CN102666493A

CN102666493A - 作为新nep抑制剂的取代的氨基甲酰基甲基氨基乙酸衍生物

Info

Publication number: CN102666493A
Application number: CN2010800523165A
Authority: CN
Inventors: 岩城雪; 川波俊夫; G·M·克桑德; 茂木宗人
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2009-11-20
Filing date: 2010-11-18
Publication date: 2012-09-12
Anticipated expiration: 2030-11-18
Also published as: US20120202862A1; CO6540001A2; US8642635B2; TWI481598B; JO2967B1; RS53422B; US20140088165A1; EP2735561A1; KR20120084327A; US20110124695A1; WO2011061271A1; DK2501683T3; US20130096168A1; AU2010320930B2; US8222286B2; SI2501683T1; JP2014167015A; HN2012001037A; ES2481890T3; CL2012001298A1

Abstract

本发明提供了式(I)的化合物或其可药用盐，其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁶、A¹、A²、X¹、s和m如本文所定义。本发明还涉及制备本发明化合物的方法以及其治疗用途。本发明进一步提供了药理学活性剂的组合产品和药物组合物。

Description

作为新NEP抑制剂的取代的氨基甲酰基甲基氨基乙酸衍生物

发明背景

内源性心房钠尿肽(ANP)(也被称为心钠素(ANF))在哺乳动物体内具有利尿、促尿钠排泄和血管松弛功能。天然的ANF肽被代谢灭活，特别是被降解酶代谢灭活，该降解酶被认为对应于中性内肽酶(NEP)EC 3.4.24.11的酶，其还负责例如脑啡肽类的代谢灭活。

中性内肽酶(EC 3.4.24.11；脑啡肽酶；心房肽酶(atriopeptidase)；NEP)是一种在疏水性残基的氨基侧裂解多种肽底物的含锌的金属蛋白酶[见Pharmacol Rev，第45卷，第87页(1993)]。这种酶的底物包括但不限于心房钠尿肽(ANP，也被称为ANF)、脑钠尿肽(BNP)、met-和leu-脑啡肽、缓激肽、神经激肽A、内皮素-1和P物质。ANP是一种有效的血管松弛剂和促尿钠排泄剂[见J Hypertens，第19卷，第1923页(2001)]。给正常个体输入ANP导致可再现的尿钠排泄和利尿作用的显著增强，包括钠排泄分数、尿流量和肾小球滤过率的增加[见J Clin Pharmacol，第27卷，第927页(1987)]。然而，ANP在循环中的半衰期短，并且已经表明肾皮质膜中的NEP是降解这种肽的主要酶[见Peptides，第9卷，第173页(1988)]。因此，NEP的抑制剂(中性内肽酶抑制剂，NEPi)应当能增加ANP的血浆水平，并且预期其可诱导促尿钠排泄和利尿作用。

这种酶参与多种生物活性寡肽的断裂，在疏水性氨基酸残基的氨基侧裂解肽键。被代谢的肽包括心房钠尿肽(ANP)、铃蟾肽、缓激肽、与降钙素基因相关的肽、内皮素、脑啡肽类、神经降压肽、P物质和血管活性肠肽。这些肽中的一些具有有效的血管舒张和神经激素功能、利尿和促尿钠排泄活性或调节行为效应。

发明概述：

本发明的目的是提供可用作中性内肽酶抑制剂(例如作为哺乳动物的ANF降解酶的抑制剂)从而通过抑制ANF降解成活性较低的代谢物来延长和增强哺乳动物的ANF的利尿、促尿钠排泄和血管舒张剂性质的新化合物。

因此，本发明的化合物特别是可用于治疗对中性内肽酶(NEP)EC3.4.24.11的抑制响应的疾患和病症。

本发明涉及如本文所述的化合物、其使用方法以及其用途。本发明化合物的实例包括式I’和I至IV中任意一式的化合物或其可药用的盐以及实施例的化合物。

因此，本发明提供了式(I’)的化合物或其可药用盐：

其中

X¹是OH、-O-C_1-7烷基、-NR^aR^b、-NHS(O)₂-C_1-7烷基或-NHS(O)₂-苄基，其中R^a和R^b在每次出现时独立地为H或C_1-7烷基；

R¹是H、C_1-6烷基或C_6-10-芳基-C_1-6烷基，其中烷基任选地被苄氧基、羟基或C_1-6烷氧基取代；

每次出现时，R²独立地是C_1-6-烷氧基、羟基、卤素、C_1-6-烷基、氰基或三氟甲基；

A²是O或NR⁵；

R⁴和R⁵独立地是H或C_1-6烷基；

A¹是键或C_1-3亚烷基链；

R³是5-或6-元杂芳基、C_6-10-芳基或C_3-7-环烷基，其中每一杂芳基、芳基或环烷基任选被一个或多个独立地选自C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H和CO₂C_1-6烷基的基团取代；

R⁶每次出现时独立地是卤素、羟基、C_1-7烷氧基、卤素、C_1-7烷基或卤代-C_1-7烷基；或

R⁴、A¹-R³连同R⁴和A¹-R³所连接的氮一起形成4-至7-元杂环基或5-至6-元杂芳基，其每一个任选地被一个或多个独立地选自C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H和CO₂C_1-6烷基的基团取代；且

m是0或1至5的整数；

s是0或1至4的整数。

本发明还提供了式(I)化合物或其可药用盐：

其中：

X¹表示OH或O-C_1-6-烷基；

R¹是H、C_1-6烷基或C_6-10-芳基-C_1-6烷基；

R⁴和R⁵独立地是H或C_1-6烷基；

A¹是键或C_1-3亚烷基链；

m是0或1至5的整数；

s是0或1至4的整数。

通过抑制中性内肽酶EC.3.4.24.11，本发明的化合物可增强生物活性肽的生物学作用。因此，所述化合物特别是具有治疗许多病症的用途，所述病症包括高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管疾病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全(糖尿病或非糖尿病性)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、肾病综合征、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、肾血管性高血压、糖尿病性视网膜病和晚期肾病(ESRD)、内皮功能障碍、舒张期功能障碍、肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上和室性心律失常、心房颤动(AF)、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重构、斑块稳定(plaque stabilization)、心肌梗死(MI)、肾纤维化、多囊性肾病(PKD)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、周期性水肿、梅尼埃(Menières)病、高醛固酮血症(hyperaldosteroneism)(原发性和继发性)和高钙尿症、腹水。此外，因为增强ANF作用的能力，这些化合物还可用于治疗青光眼。作为抑制中性内肽酶E.C.3.4.24.11能力的其他结果，本发明的化合物在其它一些治疗领域中具有活性，包括例如月经失调、早产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖病症(尤其是男性和女性不育、多囊卵巢综合征、植入失败)的治疗。本发明的化合物还应能治疗哮喘、阻塞性睡眠呼吸暂停、炎症、白血病、疼痛、癫痫症、情感障碍如抑郁和精神病如痴呆和老年意识错乱、肥胖和胃肠道病症(尤其是腹泻和肠易激综合征)、伤口愈合(尤其是糖尿病性和静脉溃疡以及压疮)、脓毒性休克、胃酸分泌功能障碍、高肾素血症、囊性纤维化、再狭窄、2型糖尿病、代谢综合征、糖尿病并发症和动脉粥样硬化、雄性和雌性性功能障碍。

在一个优选的实施方案中，本发明的化合物可用于治疗心血管病症。

在另一项实施方案中，本发明涉及在需要该治疗的受试者中治疗对中性内肽酶EC 3.4.24.11(NEP)的抑制有响应的病症或疾病的方法，该方法包括给所述受试者施用有效量的式I-IV中任一式的化合物或其可药用盐，从而治疗受试者中的对中性内肽酶EC 3.4.24.11(NEP)的抑制有响应的病症或疾病。

在另一实施方案中，本发明涉及包含式I-IV中任一式的化合物或其可药用盐以及一种或多种可药用载体的药物组合物。

在另一实施方案中，本发明涉及包含式I-IV中任一式的化合物或其可药用盐以及一种或多种治疗活性剂的药物组合的组合产品。

在另一实施方案中，本发明涉及在需要其的受试者中抑制中性内肽酶EC 3.4.24.11的方法，该方法包括给受试者施用治疗有效量的式I至VI中任一者的化合物或其可药用盐，从而抑制中性内肽酶EC 3.4.24.11。

发明详述

定义

为了解释本说明书，除非特别说明，否则将适用下面的定义，并且在适当的情况中，以单数使用的术语也将包括复数并且反之亦然。

本文所用的术语“烷基”是指包含1至20个碳原子的全饱和的分枝或无分枝(或直链或线性)的烃基团。烷基优选地包含1至6个碳原子，并且更优选地包含1至4个碳原子。烷基的代表性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基、3-甲基己基、2，2-二甲基戊基、2，3-二甲基戊基、正-庚基。术语“C_1-6烷基”是指具有1至6个碳原子的烃。术语“亚烷基”是指二价烷基基团，其中烷基如之前所定义。

本文所用的术语“卤代烷基”是指被一个或多个本文所定义的卤素基团取代的如本文所定义的烷基。优选地，卤代烷基可以是单卤代烷基、二卤代烷基或多卤代烷基，包括全卤代烷基。单卤代烷基可在烷基内具有一个碘、溴、氯或氟。二卤代烷基和多卤代烷基可在烷基内具有两个或更多个相同的卤素原子或不同卤素基团的组合。多卤代烷基优选包含最多至12个、或10个、或8个、或6个、或4个、或3个、或2个卤素基团。卤代烷基的代表性实例有氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、五氟乙基、七氟丙基、二氟氯甲基、二氯氟甲基、二氟乙基、二氟丙基、二氯乙基和二氯丙基。全卤代烷基是指氢原子都被卤素原子代替的烷基。术语“卤代-C_1-6烷基”是指具有1至6个碳原子并且被一个或多个卤素基团取代的烃。

本文所用的术语“烷氧基”是指烷基-O-，其中烷基如本文上面所定义。烷氧基的代表性实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基、环丙氧基-、环己氧基-等。烷氧基优选具有约1-6个，更优选约1-4个碳。

本文所用的术语“环烷基”是指3-12个碳原子、优选3-8个或3-7个碳原子的饱和或部分不饱和的单环、二环或三环烃基团。对于二环和三环环烷基系统而言，所有的环都是非芳族的。示例性的单环烃基团包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基和环己烯基。实例性的二环烃基团包括冰片基、十氢萘基、二环[2.1.1]己基、二环[2.2.1]庚基、二环[2.2.1]庚烯基、二环[2.2.2]辛基。示例性的三环烃基团包括金刚烷基。术语“C_3-7环烷基”是指具有3至7个碳原子的环状烃基。

术语“芳基”是指在环部分具有6-10个碳原子的单环或二环芳族烃基团。术语“芳基”也指其中芳族环与环烷基环稠合的基团，其中连接的基团位于芳族环上或稠合的环烷基环上。芳基的代表性实例是苯基、萘基、六氢吲哚基、茚满基或四氢萘基。术语“C_6-10芳基”是指在环部分具有6至10个碳原子的芳族烃基团。

术语“芳基烷基”是被芳基取代的烷基。芳基烷基的代表性实例是苄基或苯基-CH₂CH₂-。术语“C_6-10芳基-C_1-6烷基”是指具有1至6个碳原子的烃，该烃被具有6至10个碳原子的芳基取代。

术语“杂芳基”包括含有5-10个选自碳原子和1至5个杂原子的环成员并且各杂原子独立地选自O、N或S的单环或二环杂芳基，其中S和N可以被氧化成各种氧化状态。对于二环杂芳基系统而言，该系统是完全芳族的(即所有的环都是芳族的)。

典型的单环杂芳基包括噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、1，2，3-

二唑基、1，2，4-二唑基、1，2，5-

二唑基、1，3，4-

二唑基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、异噻唑-3-基、异噻唑-4-基、异噻唑-5-基、

唑-2-基、

唑-4-基、

唑-5-基、异

唑-3-基、异唑-4-基、异

唑-5-基、1，2，4-三唑-3-基、1，2，4-三唑-5-基、1，2，3-三唑-4-基、1，2，3-三唑-5-基、四唑基、吡啶-2-基、吡啶-3-基或吡啶基-4-基、哒嗪-3-基、哒嗪-4-基、吡嗪-3-基、2-吡嗪-2-基、吡嗪-4-基、吡嗪-5-基、2-、4-或5-嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、嘧啶-5-基。术语“杂芳基”还指其中杂芳族环与一个或多个芳基环稠合的基团，其中连接基团或连接点位于杂芳族环或稠合的芳基环上。二环杂芳基的代表性实例是吲哚基、异吲哚基、吲唑基、吲嗪基、嘌呤基、喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、萘啶基、喹唑啉基、喹喔啉基、菲啶基、菲咯啉基(phenathrolinyl)、吩嗪基、吩噻嗪基、吩

嗪基、苯并异喹啉基、噻吩并[2，3-b]呋喃基、呋喃并[3，2-b]吡喃基、5H-吡啶并[2，3-d]-o-

嗪基、1H-吡唑并[4，3-d]

唑基、4H-咪唑并[4，5-d]噻唑基、吡嗪并[2，3-d]哒嗪基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、咪唑并[1，2-b][1，2，4]三嗪基、7-苯并[b]噻吩基、苯并

唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并

庚因基(benzoxapinyl)、苯并

嗪基、1H-吡咯并[1，2-b][2]苯并吖庚因基(benzazapinyl)、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并三唑基、吡咯并[2，3-b]吡啶基、吡咯并[3，2-c]吡啶基、吡咯并[3，2-c]吡啶基、吡咯并[3，2-b]吡啶基、咪唑并[4，5-b]吡啶基、咪唑并[4，5-c]吡啶基、吡唑并[4，3-d]吡啶基、吡唑并[4，3-c]吡啶基、吡唑并[3，4-c]吡啶基、吡唑并[3，4-d]吡啶基、吡唑并[3，4-b]吡啶基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、吡唑并[1，5-a]吡啶基、吡咯并[1，2-b]哒嗪基、咪唑并[1，2-c]嘧啶基、吡啶并[3，2-d]嘧啶基、吡啶并[4，3-d]嘧啶基、吡啶并[3，4-d]嘧啶基、吡啶并[2，3-d]嘧啶基、吡啶并[2，3-b]吡嗪基、吡啶并[3，4-b]吡嗪基、嘧啶并[5，4-d]嘧啶基、吡嗪并[2，3-b]吡嗪基或嘧啶并[4，5-d]嘧啶基。当杂芳基部分被羟基取代时，本发明还涉及其氧代互变异构体。例如，被羟基取代的

二唑也包括氧代-

二唑，也被称为

二唑酮。该互变异构化如下所示：

本文所用的术语“杂环基”或“杂环”是指任选地被取代的、饱和或不饱和的非芳族(部分不饱和的)环，其是4-、5-、6-或7-元单环的，并且含有至少一个选自O、S和N的杂原子，其中N和S也可任选地被氧化成各种氧化状态。对于二环和三环杂环基环系统而言，非芳族环系统被定义为是一种非全饱和的或部分不饱和的环系。因此，二环和三环杂环基环系统包括其中稠合的环中的一个是芳族的，但是另一个(其它的)是非芳族的杂环基环系统。在一个实施方案中，杂环基部分表示包含5-7个环原子并任选地包含其他选自O、S或N的杂原子的饱和单环。杂环基团可以在杂原子或碳原子上进行连接。杂环基可包括稠合或桥连的环以及螺环的环。杂环的实例包括二氢呋喃基、二氧戊环基、二烷基、二噻烷基、哌嗪基、吡咯烷、二氢吡喃基、氧硫杂环戊烷基、二硫戊环、氧硫杂环己烷基、硫代吗啉代、环氧乙烷基、氮丙啶基、氧杂环丁烷基、氧杂环庚烷基、氮杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、四氢吡喃基、哌啶基、吗啉代、哌嗪基、吖庚因基、

庚因基(oxapinyl)、氧氮杂环庚烷基、氧硫杂环己基、硫杂环庚烷基、氮杂环庚烷基、二氧杂环庚烷基和二氮杂环庚烷基。

术语“卤素”包括氟、溴、氯和碘。术语“全卤化的”通常涉及这样的基团，其中所有氢都被卤素原子代替。

术语“杂原子”包括除碳或氢外的任何元素的原子。优选的杂原子是氮、氧、硫和磷。在另一个实施方案中，杂原子选自N、O和S。

本发明的化合物

本文中描述了本发明的各种实施方案。应认识到，各实施方案中描述的特征可与其它描述的特征组合以提供其它实施方案。

某些式I′化合物或式I化合物包括式II化合物：

或其可药用盐，其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、X¹、A¹、s及m具有上文式I中的定义。

在一个实施方案中，本发明涉及式I’、I或II的化合物或其可药用盐，其中：

X¹表示OH或O-C_1-6-烷基；

R¹是H或C_1-6烷基；

R⁴和R⁵独立地是H或C_1-6烷基；

A¹是键或C_1-3亚烷基链；

R³是5-或6-元杂芳基或C_6-10-芳基，其中各杂芳基和芳基任选地被一个或多个独立地选自C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H和CO₂C_1-6烷基的取代基取代；

