CN101687847A

CN101687847A - 用作肾素抑制剂的n5-(2-乙氧基乙基)-n3-(2-吡啶基)-3,5-哌啶二甲酰胺衍生物

Info

Publication number: CN101687847A
Application number: CN200880021897A
Authority: CN
Inventors: 横川文昭; 江原建; 川上新平; 入江统; 铃木雅贵; 比留佑幸; 鸟谷尾淳
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2007-06-25
Filing date: 2008-06-23
Publication date: 2010-03-31
Anticipated expiration: 2028-06-23
Also published as: ECSP099825A; AR067132A1; CU23842B1; CL2008001872A1; ES2543641T3; CU20090226A7; EA201000037A1; MA31538B1; KR101238479B1; EP2181105A1; TWI404714B; US8383650B2; AU2008267287A1; US20080319018A1; SG182223A1; KR20100023003A; AU2008267287B2; TW200911782A; ES2541107T3; CA2689109A1

Abstract

本发明涉及式I化合物，其中R1、R2、R3、R4和R5如说明书中所定义；此类化合物用于诊断和治疗温血动物、尤其用于依赖于肾素活性的疾病(＝病症)的治疗；此类化合物在制备用于治疗依赖于肾素活性的疾病的药物制剂中的用途；此类化合物在治疗依赖于肾素活性的疾病中的用途；含有此类化合物的药物组合物；包括施用此类化合物的治疗方法以及其制备方法。

Description

用作肾素抑制剂的N5-(2-乙氧基乙基)-N3-(2-吡啶基)-3，5-哌啶二甲酰胺衍生物

本发明涉及式I的3，5-取代的哌啶化合物、用于诊断和治疗性治疗温血动物、尤其用于治疗依赖于肾素活性的疾病(＝病症)的这些化合物；此类化合物在制备用于治疗依赖于肾素活性的疾病的药物制剂中的用途；此类化合物在治疗依赖于肾素活性的疾病中的用途；含有所述3，5-取代的哌啶化合物的药物组合物；包括施用所述3，5-取代的哌啶化合物的治疗方法以及制备所述3，5-取代的哌啶化合物的方法。

我们最近已经描述了可用作肾素抑制剂的新的3，5-取代的哌啶(参见PCT/EP06/012581)。尽管这些化合物适用于这种目的且对这种目的有效，但是仍然持续需要开发药动学性质进一步提高而同时达到良好功效和安全性的肾素抑制剂。特别地，提供具有增强生物利用度的肾素抑制剂具有治疗优势。生物利用度是限制生物活性化合物的治疗应用的重要因素。因此，本发明的目的为提供具有增强的生物利用度的新的有效肾素抑制剂。

本发明涉及式I化合物或其盐：

其中

R1为C_1-7烷基，其任选被一个、两个或三个选自羟基、卤素和C₁-C₇-烷氧基的取代基取代；

R2为氢、C_1-7烷基、C₁-C₇-烷氧基、卤素-C₁-C₇-烷基、卤素-C₁-C₇-烷氧基或C₁-C₇-烷氧基-C₁-C₇-烷氧基；

R3为C_1-7烷基或C_3-8环烷基；

R4为氢或羟基；且

R5为C_1-7烷基或C_3-8环烷基。

在一个优选的实施方案中，本发明涉及式I化合物或其盐，其中

R2为氢、C_1-7烷基、C₁-C₇-烷氧基、卤素-C₁-C₇-烷基或卤素-C₁-C₇-烷氧基；

R3为C_1-7烷基或C_3-8环烷基；

R4为氢或羟基；且

R5为C_1-7烷基或C_3-8环烷基。

本发明还涉及式II化合物或其盐：

其中

R3为C_1-7烷基或C_3-8环烷基；

R4为氢或羟基；且

R5为C_1-7烷基或C_3-8环烷基。

在另一个优选的实施方案中，本发明涉及式II化合物或其盐，其中

R3为C_1-7烷基或C_3-8环烷基；

R4为氢或羟基；且

R5为C_1-7烷基或C_3-8环烷基。

所述式II化合物为其中R4为氢的式I的优选实施方案。

本发明还涉及式III化合物或其盐，

R3为C_1-7烷基或C_3-8环烷基；

R4为氢或羟基；且

R5为C_1-7烷基或C_3-8环烷基。

所述式III化合物为其中R4为羟基的式I的优选实施方案。

本发明化合物显示对天然酶肾素的抑制活性。因此，式I化合物可用于治疗(该术语还包括预防)一种或多种尤其选自下文详细列出的疾病的病症或疾病，尤其是只要可通过肾素抑制而调节(更尤其是有益地影响)的这些疾病。

下文列出了用于描述本发明化合物及其用途和合成、原料和中间体等各种术语的定义。这些定义，通过替换用于本公开文本的一种、多种或所有通用表达或符号并由此获得优选的本发明实施方案，优选用于整篇说明书中所用的术语，除非它们在特定情况下单独或作为更大基团的部分另有限定。

烷基为C₁-C₇-烷基，更优选为C₁-C₄-烷基，其为直链或支链(一次或酌情多次)。术语C₁-C₇烷基定义具有至多并包括最大值7个碳原子，尤其是至多并包括最大值4个碳原子的部分，所述部分为支链(一次或多次)或直链并通过末端或非末端碳连接。例如，C₁-C₇-烷基为正戊基，正己基或正庚基，或优选C₁-C₄-烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、仲丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。

卤素或卤族元素优选为氟、氯、溴或碘，最优选为氟、氯或溴；当提及卤素时，这可表示一个或多个(例如至多三个)卤素原子存在于部分如卤素-C₁-C₇-烷基、卤素-C₁-C₇-烷氧基等(例如三氟甲基)中。

C₃-C₈-环烷基优选为单环或双环、更优选单环环烷基，其可包括一个或多个双键和/或三键。优选为C₃-C₆-环烷基。

例如，C₁-C₇-烷氧基为C₁-C₄-烷氧基，可以是直链或支链。实例为甲氧基、乙氧基、正丙氧基或异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基、戊氧基和己氧基。优选为C₁-C₄烷氧基。

芳基优选为具有6-22个碳原子的单环或双环芳基，尤其是苯基、茚基、茚满基或萘基、特别是苯基。

链烯基可以是含有双键并优选含有2-12个C原子、尤其优选2-8个C原子的直链或支链烷基。特别优选直链C_2-4链烯基。尤其优选烯丙基。

具有星号(＊)的键表示与分子其余部分结合的点。

在上下文所有的定义中，本领域技术人员不需过多试验或努力就能辨别哪些是特别相关的(例如如果存在的话，能够提供足够稳定的化合物，用于生产例如半衰期超过30秒(优选超过一周)的药物)，并因此优选为本权利要求所涵盖，且只有化学上可行的键和取代基(例如在双键或三键的情况下，可避免携有氢的氨基或羟基等以避免互变异构现象)以及存在时的互变异构形式、尤其是其平衡状态被涵盖。例如，优选为了稳定性或化学可行性的原因，链中直接相邻的原子优选不选自氧基和氧基、硫代和氧基、氧基或硫代或硫代和硫代，除非存在足够稳定的环体系等。通过其一部分的O(例如在C₁-C₇-烷氧基中)或S连接的取代基优选不与例如环中的氮连接。

盐尤其为式I化合物的可药用盐。当存在成盐基团如碱性或酸性基团时，则可以形成盐，它们可以以解离形式存在，至少是部分解离，例如在pH范围为4-10的水溶液中，或者尤其可以以固体形式、尤其结晶形式分离。

此类盐可以例如作为酸加成盐、优选与有机或无机酸、由具有碱性氮原子(例如亚氨基或氨基)的式I化合物形成，尤其是可药用盐。适当的无机酸为例如卤酸如盐酸、硫酸或磷酸。适合的有机酸为例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，例如乙酸、丙酸、乳酸、富马酸、琥珀酸、柠檬酸、氨基酸如谷氨酸或门冬氨酸、马来酸、羟基马来酸、甲基马来酸、苯甲酸、甲磺酸或乙磺酸、乙基-1，2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1，5-萘-二磺酸、N-环己基氨基磺酸、N-甲基-、N-乙基或N-丙基-氨基磺酸或其他有机质子酸如抗坏血酸。

在负电荷基团如羧基或磺酰基存在时，也可以与碱形成盐，例如金属盐或铵盐，如碱金属或碱土金属盐，例如钠、钾、镁或钙盐，或者与氨或适合的有机胺形成铵盐，如叔单胺如三乙胺或三(2-羟基乙基)胺，或者杂环碱如N-乙基-哌啶或N，N′-二甲基哌嗪。

当碱性基团或酸性基团存在于同一分子中时，式I化合物还可以形成内盐。

为分离或纯化目的，也可能采用不可药用盐，例如苦味酸盐或高铝酸盐。当用于治疗用途时，只能采用可药用盐或游离化合物(酌情包含在药物制剂中)，所以它们是优选的。

由于化合物游离形式及其盐形式、包括那些可以例如在化合物或其盐的纯化或鉴定中用作中间体的盐的密切联系，如果没有明确特别说明，在适当的情况下，当在上下文中提及“化合物”、“原料”和“中间体”时，尤其是式I化合物或其前体时，可以理解为也指其一种或多种盐，或者指相应的游离化合物及其一种或多种盐的混合物，它们每一种还应包括式I化合物的任何溶剂合物、代谢前体如酯或酰胺，或者它们的任何一种或多种的盐。可以得到不同的晶型，因此它们也包括在内。

当复数形式用于化合物、原料、中间体、盐、药物制剂、疾病、病症等，则意味着表示一种(优选)或多种单一的化合物、盐、药物制剂、疾病、病症等，如果使用单数或不确定冠词，则意味着包括复数(例如也包括相同化合物的不同构型异构体，例如外消旋体中的对映体等)或优选单数(“一个”)。

根据取代基的选择，本发明化合物可具有两个或多个不对称中心。优选的绝对构型如本文中明确指定。然而，任何可能的分离的或纯的非对映异构体、对映异构体或几何异构体及其混合物、例如对映异构体的混合物如外消旋体都包含在本发明中。

如上所述，本发明化合物为肾素活性的抑制剂，因此，可以用于治疗高血压、动脉粥样硬化、不稳定型冠脉综合症、充血性心衰、心脏肥大、心肌纤维化、心肌梗塞后心肌病(cardiomyopathy postinfarction)、不稳定型冠脉综合症、舒张功能不全、慢性肾病、肝纤维化、糖尿病导致的并发症如肾病变、血管病变和神经病变、冠状血管疾病、血管成形术后再狭窄、眼内压升高、青光眼、血管生长异常和/或高醛固酮症(hyperaldosteronism)、和/或认知损伤、阿尔茨海默氏病、痴呆、焦虑症和认知障碍等，尤其是需要抑制肾素活性(尤其是不适当的活性)的疾病。

“不当”肾素活性优选是指温血动物、尤其是人的状态，其中肾素显示了在特定状态中过高的肾素活性(例如由于一种或多种调节不当；过度表达，例如由于基因扩增或染色体重排或微生物感染，如表达异常基因的病毒；异常活性，例如导致错误的底物特异性或例如以正常量产生的活性过强的肾素；肾素活性产物除去通路的过低活性、高底物浓度等)，和/或例如通过过高肾素活性导致或维持如上下文中所述的肾素依赖性疾病或病症。此类不当肾素活性可以例如包括高于正常的活性，或者正常或甚至低于正常范围内的活性，然而，由于前面、并行和/或后面的过程、例如对其他过程的信号、调节作用、较高的底物或产物浓度等而导致直接或间接支持或维持疾病或病症，和/或以任何其他方式支持疾病或病症发作和/或存在的活性。肾素的不当活性可能依赖或可能不依赖并行的其他维持病症或疾病的机制，和/或除肾素的抑制之外，预防或治疗作用可能包括或不包括其他机制。因此，“依赖”可以称为“尤其依赖”(尤其是在当疾病或病症确实排他性地仅依赖于肾素的情况)，优选称为“主要依赖于”，更优选称为“基本上仅依赖于”。依赖于肾素活性(尤其是不当活性)的疾病或病症还可能是仅响应于肾素活性调节、尤其是在肾素抑制的情况下以有益方式响应(例如血压降低)的疾病。

当提及依赖于肾素活性(尤其是不当活性)的疾病或病症时，如在下面段落的“使用”的定义中提及时，尤其是当式I化合物被提及用于诊断或治疗性治疗、优选为治疗依赖于不当肾素活性的疾病或病症时，这优选是指依赖于天然肾素和/或其一种或多种改变形式或突变形式的不当活性的任何一种或多种疾病或病症。

当后面或以上提及术语“使用(或用途)”(作为动词或名词)(涉及式I化合物或其可药用盐的用途，或其使用方法)时，它(如果没有不同指明或在上下文中不同表述)分别(如果没有另外说明)包括本发明下列实施方案的任何一个或多个：如果没有另外说明，在适当的情况下，在治疗依赖于肾素活性(尤其是不当活性)的疾病或病症中的用途；在生产用于治疗依赖于肾素活性(尤其是不当活性)的疾病或病症的药物组合物中的用途；一种或多种式I化合物在治疗依赖于肾素活性(尤其是不当活性)的疾病或病症中使用的方法；含有一种或多种式I化合物、用于治疗依赖于肾素活性(尤其是不当活性)的疾病或病症的药物制剂；和用于治疗温血动物、尤其是人的疾病或病症、优选依赖于肾素活性(尤其是不当活性)的疾病的一种或多种式I化合物。

