CN101953864B

CN101953864B - 青阳参甙(苷)元和包含它的提取物的医药用途

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Publication number: CN101953864B
Application number: CN 201010296474
Authority: CN
Inventors: 杨明; 李云峰; 王鲁明; 袁莉; 崔承彬; 董华进; 黄世杰; 闫根稳
Original assignee: Institute of Pharmacology and Toxicology of AMMS
Current assignee: Institute of Pharmacology and Toxicology of AMMS
Priority date: 2010-09-29
Filing date: 2010-09-29
Publication date: 2013-05-22
Anticipated expiration: 2030-09-29
Also published as: CN101953864A

Abstract

本发明涉及青阳参甙(苷)元和包含它的提取物的医药用途。特别地，本发明涉及青阳参、包含青阳参甙(苷)元的青阳参提取物以及青阳参甙(苷)元在制备医药或健康产品中的用途，所述医药或健康产品用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者镇静和/或催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用。本发明还涉及一种青阳参提取物。根据本发明，青阳参提取物和青阳参甙(苷)元均具有镇静催眠药理活性，均可以应用于预防或治疗与镇静催眠相关连的疾病，尤其是应用于预防和治疗各种因素引起的睡眠功能障碍性疾病。

Description

青阳参甙(苷)元和包含它的提取物的医药用途

技术领域

本发明属于医药领域，涉及植物青阳参(Cynanchum otophyllum Schneid)的青阳参甙(苷)元以及包含青阳参甙(苷)元的提取物作为镇静催眠类药物的用途，特别是作为预防或治疗睡眠障碍类相关疾病的药物的用途。

背景技术

青阳参(Cynanchum otophyllum Schneid)是萝摩科(Asclepladaceae)植物。萝摩科约有180属2200种，分布于世界热带、亚热带、温带地区。我国有44属245种33变种，全国均有分布，但西南和华南为多分布地区。

中科院昆明植物所等研究单位对青阳参(Cynanchum otophyllum Schneid)进行了深入的研究。从其根中分出青阳参苷甲和乙(qingyangshenglv-cmideA，B)、告达亭苷元(gaudatinin)、青阳参甙(苷)元(qingyangshengenin)、罗素他敏(rostratamin)、11α-乙酰基青阳参甙(苷)元(11α-acetylqingyangshengenin)等10种强心苷及C₂₁甾苷。除此尚分离到β-谷甾醇(β-sitosterol)、香草酸(vanillicacid)、地芰糖(digmose)和软脂酸甲酯(palmiticacidmethylcater)等[植物通www.zhiwutong.com]。

药理研究证实，C₂₁-甾体脂苷具有较为明显的抗癫痫的作用[Leonard M.Ride and Charles HGrogan，J.Org.Chem.23 844(1958)]。青阳参苷尚具有具有治疗肝炎的作用[Jeanne Levy and Estera Miahel-Ber.Therapin 22(3)671-88(1967)(Fr)；C.A.67 52609h]；[何树勋等：青阳参治疗迁延性肝炎、慢性肝炎疗效观察，滇产植物药—— 青阳参的研究资料1981；65～62]。陈诗云等发现青阳参苷类化合物对NANE阳性细胞的DNA具有一定的保护作用[陈诗云，李力燕，陈渝，廖运掌等：中药药理与临床1988；4(4)]。此外，青阳参对慢性支气管炎、哮喘有一定的治疗作用。尚可以作为强心药的原料。青阳参总苷作为预防和治疗癫痫药物已经上市，商品名：青阳参片(健脑克癫片)[http://www.med126.com/pharm/2009/20090107121156_48219.shtml]。

