WO2011026401A1

WO2011026401A1 - 偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物及其医药用途

Info

Publication number: WO2011026401A1
Application number: PCT/CN2010/076331
Authority: WO
Inventors: 冯子侠; 刘晓东
Original assignee: 奇复康药物研发(苏州)有限公司
Priority date: 2009-09-01
Filing date: 2010-08-25
Publication date: 2011-03-10
Also published as: CN102000072A

Description

偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物及其医药用途技术领域

本发明涉及一类抗肿瘤药物及其医药用途，尤其涉及一类能在体内酶解释放一氧化氮自由基，具有抗肿瘤双效活性，可用于制备治疗肿瘤、癌症等疾病的药物。背景技术

一氧化氮（以下简写为 NO )作为一种自由基性质的气体，在人体中是一个低分子量和具有疏水性质的生物活性分子，可以自由穿过细胞膜，作用于胞内的靶分子。理论上一氧化氮可以到达细胞和组织内任何部位，能够在体内调控多种细胞功能和产生广泛的生物效应，所以一氧化氮供体和调节剂在新药研究开发方面有重要的应用价值。

NO作为一种生物效应分子，参与机体内各种重要的生理效应，维持机体细胞和组织正常的生命活动。在心血管系统， NO具有扩张血管，抑制血小板聚集并粘附于血管内皮的作用，对于维持血管张力、血压及血流动力学方面起着重要作用；在免疫系统， NO既是白细胞、淋巴细胞、巨噬细胞的效应分子，也是它们的调节分子。在通常的免疫过程中， NO作为细胞毒分子杀灭入侵的 ^：生物包括细菌、真菌及寄生虫等病原体和肿瘤细胞；在中枢神经系统， NO作为信息分子起重要作用，参与动物的学习、记忆过程，参与神经递质释放的调节、脑血流量以及痛觉的调节等；在外周神经系统， NO可能是非肾上腺素能、非胆碱能神经的递质或介质，参与胃肠功能调节； NO还可通过扩张胃肠粘膜血管，调节胃粘膜的血流量，促进胃粘液的分泌及粘膜损伤后的修复而具有保护粘膜作用；在内分泌系统， NO能刺激生长素、胰岛素等的分泌；在呼吸系统， NO可调节基础肺血管张力，对保持气道舒张、正常通气 /血流比和粘膜分泌有着重要作用。

可见内源性 NO在维持机体多个系统的生理功能中起重要作用。 NO供体和抗肿瘤药物的联合使用大大增强了抗肿瘤药物的作用，一些 NO供体已被证明具有良好的抗癌活性，显示出其应用的潜力和价值。也有把抗肿瘤药物和 NO供体连接起来制成前体药物，通过控制 NO在适当的部位酶解释放并杀死肿瘤细胞，实现药物的靶向性，是 NO供体类药物治疗癌症的一个新领域和重要的发展方向。然而许多急慢性疾病会导致 NO 生成减少，因此补充外源性 NO对于疾病的治疗是非常必要的。

目前，天然药物是抗肿瘤药中的重要类别。这类药物不但在干扰癌细胞的微蛋白合成中发挥主要作用，而且还具有诱导细胞凋亡、抗血管形成的积极作用，再加上天然药物毒副作用小的特点，已获得越来越广泛的应用。但是目前大部分的天然抗肿瘤药物作用不够强的弱点限制了它们的进一步应用。发明内容

本发明的目的在于提出一种具有通式（ I )的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，及其在药学上可接受的盐、盐的水合物、溶剂化物，或以其为活性成分的前体药物加，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成的药剂。以增强该天然药物的抗肿瘤活性、避免非天然药物的毒副作用。

本发明的第一个目的，将通过如下技术方案来实现：

偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述抗肿瘤天然药物具有通式 ( I ) A-X-B的结构：其中，

A = R-T, 为结合有化学基团 T的具抗肿瘤活性的天然成分；

X为连接天然成分 A和一氧化氮供体 B , 并对应取决于基团 T类型的连接结构；

B为具有释放出一氧化氮能力的供体。

进一步地，所述化学基团 T包括： -C(=0)0-、 -NH -、 -N -、 -0-、 -S -、 -CONH -、 -CON -、 -NHCON -、 -OCONH -、 -S0₂N -、 -S0₂NH-中的一种或多种混合。

