CN110240661A - 一种铁皮石斛的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种铁皮石斛的提取方法，涉及化妆品植物提取技术领域，解决了因铁皮石斛在提取过程中多糖的提取率较低，而导致其整体应用效果不佳的问题。一种铁皮石斛的提取方法，其包括以下步骤：步骤一，粗提取；步骤二，药渣处理；步骤三，纯化处理；步骤四，二次提取；步骤五，干燥研磨。本发明中铁皮石斛的提取方法，先用80%乙醇溶液通过水浴的方式脱除醇溶性糖，再对药渣进行重复煎煮，然后经水浴提取纯化后，再进行二次提取，能够大大提高多糖的提取率，进而使得到的产物具有良好的应用效果，并使该铁皮石斛的提取方法具有良好的应用性。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品植物提取技术领域，更具体地说，它涉及一种铁皮石斛的提取方法。
背景技术
铁皮石斛别称铁皮兰、吊兰、云南铁皮、铁皮吊兰，是兰科石斛属多年生草本植物，铁皮石斛是石斛类药材的上品，素有“中华仙草-药中黄金”之美称，以茎入药，含有多糖、石斛碱、生物碱等有效成分，具有滋阴清热、生津益胃、润喉明目等功效，在抗肿瘤、提高人体免疫力、治疗胃肠道疾病、抗衰老、抗氧化、抗血小板聚集、降低血糖、治疗白内障等方面均有良好疗效。
在公开号为CN109336988A的中国发明专利申请文件中公开了一种铁皮石斛的提取方法，其具体包括以下步骤：(1)取新鲜铁皮石斛，在-20℃～-50℃下冷冻处理8-12h，粉碎；(2)采用粉碎物料与水按照重量比为1:10-30，在60-90℃下提取三次，每次提取1-3h，将三次提取溶液混合，获得提取液；(3)将提取液升温至60-90℃，再降温至≤45℃，重复操作三次，再采用无菌0.22μm的微孔滤膜过滤，将过滤液蒸发浓缩，获得浓缩液。
上述申请文件中，对新鲜铁皮石斛先进行冷冻处理再粉碎，能够极大程度避免机械力对铁皮石斛细胞壁造成机械损伤，且在粉碎过程中，能够根据冷冻细胞壁破裂痕迹实现粉碎碎裂，降低了粉碎难度，而且不会影响铁皮石斛有效成分中活性成分的含量。研究表明铁皮石斛多糖含量较高，多糖的抗氧化作用明显，在化妆品中具有良好的潜在开发价值，但上述提取方法仅通过水浴对铁皮石斛进行提取，会导致多糖的提取率低，进而导致该提取方法整体应用效果不佳，因此，需要提出一种新的方案来解决上述问题。
发明内容
针对现有技术中因铁皮石斛在提取过程中多糖的提取率较低，而导致其整体应用效果不佳的问题，本发明的目的一在于提供一种铁皮石斛的提取方法，通过在80％乙醇溶液中通过水浴的方式脱除醇溶性糖，再对药渣进行重复煎煮，然后经水浴提取纯化后，并进行二次提取，以解决上述技术问题，其整体具有较高的多糖提取率，进而具有良好的应用效果。
为实现上述目的一，本发明提供了如下技术方案：
一种铁皮石斛的提取方法，包括以下步骤：
步骤一，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过10-20目筛，加入4-6倍量的80％乙醇溶液，水浴回流至沸腾，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液；
步骤二，药渣处理，对步骤一中的药渣用水进行煎煮，趁热过滤，且药渣重复煎煮2-3次，合并滤液，并将得到的滤液与粗提取液混合，得到混合提取液；
步骤三，纯化处理，将步骤二得到的混合提取液置于水浴锅中，加热回流提取，并进行减压浓缩，得到纯化物；
步骤四，二次提取，在步骤三得到的纯化物中加入3-6倍量的95％乙醇溶液，静置一段时间后，收集沉淀物，并依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥去有机溶剂，得到粗产物；
步骤五，干燥研磨，将步骤四中得到的粗产物进行真空干燥，研磨后，再次进行真空干燥，即可得到产物。
通过采用上述技术方案，将铁皮石斛原料进行粉碎，并过10-20目的筛，能够得到粒度较为均匀的铁皮石斛颗粒，然后用80％乙醇溶液对铁皮石斛原料进行水浴处理，使铁皮石斛原料中的醇溶性糖析出，抽真空过滤后得到药渣和粗提取液。对药渣进行反复煎煮，使药渣中的多糖被完全析出，并将得到的滤液与粗提取液混合，得到混合提取液。再对混合提取液进行纯化处理，经水浴回流提取后，减压浓缩得到的纯化物，能够去除混合提取液中的杂质，提高纯化物中多糖成分的纯度。然后对纯化物用95％乙醇溶液浸没，静置后得到沉淀后，而对沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，并挥去有机溶剂，能够减少多糖成分的损失，有利于提高该提取方法整体的多糖提取率。最后粗产物进行真空干燥，研磨后，再次进行真空干燥，能够得到较为干燥和纯净的产物。
进一步优选为，所述步骤一具体设置为，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过10-20目筛，加入3-5倍量的石油醚，水浴回流至沸腾，抽真空过滤后，再加入4-6倍量的80％乙醇溶液，水浴回流至沸腾，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液。