人们对本科萝摩科植物化学成分的研究很多，主要有含有强心苷、C21甾体类衍生物和娃儿藤生物碱三类化合物。强心苷类(calotropiscarodiacglycosides)是由强心苷元与4，6-二去氧己酮糖双缩合所形成的苷，如牛角瓜苷(caletropin)、马利筋苷(asclepin)、乌斯卡定(cescharidin)等。C21甾体衍生物是一系列21个碳的甾体酯苷化合物，广布于鹅绒藤属、萝摩属、牛奶菜属和马利筋属植物中。这一类甾体苷元和苷亲脂性较强，难溶于水。他们都是甾核上有多个羟基的孕甾烷的衍生物，如肉珊瑚苷元(sarcostin)、林里奥酮(lincolon)、牛皮消苷元(cynanchogenin)、普果拉灵(pergularin)等。由于苷不易分离提纯，所以苷的化学结构多数不详。娃儿藤生物碱(tylophoraalkaloids)是菲吲哚里西啶(Phenanthroindolizidine)衍生物，如娃儿藤碱(tylohorine)、娃儿藤次碱(rylophorineine)、娃儿藤新碱(tyloPhorinidinc)，娃儿藤任碱(tylocrebrine)等，此类生物碱有显著毒性，中毒症状为头昏、呕吐、呼吸困难，严重者心跳停止而死亡。娃儿藤新碱的抗癌活性活性很强，娃儿藤任碱曾用作实验性白血病治疗，但对中枢神经系统有不可逆的毒性反应。本科的不少属种可药用，治疗多种疾病，如跌打损伤、风湿、淋巴结核、痈肿疗毒、肿瘤、小儿惊风、狂犬病、小儿疳疾等。青阳参在使用计量下对人无毒，但人食用后的粪便再被狗食用，可引起狗中毒或至死；猎人亦可用青阳参根粉制成毒铒，捕杀野兽，提示该植物可能对犬科动物毒性较大。

此外，还有诸多专利文献公开了青阳参的相关化学和药理作用。例如，CN1149485A(中国专利申请号96111270.0，公开日1997年5月14日)涉及青阳参在制备抗美尼尔氏病的药物中的应用，以及用青阳参作为原料制成的治疗美尼尔氏的药物和制备该药物的方法。CN1148978A(中国专利申请号96112802.X，公开日1997年5月7日)公开了青阳参在制备抗肝炎药物中的应用，提供新的提取青阳参药效成分的方法和常规制剂方法结合制得的抗肝炎药物。

此外，CN1148958A(中国专利申请号96112900.X，公开日1997年5月7日)涉及青阳参甙甲、甙乙化合物在在制备抗肝炎药物中的应用以及在制备抗美尼尔氏病药物中的应用。CN1150951A(中国专利申请号96112803.8，公开日1997年6月4日)公开了青阳参甙丙、甙丁、甙戊、甙己、甙庚五个化合物，及其制备方法和在制药领域中尤其在制备抗肝炎药物中和抗美尼尔氏病药物中的应用。

目前更有效地利用现有药用植物资源例如青阳参是本领域令人期待的，寻找青阳参的新医药用途对于本领域而言亦是迫切的。

发明内容

本发明的目的是对青阳参的化学和药理学进行深入的开发，以其寻找青阳参的新医药应用。本发明人令人惊奇地发现，从中药材青阳参中提取到的部分化学成分例如青阳参甙(苷)元以及包含青阳参甙(苷)元的青阳参提取物具有有效的镇静催眠作用，并且可用于预防或治疗与镇静催眠、睡眠障碍相关联的疾病。本发明基于上述发现而得以完成。

发明概述

本发明第一方面提供了青阳参在制备医药或健康产品中的用途，所述医药或健康产品用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者镇静和/或催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用。

本发明第二方面提供一种青阳参提取物，其中包含青阳参甙(苷)元。

本发明第三方面提供了本发明第二方面任一项所述青阳参提取物在制备医药或健康产品中的用途，所述医药或健康产品用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者镇静和/或催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用。

本发明第四方面提供了青阳参甙(苷)元在制备医药或健康产品中的用途，所述医药或健康产品用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者镇静和/或催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用。

本发明第五方面提供了在有需要的受试者中治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂的方法，或者使有需要的受试者镇静和/或催眠的方法，或者使有需要的受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用的方法，所述方法包括给所述受试者施用预防和/或治疗、镇静和/或催眠、减少自发活动或抑制中枢的有效量的青阳参。

本发明第六方面提供了一种用于治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂或者用于镇静和/或催眠或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用的药物组合物，其中包含预防和/或治疗、镇静和/或催眠、减少自发活动或抑制中枢的有效量的青阳参、青阳参提取物、或者青阳参甙(苷)元，以及任选的药学可接受的赋形剂。

