CN109843856B

CN109843856B - Kras g12c抑制剂

Info

Publication number: CN109843856B
Application number: CN201780044670.5A
Authority: CN
Inventors: 约翰·P·费舍尔; 杰伊·布拉德福德·费尔; 詹姆斯·F·布莱克; 罗纳尔德·杰伊·新克林; 马塞多尼奥·J·梅西亚; 埃里克·詹姆斯·希肯; 马克·约瑟夫·希凯利; 约翰·J·葛庭诺; 盖伊·P·A·威格士; 劳伦斯·E·伯吉斯; 马修·阿诺德·马克思; 詹姆斯·盖尔·克里斯滕森; 马修·伦道夫·李; 帕维尔·萨瓦钦科夫; 亨利·J·齐卡; 托尼·P·唐
Original assignee: Array Biopharma Inc; Mirati Therapeutics Inc
Current assignee: Array Biopharma Inc; Mirati Therapeutics Inc
Priority date: 2016-05-18
Filing date: 2017-05-17
Publication date: 2023-05-02
Anticipated expiration: 2037-05-17
Also published as: ES2863873T3; JP2019516718A; US10633381B2; IL262867A; US20180072723A1; AU2017266911A1; JP7039489B2; US10125134B2; EP3458445A1; KR102444509B1; EP3458445B1; CN109843856A; CA3024523A1; EP3458445A4; US11267812B2; SG11201810171SA; AU2017266911B2; KR20190039475A; US20190062330A1; IL262867B

Abstract

本发明涉及抑制KRas G12C的化合物。特别地，本发明涉及不可逆地抑制KRas G12C的活性的化合物、包含所述化合物的药物组合物及其使用方法。

Description

KRAS G12C抑制剂

交叉参考

本申请在35 U.S.C.§119(e)下要求2016年5月18日提交的美国临时申请No.62/338,116和2017年1月10日提交的美国临时申请No.62/444,614的优先权，将每个申请的全部内容在此通过引用整体并入。

技术领域

本发明涉及抑制KRas G12C的化合物。特别地，本发明涉及不可逆地抑制KRasG12C的活性的化合物、包含所述化合物的药物组合物及其使用方法。

背景技术

Kirsten大鼠肉瘤2病毒癌基因同系物(Kirsten Rat Sarcoma 2 Viral OncogeneHomolog，“KRas”)是一种小GTP酶并且是Ras癌基因家族的成员。KRas充当在非活性(GDP结合型)和活性(GTP结合型)状态之间循环的分子开关，以将从多种酪氨酸激酶接收的上游细胞信号转导至下游效应物来调节多种过程，包括细胞增殖(例如，参见Alamgeer等人，(2013)Current Opin Pharmcol.13：394-401)。

三十多年前观察到激活的KRas在恶性肿瘤中的作用(例如，参见Santos等人，(1984)Science 223：661-664)。KRas的异常表达占所有癌症的高达20％，并且在25-30％的肺腺癌中报道了致癌KRas突变，其稳定GTP结合并引起KRas的组成性激活和下游信号传导。(例如，参见Samatar and Poulikakos(2014)Nat Rev Drug Disc 13(12)：928-942 doi：10.1038/nrd428)。在KRas一级氨基酸序列的密码子12和13处导致错义突变的单核苷酸取代在肺腺癌中占这些KRas驱动突变的约40％，其中G12C颠换是最常见的激活突变(例如，参见Dogan等人，(2012)Clin Cancer Res.18(22)：6169-6177，2012年9月26日在线发表。doi：10.1158/1078-0432.CCR-11-3265)。

KRAs在恶性肿瘤中众所周知的作用以及在各种肿瘤类型中KRas中发现这些频繁的突变，使得KRas成为制药工业中癌症治疗的高度引人注目的目标。尽管三十年来大规模的发现努力来开发用于治疗癌症的KRas抑制剂，但没有KRas抑制剂表现出足够的安全性和/或功效而获得监管部门批准(例如，参见McCormick(2015)Clin Cancer Res.21(8)：1797-1801)。

尽管许多针对KRas的努力失败，但抑制KRas活性的化合物仍然是非常期望的并且正在研究中，包括破坏效应物例如鸟嘌呤核苷酸交换因子(例如，参见Sun等人，(2012)Agnew Chem Int Ed Engl.51(25)：6140-6143doi：10.1002/anie201201358)以及针对KRasG12C(例如，参见Ostrem等人，(2013)Nature 503：548-551)的那些化合物。显然，仍然存在持续的兴趣和努力来开发KRas抑制剂，特别是激活包括KRas G12C在内的KRas突变体的抑制剂。

因此，需要开发新的KRas G12C抑制剂，其表现出治疗KRas G12C介导的癌症的充分的功效、稳定性和/或安全性。本发明的化合物和组合物通过提供选择性KRas G12C抑制剂，有利地克服了一个或多个前述的缺点。

发明内容

在本发明的一个方面，提供抑制KRas G12C活性的化合物。在某些实施方式中，所述化合物由式(I)表示：

或其药学上可接受的盐，其中：

X是4-12元饱和或部分饱和的单环、桥连环或螺环型环，其中所述饱和或部分饱和的单环任选被一个或多个R⁸取代；

Y是键、O、S或NR⁵；

R¹是

或

R²是氢、烷基、羟基烷基、二羟基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、-Z-NR⁵R¹⁰、杂环基、杂环基烷基、芳基、杂芳基或杂芳基烷基，其中Z、杂环基、杂环基烷基、芳基、杂芳基和杂芳基烷基中的每一者可任选被一个或多个R⁹取代；

Z是C1–C4亚烷基；

每个R³独立地是C1–C3烷基、氧代或卤代烷基；

L是键、-C(O)-或C1–C3亚烷基；

R⁴是氢、环烷基、杂环基、芳基、芳烷基或杂芳基，其中环烷基、杂环基、芳基、芳烷基和杂芳基中的每一者可任选被一个或多个R⁶或R⁷取代；

每个R⁵独立地是氢或C1–C3烷基；

R⁶是环烷基、杂环基、杂环基烷基、芳基、或杂芳基，其中环烷基、杂环基、芳基或杂芳基中的每一者可任选被一个或多个R⁷取代；

每个R⁷独立地是卤素、羟基、C1–C6烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基、氨基、氰基、杂烷基、羟基烷基或Q-卤代烷基，其中Q是O或S；

R⁸是氧代、C1–C3烷基、C2–C4炔基、杂烷基、氰基、-C(O)OR⁵、-C(O)N(R⁵)₂、-N(R⁵)₂，其中C1–C3烷基可任选被氰基、卤素、-OR⁵、-N(R⁵)₂、或杂芳基取代；

每个R⁹独立地是氢、氧代、酰基、羟基、羟基烷基、氰基、卤素，C1–C6烷基、芳烷基、卤代烷基、杂烷基、环烷基、杂环基烷基、烷氧基、二烷基氨基、二烷基酰氨基烷基或二烷基氨基烷基，其中C1–C6烷基可任选被环烷基取代；

每个R¹⁰独立地是氢、酰基、C1–C3烷基、杂烷基或羟基烷基；

R^A是不存在、氢、或C1–C3烷基；

每个R^B独立地是氢、C1–C3烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基或杂环基烷基；

m是0或者1和2之间的整数；

p是1或2；并且其中，

当

是三键时则R^A不存在，R^B存在并且p等于1，

或当

是双键时则R^A存在，R^B存在并且p等于2，或者R^A、R^B和它们相连的碳原子形成5-8元部分饱和的环烷基，其任选被一个或多个R⁷取代。

还包括具有式I-A的式I化合物：

其中R¹、R³、R⁴、R⁵、R¹⁰、L和m如式I的定义，R¹¹是氢、C1–C3烷基或羟基烷基，并且哌啶基环任选被R⁸取代，其中R⁸如式I的定义。

还包括具有式I-B的式I的化合物：

其中R¹、R³、R⁴、R⁹、L和m如式I的定义，R²是任选被一个或多个R⁹取代的杂环基烷基，并且哌啶基环任选被R⁸取代，其中R⁸如式I的定义。

在本发明的另一个方面，提供药物组合物，其包含治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的赋形剂。

在本发明的又一个方面，抑制细胞内KRas G12C活性的方法，包括使细胞与式I、式I-A或式1-B的化合物接触。在一个实施方式中，接触是体外的。在一个实施方式中，接触是体内的。

本文还提供体外或体内抑制细胞增殖的方法，所述方法包括使细胞与有效量的如本文定义的式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物接触。

还提供治疗患者癌症的方法，所述方法包括将治疗有效量的本发明的化合物或药物组合物或其药学上可接受的盐施用于有此需要的患者。

本文还提供在需要此种治疗的患者中治疗KRas G12C相关疾病或病症的方法，所述方法包括给患者施用治疗有效量的如本文定义的式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或其药物组合物。

本文还提供如本文定义的式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或其药物组合物，其用于治疗。

本文还提供如本文定义的式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或其药物组合物，其用于治疗癌症。

本文还提供式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其用于抑制KRas G12C。

本文还提供如本文定义的式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物或其药物组合物，其用于治疗KRas G12C相关疾病或病症。

本文还提供如本文定义的式I、式I-A或式1-B的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制造用于癌治疗症的药物中的用途。

本文还提供如本文定义的式I、式I-A或式1-B的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制造用于抑制KRas G12C活性的药物中的用途。

本文还提供如本文定义的式I、式I-A或式1-B的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制造用于治疗KRas G12C相关疾病或病症的药物中的用途。

本文还提供治疗有此需要的患者的癌症的方法，所述方法包括(a)确定癌症与KRas G12C突变相关(例如，KRas G12C相关癌症)；和(b)给患者施用治疗有效量的式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本文还提供式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物的制备方法。

本文还提供通过如本文定义的化合物制备方法获得的式I、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐。

具体实施方式

本发明涉及KRas G12C的抑制剂。特别地，本发明涉及不可逆地抑制KRas G12C活性的化合物、包含治疗有效量的所述化合物的药物组合物及其使用方法。

定义

除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语所具有的含义与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同。本文提及的所有专利、专利申请和出版物均通过引用并入。

用于本文中时，“KRas G12C”是指哺乳动物KRas蛋白的突变形式，其在12位氨基酸处含有半胱氨酸对甘氨酸的氨基酸取代。人KRas的氨基酸密码子和残基位置的定位是基于由UniProtKB/Swiss-Prot P01116:Variant p.Gly12Cys鉴定的氨基酸序列。

用于本文中时，“KRas G12C抑制剂”是指由本文所述的式(I)表示的本发明化合物。这些化合物能够负性调制或抑制KRas G12C的全部或部分酶活性。本发明的KRas G12C抑制剂通过与12位处半胱氨酸残基的巯基侧链形成共价加合物而与KRas G12C相互作用和不可逆地结合，导致抑制KRas G12C的酶活性。

如本文所用的“KRas G12C相关疾病或病症”是指与KRas G12C突变相关或由其介导或具有KRas G12C突变的疾病或病症。KRas G12C相关疾病或病症的非限制性例子是KRasG12C相关癌症。

用于本文中时，术语“对象”、“个体”或“患者”可互换使用，是指任何动物，包括哺乳动物，例如小鼠、大鼠、其他啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、绵羊、马、灵长类动物、和人类。在一些实施方式中，患者是人。在一些实施方式中，对象已经历和/或出现待治疗和/或预防的疾病或病症的至少一种症状。在一些实施方式中，对象已被鉴定或诊断为患有具有KRasG12C突变的癌症(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定)。在一些实施方式中，对象具有KRas G12C突变阳性的肿瘤(例如，使用管理机构批准的测定法或试剂盒确定)。对象可以是患有KRas G12C突变阳性的肿瘤的对象(例如，使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒鉴定为阳性)。对象可以是其肿瘤有KRas G12C突变阳性的对象(例如，其中肿瘤是使用管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒这样鉴定的)。在一些实施方式中，对象疑似患有KRas G12C基因相关的癌症。在一些实施方式中，对象的临床记录表明对象患有具有KRas G12C突变的肿瘤(并且任选临床记录表明对象应该用本文提供的任何组合物治疗)。

在本文所述的任何方法或用途的一些实施方式中，利用来自患者(例如，怀疑患有KRas G12C相关癌症的患者，有KRas G12C相关癌症的一种或多种症状的患者，和/或发展为KRas G12C相关癌症的风险增加的患者)的样品(例如，生物样品或活检样品(例如，石蜡包埋的样品样品)用于确定患者是否具有KRas G12C突变的测定可以包括，例如，下一代测序、免疫组织化学、荧光显微术、分离FISH分析、Southern印迹、Western印迹、FACS分析、Northern印迹、和基于PCR的扩增(例如，RT-PCR和定量实时RT-PCR)。如本领域公知的，所述测定通常例如用至少一种标记的核酸探针或至少一种标记的抗体或其抗原结合片段进行。

术语“管理机构”是一个国家批准药剂在该国的医疗用途的机构。例如，管理机构的非限制性例子是美国食品和药品管理局(U.S.Food and Drug Administration)(FDA)。

术语“氨基”是指–NH₂；

术语“酰基”是指-C(O)CH₃.

如本文所用的术语“烷基”是指具有1至12个碳原子、1-8个碳原子、1-6个碳原子或1-3个碳原子的直链和支链脂族基团，其任选被一个、两个或三个取代基取代。烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。

术语“卤代烷基”是指其中一个或多个氢被卤素替代的烷基链。卤代烷基的例子是三氟甲基、二氟甲基和氟甲基。

术语“卤代烷氧基”是指-O-卤代烷基。

“亚烷基”基团是如上文所定义的烷基，其位于两个其它化学基团之间并用于连接这两个其它化学基团。示例性的亚烷基基团包括但不限于亚甲基、亚乙基、亚丙基和亚丁基。

术语“烷氧基”是指–OC1–C6烷基。

如本文所用的术语“环烷基”包括具有3至12个碳、例如3至8个碳并且作为进一步的例子为3至6个碳的饱和和部分不饱和环状烃基团，其中环烷基还任选被取代。环烷基的例子包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。

术语“杂烷基”是指如上文定义的烷基基团，其中链中的一个或多个碳原子被选自由O、S和N组成的组中的杂原子取代。

用于本文中时，术语“羟基烷基”是指-烷基-OH。

术语“二羟基烷基”是指如本文定义的烷基基团，其中两个碳原子各自被羟基基团取代。

术语“烷基氨基”是指–NR^x-烷基，其中R^x是氢。在一个实施方式中，R^x是氢。

术语“二烷基氨基”是指–N(R^y)₂，其中每个R^y是C1–C3烷基。

术语“烷基氨基烷基”是指–烷基-NR^x-烷基，其中R^x是氢。在一个实施方式中，R^x是氢。

术语“烷基氨基烷基”是指–烷基-N(R^y)₂，其中每个R^y是C1–C4烷基，其中-–烷基-N(R^y)₂的烷基可以任选被羟基或羟基烷基取代。

“芳基”基团是包含一至三个芳族环的C₆-C₁₄芳族部分，其任选被取代。作为一个实施方式，芳基基团是C₆-C₁₀芳基基团。芳基基团的例子包括但不限于苯基、萘基、蒽基和芴基。

“芳烷基”基团包含与烷基基团共价连接的芳基基团，其任何一个都可独立地任选被取代或未取代。芳烷基基团的例子是(C₁-C₆)烷基(C₆-C₁₀)芳基，包括但不限于苄基、苯乙基和萘基甲基。取代的芳烷基的例子是其中烷基基团被羟基烷基取代。

“杂环基”或“杂环”基团是具有约3至约12个原子、例如4至8个原子的环结构，其中一个或多个原子选自由N、O和S组成的组，其余的环原子是碳。杂环基可以是单环、双环、螺环或桥环体系。杂环基团任选在一个或多个位置的碳或氮上被R⁷取代，其中R⁷如式I所定义。杂环基也独立地任选在氮上被烷基、芳基、芳烷基、烷基羰基、烷基磺酰基、芳基羰基、芳基磺酰基、烷氧基羰基、芳烷氧基羰基取代或在硫上被氧代或低级烷基取代。杂环基团的实例包括但不限于环氧基、氮杂环丁烷基、氮丙啶基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、吡咯烷基、吡咯烷酮基、哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、噻唑烷基、二噻烷基、三噻烷基、二噁烷基、噁唑烷基、噁唑烷酮基、十氢喹啉基、哌啶酮基、4-哌啶酮基(piperidinonyl)、硫代吗啉基、硫代吗啉基1,1二氧化物、吗啉基、氧氮杂环庚烷基、氮杂双环己烷、氮杂双环庚烷和氧杂氮杂环庚烷。该术语特别排除具有相邻的环O和/或S原子的化合物。

术语“杂环基烷基”是指经由烷基接头与分子的其余部分连接的如本文定义的杂环基，其中所述杂环基烷基的烷基接头可任选被羟基或羟基烷基取代。

用于本文中时，术语“杂芳基”是指具有5至14个环原子、优选5、6、9或10个环原子的基团；具有在环状阵列中共用的6、10或14个π电子；并且除了碳原子之外每个环还具有1至3个选自由N、O和S组成的组中的杂原子。杂芳基基团的例子包括：吖啶基，吖辛因基，苯并咪唑基，苯并呋喃基，苯并硫代呋喃基，苯并噻吩基，苯并噁唑基，苯并噻唑基，苯并三唑基，苯并四唑基，苯并异噁唑基，苯并异噻唑基，苯并咪唑啉基，咔唑基，4aH-咔唑基，咔啉基，色满基，色烯基，噌啉基，呋喃基，呋咱基，咪唑啉基，咪唑基，1H-吲唑基，亚吲哚基(indolenyl)，二氢吲哚基，吲嗪基，吲哚基，3H-吲哚基，异苯并呋喃基，异色满基，异吲唑基，异二氢吲哚基，异吲哚基，异喹啉基，异噻唑基，异噁唑基，亚甲基二氧苯基，萘啶基，八氢异喹啉基，二唑基，1,2,3-噁二唑基，1,2,4-噁二唑基，1,2,5-噁二唑基，1,3,4-噁二唑基，噁唑烷基，噁唑基，噁唑烷基，嘧啶基，菲啶基，菲咯啉基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩噁噻基，吩噁嗪基，酞嗪基，胡椒基，蝶啶基，嘌呤基，吡喃基，吡嗪基，吡唑烷基，吡唑啉基，吡唑基，哒嗪基，吡啶并噁唑，吡啶并咪唑，吡啶并噻唑，吡啶基(pyridinyl)，吡啶基(pyridyl)，嘧啶基，吡咯啉基，2H-吡咯基，吡咯基，喹唑啉基，喹啉基，4H-喹嗪基，喹喔啉基，奎宁环基，四氢异喹啉基，四氢喹啉基，四唑基，6H-1,2,5-噻二嗪基，1,2,3-噻二唑基，1,2,4-噻二唑基，1,2,5-噻二唑基，1,3,4-噻二唑基，噻蒽基，噻唑基，噻吩基，噻吩并噻唑基，噻吩并噁唑基，噻吩并咪唑基，苯硫基，三嗪基，1,2,3-三唑基，1,2,4-三唑基，1,2,5-三唑基，1,3,4-三唑基，和氧杂蒽基。

“杂芳基烷基”基团包含与烷基基团共价连接的杂芳基基团，其中该基团在烷基基团上，其中任何一个均独立地任选被取代或未取代。杂芳基烷基基团的例子包括与C1-C6烷基基团键合的具有5、6、9或10个环原子的杂芳基基团。杂芳烷基基团的实例包括吡啶基甲基、吡啶基乙基、吡咯基甲基、吡咯基乙基、咪唑基甲基、咪唑基乙基、噻唑基甲基、噻唑基乙基、苯并咪唑基甲基、苯并咪唑基乙基、喹唑啉基甲基、喹啉基甲基、喹啉基乙基、苯并呋喃基甲基、吲哚基乙基、异喹啉基甲基、异吲哚基甲基、噌啉基甲基和苯并噻吩基乙基。该术语特别排除具有相邻的环O和/或S原子的化合物。

用于本文中时，化合物的“有效量”是足以负性调制或抑制KRas G12C活性的量。这样的量可以作为单一剂量施用，或者可以根据它以此有效的方案施用。

用于本文中时，化合物的“治疗有效量”是足以改善或以某种方式减轻病情的症状或者停止或逆转病情的进展、或者负性调制或抑制KRas G12C活性的量。这样的量可以作为单一剂量施用，或者可以根据它以此有效的方案施用。

用于本文中时，治疗是指改善或以其它方式有益地改变病情、病症或疾病的症状或病理的任何方式。治疗还包括本文组合物的任何药物用途。

用于本文中时，通过施用特定药物组合物改善特定病症的症状是指可归因于所述组合物的施用或与所述组合物的施用有关的任何减轻，无论是永久的还是暂时的，持续的还是短暂的。

化合物

在本发明的一个方面，提供由式(I)表示的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

Y是键、O、S或NR⁵；

R¹是

或

Z是C1–C4亚烷基；

每个R³独立地是C1–C3烷基、氧代或卤代烷基；

L是键、-C(O)-或C1–C3亚烷基；

每个R⁵独立地是氢或C1–C3烷基；

R^A是不存在、氢或C1–C3烷基；

m是0或者1和2之间的整数；

p是1或2；并且其中，

当

是三键时则R^A不存在，R^B存在并且p等于1，

或当

在某些实施方式中，R¹-X是：

其中R¹是对式I定义的，并且哌嗪基环任选被R⁸取代，其中R⁸如式I的定义。在某些实施方式中，R⁸是C1–C3烷基，其中所述烷基任选氰基、OR⁵、或-C(O)N(R⁵)₂取代，其中每个R⁵独立地是氢或C1–C3烷基。

在特定实施方式中，R¹是

其中R^A、R^B和p如式I的定义。在一个实施方式中，R¹是

其中

是三键并且R^A不存在、p是1并且R^B是C1–C3烷基。在一个实施方式中，R¹是

其中

是双键并且R^A是氢或C1–C3烷基，p是2并且每个R^B独立地是氢、C1–C3烷基、二烷基氨基烷基或杂环基烷基。在一个实施方式中，R¹是–C(O)C(R^A)＝C(R^B)_p，其中R^A是氢或C1–C3烷基，p是2，所述R^B中的一个是氢、C1–C3烷基、二烷基氨基烷基或杂环基烷基并且另一个R^B是是氢或C1–C3烷基。在一个实施方式中，R¹是–C(O)CH＝CH₂。

在一个实施方式中，Y是O或NR⁵并且R²选自由烷基、羟基烷基、二羟基烷基、烷基氨基烷基、二烷基氨基烷基、杂环基、杂环基烷基和杂芳基组成的组。在一个实施方式中，Y是O并且R²是羟基烷基、二羟基烷基、烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基，其中烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基任选被一个或多个R⁹取代。在一个实施方式中，任选被取代的烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基独立地选自甲基氨基丙-2-基、二甲基氨基乙基、甲基乙基氨基乙基、二甲基氨基丙基、二甲基氨基丙-2-基、二甲基氨基丁基、二甲基氨基丁-2-基、2-二甲基氨基丙醇、或二乙基氨基乙基。在一个实施方式中，Y是O或NR⁵并且R²是任选被一个或多个R⁹取代的杂环基或杂环基烷基。当R2是杂环基或杂环基烷基时，一个或多个R⁹的非限制性例子包括C1–C3烷基、酰基、氧代、氰基、烷氧基、环烷基、环烷基甲基、卤素和羟基。任选被一个或多个R9取代的R2杂环基的非限制性例子包括：氮杂环丁烷基，C1-C3烷基取代的氮杂环丁烷基(例如，甲基氮杂环丁烷基)，卤素取代的氮杂环丁烷基(例如，二氟氮杂环丁烷基)，四氢吡喃，吡咯烷基，C1-C3烷基取代的吡咯烷基(例如，甲基吡咯烷基、二甲基吡咯烷基和异丙基吡咯烷基)，环烷基烷基吡咯烷基，羟基吡咯烷基，卤素取代的吡咯烷基(例如氟代吡咯烷基和二氟代吡咯烷基)，甲氧基乙基吡咯烷基，(N-甲基)甲氧基吡咯烷基，哌嗪基，二甲基氨基吡咯烷基，吗啉基，甲基吗啉基，1,4-氧氮杂环庚烷基，哌啶基，C1-C3烷基取代的哌啶基(例如甲基哌啶基)，酰基哌啶基，氰基哌啶基，环烷基哌啶基，卤代哌啶基(例如氟代哌啶基)，二卤代哌啶基(例如二氟哌啶基)，烷氧基哌啶基，吡咯烷酮基，哌啶酮基，硫代吗啉基-1,1-二氧化物，3-氮杂双环[3.1.0]己基，氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基，和氮杂双环[2.2.1]庚-2-基。

在一个实施方式中，Y是O并且R²是任选被一个或多个R⁹取代的杂芳基烷基。在一个实施方式中，杂芳基烷基的杂芳基部分是吡啶基。

在一个实施方式中，Y是O并且R²是-ZR⁵R¹⁰。在一个实施方式中，R⁵是C1–C3烷基并且R¹⁰独立地选自酰基、羟基烷基或烷氧基。

在一个实施方式中，Y是键并且R²是氢、杂环基或芳基，其中所述杂环基和芳基任选被一个或多个R⁹取代。

在一个实施方式中，Y是键并且R²是氢。

在一个实施方式中，Y是键并且R²是任选被一个或多个R⁹取代的杂环基。在一个实施方式中，Y是键并且R²是任选甲基、卤素或二甲基氨基取代的杂环基。R²杂环基的非限制性例子包括氮杂环丁烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基和吡咯烷基。

在一个实施方式中，Y是键并且R²是任选被一个或多个R⁹取代的芳基。在一个实施方式中，芳基是被杂环基烷基取代的苯基。

在某些其它实施方式中，当X是单环时，R⁴是芳基。在一个实施方式中，R⁴选自由苯基和萘基组成的组，并任选被一个或多个R⁶或R⁷取代。R⁷取代基的例子包括卤素、羟基、C1-C6烷基(例如C1-C3烷基)、环烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基、氨基、氰基、羟基烷基和烷氧基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基和烷氧基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自卤素、卤代烷基、甲基、异丙基、甲氧基、Q-卤代烷基和羟基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、羟基、三氟甲氧基、羟基、氟代、氯代、异丙基、环丙基和三氟甲硫基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自羟基、氟和氯。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基和C1–C3烷基或两个C1–C3烷基取代的苯基。在一个实施方式中，所述芳基是被Q-卤代烷基和羟基或氟取代的苯基。

在一个实施方式中，R⁴是芳基，其中芳基是任选被一个或多个R⁷取代的萘基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的萘基，所述R⁷基团独立地选自卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基和烷氧基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的萘基，所述R⁷基团独立地选自卤素、卤代烷基、甲基、异丙基、甲氧基、Q-卤代烷基和羟基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代基取代的萘基，所述R⁷取代基独立地选自羟基、卤素、C1–C3烷基、氨基和卤代烷基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一至三个R⁷取代基取代的萘基，所述R⁷取代基独立地选自二氟甲基、甲基、羟基、氨基、氟代和氯代。

在一个实施方式中，所述芳基是任选被一个或多个卤素取代的萘基。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基和三氟甲基或C1–C3烷基取代的萘基。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基取代的萘基。

在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代的杂芳基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代的杂芳基，所述R⁷独立地选自卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基、烷氧基和氨基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代的吲哚基(indoyl)、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、吡啶基或苯并[d]噻唑基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代的吲哚基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、吡啶基或苯并[d]噻唑基，所述R⁷独立地选自卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基、烷氧基和氨基。

在别的其它实施方式中，R⁴是杂芳基，任选是吲哚基或吲唑基，其各自可以被一个或多个R⁷取代。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代基取代的杂芳基，所述取代基独立地选自由卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基和烷氧基组成的组。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或两个R⁷取代的吲唑基，所述R⁷独立地选自烷氧基、卤代烷基和C1-C6烷基。在其它实施方式中，所述R⁴杂芳基是喹啉基或异喹啉基，各自任选被一个或多个R⁷取代。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是喹啉基或异喹啉基，各自任选被一个或多个独立地选自氨基、羟基、C1–C3烷基和羟基的R⁷取代。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是喹啉基或异喹啉基，各自任选被选自羟基和氨基的R⁷取代。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吡啶基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吡啶基，所述R⁷独立地选自C1–C3烷基、卤素和卤代烷基。在其它实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的苯并[d]噻唑基，所述R⁷是例如羟基、一个或两个C1–C3烷基、或羟基和一个或两个C1–C3烷基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吲哚基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或两个R⁷取代的吲哚基，所述R⁷独立地选自羟基和C1–C3烷基。

在一个实施方式中，在X是单环的情况下，R⁴是芳烷基。在某些实施方式中，所述芳烷基是苄基。在其它实施方式中，所述苄基的烷基任选被羟基烷基取代。

在一个实施方式中，L是键。

在一个实施方式中，m是1并且R³是C1–C3烷基。

在一个实施方式中，m是1并且R³是氧代。

在一个实施方式中，R⁸是任选被-OR⁵、氰基或杂芳基取代的杂烷基、C2-C4炔基或C1–C3烷基。在一个实施方式中，R⁸是甲基、氰基甲基、甲氧基甲基、羟甲基。在一个实施方式中，R⁸是甲基。在一个实施方式中，R⁸是氰基甲基。在一个实施方式中，R⁸是羟甲基。

在一个实施方式中，式I包括具有式I-A的化合物：

其中R¹、R³、R⁴、R⁵、R¹⁰、L和m如式I的定义，R¹¹是氢、甲基或羟基烷基，并且哌啶基环任选被R⁸取代，其中R⁸如式I的定义。在一个实施方式中，L是键。在一个实施方式中，R⁴是芳基或杂芳基，其各自任选被一个或多个R⁶或R⁷取代。在一个实施方式中，R⁴是芳基或杂芳基，其各自任选被一个或多个R⁷取代。在一个实施方式中，每个R⁷独立地选自羟基、氨基、卤素、C1–C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基、环烷基和烷氧基。在一个实施方式中，R⁵和R¹⁰各自是C1–C3烷基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基和烷氧基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自卤素、卤代烷基、甲基、异丙基、甲氧基、Q-卤代烷基和羟基。在一个实施方式中，在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、羟基、三氟甲氧基、羟基、氟代、氯代、异丙基、环丙基和三氟甲硫基。在一个实施方式中，所述芳基是被一至三个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自羟基、氟和氯。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基和C1–C3烷基或两个C1–C3烷基取代的苯基。在一个实施方式中，所述芳基是被Q-卤代烷基和羟基或氟取代的苯基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的萘基，所述R⁷基团独立地选自卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基和烷氧基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的萘基，所述R⁷基团独立地选自卤素、卤代烷基、甲基、异丙基、甲氧基、Q-卤代烷基和羟基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代基取代的萘基，所述R⁷取代基独立地选自羟基、卤素、C1–C3烷基、氨基和卤代烷基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一至三个R⁷取代基取代的萘基，所述R⁷取代基独立地选自二氟甲基、甲基、羟基、氨基、氟代和氯代。在一个实施方式中，所述芳基是任选被一个或多个卤素取代的萘基。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基和三氟甲基或C1–C3烷基取代的萘基。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基取代的萘基。在一个实施方式中，R⁴是杂芳基，其中所述杂芳基是任选被一个或两个R⁷取代的吲唑基，所述R⁷独立地选自烷氧基、卤代烷基和C1-C6烷基。在一个实施方式中，R⁴是杂芳基，其中所述杂芳基是是喹啉基或异喹啉基，各自任选被一个或多个R⁷取代。在一个实施方式中，R⁴是杂芳基，其中所述杂芳基是是喹啉基或异喹啉基，各自任选被一个或多个独立地选自氨基、羟基、C1–C3烷基和羟基的R⁷取代。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吡啶基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吡啶基，所述R⁷独立地选自C1–C3烷基、卤素和卤代烷基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的苯并[d]噻唑基，所述R⁷是例如羟基、一个或两个C1–C3烷基、或羟基和一个或两个C1–C3烷基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吲哚基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或两个R⁷取代的吲哚基，所述R⁷独立地选自羟基和C1–C3烷基。在一个实施方式中，R¹¹是甲基。在一个实施方式中，所述哌啶基环是未取代的。在一个实施方式中，所述哌啶基环被R⁸取代。在一个实施方式中，R⁸是任选被氰基或羟基取代的C1–C3烷基。在一个实施方式中，R⁸是甲基、氰基甲基或羟甲基。在一个实施方式中，R⁸是甲基。在一个实施方式中，R⁸是氰基甲基。在一个实施方式中，R⁸是羟甲基。在另一个实施方式中，R⁵和R¹⁰各自是C1–C3烷基，R¹¹是甲基，R⁸是甲基、氰基甲基或羟甲基，L是键，并且R⁴是芳基或杂芳基，各自任选被一个或多个R⁶或R⁷取代。

在一个实施方式中，式I包括具有式I-B的化合物

并且R¹、R³、R⁴、R⁹、L和m如式I的定义，R²是任选被一个或多个R⁹取代的杂环基烷基，并且哌啶基环任选被R⁸取代，其中R⁸如式I的定义。在一个实施方式中，R²杂环基烷基的杂环基部分是具有一个或两个独立地选自N和O的环杂原子的单环、双环或桥环体系。在一个实施方式中，R²杂环基是吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、1,4-氧氮杂环庚烷基、硫代吗啉基-1,1-二氧化物、3-氮杂双环[3.1.0]己基、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、和氮杂双环[2.2.1]庚-2-基，其任选被一个或多个R⁹取代。在一个实施方式中，每个R⁹选自酰基、氧代、卤素、氰基、C1–C3烷基、烷氧基、羟基烷基、杂烷基、环烷基、芳烷基和二烷基酰氨基烷基。在一个实施方式中，L是键。在一个实施方式中，R⁴是芳基或杂芳基，其各自任选被一个或多个R⁶或R⁷取代。在一个实施方式中，R⁴是芳基或杂芳基，其各自任选被一个或多个R⁷取代。在一个实施方式中，每个R⁷独立地选自羟基、氨基、卤素、C1–C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基、环烷基和烷氧基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基和烷氧基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自卤素、卤代烷基、甲基、异丙基、甲氧基、Q-卤代烷基和羟基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、羟基、三氟甲氧基、羟基、氟代、氯代、异丙基、环丙基和三氟甲硫基。在一个实施方式中，所述芳基是被一至三个R⁷基团取代的苯基，所述R⁷基团独立地选自羟基、氟和氯。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基和C1–C3烷基或两个C1–C3烷基取代的苯基。在一个实施方式中，所述芳基是被Q-卤代烷基和羟基或氟取代的苯基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的萘基，所述R⁷基团独立地选自卤素、羟基、C1-C3烷基、卤代烷基、Q-卤代烷基和烷氧基。在一个实施方式中，所述芳基是被一个或多个R⁷基团取代的萘基，所述R⁷基团独立地选自卤素、卤代烷基、甲基、异丙基、甲氧基、Q-卤代烷基和羟基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代基取代的萘基，所述R⁷取代基独立地选自羟基、卤素、C1–C3烷基、氨基和卤代烷基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一至三个R⁷取代基取代的萘基，所述R⁷取代基独立地选自二氟甲基、甲基、羟基、氨基、氟代和氯代。在一个实施方式中，所述芳基是任选被一个或多个卤素取代的萘基。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基和三氟甲基或C1–C3烷基取代的萘基。在一个实施方式中，所述芳基是被羟基取代的萘基。在一个实施方式中，R⁴是杂芳基，其中所述杂芳基是任选被一个或两个独立地选自烷氧基、卤代烷基和C1-C6烷基的R⁷取代的吲唑基。在一个实施方式中，R⁴是杂芳基，其中所述杂芳基是喹啉基或异喹啉基，各自任选被一个或多个R⁷取代。在一个实施方式中，R⁴是杂芳基，其中所述杂芳基是喹啉基或异喹啉基，各自任选被一个或多个独立地选自氨基、羟基、C1–C3烷基和羟基的R⁷取代。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吡啶基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吡啶基，所述R⁷独立地选自C1–C3烷基、卤素和卤代烷基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的苯并[d]噻唑基，所述R⁷是例如羟基、一个或两个C1–C3烷基、或羟基和一个或两个C1–C3烷基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或多个R⁷取代的吲哚基。在一个实施方式中，所述R⁴杂芳基是任选被一个或两个R⁷取代的吲哚基，所述R⁷独立地选自羟基和C1–C3烷基。在一个实施方式中，R¹¹是甲基。在一个实施方式中，所述哌啶基环是未取代的。在一个实施方式中，所述哌啶基环被R⁸取代。在一个实施方式中，所述哌啶基环是未取代的。在一个实施方式中，所述哌啶基环被R⁸取代。在一个实施方式中，R⁸是任选被氰基、羟基或甲氧基取代的C1–C3烷基。在一个实施方式中，R⁸是甲基、氰基甲基、羟甲基或甲氧基甲基。

在一个实施方式中，X是饱和桥环系。桥环系的非限制性例子包括二氮杂双环庚烷和二氮杂双环辛烷。在某些实施方式中，当X是饱和桥环系时，R¹是–C(O)CH＝CH₂。在一个实施方式中，所述桥环系被一个或两个独立地选自R⁸的基团取代，其中R⁸如式I的定义。在一个实施方式中，所述桥环系是未取代的。在一个实施方式中，所述桥环系是二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基或二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基。

在一个实施方式中，R¹-X是：

其中A和B是螺环系，其中A和B相同或不同并独立地表示4-6元饱和环系，其中所述环任选被一个或多个R⁸取代，其中R⁸如式I的定义。在某些实施方式中，R¹是–C(O)CH＝CH₂。在某些实施方式中，环A和B是未取代的。

在一个实施方式中，所述螺环系是未取代的。螺环系的非限制性例子包括：

在某些实施方式中，当A和B表示螺环系时，R¹是–C(O)CH＝CH₂。

在式I的一个实施方式中，R²选自由羟基烷基、二烷基氨基烷基、杂环基和杂环基烷基组成的组，其中所述杂环基或杂环基烷基各自独立地任选被R⁹取代。在另一个实施方式中，R²是杂环基和杂环基烷基，其中所述杂环基或杂环基烷基各自独立地任选被一个或多个R⁹取代。在某些实施方式中，R²是任选被一个或多个R⁹取代的二烷基氨基烷基。非限制性例子包括二甲基氨基乙基、二甲基氨基丙基、二甲基氨基丙-2-基、二甲基氨基丁基、二甲基氨基丁-2-基、2-二甲基氨基丙醇或二乙基氨基乙基。

在一个实施方式中，Y是O并且R²选自由羟基烷基、二烷基氨基烷基、杂环基、杂环基烷基和-ZR⁵R¹⁰组成的组，其中R⁵和R¹⁰如式I的定义。

在一个实施方式中，Y是O并且R²选自由羟基烷基、二烷基氨基烷基、杂环基和杂环基烷基组成的组，其中杂环基或杂环基烷基各自独立地任选被R⁹取代。在另一个实施方式中，R²是杂环基或杂环基烷基，其中杂环基或杂环基烷基各自独立地任选被一个或多个R⁹取代。R⁹的非限制性例子包括酰基、氧代、卤素、氰基、C1–C6烷基、烷氧基、羟基烷基、杂烷基、环烷基、芳烷基或二烷基酰氨基烷基。在某些实施方式中，R²是任选被一个或多个R⁹取代的二烷基氨基烷基。非限制性例子包括二甲基氨基乙基、二甲基氨基丙基、二甲基氨基丙-2-基、二甲基氨基丁基、二甲基氨基丁-2-基、2-二甲基氨基丙醇或二乙基氨基乙基。

在式I的一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁶或R⁷取代的芳基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁶或R⁷取代的苯基或萘基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代的苯基或萘基。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代基取代的苯基或萘基，所述R⁷取代基独立地选自卤素、羟基、C1–C3烷基、环烷基、烷氧基、卤代烷基或Q-卤代烷基，其中Q是O或S。在一个实施方式中，R⁴是任选被一个或多个R⁷取代基取代的苯基或萘基，所述R⁷取代基独立地选自甲基、三氟甲基、羟基、三氟甲氧基、羟基、氟代、氯代、异丙基、环丙基和甲硫基。

在一个实施方式中，R⁴是任选被氨基取代的异喹啉基。在一个实施方式中，R⁴是芳烷基。在某些实施方式中，所述芳烷基是苄基。在一个实施方式中，所述芳烷基是其中烷基部分被羟基或羟基烷基取代的苄基。

式(I)、式I-A和式I-B的化合物的非限制性例子选自由下列化合物及其药学上可接受的盐组成的组：

在一个实施方式中，式I的化合物包括上述化合物的三氟乙酸盐。所述式(I)、式I-A或式I-B的化合物可以配制成药物组合物。

药物组合物

在另一个方面，本发明提供药物组合物，其包含本发明的KRas G12C抑制剂和药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。本发明的化合物可以通过本领域公知的任何方法配制，并且可以制备用于通过任何途径施用，所述途径包括但不限于肠胃外、口服、舌下、透皮、局部、鼻内、气管内或直肠内。在某些实施方式中，本发明化合物在医院环境中静脉内施用。在一个实施方式中，可以通过口服途径施用。

载体的特性将取决于施用途径。用于本文中时，术语“药学上可接受的”是指与生物系统例如细胞、细胞培养物、组织或生物相容并且不干扰活性成分的生物活性的有效性的无毒物质。因此，除所述抑制剂外，本发明的组合物还可含有稀释剂、填充剂、盐、缓冲剂、稳定剂、增溶剂和本领域公知的其它物质。可药用制剂的制备描述于例如《雷氏制药科学》(Remington's Pharmaceutical Sciences)，第18版，A.Gennaro编著，Mack PublishingCo.，Easton，Pa.，1990。

用于本文中时，术语药学上可接受的盐是指保留上述化合物的期望生物活性并且表现出极少或没有不想要的毒理学效应的盐。这样的盐的例子包括但不限于与无机酸(例如，盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，硝酸等)形成的酸加成盐，以及与有机酸形成的盐，所述有机酸例如乙酸、草酸、酒石酸、琥珀酸、苹果酸、抗坏血酸、苯甲酸、鞣酸、扑酸、藻酸、聚谷氨酸、萘磺酸、萘二磺酸和聚半乳糖醛酸。所述化合物还可以作为本领域技术人员已知的药学上可接受的季盐给药，其具体包括式--NR+Z-的季铵盐，其中R是氢、烷基或苄基，并且Z是反离子，包括氯离子、溴离子、碘离子、--O-烷基、甲苯磺酸根、甲磺酸根、磺酸根、磷酸根或羧酸根(如苯甲酸根、琥珀酸根、乙酸根、乙醇酸根、马来酸根、苹果酸根、柠檬酸根、酒石酸根、抗坏血酸根、苯甲酸根、肉桂酸根、马来酸根、苯甲酸根和二苯基乙酸根)。

活性化合物包含在药学上可接受的载体或稀释剂中，其量足以向患者递送治疗有效量而不会对所治疗的患者造成严重的毒性效应。在一个实施方式中，用于所有上述条件的活性化合物剂量在约0.01至300mg/kg范围内，例如每天0.1至100mg/kg，并且作为进一步的例子，0.5至约25毫克/千克接受者体重/天。典型的局部剂量在合适的载体中为0.01-3wt/wt％。可药用衍生物的有效剂量范围可以基于待递送的母体化合物的重量来计算。如果衍生物本身表现出活性，则可以如上所述利用衍生物的重量或通过本领域技术人员已知的其它手段来估算有效剂量。

包含本发明化合物的药物组合物可用于本文所述的使用方法中。

使用方法

在又一个方面，本发明提供抑制细胞中KRas G12C活性的方法，所述方法包括使需要抑制KRas G12C活性的细胞与有效量的式(I)、式I-A或式I-B的化合物、其药学上可接受的盐或含有所述化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物接触。在一个实施方式中，接触是体外的。在一个实施方式中，接触是体内的。

用于本文中时，术语“接触”是指在体外系统或体内系统中将指定部分放到一起。例如，使KRas G12C与本文提供的化合物“接触”包括将本文提供的化合物施用于具有KRasG12C的个体或患者，例如人类，以及例如，将本文提供的化合物引入含有KRas G12C的含细胞或纯化制品的样品。

在一个实施方式中，将需要抑制KRas G12C活性的细胞与有效量的式(I)、式I-A或式I-B化合物接触，以负性调制KRas G12C的活性。在其它实施方式中，可以使用治疗有效量的药学上可接受的盐或含有式(I)、式I-A或式I-B化合物的药物组合物。

通过负性调制KRas G12C的活性，本文描述的方法被设计旨在抑制由细胞内KRasG12C活性提高引起的不希望的细胞增殖。可以按照特定治疗方案以单剂量或多剂量接触细胞，以实现期望的KRas G12C负调制。KRas G12C的共价修饰程度可以使用公知的方法、包括下面实施例A中描述的那些方法进行体外监测。另外，可以监测示例性化合物在细胞中的抑制活性，例如，通过测量抑制KRas G12C活性的磷酸化ERK的量，包括下面实施例B中描述的那些，以由主治医师评估治疗有效性和并可以相应地剂量调整。

在另一个方面，提供治疗有此需要的患者的癌症的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的式(I)、式I-A或式I-B的化合物、其药学上可接受的盐或者包含所述化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。

本文中提供的组合物和方法可用于治疗有此需要的患者的KRas G12C相关癌症，提供了包括向所述患者施用治疗有效量的式(I)、式I-A或式I-B的化合物、其药学上可接受的盐或者包含所述化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。在一个实施方式中，KRasG12C相关癌症是肺癌。

本文提供的组合物和方法可用于治疗各式各样的癌症，包括肿瘤，例如肺、前列腺、乳腺、脑、皮肤、宫颈癌，睾丸癌等。更具体地，可以通过本发明的组合物和方法治疗的癌症包括但不限于诸如下列的肿瘤类型：星形细胞、乳腺、宫颈、结直肠、子宫内膜、食道、胃、头颈、肝细胞、喉、肺、口腔、卵巢、前列腺和甲状腺癌，以及肉瘤。更具体地，这些化合物可用于治疗：心脏：肉瘤(血管肉瘤，纤维肉瘤，横纹肌肉瘤，脂肪肉瘤)，粘液瘤，横纹肌瘤，纤维瘤，脂肪瘤和畸胎瘤；肺：支气管癌(鳞状细胞癌，未分化的小细胞癌，未分化的大细胞癌，腺癌)，肺泡(细支气管)癌，支气管腺瘤，肉瘤，淋巴瘤，软骨瘤错构瘤，间皮瘤；胃肠道：食道(鳞状细胞癌，腺癌，平滑肌肉瘤，淋巴瘤)，胃(癌瘤，淋巴瘤，平滑肌肉瘤)，胰腺(导管腺癌，胰岛瘤，胰高血糖素瘤，胃泌素瘤，类癌瘤，舒血管肠肽瘤)，小肠(腺癌，淋巴瘤，类癌瘤，卡波西氏(Kaposi's)肉瘤，平滑肌瘤，血管瘤，脂肪瘤，神经纤维瘤，纤维瘤)，大肠(腺癌，管状腺瘤，绒毛状腺瘤，错构瘤，平滑肌瘤)；泌尿生殖道：肾(腺癌，Wilm氏瘤(肾母细胞瘤)，淋巴瘤，白血病)，膀胱和尿道(鳞状细胞癌，移行细胞癌，腺癌)，前列腺(腺癌，肉瘤)，睾丸(精原细胞瘤，畸胎瘤，胚胎癌，畸胎癌，绒毛膜癌，肉瘤，间质细胞癌，纤维瘤，纤维腺瘤，腺瘤样肿瘤，脂肪瘤)；肝：肝细胞瘤(肝细胞癌)，胆管癌，肝母细胞瘤，血管肉瘤，肝细胞腺瘤，血管瘤；胆道：胆囊癌，壶腹癌，胆管癌；骨：成骨肉瘤(骨肉瘤)，纤维肉瘤，恶性纤维组织细胞瘤，软骨肉瘤，尤文氏(Ewing's)肉瘤，恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)，多发性骨髓瘤，恶性巨细胞瘤脊索瘤，骨软骨瘤(骨软骨性外生骨疣)，良性软骨瘤，软骨母细胞瘤，软骨粘液样纤维瘤，骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统：颅骨(骨瘤，血管瘤，肉芽瘤，黄瘤，变形性骨炎)，脑膜(脑膜瘤，脑膜肉瘤，胶质瘤病)，脑(星形细胞瘤，髓母细胞瘤，胶质瘤，室管膜瘤，生殖细胞瘤(松果体瘤)，多形性胶质母细胞瘤，少突神经胶质瘤，神经鞘瘤，视网膜母细胞瘤，先天性肿瘤)，脊髓神经纤维瘤，脑膜瘤，胶质瘤，肉瘤)；妇科：子宫(子宫内膜癌)，宫颈(宫颈癌，肿瘤前宫颈非典型增生)，卵巢(卵巢癌(浆液性囊腺癌，粘液性囊腺癌，未分类癌)，颗粒-泡膜细胞瘤，Sertoli-Leydig细胞瘤，无性细胞瘤，恶性畸胎瘤)，外阴(鳞状细胞癌，上皮内癌，腺癌，纤维肉瘤，黑素瘤)，阴道(透明细胞癌，鳞状细胞癌，葡萄状肉瘤(胚胎横纹肌肉瘤)，输卵管(癌)；血液学：血液(骨髓性白血病(急性和慢性)，急性淋巴细胞白血病，慢性淋巴细胞白血病，骨髓增生性疾病，多发性骨髓瘤，骨髓增生异常综合征)，霍奇金氏(Hodgkin's)病，非霍奇金氏淋巴瘤(恶性淋巴瘤)；皮肤：恶性黑色素瘤，基底细胞癌，鳞状细胞癌，卡波西氏(Kaposi's)肉瘤，痣发育不良痣，脂肪瘤，血管瘤，皮肤纤维瘤，瘢痕瘤，银屑病；和肾上腺：神经母细胞瘤。在某些实施方式中，癌症是非小细胞肺癌。

患者的施用浓度和途径将取决于待治疗的癌症而变化。所述化合物、其药学上可接受的盐以及包含这样的化合物和盐的药物组合物也可以与其它抗肿瘤化合物、例如化疗共同施用，或者与其它治疗例如放射或外科手术联合使用，作为手术前或手术后的辅药。

本文还提供如本文定义的式(I)、式I-A或式I-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或其药物组合物用于治疗。

本文还提供如本文定义的式(I)、式I-A或式I-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或其药物组合物用于治疗癌症。

本文还提供式(I)、式I-A或式1-B化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物用于抑制KRas G12C。

本文还提供如本文定义的式(I)、式I-A或式1-B的化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物、或其药物组合物用于治疗KRas G12C相关疾病或病症。

本文还提供如本文定义的式(I)、式I-A或式1-B的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制造用于癌治疗症的药物中的用途。

本文还提供了如本文定义的式(I)、式I-A或式1-B化合物、或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制造用于抑制KRas G12C活性的药物中的用途。

本文还提供了如本文定义的式(I)、式I-A或式1-B化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物在制造用于治疗KRas G12C相关疾病或病症的药物中的用途。

本文还提供了治疗有此需要的患者的癌症的方法，所述方法包括(a)确定癌症与KRas G12C突变相关(例如，KRas G12C相关癌症)(例如，使用经管理机构批准的、例如FDA批准的测定法或试剂盒确定)；和(b)向患者施用治疗有效量的式(I)、式I-A或式1-B化合物、或其药学上可接受的盐、或其药物组合物。

本领域技术人员将认识到，使用合适的、已知的和公认的的细胞和/或动物模型的体内和体外试验都可预测试验化合物治疗或预防给定病症的能力。

本领域技术人员将进一步认识到，可以根据临床和医疗领域中公知的方法完成在健康患者和/或患有给定病症的患者中的人体临床试验，包括首次人体、剂量范围和功效试验。

反应方案和实施例

本发明化合物可以利用本文所述的合成方法和反应方案从可商购的试剂制备，或利用本领域技术人员公知的其它试剂和常规方法制备。

例如，本发明的化合物可以根据总反应方案I和II制备。

大体反应方案

其中L和Y是键、R²是氢且R⁴是芳基或杂芳基的式I化合物可根据方案I制备。在步骤A中，将适当官能化的二氢吡啶并嘧啶(1)与含有一种亲核胺物种的杂环偶联，另一个与保护基团结合，以提供化合物(2)。该偶联在溶剂如二氯甲烷中在碱如三乙胺或Hunig碱的存在下进行。在步骤B中，使用本领域已知的条件除去化合物(2)的Boc基团，例如在溶剂如二氯甲烷中用三氟乙酸除去，以提供化合物(3)。在步骤C中，使用合适的官能化芳基或杂芳基体系，例如三氟甲磺酸芳基酯，在钯催化剂如Pd₂DBA₃/Xantphos的存在下，在具有碱如叔丁醇钠的溶剂如甲苯中，用钯偶联引入取代基R⁴，以提供化合物(4)。在步骤D中，除去环X化合物(4)的保护基团，例如在H₂存在下在极性溶剂如EtOH/THF中通过Pd/C进行氢解，以提供化合物(5)。在最终的步骤E中，引入R¹以提供式I化合物，例如通过用具有式

或

的酰氯或具有式

的酸酐处理，其中R^A、R^B和p如式I的定义。例如，在R¹是丙烯酰基团的情况下，该反应例如在溶剂如二氯甲烷中在丙烯酰氯或丙烯酰酸酐和碱如Hunig碱存在下进行。在一些情况下，物种R⁴也将含有保护基团，其可以在合成序列的后续步骤中除去。

如以上方案1所示和所述的化合物(1)、(2)、(3)、(4)和(5)可用作制备式I化合物的中间体，并作为本发明的进一步方面提供。

其中L是键、–Y-R²不是氢并且R⁴是芳基或杂芳基的式I化合物可以根据方案II制备。在步骤A中，将适当官能化的二氢吡啶并嘧啶(6)与含有一种亲核胺物种的杂环偶联，另一个与保护基团结合，以提供化合物(7)。该偶联在溶剂如二氯甲烷中在碱如三乙胺或Hunig碱存在下进行。在步骤B中，通过用亲核试剂例如(S)-1-(二甲基氨基-丙-2-醇)在极性溶剂如二噁烷中取代氯来引入取代基–Y-R²，以提供化合物(8)。在步骤C中，使用本领域已知的条件除去Boc基团，例如在溶剂如二氯甲烷中用三氟乙酸除去，以提供化合物(9)。在步骤D中，使用合适的官能化芳基或杂芳基体系，例如三氟甲磺酸芳基酯，在钯催化剂如Pd₂DBA₃/BINAP的存在下，在具有碱如叔丁醇钠的溶剂如甲苯中，用钯偶联引入取代基R4，以提供化合物(10)。在步骤E中，除去环X的保护基团，例如在H₂存在下在极性溶剂如EtOH/THF中通过Pd/C进行氢解，以提供化合物(11)。在步骤F中，引入R¹以提供式I化合物，例如通过用具有式

或

的酰氯或具有式

的酸酐处理，其中R^A、R^B和p如式I的定义。例如，在R¹是丙烯酰基团的情况下，该反应例如在溶剂如二氯甲烷中在丙烯酰氯或丙烯酰酸酐和碱如Hunig碱存在下进行。在一些情况下，物种R⁴和R²也可含有保护基团，其可在合成序列的后续步骤中除去。

如以上方案2所示和所述的化合物(6)、(7)、(8)、(9)、(10)和(11)可用作制备式I、式I-A或式1-B化合物的中间体，并作为本发明的进一步方面提供。

因此，还提供制备式I的化合物的方法，所述方法包括：

(a)对于其中Y是键且R2是氢的式I化合物，使式5化合物

与具有式

或

的酰氯或具有式

的酸酐在碱存在下反应，其中R^A、R^B和p如关于式I那样所定义，其中X、R³和R⁴如关于式I那样所定义；或

(b)对于其中L是键且–Y-R²不是氢的式I化合物，使式(11)化合物

与具有式

或

的酰氯或具有式

的酸酐在碱存在下反应，其中L是键、–Y-R²不是氢、并且X、R³和R⁴如关于式I那样所定义，其中R^A、R^B和p如关于式I那样所定义；并且

任选形成其盐。

本发明的化合物可以具有一个或多个手性中心，并且可以作为立体异构体混合物合成，立体异构体混合物是相同构造的异构体，它们的原子在空间的排列上不同。所述化合物可以作为混合物使用，或者可以利用可商购的试剂以及本领域技术人员公知的用于分离立体异构体和对映体的常规方法，例如，根据制造商的说明书使用

(Sigma-Aldrich)或

(Diacel Corp)手性色谱HPLC柱，来分离单个组分/异构体。或者，可以使用光学纯的手性试剂和中间体来合成本发明的化合物，以制备单个异构体或对映体。除非另有说明，否则所有手性(对映和非对映)和消旋的形式都在本发明的范围内。除非另有说明，否则每当说明书、包括权利要求书提到本发明化合物时，术语“化合物”应理解为包涵所有手性(对映和非对映)和消旋的形式。

以下实施例意欲进一步说明本发明的某些实施方式，而不是意欲限制本发明的范围。

中间体1

三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯

将三氟甲磺酸3-羟基萘-1-基酯(13.101g，44.831mmol)溶于二氯甲烷中(100mL)并在0℃下搅拌。向该溶液添加氯(甲氧基)甲烷(3.7456ml，49.315mmol)和Hunig碱(11.745mL，67.247mmol)。将反应在0℃下搅拌4hr。将反应用1M HCl分配并用饱和碳酸氢钠洗涤。合并的有机层经硫酸镁干燥并真空浓缩。将浓缩的物质用二氯甲烷加载到120g

金硅胶柱上，并通过正相色谱法(

0％-20％乙酸乙酯/己烷作为洗脱剂)纯化，产生三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯(11.785g，35.045mmol，78.171％收率)。

中间体2

2-溴-7-(甲氧基甲氧基)萘

向7-溴萘-2-酚(2.0g，9.0mmol)在二甲基乙酰胺(40mL)中的溶液添加氯(甲氧基)甲烷(1.4g，18mmol)和碳酸铯(5.8g，18mmol)并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应用水稀释，水层用乙酸乙酯洗涤。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥并真空浓缩。粗物质通过正相色谱法、使用5-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱液纯化，产生2-溴-7-(甲氧基甲氧基)萘(1.0g，3.7mmol，42％收率)。

中间体3

2-溴-1-氟-3-(甲氧基甲基)苯

在室温和氮气下，向2-溴-3-氟苯酚(1422mg，7.445mmol)在22mL四氢呋喃中的搅拌溶液中逐份添加NaH(327.6mg，8.190mmol)纯的固体。15分钟后，形成溶液。通过注射器添加氯(甲氧基)甲烷(678.6μL，8.934mmol)。搅拌2小时后，用饱和氯化铵溶液淬灭反应，然后在乙酸乙酯(30mL)和水(30mL)之间分配。分离合并的有机层，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并浓缩。将粗产物在最少量的二氯甲烷中加载到用己烷预先润湿的40克

柱上并用乙酸乙酯/己烷梯度(0％-20％乙酸乙酯)洗脱。合并含有所述产物的级分并浓缩，提供为透明油的产物(1.45g，83％)。

中间体4

2-溴-1-氟-4-(甲氧基甲氧基)苯

在室温和氮气下，向3-溴-4-氟苯酚(327mg，1.71mmol)在5.1mL四氢呋喃中的搅拌溶液中逐份添加NaH(75.3mg，1.88mmol)纯的固体。15分钟后，形成溶液。通过注射器添加氯(甲氧基)甲烷(156μL，2.05mmol)。搅拌2小时后，用饱和氯化铵溶液淬灭反应，然后在乙酸乙酯和水之间分配。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并浓缩。将粗产物在最少量的二氯甲烷中加载到用己烷预先润湿的24克

柱上并用乙酸乙酯/己烷梯度(0％-20％乙酸乙酯)洗脱。合并含有所述产物的级分并浓缩，提供为透明油的产物(120mg，29.8％)。

中间体5

4-溴-5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑

向冷却到0℃的4-溴-5-甲基-1H-吲唑(0.7g，3.3mmol)在二甲基乙酰胺(30mL)中的溶液分份添加NaH(0.19g，4.6mmol)，并将反应混合物用氮气吹扫。将反应搅拌20分钟，然后添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(0.83g，5.0mmol)并将反应搅拌2小时，同时回温至室温。通过倒入水淬灭反应，并将水层提取到乙酸乙酯中。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经MgSO₄干燥并真空浓缩。使用10-50％乙酸乙酯/己烷作为洗脱液，通过色谱法纯化粗物质，产生4-溴-5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑(0.87g，79％)。

中间体6

(R)-1-(吡咯烷-1-基)丙-2-醇

在密封管中，将R-(+)-环氧丙烷(3.69mL，52.7mmol)冷却到-78℃，然后用无水二甲胺喷射几分钟。将反应混合物加热至70℃达16小时。将反应冷却并真空浓缩20分钟，提供(R)-1-(吡咯烷-1-基)丙-2-醇(5.35g，41.4mmol，98.2％收率)。

中间体7

(R)-1-吗啉代丙-2-醇

在密封管中，将R-(+)-环氧丙烷(2.111mL，30.13mmol)和吗啉(1.490mL，17.22mmol)加热至70℃达20小时。将反应冷却并真空浓缩，提供(R)-1-吗啉代丙-2-醇(2.47g，17.01mmol，98.80％收率)。

中间体8

(R)-1-(二甲基氨基)丁-2-醇

在密封管中，将R-(+)-环氧丙烷(4.00g，55.5mmol)和二甲胺(1.00g，22.2mmol)加热至65℃达18小时。将反应冷却并真空浓缩。所生成的残余物通过硅胶纯化(含0-12％MeOH的DCM)，提供(R)-1-(二甲基氨基)丁-2-醇(1.38g，11.8mmol，53.1％收率)。

