BR112013007385A2 - leptinas altamente solúveis - Google Patents

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Abstract

POLIPEPTÍDEO QUIMÉRICO, SEU USO E COMPOSIÇÃO QUE O COMPREENDE. A presente invenção refere-se apolipeptídeo quiméricos e moléculas de ácido nucleico codificando polipeptídeo quiméricos. O polipeptídeo quimérico de acordo com a invenção compreende um polipeptídeo de leptina de selo tipo selvagem em que pelo menos uma região contígua de 1 a 30 aminoácidos de uma sequência de leptina de selo tipo selvagem foi substituída com uma região contígua de 1 a 30 aminoácidos de uma sequência de leptina humana madura. São também fornecidas composições farmacêuticas e uso na preparação de medicamentos para tratar doenças e distúrbios incluindo lipodistrofia, dislipidemia, hiperlipidemia, sobrepeso, obesidade, amenorreia hipotalâmica, doença de Alzheimer, deficiência de leptina, doença do fígado adiposo ou diabetes (incluindo tipo I e tipo II). Doenças e distúrbios adicionais que podem ser tratados pelos compostos e medicamentos descritos aqui incluem esteatoepatite não alcoólica (NASH) e doença do fígado adiposo não alcoólica (NAFLD), síndrome X metabólica e doença de Huntington.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "POLIPEP- TÍDEO QUIMÉRICO, SEU USO E COMPOSIÇÃO QUE O COMPREEN- DE".
REFERÊNCIAS CRUZADAS A PEDIDOS RELACIONADOS 5 Este pedido reivindica prioridade ao Pedido US No. 61/387.402 depositado em 28 de setembro de 2010, e Pedido US No. 61/422.091, de- positado em 10 de dezembro de 2010, as descrições dos quais estão aqui incorporados por referência.
LISTAGEM DE SEQUÊNCIA O presente pedido contém Listagem de Sequência que foi apre- sentada em formato ASCII por EFS-Web e é por este meio incorporada por referência em sua totalidade. A referida cópi da de ASCI, criada em 27 de Outubro de 2011, énomeada 1317WO1.txt e tem 159.244 bytes no tamanho.
ANTECEDENTE DA INVENÇÃO A invenção fornece novos compostos que demonstraram ativi- dade biológica. Os compostos também demonstram melhoria surpreendendo e significante em propriedades físicas, tais como solubilidade e estabilidade. Os compostos da invenção são com base em sequências de lep- tina descritas no Pedido U.S. No. 61/387.402 e Pedido US No. 61/422.091. Os compostos são surpreendentemente altamente solúveis e não demons- tram a tendência a se agregar, ao contrário das leptinas de ocorrência natu- ral. As propriedades físicas dos compostos facilitam a preparação de com- posições e formulações farmaceuticamente aceitáveis, solúveis, da mesma forma fornecidas pela invenção. Doenças receptivos a tal tratamento incluem lipodistrofia, dislipidemia, hiperlipidemia, sobrepeso, obesidade, amenorrea hipotalâmica, doença de Alzheimer, deficiência de leptina, doença da estea- tose hepática, diabetes (incluindo tipo eu e tipo II), esteatoepatite não alcoó- lica (NASH), doença da esteatose hepática não alcoólica (NAFLD), síndrome metabólica X, e Doença de Huntington, ou combinações dos mesmos. Permanece uma necessidade quanto a desenvolver polipeptí- deos úteis nas doenças, condições e distúrbios metabólicos acima descritos. Consequentemente, é um objetivo da presente invenção fornecer polipeptí-

Claims (32)

