CN1876161A - 治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂及制法和质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂及制法和质量控制方法，它主要由夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g、香附200g和地龙200g或用相应重量份它们的提取物制作而成。与现有技术相比，本发明制剂具有疏肝理气，活血化瘀的功效。用于肝气郁结，气滞血瘀所致的乳腺增生，乳房胀痛等。其制剂剂型携带方便、口感良好、吸收快、抗湿性能好；所提供的制备方法及质量控制方法能够有效制备需要的制剂、保证得到的制剂品种效果显著；生产工艺科学合理。克服了现有技术、产品存在的问题。
Description
技术领域：本发明是一种治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂及制法和质量控制方法，属于中药的技术领域。
技术背景：乳腺增生是妇女常见、多发病之一，多见于25～45岁女性，其本质上是一种生理增生与复旧不全造成的乳腺正常结构的紊乱。在我国，囊性改变少见，多以腺体增生为主，故多称“乳腺增生症”。世界卫生组织(WHO)统称“良性乳腺结构不良”。本病恶变的危险性较正常妇女增加2--4倍，临床症状和体征有时与乳癌相混。其主要临床特征为乳房肿块和乳房疼痛，一般常于月经前期加重，行经后减轻。由于乳腺增生病重的一小部分以后有发展成为乳腺癌的可能性，所以有人认为乳腺增生病为乳腺癌的“癌前病变”。乳腺增生病属于中医的“乳癖”范畴。有关本病的描述最早见于《中藏经》，以后历代医家多有论述，对其病因病机、临床表现及治疗均有详尽的阐述。“乳癖”是形容气机不畅，在乳房部出现胀满疼痛，症请时缓时剧，疼痛时轻时重等特点。《疡科心德集》中是这样描述的：“有乳中结核，形如丸卵，不疼痛，不发寒热，皮色不变，其核随喜怒而消长，此名乳癖……。”西医学认为乳腺囊性增生病是患者卵巢功能失调，黄体素与雌激素比例失去平衡，黄体素分泌下降，雌激素增高导致乳腺组织增生和复旧的周期过程发生病理性改变，因而失去黄体素对雌激素抑制性影响。西药在对此病的治疗方面大多集中于激素制剂，副作用较大，疗效不巩固、复发率高，中药治疗乳腺囊性增生病是一种有效方法。其中市售的乳癖康片具有疏肝理气，活血化瘀。用于肝气郁结，气滞血瘀所致的乳腺增生，乳房胀痛。但是原剂型是水提液浸膏制成的素片，水提会将夏枯草等中药都含有多糖、粘液质提取出来，再加上是素片，抗湿性很差，而且片剂是经过压缩成型的，崩解较差；而有研究者试图改善这两个问题，如申请号为“03124458.0”，名称为“乳癖康丸及制备方法”和申请号为“03118940.7”，名称为“乳癖康颗粒及制备方法”，但是丸剂溶散时间长，颗粒剂辅料多、服用量大；鉴于这些情况，为了提高药物的稳定性，需要寻找一种治疗效果理想、质量可靠、剂型合理的有效治疗药物制剂来丰富剂型品种、满足市场需要。另外，目前针对乳癖康制剂的质量控制方法尚不能够达到使产品质量真正可控的目的，还需要针对处方中所有起主要作用的药味建立定性定量的检测方法，以利于进一步提高产品质量，保证产品质量的稳定性，造福于消费者。
发明内容：本发明的目的在于：针对现有技术，提供一种治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂及制法和质量控制方法；提供的产品具有疏肝理气，活血化瘀的功效。用于肝气郁结，气滞血瘀所致的乳腺增生，乳房胀痛等。其制剂剂型携带方便、口感良好、吸收快、抗湿性能好；所提供的制备方法及质量控制方法能够有效制备需要的制剂、保证得到的制剂品种效果显著；生产工艺科学合理，质控方法具有较强的专属性、稳定性、精确度。
本发明是这样构成的：
所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂，主要由夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g、香附200g和地龙200g或用相应重量份它们的提取物制作而成的泡腾片、注射液、粉针、冻干粉针、凝胶剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂或膜剂。确切地说，所述的制剂是胶囊剂、丸剂或颗粒剂。
所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂的制备方法，取一半处方量的丹参、香附，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，干燥，粉碎，然后分别制成不同的制剂。优选为：取一半处方量的丹参、香附，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉和淀粉适量，混匀，装入胶囊，分装时应控制相对湿度在65.0％以下，即得。
所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物颗粒剂这样制备：取丹参100g、香附100g，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉，用糊精和可溶性淀粉作为赋形剂及分散剂，75％的乙醇溶液作为润湿剂，干燥温度控制在55℃～65℃时制粒，即得。
所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂的质量控制方法，包括以下全部或部分内容：
(1)香附、α-香附酮、丹参、丹参酮IIA、丹酚酸B、丹参素或其钠盐、原儿茶醛、红花、羟基红花黄色素、山奈素、红花明苷A、夏枯草、熊果酸、郁金中全部或部分成分的鉴别方法；
(2)橙皮苷、丹参酮IIA、丹酚酸B、丹参素或其钠盐、原儿茶醛、红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素、熊果酸中全部或部分成分的含量测试方法。
其中，所述制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
a.香附和α-香附酮中-种或两种的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加乙醚或石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯或三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取香附对照药材，同法制成对照药材溶液；另取α-香附酮对照品，加醋酸乙酯或三氯甲烷制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯-醋酸乙酯或甲酸乙酯或醋酸丁酯-冰醋酸或甲酸(50～100∶0～20∶0～20)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b.丹参、丹参酮中一种或两种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醚或石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯或三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参酮IIA，加醋酸乙酯或三氯甲烷制成对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯-甲醇或三氯甲烷或醋酸乙酯或甲酸乙酯或醋酸丁酯-甲酸或冰醋酸(5～30∶0.2～10∶0～10)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
c.丹参、丹参素或其钠盐、丹酚酸B和原儿茶醛中一种或几种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醚或石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷或无水乙醇或甲醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯或三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参素或其钠盐、丹酚酸B和原儿茶醛中一种或几种，加乙醚或石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷或无水乙醇或甲醇制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯或三氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯或醋酸丁酯或丙酮-甲酸或冰醋酸(5～50∶0.2～20∶0～20)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
d.夏枯草、熊果酸中一种或两种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇或甲醇或丙酮，加热回流或超声提取，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚浸泡，倾去石油醚液，残渣加乙醇或甲醇使溶解，作为供试品溶液；取夏枯草对照药材，同法制成对照药材溶液；另取熊果酸，加乙醇或甲醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以环己烷或正己烷或石油醚或苯-三氯甲烷或二氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯或醋酸丁酯-冰醋酸或甲酸(2～20∶1～5∶1～8∶0～3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，在可见光或紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
e.红花、红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素中一种或几种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇或甲醇或丙酮或三氯甲烷，加热回流或超声提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取红花对照药材，同法制成对照药材溶液；另取红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素中一种或几种对照品，加乙醇或甲醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯或乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸或冰乙酸-水或甲醇或乙醇-冰醋酸或甲酸(2～20∶0.1～10∶0.1～10∶0～5)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
