CN108743602A - 羟基红花黄色素b在制备治疗乳腺癌药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了羟基红花黄色素B在制备治疗乳腺癌药物中的应用，本发明提出羟基红花黄色素B能诱发乳腺癌细胞周期阻滞和促进乳腺癌细胞凋亡，显著性地抑制乳腺癌细胞的增殖。本发明的有益效果是首次证明，羟基红花黄色素B能够有效地抑制乳腺癌细胞的增殖，达到治疗乳腺癌的作用，可作为制备乳腺癌细胞增殖抑制药物或抗乳腺癌药物用于抗肿瘤的研究。
Description
技术领域
本发明属于肿瘤治疗药物技术领域，涉及羟基红花黄色素B在制备治疗乳腺癌药物中的应用。
背景技术
乳腺癌是女性最常见的高度恶性肿瘤之一。全球乳腺癌发病率自20世纪70年代末开始一直呈上升趋势。虽然中国的发病率比西方国家低，但发病率和死亡率却在逐年上升，尤其是在城乡地区，这对妇女的健康构成了严重的威胁。并且有统计学数据显示近年我国乳腺癌发病率的增长速度高出西方高发国家1～2个百分点。虽然目前临床以手术切除辅助放化疗手段对乳腺癌患者进行治疗，这些治疗手段也对治疗原发性肿瘤起到了一定疗效，但乳腺癌患者的5年生存率由于耐药、复发和严重的副作用仍然较低，患者生存质量仍然得不到保证，近年来中医药预防治疗乳腺癌逐渐成为新的研究热点，因此，寻找更好的中药提取物成为乳腺癌治疗新的研究方向。
红花作为一种常见的中药材，已被证实作为治疗中风、冠心病和心绞痛的药物疗效显著，植物化学和药理学研究表明发挥作用的为黄酮类化合物。其中，羟基红花黄色素A(HSYA)是主要活性成分，具有抑制血小板聚集，活血化瘀，抗氧化，促进新陈代谢等功效。羟基红花黄色素B作为一种新提取的黄酮类化合物，与羟基红花黄色素A具有类似的结构与化学性质，且已有报道证明其具有良好的抗氧化性。
目前，羟基红花黄色素A在癌症方面的学术报道也有被提及，但羟基红花黄色素B作为一种新的提取物在乳腺癌治疗方面的具体应用仍处于空白。
发明内容
本发明的目的在于提供羟基红花黄色素B在制备治疗乳腺癌药物中的应用，本发明的有益效果是首次证明，羟基红花黄色素B能够有效地抑制乳腺癌细胞的生长与增殖，达到治疗乳腺癌的作用，可作为制备乳腺癌细胞增殖抑制药物或抗乳腺癌药物用于抗肿瘤的研究。
本发明提出羟基红花黄色素B能诱发乳腺癌细胞周期阻滞和促进乳腺癌细胞凋亡，从而显著性地抑制了乳腺癌细胞的增殖。
羟基红花黄色素B的结构式如下所示：
其中，1,5-环己二烯-1-酮，4β-D-吡喃葡萄糖基-6-α-D-果糖吡喃-3-4-5-三羟基-2-[(2e)-3(4-羟基苯基)-1-氧代-2-丙烯基]-(9CI)。
附图说明
图1为本发明实施例1中MTT实验的实验结果图；
图2为本发明实施例2中集落生成实验的实验结果图；
图3为本发明实施例3中Hoechst染色实验的实验结果图；
图4为本发明实施例4中的细胞凋亡实验的实验结果图；
图5为本发明实施例2中细胞周期实验的实验结果图。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
本发明的羟基红花黄色素B的分子式为C27H32O16，分子结构式如下所示：
1,5-环己二烯-1-酮，4β-D-吡喃葡萄糖基-6-α-D-果糖吡喃-3-4-5-三羟基-2-[(2e)-3(4-羟基苯基)-1-氧代-2-丙烯基]-(9CI)。
1、实验材料：
实验细胞：乳腺癌MCF-7细胞，采用含10％FBS、0.01mg/ml重组人胰岛素和1％青霉素链霉素的DMEM培养液，在37℃、5％CO2的加湿培养箱中培养，并利用常规胰蛋白酶EDTA消化和传代。
实验药物：羟基红花黄色素B
其他实验材料：冻存管、DMEM培养液(Gibco)、0.01mol/L的PBS缓冲液、0.25％胰蛋白酶(Solarbio，T1320)、胎牛血清(四季青，20171212)、噻唑蓝染液(Sigma，M2128)、二甲基亚砜(Sigma，D2650)、结晶紫染色液(Solarbio，G1061)、4％多聚甲醛、ANNEXIN V-FITC/PI凋亡检测试剂盒(Solarbio，CA1020)、DNA含量检测试剂盒(Solarbio，CA1510)、1.5mL离心管、5mL离心管、10mL离心管、10μL移液枪、200μL移液枪、1000μL移液枪、75cm2无菌细胞培养瓶、100mm培养皿、6孔无菌培养板、24孔无菌培养板、96孔无菌培养板、高速离心机(ThermoFisher，75007204)、超净工作台(Heal Force，HFsafe-1200LC)、Milli-QAdvantageA10超纯水机、恒温CO2培养箱(Heal Force，HF240)、光学显微镜(OPTIKA，XDS-3)、酶标仪(TECAN，Infinite 200PRO NanoQuant)等。
2、细胞活力测定
