CN102107006A

CN102107006A - 用于治疗糖尿病的偶联药物及其医药用途

Info

Publication number: CN102107006A
Application number: CN2009102648802A
Authority: CN
Inventors: 冯子侠; 刘晓东; 尚红鹰
Original assignee: QIFUKANG DRUG RESEARCH AND DEVELOPMENT (SUZHOU) Co Ltd
Current assignee: QIFUKANG DRUG RESEARCH AND DEVELOPMENT (SUZHOU) Co Ltd
Priority date: 2009-12-25
Filing date: 2009-12-25
Publication date: 2011-06-29

Abstract

本发明揭示了一种用于治疗糖尿病及其它血液血管疾病的天然偶联药物及其医药用途，该物质具有通式(I)所述的化学结构，即由活性中草药天然成分与一氧化氮供体偶联而成。可用于制备治疗糖尿病的成品药物，且具有降血糖、降血压、降血脂、抗血小板凝聚和抗脉粥样硬化等作用。进入人体后，该偶联药物能够在体内酶解而释放出一氧化氮和天然药物成分，既发挥了天然药物毒副作用小、作用持久的优点，又发挥了一氧化氮活性快而强的特点。在药学上具有广泛的用途。

Description

用于治疗糖尿病的偶联药物及其医药用途

技术领域

本发明涉及一类用于治疗血液血管病变的药物及其医药用途，尤其涉及一类能在体内酶解释放一氧化氮自由基的偶联药物，该偶联药物具有双重疗效，在降低血糖与血脂的同时，也可用于治疗其它心血管疾病。

背景技术

一氧化氮(以下简写为NO)作为一种自由基性质的气体，在人体中是一个低分子量和具有疏水性质的生物活性分子，可以自由穿过细胞膜，作用于胞内的靶分子。理论上一氧化氮可以到达细胞和组织内任何部位，能够在体内调控多种细胞功能和产生广泛的生物效应，所以一氧化氮供体和调节剂在新药研究开发方面有重要的应用价值。

NO作为一种生物效应分子，参与机体内各种重要的生理效应，维持机体细胞和组织正常的生命活动。在心血管系统，NO具有扩张血管，抑制血小板聚集并粘附于血管内皮的作用，对于维持血管张力、血压及血流动力学方面起着重要作用；在免疫系统，NO既是白细胞、淋巴细胞、巨噬细胞的效应分子，也是它们的调节分子。在通常的免疫过程中，NO作为细胞毒分子杀灭入侵的微生物包括细菌、真菌及寄生虫等病原体和肿瘤细胞；在中枢神经系统，NO作为信息分子起重要作用，参与动物的学习、记忆过程，参与神经递质释放的调节、脑血流量以及痛觉的调节等；在外周神经系统，NO可能是非肾上腺素能、非胆碱能神经的递质或介质，参与胃肠功能调节；NO还可通过扩张胃肠粘膜血管，调节胃粘膜的血流量，促进胃粘液的分泌及粘膜损伤后的修复而具有保护粘膜作用；在内分泌系统，NO能刺激生长素、胰岛素等的分泌；在呼吸系统，NO可调节基础肺血管张力，对保持气道舒张、正常通气/血流比和粘膜分泌有着重要作用。

NO能促进人类全身血液循环，预防动脉粥样老化和僵硬，显著地降低胆固醇和降低血液粘稠度，减少血块血栓的形成，恢复血管的柔软性，使血管有弹性，降低血压，加强心脏功能。NO帮助人们软化血管，舒张血管平滑肌，避免血小板结成快状堵塞血管并能促进血液循环，调节血压使血管畅通血流无障碍通行。NO在人体体内能促进脑血液循环畅快，减少脑血栓和血栓塞形成，避免和减少人类脑中风发病现象。NO对胆固醇和血脂有强烈氧化现象，可以明显减少人体内胆固醇和血脂的含量。NO能增强调节胰岛素分泌能力，降低而糖。NO可以帮助促进老年人脑部血液循环，增加脑部营养，延缓脑细胞衰老，增进老年人脑部记忆功能。减少老年人脑痴呆的发病数量。

目前，天然药物是治疗糖尿病和降血压、降血脂、抗血小斑凝聚和抗血脉粥样硬化等作用心血管疾病药中的重要类别。毒副作用小的优点已越来越被人们重视，并获得越来越广泛的应用。但是目前大部分的天然治疗糖尿病和心血管疾病的天然药物作用不够强和不够快，这些弱点限制了它们的进一步应用。

发明内容

为克服上述现有技术的不足，本发明的目的在于提出一种具有通式(I)的偶联有一氧化氮供体的用于治疗糖尿病的天然药物，及其在药学上可接受的盐、盐的水合物、溶剂化物，或以其为活性成分的前体药物，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成的药剂；以增强该天然药物的治疗糖尿病及心血管疾病的活性，避免非天然药物的毒副作用。

本发明的第一个目的，将通过如下技术方案来实现：

用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述偶联药物具有通式(I)A-X-B的结构：其中，

A＝R-T，为结合有化学基团T的具治疗糖尿病活性的天然成分；

X为连接天然成分A和一氧化氮供体B，并对应取决于基团T类型的连接结构；

B为具有释放出一氧化氮能力的供体。

进一步地，前述用于治疗糖尿病的偶联药物，其中所述化学基团T包括：-C(＝O)O-、-NH-、-N-、-O-、-S-、-CONH-、-CON-、-NHCON-、-OCONH-、-SO2N-、-SO2NH-中的一种或数种。