具体地说，所述制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
a.香附和α-香附酮中一种或两种的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加乙醚提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取香附对照药材，同法制成对照药材溶液；另取α-香附酮对照品，加醋酸乙酯制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸(90∶5∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b.丹参、丹参酮中一种或两种成分的薄层色谱法鉴别：
取本品5粒，取内容物，加乙醚20ml，振摇，放置1小时后，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
c.丹参、丹参素或其钠盐、丹酚酸B和原儿茶醛中一种或几种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加甲醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参素对照品，加甲醇制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
d.夏枯草、熊果酸中一种或两种成分的薄层色谱法鉴别：
取本品3粒，取内容物，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml(约2分钟)，倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸(20∶5∶8∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，分别在日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
e.红花、红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素中一种或几种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇回流提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取红花对照药材，同法制成对照药材溶液；另取红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素中一种或几种对照品，加乙醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以苯-甲醇-水-甲酸(10∶5∶5∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
所述制剂的含量测定方法包括以下方法中的一种或几种：
a.橙皮苷的含量测定方法
取本品适量，精密称定，加5～100％乙醇或5～100％甲醇适量，超声或浸泡或回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取橙皮苷对照品适量，制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水(5～60∶40～95)为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含陈皮以橙皮苷(C28H34O15)计，不得低于2.25mg。
b.丹参酮IIA的含量测定方法
取本品适量，精密称定，加5～100％乙醇或5～100％甲醇适量，超声或浸泡或回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹参酮IIA对照品适量，用5～100％乙醇或5～100％甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水(5～60∶40～95)为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参酮IIA计，不得低于0.5mg。
c.丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素或其钠盐中一种或几种的含量测定方法
取本品适量，精密称定，加5～100％乙醇或5～100％甲醇或水适量，超声或浸泡或回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素钠中一种或几种对照品适量，用5～100％乙醇或5～100％甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水-甲酸或乙酸或磷酸(10～90∶0～90∶0～10)为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为以下一种或几种：
(1)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹酚酸B计，不得低于7mg；
(2)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参素计，不得低于0.5mg
(3)一日用乳癖康制剂中含丹参以原儿茶醛计，不得低于0.1mg；
d.熊果酸的含量测定方法
取本品适量，加乙醇或甲醇或丙酮或石油醚或乙醚提取，挥干溶剂后，残渣加乙醇或甲醇使溶解，作为供试品溶液；取熊果酸对照品，加乙醇或甲醇制成对照品溶液，用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水-甲酸或乙酸或磷酸(10～90∶0～90∶0～10)为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含夏枯草以熊果酸计，不得低于0.7mg
具体地说：所述制剂的含量测定方法包括以下方法中的一种或几种：
a.橙皮苷的含量测定方法：
取本品适量，混匀，从中取约0.8g，精密称定，置25ml量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理(功率250W，频率33KHz)30分钟，取出，放至室温，加稀乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含32μg的溶液，作为对照品溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(40∶60)为流动相；检测波长为284nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含陈皮以橙皮苷计，不得低于4.5mg。
b.丹参酮IIA的含量测定方法
取本品适量，精密称定，加甲醇适量，超声提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹参酮IIA对照品适量，用甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(70∶30)为流动相；检测波长为270nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参酮IIA计，不得低于1mg。
c.丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素或其钠盐中一种或几种的含量测定方法
取本品适量，精密称定，加甲醇适量，超声提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素钠中一种或几种对照品适量，用甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-甲酸(19∶80∶1)为流动相；检测波长为280nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为以下一种或几种：
(1)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹酚酸B计，不得低于15mg；
(2)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参素计，不得低于1mg；
(3)一日用乳癖康制剂中含丹参以原儿茶醛计，不得低于0.2mg；
d.熊果酸的含量测定方法
取本品适量，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml(约2分钟)，倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(90∶10)为流动相；检测波长为210nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含夏枯草以熊果酸计，不得低于1.5mg。
与现有技术相比，针对现有技术，提供的产品具有疏肝理气，活血化瘀的功效。用于肝气郁结，气滞血瘀所致的乳腺增生，乳房胀痛等。其制剂剂型携带方便、口感良好、吸收快、抗湿性能好；所提供的制备方法及质量控制方法能够有效制备需要的制剂、保证得到的制剂品种效果显著；生产工艺科学合理。克服了现有技术、产品存在的问题；达到了发明的目的。
本申请人在研究中发现，由于本方使用的水提浸膏吸湿性很强，常规方法制成颗粒剂、滴丸在放置过程中会出现吸潮现象，影响了产品的稳定性和质量。于是对胶囊剂的工艺、辅料进行了一系列实验，选择出最适合本发明药物制剂的制备工艺、使用的辅料种类及用量、比例等；保证其科学、合理、可行；得到的制剂具有良好的抗湿性能和治疗效果。
实验例1：提取工艺研究
(1)因素选择：中药煎煮提取效果受到加水量、提取时间、提取次数等因素的影响。虽然现有技术已对提取时间、提取次数进行了考察，但在药材煎煮考察时，加水量也是重要因素，于是本申请人重点考察加水量的不同水平对煎煮提取效果的影响。结合生产成本、能源等方面进行综合考虑，选择因素水平。
(2)指标确定：选择浸膏收得率及橙皮苷含量作为评价指标，其原由及测定方法如下：
①浸膏收得率：浸膏是固体制剂发挥疗效的物质基础，其收率高低直接影响制剂工艺，故选择为提取指标是合理、有效的控制手段。测定方法：按处方比例称取药材400g，共6份，提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度约为1.35(60℃热测)的稠膏，在温度为60℃，真空度为-0.07～-0.09Mpa条件下干燥，称定膏重。
②含量测定：浸膏收得率高低并不能完全反映有效成份提取情况，故同时测定浸膏中橙皮苷的含量为煎煮筛选指标，参考有关文献，采用高效液相法测定橙皮苷的含量。
(3)试验：试验安排及结果见下表。
加水量考察结果表
| 试验号 | 加水量(倍) | 浸膏收得率(％) | 橙皮苷含量(mg/g) | |