R⁶每次出现时独立地是卤素、羟基、C_1-7烷氧基、卤素、C_1-7烷基或卤代-C_1-7烷基；

m是0或1至5的整数；

s是0或1至4的整数。

在另一实施方案中，本发明涉及式I’、I或II的化合物或其可药用盐，其中：

X¹表示OH或O-C_1-6-烷基；

R¹是H或C_1-6烷基；

R⁴和R⁵独立地是H或C_1-6烷基；

A¹是键或C_1-3亚烷基链；

R³是5-或6-元杂芳基，其任选被一个或多个独立地选自C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H和CO₂C_1-6烷基的取代基取代；R⁶每次出现时独立地是卤素、羟基、C_1-7烷氧基、卤素、C_1-7烷基或卤代-C_1-7烷基；

m是0或1至5的整数；

s是0或1至4的整数。

某些式I′化合物或式I化合物包括式III化合物：

或其可药用盐，其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、X¹、A¹及s具有上文式I中的定义，并且X²是卤素，且p是0或1至4的整数。

某些式I′、I、II或III化合物包括式IV化合物：

或其可药用盐，其中R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、X¹、A¹、X²、s和p具有上文式I、II和III中的定义。

在一个实施方案中，本发明涉及式III或IV的化合物，或其可药用盐，其中X²是Cl。在这一实施方案的进一方面，p是0。

以下实施方案可单独、共同或以任何组合或子组合应用。

在一个实施方案中，本发明涉及根据式I’和I至IV任一式的化合物，或上文描述的任何其他类和亚类中的任一个的化合物，或其可药用盐，其中A¹是键或CH₂。在另一实施方案中，A¹是键。

在另一实施方案中，本发明涉及根据式I’和I至IV任一式的化合物，或上文描述的任何其他类和亚类中的任一个的化合物，或其可药用盐，其中R³是任选取代的5元或6元杂芳基。在这一实施方案的一个方面，R³为选自吡嗪、吡啶、嘧啶、吡喃酮(例如任选取代的吡喃-4-酮、吡喃-2-酮，诸如3-羟基-吡喃-4-酮、3-羟基-吡喃-2-酮)、嘧啶酮及吡啶酮(例如任选取代的吡啶-4-酮或吡啶-2-酮，诸如3-羟基-1-甲基-吡啶-4-酮或1-苄基-吡啶-2-酮)的6元环杂芳基。在此实施方案的另一方面，R³是选自

唑、吡咯、吡唑、异

唑、三唑、四唑、

二唑(例如1-氧杂-3，4-二唑、1-氧杂-2，4-二唑)、

二唑酮(例如

二唑-2-酮)、噻唑、异噻唑、噻吩、咪唑及噻二唑的5元环杂芳基。R³的其它代表性实例为

唑酮、噻唑酮、

二唑酮、三唑酮、

唑酮、咪唑酮、吡唑酮。在另一实施方案中，杂芳基上的任选取代基独立地为C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H或CO₂C_1-6烷基。

在上述实施方案的另一方面，本发明涉及根据式I’和I至IV任一式的化合物，或上文描述的任何其他类和亚类中的任一个的化合物，或其可药用盐，其中R³是四唑。

在另一实施方案中，本发明涉及根据式I’和I至IV任一式的化合物，或上文描述的任何其他类和亚类中的任一个的化合物，或其可药用盐，其中R³是任选取代的苯基。在进一实施方案中，苯基上的任选取代基独立地是C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H或CO₂C_1-6烷基。在进一实施方案中，苯基被CO₂H取代并任选地被进一步取代。

在另一实施方案中，本发明涉及根据式I’和I至IV任一式的化合物，或上文描述的任何其他类和亚类中的任一个的化合物，或其可药用盐，其中R¹是C_1-6烷基(即，甲基、乙基、丙基、异丙基)。

在另一实施方案中，本发明涉及根据式I’和I至IV任一式的化合物，或上文描述的任何其他类和亚类中的任一个的化合物，或其可药用盐，其中R⁴是H。

在另一实施方案中，本发明涉及根据式I’和I至IV任一式的化合物，或上文描述的任何其他类和亚类中的任一个的化合物，或其可药用盐，其中R⁵是H。

在另一实施方案中，本发明涉及根据式I’和I至IV任一式的化合物，或上文描述的任何其他类和亚类中的任一个的化合物，或其可药用盐，其中s是0。

在另一实施方案中，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、X¹、A¹、X²、m、s和p基团是由下面实施例部分中的R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、X¹、A¹、X²、m、s和p基团定义的那些。

在另一实施方案中，本发明的个体化合物为以下实施例部分中列举的化合物或其可药用盐。

应当注意到，本发明的一些化合物的结构包括不对称碳原子。因此，应当清楚，除非另外说明，否则由该类不对称性产生的异构体(例如，所有的对映异构体和非对映异构体)包括在本发明范围内。此类异构体可以通过经典的分离技术和立体化学控制的合成以基本纯的形式获得。此外，本申请中所讨论的结构和其它化合物以及基团也包括其所有互变异构体。

本文所用的术语“异构体”是指具有相同分子式，但是原子的排列和构型不同的不同化合物。还如文中所用，术语“旋光异构体”或“立体异构体”还涉及对于本发明所给出的化合物而言可以存在的各种立体异构构型中的任何一种并且包括几何异构体。应当理解，取代基可以连接在碳原子的手性中心上。因此，本发明包括所述化合物的对映异构体、非对映异构体或外消旋物。“对映异构体”是一对彼此成不可重叠的镜像的立体异构体。一对对映异构体的1∶1的混合物是“外消旋的”混合物。在适用的情况中，用该术语来称呼外消旋混合物。“非对映异构体”是具有至少两个不对称原子，但是彼此不成镜像的立体异构体。根据Cahn-lngold-PrelogR-S系统来指定绝对立体化学。当一种化合物是纯对映异构体时，可以用R或S来指明各手性碳的立体化学。可以根据其在钠D线的波长下旋转平面偏振光的方向(右旋或左旋)来将绝对构型未知的被拆分了的化合物指定为(+)或(-)。本文所述的某些化合物包含一个或多个不对称中心或轴，因此，可以产生对映异构体、非对映异构体和可以根据绝对立体化学被定义为(R)-或(S)-的其它立体异构形式。本发明意图包括所有该类可能的异构体，包括外消旋混合物、光学纯的形式和中间体混合物。(R)-和(S)-旋光活性异构体可以用手性合成子或手性试剂来进行制备，或者可以用常规技术进行拆分。如果化合物包含双键，则取代基可以是E或Z构型。如果化合物包含被二取代的环烷基，则环烷基取代基可以具有顺式-或反式-构型。也包括所有的互变异构形式。

本发明化合物的任何不对称原子(例如，碳等)都可以以外消旋或对映体富集的形式，例如(R)-、(S)-或(R，S)-构型形式存在。在某些实施方案中，各不对称原子在(R)-或(S)-构型方面具有至少50％对映体过量，至少60％对映体过量，至少70％对映体过量，至少80％对映体过量，至少90％对映体过量，至少95％对映体过量，或至少99％对映体过量。如果可能的话，具有不饱和键的原子上的取代基可以以顺式-(Z)-或反式-(E)-形式存在。

因此，如本文所用的那样，本发明的化合物可以以可能的异构体、旋转异构体、阻转异构体、互变异构体中的一种形式或其混合物的形式存在，例如为基本纯的几何(顺式或反式)异构体、非对映异构体、旋光异构体(对映体)、外消旋物或其混合物形式。

可以根据组分的物理化学差异将所得的任何异构体混合物分离成纯或基本纯的几何或旋光异构体、非对映异构体、外消旋物，例如通过色谱法和/或分步结晶来进行分离。

可以用已知的方法将任何所得终产物或中间体的外消旋物拆分成旋光对映体，例如通过对与光学活性的酸或碱获得的其非对映异构的盐进行分离，然后释放光学活性的酸性或碱性化合物来进行拆分。因此，特别是可以用一种碱性部分来将本发明化合物拆分成其旋光对映体，例如，通过对与光学活性的酸例如酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二乙酰基酒石酸、二-O，O′-对-甲苯甲酰基酒石酸、扁桃酸、苹果酸或樟脑-10-磺酸形成的盐进行分步结晶来进行拆分。外消旋产物也可以用手性色谱，例如使用手性吸附剂的高压液相色谱(HPLC)来进行拆分。

本文所用的术语“可药用的盐”是指保留了本发明化合物的生物学有效性和性质，但是在生物学或其它方面通常不是非希望的盐。在许多情况中，本发明的化合物能凭借存在的氨基和/或羧基或与其类似的基团形成酸和/或碱盐。

可药用的酸加成盐可以用无机酸和有机酸来形成，例如乙酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、溴化物/氢溴酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、樟脑磺酸盐、氯化物/盐酸盐、氯茶碱盐(chlortheophyllonate)、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、马尿酸盐、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘甲酸盐、萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、十八酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及三氟乙酸盐。

可由其形成盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。

可由其形成盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、磺基水杨酸等。可以与无机碱和有机碱形成可药用的碱加成盐。

可由其形成盐的无机碱包括例如包括例如铵盐及来自周期表第I列至第XII列的金属。在某些实施方案中，盐衍生自钠、钾、铵、钙、镁、铁、银、锌及铜，尤其适合的盐包括铵盐、钾盐、钠盐、钙盐及镁盐。

可由其形成盐的有机碱包括例如伯、仲和叔胺，取代的胺包括天然存在的取代的胺，环胺，碱性离子交换树脂等。某些有机胺包括异丙胺、二苄基乙二胺(benzathine)、胆碱盐(cholinate)、二乙醇胺、二乙胺、赖氨酸、葡甲胺、哌嗪及氨基丁三醇。

本发明的可药用盐可以用常规化学方法由母体化合物、碱性或酸性部分来合成。一般而言，该类盐可以通过使这些化合物的游离酸形式与化学计量量的适宜碱(如Na、Ca、Mg或K氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等)反应，或者通过使这些化合物的游离碱形式与化学计量量的适宜酸反应来进行制备。该类反应通常在水或有机溶剂或二者的混合物中进行。一般地，在适当的情况中，需要使用非水性介质如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。在例如“Remington′s Pharmaceutical Sciences”，第20版，MackPublishing Company，Easton，Pa.，(1985)；和“药用盐手册：性质、选择和应用(Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use)”，Stahl and Wermuth(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)中可找到另外一些适宜盐的列表。

本文给出的任何式也意欲表示这些化合物未被标记的形式以及同位素标记的形式。例如，本文任何式中用“H”所表示的任何氢意欲表示氢的所有同位素形式(例如¹H、²H或D、³H)；本文任何式中的“C”所表示的任何碳意欲表示碳的所有同位素形式(例如¹¹C、¹³C、¹⁴C)；“N”所表示的任何氮意指表示氮的所有同位素形式(例如¹⁴N、¹⁵N)。被包括在本发明中的同位素的其它实例包括氧、硫、磷、氟、碘和氯的同位素，如¹⁸F、³¹P、³²p、³⁵S、³⁶Cl、¹²⁵I。本发明包括用各种同位素标记的本文所定义的化合物，例如其中存在放射性同位素如³H、¹³C和¹⁴C的那些化合物。在一个实施方案中，本文式中的原子以其天然丰度存在。在另一个实施方案中，一个或多个氢原子可以富集²H；或/和一个或多个原子可以富集¹¹C、¹³C或¹⁴C；或/和一个或多个氮可以富集¹⁴N。该类同位素标记的化合物可用于代谢研究(使用¹⁴C)、反应动力学研究(使用例如²H或³H)、检测或成像技术如正电子发射断层扫描术(PET)或单光子发射计算体层摄影术(SPECT)包括药物或底物组织分布测定，或可用于患者的放疗中。¹⁸F或标记的化合物对PET或SPECT研究而言是特别理想的。同位素标记的本发明化合物及其前药通常可通过用容易获得的同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂，实施下述流程或实施例和制备例中所公开的方法来进行制备。

此外，较重同位素特别是氘(即，²H或D)的富集可提供某些治疗优点，这些优点是由代谢稳定性更高例如体内半衰期增加或剂量需求降低或治疗指数得到改善带来的。应当理解，这一上下文中的氘被看做式I至IV化合物的取代基。可以用同位素富集因子来定义该类较重同位素特别是氘的浓度。本文所用的术语“同位素富集因子”是指所指定同位素的同位素丰度和天然丰度之间的比例。如果本发明化合物的取代基被指定为氘，该化合物对各指定的氘原子而言具有至少3500(各指定氘原子处52.5％的氘掺入)、至少4000(60％的氘掺入)、至少4500(67.5％的氘掺入)，至少5000(75％的氘掺入)，至少5500(82.5％的氘掺入)、至少6000(90％的氘掺入)、至少6333.3(95％的氘掺入)、至少6466.7(97％的氘掺入)、至少6600(99％的氘掺入)或至少6633.3(99.5％的氘掺入)的同位素富集因子。

同位素富集的式I至IV化合物通常可用本领域技术人员已知的常规技术或与所附实施例和制备例中所述那些方法类似的方法，用适宜的同位素富集的试剂代替之前所用的非同位素富集的试剂来进行制备。

本发明可药用的溶剂化物包括其中结晶溶剂可以是同位素取代的例如D₂O、d₆-丙酮、d₆-DMSO的那些溶剂化物。

包含能作为氢键供体和/或受体的基团的本发明化合物，即式I’、I、II、III或IV化合物可能能与适宜的共结晶形成剂形成共晶。这些共晶可以通过已知的形成共晶操作，由式I’、I、II、III、IV或V化合物来进行制备。该类操作包括研磨、加热、共升华、共熔化、或在溶液中使式I’、I、II、III或IV化合物与共晶形成剂在结晶条件下接触和分离由此形成的共晶。适宜的共晶形成剂包括WO 2004/078163中所述的那些物质。因此，本发明进一步提供了包含式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐的共晶。

本文所用的术语“可药用载体”包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如，抗细菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、盐、防腐剂、药物、药物稳定剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、矫味剂、染料等及其组合，如本领域普通技术人员已知的那样(例如参见，Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Printing Company，1990，第1289-1329页)。除非载体与活性成分不相容，否则考虑其在治疗或药物组合物中的应用。

术语本发明化合物的“治疗有效量”是指将引起受试者的生物学或医学响应，例如降低或抑制酶或蛋白活性、或改善症状、缓解病症、减缓或延迟疾病进程、或预防疾病等的本发明化合物的量。在一个非限制性实施方案中，术语“治疗有效量”是指如下的本发明化合物的量，当被施用于受试者时，其有效地(1)至少部分缓解、抑制、预防和/或改善：(i)可通过抑制中性内肽酶EC 3.4.24.11而改善的或(ii)与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性有关的或(iii)特征在于中性内肽酶EC 3.4.24.11异常活性的疾患、病症或疾病或其症状；或(2)降低或抑制中性内肽酶EC 3.4.24.11的活性；或(3)降低或抑制中性内肽酶EC 3.4.24.11的表达。在另一个非限制性实施方案中，术语“治疗有效量”是指当被施用给细胞或组织或非细胞的生物学材料或培养基时，对于至少部分降低或抑制中性内肽酶EC 3.4.24.11的活性或至少部分降低或抑制中性内肽酶EC 3.4.24.11的表达而言有效的本发明化合物的量。

本文所用的术语“受试者”是指动物。该动物一般为哺乳动物。受试者还指例如灵长类动物(例如，人)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠、鱼、鸟类等。在某些实施方案中，受试者是灵长类动物。在其他实施方案中，受试者是人。

本文所用的术语“抑制”是指给定的疾患、症状或病症或疾病的降低或遏制，或者生物学活性或过程的基准活性显著降低

在一个实施方案中，本文所用的术语任何疾病或病症的“治疗”是指疾病或病症的改善(即，减缓或抑制或降低疾病发展或其至少一种临床症状)。在另一个实施方案中，“治疗”是指缓解或改善包括患者不能辨别的那些参数在内的至少一种身体参数。在另一个实施方案中，“治疗”是指对疾病或病症进行身体上(例如稳定可辨别的症状)、生理上(例如稳定身体参数)或者这两方面同时调节。在另一个实施方案中，“治疗”是指预防或延迟疾病或病症的开始或发展或进程。

如本文中所使用的那样，若某一受试者将会从某治疗在生物学、医学或生活质量上获益，则该受试者“需要”该治疗。

除非在本文中另作说明或者与上下文明显相悖，否则本文所用的术语“一个/一种(a/an)”、“该”以及本发明上下文(尤其是权利要求书)中所用的类似术语被理解为覆盖了单数和复数。

除非本文另作说明或者与上下文明显相悖，否则本文所述的所有方法都可以以任何适宜的次序进行。本文提供的任何和全部实施例或示例性的语言(例如“诸如”)的使用仅仅是为了更好地对本发明进行说明，并不会时另外要求保护的本发明的范围构成限制。

本发明的化合物以游离形式、其盐形式或其前药衍生物的形式被获得。

当在同一个分子中同时包含碱性基团和酸基团时，本发明化合物也可以形成内盐，例如，两性离子分子。

本发明还提供了在体内转化成本发明化合物的本发明化合物的前药。前药是一种有活性或无活性的化合物，在该前药被施用于受试者后，通过体内的生理学作用，诸如水解、代谢等被化学修饰成本发明化合物。制备和使用前药时涉及的适应性和技术是本领域技术人员众所周知的。前药在概念上可被分成非排他性的两类：生物前体前药和载体前药。见药物化学实践(The Practice of Medicinal Chemistry)，第31-32章(Wermuth编辑，Academic Press，San Diego，Calif.，2001)。生物前体前药通常是与相应的活性药物化合物相比无活性或具有低活性的化合物，其包含一个或多个保护基团并且通过代谢或水解被转化成活性形式。活性药物形式和所释放的任何代谢产物都应当具有可接受的低毒性。