中间体9

(R)-1-((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-2-醇

在密封管中，将(R)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(1.00g，7.27mmol)、TEA(2.03mL，14.5mmol)和R-(+)-环氧丙烷(1.27mL，18.2mmol)加热至65℃达18小时。将反应冷却并真空浓缩。所生成的残余物通过硅胶纯化(含0-12％MeOH的DCM)，提供(R)-1-((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-2-醇(775mg，4.87mmol，67.0％收率)。

中间体10

(R)-1-((S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-2-醇

在密封管中，将(S)-3-甲氧基吡咯烷盐酸盐(1.00g，7.27mmol)、TEA(2.03mL，14.5mmol)和R-(+)-环氧丙烷(1.27mL，18.2mmol)加热至65℃达18小时。将反应冷却并真空浓缩。所生成的残余物通过硅胶纯化(含0-12％MeOH的DCM)，提供(R)-1-((S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-2-醇(781mg，4.90mmol，67.5％收率)。

中间体11

(R)-1-((S)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇

在密封管中，将R-(+)-环氧丙烷(0.609mL，8.69mmol)和(S)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷(1.00g，4.97mmol)加热至70℃达20小时。将反应冷却并真空浓缩，提供(R)-1-((S)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇(1.29g，4.20mmol，84.6％收率)。

中间体12

2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯

在0℃氮气下，向氯化锂(246mg，5.81mmol)和硼氢化锂(126mg，5.81mmol)在乙醇(9mL)中的悬液滴加4-甲基哌嗪-1,2-二羧酸1-(叔丁基)-2-甲基酯(750mg，2.90mmol)在无水THF(6mL)中的溶液。将反应搅拌过夜，形成白色沉淀。将沉淀物过滤并用乙醇洗涤。将合并的滤液和有机提取液浓缩，提供白色残余物，将其用乙酸乙酯提取。将合并的有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并真空浓缩。残余物通过色谱法用有0.2％NH₄OH的等度10％MeOH的DCM纯化，提供2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(104mg，0.452mmol，15.6％收率)。

中间体13

(S)-2-(2-甲基哌啶-1-基)乙-1-醇

将(S)-2-甲基哌啶(100mg，1.01mmol)、2-溴乙醇(78μL，139mg，1.11mmol，1.1eq.)、碘化钠(151mg，1eq.)、碳酸钾(418mg，3eq.)和乙腈(1mL)在4-mL小瓶中的混合物用氮气吹扫、密封并在室温下搅拌2天。将反应混合物在乙醚(15mL)和水(2mL)之间分配。醚层用盐水(2mL)洗涤、用TFA酸化并在高真空下干燥2天。将残余物用醚(3mL)洗涤，用水(0.5mL)稀释，并用10M NaOH(0.2mL)碱化。分离层，并将上层小心地经NaOH干燥。所述醚溶液在氮气下蒸发以收得粗(S)-2-(2-甲基哌啶-1-基)乙-1-醇(100mg，0.698mmol，69.24％收率)，为无色油。

中间体14

(R)-2-(2-甲基哌啶-1-基)乙-1-醇

根据中间体13的方法合成，使用(R)-2-甲基哌啶(99mg，1mmol)代替(S)-2-甲基哌啶。

中间体15

(S)-2-(3-甲氧基哌啶-1-基)乙-1-醇

根据中间体13的方法合成，使用(S)-3-甲氧基哌啶(173mg，1.50mmol)代替(S)-2-甲基哌啶。

中间体16

(R)-2-(3-甲氧基哌啶-1-基)乙-1-醇

根据中间体13的方法合成，使用R-3-甲氧基哌啶(173mg，1.50mmol)代替(S)-2-甲基哌啶。

中间体17

3-(1,4-氧氮杂环庚烷-4-基)丙-1-醇

向小瓶中添加高吗啉(0.250g，2.472mmol)、乙腈(4.943mL，2.472mmol)和3-溴-1-丙醇(0.2459mL，2.719mmol)。添加碳酸钾(0.6832g，4.943mmol)，将混合物温热至50℃并搅拌6小时。将混合物冷却至环境温度，用DCM稀释，过滤，并用DCM洗涤收集的固体。将滤液真空浓缩，粗油通过柱色谱纯化(Biotage Isolera，12g Isco RediSep Gold，有0.2％NH₄OH的10-20％MeOH/DCM)，提供3-(1,4-氧氮杂环庚烷-4-基)丙-1-醇(0.272g，1.708mmol)，为无色油。

中间体18

3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙-1-醇

根据中间体17的方法合成，使用(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷(0.250g，2.522mmol)代替高吗啉。

中间体19

2-(4-甲氧基哌啶-1-基)乙-1-醇

根据中间体13的方法合成，使用4-甲氧基哌啶(173mg，1.50mmol)代替(S)-2-甲基哌啶。

中间体20

2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙-1-醇

根据中间体13的方法合成，使用4,4-二氟哌啶盐酸盐(173mg，1.50mmol)代替(S)-2-甲基哌啶。

中间体21

(S)-2-(3-氟哌啶-1-基)乙-1-醇

根据中间体13的方法合成，使用S-3-氟哌啶盐酸盐(209mg，1.50mmol)代替(S)-2-甲基哌啶。

中间体22

4-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(甲基亚磺酰基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯

步骤A：4-羟基-2-(甲硫基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯：在25℃氮气下向3-氧代哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁基4-乙酯(50.0g，184mmol，1.00eq)在MeOH(1.00L)中的搅拌溶液添加NaOMe(49.8g，921mmol，5.00eq)，然后添加作为固体的2-甲基异硫脲(62.4g，331mmol，1.80eq，H₂SO₄)。将反应混合物在25℃搅拌16小时。用HCl(2M)将反应混合物调节至pH 5，并将所述混合物减压浓缩以除去MeOH。将残余物悬浮在300mL乙酸乙酯和300mL水中并快速搅拌。过滤所述悬液并收集白色固体。分离滤液，有机层用水(1×300mL)和盐水(1×200mL)洗涤。分离合并的有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，提供4-羟基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(51.0g，138mmol，75.4％收率，81.0％纯度)，为白色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 298.2[M+H]⁺。

步骤B：2-甲硫烷基-4-(三氟甲基磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶- 7-羧酸叔丁酯：在0℃下向4-羟基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(51.0g，171mmol，1.00eq)在DCM(500mL)中的搅拌悬液添加DIEA(44.3g，343mmol，59.9mL，2.00eq)，然后在氮气下添加三氟甲磺酸酐(72.6g，257mmol，42.4mL，1.50eq)。立即形成棕色溶液。在25℃下搅拌16小时后，将反应浓缩，产生棕色油。所述棕色油通过柱色谱法纯化(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝1:0至10:1)，提供2-甲硫烷基-4-(三氟甲基磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(46.0g，107mmol，62.4％收率)，为黄色固体，ESI MS m/z 430.2[M+H]⁺。

步骤C：4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7-羧酸叔丁酯：向2-甲硫烷基-4-(三氟甲基磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(46.0g，107mmol，1.00eq)在DMF(500mL)中的搅拌溶液添加DIEA(27.7g，214mmol，37.4mL，2.00eq)，然后是哌嗪-1-羧酸苄酯(25.9g，117mmol，22.7mL，1.10eq)。在氮气气氛下将反应加热至100℃达1小时。将反应混合物倒入乙酸乙酯(300mL)中，用H₂O(300mL×3)和盐水(200mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝1:0至5:1)，产生4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(51.0g，96.9mmol，90.5％收率，92.0％纯度)，为白色固体，ESI MS m/z 500.3[M+H]⁺。

步骤D：4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(25.0g，50.0mmol，1.00eq)在DCM(50.0mL)中的溶液添加TFA(85.6g，750mmol，55.6mL，15.0eq)。在25℃搅拌1小时后，将反应混合物减压浓缩。残余物溶于300mL乙酸乙酯和300mL水中并快速搅拌。将混合物用Na₂CO₃调节至pH 8。有机层用水(1×300mL)和盐水(1×200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，提供4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(19.0g，46.6mmol，93.2％收率，98.0％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z 400.2[M+H]⁺。

步骤E：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将3-苄氧基-1-溴萘(16.3g，52.1mmol，1.30eq)、4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(16.0g，40.1mmol，1.00eq)、Cs₂CO₃(32.6g，100mmol，2.50eq)、Pd₂(dba)₃(5.50g，6.01mmol，0.15eq)和2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(3.74g，8.01mmol，0.20eq)在二噁烷(300mL)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次。将所述混合物在氮气气氛下在85℃搅拌5小时。通过在0℃下添加水(200mL)淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯(3×200mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(SiO₂，DCM/MeOH＝10/1至5/1)，提供4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(16.0g，22.8mmol，56.9％收率，90.0％纯度)，为黄色固体。ESIMS m/z 632.5[M+H]⁺。

步骤F：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：在氮气下于0℃向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(8.00g，12.7mmol，1.00eq)在DCM(200mL)中的搅拌溶液添加m-CPBA(2.73g，12.7mmol，80.0％纯度，1.00eq)。在氮气气氛下于0℃搅拌2小时后，将反应混合物通过在0℃添加Na₂S₂O₃(10.0mL)淬灭，用水(100mL)稀释并用DCM(200mL)提取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法纯化(SiO₂，DCM/MeOH＝1/0至10/1)，提供4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(3.50g，4.92mmol，38.8％收率，91.0％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z648.5[M+H]⁺。

中间体23

(R)-1-(4-(2-羟基丙基)哌嗪-1-基)乙-1-酮

步骤A：1-[4-[(2R)-2-羟基丙基]哌嗪-1-基]乙酮：(2R)-2-甲基环氧乙烷(1.00g，17.2mmol，1.20mL，1.00eq)和1-哌嗪-1-基乙酮(8.00g，62.4mmol，3.62eq)放入微波管中。将密封的管在微波下150℃加热1小时。将混合物溶于DCM(80.0mL)中，添加(Boc)₂O(3.62eq，13.6g)并在20℃下搅拌1小时。残余物通过柱色谱法纯化(DCM/MeOH 100/1至10/1)，产生1-[4-[(2R)-2-羟基丙基]哌嗪-1-基]乙酮(3.80g，13.5mmol，78.2％收率，66.0％纯度)，为黄色油。

中间体24

1-(苄氧基)-3-溴-5-环丙基苯

步骤A：1-苄氧基-3,5-二溴苯：向3,5-二溴苯酚(1.50g，5.95mmol，1.00eq)和K₂CO₃(2.47g，17.9mmol，3.00eq)在MeCN(30.0mL)中的混合物添加苄基溴(1.07g，6.25mmol，742μL，1.05eq)，将反应混合物在80℃下搅拌2小时。过滤反应混合物并浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝1:1，产生1-苄氧基-3,5-二溴苯(1.60g，4.68mmol，78.6％收率)，为无色油。

步骤B：1-苄氧基-3-溴-5-环丙基苯：向1-苄氧基-3,5-二溴苯(1.20g，3.51mmol，1.00eq)和环丙基硼酸(392mg，4.56mmol，1.30eq)在H₂O(4.00mL)和二噁烷(20.0mL)中的混合物添加Pd(dppf)Cl₂(513mg，702μmol，0.20eq)和Cs₂CO₃(2.29g，7.02mmol，2.00eq)。将反应混合物在N₂下于90℃搅拌12小时。将反应混合物添加到水(20mL)中并用乙酸乙酯(2×15mL)提取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝1:1，产生1-苄氧基-3-溴-5-环丙基苯(270mg，890μmol，25.4％收率)，为无色油。

中间体25

4-(2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯

步骤A：4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯：在0℃下向3-吗啉代丙-1-醇(5.46g，37.6mmol，2.00eq)在THF(100mL)中的混合物分份添加NaH(2.26g，56.4mmol，60.0％纯度，3.00eq)。所述混合物在0℃下搅拌0.5小时后，添加4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(10.0g，18.8mmol，1.00eq)在THF(100mL)中的溶液，并将反应混合物在N₂下于0℃搅拌1.5小时。将所述混合物倒入NH₄Cl水溶液(300mL)中，并用DCM(2×200mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过柱色谱法纯化(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝50:1至10:1)，产生基4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(7.70g，12.8mmol，67.8％收率，98.8％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z 597.4[M+H]⁺。

步骤B：4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪- 1-羧酸苄酯：向4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(7.70g，12.9mmol，1.00eq)在DCM(80.0mL)中的混合物添加TFA(119g，1.04mol，76.9mL，80.6eq)，并将反应混合物在15℃下搅拌1小时。浓缩反应混合物，然后用DCM(100mL)稀释，并用NaOH水溶液调节至pH8。分离有机层，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，产生4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(6.00g，11.2mmol，86.9％收率，92.8％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z 497.4[M+H]⁺。

中间体26

4-(苄氧基)-2-溴-1-氟苯

向3-溴-4-氟苯酚(4.00g，20.9mmol，1.00eq)和K₂CO₃(8.68g，62.8mmol，3.00eq)在ACN(80.0mL)中的溶液添加苄基溴(3.65g，21.4mmol，2.54mL，1.02eq)并将反应混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法纯化(石油醚:乙酸乙酯；梯度从1:0至10:1)，产生4-苄氧基-2-溴-1-氟-苯(5.02g，17.0mmol，81.0％收率，95％纯度)，得到为白色固体。

中间体27

2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙-1-醇

步骤A：3-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：在-40℃和氮气气氛下向3-羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(10.0g，53.4mmol，1.00eq)在DCM(150.00mL)中的溶液添加二乙氨基三氟化硫(DAST)(12.9g，80.1mmol，10.6mL，1.50eq)。在-40℃搅拌2小时后，将混合物温热至20℃并搅拌16小时。将所述混合物倒入5％碳酸氢钠水溶液(200mL)中并用二氯甲烷(2×100mL)提取。有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法纯化(石油醚/乙酸乙酯100:1至5:1)。收集目标级分并在真空浓缩，产生3-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.30g，22.7mmol，42.6％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝5.27(t，J＝3.6Hz，0.5H)，5.13(t，J＝3.6Hz，0.5H)，3.77-3.38(m，4H)，2.26-2.15(m，1H)，2.08-1.85(m，1H)，1.46(s，9H)。

步骤B：3-氟吡咯烷：在0℃下向3-氟吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(4.30g，22.7mmol，1.00eq)在DCM(50.00mL)中的溶液滴加HCl/二噁烷(4M，35.0mL，6.16eq)。将混合物温热至20℃并搅拌1小时。将所述混合物真空浓缩。残余物用二异丙醚(20mL)研磨，过滤沉淀物并真空干燥，提供3-氟吡咯烷(2.70g，21.5mmol，94.6％收率，HCl)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝5.51(t，J＝3.6Hz，0.5H)，5.38(t，J＝3.6Hz，1H)，3.66-3.27(m，5H)，2.45-2.12(m，2H)。

步骤C：2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙酸甲酯：将3-氟吡咯烷(2.70g，21.5mmol，1.00eq，HCl)在DCM(27.00mL)中的悬液冷却到0℃。添加三乙胺(5.44g，53.8mmol，7.45mL，2.50eq)和2-溴乙酸甲酯(3.62g，23.7mmol，2.23mL，1.10eq)并将反应混合物在20℃下搅拌16h。将反应混合物用CH₂Cl₂(100mL)和水(50mL)稀释。有机层用5％柠檬酸水溶液(1×50mL)洗涤。水层由饱和碳酸钠水溶液(20mL)碱化并用乙酸乙酯(3×100mL)提取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并真空浓缩，产生2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙酸甲酯(2.20g，13.7mmol，63.5％收率)。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝5.22-5.02(m，1H)，3.66(s，3H)，3.35(s，2H)，3.07-2.93(m，1H)，2.91-2.77(m，2H)，2.67(dt，J＝5.2，8.4Hz，1H)，2.21-1.93(m，2H)。

步骤D：2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙醇：在0℃下向LiAlH₄(706mg，18.6mmol，1.50eq)在THF(20mL)中的溶液滴加2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙酸甲酯(2.00g，12.4mmol，1.00eq)在THF(10mL)中的溶液。将混合物温热至20℃并搅拌3小时。将混合物用饱和硫酸钠水溶液(1mL)淬灭。过滤混合物并将滤液真空浓缩。产物通过硅胶色谱法使用含5％MeOH的DMC纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙醇(1.20g，9.01mmol，72.6％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝5.28-5.05(m，1H)，3.68-3.61(m，2H)，2.99-2.73(m，4H)，2.72-2.67(m，2H)，2.58-2.45(m，1H)，2.28-1.97(m，2H)。

中间体28

3-甲基哌嗪-1,3-二羧酸1-(叔丁基)酯

步骤A：哌嗪-2-羧酸甲酯：向2-甲基哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(5.0g，22.6mmol，1.00eq)在MeOH(50.0mL)中的混合物添加HCl/二噁烷(4.0M，134mL)。将反应混合物脱气并用氮气吹扫3次，并将所述混合物在氮气气氛下于25℃搅拌12小时。减压浓缩反应混合物至干，产生甲基哌嗪-2-羧酸酯(4.89g，2HCl，粗产物)，为白色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。

步骤B：3-甲基哌嗪-1,3-二羧酸1-(叔丁基)酯：向哌嗪-2-羧酸甲酯(4.30g，粗产物)和TEA(8.02g，79.2mmol，11.0mL)在MeOH(50.0mL)中的溶液添加二碳酸二叔丁酯(4.32g，19.8mmol，4.55mL)。在25℃搅拌12小时后，将反应混合物过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法纯化(SiO₂，DCM/MeOH＝1:0至20:1)，产生3-甲基哌嗪-1,3-二羧酸1-(叔丁基)酯(4.80g，19.7mmol，两步，99.0％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.10-3.85(m，1H)，3.73(s，3H)，3.71-3.65(m，1H)，3.47-3.38(m，1H)，3.10-2.98(m，2H)，2.78-2.66(m，1H)，2.17(s，1H)，1.46(s，9H)。

中间体29

4-溴萘-2-酚

步骤A：2,4-二溴萘-1-胺：在环境温度下向Br2(246g，1.54mol，79.3mL，2.18eq)在AcOH(750mL)中的溶液添加萘-1-胺(101g，705mmol，99.0mL，1.00eq)在AcOH(500mL)中的溶液，并将反应在70℃搅拌1小时。反应混合物在室温下冷却并过滤。将滤饼用AcOH(300mL)洗涤，然后添加到20％NaOH水溶液(1.2L)中。将混合物搅拌20min并过滤。分离的固体用水(1L)洗涤并真空干燥，提供2,4-二溴萘-1-胺(200g，664mmol，94.2％收率)，为灰色固体。ESI MS m/z 301.9[M+H]⁺。

步骤B：4-溴-1-重氮基-萘-2-酚盐：在5-8℃用30min向2,4-二溴萘-1-胺(60.0g，199mmol，1.00eq)在AcOH(900mL)和丙酸(150mL)中的溶液逐份添加NaNO₂(16.5g，239mmol，13.0mL，1.20eq)，然后将反应混合物在5-8℃下搅拌30min。将反应混合物倒入冰水(4000mL)中，收集所生成的固体并用水(2×50mL)洗涤，提供4-溴-1-重氮基-萘-2-酚盐(150g，湿粗产物)，为灰色固体，其直接用于下一步。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.12-8.10(d，J＝8.4Hz，1H)，7.62-7.58(t，J＝7.6Hz，1H)，7.41-7.37(t，J＝7.6Hz，1H)，7.31-7.29(d，J＝8.0Hz，1H)，7.20(s，1H)。

步骤C：4-溴萘-2-酚：在13-15℃下用1h向4-溴-1-重氮基-萘-2-酚盐(100g，402mmol，1.00eq)在EtOH(2.00L)中的溶液逐份添加NaBH₄(30.4g，803mmol，2.00eq)，并将反应混合物在15-18℃下搅拌3hr。将反应过滤并浓缩至干。残余物溶于DCM(1000mL)中并用水(500mL×2)洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥并浓缩至干。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙醚/乙酸乙酯(60:1至10:1)洗脱。分离的产物通过反相HPLC进一步纯化，提供4-溴萘-2-酚(40.0g，139mmol，17.3％收率，77.4％纯度)，为灰色的固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.07–8.05(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60–7.58(d，J＝7.6Hz，1H)，7.41-7.36(m，3H)，7.07(s，1H)。

步骤D：3-苄氧基-1-溴萘：将4-溴萘-2-酚(30.0g，134mmol，1.00eq)、苄基溴(25.3g，148mmol，17.6mL，1.10eq)和K₂CO₃(55.7g，403mmol，3.00eq)在MeCN(500mL)中的混合物在80℃下加热1hr。将反应混合物过滤并浓缩至干。残余物通过硅胶柱色谱法纯化，用乙醚/乙酸乙酯(100:1至60:1)洗脱，提供3-苄氧基-1-溴萘(40.0g，128mmol，95％收率)，为黄色油。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.19–8.17(d，J＝8.0Hz，1H)，7.75–7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.64-7.63(d，J＝2.4Hz,1H)，7.52–7.37(m，7H)，7.23–7.21(d，J＝2.0Hz,1H)，5.2(s，2H)。

中间体30

三氟甲磺酸3-甲氧基萘-1-基酯

步骤A：3-甲氧基萘-1-酚：在0℃下向萘-1,3-二酚(3.00g，18.7mmol，1.00eq)在MeOH(60.0mL)中的溶液添加HCl/MeOH(4M，60.0mL，12.8eq)。将混合物在25℃搅拌60小时。在真空下除去溶剂。残余物通过硅胶色谱法(乙醚:乙酸乙酯＝10:1至5:1)进行纯化，产生3-甲氧基萘-1-酚(2.10g，12.1mmol，64.4％收率)，为棕色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃-d₆)δ＝8.10-8.08(d，J＝8.4Hz，1H)。7.73-7.71(d，J＝8.4Hz，1H)，7.47-7.45(m，1H)，7.38-7.35(m，1H)，6.80-6.79(d，J＝2.0Hz，1H)，6.56-6.55(d，J＝2.4Hz，1H)，3.92(s，3H)。

步骤B：(3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯：在0℃下向3-甲氧基萘-1-酚(2.10g，12.0mmol，1.00eq)在DCM(40.0mL)中的溶液添加DIEA(7.79g，60.3mmol，10.5mL，5.00eq)和三氟甲磺酸酐(5.10g，18.1mmol，2.98mL，1.50eq)。将混合物在25℃搅拌1小时。将混合物用DCM(30mL)和水(10mL)稀释，并用DCM(20mL)提取。将合并的有机层用盐水洗涤(5mL)，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(乙醚:乙酸乙酯＝20:1至10:1)进行纯化，产生(3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(3.00g，8.52mmol，70.7％收率，87.0％纯度)，为棕色油。ESI MS m/z 307.1[M+H]⁺。

中间体31

7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶

步骤A：7-苄基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇：向EtOH(600mL)分份添加Na(5.56g，241mmol，5.73mL，2.40eq)。将反应混合物搅拌1小时。向混合物添加1-苄基-3-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯(30.0g，100mmol，1.00eq，HCl)和尿素(14.5g，242mmol，13.0mL，2.40eq)。将反应混合物在75℃搅拌36小时，然后在真空下除去溶剂。将残余物溶于水(50mL)中并用HCl(120mL，2M)酸化。从溶液中沉淀出白色固体并通过过滤收集。将滤饼真空干燥，提供7-苄基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇(22.0g，83.8mmol，83.2％收率，98％纯度)，为白色固体。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝10.97(br s，1H)，10.66(br s，1H)，7.55-6.95(m，5H)，3.81-3.50(m，2H)，3.26-2.91(m，2H)，2.77-2.58(m，2H)，2.34-2.09(m，2H)。

步骤B：7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：向DIEA(30.1g，233mmol，40.7mL，3.00eq)在POCl₃(330g，2.15mol，200mL)中的溶液添加7-苄基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇(20.0g，77.7mmol，1.00eq)。将反应混合物在110℃搅拌5小时。将反应混合物真空浓缩。残余物溶于DCM(400mL)中并倒入饱和NaHCO₃(200mL)中。混合物用DCM(2×400mL)提取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(乙醚:DCM＝10:1至0:1)进行纯化，产生7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(7.70g，26.2mmol，33.7％收率)，为棕色油。¹HNMR(300MHz，氯仿-d)δ＝7.43–7.28(m，5H)，3.73(s，2H)，3.66(br s，2H)，2.84(br s，4H)

中间体32

4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-(甲磺酰基)-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯

步骤A：4-羟基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯：在氮气下于25℃通过注射器向4-乙基-3-氧代哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁酯(44.0g，162mmol，1.00eq)在MeOH(1.00mL)中的搅拌溶液添加NaOMe(35.0g，649mmol，4.00eq)在MeOH(600mL)中的溶液，然后是2-甲基异硫脲(61.1g，324mmol，2.00eq，H₂SO₄)。在25℃下搅拌16小时后，减压浓缩反应混合物以除去MeOH。将残余物悬浮在500mL乙酸乙酯和500mL水中并快速搅拌。用HCl(2M)将反应混合物调节至pH 5。过滤沉淀物，用乙酸乙酯洗涤这白色固体并真空干燥，产生4-羟基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(33.0g，103mmol，63.8％收率，93.2％纯度)，为白色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。¹HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ＝4.19(s，2H)，3.49(br s，2H)，2.46(s，3H)，2.35(br t，J＝5.2Hz，2H)，1.42(s，9H)。

步骤B：产生2-甲硫烷基-4-(三氟甲基磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯：在氮气下于0℃向4-羟基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(15.0g，50.4mmol，1.00eq)在DCM(200mL)中的搅拌悬液添加DIEA(26.1g，202mmol，35.2mL，4.00eq)，然后通过注射器添加三氟甲磺酸酐(28.5g，101mmol，16.6mL，2.00eq)。立即形成棕色溶液。将反应混合物在25℃搅拌12小时。反应混合物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝1:0至10:1)进行纯化，产生2-甲硫烷基-4-(三氟甲基磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(16.7g，35.7mmol，70.9％收率，91.9％纯度)，为白色固体。ESI MS m/z 374.0[M+H]⁺。

步骤C：4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7-羧酸叔丁酯：向2-甲硫烷基-4-(三氟甲磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(16.7g，38.9mmol，1.00eq)在DMF(100mL)中的搅拌溶液添加DIEA(10.0g，77.9mmol，2.00eq)和哌嗪-1-羧酸苄酯(9.41g，42.8mmol，1.10eq)。将反应加热至100℃并在氮气气氛下搅拌1小时。反应混合物用水(150mL)稀释，用HCl(2M)将反应混合物调节至pH5并用DCM(3×200mL)提取。合并的有机层用饱和NaHCO₃(3×150mL)、盐水(3×150mL)和H₂O(3×150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生叔丁基4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸酯(18.1g，36.2mmol，93.0％收率，94.1％纯度)，为黄色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 500.1[M+H]⁺。

步骤D：4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7-羧酸叔丁酯：在氮气下于0℃向4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(14.4g，28.9mmol，1.00eq)在DCM(150mL)中的搅拌溶液添加为固体的间氯过氧苯甲酸(17.4g，101mmol，3.50eq)。在氮气气氛下于0℃搅拌2小时后，将反应混合物用水(300mL)稀释，并将反应混合物用饱和NaHCO₃水溶液调节至pH8，并用DCM(3×200mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10:1至1:2)进行纯化，产生4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(11.0g，19.7mmol，68.6％收率，95.4％纯度)，为白色固体。ESI MS m/z 532.1[M+H]⁺.

中间体33

(1-溴异喹啉-3-基)氨基甲酸叔丁酯

步骤A：将1-溴异喹啉-3-胺(400mg，1.79mmol，1.00eq)和叔丁氧羰基碳酸叔丁酯(3.91g，17.9mmol，4.12mL，10.0eq)的混合物在70℃搅拌16小时。残余物通过柱色谱法纯化(SiO₂，乙醚/乙酸乙酯＝5:1)，产生N-(1-溴-3-异喹啉基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.24mmol，69.2％收率)，为黄色固体。ESI MS m/z 322.1，324.1[M+H]⁺。

中间体34

三氟甲磺酸3-甲氧基-6-甲基萘-1-基酯

步骤A：3-甲氧基萘-1-酚：在0℃下向萘-1,3-二酚(40.0g，250mmol，1.00eq)在MeOH(800mL)中的溶液添加HCl(4M，750mL，12.0eq，4M in MeOH)。将混合物温热至18℃并搅拌30小时。将混合物真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至1/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生3-甲氧基萘-1-酚(17.7g，96.5mmol，38.6％收率，95％纯度)，为红色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.17(d，J＝8.4Hz，1H)，7.74(d，J＝8.0Hz，1H)，7.50(ddd，J＝1.2，6.8，8.0Hz，1H)，7.38(ddd，J＝1.2，6.8，8.0Hz，1H)，6.81(d，J＝2.0Hz，1H)，6.76(br s，1H)，6.62(d，J＝2.4Hz，1H)，3.91(s，3H)。

步骤B：叔丁基-[(3-甲氧基-1-萘基)氧基]-二甲基硅烷：在0℃下向3-甲氧基萘-1-酚(20.0g，115mmol，1.00eq)和咪唑(23.5g，344mmol，3.00eq)在THF(400mL)中的溶液滴加TBSCl(26.0g，172mmol，21.1mL，1.50eq)。将混合物温热至25℃并搅拌16小时。将混合物用石油醚(600mL)和乙酸乙酯(200mL)稀释，然后用水(1×200mL)和盐水(1×200mL)洗涤。分离的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至10/1)进行纯化。获得叔丁基-[(3-甲氧基-1-萘基)氧基]-二甲基硅烷(28.0g，97.1mmol，84.6％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.01(d，J＝8.4Hz，1H)，7.61(d，J＝8.0Hz，1H)，7.35(dt，J＝1.2，7.6Hz，1H)，7.24(dt，J＝1.2，7.6Hz，1H)，6.71(d，J＝2.0Hz，1H)，6.48(d，J＝2.4Hz，1H)，3.82(s，3H)，1.02(s，9H)，0.23(s，6H)。

步骤C：叔丁基-[[3-甲氧基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1- 萘基]氧基]-二甲基硅烷和叔丁基((3-甲氧基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环- 2-基)萘-1-基)氧基)二甲基硅烷：在氮气气氛下于100℃将叔丁基-[(3-甲氧基-1-萘基)氧基]-二甲基硅烷(26.0g，90.1mmol，1.00eq)\4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1,3,2-二氧杂硼戊环(45.8g，180mmol，2.00eq)、(1Z,5Z)-环辛-1,5-二烯；2,4-二甲基-BLAH双环[1.1.0]丁烷(2.39g，3.61mmol，0.04eq)和4-叔丁基-2-(4-叔丁基-2-吡啶基)吡啶(1.45g，5.41mmol，0.06eq)在己烷(500mL)中的混合物搅拌16小时。将混合物用水(500mL)和乙酸乙酯(1000mL)稀释。分离的有机层用盐水(1×500mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至10/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生叔丁基-[[3-甲氧基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1-萘基]氧基]-二甲基硅烷和叔丁基((3-甲氧基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)萘-1-基)氧基)二甲基硅烷的混合物(38.0g，85.3mmol，94.6％收率，93％纯度)，为浅黄色油。ESI MS m/z 415.5[M+H]⁺

步骤D：8-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-6-甲氧基-萘-2-酚：在0℃下向叔丁基-[[3-甲氧基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1-萘基]氧基]-二甲基硅烷和叔丁基((3-甲氧基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3，2-二氧杂硼戊环-2-基)萘-1-基)氧基)二甲基硅烷的混合物(36.0g，86.9mmol，1.00eq)在丙酮(400mL)中的溶液添加Oxone(58.7g，95.6mmol，1.10eq)在H₂O(400mL)中的溶液。混合物在搅0℃拌1小时。将混合物用5％硫代硫酸钠水溶液(50mL)淬灭并用提乙酸乙酯(2×300mL)取。合并提取液并用水(1×200mL)、盐水(1×200mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并将滤液真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯200/1至20/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生为无色油的8-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-6-甲氧基-萘-2-酚(9.00g，28.4mmol，32.7％收率，96％纯度)和为白色固体的5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-7-甲氧基-萘-2-酚(9.00g，29.0mmol，33.4％收率，98％纯度)。ESI MS m/z 305.2[M+H]⁺

步骤E：[5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-7-甲氧基-2-萘基]三氟甲磺酸酯：在-40℃下向5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-7-甲氧基-萘-2-酚(11.0g，36.1mmol，1.00eq)和DIEA(14.0g，108mmol，18.9mL，3.00eq)在DCM(150mL)中的溶液滴加Tf₂O(12.2g，43.4mmol，7.15mL，1.20eq)。将混合物搅拌1小时。混合物用二氯甲烷(200mL)稀释并用水(1×200mL)和盐水(1×200mL)洗涤。分离的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至10/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生[5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-7-甲氧基-2-萘基]三氟甲磺酸酯(13.0g，29.8mmol，82.4％收率，100％纯度)，为白色固体。ESI MS m/z 436.9[M+H]⁺

步骤F：叔丁基-[(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)氧基]-二甲基硅烷：在氮气气氛下向[5-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基-7-甲氧基-2-萘基]三氟甲磺酸酯(12.5g，28.6mmol，1.00eq)和K₂CO₃(11.9g，85.9mmol，3.00eq)在二噁烷(160mL)中的溶液添加Pd(PPh₃)₄(3.31g，2.86mmol，0.10eq)和三甲基环三硼氧烷(14.4g，57.3mmol，16.0mL，2.00eq)。将反应加热到100℃达16小时。混合物用乙酸乙酯(200mL)稀释，然后用水(1×200mL)和盐水(1×200mL)洗涤。分离的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至5/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生叔丁基-[(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)氧基]-二甲基硅烷(8.00g，24.6mmol，85.9％收率，93％纯度)，为无色油状物，为红色固体。ESI MS m/z 303.2[M+H]⁺

步骤G：3-甲氧基-6-甲基-萘-1-酚：在0℃下向叔丁基-[(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)氧基]-二甲基硅烷(8.00g，26.5mmol，1.00eq)在THF(100mL)中的溶液添加TBAF(10.4g，39.7mmol，1.50eq)。将混合物在0℃搅拌3小时。将混合物用水(100mL)和乙酸乙酯(200mL)稀释。分离的有机层用盐水(1×100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯50/1至5/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生3-甲氧基-6-甲基-萘-1-酚(4.70g，25.0mmol，94.4％收率)，为红色固体。ESI MS m/z 188.4[M+H]⁺

步骤H：三氟甲磺酸3-甲氧基-6-甲基-1-萘酯：在-40℃下向3-甲氧基-6-甲基-萘-1-酚(4.70g，25.0mmol，1.00eq)和DIEA(9.68g，74.9mmol，13.1mL，3.00eq)在DCM(3.00mL)中的溶液滴加Tf₂O(8.45g，30.0mmol，4.94mL，1.20eq)。将混合物搅拌1小时。混合物用二氯甲烷(200mL)稀释并用水(1×200mL)和盐水(1×200mL)洗涤。分离的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至10/1)进行纯化。获得三氟甲磺酸3-甲氧基-6-甲基-1-萘酯(7.70g，24.0mmol，96.2％收率，99.9％纯度)，为无色油。ESI MS m/z 320.7[M+H]⁺。

根据中间体3的制备来制备下列中间体，用适当的苯酚取代2-溴-3-氟苯酚。

中间体44

2-溴-3-氟-1-(甲氧基甲氧基)-4-甲基苯

步骤1：将3-氟-4-甲基苯酚(1.016g，8.055mmol)放入Cs₂(3.9mL，64.44mmol)中并冷却至0℃。添加Br₂(0.4150mL，8.055mmol)并将混合物在室温下搅拌2hr。添加10％Na₂S₂O₂并用DCM提取混合物。合并有机层，干燥并过滤，提供2-溴-3-氟-4-甲基苯酚(1.389g，6.775mmol，84.10％收率)，其直接用于下一步。

步骤2：根据中间体8的程序，使用2-溴-3-氟-4-甲基苯酚代替2-溴-3-氟苯酚，制备2-溴-3-氟-1-(甲氧基甲氧基)-4-甲基苯。

中间体45

2-溴-1-异丙氧基-4-(甲氧基甲氧基)苯

步骤1：将4-异丙氧苯酚(1.00g，6.57mmol)和TEA(1.83mL，13.1mmol)放入DCM(25mL)中。滴加乙酰氯(7.56mL，7.56mmol)并将反应在室温下搅拌2hr。添加水，并用DCM提取混合物。将有机层干燥、过滤并浓缩，提供4-异丙氧基苯基乙酸酯(1.24g，6.38mmol，97.2％收率)，其直接用于下一步。

步骤2：将4-异丙氧基苯基乙酸酯(1.24g，6.585mmol)放入ACN(20mL)中并添加N-溴琥珀酰亚胺(1.173g，6.590mmol)。将混合物搅拌18hr。添加水，并用醚提取混合物。合并有机层，干燥并浓缩，提供3-溴-4-异丙氧基苯基乙酸酯(1.584g，5.800mmol，88.00％收率)，其直接用于下一步。

步骤3：将3-溴-4-异丙氧基苯基乙酸酯(500mg，1.83mmol)放入MeOH(7mL)中。将KOH(111mg，1.98mmol)在水(2mL)中的溶液添加到混合物中并在室温下搅拌1hr。通过添加1N HCl将反应混合物调节至pH3。用DCM提取混合物。将提取液合并、干燥、过滤并浓缩，提供粗3-溴-4-异丙氧苯酚，其直接用于下一反应。

步骤4：根据中间体8的程序，使用3-溴-4-异丙氧苯酚代替2-溴-3-氟苯酚，制备2-溴-1-异丙氧基-4-(甲氧基甲氧基)苯。

中间体46

1-溴-3-氯-2-异丙基-5-(甲氧基甲氧基)苯

步骤1：将1-溴-3-氯-2-异丙基-5-甲氧基苯(952mg，3.61mmol)放入DCM中(3mL)并冷却至0℃。添加BBr3(9030μL，9.03mmol)并将反应在0℃下搅拌2hr。添加水，并用DCM提取混合物。合并提取液并浓缩。所生成的残余物通过硅胶(含0-20％EtOAc的己烷)进行纯化，提供3-溴-5-氯-4-异丙基苯酚(575mg，2.30mmol，63.8％收率)。

步骤2：根据中间体8的程序，使用3-溴-5-氯-4-异丙基苯酚代替2-，制备1-溴-3-氯-2-异丙基-5-(甲氧基甲氧基)苯

中间体47

1-碘-3-(甲氧基甲氧基)萘

向4-碘萘-2-酚(0.80g，3.0mmol)在DCM(20mL)中的溶液添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(1.1mL，5.9mmol)和氯(甲氧基)甲烷(0.29g，3.6mmol)并将反应在室温下搅拌4小时，2小时后添加补加的氯(甲氧基)甲烷(0.15g)。将反应用盐水洗涤并真空浓缩。所述物质通过色谱法使用0至10％EtOAc/己烷梯度作为洗脱液进行纯化，产生1-碘-3-(甲氧基甲氧基)萘(0.80g，2.5mmol，86％收率)。

中间体48

3-苄氧基-1-溴萘

步骤A：2,4-二溴萘-1-胺：在室温下向Br₂(246g，1.54mol，79.3mL)在AcOH(750mL)中的溶液添加萘-1-胺(101g，705mmol，99.0mL)在AcOH(500mL)中的溶液并将反应在70℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤饼用AcOH(300mL)洗涤。接着将固体悬浮在20％NaOH水溶液(1.2L)中。将混合物搅拌20分钟并过滤。分离的固体用水(1L)洗涤并真空干燥，产生2,4-二溴萘-1-胺(200g，664mmol，94.2％收率)，为灰色固体。ES+APCI MS m/z301.9[M+H]⁺。

步骤B：4-溴-1-重氮基-萘-2-酚盐：在5-8℃下用30分钟向2,4-二溴萘-1-胺(60.0g，199mmol)在AcOH(900mL)和丙酸(150mL)中的溶液逐份添加NaNO₂(16.5g，239mmol，13.0mL)并将反应混合物在5-8℃下搅拌30分钟。将反应混合物倒入冰水(4000mL)中，过滤浆液并用水(2×50mL)洗涤固体，产生4-溴-1-重氮基-萘-2-酚盐(150g，湿粗产物)，立即将其以粗产物用于下一步。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.12-8.10(d，J＝8.4Hz，1H)，7.62-7.58(t，J＝7.6Hz，1H)，7.41-7.37(t，J＝7.6Hz，1H)，7.31-7.29(d，J＝8.0Hz，1H)，7.20(s，1H)。

步骤C：4-溴萘-2-酚：在13-15℃下用1小时向4-溴-1-重氮基-萘-2-酚盐(100g，402mmol)在EtOH(2.00L)中的溶液逐份添加NaBH₄(30.4g，803mmol)并将反应在15-18℃下搅拌3小时。将反应过滤并浓缩至干。残余物溶于DCM(1000mL)中并用水(500mL×2)洗涤。有机物经Na₂SO₄干燥并浓缩至干。残余物通过色谱法用石油醚/EtOAc(60/1→10/1)洗脱进行纯化并且物质通过反相HPLC再纯化，产生4-溴萘-2-酚(40.0g，139mmol，17.3％收率，77.4％纯度)，为灰色的固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.07–8.05(d，J＝8.0Hz，1H)，7.60–7.58(d，J＝7.6Hz，1H)，7.41-7.36(m，3H)，7.07(s，1H)。

步骤D：3-苄氧基-1-溴萘：将4-溴萘-2-酚(30.0g，134mmol)、BnBr(25.3g，148mmol，17.6mL)和K₂CO₃(55.7g，403mmol)在MeCN(500mL)中的混合物在80℃下加热1hr。将反应混合物过滤并浓缩至干。残余物通过硅胶柱色谱法用PE/EA(100/1至60/1)洗脱进行纯化，产生3-苄氧基-1-溴萘(40.0g，128mmol，95％收率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.19–8.17(d，J＝8.0Hz，1H)，7.75–7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.64-7.63(d，J＝2.4Hz,1H)，7.52–7.37(m，7H)，7.23–7.21(d，J＝2.0Hz,1H)，5.2(s，2H)。

中间体49

步骤A：4-羟基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯：在氮气下向3-氧代哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁基4-乙酯(50.0g，184mmol)在MeOH(1.00L)中的溶液添加NaOMe(49.8g，921mmol)和2-甲基异硫脲(62.4g，331mmol，H₂SO₄)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。向反应混合物添加HCl(2M)直至pH～5，然后将混合物减压浓缩。残余物悬浮在300mL乙酸乙酯和300mL水中。过滤悬液。有机相用水(1×300mL)、盐水(1×200mL)洗涤、经Na₂SO₄干燥、过滤并浓缩，产生4-羟基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(51.0g，138mmol，75.4％收率，81.0％纯度)，其直接用于下一反应。ES+APCI MS m/z 298.2[M+H]⁺。

步骤B：2-甲硫烷基-4-(三氟甲基磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶- 7-羧酸叔丁酯：在氮气下于0℃向4-羟基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(51.0g，171mmol)在DCM(500mL)中的溶液依次添加DIEA(44.3g，343mmol，59.9mL)和Tf₂O(72.6g，257mmol，42.4mL)。将反应混合物温热至25℃并搅拌16小时。浓缩反应混合物并将残余物通过柱色谱法用EtOAc/石油0→10％洗脱进行纯化，产生2-甲硫烷基-4-(三氟甲基磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(46.0g，107mmol，62.4％收率)。ES+APCI MS m/z 430.2[M+H]⁺。

步骤C：4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7-羧酸叔丁酯：向2-甲硫烷基-4-(三氟甲基磺酰氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(46.0g，107mmol在DMF(500mL)中的溶液添加DIEA(27.7g，214mmol，37.4mL)和哌嗪-1-羧酸苄酯(25.9g，117mmol，22.7mL)。将反应在N₂气氛下加热到100℃达一小时。将反应混合物倒入乙酸乙酯(300mL)。用H₂O(300mL×3)洗涤混合物。有机相用盐水(200mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，真空浓缩。残余物通过柱色谱法使用0→20％EtOAc/石油作为洗脱液进行纯化，产生4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(51.0g，96.9mmol，90.5％收率，92.0％纯度)ES+APCI MS m/z 500.3[M+H]⁺。

步骤D：4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1–羧酸苄酯：向4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(25.0g，50mmol)在DCM(50mL)中的溶液添加TFA(85.6g，750mmol，55.6mL)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，并将残余物溶于300mL乙酸乙酯和300mL水中，添加Na₂CO₃直至pH～8。有机层用水(1×300mL)、盐水(1×200mL)洗涤并经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1–羧酸苄酯。产物无需进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 400.2[M+H]⁺。

步骤E：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将3-苄氧基-1-溴萘(16.3g，52.1mmol)、4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(16.0g，40.1mmol)、Cs₂CO₃(32.6g，100mmol)、Pd₂(dba)₃(5.50g，6.01mmol)和RuPhos(3.74g，8.01mmol)在二噁烷(300mL)中的混合物用N₂脱气3次，并将混合物在N₂气氛下在85℃搅拌5小时。通过在0℃下添加水(200mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(3×200mL)提取。将合并的有机层用盐水(3×150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法用10→20％MeOH/DCM洗脱进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(16.0g，22.8mmol，56.9％收率，90.0％纯度ES+APCI MS m/z 632.5[M+H]⁺。

步骤F：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：在氮气气氛下于0℃向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(8.00g，12.7mmol)在DCM(200mL)中的溶液添加m-CPBA(2.73g，12.7mmol，80.0％纯度)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。通过在0℃下添加Na₂S₂O₃(10mL)淬灭反应混合物，然后用水(100mL)稀释并用DCM(200mL)提取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法用0→10％MeoH/DCM洗脱纯化为4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(3.50g，4.92mmol，38.8％收率，91.0％纯度)ES+APCI MS m/z 648.5[M+H]⁺。

中间体50

4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯

步骤A：4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7-羧酸叔丁酯：在氮气下于0℃向4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(14.4g，28.9mmol)在DCM(150mL)中的搅拌溶液添加m-CPBA固体(17.4g，101mmol)。在0℃下搅拌2小时后，将反应混合物用水(300mL)稀释，用饱和NaHCO₃水溶液碱化至pH～8，然后用DCM(3×200mL)提取。合并的有机层用盐水(3×200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯10/1至1/2)进行纯化，产生4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(11.0g，19.7mmol，68.6％收率，95.4％纯度)。ES+APCI MSm/z 532.1[M+H]⁺。

中间体51

4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑

步骤A：4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑：向4-溴-5-甲基-1H-吲唑(3g，14.2mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(2.39g，28.4mmol，2.60mL)在DCM(30mL)中的混合物添加TsOH*H₂O(270mg，1.42mmol)，并将混合物在15℃下搅拌2小时。完成后，将反应混合物真空浓缩，并将残余物通过柱色谱法使用5→20&EtOAc/石油醚作为洗脱液进行纯化，产生4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(4g，13.6mmol，95.3％收率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.01(s，1H)，7.47(d，J＝8.4Hz，1H)，7.25(d，J＝8.4Hz，1H)，5.70(dd，J＝2.8，9.2Hz，1H)，4.05-3.96(m，1H)，3.79-3.70(m，1H)，2.66-2.44(m，4H)，2.25-2.04(m，2H)，1.84-1.56(m，3H)。

中间体52

4-溴-5-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑

按照中间体51，用4-溴-5-甲氧基-1H-吲唑取代步骤A中的4-溴-5-甲基-1H-吲唑，制备4-溴-5-甲氧基-1-(四氢-2H-吡喃-2-yl)-1H-吲唑。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.00(s，1H)，7.53(d，J＝9.2Hz，1H)，7.16(d，J＝9.2Hz，1H)，5.70(dd，J＝2.8，9.2Hz，1H)，4.04-3.98(m，1H)，3.96(s，3H)，2.55-2.49(m，1H)，2.23-2.05(m，2H)，1.83-1.69(m，3H)。

中间体53

3-(苄氧基)-1-溴-2-甲基萘

步骤A：2-甲基-3-氧代-4-苯基-丁酸乙酯.向干燥的250ml三颈烧瓶中添加3-氧代-4-苯基-丁酸乙酯(4.00g，19.4mmol.)、THF(50.0mL)、氢化钠(931mg，23.3mmol)，并将反应在0℃下搅拌0.5小时。接着滴加甲基碘溶液(3.03g，21.3)。添加完成后，将反应混合物温热至20℃并在20℃下搅拌两小时。通过在℃下添加水(10.0mL)淬灭反应混合物，然后用乙酸乙酯(20.0mL)稀释并分层。接着用乙酸乙酯(20.0mL×3)提取水层。将合并的有机层用盐水(30.0mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩以产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚:乙酸乙酯20:1至10:1)进行纯化，产生2-甲基-3-氧代-4-苯基-丁酸乙酯(3.60g，16.3mmol，84.3％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.38-7.28(m，3H)，7.25-7.19(m，2H)，4.22-4.15(m，2H)，3.87(d，J＝2.0Hz，2H)，3.65(q，J＝7.2Hz，1H)，1.34(d，J＝7.2Hz，3H)，1.30-1.26(m，3H)。

步骤B：2-甲基萘-1,3-二酚.将2-甲基-3-氧代-4-苯基-丁酸乙酯(3.60g，16.3mmol)在浓硫酸(19.9g，203mmol)中的溶液在15℃下搅拌12小时。将反应混合物倒入冰水(30.0mL)并通过过滤收集所生成的固体并真空干燥，给出2-甲基萘-1,3-二酚(1.80g，10.3mmol，63.2％收率)，为红色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝8.02(d，J＝8.0Hz，1H)，7.65-7.54(m，1H)，7.41(t，J＝7.2Hz，1H)，7.36-7.31(m，1H)，6.80(s，1H)，4.29-4.20(s，2H)，2.41-2.24(s，3H)。

步骤C：3-甲氧基-2-甲基-萘-1-酚.将2-甲基萘-1,3-二酚(1.70g，9.76mmol)添加到HCl/MeOH(2M，35.0mL)中并将所生成的混合物在30℃下搅拌3天。将反应物真空浓缩，残余物通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯1:1)进行纯化，产生3-甲氧基-2-甲基-萘-1-酚(800mg，4.25mmol，43.5％收率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝8.02(d，J＝8.4Hz，1H)，7.69(d，J＝8.4Hz，1H)，7.44-7.38(m，1H)，7.37-7.31(m，1H)，6.79(s，1H)，5.14(s，1H)，3.94(s，3H)，2.29(s，3H)。

步骤D：(3-甲氧基-2-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯.在N₂气氛下于0°向3-甲氧基-2-甲基-萘-1-酚(800mg，4.25mmol)和吡啶(504mg，6.38mmol)在DCM(10.0mL)中的混合物滴加三氟乙酸酐(1.44g，5.10mmol)。将混合物温热至20℃并再搅拌5小时。在真空下除去溶剂并将残余物通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯1:1)进行纯化，产生(3-甲氧基-2-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(1.30g，4.06mmol，95.5％收率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.97(d，J＝7.6Hz，1H)，7.79-7.74(m，1H)，7.52-7.43(m，2H)，7.14(s，1H)，3.99(s，3H)，2.42(s，3H)

步骤E：1-溴-3-甲氧基-2-甲基-萘：将(3-甲氧基-2-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(466mg，1.45mmol)、t-Bu-Brettphos(154mg，290umol)、溴化钾(259mg，2.17mmol)、PEG-200(175mg)、2-丁酮(157mg，2.17mmol)和Pd₂(dba)₃(133mg，145umol)加入密封管内的甲苯(10.0mL)中，并将混合物用N₂脱气5分钟。接着，在20℃下滴加三异丁基铝(431mg，2.17mmol)。混合物加热至100℃达24hr。将反应混合物倒入水(30.0mL)中并将水层用乙酸乙酯(20.0mL×3)提取。合并的有机层用盐水(30.0mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩以产生残余物，残余物通过柱色谱(石油醚:乙酸乙酯10:1)预纯化，然后通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯10:1)产生1-溴-3-甲氧基-2-甲基-萘(700mg，2.79mmol，64.1％收率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)＝8.26-8.17(m，1H)，7.73-7.69(m，1H)，7.47-7.40(m，2H)，7.09(s，1H)，3.98-3.95(m，3H)，2.56(s，3H)。

步骤F：4-溴-3-甲基-萘-2-酚：在N₂下的同时，用10分钟的时间向冷却到-78℃的1-溴-3-甲氧基-2-甲基-萘(580mg，2.31mmol)和四丁基碘化铵(2.13g，5.78mmol)在DCM(11.0mL)中的溶液滴加BCl₃溶液(1M，5.78mL)。将反应混合物温热至0℃并在室温下搅拌2小时。接着在真空下除去溶剂并将残余物通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯5:1)进行纯化，产生4-溴-3-甲基-萘-2-酚(500mg，2.11mmol，91.3％收率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝8.26-8.15(m，1H)，7.63(dd，J＝3.6，6.0Hz，1H)，7.45-7.38(m，2H)，7.11(s，1H)，5.09(s，1H)，2.60(s，3H)，1.56(s，3H)。

步骤G：3-苄氧基-1-溴-2-甲基-萘.在N₂下于20℃向4-溴-3-甲基-萘-2-酚(265mg，1.12mmol)和苄基溴(201mg，1.18mmol)在乙腈(3.00mL)中的混合物一次性添加碳酸钾(310mg，2.24mmol)。接着将混合物在60℃下搅拌两小时。在真空下除去溶剂并将残余物通过制备型TLC(石油醚:乙酸乙酯5:1)进行纯化，产生3-苄氧基-1-溴-2-甲基-萘(250mg，695umol，31.0％收率，91.0％纯度)，为白色固体。ES+APCI MS m/z 327.0，329.0[M+H]⁺。

中间体54

2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯

步骤A：(4-溴-2-萘基)2,2-二甲基丙酸酯.在0℃下向4-溴萘-2-酚(10g，44.8mmol)和TEA(9.07g，89.7mmol)在DCM(200mL)中的溶液添加2,2-二甲基丙酰氯(8.11g，67.2mmol)。将反应将混合物在0℃下搅拌10min。通过添加水(50mL)淬灭反应混合物并分层。有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EA＝1:0至100:1)进行纯化，产生(4-溴-2-萘基)2,2-二甲基丙酸酯(9g，29.3mmol，65.4％收率)，为红色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.22(d，J＝8.0Hz，1H)，7.83-7.77(m，1H)，7.63-7.49(m，4H)，1.41(s，9H)。

中间体55

4-(2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.