| 第—次 | 第二次 | |||
| 1 | 6 | 6 | 3.06 | 4.10 |
| 2 | 8 | 6 | 3.39 | 4.04 |
| 3 | 8 | 8 | 3.51 | 4.03 |
| 4 | 10 | 6 | 4.20 | 4.01 |
| 5 | 10 | 8 | 4.75 | 3.98 |
| 6 | 10 | 10 | 4.86 | 3.91 |
由上表可知，加水量为10、10倍和10、8倍量提取的橙皮苷含量和浸膏收得率均较高，而两者之间没有明显的区别，在保证有效成分提取充分的前提下，考虑到加10倍量水耗费的资源和能源较多，因此确定提取加水量第一次10倍量，第二次8倍量。
(4)验证实验：为了验证所确定的提取工艺的可行性，我们对此工艺条件进行了三次验证实验。
试验方法：按处方比例称取药材2000g，加水煎煮2次，每次2小时，第1次加10倍量的水，第2次加8倍量的水，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.32～1.35(60℃)的稠膏，将稠膏倒入盘中，在温度为60℃，真空度为-0.07～-0.09Mpa条件下干燥，测定干膏中橙皮苷的含量，实验结果列表如下：
提取工艺验证实验结果
| 试验号 | 药材量(g) | 浸膏收得率(％) | 橙皮苷含量(mg/g) |
| 1 | 2000 | 4.77 | 3.95 |
| 2 | 2000 | 4.76 | 3.97 |
| 3 | 2000 | 4.73 | 4.02 |
由验证实验的结果可见该优化组合条件提取结果浸膏收得率及橙皮苷含量波动不大，表明该提取工艺条件是合理、稳定可行的。
实验例2：成型工艺研究
2.1胶囊剂
(1)吸湿性考察
现有技术中丹参和香附二味药取部分粉碎成细粉，兼作辅料。我们对提取药膏、药膏加入黄柏药粉后的混合物料进行吸湿性考察试验，吸湿性试验结果见下表。
吸湿性试验结果
| 样品 | 纯浸膏粉 | 浸膏粉+生药粉 | |
| 称瓶编号 | 1 | 2 | |
| 物料重量(g) | 0.9959 | 1.0125 | |
| 间隔时间吸湿百分率(％) | 1h | 1.49 | 0.71 |
| 2h | 4.09 | 1.82 | |
| 3h | 5.75 | 3.54 | |
| 4h | 8.09 | 5.03 | |
| 6h | 9.68 | 6.24 | |
| 8h | 11.57 | 8.15 | |
| 10h | 13.02 | 10.01 | |
| 12h | 16.25 | 12.11 | |
| 24h | 18.42 | 14.31 | |
| 36h | 21.94 | 16.24 | |
| 48h | 26.15 | 18.95 | |
| 72h | 29.42 | 21.62 | |
| 84h | 31.58 | 22.21 | |
通过吸湿性试验考察，认为加入生药粉的浸膏具有较好的抗吸湿作用，认为原工艺采用部分生药粉兼作辅料合理可行，用量与原工艺相同。
(2)稀释剂选择：由于中药提取物的出膏率略有波动，可以选用一定的稀释剂进行调节。原剂型中选用淀粉作为稀释剂，考虑到提取的物料性质基本相同，因此我们也选用淀粉作为稀释剂来调整处方重量。
(3)填充物料流动性考察：为保证分剂量准确，要求填充物料具良好的流动性，故以测定休止角方法考查填充物料的流动性。
固定漏斗法：取3只漏斗串联，最底端距水平放置坐标纸1.5cm处，小心地将填充物料沿漏斗壁倒入最上的漏斗中直到最下面漏斗形成的颗粒圆锥体尖端接触到漏斗下口为止，由坐标纸测出圆锥底部的直径，计算出休止角(tgα＝H/R/2)，计算结果见下表。
填充物料的休止角α
| 测定样品 | 休止角 |
| 1 | 33.5° |
| 2 | 32.3° |
| 3 | 34.8° |
由上表可知，填充物料休止角＜40°，即表明填充物料流动性好，能满足分装要求。
(4)填充物料堆密度测定及空胶囊选择空胶囊规格的选择一般根据药物的晶型、细度、密度及剂量的不同，特别是堆密度来确定。采用量筒法测定物料堆密度，即将精密称量的物料装入干燥的10ml量筒内，左右轻轻振摇，来回20次，记录容量，计算，结果见下表。
堆密度测定结果
| 批次 | 重量(g) | 容量(ml) | 堆密度(g/ml) | 平均值 |
| 1 | 2.25 | 4.25 | 0.53 | 0.54 |
| 2 | 2.25 | 4.17 | 0.54 | |
| 3 | 2.25 | 4.02 | 0.56 |
结果测得填充颗粒堆密度约0.54(g/cm3)，根据空胶囊号码和近似容量的关系，选择0号空胶囊壳分装，即每粒胶囊装量为0.405g(相当于2.2g生药/粒)左右。
(5)临界相对湿度(CRH)测定：考察分装时是否受环境的影响，对物料进行平衡吸湿性试验，即吸湿平衡曲线测定。取物料各约1g共六份，置称量瓶中，精密称定，将称量瓶盖打开，分别放入相对湿度为20％、33％、43％、60％、75％、92％的环境中，于25℃恒温培养箱内放置84小时，取出称量瓶，加盖后精密称定，计算吸湿百分率，以相对湿度为横坐标，吸湿百分率为纵坐标，绘制吸湿平衡曲线见附图1，试验结果见下表。
填充物料的吸湿百分率(％)
| 饱和盐溶液种类 | 相对湿度(％) | 吸湿百分率(％) |
| CH3COOK·1.5H2O | 20 | 3.15 |
| MgCl2·6H2O | 33 | 4.63 |
| K2CO3·2H2O | 43 | 7.23 |
| NaBr·2H2O | 60 | 13.21 |
| NaCl | 75 | 22.21 |
| KNO3 | 92 | 42.98 |
从上表可知，胶囊在不同相对湿度环境下，其吸水量不等，在相对湿度约为65.0％以下时，物料吸湿性较小，因此分装时应控制相对湿度在65.0％以下。
实验例3胶囊中丹参、丹参酮的薄层色谱法鉴别：
本实验的目的是为了突出丹参的特征，为排除制剂中与丹参所含成分类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统、显色方法等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳方法与条件：以乙醚为样品提取溶剂；以硅胶G薄层板为固定相，苯-醋酸乙酯(19∶1)为展开剂；在此条件下，样品、丹参对照药材与丹参酮IIA对照品均分离清晰，阴性无干扰。
此外，将以上最佳条件做适当调整，鉴别实验仍可做出阳性结果，可以调整的条件如下：以石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷代替乙醚为提取溶剂；或以硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板代替硅胶G薄层板为固定相，或苯-醋酸乙酯的展开剂在(5～20∶0.2～5)范围内作适当调节，或以甲苯代替苯、或以甲酸乙酯或醋酸丁酯代替醋酸乙酯并在以上比例范围内调节配制展开剂。实验中几种展开系统的展开效果比较见下表：
胶囊中丹参、丹参酮的薄层鉴别
| 展开剂 | 薄层板 | 效果 |
| 苯-乙醇(12∶1) | 硅胶G | 差：样品分离不清晰 |
| 苯-氯仿-丙酮(6∶4∶1) | 硅胶GF254 | 差：阴性有干扰 |
| 甲苯-醋酸乙酯(10∶1) | 硅胶H | 较佳：样品与对照品均分离清晰，阴性无干扰 |
| 苯-醋酸乙酯(19∶1) | 硅胶G | 最佳：样品与对照品均分离清晰，阴性无干扰 |
实验例4夏枯草、熊果酸的薄层色谱法鉴别：
本实验的目的是为了突出夏枯草的特征，为排除制剂中与夏枯草所含成分类似的其它成分的干扰，试验者对样品提取、展开系统、显色方法等分别进行了比较试验。经过筛选，确定了最佳方法与条件：取本品适量，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml(约2分钟)，倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取夏枯草对照药材，同法制成对照药材溶液；另取熊果酸，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸(20∶5∶8∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，分别在日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。结果见下表：
本发明制剂中夏枯草、熊果酸的薄层色谱法鉴别
| 展开剂 | 薄层板 | 效果 |
| 环己烷-三氯甲烷-甲醇-冰醋酸(15∶5∶1∶1) | 硅胶G | 差：样品与对照品分离均不清晰 |
| 正己烷-三氯甲烷-醋酸丁酯(10∶4∶3) | 硅胶H | 差：斑点拖尾 |
| 正己烷-三氯甲烷-醋酸丁酯-甲酸(10∶4∶3∶1) | 硅胶GF254 | 较佳：样品与对照品均分离较清晰，阴性无干扰 |
| 环己烷-三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸(20∶5∶8∶0.5) | 硅胶G | 最佳：样品与对照品均分离清晰，阴性无干扰 |
实验例5胶囊中橙皮苷的含量测定
试验以槲皮素、山柰素、异鼠李素为对照品，用Alltech P426高效液相色谱仪，确立了乳癖康胶囊中总黄酮醇苷的含量测定的最佳方法：
色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(40∶60)为流动相；检测波长为284nm。理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含32μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品10粒，取内容物，混匀，从中取约0.8g，精密称定，置25ml量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理(功率250W，频率33KHz)30分钟，取出，放至室温，加稀乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品含橘叶以橙皮苷(C28H34O15)计，一日用剂量不得低于4.5mg。
该方法分别通过了以下1～10项方法学考察试验：
1检测波长的选择橙皮苷对照品溶液，在200～400nm波长范围内扫描。结果表明，橙皮苷在284nm处有较大吸收，因此选择284nm作为测定乳癖康胶囊剂中橙皮苷含量的检测波长。
2系统适应性试验根据以上仪器条件，得到橙皮苷对照品、样品色谱图，其理论塔板数以橙皮苷计不低于2000。
3阴性干扰排除试验为考察其它药材和辅料是否干扰橙皮苷的测定，除橙皮苷外，按处方比例称取其它药材和辅料同法制成阴性对照品溶液并测定。结果表明，阴性样品对橙皮苷的含量测定无干扰。
4线性关系的考察精密量取橙皮苷对照品不同浓度的溶液，注入液相色谱仪，提取液照中国药典公开的高效液相色谱法测定。以橙皮苷的进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标做图，绘制标准曲线。见下表。
橙皮苷线性关系
