BRPI0619706A2 - composto, composição, método para inibir a atividade da proteìna aurora quinase numa amostra biológica, método para tratar um distúrbio proliferativo num paciente, método para tratar cáncer num indivìduo - Google Patents

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Hayley Binch
Michael Mortimore
Damien Fraysse
Chris Davis
Michael O'donnell
Simon Everitt
Daniel Robinson
Joanne Pinder
Andrew Miller
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Abstract

COMPOSTO, COMPOSIçãO, MéTODO PARA INIBIR A ATIVIDADE DA PROTEìNA AURORA QUINASE NUMA AMOSTRA BIOLóGICA, MéTODO PARA TRATAR UM DISTúRBIO PROLIFERATIVO NUM PACIENTE, MéTODO PARA TRATAR CáNCER NUM INDIVìDUO. A presente invenção refere-se a compostos úteis como inibidores de proteínas quinase. A invenção também provê composições farmaceuticamente aceitáveis compreendendo esses compostos e métodos para utilizar os compostos e composições no tratamento de diversas doenças, condições e distúrbios. A invenção também provê processos para preparar compostos da invenção.

Description

"COMPOSTO, COMPOSIÇÃO, MÉTODO PARA INIBIR A ATIVIDADE DA PROTEÍNA AURORA QUINASE NUMA AMOSTRA BIOLÓGICA, MÉTODO PARA TRATAR UM DISTÚRBIO PROLIFERATIVO NUM PACIENTE, MÉTODO PARA TRATAR CÂNCER NUM INDIVÍDUO".
Campo técnico da invenção
A presente invenção refere-se a compostos úteis como inibidores da proteína Aurora quinase. A invenção também refere-se a composições farmaceuticamente aceitáveis compreendendo os compostos da invenção, a métodos para utilizar os compostos e composições no tratamento de diversos distúrbios, e a processos para a preparação dos compostos.
Histórico da invenção
As proteínas Aurora são uma família de três serina/treonina quinases relacionadas (denominadas Aurora-A, -B e -C) que são essenciais para a progressão através da fase mitótica do ciclo celular. Especificamente, a Aurora-A desempenha um papel crucial na maturação e segregação centrossômica, na formação do fuso mitótico e na segregação constante de cromossomos. A Aurora-B é uma proteína cromossomal transitória (11 chromosomal passenger protein") que desempenha um papel central na regulação do alinhamento de cromossomos na placa metafásica, do ponto de controle de montagem do fuso e para a finalização correta da citocinese.
A superexpressão de Aurora-A, -B ou -C foi observada numa categoria de cânceres humanos, inclusive o colorretal, ovariano, gástrico e adenocarcinomas ductais invasivos. Diversos estudos demonstram agora que a depleção ou inibição de Aurora-A ou -B nas linhagens de células cancerosas humanas pelo siRNA, anticorpos negativos dominantes ou anticorpos neutralizantes interrompe o progresso através de mitose com o acúmulo de células com 4N DNA, e, em alguns casos, isso é acompanhado pela endoreduplicação e morte celular.
As Aurora quinases são alvos atrativos devido a sua associação com numerosos cânceres humanos e às funções que desempenham na proliferação de tais células cancerosas. Seria desejável ter um inibidor da Aurora quinase com propriedades favoráveis de semelhança com fármacos, tal como a capacidade de inibir a proliferação celular. Conseqüentemente, existe a necessidade de compostos que inibam as Aurora quinases e que também exibam propriedades favoráveis de semelhança com fármaco.
Sumário da invenção
A presente invenção provê compostos e suas composições farmaceuticamente aceitáveis que são úteis como inibidores das proteínas Aurora quinase. Esses compostos são representados pela fórmula I:
<formula>formula see original document page 3</formula>
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, onde as variáveis são conforme aqui definidas.
Esses compostos e suas composições farmaceuticamente aceitáveis são úteis para inibir as quinases in vitro, in vivo, e ex vivo. Tais usos incluem tratar ou prevenir distúrbios mieloproliferativos e distúrbios proliferativos tais como melanoma, mieloma, leucemia, linfoma, neuroblastoma, e câncer. Outros usos incluem o estudo de quinasas em fenômenos biológicos e patológicos; o estudo de vias de transdução do sinal intracelular mediadas por tais quinases; e a avaliação comparativa de novos inibidores de quinase.
Descrição detalhada da invenção
A presente invenção provê um composto da fórmula I: <formula>formula see original document page 4</formula>
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, onde R2 é alquila C1-3 ou ciclopropila; R5 é CH2CH3, CH2CF3, CH2CH2CF3
<formula>formula see original document page 4</formula>
ou
<formula>formula see original document page 4</formula>
ou
<formula>formula see original document page 4</formula>
J1 é H ou CH3;
J2 é alquila C1-4; e
Cy é cicloalquila C3-5.
Em alguns aspectos da presente invenção, R5 é selecionado de CH2CF3, CH2CH2CF3,
<formula>formula see original document page 4</formula>
ou
<formula>formula see original document page 4</formula>
Em outras concretizações, R5 é selecionado de CH2CF3 ou <formula>formula see original document page 5</formula>
Em outras concretizações ainda, R5 é CH2CF3.
Em outros aspectos da presente invenção, Ry é
<formula>formula see original document page 5</formula>
ou
<formula>formula see original document page 5</formula>
Em algumas concretizações, Ry é Em algumas concretizações, Cy é ciclopropila. Em outros aspectos da presente invenção, R2 é metila. Um aspecto prove um composto selecionado da Tabela 1 (ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo):
<table>table see original document page 5</column></row><table> <table>table see original document page 6</column></row><table> <formula>formula see original document page 7</formula> <table>table see original document page 8</column></row><table> <table>table see original document page 9</column></row><table> <table>table see original document page 10</column></row><table> <table>table see original document page 11</column></row><table> Para fins da presente invenção, os elementos químicos são identificados de acordo com a Tabela Periódica de Elementos, versão CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75thEd. Adicionalmente, princípios gerais de química orgânica são descritos em textos conhecidos pelo habilitado na técnica, inclusive, por exemplo, "Organic Chemistry", Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, e "March's Advanced Organic Chemistry", 5thEd., Ed.: Smith, M.B. e March, J., John Wiley & Sons, New York: 2 001, cujos conteúdos são aqui incorporados por referência.
Conforme aqui descrito, uma faixa numérica especificada de átomos inclui qualquer número inteiro nela contida. Por exemplo, um grupo que possui de 1-4 átomos poderia ter 1, 2, 3, ou 4 átomos.
Conforme aqui descrito, os compostos da invenção podem ser opcionalmente substituídos com um ou mais substituintes, tais como geralmente ilustrados acima, ou conforme exemplificado por classes, subclasses e espécies específicas da invenção. Será apreciado que a expressão "opcionalmente substituído" é utilizada alternativamente com a expressão "substituído ou não substituído". Em geral, o termo "substituído", seja precedido pelo termo "opcionalmente" ou não, refere-se à substituição de radicais hidrogênio numa dada estrutura com o radical de um substituinte especificado. Salvo se indicado de outra forma, um grupo opcionalmente substituído pode ter um substituinte em cada posição substituível do grupo e, quando mais de uma posição em qualquer dada estrutura puder ser substituída com mais de um substituinte selecionado de um grupo especificado, o substituinte pode ser ou igual ou diferente em cada posição. Combinações de substituintes previstos na presente invenção são preferivelmente os que resultam na formação de compostos estáveis ou quimicamente viáveis.
O termo "estável", conforme aqui utilizado, refere-se a compostos que não são substancialmente alterados quando submetidos a condições que permitam sua produção, detecção e preferivelmente sua recuperação, purificação, e uso para uma ou mais das finalidades aqui descritas. Em algumas concretizações, um composto estável ou quimicamente viável é um composto não substancialmente alterado quando mantido a uma temperatura de 40°C ou menos, na ausência de umidade ou de outras condições quimicamente reativas, por pelo menos uma semana. O termo "alquila" conforme aqui utilizado, significa um hidrocarboneto, de cadeia linear, não ramificada ou ramificada que é completamente saturado e que possui um único ponto de ligação com o restante da molécula. Exemplos específicos de grupos alquila incluem, porém não se restringem a metila, etila, isopropila, n-propila e sec-butila.
O termo "cicloalquila" refere-se a um hidrocarboneto monocíclico que é completamente saturado e que possui um único ponto de ligação com o restante da molécula. Grupos cicloalquila apropriados incluem, porém não se restringem a ciclopropila, ciclobutila, e ciclopentila.
O termo "insaturado", conforme aqui utilizado, significa que uma porção possui uma ou mais unidades de insaturação.
O termo "haloalquila" significa um alquila substituído com um ou mais átomos de halogênio, e que inclui grupos alquila perfluorados, tal como CF3. O termo "halogênio" significa F, Cl, Br, ou I. O termo "grupo protetor", conforme aqui utilizado, refere-se a um agente usado para temporariamente bloquear um ou mais sítios reativos desejados num composto multifuncional. Em certas concretizações, um grupo protetor possui uma ou mais, ou preferivelmente todas as seguintes características: a) . reage seletivamente com bom rendimento para dar um substrato protegido que é estável para as reações que ocorrem em um ou mais dos outros sítios reativos; b) . é seletivamente removível com bom rendimento por reagentes que não ataquem o grupo funcional regenerado. Grupos protetores representativos são detalhados em Greene, T.W.,Wuts, P.G em "Protective Groups in Organic Synthesis", Third Edition, John Wiley & Sons, New York: 1999 e outras edições deste livro, cujo conteúdo é aqui incorporado por referência. O termo "grupo nitrogênio protetor", conforme aqui utilizado, refere-se a agentes utilizados para temporariamente bloquear um ou mais sítios reativos de nitrogênio num composto multifuncional. Grupos nitrogênio protetores preferidos também possuem as características exemplificadas acima, e certos grupos nitrogênio protetores representativos são também detalhados no Capítulo 7 em Greene, Y.W., Wuts, P.G. em "Protective Groups in Organic Synthesis", Third Edition, John Wiley & Sons, New York: 1999, cujo conteúdo foi aqui incorporado por referência.
Salvo se indicado de outra forma, as estruturas aqui descritas também pretendem incluir todas as formas isoméricas (ex: enantioméricas, diastereoméricas, e geométricas (ou conformacionais)) da estrutura; por exemplo, as configurações ReS para cada centro assimétrico, isômeros de ligação dupla (Z) e (E) e isômeros conformacionais (Z) e (E). Portanto, isômeros estereoquímicos simples, bem como misturas enantioméricas, diastereoméricas e geométricas (ou conformacionais) dos compostos da presente invenção estão incluídas no escopo da invenção.
Salvo se indicado de outra forma, todas as formas tautoméricas dos compostos da invenção estão incluídas no escopo da presente invenção. Conforme é entendido pelo habilitado na técnica, um grupo pirazol pode ser representado em uma variedade de formas. Por exemplo, uma estrutura representada como
<formula>formula see original document page 14</formula> também representa outros tautômeros possíveis, tais como
<formula>formula see original document page 15</formula>
Da mesma forma, uma estrutura representada como
<formula>formula see original document page 15</formula>
também representa outros tautômeros possíveis, tais como
<formula>formula see original document page 15</formula>
Salvo se indicado de outra forma, um substituinte pode girar livremente em torno de quaisquer ligações giratórias. Por exemplo, um substituinte representado como
<formula>formula see original document page 15</formula>
também representa
<formula>formula see original document page 15</formula>
Da mesma forma, um substituinte representado como
<formula>formula see original document page 15</formula>
também representa
<formula>formula see original document page 15</formula>
Adicionalmente, salvo se indicado de outra forma, as estruturas aqui representadas, também pretendem incluir compostos que diferem somente quanto à presença de um ou mais átomos isotopicamente enriquecidos. Por exemplo, os compostos que possuem as estruturas da presente invenção, exceto quanto à substituição de hidrogênio com deutério ou trítio, ou a substituição de um carbono com um carbono 13C ou 14C enriquecido também estão incluídos no escopo da presente invenção. Tais compostos são úteis, por exemplo, como ferramentas ou sondas analíticas em ensaios biológicos.
Os compostos da presente invenção podem ser preparados à luz do relatório utilizando etapas geralmente conhecidas pelo habilitado na técnica. Tais compostos podem ser analisados através de métodos conhecidos, inclusive, mas não limitados a LCMS (espectrometria de massa acoplada à cromatografia líquida) e NMR (ressonância magnética nuclear). Deve ficar entendido que as condições específicas mostradas abaixo são apenas exemplos, e não pretendem limitar o escopo das condições que podem ser usadas no preparo dos compostos da presente invenção. Em vez disso, a presente invenção também inclui condições que seriam evidentes aos habilitados na técnica à luz do presente relatório para preparo dos compostos da presente invenção. Salvo se indicado de outra forma, todas as variáveis nos esquemas seguintes são aqui definidas.
São utilizadas as seguintes abreviações:
DIPEA é diisopropiletilamina
DMF é dimetilformamida
η-BuOH é n-butanol
t-BuOH é ter-butanol
EtOH é etanol
MeOH é metanol
EtOAc é acetato de etila
TFA é ácido trifluoroacético
DMSO é dimetil sulfóxido
Rt é tempo de retenção
DCM é diclorometano
MeCN é acetonitrila
THF tetrahidrofurano
TBTU é tetrafluoroborato de 2 -(ΙΗ-benzotriazol-1-il)- 1,1,3,3-tetrametilurônio
HPLC é cromatografia líquida de alto desempenho LCMS espectrometria de massa acoplada à cromatografia líquida
1H NMR é ressonância magnética nuclear Esquema Geral
<formula>formula see original document page 17</formula>
<formula>formula see original document page 17</formula>
O esquema geral acima mostra alguns métodos para preparo de compostos da presente invenção. Esquema I
<formula>formula see original document page 17</formula>
O Esquema I acima mostra uma via geral para a preparação de compostos da fórmula 4 (no Esquema I) , onde JJ corresponden às substituições na azetidina conforme aqui descrito e onde R2 e R5 são conforme aqui definidos. A pirimidina desclorada da fórmula 1 é combinada com HQ-R1 para formar um composto de fórmula 2. Em algumas concretizações, os dois compostos são aquecidos na presença de um solvente apropriado (ex: t-BuOH) por 16 horas. Em outras concretizações, os dois compostos são misturados a O0C na presença de acetonitrila e trietilamina durante 1 hora. 0 composto de fórmula 2 é então aquecido na presença de um solvente apropriado (ex: DMF) e uma base apropriada (ex: DIPEA/Nal) com um aminopirazol opcionalmente substituído para formar um composto de fórmula 3, que é aquecido na presença de azetidina na presença de um solvente apropriado (ex: n- BuoH) para formar um composto de fórmula 4.
Esquema II
<formula>formula see original document page 18</formula>
0 Esquema II acima mostra uma via geral de preparação de compostos de fórmula 6 (no Esquema II) , onde JJ corresponde às substituições na azetidina conforme aqui descrito e onde R2 e R5 são conforme aqui definido. 0 composto de fórmula 5 é combinado com um cloreto ácido apropriado (onde X" é Cl) na presença de piridina para formar um composto intermediário que, quando da mistura na presença de metóxido de sódio e metanol, forma o composto de fórmula 6. Em algumas concretizações, X" pode ser OH, quando então um reagente acoplador de ácido apropriado é usado para acoplar o ácido à amina. Exemplos de reagentes acopladores de ácido apropriados incluem, porém não se restringem a EDC, DCI e HOBT. Solventes apropriados para essas reações de acoplamento incluem, porém não se restringem a THF, CH2Cl2, e dioxano. Os esquemas seguintes mostram métodos para sintetizar diversos tipos de azetidinas. Essas azetidinas podem ser usadas para formar compostos da presente invenção de acordo com os métodos aqui descritos. Esquema A
<formula>formula see original document page 19</formula>
O Esquema A acima mostra uma via geral para a preparação de azetidinas substituídas com OH onde JJ é Cy.