步骤A：7-苄基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二酚.向EtOH(600mL)分份添加Na(5.56g，241mmol)并将混合物搅拌1小时。向该溶液添加1-苄基-3-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯(30.0g，100mmol)和尿素(14.5g，242mmol)并将反应混合物在75℃下搅拌36小时。在真空下除去溶剂并将残余物溶于水(50mL)中，通过添加HCl(120mL，2M)酸化，此时沉淀出固体。过滤固体，并将滤饼真空干燥，产生7-苄基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇(22.0g，83.8mmol)。¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝10.97(br s，1H)，10.66(br s，1H)，7.55-6.95(m，5H)，3.81-3.50(m，2H)，3.26-2.91(m，2H)，2.77-2.58(m，2H)，2.34-2.09(m，2H)。

步骤B：7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶.向DIEA(30.1g，233mmol)在POCl₃(330g，2.15mol)中的溶液添加7-苄基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二酚(20.0g，77.7mmol)并将反应混合物在110℃下搅拌5小时。完成后，将反应混合物真空浓缩。残余物溶于DCM(400mL)中并倒入饱和NaHCO₃(200mL)中并分层。用DCM(2×400mL)提取水层。合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE/DCM＝10/1至0/1)进行纯化，产生7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(7.70g，26.2mmol)。¹HNMR(300MHz，氯仿-d)δ＝7.43-7.28(m，5H)，3.73(s，2H)，3.66(br s，2H)，2.84(br s，4H)。

步骤C：4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯.向7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-pyrido[3,4-d]嘧啶(17.3g，58.8mmol)在DMSO(200mL)中的溶液添加DIEA(19.0g，147mmol)和哌嗪-1-羧酸叔丁酯(11.5g，61.7mmol)并将混合物在55℃下搅拌10小时。将反应混合物倒入乙酸乙酯(200mL)并用水(3x200mL)洗涤。合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生残余物。残余物通过由MTBE(200mL)研磨进行纯化，产生4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(24g，52.9mmol)。ES+APCI MS m/z 444.2[M+H]⁺。

步骤D：4-[7-苄基-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4- 基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯.将3-吗啉代丙-1-醇(11.8g，81.1mmol)、4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(18g，40.5mmol)、BINAP(5.05g，8.11mmol)、t-BuONa(9.74g，101mmol)和Pd₂(dba)₃(3.71g，4.05mmol)在甲苯(300mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，并将混合物在110℃和N₂气氛下搅拌3小时。将反应混合物倒入H₂O(200mL)并用乙酸乙酯(3x300mL)提取水层。合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至5/1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(14g，22.5mmol)。ES+APCI MS m/z 553.4[M+H]⁺。

步骤E：4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪- 1-羧酸叔丁酯.在N₂下向4-[7-苄基-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(14g，25.3mmol)在MeOH(1L)中的溶液添加干燥的Pd/C(3g，10％纯度)。将悬液真空脱气并用H2吹扫几次。在H₂(15psi)和40℃下搅拌混合物10小时。过滤混合物并将滤液真空浓缩，产生残余物。残余物通过反相快速色谱[水(0.1TFA)/乙腈]进行纯化，产生4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(6.5g，13.9mmol)。ES+APCI MS m/z 463.4[M+H]⁺。

中间体56

三氟甲磺酸萘-1-基酯.将α-萘酚(4g，27.74mmol)溶于3颈烧瓶内的DCM(200mL)中。将反应在水浴中冷却至10℃。向溶液滴加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(4.846ml，27.74mmol)和三氟甲磺酸酐(4.668ml，27.74mmol)。将反应在10℃下搅拌2小时。TLC(25％EtOAc，UV vis)显示反应完成。将有机物用水(2X)和盐水(2X)洗涤。有机物经MgSO₄干燥并真空浓缩。浓缩物利用正相色谱法在CombiFlash上(0％-12％EtOAc:己烷)进行纯化。将含有净化产物的所有级分合并并真空浓缩，产生三氟甲磺酸萘-1-基酯(6.77g，24.51mmol，88.34％收率)。

中间体57

(S)-2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯

向(S)-1-Boc-2-羟甲基哌嗪(1.0g，4.62mmol)在DCE(92.47ml，4.624mmol)中的溶液添加甲醛(3.474ml，46.24mmol)(37％的水溶液)，然后是三乙酰氧基硼氢化钠(4.9g，23.12mmol)。将混合物在室温下剧烈搅拌2.5小时。将混合物用饱和碳酸氢钠(30mL)处理，搅拌10分钟，然后用DCM(3x10mL)提取。合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。ES+APCIMS m/z 231.1[M+H]⁺。

中间体58

(R)-2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯

标题化合物如中间体57那样制备，用(R)-2-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯取代(S)-1-Boc-2-羟甲基哌嗪。ES+APCI MS m/z 231.1[M+H]⁺

中间体59

1-溴-3-氯-2-氟-5-(甲氧基甲氧基)苯

向圆底烧瓶中添加THF(8.87ml，4.44mmol)，然后是氢化钠，60％在矿物油中的分散体(0.213g，5.32mmol)。混合物冷却至0℃，然后逐份添加3-溴-5-氯-4-氟苯酚(1.0g，4.44mmol)。一旦鼓泡停止，就将所生成的深色混合物在0℃下搅拌30min。然后添加氯甲基甲醚(0.421ml，5.54mmol)并将混合物温热至环境温度，在此搅拌2hr。添加饱和氯化铵水溶液，并用DCM提取混合物。有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗物质进行色谱(0-15％EtOAc的己烷溶液)，提供为透明油的产物。

中间体60

4-溴-1-四氢吡喃-2-基-5-(三氟甲基)吲唑

步骤A：4-溴-1-四氢吡喃-2-基-5-(三氟甲基)吲唑：向4-溴-5-(三氟甲基)-1H-吲唑(500mg，1.89mmol，1eq)在DCM(10mL)中的溶液添加3,4-二氢-2H-吡喃(476mg，5.66mmol，517uL，3eq)和TsOH·H₂O(35.9mg，188umol，0.1eq)。将混合物在15℃下搅拌1小时。浓缩混合物。将残余物通过柱色谱法(SiO₂，PE:EA＝10:1至1:1)进行纯化，产生4-溴-1-四氢吡喃-2-基-5-(三氟甲基)吲唑(480mg，1.37mmol，72.9％收率)，为黄色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.20(s，1H)，7.69-7.63(m，2H)，5.70(dd，J＝2.8，8.8Hz，1H)，4.05-3.96(m，1H)，3.79-3.70(m，1H)，2.56-2.50(m，1H)，2.27-2.04(m，2H)，1.80-1.74(m，2H)，1.60-1.54(m，1H)。

中间体61

8-溴-6-(甲氧基甲氧基)喹啉：将8-溴喹啉-6-醇(1.00g，4.46mmol)在DCM(20mL)中的搅拌悬液冷却至0℃并添加二异丙基乙胺(1.2mL，6.7mmol，1.5eq.)，然后滴加氯(甲氧基)甲烷(0.41mL，5.4mmol，1.2eq.)，将反应混合物温热至室温过夜。接下来添加浓氨水(0.5mL，～5mmol)，将生成的混合物在室温下搅拌1小时。将混合物真空蒸发并在硅胶Redisep 40g上使用20％EtOAc/己烷作为洗脱液进行色谱分离，产生无色粉末(0.52g，44％)。ES+APCI MS m/z 268.0，[M+H]⁺。

实施例1

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)- 羧酸叔丁酯：在2mL的二甲基乙酰胺中合并4-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(1.0g，3.7mmol)、三乙胺(1.0mL，7.4mmol)和1-哌嗪羧酸苄酯(0.86mL，4.4mmol)。密封反应容器，在搅拌下将反应混合物加热至90℃。5小时后，将反应混合物用盐水稀释，用甲基叔丁基醚提取。将合并的有机层依次用饱和氯化铵和盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并减压浓缩成稠油。将所述油用1:1乙酸乙酯/己烷洗脱进行色谱分离(

24g)，产生4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(1.3g，2.9mmol，77％收率)。ES+APCI MS m/z 454.2[M+H]⁺。

步骤B：4-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(1.58g，3.484mmol)在二氯甲烷(11.61mL，3.484mmol)中的溶液添加三氟乙酸(2.668mL，34.84mmol)并将反应在室温下搅拌3小时。将反应真空浓缩，残余物吸收在二氯甲烷中。所述溶液依次用1M NaOH和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过柱色谱法(Biotage Isolera，24G Isco

Gold，10至20％甲醇/二氯甲烷)进行纯化，给出产物(1.1g，89％)，为灰白色泡沫。ES+APCI MS m/z 354.2[M+H]⁺。

步骤C：4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4- 基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向小瓶中添加三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(0.0069g，0.0075mmol)、消旋-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘(0.0096g，0.015mmol)和甲苯(0.62mL，0.19mmol)。将氩气鼓泡通过混合物5分钟，然后将小瓶加盖并将混合物加热至100℃达15分钟。将混合物冷却至环境温度，然后添加叔丁醇钠(0.036g，0.37mmol)，接着是1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘(0.050g，0.19mmol)和4-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.13g，0.37mmol)。将小瓶加盖并将混合物加热至100℃达20小时。将混合物冷却至环境温度，用二氯甲烷稀释并通过GF/F纸过滤。滤液通过柱色谱法(Biotage Isolera，24G Isco

10-50％乙酸乙酯/二氯甲烷)进行浓缩，给出产物(0.062g，61％)，为灰白色泡沫。ES+APCI MS m/z 540.3[M+H]⁺。

步骤D：7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶：向4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.061g，0.11mmol)在乙醇(1.1mL，0.11mmol)and四氢呋喃(1.1mL，0.11mmol)中的溶液添加钯(0.024g，0.011mmol)(Degussa型，10wt％，50％H₂O)。通过真空将H₂气氛引入反应容器中，然后将反应混合物保持在H₂气氛下。将混合物在环境温度下搅拌小时2.5小时，然后用甲醇稀释并通过GF/F纸过滤。将无色滤液在真空下用甲苯浓缩，提供灰白色泡沫(0.048g，105％)，其直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 406.2[M+H]⁺。

步骤E：1-(4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：在环境温度下向7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶(0.046g，0.11mmol)在二氯甲烷(1.1mL，0.11mmol)中的悬液添加丙烯酰氯(1.2mL，0.12mmol)(新鲜制备的0.1M在二氯甲烷中的溶液)，然后是三乙胺(0.032mL，0.23mmol)。将反应在环境温度下搅拌1小时。浓缩混合物，产物通过柱色谱法(Biotage Isolera，12G Isco

乙酸乙酯)进行纯化，给出产物(0.042g，79％)，为灰白色固体泡沫。ES+APCI MS m/z 460.2[M+H]⁺。

步骤F：1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向1-(4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.034g，0.074mmol)在乙酸乙酯(0.74mL，0.074mmol)中的溶液添加盐酸(在2-丙醇中的5至6N溶液(0.44mL，2.2mmol)。将混合物在环境温度下搅拌5小时。将混合物用乙酸乙酯(10mL)稀释，通过聚丙烯过滤器过滤，收集的固体用乙酸乙酯和己烷洗涤以提供产物，为HCl盐。用1mL氢氧化铵/甲醇处理所述不纯的物质以淬灭酸，并浓缩混合物。将残余物溶于10％甲醇/二氯甲烷中并通过柱色谱法(BiotageIsolera，12G Isco

2至5％甲醇/乙酸乙酯)进行纯化，给出产物(0.008g，25％)，为灰白色固体。ES+APCI MS m/z 416.2[M+H]⁺。

1H NMR(CD3OD，400MHz）8.49(s，1H)，8.07(app d，J＝8.2Hz，1H)，7.61(app d，J＝8.2Hz，1H)，7.35(m，1H)，7.25(m，1H)，6.80(m，3H)，6.23(dd，J＝16.8，1.6Hz，1H)，5.77(dd，J＝10.6，2.0Hz，1H)，4.22(br s，2H)，3.80(app t，J＝4.7Hz，4H)，3.63(br s，4H)，3.35(brs，2H)，3.03(br s，2H)。

实施例2

1-(4-(7-(7-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例1的方法合成，在步骤C中用2-溴-7-(甲氧基甲氧基)萘代替1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 416.1[M+H]⁺。

实施例3

1-(4-(7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例1的方法合成，在步骤C中用1-碘萘代替1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 400.2[M+H]⁺。

实施例4

1-(4-(7-(2-氟-6-羟基苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例1的方法合成，在步骤C中用2-溴-1-氟-3-(甲氧基甲基)苯代替1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 384.2[M+H]⁺。

实施例5

1-(4-(7-(2-氟-5-羟基苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例1的方法合成，在步骤C中用2-溴-1-氟-4-(甲氧基甲氧基)苯代替1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 384.2[M+H]⁺。

实施例6

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A-C：4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4- d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：根据实施例1的方法中步骤A-C合成，在步骤A中用4-氯-6-甲基-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯代替4-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸酯。ES+APCI MS m/z 430.2[M+H]⁺。

步骤D1：4-(7-(3-羟基萘-1-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4- 基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.05g，0.09mmol)在异丙醇(10mL)中的溶液添加氯化氢(5-6M在异丙醇中的溶液)(0.02mL，0.09mmol)，并将反应在室温下搅拌1小时。将反应真空浓缩，浓缩物在乙酸乙酯和水之间分配以将所述物质转化为游离碱。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥并真空浓缩，产生4-(7-(3-羟基萘-1-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.005g，0.010mmol，11％收率)。ES+APCI MSm/z 510.3[M+H]⁺。

步骤D2：4-(7-(3-羟基萘-1-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-醇：根据实施例1的方法中步骤D制备。

步骤E：1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：根据实施例1的方法中步骤E制备。

实施例7

1-(4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A-D：4-(7-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：根据总体方案1中步骤A-C合成，在步骤C中用4-溴-5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑代替1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。

步骤D1：4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基) 哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-(7-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.16g，0.26mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液添加2,2,2-三氟乙酸(0.89g，7.8mmol)，然后是苯甲醚(0.028g，0.26mmol)，并将反应在室温下搅拌3小时。将反应真空浓缩，浓缩的物质吸收在乙酸乙酯中并用碱性盐水洗涤。将合并的有机层经MgSO₄干燥并真空浓缩。将粗物质用0至10％甲醇/二氯甲烷作为洗脱液进行色谱分离，产生4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.05g，38％)。ES+APCI MS m/z 484.2[M+H]⁺。

步骤D2：7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶：根据实施例1的方法中步骤D制备。

步骤E：1-(4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：根据实施例1的方法中的步骤E制备。

实施例8

(S)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7 (6H)-羧酸叔丁酯：将1-哌嗪羧酸苄酯(1.268mL，6.575mmol)和2,4-二氯-5,6-二氢吡啶并[3 4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(2g，6.575mmol)溶于二甲基乙酰胺(10mL)中并用N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(3.445mL，19.73mmol)处理。将反应将混合物在85℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并浓缩。浓缩物通过色谱法(

0％-50％乙酸乙酯:己烷作为洗脱液)进行纯化，提供所述产物(2.69g，83％)。ES+APCI MS m/z 488.2，490.2[M+H]⁺。

步骤B：(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯：将4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(235mg，0.482mmol)、和(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇(497mg，4.82mmol)添加到二噁烷(0.5mL)中并加热至100℃达3天。将反应浓缩，所生成残余物通过硅胶(Biotage Isolera，0-12％甲醇的二氯甲烷溶液)进行纯化，提供(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(200mg，0.361mmol，74.9％收率)。ES+APCI MSm/z 555.3[M+H]⁺。

步骤C：(S)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4- d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(200mg，0.3606mmol)在二氯甲烷(1202μL，0.3606mmol)中的溶液添加三氟乙酸(828.3μL，10.82mmol)并将反应在室温下搅拌3小时。将反应真空浓缩，残余物吸收在二氯甲烷中。将溶液用1M NaOH继以盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。粗产物通过柱色谱法(Biotage Isolera，24G Isco

Gold，10至20％甲醇/二氯甲烷)进行纯化，给出产物，为灰白色泡沫(0.135g，83％)。ES+APCI MS m/z 455.2[M+H]⁺。

步骤D：(S)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向小瓶中添加三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(21.8mg，0.0238mmol)、消旋-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘(30.4mg，0.0488mmol)和甲苯(991μL，0.297mmol)。将氩气鼓泡通过混合物5分钟，然后将小瓶加盖并将混合物加热至100℃达15分钟。混合物冷却至环境温度并添加叔丁醇钠(57.2mg，0.595mmol)然后是三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯(100mg，0.297mmol)和(S)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯苄(135mg，0.297mmol)。将小瓶加盖并将混合物加热至100℃达18小时。将混合物冷却并浓缩。粗物质通过硅胶(Biotage Isolera，0-11％甲醇/二氯甲烷)进行纯化，提供(S)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(68mg，0.106mmol，35.7％收率)。ES+APCI MS m/z641.3[M+H]⁺。

步骤E：(S)-2-((7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)-N,N-二甲基丙-1-胺：向(S)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(68mg，0.11mmol)在乙醇(1061μL，0.11mmol)和四氢呋喃(1061μL，0.11mmol)中的溶液添加钯(113mg，0.053mmol)(Degussa型，10wt％，50％H₂O)。通过真空引入H₂气氛，然后将反应容器保持在H₂气氛下。将混合物在环境温度下搅拌小时3小时。所述混合物用甲醇稀释并通过GF/F纸过滤。浓缩无色滤液，提供(S)-2-((7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)-N,N-二甲基丙-1-胺(54mg，100％收率)，其不经纯化即用于下一步。ES+APCI MS m/z 507.3[M+H]⁺。

步骤F：(S)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：在环境温度下向(S)-2-((7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)-N,N-二甲基丙-1-胺(54mg，0.11mmol)在二氯甲烷(1066μL，0.11mmol)中的悬液添加丙烯酰氯(1279μL，0.13mmol)(新鲜制备的0.1M在DCM中的溶液)，然后是三乙胺(30μL，0.21mmol)。将反应在环境温度下搅拌20分钟。浓缩混合物，产物通过柱色谱法(Biotage Isolera，12G Isco

0-15％甲醇/二氯甲烷)进行纯化，给出(S)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(51mg，0.091mmol，85％收率)。ES+APCI MS m/z 561.3[M+H]⁺.

步骤G：1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将(S)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(51mg，0.091mmol)添加到含有350μL甲醇和几滴四氢呋喃的小瓶中，并将该反应小瓶加盖。在搅拌下添加HCl(379μL，2.3mmol)(6M的水溶液)，并将混合物加热至55℃达3小时。将反应冷却并真空浓缩。添加饱和碳酸氢盐溶液，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液提取反应。合并有机层并浓缩。所生成的残余物通过硅胶(Biotage Isolera，有1％浓氯化铵的4-20％甲醇的二氯甲烷溶液)进行纯化，提供标题产物(25.3mg，54％)。ES+APCI MS m/z 517.2[M+H]⁺。

¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.90(d，1H，J＝8.314Hz)，7.54(d，1H，J＝8.021)，7.34(m，1H)，7.24(m，1H)。6.72(m，1H)，6.56-6.48(m，2H)，6.32(dd，1H，J＝16.726，1.858)，5.73(dd，1H，J＝10.368，1.858)，5.45(m，1H)，4.09-3.94(m，2H)，3.63(bs，2H)，3.47(bs，2H)，3.31(m，4H)，3.16(bs，2H)，2.84(m，1H)，2.60(bs，2H)，2.45(m，1H)，2.43(s，6H)，1.31(d，3H，J＝6.162Hz)

实施例9

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(二甲基氨基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 503.2[M+H]⁺。

实施例10

1-(4-(2-(3-(二甲基氨基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-(二甲基氨基)丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 517.3[M+H]⁺。

实施例11

1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用1-(二甲基氨基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 517.3[M+H]⁺。

实施例12

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用1-甲基哌嗪代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 514.3[M+H]⁺。

实施例13

1-(4-(2-(3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用N,N-二甲基吡咯烷-3-胺代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 528.3[M+H]⁺。

实施例14

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤A中用(S)-2-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯代替哌嗪-1-羧酸苄酯并且在步骤B中用2-(二甲基氨基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 517.3[M+H]⁺。

实施例15

(R)-1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤A中(R)-2-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯取代哌嗪-1-羧酸苄酯并且在步骤B中2-(二甲基氨基)乙-1-醇取代(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCIMS m/z 517.3[M+H]⁺。

实施例16

1-(6-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤A中用2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸苄酯代替哌嗪-1-羧酸苄酯并且在步骤B中用2-(二甲基氨基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 515.3[M+H]⁺。

实施例17

1-(4-(2-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用N,N-二甲基哌啶-4-胺代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 580.3[M+H]⁺。

实施例18

1-(6-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤A中用2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸苄酯代替哌嗪-1-羧酸苄酯并且在步骤B中1-(二甲基氨基)丙-2-醇取代(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例19

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 517.3[M+H]⁺。

实施例20

1-(6-(2-(3-(二甲基氨基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤A中用2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸苄酯代替哌嗪-1-羧酸苄酯以及在步骤B中3-(二甲基氨基)丙-1-醇取代(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例21

1-(4-(2-((4-(二甲基氨基)丁-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用4-(二甲基氨基)丁-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 531.3[M+H]⁺。

实施例22

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用1-甲基哌啶-4-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例23

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用1-甲基吡咯烷-3-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 515.3[M+H]⁺。

实施例24

1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用1-(二甲基氨基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，在步骤D中用1-溴萘代替三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯，并取消步骤G。ES+APCI MS m/z 501.3[M+H]⁺。

实施例25

1-(4-(2-(3-(二甲基氨基)丙氧基)-7-(1-苯基ethyl)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-(二甲基氨基)丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，在步骤D中用(1-溴乙基)苯代替三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯，并取消步骤G。ES+APCI MS m/z 559.3[M+H]⁺。

实施例26

1-(4-(2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(哌嗪-1-基)乙酸乙酯代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。在步骤D之后，进行以下皂化反应：将4-(2-(4-(2-乙酰氧基乙基)哌嗪-1-基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯吸收在THF中(5mL)并添加2M LiOH(1mL)。将混合物在环境温度下搅拌24hr。添加饱和NH₄Cl并将反应用DCM提取。将合并的有机层浓缩，所生成的残余物通过硅胶(BiotageIsolera Gold，用0-10％MeOH的DCM溶液洗脱)进行纯化，提供4-(2-(4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯。合成的其余部分如实施例8中的步骤E进行。ES+APCI MS m/z 544.3[M+H]⁺。

实施例27

1-((S)-4-(2-(((R)-1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤A中用(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯代替哌嗪-1-羧酸苄酯以及在步骤B中用(R)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 531.3[M+H]⁺。

实施例28

(S)-1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤A中用(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯代替哌嗪-1-羧酸苄酯并且在步骤B中用2-(二甲基氨基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 517.2[M+H]⁺。

实施例29

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-吗啉乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-吗啉乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 545.2[M+H]⁺。

实施例30

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-吗啉-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用吗啉代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 501.3[M+H]⁺。

实施例31

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(吡咯烷-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用吡咯烷代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 485.2[M+H]⁺。

实施例32

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-(吡咯烷-1-基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-(吡咯烷-1-基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 543.4[M+H]⁺。

实施例33

1-(4-(2-(2-(1,1-二氧化硫代吗啉)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐

步骤A：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(300mg，463.12μmol，1.00eq)和2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙醇(166mg，926μmol，2.00eq)在甲苯(10.0mL)中的混合物添加NaOBu-t(133mg，1.39mmol，3.00eq)、BINAP(57.7mg，92.6μmol，0.20eq)、Pd₂(dba)₃(42.4mg，46.3μmol，0.10eq)。将反应将混合物在N₂下于90℃搅拌12小时。过滤反应混合物，滤饼用DCM(3×10mL)洗涤。将滤液真空浓缩。残余物通过快速色谱法(40％MeCN的水溶液(0.1％TFA))进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(230mg，301μmol，65.1％收率)，为棕色固体。ESI MS m/z 763.5[M+H]⁺。

步骤B：4-[2-[2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚：在N₂下向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(190mg，249μmol，1.00eq)在MeOH(10.0mL)中的溶液添加Pd/C(100mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌4小时。过滤反应混合物并将滤液真空浓缩，产生4-[2-[2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(90.0mg，167μmol，67.1％收率)，为棕色固体。ESI MS m/z 539.4[M+H]⁺。

步骤C：1-[4-[2-[2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向4-[2-[2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(90.0mg，167μmol，1.00eq)和DIEA(64.8mg，501μmol，87.5μL，3.00eq)在DCM(2.00mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(19.0mg，150μmol，0.90eq)。将反应混合物在-40℃下搅拌0.5h。用1mL MeOH淬灭反应混合物并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC柱纯化：Phenomenex Synergi C18 150*25*，10μ；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：12％-42％，11min，产生1-[4-[2-[2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐(32.6mg，50.2μmol，30.0％收率，91.3％纯度)，为棕色固体。ESI MS m/z 593.5[M+H]⁺。

实施例34

1-(4-(2-(3-(1,1-二氧化硫代吗啉)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐

根据实施例33的方法合成，在步骤A中用3-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)丙-1-醇代替2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙醇。ESI MS m/z 607.5[M+H]⁺。

实施例35

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(4-吗啉丁氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐

根据实施例33的方法合成，在步骤A中用4-吗啉丁-1-醇代替2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙醇。ESI MS m/z 573.4[M+H]⁺。

实施例36

(R)-1-(4-(2-((1-(4-乙酰基哌嗪-1-基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例33的方法合成，在步骤A中用1-[4-[(2R)-2-羟基丙基]哌嗪-1-基]乙酮代替2-(1,1-二氧代-1,4-噻嗪烷-4-基)乙醇。ESI MS m/z 600.6[M+H]⁺。

实施例37

1-(4-(2-(2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[2-[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙氧基]-7-(3-苄氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：在0℃下向1-[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]乙酮(277mg，1.61mmol，2.60eq)在THF(8.00mL)中的溶液添加NaH(49.4mg，1.23mmol，60％纯度，2.00eq)。将反应混合物在0℃下搅拌15分钟。向混合物添加在THF(2.00mL)中的4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(400mg，618μmol，1.00eq)。将反应混合物在0℃下搅拌20分钟。用饱和NH₄Cl(6mL)和水(6mL)淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3×30mL)提取反应混合物。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生4-[2-[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙氧基]-7-(3-苄氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(450mg，534μmol，86.5％收率，89.7％纯度)，为棕色固体。ESI MS m/z 756.3[M+H]⁺。

步骤B：1-[4-[2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]乙基]哌嗪-1-基]乙酮：在N₂下向4-[2-[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙氧基]-7-(3-苄氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(200mg，264μmol，1.00eq)在THF(10.0mL)中的溶液添加Pd/C(100mg，10％纯度)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌12小时。过滤反应混合物并将滤饼用THF(3×5mL)洗涤。将滤液真空浓缩，产生1-[4-[2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]乙基]哌嗪-1-基]乙酮(80.0mg，150μmol，56.9％收率)，为棕色固体。

步骤C：1-[4-[2-[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下用0.5h向1-[4-[2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]乙基]哌嗪-1-基]乙酮(80.0mg，150μmol，1.00eq)和DIEA(58.3mg，451μmol，78.8μL，3.00eq)在DCM(2.00mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(14.2mg，113μmol，0.75eq)。将反应混合物用MeOH(1mL)淬灭并通过DCM(20mL)稀释，接着用水(5mL)洗涤。合并的有机层用盐水(5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。反应混合物通过制备型HPLC纯化：PhenomenexGemini 150*25mm*，10μ；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：30％-55％，10min，产生1-[4-[2-[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(13.8mg，23.3μmol，15.5％收率，98.7％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 586.3[M+H]⁺。

实施例38

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例37的方法合成，在步骤A中用3-(1-哌啶基)丙-1-醇代替1-[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]乙酮。ESI MS m/z 557.5[M+H]⁺。

实施例39

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-(吡咯烷-1-基)丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例37的方法合成，在步骤A中用3-吡咯烷-1-基丙-1-醇代替1-[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]乙酮。ESI MS m/z 543.3[M+H]⁺。

实施例40

1-(4-(2-(4-(二甲基氨基)丁氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例37的方法合成，在步骤A中用4-(二甲基氨基)丁-1-醇代替1-[4-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]乙酮。ESI MS m/z 531.4[M+H]⁺。

实施例41

1-(4-(7-(3-环丙基-5-羟基苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐

步骤A：4-[7-(3-苄氧基-5-环丙基-苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸酯：向4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(400mg，805μmol，1.00eq)和1-苄氧基-3-溴-5-环丙基-苯(268mg，886μmol，1.10eq)在甲苯(10.0mL)中的混合物添加2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(75.2mg，161μmol，0.20eq)、Pd₂(dba)₃(111mg，121μmol，0.15eq)和Cs₂CO₃(656mg，2.01mmol，2.50eq)。将反应混合物在N₂下于90℃搅拌12小时。将混合物添加到水(15mL)中并用DCM(2×15mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝3:1至二氯甲烷:甲醇＝10:1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-5-环丙基-苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(170mg，230μmol，28.5％收率，97.2％纯度)，为棕色油。ESI MS m/z719.6[M+H]⁺。

步骤B：3-环丙基-5-[2-(3-吗啉代丙氧基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7-基]苯酚向4-[7-(3-苄氧基-5-环丙基-苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(150mg，209μmol，1.00eq)在MeOH(10.0mL)中的混合物添加Pd/C(150mg，10％纯度)和CH₃COOH(25.1mg，417.3μmol，23.9μL，2.00eq)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌2小时。所述反应混合物通过

过滤并浓缩滤液。获得产物3-环丙基-5-[2-(3-吗啉代丙氧基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]苯酚di乙酸酯(80.0mg，130μmol，62.4％收率)，为黄色固体。ESI MS m/z 495.2[M+H]⁺。

步骤C：1-[4-[7-(3-环丙基-5-羟基-苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮在-78℃下向3-环丙基-5-[2-(3-吗啉代丙氧基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]苯酚二乙酸酯(80.0mg，130μmol，1.00eq)在DCM(2.00mL)中的混合物添加DIEA(168mg，1.30mmol，227μL，10.0eq)和丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(13.1mg，104μmol，0.80eq)，将反应混合物在-78℃下搅拌0.5小时。将反应混合物用MeOH(2eq，10mg)淬灭，然后浓缩。残余物通过制备型HPLC(Instrument GX-K；柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*，10μ；条件：水(0.1％TFA)-ACN；开始B：8；结束B：38；梯度时间(min)：11；100％B保持时间(min)：2；流速(mL/min)：25)进行纯化。通过冷冻干燥浓缩分离的产物。获得产物1-[4-[7-(3-环丙基-5-羟基-苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐(21.5mg，31.1μmol，23.9％收率，95.8％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 549.5[M+H]⁺。

实施例42

1-(4-(7-(2-氟-5-羟基苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例41的方法合成，在步骤A中用4-(苄氧基)-2-溴-1-氟苯代替1-苄氧基-3-溴-5-环丙基-苯。ESI MS m/z 527.4[M+H]⁺。

实施例43

1-(4-(7-(3-羟基-6-甲基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，1.01mmol，1.00eq)、(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(483mg，1.51mmol，1.50eq)、Cs₂CO₃(820mg，2.52mmol，2.50eq)、2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(93.9mg，201.3μmol，0.20eq)和Pd₂(dba)₃(92.2mg，100μmol，0.10eq)在甲苯(3.00mL)中的混合物在90℃下搅拌10小时。将混合物用乙酸乙酯(50.0mL)稀释。通过过滤除去沉淀，将滤液真空浓缩。残余物通过反相硅胶柱色谱法(0.1％TFA水/乙腈)进行纯化。合并目标级分并用饱和碳酸氢钠水溶液(2.00mL)碱化，然后真空浓缩。残余物用乙酸乙酯(2×100mL)提取。合并的提取液用盐水(1×100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，产生4-[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(400.mg，599μmol，59.4％收率，100％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 667.6[M+H]⁺。

步骤B：4-[3-[[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉：在N₂下向4-[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(370mg，554μmol，1.00eq)在MeOH(10.0mL)中的溶液添加Pd-C(100mg，10％纯度)和AcOH(66.6mg，1.11mmol，2.00eq)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌2小时。过滤反应混合物并真空浓缩，提供4-[3-[[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉(295mg，553μmol，99.8％收率)，为黄色固体，其不经纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 533.6[M+H]⁺

步骤C：1-[4-[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在氮气气氛下于-40℃向丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(56.8mg，450μmol，0.80eq)和DIEA(727mg，5.63mmol，983μL，10.0eq)在DCM(2.00mL)中的混合物添加4-[3-[[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉(300mg，563μmol，1.00eq)在DCM(1.00mL)中的溶液。将混合物搅拌1小时。反应混合物通过在-40℃下添加MeOH(50μL)淬灭，用水(10.0mL)稀释，用DCM(10.0mL)提取，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，提供1-[4-[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(270mg，460μmol，81.7％收率)ESI MS m/z 587.6[M+H]⁺。

步骤D：1-[4-[7-(3-羟基-6-甲基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-78℃下向1-[4-[7-(3-甲氧基-6-甲基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(100mg，170μmol，1.00eq)在DCM(3.00mL)中的溶液添加BBr₃(213mg，852μmol，82.1μL，5.00eq)。将混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物冷却至-78℃并用DCM(20.0mL)稀释，通过添加饱和碳酸氢钠溶液(5.00mL)淬灭并在-78℃下搅拌10min，然后温热至0℃。所述混合物用DCM(2×15.0mL)提取，用盐水(1×20.0mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化(柱子：Phenomenex Gemini C18 250*50mm*，10μ；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：27％-57％，12min)，提供1-[4-[7-(3-羟基-6-甲基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(11.0mg，18.6μmol，10.9％收率，97.0％纯度)，为棕色固体。ESI MS m/z573.6[M+H]⁺。

实施例44

1-(4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，1.01mmol，1.00eq)、2-[(4-溴-5-甲基-吲唑-1-基)甲氧基]乙基-三甲基硅烷(448mg，1.31mmol，1.30eq)、Cs₂CO₃(822mg，2.53mmol，2.50eq)、Pd₂(dba)₃(138mg，151μmol，0.15eq)和2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(94.3mg，202μmol，0.20eq)在甲苯(20.0mL)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次，并在氮气氛下于90℃搅拌10小时。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯提取(3×100mL)。合并的有机层用盐水(3×50.0mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过反相HPLC(0.1％TFA水/乙腈)进行纯化，提供4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(420mg，554μmol，54.9％收率)，为黄色油。ESI MSm/z 757.6[M+H]⁺。

步骤B：4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(370mg，488μmol，1.00eq)在MeOH(10.0mL)中的溶液添加三乙胺(98.9mg，977μmol，135μL，2.00eq)、Pd/C(100mg，10％纯度)和叔丁氧羰基碳酸叔丁酯(213mg，977μmol，224μL，2.00eq)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌2小时。过滤反应混合物并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝1:0至10:1)进行纯化，提供4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(340mg，470μmol，96.2％收率)，为棕色油。ESI MS m/z 723.5[M+H]⁺。

步骤C：4-[3-[[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并 [3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉三氟乙酸盐：向4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150mg，207μmol，1.00eq)在DCM(500μL)中的溶液添加TFA(354mg，3.11mmol，230μL，15.0eq)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，提供4-[3-[[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉三氟乙酸盐(125mg，206μmol，99.3％收率)，为棕色油，并且不经纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 493.4[M+H]⁺。

步骤D 1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在氮气气氛下于-40℃向4-[3-[[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉三氟乙酸盐(120mg，197μmol，1.00eq，TFA)和DIEA(255mg，1.98mmol，345μL，10.0eq)在二氯甲烷(2.00mL)中的混合物添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(19.9mg，158μmol，0.80eq)的二氯甲烷(1.00mL)溶液。将混合物搅拌1小时。在-40℃下添加MeOH(50.0μL)淬灭反应混合物，用水(10.0mL)稀释，用二氯甲烷(10.0mL)提取，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*，10μ；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：30％-60％，10min)，提供1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(19.0mg，34.4μmol，17.4％收率，99.0％纯度)，为白色固体。ESI MS m/z 547.5[M+H]⁺。

实施例45

1-((1R,5S)-3-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯：向7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(920mg，3.13mmol，1.00eq)和3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(677mg，3.19mmol，1.02eq)在DMSO(18.0mL)中的混合物添加DIEA(1.21g，9.39mmol，1.64mL，3.00eq)。将反应混合物在60℃下搅拌1小时。混合物用EtOAc(3×20mL)稀释提取，用水(10mL)、1N HCl(5mL)、NaHCO₃(15mL)和盐水(15mL)洗涤。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生3-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(1.30g，2.41mmol，76.9％收率，87.0％纯度)，为棕色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 470.2[M+H]⁺。

步骤B：3-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯：在N₂下于15℃向1-(二甲基氨基)丙-2-醇(857mg，8.31mmol，942μL，3.00eq)在THF(40.0mL)中的溶液添加NaH(222mg，5.54mmol，60.0％纯度，2.00eq)。在15℃下搅拌0.5小时后，添加3-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(1.30g，2.77mmol，1.00eq)。将混合物在密封管中在100℃下搅拌12小时。用水(3mL)缓慢淬灭反应，然后真空浓缩。残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH 60:1至10:1)进行纯化，产生3-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(700mg，1.07mmol，38.8％收率，82.4％纯度)，为黄色油。

步骤C：3-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯：在N₂下向3-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(700mg，1.30mmol，1.00eq)在MeOH(30.0mL)中的溶液添加Pd/C(200mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫4次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌12小时。真空浓缩反应混合物。残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH 50:1至5:1)进行纯化，产生3-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(500mg，952μmol，73.2％收率，85.0％纯度)，为黄色油。

步骤D：3-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯：将Pd₂(dba)₃(84.1mg，91.8μmol，0.10eq)添加到3-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(410mg，918μmol，1.00eq)、3-苄氧基-1-溴萘(293mg，936μmol，1.02eq)、2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(85.7mg，184μmol，0.20eq)和Cs₂CO₃(897mg，2.75mmol，3.00eq)在二噁烷(9.00mL)中的溶液。将反应混合物在N₂下于100℃搅拌7小时，然后真空浓缩。将残余物用水(5mL)稀释，并用DCM(2×20mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH 100:1至20:1)进行纯化，产生3-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(317mg，441μmol，48.1％收率，94.5％纯度)，为黄色油。ESI MSm/z 679.2[M+H]⁺。

步骤E：3-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯：向基3-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(340mg，501μmol，1.00eq)在MeOH(6.80mL)中的溶液添加Pd/C(120mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫4次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌1.5小时。将混合物真空浓缩，产生3-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(210mg，316μmol，63.1％收率，88.6％纯度)，为黄色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 589.3[M+H]⁺。

步骤F：4-[4-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚三氟乙酸盐：向3-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯(180mg，306μmol，1.00eq)在DCM(230μL)中的溶液添加TFA(349mg，3.06mmol，226μL，10.0eq)。将反应混合物在18℃下搅拌0.5小时。将混合物真空浓缩，产生4-[4-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚三氟乙酸盐(528mg，粗产物)，为红色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 489.2[M+H]⁺。

步骤G：1-[3-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基]丙-2-烯-1-酮：在-50℃下向4-[4-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚三氟乙酸盐(149mg，306μmol，1.00eq)和DIEA(1.36g，10.5mmol，1.84mL，34.5eq)在DCM(1.50mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(30.9mg，245μmol，0.80eq)。将混合物在-40并然后在-20℃下搅拌30分钟。用MeOH(19.6mg)淬灭反应并真空浓缩。残余物通过制备型TLC(DCM/MeOH 7:1)进行纯化，产生1-[3-[2-[2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基]丙-2-烯-1-酮(18.9mg，32.8μmol，10.7％收率，94.3％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 543.3[M+H]⁺。

实施例46

1-((1R,5S)-8-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例4的方法合成，在步骤A中用(1R,5S)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-羧酸叔丁酯代替3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-羧酸叔丁酯。ESI MS m/z 543.4[M+H]⁺。

实施例47

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：2-(苄基氨基)丙酸乙酯：向2-溴丙酸乙酯(30.0g，165mmol，21.6mL，1.00eq)、BnNH₂(23.1g，215mmol，23.6mL，1.30eq)在MeCN(600mL)中的溶液添加K₂CO₃(45.8g，331mmol，2.00eq)。将混合物在80℃下搅拌2小时。过滤反应混合物，并将滤饼用DCM(300mL)洗涤。滤液真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(乙醚:乙酸乙酯＝10:1至4:1)进行纯化，产生2-(苄基氨基)丙酸乙酯(34.0g，163mmol，98.4％收率，99.4％纯度)，为无色油。

步骤B：4-[苄基-(2-乙氧基-1-甲基-2-氧代-乙基)氨基]丁酸乙酯：向2-(苄基氨基)丙酸乙酯(31.0g，150mmol，1.00eq)和4-溴丁酸乙酯(87.5g，449mmol，64.4mL，3.00eq)在MeCN(600mL)和水(60.0mL)中的溶液添加Cs₂CO₃(97.5g，299.12mmol，2.00eq)和KI(4.97g，29.9mmol，0.20eq)。将反应混合物在80-90℃下搅拌40小时。过滤反应混合物，并将滤饼用DCM(2×100mL)洗涤。滤液真空浓缩。残余物溶于DCM(300mL)中并用盐水(80mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过快速硅胶色谱法(乙醚:乙酸乙酯＝1:0至20:1)进行纯化，产生4-[苄基-(2-乙氧基-1-甲基-2-氧代-乙基)氨基]丁酸乙酯(28.0g，87.1mmol，58.3％收率)，为黄色油。

步骤C：1-苄基-2-甲基-3-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯：向4-[苄基-(2-乙氧基-1-甲基-2-氧代-乙基)氨基]丁酸乙酯(28.0g，87.1mmol，1.00eq)在THF(600mL)中的溶液添加tBuOK(19.6g，174mmol，2.00eq)。将反应混合物在18℃下搅拌1小时。反应混合物用水(100mL)淬灭并用MTBE(3×300mL)和DCM(2×200mL)提取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱法(乙醚:乙酸乙酯＝100:1至20:1)进行纯化，产生1-苄基-2-甲基-3-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯(20.0g，58.8mmol，67.5％收率，81.0％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z 276.0[M+H]⁺。

步骤D：7-苄基-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇：向EtOH(400mL)添加Na(3.76g，163mmol，3.88mL，2.50eq)。将反应混合物在20℃下搅拌0.5小时。向所述混合物添加1-苄基-2-甲基-3-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯(18.0g，65.4mmol，1.00eq)和尿素(9.82g，163mmol，8.77mL，2.50eq)并将反应混合物在80℃下搅拌80小时。真空除去溶剂。残余物溶于水(100mL)中并用MTBE(3×50mL)洗涤。用HCl(15mL，12M)将水相调节至pH6-7。过滤混合物，用水(30mL)洗涤滤饼并真空干燥，产生7-苄基-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇(12.0g，44.2mmol，67.7％收率，100％纯度)，作为棕色固体获得。ESI MS m/z 272.0[M+H]⁺。

步骤E：苄基-2,4-二氯-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：将7-苄基-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇(5.00g，18.4mmol，1.00eq)在POCl₃(305g，1.99mol，185mL，108eq)中的混合物加热到110℃达12小时。真空除去溶剂。残余物溶于DCM(500mL)中并在保持pH大于7的同时，倒入饱和NaHCO₃(200mL)中。有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥。所述溶液通过硅胶垫过滤，并将滤饼用DCM(3×400mL)洗涤。将合并的有机层真空浓缩，产生7-苄基-2,4-二氯-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(4.50g，14.6mmol，79.2％收率)，为棕色油。

步骤F：4-(7-苄基-2-氯-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪- 1-羧酸酯：向7-苄基-2,4-二氯-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(3.00g，9.73mmol，1.00eq)和DIEA(2.52g，19.5mmol，3.40mL，2.00eq)在二噁烷(60.0mL)中的溶液添加哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.90g，10.2mmol，1.05eq)。将反应混合物在60℃下搅拌12小时。真空除去溶剂。残余物通过硅胶色谱法(乙醚:乙酸乙酯＝2:1)进行纯化，产生4-(7-苄基-2-氯-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.30g，7.15mmol，73.5％收率，99.3％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 458.1[M+H]⁺。

步骤G：4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-(二甲基氨基)乙醇(583mg，6.54mmol，655μL，3.00eq)在甲苯(20.0mL)中的溶液添加Pd(OAc)₂(48.9mg，218μmol，0.10eq)、4-(7-苄基-2-氯-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.00g，2.18mmol，1.00eq)、Cs₂CO₃(2.13g，6.54mmol，3.00eq)和BINAP(272mg，436μmol，0.20eq)。将反应混合物在N₂下于110℃搅拌3小时。将反应混合物真空浓缩。残余物溶于水(10mL)中并用DCM(3×40mL)提取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(乙醚:乙酸乙酯＝5:1至2:1，然后DCM:MeOH＝50:1至5:1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(900mg，1.76mmol，80.8％收率)，为棕色固体。ESI MS m/z 511.2[M+H]⁺。

步骤H：4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(800mg，1.57mmol，1.00eq)在MeOH(20.0mL)中的溶液添加Pd/C(100mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(50psi)下于40℃搅拌2小时。过滤反应混合物并用MeOH(3×200mL)洗涤滤饼。滤液真空浓缩，产生4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(450mg，1.07mmol，68.2％收率)，为棕色油，其不经进一步纯化即用于下一步。ESI MS m/z 421.3[M+H]⁺。

步骤I：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(380mg，904μmol，1.00eq)和3-苄氧基-1-溴萘(311mg，994μmol，1.10eq)在二噁烷(8.00mL)中的混合物，添加Cs₂CO₃(883mg，2.71mmol，3.00eq)和2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(84.3mg，181μmol，0.20eq)和Pd₂(dba)₃(82.7mg，90.4μmol，0.10eq)。将反应混合物在N₂下于90℃搅拌12小时。真空浓缩反应混合物。残余物在DCM(50mL)和水(20mL)之间分配。用DCM(50mL)提取反应混合物。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(乙醚:乙酸乙酯＝5:1，然后DCM:MeOH＝100:1至5:1)进行纯化，然后通过制备型TLC(DCM:MeOH＝10:1)纯化分离的产物，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，306μmol，33.9％收率)，为棕色固体。ESI MS m/z 653.4[M+H]⁺。

步骤J：4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚双三氟乙酸盐：向4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，177μmol，1.00eq)在DCM(130.00μL)中的溶液添加TFA(202mg，1.78mmol，132μL，10.00eq)。将反应混合物在20℃下搅拌1小时。真空除去溶剂，提供4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚双三氟乙酸盐(175.00mg)，为棕色油，其不经进一步纯化即用于下一步。

步骤K：1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-8-甲基-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚双三氟乙酸盐(97.4mg，141μmol，1.00eq)在DCM(500.00μL)中的溶液添加DIEA(222mg，1.72mmol，300μL，12.2eq)和丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(14.2mg，113μmol，0.80eq)。将反应混合物在-40℃下搅拌0.5h。用一滴MeOH淬灭反应混合物并真空浓缩。残余物通过制备型TLC(DCM:MeOH＝10:1)、然后通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*，10μ；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：15％-45％，13min)进行纯化，产生1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-8-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(10.7mg，20.7μmol，三步6.8％收率)，为棕色油。ESI MS m/z 517.2[M+H]⁺。

实施例48

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐

步骤A：4-[苄基-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)氨基]戊酸乙酯：将4-氧代戊酸乙酯(47.0g，326mmol，46.5mL，1.50eq)、2-(苄基氨基)乙酸乙酯(42.0g，217.3mmol，1.00eq)和AcOH(13.0g，217mmol，12.4mL，1.00eq)在DCM(800mL)中的溶液在12-18℃下搅拌30min，然后在0-5℃下冷却，滴加NaBH(OAc)₃(138g，652mmol，3.00eq)。将混合物温热至10-18℃并搅拌16小时。用水(1000mL)淬灭反应混合物并用DCM(2×500mL)提取。将合并的有机相干燥并浓缩至干。残余物通过硅胶柱用乙醚/乙酸乙酯(60:1至40:1)洗脱进行纯化，提供4-[苄基-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)氨基]戊酸乙酯(42.0g，91.5mmol，42.1％收率，70％纯度)，为无色油。ESI MS m/z 322.2[M+H]⁺。

步骤B：1-苄基-2-甲基-5-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯：将4-[苄基-(2-乙氧基-2-氧代-乙基)氨基]戊酸乙酯(37.00g，115.12mmol，1.00eq)和t-BuOK(16.8g，150mmol，1.30eq)在甲苯(30.0mL)中的溶液在25℃下搅拌5小时。用水(50mL)淬灭反应并用乙酸乙酯(2x30mL)提取。将合并的有机提取液干燥并浓缩至干，提供1-苄基-2-甲基-5-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯(14.6g，53.0mmol，46％收率)，为黄色油，其直接用于下一步。

步骤C：7-苄基-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇：将Na(3.05g，133mmol，3.14mL，2.50eq)溶于EtOH(280mL)，然后添加1-苄基-2-甲基-5-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯(14.6g，53.0mmol，1.00eq)和尿素(7.96g，133mmol，7.11mL，2.50eq)。在N₂下将反应混合物加热至回流(78℃)16hr。将反应混合物浓缩至干。残余物溶于水(100mL)中，用MTBE(100mL)洗涤。用6N HCl(2mL)将水相的pH调节至pH6-7。通过过滤收集所生成的固体并在60℃下真空干燥，提供7-苄基-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇(5.00g，17.1mmol，32.3％收率，93％纯度)，为浅黄色固体。

步骤D：7-苄基-2,4-二氯-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：将POCl₃(49.5g，323mmol，30.0mL，58.4eq)和7-苄基-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2,4-二醇(1.50g，5.53mmol，1.00eq)加热至100℃回流12小时。将反应浓缩至干以除去POCl₃。残余物溶于DCM(40mL)中并用饱和NaHCO₃水溶液/饱和Na₂CO₃水溶液(1/1，60mL)洗涤。过滤混合物，并将有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生7-苄基-2,4-二氯-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(2.08g，粗产物)，为棕色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 307.9，309.9[M+H]⁺。

步骤E：4-(7-苄基-2-氯-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪- 1-羧酸酯：向7-苄基-2,4-二氯-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(2.50g，8.11mmol，1.00eq)和哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.54g，8.27mmol，1.02eq)在二噁烷(50.0mL)中的混合物添加DIEA(3.14g，24.3mmol，4.25mL，3.00eq)。将混合物在60℃下搅拌20小时。将混合物真空浓缩。将残余物用水(20mL)稀释，并用DCM(2×80mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过自动快速色谱系统(乙醚/乙酸乙酯50:1至2:1)进行纯化，产生4-(7-苄基-2-氯-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.59g，5.29mmol，65.2％收率，93.5％纯度)，为黄色固体。

步骤F：4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下于15℃向2-(二甲基氨基)乙醇(701mg，7.86mmol，788μL，3.00eq)在THF(45.0mL)中的溶液添加NaH(210mg，5.24mmol，60.0％纯度，2.00eq)。在15℃下搅拌0.5小时后，添加4-(7-苄基-2-氯-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.20g，2.62mmol，1.00eq)。将混合物在密封管中在110℃下搅拌18小时。将混合物真空浓缩。残余物通过柱色谱法经Al₂O₃(DCM/MeOH 100:1至10:1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.38g，2.36mmol，90.3％收率，87.5％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z 511.3[M+H]⁺。

步骤G：4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.50g，2.94mmol，1.00eq)在MeOH(80.0mL)中的溶液添加Pd/C(450mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫4次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌12小时。过滤反应混合物并浓缩滤液。残余物通过柱色谱法(DCM/MeOH 40/1至10/1)进行纯化，产生4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.15g，2.46mmol，83.7％收率，90.0％纯度)，为黄色油。

步骤H：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将Pd₂(dba)₃(109mg，119μmol，0.10eq)添加到4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.19mmol，1.00eq)、3-苄氧基-1-溴萘(410mg，1.31mmol，1.10eq)、2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(111mg，238μmol，0.20eq)和Cs₂CO₃(1.16g，3.57mmol，3.00eq)在二噁烷(10.0mL)中的溶液中。将反应混合物在N₂下于90℃搅拌12小时。将混合物真空浓缩。将残余物用水(5mL)稀释，并用DCM(2×20mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法经Al₂O₃(DCM/MeOH 100/1至10/1)并通过制备型TLC(DCM/MeOH 5:1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(309mg，453μmol，38.1％收率，95.8％纯度)，为黄色油。

步骤I：4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(340mg，521μmol，1.00eq)在MeOH(6.80mL)中的溶液添加Pd/C(120mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫4次。混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌1.5小时。将混合物真空浓缩，产生4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(210mg，312μmol，59.8％收率，83.5％纯度)，为粉红色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 563.3[M+H]⁺。

步骤J：4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚三氟乙酸盐：向4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(180mg，320μmol，1.00eq)在DCM(240μL)中的溶液添加TFA(365mg，3.20mmol，237μL，10.0eq)。将混合物在18℃下搅拌0.5小时。将混合物真空浓缩，产生4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚三氟乙酸盐(273mg)，为黄色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。

步骤K：1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-50℃下向4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6-甲基-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚三氟乙酸盐(148mg，320μmol，1.00eq)和DIEA(494mg，3.83mmol，668μL，12.0eq)在DCM(500μL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(32.3mg，256μmol，0.80eq)。将混合物在-40至-20℃下搅拌30分钟。用MeOH(20.5mg)淬灭反应并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*，10μ；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：8％-38％,13min)进行纯化，产生1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6-甲基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐(73.7mg，113μmol，35.2％收率，96.3％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 517.3[M+H]⁺。

实施例49

1-(4-(2-(2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯：将2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙醇(401mg，3.01mmol，1.60eq)、4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-甲磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(1.00g，1.88mmol，1.00eq)、Cs₂CO₃(1.84g，5.64mmol，3.00eq)、Pd(OAc)₂(42.2mg，188μmol，0.10eq)和BINAP(234mg，376μmol，0.20eq)在甲苯(50.00mL)中的混合物在110℃下搅拌3小时。将混合物真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯10:1至100:1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(1.20g，1.07mmol，56.8％收率，52％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 585.3[M+H]⁺。

步骤B：4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶- 4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：在0℃下向4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(1.20g，2.05mmol，1.00eq)在DCM(10.00mL)中的溶液添加TFA(3.51g，30.8mmol，2.28mL，15.00eq)。将混合物温热至25℃并搅拌16小时。用水(100mL)稀释混合物并将所述溶液用乙酸乙酯(2×100mL)提取。水层用饱和碳酸钠水溶液(50mL)碱化，然后用乙酸乙酯(2×100mL)提取。合并的有机层用盐水洗涤(1×100mL)，经硫酸钠干燥，并过滤。滤液真空浓缩，提供4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(800mg，1.65mmol，80.4％收率)，为黄色胶状物。ESI MS m/z 485.3[M+H]⁺。

步骤C：4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(750mg，1.55mmol，1.00eq)、(3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(949mg，3.10mmol，2.00eq)、2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(144.66mg，310.00μmol，0.20eq)、Pd₂(dba)₃(141.94mg，155.00μmol，0.10eq)和Cs₂CO₃(1.52g，4.65mmol，3.00eq)在甲苯(70.00mL)中的混合物在110℃下搅拌16小时。将混合物真空浓缩并用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)稀释。分离的有机层用盐水(1×100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯10:1至乙酸乙酯/甲醇10:1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(700mg，961μmol，62.0％收率，88％纯度)，为棕色固体。ESI MS m/z 641.3[M+H]⁺。

步骤D：2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基- 6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：将4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(700.00mg，1.09mmol，1.00eq)在MeOH中的混合物在40℃下用干燥的Pd/C(140mg)作为催化剂氢化(15psi)4小时。所述催化剂通过

毡过滤并将滤液真空浓缩，提供2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(500mg，987μmol，90.6％收率)，为棕色固体。

步骤E：1-[4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在氮气气氛下于-40℃向2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(500mg，987μmol，1.00eq)和DIEA(255mg，1.97mmol，345μL，2.00eq)在二氯甲烷(8mL)中的混合物添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(124mg，987μmol，1.00eq)在二氯甲烷(2mL)中的溶液。将混合物温热至25℃并搅拌1小时。将混合物用水(20mL)和二氯甲烷(30mL)稀释。分离的有机层用盐水(1×30mL)洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇100/1至10/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生1-[4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(450mg，714μmol，72.4％收率，89％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 561.2[M+H]⁺。

步骤F：1-[4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在氮气气氛下于-70℃向1-[4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-甲氧基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(400mg，713μmol，1.00eq)在DCM(2.00mL)中的溶液添加BBr₃(1.30g，5.19mmol，500μL，7.27eq)。将混合物温热至0℃并搅拌1小时。将混合物用二氯甲烷(20mL)稀释，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)淬灭。分离的有机层用盐水(1×10mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(Phenomenex SynergiC18 150*25*，10μ；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：18％-48％,12min.)进行纯化。收集目标级分并冻干，产生1-[4-[2-[2-(3-氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(40.0mg，63.7μmol，8.92％收率，87％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 547.3[M+H]⁺。

实施例50

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(羟甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：2-甲基-4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪- 1,2-二羧酸1-叔丁酯：向7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(2.00g，6.80mmol，1.00eq)在DMSO(40.0mL)中的溶液添加DIEA(1.76g，13.6mmol，2.38mL，2.00eq)和2-甲基哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(1.74g，7.14mmol，1.05eq)。将混合物在55℃下搅拌16小时。将混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(3×100mL)提取。合并的有机层用盐水(3×100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，乙醚/乙酸乙酯＝1:0至3:1)进行纯化，产生2-甲基-4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(3.10g，5.70mmol，83.8％收率，92.3％纯度)，为黄色半固体。ESI MS m/z 502.2[M+H]⁺。

步骤B：2-甲基4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯：将2-甲基-4-(7-苄基-2-氯-6,8-dihydro-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(3.00g，5.98mmol，1.00eq)、2-(二甲基氨基)乙醇(1.07g，12.0mmol，1.20mL，2.00eq)、Cs₂CO₃(4.87g，15.0mmol，2.50eq)、Pd(OAc)₂(201mg，897μmol，0.15eq)和BINAP(744mg，1.20mmol，0.20eq)在甲苯(60.0mL)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次，然后将混合物在氮气气氛下于110℃搅拌3小时。将反应混合物用水(50mL)稀释并用乙酸乙酯(3×50mL)提取。合并的有机层用盐水(3×50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝1:0至5:1)进行纯化，产生2-甲基-4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(3.10g，4.45mmol，80.4％收率，86.0％纯度)，为黑色油。ESI MS m/z 555.3[M+H]⁺。

步骤C：2-甲基4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯：在N₂下向2-甲基-4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(2.33g，4.20mmol，1.00eq)在MeOH(50.0mL)中的溶液添加Pd/C(233mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(15psi)下于40℃搅拌36小时。过滤反应混合物并将有机相浓缩至干，产生2-甲基4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(1.50g，粗产物)，为无色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。

步骤D：2-甲基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯：将2-甲基4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(1.50g，粗产物)、3-苄氧基-1-溴萘(1.49g，4.76mmol，1.30eq)、Cs₂CO₃(2.98g，9.15mmol，2.50eq)、Pd₂(dba)₃(503mg，549μmol，0.15eq)和2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(342mg，732μmol，0.20eq)在二噁烷(100mL)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次，并将混合物在氮气气氛下于85℃搅拌5小时。通过在0℃下添加水(50mL)淬灭反应混合物，并用DCM(3×100mL)提取。合并的有机层用盐水(3×150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝10:1至5:1)进行纯化，产生2-甲基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(1.72g，2.25mmol，53.5％收率，91％纯度)，为黄色。ESI MS m/z 697.3[M+H]⁺。

步骤E：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-羧酸甲酯：在0℃下向2-甲基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(1.32g，1.89mmol，1.00eq)在DCM(20.0mL)中的溶液添加TFA(4.31g，37.8mmol，2.80mL，20.0eq)并将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩至干。残余物溶于DCM(50mL)和H₂O(20mL)中并用饱和NaHCO₃将反应混合物调节至pH 8。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-羧酸甲酯(1.12g，1.87mmol，69.6％收率，70％纯度)，为棕色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 597.4[M+H]⁺。

步骤F：[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]甲醇：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-羧酸甲酯(400mg，0.670mmol)在THF(5.00mL)中的混合物在0℃下添加LiAlH₄(102mg，2.68mmol，4.00eq)。将反应混合物脱气并用氮气吹扫3次，在氮气气氛下于0℃搅拌2小时。反应混合物通过在0℃下添加Na₂SO₄·10H₂O(0.5g)淬灭，然后用DCM(50mL)稀释。将合并的有机层过滤，经Na₂SO₄干燥，并减压浓缩，产生[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]甲醇(280mg，0.493mmol，73.6％收率)，为黄色半固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 569.3[M+H]⁺。

步骤G：2-[[7-(3-苄氧基-1-萘基)-4-[3-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺：向[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]甲醇(250mg，440μmol，1.00eq)和NaH(176mg，4.40mmol，60.0％纯度，10.0eq)在THF(10.0mL)中的搅拌溶液在0℃下添加叔丁基二甲基氯硅烷(232mg，1.54mmol，189μL，3.50eq)。将混合物在氮气气氛下于25℃搅拌12小时。通过在0℃下添加水(25mL)淬灭反应混合物并用DCM(3×30mL)提取。合并的有机层用盐水(3×30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干。残余物通过制备型TLC(SiO₂，DCM/MeOH＝10:1)进行纯化，产生2-[[7-(3-苄氧基-1-萘基)-4-[3-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺(128mg，180μmol，40.9％收率，96.0％纯度)，为无色半固体。ESI MS m/z 683.3[M+H]⁺。

步骤H：1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮；在-40℃下向2-[[7-(3-苄氧基-1-萘基)-4-[3-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺(128mg，187μmol，1.00eq)和三乙胺(47.4mg，469μmol，65.0μL，2.50eq)在DCM(5.00mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(35.5mg，281μmol，1.50eq)并搅拌30分钟。将反应混合物减压浓缩至干。残余物通过制备型TLC(SiO₂，DCM/MeOH＝10:1)进行纯化，产生1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(92.0mg，101μmol，54.0％收率，81.0％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 737.3[M+H]⁺。

步骤I：1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(羟甲基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：将1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(92.0mg，125μmol，1.00eq)在DCM(8.00mL)中的混合物添加BBr₃(17.0mg，67.8μmol，6.53μL，10.0eq)。将混合物在氮气气氛下于-40℃搅拌30分钟，然后在25℃下减压浓缩至干。向残余物添加饱和NaHCO₃水溶液(0.5mL)。将所述溶液在0℃下调节至pH 7，然后添加MeOH(2.0mL)。通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*，10μ；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：15％-45％，11min)纯化所述溶液。收集目标级分并减压浓缩除去MeCN并冻干，产生1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(羟甲基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(6.30mg，11.2μmol，9.00％收率，95.0％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 533.2[M+H]⁺。

实施例51

丙烯酰-4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-N,N-二甲基哌嗪-2-羧酰胺

步骤A：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-叔丁氧羰基-哌嗪-2-羧酸：向2-甲基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(300mg，431μmol，1.00eq)在THF(4.00mL)和H2O(1.00mL)中的溶液添加NaOH(68.9mg，1.72mmol，4.00eq)。将混合物在氮气气氛下于25℃搅拌12小时。将反应混合物用水稀释(50mL)用HCl(6M)将反应混合物调节至pH 6，然后用DCM(3×50mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-叔丁氧羰基-哌嗪-2-羧酸(310mg，粗产物)，为黄色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 683.3[M+H]⁺。

步骤B：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(二甲基氨甲酰)哌嗪-1-羧酸叔丁酯将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-叔丁氧羰基-哌嗪-2-羧酸(310mg，粗产物)和DIEA(352mg，2.72mmol，476μL)在DCM(10.0mL)中的混合物在0℃下逐份添加HATU(259mg，681μmol)。搅拌30分钟后，一次性添加N-甲基甲胺(130mg，1.59mmol，146μL，HCl)。将反应混合物脱气并用氮气吹扫3次。在氮气气氛下于25℃搅拌12小时后，将反应混合物用水(50mL)在0℃下稀释并用DCM(3×50mL)提取。合并的有机层用HCl(1M)调节至pH 6，用盐水(3×50mL)和水(3×50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(二甲基氨甲酰)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(345mg，428μmol，两步94.2％收率，88.0％纯度)，为黄色半固体。ESI MS m/z 710.3[M+H]⁺。

步骤C：4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(二甲基氨甲酰)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(二甲基氨甲酰)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(345mg，486μmol，1.00eq)在MeOH(5.00mL)中的溶液在N₂下添加Pd/C(80.0mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(15psi)下于25℃搅拌8小时。过滤反应混合物并将滤液减压浓缩至干，产生4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(二甲基氨甲酰)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(197mg，粗产物)，为棕色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z620.3[M+H]⁺。

步骤D：4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-N,N-二甲基-哌嗪-2-羧酰胺：将4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(二甲基氨甲酰)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(197mg，粗产物)在DCM(5.00mL)中的混合物在0℃下添加HCl/二噁烷(4M，1.61mL)。将反应混合物脱气并用氮气吹扫3次并在氮气气氛下于25℃搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩至干。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*，10μ；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：10％-30％，7.8min)进行纯化。将收集的水相冻干至干，产生4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-N,N-二甲基-哌嗪-2-羧酰胺(90.0mg，171μmol，53.1％收率，99.0％纯度)，为棕色固体。ESI MS m/z 520.2[M+H]⁺。

步骤E：4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-N,N-二甲基-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-羧酰胺：在0℃下向4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-N,N-二甲基-哌嗪-2-羧酰胺(70.0mg，135μmol，1.00eq)在DMAC(500μL)中的溶液添加三乙胺(40.9mg，404μmol，56.0μL，3.00eq)，然后添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(2.55mg，20.2μmol，0.15eq)。将混合物在氮气气氛下于0℃搅拌2小时。过滤反应混合物并将收集的有机相通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*，10μ；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：15％-45％，12min)进行纯化。将收集的水相冻干，产生4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-N,N-二甲基-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-羧酰胺(10.0mg，16.5μmol，12.2％收率，94.6％纯度)，为黄色半固体。ESI MSm/z 574.2[M+H]⁺。

实施例52

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-苄基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶- 4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-(1-哌啶基)乙醇(872mg，6.75mmol，899μL，3.00eq)在甲苯(40.0mL)中的溶液添加Pd(OAc)₂(50.5mg，225μmol，0.10eq)，Cs₂CO₃(2.20g，6.75mmol，3.00eq)、BINAP(280mg，450μmol，0.20eq)和4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.00g，2.25mmol，1.00eq)。将混合物在N₂下于110℃搅拌12小时，然后真空浓缩。残余物用水(10.0mL)稀释，用乙酸乙酯(3×20mL)提取，用盐水(1×50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝10:1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(700mg，1.30mmol，58.0％收率)，为红色固体。ESI MS m/z 537.3[M+H]⁺。

步骤B：4-[2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-[7-苄基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(600mg，1.12mmol，1.00eq)在MeOH(50.0mL)中的混合物添加Pd/C(67.2mg，10％)。将混合物在H₂下于40℃搅拌24小时。将混合物过滤并真空浓缩，产生4-[2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，粗产物)，为棕色油，并不经进一步纯化用于下一步。ESI MS m/z 447.3[M+H]⁺。

步骤C：4-[7-(3-甲氧基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-[2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250mg)和(3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(343mg，1.12mmol)在甲苯(6.00mL)中的溶液添加2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(52.3mg，112μmol)、Pd₂(dba)₃(32.19mg，55.98μmol)和Cs₂CO₃(548mg，1.68mmol)。在N₂下于110℃搅拌72小时后，将混合物真空浓缩，用水(20.0mL)稀释，用乙酸乙酯(3×30.0mL)提取，用盐水(1×50.0mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝10:1)进行纯化，产生4-[7-(3-甲氧基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg，232μmoL，两步，41.5％收率)，为黄色固体。ESI MS m/z 603.3[M+H]⁺。

步骤D：7-(3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：将4-[7-(3-甲氧基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg，199μmol，1.00eq)和TFA(340mg，2.99mmol，221μL，15.0eq)在DCM(1.00mL)中的混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生7-(3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶双三氟乙酸盐(145mg，粗产物)，为黄色固体，其不经进一步纯化用于下一步。ESI MS m/z 503.3[M+H]⁺。

步骤E：1-[4-[7-(3-甲氧基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-78℃下向7-(3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶双三氟乙酸盐(145mg，粗产物)和Et₃N(221mg，2.18mmol，303μL)在DCM(2.00mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(25.0mg，198μmol)。在0℃下搅拌0.5h后，将混合物用MeOH淬灭并真空浓缩。通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝10:1)纯化混合物，产生1-[4-[7-(3-甲氧基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(90.0mg，162μmol，两步81.5％收率)，黄色固体。ESI MS m/z 557.3[M+H]⁺。

步骤F：1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-78℃下向1-[4-[7-(3-甲氧基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(90.0mg，162μmol，1.00eq)在DCM(2.00mL)中的溶液添加BBr₃(405mg，1.62mmol，156μL，10.0eq)。在0℃下搅拌1h后，将混合物在-78℃下用饱和碳酸氢钠溶液淬灭并在0℃下搅拌0.5h。将混合物用乙酸乙酯(3×20.0mL)提取，用盐水(1×40.0mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(Phenomenex Gemini 150*25mm*，10μ；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：55％-85％,10min)进行纯化，产生1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(6.19mg，10.8μmol，6.71％收率，95％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z543.2[M+H]⁺。

实施例53

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(羟甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-甲基4-(7-苄基-2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1, 3-二羧酸1-叔丁酯：将7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(3.00g，10.2mmol，1.00eq)、3-甲基哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯(2.62g，10.7mmol，1.05eq)、DIEA(3.30g，25.5mmol，4.45mL，2.50eq)在DMSO(50.0mL)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次。将混合物在氮气气氛下于100℃搅拌12小时。将反应混合物用DCM(200mL)稀释，用盐水(3×50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝10:1至3:1)进行纯化，产生3-甲基4-(7-苄基-2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯(2.10g，3.81mmol，37.4％收率，91.0％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z 502.1[M+H]⁺。

步骤B：3-甲基4-(7-苄基-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯：3-甲基4-(7-苄基-2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯(2.10g，4.17mmol，1.00eq)、2-(二甲基氨基)乙醇(929mg，10.4mmol，1.04mL，2.50eq)、Pd(OAc)₂(140mg，625μmol，0.15eq)、BINAP(519mg，833μmol，0.20eq)和Cs₂CO₃(3.39g，10.4mmol，2.50eq)在甲苯(60.0mL)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次。将混合物在氮气气氛下于110℃搅拌3小时。将反应混合物过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝30:1至10:1)进行纯化，产生3-甲基4-(7-苄基-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯(1.30g，1.67mmol，40.0％收率，71.4％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z555.3[M+H]⁺。

步骤C：3-甲基4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯：在N₂下向3-甲基4-(7-苄基-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯(1.30g，2.34mmol，1.00eq)在MeOH(15.0mL)中的溶液添加Pd/C(300mg)。将悬液真空脱气并用氢气吹扫几次。将混合物在氢气(15psi)下于45℃搅拌48小时。滤除催化剂并将滤液减压浓缩，产生1-叔丁基3-甲基4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸酯(780mg，粗产物)，为无色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。

步骤D：3-甲基4-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯：将3-甲基4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯(780mg，粗产物)、3-苄氧基-1-溴萘(684mg，2.18mmol)、Pd2(dba)3(231mg，252μmol)、Cs₂CO₃(1.37g，4.20mmol)和2-二环己基膦-2′,6′-二异丙氧基联苯(RuPhos)(157mg，336μmol)在二噁烷(20.0mL)中的混合物脱气并用氮气吹扫3次。将混合物在氮气气氛下于85℃搅拌5小时。将反应混合物过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝10:1至5:1)进行纯化，产生3-甲基4-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯(750mg，1.02mmol，两步43.6％收率，95.0％纯度)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.10(d，J＝8.0Hz，1H)，7.73(d，J＝8.0Hz，1H)，7.58-7.31(m，8H)，7.00(d，J＝2.0Hz，1H)，6.89(d，J＝2.0Hz，1H)，5.18(s，2H)，4.75(br s，1H)，4.45(br d，J＝13.2Hz，1H)，4.42-4.34(m，1H)，4.34-4.28(m，1H)，4.15(br s.，2H)，4.13-3.91(m，1H)，3.85-3.70(m，5H)，3.49-3.33(m，2H)，3.31-3.07(m，2H)，2.99(br s，1H)，2.83-2.68(m，3H)，2.35(s，6H)，1.48(s，9H)。

步骤E：1-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-羧酸甲酯：在0℃下向3-甲基4-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,3-二羧酸1-叔丁酯(200mg，287μmol，1.00eq)在DCM(5.00mL)中的溶液添加TFA(770mg，6.75mmol，500μL，23.5eq)。将混合物在氮气气氛下于25℃搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩至干。残余物溶于DCM(100mL)和水(50mL)中并将溶液用饱和Na₂CO₃水溶液调至pH 8，然后用DCM(3×50mL)提取。合并的有机层用盐水(3×50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生1-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-羧酸甲酯(171mg，263μmol，91.6％收率，91.7％纯度)，为黄色固体。ESIMS m/z 597.2[M+H]⁺。

步骤F：(1-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)甲醇：在0℃下向1-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-羧酸甲酯(171mg，287μmol，1.00eq)在THF(5.00mL)中的混合物添加LiAlH₄(65.3mg，1.72mmol，6.00eq)。在25℃下搅拌2小时后，通过在0℃下添加水(30mL)淬灭反应混合物，并用DCM(3×30mL)提取。合并的有机层用盐水(3×30mL)洗涤。收集的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生(1-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)甲醇(160mg，281μmol，98.2％收率，100％纯度)，为无色半固体。ESIMS m/z 569.2[M+H]⁺。

步骤G：2-((7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-4-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)-N,N-二甲基乙胺：在0℃下向(1-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)甲醇(160mg，281μmol，1.00eq)在THF(5.00mL)中的混合物添加NaH(94.0mg，2.35mmol，60.0％纯度，8.00eq)。搅拌30分钟后，滴加叔丁基二甲基氯硅烷(133mg，881μmol，108μL，3.00eq)。将混合物在氮气气氛下于25℃搅拌6小时。将反应混合物减压浓缩，产生2-((7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-4-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)-N,N-二甲基乙胺(133mg，165μmol，56.1％收率，84.6％纯度)，为浅黄色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 683.2[M+H]⁺。

步骤H：1-(4-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向2-((7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-4-(2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)-N,N-二甲基乙胺(133mg，165μmol，1.00eq)和TEA(39.4mg，389μmol，54.0μL，2.00eq)在DCM(3.00mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(31.9mg，253μmol，1.30eq)。在-40℃下搅拌2小时后，用MeOH(1M)淬灭反应混合物并减压浓缩，产生1-(4-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(140mg，粗产物)，为黄色固体。ESI MS m/z 737.2[M+H]⁺。

步骤I：1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(羟甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向1-(4-(7-(3-(苄氧基)萘-1-基)-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(140mg，粗产物)在DCM(5.00mL)中的溶液添加BBr₃(476mg，1.90mmol，183μL)。在氮气气氛下于-40℃搅拌2小时后，将混合物减压浓缩至干。添加水(0.5mL)和MeOH(2.5mL)，并将所生成的溶液通过制备型HPLC(柱子：Waters Xbridge 150*25 5u；流动相：[水(10mM NH₄HCO₃)-ACN]；B％：27％-57％，11min)进行纯化。收集目标级分并冻干，产生1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(羟甲基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(4.32mg，7.94μmol，4.18％收率，97.9％纯度)，为白色固体。ESI MS m/z 533.4[M+H]⁺。

实施例54

1-[4-[7-(3-氨基-1-异喹啉基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-羟基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯：在N₂下向Na(4.24g，184mmol，4.37mL，2.50eq)在EtOH(400mL)中的溶液添加4-乙基3-氧代哌啶-1,4-二羧酸1-叔丁酯(20.0g，73.7mmol，1.00eq)和乙酸甲脒(11.5g，111mmol，1.50eq)。将混合物在70℃下搅拌5小时。将反应混合物用HCl(1N)调节至pH 7，用DCM(3×200mL)提取，用盐水(1×400mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生4-羟基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(16.0g，63.7mmol，86.4％收率)，为棕色固体。ESI MS m/z 274.0[M+H]⁺。

步骤B：4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯：向4-羟基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(16.0g，63.7mmol，1.00eq)在DMF(4.00mL)中的溶液添加DBU(29.1g，191mmol，28.8mL，3.00eq)和六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基鏻(PYBOP)(39.8g，76.4mmol，1.20eq)。将混合物在25℃下搅拌1小时。添加哌嗪-1-羧酸苄酯(21.0g，95.5mmol，18.5mL，1.50eq)并将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物用乙酸乙酯(500mL)稀释并用水洗涤(3×400mL)，经干燥Na₂SO₄，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法进行纯化(SiO₂，乙醚/乙酸乙酯＝1:1)，产生叔丁基4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸酯(2.00g，4.41mmol，6.93％收率)，为黄色油。ESI MS m/z 454.3[M+H]⁺.

