CH670825A5

CH670825A5 -

Info

Publication number: CH670825A5
Application number: CH2358/88A
Authority: CH
Inventors: William Allen Slusasrchyk; Tamara Dejneka; William Henry Koster
Original assignee: Squibb & Sons Inc
Priority date: 1985-01-28
Filing date: 1986-01-27
Publication date: 1989-07-14
Also published as: GB2170201A; HUT40407A; FR2576596A1; AU588017B2; ES551252A0; ZA86302B; RO93483A; YU167087A; BE904121A; GB2198133B; CA1279322C; SE9002338D0; SE8600355D0; LU86262A1; PL149156B1; HU196367B; SE502442C2; ATA20386A; SE467824B; DK39486D0

Description

DESCRIPTION

Le brevet des Etats-Unis N° 4.337.197, publié le 29 juin 1982, décrit des acides ß-lactame hydroxamiques O-sulfatés ayant une activité antibactérienne. Des composés préférés décrits dans ce brevet ont la formule suivante:

r'-nh

1 \

*'4

ce c-r1

c n-o-

3 k dans laquelle R'j est un groupe acyle, R'3 et R'4 sont les mêmes groupes ou sont des groupes différents, chacun représentant un hydrogène ou un alkyle, et M® est un hydrogène ou un cation.

Plusieurs procédés de préparation de ces composés sont décrits, y compris un procédé utilisant un produit intermédiaire ayant la formule:

A'-NH

\ ?;VR 4

Vk v 1

ck I

•nh-o-y'

/

10 dans laquelle A' est un groupe inhibant azoté et Y' est un groupe benzyle ou pivaloyle. Comme décrit dans ce brevet, le groupe hydroxyle du produit intermédiaire précité est transformé en un groupe sortant en utilisant par exemple un réactif classique, tel que le chlorure de méthanesulfonyle. Le composé complètement inhibé 15 présente la formule:

a'-nh \

'ch-I

,C—

ol;0^'4 -C— R'

-NH-O-Y'

(où L' est un groupe sortant) et peut être cyclisé par traitement au moyen d'une base, par exemple du carbonate de potassium, pour donner un composé ayant la formule:

Le brevet décrit un autre procédé de cyclisation, en une seule étape, consistant à traiter un produit intermédiaire ayant la formule:

oh r'4

KH \h—C-

A ✓

•nh-

'3

-O—Y'

40 par la triphénylphosphine et le diéthylazodicarboxylate.

On a trouvé qu'un sel pharmaceutiquement acceptable de l'acide [3S(Z)]-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-l-(sulfo-oxy)-3-azétidinyl]amino]-2-oxoéthylidène]amino]oxy]acétique, ce composé ayant la formule:

(I)

c-ch-

i 3

•n-0-s03h ch2-cooh

55 est un agent antibactérien de qualité supérieure.

Pour préparer l'acide [3S(Z)]-2-[[[2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3-azétidinyl]amino]-2-oxoéthylidène]-amino]oxy]acétique, il était nécessaire d'améliorer le procédé décrit dans le brevet des Etats-Unis N° 4.337.197.

"60 On a trouvé qu'un composé ayant la formule:

a-nh

(II)

V

65

y ch-I

C—

OK R,

-nh-or,

peut être sulfoné pour donner un composé ayant la formule:

3

670 825

(III)

A-NH

o-so.

y

CH-I

c—

A ^

" ^2

-NH-'

OR3

Pour l'administration orale, un sel pharmaceutiquement acceptable du composé de formule (I) peut être formulé sous forme de comprimés, capsules ou solution ou suspension dans un véhiculeur aqueux.

La transformation du groupe hydroxyle d'un composé ayant la formule:

A"\_. IVI*1

Les composés de formule (III) sont des produits intermédiaires nouveaux et, comme tels, font partie intégrante de l'invention. La cyclisation d'un composé entièrement inhibé de formule (III) permet d'obtenir le produit intermédiaire utile ayant la formule:

(II)

y

CH-

1

C—

-NH-OR,

(IV)

A-NH

V

il

-js-sj

-N-OR-

en un groupe sortant est compliquée par le fait que le composé est' un alcool tertiaire. On a trouvé que, si un composé de formule (II) est sulfoné au moyen d'un complexe de pyridine (ou de pyridine substituée) et d'anhydride sulfurique ayant la formule:

(V)

y

Tels qu'utilisés dans les formules (II), (III) et (IV) et dans toute la description, les symboles ont la signification indiquée ci-après.