通过采用上述技术方案，用石油醚对粉碎过筛后的铁皮石斛原料进行水浴回流处理，能够脱除铁皮石斛原料中的脂质物，再用80％乙醇溶液脱除醇溶性糖，能够脱除的较为彻底，且在后续的提取过程中能够提高多糖的产率，并使得到的产品具有较高的纯度，有利于提高该铁皮石斛提取方法整体的应用性。
进一步优选为，所述步骤三中，步骤二得到的混合提取液进行预处理，且具体包括如下步骤：将混合提取液置于一容器中，在不断进行搅拌的过程中逐滴加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液，直至观察混合提取液的浑浊度不再提高，进行过滤除杂，得到预处理后的混合提取液。
通过采用上述技术方案，亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液能够使混合提取液中的蛋白质产生沉淀，混合提取液产生浑浊，且在滴加过程中，直至观察混合提取液的浑浊度不再提高，则说明蛋白质已完全沉淀，而将蛋白质去除，不仅有利于提高多糖的提取率，还能提高产品的整体品质，进而能够大大提高铁皮石斛提取方法整体的应用效果。
进一步优选为，所述步骤三具体设置为，纯化处理，将步骤二得到的混合提取液置于水浴锅中，加热回流提取，然后加入活性炭，煮沸一端时间后，将活性炭过滤去除，然后进行减压浓缩，得到纯化物。
通过采用上述技术方案，在混合提取液回流提取后，加入活性炭，并煮沸一端时间，能够起到良好的脱色效果，排除了色素对后期二次提取过程中的干扰，能够提高多糖的提取率，且能得到较为纯净的产品。同时，活性炭的吸附净化能力，能够去除在提取过程中产生有害物质，进而能够提高该提取方法整体的应用效果。
进一步优选为，所述步骤一中，水浴回流的温度为75-85℃，回流时间为60-80min。
通过采用上述技术方案，水浴回流的温度为75-85℃，回流时间为60-80min，能够使80％乙醇溶液将铁皮石斛原料中的醇溶性糖完全析出，且能得到较为完整的药渣，便于后续对药渣进行煎煮提取。
进一步优选为，所述步骤二中，药渣每次进行煎煮的时间为15-20min。
通过采用上述技术方案，药渣每次煎煮15-20min，保证在重复煎煮的过程中能够使多糖物质完全析出，且在析出的过程中能保证多糖物质具有较高的品质。
进一步优选为，所述步骤三中，水浴回流的温度为45-55℃，回流时间为50-70min。
进一步优选为，所述步骤四中，纯化物中95％乙醇溶液后需静置20-24h。
进一步优选为，所述步骤五中，粗产物进行真空干燥的温度为55-65℃，且每次干燥时间为3-5h。
通过采用上述技术方案，采用上述参数控制，能够使混合提取液在纯化处理过程中得到品质较高的纯化物，且使纯化物在二次提取过程中能够析出得到更多的粗产物，并经干燥研磨后，能够得到品质较高的产物，同时，有利于保证该提取方法整体的多糖提取率。
综上所述，与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
(1)通过在80％乙醇溶液中通过水浴的方式脱除醇溶性糖，再对药渣进行重复煎煮，然后经水浴提取纯化后，并进行二次提取，能够减少多糖成分的损失，有利于提高该提取方法整体的多糖提取率，且使该提取方法整体具有良好的应用效果；
(2)用石油醚对粉碎过筛后的铁皮石斛原料进行水浴回流处理，能够脱除铁皮石斛原料中的脂质物；用亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液去除混合提取液中的蛋白质；在在混合提取液回流提取后，加入活性炭进行脱色处理；其均能够提高多糖的产率，并使得到的产品具有较高的纯度，有利于提高该铁皮石斛提取方法整体的应用性；
(3)选用上述参数控制，不仅能够得到品质较高的产物，还有利于保证该提取方法整体的多糖提取率，进而使铁皮石斛的提取方法整体具有良好的应用效果。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例，对本发明进行详细描述。
实施例1：一种铁皮石斛的提取方法，其具体包括如下步骤：
步骤一，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过10目筛，加入4倍量的80％乙醇溶液，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为75℃，回流时间为80min，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液；
步骤二，药渣处理，对步骤一中的药渣用水进行煎煮，煎煮的时间为15min，趁热过滤，且药渣重复煎煮3次，合并滤液，并将得到的滤液与粗提取液混合，得到混合提取液；
步骤三，纯化处理，将步骤二得到的混合提取液置于水浴锅中，加热回流提取，水浴回流的温度为45℃，回流时间为70min，并进行减压浓缩至原体积的40％，得到纯化物；
步骤四，二次提取，在步骤三得到的纯化物中加入3倍量的95％乙醇溶液，静置20h后，收集沉淀物，并依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥去有机溶剂，得到粗产物；
步骤五，干燥研磨，将步骤四中得到的粗产物进行真空干燥，研磨后，再次进行真空干燥，而真空干燥的温度为55℃，且每次干燥时间为5h，即可得到产物。