步骤C：将4-(4-苄氧基羰基哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-羧酸叔丁酯(1.20g，2.65mmol，1.00eq)和TFA(4.53g，39.7mmol，2.94mL，15.0eq)在DCM(2.00mL)中的混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩。用饱和NaHCO₃水溶液将浓缩的物质调节至pH 8，然后用乙酸乙酯(3×30.0mL)提取，用盐水(1×100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生4-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(800mg，2.26mmol，85.4％收率)，为黄色油。ESI MS m/z 354.3[M+H]⁺。

步骤D：4-[7-[3-(叔丁氧羰基氨基)-1-异喹啉基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将N-(1-溴-3-异喹啉基)氨基甲酸叔丁酯(330mg，1.02mmol，1.00eq)、DIEA(264mg，2.04mmol，357μL，2.00eq)和4-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(541mg，1.53mmol，1.50eq)在DMSO(3.00mL)中的混合物在80℃下搅拌10小时。将混合物用水(5.00mL)稀释并用乙酸乙酯(3×20mL)提取。合并的提取液经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过反相柱(TFA，0.1％)进行纯化，产生4-[7-[3-(叔丁氧羰基氨基)-1-异喹啉基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(400mg，665μmol，65.2％收率)，为黄色固体。ESI MS m/z 596.3[M+H]⁺。

步骤E：N-[1-(4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基)-3-异喹啉基]氨基甲酸叔丁酯：将4-[7-[3-(叔丁氧羰基氨基)-1-异喹啉基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(240mg，403μmol，1.00eq)、KOH(36.2mg，645μmol，1.60eq)在H₂O(2.40mL)和正丁醇(2.40mL)中的混合物在100℃下搅拌12小时。将混合物用乙酸乙酯(3×5.00mL)稀释，用盐水(1×10.0mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生N-[1-(4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基)-3-异喹啉基]氨基甲酸叔丁酯(150mg，325μmol，80.7％收率)，为黄色油。ESI MS m/z 462.3[M+H]⁺。

步骤F：1-(4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基)异喹啉-3-胺三氟乙酸盐：将N-[1-(4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基)-3-异喹啉基]氨基甲酸叔丁酯(150mg，325μmol，1.00eq)和TFA(556mg，4.87mmol，361μL，15.0eq)在DCM(360μL)中的溶液在25℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生1-(4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基)异喹啉-3-胺三氟乙酸盐(154.52mg，粗产物)，为黄色固体，其不经进一步纯化用于下一步。

步骤G：1-[4-[7-(3-氨基-1-异喹啉基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基] 哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向1-(4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基)异喹啉-3-胺三氟乙酸盐(150mg，粗产物)和Et₃N(319mg，3.15mmol，437μL)在DCM(2.00mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(31.8mg，252μmol)，然后在-40℃下搅拌0.5h。通过添加MeOH(20.22mg，630.96μmol)淬灭混合物并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(Phenomenex Gemini 150*25mm*，10μ；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：26％-56％，10min)进行纯化，产生1-[4-[7-(3-氨基-1-异喹啉基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(35.4mg，82.5μmol，26.2％收率，96.8％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 416.3[M+H]⁺。

实施例55

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)-3-羟基丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(二甲基氨基)丙-1,3-二醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 533.3[M+H]⁺。

实施例56

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-吗啉代丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-吗啉代丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 559.3[M+H]⁺。

实施例57

(S)-5-(((4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)吡咯烷-2-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(S)-5-(羟甲基)吡咯烷-2-酮代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例58

(R)-5-(((4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)吡咯烷-2-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-5-(羟甲基)吡咯烷-2-酮代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.2[M+H]⁺。

实施例59

N-(2-((4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)乙基)乙酰胺

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用N-(2-羟乙基)乙酰胺代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 517.3[M+H]⁺。

实施例60

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丁-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-(二甲基氨基)丁-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 545.3[M+H]⁺。

实施例61

(S)-6-(((4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)哌啶-2-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用6-(羟甲基)哌啶-2-酮代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，并通过手性色谱分离产物。峰2被给予(S)立体化学，这并未被证实。ES+APCIMS m/z 543.3[M+H]⁺.

实施例62

(R)-6-(((4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)哌啶-2-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用6-(羟甲基)哌啶-2-酮代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，并通过手性色谱分离。峰1被指定为(R)立体化学，但该立体化学未经证实。ES+APCI MS m/z 543.2[M+H]⁺。

实施例63

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(((R)-1-((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-((R)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺。

实施例64

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(((R)-1-((S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-((S)-3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺。

实施例65

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(((R)-1-((S)-3-羟基吡咯烷-1-基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-((S)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-1-基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 559.3[M+H]⁺。

实施例66

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-3-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(S)-1-甲基哌啶-3-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例67

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-3-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-甲基哌啶-3-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例68

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用1-碘萘代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 501.3[M+H]⁺。

实施例69

1-(4-(7-(异喹啉-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例1的方法合成，在步骤C中用4-溴异喹啉代替1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 401.2[M+H]⁺。

实施例70

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-(甲氨基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用1-(甲氨基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 503.3[M+H]⁺。

实施例71

1-(4-(7-(2-羟基-1-苯基乙基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例1的方法合成，在步骤C中用2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-苯基乙基甲磺酸酯代替1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 394.2[M+H]⁺。

实施例72

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(1-甲基哌啶-3-基)甲醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 543.3[M+H]⁺。

实施例73

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(二甲基氨基)丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 517.2[M+H]⁺。

实施例74

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-吗啉代丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 559.3[M+H]⁺。

实施例75

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-(哌啶-1-基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-1-(哌啶-1-基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 557.3[M+H]⁺。

实施例76

(R)-1-(4-(7-(3-氯-5-羟基-2-异丙基苯基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用1-溴-3-氯-2-异丙基-5-(甲氧基甲氧基)苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 545.3[M+H]⁺。

实施例77

1-(4-(2-(2-((1S,4R)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-((1S,4R)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 555.2[M+H]⁺。

实施例78

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(5-羟基-2-(三氟甲氧基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用2-溴-4-(甲氧基甲氧基)-1-(三氟甲氧基)苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 551.2[M+H]⁺.

实施例79

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(5-羟基-2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用2-溴-4-(甲氧基甲氧基)-1-(三氟甲基)苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 535.2[M+H]⁺。

实施例80

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((4-甲基哌嗪-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(4-甲基哌嗪-2-基)甲醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 544.3[M+H]⁺。

实施例81

1-(2-((4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)乙基)哌啶-4-腈

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用1-(2-羟乙基)哌啶-4-腈代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 568.2[M+H]⁺。

实施例82

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 572.4[M+H]⁺。

实施例83

1-(4-(2-(2-((2-羟乙基)(甲基)氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-((2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)(甲基)氨基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 533.3[M+H]⁺。

实施例84

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(2-氟-6-羟基-3-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用2-溴-3-氟-1-(甲氧基甲氧基)-4-甲基苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 499.3[M+H]⁺。

实施例85

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(吡咯烷-1-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(吡咯烷-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.2[M+H]⁺。

实施例86

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(2-羟基-5-(三氟甲氧基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用2-溴-1-(甲氧基甲氧基)-4-(三氟甲氧基)苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 551.2[M+H]⁺。

实施例87

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-氟-2-羟基-6-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用2-溴-4-氟-3-(甲氧基甲氧基)-1-甲基苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 499.2[M+H]⁺。

实施例88

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(2-甲基哌啶-1-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(S)-2-(2-甲基哌啶-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 557.2[M+H]⁺。

实施例89

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(1-甲基吡咯烷-3-基)甲醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例90

1-(4-(7-(5-羟基-2-(三氟甲氧基)苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-吗啉代丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，并在步骤D中用2-溴-4-(甲氧基甲氧基)-1-(三氟甲氧基)苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 593.2[M+H]⁺。

实施例91

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基-5-(三氟甲氧基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用3-溴-1-(甲氧基甲氧基)-5-(三氟甲氧基)苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 551.2[M+H]⁺。

实施例92

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(4-甲基哌啶-1-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(4-甲基哌啶-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 557.2[M+H]⁺。

实施例93

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((4-吗啉丁-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用4-吗啉丁-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺。

实施例94

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(5-羟基-2-甲氧基苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用3-溴-1-(甲氧基甲氧基)-4-甲氧基苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 497.2[M+H]⁺。

实施例95

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(2-羟基-6-甲基苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤D中用2-溴-1-(甲氧基甲氧基)-3-甲基苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 481.2[M+H]⁺。

实施例96

1-(4-(7-(5-羟基-2-异丙氧基苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-吗啉代丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，并在步骤D中用2-溴-4-(甲氧基甲氧基)-1-(异丙氧基)苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 567.2[M+H]⁺。

实施例97

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(2-甲基哌啶-1-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-2-(2-甲基哌啶-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 557.3

实施例98

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(3-甲氧基哌啶-1-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(S)-2-(3-甲氧基哌啶-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 557.3[M+H]⁺。

实施例99

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(3-甲氧基哌啶-1-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-2-(3-甲氧基哌啶-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 557.3[M+H]⁺。

实施例100

1-(4-(2-((1-环丙基哌啶-4-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(1-环丙基哌啶-4-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 555.3[M+H]⁺。

实施例101

1-(4-(2-(3-(1,4-氧氮杂环庚烷-4-基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(3-(1,4-氧氮杂环庚烷-4-基)丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺。

实施例102

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(二乙氨基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 531.3[M+H]⁺。

实施例103

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中(1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)甲醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺。

实施例104

1-(4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 571.3[M+H]⁺。

实施例105

1-(4-(7-(5-羟基-2-甲基苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-吗啉代丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，并在步骤D中用2-溴-4-(甲氧基甲氧基)-1-甲基苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 523.3[M+H]⁺。

实施例106

1-(4-(7-(4-羟基-2-(三氟甲氧基)苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-吗啉代丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，并在步骤D中用2-溴-5-(甲氧基甲氧基)-1-(三氟甲氧基)苯代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 593.2[M+H]⁺。

实施例107

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-((2-甲氧基乙基)(甲基)氨基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 547.3[M+H]⁺。

实施例108

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(4-甲氧基哌啶-1-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(4-甲氧基哌啶-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺。

实施例109

1-(4-(2-(2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 579.2[M+H]⁺。

实施例110

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(R)-(1-甲基吡咯烷-3-基)甲醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例111

(S)-1-(4-(2-(2-(3-氟哌啶-1-基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用(S)-2-(3-氟哌啶-1-基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 561.3[M+H]⁺。

实施例112

1-(4-(7-(3-(二氟甲基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-吗啉代丙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇，并在步骤D中用1-溴-3-(二氟甲基)萘(0.129g，0.503mmol)代替三氟甲磺酸(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯。ES+APCI MS m/z 593.2[M+H]⁺。

实施例113

4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-7,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-6(5H)-酮

步骤A：4-(6-氟吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-氯-6-氟吡啶并[3,4-d]嘧啶(1.07g，5.83mmol)在DCM(20mL)中的溶液添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(2.09mL，11.7mmol)，然后是哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.19g，6.41mmol)，并将反应在室温下搅拌2小时。将反应混合物用盐水洗涤，经MgSO₄干燥并真空浓缩，提供4-(6-氟吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，其直接用于下一步(1.8g，92.6％)，ES+APCI MS m/z334.1[M+H]⁺。

步骤B：4-(6-(苄氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：用氮气脱气的同时，向苯甲醇(0.65g，6.0mmol)在DMA(10mL)中的溶液分份添加氢化钠(0.24g，6.0mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌30分钟。向反应添加作为固体的4-(6-氟吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.0g，3.0mmol)并将反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应倒入水(300mL)中并用乙酸乙酯提取水层。有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥并真空浓缩。将粗物质用0至100％乙酸乙酯/DCM梯度作为洗脱液进行色谱分离，产生4-(6-(苄氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.4g，0.95mmol，32％收率)。ES+APCIMS m/z422.2[M+H]⁺。

步骤C：4-(6-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-(6-(苄氧基)吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.40g，0.95mmol)在95％乙醇(30mL)中的经氮气吹扫的溶液添加Pd/C(0.10g，0.95mmol)。将反应抽真空并用氢气回填三次。第三次回填后将反应混合物在室温下搅拌4小时。将反应再次用氮气脱气，浆液通过

过滤，并将滤液真空浓缩，产生4-(6-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.4g，126％)。ES+APCI MS m/z 334.4[M+H]⁺。

步骤D：4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-6-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向密封管内4-(6-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.28g，0.84mmol)在二噁烷(4mL)中的溶液添加磷酸钾(0.36g，1.7mmol)、N1,N2-二甲基乙-1,2-二胺(0.074g，0.84mmol)和1-碘-3-(甲氧基甲氧基)萘(0.53g，1.7mmol)。将反应用氩气喷射20分钟，然后添加碘化铜(I)(0.16g，0.84mmol)。将反应容器密封并加热至100℃过夜。用水稀释反应并用乙酸乙酯(2x150mL)提取水层。将有机物用盐水洗涤，经MgSO₄干燥并真空浓缩。将物质用0至100％乙酸乙酯/DCM梯度作为洗脱液进行色谱分离，产生4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-6-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.30g，0.58mmol，69％收率)ES+APCIMS m/z 520.2[M+H]⁺。

步骤E：7-(3-羟基萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-7,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-6 (5H)-酮：向4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-6-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.30g，0.58mmol)在甲醇(10mL)中的溶液添加氯化氢水溶液(0.38mL，2.3mmol)并将反应在50℃下搅拌过夜。将反应真空浓缩，产生7-(3-羟基萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-7,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-6(5H)-酮，为双HCl盐(0.26g，100％)。ES+APCI MS m/z 376.1[M+H]⁺。

步骤F：4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-7,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-6(5H)-酮：向7-(3-羟基萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-7,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-6(5H)-酮二盐酸盐(0.26g，0.58mmol)在DCM/乙腈的1:1溶液(10mL)中的浆液添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.45g，3.5mmol)和丙烯酰氯(0.052g，0.58mmol)，并将反应在室温下搅拌1小时。将反应真空浓缩并将所述物质通过反相制备型HPLC(使用5至95％ACN/水的梯度)进行纯化，产生4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-7,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-6(5H)-酮(0.038g，0.088mmol，15％收率)。ES+APCI MS m/z 430.2[M+H]⁺。

实施例114

4-(6-丙烯酰-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-7,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-6(5H)-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯盐酸盐(305mg，1.54mmol)代替哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.19g，6.41mmol)。ES+APCI MS m/z442.2[M+H]⁺

实施例115

根据实施例8的方法合成，在步骤A中用(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯(1.155g，4.931mmol)代替1-哌嗪羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 531.3[M+H]⁺。

实施例116

根据实施例8的方法合成，在步骤A中用(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯(1.155g，4.931mmol)代替1-哌嗪羧酸苄酯。还有，在步骤B中用2-(二甲基氨基)乙-1-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 517.3[M+H]⁺。

实施例117

实施例118

实施例119

实施例120

实施例121

4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-8(5H)-酮

步骤A：2,4-二氯-8-氧代-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯.向圆底烧瓶中添加2,4-二氯-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(1.0g，3.29mmol)和EtOAc(16.4mL)。添加高碘酸钠(2.11g，9.86mmol)在水(16.4mL)中的溶液。添加氯化钌(III)(0.102g，0.493mmol)并将混合物在松松加盖下搅拌并在环境温度下剧烈搅拌6h。将混合物在水和EtOAc之间分配，并分离层。水层用EtOAc进一步提取，将合并的提取液用盐水(2x20mL)洗涤并经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱法(10-30％EtOAc/己烷，用CH₂Cl₂加载)进行纯化，给出0.864g(82％)所述产物，为灰白色固体。

步骤B：4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-氧代-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯.向2,4-二氯-8-氧代-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(0.400g，1.26mmol)在CH₂Cl₂(5.0mL)中的溶液添加N,N-二异丙基乙胺(0.325g，2.51mmol)，然后是1-哌嗪羧酸苄酯(0.255mL，1.32mmol)，并将反应在环境温度下搅拌1.5h。将反应混合物用CH₂Cl₂(10mL)稀释并用0.5M KHSO₄溶液(5mL)、接着是饱和NaHCO₃水溶液和盐水洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将粗产物在10mL MTBE中超声处理，并通过真空过滤分离所生成的固体。将固体真空干燥，提供0.507g(80％)的目标产物，为灰白色固体，其直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 502.1[M+H]⁺。

步骤C：4-(2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯.将4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-8-氧代-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(0.255g，0.5080mmol)在CH₂Cl₂(1.0mL)中的溶液冷却至0℃。添加三氟乙酸(0.3890mL，5.080mmol)并将混合物温热至环境温度。1小时后，将混合物用CH₂Cl₂稀释并添加到盐水(10mL)和3.0M NaOH水溶液(1.7mL，5.080mmol)的混合物中。合并层，用饱和NaHCO₃水溶液调节至pH 8。分离层，水相用2×10mL的CH₂Cl₂提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。得到标题化合物(0.223g，定量)，为黄色/橙色泡沫。ES+APCI MS m/z 402.1[M+H]⁺。

步骤D：4-(2-(3-吗啉代丙氧基)-8-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯.向小瓶添加N-羟基丙基吗啉(0.687g，4.73mmol)和4-(2-氯-8-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.190g，0.473mmol)，然后是二噁烷(1.6mL)。添加碳酸铯(0.462g，1.42mmol)并将混合物在65℃下搅拌15小时。将混合物用CHCl₃稀释并过滤，并将固体另用CHCl₃洗涤。将滤液真空浓缩并通过柱色谱法(2-10％MeOH/DCM，具有1％NH₄OH)进行纯化，给出0.061g(25％)目标产物，为浓稠无色的油。ES+APCI MS m/z 511.2[M+H]⁺。

步骤E：4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-8-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯.向小瓶添加4-(2-(3-吗啉代丙氧基)-8-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.060g，0.12mmol)、N,N'-二甲基乙二胺(0.010g，0.12mmol)和1-碘-3-(甲氧基甲氧基)萘(0.074g，0.24mmol)，然后是二噁烷(0.78mL)和磷酸三钾(0.050g，0.24mmol)。将反应用鼓泡Ar吹扫10分钟，然后添加碘化铜(I)(0.022g，0.12mmol)并密封小瓶。将混合物加热至110℃并搅拌16小时。将混合物冷却至环境温度，用水稀释并用EtOAc(3x10mL)提取。合并的有机提取液经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将混合物通过柱色谱法(2-8％MeOH/DCM)进行纯化，给出0.062g(76％)所述产物，为棕褐色泡沫。ES+APCI MS m/z 697.3[M+H]⁺。

步骤F：7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-4-(哌嗪-1-基)-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-8(5H)-酮.向4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-8-氧代-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.062g，0.089mmol)在EtOH(0.44mL)和THF(0.44mL)中的溶液添加钯碳(0.038g，0.018mmol)(Degussa型，10wt％，50％H₂O)，然后藉由真空继之以气囊压力引入氢气气氛。将混合物在环境温度下搅拌1.5h，然后温热至45℃并搅拌1小时。用EtOAc稀释混合物并通过尼龙过滤器过滤。将滤液真空浓缩，提供浅棕褐色泡沫(0.052g)，将其干燥过夜，并重新交付于上述相同的反应条件。在环境温度下搅拌5h后，添加补加的Pd/C(0.050g)并将反应在环境温度下再搅拌2h。用EtOAc稀释混合物并通过尼龙过滤器过滤。将固体用EtOAc和MeOH洗涤，并将滤液真空浓缩，提供0.029g(58％)目标产物，为浅棕褐色泡沫。ES+APCI MS m/z 563.3[M+H]⁺。

步骤G：4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-8(5H)-酮.在-78℃下向7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-4-(哌嗪-1-基)-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-8(5H)-酮(0.028g，0.050mmol)在CH₂Cl₂(0.50mL)中的溶液添加三乙胺(0.014mL，0.100mmol)。添加丙烯酰氯(0.55mL，0.055mmol，新鲜制备的0.1M CH₂Cl₂)，然后将反应搅拌0.5h。将混合物用CHCl₃稀释并添加饱和NH₄Cl水溶液。分离层，并将水层用CHCl₃(2x10mL)提取。合并的提取液经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。粗产物通过柱色谱法(4-6％MeOH/DCM)进行纯化而给出0.018g(59％)，提供标题化合物，为固体灰白色泡沫。ES+APCI MS m/z 617.3[M+H]⁺。

步骤H：4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-8(5H)-酮.向4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,7-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-8(5H)-酮(0.018g，0.0292mmol)在1/1MeOH/THF(0.6mL)中的溶液添加HCl(0.0486mL，0.292mmol，6N水溶液)。将混合物在35℃下搅拌7小时。将混合物用盐水稀释，并用饱和NaHCO₃水溶液调节至pH 8。将混合物用10％IPA/CHCl₃(2x10mL)和CHCl₃(10mL)提取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。粗物质经由柱色谱法(6-10％MeOH/DCM)进行纯化，给出0.012g(71％)所述产物，为灰白色固体。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺。

实施例122

(R,E)-4-(二甲基氨基)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮双三氟乙酸盐

步骤A-E：(R)-2-((7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)-N,N-二甲基丙-1-胺根据实施例8的方法、步骤A至步骤E合成，在步骤B中用(R)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。

步骤F：(R)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-yl)萘-2-酚二盐酸盐：向(R)-2-((7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)-N,N-二甲基丙-1-胺(75mg，0.15mmol)在DCM(2.9mL)中的溶液添加6N HCl in iPrOH(247μl，1.5mmol)并将混合物在环境温度下搅拌1h。将反应混合物浓缩至干，提供(R)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-yl)萘-2-酚二盐酸盐，其直接用于下一站。ES+APCI MS m/z 463.2[M+H]⁺。

步骤G：(R,E)-4-(二甲基氨基)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7- (3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮双三氟乙酸盐：将(R)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-yl)萘-2-酚二盐酸盐(7mg，0.01mmol)、HATU(6.2mg，0.02mmol)、(2E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(2.1mg，0.02mmol)、DIEA(6.9μl，0.04mmol)在DCM(131μl)中的溶液在环境温度下搅拌1h。过滤残余物，将滤液直接加载到Gilson C18 prep HPLC上，用有0.1％TFA添加剂的5-95％乙腈/水洗脱。浓缩含有目标产物的级分，提供(R,E)-4-(二甲基氨基)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮双三氟乙酸盐。ES+APCI MS m/z574.2[M+H]⁺。

实施例123

1-(4-(2-(2-羟基-3-吗啉代丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例8的方法合成，在步骤B中用3-吗啉代丙-1,2-二醇代替(S)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 575.2[M+H]⁺。

实施例124

(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(4-氟-3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将(R)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(221mg，0.345mmol)放入ACN(2mL)并将混合物冷却至0℃。添加SelectFluor(183mg，0.517mmol)并将反应在室温下搅拌30分钟。加水并用DCM提取混合物。合并有机层并浓缩。所生成的残余物通过反相色谱法(5-95％ACN:水，有0.1％TFA)进行纯化，提供(R)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(4-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯三氟乙酸盐(48mg，0.0729mmol，21.1％收率)。

步骤B：(R)-1-(4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(4-氟-3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮按照实施例33的步骤D-F制备，用(R)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(4-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯三氟乙酸盐取代4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 535.2[M+H]⁺。

实施例125

(R)-1-(4-(7-(4-氯-3-羟基萘-1-基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将(R)-4-(2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(83mg，0.130mmol)和NCS(21.6mg，0.162mmol)放入ACN(2mL)并在室温下搅拌3小时。加水并用DCM(3x15mL)提取混合物。合并有机层并浓缩。所生成的残余物通过反相色谱法(5-95％ACN:水，有0.1％TFA)进行纯化，提供(R)-4-(7-(4-氯-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯三氟乙酸盐(17mg，0.0252mmol，19.4％收率)。

步骤B：(R)-1-(4-(7-(4-氯-3-羟基萘-1-基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮按照实施例33的步骤D-F制备，在步骤D中用(R)-4-(7-(4-氯-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸酯三氟乙酸盐取代4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯并使用THF作为溶剂。ES+APCI MS m/z 551.2[M+H]⁺。

实施例126

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐

步骤A：4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,6,7,8- 四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向微波炉中的4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.20g，0.35mmol)在二噁烷中的浆液添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.45g，3.5mmol)、Cs₂CO₃(0.34g，1.0mmol)和2-(吡啶-2-基)乙-1-醇(0.43g，3.5mmol)，并将反应在在微波炉中加热至15℃达1hr。将反应用EtOAc稀释并用水、盐水洗涤，brine，经MgSO₄干燥并真空浓缩。将物质用0至100％EtOAc/DCM梯度作为洗脱液进行色谱分离，产生4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.16g，0.24mmol，70％收率)。

步骤B：4-(4-(哌嗪-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d] 嘧啶-7(6H)-yl)萘-2-酚：向固体4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.12g，0.18mmol)添加MeOH(20mL)。将溶液用氮气脱气5分钟，然后添加Pd/C(0.058g，0.54mmol)。通过真空抽空反应容器并用H₂回填。该程序进行三次，并且在第三次回填之后，将浆液在氢气气氛下搅拌1hr。将反应再次用氮气脱气5分钟。所述浆液通过

过滤，并用MeOH(100mL)洗涤

将合并的有机提取液浓缩，用10mL 1:1 TFA/DCM处理2hr。将反应再次真空浓缩，产生4-(4-(哌嗪-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-yl)萘-2-酚(0.096g，0.20mmol，110％收率)。

步骤C：1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向4-(4-(哌嗪-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-yl)萘-2-酚(0.096g，0.20mmol)在DCM中的溶液添加Hunig碱(0.17mL，0.99mmol)和丙烯酰氯(0.018g，0.20mmol)，并将反应在室温下搅拌30分钟。将反应真空浓缩并将粗物质通过反相制备型HPLC纯化，产生1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮三氟乙酸盐(0.0057g，0.011mmol，5.3％收率)。ES+APCI MS m/z 537.2[M+H]⁺。

实施例127

(S)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶

步骤A：4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7 (6H)-羧酸叔丁酯：向2,4-二氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(8g，26.30mmol)在DMA(263.0ml，26.30mmol)中的溶液添加哌嗪-1-羧酸苄酯(5.793g，26.30mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(4.721ml，26.30mmol)，并将反应在室温下搅拌2小时。TLC(20％EtOAc/DCM)、紫外可视化显示反应完成。接着将反应物倒入水中并提取到DCM中。接着用水(2x)、盐水洗涤有机物，经MgSO4干燥并真空浓缩。将该浓缩物加载到220gRegiSep柱上，并在CombiFlash上进行色谱分离(0％-10％，EtOAc:DCM)。将含有目标产物的所有级分合并并浓缩，产生4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(9.768g，20.02mmol，76.11％收率)，为白色泡沫。ES+APCI MSm/z 488.2[M+H]⁺。

步骤B：4-(2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-(4-((苄氧基)羰基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(9.768g，20.02mmol)溶于二氯甲烷中(200.2ml，20.02mmol)并用2,2,2-三氟乙酸(15.33ml，200.2mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌4小时。完成后，接着将反应真空浓缩并吸收在EtOAc中，将有机物用1M NaOH(2X)、盐水洗涤，经MgSO4干燥并真空浓缩。4-(2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(7.406g，19.09mmol，95.39％收率)以粗产物用于下一反应中。ES+APCI MS m/z 388.2[M+H]⁺。

步骤C：4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：在氩气下向4-(2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯、BINAP(0.275g，0.442mmol)和Pd2(dba)3(0.203g，0.221mmol)添加甲苯(221ml，11.1mmol)，并将反应Ar鼓泡10分钟，然后加热至100℃达10分钟。接着将反应冷却至室温，并向该深色溶液添加作为固体的4-(2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(4.29g，11.1mmol)和叔丁醇钠(2.13g，22.1mmol)。最后，添加三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯(7.44g，22.1mmol)(作为油)，并将反应加热至100℃达1小时。将反应冷却至室温并真空浓缩。将浓缩物用EtOAc溶解并用水和盐水洗涤。合并的有机物经Na2SO4干燥并真空浓缩。然后将残余物加载到CombiFlash上并使用0％-->50％Hexane:EtOAc作为洗脱液进行色谱分离。合并含有洁净产物的级分并真空浓缩，给出4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(2.6g，4.53mmol，40.9％收率)。ES+APCI MS m/z 574.2[M+H]⁺。

步骤D：(S)-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：在微波管中将4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(300mg，0.523mmol)溶于二噁烷(6532μl，0.523mmol)中并用碳酸铯(511mg，1.57mmol)、Hunig碱(913μl，5.23mmol)和N-甲基-L-脯氨醇(421mg，3.66mmol)处理。然后将管加盖并在170℃下微波3小时。将反应通过GF/F纸过滤。将滤液真空浓缩，并将残余物加到12gRegiSep gold柱上，并在CombiFlash上进行色谱分离(0％-15％，DCM:MeOH)。合并含有洁净产物的所有级分并真空浓缩，产生(S)-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(220mg，0.337mmol，64.5％收率)。ES+APCI MS m/z 653.3[M+H]⁺。

步骤E：(S)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶：将(S)-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(220mg，0.337mmol)在EtOH(3370μl，0.337mmol)和THF(3370μl，0.337mmol)中的溶液用N2吹扫5分钟。向该溶液添加钯碳(179mg，0.0843mmol)(Degussa型，10wt％，50％H2O)，并立即加盖并用N2再吹扫5min。然后在通过真空、继之以气囊压力引入的H2下搅拌所述溶液。然后将混合物在环境温度下搅拌过夜。LC/MS显示反应完成。将混合物用MeOH稀释，并通过填塞的硅藻土过滤。然后将滤液真空浓缩并将(S)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶(91mg，0.175mmol，52.1％收率)作为粗产物带入下一步。ES+APCI MS m/z 519.3[M+H]⁺。

步骤F：(S)-1-(4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：在环境温度下向(S)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶(92mg，0.18mmol)在二氯甲烷(1774μl，0.18mmol)中的悬液添加丙烯酰氯(1774μl，0.18mmol)，然后是Hunig碱(62μl，0.35mmol)。然后将反应在环境温度下搅拌1小时。然后将混合物浓缩并加载到4g RegiSep gold柱上并在CombiFlash上进行色谱分离(0％-15％，DCM:MeOH)。合并含有洁净产物的所有级分并真空浓缩，产生(S)-1-(4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(74mg，0.13mmol，73％收率)。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺.

步骤G：(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将(S)-1-(4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(74mg，0.13mmol)溶于甲醇(4307μl，0.13mmol)中并用氯化氢(1077μl，6.5mmol)(水溶液)处理。将反应在55℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，并重悬于1.5mL MeOH中。将悬液加载到Gilson(制备型HPLC)上，用5-->95％ACN/0.1％TFA水溶液/0.1％TFA洗脱。合并含有洁净产物的所有级分并冻干过夜，产生(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(26mg，0.049mmol，38％收率)。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例128

1-(4-(2-(3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-(2-(3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.20g，0.35mmol)在二噁烷中的溶液添加N,N-二甲基氮杂环丁烷-3-胺盐酸盐(0.24g，1.7mmol)和N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.45g，3.5mmol)，并将反应加热到80C达72hr。将反应真空浓缩并将残余物使用0-->20％MeOH/DCM作为洗脱液进行色谱分离，产生4-(2-(3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.25g，105％)。ES+APCI MS m/z 638.3[M+H]⁺。

1-(4-(2-(3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮根据实施例127制备，在步骤E中用4-(2-(3-(二甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯取代(S)-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 514.2[M+H]⁺。

实施例129

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：(2R)-2-[(1R)-1-羟乙基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：将BH₃-Me₂S(10M，549uL)和(3aS)-1-甲基-3,3-二苯基-3a,4,5,6-四氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]氧杂氮杂环戊硼烷(1.00M，844uL,)在THF(10mL)中的混合物在15℃下搅拌1小时。向所述混合物添加(2R)-2-乙酰基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.90g，4.22mmol)在THF(10mL)中的溶液并将混合物在15℃下搅拌1小时。通过添加甲醇(2.00mL)淬灭混合物，并将反应混合物真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝50/1-5/1)进行纯化，产生(2R)-2-[(1R)-1-羟乙基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.60g，2.79mmol，66.0％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，CD₃OD)δ＝5.18(br s，1H)，3.73(dt，J＝4.8，8.0Hz，1H)，3.70-3.43(m，2H)，3.28(td，J＝6.64，10.8Hz，1H)，1.96(qd，J＝7.2，12.8Hz，1H)，1.89-1.68(m，2H)，1.62(br s，J＝6.4Hz，1H)，1.47(s，9H)，1.15(d，J＝6.0Hz，3H)。

步骤B：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.70g，1.08mmol)和(2R)-2-[(1R)-1-羟乙基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(349mg，1.62mmol)在THF(10mL)中的溶液添加t-BuONa(312mg，3.24mmol)并将混合物在10℃下搅拌1小时。将混合物用水(10mL)稀释并将水层用乙酸乙酯(3×10mL)提取。合并的有机物用盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.35g，412umol，38.1％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 799.4[M+H]⁺。

步骤C：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.30g，375umol)和TFA(642mg，5.63mmol，417uL)在二氯甲烷(0.42mL)中的混合物在10℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(305mg)LCMS[M+1]：ES+APCI MS m/z 699.2[M+H]⁺。

步骤D：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.30g，粗产物)、甲醛(210mg，1.85mmol，192uL，37％水)和AcOH(22.16mg，369umol，21.1uL)在甲醇(3.00mL)中的混合物在15℃下搅拌0.5小时。向混合物添加NaBH₃CN(58.0mg，923umol)并将混合物在15℃下搅拌48小时。通过在0℃下添加H₂O(5mL)淬灭混合物，并用乙酸乙酯(3×10mL)提取水层。合并的有机层用盐水(15.0mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过反相快速色谱[水(0.10％甲酸)/乙腈]进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.10g，126umol)，为黄色油。ES+APCI MS m/z713.4[M+H]⁺。

步骤E：4-[2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚：在-78℃下将氨气鼓泡通入甲醇(3mL)中30分钟。接下来添加4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.09g，126umol)和干燥的10％Pd/C(0.10g)并将混合物在H₂(15psi)下于10℃搅拌1小时。将反应过滤并将滤液真空浓缩，产生4-[2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(0.04g，粗产物)，为黄色油。ES+APCI MS m/z 489.2[M+H]⁺。

步骤F：1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向4-[2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(0.04g)和Et₃N(124mg，1.23mmol，171uL)在DCM(2.00mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(7.23mg，57.3umol)并将反应在-40℃下搅拌0.5h。通过添加甲醇(0.10mL)淬灭混合物并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex SynergiC18 150*25*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：用10分钟从10％-37％)进行纯化，产生1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[(1R)-1-[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(9.13mg，15.5umol)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 543.4[M+H]⁺.

实施例130

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((S)-1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((S)-1-((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮按照实施例129制备，在步骤A中用(3aR)-1-甲基-3,3-二苯基-3a,4,5,6-四氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]噁唑硼烷取代(3aS)-1-甲基-3,3-二苯基-3a,4,5,6-四氢吡咯并[1,2-c][1,3,2]噁唑硼烷，同时还在步骤A中用(2S)-2-乙酰基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯取代(2R)-2-乙酰基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯。ES+APCI MS m/z 543.4[M+H]⁺。

实施例131

1-[4-[2-[(1R)-2-[ethyl(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：(2R)-1-[乙基(甲基)氨基]丙-2-醇：将(2R)-2-甲基环氧乙烷(540mg，9.31mmol，651uL)添加到含N-甲基乙胺(500mg，8.46mmol，725uL)的MeOH(10mL)中。将所生成的溶液在密封管中于80℃搅拌3小时。完成后，将混合物真空浓缩，产生(2R)-[乙基(甲基)氨基]丙-2-醇(260mg，粗产物)，为浅黄色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。

步骤B：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向(2R)-1-[乙基(甲基)氨基]丙-2-醇(217mg，1.85mmol)在甲苯(20mL)中的溶液添加4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(400mg，617umol)、Pd₂(dba)₃(56.6mg，61.8umol)、BINAP(76.9mg，124umol)和NaOtBu(178mg，1.85mmol)，并将混合物用N2脱气15分钟，然后在N₂下加热至90℃达16小时。完成后，过滤反应混合物并将滤液真空浓缩。残余物通过反相色谱法纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(110mg，153umol，24.8％收率，97.5％纯度)。ES+APCI MS m/z 701.4[M+H]⁺。

步骤C：4-[2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚：在N₂下向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(100mg，143umol)在MeOH(3.00mL)中的溶液添加HCl/MeOH(4M，143uL)，然后是Pd(OH)₂/C(50mg)。将悬液在真空下脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于40℃搅拌4小时。完成后，过滤反应混合物并浓缩滤液，产生4-[2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(76.0mg，125umol，87.5％收率，90.3％纯度，2HCl)，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MSm/z 477.2[M+H]⁺。

步骤D：1-[4-[2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-50℃下向4-[2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(70mg，127umol，2HCl)和DIEA(98.8mg，764umol，133uL)在DCM(1.50mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(12.9mg，102umol)。将混合物在-40至-20℃下搅拌30分钟。完成后，通过添加MeOH(17.0mg)淬灭混合物并真空浓缩。残余物用水(1mL)稀释并用DCM(3×6mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：48％-78％，10min)进行纯化，产生1-[4-[2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(9.23mg，17.2umol，13.5％收率，98.7％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 531.3[M+H]⁺。

实施例132

1-[4-[2-[(1-环己基吡咯烷-3-基)甲氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：1-环己基吡咯烷-3-羧酸酯：在0℃下向吡咯烷-3-羧酸甲酯(1.00g，6.04mmol，HCl)和DIEA(780mg，6.04mmol，1.05mL)的溶液添加环己酮(652mg，6.64mmol，686uL)和HOAc(725mg，12.1mmol，691uL)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5h。在0℃下向反应混合物分份添加NaBH(OAc)₃(3.84g，18.12mmol)。在0至15℃下搅拌反应混合物12小时。完成后，通过添加水(5mL)淬灭反应混合物，并在真空下浓缩有机物。用DCM(10mL×2)提取水层并用饱和NaHCO₃(10mL)和Na₂CO₃(2mL)调节pH至pH>8。合并有机层，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。将残余物用MTBE/石油醚(1:3，20mL)研磨并真空浓缩滤液，产生1-环己基吡咯烷-3-羧酸甲酯(1.00g，4.73mmol，78.4％收率)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 212.2[M+H]⁺。

步骤B：(1-环己基吡咯烷-3-基)甲醇：在-10℃下向1-环己基吡咯烷-3-羧酸甲酯(1.00g，4.73mmol)在THF(20mL)中的溶液添加LiAlH₄(413mg，10.9mmol)。将反应混合物在-10℃下搅拌5小时。通过添加饱和Na₂SO₄(2mL)淬灭反应混合物并过滤混合物，滤饼用THF(3×50mL)洗涤。合并的有机物真空浓缩，产生：(1-环己基吡咯烷-3-基)甲醇(800mg，4.36mmol，92.3％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝3.71(dd，J＝4.1，10.0Hz，1H)，3.53(dd，J＝4.4，10.0Hz，1H)，2.90(dt，J＝4.4，8.8Hz，1H)，2.74(dd，J＝3.2，8.8Hz，1H)，2.53(dd，J＝6.8，8.8Hz，1H)，2.36-2.24(m，2H)，2.04-1.93(m，2H)，1.90(br s，2H)，1.78-1.64(m，3H)，1.61-1.52(m，1H)，1.33-1.12(m，5H)

1-[4-[2-[(1-环己基吡咯烷-3-基)甲氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例131制备，在步骤B中用(1-环己基吡咯烷-3-基)甲醇取代(2R)-1-[乙基(甲基)氨基]丙-2-醇。ES+APCI MS m/z 597.4[M+H]⁺。

实施例133

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氨基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氨基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(400mg，617umol)和3-吗啉代丙-1-胺(534mg，3.70mmol，540uL)在DMSO(4.00mL)中的溶液加热到100℃达12小时。完成后，将混合物用水(4mL)稀释并用EtOAc(3×20mL)提取。将有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过柱色谱法经过Al₂O₃用乙酸乙酯/石油醚(20→100％)洗脱进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氨基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(245mg，320umol，51.8％收率，95.0％纯度)，为黄色油。ES+APCI MSm/z728.6[M+H]⁺。

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氨基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例131制备，在步骤C中用4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氨基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯取代基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 558.6[M+H]⁺。

实施例134

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(哌啶-3-基甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：(3R)-3-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯：在15℃下将TEA(1.76g，17.4mmol，2.42mL)添加到[(3R)-3-哌啶基]甲醇(1.0g，8.68mmol)在THF(25.0mL)中的溶液中，然后添加Boc₂O(1.89g，8.68mmol，1.99mL)在THF(5mL)中的溶液。将混合物在15℃下搅拌12小时。真空除去溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯(50ml)和H₂O(30mL)。将溶液用HCl(6M)酸化至pH～6并分离层。用盐水(3×50mL)洗涤有机物并将合并的有机物浓缩至干，产生(3R)-3-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.68g，7.80mmol，89.9％收率，100％纯度)，为无色晶体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝3.73(br s，2H)，3.51(br d，J＝6.8Hz，2H)，3.05(br s，2H)，1.83-1.71(m，2H)，1.62(br s，1H)，1.46(s，9H)，1.44-1.37(m，1H)，1.35-1.22(m，1H)。

步骤B：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-叔丁氧羰基-3-哌啶基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向(3R)-3-(羟甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(332mg，1.54mmol)在THF(5mL)中的溶液添加t-BuONa(223mg，2.32mmol)。接下来添加4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，772umol)在THF(5mL)中的溶液并将混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，残余物通过柱色谱法用石油醚/乙酸乙酯(10/1至3/1)洗脱进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-叔丁氧羰基-3-哌啶基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(510mg，628umol，81.4％收率，98.4％纯度)，为白色固体。ES+APCI MS m/z 799.4[M+H]⁺。

步骤C：(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-tert-butoxy羰基-3-哌啶基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(250mg，313umol)在MeOH(5mL)中的溶液用NH₃(10％，w/w)吹扫，然后添加10％Pd/C(50mg)。将悬液真空脱气并将混合物在H₂(15psi)下于15℃搅拌12小时。将反应混合物过滤并减压浓缩至干，产生(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(126mg，211umol，67.4％收率，96.2％纯度)，为无色油。ES+APCI MS m/z 575.5[M+H]⁺。

步骤D：(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯：在-40℃下向(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(126mg，219umol)和TEA(33.3mg，329umol，45.8uL)在DCM(5.0mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(24.9mg，197umol)，并将反应在-40℃下搅拌30分钟。通过添加MeOH(0.5mL)淬灭反应混合物并浓缩至干。将残余物溶于EtOAc(50mL)和H₂O(20mL)。将所生成的溶液用HCl(1M)酸化至pH～6并分离层。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(120mg，172umol，78.5％收率，90.2％纯度)，为黄色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 629.6[M+H]⁺.

步骤E：1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(3R)-3-哌啶基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在0℃下向(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(120mg，191umol)在DCM(3.0mL)中的溶液添加TFA(326mg，2.86mmol，212uL)。将混合物在N₂气氛下于15℃搅拌2小时。将反应混合物用NH₃(30％水溶液，三滴)碱化并浓缩至干。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：5％-35％，10min)进行纯化，产生1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(3R)-3-哌啶基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(24.5mg，38.9umol，20.4％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 529.4[M+H]⁺。

实施例135

1-[4-[2-[3-(4-乙酰基哌嗪-1-基)丙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：1-[4-(3-羟基丙基)哌嗪-1-基]乙酮：向1-哌嗪-1-基乙酮(2.00g，15.6mmol)和K₂CO₃(4.31g，31.2mmol)在CH₃CN(50.0mL)中的溶液添加3-溴丙-1-醇(3.25g，23.4mmol)。将混合物在80℃下搅拌5小时。过滤固体并蒸发滤液，产生1-[4-(3-羟基丙基)哌嗪-1-基]乙酮(2.00g，10.7mmol，68.8％收率)，为无色油。

1-[4-[2-[3-(4-乙酰基哌嗪-1-基)丙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例131制备，在步骤C中用1-[4-(3-羟基丙基)哌嗪-1-基]乙酮取代4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 600.3[M+H]⁺。

实施例136

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙醇：向3-甲氧基吡咯烷(450mg，3.27mmol，HCl)和2-溴乙醇(408mg，3.27mmol)在CH₃CN(10mL)中的溶液添加K₂CO₃(1.36g，9.81mmol)。将混合物在80℃下搅拌3小时。过滤固体并蒸发滤液，产生2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙醇(450mg，3.10mmol，94.8％收率)，为无色油。

步骤B：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，771umol)、2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙醇(224mg，1.54mmol)和t-BuONa(222mg，2.32mmol)在甲苯(10mL)中的混合物在N₂气氛下于20℃搅拌1小时。将混合物冷却至0℃并添加HCl(2M)直至pH～7。过滤混合物并将滤液真空浓缩。残余物通过柱色谱法使用0→10％MeOH/DCM作为洗脱液进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(110mg，147.9umol，19.1％收率)ES+APCI MS m/z729.2[M+H]⁺。

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例131制备，在步骤C中用4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯取代4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 559.3[M+H]⁺。

实施例137

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[3-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：(3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-1-醇：向3-甲氧基吡咯烷(500mg，3.63mmol，HCl)和3-溴丙-1-醇(505mg，3.63mmol)在CH₃CN(10mL)中的溶液添加K₂CO₃(1.51g，10.9mmol)。将混合物在20℃下搅拌5小时。过滤固体并蒸发滤液，产生3-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-1-醇(540mg，3.39mmol，93.3％收率)。

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[3-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例131制备，在步骤B中用(3-甲氧基吡咯烷-1-基)丙-1-醇取代(2R)-1-[乙基(甲基)氨基]丙-2-醇。ES+APCI MS m/z573.3[M+H]⁺。

实施例138

1-[4-[2-[2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)乙醇：向3,3-二氟氮杂环丁烷(500mg，3.86mmol，HCl)和2-溴乙醇(482mg，3.86mmol，274uL)在CH₃CN(10mL)中的溶液添加K₂CO₃(1.60g，11.5mmol)并将反应在80℃下搅拌16小时。将反应过滤并蒸发滤液，产生2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)乙醇(300mg，2.19mmol，56.7％收率)。

1-[4-[2-[2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例131制备，在步骤B中用2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)乙醇取代(2R)-1-[乙基(甲基)氨基]丙-2-醇。ES+APCIMS m/z 551.4[M+H]⁺。

实施例139

1-[4-[2-[2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)乙酸甲酯：向2-溴乙酸甲酯(1.17g，7.67mmol，723uL)在DCM(10mL)中的冷却到0℃的悬液添加TEA(1.76g，17.4mmol，2.42mL)和3,3-二氟吡咯烷(1.00g，6.97mmol，HCl)，并将反应混合物在20℃下搅拌16小时。将反应过滤并蒸发滤液。残余物通过柱色谱法用0.5％-->20％MeOH/DCM作为洗脱液进行纯化，产生2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)乙酸甲酯(580mg，3.24mmol，46.4％收率)。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝3.73(s，3H)，3.38(s，2H)，3.11(t，J＝13.6Hz，2H)，2.92(t，J＝6.8Hz，2H)，2.36-2.26(m，2H)。

步骤B：2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)乙醇：在0℃下向LiAlH₄(184mg，4.86mmol)在THF(5.0mL)中的溶液滴加2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)乙酸甲酯(580mg，3.24mmol)在THF(5.0mL)中的溶液。将混合物温热至20℃并搅拌3小时。通过添加饱和硫酸钠水溶液(1.50mL)淬灭混合物。将反应过滤并将滤液真空浓缩，产生2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)乙醇(330mg，2.18mmol，67.4％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝3.64(t，J＝5.2Hz，2H)，2.97(t，J＝13.2Hz，2H)，2.82(t，J＝7.2Hz，2H)，2.68(t，J＝5.2Hz，2H)，2.49(br.s，1H)，2.34-2.24(m，2H)。

1-[4-[2-[2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例131制备，在步骤B中用2-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)乙醇取代(2R)-1-[乙基(甲基)氨基]丙-2-醇。ES+APCI MS m/z565.3[M+H]⁺。

实施例140

2-[3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-基]-N,N-二甲基-乙酰胺

步骤A：1-[2-(二甲基氨基)-2-氧代-乙基]吡咯烷-3-羧酸甲酯：将吡咯烷-3-羧酸甲酯(1.00g，6.04mmol，HCl)和NaHCO3(1.01g，12.1mmol，470uL)在ACN(200.0mL)中的溶液在10℃下搅拌5分钟。接着在10℃下添加2-溴-N,N-二甲基-乙酰胺(1.00g，6.04mmol)在ACN(5.00mL)中的溶液并将反应在10℃下搅拌6小时，然后在50℃下搅拌2小时。过滤混合物并用DCM(3×15ml)洗涤固体。真空浓缩滤液并将残余物通过柱色谱法使用0→10％MeOH/DCM作为洗脱液进行纯化，产生1-[2-(二甲基氨基)-2-氧代-乙基]吡咯烷-3-羧酸甲酯(480mg，2.02mmol，33.4％收率)。

步骤B：2-[3-(羟甲基)吡咯烷-1-基]-N,N-二甲基-乙酰胺：在-60℃下向1-[2-(二甲基氨基)-2-氧代-乙基]吡咯烷-3-羧酸甲酯(500mg，2.33mmol)在THF(10mL)中的溶液添加LiAlH₄(203mg，5.36mmol)，并将反应混合物在-60℃下搅拌10分钟。通过添加饱和Na₂SO₄(0.4mL)淬灭反应混合物并过滤浆液。将滤饼用THF(3×50mL)洗涤并将滤液真空浓缩，产生2-[3-(羟甲基)吡咯烷-1-基]-N,N-二甲基-乙酰胺(400mg，2.15mmol，92.2％收率)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 187.1[M+H]⁺。

步骤C：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[1-[2-(二甲基氨基)-2-氧代-乙基]吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，772umol)、2-[3-(羟甲基)吡咯烷-1-基]-N,N-二甲基-乙酰胺(216mg，1.16mmol)和NaOBu-t(148mg，1.54mmol)在甲苯(10mL)中的混合物在15℃下搅拌15分钟。反应混合物通过硅胶色谱法使用20→100％EtOAc/石油醚直接纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[1-[2-(二甲基氨基)-2-氧代-乙基]吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(310mg，395umol，51.1％收率，98％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 770.4[M+H]⁺。

2-[3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-基]-N,N-二甲基-乙酰胺按照实施例131制备，在步骤C中用4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[1-[2-(二甲基氨基)-2-氧代-乙基]吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯取代4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[(1R)-2-[乙基(甲基)氨基]-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 600.3[M+H]⁺。

实施例141

1-[4-[2-[[1-(2-羟乙基)吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：吡咯烷-3-羧酸甲酯：在0℃下向吡咯烷-1,3-二羧酸1-(叔丁基)3-甲酯(10.0g，43.6mmol)在DCM(50mL)中的溶液添加HCl/二噁烷(4M，109mL)并在0℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生吡咯烷-3-羧酸甲酯(7.00g，粗产物，HCl)，为棕色油。¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝3.77(s，3H)，3.56-3.53(m，2H)，3.41-3.37(m，3H)，2.40-2.24(m，2H)。

步骤B：1-(2-苄氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸甲酯：将吡咯烷-3-羧酸甲酯(3.0g，18.1mmol，HCl)、Cs₂CO₃(17.7g，54.3mmol)和KI(301mg，1.81mmol)在MeCN(60mL)中的溶液在15℃下搅拌5min。然后在15℃下将2-溴乙氧基甲苯(4.67g，21.7mmol，3.43mL)在ACN(15mL)中的溶液添加到混合物中并在15℃下搅拌1小时。接着将混合物温热至50℃并在50℃下搅拌12小时。过滤反应混合物，用DCM(3×30mL)洗涤滤饼并将滤液真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex luna C18 250*50mm*10um；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：10ACN％-40ACN％，30min40％min)进行纯化，产生1-(2-苄氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸甲酯(1.48g，5.06mmol，27.9％收率，90.0％纯度)，为棕色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.36-7.28(m，5H)，4.56(s，2H)，3.70(s，3H)，3.61-3.58(t，J＝6.0Hz，2H)，3.02–3.00(m，2H)，2.78-2.67(m，4H)，2.58-2.49(m，1H)，2.11-2.08(m，2H)

步骤C：(1-(2-(苄氧基)乙基)吡咯烷-3-基)甲醇：在-10℃下向1-(2-苄氧基乙基)吡咯烷-3-羧酸甲酯(1.38g，5.24mmol)在THF(27mL)中的溶液添加LiAlH₄(457mg，12mmol)并在-10℃下搅拌0.5小时。通过饱和Na₂SO₄(1mL)淬灭反应混合物，并过滤，将滤饼用THF(5×30mL)洗涤，滤液真空浓缩，产生(1-(2-(苄氧基)乙基)吡咯烷-3-基)甲醇(1.30g，3.31mmol，63.3％收率，60.0％纯度)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 236.1[M+H]⁺。