术语“治疗”是指对所述疾病或病症、尤其上下文所述一种或多种疾病或病症的预防性(例如延缓或防止疾病或病症的发作)或优选治疗性(包括但不限于预防、延迟发作和/或进程、减轻、治愈、症状缓解、症状减轻、患者状况改善、肾素调节和/或肾素抑制)治疗。

本发明优选的实施方案

以下所述各组本发明优选的实施方案并非是排他的，而是例如为了用更具体的定义代替一般性表达或符号，这些各组化合物中的一部分可以酌情采用以上给出的定义互换或交换，或省略，且彼此独立的更具体的定义中的每一个可以独立引入或者与用于其他更一般性表达或符号的一个或多个其他更具体的定义一起引入。

本发明优选涉及式I、式II或式III化合物，其中部分R5以R构型连接或者其中这些部分以S构型连接。

因此，本发明更优选涉及如上下文中所定义的式I、式II或式III化合物，其具有如下式IIA或IIB或者其(优选可药用)盐所示的构型：

或者，如下式IIIA或IIIB或者其(优选可药用)盐所示的构型：

其中在式IIA、IIB、IIIA和IIIB中，R1、R2、R3和R5如上下文对式I化合物所定义。

或者并且也更优选，本发明涉及如上下文中所定义的式I或式III化合物，其具有如下式III’或者其(优选可药用)盐所示的构型：

其中在式III’中，R1、R2、R3和R5如上下文中对式I化合物所定义。

或者并且也更优选，本发明涉及如上下文中所定义的式I或式III化合物，其具有如下式III’A或式III’B或者其(优选可药用)盐所示的构型：

其中在式III’A和III’B中，R1、R2、R3和R5如上下文中对式I化合物所定义。

在第一个优选的实施方案中，本发明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R1为C_1-7烷基，更优选C_1-4-烷基，其任选被C₁-C₇-烷氧基、更优选C_1-4-烷氧基取代。在一个实施方案中，R1为未被取代的C_1-7烷基。R1特别优选的实例选自：

和

在另一个优选的实施方案中，本发明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R2为氢、C₁-C₇-烷氧基或C₁-C₇-烷氧基-C₁-C₇-烷氧基；更优选为氢、C₁-C₄-烷氧基或C₁-C₄-烷氧基-C₁-C₄-烷氧基。R2特别优选的实例选自：

氢、

和

在一个优选的实施方案中，本发明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R2为氢或C₁-C₇-烷氧基；更优选为氢或C₁-C₄-烷氧基。R2特别优选的实例选自：

氢、

和

在另一个优选的实施方案中，本发明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R3为C_3-7烷基或C_3-6-环烷基；更优选为支链C_4-6-烷基或环丙基。

R3特别优选的实例为：

和

在一个实施方案中，R3为环丙基。

在另一个优选的实施方案中，本发明尤其涉及式I、II、III、III’、IIA、IIB、IIIA、IIIB、III’A或III’B的化合物，其中R5为C_1-5-烷基或C_3-6-环烷基，更优选为C_1-4烷基或环己基。所述烷基可以是支链或通过非末端C连接。R5特别优选的实例为：

和

本发明的具体实施方案在实施例中提供，因此，本发明在非常优选的实施方案中涉及涉及选自实施例中给出化合物的式I化合物或其盐以及它们根据本发明的用途。

制备方法

式I化合物或其盐尤其如PCT/EP06/012581中所述或类似于其中所述的方法制备，一般通过包括如下的方法制备：

a)使式IV化合物或其(优选)活化衍生物，

其中PG为保护基团且R4和R5如上所定义，

与式V化合物反应，

其中R1、R2和R3如上所定义；或

b)使式VI化合物或其(优选)活化衍生物，

其中PG为保护基团且R1、R2、R3和R4如上所定义，

与式VII化合物反应，

其中R5如上所定义；

并且如有需要，在上述任何一个或多个方法完成后，将可得的式I化合物或其被保护的形式转化为不同的式I化合物，将可得的式I化合物的盐转化为游离化合物或不同的盐，将可得的游离式I化合物转化为其盐，和/或将可得的式I化合物的异构体混合物分离成单个异构体；

其中在任何原料中，除所述特定保护基团之外，可存在更多的保护基团，并且在适当的阶段去除任何保护基团或所结合的树脂以便获得相应的式I化合物或其盐。

或者，式I化合物或其盐一般通过包括以下的方法制备：

使式(IXa)化合物或其(优选)活化衍生物，

其中PG为保护基团，R4如上定义且R6为未取代或取代的烷基或链烯基，优选为C₁-C₄烷基，

与式V化合物反应，

其中R1、R2和R3如上所定义；

以获得式Xa的酰胺，

将其酯部分水解以获得式XIa化合物，

所述式XIa化合物或其(优选)活化衍生物又可与式VII化合物反应，

其中R5如上所定义，

以获得式XII化合物，

此外，式I化合物或其盐可一般通过包括以下的方法制备：

使式(IXb)化合物或其(优选)活化衍生物，

与式VII化合物反应，

其中R5如上所定义，

以获得式Xb的酰胺，

将其酯部分水解以获得式XIb化合物，

所述式XIb化合物或其(优选)活化衍生物又可与式V化合物反应，

其中R1、R2和R3如上所定义，

以获得式XII化合物，

在式IV、VI、IXa、IXb、XIa或XIb化合物的情况下，其活化衍生物为其中羧基的OH基团优选被离去基团如卤素、例如氯、溴或碘或有机磺酰氧基如对甲苯磺酰氧基或甲磺酰氧基替换的相应化合物。然后，其此类活化衍生物与式V或VII化合物的反应优选在亲核取代的标准条件下进行。在优选的实施方案中，活化衍生物包括例如酰卤、酸酐和活化酯。活化酯为本领域技术人员已知的酯，例如N-琥珀酰亚胺。式IV、VI、IXa或IXb的羧酸的活化衍生物为例如所述酸与EDCI、BopCl或TcBocCl反应后形成的相应的中间体化合物。在另一个优选的实施方案中，式IV、VI、IXa、IXb、XIa或XIb的活化衍生物为在Vilsmeier反应条件下形成的相应衍生物。

而且，用于制备式I化合物或其可药用盐的方法可包括：

使式VIII化合物

其中PG为保护基团，

与醇R6OH在手性胺催化剂的存在下反应，其中R6为未取代或取代的烷基或链烯基，优选为C₁-C₄烷基，

以获得式VIII’a或VIII’b化合物。

胺的性质决定酯形成的位置，因此决定立体选择性。手性胺催化剂的优选实例为手性叔胺，更优选为金鸡纳生物碱类，如奎尼定和奎宁，更优选为修饰的金鸡纳生物碱类。此类修饰的金鸡纳生物碱类的实例如下所示。更详细的描述参见Tian，S.-K.；Chen，Y.；Hang，J.；Tang，L.；McDiad，P.；Deng，L.；Acc.Chem.Res.2004，37，621-631以及其中所引用的参考文献。

DHQD(二氢奎尼定基) DHQ(二氢奎宁基)

DHQD-CLB DHQD-MEQ DHQD-PHN

1 2 3

(DHQD)₂PYR (DHQD)₂PHAL (DHQD)₂AQN

4 5 6

缩写：

DHQD-CLB 氢化奎尼定4-氯苯甲酸酯

DHQ-CLB 氢化奎宁4-氯苯甲酸酯

DHQD-MEQ 氢化奎尼定4-甲基-2-喹啉基醚

DHQ-MEQ 氢化奎宁4-甲基-2-喹啉基醚

DHQD-PHN 氢化奎尼定9-O-(9’-菲基)醚

DHQ-PHN 氢化奎宁9-O-(9’-菲基)醚

(DHQD)2PYR 氢化奎尼定2，5-二苯基-4，6-嘧啶二基二醚

(DHQ)2PYR 氢化奎宁2，5-二苯基-4，6-嘧啶二基二醚

(DHQD)2PHAL 氢化奎尼定1，4-酞嗪二基二醚

(DHQ)2PHAL 氢化奎宁1，4-酞嗪二基二醚

(DHQD)2AQN 氢化奎尼定蒽醌-1，4-二基二醚

(DHQ)2AQN 氢化奎宁蒽醌-1，4-二基二醚

优选的胺为DHQ如(DHQ)₂AQN)，和DHQD如(DHQD)₂AQN。

至于反应条件，还可参考Tian，S.-K.等人。具体而言，手性胺催化剂通常采用低于等摩尔量，优选低于50mol％，如5-40mol％，更优选10-35mol％，最优选30mol％。

醇R6OH为用于在式VIII化合物上酯化和在酰胺存在下水解的适合的醇，例如未取代或取代的烷基或链烯基，优选为C₁-C₄烷基，其中取代的烷基优选选自卤素、芳基或取代的烷基，特别是氟或苯基。取代的烷基的实例包括三氟甲基、二氟甲基、二氟乙基、氟甲基、氟乙基或苄基。最优选地，R6OH为甲醇。

反应溶剂可如下所述选择，特别优选醚溶剂，如乙醚或四氢呋喃(THF)或它们的混合物，例如乙醚∶THF(4∶1)或(3∶1)。可选择反应温度以使反应以有效的方式完成，同时尽可能防止不需要副产物的形成。通常反应温度为-100～20℃，例如-80～10℃，优选-40～0℃。

通过本领域已知的适合的重结晶技术可以实现产物VIII’a或VIII’b的分离。例如，可参考在Park，J.-S.：Yeom，C.-E.：Choi，S.H.：Ahn，Y.S.：Ro，S.：Jeom，Y.H.：Shin，D.-K.：Kim，B.M.Tetrahedron Lett.2003，44，1611-1614和其中所引用参考文献中所采用的重结晶方法。因此，可以采用手性胺，如α-苯乙胺。

流程1a和1b显示了用于制备式II化合物的两种优选方法。应注意，对于每种转化的每一个箭头的简单描述仅仅是用于说明目的，不应视为对顺序或每一个具体步骤的限定。

流程1a

流程1b

酯水解和脱保护可以根据本领域熟知的方法进行，例如参考书如Richard C.Larock，“有机转化概述：官能团制备指南”，第二版，Wiley-VCH Verlag GmbH，2000或T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有机合成的保护基团”，第三版，Wiley，New York 1999中所述的方法；还可参见下面与保护和脱保护方法有关的文献。

本发明包括所有可药用的同位素标记的式(I)化合物，其中一个或多个原子被具有相同原子数但原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的原子质量或质量数的原子取代。

适合于包含于本发明化合物中的同位素的实例包括氢如²H和³H、碳如¹¹C、¹³C和¹⁴C、氯如³⁶Cl、氟如¹⁸F、碘如¹²³I和¹²⁵I、氮如¹³N和¹⁵N、氧如¹⁵O、¹⁷O和¹⁸O、磷如³²P和硫如³⁵S。

用较重的同位素如氘即²H取代可以提供某些由更大的代谢稳定性导致的治疗优势，例如体内半衰期增加或剂量需求减少，因此在某些情况中可以是优选的。

同位素标记的式(I)化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于附加实施例和制备部分中所述的那些方法、使用适合的同位素标记的试剂代替先前所用的未标记的试剂而制备。

原料

在随后原料(此术语也包括中间体)及其合成的描述中，如果没有另外直接说明或没有在上下文中说明，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8和PG以上或者在各种原料或中间体的实施例中所述的含义。如果没有特别指明，保护基团可在适当的步骤中引入和除去从而防止官能团在相应的反应步骤中发生不期望的反应，保护基团的应用、引入和除去它们的方法如上下文中所述。本领域技术人员可容易地确定是否以及哪一种保护基团是有用或者是需要的。

就任何原料而言，如果存在异构体(例如非对映体、对映体)，则可以在适当的阶段根据标准方法将它们分离。

其他原料在本领域中是已知的、可得自商业和/或它们可在实施例中发现或者根据实施例的相似方法得到。

一般方法条件

以下一般(如果可能的话)适用于所有上下文中提到的方法，但是优选上下文具体提及的反应条件：

在任何上下文中所述的反应中，即使没有特别说明，可以酌情或根据需要使用保护基团对不期望参加给定反应的官能团进行保护，并且它们可在适当或需要的阶段引入和/或除去。因此，无论何处本说明书中描述未具体提及保护和/或脱保护的反应，也可能包括包括使用保护基团的反应。

在本公开的范围内，除非本文另有说明，只有不是特定所需式I终产物的组分的易于除去的基团被称为“保护基团”或PG。用此类保护基团保护官能团、保护基团自身和适用于其引入和除去的反应被描述于例如标准参考文献中，例如J.F.W.McOmie，“有机化学的保护基团”，PlenumPress，London和New York 1973；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“有机合成的保护基团”，第三版，Wiley，New York 1999；“肽化学”：第3卷(编辑：E.Gross和J.Meienhofer)，Academic Press，London和NewYork 1981；“有机化学方法”，Houben Weyl，第4版，第15/I卷，GeorgThieme Verlag，Stuttgart 1974；H.-D.Jakubke和H.Jeschkeit，“氨基酸、肽和蛋白质”，Verlag Chemie，Weinheim，Deerfield Beach和Basel 1982；以及Jochen Lehmann，“碳水化合物：单糖及其衍生物”，Georg ThiemeVerlag，Stuttgart 1974。保护基团的特征在于它们可易于除去(即没有不需要的二级反应发生)，例如通过溶剂解、还原、光解或者在生理条件(例如通过酶裂解)下。