发明详述

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述医药或健康产品的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.01-50g，优选0.02-20g，更优选0.05-10g，再更优选0.05-5g。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述医药或健康产品包含青阳参药材的提取物。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述的医药或健康产品包含青阳参药材以水、醇(例如乙醇)、或水-醇(例如乙醇)混合物(例如 50-98％乙醇，例如75-98％乙醇，例如95％乙醇)为提取溶剂的提取物。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述的医药或健康产品包含青阳参药材的提取物，该提取物是以水、醇(例如乙醇)、或水-醇(例如乙醇)混合物(例如50-98％乙醇，例如75-98％乙醇，例如95％乙醇)为溶剂提取，并经乙酸乙酯萃取获得的乙酸乙酯萃取部分。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述医药或健康产品包含青阳参药材的提取物，该提取物中包含青阳参甙(苷)元。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述医药或健康产品包含青阳参药材的提取物，该青阳参的提取物是经如下步骤制备的：将青阳参用含水乙醇溶液(例如50-98％乙醇，例如75-98％乙醇，例如95％乙醇)提取；使所得醇提取物除去溶剂后用乙酸乙酸和水的混合物(例如乙酸乙酸∶水＝1∶1(v/v))萃取，乙酸乙酯层除去溶剂即得。

根据本发明第一方面任一项的用途，其中所述医药或健康产品包含青阳参甙(苷)元。

根据本发明第二方面任一项的青阳参提取物，其中所述青阳参甙(苷)元的量占所述提取物总重量的2-40％(w/w)，优选3-30％(w/w)，优选5～10％(w/w)。

根据本发明第二方面任一项的青阳参提取物，其是青阳参药材以水、醇(例如乙醇)、或水-醇(例如乙醇)混合物(例如50-98％乙醇，例如75-98％乙醇，例如95％乙醇)为提取溶剂的提取物。

根据本发明第二方面任一项的青阳参提取物，其是以水、醇(例如乙醇)、或水-醇(例如乙醇)混合物(例如50-98％乙醇，例如60％乙醇、95％乙醇)为溶剂提取，并经乙酸乙酯萃取获得的乙酸乙酯萃取部分。

根据本发明第二方面任一项的青阳参提取物，其是经如下步骤制备的：将青阳参用含水乙醇溶液(例如50-98％乙醇，例如75-98％乙醇，例如95％乙醇)提取；使所得醇提取物除去溶剂后用乙酸乙酸和水的混合物(例如乙酸乙酸∶水＝1∶1(v/v))萃取，乙酸乙酯层除去溶剂即得。

根据本发明第二方面任一项的青阳参提取物，其是经如下步骤制备的：将青阳参用含水乙醇溶液(例如50-98％乙醇，例如75-98％乙醇，例如约95％乙醇)在回流温度下提取；使所得醇提取物除去溶剂后在乙酸乙酸和水之间(例如乙酸乙酸∶水＝1∶1(v/v))萃取，乙酸乙酯层除去溶剂即得。

根据本发明第二方面任一项的青阳参提取物，其可用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者镇静和/或催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用。

根据本发明第三方面任一项的用途，其中所述提取物的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.01-50g，优选0.02-20g，更优选0.05-10g，再更优选0.05-5g。

根据本发明第四方面任一项的用途，其中所述医药或健康产品的剂量为所述受试者每天相当于青阳参甙(苷)元0.01-50mg/kg体重、0.1-50mg/kg体重、0.1-40mg/kg体重、1-25mg/kg体重、或2-20mg/kg体重。

本发明第五方面提供了在有需要的受试者中治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂的方法，或者使有需要的受试者镇静和/或催眠的方法，或者使有需要的受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用的方法，所述方法包括给所述受试者施用预防和/或治疗、镇静和/或催眠、减少自发活动或抑制中枢的有效量的青阳参。在一个实施方案中，所述青阳参是以医药或健康产品的形式给所述受试者施用的。在一个实施方案中，所述医药或健康产品具有本发明第一方面任一项所述的特征。

本发明第五方面还提供了在有需要的受试者中治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂的方法，或者使有需要的受试者镇静和/或催眠的方法，或者使有需要的受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用的方法，所述方法包括给所述受试者施用预防和/或治疗、镇静和/或催眠、减少自发活动或抑制中枢的有效量的本发明第二方面任一项所述青阳参提取物。