A est un groupe benzyloxycarbonyle, ^-nitrobenzyloxycarbo-nyle, Z-butyloxycarbonyle, o-nitrophénylsulfényle ou triphénylmé-thyle; 25

Ri et R2 sont les mêmes groupes ou des groupes différents, (III) A-NH

chacun étant un alkyle de 1 à 4 atomes de carbone;

R3 est un groupe benzyle, /)-nitrobenzyle, benzyloxyméthyle, 2-méthoxy-2-propyle, 2-éthoxy-2-propyle, tétrahydropyranne-2-yle, 2-triméthylsilyléthyle, f-butyldiméthylsilyle ou /-butyldiphénylsilyle.

Les sels pharmaceutiquement acceptables des composés de formule (I) comprennent les sels basiques formés avec des cations inorganiques et organiques. De tels sels comprennent des sels d'ammonium, des sels de métaux alcalins, tels que des sels de sodium et de potassium, des sels de métaux alcalino-terreux, tels que des sels de calcium et de magnésium, et des sels provenant de bases organiques, telles que la dicyclohexylamine, la benzathine, l'hydrabamine, la N-méthyl-D-glucamine.

Les composés de formules (I), (VI) et (IX) sont décrits comme étant des acides. Ils peuvent toutefois également exister sous forme d'ions hermaphrodites (sels internes), ceux-ci étant également inclus dans l'expression «sels pharmaceutiquement acceptables» et entrant dans le cadre de l'invention.

Les sels pharmaceutiquement acceptables de l'acide [3S(Z)]-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3- 45 azétidinyl]amino]-2-oxoéthylidène]amino]oxy]acétique sont des (TV)

agents antibactériens présentant des propriétés supérieures inattendues, comparativement aux autres acides ß-lactame hydroxamiques O-sulfatés. Plus particulièrement, les sels selon l'invention présentent des caractéristiques supérieures d'adsorption orale chez un hôte mammifère, associées à une stabilité améliorée aux enzymes ß-lacta-mase responsables de la résistance au ß-lactame dans le domaine clinique, ainsi qu'à une stabilité chimique améliorée.

Les sels pharmaceutiquement acceptables du composé de formule (I) peuvent être utilisés pour combattre des infections bactériennes Gram négatif chez des espèces mammifères, telles que des animaux domestiques (par exemple chiens, chats, chevaux et analogues) et chez les êtres humains. Les sels sont particulièrement appropriés pour l'administration orale, bien que tous les modes d'administration utilisés dans le passé pour l'application des pénicillines et des céphalosporines à l'emplacement de l'infection soient également envisagés.

Pour combattre une infection bactérienne Gram négatif chez un hôte mammifère, un sel pharmaceutiquement acceptable du (VI)

composé de formule (I) peut être administré à un mammifère qui 65 doit être soigné, en une quantité d'environ 1 mg/kg/jour à environ 350 mg/kg/jour, de préférence en une quantité comprise entre environ 10 mg/kg/jour et environ 100 mg/kg/jour.

SO,

dans laquelle m est égal à 0,1, 2 ou 3, la réaction fournit, avec un rendement élevé, un composé ayant la formule:

\

CH-1

c —

o-so,

■C—R2

.3=0)

-NH-

°*3

Le complexe pyridine/anhydride sulfurique réagit de préférence avec 35 le groupe hydroxyle (comme on le désire).

La réaction de sulfonation peut être effectuée dans un solvant organique, tel que la pyridine, la mono-, di- ou triméthylpyridine, des hydrocarbures chlorés (par exemple le dichlorométhane, le 1,2-di-chloroéthane), l'acétonitrile, le diméthylformamide et le dioxanne. 40 La réaction s'effectuera de préférence à environ 0-100° C.