| 编号 | 橙皮苷量(μg) | 峰面积 |
| 1 | 0.17056 | 145962 |
| 2 | 0.51168 | 440516 |
| 3 | 0.85280 | 737658 |
| 4 | 1.19392 | 1025148 |
| 5 | 1.53504 | 1320971 |
回归方程：Y＝860298X+388.50
相关系数：γ＝0.9999
结果表明，橙皮苷在0.17056μg～1.53504μg范围之内线性关系良好。
5样品提取时间的选择
取本品10粒，取内容物，混匀，从中精密称取约0.8g(共4份)，精密称定，分置25ml量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理(功率250W，频率33KHz)30分钟，取出，放至室温，加稀乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，即得。见下表。
提取时间
| 提取时间(min) | 橙皮苷(mg/粒) |
| 10 | 0.3675 |
| 20 | 0.3761 |
| 30 | 0.3854 |
| 40 | 0.3861 |
结果表明，超声处理30min即可提取完全，因此提取时间定为30分钟。
6精密度试验
精密吸取同一份橙皮苷对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，重复测定5次，考察对照品溶液精密度，测定结果见下表。
精密度试验
| 试验次数 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 平均值 | RSD(％) |
| 峰面积 | 586448 | 571329 | 588754 | 584261 | 580764 | 582311 | 1.17 |
结果表明，对照品溶液精密度良好。
7稳定性试验
7.1对照品稳定性试验分别在0、2、4、6、8小时精密吸取同一份橙精密吸取橙皮苷对照品溶液20μl，注入液相色谱仪，分别在进样测定，测定结果见下表。
对照品溶液稳定性试验结果
| 时间(h) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 平均值 | RSD(％) |
| 峰面积 | 586448 | 571329 | 588754 | 584261 | 580764 | 582311 | 1.17 |
结果表明，对照品溶液在8小时内稳定性良好。
7.2供试品溶液稳定性试验分别在0、2、4、6、8小时精密吸取同一份供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定结果见下表。
供试品溶液稳定性试验结果
| 时间(h) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 平均值 | RSD(％) |
| 含量(mg/粒) | 0.3854 | 0.3912 | 0.3876 | 0.3812 | 0.3933 | 0.3877 | 1.23 |
结果表明，供试品溶液在8小时内稳定性良好。
8重复性试验取本品内容物，混匀，从中取约0.8g(共5份)，精密称定，按正文供试品溶液制备和测定项下进行操作。结果见下表。
重复性试验
| 时间(h) | 0 | 2 | 6 | 10 | 24 | 平均值 | RSD(％) |
| 含量(mg/粒) | 0.3961 | 0.3857 | 0.3914 | 0.3862 | 0.3903 | 0.3899 | 1.09 |
结果表明，重复性良好。
9加样回收率试验
取本品10粒，取内容物，混匀，从中取约0.4g(共6份)，精密称定，置25ml量瓶中；精密称取橙皮苷9.29mg，置25ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率250W，频率33KHz)使溶解，取出，放至室温，加甲醇至刻度，摇匀，精密量取0.8ml，1.0ml，1.2ml(各2份)，分置上述25ml量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理(功率250W，频率33KHz)30分钟，取出，放至室温，加稀乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，精密吸取续滤液20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。测定结果见下表。
乳癖康胶囊中橙皮苷含量：0.9310mg/g。
橙皮苷加样回收率试验
| 编号 | 供试品称量(g) | 供试品中纯品量(mg) | 橙皮苷加入量(mg) | 测得量(mg) | 回收率(％) |
| 1 | 0.38951 | 0.3626 | 0.2973 | 0.6558 | 98.62 |
| 2 | 0.40125 | 0.3736 | 0.2973 | 0.6582 | 95.73 |
| 3 | 0.39574 | 0.3684 | 0.3716 | 0.7301 | 97.34 |
| 4 | 0.38036 | 0.3541 | 0.3716 | 0.7187 | 98.12 |
| 5 | 0.39251 | 0.3654 | 0.4459 | 0.8022 | 97.96 |
| 6 | 0.39643 | 0.3691 | 0.4459 | 0.8085 | 98.54 |
橙皮苷平均回收率＝97.72％，RSD＝1.10％；
10样品含量测定
按正文供试品溶液的制备和测定法项下操作，测定十批样品，结果见下表。
十批样品含量测定结果
| 批号 | 橙皮苷(mg/粒) |
| 031001 | 0.3852 |
| 031002 | 0.3427 |
| 031003 | 0.3651 |
| 031101 | 0.3292 |
| 031102 | 0.3343 |
| 031103 | 0.4127 |
| 031104 | 0.8154 |
| 040101 | 0.3852 |
| 040102 | 0.3664 |
| 040103 | 0.4135 |
结论：根据10批样品含量测定结果暂定，本品每粒含橙皮苷(C28H34O15)，不得低于0.30mg。本品一日用剂量片剂中含陈皮以橙皮苷(C28H34O15)计，不得少于4.5mg。
实验例6：药效学实验
对乳腺增生病治疗作用的研究：取雌性大鼠50只，随机分为5组，每组10只，分别为正常对照组、模型对照组、市售乳癖康片组、本发明胶囊组、本发明颗粒剂组。除正常对照组外，其余各组每鼠肌肉注射苯甲酸雌二醇0.5mg/kg，每日1次，连续40d，继而改用肌肉注射黄体酮4mg/kg，每日1次，连续10d，此时大鼠乳头出现红、肿和增大，并有部分乳晕出现，大鼠乳腺增生模型形成。注射完苯甲酸雌二醇后按组分别ig给药，剂量见下表，正常对照组和模型对照组灌服蒸馏水，给药量均为10ml/kg。每日1次，连续给药4周。主要药效学实验及观测指标如下：
(1)对乳腺增生大鼠乳腺直径的影响
造模后，给药后2周和4周分别用游标卡尺测量大鼠第1只左胸乳乳腺直径。具体数据见下表。
对乳腺增生大鼠乳腺直径(mm)的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | 给药前 | 给药后2周 | 给药后4周 |
| 正常对照组模型对照组乳癖康片组本发明胶囊组本发明颗粒剂组 | --666 | 3.5±0.76.0±0.55.9±0.65.8±0.45.7±0.5 | 3.9±0.65.1±0.54.9±0.44.6±0.54.8±0.5 | 4.5±0.75.6±0.64.5±0.54.3±0.34.3±0.7 |
结果表明，造模后各组大鼠乳腺直径比正常对照组有显著增大，给大鼠灌胃乳癖康片、本发明胶囊、本发明颗粒剂组2周、4周后，大鼠乳腺直径比模型对照组均有显著减小，4周后基本恢复到正常动物的水平。
(2)对乳腺增生大鼠血清垂体泌乳素(PRL)、孕酮(P)激素水平的影响
给药4周后，大鼠眼眶静脉丛采血，放免法测定血清E2、PRL、P水平。具体数据见下表。
对乳腺增生大鼠血清性激素水平的影响
| 组别 | 剂量(g/kg) | PRL(ng/ml) | P(ng/ml) |
| 正常对照组模型对照组乳癖康片组本发明胶囊组本发明颗粒组 | --666 | 5.26±0.655.67±0.815.12±0.484.84±0.875.06±1.12 | 26.34±8.0514.36±4.9515.92±5.9419.67±10.7518.54±4.27 |
结果表明，造模组大鼠血清P比正常对照组显著减少。给大鼠灌胃乳癖康片、本发明产品4周后，PRL比模型对照组也有减少；P比模型对照组有所增加。
(3)对乳腺增生大鼠病理组织变化的影响
给药4周后，取大鼠乳腺，10％中性福尔马林固定6～8h，3μm连续切片，HE染色，用生理显微镜观察乳腺增生情况，并用图象分析处理系统采集、记录和分析图象(分辨率1300×1030)，计数每视野的平均小叶数、导管数、每小叶的平均腺泡数及导管的平均直径。根据腺腔内分泌物的多少及范围分为-、+、++、+++、++++，对应取值1、2、3、4、5计分。具体结果见下表。
对乳腺增生大鼠病理组织变化的影响
| 组别 | 腺泡数(个/小叶) | 腺腔直径(μm) | 胸腔分泌物(平均积分) | 导管数(个/视野) |
| 正常对照组 | 8.67±0.82 | 35.91±5.36 | 1.50±0.72 | 4.38±0.84 |
| 模型对照组乳癖康片组本发明胶囊组本发明颗粒组 | 15.26±2.7411.09±1.579.34±2.759.04±0.39 | 72.24±12.8568.45±9.4862.08±5.6755.52±5.34 | 3.80±1.272.50±0.542.20±0.852.01±1.13 | 5.96±1.185.62±0.915.48±0.645.15±0.76 |
造模组大鼠乳腺腺体镜下观察：腺泡数明显增多，腺腔明显扩张呈囊状，少数分支增多呈扭曲状，部分腺上皮细胞增生呈假复层排列，细胞约2～4层，腺腔内可见大量均质红染的分泌物，小叶的平均腺泡数、腺腔的平均直径及腺腔内分泌物比正常对照组均有显著增加。给大鼠灌胃乳癖康颗粒、本发明胶囊、本发明滴丸4周后，与模型组相比，各组大鼠小叶中的平均腺泡数、腺腔的平均直径及腺腔内分泌物均有明显减小，且本发明产品的效果要优于市售乳癖康片。
附图说明：
图1是本发明胶囊剂填充物料的吸湿平衡曲线图。
具体的实施方式：
本发明的实施例1：夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g香附200g地龙200g
取丹参100g、香附100g，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉和淀粉适量，混匀，装入胶囊，分装时应控制相对湿度在65.0％以下，即得胶囊剂，本产品口服、一日三次、每次5粒。
本发明的实施例2：夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g香附200g地龙200g
