CN113735990A - 一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，包括以下步骤：S1：原材料处理，对石斛进行预处理；S2：原材料提纯；S3：提纯液处理；S4：提纯液调理；S5：提纯液分离；S6：制得石斛多糖；S7：制得石斛碱，S1步骤中原材料处理，先将细茎石斛杀青，然后以60‑80℃的温度，30‑50min的时间进行烘干，再采用粉碎机对烘干后的细茎石斛进行粉碎，过30‑50目筛得到石斛粉末备用，S2步骤中的原材料处理的具体操作为：加入70‑85℃的石油醚，石斛粉末与石油醚的比例为1g:4‑6ml，回流提取1.25‑2h，本发明通过将石斛粉末制成溶液，然后对溶液进过层层加工，再对Sevag试剂进行改良，分离后的溶液可分别制成石斛多糖和石斛碱，并且提取量较高。
Description
技术领域
本发明涉及石斛技术领域，尤其涉及一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法。
背景技术
石斛，又名仙斛兰韵、不死草、还魂草、紫萦仙株、吊兰、林兰、禁生等；茎直立，肉质状肥厚，稍扁的圆柱形，长10～60厘米，粗达1.3厘米；药用植物，性味甘淡微咸，寒，归胃、肾，肺经；益胃生津，滋阴清热；用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕，病后虚热，目暗不明；石斛花姿优雅，玲珑可爱，花色鲜艳，气味芳香，被喻为“四大观赏洋花”之一；
现有石斛中可提取出石斛多糖和石斛碱，但现有技术中的石斛多糖和石斛碱的提取率不高，效率差，因此，我们提出一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，用于解决上述问题。
发明内容
基于背景技术存在石斛多糖和石斛碱的提取率不高，效率差的技术问题，本发明提出了一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法；
本发明提出的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，包括以下步骤：
S1：原材料处理，对石斛进行预处理；
S2：原材料提纯；
S3：提纯液处理；
S4：提纯液调理；
S5：提纯液分离；
S6：制得石斛多糖；
S7：制得石斛碱。
优选地，S1步骤中原材料处理，先将细茎石斛杀青，然后以60-80℃的温度，30-50min的时间进行烘干，再采用粉碎机对烘干后的细茎石斛进行粉碎，过30-50目筛得到石斛粉末备用。
优选地，S2步骤中的原材料处理的具体操作为：加入70-85℃的石油醚，石斛粉末与石油醚的比例为1g:4-6ml，回流提取1.25-2h，再对石斛粉末以100-125℃的温度进行加热，过滤掉石斛粉末表面的浮沫后挥干溶剂，最后加入95％的乙醇和丙酮，回流提取1-1.25h后过滤，挥干溶剂，石斛粉末与乙醇和丙酮的比例为1g:5ml，制得提纯溶液。
优选地，S3步骤中提纯液处理的具体操作为：在提纯溶液内加水，提纯溶液与水的比例为1:20-60，以85-100℃的温度下水浴0.95-1.5h，残渣反复提取3-5次，再进行过滤，最后将过滤后的滤液合并，再进行减压浓缩至2/1，再以4倍容积的95％乙醇沉淀数次，再溶解、浓缩、透析、冻干，得石斛粗多糖。
优选地，S4步骤中提纯液调理的具体步骤为：最后将双蒸水加入到石斛粗多糖内，双蒸水与石斛粗多糖的比例为100ml:1g，再以4:1的比例加Sevag试剂，震荡2-5min。
优选地，S5步骤中提纯液分离的具体步骤为：对溶液在常温下使用1000Da分子量的超滤膜进行超滤分离，最后得到过滤液与残留液。
优选地，S6步骤中将残留液浓缩后冷冻干燥，制得石斛多糖。
优选地，S7步骤中将过滤液浓缩后冷冻干燥，制得石斛碱。