La cyclisation, par l'intermédiaire d'une base, d'un composé de formule (III) fournit le produit intermédiaire correspondant ayant la formule:

A-NH

v-

il

-£-R2 -N-OR,

50 La base est de préférence une base inorganique, telle qu'un carbonate de métal alcalin (par exemple carbonate de sodium ou carbonate de potassium), et devra être présente en excès [environ 2 à 10 équivalents par produit en réaction de formule (III)]. La réaction s'effectue de préférence dans un mélange de solvants organiques 55 aqueux. Le constituant organique peut être l'acétate d'éthyle, l'acétonitrile, l'acétone, la méthyléthylcétone, la méthylpropylcétone, la méthylbutylcétone, la méthylisobutylcétone, le 1,2-dichloroéthane, la pyridine ou la mono-, di- ou triméthylpyridine.

Un produit intermédiaire de formule (IV) peut être utilisé pour 60 préparer un agent antibactérien qui est un sel d'un composé ayant la formule:

*1

acyl-NH-

*CH-

■C—R„

-N-O-SO3H .

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4

Comme décrit dans le brevet des Etats-Unis N° 4.337.197, le groupe inhibant «R3 » peut être retiré en premier lieu d'un produit intermédiaire de formule (IV) pour fournir l'acide hydroxamique correspondant ayant la formule:

a-nh

(vii)

>-

ii

-f-R2

-N-OE.

Les réactions utilisées pour retirer les divers groupes «R3» sont connues dans la technique et dépendront bien entendu du groupe «R3» considéré.

La sulfonation d'un composé de formule (VII) fournit le composé correspondant ayant la formule:

(VIII)

a-nh w-

il

"f-R2

-H—O—S03Hf ou un sel basique de ce composé, et peut être effectuée par réaction avec un complexe de l'anhydride sulfurique avec la pyridine, le di-méthylformamide ou la 2,6-lutidine.

L'enlèvement du groupe inhibant «A» 3-amino d'un composé de formule (VIII) fournit le produit clé intermédiaire correspondant ayant la formule:

(ix)-

KF "2

11

CH-

■C—R_

-n-o-so k.

La méthode utilisée pour retirer le groupe inhibant dépendra du groupe inhibant considéré.

En ce qui concerne la préparation du produit désiré de formule (I), un composé de formule (IX), dans laquelle ri et r2 sont tous deux un groupe méthyle, à savoir

(x)

**2

CH-

CH3

• c—ch.

0-

-n-o-so3h est acylé avec un composé acide carboxylique ayant la formule: (XI)

-COOH

ch2-coor dans laquelle r est un groupe inhibant acide carboxylique qui est ensuite retiré suivant des méthodes conventionnelles. L'acylation est conventionnelle et peut s'efiFectuer au moyen de l'acide carboxylique comme tel, ou d'un halogénure ou d'un anhydride ou d'un ester actif d'acide carboxylique.

Les exemples suivants illustrent le procédé selon l'invention. Le procédé est utilisé pour préparer l'acide [3S(Z)]-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3-azétidinyl]amino]-2-oxoéthylidène]amino]oxy]acétique en tant que produit chiral et comme constituant d'un mélange racémique.

Exemple 1

Acide [3 ±(Z) ]-2-[ [[!-(2-amino-4-thiazolyl) -2-f[2,2-diméthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3-azétidinyl]amino ]-2-oxoéthylidène] amino ]oxy]~ acêtique, sel disodique