取丹参100g、香附100g，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉，以PEG400为基质，药物与基质的配比为1∶2，混匀，滴入冷却剂甲基硅油中，滴制条件如下：熔融温度60℃，保温滴制，冷却温度1～5℃，滴距12cm，冷却柱长20cm，将制得的滴丸置于微型底喷式沸腾颗粒包衣机内进行包衣，包衣，3％欧巴代2为包衣材料，包衣液喷入速度为180～200g/min，进风温度为控制在85～88℃之间，锅体转速控制在6～8/min，即得滴丸剂。
本发明的实施例3：夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g香附200g地龙200g
取丹参100g、香附100g，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉，再加入10％碳酸氢钠、12％枸橼酸、1％阿司帕坦分别粉碎，与药粉混合均匀，制粒，干燥，压片，包衣，包衣材料：内层使用PVP加钛白粉、外层使用丙烯酸树脂II，片床温度30℃时，喷射速度6.0ml/kg·min，即得泡腾片剂。
本发明的实施例4：夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g香附200g地龙200g
取丹参100g、香附100g，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉，用糊精和可溶性淀粉作为赋形剂及分散剂，75％的乙醇溶液作为润湿剂，干燥温度控制在55℃～65℃时制粒，即得。
本发明的实施例5：夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g香附200g地龙200g
取丹参100g、香附100g，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉，加入卡波姆，制成凝胶剂。
本发明的实施例6：夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g香附200g地龙200g
取丹参100g、香附100g，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉，加入羧甲基纤维素钠，压片，制成分散片。
本发明的实施例7：本发明产品中香附和α-香附酮的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加乙醚提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取香附对照药材，同法制成对照药材溶液；另取α-香附酮对照品，加醋酸乙酯制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-冰醋酸(50∶20∶10)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例8：本发明产品中香附的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取香附对照药材，同法制成对照药材溶液，吸取上述三种溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸丁酯-冰醋酸(85∶12∶4)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例9：本发明产品中丹参和丹参酮IIA的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加乙醚提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参酮IIA，加醋酸乙酯制成对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-甲醇-甲酸(25∶0.2∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例10：本发明产品中香附和α-香附酮的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加石油醚提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取香附对照药材，同法制成对照药材溶液；另取α-香附酮对照品，加三氯甲烷制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(90∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例11：本发明产品中丹参和丹参酮IIA的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加醋酸乙酯提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参酮IIA，加三氯甲烷制成对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述溶液各15μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-醋酸乙酯(30∶～10)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例12：本发明产品中夏枯草、熊果酸的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇，超声提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取夏枯草对照药材，加乙醚，超声提取，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚浸泡，倾去石油醚液，残渣加乙醇或甲醇使溶解，滤过，滤液作为对照药材溶液；另取熊果酸，加乙醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸(2∶1∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例13：本发明产品中丹参的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述种溶液各10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以甲苯-三氯甲烷-冰醋酸(5∶0.5∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例14：本发明产品中红花和羟基红花黄色素的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加丙酮提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取红花对照药材，同法制成对照药材溶液；另取羟基红花黄色素对照品，加甲醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各20μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-水(10∶5∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例15：本发明产品中丹参、丹酚酸B的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加甲醇提取，滤过，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹酚酸B对照品，加甲醇制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-甲酸(45∶10∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例16：本发明产品中α-香附酮的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加三氯甲烷提取，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液，取α-香附酮对照品，加醋酸乙酯或三氯甲烷制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-醋酸乙酯(90∶10)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例17：本发明产品中丹参、丹参素和原儿茶醛的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙酸乙酯提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参素钠、原儿茶醛对照品，加甲醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(10∶1∶10)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例18：本发明产品中红花的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇加热回流提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取红花对照药材，同法制成对照药材溶液；吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-甲醇-水-甲酸(20∶10∶0.1∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例19：本发明产品中夏枯草、熊果酸的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加丙酮，加热回流提取，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚浸泡，倾去石油醚液，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；取夏枯草对照药材，同法制成对照药材溶液；另取熊果酸，加甲醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各20μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚-二氯甲烷-甲酸乙酯-冰醋酸(10∶5∶5∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点。
