UA126865C2 - Антитіла проти ilt4 і антигензв'язувальні фрагменти - Google Patents

Антитіла проти ilt4 і антигензв'язувальні фрагменти Download PDF

Info

Publication number
UA126865C2
UA126865C2 UAA201910947A UAA201910947A UA126865C2 UA 126865 C2 UA126865 C2 UA 126865C2 UA A201910947 A UAA201910947 A UA A201910947A UA A201910947 A UAA201910947 A UA A201910947A UA 126865 C2 UA126865 C2 UA 126865C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
amino acid
acid sequence
antibody
zeo
antigen
Prior art date
Application number
UAA201910947A
Other languages
English (en)
Inventor
Луіс А. Суніґа
Луис А. Сунига
Барбара Джойс-Шаікг
Барбара Джойс-Шаикг
Мілан Блануша
Милан Блануша
Андреа Клаудіа Шустер
Андреа Клаудиа Шустер
Корнеліа Шульце
Корнелиа Шульце
Original Assignee
Мерк Шарп Енд Доум Елелсі
Мерк Шарп Энд Доме Элэлси
Ейдженус Інк.
Эйдженус Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Мерк Шарп Енд Доум Елелсі, Мерк Шарп Энд Доме Элэлси, Ейдженус Інк., Эйдженус Инк. filed Critical Мерк Шарп Енд Доум Елелсі
Publication of UA126865C2 publication Critical patent/UA126865C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів, що зв'язуються з ILT4 людини, і фармацевтичних композицій, що їх містять. Даний винахід також стосується способів їх застосування, наприклад, в лікуванні або профілактиці злоякісного новоутворення у індивідуума, і способів отримання таких антитіл і фрагментів.

Description

ПЕРЕХРЕСНЕ ПОСИЛАННЯ НА СПОРІДНЕНІ ЗАЯВКИ
За даною заявкою запитується пріоритет по тимчасовій заявці США Мо 62/483019, поданій 7 квітня 2017 року, опис якої включений в даний опис в повному обсязі.
ГАЛУЗЬ ВИНАХОДУ
Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів, що зв'язуються з імуноглобулін- подібним транскриптом 4 (І-Т4), а також способів отримання і застосування таких антитіл і антигензв'язувальних фрагментів, наприклад, для лікування захворювань, таких як злоякісні новоутворення.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
Поширена стратегія, що використовується пухлинними клітинами для уникнення природженої і адаптивної імунної відповіді, асоційована з аномальною експресією лейкоцитарного антигену людини (НІ А)-о (Сигідійапо еї аї. Сіїп Сапсег Ке5. 2013 і сСоплаїе? еї а).
Сіїї Вем Сіїп Гар бсі. 2012). НГА-С може прямо інгібувати функціонування імунних клітин за допомогою зв'язування рецепторів і/або трогоцитозу і порушення хемотаксису (Могапаі еї аї.
Суюкіпе Сгоулп ЕРасіог Кеміему. 2014 і (іп еї аІ. Мо! Мей. 2015). Його висока експресія в різних типах пухлин, включаючи наприклад, колоректальний рак, рак підшлункової залози, ендометрія, легень, молочної залози, яєчника і шлунка, асоційована з пізньою стадією захворювання, інвазивністю пухлини, метастатичним потенціалом і несприятливим прогнозом (Сп о еї а. Мої Мей. 2015. ії Гоитапде еї аїІ. пі У Сапсег. 2014). Показано, що антитіло- опосередкована блокада функціонування НІГ А-С в моделях на трансгенних мишах інгібує розвиток пухлини і блокує експансію супресорних клітин мієлоїдного походження (МОЗС) (Гоштапде еї аї. Іпї у Сапсег. 2014,. (іп еї аіІ. Нит Іттипої. 2013,. ії Адацдпне еї аї. Віоса. 2011).
Зв'язування НІ А-О з ІЇТ4 може прямо інгібувати функціонування моноцитів, дендритних клітин і нейтрофілів, таким чином, порушуючи природжену протипухлинну імунну відповідь. Взаємодія між НІ А-О і моноцитами, зумовлена ІІ ТА, інгібує дозрівання антигенпрезентуючих клітин (АПК) моноцитарного походження людини, що призводить до зниженої експресії антигенів МНС класу
Її костимуляторних молекул внаслідок активації еїаїЗ (Соіоппа еї аї. У Іттипої. 1998; АПап еї аї.
У Ехр Мед. 1999, и МПапод еї аїЇ. Ргос Май! бсі ОБА. 2008). При використанні дендритних клітин (рС) моноцитарного походження людини і І. Т4-трансгенних мишей показано, що НІ А-С індукує
Зо розвиток толерогенних АПК і арешт дозрівання/активації мієлоїдних ОС, і індукція толерогенних ОС під дією НІ А-С відбувалася за допомогою порушення шляху презентування
МН класу І! (Ківісп еї а. Єиг У Іттипої. 2005).
У пацієнтів, що не відповідають на Т-клітинну терапію, але які можуть отримати користь від зменшення опосередкованної тканинними макрофагами/МО5ЗС толерантності пухлини (наприклад, "багатих" на мієлоїдні клітини пухлин), є незадоволена потреба в лікуванні. За допомогою блокади ІЇ-Т4 можна задовольнити цю потребу, і вона буде відрізнятися від існуючих направлених на Т-клітини антитіл (наприклад, проти РОТ, проти ТІСІТ) зменшенням супресії толерогенних мієлоїдних клітин в мікрооточенні пухлині.
СУТЬ ВИНАХОДУ
Даний винахід стосується антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів, що зв'язуються з
І-Т4 людини. У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі І-Т4 людини, вибраному з групи, що складається з | УВЕККБАБМУУ (ЗЕО ІЮ МО: 59), ТВІВРЕЇ (5ЕО ІЮ МО: 60), МСГ (ЗЕО ІО МО: 61) і НТОКМСОСО (ЗЕО ІЮ МО: 62). У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент захищає епітоп від дейтерообміну з джерелом дейтерію, таким як 020. У одному з варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі І МАВЕККБАБМ (5ЕО 10
МО: 59). У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі ТВІВРЕЇ (5ЕО ІО МО: 60). У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі МОР (ЗЕО ІЮО МО: 61). У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі НІСКУССО (5ЕО ІО МО: 62). У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками у двох, трьох або чотирьох епітопах ІІ Т4, вибраних з групи, що складається з | МУВЕККБАБМУ (З5ЕО ІЮ МО: 59), ТВІВРЕЇ (5ЕО ІЮ МО: 60),
МООР (ЗЕО ІЮ МО: 61) і НТОКУССО (5ЕО ІО МО: 62). У одному з варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі | УКЕККЗАБМУ (5ЕО ІЮ МО: 59) і захищає епітоп від дейтерообміну з 60 джерелом дейтерію, таким як 020. У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі ТВІКРЕЇ (ЗЕО ІО МО: 60) і захищає епітоп від дейтерообміну з джерелом дейтерію, таким як Ф2О. У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі МБО (ЗЕО 10
МО: 61) і захищає епітоп від дейтерообміну з джерелом дейтерію, таким як О20. У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі НІСЄЕУОСО (ЗЕО ІО МО: 62) і захищає епітоп від дейтерообміну з джерелом дейтерію, таким як 020. У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в двох, трьох або чотирьох епітопах ІЇТ4, вибраних з групи, що складається з
ГУКЕККЗАБУМ (5ЕО ІО МО: 59), ТКІКРЕГЇ. (5ЕО ІО МО: 60), МСОРЕ (5ЕО ІО МО: 61) ї НТСКУССО (ЗЕО ІО МО: 62), і захищає епітопи від дейтерообміну з джерелом дейтерію, таким як 020.
Даний винахід також стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується 3 тим же оепітопом //Т4 людини, що і будь-яке антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, представлені в даному описі. У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з тим же епітопом ІГТ4 людини, що і антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що містять амінокислотні послідовності важкого ланцюга і легкого ланцюга, наведені в -«»ЕОІЮО МО: 113;5214;5215;216;5217;5213; 861 11;9111;10111;12і13;14115;79і13: 8014: 8015;8016;8017: 8013: 82і11;831і11; 84 111; 85 і 13; і 86 і 15; відповідно. У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з тим же оепітопом ІТ4 людини, що і антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що містять амінокислотні послідовності варіабельного домену важкого ланцюга і варіабельного домену легкого ланцюга, наведені в 5ЕО ІЮ МО: 63 і 70; 57 і 71;57172;57173;57158:57170: 64174; 651 74: 661 74:67 і 75; 68 і 76; відповідно.
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що конкурує за зв'язування з ІП/Т4 людини з антитілом або його антигензв'язувальним фрагментом, представленим в даному описі. У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент конкурує за зв'язування з І/Т4 людини з антитілом або фрагментом, що містить амінокислотні послідовності важкого ланцюга і легкого ланцюга, наведенів ЗХЕОІО МО: 113;21і14;215;216;21і7;213;81і11159111;510111;12і13;14 115; 791 3; 8014;8015;8016; 8017: 8013;82і11;83111: 84111: 85113; їі 86 і 15; відповідно. У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент конкурує за зв'язування з І/Т4 людини з антитілом або фрагментом, що містить амінокислотні послідовності варіабельного домену важкого ланцюга і варіабельного домену легкого ланцюга, наведені в
ЗЕОІОМО:63і70;57171;57172;57173:57158;571і70;64і74:65і 74: 66174: 67175; 68 і 76; відповідно.
Крім того, даний винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІТ4 людини що містить: (а) ділянку-! 1, що визначає комплементарність (СОК-
Ї1), ділянку-/2, що визначає комплементарність (СОК-12), і ділянку-ЇЗ3, що визначає комплементарність (СОК-І 3), варіабельного домену (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну, що містять амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 3-7, 11, 13, 15 або 45; і/або (Б) ділянку-НІ, що визначає комплементарність (СОВ-НІ), ділянку-Н2, що визначає комплементарність (СОК-Н2), і ділянку-НЗ, що визначає комплементарність (СОК-НЗ), варіабельного домену (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну, що містять амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 1, 2, 8-10, 12, 14, 44 або 79-86.
У варіанті здійснення винаходу антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: (1) домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СМ УМУ/5 (5ЕО 10 МО: 16), СОВ-Н2: БІМНХОЗТМУМРЗІ-К5, де
Х є 5 або А (ЗЕО ІО МО: 17), і СОБ-НЗ: ГРТЕУУМТТКУРОЇГ. (ЗЕО ІЮ МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазОЗмМІБАСМОМН (ЗЕО ІЮ МО: 19), СОВ-12: ВХІХ»МеРБ; де Хі є 5 або А, іХг є М, О, Е або О (ЗЕО ІО МО: 20), ії СОБК-І 3: ОБЕОМ5І БАМУМ (5ЕО ІЮ МО: 21); (2) домен Мн, що містить: СОВ-НІ: ЗМАЇІ5 (5ЕО І МО: 22), СОВ-Нг: СПРІЄЕТАММАОКРОС (ЗЕО І МО: 23) і
СОВ-НЗ: УЕХІХ2ЗОУУУКОСАНОІ; де Хі є 0 або 5, і Х» є 5 або А (5ЕО ІО МО: 24), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТІ АБЗСІММОТУВІН (ЗЕО ІЮ МО: 25), СОВ-12: УКЗОоБОоКНОаЗ (ЗЕО І МО: 26) і СОК-І 3: АМ/У5ЗЗГМУМ (5ЕО ІЮ МО: 27); (3) домен Мн, що містить: СОВ-НІ: БМАМН (5ЕО ІЮ
МО: 28), СОВ-Н2: МІЗМОО5МКУМАОЗУКО (ЗЕО ІЮ МО: 29) і СОБ-НЗУ: МАЕУЛОЇ М/5РЕОМ (5ЕО
ІО МО: 30), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ВАБОСІЗБУМІ А (5ЕО ІО МО: 31), СОВ-1 2:
ААББЗІ ОБ (ЗЕО ІЮ МО: 32) і СОК-І3: ООММОУРРТ (5ЕО ІО МО: 33); і/або (4) домен Мн, що містить: СОВ-НІ: ЕІ ЗМН (ЗЕО І МО: 34), СОВ-Н2: СОБЕОРЕОЮОСЕТІМАОКРОС (5ЕО ІЮ МО: 35) і
СОВ-НЗ: АСРІ УТІЕОУМИІРОМУУБОР (ЗЕО ІЮ МО: 36), і/або домен Мі, що містить: СОВ-11: во тазо5ОмМІшАСМОМН (ЗЕО І МО: 37) СОВ-І2: ОМОМАРБЗ (5ЕБО 10 МО: 38) і СОК-І 3:
О5МОББІБавБИамм (5ЕО ІО МО: 39).
У одному з варіантів здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) і СОК-НЗ: І РТАМ/УТТАМЕОІ. (5ЕО ІО МО: 18); і/або, домен Мі, що містить: СОВ-І 1: тавзв5МІшАаМОМН (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: ОМЗМКРЗ (ЗЕБО І МО: 49) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент містить: домен
Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ 5 (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗаЗТМУМРБЇІ КБ (ЗЕО І МО: 47) ії СОБ-НУЗУ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕБО ІЮ МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: БОБМАР5 (ЗБО ІЮ МО: 50) ії СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: тавзвеМмІшАаМОМНн (ЗЕО І МО: 19), СОВ-І2: СЕБМАКРЗ (5БО ОО МО: 51) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОвВ-І2: СО5МКРБЗ(ЗЕБЕО І МО: 52) і СОК-1 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У одному з варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СМАМАРБ (5ЕБО І МО: 53) їі СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТАУМУМТТАМРЕОЇ (5ЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1:
Зо таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОАМАРБ5 (ЗЕБО ІБ МО: 54) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаУОМНн (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СЕБЕАМАКРЗ (5БО ІО МО: 55) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОАМКРЗ (ЗЕБО ОО МО: 56) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У одному з варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: ОМЗМКРЗ (ЗЕБО І МО: 49) їі СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОБМАРЗ (ЗБО ІЮ МО: 50) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить"СОвВ-НІ: УМ (ЗЕО І МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ К5 (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТКУРОЇГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаУОМНн (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СЕБМАРЗ (5БО ОО МО: 51) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: бо таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОвВ-І2: СО5МКРЗ (ЗЕБО І МО: 52) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (ЗЕО І МО: 21).
У одному з варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: тавзвОМІшАСаМОМН (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СМАМКРЗ (ЗЕБО ОО МО: 53) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАЯЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: тавз55МІшАаМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОАМАР5 (ЗЕБО ІЮ МО: 54) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таз55МІшАСаУОМН (ЗЕБО І МО: 19), СОВ-І2: СЕБЕАМАКРЗ (5БО ІО МО: 55) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: го тавв55МІшАаМОМНн (З5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОАМКРЗ (ЗЕБО І МО: 56) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де легкий ланцюг імуноглобуліну має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в 5ЕО ІЮ МО: 3,4, 5,6, 7, 11, 13, 15 або 45, і/або важкий ланцюг імуноглобуліну має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 1,2, 8, 9, 10, 12, 14, 44, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85 або 86.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить
Зо легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де легкий ланцюг імуноглобуліну містить варіабельний домен легкого ланцюга, що має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в 5ХЕО ІЮ МО: 70, 71, 72, 73, 58, 74, 75, 76 або 77, і/або важкий ланцюг імуноглобуліну містить варіабельний домен важкого ланцюга, що має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮО МО: 63, 57, 64, 65, 66, 67, 68 або 69.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де легкий ланцюг імуноглобуліну містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІО МО: 3, 4, 5, 6, 7, 11, 13, 15 або 45; і/або важкий ланцюг імуноглобуліну містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 1, 2, 8, 9, 10, 12, 14, 44, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85 або 86.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобулін або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де варіабельний домен легкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІО МО: 70, 71, 72, 73, 58, 74, 75, 76 або 77, і/або варіабельний домен важкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 63, 57, 64, 65, 66, 67, 68 або 69.
Крім того, даний винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить будь-який з наступних наборів важких ланцюгів імуноглобуліну і легких ланцюгів імуноглобуліну: (1) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 1; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 3; (2) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5БО ІЮ МО: 4; (3) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 5; (4) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ХЕО бо ІО МО: 6; (5) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБЕО ІО МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 7; (б) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮО МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 3; (7) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 8; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 11; (8) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 9; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 11; (9) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 10; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 11; (10) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗБО ІЮ МО: 12; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 13; (11) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 14; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 15; (12) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 79; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 3; (13) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 4; (14) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 5; (15) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗБО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 6; (16) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 7; (17) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 3; (18) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЗЕО ІЮО МО: 82; легкий
Зо ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 11; (19) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 83; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 11; (20) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО І МО: 84; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 11; (21) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 85; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 13; або (22) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 86; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: 15.
Крім того, даний винахід стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить будь-який з наступних наборів варіабельних доменів важкого ланцюга і варіабельних доменів легкого ланцюга: (1) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 63, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 70; (2) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО
ІО МО: 71; (3) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 72; (4) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить
БО амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 73; (5) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО
ІО МО: 58; (6) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 70; (7) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 64, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 74; (8) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 65, і 60 варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО
ІО МО: 74; (9) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 66, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЗЕО ІЮ МО: 74; (10) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: 67, і варіабельний домен легкого
Б ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 75; або (11) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 68, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 76.
У одному з переважних варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить домен Мн, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 57; і домен Мі, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 58.
У іншому переважному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 2; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 7.
У іншому переважному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІО МО: 7.
У одному з варіантів здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 57.
У іншому варіанті здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 57, де легкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 90.
У ще одному варіанті здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 57, де важкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 89.
У іншому варіанті здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 57, де легкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 90, і важкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 89.
У одному з варіантів здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 7, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 2.
У іншому варіанті здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в
ЗЕО ІЮО МО: 7, і кожний важкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в
ЗЕО ІЮ МО: 2.
У варіанті здійснення винаходу антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є глікозилованним, наприклад, з М-зв'язаними гліканами сконструйованих дріжджів або М- зв'язаними гліканами клітин яєчника китайського хом'яка (СНО). У варіанті здійснення винаходу антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент є антитілом.
Даний винахід також стосується фармацевтичної композиції, що містить антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, представлені в даному описі. У деяких варіантах здійснення композиція додатково містить терапевтичний засіб (наприклад, пембролізумаб). У деяких варіантах здійснення композиція додатково містить фармацевтично прийнятний носій. У інших варіантах здійснення композиція додатково містить терапевтичний засіб (наприклад, пембролізумаб) і фармацевтично прийнятний носій.
У одному з варіантів здійснення фармацевтична композиція містить: (ї) антитіло, що складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 7, і кожний важкий ланцюг 60 складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 2, і (її) пембролізумаб.
Даний винахід додатково стосується поліпептиду (наприклад, виділеного поліпептиду), що включає легкий ланцюг імуноглобуліну і/або важкий ланцюг імуноглобуліну або їх варіабельний домен з будь-якого антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, представленого в даному описі. Наприклад, у варіанті здійснення винаходу поліпептид містить амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з БЕО ІЮ МО: 1-39, 44, 45, 47-58, 63-77 і 79-86.
Даний винахід також стосується будь-якого полінуклеотиду (наприклад, ДНК або РНК), що кодує будь-який поліпептид, представлений в даному описі. У іншому аспекті даний винахід стосується вектора, що містить полінуклеотид, представлений в даному описі. Даний винахід також стосується клітини-хазяїна (наприклад, клітини СНО), що містить полінуклеотид або вектор, представлений в даному описі.
Даний винахід стосується способу блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В і/або
НІ А-Е, наприклад, іп міїго або іп мімо, наприклад, в організмі індивідуума, який потребує цього (наприклад, людини), що включає введення індивідууму ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, представлених в даному описі. У деяких варіантах здійснення спосіб блокування зв'язування ІТ4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В і/або НІ А-Е додатково включає здійснення терапевтичного способу (наприклад, протипухлинної променевої терапії або хірургічної туморектомії) відносно індивідуума. У деяких варіантах здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В і/або НІ А-Е додатково включає введення індивідууму терапевтичного засобу (наприклад, пембролізумабу). У інших варіантах здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В і/або НІ А-Е додатково включає здійснення терапевтичного способу (наприклад, протипухлинної променевої терапії або хірургічної туморектомії) і введення індивідууму терапевтичного засобу (наприклад, пембролізумабу).
Даний винахід також стосується способу лікування злоякісного новоутворення у індивідуума (наприклад, людини), що включає введення індивідууму ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, представлених в даному описі. У деяких варіантах здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення додатково включає здійснення терапевтичного способу (наприклад, протипухлинної променевої терапії або хірургічної туморектомії) відносно індивідуума. У деяких варіантах здійснення спосіб лікування злоякісного
Зо новоутворення додатково включає введення індивідууму терапевтичного засобу (наприклад, пембролізумабу). У інших варіантах здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення додатково включає здійснення терапевтичного способу (наприклад, протипухлинної променевої терапії або хірургічної туморектомії) і введення індивідууму терапевтичного засобу (наприклад, пембролізумабу).
Даний винахід також стосується способу отримання антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом, або його імуноглобулінового ланцюга (наприклад, його Мн і/або Му), що включає культивування клітини-хазяїна (наприклад, клітини
СНО), що містить полінуклеотид (наприклад, де полінуклеотид знаходиться у векторі і/або вбудований в одну або більше хромосом клітини-хазяїна), що кодує антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, або його імуноглобуліновий ланцюг, для експресії антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента, або його імуноглобулінового ланцюга.
Даний винахід також стосується способу отримання антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом, або його імуноглобулінового ланцюга (наприклад, його Мн і/або Му), що включає: експресію полінуклеотиду, що кодує антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, або його імуноглобуліновий ланцюг.
Антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з ІІ Т4 людини, або його імуноглобуліновий ланцюг, що є продуктом вказаного способу, також є частиною даного винаходу.
Спосіб детекції наявності пептиду І-Т4 або його фрагмента в зразку також є частиною даного винаходу. Спосіб включає наведення зразка в контакт з антитілом або антигензв'язувальним фрагментом за даним винаходом і детекцію наявності комплексу антитіла або антигензв'язувального фрагмента і пептиду ІЇТ4 або його фрагмента, де детекція комплексу свідчить про наявність пептиду ІТ4 або його фрагмента. У варіанті здійснення винаходу спосіб здійснюють іп міїго, наприклад, в біологічному зразку, наприклад, хірургічному біоптаті або зразку крові, індивідуума. У іншому варіанті здійснення спосіб здійснюють іп мімо, наприклад, в організмі індивідуума. У ще одному варіанті здійснення індивідуум є людиною.
КОРОТКИЙ ОПИС КРЕСЛЕНЬ
Фігура 1. Теплова карта мічення дейтерієм зв'язування ріЕ1(с1) з І.Т4-Нів.
На фігурах 2А і 28 показана кристалічна структура ІЇТ4 людини. На фігурі 2А показані рівні бо мічення дейтерієм, картовані на структурі І-Т4 людини. На фігурі 28 показана кристалічна структура доменів 1 і 2 І-Т4 людини в комплексі з НІ А-0. Вказані ІТ4, важкий ланцюг НІ А-С і бета 2 мікроглобулін. Вказані епітопи ІТ4 людини, що містять залишки І УВЕККБАБМУ (5ЕО І
МО: 59), ТКІКРЕГ. (ЗЕО ІО МО: 60), МСОР (5ЕО ІЮО МО: 61) ії НТОКУССО (5ЕО І МО: 62).
На фігурах ЗА і ЗВ показано зв'язування І-Т4 з НІ А-О і блокада 1Е1 (54). Т-клітини миші
ЗАЗ, трансфіковані з використанням ІТ4 людини, блокували з допомогою блокади Ес, а потім інкубували з титруваннми концентраціями 1Е1 (54) (починаючи з 27 мкг/мл, розбавлення 1:3) або з ізотипічним контролем ПпіІдс4 (27 мкг/мл). Фігура ЗА. 1Е1 (54) або пІдс4 визначали з використанням міченого флуорохромом антитіла кози проти Е(аб)» людини і проточної цитометрії. Фігура ЗВ. Після попередньої обробки 1Е1 (054) клітини інкубували з 2 мкг/мл біотинільованого НІ А-Ес або контрольного Ес (тМмІЗТА-Ес). Зв'язування Ес визначали з використанням РЕ-кон'югованого стрептавідину і проточної цитометрії. Представлені графіки відповідають З незалежним експериментам. Представлені значення ІСво і ЕС5о є середніми значеннями для цих експериментів -ж7- стандартне відхилення.
Фігура 4. Блокада зв'язування не-НІ А-7 МНС класу І з ІІ Т4 ї рТЕ!1 (1). Т-клітини миші ЗА9, трансфіковані з використанням І/Т4 людини, заздалегідь обробляли титруваннми концентраціями ріЄЕ1 (С1) (починаючи з 10 мкг/мл, розбавлення 1:3) або ізотипічним контролем "ас (10 мкг/мл) перед інкубацією з міченими флуорохромом тетрамерами НІ А-Е або СО1а, або міченими флуорохромом дексамерами НІГАТА2:01 або НІА"В7:02. Зв'язування тетрамерів/дексамерів визначали за допомогою проточної цитометрії і для кожного будували графік середньої інтенсивності флуоресценції. Розбавлення/концентрації, що використовуються для кожного дексамера/гетраметра, є наступними: НІ А"А2:01-дексамер РЕ: 1:25; НІ А"В7:02- дексамер РІТС: 1:25; СОТа-тетрамер РЕ: 1:50; НІ А-Е-тетрамер РЕ: 1 мкг/мл.
Фігури 5БА-5С. Блокада зв'язування АМОРТІ. з ІСТ4 і р1є1(С1). Фігура 5А. Біотинільовані білки АМОРТІ. заздалегідь інкубували протягом 20 хв. з рТЕї (с1) або їЇдДс1 людини, кінцева концентрація кожного становила 20 мкг/мл. Потім розчини додавали до Т-клітин миші ЗА9, трансфікованих з використанням ІІ Т4 людини, і інкубували протягом ще 30 хвилин. Зв'язування
АМОРТІЇ визначали з використанням РЕ-кон'югованого стрептавідину і аналізували за допомогою проточної цитометрії. Також додавали РЕ-мічений тетрамер НІ А-О як позитивний контроль зв'язування/олокування І/Т4. Білки АМОРТІ окупували в КеО 5У5ЗТЕМ5 і
Зо біотинілювали; фігура 5В. Т-клітини миші ЗАЗ9, трансфіковані з використанням ІЇТ4 людини, блокували за допомогою блокування Ес, потім інкубували з 20 мкг/мл ріЄЕї (51) або підс1 ізотипічного контролю. Після інкубації визначали ріЄї (С1) або підсС1 за допомогою міченого флуорохромом антитіла кози проти Е(абр)2 людини і аналізували за допомогою проточної цитометрії; фігура 5С. Т-клітини ЗАУ9У з контрольним вектором використовували як негативний контроль зв'язування АМОРТІ. Клітини обробляли, як описано в (А), за винятком того, що не здійснювали обробку антитілом.
Фігури бА і 68. Специфічність зв'язування 1Е1((54) сімейства ІТ. Т-клітини миші ЗА9, трансфіковані з використанням членів сімейства ШТ людини, отриманих з консенсусних послідовностей, опублікованих в базі даних Шпіргої використовували для тестування зв'язування антитіла пІдс4 ізотипічного контролю або 1Е1 (04) у фіксованій дозі 10 мкг/мл. Т- клітини ЗАУ з контрольним вектором використовували як додатковий негативний контроль.
Також показано зв'язування комерційно доступних антитіл проти ІТ порівняно з відповідним ізотипічним контролем для демонстрації експресії члена сімейства ІТ. Представлені дані відповідають двом експериментам зі схожими результатами. Див. легенду до фігури.
Фігура 7. Відновлення вивільнення ІЛ-2 з трансфектантів Т-клітин ЗАЗ з 1/Т4 з використанням ТЕ1 (034). Т-клітини миші ЗАЗ, трансфіковані з використанням І/Т4 людини, обробляли зв'язаним з планшетом антитілом проти СОЗ в присутності розчинного 1Е1 (54) або ізотипічного контролю (пиЇдос4) в концентрації що починається з 27 мкг/мл і серійно розбавленій в З рази до 0,3 мкг/мл. Через 24 год. інкубації супернатанти видаляли і вимірювали
ІЛ-2 миші за допомогою ЕГІЗА. Представлений графік відповідає 5 незалежним експериментам.
Представлене значення ЕсСозо є середнім для цих експериментів ж/- стандартне відхилення.
Фігура 8. Відновлена за допомогою ріЄї (64) і 1Е1 (04), індукована ІТА:НІ А-С супресія дегрануляції тучних клітин. Тучні клітини миші М/ТМС трансфікували з використанням І-Т4 людини і заздалегідь обробляли титруваннми концентраціями 1Е1 (034), р1є1 (54) або підс4 ізотипічного контролю (починаючи з 10 мкг/мл, розбавлення 1:3) перед стимуляцією зв'язаним з планшетом антитілом проти СО200КІа (клон ЮОХ89; 1 мкг/мл) і зв'язаним з планшетом тетрамером НІ А-С2 (0,625 мкг/мл). Після стимуляції протягом 1 години дегрануляцію оцінювали за допомогою збирання супернатантів тучних клітин для вимірювання вивільнення рД- гексозамінідази з використанням колориметричного ферментативного аналізу. Представлені 60 дані відповідають 2 незалежним експериментам з З повтореннями на точку даних.
Фігури 9А ії 98. Посилена 1Е1 (54) І Р5з-індукована експресія прозапальних мієлоїдних цитокінів. Цільні РВМСОС здорових пацієнтів виділяли з камер лейкоредукції і обробляли 0,25 мкг/мл І Р в присутності піді (30 мкг/мл; незафарбовані кола) або 1Е1 (04) (позначеного на фігурі як "ТЕ1") (від ЗО мкг/мл до З пг/мл; зафарбовані кола) протягом З днів. Після стимуляції супернатанти аналізували на експресію цитокінів ((фігура 9А) ГМ-КОФ ії (фігура 98) ФНОО) з використанням набору для аналізу множини цитокінів Мезо бсаіе Різсомегу. Кожний колір відповідає даним для окремого пацієнта. Також показані умови без якої-небудь стимуляції (зафарбовані трикутники).
Фігури 10А і 108. Посилена 1Е1 (54), індукована антитілом проти СОЗ експресія прозапальних мієлоїдних цитокінів. (АВ) Цільні РВМС здорових пацієнтів виділяли з камер лейкоредукції і обробляли 0,01 мкг/мл антитіла проти СОЗ (НІТЗа) в присутності пІдс4 (30 мкг/мл; незафарбовані кола) або 1Е1 (4) (позначеного на фігурі як "ТЕ1") (від 30 мкг/мл до
З пг/мл; зафарбовані кола) протягом З днів. Після стимуляції супернатанти аналізували на експресію цитокінів ((фігура 10А) ГМ-КСФ і (фігура 108) ФНОО) з використанням набору для аналізу множини цитокінів Мезо зсаїе Обізсомегу. Кожний колір відповідає даним для окремого пацієнта. Також показані умови без якої-небудь стимуляції (зафарбовані трикутники).
Фігури 11А-11Е. Обробка рієї (54) призводить до інгібування росту пухлини в моделі пухлини 5КМЕЇ 5 на гуманізованих мишах. Гуманізованим мишам МБО з перелитою СОЗ4ч- пуповинною кров'ю від 2 різних донорів пуповинної крові підшкірно інокулювали 1х106 пухлинних клітин ЗКМЕЇ 5 в лівий бік. Після інокуляції пухлинам дозволяли рости, і тих мишей, пухлини яких досягали середнього розміру 150 мм3, випадково розподіляли в групи по 6 (З від кожного донора стовбурових клітин, загалом п-б на групу). Потім мишей стимулювали пІдсі ізотипічного контролю або р1Еї (04) (по 20 мг/кг кожний) кожні 5 днів до кінця дослідження, при цьому пухлини і масу тіла вимірювали щотижня. Відстежували ріст пухлини у мишей, яким вводили ізотипічний контроль і р'Є!1 (4), з плином часу. На фігурі 11А показаний свіжий об'єм пухлини (мм) -/- ЗО з плином часу для обох груп, і на фігурах 118 і 11С показані об'єми пухлин (мму) в окремих мишей з плином часу для мишей, яким вводили ізотипічний контроль і ртЕ1 (094), відповідно. На фігурі 110 показана маса пухлини в окремих мишей, яким вводили ізотипічний контроль або р1Е1 (с4), з плином часу; на фігурі 11Е показана втрата ваги в кожній
Зо групі лікування, яку також вимірювали з плином часу. Після завершення дослідження мишей умертвляли, а пухлини збирали і зважували.
На фігурах 12А-120 показано, що введення 1Е1((4) призводило до інгібування росту пухлини в моделі пухлини ЗК-МЕЇ -5 на гуманізованих мишах. На фігурі 12А показаний середній об'єм пухлини (ммУ) 4/- ЗО з плином часу у мишей, яким вводили 1ТЕ1(054), і мишей, яким вводили Ід04 ізотипічного контролю. На фігурі 128 показана зміна маси тіла з плином часу в обох групах. На фігурі 12С показана кінцева маса пухлини в окремих мишей, яким вводили ізотипічний контроль або 1Е1((34). На фігурі 120 показана кінцева маса селезінки в окремих мишей, яким вводили ізотипічний контроль або 1Е1(04).
Фігура 13. Зв'язування гаплотипів ІЇТ4. Т-клітини миші ЗАЗ, трансфіковані з використанням алельних варіантів І-Т4 людини, використовували для тестування зв'язування антитіла піді ізотипічного контролю або 1Е1 (034) в фіксованій дозі 10 мкг/мл. Т-клітини ЗАУ9У з контрольним вектором використовували як додатковий негативний контроль. Гаплотипи представлені в таблиці 2. Представленні дані відповідають двом експериментам зі схожими результатами.
Фігури 14А і 14В. Експресія РНК ІТ4 в різних типах пухлин або типах клітин відповідно до загальнодоступних баз даних. НА фігурі 14А показана експресія РНК ІІ ТА в різних типах пухлин відповідно до бази даних ТСОА. На фігурі 148 показана експресія РНК ІІТ4 в різних типах клітин відповідно до бази даних Вінпергіпі.
На фігурах 15А і 158 показано зв'язування 1Е1((54) з мієлоїдними клітинами зі зразків гістокультури нирковоклітинної карциноми (КСС) (фігура 15А) і колоректального раку (СКС) (фігура 158).
Фігура 16. Переважні М-зв'язані глікани для моноклональних антитіл, продукованих клітинами яєчника китайського хом'яка (М-зв'язані глікани СНО) і в сконструйованих дріжджових клітинах (М-зв'язані глікани сконструйованих дріжджів): квадрати: М-ацетилглюкозамін (С1ісМас); кола: маноза (Мап); ромби: галактоза (Заї); трикутники: фукоза (Рис).
На фігурі 17 показана протипухлинна ефективність різних антитіл проти І/Т4 в моделі пухлини ЗК-МЕЇ -5 на гуманізованих мишах.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
Для кращого розуміння винаходу нижче спеціально визначені деякі технічні і наукові терміни. Якщо в описі конкретно не вказано інше, всі інші технічні і наукові терміни, що бо використовуються в ньому, мають значення, загальноприйнято зрозуміле фахівцеві в галузі, до якої належить винахід.
У межах винаходу, включаючи формулу винаходу, терміни в однині включають посилання на відповідну множину, якщо контекст чітко не вказує на інше.
Термін "афінність" стосується сили суми всіх нековалентних взаємодій між окремою ділянкою зв'язування молекули (наприклад, антитіла) і його партнером по зв'язуванню (наприклад, антигеном). Якщо не вказано інше, в межах винаходу термін "афінність зв'язування" стосується характерної афінності зв'язування, що відображає взаємодію 1:1 між членами пари зв'язування (наприклад, антитіла і антигену). Афінність молекули Х до свого партнера У, як правило, можна представляти у вигляді константи дисоціації (Ко). Афінність можна вимірювати поширеними, відомими в цій галузі способами, включаючи КіпЕХА і Віасоге.
У межах винаходу термін "антитіло" включає, як необмежувальні приклади, моноклональні антитіла, поліклональні антитіла, поліспецифічні антитіла (наприклад, біспецифічні антитіла), повністю людські антитіла і химерні антитіла.
У межах винаходу, якщо не вказано інше, термін "антигензв'язувальний фрагмент" стосується антигензв'язувальних фрагментів антитіл, тобто фрагментів антитіл, що зберігають здатність зв'язуватися з антигеном, що зв'язується повнорозмірним антитілом, наприклад фрагментів, що зберігають одну або більше ділянок СОК. Необмежувальні приклади зв'язувальних фрагментів антитіла включають РЕар-, Бар, Е(аб)2-, Ем-фрагменти, окремі важкі ланцюги або легкі ланцюги антитіл і окремі варіабельні ділянки важкого ланцюга або легкого ланцюга. "РГар-фрагмент" складається з одного легкого ланцюга, СНІ і варіабельних ділянок одного важкого ланцюга. Важкий ланцюг молекули Баб не може утворювати дисульфідний зв'язок з іншою молекулою важкого ланцюга. "БРар-фрагмент" може бути продуктом розщеплення антитіла папаїном. "Ес"-ділянка містить два фрагменти важкого ланцюга, що містять домени СНІ ії СН2 антитіла. Два фрагменти важкого ланцюга утримуються разом двома або більше дисульфідними зв'язками і гідрофобними взаємодіями доменів СНЗ. "Рар'-фрагмент" містить один легкий ланцюг і частину або фрагмент одного важкого ланцюга, що містить домен Мн і домен СНІ, а також ділянку між доменами СНІ і сне, таким
Зо чином, що між двома важкими ланцюгами двох Рар'-фрагментів може утворюватися міжланцюжковий дисульфідний зв'язок з утворенням молекули Е(аб». "Р(абв)»г5-фрагмент" містить два легкі ланцюги і два важкі ланцюги, що містять частину константної ділянки між доменами СНІ і СНО, таким чином, що між двома важкими ланцюгами утворюється міжланцюжковий дисульфідний зв'язок. Таким чином, Е(аб)»5-фрагмент складається з двох фрагментів Рар', що утримуються разом дисульфідним зв'язком між двома важкими ланцюгами. "Е(аб')»:-фрагмент" може бути продуктом розщеплення антитіла пепсином. "Гк-ділянка" містить варіабельні ділянки і важких, і легких ланцюгів, але в ній відсутні константні ділянки.
Термін "виділене антитіло" стосується стану очищення і в такому контексті термін означає, що молекула, по суті, не містить інші біологічні молекули, такі як нуклеїнові кислоти, білки, ліпіди, вуглеводи або інший матеріал, такий як клітинний детрит і середовища для вирощування. Як правило, термін "виділений" не призначений для позначення повної відсутності такого матеріалу або відсутності води, буферів або солей, якщо вони не присутні в кількостях, по суті, що заважають експериментальному або терапевтичному використанню зв'язувальної сполуки, як представлено в даному описі.
У межах винаходу термін "моноклональне антитіло" стосується популяції, по суті, гомогенних антитіл, тобто молекули антитіл, що складають популяцію, є ідентичними за амінокислотною послідовністю, за винятком можливих природних мутацій, які можуть бути присутніми в незначних кількостях. На відміну від цього, препарати загальноприйнятих (поліклональних) антитіл, як правило, включають множину різних антитіл, що мають різні амінокислотні послідовності їх варіабельних доменів, що часто є специфічними для різних епітопів. Визначення "моноклональне" вказує на тип антитіла, отриманого 3, по суті, гомогенної популяції антитіл, і не треба тлумачити його як вимогу отримання антитіла яким-небудь конкретним способом. Наприклад, моноклональні антитіла для використання в даному винаході можна отримувати гібридомним способом, уперше описаним в Копіег еї аїЇ. (1975) Маїиге 256: 495, або способами рекомбінантної ДНК (див., наприклад, патент США Мо 4816567). "Моноклональні антитіла" також можна виділяти з фагових бібліотек антитіл способами, описаними, наприклад, в Сіаскзоп еї аї. (1991) Маїиге 352: 624-628 и Магкз еї а. (1991) 9. Мо).
Вісі. 222: 581-597. Див. також Ргевзіа (2005) 9. АПегду Сііп. Іттипої. 116:731. бо Термін "повністю людське антитіло" стосується антитіла, що містить тільки білкові послідовності імуноглобуліну людини. Повністю людське антитіло може містити вуглеводні ланцюги миші, якщо його отримують за допомогою миші, клітин миші або гібридоми, отриманої з клітин миші. Аналогічно, термін "антитіло миші" стосується антитіла, що містить тільки послідовності імуноглобуліну миші. Альтернативно, повністю людське антитіло може містити вуглеводні ланцюга щура, якщо його отримують за допомогою щура, клітин щура або гібридоми, отриманої з клітин щура. Аналогічно, термін "антитіло щура" стосується антитіла, що містить тільки послідовності імуноглобуліну щура.
В основному, базова структурна одиниця "антитіла" містить тетрамер. У моноспецифічному антитілі кожний тетрамер включає дві ідентичні пари поліпептидних ланцюгів, а кожна пара містить один "легкий" (приблизно 25 кДа) і один "важкий" ланцюг (приблизно 50-70 кДа). Аміно- кінцева частина кожного ланцюга включає "варіабельну ділянку" або "варіабельний домен" з приблизно від 100 до 110 або більше амінокислот, головним чином, що відповідають за розпізнавання антигену. Карбокси-кінцева частина важкого ланцюга може визначати константну ділянку, головним чином, що відповідає за ефекторну функцію.
Як правило, константні ділянки легких ланцюгів людини класифікують як каппа і лямбда легкі ланцюги. Крім того, константні ділянки важких ланцюгів людини, як правило, класифікують як мю, дельта, гамма, альфа або епсилон, і вони визначають ізотип антитіла як І9М, дО, Ідс,
ІЧА ї ІЗЕ, відповідно. Підтипи цих дО включають, наприклад, Ідс1 і Ідс4. Даний винахід стосується антитіл проти ІТ4 і антигензв'язувальних фрагментів, що містять будь-які з цих константних ділянок легких і/або важких ланцюгів.