进一步地，所述天然成分 A 结合一氧化氮供体 B 前为：芦荟大黄素 ( Aloe-emodin,Rhabarberone )、扁兆武 ( Amygdalin )、山莱菪减 ( Anisodamine )、小臂胺 ( Berbaraiine )、鸦胆子素 A( Bruceine A )、鸦胆子素 B ( Bruceine B )、鸦胆子素 C( Bruceine C )、鸦胆子素 D ( Bruceine D )、鸦胆子苦醇（ Brusatol )、喜树碱（ Canptothecine )、三尖衫碱（ Cephalotaxine )、白屈菜碱（ Chelidonine )、葫芦素 B ( Cucurbitacin B )、葫芦素 E ( Cucurbitacin E )、姜黄醇 ( Curcumol )、力口拿大麻武 ( Cymarin )、双香豆素 ( Dicoumarin )、大黄素（Emodin )、燃料木素（ Genistein )、人参皂甙（ Rbl,Rb2,Rc,Rd,Re,Rf,gl )、奥可梯木碱（ Glaziovine )、棉酚（ Gossypol )、汉防己乙素 ( Hanfanggichin B )、哈林通碱 ( Harringtonine )、堆心菊素( Helenalin )、次臂减 *( Oxyacanthine )*、氧苦参减( Oxymatrine )、柔毛地胆亭（ Molephantin )、柔毛地胆宁（ Molephatinin )、单尿豆碱（ Menocrotaline )、杨梅黄素 ( Myricetin )、美登减 ( magtansine )、毛拷利素( Lasiokaurin )、全缘减 ( Lntegerimine )、石蒜碱（ Lycorine )、盾叶鬼臼素（ Peltatin )、盾叶鬼臼素（ Peltatin )、扁塑藤素（ Pristimerin )、 i石縣碱（ Pseudolycorin )、冬凌草素（ Rubescensin )、冬凌草乙素 ( Rubescensin B )、柴胡皂代 A ( Saikosaponin A )、柴胡皂代 D ( Saikosaponin D )、紫草素（ Schikonin )、谷栽醇（ Stitosterol )、四氢大麻酚（ Tetrahydrocannabinol )、雷公藤（ Triptolide )、恩其明 ( Ungeremine )、长春碱 * ( Vinblastine )、醛基长春碱（ Vincristine )、土贝母苷甲 ( Tubeimoside )、大叶茜草素（ Mollugin )、小豆蔻明（ Cardamonin )、山姜素（ Alpinetin )、五味子醇甲（Schizandrin ), 水飞蓟宾（ Silybin )、牛蒡苷（ Arctiin )、牛横胆酸钠 ( Sodium Tauurocholate )、贝母素乙（ Peinine )、贝母素甲（ Peimine )、西红花甘 -II ( Crocin-II )、防己诺林碱（ Fangchinoline )、异秦皮啶（ Isofraxidin )、异鼠李素（ Isorhamnetin )、左旋紫草素（Snikonin )、汉黄芩素（ Wogonin )、甘草甘（ Liquiritin )、松果菊苷（ Echinacoside )、表儿茶素（ Epicutechin ),姜黄素（ Curcumin ),栀子苷（ Geniposide ),重楼皂苷 I ( Chonglou Saponin I )、重楼皂苷 II ( Chonglou Saponin II )、重楼皂苷 VI ( Chonglou Saponin VI )、酯蟾毒配基（ Resibufogenin )、莪术醇（ Curcumerol )、高良姜素（ Galangin )、淫羊藿苷（ Icarrin )、羟基红花黄色素 A ( Hydroxysattlor yellow A )、蔓荆子黄素 ( Vitexicapin )、高三尖衫酯碱 ( Homo harringtonine )、马免铃酸 ( Aristoiochis acid )、富马酸 ( Fumaric acid )、没食子酸 ( Gallic acid )、甘草次酸 ( Glycyrrhetinic acid )、甘草酸 ( Glycyrrhizic acid )、药才艮碱 ( Jatrorrhizine )、齐墩果酸（ Oleanolic acid )、大黄酸、熊果酸（ Ursolic acid )、丹酚酸 B ( Salvianolic acid B )、 Z竹节香附素 A ( RaddeaninA )、白果新酸 ( Ginkgoneolic acid )、胆红素（ Bilirubin )、常春藤皂苷元（ Hederagenin )、土荆皮乙酸（ Pseudolaric acid )、秋水仙胺（ Colchamine )、秋水仙碱（ Colchicine )、敏玉红（ Indirubin )、派利文碱 ( Perivine ) , 番茄碱（Tomatine )或紫杉醇（ Paditaxe )之一的具有化学基团 T的天然产物。

进一步地，具有释放出一氧化氮能力的供体 B的结构包括：

-C1到 C20的直链或带支链的烷链，并选择性地连有取代基 -OH, -0- , -Br, -C1, -I, -F, -ON0₂或 y;其中 y是 -(C1-C10 alkyl)-ON0₂, -O(Cl-C10 alkyl)-ON0₂, -OC(O)(Cl-C10 alkyl)-ON0₂。

通式（ II )结构为

式中 yl是 C(CH₃)₂, y2是 O, y3是 C(O) , y4是 O, y5 -(CH₂)i.₂-(x)o-i-(CH2)₀-i; y5中 x是 -O-或 -CR ²- , R¹和 R²是独立的含有氢或 C1-C4的皖基。

通式（ III )结构为

，式中 Y⁶是 CI到 C20的直链或有支链的烷链，或 -CH=CH-(CH₂)n²- , ( n²=0-10 )； 1 是11、 C1-C5的烷链、 -COOH或 -OR' , 所述 R，是 H或 C1-C3的烷链； Z是 -0-、 -C(0)0-或 -OC(O)-; n是 0或 1 ; nl 是 0或 ^ 是到 C20的直链或有支链的烷链，并选择性地连有一个或多个取代基 -OH、 -0- -Br -Cl -1 -F -ONO

d) :

通式（IV)结构为—

e) :

通式（ V ) 结构为 (^CH2)n5 ^Z1 式中

ZiA^ C O-或 OC(O)-, 其中 n6=0-20 n7=l-20

f): （VI)结构为 [(CH2)_n8 Q]_n9

Jn10 ΌΝΟ 通式式中 Q是 O或 S; n8=l-6; n9=l-10; nl0=l-10

g) :

通式（ YD ) 的结构为

，式中 ηΐι=0-10; nl2=l-10; Rl R2 R3 R4是相同或相异的基团，分别为含 H, C1-C4的直链或有支链的烷基； W是饱和或非包和的五、六元杂环，含一个或一个以上的 N 0 S

h) :

通式（ ) 的结构为

i):

通式（IX) 的结构为

, 式中 V是- CH₂ - -0- -S-或 -NH-, U是 C1-C10 的烷链，或选择取代 -OH -NH - -CN -CONH₂ -N0₂ -COCH₃ -COOCH₃ -NHCOCH₃ -CON(R₅)(R₆)之一；其中 R₅和 R₆为相同或相异的 C1-C3烷链。

j): 通式（ X )的结构为

，式中 η13=1-8; Υ⁷是胺基并连接如下结构:

, 其中 R₇,

R₈是独立的 C1-C12的直烷链、 C3-C12的有支链的烷链、 C3-C12的含双键的不饱和烷链，或与氮原子一起构成杂环； R₉、 RIQ、 Rii和 Ri₂分别是 H、 C1-C8的直烷链、 C3-C8的有支链的烷链、芳基和 -C(0)-、 C(0)0-R₁₂、 -C(0)NH-R₁₂、 -C(0)S-R₁₂之一。

k ):

通式（XI )的结构为

, 式中 R13 A H、 F、 Cl、 Br、 I、 OH、 OR

C1-C8的直烷链；其中 R₁₄是 C1~C8的直烷链。

1 ):