5

A) N- (t-butyloxycarbonyl) -N2- (phénylméthoxy) -D,L-3-hydroxy-valinamide

Une solution contenant 24,84 g (106,6 mmol) de N-t-butyloxy-carbonyl-D,L-3-hydroxyvaline et 16,33 g (106,6 mmol) d'hydroxy-10 benzotriazole monohydraté dans 500 ml de tétrahydrofuranne anhydre est refroidie à —10° C, puis on ajoute 22 g (106,6 mmol) de dicyclohexylcarbodiimide. On ajoute le mélange sous atmosphère d'azote pendant 1 heure à 0° C. Une solution contenant 13,13 g (10,6 mmol) d'O-benzylhydroxylamine dans 250 ml de tétrahydrofu-15 ranne anhydre est ensuite introduite, en l'espace de 15 minutes, dans le mélange ester activé, puis le mélange résultant est agité sous atmosphère d'azote pendant 1 heure à 0° C. Le produit insoluble est séparé par filtration et le filtrat est concentré sous vide, de manière à obtenir une mousse. La mousse est extraite à l'acétate d'éthyle et un 20 produit plus insoluble est séparé par filtration. Le filtrat est lavé deux fois par une solution à 5% de carbonate de sodium. La phase organique est séchée (sur sulfate de sodium) et évaporée de manière à obtenir un sirop qui, cristallisé par 130 ml d'éther isopropylique, fournit 24,7 g du composé spécifié dans le titre, point de fusion 76-25 78° C. La liqueur mère est évaporée pour donner un sirop (10 g), lequel est chromatographié sur une colonne contenant 300 g de silicAR CC-4 tassé dans du chloroforme. La colonne est éluée, tout d'abord avec 1 litre de chloroforme, puis avec 2 litres de méthanol à 2% dans du chloroforme. Le dernier système de solvant élue un 30 produit supplémentaire (TLC — Chromatographie en couche mince —, Rf 0,9, chloroforme/méthanol, 3:1) plus une impureté qui se déplace sur le front de solvant. Les fractions recueillies sont évaporées sous vide pour donner un sirop (8 g) qui, cristallisé par 25 ml d'éther isopropylique, fournit 5 g du composé du titre, point de 35 fusion 76-78° C.

B) N- (t-butyloxycarbonyl) -N2- (phénylméthoxy) -D,L-3- (sulfooxy) -valinamide, sel de pyridinium

On introduit dans un ballon à fond rond de 500 ml de la pyridine 40 anhydre (8,08 ml, 0,10 mol) que l'on refroidit à —10° C sous azote. On ajoute goutte à goutte (avec agitation magnétique énergique) du triméthylsilylchlorosulfonate, puis le mélange réactionnel épaissi (en raison de la précipitation du produit) est agité pendant 0,5 heure à 0° C. Le chlorotriméthylsilane est séparé sous vide, ce qui donne 15 g 4S du complexe pyridine/anhydride sulfurique.

LeN-(t-butyloxycarbonyl)-N2-(phénylméthoxy)-D,L-3-hydroxy-valinamide (16,92 g, 50 mmol) est dissous dans 200 ml de pyridine anhydre, puis on ajoute 9,87 g (62,5 mmol) du complexe pyridine/ anhydride sulfurique. On agite le mélange à 55° C sous azote 50 pendant 2 heures. On ajoute une autre portion (790 mg, 5 mmol) du complexe pyridine/anhydride sulfurique et l'on poursuit l'agitation pendant 1 heure. La Chromatographie en couche mince (TLC) [n-butanol/acide acétique/eau (3:1:1)] met en évidence un seul produit, Rf 0,77 (le produit de départ se déplace vers le front de solvant). Le 55 mélange réactionnel est concentré sous vide pour donner une huile. Cette huile est purifiée trois fois par l'acétonitrile pour donner le composé brut, indiqué dans le titre, sous la forme d'une mousse. Le rendement est considéré comme quantitatif.

60 C) (3 ±) -3-f (t-butyloxycarbonyl) aminoJ-4,4-diméthyl-l- (phénylméthoxy ) -2-azétidinone

Le ballon contenant le N-(t-butyloxycarbonyl)-N2-(phénylmé-thoxy)-D,L-3-(sulfooxy)valinamide, sel de pyridinium brut (environ 50 mmol) est placé dans un bain de glace, puis on ajoute, tout en 65 agitant vigoureusement, 400 ml d'acétate d'éthyle, puis une solution contenant 42,8 g (0,31 mol) de carbonate de potassium dans 90 ml d'eau. Le mélange obtenu est agité vigoureusement au reflux (température du bain d'huile 95° C) pendant 2 heures sous azote. Le

5

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mélange réactionnel est refroidi à température ambiante et les phases sont séparées. La phase aqueuse est extraite avec 2 x 200 ml d'acétate d'éthyle, et toutes les phases organiques sont rassemblées, desséchées (sur sulfate de sodium) et évaporées sous vide. L'huile est reprise par de l'acétate d'éthyle 40%/hexane (125 ml) et filtrée rapidement sur un tampon de 350 ml (10 cm) de silicAR CC-7, en utilisant 3 à 4 litres d'acétate d'éthyle 40%/hexane. Le filtrat est évaporé sous vide pour donner un produit solide (12,2 g). La cristallisation par 50 ml d'éther isopropylique donne le composé du titre, point de fusion 110° C. Par évaporation de la liqueur mère, on obtient 4,75 g d'un solide visqueux contenant environ 15% de plus du composé, en se fondant sur le spectre RMN 1H.