载体前药是包含例如改善吸收和/或定位传递于作用部位的转运部分的药物化合物。对于该类载体前药而言，位于药物部分和转运部分之间的连接理想地是共价键，该前药是无活性的或者比所述药物化合物的活性低，并且所释放出来的任何转运部分都是可接受的无毒的。对于想要用转运部分来提高吸收的前药来说，转运部分通常应被迅速释放。在另一些情况中，希望利用提供缓慢释放的部分，例如某些聚合物或其它部分，如环糊精。例如，可以用载体前药来改善一种或多种下面的性质：增加亲脂性、增加药理学作用的持续时间、增加部位特异性、降低毒性和不良反应、和/或在药物配制方面得到改善(例如，稳定性、水溶性、抑制不希望的感官性质或理化性质)。例如，可以通过(a)用亲脂性羧酸(例如具有至少一个亲脂性部分的羧酸)酯化羟基，或(b)用亲脂性醇(例如具有至少一个亲脂性部分的醇，例如脂族醇)酯化羧酸来增加亲脂性。

示例性的前药例如是游离羧酸的酯和硫醇的S-酰基衍生物以及醇或酚的O-酰基衍生物，其中酰基具有本文所定义的含义。合适的前药通常是可在生理性条件下通过溶剂分解被转化成母体羧酸的可药用的酯衍生物，例如，低级烷基酯、环烷基酯、低级烯基酯、苄酯、单-或二-取代的低级烷基酯，诸如ω-(氨基、单-或二-低级烷基氨基、羧基、低级烷氧基羰基)-低级烷基酯、α-(低级烷酰氧基、低级烷氧基羰基或二-低级烷基氨基羰基)-低级烷基酯，如现有技术中常用的新戊酰氧基甲基酯等。此外，胺类以芳基羰氧基甲基取代的衍生物的形式被掩蔽，其在体内被酯酶裂解释放出游离药物和甲醛(Bundgaard，J.Med.Chem.2503(1989))。此外，包含酸性NH基团如咪唑、亚胺、吲哚等的药物用N-乙酰氧基甲基掩蔽(Bundgaard，Design of Prodrugs，Elsevier(1985))。羟基以酯和醚的形式被掩蔽。EP039,051(Sloan和Little)公开了曼尼西碱异羟肟酸前药、其制备以及应用。

此外，包括其盐在内的本发明的化合物也可以以其水合物的形式获得，或者包含它们结晶用的其它溶剂。

一般合成流程

本发明的化合物可以用下面的流程、实施例所述的方法和使用现有技术中公认的技术来合成。本文所述的所有化合物都作为化合物被包括在本发明中。本发明的化合物可以根据流程1-3中所述的方法中的至少一种来合成。

在本文的范围内，除非在上下文中特别说明，否则仅将不是本发明化合物的期望的特定终产物的构件的可容易除去的基团称为“保护基团”。在例如标准参考著作，如J.F.W.McOmie，“有机化学中的保护基团(Protective Groups in Organic Chemistry)”，Plenum Press，伦敦和纽约，1973，T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有机合成中的保护基团(ProtectiveGroups in Organic Synthesis)”，第三版，Wiley，纽约，1999中描述了用该类保护基团对官能团进行保护、保护基团本身以及其裂解反应。

具有至少一个成盐基团的本发明化合物的盐可以以本身已知的方式制备。例如，具有酸基团的本发明化合物的盐例如可以通过用以下化合物处理本发明化合物来形成：金属化合物，如适宜有机羧酸的碱金属盐，例如2-乙基己酸的钠盐；有机碱金属或碱土金属化合物，如相应的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐，如氢氧化钠或氢氧化钾、碳酸钠或碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾；相应的钙化合物；或氨或适宜的有机胺。优选地使用化学计算量或仅少量过量的成盐试剂。本发明化合物的酸加成盐是以常规方式获得的，例如通过用酸或适宜的阴离子交换试剂处理所述化合物来获得。包含酸性和碱性成盐基团例如游离羧基和游离氨基的本发明化合物的内盐例如可以通过例如用弱碱将盐例如酸加成盐中和至等电点来形成，或者可以通过用离子交换剂处理来形成。

可以用常规方式将盐转化成游离化合物；例如，可以通过用适宜的酸处理将金属盐和铵盐转化，例如可以通过用适宜的碱性物质处理来使酸加成盐转化。

可以用本身已知的方式将可根据本发明获得的异构体混合物分离成单独的异构体；例如，可以通过在多相溶剂混合物之间进行分配、重结晶和/或色谱分离例如硅胶色谱分离或通过例如使用反相柱的中压液相色谱来分离非对映异构体；且例如可以通过与光学纯的成盐试剂形成盐并分离由此获得的非对映异构体混合物(例如通过分步结晶、使用旋光活性柱材料的色谱法进行分离)来分离外消旋物。

可以根据标准方法例如用色谱法、分配法、(重)结晶等对中间体和终产物进行后处理和/或纯化。

下面的描述一般适用于本文上下文所述的所有方法。

上述所有方法步骤都可以在本身已知的反应条件(包括特别提及的那些条件)下进行，在不存在或通常在存在溶剂或稀释剂(包括例如对所用试剂而言为惰性并能溶解它们的溶剂或稀释剂)、在不存在或存在催化剂、缩合剂或中和剂例如离子交换剂如阳离子交换剂例如H+形式的阳离子交换剂的情况下进行，根据反应和/或反应物的性质，在降低、正常或升高的温度下，例如在约-100℃至约190℃，包括例如在大约-80℃至大约150℃，例如-80至-60℃、室温、-20至40℃下或在回流温度下、在大气压或密封容器中进行，当适宜时在压力下进行，和/或在惰性气氛下，例如在氩气或氮气气氛下进行。

在反应的所有阶段，都可以将所形成的异构体混合物分离成单独的异构体，例如非对映异构体或对映异构体，或者将其分离成任何所需的异构体混合物，例如外消旋物或非对映异构体混合物，例如与“另外的方法步骤”下所述的方法类似地来进行分离。

除非在方法的描述中特别标明，否则可选择的适用于任何特定反应的溶剂包括明确提及的那些溶剂，例如水；酯，如低级烷基-低级链烷酸酯，例如乙酸乙酯；醚，如脂族醚，例如乙醚；或环状醚，例如四氢呋喃或二

烷；液体芳族烃，如苯或甲苯；醇，如甲醇、乙醇或1-或2-丙醇；腈，如乙腈；卤化烃，如二氯甲烷或氯仿；酰胺，如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺；碱，如杂环氮碱，例如吡啶或N-甲基吡咯烷-2-酮；羧酸酐，如低级链烷酸酐，例如乙酸酐；环状、直链或支链烃，如环己烷、己烷或异戊烷、甲基环己烷，或这些溶剂的混合物，例如水溶液。该类溶剂混合物也可用于后处理，例如通过色谱法或分配进行的后处理中。

包括其盐在内的所述化合物也可以以水合物的形式获得，或者它们的结晶可包括结晶用的溶剂。可存在不同的结晶形式。

本发明还涉及所述方法的如下那些形式：其中用在该方法的任何阶段可获得的中间体化合物作为起始原料并进行其余方法步骤；或者其中在反应条件下形成起始原料或起始原料以衍生物形式例如以被保护形式或盐形式进行应用；或者在所述方法条件下制备可用本发明方法获得的化合物并在原位对其进一步进行处理。

合成本发明化合物所用的所有起始原料、结构单元、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂和催化剂都可以商业获得或者可以用本领域普通技术人员已知的有机合成方法来制备(Houben-Weyl，第4版，1952，有机合成方法(Methods of Organic Synthesis)，Thieme，第21卷)。

通常，可根据以下提供的流程1至7制备式I至式IV化合物。

可通过使中间体A水解来制备其中X¹为羟基的式I’或式I的本发明化合物，在中间体A中A¹、R¹、R²、R³、R⁴及m具有上文式I’或式I中的定义；且P¹为选自(但不限于)甲基、乙基或叔丁基或甲氧基苄基或苄基的适当保护基。

可使用选自(但不限于)NaOH、KOH或LiOH的碱或选自(但不限于)TFA、HCl或BCl₃的酸，应用标准方法来水解中间体A。当P¹为苄基或甲氧基苄基时，脱保护的优选方法为在诸如但不限于钯碳的催化剂存在下进行氢化。

在一些情况下，中间体A的水解是不需要的；例如当中间体A是其中X¹为O-烷基的式I’或I的本发明化合物时。

流程1说明了中间体A的合成。可根据以下流程1中描述的一般方法来制备中间体A，其中A¹、P¹、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、s及m如先前定义。

流程1

步骤1a中，可通过中间体1A(其中P²为选自但不限于叔丁氧基羰基、苄氧基羰基、芴甲氧羰基、苄基或甲氧基苄基的适当保护基且其中LG¹为选自但不限于卤素(例如溴、氯或碘)或三氟甲磺酰氧基的离去基团)与中间体2A(其中R²及m如先前所述且其中BG为选自但不限于硼酸、三氟硼酸酯或硼酸酯的适当基团)的交叉偶联来制备中间体3A。可应用已知的偶联方法包括使用钯物质(诸如但不限于Pd(PPh₃)₄、PdCl₂(dppf)、Pd(PPh₃)₂Cl₂或Pd(OAc)₂与膦配体(诸如PPh₃、dppf、PCy₃或P(t-Bu)₃))及碱(诸如但不限于Na₂CO₃、K₃PO₄、K₂CO₃、KF、CsF、NaO-t-Bu或KO-t-Bu)进行的中间体1A与中间体2A的Suzuki-Miyaura偶联。

在步骤2a中，可通过适当保护中间体3A(其中P³为保护基，诸如但不限于叔丁基、甲基、苄基、芴基甲基、烯丙基或甲氧基苄基)；随后适当脱除保护基P2基团来制备中间体4A。

在步骤3a中，可通过使中间体4A(其中R²、R⁵、R⁶、s、m及P³如先前定义)与中间体6A(其中R¹及P¹如上文先前定义，且其中LG²为选自但不限于三氟甲磺酰基氧基、甲苯磺酰基氧基、甲磺酰基氧基、碘、溴及氯的离去基团)反应，接着使用适当方法脱除保护基P³来制备中间体5A。备选地，可通过使中间体4A与中间体6B(其中R¹及P¹如上文所定义)反应，接着使用适当方法脱除保护基P³来制备中间体5A。可应用已知的偶联方法包括：使用诸如但不限于叔胺(例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺)、吡啶或K₂CO₃的碱用中间体6A烷基化中间体4A；或在诸如在催化剂(诸如钯碳)存在下的氢化条件下、或在存在或不存在诸如乙酸、TFA或Ti(i-PrO)₄的酸的情况下使用还原试剂(例如NaBH₄、NaBH(OAc)₃或NaBH₃CN)的还原条件下中间体4A与中间体6B的还原胺化条件。

在步骤4a中，可通过使中间体5A(其中P¹、R¹、R²、R⁵、R⁶、s及m如先前所述)与中间体7A(其中A¹、R³及R⁴如先前所述)偶联来制备中间体A。可应用已知的偶联方法包括但不限于：使用诸如三光气、羰基二咪唑、氯甲酸4-硝基苯酯或碳酸二琥珀酰亚胺酯的试剂将中间体5A转化为相应的唑烷-2，5-二酮，使用诸如亚硫酰氯或草酰氯的试剂将中间体5A转化为相应的酰卤，或使用诸如ClC(O)O-异丁基、2，4，6-三氯苯甲酰氯或丙基膦酸酐环三聚体(T3P)的试剂将中间体5A转化为相应的混合酸酐，接着使

唑烷-2，5-二酮、酰卤或混合酸酐与中间体7A在存在或不存在诸如叔胺(例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺)或K₂CO₃的碱的情况下反应。备选地，可使用肽缩合试剂(包括但不限于：二环己基碳二亚胺(DCC)、二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCHCl)、苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷子基-

六氟磷酸盐(PyBOP)或苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲基氨基)

六氟磷酸盐(BOP))在存在或不存在诸如1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-氮杂苯并三唑或二甲基氨基吡啶的试剂的情况下使中间体5A与中间体7A偶联。

流程2说明了中间体5A的合成。也可根据以下流程2中描述的方法制备中间体5A，其中BG、LG¹、LG²、P¹、P³、R¹、R²及m如先前定义。

流程2

步骤1b中，可通过使中间体8A(其中LG¹、R⁵、R⁶、s及P³如先前描述)与中间体6A(其中R¹、P¹及LG²如先前所述)反应，随后适当脱除保护基P³来制备中间体9A。备选地，可通过使中间体8A与中间体6B(其中P¹及R¹如先前所述)反应，接着适当脱除保护基P³来制备中间体9A。可应用已知的反应方法，包括使用诸如但不限于叔胺(例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺)、吡啶或K₂CO₃的碱用中间体6A烷基化中间体8A；或在诸如在催化剂(诸如钯碳)存在下的氢化条件下、或在存在或不存在诸如乙酸、TFA或Ti(i-PrO)₄的酸的情况下使用还原剂(例如NaBH₄、NaBH(OAc)₃或NaBH₃CN)的还原条件下中间体8A与中间体6B的还原胺化条件。

步骤2b中，可通过使中间体9A(其中LG¹、P¹、R⁵、R⁶、R¹及s如先前所述)与中间体2A(其中BG、m及R²如先前所述)交叉偶联来制备中间体5A。可应用已知的偶联方法包括使用钯物质(诸如但不限于Pd(PPh₃)₄、PdCl₂(dppf)、Pd(PPh₃)₂Cl₂或Pd(OAc)₂与膦配体(诸如PPh₃、dppf、PCy₃或P(t-Bu)₃))及碱(诸如但不限于Na₂CO₃、K₃PO₄、K₂CO₃、KF、CsF、NaO-t-Bu或KO-t-Bu)进行的中间体9A与中间体2A的Suzuki-Miyaura偶联。

还可根据以下流程3中描述的一般方法制备中间体9A，其中LG¹、P¹、P³、R⁵、R⁶、R¹及s如先前所述。

流程3

步骤1c中，可通过中间体10A(其中LG¹、R⁶、s及P³如先前所述)与中间体11A(其中P¹、R⁵及R¹如先前所述)的还原胺化来制备中间体9A。可应用已知的还原胺化方法包括：诸如但不限于在催化剂诸如钯碳存在下的氢化条件，或使用诸如但不限于NaBH₄、NaBH(OAc)₃或NaBH₃CN的试剂在存在或不存在诸如乙酸、TFA或Ti(i-PrO)₄的酸的情况下的还原条件。可根据已报道的方法制备中间体10A。这一化学方法的说明性实例概述于WO 2006015885中。

还可根据以下流程4中描述的一般方法制备中间体5A，其中m、P¹、P³、R¹及R²如先前所述。

流程4

步骤1d中，可通过中间体12A(其中m、P³、R⁵、R⁶、s、m和R²如先前所述)与中间体11A(其中P¹、R⁵及R¹如先前所述)的还原胺化来制备中间体5A。可应用已知的还原胺化方法，包括：诸如但不限于在催化剂诸如钯碳存在下的氢化条件，或使用诸如但不限于NaBH₄、NaBH(OAc)₃或NaBH₃CN的试剂在存在或不存在诸如乙酸、TFA或Ti(i-PrO)₄的酸的情况下的还原条件。可根据已报道的方法制备中间体12A。这一化学方法的说明性实例概述于WO 2006015885中。

还可根据以下流程5中描述的一般方法制备中间体A，其中A¹、LG²、P¹、P²、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、s和m如先前所述。

流程5

步骤1e中，可通过使中间体3A与中间体7A偶联来制备中间体13A。可应用已知的偶联方法，包括但不限于：使用诸如三光气、羰基二咪唑、氯甲酸4-硝基苯酯或碳酸二琥珀酰亚胺酯的试剂将中间体3A转化为相应的

唑烷-2，5-二酮、使用诸如亚硫酰氯或草酰氯的试剂将中间体3A转化为相应的酰卤、或使用诸如ClC(O)O-异丁基或2，4，6-三氯苯甲酰氯的试剂将中间体3A转化为相应的混合酸酐，接着使唑烷-2，5-二酮、酰卤或混合酸酐与中间体7A在存在或不存在诸如叔胺(例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺)或K₂CO₃的碱的情况下反应，且适当脱除P²保护基。备选地，可使用肽缩合试剂(包括但不限于：二环己基碳二亚胺(DCC)、二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC HCl)、苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷子基-

六氟磷酸盐(PyBOP)或苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(BOP))使中间体3A与中间体7A在存在或不存在诸如1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-氮杂苯并三唑或二甲基氨基吡啶的试剂的情况下偶联，接着适当脱除P²保护基。