У межах винаходу терміни "варіабельна ділянка", "варіабельний домен", "М-ділянка" або "М- ланцюг" означають сегмент ланцюгів Ідс, варіабельний по своїй послідовності серед різних антитіл. Термін "варіабельна ділянка" антитіла стосується варіабельної ділянки легкого ланцюга антитіла або варіабельної ділянки важкого ланцюга антитіла, як окремо, так і в комбінації. Варіабельну ділянку важкого ланцюга можна позначати як "Ун". Варіабельну ділянку легкого ланцюга можна позначати як "Мі". Як правило, варіабельні ділянки важких і легких ланцюгів містять три гіперваріабельні ділянки, що також позначаються як ділянки, які визначають комплементарність (СОК), що знаходяться у відносно консервативних каркасних ділянках (ЕК). СОК, як правило, вирівнюють по каркасних ділянках, і вони роблять можливими
Зо зв'язування зі специфічним епітопом. В основному, від М-кінця до С-кінця варіабельні домени легких і важких ланцюгів містять ЕК!, СОКІ, ЕК2, СОК2, ЕКЗ, СОКЗ і ЕК4. Приписування амінокислот до кожного домену, як правило, здійснюють відповідно до визначень, наведених в
Зедиєпсе5 ої Ргоївіп5 ої Іттипоіодіса! Іпіегезі, Кабаї, єї аї.; Маїййопа! Іпвійшев ої Неайй,
ВеїШезаа, Ма.; Бій ей.; МІН Рибрі. Мо. 91-3242 (1991); Кабаї (1978) Айм. Ргої. Спет. 32:1-75;
Кавбаї, евї а!., (1977) 9. Віої. Снет. 252:6609-6616; Спопіа, єї а!., (1987) У Мої. Віо!. 196:901-917 или Споїпіа, еї аї., (1989) Маїшге 342:878-883.
Термін "СОК" стосується однієї з трьох гіперваріабельних ділянок (НІ, Н2, або НЗ) в некаркасній ділянці В-листового каркасу Мн антитіла або однієї з трьох гіперваріабельних ділянок (11, 12, або ІЗ) в некаркасній ділянці В-листового каркасу Мі антитіла. Таким чином,
СОК являють особою послідовності варіабельної ділянки, що перемежовуються з послідовностями каркасної ділянки. Ділянки СОМ добре відомі фахівцям в цій галузі, і їх визначають, наприклад, по Кабаї як ділянки найбільшої гіперваріабельності у варіабельних доменах антитіла. Послідовності діллнки СОК також визначають структурно по СВпоїйіа як залишки, що не є частиною консервативного В-листового каркасу, і, таким чином, вони можуть адаптуватися до іншої конформації. Обидві термінології є загальновизнаними в цій галузі.
Послідовності ділянок СОК також визначають з використанням АБМ, Сопіасі і ІМСТ. Положення
СОК в канонічній варіабельній ділянці антитіла визначають за допомогою порівняння численних структур (АГ-ї агікапі сеї аї., 1997, 9). Мої. Віої. 273:927-48; Могеєа еєї аї!., 2000, Меїпоа5 20:267-79). Так як кількість залишків у гіперваріабельній ділянці варіюється в різних антитілах, додаткові залишки відносно канонічних положень загальноприйнято нумерують з допомогою а,
Б, с і т.д. поруч з номером залишку в схемі нумерації канонічної варіабельної ділянки (АЇ
Іа;ікапі еї аїЇ, вище). Така номенклатура також добре відома фахівцям в цій галузі.
Відповідність між системами нумерації, включаючи, наприклад, нумерацію по КаБбаї і унікальну систему нумерації ІМОТ, добре відома фахівцеві в цій галузі і представлена нижче в таблиці 1.
В деяких варіантах здійснення СОК визначають за допомогою системи нумерації Кабаї. У інших варіантах здійснення СОК визначають за допомогою системи нумерації ІМОСТ. У інших варіантах здійснення СОК визначають за допомогою системи нумерації АБМ. У інших варіантах здійснення СОК визначають за допомогою системи нумерації Споїйіа. У інших варіантах здійснення СОК визначають за допомогою системи нумерації Сопіасі. 60
Таблиця 1
Відповідність між системами нумерації СОК 0 |КаранСпоша | іІмст | Караг | Ам | Спошіа | Сопівс!
Термін "їдентичність послідовності" стосується ступеня, до якого амінокислоти з двох поліпептидів є однаковими в еквівалентних положеннях при оптимальному вирівнюванні двох послідовностей.
Схожість послідовності включає ідентичні залишки і неідентичні, біохімічно споріднені амінокислоти. Біохімічно споріднені амінокислоти, що мають схожі властивості, які можуть бути взаємозамінними, описані вище.
Терміни "консервативно модифіковані варіанти" або "консервативна заміна" стосуються замін амінокислот в білку іншими амінокислотами, що мають схожі характеристики (наприклад, заряд, розмір бічного ланцюга, гідрофобність/гідрофільность, конформація і жорсткість кістяка, і т. д.), таким чином, що можна багато разів здійснювати зміни без зміни біологічної активності білка. Фахівцям в цій галузі відомо, що, в основному, одиничні заміни амінокислот в ділянках поліпептиду, що не мають істотного значення, по суті, не змінюють біологічну активність (див., наприклад, Умаїсоп еї а!. (1987) МоїІесшіаг Біоіоду ої Те Сепе, Те Вепіатіп/Ситтіпуд5 Риб. Со., р. 224 (Ап Ед.)). Крім того, менш ймовірно, що заміни структурно або функціонально схожих амінокислот порушать біологічну активність. Приклади консервативних замін наведені в таблиці 2.
Таблиця 2
Приклади консервативних амінокислотних замін ев ейма////////
У межах винаходу термін "епітоп" стосується ділянки на антигені, з якою зв'язується антитіло або антигензв'язувальний фрагмент. Зв'язування антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, представленого в даному описі, з епітопом означає, що антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з одним або більше амінокислотними залишками в епітопі.
Термін "виділена" молекула нуклеїнової кислоти або полінуклеотид означає ДНК або РНК, наприклад, геномного або синтетичного походження або ДНК або РНК, отриману з мРНК або
КДНК або деяких їх комбінацій, не зв'язану з частиною або всім полінуклеотидом, в якому виділений полінуклеотид виявляють в природі, або зв'язану з полінуклеотидом, з яким вона не зв'язана в природі. У цілях за даним винаходом, потрібно розуміти, що "полінуклеотид, який містить" (або т. п.) конкретну нуклеотидну послідовність, не включає інтактні хромосоми.
Виділені полінуклеотиди, що "містять" конкретні послідовності нуклеїнової кислоти, можуть включати, в доповнення до конкретних послідовностей, кодуючі послідовності для до десяти або навіть до двадцяти або більше інших білків або їх частин або фрагментів, або вони можуть включати функціонально зв'язані регуляторні послідовності, що контролюють експресію кодуючої ділянки вказаних послідовностей нуклеїнової кислоти, і/або можуть включати послідовності вектора.
Фраза "контрольні послідовності" стосується полінуклеотидних послідовностей, необхідних або корисних для експресії функціонально зв'язаної кодуючої послідовності в конкретному організмі-хазяїні. Контрольні послідовності, придатні для прокаріот, наприклад, включають промотор, необов'язково, послідовність оператора і ділянку зв'язування рибосоми. Відомо, що еукаріотичні клітини використовують промотори, сигнали поліаденілювання і енхансери. У варіанті здійснення винаходу полінуклеотид функціонально зв'язаний з промотором, таким як вірусний промотор, промотор СМУ, промотор 5М40, або невірусний промотор, або промотор фактора елонгації (ЕР)-1, і/або інтроном.
Нуклеїнова кислота є "функціонально зв'язаною", якщо вона розташована в функціональному взаємозв'язку з іншим полінуклеотидом. Наприклад, ДНК для перед- послідовності або секреторної лідерної послідовності функціонально зв'язана з ДНК для поліпептиду, якщо вона експресується як білок-«попередник, що бере участь в секреції поліпептиду; промотор або енхансер функціонально зв'язаний з кодуючою послідовністю, якщо він впливає на транскрипцію послідовності; або ділянка зв'язування рибосоми функціонально зв'язана з кодуючою послідовністю, якщо вона розташована таким чином, що полегшує
Зо трансляцію. Як правило, але не обов'язково, термін "функціонально зв'язаний" означає, що зв'язані полінуклеотидні послідовності є суміжними і, у випадку секреторної лідерної послідовності, суміжними і в рамці зчитування. Однак енхансери можуть не бути суміжними.
Зв'язування здійснюють за допомогою лігування в зручних ділянках рестрикції. Якщо таких ділянок немає, використовують синтетичні олігонуклеотидні адаптери або лінкер відповідно до загальноприйнятої практики.
У межах винаходу вираз "клітина", "лінія клітин" і "культура клітин" використовують взаємозамінно, і всі такі позначення включають їх потомство. Таким чином, терміни "трансформанти" і "трансформовані клітини" включають первинні клітини і отримані з них культури без урахування кількості перенесень. Також потрібно розуміти, що не все потомство буде мати точно такий же вміст ДНК внаслідок навмисних або ненавмисних мутацій. Термін включає мутантне потомство, що має ту ж функцію або біологічну активність за результатами скринінгу, що і вихідна трансформована клітина. Випадки, коли необхідне різне позначення, будуть очевидні з контексту.
Клітини-хазяїни включають еукаріотичні і прокаріотичні клітини-хазяїни, включаючи клітини ссавців. Клітини-хазяїни можна використовувати як хазяїни для експресії антитіл проти І-Т4 і їх антигензв'язувальних фрагментів. Клітини-хазяїни включають, крім іншого, клітини яєчника китайського хом'яка (СНО), М5О, клітини 5Р2, клітини НегГа, клітини нирки новонародженого хом'яка (ВНК), клітини нирки мавпи (СО5), клітини печінковоклітинної карциноми людини (наприклад, Нер 02), клітини А5бБ49, клітини ЗТЗ3 і клітин НЕК 293. Клітини-хазяїни ссавців включають клітини людини, миші, щура, собаки, мавпи, свині, кози, бика, коня і хом'яка. Інші лінії клітин, які можна використовувати, є лініями клітин комах (наприклад, Зроаоріега їгидірегаа або Тгіспоріивіа пі), клітинами амфібії, бактеріальними клітинами, рослинними клітинами і клітинами грибів. Клітини грибів включають дріжджові клітини і клітини ниткоподібних грибів, включаючи, наприклад, Ріспіа рабвіогі5, Ріспіа їпіапаїса, Ріспіа ІгепаІорпіа, Ріспіа Косіатає,
Ріспіа тетрбгапавєгїасієпв, Ріспіа тіпша (Одаїава тіпшіа, Рісніа Іпапегі), Ріспіа орипііає, Рісніа
ІШептої!оїегапв, Рісніа заїїсіагліа, Ріспіа доегсиит, Ріспіа рі)регі, Ріспіа 5рії5, Ріспіа метаноліса,
Рісніа 5р., Засспаготусез сегемівіає, Засспаготусез 5р., Напзепшіа роїутогрНа, Кіпулегтотусев 5р., Кінуухеготусез Іасіїз, Сапаїда аїрісап5, АзрегойШв підціапе, Азрегоїййи5 підег, Аврегойив5 огулає, Пісподепта геезеї, Спгузоврогішт ІшсКпоуепве, Еивзагішт в5р., Еизагішт дгатіпеит, бо Еизагішт мепепайт, Рпузсопійгейа раїеп5 і Меигозрога осгазза. Ріспіа 5р., будь-які
Засспаготусез 5р., Напзепшціа роїЇутогрпа, будь-які Кісумеготусез 5р., Сапаїда аібрісапв, будь-які
АзрегаоїНи5 5р., Тгісподегта геезеї, Спгузозрогічт ІпсКпомепзе, будь-які Ризагішт 5р., Магом/іа
Іроїуїса і Меигозрога сгахза. Даний винахід стосується будь-якої клітини-хазяїна (наприклад, клітини СНО або клітини Ріспіа, наприклад, Ріспіа равіогіб5), що містить антитіло проти ІІТ4 або його антигензв'язувальний фрагмент, або що містить полінуклеотид, що кодує таке антитіло або фрагмент, або що містить вектор, що містить полінуклеотид.
Терміни "лікувати" або "лікування" означають введення антитіл проти І/Т4 або їх антигензв'язувальних фрагментів за даним винаходом індивідууму, що має один або більше симптоми захворювання, при якому антитіла проти І/Т4 і антигензв'язувальні фрагменти є ефективними, наприклад, в лікуванні індивідуума, що має злоякісне новоутворення або інфекційне захворювання, або, як передбачають, що має злоякісне новоутворення або інфекційне захворювання, при якому засіб має терапевтичну активність. Як правило, антитіло або фрагмент вводять в "ефективній кількості" або "ефективній дозі", яка буде полегшувати один або більше симптомів (наприклад, злоякісного новоутворення або інфекційного захворювання) у індивідуума або популяції, що піддається лікуванню, індукуючи регресування або усунення таких симптомів або інгібуючи прогресування таких симптомів, наприклад, симптомів злоякісного новоутворення, таких як ріст пухлини або метастазування, в будь-якій клінічно значній мірі. Ефективна кількість антитіла або фрагмента може варіюватися залежно від таких факторів, як стадія захворювання, вік і маса тіла пацієнта і здатність лікарського засобу викликати бажану відповідь у індивідуума.
У межах винаходу термін "антитіло проти ІЇТ4 або його антигензв'язувальний фрагмент" стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІЇ.Т4 людини.
Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів, наведених в даному описі, що специфічно зв'язуються з ІІ Т4. Антитіло або антигензв'язувальний фрагмент "специфічно" зв'язується з поліпептидом, що містить вказану послідовність (наприклад, І-Т4 людини), якщо вони зв'язуються з поліпептидами, що містять послідовність, з Ко приблизно 20
НМ або більш високою афінністю (наприклад, приблизно 17 нМ, 10 НМ, 5 НМ, 1 нМ, 100 пМ або 1 пМ), але не зв'язується з білками, в яких послідовність відсутня. Наприклад, антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, що специфічно зв'язуються з поліпептидом, що містить ІТ
Зо людини, можуть зв'язуватися з РІ АСФ-міченою формою І/Т4 людини, але не зв'язуються з іншими Р АСФ-міченими білками, в яких відсутні послідовності ІІ Т4.
І тА
У варіанті здійснення винаходу амінокислотна послідовність ІТ4 людини містить амінокислотну послідовність:
МІТРІМІМІСІ СІ 5Б'ЯРАТН МОТОТІРКРТ ГМ/АЕРОБМІТ ОС5РМУТІ 5СО 251 ЕАОЄМНІ 60
УВЕККЗАБМІ ТВІАВРЕУКМ СОЕНІРБІТМУ ЕНТаВУСаСОМ УЗВАВРМУБЗЕЇ 5 ОРІ М ММТОА 120
УРКРТІ БАОР 5РУУТЗОСИВАМ ТП ОСЕБОМАРЕ СОРІЇ СКЕСЕ ЕЕНРОСІ М5О РНАНОа5З5ВАЇ 180
ЕБУМаРУБРМА ВМУЗНАСУСУО І МЗРМУМ/З5ОР ЗО БЕ Г МРОа МЗККРБЇ ЗМО РаРУМАРСЕ5 240
ГТ ОоСУБОМа МОАЕМІ УКЕС ЕВОГГАОЇ РЕВА ОРОАИї БОАМ ЕТ аРУБАНЗУ ССОМАСУаЙАН оо
МІ 55ЕСБАРБ ОРІ ОШІТОО ІВЕТРЕЇЗМО РЕОРТМАБСОЄЕМ МТ СОБМУВО ЕНТРІ ТКА, 360
ААРБАРІ ВІ 85 ІНЕУРКМОАЕ ЕРМЗРУТЗАН ДИТУВСУСавІ МЗОРМІІІЇ ЗНР 5ЕРІ ЕІ УМБа 420
РОМОа55РРРТ аРІЗТРАСРЕ ВОРІГТРТОБО РОБИ сеАНІ С ММІСП МАММІ ПС СЕ 480
ПЕАНАВОСК НУТЗТОВКАО ГЕОНРАСАМОР ЕРТОВИаї ОМА 55РААВАОЄЕ МІ МААУКОТО 540
РЕВИМЕМОТА АААЗЕАРОЮМ ТУАОЇІ Н5І ТІ ВАКАТЕРРРБО ОЕВЕРРАЕРЗ ІМАТІ АІН 598 (ЗЕО І МО: 40; сигнальна послідовність підкреслена). Див. Опіргої, реєстраційний
Мо С8М423.
У іншому варіанті здійснення винаходу амінокислотна послідовність І-Т4 людини містить наступну амінокислотну послідовність без сигнальної послідовності:
ОТОТІРКРТ І/М/АЕРОБМІТ ОС5РМТІ 5СО 51 ЕАОЄУНВІ 39
УВЕККЗАБМ/І ТВІВРЕ МКМ СОЕНІРБІТМУ ЕНТаВУСаСОМ УЗВАВМУ5ЕЇ 5 ОРІ М ММТОА 99
УРКРТІ БАОР 5РУУТЗОСИВАМ ТП ОСЕБОМАРЕ СОРІЇ СКЕСЕ ЕЕНРОСІ М5О РНАНОа5З5ВАЇ 159
ЕБМаРУБРМА ВМУЗНАСМОИМО І МЗРУУМЗОР ЗО ЕП МРОа МЗККРБЇ ЗМО РОРУМАРСОЕ5 219
ГТ ОоСУБОМа МОАЕМІ УКЕС ЕВОГГАОЇ РЕВА ОРОАИї БОАМ ЕТ аРУБАНЗУ ССОМАСУаЙАН 60 279
МІ 55ЕСБАРБ ОРІ ОШІТОО ІВИТРЕЇЗМО РАРТМАБОЄМ МТ СОБМВО ЕНТРП ТКАС 339
ААРБАРІ ВІ 85 ІНЕУРКМОАЕ ЕРМЗРУТЗАН ДИТУВСУавІ МЗОРМІІЇ ЗНР 5ЕРІ Е МУБОа 399
РОМа5БЗРРРТ СРІЗТРАСРЕ СОРІ ТРТаБО РОБИ ВНІС ММІСІ МАММІ ПІ ТО 1 Е 459
ПЕАНАВОСК НУТЗТОВКАО ГЕОНРАСАМОР ЕРТОВИаї ОМА 55РААВАОЄЕ МІ МААУКОТО 519
РЕВИМЕМОТА АААЗЕАРОЮМ ТУАОЇІ Н5І ТІ ВАКАТЕРРРБО ОЕВЕРРАЕРЗ ІМАТІ АІН 577 (ЗЕО ІО МО: 78).
У варіанті здійснення винаходу амінокислотна послідовність ІТ4 яванського макаки містить амінокислотну послідовність:
МТІТРІСМУНІС СІ 5 РАТН МОДИ РКРТ ГМ/АЕРОБМІВ ЕСЗРМУТІ СО 51 ОМОЄМНІ. 60
УВЕКМРАБМ/М ВОІРОЕБЇ МКК СУЕАЇСЕІТМ ЕНТИОМАСОМ УЗНОЗУУМЗЕРБЗ ОРІ ЕІ ММТИаА 120
У5КРТІЗАЇ Р БРУМАБОСММУ ТІ ОСОБОМАР О5ЕТІ СКЕСЕ ОЕНРОВІ МСО ЗНАВНОУМУБУАМ 180
Е5БУаРУБРОА ВМУ5УВСТИМІ 55АРМУМУ5І Р БОГ ЄГІ МРОа УЗККРБЇ 5МО РОРУМАРО ОК 240
ГГ оСаврда хмОвгАГУКЕС ЕСОРГОВАРМУА ОРОДагІї БОАМ ЕП аРУЗНЬЗН СИОУВвОоБИаАН оо
МІ 55ЕМ5ЗАРБ ОРІ ОШАСО ІВСАРЕЇ 5МО РЕРКУМБОЄЕМ МП СОББЗУО ЕНАРІ І ТОдДа 360
ААБАНІ НІ 05 МУКУРКУОАЕ ЕРМЗРУТЗАН ДАИТУВСТУ,5А З5МРМІ І 5УР ЗОРІ ЕІ МУ5Оа 420
РБІССаРБЗОРТТ ЯРТЗТСОРЕО ОРІ ТРТА5АР О5СІ! ЯВНІ ОМ МТОМІМАЄМ ІГР ЛІ. 480
МЕВУВВОСКА М ТЗАОВКАВЕ ОНРАСАМЕРЕ РАДВИаїГОВА5 5РААОТОЕЕМ І МААМКОТОР 540
ЕРОМЕГОЗВА ААЗЕОРОЮМТ МАО О5І ТІ А ВЕАТЕРРРБО ЕВАРРМУЕЗ5БІ МАТІ ТІН 597 (ЗЕО І МО: 43; сигнальна послідовність підкреслена). Див. МОВІ геївед ХР. 005590753.
У варіанті здійснення винаходу сигнальна послідовність для експресії І/.Т4 або будь-якого іншого поліпептиду, наведеного в даному описі, являє собою МТРІММ ІСІ СІ БІ ОРАЕТНМ (амінокислоти 1-21 5БЕО ІО МО: 40) або МТРІМТМИІСІ СІ БІ ОРЕТНМУ (амінокислоти 1-21 5ЕО І
Зо МО: 43), або МР ГІ. І РІГ УМАСАГА (5ЕО І МО: 46).
У варіанті здійснення винаходу антитіло проти І/Т4 або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом зв'язується з позаклітинним доменом ЇЇ ТА:
ОТОатІРКРТ ММАЕРОБМІТОСОРМТІ 5СОС5БІ ЕАОЄМУ ВІ МАЕККЗАБУМТВІВРЕЇ МКМООЕНІРБІ
ТЕНТИ ВУаСОМУЗААВМУ5ЕЇ ЗОРІ М ММТОАУРКРТІ БАОРБРУУТЗССО ВАМ ОСЕБОМАРОИІ
ІЇСКЕСЕЕЕНРОСІ МБОРНАНОаЗЗААІЕЗМаРУБРМАРМУЗНАСМИамМОІ МОРУУМЗЗРЗОП ЕІ МРОа
МБККРБОІ БМОРОРУМАРСЕБІ ТІ ОСУБОМамМОвВЕМІ УКЕСЕВОЇ ВО РЕВОРОАСІ БОАМЕТІ а РМ зАБ5УСаОУвВСуУСАНМІ 55ЕС5АРБОРІ ОІНТИадОІвВаИТтРЕІЗМОРИРТМАБИаЄЕММТ І СОМ ВОЕНТЕ
І Г/ТКАСААВАРІ ВІ АВБІНЕМРКМОАЕЕРМЗРУТЗАНАСТУВСУС5БІ МБ5ОРМІ І ЗНРОЗЕРІ ЕЇ МУБаРБО
МавзоРРРТОРІЗТРАСРЕВБОРІ ТРТаБОРОЗИ СаВвНІ СМ (амінокислоти 22-461 5ЕО І МО: 40), або його злитим з імуноглобуліном білком (наприклад,
ІДО1 або Ідс4), або трансмембранною формою (ТМ), що експресується на поверхні клітини:
ОТОатІРКРТ ММАЕРОБМІТОСОРМТІ 5СОС5БІ ЕАОЄМУ ВІ МАЕККЗАБУМТВІВРЕЇ МКМООЕНІРБІ
ТЕНТИ ВУаСОУМААВМУЗЕЇ ОРІ М МУМТОАУРКРТІ БАОРБРУУТЗОС ВМТ ОСЕБОМАРИИІ
ІЇСКЕСЕЕЕНРОСІ МБОРНАНОаЗЗААІЕЗМаРУБРМАРМУЗНАСМИамМОІ МОРУММЗЗРЗОЇ І ЕІ УРА
МБККРБОІ БМОРОРУМАРСЕБІ ТІ ОСУБОМамМОвВЕМІ УКЕСЕВОЇ ВО РЕВОРОАСІ БОАМЕТІ а РМ зАБ5УСаОУвВСуУСАНМІ 55ЕС5АРБОРІ ОІНТИадОІвВаИТтРЕІЗМОРИРТМАБИаЄЕММТ І СОМ ВОЕНТЕ
І Г/ТКАСААВАРІ ВІ АВБІНЕМРКМОАЕЕРМЗРУТЗАНАСТУВСУС5БІ МБ5ОРМІ І ЗНРОЗЕРІ ЕЇ МУБаРБО
МавзовРРРТОаРІЗТРАСРЕВБОРІ ТРТаЗБОРОЗИаГаВвНІ СУМІСІ МАММІ І С РО АНнЕеЕвОГВКН (амінокислоти 22-491 5ЕО ІЮО МО: 40).
Антитіла і антигензв'язувальні фрагменти
Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів (наприклад, повністю людських антитіл), що зв'язуються з І/Т4 (що в даному описі позначаються як "антитіла проти І-Т4"), і способів застосування антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів у лікуванні або профілактиці захворювання. У одному з варіантів здійснення винахід стосується антагоністичних антитіл проти ІІ ТА і способів застосування антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів в лікуванні або профілактиці захворювання.
У одному з аспектів даний винахід включає антитіла проти І ТА і їх антигензв'язувальні фрагменти, як вказано в даному описі, що мають одну або більше з властивостей, наведених нижче: 60 - зв'язується з ІЇ Т4 людини в одному або більше амінокислотних залишках в | УКЕККЗАБУУ
(ЗЕО ІО МО: 59), ТКІКРЕЇ. (ЗЕО ІЮО МО: 60), МСООРЕ (ЗЕО ІЮ МО: 61) лабо НТЕСКУССО (ЗЕО ІЮ
МО: 62), або захищає І УКЕККЗАБУМ (5ЕО ІЮ МО: 59), ТКІКРЕЇГ. (5ЕО ІО МО: 60), МБООБЕ (ЗЕО
ІО МО: 61) і/або НТОКУССО (ЗЕО ІЮО МО: 62) від дейтерообміну (наприклад, О2О), наприклад, що визначається за допомогою мас-спектрометрії воднево-дейтерієвого обміну, і/або зв'язується з ІЇТ4 з тепловою картою, по суті, такою, як представлена на фігурі 1; - зв'язується з ІЇ.Т4 людини в домені 1 (див. Умісох еї аІ. ВМС 5ігисічгаї! Віоіоду 2:6 (2002)); - зв'язується з позаклітинним доменом І-Т4 людини або ТМ-формою ІІ-Т4, що експресується на поверхні клітини, наприклад, перед-В-клітини, клітини яєчника китайського хом'яка, клітини 0937 або клітини дигкаї УЕб. - обчислений рі «7,29 (наприклад, 7,29 або 7,30); - експериментально визначений рі -- 7,2; - відрізняється термограмою, що має початкову Тт »60 "С, Тті х 65,27 і Тло - 78,8 76; - зв'язується з /Т4 людини з Ко приблизно 1,7х10-4 М (наприклад, як визначають за допомогою поверхневого плазмонного резонансу, наприклад, зв'язування антитіла проти ІІ ТА з міченим полігістидином І-Т4 людини); - Кат5,5х105 М- с" (наприклад, як визначають за допомогою поверхневого плазмонного резонансу, зв'язування антитіла проти ІТ4 з міченим полігістидином І-Т4 людини); - Ка-9х103 с (наприклад, як визначають за допомогою поверхневого плазмонного резонансу, наприклад, зв'язування антитіла проти І ТА з міченим полігістидином І-Т4 людини); - блокує зв'язування НІ А-О (наприклад, Ес-злитого НІ А-0) з ІІ. Т4 людини (наприклад, ІІ Т4 на Т-клітинах миші ЗА, які трансфіковані з використанням ІТ4 і експресують його), наприклад, з ІСво приблизно 0,25 мкг/мл (-0,06 мкг/мл), наприклад, як визначають за допомогою поверхневого плазмонного резонансу; - блокує зв'язування НІ А-А, НІ А-В (наприклад, мічених флуорохромом дексамерів НІ А-А, таких як НІГА"А2:01, або НІА-В, таких як НІГ А"В7:02), і/або НІА-Е (наприклад, мічених флуорохромом тетрамерів НІГА-Е) з ІСТ4 (наприклад, І/Т4 на Т-клітинах миші ЗА9, які трансфіковані з використанням І/Т4 і експресують його), наприклад, як визначають за допомогою поверхневого плазмонного резонансу; - блокує зв'язування ІЇТ4 (наприклад, І/Т4 на Т-клітинах миші ЗА9, які трансфіковані з
Зо використанням І-Т4 і експресують його) з АМОРТІ1, АМОРТІ 4 і/або АМОРТІ 7 (наприклад, біотинільованими білками АМОРТІ), наприклад, як визначають за допомогою поверхневого плазмонного резонансу; - не зв'язується з ІІ.Т2, І.Т3, І Т5, І КВ5, ПІІ КАТ, ПІІ КА2, І. 17, І Т8 і/або ІІ Т11; - реверсує І/Т4 опосередковану супресію ІЛ-2 в трансфікованих з використанням ІТ4 клітинах ЗА9, наприклад, з ЕСвзо 0,43 мкг/мл (20,14 мкг/мл); - відновлює ІГТ4:НІА-С-індуковану супресію дегрануляції тучних клітин (наприклад, в присутності зв'язаного з планшетом тетрамера Ні А-б), наприклад, де тучні клітини експресують І/Т4 і СО200Кіа, і їх стимулюють, наприклад, з використанням антитіло- опосередкованого перехресного зшивання СО2ООВІ а; - підвищує ліпополісахарид (І Р5)-індуковану експресію прозапальних мієлоїдних цитокінів, наприклад, ГМ-КСФф і/або ФНоОа, з мононуклеарних клітин периферичної крові (РВМС); - підвищує індуковану антитілом проти СОЗ експресію прозапальних мієлоїдних цитокінів, наприклад, ГМ-КСФф і/або ФНоОа, з мононуклеарних клітин периферичної крові (РВМС); - інгібує ріст пухлини у людей або, наприклад, інших ссавців, таких як миші (наприклад, миші
МО з імунодефіцитом), реконструйованих з використанням гемопоетичних стовбурових клітин людини, наприклад, що включають периферичні СО45-імунні клітини людини, наприклад, де пухлина є меланомою шкіри людини, наприклад, з лінії клітин зЗКМЕЇ 5; - полегшує опосередковану супресорними клітинами макрофагального/мієлоїдного походження (МО5С) толерантність пухлини в організмі індивідуума (наприклад, людини) з пухлиною; - не зв'язується з ІЇ Т4 яванського макаки і/або рігВ миші; і/або - за допомогою нього забарвлюють СО14- моноцити людини і/або СО11В-.- гранулоцити людини; - зв'язується з одним або більше (наприклад, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або всіма 10) з гаплотипів
І-Т4 людини, наведених в таблиці 7.
Важкий ланцюг антитіла 1ЄЕ1 (С1Е) (Ід4)
Важкий ланцюг
ЕМО ООМ САС КРОЗЕТІ 5І ТСДАУУасоЕЗаУУМБМІВОРРОКИЇ ЕМІСЕЇМНЗИазТтМММРБІК
ЗАМТІЗМОТЗКМОГЕ5ІКІ 55 ГТААОТАУУУСАВІ РТЕУУМТТАУЕрІ мууа ваті мгу55АЗТКаРБЗМЕРІ. 60 АРСЗАБЗТЗЕЗТААЇ аСІ МКОУМЕРЕРУТУБМ МЗСОАЇ ТЗаУНТЕРАМІ О55О01 51 55УМТУРЗББІ СТ
КТУТСММОНКРОЬМТКУОКАМЕЗКМОа РРСРРСОРАРЕГНРІ СО РБЗУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУММО
М5БОБОРЕМОЕЄМУ УМрамЕМНМАКТКРАЕЄЕОЕМЗТУВУММІ ТМ НОУМІ МОКЕУКСКУЗМКаї Р
ЗІЕКТІЗКАКИОРАВЕРОМУУТІ РРЗОЄЕМТКМОМУБІ ТОЇ УКИЕМРЗОІАМЕМЕЗМИОРЕММУКТТРРМІ. рзравзгЕв| УВІ ТМОКЗАУМОБаЙмММЕЗСЗУМНЕАІ НМНУТОКОБІ 5І БІ СК (ЗЕБЕО 10 МО: 1; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен важкого ланцюга
ЕМО ООМ/САСІ І КРОЗЕТІ 5І ТСАУааБЕЗаМММЗУМІВОРРОаКаИї ЕММИЕІМНЗавзтмМУМРБІ К
ЗАМТІЗМОТЗКМОВЕ5І КІ 55 ТААОТАМУМСАВІ РТАММТТАМРОЇГ МУ, ВИті муз (ЗЕО ІО МО: 63)
Важкий ланцюг антитіла 1Е1 (С1Е, 554А) (404)
Важкий ланцюг
ЕМО ООМ/ САС КРОЗЕТІ 5І ТСАУУасоЕЗаУУМЗМІВОРРОКИЇ ЕМІСЕІМНАСЗТМУМРБІ К
ЗАМТІЗМОТЗКМОГЕ5ІКІ 55 ГТААОТАУУУСАВІ РТЕУУМТТАУЕрІ мууа ваті мгу55АЗТКаРБЗМЕРІ.
АРСБЗАБЗТЗЕЗТААГ аСІ МКОУМЕРЕРУТУБМ МСА ТЗаМНТЕРАМІ О55ОІ 51 55УММТУРБЗББІ СТ
КТУТСММОНКРОЬМТКУОКАМЕЗКМОа РРСРРСОРАРЕГНРІ СО РБЗУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУММО
М5БОБОРЕМОЕЄМУ УМрамЕМНМАКТКРАЕЄЕОЕМЗТУВУММІ ТМ НОУМІ МОКЕУКСКУЗМКаї Р
ЗІЕКТІЗКАКЕОРАВЕРОМУУТІ РРЗОЄЕМТКМОМУБІ ТОЇ УКИЕМРЗОІАМЕЖМЕЗМИОРЕММУКТТРРМІ. рзравзгЕв| УВІ ТМОКЗАУМОБаЙмММЕЗСЗУМНЕАІ НМНУТОКОБІ 5І БІ СК (ЗЕБЕО 10 МО: 2; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен важкого ланцюга
ЕМО ООМ/САСІ І КРОЗЕТІ 5І ТСАУааБЕЗаМММЗУМІВОРРИаКаї ЕМІСЕІМНАСЗТМУМРБІЇ К
ЗАМТІЗМОТЗКМОВЕ5І КІ 55 ТААОТАМУМСАВІ РТАММТТАМРОЇГ МУ, ВИті муз (ЗЕО ІО МО: 57)
Важкий ланцюг антитіла 1Е1 (9451)
Важкий ланцюг
ОМОГООМСАСІІ КРОЗЕТІ 5БІТСАУУасЗЕБСОУММУЗУММІВОРРОКИаЇ ЕМІСЕ ЯНІС МММРБІК
ЗАМТІЗМОТЗКМОГЕ5ІКІ 55 ТААОТАУУУСАВГ РТВУУУТТВУЕОВІ ума ваИті мІу55АЗТКОаРБЗМЕРІ.
АРББЗКОТЗОИТААІ ас МКкКОМЕРЕРУТУЗУУМЗСИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55И:І 51 55УМТУРБЗББІ СТ
ОТМІСМУМНКРОМТКМОКАМЕРКЗСОКТНТСРРСОРАРЕГІЇ ССОРБЗМУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУМ
МОМЗ5НЕОРЕУКЕМУ УМВИМЕМНМАКТКРАЕЕОУМЗТУАМММІ ТМ НОБУ/ЛІ МСОКЕМКОСКМУ5МКАЇ Р
АРІЕКТІЗКАКИОРАЕЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТОЇ УК ЕУРБОІАМЕМЕЗМСОРЕММУКТТРРМУ
ГгоБразЕР УК ТОК АМОСаММЕЗСЗУМНЕАІ НМНУТОКОІ 5І РОК (ЗЕБЕО 10 МО: 44; варіабельний домен підкреслений; СОМ позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен важкого ланцюга
ОМОГ ООМ САС І КРОЗЕТІ 5І ТСАУМааЕЗаУММУМІВОРРОКИаИї ЕУМІИЕІМНЗавтмМимМРБІ К
ЗАМТІЗМОТЗКМОВЕ5І КІ 55 ТААОТАМУМСАВІ РТАММТТАМРОЇГ МУ, ВИті муз (ЗЕО ІО МО: 69)
СОК важкого ланцюга 1Е1
СОВ-НІ: ах (5ЕО І МО: 16)
СОВ-Н2: ЕІМНХОЗТМУМРЗІ К5, де Х є 5 або А (наприклад, ЕІМНЗОЗТМУМРБІ КЗ або
ЕІМНАСЗТМУМРОБЇ КБ) (ЗЕО ІЮ МО: 17)
СОВ-НЗ: І РТАУУМТТАМРЕОЇ (5ЕО ІЮО МО: 18)
Легкий ланцюг антитіла 1Е1 (С1Е) (лямбда)
Легкий ланцюг
ЕБМГТОРРОУБСАРООВМУ ТІЗСТОаЗЗЗМИаДдамМОоУНМУМООГ РИтТАРК а МЗМВРЗамРОВЕ
ЗУБКБИАБАБІ АІТаї ОАДЕСЕАОМУСОЗЕОМОІ ЗАМУРаСИТтої ТМ аОРКААРЗМТІ ЕРРЗОЗЕЕГ О
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМУААБЗОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗС
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕБЕО 10 МО: 3; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен легкого ланцюга
ЕБМ ТОРРОУБСАРООВМУТІЗСТОаЗЗЗМІБАСУОУНУМУМООЇ РЕТАРК ІМАМЗМА!АРЗОаМРОВЕ
ЗУБЗКЗИАБАБІ АІТИаЇ ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУУгааато ТМ (ЗЕО ІО МО: 70)
Легкий ланцюг антитіла 1Е1 (С1Е, 554А) (лямбда)
Легкий ланцюг 60 ЕБМГТОРРОУБСАРООВУТІЗСТОаЗ5ЗЗМаИаДАдаМОУНМУМООЇ РИатТАРК ПУСМАМАРЗИаУРОВЕ
ЗУЗКБСАБАБІ АІТаГ ОАЕРЕАОУУСОБЕОМЗІ ЗАУМеаСсаТтоО ТМ аОРКААРЗМТГ ЕРРЗБЗЕБЕГО
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМУААБЗОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗС
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕБЕО 10 МО: 4; оваріабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен легкого ланцюга
ЕБМІ ТОРРОУБСАРООВМУТІЗСТаЗЗЗМІБЖАСУ ОУН МОЇ РЕТАРК МИ МАМА РОСМРОВЕ
ЗУБЗКЗИАБАБІ АІТИаЇ ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУУгааато ТМ (ЗЕО ІО МО: 71)
Легкий ланцюг антитіла 1Е1 (С1Е, М53О) (лямбда)
Легкий ланцюг
ЕБМГТОРРОУБСАРООВУТІЗСТОаЗ5ЗЗМСИа АдаМОоУНМУМООІ РИТАРК УСОЗМВРЗамУРОВЕ
ЗУЗКБСАБАБІ АІТаГ ОАЕРЕАОУУСОБЕОМЗІ ЗАУМеаСсаТтоО ТМ аОРКААРЗМТГ ЕРРЗБЗЕБЕГО
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМУААБЗОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗС
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕБЕО 10 МО: 5; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен легкого ланцюга
ЕБМІ ТОРРОУБСАРООВМУТІЗСТОЗЗЗМІБАСУОУНУМУМООЇ РЕТАРК ПМС ОЗМАРЗаМУРОВЕ
ЗУБЗКЗИАБАБІ АІТИаЇ ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУУгааато ТМ (ЗЕО ІО МО: 72)
Легкий ланцюг антитіла 1Е1 (О1Е, М5ЗЕ) (лямбда)
Легкий ланцюг
ЕБУМТОРРОУБСАРООВУТІЗСТОаЗЗЗМИаДАдаМОУНМУМООІ РИтТАРК ПУСЕЗМАРЗОаУРОВЕ
ЗУЗКБСАБАБІ АІТаГ ОАЕРЕАОУУСОБЕОМЗІ ЗАУМеаСсаТтоО ТМ аОРКААРЗМТГ ЕРРЗБЗЕБЕГО
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМУААБЗОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗС
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕБЕО 10 МО: 6; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Зо Варіабельний домен легкого ланцюга
ЕБМ ТОРРОУБСАРООВМУТІЗСТОаЗЗЗМІАСУОУНУМУМООЇ РЕТАРК ПМС ЕЗМАРБЗОаУРОВЕ
ЗУБЗКЗИАБАБІ АІТИаЇ ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУУгааато ТМ (ЗЕО ІО МО: 73)
Легкий ланцюг антитіла 1Е1 (С1Е, М530) (лямбда)
Легкий ланцюг
ЕБМГТОРРОУБСАРООВУТІЗСТОаЗ5ЗЗМСИаДдаМОоУНМУМОО РИатТАРК СОМ АРЗИамМРОВЕ
ЗУЗКБСАБАБІ АІТаГ ОАЕРЕАОУУСОБЕОМЗІ ЗАУМеаСсаТтоО ТМ аОРКААРЗМТГ ЕРРЗБЗЕБЕГО
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМУААБЗОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗС
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕБЕО 10 МО: 7; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен легкого ланцюга
ЕБМІ ТОРРОУБСАРООВМУТІЗСТОаЗЗЗМІБАСУОУНУМУМООЇ РЕТАРК ПМС О5МАРБИаМРОВЕ
ЗУБЗКЗИАБАБІ АІТИаЇ ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУУгааато ТМ (ЗЕО ІО МО: 58)
Легкий ланцюг антитіла 1Е1 (лямбда)
Легкий ланцюг
ОБМІ ТОРРБУБСАРООВМУТІЗСТОЗ5З5МСаИаАаМОУНМУМООЇ РатгТАРК Мамо МАРЗахуРове
ЗУБКБИАБАБІ АІТаї ОАДЕСЕАОМУСОЗЕОМОІ ЗАМУРаСИТтої ТМ аОРКААРЗМТІ ЕРРЗОЗЕЕГ О
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМААБОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗСО
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕБЕО 10 МО: 45; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен легкого ланцюга
ОБМІ ТОРРОУБИАРООВМУТІЗСТОЗЗЗМСАСУОУНУМООЇ РЕТАРК ІМаМОМАРЗаМУРОВЕ
ЗУБЗКЗИАБАБІ АІТИаЇ ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУУгааато тм (ЗЕО ІО МО: 77)
СОК легкого ланцюга 1Е1
СОов-І 1: ТаЗ5ЗМІБАСМОМН (ЗЕО ІЮ МО: 19) 60 СОВ-І2: аХІХаМАРО; де Хі є М, ОО, Е або 0, ії Хо» є 5 або А (наприклад, СМЗМЕАР5,
СМАМЕАРБЗ, СОЗМЕАРЗ, СЕЗМЕРБ5 або СОО5БМКРЗБ) (ЗЕО І МО: 20)
СОВ-Г 3: ОБЕОМ5І БАММ (5ЕО ІЮО МО: 21)
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, що включають СОК важкого і легкого ланцюга 1ЕТ, або Мн ї Мі 1Е1, або важкий ланцюг і легкий ланцюг 1Е1 (або їх варіант, наприклад, як указано в даному описі), можна позначати як "ТЕ1".