通式（ΧΠ )的结构为

, 式中 R₁₄ H、 _{C 1}、 _F、 Br、 I、

C1-C5的烷链、 -COOH或 -OR，， nl5=l-8; 其中 R，是 H或 C1-C3的烷链。

m ):

通式（ ΧΠΙ )的结构为

，式中 R₁₅、 R₁₆是独立的 C1-C12 的相同或相异的直烷链； R₁₇是 -C(0)-R₁₂、 C(0)0-R₁₂、 -C(0)NH-R₁₂、 -C(0)S-R₁₂、 C1-C5 的烷链之一； nl6=l-8。

更进一步地，所述通式（ VD ) 中杂环 W的结构选择为：

更进一步地，当 T为 -C(=0)0-时，所述连接基团 X的结构通式为 z \或直接与 B相连；其中， R₁₈、 R₁₉是甲基或乙基。而当 T为 -NH -、 -0-、 -S -、 -CONH -、 -CON -、

NHCON -、 -OCONH -、 -S0₂N -、 -N -、 -S02NH-时，所述偶联基团

；其中， R₂₀为 ₀、 N、 s。

本发明的第二个目的，将通过以下技术方案来实现：

具有通式（ I )所示的天然成分和一氧化氮供体偶联药物，其特征在于：在治疗癌症中的应用，包括肝癌、肺癌、结肠直肠癌、子官颈癌、淋巴癌、胰脏癌、乳癌、胃癌、口腔癌、食道癌、鼻咽癌、摄护腺癌、胰脏癌、血癌、皮肤癌、骨癌、肾癌或其他癌变症状。

此外，以通式（ I )所示的偶联药物为核心成分的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物为由通式（ I )所述的任一化合物或其药学上可接受的盐、盐的水合物、溶剂化物，或以其为活性成分的前体药物，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成的药剂。

进一步地，所述药剂形式包括片剂、胶嚢、丸剂、注射剂、緩释制剂、控释制剂以及各种微粒给药系统。

本发明偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物投入应用后，能够有效增强天然药物成分的抗肿瘤活性及选择性，避免非天然药物的毒副作用。此外，由该偶联药物制成的药剂，能够广泛而有效地应用于癌症的治疗之中，具有突出的双效抑制病变细胞的能力。附图说明：

图 1是本发明一实施例化合物 III在 24、 48、 72小时内对 AGS细胞的抑制率曲线图；图 2是本发明一实施例化合物 V在 24、 48、 72小时内对 AGS细胞的抑制率曲线图；图 3是本发明一实施例化合物 II在 24、 48、 72小时内对 AGS细胞的抑制率曲线图；图 4是本发明以实施例化合物 I在 24、 48、 72小时内对 AGS细胞的抑制率曲线图；图 5是化合物 II作用于 Hela细胞 48小时的抑制率曲线图；

图 6是化合物 III作用于 Hela细胞 48小时的抑制率曲线图；

图 7是单一熊果酸作用于 Hela细胞 48小时的抑制率曲线图；

图 8是本发明偶联药物的药用机理的示意图。具体实施方式

以下通过釆用熊果酸和大黄酸为天然成分的实施例，用化学合成方法将该天然成分 A 以其连接结构 X与一氧化氮供体 B连接起来，形成具有体内酶解释放一氧化氮的偶联化合物，进而将其制成药学上可接受的盐、盐水化合物、溶剂化物、或以其为活性成分的前体药物，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成的药剂。对本发明抗肿瘤天然药物的通式结构、制备过程及预防、治疗病变的生物试验作进一步地详细说明。其中：

其中 A = R-T,为结合有化学基团 T的具抗肿瘤活性的天然成分，为自然界普遍存在、易于提取得到的天然产物，包括芦荟大黄素、扁桃甙、大黄素、熊果素等；

X为连接天然成分 A和一氧化氮供体 B ,并对应取决于基团 T类型的连接结构。当 T 为 -C(=0)0-时，所述连接基团 X的结构通式为 ^ ^或直接与 B相连，其中， R₁₈、 R₁₉是甲基或乙基；

当 T为-顧-、 -0-、 -S -、 -CONH -、 -CON -、 -NHCON -、 -OCONH -、 -S0₂N -、

-N -、 -S0₂NH-时，所述偶联基团 X的结构通式为

、 R₂₀或 , 其中， R₂₀为 0、 N、 S。

B为具有释放出一氧化氮能力的供体。该一氧化氮供体 B的结构具有多样性，其可以是： C1到 C20的直链或带支链的烷链，并选择性地连有取代基 -OH, -0- , -Br, -C1, -I, -F , -ON0₂或 y; 其中 y是 -(C1-C10 alkyl)-ON0₂ , -O(Cl-C10 alkyl)-0 ON0₂, -OC(O)(Cl-C10 alkyl)-ON0₂;

或为具有如下结构通式的可选类型：

式中 yl是 C(CH₃)₂, y2是 O, y3是 C(O), y4是 O, y5 -(CH₂)i.₂-(x)o-i-(CH2)₀-i; y5 x是 -O-或 -CR ²-, R¹和 R²是独立的含有氢或 C1-C4的皖基；

式中， Y⁶是 CI到 C20的直链或有支链的烷链，或 -CH=CH-(CH₂)n²-, (n²=0-10); R 是 C1-C5的烷链、 -COOH或 -OR，，所述 R，是 H或 C1-C3的烷链； Z是 -0-、 -C(0)0- 或 -OC(O)-; n是 0或 1; nl是 0或 1; 是 C1到 C20的直链或有支链的烷链，并选择性地连有一个或多个取代基 -OH、 -0-、 -Br、 -Cl、 -1、 -F、 -ON0₂;

式中 n3=0-5; n4=l-5;

式中 Zi A-QC O-或 OC(O)-, 其中 n6=0-20、 n7=l-20;

[(CH2)_n8 Q]_n9 (CH₂)_n10 ON0_{2 ( VI )} n8=l-6; n9=l-10; nl0=l-10;