Esquema B
<formula>formula see original document page 19</formula>
O Esquema B mostra uma via geral para a preparação de azitidinas substituídas com ciclopropila-fluoro. O composto 10 é oxidado sob condições apropriadas para formar o composto 11, que, sob condições Grignard adequadas, é combinado com ciclopropila-MgBr para formar a azeditina substituída com ciclopropila 12. O composto 12 é então fluorado sob condições de fluoração apropriadas para formar 13, que é hidrogenado sob condições Pd/C para formar a azetidina livre desprotegida 14 .
Conseqüentemente, a presente invenção refere-se a processos para preparar os compostos da presente invenção.
Métodos para avaliar a atividade dos compostos da presente invenção (ex: ensaios de quinase) são conhecidos no estado da técnica e são também descritos nos exemplos estabelecidos.
A atividade dos compostos como inibidores de proteína 1quinase pode ser testada in vitro, in vivo ou numa linhagem celular. Ensaios in vitro incluem ensaios que determinam a inibição ou da atividade da quinase ou da atividade de ATPase da quinase ativada. Os ensaios alternados in vitro quantificam a capacidade de o inibidor ligar-se à proteína quinase e podem ser medidos radiomarcando-se o inibidor antes da ligação, isolando-se o complexo inibidor/quinase e determinando-se a quantidade de ligado radiomarcado, ou executando um experimento competitivo no qual novos inibidores são incubados com o ligado de quinase a radioligantes conhecidos.
Outro aspecto da invenção refere-se à inibição da atividade da quinase numa amostra biológica, cujo método compreende contatar dita amostra biológica com um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo dito composto. 0 termo "amostra biológica", conforme aqui utilizado, significa uma amostra in vitro ou ex-vivo, incluindo, sem limitação, culturas celulares ou seus extratos; material biopsiado obtido de um mamífero ou seus extratos; e sangue, saliva, urina, fezes, sêmen, lágrimas ou outros fluidos corporais ou seus extratos. A inibição da atividade da quinase numa amostra biológica é útil para uma variedade de objetivos conhecidos pelo habilitado na técnica. Exemplos de tais objetivos incluem, porém não se restringem à transfusão de sangue, armazenamento de amostra biológica para transplante de órgão, e ensaios biológicos. A inibição da atividade da quinase numa amostra biológica é também útil para o estudo de quinases em fenômenos biológicos e patológicos, para o estudo de vias de transdução de sinal intracelular mediado por tais quinases, e para a avaliação comparativa de novos inibidores de quinase.
Os inibidores da proteína Aurora quinase ou de seus sais farmacêuticos podem ser formulados em composições farmacêuticas para administração em animais ou humanos. Essas composições farmacêuticas, que compreendem uma quantidade do inibidor da proteína Aurora eficaz para tratar ou prevenir uma condição mediada por Aurora e um portador farmaceuticamente aceitável, são outra concretização da presente invenção.
O termo "condição mediada por Aurora" ou "doença mediada por Aurora" conforme aqui utilizado, significa qualquer doença ou outra condição nociva a saúde na qual a Aurora (Aurora A, Aurora B e Aurora C) é conhecida por desempenhar alguma função. Tais condições incluem, sem limitação, câncer, distúrbios proliferativos, e distúrbios mieloproliferativos.
Exemplos de distúrbios mieloproliferativos incluem, porém não se restringem a policitemia vera, trombocitemia, metaplasia mielóide com mielofibrose, leucemia mielógena crônica (CML), leucemia mielomonocítica crônica, síndrome hipereosinofílica, leucemia mielomonocítica juvenil, e doença mastocitária sistêmica.
O termo "câncer" também inclui, porém não se restringe aos seguintes tipos de câncer: epidermóide Oral: cavidade bucal, lábios, língua, boca, faringe; Cardíaco: sarcoma (angiosarcoma,fibrosarcoma,rabdomiosarcoma, liposarcoma), mixoma, rabdomioma, fibroma, lipoma e teratoma; Pulmão: carcinoma broncogênico (de célula escamosa ou epidermóide, indiferenciado de pequenas células,indiferenciado de grandes células, adenocarcinoma), carcinoma alveolar (bronquiolar), adenoma bronquial, sarcoma, linfoma, hamartoma condromatoso, mesotelioma; Gastrointestinal: esôfago (carcinoma de células escamosas, laringe, adenocarcinoma, leiomiosarcoma, linfoma), estômago (carcinoma, linfoma, leiomiosarcoma) , pâncreas (adenocarcinoma ductal, insulinoma, glucagonoma, gastrinoma, tumores carcinóides, vipoma), intestino grosso e delgado (adenocarcinoma, linfoma, tumores carcinóides, sarcoma de Kaposi, leiomioma, hemangioma, lipoma, neurofibroma, fibroma), intestino grosso (adenocarcinoma, adenoma tubular, adenoma viloso, hamartoma, leiomioma), cólon, cólon-reto, colorretal; reto. Trato Genito-urinário: rins (adenocarcinoma, tumor de Wilm [nefroblastoma], linfoma, leucemia), bexiga e uretra (carcinoma de células escamosas, carcinoma celular transitório, adenocarcinoma) , próstata (adenocarcinoma, sarcoma), testículo (seminoma, teratoma, carcinoma embrionário, teratocarcinoma, coriocarcinoma, sarcoma, carcinoma celular intersticial, carcinoma, fibroma, fibroadenoma, tumores adenomatóides, lipoma); Fígado: hepatoma (carcinoma hepatocelular) , colangiocarcinoma, hepatoblastoma, angiosarcoma, adenoma hepatocelular, hemangiona, vias biliares; Ósseo: sarcoma osteogênico (osteosarcoma) , fibrosarcoma, histiocitoma fibroso maligno, condrosarcoma, sarcoma de Ewing, linfoma maligno (sarcoma de célula reticular), mieloma múltiplo, tumor maligno de célula gigante, cordoma, osteocondroma, (exostoses osteocartilaginosas) , condroma benigno, condroblastoma, condromixofibroma, osteoma osteóide e tumores de célula gigante; Sistema Nervoso Central: Esqueleto (osteoma, hemangioma, granuloma, xantoma, osteíte deformante), meninges (meningioma, meningiosarcoma, gliomatose), cérebro (astrocitoma, meduloblastoma, glioma, ependimoma, germinoma [pinealoma] , glioblastoma multiforme, oligodendroglioma, schwanoma, retinoblastoma, tumores congênitos), medula espinhal, neurofibroma, meningioma, glioma, sarcoma); Ginecológico: útero (carcinoma endometrial), colo do útero (carcinoma cervical, displasia cervical pré- tumoral), ovários (carcinoma ovariano [cistadenocarcinoma seroso, cistadenocarcinoma mucinoso, carcinona não classificado], tumores de células granulosas-teçais, tumores de células de Sertoli-Leydig, disgerminoma, teratoma maligno) , vulva (carcinoma de célula escamosa, carcinoma intraepitelial, adenocarcinoma, fibrosarcoma, melanoma), vagina (carcinoma de células claras, carcinoma de células escamosas, sarcoma botrióide (rabdomiosarcoma embrionário) , trompas de Falópio (carcinoma) , mama; Hematológico: sangue (leucemia mielóide[aguda e crônica], leucemia Iinfoblástica aguda, leucemia linfocítica crônica, doenças mieloproliferativas, mieloma múltiplo, síndrome mielodisplásica); doença de Hodgkin, linfoma não-Hodgkin [linfoma maligno] célula pilosa; distúrbios linfóides; Pele: melanoma maligno, carcinoma de célula basal, carcinoma de célula escamosa, sarcoma de Kaposi, ceratoacantoma, nevo displásico (mola), lipoma, angioma, dermatofibroma, quelóides, psoríase; Glândula Tireóide: carcinoma papilar da tireóide, carcinoma folicular da tireóide; carcinoma medular da tireóide, câncer de tireóide indiferenciado, neoplasia endócrina múltipla tipo 2A, neoplasia endócrina múltipla tipo 2B, câncer medular de tireóide familiar, feocromocitoma, paraganglioma; e Glândulas Supra-Renais: neuroblastoma. Assim, o termo "célula cancerosa", conforme aqui citado, inclui uma célula afetada por qualquer uma das condições acima identificadas. Em algumas concretizações, o câncer é selecionado de colorretal, tireóide, ou câncer de mama. Em algumas concretizações, os compostos da presente invenção são úteis para tratar câncer, tais como colorretal, tireóide, de mama, e câncer de pulmão; e distúrbios mieloproliferativos, tais como policitemia vera, trombocitemia, metaplasia mielóide com mielofibrose, leucemia mielógena crônica, leucemia mielomonocítica crônica, síndrome hipereosinofílica, leucemia mielomonocítica juvenil, e doença mastocitária sistêmica.
Em algumas concretizações, os compostos da presente invenção são úteis para tratar distúrbios hematopoiéticos, em especial, leucemia mielógena aguda (AML), leucemia mielógena crônica (CML), leucemia promielocítica aguda (APL), e leucemia linfocítica aguda (ALL).
Além dos compostos da presente invenção, derivados ou profármacos farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da presente invenção podem também ser empregados em composições para tratar ou prevenir os distúrbios acima identificados.
Um "derivado ou profármaco farmaceuticamente aceitável" significa qualquer éster, sal de um éster farmaceuticamente aceitável ou outro derivado de um composto da presente invenção que, mediante administração a um receptor, é capaz de prover, seja direta ou indiretamente, um composto da presente invenção ou metabólito inibitoriamente ativo ou seu resíduo. Tais derivados ou profármacos incluem os que aumentam a biodisponibilidade dos compostos da presente invenção, quando tais compostos são administrados a um paciente (ex: permitindo que um composto administrado oralmente seja mais facilmente absorvido pela corrente sangüínea) ou que aumentam a liberação do composto original para um compartimento biológico (ex: cérebro ou sistema linfático) em relação às espécies originais.
Exemplos de profármacos farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da presente invenção incluem, sem restrição, ésteres, ésteres de aminoácido, ésteres de fosfato, sais metálicos e ésteres de sulfonato.
Os compostos da presente invenção podem existir na forma livre para tratamento, ou, quando apropriado, como um sal farmaceuticamente aceitável.
Conforme aqui utilizado, o termo "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se a sais de um composto que são, no escopo de critério médico confiável, adequados para uso em contato com os tecidos de humanos e animais inferiores sem toxicidade, irritação, resposta alérgica indevidas e similares, e são proporcionais à razoável relação risco/benefício.
Sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da presente invenção incluem os derivados de ácidos e bases inorgânicos e orgânicos. Esses sais podem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação final dos compostos. Sais de adição de ácido podem ser preparados 1). reagindo-se o composto purificado na sua forma em base livre com um ácido orgânico ou inorgânico apropriado e 2). isolando-se o sal assim formado.
Exemplos de sais de adição de ácido apropriados incluem acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, benzenossulfonato, bissulfato, butirato, citrato, canforato, canforsulfonato, ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanossulfonato, formiato, fumarato, glucoheptanoato, glicerofosfato, glicolato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, cloridrato, bromidrato, iodidrato, 2-hidroxietanossulfonato, lactato, maleato, malonato, metanossulfonato, 2- naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, palmoato, pectinato, perssulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, salicilato, succinato, sulfato, tartarato, tiocianato, tosilato e undecanoato. Outros ácidos, tais como oxálico, embora não sejam por si próprios farmaceuticamente aceitáveis, podem ser empregados na preparação de sais úteis como intermediários para obter compostos da invenção e seus sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis.
Sais de adição de base podem ser preparados 1). reagindo- se o composto purificado em sua forma ácida com uma base orgânica ou inorgânica apropriada e 2). isolando-se o sal assim formado.
Sais derivados de bases apropriadas incluem sais metálicos alcalinos (ex: sódio e potássio), sais metálicos alcalinoterrosos (ex: magnésio), amônio e N+(alquila C1-4)4. A presente invenção também prevê a quaternização de quaisquer grupos básicos contendo nitrogênio dos compostos aqui descritos. Produtos solúveis em água ou óleo ou dispersíveis podem ser obtidos através de tal quaternização.
Sais de adição de base também incluem sais metálicos alcalinos ou metálicos alcalinoterrosos. Sais metálicos alcalinos ou metálicos alcalinoterrosos incluem sódio, lítio, potássio, cálcio, magnésio e similares. Outros sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, quando apropriado, cátions atóxicos de amônio, amônio quaternário e de amina formados utilizando contra-íons tais como haleto, hidróxido, carboxilato, sulfato, fosfato, nitrato, sulfonato de alquila inferior e sulfonato de arila. Outros ácidos e bases, embora não sejam por si próprios farmaceuticamente aceitáveis, podem ser empregados na preparação de sais úteis como intermediários na obtenção dos compostos da invenção e seus sais de adição de ácido ou de base farmaceuticamente aceitáveis. Portadores farmaceuticamente aceitáveis que podem ser usados nessas composições farmacêuticas incluem, porém não se restringem a trocadores iônicos, alumina, estearato de alumínio, lecitina, proteínas séricas, tais como albumina sérica humana, substâncias tampão tais como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potássio, misturas glicerídicas parciais de ácidos graxos vegetais saturados, água, sais ou eletrólitos, tais como sulfato de protamina, hidrogeno fosfato dissódico, hidrogeno fosfato de potássio, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trisilicato de magnésio, polivinil pirrolidona, substâncias à base de celulose, polietileno glicol, carboximetilcelulose sódica, poliacrilatos, ceras, polímeros em bloco de polietileno-polioxipropileno, polietileno glicol e gordura de lã.
As composições da presente invenção podem ser administradas oralmente, parenteralmente, através de inalação por pulverização, topicamente, retalmente, nasalmente, bucalmente, vaginalmente ou através de um reservatório implantado. 0 termo "parenteral", conforme aqui utilizado, inclui injeção subcutânea, intravenosa, intramuscular, intra-articular, intra-sinovial, intraesternal, intratecal, intraperitoneal, intrahepática, intralesional e intracraniana ou técnicas de infusão.
Formas injetáveis estéreis das composições da presente invenção podem ser uma suspensão aquosa ou oleaginosa. Essas suspensões podem ser formuladas de acordo com as técnicas conhecidas no estado da técnica utilizando agentes de dispersão ou umectantes apropriados e agentes de suspensão. A preparação injetável estéril pode também ser uma solução ou suspensão estéril injetável num diluente ou solvente atóxico parenteralmente aceitável, por exemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser empregados estão a água, solução de Ringer e solução isotônica de cloreto de sódio. Além disso, óleos fixos estéreis são convencionalmente empregados como meio solvente ou de suspensão. Para essa finalidade, um óleo fixo suave pode ser empregado, incluindo os mono ou diglicerídeos sintéticos. Ácidos graxos, tais como ácido oleico e seus derivados de glicerídeo são úteis na preparação de injetáveis, da mesma forma que os óleos naturais farmaceuticamente aceitáveis, tais como óleo de oliva ou óleo de rícino, especialmente em suas versões polioxietiladas. Essas soluções ou suspensões oleosas podem também conter um diluente ou dispersante alcoólico de cadeia longa, tais como carboximetil celulose ou agentes dispersantes similares que são comumente utilizados na formulação de formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis incluindo emulsões e suspensões. Outros surfactantes comumente utilizados, tais como os Tweens, Spans e outros agentes emulsificantes ou intensificadores de biodisponibilidade que são comumente utilizados na fabricação de formas de dosagem sólidas, líquidas ou outras formas de dosagem farmaceuticamente aceitáveis podem também ser usados para fins da formulação.
As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser oralmente administradas em qualquer forma de dosagem oralmente aceitável inclusive, porém não restrito a cápsulas, comprimidos, suspensões ou soluções aquosas. No caso de comprimidos para uso oral, portadores comumente utilizados podem incluir lactose e amido de milho. Agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, podem também ser adicionados. Para administração oral na forma de cápsula, diluentes úteis podem incluir lactose e amido de milho seco. Quando suspensões aquosas são necessárias para uso oral, o ingrediente ativo pode ser combinado com agentes emulsificantes e de suspensão. Se desejado, certos agentes adoçantes, aromatizantes ou corantes podem também ser adicionados.