Важкий ланцюг антитіла 2Аб6 (О1Е) (ІдСс4)
Важкий ланцюг
ЕМОЇ МОБЕИАЕУККРИИЗЗУКУЗСКАБИСТЕЗЗМАІЗММВОАРООСІ ЕММасСПШРІЕТАММАОКЕ
ОСАМТІТАОЕЗТЗТАУМЕГЇ 551" ВА5ЕО ТАУУУСАВУєОЗЗСОМ УКССАЕОМ/СОСТММ ГУ5БЗАВТКаР
ЗМЕРІ АРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55И1І. 51 55УМТУРБ
ЗЗаТКТУТСОММОНКРУЬМТКУОКАМЕЗКУОРРОРРОРАРЕНБІ ИаРБЗМУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУУММОУМ5ОЕОРЕМОЄЕМУ УУрамМЕМНМАКТКРАЕЄОЄМЗТУВУМ МІ ТМ НОБУУЛ МЕОККЕУКСКУЗМ
Каг РУБІЕКТІЗКАКИОРАВЕРОМУУТІ РРЗОЄЕМТКМОМУБІ ТС УКЕЕМРЗБІАМЕМЕЗМИООРЕММУК
ТТРРМ ОБОСЗЕРСУЗВІТМОКЗАУМОБаММЕЗСЗУММНЕАНМНУТОКБІ БІ БІ СК (ЗЕБЕО 10 МО: 8; варіабельний домен підкреслений; СОМ позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен важкого ланцюга
ЕМО МОБСАЕЄЕУККРОБЗУКУЗСКАВИаастТЕЗЗМАІВБУМУУВОАРООІ ЕУМастптРІГИТАММАОКЕ
ОС АМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5ЕОТАУУУСАВУгОоЗЗСМУУКОСАБОМУССОСТМУТУБ (ЗЕО ІО МО: 64)
Важкий ланцюг антитіла 2Аб6 (О1Е, 5102А, М1191І) (да)
Важкий ланцюг
ЕМО! МОБСЕАЕЄЕУККРОЗБЗУКУЗСКАЗОСТЕЗЗМАІЗМУВОАРСОСІЇ ЕУУМаСсПРІЕЄТАММАОКЕ
ОСАУТІТАСЕЗТЗТАМУМЕЇ 551 ВБЕОТАМУУСАВМЕВАЗСОУУУКСОСАЕЮ ММ СсОСТЕУТУББАЗТКаР
ЗМЕРІ АРСЗАЗТЗЕЗТААЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55И1І. 51 55УМТУРБ
З аТКТУТСОММОНКРУЬМТКМОКАМЕЗКМОаРРСОРРОРАРЕГРІ СчОаРБМУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУУММОУМ5ОЕОРЕМОЄЕМУ УУрамМЕМНМАКТКРАЕЄОЄМЗТУВУМ МІ ТМ НОБУУЛ МЕОККЕУКСКУЗМ
Каг РУБІЕКТІЗКАКИОРАВЕРОМУУТІ РРЗОЄЕМТКМОМУБІ ТС УКЕЕМРЗБІАМЕМЕЗМИООРЕММУК
ТТРРМ ОБОСЗЕРСУЗВІТМОКЗАУМОБаММЕЗСЗУММНЕАНМНУТОКБІ БІ БІ СК
Зо (ЗЕБЕО 10 МО: 9; варіабельний домен підкреслений; СОМ позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен важкого ланцюга
ЕМО МОБСАЕЄЕУККРОБЗУКУЗСКАВИаастТЕЗЗМАІВБУМУУВОАРООІ ЕУМастптРІГИТАММАОКЕ
ОС ВАМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5ЕОТАУУМСАВУЕєВАЗОМУКСОССАБО МУ СсОС,СТУТУЗо (ЗЕО ІО МО: 65)
Важкий ланцюг антитіла 2Аб (СО1Е, 01015, М1191І) (4054)
Важкий ланцюг
ЕМОЇ МОБЕИАЕУККРИИЗЗУКУЗСКАБИСТЕЗЗМАІЗММВОАРООСІ ЕММасСПШРІЕТАММАОКЕ
ОСАМТІТАОЕЗТЗТАУМЕЇ 551 В5ЕОТАУУУСАВУЕЗЗЗОУМ УКССАЕСІМССОСТІМТУЗЗАЗТКОаРО
МЕРІ АРСЗА5ОТЗЕЗТААІЇ СІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55ИЦ2І М5І 55УМТУРББ
З'аТКТИТОММОНнНКРУЬМТКМОКАМЕЗКМОаРРОРРОРАРЕРІ СОИРБЗМУНБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО
МУМВУБОЕОРЕМОЕМУУУрамЕМНМАКТКРАЕЄОЕМЗТУВМУМУМІ ТМІ НОБУМІ МОКЕУКСКМУЗМК
СІ РУОБІЕКТІЗКАКИОРАВЕРОМУУТІ РРЗОЄЕМТКМОМ5І ТС УКЕЕМРЗОІАМЕМЕЗМООРЕММУКТТ
РРМІ ОБОрав5ЕРІ ЗА ТМОКЗРАМОБОММЕЗСЗУМНЕАЇІ НМНУТОКОІ 5І БІ Кк (ЗЕБЕО 10 МО: 10; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен важкого ланцюга
ЕМО МОБСАЕЄЕУККРОБЗУКУЗСКАВИаастТЕЗЗМАІВБУМУУВОАРООІ ЕУМастптРІГИТАММАОКЕ
ОС АМТІТАОЕЗТЗТАММЕЇ 551 В5ЕОТАУУУСАВУЕє55ЗСМ УКОаСАРОМУСОСТІ МТУ (ЗЕО ІО МО: 66)
Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів, де залишок 1 5ЕО
ІО МО: 8, 9, 10, 64, 65 або 66 є О замість Е.
СОК важкого ланцюга 2А6
СОВ-НІ: 5МАЇІ5 (5ЕО ІЮ МО: 22)
СОВ-Н2г: СпРІБЄЕТАММАОКРОС (ЗЕО 10 МО: 23)
СОВ-НУ: МЕХІХ»ЗОМУКОСАРОІ; де Хі є О або 5, і Х» є 5 або А (наприклад,
МЕОЗЗСОУУУКОСАНБОІ, МЕрАБСУУУКОСАНОІ або УЕ555СОУУУКОСАНО) (ЗЕО ІЮ МО: 24)
Легкий ланцюг антитіла 2Аб6 (лямбда)
Легкий ланцюг 60 ОБМІТОРББІ БАБРОАБАБІ ТСТІ ВЗСІММОТУВІНУМООКРЕЗРРОМ І нУКкЗОБОКНОСЗИМ
РОВЕЗаЗКОРБАМАСІ ЗИ О5ЕВСЕАВУМСАММЗЗТМУМЕсСИааТтОЇ ТМ ФаОРКААРЗМТІ ЕРРЗБЗЕ
ЕГОАМКАТІ УСІ ІЗОЕМРЕАМТМАМУКАрЗЗРУКАСМЕТТТРОКОЗММКМААБОМІ ЗІ ТРЕСУКЗНА5
У5СОМТНЕОЗТУЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕБЕО 10 МО: 11; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен легкого ланцюга
О5БМІ ТОРББІ БАБРОАБЗАБІ ТСТІ В5аІММОТМВІНУМООКРабЗРРОМІ НУКЗОЗОКНОСЗИаМ
РЗЬВЕЗазкоОРБАМАСІ ІЗ ОЗЕОЕАрУМСАМ/ ЗО ПУУгааа,атОІ тм (ЗЕО ІО МО: 74)
Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів, де залишок 1 5ЕО
ІО МО: 11 або 74 є Е замість 0).
СОК легкого ланцюга 2Аб6
СОВ-І1: ТІ АБСІММОТУВІН (5ЕО ІЮ МО: 25)
СОов-12: УКБОоБОКНОИЗ (ЗЕО ІО МО: 26)
СОВ-Г 3: АМ/У5ОТМУМ (ЗЕО ІЮ МО: 27)
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, що включають СОК важкого і легкого ланцюга 2А6, або Мн і Мі 2Аб6, або важкий ланцюг і легкий ланцюг 2Аб (або їх варіант, наприклад, як указано в даному описі), можна позначати як "2Аб6".
Важкий ланцюг антитіла 357 (С1Е) (404)
Важкий ланцюг
ЕМО! МЕЗССОУМОРСВБІ ВІ ЗСААЗСОЕТЕ55МАМНУУВОАРОКИаї ЕУУМАМІЗ УВОЗМКУМАВЗ
УкавеЕтІзвоМ5КМТІМСОММ5І ВАЕОТАУУУСАНМСИЕУЛОЇ МУЗРЕОЮУУСОСТІ МТГУ5БЗАБТКаРБ
МЕРІГАРСЗА5ЗТЗЕЗТААІ СІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗИАІ ТЗаУНТЕРАМІ О55(12І 51 55УМТУРБЗБ
З'аТКТИТОММОНнНКРУЬМТКМОКАМЕЗКМОаРРОРРОРАРЕРІ СОИРБЗМУНБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТО
ММ УБОЕОРЕМОЕМУ УУрамЕМНМАКТКРАЕЄОЕМЗТУВУМУМІ ТМІ НОБУМІ МОКЕУКСКМУЗМК
СІ РУОБІЕКТІЗКАКИОРАВЕРОМУТІ РРЗОЄЕМТКМОМ5І ТС УКИОЕМРБОІАМЕМЕЗМСООРЕММУКТТ
РРМІ ОБОрав5ЕРІ ЗА ТМОКЗРАМОБОММЕЗСЗУМНЕАЇІ НМНУТОКОІ 5І БІ Кк (ЗЕБЕО 10 МО: 12; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням).
Зо Варіабельний домен важкого ланцюга
ЕМО МЕЗСОСОС УМО РОВІ ВІ БСААЗОЕТЕЗ5УАМНУ УВО РОКИ! ЕМУМАМІЗМОСЗМКУМАО
УКОаВЕТІЗАОМ5КМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАУУМСАВМИаємії МУЗРЕОЮУМУСОСТІ МТУ (ЗЕО ІО МО: 67)
Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів, де залишок 1 5ЕО
ІО МО: 12 або 67 є О замість Е.
СОК важкого ланцюга 307
СОВ-НІ: 5МАМН (5ЕО І МО: 28)
СОов-Н2г: МІХ ЗМКУМАрБУКа (5ЕО І МО: 29)
СОВ-НЗ: МАЕУЛОЇ М/ЗРЕОМ (5ЕО ІО МО: 30)
Легкий ланцюг антитіла 307 (каппа)
Легкий ланцюг
ВІОМТО5РОБУЗАЗУСОВМУТІТСВАБОСІЗБЗУ АМУООКРОКАРКЕ ІМААЗБІ О5аУРОКЕЗО5 сзатоеТІ ТІЗБГОРЕОРГАТУУСООМУМЗУРРТЕССИасТКМУЕІКАІМААРБЗУРІРРРЗОБОЇ КБИатАУМО
ГЕММЕМРАЕАКМОМУКМОМАЇ О5БаМЗОЕЗУМТЕООЗКОБЗТУБІ 55Т7І ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕУТНОС
І 55РУТКЗЕМАИаЕС (ЗЕБЕО 10 МО: 13; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен легкого ланцюга
РПІОМТО5РОБУБЗАВУМИОВМТІТСВАБОСІЗБЗУМ АМУУООКРОКАРКЕ ІМААББОІ ОБИУРЗКЕБОа5 азатоеТТІЗЗІ ОРЕОБАТУУСООУМЗУРРТРСИаИткМв Кк (ЗЕО ІО МО: 75)
СОК легкого ланцюга 367
СОВ-І1: ВАБОСІЗБЗУМІ А (5ЕО 10 МО: 31)
СОВ-12: ААББІ О5 (ЗЕО ІО МО: 32)
СОВ-І 3: ООУМ5УРРТ (5ЕО ІЮ МО: 33)
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, що включають СОК важкого і легкого ланцюга 307, або Мн і Мі 307, або важкий ланцюг і легкий ланцюг 3057 (або їх варіант, наприклад, як указано в даному описі), можна позначати як "357".
Важкий ланцюг антитіла 2С1 (О1Е) (404) бо Важкий ланцюг
ЕМО! МОБСАЕУККРОСОАБУКУЗСКУЗИТхТІ ТЕ ЗМНУУВОАРОКаї ЕУУМОаСЕОРЕОСЕТІМАОК
ЕОСВАМТМТЕОТ5ТОТАУМЕЇ 55-А5ЕОТАУУУСАВАИРІ М ТЕСУМІРОМУ/ЕОРМСТОСТІ МТУЗА
ЗІКаРЗМЕРІ АРСЗА5ЗТЗЕЗТААІ СІ УКОМЕРЕРУТУБМУМЗИаАІ ТЗаМУНТЕРАМІ О55101. 5І 55
МТУРБЗБЗІ акти ОММОнкРУОМТКУМОКАМЕЗКУСРРОРРОРАРЕРІ СОИРБЗМУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТ
РЕМТСУУМОУМ5ОЕОРЕМОЕЄММ УМрамМЕМНМАКТКРАЕЕОЕМЗТУАМУУБМІ ТМ НОСУМІ МЕОКЕУКС
КУЗМКаї РОБІЕКТІЗКАКИОРАЕРОМУТІ РРЗЗОБЕМТКМОМУБІ ТОЇ УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМООРЕ
ММУКТТРРМ ОБравзеЕвРі УЗАСТМОКЗАУМОБаММЕЗСЗУММНЕАНМНУТОКБІ БІ Б ЯК (ЗЕБЕО 10 МО: 14; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен важкого ланцюга
ЕМО МОБАЕЄЕУККРОАБУКУЗСКУЗОИчхТтІ ТЕ БМНУУВОАРОКаї ЕУ/МасСЕОРЕОСЕТІМАОК
ЕОСАМТМТЕОТЗТОТАУМЕЇ 551 АЗЕОТАУУУСАВАСРІ МТІРЯУМИІРОМУ ГОРУ СОЮОСЄТІ МТУ (ЗЕО ІО МО: 68)
Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів, де залишок 1 5ЕО
ІО МО: 14 або 68 є О замість Е.
СОК важкого ланцюга 2С1
СОВ-НІ: ЕІ ЗМН (5ЕО ІЮ МО: 34)
СОовВ-Н2г: агОРЕОСЕТІМАОКРОИ (5ЕО ІО МО: 35)
СОВ-НЗ: АОРІ МТІРЕУМПРОМУУБОР (ЗЕО І МО: 36)
Легкий ланцюг антитіла 2С1 (С1Е) (лямбда)
Легкий ланцюг
ЕБМГТОРРОУБСАРООВУТІЗСТОаЗ5ЗЗМСИаДдаМОоУНМУМООГ РИатТАРК а МЗМВРЗамРОВЕ зазкБатзАБІАІТаг одЕОСЕАОрУУСОЗУОЗБІ ЗаЗСУМРасато Пп СОРКААРБМТІ ЕРРЗЗЕБЇ.
ОАМКАТІ МСГ ІБОЕУРЕАМТМАМКАОЗБРУКАСМЕТТТРУКОЗММКУААБЗМІ 5І ТРЕСМУКЗНАБЗУ5
СОУМТНЕС5ЗТУЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕБЕО 10 МО: 15; варіабельний домен підкреслений; СОК позначені подвійним підкресленням)
Варіабельний домен легкого ланцюга
ЕБМ ТОРРОУБСАРООВМУТІЗСТОаЗЗЗМІБАСУОУНУМУМООЇ РЕТАРК ІМАМЗМА!АРЗОаМРОВЕ
Зо ЗазкКБат5АБІ АТ ОАЕОЕАрУМСОЗУр5Б5І БаЗаУУгаваТто (ЗЕО ІО МО: 76)
Даний винахід стосується антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів, де залишок 1 5ЕО
ІО МО: 15 або 76 є О замість Е.
СОК легкого ланцюга 2С1
СОов-І 1: ТаЗ5ЗМІБАСМОМН (ЗЕО ІЮ МО: 37)
СОов-12: аМмемаАРБ (ЗЕО ІО МО: 38)
СОов-І3: 550551 5авБамм (5ЕО ІЮ МО: 39)
Антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, що включають СОК важкого і легкого ланцюга 2С1, або Мн і М. 2С1, або важкий ланцюг і легкий ланцюг 2С1 (або їх варіант, наприклад, як указано в даному описі), можна позначати як "2С1".
У різних варіантах здійснення антитіла або його антигензв'язувального фрагмента відсутній
С-кінцевий лізин важкого ланцюга імуноглобуліну.
Таким чином, в деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де легкий ланцюг імуноглобуліну містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 3, 4, 5, 6, 7, 11, 13, 15 або 45; і/або важкий ланцюг імуноглобуліну містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 1, 2, 8, 9, 10, 12, 14, 44, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85 або 86.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 1 або 79; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІЮО МО: 3.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 4.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, 60 наведену в ЗЕО ІЮ МО: 5.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕОІЮО МО: 6.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІЮ МО: 7.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 3.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 8 або 82; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 11.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 9 або 83; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 11.
У інших варіантах здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО І МО: 10 або 84; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІЮО МО: 11.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 12 або 85; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІЮО МО: 13.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить:
Зо важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 14 або 86; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІЮО МО: 15.
У деяких інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де варіабельний домен легкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 70, 71, 72, 73, 58, 74, 75, 76 або 77, і/або варіабельний домен важкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 63, 57, 64, 65, 66, 67, 68 або 69.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 63, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 70.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 71.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність,
БО наведену в ЗЕО ІЮ МО: 72.
У інших варіантах здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 73.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 58.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: 60 варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 70.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 64, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 74.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 65, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 74.
У інших варіантах здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 66, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 74.
У інших варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 67, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 75.
У інших варіантах здійснення, антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 68, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 76.
У додатковому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з ІІ Т4, містить варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну, що містить
СОВ-І1, СОВ-І2 ї СОВК-І3 1Е1 (наприклад, 5ЕО ІЮО МО: 19-21), і варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну, що містить СОБ-НІ, СОВ-Н2 ї СОК-НЗ 1Е1 (наприклад, 5ЕО
ІО МО: 16-18).
У додатковому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з ІІ Т4, містить варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну, що містить
Зо СОВ-І1, СОВ-І2 ї СОВК-І3 2Аб6 (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 25-27), і варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну, що містить СОБ-НІ, СОВ-Н2 ї СОК-НЗ 2Аб6 (наприклад, 5ЕО
ІО МО: 22 24).
У додатковому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з ІІ Т4, містить варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну, що містить
СОВ-І1, СОВ-І2 і СОК-І3 307 (наприклад, ЗЕО ІО МО: 31 33), і варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну домен, що містить СОВ-НІ, СОВ-Н2 ії СОБК-НЗ 307 (наприклад,
ЗЕО І МО: 28 30).
У додатковому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з ІІ Т4, містить варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну, що містить
СОВ-І1, СОВ-І2 ії СОК-І3 2С1 (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 37 39), і варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну, що містить СОК-НІ, СОВ-Н2 і СОК-НЗ 2С1 (наприклад, 5ЕО
ІО МО: 34 36).
У одному з варіантів здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СМЗМКРБЗ(ЗЕО І МО: 49) ії СОК-1 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або антигензв'язувальний фрагмент містить: домен
Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ 5 (ЗЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗаЗТМУМРБІ КБ (ЗЕО І МО: 47) ії СОБ-НУЗУ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕБО ІЮ МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19) СОВ-І2: СОБ5МКРБ(ЗЕБЕО ІЮ МО: 50) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: тавз5еМмІшАаУОМНн (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СЕБЗМАРБЗ(ЗЕБЕО ІО МО: 51) ії СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАМУМ (5ЕО ІЮО МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО 60 ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1:
таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОвВ-І2: СО5МКРБЗ(ЗЕБЕО І МО: 52) і СОК-1 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У одному з варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІЮ МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (ЗЕ
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СМАМКРБЗ(ЗЕО І МО: 53) ії СОК-Ї 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОАМАРБ5 (ЗЕБО ІБ МО: 54) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаУОМНн (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СЕБЕАМАКРЗ (5БО ІО МО: 55) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗавтМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОАМКРЗ (ЗЕБО І МО: 56) і СОВ-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У одному з варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) ії СОК-НЗ: І РТАУМУМТТАМРЕОГ. (5ЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СМЗМКРБЗ(ЗЕО І МО: 49) ії СОК-1 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІЮ МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
Зо ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19) СОВ-І2: СОБ5МКРБ(ЗЕБЕО ІЮ МО: 50) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить"СОвВ-НІ: УМ (ЗЕО І МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ К5 (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: тавз5ОМІшАаМОМН (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СЕБЗМАРБЗ(ЗЕБЕО ІО МО: 51) ії СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ К5 (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОвВ-І2: СО5МКРБЗ(ЗЕБЕО І МО: 52) і СОК-1 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У одному з варіантів здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: ЯСМАМАРБ(БЗЕО 10 МО: 53) ії СОКА- 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) ії СОК-НЗ: І РТАУМУМТТАМРЕОГ. (5ЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОАМАРБ5 (ЗЕБО ІБ МО: 54) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО
ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: таввеМмІшАаУОМНн (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СЕБЕАМАКРЗ (5БО ІО МО: 55) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
У іншому варіанті здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить: домен Мн, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРБІ КЗ (5ЕО 60 ІО МО: 48) їі СОК-НЗ: І РТЕУУМТТЕМРОГ. (ЗЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1:
таввеМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: СОАМКРЗ (ЗЕБО ОО МО: 56) і СОК-І 3:
ОБЕОМ5І ЗАММ (5ЕО І МО: 21).
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІЇТ4 і що містить домен Мі антитіла 1Е1 (наприклад, 5ЕО 1ІЮ МО: 70, 71, 72, 73, 58 або 77) і/або домен Мн антитіла 1Е1 (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 63, 57 або 69).
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІЇТ4 і що містить домен Мі антитіла 2Аб (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 74) і/або домен Мн антитіла 2Аб6 (наприклад, ЗЕО ІЮО МО: 64, 65 або 66).
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІІ Т4 і що містить домен Мі антитіла 3057 (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 75) і/або домен Мн антитіла 37 (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 67).
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІІ Т4 і що містить домен Мі антитіла 2С1 (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 76) і/або домен Мн антитіла 2С1 (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 68).
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІІ Т4 і що містить легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 1Е1 (наприклад, ЗЕО
ІО МО: 3, 4, 5, 6, 7 або 45) іл або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 1Е1 (наприклад, ЗЕО ІЮ
МО: 1, 2, 44, 79, 80 або 81).
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІЇ.Т4 і що містить легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 2А6 (наприклад, ЗЕО
ІО МО: 11) і/або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 2А6 (наприклад, 5ЕО ІЮО МО: 8, 9, 10, 82, 83 або 84).
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІЇ Т4 і що містить легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 357 (наприклад, ЗЕО
ІО МО: 13) і/або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 357 (наприклад, 5ЕО ІО МО: 12 або 85).
Даний винахід додатково стосується антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що зв'язується з ІІ Т4 і що містить легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 2С1 (наприклад, ЗЕО
ІО МО: 15) і/або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 2С1 (наприклад, 5ЕО ІЮО МО: 14 або 86).
Даний винахід додатково стосується антитіла, що складається з двох важких ланцюгів і
Зо двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить Мі або легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 1Е1, 2Аб6, 307 або 2С1, і кожний важкий ланцюг містить Мн або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 1Е1, 2А6, 307 або 2С1.
У одному з варіантів здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 57.
У іншому варіанті здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 57, де легкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 90.
У ще одному варіанті здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 57, де важкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 89.
У іншому варіанті здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 57, де легкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО І
МО: 90, і важкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 89.
У одному з варіантів здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 7, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 2.
У іншому варіанті здійснення антитіло складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в
ЗЕО ІЮО МО: 7, і кожний важкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в
ЗЕО ІЮ МО: 2. бо У варіанті здійснення винаходу антитіло або антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом містить Мі (з сигнальною послідовністю або без неї), наприклад, Мі в будь-якій з ФЗЕО
ІО МО: 58 або 70 77, що містить до 1, 2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 або більше консервативних або неконсервативних амінокислотних замін; і/або Мн (з сигнальною послідовністю або без неї), наприклад, Мн в будь-якій з ФЕО ІО МО: 57 або 63 69, що містить до 1,2, 3,4,5,6, 7, 8, 9, 10 або більше консервативних або неконсервативних амінокислотних замін, але що все одно зв'язується з ІІ Т4.
Даний винахід також стосується поліпептидів, що містять амінокислотні послідовності, представлені в даному описі, наприклад ЗЕО ІЮО МО: 1-39, 44, 45, 47-58, 63-77 або 79-86, а також поліпептиди, що містять такі амінокислотні послідовності з до 1,2, 3,4,5,6, 7, 8, 9, 10, 12, 15, 20 або більше консервативних або неконсервативних амінокислотних замін.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де легкий ланцюг імуноглобуліну має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в 5ЕО ІЮ МО: 3,4, 5,6, 7, 11, 13, 15 або 45, і/або важкий ланцюг імуноглобуліну має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 1,2, 8, 9, 10, 12, 14, 44, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85 або 86.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент містить легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де легкий ланцюг імуноглобуліну містить варіабельний домен легкого ланцюга, що має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в 5ХЕО ІЮ МО: 70, 71, 72, 73, 58, 74, 75, 76 або 77, і/або важкий ланцюг імуноглобуліну містить варіабельний домен важкого ланцюга, що має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮО МО: 63, 57, 64, 65, 66, 67, 68 або 69.
У варіанті здійснення винаходу важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла проти І/Т4 або антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом функціонально зв'язаний з сигнальною послідовністю, наприклад, що містить амінокислотну послідовність МЕМ/УЗУМУМЕГ ЕР МТ ТОУНЬЗ (ЗЕО 10 МО: 41), і/або легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла проти //Т4 або
Зо антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом функціонально зв'язаний з сигнальною послідовністю, наприклад, що містить амінокислотну послідовність МЗЕМРТОМІ СГ УМ ТрАКС (ЗЕО ІО МО: 42).
У варіанті здійснення винаходу М-кінцевий глутамін (С) ланцюга імуноглобуліну, наведеного в даному описі (наприклад, важкого і/або легкого), замінюють піроглутаміновою кислотою.
У одному з варіантів здійснення М-кінцевий С важкого ланцюга імуноглобуліну замінюють піроглутаміновою кислотою. У іншому варіанті здійснення М-кінцевий С) легкого ланцюга імуноглобуліну замінюють піроглутаміновою кислотою. У ще одному варіанті здійснення М- кінцевий 0 важкого ланцюга імуноглобуліну і М-кінцевий С важкого ланцюга імуноглобуліну замінюють піроглутаміновою кислотою.
Даний винахід також стосується антитіл або антигензв'язувальних фрагментів, що зв'язуються з тим же епітопом І-Т4 (наприклад, І-Т4 людини), що і будь-яке антитіло проти ІТ4 або його антигензв'язувальний фрагмент, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 або 2С1). У одному з варіантів здійснення епітоп являє собою І УКЕКК5БАБУМ (ЗЕО ІЮО МО: 59). У іншому варіанті здійснення епітоп являє собою ТКІЕРЕЇ (5ЕО ІЮ МО: 60). У ще одному варіанті здійснення епітоп являє собою МСОР (5ЕО ІЮ МО: 61). У іншому варіанті здійснення епітоп являє собою НТОКУОСО (ЗЕО ІО МО: 62). У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний Фрагмент зв'язується з тим же епітопом І Т4 людини, що і антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що містять амінокислотні послідовності важкого ланцюга і легкого ланцюга, наведені в З»ЕОІО МО: 113;214;5215;216;217;213;8111;9111; 10111;12і113;14ї15;7913;8014;8015: 8016 801і7;801і3;82і11;83і11;84111;851і13; і 86 15; відповідно. У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент зв'язується з тим же оепітопом ІТ4 людини, що і антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент, що містять амінокислотні послідовності варіабельного домену важкого ланцюга і варіабельного домену легкого ланцюга, наведені в 5ЕО ІЮ МО: 63 і 70; 57 і 71;57172;57173;57158:57170: 64174; 651 74: 661 74:67 1 75; 68 і 76; відповідно.
Даний винахід включає антитіла і антигензв'язувальні фрагменти, що перехресно блокують зв'язування будь-якого антитіла проти І/Т4 або його антигензв'язувального фрагмента, представлених в даному описі (наприклад, 1Е1, 2А6, 3057 або 2С1), з ІЇТ4 (наприклад, ІІ Т4 людини), або що конкурують з будь-яким антитілом проти І-Т4 або його антигензв'язувальним 60 фрагментом, представленим в даному описі (наприклад, 1ЕЇ1, 2Аб6, 357 або 2С1), з ІІ Т4
(наприклад, І-Т4 людини). Перехресно блокуючі антитіла і їх антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі, можна ідентифікувати з урахуванням їх здатності блокувати зв'язування будь-якого з антитіл або фрагментів, конкретно наведених в даному описі, з ІІТ4 в аналізах зв'язування (наприклад, за допомогою інтерферометрії біошару (ВІ; наприклад, аналізі зв'язування ЕОКТЕВІО ОСТЕТ; РАЇЇ РопеВіо Согр; Мепіо Рак, СА), поверхневого плазмонного резонансу (5РЕК), ВІАСоге, ЕГІЗА, проточної цитометрії). Наприклад, у варіанті здійснення винаходу при використанні ВІЇ кінчик оптоволоконного зонда покривають лігандом (наприклад, І-Т4) і використовують як біосенсор, де зв'язування антитіла проти І/Т4 або антигензв'язувального фрагмента з І/Т4 змінює картину інтерференції білого світла, що відбивається від шару зонда, зв'язаного з ІЇТ4, і внутрішнього референсного шару. Зсув свідчить про зв'язування ІІ Т4/антитіла проти І Т4. У варіанті здійснення винаходу покритий І Т4 кінчик занурюють у розчин аналіту, що містить антитіло або антигензв'язувальний фрагмент, наприклад, в ямки 96- або 384-ямкового планшета. У варіанті здійснення винаходу планшет струшують під час зчитування для створення орбітального потоку. Для зчитування при аналізі біле світло направляють по довжині волокна. Як указано вище, інтерференція світла, що відбивається від референсного шару і іммобілізованих поверхонь, що містять І-Т4 з кінчика, створює характерну картину світла, що повертається вгору по волокну. Коли молекули зв'язуються з іммобілізованою сенсорною поверхнею, ця картина змінюється пропорційно до ступеня зв'язування. Наприклад, можна використовувати аналізи, в яких білок ІІ.Т4 (наприклад,
І-Т4 людини) іммобілізують на зонді ВІ | або планшеті, референсне антитіло проти ІЇТ4 або фрагмент зв'язується з ІЇТ4 (наприклад, в насичувальній концентрації), і додають антитіло, що тестується, проти І-Т4 або фрагмент. Потім визначають здатність антитіла, що тестується, конкурувати з референсним антитілом за зв'язування з І/Т4. У форматі ВІ! інтерференцію комплексу ІС-Т4 піддають моніторингу для визначення того, чи конкурує антитіло ефективно з референсним антитілом, наприклад, моніторингу піддають зсув довжини хвилі світла в нанометрах з плином часу, де зсув свідчить про додаткове зв'язування антитіла, що тестується, і відсутність перехресного блокування. У варіанті здійснення винаходу у форматі ВІЇ перехресне блокування в якісному відношенні вважають таким, що відбувається між антитілами, якщо не спостерігають додаткового зв'язування антитіла, що тестується. У варіанті
Зо здійснення винаходу як контроль підтверджують перехресне блокування референсного антитіла самим собою; де вважають, що аналіз проведений правильно, якщо референсне антитіло може перехресно блокувати своє власне зв'язування з ІЇТ4. Здатність антитіла, що тестується, інгібувати зв'язування антитіла проти І-Т4 або фрагмента 1Е1, 2Аб6, 307 або 2С1 з
І-Т4 (наприклад, І-Т4 людини) свідчить про те, що антитіло, що тестується, може перехресно блокувати зв'язування антитіла або фрагмента з ІІ Т4 (наприклад, ІЇТ4 людини) і, таким чином, в деяких випадках може зв'язуватися з тим же епітопом ІТ4 (наприклад, І/Т4 людини), що і 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1. Як указано вище, антитіла і фрагменти, що зв'язуються з тим же епітопом, що і будь-яке з антитіл проти І-Т4 або фрагментів за даним винаходом, також є частиною даного винаходу. У варіанті здійснення винаходу ВГ! здійснюють в сендвіч-форматі, де референсне антитіло проти І/Т4 або антигензв'язувальний фрагмент іммобілізують на зонді, а потім воно зв'язується з І Т4. Потім антитіло, що тестується, проти І/Т4 або антигензв'язувальний фрагмент тестують на здатність зв'язуватися з референсним антитілом або фрагментом.
У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент конкурує за зв'язування з ІЇ/Т4 людини з антитілом або фрагментом, що містить амінокислотні послідовності важкого ланцюга і легкого ланцюга, наведені в ЗЕОФІО МО: 113;214;215;216;2 і7;2і3;8111591і11;10111;12і13;14і15:7913: 80148015: 80168017; 8013;82111; 83 11; 84 ї 11; 85 і 13; і 86 ї 15; відповідно. У деяких варіантах здійснення антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент конкурує за зв'язування з І/Т4 людини з антитілом або фрагментом, що містить амінокислотні послідовності варіабельного домену важкого ланцюга і варіабельного домену легкого ланцюга, наведені в ЗХЕОІЮО МО: 63170; 57171557 172; 57 і 73; 57158557170; 64174651 7466174: 671 75; 68 і 76; відповідно.
Даний винахід стосується антитіл проти І-Т4 і їх антигензв'язувальних фрагментів, що містять М-зв'язані глікани, які, як правило, додаються до імуноглобулінів, продукованих в клітинах яєчника китайського хом'яка (М-зв'язані глікани СНО) або сконструйованих дріжджових клітинах (М-зв'язані глікани сконструйованих дріжджів), таких як, наприклад, Рісніа равіогів.
Наприклад, у варіанті здійснення винаходу антитіла проти І/Т4 і їх антигензв'язувальні фрагменти містять один або більше з "М-зв'язаних гліканів сконструйованих дріжджів" або "М- зв'язаних гліканів СНО", наведених на фігурах 16 (наприклад, 0, і/або 0 ЕК, і/або с1, і/або 1 60 Е, або (2 Р, і/або Мап5). У варіанті здійснення винаходу антитіла проти І/Т4 і їх антигензв'язувальні фрагменти містять М-зв'язані глікани сконструйованих дріжджів, тобто 0, мМабо (1, і/або с2, які, необов'язково, додатково включають Мап5. У варіанті здійснення винаходу антитіла проти І Т4 і їх антигензв'язувальні фрагменти містять М-зв'язані глікани
СНО, тобто 0 Е, 1 Є і с2 Е, які, необов'язково, додатково включають С0, і/або С1, і/або 2, і/або Мап5. У варіанті здійснення винаходу приблизно від 80 95 до приблизно 95 95 (наприклад, приблизно 80-90 95, приблизно 85 95, приблизно 90 95 або приблизно 95 95) всіх М-зв'язаних гліканів на антитілах проти І ТА і їх антигензв'язувальних фрагментах є М-зв'язаними гліканами сконструйованих дріжджів або М-зв'язаними гліканами СНО. Див. Мей еї аїЇ. Меаві. 28(3): 237- 252 (2011); Натійоп еї аЇ. бсіепсе. 313(5792): 1441-1443 (2006); Натійоп єї аІ. Сит Оріп
Віотесппої. 18(5): 387-392 (2007). Наприклад, у варіанті здійснення винаходу сконструйована дріжджова клітина являє собою СР1І5.0, або усі 8316, або штами, наведені в патенті США
Мо 7795002 або 2пПпа єї аІ. МеїШйоа» Мої Віої. 988:31-43 (2013). Див. також публікацію міжнародної патентної заявки Мо М/О2013/066765.
Полінуклеотіди
Даний винахід включає полінуклеотиди (наприклад, ДНК або РНК), що кодують ланцюги імуноглобулінів з антитіл проти ІІ Т4 і їх антигензв'язувальних фрагментів, представлених в даному описі. Наприклад, даний винахід стосується нуклеїнових кислот, що кодують важкі і/або легкі ланцюги імуноглобуліну з антитіл 1Е1, 2А6, 307 і 2С1 (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 1-15, 44 і 45 або їх варіабельний домен), як представлено в даному описі, а також нуклеїнові кислоти, гіоридизующиеся з ними.
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга антитіла, що містить СОБ-І1, СОВ-12 і СОК-І3 1Е1 (наприклад, що містить амінокислоти, наведені в 5ЕО ІЮ МО: 19-21), і/або варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга антитіла, що містить СОК-НІ, СОВ-Н2 ї СОБК-НЗ 1Е1 (наприклад, що містить амінокислоти, наведені в 5ЗЕО ІО МО: 16-18).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга антитіла, що містить СОБ-І1, СОВ-12 і СОК-І3 2Аб (наприклад, що містить амінокислоти, наведені в 5ЕО ІЮО МО: 25-27), і/або варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга антитіла, що містить СОВК-НІ, СОВ-Н2 ї СОБК-НЗ 2Аб (наприклад, що містить амінокислоти,
Зо наведені в 5ЕО ІЮО МО: 22-24).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга антитіла, що містить СОК-І1, СОВ-12 і СОК-І3 3067 (наприклад, що містить амінокислоти, наведені в 5ЕО ІЮ МО: 31-33), і/або варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга антитіла, що містить СОК-НІ, СОВ-Н2 і СОК-НЗ 307 (наприклад, що містить амінокислоти, наведені в 5ЗЕО ІЮ МО: 28-30).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують варіабельний домен (Мі) легкого ланцюга антитіла, що містить СОК-І1, СОВ-І2 і СОК-І3 2С1 (наприклад, що містить амінокислоти, наведені в 5БЕО ІЮ МО: 37-39), і/або варіабельний домен (Мн) важкого ланцюга антитіла, що містить СОВК-НІ, СОВ-Н2 ї СОВК-НЗ 2С1 (наприклад, що містить амінокислоти, наведені в 5ЗЕО ІЮ МО: 34-36).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують домен Мі антитіла 1Е1 (наприклад,
ЗЕО ІО МО: 70, 71, 72, 73, 58 або 77) і/або домен Мн антитіла 1Е1 (наприклад, ЗЕО ІЮО МО: 63, 57 або 69).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують домен Мі антитіла 2Аб (наприклад,
ЗЕО ІЮ МО: 74) і/або домен Мн антитіла 2Аб6 (наприклад, ЗЕО ІЮО МО: 64, 65 або 66).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують домен Мі антитіла 307 (наприклад,
ЗЕО ІЮ МО: 75) і/або домен Мн антитіла 357 (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 67).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують домен Мі антитіла 2С1 (наприклад,
ЗЕО І МО: 76) і/або домен Мн антитіла 2С1 (наприклад, 5ЕО ІЮО МО: 68).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 1Е1 (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 3, 4, 5, 6, 7 або 45) іл або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 1Е1 (наприклад, ЗЕО ІО МО: 1, 2 або 44).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 2Аб6 (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 11) і/або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 2А6 (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 8, 9 або 10).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 3057 (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 13) і/або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 357 (наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 12).
Даний винахід стосується полінуклеотидів, що кодують легкий ланцюг імуноглобуліну 60 антитіла 2С1 (наприклад, ЗЕО ІЮ МО: 15) і/або важкий ланцюг імуноглобуліну антитіла 2С1
(наприклад, 5ЕО ІЮ МО: 14).
У конкретному варіанті здійснення полінуклеотид містить нуклеотидну послідовність, наведену в 5ЕО ІО МО: 87. У іншому конкретному варіанті здійснення полінуклеотид містить нуклеотидну послідовність наведену в 5ЕО ІЮ МО: 88. У ще одному варіанті здійснення полінуклеотид містить нуклеотидну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 87, і нуклеотидну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 88.
Даний винахід також стосується експресуючих векторів, що містять виділені нуклеїнові кислоти за винаходом, де нуклеїнова кислота функціонально зв'язана з однією або більше контрольними послідовностями, наприклад, розпізнаваними клітиною-хазяїном, якщо клітина- хазяїн трансфікована з використанням вектора. Даний винахід також стосується клітин- хазяїнів, що містять експресуючий вектор за даним винаходом. У деяких варіантах здійснення клітини-хазяїни є клітинами СНО.
Способи отримання антитіл і їх антигензв'язувальних фрагментів
Антитіла проти І/Т4 і антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1), можна отримувати рекомбінантно. У цьому варіанті здійснення нуклеїнові кислоти, що кодують один або більше з імуноглобулінових ланцюгів антитіл і антигензв'язувальних фрагментів за винаходом (наприклад, будь-яку з ЗЕО ІО МО: 1- 15, 44, 45 або 79-86 або що містять Мн або Мі 1Е1, 2А6, 307 або 2С1, наведені в будь-якій з
ЗЕО І МО: 57, 58, 63-77), можна вбудовувати у вектор і/або хромосому клітини-хазяїна і експресувати в рекомбінантній клітині-хазяїні. Існує декілька відомих в цій галузі способів, за допомогою яких отримують рекомбінантні антитіла.
Антитіла (наприклад, 1ЕЇ1, 2Аб, 3057 або 2С1) можна виділяти з середовища для культивування з використанням стандартних способів очищення білка. Крім того, експресію імуноглобулінових ланцюгів за винаходом з виробничих ліній клітин можна підвищувати з використанням низки відомих способів. Наприклад, система експресії гена глутамінсинтетази (система 55) являє собою поширений підхід підвищення експресії в деяких умовах. Даний винахід стосується векторів, що містять один або більше полінуклеотидів, що кодують один або більше з вказаних імуноглобулінових ланцюгів і ген глутамінсинтетаза (25). У варіанті здійснення винаходу вектор знаходиться у клітині-хазяїні, в якій відсутня функціональна
Зо глутамінсинтетаза. У варіанті здійснення винаходу клітина-хазяїн знаходиться в середовищі для культивування, в якому, по суті, відсутній глутамін. Способи отримання одного або більше з таких імуноглобулінових ланцюгів, або антитіла проти І-Т4, або його антигензв'язувального фрагмента, що включають культивування такої клітини-хазяїна в середовищі для культивування, в якому, по суті, відсутній глутамін, входять в обсяг даного винаходу, як і такі антитіла і фрагменти, що отримуються таким способом.
В основному, глікопротеїни, продуковані в конкретній лінії клітин або трансгенній тварині, будуть мати профіль глікозилування, характерний для глікопротеїнів, продукованих в лінії клітин або трансгенній тварині. Таким чином, конкретний профіль глікозилування імуноглобулінового ланцюга, або антитіла, або антигензв'язувального фрагмента, що містить імуноглобуліновий ланцюг, буде залежати від конкретної лінії клітин або трансгенної тварини, що використовується для отримання антитіла. Антитіла і антигензв'язувальні фрагменти з профілем глікозилування, що включає тільки нефукозиловані М-глікани, можуть бути переважними, так як показано, що ці антитіла і антигензв'язувальні фрагменти, як правило, демонструють більш високу ефективність, ніж відповідні фукозиловані аналоги іп міїго і іп мімо (див. наприклад, ЗПпіпКкамжша ей а)». 9. Віої. Спет. 278: 3466-3473 (2003); патенти
США МоМо 6946292 і 7214775). Ці антитіла проти І/Т4 і антигензв'язувальні фрагменти (наприклад, 1Е1, 2Аб, 3057 або 2С1) з нефукозилованими М-гліканами є частиною даного винаходу.