式中 nll=0-10; nl2=l-10; Rl、 R2、 R3、 R4是相同或相异的基团，分别为含 H, C1-C4的直链或有支链的烷基； W是饱和或非饱和的五、六元杂环，含一个或一个以上的1^、 0、 S; 其中所述杂环 W的结构选择为

;

式中 V是 ~CH₂-、-0-、-S-或 -NH- , U是 C1-C10的烷链，或选择取代 -OH、- NH -、 -CN、 -CONH₂、 -N0₂、 -NHCOCH₃、 -COCH₃、 -COOCH₃、 -CON(R₅)(R₆); 其中 R₅和 R₆为相同或相 -C3的烷链；

式中 nl3=l-8; Y⁷是胺基并连接如下结构:

(d) , 其中 R

R₈是独立的 C1-C12的直烷链、 C3-C12的有支链的烷链、 C3-C12的含双键的不饱和烷链, 或与氮原子一起构成杂环； R₉、 RIQ、 Rii和 Ri₂分别是 H、 C1-C8的直烷链、 C3-C8的有支链的烷链、芳基和 -C(0)-、 C(0)0-R₁₂、 -C(0)NH-R₁₂、 -C(0)S-R₁₂之一；

式中 R13 A H、 F、 Cl、 Br、 I、 OH、 OR₁₄、 C1-C8的直烷链；其中 R₁₄是 C1~C8的直烷链

( X II )

式中 R₁₄A H、 Cl、 F、 Br、 I、 CI— C5的烷链、 -COOH或— OR，， nl5=l— 8; 其中 R，是 H或 C1-C3的烷链

式中 R₁₅、 R₁₆是独立的 C1-C12的相同或相异的直烷链； R₁₇是 -C(0)-R₁₂、 C(0)0-R₁₂、 -C(0)NH-R₁₂、 -C(0)S-R₁₂、 CI— C5的烷链之一； nl6 =l— 8。

选用上述一氧化氮供体 B 多种形式中的一种或多种，分别与自然界的抗肿瘤天然药物相偶联，从而结合成一种新型的具有体外稳定性、而在体内能够酶解释放出一氧化氮的药品。

实施例一：大黄酸和一氧化氮供体偶联化合物 I

该偶联化合物 I的合成方程式为：

Br^^OH

NaOH, THF

I

该偶联化合物 I的化学名：

4-(2-(4,5-dihydroxy-9,10-dioxo-9,10-dihydroanthracene-2-carbonyloxy)ethoxy)

- 3 - (phenylsulfonyl) - 1 ,2,5-oxadiazole 2- oxide。

该偶联化合物 I的制备过程为：

第一步：将质量比为 50%的 NaOH ( 70mmol ) 慢慢滴加到化合物 2 (化学名：

3,4-bis(phenylsulfonyl)-l,2,5-oxadiazole 2-oxide , 70mmol )和溴乙醇 ( 70mmol ) 的 THF

( 400ml )溶液，所得混合物在室温下搅拌 16小时，再滴加质量比为 50%的 NaOH( 20mmol ) 并搅拌 2 小时以完成反应。将有机溶剂蒸发掉并将剩余物质倒到水水中。用二氯甲烷

( 100ml )重复提取产物三次，合并有机层，用无水硫酸镁干燥、过滤并蒸发溶剂。用硅胶层析（ Haxane-20%haxane/EtOAc ) 纯化得化合物 3 ( 10.2g )。

第二步：将化合物 1(大黄酸， 18mmol )溶于 DMF( 50ml )中，再加入 Na₂C0₃( 20mmol ) 和 KI ( 5mmol ), 搅拌 15分钟后加入化合物 3 ( 15mmol ), 所得化合物在室温下搅拌 16 小时。过滤去固体后用 EtOAc ( 30ml )重复提取产物三次，合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂。用硅胶层析（ Haxane-20%haxane/EtOAc )纯化得化合物 I ( 1.5g )。经上述方法制备所得的偶联化合物 I ,经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物 I确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹ H NMR ( DMSO-d6 ) 7.99-7.42 ( m, 9H ) , 4.81-4.78 ( m, 2Η ) , 4.73-4.68

(m, 2Η) , 5.37-5.30 ( m, 1Η ) , 4.09-3.96 ( m, 5H ) , 3.83-3.80 ( m, 1H ) , 3.69-3.66 (m, 1H) , 3.56-3.54 (m, 1H ) , 2.29-2.24 ( m, 5H ) , 2.11-2.09 ( m, 2H ) , 1.64-1.63 (m, 1H) , 1.62-1.61 ( m, 3H);

¹³C NMR ( DMSO-d6 ) 191.82 (C) , 181.16 (C) , 164.28 (C) , 161.92 (C) ,

161.47 (C) , 159.25 (C) , 138.16 (CH) , 137.69 (C) , 136.68 (CH) , 136.59 (C) , 134.56 ( C ) , 133.76 ( C ) , 130.39 (CH) , 126.71 ( CH ) , 125.16 (CH) , 124.66 (CH) , 119.96 (CH) , 119.84 (CH) , 119.03 (CH) , 116.84 ( C ) , 110.99 ( C ) , 69.64 ( CH₂ ) , 63.56 (CH₂)。 MS ( APCI ) mz 553.1 ( M+H ) +, Anal。

CalcdforC₂₅H₁₆N₂O_uS:C, 54.35； H, 2.92; N, 5.07。 Found:C，54.17; H, 2.88； N, 4.80。

实施例二：大黄酸和一氧化氮供体偶联化合物 II

该偶联化合物

1 (Rhein

II

该偶联化合物 II的化学名：

(Z)-2-((4,5-dihydroxy-9,10-dioxo-9,10-dihydroanthracene-2-carbonyloxy)

methoxy)- 1 - (pyrrolidin- 1 -yl)diazene oxide。

该偶联化合物 II的制备过程为：

将化合物 1 (大黄酸， 14mmol)溶于 DMF (100ml) , 加入 Na₂C0₃ ( 15mmol )和

KI ( 2mmol ) , 搅拌 15 分钟后加化合物 4 ( 化学名：

(Z)-2-(chloromethoxy)-l -(pyrrolidin- l-yl)diazene oxide, 12mmol ) 。所得化合物在 100 °C温度下搅拌 16小时。冷却后过滤去固体，用 EtOAc (30ml)重复提取产物三次，合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂。用硅胶层析（ Haxane-20%haxane/EtOAc ) 纯化得化合物 II ( 0.8g ) 。