保护基团或PG、特别是对氮如本文所述的化合物的哌啶氮的保护基团的实例为烷氧基羰基、磺酰基和酰基。优选的保护基团包括例如(i)C₁-C₂-烷基，它被苯基单-、二-或三取代，如苄基(或)二苯甲基或三苯甲基，其中苯基环为未取代的或被一个或多个、例如2个或3个残基取代，例如选自下组的基团：C₁-C₇-烷基、羟基、C₁-C₇-烷氧基、卤素、硝基、氰基和CF₃；苯基-C1-C2-烷氧基羰基；和烯丙基或肉桂基。尤其优选低级(例如C₁-C₇)烷氧基羰基，如叔丁氧基羰基或苄氧基羰基；苄氧基羰基(Cbz)、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)、苄氧基甲基(BOM)、新戊酰基-氧基-甲基(POM)、三氯乙氧基羰基(Troc)、1-金刚烷基氧基羰基(Adoc)，但是也可以为苄基、异丙苯基(cumyl)、二苯甲基、三苯甲基、烯丙基、alloc(烯丙基氧基羰基)。保护基团也可以为甲硅烷基、例如三烷基甲硅烷基，尤其是三甲基甲硅烷基、叔丁基-二甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基、三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)，也可以为取代的磺酰基或取代的亚磺酰基。最优选低级(例如C₁-C₇)烷氧基羰基，如叔-丁氧基羰基。保护基团也可以为磺酰基，优选芳基磺酰基，如取代的或未取代的苯基磺酰基。在此情况下，苯基如果是被取代的，则它可以为单-、二-或三-取代的，优选被下列适合的基团单-或二-取代：如C₁-C₇-烷基、C₁-C₇-烷氧基、卤素-C₁-C₇-烷基、卤素-C₁-C₇-烷氧基、卤素、羟基、硝基、氰基，更优选硝基或甲基。磺酰基保护基团特别优选的实例为2，4-二硝基苯基磺酰基、4-硝基苯基磺酰基、2-硝基苯基磺酰基和4-甲基苯基磺酰基。

所有上述方法步骤可以在本身已知的反应条件下进行，优选那些特别提及的条件，不存在或通常存在溶剂或稀释剂，优选对所用试剂惰性并溶解它们的溶剂或稀释剂，不存在或存在催化剂、缩合剂或中和剂，例如离子交换剂如阳离子交换剂，例如H⁺型的，取决于反应和/或反应物的性质，在降低、正常或升高温度、例如温度范围为约-100℃至约190℃，优选为约-80℃至约150℃，例如-80℃至-60℃，于室温，于-20℃至40℃或于回流温度，在大气压下或在密闭的容器、酌情在压力下，和/或在惰性气氛下，例如在氩气或氮气气氛下。

除非在方法描述中另外说明，否则可以从中选择那些适用于任意特定反应的溶剂的溶剂，包括那些特别提及的溶剂，或者例如水；酯类，如低级烷基-低级烷酸酯，如乙酸乙酯；醚类，如脂族醚，如乙醚，或环醚，例如四氢呋喃或二氧六环；液体芳族烃类，如苯或甲苯；醇类，如甲醇、乙醇或1-或2-丙醇；腈类，如乙腈；卤代烃类，如二氯甲烷或氯仿；酰胺类，如二甲基甲酰胺或二甲基乙酰胺；碱类，如杂环氮碱，例如吡啶或N-甲基吡咯烷-2-酮；羧酸酐类，如低级链烷酸酐，例如乙酸酐；环状、直链或支链烃类，如环己烷、己烷或异戊烷；或者这些溶剂的混合物，例如水溶液。此类溶剂混合物也可以用于例如通过色谱法或分配的处理过程中。

本发明还涉及这些方法的一些形式，其中在任何方法阶段作为中间体获得的化合物被用作原料，并进行其余的方法步骤，或其中起始原料在反应条件下形成或以衍生物形式、如被保护形式或盐的形式使用，或者根据本发明方法可获得的化合物在一定的方法条件下生成并进一步原位加工。在本发明的方法中，优选使用那些能产生所述优选式I化合物的原料。特别优选那些与实施例中所述相同或相似的反应条件。本发明还涉及本文中所述的新原始化合物和中间体，尤其是那些能产生新式I化合物或本文中优选提及的式I化合物的原始化合物和中间体。

药物应用、药物制剂和方法

如上所述，式I化合物为肾素活性抑制剂，因而可用于治疗高血压、动脉粥样硬化、不稳定型冠脉综合征、充血性心衰、心肌肥大、心肌纤维化、心肌梗塞后心肌病、不稳定型冠脉综合征、舒张功能不全、慢性肾病、肝纤维化、糖尿病导致的并发症如肾病变、血管病变和神经病变、冠状血管疾病、血管成形术后再狭窄、眼内压升高、青光眼、血管生长异常和/或高醛固酮症、和/或认知损伤、阿尔茨海默氏病、痴呆、焦虑症和认知障碍等。尤其优选高血压，至少作为待治疗疾病的一个组分，即可以治疗(预防性和/或治疗性)单独的或与一或多种(尤其是上述)其他疾病组合的高血压。

本发明进一步提供药物组合物，包含治疗有效量的药理学活性的式I化合物单独或与一种或多种可药用载体的组合。

根据本发明的药物组合物是适用于对哺乳动物、包括人肠内如口服或直肠、透皮和胃肠外施用的那些，以抑制肾素活性，用于治疗与肾素活性(尤其是不当肾素活性)有关的病症。此类病症包括高血压、动脉粥样硬化、不稳定型冠脉综合征、充血性心衰、心肌肥大、心肌纤维化、心肌梗塞后心肌病、不稳定型冠脉综合征、舒张功能不全、慢性肾病、肝纤维化、糖尿病导致的并发症如肾病变、血管病变和神经病变)、冠状血管疾病、血管成形术后再狭窄、眼内压升高、青光眼、血管生长异常和/或高醛固酮症、和/或认知损伤、阿尔茨海默氏病、痴呆、焦虑症和认知障碍等。尤其优选包含高血压的疾病，更尤其是高血压本身，其中采用药物组合物的治疗或式I化合物的使用在预防上和/或(优选)治疗上是有用的。

所以，药理学活性的式I化合物可用于制备包含其治疗有效量连同或混合有适合于肠内或胃肠外施用的赋形剂或载体的药物组合物。优选片剂和明胶胶囊，它们含有活性成分以及：

a)稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸：

b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石、硬脂酸、其镁盐或钙盐和/或聚乙二醇；对于片剂，还可含有：

c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊剂、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯基吡咯烷酮；如有需要，还可以含有：

d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐或泡腾混合物；和/或

e)吸收剂、着色剂、调味剂和增甜剂。

注射用组合物优选等渗水溶液或混悬液，栓剂最好由脂肪乳或混悬液制备。

所述组合物可以是灭菌的和/或含有佐剂，例如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。另外，它们也可以含有其它有治疗价值的物质。所述组合物可以分别根据常规的混和、制粒或包衣方法制备，且含有约0.1-75％、优选约1-50％活性成分。

透皮应用的适合制剂包括治疗有效量的本发明化合物和载体。有益的载体包括可吸收的药理学上可接受的溶剂，以帮助穿透宿主皮肤。从特性上讲，透皮装置为绷带的形式，包括被衬(backing member)、含有化合物以及任选载体的储库、任选的在延长的时间内以受控和预定的速度将化合物传递通过宿主皮肤的控速屏障、将本装置固定于皮肤的装置。

因此，本发明提供如上所述的用于治疗由肾素活性介导病症的药物组合物，所述病症优选高血压、动脉粥样硬化、不稳定型冠脉综合征、充血性心衰、心肌肥大、心肌纤维化、心肌梗塞后心肌病、不稳定型冠脉综合征、舒张功能不全、慢性肾病、肝纤维化、糖尿病导致的并发症如肾病变、血管病变和神经病变、冠状血管疾病、血管成形术后再狭窄、眼内压升高、青光眼、血管生长异常和/或高醛固酮症、和/或认知损伤、阿尔茨海默氏病、痴呆、焦虑症和认知障碍，以及其使用的方法。

药物组合物可以含有治疗有效量的如本文所定义的式I化合物，单独或者与另一种治疗剂组合，例如，各自在本领域报道的有效治疗剂量。此类治疗剂包括：

a)抗糖尿病药物，如胰岛素、胰岛素衍生物和模拟物；胰岛素促分泌素，如磺酰脲类，例如格列吡嗪、格列本脲和Amaryl；促胰岛素的磺酰脲受体配体，如格列奈类，如那格列奈和瑞格列奈；过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)配体；蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制剂如PTP-112；GSK3(糖原合酶激酶-3)抑制剂如SB-517955、SB-4195052、SB-216763、NN-57-05441和NN-57-05445；RXR配体如GW-0791和AGN-194204；钠-依赖型葡萄糖共转运体抑制剂如T-1095；糖原磷酸化酶A抑制剂如BAYR3401；双胍类，如二甲双胍；α-葡糖苷酶抑制剂，如阿卡波糖；GLP-1(胰高血糖素样肽-1)、GLP-1类似物，如Exendin-4和GLP-1模拟物；和DPPIV(二肽基肽酶IV)抑制剂，如LAF237；

b)降血脂药物，如3-羟基-3-甲基-戊二酰基辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，例如洛伐他汀、匹伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、西立伐他汀、美伐他汀、velostatin、氟伐他汀、达伐他汀、阿托伐他汀、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)和雷伐他汀(rivastatin)；鲨烯合酶抑制剂；FXR(类法尼醇X受体)和LXR(肝X受体)配体；考来烯胺；贝特类；烟酸和阿司匹林；

c)减肥药，如奥利司他；和

d)抗高血压药物，例如，髓袢利尿剂，如依他尼酸、呋塞米和托塞米；血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂，如贝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、赖诺普利、莫西普利、培哚普利、喹那普利、雷米普利和群多普利；Na-K-ATP酶膜泵抑制剂，如地高辛；中性肽链内切酶(NEP)抑制剂；ACE/NEP抑制剂，如奥马曲拉(omapatrilat)、山帕曲拉(sampatrilat)和法西多曲；血管紧张素II拮抗剂，如坎地沙坦、依普沙坦(eprosartan)、厄贝沙坦、氯沙坦、替米沙坦和缬沙坦，特别是缬沙坦；β-肾上腺素能受体阻断剂，如醋丁洛尔、阿替洛尔、倍他洛尔、比索洛尔、美托洛尔、纳多洛尔、普萘洛尔、索他洛尔和噻吗洛尔；影响收缩力的药物(inotropicagent)，如地高辛、多巴酚丁胺和米力农；钙通道阻滞剂，如氨氯地平、苄普地尔、地尔硫卓、非洛地平、尼卡地平、尼莫地平、硝苯地平、尼索地平和维拉帕米；醛固酮受体拮抗剂；和醛固酮合酶抑制剂。

其它具体的抗糖尿病化合物由Patel Mona描述于Expert Opin InvestigDrugs，2003，12(4)，623-633的附图1至7。式I化合物与其它活性成分可以同时施用或在其之前或之后施用，可以以相同或不同的施用途径分别施用，或者在相同的药物制剂中一起施用。

由代码、通用名或商品名加以识别的治疗剂的结构可以得自现行版的“默克索引”标准目录，或者得自数据库，例如Patents International(例如IMS World Publications)。

因此，本发明提供药用产品或组合物，包含单独的或与治疗有效量的另一种治疗剂组合的治疗有效量的式I化合物，所述另一种治疗剂优选选自抗糖尿病药物、降血脂药物、减肥药或抗高血压药物，最优选如上所述的抗糖尿病药物、抗高血压药物和降血脂药物。

本发明进一步涉及用作药物的如上所述的药物组合物。

本发明进一步涉及如上所述的药物组合物或组合在制备用于治疗由肾素活性(特别是不当肾素活性)介导的病症的药物中的用途，所述病症优选高血压、动脉粥样硬化、不稳定型冠脉综合征、充血性心衰、心肌肥大、心肌纤维化、心肌梗塞后心肌病、不稳定型冠脉综合征、舒张功能不全、慢性肾病、肝纤维化、糖尿病导致的并发症如肾病变、血管病变和神经病变、冠状血管疾病、血管成形术后再狭窄、眼内压升高、青光眼、血管生长异常和/或高醛固酮症、和/或认知损伤、阿尔茨海默氏病、痴呆、焦虑症和认知障碍等。

所以，本发明还涉及用作药物的式I化合物、涉及式I化合物在制备用于预防和/或治疗由肾素活性(特别是不当肾素活性)介导的病症的药物组合物中的用途、涉及用于由肾素活性(特别是不当肾素活性)介导的病症的药物组合物，所述组合物包含式I化合物或其可药用盐以及可药用的稀释剂或载体材料。

本发明进一步提供用于预防和/或治疗由肾素活性(特别是不当肾素活性)介导的病症的方法，它包括对需要此类治疗的温血动物、尤其是人施用治疗有效量的式I化合物。

用于约50-70kg的哺乳动物的单位剂量可以含有约1mg至1000mg之间、最好在约5-600mg之间的活性成分。活性化合物的治疗有效剂量取决于温血动物的种类(尤其是哺乳动物，更尤其是人类)、体重、年龄和个体情况，也取决于施用模式以及所涉及的化合物。