Alternativamente, as composições farmacêuticas da presente invenção podem ser administradas na forma de supositórios para administração retal. Estes podem ser preparados misturando-se o agente com um excipiente não irritante apropriado que seja sólido â temperatura ambiente, mas líquido à temperatura retal de forma a se derreter no reto para liberação do fármaco. Tais materiais podem incluir manteiga de cacau, cera de abelhas e polietileno glicóis.
As composições farmacêuticas da presente invenção podem também ser administradas topicamente, especialmente quando o alvo de tratamento inclui áreas ou órgãos de fácil acesso pelas aplicações tópicas, incluindo doenças dos olhos, pele, ou do trato intestinal inferior. Formulações tópicas apropriadas podem ser preparadas para cada uma dessas áreas ou órgãos.
A aplicação tópica no trato intestinal inferior pode ser efetuada numa formulação de supositório retal (vide acima) ou numa formulação de enema apropriada. Adesivos transdérmicos topicamente podem também ser usados. Para aplicações tópicas, as composições farmacêuticas podem ser formuladas numa pomada apropriada contendo o componente ativo suspenso ou dissolvido em um ou mais portadores. Portadores para administração tópica dos compostos da presente invenção podem incluir, porém não se restringem a óleo mineral, petrolato líquido, petrolato branco, composto de propileno glicol, polioxietileno, polioxipropileno, cera emulsificante e água. Alternativamente, as composições farmacêuticas podem ser formuladas numa loção ou creme adequado contendo os componentes ativos suspensos ou dissolvidos em um ou mais portadores farmaceuticamente aceitáveis. Portadores apropriados podem incluir, porém não se restringem a óleo mineral, monoestearato de sorbitan, polisorbato 60, cera de cetil ésteres, álcool cetearílico, 2-octildodecanol, álcool benzílico e água. Para uso oftálmico, as composições farmacêuticas podem ser formuladas na forma de suspensões micronizadas em solução salina estéril isotônica de pH ajustado, ou na forma de soluções em solução salina estéril isotônica com pH ajustado, com ou sem preservativo tal como cloreto de benzilalcônio. Alternativamente, para usos oftálmicos, as composições farmacêuticas podem ser formuladas numa pomada tal como petrolato.
As composições farmacêuticas da presente invenção podem também ser administradas através de aerosol ou inalação nasal. Tais composições podem ser preparadas como soluções em solução salina, empregando álcool benzílico ou outros preservativos, promotores de absorção para aumentar a biodisponibilidade, fluorocarbonetos, e/ou outros agentes solubilizantes ou dispersantes convencionais.
A quantidade de inibidor de quinase que pode ser combinada com os materiais portadores para produzir uma forma de dosagem única variará dependendo do hospedeiro tratado, do modo específico de administração e da indicação. Em uma concretização, as composições devem ser formuladas de forma que uma dosagem entre 0,01 - 100 mg/kg peso corporal/dia do inibidor possa ser administrada a um paciente recebendo essas composições.
Em outra concretização, as composições devem ser formuladas de forma que uma dosagem entre 0,1 - 100 mg/kg de peso corporal/dia do inibidor possa ser administrada a um paciente recebendo essas composições.
Deve ficar entendido que uma dosagem e regime de tratamento específicos para qualquer paciente em particular dependerá de uma variedade de fatores, inclusive da atividade do composto específico empregado, da faixa etária, peso corporal, saúde geral, sexo, dieta, tempo de administração, taxa de excreção, combinação farmacológica, e do critério do médico responsável e da gravidade da doença específica que estiver sendo tratada. A quantidade de inibidor também dependerá do composto específico na composição.
De acordo com outra concretização, a invenção provê métodos para tratar ou prevenir câncer, um distúrbio proliferativo ou um distúrbio mieloproliferativo compreendendo a etapa de administrar a um paciente um dos compostos ou composições farmacêuticas aqui descritas. O termo "paciente", conforme aqui utilizado, significa um animal, incluindo um ser humano.
Em algumas concretizações, dito método é usado para tratar ou prevenir um distúrbio hematopoiético, tal como leucemia mielógena aguda (AML), leucemia promielocítica aguda (APL), leucemia mielógena crônica (CML), ou leucemia linfocítica aguda (ALL).
Em outras concretizações, dito método é utilizado para tratar ou prevenir distúrbios mieloproliferativos, tais como policitemia vera, trombocitemia, metaplasia mielóide com mielofibrose, leucemia mielógena crônica (CML), leucemia mielomonocítica crônica, síndrome hipereosinofílica, leucemia mielomonocítica juvenil e doença mastocitária sistêmica. Em outras concretizações ainda, dito método é utilizado para tratar ou prevenir câncer, tais como câncer de mama, cólon, próstata, pele, pâncreas, cérebro, trato genito- urinário, sistema linfático, estômago, laringe e pulmão, incluindo adenocarcinoma pulmonar, câncer pulmonar de pequenas células, e câncer pulmonar não de pequenas células.
Outra concretização provê um método para tratar ou prevenir câncer, compreendendo a etapa de administrar a um paciente um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo dito composto.
Outro aspecto da invenção refere-se a inibir a atividade de quinase num paciente, cujo método compreende administrar ao paciente um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo dito composto. Em algumas concretizações, dita quinase é uma Aurora quinase (Aurora A, Aurora B, Aurora C) , Abl, Abl(T315I), Arg, FLT-3, JAK- 2, MLKl, PLK4, Tie2, ou TrkA.
Dependendo das condições específicas a serem tratadas ou prevenidas, fármacos adicionais podem ser administrados juntamente com os compostos da presente invenção. Em alguns casos, esses fármacos adicionais são normalmente administrados para tratar ou prevenir a mesma condição. Por exemplo, os agentes quimioterápicos ou outros agentes anti-proliferativos podem ser combinados com os compostos da presente invenção para tratar doenças proliferativas. Outro aspecto da presente invenção é dirigido para um método para tratar câncer num indivíduo necessitado do mesmo, compreendendo a administração seqüencial ou a co- administração de ura composto da presente invenção ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e outro agente terapêutico. Em algumas concretizações, dito agente terapêutico adicional é selecionado de um agente antineoplásico, agente anti-proliferativo, ou de um agente quimioterápico.
Em algumas concretizações, dito agente terapêutico adicional é selecionado de camptotecina, o inibidor de MEK: U0126, um inibidor de KSP (proteína de fuso tipo cinesina), adriamicina, interferons, e derivados de platina, tal como Cisplatina.
Em outras concretizações, dito agente terapêutico adicional é selecionado de taxanos, inibidores de bcr-abl (tal como Gleevec, dasatinibe, e nilotinibe); inibidores de EGFR (tal como Tarceva e Iressa) ; agentes danificadores de DNA (tal como cisplatina, oxaliplatina, carboplatina, inibidores de topoisomerase, e antraciclinas) ; e anti-metabólitos (tal como AraC e 5- FU) .
Em outras concretizações ainda, dito agente terapêutico adicional é selecionado de camptotecina, doxorrubicina, idarubicina, cisplatina, taxol, taxotere, vincristina, tarceva, o inibidor de MEK, U0126, um inibidor de KSP, vorinostat, Gleevec, dasatinibe e nilotinibe. Em outra concretização, dito agente terapêutico adicional é selecionado de inibidores de Her-2 (tal como Herceptina); inibidores de HDAC (tal como vorinostat), inibidores de VEGFR (tal como Avastin), inibidores de c- KIT e FLT-3 (tal como sunitinibe) inibidores de BRAF (tal como BAY 43-9006 da Bayer), inibidores de MEK (tal como o PD0325901 da Pfizer) ; venenos do fuso (tal como Epothilonas e partículas de paclitaxel ligadas a proteína (tal como Abraxane®).
Outras terapias ou agentes antineoplásicos que podem ser usados em combinação com os agentes antineoplásicos da invenção da presente invenção incluem cirurgia, radioterapia (em alguns exemplos, radiação gama, radioterapia por feixe de neutrons, radioterapia por feixe de elétrons, terapia protônica, braquiterapia, e isótopos radioativos sistêmicos, para citar alguns), terapia endócrina, modificadores de resposta biológica (interferons, interleucinas, e fator de necrose tumoral (TNF) para citar alguns) , hipertermia e crioterapia, agentes para atenuar quaisquer efeitos adversos (ex: antieméticos), e outros fármacos quimioterápicos aprovados, inclusive, porém não restritos a fármacos alquilantes (mecloretamina, clorambucil, ciclofosfamida, Melfalan, Ifosfamida) , antimetabólitos (Metotrexate) , antagonistas de purina e antagonistas de pirimidina (6- mercaptopurina, 5-Fluorouracil, Cytarabile, Gemciutabine) , venenos do fuso (Vinblastina, Vincristina, Vinorelbina, Paclitaxel) , podofilotoxinas (Etoposídeo, Irinotecan, Topotecan) , antibióticos (Doxorubicina, Bleomicina, Mitomicina), nitrosouréias (Carmustina, Lomustina), íons inorgânicos (Cisplatina, Carboplatina), enzimas (Asparaginase) , e hormônios (Tamoxifeno, Leuprolida, Flutamida, e Megestrol), Gleevec™, dexametasona, e ciclofosfamida.
Um composto da presente invenção pode também ser útil para tratar câncer em combinação com os seguintes agentes terapêuticos: abarelix (Plenaxis depot ); aldesleucina (Prokine ®) ; Aldesleukin (Proleukin ) ; Alemtuzumabb (Campath ®) ; alitretinoma (Panretin ) ; alopurinol (Zyloprim ® ); altretamina (Hexalen®); amifostina (Ethyol®); anastrozol (Arimidex®); trióxido arsênico (Trisenox® ); asparaginase (Elspar ); azacitidina (Vidaza®); bevacuzimab (Avastin®); cápsulas de bexaroteno (Targretin®); gel de bexaroteno (Targretin®); bleomicina (Blenoxane® ); bortezomib (Velcade ); busulfan intravenoso (Busulfex®); busulfan oral (Myleran®); calusterona (Methosarb®); capecitabina (Xeloda®); carboplatina (Paraplatin® ); carmustina (BCNU , BiCNU ); carmustina (Gliadel®); carmustina com Polifeprosan 20 Implante (Gliadel Wafer ®); celecoxibe (Celebrex ); cetuximabe (Erbitux® ) ; clorambucil (Leukeran ) ; cisplatina (Platinol ®); cladribina (Leustatin , 2-CdA ); clofarabina (Clolar®); ciclofosfamida (Cytoxan®, Neosar®); ciclofosfamida (Cytoxan Injection®); ciclofosfamida (Cytoxan Tablet ®) ; citarabina (Cytosar-U ) ; citarabma liposomal (DepoCyt®) ; dacarbazina (DTIC-Dome®) ; dactinomicina, actinomicina D (Cosmegen ); Darbepoetin alfa (Aranesp®); daunorubicina lipossômica (DanuoXome®); daunorubicina, daunomicina (Daunorubicin®); daunorubicina, daunomicina (Cerubidine®); Denileukin diftitox (Ontak®); dexrazoxano (Zinecard®); docetaxel (Taxotere®); doxorubicina (Adriamycin PFS®); doxorubicina (Adriamycin, Rubex®); doxorubicina (Adriamycin PFS Injection®); doxorubicina lipossômica (Doxil); propionato de dromostanolona (dromostanolone); propionato de dromostanolona (Masterone injection®); Solução de Elliotfs B (Elliott'S B Solution®); epirubicina (Ellence®); Epoetina alfa (epogen®); erlotinibe (Tarceva®); estramustina (Emcyt®); fosfato de etoposídeo (Etopophos®); etoposídeo, VP-16 (Vepesid®); exemestano (Aromasin®); Filgrastim (Neupogen®); floxuridina (intraarterial) (FUDR®); fludarabina (Fludara®); fluorouracil, 5-FU (Adrucil®); fulvestrant (Faslodex®); gefitinibe (Iressa®); gemcitabina (Gemzar®); gemtuzumab ozogamicina (Mylotarg®); acetato de goserelina (Zoladex Implant®); acetato de goserelina (Zoladex®); acetato de histrelina (Histrelin implant®); hidroxiuréia (Hydrea®); Ibritumomab Tiuxetan (Zevalin®); idarubicina (Idamycin®); ifosfamida (IFEX®) ; mesilato de imatinibe (Gleevec®); interferon alfa 2a (Roferon A®); Interferon alfa-2b (Intron A®); irinotecan (Camptosar®); lenalidomida (Revlimid®); letrozol (Femara®); leucovorin (Wellcovorin®, Leucovorin®); Acetato de Leuprolide (Eligard®); levamisol (Ergamisol®); lomustina, CCNU (CeeBU®); mecloretamina, mostarda de nitrogênio (Mustargen®); acetato de megestrol (Megace®); melfalan, L-PAM (Alkeran®); mercaptopurina, 6-MP (Purinethol®); mesna (Mesnex®); mesna (Mesnex tabs®); metotrexato (Methotrexate®); metoxsalen (Uvadex®); mitomicina C (Mutamycin®); mitotano (Lysodren®); mitoxantrona (Novantrone ); fenpropionato de nandrolona (Durabolin- 50®); nelarabina (Arranon®); Nofetumomab (Verluma®); Oprelvekin (Neumega®); oxaliplatina (Eloxatin®); paclitaxel (Paxene®); paclitaxel (Taxol ); partículas de paclitaxel ligadas a proteína (Abraxane®); palifermin (Kepivance®); pamidronato (Aredia®); pegademase (Adagen (Pegademase Bovine)®); pegaspargase (Oncaspar®); Pegfilgrastim (Neulasta ); pemetrexed dissodico (Alimta®); pentostatina (Nipent®); pipobroman (Vercyte®); plicamicina, mitramicina (Mithracin ); porfimer sódico (Photofrin®); procarbazina (Matulane®); quinacrina (Atabrine® ); Rasburicase (Elitek® ); Rituximab (Rituxan ); sargramostim (Leukine®) ; Sargramostim (Prokine®) ; sorafenib (Nexavar®) ; estreptozocina (Zanosar®) ; maleato de sunitinibe (Sutent®) ; talco(Sclerosol®); tamoxifeno (Nolvadex® ); temozolomida (Temodar® ); teniposideo, VM-26 (Vumon®); testolactona (Teslac®); tioguanina, 6-TG (Thioguanine®) ; tiotepa (Thioplex®) ; topotecan (Hycamtin® ) ; toremifeno (Fareston® ) ; Tositumomab (Bexxar®); Tositumomab/I-131 tositumomab (Bexxar®); Trastuzumab (Herceptin ); tretinoina, ATRA (Vesanoid ); Uracil Mustard (Uracil Mustard Capsules®); valrubicina (Valstar® ) ; vinblastina (Velban® ) ; vincristina (Oncovin® ); vinorelbina (Navelbine® ); zoledronato (Zometa® ) e vorinostat (Zolinza® ).
Para uma discussão abrangente de terapias antineoplásicas consulte http://www.nci.nih.gov/, uma listagem de fármacos oncológicos aprovados pelo FDA em http://www.fda.gov/cder/cancer/druglistframe.htm, and The Merck Manual, Seventeenth Ed. 1999, cujos conteúdos são aqui incorporados por referência.
Outra concretização provê um uso simultâneo, separado ou seqüencial de uma preparação combinada.
Os agentes adicionais podem ser administrados separadamente, como parte de um regime de dosagem múltiplo do composto ou da composição contendo inibidor de quinase. Alternativamente, esses agentes podem fazer parte de uma forma de dosagem única, misturado com o inibidor de quinase numa composição única.
Para que a presente invenção seja melhor compreendida, os seguintes exemplos preparatórios e de teste são descritos abaixo. Esses exemplos são para fins de ilustração apenas, não devendo ser interpretados como restringindo o escopo da invenção em nenhum aspecto. Todos os documentos aqui citados são aqui incorporados por referência.