本发明的实施例20：本发明产品中丹参和原儿茶醛的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醚提取，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取原儿茶醛对照品，加甲醇制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各20μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-冰醋酸(20∶5∶10)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例21：本发明产品中红花、红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加甲醇，超声提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取红花对照药材，同法制成对照药材溶液；另取红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素对照品，分别加甲醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲苯-乙酸-甲醇(20∶0.50∶10)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例22：本发明产品中香附和α-香附酮的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加乙醚提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取香附对照药材，同法制成对照药材溶液；另取α-香附酮对照品，加醋酸乙酯制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸(90∶5∶5)为展开剂，展开，取出，晾干，紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例23：本发明产品中丹参、丹参素的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加甲醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参素对照品，加甲醇制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例24：本发明产品中熊果酸的薄层色谱法鉴别：
取本品，加乙醇加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml(约2分钟)，倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸(20∶5∶8∶0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，分别在日光及紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
本发明的实施例25：本发明产品中丹参、丹参酮的薄层色谱法鉴别：
取本品，加乙醚20ml，振摇，放置1小时后，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(19∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例26：本发明产品中红花、红花明苷A的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇回流提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取红花对照药材，同法制成对照药材溶液；另取红花明苷A对照品，加乙醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以苯-甲醇-水-甲酸(10∶5∶5∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明的实施例27：本发明产品中橙皮苷的含量测定方法
取本品适量，精密称定，加5～100％乙醇或5～100％甲醇适量，超声或浸泡或回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取橙皮苷对照品适量，制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水(5～60∶40～95)为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含陈皮以橙皮苷(C28H34015)计，不得低于2.25mg。
本发明的实施例28：本发明产品中丹参酮IIA的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加80％乙醇甲醇适量，回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹参酮IIA对照品适量，用80％乙醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(55∶45)为流动相；检测波长为280nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参酮IIA计，不得低于0.5mg。
本发明的实施例29：本发明产品中原儿茶醛、丹参素的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加水适量，回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取原儿茶醛、丹参素钠对照品适量，用甲醇制成对照品溶液；用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-甲酸(70∶20∶10)为流动相；检测波长为270nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：
(1)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参素计，不得低于0.5mg；
(2)一日用乳癖康制剂中含丹参以原儿茶醛计，不得低于0.1mg。
本发明的实施例30：本发明产品中熊果酸的含量测定方法：
取本品适量，加甲醇提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取熊果酸对照品，加甲醇制成对照品溶液，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-甲酸(70∶20∶1)为流动相；检测波长为210nm；外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含夏枯草以熊果酸计，不得低于0.7mg。
本发明的实施例31：本发明产品中丹参酮IIA的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加55％甲醇适量，超声提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹参酮IIA对照品适量，用55％甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(60∶40)为流动相；检测波长为270nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参酮IIA计，不得低于1mg。
本发明的实施例32：本发明产品中熊果酸的含量测定方法：
取本品适量，加丙酮提取，挥干溶剂后，残渣加乙醇使溶解，作为供试品溶液；取熊果酸对照品，加乙醇制成对照品溶液，用八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水-磷酸(60∶20∶10)为流动相；检测波长为220nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含夏枯草以熊果酸计，不得低于0.7mg。
本发明的实施例33：本发明产品中丹酚酸B的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加乙醇适量，超声提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹酚酸B对照品适量，用乙醇制成对照品溶液；用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-磷酸(90∶5∶0.5)为流动相；检测波长为280nm，以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含丹参以丹酚酸B计，不得低于7mg。
本发明的实施例34：本发明产品中橙皮苷的含量测定方法：
取本品适量，混匀，从中取约0.8g，精密称定，置25ml量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理(功率250W，频率33KHz)30分钟，取出，放至室温，加稀乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含32μg的溶液，作为对照品溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(40∶60)为流动相；检测波长为284nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含陈皮以橙皮苷计，不得低于4.5mg。
本发明的实施例35：本发明产品中丹参酮IIA的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加甲醇适量，超声提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹参酮IIA对照品适量，用甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(70∶30)为流动相；检测波长为270nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参酮IIA计，不得低于1mg。
本发明的实施例36：本发明产品中熊果酸的含量测定方法：
取本品适量，加石油醚提取，挥干溶剂后，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；取熊果酸对照品，加甲醇制成对照品溶液，用二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸(40∶10∶10)为流动相；检测波长为230nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含夏枯草以熊果酸计，不得低于1mg。