进一步地，前述用于治疗糖尿病的偶联药物，其中所述天然成分包括乌头碱(Acoitine)、梫木毒素(Andromedotoxin)、山莨菪碱(Anisodamine)、芹菜甙员(Apigenin)、萹蓄甙(Avicularin)、黄今甙元(Baicalein)、黄今甙、小劈胺(Berbarmine)、铃兰毒醇(Convallatoxol)、铃兰毒甙(Convallatoxin)、铃兰糖甙(Convallatoside)、加拿大麻甙(Cymarin)、北豆根碱(Dauricine)、双香豆素(Dicoumarin)、地高辛(Cordioxil)、薯蓣皂甙(Dioscin)、羊角拗甙(Divaricoside)、大黄素(Emodin)、燃料木素(Genistein)、奥可梯木碱(Glaziovine)、汉防己乙素(Hanfanggichin B)、黄白糖芥甙(Helveticoside)、异欧前胡素(Isoimperatorin)、药根碱(Jatrorrhizine)、黄夹次代甲(Peruvoside)、黄夹次代乙(Meriifolin)、橄榄苦代(Oleuroperin)、长塑黄麻代(Olitoriside)、次劈碱(Oxyacanthine)、氧苦参碱(Oxymatrine)、桑色素(Motin)、N-甲基酪胺(N-methyltytamine)、木兰箭毒碱(Magnocurarine)、木兰碱(Magnoflorine)、全缘碱(Lntegerimine)、石蒜碱(Lycorine)、灼药代(Paeoniflorin)、浙贝母碱(Peinmine)、黄柏碱(Phellodendrine)、原儿茶醛(Protocatechuic aldehyde)、北美芹素(Pteryxin)、葛根素(Puerarin)、槲皮素(Quercetin)、奎尼丁(Quinidine)、芦丁(Rutin)、柴胡皂代A(Saikosaponin A)、柴胡皂代D(Saikosaponin D)、猪毛菜碱(Salsoline)、东莨菪碱(Scopolamine)、蛇根碱^*(Serpentinine)、水飞蓟素(Silymarin)、青藤碱(Sinomenine)、西贝母碱(Siperimine)、乌头碱准噶尔乌头碱(Songorine)、-谷栽醇(Stitosterol)、毒毛旋花子代-K(Strophantylside-K)、对羟福林(Synephrine)、恩其明(Ungeremine)、长春胺(Vincamine)、长春林碱(Vincarine)、醛基长春碱(Vindristine)、儿茶素(Catechin)、三七皂甙R1(Notoginsenoside R1)、小豆蒄明(Cardamonin)、山姜素(Alpinetin)、升麻素(Cimifugin)、升麻素苷(Prim-O-glucosylcimifugin)、红景天甘(Salidroside)、血遏素(Dracorhodin)、西贝碱(Sipemine)、西红花甘-I(Crocin-I)、西红花甘-II(Crocin-II)、防己诺林碱(Fangchinoline)、华蟾酥毒基(Cinobufagin)、竹节香附素A(RaddeaninA)、平贝碱甲(Pingpeimine A)、芥子碱(Sinapine)、和厚朴酚(Honokiol)、松酯醇二葡萄糖苷(Pinoresinol diglucoside)、环维黄杨星D(Cyclovirobuxinum D)、虎杖苷(polydatin)、哈巴俄苷(Harpagoside)、姜黄素(Curcumin)、酯蟾毒配基(Resibufogenin)、莪术醇(Curcumerol)、莲心碱(Liensinine)、淫羊藿苷(Icarrin)、黄芩素(Baicalein)、黄芪甲苷(AstragalosideIV)、紫丁香苷(Syringin)、槲皮素(Quercetin)、薯蓣皂苷元(Diosgenin)、熊果甙(Arbutin)、黄今甙、四氢鸭脚木碱(Tetrahydroalstonine)、梓醇(Catapol)、氨基丁酸(Aminobutyric acid，Peperidic acid)、丹参(Danchensu)、甜菜碱(Betaine)、咖啡酸(Caffeic acid)、番红花酸(Crocetin)、阿魏酸(Ferulic acid)、富马酸(Fumaricacid)、甘草酸(Glycyrrhizic acid)、麻油酸(Ricinoleic acid)、阿魏酸(Ferulicacid)、齐墩果酸(Oleanolic acid)、异阿魏酸(Isoferalic acid)、黄常山碱甲(Dichroine)、黄常山碱乙(Dichroine)、黄常山碱丙(Dichroine)、和乌胺(Higenamine)、钩藤碱(Rhynchophylline)、番茄碱(Tomatine)、三刺皂荚碱(Triacanthine)、三叶木防己碱(Trilobine)、牛磺酸(Taurine)及其他同类成分中的一种或多种结合。