Даний винахід додатково включає фрагменти антитіл з антитіл проти І-Т4, представлених в
БО даному описі (наприклад, 1ЕЇ1, 2Аб, 357 або 2С1). Фрагменти антитіл включають К(аб)»- фрагменти, які можна отримувати за допомогою ферментативного розщеплення Ід, наприклад, пепсином. Рар-фрагменти можна отримувати за допомогою, наприклад, відновлення Е(ар)2 дитіотреїтолом або меркаптоетиламіном. Раб-фрагмент являє собою ланцюг Мі-СЇ, з'єднаний з ланцюгом Мн-СНІ за допомогою дисульфідного містка. Е(ар)г фрагмент являє собою два Раб-фрагменти, які, в свою чергу, з'єднані двома дисульфідними містками. Гар-частини молекул ЕК(аб)2г включають частини Ес-ділянок, між якими знаходяться дисульфідні містки. Ем-фрагмент являє собою ділянку Мі або Мн.
Даний винахід стосується антитіл проти І/Т4 і їх антигензв'язувальних фрагментів (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 3057 або 2С1), що класифікуються як ІдА, дО, ЧЕ, дос і ДМ. У одному з бо варіантів здійснення антитіло проти І-Т4 або антигензв'язувальний фрагмент містить Мн, як указано в даному описі, і константну ділянку важкого ланцюга, наприклад, константну ділянку людини, таку як константну ділянку ут, у2, уз або у4 важкого ланцюга людини або її варіант. У варіанті здійснення винаходу антитіло або антигензв'язувальний фрагмент містить Мн, як указано в даному описі, і константну ділянку легкого ланцюга, наприклад, константну ділянку легкого ланцюга людини, таку як ділянка лямбда або каппа легкого ланцюга людини або її варіант. Як необмежувальний приклад, константна ділянка важкого ланцюга людини може являти собою у! або у4, і константна ділянка легсого ланцюга людини може являти собою каппа ділянку. Як необмежувальний приклад, константна ділянка важкого ланцюга людини може являти собою уї або у4, і константна ділянка легкого ланцюга людини може являти собою лямбда ділянку. У варіанті здійснення винаходу Ес-ділянка антитіла являє собою у4 з мутацією
Зег228Рго (Зспициптанп, У еї аї., Мої. Іттипої. 38: 1-8, 2001).
У деяких варіантах здійснення винаходу різні константні домени можна з'єднувати з ділянками Мі і Мн, отриманими з СОР, представлених в даному описі. Наприклад, якщо конкретне передбачуване застосування антитіла або антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом стосується змінених ефекторних функцій, можна використовувати константний домен важкого ланцюга, інший, ніж у (901 людини, або гібридний Ідс1/Лдо4. Такі антитіла проти ІЇТ4 і їх антигензв'язувальні фрагменти (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 або 2С1) і гібриди, що містять константний домени Ідсі1 і Їдо4, є частиною даного винаходу.
У одному з варіантів здійснення константний домен /дс4 відрізняється від нативного константного домену Ідс4 людини (5м/і55-Ргої, реєстраційний номер РО1861.1) в положенні, що відповідає положенню 228 в системі БО і положенню 241 в системі Кабаї, де нативний бег108 замінюють Рго для запобігання потенційному утворенню міжланцюжкового дисульфідного зв'язку між Суз106 і Суб5109 (що відповідають положенням Су5 226 і Суб 229 в системі БО і положенням Суз 239 і Су 242 в системі Кара), що може перешкодити правильному утворенню внутрішньоланцюжкових дисульфідних зв'язків. Див. Апдаї еї аЇ. (1993) Мої. Ітипої. 30:105. У інших випадках можна використовувати модифікований константний домен Ідс1, підданий модифікації для підвищення часу напівжиття або зниження ефекторної функції. Такі антитіла проти І ТА і їх антигензв'язувальні фрагменти (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 або 2С1), що містять модифікований константний домен Ідеї, є частиною даного винаходу.
Зо Даний винахід стосується рекомбінантних способів отримання антитіла проти ІІ Т4, або його антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом (наприклад, 1Е1, 2А6, 3057 або 2С1), або його імуноглобулінового ланцюга, що включає (ї) вбудовування полінуклеотиду, що кодує один або більше імуноглобулінових ланцюгів антитіла або фрагмента (наприклад, що містять амінокислотну послідовність, що включає будь-яку одну або більше з послідовностей, наведених в ЗЕО ІЮ МО: 1-15, 44 і/або 45), наприклад, де полінуклеотид знаходиться у векторі іабо функціонально зв'язаний з промотором (наприклад, вірусним промотором, промотором
СММ або промотором 5М40); (її) культивування клітини-хазяїна (наприклад, клітини-хазяїна ссавця, грибкової клітини-хазяїна, бактеріальної клітини-хазяїна, клітини яєчника китайського хом'яка (СНО), клітини МО, клітини 5РА2, клітини Неї! а, клітини нирки новонародженого хом'яка (ВНК), клітини нирки мавпи (СО5), клітини печінковоклітинної карциноми людини (наприклад,
Нер С2), клітини А549, клітини 313, клітини НЕК 293, клітини Ріспіа або клітин Ріспіа равіогів) в умовах, сприятливих для експресії полінуклеотидів, і, (ії) необов'язково, виділення антитіла, або фрагмента, або ланцюга з клітини-хазяїна і/або середовища, в якому вирощують клітину- хазяїна. При отриманні антитіла або антигензв'язувального фрагмента, що містить декілька імуноглобулінових ланцюгів, наприклад, антитіла, що містить два важкі ланцюги імуноглобуліну і два легкі ланцюги імуноглобуліну, коекспресія ланцюгів в одній клітині-хазяїні призводить до зв'язування ланцюгів, наприклад, в клітині, або на поверхні клітини, або поза клітиною, якщо такі ланцюги секретуються таким чином, що утворюється молекула антитіла або антигензв'язувального фрагмента. Способи за даним винаходом включають способи, де експресується тільки важкий ланцюг імуноглобуліну або тільки легкий ланцюг імуноглобуліну (наприклад, будь-який з ланцюгів, представлених в даному описі, включаючи зрілі фрагменти іабо їх варіабельні домени). Такі ланцюги можна використовувати, наприклад, як проміжні продукти при експресії антитіла або антигензв'язувального фрагмента, що включає такий ланцюг.
Конструювання Ес-ділянки антитіла
Антитіла проти ІТ4 і антигензв'язувальні фрагменти за даним винаходом (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1) також можна конструювати так, щоб вони включали модифікації в Ес- ділянці, як правило, для зміни однієї або більше функціональних властивостей антитіла, таких як час напівжиття у сироватці, зв'язування комплементу, зв'язування Ес-рецептора і/або бо ефекторна функція (наприклад, антиген-залежна клітинна цитотоксичність). Крім того, антитіла
Зо і фрагменти, представлені в даному описі, можна модифікувати хімічно (наприклад, до антитіла можна приєднувати одну або більше хімічних сполук) або модифікувати для зміни його глікозилування, знову ж, для зміни однієї або більше функціональних властивостей антитіла.
Кожний з цих варіантів здійснення більш детально описаний нижче. Нумерація залишків у Ес- ділянці відповідає індексу ЄЮ Кабаї.
Антитіла і антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2А6, 3057 і/або 2С1), також включають антитіла з модифікованими (або блокованими) Ес- ділянками для досягнення змінених ефекторних функцій. Див., наприклад, патент США
Мо 5624821; М/О2003/086310; УМО2005/120571;. М/О2006/0057702. Таку модифікацію можна використовувати для підвищення або супресії різних реакцій імунної системи з можливою користю для діагностики і терапії. Зміни Ес-ділянки включають зміни амінокислот (заміни, делеції і/або інсерції), глікозилування або деглікозилування, а також додавання множини Ес- доменів. Зміни Ес також можуть призводити до зміни часу напівжиття терапевтичних антитіл, що робить можливим менш часте введення доз і, таким чином, підвищує зручність і знижує використання матеріалу. Див. Ргезіа (2005) 9. АПегду Сіїп. Іттипої. 116:731, рр. 734-35.
У одному з варіантів здійснення винаходу антитіло проти ІЇТ4 або антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1) є антитілом або фрагментом ізотипу Ідс4, що містить мутацію серину в пролін в положенні, що відповідає положенню 228 (5228Р; індекс ЕМ) в шарнірній ділянці важкого ланцюга константної ділянки. Показано, що ця мутація усуває гетерогенність дисульфідних містків між важкими ланцюгами в шарнірній ділянці (Ападаї еї аї. вище; положення 241 відповідає системі нумерації Кабрай.
В одному з варіантів здійснення винаходу шарнірну ділянку СНІ антитіла проти ІТ4 або його антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1) модифікують таким чином, що кількість залишків цистеїну в шарнірній ділянці підвищують або знижують (наприклад, на 1, 2 або 3). Цей підхід описаний в патенті США Мо 5677425.
Кількість залишків цистеїну в шарнірній ділянці СНІ змінюють, наприклад, для полегшення збирання легких і важких ланцюгів або для підвищення або зниження стабільності антитіла.
У іншому варіанті здійснення шарнірну ділянку Ес антитіла проти 1/4 або антигензв'язувального фрагмента (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1) піддають мутагенезу
Зо для зниження біологічного часу напівжиття антитіла. Більш конкретно, в ділянці поверхні домену СН2-СНЗ фрагмента Ес шарнірної ділянки включають одну або більше мутації амінокислот таким чином, що в антитіла зменшене зв'язування зі стафілококовим протеїном А (5рА) відносно зв'язування з 5рА нативного Ес шарнірного домену. Цей підхід детально описаний в патенті США Мо 6165745.
У іншому варіанті здійснення антитіло проти ІЇ/Т4 або антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1) модифікують для підвищення його біологічного часу напівжиття. Можливі різні підходи. Наприклад, можна вбудовувати одну або більше з наступних мутацій: Т252І/, Т2545, Т256Е, як описано в патенті США Мо 6277375. Альтернативно, для підвищення біологічного часу напівжиття можна змінювати ділянку СНІ або Сі антитіла так, щоб вона містила епітоп зв'язування рецептора порятунку, отриманий з двох петель домену
СНа Ес-ділянки до, як описано в патентах США МоМо 5869046 і 6121022.
У інших варіантах здійснення Ес-ділянку змінюють за допомогою заміни щонайменше одного амінокислотного залишку іншим амінокислотним залишком для зміни ефекторних функцій антитіла проти ІТ4 або антигензв'язувального фрагмента (наприклад, 1Е1, 2А6, 3057 і/або 2С1). Наприклад, одну або більше амінокислот, вибраних з амінокислотних залишків 234, 235, 236, 237, 297, 318, 320 ї 322, можна замінити іншим амінокислотним залишком таким чином, що антитіло має змінену афінність до ефекторного ліганду, але зберігає здатність до зв'язування антигену батьківського антитіла. Ефекторний ліганд, афінність до якого змінюють, може бути, наприклад, Ес-рецептором або компонентом комплементу С1. Цей підхід детально описують у патентах США МоМо 5624821 і 5648260.
У іншому прикладі одну або більше амінокислот, вибраних з амінокислотних залишків 329, 331 їі 322, можна замінювати іншим амінокислотним залишком таким чином, що антитіло проти
І-Т4 або антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1) має змінене зв'язування С14д і/або знижену або усунену зумовлену комплементом цитотоксичність (СОС).
Цей підхід детально описують в патенті США Мо 6194551.
У іншому прикладі один або більше амінокислотних залишків в положеннях амінокислот 231 ї 239 змінюють для зміни здатності антитіла зв'язуватися з комплементом. Цей підхід описують в публікації РСТ Мо УМО 94/29351.
У іншому прикладі Ес-ділянку модифікують для підвищення або зниження здатності антитіла бо проти І/Т4 або антигензв'язувального фрагмента (наприклад, 1ЕЇ1, 2Аб, 3057 і/або 2С1)
опосередковувати антитілозалежну клітинну цитотоксичність (АЮОСС) і/або підвищувати або знижувати афінність антитіла або фрагмента до рецептора Есу за допомогою модифікації однієї або більше амінокислот в наступних положеннях: 238, 239, 243, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 264, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 або 439. Цей підхід описують в публікації РСТ Мо УМО 00/42072. Крім того, картовані ділянки зв'язування ІдсС1 людини з Есук!, ЕсукіІ, ЕсуКІ ії РоКп і описані варіанти з поліпшеним зв'язуванням (див. Зпіеїа5 еї аї. (2001) 9. Віої. Спет. 276:6591-6604). Показано, що конкретні мутації в положеннях 256, 290, 298, 333, 334 і 339 поліпшують зв'язування з ЕСукІП. Крім того, показано, що наступні комбіновані мутанти поліпшують зв'язування Есукі: Т256А/5298А, 5298А/ЕЗЗЗА, 5298А/К224А і 5298А/ЕЗЗЗА/КЗЗ4А.
У одному з варіантів здійснення Ес-ділянку модифікують для зниження здатності антитіла проти І-Т4 або антигензв'язувального фрагмента (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 3057 і/або 2С1) опосередковувати ефекторну функцію і/або підвищувати протизапальні властивості за допомогою модифікації залишків 243 і 264. У одному з варіантів здійснення Ес-ділянку антитіла модифікують за допомогою заміни залишків в положеннях 243 і 264 аланіном. У одному з варіантів здійснення Ес-ділянку модифікують для зниження здатності антитіла опосередковувати ефекторну функцію і/або підвищувати протизапальні властивості за допомогою модифікації залишків 243, 264, 267 і 328.
Посттрансляційні модифікації
У іншому варіанті здійснення антитіло має конкретний профіль глікозилування. Наприклад, аглікозиловане антитіло проти І.Т4 або його антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1), в якому відсутнє глікозилування, є частиною даного винаходу. Профіль глікозилування антитіла або фрагмента можна змінювати, наприклад, для підвищення афінності або авідності антитіла до антигену. Такі модифікації можна здійснювати, наприклад, за допомогою зміни однієї або більше ділянок глікозилування в послідовності антитіла або фрагмента. Наприклад, можна здійснювати одну або більше замін амінокислот, що призводять до видалення однієї або більше з ділянок глікозилування каркасу варіабельної ділянки, щоб,
Зо таким чином, усунути глікозилування в цій ділянці. Таке аглікозилування може підвищувати афінність або авідність антитіла або фрагмента до антигену. (Див., наприклад, патенти
США МоМо 5714350 і 6350861).
Також можна отримувати антитіло проти І/Т4 або антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1) за винаходом, в якому профіль глікозилування включає гіпофукозиловані або афукозиловані глікани, такі як гіпофукозиловані антитіла і антигензв'язувальні фрагменти або афукозиловані антитіла і фрагменти, що мають знижену кількість фукозильних залишків на глікані. Антитіло або антигензв'язувальний фрагмент також можуть включати глікани, що мають підвищену кількість структур СісМас в точках галуження.
Показано, що такі змінені профілі глікозилування підвищують здатність антитіл до АОСС. Такі модифікації можна здійснювати, наприклад, за допомогою експресії антитіла або фрагмента в клітині-хазяїні, в якій шлях глікозилування генетично сконструйований для отримання глікопротеїнів із конкретними профілями глікозилування. Ці клітини відомі в цій галузі, і їх можна використовувати як клітини-хазяїни, в яких експресують рекомбінантні антитіла за винаходом, для отримання антитіла зі зміненим глікозилуванням. Наприклад, у лініях клітин
М5704, М5705, і М5709 відсутній ген фукозилтрансферази, РОТВ (9(1,6)-фукозилтрансферази), таким чином, що в антитілах, які експресуються в лініях клітин М5704, М5705 і М5709, на вуглеводах відсутня фукоза. Даний винахід стосується антитіл проти //Т4 і антигензв'язувальних фрагментів, в яких відсутня фукоза або які отримані за допомогою клітини-хазяїна, в якій відсутній ЕОТ8. РОТ8-- лінії клітин М5704, М5705 і М5709 отримані за допомогою направленого пошкодження гена РОТ8 в клітинах СНО/ОС44 з використанням двох векторів заміщення (див. патентну публікацію США Мо 20040110704 і Матапе-ОНпикі еї а). (2004) Віоїеснпо! Віоєпд 87:614-22). Як інший приклад, в ЕР 1176195 описують лінію клітин з функціонально пошкодженим геном РОТ8, що кодує фукозилтрансферазу, таким чином, що антитіла, які експресуються в такій лінії клітин, демонструють гіпофукозилування завдяки зниженню або усуненню ферменту, що діє у відношенні а-1,6-зв'язку. У ЕР 1176195 описують лінії клітин людини, що мають низьку активність ферменту відносно додавання фукози до М- ацетилглюкозаміну, що зв'язується з ЕРо-ділянкою антитіла, або не мають ферментативної активності, наприклад, лінію клітин мієломи щура МВ2/0 (АТСС СКІ 1662). У публікації
РСТ Мо УМО 03/035835 описують варіант лінії клітин СНО, клітини І ес13, зі зниженою здатністю бо приєднувати фукозу до Авп(297)-зв'язаних вуглеводів, що також призводить до гіпофукозилування антитіл, які експресуються в цій клітині-хазяїні (див. також Зпіеїй5 еї аї. (2002) 9. Віої. Спет. 277:26733-26740). Антитіла з модифікованим профілем глікозилування також можна отримувати в курячих яйцях, як описано в публікації РСТ Мо УМО 06/089231.
Альтернативно, антитіла з модифікованим профілем глікозилування можна отримувати в рослинних клітинах, таких як Їетпа (патент США Мо 7632983). Способи отримання антитіл в рослинній системі описані в патентах США МоМо 6998267 і 7388081. У публікації РСТ Мо УУО 99/54342 описують лінії клітин людини, сконструйовані для експресії глікопротеїн-модифікуючих глікозилтрансфераз (наприклад, В(1,4)-М-ацетилглюкозамінілтрансферази ПП (пт), таким чином, що антитіла, які експресуються в сконструйованих лініях клітин, мають підвищену кількість структур СісМас в точках галуження, що призводить до підвищеної активності АОСС антитіл (також див. Штапа еї аІ. (1999) Маї. Віоїтесп. 17:176-180). Антитіла проти І ТА і їх антигензв'язувальні фрагменти за даним винаходом, продуковані такими клітинами-хазяїнами, є частиною даного винаходу.
Альтернативно, залишки фукози в антитілі проти І/Т4 або антигензв'язувальному фрагменті (наприклад, 1Е1, 2Аб, 3057 і/або 2С1) можна відщіплювати з використанням ферменту фукозидази; наприклад, с-Ії-фукозидаза видаляє фукозильні залишки з антитіл (Тагепіїйпо сеї аї. (1975) Віоспет. 14:5516-23). Даний винахід стосується антитіл і фрагментів, оброблених ферментом фукозидазою.
Антитіло проти ІЇ-Т4 або антигензв'язувальні фрагменти (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1), представлені в даному описі, додатково включають антитіла і фрагменти, які продукуються в клітинах-хазяїнах нижчих еукаріот, зокрема, грибкових клітинах-хазяїнах, таких як дріжджі і ниткоподібні гриби, генетично сконструйовані для продукування глікопротеїнів, що мають профілі глікозилування, подібні таким у ссавців або людини (див. наприклад, Стпої еї аї, (2003) Ргос. Май. Асай. Зсі. 100: 5022-5027; Натіюп еї аї., (2003) Зсівєпсе З01: 1244-1246;
Натійоп єї аїЇ., (2006) Зсієпсе 313: 1441-1443). Конкретною перевагою цих генетично модифікованих клітин-хазяїнів порівняно з лініями клітин ссавців, що використовуються зараз, є можливість контролю профілю глікозилування глікопротеїнів, які продукуються в клітинах таким чином, що можна отримувати композиції глікопротеїнів, де переважає конкретна структура М- гліканів (див., наприклад, патент США Мо 7029872 і патент США Мо 7449308). Ці генетично
Зо модифіковані клітини-хазяїни використовують для отримання антитіл, що переважно мають конкретні структури М-гліканів (див., наприклад, Гі еї аї., (2006) Маї. Віотесппої. 24: 210-215).
Кон'югати антитіл
Антитіла проти І/Т4 і антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1), також можна кон'югувати з пептидом або хімічною сполукою. Хімічна сполука може бути, крім іншого, полімером, радіонуклідом або терапевтичним, або цитотоксичним засобом. У конкретних варіантах здійснення винаходу хімічна сполука є полімером, що підвищує час напівжиття молекули антитіла в організмі індивідуума. Полімери включають, як необмежувальні приклади, гідрофільні полімери, що включають, як необмежувальні приклади, поліетиленгліколь (РЕС) (наприклад, РЕС з молекулярною масою 2кДа, 5 кДа, 10 кДа, 12 кДа, 20 кДа, 30 кДа або 40 кДа), декстран і монометоксиполіетиленгліколь (пРЕС). У Геє, еї аї., (1999) (Віосоп)і Спет. 10:973-981) описують РЕС кон'юговані одноланцюжкові антитіла. У УМеп, еї аї., (2001) (Віосоп). Спет. 12:545-553) описують кон'югацію антитіл з РЕС, з'єднаним з хелатором радіоактивного металу (діетилентриамінпентаоцтовою кислотою (ОТРА)).
Антитіла і антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1), також можна кон'югувати з мітками, такими як радіоактивні мітки. Мітки включають, як необмежувальні приклади, У9Тс,0М, 111, з2р, 140, 125|, ЗН, 1911, 110, 150), 79М, 8, 355 510, 57То, 226Ва, б0Со, 59Ее, 5756, 152ЕБу, 6750), 2170, 211, 212рр, 475с, 109ра, 23иТп, і ОК, 1570334,
Мп, 2-Ттг і 56Ее.
Антитіла проти ІІ Т4 і фрагменти антитіл, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1), також можна пегилювати (наприклад, з використанням 1 РЕС або молекули полімеру РЕС З кДа, 12 кДа або 40 кДа), наприклад, для підвищення біологічного часу напівжиття (наприклад, в сироватці). Для опегилювання антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, як правило, проводять реакцію антитіла або фрагмента з реакційноздатною формою поліетиленгліколю (РЕС), такою як реакційноздатне складноефірне або альдегідне похідне РЕС, в умовах, в яких одну або більше групу РЕС приєднують до антитіла або антигензв'язувального фрагменту. У конкретних варіантах здійснення пегилювання здійснюють за допомогою реакції ацилування або алкілування з реакційноздатною молекулою РЕС (або аналогічним реакційноздатним водорозчинним бо полімером). У межах винаходу термін "поліетиленгліколь" призначений для включення будь-
якої з форм РЕС, що використовуються для дериватизації інших білків, таких як моно-(С1-С10)- алкокси- або -арилокси-поліеєтиленгліколь або полієтиленгліколь-малеїмід. У деяких варіантах здійснення антитіло, що підлягає пегилюванню, є аглікозилованим антитілом. Способи пегилювання білків відомі у цій галузі, іїх можна використовувати відносно антитіл за винаходом. Див., наприклад, ЕР 0 154316 1ЕР 0 401 384.
Антитіла проти І/Т4 і антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1), також можна кон'югувати з мітками, такими як флуоресцентні або хемілюмінесцентні мітки, включаючи флуорофори, такі як хелати рідкоземельних металів, флуоресцеїн і його похідні, родамін і його похідні, ізотіоціанат, фікоеритрин, фікоціанін, алофікоціанін, о-фталевий альдегід, флуорескамін, "2Еи, дансил, умбеліферон, люциферин, люмінолова мітка, ізолюмінолова мітка, мітка складного ефіру ароматичного акридинію, імідазолова мітка, мітка солі акридинію, мітка оксалатного складного ефіру, екворинова мітка, 2,3-дигідрофталазиндіони, біотин/авідин, спінові мітки і стабільні вільні радикали.
Антитіла проти І-Т4 їі антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1), також можна кон'югувати з цитотоксичним фактором, таким як дифтерійний токсин, ланцюг екзотоксину А Рзхендотопах аегидіпоза, ланцюг А рицину, ланцюг А абрину, ланцюг А модецину, альфа-сарцин, білки і сполуки АїІепгігез гогаїї (наприклад, жирні кислоти), діантинові білки, білки РАРІ, РАРІЇ і РАР-5 РНуіасса атегісапа, інгібітор
Мотогаїса сНагапійа, курцин, кротин, інгібітор Заропагіа опПісіпаїї5, мітогелін, рестриктоцин, феноміцин і еноміцин.
Можна використовувати будь-який відомий у цій галузі спосіб кон'югації антитіл і антигензв'язувальних фрагментів з різними сполуками, включаючи способи, описані в Нипіег, еї аї.,, (1962) Маште 144:945; Мамід, еї аї., (1974) Віоспетівігу 13:1014; Раїп, єї аї., (1981)
У. Ітітипої. Мей. 40:219; ії Мудгеп, х., (1982) Нібіоспет. апа Суюспет. 30:407. Способи кон'югації антитіла є загальноприйнятими і добре відомими у цій галузі.
Фармацевтичні композиції і введення
Фармацевтичні композиції, що містять антитіла проти І-Т4 (наприклад, повністю людські антитіла, такі як антагоністичні повністю людські антитіла (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1) і
Зо їх антигензв'язувальні фрагменти, можна готувати для зберігання за допомогою змішування антитіл або їх антигензв'язувальних фрагментів, що мають бажаний ступінь чистоти, з необов'язковими фізіологічно прийнятними носіями, ексципієнтами або стабілізаторами (див., наприклад, Ретіпдіоп, Кетіпдіоп'є РПагптасешіса! Зсіеєпсе5 (187 ей. 1980)) у формі водних розчинів або ліофілізованих або інших висушених формах.
В одному з варіантів здійснення фармацевтична композиція містить антитіло, що складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 7, і кожний важкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в 5ЕО ІЮО МО: 2.
У іншому варіанті здійснення фармацевтична композиція містить: (ї) антитіло, що складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 7, і кожний важкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 2, і (її) пембролізумаб.
Склади терапевтичних і діагностичних засобів можна отримувати за допомогою змішування з прийнятними носіями, ексципієнтами або стабілізаторами у формі, наприклад, ліофілізованих порошків, суспензій або водних розчинів (див., наприклад, Нагатанп, еї аї. (2001) сСоодтап апа
Сітап' РІаптасоіодіса! Вахіз ої Тпегарешіс5, МеоОСгам/-НІЇ, Мем Мої, МУ; Сбеппаго (2000)
Ветіпдюп: Те 5сієпсе апа Ргасіїсе ої Ріраптасу, ІГірріпсой, УМ ПШіатв, апа У/їКіпв, Мем Мої, МУ;
Амів, єї аї. (сд5.) (1993) Рпаптасешіса! Созаде ЕРоптв: Рагепівга! Медісаїоп5, Магсе! ОекКег, МУ;
Мерегптап, єї аї. (ед5.) (1990) РНнаптасешісаі Юозаде Боптве: ТГарієї5, Магсе! ОекККег, МУ;
Пебрептанп, еї аї. (єдв.) (1990) Рнаптасешіса! Оозаде Еоптв: Різрегзе бЗузіет5, Магсе! Реккег,
МУ; Меїпег апа КоїковКіє (2000) Ехсірієпі Тохіспу апа Заїеїу, Магсе! Оеккег, Іпс., Мем/ МогК, МУ).
Токсичність і терапевтичну ефективність композицій антитіла проти 1/4 або антигензв'язувального фрагмента (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1), що вводяться окремо або в комбінації з іншим терапевтичним засобом, можна визначати стандартними фармацевтичними способами з використанням культур клітин або експериментальних тварин, наприклад, для визначення І О5о (дози, летальної для 50 95 популяції) і ЕОзо (дози, ефективної для 50 95 популяції). Співвідношення доз між токсичними і терапевтичними ефектами являє собою терапевтичний індекс (ЇО5о/ ЕЮО5во). У конкретних аспектах бажаними є антитіла, що демонструють високі терапевтичні індекси. Дані, отримані за допомогою цих аналізів культур 60 клітин і досліджень на тваринах, можна використовувати при визначенні діапазону доз для використання на людях. Доза таких сполук, переважно, потрапляє у діапазон концентрацій в кровотоці, включаючи ЕЮОзо з невисокою токсичністю або без неї. Дози можуть варіюватися в межах цього діапазону залежно від лікарської форми, що використовується, і шляху введення.
У додатковому варіанті здійснення індивідууму вводять додатковий терапевтичний засіб, що вводиться індивідууму разом з антитілом проти І-Т4 (наприклад, повністю людським антитілом, таким як антагоністичні повністю людські антитіла) або його антигензв'язувальним фрагментом, представленим в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1), згідно з Рпузісіапє" Оевзк
Веїегепсе 2003 (Тпотзхоп Неайнсаге; 57-е видання (1 листопада 2002 року)).
Спосіб введення може варіюватися. Шляхи введення включають пероральний, ректальний, черезслизовий, кишковий, парентеральний; внутрішньом'язовий, підшкірний, внутрішньошкірний, інтрамедулярний, інтратекальний, прямий внутрішньошлуночковий, внутрішньовенний, інтраперитонеальний, інтраназальний, внутрішньоочний, інгаляційний, інсуфляційний, місцевий, шкірний, трансдермальний або внутрішньоартеріальний.
Даний винахід стосується способів введення антитіла проти //Т4 або його антигензв'язувального фрагмента (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1), що включає введення антитіла або фрагмента в організм індивідуума. Наприклад, спосіб включає проколювання тіла індивідуума голкою шприца і ін'єкцію антитіла або фрагмента в організм індивідуума, наприклад, у вену, артерію, пухлину, м'язову тканину або підшкірний жир індивідуума.
Даний винахід стосується посудини (наприклад, пластикового або скляного флакона, наприклад, з кришкою, або хроматографічної колонки, порожнистої голки або циліндра шприца), що містить будь-які з антитіл проти І/Т4 або антигензв'язувальних фрагментів (наприклад, 1Е1, 2Аб, 3057 і/або 2С1), наведених в даному описі, або їх фармацевтичну композицію, що містить фармацевтично прийнятний носій.
Даний винахід також стосується ін'єкційного пристрою, що містить будь-які з антитіл проти
І-Т4 або антигензв'язувальних фрагментів (наприклад, ТЕ1, 2Аб6, 307 і/або 2С1), наведених в даному описі, або їх фармацевтичну композицію. Ін'єкційний пристрій є пристроєм, за допомогою якого речовину вводять в організм індивідуума парентеральним, наприклад, внутрішньом'язовим, підшкірним або внутрішньовенним. Наприклад, ін'єкційний пристрій може являти собою шприц (наприклад, заздалегідь наповнений фармацевтичною композицією, такий
Зо як автоіїнжектор), наприклад, що включає циліндр для утримання рідини, що підлягає ін'єктуванню (наприклад, що містить антитіло або фрагмент, або їх фармацевтичну композицію), голку для проколювання шкіри і/або кровоносних судин для ін'єктування рідини; і поршень для проштовхування рідини з циліндра і через порожнину голки. У варіанті здійснення винаходу ін'єкційний пристрій, що містить антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом або їх фармацевтичну композицію, є пристроєм для внутрішньовенної (ІМ) ін'єкції. Такий пристрій включає антитіло або фрагмент, або їх фармацевтичну композицію в канюлі або троакарі/голці, які з'єднують з трубкою, яку можна з'єднувати з мішком або резервуаром для утримування рідини (наприклад, фізіологічного розчину або розчину лактату
Рінгера, що містить Масі, лактат натрію, КСІ, Сасі» і, необов'язково, що включає глюкозу), що вводиться в організм індивідуума через канюлю або троакар/голку.
Фармацевтичні композиції, представлені в даному описі, також можна вводити з використанням безголкового підшкірного ін'єкційного пристрою, такого як пристрої, описані в патентах США МеМоео 6620135, 6096002, 5399163, 5383851, 5312335, 5064413, 4941880, 4790824 або 4596556. Такі безголкові пристрої, що містять фармацевтичну композицію, також є частиною даного винаходу. Фармацевтичні композиції, представлені в даному описі, також можна вводити за допомогою інфузії. Приклади добре відомих імплантатів і модулів для введення фармацевтичних композицій включають пристрої, що описуються в: патенті США
Мо 4487603, в якому описують імплантовану мікроіїінфузійну помпу для розподілу лікарського засобу з контрольованою швидкістю; патенті США Мо 4447233, в якому описують інфузійну помпу для введення лікарського засобу з точною швидкістю інфузії; патенті США Мо 4447224, в якому описують імплантований пристрій для інфузії зі змінним потоком для безперервного введення лікарського засобу; патенті США Мо 4439196, в якому описують систему для осмотичної доставки лікарського засобу, що має багатокамерні компартменти. Фахівцям у цій галузі добре відомо багато інших таких імплантатів, систем введення і модулів, і імплантати, системи введення і модулі, що містять фармацевтичні композиції за даним винаходом, входять в обсяг даного винаходу.
Антитіла (наприклад, повністю людські антитіла, такі як антагоністичні повністю людські антитіла) або їх антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1), можна вводити за допомогою безперервної інфузії або за допомогою доз, 60 що вводяться, наприклад, щодня, 1-7 разів на тиждень, раз на тиждень, раз на два тижні,
щомісяця, раз на два місяці, раз на квартал, раз в півроку, щорічно і т.д. Дози можна вводити, наприклад, внутрішньовенно, підшкірно, місцево, перорально, назально, ректально, внутрішньом'язово, внутрішньоцеребрально, інтраспинально або за допомогою інгаляції.
Ефективна доза антитіла проти І/Т4 або його антигензв'язувального фрагмента за даним винаходом становить від приблизно 0,05 мг/кг (маси тіла) до приблизно 30 мг/кг (маси тіла), наприклад, для лікування або профілактики злоякісного новоутворення або інфекційних захворювань.
Визначення придатної дози здійснює клініцист, наприклад, з використанням параметрів або факторів, які, як відомо або як передбачають у цій галузі, впливають на лікування. Як правило, при визначенні дози починають з кількості, значно меншої, ніж оптимальна доза, і її підвищують з невеликими приростами до досягнення бажаного або оптимального ефекту відносно яких- небудь негативних побічних ефектив. Важливі діагностичні параметри включають параметри симптомів, наприклад, запалення або рівень продукованих запальних цитокінів. В основному, бажано отримувати біологічний засіб, призначений для використання, з того ж виду, до якого належить тварина, що підлягає лікуванню, щоб, таким чином, мінімізувати яку-небудь імунну відповідь на реагент. У випадку людей бажаними можуть бути, наприклад, химерні і повністю людські антитіла. Доступні керівництва з вибору придатних доз антитіл проти І/Т4 або фрагментів (див., наприклад, УМмажглупсгак (1996) Апібоду Тпегару, Віо5 Зсіепійс Риб. а,
Охгогазніге, ОК; Кгезіпа (єд.) (1991) Мопосіопа! Апіїбодієз, СуїюКіпез5 апа АнйнНтйіфз5, Магсе! Оеккег,
Мем Моїк, МУ; Васі (ва.) (1993) Мопосіопа! Апіїбодієє апа Реріїде Пегару іп Ашоіїттипе рівеазев, Магсе! ОекКег, Мем Могк, МУ; Ваєт! єї а!. (2003) Мем Епаї. У. Мед. 348:601-608; Міїдтот еї аІ. (1999) Мем Епаоії. 9). Мед. 341:1966-1973; біатоп еї аї. (2001) Мем Епаї. У. Мед. 344:783- 792; Вепіатіпомії? еї аІ. (2000) Мем Епаї. У. Мей. 342:613-619; Спо еї аї. (2003) Мем Епо).
У. Мей. 348:24-32; І ір5Ку єї аї. (2000) Мем Епа)!. У). Мед. 343:1594-1602).
Те, чи зменшений симптом захворювання, можна оцінювати за допомогою будь-якого клінічного вимірювання, як правило, яке використовується лікуючими лікарями або іншими медичними працівниками, для оцінки важкості або статусу прогресування цього симптому. Хоча варіант здійснення даного винаходу (наприклад, спосіб лікування або промисловий виріб) може не бути ефективним в зменшенні симптомів цільового захворювання у кожного індивідуума, він
Зо повинен зменшувати симптоми цільового захворювання у статистично значної кількості індивідуумів, що визначають за допомогою будь-якого статистичного критерію, відомого у цій галузі, такого як Ї-критерій Стьюдента, критерій хі-квадрат, О-критерій Манна і Уїтні, критерій
Краськела-Уолліса (Н-критерій), критерій Джонкхієра-Терпстра і критерію Вілкоксона.
Терапевтичне застосування антитіла проти І-Т4
Даний винахід також стосується способів лікування або профілактики злоякісного новоутворення у індивідуумів, таких як люди, які потребують такого лікування, за допомогою введення ефективної кількості антитіл проти ІІТ4 або їх антигензв'язувальних фрагментів за даним винаходом, представлених в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1), які можуть бути ефективними для такого лікування або профілактики.
У деяких варіантах здійснення злоякісне новоутворення є солідною пухлиною. У інших варіантах здійснення злоякісне новоутворення є гемобластозом. У деяких варіантах здійснення злоякісне новоутворення є метастазуючим. У деяких варіантах здійснення злоякісне новоутворення є рецидивним. У інших варіантах здійснення злоякісне новоутворення є рефрактерним. У інших варіантах здійснення злоякісне новоутворення є рецидивним і рефрактерним.
У деяких варіантах здійснення злоякісне новоутворення є анапластичною астроцитомою, астроцитомою, раком сечового міхура, раком кісткової тканини, злоякісним новоутворенням головного мозку, раком молочної залози (наприклад, який відрізняється мутацією ВКСАТ і/або
ВАСАг), карциноїдною пухлиною, раком шийки матки, хондросаркомою, папіломою хоріоїдного сплетення, колоректальним раком, раком ендометрія, епендимомою, раком стравоходу, саркомою Юїнга, раком жовчного міхура, раком шлунка, гліобластомою, раком голови і шиї, гепатобластомою, печінковоклітинною карциномою, ідіопатичним мієлофіброзом, раком нирки, лейкозом, раком печінки, раком легень (наприклад, недрібноклітинним раком легень), лімфомою, медулобластомою, меланомою, менінгіомою, карциномою Меркеля, мезотеліомою, множинною мієломою, нейробластомою, олігодендрогліомою, остеосаркомою, раком яєчників, раком підшлункової залози, справжньою поліцитемією, примітивною нейроектодермальною пухлиною, раком передміхурової залози, нирковоклітинним раком, перехідноклітинним раком нирки, ретинобластомою, рабдоїдною пухлиною нирки, рабдоміосаркомою, раком слинних залоз, саркомою, раком тонкого кишечнику, саркомою м'яких тканин, плоскоклітинною бо карциномою (наприклад, плоскоклітинною карциномою шкіри), синовіальною саркомою,
тромбоцитемією, раком щитовидної залози, раком матки, вестибулярною шванномою або пухлиною Вільмса. У варіанті здійснення винаходу злоякісне новоутворення є метастазуючим злоякісним новоутворенням, наприклад, описаних вище типів.
У варіанті здійснення винаходу злоякісне новоутворення є багатою на мієлоїдні клітини пухлиною (наприклад, мезотеліомою, раком нирки, лімфомою, саркомою, меланомою, раком голови і шиї, раком молочної залози, раком сечового міхура, раком шлунка, раком яєчників або раком щитовидної залози; див. наприклад, Вигі еї а). Сапсег. 117 (22):5234-44 (2011);
Раппептапп еї а. Опсоїттипоїоду 2(3):623562 (2013); 5івїдІ еї а. М. Епді. У. Меа. 362:875-885 (2010); Рцімага еї аї., Ат. У. Раїної. 179(3):1157-70 (2011); ВгопКногві еї аї. Іпме5і. Орпінаїтої.
Мів. Зсі. 52(2):643-50 (2011); ВаІегтраз еї аї. Вг. У. Сапсег 111(8):1509-18 (2014); і папа еї аї.
РГо5 Опе 7(12):е50946 (2012)). Так як І-Т4 експресується, головним чином, мієлоїдними клітинами і гранулоцитами, і інфільтрація пухлин мієлоїдними клітинами, як правило, асоційована з несприятливим прогнозом внаслідок імуносупресорних ефектив цих клітин, які можуть антагоністично діяти на протипухлинні відповіді Т-клітин, лікування антитілом проти
І-Т4 або антигензв'язувальним фрагментом за даним винаходом буде приносити користь індивідуумам з високою інфільтрацією мієлоїдними або імуносупресорними мієлоїдними клітинами.
Таким чином, даний винахід стосується способів лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, що включають введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить (а) СОВ-І 1, СОВ-12 і СОК-І З варіабельного домену (Мі) легкого ланцюга імуноглобулінового ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: З 7, 11, 13, 15 або 45; і/або (в) СОБ-НІ, СОВ-Н2 і СОБ-НЗ варіабельного домену (Мн) важкого ланцюга імуноглобулінового ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 1, 2, 8-10, 12, 14, 44 або 79-86.
У варіанті здійснення винаходу спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: (1) домен Мн, що містить: ділянку-НІ, що визначає комплементарність (СОК-НІ): УМ (5БО ІЮО МО: 16), ділянку-Н2, що визначає комплементарність (СОК-Н2г): ЕІМНХОЗТМУМРЗІ КЗ, де Х є 5 або А (ЗЕО ІО МО: 17), і ділянку-
Зо НЗ, що визначає комплементарність (СОК-НІЗ): ГРТЕУУМТТЕМУРОГ (5ЕО ІО МО: 18), і/або домен
Мі, що містить: ділянку-І 1, що визначає комплементарність (СОВК-І 1): ТАЗЗЗМІСАСМОМН (5ЕО
ІО МО: 19), ділянку-І2, що визначає комплементарність (СОК-І 2): ОХІХ2МКРБ5; деХі єЗабой, їі
Хг є М, ОО, Е або Ю (ЗЕО ІЮ МО: 20), і ділянку-ІЇ 3, що визначає комплементарність (СОК-Ї 3):
ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІО МО: 21); (2) домен Мн, що містить: СОВ-НІ: БМАЇІ5 (5ЕО І МО: 22),
СОв-Нг: ап РІБЄИТАММАОКРОС (5ЕО ІО МО: 23) ії СОБК-НЗ: МЕХІХ2ЗОУУУКОСАНОІ; де Хі є Ю або 5, і Хг2 є 5 або А (ЗЕО ІЮ МО: 24), або домен Мі, що містить: СОВ-1 1: ТІ А5аІММОТУВІН (ЗЕО І МО: 25), СОВ-І/2: У«К505ОКНОС5 (5ЕО ІО МО: 26) і СОВ-І 3: АІММ/УЗЗІМУМ (ЗЕО І МО: 27); (3) домен Мн, що містить: СОВ-НІ: 5БМАМН (5ЕБЕО 10 МО: 28), СОВ-Не:
МІЗМООЗМКУМАОБМУКО (ЗЕО ІЮ МО: 29) і СОБК-НЗ: МОЕУМОЇ МУЗРЕОМ (ЗЕО ІЮО МО: 30), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ВАБОСІЗБУМІ А (5ЕБО ІО МО: 31), СОВ-І2: ААББ5БІ О5 (5ЕО 10
МО: 32) і СОК-І 3: ООУМЗУРРТ (ЗЕО ІЮ МО: 33); і/або (4) домен Мн, що містить: СОВ-НІ1:
ЕГЗ5МН (ЗЕО І МО: 34), СбОВ8-Н2: СБОРЕОСЕТІМАОКРОС (5БО ІО МО: 35) і СОК-НЗ:
АСРІ УТІРОУМИІРОММУРОР (ЗЕБО 10 МО: 36), і/або домен Му, що містить: СОВ-11: таввемМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 37) СОВ-І2: ОМЗМКРЗ (ЗЕБО І МО: 38) і СОК-І 3:
ОоБУОББІ БаБИММ (5ЕО ІО МО: 39).