本发明的实施例37：本发明产品中丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素或其钠盐中一种或几种的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加甲醇适量，超声提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素钠中一种或几种对照品适量，用甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-甲酸(19∶80∶1)为流动相；检测波长为280nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为以下一种或几种：
(1)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹酚酸B计，不得低于15mg；
(2)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参素计，不得低于1mg；
(3)一日用乳癖康制剂中含丹参以原儿茶醛计，不得低于0.2mg。
本发明的实施例38：本发明产品中熊果酸的含量测定方法：
取本品适量，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚(30～60℃)浸泡2次，每次15ml(约2分钟)，倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取熊果酸，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(90∶10)为流动相；检测波长为210nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含夏枯草以熊果酸计，不得低于1.5mg。
本发明的实施例39：本发明产品中丹参酮IIA的含量测定方法：
取本品适量，研细，置具塞锥形瓶中，加入适量甲醇，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过(必要时离心)，取续滤液作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品适量，加甲醇制成每1ml含5μg的溶液作为对照品溶液，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水(78∶22)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按丹参酮IIA峰计算应不低于2000。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，本品一日用制剂中含丹参以丹参酮IIA(C19H18O3)计，不得少于1.5mg。
本发明的实施例40：本发明产品中原儿茶醛的含量测定方法：
取本品装量差异项下的内容物，研细，混匀，取1g，精密称定，精密加入水25ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取滤液10ml，蒸干，残渣加50％甲醇溶解并转移至5ml量瓶中，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。另取原儿茶醛对照品适量，加50％甲醇制成每1ml含30μg的溶液，作为对照品溶液。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇查畺甲酸(18∶81.5∶0.5)为流动相；检测波长为280nm。精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，本品一日用剂量中含丹参以原儿茶醛计，不得少于0.4mg。
Claims (10)
1.一种治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂，其特征在于：它主要由夏枯草500g、橘叶500g、丹参200g、红花200g、郁金200g、皂角刺200g、香附200g和地龙200g或用相应重量份它们的提取物制作而成的泡腾片、注射液、粉针、冻干粉针、凝胶剂、分散片、胶囊剂、软胶囊剂、微囊剂、颗粒剂、丸剂、微丸、散剂、滴丸剂、缓释制剂、控释制剂、凝胶剂、口服液体制剂、煎膏剂、浸膏剂或膜剂。
2.按照权利要求1所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂，其特征在于：所述的制剂是胶囊剂、丸剂或颗粒剂。
3.如权利要求1或2所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂的制备方法，其特征在于：取一半处方量的丹参、香附，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩，干燥，粉碎，然后分别制成不同的制剂
4.按照权利要求3所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂的制备方法，其特征在于：所述制剂中的胶囊剂这样制备：取一半处方量的丹参、香附，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉和淀粉适量，混匀，装入胶囊，分装时应控制相对湿度在65.0％以下，即得。
5.按照权利要求3所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂的制备方法，其特征在于：所述制剂中的颗粒剂这样制备：取丹参100g、香附100g，混合粉碎成细粉，剩余丹参、香附和其余六味加水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍水，第二次加8倍水，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度60℃时为1.32～1.35的稠膏，干燥，粉碎，加入上述细粉，用糊精和可溶性淀粉作为赋形剂及分散剂，75％的乙醇溶液作为润湿剂，干燥温度控制在55℃～65℃时制粒，即得。
6.如权利要求1或2所述的治疗乳腺增生的乳癖康药物制剂的质量控制方法，其特征在于：一种乳癖康的质量控制方法，其特征在于：该方法包括以下全部或部分内容：
(1)香附、α-香附酮、丹参、丹参酮I IA、丹酚酸B、丹参素或其钠盐、原儿茶醛、红花、羟基红花黄色素、山奈素、红花明苷A、夏枯草、熊果酸、郁金中全部或部分成分的鉴别方法；
(2)橙皮苷、丹参酮IIA、丹酚酸B、丹参素或其钠盐、原儿茶醛、红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素、熊果酸中全部或部分成分的含量测试方法。
7.按权利要求6所述的乳癖康制剂的质量控制方法，其特征在于：所述制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
香附和α-香附酮中一种或两种的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加乙醚或石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯或三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取香附对照药材，同法制成对照药材溶液；另取α-香附酮对照品，加醋酸乙酯或三氯甲烷制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯-醋酸乙酯或甲酸乙酯或醋酸丁酯-冰醋酸或甲酸＝50～100∶0～20∶0～20为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b.丹参、丹参酮中一种或两种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醚或石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯或三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参酮IIA，加醋酸乙酯或三氯甲烷制成对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯-甲醇或三氯甲烷或醋酸乙酯或甲酸乙酯或醋酸丁酯-甲酸或冰醋酸＝5～30∶0.2～10∶0～10为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
c.丹参、丹参素或其钠盐、丹酚酸B和原儿茶醛中一种或几种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醚或石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷或无水乙醇或甲醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯或三氯甲烷使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参素或其钠盐、丹酚酸B和原儿茶醛中一种或几种，加乙醚或石油醚或醋酸乙酯或三氯甲烷或无水乙醇或甲醇制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G薄层板或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯或三氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯或醋酸丁酯或丙酮-甲酸或冰醋酸＝5～50∶0.2～20∶0～20为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
d.夏枯草、熊果酸中一种或两种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇或甲醇或丙酮，加热回流或超声提取，滤过，滤液蒸干，残渣用石油醚浸泡，倾去石油醚液，残渣加乙醇或甲醇使溶解，作为供试品溶液；取夏枯草对照药材，同法制成对照药材溶液；另取熊果酸，加乙醇或甲醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G或硅胶H薄层板或硅胶6F254薄层板上，以环己烷或正己烷或石油醚或苯-三氯甲烷或二氯甲烷-醋酸乙酯或甲酸乙酯或醋酸丁酯-冰醋酸或甲酸＝2～20∶1～5∶1～8∶0～3为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，在可见光或紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；