实施例2：一种铁皮石斛的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤一，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过20目筛，加入6倍量的80％乙醇溶液，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为85℃，回流时间为60min，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液；
步骤二，药渣处理，对步骤一中的药渣用水进行煎煮，煎煮的时间为20min，趁热过滤，且药渣重复煎煮2次，合并滤液，并将得到的滤液与粗提取液混合，得到混合提取液；
步骤三，纯化处理，将步骤二得到的混合提取液置于水浴锅中，加热回流提取，水浴回流的温度为55℃，回流时间为50min，并进行减压浓缩至原体积的60％，得到纯化物；
步骤四，二次提取，在步骤三得到的纯化物中加入6倍量的95％乙醇溶液，静置24h后，收集沉淀物，并依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥去有机溶剂，得到粗产物；
步骤五，干燥研磨，将步骤四中得到的粗产物进行真空干燥，研磨后，再次进行真空干燥，而真空干燥的温度为65℃，且每次干燥时间为3h，即可得到产物。
实施例3：一种铁皮石斛的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤一，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过15目筛，加入5倍量的80％乙醇溶液，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为80℃，回流时间为70min，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液；
步骤二，药渣处理，对步骤一中的药渣用水进行煎煮，煎煮的时间为17.5min，趁热过滤，且药渣重复煎煮3次，合并滤液，并将得到的滤液与粗提取液混合，得到混合提取液；
步骤三，纯化处理，将步骤二得到的混合提取液置于水浴锅中，加热回流提取，水浴回流的温度为50℃，回流时间为60min，并进行减压浓缩至原体积的50％，得到纯化物；
步骤四，二次提取，在步骤三得到的纯化物中加入4.5倍量的95％乙醇溶液，静置22h后，收集沉淀物，并依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥去有机溶剂，得到粗产物；
步骤五，干燥研磨，将步骤四中得到的粗产物进行真空干燥，研磨后，再次进行真空干燥，而真空干燥的温度为60℃，且每次干燥时间为4h，即可得到产物。
实施例4：一种铁皮石斛的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤一具体设置为，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过10目筛，加入3倍量的石油醚，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为45℃，回流时间为50min，抽真空过滤后，再加入4倍量的80％乙醇溶液，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为75℃，回流时间为80min，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液。
实施例5：一种铁皮石斛的提取方法，与实施例4的不同之处在于，步骤一具体设置为，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过10目筛，加入4倍量的石油醚，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为50℃，回流时间为45min，抽真空过滤后，再加入4倍量的80％乙醇溶液，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为75℃，回流时间为80min，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液。
实施例6：一种铁皮石斛的提取方法，与实施例4的不同之处在于，步骤一具体设置为，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过10目筛，加入5倍量的石油醚，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为55℃，回流时间为40min，抽真空过滤后，再加入4倍量的80％乙醇溶液，水浴回流至沸腾，水浴回流的温度为75℃，回流时间为80min，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液。
实施例7：一种铁皮石斛的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤三中，对步骤二得到的混合提取液进行预处理，且具体包括如下步骤：将混合提取液置于一容器中，在不断进行搅拌的过程中逐滴加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液，直至观察混合提取液的浑浊度不再提高，进行过滤除杂，得到预处理后的混合提取液。