本发明的有益效果：
1、通过将石斛粉末溶液内加入Sevag试剂，Sevag试剂条件温和，不会引起多糖的变性；
2、通过对石斛粉末溶液进行提纯，处理，调理和分离等操作，可使得石斛提取出来的石斛多糖和石斛碱的量大大增加；
本发明通过将石斛粉末制成溶液，然后对溶液进过层层加工，再对Sevag试剂进行改良，分离后的溶液可分别制成石斛多糖和石斛碱，并且提取量较高。
附图说明
图1为本发明提出的的工作流程图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
参照图1，实施例一
本实施例中提出了一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，包括以下步骤：
S1：原材料处理，对石斛进行预处理，先将细茎石斛杀青，然后以65℃的温度，35min的时间进行烘干，再采用粉碎机对烘干后的细茎石斛进行粉碎，过45目筛得到石斛粉末备用；
S2：原材料提纯，加入75℃的石油醚，石斛粉末与石油醚的比例为1g:5ml，回流提取1.8h，再对石斛粉末以115℃的温度进行加热，过滤掉石斛粉末表面的浮沫后挥干溶剂，最后加入95％的乙醇和丙酮，回流提取1.15h后过滤，挥干溶剂，石斛粉末与乙醇和丙酮的比例为1g:5ml，制得提纯溶液；
S3：提纯液处理，在提纯溶液内加水，提纯溶液与水的比例为1:30，以85℃的温度下水浴1h，残渣反复提取4次，再进行过滤，最后将过滤后的滤液合并，再进行减压浓缩至2/1，再以4倍容积的95％乙醇沉淀数次，再溶解、浓缩、透析、冻干，得石斛粗多糖；
S4：提纯液调理，最后将双蒸水加入到石斛粗多糖内，双蒸水与石斛粗多糖的比例为100ml:1g，再以4:1的比例加Sevag试剂(Sevag试剂的具体配比为1:4:1的异戊醇、氯仿和丁二醇混合制得)，震荡4min；
S5：提纯液分离，对溶液在常温下使用1000Da分子量的超滤膜进行超滤分离，最后得到过滤液与残留液；
S6：将残留液浓缩后冷冻干燥，制得石斛多糖；
S7：将过滤液浓缩后冷冻干燥，制得石斛碱。
参照图1，实施例二
本实施例中提出了一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，包括以下步骤：
S1：原材料处理，对石斛进行预处理，先将细茎石斛杀青，然后以70℃的温度，40min的时间进行烘干，再采用粉碎机对烘干后的细茎石斛进行粉碎，过35目筛得到石斛粉末备用；
S2：原材料提纯，加入75℃的石油醚，石斛粉末与石油醚的比例为1g:4ml，回流提取1.5h，再对石斛粉末以122℃的温度进行加热，过滤掉石斛粉末表面的浮沫后挥干溶剂，最后加入95％的乙醇和丙酮，回流提取1.15h后过滤，挥干溶剂，石斛粉末与乙醇和丙酮的比例为1g:5ml，制得提纯溶液；
S3：提纯液处理，在提纯溶液内加水，提纯溶液与水的比例为1:40，以85-100℃的温度下水浴1.2h，残渣反复提取4次，再进行过滤，最后将过滤后的滤液合并，再进行减压浓缩至2/1，再以4倍容积的95％乙醇沉淀数次，再溶解、浓缩、透析、冻干，得石斛粗多糖；
S4：提纯液调理，最后将双蒸水加入到石斛粗多糖内，双蒸水与石斛粗多糖的比例为100ml:1g，再以4:1的比例加Sevag试剂(Sevag试剂的具体配比为1:4:1的异戊醇、氯仿和丁二醇混合制得)，震荡4min；
S5：提纯液分离，对溶液在常温下使用1000Da分子量的超滤膜进行超滤分离，最后得到过滤液与残留液；
S6：将残留液浓缩后冷冻干燥，制得石斛多糖；
S7：将过滤液浓缩后冷冻干燥，制得石斛碱。
参照图1，实施例三
本实施例中提出了一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，包括以下步骤：
S1：原材料处理，对石斛进行预处理，先将细茎石斛杀青，然后以65℃的温度，40min的时间进行烘干，再采用粉碎机对烘干后的细茎石斛进行粉碎，过40目筛得到石斛粉末备用；