根据前述，本发明还提供了例如用于本文中所定义的任何方法的、含有治疗组合的药用产品，例如试剂盒、药盒(kit of parts)，所述产品包含式I化合物或其可药用盐，与至少一种包含至少另一种治疗剂的药物组合物并行或顺序使用，所述另一种治疗剂优选选自抗糖尿病药物、降血脂药物、减肥药或抗高血压药物。该试剂盒可以含有用于其施用的说明书。

类似地，本发明提供了药盒，它包括：(i)含有根据本发明的式I化合物的药物组合物；和(ii)含有选自抗糖尿病药物、降血脂药物、减肥药、抗高血压药物的化合物或其可药用盐的药物组合物，为组分(i)和(ii)的两种分立单元形式。

同样，本发明提供了如上文所定义的方法，该方法包括共同施用、例如并行或顺序施用治疗有效量的式I化合物或其可药用盐和至少一种第二药物，所述第二药物优选为抗糖尿病药物、降血脂药物、减肥药或抗高血压药物，例如如上所述的那些药物。

优选本发明化合物施用于有需要的哺乳动物。

优选本发明化合物用于治疗对响应于肾素活性(特别是不当肾素活性)调节的疾病，尤其是一种或多种上述特定疾病。

最后，本发明提供了方法或用途，其包括施用式I化合物与治疗有效量的抗糖尿病药物、降血脂药物、减肥药或抗高血压药物的组合。

最后，本发明提供了方法或用途，其包括施用如本文所述药物组合物形式的式I化合物。

化合物的上述性质可通过体外和体内试验证明，有利地采用哺乳动物，例如小鼠、大鼠、兔、犬、猴，或者分离的器官、组织及其制品。所述化合物可以在体外以溶液的形式、例如优选水溶液使用，也可以在体内经肠内、胃肠外、有利地静脉内应用，例如以混悬液或水溶液的形式。体外浓度范围可在约10^-3摩尔至10^-10摩尔浓度之间。体内的治疗有效量的范围取决于施用途径，在约0.001至500mg/kg之间，优选在约0.1至100mg/kg之间。

如上所述，本发明化合物具有酶抑制性质。特别是，它们抑制天然酶肾素的作用。肾素通过肾脏进入血液，在血液中它使血管紧张素原裂解，释放十肽血管紧张素I，然后十肽血管紧张素I在肺、肾和其它器官中裂解为八肽血管紧张素II。该八肽能够通过动脉血管收缩直接升高血压，并通过自肾上腺释放钠离子保留激素醛固酮间接升高血压，同时伴随着细胞外液体积增加，该增加有助于血管紧张素II的作用。肾素酶活性的抑制剂导致血管紧张素I的形成减少，结果产生的血管紧张素II的量也较少。活性肽激素的浓度减少是肾素抑制剂降低血压效果的直接原因。

肾素抑制剂的作用可通过体外试验的方法、尤其在实验上进行证明，在各种系统(人血浆、纯化的人肾素以及合成或天然的肾素底物)中测定的血管紧张素I的形成减少。

尤其可以采用下列体外试验：

1)在含有0.05M NaCl、0.5mm EDTA和0.05％CHAPS的0.1MTris-HCl缓冲液(pH 7.4)中，将7.5nM浓度的重组人肾素(采用标准方法在中国仓鼠卵巢细胞中表达并纯化)与各种浓度的测试化合物于室温孵育1小时。加入合成肽底物Arg-Glu(EDANS)-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile_His_Thr-Lys(DABCYL)-Arg9，使其终浓度为2μM，在微量培养板分光-荧光仪中，记录350nM的激发波长和500nM的发射波长时的荧光增强。以肾素活性的抑制百分率作为测试化合物浓度的函数计算IC50值(荧光共振能量转移分析，FRET测定法)。在本测定法中，式I化合物优选可显示范围在1nM-20μM之间的IC₅₀值。

2)或者，在含有0.05M NaCl、0.5mm EDTA和0.05％CHAPS的0.1MTris-HCl缓冲液(pH 7.4)中，将0.5nM浓度的重组人肾素(采用标准方法在中国仓鼠卵巢细胞中表达并纯化)与各种浓度的测试化合物于37℃孵育2小时。加入合成肽底物Arg-Glu(EDANS)-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile_His_Thr-Lys(DABCYL)-Arg9，使其终浓度为4μM，在微量培养板分光-荧光仪中，记录340nM的激发波长和485nM的发射波长时的荧光增强。以肾素活性的抑制百分率作为测试化合物浓度的函数计算IC50值(荧光共振能量转移分析，FRET测定法)。在本测定法中，式I化合物优选可显示范围在1nM-20μM之间的IC₅₀值。

3)在另一种测定法中，在含有0.05M NaCI、0.5mm EDTA和0.025％(w/v)CHAPS的0.1M Tris-HCI缓冲液(pH 7.4)中，将加入0.8nM浓度的重组人肾素(采用标准方法在中国仓鼠卵巢细胞中表达并纯化)的人血浆与各种浓度的测试化合物于37℃孵育2小时。加入合成肽底物Ac-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile-His-Asn-Lys-[DY-505-X5]，使其终浓度为2.5μM。加入过量的阻断抑制剂终止酶反应。通过毛细管电泳分离反应产物，通过分光光度法于505nM波长处定量。以肾素活性的抑制百分率作为测试化合物浓度的函数计算IC50值。在本测定法中，式I化合物优选可显示范围在1nM-20μM之间的IC₅₀值。

4)在另一种测定法中，在含有0.05M NaCI、0.5mm EDTA和0.025％(w/v)CHAPS的0.1M Tris-HCI缓冲液(pH 7.4)中，将0.8nM浓度的重组人肾素(采用标准方法在中国仓鼠卵巢细胞中表达并纯化)与各种浓度的测试化合物于37℃孵育2小时。加入合成肽底物Ac-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu-Val-Ile-His-Asn-Lys-[DY-505-X5]，使其终浓度为2.5μM。加入过量的阻断抑制剂终止酶反应。通过毛细管电泳分离反应产物，通过分光光度法于505nM波长处定量。以肾素活性的抑制百分率作为测试化合物浓度的函数计算IC50值。在本测定法中，式I化合物优选可显示范围在1nM-20μM之间的IC₅₀值。

在缺乏盐的动物中，肾素抑制剂能够使得血压降低。人肾素可能与其它物种的肾素不同。为了测试人类肾素抑制剂，可以采用灵长类、例如绒猴(绒毛猴(Callithrix jacchus))，因为人类肾素与灵长类肾素的酶活性域基本同源。尤其可以采用下列体内试验：

式I化合物可以如文献中所述在灵长类动物中体内试验(参见例如Schnell CR等人，“采用遥测术测定清醒、未受限绒猴的血压和心率”，Am J Physiol 264(Heart Circ Physiol 33).1993：1509-1516；或Schnell CR等人，“采用遥测术测定清醒、不受限绒猴的血压、心率、体温、ECG和活动”，第五届FELASA研讨会文集：Welfare and Science.编辑BRIGHTON.1993)。

已经发现，新化合物除了是有效的肾素抑制剂之外，还显示改善的生物利用度。生物利用度优选等于或高于20％，更优选等于或高于30％。生物利用度可如下测定。

在埋植有颈静脉插管的雄性Sprague-Dawley大鼠中研究化合物的药动学特征。化合物以0.5％甲基纤维水溶液口服施用或以N-甲基吡咯烷酮-PEG200(10∶90，v/v)静脉内施用。代表性剂量分别为6mg/kg p.o.和2mg/kgi.v.。在不同时间点通过静脉插管连续采集血样到肝素化管，直到给药后32小时，然后离心分离血浆。在用乙腈萃取后，通过液相色谱法-串联质谱法测定本发明所述化合物的血浆浓度。

采用非室模型方法计算药动学参数。

缩写

Boc 叔-丁氧基羰基

BopCl 双(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酸氯

CAN 硝酸铈铵(IV)

DMF N，N-二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

EDCI.HCl 1-[3-(二甲氨基)丙基]-3-乙基碳二亚胺盐酸盐

Et 乙基

EtOAc 乙酸乙酯

h 小时

HOAT 1-羟基-7-氮杂苯并三唑

mL 毫升

Me 甲基

MS 质谱法

NMP N-甲基吡咯烷酮

Ph 苯基

i-Pr 异丙基

RT 室温

TcBocCl 氯甲酸2，2，2-三氯-1，1-二甲基乙酯

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱法

t_R 保留时间

温度以摄氏度测定。除非另有说明，反应于RT进行。除非另有说明，H₂存在下的氢化反应在大气压下进行。使用“Biotage Initiator 60”设备进行微波照射。

HPLC条件-A：

柱：CombiScreen ODS-AM，50×4.6mm。

流速：2.0mL/min

流动相：A)TFA/水(0.1/100，v/v)，B)TFA/乙腈(0.1/100，v/v)

梯度：线性梯度，5％B至100％B 5min，然后100％B 2min

检测：于215nm UV检测

HPLC条件-B：

柱：ACQUITY UPLC^TM BEH C₁₈1.7μm，50×2.1mm。

流速：0.5mL/min

流动相：A)TFA/水(0.1/100，v/v)，B)TFA/乙腈(0.1/100，v/v)

梯度：5％B 0.5min，然后线性梯度5％B至100％B 1.5min，然后100％B1.0min

检测：于215nm UV检测

HPLC条件-C：

柱：ACQUITY UPLC^TM BEH C₁₈1.7μm，50×2.1mm.

流速：0.5mL/min

流动相：A)TFA/水(0.1/100，v/v)，B)TFA/乙腈(0.1/100，v/v)

梯度：5％B 0.5min，然后线性梯度5％B至100％B 5.0min，然后100％B1.5min

检测：于215nm UV检测

TLC条件：测量TLC的R_f值，5×10cm TLC板，硅胶F₂₅₄，Merck，Darmstadt，德国。

以下详细描述用于制备式I化合物的方法。应注意，对于每种转化的每一个箭头上的简单描述仅仅用于说明目的，不应理解为是对顺序或每个单独步骤的限定。

流程1a

流程1b

流程2

流程3(在流程图1a和1b中作为原料所示的环酐的制备)

A：吡啶-3，5-二甲酸二甲酯

将含3，5-吡啶二甲酸(1.5g，63mmol)和浓H₂SO₄(0.9mL)的MeOH(15mL)在微波炉中于120℃加热2小时。蒸发溶剂，得到残渣，将其在乙酸乙酯和碳酸氢钠饱和水溶液之间分配。有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发，得到浅黄色固体。

MS(LC-MS)：196[M+H]^+·TLC，Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)＝0.56。

B：哌啶-3，5-二甲酸二甲酯

将含吡啶-3，5-二甲酸二甲酯(5.3g，27mmol)和Rh/PtO₂(0.5g)的MeOH(200mL)在氢气下搅拌过夜。将所得混合物过滤，蒸发溶剂，得到棕色油。MS(LC-MS)：202[M+H]⁺。

C：哌啶-1，3，5-三甲酸1-叔丁酯3，5-二甲酯

将哌啶-3，5-二甲酸二甲酯(5.4g，26.8mmol)在CH₂Cl₂(55mL)中的溶液用Boc₂O(6.4g，29.5mmol)处理，于室温将反应物搅拌过夜。将反应用0.1NHCl水溶液淬灭，有机相用0.1N HCl水溶液洗涤。合并的有机相用CH₂Cl₂/MeOH(9/1)萃取2次，然后将合并的有机相通过Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发。所得的残渣经硅胶快速色谱法(洗脱剂：CH₂Cl₂/MeOH 95∶5)纯化，得到标题化合物，为黄色固体。MS(LC-MS)：302[M+H]⁺。TLC，Rf(CH₂Cl₂/MeOH 95∶5)＝0.5。

D：哌啶-1，3，5-三甲酸1-叔丁酯

向哌啶-1，3，5-三甲酸1-叔丁酯3，5-二甲酯(6.8g，22.5mmol)在MeOH/水(4∶1，120mL)中的溶液加入K₂CO₃(9.4g，68mmol)。将反应混合物在回流下搅拌过夜。蒸发MeOH，残渣用二氯甲烷和1N HCl水溶液萃取。有机相通过Na₂SO₄干燥，过滤并蒸发，得到浅黄色固体。MS(LC-MS)：274[M+H]⁺。

E：2，4-二氧代-3-氧杂-7-氮杂-双环[3.3.1]壬烷-7-甲酸叔丁酯

将哌啶-1，3，5-三甲酸1-叔丁酯(1g，3.6mmol)在乙酸酐(20mL)中的悬浮液于回流下加热2小时。将反应混合物与甲苯一起蒸发三次，然后将其于室温、高真空干燥过夜，得到黄色固体。MS(LC-MS)：278[M+Na]⁺。

(3S，5R)-原料-F

于80℃向(3S，5R)-原料-F(67％ee)(47g，162mmol)在热EtOH(162mL)中的溶液加入(S)-(-)-1-苯乙胺(20.6mL，162mmol)。将溶液冷却至室温，将其放置过夜，得到盐的沉淀。过滤收集该盐。在EtOH中的相同重结晶过程重复三次后，将所得的盐溶于水，用5N和1N HCl酸化，用AcOEt萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥。在减压下浓缩，得到(3S，5R)-原料-F：无色晶体；ES-MS：M+H＝288：_Bt_Ret＝2.67min。手性HPLC(柱：CHIRALPAH AD-H(0.46cm×25cm)，洗脱剂：己烷/i-PrOH/0.1％TFA＝95/5，流速：0.5mL/min，检测：UV 210nM，温度：rt)t_R＝37min。