更进一步地，前述用于治疗糖尿病的偶联药物，其中所述一氧化氮供体B的结构为：

a)：

--C1到C20的直链或带支链的烷链，并选择性地连接有取代基-OH，-O-，-Br，-Cl，-I，-F，-ONO₂或y；其中y是-(C1-C10 alkyl)-ONO₂，-O(C1-C10alkyl)-O ONO₂，-OC(O)(C1-C10 alkyl)-ONO₂。

b)：

通式(II)的结构为

式中y1是C(CH₃)₂，y2是O，y3是C(O)，y4是O，y5是-(CH₂)_1-2-(x)_0-1-(CH₂)_0-1；y5中x是-O-或-CR¹R²-，R¹和R²是独立的含有氧或C1-C4的皖基。

c)：

通式(III)的结构为

式中Y⁶是C1到C20的直链或有支链的烷链，或-CH＝CH-(CH₂)n²-，(n²＝0-10)；R是H、C1-C5的烷链、-COOH或-OR’，所述R’是H或C1-C3的烷链；Z是-O-、-C(O)O-或-OC(O)-；n是0或1；n1是0或1；X₁是C1到C20的直链或有支链的烷链，并选择性地连有一个或多个取代基-OH、-O-、-Br、-Cl、-I、-F、-ONO₂。

d)：

通式(IV)的结构为

式中n3＝0-5；n4＝1-5。

e)：

通式(V)的结构为

式中Z₁是-C(O)O-或OC(O)-，其中n6＝0-20、n7＝1-20。

f)：

通式(VI)的结构为

式中Q是O或S；n8＝1-6；n9＝1-10；n10＝1-10。

g)：

通式(VII)的结构为

式中n11＝0-10；n12＝1-10；R1、R2、R3、R4是相同或相异的基团，分别为含H，C1-C4的直链或有支链的烷基；W是饱和或非饱和的五、六元杂环，含一个或一个以上的N、O、S。

h)：

通式(VIII)的结构为

i)：

通式(IX)的结构为

式中V是-CH₂-、-O-、-S-或-NH-，U是C1-C10的烷链，或选择取代-OH、-NH-、-CN、-CONH₂、-NO₂、-NHCOCH₃、-COCH₃、-COOCH₃、-CON(R₅)(R₆)之一；其中R₅和R₆为相同或相异的C1-C3的烷链。

j)：

通式(X)的结构为

式中n13＝1-8；Y⁷是胺基并连接如下结构：

其中R₇、R₈是独立的C1-C12的直烷链、C3-C12的有支链的烷链、C3-C12的含双键的不饱和烷链，或与氮原子一起构成杂环；R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂分别是H、C1-C8的直烷链、C3-C8的有支链的烷链、芳基和-C(O)-、C(O)O-R₁₂、-C(O)NH-R₁₂、-C(O)S-R₁₂之一。

k)：

通式(XI)的结构为

式中R13是H、F、Cl、Br、I、OH、OR₁₄、C1-C8的直烷链；其中R₁₄是C1-C8的直烷链。

l)：

通式(XII)的结构为

式中R₁₄是H、Cl、F、Br、I、C1-C5的烷链、-COOH或-OR’，n15＝18；其中R’是H或C1-C3的烷链。

m)：

通式(XIII)的结构为

式中R₁₅、R₁₆是独立的C1-C12的相同或相异的直烷链；R₁₇是-C(O)-R₁₂、C(O)O-R₁₂、-C(O)NH-R₁₂、-C(O)S-R₁₂、C1-C5的烷链之一；n16＝1-8。

再进一步地，前述用于治疗糖尿病的偶联药物，其中所述通式VII中杂环W的结构选择为：

中任一种。

更进一步地，前述用于治疗糖尿病的偶联药物，当T为-C(＝O)O-时，所述偶联基团X的结构通式为或直接与B相连；其中，R₁₈、R₁₉是甲基或乙基。而当T为-NH-、-O-、-S-、-CONH-、-CON-、-NHCON-、-OCONH-、-SO₂N-、-N-、-SO₂NH-时，所述偶联基团X的结构通式为

或

其中，R₂₀为O、N、S。

进一步地，前述用于治疗糖尿病的偶联药物，由天然药物齐墩果酸、大黄酸与一氧化氮供体偶联合成化合物至少包括：

本发明的第二个目的，将通过以下技术方案来实现：

具有通式(I)所示的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：在治疗糖尿病及血液血管疾病中的应用，包括糖尿病、高血压、高血脂、血小板凝聚固结和血脉粥样硬化或其它病变症状。

此外，以通式(I)所示的偶联药物为核心成分的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物为由通式(I)所述的任一化合物或其药学上可接受的盐、盐的水合物、溶剂化物，或以其为活性成分的前体药物，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成的药剂。

进一步地，所述药剂形式包括片剂、胶囊、丸剂、注射剂、缓释制剂、控释制剂以及各种微粒给药系统。

本发明用于治疗糖尿病的偶联药物，能在人体内酶解而释放出一氧化氮和具活性的天然药物成分，既发挥了天然药物毒副作用小、药效持久的优点，又发挥了一氧化氮活性快而强的特点，在临床上具有广泛的用途。

具体实施方式

以下通过具体实施例，对本发明用于治疗糖尿病的偶联药物的通式结构、制备过程及预防、治疗病变的生物试验作详细说明若干：

用化学合成方法将天然药材的活性有效成分A通过连接部分的偶联基团X同一氧化氮供体B连接起来，形成具有体内酶解释放一氧化氮的偶联化合物，或其药学上可接受的盐等不同形式。进而通过添加药学上可接受的辅料或载体制备成药剂。其核心具有通式A-X-B的结构。

其中A＝R-T，为结合有化学基团T的具治疗糖尿病活性的天然成分，为自然界普遍存在、易于提取得到的天然产物，包括头碱、梫木毒素、山莨菪碱、芹菜甙员、萹蓄甙、齐敦果酸、大黄酸等。

X为连接天然成分A和一氧化氮供体B，并对应取决于基团T类型的连接结构。当T为-C(＝O)O-时，所述偶联基团X的结构通式为或直接与B相连；其中，R₁₈、R₁₉是甲基或乙基；