e.红花、红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素中一种或几种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇或甲醇或丙酮或三氯甲烷，加热回流或超声提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取红花对照药材，同法制成对照药材溶液；另取红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素中一种或几种对照品，加乙醇或甲醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各1～30μl，分别点于同一硅胶G或硅胶H薄层板或硅胶GF254薄层板上，以苯或甲苯或乙酸乙酯或甲酸乙酯-甲酸或乙酸或冰乙酸-水或甲醇或乙醇-冰醋酸或甲酸＝2～20∶0.1～10∶0.1～10∶0～5为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。
8.按权利要求7所述的乳癖康制剂的质量控制方法，其特征在于：所述制剂的鉴别方法包括以下全部或部分内容：
a.香附和α-香附酮中一种或两种的薄层色谱鉴别：
取本品适量，加乙醚提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取香附对照药材，同法制成对照药材溶液；另取α-香附酮对照品，加醋酸乙酯制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以苯-醋酸乙酯-甲酸＝90∶5∶5为展开剂，展开，取出，晾干，紫外灯下检视，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
b.丹参、丹参酮中一种或两种成分的薄层色谱法鉴别：
取本品5粒，取内容物，加乙醚20ml，振摇，放置1小时后，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA，加醋酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯＝19∶1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
c.丹参、丹参素或其钠盐、丹酚酸B和原儿茶醛中一种或几种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加甲醇提取，滤过，滤液蒸干，残渣加醋酸乙酯使溶解，作为供试品溶液；取丹参对照药材，同法制成对照药材溶液；另取丹参素对照品，加甲醇制成对照品溶液，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯＝10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
d.夏枯草、熊果酸中一种或两种成分的薄层色谱法鉴别：
取本品3粒，取内容物，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用30～60℃的石油醚浸泡2次，每次15ml、2分钟，倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典附录公开的薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-醋酸乙酯-冰醋酸＝20∶5∶8∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，分别在日光及365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点；
e.红花、红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素中一种或几种的薄层色谱法鉴别：
取本品适量，加乙醇回流提取，滤过，滤液作为供试品溶液；取红花对照药材，同法制成对照药材溶液；另取红花明苷A、羟基红花黄色素、山奈素中一种或几种对照品，加乙醇制成对照品溶液，吸取上述溶液各10μl，分别点于同一硅胶H薄层板上，以苯-甲醇-水-甲酸＝10∶5∶5∶0.1为展开剂，展开，取出，晾干，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
9.按权利要求6所述的乳癖康制剂的质量控制方法，其特征在于：所述制剂的含量测定方法包括以下方法中一种或几种的含量测定方法：
a.橙皮苷的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加5～100％乙醇或5～100％甲醇适量，超声或浸泡或回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取橙皮苷对照品适量，制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水＝5～60∶40～95为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含陈皮以橙皮苷：C28H34O15计，不得低于2.25mg；
b.丹参酮IIA的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加5～100％乙醇或5～100％甲醇适量，超声或浸泡或回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹参酮IIA对照品适量，用5～100％乙醇或5～100％甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水＝5～60∶40～95为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参酮IIA计，不得低于0.5mg；
c.丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素或其钠盐中一种或几种的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加5～100％乙醇或5～100％甲醇或水适量，超声或浸泡或回流提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素钠中一种或几种对照品适量，用5～100％乙醇或5～100％甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水-甲酸或乙酸或磷酸＝10～90∶0～90∶0～10为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为以下一种或几种：
(1)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹酚酸B计，不得低于7mg；
(2)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参素计，不得低于0.5mg；
(3)一日用乳癖康制剂中含丹参以原儿茶醛计，不得低于0.1mg；
d.熊果酸的含量测定方法：
取本品适量，加乙醇或甲醇或丙酮或石油醚或乙醚提取，挥干溶剂后，残渣加乙醇或甲醇使溶解，作为供试品溶液；取熊果酸对照品，加乙醇或甲醇制成对照品溶液，用十八烷基硅烷键合硅胶或八烷基硅烷键合硅胶或二烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇或乙腈-水-甲酸或乙酸或磷酸＝10～90∶0～90∶0～10为流动相；检测波长为190～410nm中的一个或几个；以标准曲线法或外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含夏枯草以熊果酸计，不得低于0.7mg。
10.按权利要求9所述的乳癖康制剂的质量控制方法，其特征在于：所述制剂的含量测定方法包括以下方法中的一种或几种：
a.橙皮苷的含量测定方法：
取本品适量，混匀，从中取约0.8g，精密称定，置25ml量瓶中，加稀乙醇适量，在功率为250W，频率为33KHz下超声处理30分钟，取出，放至室温，加稀乙醇至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含32μg的溶液，作为对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水＝40∶60为流动相；检测波长为284nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含陈皮以橙皮苷计，不得低于4.5mg；
b.丹参酮IIA的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加甲醇适量，超声提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹参酮IIA对照品适量，用甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水＝70∶30为流动相；检测波长为270nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参酮IIA计，不得低于1mg；
c.丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素或其钠盐中一种或几种的含量测定方法：
取本品适量，精密称定，加甲醇适量，超声提取，放至室温，加溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；精密称取丹酚酸B、原儿茶醛、丹参素钠中一种或几种对照品适量，用甲醇制成对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-甲酸＝19∶80∶1为流动相；检测波长为280nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为以下一种或几种：
(1)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹酚酸B计，不得低于15mg；
(2)一日用乳癖康制剂中含丹参以丹参素计，不得低于1mg；
(3)一日用乳癖康制剂中含丹参以原儿茶醛计，不得低于0.2mg；
d.熊果酸的含量测定方法：
取本品适量，加乙醇20ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣用30～60℃的石油醚浸泡2次，每次15ml、2分钟，倾去石油醚液，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取熊果酸，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水＝90∶10为流动相；检测波长为210nm；以外标一点法进行计算，待测乳癖康制剂含量限度应为：一日用乳癖康制剂中含夏枯草以熊果酸计，不得低于1.5mg。
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