(3S，5R)-原料-F(98％ee)

于-40℃，向N₂下的原料-E(401.5mg，1.57mmol)和商业可得的(DHQD)₂AQN(423.6mg，0.47mmol，95％纯度)^a在Et₂O(60mL)和THF(20mL)中的溶液加入MeOH(0.64mL，15.67mmol)。于此温度下搅拌24小时后，加入柠檬酸饱和水溶液。将反应混合物用EA萃取。有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，经硅胶色谱法，得到(3S，5R)-原料-F(98％ee)，为白色无定形物。ES-MS：M+H-tBu＝232：HPLC：_Ct_Ret＝2.73min。手性HPLC(柱：CHIRALPAH AD-H(0.46cm×25cm)，洗脱剂：己烷/i-PrOH＝95/5，流速：0.5mL/min，检测：UV 210nM，温度：室温)(3R，5S)-原料-F的t_R＝33.25min，(3S，5R)-原料-F为35.56min。

^aChen，Y.：Tian，S-K.：Deng，Li.J.Am.Chem.Soc.2000，122，9542-9543。

(3R，5S)-原料-F

于70℃、向(3R，5S)-原料-F(72％ee)(4.2g，14.6mmol)在热EtOH(20mL)中的溶液加入(R)-1-苯乙胺(1.79g，14.76mmol)。将溶液冷却至室温，将其放置1小时，得到盐的沉淀。过滤收集该盐。相同的重结晶过程重复三次后，将所得盐溶于水，用1M HCl水溶液酸化，用乙醚萃取五次。合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥。在减压下浓缩，得到(3R，5S)-原料-F：无色晶体；ES-MS：M+H＝288：_Bt_Ret＝2.67min。手性HPLC：AD-H，5％i-PrOH/己烷，流速0.5mL/min，210nM，t_Ret＝33(主要成分)，36(次要成分)。

(3R，5S)-原料-F(72％ee)

于0℃、N₂下向原料-E(200mg，0.78mmol)在THF(10mL)和乙醚(30mL)中的溶液加入(DHQ)₂AQN(67mg，0.08mmol)和MeOH(0.32mL)。将所得混合物于0℃搅拌5小时。加入1M HCl水溶液后，用EtOAc萃取混合物。有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥。在减压下浓缩，硅胶快速色谱法得到(3R，5S)-原料-F：ES-MS：M+H＝288：_Ct_Ret＝2.67min。手性HPLC：72％ee，AD-H，5％i-PrOH/己烷，流速0.5mL/min，210nM，t_Ret＝33(主要成分)，36(次要成分)。

(3R，4S，5S)-原料-G((3R，4S，5S)-N-叔丁氧基羰基-4-羟基-哌啶-3，5-二甲酸3-甲酯)

将(3R，4S，5S)，和(3S，4R，5R)，-N-叔丁氧基羰基-4-羟基-哌啶-3，5-二甲酸3-甲酯(96％ee)(78g，0.26mol)的混合物溶于MeOH(500mL)，于室温加入(S)-(-)1-苯乙胺(33mL，0.26mol)。将混合物于室温搅拌30min，在减压下浓缩，得到盐，为无色无定形物。于70℃将所得残渣溶于CH₃CN(1.3L)，于室温剧烈搅拌20小时。过滤收集白色结晶盐，用Et₂O洗涤。重复相同的重结晶过程(溶于CH₃CN并于室温搅拌)两次或三次后，将所得盐溶于水，用5N和1N HCl酸化至pH 3，用AcOEt萃取。合并的有机相通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到对映体纯(3R，4S，5S)-原料-G，为白色固体；ES-MS：M+H＝304：_Ct_Ret＝2.37min。手性HPLC：＞99.9％ee，AD-H，7.5％i-PrOH/己烷/0.1％TFA，流速0.75mL/min，210nM，t_Ret＝24min。

(3R，4S，5S)-原料-G(96％ee)

于室温向(3，4-cis-4，5-cis)-N-叔丁氧基羰基-4-羟基-哌啶-3，5-二甲酸二甲酯(18g，Liang，X.：Lohse，A.：Bols，M.J.Org.Chem.2000，65，7432)在磷酸盐缓冲液(0.2M，pH7.5，540mL)中的溶液加入脂肪酶M(Mucorjavanicus)(5.4g)。将反应混合物于35℃搅拌6天，然后用5N和1N HCl酸化至pH 3。用EtOAc萃取混合物，有机相用Na₂SO₄干燥，在减压下浓缩，得到(3R，4S，5S)-原料-G，为白色固体；ES-MS：M+H＝304：_Ct_Ret＝2.37min。手性HPLC：95.8％ee，AD-H，7.5％i-PrOH/己烷/0.1％TFA，流速0.75mL/min，210nM，t_Ret＝24min(3R，4S，5S)，26min(3S，4R，5R)。

实施例1

将中间体1.1(70mg，0.125mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(2mL)中的混合物于室温搅拌。搅拌1小时后，将反应混合物真空浓缩，得到实施例1：ES-MS：M+H＝459：_Ct_Ret＝3.26min。

中间体1.1

向中间体1.4(27mg，0.150mmol)和中间体1.9(50mg，0.125mmol)在CH₂Cl₂中的溶液加入BopCl(47mg，0.188)和Et₃N(19mg，0.188mmol)。于室温搅拌16小时后，将反应混合物用H₂O(10mL)稀释，用EtOAc(50mL)萃取。有机相连续用5％NaHCO₃水溶液、H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体1.1，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝559：HPLC：_ct_Ret＝4.23min。

中间体1.2

于0℃向中间体1.3(450mg，1.09mmol)在THF/H₂O(5/5mL)中的溶液加入LiOH.H₂O(84mg，2mmol)。于相同温度搅拌1小时后，将反应用5％KHSO₄水溶液(20mL)淬灭，用EtOAc(200mL)萃取。用H₂O和盐水洗涤有机相，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到中间体1.2，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝401：_ct_Ret＝3.30。

中间体1.3

类似于中间体1.1的制备，通过中间体1.7与(3S，5R)-原料-F的偶联反应，合成中间体1.3：ES-MS：M+H＝415：_ct_Ret＝3.69min。

中间体1.4

于0℃向中间体1.5(230mg，1.20mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中的溶液加入Et₃SiH(728mg，6.26mmol)和TFA(1.48g，12.9mmol)，然后于室温搅拌混合物。搅拌15小时后，将反应混合物在真空中浓缩。将残渣悬于5％NaHCO₃水溶液，用CH₂Cl₂萃取。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空浓缩，将所得残渣经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体1.4，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝177：HPLC：_ct_Ret＝2.24min。

中间体1.5

于0℃向中间体1.6(300mg，1.45mmol)在THF(10mL)中的溶液加入MeLi(1M于Et₂O中，7.25mmol)，然后于室温搅拌混合物。搅拌1小时后，将反应混合物冷却至0℃，用5％NaHCO₃水溶液(50mL)淬灭。然后将反应混合物用EtOAc(200mL)萃取。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体1.5，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝193：HPLC：_ct_Ret＝1.74min。

中间体1.6

于室温向6-氯烟酸乙酯(1g，5.4mmol)在NMP(10mL)中的溶液加入环丙胺(4.12g，72.2mmol)和K₂CO₃(2.2g，16mmol)，然后在70℃搅拌混合物。搅拌12小时后，将反应混合物冷却至室温，用H₂O(100mL)淬灭。将反应混合物用EtOAc(200mL)萃取。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，将其从n-己烷/Et₂O中重结晶，得到中间体1.6，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝207：HPLC：_ct_Ret＝1.98min。

中间体1.7

类似于实施例1的制备，通过中间体1.8的脱保护合成中间体1.7：ES-MS：M+H＝146：_Bt_Ret＝1.32min。

中间体1.8

向0℃、N₂下的Boc-D-亮氨醇(277.9mg，1.278mmol)在DMF(5mL)中的溶液加入NaH(80.3mg于矿物油中60wt％，2.00mmol)。在相同温度搅拌几分钟后，加入EtI(0.122mL，1.53mmol)。将所得溶液在室温搅拌2小时。用H₂O淬灭反应，用EtOAc萃取混合物，经Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶色谱法纯化，得到中间体1.8：ES-MS：M+H-Boc＝146：_Bt_Ret＝2.11min。

实施例2

在N₂下，将中间体2.1(194.2mg，0.33mmol)在4N HCl的EtOAc溶液(3mL)中的溶液于RT搅拌35min。在减压下浓缩，得到实施例2，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝485：_Ct_Ret＝3.08min。

中间体2.1

向RT、N₂下的中间体2.2(153.8mg，0.356mmol)在CH₂Cl₂(5mL)中的溶液加入EDCI.HCl(95mg，0.42mmol)和HOAt(70mg，0.51mmol)。在相同温度搅拌所得溶液15min。然后，于0℃缓慢加入中间体2.4(73mg，0.35mmol)和三乙胺(0.25mL，1.78mmol)在CH₂Cl₂(3mL)中的溶液。将溶液在RT搅拌60min。在减压下浓缩，得到粗残渣，其经硅胶色谱法纯化，得到中间体2.1，为白色无定形物；ES-MS：M＝585：HPLC：_Ct_Ret＝4.78min。

中间体2.2

于0℃向中间体2.3(160mg，0.359mmol)在THF/H₂O(5/5mL)中的溶液加入LiOH.H₂O(29mg，0.691mmol)。在相同温度搅拌1小时后，用5％KHSO₄水溶液(20mL)淬灭反应，用CH₂Cl₂萃取(50mL)。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到中间体2.2，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝432：HPLC：_ct_Ret＝3.50min。

中间体2.3

于0℃向(3R，5S)-原料-F(293mg，1.02mmol)在THF(10mL)中的溶液加入Et₃N(206mg，2.04mmol)和TcBocCl(488mg，2.04mmol)。在相同温度搅拌1小时后，于0℃加入MgBr₂.Et₂O(527mg，2.04mmol)和中间体1.4(180mg，1.02mmol)，然后于室温搅拌混合物。搅拌3小时后，用5％KHSO₄水溶液(50mL)淬灭反应，用EtOAc(100mL)萃取。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空浓缩，将所得残渣经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体2.3，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝446：HPLC：_ct_Ret＝3.86min。

中间体2.4

类似于实施例1的制备，通过中间体2.5的脱保护合成中间体2.4。ES-MS：M+H＝172：_Bt_Ret＝1.55min。

中间体2.5

向RT、N₂下的商业可得的N-Boc-L-环己基甘氨酸醇(glycinol)(499mg，2.05mmol)在DMF(8mL)中的溶液加入0℃的NaH(164mg，4.10mmol)和EtI(179μL，2.26mmol)。将反应混合物于RT搅拌2小时。然后，将H₂O加至所得溶液。用CH₂Cl₂萃取水相。合并的有机相通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，然后用硅胶柱色谱法纯化，得到中间体2.5：白色无定形物，ES-MS：M+H＝272：_Bt_Ret＝2.46min。

实施例3

于室温搅拌中间体3.1(65mg，0.098mmol)和4M HCl的二噁烷溶液(2mL)的混合物。搅拌1小时后，将反应混合物真空浓缩，得到实施例3：ES-MS：M+H＝563：_Ct_Ret＝4.21min。

中间体3.1

于室温，向中间体3.2(60mg，0.112mmol)和中间体1.7(24mg，0.132mmol)在CH₂Cl₂(1mL)中的溶液加入EDCl.HCl(32mg，0.168mmol)，HOAt(23mg，0.168mmol)和Et₃N(17mg，0.168mmol)；然后于室温搅拌混合物。在相同温度搅拌16小时后，用H₂O(10mL)稀释反应混合物，用EtOAc(50mL)萃取。有机相用5％NaHCO₃水溶液、H₂O和盐水连续洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体3.1，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝663：HPLC：_ct_Ret＝4.83min。

中间体3.2

于0℃，向中间体3.3(85mg，0.155mmol)在THF/H₂O(5/5mL)中的溶液加入LiOH.H₂O(14mg，0.330mmol)。在相同温度搅拌1小时后，反应混合物用5％KHSO₄水溶液(20mL)淬灭，用Et₂O(100mL)萃取。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到中间体3.2，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝536：HPLC：_ct_Ret＝4.32min。

中间体3.3

于0℃，向(3R，5S)-原料-F(103mg，0.36mmol)在CH₃CN(1mL)中的溶液加入Et₃N(43mg，0.43mmol)、TcBocCl(86mg，0.36mmol)。在相同温度搅拌1小时后，于0℃加入MgBr₂.Et₂O(112mg，0.43mmol)和中间体3.4(100mg，0.36mmol)，然后于室温搅拌混合物。搅拌24小时后，反应混合物用5％KHSO₄水溶液淬灭，用EtOAc萃取。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体3.3，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝550：HPLC：_ct_Ret＝4.65min。