У одному з варіантів здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІЮ МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНЗОЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕБЕО ІЮО МО: 47) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТазвОмМмадамомМН (5ЕО ІО Мо: 19), СОВ-12: ОМЗМАРБ(ЗЕО
ІО МО: 49) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНЗОаЗТМУМРОЇ КБ (ЗЕО ІО МО: 47) і СОБ-НІЗ: ГРТЕУУМТТКМУЕОЇ (5ЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТтазОЗОМІШАСМОМН (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-12: ОО5МАРБО(ЗЕО
ІО МО: 50) ії СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його 60 антигензв'язувального фрагмента, що містить: СМУМ/Б (5БО ОО МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНЗОЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕБЕО ІЮО МО: 47) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТаЗЗЗМІСАСМОМН (5ЕО ІЮ МО: 19), СОВ-12: ОЕЗМАРО(ЗЕО ІЮ
МО: 51) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (ЗЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНЗОЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕБЕО ІЮО МО: 47) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТавзоемМмІаАамМОМНн (5ЕО ІЮ МО: 19), СОВ-12: ОЮ5МАРО(ЗЕО
ІО МО: 52) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У одному з варіантів здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНЗОЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕБЕО ІЮО МО: 47) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазОемМмІШАСаМОМН (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-12: ОМАМАРБЗ (ЗЕО
ІО МО: 53) ії СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО ІЮ МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНЗОЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕБЕО ІЮО МО: 47) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТтаЗОМІСШАСМОМН (5ЕО ІЮ МО: 19), СОВ-І2: ЧООАМАРБЗ (ЗЕО
ІО МО: 54) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНЗОаЗТМУМРОЇ КБ (ЗЕО ІО МО: 47) і СОБ-НІЗ: ГРТЕУУМТТКМУЕОЇ (5ЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазОЗмІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12: СОЕАМАРБЗ (З5ЕО
ІО МО: 55) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його
Зо антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНЗОЗТМУМРБІ КЗ (5ЕБЕО ІЮО МО: 47) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУБОЇ (ЗЕО ІЮ МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазОемМмІШАСаМОМН (ЗЕО І МО: 19), СОВ-12: ООАМАРБЗ (ЗЕО
ІО МО: 56) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У одному з варіантів здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНАСЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕО ІЮ МО: 48) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазоемМмІаАаМмОМН (ЗЕО ІЮ МО: 19), СОВ-12: ОМ5МАРО(ЗЕО
ІО МО: 49) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНАСЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕО ІЮ МО: 48) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТтазОЗОМІШАСМОМН (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-12: ОО5МАРБО(ЗЕО
ІО МО: 50) ї СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНАСЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕО ІЮ МО: 48) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазЗЗМІИАСМОМН (5ЕО І МО: 19), СОВ-12: ЧЕЗМАРБ(ЗЕО 10
МО: 51) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (ЗЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНАСЗТМУМРОЇ КО (5ЕО ІЮО МО: 48) і СОБ-НІЗ: ГГ РТЕУУМТТКМУЕОЇ (5ЕО ІО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазОемМмІШАСаМОМН (ЗЕО І МО: 19), СОВ-12: СОБМАРБ (ЗЕО
ІО МО: 52) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У одному з варіантів здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його 60 антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНАСЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕО ІЮ МО: 48) і СОБ-НЗ: І РТАМ/МТТАМУРЕОЇ (5ЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазоемМмІаАаМмОМНн (5ЕО ІЮ МО: 19), СОВ-І2: ОМАМАРО(ЗЕО
ІО МО: 53) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНАСЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕО ІЮ МО: 48) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТтаЗОМІШАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-І2: ЧООАМАРБЗ (ЗЕО
ІО МО: 54) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНАСЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕО ІЮ МО: 48) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТазОЗмІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12: СОЕАМАРБЗ (З5ЕО
ІО МО: 55) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО І МО: 16), СОВ-Н2:
ЕІМНАСЗТМУМРБЇ КЗ (5ЕО ІЮ МО: 48) і СОБ-НУЗ: ГРТЕМУУТТКУРОЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: Та5ЗОМІСШАСМОМН (5ЕО ІЮ МО: 19), СОВ-12: ЧОВАМАРБ (5ЕО
ІО МО: 56) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У інших варіантах здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де легкий ланцюг імуноглобуліну містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 3, 4, 5, 6, 7, 11, 13, 15 або 45; і/або важкий ланцюг імуноглобуліну містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 1, 2,8,9, 10, 12, 14, 44, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85 або 86.
У інших варіантах здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка
Зо потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де варіабельний домен легкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 70, 71, 72, 73, 58, 74, 75, 76 або 77, і/або варіабельний домен важкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 63, 57, 64, 65, 66, 67, 68 або 69.
У інших варіантах здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: будь-який з наступних наборів важких ланцюгів імуноглобулінів і легких ланцюгів імуноглобулінів: (1) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 1; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5БО ІЮ МО: 3; (2) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 4; (3) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 5; (4) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО І МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 6; (5) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 7; (6) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5БО ІЮ МО: 3; (7) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 8; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 11; (8) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 9; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ХЕО
ІО МО: 11; (9) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 10; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 11; (10) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну 60 послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 12; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 13; (11) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 14; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 15; (12) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 79; легкий
Б ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 3; (13) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 4; (14) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗБО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 5; (15) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 6; (16) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 7; (17) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 3; (18) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 82; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 11; (19) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗБО ІЮ МО: 83; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 11; (20) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 84; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 11; (21) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 85; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 13; або (22) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 86; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: 15.
У інших варіантах здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його
Зо антигензв'язувального фрагмента, що містить: будь-які з наступних наборів варіабельних доменів важкого ланцюга і варіабельних доменів легкого ланцюга: (1) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 63, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕБЕО І МО: 70; (2) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 71; (3) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 72; (4) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 73; (5) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 58; (6) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: 70; (7) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 64, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 74; (8) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 65, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить
БО амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 74; (9) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 66, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 74; (10) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 67, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 75; або (11) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 68, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 76.
У одному з переважних варіантів здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його бо антигензв'язувального фрагмента, що містить: домен Мн, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 57, і домен Мі, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 58.
У іншому переважному варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 2, і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 7.
У іншому переважному варіанті здійснення спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 80, і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 7.
Даний винахід також стосується способів блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С, НІ А-А,
НГА-В і/або НІ А-Е у людини, яка потребує цього, що включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить (а) СОВ-І1, СОВ-І2 і
СОВ-ІЇЗ варіабельного домену (Мі) легкого ланцюга імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: З 7, 11, 13, 15 або 45; і/або (в) СОБ-НІ, СОВ-Н2 і СОБ-НЗ варіабельного домену (Мн) важкого ланцюга імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 1, 2, 8-10, 12, 14, 44 або 79-86.
У варіанті здійснення винаходу спосіб блокування зв'язування І-Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: (1) домен Мн, що містить: ділянку-НІ1, що визначає комплементарність (СОК-НІТ): СУММУ (ЗЕО ІЮО МО: 16), ділянку-Н2, що визначає комплементарність (СОК-Н2г): ЕІМНХОЗТМУМРЗБІ КО, де Х є 5 або А (ЗЕО ІЮ МО: 17), і ділянку-НЗ3, що визначає комплементарність (СОБ-НЗ): ГРТАУМ/МТТАМЕОІ (5ЕО ІЮ МО: 18),
Мабо домен Мі, що містить: ділянку-Ї/17, що визначає комплементарність (СОК-Ї 1):
ТО555МІВАСУОЮМН (5ЕБО ІЮ МО: 19), ділянку-/2, що визначає комплементарність (СОК-Ї 2):
ОХІХ2МКРБ5, деХі єЗабо в,їХе є М, 0, Е або Ю (5ЕО ІО МО: 20), і ділянку-ІЇ 3, що визначає комплементарність (СОМК-І 3): ОБЕОМ5ЗІ ЗАМУМ (5ЕО І МО: 21); (2) домен Мн, що містить: СОВ-
НІ: 5МАІ5 (5ЕО 10 МО: 22), СОВ-Н2: ОПРІЕСЄТАМУАОКРОС (ЗЕБО І МО: 23) ії СОБ-НЗ:
МЕХІХ2ЗОМУКОСАРОІ, де Хі є ОО або 5, і Хо є 5 або А (5ЕО ІО МО: 24), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТІ АБаїМмМОТмВІН (5ЕО І МО: 25), СОВ-12: УК5ОоБОоКНОаБЗ (ЗЕО ІО МО: 26) і СОК-І 3: АІМ/М5БТММ (ЗЕО ІЮ МО: 27); (3) домен Мн, що містить: СОВ-НІ: БМАМН (5ЕО І МО: 28), СОВ-Н2: МІЗМООЗМКУМАОБУКО (ЗЕО ІЮ МО: 29) і СОК-НЗ: МСОЕУЛОЇ М/ЗРЕОМ (ЗЕО І
МО: 30), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ВАБОСІЗБУМ А (5ЕО ІО МО: 31), СОВ-12:
ААББЗІ ОБ (ЗЕО ІЮ МО: 32) і СОК-І3: ООММ5УРРТ (ЗЕО ІЮО МО: 33); і/або (4) домен Мн, що містить: СОВ-НІ: ЕІ ЗМН (ЗЕО І МО: 34), СОВ-Нг: аОгОРЕОСЕТІМАОКРОИ (ЗЕО ІЮ МО: 35) і
СОВ-НЗ: АСРІ УТІЕОУМИІРОМУУБОР (ЗЕО ІЮ МО: 36), і/або домен Мі, що містить: СОВ-11: таввемМмІшАаМОМНн (5ЕО ІО МО: 37) СОВ-І2: ОМЗМКРЗ (ЗЕБО І МО: 38) і СОК-І 3:
О5МОББІБавБИамм (5ЕО ІО МО: 39).
У одному з варіантів здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ 5 (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗОЗТМУМРЗБІ КЗ (ЗЕО ІЮ МО: 47) і СОК-НЗ: Г РТАМ/УТТАМЕОІ (5ЕО ІЮ МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: Та5ЗЗМІСШАСМОМН (5БО 10 МО: 19), СОВ-12:
СМЗМАРБЗ(ЗЕО І МО: 49) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗБАММ (ЗЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ 5 (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗОЗТМУМРБІ КЗ (ЗЕО ІЮ МО: 47) і СОК-НЗ: Г РТАМ/УТТАМЕОІ. (ЗЕО І МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І/1: Та5ЗОЗМІШАСМОМН (5ЕО І МО: 19), СОВ-12:
СОБМЕАРБ(ЗЕО ІЮ МО: 50) і СОБ-І 3: ОБЕОМ5І БАМУМ (ЗЕО ІО МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СУММУ (5ЕО ІО МО: 16),
СОВ-Н2: ЕІМНЗОЗТМУМРЗБІ КЗ (ЗЕО ІЮ МО: 47) ії СОК-НЗ: І РТАМ/УТТАМРЕОЇ (5ЕО ІЮ МО: 18),
Мабо домен Му, що містить: СОВ-І1: Та55ЗО5МІШАСМОМН (5ЕБЕО 10 МО: 19), СОВ-12:
СЕБМАРБ(ЗЕО ІО МО: 51) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І 5БАММ (5ЕО ІО МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В 60 мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУМУ (5ЕО І
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНОЗОЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1Ю МО: 47) і СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СОБМАРБЗ(ЗЕО І МО: 52) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (ЗЕО ІЮ МО: 21).
У одному з варіантів здійснення спосіб блокування зв'язування І Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ 5 (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНЗОЗТМУМРЗБІ КЗ (ЗЕО ІЮ МО: 47) і СОК-НЗ: Г РТАМ/УТТАМЕОІ. (ЗЕО ІЮ МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І/1: Та5ЗОЗМІШАСМОМН (5ЕО І МО: 19), СОВ-12:
СМАМАРБЗ(ЗЕО І МО: 53) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (ЗЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУМУ (5ЕО І
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНОЗОЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1Ю МО: 47) і СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СОАМАРБ (ЗЕО І МО: 54) і СОВ-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (ЗЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУМУ (5ЕО І
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНОЗОЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1Ю МО: 47) і СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СЕАМЕРЗ (З5ЕО ІЮ МО: 55) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗБАММ (5ЕО ІЮО МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО 1ІЮ
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНОЗОЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1Ю МО: 47) і СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СОрАМЕРЗ (5ЕО ІО МО: 56) і СОБ-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У одному з варіантів здійснення спосіб блокування зв'язування І Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУМУ (5ЕО ІЮ
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1 МО: 48) ії СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СМЗМАРБЗ(ЗЕО І МО: 49) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І ЗБАММ (ЗЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ 5 (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2г: ЕІМНАЄЗТМУМРЗБІ КЗ (ЗЕО І МО: 48) і СОК-НЗ: Г РТАМ/УТТАМЕОІ. (ЗЕО ІЮ МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І/1: Та5ЗОЗМІШАСМОМН (5ЕО І МО: 19), СОВ-12:
СОБМЕАРБ(ЗЕО ІЮ МО: 50) і СОБ-І 3: ОБЕОМ5І БАМУМ (ЗЕО ІО МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІЇ Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ 5 (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСОТМУМРБІ К5 (5ЕО І МО: 48) і СОК-НЗ: Г РТАМ/УТТАМЕОІ. (ЗЕО ІЮ МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: Та5ЗЗМІСШАСМОМН (5БО 10 МО: 19), СОВ-12:
СЕБМАРБ(ЗЕО ІО МО: 51) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І 5БАММ (5ЕО ІО МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ 5 (5ЕО ІО МО:
БО 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРЗБІ КЗ (ЗЕО І МО: 48) і СОК-НЗ: Г РТАМ/УТТАМЕОІ (5ЕО ІЮ МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І/1: Та5ЗОЗМІШАСМОМН (5ЕО І МО: 19), СОВ-12:
СОБМАРБЗ(ЗЕО І МО: 52) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (ЗЕО ІЮ МО: 21).
У одному з варіантів здійснення спосіб блокування зв'язування І Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІ А-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУММУ (5ЕО 1ІЮ
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1 МО: 48) ії СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), і/або домен Мі, що містить: СОВ-І 1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СМАМАРБЗ(ЗЕО І МО: 53) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (ЗЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В 60 мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУМУ (5ЕО І
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1 МО: 48) ії СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СОАМЕКРБ (ЗЕО ІЮ МО: 54) і СОВ-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (ЗЕО І МО: 21).
У ще одному варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУМУ (5ЕО І
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1 МО: 48) ії СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (5ЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СЕАМЕРЗ (З5ЕО ІЮ МО: 55) і СОК-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У іншому варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІГ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: СОВ-НІ: СУМУ (5ЕО І
МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАСЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО 1 МО: 48) ії СОБ-НЗ: І РТАУУМТТАУРОЇ. (ЗЕО Ір
МО: 18), або домен Мі, що містить: СОВ-І1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (ЗЕО ІО МО: 19), СОВ-12:
СОрАМЕРЗ (5ЕО ІО МО: 56) і СОБ-І 3: ОБЕОМ5І ЗАУМ (5ЕО ІЮ МО: 21).
У інших варіантах здійснення спосіб блокування зв'язування І Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де легкий ланцюг імуноглобуліну містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 3, 4, 5, 6, 7, 11, 13, 15 або 45; і/або важкий ланцюг імуноглобуліну містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІЮ МО. 1, 2, 8, 9, 10, 12, 14, 44, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85 або 86.
У інших варіантах здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-Сї, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: легкий ланцюг імуноглобуліну, важкий ланцюг імуноглобуліну, або і легкий, і важкий ланцюг імуноглобуліну, де варіабельний домен легкого ланцюга містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 70, 71, 72, 73, 58, 74, 75, 76 або 77, і/або варіабельний домен важкого ланцюга містить амінокислотну
Зо послідовність, наведену в 5ЕО ІО МО: 63, 57, 64, 65, 66, 67, 68 або 69.
У інших варіантах здійснення спосіб блокування зв'язування І Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: будь-який з наступних наборів важких ланцюгів імуноглобулінів і легких ланцюгів імуноглобулінів: (1) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 1; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 3; (2) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЗЕО ІЮ
МО: 4; (3) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО І МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 5; (4) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 6; (5) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5БО ІЮ МО: 7; (6) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 3; (7) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 8; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 11; (8) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО І МО: 9; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 11; (9) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 10; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 11; (10) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 12; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 13; (11) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 14; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 15; (12) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: бо 79; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 3; (13) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО І МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 4; (14) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 5; (15) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 6; (16) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 7; (17) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 80; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ
МО: 3; (18) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗБО ІЮ МО: 82; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 11; (19) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність наведену в ЗЕО ІЮ МО: 83; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 11; (20) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 84; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕБО ІЮ МО: 11; (21) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 85; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 13; або (22) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ
МО: 86; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО
ІО МО: 15.
У інших варіантів здійснення спосіб блокування зв'язування І Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В мМабо НІГА-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: будь-які з наступних наборів варіабельних доменів важкого ланцюга і варіабельних доменів легкого ланцюга: (1) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 63, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність,
Зо наведену в 5ЕО ІЮО МО: 70; (2) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 71; (3) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 72; (4) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 73; (5) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 58; (б) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 57, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: 70; (7) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 64, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 74; (8) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 65, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 74; (9) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 66, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 74; (10) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в
ЗЕО ІО МО: 67, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 75; або (11) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 68, і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮО МО: 76.
У одному з переважних варіантів здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С,
НГ А-А, НГ А-В і/або НІ А-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: домен Мн, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 57, і домен Мі, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 58.
У іншому переважному варіанті здійснення спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С, 60 НГ А-А, НГ А-В і/або НІ А-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЗЕО ІЮ МО: 2, і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 7.
У іншому переважному варіанті здійснення, спосіб блокування зв'язування ІІ Т4 з НІ А-С,
НГ А-А, НГ А-В і/або НІ А-Е у людини, яка потребує цього, включає введення людині ефективної кількості антитіла або його антигензв'язувального фрагмента, що містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 80, і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 7.
Даний винахід також стосується способів лікування або профілактики інфекційного захворювання у індивідуума за допомогою введення індивідууму ефективної кількості антитіл проти ІТ4 або їх антигензв'язувальних фрагментів, представлених в даному описі (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1), які можуть бути ефективними для такого лікування або профілактики.
У варіанті здійснення винаходу інфекційне захворювання є вірусною інфекцією. У варіанті здійснення винаходу інфекційне захворювання є бактеріальною інфекцією. У варіанті здійснення винаходу інфекційне захворювання є паразитарною інфекцією. У варіанті здійснення винаходу інфекційне захворювання є грибковою інфекцією.
Даний винахід стосується способів лікування будь-якого зі злоякісних новоутворень або інфекційних захворювань, представлених в даному описі, за допомогою введення терапевтично ефективної кількості антитіла проти І/Т4 або його антигензв'язувального фрагмента (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1), необов'язково, разом з будь-яким із додаткових хіміотерапевтичних засобів або способів терапії, представлених в даному описі, а також композицій, що включають таке антитіло або фрагмент разом з таким додатковим хіміотерапевтичним засобом (наприклад, спільно складеним антитілом або фрагментом і додатковим хіміотерапевтичним засобом). "Індивідуум" є ссавцем, таким як, наприклад, людина, собака, кішка, кінь, корова, миша, щур, мавпа (наприклад, яванський макак, наприклад, Масаса їазсісціагіх або Масаса тшиаца) або кролик.
У варіанті здійснення винаходу антитіло проти І-Т4 (наприклад, повністю людське антитіло, таке як антагоністичні повністю людські антитіла) або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1) знаходиться в асоціації з додатковим хіміотерапевтичним засобом, таким як антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент. У варіанті здійснення винаходу додатковий хіміотерапевтичний засіб є антиеметиком, еритропоетином, ГМ-КСФ, вакциною, антитілом проти РО-І 1 або його антигензв'язувальним фрагментом, антитілом проти РО-ІЇ2 або його антигензв'язувальним фрагментом, антитілом проти РОЇ або його антигензв'язувальним фрагментом (наприклад, пембролізумабом або ніволумабом), 5-фторурацилом (5-ЕО), сполукою платини, бевацизумабом, даунорубіцином, доксорубіцином, темозоломідом топотеканом, іринотеканом, паклітакселом, доцетакселом, іматинібом або ритуксимабом.
Термін "в асоціації з" означає, що компоненти, антитіло проти ІТ4 (наприклад, повністю людське антитіло, таке як антагоністичні повністю людські антитіла) або його антигензв'язувальний фрагмент за даним винаходом (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1) разом з іншим засобом, таким як пембролізумаб або ніволумаб, можна складати в єдиній композиції, наприклад, для одночасного введення, або складати окремо в двох або більше композиціях (наприклад, наборі). Кожний компонент можна вводити індивідууму в інший час, ніж інший компонент, що вводиться; наприклад, кожне введення можна здійснювати неодночасно (наприклад, окремо або послідовно) з інтервалами протягом вказаного періоду часу. Крім того, індивідууму можна вводити окремі компоненти одним або різними шляхами (наприклад, де антитіло проти І-Т4 (наприклад, повністю людське антитіло, таке як антагоністичні повністю людські антитіла) або його антигензв'язувальний фрагмент (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1) вводять парентерально, а паклітаксел вводять перорально).
Аналізи й експериментальне і діагностичне застосування
Даний винахід стосується будь-якого способу отримання комплексу між антитілом проти
І-Т4 або його антигензв'язувальним фрагментом за даним винаходом і І/Т4 або його фрагментом, що включає наведення поліпептиду І-Т4 або фрагмента в контакт з антитілом проти І/Т4 або антигензв'язувальним фрагментом в умовах, придатних для зв'язування і утворення комплексу.
Антитіла проти І-Т4 (наприклад, повністю людські антитіла, такі як антагоністичні повністю людські антитіла) і їх антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1), можна використовувати як засоби для афінного очищення. У цьому бо способі антитіла проти ІЇ ТА і їх антигензв'язувальні фрагменти іммобілізують на твердій фазі,
такій як сефадекс, скло або агарозна смола, або фільтрувальному папері, способами, добре відомими у цій галузі. Іммобілізоване антитіло або фрагмент приводять в контакт зі зразком, що містить білок І-Т4 (або його фрагмент), що підлягає очищенню, а потім підкладку промивають придатним розчинником, за допомогою якого зі зразка видаляють матеріал, за винятком білка
І. Т4, зв'язаного з іммобілізованим антитілом або фрагментом. І нарешті, підкладку промивають розчинником, з допомогою якого елююють зв'язаний І/Т4 (наприклад, протеїн А). Такі іммобілізовані антитіла і фрагменти є частиною даного винаходу.
Даний винахід стосується клітинних способів ЕГІЗА з використанням антитіл проти ІГ-ТА і їх антигензв'язувальних фрагментів за даним винаходом (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1). У варіанті здійснення винаходу спосіб призначений для визначення того, чи містять клітини І ТА, і спосіб включає стадії: (|) приведення вказаних клітин, іммобілізованих на твердій підкладці (наприклад, мікропланшеті) і тестованих на наявність І Т4, в контакт з антитілом проти ІІТ4 або його антигензв'язувальним фрагментом за даним винаходом, (ії) необов'язково, промивання суміші для видалення незв'язаного антитіла проти І/Т4 або фрагмента, (ії) приведення антитіла проти І/Т4 або фрагмента в контакт з міченим вторинним антитілом або його антигензв'язувальним фрагментом, що зв'язується з антитілом проти ІЇТ4 або фрагментом, (ім) необов'язково, промивання комплексу для видалення незв'язаних антитіл або фрагментів і (м) детекції наявності мітки на вторинному антитілі або фрагменті; де детекція мітки свідчить про те, що клітини, що містять ІІ ТА, іммобілізовані на твердій поверхні.
Даний винахід стосується аналізів ЕГІЗА (твердофазних імуноферментних аналізів), що включають використання антитіла проти ІТ4 (наприклад, повністю людських антитіл, таких як антагоністичні повністю людські антитіла) або його антигензв'язувального фрагмента, представлених в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1). Наприклад, такий спосіб визначення того, чи містить зразок ІЇ-Т4 або його фрагмент, включає наступні стадії: (а) покриття субстрату (наприклад, поверхні ямки планшета для мікротитрування, наприклад, пластикового планшета) антитілом проти І-Т4 (наприклад, повністю людськими антитілами, такими як антагоністичні повністю людські антитіла) або його антигензв'язувальним фрагментом (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1); (Б) нанесення зразка, що підлягає тестуванню на наявність ІІ. Т4, на субстрат;
Зо (с) промивання субстрату для видалення незв'язаного матеріалу в зразку; (4) нанесення детектовано мічених антитіл (наприклад, зв'язаних з ферментом антитіл), також специфічних для антигену І! ТА; (є) промивання субстрату для видалення незв'язаних мічених антитіл; () детекції мітки на антитілах; якщо мічені антитіла зв'язані з ферментом, нанесення хімічної речовини, що перетворюється ферментом в детектований, наприклад, флуоресцентний, сигнал; і детекція мітки, наприклад, асоційованої з субстратом, свідчить про наявність білка І-Т4.
У варіанті здійснення винаходу мічене антитіло або його антигензв'язувальний фрагмент мітять пероксидазою, яка реагує з АВТ5 (наприклад, 2,2'-азино-біс(З-етилбензтіазолін-б- сульфоновою кислотою)) або 3,3, 5,5'-тетраметилбензидином, для досягнення зміни кольору, що піддається детекції. Альтернативно, мічене антитіло або фрагмент мітять детектованим радіоактивним ізотопом (наприклад, ЗН), який можна визначати за допомогою сцинтиляційного лічильника в присутності сцинтилятора.
Антитіло проти І-Т4 (наприклад, повністю людські антитіла, такі як антагоністичні повністю людські антитіла) або його антигензв'язувальний фрагмент за винаходом (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1) можна використовувати у вестерн-блотингу або імуноблотингу. Такий спосіб є частиною даного винаходу і включає, наприклад: (1) отримання мембрани або іншого твердого субстрату, що містить зразок, що піддається тестуванню на наявність І/Т4 або його фрагмента, наприклад, необов'язково, що включає стадію перенесення білків зі зразка, що піддається тестуванню на наявність ІЇТ4 (наприклад, після електрофоретичного розділення білків в зразку з допомогою ПААГ або ПААГ в присутності 5О5), на мембрану або інший твердий субстрат (наприклад, відомими у цій галузі способами (наприклад, напівсухого блотингу або танк-блотингу)); і приведення мембрани або іншого твердого субстрату, що піддається тестуванню на наявність зв'язаного ІЇТ4 або його фрагмента, в контакт з антитілом проти І Т4 або його антигензв'язувальним фрагментом за винаходом (наприклад, 1Е1, 2Аб, 307 і/або 2С1); (2) промивання мембрани один або більше разів для видалення незв'язаного антитіла проти ІЇТ4 або фрагмента і інших незв'язаних речовин; і (3) детекцію зв'язаного антитіла проти ІІ. Т4 або фрагмента. бо Така мембрана може мати форму, наприклад, нітроцелюлозної або вінілової (наприклад,
полівініліденфторидної (РМОЕ)) мембрани, на яку переносять білки, що піддаються тестуванню на наявність ІЇТ4, в неденатуруючому ПААГ (електрофорез в поліакриламідному гелі) або
ПААГ в присутності 5ЮО5 (електрофорез в поліакриламідному гелі в присутності додецилсульфату натрію) (наприклад, після електрофоретичного розділення в гелі). Перед приведенням мембрани в контакт з антитілом проти І/Т4 або фрагментом мембрану, необов'язково, блокують, наприклад, знежиреним сухим молоком або т.п. для зв'язування неспецифічних ділянок зв'язування білка на мембрані.
Детекція зв'язаного антитіла проти І/Т4 або фрагмента свідчить про те, що білок ІІ Т4 присутній на мембрані або субстраті і в зразку. Детекцію зв'язаного антитіла або фрагмента можна здійснювати за допомогою зв'язування антитіла або фрагмента з детектовано міченим вторинним антитілом (антитілом проти імуноглобуліну), а потім детекції наявності мітки вторинного антитіла.
Антитіла проти І-Т4 (наприклад, повністю людські антитіла, такі як антагоністичні повністю людські антитіла) і їх антигензв'язувальні фрагменти, представлені в даному описі (наприклад, 1Е1, 2Аб6, 307 і/або 2С1), також можна використовувати для імуногістохімії. Такий спосіб є частиною даного винаходу і включає, наприклад, (1) приведення клітин (наприклад, клітин мієлоїдного паростка, таких як моноцити, макрофаги або дендритні клітини), що піддаються тестуванню на наявність білка І-Т4, в контакт з антитілом проти І-Т4 або його антигензв'язувальним фрагментом за винаходом (наприклад, 1Е1, 2А6, 307 і/або 2С1) і (2) детекцію антитіла або фрагмента на клітинах або в них.
Якщо саме антитіло або фрагмент є детектовано міченими, їх можна визначати прямо.
Альтернативно, антитіло або фрагмент можна зв'язувати з детектовано міченим вторинним антитілом, а потім визначати мітку.
Приклади
Ці приклади призначені для ілюстрування даного винаходу, а не для його обмеження.
Композиції і способи, наведені в прикладах, є частиною даного винаходу.
У межах винаходу термін "р1Ее1 (51)39" стосується повністю людського тАбр проти ІЇТ4 1Е1, отриманого з генів М зародкової лінії, (ЗНМ4-3470 ії ІІ М1-40701, відповідно; що містить Ідс1 людини і константні домени лямбда людини. важкий ланцюг
ОМОГ ООМ САС І КРОЗЕТІ 5І ТСАУМааЕЗаУММУМІВОРРОКИаИї ЕУМІИЕІМНЗавтмМимМРБІ К
ЗАМТІЗМОТЗКМОВЕ5І КІ 554 ТААОТАМУМСАВІ РТВММТТАУБОЇГ МИ, ВИті МГУЗ5АЗТКОаРБЗМУЕРІ.
АРББКОТЗОСИТААІ аСІ МКОМЕРЕРУТУБУУМЗСИАЇ Т5аУНТЕРАМІ 0551: 51 55УМТУРБЗББІ СТ
ОТМІСМУМНКРОМТКМОКАМЕРКЗСОКТНТОСРРОРАРЕЇ І СИРБЗМУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗВТРЕМТСУМ
МОМЗ5НЕОРЕУКЕМУ УМВИМЕМНМАКТКРАЕЕОУМЗТУАММЗМІ ТМ НОБУУЛІ МСОКЕМКОСКМУЗМКАЇ Р
АРІЕКТІЗКАКИОРАЕЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТОЇ УК ЕУРБОІАМЕМЕЗМСОРЕММУКТТРРМУ
ГгоБразЕР УК ТОК АМОСаММЕЗСЗУМНЕАІ НМНУТОКОІ 5І РОК (ЗЕО ІО МО: 44) легкий ланцюг
ОБМІ ТОРРОУБИАРООВМУТІЗСТОЗЗЗМСАСУОУНУМООЇ РЕТАРК ІМаМОМАРЗаМУРОВЕ
ЗУБЗКБИАБАБІ АІТа ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУМгаСаИТтоїІ ТМ ФОРКААРЗМТІ ЕРРОЗЕЕГ О
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМУААБЗОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗС
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕО ІЮ МО: 45)
У межах винаходу термін "р1Е1 (054)" стосується повністю людського тАб проти ІГТ4 1Е1 (що містить мутації ОТЕ у важкому ланцюгу і СТЕ в легкому ланцюгу), отриманого з генів М зародкової лінії, (зНМ4-3470 і ІСІ М1-40501, відповідно; що містить 954 людини (5228Р) і константні домени лямбда людини. важкий ланцюг
ЕМО ОСМУСАЦІ І КРОЕТІ БІ ТСАУУСаБЕЗаУУМЗМІВОРРОаКаИаї ЕМІСЕІМНЗавтмМимМРБІ К
ЗАМТІЗМОТ5КМОЕ5І КІ 554 ТААОТАМУМСАВІ РТВММТТАУБОГ МИ, ВИті МГУ55АЗТКОаРБЗМУЕРІ.
АРСЗАБЗТЗЕЗТААЇ аСІ МКОУМЕРЕРУТУБМ МЗСОАЇ ТЗаУНТЕРАМІ О55О01 51 55УМТУРЗББІ СТ
КТУТСММОНКРОЬМТКУОКАМЕЗКМОа РРСРРСОРАРЕГНРІ СО РБЗУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУММО
М5БОБОРЕМОЕЄМУ УМрамЕМНМАКТКРАЕЄЕОЕМЗТУВУММІ ТМ НОУМІ МОКЕУКСКУЗМКаї Р
ЗІЕКТІЗКАКЕОРАВЕРОМУУТІ РРЗОЄЕМТКМОМУБІ ТОЇ УКИЕМРЗОІАМЕЖМЕЗМИОРЕММУКТТРРМІ. рзравзгЕв| УВІ ТМОКЗАУМОБаЙмММЕЗСЗУМНЕАІ НМНУТОКОБІ 5І БІ СК (ЗЕО ІЮО МО: 1) »константний домен Ідс4 людини (5228Р) 60 АЗБТКОаРБМЕРІ АРСЗАЗТЗЕБЗТААЇ СІ УКОМЕРЕРУТУБУУМЗИАІ ТЗОаМНТЕРАМІ О55І 51.
ЗМУ ГУРБЗБЗЗІ ТКТМИТОММОНКРОЬМТКУОКАМЕЗКМОаРРСОРРОРАРЕГРІ СИ РБЗУГБІ ЕРРКРКОТІ МІ
ЗАТРЕМТСУММОУМЗОЕОРЕМОЄМУ УМВаМЕМНМАКТКРАЕЄОЕЄЕМЗТУВУМ МІ ТМ НООУУІ МОаКЕ
УКСКУЗМКаї РУЬУІЕКТІЗКАКЕИОРАВЕРОМУУТІ РРЗОБЄЕМТКМОМУБІ ТОЇ УКОЕМРЗОІАМЕМЕЗМОа
ОРЕММУКТТРРМІ ОБразеЕРІ У5ВІ ТМОКЗАУМОБбСММУЕЗСЗУМНЕАІ НМНУТОКОБІ 5І І СК (ЗЕО ІЮ МО: 89) легкий ланцюг
ЕЗМ ТОРРІОУБСАРООВМТІЗСТОаЗЗЗМИаАаМУОУНУМООЇ РаТАРКО ІМаМЗМАРБЗаМУРОВЕ
ЗУБЗКБИАБАБІ АІТИаЇ ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУУРааИТтої ТМ а(ОРКААРЗМТІ ЕРРЗЗЕЕГ ОО
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМУААБЗОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗС
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕОІЮО МО: 3) »константний домен лямбда людини
СОРКААРБЗМТІ ЕРРЗБЗЕБЇ ОАМКАТІ УСІ ІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРУКОЗММК
УААБЗУІ БІ. ТРЕОМКЗНАЗУЗСОМТНЕСЗТМЕКТМАРТЕС5 (ЗЕО ІЮ МО: 90)
У межах винаходу термін "ТЕ1 (54)у" стосується повністю людського тАБб проти ІГТ4 1Е1 (що містить мутації О1Е ії М53О в легкому ланцюгу їі О1ТЕ їі 554А у важкому ланцюгу), отриманому з генів М зародкової лінії, І5ІНМ4-340 і ІІ М1-40701, відповідно; що містить Ід4 людини (5228Р) і константні домени лямбда людини. важкий ланцюг
ЕМО ОСМУСАЦІ І КРОЕТІ БІ ТСАУМСаБЕЗаУММЗМІВОРРОКаї ЕММІСБЕІМНАаЗТМУМРБЇ К
ЗАМТІЗМОТЗКМОВЕ5І КІ 554 ТААОТАМУМСАВІ РТВММТТАУБОЇГ МИ, ВИті МГУЗ5АЗТКОаРБЗМУЕРІ.
АРСЗАБЗТЗЕЗТААЇ аСІ МКОУМЕРЕРУТУБМ МЗСОАЇ ТЗаУНТЕРАМІ О55О01 51 55УМТУРЗББІ СТ
КТУТСММОНКРОЬМТКУОКАМЕЗКМОа РРСРРСОРАРЕГНРІ СО РБЗУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСУММО
М5БОБОРЕМОЄМУ УМрамМЕМНМАКТКРАЕЕОЕМЗТУВУУМІ ТМ НОСУМІ МЕКЕУКСКУЗМКаї Р
ЗІЕКТІЗКАКЕОРАВЕРОМУУТІ РРЗОЄЕМТКМОМУБІ ТОЇ УКИЕМРЗОІАМЕЖМЕЗМИОРЕММУКТТРРМІ. рзравзгЕв| УВІ ТМОКЗАУМОБаЙмММЕЗСЗУМНЕАІ НМНУТОКОБІ 5І БІ СК (ЗЕО ІЮ МО: 2) легкий ланцюг
ЕЗМ ТОРРІОУБСАРООВМТІЗСТОаЗО5ЗМИаАаМУОУНУМООЇ РаТАРКО ІМаО5МАРБЗОаМУРОВЕ
ЗУБЗКБИАБАБІ АІТИаЇ ОАЕОЕАОМУСОЗЕОМ5І БАУУРааИТтої ТМ а(ОРКААРЗМТІ ЕРРЗЗЕЕГ ОО
АМКАТІ МСПІЗОЕМРЕАМТМАМУКАОЗЗРУКАСМЕТТТРОЬКОЗММКМУААБЗОЗМІ ЗІ ТРЕОСМУКЗНАЗУЗС
ОМТНЕОЗТУМЕКТУМАРТЕС5 (ЗЕО ІЮ МО: 7)
Приклад 1: Ідентифікація і характеризація антитіл проти ІТ4
Отримання і ідентифікація антитіл
Батьківське тАб людини проти І/Т4 1Е1 ідентифікували з використанням платформи
ВЕТАВОСУТЕ ОІ5РІ АМУ (Вгеоибз-Музштота еї аЇ., Мешоа5 65(1): 57-67 (2014)). У платформі
КЕТКОСУТЕ ОІ5ЗРІАМ використовують ретровірусне перенесення генів антитіл людини в перед-В-клітини ссавців для отримання стабільних бібліотек дисплея антитіл з високою різноманітністю. Як вихідний матеріал для важких і легких ланцюгів антитіл використовували пуповинну кров людини, що містить наївні В-клітини. Клітинні бібліотеки антитіл, як правило, експресували х»108 різних повнорозмірних моноклональних антитіл людини (ізотипів НІдсС -4) на поверхні перед-В-клітин.
Попередні панелі антитіл компілювали зі збігів антитіл, ідентифікованих в З окремих групах скринінгів ФВЕТКОСУТЕ ОІЗРІ АУ. Кандидатів збагачували з урахуванням детекції зв'язування рекомбінантних антигену І/Т4 людини з клонами В-клітин за допомогою РАС5. Сортували передбачувані клони В-клітин і визначали послідовності їх антитіл. Потім ці послідовності використовували для отримання антитіл кандидатів і підтверджували зв'язування І/Т4 з використанням аналізу зв'язування трансфектантів клітин СНО з І/Т4 з використанням батьківських клітин СНО як негативного контролю. Кандидатів також піддавали скринінгу на специфічність до ІТ4 відносно близькоспоріднених членів сімейства ІСТ (РАС5 трансфектантів
СНО з 1Т2, КАТ ії ПКА?2 людини) і членів сімейства ІТ за допомогою проточно- цитометричного аналізу (КАТ, ПІ ЕА2, ПІ КА4, ПІ КАБ, ПІ ЕКАб, І Т2, Ті 3).
Моноклональні антитіла додатково тестували на їх здатність зв'язуватися з трансфектантами СНО з І/Т4 яванського макаки (передбачена послідовність з МСВІ) за допомогою ЕБАС5. тАБр-кандидатів також піддавали скринінгу на їх здатність блокувати зв'язування рекомбінантного ліганду НІ А-24-Ес з рекомбінантним білком І/Т4 в аналізах на основі І штіпех або з ІЇ/Т4-експресуючими клітинами СНО в аналізах на основі ЕАС5. бо Функціональну активність антитіл кандидатів аналізували трьома способами: 1) відновлення спонтанної супресії ІЛ-2 в І. Т4-трансфікованих Т-клітинах миші ЗА9У; 2) відновлення НІ А-а- залежної супресії стимульованої СО2О0ОРІ а дегрануляції тучних клітин у трансфектантів М/ТМО
І-ТА4 миші; і 3) Модуляція цитокінів в реакціях змішаної культури лімфоцитів із цільними РВМС.
Враховуючи вказані вище критерії скринінгу, вибирали вісім антитіл проти ІТ4 (1Е1, 152, 2А6, 205, ЗЕб, 3067, 2С1 і 5Аб) на основі їх функціональних і біофізичних властивостей.
Антитіла додатково аналізували і повторно оцінювали в ряді біофункціональних, біофізичних і фізико-хімічних аналізів. У функціональних аналізах оцінювали антитіло-опосередковане дозозалежне відновлення супресії ІЛ-2 клітинами ЗАЗУ і дегрануляцію тучних клітин, описаних вище. Здійснювали аналіз І иштіпех, клітинний аналіз блокування ліганду і аналіз конкуренції за ліганд і визначали властивості зв'язування і афінності до цільового антигену І-Т4, нецільових антигенів і субпопуляцій РВМСОС з використанням аналізів Віасоге і проточної цитометрії, відповідно. У біофізичних аналізах оцінювали стабільність (температура, рН), деградацію і агрегацію антитіл. Вивчали недоліки послідовностей і потенційні мотиви посттрансляційних модифікацій для виключення потенційних ризиків, пов'язаних з отриманням антитіл. І нарешті, кандидатів тестували в дослідженні регресування пухлини іп мімо з використанням стимульованих клітинами меланоми 5КМЕЇ 5 гуманізованих мишей.