步骤2e中，可通过使中间体13A与中间体6A(其中LG²如先前所述)反应来制备中间体A。备选地，可通过使中间体13A与中间体6B反应来制备中间体A。可应用已知的反应方法，包括：使用诸如但不限于叔胺(例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺)、吡啶或K₂CO₃的碱用中间体6A烷基化中间体13A；或在诸如但不限于在催化剂(诸如钯碳)存在下的氢化条件下、或使用试剂(例如但不限于NaBH₄、NaBH(OAc)₃或NaBH₃CN)在存在或不存在诸如乙酸、TFA或Ti(i-PrO)₄的酸的情况下的还原条件下中间体13A与中间体6B的还原胺化。

还可根据以下流程6中描述的方法制备中间体A，其中A¹、BG、LG¹、P¹、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、s及m如先前所述。

流程6

步骤1f中，可通过使中间体9A(其中LG¹、P¹、R⁵、R⁶、m、s和R¹如先前所述)与中间体7A偶联来制备中间体14A。可应用已知的偶联方法，包括但不限于：使用诸如三光气、羰基二咪唑、氯甲酸4-硝基苯酯或碳酸二琥珀酰亚胺酯的试剂将中间体9A转化为相应的

唑烷-2，5-二酮、使用诸如亚硫酰氯或草酰氯的试剂将中间体9A转化为相应的酰卤、或使用诸如ClC(O)O-异丁基或2，4，6-三氯苯甲酰氯的试剂将中间体9A转化为相应的混合酸酐，接着使

唑烷-2，5-二酮、酰卤或混合酸酐与中间体7A在存在或不存在诸如叔胺(例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺)或K₂CO₃的碱的情况下反应。备选地，可使用肽缩合试剂(包括但不限于：二环己基碳二亚胺(DCC)、二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC HCl)、苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷子基-

六氟磷酸盐(PyBOP)或苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲基氨基)六氟磷酸盐(BOP))使中间体9A与中间体7A在存在或不存在诸如1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-氮杂苯并三唑或二甲基氨基吡啶的试剂的情况下偶联。

步骤2f中，可通过使中间体14A(其中A¹、LG¹、P¹、R¹、R³、R⁵、R⁶、m、s及R⁴如先前所述)与中间体2A(其中R²、m及BG如先前所述)交叉偶联来制备中间体A。可应用已知的偶联方法，包括使用钯物质(诸如但不限于Pd(PPh₃)₄、PdCl₂(dppf)或Pd(OAc)₂与膦配体(诸如PPh₃、dppf、PCy₃或P(t-Bu)₃))及碱(诸如但不限于Na₂CO₃、K₃PO₄、K₂CO₃、KF、CsF、NaO-t-Bu或KO-t-Bu)进行的中间体14A与中间体2A的Suzuki-Miyaura偶联。

还可根据以下流程7中描述的方法制备中间体14A，其中A¹、LG¹、LG²、P¹、P²、R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、s和m如之前所述。

流程7

步骤1g中，可通过使中间体1A(其中P²、R⁵、R⁶、s和LG¹如先前定义)与中间体7A(其中A¹、R³和R⁴如先前定义)偶联，接着适当脱除P²保护基，从而制备中间体15A。可应用已知的偶联方法，包括但不限于：使用诸如三光气、羰基二咪唑、氯甲酸4-硝基苯酯或碳酸二琥珀酰亚胺酯的试剂将中间体1A转化为相应的

唑烷-2，5-二酮、使用诸如亚硫酰氯或草酰氯的试剂将中间体1A转化为相应的酰卤、或使用诸如ClC(O)O-异丁基或2，4，6-三氯苯甲酰氯的试剂将中间体1A转化为相应的混合酸酐，接着使

六氟磷酸盐(PyBOP)或苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲基氨基)

六氟磷酸盐(BOP))使中间体1A与中间体7A在存在或不存在诸如1-羟基苯并三唑、1-羟基-7-氮杂苯并三唑或二甲基氨基吡啶的试剂的情况下偶联。

步骤2g中，可通过使中间体15A(其中A¹、LG¹、R³、R⁵、R⁶、s及R⁴如先前定义)与中间体6A(其中R¹、P¹及LG²如先前定义)反应来制备中间体14A。备选地，可通过使中间体15A(其中A¹、LG¹、R³、R⁵、R⁶、s及R⁴如先前定义)与中间体6B(其中R¹及P¹如先前所述)反应来制备中间体14A。可应用已知的反应方法，包括使用诸如但不限于叔胺(例如三乙胺或N，N-二异丙基乙胺)、吡啶或K₂CO₃的碱进行的中间体15A与中间体6A的烷基化；或在诸如但不限于在催化剂(诸如钯碳)存在下的氢化条件下、或使用试剂(诸如但不限于NaBH₄、NaBH(OAc)₃或NaBH₃CN)在存在或不存在诸如乙酸、TFA或Ti(i-PrO)₄的酸的情况下的还原条件下中间体15A与中间体6B的还原胺化。

本发明进一步包括本发明方法的任何变体，其中将可在其任何阶段获得的中间产物用作起始原料且进行剩余步骤，或其中起始原料在反应条件下原位形成，或其中反应成分以其盐或光学纯对映体的形式使用。

本发明化合物及中间体还可根据本领域技术人员通常已知的方法相互转化。

在另一方面，本发明提供了包含本发明化合物或其可药用盐和一种或多种可药用载体的药物组合物。该药物组合物可被配制为用于特定施用途径如口服施用、胃肠外施用和直肠施用等。此外，本发明的药物组合物还可以被制备为固体形式(包括但不限于胶囊、片剂、丸剂、颗粒剂、粉剂或栓剂)或液体形式(包括但不限于溶液剂、混悬剂或乳剂)。药物组合物可以被进行常规制药操作如灭菌和/或可以包含常规惰性稀释剂、润滑剂或缓冲剂以及辅助剂，诸如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂和缓冲剂等。

药物组合物典型地是片剂或明胶胶囊，其包含活性成分和

a)稀释剂，例如，乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸；

b)润滑剂，例如，硅石、滑石粉、硬脂酸、其镁或钙盐和/或聚乙二醇；对于片剂而言，还有

c)粘合剂，例如，硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要的话，还包含

d)崩解剂，例如，淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐、或泡腾合剂；和/或

e)吸收剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。

可以根据现有技术已知的方法对片剂包膜衣或肠衣。

口服施用的适宜组合物包括片剂、锭剂、水性或油性混悬剂、可分散的粉剂或颗粒剂、乳剂、硬或软胶囊或糖浆剂或酏剂形式的有效量的本发明化合物。用于口服使用的组合物是根据药物组合物制备领域任何已知的方法来进行制备的，并且该类组合物可包含一种或多种选自甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂的物质以提供药学美观和适口的制剂。片剂可含有与适于制备片剂的无毒可药用赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂例如是惰性稀释剂，诸如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如，玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂未被包衣或通过用于延迟其在胃肠道中的崩解和吸收的已知技术进行了包衣，从而提供长久的持续作用。例如，可以使用延时材料诸如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。用于口服应用的制剂可以以其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合的硬明胶胶囊形式或其中活性成分与水或油性介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合的软明胶胶囊形式呈现。

某些可注射的组合物是等渗的水性溶液或混悬液，栓剂有利地是由脂肪乳剂或混悬液制备的。所述组合物可以被灭菌和/或包含辅助剂，诸如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶解促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。此外，它们还可包含其他有治疗价值的物质。所述组合物是分别根据常规混合、制粒或包衣方法来制备的，并且包含约0.1-75％或约1-50％的活性成分。

用于经皮应用的适宜组合物包含有效量的本发明化合物和合适的载体。施用经皮递送的载体包括用于帮助通过主体皮肤的药理学可接受的可吸收溶剂。例如，经皮装置为包含背衬部件、包含所述化合物和任选的载体的储库、任选的用于以受控和预定的速率在长期内向主体皮肤传递化合物的控速屏障、和将该装置固定在皮肤上的工具。

用于局部应用例如应用于皮肤和眼睛的适宜组合物包括水溶液、混悬液、软膏、霜剂、凝胶或可喷雾制剂，例如，用于通过气雾剂等递送。该类局部递送系统特别适于皮肤应用。因此，它们特别适用于局部应用，包括现有技术中众所周知的化妆品制剂。该类制剂可包含增溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲剂和防腐剂。

如本文所用的那样，局部应用还可涉及吸入剂或鼻内应用。它们可方便地以干粉形式(单独地、混合物的形式例如与乳糖的干混合物；或混合组分颗粒例如与磷脂的混合组分颗粒形式)由干粉吸入器进行递送或在使用或不使用适宜抛射剂的情况下由加压的容器、泵、喷雾器、雾化器或喷洒器以喷雾剂形式递送。

因为水可能会促进某些化合物分解，因此，本发明进一步提供了包含作为活性成分的本发明化合物的无水药物组合物和剂型。

本发明的无水药物组合物和剂型可以用无水或低含水量的成分和低水分或低湿度条件来制备。可以制备无水药物组合物并以维持其无水状态的方式对其进行贮存。因此，应用已知可阻止与水分接触的材料对无水组合物进行包装，从而使得它们被包括在适宜的制剂药盒中。适宜包装的实例包括但不限于密封的箔、塑料制品、单位剂量容器(例如，小瓶)、凸泡包装和条状包装(strip packs)。

本发明进一步提供了包含一种或多种降低作为活性成分的本发明化合物的降解速率的物质的药物组合物和剂型。在本文被称为“稳定剂”的该类物质包括但不限于抗氧化剂诸如抗坏血酸、pH缓冲剂或盐缓冲剂等。

游离形式或可药用盐形式的式I至IV中任意一项的化合物、或其可药用盐表现出有价值的药理学性质，例如中性内肽酶EC 3.4.24.11调节性质，例如在下一部分中提供的体外和体内试验中所表明的性质，并且因此表明它们可用于治疗。

本发明的化合物或其可药用的盐可用于治疗选自下列的适应征：高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管疾病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全(糖尿病或非糖尿病性)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、肾病综合征、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、肾血管性高血压、糖尿病性视网膜病和晚期肾病(ESRD)、内皮功能障碍、舒张期功能障碍、肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上和室性心律失常、心房颤动(AF)、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重构、斑块稳定、心肌梗死(MI)、肾纤维化、多囊性肾病(PKD)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、周期性水肿、梅尼埃病、高醛固酮血症(原发性和继发性)和高钙尿症、腹水、青光眼、月经失调、早产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖病症(尤其是男性和女性不育、多囊卵巢综合征、植入失败)、哮喘、阻塞性睡眠呼吸暂停、炎症、白血病、疼痛、癫痫症、情感障碍诸如抑郁和精神病诸如痴呆和老年意识错乱、肥胖和胃肠道病症(尤其是腹泻和肠易激综合征)、伤口愈合(尤其是糖尿病性和静脉溃疡以及压疮)、脓毒性休克、胃酸分泌功能障碍、高肾素血症、囊性纤维化、再狭窄、2型糖尿病、代谢综合征、糖尿病并发症和动脉粥样硬化、雄性和雌性性功能障碍。因此，作为另一实施方案，本发明提供了式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐的用途。在另一实施方案中，治疗选自与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病。在另一实施方案中，疾病选自上文列出的那些，适宜地是高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、2型糖尿病和糖尿病并发症，最适宜地是心血管疾病诸如高血压、肾功能不全包括水肿和充血性心力衰竭。

因此，作为另一实施方案，本发明提供式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐在治疗中的用途。在另一实施方案中，治疗选自可通过抑制中性内肽酶EC 3.4.24.11活性来治疗的疾病。

在另一实施方案中，本发明提供了治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病的方法，该方法包括施用治疗学上可接受的量的式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐。在另一实施方案中，所述疾病选自上文提及的那些，适宜地是高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、2型糖尿病和糖尿病并发症，最适宜地是心血管疾病诸如高血压、肾功能不全包括水肿和充血性心力衰竭。

对于约50-70kg的受试者，本发明的药物组合物或组合可为约1-1000mg活性成分的单位剂量形式，或为约1-500mg或约1-250mg或约1-150mg或约0.5-100mg或约1-50mg活性成分的单位剂量形式。化合物、药物组合物或其组合的治疗有效剂量取决于受试者的物种、体重、年龄及个体状况、所治疗的病症或疾病或其严重性。一般熟练的医师、临床医生或兽医可容易地确定预防、治疗或抑制病症或疾病进程所必需的各活性成分的有效量。

以上引用的剂量性质可在体外和体内试验中有利地使用哺乳动物例如小鼠、大鼠、狗、猴或其离体器官、组织和制备物来证明。本发明的化合物可以在体外以溶液、例如水溶液的形式应用，以及在体内经肠、胃肠道外、有利地经静脉内、例如作为混悬液或在水性溶液中应用。体外剂量的范围可以在约10-3摩尔至约10-9摩尔浓度之间。体内治疗有效量可以根据施用途径为约0.1-500mg/kg或约1-100mg/kg。

本发明化合物的活性可以通过如下体外和体内方法和/或通过本领域详述的如下体外和体内方法来评价。参见A fluorescence lifetime-basedassay for protease inhibitor profiling on human kallikrein 7 Doering K，Meder G，Hinnenberger M，Woelcke J，Mayr LM，Hassiepen U BiomolScreen.2009年1月；14(1)：1-9。

具体而言，可以如下测定重组人中性内肽酶(NEP，EC 3.4.24.11)的体外抑制：

将重组人中性内肽酶(在昆虫细胞中表达，采用标准方法纯化，终浓度7pM)与各种浓度的受试化合物一起于室温在10mM磷酸钠缓冲液(pH7.4)中预温育1小时，所述缓冲液含有150mM NaCl和0.05％(w/v)CHAPS。通过添加合成的肽底物Cys(PT14)-Arg-Arg-Leu-Trp-OH至终浓度为0.7μM引发酶反应。底物水解使得通过FLT读数计测定的PT14的荧光寿命(FLT)增加，如Doering等人(2009)所述。于室温下温育1小时(t＝60min)后测定了化合物对酶活性的作用。采用非线性回归分析软件由抑制百分数对比于抑制剂浓度的图计算了IC50值，IC50值相应于使没有抑制剂存在下测定的FLT值下降50％的抑制剂浓度。

采用测试分析(如上文所述)，根据下文提供的表1，本发明的化合物显示出抑制功效。

表1 化合物的抑制活性

化合物：实施例#	人NEP IC₅₀(nM)
		实施例3-1	0.09
实施例3-2	0.3
		实施例3-4	11
实施例3-7	2.4
		实施例3-10	91
实施例3-12	0.2
		实施例3-13	0.2

本发明的化合物可以与一种或多种其他治疗剂同时、在其之前或之后施用。本发明的化合物可以通过相同或不同施用途径单独施用或者与其他活性剂在同一药物组合物中一起施用。

在一实施方案中，本发明提供了包含式I’、I、II、III或IV化合物、或其可药用盐和至少一种其他治疗剂的作为组合制剂用于同时、分别或依次在治疗中使用的产品。在一个实施方案中，所述治疗是与中性内肽酶EC3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的治疗。

作为组合制剂提供的产品包括在同一药物组合物中包含式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐以及其他治疗剂的组合物，或者呈单独形式、例如药盒形式的式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐和其他治疗剂。

在一个实施方案中，本发明提供了包含式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐和其他治疗剂的药物组合物。药物组合物可以任选包含如上文所述的可药用赋形剂。

在一个实施方案中，本发明提供了包含两个或更多个单独药物组合物的药盒，所述药物组合物中至少一个含有式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐。在一个实施方案中，药盒包含单独容纳所述组合物的装置，诸如容器、分开的瓶或分隔箔袋。这类药盒的实例有如通常用于包装片剂、胶囊等的泡罩包装。

本发明的药盒可用于施用不同的剂型，例如口服和胃肠道外剂型，用于在不同的剂量间隔施用单独的组合物或者相对于一种独立的组合物逐渐增加另一种独立的组合物。为了增加便利性，本发明的药盒通常含有施用说明书。

在本发明的组合治疗中，本发明的化合物和其他治疗剂可以通过相同或不同的制造商来制备和/或配制。而且，本发明的化合物和其他治疗剂可以(i)在将组合产品发放给医师之前(例如当药盒包含本发明的化合物和其他治疗剂时)；(ii)通过医生自己(或在医师的指导下)在临施用前；(iii)由患者自己、例如在依次施用本发明的化合物和其它治疗剂期间被带入组合治疗中。

因此，本发明提供了式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐在用于治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的用途，其中所述药物被制备用于与其它治疗剂一起施用。本发明还提供了其他治疗剂用于治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的用途，其中所述药物与式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐一起施用。

本发明还提供了用于治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的方法的式I’、I、III、III或IV化合物或其可药用盐，其中所述的式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐被制备用于与其他治疗剂一起施用。本发明还提供了用于治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的方法的其他治疗剂，其中所述的其他治疗剂被制备用于与式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐一起施用。本发明还提供了用于治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的方法的式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐，其中所述的式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐与其它治疗剂一起施用。本发明还提供了用于治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的方法的其它治疗剂，其中所述的其他治疗剂与式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐一起施用。

本发明还提供了式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐用于治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的用途，其中患者之前(例如24小时内)已经用其他治疗剂进行了治疗。本发明还提供了其他治疗剂用于治疗与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的疾病或疾患的用途，其中患者之前(例如24小时内)已经用式I’、I、II、III或IV化合物或其可药用盐进行了治疗。