经上述方法制备所得的偶联化合物 II ,经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物 II确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹ H NMR ( DMSO-d6 ) 8.14 ( s, 1H ) , 7.87-7.74 ( m, 3H ) , 7.44-7.42 ( d,

1H, J=6Hz ) , 6.03 (s, 2H ) , 3.51-3.37 ( m, 4H ) , 1.89-1.85 ( m, 4H ) ；

¹³C NMR ( DMSO-d6 ) 191.54 (C) , 181.24 (C) , 163.45 (C) , 161.91 (C) ,

161.43 (C) , 136.13 (CH) , 135.03 (C) , 134.62 (C) , 133.60 (C) , 125.19 (CH) , 124.72(C) , 120.05 ( CH ) , 119.94(C) , 118.97 (CH) , 116.75(C) , 86.87 ( CH₂ ) , 50.94 (CH₂) , 22.94 (CH₂)。

MS ( APCI ) mJz 428.0 ( M+H ) +, Anal。

CalcdforC₂₀H₁₇N₃O₈:C, 56.21； H, 4.01； N, 9.83。 Found:C, 55.89； H, 4.23； N, 9.47。

实施例三：熊果酸和一氧化氮供体偶联化合物 III

该偶联化合物 III的化结构为：

该偶联化合物 III的化学名：

(Z)-2-(((lS,2R,6aS,6bR,10S,12aR,12bR)-10-hydroxy-l,2,6a,6b,9,9,12a-heptam

ethyl-l，2，3，4，4a，5，6，6a，6b，7，8，8a，9，10，ll，12，12a，12b，13，14b-icosahydropicene-4a-car bonyloxy)methoxy)-l - (pyrrolidin- 1 -yl)diazene oxide。

该偶联化合物 III的制备过程与实施例二的制备过程相同，仅天然成分发生了变换，故不再赘述。该制得的偶联化合物 III (2.0克）经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物 III确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹ H NMR ( DMSO-d6 ) 5.74 ( s, 2H), 5.24 ( s, 1H), 3.59-3.54 ( m, 4H),

3.24-3.19 (m, 1H), 1.98-1.89 (m, 8H), 1.68-1.56 (m, 9H), 1.33-1.25 (m, 8H), 1.05-0.80 (m, 24H); ¹³C NMR ( DMSO-d6 ) 176.22 ( C ), 137.72 ( C ), 125.85 ( CH ), 87.51 ( CH₂ ), 76.95

(CH), 77.40 (C), 76.56 (C), 76.54 (C), 56.19 (CH), 52.54 (CH), 50.72 (CH₂), 48.22(C), 47.53 (CH), 41.07(C), 39.53 (CH), 38.97 (CH), 38.73 (CH), 36.68 (CH₂), 36.61 (CH₂), 36.40 (C), 36.28 ( CH₂ ), 33.01 (CH₂), 30.54 ( CH₂ ), 28.09 (CH), 27.87 (CH₂), 27.18 (CH₂), 24.00 (CH₂), 23.47 (CH), 23.24 (CH₂), 22.91 (CH₂), 21.08 (CH), 16.25 (CH₂), 16.90 (CH), 16.89 (CH), 15.56 (CH), 15.36 (CH)。

MS ( APCI ) m/z 617.4 ( M+NH₄ ) +, Anal。

CalcdforC₃₅H₅₇N₃0₅:C, 70.08； H, 9.58； N, 7.00。 Found:C, 69.68； H, 9.46； N, 6.78。

实施例四：熊果酸和一氧化氮供体偶联化合物 IV

该偶联化合物 IV的化学名：

3-cyano-4-(((lS,2R,6aS,6bR,10S,12aR,12bR)-10-hydroxy-l,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl- l，2，3，4，4a，5，6，6a，6b，7，8，8a，9，10，ll，12，12a，12b，13，14b-icosahydropic

ene-4a-carbonyloxy)methyl)- 1 ,2,5-oxadiazole 2-oxide。

该偶联化合物 IV的制备过程为：

将化合物 5 (熊果酸， 3mmol)溶于 DMF (30ml), 加入 Na₂C0₃ ( 3.6mmol )和 KI ( lmmol ),搅拌 15分钟后加化合物 6 (化学名： 4-(bromomethyl)-3-cyano-l,2,5-oxadiazole 2-oxide, 2.5mmol )。所得化合物在室温下搅拌 16小时。过滤去固体后用 EtOAc ( 30ml ) 重复提取产物三次，合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂。用硅胶层析 ( Haxane-20 haxane/EtOAc ) 纯化得化合物 IV ( 0.5g )。

经上述方法制备所得的偶联化合物 IV经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物 IV确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹ H NMR ( CDCI3 ) 5.30 ( s, 1H), 5.29-5.07 ( m, 2H), 3.23-3.18 ( m, 1H),

2.26-2.22 ( d, 1H, J=12Hz ), 1.90-1.87 ( m, 2H), 1.75-1.56 ( m, 12H), 1.54-1.45 ( m, 6H), 1.08-0.86 (m, 24H); ¹³C NMR ( CDCI3) 176.31(C), 152.55 (C), 137.64 (C), 126.20 (CH), 104.87 (C),

78.97 (CH), 55.54 (CH₂), 55.19 (CH), 52.80 (CH), 48.63 (C), 47.43 (CH), 42.01 (C), 41.07 (C), 39.49 (C), 38.97 (CH), 38.71 (CH), 38.58 (CH₂), 36.94 (C),