Біофізичні властивості
Дослідження здійснювали з допомогою послідовності ЛЕЇ людини (кістяк (3054 людини з мутацією 5228Р), що транзиторно експресується в клітинах СНО. 1Е1 мало наступні фізико- хімічні характеристики: обчислені і експериментально визначені ізоелектричні точки (РІ) становили, відповідно, «-7,29 і -7,2, рівень агрегації (молекули НМУМ) становив «5 95, початкова
Тт »60 "С, Ті 65,2 С, Тто 78,8 "С, і воно було стабільним протягом щонайменше 5 циклів заморожування/розморожування. Послідовність /1Е1 початково містила /М-ділянку глікозилування в Мн СОК2, яку успішно коригували за допомогою мутації 554А без негативного впливу на зв'язування за результатами ВІАСОКЕ і функціонального аналізу. При дослідженнях в стресових умовах виявляли дезамідування залишку М5З3 в М-СОКЗ (» 13 95 в умовах високого
РН). М53 успішно коригували (М53О) без негативного впливу на зв'язування і в функціональному аналізі (відновлення вивільнення ІЛ-2 трансфектантами Т-клітин ЗАЗ з ІІ Т4 з використанням ТЕТ). Обидва М-кінцеві залишки О в Мн і Мі 1Е1 піддавали мутагенезу в Е (Мн-
Зо ОЛ1Е ії М-О1Е) для зниження ризику гетерогенності по причині дезамідування. У дослідженнях в стресових умовах, здійснених на мутантній послідовності ТЕТ (Мн СОТЕТЕТ, 554А/О1Е Мі, М5ЗО)
Ід0054 5228Р/лямбда), виявляли «17 95 окислення залишку УМ102 в Мн-СОКЗ в умовах примусового окислення з використанням ААРН (2,2'-азобіс(2 амідинопропан)дигідрохлориду) через б годин з мінімальним впливом на зв'язування і функцію. ААРН використовують для примусового окислення залишків Тгр і Меї. У тих же умовах визначали «8 до окислення М/7 в каркасі Мн без впливу на зв'язування і функцію. При пептидному картуванні визначали приблизно 8 95 афукозилованого антитіла. Цей результат може бути пов'язаний з тим, що молекулу експресували в транзиторно трансфікованих клітинах СНО.
Епітопне картування
Епітоп на І.Т4 для клону антитіла рТЄЕ1(С1) ідентифікували за допомогою мас-спектрометрії воднево-дейтерієвого обміну. Антитіло ріЄ1(с1) заздалегідь змішували з рекомбінантним, міченим гістидином позаклітинним доменом ІТ4, потім комплекс інкубували в дейтерієвому буфері. Ступінь вбудовування дейтерію вимірювали за допомогою мас-спектрометрії. Залишки
І-Т4 ГУАЕККВАБМУ (39-48 з ІІ Т4 без сигнальної послідовності) (ЗЕО ІЮ МО: 59) і ТКІКРЕГ (50- 56 з ІІ Т4 без сигнальної послідовності) (ЗЕО ІЮ МО: 60) і, в меншій мірі, МОРЕ (59-62 з ІІ Т4 без сигнальної послідовності) (ЗЕО 10 МО: 61) і НТОКМОСО (71-78 з І! Т4 без сигнальної послідовності) (5ЕО ІЮ МО: 62) ідентифікували як такі, що демонструють найбільші відмінності в міченні дейтерієм, порівняно зі зразком тільки з антигеном, що свідчить про те, що, ймовірно, вони є залишками, які взаємодіють з р1Е1((1) (фігура 1). Ці пептиди знаходяться на домені 1
І-Т4. Інші пептиди на домен 1 і 2, що демонструють менші відмінності в міченні дейтерієм, ймовірно, захищені завдяки конформаційній стабільності після зв'язування антитіла. Не спостерігали значних відмінностей в міченні в доменах З і 4.
При картуванні по кристалічній структурі ІТ4 людини залишки, захищені ріЕ1(554), утворюють нелінійний конформаційний епітоп, що містить три бета-тяжа і петлю (фігура 2А).
І-Т4 використовує дві поверхні зв'язування для залучення свого ліганду НІ А-а (5НігоівНі єї аі, 2006): ділянку 1 для зв'язування бета-2-мікроглобуліну, що знаходиться в домені 2 ІЇ Т4, ї ділянку 2 для зв'язування важкого ланцюга НІ А-б, що знаходиться в домені 1 І-Т4 (фігура 2В).
Ділянка 1 включає залишки ІСТ4 Ттр-67, А5р-177, Авп-179 і МаІ-183 (нумерація по ЗПігої5пі еї а!, 2006). Ділянка 2 включає І Т4 залишки Ага-36, Гу-38, І уб-42, Пе-47 і Тпг-48 (нумерація по бо зпігоїзПі еї аі, 2006). Дані НОХ-М5 в цьому описі свідчать про те, що Туг-38, ГГ уб5-42 і ТП -48
(нумерація по ЗПігої5Ппі еї аІ, 2006) є частиною епітопу р1Е1(С1) на домені 1 І-Т4 як залишки
Тук-40, І уб-44 і Тпг-50 ІЇ/Т4 людини (фігура 2А). Це свідчить про те, що епітоп ІЇТ4 людини, зв'язаний рТЕ1(С1), перекривається з епітопом ділянки 2, зв'язаним лігандом НІ А-(.
Приклад 2: Афінність, властивості зв'язування і блокування тАБ проти І.Т4 1Е1
Афінності зв'язування 1Е1((54) ії НГА-С1 з ІЇ/Т4 людини, що визначаються за допомогою поверхневого плазмонного резонансу (5РЕК)
Зв'язування 1Е1(04) і НІ А-21-Ес (рекомбінантного позаклітинного домену НІ А-а (ізоформи 1), злитого з Ес-доменом ЇД01 людини для отримання розчинного білка НІ А-С1) з І Т4-Нів (рекомбінантним позаклітинним доменом ІЇТ4 людини, злитим з полігістидиновою міткою для отримання розчинного білка ІЇТ4) аналізували за допомогою Віасоге. 1Е1(54) або НІ А-С1-Ес фіксували на чипі Віасоге за допомогою фіксації через Ес. Потім мономерний І Т4-Нів тестували на зв'язування, і дані свідчили про те, що І-Т4-Нів зв'язувався з 1Е1((54) з у 600 разів більш високою афінністю, ніж НІ А-С11-Ес (таблиця 3).
Таблиця З
ІТ4-Нів зв'язується з 1Е1(04) з більш ніж в 600 разів більшою афінністю, ніж НІ А-(21-Ес.
Кінетика зв'язування 1:1 і аналізи рівноваги свідчать про 630- і 670-кратних відмінностях.
НСА-с1Рс(55А)7777777771Ї7771711- 1111710 - | 1лв-05| 7 670
Аналіз поверхневого плазмонного резонансу (5РК) за допомогою пристрою Віасогте Т200 (СЕ НЕАГТНСАРКЕ) використовували для визначення моновалентних афінностей тАр Ідс4 проти І-Т4 людини (1Е1(054)) і злитого білка НІ А-С1-Ес (НІ А-С1-Ес) до міченого полігістидином
І-Т4 людини (І/Т4-Ні5). тАр або Ес-злитий білок фіксували на сенсорному чипі СМ5, підготовленому з використанням набору для фіксації Ес людини (ЗЕ НЕАТНСАКЕ,), і на цю поверхню ін'єктували серії титрованих концентрацій І/Т4-Ні5. Для апроксимації кожної серії титрування до моделі зв'язування 1:1 використовували програмне забезпечення Віасоге Т200.
Визначали константи швидкості асоціації (Ка, М- с) і дисоціації (Ка, с") для кожного набору титрованих концентрацій і використовували їх для обчислення константи дисоціації, Ко (М)-Коп/Коп для кожного титрування. Як показано в таблиці 1, моновалентні афінності (Ко) тАБб 1Е1(54) ії НГА-С1-Ес до І Т4 людини, міченого Ні, становили 17 нМ і 11 мкМ, відповідно, при цьому співвідношення Ко свідчить про 630-кратну відмінність. Через високі кінетичні константи
Ка і Ка, для підтвердження низької афінності НІ А-21-Ес до ІСТ4-Ніх5 також використовували стаціонарну апроксимацію (З55А).
Зо Блокування зв'язування НІ А-б з трансфектантами Т-клітин ЗА9У з І/-Т4 з використанням 1Ет1(Сс4)
Трансфектанти Т-клітин ЗАЗ з ІЇ/Т4 заздалегідь обробляли 1Е1(54) або ізотипічним контролем в різних дозах з подальшою вторинною детекцією 1Е1((04) (фігура ЗА) або за допомогою обробки фіксованою концентрацією біотинільованого химерного НІ А-С21-Ес для оцінки здатності 1Е1(54) блокувати когнатний ліганд (фігура 3В). 1Е1(54) і НГ А-С-Ес визначали за допомогою проточної цитометрії. Дані свідчили про те, що 1Е1(54) блокувало зв'язування
НГА-С1-Ес дозозалежним чином.
Аналіз І итіпех і клітинні аналізи блокування ліганду і конкуренції за ліганд
Антитіла 1Е1, 2Аб, 2С1 і 307 тестували в аналізі І штіпех і клітинному аналізі блокування ліганду і конкуренції за ліганд на здатність інгібувати взаємодію рекомбінантного димерного
НГ А-О з антигеном ІІ Т4, з'єднаним з частинками або експресованими клітинами СНОЛІ ТА.
У аналізах блокування ліганду і конкуренції за ліганд на основі І штіпех використовували рекомбінантний антиген І/Т4 людини, хімічно з'єднаний з частинками І итіпех. У аналізі блокування частинки заздалегідь інкубували з діапазоном доз (0,5-9000 нг/мл в серійному розбавленні 1:3) варіантів пІдс4 антитіла проти І Т4 1Е1, 2Аб, 2С1 або 307. Потім зв'язаний з частинками антиген ІЇТ4 тестували на зв'язування з розчинним біотинільованим злитим білком
НГА-С/Ес у концентрації 50 нМ. У аналізі конкуренції за ліганд І итіпех з'єднані з антигеном частинки І итіпех заздалегідь інкубували з розчинним біотинільованим злитим білком НІ А-СИРс у концентрації 50 нМ перед титруванням (0,5-9000 нг/мл в серійному розбавленні 1:3) варіантів під антитіла проти І.Т4 1Е1, 2Аб, 2С1 або 307. У обох варіантах аналізу взаємодію І ТА:НІ А- б визначали з використанням РЕ-кон'югованого антитіла проти стрептавідину і визначали значення ІСьо. Всі антитіла, що тестуються, демонстрували дозозалежне блокування зв'язування НІ А-С зі з'єднаним з частинками І итіпех І-Т4/Рс, і значення ІСзо наведені в таблиці 4. Всі антитіла, що тестуються, також демонстрували дозозалежну конкуренцію з НІ А-с за зв'язування зі з'єднаним з частинками І-ТА/Ес (дані не представлені).
Таблиця 4
Аналіз блокування ліганду І итіпех
У клітинних аналізах блокування ліганду і конкуренції за ліганд слідували принципу, схожому з тим, що описується для аналізів І штіпех, і в них для поверхневої експресії антигену використовували лінію клітин СНО/ЛІ Т4. У аналізі блокування клітини заздалегідь інкубували з антитілом, що тестується, з використанням діапазону доз 1-20000 нг/мл в серійному розбавленні 1:3. Потім антигени ІГТ4 тестували на зв'язування з розчинним біотинільованим злитим білком НІ А-С/Рс у концентрації 5 мкг/мл. У конкурентному аналізі використовували зворотний варіант. Клітини заздалегідь інкубували з розчинним біотинільованим злитим білком
НГА-С/Ес у концентрації 5 мкг/мл перед додаванням титрованих доз антитіла, що тестується, в діапазоні 1-20000 нг/мл в серійному розбавленні 1:3. Взаємодію І/Т4:НГА-З визначали з використанням РЕ-кон'югованого антитіла проти стрептавідину. Всі антитіла, що тестуються, демонстрували дозозалежне блокування зв'язування НІ А-С з експресованим СНО |ТА, і значення ІСво наведені в таблиці 5. Всі антитіла, що тестуються, також демонстрували дозозалежну конкуренцію з НІГА-З за зв'язування з експресованим СНО І/Т4 (дані не представлені).
Таблиця 5
Клітинний аналіз блокування ліганду
Блокада зв'язування ліганду не-НІ А-с МНС класу І з трансфектантами Т-клітин ЗАЗ з ІІ Т4 з використанням ріЕ1(с1)
Трансфектанти Т-клітин ЗАЗ з ІІ Т4 заздалегідь обробляли р1Е1(С1) або пІдС1 ізотипічного контролю в різних дозах з подальшою обробкою фіксованою концентрацією мічених флуорохромом тетрамерів НІ А-Е або СОТа, або дексамерів НГА АО2:01, або НІГ А"В7:02, для оцінки здатності р1Є1(с1) блокувати ліганди не-НІ А-с МНС класу І. Зв'язування НІ А-А, НІ А-В і
НГА-Е з Ії Т4 інгібували за допомогою ріЕ1(с1) дозозалежним чином (фігура 4), що свідчить
Зо про здатність рТЕ1(С1) блокувати інші відомі ліганди МНС класу І.
Блокада зв'язування АМОРТІ з трансфектантами Т-клітин ЗАЗУ з І/Т4 з використанням рРТЕТ(С1)
Нещодавно виявлено, що ангіопоетин-подібні (АМОРТІ) білки зв'язуються з І Т4, експресованим гемопоетичними стовбуровими клітинами людини (2Пепд еї аї., Маїшиге. 2012
Мау 30:485(7400):656-60 и Оепо еї а. Віосд. 2014 Ацд 7;124(6):924-35). Для тестування того, чи може ріЕ1(С1) блокувати зв'язування членів сімейства АМОРТІ. з ІЇТ4, купували комерційно доступні білки АМОРТІ. або їх фрагменти і тестували їх на зв'язування з трансфектантами Т- клітин ЗАЗ з ІІ Т4, заздалегідь обробленими р1Е1(С1). Дані про зв'язування свідчать про те, що
АМОРТІ, 4 і, потенційно, 7 можуть зв'язуватися з ІЇТ4, але не з клітинами з контрольним вектором, при концентраціях білка, що тестуються. ріЕт1(1) могло повністю блокувати зв'язування білка АМОРТІ. в насичувальній дозі (фігура 5).
Специфічність 1Е1(54) відносно сімейства ІТ при зв'язуванні з трансфектантами Т-клітин
ЗАЗУ з ІТ людини
Специфічність 1Е1(054) відносно сімейства ІТ при зв'язуванні з членами сімейства ІТ людини аналізували за допомогою проточної цитометрії клітин з використанням лінії Т-клітин
ЗА9, трансфікованих для експресії І-Т4, І Т2, І-ТЗ (два варіанти), ІСТ5, ГП КВ5, ГІСКАТ, ПІІ ВА2,
І-Т7, Т8 або І/Т11 людини. 1Е1(054) специфічно зв'язувалося з І /Т4 людини і не демонструвало перехресну реактивності відносно якого-небудь іншого тестованого члена сімейства ІІТ (фігури 6А і 68).
Приклад 3: Біологічна активність тАб проти І/Т4 1ЕЇ1 в сконструйованих і первинних клітинах
Здатність 1Е1(054), 2Аб, 2С1 і 307 реверсувати супресію інтерлейкіну-2 в аналізах сконструйованих клітин ЗАЗ з ІІ Т4
Для стимуляції контрольних Т-клітин миші ЗАУ використовували антитіло проти СОЗ, що призводило до підвищення вивільнення ІЛ-2. На відміну від цього, трансфектанти Т-клітин ЗА9 з І/Т4 не могли експресувати ІЛ-2 при стимуляції СЮОЗ, ймовірно, внаслідок перехресної реактивності ІТ4 з молекулами МНС класу І миші або через невідомі ксено-ліганди. Очевидно, ця взаємодія призводить до спонтанної мультимеризації/активації рецептора ІСТ4, що призводить до супресії опосередкованого антитілом проти СОЗ вивільнення ІЛ-2. Таким чином, антитіло, що функціонально зв'язується з ІЇТ4, що блокує взаємодію І Т4 з ксено-лігандами і/або інгібує мультимеризацію рецептора, повинно відновлювати вивільнення ІЛ-2. 1Е1(54), 2А6, 2С1 і 307 тестували на опосередковане вивільнення ІЛ-2 трансфектантами
Т-клітин миші ЗА9У з ІЇ/Т4. 1Е1(54), 2Аб6, 2С1 або 307 додавали до ІЇТ4- трансфектантів Т- клітин миші ЗАЗ і вимірювали вивільнення ІЛ-2 фотометрично за допомогою ЕГІЗА після 24 годин опосередкованної антитілом проти СОЗ стимуляції клітин. Типова крива доза-ефект для 1Є1(04) представлена на фігурі 7. Значенія ЕСво антитіл, що тестуються, визначали за допомогою кривих доза-ефект, і вони представлені в таблиці 6.
Таблиця 6
Аналіз репресії ІЛ-2
Аналіз дегрануляції клітин М/УТМС миші (тучних клітин дикого типу) (тільки якісний) рТЕ1(04) і 1Е1(054) тестували на відновлення І Т4:НІ А-С-залежної дегрануляції тучних
Зо клітин. Тучні клітини УУТМС миші трансфікували з використанням ІЇ-Т4 людини і стимулювали зв'язаним з планшетом антитілом проти СО2О0ОКі а. Антитіло-опосередковане перехресне зшивання СО2ООВІ а призводило до дегрануляції тучних клітин за допомогою активації мотивів
ІТАМ, що виявляються у внутрішньоклітинному домені СО220Аіа. Дегрануляцію можна вимірювати колориметрично за допомогою аналізу вивільнення вмісту гранул у супернатантах, що аналізуються. У присутності зв'язаного з планшетом тетрамера НІА-С |інгібували
СО200ВІ а-опосередкованну дегрануляцію тучних клітин в трансфектантах ІЇТ4. Попередня обробка трансфектантів М/ТМС з І/Т4 з використанням ріЄЕї1(084) або 1Е1(54) перед стимуляцією зв'язаним з планшетом антитілом проти СО200КіІа і тетрамером НІА-С реверсувала інгібування дегрануляції дозозалежним чином (фігура 8).
Ефект 1ЄЕ1(054) відносно секреції цитокінів мієлоїдного походження первинними мононуклеарними клітинами периферичної крові (РВМС) людини
Оцінка 1Е1(054) в аналізі стимуляції І Р5 первинних РВМС людини
Як повідомляють, ФНОса, класичний прозапальний цитокін мієлоїдного походження, експресується моноцитами, які експресують низькі рівні І-Т4 при стимуляції ГР5. Моноцити з високою експресією ІТ4 не експресували стільки ж ФНОа, і виявляли, що відсутність експресії
І-Т4 є характерною ознакою моноцитів, виділених з пацієнтів з псоріатичним артритом (Вегдатіпі еї аіІ., РГо5 Опе. 2014 Маг 27;:9(3):692018). Експресія І/Т4 на моноцитах може інгібувати ефекторну активність мієлоїдних клітин і антагоністично діяти на індукцію прозапальних цитокінів (наприклад, ФНОЯ) в присутності прозапальних стимулів (наприклад,
ІРБ). У зв'язку з цим, цільні РВМС, виділені зі здорових людей-донорів, обробляли І РЗ і з допомогою 1Е1(54) оцінювали здатність антагонізму І-Т4 призводити до підвищення експресії прозапальних мієлоїдних цитокінів. На фігурах 9А і 9В представлені дані одного з трьох експериментів з використанням З донорів в кожному, що свідчать про те, що 1Е1(54) підвищувало І Ре-залежну експресію ГМ-КСФ і ФНОса (цитокінів мієлоїдного походження) дозозалежним чином.
Оцінка 1Е1(054) в аналізі стимуляції антитілом проти СОЗ первинних РВМС людини
Для оцінки того, чи може обробка 1ЄЕ1((854) підвищувати експресію Т-клітинних або мієлоїдних ефекторних цитокінів в присутності субоптимального Т-клітинного стимулу, цільні
РВМС, виділені зі здорових людей-донорів, обробляли антитілом проти СОЗ для індукції проліферації Т-клітин, і з допомогою 1Е1((534) оцінювали здатність антагонізму І/-Т4 модифікувати експресію цитокінів. На фігурах 10А і 108 показані дані одного з трьох експериментів з З донорами кожний, що свідчать про те, що 1Е1(054) підвищувало залежну від антитіла проти СОЗ експресію ГМ-КСФ і ФНОс дозозалежним чином.
Приклад 4: Протипухлинна ефективність антитіл проти ІЇТ4 в моделі пухлини З5К-МЕЇ -5 на гуманізованих мишах
Протипухлинна ефективність 1Е1, 2Аб, 2С1 і 205 в моделі пухлини на гуманізованих мишах
Антитіла Т1Е1, 2Аб, 2С1 і 205 тестували в аналізі іп мімо регресування пухлини.
Гуманізованим мишам (мишам М5О, реконструйованим з використанням гемопоетичних стовбурових клітин людини для імітації будови імунних клітин людини) інокулювали 1х105 клітин меланоми 5КМЕЇ 5 (НГ А класу А"02:01) і здійснювали моніторинг росту пухлини до досягнення середнього розміру 150 мм? через приблизно 35 днів. Семи рандомізованим групам мишей, кожна з яких включає шість тварин, підшкірно вводили антитіло ізотипічного контролю (підт пІдсЯ4, по 20 мг/кг кожного) або 20 мг/кг будь-якого з наступних антитіл проти ІСТ4: 1Е1-- дат, 1Е1-іс1 (М2970О) (Рсо-наївний мутант), 1Е1-Іда4, 2Аб6-Ідс24, 2С1-Іі954 і 205-І9с4.
Мишам вводили дози кожні сім днів (в день 35, 42 і 49; усього три дози) і вимірювали розмір пухлини до дня 63. Результати свідчать про знижений ріст пухлини у мишей, яким вводили 1Е1 (дат, Ідса1-(М2970), Ідс2а4), 2А6-Ід054 і 205-194, порівняно з тваринами, яким вводили ізотипічний контроль (фігура 17). На відміну від цього, у мишей, яким вводили ізотипічний контроль або антитіло-кандидат проти ІІ Т4 2С1, не спостерігали зниження росту пухлини.
Протипухлинна ефективність р1Е1(54) в моделі пухлини на гуманізованих мишах
Зо Розробляли модель пухлини на гуманізованих мишах для тестування ефективності іп мімо рТЕ1(с4) відносно інгібування росту пухлини. Мишей МО з імунодефіцитом реконструювали з використанням гемопоетичних стовбурових клітин людини. Після підтвердження того, що миші мають периферичні СО45-- імунні клітини людини (225 95 РВМОС), їх інокулювали пухлинними клітинами 5К-МЕЇГ-5, пухлинною лінією, отриманою з меланоми шкіри людини. Ці клітини вибирали по експресії НІ А-С2х. Після інокуляції пухлинам дозволяли рости до розміру приблизно 150 мм3. Мишей випадково розподіляли по групах і вводили пІдс4 ізотипічного контролю або
РТЕТ(С4).
У мишей, яким вводили ріЄЕ1((4), спостерігали інгібування росту пухлини протягом дослідження (фігура 11А). Спостерігали одне повне і одне часткове регресування при використанні р1ЄЕ1((34) (фігура 11С).
Протипухлинна ефективність 1Е1(54) в моделі пухлини на гуманізованих мишах
Протипухлинну активність 1Е1((54) тестували в моделі пухлини 5К-МЕЇ -5 на гуманізованих мишах. У цій моделі мишей М5О5 (МОО.Са-Рікасеса ЦегдітУлв2уУ) з імунодефіцитом опромінювали і ін'єктгували їм гемопоетичні СОЗ4- стовбурові клітини людини, виділені з пуповинної крові. Після декількох місяців приживлення в крові мишей можна визначити імунні клітини людини. Потім мишам підшкірно (5С) імплантували лінію клітин 5К-МЕЇ -5, отриману з меланоми людини.
У цьому дослідженні мишам М5О, яким у віці 3-4 тижнів трансплантували отримані з пуповинної крові людини СО34ж- клітини З окремих донорів, у віці приблизно 20 тижнів ін'єктували 5С 1х105 клітин ЗК-МЕЇГ -5. Гуманізованих мишей М5О, які несуть пухлини 5К-МЕЇ - 5, приписували до 2 груп лікування по 6 мишей на групу (З миші з кожної когорти з донорськими сОр34 клітинами людини на групу лікування), коли середній розмір пухлини досягав приблизно 100 мм3 через 21 день після інокуляції пухлини (00 рандомізації). Мишам, які несуть пухлини, ін'єктували 50 20 мг/кг ТЕ1(54) або тАбБ пІдСі4 ізотипічного контролю кожні 7 днів у кількості 4 дози. Об'єми пухлин піддавали моніторингу кожні 7 днів після початку лікування.
Протипухлинна ефективність в групі лікування 1Е1(54) була значне вище, ніж в групі ізотипічного контролю (р:0,001 з дня 28 по день 49) (фігура 12А). Кінцева маса пухлини у мишей, яким вводили 1Е1(54), була нижчою, ніж у мишей, яким вводили ізотипічний контроль (фігура 12С). Загалом, результати свідчать про значну протипухлинну ефективність 1Е1((4) в бо дозі 20 мг/кг в моделі пухлини 5К-МЕГ-5 на гуманізованих мишах. При введенні 1Е1(54) не спостерігали ефекту відносно маси тіла (фігура 128) і маси селезінки (фігура 120).
Приклад 5: Зв'язування 1Е1((4) з трансфектантами Т-клітин ЗАУ9У людини з ІТ, специфічне відносно гаплотипів ІІ Т4
Дані про однонуклеотидні поліморфізми із загальнодоступних джерел (проект "1000 геномів", фаза 3) використовували для визначення частот алелей І/Т4 в африканських, європейських, азіатських і пвіденно-азіатських популяціях. Визначали послідовності гаплотипів, які експресуються з частотою 5 95 або більше в будь-якій популяції (гаплотипи 1,2,5,7,9110 в таблиці 7), і експресували їх в Т-клітинах ЗАЗ. 1Е1((54) зв'язувало всі гаплотипи, що тестуються, при використанні насичувальних доз антитіла (фігура 13). Гаплотип 2 відповідав консенсусній послідовності, наведеній в Опіргої. Гаплотип 5 використовували у функціональних аналізах і аналізах з використанням ліганду. Дані про зв'язування гаплотипів свідчать про те, що 1Е1(54) зв'язується з усіма основними алельними варіантами, що тестуються.
Таблиця 7
Частоти гаплотипів ІЇ.Т4 в популяціях людини тип і 1 дАтвос о Їм ЇЇ но; с 1 в 1023| 009 | 05 |060| 05 2 пПсвос Е | М ЇЇ нн | с | вн |0л4| 004 | 022 |0081 028
З АТС 0 ЇМ ЇЇ ХХ | с | в | | 003 4 Псбсс є 1 мМ 1 нн 1 м 1 в 1 1 1|001 1 ж 5 ІАСАСТІ 0 | М | У | М | нн 030! 07 | 058 10081 037 6 ІАСАССЇ ОЇ М ЇЇ 7 | М | я 1002, 004 | | |002. 7 дСосСт о Її М ЇЇ н | М | нн |002| 006 8 СОС о | М ЇЇ нс 11 н їЇ 1|0092| |/ 9 дсассТ о 1 М ЇЇ нм | в 1002 | |001|0 ох | но | с | я ов ом ого
ЩеМмРу | 080 | 024 | 045 | 046 | 046 хГаплотипи для кожної популяції наведені з урахуванням даних фази З проекту "1000 геномів" і визначені з використанням РІ ІМК для аналізу несинонімічних 5МР, вказаних у базі даних ЕХАС.
Приклад 6: Експресія РНК ІІ Т4 у типах пухлин і клітин з урахуванням даних з баз ТСОА і
Вісеріїпі
Експресію ІСТ4 у типах пухлин і популяціях клітин визначали з використанням загальнодоступних наборів даних секвенування РНК за допомогою Отісзоїй (Оіадеп, Сагу, МО).
Набір даних ТССА (ТСОСА В38 20171002 м4, пере: /дас ропаї.псі.піп.дом/) складається із 11292 зразків з даними секвенування РНК. Набір даних Вішйергіпі (Вісергіпі В38 20170216 м2, пОру/Лимли.ріпергіпі-ерідепоте.ец/) складається із 258 зразків нормальної крові для 55 типів клітин з даними секвенування РНК. Типи пухлин з найбільш високою експресією ІІ-Т4 на рівні
РНК включають ГАМІ. (тобто АМІ), БІ ВС (тобто ОСІ ВСІ3, ТОСТ, МЕЗО, КІКС (фігура 14А). Типи клітин з найбільш високою експресією І-Т4 на рівні РНК включають нейтрофіли, моноцити, остеокласти, еозинофіли, макрофаги і дендритні клітини (фігура 148). У цьому наборі даних лімфоцити мали низьку експресію ІІ Т4 або не мали її взагалі. ЕРКМ 1 (або ГОС2(ЕРКМ 0,1) від 0) є найбільш широко поширеним евристичним фіксованим пороговим значенням, хоча більш низькі значення ЕРКМ можуть свідчити про наявність генів з "низькою експресією" в зразку.
Приклад 7: Зв'язування 1Е1(054) з мієлоїдними клітинами зі зразків гістокультур пухлин
Зо Гістокультури отримували зі свіжих зразків пухлин людини (хірургічна резекція) і обробляли
Іц904 проти К5ЗМ (ізотипічним контролем) або 1Е1(554) в дозі 20 мкг/мл протягом 18-24 годин при 37 "С. Після обробки зрізи пухлин розщеплювали на суспензії окремих клітин і забарвлювали для ЕАС5. На точкових діаграмах і контурних діаграмах представлені дані ЕАС5 для суспензій окремих клітин з гістокультур пухлин КСС (фігура 15А) або СКС (фігура 158В). Всі мієлоїдні клітини можна розділяти на чотири субпопуляції з урахуванням експресії СОббЬ і/або СО14. Ці чотири субпопуляції мієлоїдних клітин одночасно аналізували на експресію //Т4 з використанням неконкурентного комерційного РЕ-кон'югованого антитіла проти І-Т4 (Віої едепа, кат. Мо 338706, Зап Оіедо, СА) і зв'язаного з поверхнею клітини 1Е1(054) з використанням вторинного антитіла проти Ідс4. Спостерігали хорошу кореляцію між І Т4-- клітинами і ТЕ1(Сс4)- клітинами в гістокультурах, оброблених 1Е1(054). Спостерігали, що в цих зразках лімфоцити, які інфільтрують пухлину, були І Т4 і 1Е1(54) клітинами.
Обсяг даного винаходу не обмежений конкретними варіантами здійснення, представленими в даному описі. Фактично, обсяг даного винаходу стосується варіантів здійснення, конкретно наведених в даному описі, і інших варіантів здійснення, не наведених конкретно в даному описі; варіанти здійснення, конкретно наведені в даному описі, не претендують на вичерпний характер. Різні модифікації винаходу в доповнення до модифікацій, представлених в даному описі, будуть очевидні фахівцям в цій галузі з наведеного вище опису. Такі модифікації призначені для включення до обсягу формули винаходу.
Протягом всієї даної заявки процитовані патенти, патентні заявки, публікації, описи продуктів і способів, описи яких включені в даний опис як посилання в повному обсязі для всіх цілей.
Список послідовностей
Дана заявка подана з копією списку послідовностей в машиночитаній формі (СКЕ). СКЕ названа 24443 РСТ ЗЕО ІЗТІХІ, створена 22 березня 2018 року, її розмір становить 128042 байт, вона включена в даний опис як посилання в повному обсязі.