当T为-NH-、-O-、-S-、-CONH-、-CON-、-NHCON-、-OCONH-、-SO₂N-、-N-、-SO₂NH-时，所述偶联基团X的结构通式为

或

其中，R₂₀为O、N、S。

B为具有释放出一氧化氮能力的供体。该一氧化氮供体B的结构具有多样性，其可以是：--C1到C20的直链或带支链的烷链，并选择性地连接有取代基-OH，-O-，-Br，-Cl，-I，-F，-ONO₂或y；其中y是-(C1-C10 alkyl)-ONO₂，-O(C1-C10 alkyl)-O ONO₂，-OC(O)(C1-C10 alkyl)-ONO₂。

或为具有如下结构通式的可选类型：

式中y1是C(CH₃)₂，y2是O，y3是C(O)，y4是O，y5是-(CH₂)_1-2-(x)_0-1-(CH₂)_0-1；y5中x是-O-或-CR¹R²-，R¹和R²是独立的含有氢或C1-C4的皖基；

式中Y⁶是C1到C20的直链或有支链的烷链，或-CH＝CH-(CH₂)n²-，(n²＝0-10)；R是H、C1-C5的烷链、-COOH或-OR’，所述R’是H或C1-C3的烷链；Z是-O-、-C(O)O-或-OC(O)-；n是0或1；n1是0或1；X₁是C1到C20的直链或有支链的烷链，并选择性地连有一个或多个取代基-OH、-O-、-Br、-Cl、-I、-F、-ONO₂；

式中n3＝0-5；n4＝1-5；

式中Z₁是-C(O)O-或OC(O)-，其中n6＝0-20、n7＝1-20；

式中Q是O或S；n8＝1-6；n9＝1-10；n10＝1-10；

式中n11＝0-10；n12＝1-10；R1、R2、R3、R4是相同或相异的基团，分别为含H，C1-C4的直链或有支链的烷基；W是饱和或非饱和的五、六元杂环，含一个或一个以上的N、O、S。其中所述杂环W的结构选择为：

中任一种；

式中V是-CH₂-、-O-、-S-或-NH-，U是C1-C10的烷链，或选择取代-OH、-NH-、-CN、-CONH₂、-NO₂、-NHCOCH₃、-COCH₃、-COOCH₃、-CON(R₅)(R₆)之一；其中R₅和R₆为相同或相异的C1-C3的烷链；

式中n13＝1-8；Y⁷是胺基并连接如下结构：

其中R₇、R₈是独立的C1-C12的直烷链、C3-C12的有支链的烷链、C3-C12的含双键的不饱和烷链，或与氮原子一起构成杂环；R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂分别是H、C1-C8的直烷链、C3-C8的有支链的烷链、芳基和-C(O)-、C(O)O-R₁₂、-C(O)NH-R₁₂、-C(O)S-R₁₂之一；

式中R13是H、F、Cl、Br、I、OH、OR₁₄、C1-C8的直烷链；其中R₁₄是C1-C8的直烷链；

式中R₁₄是H、C1、F、Br、I、C1-C5的烷链、-COOH或-OR’，n15＝1-8；其中R’是H或C1-C3的烷链；

选用上述一氧化氮供体B多种形式中的一种或多种，分别与自然界的具有抑制糖尿病的活性天然药物(齐墩果酸、大黄酸)相偶联，从而结合成一种新型的具有体外稳定性、而在体内能够酶解释放出一氧化氮的药品。其结构式为：

以下便用齐墩果酸(市售品)、大黄酸(市售品)和一氧化氮供体连接的偶联药物为实施例进一步说明本发明，但以下实施例说明并不意味着对本发明药物通式结构的限制。

实施例一：齐墩果酸(OA)和一氧化氮供体偶联化合物XIV

该偶联化合物XIV的合成方程式为：

该偶联化合物XIV的化学名为：

(Z)-2-(((6aS，6bR，10S，12aR，12bR)-10-hydroxy-2，2，6a，6b，9，9，12a-heptamethyl-1，2，3，4，4a，5，6，6a，6b，7，8，8a，9，10，11，12，12a，12b，13，14b-icosahydropicene-4a-carbonyloxy)methoxy)-1-(pyrrolidin-1-yl)diazene oxide。

该偶联化合物XIV的制备过程为：

将化合物OA(齐敦果酸，84mmol)溶于DMF(100ml)，加入90mmol的Na₂CO₃和10mmol的KI，搅拌15分钟后加化合物1(化学名：(Z)-2-(chloromethoxy)-1-(pyrrolidin-1-yl)diazene oxide、已知化合物、自制)(72mmol)。所得混合物在100℃温度下搅拌16小时。冷却后过滤去固体，加水150ml，用EtOAc(180ml)重复提取产物三次，合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂。用硅胶层析(Haxane-40％haxane/EtOAc)纯化得化合物XIV(5.1g)。

经上述方法制备所得的偶联化合物XIV，经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物XIV确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹H NMR(DMSO-d6)δ5.77(m，2H)，5.27(s，1H)，3.57-3.53(m，4H)，3.22-3.18(m，1H)，2.88-2.83(m，1H)，1.96-1.84(m，7H)，1.69-1.50(m，11H)，1.39-0.68(m，30H)；