本发明第五方面还提供了在有需要的受试者中治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂的方法，或者使有需要的受试者镇静和/或催眠的方法，或者使有需要的受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用的方法，所述方法包括给所述受试者施用预防和/或治疗、镇静和/或催眠、减少自发活动或抑制中枢的有效量的青阳参甙(苷)元。在一个实施方案中，所述青阳参甙(苷)元的剂量为所述受试者每天0.01-50mg/kg体重、0.1-50mg/kg体重、0.1-40mg/kg体重、1-25mg/kg体重、或2-20mg/kg体重。

根据本发明第六方面任一项所述药物组合物，其中所述青阳参提取物具有本发明第二方面任一项所述青阳参提取物的特征。

根据本发明第六方面任一项的药物组合物，其中所述的药物组合物给予受试者的剂量为所述受试者每天相当于青阳参甙(苷)元0.01-50mg/kg体重、0.1-50mg/kg体重、0.1-40mg/kg体重、1-25mg/kg体重、或2-20mg/kg体重。

本发明任一方面或该任一方面的任一项所具有的特征同样适用其它任一方面或该其它任一方面的任一项，只要它们不会相互矛盾，当然在相互之间适用时，必要的话可对相应特征作适当修饰。在本发明中，例如，提及“本发明第一方面任一项”时，该“任一项”是指本发明第一方面的任一子方面；在其它方面以类似方式提及时，亦具有相同含义。

下面对本发明的各个方面和特点作进一步的描述。

本发明所引述的所有文献，它们的全部内容通过引用并入本文，并且如果这些文献所表达的含义与本发明不一致时，以本发明的表述为准。此外，本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义，即便如此，本发明仍然希望在此对这些术语和短语作更详尽的说明和解释，提及的术语和短语如有与公知含义不一致的，以本发明所表述的含义为准。

根据本发明，青阳参甙(苷)元(Qingyangshengenin，C₂₈H₃₆O₈)，其具有如下化学结构式：

本文中使用的术语“约”，如出现时，其通常是指本领域允许的误差范围，例如±10％，例如±5％，例如±2％。

如本文所述的，术语“有效量”是指可在受试者中实现治疗、预防、镇静和/或催眠本发明所述疾病、病症或身体状态的剂量。

如本文所述的，术语“药物组合物”，其可以与“组合物”互换使用，并且可以指可用于在受试者中实现治疗、预防、镇静和/或催眠本发明所述疾病、病症或身体状态的物质。

如本文所述的，术语“受试者”或“患者”，可以指接受本发明组合物和提取物以治疗、预防、镇静和/或催眠本发明所述疾病、病症或身体状态的动物，特别是哺乳动物，例如人、狗、猴、牛、马等。

如本文所述的，“％”，如未特别指明，对于总物料是固体时一般是指重量/重量的百分比，对于总物料是液体时一般是指重量/体积的百分比。当然，对于总物料是液体并且溶质是液体时，表征该液态溶质的百分比一般是指体积/体积的百分比。对于描述乙醇时使用的％，例如95％乙醇，其具有本领域公知的含义，例如可参见2005年版《中华人民共和国药典二部》凡例中的定义。

如本文所述的，“％(w/w)”是指重量比重量的百分比。

如本文所述的，术语“提取物”，如未另外指明，是指青阳参的“提取物”；在实施例中使用试药为提取物时，如未另外指明，是指实施例1制备的青阳参提取物。

根据本发明，其中涉及化学成分的组成表征例如提取物中青阳参甙(苷)元的含量测定，可以参考《中药成方制剂标准1997年》中标准号为WS3-B-2343-97中所记载的方法。

如本文所述的，术语“乙酸乙酯部分”或者“乙酸乙酯萃取部分”，是指一种由乙酸乙酯处理后获得的、存在于乙酸乙酯中的植物有效部位，亦可称为“乙酸乙酯部位”。

如本文所述的，术语“医药”或“健康产品”等，以及所述的术语“药物”、“提取物”、“组合物”、“药物组合物”等，不但可以指代为一种具有药理和/或生理功能药品，还可以指代为一种具有药理和/或生理功能产品，例如健康产品，例如“保健品”，例如功能性食品或保健食品。因此，根据本发明各个方面的主题提及到术语“医药”或“健康产品”以及“药物”、“提取物”、“组合物”、“药物组合物”、“保健品”等，本领域技术人员可以理解，上述各术语均可以表示欲意用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者镇静和/或催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用。