在一个实施方案中，其它治疗剂选自：

在一个实施方案中，其它治疗剂选自：HMG-Co-A还原酶抑制剂、血管紧张素受体阻断剂(ARBs，血管紧张素II受体拮抗剂)、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、钙通道阻断剂(CCB)、内皮素拮抗剂、肾素抑制剂、利尿剂、ApoA-I模拟物、抗糖尿病剂、减肥剂、醛固酮受体阻断剂、内皮素受体阻断剂、醛固酮合酶抑制剂(ASI)、CETP抑制剂和5型磷酸二酯酶(PDE5)抑制剂。

术语与第二种活性剂或治疗“组合”包括：共同施用本发明的化合物(例如式I至IV中任一项的化合物或如本文别处所述的化合物)和第二种活性剂或治疗；首先施用本发明的化合物，然后施用第二种活性剂或治疗；以及首先施用第二种活性剂或治疗，然后施用本发明的化合物。

术语“第二种活性剂”包括在本领域已知治疗、预防或者减轻本文所述的疾病或病症的症状的任意活性剂，所述疾病或病症例如是对中性内肽酶的抑制有响应的病症或疾病，例如：高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管疾病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全(糖尿病或非糖尿病性)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、肾病综合征、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、肾血管性高血压、糖尿病性视网膜病和晚期肾病(ESRD)、内皮功能障碍、舒张期功能障碍、肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上和室性心律失常、心房颤动(AF)、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重构、斑块稳定、心肌梗死(MI)、肾纤维化、多囊性肾病(PKD)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、周期性水肿、梅尼埃病、高醛固酮血症(原发性和继发性)和高钙尿症、腹水、青光眼、月经失调、早产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖病症(尤其是男性和女性不育、多囊卵巢综合征、植入失败)、哮喘、阻塞性睡眠呼吸暂停、炎症、白血病、疼痛、癫痫症、情感障碍诸如抑郁和精神病诸如痴呆和老年意识错乱、肥胖和胃肠道病症(尤其是腹泻和肠易激综合征)、伤口愈合(尤其是糖尿病性和静脉溃疡以及压疮)、脓毒性休克、胃酸分泌的调节、高肾素血症的治疗、囊性纤维化、再狭窄、2型糖尿病、代谢综合征、糖尿病并发症和动脉粥样硬化、雄性和雌性性功能障碍。

第二种活性剂的实例包括HMG-Co-A还原酶抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、钙通道阻断剂(CCB)、内皮素拮抗剂、肾素抑制剂、利尿剂、ApoA-I模拟物、抗糖尿病剂、减肥剂、醛固酮受体阻断剂、内皮素受体阻断剂、醛固酮合酶抑制剂(ASI)和CETP抑制剂。

术语“HMG-Co-A还原酶抑制剂”(也称为β-羟基-β-甲基戊二酰-辅酶-A还原酶抑制剂)包括可以用于降低血中脂质水平包括胆固醇的活性剂。实例包括阿托伐他汀、西立伐他汀、康帕丁(compactin)、达伐他汀、二氢康帕丁、氟多他汀(fluindostatin)、氟伐他汀、洛伐他汀、匹伐他汀、美伐他汀、普伐他汀、雷伐他汀(rivastatin)、辛伐他汀和维洛他汀(velostatin)或其可药用盐。

术语“ACE抑制剂”(也称为血管紧张素转化酶抑制剂)包括中断血管紧张素I被酶降解为血管紧张素II的分子。这类化合物可以用于调节血压和用于治疗充血性心力衰竭。实例包括阿拉普利、贝那普利、贝那普利拉、卡托普利、西罗普利、西拉普利、地拉普利、依那普利、依那普利拉(enaprilat)、福辛普利、咪达普利、赖诺普利、莫维托普利(moveltopril)、培哚普利、喹那普利、雷米普利、螺普利、替莫普利和群多普利或其可药用盐。

术语“内皮素拮抗剂”包括波生坦(参见EP 526708A)、替唑生坦(参见WO 96/19459)或其可药用盐。

术语“肾素抑制剂”包括地替吉仑(化学名：[1S-[1R＊，2R＊，4R＊(1R＊，2R＊)]]-1-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-L-脯氨酰-L-苯基丙氨酰基-N-[2-羟基-5-甲基-1-(2-甲基丙基)-4-[[[2-甲基-1-[[(2-吡啶基甲基)氨基]羰基]丁基]氨基]羰基]己基]-N-α-甲基-L-组氨酸酰胺)；特拉吉仑(化学名：[R-(R＊，S＊)]-N-(4-吗啉基羰基)-L-苯基丙氨酰基-N-[1-(环己基甲基)-2-羟基-3-(1-甲基乙氧基)-3-氧代丙基]-S-甲基-L-半胱氨酸酰胺)；阿利吉仑(化学名：(2S，4S，5S，7S)-5-氨基-N-(2-氨甲酰基-2，2-二甲基乙基)-4-羟基-7-{[4-甲氧基-3-(3-甲氧基丙氧基)苯基]甲基}-8-甲基-2-(丙-2-基)壬酰胺)和占吉仑(化学名：[1S-[1R＊[R＊(R＊)]，2S＊，3R＊]]-N-[1-(环己基甲基)-2，3-二羟基-5-甲基己基]-α-[[2-[[(4-甲基-1-哌嗪基)磺酰基]甲基]-1-氧代-3-苯基丙基]-氨基]-4-噻唑丙酰胺)，或其盐酸盐，或者如Speedel开发的SPP630、SPP635和SPP800，或者式(A)和(B)的RO 66-1132和RO 66-1168：

或其可药用盐。

术语“阿利吉仑”若无特别定义的话被理解为是游离碱及其盐、尤其是其可药用盐、最优选其半富马酸盐。

血管紧张素II受体拮抗剂或其可药用盐被理解为与血管紧张素II受体的AT₁-受体亚型结合、但是不导致受体活化的活性成分。抑制AT₁-受体的结果是，这些拮抗剂可以例如用作抗高血压药或用于治疗充血性心力衰竭。

AT₁受体拮抗剂类别包括具有不同结构特征的化合物，尤其优选是非肽的那些。例如可以提及的有选自如下的化合物：缬沙坦、氯沙坦、坎地沙坦、依普罗沙坦、厄贝沙坦、沙普立沙坦、他索沙坦、替米沙坦、命名为E-1477的下式化合物

命名为SC-52458的下式化合物

和命名为ZD-8731的下式化合物

或者其各自的可药用盐。

优选的AT₁-受体拮抗剂是已经上市的那些，最优选是缬沙坦或其可药用盐。

术语“钙通道阻滞剂(CCB)”包括二氢吡啶类(DHPs)和非DHPs(例如地尔硫型和维拉帕米型CCBs)。实例包括氨氯地平、非洛地平、瑞司啶(ryosidine)、伊拉地平、拉西地平、尼卡地平、硝苯地平、尼古地平、尼鲁地平、尼莫地平、尼索地平、尼群地平和尼伐地平，优选是选自氟桂利嗪、普尼拉明、地尔硫

芬地林、戈洛帕米、米贝拉地尔、阿尼帕米、噻帕米和维拉帕米或其可药用盐的非DHP代表药。CCBs可以用作抗高血压、抗心绞痛或抗心律失常药。

术语“利尿剂”包括噻嗪衍生物(例如氯噻嗪、氢氯噻嗪、甲基氯噻嗪(methylclothiazide)和氯噻酮(chlorothalidon))。

术语“ApoA-I模拟物”包括D4F肽(例如式D-W-F-K-A-F-Y-D-K-V-A-E-K-F-K-E-A-F)。

术语“抗糖尿病剂”包括促进胰腺β-细胞分泌胰岛素的胰岛素分泌增强剂。实例包括双胍衍生物(例如二甲双胍)、磺脲类(SU)(例如甲苯磺丁脲、氯磺丙脲、妥拉磺脲、醋磺己脲、4-氯-N-[(1-吡咯烷基氨基)羰基]-苯磺酰胺(格列吡脲(glycopyramide))、优降糖(格列本脲)、格列齐特、1-丁基-3-间氨基苯磺酰脲、氨磺丁酰、格列波脲(glibonuride)、格列吡嗪、格列喹酮、格列哌特(glisoxepid)、格列噻唑、格列丁唑(glibuzole)、格列己脲、格列嘧啶、格列平脲、苯磺丁脲和甲苯基环拉酰胺(tolylcyclamide))或其可药用盐。另外的实例包括下式的苯丙氨酸衍生物(例如那格列奈[N-(反式-4-异丙基环己基羰基)-D-苯丙氨酸](参见EP 196222和EP 526171)：

)；

瑞格列奈[(S)-2-乙氧基-4-{2-[[3-甲基-1-[2-(1-哌啶基)苯基]丁基]氨基]-2-氧代乙基}苯甲酸](参见EP 589874、EP 147850 A2且特别是第61页实施例11，和EP 207331Al)；(2S)-2-苄基-3-(顺式-六氢-2-异二氢吲哚基羰基)-丙酸钙二水合物(例如米格列奈(参见EP 507534))；和格列美脲(参见EP31058)。另外的实例包括DPP-IV抑制剂、GLP-1和GLP-1激动剂。

DPP-IV负责使GLP-1失活。更具体而言，DPP-IV产生GLP-1受体拮抗剂，由此缩短对GLP-1的生理学响应。GLP-1是主要的胰腺胰岛素分泌刺激物，它对葡萄糖处置具有直接的有益作用。

DPP-IV抑制剂可以是肽或优选非肽的。DPP-IV抑制剂各自一般地和具体地例如在WO 98/19998、DE 196 16 486 A1、WO 00/34241和WO95/15309中公开，特别是在各自的化合物权利要求和实施例的终产物中公开，终产物、药物制剂和权利要求的主题在此引入本申请作为这些公开内容的参考。优选的是分别在WO 98/19998的实施例3和WO 00/34241的实施例1中具体公开的那些化合物。

GLP-1是促胰岛素的蛋白质，它例如由W.E.Schmidt等人在Diabetologia，28，1985，704-707中和在US 5,705,483中进行了描述。

术语“GLP-1激动剂”包括GLP-1(7-36)NH₂的变体和类似物，它们特别在US 5,120,712、US 5,118666、US 5,512,549、WO 91/11457中和由C.Orskov等人在J.Biol.Chem.264(1989)12826中被公开。另外的实例包括其中Arg³⁶的羧基末端酰胺官能团在GLP-1(7-36)NH₂分子的第37位上被Gly代替的GLP-1(7-37)及其变体和类似物、包括GLN⁹-GLP-1(7-37)、D-GLN⁹-GLP-1(7-37)、乙酰基LYS⁹-GLP-1(7-37)、LYS¹⁸-GLP-1(7-37)和特别是GLP-1(7-37)OH、VAL⁸-GLP-1(7-37)、GLY⁸-GLP-1(7-37)、THR⁸-GLP-1(7-37)、MET⁸-GLP-1(7-37)和4-咪唑并丙酰基-GLP-1。还特别优选由Greig等人在Diabetologia 1999，42，45-50中描述的GLP激动剂类似物艾塞那肽-4(exendin-4)。

“抗糖尿病剂”定义中还包括胰岛素敏感性增强剂，其可恢复受损的胰岛素受体功能以降低胰岛素抗性并因此增强胰岛素敏感性。实例包括降血糖的噻唑烷二酮衍生物(例如格列酮(glitazone)、(S)-((3，4-二氢-2-(苯基-甲基)-2H-1-苯并吡喃-6-基)甲基-噻唑烷-2，4-二酮(恩格列酮)、5-{[4-(3-(5-甲基-2-苯基-4-

唑基)-1-氧代丙基)-苯基]-甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(达格列酮)、5-{[4-(1-甲基-环己基)甲氧基)-苯基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(环格列酮)、5-{[4-(2-(1-吲哚基)乙氧基)苯基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(DRF2189)、5-{4-[2-(5-甲基-2-苯基-4-

唑基)-乙氧基)]苄基}-噻唑烷-2，4-二酮(BM-13.1246)、5-(2-萘基磺酰基)-噻唑烷-2，4-二酮(AY-31637)、双{4-[(2，4-二氧代-5-噻唑烷基)甲基]苯基}甲烷(YM268)、5-{4-[2-(5-甲基-2-苯基-4-

唑基)-2-羟基乙氧基]苄基}-噻唑烷-2，4-二酮(AD-5075)、5-[4-(1-苯基-1-环丙烷羰基氨基)-苄基]-噻唑烷-2，4-二酮(DN-108)、5-{[4-(2-(2，3-二氢吲哚-1-基)乙氧基)苯基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮、5-[3-(4-氯-苯基])-2-丙炔基]-5-苯基磺酰基)噻唑烷-2，4-二酮、5-[3-(4-氯苯基])-2-丙炔基]-5-(4-氟苯基-磺酰基)噻唑烷-2，4-二酮、5-{[4-(2-(甲基-2-吡啶基-氨基)-乙氧基)苯基]甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(罗西格列酮)、5-{[4-(2-(5-乙基-2-吡啶基)乙氧基)苯基]-甲基}噻唑烷-2，4-二酮(吡格列酮)、5-{[4-((3，4-二氢-6-羟基-2，5，7，8-四甲基-2H-1-苯并吡喃-2-基)甲氧基)-苯基]-甲基}-噻唑烷-2，4-二酮(曲格列酮)、5-[6-(2-氟-苄基氧基)萘-2-基甲基]-噻唑烷-2，4-二酮(MCC555)、5-{[2-(2-萘基)-苯并

唑-5-基]-甲基}噻唑烷-2，4-二酮(T-174)和5-(2，4-二氧代噻唑烷-5-基甲基)-2-甲氧基-N-(4-三氟甲基-苄基)苯甲酰胺(KRP297))。

其他的抗糖尿病剂包括胰岛素信号传导途径调节剂如蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP酶)抑制剂、抗糖尿病的非小分子模拟化合物和谷氨酰胺-果糖-6-磷酸酰胺转移酶(GFAT)抑制剂；影响失调的肝葡萄糖生成的化合物如葡萄糖-6-磷酸酶(G6P酶)抑制剂、果糖-1，6-二磷酸酶(F-1，6-Bp酶)抑制剂、糖原磷酸化酶(GP)抑制剂、胰高血糖素受体拮抗剂和烯醇丙酮酸磷酸羧激酶(PEPCK)抑制剂；丙酮酸脱氢酶激酶(PDHK)抑制剂；胃排空抑制剂；胰岛素；GSK-3抑制剂；类视色素X受体(RXR)激动剂；β-3 AR激动剂；解偶联蛋白(UCPs)激动剂；非格列酮型PPARγ激动剂；双重PPARα/PPARγ激动剂；抗糖尿病的含钒化合物；肠降血糖素激素如胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和GLP-1激动剂；β-细胞咪唑啉受体拮抗剂；米格列醇；α₂-肾上腺素能拮抗剂；及其可药用盐。

术语“减肥剂”包括脂酶抑制剂(例如奥利司他)和食欲抑制剂(例如西布曲明和芬特明)。

醛固酮合酶抑制剂或其可药用盐被理解为是具有抑制醛固酮产生的性质的活性成分。醛固酮合酶(CYP11B2)是催化肾上腺皮质中醛固酮产生的最后步骤、即11-脱氧皮质酮向醛固酮转化的线粒体细胞色素P450酶。用所谓的醛固酮合酶抑制剂抑制醛固酮产生已知是一种成功治疗低钾血、高血压、充血性心力衰竭、心房纤维性颤动或肾衰竭的变通方式。这种醛固酮合酶抑制活性可以由本领域技术人员按照标准分析法(例如US2007/0049616)来容易地测定。

醛固酮合酶抑制剂的类别包括甾体和非甾体醛固酮合酶抑制剂，后者是最优选的。

优选可自商业途径获得的醛固酮合酶抑制剂或已经被卫生当局批准的那些醛固酮合酶抑制剂。

醛固酮合酶抑制剂的类别包括具有不同结构特征的化合物。例如可以提及的有选自非甾体芳香酶抑制剂阿那曲唑、法倔唑(包括其(+)-对映异构体)以及甾体芳香酶抑制剂依西美坦的化合物或者如果适当的话其各自的可药用盐。

最优选的非甾体醛固酮合酶抑制剂是下式的法倔唑盐酸盐的(+)-对映异构体(US专利4617307和4889861)

或者如果适当的话其可药用盐。

优选的甾体醛固酮拮抗剂是下式的依普利酮(参考EP 122232 A)