¹³C NMR(DMSO-d6)δ176.22(C)，143.34(C)，122.63(CH)，87.57(CH₂)，78.95(CH)，77.40(C)，76.09(C)，56.23(CH)，50.73(CH₂)，47.61(CH)，46.83(C)，45.81(CH₂)，41.66(C)，41.04(CH)，39.31(C)，38.71(C)，38.45(CH₂)，36.99(C)，33.77(CH₂)，32.96(CH)，32.70(CH₂)，32.05(CH₂)，30.61(C)，28.06(CH)，27.58(CH₂)，27.15(CH₂)，25.79(CH)，23.53(C)，23.37(CH)，22.91(CH₂)，22.86CH₂)，18.29(CH₂)，16.79(CH)，15.53(CH)，15.24(CH)。

MS(APCI)m/z 617.4(M+NH₄)⁺，Anal。

Calcd for C₃₅H₅₇N₃O₅·1.5H₂O：C，67.06；H，9.65；N，6.70。Found：C，66.94；H，9.78；N，6.88。

实施例二：齐敦果酸(OA)和一氧化氮供体偶联化合物XV

该偶联化合物XV的合成方程式为：

该偶联化合物XV的化学名为：

3-cyano-4-(((6aS，6bR，10S，12aR，12bR)-10-hydroxy-2，2，6a，6b，9，9，12a-heptamethyl-1，2，3，4，4a，5，6，6a，6b，7，8，8a，9，10，11，12，12a，12b，13，14b-icosahydropicene-4a-carbonyloxy)methyl)-1，2，5-oxadiazole 2-oxide。

该偶联化合物XV的制备过程为：

将化合物OA(齐敦果酸，3mmol)溶于DMF(30ml)，加入3.6mmol的Na₂CO₃和1mmol的KI，搅拌15分钟后加化合物2(化学名：4-(bromomethyl)-3-cyano-1，2，5-oxadiazole 2-oxide、已知化合物、自制)(2.5mmol)。所得混合物在室温下搅拌16小时。过滤去固体后加水(50ml，用EtOAc(30ml)重复提取产物三次，合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂。用硅胶层析(Haxane-30％haxane/EtOAc纯化得化合物XV(0.52g)。

经上述方法制备所得的偶联化合物XV，经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物XV确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹H NMR(CDCl₃)δ5.33(s，1H)，5.23-5.11(m，2H)，3.22-2.91(m，1H)，2.89-2.84(d，1H，J＝12Hz)，2.08-2.03(m，2H)，1.87-1.64(m，9H)，1.63-1.49(m，13H)，1.09-0.79(m，20H)；

¹³C NMR(CDCl₃)δ176.55(C)，152.59(C)，142.94(C)，123.07(CH)，104.83(C)，78.90(CH)，55.62(CH₂)，55.15(CH)，47.47(C)，47.22(CH)，45.62(CH₂)，41.64(C)，41.30(CH)，39.25(C)，38.68(C)，38.37(CH₂)，36.97(C)，33.62(CH₂)，32.94(C)，32.60(CH₂)，32.18(CH₂)，30.83(C)，30.57(CH)，28.09(CH)，28.05(CH)，27.66(CH₂)，27.12(CH₂)，25.81(CH)，23.50(CH)，22.95(CH₂)，18.23(CH₂)，16.73(CH)，15.50(CH)，15.22(CH)。MS(APCI)m/z 580.4(M+H)⁺，Anal。

Calcd for C₃₄H₄₉N₃O₅：C，70.44；H，8.52；N，7.25。Found：C，70.81；H，8.56；N，6.90。

实施例三：大黄酸(Rh)和一氧化氮供体偶联化合物XVI

该偶联化合物XVI的化学结构式：

该偶联化合物XVI的化学名为：

3-cyano-4-((4，5-dihydroxy-9，10-dioxo-9，10-dihydroanthracene-2-carbonyloxy)methyl)-1，2，5-oxadiazole 2-oxide。

该偶联化合物XVI的制备过程与实施例二相同，故不再赘述。经上述方法制备所得的偶联化合物XVI，经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物XVI确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹H NMR(DMSO-d6)δ8.20-7.40(m，5H)，5.69(2H)；

¹³C NMR(DMSO-d6)δ191.10(C)，180.67(C)，163.06(C)，161.34(C)，160.87(C)，153.60(C)，137.59(CH)，137.69(C)，136.13(C)，133.96(C)，133.05(C)，124.69(CH)，124.32(CH)，119.40(CH)，118.60(CH)，116.17(C)，119.96(CH)，106.16(C)，96.63(C)。

MS(APCI)m/z 407.5(M+H)⁺，Anal。

Calcd for C₁₉H₉N₃O₈：C，56.03；H，2.23；N，10.31。Found：C，55.91；H，2.28；N，10.23。

实施例四：大黄酸(Rh)和一氧化氮供体偶联化合物XVII

该偶联化合物XVII的合成方程式为：

该偶联化合物XVII的化学名为：

(3S，3aR，6R，6aS)-6-(nitrooxy)hexahydrofuro[3，2-b]furan-3-yl4，5-dihydroxy-9，10-dioxo-9，10-dihydroanthracene-2-carboxylate。

该偶联化合物X VII的制备过程为：

将化合物Rh(大黄酸，84mmol)溶于DCM(200ml)，加入90mmol的EDCI和90mmol的DMAP，在室温下搅拌15分钟。后加化合物3(化学名Isosorbide Dinitrate(90mmol)、已知化合物)。所得混合物在室温下搅拌48小时。过滤去固体后用水洗两次(2X150ml)，用180ml的DCM重复提取产物三次，合并有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤并蒸发溶剂。用硅胶层析(Haxane-40％haxane/EtOAc纯化得化合物XVII(0.52g)。