REIVINDICAÇÕES
1. Polipeptídeo quimérico, caracterizado pelo fato de que com- preende um polipeptídeo de leptina de selo tipo selvagem em que pelo me- nos uma região contígua de 1 a 30 aminoácidos de uma sequência de lepti- 5 na de selo tipo selvagem foi substituída com uma região contígua de 1 a 30 aminoácidos de uma sequência de leptina humana madura.
2. Polipeptídeo quimérico de acordo com a reivindicação 1, ca- racterizado pelo fato de que duas ou mais regiões contíguas de 1 a 30 ami- noácidos de uma sequência de leptina de selo tipo selvagem foram substitu- ídas em cada região com uma região contígua de 1 a 30 aminoácidos de uma sequência de leptina humana madura.
3. Polipeptídeo quimérico de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que uma sequência de leptina de selo tipo sel- vagem compreende a sequência de aminoácido de SEQ ID NO:28 ou SEQ ID NO:31.
4. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lepti- na humana madura compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51.
5. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lepti- na humana madura compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40,
SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos uma substituição de aminoácido em uma posição onde a 5 divergência é observada em uma posição correspondente em uma leptina de outras espécies.
6. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lepti- na humana madura compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos duas substituições de aminoácido em posições onde a di- vergência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
7. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lepti- na humana madura compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos three substituições de aminoácido em posições onde a di- vergência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
8. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lepti- na humana madura compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, 5 SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos four substituições de aminoácido em posições onde a diver- gência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
9. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lepti- na humana madura compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos cinco substituições de aminoácido em posições onde a di- vergência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
10. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lepti- na humana madura compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ
ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura 5 tem pelo menos seis substituições de aminoácido em posições onde a diver- gência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
11. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lep- tina humana madura compreende uma sequência de aminoácido seleciona- da do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos sete substituições de aminoácido em posições onde a divergência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
12. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lep- tina humana madura compreende uma sequência de aminoácido seleciona- da do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos oito substituições de aminoácido em posições onde a divergência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
13. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lep- tina humana madura compreende uma sequência de aminoácido seleciona- 5 da do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos nove substituições de aminoácido em posições on- de a divergência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
14. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado pelo fato de que uma sequência de lep- tina humana madura compreende uma sequência de aminoácido seleciona- da do grupo que consiste em: SEQ ID NO:12, SEQ ID NO:13, SEQ ID NO:20, SEQ ID NO:21, SEQ ID NO:22, SEQ ID NO:23, SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:25, SEQ ID NO:26, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:34, SEQ ID NO:35, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:37, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:39, SEQ ID NO:40, SEQ ID NO:41, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50, e SEQ ID NO:51, em que a sequência de leptina humana madura tem pelo menos dez substituições de aminoácido em posições onde a divergência é observada em posições correspondentes em uma leptina de outras espécies.
15. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que a sequência de leptina humana madura compreende a sequência de aminoácido de SEQ ID NO:24.
16. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri-
co compreende uma sequência de aminoácido com pelo menos 80% de identidade com uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:32, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:55, SEQ ID 5 NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:58, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:68, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:70, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:74, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:80, ID NO:81, SEQ ID NO:82, SEQ ID NO:83, SEQ ID NO:84, e SEQ ID NO:85.
17. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende uma sequência de aminoácido com pelo menos 80% de identidade com uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:32, SEQ ID NO:33.
18. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende uma sequência de aminoácido com pelo menos 80% de identidade a sequência de aminoácido de SEQ ID NO:33.
19. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende uma sequência de aminoácido com pelo menos 90% de identidade a sequência de aminoácido de SEQ ID NO:33.
20. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:32, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53, SEQ ID NO:54, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:58, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:60, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:63, SEQ ID NO:64, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:66, SEQ ID NO:67, SEQ ID NO:68, SEQ ID NO:69, SEQ ID
NO:70, SEQ ID NO:71, SEQ ID NO:72, SEQ ID NO:73, SEQ ID NO:74, SEQ ID NO:75, SEQ ID NO:76, SEQ ID NO:77, SEQ ID NO:78, SEQ ID NO:79, SEQ ID NO:80, ID NO:81, SEQ ID NO:82, SEQ ID NO:83, SEQ ID NO:84, e SEQ ID NO:85. 5 21. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende uma sequência de aminoácido selecionada do grupo que consiste em: SEQ ID NO:29, SEQ ID NO:30, SEQ ID NO:32, SEQ ID NO:33.
22. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende a sequência de aminoácido de SEQ ID NO:29.
23. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende a sequência de aminoácido de SEQ ID NO:30.
24. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende a sequência de aminoácido de SEQ ID NO:32.
25. Polipeptídeo quimérico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que o polipeptídeo quiméri- co compreende a sequência de aminoácido de SEQ ID NO:33.
26. Uso de um polipeptídeo quimérico como definido em qual- quer uma das reivindicações 1 a 25, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de uma composição farmacêutica para tratar uma doença ou distúrbio em um indivíduo em necessidade do mesmo.
27. Uso de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que a doença ou distúrbio é doença ou distúrbio é selecionado do grupo que consiste em: lipodistrofia, dislipidemia, hiperlipidemia, sobrepeso, obesidade, amenorreia hipotalâmica, doença de Alzheimer, deficiência de leptina, doença do fígado adiposo, diabetes (incluindo tipo I e tipo II), estea- toepatite não alcoólica (NASH), doença do fígado adiposo não alcoólica (NAFLD), síndrome X metabólica e doença de Huntington.
28. Uso de acordo com a reivindicação 26 ou 27, caracterizado pelo fato de que a doença ou distúrbio é lipodistrofia, dislipidemia, hiperlipi- demia, sobrepeso, obesidade, amenorreia hipotalâmica, doença de Alzhei- mer, deficiência de leptina, doença do fígado adiposo ou diabetes.
29. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 26 a 5 28, caracterizado pelo fato de que a doença ou distúrbio é diabetes tipo I ou diabetes tipo II.
30. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 26 a 28, caracterizado pelo fato de que a doença ou distúrbio é obesidade.
31. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 26 a 28, caracterizado pelo fato de que a doença ou distúrbio é lipodistrofia ou deficiência de leptina.
32. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um polipeptídeo quimérico como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 25 e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
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