D) (3 ±)-3-[(t-butyloxycarbonyl)aminoJ-l-hydroxy-4,4-diméthyl-2-azétidinone

La (3 ± )-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-4,4-diméthyl-l-(phényl-méthoxy)-2-azétidinone (8,07 g, 25 mmol) est hydrogénée, sous la pression atmosphérique et à température ambiante, dans 40 ml de méthanol avec 0,6 g de palladium 10% sur charbon, comme catalyseur, pendant 2 heures. Le mélange réactionnel est filtré sur un tampon de célite, et le filtrat est concentré sous vide. On ajoute de l'acétonitrile et l'on évapore en reprenant le résidu (deux fois), ce qui donne 5,78 g du composé du titre, sous la forme d'une mousse solide.

E) (3 ±)-3-[( t-butyloxycarbonyl) amino]-2-oxo-4,4-diméthyl-l-azétidinylsulfate, sel de potassium

Le complexe pyridine/S03 (8,02 g, 50 mmol) est ajouté par fractions à une solution de (3 ± )-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-l-hydr-oxy-4,4-diméthyl-2-azétidinone (5,78 g, 25 mmol) dans de la pyridine anhydre (120 ml), à 0° C, sous argon. Le mélange réactionnel est agité, à température ambiante, pendant 2,5 heures, et concentré sous vide. On dissout le résidu dans 32 ml d'acétone 10%/solution aqueuse tampon (pH 7) de phosphate de potassium monobasique 0,5M, puis on ajuste le pH à 5,2 avec de l'hydroxyde de potassium IN. La solution obtenue est chromatographiée sur 270 ml de résine Dowex-50 (K+), avec une solution d'acétone 10% : eau. Les fractions appropriées sont rassemblées et concentrées sous vide pour donner 13,6 g de produit brut. Celui-ci est encore purifié par Chromatographie sur 680 ml de résine HP-20, d'abord avec 200 ml d'eau, puis avec de l'acétone 10% : eau. Les fractions appropriées sont rassemblées et lyophilisées pour donner 7,13 g du composé du titre, point de fusion 163-170° C, avec décomposition.

F) (3 ±) -3-amino-2-oxo-4,4-diméthyl-l-azétidinylsulfate

Le (3 ± )-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-4,4-diméthyl-l-azétidi-nylsulfate, sel de potassium (5,48 g, 15 mmol) est mis en suspension dans 20 ml de dichlorométhane anhydre, à —10° C, sous argon. On ajoute de l'anisol (6 ml) puis, en l'espace de 2 minutes, 26 ml d'acide trifluoroacétique. Le mélange réactionnel est agité à —10° C pendant 20 minutes, puis concentré sous vide. Le résidu est trituré avec de l'éther (trois fois), puis séché sous vide pour donner le composé du titre sous la forme d'un produit solide blanc.

G) Acide [3 ±(Z)]-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-dimêthyl-4-oxo-l-(sulfooxy ) -3-azétidinyl] amino J-2-oxoéthylidène] amino ]-oxy]acétique, diphênylméthylester, sel de sodium

L'acide (Z)-(2-amino-4-thiazolyl)-[[(2-diphénylméthoxy)-2-oxo-éthoxy]imino]acétique (6,52 g, 16 mmol) et de la triéthylamine (2,5 ml, 18 mmol) sont dissous dans 60 ml de diméthylformamide à —30° C, sous argon. Du diphénylchlorophosphate (3,5 ml, 17 mmol) est ajouté goutte à goutte, et le mélange réactionnel est agité à — 30° C pendant 1,5 heure.