СПИСОК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1105 Мекск 5Ппакр « РопПше Согр. доусе-5НаїкП, Ваграта А 7апіда, Іців А
Віапиза, Міїап А зспПивбег, Апагеа А 5спц1іЄле, Когпеїїа А «1205 АНТИТІЛА ПРОТИ ІГТ4 І АНТИЗВ'ЯЗУВАЛЬНІ ФРАГМЕНТИ «1305 24443-ЩО-РСТ «1505 62/483,019
Зо «1515 2017-04-17 «1605 190 «1705 РасепеІпПп уегвіоп 3.5 «2105 1 «2115 448 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 1 сі Маї б1іп Гец сіп сіп Тер с1у Аїа сС1у гей гей пув Рго бет б1ц 1 5 10 15
ТпПх Гец бБет Гецп ТПї Сув Аїа Уа1 Тук сіу с1у бБет РПпе Бек с1Уу Тук 20 25 30
Тут Ткр бет Тгр І1е Агд біп Рго Рго сбіу Ппув с1у Гей сі ТкЕр Ше 35 40 45 сС1у б1п І1їе Авп Нів Бек Сіу бБет ТПг Авп Туг Авп Ркго бет Іец Гув 50 55 бо зек Агкд Уаі1і ТПїх Іїе бек УМаії Авр ТПт бБет Гув Авп сбіп РоПе бег Гей
65 70 75 80
Туз Гец бБет бБет Уаі ТПх Аза Аза Авр ТПтІ Аїа Уаі1ї Тут Тук Сув Аїа 85 30 935
Ат9д Гей Рго ТПтІ Акуд Ткр Уаї! ТПї ТПїІ Агуд Тут Робе Авр їец Тгр 01У 100 105 110
Атуд б1у ТПт Гец Уаі ТПтІ Уаї бет бБет Аїа бет ТПт Гув сіу Рко 5бег 115 120 125 уаї Рпе Рго Гец Аїа Рко Сув бБет Агд Бех ТПтІ бет біц бет ТПтІ А1а 130 135 140
Аїа теп сб1у Сув Гец Уаі Пув Авр Тут РпПе Рго сіц Рго Уаі! ТПт Уаї 145 150 155 160 бек Тер Авп бехт С1у Аїа їеец ТПт бегт с1у Уаї Ніз Трк Ріе Рго А1а 165 170 175
Ууаї Гей сбіп бБет бБет сіу Гецп Тук бБет Гей бБет бБет Уаі Уа1і ТПт Уаї 180 185 190
Зо
Рго бек бет бБет КГец біу ТПтї Кпув ТПт Тут ТПт Суз Авп Уаї Авр Нів 195 200 205
З5
Туз Рко бБет Авп ТПІ Кпув Уаі Авр ув Акд Уаі сі бБет Гуз Тух щу 210 215 220
Рго Рко Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Сбіц Рпе Гец сіу С1у Рго 5ег 225 230 235 240 уаї Рпе Гецп Рпе Рко Рго Ппув Ркго Гуз Авр ТПтІ Ггец Меє Іїе 5Бет Агд 245 250 255
ТПЕ Рко сід Уаї ТПї Сув Уа1ї Уа1 Уа1 Авр Уаії бБет сбіп сб1цп Авр Рго 260 265 270
Сі Маї с1іп РбБе Авп Тгр Тук Уаї Авр сС1у Уа1 с1і1ц Уаї Ніз Авп Аїа 275 280 285
Туз ТПжт Кпув Рго Агкд бі бі біп Рбе Авп о бет ТПІ Тут Акд Уаі1ї Уаї 290 295 300 бек Уаї Пец ТртІ Уаї Гецш Ніз Сіп Авр Тгр їец Авп с1у Ппув біц Туг 305 310 315 320 туз Сув пув Уаї бек Авп гув бі1у Пец Рго бет бБет Іїе сі Гуз ТЕПкК 325 330 335
Іїе Бек Гпув Аїа пув сіу біп Рго Агд Сіц Рго біп УМаії Тук ТПкг Гей 340 345 350
Ргто Рго бек біп бі біцш Меє ТПг Гув Авп о сіп Уаії бек Ге ТПкК Сув 355 З6о 365 теп Уаї пув с1у Рре Тук Рго бек Авр Іїе Аїа Уаі сій Тгр сіц бек 370 375 380
Авп о б1у біп Рго с1іц Авп Авп Тут Гуз ТПї ТБбтг Рго Рго Уаі Іец Авгр 385 390 395 400 зект Авр біу бек РПе РпПе їпецп Тут бБегт Атгд Гецп ТПтІ Уаі1і Авр Гуз бек 405 410 415
Зо Агуд о ТкЕр с1п сі с1у Авп Уа1! РіПе бек Сув бек Уа1 Меєсє Ніз сС1цп А1а 420 425 430
Пец Нів Авп Нів Тут ТПг сіп Гпуз бек Гей бек Гц бБет Іїєц С1у Гуз
З5 435 440 445 «2105 2 «2115 448 40 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 2 45 сі Маї сбіп Гецш сіп біп Тгр сб1у Аїа сіу Гей Пец Гув Ркго бет бій 1 5 10 15
ТпПх Гец бБет Гецп ТПї Сув Аїа Уа1 Тук сіу с1у бБет РПпе Бек с1Уу Тук 50 20 25 30
Тут Ткр бет Тгр І1е Агу біп Рго Рго сбіу Ппув с1у Гей сі ТкЕр Ше 55 сСіу б1іц І1їе Авп Нів Аїа СсСіу бБетг ТрІ Авзп Тут Авп Рго бет Ієц Гуз бо зек Агкд Уаі1і ТПїх Іїе бБет УМа1ї Авр ТПт бБет Гув Авп сбіп РоПе бег Гей 65 70 75 80
Туз Гец бБет бБет Уаі ТПх Аза Аза Авр ТПгІ Аїа Уа1ї Тут Тук Сув Аїа 85 Зо 935
Ат9д Гей Рго ТПтІ Акуд Ткр Уаї! ТПї ТПїІ Агуд Тут Робе Авр їец Тгр 01У 100 105 110
Ак біу ТпПкг Гей Уа! ТПтї Маї бек бек Аїа бБет ТПтг Гув с1у Рго бБег 115 120 125 уаї Рпе Рго Гец Аїа Рко Сув бБет Агд Бех ТПтІ бет біц бет ТПтІ А1а 130 135 140
А1їа тец с1у Сув Гец Уаії Гпув Авр Тут РпПе Рго біц Рго Уаі1! ТПт Уаї 145 150 155 160 бек Тер Авп бехт С1у Аїа їеец ТПт бегт с1у Уаї Ніз Трк Ріе Рго А1а 165 170 175
Зо
Ууаї Гей сбіп бБет бБет сіу Ге Тут бек Гец бет бБет Уаі1і Уаі1і ТПт Уаї 180 185 190
Рго бек бБет бек Гей С1у ТПтг Кув ТПт Тук ТрПї Сув Авп Уаії Авр Нів 195 200 205
Туз Рко бБет Авп ТПІ Кпуз Уа1і Авр пув Акд Уаії сі бБет Гуз Тух щу 210 215 220
Ркго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Гей сіу сі1у Рко бек 225 230 235 240 уаї Рпе Гецп Рпе Рко Рко Ппув Ркго Гуз Авр ТПтІ Ггец Меє Іїе 5Бет Агд 245 250 255
ТПЕ Рко сід Уаї ТПї Сув Уа1ї Уа1 Уа1 Авр Уаії бБет сбіп сб1цп Авр Рго 260 265 270 сі Ма1! сіп Рбе Авп Тгр Тут Уаі1! Авр сі1у Уа1! сіц Уа1ї Нів Авп А1а 275 280 285
Туз ТПжт Кпув Рго Агкд бі бі біп Рбе Авп о бет ТПІ Тут Акд Уаі1ї Уаї 290 295 300 бек Уаї теп ТПк Уаї їец Нів сбіп Авр Тгр Гец Авп СсС1іу пув СсС1ц Туг 305 310 315 320 туз Сув пув Уаї бек Авп гув бі1у Пец Рго бет бБет Іїе сі Гуз ТЕПкК 325 330 335
І1е Бек Гув Аїа пув сіу сбіп Рго Агд бі Рго біп Уаі! Тут ТПтг Іец 340 345 350
Ргто Рго бек біп бі біцш Меє ТПг Гув Авп о сіп Уаії бек Ге ТПкК Сув 355 360 365 теп Уаї пув с1у Рре Тук Рго бек Авр Іїе Аїа Уаі сій Тгр сіц бек 370 375 380
Авп о біу біп Рго біц Авп Авп Тук Гув ТПтг ТПї Рго Рго Уаії Гец Авр 385 390 395 400 зект Авр біу бек РПе РпПе їпецп Тут бБегт Атгуд Гецп ТПтІ Уаі1і Авр Гуз бек
Зо 405 410 415
Атд Тгр сб1п бі сб1у Азп Уа1! Рібе Бех Сув Бек Уаї Меє Ніз сій Аї1а 420 425 430
З5
Пец Нів Авп Нів Тут ТПг сіп Гпуз бек Гей бек Гей бег Гц С1у Гуз 435 440 445 40 «2105 З «2115 217 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз 45 «4005 3 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп 1 5 10 15 50
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30 55
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТїа Рго Гуз Іеєц теп Ії1е Тут с1у Авп бек Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РІГе 50 55 бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1УуУу Гей 65 70 75 80 біп Аїа бі Авр сі Аза Авр Тухк Тук Сув біп бек Рпе Авр Авп б5ег 85 Зо 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСіу бі1у біу ТпПк сбіп Гец ТПтІ Уаії гейш щу 1600 105 110 біп Рго Пув Аза Аїа Ркго бет Уаі! ТПтїІ Гей Рібе Рго Рго бет бет б1ц 115 120 125 бі пец біп Аза Авп Гув Аїа ТПт їец Уаї Сув Гей І1е бБегт Авр РІе 130 135 140
Тук Рко с1у Аї1а Уаі ТПх Уа1ії Аза Тгр ув Аза Авр Бек бек Рко Уаї1 145 150 155 160
Зо Тув Аїа сіу Уаі Сі ТрПг ТП ТПг о Ркго Бек пув біп Бег Авп Авп Гув 165 170 175
Тут Аїа А1ї1а бет бБет Тук Гей бек Гей ТПг Рго бі сіп Тер Гуз бек
З5 180 185 190
Ніз Агд бек Тут бек Сув біп Уа1і ТБбг Ніз Сі бі1у бек ТПгт Уаї Сс1ц 195 200 205
Туз ТПтІ Уаії Аїа Ркго ТПхї бі Сув бек 210 215 «2105 4 «2115 217 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 4 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт О1у Аїа Рго сіу сіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп СсСіп їец Рго бі1у ТртІ АТа Рго Гуз Ієц 35 40 45 теп І1ї1е Тут с1у Авп Аза Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РіГе 50 55 бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБет Аїа бек ге Аїа І1їе ТПг СсС1Уу Гей 65 70 75 80 біп Аїа бі Авр сі Аза Авр Тухк Тук Сув біп бек Рпе Авр Авп б5ег 85 Зо 935
Те бБет Аїа Тут Уа1 Рпе сСіу б1у біу ТПтї сіп Гецп ТПтї Уаії гейш щу 1600 105 110 біп Рго Пув Аза Аїа Ркго бет Уаі! ТПтїІ Гей Рібе Рго Рго бет бет б1ц 115 120 125 бі пец біп Аза Авп Гуз Аїа ТПт їец Уаї Сув Гей І1е бБегт Авр РІе 130 135 140
Зо
Тук Рко с1у Аї1а Уаі ТПх Уа1ії Аза Тгр ув Аза Авр Бек бек Рко Уаї1 145 150 155 160
Тув Аїа сіу Уаі Сі ТрПг ТП ТПг о Ркго Бек пув біп Бег Авп Авп Гув 165 170 175
Тут Аїа А1ї1а бет бБет Тук Гей бек Гей ТПг Рго бі сіп Тер Гуз бек 180 185 190
Ніз Агд бек Тут бек Сув біп Уа1і ТБбг Ніз Сі бі1у бек ТПг Уаї с1ц 195 200 205
Туз ТПтІ Уаії Аїа Ркго ТПхї бі Сув бек 210 215 «2105 5 «2115 217 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 »чф5 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп
1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТїа Рго Гуз Іеєц 35 40 45 теп І1е Тут с1у біп бек Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РіГе 50 55 бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1УуУу Гей 65 70 75 80 біп Аїа бі Авр сі Аза Авр Тухк Тук Сув біп бек Рпе Авр Авп б5ег 85 90 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСіу бі1у біу ТпПк сбіп Гец ТПтІ Уаії гейш щу 1600 195 110 біп Рго Пув Аза Аїа Ркго бет Уаі! ТПтїІ Гей Рібе Рго Рго бет бет б1ц 115 120 125
Зо бі пец біп Аза Авп Гув Аїа ТПт їец Уаї Сув Гей І1е бБегт Авр РІе 130 135 140
З5
Тук Рко с1у Аї1а Уаі ТПх Уа1ії Аза Тгр ув Аза Авр Бек бек Рко Уаї1 145 150 155 160
Тув Аїа сіу Уаі Сі ТрПг ТП ТПг о Ркго Бек пув біп Бег Авп Авп Гув 165 170 175
Тут Аїа А1ї1а бет бБет Тук Гей бек Гей ТПг Рго бі сіп Ткгр Гуз бек 180 185 190
Ніз Агд бек Тут бек Сув біп Уа1і ТБбг Ніз Сі бі1у бек ТПг Уаї с1ц 195 200 205
Туз ТПтІ Уаії Аїа Ркго ТПхї бі Сув бек 210 215 «2105 6 «2115 217 «2125 БІЛОК
«213» Ното зарієпз «4005 6 бі бек Уаї Гецп ТПг біп Рго Рго бек Уаі Бек Сб1у Азїа Рго сіу сСіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бБегт бБег Авп І1е с1у Аїа с1Уу 20 25 30
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТїа Рго Гуз Іеєц 35 40 45 теп І1ї1е Тут с1у бі бек Авп Агд Рго бет сіу Уаі Рго Авр Агд Ріе 50 55 бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1УуУу Гей 65 70 75 80 біп Аїа бі Авр сі Аза Авр Тут Тут Сув біп Бек Рпе Авр Авп б5ег 85 Зо 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСіу бі1у біу ТпПк сбіп Гец ТПтІ Уаії гейш щу
Зо 1600 195 110 біп Рго Пув Аза Аїа Рго бек Уаі! ТПтї Гей Рібе Рго Рго бет бет б1ц 115 120 125
З5 бі пец біп Аза Авп Гув Аїа ТПт їец Уаї Сув Гей І1е бБегт Авр РІе 130 135 140
Тук Рко с1у Аї1а Уаі ТПх Уа1ії Аза Тгр ув Аза Авр Бек бек Рко Уаї1 145 150 155 160
Тув Аїа сіу Уаі Сі ТрПг ТП ТПг о Ркго Бек пув біп Бег Авп Авп Гув 165 170 175
Тут Аїа А1ї1а бет бБет Тук Гей бек Гей ТПг Рго бі сіп Тер Гуз бек 180 185 190
Ніз Агд бек Тут бек Сув біп Уа1і ТБбг Ніз Сі бі1у бек ТПг Уаї с1ц 195 200 205
Туз ТПтІ Уаії Аїа Ркго ТПхї бі Сув бек 210 215
«2105 7 «2115 217 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 17 бі бек Уаї Гецп ТПг біп Рго Рго бек Уаі Бек Сб1у Азїа Рго сіу сСіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТїа Рго Гуз Іеєц 20 теп І1ї1е Тут с1у Авр бек Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РіГе бо 25
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1УуУу Гей 65 70 75 80
Зо біп Аїа бі Авр сі Аза Авр Тухк Тук Сув біп бек Рпе Авр Авп б5ег 85 Зо 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСіу бі1у біу ТпПк сбіп Гец ТПтІ Уаії гейш щу
З5 1600 105 110 біп Рго Пув Аза Аїа Ркго бет Уаі! ТПтїІ Гей Рібе Рго Рго бет бет б1ц 115 120 125 40 бі пец біп Аза Авп Гув Аїа ТПт їец Уаї Сув Гей І1е бБегт Авр РІе 130 135 140 45
Тук Рко с1у Аї1а Уаі ТПх Уа1ії Аза Тгр ув Аза Авр Бек бек Рко Уаї1 145 150 155 160 50 Тув Аїа сіу Уаі Сі ТрПг ТП ТПг о Ркго Бек пув біп Бег Авп Авп Гув 165 170 175
Тут Аїа А1ї1а бет бБет Тук Гей бек Гей ТПг Рго бі сіп Тер Гуз бек 55 180 185 190
Ніз Агд бек Тут бек Сув біп Уа1і ТБбг Ніз Сі бі1у бек ТПгт Уаї Сс1ц
195 200 205
Туз ТПтІ Уаії Аїа Ркго ТПхї бі Сув бек 210 215 «2105 8 «2115 451 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 8 сі Маї сбіп Гец Уаії біп бек б1у Аїа сіц Маї Ппув Ппув Ркго біу 5Бег 1 5 10 15
Ззек Уаії пуз Уа1ї бек Сув пув Аїа бек с1і1у с1у ТПтї РПпе бек бек Тук 20 25 30
Аза Іїе Бех Тгтр Уаі Акд сіп Аїа Рго сіу сбіп с1у Гец біц Ткр Меє 35 40 45 сіу б1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп гув РПе 50 55 бо
Зо сбіп б1у Акуд Маії ТПтІ Іїе ТБПх Аза Авр бій бег ТПт бБет ТПт Аїа Туг 65 70 75 80
Меє сій Гец бег бек Гец Агуд Бек сій Авр ТПт Аїа Уаії Тут Тук Сув 85 Зо 935
Аза Атуд Тут Рпе Авр бек бек с1у Тгр Тут Ппув біу б1у Аїа Рпе Авгр 1600 195 110
І1е ТЕр сіу сіп сі1у ТПї Мер Уа1ії ТПїх Уаі1ї бБет бБет Аїа бБет ТПтї Гуз 115 120 125 с1іу Рго бБет МУМаії РПпе Рго Гец А1їа Ркго Сув бБет Агуд бет ТПт бет б1ц 130 135 140 бек ТПї Аїа Аза гец сбіу Сув Гей Маї Гув Авр Тут РПпе Рго с1ц Рго 145 150 155 160
Уаї Трг Уа1ї Бек Тгр Авп бек с1у А1ї1а Іїец ТПг Бех сС1у Уа1 Нів ТЕГ 165 170 175
Рпе Рго Аїа Уаії гецп біп бек бек С1у Гей Тут бБет Гецп бек бек Уаї 180 185 190
Ууа1ї ТПпЕх Уаі1ї Рго бек бБет бБет Гей с1у ТПг пув ТПт Тут ТПЕ Сув Авп 195 200 205
Ууаї Авр Нів Кпув Рго бБет Авп ТПт Кпув Уа1і! Авр гув Акд Уаї Сі 5бег 210 215 220
Гуз Тут сі1у Рко Ркго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго біц Рпе Гей щу 225 230 235 240 с1іу Рго бБет Маії РПпе Гец Рпе Рко Ркго Гуз Рго гув Авр ТПт Іец Меє 245 250 255
І1е бБет Акд ТПтІ Рко сіц Уа1і ТПї Сузв Уа1ї Уаї Уа1ї Авр Уаії бек сіп 260 265 270 бі Авр Рго сіц Уаії бСіп Рпе Авп Тгр Туг Уаі Авр с1у Уа1! сіц Уаї 275 280 285
Ніз Авп Аїа пув ТПтІ Кпув Рго Агд Сі бі б1іп Рбе Авп бек ТіПг Туг
Зо 290 295 300
Атд Уаї Уаї бек Уаі1ї їец ТПг Уаї їец Нів сіп Азр Тер Іец Азп 01У 305 310 315 320
З5 туз січ Тут пув Сув пув Уаі1і бек Авп Гув С1у Гецп Рго бек бек Те 325 330 335 біц пув ТПтІ Іїе бБег Гув Аїа Гпув сіу сіп Рго Акд бій Рго біп Уаї 340 345 350
Тут ТПг Гей Рго Рго Бек сіп сій біц Меє ТПг Гув Авп Сбіп Уаї 5ег 355 360 365 теп ТПт Сув гец Уаії пуз б1у Рбпе Тук Рго бБет Авр Іїе Аїа Уа1ї с1ц 370 375 380
ТЕр сіц бБет Авп сб1у біп Рго бі Авп Авп Тут Пув ТПтї ТПкг Рго Рго 385 390 395 400 уаї гейш Авр 5Бет Авр сіу бБет РПе РПе Гецп Тут бБет Агд їец ТПтІ Уаї 405 410 415
Авр Гув бБет Агд Тгтр сіп сі с1у Авзп Уа1і Рібе бет Сув бБет Уа! Меє 420 425 430
Ніз с1п АТїа Пец Нівз Авп Нів Тут ТПг біп Гуз бетг Пец бек Кгєц 5бег 435 440 445 теп с1УуУ Гуз 450 «2105 19 «2115 451 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 19 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго сб1у бБег 1 5 10 15
Ззек Уаії пуз Уа1ї бек Сув пув Аїа бек с1і1у с1у ТПтї РПпе бек бек Тук 20 25 30
Зо Азїа Іїе Бек Тгр Уаі Агу Сбіп Аза Рго сіу Сбіп сС1у Гей сбіц Тгр Меє сіу б1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп гув РПе
З5 50 зо бо сбіп б1у Акуд Маії ТПтІ Іїе ТПтІ А1їа Авр Сі бетгт ТПт бет ТПтІ Аїа Туг 65 70 75 80 40
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бет бій Авр ТПтІ Аїа Уаі1! Тут Тут Сув 85 Зо 935 45
Аза Атуд Тут Рпе Авр Аїа бет сі1іу Тгр Тух гув біу б1іу Аїа Рпе Авгр 100 105 110
Іїе Тер сі1у Сіп сі1іу ТПї Теп Уа1! ТПг Уаії бек бБегхт Аїа бБет ТПкг Гуз 115 120 125 с1іу Рго бБет Маії РПпе Ркго Гец А1їа Ркго Сув бБет Агуд бет ТПт бет сіц 130 135 140 бек ТПї Аїа Аза гец сбіу Сув Гей Маї Гув Авр Тут РПпе Рго с1ц Рго
145 150 155 160
Уа1ї Трт Уаї бег Тгр Азп бег с1іу Аїа їеєц ТПт бегт біу Уаї Нів ТПг 165 170 175
Рпе Рго Аїа Уаії гецп біп бек бек С1у Гей Тут бБет Гецп бек бек Уаї 180 185 190 уаї ТПтгІ Маї Рго бБет бБет бБет Гец сіу ТПх Ггув ТПтг Тут ТПт Сув Авп 195 200 205
Ууаї Авр Нів Кпув Рго бБет Авп ТПт Кпув Уа1і! Авр гув Акд Уаї Сі 5бег 210 215 220
Кпув Тук сіу Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго біц Рпе Гей щЩ1У 225 230 235 240 с1іу Рго бБет Маії РПпе Гец Рпе Рко Ркго Гуз Рго гув Авр ТПт Іец Меє 245 250 255
І1е бБет Акуд ТПтІ Рко сіц Уа1і ТПг Сув Уаї Уаії Уаії Авр Уаії бек сіп 260 265 270
Зо січ Авр Рго біц Маі сіп Рпе Авзп Тктр Тут Уа1і1 Авр сСі1у Уаї біц Уаї 275 280 285
З5
Ніз Авп Аїа пув ТПтІ Гпув Рго Агд бі бі Сіп Робе Авп бек ТіПг Туг 290 295 300
Атуд Уа1ї1 Уа1ї Бек Уа1і! Іец ТПг Уаї їец Нів Сіп Авр Тер їец Авп сС1Уу 305 310 315 320 туз січ Тут пув Сув пув Уаії бек Авп Гув С1у Гецп Рго бек бек Те 325 330 335 біц пув ТПтІ Іїе бБег Гув Аїа Гпув сіу сіп Рго Акд бій Рго біп Уаї 340 345 350
Тук ТПт Гец Ркго Рго бек біп біш бі Меєсє ТПтІ пув Авп сіп Уа1ї бек 355 360 365 теп ТПт Сув гец Уаії пуз б1у Рбпе Тук Рго бБет Авр Іїе Аїа Уа1ї с1ц 370 375 380
ТЕр сіц бБет Авп сб1у біп Рго бі Авп Авп Тут Пув ТПтї ТПкг Рго Рго 385 390 395 400 уаї гейш Авр 5Бет Авр сіу бБет РПе РПе Гецп Тут бБет Агд їец ТПтІ Уаї 405 410 415
Авр Гув Бек Агд Ттр Сбіп бі б1у Авп Уаі РПпе бек Сув Бек Уа! Меє 420 425 430
Ніз с1п АТїа Пец Нівз Авп Нів Тут ТПг біп Гуз бетг Пец бек Ієц 5бег 435 440 445 теп с1УуУ Гуз 450 «2105 10 «2115 451 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 10 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго сб1у бБег
Зо 1 5 19 15
Ззек Уаії пув Уа1ії бек Сув пув Аїа бек с1і1у с1у ТПтї РПпе бек бек Тук 20 25 30
З5
Аза Іїе Бех Тгтр Уаі Акд сіп Азїа Рго сСіу біп сбіу їец біц Тгр Меє 40 сіу б1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп гув РПе бо 45 Сбіп б1у Акд Уа1і ТПг І1їе ТПїІ Аїа Авр сій бек ТПт бБег ТПтг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бет бій Авр ТПтІ Аїа Уаі1! Тут Тут Сув 50 85 30 935
Аза Ату Тут РПе бБет бет бет Сс1і1у Тгр Тух гув біу б1іу Аїа Рпе Авгр 100 105 110 55
І1е ТЕр сіу сіп с1і1у ТПтї Ге Уа1і ТПх Уаі1ї бБет бБет Аїа бБет ТПтї Гуз 115 120 125 с1іу Рго бБет Маії РПпе Ркго Гец А1їа Ркго Сув бБет Агуд бет ТПт бет б1ц 130 135 140 бек ТПї Аїа Аза гец сбіу Сув Гей Маї Гув Авр Тут РПпе Рго с1ц Рго 145 150 155 160
Уа1ї Трт Уаї бег Тгр Азп бег с1іу Аїа їеєц ТПт бегт біу Уаї Нів ТПг 165 170 175
Рпе Ркго Аїа Маії Гей сіп бег бек біу Ппецп Туг бек Гец бек бек Уаї 180 185 190 уаї ТПтгІ Маї Рго бБет бБет бБет Гец сіу ТПх Ггув ТПтІ Тут ТПтг Сув Авп 195 200 205
Ууаї Авр Нів Кпув Рго бБет Авп ТПт Кпув Уа1і! Авр гув Акд Уаї Сі 5бег 210 215 220
Гуз Тут сі1у Рко Ркго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго біц Рпе Гей щу 225 230 235 240
Зо с1іу Рго бБет Маії РПпе Гец Рпе Рко Ркго Гуз Рго гув Авр ТПт Іец Меє 245 250 255
Іїе Бек Агуд ТПт Рго біц Уа1і ТПг Сув Уаії Уаї Уа1 Авр Уаї бек сСіп 260 265 270 січ Авр Рго біц Маі сіп Рпе Авзп Тктр Тут Уа1і1 Авр сСі1у Уаї біц Уаї 275 280 285
Ніз Авп Аїа пув ТПтІ Кпув Рго Агд Сі бі б1іп Рбе Авп бек ТіПг Туг 290 295 300
Атд Уаї Уаї бек Уаі1ї їец ТПг Уаї їец Нів сіп Азр Тер Іец Азп 01У 305 310 315 320 туз січ Тут пув Сув пув Уаі1і бек Авп Гув С1у Гецп Рго бек бек Те 325 330 335 сі пузв ТП Іїе бБег Гув Аїа Ппув сб1у сіп Рго Акуд бі Рго сіп Уаї 340 345 350
Тук ТПт Гец Ркго Рго бек біп біш бі Меєсє ТПтІ пув Авп сіп Уа1ї бек 355 360 365
Тецп ТПг Сув Гец Уаї Гуз с1у Рпе Тут Рго бБег Авр І1е Аїа Уа1 с1ц 370 375 380
ТЕр сіц бБет Авп сб1у біп Рго бі Авп Авп Тут Пув ТПї ТБПкг Рго Рго 385 390 395 400 уаї гейш Авр 5Бет Авр сіу бБет РПе РПе Гецп Тут бБет Агд їец ТПтІ Уаї 405 410 415
Авр Гув бБет Агд Тгтр сіп сід с1у Авзп Уа1ї РпПе бБег Сув бБет Уа! Меє 420 425 430
Ніз с1п АТїа Пец Нівз Авп Нів Тут ТПг біп Гуз бетг Пец бек Ієц 5бег 435 440 445
Те о1УуУ Гуз 450 «2105 111
Зо «2115 221 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 111
З5
Сіп бек Маії Гецп ТПт сіп Рко бет бБет Гец бегт Азїа бет Рго С1у А1а 1 5 10 15 зет Аїа бБет Пец ТП Сув ТПг Гей Агуд бБехт сб1іу І1їе Авп Уаі Авр ТІПг 20 25 30
Тут Агд І1їе Нів Тгр Тук біп с1іп пув Рго с1у бег Рго Рго Сіп Туг 35 40 45 їпеч теп Агд Тут Кпуз бек Авр бегт Авр Гуз Нів Сіп бі1у бек біу Уаї1 бо 50
Рко бБет Агд РіПе бек біу бек пув Авр Рго 5ехт Аїа Авп Аїа с1у Ше 65 70 75 80 55 теп Гец І1е бет с1і1у Гецп біп бек бі Авр біц Аза Авр Тут Тут Сув 85 Зо 935
А1їа Іїе Ттр Тут бБет бБет ТПтІ Тктр Уаі Рпе сСі1у біу біу ТПкг сіп Гец 100 105 110
ТПкх Уаї гец с1у біп Рго ув Аза Аза Рко бБет Уаі! ТПї Гецп Роіе Рго 115 120 125
Рго Бек бБет бі бі гейш бСіп Азїа Авп Гув Аїа ТПтї Гей Уаі1ї! Сув Гец 130 135 140
І1е бБет Авр Рпе Тут Рко с1у Аїа Уаї ТПтІ Уаії Аїа Тгр Гуз А1а Авр 145 150 155 160
Зек бек Рго Уа1і1 пув Аїа сіу Маі сі ТПтг ТПк ТПк Рко бек Гуз біп 165 170 175 зек Авп Авп гуз Тут Аїа Аїа бет бБет Тут Гей бек Гецп ТПг Рго біц 180 185 190
Сіп Тер Гуз бек Нів Агд бек Тут бек Сув біп Уа1! Тбкг Ніз с1ш 0Щ1уУ 195 200 205
Зо зет ТПт Уаії бі Ппув ТПт Уаії Аза Рго ТПпх сіц Сув бБег 210 215 220 «2105 12
З5 «2115 4459 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 12 сі Маї б1іп Гец Маі сіц бехт с1у сі1у с1у Уаї Уаії біп Рго с1у Акгд 1 5 10 15 зет гейш Агуд Пец бек Сув Аїа Аїа бБет Сіу Рпе ТПтІ РпПе бБетг бек Туг 20 25 30
А1ї1а Меє Ніз Тер уаї Агд біп Аза Рго сбі1у Гуз СсС1у їец с1іц Тгр Уаї 35 40 45
А1їа Маї Іїе бБет Тут Авр сіу бБет Авп Гуз Тут Тут Аїа Авр бБет Уаї 50 55 бо туз с1у Акд РпПе ТПї Іїе бек Агуд Авр Авп о бет Пув Авп ТПтх Гец Тук 65 70 75 80 теп сіп Меє Азп бет Ггец Агд Аза бі Авр ТПтІ Аїа Уаї Тут Тут Сув 85 Зо 935
Аза Атуд Уаії сіу сіц Тер І1е сіп Гей Тгр бег Рго Рпе Авр Тут Ттгр 100 105 110 сіу біп сб1у ТПт Гец Уаі ТПт Уаї бет бек Аза бет ТПт пув С1Уу Ркго 115 120 125 зетк Уаії Рпе Рго Гей Аїа Рго Сув бБет Агуд Бег ТПт бет бій бек ТІПг 130 135 140
А1їа Аїа Гец сіу Сув Гец Уаії Гпув Авр Тут Рпе Рго біц Рго Уаї ТПг 145 150 155 160
Уаї Бек Ттгр Авп бек СсС1у Аїа Іецш ТПх бег с1іу Уаії Ніз Трк Рре Рго 165 170 175
А1їа уаії Гец сіп бет бБет сіу Ге Тут бек Гей бет бБет Уаі1і Уаї ТПг 180 185 190
Зо уаї Рко бБет бБет бБет Гец сіу ТПї Гпуз ТПх Тут ТПт Сув Авп Уаї Авр 195 200 205
Нів пув Ркго бБет Авп ТПт пув Уа1і Авр Гуз Акд Уаї сій бек Гув Туг 210 215 220 сіу Ркго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Гец сіу с1у РкКо 225 230 235 240
Ззек Уаі1і Рібе Гей Рібе Рго Рго Пув Рго Пув Авр ТПтІ Гепп Меї І1е бек 245 250 255
Атуд ТПг Рго сіц Уаі ТПт Сув Уа1 Уа1ї Уаї Авр Уаії Бек біп б1Ч Авгр 260 265 270
Рго Сі Уаї с1іп Рібе Авп Тгр Тук Уаії Авр сС1у Уа1і с1іц Уаї Ніз Авзп 275 280 285
Аїа гув ТПк пув Рго Агд бі бій сб1іп Рбе Авп бек ТПг Тут Агд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаї їец ТПт Уаї Гц Нівз Сіп Авр Тгр Геєц Авп с1у Гпув б1ци 305 310 315 320
Тут Кгув Сув Гуз Уаії бек Авп о Гув сіу Гец Рго бБет Бет І1е січ Гув 325 330 335
ТпПї Іїе бБет Гпув Аїа гуз С1у біп Рго Агд бід Рго сіп Уаі1і Тук Тік 340 345 350
Те Рко Рко бБет біп бі бі Меєсє ТПг пув Авп біп Уаі1ї бек Ге Тік 355 360 365
Сув Гец Уаї пув с1у Рбе Тухк Рго Бех Авр Іїе Аїа Уаі сій Тгр с1ц 370 375 380 зек Авп біу біп Рго бій Авп о Авп Тут Гув ТПх ТПх Рко Ркго Уаї Гей 385 390 395 400
Авр Бех Авр сіу Бек РПе Рбпе Гей Тут бБетг Агд Пец ТПтІ Уаії Авр Гувг 405 410 415 бек Агд Тгр б1іп Сі б1у Авп Уа1ї Ріе бБет Сув бБет Уаі1! Меє Ніз с1ц
Зо 420 425 430
А1ї1а те Нів Авп Нів Тут ТПг сіп Гуз бБег ІТец бег Іїец Бех Ієц С1У 435 440 445
З5
Туз 40 «2105 13 «2115 214 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз 45 «4005 13
Авр Іїе сбіп Меєсє ТПт сіп бет Рко бБетї бБеїт Уаії бБегт Аїа бБет Уаі1ї 01Уу 1 5 10 15 50
Авр Атуд Маї ТПтІ Іїе ТПт Сув Агуд Аїа бБет біп с1іу Іїе бБет бБет Тгр 20 25 30 55 теп Аїа Ткр Тут Сіп біп ув Рго бі1у Гув Аїа Рго Гуз Рпе Тец Те
Тут Аїа А1їа бет бБет Гей біп бет біу Уаі Рко бБет Ппув Рпе Бех щу 50 55 бо
Зек біу бек бі1у ТПх Авр Рпе ТПтї ТІецй ТПІ Іїе бБет Бек Гей сіп Рго 65 70 75 80 бі Авр Рпе Аїа ТПтІ Тук Тук Сув сіп сіп Тут Авп бБег Тук Рго Рго 85 Зо 935
ТПЕ Рпе сі1у с1у с1у ТПх Кпув Уа1 біш Іїе Гув Агд ТПї Уаі Аїа Аїа 1600 195 110
Ркто Бек Уаі1і Рібе Іїе Рпе Рго Рго бБег Авр сій сіп Гец Гуз бех ШУ 115 120 125
ТПх Аїа бБет Уаї Уаї Сув Ггец Гецп Авп Авп Рпе Тут Рго Агд сі Аїа 130 135 140 туз Уаї сіп Ткр гуз Уаі Авр Авп Аїа Гей біп бет со1у Авп бек сіп 145 150 155 160
Зо бі бек Уа1і ТПг сіц біп Авр бек Гув Авр бБеїт ТПт Тут Бек Гец бБег 165 170 175 бек ТПкг Пец ТрПІ Кгец бет Кпуз Аїа Авр Тут Сіцш Гуз Нів Ппув Уа1! Туг
З5 180 185 190
А1ї1а Сув сі Уа1! Трт Нів біп с1іу Гец бег бек Рго Уа1і! Трт Ппув бег 195 200 205
Рпе Ап Агд с1у біц Сув 210 «2105 14 «2115 456 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 14 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго С1у А1а 1 5 10 15
Ззек Уаї пувз Уа1і бек Сув КГув Маії бек сіу Тук ТПкх Гец ТПг бій Гей 20 25 30 бек Меє Нів Тгр Уаї Агд сіп Аїа Рго с1у пув б1у Те Сі Ткгр Меє 35 40 45 сіу б1у Рпе Авр Рго біц Авр сіу сіц ТПтї І1е Тут Аїа Сбіп гув РПе 50 55 бо сбіп б1у Акту Маії ТПт Меє ТПтІ с1п Авр ТПї бетгт ТПтІ Авр ТПтІ Аїа Туг 65 70 75 80
Меє сій Гец бег бек Гец Агуд Бек сій Авр ТПт Аїа Уаії Тут Тук Сув 85 Зо 935
Аза Ату Аза сіу Рко Гец Тут ТПїІ І1ї1е Рпе сСіу Уаї Уаі Ії1е Іїе Ркго 1600 105 110
Авр Авп о ТтІр Рпе Авр Ркго Тктр сі1у Сіп б1у ТПт гец Уаі1і ТПт Уаї 5ег 115 120 125 зек А1ї1а бек ТПх Кпув біу Рго бек Маії Рпе Рго Гей Аїа Рго Сув бек 130 135 140
Зо
Атуд бБет ТПт бБет сіц бет ТПтІ Аза Аїа Гей сбіу Сув Гец Уаії Гув Авр 145 150 155 160
Тук Рпе Ркго біц Рго УМа1і ТПг Уаї бБет Тгр Авп Бех сіу Аїа Іец ТіПг 165 170 175 бек сіу Ма1ї Ніз ТП Рібе Рго Аїа Уаї їєц Сіп бет бек С1у Гец Туг 180 185 190
Ззек Гецп бек бек Уаі1і Уа1 ТПг Ма1 Рго бБет бБет Бек Гецп с1у ТПкК Гуз 195 200 205
ТПк Тук ТБкг Сув Авп Уа1ї Авр Ніз Кпув Рго бек Авзп ТПтІ Гуз Уа1ї! Авр 210 215 220
Туз Акд Уаї сі бек Кпуз Тук б1у Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа 225 230 235 240
Рго сСіц Рпе пец сіу с1у Рго Бек Уаі Рпе Гей Рпе Рго Рго КПув Рго 245 250 255
Туз Авр ТПІ Ггецп Ме Іїе бек Агуд ТПх Рго біц Уаі ТПт Сувз Уаї1ї Уаї 260 265 270
Ууа1 Авр Уа1і бек біп біц Авр Рго сіц Уаі Сбіп Рпе Авп Тгр Тут Уаї 275 280 285
Авр сбіу Уаї біцш уаї Ніз Авп Аза Гуз ТПг туз Рго Агд Сі бі с1п 290 295 300
Рпе Азп бет ТПІ Тугк Агуд Уа! Уаї бБет Уа1ї гц ТПтІ Уаї Ієц Ніз сіп 305 310 315 320
Авр Ттр Гец Авп сіу пув сіцЧ Тут Гпув Сув Ппув Маії бБет Авп Гув с1Уу 325 330 335
Те Рко бБет бет І1е бі пув ТПх Іїе Бех їув Аїа Гув с1у сіп Рго 340 345 350
Ак бій Рго сіп Уаі Тут ТПї Гей Рго Рго Бех сіп сій сіц Меє ТПг 355 360 365
Тув Авп сіп Уаї бек Гей ТПх Сув Ге Уа1! Гув с1у РПпе Тук Ркго бек
Зо 370 375 380
Авр чІ1їе Аїа Уаі сіц Ткр сі бек Авп б1іу біп Рго біц Авп Авп Тут 385 390 395 400
З5
Туз ТПжх ТПт Рко Рго Уаії Ггецп Авр бек Авр сб1іу бБет РПпе РпПе Гей Тук 405 410 415 зек Акд Гей ТПтІ Уа1і Авр пув бегхт Агд Ттр сбіп бій с01у Авп Уа1ї! РБГе 420 425 430 бек Сув бБет Уаї Месє Нів сіц АтТа Гец Нів Авп Нів Тух ТПг сіп Гув 435 440 445
Зек Гей бек Гей бек Ггецп с1Уу Гуз 450 455 «2105 15 «2115 219 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 15 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30
Тут Авр Уаї Нів Тер Тут сіп сСіп Пец Рго сСі1у ТПг Аїа Рго Гуз Ієц 35 40 45 теп Ії1е Тут с1у Авп бек Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РІГе 50 зо бо
Ззек біу бБек Кпув бек біу ТПг бБег Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1Уу Гей 65 70 75 80 біп Аїа бій Авр сбіц Аїа Авр Тут Тут Сув біп бБет Тут Авр бБет 5Бег 85 Зо 935
Те бБет сіу бБет Сіу Уаії Уаі1і Рпе сіу сіу с1у ТПтї сіп Ге І1е Ше 100 105 110
Зо Тец с1у сіп Рго Пув Аїа Аза Рго бек Уаі! ТПг Гей Рпе Рго Рго 5ег 115 120 125
Ззек бі бі ге біп Аза Авп Гуз Аїа ТПтІ Гецп Уаї Сув Гей І1е бек 130 135 140
Авр Рпе Тут Рго сіу Аїа Уаі! ТПїІ Уаії Аза Тгр ув Аза Авр бБет 5Бег 145 150 155 160
Рто Уаі ув Аїа сіу Уа1 бій ТПг ТПг ТПтг Рко бек пув біп бБекгк Авп 165 170 175
Авп опув Тут Аїа Аїа бет бет Тут Гец бек Гей ТПгІ Рго біц сіп Тгр 180 185 190 пув бек Нів Агд бек Тут Бек Сув сбіп Уа1 ТПг Нів сіц сС1у Бек ТЕГ 195 200 205 уаї біцш пув ТПт Уаі Аїа Рко ТПї сі Сув бБекг 210 215 «2105 16
«2115 5 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 16 сіу Тук Тук Тер 5ег 1 5 «2105 17 «2115 16 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «2205 «221» МІБ5БС ЕБАТОВКЕ «2225 (5)..(5) «223» Х є 5аббо вд «4005 17
Сіц І1е Авп Нів Хаа Сіу бек ТПтІ Авп Тугк Авп Рго бет Гец Гув бег 1 5 10 15 «2105 18 «2115 13
Зо «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 18 теп Рго ТПг Акуд Тгр Ма1і ТПг ТПг Акуд Тут Рбе Авр Гец 1 5 10 «2105 19 «2115 14 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 19
ТПк сС1у бек бБетг бек Авп І1їе С1у Аї1а с1у Туг Авр Уа1ї! Нів 1 5 10 «2105 20 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «2205 «221» МІБ5БС ЕБАТОВКЕ «2225 (2)..(2)
«223» Х є М, 0, Е або 0 «221» МІБ5БС ЕБАТОВКЕ «222» (3)..(3) «223» Х є 5аббо вд «4005 20 с1у Хаа Хаа Авп Акд Рго 5бег 1 5 «2105 21 «2115 11 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 21 біп бек Рпе Авр Авп бБет Гец бБет Аїа Тут Уаї1ї 1 5 10 «2105 22 «2115 5 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз
Зо «4005 ЩД 22 бек Тут Аїа Ії1їе бек 1 5
З5 «2105 23 «2115 17 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 23 с1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп Гуз Рпе сіп 1 5 10 15 ов1уУ «2105 24 «2115 15 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «2205 «221» МІБ5БС ЕБАТОВКЕ
«222» (3)..(3) «223» Х є р або 5 «2205 «221» МІБ5БС ЕБАТОВКЕ «222» (4)..(4) «223» Х є 5аббо вд «4005 24
Тук Рпе Хаа Хаа бет сС1іу Тгр Тух пув б1у б1у Аїа Рпе Авр Пе 1 5 10 15 «2105 25 «2115 14 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 25
ТЕ Гец Агд бБег С1у І1їе Авп Уа1ї Авзр ТПгІ Туг Агд І1е Нівз 1 5 10 «2105 26 «2115 11 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз
Зо «4005 26
Тут пузв бек Авр бет Авр Гуз Ніз Сіп сб1у 5бБекг 1 5 10
З5 «2105 27 «2115 9 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 27
А1їа Іїе Ттр Тут бБет бБет ТПт Ткр Уаї 1 5 «2105 28 «2115 5 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 28 бек Тух А1їа Меє Нів 1 5
«2105 «29 «2115 17 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 29 уаї Іїе Бек Тут Авр сіу бБет Авп Гуз Тух Тут Аза Авр бБет Уаї1ї Гуз 1 5 10 15 ов1уУ «2105 30 «2115 13 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 30 уаї с1у біцш Тер Іїе сіп Гец Ткр бет Рго РоПе Авр Туг 1 5 10 «2105 31 «2115 11 «2125 БІЛОК
Зо «213» Ното зарієпз «4005 31
Атуд Аза бБет сіп сіу І1е бет бБет Тгр Іец Аїа
З5 1 5 10 «2105 32 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 32
Аза Аїа Бек бБег Гец біп 5бег 1 5 «2105 33 «2115 9 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 33 біп біп Тут Авп о бБет Тут Ркго Ркго ТПг 1 5
«2105 34 «2115 5 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 34 сі Пец бекгк Меє Нів 1 5 «2105 35 «2115 17 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 35 с1у Рпе Авр Рго сій Авр сіу бій ТПг Ії1е Тут Аза сбіп Гув РПпе сіп 1 5 10 15 ов1уУ «2105 36 «2115 20
Зо «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 36
Азїа сіу Рго Гей Тугк ТПтІ Іїе Рпе сіу Уаії Уаї Іїе Іїе Рго Авр Авп 1 5 10 15
ТЕр Рпе Авр Ркго 20 «2105 37 «2115 14 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 37
ТВІ сСіу бек бек Бек Авп І1е СсС1у Аї1а сС1у Тут Авр Уа1ї Нів 1 5 10 «2105 38 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз
«4005 38 с1у Авп бБег Авп Агкд Ркго 5бег 1 5 «2105 39 «2115 13 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 39 біп бек Тут Авр бБет бБет Гец бет Сіу бек біу Уаї Уаї 1 5 10 «2105 40 «2115 598 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 40
Мес ТПпІ Рго Іїе Уа! ТПтї Уаї Геп Іїе Сув Гей с1у Гей Бек Ге ШУ 1 5 10 15
Рго Агд ТПт Ніз Уаї сбіп Трт сС1у ТБПт І1їе Рго Гуз Рго Тіт Іец Тгр
Зо 20 25 30