或螺内酯；或者如果适当的话其各自的可药用盐。

可用于所述组合的醛固酮合酶抑制剂有例如US2007/0049616中、特别是化合物权利要求和实施例的终产物中一般和具体公开的化合物和类似物，终产物、药物制剂和权利要求的技术方案在此引入本申请作为该公开的参考。适用于本发明的优选的醛固酮合酶抑制剂包括但不限于4-(6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-基)-3-甲基苯甲腈；5-(2-氯-4-氰基苯基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-甲酸(4-甲氧基苄基)甲基酰胺；4’-氟-6-(6，7，8，9-四氢-5H-咪唑并[1，5-a]氮杂-5-基)联苯-3-甲腈；5-(4-氰基-2-甲氧基苯基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-甲酸丁基酯；4-(6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-基)-2-甲氧基苯甲腈；5-(2-氯-4-氰基苯基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-甲酸4-氟苄基酯；5-(4-氰基-2-三氟甲氧基苯基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-甲酸甲酯；5-(4-氰基-2-甲氧基苯基)-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-甲酸2-异丙氧基乙基酯；4-(6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-基)-2-甲基苯甲腈；4-(6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-基)-3-氟苯甲腈；4-(6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-基)-2-甲氧基苯甲腈；3-氟-4-(7-亚甲基-6，7-二氢-5H-吡咯并[1，2-c]咪唑-5-基)苯甲腈；顺式-3-氟-4-[7-(4-氟-苄基)-5，6，7，8-四氢-咪唑并[1，5-a]吡啶-5-基]苯甲腈；4’-氟-6-(9-甲基-6，7，8，9-四氢-5H-咪唑并[1，5-a]氮杂

-5-基)联苯-3-甲腈；4’-氟-6-(9-甲基-6，7，8，9-四氢-5H-咪唑并[1，5-a]氮杂

-5-基)联苯-3-甲腈或者各自的(R)或(S)对映异构体；或者如果适当的话其可药用盐。

术语醛固酮合酶抑制剂还包括WO2008/076860、WO2008/076336、WO2008/076862、WO2008/027284、WO2004/046145、WO2004/014914、WO2001/076574中公开的化合物和类似物。

而且，醛固酮合酶抑制剂还包括如下文献中公开的化合物和类似物：美国专利申请US2007/0225232、US2007/0208035、US2008/0318978、US2008/0076794、US2009/0012068、US20090048241和PCT申请WO2006/005726、WO2006/128853、WO2006128851、WO2006/128852、WO2007065942、WO2007/116099、WO2007/116908、WO2008/119744和欧洲专利申请EP 1886695。适用于本发明的优选的醛固酮合酶抑制剂包括但不限于8-(4-氟苯基)-5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]嗪；4-(5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]

嗪-8-基)-2-氟苯甲腈；4-(5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]

嗪-8-基)-2，6-二氟苯甲腈；4-(5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]

嗪-8-基)-2-甲氧基苯甲腈；3-(5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]

嗪-8-基)苯甲腈；4-(5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]嗪-8-基)酞腈；4-(8-(4-氰基苯基)-5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]嗪-8-基)苯甲腈；4-(5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]

嗪-8-基)苯甲腈；4-(5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]

嗪-8-基)萘-1-甲腈；8-[4-(1H-四唑-5-基)苯基]-5，6-二氢-8H-咪唑并[5，1-c][1，4]

嗪，由Speedel开发，或者各自的(R)或(S)对映异构体；或者如果适当的话其可药用盐。

术语“内皮素受体阻断剂”包括波生坦。

术语“CETP抑制剂”指抑制胆甾醇酯转移蛋白(CETP)介导的各种胆甾醇酯和甘油三酯从HDL转运至LDL和VLDL的化合物。这类CETP抑制活性容易由本领域技术人员按照标准测定法(例如美国专利6,140,343)来测定。实例包括美国专利6,140,343和美国专利6,197,786中公开的化合物(例如[2R，4S]4-[(3，5-双-三氟甲基-苄基)-甲氧羰基-氨基]-2-乙基-6-三氟甲基-3，4-二氢-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(托彻普(torcetrapib))；美国专利6,723,752中公开的化合物(例如(2R)-3-{[3-(4-氯-3-乙基-苯氧基)-苯基]-[[3-(1，1，2，2-四氟-乙氧基)-苯基]-甲基]-氨基}-1，1，1-三氟-2-丙醇)；美国专利申请序列号10/807,838中公开的化合物；美国专利号5,512,548中公开的多肽衍生物；分别在J.Antibiot.，49(8)：815-816(1996)和Bioorg.Med.Chem.Lett.；6：1951-1954(1996)中公开的玫瑰酮内酯衍生物和含磷酸的胆甾醇酯类似物。此外，CETP抑制剂还包括WO2000/017165、WO2005/095409和WO2005/097806中公开的那些。

优选的PDE5抑制剂是昔多芬。

特别感兴趣的第二种活性剂包括内皮素拮抗剂、肾素抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂、钙通道阻断剂、利尿剂、抗糖尿病剂如DPPIV抑制剂、和醛固酮合酶抑制剂。

在一个实施方案中，本发明提供了组合，尤其是药物组合，其包含治疗有效量的式I’、I、II、III或IV定义的化合物或其可药用盐，以及一种或多种选自以下的治疗活性剂：HMG-Co-A还原酶抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂、血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、钙通道阻断剂(CCB)、内皮素拮抗剂、肾素抑制剂、利尿剂、ApoA-I模拟物、抗糖尿病剂、减肥剂、醛固酮受体阻断剂、内皮素受体阻断剂、醛固酮合酶抑制剂(ASI)和CETP抑制剂。

在一个实施方案中，本发明提供了抑制受试者中性内肽酶EC 3.4.24.11活性的方法，其中该方法包括给该受试者施用治疗有效量的式I’、I、II、III或IV定义的化合物或其可药用盐。

在一个实施方案中，本发明提供了治疗受试者的与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的病症或疾病的方法，其中该方法包括给该受试者施用治疗有效量的式I’、I、II、III或IV定义的化合物或其可药用盐。

在一个实施方案中，本发明提供了治疗受试者的与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的病症或疾病的方法，其中该病症或疾病选自：高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管疾病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全(糖尿病或非糖尿病性)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、糖尿病性肾病、肾病综合征、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、肾血管性高血压、糖尿病性视网膜病和晚期肾病(ESRD)、内皮功能障碍、舒张期功能障碍、肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上和室性心律失常、心房颤动(AF)、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重构、斑块稳定、心肌梗死(MI)、肾纤维化、多囊性肾病(PKD)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、周期性水肿、梅尼埃病、高醛固酮血症(原发性和继发性)和高钙尿症、腹水、青光眼、月经失调、早产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖病症(尤其是男性和女性不育、多囊卵巢综合征、植入失败)、哮喘、阻塞性睡眠呼吸暂停、炎症、白血病、疼痛、癫痫症、情感障碍诸如抑郁和精神病诸如痴呆和老年意识错乱、肥胖和胃肠道病症(尤其是腹泻和肠易激综合征)、伤口愈合(尤其是糖尿病性和静脉溃疡以及压疮)、脓毒性休克、胃酸分泌功能障碍、高肾素血症、囊性纤维化、再狭窄、2型糖尿病、代谢综合征、糖尿病并发症和动脉粥样硬化、雄性和雌性性功能障碍。

在一个实施方案中，本发明提供了作为药物的式I’、I、II、III或IV定义的化合物。

在一个实施方案中，本发明提供了式I’、I、II、III或IV定义的化合物或其可药用盐用于治疗受试者中与中性内肽酶EC 3.4.24.11活性相关的病症或疾病的用途。

在一个实施方案中，本发明提供了式I’、I、II、III或IV定义的化合物用于制备治疗受试者中特征在于中性内肽酶EC 3.4.24.11活性的病症或疾病的药物中的用途，其中所述病症或疾病特别选自：高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管疾病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全(糖尿病或非糖尿病性)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、肾病综合征、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、肾血管性高血压、糖尿病性视网膜病和晚期肾病(ESRD)、内皮功能障碍、舒张期功能障碍、肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上和室性心律失常、心房颤动(AF)、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重构、斑块稳定、心肌梗死(MI)、肾纤维化、多囊性肾病(PKD)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、周期性水肿、梅尼埃病、高醛固酮血症(原发性和继发性)和高钙尿症、腹水、青光眼、月经失调、早产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖病症(尤其是男性和女性不育、多囊卵巢综合征、植入失败)、哮喘、阻塞性睡眠呼吸暂停、炎症、白血病、疼痛、癫痫症、情感障碍诸如抑郁和精神病诸如痴呆和老年意识错乱、肥胖和胃肠道病症(尤其是腹泻和肠易激综合征)、伤口愈合(尤其是糖尿病性和静脉溃疡以及压疮)、脓毒性休克、胃酸分泌功能障碍、高肾素血症、囊性纤维化、再狭窄、2型糖尿病、代谢综合征、糖尿病并发症和动脉粥样硬化、雄性和雌性性功能障碍。

在一个实施方案中，本发明提供了式I’、I、II、III或IV定义的化合物用于治疗受试者中特征在于中性内肽酶EC 3.4.24.11活性的病症或疾病的用途，其中所述病症或疾病特别选自：高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管疾病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全(糖尿病或非糖尿病性)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、肾病综合征、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、肾血管性高血压、糖尿病性视网膜病和晚期肾病(ESRD)、内皮功能障碍、舒张期功能障碍、肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上和室性心律失常、心房颤动(AF)、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重构、斑块稳定、心肌梗死(MI)、肾纤维化、多囊性肾病(PKD)、肾衰竭(包括水肿和盐潴留)、周期性水肿、梅尼埃病、高醛固酮血症(原发性和继发性)和高钙尿症、腹水、青光眼、月经失调、早产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖病症(尤其是男性和女性不育、多囊卵巢综合征、植入失败)、哮喘、阻塞性睡眠呼吸暂停、炎症、白血病、疼痛、癫痫症、情感障碍诸如抑郁和精神病诸如痴呆和老年意识错乱、肥胖和胃肠道病症(尤其是腹泻和肠易激综合征)、伤口愈合(尤其是糖尿病性和静脉溃疡以及压疮)、脓毒性休克、胃酸分泌功能障碍、高肾素血症、囊性纤维化、再狭窄、2型糖尿病、代谢综合征、糖尿病并发症和动脉粥样硬化、雄性和雌性性功能障碍。

本发明的例证：

以下实施例用于解释本发明，而不解释为限制本发明。温度以摄氏度给出。若无另外指出，所有蒸发在减压下、优选在约15mmHg至100mmHg(＝20-133mbar)下进行。终产物、中间体和原料的结构通过标准分析方法如微量分析和波谱特征如MS、IR、NMR来确定。所用缩略语是本领域常规的那些。

用于合成本发明的化合物的所有原料、结构单元、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂和催化剂可自商业途径获得，或者可以通过本领域技术人员已知的有机合成方法来产生(Houben-Weyl，第4版，1952，Methods ofOrganic Synthesis，Thieme，第21卷)。而且，本发明的化合物可以通过本领域技术人员已知的有机合成方法如以下实施例中所示的那样来产生。

本发明的例证：

用于合成本发明的化合物的所有原料、结构单元、试剂、酸、碱、脱水剂、溶剂和催化剂可自商业途径获得，或者可以通过本领域技术人员已知的有机合成方法来产生(Houben-Weyl，第4版，1952，Methods ofOrganic Synthesis，Thieme，第21卷)。而且，本发明的化合物还可以通过本领域技术人员已知的有机合成方法如以下实施例中所示的那样来产生。

已经发现实施例3-1和3-2至3-15的化合物对NEP而言具有在约0.001nM至约10,000nM范围的IC₅₀值。

测定保留时间的条件如下：

HPLC条件A：

柱子：INERTSIL C8-3，3μm×33mm×3.0mm，于40℃

流速：2mL/min

流动相：A)0.5mM甲酸铵的H₂O溶液，B)50％MeOH的CH₃CN溶液

梯度：2分钟内由5％B至95％B的线性梯度

检测：DAD-UV，于210-400nm

HPLC条件B：

柱子：INERTSIL C8-3，3μm×33mm×3.0mm，于40℃

流速：2mL/min

流动相：A)0.1％甲酸的H₂O溶液，B)50％MeOH的CH₃CN溶液

梯度：2分钟内由5％B至95％B的线性梯度

检测：DAD-UV，于210-400nm

HPLC条件C：

柱子：INERTSIL C8-3，3μm×33mm×3.0mm，于40℃

流速：2mL/min

流动相：A)0.5mM甲酸铵的H₂O溶液，B)50％MeOH的CH₃CN溶液

梯度：2分钟内由40％B至95％B的线性梯度

检测：DAD-UV，于210-400nm

HPLC条件D：

柱子：INERTSIL C8-3，3μm×33mm×3.0mm，于40℃

流速：2mL/min

流动相：A)0.1％甲酸的H₂O溶液，B)50％MeOH的CH₃CN溶液

梯度：2分钟内由40％B至95％B的线性梯度

检测：DAD-UV，于210-400nm

采用二维NMR测定了相对立体化学。在反应条件下预期载有二苯基甲基的立体中心不会外消旋化。因此，基于相对立体化学和载有二苯基甲基的中心的立体化学确定了绝对立体化学。

实施例1-1：(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸乙酯的合成

向(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙基氨基)-丙酸(4.0g，10.84mmol)在二氯甲烷(60mL)及饱和NaHCO₃水溶液(10mL)中的悬浮液中加入三光气(1.90g，6.39mmol)。剧烈搅拌0.5小时后，用EtOAc稀释反应混合物，并在减压下部分浓缩。通过添加饱和NaHCO₃水溶液来淬灭过量的三光气且搅拌0.5小时。用EtOAc萃取混合物并用盐水洗涤。用Na₂SO₄干燥有机层，并在减压下浓缩。将得到的残余物溶解于二氯甲烷(50mL)中。在0℃下向混合物中添加三乙胺(1.93mL，13.8mmol)及5-氨基-1H-四唑(1.18g，13.84mmol)，并将反应混合物逐渐升温至室温。搅拌2小时后，浓缩反应混合物并通过硅胶柱色谱(洗脱液：10％MeOH的二氯甲烷溶液)纯化，以得到所需的反式异构体产物和顺式异构体的混合物。使所得物质从CH₃CN中重结晶3次以得到(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸乙酯(3.92g)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.11(t，3H，J＝7.1Hz)，1.15(d，3H，J＝6.8Hz)，2.89(dd，1H，J＝8.1，13.7Hz)，3.02(dd，1H，J＝5.8，14.0Hz)，3.27-3.36(m，1H)，3.75-3.83(m，1H)，4.01(q，2H，J＝7.1Hz)，7.34(d，2H，J＝8.3Hz)，7.38-7.42(m，1H)，7.47(dd，1H，J＝7.8，7.8Hz)，7.60-7.65(m，3H)，7.69(dd，1H，J＝1.8，1.8Hz)；MS：m/z(MH⁺)443；HRMS：C₂₂H₂₃ClN₆O₃(M)⁺的计算值442.1，实验值442.1；EA：C21H23ClN6O3的计算值：C，56.95；H，5.23；N，18.97.实验值：C，56.88；H，5.07；N，19.1.

手性HPLC保留时间＝9.26min.[条件：Daicel CHIRALCEL OJ-H4.6x100mm)；流速＝1ml/min.；洗脱液：20％EtOH(含0.1％TFA)的庚烷溶液]。

使用与实施例1-1类似的方法以及适当的中间体制备以下化合物：

实验1-11.(S)-2-{(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-[甲基-(1H-四唑-5-基)-氨基甲酰基]-乙基氨基}-丙酸乙酯

向(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙基氨基)-丙酸(225mg，0.599mmol)在二氯甲烷(4mL)及饱和NaHCO₃水溶液(1mL)中的悬浮液中加入三光气(178mg，0.599mmol)。剧烈搅拌10分钟后，用EtOAc稀释反应混合物，并在减压下部分浓缩。通过添加饱和NaHCO₃水溶液来淬灭过量的三光气且搅拌0.5小时。用EtOAc萃取混合物并用盐水洗涤。用Na₂SO₄干燥有机层，并在减压下浓缩。将得到的残余物溶解于二氯甲烷(5mL)中。向混合物中添加三乙胺(0.167mL，1.197mmol)及[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基]-甲基-胺(197mg，0.898mmol)，并在45℃搅拌过夜。再加入额外的三乙胺(0.167mL，1.197mmol)及[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基]-甲基-胺(197mg，0.898mmol)，并在45℃搅拌30小时。在减压下浓缩反应混合物，并通过硅胶柱色谱(洗脱液：10％MeOH的DCM溶液)纯化，得到(S)-2-((S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-{[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基]-甲基-氨基甲酰基}-乙基氨基)-丙酸乙酯(261mg)。MS：m/z(MH⁺)577；HPLC保留时间1.36min(HPLC条件C)。

然后，将(S)-2-((S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-{[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基]-甲基-氨基甲酰基}-乙基氨基)-丙酸乙酯(260mg，0.451mmol)溶解于TFA(5mL)和DCM(5mL)中，并在50℃搅拌12小时，以及在75℃搅拌5小时。减压下浓缩反应混合物，以得到(S)-2-{(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-[甲基-(1H-四唑-5-基)-氨基甲酰基]-乙基氨基}-丙酸乙酯(120mg)。MS：m/z(MH⁺)457；HPLC保留时间0.95min(HPLC条件C)。

实施例1-14：(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙氧基]-丙酸乙酯

在室温下向(S)-3-(3’-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙氧基)-丙酸(62mg，0.165mmol)在THF(5ml)中的溶液中添加5-氨基四唑(38.0mg，0.447mmol)、DIPEA(0.086ml，0.494mmol)，随后添加1，3-二异丙基碳二亚胺(0.060ml，0.387mmol)。在室温下搅拌反应物3小时。通过盐水淬灭反应并用EtOAc萃取。用盐水洗涤经合并的有机层并用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。HPLC保留时间＝0.99分钟(条件C)；MS(m+l)＝444。

实施例2-1：(S)-2-[(R)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸乙酯

通过反相HPLC(Sunfire C-18柱，含0.1％TFA的H₂O/CH₃CN)分离由实施例1-1中描述的方法获得的顺式异构体，得到(S)-2-[(R)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸乙酯；¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.07(t，3H，J＝7.1Hz)，1.12(d，3H，J＝6.8Hz)，2.88(dd，1H，J＝8.1，13.6Hz)，3.04(dd，1H，J＝6.1，13.6Hz)，3.18-3.26(m，1H)，3.69-3.78(m，1H)，3.87-4.03(m，2H)，7.35(d，2H，J＝8.1Hz)，7.37-7.42(m，1H)，7.47(dd，1H，J＝7.8，7.8Hz)，7.58-7.65(m，3H)，7.68-7.72(m，1H)；MS：m/z(MH⁺)443.