1-[4-[2-[[1-(2-羟乙基)吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例136制备，在步骤B中用(1-(2-(苄氧基)乙基)吡咯烷-3-基)甲醇取代2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙醇。ES+APCI MSm/z 559.3[M+H]⁺。

实施例142

1-[4-[2-(2-羟基乙氧基)-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

1-[4-[2-(2-羟基乙氧基)-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例136制备，在步骤B中用2-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基乙醇取代2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙醇。ES+APCI MS m/z476.2[M+H]⁺。

实施例143

1-[4-[2-(2,3-二羟基丙氧基)-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

1-[4-[2-(2,3-二羟基丙氧基)-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例136制备，在步骤B中用(2,2-二甲基-1,3--二氧戊环-4-基)甲醇取代2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙醇。ES+APCI MS m/z 506.3[M+H]⁺。

实施例144

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：(2S)-2-(苄氧基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向NaH(2.38g，59.6mmol，60％纯度)在THF(50mL)中的浆液添加(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(10g，49.69mmol)在THF(50mL)中的溶液并将混合物在10℃下搅拌1小时。在0℃下滴加溴甲苯(12.8g，74.5mmol，8.85mL)并将混合物在10℃下搅拌16小时。通过添加饱和氯化铵水溶液(20mL)淬灭混合物，然后用乙酸乙酯(200mL)和水(100mL)稀释。分离的有机层用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至5/1)进行纯化，产生(2S)-2-(苄氧基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8.2g，28.06mmol，56.5％收率，99.7％纯度)，作为无色油获得。ES+APCI MS m/z 192.1[M+H-Boc]⁺。

步骤B：(2S)-2-(苄氧基甲基)吡咯烷：在氮气气氛下于0℃向(2S)-2-(苄氧基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(8.2g，28.14mmol)在CH₂Cl₂(28mL)中的溶液滴加TFA(43.1g，378mmol，28.0mL)。将混合物在15℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩。残余物用二氯甲烷(100mL)稀释，然后用1M氢氧化钠水溶液(10mL)洗涤，直至水层达到pH～10。分离的有机层用盐水(2×20mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，产生(2S)-2-(苄氧基甲基)吡咯烷(4g，20.9mmol，74.3％收率LCMS ES+APCI MS m/z 192.2[M+H]⁺。

步骤C：(2S)-2-(苄氧基甲基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷：将1-溴-2-甲氧基乙烷(0.9g，6.48mmol，608uL)、(2S)-2-(苄氧基甲基)吡咯烷(1.24g，6.48mmol)和K₂CO₃(2.68g，19.4mmol)在CH₃CN(20mL)中的混合物在15℃下搅拌1小时，然后在78℃下搅拌12小时。将混合物用乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)稀释。分离的有机层用盐水(1×50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/二氯甲烷/甲醇1/1/0至10/10/2)进行纯化，产生(2S)-2-(苄氧基甲基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷(900mg，3.61mmol，55.7％收率)，为无色油。ES+APCI MS m/z 250.2[M+H]⁺。

步骤D：(S)-(1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲醇：(2S)-2-(苄氧基甲基)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷(900mg，3.61mmol)在MeOH(20mL)中的溶液添加10％Pd/C(721.88umol)并将浆液在H₂(50psi)下与10℃搅拌16小时。将反应过滤并将滤液真空浓缩，产生(S)-(1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲醇(450mg，2.83mmol，78.30％收率)。

步骤E：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲醇(245mg，1.54mmol)，基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，772umol)和t-BuONa(223mg，2.32mmol)在THF(5mL)中的混合物在N₂气氛下于20℃搅拌0.5小时。将反应混合物倒入H₂O(30mL)并用乙酸乙酯(3x30mL)提取水层。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝300/1至10:1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(260mg，349umol，45.3％收率)。ES+APCI MS m/z 743.4[M+H]⁺。

步骤F：4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂气氛下向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(240mg，323umol)和(Boc)₂O(141mg，646umol，148uL)在MeOH(150mL)中的溶液添加10％Pd/C(100mg)。将悬液脱气并用H₂吹扫3次。将混合物在H₂(15PSI)下于40℃搅拌12小时。过滤反应混合物并浓缩滤液，产生4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(215mg，粗产物)。ES+APCI MS m/z 619.1[M+H]⁺。

步骤G：4-[2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚：向4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(215mg，347umol)在DCM(500uL)中的溶液添加TFA(594mg，5.21mmol，385uL)，并将混合物在15℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生4-[2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(219mg，346umol)。ES+APCI MS m/z 519.4[M+H]⁺。

步骤H：1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：向冷却至-40℃的4-[2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(219mg，346umol)和DIEA(447mg，3.46mmol，603uL)在二氯甲烷(4.00mL)中的混合物在氮气气氛下添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(34.9mg，276.92umol)在二氯甲烷(1.00mL)中的溶液。将混合物在-40℃下搅拌1小时。通过添加饱和NaHCO₃(2.00mL)淬灭反应，将混合物倒入冰水(20mL)并用二氯甲烷(20mL×2)提取。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Gemini 150*25 5u；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：32％-62％，12min)进行纯化，产生1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(27mg，46.7umol)。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]⁺。

实施例145

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向(2S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.24g，6.17mmol)和4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(2g，3.09mmol)在THF(50mL)中的溶液添加t-BuONa(890mg，9.26mmol)，并将反应在15℃下搅拌0.5小时。将反应混合物倒入H₂O(100mL)并用乙酸乙酯(3X100mL)提取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1:1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(1.62g，2.02mmol，65.5％收率)。ES+APCI MS m/z 785.6[M+H]⁺。

步骤B：(2S)-2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸酯：在15℃下将NH₃鼓泡通入MeOH(50mL)30分钟。向该溶液添加4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(1.6g，2.04mmol)，然后在N₂下添加干燥的10％Pd/C(500mg)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于40℃搅拌1小时。然后过滤混合物并将滤液真空浓缩，产生(2S)-2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.00g，1.78mmol)。ES+APCI MS m/z 561.5[M+H]⁺。

步骤C：(2S)-2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-[4-(2,2,2-三氟乙酰基)哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向(2S)-2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(800mg，1.43mmol)在DCM(5.00mL)中的溶液添加TFAA(599mg，2.85mmol)和DIEA(737mg，5.71mmol)，并将反应在0℃下搅拌0.5小时。将反应混合物倒入H₂O(50mL)并用乙酸乙酯(50mL×3)提取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生(2S)-2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-[4-(2,2,2-三氟乙酰基)哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.5g，粗产物)。ES+APCI MS m/z 657.5[M+H]⁺。

步骤D：2,2,2-三氟-1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]乙酮：向(2S)-2-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-[4-(2,2,2-三氟乙酰基)哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(300mg，粗产物)在DCM(500uL)中的溶液添加TFA(521mg，4.57mmol，338uL)并将混合物在15℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生2,2,2-三氟-1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]乙酮(306mg)。ES+APCI MS m/z 557.3[M+H]⁺。

步骤E：2,2,2-三氟-1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]乙酮：向丙酮(132mg，2.28mmol，167uL)和2,2,2-三氟-1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]乙酮(306mg，粗产物，TFA)在MeOH(5.00mL)中的溶液添加AcOH(54.8mg，912umol，52.2uL)和NaBH₃CN(115mg，1.83mmol)，并将混合物在15℃下搅拌16小时。将反应混合物用H₂O(20mL)稀释并用乙酸乙酯(20mL×3)提取。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生2,2,2-三氟-1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]乙酮(300mg，粗产物)。ES+APCI MS m/z 599.5[M+H]⁺。

步骤F：4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢- 5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚：向2,2,2-三氟-1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]乙酮(300mg，粗产物)在MeOH(10mL)中的溶液添加K₂CO₃(346mg，2.51mmol)并将混合物在15℃下搅拌1小时。过滤反应混合物并浓缩滤液，产生4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(250mg)。ES+APCIMS m/z 503.3[M+H]⁺。

步骤G：1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：向冷却至-40℃的4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(250mg，粗产物)和DIEA(643mg，4.97mmol，866uL)在DCM(5.00mL)中的混合物在氮气气氛下添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(50.2mg，398umol)在DCM(1mL)中的溶液。将混合物在-40℃下搅拌1小时。通过添加饱和NaHCO₃(2.00mL)淬灭反应。将混合物倒入冰水(20mL)并用DCM(20mL×2)提取。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：52％-78％，12min)进行纯化。1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(10mg，17.6umol)。ES+APCI MS m/z 557.3[M+H]⁺。

实施例146

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.50g，772umol)、(3R)-3-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(311mg，1.54mmol)和t-BuONa(223mg，2.32mmol)在THF(10mL)中的混合物在20℃下搅拌1小时。将混合物用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(3×20mL)提取水层。合并的有机层用饱和氯化钠(1×30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.40g，499umol)。ES+APCI MS m/z 785.2[M+H]⁺。

步骤B：(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：在-78℃下将NH₃鼓泡通入甲醇(10mL)30分钟。将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-叔丁氧羰基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(0.25g，319umol)和10％Pd/C(0.10g)加入混合物中并在H₂(15psi)下于10℃搅拌1小时。将混合物过滤并真空浓缩，产生(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.17g，303umol)。ES+APCI MS m/z 561.3[M+H]⁺。

步骤C：(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：向(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.17g，303umol)和Et₃N(153mg，1.52mmol，211uL)在二氯甲烷(4.00mL)中的冷却至-40℃的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(26.8mg，212umol)，并将混合物在-40℃下搅拌0.5h。通过添加甲醇(0.10mL)淬灭混合物并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(Al₂O₃，二氯甲烷/甲烷＝10/1)进行纯化，产生(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.12g，189umol)。ES+APCI MS m/z 615.5[M+H]⁺。

步骤D：1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：将(3R)-3-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(0.10g，163umol)和TFA(278mg，2.44mmol，181uL)在二氯甲烷(0.20mL)中的混合物在10℃下搅拌1小时。通过添加NH₃·H₂O淬灭混合物并调节pH直至pH＝7。将混合物通过制备型HPLC(柱子：Venusil XBP C8150*25*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：15％-45％，10min)进行纯化，产生1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(3R)-吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(22.8mg，42.9umol)。ES+APCI MS m/z 515.4[M+H]⁺。

实施例147

2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：(Z)和(E)-4-溴丁-2-烯腈：在15℃下向丁-3-烯腈(98g，1.46mol，118mL)在叔丁醇(150mL)和石油醚(575mL)中的溶液添加Br₂(233g，1.46mol，75.3mL)在叔丁醇(150mL)中的溶液并将反应搅拌30分钟。接着向反应添加乙醇钠的乙醇溶液(100g，0.6mol，850mL)。将反应混合物在15℃下搅拌2小时。接着过滤反应并将滤液真空浓缩。残余物通过柱色谱法使用2→20％乙酸乙酯/石油醚作为洗脱液进行纯化，产生(Z)和(E)-4-溴丁-2-烯腈的混合物(141g，E/Z＝2.5/1，粗产物)，为浅黄色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d,)(E)，δ＝6.79(td，J＝7.2，16.0Hz，1H)，5.63(d，J＝16.0Hz，1H)，4.00(dd，J＝1.2，6.8Hz，2H)；(Z)，δ＝6.66(td，J＝8.0，10.8Hz，1H)，5.44(d，J＝10.8Hz，1H)，4.16(dd，J＝0.8，8.0Hz，2H)。

步骤B：2-(1,4-二苄基哌嗪-2-基)乙腈：在0℃下向N,N'-二苄基乙-1,2-二胺(115g，480mmol，113mL)和TEA(97.0g，959mmol，133mL)在甲苯(1L)中的混合物滴加4-溴丁-2-烯腈(70g，粗产物)并将反应在15℃下搅拌12小时。过滤反应混合物并减压浓缩滤液。残余物通过柱色谱法使用5→50％EtOAc/石油醚作为洗脱液进行纯化，产生2-(1,4-二苄基哌嗪-2-基)乙腈(82g，240mmol，两步37％收率，89.3％纯度)，为浅黄色半固体。ES+APCI MSm/z 306.3[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.40-7.23(m，10H)，3.85-3.76(m，1H)，3.54-3.44(m，3H)，3.07-2.96(m，1H)，2.94-2.84(m，1H)，2.68-2.35(m，7H)。

步骤C：2-哌嗪-2-基乙腈：在0℃下向2-(1,4-二苄基哌嗪-2-基)乙腈(164g，536mmol)在DCE(1500mL)中的溶液滴加1-氯乙基氯甲酸酯(306g，2.14mol)。添加后，将反应混合物加热到85℃大约48小时。蒸发二氯乙烷并将残余物吸收在MeOH(1500mL)中并加热到70℃达1小时。将反应混合物减压浓缩，用MTBE(3X3L)磨碎固体并将固体减压干燥，产生2-哌嗪-2-基乙腈。将粗产物通过用乙醇和水重结晶(8:1，v:v)进行纯化，产生2-哌嗪-2-基乙腈，为灰白色固体(53g，428mmol，40.0％收率，96.4％纯度，2HCl)。ES+APCI MS m/z 126.2[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz，D₂O)δ＝4.01-3.96(m，1H)，3.81-3.67(m，3H)，3.46-3.27(m，3H)，3.09(d，J＝6.0HZ，2H)。

步骤D：2-[4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基] 乙腈：向7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(1.2g，4.08mmol)和2-哌嗪-2-基乙腈(808mg，4.08mmol，2HCl)在二噁烷(24mL)中的混合物添加DIEA(2.64g，20.4mmol，3.55mL)。将反应混合物在50℃下搅拌3小时。完成后，将反应混合物用水(50mL)稀释并用EtOAc(3×80mL)提取水层。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生2-[4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基]乙腈(1.56g，4.07mmol，100％收率)，为棕色固体。

步骤E：4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基) 哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-[4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基]乙腈(1.56g，4.07mmol)添加(Boc)₂O(9.50g，43.5mmol，10mL)并将混合物加热至50℃达2小时。完成后，将反应混合物通过硅胶色谱法使用10→50％EtOAc/石油醚作为洗脱液进行纯化，产生4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.2g，2.44mmol，59.9％收率，98.3％纯度)，为棕色固体。ES+APCIMS m/z 483.3[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.39-7.27(m，5H)，4.59(br s，1H)，4.06(br d，J＝13.6Hz，2H)，3.90(br d，J＝11.6Hz，1H)，3.74-3.49(m，4H)，3.29(dd，J＝4.0，13.6Hz，1H)，3.18(br s，1H)，3.10-3.00(m，1H)，2.85-2.55(m，6H)，1.53-1.45(m，9H)。

步骤F：4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇(655.74mg，5.69mmol，676uL在THF(25mL)中的溶液添加NaH(182mg，4.55mmol，60％纯度)并将反应混合物在0℃下搅拌0.5h。向所述混合物添加4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.1g，2.28mmol)，并将反应混合物在N₂下在密封管中于70℃搅拌12小时。完成后，通过添加饱和NH₄Cl(20mL)淬灭反应混合物并用EtOAc(2×50mL)提取水层。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.1g，1.86mmol，81.7％收率，95％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 562.4[M+H]⁺。

步骤G：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将氨气鼓泡通入MeOH(30mL)5分钟。向该溶液添加4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(950mg，1.69mmol)和10％Pd/C(200mg)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次并将混合物在H₂(15psi)下于40℃搅拌9小时。完成后，将反应混合物过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi Max-RP 250*50mm*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：15％-40％，30；58％min)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(400mg，830umol，49.1％收率，97.8％纯度)，作为棕色油获得。ES+APCI MS m/z 472.4[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.59(br s，1H)，4.43-4.28(m，1H)，4.18-4.09(m，1H)，4.07-3.90(m，4H)，3.88-3.78(m，1H)，3.21(br dd，J＝3.2，13.6Hz，2H)，3.16-3.05(m，2H)，3.03-2.90(m，2H)，2.82-2.55(m，4H)，2.48(s，3H)，2.33-2.22(m，1H)，2.11-2.00(m，1H)，1.91-1.62(m，4H)，1.51(s，9H)。

步骤H：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150mg，318umol)、1-溴萘(98.8mg，477umol，66.3uL)、Cs₂CO₃(311mg，954umol)和RuPhos(29.7mg，63.6umol)在甲苯(3mL)中的溶液添加Pd₂(dba)₃(29.1mg，31.8umol)，然后将悬液真空脱气并用N₂吹扫3次。将反应混合物在100℃下搅拌12小时。将混合物在水(10mL)和EtOAc(20mL)之间分配，并分离层。随后用EtOAc(3×20mL)提取水层。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过反相快速色谱法进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(70mg，111umol，35.0％收率，95.0％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 598.6[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.21-8.20(m，1H)，7.87-7.85(m，1H)，7.61-7.59(d，J＝8.0Hz，1H)，7.51-7.49(m，2H)，7.45-7.41(t，J＝7.6Hz，1H)，7.15-7.13(d，J＝7.2Hz，1H)，4.63(br s，1H)，4.46(br s，1H)，4.33-4.28(m，4H)，4.10-4.07(m，2H)，3.97-3.94(br d，J＝11.6Hz，1H)，3.46(br s，1H)，3.31-3.27(br d，J＝14.0Hz，1H)，3.07-3.01(m，2H)，2.77(br s，3H)，2.55(br s，3H)，2.35(br s，1H)，1.82(br s，7H)，1.52(s，9H)。

步骤I：2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：在15℃下向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(60mg，100umol)在DCM(0.1mL)中的溶液添加TFA(154mg，1.35mmol，0.1mL)并在15℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，产生2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(50mg)，为棕色油。

步骤J：2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(50mg，81.8umol，TFA)和DIEA(106mg，817umol，142uL)在DCM(0.2mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(11.3mg，89.9umol)，并将反应在0-15℃下搅拌1.5小时。将反应混合物真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：15％-45％,10.5min)进行纯化，产生2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(9.16mg，15.1umol，18.5％收率，98.7％纯度，甲酸盐)，为黄色油。ES+APCI MS m/z 552.5[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.45(br s，1H)，8.22-8.19(m，1H)，7.87-7.85(m，1H)，7.62-7.60(d，J＝8.0Hz，1H)，7.51-7.49(m，2H)，7.45-7.43(t，J＝7.6Hz，1H)，7.15-7.13(d，J＝7.2Hz，1H)，6.60(br s，1H)，6.42-6.38(m，1H)，5.84-5.82(br d，J＝10.8Hz，1H)，5.08(br s，1H)，4.78-4.53(br dd，J＝6.8，11.6Hz，2H)，4.42-4.40(m，1H)，4.27(br s，2H)，4.21-4.18(br d，J＝14.0Hz，1H)，4.12-3.78(brd，J＝12.8Hz，2H)，3.68-3.07(m，7H)，3.05-2.84(m，3H)，2.77(d，J＝1.6Hz，3H)，2.71-2.64(m，1H)，2.26-2.17(m，1H)，2.11-2.03(m，1H)，2.02-1.88(m，2H)。

实施例148

2-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，424umol)、4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(188mg，636umol)、RuPhos(39.6mg，84.8umol)和Cs₂CO₃(414mg，1.27mmol)在甲苯(6mL)中的溶液添加Pd₂(dba)₃(38.8mg，42.4umol)，并将反应在N₂下于100℃搅拌12小时。完成后，(PE：EtOAc＝3:1至0:1)将混合物通过硅胶色谱法直接进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg，149umol，35.1％收率，85.0％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 686.6[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.04(d，J＝2.0Hz，1H)，7.33-7.29(m，2H)，5.70(dd，J＝2.4，9.2Hz，1H)，4.62(br s，1H)，4.39(br s，1H)，4.34-4.28(m，2H)，4.20-4.14(m，1H)，4.05(br d，J＝12.0Hz，2H)，3.91(br d，J＝12.4Hz，1H)，3.81-3.72(m，1H)，3.53(br t，J＝4.8Hz，2H)，3.27(br d，J＝10.8Hz，2H)，3.10(br d，J＝6.8Hz，1H)，3.06-2.96(m，1H)，2.90-2.65(m，5H)，2.59(br d，J＝10.2Hz，1H)，2.50(s，3H)，2.43(s，3H)，2.35-2.26(m，1H)，2.23-2.15(m，1H)，2.11(br s，2H)，1.90-1.65(m，7H)，1.54(s，9H)。

步骤B：2-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150mg，219umol)在DCM(0.2mL)中的溶液添加TFA(616mg，5.40mmol，0.4mL)，并将反应混合物在15℃下搅拌12小时。完成后，真空除去溶剂，产生2-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(159mg，218umol，99.6％收率，2TFA)，为红色油。

步骤C：2-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在-40℃下向2-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(159mg，218umol，2TFA)和DIEA(366mg，2.83mmol，493uL)在DCM(4mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(24.7mg，196umol)，并将反应混合物在-20℃下搅拌1小时。完成后，通过添加水(2mL)淬灭反应混合物，分离水层并用DCM(2×10mL)反提取。将合并的有机物真空浓缩并将残余物通过硅胶色谱法(DCM:MeOH＝50:1至5:1)纯化，然后通过反向制备型HPCL(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：经10分钟4％-34％)进行纯化，产生2-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(1.77mg，3.10umol)。ES+APCI MS m/z 556.5[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.00(s，1H)，7.18(br s，1H)，7.16-7.11(m，1H)，6.52(br s，1H)，6.37-6.21(m，1H)，5.75(br d，J＝10.4Hz，1H)，4.99(br s，1H)，4.67(br dd，J＝6.4，11.6Hz，1H)，4.34(br dd，J＝3.9，11.6Hz，1H)，4.24(s，2H)，4.11(br d，J＝12.8Hz，1H)，3.94(br s，1H)，3.57-3.40(m，4H)，3.29(br d，J＝13.8Hz，1H)，3.19(br s，1H)，3.02(br dd，J＝12.4，19.7Hz，2H)，2.87(br dd，J＝8.4，16.4Hz，2H)，2.76-2.58(m，6H)，2.35(s，3H)，2.22-2.10(m，1H)，2.01(br d，J＝8.4Hz，1H)，1.89(br s，2H)。

实施例149

2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(130mg，276umol)、2-[[4-溴-5-(三氟甲基)吲唑-1-基]甲氧基]乙基-三甲基硅烷(120mg，303umol)、Pd₂(dba)₃(50.5mg，55.1umol)、RuPhos(51.5mg，110umol)、Cs₂CO₃(225mg，689umol)在甲苯(3.00mL)中的混合物用N₂脱气，然后在N₂下加热到90℃达12小时。完成后，过滤混合物并浓缩滤液。将残余物通过制备型TLC(EtOAc/MeOH 8/1)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg，169umol，61.4％收率，95.0％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 786.3[M+H]⁺。

步骤B：2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg，178umol)在DCM(3.00mL)中的溶液添加2,6-二甲基吡啶(229mg，2.14mmol)和TMSOTf(238mg，1.07mmol)。将混合物在15℃下搅拌2小时。完成后，通过添加MeOH(0.5mL)淬灭混合物并真空浓缩，产生2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(200mg，粗产物)，为黄色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 686.6[M+H]⁺。

步骤C：2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(122mg，178umol)和DIEA(138mg，1.07mmol，186uL)在DCM(3.00mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(18.0mg，143umol)。将混合物在20℃下搅拌1.5小时。完成后，将混合物用水(0.5mL)稀释并用EtOAc(2×5mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型TLC(EA/MeOH 10/1)和制备型HPLC(柱子：Boston pH-lex150*25 10um；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：39％-69％，10min)进行纯化，产生2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(54.0mg，43.8umol)。ES+APCI MS m/z 740.6[M+H]⁺。

步骤D：2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：向2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(20mg，27.0umol)在DCM(60uL)中的溶液添加TFA(30.8mg，270umol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。反应未完成，因此添加额外的TFA(30.8mg)并将反应在20℃下再搅拌0.5小时。完成后，通过添加饱和NaHCO₃水溶液(1mL)将混合物的pH调节至8并用EtOAc(2×5mL)提取水层。合并的有机层用盐水(3mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。将残余物用MeOH(0.5mL)稀释，添加NH₃·H₂O(0.5mL)并将混合物在20℃下搅拌0.5小时。将混合物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：15％-45％，10.5min)进行纯化，产生2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(2.68mg，3.99umol)，为白色固体。ES+APCI MS m/z 610.5[M+H]⁺。¹HNMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.22(s，1H)，7.68(d，J＝9.2Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，1H)，6.60(br s，1H)，6.45-6.35(m，1H)，5.84(br d，J＝11.2Hz，1H)，5.09(br s，1H)，4.71-4.60(m，1H)，4.42-4.27(m，3H)，4.17(br d，J＝11.2Hz，1H)，4.01(br d，J＝12.4Hz，2H)，3.78-3.31(m，5H)，3.23-3.03(m，2H)，3.02-2.75(m，4H)，2.71(s，3H)，2.66-2.57(m，1H)，2.27-2.12(m，1H)，2.10-2.03(m，3H)。ES+APCI MS m/z 610.1[M+H]⁺。

实施例150

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((R)-1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：4-[7-苄基-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，1.04mmol)、(2R)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇(214mg，2.07mmol)和叔丁醇钠(298mg，3.11mmol)在甲苯(20mL)中的混合物添加BINAP(129mg，207umol)和Pd₂(dba)₃(94.8mg，104umol)，用氮气喷射混合物，然后在90℃下搅拌5hr。将混合物用乙酸乙酯(100mL)和水(100mL)稀释，分离有机层并经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱[水(0.1％甲酸水溶液)/乙腈]进行纯化。收集目标级分，用饱和碳酸钠水溶液(5mL)中和并用10％MeOH/DCM(2×50mL)提取。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，产生4-[7-苄基-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，480umol)ES+APCI MS m/z 550.4[M+H]⁺。

步骤B：2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-[7-苄基-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.1g，2.00mmol)在MeOH(10mL)中的溶液添加NH₃(792mg，46.5mmol)在MeOH(3.96g，123.56mmol，5mL)中的溶液，然后添加10％Pd/C(500mg)。将混合物在H₂(15psi)下于40℃搅拌12hr。将反应过滤并将滤液减压浓缩至干，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(756mg，粗产物)，作为黄色固体获得。ES+APCI MS m/z 460.3[M+H]⁺。

步骤C：2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：(4-溴-2-萘基)2,2-二甲基丙酸酯(304mg，990umol)、2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(350mg，761umol)、[2-(2-氨基乙基)phenyl]-氯钯、二环己基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(84.4mg，114umol)和Cs₂CO₃(620mg，1.90mmol)在甲苯(10mL)中的混合物用N₂吹扫3次并将混合物在N₂气氛下于70℃搅拌16小时。将反应混合物倒入H₂O(50mL)并用乙酸乙酯(50mL×3)提取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生残余物。将残余物通过反相快速色谱法[水(0.1％甲酸)/乙腈]进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(210mg，303umol)。ES+APCI MSm/z 686.4[M+H]⁺。

步骤D：[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：向2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(210mg，306umol)在二氯甲烷(300uL)中的溶液添加TFA(523mg，4.59mmol，340uL)，并将混合物在15℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(214mg，305umol)。ES+APCI MS m/z 586.4[M+H]⁺。

步骤E：[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：向冷却至-40℃的[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(214mg，305umol，TFA)和DIEA(395mg，3.06mmol，532uL)在二氯甲烷(5.00mL)中的混合物在氮气气氛下添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(38.6mg，305umol)在二氯甲烷(1.00mL)中的溶液。将混合物温热至0℃并搅拌1小时。真空浓缩混合物，产生残余物。将残余物通过反相快速色谱法[水(0.1％三氟乙酸)\乙腈]进行纯化，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(100mg，156umol)。ES+APCI MS m/z 640.7[M+H]⁺。

步骤F：2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：向冷却至0℃的[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(90mg，141umol)在THF(500uL)中的溶液添加NaOH(2M，281.34uL)，并将混合物在15℃下搅拌16小时。通过添加20甲酸溶液将混合物的pH调节至7。接着用二氯甲烷(3×10mL)提取水溶液。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18150*25*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：7％-37％，10min)进行纯化，产生2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(5mg，8.82umol，6.27％收率，98％纯度)ES+APCI MS m/z 556.3[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝8.54(br s，0.6H)，8.07(d，J＝8.4Hz，1H)，7.63(d，J＝8.4Hz，1H)，7.37(t，J＝7.2Hz，1H)，7.30-7.21(m，1H)，6.91-6.72(m，3H)，6.29(br d，J＝16.4Hz，1H)，5.84(br d，J＝11.2Hz，1H)，5.48(br s，1H)，5.26-4.96(m，1H)，4.57(br s，1H)，4.24-4.09(m，4H)，3.74-3.54(m，1H)，3.48(m，2H)，3.22(m，2H)，3.10-2.86(m，5H)，2.78(br d，J＝14.4Hz，1H)，2.53(br s，6H)，1.37(dd，J＝2.0，6.4Hz，3H)。

实施例151

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((R)-1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

(2-(1-丙烯酰-4-(2-(((R)-1-(二甲基氨基)丙-2-基)氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈按照实施例150制备，在步骤C中用1-溴萘取代(4-溴-2-萘基)2,2-二甲基丙酸酯并省去步骤F。ES+APCI MS m/z 540.3[M+H]⁺.¹HNMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝8.51(s，1H)，8.26-8.19(m，1H)，7.90-7.84(m，1H)，7.62(d，J＝8.0Hz，1H)，7.53-7.47(m，2H)，7.46-7.39(m，1H)，7.25-7.18(m，1H)，6.82(br s，1H)，6.30(br d，J＝17.2Hz，1H)，5.84(br d，J＝10.4Hz，1H)，5.62-5.53(m，1H)，5.08(br s，1H)，4.70-4.39(m，1H)，4.26-4.11(m，4H)，3.94-3.59(m，1H)，3.48-3.34(m，2H)，3.28-3.18(m，3H)，3.13-2.92(s，5H)，2.79-2.61(s，6H)，1.48(dd，J＝2.0，6.0Hz，3H)。

实施例152

2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.50g，1.09mmol)、4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(482mg，1.63mmol)、t-BuONa(314mg，3.26mmol)和[2-(2-氨基乙基)苯基]-氯钯；二环己基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(80.4mg，109umol)在甲苯(30mL)中的混合物在70℃下搅拌10小时。将混合物用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(3×20mL)提取水层。有机层用饱和氯化钠溶液(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱法[水(甲酸，0.1％.)/乙腈]进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.40g，522umol，48.0％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 674.3[M+H]⁺。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.03(d，J＝1.6Hz，1H)，7.31-7.27(m，2H)，5.68(dd，J＝2.4，9.6Hz，1H)，5.31(br s，1H)，4.61(br s，1H)，4.28(s，2H)，4.08-3.94(m，3H)，3.86(br d，J＝11.6Hz，1H)，3.79-3.71(m，1H)，3.52(br t，J＝4.8Hz，2H)，3.24(br d，J＝12.8Hz，2H)，3.04-2.91(m，1H)，2.87-2.67(m，5H)，2.65-2.47(m，2H)，2.41(s，3H)，2.32(br s，6H)，2.17(br d，J＝4.0Hz，1H)，2.09(br s，1H)，1.77(br t，J＝10.8Hz，3H)，1.52(s，9H)，1.36(d，J＝6.0Hz，3H)。

步骤B：2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-(氰基甲基)-4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.38g，564umol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液添加TMSOTf(752mg，3.38mmol)和2,6-二甲基吡啶(725mg，6.77mmol)，并将混合物在10℃下搅拌1小时。通过添加甲醇(0.10mL)淬灭混合物并真空浓缩。残余物通过反相色谱法[水(甲酸，0.1％)/乙腈]进行纯化。合并收集的级分，通过添加饱和碳酸氢钠溶液将pH调节至pH>7并用二氯甲烷/甲醇(10/1)(3×10mL)提取水层。提取液用饱和氯化钠溶液(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(0.30g，粗产物)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 574.1[M+H]⁺。

步骤C：2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(0.20g，粗产物)和TEA(176mg，1.74mmol，243uL)在二氯甲烷(1.00mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(44.0mg，349umol)。并将反应在0℃下搅拌0.5h。通过添加甲醇(0.10mL)淬灭混合物并真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱法[水(甲酸，0.1％)/乙腈]进行纯化。合并收集的级分，通过添加饱和碳酸氢钠溶液将pH调节至pH>7，并用二氯甲烷/甲醇(10/1)(3×5.00mL)提取水层。提取液用饱和氯化钠溶液(1×10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(0.10g，127umol，两步36.6％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 628.6[M+H]⁺。

步骤D：2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(40mg，63.7umol)和TsOH(1.10mg，6.37umol)在乙腈(3mL)中的混合物在90℃下搅拌1小时。通过在0℃下添加饱和碳酸氢钠(2mL)淬灭混合物并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(Al₂O₃，二氯甲烷/甲醇＝5/1)进行纯化。将收集的目标级分真空浓缩，产生白色固体。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(10mM NH₄HCO₃)-ACN]；B％：35％-65％，3min)和(柱子：Boston Green ODS 150*30 5u；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：15％-45％，10min)进行纯化。汇集目标级分并冻干，产生2-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(2.99mg，5.50umol)。ES+APCI MS m/z 544.5[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.36(br s，1H)，8.09(s，1H)，7.29(br s，1H)，7.24-7.20(m，1H)，6.62(br d，J＝13.6Hz，1H)，6.47-6.24(m，1H)，5.83(br d，J＝10.8Hz，1H)，5.50(br s，1H)，5.08(br s，1H)，4.60(br s，1H)，4.31(s，2H)，4.12(br d，J＝14.4Hz，1H)，3.99(br d，J＝10.8Hz，1H)，3.55(br t，J＝5.6Hz，2H)，3.42-3.29(m，1H)，3.10(br s，1H)，3.00-2.68(m，7H)，2.49(s，6H)，2.43(s，3H)，1.39(d，J＝6.0Hz，3H)。

实施例153

2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，773umol)和3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙-1-醇(219mg，1.39mmol)在甲苯(10mL)中的溶液添加tBuONa(111mg，1.16mmol)。将反应混合物在18℃下搅拌0.5小时。完成后，将混合物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc＝3:1至0:1，然后EA:MeOH＝50:1至10:1)、然后是反相快速色谱法(50％至90％MeCN的水溶液，碱性条件)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg，156umol，20.5％收率，97.9％纯度)，为棕色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.19-8.12(m，1H)，7.83-7.77(m，1H)，7.55-7.43(m，2H)，7.29(d，J＝1.6Hz，1H)，6.84(d，J＝2.0Hz，1H)，4.64(br s，1H)，4.42-4.35(m，3H)，4.26(br d，J＝5.2Hz，2H)，4.12-4.03(m，3H)，3.96(br d，J＝12.8Hz，1H)，3.62(dd，J＝1.6，7.6Hz，1H)，3.50(br s，2H)，3.31(br d，J＝13.6Hz，3H)，3.11-2.97(m，2H)，2.94(br d，J＝8.8Hz，1H)，2.89-2.69(m，5H)，2.54(brd，J＝9.8Hz，1H)，2.00-1.92(m，2H)，1.90-1.83(m，1H)，1.73(br d，J＝10.0Hz，1H)，1.53(s，9H)，1.41(s，9H)

步骤B：4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：将2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg，162umol)在TFA(370mg，3.24mmol，240uL)中的溶液在18℃下搅拌1小时。完成后，真空除去溶剂，产生4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(140mg，161umol，99.5％收率，2TFA)，为棕色油。

步骤C：[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：在0℃下向[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(140mg，161umol)和DIEA(167mg，1.29mmol，225uL)在DCM(2mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(30.5mg，242umol)。将反应混合物在18℃下搅拌1小时。完成后，通过添加水(5mL)淬灭反应混合物并用DCM(3×10mL)提取水层。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱法(碱性条件，MeCN/NH₃·H₂O的水溶液：50％至80％)进行纯化，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(60mg，86.5umol，53.6％收率)。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.22-8.13(m，1H)，7.84-7.78(m，1H)，7.56-7.45(m，2H)，7.31(d，J＝2.0Hz，1H)，6.86(d，J＝2.4Hz，1H)，6.62(br s，1H)，6.47-6.37(m，1H)，5.92-5.79(m，1H)，5.24-4.88(m，1H)，4.75(br s，1H)，4.45-4.36(m，3H)，4.31-4.20(m，2H)，4.15(br d，J＝13.6Hz，1H)，4.10-4.01(m，2H)，3.64(dd，J＝1.6，7.6Hz，2H)，3.51(br s，2H)，3.38(br s，2H)，3.14(brs，1H)，3.08-2.73(m，7H)，2.56(br d，J＝10.0Hz，1H)，2.03-1.93(m，2H)，1.88(br d，J＝9.6Hz，1H)，1.78-1.70(m，1H)，1.61(s，9H)，1.43(s，9H)。

步骤D：2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：向[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(60mg，86.5umol)在THF(0.5mL)中的溶液添加NaOH(2M，600uL)。将反应混合物在18℃下搅拌12小时。完成后，通过添加4滴HCOOH(20％的水溶液)酸化反应混合物，用DCM(5×8mL)提取水层。合并的有机物经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Luna C18 150*25 5u；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：10％-40％，10min)进行纯化，产生2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(19.8mg，28.3umol，32.8％收率，93.8％纯度，甲酸盐)，作为棕色固体获得。ES+APCI MS m/z 610.5[M+H]⁺。

实施例154

2-[4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[2-甲硫烷基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向2-(氰基甲基)-4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3g，7.42mmol)、1-溴萘(3.07g，14.8mmol，2.06mL)和Cs₂CO₃(7.25g，22.2mmol)在甲苯(60mL)中的溶液添加XPhos palladacycle gen3(628mg，742umol)，将悬液真空脱气并用N₂吹扫数次。将混合物温热至70℃并在70℃下搅拌10小时。将所生成的混合物过滤并用EtOAc(3×20mL)洗涤滤饼。合并的有机物减压浓缩，产生残余物。残余物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc，从50:1至3:1)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-甲硫烷基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.55g，6.02mmol，81.2％收率，90.0％纯度)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 531.4[M+H]^+.

步骤B：2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向2-(氰基甲基)-4-[2-甲硫烷基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.95g，5.56mmol)在DCM(60mL)中的溶液添加m-CPBA(1.13g，5.56mmol，85.0％纯度)并在0℃下搅拌1小时。通过在0℃下添加饱和Na₂S₂O₃(20mL)淬灭反应混合物并分离层，将水层用水(20mL)稀释并用EtOAc(60mL)提取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生残余物。将残余物通过反相快速色谱柱(ACN/水(0.1％甲酸)＝100％)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.7g，2.80mmol，50.3％收率，90.0％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 574.4[M+H]⁺。

步骤C：2-(氰基甲基)-4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，549umol)和3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙-1-醇(160mg，1.02mmol)在甲苯(6mL)中的溶液添加tBuONa(79.1mg，823umol)。将反应混合物在18℃下搅拌0.5小时。完成后，将反应混合物通过硅胶色谱法(PE:EA＝3:1至0:1，然后EA:MeOH＝50:1至10:1)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，249umol，45.3％收率，79.6％纯度)，作为棕色固体获得。ES+APCI MS m/z 640.5[M+H]⁺。

步骤D：2-[4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：将2-(氰基甲基)-4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，313umol)在TFA(770mg，6.75mmol，500uL)中的反应混合物在18℃下搅拌1小时。完成后，真空除去溶剂，产生2-[4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(271mg，粗产物)，为棕色油。

步骤E：2-[4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(271mg，502umol)和DIEA(323mg，2.50mmol，0.435mL)在DCM(6mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(60mg，476umol)并将反应混合物在18℃下搅拌1小时。完成后，通过添加一滴水淬灭反应混合物并通过硅胶色谱法(PE:EtOAc＝3:1至0:1)、然后制备型HPLC(柱子：Gemini 150*25 5u；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：33％-63％，12min)进行纯化，产生2-[4-[7-(1-萘基)-2-[3-[(1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基]丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(23.8mg，40.0umol，7.97％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 594.5[M+H]⁺。

实施例155

(S)-1-(4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇(4.15g，36.0mmol，4.28mL)在THF(100mL)中的混合物分份添加NaH(2.16g，54.06mmol，60％纯度)。将混合物在0℃下搅拌1小时后，添加4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(8.0g，18.02mmol)在THF(60mL)中的溶液并将混合物在70℃下搅拌11小时。完成后，将反应混合物倒入NH₄Cl水溶液(160mL)，并用EtOAc(2×100mL)提取水层。合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1至乙酸乙酯/甲醇＝10:1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.9g，8.70mmol，48.3％收率，92.8％纯度)，为灰色固体。ES+APCI MS m/z523.2[M+H]⁺

步骤B：4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.20g，4.21mmol)在MeOH(30mL)中的混合物添加Pd(OH)₂/C(700mg，10％纯度)，将混合物真空脱气并用H₂吹扫数次，并将反应在H₂(15Psi)下于40℃搅拌12小时。完成后，将反应混合物通过硅藻土过滤并浓缩滤液，产生4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.80g，4.02mmol，95.6％收率，96.7％纯度)，为黑色固体。ES+APCI MS m/z 433.1[M+H]⁺。

步骤C：4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，462umol)和4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(204mg，694umol)在甲苯(4mL)中的混合物添加Pd₂(dba)₃(63.5mg，69.4umol)、RuPhos(43.2mg，92.5umol)和Cs₂CO₃(301mg，925umol)，并将混合物在N₂下于110℃搅拌12小时。完成后，将反应混合物在水(10mL)和EtOAc之间分配并分离层。随后用EtOAc(2×10mL)提取水层，合并的有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至乙酸乙酯/MeOH＝10/1)进行纯化，产生4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(240mg，310umol，67.1％收率，83.6％纯度)，为棕色油。ES+APCI MS m/z647.6[M+H]⁺。

步骤D：7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基pyrrolidin-2-yl]甲氧基]- 4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：向4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(240mg，371umol)在DCM(1mL)中的混合物添加TFA(1.54g，13.5mmol，1mL)，并将混合物在15℃下搅拌1小时。完成后，浓缩反应混合物，产生7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基pyrrolidin-2-yl]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(250mg，309umol，83.4％收率，85.5％纯度，2TFA)，为棕色固体，其不经进一步纯化即用于下一步。ES+APCI MS m/z 463.4[M+H]⁺。

步骤E：1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：向7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(250mg，362umol，2TFA)在DCM(2mL)中的混合物添加DIEA(702mg，5.43mmol，946uL)，并将混合物冷却至-50℃。在-50℃下向反应分份添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(36.5mg，289umol)，并将混合物在-50℃下搅拌30分钟。完成后，通过添加MeOH(1mL)淬灭反应混合物并浓缩混合物。将残余物吸收在DCM(10mL)中并用H₂O(2×8mL)洗涤有机物。将有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过制备型HPLC((仪器：gx-l；柱子：PhenomenexGemini C18 250*50mm*10um；条件：水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN；开始B：32；结束B：62；梯度时间(min)：12；100％B保持时间(min)：2；流速(ml/min)：25)进行纯化，产生1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(48.6mg，92.9umol，25.7％收率，98.7％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 517.5[M+H]⁺。

实施例156

(S)-1-(4-(2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(S)-1-(4-(2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮按照实施例155制备，在步骤C中用4-溴-1-四氢吡喃-2-基-5-(三氟甲基)吲唑(中间体60)取代4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑。ES+APCI MS m/z 571.4[M+H]⁺。

实施例157

(S)-1-(4-(7-(5-甲氧基-1H-吲唑-4-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(S)-1-(4-(7-(5-甲氧基-1H-吲唑-4-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮按照实施例155制备，在步骤C中用4-溴-5-甲氧基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑取代4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑。ES+APCI MS m/z 533.4[M+H]⁺。

实施例158

1-[4-[7-(2-异丙基苯基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-(2-异丙基苯基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，462umol)、1-溴-2-异丙基-苯(120mg，601umol)、Cs₂CO₃(452mg，1.39mmol)和XPHOSPALLADACYCLE GEN 3(78.3mg，92.5umol)在甲苯(4.00mL)中的混合物用N₂脱气，然后在N₂下加热到100℃达10小时。完成后，过滤混合物并浓缩滤液。粗产物通过硅胶色谱法用EtOAc/MeOH＝50/1至5/1洗脱进行纯化，产生4-[7-(2-异丙基苯基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(84.6mg，134umol，28.9％收率，87.0％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 551.2[M+H]⁺。

1-[4-[7-(2-异丙基苯基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例155制备，在步骤D中用4-[7-(2-异丙基苯基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯取代4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯。ES+APCI MS m/z 505.6[M+H]⁺。

实施例159

(S)-1-(4-(2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(S)-1-(4-(2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮按照实施例155制备，在步骤C中用1-溴-2-(三氟甲基)苯取代4-溴-5-甲基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑。ES+APCI MS m/z531.5[M+H]⁺。

实施例160

1-(4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[2-甲硫烷基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(3.15g，7.88mmol)、2-[(4-溴-5-甲基-吲唑-1-基)甲氧基]乙基-三甲基硅烷(3.50g，10.2mmol)、Cs₂CO₃(6.42g，19.70mmol)、Pd₂(dba)₃(1.08g，1.18mmol)和RuPhos(735mg，1.58mmol)在甲苯(50mL)中的混合物用N₂脱气3次，并将混合物在N₂气氛下于90℃搅拌10小时。通过添加水(100mL)淬灭反应混合物并将水层用乙酸乙酯(3×100mL)提取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法使用1→33％EtOAc/石油醚进行纯化，产生4-[2-甲硫烷基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(2.30g，2.93mmol，37.1％收率)。ES+APCI MS m/z 660.3[M+H]⁺。

步骤B：4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：在0℃下向4-[2-甲硫烷基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(2.30g，3.49mmol)在DCM(20mL)中的搅拌溶液添加m-CPBA(601mg，3.49mmol)。将反应混合物在N2气氛下于0℃搅拌1小时。通过在0℃下添加Na₂S₂O₃(10mL)淬灭反应混合物，然后用水(100mL)稀释并用DCM(200mL)提取水层。合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法使用1→10％MeOH/DCM作为洗脱液进行纯化，产生4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(2.00g，2.84mmol，81.4％收率)。ES+APCI MS m/z 676.3[M+H]⁺。

步骤C：4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，739umol)和3-(1-哌啶基)丙-1-醇(211mg，1.48mmol)在THF(10mL)中的混合物逐份添加t-BuONa(213mg，2.22mmol)，并将混合物在N₂气氛下于20℃搅拌1小时。将混合物冷却至0℃并添加HCl(2M)直至pH～7。过滤混合物并真空浓缩滤液。将残余物通过反相快速色谱法使用5→95％0.5％TFA/水/乙腈作为洗脱液进行纯化，产生4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(300mg，385.umol，52.1％收率)。ES+APCI MS m/z 755.4[M+H]⁺。

步骤D：7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)- 5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶：在N₂下向4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(300mg，397umol)在MeOH(20mL)中的溶液添加HCl/MeOH(4M，1.99mL)和Pd(OH)₂(200mg，10％纯度)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于25℃搅拌1小时。过滤反应混合物并浓缩滤液，产生7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶(250mg，360umol，90.7％收率)。

步骤E：1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在氮气气氛下于-40℃向7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)-2-(3-(哌啶-1-基)丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶(250mg，360umol，2HCl)和DIEA(465mg，3.60mmol，629uL)在DCM(8.00mL)中的混合物添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(36.3mg，288umol)在DCM(2.00mL)中的溶液，并将反应搅拌1小时。通过在40℃下添加NaHCO₃(500uL)淬灭反应混合物，然后用水(10mL)稀释并用DCM(10ml)提取水层。将有机物经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO2，DCM/MeOH 1/0 to 5/1)进行纯化并通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：8％-28％，10min)进一步纯化，产生1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[3-(1-哌啶基)丙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(16.0mg，29.1umol，8.07％收率)。ES+APCI MS m/z545.3[M+H]⁺。

实施例161

1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[(1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[(1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例160制备，在步骤C中用(1-甲基吡咯烷-3-基)甲醇取代3-(1-哌啶基)丙-1-醇。ES+APCI MS m/z 517.4[M+H]⁺。

实施例162

1-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将(2R)-1-(二甲基氨基)丙-2-醇(183mg，1.78mmol)(8.00mL)、4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(400mg，592umol)和NaOtBu(114mg，1.18mmol)在甲苯中的混合物在15℃下搅拌0.5小时。将反应混合物过滤并将滤液真空浓缩。残余物通过柱色谱法经Al₂O₃(石油醚/Ethyl乙酸酯10/1to 0/1)进行纯化，产生4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(280mg，352umol)。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.08(s，1H)，7.46-7.39(m，5H)，7.38-7.33(m，2H)，5.76(s，2H)，5.43-5.33(m，1H)，5.24(s，2H)，4.35(s，2H)，3.72-3.67(m，4H)，3.64-3.56(m，4H)，3.55-3.47(m，4H)，2.87-2.80(m，2H)，2.74(dd，J＝6.8，12.8Hz，1H)，2.49(s，3H)，2.47-2.40(m，1H)，2.36(s，6H)，1.42(d，J＝6.4Hz，3H)，0.98-0.92(m，2H)，0.00(s，9H)。

步骤B：4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(200mg，280umol)和(Boc)₂O(122mg，559umol，129uL)在MeOH(6.00mL)中的溶液添加10％Pd/C(80mg)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于25℃搅拌1小时和35℃搅拌1小时。完成后，过滤混合物并真空浓缩滤液，产生4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯和(2R)-N,N-二甲基-2-[[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙-1-胺的混合物，作为混合物(110mg)。ES+APCI MS m/z 681.3[M+H]⁺。

步骤C：(2R)-N,N-二甲基-2-[[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙-1-胺：(2R)-N,N-二甲基-2-[[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙-1-胺(TFA)和[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-5-甲基-吲唑-1-基]甲醇。将110mg 4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯和(2R)-N,N-二甲基-2-[[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙-1-胺的混合物在TFA(3.08g，27.0mmol)中的溶液在30℃下搅拌1小时。完成后，将混合物真空浓缩，产生260mg(2R)-N,N-二甲基-2-[[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙-1-胺和[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-5-甲基-吲唑-1-基]甲醇的混合物。ES+APCI MS m/z 451.3[M+H]⁺。

步骤D：1-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：向冷却至-50℃的260mg(2R)-N,N-二甲基-2-[[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙-1-胺和[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-5-甲基-吲唑-1-基]甲醇的混合物在DCM(1.00mL)中的溶液添加DIEA(594mg，4.59mmol)，然后滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(18.0mg，143umol)，并将混合物在-50℃至-40℃之间搅拌30分钟。完成后，将混合物真空浓缩，产生100mg 1-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮和1-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[1-(羟甲基)-5-甲基-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮的混合物。ES+APCI MS m/z 505.4[M+H]⁺。

步骤E：1-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：100mg的1-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮和1-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-[1-(羟甲基)-5-甲基-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮在THF(22mL)和水(550uL)中的混合物添加NaOH(44.8mg，1.12mmol)，并将混合物在10℃下搅拌3小时。完成后，将混合物真空浓缩。残余物用水(1mL)稀释并用DCM(3×5mL)提取。合并的有机物经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：10％-40％，12min)进行纯化，产生1-[4-[2-[(1R)-2-(二甲基氨基)-1-甲基-乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(16.2mg，29.2umol，99.0％纯度，甲酸盐)，为灰白色固体。ES+APCI MS m/z 505.2[M+H]⁺。

实施例163

1-(4-(2-(2-(二乙氨基)乙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[2-[2-(二乙氨基)乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，739umol)和2-(二乙氨基)乙醇(173mg，1.48mmol，197uL)在THF(10mL)中的混合物添加t-BuONa(213mg，2.22mmol)，并将混合物在N₂气氛下于20℃搅拌1小时。将混合物冷却至0℃并添加HCl(2M)直至pH～7。过滤混合物并将滤液真空浓缩。残余物通过柱色谱法使用0→10％MeOH/DCM作为洗脱液进行纯化，产生不纯的物质，其通过反相色谱法进一步纯化，产生4-[2-[2-(二乙氨基)乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(220mg，295umol，39.9％收率)。ES+APCI MS m/z 729.3[M+H]⁺。

步骤B：N,N-二乙基-2-[[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]乙胺：在N₂下向4-[2-[2-(二乙氨基)乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(120mg，164umol)在MeOH(10mL)中的溶液添加Pd(OH)₂(99.4mg，10％纯度)和HCl/MeOH(4M，823.05uL)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于25℃搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生N,N-二乙基-2-[[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]乙胺(105mg，157.24umol)。ES+APCI MS m/z 595.4[M+H]⁺。

步骤C：1-[4-[2-[2-(二乙氨基)乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向N,N-二乙基-2-[[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]乙胺(105mg，158umol，2HCl)和DIEA(204mg，1.58mmol，276uL)在DCM(8mL)中的混合物在氮气气氛下添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(15.9mg，126.4umol)在DCM(2mL)中的溶液，并将反应搅拌1小时。通过在-40℃下添加NaHCO₃(500uL)淬灭反应混合物，然后用水(10mL)稀释。用DCM(10ml)提取水层，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法使用0→20％MeOH/DCM作为洗脱液进行纯化，产生1-[4-[2-[2-(二乙氨基)乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(60.0mg，71.2umol，45.0％收率)。ES+APCI MS m/z 649.3[M+H]⁺。

步骤D：1-[4-[2-[2-(二乙氨基)乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：向1-[4-[2-[2-(二乙氨基)乙氧基]-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(50mg，77.0umol)在DCM(500uL)中的溶液添加TFA(175mg，1.54mmol，114uL)。将混合物在15℃下搅拌16小时。将反应混合物真空浓缩并将残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10um；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：32％-62％，12min)进行纯化后，产生1-[4-[2-[2-(二乙氨基)乙氧基]-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(16.0mg，30.2umol，39.2％收率)。ES+APCI MS m/z 519.3[M+H]⁺。

实施例164

1-(4-(7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)乙酮

步骤A：4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(500mg，739umol)和2-(1-哌啶基)乙醇(191mg，1.48mmol，197uL)在甲苯(20mL)中的溶液添加t-BuONa(213mg，2.22mmol)。将混合物在N₂气氛下于20℃搅拌1小时。将混合物冷却至0℃并添加HCl(2M)直至pH～7。过滤混合物并将滤液真空浓缩。残余物通过柱色谱法使用0→10％MeOH/DCM作为洗脱液进行纯化，产生4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(300mg，404umol，54.7％收率)。ES+APCI MS m/z 741.4[M+H]⁺。

步骤B：7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8- 二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：将4-[7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(250mg，337umol)在TFA(10mL)中的溶液在80℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，产生7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(200mg，283umol，84.1％收率)。ES+APCI MS m/z 477.3[M+H]⁺。

步骤C：1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-哌嗪-1-基-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(200mg，283umol，2TFA)和DIEA(366mg，2.84mmol，495uL)在DCM(8mL)中的混合物在氮气气氛下添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(28.6mg，227umol)在DCM(2mL)中的溶液，并将反应搅拌1小时。通过在-40℃下添加NaHCO₃(500uL)淬灭反应混合物，然后用水(10mL)和DCM(10ml)稀释。分离的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10um；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：30％-60％，12min)进行纯化。1-[4-[7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-2-[2-(1-哌啶基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(6.00mg，11.1umol，3.94％收率，99.0％纯度)。ES+APCI MS m/z 531.4[M+H]⁺。

实施例165

1-[4-[7-(2-氟-3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-甲氧基萘-1-酚：在0℃下向萘-1,3-二酚(20g，125mmol)在MeOH(150mL)中的溶液添加HCl/MeOH(4M，250mL)。将混合物温热至18℃并搅拌36小时。将混合物真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至1/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生3-甲氧基萘-1-酚(11g，62.5mmol，50.1％收率，99％纯度)，为浅黄色固体。ES+APCI MS m/z 175.1[M+H]⁺.

步骤B：4-溴-3-甲氧基-萘-1-酚：在0℃下向3-甲氧基萘-1-酚(0.50g，2.87mmol)在THF(10mL)中的溶液添加NBS(562mg，3.16mmol)在THF(3.00mL)中的溶液。在0℃下搅拌2小时后，将混合物真空浓缩，用H₂O(5mL)稀释，用二氯甲烷(3×10mL)提取。合并的提取液用饱和氯化钠(1×20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)进行纯化，产生4-溴-3-甲氧基-萘-1-酚(0.43g，1.43mmol，49.7％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 253[M+H]⁺。

步骤C：4-溴-2-氟-3-甲氧基-萘-1-酚：在-40℃下向4-溴-3-甲氧基-萘-1-酚(4.00g，15.8mmol)在乙腈(20mL)中的溶液添加1-(氯甲基)-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷；双四氟硼酸盐(6.72g，19.0mmol)在乙腈(20mL)中的溶液。在-40℃下搅拌1小时和在10℃下搅拌3小时后，将混合物真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)进行纯化，产生4-溴-2-氟-3-甲氧基-萘-1-酚(4.00g，10.6mmol，67.2％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 271.0[M+H]⁺.