36.43 (CH₂), 32.90 (CH₂), 30.85 (CH), 30.45 (CH₂), 29.70 (C), 28.09 (CH), 27.96

(CH₂), 27.19 (CH₂), 24.15 (CH₂), 23.51 (CH), 23.21 ( CH₂ ), 21.03 (CH), 18.26 (CH₂), 16.86 (CH), 16.89 (CH), 15.58 (CH), 15.37 (CH)。

MS ( APCI ) mJz 580.6 ( M+H ) +, Anal。

CalcdforC₃₄H₄₉N₃0₅:C, 70.44; H, 8.52; N, 7.25。 Found:C, 70.32; H, 8.33； N, 6.93。

实施例五：熊果酸和一氧化氮供体偶联化合物 V

该偶联化合物 V的

V

该偶联化合物 V的化学名：

4-(2-((lS,2R,6aS,6bR,10S,12aR,12bR)-10-hydroxy-l,2,6a,6b,9,9,12a-heptamet hyl-l，2，3，4，4a，5，6，6a，6b，7，8，8a，9，10，ll，12，12a，12b，13，14b-icosahydropicene-4a-carbo nyloxy)ethoxy)-3-(phenylsulfonyl)-l,2,5-oxadiazole 2-oxide。

该偶联化合物 V的制备过程与实施例一的制备过程相同，故不再赘述。该制得的偶联化合物 V (5.0克）经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物 V 确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

经上述方法制备所得的偶联化合物 V经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物 V确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹ H NMR ( CDCI3 ) 8.08-8.04 ( m, 2H), 7.76-7.74 ( m, 1H), 7.64-7.59 ( m,

2H), 5.27-5.25 ( m, 1H ), 4.62-4.69 ( m, 2H), 4.44-4.41 ( m, 2H), 3.23-3.18 ( m, 1H), 2.26-2.24 ( d, 1H, J=6Hz ), 1.73-1.24 ( m, 20H), 1.08-0.78 ( 24H );

¹³C NMR ( CDCI3 ) 177.21 (C), 158.66 (C), 137.06 (C), 135.53 (CH), 129.57

(CH), 128.49 (CH), 125.76 (CH), 110.41 (C), 78.92 (CH), 77.41 (C), 76.96 (C), 76.56 (C), 69.01 (CH₂), 61.97 (CH₂), 61.02 (CH₂), 56.16 (CH), 52.82 (CH), 48.20 (C), 48.05 (C), 47.47 ( CH ), 42.02 (C), 39.51 (C), 39.49 (C), 38.98 (CH), 38.67 (CH₂), 36.87 (C), 36.66 (CH₂), 32.90 ( CH₂ ), 30.56 (CH₂), 28.07 (CH), 27.95 ( CH₂ ),

27.13 (CH), 24.13 (CH₂), 23.45 (CH), 23.22 ( CH₂ ), 21.07 (CH), 18.22 (CH₂), 17.01 (CH), 16.91 (CH), 15.55 (CH), 15.34 (CH)。

MS ( APCI ) m/z 725.3 ( M+H ) +, Anal。

CalcdforC₄₀H₅₆N₂O₈S:C, 66.27; H, 7.79； N, 3.86。 Found:C, 66.22; H, 7.69； N, 3.76。

上述实施例中以大黄酸和熊果酸偶联一氧化氮供体制成的抗肿瘤药物成分，以下与单纯的熊果酸和大黄酸作为对照，釆用国际标准的 MTT法检测所制成的化合物对肿瘤细胞生长的抑制活性。

实验材料

培养基 RPMI 1640, 灭活新生小牛血清青霉素（ 10万 u/L), 链霉素（0.1g/L), 四甲基偶氮唑盐（MTT), 二甲亚砜（DMSO), 人子宫颈癌 HeLa细胞，人肝癌 Hep G2细胞，人胃癌 AGS细胞，小鼠黑色素瘤 B16细胞（该些细胞为市售产品）。

实验步骤

收集对数期细胞，配成浓度为 1χ10⁴~ lxlO⁵个 /mL, 加入 96 孔板中，每孔 100 L, 5 C0₂, 37°C孵育，至细胞单层铺满孔底，药物按照终浓度为 0 M、 2 M、 10 M、 20 M、 40 M处理细胞。 5%C0₂、 37°C分别孵育 24、 48、 72小时，每孔加入 20 L的 MTT溶液（ 5mg/mL, 即 0.5%的 MTT) , 继续培养 4h, 终止培养， PBS冲 2-3遍。每孔加入 150 L二甲基亚砜，置摇床上低速振荡 10min。酶联免疫检测仪 OD₄₉₂nm处测量各孔的吸光值，同时设置调零孔和对照孔，实验设置 4个平行孔，计算细胞生长抑制率。

计算公式

lgIC50 = Xm - 1 ( P - ( 3 - Pm - Pn ) /4), 其中：

Xm~lg最大剂量； l~lg (最大剂量、相临剂量）； P〜阳性反应率之和； Pm〜最大阳性反应率； Pn〜最小阳性反应率；

抑制率 = 1 -力。药组 OD值 /对照组 OD值；

公式中大最大、最小阳性反应率分别就是最大、最小抑制率。

实验结果

化合物对人胃癌细胞 AGS增殖抑制作用

如图 1〜图 4所示，分别是由本发明上述实施例中化合物 III、化合物 V、化合物 II 及化合物 I分别在 24、 48、 72小时内对 AGS细胞的抑制率曲线图，其中纵坐标为病毒细胞抑制率，而横坐标为化合物浓度。从这些附图对比可见：本发明这组化合物对人胃癌细胞 AGS总体都有很好的抑制作用。其中以化合物 I、 II、 III和 V作用显著，化合物 III在浓度 20 M时抑制率达 85%; 化合物 V在浓度 20 M时抑制率达到 100%; 化合物 I在浓度 7.5 M时抑制率达到 100%。而对照化合物熊果酸（UA )在 20 M时抑制率只达到 15%。这几种化合物均起效早，在较低浓度就表现良好的抑制效果。相同浓度下比较，都比 UA作用效果好得多。而大黄酸（RH )衍生物 I也比大黄酸的抑制作用明显增强。