如本文所述的，短语“用于受试者镇静和/或催眠”亦可理解为将本发明提供的青阳参、青阳参提供物或式I化合物等作为镇静剂和/或催眠剂提供给有需要的受试者，以使受试者产生期望的镇静和/或催眠作用。类似地，短语“用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用”亦可理解为将本发明提供的青阳参、青阳参提供物或式I化合物等作为自发活动抑制剂或中枢抑制提供给有需要的受试者，以使受试者产生期望的减少自发活动或中枢抑制的作用。

本发明药物组合物中使用的“药学可接受的赋形剂”可以是药物制剂领域中任何常规的赋形剂。特定赋形剂的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的赋形剂包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂、注射乳剂(注射用无菌粉针)等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

本发明的目的，是寻找青阳参中具有镇静催眠生物活性的物质成分，并将该其开发为新的医药用途。本发明人经过系统检索，没有见到青阳参提取物和青阳参甙(苷)元具有预防或治疗镇静催眠作用的报道，也没有见到他们作为预防或治疗与镇静催眠、睡眠障碍相关联疾病的药物的报道。

本发明涉及青阳参提取物和其经过分离得到的青阳参甙(苷)元。经动物实表明，青阳参提取物和青阳参甙(苷)元均具有镇静催眠药理活性，均可以应用为预防或治疗与镇静催眠相关连的疾病，尤其是应用于预防和治疗各种因素引起的睡眠功能障碍性疾病。

本发明人经过深入的研究，发现青阳参的乙酸乙酯提取物具有镇静催眠的作用，进一步研究证实，青阳参乙酸乙酯提取物中的青阳参甙(苷)元是主要镇静催眠活性物质成分。青阳参提取物及青阳参甙(苷)元的镇静催眠活性，是经动物实验得以证实的。

在本发明的一个方面，涉及药物组合物，其包括青阳参提取物及药用载体；青阳参提取物经过溶剂提取、柱层析分离得到的青阳参甙(苷)元及药用载体，以及它们作为预防或治疗与镇静催眠相关连的疾病，尤其是预防和治疗各种因素引起的睡眠功能障碍性疾病，如失眠，睡眠时间短暂等方面的医药用途。

在本发明的一个方面，涉及青阳参提取物和青阳参甙(苷)元，对睡眠障碍等方面的药物组合物的应用，包括单独使用或加以药用辅料制成的各种制剂，如片剂，胶囊，溶液，悬浮液，注射液，滴注液等。

在本发明的一个方面，涉及青阳参提取物和青阳参甙(苷)元，通过口服、注射、非肠道或局部途径给药。

本发明药物组合物可按本领域已知方法制备，例如将青阳参原料药经过溶解提取，得到提取物，将提取物经过柱层析分离得到青阳参甙(苷)元。所用的有机体溶剂包括水，醇类如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等；酮类如丙酮，丁酮，戊酮，酯类如乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯等。柱层析材料为硅胶、键合硅胶、凝胶等；洗脱剂有氯仿、甲醇、丙酮、水、盐酸等，包括他们的任意组合体。

具体实施方式

下面通过具体的实施例和实验例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例和实验例仅仅是用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所用材料和操作方法是本领域公知的。

实施例1：青阳参提取物和青阳参甙(苷)元的提取、分离和结构研究

步骤1：取青阳参1kg(Cynanchum otophyllum Schneid，山西运城青阳参种植厂出品，经该厂王天才教授鉴定)，用95％乙醇回流提取3次，减压浓缩得到浸膏，用乙酸乙酯/水溶液(1/1，v/v)萃取，将乙酸乙酯层减压，浓缩得到浸膏，干燥，得9.6g，即为青阳参提取物。经测定，该提取物中的青阳参甙(苷)元的含量约为5％(w/w)。

步骤2：取步骤1所得青阳参提取物5g，经硅胶(100～200目)柱层析(柱床：Φ＝50mm，H＝700mm，V＝500ml)，以氯仿/甲醇梯度洗脱；再经过一次柱层析，以乙腈/水(50/50→60/40)梯度洗脱，得到青阳参甙(苷)元0.2克。