步骤D：2-氟-3-甲氧基-萘-1-酚：4-溴-2-氟-3-甲氧基-萘-1-酚(2.00g，7.38mmol)and 10％Pd/C(0.01g)在乙酸乙酯(20mL)中的混合物在15psi的H₂下于10℃搅拌1小时。将混合物过滤并真空浓缩，产生2-氟-3-甲氧基-萘-1-酚(1.60g，粗产物)，为黄色油，并且不经进一步纯化用于下一步中。ES+APCI MS m/z 193.0[M+H]⁺。

步骤E：(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯：在-78℃下向2-氟-3-甲氧基-萘-1-酚(1.60g，粗产物)和TEA(1.85g，18.3mmol，2.55mL)在二氯甲烷(30mL)中的溶液添加三氟甲磺酰基三氟甲磺酸酯(2.35g，8.33mmol，1.37mL)1小时。将混合物用饱和氯化铵(30mL)淬灭，用乙酸乙酯(3×20mL)提取，用饱和氯化钠(1×50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)进行纯化，产生(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(1.10g，2.07mmol，两步24.9％收率)，为黄色固体。ES+APCI MSm/z 324.9[M+H]⁺。

步骤F：4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.40g，865umol)、(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(561mg，1.73mmol)、RuPhos(80.7mg，173umol)、Pd₂(dba)₃(79.2mg，86.5umol)和t-BuONa(249mg，2.59mmol)在甲苯(10mL)中的混合物在N₂下于110℃搅拌5小时。将混合物用水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(3×10mL)提取。提取液用饱和氯化钠(1×20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱法[水(0.1％甲酸)/乙腈]进行纯化，产生4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.35g，495umol，57.2％收率)，为黄色油。ES+APCI MSm/z 637.1[M+H]⁺。

步骤G：4-[3-[[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并 [3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉：将4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.40g，628.umol)和TFA(1.07g，9.42mmol，698uL)在二氯甲烷(0.70mL)中的混合物在10℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生4-[3-[[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉(0.41g，粗产物，TFA)，为黄色油，并且不经进一步纯化用于下一步中。ES+APCI MS m/z 537.5[M+H]⁺。

步骤H：1-[4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向4-[3-[[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉(0.41g，粗产物，TFA盐)和TEA(635mg，6.27mmol，873uL)在二氯甲烷(5.0mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(79.1mg，627umol)。在-40℃下搅拌0.5h后，用甲醇(0.10mL)淬灭混合物并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(Al₂O₃，二氯甲烷/甲醇＝10/1)进行纯化，产生1-[4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.25g，411umol，两步65.5％收率)，为黄色油。ES+APCI MSm/z 591.0[M+H]⁺。

步骤I：1-[4-[7-(2-氟-3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-78℃下向1-[4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.20g，339umol)在二氯甲烷(4.00mL)中的溶液添加BBr₃(424mg，1.69mmol，163uL)0.5小时并在0℃下搅拌2小时。在-78℃下用饱和碳酸氢钠(5mL)淬灭混合物并在0℃下搅拌0.5h。用二氯甲烷(3×10mL)提取混合物并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：13％-45％,7min)进行纯化，产生1-[4-[7-(2-氟-3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(35.2mg，60.8umol，17.9％收率，99.4％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 577.0[M+H]⁺。

实施例166

1-[4-[7-(6-羟基-2-甲基-1,3-苯并噻唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-三异丙基甲硅烷氧基苯胺：向4-氨基苯酚(5.00g，45.8mmol，7.14mL)在DCM(50.0mL)中的溶液添加咪唑(4.06g，59.6mmol)。向混合物滴加TIPSCl(13.3g，68.7mmol，14.7mL)。将混合物在下搅拌小时15℃ for 12hours.完成后，将反应混合物过滤并将滤液真空浓缩。将残余物通过自动快速色谱系统(PE/EA 100/1至3/1)进行纯化，产生4-三异丙基甲硅烷氧基苯胺(9.46g，33.9mmol，73.9％收率，95.0％纯度)，为黑色油。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝6.74-6.71(m，1H)，6.71-6.69(m，1H)，6.60-6.58(m，1H)，6.58-6.55(m，1H)，3.66-2.98(m，2H)，1.28-1.16(m，3H)，1.11-1.06(m，18H)

步骤B：2,6-di溴-4-三异丙基甲硅烷氧基苯胺：在0℃下向4-三异丙基甲硅烷氧基苯胺(7.30g，27.5mmol)在DCM(73.0mL)and MeOH(73.0mL)中的溶液滴加含Br₂(11.0g，68.8mmol，3.55mL)的DCM(5mL)。将混合物在15℃下搅拌5小时。完成后，用亚硫酸钠溶液(60mL)稀释混合物并用DCM提取(3×200mL)。有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(PE/EA50/1至1/1)进行纯化，产生2,6-二溴-4-三异丙基甲硅烷氧基苯胺(10.8g，23.2mmol，84.4％收率，90.8％纯度)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 423.9[M+H]⁺。

步骤C：N-(2,6-二溴-4-三异丙基甲硅烷基oxy-苯基)乙酰胺：向2,6-二溴-4-三异丙基甲硅烷氧基苯胺(10.4g，24.6mmol)和CH₃COOH(52mL)的溶液添加乙酸酐(10.9g，107mmol，10mL)。将反应混合物在90℃下搅拌1小时。完成后，添加水(100mL)和DCM(200mL)并分离层。用DCM(100mL×2)提取水相。合并的提取液用5％Na₂CO₃(80mL)洗涤，用盐水(100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(PE/EA 50/1至1:1)进行纯化，产生N-(2,6-二溴-4-三异丙基甲硅烷基oxy-苯基)乙酰胺(7.32g，14.2mmol，57.6％收率，90.0％纯度)，为棕色固体。

¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.16(s，1H)，7.11(s，2H)，2.21(s，3H)，1.28-1.24(m，3H)，1.12-1.09(m，18H)。

步骤D：N-(2,6-二溴-4-三异丙基甲硅烷氧基-苯基)硫代乙酰胺：向N-(2,6-二溴-4-三异丙基甲硅烷氧基-苯基)乙酰胺(7.22g，15.5mmol)在甲苯(116mL)中的溶液添加劳氏试剂(LAWESSON'S REAGENT)(3.14g，7.76mmol)。将混合物加热至110℃达2小时。完成后，将混合物真空浓缩。残余物通过柱色谱法(PE/EA 100/1至1/1)进行纯化，产生N-(2,6-二溴-4-三异丙基甲硅烷氧基-苯基)硫代乙酰胺(5.41g，8.40mmol，54.1％收率，74.7％纯度)，为黄色油。ES+APCI MS m/z 481.9[M+H]⁺。

步骤E：4-溴-2-甲基-1,3-苯并噻唑-6-醇：将CuI(94.2mg，494umol)添加到N-(2,6-二溴-4-三异丙基甲硅烷氧基-苯基)硫代乙酰胺(2.38g，4.94mmol)、1,10-菲罗啉(134mg，741umol)和Cs₂CO₃(4.83g，14.8mmol)在DME(48.0mL)中的溶液中。然后将反应混合物在N₂下于80℃搅拌12小时。完成后，过滤反应混合物并浓缩滤液。残余物通过柱色谱法(PE/EA 50/1至0/1)进行纯化，产生4-溴-2-甲基-1,3-苯并噻唑-6-醇(1.33g，3.54mmol，71.7％收率，65.0％纯度)，为棕色油。

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ＝7.33(d，J＝2.4Hz，1H)，7.14(d，J＝2.4Hz，1H)，3.40-3.33(m，1H)，2.72(s，3H)。

步骤F：6-苄氧基-4-溴-2-甲基-1,3-苯并噻唑：向4-溴-2-甲基-1,3-苯并噻唑-6-醇(1.28g，5.24mmol)和K₂CO₃(2.17g，15.72mmol)在ACN(26.0mL)中的混合物添加BnBr(988mg，5.76mmol，685uL)。将反应混合物在45℃下搅拌1小时。完成后，过滤反应混合物并浓缩滤液。残余物通过柱色谱法(PE/EA 200/1至10/1)进行纯化，产生6-苄氧基-4-溴-2-甲基-1,3-苯并噻唑(1.10g，3.13mmol，59.7％收率，95.0％纯度)，为浅黄色固体。ES+APCI MSm/z 336.2[M+H]⁺。

步骤G：4-[7-(6-苄氧基-2-甲基-1,3-苯并噻唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(400mg，805umol)、6-苄氧基-4-溴-2-甲基-1,3-苯并噻唑(323mg，967umol)、RuPhos(75.2mg，161umol)、Cs₂CO₃(787mg，2.42mmol)和Pd₂(dba)₃(73.8mg，80.6umol)在甲苯(16mL)中在N₂下于85℃搅拌16小时。完成后，过滤反应混合物并浓缩滤液。残余物通过柱色谱法经过Al₂O₃(PE/EA 10/1至0/1)进行纯化，产生4-[7-(6-苄氧基-2-甲基-1,3-苯并噻唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(340mg，408umol，50.7％收率，90.0％纯度)，为黄色油。ES+APCI MS m/z 750.5[M+H]⁺。

步骤H：2-甲基-4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3, 4-d]嘧啶-7-基]-1,3-苯并噻唑-6-醇：向4-[7-(6-苄氧基-2-甲基-1,3-苯并噻唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(160mg，213umol)在MeOH(4mL)中的溶液添加HCl/MeOH(4M，533uL)，然后在N₂下添加Pd(OH)₂/C(80mg，533umol)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于40℃搅拌8小时。完成后，过滤反应混合物并浓缩滤液，产生2-甲基-4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-1,3-苯并噻唑-6-醇(110mg，126umol，59.2％收率，68.7％纯度，2HCl)，为黄色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 526.2[M+H]⁺。

步骤I：1-[4-[7-(6-羟基-2-甲基-1,3-苯并噻唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-50℃下向2-甲基-4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-1,3-苯并噻唑-6-醇(110mg，184umol，2HCl)和DIEA(143mg，1.10mmol，193uL)在DCM(2.00mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(18.5mg，147umol)。将混合物在-40--20℃下搅拌30分钟。完成后，通过MeOH(0.5mL)淬灭混合物并真空浓缩。残余物用水(2mL)稀释并用DCM(3×6mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过柱色谱法经过Al₂O₃(DCM/MeOH 20/1至10/1)、制备型HPLC(柱子：Gemini 150*25 5u；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：21％-51％，12min)进行纯化，产生1-[4-[7-(6-羟基-2-甲基-1,3-苯并噻唑-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(32.4mg，55.4umol，30.2％收率，99.1％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 580.4[M+H]⁺。

实施例167

1-(4-(7-(5-羟基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：2-溴-4-甲氧基苯胺：在-10℃下，向4-甲氧基苯胺(100g，812mmol)在THF(3L)中的溶液分三份添加N-溴琥珀酰亚胺(152g，853mmol)，并将混合物在相同温度下搅拌30min。将混合物减压浓缩。残余物通过柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯15/1)进行纯化，产生2-溴-4-甲氧基苯胺，为红色油(30.58g，18.6％收率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.01(d，J＝2.4Hz，1H)，6.74-6.70(m，2H)，3.85-3.74(m，2H)，3.73(s，3H)。

步骤B：1-(2-氨基-3-溴-5-甲氧基苯基)-2-氯丙-1-酮：向2-溴-4-甲氧基-苯胺(15.0g，74.2mmol)在1,1-二氯乙烷(220mL)中的0℃溶液添加三氯化硼(1.00M，89.1mL)、2-氯丙腈e(9.97g，111mmol)和四氯化钛(16.9g，89.1mmol)。将混合物在85℃加热24小时。将混合物在0℃下倒入冰和盐酸(20％，300mL)中，浓缩，并将残余物回流0.5小时。将该混合物在0℃下用氢氧化钠(饱和水溶液，120mL)碱化至pH 4，然后用乙酸乙酯(300mL×2)提取。合并的有机提取液用盐水(200mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷50/1/1)进行纯化，产生1-(2-氨基-3-溴-5-甲氧基苯基)-2-氯丙-1-酮，为黄色固体(18.7g，86.3％收率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.37(d，J＝2.8Hz，1H)，7.32(d，J＝2.8Hz，1H)，6.60(brs，2H)，5.25(q，J＝6.4Hz，1H)，3.80(s，3H)，1.74(d，J＝6.4Hz，3H)。

步骤C：7-溴-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚：向1-(2-氨基-3-溴-5-甲氧基-苯基)-2-氯-丙-1-酮(18.7g，64.1mmol)在二噁烷(500mL)和H₂O(50mL)中的溶液添加NaBH₄(2.67g，70.5mmol)，并将该混合物在100℃下搅拌15小时。冷却混合物，用盐酸(aq.，0.10M，100mL)稀释并用二氯甲烷(300mL×2)提取。将有机物用盐水(200mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物通过柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯25/1)进行纯化，产生7-溴-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚，为黄色固体(7.01g，45.6％收率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ＝7.91(brs，1H)，7.03-6.91(m，2H)，6.23(d，J＝1.2Hz，1H)，3.84(s，3H)，2.46(s，3H)。

步骤D：4-(7-(5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(275mg，594umol)和7-溴-5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚(130mg，540umol)在2-甲基-2-丁醇(15.0mL)中的混合物添加^tBuONa(104mg，1.08mmol)和氯(2-二环己基膦-2',6'-di-^i-丙氧基-1,1'-联苯基)[2-(2-氨乙基苯基)]钯(II)甲基-叔丁基醚加合物(44.1mg，54.0umol)。将该混合物在N₂气氛下于90℃搅拌8小时。过滤混合物，减压浓缩。将残余物通过制备型TLC(二氯甲烷/甲醇10/1)进行纯化，产生4-(7-(5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯，为黄色油(131mg，36.8％收率)。ES+APCI MS m/z622.4[M+H]⁺。

步骤E：4-[3-[[7-(5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢- 5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉：向4-[7-(5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(131mg，211umol)在二氯甲烷(10mL)中的0℃溶液滴加三氟乙酸(2.00mL)，并将反应在15℃下搅拌3小时。减压浓缩混合物，残余物不经进一步纯化用于下一步。(126mg crudeproduct)。ES+APCI MS m/z 522.4[M+H]⁺。

步骤F：1-(4-(7-(5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向4-[3-[[7-(5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉(74mg，116umol，三氟乙酸salt)在二氯甲烷(5mL)中的-60℃溶液添加二异丙基乙胺(45.1mg，349umol，60.8uL)并将混合物在相同温度下搅拌10min。用柠檬酸(水溶液，1.00mL)淬灭混合物，用二氯甲烷(10mL×2)提取，用盐水(15mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥并真空浓缩。将残余物通过制备型TLC进行纯化，产生1-(4-(7-(5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，为黄色固体(31mg，39.2％收率)。ES+APCI MS m/z 576.4[M+H]⁺。

步骤G：1-(4-(7-(5-羟基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向1-[4-[7-(5-甲氧基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(26mg，45.2umol)在二氯甲烷(5mL)中的-78℃溶液添加三溴化硼(56.6mg，226umol，21.8uL)。使反应温热至0℃并搅拌12小时。用NaHCO₃(水溶液，3mL)中和混合物并用二氯甲烷(5mL×2)提取，用盐水(10mL)洗涤，通过无水硫酸钠干燥，真空浓缩。残余物通过制备型HPLC进行纯化，产生1-(4-(7-(5-羟基-2-甲基-1H-吲哚-7-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，为黄色固体(8.16mg，29.1％收率，90.3％纯度)。ES+APCI MS m/z 562.5[M+H]⁺。

实施例168

1-(3-(羟甲基)-4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.50g，16.2mmol)在THF(30mL)中的溶液添加NaH(3.24g，80.9mmol，60.0％纯度)。搅拌30分钟后，一次性添加TBDPSCl(6.67g，24.3mmol，6.23mL)。将混合物温热至10℃并在N₂气氛下搅拌12小时。通过在0℃下添加水淬灭反应混合物，然后用DCM(200mL)提取。有机层用Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法进行纯化(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯 1/0 to 1/2)，产生3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(6.34g，12.1mmol，74.8％收率，86.8％纯度)，为无色油。ES+APCI MS m/z455.3[M+H]⁺。

步骤B：4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(7.25g，13.9mmol)、7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(3.89g，13.2mmol)和DIEA(4.27g，33.0mmol，5.77mL)在DMSO(60mL)中的混合物在N₂气氛下于55℃搅拌24小时。将反应混合物用乙酸乙酯(300mL)稀释并用盐水(3×150mL)洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯1/0至3/1)进行纯化，产生4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(4.50g，5.91mmol，44.7％收率，93.5％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 721.3[M+H]⁺。

步骤C：4-[7-苄基-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.00g，2.81mmol)、3-吗啉代丙-1-醇(815mg，5.62mmol)、Pd(OAc)₂(94.6mg，422umol)、BINAP(350mg，562umol)和t-BuONa(674mg，7.03mmol)在甲苯(30mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，然后将混合物加热至110℃并在N₂气氛下搅拌3小时。完成后，将反应混合物过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH 70/1至20/1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.50g，1.69mmol，60.0％收率，92.3％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 821.4[M+H]⁺。

步骤D：3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[7-苄基-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.50g，1.83mmol)在MeOH(20mL)中的溶液添加Pd-C(10％，1.5g)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(50psi)下于50℃搅拌24小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，产生3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(988mg，1.21mmol，66.1％收率，89.5％纯度)，为无色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z731.5[M+H]⁺。

步骤E：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(731mg，1.00mmol)、3-苄氧基-1-溴萘(783mg，2.50mmol)、[2-(2-氨基苯基)苯基]钯(1+)；二环己基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷；甲磺酸盐(169mg，200umol)、Cs₂CO₃(815mg，2.50mmol)在甲苯(15mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，然后将混合物在N₂气氛下于60℃搅拌24小时。将反应混合物过滤并减压浓缩至干并通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝70/1至30/1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250mg，188umol，18.8％收率，72.3％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 963.4[M+H]⁺。

步骤F：3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(250mg，188umol)在MeOH(3mL)中的溶液添加10％Pd/C(0.25g)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于50℃搅拌3小时。完成后，将反应混合物过滤并减压浓缩至干，产生3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(180mg，128umol，68.1％收率，62.0％纯度)，为深黄色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 873.4[M+H]⁺。

步骤G：4-[4-[2-(羟甲基)哌嗪-1-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚：将3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(130mg，149umol)、氟化氢吡啶(123mg，744umol，112uL，60.0％纯度)在THF(1.5mL)中的混合物在N₂气氛下于25℃搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩至干。将残余物通过反相HPLC(TFA条件；MeCN的H₂O溶液；0～30％，流速；40mL/mins)进行纯化。将目标级分减压浓缩，产生4-[4-[2-(羟甲基)哌嗪-1-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(84mg，104umol，69.6％收率，94.1％纯度，2TFA)，为黄色半固体。ES+APCI MS m/z 535.3[M+H]⁺。

步骤H：1-[3-(羟甲基)-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向4-[4-[2-(羟甲基)哌嗪-1-基]-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(84.0mg，114umol，2TFA)、DIEA(36.9mg，285umol，49.8uL)在DCM(3mL)中的混合物滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(8.63mg，68.44umol)，然后在N₂气氛下于-40℃搅拌0.5小时。通过添加MeOH(0.5mL)淬灭反应混合物并减压浓缩至干。残余物通过制备型HPLC(柱子：Venusil XBPC8 150*25*10um；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：10％-40％，10min)进行纯化。收集目标级分并冻干至干，产生1-[3-(羟甲基)-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(9.75mg，14.5umol，12.7％收率，94.4％纯度，甲酸盐)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 589.3[M+H]⁺。

实施例169

1-[3-(羟甲基)-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(495mg，694umol)、[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇(160mg，1.39mmol，165uL)和叔丁醇钠(200mg，2.08mmol)在甲苯(25mL)中的混合物添加BINAP(86.5mg，139umol)和Pd₂(dba)₃(63.6mg，69.5umol)。将混合物用氮气气氛鼓泡并在80℃下搅拌6h。将反应混合物用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(2×15mL)提取。将合并的有机层用水(2×30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝30/1至1:1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(207mg，262umol，37.7％收率)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.62-7.53(m，4H)，7.43-7.28(m，11H)，4.42-4.29(m，1H)，4.26-3.87(m，4H)，3.81(brd，J＝13.2Hz，2H)，3.75–3.60(m，4H)，3.44(dd，J＝1.6，17.2Hz，1H)，3.24-3.04(m，3H)，2.96(br s，1H)，2.75(br s，3H)，2.49(s，3H)，2.43-2.28(m，2H)，2.10-1.96(m，2H)，1.91-1.80(m，1H)，1.80-1.67(m，2H)，1.43(s，9H)，1.02-0.89(m，9H)。

步骤B：3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]oxy甲基]-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在-40℃下将NH₃在甲醇(30mL)中鼓泡30分钟。向4-[7-苄基-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(530mg，670umol)在上述混合物中的溶液在N₂下添加干燥的10％Pd/C(0.30g)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在15psi的H₂下于40℃搅拌10小时。过滤反应混合物并减压浓缩，产生3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]oxy甲基]-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(394mg，427umol，63.8％收率)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.57(br t，J＝6.0Hz，4H)，7.43-7.33(m，6H)，4.43(br dd，J＝5.2，10.4Hz，1H)，4.32-4.00(m，4H)，3.99-3.89(m，2H)，3.88-3.65(m，4H)，3.27-2.89(m，6H)，2.81(br d，J＝8.4Hz，2H)，2.56-2.50(m，3H)，2.42(br d，J＝16.8Hz，2H)，2.13-2.03(m，1H)，1.88(br d，J＝6.8Hz，1H)，1.79(br d，J＝5.2Hz，2H)，1.43(s，9H)，0.95(br s，9H)。

步骤C：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.16g，228umol)、3-苄氧基-1-溴萘(143mg，457umol)、[2-(2-氨基乙基)苯基]-氯钯；二环己基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷(16.9mg，22.8umol)和t-BuONa(43.9mg，457umol)在甲苯(4mL)中的混合物在N₂下于70℃搅拌12小时。将混合物用水(5.00mL)稀释并用乙酸乙酯(3×10mL)提取。合并的有机层用饱和氯化钠(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱法[水(甲酸，0.1％)/乙腈]进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.15g，157umol，68.9％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 933.1[M+H]⁺。

步骤D：3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在-78℃下将NH₃鼓泡通入甲醇(10mL)30分钟。添加4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.10g，107umol)和干燥的10％Pd/C(0.01g)，并将混合物在15psi的H₂下于10℃搅拌1小时。浆液通过硅藻土垫过滤并真空浓缩滤液，产生3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.09g，粗产物)，为黄色油，并且不经进一步纯化用于下一步中。ES+APCI MS m/z 843.0[M+H]⁺。

步骤E：4-[4-[2-(羟甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚：将3-[[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧甲基]-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.04g，粗产物)和吡啶；氢氟酸盐(118mg，712umol，106uL)在二氯甲烷(2mL)中的混合物在0℃下搅拌1小时并在10℃下搅拌12小时。通过添加饱和碳酸氢钠溶液(3.00mL)将混合物的pH调节至pH>7并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(Al₂O₃，二氯甲烷/甲醇＝5/1)进行纯化，产生4-[4-[2-(羟甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(0.04g，粗产物)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 505.2[M+H]⁺。

步骤F：1-[3-(羟甲基)-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向4-[4-[2-(羟甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]萘-2-酚(0.02g，粗产物)和TEA(40.1mg，396umol，55.17uL)在二氯甲烷(2mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(999ug，7.93umol)，然后将混合物在-40℃下搅拌0.5h。通过添加甲醇(0.10mL)淬灭混合物并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(Al₂O₃，二氯甲烷/甲醇＝5/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(10mM NH4HCO3)-ACN]；B％：38％-68％，3min)进行纯化。收集目标级分并冻干，产生1-[3-(羟甲基)-4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.08mg，1.73umol)。ES+APCI MS m/z 559.5[M+H]⁺。

实施例170

2-(1-丙烯酰-4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：1-(叔丁基)2-甲基4-(7-苄基-2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4- 基)哌嗪-1,2-二羧酸酯：向7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(5.00g，17.0mmol)和2-甲基哌嗪-1,2-di羧酸1-叔丁酯(4.24g，17.3mmol)在DMSO(80mL)中的溶液添加DIEA(5.49g，42.5mmol，7.42mL)。在55℃下搅拌12小时后，将混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，用盐水(3×150mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，PE/EA＝3/1)进行纯化，产生2-甲基4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(8.00g，15.9mmol，93.8％收率)，为黄色油。ES+APCI MS m/z502.1[M+H]⁺。

步骤B：2-甲基4-(7-苄基-2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,2-二羧酸1-(叔丁基)酯：将2-甲基4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(8.00g，15.9mmol)、2-(二甲基氨基)乙醇(2.84g，31.9mmol，3.19mL)、Cs₂CO₃(13.0g，39.8mmol)、Pd(OAc)₂(537mg，2.39mmol)和BINAP(1.98g，3.19mmol)在甲苯(30mL)中的混合物在氮气下于110℃搅拌3小时。将混合物用水(30mL)稀释，然后用乙酸乙酯(3×50mL)提取。将提取液用盐水(1×100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过反相HPLC(TFA，0.1％)进行纯化，产生2-甲基4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(6.00g，10.8mmol，67.9％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z555.3[M+H]⁺。

步骤C：2-甲基4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯：将2-甲基4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(6.00g，10.8mmol)和10％Pd/C(600mg，10.8mmol)在MeOH(100mL)中的混合物在50psi的H₂下于40℃搅拌12小时。过滤混合物并将滤液真空浓缩，产生基2-甲基4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(4.50g，粗产物)，作为黄色固体获得。ES+APCI MS m/z 465.3[M+H]⁺。

步骤D：2-甲基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯：将2-甲基4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(2.90g，6.24mmol)、3-苄氧基-1-溴萘(2.54g，8.12mmol)、Pd₂(dba)₃(857mg，936umol)、RuPhos(728mg，1.56mmol)和Cs₂CO₃(5.08g，15.6mmol)在1,4-二噁烷(150mL)中的混合物在N₂下于85℃搅拌5小时。将混合物用水(100mL)稀释，用DCM(1×200mL)提取。将提取液用盐水(1×300mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过反相HPLC(TFA，0.1％)进行纯化，产生2-甲基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(3.50g，5.02mmol，两步72.5％收率)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 697.3[M+H]⁺。

步骤E：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在-60℃下向2-甲基4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1,2-二羧酸1-叔丁酯(1.00g，1.44mmol)在THF(10mL)中的溶液分份添加LiAlH₄(219mg，5.76mmol)。搅拌2小时后，用饱和硫酸钠溶液(0.3mL)淬灭混合物，过滤并用DCM(100mL)洗涤滤饼。将合并的滤液真空浓缩，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(750mg，1.12mmol，77.8％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 669.3[M+H]⁺。

步骤F：2-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，149umol)、TBAI(11.1mg，29.9umol)、1-(对甲苯磺酰基)咪唑(79.9mg，359umol)、NaCN(0.12g，2.45mmol)和TEA(37.8mg，374umol，51.8uL)在DMF中的混合物在155℃下搅拌6小时。将混合物真空浓缩，用水(1×5mL)稀释，然后用乙酸乙酯(3×10mL)提取。将提取液用盐水(1×20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10um；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：50％-70％，28MIN)进行纯化，产生2-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(160mg，277umol，37.1％收率)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 578.5[M+H]⁺。

步骤G：2-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(60mg，104umol)和DIEA(67.1mg，519umol，90.7uL)在DCM(2mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(13.1mg，104umol)。在10℃下搅拌4小时后，用MeOH(0.1mL)淬灭混合物，然后真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH 10/1)进行纯化，产生2-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(40.0mg，63.3umol，61.0％收率)，为黄色油。ES+APCIMS m/z 632.3[M+H]⁺。

步骤H：2-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在-78℃下以0.5h向2-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(30mg，47.5umol)在DCM(2mL)中的溶液添加BBr₃(35.7mg，142umol，13.7uL)。将混合物温热至0℃并搅拌2小时。将混合物真空浓缩，然后在-78-0℃下用饱和碳酸氢钠溶液淬灭。混合物通过柱色谱法(Al₂O₃，DCM/MeOH＝5/1)纯化，然后通过制备型HPLC(柱子：Gemini 150*25 5u；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：30％-60％，,12min)进一步纯化。收集目标级分并冻干，产生2-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(810ug，1.46umol，3.07％收率，97.5％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 542.5[M+H]⁺。

实施例171

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：2-(3-氧代哌嗪-2-基)乙酸乙酯：向(E)-丁-2-烯二酸二乙酯(30.2g，175mmol，28.8mL)在i-PrOH(300mL)中的溶液添加乙-1,2-二胺(11.0g，183mmol，12.2mL)。在25℃下搅拌12小时后，将反应混合物减压浓缩至干。将粗白色固体用MTBE(500mL)洗涤并真空干燥，产生2-(3-氧代哌嗪-2-基)乙酸乙酯(26.0g，140mmol，79.6％收率，100％纯度)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝6.55(br s，1H)，4.15(q，J＝6.8Hz，2H)，3.80-3.72(m，1H)，3.47(dt，J＝4.8，11.2Hz，1H)，3.36-3.22(m，1H)，3.18-3.08(m，1H)，3.07-2.95(m，2H)，2.76-2.70(m，1H)，1.25(t，J＝7.2Hz，3H)。

步骤B：2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-哌嗪-2-基]乙酸乙酯：在0℃下向2-(3-氧代哌嗪-2-基)乙酸乙酯(23.6g，127mmol)在甲醇(400mL)中的混合物添加4-甲氧基苯甲醛(18.9g，139mmol，16.9mL)和CH₃COOH(15.2g，253mmol，14.5mL)。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物冷却至-10℃。向混合物分份添加NaBH₃CN(23.9g，380mmol)，将反应混合物温热至15℃并再搅拌11小时。通过添加水(400ML)淬灭反应并用DCM(2×300mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物用乙酸乙酯(300mL)再溶解，然后用0.5M HCl溶液(2×200mL)洗涤。水相用Na₂CO₃固体调节至pH 7～8，然后用DCM(2×300mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩，产生2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-哌嗪-2-基]乙酸乙酯(27.2g，87.6mmol，69.0％收率，98.5％纯度)，为无色油。ES+APCI MS m/z307.1[M+H]⁺。

步骤C：2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙醇：在0℃下向2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-氧代-哌嗪-2-基]乙酸乙酯(27.2g，88.8mmol)在THF(500mL)中的混合物分份添加LiAlH₄(10.1g，266mmol)。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物加热到70℃并搅拌11小时。完成后，用饱和Na₂SO₄水溶液(40mL)淬灭反应，过滤，然后浓缩。获得产物2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙醇(20g，粗产物)，为黄色油。ES+APCI MS m/z 251.1[M+H]⁺。

步骤D：叔丁基-[2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙氧基]-二苯基硅烷：在0℃下向2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙醇(20g，粗产物)在THF(300mL)中的混合物分份添加NaH(15.9g，399mmol，60％纯度)，然后添加TBDPSCl(65.9g，239mmol，61.6mL)在THF(100mL)中的溶液。将混合物温热至15℃并再搅拌12小时。完成后，将反应倒入NH₄Cl溶液(300mL)中，并用DCM(2×300mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚：乙酸乙酯3/1至二氯甲烷/甲醇10/1)进行纯化，产生叔丁基-[2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙氧基]-二苯基硅烷(29.5g，59.9mmol，两步35％，99.2％纯度)，为黄色油。ES+APCI MS m/z 489.4[M+H]⁺。

步骤E：3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]oxyethyl]-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向叔丁基-[2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙氧基]-二苯基硅烷(11.0g，22.5mmol)在MeOH(200mL)中的混合物添加TEA(6.83g，67.5mmol，9.36mL)和(Boc)₂O(9.82g，45.0mmol，10.3mL)。在15℃下搅拌3小时后，将反应浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚:乙酸乙酯1/0至5/1)进行纯化，产生3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]oxyethyl]-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(11.0g，18.7mmol，82.9％收率，100％纯度)，为无色油。ES+APCI MS m/z 589.4[M+H]⁺。

步骤F：3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(9.00g，15.3mmol)在MeOH(150mL)中的混合物添加10％Pd/C(849umol)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫三次。将混合物在H₂(50Psi)下于40℃搅拌18小时。完成后，将反应混合物通过硅藻土塞过滤浓缩滤液。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯10/1至3:1)进行纯化，产生3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.80g，12.2mmol，79.5％收率，98.2％纯度)，为无色油。ES+APCI MS m/z 469.4[M+H]⁺。

步骤G：2-[4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙氧基-叔丁基-二苯基-硅烷：将7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(4.00g，13.6mmol)、叔丁基-[2-[1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙氧基]-二苯基-硅烷(6.98g，14.3mmol)和DIEA(4.39g，34.0mmol，5.93mL)在DMSO(80mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，将混合物加热至55℃并在N₂气氛下搅拌12小时。将反应混合物用水(300mL)稀释并用乙酸乙酯(3×200mL)提取。合并的有机层用盐水(3×200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯1/0至3/1)进行纯化，产生2-[4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙氧基-叔丁基-二苯基-硅烷(9.00g，11.7mmol，86.0％收率，97.0％纯度)，为黄色油。ES+APCI MS m/z 746.4[M+H]⁺。

步骤H：2-[[7-苄基-4-[3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺：将2-(二甲基氨基)乙醇(2.39g，26.8mmol，2.69mL)、2-[4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-2-基]乙氧基-叔丁基-二苯基-硅烷(8.00g，10.7mmol)、Pd(OAc)₂(361mg，1.61mmol)、BINAP(1.34g，2.14mmol)和Cs₂CO₃(8.73g，26.8mmol)在甲苯(100mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次。将混合物加热至110℃并在N₂气氛下搅拌3小时。过滤反应混合物并将滤液减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH 50/1至10/1)进行纯化，产生2-[[7-苄基-4-[3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺(6.50g，粗产物)，为黄色半固体。ES+APCI MS m/z 799.4[M+H]⁺。

步骤I：2-[4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d] 嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙醇：2-[4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙醇：将2-[[7-苄基-4-[3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[(4-甲氧基苯基)甲基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺(6.50g，粗产物)在TFA(80mL)中的溶液在80℃下搅拌12小时。减压浓缩反应混合物至干，将残余物再溶于DCM(300mL)中并用水(200mL)洗涤。收集水相并用饱和NaHCO₃水溶液碱化至pH～8，然后用DCM(3×200mL)提取。合并的有机相经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生2-[4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙醇(3.00g，粗产物)，为黄色半固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。

步骤J：2-[[7-苄基-4-[3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺：2-[4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙醇(3.0g，粗产物)在THF(40mL)中的溶液在0℃下添加NaH(1.36g，34.1mmol，60.0％纯度)。搅拌30分钟后，分份添加TBDPSCl(2.81g，10.2mmol，2.63mL)。将混合物温热至25℃并在N₂气氛下再搅拌2小时。通过在0℃下添加水(30mL)淬灭反应混合物并提取到乙酸乙酯(3×100mL)中。合并的有机层用盐水(3×100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干，产生2-[[7-苄基-4-[3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺(6.00g，粗产物)，为黄色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 679.4[M+H]⁺。

步骤K：4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-[[7-苄基-4-[3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺(6.0g，粗产物)，Boc₂O(18.5g，84.8mmol，19.5mL)在MeOH(3mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次。将混合物加热至80℃并在N₂气氛下搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH 1/0至10/1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.10g，3.28mmol，四步30.7％收率，82.2％纯度)，为半固体。ES+APCI MS m/z 779.4[M+H]⁺。

步骤L：2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.10g，3.28mmol，82.2％纯度)在MeOH(60mL)中的溶液添加Pd-C(10％，2g)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫三次。将混合物在H₂(50psi)下于50℃搅拌36小时。将反应混合物过滤并减压浓缩至干，产生2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.20g，2.75mmol，83.8％收率，86.0％纯度)，为黄色固体，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 689.4[M+H]⁺。

步骤M：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.85g，2.69mmol)、3-苄氧基-1-溴萘(1.09g，3.49mmol)、Cs₂CO₃(2.19g，6.71mmol)、[2-(2-氨基苯基)苯基]钯(1+)；二环己基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷；甲磺酸盐(341mg，403umol)在甲苯(40mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，并将混合物在N₂气氛下于65℃搅拌10小时。完成后，将反应混合物过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH 1/0至10/1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.85g，1.69mmol，63.2％收率，84.3％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 922.5[M+H]⁺。

步骤N：1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，543umol)、2,6-二甲基吡啶(700mg，6.51mmol，759uL)在DCM(10mL)中的溶液添加TMSOTf(724mg，3.26mmol，588uL)。在N₂气氛下于40℃搅拌2小时后，将反应混合物冷却至-40℃并逐份添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(137mg，1.09mmol)。将反应混合物温热至25℃并在N₂气氛下再搅拌12小时。完成后，将反应混合物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH 30/1至10/1)直接纯化，产生1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(256mg，226umol，41.6％收率，77.2％纯度)，为半固体。ES+APCI MS m/z 875.5[M+H]⁺。

步骤O：1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(133mg，152umol)在DCM(5.00mL)中的溶液滴加BBr₃(571mg，2.28mmol，220uL)。将反应混合物温热至0℃并搅拌3小时。将混合物减压浓缩至干。粗物质用MTBE(25mL)洗涤并收集固体。将固体在0℃下用饱和NaHCO₃溶液(0.5mL)洗涤至pH～8，然后溶于MeOH(3mL)中。将混合物通过制备型HPLC(柱子：Boston Green ODS 150*30 5u；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：15％-39％，10min)直接纯化，产生1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(16.7mg，28.2umol，18.5％收率，99.9％纯度，甲酸盐)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 547.3[M+H]⁺。

实施例172

1-(4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-(2-羟乙基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(3.04g，10.3mmol)、3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.08g，10.8mmol)、DIEA(3.34g，25.8mmol，4.51mL)在DMSO(60mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次。将混合物加热至55℃并在N₂气氛下搅拌16小时。冷却至室温后，将反应混合物用水(100mL)稀释并用乙酸乙酯(3×100mL)提取。合并的有机层用盐水(3×100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯1/0至3/1)进行纯化，产生4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.50g，4.53mmol，43.9％收率，94.0％纯度)，为黄色半固体。ES+APCI MS m/z 726.4[M+H]⁺。

步骤B：4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-(二甲基氨基)乙醇(1.07g，12.1mmol，1.21mL)、4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(3.50g，4.82mmol)、Pd(OAc)₂(162mg，723umol)、BINAP(600mg，964umol)和Cs₂CO₃(3.92g，12.1mmol)在甲苯(40mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次。将混合物在N₂气氛下伴随搅拌加热至110℃达3小时。冷却至室温后，将反应混合物过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(SiO₂，DCM/MeOH＝1/0至10/1)进行纯化，产生4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.30g，2.57mmol，53.3％收率，87.0％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 779.5[M+H]⁺。

步骤C：3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.30g，2.95mmol)在MeOH(40mL)中的溶液添加Pd-C(10％，1.5g)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。在H₂(50psi)下于50℃搅拌36小时后，将反应混合物过滤并减压浓缩，产生3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.58g，1.83mmol，61.9％收率，79.6％纯度)，为无色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 689.4[M+H]⁺。

步骤D：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.48g，2.15mmol)、3-苄氧基-1-溴萘(875mg，2.80mmol)，Cs₂CO₃(1.75g，5.38mmol)、[2-(2-氨基苯基)苯基]钯(1+)；二环己基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷；甲磺酸盐(273mg，323umol)在甲苯(30mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，然后将混合物在N₂气氛下于65℃搅拌24小时。将反应混合物过滤并减压浓缩至干。残余物通过柱色谱法(Al₂O₃，DCM/MeOH＝1/0至20/1)进行纯化，产生4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.20g，1.07mmol，49.7％收率，82.0％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 921.4[M+H]⁺。

步骤E：2-[[7-(3-苄氧基-1-萘基)-4-[2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]oxy]-N,N-二甲基-乙胺：将4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，326umol)和2,6-二甲基吡啶(419mg，3.91mmol，455uL)在DCM(10mL)中的混合物在0℃下逐份添加TMSOTf(434mg，1.95mmol，353uL)。将混合物温热至10℃并在N₂气氛下搅拌12小时。反应混合物直接通过柱色谱法(Al₂O₃，DCM/MeOH 1/0至50/1)进行纯化，产生2-[[7-(3-苄氧基-1-萘基)-4-[2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺(210mg，229umol，70.3％收率，89.5％纯度)，为黄色半固体。ES+APCI MS m/z 821.5[M+H]⁺。

步骤F：1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在氮气气氛下于–40℃向2-[[7-(3-苄氧基-1-萘基)-4-[2-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]-N,N-二甲基-乙胺(210mg，256umol)和DIEA(49.6mg，384umol，67.0uL)在DCM(10mL)中的混合物逐份添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(33.9mg，269umol)。在相同温度下搅拌30分钟后，将反应混合物直接通过柱色谱法(Al₂O₃，DCM/MeOH 1/0至50/1)进行纯化，产生1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(221mg，214umol，83.6％收率，84.7％纯度)，为浅黄色半固体。ES+APCI MS m/z 875.4[M+H]⁺。

步骤G：1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：将1-[4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-[2-[叔丁基(二苯基)甲硅烷基]氧乙基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(221mg，253umol)在DCM(10mL)中的混合物在-40℃下添加BBr₃(949mg，3.79mmol，365uL)。将混合物在N₂气氛下于0℃搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩至干。粗产物在0℃下用MTBE(25mL)、饱和NaHCO₃溶液(0.5mL)洗涤至pH～8并溶于MeOH(3mL)中。所生成的溶液通过制备型HPLC(柱子：Boston Green ODS150*30 5u；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：11％-41％，10min)进行纯化，产生1-[4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-3-(2-羟乙基)哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(26.7mg，44.0umol，17.4％收率，97.8％纯度，甲酸盐)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 547.3[M+H]⁺。

实施例173

1-(4-(7-(3-羟基-2-甲基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-(4-(7-(3-羟基-2-甲基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮根据实施例165 1-[4-[7-(2-氟-3-羟基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮的程序制备，在步骤F中用(3-甲氧基-2-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯取代(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯，产生目标产物1-(4-(7-(3-羟基-2-甲基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮，为黄色固体(10.4mg，13.1％收率，98.1％纯度)。ES+APCI MS m/z 573.5[M+H]⁺。

实施例174

(R)-1-(4-(2-((5,5-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：(5R)-5-(羟甲基)-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：在15℃下向(2R)-1-叔丁氧羰基-5,5-二甲基-吡咯烷-2-羧酸(500mg，2.06mmol)在无水THF(4mL)中的溶液滴加BH₃-Me₂S(2M，1.23mL)。将反应在50℃下加热5分钟。在冰浴中冷却后，向所述混合物添加甲醇(20mL)。在25℃下减压浓缩反应混合物。获得(5R)-5-(羟甲基)-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(400mg，1.74mmol，84.9％收率)，为白色固体。

¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝3.97-3.81(m，1H)，3.62(dd，J＝3.6，10.8Hz，1H)，3.45-3.33(m，1H)，2.02-1.79(m，3H)，1.79-1.67(m，1H)，1.49-1.41(m，12H)，1.32(s，3H)。

步骤B：4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2R)-1-叔丁氧羰基-5,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯：向(5R)-5-(羟甲基)-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(212mg，926umol)和4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(300mg，463umol)在THF(10mL)中的溶液添加t-BuONa(133mg，1.39mmol)。在15℃下搅拌1小时后，将反应混合物倒入H₂O(20mL)并用乙酸乙酯(20mL×3)提取。将有机相用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱法[水(0.1％甲酸)/乙腈]进行纯化。收集目标级分并真空浓缩。获得化合物4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2R)-1-叔丁氧羰基-5,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(110mg，129umol，28.1％收率，96％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z813.5[M+H]⁺。

步骤C：(5R)-5-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：在-40℃下将NH₃鼓泡通入MeOH(30mL)30分钟。在N₂下向4-[7-(3-苄氧基-1-萘基)-2-[[(2R)-1-叔丁氧羰基-5,5-二甲基-吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(200mg，246umol)在上述混合物(NH₃/MeOH)中的溶液添加干燥的Pd-C(10％，100mg)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于15℃搅拌1小时。过滤掉催化剂并浓缩滤液，产生产物(5R)-5-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(150mg，244umol，99.4％收率，96％纯度)，为黄色固体，并且不经纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 589.3[M+H]⁺。

步骤D：(5R)-5-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：在氮气气氛下于-40℃向(5R)-5-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(130mg，221umol)和DIEA(285mg，2.21mmol，385uL)在二氯甲烷(3mL)中的混合物添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(22.3mg，176umol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液。将混合物在-40℃下搅拌1小时。通过添加饱和NaHCO₃(2mL)水溶液淬灭反应。然后将混合物倒入水(20mL)中并用二氯甲烷(20mL×2)提取。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，二氯甲烷/甲醇＝1/0至10/1)进行纯化。获得(5R)-5-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(140mg，217umol，98.6％收率)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 643.6[M+H]⁺。

步骤E：1-[4-[2-[[(2R)-5,5-二甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：向(5R)-5-[[7-(3-羟基-1-萘基)-4-(4-丙-2-烯酰哌嗪-1-基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧甲基]-2,2-二甲基-吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(120mg，187umol)在二氯甲烷(200uL)中的溶液添加TFA(212mg，1.87mmol，138uL)。将混合物在15℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，然用二氯甲烷(5mL)稀释并通过添加饱和NaHCO₃水溶液调节PH＝7。用二氯甲烷(10mL×3)提取混合物。合并的有机相经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：45％-75％，12min)进行纯化。通过冻干获得1-[4-[2-[[(2R)-5,5-二甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(30mg，53.6umol，28.7％收率，97％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 543.5[M+H]⁺。

实施例175

(S)-1-(4-(7-(3-羟基-2-甲基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(S)-1-(4-(7-(3-羟基-2-甲基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮根据实施例165的程序合成，在步骤F中用4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯取代4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯并用(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯取代(3-甲氧基-2-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯，产生1-[4-[7-(3-羟基-2-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(10.2mg，17.3umol，21.4％收率，100％纯度，甲酸盐)，为白色固体。ES+APCI MS m/z 543.4[M+H]⁺。

实施例176

2-[(2S)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：(3aR)-1-氧代-3a,4,6,7-四氢-3H-氧杂噻唑并[3,4-a]吡嗪-5-羧酸叔丁酯：在0℃下向咪唑(15.7g，231mmol)在DCM(100mL)中的溶液添加SOCl₂(8.25g，69.4mmol，5.03mL)。将反应混合物在15℃下搅拌1小时。在-70℃下向所述混合物添加含(3R)-3-(羟甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5g，23.1mmol)的DCM(100mL)。将反应混合物在15℃下搅拌12小时。完成后，通过饱和NH₄Cl(100mL)淬灭反应混合物并分离，用DCM(40mL)提取水层。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生(3aR)-1-氧代-3a,4,6,7-四氢-3H-氧杂噻唑并[3,4-a]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(5.8g，22.1mmol，95.6％收率)，为棕色固体。

步骤B：(3aR)-1,1-二氧代-3a,4,6,7-四氢-3H-氧杂噻唑并[3,4-a]吡嗪-5-羧酸叔丁酯：在0℃下向(3aR)-1-氧代-3a,4,6,7-四氢-3H-氧杂噻唑并[3,4-a]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(7.5g，28.6mmol)在MeCN(225mL)中的溶液添加含NaIO₄(7.95g，37.2mmol，2.06mL)的水(75mL)、然后是RuCl₃.H₂O(129mg，572umol)。将反应混合物在15℃下搅拌0.5小时。完成后，用饱和NH₄Cl(10mL)淬灭反应混合物并用EtOAc(20mL)提取。有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc＝3:1至1:1)进行纯化，产生(3aR)-1,1-二氧代-3a,4,6,7-四氢-3H-氧杂噻唑并[3,4-a]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(7g，25.2mmol，88.0％收率)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.64(dd，J＝6.4，8.0Hz，1H)，4.36-3.94(m，3H)，3.64(ddt，J＝3.6，6.0，9.2Hz，1H)，3.46(br d，J＝11.6Hz，1H)，3.13(br s，1H)，2.96(dt，J＝3.2，11.2Hz，2H)，1.48(s，9H)

步骤C：(3S)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向(3aR)-1,1-二氧代-3a,4,6,7-四氢-3H-氧杂噻唑并[3,4-a]吡嗪-5-羧酸叔丁酯(5g，18.0mmol)在DMF(100mL)中的溶液添加KCN(1.04g，16.0mmol，684.94uL)。将反应混合物加热到50℃达16小时。完成后，反应混合物被HCl(2M，50mL)淬灭并在15℃下搅拌1h。将混合物通过NaOH(40％，10mL)碱化并用EtOAc(3×100mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc＝3:1至0:1然后EtOAc:MeOH＝100:1至10:1)进行纯化，产生(3S)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.1g，4.88mmol，27.2％收率)，为棕色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝4.05-3.71(m，2H)，3.08-2.88(m，3H)，2.84-2.62(m，2H)，2.56-2.37(m，2H)，1.47(s，9H)。

步骤D：2-[(2S)-哌嗪-2-基]乙腈：将(3S)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(850mg，3.77mmol)和HCl/二噁烷(4M，20mL)的反应混合物在15℃下搅拌1小时。完成后，真空除去溶剂，产生2-[(2S)-哌嗪-2-基]乙腈(740mg，3.74mmol，99.0％收率，2HCl)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝4.04-3.90(m，1H)，3.81-3.70(m，2H)，3.69-3.61(m，2H)，3.53-3.36(m，2H)，3.13(d，J＝6.4Hz，2H)。

步骤E：2-[(2S)-4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪- 2-基]乙腈：向7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(1.3g，4.42mmol)和2-[(2S)-哌嗪-2-基]乙腈(1.17g，5.91mmol，2HCl)在二噁烷(25mL)中的混合物添加DIEA(2.86g，22.1mmol，3.85mL)。将反应混合物在50℃下搅拌12小时。完成后，用水(50mL)稀释反应混合物并用EtOAc(3×80mL)提取。合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生2-[(2S)-4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基]乙腈(1.69g，4.41mmol，100％收率)，为棕色固体。

步骤F：(2S)-4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-[(2S)-4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基]乙腈(1.69g，4.41mmol)和(Boc)₂O(10.3g，47.2mmol，10.8mL)的反应混合物加热到50℃达2小时。完成后，将反应混合物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc＝10:1至1:1)进行纯化，产生(2S)-4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.1g，2.12mmol，48.0％收率，93％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 483.4[M+H]⁺。

步骤G：(2S)-4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：0℃下向2-(二甲基氨基)乙醇(415mg，4.66mmol，468uL)在THF(20mL)中的溶液添加NaH(149mg，3.73mmol，60％纯度)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5h。向所述混合物添加(2S)-4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(900mg，1.86mmol)。在密封管中将反应混合物在N₂下于70℃搅拌12小时。完成后，反应混合物被水(10mL)淬灭并用EtOAc(3×40mL)提取。合并的有机层用活性炭处理并过滤。真空浓缩滤液，产生(2S)-4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(600mg，1.12mmol，60.1％收率)，为棕色固体。

步骤H：(2S)-2-(氰基甲基)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将NH₃鼓泡通入MeOH(20mL)中5min。向溶液添加(2S)-4-[7-苄基-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(600mg，1.12mmol)和10％Pd/C(200mg)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于40℃搅拌16小时。完成后，过滤混合物并用MeOH(3×30mL)洗涤滤饼。真空浓缩滤液。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex luna(2)C18 250*50 10u；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：％-％,30MIN；60％min)进行纯化，产生(2S)-2-(氰基甲基)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(167mg，331umol，29.6％收率，88.3％纯度)，为无色油。ES+APCI MS m/z 446.3[M+H]⁺。

步骤I：(2S)-2-(氰基甲基)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向(2S)-2-(氰基甲基)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(180mg，404umol)、(4-溴-2-萘基)2,2-二甲基丙酸酯(248mg，808umol)和Cs₂CO₃(395mg，1.21mmol)在甲苯(6mL)中的溶液添加XPHOS Palladacycle Gen3(34.20mg，40.4umol)。将反应混合物在N₂下于70℃搅拌4小时。完成后，将反应混合物通过硅胶色谱法(PE:EA＝5:1至0:1)进行纯化，产生(2S)-2-(氰基甲基)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，272umol，67.3％收率，91.3％纯度)，为棕色固体。ES+APCIMS m/z 672.0[M+H]⁺。

步骤J：[4-[4-[(3S)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：向(2S)-2-(氰基甲基)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，298umol)在DCM(0.3mL)中的溶液添加TFA(420mg，3.68mmol，273uL)。将反应混合物在15℃下搅拌1小时。完成后，真空浓缩反应混合物，产生[4-[4-[(3S)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(238mg，298umol，99.9％收率，2TFA)，为棕色油。

步骤K：[4-[4-[(3S)-3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：在0℃下向[4-[4-[(3S)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(238mg，298umol，2TFA)和DIEA(308mg，2.38mmol，415uL)在DCM(5mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(56.3mg，446umol)。将反应混合物在15℃下搅拌1小时。完成后，用一滴水淬灭反应混合物。将混合物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc＝1:1至0:1然后EtOAc:MeOH＝50:1至3:1)进行纯化，产生[4-[4-[(3S)-3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(300mg，粗产物)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 626.4[M+H]⁺。

步骤L：2-[(2S)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：向[4-[4-[(3S)-3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(300mg，479umol)在THF(3mL)中的溶液添加NaOH(2M，3mL)的水溶液。将反应混合物在15℃下搅拌8小时。完成后，反应混合物用0.5mL甲酸(20％水溶液)酸化至PH＝7，并用DCM(5×10mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩.

残余物通过制备型HPLC(柱子：Boston Green ODS 150*30 5u；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％：25％-49％，10min)进行纯化，产生2-[(2S)-4-[2-[2-(二甲基氨基)乙氧基]-7-(3-羟基-1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(18.3mg，30.2umol，两步10.1％收率，96.7％纯度，甲酸盐)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 542.5[M+H]⁺。

实施例177

2-[4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在18℃下向2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，549umol)和[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲醇(126mg，1.10mmol)在甲苯(6mL)中的溶液添加t-BuONa(79.1mg，823umol)，并将反应混合物在18℃下搅拌0.5小时。然后向混合物添加EtOAc(20mL)和水(15mL)，然后用EtOAc(3×20mL)提取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过反相快速色谱柱(ACN/水(0.1％甲酸)＝42％)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，331umol，60.4％收率，99.0％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 598.3[M+H]⁺。

步骤B：2-[4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg，334umol)和TFA(763mg，6.69mmol，495uL)的混合物在18℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，产生2-[4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(250mg，粗产物，2TFA)，为棕色油.

步骤C：2-[4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(250mg，344umol，2TFA)和DIEA(356mg，2.76mmol，480uL)在DCM(5mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(65.2mg，517umol)，并将混合物在18℃下搅拌1.5小时。用水(3mL)淬灭反应混合物，然后用DCM(3×6mL)提取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(10mM NH4HCO3)-ACN]；B％30％-60％,3min)进行纯化，产生2-[4-[2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(9.98mg，17.0umol，4.94％收率，94.1％纯度)，为白色固体。ES+APCIMS m/z 552.5[M+H]⁺。

实施例178

2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：7-苄基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇：将MeOH(1000mL)和Na(22.0g，957mmol，22.7mL)的悬液搅拌30min。在15℃下向该混合物添加1-苄基-3-氧代-哌啶-4-羧酸乙酯(50g，191mmol)和2-甲基异硫脲(47.9g，344mmol，0.5H₂SO₄)。将反应混合物在15℃下搅拌30小时。通过HCl(2M)(300mL)酸化反应混合物直至pH＝6并减压浓缩。将残余物悬浮在200mL水中并快速搅拌。过滤悬液，收集白色固体并用乙酸乙酯洗涤。获得7-苄基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(68g，151mmol，79.1％收率，64.0％纯度)，为白色固体。

步骤B：7-苄基-4-氯-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：向7-苄基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-醇(50g，174mmol)在CHCl₃(1000mL)中的溶液添加POCl₃(166g，1.08mol，100mL)，并将混合物在80℃下搅拌13小时。完成后，真空浓缩反应混合物。将残余物用EtOAc(500mL)稀释并用饱和Na₂CO₃(800mL)碱化至PH＝7。将混合物用乙酸乙酯(3×400mL)提取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EA从100:1至80:1)进行纯化，产生7-苄基-4-氯-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(21.7g，67.4mmol，38.7％收率，95.0％纯度)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 306.1[M+H]⁺。

步骤C：4-(7-苄基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向7-苄基-4-氯-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(2.6g，8.50mmol)and 2-哌嗪-2-基乙腈(1.68g，8.50mmol，2HCl)在DMSO(52mL)中的溶液添加DIEA(5.49g，42.5mmol，7.40mL)。将混合物温热至80℃并在80℃下搅拌6小时。向所述混合物添加(Boc)₂O(18.5g，85.0mmol，19.5mL)并将混合物在80℃下搅拌1小时。添加水(150mL)并将混合物用乙酸乙酯(3×200mL)提取。合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EA从10:1至0:1)进行纯化，产生4-(7-苄基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.74g，5.26mmol，61.9％收率，95.0％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z495.4[M+H]⁺。

步骤D：2-(氰基甲基)-4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基) 哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向4-(7-苄基-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.51g，5.07mmol)和DIEA(1.97g，15.2mmol，2.65mL)在DCE(50mL)中的溶液添加氯甲酸1-氯乙酯(1.81g，12.7mmol)，并将混合物在15℃下搅拌3小时。将反应混合物真空浓缩。残余物溶于MeOH(50mL)中并将反应混合物在70℃下搅拌1.5小时。真空浓缩混合物。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi Max-RP 250*50mm*10um；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：23％-48％,30；50％min)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.13g，2.51mmol，49.5％收率，90.0％纯度)，为粉红色固体。ES+APCI MS m/z405.3[M+H]⁺。

步骤E：2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-(氰基甲基)-4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(730mg，1.80mmol)、(4-溴-2-萘基)2,2-二甲基丙酸酯(832mg，2.71mmol)和Cs₂CO₃(1.76g，5.41mmol)在甲苯(18mL)中的溶液添加[2-(2-氨基苯基)苯基]钯(1+)；二环己基-[2-(2,4,6-三异丙基苯基)苯基]磷烷-甲磺酸盐(153mg，180umol)，将悬液真空脱气并用N₂吹扫数次。将反应混合物在70℃下搅拌4小时。完成后，向混合物加水(20mL)。所生成的混合物用EtOAc(4×20mL)提取。合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc从30:1至0:1)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(740mg，1.15mmol，63.7％收率，98.0％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 631.5[M+H]⁺。

步骤F：2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-甲硫烷基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，158umol)在DCM(2mL)中的溶液添加m-CPBA(32.2mg，158umol，85.0％纯度)，并将混合物在0℃下搅拌1小时。在0℃下通过饱和Na₂S₂O₃(4mL)淬灭反应混合物并分离，然后用水(10mL)稀释并用乙酸乙酯(10mL)提取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生残余物。残余物通过硅胶色谱法(PE:EA从10:1至0:1)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(90mg，125umol，79.0％收率，90.0％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z647.5[M+H]⁺。

步骤G：2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(560mg，866umol)、[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇(199mg，1.73mmol)在甲苯(10mL)中的溶液添加t-BuONa(125mg，1.30mmol)，并将混合物在0℃下搅拌0.5小时。将混合物在EtOAc(20mL)和水(15mL)之间分配并分离。然后用EtOAc(3×20mL)提取水层。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过反相快速色谱柱进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(340mg，481umol，55.5％收率，98.7％纯度)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 698.4[M+H]⁺。

步骤H：[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：在15℃下向2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg，201umol)在DCM(0.2mL)中的溶液添加TFA(229mg，2.01mmol，148uL)，并将混合物在15℃下搅拌5小时。真空浓缩反应混合物，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(170mg，粗产物，2TFA)，为棕色油。

步骤I：[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：在0℃下向[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(170mg，206umol，2TFA)和DIEA(213mg，1.65mmol，287uL)在DCM(0.3mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(38.9mg，309umol)，并将该混合物在15℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(0.5mL)淬灭，然后真空浓缩。残余物(DCM:MeOH＝10:1)通过硅胶色谱法(从PE:EtOAc＝2:1至EtOAc:MeOH＝0:1)进行纯化，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(170mg，182umol，88.7％收率，70.0％纯度)，为棕色油。ES+APCI MS m/z 652.6[M+H]⁺。

步骤J：2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：向[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(170mg，261umol)在THF(1.5mL)中的溶液添加NaOH(2M，1.5mL)，并将反应在15℃下搅拌6小时。反应混合物用HCOOH(20％，0.1mL)中和至PH＝7。所生成的混合物用DCM(3×5mL)提取，合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生残余物。残余物通过制备型HPLC(柱子：Luna C18 150*25 5u；流动相：[水(0.225％甲酸)-ACN]；B％:12％-39％，10min)进行纯化，产生2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(6.88mg，11.6umol，4.44％收率，95.6％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 568.5[M+H]⁺。

实施例179

2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲醇：在0℃下向(3R)-3-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1g，4.97mmol)在THF(40mL)中的溶液添加LiAlH₄(377mg，9.94mmol)，然后将混合物温热至70℃并在70℃下搅拌4小时。通过饱和Na₂SO₄(3mL)淬灭反应混合物并过滤，滤饼用THF(5×20mL)洗涤。将合并的有机相真空浓缩，产生[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲醇(820mg，粗产物)，为黄色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝3.66-3.62(dd，J＝4.8，10.0Hz，1H)，3.53-3.49(dd，J＝5.6，10.0Hz，1H)，3.35-3.18(m，1H)，2.77-2.68(m，1H)，2.59-2.53(m，1H)，2.52-2.45(m，1H)，2.40-2.33(m，1H)，2.32(s，3H)，2.31-2.26(m，1H)，2.04-1.93(m，1H)，1.69-1.59(m，1H)

步骤B：2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-甲基亚磺酰基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(500mg，773umol)和[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲醇(178mg，1.55mmol)在甲苯(10mL)中的溶液添加t-BuONa(111mg，1.16mmol)，并将该混合物在15℃下搅拌0.5小时。向所述混合物添加乙酸乙酯(20mL)和水(15mL)，然后用乙酸乙酯(3×20mL)提取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过反相快速色谱柱(ACN/水(0.1％甲酸)＝42％)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(180mg，245umol，31.7％收率，95.0％纯度)，为棕色固体。ES+APCI MS m/z 698.6[M+H]⁺。

步骤C：[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：将2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(180mg，258umol)和TFA(588mg，5.16mmol，382uL)的混合物在20℃下搅拌1.5小时。将反应混合物真空浓缩，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(200mg，粗产物，2TFA)，为棕色油。

步骤D：[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯：在0℃下向[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(200mg，242umol，2TFA)和DIEA(470mg，3.63mmol，633uL)在DCM(0.6mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(30.5mg，242umol)，并将反应在15℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EA＝2:1～0:1至DCM:MeOH＝50:1～1:1)进行纯化，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(630mg，粗产物)，为棕色油。ES+APCIMS m/z 652.6[M+H]⁺。

步骤E：2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在18℃下向[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(630mg，966umol)在THF(3mL)中的溶液添加NaOH(2M，3mL)，并将混合物在18℃下搅拌2小时。将反应混合物用HCOOH(20％，0.5mL)中和至PH＝7。所生成的混合物用DCM(3×5mL)提取，合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(10mM NH4HCO3)-ACN]；B％：35％-65％,3min)进行纯化，产生2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(3R)-1-甲基吡咯烷-3-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(9.4mg，15.8umol，1.64％收率，95.5％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 568.5[M+H]⁺。

实施例180

4-(3-(4-(哌嗪-1-基)-7-(5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-氧基)丙基)吗啉

步骤A.2-[[4-溴-5-(三氟甲基)吲唑-1-基]甲氧基]乙基-三甲基硅烷：在0℃下向4-溴-5-(三氟甲基)-1H-吲唑(650mg，2.45mmol，1eq)在DMF(30mL)中的溶液添加NaH(117.71mg，2.94mmol，60％纯度，1.2eq)。在0℃下搅拌1小时之后，滴加2-(氯甲氧基)乙基三甲基硅烷(531.56mg，3.19mmol，564.29uL，1.3eq)在DMF(10mL)中的溶液。将混合物温热至15℃并搅拌2小时。用饱和氯化铵水溶液(50.0mL)淬灭混合物，用水(100.0mL)稀释，然后用乙酸乙酯(3×100.0mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10:1)进行纯化。获得2-[[4-溴-5-(三氟甲基)吲唑-1-基]甲氧基]乙基-三甲基硅烷(680mg，1.70mmol，69.44％收率，99.0％纯度)，为无色油。ES+APCI MS m/z 395.0[M+H]⁺。

步骤B.4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-[[4-溴-5-(三氟甲基)吲唑-1-基]甲氧基]乙基-三甲基硅烷(444.35mg，1.12mmol，1.3eq)、4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(400mg，864.71umol，1eq)、RuPhos(80.70mg，172.94umol，0.2eq)、Pd₂(dba)₃(118.77mg，129.71umol，0.15eq)和Cs₂CO₃(845.21mg，2.59mmol，3eq)在甲苯(40mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，并将混合物在氮气下于90℃搅拌12hr。减压浓缩反应混合物去除甲苯。残余物用水100mL稀释并用乙酸乙酯300mL(100mL x 3)提取。合并的有机层用水300mL(100mL x3)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO2，DCM：CH₃OH＝30:1至20:1)进行纯化。获得4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(400mg，446.87umol，51.68％收率，86.8％纯度)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z773.3[M+H]⁺。

步骤C.4-[3-[[4-哌嗪-1-基-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉：在25℃下向4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，111.72umol，1eq)在DCM(2mL)中的溶液添加TFA(254.77mg，2.23mmol，165.43uL，20eq)。将反应混合物在25℃下搅拌12小时。真空浓缩反应混合物。获得4-[3-[[4-哌嗪-1-基-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉(200mg，粗产物，TFA)，为棕色油。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步。ES+APCI MS m/z 547.5[M+H]⁺.

