附图对本发明作进一步说明。

按上述制备方法生产2批清瘟败毒超微粉，批号分别为20130807和20130814，按上述检测薄层鉴别方法进行检测。

实施例一

水牛角未经膨化时清瘟败毒超微粉的生产和质量鉴别。

以石膏12000g、地黄3000g、水牛角6000g、黄连2000g、栀子3000g、牡丹皮2000g、黄芩2500g、赤芍2500g、玄参2500g、知母3000g、连翘3000g、桔梗2500g、甘草1500g、淡竹叶2500g为投放量，用普通粉碎机进行粗粉碎，混合之后80℃烘干至水分在6％以下，然后用双向气流超微粉筛机在常温下进行超微粉碎，将过300目筛网的药物进行收集，再混合之后即得，该批产品粉碎总耗时为5小时，产率为81.8％。

取本品5g，加乙醇30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，取续滤液作为供试品溶液。取芒果苷对照品，加稀乙醇制成1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取两种溶液各4μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙醇-丙酮-水-乙酸乙酯为展开剂，其中四者质量比为1～1.5：1：1～1.5：1，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

实施例二

水牛角膨化后清瘟败毒超微粉的生产和质量鉴别。

先将30000g水牛角进行膨化处理，以石膏11500g、地黄3000g、水牛角(膨化处理后)5500g、黄连2000g、栀子3000g、牡丹皮2000g、黄芩2500g、赤芍2500g、玄参2500g、知母3000g、连翘3000g、桔梗2000g、甘草1500g、淡竹叶2500g为投放量，用普通粉碎机进行粗粉碎，混合之后80℃烘干至水分在6％以下，然后用双向气流超微粉筛机在常温下进行超微粉碎，将过300目筛网的药物进行收集，再混合之后即得，该批产品粉碎总耗时为3小时，产率为91.3％。

取本品5g，加乙醇30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，取续滤液作为供试品溶液。取芒果苷对照品，加稀乙醇制成1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取两种溶液各4μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙醇-丙酮-水-乙酸乙酯为展开剂，其中四者质量比为1～1.5：1：1～1.5：1，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

Claims (6)

1.一种清瘟败毒超微粉的制备及薄层鉴别方法，其特征在于制备和薄层鉴别方法包括下述步骤：

步骤1、将各原料按以下重量份数进行称取：石膏110～120、地黄20～25、膨化处理后的水牛角50～60、黄连15～20、栀子22～30、牡丹皮15～20、黄芩20～25、赤芍20～22、玄参20～25、知母25～30、连翘25～30、桔梗20～25、甘草12～15、淡竹叶25～30；

步骤2、将称取后的上述原料用粉碎机进行粗粉碎，于70～80℃烘干至水分质量百分比在6％以下，然后用双向气流超微粉筛机在常温下进行超微粉碎，将通过250～300目筛网筛分的药物进行收集，再混合之后即得到清瘟败毒超微粉；

步骤3、取少量步骤2制备的清瘟败毒超微粉，加入乙醇，配成清瘟败毒超微粉浓度为5～6g/mL的乙醇溶液，加热回流1小时，放冷，过滤，取续滤液作为供试品溶液；

步骤4、取芒果苷对照品，加稀乙醇制成1mL含0.5mg芒果苷对照品的溶液，作为对照品溶液；

步骤5、薄层色谱鉴别方法：吸取供试品溶液和对照品溶液各4μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙醇-丙酮-水-乙酸乙酯为展开剂，其中四者质量比为(1～1.5)：1：(1～1.5)：1，展开，取出，晾干，其中薄层色谱板上喷以质量浓度为3～6％的硫酸甲醇溶液作为荧光增强剂；

步骤6、将薄层色谱板置紫外光灯下检视，其中紫外光灯为365nm：供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2.如权利要求1所述的清瘟败毒超微粉的制备及薄层鉴别方法，其特征在于重量百分比为石膏120、地黄25、膨化处理后的水牛角60、黄连20、栀子30、牡丹皮15、黄芩25、赤芍20、玄参25、知母30、连翘30、桔梗25、甘草12、淡竹叶25。

3.如权利要求1所述清瘟败毒超微粉的制备及薄层鉴别方法，其特征在于将药材用粉碎机进行粗粉碎后混合，80℃烘干至水分质量百分比在6％以下。

4.如权利要求1所述清瘟败毒超微粉的制备及薄层鉴别方法，其特征在于用双向气流超微粉筛机进行超微粉碎，过300目筛网进行收集。

5.如权利要求1所述的清瘟败毒超微粉的制备及薄层鉴别方法，其特征在于供试品的制备过程为：步骤3中配成清瘟败毒超微粉浓度为5g/mL的乙醇溶液。

6.如权利要求1所述的清瘟败毒超微粉的制备及薄层鉴别方法，其特征在于步骤五中乙醇-丙酮-水-乙酸乙酯为展开剂，其中四者质量比为1：1：1：1。