表征：青阳参甙(苷)元为白色无定型粉末，EI-MSm/z：499[M-H]^-。¹H NMR(C₅D₅N，400MHz)δ：1.29(s，3H，19-Me)；1.54(d，3H，J＝6.02Hz，21-Me)；2.14(s，3H，18-Me)；4.11(m，1H，3-H)；5.32(dd，1H，J＝6.73和11.21Hz，H-12)；5.26(1H，H-6)；6.82(d，2H，J＝7.81Hz，H-4，6’)；7.79(d，2H，J＝7.63Hz，H-3’，7’)。¹³C-NMR(C₅D₅N)δ：C₍₁₎-39.28；C₍₂₎-31.69C₍₃₎-76.89；C₍₄₎-42.05；C₍₅₎-140.54；C₍₆₎-119.81；C₍₇₎-35.21；C₍₈₎-74.67；C₍₉₎-44.44；C₍₁₀₎-38.12；C₍₁₁₎-25.39；C₍₁₂₎-75.39；C₍₁₃₎-59.87；C₍₁₄₎89.59；-C₍₁₅₎-34.12；C₍₁₆₎-33.43；C₍₁₇₎-93.64；C₍₁₈₎-10.97；C₍₁₉₎-18.93；C₍₂₀₎-211.37；C₍₂₁₎-28.45；C_(1’)-165.89；C_(2’)-123.43；C_(3’)-133.56；C_(4’)-116.78；C_(5’/9’)-164.58；C_(6’/8’)-116.81；C_(7’)-133.22。上述波谱数据与文献报道的青阳参甙(苷)元相吻合。[MAXX，J IANG F T，et al.New pregnane glycosides from the roots of Cynanchum otophyllum[J]1 Steroids，2007，72(12)：778-786]。

实施例2：青阳参提取物片和青阳参甙(苷)元片的制备

按以下表1和表2中配方比例，取原料药(分别得自实施例1的青阳参提取物和青阳参甙(苷)元)溶解50％乙醇中，加入淀粉，混匀，再加入阿拉伯胶和羧甲基纤维素充分混匀，制成软材，湿法制粒，60℃干燥。整粒，加入硬脂酸镁压片，即得。获得的青阳参提取物片和青阳参甙(苷)元片均为白色光滑硬质片。

表1.制备青阳参提取物100片配方

组分	重量(克)
		青阳参提取物	30.0
淀粉	14.0
		阿拉伯胶	0.5
羧甲基纤维素	3.0
		硬脂酸镁	2.5
总量	50.0

表2.制备青阳参甙(苷)元100片配方

组分	重量(克)
		青阳参甙(苷)元	2.0
淀粉	18.0
		阿拉伯胶	0.5
羧甲基纤维素	2.0
		硬脂酸镁	2.5
总量	25.0

实施例3：青阳参提取物和青阳参甙(苷)元对小鼠自发活动性的影响

I.材料

青阳参提取物(得自实施例1，批号：090312)；青阳参甙(苷)元(得自实施例1，批号090424)，均为军事医学科学院毒物药物研究所植化室提供。昆明种小鼠，18～22g雄性。军事医学科学院实验动物中心提供，许可证：SCXK(军)2002-001。

II.方法

小鼠禁食2小时，对照组给予配制试药的溶剂(生理盐水)，药物分为不同剂量组，每剂量4只，口服给药后60分钟将小鼠置红外自发活动仪中(中国科学院药物研究所研制)，每1只放一箱中，计10分钟自发活动数。试验结果采用相应的统计学方法处理，两组间均数显著性比较用t检验，两组间反应率比较用卡方检验。

III.结果与讨论

小鼠口服青阳参提取物50～200mg/kg，青阳参甙(苷)元10～50mg/kg，60分钟后其自发活动数较对照明显减少，并呈剂量依赖性。但动物末出现共济失调或翻正反射消失等症状。结果表明青阳参提取物及青阳参甙(苷)元具有中枢镇静催眠作用。结果分别见表3和表4。

表3.青阳参提取物对小鼠自发活动性的影响

与对照比较，＊p＜0.05

表4.青阳参甙(苷)元对小鼠自发活动性的影响

与对照比较，＊p＜0.05；＊＊p＜0.01

实施例4：青阳参提取物和青阳参甙(苷)元对小鼠戊已比妥钠阈下麻醉剂量的协同试验

I.原理

小鼠给予阈下剂量的戊巴比妥钠后，再给予一定剂量的待测药物，探讨药物对中枢的抑制作用，检验有无镇静催眠作用。镇静药和催眠药皆可使给药小鼠处于翻正反射消失的中枢抑制状态。