步骤D.1-[4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-50℃下向4-[3-[[4-哌嗪-1-基-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基]氧基]丙基]吗啉(200mg，TFA)和DIEA(600mg，4.64mmol，808.63uL)在DCM(2mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(13mg，103.08umol)。将混合物在-50℃下搅拌30min。将混合物用水淬灭并用乙酸乙酯(50mL)提取，有机层用水(1×20mL)和盐水(1×20mL)洗涤。分离的有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(FA条件)柱子：Luna C18 150*255u；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-36％,10min]进行纯化。获得1-[4-[2-(3-吗啉代丙氧基)-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(18.26mg，28.12mmol，两步23％，99.6％纯度，FA)，为黄色固体。ES+APCI MS m/z 601.4[M+H]⁺。

实施例181

1-(4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A.4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙-1-醇(107mg，681umol)在THF(2mL)中的溶液添加t-BuONa(98.1mg，1.02mmol)，然后是4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-甲基-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸苄酯(230mg，340umol)。将混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物倒入水(10mL)中并用DCM(2x10mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。得到的产物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：25％-55％，12min)进行纯化，产生4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(110mg，143umol，42.0％收率)，作为黄色固体获得。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ8.08-8.01(m，1H)，7.45-7.43(m，4H)，7.37-7.31(m，3H)，5.76(s，2H)，5.24(s，2H)，4.76-4.63(m，1H)，4.60-4.45(m，3H)，4.42(s，2H)，4.36-4.24(m，1H)，3.96-3.83(m，2H)，3.79-3.65(m，8H)，3.64-3.53(m，6H)，3.12-2.92(m，1H)，2.90–2.77(m，2H)，2.48(s，3H)，2.44-2.41(m，1H)，2.36-2.12(m，3H)，0.98-0.93(m，2H)，0.01--0.03(m，9H)

步骤B.4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂气氛下向4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(90mg，117umol)和BOC₂O(51.1mg，234.1umol，53.8uL)MeOH(2mL)中的溶液添加Pd/C(10％，50mg)。将悬液真空脱气并用H₂吹扫数次。将混合物在H₂(15psi)下于40℃搅拌12小时。过滤混合物并浓缩。将残余物通过制备型TLC(SiO₂，DCM/MeOH＝10:1)进行纯化，产生4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(30mg，40.8umol)。ES+APCI MS m/z 735.6[M+H]⁺。

步骤C.(1S,4S)-5-(3-((7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)丙基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷：向4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(30mg，40.8umol)在DCM(0.5mL)中的溶液滴加TFA(770mg，6.75mmol)。将混合物在15℃下搅拌2小时。真空浓缩混合物，产生(1S,4S)-5-(3-((7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)丙基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷(30mg，粗产物)。ES+APCI MS m/z 505.5[M+H]⁺。

步骤D.1-(4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：在-50℃下向(1S,4S)-5-(3-((7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-4-(哌嗪-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)丙基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷(20mg，39.6umol，1eq)和DIEA(30.7mg，238umol，41.4uL，6eq)在DCM(2mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(4.00mg，31.7umol，0.8eq)。将混合物在-40--20℃下搅拌0.5小时。真空浓缩混合物。所得产物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：35％-65％,12min)进行纯化。获得产物1-(4-(2-(3-((1S,4S)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(6.48mg，11.2umol，两步28.3％收率，96.8％纯度)，为白色固体。ES+APCI MS m/z 559.5[M+H]⁺。

实施例182

2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯.向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(190mg，403umol)、(4-溴-2-萘基)2,2-二甲基丙酸酯(248mg，806umol)和Cs₂CO₃(394mg，1.21mmol)在甲苯(5mL)中的混合物添加XPHOSPalladacycle Gen 3(34.1mg，40.29umol)，并将反应混合物在N₂下于70℃搅拌4小时。完成后，将反应混合物通过硅胶色谱法(PE:EA＝3:1至0:1)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(95mg，118umol)。ES+APCI MS m/z698.4[M+H]⁺。

步骤B：[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯.在15℃下向2-(氰基甲基)-4-[7-[3-(2,2-二甲基丙酰氧基)-1-萘基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(40mg，57.3umol)在DCM(0.1mL)中的溶液添加TFA(154mg，1.35mmol)。将反应混合物在15℃下搅拌1小时。完成后，真空除去溶剂，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(47mg，56.9umol)。

步骤C：[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯.在0℃下向[4-[4-[3-(氰基甲基)哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(47mg，56.9umol)和DIEA(58.9mg，455umol)在DCM(1mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(10.8mg，85.4umol)。将反应混合物在15℃下搅拌1小时。完成后，加入一滴水淬灭反应混合物。残余物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc＝3:1至EtOAc:MeOH＝3:1)进行纯化，产生[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(130mg，粗产物)。ES+APCI MS m/z652.5[M+H]⁺。

步骤D：2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈.向[4-[4-[3-(氰基甲基)-4-丙-2-烯酰-哌嗪-1-基]-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-7-基]-2-萘基]2,2-二甲基丙酸酯(250mg，384umol)在THF(1.5mL)中的溶液添加NaOH(2M，1.5mL)的水溶液。将反应混合物在15℃下搅拌9小时。完成后，加入两滴甲酸(20％水溶液)酸化反应混合物以达到pH＝7，并用DCM(5×10mL)提取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Boston Green ODS 150*30 5u；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：20％-47％，10min)进行纯化，产生2-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(13.1mg，21.2umol)。ES+APCI MS m/z 568.5[M+H]⁺。

实施例183

2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯.向2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，549umol)和[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇(126mg，1.10mmol，130uL)在甲苯(6.00mL)中的溶液添加t-BuONa(105mg，1.10mmol)。将混合物在20℃下搅拌0.25小时。完成后，过滤混合物并浓缩滤液。残余物通过硅胶色谱法(EA/MeOH 50/1至10/1)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，427umol)。ES+APCI MS m/z 598.6[M+H]⁺。

步骤B：2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈.向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(270mg，452umol)在DCM(330uL)中的溶液添加TFA(515mg，4.52mmol)。将混合物在20℃下搅拌0.5小时并真空浓缩。然后添加TFA(334uL)。将混合物在20℃下搅拌1小时。完成后，真空浓缩混合物，产生2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(400mg，粗产物)。ES+APCI MS m/z498.4[M+H]⁺。

步骤C：2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈.在0℃下向2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(276mg，451umol)和DIEA(1.46g，11.3mmol)在DCM(4.00mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(51.2mg，406umol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。完成后，将混合物用水(0.5mL)稀释并用EtOAc(2×10mL)提取。将合并的有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(0.05％氢氧化铵v/v)-ACN]；B％：55％-85％,12min)进行纯化，产生2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(37.1mg，66.3umol)。ES+APCI MS m/z 552.4[M+H]⁺。

实施例184

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-羟基丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

1-[4-[7-(3-羟基-1-萘基)-2-(3-羟基丙氧基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮按照实施例136制备，在步骤B中用3-[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧丙-1-醇取代2-(3-甲氧基吡咯烷-1-基)乙醇。ES+APCI MS m/z 490.3[M+H]⁺。

实施例185

1-(4-(2-(3-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙-1-醇：向小瓶中添加(1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷盐酸盐(0.250g，2.522mmol)、CH₃CN(5.04mL)和3-溴-1-丙醇(0.274mL，3.026mmol)。然后添加K₂CO₃(1.05g，7.57mmol)并将混合物温热至50℃，将其在此温度下搅拌16小时。然后将混合物冷却至环境温度，用CH₂Cl₂稀释并过滤，固体用CH₂Cl₂洗涤。然后浓缩滤液，并将粗油经由柱色谱法(有0.2％NH₄OH的5％MeOH/DCM)进行纯化以给出产物，为无色油。

步骤B：1-(4-(2-(3-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7- (3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：根据实施例127的方法使用以下程序代替步骤D中概括的程序合成。向小瓶中添加3-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙-1-醇(0.171g，1.09mmol)和4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.125g，0.218mmol)，然后是二噁烷(0.435mL)。然后添加Cs₂CO₃(0.213g，0.653mmol)并将混合物加热至100℃达15小时。将反应用CH₂Cl₂稀释，过滤并将残余的固体用CH₂Cl₂洗涤。然后将滤液经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。粗残余物通过柱色谱法(有0.2％NH4OH的4％MeOH/DCM)进行纯化以给出产物，为黄色泡沫。ES+APCI MS m/z 571.2[M+H]⁺。

实施例186

4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-(吗啉甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯

4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-(吗啉甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：根据实施例127的方法使用以下程序代替步骤D中概括的程序合成。向4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(0.150g，0.261mmol)和3-(4-吗啉甲基)-苯基硼酸频哪醇酯盐酸盐(0.266g，0.784mmol)在二噁烷(2.61mL)中的溶液添加Na₂CO₃(0.523mL，1.0452mmol，2.0M Aq)。通过氩气鼓泡将混合物脱气5分钟。然后添加四(三苯基膦)钯(0)(0.030g，0.026mmol)并将混合物加热至95℃，在此温度下将其搅拌7小时。将反应冷却至环境温度，然后用CH₂Cl₂稀释并过滤。固体用CH₂Cl₂洗涤。然后将滤液经Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。粗残余物通过柱色谱法(30-50％EtOAc/DCM)进行纯化以给出产物，为黄色泡沫。ES+APCI MS m/z 591.3[M+H]⁺。

实施例187

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用N-甲基-D-脯氨醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 529.3[M+H]⁺。

实施例188

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用(3S)-(1-甲基-吡咯烷-3-基)-甲醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z529.2[M+H]⁺。

实施例189

1-(4-(2-((1-苄基吡咯烷-3-基)甲氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-(4-(2-((1-苄基吡咯烷-3-基)甲氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用(1-苄基吡咯烷-3-基)甲醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 605.3[M+H]⁺。

实施例190

1-(4-(2-((1-环丙基吡咯烷-3-基)甲氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-(4-(2-((1-环丙基吡咯烷-3-基)甲氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用(1-环丙基-3-吡咯烷基)甲醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 555.3[M+H]⁺。

实施例191

1-((2S,6R)-4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,6-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-((3S,5R)-4-(叔丁氧羰基)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯：将2,4-二氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯(500mg，1.48mmol)、顺式-2,6-二甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(349mg，1.63mmol)和DIEA(0.26mL)在N,N-二甲基乙酰胺(1mL)中的悬液在室温下搅拌过夜。将反应混合物在EtOAc(15mL)和1M NaHCO₃(5mL)之间分配并分离层。有机层用2M Na₂CO₃和盐水(各2mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将残余物在硅胶Redisep 24g柱上使用20至50％EtOAc的己烷溶液作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(0.440g，58％)。ES+APCI MS m/z 516.2[M+H]⁺。

步骤B：4-((3S,5R)-4-(叔丁氧羰基)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯：将在4-mL小瓶中的4-((3S,5R)-4-(叔丁氧羰基)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯(400mg，0.775mmol)、3-吗啉代丙-1-醇(400mg，2.33mmol，5eq.)、碳酸铯(1.26g，3.88mmol，5eq.)和二噁烷(3mL)的混合物用氮气吹扫。将小瓶加盖并将混合物在110℃下搅拌20h，然后在120℃下搅拌过夜。将反应冷却，用EtOAc(10mL)稀释，通过硅藻土过滤并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶Redisep 40g上进行纯化，使用2至0％MeOH/DCM+0.2％NH₄OH作为洗脱液，产生浅黄色非晶固体(272mg，56％)。

步骤C：(2S,6R)-2,6-二甲基-4-(2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3, 4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-((3S,5R)-4-(叔丁氧羰基)-3,5-二甲基哌嗪-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯(272mg，0.095mmol)、钯on carbon(50mg，Degussa型，10wt％，50％H₂O)、EtOH(5mL)和THF(5mL)的混合物用氢气吹扫并在H₂气氛(橡胶气囊)下搅拌3小时。将反应混合物用EtOH(3mL)稀释，通过硅藻土过滤并用EtOH(2x2mL)洗涤硅藻土。合并的有机物真空蒸发并在高真空下干燥2天，产生灰白色泡沫(205mg，96％)。ES+APCI MS m/z 491.3[M+H]⁺。

步骤D：(2S,6R)-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6, 7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,6-二甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在氮气下于室温向三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(19mg，0.020mmol)在无水脱气甲苯(0.5mL)中的搅拌悬液添加(+/-)-2,2`-双(二苯基膦基)-1,1`-联萘(24mg，0.038mmol)。然后将混合物加热到100℃达15分钟。所产生的深色混合物冷却至室温并添加固体叔丁醇钠(39mg，0.41mmol)，然后是三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯(82mg，0.25mmol)和(2S,6R)-2,6-二甲基-4-(2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(100mg，0.20mmol)在脱气无水甲苯(0.5mL)中的溶液。关闭烧瓶并在搅拌下加热至100℃达30min。将反应混合物冷却并在EtOAc(20mL)和水(10mL)之间分配。分离有机层并用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶Redisep 40g上使用4％MeOH+0.1％NH₄OH的DCM溶液作为洗脱液进行纯化，产生无色固体(87mg，63％)。ES+APCI MS m/z 684.3[M+H]⁺。

步骤E：1-((2S,6R)-4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,6-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将(2S,6R)-4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2,6-二甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(87mg，0.129mmol)溶于1M TFA/DCM中。反应混合物变成红棕色，然后是深红色。LCMS表明非选择性的Boc和MOM去保护。在室温下搅拌30min后，再添加0.2mL TFA并将反应混合物在室温下再放30min。将所生成的双相混合物真空蒸发，在水(5mL)和DCM(10mL)+NEt₃(0.5mL)之间分配并分离有机层。有机层经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。残余物通过色谱法在硅胶Redisep 40g上使用6％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行纯化，产生另一种残余物，将其在反相C18上用5-95％MeCN-H₂O+0.1％TFA上再纯化，产生的产物被认为是与TFA的双盐(1.35mg，1.3％)。ES+APCI MS m/z 587.3[M+H]⁺。

实施例192

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用1-甲基-(3R)-3-哌啶甲醇代替N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 543.3[M+H]⁺。

实施例193

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((4-甲基吗啉-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((4-甲基吗啉-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用(4-甲基-2-吗啉基)甲醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 545.3[M+H]⁺。

实施例194

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((4-甲基吗啉-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((4-甲基吗啉-3-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用4-甲基-3-(羟甲基)吗啉取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 545.2[M+H]⁺。

实施例195

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(R)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用(R)-(1-甲基哌啶-2-基)甲醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 543.3[M+H]⁺。

实施例196

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(S)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基哌啶-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用(S)-(1-甲基哌啶-2-基)甲醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 543.2[M+H]⁺。

实施例197

(S)-1-(4-(2-((1-乙基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(S)-1-(4-(2-((1-乙基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤D中用[(2S)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 543.3[M+H]⁺。

实施例198

(S,E)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮

S,E)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤F中用反式巴豆酰氯取代丙烯酰氯。ES+APCI MS m/z 543.2[M+H]⁺。

实施例199

(S,E)-4-(二甲基氨基)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮

(S,E)-4-(二甲基氨基)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，用以下程序取代步骤F。将7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4-(哌嗪-1-基)-4a,5,6,7,8,8a-六氢吡啶并[3,4-d]嘧啶(150mg，0.288mmol)溶于DCM(5mL)中并用(2E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(74.4mg，0.576mmol)和Hunig碱(252μl，1.44mmol)处理。向该混合物添加作为粉末的纯EDC(55.2mg，0.288mmol)和HOBT(38.9mg，0.288mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1小时并加热到35℃再3个小时。真空浓缩反应混合物并在CombiFlash(0％-15％DCM/MeOH w/1％NH4OH改性剂)上纯化。将含有洁净的目标产物的所有级分合并并真空浓缩，给出(E)-4-(二甲基氨基)-1-(4-(7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-4a,5,6,7,8,8a-六氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮(105mg，0.166mmol，57.7％收率)。产物相应地按照实施例127的其余部分，产生(S,E)-4-(二甲基氨基)-1-(4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-酮(14.8mg，0.025mmol，15.2％收率)。ES+APCI MS m/z 586.3[M+H]⁺。

实施例200

(S)-1-(4-(2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

(S)-1-(4-(2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤C中用三氟甲磺酸萘-1-基酯取代三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯并且不进行步骤F。ES+APCI MS m/z 513.3[M+H]⁺。

实施例201

1-((R)-2-甲基-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-((R)-2-甲基-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7, 8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤A中用2-甲基哌嗪-1-羧酸(R)-苄酯取代哌嗪-1-羧酸苄酯并在步骤C中用三氟甲磺酸萘-1-基酯取代三氟甲磺酸3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基酯并且不进行步骤F。ES+APCIMS m/z 527.3[M+H]⁺。

实施例202

1-((S)-4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-((S)-4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7, 8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤A中用(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯取代哌嗪-1-羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 543.3[M+H]⁺。

实施例203

1-((S)-4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

1-((S)-4-(7-(3-羟基萘-1-基)-2-(((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7, 8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.该化合物按照实施例127制备，在步骤A中用(S)-3-甲基哌嗪-1-羧酸苄酯取代哌嗪-1-羧酸苄酯并在步骤D中用N-甲基-D-脯氨醇取代N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 543.3[M+H]⁺。

实施例204

1-(4-(2-((1-环丙基哌啶-4-基)氨基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-(2-((1-环丙基哌啶-4-基)氨基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6, 7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(75mg，0.13mmol)、1-环丙基哌啶-4-胺(55mg，0.39mmol)和二噁烷(0.5mL)的混合物加热到120℃达36h。将反应混合物冷却至室温，在EtOAc(10mL)和水(3mL)之间分配并分离层。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发，残余物在硅胶Redisep 24g上使用6至10％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(43mg，49％)。ES+APCI MS m/z 678.3[M+H]⁺。

步骤B：1-(4-(2-((1-环丙基哌啶-4-基)氨基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)- 5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将4-(2-((1-环丙基哌啶-4-基)氨基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(43mg，0.063mmol)、钯碳(20mg，Degussa型，10wt％，50％H₂O)、EtOH(1.5mL)和THF(1.5mL)的混合物用氢气吹扫并在H₂气氛(橡胶气囊)下搅拌3小时。将混合物用EtOH(3mL)稀释，通过硅藻土过滤并用EtOH(2x2mL)洗涤硅藻土。合并的有机物真空蒸发。残余物溶于DCM(5mL)中并在搅拌下在冰盐浴上冷却。接下来立即添加三乙胺(0.03mL)，然后是丙烯酰氯(10μL)。在-5℃下1min后，用NH₄OH(0.05mL)淬灭反应并真空蒸发。将残余物与DCM(5mL)一起搅拌5min，过滤，并在硅胶Redisep 12g上使用6至20％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(22mg，48％)。ES+APCI MS m/z 598.3[M+H]⁺。

步骤C：1-(4-(2-((1-环丙基哌啶-4-基)氨基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向1-(4-(2-((1-环丙基哌啶-4-基)氨基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(22mg，0.037mmol)在MeOH和THF 1:1(3mL)混合物中的搅拌溶液一次性添加6M HCl水溶液(0.3mL，34eq.)，并将所生成的溶液在搅拌下于50℃加热1.5小时。将反应混合物冷却至室温，在EtOAc(15mL)和0.5M Na₂CO₃(10mL)之间分配并分离有机层。合并的有机层用盐水(3mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将残余物在硅胶Redisep 12g上使用8至10％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(15mg，74％)。ES+APCI MS m/z 554.3[M+H]⁺。

实施例205

1-(4-(7-(6-羟基喹啉-8-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-(7-(6-(甲氧基甲氧基)喹啉-8-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：在氮气下于室温向三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(17mg，0.019mmol)在脱气无水甲苯(0.5mL)中的搅拌悬液添加(+/-)-2,2`-双(二苯基膦基)-1,1`-联萘(24mg，0.038mmol)，并将混合物加热至100℃达15分钟。将深色混合物冷却至室温，然后添加固体叔丁醇钠(36mg，0.38mmol)，然后是8-溴-6-(甲氧基甲氧基)喹啉(61mg，0.23mmol)和4-(2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(94mg，0.19mmol)在脱气无水甲苯(0.5mL)中的溶液。封闭烧瓶并加热到100℃达1小时。将反应混合物冷却至室温，在EtOAc(15mL)和水(5mL)之间分配并分离有机层。用盐水洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将残余物在硅胶Redisep 24g上使用4至10％MeOH的二氯甲烷溶液(+0.2％NH₄OH)作为洗脱液进行色谱分离，产生黄色固体(28mg，22％)。ES+APCI MS m/z 684.3[M+H]⁺。

步骤B：1-(4-(7-(6-(甲氧基甲氧基)喹啉-8-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8- 四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将4-(7-(6-(甲氧基甲氧基)喹啉-8-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(28mg，0.095mmol)、Pd/C(15mg，Degussa型，10wt％，50％H₂O)、EtOH(2mL)和THF(2mL)的混合物用氢气吹扫并在H₂气氛(橡胶气囊)下搅拌2小时。将反应混合物用EtOH(3mL)稀释，通过硅藻土过滤并用EtOH(2x2mL)洗涤硅藻土，合并的有机物真空蒸发。所生成的固体溶于DCM(5mL)中并在搅拌下在冰盐浴中冷却。然后立即添加三乙胺(0.04mL，3eq.)继以丙烯酰氯(16μL，2eq.)。在-5℃下1min后，用NH₄OH(0.05mL)淬灭反应并真空蒸发。通过棉塞过滤混合物，在硅胶Redisep 12g上使用6至10％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生另一种残余物，将其在反相色谱C18上用5至95％MeCN，+0.1％HCO₂H再纯化，生产的产物被认为是双甲酸盐，为黄色固体(12mg，42％)。ES+APCI MS m/z 604.2[M+H]⁺。

步骤C：1-(4-(7-(6-羟基喹啉-8-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向1-(4-(7-(6-(甲氧基甲氧基)喹啉-8-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(12mg，0.017mmol)在MeOH和THF 1:1(1mL)的混合物中的搅拌溶液立即添加6M HCl水溶液(0.1mL，35eq.)，并将溶液在搅拌下于50℃加热1.5h。将反应混合物冷却至室温，在EtOAc(15mL)和pH8的0.5M磷酸钠缓冲液(5mL)之间分配并分离层。合并的有机层用盐水(1mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶Redisep 12g上使用7至10％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行纯化，产生的残余物通过反相色谱法，C18，5至95％MeOH+0.1％TFA,)进行纯化，产生的产物为三TFA盐，为无色固体(4.87mg，31％)。ES+APCI MS m/z 560.3[M+H]⁺。

实施例206

1-(4-(2-(3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙-1-醇.将在4-mL小瓶中的3-氮杂双环[3.1.0]己烷盐酸盐(200mg，1.67mmol)、3-溴丙-1-醇(166μL，1.84mmol，1.1eq.)、K₂CO₃(0.69g，5.02mmol，3eq.)、NaI(251mg，1.67mmol，1eq.)和乙腈(2mL)的混合物用N₂冲洗。将小瓶加盖并在室温下搅拌2天。将混合物用水(2mL)稀释并用醚(15mL)提取。将醚溶液用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并倒入梨形烧瓶中，添加三氟乙酸(128μL，1eq)并将混合物浓缩至～5mL。倾析上部醚层并弃去，将残余的油状液体真空干燥过夜。将油状液体用水(0.5mL)稀释，然后在搅拌下添加醚(10mL)添加继以50％NaOH(0.2mL，2.5mmol，2eq.)。分离层，将有机溶液经KOH干燥并在氮气下小心浓缩，产生粗3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙-1-醇，为无色油。不经进一步纯化即用于下一阶段。

步骤B：4-(2-(3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)- 萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将在1.7-mL小瓶中4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(75mg，0.13mmol)、粗3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙-1-醇(55mg，0.39mmol，3eq.)、Cs₂CO₃(213mg，0.65mmol，5eq.)和二噁烷(0.5mL)的混合物用氮气吹扫。将小瓶加盖并在120℃下搅拌整个周末。将反应混合物冷却，在EtOAc(15mL)和水(5mL)之间分配并分离层。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，真空蒸发，残余物在硅胶Redisep 24g上使用4至10％MeOH+1％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生产物。ES+APCI MS m/z 679.3[M+H]⁺。

步骤C：1-(4-(2-(3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将4-(2-(3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(49mg，0.072mmol)、钯碳(12mg，Degussa型，10wt％，50％H₂O)、EtOH(1.5mL)和THF(1.5mL)的混合物用氢气吹扫并在H₂气氛(橡胶气囊)下搅拌3小时。将反应混合物用EtOH(3mL)稀释，通过硅藻土过滤并用EtOH(2x2mL)洗涤硅藻土。将合并的有机物真空蒸发。所生成的无色固体溶于DCM(5mL)中，在搅拌下在冰盐浴中冷却并立即添加三乙胺(0.04mL，3eq.)，然后添加丙烯酰氯(16μL，2eq.)。在-5℃下1min后，用NH₄OH(0.05mL)淬灭反应并真空蒸发。将粗产物溶于DCM(5mL)中，通过棉塞过滤，，在硅胶Redisep 12g上使用6至10％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(30mg，69％)。ES+APCI MS m/z 599.3[M+H]⁺。

步骤D：1-(4-(2-(3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)- 5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向1-(4-(2-(3-(3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基)丙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(30mg，0.050mmol)在MeOH和THF 1:1(3mL)的混合物中的搅拌溶液添加6M HCl水溶液(0.3mL，36eq.)，并将溶液在搅拌下于50℃加热1.5h。将反应混合物冷却至室温，在EtOAc(20mL)和0.5M Na₂CO₃(5mL)之间分配并分离层。有机层用盐水(1mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将残余物在硅胶Redisep 12g上使用6％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(20.62mg，74％)。ES+APCI MS m/z 555.4[M+H]⁺。

实施例207

(R)-1-(4-(2-(2-(3-氟哌啶-1-基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：(R)-2-(3-氟哌啶-1-基)乙-1-醇.将在4-mL小瓶中的R-3-氟哌啶盐酸盐(209mg，1.50mmol)、2-溴乙-1-醇(117μL，1.65mmol，1.1eq.)、K₂CO₃(0.62g，4.5mmol，3eq.)、碘化钠(225mg，1.5mmol，1eq.)和乙腈(2mL)的混合物用N₂冲洗。将小瓶加盖并在室温下搅拌2天。所生成的悬液用水(2mL)稀释并用醚(15mL)提取。将醚溶液用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并倾析到梨形烧瓶，添加三氟乙酸(115μL，1eq)并将混合物浓缩至～5mL。倾析出上部醚层，残余的油状液体真空干燥过夜。将油状液体在搅拌下用水(0.5mL)和醚(10mL)稀释，然后添加50％NaOH(0.2mL，2.5mmol，2eq.)。分离层，将有机溶液经KOH干燥，过滤并在氮气下小心浓缩，产生粗氨基醇，为无色油(120mg，54％)。

步骤B：(R)-4-(2-(2-(3-氟哌啶-1-基)乙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)- 5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将在1.7-mL小瓶中的4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(75mg，0.13mmol)、粗(R)-2-(3-氟哌啶-1-基)乙-1-醇(58mg，0.39mmol)、Cs2CO3(213mg，0.65mmol)和二噁烷(0.5mL)的混合物用氮气吹扫。将小瓶加盖并在110℃下搅拌48小时。将反应混合物冷却，用EtOAc(1mL)稀释，通过硅藻土过滤并将硅藻土用EtOAc(2x2mL)洗涤，合并的有机物真空蒸发。将残余物在硅胶Redisep 24g上使用6％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(30mg，34％)。ES+APCI MS m/z 685.4[M+H]⁺.

步骤C：(R)-1-(4-(2-(2-(3-氟哌啶-1-基)乙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将(R)-4-(2-(2-(3-氟哌啶-1-基)乙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(30mg，0.044mmol)、钯碳(10mg，Degussa型，10wt％，50％H₂O)、EtOH(1.5mL)和THF(1.5mL)的混合物用氢气吹扫并在H₂气氛(橡胶气囊)下搅拌2小时。将反应混合物用EtOH(3mL)稀释，通过硅藻土过滤并用EtOH(2x2mL)洗涤硅藻土。将合并的有机物真空蒸发。残余物溶于DCM(3mL)中并在搅拌下在冰盐浴中冷却。接下来立即添加三乙胺(0.02mL，3eq.)，然后添加丙烯酰氯(7μL，2eq.)。在-10℃下1min后，用NH₄OH(0.03mL)淬灭反应并真空蒸发。残余物溶于DCM(5mL)中，过滤，在硅胶Redisep 12g上使用6至10％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH在DCM中作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(22mg，83％)。ES+APCI MS m/z 605.3[M+H]⁺。

步骤D：(R)-1-(4-(2-(2-(3-氟哌啶-1-基)乙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7, 8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向(R)-1-(4-(2-(2-(3-氟哌啶-1-基)乙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(22mg，0.036mmol)在MeOH和THF 1:1(3mL)的混合物中的搅拌溶液添加6M HCl水溶液(0.3mL)，并将溶液在搅拌下于50℃加热1.5h。将反应混合物冷却至室温，在EtOAc(20mL)和0.5M Na₂CO₃(5mL)之间分配并分离层。有机层用盐水(1mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将残余物在硅胶Redisep 12g上使用6％MeOH的DCM溶液+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行色谱分离，产生无色固体(16.86mg，83％)。ES+APCI MS m/z 561.2[M+H]⁺。

实施例208

1-(4-(2-(3-((3R,4S)-3,4-二氟吡咯烷-1-基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-((3R,4S)-3,4-二氟吡咯烷-1-基)丙-1-醇.将在7-mL小瓶中的(3R,4S)-3,4-二氟吡咯烷盐酸盐(200mg，1.39mmol)、3-溴丙-1-醇(126μL，1.39mmol，1.0eq.)、碳酸钾(577mg，4.18mmol，3eq.)、碘化钠(209mg，1.39mmol，1eq.)和乙腈(2mL)的混合物用N₂冲洗。将小瓶加盖并将反应混合物在室温下搅拌2天。将混合物用水(2mL)稀释并用醚(15mL)提取。醚溶液用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并倾析到梨形烧瓶中。接下来添加三氟乙酸(107μL，1eq)并将混合物在真空下蒸发和干燥。残余物用水(0.5mL)稀释并用醚(5mL)洗涤。向水层添加乙醚(15mL)，然后是10M NaOH(0.2mL，5mmol)，并将混合物搅拌1小时。分离有机层并经固体KOH干燥，通过棉塞过滤，并在N₂下蒸发，产生无色油(80mg，35％)，其在下一反应中以粗产物使用。

步骤B：4-(2-(3-((3R,4S)-3,4-二氟吡咯烷-1-基)丙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将在1.7-mL小瓶中的4-(2-氯-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(75mg，0.13mmol)、粗2-(4,4-二氟哌啶-1-基)乙-1-醇(65mg，0.39mmol)、碳酸铯(213mg，0.65mmol，5eq.)和二噁烷(0.5mL)的混合物用氮气吹扫。将小瓶加盖并在110℃下搅拌整个周末。将反应混合物冷却至室温并在EtOAc(15mL)和水(5mL)之间分配并分离层。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶Redisep 24g上使用3％MeOH的DCM溶液作为洗脱液进行纯化，产生无色固体(46mg，50％)。ES+APCI MS m/z703.3[M+H]⁺。

步骤C：1-(4-(2-(3-((3R,4S)-3,4-二氟吡咯烷-1-基)丙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将4-(2-(3-((3R,4S)-3,4-二氟吡咯烷-1-基)丙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(46mg，0.065mmol)、钯碳(15mg，Degussa型，10wt％，50％H₂O)、EtOH(1mL)和THF(1mL)的混合物用氢气吹扫并在H₂气氛(橡胶气囊)下搅拌3小时。将反应混合物用EtOH(3mL)稀释，通过硅藻土过滤并用EtOH(2x2mL)洗涤硅藻土。将合并的有机物真空蒸发。残余物溶于DCM(3mL)中并在搅拌下在冰盐浴中冷却。接下来添加三乙胺(0.02mL)，然后添加丙烯酰氯(7μL，2eq.)。在-10℃下1min后，用NH₄OH(0.03mL)淬灭反应并真空蒸发。将残余物溶于DCM(3mL)中，过滤并通过色谱法在硅胶Redisep 12g上使用5％MeOH的DCM溶液作为洗脱液进行纯化，产生无色固体(29mg，71％)。ES+APCI MS m/z 623.3[M+H]⁺。

步骤D：1-(4-(2-(3-((3R,4S)-3,4-二氟吡咯烷-1-基)丙氧基)-7-(3-羟基萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：向1-(4-(2-(3-((3R,4S)-3,4-二氟吡咯烷-1-基)丙氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(29mg，0.047mmol)在MeOH和THF 1:1的混合物(2mL)中的搅拌溶液添加6M HCl水溶液(0.2mL)并将溶液在搅拌下于50℃加热1.5h。将反应混合物冷却至室温，在EtOAc(15mL)和0.5M Na₂CO₃(10mL)之间分配并分离层。有机层用盐水(3mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。残余物通过色谱法在硅胶Redisep 12g上使用5％MeOH的DCM溶液作为洗脱液进行纯化，产生无色固体(12.87mg，48％)。ES+APCIMS m/z 579.2[M+H]⁺。

实施例209

1-(4-(7-(5-甲基-1H-吲哚-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-溴-5-甲基-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吲哚：将4-溴-5-甲基-1H-吲哚(100mg，0.476mmol)在无水THF(2mL)中的溶液在冰盐浴中在氮气下伴随搅拌冷却。添加氢化钠(23mg 60％油溶液，0.57mg，1.2eq.)并将混合物在-5℃下搅拌30min，然后在室温下搅拌1h(气体逸出停止)。接下来添加三异丙基氯硅烷(0.10mL，0.48mmol，1eq.)并将反应混合物在室温下搅拌2小时。将反应在EtOAc(15mL)和水(10mL)之间分配并分离层。有机层用水(5mL)、盐水(5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将残余物在硅胶上使用己烷作为洗脱液进行纯化，产生产物(107mg，63％)。

步骤B：4-(7-(5-甲基-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吲哚-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(17mg，0.019mmol)和(+/-)-2,2`-双(二苯基膦基)-1,1`-联萘(24mg，0.038mmol)在无水脱气的甲苯(0.5mL)中的搅拌混合物在氮气下加热到100℃达15分钟。将混合物冷却至室温，添加固体叔丁醇钠(37mg，0.38mmol)，然后添加4-溴-5-甲基-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吲哚(90mg，0.25mmol)和4-(2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(94mg，0.19mmol)在无水脱气的甲苯(0.5mL)中的溶液。封闭反应烧瓶并加热到100℃过夜。将反应混合物冷却至室温，在EtOAc(15mL)和水(5mL)之间分配并分离层。有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶Redisep 24g上使用3至5％MeOH的二氯甲烷溶液作为洗脱液进行纯化，产生淡黄色固体(28mg，19％)。ES+APCI MS m/z 782.3[M]⁺。

步骤C：1-(4-(7-(5-甲基-1H-吲哚-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：将4-(7-(5-甲基-1-(三异丙基甲硅烷基)-1H-吲哚-4-基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(46mg，0.065mmol)、钯碳(35mg，Degussa型，10wt％，50％H₂O)在EtOH(1mL)和THF(1mL)中的混合物用氢气吹扫并在H₂气氛(橡胶气囊)下搅拌过夜。将反应混合物用二噁烷(3mL)稀释，通过硅藻土过滤并将硅藻土用二噁烷(2x2mL)洗涤。合并的有机物真空蒸发并在高真空下干燥。将残余物在N₂下溶于THF(1mL)中，然后在搅拌下添加1M四正丁基氟化铵的THF溶液(0.07mL，2eq.)并将溶液在0℃下搅拌15分钟。将反应混合物在醚(15mL)和水(5mL)之间分配并分离层。有机层用水(3mL)、盐水(3mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并在氮气下蒸发。将粗产物溶于DCM(3mL)中并在搅拌下在冰-盐-干冰浴(-20℃)中冷却。接下来添加三乙胺(10μL，2eq.)，然后是丙烯酰氯(2μL，0.75eq.)。在-20℃下10min后，用NH4OH(0.03mL)淬灭反应并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶柱上使用5％MeOH/DCM+0.1％NH₄OH作为洗脱液进行纯化，产生无色固体(3.69mg，19％)。ES+APCI MS m/z 546.3[M+H]⁺。

实施例210

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：2-氯-4-(3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)- 羧酸叔丁酯：将2,4-二氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(8.00g，26.3mmol)、Hunig碱(22.9ml，132mmol)和2-(哌嗪-2-基)乙腈二盐酸盐(5.21g，26.3mmol)放入DMA(75mL)中并在室温下搅拌20分钟。向反应加水并用EtOAc(3x100mL)提取混合物。合并提取液并用水(3x50mL)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，提供粗物质，就此使用。ES+APCI MS m/z 393.3[M+H]⁺。

步骤B：4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯：将2-氯-4-(3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(10.5g，26.7mmol)和TEA(5.6ml，40.1mmol)放入THF(100mL)中并冷却至0℃。添加氯甲酸苄酯(5.7ml，40.1mmol)并将反应在0℃下搅拌30分钟。向反应加水，用DCM(3x50mL)提取混合物并将提取液合并和浓缩。残余物通过硅胶(0-60％EtOAc的己烷溶液作为洗脱液)进行纯化，提供4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(12.9g，24.5mmol，92％收率)。ES+APCI MS m/z 527.1[M+H]⁺。

步骤C：4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯：在密封管中将4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(1.50g，2.85mmol)溶于二噁烷(1.42ml，2.85mmol)中并用研磨过的碳酸铯(1.85g，5.69mmol)和(2S)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲醇(1.64g，14.2mmol)处理。然后将管加盖并加热到90℃达24hr。将反应冷却至室温并加水。用DCM(3x25mL)提取混合物，并将合并的有机物真空浓缩。残余物通过硅胶(含0-12％MeOH的DCM w/0.2％NH4OH作为洗脱液)进行纯化，产生4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(831mg，1.37mmol，48％收率)。ES+APCI MS m/z 606.2[M+H]⁺。

步骤D：2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(831mg，1.37mmol)放入DCM(15mL)中，添加TFA(2114μL，27.4mmol)并将反应在室温下搅拌1hr。将反应浓缩。添加饱和碳酸氢钠并用DCM(3x25mL)提取混合物。合并提取液，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，产生2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(665mg，1.32mmol，96％收率)，将其就此使用。ES+APCI MS m/z 506.2[M+H]⁺。

步骤E：2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向小瓶中添加碳酸铯(103mg，0.316mmol)、2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(80mg，0.158mmol)、Rhuphos Pd G3(13.2mg，0.016mmol)、1-溴-2-(三氟甲基)苯(53.4mg，0.237mmol)和1,4-二噁烷(1582μL，0.158mmol)，将小瓶用Ar脱气，密封，然后加热到70℃达24小时。向反应添加水和饱和NH4Cl并用DCM提取混合物。将有机层真空浓缩。生成的残余物通过硅胶(含0-12％MeOH的DCM w/0.2％NH4OH作为洗脱液)进行纯化，提供2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(20.5mg，0.032mmol，20％收率)。ES+APCI MS m/z 650.3[M+H]⁺。

步骤F：2-(4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5, 6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：向2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(20.5mg，0.032mmol)在EtOH(316μL，0.0316mmol)和THF(316μL，0.032mmol)中的溶液添加钯(16.8mg，0.008mmol)(Degussa型，10wt％，50％H2O)，然后通过真空继以气囊压力引入H2气氛并搅拌2小时。然后将混合物用MeOH稀释并通过GF/F纸过滤。然后浓缩滤液，提供目标产物，将其就此使用。ES+APCI MS m/z 516.2[M+H]⁺。

步骤G：2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：将2-(4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(16.3mg，0.032mmol)和三乙胺(13.2μL，0.095mmol)放入CH2Cl2(316μL，0.032mmol)并冷却至0℃。添加丙烯酰氯(632μL，0.063mmol)(新鲜制备的0.1M的DCM溶液)并将反应在0℃下搅拌1小时。将混合物浓缩，所生成的残余物通过反相色谱法(0-50％ACN:水w/0.1％TFA)进行纯化，提供目标产物(18.9mg，0.027mmol，87％收率)。ES+APCI MSm/z 570.3[M+H]⁺。

实施例211

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲氧基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

根据实施例210的步骤E-G合成，在步骤E中使用1-溴-2-(三氟甲氧基)苯代替1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 586.3[M+H]⁺。

实施例212

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

根据实施例210的步骤E-G合成，在步骤E中使用3-溴-4-(三氟甲基)吡啶代替1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 571.3[M+H]⁺。

实施例213

1-(4-(7-(5-羟基-2,3-二甲基苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-溴-4,5-二甲基苯酚：在密封管中将DPPE(0.431g，1.08mmol)、4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环(1.73g，13.5mmol)、(1,5-环辛二烯)-η5-茚基)铱(I)(0.449g，1.08mmol)和1-溴-2,3-二甲基苯(1.00g，5.40mmol)放入环己烷(6mL)并加热到100℃达50hr。将反应浓缩并加入丙酮(5mL)中，添加oxzone(3.32g，5.40mmol)并搅拌10min。用饱和NaHSO3淬灭反应并用DCM(3x20ml)提取。提取液用盐水、水洗涤并浓缩。将残余物用DCM洗脱通过硅胶塞，提供3-溴-4,5-二甲基苯酚(238mg，1.18mmol，22％收率)。

步骤B：1-溴-5-(甲氧基甲氧基)-2,3-二甲基苯：根据制备中间体3来制备，用3-溴-4,5-二甲基苯酚取代2-溴-3-氟苯酚。

步骤C：1-(4-(7-(5-羟基-2,3-二甲基苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮2,2,2-三氟乙酸酯：根据实施例1的步骤C-F制备，在步骤C中用中间体25取代4-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯并用1-溴-5-(甲氧基甲氧基)-2,3-二甲基苯取代1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 537.3[M+H]⁺。

实施例214

1-(4-(7-(5-羟基-2-((三氟甲基)thio)苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：3-溴-4-((三氟甲基)硫代)苯酚：在密封管中将3-溴苯酚(575mg，3.32mmol)和N,4-二甲基-N-(三氟甲基)苯磺酰胺(1010mg，3.99mmol)放入无水DCE(6mL)中。缓慢添加三氟甲磺酸(295μL，3.32mmol)，然后将反应加热到80℃达18小时。将反应冷却并真空除去溶剂，生成的残余物通过硅胶(0-20％EtOAc的己烷溶液)进行纯化，提供3-溴-4-((三氟甲基)硫代)苯酚(650mg，2.38mmol，72％收率)

步骤B：(2-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)(三氟甲基)硫烷：根据制备中间体3来制备，用3-溴-4-((三氟甲基)硫代)苯酚取代2-溴-3-氟苯酚。

步骤C：1-(4-(7-(5-羟基-2-((三氟甲基)硫代)苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6, 7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮：根据实施例1的步骤C-F制备，在步骤C中用中间体25取代4-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯并用(2-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)(三氟甲基)硫烷取代1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 609.2[M+H]⁺。

实施例215

(R)-1-(4-(2-(2-羟基-3-吗啉代丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

标题化合物通过实施例123的SFC手性拆分、使用Phenomenex OZ-H柱(4.6mmx250mm，5u)并用40-60％MeOH：IPA:DEA(80:20:1)以4mL/min洗脱而获得。收集第一个洗脱峰，提供其中立体化学任意分配的目标化合物。ES+APCI MS m/z 575.2[M+H]⁺。

实施例216

(S)-1-(4-(2-(2-羟基-3-吗啉代丙氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

标题化合物通过实施例123的SFC手性拆分、使用Phenomenex OZ-H柱(4.6mmx250mm，5u)并用40-60％MeOH：IPA:DEA(80:20:1)以4mL/min洗脱而获得。收集第二个洗脱峰，提供其中立体化学任意分配的目标化合物。ES+APCI MS m/z 575.2[M+H]⁺.

实施例217

1-(4-(2-((1-羟基-3-吗啉代丙-2-基)氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

实施例218

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：4-(2-(((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯：在密封小瓶中，将4-(2-氯-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(150mg，0.27mmol)在二噁烷(2712μL，0.27mmol)中的溶液用氩气喷射，并在氩气下依次添加(2S,4R)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧}-2-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸酯(270mg，0.81mmol)、Cs2CO3(265mg，0.81mmol)、Rhuphos Pd G3(22.7mg，0.027mmol)并再喷射5min。将反应混合物加盖并在100℃下加热2hr。加水并用DCM(3x15mL)提取混合物。合并提取液并浓缩，生成的残余物通过硅胶(0-40％EtOAc的己烷溶液)进行纯化，提供4-(2-(((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(113mg，0.13mmol，49％收率)。

步骤B：(2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(((4-(3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：向4-(2-(((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(113mg，0.133mmol)在EtOH(1.3mL，0.133mmol)和THF(1.3mL，0.133mmol)中的溶液添加钯(70.9mg，0.033mmol)(Degussa型，10wt％，50％H2O)，然后通过真空继以气囊压力引入H2气氛。然后将混合物在环境温度下搅拌2小时。然后将混合物用1:1MeOH和THF稀释并通过GF/F纸过滤。然后浓缩滤液，提供粗产物，将其就此使用。

步骤C：(2S,4R)-2-(((4-(4-丙烯酰-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-7-(萘-1-基)-5, 6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯：将(2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-(((4-(3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(95mg，0.13mmol)和三乙胺(56μL，0.40mmol)放入CH2Cl2(1331μL，0.13mmol)并冷却至0℃。添加丙烯酰氯(2661μL，0.27mmol)(新鲜制备的0.1M的DCM溶液)并将反应在0℃下搅拌30min。向反应加水并用DCM(3x15mL)提取混合物。合并提取液并浓缩，提供粗物质，将其就此使用。

步骤D：2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈.将(2S,4R)-2-(((4-(4-丙烯酰-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基)氧基)甲基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(92mg，0.12mmol)放入DCM(3mL)中并添加TFA(92μL，1.2mmol)，将反应在室温下搅拌2小时。向反应添加饱和碳酸氢钠并用DCM(3x15mL)提取混合物。合并提取液，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，产生粗物质，将其就此使用。

步骤E：2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2- 基)乙腈：将2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(80mg，0.12mmol)、甲醛(45.0μL，0.60mmol)和Na(OAc)3BH(50.8mg，0.24mmol)放入THF(2mL)中并搅拌2hr。添加饱和碳酸氢钠并用10％MeOH的DCM溶液(3x15mL)提取混合物。合并提取液，用硫酸钠干燥，并浓缩，提供粗物质，将其就此使用。

步骤F：2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7- (萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈2,2,2-三氟乙酸酯：将2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(81mg，0.119mmol)放入DCM(5mL)中并添加HCl(594μL，2.38mmol)，将反应搅拌1hr。浓缩反应物，通过反相色谱法(0-50％ACN:水，有0.1％TFA)纯化物质，提供2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-羟基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(38.9mg，0.057mmol，48％收率)。ES+APCI MS m/z 568.3[M+H]⁺。

实施例219

1-(4-(2-((1,4-二甲基哌嗪-2-基)甲氧基)-7-(3-羟基萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

标题化合物的制备与实施例127相同，在步骤D中用(1,4-二甲基-2-哌嗪基)甲醇代替N-甲基-L-脯氨醇。ES+APCI MS m/z 558.3[M+H]⁺。

实施例220

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：4-(2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1- 羧酸苄酯：向4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(4.00g，7.59mmol)在DCM(25.3ml，7.59mmol)中的溶液添加三氟乙酸(17.4ml，227.7mmol)，并将反应在室温下搅拌3小时。将反应浓缩成稠油。缓慢添加饱和碳酸氢钠并用10％MeOH的DCM溶液(3x50mL)提取混合物。合并提取液，用硫酸钠干燥并浓缩，提供目标产物(3.24g，7.6mmol，100％收率)，将其就此使用。ES+APCI MS m/z 506.2[M]⁺。

步骤B：4-(2-氯-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向圆底烧瓶添加碳酸铯(8.01g，24.6mmol)、4-(2-氯-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(3.5g，8.2mmol)、1-溴萘(4.6ml，32.8mmol)和RuPhos Pd G3(1.0g，1.23mmol)。抽空烧瓶后，在氩气流通过隔膜添加1,4-二噁烷(82.0ml，8.20mmol)。将氩气鼓泡通过混合物5分钟，然后将混合物加热至70℃过夜。将反应冷却、添加水并用乙酸乙酯提取，将有机物真空浓缩。把黄色固体溶解在最少量的DCM中，并通过硅胶色谱法(25-60％EtOAc的己烷溶液)进行纯化，提供4-(2-氯-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(2.0g，3.6mmol，44.1％收率)。ES+APCI MS m/z 553.2[M]⁺。

步骤C：4-(2-(((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯：在小瓶中，将4-(2-氯-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(120mg，0.22mmol)溶于二噁烷(108μL，0.217mmol)中，并用碳酸铯(141mg，0.434mmol)和(2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟-2-羟甲基吡咯烷(47.6mg，0.217mmol)处理。然后将该管加盖并加热到90℃达12小时。通过GF/F纸过滤反应并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(0-6％MeOH的DCM溶液)进行纯化。ES+APCI MS m/z 736.3[M+H]⁺。

步骤D：2-(氰基甲基)-4-(2-(((2S,4R)-4-氟吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向4-(2-(((2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(125mg，0.170mmol)在DCM(170μL，0.170mmol)中的溶液添加三氟乙酸(195μL，2.55mmol)并将反应在室温下搅拌2hr。将有机物用碳酸氢钠洗涤并将水层用DCM反提取。将合并的有机层浓缩并且不经进一步纯化即使用。ES+APCI MSm/z 636.3[M+H]⁺。

步骤E：2-(氰基甲基)-4-(2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7- (萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向2-(氰基甲基)-4-(2-(((2S,4R)-4-氟吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(105mg，0.1652mmol)在DCE(3303μL，0.1652mmol)中的溶液添加甲醛(124.1μL，1.652mmol)(37％的水溶液)，然后是三乙酰氧基硼氢化钠(175.0mg，0.8258mmol)。将混合物在室温下剧烈搅拌2.5h。将混合物用饱和碳酸氢钠(30mL)处理，搅拌10min，然后用DCM(3x10mL)提取。合并的有机相经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，就此用于下一步反应。ES+APCI MS m/z 650.3[M+H]⁺。

步骤F：2-(4-(2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5, 6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：向2-(氰基甲基)-4-(2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(85mg，0.13mmol)在EtOH(1308μL，0.13mmol)和THF(1308μL，0.13mmol)中的溶液添加钯(70mg，0.033mmol)(Degussa型，10wt％，50％H2O)，然后通过真空继以气囊压力引入H2气氛。然后将混合物在环境温度下搅拌过夜。然后将混合物用MeOH稀释并通过GF/F纸过滤。然后浓缩滤液，提供2-(4-(2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈。ES+APCI MS m/z 516.3[M+H]⁺。

步骤G：2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7- (萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：在0℃下向2-(4-(2-(((2S,4R)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(65mg，0.126mmol)在DCM(1261μL，0.126mmol)中的悬液添加丙烯酰氯(2521μL，0.252mmol)(新鲜制备的0.1M的DCM溶液)，然后是三乙胺(35.1μL，0.252mmol)。然后将反应在0℃下搅拌45分钟。将反应浓缩并通过反相色谱法(0-50％CAN:水，有0.1％TFA)进行纯化，提供标题化合物。ES+APCI MS m/z 570.3[M+H]⁺。

实施例221

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4S)-4-氟-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

根据实施例220的方法中的步骤C-G合成，在步骤C中用(2S,4S)-4-氟-2-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯代替(2S,4R)-4-氟-2-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯。ES+APCI MSm/z 570.3[M+H]⁺。

实施例222

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4S)-4-甲氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例220(步骤C-G)制备，在步骤C中用(2S,4S)-2-(羟甲基)-4-甲氧基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯取代(2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟-2-羟甲基吡咯烷。ES+APCI MS m/z 582.3[M+H]⁺。

实施例223

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-4-甲基哌嗪-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A-F：2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-4-甲基哌嗪-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5, 6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：标题化合物按照实施例220(步骤C-G)制备，在步骤C中用(S)-2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯取代(2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟-2-羟甲基吡咯烷。ES+APCI MS m/z 567.3[M+H]⁺。

实施例224

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((R)-4-甲基哌嗪-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例220(步骤C-G)制备，在步骤C中用(R)-2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯取代(S)-2-(羟甲基)-4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯。ES+APCI MS m/z567.3[M+H]⁺。

实施例225

2-(1-丙烯酰-4-(7-(5-氟-2-(三氟甲氧基)苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用2-溴-4-氟-1-(三氟甲氧基)苯取代1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 604.3[M+H]⁺。

实施例226

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)吡啶-3-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用3-溴-2-(三氟甲基)吡啶取代1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 571.3[M+H]⁺。

实施例227

2-(1-丙烯酰-4-(7-(2-氟苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴-2-氟苯取代1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 520.3[M+H]⁺。

实施例228

2-(1-丙烯酰-4-(7-(2,3-二甲基苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴-2,3-二甲基苯取代1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 530.3[M+H]+。

实施例229

2-(1-丙烯酰-4-(7-(2-氯苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴-2-氯苯取代1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 536.2[M]+。

实施例230

2-(1-丙烯酰-4-(7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴-3-氟-2-(三氟甲基)苯取代1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 588.3[M+H]+。

实施例231

2-(1-丙烯酰-4-(2-(3-羟基丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-(2-(3-羟基丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：标题化合物按220的步骤C制备，用丙-1,3-二醇取代(2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟-2-羟甲基吡咯烷。ES+APCI MS m/z 593.3[M+H]⁺。

步骤B：4-(2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7, 8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯：向小瓶中添加2-(氰基甲基)-4-(2-(3-羟基丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(77.6mg，0.131mmol)，将其溶于DCM(655μL，0.131mmol)中。将混合物冷却至0℃，然后添加三乙胺(36.5μL，0.262mmol)继以4-(二甲基氨基)-吡啶(4.80mg，0.04mmol)。然后添加叔丁基二甲基氯硅烷(29.6mg，0.196mmol)并将混合物搅拌过夜，同时升温至室温。将反应混合物到在饱和盐水溶液(5ml)上并将混合物用EtOAc提取(10mL)两次。将有机相经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。粗反应产物就此使用。ES+APCI MS m/z 707.4[M+H]+。

步骤C：2-(4-(2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6, 7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：向4-(2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(106mg，0.150mmol)在EtOH(1499μL，0.150mmol)和THF(1499μL，0.150mmol)中的溶液添加钯(79.8mg，0.0375mmol)(Degussa型，10wt％，50％H2O)，然后通过真空继以气囊压力引入H2气氛。然后将混合物在环境温度下搅拌过夜。然后将混合物用MeOH稀释并通过GF/F纸过滤。然后将滤液浓缩成无色固体，不经进一步纯化即使用。ES+APCI MS m/z 573.3[M+H]+。

步骤D：2-(1-丙烯酰-4-(2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-7-(萘- 1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：在-78℃下向2-(4-(2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(75mg，0.131mmol)在DCM(1309μL，0.131mmol)中的悬液添加丙烯酰氯(2619μL，0.262mmol)(新鲜制备的0.1M的DCM溶液)，然后是三乙胺(36.5μL，0.262mmol)。然后将反应在0℃下搅拌30分钟。将反应浓缩并在下一反应中使用粗产物。ES+APCI MS m/z 627.4[M+H]+。

步骤E：2-(1-丙烯酰-4-(2-(3-羟基丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：在0℃下向2-(1-丙烯酰-4-(2-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(90mg，0.14mmol)在DCM(1436μL，0.14mmol)中的溶液添加盐酸(4.0M in 1,4-dioxane)(359μL，1.4mmol)。将反应搅拌30min，此时将其用饱和碳酸氢钠淬灭并提取到10％IPA的CHCl3溶液中(3x15ml)。将合并的有机层浓缩并将残余物通过反相色谱法(0-95％ACN:H2O，有0.1TFA)进行纯化。ES+APCI MS m/z 513.2[M+H]+。

实施例232

1-(4-(7-(3-氯-2-氟-5-羟基苯基)-2-(3-吗啉代丙氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

标题化合物根据实施例1的步骤C-F制备，在步骤C中用中间体25取代4-(5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯和用1-溴-3-氯-2-氟-5-(甲氧基甲氧基)苯取代1-溴-3-(甲氧基甲氧基)萘。ES+APCI MS m/z 561.2[M]+。

实施例233

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-乙基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-乙基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8- 四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈.该化合物按照实施例147制备，在步骤F中用(S)-(1-乙基吡咯烷-2-基)甲醇取代N-甲基-L-脯氨醇取代[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇。ES+APCI MS m/z 566.3[M+H]⁺。

实施例234

2-((S)-1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：(R)-2-(羟甲基)哌嗪-1,4-二羧酸1-苄基4-(叔丁基)酯：在0℃下向(R)-1-Boc-3-羟甲基哌嗪(5.00g，23.1mmol)和NaHCO₃(5.83g，69.4mmol)在乙酸乙酯(46.2ml)和水(46.2ml)中的搅拌的双相溶液滴加氯甲酸苄酯(4.95ml，34.7mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌过夜。将反应混合物用EtOAc(50.0ml)稀释，分离有机层，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。粗产物通过快速色谱法用10-50％EtOAc/己烷梯度洗脱进行纯化，给出标题化合物(7.62g，21.7mmol，94.1％)。ESI MS m/z 251.1[M-Boc+H]+。

步骤B.(R)-2-(((甲磺酰基)氧基)甲基)哌嗪-1,4-二羧酸1-苄基4-(叔丁基)酯：在0℃下向(R)-2-(羟甲基)哌嗪-1,4-二羧酸1-苄基4-(叔丁基)酯(1.69g，4.83mmol)和三乙胺(1.01ml，7.25mmol)在CH₂Cl₂(32.2ml)中的溶液滴加纯MsCl(0.561ml，7.25mmol)，并将所生成的混合物在室温下搅拌10min。将反应混合物倒入分液漏斗，用乙酸乙酯稀释，然后依次用1N HCl、水、NaHCO₃(饱和)和盐水洗涤，给出标题化合物(1.9g，～100％，作为粗物质用于下一步)。ESI MS m/z 329.1[M-Boc+H]+。

步骤C.(S)-2-(氰基甲基)哌嗪-1,4-二羧酸1-苄基4-(叔丁基)酯：将(R)-2-(((甲磺酰基)氧基)甲基)哌嗪-1,4-二羧酸1-苄基4-(叔丁基)酯(2.10g，4.90mmol)、氰化钠(0.480g，9.80mmol)在DMA(49.0ml)中的溶液在55℃下加热1天。该反应之后是HPLC(15min方法)。将混合物在EtOAc/盐水之间分配，有机层用盐水(3x)洗涤，经MgSO₄干燥并浓缩。将残余物通过快速色谱法用0-100％EtOAc/己烷梯度洗脱进行纯化，给出标题化合物(1.40g，3.90mmol，79.5％)。将水层碱化并在氰化物废物流中处置。ESI MS m/z 260.1[M-Boc+H]+。

步骤D.(S)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯盐酸盐：将(S)-2-(氰基甲基)哌嗪-1,4-二羧酸1-苄基4-(叔丁基)酯(5.32g，14.8mmol)放入CH₂Cl₂(25mL)并添加HCl(4.0N的二噁烷溶液，18.5ml，74.0mmol)，将反应在环境温度下搅拌1d。浓缩反应混合物，给出标题化合物(4.3g，99％)。ESI MS m/z 260.1[M+H]+。

步骤E.(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯：将(S)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(1.01g，3.89mmol)、2,4-二氯-5,6-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(8H)-羧酸叔丁酯(1.18g，3.89mmol)和DIEA(1.36ml，7.79mmol)在DMSO(19.5ml)中的溶液在50℃下加热1天。将反应混合物在乙酸乙酯和盐水之间分配，并分离有机物。将有机相用盐水(3x)洗涤，经MgSO₄干燥并浓缩，给出标题化合物(1.63g，3.09mmol，79.4％)。ESI MS m/z 527.2[M+H]+。

步骤F.4-((S)-4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯：In 250mL heavy-wall round bottom flask with a PTFE screw cap在有PTFE螺旋盖的250毫升厚壁圆底烧瓶中添加(S)-4-(4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(1.64g，3.11mmol)在二噁烷(31.1ml)中的溶液，并将混合物用氩气喷射。在氩气下向混合物依次添加(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(1.08g，9.34mmol)、Cs₂CO₃(3.04g，9.34mmol)和Ruphos-Pd Gen3催化剂(0.260g，0.311mmol)并再喷射5min。将反应混合物加盖并在100℃下加热1天。将反应混合物用乙酸乙酯稀释并用盐水(2x)洗涤有机物。有机层经MgSO4干燥并浓缩，产生残余物，将其通过快速色谱法用0-20％(MeOH+2％NH₄OH)的DCM溶液洗脱进行纯化，给出标题化合物(1.42g，2.34mmol，75.3％)。ESI MS m/z 606.3[M+H]+。

步骤G.(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8- 四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯双三氟乙酸盐：将4-((S)-4-((苄氧基)羰基)-3-(氰基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸叔丁酯(38mg，0.063mmol)在CH₂Cl₂(627μl)和TFA(242μl，3.1mmol)中的溶液在室温下搅拌1天。浓缩反应混合物并以双TFA盐用于下一反应中(46mg，0.063mmol，100％)。ESI MS m/z 506.3[M+H]+。

步骤H.(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯双三氟乙酸盐(46mg，0.063mmol)、1-溴萘(39.3mg，0.190mmol)和Cs₂CO₃(61.9mg，0.190mmol)在二噁烷(633μl)中的悬液用氩气喷射5min。向该混合物添加Ruphos Pd Gen 3(5.29mg，0.006mmol)，并将所生成的悬浮液用氩气再喷射1分钟。将小瓶加盖并在100℃加热2h。将反应混合物在EtOAc和水之间分配，并用EtOAc(3x)提取水层。合并的有机层经MgSO4干燥并浓缩。残余物通过快速色谱法用5％MeOH/1％NH₄OH/CH₂Cl₂等度洗脱进行纯化，给出标题化合物(31.9mg，0.050mmol，79.8％)。ESI MS m/z 632.3[M+H]+。