经上述方法制备所得的偶联化合物XVII，经核磁共振、质谱检测及元素分析等检测手段证明，该偶联化合物XVII确实具有上述分子式所述的元素成分及分子结构。具体参数为：

300mz ¹H NMR(DMSO-d6)δ8.34-7.26(m，5H)，5.51-5.40(2H)，5.15-5.11(m，1H)，4.70-4.68(d，1H，J＝6Hz)，4.23-3.94(m，4H)；

¹³C NMR(DMSO-d6)δ192.75(C)，180.79(C)，163.43(C)，162.86(C)，162.34(C)，137.86(C)，136.88(CH)，134.03(C)，133.39(C)，125.42(CH)，125.0(CH)，124.69(CH)，120.48(CH)，120.13(CH)，118.60(C)，86.52(CH)，81.65(CH)，81.14(CH)，78.97(CH)，73.47(CH₂)，69.42(CH₂)。

MS(APCI)m/z 457.9(M+H)⁺，Anal。

Calcd for C₂₁H₁₅NO₁₁：C，55.27；H，3.09；N，3.07。Found：C，55.30；H，3.33；N，2.88。

上述实施例中以大黄酸和齐墩果酸偶联一氧化氮供体制成用于治疗糖尿病的药物成分，以下用STZ诱发糖尿病动物模型测试化合物XIV的药理活性。

链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病动物模型的原理

STZ对一定种属动物的胰岛β细胞有选择性破坏作用，能诱发许多动物产生糖尿病，一般采用大鼠和小鼠造模。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。一型糖尿病与二型糖尿病动物模型的制备与STZ注射的剂量有关系：大剂量注射时，由于直接引起胰岛β细胞的广泛破坏，可造成一型糖尿病模型；而注射较少量STZ时，由于只是破坏一部分胰岛β细胞的功能，造成外周组织对胰岛素不敏感，同时给予高热量饲料喂养，两者结合便诱导出病理、生理改变都接近于人类二型糖尿病的动物模型。

1、仪器、试剂与材料

精密电子天平；

链脲佐菌素(美国Sigma公司)，使用前用柠檬酸缓冲液配成所需浓度；

柠檬酸、柠檬酸钠(上海国药集团)；

普通级SD大鼠，雄性，体重180～220g(购于上海斯莱克试验动物中心)；

实验鼠颗粒饲料(南京安立默科技有限公司)；

猪胆盐(上海国药集团)；

蛋黄粉(自制)；

猪油(自制)；

蔗糖(上海国药集团)；

血糖仪(美迪信MM800型血糖仪)、血糖试纸。

2、实验方法

2.1供试品溶液的制备

柠檬酸缓冲液的配制：

柠檬酸(FW：192.13)2.1g加入双蒸水100mL中配成A液

柠檬酸钠(FW：294.10)2.94g加入双蒸水100mL中配成B液

链脲佐菌素配制液：用时将A、B液按1∶1混合，Ph计测定Ph值，调节Ph值至4.2--4.5

用柠檬酸缓冲液以1％的浓度溶解STZ，腹腔注射，30分钟内注射完毕。

2.2糖尿病模型的建立和分组方法

取200±20g雄性SD大鼠30只，随机分为6组，每组5只。设立阴性药物对照组(喂常规饲料)；其它5组喂高脂高糖饲料(10％蛋黄粉、10％蔗糖、5％猪油、0.5％猪胆盐、75％基础饲料)，喂食30天，空腹腹腔注射链脲佐菌素30mg/kg/d，连续注射三天。至给药结束，其中2组给予供试药品(低剂量、中剂量)，1组给予对照药物，，灌胃给药，同时阴性药物对照组也灌胃给药，给等量的2％的吐温生理盐水，低剂量组和中剂量组给化合物XIV，给药前用2％的吐温生理盐水溶解，剂量分别为25mg/kg/d、50mg/kg/d。给药一周。每天测定饮水量，每周称一次体重。于给药最后一日禁食12h后，称重，用血糖仪测定血糖。断尾取血，测定血清TC、TG、LDL-C，所得数据进行统计学处理。

2.3大鼠饮水量测定

试验过程中每天测定各组大鼠的饮水量，测定前给相同体积的水量，24h后记录剩余水量，两者之差就是该组大鼠每天的饮水量。

2.4血脂测定

血液凝固后以4500转/分离心15min取血清测定TC、TG、LDL-C。

2.5血糖测定

以血糖下降百分率表示：

式中a：给药前血糖值；b：给药后血糖值。

3、试验结果与分析

3.1化合物XIV对模型大鼠体重的影响

从表1中可以看出，建模前各组大鼠之间体重无明显差异，建模后给药前由于喂食高脂高糖饲料大鼠体重明显增加，说明建模成功。灌胃给药齐墩果酸(OA)和化合物XIV一周后，从表1中可看出化合物XIV的低剂量组和中剂量组均比模型组体重减轻，且中剂量组体重减轻较多，阴性药物对照组只喂食等量的2％的吐温生理盐水溶液，与正常组体重较为接近，阳性药物对照组给药OA 50mg/kg/d，大鼠体重与模型组相比明显减轻，说明OA和化合物XIV均有减轻高脂高糖大鼠体重的作用。