MCF-7细胞培养至对数期，用胰蛋白酶-EDTA溶液充分消化，接种于96孔板(6×103孔)。培养24h后，将用DMEM培养液稀释的不同浓度HSYB加入96孔板细胞中，使每孔终浓度分别为0、5、10、15、20、25、30、35、40μg/mL。设有空白组(无细胞)和对照组(无药物)，每组设6个复孔。处理24h后，吸去上清液，每孔加入10μL 5mg/mL的MTT液体，放置于37℃培养箱内。培养2h后，取出培养基，每孔加入150μLDMSO。摇床摇晃10分钟，用酶标仪检测490nm处的吸光值。结果如图1所示，在相同的作用时间下，随着羟基红花黄色素B药物浓度的增加，其对MCF-7细胞增值抑制逐渐增加；且IC50在20～30μg/mL之间，经过统计学分析，实验组与对照组相比较均存在统计学差异(P﹤0.01)。
3、集落生成实验
将MCF-7细胞按照每孔200个的密度接种于6孔板中，孵育24小时后，用不同浓度(5、10、20和30μg/mL)的羟基红花黄色素B处理细胞，在37℃下处理24小时，然后用3天不含羟基红花黄色素B的新鲜培养基代替培养基。培养14天后，用4％的组织细胞固定甲醛固定细胞15分钟，PBS清洗两遍，然后用结晶紫染色液在室温下染色10分钟。用数码相机拍摄染色细胞，计数细胞集落(＞50个细胞)。结果如图2所示，羟基红花黄色素B可以影响MCF-7细胞集落生成的能力，抑制其增殖能力。经过统计学分析，实验组与对照组相比较均存在统计学差异(P﹤0.01)。
4、Hoechst染色实验
Hoechst染色检测试剂盒检测HSYB诱导MCF-7细胞凋亡。取无菌盖玻片至于10cm培养皿中，将MCF-7细胞接种于盖玻片(1.5×105/皿)上培养24h，分别加入不同浓度(10、20和30μg/mL)的羟基红花黄色素B工作液处理细胞，孵育24h，然后将培养基丢弃。并用PBS冲洗细胞两次。随后，用Hoechst 33258染色液染色细胞10分钟，最后用PBS冲洗染色细胞并在荧光显微镜下观察。结果如图3所示，荧光显微镜下经羟基红花黄色素B处理过的MCF-7细胞细胞核致密浓染，有明显的凋亡小体出现。
5、细胞凋亡实验
将对数生长期MCF-7细胞消化离心并接种于6孔板(1.5×105/皿)，培养24h待其长至80％左右，用不同浓度(10、20和30μg/mL)的羟基红花黄色素B处理细胞。随后，将细胞用不含EDTA的胰蛋白酶消化收集，PBS清洗2遍后，用500μL含有Annexin V-FITC(5μL)和PI(5μL)的染色缓冲液中重新悬浮并避光反应5-10分钟，最后用流式细胞仪检测。结果如图4所示，羟基红花黄色素B可以使凋亡细胞比例明显增加，且比例与给药浓度呈正相关关系。经过统计学分析，实验组与对照组相比较均存在统计学差异(P﹤0.01)。
6、细胞周期实验
如上方法诱导细胞凋亡后收集细胞，PBS洗涤细胞一次后，1500rpm离心5分钟收集细胞并调整细胞浓度为1*106/mL，将制备得的细胞悬液离心去上清，加入70％预冷乙醇500μL固定过夜，第二日，PBS清洗固定液后加入100μL RNaseA溶液重悬细胞，37℃水浴30分钟后，加入400μL染色液混匀，避光孵育30分钟后用流式细胞仪检测。结果如图5所示，羟基红花黄色素B可显著诱导S期细胞周期阻滞。经过统计学分析，实验组与对照组相比较均存在统计学差异(P﹤0.01)。
本发明以体外培养乳腺癌细胞MCF-7为研究对象，从细胞周期、细胞凋亡和细胞增殖等方面，探究羟基红花黄色素B对乳腺癌细胞生物学行为的影响；首次发现羟基红花黄色素B在制备乳腺癌药物中的应用，发现其能诱发乳腺癌细胞周期阻滞和促进乳腺癌细胞凋亡，显著性地抑制乳腺癌细胞的增殖，为提供一种新的治疗乳腺癌药物奠定了基础，为抗乳腺癌下一步研究提供实验和理论依据。
本发明提供的羟基红花黄色素B从中药红花提取，成分安全可靠。这也为乳腺癌治疗提高有效性、延长患者寿命和提高生存质量开拓了一个新的领域。
以上所述仅是对本发明的较佳实施方式而已，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施方式所做的任何简单修改，等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。
Claims (2)
1.羟基红花黄色素B在制备治疗乳腺癌药物中的应用，其特征在于：羟基红花黄色素B诱发乳腺癌细胞周期阻滞和促进乳腺癌细胞凋亡，显著性地抑制了乳腺癌细胞的增殖。
2.按照权利要求1所述羟基红花黄色素B在制备治疗乳腺癌药物中的应用，其特征在于：所述羟基红花黄色素B的结构式如下所示：
其中，1,5-环己二烯-1-酮，4β-D-吡喃葡萄糖基-6-α-D-果糖吡喃-3-4-5-三羟基-2-[(2e)-3(4-羟基苯基)-1-氧代-2-丙烯基]-(9CI)。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1876161A (zh) * | 2005-05-12 | 2006-12-13 | 贵阳云岩西创药物科技开发有限公司 | 治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂及制法和质量控制方法 |