Au (3±)-3-amino-2-oxo-4,4-diméthyl-l-azétidinylsulfate brut, préparé précédemment, dissous dans 10 ml de diméthylformamide à 0° C, on ajoute 6,6 ml de triéthylamine. Cette solution est ajoutée goutte à goutte à l'anhydride mélangé précité à —30° C. Le mélange réactionnel est agité à —30 à —20° C pendant 3,5 heures, puis on le laisse reprendre la température ambiante. On sépare par filtration les matières insolubles, puis on concentre le filtrat sous vide. On dissout le résidu dans 60 ml d'acétone 20%/tampon phosphate de sodium monobasique 0,5M (pH 7), puis on ajuste le pH à 6,0 avec de l'hydroxyde de sodium 2N. La solution est chromatographiée sur 300 ml de résine Dowex-50 (Na+), avec une solution d'acétone 20% : eau. Les fractions appropriées sont rassemblées et lyophilisées à sec. Le produit brut est dissous dans 200 ml d'acétonitrile contenant de l'eau, et les sels inorganiques insolubles sont séparés par filtration. Le filtrat est concentré sous vide, ce qui donne 19,32 g du composé du titre, renfermant comme impureté le produit de départ acide.

H) Acide [3 ± (Z) ]-2-[[[ l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[ [2,2-diméthyl-4-oxo-l - (sulfooxy ) -3-azétidinyl] aminoJ-2-oxoéthylidène] amino]-oxy]acétique, sel disodique

Le produit brut acide [3 ± (Z)]-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3-azétidinyl]amino]-2-oxoéthylidè-ne]amino]oxy]acétique, diphénylméthylester, sel de sodium (19,3 g) est mis en suspension dans 50 ml de dichlorométhane et 6 ml d'anisol à —10° C sous argon. On ajoute de l'acide trifluoroacétique (90 ml), puis le mélange réactionnel est agité pendant 1 heure, concentré sous vide et trituré avec de l'éther (trois fois). Le produit brut est dissous dans 40 ml de tampon au phosphate de sodium monobasique 0,5M, pH 7,0, et le pH est ajusté à 6,8 avec de l'hydroxyde de sodium 2N. Cette solution est chromatographiée sur 900 ml de HP-20 avec de l'eau. Les fractions appropriées sont divisées en deux parties. La partie la moins pure est rechromatographiée sur 500 ml de HP-20. Les fractions appropriées sont réunies avec celles de la première Chromatographie et lyophilisées pour donner 3,8 g du composé du titre, point de fusion 195-210° C, avec décomposition.

Analyse pour C12H13N509S2Na2 -2,4H20:

Calculé: C 27,46 H 3,41 N 13,35 S 12,22%

Trouvé: C 27,46 H 3,48 N 13,06 S 12,04%

Exemple 2

Acide [3S(Z)]-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3-azétidinyl] amino ]-2-oxoéthylidène] amino ]oxy ]-acétique, sel disodique

A) Sel de N-(t-butyloxycarbonyl)-L-3-hydroxyvaline, a-méthyl-benzylamine

Une solution de N-t-butyloxycarbonyl-ß-hydroxyvaline (7,02 g, 30 mmol) dans 250 ml d'éthyléther est traitée avec 3,63 g (30 mmol) de S-(—)-a-méthylbenzylamine et la solution résultante est ensemencée par un sel finement divisé provenant d'une redissolution antérieure. On laisse reposer 8 heures à 25° C, puis on sépare par filtration le produit solide blanc obtenu, on le lave à l'éther et on le dessèche à l'air, ce qui donne 4,78 g du composé brut indiqué dans le titre, point de fusion 137-140° C.

La recristallisation de 8,87 g de produit brut s'effectue par mise en solution dans 200 ml d'acétonitrile, au reflux, et refroidissement à 25° C. On laisse reposer à 25° C pendant 1 heure et on filtre, ce qui donne, après lavage à l'acétonitrile et à l'acétate d'éthyle, puis séchage à l'air, 6,81 g du composé du titre, point de fusion 144-146° C. Une seconde recristallisation de l'échantillon de 6,81 g par 150 ml d'acétonitrile fournit 6,02 g du composé du titre, point de fusion 146-147° C, [a]D = -4,5° C (C = 2,0, méthanol).