组别	动物数量(只)	建模前平均体重(g)	建模后给药前平均体重(g)	给药后平均体重(g)
					正常组	5	246.6±2.5	280.5±1.5	431.9±3.2
模型组	5	249.6±1.6	282.5±2.5	403.8±2.3
					低剂量组	5	255.7±0.4	292.9±1.2	392.7±1.5
中剂量组	5	254.2±0.6	286.6±3.4	374.1±2.5
					阴性药物对照组	5	247.8±1.9	288.9±2.5	408.9±1.9
阳性药物对照组	5	247.1±2.0	265.6±3.2	377.5±2.3

表1：OA和化合物XIV对大鼠体重的影响

3.2化合物XIV对模型大鼠饮水量的影响

从表2中可以看出，建模前各组大鼠之间饮水量无明显差异，建模后给药前由于喂食高脂高糖饲料大鼠饮水量降低，给药后正常组不变，而化合物XIV的两个剂量组饮水量减少。提示药物可能有降糖作用，需测定血糖进行验证。

组别	动物数量(只)	建模前平均饮水量(ml)	建模后给药前平均饮水量(ml)	给药后平均饮水量(ml)
					正常组	5	83.0	64.0	65.0
模型组	5	82.5	76.0	90.0
					低剂量组	5	82.0	80.0	60.0
中剂量组	5	80.5	64.0	60.0
					阴性药物对照组	5	80.5	76.0	86.0
阳性药物对照组	5	85.0	90.0	98.0

表2：OA和化合物XIV对大鼠饮水量的影响

3.3化合物XJV对模型大鼠血糖的影响

从表3可以看出，正常组喂食普通饲料血糖值正常，其余5组喂食高脂高糖饲料并腹腔注射STZ空腹血糖值均超出血糖正常范围，揭示造模成功。给药后阳性药物对照组血糖下降14.0％，化合物XIV的低剂量组和中剂量组血糖下降率分别为18.7％和36.9％，均比阳性对照药物OA下降的多，说明化合物XIV在降血糖方面明显优于齐墩果酸。

组别	建模后给药前血糖值(mmol/L)	给药后血糖值(mmol/L)	血糖下降率(％)
				正常组	6.0	4.9	-
模型组	14.6	14.7	-
				低剂量组	18.2	14.8	18.7
中剂量组	19.5	12.3	36.9
				阴性药物对照组	12.9	10.4	-
阳性药物对照组	21.4	18.4	14.0

表3：OLA和化合物XIV对大鼠血糖的影响

3.4化合物XIV对模型大鼠血清TG(甘油三酯)、TC(胆固醇)、LDL-C(低密度脂蛋白)的影响

给药最后一天下午取大鼠血清测定血清中TC、TG、LDL-C值，跟模型组比较看有无变化。从结果看，化合物XIV低剂量组TG下降4.48％，可初步得出化合物XIV具有一定的降血脂作用，但可能由于给药时间过短，仅给药一周，化合物XIV还没有发挥足够的作用。

组别	TG(mmol/L)	TC(mmol/L)	LDL-C(mmol/L)	Decrease(％)
					正常组	2.34	1.72	0.92	-
模型组	2.68	2.13	0.99	-
					低剂量组	2.56	2.21	1.18	4.48
中剂量组	2.99	2.74	1.45	-
					阴性药物对照组	3.30	2.12	1.08	-
阳性药物对照组	2.21	3.01	1.60	17.54

表4：OLA和化合物XIV对大鼠血清TC、TG、LDL-C的影响

本发明的有效结果

根据用公认的用STZ(链脲佐菌素)诱发糖尿病动物模型测试化合物药理活性的结果，显示了齐墩果酸与一氧化氮供体偶联化合物XIV对喂食高脂高糖饲料大鼠的降血糖作用比齐墩果酸大大增强了，同时还具有一定的降血脂和降低高脂高糖大鼠体重的作用。结果不仅说明本发明的实例化合物XIV具有大大增强的降血糖作用，可以和药用载体混合制成治疗糖尿病的药物，而且还可以将本发明的方法推广应用到所有具有一定降血糖作用的中草药有效成分，分别制成与一氧化氮供体偶联的药物，以增强它们的降血糖作用，成为可以应用于临床的治疗糖尿病药物，并具有一定的降血脂作用。在临床上具有广泛的用途。除上述实施例针对糖尿病的治疗应用外，本发明在血液血管疾病中的应用还包括高血压、高血脂、血小板凝聚固结和血脉粥样硬化或其它病变症状。

在药学应用上，将该通式(I)所示的偶联药物成分作为成品药组合物的核心成分，该核心成分为由通式(I)所表征的任一化合物或其药学上可接受的盐、盐的水合物、溶剂化物，或以其为活性成分的前体药物，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成。由该核心成分制成的成品药剂最终形式可以包括片剂、胶囊、丸剂、注射剂、缓释制剂、控释制剂以及各种微粒给药系统。

Claims

1.用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述偶联药物具有通式(I)A-X-B的结构：其中，

B为具有释放出一氧化氮能力的供体。

2.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述化学基团T包括：-C(＝O)O-、-NH-、-N-、-O-、-S-、-CONH-、-CON-、-NHCON-、-OCONH-、-SO2N-、-SO2NH-中的一种或数种。