S2：原材料提纯，加入80℃的石油醚，石斛粉末与石油醚的比例为1g:5ml，回流提取1.7h，再对石斛粉末以122℃的温度进行加热，过滤掉石斛粉末表面的浮沫后挥干溶剂，最后加入95％的乙醇和丙酮，回流提取1h后过滤，挥干溶剂，石斛粉末与乙醇和丙酮的比例为1g:5ml，制得提纯溶液；
S3：提纯液处理，在提纯溶液内加水，提纯溶液与水的比例为1:50，以90℃的温度下水浴1.2h，残渣反复提取5次，再进行过滤，最后将过滤后的滤液合并，再进行减压浓缩至2/1，再以4倍容积的95％乙醇沉淀数次，再溶解、浓缩、透析、冻干，得石斛粗多糖；
S4：提纯液调理，最后将双蒸水加入到石斛粗多糖内，双蒸水与石斛粗多糖的比例为100ml:1g，再以4:1的比例加Sevag试剂(Sevag试剂的具体配比为1:4:1的异戊醇、氯仿和丁二醇混合制得)，震荡2-5min；
S5：提纯液分离，对溶液在常温下使用1000Da分子量的超滤膜进行超滤分离，最后得到过滤液与残留液；
S6：将残留液浓缩后冷冻干燥，制得石斛多糖；
S7：将过滤液浓缩后冷冻干燥，制得石斛碱。
参照图1，实施例四
本实施例中提出了一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，包括以下步骤：
S1：原材料处理，对石斛进行预处理，先将细茎石斛杀青，然后以70℃的温度，30min的时间进行烘干，再采用粉碎机对烘干后的细茎石斛进行粉碎，过30-50目筛得到石斛粉末备用；
S2：原材料提纯，加入82℃的石油醚，石斛粉末与石油醚的比例为1g:6ml，回流提取1.7h，再对石斛粉末以125℃的温度进行加热，过滤掉石斛粉末表面的浮沫后挥干溶剂，最后加入95％的乙醇和丙酮，回流提取1.1h后过滤，挥干溶剂，石斛粉末与乙醇和丙酮的比例为1g:5ml，制得提纯溶液；
S3：提纯液处理，在提纯溶液内加水，提纯溶液与水的比例为1:60，以95℃的温度下水浴1.2h，残渣反复提取1次，再进行过滤，最后将过滤后的滤液合并，再进行减压浓缩至2/1，再以4倍容积的95％乙醇沉淀数次，再溶解、浓缩、透析、冻干，得石斛粗多糖；
S4：提纯液调理，最后将双蒸水加入到石斛粗多糖内，双蒸水与石斛粗多糖的比例为100ml:1g，再以4:1的比例加Sevag试剂(Sevag试剂的具体配比为1:4:1的异戊醇、氯仿和丁二醇混合制得)，震荡4min；
S5：提纯液分离，对溶液在常温下使用1000Da分子量的超滤膜进行超滤分离，最后得到过滤液与残留液；
S6：将残留液浓缩后冷冻干燥，制得石斛多糖；
S7：将过滤液浓缩后冷冻干燥，制得石斛碱。
参照图1，实施例五
本实施例中提出了一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，包括以下步骤：
S1：原材料处理，对石斛进行预处理，先将细茎石斛杀青，然后以80℃的温度，50min的时间进行烘干，再采用粉碎机对烘干后的细茎石斛进行粉碎，过50目筛得到石斛粉末备用；
S2：原材料提纯，加入85℃的石油醚，石斛粉末与石油醚的比例为1g:6ml，回流提取2h，再对石斛粉末以125℃的温度进行加热，过滤掉石斛粉末表面的浮沫后挥干溶剂，最后加入95％的乙醇和丙酮，回流提取1.25h后过滤，挥干溶剂，石斛粉末与乙醇和丙酮的比例为1g:5ml，制得提纯溶液；
S3：提纯液处理，在提纯溶液内加水，提纯溶液与水的比例为1:60，以100℃的温度下水浴1.5h，残渣反复提取5次，再进行过滤，最后将过滤后的滤液合并，再进行减压浓缩至2/1，再以4倍容积的95％乙醇沉淀数次，再溶解、浓缩、透析、冻干，得石斛粗多糖；
S4：提纯液调理，最后将双蒸水加入到石斛粗多糖内，双蒸水与石斛粗多糖的比例为100ml:1g，再以4:1的比例加Sevag试剂(Sevag试剂的具体配比为1:4:1的异戊醇、氯仿和丁二醇混合制得)，震荡2-5min；