中间体3.4

于0℃，向中间体3.5(550mg，1.85mmol)在CH₂Cl₂(20mL)中的溶液加入Et₃SiH(2.3g，10.8mmol)和TFA(7.4g，64.5mmol)。于室温搅拌所得混合物。搅拌15小时后，将反应混合物在真空中浓缩。将残渣悬于5％NaHCO₃水溶液，用CH₂Cl₂萃取。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体3.4，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝281：HPLC：_ct_Ret＝3.61min。

中间体3.5

于0℃，向中间体3.6(574mg，1.7mmol)在THF(18mL)中的溶液加入MeMgBr(于乙醚中的0.96M溶液，8.83mL，8.48mmol)。将所得混合物于室温搅拌1小时。加水后，用EtOAc萃取混合物，用NaHCO₃水溶液、盐水洗涤，经MgSO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体3.5，为无色油；ES-MS：M+H＝297：HPLC：_ct_Ret＝3.50min。

中间体3.6

向中间体3.7(737mg，2.44mmol)在NMP(17mL)中的溶液加入K₂CO₃(1.69g，12.2mmol)和异丁胺(535mg，7.32mmol)，将所得混合物在120℃搅拌过夜。加水后，用EtOAc萃取混合物，用水、盐水洗涤，经MgSO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体3.6，为无色晶体；ES-MS：M+H＝339：HPLC：_ct_Ret＝3.94min。

中间体3.7

向中间体3.8(1g，4.07mmol)在DMF(15mL)中的溶液加入K₂CO₃(1.69g，12.2mmol)和异丁基碘(1.5g，8.14mmol)，将所得混合物于60℃搅拌2小时。然后用EtOAc稀释混合物，用水、KHSO₄饱和水溶液、NaHCO₃饱和水溶液、盐水洗涤，经MgSO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体3.7，为无色晶体；ES-MS：M+H＝302：HPLC：_ct_Ret＝4.49min。

中间体3.8

于0℃向3-甲氧基丙-1-醇(1.4g)在THF(30mL)中的溶液加入NaH(625mg，15.6mmol)，将混合物在室温搅拌30min。然后，于0℃向混合物加入4，6-二氯烟酸(1.2g，6.25mmol，美国专利2005049419)在THF(10mL)中的溶液，将其于室温再搅拌3小时。加水后，用乙醚洗涤混合物。用KHSO₄酸化水相，然后用乙醚萃取。有机相用盐水洗涤，经MgSO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体3.7，为无色晶体；ES-MS：M+H＝：246，HPLC：_ct_Ret＝3.34min。

实施例4

类似于实施例1的制备，通过中间体4.1(18mg，0.03mmol)的脱保护合成实施例4。实施例4：ES-MS：M+H＝489：_Ct_Ret＝2.84min。

中间体4.1

将中间体4.2(468mg，2.27mmol)、中间体1.2(1g，2.5mmol)、BopCl(1.73g，6.81mmol)和三乙胺(688mg，6.81mmol)的溶液于室温搅拌4小时。加入KHSO₄饱和水溶液后，用EtOAc萃取混合物。有机层用水、NaHCO₃饱和水溶液、盐水洗涤，经MgSO₄干燥。硅胶柱色谱法得到中间体4.1：无色油，ES-MS：M+H＝589：_Bt_Ret＝1.92min。

中间体4.2

将中间体4.3(2g，9mmol)溶于CH₂Cl₂(14mL)中。于室温向该溶液加入三乙基硅烷(14mL)和TFA(14mL)，将混合物于50℃搅拌3小时。在真空下除去溶剂，用AcOEt稀释残渣。所得混合物用NaHCO₃饱和水溶液、盐水洗涤，经MgSO₄干燥。硅胶柱色谱法得到中间体4.2：无色晶体，ES-MS：M+H＝207：_Bt_Ret＝1.51min。

中间体4.3

向中间体4.4(2.5g，2.63mmol)在NMP(20mL)中的溶液加入K₂CO₃(9.2g，66.6mmol)和异丁基碘(2.3mL，20mmol)。将所得混合物在80℃搅拌40min。然后加入环丙胺(4.6mL，66.6mmol)，将反应混合物于110℃搅拌过夜。加水后，用AcOEt萃取混合物。用水、盐水洗涤有机层，经MgSO₄干燥。从EtOAc-正己烷中重结晶，得到中间体4.3：无色晶体，ES-MS：M+H＝265：_Bt_Ret＝1.54min。

中间体4.4

于0℃向NaH(5.2g，130mmol)在THF(100mL)中的悬浮液加入MeOH(4.2g，130mmol)。于室温搅拌30min后，于0℃逐滴加入4，6-二氯烟酸(10g，52.9mmol，美国专利2005049419)在THF(100mL)中的溶液。于室温将所得混合物搅拌过夜。加水后，用乙醚洗涤混合物。水相用KHSO₄酸化，然后用乙醚萃取。用盐水洗涤有机相，经MgSO₄干燥。在减压下浓缩，得到中间体4.4：无色晶体，ES-MS：M+H＝188：_Ct_Ret＝1.80min。

实施例5

类似于实施例1的制备，通过中间体5.1的脱保护合成实施例5。实施例5：ES-MS：M+H＝515：_ct_Ret＝3.92min。

中间体5.1

类似于中间体1.1的制备，通过中间体5.2与中间体2.4的偶联反应，合成中间体5.1。ES-MS：M+H＝615：_ct_Ret＝4.45min。

中间体5.2

类似于中间体1.2的制备，通过中间体5.3(1g，2.1mmol)的皂化，合成中间体5.2。中间体5.2：无色油，ES-MS：M＝462：HPLC：_Ct_Ret＝2.85min。

中间体5.3

类似于中间体1.3的制备，通过中间体4.2(800mg，3.88mmol)和(3R，5S)-原料-F(1230mg，4.27mmol)的缩合，合成中间体5.3。中间体5.3：无色油，ES-MS：M＝476：HPLC：_Ct_Ret＝1.78min。

实施例6

类似于实施例1的制备，通过中间体6.1的脱保护，合成实施例6。实施例6：ES-MS：M+H＝505：_ct_Ret＝3.29min。

中间体6.1

类似于中间体1.1的制备，通过中间体6.2与中间体1.7的偶联反应，合成中间体6.1。中间体6.1：ES-MS：M+H＝605：_ct_Ret＝4.11min。

中间体6.2

类似于中间体1.2的制备，通过中间体6.3的皂化，合成中间体6.2。中间体6.2：ES-MS：M+H＝478：_ct_Ret＝3.41min。

中间体6.3

类似于中间体1.3的制备，通过中间体6.4与(3R，5S)-原料-F的偶联反应，合成中间体6.3。中间体6.3：S-MS：M+H＝492：_ct_Ret＝3.81min。

中间体6.4

类似于中间体1.4的制备，通过中间体6.5的脱羟基，合成中间体6.4。中间体6.4：ES-MS：M+H＝223：_ct_Ret＝2.78min。

中间体6.5

类似于中间体1.5的制备，通过中间体6.6的烷基化，合成中间体6.5。中间体6.5：ES-MS：M+H＝239：_ct_Ret＝1.95min。

中间体6.6

类似于中间体4.5的制备，由中间体4.6(用异丁胺代替环丙胺)合成中间体6.6。中间体6.6：ES-MS：M+H＝281：_ct_Ret＝2.54min。

实施例7

类似于实施例1的制备，通过中间体7.1的脱保护，合成实施例7。中间体7.1：ES-MS：M+H＝445：_ct_Ret＝3.44min。

中间体7.1

类似于中间体1.1的制备，通过中间体2.2与中间体7.2的偶联反应，合成中间体7.1。中间体7.1：ES-MS：M+H＝545：_ct_Ret＝4.30min。

中间体7.2

类似于实施例1的制备，通过中间体7.3的脱保护，合成中间体7.2。中间体7.2：ES-MS：M+H＝132：_Bt_Ret＝1.17min。

中间体7.3

类似于实施例1.8的制备，通过Boc-D-缬氨醇[Journal of OrganicChemistry，2000，65(16)，5037-5042]的烷基化，合成中间体7.3。中间体7.3：ES-MS：M+H-Boc＝132：_Bt_Ret＝2.03min。

实施例8

类似于实施例1的制备，通过中间体8.1的脱保护，合成实施例8。实施例8：ES-MS：M+H＝589：_ct_Ret＝3.50min。

中间体8.1

向中间体8.2(49mg，0.239mmol)和中间体1.2(80mg，0.20mmol)在CH₂Cl₂中的溶液加入BopCl(153mg，0.60mmol)和Et₃N(61mg，0.60mmol)。于室温搅拌25小时后，反应混合物用H₂O(10mL)稀释，用EtOAc(50mL)萃取。有机相连续用5％NaHCO₃水溶液、H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体8.1，为白色无定形物；ES-MS：M+H＝589：HPLC：_ct_Ret＝3.50min。

中间体8.2

类似于中间体1.4的制备，通过中间体8.3的还原，合成中间体8.2。中间体8.2：ES-MS：M+H＝207：_ct_Ret＝3.71min。

中间体8.3

于室温向中间体8.4(500mg，2.5mmol)在DMSO(10mL)中的溶液加入环丙胺(1.65g，28.9mmol)和K₂CO₃(415mg，7.5mmol)。然后于80℃搅拌所得混合物。搅拌5小时后，将反应混合物冷却至室温，用H₂O(50mL)淬灭。所得混合物用EtOAc(100mL)萃取。有机相用H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体8.3，为黄色无定形物；ES-MS：M+H＝221：HPLC：_ct_Ret＝2.34min。

中间体8.4

于0℃，向中间体8.5(1.85g，7.56mmol)在THF(40mL)中的溶液加入MeLi(1M于Et₂O中，9.07mmol)，然后于室温搅拌混合物。于室温搅拌1小时后，将反应混合物冷却至0℃，用5％KHSO₄水溶液(100mL)淬灭。然后反应混合物用CH₂Cl₂(100mL)萃取。有机相用5％NaHCO₃水溶液、H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到中间体8.4，为黄色无定形物；ES-MS：M+H＝200：HPLC：_ct_Ret＝2.82min。

中间体8.5

于室温向中间体8.6(2g，10mmol)在ClCH₂CH₂Cl中的溶液加入SOCl₂(2mL)和DMF(0.1mL)，然后于60℃搅拌混合物。于60℃搅拌3小时后，将反应混合物真空浓缩，得到黏性物质，其不需进一步纯化而用于下一步反应。

于0℃，向该粗品在CH₂Cl₂中的溶液加入N，O-二甲基羟胺盐酸盐(1.46g，15mmol)和Et₃N(1.52g，15mmol)，然后于室温搅拌混合物。于室温搅拌19小时后，反应混合物用H₂O(100mL)淬灭，用CH₂Cl₂(100mL)萃取。有机相连续用5％NaHCO₃水溶液、H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体8.5，为棕色油；ES-MS：M+H＝245：HPLC：_ct_Ret＝2.27min。

中间体8.6

类似于中间体4.6的制备，通过2，4-二氯烟酸(美国专利2005049419)与乙醇钠的反应合成中间体8.6。中间体8.6：ES-MS：M+H＝202：_ct_Ret＝2.12min。

实施例9

将N₂下中间体9.1(13mg，0.02mmol)在4N HCl-二噁烷(4mL)中的溶液于0℃搅拌15min。然后，将溶液升至室温，于RT搅拌1小时。在减压下浓缩混合物，得到实施例9，为白色无定形物。ES-MS：M+H＝563：_At_Ret＝2.48min。

中间体9.1

向0℃、N₂下的中间体9.2(20mg，0.037mmol)在CH₂Cl₂(3mL)中的溶液加入EDCI.HCl(11.6mg，0.075mmol)和HOAt(10.1mg，0.075mmol)。在相同温度搅拌5min后，将中间体1.7(13.6mg，0.075mmol)和Et₃N(0.04mL，0.22mmol)加至反应混合物。将所得溶液升至RT，于室温搅拌过夜。反应用H₂O淬灭，用CH₂Cl₂萃取。合并的有机萃取液用H₂O和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，在真空中浓缩。将残渣经硅胶快速色谱法纯化，得到期望的偶联产物-中间体9.1，为白色无定形物。ES-MS：M+H＝663：HPLC：_ct_Ret＝3.71min。

中间体9.2

于0℃，向中间体9.3(20mg，0.04mmol)在干燥THF(1mL)中的溶液加入0.22M LiOH溶液(0.5mL，0.11mmol)。将所得溶液在室温搅拌2小时。反应用KHSO₄饱和溶液(1mL)淬灭，用EtOAc萃取。用Na₂SO₄干燥后，在减压下浓缩，得到中间体9.2，为固体。此物质不需进一步纯化而用于下一步骤。ES-MS：M+H＝536：_ct_Ret＝2.93min。

中间体9.3

向N₂下(3R，4S，5S)-原料-G(100mg，0.33mmol)在干燥THF(5mL)中的溶液加入(1-氯-2-甲基-丙烯基)-二甲基-胺(0.066mL，0.69mmol)，同时在冰浴中冷却。在相同温度搅拌5min后，将反应升至RT，再搅拌20min。在减压下浓缩反应混合物，得到(3R，4R，5S)-5-氯羰基-4-羟基-哌啶-1，3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯。此物质不需进一步纯化而用于下一步骤。于0℃向中间体9.4(87mg，0.33mmol)和Et₃N(0.13mL，0.99mmol)在干燥THF(2mL)中的溶液逐滴加入该酰氯在THF(2mL)中的溶液，将所得混合物于RT搅拌2小时。混合物用NaHCO₃饱和水溶液淬灭，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，在减压下浓缩。将残渣经反相色谱法纯化，得到中间体9.3，为油。ES-MS：M+H＝550：_ct_Ret＝3.74min。