3.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述天然成分包括乌头碱、梫木毒素、山莨菪碱、芹菜甙员、萹蓄甙、黄今甙元、黄今甙、小劈胺、铃兰毒醇、铃兰毒甙、铃兰糖甙、加拿大麻甙、北豆根碱、双香豆素、地高辛、薯蓣皂甙、羊角拗甙、大黄素、燃料木素、奥可梯木碱、汉防己乙素、黄白糖芥甙、异欧前胡素、药根碱、黄夹次代甲、黄夹次代乙、橄榄苦代、长塑黄麻代、次劈碱^*、氧苦参碱、桑色素、N-甲基酪胺、木兰箭毒碱、木兰碱、全缘碱、石蒜碱、灼药代、浙贝母碱、黄柏碱、原儿茶醛、北美芹素、葛根素、槲皮素、奎尼丁、芦丁、柴胡皂代A、柴胡皂代D、猪毛菜碱、尔莨菪碱、蛇根碱、水飞蓟素、青藤碱、西贝母碱、准噶尔乌头碱、-谷栽醇、毒毛旋花子代-K、对羟福林、恩其明、长春胺、长春林碱、醛基长春碱、儿茶素、三七皂甙R1、小豆蔻明、山姜素、升麻素、升麻素苷、红景天甘、血遏素、两贝碱、西红花甘-I、西红花甘-II、防己诺林碱、华蟾酥毒基、竹节香附素A、平贝碱甲、芥子碱、和厚朴酚、松酯醇二葡萄糖苷、环维黄杨星D、虎杖苷、哈巴俄苷、姜黄素、酯蟾毒配基、莪术醇、莲心碱、淫羊藿苷、黄芩素、^*黄芪甲苷、紫丁香苷、槲皮素、薯蓣皂苷元、熊果甙、黄今甙、四氢鸭脚木碱^*、梓醇、氨基丁酸、丹参、甜菜碱、咖啡酸、番红花酸、阿魏酸、富马酸、甘草酸、麻油酸、阿魏酸、齐墩果酸、异阿魏酸、黄常山碱甲、黄常山碱乙、黄常山碱丙、和乌胺、钩藤碱、番茄碱、三刺皂荚碱、三叶木防己碱、牛磺酸及其他同类成分中一种或多种结合。

4.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B的结构为：--C1到C20的直链或带支链的烷链，并选择性地连接有取代基-OH，-O-，-Br，-Cl，-I，-F，-ONO₂或y；其中y是-(Cl-C10 alkyl)-ONO₂，-O(C1-C10 alkyl)-O ONO₂，-OC(O)(C1-C10 alkyl)-ONO₂。

5.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(II)的结构：

式中y1是C(CH₃)₂，y2是O，y3是C(O)，y4是O，y5是-(CH₂)_1-2-(x)_0-1-(CH₂)_0-1；y5中x是-O-或-CR¹R²-，R¹和R²是独立的含有氢或C1-C4的皖基。

6.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(III)的结构：

7.根据权利要求6所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述X₁是通式(IV)的结构：

式中n3＝0-5；n4＝1-5。

8.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(V)的结构：

式中Z₁是-C(O)O-或OC(O)-，其中n6＝0-20、n7＝1-20。

9.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(VI)的结构：

——[(CH2)_n8——Q]_n9——(CH₂)_n10——ONO₂ VI

式中Q是O或S；n8＝1-6；n9＝1-10；n10＝1-10。

10.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(VII)的结构：

11.根据权利要求10所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述杂环W的结构选择为：

中任一种。

12.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(VIII)的结构：

13.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(IX)的结构：

14.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(X)的结构：

式中n13＝1-8；Y⁷是胺基并连接如下结构：

其中R₇、R₈是独立的C1-C12的直烷链、C3-C12的有支链的烷链、C3-C12的含双键的不饱和烷链，或与氮原子一起构成杂环；R₉、R₁₀、R₁₁和R₁₂分别是H、C1-C8的直烷链、C3-C8的有支链的烷链、芳基和-C(O)-、C(O)O-R₁₂、-C(O)NH-R₁₂、-C(O)-R₁₂之一。

15.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(XI)的结构：

16.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(XII)的结构：

式中R₁₄是H、C1、F、Br、I、C1-C5的烷链、-COOH或-OR’，n15＝1-8；其中R’是H或C1-C3的烷链。

17.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述一氧化氮供体B具有如下通式(XIII)的结构：

18.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：当T为-C(＝O)O-时，所述偶联基团X的结构通式为

或直接与B相连；其中，R₁₈、R₁₉是甲基或乙基。

19.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：当T为-NH-、-O-、-S-、-CONH-、-CON-、-NHCON-、-OCONH-、-SO₂N-、-N-、-SO₂NH-时，所述偶联基团X的结构通式为

或

其中，R₂₀为O、N、S。

20.根据权利要求1所述的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：所述偶联药物由天然药物齐墩果酸、大黄酸与一氧化氮供体偶联合成化合物至少包括：

21.具有通式(I)所示的用于治疗糖尿病的偶联药物，其特征在于：在治疗糖尿病及血液血管疾病中的应用，包括糖尿病、高血压、高血脂、血小板凝聚固结和血脉粥样硬化或其它病变症状。

22.以通式(I)所示的偶联药物为核心成分的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物为由通式(I)所述的任一化合物或其药学上可接受的盐、盐的水合物、溶剂化物，或以其为活性成分的前体药物，加上药学上可接受的辅料或载体制备而成的药剂。

23.根据权利要求21所述的以通式(I)所示的偶联药物为核心成分的药物组合物，其特征在于：所述药剂形式包括片剂、胶囊、丸剂、注射剂、缓释制剂、控释制剂以及各种微粒给药系统。