使用与实施例1-1及2-1类似的方法以及适当中间体制备以下化合物：

实施例3-1：(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸

用2M NaOH水溶液(2mL)和EtOH(0.5mL)处理(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸乙酯(100mg，0.226mmol)。在室温下搅拌1小时后，用2M HCl酸化反应混合物以调节pH值为1。通过过滤收集得到的沉淀。使所得到的物质从EtOH结晶，得到(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸(94mg)。

¹H NMR (400MHz，DMSO-d6)δ1.15(d，3H，J＝7.1Hz)，2.94(dd，1H，J＝7.3，13.7Hz)，3.03(dd，1H，J＝6.3，13.6Hz)，3.26(dd，1H，J＝7.1，13.9Hz)，3.81(dd，1H，J＝6.9，6.9Hz)，7.33(d，2H，J＝8.3Hz)，7.38-7.42(m，1H)，7.47(dd，1H，J＝7.8，7.8Hz)，7.59-7.64(m，3H)，7.69(dd，1H，J＝1.8，1.8Hz)，15.9(bs，1H)；MS：m/z(MH⁺)415；HRMS：C₁₉H₁₉ClN₆O₃(M)⁺的计算值414.1，实验值414.1

手性HPLC保留时间＝13.17min.[条件：Daicel CHIRALPAK IA4.6x100mm)；流速＝1ml/min.；洗脱液：20％EtOH(含0.1％TFA)的庚烷溶液]。

实施例3-2：(S)-2-[(S)-2-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸

向(S)-2-[(S)-2-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸叔丁酯(103mg，0.204mmol)的DCM(2mL)溶液中加入TFA(1mL)和三乙基硅烷(0.098mL，0.611mmol)。搅拌8小时后，在减压下浓缩反应混合物。通过反相HPLC(Sunfire C-18柱，洗脱液：含0.1％TFA的H₂O/CH3CN)纯化残余物，得到(S)-2-[(S)-2-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸。¹H NMR(400MHz，DMSO-d6+TFA-d)1.49(d，3H，J＝7.1Hz)，3.29(dd，1H，J＝7.6，13.9Hz)，3.42(dd，1H，J＝7.1，14.2Hz)，4.13(dd，1H，J＝7.1，14.0Hz)，4.62(dd，1H，J＝7.3，7.3Hz)，7.37(d，1H，J＝2.5Hz)，7.37-7.43(m，2H)，7.40(d，2H，J＝4.3Hz)，7.48(dd，1H，J＝2.5，8.6Hz)，7.59(d，1H，J＝8.6Hz)，14.89(bs，1H)；HPLC保留时间1.25分钟(条件A)；MS：m/z(MH⁺)449。

使用与实施例3-1或3-2类似的方法以及适当原料及条件制备以下化会物

实施例3-3：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6+TFA-d)δ1.48(d，3H，J＝7.1Hz)，3.27(dd，1H，J＝8.8，13.1Hz)，3.47(dd，1H，J＝6.1，13.4Hz)，4.03(dd，1H，J＝7.1，14.1Hz)，4.47(dd，1H，J＝7.3，7.3Hz)，7.37-7.42(m，5H)，7.47(dd，1H，J＝2.8，8.6Hz)，7.58(d，1H，J＝8.6Hz)，14.89(bs，1H)。

实施例3-4：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.37(d，3H，J＝6.8Hz)，3.20(d，2H，J＝6.3Hz)，3.73-3.87(bs，1H)，4.25-4.38(bs，1H)，7.33-7.38(m，1H)，7.36(d，2H，J＝8.1Hz)，7.45(dd，2H，J＝7.4，7.4Hz)，7.60-7.66(m，4H)。

实施例3-5：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.35-1.43(m，3H)，3.20(bs，2H)，3.71(s，3H)，3.75-4.00(m，1H)，4.36(bs，1H)，7.05-7.20(m，3H)，7.31(d，2H，J＝8.3Hz)，7.45(d，2H，J＝8.3Hz)。

实施例3-6：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6+TFA-d)δ1.48(d，3H，J＝7.3Hz)，3.22(dd，1H，J＝7.6，13.6Hz)，3.32(dd，1H，J＝6.6，13.9Hz)，3.96(dd，1H，J＝7.3，14.4Hz)，4.50(dd，1H，J＝7.3，7.3Hz)，6.97(s，1H)，7.33-7.38(m，3H)，7.45(t，2H，J＝7.8Hz)，7.61-7.67(m，4H)。

实施例3-7：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.37(bd，3H，J＝4.8Hz)，3.09-3.26(m，2H)，3.67-3.90(m，1H)，4.10-4.37(m，1H)，5.83(s，1H)，7.34(d，2H，J＝8.1Hz)，7.40-7.45(m，1H)，7.48(dd，1H，J＝7.8，7.8Hz)，7.61-7.66(m，1H)，7.66-7.73(m，3H)。

实施例3-8：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.19-1.39(m，3H)，3.05-3.218(m，2H)，3.30-4.25(m，2H)，5.83(s，1H)，7.33(d，2H，J＝8.3Hz)，7.40-7.44(m，1H)，7.48(dd，1H，J＝7.8，7.8Hz)，7.61-7.73(m，4H)。

实施例3-9：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.48-1.57(m，3H)，3.05-3.47(m，2H)，3.728/3.31(s×2，总共3H)，4.02-4.21(m，1H)，5.61-5.82(m，1H)，7.06-7.27(m，1H)，7.34-7.76(m，7H)。

实施例3-10：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.35-1.43(m，3H)，3.13-3.34(m，2H)，3.35-3.95(m，1H)，3.73(s，3H)，4.08-4.45(m，1H)，7.39-7.45(m，3H)，7.49(dd，1H，J＝7.8，7.8Hz)，7.62-7.75(m，4H)。

实施例3-11：¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.32-1.42(m，3H)，3.13-3.34(m，2H)，3.35-3.95(m，1H)，3.73(s，3H)，4.02-4.36(m，1H)，7.37-7.45(m，3H)，7.49(dd，1H，J＝7.8，7.8Hz)，7.61-7.74(m，4H)。

实施例3-12：¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 1.67-1.90(m，2H)，2.59(t，J＝7.7Hz，2H)，2.96(dd，J＝13.6，7.3Hz，1H)，3.07(dd，J＝13.6，7.1Hz，1H)，3.11-3.17(m，1H)，3.78(t，J＝7.1Hz，1H)，7.07-7.18(m，5H)，7.33(d，J＝8.3Hz，2H)，7.37-7.42(m，1H)，7.46(t，J＝8.0Hz，1H)，7.61(d，J＝8.3Hz，3H)，7.68(t，J＝1.8Hz，1H)，12.02(br.s.，1H)，15.89(br.s.，1H)。

实施例3-13：¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 0.91(t，J＝7.5Hz，3H)，1.67-1.80(m，2H)，3.08-3.27(m，2H)，3.56(br.s.，3H)，4.16(br.s.，1H)，7.34(d，J＝8.3Hz，2H)，7.41(ddd，J＝7.8，2.0，1.0Hz，1H)，7.47(t，J＝7.8Hz，1H)，7.61(dt，J＝8.0，1.5，1.1Hz，1H)，7.64(d，J＝8.3Hz，2H)，7.68(t，J＝1.8Hz，1H)，12.27(br.s.，1H)，16.09(br.s.，1H)。

实施例3-14：¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 2.83-2.91(m，2H)，2.91-3.11(m，2H)，3.56(br.s.，2H)，3.88(br.s.，1H)，7.14-7.20(m，3H)，7.20-7.26(m，2H)，7.29(d，J＝8.3Hz，2H)，7.38-7.42(m，1H)，7.47(t，J＝7.8Hz，1H)，7.56-7.63(m，3H)，7.68(t，J＝1.9Hz，1H)，11.92(br.s.，1H)，15.91(br.s.，1H)。

实施例3-15：¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 2.81-3.03(m，4H)，3.51(t，J＝6.4Hz，1H)，3.79(t，J＝6.2Hz，1H)，7.14-7.29(m，7H)，7.38-7.42(m，1H)，7.47(t，J＝7.8Hz，1H)，7.55(d，J＝8.1Hz，2H)，7.59(dt，J＝7.6，1.4Hz，1H)，7.66(t，J＝1.9Hz，1H)，11.78(br.s.，1H)，15.86(br.s.，1H)。

实施例3-16：¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 2.97(dd，1H，J＝7.1，13.6Hz)，3.07(dd，1H，J＝6.3，13.6Hz)，3.47(dd，1H，J＝5.1，5.1Hz)，3.58(d，2H，J＝5.1Hz)，3.87(dd，1H，J＝6.6Hz)，4.41(d，1H，J＝12.4Hz)，4.46(d，1H，J＝12.1Hz)，7.22-7.36(m，7H)，7.38-7.42(m，1H)，7.47(t，1H，j＝7.8Hz)，7.58-7.64(m，3H)，7.68(t，1H，J＝1.8Hz)。

实施例3-17：¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δppm 2.97-3.13(m，2H)，3.21(s，3H)，3.40-3.61(m，3H)，3.76-4.01(m，1H)，7.34(d，J＝8.34Hz，2H)，7.38-7.43(m，1H)，7.47(t，J＝8.08Hz，1H)，7.59-7.65(m，3H)，7.69(bt，J＝1.77Hz，1H)。

实施例3-18：1H NMR(400MHz，DMSO-d₆)d ppm 1.31(d，J＝6.6Hz，3H)，3.05-3.18(m，2H)，4.03(q，J＝6.8Hz，1H)，4.58(t，J＝6.3Hz，1H)，7.35(d，J＝8.1Hz，2H)，7.37-7.42(m，1H)，7.47(t，J＝7.8Hz，1H)，7.55-7.65(m，3H)，7.66-7.72(m，1H)，12.13(br.s.，1H)，12.69(br.s.，1H)，15.96(br.s.，1H)。

实施例3-19：(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-3-羟基-丙酸

实施例3-20：(S)-2-[(S)-2-联苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-3-羟基-丙酸

向(S)-3-苄氧基-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-丙酸乙酯(47mg，0.090mmol)在EtOAc(1mL)和EtOH(1mL)中的溶液中加入5％Pd-C(9.6mg，0.0045mmol)。用气球装载氢气且在50℃下搅拌反应混合物6小时。通过硅藻土垫过滤反应混合物并浓缩滤液。通过反相HPLC(Sunfire C-18柱，洗脱液：含0.1％TFA的H₂O/CH3CN)纯化残余物，得到(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-3-羟基-丙酸和(S)-2-[(S)-2-联苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-3-羟基-丙酸。

(S)-2-[(S)-2-(3′-氯-联苯-4-基)-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-3-羟基-丙酸；NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.99-3.14(m，2H)，3.50-3.67(m，3H)，3.86-3.98(m，1H)，7.34(d，2H，J＝8.3Hz)，7.38-7.42(m，1H)，7.47(t，2H，J＝7.8Hz)，7.58-7.70(m，4H))；HPLC保留时间1.17分钟(条件A)；MS：m/z(MH+)431.

(S)-2-[(S)-2-联苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基氨基甲酰基)-乙基氨基]-3-羟基-丙酸；NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 3.18(dd，1H，J＝7.6，13.4Hz)，3.24-3.36(m，1H)，3.66-3.87(m，3H)，4.17-4.37(m，1H)，7.32(d，2H，J＝8.1Hz)，7.32-7.38(m，1H)，7.44(t，2H，J＝7.8Hz)，7.56-7.67(m，4H))；HPLC保留时间1.00分钟(条件A)；MS：m/z(MH+)397。

实施例4-1：(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-2-甲基磺酰氨基-1-甲基-2-氧代-乙基氨基)-N-(1H-四唑-5-基)-丙酰胺

应用与实施例1-1类似的方法制备实施例4-1。NMR(400MHz，DMSO-d6+TFA-d)δ1.21(d，J＝6.32Hz，3H)，2.92-3.05(m，1H)，3.05-3.14(m，1H)，3.17(s，3H)，3.34-3.46(m，1H)，3.82-3.95(m，1H)，7.35(d，J＝8.08Hz，2H)，7.39-7.43(m，1H)，7.47(t，J＝7.83Hz)，7.60-7.66(m，3H)，7.68-7.22(m，1H))；HPLC保留时间1.21分钟(条件A)；MS：m/z(MH+)492.

以如下方法制备原料或中间体：

中间体1：(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙基氨基)-丙酸

步骤1：向Boc-L-4-溴苯丙氨酸(15.0g，43.6mmol)、3-氯苯基硼酸(8.52g，54.5mmol)及四(三苯基膦)钯(0)(1.51g，1.31mmol)在1，2-二甲氧基乙烷(180mL)中的溶液中添加2M NaCO₃水溶液(33mL)。加热反应混合物至85℃。搅拌2小时后，冷却反应混合物至室温，并用EtOAc稀释。用1M HCl和盐水洗涤混合物。用Na₂SO₄干燥有机层，在减压下浓缩，并通过硅胶柱色谱(洗脱液：10％MeOH的二氯甲烷溶液)纯化，得到(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(3′-氯-联苯-4-基)-丙酸(13.6g)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.43(s，9H)，3.08-3.17(m，1H)，3.21-3.31(m，1H)，4.65(bs，1H)，5.01(bs，1H)，7.23-7.32(m，3H)，7.45-7.50(m，2H)，7.52-7.60(m，1H)，7.63-7.70(m，2H)；MS：m/z(MH⁺)376。

步骤2：向(S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(3′-氯-联苯-4-基)-丙酸(12.9g，34.3mmol)的DMF(130mL)溶液中添加溴化苄(8.16mL，68.6mmol)和NaHCO₃(5.77g，68.6mmol)。在室温下搅拌过夜后，用EtOAc稀释反应混合物。用H₂O和盐水洗涤混合物，用Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。用⁴M HCl的二

烷溶液(30mL)处理得到的残余物并搅拌2小时。浓缩反应混合物且用iPr₂O冲洗所得残余物，得到(S)-2-氨基-3-(3′-氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯(11.2g).¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.14(dd，1H，J＝7.7，12.0Hz)，3.27(dd，1H，J＝5.9，12.0Hz)，4.38(dd，1H，J＝5.9，7.7Hz)，5.15(s，2H)，7.23-7.27(m，2H)，7.30-7.34(m，5H)，7.42-7.45(m，1H)，7.51(dd，1H，J＝7.6，7.6Hz)，7.61-7.66(m，3H)，7.69(dd，1H，J＝1.8，1.8Hz)，8.64(bs，2H)；MS：m/z(MH⁺)366。

步骤3：在0℃向(S)-2-氨基-3-(3′-氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯(10.0g，24.9mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中加入三乙胺(10.4mL，74.6mmol)。在搅拌10分钟后，在室温下添加(R)-2-(三氟甲基磺酰基氧基)丙酸乙酯(9.3mL，49.5mmol)，并搅拌1小时。在室温下再添加三乙胺(10.4mL，74.6mmol)和(R)-2-(三氟甲基磺酰基氧基)丙酸乙酯，并再搅拌2小时。用H₂O洗涤反应混合物，并在减压下浓缩有机层。通过硅胶柱色谱(EtOAc/庚烷)纯化得到的残余物，得到(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙基氨基)-丙酸苄酯(10.6g)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.21(t，3H，J＝7.3Hz)，1.27(d，3H，J＝6.8Hz)，1.89(bs，1H)，2.95-3.07(m，2H)，3.38(dd，1H，J＝6.8，14.8Hz)，3.69(dd，1H，J＝7.1，7.1Hz)，4.06-4.17(m，2H)，5.06(d，1H，J＝12.1Hz)，5.12(d，1H，J＝12.1Hz)，7.20-7.25(m，4H)，7.28-7.34(m，4H)，7.35(dd，1H，J＝7.6，7.6Hz)，7.41-7.46(m，3H)，7.53(dd，1H，J＝1.5，1.5Hz)；MS：m/z(MH⁺)466。