EXEMPLOS
Conforme aqui utilizado, o termo "Rt(min)" refere-se ao tempo de retenção de HPLC, em minutos, associado com o composto. Salvo se indicado de outra forma, o método de HPLC utilizado para obter o tempo de retenção relatado é o seguinte:
Coluna : Coluna ACE C8, 4,6 χ 150 mm
Gradiente: 0-100% acetonitrila+metanol 60:40 (20 mM Tris fosfato)
Taxa de escoamento : 1,5 ml/minuto Detecção: 225 nm.
Amostras de espectrometria de massa foram analisadas num espectrômetro de massa MicroMass Quattro Micro operado num modo MS simples com ionização por eletropulverização. As amostras foram introduziddas no espectrômetro de massa utilizando cromatografia. A fase móvel para todas as análises de espectrometria de massa consistia de 10 mM acetato de amônio pH 7 e uma mistura 1:1 de acetonitrila- metanol, as condições de gradiente de coluna foram de 5%- 100% acetonitrila-metanol durante um tempo de gradiente de 3,5 min e 5 mins de tempo de operação numa coluna ACE C8 3,0 χ 75 mm. Taxa de escoamento foi de 1,2 ml/min. Os espectros 1H-NMR foram registrados a 400 MHz utilizando um instrumento Bruker DPX 400. Os compostos seguintes de fórmula I foram preparados e analisados como segue.
Exemplo 1
<formula>formula see original document page 36</formula>
N- (4- (4,6-dicloropirimidin-2-iltio)fenil)ciclopentano carboxamida
Uma solução de 4,6-dicloro-2-(metilsulfonil)pirimidina (1/96g, 8, 69 mmol)e N- (4- mercaptofenil)ciclopentanocarboxamida (2,06g, 8,69 mmol) em acetonitrila (40 ml) foi resfriada até 0°C. Trietilamina (0,88g, 8,69 mmol, 1,21 ml) foi adicionada gota a gota e a solução agitada durante 10 min a 0°C durante 10 min e então à temperatura ambiente durante 2 horas. Água (15 ml) foi adicionada e a suspensão filtrada, lavada com água (30 ml) e então secada para dar o composto título na forma de um sólido amarelo-pálido (1,87g, 49%)
IHNMR (DMS0-d6) 1.50- 1.61 (2H, m) , 1.65 - 1.78 (4H, m) , 1.82 - 1.93 (2H, m) , 2.76 - 1.82 (1H, m) , 7.52 (2H, d), 1.70 - 1.75 (3H, m), 10.08 (1H, s). ES+ 368.
Exemplo 2
<formula>formula see original document page 37</formula>
N- (4- (4- (3-metil-lH-pirazol-5-ilamino) -6-cloropirimidin- 2-iltio)fenil) ciclopentanocarboxamida
A uma solução de 3-metil-ΙΗ-pirazol-5-amina (160 mg, 1.63 mmol) e N-(4-(4 , 6-dicloropirimidin-2- iltio)fenil)ciclopentano carboxamida (600 mg, 1.63 mmol) em dimetil formamida (10 ml) adicionou-se diisopropiletilamina (248 mg, 1.96 mmol, 0.34 ml) . A mistura foi então aquecida até 80°C durante 18 horas e deixada resfriar até temperatura ambiente. EtOAc (40 ml) foi adicionado e lavado com salmoura, secado (MgSO4) e concentrado em vácuo. O produto bruto foi então purificado através de cromatografia de flasheamento 7:3 EtOAc:hexano E EtOAc JE 5% MeOHrEtOAc para dar um composto título na forma de um sólido esbranquiçado (431 mg, 62%) . IH NMR (DMS0-d6) 1.50 - 1.55 (2H, m) , 1.61 - 1.78 (4H, m) , 1.79 - 1.85 (2H, m) , 1.90 (3H, brs) , 2.72 - 1.81 (1H, m) , 5.21 (1H ,brs), 6.46 (1H, brs), 7.52 (2H, d), 7.78 (2H, d), 10.11 (1H, s), 10.18 (1H, brs), 11.95 (1H, brs). ES+ 429. Exemplo 3
<formula>formula see original document page 38</formula>
N- (4- ( (4- (3-metil-lH-pirazol-5-ilamino)-6-(3-ciclopropil- 3-hidroxiazetidin-1-il)pirimidin-2- il)sulfanil)fenil)ciclopentanocarboxamida (1-9)
A uma suspensão de N-(4-(4-(3-metil-lH-pirazol-5- ilamino)-6-cloropirimidin-2-iltio)fenil)
ciclopentanocarboxamida (200 mg, 0.47 mmol) e cloridrato de 3-ciclopropil azetidin-3-ol (70 mg, 0.47 mmol) em n- BuOH (5 ml) adicionou-se diisopropiletilamina (239 mg, 1.88 mmol, 0.30 ml) . A mistura foi aquecida até 100°C durante 16 horas e então deixada esfriar até temperatura ambiente e diluída com EtOAc (30 ml) e NaHCO-3 sat. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada (Na2SO4) e concentrada. 0 produto bruto foi então purificado através de cromatografia de flasheamento EtOAc E 5% MeOH: EtOAc para dar o composto título na forma de um sólido esbranquiçado.(70 mg, 30%). IH NMR (DMS0-d6) 0.30 - 0.35 (2H, m) , 0.39 - 0.44 (2H, m) , 1.16 - 1.21 (1H, m) , 1.56 - 1.75 (6H, m) , 1.83 - 1.90 (2H, m) , 2.00 (3H, s) , 2.76 - 2.82 (1H, m) , 3.65 (4H, dd) , 5.35 (1H, s),. 5.58 (1H, s) , 7.47 (2H, d), 7.72 (2H, d), 9.19 (1H, s) , 10.06 (1H, s), 11.65 (1H, s). ES+ 506.
A Tabela 2 abrixo mostra dados para certos compostos representativos preparados de acordo com o método descrito no Esquema I e nos Exemplos 1-3. Os números de composto correspondem aos compostos mostrados na Tabela 1. <table>table see original document page 39</column></row><table> <table>table see original document page 40</column></row><table> <table>table see original document page 41</column></row><table> 6-Cloro-N- (3-metil-lH-pirazol-5-il) -2-metiltio)pirimidin- 4-amina
A uma solução agitada de 4,6-dicloro-2- (metiltio)pirimidina (25 g, 0.128 mol) em DMF (100 ml)adicionou-se diisopropilamina (19.8 g, 0.154 mol) seguido de 3-amino-5-metilpirazol (13.7 g, 0.154 mol) em porções durante 10 minutos. A solução foi aquecida até 50°C durante 16 horas, após o que todo material de partida foi reagido (através de análise por LC/MS). A mistura foi resfriada até temp. ambiente e despejada em água (250 ml) . O precipitado foi filtrado e o sólido úmido transformado em pasta em dietil éter (300 ml) . O sólido foi novamente filtrado e novamente transformado em pasta em metanol (100 ml) . O produto filtrado foi secado ao ar no sinterizador, e então novamente secado sob vácuo o que deu o composto título na forma de um sólido esbranquiçado (22.lg, rendimento 66%). 1H NMR (d6-DMS0) δ 2.22 (3H, s, CH3), 3.31 (3H, s, CH3), 6.00-7.50 (2H, br, CH), 10.17 (1H, s, NH), 12.10 (1H, s, NH); MS ES + 256.08, ES - 254.25.
<formula>formula see original document page 42</formula>
6-cloro-N-(3-metil-lH-pirazol-5-il) -2- (metilsulfonil) pirimidin-4-amina
A uma suspensão agitada de 6-cloro-N-(3-metil-lH-pirazol- 5-il)-2-(metilsulfinil)pirimidin-4-amina (8 g, 31.2 mmol) em metanol (200 ml) a 0°C adicionou-se uma suspensão de Oxone (44 g, 71.7 mmol) em água (100 ml) em porções durante 10 minutos. A mistura foi agitada durante 30 minutos a 0o C e então aquecida até temperatura ambiente e agitada por mais 2 horas. A mistura de reação foi filtrada e o sólido resultante transformado em pasta em bicarbonato de sódio aquoso. A mistura foi filtrada e o sólido lavado com água, e então dietil éter. O sólido foi transformado em pasta em acetato de etila, filtrado e secado o que deu o composto título na forma de um sólido esbranquiçado (7.9 g, 88%); 1H NMR (d6-DMS0) δ 2.24 (3H, s), 3.35 (3H, s), 5.85 (0.5H, brs) , 6.50 (0.5H, brs), 6.95 (0.5H, brs), 8.00 (0.5H, brs), 10.95 (1H, s), 12.28 (1H, s); MS ES + 288.07, ES - 286.25.
<formula>formula see original document page 43</formula>
N- (4- (4- (3-metil-1Η-pirazol-5-ilamino)-6-cloropirimidin- 2-iltio)-3 -fluorofenil)ciclopropanocarboxamida
Uma solução de N-(3-fluoro-4-mercaptofenil)ciclopropano- carboxamida (1.0 g, 4.8 mmol) e 6-cloro-N-(3-metil-IH- pirazol-5-il)-2-(metilsulfonil)pirimidin-4-amina (1.4 g, 4.8 mmol) em t-butanol (10 ml) foi aquecida até 70°C durante 18 h. A mistura de reação resfriada até temperatura ambiente foi então diluída com EtOAc (60 ml), lavada com solução sat. de NaHCO3 (30 ml), salmoura (30 ml), secada (MgSO4), filtrada e concentrada em vácuo. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de flasheamento sobre sílica (EtOAc/petrol 20 a 60%) para dar o composto título na forma de um sólido branco (800mg, 40%). ES+ 419.
N- (4- ((4- (3-metil-lH-pirazol-5-ilamino)-6-(3-ciclopropil- 3-hidroxiazetidin-1-il)pirimidin-2-il)sulfanil)-3- fluorofenil)ciclopropanocarboxamida (I-II)
Uma mistura de N-(4-(4-(3-metil-1H-pirazol-5-ilamino)-6- cloropirimidin-2-iltio)-3-fluorofenil)ciclopropano- carboxamida (160 mg, 0.38 mmol), cloridrato de 3- cicloropilazetidin-3-ol (70 mg, 0.49 mmol) e DIPEA (0.20 ml) em n-butanol (1.5 ml) foi aquecida em microondas a 13 OoC durante 1 h. A mistura de reação foi então resfriada até temperatura ambiente, diluída com EtOAc (20 ml), lavada com solução sat. de NaHC03 (10 ml), água (2 χ 10 ml) , salmoura (10 ml) , secada (MgS04) , filtrada e evaporada em vácuo. 0 produto bruto foi purificado através de cromatografia de flasheamento sobre sílica (EtOAc/Petrol 30 a 80 %) para dar o composto título na forma de um sólido branco (55 mg, 29%) . IH NMR (DMS0-d6) 0.33-0.36 (2 H, m) , 0.42-0.48 (2 H, m) , 0.82-0.86 (4 H, m) , 1.21-1.24 (2 H, m) , 1.85-1.89 (1 H, m) , 2.08 (3 H, s) , 2.10-2.15 (1 H, m) , 3.66-3.75 (4 H, m) , 5.42 (1 H, br s) , 5.67 (1 Η, 1 H, s) , 5.8 (1 H, br s) , 7.42 (1 H, d), 7.52-7.58 (1 H, m) , 7.75 (1 H, d), 9.27 (1 H, s) , 10.65 (1 H, s), 11.9 (1 H, br s). ES+ 496.90.
A Tabela 3 abaixo mostra dados para certos compostos representativos preparados de acordo com o método descrito no Esquema Geral (Método B) e no Exemplo 6. Os números do composto correspondem aos compostos mostrados na Tabela 1. Tabela 3
<table>table see original document page 44</column></row><table> Exemplo 5
<formula>formula see original document page 45</formula>
N-Benzidrilazetidin-3-ona
A uma pasta agitada de 1-(difenilmetil)-3- hidroxiazetidina (30g, 0.126 mol) em trietilamina (63g, 0.628 mol) adicionou-se uma solução de complexo de trióxido de enxofre piridina (60g, 0.376 mol) em DMSO
<formula>formula see original document page 45</formula>
anidro (300 ml) gota a gota durante 30 minutos. A mistura resultante foi aquecida até 50°C durante 30 minutos. A mistura de reação foi então resfriada até temperatura ambiente e despejada numa mistura de água (IL) e acetato de etila (800 ml) . A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com acetato de etila (3 χ 200 ml) . As soluções orgânicas combinadas foram então lavadas com água (3 χ 2 00 ml) , e então saturadas com salmoura (2 00 ml) , secadas (sulfato de magnésio) , filtradas e concentradas. 0 resíduo foi purificado sobre sílica gel, eluindo com acetato de etila/petrol 5-10%; O produto foi obtido na forma de um sólido branco (26.2g, 86%); 1H NMR CDCl3 δ 4.07 (4H, s) , 4.62 (1H, s) , 7.20-7.39 (6H, m) , 7.53 (4H, d).
Cloridrato de I-Benzidril-3-ciclopropilazetidin-3-ol Uma solução de brometo de ciclopropilmagnésio em THF(0.5M, 6OOml, 0.5 mol) foi esfriada até -78°C sob atmosfera de nitrogênio. A precipitação pareceu ocorrer nesta temperatura. Uma solução de N-benzidrilazetidin-3 - ona (24.2g, 0.102 mol) em THF anidro (130 ml) foi adicionada gota a gota durante 30 minutos. A mistura foi agitada por mais 90 minutos a -78°C após o que uma solução saturada de bicarbonato de sódio (400 ml) e água (100 ml) foram adicionadas lentamente. A mistura foi então diluída com acetato de etila (IL) e deixada aquecer até temperatura ambiente. A fase orgânica foi então separada (a camada aquosa era uma emulsão de sais de magnésio mas foi facilmente separada da camada orgânica) e a camada aquosa extraída com acetato de etila (3x300 ml). As soluções orgânicas combinadas foram então lavadas, saturadas com salmoura (300 ml) , secadas (sulfato de magnésio) , filtradas e concentradas para dar um óleo amarelo pálido. 0 produto bruto foi purificado sobre sílica gel, eluindo com acetato etila/petrol 20- 30%. O álcool resultante (28,3g) foi dissolvido em éter (350 ml) e a solução resfriada até 0°C. Uma solução de HCl em éter (2M, 13 0 ml) foi então adicionada gota a gota durante 15 minutos. 0 sal de HCl precipitou da solução. A pasta resultante foi agitada a 0°C por mais 10 minutos e então filtrada. A torta de filtro foi lavada com éter (2x100 ml) e o sólido secado sob vácuo o que deu o produto na forma de um sólido branco (28.2g, 88%); 1H NMR dg-DMSO δ 0.31-0.50 (4H, m) , 1.35 (0.3H, m) , 0.51 (0.7H, m) , 3.41-4.10 (5H, m) , 5.88 (0.3H, d), 6.05 (0.7H, d), 6.35 (1H, brs) , 7.30-7.50 (6H, m) , 7.61-7.82 (4H, m) ; ES + 280.71.
<formula>formula see original document page 46</formula>
Cloridrato de 1-Benzidril-3-ciclopropil-3-fluoroazetidina NaHCO3 saturado (100 ml) foi adicionado a uma suspensão de cloridrato de 1-Benzidril-3-ciclopropilazetidin-3-ol (7.78 g, 24.50 mmol) em acetato de etila (100 ml). A mistura foi transferida para um funil de separação e vigorosamente sacudida até que todo o sólido se dissolvesse. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa extraída com acetato de etila (50 ml) . Os extratos orgânicos combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados em óleo. 0 óleo foi dissolvido em diclorometano (100 ml) e resfriado até -78°C. Trifluoreto de [bis(2-metoxietil)amino]enxofre. (5.98 g, 27.05 mmol, 5.0 ml) foi adicionado gota a gota e a solução agitada durante 3 0 minutos a -78°C e então aquecido até O0C e agitado por mais 1 hora. A reação foi rapidamente resfriada com NaHCO3 sat. (50 ml) e salmoura (50 ml) e a camada aquosa extraída com diclorometano (50 ml) . Os extratos orgânicos combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados para dar um óleo amarelo. 0 produto bruto foi purificado sobre sílica gel, eluindo com acetato de etila/petrol 5%. 0 álcool resultante foi dissolvido em éter (100 ml) e a solução resfriada até 0o C. Uma solução de HCl em éter (2M, 25 . ml) foi então adicionada gota a gota durante 5 minutos. 0 sal de HCl precipitou da solução. A pasta resultante foi agitada a 0°C por mais 10 minutos e então filtrada. A torta do filtro foi lavada com éter (20 ml) e o sólido secado sob vácuo o que deu o produto na forma de um sólido branco (4.71 g, 61%). 1H NMR d4-MeOH δ 0.30-0.52 (4H, m) , 1.22 (1H, brs) , 4.01- 4.23 (4H, m) , 5.50-5.60 (1H, brs), 7.13-7.46 (10H, m) ; ES+ 282.