实施例8：一种铁皮石斛的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤三具体设置为，纯化处理，将步骤二得到的混合提取液置于水浴锅中，加热回流提取，水浴回流的温度为45℃，回流时间为70min，然后加入活性炭，煮沸20min后，将活性炭过滤去除，然后进行减压浓缩至原体积的40％，得到纯化物。
对比例1：一种铁皮石斛的提取方法，选用公开号为CN109336988A的发明申请文件中实施例1所公开的铁皮石斛的提取方法。
对比例2：一种铁皮石斛的提取方法，选用公开号为CN108079198A的发明申请文件中实施例1所公开的铁皮石斛的提取方法。
对比例3：一种铁皮石斛的提取方法，选用公开号为CN104844723A的发明申请文件中实施例1所公开的铁皮石斛提取物的制备方法。
效果测试试验样品：取3300g铁皮石斛原料，购自云南金九地生物科技有限公司，并将其平均分成11份，每份300g。
试验方法：使用实施例1-8和对比例1-3中铁皮石斛的提取方法，分别对11份铁皮石斛原料进行提取制备，对提取的产物进行多糖含量的检测，而检测方法依据《中华人民共和国药典》2015版一部铁皮石斛项下多糖的检测，检测产物中多糖的含量，并测算每种提取方法的提取率试验结果：实施例1-8和对比例1-3的测试结果如表1所示。由表1可知，由实施例1-3和对比例1-3的测试结果对比可得，通过在80％乙醇溶液中通过水浴的方式脱除醇溶性糖，再对药渣进行重复煎煮，然后经水浴提取纯化后，并进行二次提取，能够提高产物中多糖的含量，且整体具有较高的提取率。由实施例1-3和实施例4-6的测试结果对比可得，用石油醚对粉碎过筛后的铁皮石斛原料进行水浴回流处理，能够提高多糖的提取率，并使得到的产品具有较高的纯度。由实施例7、实施例8和实施例1-3的测试结果分别对比可得，对混合提取液进行预处理以及加入活性炭进行脱色处理，均能够提高产物中多糖的含量和多糖的提取率。
表1实施例1-8和对比例1-3的测试结果
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种铁皮石斛的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过10-20目筛，加入4-6倍量的80%乙醇溶液，水浴回流至沸腾，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液；
步骤二，药渣处理，对步骤一中的药渣用水进行煎煮，趁热过滤，且药渣重复煎煮2-3次，合并滤液，并将得到的滤液与粗提取液混合，得到混合提取液；
步骤三，纯化处理，将步骤二得到的混合提取液置于水浴锅中，加热回流提取，并进行减压浓缩，得到纯化物；
步骤四，二次提取，在步骤三得到的纯化物中加入3-6倍量的95%乙醇溶液，静置一段时间后，收集沉淀物，并依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，挥去有机溶剂，得到粗产物；
步骤五，干燥研磨，将步骤四中得到的粗产物进行真空干燥，研磨后，再次进行真空干燥，即可得到产物。
2.根据权利要求1所述的铁皮石斛的提取方法，其特征在于，所述步骤一具体设置为，粗提取，取铁皮石斛原料，将其进行粉碎，过10-20目筛，加入3-5倍量的石油醚，水浴回流至沸腾，抽真空过滤后，再加入4-6倍量的80%乙醇溶液，水浴回流至沸腾，抽真空过滤，得到药渣和粗提取液。
3.根据权利要求1所述的铁皮石斛的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，步骤二得到的混合提取液进行预处理，且具体包括如下步骤：将混合提取液置于一容器中，在不断进行搅拌的过程中逐滴加入亚铁氰化钾溶液和乙酸锌溶液，直至观察混合提取液的浑浊度不再提高，进行过滤除杂，得到预处理后的混合提取液。
4.根据权利要求1所述的铁皮石斛的提取方法，其特征在于，所述步骤三具体设置为，纯化处理，将步骤二得到的混合提取液置于水浴锅中，加热回流提取，然后加入活性炭，煮沸一端时间后，将活性炭过滤去除，然后进行减压浓缩，得到纯化物。
5.根据权利要求1所述的铁皮石斛的提取方法，其特征在于，所述步骤一中，水浴回流的温度为75-85℃，回流时间为60-80min。
6.根据权利要求1所述的铁皮石斛的提取方法，其特征在于，所述步骤二中，药渣每次进行煎煮的时间为15-20min。
7.根据权利要求1所述的铁皮石斛的提取方法，其特征在于，所述步骤三中，水浴回流的温度为45-55℃，回流时间为50-70min。
8.根据权利要求1所述的铁皮石斛的提取方法，其特征在于，所述步骤四中，纯化物中95%乙醇溶液后需静置20-24h。
9.根据权利要求1所述的铁皮石斛的提取方法，其特征在于，所述步骤五中，粗产物进行真空干燥的温度为55-65℃，且每次干燥时间为3-5h。
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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