B) N- (t-butyloxycarbonyl) -L-3-hydroxyvaline

Le sel de N-(t-butyloxycarbonyl)-L-3-hydroxyvaline, a-méthyl-benzylamine (6,02 g, 17,0 mmol) est secoué avec un mélange contenant 250 ml d'acétate d'éthyle et 100 ml de bisulfate de potassium à 10%, puis les couches sont séparées. La couche organique est lavée à l'eau, puis à l'eau salée, desséchée (sur sulfate de sodium) et évaporée, ce qui donne une mousse. Par trituration avec de l'hexane, on obtient le composé du titre, sous la forme d'une poudre blanche s'écoulant librement, 3,79 g, point de fusion 116-118° C, [a]D = +7,6°C (C = 2,0, acétate d'éthyle).

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10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

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Un échantillon du composé du titre est transformé en son mé-thylester au moyen du diazométhane. La RMN protonique (400 MHz) d'un mélange contenant 5 mg du méthylester et 10 g de tris-[3-(heptafluoropropylhydroxyméthylène)-d-camphorato], euro-pium (HT) présente, à 0° C, une proportion de 95:5 d'énantiomères.

Le déblocage du composé (acide chlorhydrique/acétate d'éthyle) en son chlorhydrate aminoacide libre et la comparaison avec la rotation spécifiée dans la littérature indiquent que la stéréochimie absolue du composé est de configuration S [voir «Bull. Chem. Soc. Japan», 39,2287 (1966)].

Ç) N-(t-butyloxycarbonyl)-N2-(phénylméthoxy)-L-3-hydroxyvalin-amide

En suivant le mode opératoire de l'exemple 1 A), mais en remplaçant la N-(t-butyloxycarbonyl)-D,L-3-hydroxyvaline par la N-(t-butyloxycarbonyl)-L-3-hydroxyvaline, on obtient le composé du titre.

D) (3S)-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-4,4-diméthyl-l-(phényl-méthoxy)-2-azètidinone

En suivant les modes opératoires des exemples 1B) et 1C), mais en remplaçant le N-(t-butyloxycarbonyl)-N2-(phénylméthoxy)-D,L-3-hydroxyvaIinamide par le N-(t-butyloxycarbonyl)-N2-(phénylmé-thoxy)-L-3-hydroxyvalinamide, on obtient le composé du titre. La liqueur mère provenant de la cristallisation est purifiée par chroma-tographie-fiash sur gel de silice LPS-1 (en éluant avec l'acétate d'éthyle 20%/hexane).

E) (3S)-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-l-hydroxy-4,4-diméthyl-2-azétidinone

En suivant le mode opératoire de l'exemple 1D), mais en remplaçant la (3±)-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-4,4-diméthyl-l,l-(phénylméthoxy)-2-azétidinone par la (3S)-3-[(t-butyloxycarbonyl)-amino]-4,4-diméthyl-l-(phénylméthoxy)-2-azétidinone, on obtient le composé du titre.

F) (3S)-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-2-0X0-4,4-dimêthyl-l-azétidinylsulfate, sel de potassium

En suivant le mode opératoire de l'exemple 1E), mais en remplaçant la (3 ± )-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-l-hydroxy-4,4-diméthyl-2-azétidinone par la (3S)-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-l-hydroxy-4,4-diméthyl-2-azétidinone, on obtient le composé du titre. Après élimination des matières volatiles, le résidu brut est dissous dans l'acétone 10%/tampon au phosphate de potassium monobasique 0,5M (pH 7,2), et le pH est ajusté à 5,0 au moyen d'hydroxyde de potassium 3N. Cette solution est soumise à la Chromatographie sur Dowex (forme potassium), puis purifiée sur HP-20.

G) Acide [3S(Z) ]-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-1-(sulfooxy)-3-azétidinyl]amino]-2-oxoéthylidène]amino ]oxy ]-acétique, diphénylméthylester, sel de sodium

De la diisopropyléthylamine (0,54 ml, 3,09 mmol) est ajoutée à 1,152 g (2,81 mmol) d'acide (Z)-(2-amino-4-thiazolyl)-[[2-diphényl-

méthoxy-2-oxoéthoxy]imino]acétique dans 9,4 ml de diméthylformamide. Le mélange est refroidi à —20° C, on ajoute du diphénylchlo-rophosphate (0,59 ml, 2,81 mmol), puis le mélange résultant est agité pendant 1 heure pour obtenir un anhydride mixte.