II.材料

青阳参提取物(得自实施例1，批号：090312)；青阳参甙(苷)元(得自实施例1，批号090424)，均为军事医学科学院毒物药物研究所植化室提供。戊巴比妥，沃凯公司提供(批号：ws20050411)。

昆明种小鼠，18～22g雄性。军事医学科学院实验动物中心提供，许可证：SCXK(军)2002-001。

III.方法

小鼠禁食16小时，将青阳参提取物和苷元口服给药60分钟后，以及腹腔注射15分钟后，腹腔注射戊巴比妥20mg/kg。用盲法评价小鼠的翻正反射，置小鼠于平台上，使之侧卧，小鼠在20s内无一足掌接触台面为翻正反射消失阳性。每5分钟侧卧小鼠1次，至出现翻正反射为止。试验结果采用相应的统计学方法处理，两组间均数显著性比较用t检验，两组间反应率比较用卡方检验，见表5和表6。

IV.结果与讨论

小鼠口服、注射青阳参提取物或青阳参甙(苷)元后，在戊巴比妥阈下麻醉条件下，动物出现不同程度的翻正反射消失，并呈一定的量效关系。说明青阳参提取物和青阳参甙(苷)元具有良好的镇静催眠作用。

表5.青阳参提取物对小鼠戊巴比妥阀下麻醉剂量的影响

与对照组比，＊p＜0.05

表6.青阳参甙(苷)元对小鼠戊巴比妥阀下麻醉剂量的影响

与对照组比，＊p＜0.05

Claims

1.青阳参在制备医药或健康产品中的用途，所述医药或健康产品用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用；其中所述的医药或健康产品包含青阳参药材以水-醇混合物为提取溶剂的提取物经乙酸乙酯萃取获得的乙酸乙酯萃取部分，其中所述水-醇混合物中的醇是乙醇。

2.根据权利要求1的用途，其中所述医药或健康产品的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.01-50g。

3.根据权利要求1的用途，其中所述医药或健康产品的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.02-20g。

4.根据权利要求1的用途，其中所述医药或健康产品的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.05-10g。

5.根据权利要求1的用途，其中所述医药或健康产品的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.05-5g。

6.根据权利要求1所述的用途，其中所述水-醇混合物是50-98％乙醇。

7.根据权利要求1所述的用途，其中所述水-醇混合物是75-98％乙醇。

8.根据权利要求1所述的用途，其中所述水-醇混合物是95％乙醇。

9.青阳参提取物在制备医药或健康产品中的用途，所述医药或健康产品用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者镇静和/或催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用，其中所述青阳参提取物是青阳参药材以水-醇混合物为提取溶剂的提取物经乙酸乙酯萃取获得的乙酸乙酯萃取部分，其中所述水-醇混合物中的醇是乙醇。

10.根据权利要求9的用途，其中所述青阳参提取物中含有青阳参甙(苷)元。

11.根据权利要求10的用途，其中所述青阳参甙(苷)元的量占所述提取物总重量的2-40％w/w。

12.根据权利要求10的用途，其中所述青阳参甙(苷)元的量占所述提取物总重量的3-30％w/w。

13.根据权利要求10的用途，其中所述青阳参甙(苷)元的量占所述提取物总重量的5-10％w/w。

14.根据权利要求9的用途，其中所述水-醇混合物是50-98％乙醇。

15.根据权利要求9的用途，其中所述水-醇混合物是75-98％乙醇。

16.根据权利要求9的用途，其中所述水-醇混合物是95％乙醇。

17.根据权利要求9至16中任一项所述的用途，其中所述提取物的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.01-50g。

18.根据权利要求9至16中任一项所述的用途，其中所述提取物的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.02-20g。

19.根据权利要求9至16中任一项所述的用途，其中所述提取物的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.05-10g。

20.根据权利要求9至16中任一项所述的用途，其中所述提取物的剂量为所述受试者每天每kg体重相当于青阳参药材0.05-5g。

21.青阳参甙(苷)元在制备医药或健康产品中的用途，所述医药或健康产品用于受试者治疗和/或预防与睡眠功能障碍相关的疾病或病症、失眠、睡眠时间短暂，或者用于受试者镇静和/或催眠，或者用于受试者产生减少自发活动或中枢抑制的作用。