步骤4：用H2(气球)处理(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙基氨基)-丙酸苄酯(10.0g，21.5mmol)及5％钯碳(0.914g)在EtOAc(200mL)中的悬浮液，在10-15℃下搅拌1.5小时并在室温下搅拌0.5小时。将得到的沉淀溶解于甲醇中，并通过硅藻土垫过滤。在减压下浓缩滤液，并从EtOAc重结晶所得残余物，得到(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙基氨基)-丙酸(5.6g)。在减压下浓缩母液，并通过硅胶柱色谱纯化，得到额外量的(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙基氨基)-丙酸(1.4g)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.13(t，3H，J＝7.1Hz)，1.15(d，3H，J＝6.8Hz)，2.85(dd，1H，J＝7.1，14.1Hz)，2.93(dd，1H，J＝6.3，13.6Hz)，3.30-3.37(m，1H)，3.48(dd，1H，J＝6.5，6.5Hz)，4.03(q，2H，J＝7.1Hz)，7.32(d，2H，J＝8.3Hz)，7.38-7.43(m，1H)，7.48(dd，1H，J＝7.8，7.8Hz)，7.59-7.65(m，3H)，7.70(dd，1H，J＝2.0，2.0Hz)；MS：m/z(MH⁺)376。

中间体2：(S)-2-((S)-1-叔丁氧基羰基-乙基氨基)-3-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-丙酸

使用用于制备中间体1的步骤1(使用2，5-二氯苯基硼酸替代3-氯苯基硼酸)及步骤2中描述的相同方法来制备((S)-2-氨基-3-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯盐酸盐。

步骤3，：从在DCM(5mL)中的(R)-2-羟基-丙酸叔丁酯(602mg，4.12mmol)、三氟甲磺酸酐(0.696mL，4.12mmol)和2，6-二甲基吡啶(0.480mL，4.12mmol)制备(R)-2-(三氟甲基磺酰基氧基)丙酸叔丁酯。在0℃下向((S)-2-氨基-3-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯盐酸盐(600mg，1.38mmol)在二氯甲烷(10mL)中的悬浮液中加入三乙胺(0.574mL，4.12mmol)。搅拌10分钟后，在室温下添加一半量的新制备的(R)-2-(三氟甲基磺酰基氧基)丙酸叔丁酯，并搅拌1小时。在室温下再添加三乙胺(0.574mL，4.12mmol)和剩下的(R)-2-(三氟甲基磺酰基氧基)丙酸叔丁酯，再搅拌2小时。用H₂O洗涤反应混合物，并在减压下浓缩有机层。通过硅胶柱色谱(EtOAc/庚烷)纯化所得到的残余物，得到(S)-2-((S)-1-叔丁氧基羰基-乙基氨基)-3-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯(580mg)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1.24(t，3H，J＝6.8Hz)，1.41(s，9H)，3.00-3.07(m，2H)，3.26(dd，1H，J＝7.1，13.9Hz)，3.70(dd，1H，J＝7.1，7.1Hz)，5.09(s，2H)，7.20-7.42(m，12H)；MS：m/z(MH⁺)528。

步骤4’：用H2(气球)处理(S)-2-((S)-1-叔丁氧基羰基-乙基氨基)-3-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯(580mg，1.10mmol)和5％钯碳(0.146g)在EtOAc(10mL)中的悬浮液，并在室温下搅拌1.5小时。将所得到的沉淀溶解于甲醇中，并通过硅藻土垫过滤。在减压下浓缩滤液，并从EtOAc重结晶所得到的残余物，得到(S)-2-((S)-1-叔丁氧基羰基-乙基氨基)-3-(2′，5′-二氯-联苯-4-基)-丙酸(438mg)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.12(d，3H，J＝7.1Hz)，1.35(s，9H)，2.84(dd，2H，J＝7.3，13.6Hz)，2.95(dd，2H，J＝6.1，13.6Hz)，3.20(dd，1H，J＝6.8，13.6Hz)，3.48(dd，1H，J＝6.1，7.3Hz)，7.33(d，2H，J＝8.6Hz)，7.37(d，2H，J＝8.3Hz)，7.42-7.49(m，2H)，7.60(d，2H，J＝8.6Hz)；MS：m/z(MH⁺)438。

使用与中间体1或中间体2类似的方法以及适当试剂制备以下中间体：

中间体9：[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基]-甲基-胺

向5-氨基-1H-四唑(1.50g，17.6mmol)在DMF(30mL)中的悬浮液中加入Cs₂CO₃(8.62g，26.4mmol)和PMBCl(2.90g，18.5mmol)。在60℃下搅拌3小时后，冷却反应混合物至室温并用EtOAc稀释。用H₂O和盐水洗涤混合物，通过Na₂SO₄干燥并在减压下浓缩。用DCM稀释残余物，并通过过滤收集所得沉淀，得到1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基胺(0.625g).¹H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.73(s，3H)，5.27(s，2H)，6.78(s，2H)，6.92(d，2H，J＝8.8Hz)，7.21(d，2H，J＝8.8Hz)。

接着，向1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基胺(600mg，2.92mmol)在MeOH(10mL)中的悬浮液中添加多聚甲醛(132mg，4.39mmol)及甲醇钠(632mg，25wt％在MeOH中)。使混合物回流30分钟直至悬浮液变为澄清溶液。冷却混合物至室温，并分批添加硼氢化钠(332mg，8.77mmol)。再使反应混合物回流15分钟。冷却至室温后，用H₂O淬灭反应。用EtOAc稀释混合物，部分浓缩且用盐水洗涤。用Na₂SO₄干燥有机层并在减压下浓缩。通过硅胶柱色谱(洗脱液：10％MeOH的DCM溶液)纯化残余物，得到[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基]-甲基-胺(0.63g)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ3.00(d，3H，J＝5.3Hz)，3.61(bs，1H)，3.82(s，3H)，5.25(s，2H)，6.91(d，2H，J＝8.8Hz)，7.16(d，2H，J＝8.8Hz)；MS：m/z(MH⁺)220。

中间体11：(S)-3-(3’-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙氧基)-丙酸

步骤1：向冰浴中的4-溴-L-苯丙氨酸(2.5g，10.24mmol)与乙酸(20ml)和水(75ml)溶剂的混合物中逐滴添加亚硝酸钠(2.120g，30.7mmol)的水(20.00ml)溶液。使混合物缓慢升温至室温，并搅拌过夜。向悬浮液中缓慢逐滴添加甲胺的THF溶液(20.48ml，41.0mmol)，混合物变得澄清，并在室温下搅拌1小时。浓缩混合物以移除THF，并用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机层，并通过无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到为灰白色固体的粗产物：1.7g(产率：43％)。HPLC保留时间＝0.83分钟(条件A)；MS(m+2)＝246。

步骤2：在室温下向(S)-3-(4-溴-苯基)-2-羟基-丙酸(1.5g，6.12mmol)的DME(60ml)溶液中添加3-氯苯硼酸(1.436g，9.18mmol)，然后添加Na₂CO₃水溶液(6.12ml，12.24mmol)和Pd(Ph₃P)₄(0.212g，0.184mmol)。在85℃下搅拌混合物过夜。再向反应物中添加EtOAc，并用1N HCl酸化至PH～5。用盐水洗涤合并的有机层，并通过无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过HPLC(20％至80％ACN-H₂O(0.1％TFA))纯化残余物，得到白色固体：550mg(产率：32％)。HPLC保留时间＝1.23分钟(条件A)；MS(m-1)＝275。

步骤3：在-78℃下向(S)-3-(3’-氯-联苯-4-基)-2-羟基-丙酸苄酯(282mg，0.769mmol)的THF(6ml)溶液中加入LiHMDS/THF(1.999ml，1.999mmol)，并在-78℃下搅拌得到的黄色混合物25分钟，接着在-20℃下添加(R)-2-(三氟甲基磺酰基氧基)丙酸乙酯(0.860ml，4.61mmol)。1小时后，反应基本完成。用饱和NH₄Cl淬灭反应，并用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机层，过滤并浓缩。通过HPLC(75％至100％ACN-H₂O(0.1％TFA))纯化残余物，得到产物：140mg(产率：39％)。HPLC保留时间＝1.57分钟(条件C)；MS(m+1)＝467。

步骤4：在H₂气球下氢化(S)-3-(3’-氯-联苯-4-基)-2-((S)-1-乙氧基羰基-乙氧基)-丙酸苄酯和10％湿Pd/C在EtOAc中的混合物30分钟。滤除反应物中的催化剂，并浓缩。通过HPLC(15％至70％ACN-H₂O(0.1％TFA))纯化残余物，得到油状物：128mg。HPLC保留时间＝1.07分钟(条件C)；MS(m-1)＝375。

中间体12：(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-2-甲磺酰氨基-1-甲基-2-氧代-乙基氨基)-丙酸

步骤1：向(S)-2-((S)-1-叔丁氧基羰基-乙基氨基)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯(1.12g，2.27mmol)的DCM(5mL)溶液中添加TFA(5mL)。搅拌3小时后，浓缩反应混合物并通过硅胶柱色谱(洗脱液：DCM中的10％MeOH)纯化，得到(S)-2-((S)-1-羧基-乙基氨基)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯。MS：m/z(MH⁺)438；HPLC保留时间0.73min(HPLC条件C)。

步骤2：向(S)-2-((S)-1-羧基-乙基氨基)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯(600mg，1.37mmol)在DCM(7mL)和饱和NaHCO₃水溶液(2mL)中的溶液中加入三光气(407mg，1.37mmol)。搅拌0.5小时后，用EtOAc稀释反应混合物，并再搅拌0.5小时直至气体的产生完结。分离有机层，用盐水洗涤并浓缩。将其溶解于DCM(7mL)中并添加甲磺酰胺(195mg，2.06mmol)。在室温下搅拌1小时后，用EtOAc稀释反应混合物并用盐水洗涤。用Na₂SO₄干燥有机层，浓缩并通过硅胶柱色谱(洗脱液：在DCM中的10％MeOH)纯化，得到(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-2-甲磺酰氨基-1-甲基-2-氧代-乙基氨基)-丙酸苄酯。MS：m/z(MH⁺)515；HPLC保留时间1.58min(HPLC条件A)。

步骤3：将其溶解于EtOAc中。添加5％Pd-C(146mg)并在室温下用H2气球氢化1小时。通过硅藻土垫过滤反应混合物并浓缩滤液。从MeOH中重结晶所得固体，得到(S)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-2-((S)-2-甲磺酰氨基-1-甲基-2-氧代-乙基氨基)-丙酸。MS：m/z(MH⁺)425；HPLC保留时间1.14min(HPLC条件A)。

中间体12-2：(S)-2-((S)-1-叔丁氧基羰基-乙基氨基)-3-(3′-氯-联苯-4-基)-丙酸苄酯

使用与中间体1及中间体2类似的方法以及适当试剂制备中间体12-2。MS：m/z(MH⁺)494；HPLC保留时间1.50min(HPLC条件C)。

可以看出，本发明的化合物可用作中性内肽酶(EC 3.4.24.11)活性的抑制剂，因此可用于治疗与中性内肽酶(EC 3.4.24.11)活性相关的疾病和疾患、诸如本文公开的疾病。

应当理解，仅以举例的方式对本发明进行了描述，可以对本发明进行修改，这些修改仍然在本发明的主旨和范围内。

Claims

1.本发明因此提供了式(I’)化合物或其可药用盐：

其中

A²是O或NR⁵；

R⁴和R⁵独立地是H或C_1-6烷基；

A¹是键或C_1-3亚烷基链；

R⁴、A¹-R³连同R⁴及A¹-R³所连接的氮一起形成4-至7-元杂环基或5-至6-元杂芳基，其每一个任选地被一个或多个独立地选自C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H和CO₂C_1-6烷基的基团取代；以及

m是0或1至5的整数；

s是0或1至4的整数。

2.式I的权利要求1的化合物或其可药用盐：

其中：

X¹表示OH或O-C_1-6-烷基

R¹是H、C_1-6烷基或C_6-10-芳基-C_1-6烷基；

R⁴和R⁵独立地是H或C_1-6烷基；

A¹是键或C_1-3亚烷基链；

R⁴、A¹-R³连同R⁴及A¹-R³所连接的氮一起形成4-至7-元杂环基或5-至6-元杂芳基，其每一个任选地被一个或多个独立地选自C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H和CO₂C_1-6烷基的基团取代；且

m是0或1至5的整数；

s是0或1至4的整数。

3.式II的权利要求1或2的化合物或其可药用盐：

4.式III的权利要求1或2的化合物或其可药用盐：

其中X²是卤素，且p是0或1至4的整数。

5.式IV的权利要求4的化合物或其可药用盐：

6.前述任一项权利要求的化合物或其可药用盐，其中

X¹表示OH或O-C_1-6-烷基；

R¹是H或C_1-6烷基；

R²每次出现时独立地是C_1-6-烷氧基、羟基、卤素、C_1-6-烷基、氰基或三氟甲基；

R⁴和R⁵独立地是H或C_1-6烷基；

A¹是键或C_1-3亚烷基链；

R³是5-或6-元杂芳基，其任选地被一个或多个独立地选自C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H和CO₂C_1-6烷基的基团取代；

m是0或1至5的整数；

s是0或1至4的整数。

7.前述任一项权利要求的化合物或其可药用盐，其中

A¹是键或CH₂。

8.前述任一项权利要求的化合物或其可药用盐，其中

R¹是甲基或乙基，R⁵和R⁴是H。

9.前述任一项权利要求的化合物或其可药用盐，其中

R³是选自

唑、吡咯、吡唑、异唑、三唑、四唑、

二唑、噻唑、异噻唑、噻吩、咪唑及噻二唑的5元环杂芳基；其每一个任选地被一个或多个独立地选自C_1-6烷基、卤素、卤代C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、羟基、CO₂H和CO₂C_1-6烷基的基团取代。

10.前述任一项权利要求的化合物或其可药用盐，其中

R³是四唑。

11.权利要求4-10中任一项的化合物或其可药用盐，其中

X²是Cl。

12.药物组合物，其包含权利要求1至11中任意一项的化合物或其可药用的盐和一种或多种可药用载体。

13.一种组合产品，其包含：权利要求1至11中任意一项的化合物或其可药用的盐；和一种或多种选自下列的治疗活性剂：HMG-Co-A还原酶抑制剂、血管紧张素受体阻滞剂、血管紧张素转化酶抑制剂、钙通道阻滞剂、内皮素拮抗剂、肾素抑制剂、利尿剂、ApoA-I模拟物、抗糖尿病药、减肥药、醛固酮受体阻滞剂、内皮素受体阻滞剂、醛固酮合酶抑制剂、CETP抑制剂和5型磷酸二酯酶(PDE5)抑制剂。

14.在有需要的受试者中抑制中性内肽酶EC.3.4.24.11.活性的方法，其包括：给所述受试者施用治疗有效量的权利要求1至11中任意一项的化合物或其可药用的盐。

15.在有需要的受试者中治疗与中性内肽酶EC.3.4.24.11.活性相关的病症或疾病的方法，其包括：给所述受试者施用治疗有效量的权利要求1至11中任意一项的化合物或其可药用的盐。

16.权利要求15的方法，其中所述病症或疾病选自：高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管疾病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全、肾衰竭、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、肾病综合征、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、肾血管性高血压、糖尿病性视网膜病和晚期肾病(ESRD)、内皮功能障碍、舒张期功能障碍、肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上和室性心律失常、心房颤动(AF)、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重构、斑块稳定、心肌梗死(MI)、肾纤维化、多囊性肾病(PKD)、肾衰竭、周期性水肿、梅尼埃病、高醛固酮血症、高钙尿症、腹水、青光眼、月经失调、早产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖病症、哮喘、阻塞性睡眠呼吸暂停、炎症、白血病、疼痛、癫痫症、情感障碍、抑郁、精神病、痴呆、老年意识错乱、肥胖、胃肠道病症、伤口愈合、脓毒性休克、胃酸分泌功能障碍、高肾素血症、囊性纤维化、再狭窄、2型糖尿病、代谢综合征、糖尿病并发症、动脉粥样硬化、雄性和雌性性功能障碍。

17.用作药物的权利要求1至11中任意一项的化合物或其可药用盐。

18.权利要求1至11中任意一项的化合物或其可药用盐用于在需要该治疗的受试者中治疗与中性内肽酶EC.3.4.24.11.活性相关的病症或疾病的用途。

19.权利要求18的用途，其中所述病症或疾病选自：高血压、顽固性高血压、肺高压、肺动脉高压、单纯收缩期高血压、外周血管疾病、心力衰竭、充血性心力衰竭、左心室肥大、心绞痛、肾功能不全、肾衰竭、糖尿病性肾病、非糖尿病性肾病、肾病综合征、肾小球肾炎、硬皮病、肾小球硬化、原发性肾病的蛋白尿、肾血管性高血压、糖尿病性视网膜病和晚期肾病(ESRD)、内皮功能障碍、舒张期功能障碍、肥厚型心肌病、糖尿病性心肌病、室上和室性心律失常、心房颤动(AF)、心脏纤维化、心房扑动、有害的血管重构、斑块稳定、心肌梗死(MI)、肾纤维化、多囊性肾病(PKD)、肾衰竭、周期性水肿、梅尼埃病、高醛固酮血症、高钙尿症、腹水、青光眼、月经失调、早产、先兆子痫、子宫内膜异位和生殖病症、哮喘、阻塞性睡眠呼吸暂停、炎症、白血病、疼痛、癫痫症、情感障碍、抑郁、精神病、痴呆、老年意识错乱、肥胖、胃肠道病症、伤口愈合、脓毒性休克、胃酸分泌功能障碍、高肾素血症、囊性纤维化、再狭窄、2型糖尿病、代谢综合征、糖尿病并发症、动脉粥样硬化、雄性和雌性性功能障碍。