<formula>formula see original document page 47</formula>
Cloridrato de 3-ciclopropil-3-fluoroazetidina A paládio úmido a 10% sobre carbono (catalisador Degussa) sob nitrogênio adicionou-se etanol (100 ml) . Uma solução de cloridrato de l-Benzidril-3-ciclopropil-3- fluoroazetidina (6.74 g, 21.23 mmol) em etanol (50 ml)foi adicionada ao catalisador e a mistura hidrogenada a 60 psi no aparelho de hidrogenação por agitação Parr durante 5 horas. A reação foi filtrada em placa de celite e concentrada até se tornar um óleo. Éter (50 ml) foi adicionado e a mistura resfriada até O0C e agitada até a formação de um precipitado. A suspensão foi filtrada e a torta do filtro lavada com éter (20 ml) e o sólido secado sob vácuo o que deu o produto na forma de um sólido esbranquiçado (3.00 g, 93%). 1H NMR d6-DMS0 δ 0.52-0.56 (2H, m), 0.59-0.64 (2H, m),1.35-1.40 (IH7 m), 3.91-4.10 (4H, m), 4.01-4.23 (4H, m), 9.50 (1H, brs), 9.63 (1H, brs).
Exemplo 6
<formula>formula see original document page 48</formula>
N- (4- (4-(3-metil-lH-pirazol-5-ilamino)-6-(3-ciclopropil- 3-fluoroazetidin-l-il)pirimidin-2-iltio)fenil)-3,3,3- trifluoropropanamida (Composto 1-14)
<formula>formula see original document page 48</formula>
6- (3-ciclopropil-3-fluoroazetidin-l-il)-N-(3-metil-lH- pirazol-5-il)-2-(metiltio)pirimidin-4-amina
A uma mistura de 6-cloro-N-(3-metil-ΙΗ-pirazol-5-il)-2- (metiltio)pirimidin-4-amina (150 g, 0.58 mol), cloridrato de 3-ciclopropil-3-fluoroazetidina (132.2 g, 0.87 mol) adicionou-se diisopropiletilamina (208 g, 1.61 mol) e isopropanol (1.125 L) e então aqueceu-se até refluxo durante 23 horas. A reação foi resfriada até obtenção de uma solução levemente turva a 85°C e filtrada e a solução homogênea concentrada até um volume mínimo. EtOAc foi adicionado (IL) e concentrado até volume mínimo. EtOAc (IL) e H2O (IL) foram adicionados e as camadas separadas (a camada orgânica começou a cristalizar o produto durante a extração) . A camada aquosa foi também extraída com EtOAc (50 0 ml) . Concentrado o primeiro extrato orgânico .até secagem para dar um sólido branco. Hexano (750 ml) foi adicionado ao segundo extrato orgânico e a pasta agitada à temperatura ambiente, e então resfriada até O0C durante 3 0 min. Filtrada e lavada com bastante heptano. A torta de filtro foi secada sob vácuo. A torta de filtro e o sólido branco da primeira extração foram combinados para dar 155,1 g do produto desejado. (155.1 g, 77 %) . IH NMR (DMSO, 400 MHz) 0.44 (2H, m) , 0.60 (2H, m) , 1.38-1.43 (1H, m) , 2.18 (3H, s) , 2.42 (3H, s) , 3.89- 3.97 (4H, m) , 5.92 (1H, br s) , 6.04 (1H, br s) , 9.23 (1H, s) , 11 .86 (1H, s) . ES+ 335
6- (3-ciclopropil-3-fluoroazetidin-l-il)-N-(3-metil-lH- pirazol-5-il)-2-(metilsulfonil)pirimidin-4-amina
Uma solução de 6-(3-ciclopropil-3-fluoroazetidin-1-il)-N- (3-metil-ΙΗ-pirazol-5-il) -2-(metiltio)pirimidin-4-amina (130 g, 389 mmol) em MeOH (5.2 L) foi resfriada até 0 °C. Uma solução de Oxone (526g, 855 mmol) em H2O (5.2 L) foi lentamente adicionada à pasta mantendo-se a temperatura abaixo de 5°C. Após adição a reação foi deixada aquecer até temperatura ambiente da noite para o dia. Uma solução de 10% de NaHSO3 (325 ml) e uma solução a 10% de K2CO3 (2,6 L) foi então adicionada para neutralizar a mistura de reação, a solução filtrada e a torta de filtro lavada com H2O (3,3 L) . 0 sólido foi transformado em pasta com H2O (2,6 L) , a solução filtrada e a torta de filtro lavada com H2O (3,3L). 0 sólido foi secado sob vácuo (72.3 g, 51 %) . IH NMR (DMSO) : 0.47 (2H, m) , 0.60 (2H, 5 m) , 1.43-1.46 (1H, m) , 2.20 (3H, s) , 3.25 (3H, s) , 3.97- 4.11 (4H, m), 5.93 (1H, br s), 6.47 (1H, br s). 9.88 (1H, s) , 12.01 (1H, br s) . ES+ 367
<formula>formula see original document page 50</formula>
N- (4- (4- (3-metil-lH-pirazol-5-ilamino)-6-(3-ciclopropil- 3-fluoroazetidin-l-il) pirimidin-2-iltio)fenil)-3,3,3- trifluoropropanamida (Composto 1-14)
Uma pasta de 6-(3-ciclopropil-3-fluoroazetidin-1-il)-N- (3-metil-lH-pirazol-5-il)-2-(metilsulfonil)pirimidin-4 - amina (61g, 170 mmol) e 3,3 , 3-trifIuoro-N-(4- mercaptofenil)propanamida (41 g, 175 mmol) em CH3CN (1300 mL) foi aquecida até refluxo durante 1,5 horas. Durante esse período, a pasta transformou-se de fina e amarelada em espessa e de um branco brilhante. A mistura foi então resfriada até 0o C e agitada a esta temperatura durante 15 minutos. Filtrada e lavada com CH3CN frio (650 ml) . 0 sólido resultante foi secado durante 2 0 horas a 3 8°C sob vácuo doméstico. 0 sólido branco foi carregado para um reator apropriado com EtOAc (1300 ml) e NaHCO3(sat) (1300 ml) . A mistura foi agitada até que não houvesse mais nenhum sólido. Então, as camadas foram separadas e a camada aquosa lavada com EtOAc (3 90 ml) . As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre MgSO4, filtradas, lavadas com EtOAc (13 0 ml) e concentradas até volume mínimo num evaporador rotativo. A mistura resultante foi recristalizada de EtOAc e hexano para dar o produto desejado na forma de um sólido branco ((56.2 g, 72%)IH NMR (MeOD, 400 MHz) : 0.40-0.45 (2H, m) , 0.60-0.65 (2Η, m) , 1.3-1.4 (1Η, m) , 2.05 (2Η, s) , 3.25-3.40 (2Η, m) , 3.85-3.40 (4Η, m) , 5.40-5.50 (2Η, m) , 7.50-7.55 (2Η, d), 7.65-7.70 (2Η, d). ES+ 522.
A Tabela 4 abaixo mostra dados para certos compostos representativos de acordo com o método descrito no Esquema Geral (Método A) e no Exemplo 6. Os números do composto correspondem aos compostos mostrados na Tabela 1.
Tabela 4
<table>table see original document page 51</column></row><table>
Exemplo 7
<formula>formula see original document page 51</formula>
N- (5- (4-(3-metil-lH-pirazol-5-ilamino)-6-(3-ciclopropil- 3-fluoroazetidin-l-il)pirimidin-2-iltio)piridin-2-il)- 3,3,3-trifluoropropanamida (1-21) A uma solução de 2-(6-aminopiridin-3-iltio)-6-(3 - ciclopropil-3-fluoroazetidin-l-il)-N-(3-metil-ΙΗ-pirazol- 5-il) pirimidin-4-amina (300 mg, 0.7 mmol) e BOC2O (220 mg, 1 mmol) em solução de hidróxido de sódio 4.5 M (0.4 70 ml) e DCM (10 ml) adicionou-se DMA.P (5 mg). A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h e então lavada com solução de NaHC03 sat., salmoura, secada (MgSO4), filtrada e evaporada em vácuo. 0 produto bruto foi purificado através de cromatografia de flasheamento ((12 g Si02, EtOAc/petrol) para dar o intermediário desejado (60 mg, 17%) ES+ 513. Esse intermediário (60 mg, 0.12 mmol) foi dissolvido em piridina (2 ml) e cloreto de 3, 3, 3-trifluoropropanoíIa (34 mg, 0.23 mmol) foi adicionado gota a gota e então agitado à temperatura ambiente durante 3 0 minutos. Mais 3 gotas de cloreto de 3, 3, 3-trifluoropropanoíIa foram adicionados para dar completa conversão em produto após agitação por mais 30 min. A mistura de reação foi então concentrada em vácuo, o resíduo redissolvido em DCM (2ml)/TFA (Iml) e agitada à temperatura ambiente durante 2h. A mistura foi concentrada em vácuo e o produto bruto purificado através de LCMS e liofilizado (MeCN/H20/TFA) para dar o composto título na forma de um sólido e sal de TFA (25 mg, 33%). IH NMR (DMS0-d6) 0.20-0.21 (2 H, m), 0.36-0.38 (2 H, m), 1.15-1.20 (1 H, m), 1.77 (3 H, s), 3.40-3.50 (2 H, m ), 3.57-3.72 (4 H, m), 5.10-5.15 (12 H, s), 7.75-7.80 (1 H, d), 7.92-7.97 (1 H, d), 8.22 (1 H, s), 9.20 (1 H, s), 10.91 (1 H, s). ES+ 523. Os experimentos mostrados abaixo descrevem a preparação de alguns dos compostos utilizados nos exemplos aqui descritos.
Composto A
<formula>formula see original document page 52</formula>
3,3,3-trifIuoro-W- (4-mercaptofenil)propanamida <formula>formula see original document page 53</formula>
S-4- (3,3,3-trifluoropropanamido)fenil 3,3,3- trifluoropropanotioato 4-Aminotiofenol foi derretido e carregado num frasco. EtOAc (1950 ml) degasifiçado foi adicionado. Uma solução de K2CO3 (92g, 670 mmol) em H2O degasificado (1300 vol) foi adicionada. A solução foi resfriada até 0o C e o cloreto de 3,3,3-trifluoropropanoila (55.2 g, 600 mmol)foi lentamente adicionado para manter a temperatura abaixo de 10°C) . A reação foi aquecida até temperatura ambiente. A camada orgânica foi separada e lavada com salmoura (13 0 0 ml) e então concentrada num evaporador rotativo. 0 sólido foi transformado em pasta em heptano/EtOAc (390 ml/390 ml) durante 3 0 minutos. Heptano (780 ml) foi adicionado e a pasta resfriada até O0C durante 3 0 minutos. A pasta foi filtrada. A torta do filtro foi secada sob vácuo para dar o composto desejado (51.3 g, 87.2%).
<formula>formula see original document page 53</formula>
3,3,3-trifIuoro-W- (4-mercaptofenil)propanamida 3,3,3-trifluoropropanotioato de S-4-(3,3,3- trifluoropropanamido)fenila (44.8 g, 189 mmol) e EtOH (70 mL) foram carregados em um frasco. HCl concentrado (22,5 ml) foi lentamente adicionado para manter a temperatura abaixo de 30°C. A reação foi então aquecida até 50° C durante 17,5 horas. A mistura de reação foi reduzida para 41 ml através de destilação a vácuo a 50° C. A reação foi resfriada até temperatura ambiente e H2O (51 ml) foi acrescentado. A pasta foi filtrada e a torta de filtro lavada com H2O (3 χ 35 ml) . 0 sólido foi secado sob vácuo para produzir o composto desejado (19.9 g, 58%). Exemplo 9 : Ensaio de Inibição de Aurora-2 (Aurora A) Os compostos foram identificados quanto à sua capacidade de inibir a Aurora-2 utilizando um ensaio padrão de enzima acoplada (Fox et al., Protein Sci., (1998) 7, 2249). Os ensaios foram conduzidos numa mistura de 100mM Hepes (pH 7,5), IOmM MgCl2, ImM DTT, 25mM NaCl, 2 . 5mM fosfoenolpiruvato, 300 μΜ NADH, 30 μg/ml piruvato quinase e 10 μg/ml lactato dehidrogenase. As concentrações finais de substrato no ensaio foram de 4 0 0μΜ ATP (Sigma Chemicals) e 570μΜ peptídeo (Kemptide, American Peptide, Sunnivale, CA) . Os ensaios foram conduzidos a 30°C e na presença de 4OnM Aurora-2.
Uma solução tampão de ensaio concentrada foi preparada contendo todos os reagentes relacionados acima, com exceção da Aurora-2 e do composto de teste de interesse. 55 μl da solução concentrada foram colocados numa placa de 96 cavidades seguido de adição de 2 μl de diluições seriais contendo DMSO concentrado do composto de teste (tipicamente iniciando a partir de uma concentração final de 7,5 μΜ) . A placa foi pré-incubada por 10 minutos a 30°C e a reação iniciada mediante adição de 10 μl de Aurora-2. As taxas iniciais de reação foram determinadas com um leitor de placas Molecular Devices SpectraMax Plus por um período de 10 minutos. Os dados de IC50 e Ki foram calculados a partir de uma análise de regressão não- linear utilizando o pacote de software Prism (GrafPad Prism versão 3.Ocx para Macintosh, GrafPad Software, San Diego Califórnia, USA).
Exemplo 10 : Ensaio de Inibição de Aurora-I (Aurora B) (radiométricô)
Uma solução tampão de ensaio foi preparada, consistindo de 25 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 0,1% BSA e 10% glicerol. Uma solução 22 nM de Aurora-B, também contendo 1,7 mM DTT e 1,5 mM Kemptide (LRRASLG) foi preparada em tampão de ensaio. A 22 μΐι de solução de Aurora-B, numa placa de 96 cavidades, adicionou-se 2μ1 de uma solução concentrada de composto em DMSO e a mistura deixada equilibrar durante 10 minutos a 25°C. A reação enzimática foi iniciada mediante adição de 16 μl solução concentrada [γ-33Ρ) -ATP (-20 nCi/μl) preparada em tampão de ensaio, até uma concentração final de ensaio de 800 μΜ. A reação foi interrompida após 3 horas mediante adição de 16 μL 500 mM ácido fosfórico e os níveis de incorporação de 33P no substrato peptídico foram determinados através do método a seguir descrito.