中间体9.4

将中间体9.5(4.3g，15.3mmol)溶于CH₂Cl₂(51mL)中。于室温向该溶液加入三乙基硅烷(24.4mL，153mmol)和TFA(22.7mL，306mmol)。将混合物于35℃搅拌10小时。在真空下除去溶剂，用AcOEt稀释残渣。有机相用NaHCO₃饱和水溶液、盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。硅胶柱色谱法得到中间体9.4：无色晶体，ES-MS：M+H＝265：_Ct_Ret＝2.53min。

中间体9.5

将中间体9.6(5.3g，16.4mmol)溶于THF(84mL)中。于0℃向该溶液加入0.97M MeMgBr的THF溶液(85mL，82.2mmol)，将混合物在相同温度搅拌1小时。加水后，用AcOEt萃取混合物。用盐水洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥。硅胶柱色谱法得到中间体9.5：无色晶体，ES-MS：M+H＝281：_Ct_Ret＝1.75min。

中间体9.6

将中间体9.7(22.1g，90.2mmol)溶于NMP(250mL)中。向该溶液加入K₂CO₃(37.2g，270.6mmol)和异丁基碘(15.5mL，135.3mmol)，将混合物于80℃搅拌1小时，然后加入环丙胺(33.9mL，451.0mmol)，将混合物于110℃搅拌过夜。加水后，用AcOEt萃取混合物。有机层用水、盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。硅胶柱色谱法得到中间体9.6：无色晶体，ES-MS：M+H＝323：_Ct_Ret＝2.61min。

中间体9.7

将4，6-二氯烟酸(20g，104.7mmol，美国专利2005049419)溶于THF(120mL)。于0℃将该溶液加至NaH(11.4，262mmol)和3-甲氧基-丙-1-醇(23.6g，262mmol)在THF(120mL)中的溶液，将所得混合物于RT搅拌2小时。加水后，用乙醚洗涤混合物。水层用1N HCl水溶液酸化，用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥。在真空下除去溶剂，得到中间体9.7：无色晶体，ES-MS：M+H＝246：_Ct_Ret＝2.14min。

实施例10

将N₂下中间体10.1(262mg，0.46mmol)在4N HCl二噁烷溶液(3mL)中的溶液于RT搅拌40min。在减压下浓缩，得到HCl盐。然后，加入NaHCO₃水溶液。用EtOAc萃取水层。合并的有机萃取液通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到粗残渣，其经硅胶色谱法、然后经制备型反相HPLC纯化，得到期望的胺(170.2mg，0.358mmol)。向此胺在甲苯(3mL)中的溶液加入4N HCl-二噁烷(3mL)。在减压下浓缩，得到期望的实施例10(HCl盐)，为白色物质；ES-MS：M+H＝475：_Ct_Ret＝2.87min。

中间体10.1

于RT、N₂下向中间体10.2(174.5mg，0.39mmol)在CH₂Cl₂(10mL)中的溶液，加入EDCI.HCl(130mg，0.57mmol)和HOAt(100mg，0.73mmol)。将反应混合物在相同温度搅拌数分钟。然后，于0℃加入中间体1.7(117mg，0.64mmol)和三乙胺(0.19mL，1.36mmol)。将所得溶液于RT搅拌过夜，然后将H₂O加至反应混合物。用CH₂Cl₂萃取水相。合并的有机相通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到粗残渣，其经硅胶色谱法纯化，得到中间体10.1，为白色无定形物；ES-MS：M＝575：HPLC：_Ct_Ret＝3.90min。

中间体10.2

向0℃的中间体10.3(180mg，0.39mmol)在THF(7mL)中的溶液缓慢加入LiOH水溶液(40.7mg，0.97mm ol于H₂O(7mL)中)。在相同温度搅拌所得溶液25min。反应混合物用H₂O稀释，然后用Et₂O洗涤。用KHSO₄饱和水溶液酸化水相，然后用Et₂O萃取。合并的有机萃取液通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到中间体10.2，为白色无定形物；ES-MS：M＝448：HPLC：_Ct_Ret＝3.00min。

中间体10.3

于0℃、N₂下向(3R，4S，5S)-原料-G(200mg，0.65mmol)在CH₂Cl₂(5mL)中的溶液加入1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺(0.1mL，0.76mmol)。将溶液在相同温度搅拌60min。然后，于0℃加入中间体1.4(229mg，1.3mmol)。将所得溶液加热至RT，搅拌20min，然后加入H₂O，用CH₂Cl₂萃取混合物。合并的有机萃取液通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到粗残渣，其经硅胶色谱法纯化，得到中间体10.3。ES-MS：M＝462：HPLC：_Ct_Ret＝3.66min。

实施例11

类似于实施例1的制备，通过中间体11.1的脱保护合成实施例11。实施例11：ES-MS：M+H＝461：_ct_Ret＝3.80min。

中间体11.1

类似于中间体1.1的制备，通过中间体10.2与中间体7.2的偶联反应，合成中间体11.1。中间体11.1：ES-MS：M+H＝561：_ct_Ret＝4.14min。

实施例12

于0℃，将N₂下中间体12.1(9.3mg，0.015mmol)在4N HCl-二噁烷(1mL)中的溶液搅拌15min。然后，将该溶液升温至RT，于室温搅拌20min。在减压下浓缩混合物，得到实施例12，为白色无定形物.ES-MS：M+H＝505：_ct_Ret＝2.94min。

中间体12.1

于0℃、N₂下向中间体12.2(63mg，0.13mmol)在CH₂Cl₂(3mL)中的溶液加入EDCI.HCl(33.0mg，0.21mmol)和HOAt(29.0mg，0.21mmol)。在相同温度搅拌5min后，将中间体1.7(38.0mg，0.21mmol)和Et₃N(0.06mL，0.42mmol)加至反应混合物。将所得溶液升温至RT，于RT搅拌过夜。反应用H₂O淬灭，用CH₂Cl₂萃取。合并的有机萃取液用H₂O和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，在真空中浓缩。将残渣经硅胶快速色谱法纯化，得到中间体12.1，为白色无定形物。ES-MS：M+H＝605：HPLC：_ct_Ret＝3.93min。

中间体12.2

于0℃，向中间体12.3(68mg，0.14mmol)在干燥THF(1mL)中的溶液加入0.4M LiOH溶液(1.0mL，0.41mmol)。将所得溶液在室温搅拌2小时。反应用KHSO₄饱和水溶液(1mL)淬灭，用EtOAc萃取。通过Na₂SO₄干燥后，在减压下浓缩，得到中间体12.2，为固体。此物质不需进一步纯化而用于下一步骤。ES-MS：M+H＝478：_At_Ret＝2.77min。

中间体12.3

在N₂下，向(3R，4S，5S)-原料-G(132mg，0.44mmol)在干燥CH₂Cl₂(2mL)中的溶液加入(1-氯-2-甲基-丙烯基)-二甲基-胺(0.06mL，0.66mmol)，同时在冰浴中冷却。在相同温度搅拌5min后，将反应升温至RT，再搅拌20min。在减压下浓缩反应混合物，得到(3R，4R，5S)-5-氯羰基-4-羟基-哌啶-1，3-二甲酸1-叔丁酯3-甲酯。此物质不需进一步纯化而用于下一步骤。于0℃向中间体12.4(90mg，0.44mmol)和Et₃N(0.18mL，1.32mmol)在干燥CH₂Cl₂(2mL)中的溶液逐滴加入该酰氯在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液。将所得混合物于室温搅拌2小时。混合物用NaHCO₃饱和水溶液(3mL)淬灭，用水洗涤，经Na₂SO₄干燥，在减压下浓缩。将残渣经硅胶快速色谱法纯化，得到中间体12.3，为油。ES-MS：M+H＝492；_At_Ret＝3.10min。

中间体12.4

在5mL玻璃微波管中放入中间体1.5(100mg，0.52mmol)和CAN(123.4mg，0.21mmol)和干燥MeOH(2mL)。使用Biotage Initiator 60EXP于100℃、微波辐射下加热反应达15min。除去溶剂，用NaHCO₃饱和水溶液、水洗涤残渣，经Na₂SO₄干燥，在减压下浓缩。将残渣经硅胶快速色谱法纯化，得到中间体12.4，为白色固体物质。ES-MS：M+H＝207；_ct_Ret＝3.02min。

实施例13

将N₂下中间体13.1(107mg，0.177mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(3mL)中的溶液于RT搅拌40min。在减压下浓缩得到粗HCl盐。该粗品经制备型反相HPLC纯化，得到实施例13，为白色物质；ES-MS：M+H＝505；_Ct_Ret＝2.63min。

中间体13.1

向RT、N₂下中间体13.2(122.7mg，0.257mmol)在CH₂Cl₂(5mL)中的溶液加入EDCI.HCl(83mg，0.363mmol)和HOAt(60.9mg，0.447mmol)。将反应混合物在相同温度搅拌数分钟。然后，于RT加入中间体1.7(69mg，0.38mmol)和三乙胺(0.11mL，0.82mmol)。将所得溶液在相同温度搅拌过夜。在减压下浓缩，得到粗残渣，其经硅胶色谱法纯化，得到中间体13.1，为白色无定形物；ES-MS：M＝605；HPLC：_Ct_Ret＝3.39min。

中间体13.2

向0℃的中间体13.3(168mg，0.34mmol)在THF(10mL)中的溶液缓慢加入LiOH水溶液(27.65mg，0.659mmol于H₂O(10mL)中)。在相同温度搅拌所得溶液40min。反应混合物用H₂O稀释，用Et₂O洗涤。水相用KHSO₄饱和水溶液酸化，用Et₂O萃取。合并的有机萃取液通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到中间体13.2，为白色无定形物；ES-MS：M＝478：HPLC：_Bt_Ret＝1.61min。

中间体13.3

向0℃、N₂下(3R，4S，5S)-原料-G(499.7mg，1.647mmol)在CH₂Cl₂(33mL)中的溶液加入1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺(0.22mL，1.65mmol)。将溶液在相同温度搅拌60min。然后，于0℃加入中间体4.4(683.3mg，3.3mmol)。将所得溶液升温至RT，搅拌60min。然后，将混合物用H₂O稀释，用CH₂Cl₂萃取。合并的有机萃取液通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到粗残渣，其经硅胶色谱法纯化，得到中间体13.3。ES-MS：M＝492；HPLC：_Ct_Ret＝2.96min。

实施例14

将N₂下中间体14.1(65mg，0.107mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(2mL)中的溶液于RT搅拌40min。在减压下浓缩，得到粗HCl盐。该粗品经制备型反相HPLC纯化，得到实施例14，为白色物质；ES-MS：M+H＝505；_Ct_Ret＝2.79min。

中间体14.1

向RT、N₂下中间体14.2(150mg，0.314mmol)在CH₂Cl₂(1mL)中的溶液加入EDCI.HCl(90mg，0.471mmol)和HOAt(64mg，0.471mmol)。将反应混合物在相同温度搅拌数分钟。然后，于RT加入中间体1.7(69mg，0.38mmol)和三乙胺(0.066mL，0.471mmol)。将所得溶液在相同温度搅拌过夜。在减压下浓缩，得到粗残渣，其经硅胶色谱法纯化，得到中间体14.1，为白色无定形物；ES-MS：M＝605；HPLC：_Ct_Ret＝3.56min。

中间体14.2

向0℃的中间体14.3(500mg，1.02mmol)在THF(10mL)中的溶液缓慢加入LiOH水溶液(84mg，2.10mmol于H₂O(10mL)中)。在相同温度搅拌所得溶液40min。反应混合物用H₂O稀释，用Et₂O洗涤。用KHSO₄饱和水溶液酸化水相，用Et₂O萃取。合并的有机萃取液通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到中间体14.2，为白色无定形物；ES-MS：M＝478；HPLC：_Ct_Ret＝2.79min。

中间体14.3

向0℃、N₂下(3R，4S，5S)-原料-G(1g，3.3mmol)在CH₂Cl₂(33mL)中的溶液加入1-氯-N，N，2-三甲基-1-丙烯基胺(0.523mL，3.95mmol)。将溶液在相同温度搅拌60min。然后，于0℃加入中间体8.2(817mg，3.95mmol)和Et₃N(0.552mL，3.95mmol)。将所得溶液升温至RT，搅拌60min。然后，混合物用H₂O稀释，用CH₂Cl₂萃取。合并的有机萃取液通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到粗残渣，其经硅胶色谱法纯化，得到中间体14.3。ES-MS：M＝492；HPLC：_Ct_Ret＝3.01min。

实施例15

将N₂下中间体15.1(15.1mg，0.023mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(3mL)中的溶液于RT搅拌30min。在减压下浓缩，得到实施例15，为白色物质；ES-MS：M+H＝565；_Ct_Ret＝4.30min。

中间体15.1

于RT，将H₂气体通入中间体15.2(22mg，0.029mmol)和10％Pd-C(1mg)在MeOH(2mL)中的黑色悬浮液。于RT搅拌过夜后，将反应混合物滤过硅藻土。在减压下浓缩滤液，用硅胶柱色谱法(己烷/EtOAc)纯化，得到中间体15.1(15.1mg，0.023mmol，78％)；ESI-MS(M+H)：665，HPLC：_Ct_Ret＝4.57min。

