CN104448013A - 一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，所述工艺中使用原材料包括铁皮石斛，纤维素酶(生化试剂)，葡萄糖，苯酚，丙酮，石油醚，无水乙醇，本发明利用纤维素酶法联合提取铁皮石斛中多糖与石斛碱，在获得石斛多糖的同时获得石斛碱，且保持了酶法单一提取多糖的高效率，提供了可有效破除细胞壁的影响，促进多糖等的溶出，过程条件温和，在一定程度上提高了提取率，具有较高的经济效益。

Description

一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺

技术领域

本发明涉及石斛加工领域，更具体的说是一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺。

背景技术

现代药理研究证明，石斛属植物具有抗肿瘤、增强机体免疫力、抗血小板聚集、治疗白内障等作用，其中石斛多糖具有提高免疫力、抗肿瘤作用；可改善造血、凝血功能；对治疗中枢神经系统、肝脏、肾脏、胃肠道病变有效；对烫伤、病毒、细菌感染也有显著疗效；石斛生物碱可用于预防和治疗关节炎，保护消化道粘膜急性或慢性损伤，特别用于防治急性的慢性消化道溃疡。石斛多糖的提取多采用传统的水提醇沉方法：先用石油醚除脂，乙醇除醇溶性糖，再加水热提，浓缩提取液后加醇沉淀出多糖。该方法采用的提取温度比较高，时间较长，成本高，提取率较低。

发明内容

本发明提供一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，为实现本发明的目的，本发明的技术方案如下：

一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，所述工艺中使用原材料包括铁皮石斛，纤维素酶(生化试剂)，葡萄糖，苯酚，丙酮，石油醚，无水乙醇。

优选的，其具体步骤包括：

(1)干燥、粉碎、酶解及过滤。干燥的铁皮石斛经粉碎后过80目筛，用石油醚脱脂，脱脂后的铁皮石斛加入温水，缓缓加入己活化 的纤维素酶液，并轻轻搅拌，恒温酶解一定时间后立即升温至90℃灭酶，迅速冷却过滤#滤渣加入90％乙醇浸提0.5h，过滤，滤渣再加入一半量90％乙醇浸提0.5h，过滤；

(2)重复过滤。合并二次过滤滤液，回收乙醇，剩余液中加入氯仿，萃取石斛碱，回收氯仿得总石斛碱，经90％乙醇提取后的残渣加入水，在一定温度下浸提一定时间，过滤，再加入一半量水重复浸提一次，过滤；

(3)提取、纯化、合并二次滤液，浓缩，加入无水乙醇，使体系乙醇浓度达到80％(体积比)，在冷库中静置过夜，过滤，滤渣经真空干燥得石斛多糖，石斛碱浸膏和石斛多糖分别用相应溶剂溶解，定容，石斛碱浸膏经硅胶柱层析进一步纯化，粗石斛多糖经DEAE纤维素柱或葡聚糖凝胶柱进一步纯化。

优选的，所述铁皮石斛多糖含量的测定采用苯酚蒽酮-硫酸法。

有益效果：本发明利用纤维素酶提取铁皮石斛中多糖与石斛碱，在获得石斛多糖的同时获得石斛碱，且保持了酶法单一提取多糖的高效率，提供了可有效破除细胞壁的影响，促进多糖等的溶出，过程条件温和，在一定程度上提高了提取率，具有较高的经济效益。

具体实施方式

为使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。

一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，所述工艺中使用原材料包括铁皮石斛，纤维素酶(生化试剂)，葡萄糖，苯酚，丙酮，石油醚，无水乙 醇，其具体步骤包括：(1)干燥、粉碎、酶解及过滤。干燥的铁皮石斛经粉碎后过80目筛，用石油醚脱脂，脱脂后的铁皮石斛加入温水，缓缓加入己活化的纤维素酶液，并轻轻搅拌，恒温酶解一定时间后立即升温至90℃灭酶，迅速冷却过滤#滤渣加入90％乙醇浸提0.5h，过滤，滤渣再加入一半量90％乙醇浸提0.5h，过滤；(2)重复过滤。合并二次过滤滤液，回收乙醇，剩余液中加入氯仿，萃取石斛碱，回收氯仿得总石斛碱，经90％乙醇提取后的残渣加入水，在一定温度下浸提一定时间，过滤，再加入一半量水重复浸提一次，过滤；(3)提取、纯化、合并二次滤液，浓缩，加入无水乙醇，使体系乙醇浓度达到80％(体积比)，在冷库中静置过夜，过滤，滤渣经真空干燥得石斛多糖，石斛碱浸膏和石斛多糖分别用相应溶剂溶解，定容，石斛碱浸膏经硅胶柱层析进一步纯化，粗石斛多糖经DEAE纤维素柱或葡聚糖凝胶柱进一步纯化，所述铁皮石斛多糖含量的测定采用苯酚蒽酮-硫酸法。

本发明工艺所述纤维素酶法提取石斛多糖与石斛碱的最佳工艺条件是:纤维素酶用量0.55％，酶解时间1.6h，酶解温度48℃，酶解PH值5.3。在此条件下，石斛多糖收率达到20％以上，石斛碱收率达到0.4％以上。

以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。

Claims (3)

1.一种铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，其特征在于，所述工艺中使用原材料包括铁皮石斛，纤维素酶(生化试剂)，葡萄糖，苯酚，丙酮，石油醚，无水乙醇。

2.根据权利要求1所述的铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，其特征在于，其具体步骤包括：

(1)干燥、粉碎、酶解及过滤,干燥的铁皮石斛经粉碎后过80目筛，用石油醚脱脂，脱脂后的铁皮石斛加入温水，缓缓加入己活化的纤维素酶液，并轻轻搅拌，恒温酶解一定时间后立即升温至90℃灭酶，迅速冷却过滤#滤渣加入90％乙醇浸提0.5h，过滤，滤渣再加入一半量90％乙醇浸提0.5h，过滤；

(2)重复过滤,合并二次过滤滤液，回收乙醇，剩余液中加入氯仿，萃取石斛碱，回收氯仿得总石斛碱，经90％乙醇提取后的残渣加入水，在一定温度下浸提一定时间，过滤，再加入一半量水重复浸提一次，过滤；

(3)提取、纯化、合并二次滤液，浓缩，加入无水乙醇，使体系乙醇浓度达到80％(体积比)，在冷库中静置过夜，过滤，滤渣经真空干燥得石斛多糖，石斛碱浸膏和石斛多糖分别用相应溶剂溶解，定容，石斛碱浸膏经硅胶柱层析进一步纯化，粗石斛多糖经DEAE纤维素柱或葡聚糖凝胶柱进一步纯化。

3.根据权利要求1所述的铁皮石斛中石斛多糖与石斛碱的提取工艺，其特征在于，所述铁皮石斛多糖含量的测定采用苯酚蒽酮-硫酸法。