步骤I.2-((S)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7, 8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：向用氮气喷射过的(S)-2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(31mg，0.049mmol)在甲醇(981μl)和THF(981μl)中的溶液添加Pd/C(10.4mg，0.00491mmol)，并将混合物在气囊压力的H₂气氛下搅拌1天。将反应混合物通过PTFE注射器过滤器(25mm)过滤并浓缩滤液，给出标题化合物(23.4mg，0.047mmol，95.8％)。ESI MS m/z 498.3[M+H]+。

步骤J.2-((S)-1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：向2-((S)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(23.4mg，0.047mmol)在CH₂Cl₂(470μl)中的溶液添加DIEA(41.1μl，0.235mmol)，然后是丙烯酰氯(12μl，0.141mmol)。所生成的混合物在环境温度下搅拌15分钟。将反应混合物在EtOAc和2N K₂CO₃和盐水之间分配。用EtOAc(2x)提取水层。合并的有机层经MgSO₄干燥并浓缩。残余物通过快速色谱法用5％MeOH/1％NH₄OH的CH₂Cl₂溶液洗脱进行纯化，给出标题化合物(19.2mg，0.035mmol，74.0％)。ESI MS m/z 552.3[M+H]+。

实施例235

2-((S)-1-((E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A.2-((S)-1-((E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷- 2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：向来自实施例234中步骤I的2-((S)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(25mg，0.0502mmol)、(2E)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(13.0mg，0.100mmol)、DIEA(43.9μl，0.251mmol)在CH₂Cl₂(502μl)中的溶液添加HATU(28.7mg，0.0754mmol)，并将所生成的混合物在环境温度下搅拌1小时。将反应混合物在EtOAc和盐水之间分配。水层用EtOAc(2x)提取。合并的有机层经MgSO₄干燥并浓缩。残余物通过制备型-C18用5-95％ACN/H₂O+0.1％TFA洗脱进行纯化。将目标级分在EA/2M K₂CO₃之间分配。水溶液用EtOAc(2x)提取。合并的有机层经MgSO₄干燥并浓缩，给出标题化合物(19.0mg，0.031mmol，62.1％)。ESI MS m/z 609.4[M+H]+。

实施例236

2-((S)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(E-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯酰)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A.2-((S)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-(E-4-(哌啶-1-基)丁-2-烯酰)哌嗪-2-基)乙腈根据实施例235制备，用(2E)-4-(1-哌啶基)-2-丁烯酸HCl盐取代，给出标题化合物(30mg，0.046mmol，92.0％)。ESI MS m/z 649.3[M+H]+。

实施例237

2-((S)-1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈2,2,2-三氟乙酸酯

根据实施例234合成，用1-溴-2-(三氟甲基)苯取代1-溴萘。ES+APCI MS m/z570.3[M+H]⁺。

实施例238

2-(1-丙烯酰-4-(7-(6-甲基-1H-吲唑-7-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：7-溴-6-甲基-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑.将7-溴-6-甲基-1H-吲唑(200mg，0.948mmol)在四氢呋喃(2ml，0.948mmol)中的溶液在搅拌下在冰浴中冷却。将氢化钠(45.5mg，1.14mmol)逐份添加到混合物中并将反应在0℃下搅拌1小时。接下来添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(0.201ml，1.14mmol)并将反应搅拌2小时，同时升温至室温。将混合物在EtOAc(20mL)和水(10mL)之间分配并分离层。有机层用水(2x10mL)、盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶上使用20至40％EtOAc/己烷作为洗脱液进行纯化，产生7-溴-6-甲基-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑(46mg，14％)以及异构体7-溴-6-甲基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑(214mg，66％)。ES+APCI MS m/z 341.1[M]⁺。

步骤B：2-(氰基甲基)-4-(7-(6-甲基-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)- 2H-吲唑-7-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(50mg，0.099mmol)、7-溴-6-甲基-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑(46mg，0.13mmol)、Cs₂CO₃(97mg，0.30mmol)、Ruphos Pd G3(83mg，0.099mmol)和二噁烷(1mL)的混合物用氮气吹扫并在70℃下搅拌6小时。将反应混合物冷却至室温并在EtOAc(20mL)和水(10mL)之间分配并分离层。有机层用水(5mL)、盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶Redisep 24g上使用2至20％MeOH/DCM作为洗脱液进行纯化，产生无色固体(50mg，66％)。ES+APCI MS m/z 766.4[M]⁺。

步骤C：2-(氰基甲基)-4-(7-(6-甲基-1H-吲唑-7-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2- 基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：将纯2-(氰基甲基)-4-(7-(6-甲基-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑-7-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(10mg，0.0131mmol)(10mg，0.0131mmol)溶于三氟乙酸(1ml，13.1mmol)，并将该棕黄色溶液在室温下搅拌1.5小时。将反应混合物倒入乙酸乙酯(20mL)并用2M Na₂CO₃(10mL，20mmol)、水(2x3mL)、盐水(5mL)仔细洗涤有机物，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发，产生淡黄色固体(8mg，96％)。ES+APCI MS m/z 636.3[M+H]⁺。

步骤D：2-(1-丙烯酰-4-(7-(6-甲基-1H-吲唑-7-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2- 基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：将2-(氰基甲基)-4-(7-(6-甲基-1H-吲唑-7-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(16mg，0.02517mmol)、甲醇(1.5ml，0.02517mmol)、四氢呋喃(1.815mg，0.02517mmol)和钯碳(10mg，5％，Degussa型E101NO/W)的搅拌混合物脱气并在氢气氛下搅拌1小时。通过硅藻土(2mL)过滤混合物并将硅藻土用THF(3x3mL)洗涤。将合并的有机物真空浓缩至～0.5mL，溶于DCM(5mL)，在搅拌下在EtOH-H₂O-CO₂浴中冷却至-30℃。接下来添加三乙胺(0.02mL，5eq.)，然后是丙烯酰氯(0.006134ml，0.07550mmol)，并在-30℃下将反应混合物搅拌1min。用NH₄OH(0.03mL)淬灭反应并真空浓缩。将残余物在1MNaHCO₃(3mL)和EtOAc(15mL)之间分配并分离层。有机层用水(3mL)、盐水(3mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。产物通过色谱法在硅胶Redisep 12g上使用10至20％MeOH/DCM+0.2％NH₄OH作为洗脱液进行纯化，产生无色固体(5.96mg，43％)。ES+APCI MS m/z 556.3[M+H]⁺。

实施例239

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(3-(三氟甲基)吡啶-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

根据实施例210的步骤E-G合成，在步骤E中用4-溴-3-(三氟甲基)吡啶氢溴酸盐代替1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 571.3[M+H]⁺。

实施例240

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(2,2,2-三氟乙基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

根据实施例210的步骤E-G合成，在步骤E中用1-溴-2-(2,2,2-三氟乙基)苯代替1-溴-2-(三氟甲基)苯。ES+APCI MS m/z 584.3[M+H]⁺。

实施例241

2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯

步骤A：在小瓶中，将2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(100mg，0.198mmol)溶于二噁烷(98.9μl，0.198mmol)并用碳酸铯(129mg，0.396mmol)和2-氟-3-(三氟甲基)吡啶(163mg，0.989mmol)处理，然后将该管加盖并加热到90℃达12hr。通过GF/F纸过滤反应并浓缩。残余物通过硅胶色谱法(0-12％MeOH的DCM溶液)进行纯化。

步骤B：根据实施例210的步骤F-G合成，在步骤F中用基2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯代替2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯。ES+APCI MS m/z 571.3[M+H]⁺。

实施例242

2-(1-(丁-2-炔酰)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

在0℃下，向含有N,N-二甲基甲酰胺(603μL，0.06mmol)的25mL RBF添加2-(4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(30mg，0.06mmol)和三乙胺(12.2mg，0.12mmol)。在剧烈搅拌反应混合物，同时一次性添加2-丁炔酸(6.08mg，0.07mmol)添加。接下来，将1-丙烷膦酸环酐(26.9μl，0.09mmol)添加到正在搅拌的混合物中。使反应在0℃下搅拌2h。添加水并将反应用EtOAc(2x25mL)提取。有机层用饱和LiCl、NaCl、和水(各10mL洗涤)洗涤。干燥并浓缩成固体，将其通过反相制备型HPLC(5-95％ACN:H2O，有0.1％TFA)进行纯化，提供标题化合物。

实施例243

2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[2-甲硫烷基-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向2-(氰基甲基)-4-(2-甲硫烷基-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.05g，2.60mmol)、2-[[4-溴-5-(三氟甲基)吲唑-1-基]甲氧基]乙基-三甲基硅烷(1.13g，2.86mmol)、RuPhos(484mg，1.04mmol)和Cs₂CO₃(2.11g，6.49mmol)在甲苯(20mL)中的溶液添加Pd₂(dba)₃(475mg，519umol)，将悬液真空脱气并用N₂吹扫数次。将混合物温热至90℃并在90℃下搅拌7小时。过滤反应混合物并用EtOAc(3×20mL)洗涤滤饼。将合并的有机层真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EA从30:1至4:1)、然后通过反相快速色谱柱(ACN：100％)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-甲硫烷基-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(850mg，1.12mmol，43.3％收率，95.0％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 719.5[M+H]⁺。

步骤B：2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在0℃下向2-(氰基甲基)-4-[2-甲硫烷基-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(850mg，1.18mmol)在DCM(17mL)中的溶液添加m-CPBA(240mg，1.18mmol，85.0％纯度)，并在0℃下搅拌1小时。在0℃下通过饱和Na₂S₂O₃(15mL)淬灭反应混合物并分离，然后用水(10mL)稀释并用EtOAc(30mL)提取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过反相快速色谱柱(ACN/水(0.1％FA)＝80％)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(730mg，944umol，79.8％收率，95.0％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 735.5[M+H]⁺。

步骤C：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4- 基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在15℃下向2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，408umol)和[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇(94.0mg，816umol)在甲苯(6mL)中的溶液添加t-BuONa(58.8mg，612umol)，并在15℃下搅拌0.5小时。向混合物添加EtOAc(15mL)和水(5mL)，然后用EtOAc(3×10mL)提取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过反相快速色谱柱(ACN/水(0.1％FA)＝54％)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(216mg，261umol，64.0％收率，95.0％纯度)，为棕色固体。ESI MSm/z 786.6[M+H]⁺。

步骤D：2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2- 三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪- 2-基]乙腈：在0℃下向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(190mg，242umol)和2,6-二甲基吡啶(311mg，2.90mmol，338uL)在DCM(4mL)中的溶液添加TMSOTf(645mg，2.90mmol，524uL)，并在20℃下搅拌1小时。将反应混合物用MeOH(1mL)淬灭，然后真空浓缩。残余物通过反相快速色谱柱(ACN/水(0.1％FA)＝40％)进行纯化。获得2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(85mg，123umol，50.8％收率，99.0％纯度)，为白色固体。ESIMS m/z 686.5[M+H]⁺。

步骤E：2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2- 三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙- 2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈在0℃下向2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(85.0mg，124umol)、DIEA(96.1mg，744umol，130uL)在DCM(2mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(23.4mg，186umol)，并将混合物在20℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(2mL)淬灭。所生成的混合物用DCM(3×5mL)提取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过反相快速色谱柱(ACN/水(0.1％FA)＝48％)进行纯化，产生2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(45mg，54.7umol，44.2％收率，90.0％纯度)，为白色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.16(s，1H)，7.71(d，J＝8.8Hz，1H)，7.52(d，J＝8.8Hz，1H)，6.59(brs，1H)，6.45-6.36(m，1H)，5.84(br d，J＝10.4Hz，1H)，5.76(s，2H)，5.12(s，1H)，4.44-4.28(m，3H)，4.21-4.08(m，2H)，3.98(br d，J＝12.0Hz，1H)，3.63-3.54(m，2H)，3.48-3.39(m，2H)，3.32(br s，1H)，3.10(br s，2H)，2.99-2.86(m，2H)，2.80(br s，2H)，2.73-2.58(m，2H)，2.49(s，3H)，2.28(br s，1H)，2.05(br s，1H)，1.77(br s，4H)，0.94-0.88(m，2H)，-0.04(s，9H)。

步骤F：2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈向2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1-(2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基)吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(45mg，60.8umol)在DCM(0.15mL)中的溶液添加TFA(208mg，1.82mmol，135uL)，并将混合物在20℃下搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO₃(2mL)碱化到pH＝8。所生成的混合物用DCM:MeOH(10:1)(3×5mL)提取。将合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：10％-40％，10.5min)进行纯化，产生2-[4-[2-[[(2R)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-[5-(三氟甲基)-1H-吲唑-4-基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(8.2mg，12.0umol，19.8％收率，96.2％纯度，FA)，为黄色油。ESI MS m/z 610.4[M+H]⁺。

实施例244

2-[4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在N₂下向2-(氰基甲基)-4-[2-[(1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(210mg，445umol)、8-溴异喹啉(185mg，891umol)、RuPhos(41.6mg，89.1umol)和Cs₂CO₃(435mg，1.34mmol)在甲苯(4.5mL)中的溶液添加Pd₂(dba)₃(40.8mg，44.5umol)。将悬液真空脱气并用N₂吹扫数次。将混合物在N₂下于90℃搅拌12小时。过滤混合物并用EtOAc(3×10mL)洗涤滤饼。将合并的有机层真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱柱(ACN/水(0.1％FA)＝20％)进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(160mg，240umol，54.0％收率，90.0％纯度)，为棕色固体。ESI MS m/z 599.4[M+H]⁺。

步骤B：2-[4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：将2-(氰基甲基)-4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(190mg，317umol)和TFA(724mg，6.35mmol，470uL)的溶液在20℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，产生2-[4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(230mg，粗产物，2TFA)，为棕色油。

步骤C：2-[4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(230mg，316umol，2TFA)和DIEA(409mg，3.17mmol，551uL)在DCM(5mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(47.9mg，380umol)，然后将混合物在20℃下搅拌1小时。向混合物添加水(5mL)。所生成的混合物用DCM(3×5mL)提取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*25*10um；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：1％-20％,10min)进行纯化，产生2-[4-[7-(8-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(12.5mg，19.7umol，6.23％收率，94.5％纯度，FA)，为黄色固体。ESI MS m/z 553.2[M+H]⁺。

实施例245

2-[4-[7-(7-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：(7-甲基-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯：在-5℃下向7-甲基四氢化萘-1-酮(2.00g，12.5mmol)和DIPEA(4.84g，37.5mmol，6.52mL)在DCM(30mL)中的溶液滴加Tf₂O(5.28g，18.7mmol，3.09mL)。将混合物在20℃下搅拌3小时。完成后，将混合物真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE/EA 1/0至100/1)进行纯化，产生(7-甲基-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯(1.53g，4.45mmol，35.6％收率，85.0％纯度)，为黄色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.17(s，1H)，7.11-7.05(m，2H)，6.01(t，J＝4.8Hz，1H)，2.83(t，J＝8.0Hz，2H)，2.50(dt，J＝4.8，8.0Hz，2H)，2.36(s，3H)。

步骤B：(7-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯：将(7-甲基-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯(1.40g，4.79mmol)和DDQ(2.17g，9.58mmol)在二噁烷(28mL)中的混合物在105℃下搅拌12小时。完成后，将混合物真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE/EA 1/0至100/1)进行纯化，产生(7-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(1.10g，3.41mmol，71.2％收率，90.0％纯度)，为黄色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.87-7.79(m，3H)，7.49-7.38(m，3H)，2.59(s，3H)。

步骤C：4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基) 哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将7-苄基-2,4-二氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(10g，34.0mmol)、2-哌嗪-2-基乙腈(10.1g，51.0mmol，2HCl)和DIEA(17.6g，136mmol，23.7mL)在二噁烷(100mL)中的混合物在50℃下搅拌2小时。添加Boc₂O(14.8g，68.0mmol，15.6mL)并将混合物在50℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩并将残余物用乙酸乙酯(500mL)稀释。分离的有机层用水(1×300mL)、盐水(1×200mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用乙酸乙酯(100mL)研碎。过滤出沉淀，用乙酸乙酯(50mL)洗涤滤饼并真空干燥，产生灰色固体。滤液真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯100/1至1/2)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生固体然后与上面的固体合并，产生4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(15g，29.10mmol，85.6％收率，93.7％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 483.1[M+H]⁺。

步骤D：4-[7-苄基-2-[(1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4- d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸酯：在0℃下向[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲醇(1.19g，10.4mmol，1.23mL，2.5eq)在THF(30.0mL)中的溶液添加NaH(331mg，8.28mmol，在矿物油中60％纯度，2.00eq)并将混合物在0℃下搅拌0.5h。将4-(7-苄基-2-氯-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.00g，4.14mmol，1.00eq)加入混合中，并将混合物在80℃下搅拌4小时。将混合物倒入冰水(100mL)中并用乙酸乙酯(3×150mL)提取。将有机层用饱和氯化钠溶液(1×200mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生4-[7-苄基-2-[(1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.86g，粗产物)，为黑色油，其不经进一步纯化即用于下一步。ESI MS m/z 562.3[M+H]⁺。

步骤E：2-(氰基甲基)-4-[2-[(1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：在-78℃下将NH₃鼓泡通入甲醇(70.0mL)30分钟。将4-[7-苄基-2-[(1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(2.00g，粗产物)和Pd/C(0.20g，10％纯度)加入混合物中。将混合物在15psi的H₂下于40℃搅拌24小时。将混合物过滤并真空浓缩。残余物通过反相快速色谱法[水(FA，0.1％)/乙腈]进行纯化。用饱和碳酸氢钠溶液(5.00mL)将目标级分调节到pH>7并用乙酸乙酯(3×100mL)提取水层。合并的有机层用盐水(1×100mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生2-(氰基甲基)-4-[2-[(1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.40g，845umol，两步29.4％收率)，为黄色固体。ESI MS m/z 472.2[M+H]⁺。

步骤F：2-(氰基甲基)-4-[2-[(1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-(氰基甲基)-4-[2-[(1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(185mg，392umol)、(7-甲基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(159mg，549umol)、Pd₂(dba)₃(35.9mg，39.2umol)、RuPhos(36.6mg，78.5umol)和Cs₂CO₃(320mg，981umol)在甲苯(30mL)中的溶液用N2脱气，然后在N₂下加热到90℃达12小时。完成后，将混合物过滤并将滤液真空浓缩。残余物通过反相快速色谱法[水(0.1％NH₃·H₂O)/乙腈]进行纯化，产生2-(氰基甲基)-4-[7-(7-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(180mg，283umol，72.1％收率，96.1％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 612.6[M+H]⁺。

步骤G：2-[4-[7-(7-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8- 二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：将2-(氰基甲基)-4-[7-(7-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(180mg，294umol)在TFA(671mg，5.88mmol，436uL)中的溶液在20℃下搅拌1小时。完成后，将混合物真空浓缩，产生2-[4-[7-(7-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(0.37g，粗产物，TFA)，为黄色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。

步骤H：2-[4-[7-(7-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8- 二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[7-(7-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(189mg，粗产物，TFA)和DIEA(976mg，7.55mmol，1.32mL)在DCM(4mL)中的溶液滴加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(38.1mg，302umol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。完成后，将反应用MeOH(0.5mL)淬灭，用水(1mL)稀释并用DCM(3×5mL)提取。有机层经Na₂SO₄干燥并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：15％-45％,10.5min)进行纯化，产生2-[4-[7-(7-甲基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(13.2mg，21.3umol，两步14.2％收率，98.4％纯度，FA)，为黄色固体。ESI MS m/z 566.5[M+H]⁺。

实施例246

2-[4-[7-(4-氟-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈.

根据实施例147的方法合成，在步骤H中用1-溴-4-氟萘取代1-溴萘。ESI MS m/z570.5[M+H]⁺。

实施例247

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(喹啉-8-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

根据实施例147的方法合成，在步骤H中用8-溴喹啉取代1-溴萘。ESI MS m/z553.2[M+H]⁺.

实施例248

(S)-1-(4-(7-(5-异丙基-1H-吲唑-4-基)-2-((1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：2-(2-溴-4-氟-苯基)丙-2-醇：在-50℃下向1-(2-溴-4-氟-苯基)乙酮(10g，46.1mmol)在THF(100mL)中的溶液添加MeMgBr(醚溶液)(3M，46.08mL)。将混合物温热至0℃并搅拌3小时。在-50℃下用饱和氯化铵水溶液(10mL)淬灭混合物。将混合物温热至15℃，然后后用乙酸乙酯(500mL)稀释。分离的有机层用水(1×500mL)和盐水(1×500mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，产生2-(2-溴-4-氟-苯基)丙-2-醇(10g，36.5mmol，79.2％收率，85％纯度)，为无色油。

步骤B：2-溴-4-氟-1-异丙基-苯：向2-(2-溴-4-氟-苯基)丙-2-醇(9g，38.6mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液添加Et₃SiH(8.98g，77.2mmol，12.3mL)和TFA(65.1g，571mmol，42.3mL)。将混合物在15℃下搅拌1小时，然后加热到50℃达1小时。将反应混合物真空浓缩，然后用乙酸乙酯(100mL)稀释。通过添加饱和NaHCO₃水溶液将水层pH调节到pH＝7，并用乙酸乙酯(50mL×3)提取。合并的有机相用盐水(30mL)洗涤，用无水Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/0至100/1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩。获得2-溴-4-氟-1-异丙基-苯(7g，32.2mmol，83.5％收率)，为无色油。¹HNMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.36-7.27(m，2H)，7.09-7.02(m，1H)，3.46-3.31(m，1H)，1.28(d，J＝6.8Hz，6H)。

步骤C：2-溴-6-氟-3-异丙基-苯甲醛：在氮气气氛下于-70℃向2-溴-4-氟-1-异丙基-苯(7g，32.2mmol)在THF(100mL)中的混合物添加LDA(2M的甲苯溶液，24.2mL)。将混合物搅拌0.5小时，然后添加DMF(7.07g，96.7mmol，7.44mL)。将混合物在-70℃下搅拌2小时。用水(100mL)淬灭反应并用乙酸乙酯(2×100mL)提取。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO2，PE\EA＝1\0至10\1)进行纯化。收集目标级分并真空浓缩，产生2-溴-6-氟-3-异丙基-苯甲醛(2.4g，9.79mmol，30.4％收率)，为黄色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝10.41(s，1H)，7.48(dd，J＝5.6，8.8Hz，1H)，7.13(t，J＝9.2，1H)，3.57-3.46(m，1H)，1.26(d，J＝7.2Hz，6H)。

步骤D：4-溴-5-异丙基-1H-吲唑：将含2-溴-6-氟-3-异丙基-苯甲醛(2.4g，9.79mmol)的DMSO(3mL)中添加N₂H₄·H₂O(15.4g，302mmol，15mL，98％纯度)，并将混合物加热至110℃并搅拌16小时。将反应混合物倒入H₂O(10mL)并用乙酸乙酯(20mL×3)提取。将有机相用盐水(10mL)洗涤，经无水Na₂SO₄干燥并真空浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1)进行纯化，产生4-溴-5-异丙基-1H-吲唑(650mg，2.72mmol，27.8％收率)，为黄色固体。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝10.24(br s，1H)，8.08(d，J＝0.8Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，1H)，7.34(d，J＝8.8Hz，1H)，3.56(td，J＝6.8，13.6Hz，1H)，1.29(d，J＝6.8Hz，6H)。

步骤E：4-溴-5-异丙基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑：向3,4-二氢-2H-吡喃(457mg，5.44mmol，497uL，2eq)在二氯甲烷(15mL)中的溶液添加TsOH·H₂O(51.7mg，271umol)和4-溴-5-异丙基-1H-吲唑(650mg，2.72mmol)。将混合物在20℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20mL)稀释并用乙酸乙酯(20mL×2)提取。合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1)进行纯化并通过反相快速色谱法[水(0.1％甲酸)/乙腈]进一步纯化，产生4-溴-5-异丙基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(170mg，494umol，18.2％收率，94％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z 323.0[M+H]⁺。

步骤F：4-[7-(5-异丙基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-溴-5-异丙基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(136mg，420umol)、4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(140mg，323umol)、RuPhos(15.1mg，32.4umol)、RuPhos-Pd-G2(25.1mg，32.4umol)和t-BuONa(77.7mg，809umol)在甲苯(3mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫3次，并将混合物在N₂气氛下于90℃搅拌12小时。将混合物用乙酸乙酯(20mL)稀释并用水(20mL)洗涤。将有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并减压浓缩，产生残余物。残余物通过柱色谱法(SiO2，DCM/MeOH＝100/1至10/1)进行纯化，收集目标级分并真空浓缩，产生4-[7-(5-异丙基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(70mg，96.5umol，29.8％收率，93％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z675.3[M+H]⁺。

步骤G：7-(5-异丙基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4- 哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：向4-[7-(5-异丙基-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(40mg，59.3umol)在二氯甲烷(100uL)中的溶液添加TFA(101mg，889umol，65.8uL)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生7-(5-异丙基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(42mg，58.4umol，98.6％收率，2TFA)，为棕色油，其不经纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 491.4[M+H]⁺。

步骤H：1-[4-[7-(5-异丙基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在氮气气氛下于-40℃向7-(5-异丙基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(42mg，58.4umol)和DIEA(75.5mg，584umol，102uL)在二氯甲烷(2mL)中的混合物添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(7.37mg，58.4umol，1eq)在二氯甲烷(1mL)中的溶液。将混合物在-40℃下搅拌1小时。通过添加饱和NaHCO₃(2mL)水溶液淬灭反应。然后将混合物倒入水(20mL)中并用二氯甲烷(20mL×2)提取。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Luna C18 150*25 5u；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：5％-38％，10min)进行纯化，产生1-[4-[7-(5-异丙基-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(4.5mg，7.93umol，13.6％收率，96％纯度)，为黄色固体。ESI MS m/z 545.2[M+H]⁺。

实施例249

1-[4-[7-(2-氟-3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]- 6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.50g，1.16mmol)、(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(562mg，1.73mmol)、RuPhos(108mg，231umol)、Pd₂(dba)₃(106mg，116umol)和t-BuONa(333mg，3.47mmol)在甲苯(7mL)中的混合物在氮气气氛下于110℃搅拌3小时。将混合物冷却，通过添加饱和碳酸氢钠溶液将水层的pH调节到7并用乙酸乙酯(3×20mL)提取水层。将合并的有机层用饱和氯化钠溶液洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，二氯甲烷/甲醇＝10/1)进行纯化并将混合物浓缩，产生4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.20g，274umol，11.8％收率,)，为黄色固体。ESI MS m/z 607.0[M+H]⁺。

步骤B：7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4- 哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：将4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.20g，330umol)和TFA(564mg，4.94mmol，366uL)在二氯甲烷(0.4mL)的混合物在10℃下搅拌1小时。将混合物真空浓缩，产生7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(205mg，粗产物)，为黄色油，其不经进一步纯化即用于下一步。ESI MS m/z 507.0[M+H]⁺。

步骤C：1-[4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-40℃下向7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(0.20g，粗产物)和TEA(399mg，3.95mmol，549uL)在二氯甲烷(5mL)中的溶液添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(49.8mg，394umol)，然后在-40℃下搅拌0.5h。用甲醇(0.10mL)淬灭混合物并真空浓缩。将残余物通过反相快速色谱法[水(0.1％TFA)/乙腈]进行纯化。通过添加饱和碳酸氢钠溶液使水层pH为7，并用二氯甲烷/甲醇(10/1)(3×10mL)提取水层。合并的有机层用饱和氯化钠(1×5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，产生1-[4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.10g，174umol，44.1％收率)，为黄色油。ESI MS m/z 561.5[M+H]⁺。

步骤D：1-[4-[7-(2-氟-3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在-78℃下向1-[4-[7-(2-氟-3-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(0.10g，174umol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液添加BBr₃(223mg，892umol，85.9uL)。将混合物在-78℃下搅拌0.5h和在0℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩，用二氯甲烷(3mL)和水稀释，并通过在-78-0℃下添加饱和碳酸氢钠溶液将水层pH调节至>7。接下来用二氯甲烷(3×5.00mL)提取水层。合并的有机物真空浓缩。残余物通过柱色谱法(Al₂O₃，二氯甲烷/甲醇＝10/1)进行纯化并将混合物真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Phenomenex Gemini 150*25mm*10um；流动相：[水(10mMNH₄HCO₃)-ACN]；B％：30％-60％，3min)进行纯化并通过制备型HPLC(柱子：Luna C18 150*255u；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：20％-50％，10min)进一步纯化。收集目标级分并冻干，产生1-[4-[7-(2-氟-3-羟基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(1.59mg，2.91umol，1.63％收率，100％纯度，FA)，为黄色固体。ESI MS m/z 547.2[M+H]⁺。

实施例250

1-[4-[7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-溴-5-氯-1-四氢吡喃-2-基-吲唑：向4-溴-5-氯-1H-吲唑(100mg，432.0umol)在DCM(3mL)中的溶液添加TsOH·H₂O(8.22mg，43.2umol)和3,4-二氢-2H-吡喃(72.7mg，864umol，79.0uL)。将混合物在20℃下搅拌2小时。将反应用水(20mL)洗涤并用乙酸乙酯(20mL x 2)提取水层。合并的有机物用Na₂SO₄干燥并真空除去溶剂。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝10:1)进行纯化，产生4-溴-5-氯-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(270mg，810umol，93.8％收率)，为白色固体。ESI MS m/z 547.2[M+H]⁺。

步骤B：4-[7-(5-氯-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2- 基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(123mg，284.4umol)、4-溴-5-氯-1-四氢吡喃-2-基-吲唑(135mg，427umol)、Pd₂(dba)₃(26.0mg，28.4umol)、RuPhos(20.0mg，42.9umol)和Cs₂CO₃(278mg，853umol)在二噁烷(10mL)中的混合物脱气并用N₂吹扫，然后将混合物在N₂气氛下于100℃搅拌12hr。通过添加水(20mL)淬灭反应。将混合物用乙酸乙酯(20mL x 3)提取。合并的有机物用Na₂SO₄干燥并将溶剂真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，乙酸乙酯/MeOH＝10/1)进行纯化，产生-4-[7-(5-氯-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(130.0mg，188.4umol，66.3％收率)，为白色固体。ESI MS m/z 668.2[M+H]⁺。

步骤C：7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶：向4-[7-(5-氯-1-四氢吡喃-2-基-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(50.0mg，74.9umol)在DCM(2mL)中的溶液添加TFA(1.95mL)。将混合物在20℃下搅拌1hr。真空除去有机溶剂，产生7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(40.0mg，粗产物，2TFA)，为黄色油，其不经进一步纯化直接用于下一步。ESI MS m/z 483.4[M+H]⁺。

步骤D：1-[4-[7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]- 6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮：在N₂气氛下向7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-4-哌嗪-1-基-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶(40.0mg，2TFA)和DIEA(50mg，387umol，67.4uL)在DCM(3mL)中的溶液滴加丙烯酸酐(9.0mg，71.4umol)。将混合物在-70℃下搅拌15min。通过添加水(10mL)淬灭反应。用乙酸乙酯(10mL x 3)提取混合物。有机层用Na₂SO₄干燥并真空除去溶剂。残余物通过制备型HPLC(柱子：Luna C18 150*255u；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：10％-37％,10mins)进行纯化并冻干，产生1-[4-[7-(5-氯-1H-吲唑-4-基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-基]丙-2-烯-1-酮(11.9mg，20.8umol，两步27.3％，100％e.e.)，为黄色固体。ESI MS m/z 537.2[M+H]⁺。

实施例251

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：4-(2-(((S)-1-(叔丁氧羰基)-2-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯.在微波管中将4-(2-氯-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(200mg，0.362mmol)溶于二噁烷(181μl，0.362mmol)并用碳酸铯(236mg，0.723mmol)和(S)-2-(羟甲基)-2-甲基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(389mg，1.81mmol)处理。然后将该管加盖并加热到90℃达2小时。LC/MS显示反应完成。将反应冷却至室温并通过GF/F纸过滤。将滤液真空浓缩并在CombiFlash上色谱分离(0％-10％DCM:MeOH)。合并含有洁净产物的所有级分并浓缩，产生4-(2-(((S)-1-(叔丁氧羰基)-2-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(264mg，0.361mmol，99.7％收率)。ES+APCI MS m/z 732.4[M+H]⁺。

步骤B：2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-2-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)- 5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯.将4-(2-(((S)-1-(叔丁氧羰基)-2-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(264mg，0.361mmol)溶于二氯甲烷(3607μl，0.361mmol)并用TFA(556μl，7.21mmol)处理。将反应在室温下搅拌1小时。LC/MS显示反应完成。将反应真空浓缩并用饱和碳酸氢钠处理。用DCM(2X)提取水层，合并的有机物经Na2SO4干燥并真空浓缩，产生2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-2-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(210mg，0.332mmol，92.2％收率)。ES+APCI MS m/z 632.3[M+H]⁺。

步骤C：2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯.将2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-2-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(105mg，0.1662mmol)溶于甲酸(94.05μl，2.493mmol)并用甲醛(1868μl，24.93mmol)处理。将反应混合物在85℃下搅拌1小时。LC/MS显示反应完成。将反应冷却至室温，用饱和碳酸氢钠处理并用DCM(2X)提取混合物，合并有机物并经Na2SO4干燥。将合并的有机物真空浓缩并在CombiFlash上色谱分离(0％-10％DCM:MeOH)。合并含有洁净产物的所有级分并真空浓缩，产生2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(75mg，0.1161mmol，69.88％收率)。ES+APCI MS m/z 646.4[M+H]⁺。

步骤D：2-(4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7, 8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈.将2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(117mg，0.181mmol)在EtOH(1812μl，0.181mmol)和THF(1812μl，0.181mmol)中的溶液用N₂吹扫5分钟。向该溶液添加钯(96.4mg，0.0453mmol)(Degussa型，10wt％，50％H₂O)，立即加盖并用N₂再吹扫5min。然后将溶液在H₂气氛下搅拌1小时。LC/MS显示洁净的目标产物。将混合物用MeOH稀释并通过填塞的硅藻土过滤。然后将滤液真空浓缩，提供2-(4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(88mg，0.172mmol，94.9％收率)。ES+APCI MS m/z 512.3[M+H]⁺。

步骤E：2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈.向2-(4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(88mg，0.17mmol)在二氯甲烷(1720μl，0.17mmol)中的悬液在环境温度下添加丙烯酰氯(14μl，0.17mmol)，然后是Hunig碱(60μl，0.34mmol)。然后将反应在环境温度下搅拌30分钟。LC/MS显示反应完成。将反应混合物真空浓缩。将浓缩物重悬浮于ACN:H2O的60:40混合物中并在Gilson(制备型HPLC)上使用含5-->95％ACN/0.1％TFA的水/0.1％TFA作为洗脱液进行纯化。将含有产物的级分合并并用饱和碳酸氢钠游离碱化，有机物用DCM提取。将有机物经MgSO4干燥并真空浓缩，产生2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1,2-二甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(14mg，0.025mmol，14％收率)。ES+APCI MS m/z 566.3[M+H]⁺。

实施例252

2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯

步骤A：(S)-吡咯烷-2-基甲醇：在氮气气氛下于0℃向(S)-2-(羟甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(2g，9.94mmol)在CH₂Cl₂(40mL)中的溶液添加HCl(4M的二噁烷溶液，49.69mL)。在15℃下搅拌30min后，将混合物真空浓缩。获得(S)-吡咯烷-2-基甲醇(1.37g，9.96mmol，100％收率，HCl)，为黄色固体。

步骤B：[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲醇：将[(2S)-吡咯烷-2-基]甲醇(750mg，7.41mmol，724uL)和丙酮(4.31g，74.2mmol，5.46mL)在MeOH(20mL)中的混合物在H₂(30psi)下用Pd/C(100mg，7.41mmol，10％纯度)于15℃氢化3小时。将混合物过滤并真空浓缩。获得[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲醇(0.821g，5.73mmol，77.3％收率)，为黄色油。¹H NMR(400MHz，甲醇-d₄)δ＝3.54(dd，J＝4.0，10.8Hz，1H)，3.40-3.35(m，1H)，2.99-2.86(m，3H)，2.60-2.50(m，1H)，1.94-1.82(m，1H)，1.82-1.66(m，3H)，1.15(d，J＝6.4Hz，3H)，1.08(d，J＝6.4Hz，3H)。

步骤C：2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯：向2-(氰基甲基)-4-[2-甲基亚磺酰基-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg，549umol)和[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲醇(157mg，1.10mmol)在THF(5mL)中的混合物添加t-BuONa(158mg，1.65mmol)。在20℃下搅拌0.5小时后，在将溶液温度保持在0℃的同时，将反应混合物用HCl(1M)中和至pH＝7，然后将混合物减压浓缩。残余物通过反相快速色谱法[水(0.1％TFA)/乙腈]进行纯化。收集目标级分，用饱和NaHCO₃溶液中和并用乙酸乙酯(200mL)提取。有机层经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。获得2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(174mg，278umol，50.7％收率，100％纯度)，为黄色油。ESI MS m/z 626.2[M+H]⁺。

步骤D：2-[4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢- 5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈：在氮气气氛下于0℃向2-(氰基甲基)-4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-1-羧酸叔丁酯(174mg，278umol)在CH₂Cl₂(5mL)中的溶液添加TFA(7.70g，67.5mmol，5.00mL)。在15℃下搅拌0.5h后，将混合物真空浓缩。获得2-[4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(178mg，粗产物，TFA)，为黄色油。ESI MS m/z 526.1[M+H]⁺。

步骤E：2-[4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢- 5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈：在0℃下向2-[4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈(178mg，粗产物，TFA盐)和DIEA(360mg，2.78mmol，485uL)在CH₂Cl₂(5mL)中的混合物添加丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯(28.1mg，223umol)。将混合物在20℃下搅拌1小时。将反应混合物在0℃下用NaHCO₃饱和溶液(5mL)淬灭，然后用CH₂Cl₂(2×25mL)提取。合并的有机层用盐水(1×50mL)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC(柱子：Boston Green ODS 150*305u；流动相：[水(0.225％FA)-ACN]；B％：27％-54％，10min)进行纯化。获得2-[4-[2-[[(2S)-1-异丙基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈(11.7mg，18.3umol，两步6.58％收率，97.9％纯度，FA)，为棕色固体。ESI MS m/z 580.2[M+H]⁺。

实施例253

2-(1-丙烯酰-4-(7-(7-氯萘-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：(7-氯-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯：在N₂下于0℃向7-氯四氢化萘-1-酮(2g，11.1mmol，1eq)和DIEA(4.29g，33.2mmol，5.79mL)在DCM(35mL)中的混合物一次性添加Tf₂O(4.69g，16.6mmol，2.74mL)。将混合物在25℃下搅拌5小时。减压浓缩反应混合物。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝200/1至50/1)进行纯化。获得(7-氯-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯(2.25g，7.02mmol，63.4％收率，97.6％纯度)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.32(d，J＝2.0Hz，1H)，7.24(dd，J＝2.0，8.0Hz，1H)，7.12(d，J＝8.0Hz，1H)，6.10(t，J＝4.8Hz，1H)，2.88-2.80(m，2H)，2.53(dt，J＝4.8，8.0Hz，2H)。

步骤B：(7-氯-1-萘基)三氟甲磺酸酯：在N₂下向(7-氯-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯(1.57g，5.02mmol)在二噁烷(35mL)中的混合物一次性添加DDQ(2.28g，10.0mmol)。将混合物在25℃下搅拌30min，然后加热至105℃并搅拌5小时。减压浓缩反应混合物除去1,4-二噁烷。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝200/1至50/1)进行纯化。获得(7-氯-1-萘基)三氟甲磺酸酯(1.24g，3.94mmol，78.5％收率，98.7％纯度)，为无色油。¹HNMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.05(d，J＝2.0Hz，1H)，7.87-7.83(m，2H)，7.57-7.47(m，3H)。

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用(7-氯-1-萘基)三氟甲磺酸酯取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。ESIMS m/z 586.1[M+H]⁺。

实施例254

2-[4-[7-(5-氟-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴-5-氟萘取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 570.3[M+H]⁺。

实施例255

2-[4-[7-(7-甲氧基-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：(7-甲氧基-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯：向7-甲氧基四氢化萘-1-酮(1g，5.67mmol)和DIEA(2.20g，17.0mmol，2.97mL)在DCM(15mL)中的溶液滴加Tf₂O(2.40g，8.51mmol，1.40mL)，然后将混合物在20℃下搅拌12小时。将反应混合物真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc从1:0至100:1)进行纯化，产生(7-甲氧基-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯(1.7g，5.24mmol，92.3％收率，95.0％纯度)，为黄色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.06(d，J＝8.4Hz，1H)，6.75(dd，J＝2.4，8.4Hz，1H)，6.66(d，J＝2.4Hz，1H)，6.45(s，1H)，3.80(s，3H)，3.04-2.96(m，2H)，2.68(t，J＝8.4Hz，2H)。

步骤2：(7-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯：将(7-甲氧基-3,4-二氢萘-1-基)三氟甲磺酸酯(1.7g，5.51mmol)和DDQ(2.50g，11.0mmol)在二噁烷(30mL)中的混合物在105℃下搅拌12小时。将反应混合物真空浓缩。残余物通过硅胶色谱法(PE:EtOAc从1:0至50:1)进行纯化，产生(7-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯(1.41g，4.14mmol，75.1％收率，90.0％纯度)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝7.84(d，J＝9.2Hz，1H)，7.78(d，J＝8.8Hz，1H)，7.65(d，J＝2.4Hz，1H)，7.24-7.21(m，2H)，7.15(d，J＝2.4Hz，1H)，3.94(s，3H)。

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用(7-甲氧基-1-萘基)三氟甲磺酸酯取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 582.4[M+H]⁺。

实施例256

1-(2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：4-(4-(叔丁氧羰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并 [3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯：将2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.715g，3.10mmol)在N,N-二甲基乙酰胺(3ml)中的溶液在搅拌下在冰浴上冷却并分小份添加2,4-二氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯(1.00g，2.96mmol)添加，然后是DIPEA(0.57mL，3.25mmol，1.1eq.)。使所生成的溶液经1小时升温至室温，然后在水(15mL)和MTBE(50mL)之间分配。有机层用水(2x10mL)、盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发，产生黄色固体(1.54g，98％)。ES+APCI MS m/z 532.3，[M+H]⁺。

步骤B：4-(4-(叔丁氧羰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯：将粗4-(4-(叔丁氧羰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2-氯-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯(500mg，0.940mmol)、(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇(216mg，1.88mmol)、Cs₂CO₃(612mg，1.88mmol)和二噁烷(0.5mL)的混合物氮气用冲洗。将小瓶加盖并在120℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却，在EtOAc(20mL)和水(10mL)之间分配，有机层用水和盐水(各5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将化合物通过硅胶色谱法，Redisep 40g，用4至10％MeOH/DCM+0.2％NH₄OH洗脱进行纯化，产生黄色固体(197mg，34％)。ES+APCI MS m/z 611.4[M+H]⁺。

步骤C：2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将4-(4-(叔丁氧羰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,8-二氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-7(6H)-羧酸苄酯(197mg，0.323mmol)、甲醇(10mL)和钯碳(10mg，5％，Degussa型E101 NO/W)的混合物脱气并在氢气氛(气囊)下搅拌1小时。将反应混合物通过硅藻土(2mL)过滤，用MeOH(3x3mL)洗涤，真空蒸发，并通过在真空和高真空下用甲苯蒸发进行干燥，产生无色固体(150mg，98％)。ES+APCI MS m/z 477.2[M+H]⁺。

步骤D：2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯：将2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并-[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150mg，0.315mmol)，Cs₂CO₃(308mg，0.944mmol)、二噁烷(1mL)、1-碘萘(0.0689ml，0.472mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(26.3mg，0.0315mmol)(RuPhos-Pd-G3)的混合物用氮气吹扫，将烧瓶加盖并在70℃下搅拌过夜。冷却反应混合物，在EtOAc(15mL)和水(5mL)之间分配，有机层用水和盐水(各5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥并真空蒸发。将化合物通过硅胶色谱法，Redisep 40g，使用4至10％MeOH+0.5％NH₄OH作为洗脱液进行纯化，产生无色固体，131mg。ES+APCI MS m/z 603.3[M+H]⁺。

步骤E：1-(2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1- 基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮.将2-(甲氧基甲基)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(130mg，0.2157mmol)溶于1M三氟乙酸的DCM溶液中，并让所生成的溶液保持在室温下一小时。将反应混合物在2M Na₂CO₃(5mL)和DCM(15mL)之间分配，并将有机层真空蒸发。固体残余物溶于DCM(5mL)中，在冰-EtOH-CO₂浴上在搅拌下冷却到-30℃，添加三乙胺(0.09ml，0.64mmol)，然后是丙烯酰氯(0.035ml，0.43mmol)。在-30℃下1min后，用NH₄OH(0.05mL)淬灭反应混合物，真空蒸发并在高真空下干燥。残余物溶于DCM(5mL)中，通过棉塞过滤，并通过硅胶色谱法，Redisep 40g，用5至10％MeOH/DCM+0.25％NH₄OH洗脱进行纯化，产生无色固体(19.6mg，16％)。ES+APCI MS m/z557.3，[M+H]⁺.

实施例257

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

步骤A：2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7- (萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯：在锥形底小瓶中，将4-(2-氯-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-2-(氰基甲基)哌嗪-1-羧酸苄酯(200mg，0.362mmol)在二噁烷(3616μl，0.362mmol)中的溶液用氩气喷射5分钟。在氩气下依次添加(S)-(1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲醇(168mg，1.08mmol)、Cs2CO3(353mg，1.08mmol)、Rhuphos Pd G3(30.2mg，0.0362mmol)并再喷射5分钟。将反应混合物加盖并在100℃下加热1小时。LC/MS显示反应完成。添加EtOAc并用盐水(2x)洗涤。合并的有机物经Na2SO4干燥并真空浓缩。浓缩物通过快速色谱法用0-20％DCM/MeOH+2％NH4OH洗脱进行纯化。将含有洁净目标产物的所有级分合并并浓缩，产生2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(90mg，0.134mmol，37.0％收率)。ES+APCI MS m/z 672.4[M+H]⁺。

步骤B：2-(4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5, 6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：将2-(氰基甲基)-4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-羧酸苄酯(90mg，0.13mmol)在EtOH(1340μl，0.13mmol)和THF(1340μl，0.13mmol)中的溶液用N2吹扫5min。向该溶液添加钯(36mg，0.033mmol)(Degussa型，10wt％，50％H2O)，然后立即加盖并用N2再吹扫分钟。然后将溶液在通过真空继以通过气囊压力引入的H2下搅拌。然后将混合物在环境温度下搅拌1小时。LC/MS显示目标产物。将混合物用MeOH稀释并通过填塞的硅藻土过滤。然后将滤液真空浓缩，提供2-(4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(71mg，0.13mmol，99％收率)。ES+APCI MS m/z 538.3[M+H]⁺。

步骤C：2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘- 1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈：在环境温度下向2-(4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(71mg，0.132mmol)在二氯甲烷(1320μl，0.132mmol)中的悬液添加丙烯酰氯(10.7μl，0.132mmol)，然后是Hunig碱(46.1μl，0.264mmol)。然后将反应在环境温度下搅拌1小时。LC/MS显示反应完成。将反应混合物真空浓缩。浓缩物重悬浮于ACN：H2O的60:40混合物中并在Gilson(制备型HPLC)上用含5-->95％ACN/0.1％TFA的水/0.1％TFA洗脱进行纯化。合并含有产物的级分，用饱和碳酸氢钠游离碱化并用DCM提取有机物。将有机物经MgSO4干燥并真空浓缩，产生2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈(15.7mg，0.0265mmol，20.1％收率)。ES+APCI MS m/z 592.4[M+H]⁺。

实施例258

2-[4-[7-(1-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴异喹啉取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 553.3[M+H]⁺。

实施例259

2-[4-[7-(6-氟-1-萘基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

步骤A：(6-氟-1-萘基)三氟甲磺酸酯：在0℃下向6-氟萘-1-酚(0.10g，617umol)和DIEA(159mg，1.23mmol，215uL)在二氯甲烷(3mL)中的溶液添加三氟甲磺酰三氟甲磺酸酯(191mg，678umol，112uL)。在0℃下搅拌1小时后，将混合物用水(5mL)稀释并用二氯甲烷(3×5mL)提取。将有机层用盐水(1×5mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过柱色谱法(SiO₂，石油醚/乙酸乙酯＝3/1)进行纯化，产生(6-氟-1-萘基)三氟甲磺酸酯(0.17g，543umol，88.1％收率)，为无色油。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δ＝8.10(dd，J＝5.2，8.8Hz，1H)，7.83(d，J＝8.4Hz，1H)，7.58-7.50(m，2H)，7.48-7.40(m，2H)。

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1(6-氟-1-萘基)三氟甲磺酸酯取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 570.3[M+H]⁺.

实施例260

2-[4-[7-(4-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用4-溴异喹啉取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 553.1[M+H]⁺。

实施例261

2-[1-(2-甲基丙-2-烯酰)-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴萘取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用2-甲基丙-2-烯酰氯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 566.4[M+H]⁺。

实施例262

2-[4-[7-(5-异喹啉基)-2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用5-溴异喹啉取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 553.4[M+H]⁺。

实施例263

2-[1-[(E)-丁-2-烯酰]-4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(1-萘基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]哌嗪-2-基]乙腈

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴萘取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用(E)-丁-2-烯酰氯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 566.4[M+H]⁺.

实施例264

2-[4-[2-[[(2S)-1-甲基吡咯烷-2-基]甲氧基]-7-(5-喹啉基)-6,8-二氢-5H-吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基]-1-丙-2-烯酰-哌嗪-2-基]乙腈

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用5-溴喹啉取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。ESI MS m/z 553.4[M+H]⁺。

实施例265

2-(1-丙烯酰-4-(7-(3-甲基-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用1-溴-3-甲基-2-(三氟甲基)苯取代1-溴萘。ES+APCI MS m/z 584.3[M+H]⁺。

实施例266

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例147的步骤F-J合成，在步骤F中使用(S)-(1-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-2-基)甲醇代替(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇。ES+APCI MS m/z596.3[M+H]⁺。

实施例267

2-((S)-1-丙烯酰-4-(2-(((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例234合成，在步骤F中使用(R)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇代替(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇。ES+APCI MS m/z 552.3[M+H]⁺。

实施例268

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((2S,4R)-4-甲氧基-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例220的(步骤C-G)合成，在步骤C中使用(2S,4R)-2-(羟甲基)-4-甲氧基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯代替(2S,4R)-1-(叔丁氧羰基)-4-氟-2-羟甲基吡咯烷。ES+APCI MS m/z 582.3[M+H]⁺。

实施例269

2-(1-丙烯酰-4-(2-(2-(二甲基氨基)-2-甲基丙氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按照实施例147合成，在步骤F中用2-二甲基氨基-2-甲基-1-丙醇取代(S)-(1-(环丙基甲基)吡咯烷-2-基)甲醇。ES+APCI MS m/z 554.4[M+H]⁺。

实施例270

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((R)-4-甲基吗啉-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例147的步骤F-J合成，在步骤F中使用(R)-N-Boc-2-羟甲基吗啉代替(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇。ES+APCI MS m/z 568.3[M+H]⁺。

实施例271

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-4-甲基吗啉-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例147的步骤F-J合成，在步骤F中使用(S)-N-Boc-2-羟甲基吗啉代替(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇。ES+APCI MS m/z 568.3[M+H]⁺。

实施例272

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-4-甲基吗啉-3-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例147的步骤F-J合成，在步骤F中使用(R)-3-(羟甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯代替(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇。ES+APCI MS m/z 568.3[M+H]⁺。

实施例273

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((R)-4-甲基吗啉-3-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例147的步骤F-J合成，在步骤F中使用(S)-3-(羟甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯代替(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇。ES+APCI MS m/z 568.3[M+H]⁺。

实施例274

2-((S)-1-丙烯酰-4-(7-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例234的步骤G-J合成，在步骤F中使用(R)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇代替(S)-(1-甲基吡咯烷-2-基)甲醇并在步骤H中使用1-溴-3-氟-2-(三氟甲基)苯代替1-溴萘。ES+APCI MS m/z 588.3[M+H]⁺。

实施例275

2-(1-丙烯酰-4-(7-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例210的步骤E-G合成，在步骤E中用2-溴-1-氟-3-(三氟甲基)苯取代1-溴萘。ES+APCI MS m/z 588.3[M+H]⁺。

实施例276

2-(1-丙烯酰-4-(7-(4-氟-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例210的步骤E-G合成，在步骤E中用1-溴-4-氟-2-(三氟甲基)苯取代1-溴萘。ES+APCI MS m/z 588.3[M+H]⁺。

实施例277

2-(1-丙烯酰-4-(7-(3-氯-2-(三氟甲基)苯基)-2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物根据实施例210的步骤E-G合成，在步骤E中用1-溴-3-氯-2-(三氟甲基)苯取代1-溴萘并在步骤F中用THF代替EtOH/THF。ES+APCI MS m/z 604.3[M+H]⁺。

实施例278

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(喹啉-4-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按实施例210的步骤E-G制备，在步骤E中用4-溴喹啉取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。

实施例279

2-(1-丙烯酰-4-(2-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按实施例210制备，在步骤C中用N,N-二甲基-乙醇胺取代(2S)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲醇并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。

实施例280

2-(4-(2-(3-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)-1-丙烯酰哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按实施例210制备，在步骤C中用3-((1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基)丙-1-醇取代(2S)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲醇并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。

实施例281

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((R)-1-甲基吡咯烷-3-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按实施例210制备，在步骤C中用(R)-(1-甲基吡咯烷-3-基)甲醇取代(2S)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲醇并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。

实施例282

2-(1-(3-甲基丁-2-烯酰)-4-(2-(((S)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(萘-1-基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按实施例210制备，在步骤E中用1-溴萘取代1-溴-2-(三氟甲基)苯并还在步骤G中用3-甲基丁-2-烯酰氯取代丙烯酰氯。

实施例283

2-(1-丙烯酰-4-(2-(((R)-1-甲基吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

标题化合物按实施例210制备，在步骤C中用(2R)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲醇取代(2S)-1-乙基-2-吡咯烷基]甲醇并还在步骤G中用丙-2-烯酰丙-2-烯酸酯取代丙烯酰氯。

实施例284

2-(1-丙烯酰-4-(2-(2-(二乙氨基)乙氧基)-7-(2-(三氟甲基)苯基)-5,6,7,8-四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-4-基)哌嗪-2-基)乙腈

实施例A

KRas G12C修饰的测定

本实施例利用LCMS测定以检测本发明的示例性化合物和KRAS G12C的共价加合物，来说明所述示例性化合物与KRas G12C共价结合。

在K-Ras测定缓冲液(25mM HEPES，150mM NaCl，5mM MgCl₂，和10mM辛基β-吡喃葡萄糖苷，pH 7.5)中，GDP-负载的K-Ras(1-169)G12C、C51S、C80L、C118S以及GTP-负载的K-Ras(1-169)G12C、C51S、C80L、C118S、Q61H的蛋白质浓度调节到2μM。然后将各蛋白质溶液的10μL等份转移到384孔微量滴定板中。在DMSO中以其目标最终测定浓度的50倍产生初始化合物储液。

将示例性的式(I)化合物在K-Ras测定缓冲液中稀释25倍至最终为其终浓度的两倍。然后将各稀释化合物溶液的10μL等份添加到微量滴定板中的各蛋白质溶液中以引发反应。典型的最终化合物浓度为3.0、5.0和25.0μM。在各时间点，用20μL的25mM乙酸溶液淬灭反应。通常的测定终点为15、180和1440分钟。一旦所有反应都被淬灭，就将板热密封并将样品注入LC/MS系统中进行数据采集。

数据采集在Agilent 6520 Q-TOF精确质谱仪上进行。将样品以其液相注射到C-3反相柱上以除去测定缓冲液并制备用于质谱仪的样品。用乙腈梯度从柱上洗脱蛋白质并直接进给到质量分析仪中。数据采集后立即在Agilent MassHunter软件中进行初始原始数据分析。

完整蛋白质的原始数据分析只是使用Mass Hunter中提供的最大熵去卷积对溶液中各蛋白质的多个电荷状态进行去卷积。为了将复杂度最小化，仅考虑在有限质量范围内的数据进行分析，用最少一个道尔顿质量步长间隔。输出在原始数据分析期间识别的所有质量的高度，以在

数据分析软件中进一步分析。

最终数据分析是在

数据分析软件包中的多步过程。简而言之，将各蛋白质的质量计算为该样品的总信号的百分比，然后将该百分比标准化为不存在反应性化合物时该蛋白质信号的百分比。这些归一化信号报告为对照的归一化百分比(POC)。增加的POC值指示在给定条件下与相同条件的其它化合物相比展示更高修饰程度的化合物。示例性式(I)化合物在5μM浓度下测试3小时的结果显示在表1中。关键符号：“A”≤25％POC；“B”>25％POC-≤50％POC；“C”>50％POC和ND＝未确定。

表1

示例性的式(I)化合物对KRas G12C活性的抑制

实施例B

KRas G12C依赖性细胞生长的抑制

本实施例说明了本发明的示例性化合物抑制表达KRas G12C的肿瘤细胞系的生长。

通过测量KRas活性的下游标志——磷酸化ERK(“Phospho-ERK”)的量来确定本发明的示例性化合物对KRAs G12C的细胞抑制。

NCI-H358细胞(ATCC CRL-5807)表达KRas G12C并在补充有10％胎牛血清、青霉素/链霉素和10mM HEPES的RPMI培养基中培养。将细胞以50,000个细胞/孔的浓度铺在聚-D-赖氨酸涂层的96孔板中，并使其贴壁8-12小时。然后添加稀释的化合物，终浓度为0.5％DMSO。3小时后，除去培养基，添加150μL4％甲醛，并将板温育20分钟。将板用PBS洗涤，用150μL冰冷的100％甲醇进行10分钟透性化。非特异性抗体与板的结合在室温下用100μL的Licor封闭缓冲液(Li-Cor Biotechnology，Lincoln NE)封闭1小时。将阳性对照样品和缺乏细胞的样品作为标准与测试样品平行处理。

使用对磷酸化形式的ERK特异的抗体确定Phospho-ERK的量，并与GAPDH的量进行比较。用于检测的一抗如下添加：在Licor封闭液+0.05％Tween 20中1:500稀释的Phospho-ERK(Cell Signaling cs9101)和1:5000稀释的GAPDH(Millipore MAB374)。将板在室温下温育2小时。用PBS+0.05％Tween20洗涤板。

用于显现一抗的二抗如下添加：在Licor Block+0.05％Tween 20中1:1000稀释的抗兔-680和1:1000稀释的抗小鼠-800，并在室温下温育1小时。将板用PBS+0.05％Tween 20洗涤。向每个孔添加100μL等份的PBS，并在LICOR AERIUS读板器上读板。

将pERK(Thr202/Tyr204)信号用GAPDH信号归一化，并计算DMSO对照值的百分比。利用剂量反应曲线的4参数拟合产生IC₅₀值。示例性的式(I)化合物的结果显示在表2中。关键符号：“A”≥0.001-≤1μM；“B”>1μM和ND＝未确定。

表2

示例性化合物对KRas G12C介导的细胞增殖的抑制

虽然本发明已经结合其具体实施方式进行了描述，但是应该理解，它能够进一步修改，并且本申请意欲覆盖如下所述的任何本发明的变化、用途或改编：其总体上遵循本发明原理并包括在本发明所属领域内已知或惯常的实践范围内以及可应用于上文阐述的基本特征的这类对本公开内容的偏离，本发明在如下所附权利要求的范围内。

Claims

1.一种化合物，其选自由下列组成的组：

及其药学上可接受的盐。

2.一种药物组合物，其包含治疗有效量的根据权利要求1所述的化合物、和药学上可接受的赋形剂。

3.根据权利要求1所述的化合物在制备用于抑制细胞中KRas G12C活性的药物中的用途，包括使希望抑制KRas G12C活性的细胞与有效量的根据权利要求1所述的化合物或含有根据权利要求1所述的化合物的药物组合物接触。

4.根据权利要求1所述的化合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途，包括给患有癌症的患者单独地或与药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂组合地施用治疗有效量的根据权利要求1所述的化合物。

5.根据权利要求4所述的用途，其中所述癌症选自由下列组成的组：肉瘤，粘液瘤，横纹肌瘤，纤维瘤，脂肪瘤，畸胎瘤，肺癌，淋巴瘤，软骨瘤错构瘤，间皮瘤，食道癌，胃癌，胰腺癌，小肠癌，大肠癌，肾癌，膀胱和尿道癌，前列腺癌，睾丸癌，肝癌，胆道癌，骨癌，颅骨癌，脑膜癌，脑癌，脊髓神经纤维瘤，子宫癌，阴道癌，血癌，霍奇金氏病，非霍奇金氏淋巴瘤，和皮肤癌。

6.根据权利要求5所述的用途，其中所述血癌是白血病。

7.根据权利要求4所述的用途，其中所述癌症是KRas G12C相关癌症。

8.根据权利要求4所述的用途，其中所述癌症是非小细胞肺癌。

9.根据权利要求1所述的化合物或根据权利要求2所述的药物组合物在制备用于治疗癌症的药物中的用途，包括：(a)确定所述癌症与KRas G12C突变相关；和(b)给患者施用治疗有效量的根据权利要求1所述的化合物或根据权利要求2所述的药物组合物。