中间体15.2

于室温向中间体15.3(34.9mg)和中间体1.7(12.1mg，0.067mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液加入EDCl·HCl(16mg，0.083mmol)、HOAt(11.3mg，0.083mmol)和Et₃N(9.3μL，0.067mmol)，然后将混合物于RT搅拌过夜。加水后，用CH₂Cl₂萃取混合物。干燥有机层，在减压下浓缩，用硅胶柱色谱法(己烷/EtOAc)纯化，得到中间体15.2(22mg，0.029mmol)；ES-MS：M⁺＝755；_Bt_Ret＝2.54min。

中间体15.3

于0℃，向中间体15.4(36.6mg)在THF/H₂O(3/3mL)中的溶液加入LiOH·H₂O(6.8mg，0.29mmol)。于RT搅拌30min后，用5％KHSO₄水溶液淬灭反应，用Et₂O萃取混合物。有机层通过Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，得到中间体15.3(34.9mg)；ESI-MS(M+H)：628，HPLC：_Ct_Ret＝4.66min。

中间体15.4

向RT、N₂下(3R，4S，5S)-原料-G(100mg，0.33mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液加入1-氯-N，N-2-三甲基-1-丙烯基胺(55.7μL，0.42mmol)。将溶液于RT搅拌30min。然后于0℃加入含中间体15.5(100mg，0.28mmol)和三甲胺(62.6μL，0.45mmol)的CH₂Cl₂(2mL)。将所得溶液升温至RT，于RT搅拌1小时。加入水和1N HCl。用EtOAc萃取水层。用盐水洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥。在减压下浓缩，用制备型TLC(己烷/EtOAc)纯化，得到中间体15.4(36.6mg)；ESI-MS(M+H)：642，HPLC：_Bt_Ret＝2.39min。

中间体15.5

于0℃，向中间体15.6(801.1mg，2.15mmol)在CH₂Cl₂(3.5mL)中的溶液加入三乙基硅烷(3.4mL，21.1mmol)和TFA(3.3mL，43.0mmol)，然后将混合物于40℃搅拌3小时。在真空中浓缩大多数溶剂，用EtOAc稀释残渣，用1N NaOH水溶液中和，并用EtOAc萃取混合物。有机层通过Na₂SO₄干燥，在真空中浓缩。该残渣经硅胶柱色谱法(己烷/EtOAc)纯化，得到中间体15.5(651mg，1.83mmol，85％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.76(s，1H)，7.35-7.27(m，5H)，5.81(s，1H)，4.53(s，2H)，4.41(brs，1H)，4.08(dd，J＝6.6，6.0Hz，2H)，3.67(dd，J＝6.1，6.0Hz，2H)，3.04(dd，J＝6.6，6.0Hz，2H)，3.02-2.97(m，1H)，2.11(五重峰，J＝6.0Hz，2H)，1.87(五重峰，J＝6.6Hz，1H)，1.18(s，3H)，1.16(s，3H)，0.99(s，3H)，0.97(s，3H)；ESI-MS(M+H)：357，HPLC：_Ct_Ret＝3.60min。

中间体15.6

于0℃，向中间体15.7(1.28g，3.1mmol)在THF(16mL)中的溶液加入1M MeMgBr的THF溶液(15.9mL，15.4mmol)。在相同温度搅拌1小时后，将混合物升温至RT，在RT搅拌过夜。加入水和NaHCO₃饱和水溶液后，用EtOAc萃取混合物。用盐水洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥，在真空中浓缩。残渣经硅胶柱色谱法(己烷/EtOAc)纯化，得到中间体15.6(1.06g，2.8mmol，92％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.91(s，1H)，7.35-7.27(m，5H)，5.86(s，1H)，4.53(s，3H)，4.18(dd，J＝6.1，6Hz，2H)，3.72(brs，1H)，3.66(dd，J＝6.1，6Hz，2H)，3.05(dd，J＝6.5，6Hz，2H)，2.14(五重峰，J＝6.0Hz，2H)，1.87(五重峰，J＝6.5Hz，1H)，1.56(s，6H)，0.99(s，3H)，0.97(s，3H)；ESI-MS(M+)：372，HPLC：_Ct_Ret＝3.12min。

中间体15.7

向中间体15.8(1.56g，4.1mmol)在NMP(42mL)中的RT溶液加入K₂CO₃(856mg，6.2mmol)和异丁胺(604μL，6.2mmol)，将混合物于110℃搅拌过夜。加水后，用EtOAc萃取混合物。用盐水洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥，在真空中浓缩。残渣经硅胶柱色谱法(己烷/EtOAc)纯化，得到中间体15.7(1.3g，3.1mmol，75％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.60(s，1H)，7.38-7.22(m，5H)，5.77(s，1H)，4.95-4.86(m，1H)，4.52(s，2H)，4.15(dd，J＝6.1，6.0Hz，2H)，4.00(d，J＝6.6Hz，2H)，3.71(dd，J＝6.1，5.5Hz，2H)，3.09(dd，J＝6.6，6.0Hz，2H)，2.19-2.10(m，2H)，2.06-1.95(m，1H)，1.94-1.83(m，1H)，1.00(s，3H)，0.99(s，3H)，0.98(s，3H)，0.97(s，3H)；ESI-MS(M+)：414，HPLC：_Ct_Ret＝3.59min。

中间体15.8

将上述粗中间体15.9(10.4mmol)溶于NMP(52mL)中。向该溶液加入K₂CO₃(4.32g，31.2mmol)和异丁基碘(1.8mL，15.6mmol)，将混合物于80℃搅拌1小时。加水后，用EtOAc萃取混合物。用盐水洗涤有机层，经Na₂SO₄干燥，在真空中浓缩。残渣经硅胶柱色谱法(己烷/EtOAc)纯化，得到中间体15.8(3.1g，8.2mmol，79％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.71(S，1H)，7.36-7.23(m，5H)，6.91(s，1H)，4.51(s，2H)，4.21(t，J＝6.0Hz，2H)，4.06(d，J＝7.0Hz，2H)，3.68(t，J＝6.0Hz，2H)，2.20-2.10(m，2H)，2.08-1.97(m，1H)，1.00(s，3H)，0.98(s，3H)；ESI-MS(M+)：377，HPLC：_Bt_Ret＝2.31min。

中间体15.9

将4，6-二氯烟酸(2g，10.4mmol)溶于THF(20mL)中。于0℃将该溶液加至NaH(1.04g，26.0mmol)和3-苄氧基-1-丙醇(4.1mL，26.0mmol)在THF(80mL)中的溶液，将所得混合物于RT搅拌3小时。加水后，用1N HCl酸化混合物，然后用EtOAc萃取。有机萃取液通过Na₂SO₄干燥，在真空中浓缩。残渣经硅胶柱色谱法(己烷/EtOAc)纯化，得到中间体15.9，为3-苄氧基-1-丙醇混合物。ESI-MS(M+)：321，HPLC：_Bt_Ret＝1.82min。

实施例16

将N₂下中间体16.1(65mg，0.116mmol)在4N HCl的二噁烷溶液(2mL)中的溶液于RT搅拌2小时。在减压下浓缩，得到实施例16，为白色物质；ES-MS：M+H＝461；_Ct_Ret＝3.80min。

中间体16.1

于室温，向中间体10.2(80mg，0.179mmol)和中间体7.2(36mg，0.215mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液加入EDCI·HCl(54mg，0.281mmol)、HOAt(38mg，0.281mmol)和Et₃N(28mg，0.281mmol)，然后将混合物在相同温度搅拌2小时。反应用H₂O(10mL)淬灭，用EtOAc(50mL)萃取。有机萃取液用5％NaHCO₃水溶液、H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩有机相，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到Boc中间体(65mg，0.116mmol，65％)，为无色无定形物；ES-MS：M+H＝561，HPLC：_ct_Ret＝4.64min。

实施例17

于RT、N₂下将中间体17.1(66mg，0.109mmol)溶于4N HCl-二噁烷(0.5mL)中。搅拌15min后，在减压下浓缩，得到粗盐。然后，加入NaHCO₃饱和水溶液。有机相用CH₂Cl₂萃取，经Na₂SO₄干燥。过滤，在减压下浓缩，得到粗品。此粗品经硅胶色谱法纯化，得到实施例17(游离碱)(23.45mg，0.0466mmol)，收率43％。ES-MS：M+H＝503，_At_ret＝2.10min。

中间体17.1

于RT，向N₂下中间体13.2(91.6mg，0.192mmol)在CH₂Cl₂(3mL)中的溶液加入EDCI·HCl(60mg，0.26mmol)和HOAt(49mg，0.36mmol)。在此温度搅拌数分钟后，加入溶于CH₂Cl₂(3mL)中的中间体17.2(34.3mg，0.19mmol)和Et₃N(0.133mL，0.96mmol)。将所得溶液在此温度搅拌1小时。在减压下浓缩，得到粗品。经硅胶色谱法纯化，得到中间体17.1(66.0mg，0.109mmol)，收率为57％。ES-MS：M+H＝603，_ct_ret＝3.21min。

中间体17.2

在N₂下，将中间体17.3(46.8mg，0.192mmol)溶于4HCl-二噁烷(1mL)中。于RT搅拌30min后，在减压下浓缩，得到中间体17.2(34.3mg，0.19mmol)，收率为99％。ES-MS：M+H＝144，_ct_ret＝1.21min。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)8.27(br，2H)，7.90-7.55(br，1H)，3.31(s，3H)，3.18(brd，J＝6.04Hz，2H)，3.13-3.00(br，1H)，2.40-2.00(br，3H)，1.88(brd，J＝13.12Hz，2H)，1.70-1，40(br，2H)，1.18-0.99(br，2H)。

中间体17.3

于0℃，向N₂下中间体17.4(112.1mg，0.488mmol)在THF(3mL)中的溶液加入氢化钠(19.5mg于60wt％矿物油中，0.488mmol)和甲基碘(30.3μL，0.488mmol)。将溶液升温至RT。在此温度搅拌过夜后，加入H₂O和KHSO₄饱和水溶液。有机相用乙酸乙酯萃取，经Na₂SO₄干燥。过滤，在减压下浓缩，得到粗品。经硅胶色谱法纯化，得到期望的中间体17.3(46.8mg，0.19mmol)，收率为39％。ES-MS：M+H＝244，_ct_ret＝1.92min。¹H NMR(400MHz，CDCl

4.40-4.30(m，1H)，3.37(br，1H)，3.32(s，3H)，3.17(d，J＝6.56Hz，2H)，2.02(d，J＝9.56Hz，2H)，1.81(d，J＝11.6Hz，2H)，1.49(m，1H)，1.44(s，9H)，1.13-0.98(m，4H)。

中间体17.4

于0℃，向N₂下商业可得的顺-4-叔丁氧基羰基氨基-环己烷甲酸(200mg，0.82mmol)在THF(3mL)中的溶液加入Et₃N(0.17mL，1.23mmol)和氯甲酸异丁酯(0.106mL，0.82mmol)。在此温度搅拌30min后，过滤，在减压下浓缩，得到酐。

于0℃，向N₂下该粗品在MeOH(5mL)中的溶液加入NaBH₄(170mg，4.49mmol)。在此温度搅拌40min后，将KHSO₄饱和水溶液加至溶液中。有机相用CH₂Cl₂萃取，经Na₂SO₄干燥。过滤，在减压下浓缩，得到粗品。经硅胶色谱法纯化，提供中间体17.4(185.3mg，0.808mmol)，收率为99％。ES-MS：M+H＝230，_ct_ret＝1.62min。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)

4.38(br，1H)，3.45(br，2H)，3.38(br，1H)，2.04(d，J＝9.12Hz，2H)，1.83(d，J＝10.8Hz，2H)，1.47(s，9H)，1.26(dd，J＝7.32，7.08Hz，1H)，1.15-0.99(m，4H)。

实施例18

将中间体18.1(180mg，0.305mmol)和HCl/二噁烷(4M溶液，2mL)的混合物于室温搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，得到实施例18(170mg)，为无色无定形物；ES-MS：M+H＝491，HPLC：_ct_Ret＝2.46min。

中间体18.1

于室温向中间体14.2(200mg，0.419mmol)和中间体7.2(105mg，0.628mmol)在CH₂Cl₂(2mL)中的溶液加入EDCI·HCl(120mg，0.628mmol)、HOAt(85mg，0.628mmol)和Et₃N(64mg，0.628mmol)，然后将混合物在相同温度搅拌2小时。将反应用H₂O(50mL)淬灭，用EtOAc(100mL)萃取。有机萃取液用5％NaHCO₃水溶液、H₂O和盐水洗涤，然后经Na₂SO₄干燥。将有机相在真空中浓缩，得到粗残渣，其经SiO₂柱色谱法纯化，得到中间体18.1(180mg，0.305mmol，73％)，为无色无定形物；ES-MS：M+H＝591，HPLC：_ct_Ret＝3.37min。

生物试验

根据以上第2)项所述的方法，体外评价肾素抑制活性。

代表性式I化合物的结果

等价物

本领域技术人员应认识到或者能够采用只是常规实验确定在本文所述的特定过程的多种等价物。这样的等价物被认为处于本发明的范围内并且由以下权利要求涵盖。这些专利、申请和其他文件的合适的组分、过程和方法可被选择用于本发明及其实施方案。