化合物对人胃癌细胞 AGS增殖抑制作用（ 48小时）

化合物对人子宫颈癌 Hela细胞增殖抑制作用

如图 5〜图 7所示，分别是由本发明上述实施例中化合物 II、化合物 III及单一熊果酸分别对 Hela细胞 48小时作用的抑制率曲线图，其中纵坐标为病毒细胞抑制率，而横坐标为化合物浓度。所测化合物呈现不同程度的活性。其中化合物 II、 III和 V均对 Hela 细胞有很高的抑制增值作用，并且这些化合物的抑制作用一般在作用 48h表现较明显。化合物 I, IV和 RH (大黄酸）的抑制作用不明显。大黄酸衍生物 II比大黄酸的抑制作用大大增强。熊果酸^"生物 III在浓度 11 M 时抑制率达到 100%。而熊果酸在 20 M时抑制率只达到 58%。

表二：化合物对人子宫颈癌细胞 HeLa增殖抑制作用（48小时）

* 无明显活性

化合物对人肝癌 Hep G2细胞增殖抑制作用

化合物 I在 48h时浓度为 20 M时抑制率最高为 49.4% ( IC50=20.03 M ) 。化合物 IV在浓度 20 M 24h测定对 Hep G2细胞抑制率为 24.28%。而作为对照的大黄酸在浓度 20 M时对 Hep G2细胞的抑制率最高为只有 17.7%。

化合物对小鼠黑色素瘤 B16细胞增殖抑制作用

所测化合物对小鼠黑色素瘤细胞有不同程度的增值抑制作用，但抑制作用均不是很强，抑制作用出现在 48h-72h之间，抑制率范围在 48h 20 M时为 15% ~ 41%。结论

根据用 MTT法检测实例化合物对肿瘤细胞生长的抑制活性结果，本发明的实例化合物对人胃癌 AGS细胞,人子宫颈癌 HeLa细胞，人肝癌 Hep G2细胞和小鼠黑色素瘤 B16细胞都有不同程度的抑制作用。尤其是对人胃癌 AGS 细胞和人子宫颈癌 HeLa细胞,大部分化合物都呈现了很强的抑制作用。显示了熊果酸与一氧化氮供体偶联化合物和大黄酸与一氧化氮供体偶联化合物的抑制肿瘤细胞的作用比熊果酸或大黄酸都大大增强了。结果不仅说明本发明的实例化合物具有大大增强的抗肿瘤活性，可以和药用载体混合制成抗肿瘤药物，而且还可以将本发明的方法推广应用到所有具有一定抗肿瘤活性的中草药有效成分，分别制成与一氧化氮供体偶联的药物，以增强它们的抗肿瘤活性，成为可以应用于临床的抗肿瘤药物。除上述作为证明的四种肿瘤或癌症病变外，本发明在治疗的应用中，还包括肺癌、结肠直肠癌、淋巴癌、胰脏癌、乳癌、胃癌、口腔癌、食道癌、鼻咽癌、摄护腺癌、胰脏癌、血癌、皮肤癌、骨癌、肾癌或其他癌变症状。

在药学应用上，将该通式（ I )所示的偶联药物成分作为成品药组合物的核心成分，该核心成分为由通式（ I )所表征的任一化合物或其药学上可接受的盐、盐的水合物、溶剂化物，或以其为活性成分的前体药物，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成。由该核心成分制成的成品药剂最终形式可以包括片剂、胶嚢、丸剂、注射剂、緩释制剂、控释制剂以及各种微粒给药系统。

需要说明的是：以上制备偶联药物所用的熊果酸和大黄酸均为市售品，它们与一氧化氮供体连接成偶联药物的实施过程仅作为实例给出，并不意味着以此对本发明药物通式结构的限制。

Claims

权利要求

1. 偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述抗肿瘤天然药物具有通式（ I ) A-X-B的结构：其中，

A = R-T, 为结合有化学基团 T的具抗肿瘤活性的天然成分；

X为连接天然成分 A和一氧化氮供体 B, 并对应取决于基团 T类型的连接结构；

B为具有释放出一氧化氮能力的供体。

2. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述化学基团 T包括： -C(=0)0-、 -NH -、 -N -、 -0-、 -S -、 -CONH -、 -CON -、 -NHCON -、 -OCONH -、 -S0₂N -、 -S0₂NH-中的一种或多种混合。

3. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述天然成分 A结合一氧化氮供体 B前为：芦荟大黄素、扁桃甙、山莨菪碱、小劈胺、鸦胆子素 A、鸦胆子素^ 鸦胆子素。、鸦胆子素 D、鸦胆子苦醇、喜树碱、三尖衫碱、白屈菜碱、葫芦素 B、葫芦素 E、姜黄醇、加拿大麻甙、双香豆素、大黄素、燃料木素、人参皂甙、奥可梯木碱、棉酚、汉防己乙素、哈林通碱、堆心菊素、次劈碱 *、氧苦参碱、柔毛地胆亭、柔毛地胆宁、单尿豆碱、杨梅黄素、美登碱、毛拷利素、全缘碱、石蒜碱、盾叶鬼臼素、盾叶鬼臼素、扁塑藤素、假石蒜碱、冬凌草素、冬凌草乙素、柴胡皂代八、柴胡皂代 D、紫草素、谷栽醇、四氢大麻酚、雷公藤、恩其明、长春碱 *、醛基长春碱、土贝母苷甲、大叶茜草素、小豆蔻明、山姜素、五味子醇甲、水飞蓟宾、牛蒡苷、牛横胆酸钠、贝母素乙、贝母素甲、西红花甘 -11、防己诺林碱、异秦皮啶、异鼠李素、左旋紫草素、汉黄芩素、甘草甘、松果菊苷、表儿茶素、姜黄素、栀子苷、重楼皂苷 I、重楼皂苷 II、重楼皂苷 VI、酯蟾毒配基、莪术醇、高良姜素、淫羊藿苷、羟基红花黄色素、蔓荆子黄素、高三尖衫酯碱、马兜铃酸、富马酸、没食子酸、甘草次酸、甘草酸、药才艮碱、齐墩果酸、大黄酸、熊果酸、丹酚酸 B、 Z竹节香附素 A、白果新酸、胆红素、常春藤皂苷元、土荆皮乙酸、秋水仙胺、秋水仙碱、靛玉红、派利文碱、番茄碱或紫杉醇之一的具有化学基团 T的天然产物。

4. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一氧化氮供体结构为：- C1到 C20的直链或带支链的烷链，并选择性地连有取代基 -OH, -0-, -Br, -CI, -I, -F, -ON0₂或 y;其中 y是 -(C1-C10 alkyl)-ON0₂, -O(Cl-C10 alkyl)-ON0₂, -OC(O)(Cl-C10 alkyl)-ON0₂。

5. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一氧化氮供体 B具有如下通式（ II ) 的结构：

式中 yl是 C(CH₃)₂, y2是 O, y3是 C(O), y4是 O, y5 -(CH₂)i.₂-(x)o-i-(CH2)₀-i; y5中 x是 -O-或 -CR ²-, R¹和 R²是独立的含有氢或 C1-C4的皖基。

6. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一 B具有如下通式（III ) 的结构：

式中， Y⁶是 CI到 C20的直链或有支链的烷链，或 -CH=CH-(CH₂)n²-, (n²=0-10); R 是 C1-C5的烷链、 -COOH或 -OR，，所述 R，是 H或 C1-C3的烷链； Z是 -0-、 -C(0)0- 或 -OC(O)-; n是 0或 1; nl是 0或 1; 是 C1到 C20的直链或有支链的烷链，并选择性地连有一个或多个取代基 -OH、 -0-、 -Br、 -Cl、 -1、 -F、 -ON0₂。

7. 根据权利要求 6所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述

式中 n3=0-5; n4=l-5。

8. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一氧化氮供体 B具有如下通式（ V ) 的结构：

式中 Zi A-QC O-或 OC(O)-, 其中 n6=0-20、 n7=l-20。

9. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一氧化氮供体 B具有如下通式（VI ) 的结构：

[(CH2)_n8 Q]_n9 (CH₂)_n10 〇N〇₂ ( ), 式中 Q是 0或 S; n8=l-6; n9=l-10; nl0=l-10。

10. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一化氮供体 B具有如下通式（VD ) 的结构：

式中 nll=0-10; nl2=l-10; Rl、 R2、 R3、 R4是相同或相异的基团，分别为含 H, C1-C4的直链或有支链的烷基； W是饱和或非饱和的五、六元杂环，含一个或一个以上的 0、 S。

11. 根据权利要求 10所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述

12. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一氧化氮供体 B具有如下通式（ ) 的结构：

隠

13. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一氧化氮供 B体具有如下通式（IX ) 的结构：

式中 V是 -CH₂-、 -0-、 -S-或 -NH-, U是 C1-C10的烷链，或选择取代 -OH、 -NH -、 -CN、 -CONH₂、 -N0₂、 -NHCOCH₃、 -COCH₃、 -COOCH₃、 -CON(R₅)(R₆)之一；其中 R₅和 R₆为相同或相异的 C1-C3烷链。

14. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一化氮供体 B具有如下通式（ X ) 的结构：

式中 η13=1-8; Υ⁷是胺基并连接如下结构:

Y⁷(a)

(d) , 其中 R

R₈是独立的 C1-C12的直烷链、 C3-C12的有支链的烷链、 C3-C12的含双键的不饱和烷链，或与氮原子一起构成杂环； R₉、 Ri。、 Ru和 R₁₂分别是 H、 C1-C8的直烷链、 C3-C8的有支链的烷链、芳基和 -C(0)-、 C(0)0-R₁₂、 -C(0)NH-R₁₂、 -C(0)S-R₁₂之一。

15. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一氧化氮供体 B具有如下通式（XI ) 的结构：

式中 R13 A H、 F、 Cl、 Br、 I、 OH、 OR₁₄、 C1-C8的直烷链；其中 R₁₄是 C1~C8的直烷链。

16. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一 ) 的结构：

( ΧΠ ), 式中 R₁₄A H、 Cl、 F、 Br、 I、 CI— C5的烷链、 -COOH或— OR，， nl5=l— 8; 其中 R，是 H或 C1-C3的烷链。

17. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：所述一氧化氮供体 B具有如下通式（ΧΠΙ ) 的结构：

式中 R₁₅、 R₁₆是独立的 C1-C12的相同或相异的直烷链； R₁₇是 -C(0)-R₁₂、 C(0)0-R₁₂、 -C(0)NH-R₁₂、 -C(0)S-R₁₂、 C1-C5的烷链之一； nl6=l— 8。

18. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗瘤天然药物，其特征在于：当

T为 -C(=0)0-时，所述连接基团 X的结构通式为

或直接与 B相连；其中， R₁₈、 R₁₉是甲基或乙基。

19. 根据权利要求 1所述的偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物，其特征在于：当 T为 -NH -、 -0-、 -S -、 -CONH -、 -C -、 -NHCON -、 -OCONH -、 -S0₂N -、 -N -、 -S0₂NH- 时，所述偶联基团

；其中， R₂₀为 0、 N、

S。

20. 具有通式（ I )所示的天然成分和一氧化氮供体偶联药物，其特征在于：在治疗癌症中的应用，包括肝癌、肺癌、结肠直肠癌、子官颈癌、淋巴癌、胰脏癌、乳癌、胃癌、口腔癌、食道癌、鼻咽癌、摄护腺癌、胰脏癌、血癌、皮肤癌、骨癌、肾癌或其他癌变症状。

21. 以通式（ I )所示的偶联药物为核心成分的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物为由通式（ I )所述的任一化合物或其药学上可接受的盐、盐的水合物、溶剂化物，或以其为活性成分的前体药物，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成的药剂。

22. 根据权利要求 21所述的以通式（ I )所示的偶联药物为核心成分的药物组合物，其特征在于：所述药剂形式包括片剂、胶嚢、丸剂、注射剂、緩释制剂、控释制剂以及各种微粒给药系统。