Uma placa de fosfocelulose de 96 cavidades (Millipore, Cat. No. MAPHNOB 5 0) foi pré-tratada com 100 μL; de 100 mM ácido fosfórico antes da adição da mistura de reação enzimática (40 μl) . A solução foi deixada impregnar na membrana de fosfocelulose durante 3 0 minutos e a placa posteriormente lavada quatro vezes com 200 μL de 100 mM ácido fosfórico. A cada cavidade da placa seca adicionou- se 30 μL de coquetel de cintilação líquida Optiphase "Supermix" (Perkin Elmer) antes da contagem de cintilação (Contador de Cintilação Líquida 1450 Microbeta, Wallac). Os níveis de radioatividade de referência não catalisada com enzima foram determinados mediante adição de 16 μΐ de 500 mM ácido fosfórico às cavidades de controle, contendo todos os componentes de ensaio (que atuam para desnaturação da enzima), antes da adição da solução [γ- 33P)-ATP. Os níveis de incorporação de 33P catalisada com enzima foram calculados subtraindo-se as contagens médias de referência daquelas medidas em cada concentração de inibidor. Para cada determinação de Ki, 8 pontos de dados, tipicamente abrangendo a faixa de concentração 0 - 10 μΜ do composto, foram obtidos em duplicata (concentrados DMSO foram preparados a partir de um concentrado de composto de 10 mM com diluições seriais posteriores de 1:2,5). Valores Ki foram calculados a partir de dados de taxa inicial através de regressão não linear utilizando o pacote de software Prism (Prism 3,0, Graphpad Software, San Diego, CA) .
Exemplo 11: Ensaio de Inibição de Itk: Ensaio baseado em Radioatividade
Os compostos da presente invenção foram avaliados como inibidores de Itk quinase humana utilizando um ensaio baseado em radioatividade.
Os ensaios foram conduzidos numa mistura de 2 0 mM MOPS (pH 7,0), 10 mM MgCl2, 0,1% BSA e ImM DPT. As concentrações finais de substrato no ensaio foram de 7,5 μΜ [γ-33Ρ] ATP (400 μCi 33P ΑΤΡ/μmol ATP, Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals) e 3mM peptídeo (proteína SAM68 Δ332-443). Os ensaios foram conduzidos a 25°C na presença de 509 nm Itk. Uma solução tampão de ensaio concentrada foi preparada contendo todos os reagentes relacionados acima, com exceção de ATP e do composto de teste de interesse. 50 μl da solução concentrada foram colocados numa placa de 96 cavidades seguido da adição de 2μl de concentrado de DMSO contendo diluições seriais do composto de teste (tipicamente iniciando a partir de uma concentração final de 50 μΜ com diluições seriais duplas) em duplicata (concentração final de DMSO 2%). A placa foi pré-incubada durante 10 minutos a 2 5°C e a reação iniciada mediante adição de 50 μl [γ-33Ρ]ΑΤΡ (concentração final 7,5 μΜ).
A reação foi interrompida após 10 minutos mediante adição de 100 μL 0,2M ácido fosfórico + 0,01% TWEEN 20. Uma placa de 96 cavidades com filtro de fosfocelulose "multiscreen" (Millipore, Cat. No. MAPHNOB50) foi pré- tratada com 100 μL, 0, m2 M ácido fosfórico + 0,01% TWEEN 20 antes da adição de 170 μL da mistura de interrupção do ensaio. A placa foi lavada com 4 χ 200 μL 0, 2M ácido fosfórico + 0,01% TWEEN 20. Após secagem, 30 μL de coquetel de cintilação líquida Optiphase "Supermix" (Perkin Elmer) foi adicionado à placa antes da contagem de cintilação (Contador de Cintilação Líquida 1450 Microbeta, Wallac).
Os dados Ki(app) foram calculados a partir da análise de regressão não-linear dos dados da taxa inicial utilizando o pacote de software Prism (GraphPad Prism versão 3, Ocx para Macintosh, GraphPad Software, San Diego, Califórnia, USA). Exemplo 12 : Ensaio de Inibição de JAK3
Os compostos foram identificados quanto à sua capacidade de inibir JAK utilizando o ensaio mostrado abaixo. As reações foram conduzidas num tampão de quinase contendo 100 mM HEPES (pH 7,4), 1 mM DTT, 10 mg MgCl2, 25 mM NaCl, e 0,01% BSA. As concentrações de substrato no ensaio foram de 5 μΜ ATP (200 uCi/μτηοΙ ATP) e 1 μΜ poli (Flu) 4Tyr. As reações foram executadas a 25°C e 1 nM JAK 3 .
10 A cada cavidade de uma placa de policarbonato contendo 96 cavidades, adicionou-se 1,5 μL de um inibidor JAK3 candidato juntamente com 50 μL de tampão quinase contendo 2 μΜ Poli(Glu)4Tyr e 10 μΜ ATP que foi então misturado e 50μ1 de tampão quinase contendo 2 nM enzima JAK 3 adicionados para dar início à reação. Após 20 minutos à temperatura ambiente (2 5°C) , a reação foi interrompida com 50 μL· de ácido tricloroacético a 2 0% (TCA) que também continha 0,4 mM ATP. Todos os conteúdos de cada cavidade foram então transferidos para uma placa de filtro em fibra de vidro de 96 cavidades utilizando um Coletor de Células TomTek. Após lavagem, 60 μΐ de fluido de cintilação foram adicionados e a incorporação de 33P detectada num contador Perkin Elmer TopCount. Exemplo 13 : Ensaio de Inibição de JAK2 Os ensaios são conduzidos conforme descrito acima no Exemplo 13, com exceção de que a enzima JAK-2 foi utilizada, a concentração final de poli (Glu) 4Tyr foi de 15 μΜ e a concentração final de ATP foi de 12 μΜ. Exemplo 14 : Ensaio de Inibição de FLT-3 Os compostos foram identificados quanto à sua capacidade de inibir a atividade de FLT-3 utilizando um ensaio de ligação a filtro radiométrico. Este ensaio monitora a incorporação de 33P por um substrato poli(Glu,Tyr) 4:1 (pE4Y). As reações foram executadas numa solução contendo 100 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 25 mM NaCl, 1 mM DTT, 0,01% BSA e 2,5% DMSO. As concentrações finais de substrato no ensaio foram de 90 μΜ ATP e 0,5 mg/ml pE4Y (ambos da Sigma Chemicals, St. Louis, MO). A concentração final de um composto da presente invenção era geralmente entre 0,01 e 5 μΜ. Tipicamente, uma titulação de 12 pontos foi conduzida preparando-se diluições seriais de concentrado de DMSO 10 mM do composto de teste. As reações foram conduzidas à temperatura ambiente. Duas soluções de ensaio foram preparadas. A solução 1 contém 100 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 25 mM NaCl, 1 mg/ml pE4Y e 180 mM ATP (contendo 0,3 mCi de [γ-33ρ]ΑΤΡ para cada reação) . A solução 2 contém 100 mM HEPES (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 25 mM NaCl, 2 mM DTT, 0,02% BSA e 3 nM FLT-3. 0 ensaio foi conduzido numa placa de 96 cavidades misturando-se 50 μΐ cada da Solução 1 e 2,5 ml dos compostos da presente invenção. A reação foi iniciada com a Solução 2. Após incubação durante 2 0 minutos à temperatura ambiente, a reação foi interrompida com 50 μΐ de TCA 20% contendo 0,4 mM de ATP. Todo o volume de reação foi então transferido para uma placa de filtro e lavado com TCA 5% através de um Coletor 9600 da TOMTEC (Hamden, CT) . A quantidade de incorporação de 33P pelo pE4Y foi analisada através de um Contador de Cintilação em Microplaca Packard Top Count (Meriden, CT) . Os dados foram ajustados utilizando o software Prism para obter um IC50 ou Ki.
Exemplo 15 : Ensaio de Estabilidade Microssomal
A estabilidade microssomal foi monitorada através da geração de perfis de depleção-tempo em microssomos de uma categoria de espécies (camundongo CD-I macho, rato Sprague-Dawley, cão Beagle, macaco cinomolgo, e humano de sexo misto dividido em grupos).
As soluções de composto reforçadas foram preparadas diluindo-se a solução concentrada de composto em DMSO (tipicamente 10 mM) para dar uma solução em acetonitrila (0,5 mM). 0 composto (para dar uma concentração final de 5 μΜ) foi incubado com uma mistura final de reação (1000 μl) consistindo de proteína de microssomo hepático (1 mg/ml) e um jS-nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato, sistema regenerador (NADPH) na forma reduzida (RGS) [consistindo de 2mM /3-nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato (NADP) , 20,5 mM ácido isocítrico, 0,5 U de isocitrato dehidrogenase/ml, 30 mM cloreto de magnésio, e 0,1 M tampão fosfato (PB) pH 7,4] na presença de 0,1 M PB (pH 7,4).
A reação foi iniciada mediante adição (250 μl) do RGS pré-incubado à mistura pré-incubada de microssomo /VRT/PB (a pré-incubação em ambos os casos foi realizada por 10 minutos a 37°C) . As amostras foram incubadas em frascos Eppendorf (1,5 ml) num agitador aquecedor (DPC Micromix 5 (ajustes; forma 20, amplitude 4) modificado para ser aquecido, até 37°C, com aquecedores de dupla placa fixados à plataforma e controlados por um aquecedor manual Packard) ligado a um manipulador de líquidos automatizado Multiprobe II HT Ex. O manipulador de líquidos foi programado (software WinPREP) para amostrar a mistura de incubação microssomal após 0, 2, 10, 30 e 60 minutos de incubação e transferir uma alíquota (100 μl) para um bloco interruptor (bloco de 96 cavidades)contendo 100 μl de metanol resfriado. A % orgânicos na mistura de interrupção foi otimizada para a análise mediante adição de volumes apropriados de aquoso/orgânico(tipicamente 100 μL de 50:50 metanol:água) . Antes da análise o bloco de interrupção foi colocado sobre um agitador (DPC Micromix 5; 10 min, forma 20, amplitude 5) para precipitar as proteínas. O bloco foi então centrifugado (Jouan GR412; 2000 rpm, 15 min, 4°C) . Uma alíquota de amostra (200 μl) foi então transferida para um bloco de análise e o bloco centrifugado novamente (Jouan GR412; 2000 rpm, 5 min, 4°C) antes de ser enviado para análise. Os perfis de depleção foram determinados monitorando-se o desaparecimento de VRT através de cromatografia líquida-espectrometria de massa seqüencial (LC-MS/MS) . As amostras foram injetadas (20 μl; sistema cromatográfico líquido Agilent 1100 equipado com autoamostrador)sobre uma coluna analítica. A fase móvel consistiu de água + 0,05% (v/v) ácido fórmico (A) e metanol + 0,05% (v/v) ácido fórmico (B).
A execução de um método de gradiente otimizado para o composto de interesse realizou a eluição do composto da coluna analítica: o tempo total de operação foi de 6 minutos com uma taxa de escoamento de 0,35 ml/min. Todo o efluente da coluna ingressou na fonte de ionização de eletropulverização (modo positivo) de um espectrômetro de massa seqüencial Micromass Quattro LC entre 0,5 e 5,9 min da operação. A espectrometria de massa foi otimizada para o composto de interesse. Todas as incubações foram conduzidas em duplicata e os resultados expressados como % remanescente original a 30 minutos ou 60 minutos em relação à amostra a 0 minuto.
Exemplo 16 : Análise de proliferação e viabilidade celular
Os compostos foram identificados quanto à sua capacidade de inibir a proliferação celular e seus efeitos sobre a viabilidade celular utilizando células de Colo205 obtidas de ECACC e utilizando o ensaio mostrado abaixo.
As células Colo205 foram inoculadas em placas de 96 cavidades e o composto serialmente diluído adicionado às cavidades em duplicata. Os grupos de controle incluíram células não tratadas, o diluente do composto (0,1% DMSO isoladamente) e o meio de cultura sem células. As células foram então incubadas durante 72 ou 96 horas a 3 7°C numa atmosfera de 5% C02/95% umidade.
Para medir a proliferação, 3 horas antes do final do experimento, 0,5 μCi de 3H timidina foi adicionado a cada cavidade. As células foram então coletadas e a radioatividade incorporada contada num beta-contador de microplaca Wallac. A viabilidade celular foi avaliada utilizando Promega CellTiter 96AQ para medir a conversão de MTS. As curvas de resposta à dose foram calculadas utilizando software Prism 3,0 (GraphPad) ou SoftMax Pro 4.3.1 LS (Molecular Devices).
Exemplo 17: Ensaio de Inibição de Atividade de Abl Quinase e Determinação da Constante de Inibição Ki Os compostos foram identificados quanto à sua capacidade de inibir a atividade de Abl quinase truncada no terminal (Fox et al. , Protein Sci., 7, p.2249 (1998). As reações foram conduzidas numa solução contendo 100 mM HEPES (pH 7,5), 10 mg MgCl2, 25 mM NaCl, 300 μΜ NADH, 1 mM DTT e 3% DMSO. As concentrações finais de substrato no ensaio foram de 110 μΜ ATP (Sigma Chemicals, St Louis, MO) e 70 μΜ peptídeo (EAIYAAPFAKKK, American Peptide, Sunnyvale, CA) . As reações foram executadas a 3 O0C e 21 nM Ab quinase. As concentrações finais dos componentes do sistema de enzima acoplada foram de 2,5 mM fosfoenolpiruvato, 200 μΜ NADH, 60 μg/ml piruvato quinase e 20 μg/ml lactato dehidrogenase.
Uma solução tampão de ensaio concentrada foi preparada contendo todos os reagentes listados acima com exceção de ATP e do composto de teste de interesse. A solução tampão de ensaio concentrada (60 μΐ) foi incubada numa placa de 96 cavidades com 2μ1 do composto de teste de interesse a concentrações finais tipicamente estendendo- se de 0,002 μΜ a 30 μΜ a 30°C durante 10 minutos. Tipicamente, uma titulação de 12 pontos foi preparada através de diluições seriais (de concentrados de composto de ImM) com DMSO dos compostos de teste em placas filhas. A reação foi iniciada mediante adição de 5 μΐ de ATP (concentração final de 110 μΜ) . As taxas de reação foram obtidas utilizando um leitor de placa Spectramax da Molecular Devices (Sunnyvale, CA) durante 10 minutos a 30°C. Os valores Ki foram determinados com base nos dados da taxa residual como uma função de concentração de inibidor utilizando regressão não linear (Prism 3.0, Software Graphpad, San Diego, CA). 0 composto 14 demonstrou inibir a Abl quinase. Exemplo 18: Ensaio de Inibição da Atividade da Abl Quinase Mutante (T315I) e Determinação da Constante de Inibição IC50 Os compostos foram identificados quanto à sua capacidade de inibir a forma mutante T315I de Abl humana em Soluções de Sinalização Celular Upstate (Dundee, UK). Num volume final de reação de 25 μl, a mutante T315I de Abl humana (5-10 mU) foi incubada com 8 mM MOPS pH 7,0, 0,2 mM EDTA, 50 μΜ EAIYAAPFAKKK, 10 mM Acetato Mg, [γ~33Ρ-ΑΤΡ] (atividade específica aprox. 500 cpm/pmol, 10 mM concentração final do ensaio) e o composto de teste de interesse em concentrações finais acima da faixa de Ο- 4 μΜ. A reação foi iniciada mediante adição da mistura de MgTAP. Após incubação durante 40 minutos à temperatura ambiente, a reação foi interrompida mediante adição de 5 μl de uma solução de ácido fosfórico a 3%. 10 μl da reação foi então borrada sobre uma placa de filtro e lavada três vezes durante 5 minutos em 75 mM ácido fosfórico e uma vez em metanol antes da secagem e contagem de cintilação. Os valores de inibição IC50 foram determinados com análise de regressão não-linear das atividades enzimáticas residuais como uma função da concentração do inibidor (Prism 3.0, GraphPad Software, San Diego, CA).
Exemplo 19: Ensaio de Inibição de Plk4
Os Compostos foram identificados quanto à sua capacidade de inibir Plk4 utilizando um ensaio de incorporação radioativo-fosfato. Os ensaios foram conduzidos numa mistura de 8mM MOPS (pH 7,5), 10 mM MgCl2, BSA 1% e 2 mM DTT. As concentrações do substrato final foram de 15μΜ [γ-33Ρ]ATP (22 7mCi 33P ATP/ mmol ATP, Amersham Farmacia Biotech/Sigma Chemicals) e 300μΜ peptídeo (KKKMDATFADQ).