| WO2011026401A1 (zh) * | 2009-09-01 | 2011-03-10 | 奇复康药物研发(苏州)有限公司 | 偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物及其医药用途 |
| CN106083788A (zh) * | 2016-06-24 | 2016-11-09 | 南京中医药大学 | 一种具有抗肿瘤活性和抗炎活性的醌式查尔酮碳苷二聚体化合物及其制备方法 |
| US9844577B1 (en) * | 2017-04-18 | 2017-12-19 | Fang-Ping Chao | Medicinal composition for prevention or treatment retinal ischemia |
| CN108392486A (zh) * | 2018-01-23 | 2018-08-14 | 滨州医学院 | 羟基红花黄色素b在防治心肌缺血再灌注损伤方面的应用 |
-
2018
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Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1876161A (zh) * | 2005-05-12 | 2006-12-13 | 贵阳云岩西创药物科技开发有限公司 | 治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂及制法和质量控制方法 |
| WO2011026401A1 (zh) * | 2009-09-01 | 2011-03-10 | 奇复康药物研发(苏州)有限公司 | 偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物及其医药用途 |
| CN102000072A (zh) * | 2009-09-01 | 2011-04-06 | 奇复康药物研发(苏州)有限公司 | 偶联有一氧化氮供体的抗肿瘤天然药物及其医药用途 |
| CN106083788A (zh) * | 2016-06-24 | 2016-11-09 | 南京中医药大学 | 一种具有抗肿瘤活性和抗炎活性的醌式查尔酮碳苷二聚体化合物及其制备方法 |
| US9844577B1 (en) * | 2017-04-18 | 2017-12-19 | Fang-Ping Chao | Medicinal composition for prevention or treatment retinal ischemia |
| CN108392486A (zh) * | 2018-01-23 | 2018-08-14 | 滨州医学院 | 羟基红花黄色素b在防治心肌缺血再灌注损伤方面的应用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| CHUANJUN QU ET AL: "Inhibitory Effect of Hydroxysafflor Yellow B on the Proliferation of Human Breast Cancer MCF-7 Cells", 《RECENT PATENTS ON ANTI-CANCER DRUG DISCOVERY》 * |
| SHIJUN YUE ET AL: "Two New Quinochalcone C-Glycosides from the Florets of Carthamus tinctorius", 《INT. J. MOL. SCI》 * |
| YUYING LI ET AL.: "Hydroxysafflor yellow A induces apoptosis in MCF-7 cells by blocking NFkB/p65 pathway and disrupting mitochondrial transmembrane potential", 《RSC ADVANCES》 * |
| 陈梦: "羟基红花黄色素A的植物雌激素样作用及机制研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
| 黄玲玲等: "红花有效成分抗肿瘤机制研究进展", 《江西中医药》 * |
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