S5：提纯液分离，对溶液在常温下使用1000Da分子量的超滤膜进行超滤分离，最后得到过滤液与残留液；
S6：将残留液浓缩后冷冻干燥，制得石斛多糖；
S7：将过滤液浓缩后冷冻干燥，制得石斛碱。
对比常规的石斛多糖和石斛碱与实施例一至五制得的石斛多糖和石斛碱，实施例一至五制得的石斛多糖和石斛碱如下表：
| 实施例 | 一 | 二 | 三 | 四 | 五 |
| 石斛多糖 | 11.2％ | 12.63％ | 11.63％ | 12.45％ | 12.01％ |
| 石斛碱 | 0.28％ | 0.3％ | 0.34％ | 0.25％ | 0.29％ |
由上述表格可知，本发明提出的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法具有明显提高，且实施三为最佳实施例。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：原材料处理，对石斛进行预处理；
S2：原材料提纯；
S3：提纯液处理；
S4：提纯液调理；
S5：提纯液分离；
S6：制得石斛多糖；
S7：制得石斛碱。
2.根据权利要求1所述的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，其特征在于，S1步骤中原材料处理，先将细茎石斛杀青，然后以60-80℃的温度，30-50min的时间进行烘干，再采用粉碎机对烘干后的细茎石斛进行粉碎，过30-50目筛得到石斛粉末备用。
3.根据权利要求1所述的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，其特征在于，S2步骤中的原材料处理的具体操作为：加入70-85℃的石油醚，石斛粉末与石油醚的比例为1g:4-6ml，回流提取1.25-2h，再对石斛粉末以100-125℃的温度进行加热，过滤掉石斛粉末表面的浮沫后挥干溶剂，最后加入95％的乙醇和丙酮，回流提取1-1.25h后过滤，挥干溶剂，石斛粉末与乙醇和丙酮的比例为1g:5ml，制得提纯溶液。
4.根据权利要求1所述的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，其特征在于，S3步骤中提纯液处理的具体操作为：在提纯溶液内加水，提纯溶液与水的比例为1:20-60，以85-100℃的温度下水浴0.95-1.5h，残渣反复提取3-5次，再进行过滤，最后将过滤后的滤液合并，再进行减压浓缩至2/1，再以4倍容积的95％乙醇沉淀数次，再溶解、浓缩、透析、冻干，得石斛粗多糖。
5.根据权利要求1所述的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，其特征在于，S4步骤中提纯液调理的具体步骤为：最后将双蒸水加入到石斛粗多糖内，双蒸水与石斛粗多糖的比例为100ml:1g，再以4:1的比例加Sevag试剂，震荡2-5min。
6.根据权利要求1所述的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，其特征在于，S5步骤中提纯液分离的具体步骤为：对溶液在常温下使用1000Da分子量的超滤膜进行超滤分离，最后得到过滤液与残留液。
7.根据权利要求1所述的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，其特征在于，S6步骤中将残留液浓缩后冷冻干燥，制得石斛多糖。
8.根据权利要求1所述的一种从石斛中分离提取石斛多糖和石斛碱的方法，其特征在于，S7步骤中将过滤液浓缩后冷冻干燥，制得石斛碱。
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