Le (3S)-3-[(t-butyloxycarbonyl)amino]-2-oxo-4,4-diméthyl-l-azétidinylsulfate, sel de potassium (0,98 g, 2,81 mmol) est mis en suspension dans 7,5 ml de dichlorométhane, puis refroidi à —10° C. On ajoute de l'anisol (2,13 ml), puis 9,4 ml d'acide trifluoroacétique. On agite le mélange résultant pendant 1 heure à —10° C. On ajoute du toluène (~5 ml) et on évapore les matières volatiles. Le résidu est trituré avec de l'hexane et de l'éther anhydre, puis retiré pour donner une poudre blanche de (3S)-amino-2-oxo-4,4-diméthyl-l-azétidinyl-sulfate.

Le résidu est refroidi à —20° C et dissous dans 9,4 ml de diméthylformamide. De la diisopropyléthylamine (1,47 ml, 8,34 mmol) est ajoutée, puis l'anhydride mixte est immédiatement introduit. Le mélange réactionnel est agité pendant 3. heures à —20° C. Les matières volatiles sont éliminées sous vide, le résidu est dissous dans l'acétone 20%/eau à 0° C, puis le pH est ajusté à 6,5 au moyen de bicarbonate de sodium aqueux.

Le mélange résultant est purifié par Chromatographie sur colonne avec de l'acétone 20%/eau sur résine Dowex-50 x 2-400 (forme sodium), cela étant suivi d'une Chromatographie sur HP-20 (en éluant avec de l'eau, acétone 5%/eau, acétone 10%/eau, acétone 20%/eau, acétone 30%/eau et acétone 40%/eau) pour donner le composé da titre.

H) Acide [3S(Z,) ]-2-[[[I-(2-amino-4-thiazolyl) -2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-1-(sulfooxy ) -3-azétîdmyl] amino]-2-oxoéthylidène] amino ]oxy]-acétique, sel disodique

L'acide [3S(Z)],-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-dimêthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3-azétidinyl]amino]-2-oxoéthylidène]amino]oxy]-acétique, diphénylméthylester, sel de sodium est mis en suspension dans 11,2 ml de dichlorométhane à —10° C. On ajoute de l'anisol (1,12 ml) puis, goutte à goutte, 18,7 ml d'acide trifluoroacétique. On agite le mélange pendant 40 minutes à 0° C. On ajoute du toluène et on évapore les matières volatiles. Le résidu est trituré avec de l'éther anhydre et retiré pour donner un produit solide blanc. Le résidu est dissous dans l'eau (pH 2,75) et purifié par Chromatographie sur HP-20 (en éluant avec-de l'eau, acétone 5%/eau, acétone 10%/eau et acétone 20%/eau) pour fournir, par lyophilisation, 640 mg de l'ion hermaphrodite du composé du titre. L'ion hermaphrodite est dissous dans l'eau, puis on ajoute 2 équivalents de bicarbonate de sodium (244 mg, 2,9 mmol) (pH 5,75). La Chromatographie de cette solution sur HP-20 (en éluant avec de l'eau) fournit, par lyophilisation, 572 mg du composé du titre, point de fusion 140-145° C, avec décomposition.

Analyse pour C12H13N509S2Na2 • 1,56H20:

Calculé: C 28,31 H 3,10 N 13,64%

Trouvé: C 28,31 H 3,19 N 13,76%

6

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

Claims

670 825 REVENDICATIONS

1. Composé acide [3S(Z)]-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-dîméthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3-azétidinyl]amino]-2-oxoéthylidène]-amino]oxy]acétique ayant la formule:

et les sels pharmaceutiquement acceptables de ce composé.

2. Procédé de préparation du composé acide [3S(Z)]-2-[[[l-(2-amino-4-thiazolyl)-2-[[2,2-diméthyl-4-oxo-l-(sulfooxy)-3-azétidinyl]-amino]-2-oxoéthylidène]amino]oxy]acétique ayant la formule:

c-ch-

n-o-so3h ch2-cooh et des sels pharmaceutiquement acceptables de ce composé, caractérisé en ce qu'on effectue l'acylation d'un composé ayant la formule:

hh-

"CH-

•C—CH.

-n-o-so3h avec un composé acide carboxylique ayant la formule:

-COOH

ch2-coor dans laquelle R est un groupe inhibant acide carboxylique qui est ensuite retiré.