Os ensaios foram conduzidos a 25°C na presença de 25 nM Plk4. Uma solução tampão de ensaio concentrada foi preparada contendo todos os reagentes listados acima. 30 μl da solução concentrada foram colocados numa placa de 96 cavidades seguido de adição de 2 μl de DMSO concentrado contendo diluições seriais do composto de teste (tipicamente iniciando a partir de uma concentração final de 10 μΜ com diluições seriais duplas) em duplicada (concentração final DMSO 5%) . A placa foi pré-incubada durante 10 minutos a 25°C e a reação iniciada mediante adição de 8 μL [γ-33Ρ]ΑΤΡ (concentração final 15μΜ). Â reação foi interrompida após 180 minutos mediante adição de 100 μL 0,15 M ácido fosfórico. Uma placa de 96 cavidades com filtro de fosfocelulose (Millipore, cat. No. MAPHNOB50) foi pré-tratada com 100 μL 0,2M ácido fosfórico antes da adição de 125 μΐϋ da mistura de ensaio interrompida. A placa foi lavada com 4 χ 200 μL, 0,2M ácido fosfórico. Após secagem, 100μl de coquetel de cintilação líquida Optiphase "Supermix" (Perkin Elmer) foram adicionados à cavidade antes da contagem de cintilação (Contador de Cintilação Líquida 1450 Microbeta, Wallac). Após remover os valores médios prévios para todos os pontos de dados, os dados Ki(app) foram calculados a partir da análise de regressão não- linear dos dados da taxa inicial utilizando o pacote de software Prism (GrafPad Prism versão 3.Ocx para Macintosh, GrafPad Software, San Diego Califórnia, USA).
Exemplo 20 - Ensaio de Inibição de FGFRl, MLKl, Tie2, e
TrkA
O(s) composto(s) foram identificados quanto à sua capacidade de inibir Arg (Abl-2), FGFRl, MLKl, Tie2 e TrkA utilizando métodos de identificação conhecidos pelo habilitado na técnica. Todas as enzimas acima citadas foram identificadas com concentrações ATP em ou próximas do Kffl para ATP.
A Tabela 5 abaixo mostra os valores IC50 obtidos no Exemplo 20.
Tabela 5
<table>table see original document page 63</column></row><table>
A Tabela 6 abaixo mostra os valores Ki obtidos no Exemplo 20 :
Tabela 6 <table>table see original document page 64</column></row><table>
A Tabela 7 abaixo mostra os dados dos Exemplos 9, 10 e 16
descritos acima. Tabela 7
<table>table see original document page 64</column></row><table>
A Tabela 8 abaixo mostra dados dos Exemplos 12-14 e 17- 18 .
<table>table see original document page 64</column></row><table> <table>table see original document page 65</column></row><table>
Embora diversas concretizações da presente invenção tenham sido descritas, é evidente que os exemplos básicos podem ser alterados para prover outras concretizações que utilizem ou abranjam os compostos, métodos, e processos da presente invenção. Portanto, será apreciado que o escopo da presente invenção seja definido pelas reivindicações em anexo.

Claims (17)

1. Composto, caracterizado pelo fato de apresentar a seguinte fórmula ii-d: <formula>formula see original document page 66</formula> ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, onde: R2 é alquila C1.2 ou ciclopropila; R5 é CH2CH3, CH2CF3, CH2CH2CF3, <formula>formula see original document page 66</formula> J1 é H ou CH3; J2 é alquila Ci-4; e Cy é cicloalquila C3.5.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de R5 ser selecionado de CH2CF3, CH2CH2CF3, <formula>formula see original document page 67</formula>
3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de R5 ser selecionado de CH2CF3 ou <formula>formula see original document page 67</formula>
4. Composto, de acordo com a reivindicação caracterizado pelo fato de R5 ser CH2CF3.
5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1-4, caracterizado pelo fato de Ry ser <formula>formula see original document page 67</formula>
6. Composto, de acordo com a reiveindicacao 5, caracterizado pelo fato de Ry ser <formula>formula see original document page 67</formula>
7. Composto, de acordo com a reivindicação caracterizado pelo fato de Cy ser ciclopropila.
8. Composto, de acordo com qualquer uma reivindicações 1-7, caracterizado pelo fato de R2 metila.
9. Composto, de acordo com a reivindicação caracterizado pelo fato de ser selecionado das seguintes fórmulas: <formula>formula see original document page 68</formula> <formula>formula see original document page 69</formula> <formula>formula see original document page 70</formula> I-21
10. Composição, caracterizada pelo fato de compreender um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1-9, e um portador, adjuvante ou veículo farmaceuticamente aceitável.
11. Método para inibir a atividade da proteína Aurora quinase numa amostra biológica, caracterizado pelo fato de compreender contatar dita amostra biológica com um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1-9.
12. Método para tratar um distúrbio prolif erativo num paciente, caracterizado pelo fato de compreender a etapa de administrar a dito paciente um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1-9.
13. Método, de acordo com a reivindicação 12, no qual dito distúrbio proliferativo é selecionado de melanoma, mieloma, leucemia, 1informa, neuroblastoma, ou câncer selecionado de cólon, mama, gástrico, ovariano, cervical, pulmonar, do sistema nervoso central (SNC), renal, prostático, de bexiga, pancreático, cerebral (gliomas), de cabeça e pescoço, renal, hepático, melanoma, sarcoma ou câncer de tireóide, num paciente necessitado de tal método, caracterizado pelo fato de compreender administrar a dito paciente um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1-9.
14. Método para tratar câncer num indivíduo, necessitado do mesmo, caracterizado pelo fato de compreender a administração seqüencial ou a co-administração de um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações de 1-9, ou de um sal f armaceuticamente aceitável do mesmo, e de outro agente terapêutico.
15. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de dito agente terapêutico ser selecionado de taxanos, inibidores de bcr-abl, inibidores de EGFR, agentes danificadores do DNA, e antimetabólitos.
16. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de dito agente terapêutico ser selecionado de Paclitaxel, Gleevec, dasatinibe, nilotinibe, Tarceva, Iressa, cisplatina, oxaliplatina, carboplatina, antraciclinas, Arac e 5-FU.
17. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de dito agente terapêutico ser selecionado de camptotecina, doxorrubicina, idarubicina, cisplatina, taxol, taxotere, vincristina, tarceva, o inibidor de MEK, U0126, um inibidor de KSP, vorinostat, Gleevec, dasatinibe e nilotinibe.
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WO (3) WO2007056221A2 (pt)

Families Citing this family (72)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6660731B2 (en) 2000-09-15 2003-12-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
CA2422377C (en) 2000-09-15 2010-04-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
SE0104140D0 (sv) * 2001-12-07 2001-12-07 Astrazeneca Ab Novel Compounds
WO2004072029A2 (en) 2003-02-06 2004-08-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazolopyridazines useful as inhibitors of protein kinases
JP5001179B2 (ja) * 2005-02-16 2012-08-15 アストラゼネカ アクチボラグ 化学物質
EP1899323A2 (en) * 2005-05-16 2008-03-19 AstraZeneca AB Pyrazolylaminopyrimidine derivatives useful as tyrosine kinase inhibitors
AU2006304897B2 (en) * 2005-10-18 2012-07-12 Janssen Pharmaceutica N.V. Method of inhibiting FLT3 kinase
DK1945631T3 (da) * 2005-10-28 2012-10-22 Astrazeneca Ab 4- (3-aminopyrazole) pyrimidinderivater til anvendelse som tyrosinkinaseinhibitorer til behandling af cancer
CN103145702A (zh) 2005-11-03 2013-06-12 顶点医药品公司 用作激酶抑制剂的氨基嘧啶
EP1951716B1 (en) * 2005-11-16 2011-05-04 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors
EP2016070B1 (en) 2006-04-20 2016-01-13 Janssen Pharmaceutica N.V. Inhibitors of c-fms kinase
US8697716B2 (en) 2006-04-20 2014-04-15 Janssen Pharmaceutica Nv Method of inhibiting C-KIT kinase
NZ576750A (en) 2006-11-02 2012-01-12 Vertex Pharma Aminopyridines and aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
DE602007007985D1 (de) 2006-12-19 2010-09-02 Vertex Pharma Als inhibitoren von proteinkinasen geeignete aminopyrimidine
CA2680029A1 (en) * 2007-03-09 2008-09-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
WO2008112642A1 (en) 2007-03-09 2008-09-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
AU2008226461A1 (en) 2007-03-09 2008-09-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyridines useful as inhibitors of protein kinases
AU2008240313A1 (en) 2007-04-13 2008-10-23 Aj Park Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors
EP2155742A1 (en) * 2007-04-18 2010-02-24 AstraZeneca AB 5-aminopyrazol-3-yl-3h-imidazo [4,5-b]pyridine derivatives and their use for the treatment of cancer
CN101801959A (zh) 2007-05-02 2010-08-11 沃泰克斯药物股份有限公司 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物
CN101679387A (zh) * 2007-05-02 2010-03-24 沃泰克斯药物股份有限公司 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物
EP2152694A2 (en) 2007-05-02 2010-02-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazoles and pyrazoles useful as kinase inhibitors
UA99459C2 (en) * 2007-05-04 2012-08-27 Астразенека Аб 9-(pyrazol-3-yl)- 9h-purine-2-amine and 3-(pyraz0l-3-yl)-3h-imidazo[4,5-b]pyridin-5-amine derivatives and their use for the treatment of cancer
ATE521609T1 (de) * 2007-05-04 2011-09-15 Astrazeneca Ab Aminothiazolylpyrimidinderivate und ihre verwendung bei der behandlung von krebs
AU2008257044A1 (en) * 2007-05-24 2008-12-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazoles and pyrazoles useful as kinase inhibitors
AU2008262291A1 (en) * 2007-06-11 2008-12-18 Miikana Therapeutics, Inc. Substituted pyrazole compounds
WO2009018415A1 (en) * 2007-07-31 2009-02-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process for preparing 5-fluoro-1h-pyrazolo [3, 4-b] pyridin-3-amine and derivatives thereof
EP2190849B1 (en) * 2007-08-15 2013-11-20 Vertex Pharmceuticals Incorporated 4-(9-(3,3-difluorocyclopentyl)-5,7,7-trimethyl-6-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-5h-pyrimido[4,5-b[1,4]diazepin-2-ylamino)-3-methoxybenzamide derivatives as inhibitors of the human protein kinases plk1 to plk4 for the treatment of proliferative diseases
AU2008305294B2 (en) 2007-09-21 2012-11-29 Array Biopharma Inc. Pyridin-2 -yl-amino-1, 2, 4 -thiadiazole derivatives as glucokinase activators for the treatment of diabetes mellitus
WO2009086012A1 (en) * 2007-12-20 2009-07-09 Curis, Inc. Aurora inhibitors containing a zinc binding moiety
WO2009114703A2 (en) * 2008-03-12 2009-09-17 Fox Chase Cancer Center Combination therapy for the treatment of cancer
ES2380648T3 (es) * 2008-03-13 2012-05-17 Bristol-Myers Squibb Company Derivados de piridazina como inhibidores del factor XIA
MX2010010165A (es) * 2008-03-17 2010-11-25 Scripps Research Inst Procedimientos quimicos y geneticos combinados para generacion de celulas madre pluripotentes inducidas.
AR072085A1 (es) * 2008-06-11 2010-08-04 Astrazeneca Ab Compuestos triciclicos, metodos para su preparacion, composicion farma-ceutica que los comprende y su uso en el tratamiento de enfermedades me-diadas por la actividad de las proteinas quinasas
CN105574346A (zh) * 2008-09-05 2016-05-11 新基阿维罗米克斯研究公司 多肽偶联物与不可逆抑制剂的设计方法和检测方法
TW201018693A (en) * 2008-09-30 2010-05-16 Astrazeneca Ab Chemical compounds 496-1p
KR101741168B1 (ko) 2008-12-22 2017-05-29 밀레니엄 파머슈티컬스 인코퍼레이티드 오로라 키나아제 억제제 및 항­ｃｄ 항체의 병용
US20120202818A1 (en) * 2009-06-09 2012-08-09 California Capital Equity, Llc Ureidophenyl substituted triazine derivatives and their therapeutical applications
IN2012DN02534A (pt) 2009-09-16 2015-08-28 Avila Therapeutics Inc
MX2012007684A (es) 2009-12-30 2012-10-05 Avila Therapeutics Inc Modificacion covalente ligando dirigida de proteina.
WO2012000103A1 (en) 2010-07-02 2012-01-05 University Health Network Methods of targeting pten mutant diseases and compositions therefor
CN103153063B (zh) * 2010-07-30 2016-02-17 肿瘤疗法科学股份有限公司 喹啉衍生物及含有其的melk抑制剂
US9382229B2 (en) 2011-02-15 2016-07-05 The Johns Hopkins University Compounds and methods of use thereof for treating neurodegenerative disorders
ME02382B (me) 2011-07-27 2016-06-20 Astrazeneca Ab 2-(2,4,5-supstituisani-anilino) piramidisnki derivati kao egfr modulatori korisni za tretman raka
BR112014003997A2 (pt) 2011-08-25 2017-03-21 Hoffmann La Roche composto, método para inibição da atividade de pak1 em uma célula e paciente, método para o tratamento ou melhoria da gravidade do câncer ou de um distúrbio hiperproliferativo em um paciente, utilização do composto e composição
JP2014525418A (ja) * 2011-09-05 2014-09-29 浙江海正薬業股▲ふん▼有限公司 タンパク質キナーゼ阻害活性を有する４−置換−（３−置換−１ｈ−ピラゾール−５−アミノ）−ピリミジン誘導体及びその使用
WO2013082476A1 (en) 2011-11-30 2013-06-06 Emory University Antiviral jak inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
US8815877B2 (en) 2011-12-22 2014-08-26 Genentech, Inc. Serine/threonine kinase inhibitors
US8916555B2 (en) 2012-03-16 2014-12-23 Axikin Pharmaceuticals, Inc. 3,5-diaminopyrazole kinase inhibitors
SI3459942T1 (sl) 2012-04-24 2021-05-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitorji DNA-PK
US20130310340A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Rigel Pharmaceuticals, Inc. Method of treating muscular degradation
US9539259B2 (en) 2012-05-23 2017-01-10 The Johns Hopkins University Compounds and methods of use thereof for treating neurodegenerative disorders
CN104797267A (zh) 2012-06-26 2015-07-22 德玛医药 使用卫康醇、二乙酰二脱水卫矛醇、二溴卫矛醇或类似物或其衍生物治疗具有基因多型性或ahi1失调或突变患者的抗酪氨酸激酶抑制剂的恶性肿瘤的方法
CA2890018A1 (en) * 2012-11-05 2014-05-08 Nant Holdings Ip, Llc Substituted indol-5-ol derivatives and their therapeutical applications
CN107200749B (zh) 2013-03-12 2019-09-03 沃泰克斯药物股份有限公司 Dna-pk抑制剂
WO2014145403A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Nantbio, Inc. Substituted indol-5-ol derivatives and their therapeutic applications
WO2014168986A1 (en) 2013-04-08 2014-10-16 Brown Dennis M Therapeutic benefit of suboptimally administered chemical compounds
NZ631142A (en) 2013-09-18 2016-03-31 Axikin Pharmaceuticals Inc Pharmaceutically acceptable salts of 3,5-diaminopyrazole kinase inhibitors
RS60426B1 (sr) 2013-10-17 2020-07-31 Vertex Pharma Kokristali (s)-n-metil-8-(1-((2'-metil-[4,5'-bipirimidin]-6-il)amino)propan-2-il)hinolin-4-karboksamida i njihovi deuterisani derivati kao inhibitori dnk-pk
JP6525474B2 (ja) 2013-12-06 2019-06-05 ミレニアム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＭｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． オーロラキナーゼ阻害剤と抗ｃｄ３０抗体の併用
HUE049801T2 (hu) 2014-12-23 2020-10-28 Sma Therapeutics Inc 3,5-diaminopirazol kináz inhibitorok
WO2016197009A1 (en) 2015-06-05 2016-12-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Triazoles for the treatment of demyelinating diseases
US10722484B2 (en) 2016-03-09 2020-07-28 K-Gen, Inc. Methods of cancer treatment
CA3038657A1 (en) 2016-09-27 2018-04-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Method for treating cancer using a combination of dna-damaging agents and dna-pk inhibitors
EP3555074B1 (en) * 2016-12-14 2022-07-27 Intervet International B.V. Aminopyrazoles as selective janus kinase inhibitors
AU2017388300B2 (en) 2016-12-28 2022-03-31 Minoryx Therapeutics S.L. Isoquinoline compounds, methods for their preparation, and therapeutic uses thereof in conditions associated with the alteration of the activity of beta galactosidase
CN106841420A (zh) * 2016-12-30 2017-06-13 广州中大南沙科技创新产业园有限公司 一种LC‑MS/MS测定大鼠血浆中Ly‑7u浓度的方法
US11874276B2 (en) 2018-04-05 2024-01-16 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. STING levels as a biomarker for cancer immunotherapy
CN110132795A (zh) * 2019-05-20 2019-08-16 华核（天津）新技术开发有限公司 放射性去污效率测试方法
US20220305048A1 (en) 2019-08-26 2022-09-29 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Use of heparin to promote type 1 interferon signaling
CN116348116A (zh) * 2020-03-06 2023-06-27 台湾卫生研究院 嘧啶化合物及其医药用途
EP4146627A1 (en) 2020-04-30 2023-03-15 United States Government as represented by the Department of Veterans Affairs Krüppel-like factor 15 (klf15) small molecule agonists in kidney disease

Family Cites Families (105)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3133081A (en) 1964-05-12 J-aminoindazole derivatives
US3935183A (en) 1970-01-26 1976-01-27 Imperial Chemical Industries Limited Indazole-azo phenyl compounds
BE754242A (fr) 1970-07-15 1971-02-01 Geigy Ag J R Diamino-s-triazines et dinitro-s-triazines
US3998951A (en) * 1974-03-13 1976-12-21 Fmc Corporation Substituted 2-arylquinazolines as fungicides
DE2458965C3 (de) 1974-12-13 1979-10-11 Bayer Ag, 5090 Leverkusen 3-Amino-indazol-N-carbonsäure-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie sie enthaltende Arzneimittel
MA18829A1 (fr) 1979-05-18 1980-12-31 Ciba Geigy Ag Derives de la pyrimidine,procedes pour leur preparation,compositions pharmaceutiques contenant ces composes et leur utilisation therapeutique
DOP1981004033A (es) * 1980-12-23 1990-12-29 Ciba Geigy Ag Procedimiento para proteger plantas de cultivo de la accion fitotoxica de herbicidas.
SE8102194L (sv) 1981-04-06 1982-10-07 Pharmacia Ab Terapeutiskt aktiv organisk forening och farmaceutisk beredning innehallande denna
SE8102193L (sv) 1981-04-06 1982-10-07 Pharmacia Ab Terapeutiskt aktiv organisk forening och dess anvendning
JPS58124773A (ja) * 1982-01-20 1983-07-25 Mitsui Toatsu Chem Inc ５−メチルチオピリミジン誘導体とその製造法と農園芸用殺菌剤
EP0136976A3 (de) 1983-08-23 1985-05-15 Ciba-Geigy Ag Verwendung von Phenylpyrimidinen als Pflanzenregulatoren
DE3725638A1 (de) 1987-08-03 1989-02-16 Bayer Ag Neue aryloxy (bzw. thio)aminopyrimidine
US5710158A (en) 1991-05-10 1998-01-20 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Aryl and heteroaryl quinazoline compounds which inhibit EGF and/or PDGF receptor tyrosine kinase
US5597920A (en) 1992-04-30 1997-01-28 Neurogen Corporation Gabaa receptor subtypes and methods for screening drug compounds using imidazoquinoxalines and pyrrolopyrimidines to bind to gabaa receptor subtypes
JPH0665237A (ja) 1992-05-07 1994-03-08 Nissan Chem Ind Ltd 置換ピラゾール誘導体および農園芸用殺菌剤
WO1995009851A1 (en) 1993-10-01 1995-04-13 Ciba-Geigy Ag Pharmacologically active pyrimidineamine derivatives and processes for the preparation thereof
AU700964B2 (en) * 1994-11-10 1999-01-14 Cor Therapeutics, Inc. Pharmaceutical pyrazole compositions useful as inhibitors of protein kinases
IL117659A (en) 1995-04-13 2000-12-06 Dainippon Pharmaceutical Co Substituted 2-phenyl pyrimidino amino acetamide derivative process for preparing the same and a pharmaceutical composition containing same
WO1997009325A1 (en) 1995-09-01 1997-03-13 Signal Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine carboxylates and related compounds and methods for treating inflammatory conditions
US5935966A (en) 1995-09-01 1999-08-10 Signal Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine carboxylates and related compounds and methods for treating inflammatory conditions
GB9523675D0 (en) 1995-11-20 1996-01-24 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6716575B2 (en) 1995-12-18 2004-04-06 Sugen, Inc. Diagnosis and treatment of AUR1 and/or AUR2 related disorders
DE69716916T2 (de) 1996-07-13 2003-07-03 Glaxo Group Ltd Kondensierte heterozyklische verbindungen als protein kinase inhibitoren
JPH10130150A (ja) 1996-09-05 1998-05-19 Dainippon Pharmaceut Co Ltd 酢酸アミド誘導体からなる医薬
GB9619284D0 (en) 1996-09-16 1996-10-30 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
WO1998014450A1 (en) 1996-10-02 1998-04-09 Novartis Ag Pyrimidine derivatives and processes for the preparation thereof
BR9712530A (pt) 1996-10-11 1999-10-19 Warner Lambert Co Inibidores de ésteres de asparato de enzima de conversão de interleucina-1beta
EA200000409A1 (ru) 1997-10-10 2000-10-30 Сайтовиэ, Инк. Соединение, фармацевтическая композиция, способ ингибирования гибели клетки в одной клетке или ткани, способ лечения или снижения клеточной смерти, способ лечения или профилактики поликистозного заболевания почек или анемии/эритропоэза у животных, способ защиты органа или ткани млекопитающего от гибели клеток, способ снижения или профилактики гибели клеток в органе или ткани донора после их трансплантации, способ снижения или предотвращения гибели спермы или яйцеклеток
US6267952B1 (en) 1998-01-09 2001-07-31 Geltex Pharmaceuticals, Inc. Lipase inhibiting polymers
JP2000026421A (ja) 1998-01-29 2000-01-25 Kumiai Chem Ind Co Ltd ジアリ―ルスルフィド誘導体及び有害生物防除剤
US6200977B1 (en) 1998-02-17 2001-03-13 Tularik Inc. Pyrimidine derivatives
EP1076563B1 (en) 1998-03-16 2005-05-11 Cytovia, Inc. Dipeptide caspase inhibitors and the use thereof
AP1411A (en) 1998-06-02 2005-05-10 Osi Pharm Inc Pyrrolo[2,3d] pyrimidine compositions and their use.
ATE274510T1 (de) 1998-06-19 2004-09-15 Chiron Corp Glycogen synthase kinase 3 inhibitoren
WO2000011003A1 (en) 1998-08-21 2000-03-02 Du Pont Pharmaceuticals Company ISOXAZOLO[4,5-d]PYRIMIDINES AS CRF ANTAGONISTS
US6184226B1 (en) 1998-08-28 2001-02-06 Scios Inc. Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α
ES2241324T3 (es) 1998-10-08 2005-10-16 Astrazeneca Ab Derivados de quinazolina.
GB9828640D0 (en) 1998-12-23 1999-02-17 Smithkline Beecham Plc Novel method and compounds
GB9828511D0 (en) 1998-12-24 1999-02-17 Zeneca Ltd Chemical compounds
CA2367856C (en) 1999-03-29 2013-10-15 Uutech Limited Analogs of gastric inhibitory peptide and their use for treatment of diabetes
GB9914258D0 (en) 1999-06-18 1999-08-18 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US20020065270A1 (en) 1999-12-28 2002-05-30 Moriarty Kevin Joseph N-heterocyclic inhibitors of TNF-alpha expression
CZ20013540A3 (cs) * 2000-02-05 2002-03-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Deriváty pyrazolu jako inhibitory ERK a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
WO2001060816A1 (en) * 2000-02-17 2001-08-23 Amgen Inc. Kinase inhibitors
GB0004887D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
AU2001251165A1 (en) 2000-04-03 2001-10-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of serine proteases, particularly hepatitis c virus ns3 protease
DE60133897D1 (de) 2000-06-28 2008-06-19 Astrazeneca Ab Substituierte chinazolin-derivate und deren verwendung als aurora-2-kinase inhibitoren
DE60141608D1 (de) 2000-07-21 2010-04-29 Dendreon Corp Peptide als inhibitoren der ns3-serinprotease des hepatitis c virus
EA200300205A1 (ru) 2000-08-31 2003-06-26 Пфайзер Продактс Инк. Производные пиразола и их применение в качестве ингибиторов протеинкиназы
US6495582B1 (en) * 2000-09-15 2002-12-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Isoxazole compositions useful as inhibitors of ERK
US6610677B2 (en) 2000-09-15 2003-08-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
US7473691B2 (en) * 2000-09-15 2009-01-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
CA2422377C (en) * 2000-09-15 2010-04-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
US6660731B2 (en) 2000-09-15 2003-12-09 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
US6613776B2 (en) 2000-09-15 2003-09-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
US6641579B1 (en) 2000-09-29 2003-11-04 Spectrasonics Imaging, Inc. Apparatus and method for ablating cardiac tissue
US6716851B2 (en) 2000-12-12 2004-04-06 Cytovia, Inc. Substituted 2-aryl-4-arylaminopyrimidines and analogs as activators or caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
DE10061863A1 (de) 2000-12-12 2002-06-13 Basf Ag Verfahren zur Herstellung von Triethylendiamin (TEDA)
EP1345922B1 (en) * 2000-12-21 2006-05-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
MY130778A (en) 2001-02-09 2007-07-31 Vertex Pharma Heterocyclic inhibitiors of erk2 and uses thereof
US6759983B2 (en) * 2001-03-28 2004-07-06 Strategic Analysis, Inc. Method and device for precise geolocation of low-power, broadband, amplitude-modulated signals
ES2292753T4 (es) 2001-03-29 2009-02-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibidores de quinasas n-terminales c-jun (jnk) y otras proteina quinasas.
ATE339416T1 (de) 2001-04-13 2006-10-15 Vertex Pharma Inhibitoren von c-jun-n-terminalen-kinasen (jnk) und anderen proteinkinasen
AU2002305205A1 (en) 2001-04-20 2002-11-05 Jingrong Cao 9-deazaguanine derivatives as inhibitors of gsk-3
CA2446864C (en) * 2001-05-16 2011-02-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of src and other protein kinases
WO2002102800A1 (en) 2001-06-15 2002-12-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 5-(2-aminopyrimidin-4-yl) benzisoxazoles as protein kinase inhibitors
CA2452603A1 (en) * 2001-07-03 2003-01-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Isoxazolyl-pyrimidines as inhibitors of src and lck protein kinases
US6698980B2 (en) * 2001-07-30 2004-03-02 Stewart Mining Products Inc. Rock stabilizing apparatus and method
WO2003026665A1 (en) 2001-09-26 2003-04-03 Bayer Pharmaceuticals Corporation 2-phenylamino-4-(5-pyrazolylamino)-pyrimidine derivatives as kinase inhibitors, in particular, src kinase inhibitors
US6569499B2 (en) 2001-10-02 2003-05-27 Xerox Corporation Apparatus and method for coating photoreceptor substrates
EP2198867A1 (en) * 2001-12-07 2010-06-23 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Pyrimidine-based compounds useful as GSK-3 inhibitors
ATE468336T1 (de) 2002-03-15 2010-06-15 Vertex Pharma Azolylaminoazine als proteinkinasehemmer
ATE365733T1 (de) * 2002-03-15 2007-07-15 Vertex Pharma Zusammensetzungen brauchbar als protein-kinase- inhibitoren
WO2003077921A1 (en) 2002-03-15 2003-09-25 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Azinylaminoazoles as inhibitors of protein kinases
WO2003078426A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-25 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Azolylaminoazine as inhibitors of protein kinases
US7863282B2 (en) * 2003-03-14 2011-01-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions useful as inhibitors of protein kinases
US20030207873A1 (en) 2002-04-10 2003-11-06 Edmund Harrington Inhibitors of Src and other protein kinases
WO2003091246A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrrole derivatives as inhibitors of erk2 and uses thereof
MY141867A (en) 2002-06-20 2010-07-16 Vertex Pharma Substituted pyrimidines useful as protein kinase inhibitors
WO2004005283A1 (en) 2002-07-09 2004-01-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Imidazoles, oxazoles and thiazoles with protein kinase inhibiting activities
KR20050032105A (ko) * 2002-08-02 2005-04-06 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ｇｓｋ-3의 억제제로서 유용한 피라졸 조성물
US7262200B2 (en) 2002-10-25 2007-08-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indazolinone compositions useful as kinase inhibitors
JP2004224944A (ja) * 2003-01-24 2004-08-12 Kuraray Plast Co Ltd 高周波接着性に優れた熱可塑性樹脂組成物
EP1678169B1 (en) 2003-10-17 2009-07-22 Astrazeneca AB 4-(pyrazol-3-ylamino)pyrimidine derivatives for use in the treatment of cancer
MY141220A (en) * 2003-11-17 2010-03-31 Astrazeneca Ab Pyrazole derivatives as inhibitors of receptor tyrosine kinases
GB0402653D0 (en) * 2004-02-06 2004-03-10 Cyclacel Ltd Compounds
EP1910379B1 (en) 2005-07-28 2011-10-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Caspase inhibitor prodrugs
WO2007022384A2 (en) * 2005-08-18 2007-02-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazine kinase inhibitors
WO2007023382A2 (en) 2005-08-25 2007-03-01 Pfizer Inc. Pyrimidine amino pyrazole compounds, potent kinase inhibitors
WO2007041358A2 (en) * 2005-09-30 2007-04-12 Miikana Therapeutics, Inc. Substituted pyrazole compounds
CN103145702A (zh) 2005-11-03 2013-06-12 顶点医药品公司 用作激酶抑制剂的氨基嘧啶
EP1951716B1 (en) 2005-11-16 2011-05-04 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Aminopyrimidines useful as kinase inhibitors
NZ576750A (en) 2006-11-02 2012-01-12 Vertex Pharma Aminopyridines and aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
DE602007007985D1 (de) * 2006-12-19 2010-09-02 Vertex Pharma Als inhibitoren von proteinkinasen geeignete aminopyrimidine
WO2008080965A2 (en) * 2006-12-29 2008-07-10 Tibotec Pharmaceuticals Ltd. Hiv inhibiting 5,6-substituted pyrimidines
AU2008226461A1 (en) * 2007-03-09 2008-09-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyridines useful as inhibitors of protein kinases
CA2680029A1 (en) 2007-03-09 2008-09-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
WO2008112642A1 (en) * 2007-03-09 2008-09-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Aminopyrimidines useful as inhibitors of protein kinases
CN101675041A (zh) * 2007-03-20 2010-03-17 沃泰克斯药物股份有限公司 用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物
WO2008131103A2 (en) * 2007-04-17 2008-10-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Drug discovery methods for aurora kinase inhibitors
CN101801959A (zh) 2007-05-02 2010-08-11 沃泰克斯药物股份有限公司 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物
EP2152694A2 (en) 2007-05-02 2010-02-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazoles and pyrazoles useful as kinase inhibitors
CN101679387A (zh) * 2007-05-02 2010-03-24 沃泰克斯药物股份有限公司 可用作激酶抑制剂的氨基嘧啶类化合物
AU2008257044A1 (en) * 2007-05-24 2008-12-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazoles and pyrazoles useful as kinase inhibitors
CA2984994C (en) 2009-03-20 2020-03-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process for making modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator

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