Аза бій Рго Авр бБет Уаії І1е ТПїІ Сіп сбі1іу бБет Рго Уаі1! ТПтї Іец 5бег
З5
Сув сіп сіу бБет Ге сі Аза біп бі Тук Агкд Гец Тут Агд с1ц Гуз бо 40 туз бБет Аїа бет Тгр І1ї1е ТПх Агуд Іїе Агд Рго біц Гецп Уаї Гуз Авп 65 70 75 80 45 сСі1у б1п Рпе Нів І1е Рго бет І1е ТПг Тгр Сі Нівз ТПг с1у Агд Туг 85 Зо 935 сіу Сув біп Тут Тут б5Бет Акуд Аїа Акуд Тгр бБегт біц Гец бБет Авр Ркго 50 1600 195 110 теп Уаї гецп Уаї Меє ТПх с1у Аза Тук Рго Пув Рго ТПтї Гецп бек Аїа 115 120 125 55 біп Рго бет Ргто Уаії МУМаі ТПт бБет сіу с1у Акд Уа1і ТПг Іец біп Сув 130 135 140
Сіц бек біп Маі Аїа Рпе сіу с1у Рпе І1е гей Сув пув сіц сіу сіц 145 150 155 160
Сі біш Нів Рго біп Суз Гец Авп бехт Сіп Рго Нізв Аїа Агд с1у бег 165 170 175 зехт Агд Аїа Іїе Рбе бек Уа1 с1у Рго Маії бБет Рго Авп Агд Агд Тгр 180 185 190 бек Нів Агуд Сув Тут С1іу Тут Авр Гей Авп бБехгк Рго Тут Уаі1ї Тгр 5ег 195 200 205
Зек Рго Бек Авр Геп Гей біцп їей Гей Маії Рко Сіу Уаї Бек Кпув Туз 210 215 220
Рко Бек Гецп бек Уа1і біп Рго сб1у Рго Уаі Уаі Аїа Рго сіу сіц бек 225 230 235 240 теп ТПтї Гец сіп Сузв Уаі бек Авр Уаі сіу Тут Авр Акуд РіПе Уаї Ієц 245 250 255
Зо
Тут гув сі с1у б1п Агд Авр Ге Агуд біп Тец Рго с1у Агд сіп Рго 260 265 270 біп Аїа сб1у Гец бек біп Аза Авп Рпе ТПт Іецп с1у Рго Уаії бетг Агд 275 280 285 бек Тук бі1у с1у Сіп Тут Агд Сув Тут с1у Аїа Ніз Авп Гей бетг 5бекг 290 295 300 сіц Сув бБехт Аїа Рго Бек Авр Рго Гей Авр Іїе їец Іїе ТПтг сС1у сіп 305 310 315 320
І1їе Агд сіу ТПт Рко РпПе І1е бек Уаі біп Рго біу Рго ТПтІ Уаї А1а 325 330 335 бек с1у б1іц Авп Уа! ТІ їєц теп Сув Сб1іп бег Тгр Агд Сіп Ріе Нівз 340 345 350
ТПг Рпе Гей їец ТПї Гуз Аза сі1у Аїа Аза Авр Аза Рго їецй Агд Гец 355 360 365
Атд бБет І1е Нів сіц Тук Рго Гуз Тут біп Аїа сі Робе Рго Мебє 5ег 370 375 380
Рго Уа1 ТПт бек Аїа Нів Аїа сС1у ТіПг Тут Агуд Сув Тухк сС1і1у бек Гей 385 390 395 400
Авп обБет Авр Рго Тут Гец Їїеєц бБет Нів Рго бБехт Сі Рго Іїец Сі Іеєц 405 410 415 уаї Маї Бек сіу Рко бБет Мер сСіу бБет бек Рго Рго Рго ТПтІ О1Уу Ркго 420 425 430
І1е Бек ТПтІ Ркго Аїа сСі1іу Рго бі Авр біп Рго їец ТПтІ Рго ТПх щу 435 440 445 бек Авр Рго Сіп бек біу їец С1у Агкд Ніз Іц біу Уаї Уа1ї Ії1е 01Уу 450 455 460
Іїе Гецш Маі Аїа Уаї Уаї Гей Гецп Гей Гец їецп Пец Гей Гец Гец РБПе 465 470 475 480 їец І1е їец Агуд Ніз Агд Агуд Сіп б1у Гуз Нів Тер ТПтх бБег ТПг с1іп
Зо 485 490 495
Атуд гув АТїа Авр Рпбе Сіп Нів Рго Аїа Сб1у Аїа Уаї С1і1у Рго сі Рго 500 505 510
З5
ТПЕ Авр Акуд с1у Ггецп біп Тгр Агуд бек бБехт Рго Аіїа Аїа Авр Аїа сіп 515 520 525 бі бій Авп о Гец Тут Аїа Аїа Уаї ув Авр ТПгІ біп Рго біц Авр с01У 530 535 540 уаї бі Мес Авр ТПтІ Агу Аза Аза Аїа бег бій Аза Рго сіп Авр Уаї 545 5Б5О 555 5б6О
ТПк Тут АТїа сіп їеец Нів бБетг їец ТПг Іецп Агуд Агд Туз АТїа Тіт Сс1ц 565 570 575
Ргто Рго Рго бек біп біш Агд бій Рго Рго Аїа сі Рго бек І1е Тук 580 585 5ЗО
А1а ТБг теп АїТїа І1е Нів 595
«2105 241 «2115 19 «2125 БІЛОК «213» Штучна послідовність «2205 «223» сигнальний пептид «4005 41
Меє бій Ттр бБет Ттр Уаі РпПе Ггецп РпПе Рібе Гей бБег Уа! ТПтг ТПт с1У 1 5 10 15
Уаї Нів бек «2105 42 «2115 20 «2125 БІЛОК «213» Штучна послідовність «2205 «223» сигнальний пептид «4005 42
Зо
Меє бБет Маії Рго ТПтІ сіп Уаі Гец сСі1у Гей Гей Гецп Гец Ткгр Гецп ТПг 1 5 10 15
Авр Аїа Агд Сув 20 «2105 43 «2115 597 «2125 БІЛОК «213» Масаса Гавсісціагів «4005 43
Меє ТПІ Рго Іїе Гец Меє Уаї Ггецп І1е Сув Гей Сі1у Гец Бех ІГец с1Уу 1 5 10 15
Рго Агуд ТПт Нів Уаї сСіп Аза сС1у І1їе їец Рго Пув Рго ТПг Ієц Тгр 20 25 30
А1їа бій Рго сіу бБет Уаії І1е бБет бі сіу бБетк Рго Уаі ТПтїІ Іец Агд 35 40 45
Суз сб1п с1у бБег їец Сіп Уаї сіп сі Тут Нів Гц Тут Агд СсСіц Гуз
50 зо бо
Авп о Рго Аїа бБет Тгтр Уаі Акд сСіп Іїе Ату сіп сіц Гец Уаї Гпув Гуз 65 70 75 80
СсСіу Ту Рпбе АТїа І1їе сСі1іу Рбе І1їе ТрІ Тгр сбіц Нів ТПг с1у с1іп Туг 85 30 35
Атд Сув біп Туг Тут бБет Нів БбБет Тер Тгр бек Сі Рго Бех Авр Рго 1600 195 110 теп січ Гец Уаї Уаї ТПкх с1у Аза Тук бек пув Рго ТПтї Гецп бек Аїа 115 120 125 теп Рго бБег Ркго Уаі! Уа1і Аїа бек сіу б1у Авп Ма! ТПг Гец сіп Сув 130 135 140
Авр бБет біп УМаі Аїа Рпе Авзр бет РпПе ТПї Гей Сув пув біц с1у с1ц 145 150 155 160
Авр біц Нів Рго сіп Агд їец Авп о Сув біп бек Нів Аїа Агд СсС1у Тгр 165 170 175
Зо зехк Тгр Аїа Уа1і Рібе бек Уа1 с1у Рго Маії бБет Рго 5еїхт Агд Агкд Тгр 180 185 190
З5 бек Тут Агд Сув Тухк біу Тук Іїе бБегхт бБегт Аїа Рго Авп Уаі1ї Ткгр бек 195 200 205 теп Рго бБег Авр Гец пецп бій Гецп Гей Уаі Рго сіу Уаії бек Гув Гув 210 215 220
Рко Бек Гецп бек Уа1і біп Рго сб1і1у Рго Уаі Уаі Аїа Ркго с1у Авр Гуз 225 230 235 240
Те ТПт Ге сіп Сузвз біу бек Авр Аїа сіу Тут Авр Атуд Рпе Аїа гец 245 250 255
Тут гув січ с1у сі б1у Авр Рпе Гей біп Агуд Рго Уаі Агд сіп Рго 260 265 270 біп Аїа с1у Гец бек сіп Аїа Азп РоПе Гей гей біу Рго Уаі бБет Акгд 275 280 285 бек Нів бі1у с1у Сіп Тут Агуд Сув бБет С1у Аїа Ніз Авп Гей бетг 5бекг 290 295 300 біц Тер бБег Аїа Рго 5Бет Авр Рго Гей Авр Іїе їец Іїе Аїа сС1у сіп 305 310 315 320
Іїе Агуд с1іу Акд Рго РіПе Гей бек Уаії Сіп Рго сіу Рко Гпув Уаї1ї Уаї 325 330 335 бек с1у б1іц Авп Уа! ТІ їєц теп Сув Сб1іп бег бет Тгр Сіп Ріе Нівз 340 345 350
А1ї1а Рпе їеєц Тїеєц ТПт Сіп Аїа сСіу Аїа Аїа Авр АТїа Ніз Ієц Нів Ієц 355 360 365
Ат9д бБет Мес Тут пув Тут Рко пувз Тут біп Аїа біц Рпе Рго Меє 5ег 370 375 380
Рго Уа1ї ТПтг бБег Аїа Ніз Аїа сС1у ТПт Тут Агд Суз Тук С1у бБет Агд 385 390 395 400
Зо зек Бек Авп Рго Тут Гей Гей бБет Маі1і Рго бБетг Авр Рго їец бій Гец 405 410 415 уаї Маї Бек сіу Рко бБет сіу с1у Рго бек бет Рго ТПтІ ТПтІ О1Уу Ркго
З5 420 425 430
ТПк о бБет ТПтІ Сув б1у Рго бі Авр біп Рго їец ТПІ Рго ТПк сі1у бек 435 440 445
А1ї1а Рго Сіп бек сіу їец б1у Агуд Нів їецш сі1іу Уаї Уа1! Трк сС1у Уаї1 450 455 460
Тец Маі Аїа Рпе Уаї Іїей Гецп Гей РпПе їец Гей Гей Гец Гецп РПе Гей 465 470 475 480
Ууаї Гей Агуд Тут Агкуд Агу біп б1у Гув Агуд Тгр ТПг 5ег Аїа сіп Агд 485 490 495 уз АТа Авр Робе Сіп Нів Рго Аїа СсС1у Аї1а Уаї Сі Рго СсС1іц Рго Агд 500 505 510
Авр Атуд с1у Гец сіп Акуд Акуд бет бехт Рго Аїа Азїа Авр ТПтІ сіп с1ц
515 520 525 січ Авп Гей Тут Аїа Аїа Уаі Гув Авр ТПтІ сіп Рго бій Авр о1у Уаї 530 535 540 біц Гей Авр б5Бегт Агуд Аїа Аїа А1їа бет бій Авр Рго біп Авр Уаї ТПг 545 5Б5О 555 5б6О
Тут Аїа сіп Гец Сіп бек Ггеп ТПх Гец Агд Акд сб1ц Аза ТПК сі Рго 565 570 575
Ргто Рго бек біп бі Агуд Аїа Рго Рго Уаії Сі бБет Бек Іїе Тух Аїа 580 585 5ЗО
ТВтІ Гей Тк І1е Нів 595 «2105 44 «2115 451 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз «4005 а44
Зо сіп УМаї біп Гец сіп сіп Тер с1у Аїа сС1у гей гей пув Рго бет б1ц 1 5 10 15
ТПт Гец бБег Ггец ТПтї Сув Аїа Уаї Тук сСіу сіу Бек РпПе бек о1УуУу Туг 20 25 30
Тут Ткр бет Тгр І1е Агд біп Рго Рго сбіу Ппув с1у Гей сі ТкЕр Ше 35 40 45 сСіу б1іц І1їе Авзп Нів бБег Сіу бБет ТПг Авп Тут Авп Рго бБет Гец Гуз 50 55 бо зек Агкд Уаі1і ТПїх Іїе бек УМаії Авр ТПт бБет Гув Авп сбіп РоПе бег Гей 65 70 75 80
Туз Гец бБет бБет Уаі ТПх Аїа Аза Авзр ТПтІ Аїа Уаї Тут Тук Сув Аїа 85 Зо 935
Акд Гей Рго ТПг Акуд Тгр Ма1і ТП ТПг Агуд Тут Ропе Авр Гей Тгр Щ1Уу 100 105 110
Атуд б1у ТПт Гец Уаі1і ТПх Уа1і1 бек бБет Аїа бБетг ТПт пув с1у Рго 5бБег 115 120 125
Ууа1ї Рпе Рго Гей Аїа Рго бБет бек Кпув бБетг ТПт бек сбіу с1у ТПтг Аїа 130 135 140
А1їа тец с1у Сув Гец Уаі1 Гпув Авр Тут РпПе Рго біц Рго Уаі1! ТПт Уаї 145 150 155 160 бек Тер Авп бехт С1у Аїа їеец ТПт бегт с1у Уаї Ніз Трк Ріе Рго А1а 165 170 175
Ууаї Гей сбіп бБет бБет сіу Ге Тут бек Гец бет бБет Уаі1і Уаі1і ТПт Уаї 180 185 190
Рго бек бет бБет Гец біу ТПтї Сіп Тіт Тут І1їе Суз Авп Уаї Авп Нів 195 200 205
Тпув Рго бБег Авп ТПтІ пПув Уаі Авр ув Акд Уа1! бій Рго Гпув бек Сув 210 215 220
Авр Гув ТПх Нів ТБт Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Сбіц Іец Ієцш 01У
Зо 225 230 235 240 с1іу Рго бБет Маії РПпе Гец Рпе Рко Ркго Гуз Рго гув Авр ТПт Іец Меє 245 250 255
З5
ІТ1е бБег Агд ТПт Рго Сі Уа1ї ТрІ Сув Уаї Уа1 Уаї Авр Уа1ї! бег Ніз 260 265 270 січ Авр Рго біц Маії Ппув Рпе Авзп Тктр Тут Уаі1 Авр сСі1у Уаї біц Уаї 275 280 285
Нів Авп о Атїа Ггув ТПкг Гуз Рго Агд сі Сі сб1п Тук Авп бек Тіт Туг 290 295 300
Атд Уаї Уаї бек Уаі1ї їец ТПг Уаї їец Нів сіп Азр Тер Іец Азп 01У 305 310 315 320 туз січ Тут пув Сув гув Уа1і бек Авп Гув Аїа Гей Рго Аїа Рго Ше 325 330 335 біц пув ТПтІ Іїе бБег Гув Аїа Гпув сіу сіп Рго Акд бій Рго біп Уаї 340 345 350
Тук ТПт Гец Ркго Рго бек Агд бі бі Меєсє ТПтІ пув Авп сіп Уа1ї бек 355 360 365 теп ТПт Сув гец Уаії пуз б1у Рбпе Тук Рго бБет Авр Іїе Аїа Уа1ї с1ц 370 375 380
ТЕр сіц бБет Авп сб1у біп Рго бі Авп Авп Тут Пув ТПтї ТПкг Рго Рго 385 390 395 400
Ууаї Гей Авр бБег Авр біу бек РПпе РПпе Гей Тук бек Ппув Гец ТПт Уаї 405 410 415
Авр Гув бБет Агд Тгтр сіп сіп с1у Азп Уа1і Рібе бет Сув бБет Уа! Меє 420 425 430
Ніз с1п АТїа Пец Нівз Авп Нів Тут ТПг біп Гуз бетг Пец бек Ієц 5бег 435 440 445
Рхко с1У Гувг 450
Зо «2105 45 «2115 217 «2125 БІЛОК «213» Ното зарієпз
З5 «4005 45 сСіп бек Маії Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп 1 5 10 15 40
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30 45
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТїа Рго Гуз Іеєц
Течш І1їе Тук б1у Авп бек Авп Агд Рго бБехт сіу Уаі Рго Авр Агд РІПе 50 55 бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1УуУу Гей 65 70 75 80 біп Аїа бій Авр сбіц Аїа Авр Тут Тут Сув біп бБет Рпе Авр Авп 5бег
85 Зо 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСіу бі1у біу ТпПк сбіп Гец ТПтІ Уаії гейш щу 1600 105 110 біп Рго Пув Аза Аїа Ркго бет Уаі! ТПтїІ Гей Рібе Рго Рго бет бет б1ц 115 120 125 бі пец біп Аза Авп Гув Аїа ТПт їец Уаї Сув Гей І1е бБегт Авр РІе 130 135 140
Тук Рко с1у Аї1а Уаі ТПх Уа1ії Аза Тгр ув Аза Авр Бек бек Рго Уаї1 145 150 155 160
Тув Аїа сіу Уаі Сі ТрПг ТП ТПг о Ркго Бек пув біп Бег Авп Авп Гув 165 170 175
Тут Аїа А1ї1а бет бБет Тук Гей бек Гей ТПг Рго бід сбіп Тгр Гуз бек 180 185 190
Ніз Агд бек Тут бек Сув біп Уа1і ТБбг Ніз Сі бі1у бек ТПг Уаї с1ц 195 200 205
Зо
Туз ТПтІ Уаії Аїа Ркго ТПхї бі Сув бек 210 215
З5 «2105 546 «2115 16 «2125 БІЛОК «213» Штучна послідовність «2205 «223» сигнальний пептид «4005 46
Меє Рго Гец Гец Гец Гец Гец Рко Гей Гей Тгр Аїа сСіу Аїа Іїец А1а 1 5 10 15 «2105 47 «2115 16 «2125 БІЛОК «213» сСовВ-Н2, варіант 1 «4005 47
Сіц І1е Авп Нів бет Сіу бек ТПтІ Авп Тугк Авп Рго бет Гец Гув бег 1 5 10 15
«2105 48 «2115 16 «2125 БІЛОК «2135» сСовВ-Н2, варіант 2 «4005 а48 сі І1е Авп Нів А1їа с1у бекгк ТПг Авп Тут Авп Рго бБет Іїец Кув 5ег 1 5 10 15 «2105 49 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» сСОВ-12, варіант 1 «4005 а49 сб1у Авп бБег Авп Агд Ркго бек 1 5 «2105 50 «2115 7 «2125 БІЛОК «2135 сСОоВ-12, варіант 2
Зо «4005 50 сіу біп бБег Авп Агкд Ркго 5бег 1 5
З5 «2105 Ч-551 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» сСОВ-12, варіант 3 «4005 51 сіу бій бБег Авп Агд Рго бек 1 5 «2105 52 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» сСОВ-12, варіант 4 «4005 щД 52 с1у Авр бБег Авп Агкд Ркго 5бег 1 5 «2105 53
«2115 7 «2125 БІЛОК «2135» сСОВ-12, варіант 5 «4005 53 сб1у Авп Аза Авп Агд Рго бек 1 5 «2105. 54 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» СсСОоВ-12, варіант 6 «4005 54 сіу біп Аза Авп Агкд Ркго 5бег 1 5 «2105. -ю55 «2115 7 «2125 БІЛОК «2135» сСОоВ-12, варіант 7 «4005. 255 сі1у бій Аза Авп Агд Рго бек
Зо 1 5 «2105 (56 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» сСОВ-12, варіант 8 «4005 56 с1у Авр Аїа Авп Агкд Рго 5бег 1 5 «2105 157 «2115 121 «2125 БІЛОК «2135 УН 11 (с4) «4005 57 сі Маї біп Гец сіп сіп Тгр с1у Аїа сСі1у Гей Ггецп пув Рго бБет б1ц 1 5 10 15
ТПт Гец бБег Гец ТПтї Сув Аїа Уаї Тук сіу сіу Бек РПпе бек С1Уу Туг 20 25 30
Тут Ткр бет Тгтр І1е Агу біп Рго Рго сбіу Ппув с1у Гей сі ТкЕр Ше 35 40 45 сС1у бі І1їе Авп Ніз А1їа СсСі1у бБег ТПг Авп Туг Авп Ркго бетг Іец Гув 50 55 бо зек Агкд Уаі1і ТПїх Іїе бек УМаії Авр ТПт бБет Гув Авп сбіп РоПе бег Гей 65 70 75 80
Туз Гец бБет бБет Уаі ТПх Аза Аза Авр ТПгІ Аїа Уа1ї Тут Тук Сув Аїа 85 Зо 935
Ат9д Гей Рго ТПтІ Акуд Ткр Уаї! ТПї ТПїІ Агуд Тут Робе Авр їец Тгр 01У 100 105 110
Атуд б1у ТПг Ге Уа! ТПт Уаї бек 5бег 115 120 «2105 58 «2115 111 «2125 БІЛОК «2135 У 11 (с4)
Зо «4005 58 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп 1 5 10 15
З5
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30 40 Тут Авр Уаї Нів Тер Тут сіп сСіп Пец Рго сСі1у ТПг Аїа Рго Гуз Ієц теп І1ї1е Тут с1у Авр бек Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РіГе 45 50 зо бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1УуУу Гей 65 70 75 80 біп Аїа бій Авр сбіц Аїа Авр Тут Тут Сув біп бБет Рпе Авр Авп 5бег 85 90 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСі1у сбіу сб1іу ТПг сбіп Ге ТПтї Уаї Гец 100 105 110
«2105 59 «2115 10 «2125 БІЛОК «213» Епітоп 1 ІЇТ4 «4005 59 теп Тут Акд сіц пув Гпув бБегхт Аїа бБет ТтІтр 1 5 10 «2105 60 «2115 7 «2125 БІЛОК «213» Епітоп 2 І1Т4 «4005 60
ТПг Агд І1е Агду Рго сбіц Гец 1 5 «2105 61 «2115 14 «2125 БІЛОК «213» Епітоп 3 ІІГТ4 «4005 61
Зо
Авп о1у біп РПе 1
З5 «2105 62 «2115 8 «2125 БІЛОК «213» Епітоп 4 ІІТ4 «4005 62
Ніз ТрптІ сС1у Агд Тут С1у Сув с1п 1 5 «2105 63 «2115 121 «2125 БІЛОК «2135 УН 11 (О1Е) «4005 63 сі Маї біп Гец сіп сіп Тгр с1у Аїа сСі1у Гей Ггецп пув Рго бБет б1ц 1 5 10 15
ТпПх Гец бБет Гецп ТПї Сув Аїа Уа1 Тук сіу с1у бБет РПпе Бек с1Уу Тук 20 25 30
Тут Ткр бет Тгтр І1е Агу біп Рго Рго сбіу Ппув с1у Гей сі ТкЕр Ше 35 40 45 сСіу б1іц І1їе Авзп Нів бБег Сіу бБет ТПрІ Авзп Тут Авп Рго бет Ієц Гуз 50 55 бо зек Агкд Уаі1і ТПїх Іїе бек УМаії Авр ТПт бБет Гув Авп сбіп РоПе бег Гей 65 70 75 80
Тпув Гец бБег бБет Уаі! ТПх Аза Аза Авр ТПтІ Аїа Уаї Тут Тут Сув Аї1а 85 Зо 935
Ат9д Гей Рго ТПтІ Акуд Ткр Уаї! ТПї ТПїІ Агуд Тут Робе Авр їец Тгр 01У 1600 195 110
Атуд б1у ТПг Ге Уа! ТПт Уаї бек 5бег 115 120 «2105 564 «2115 124 «2125 БІЛОК
Зо «2135 УН 2А6 (О1Е) «4005 К64 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго сб1у бБег
З5 1 5 19 15
Ззек Уаії пуз Уа1ї бек Сув пув Аїа бек с1і1у с1у ТПтї РПпе бек бек Тук 20 25 30 40
Аза Іїе Бех Тгтр Уаі Акд сіп Азїа Рго сСіу біп сбіу їец біц Тгр Меє 45 сіу б1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп гув РПе бо 50 Сбіп б1у Акд Уа1і ТПг І1їе ТПїІ Аїа Авр сій бек ТПт бБег ТПтг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бет бій Авр ТПтІ Аїа Уаі1! Тут Тут Сув 55 85 30 935
Аза Атуд Тут РПпе Авр бБет бет Сс1і1у Тгр Тух гув біу б1іу Аїа Рпе Авгр
100 105 110
І1е Тр сі1у сіп сіу ТПтї Ме Уа1і ТПї Уаії бек бекг 115 120 «2105 ющЛ65 «2115 124 «2125 БІЛОК «2135 УН 2Аб6 (01, 5102А, М1191) «4005 65 сі Маї сбіп Гец Уаії біп бек б1у Аїа сіц Уа1ї пув Гув Рго сіу бБекг 1 5 10 15
Ззек Уаї пуз Уаї бек Сув пПув Аїа бет біу с1у ТПтї Ріре бек бек Тукг 20 25 30
Аза Іїе Бех Тгтр Уаі Акд сіп Азїа Рго сСіу біп сбіу їец біц Тгр Меє 35 40 45 сіу б1у Іїе Іїе Рго І1е Рпбе с1у ТБПх Аза Авп Тугт Аїа біп гув РПе 50 55 бо
Зо сбіп б1у Акуд Маії ТПтІ Іїе ТПтІ А1їа Авр Сі бетгт ТПт бет ТПтІ Аїа Туг 65 70 75 80
Меє сій Гец бег бек Гецп Агуд Бек сій Авр ТПт Аїа Уаії Тут Тук Сув 85 Зо 935
Аза Атуд Тут Рпе Авр Аїа бет сі1іу Тгр Тух гув біу б1іу Аїа Рпе Авгр 1600 195 110
І1е ТЕр сі1у сіп сіу ТПтї Ггец Уа1і ТПї Уаії бек бекг 115 120 «2105 66 «2115 124 «2125 БІЛОК «2135 УН 2Аб6 (О1Е, 01015, М1191) «4005 66 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго сб1у бБег 1 5 19 15
Ззек Уаії пуз Уа1ї бек Сув пув Аїа бек с1і1у с1у ТПтї РПпе бек бек Тук
20 25 30
Аза Іїе Бех Тгтр Уаі Акд сіп Азїа Рго сСіу біп сбіу їец біц Тгр Меє 35 40 45 сіу б1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп гув РПе 50 55 бо сбіп б1у Акуд Маії ТПтІ Іїе ТПтІ А1їа Авр Сі бетгт ТПт бет ТПтІ Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бет бій Авр ТПтІ Аїа Уаі1! Тут Тут Сув 85 Зо 935
Аза Агуд Тут РПпе бБет бБет бек с1у Тгр Тухт гувз сі1у б1у Аїа РоПе Авр 100 105 110
І1е ТЕр сі1у сіп сіу ТПтї Ггец Уа1і ТПї Уаії бек бекг 115 120 «2105 67 «2115 122
Зо «2125 БІЛОК «2135 УН 367 (О1Е) «4005 67 сі Маї сбіп Гецш Уаі бій бек сіу сіу сіу Уа1і Уаі1і сбіп Рго с1у Агд 1 5 10 15
Ззек Гей Агд Ггецп бек Сув Аїа Аїа бек с1у РПпе ТПтІ РПе бек бек Тук 20 25 30
А1ї1а Меє Ніз Тер уаї Агд біп Аза Рго сбі1у Гуз СсС1у їец с1іц Тгр Уаї 35 40 45
А1їа Маї Іїе бБет Тут Авр сіу бБет Авп Гуз Тут Тут Аїа Авр бБет Уаї бо 50 туз с1у Акд РпПе ТПї Іїе бек Агуд Авр Авп о бет Пув Авп ТПтх Гец Тук 65 70 75 80 55 теп сіп Месб Авзп о 5ет Гей Агд Аїа сій Авр ТПт Аза Уаї Тут Тук Сув 85 Зо 935
Аза Атуд Уаії сіу сіц Тер І1е сіп Гей Тгр бег Рго Рпе Авр Тут Ттгр 1600 195 110 с1у біп б1у ТПг Гей Уаії ТПтї Уаї Бек 5ег 115 120 «2105 568 «2115 129 «2125 БІЛОК «2135 УН 2С1 (О1Е) «4005 68 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго С1у А1а 1 5 19 15 зет Уаї пув Маі1ії Бек Сув Гпув Уаі бек с1у Тут ТПтї Гей ТПкг сіц Гец 20 25 30 бек Меє Нів Тгр Уаї Агд сіп Аїа Рго с1у пув б1у Те Сі Ткгр Меє сіу б1у Рпе Авр Рго біц Авр сіу сіц ТПтї І1е Тут Аїа Сбіп гув РПе бо
Зо сбіп б1у Акту Маії ТПт Меє ТПтІ с1п Авр ТПї бетгт ТПтІ Авр ТПтІ Аїа Туг 65 70 75 80
З5
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бет бій Авр ТПтІ Аїа Уаі1! Тут Тут Сув 85 30 35 40 Аза Агуд Аза сіу Рко їец Тут ТПг Іїе Рпе сСі1у Уа1! Уаї І1е І1е Рго 1600 195 110
Авр Авп о ТтІр Рпе Авр Ркго Тктр сі1у Сіп б1у ТПт гец Уаі1і ТПт Уаї 5ег 45 115 120 125 зекг 50 «2105 69 «2115 121 «2125 БІЛОК 55 «2135» УНрівн1(с1) «4005 69 сіп УМаї біп Гец сіп сіп Тер с1у Аїа сС1у гей гей пув Рго бет б1ц 1 5 10 15
ТПт Гец бБег Гец ТПтї Сув Аїа Уаї Тук сіу сіу Бек РПпе бек С1Уу Туг 20 25 30
Тут Ткр бет Тгр І1е Агд біп Рго Рго сбіу Ппув с1у Гей сі ТкЕр Ше 35 40 45 сСіу б1іц І1їе Авзп Нів бБег Сіу бБет ТПрІ Авзп Тут Авп Рго бет Ієц Гуз 50 55 бо зек Агкд Уаі1і ТПїх Іїе бек УМаії Авр ТПт бБет Гув Авп сбіп РоПе бег Гей 65 70 75 80
Туз Гец бБет бБет Уаі ТПх Аза Аза Авр ТПгІ Аїа Уа1ї Тут Тук Сув Аїа 85 Зо 935
Акд Гей Рго ТПг Акуд Тгр Ма1і ТП ТПг Агуд Тут Ропе Авр Гей Тгр Щ1Уу 100 105 110
Атуд б1у ТПг Ге Уа! ТПт Уаї бек 5бег
Зо 115 120 «2105 170 «2115 111 «2125 БІЛОК «2135 У 151 (О1Е) «4005 70 бі бек Уаї Гецп ТПг біп Рго Рго бек Уаі Бек Сб1у Азїа Рго сіу сСіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТа Рго Гуз Ієц 35 40 45 теп Ії1е Тут с1у Авп бек Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РІГе 50 55 бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа Іїе ТПг сС1УуУ Гей 65 70 75 80 біп Аїа бій Авр сбіц Аїа Авр Тут Тут Сув біп бБет Рпе Авр Авп 5бег 85 Зо 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Ррпе сіу біу б1і1у ТПг сіп Гецп ТПт Уаї Ієц 100 105 110 «2105 71 «2115 111 «2125 БІЛОК «2135 У 151 (01, 5548А) «4005 71 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30
Тут Авр Уаї Нів Тер Тут сіп сСіп Пец Рго сСі1у ТПг Аїа Рго Гуз Ієц теп І1ї1е Тут с1у Авп Аза Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РіГе
Зо 50 зо бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1УуУу Гей 65 70 75 80
З5 біп Аїа бій Авр сбіц Аїа Авр Тут Тут Сув біп бБет Рпе Авр Авп 5бег 85 Зо 935 40
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСі1у сбіу сб1іу ТПг сбіп Ге ТПтї Уаї Гец 100 105 110 45 «2105 72 «2115 111 «2125 БІЛОК «2135 Уї 151 (01, М530) «4005 172 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТїа Рго Гуз Іеєц 35 40 45 теп І1е Тут с1у біп бек Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РіГе 50 55 бо зетк Уаії бБет Пув Бек с1у Аїа Бех Аїа Бек Гец Аїа І1е ТПг с1Уу Гец 65 70 75 80 біп Аїа бій Авр сбіц Аїа Авр Тут Тут Сув біп бБет Рпе Авр Авп 5бег 85 30 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСі1у сбіу сб1іу ТПг сбіп Ге ТПтї Уаї Гец 100 105 110 «2105 73 «2115 111 «2125 БІЛОК «2135 Уї 161 (01, М5ЗЕ) «4005 73 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп
Зо 1 5 19 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБег Авп І1е с1у Аїа с1Уу 20 25 30
З5
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТїа Рго Гуз Іеєц 40 теп І1ї1е Тут с1у бі Бек Авп Агуд Рго бет сіу Уаі Рго Авр Агд Ріе бо 45 зетк Уаії бБет Пув Бек с1у Аїа Бех Аїа Бек Гец Аїа І1е ТПг с1Уу Гец 65 70 75 80 біп Аїа бій Авр сбіц Аза Авр Тухк Тук Сув біп бек РПе Авр Авп 5бег 50 85 30 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСі1у сбіу сб1іу ТПг сбіп Ге ТПтї Уаї Гец 100 105 110 55 «2105 174 «2115 115
«2125 БІЛОК «2135 УТ 2А6 «4005 мБЯ74
Сіп бек Маії Гецп ТПт сіп Рко бет бБет Гец бегт Азїа бет Рго С1у А1а 1 5 10 15 зет Аїа бБет Пец ТП Сув ТПг Гей Агуд бБехт сб1іу І1їе Авп Уаі Авр ТІПг 20 25 30
Тут Агд І1їе Нів Тгр Тук біп с1іп пув Рго с1у бег Рго Рго Сіп Туг 35 40 45 їпеч теп Агд Тут Кпуз бек Авр бегт Авр Гуз Нів Сіп бі1у бек СсС1у Уаї1ї 50 55 бо
Рко бБет Агд РіПе бек біу бек пув Авр Рго 5ехт Аїа Авп Аїа с1у Ше 65 70 75 80 теп Гец І1е бет с1і1у Гецп біп бек бі Авр біц Аза Авр Тут Тут Сув 85 Зо 935
Зо Азїа Іїе Тгр Тут бек бБет ТПїІ Тгр Уаі! Рпе сС1у сі1у с1у ТПЕ сіп Гей 100 105 110
ТПЕ Уаї Іец
З5 115 «2105 175 «2115 107 40 «2125 БІЛОК «2135 Ут 367 «4005 75 45 Авр Іїе сбіп Меєс ТПг Сбіп бет Рго бБег бБег Уаі1і бек Аїа Бех Уаі У 1 5 10 15
Авр Атуд Маї ТПтІ Іїе ТПт Сув Акуд Аїа бек біп біу Іїе бБет бБет Ттгр 50 20 25 30 теп Аїа Ткр Тут Сіп біп ув Рго бі1у Гув Аїа Рго Гуз Рпе Тец Те 55
Тут Аїа А1їа бет бБет Гей біп бек біу Уа1 Рго бБет Пув Рпе Бех щу бо
Зек біу бек бі1у ТПх Авр Рпе ТПтї ТІецй ТПІ Іїе бБет Бек Гей сіп Рго 65 70 75 80 біЧ Авр Рпе Аїа ТПтІ Тут Тут Сув біп біп Тут Авп бБет Тут Рго Ркго 85 90 935
ТПЕ Рпе сіу сі1у с1у ТПжї Гпуз Уаі1і бі Іїе Гуз 100 105 «2105 776 «2115 113 «2125 БІЛОК «2135 Ут 2с1 «4005 76 сіц бек Маї Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1іу Азїа Рго сіу сіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30
Зо Тут Авр Уаї Нів Тер Тут сіп сСіп Пец Рго сСі1у ТПкг Аїа Рко Гув Іец теп Ії1е Тут с1у Авп бек Авп Агуд Рго бехт б1іу Уаі Рго Авр Акд РІГе
З5 50 зо бо
Ззек біу бБек Кпув бек біу ТПг бБег Аїа бБет еп Аїа Іїе ТПг сС1Уу Іецй 65 70 75 80 40 біп Аїа бій Авр сбіц Аїа Авр Тут Тут Сув біп бБет Тут Авр бБет 5Бег 85 Зо 935 45
Те бБет сіу бБет Сіу Уаї1ї Уа1і Рпе сіу сіу с1у ТПї Сіп Ге ІШе Пе 100 105 110
Теч «2105 177 «2115 111 «2125 БІЛОК «213» У 1Е1
«4005 7177 сСіп бек Маії Ге ТПт сіп Рко Рко бет Уаі бБехт б1у Аїа Рго сС1у сіп 1 5 10 15
Атдуд Маї ТПтІ Іїе бБет Сув ТПт сіу бБет бек бБегхт Авп Іїе б1у Аїа 01Уу 20 25 30
Тут Авр Уа1 Нів Тгр Ту сбіп Сіп їєц Рго СсС1у ТБтІ АТїа Рго Гуз Іеєц 35 40 45
Течш І1їе Тук б1у Авп бек Авп Агд Рго бБехт сіу Уаі Рго Авр Агд РІПе 50 55 бо
Ззек Уаії бек пув бек б1іу Аїа бБегт Аїа бБет Гей Аїа І1е ТПг СсС1УуУу Гей 65 7о 75 80 біп Аїа бій Авр сбіц Аїа Авр Тут Тут Сув біп бБет Рпе Авр Авп 5бег 85 Зо 935
Те бБет Аїа Тут Уаі Рпе сСі1у сбіу сб1іу ТПг сбіп Ге ТПтї Уаї Гец 100 105 110
Зо «2105 78 «2115 1577 «2125 БІЛОК «213» ІЇ1Т4 людини без сигнальної послідовності
З5 «4005 7178 біп ТпПг со1у ТПтг Іїе Ркго Ппув Рко ТПтІ Гей Тгр Аїа біц Рго Авр 5ег 1 5 10 15 40 уаї Іїе ТПг сіп сіу бБет Рко Уаі1і! ТПтї Ггецп бет Сув біп сбіу бБет ТГец 20 25 30 45 січ Аїа сбіп сбіц Тут Акд Гец Тут Акд бі гув пув бБет Аїа бет Тктгр
І1е Трг Акуд І1е Акуд Рго бі Іец Уа! гув Авп с1у с1п Рре Ніз І1е 50 55 бо
Рго бек І1е ТІ Тер біцш Ніз ТПк с1у Агд Тут біу Сув Сіп Тухг Туг 65 7о 75 80 зехт Агд Аза Агуд Тгр бек бій Гей бБег Авр Ркго Гей Уаі1і Гей Уаії Мес
85 30 35
ТПк с1у Аїа Тут Рго Гпув Рго ТПх Гей бехг Аїа біп Рго бек Рко Уаї1 1600 195 110 уаї ТПг бек сіу сі1у Акд Уа1і! ТПїІ Гей біп Сув біц бБет біп Уаї А1а 115 120 125
Рпе сі1у сбі1у Рпбе І1їе Гецш Суз пув біш с1у Сі б1іц с1ц Нів Рго с1іп 130 135 140
Сув Гец Авп бег Сіп Рго Нів Аїа Агд Сіу бек бег Агд Аїа І1е РБГе 145 150 155 160 бек Уаї с1у Рко Уа1ї бек Рго Авп Агуд Агуд Тгр бет Нів Акд Сув Туг 165 170 175 сіу Туг Авр Гец Авп бБет Рко Тут Уаі1і! Тгр бБет бБет Рго бБет Авр ТГец 180 185 190 теп січ Гец Ггец Уаі Рго біу Уа1 бек пув Пув Рго Бек Гецп бек Уаї1ї 195 200 205
Зо біп Рго біу Рго Уаі УМаі Аїа Рко сіу сіц бек Гей ТПг Гц біп Сув 210 215 220
З5 уаї бБехт Авр Уаії сіу Тут Авр Акуд РпПе Уаії гей Тут Гув сіц сі1у с1ц 225 230 235 240
Аг Авр Гец Агд Сбіп їец Рго б1у Агд сСіп Рго Сбіп Аїа с1у Гец бБег 245 250 255 біп Аза Авп Рпе ТПт Гец сіу Рко Уа1і бБегт Агуд бБег Тут сіу с1у сіп 260 265 270
Тут Агд Сув Тут С1у Аїа Нів Авп Гец бетгт бек Сі Суз Бех Аїа Рго 275 280 285 зект Авр Рго гей Авр Іїе їец Іїе ТПтІ с1у сіп І1е Агд с1у ТПкК Рго 290 295 300
Рпе І1е бек Уа1і біп Рго біу Рго ТПт Уаі Аїа бек с1у сі Авп Уаї 305 310 315 320
ТЕ Гец Гец Сув Сіп бБетг Тгр Агд Сіп Рпбе Нів Тіт Робе Гєц Ієц ТЕПг 325 330 335 пуз АТїа сС1у Аза АТа Авр Аза Рго їеєц Агд їєц Агуд бБет І1е Ніз Сс1ц 340 345 350
Тук Рко пув Тут біп Аїа сі Рпе Рко Меє бег Рго Уа! ТПтг 5ек Аїа 355 360 365
Ніз Аїа сі1у ТПт Тут Агд Сув Тут Сіу бБет Гец Азп бБет Авр Рго Туг 370 375 380 пецп теп бек Нів Рго бек біц Рго Гец біц їєц Уаї Уаї бек С1у Рго 385 390 395 400
Ззек Мер Сіу бек бек Рго Рго Рго ТПтІ с1у Рго Іїе Бек ТПхсх Рго Аїа 405 410 415 сіу Рго біц Авр сіп Ркго Гец ТПтІ Ркго ТПїх біу бБет Авр Рго Сбіп 5бег 420 425 430
Зо сС1у пе сС1у Акд Нівз Іецш СсС1іу Уа1ї Уаї І1ї1е СсС1у І1е їєц Уа1 А1а Уаї 435 440 445 уаї пец їец їец Гей Гц їец Гей їеєц Гц Робе їєц І1е Гїец Агд Нівз 450 455 460
Агуд Агд сб1іп б1у Гуз Нів Тер ТПт бек ТПт с1іп Агд Гуз Аїа Азр Ріє 465 470 475 480
Сіп Нів Рго Аїа сС1у Аза Уаї сі1у Рго Сі Рго ТПт Азр Агд с1уУу Іец 485 490 495 біп Тер Агуд бБегт бБехт Рго Аї1а Аї1а Авр Аїа Сбіп біц біц Авп Тец Туг 500 505 510
Аза Аїа Уа1ї Гпув Авр ТПт біп Рго сій Авр сбі1у Уа1і бій Меєсє Авр ТПг 515 520 525
Атуд Аїа Аза Аїа бБет сіц Аза Ркго сСіп Авр Уаї ТПІ Тут Аїа сіп Гец 530 535 540
Ніз бек їец ТПт їец Агд Агуд Гуз АТа ТПт Сі Рго Рго Рго бет сіп
545 5Б5О 555 5б6О січ Агуд бій Рго Рго Аїа сіц Рко бет І1е Тут Аїа ТПг Іецй Аза Ії1є 565 570 575
Нів «2105 179 «2115 447 «2125 БІЛОК «213» Но 181 (01) без С-кінцевого К «4005 179 сі Маї б1іп Гец сіп сіп Тер с1у Аїа сС1у гей гей пув Рго бет б1ц 1 5 19 15
ТпПх Гец бБет Гецп ТПї Сув Аїа Уа1 Тук сіу с1у бБет РПпе Бек с1Уу Тук 20 25 30
Тут Ткр бет Тгр І1е Агд біп Рго Рго сбіу Ппув с1у Гей сі ТкЕр Ше
Зо сСіу б1іц І1їе Авзп Нів бБег Сіу бБет ТПрІ Авзп Тут Авп Рго бет Ієц Гуз бо 35 зет Акд Уаі! ТПї Іїе бек Уаії Авр ТПт бек Гув Авп біп РоПе 5бег Гец 65 70 75 80
Туз Гец бБет бБет Уаі ТПх Аза Аза Авр ТПгІ Аїа Уа1ї Тут Тук Сув Аїа 40 85 30 935
Ат9д Гей Рго ТПтІ Акуд Ткр Уаї! ТПї ТПїІ Агуд Тут Робе Авр їец Тгр 01У 100 105 110 45
Атуд б1у ТПт Гец Уаі ТПтІ Уаї бет бБехт Аїа бет ТПт пув С1у Рго 5бБег 115 120 125 50 уаї Рпе Рго Гец Аїа Рко Сув бБет Агд Бех ТПтІ бет біц бет ТПтІ А1а 130 135 140 55 Аїа теп с1у Сув Гец Уаі Пув Авр Тут Рпе Рго бі Ркго Уаі ТПт Уаї 145 150 155 160 бек Тер Авп бехт С1у Аїа їеец ТПт бегт с1у Уаї Ніз Трк Ріе Рго А1а 165 170 175
Ууаї Гей сіп бБег Бек біу Ппецп Тук бек Гей бек бек Уаії Уаі ТПкг Уаї 180 185 190
Рго бек бет бБет КГец біу ТПтї Кпув ТПт Тут ТПт Суз Авп Уаї Авр Нів 195 200 205
Туз Рко бБет Авп ТПІ Кпуз Уа1і Авр пув Акд Уаії сі бБет Гуз Тух щу 210 215 220
Ркго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго бій Рпе Гей сіу сі1у Рко бек 225 230 235 240 уаї Рпе Гецп Рпе Рко Рко Ппув Ркго Гуз Авр ТПтІ Ггец Меє Іїе 5Бет Агд 245 250 255
ТПт Ркго сіц Уаі ТПї Сув Уа1ї Уаї Уаії Авр Уа1ї Бек сіп бі Авр Рго 260 265 270
Сі Маї с1іп РбБе Авп Тгр Тук Уаї Авр сС1у Уа1 с1і1ц Уаї Ніз Авп Аїа
Зо 275 280 285
Туз ТПжт Кпув Рго Агкд бі бі біп Рбе Авп о бет ТПтІ Тут Агд Уаі1ї Уаї 290 295 300
З5 бек Уаї Пец ТртІ Уаї Гецш Ніз Сіп Авр Тгр їец Авп с1у Ппув біц Туг 305 310 315 320 туз Сув пув Уаї бек Авп гув біу Пец Рко бет бет І1е бі Гув ТіК 325 330 335
Іїе Бек Гпув Аїа пув сіу біп Рго Агд Сіц Рго біп УМаії Тук ТПкг Гей 340 345 350
Ргто Рго бек біп бі біцш Меє ТПт Гув Авп біп Уа1ї Бек Ге Тік Сув 355 З6о 365 теп Уаї пув с1у Рре Тук Рго бек Авр Іїе Аїа Уаі сій Тгр сіц бек 370 375 380
Авп о б1у біп Рго сій Авп Авп о Тухк Гуз ТПг ТПтг Рго Рго Уаії Іец Авр 385 390 395 400 зект Авр біу бек РПе РпПе їпецп Тут бБегт Атгд Гецп ТПтІ Уаі1і Авр Гуз бек 405 410 415
Атуд Тгр сС1іп бі с1у Авп Уа1! Рібе Бех Сув Бек Уаї Меє Ніз сій Аї1а 420 425 430
Пец Нів Авп Нів Тут ТПг сіп Гуз бег Іец бег Іец Бех Ієц С1Уу 435 440 445 «2105 80 «2115 447 «2125 БІЛОК «213» Но 161 (016, 554А) без С-кінцевого К «4005 80 сі Маї б1іп Гец сіп сіп Тер с1у Аїа сС1у гей гей пув Рго бет б1ц 1 5 10 15
ТпПх Гец бБет Гецп ТПї Сув Аїа Уа1 Тук сіу с1у бБет РпПе бек С1Уу Тук 20 25 30
Зо Тут Тер бБег Тгр Іїе Агд сіп Рго Рго Ссіу Гув с1у Гец Сі Тгр І1е сСіу б1іц І1їе Авп Нів Аїа СсСіу бБетг ТрІ Авп Тут Авп Рго бБет Іец Гуз
З5 50 зо бо зек Агкд Уаі1і ТПїх Іїе бек УМаії Авр ТПт бБет Гув Авп сбіп РоПе бег Гей 65 70 75 80 40
Туз Гец бБет бБет Уаі ТПх Аза Аза Авзр ТПтІ Аїа Уаії Тут Тук Сув Аїа 85 Зо 935 45
Ат9д Гей Рго ТПтІ Акуд Ткр Уаї! ТПї ТПїІ Агуд Тут Робе Авр їец Тгр 01У 100 105 110
Ак біу ТпПкг Гей Уа! ТПк Уа1ї бБег бБет Аїа бек ТПг Гув с1у Рго бБег 115 120 125 уаї Рпе Рго Гец Аїа Рко Сув бБет Агд Бех ТПтІ бет біц бет ТПтІ А1а 130 135 140
А1їа тецшц с1у Сув Гец Уаі1 Гпув Авр Тут РпПе Рго біц Рго Уаі1! ТПт Уаї
145 150 155 160 бек Тер Авп бехт С1у Аїа їеец ТПт бегт с1у Уаї Ніз Трк Ріе Рго А1а 165 170 175
Ууаї Гей сбіп бБет бБет сіу Ге Тут бек Гец бет бБет Уаі1і Уаі1і ТПт Уаї 180 185 190
Рго бек бет бБет КГец біу ТПтї Кпув ТПт Тут ТПт Суз Авп Уаї Авр Нів 195 200 205
Туз Рко бБет Авп ТПІ Кпуз Уа1і Авр пув Акд Уаії сі бБет Гуз Тух щу 210 215 220
Рго Рко Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Сбіц Рпе Гец сіу С1у Рго 5ег 225 230 235 240 уаї Рпе Гецп Рпе Рко Рко Ппув Ркго Гуз Авр ТПтІ Ггец Меє Іїе 5Бет Агд 245 250 255
ТПЕ Рко сід Уаї ТПї Сув Уа1ї Уа1 Уа1 Авр Уаії бБет сбіп сб1цп Авр Рго 260 265 270
Зо
Сі Маї с1іп РбБе Авп Тгр Тук Уаї Авр сС1у Уа1 с1і1ц Уаї Ніз Авп Аїа 275 280 285
З5
Туз ТПжт Кпув Рго Агкд бі бі біп Рбе Авп о бет ТПІ Тут Акд Уаі1ї Уаї 290 295 300 бек Уаї теп ТПк Уаї їец Нів сбіп Авр Тгр Гец Авп СсС1іу пув СсС1ц Туг 305 310 315 320 туз Сув пув Уаї бек Авп гув бі1у Пец Рго бет бБет Іїе сі Гуз ТЕПкК 325 330 335
І1е Бек Гув Аїа пув сіу сбіп Рго Агд бі Рго біп Уаі! Тут ТПтг Іец 340 345 350
Ргто Рго бек біп бі біцш Меє ТПг Гув Авп о сіп Уаії бек Ге ТПкК Сув 355 360 365 теп Уаї пув с1у Рре Тук Рго бек Авр Іїе Аїа Уаі сій Тгр сіц бек 370 375 380
Авп о б1у біп Рго с1іц Авп Авп Тут Гуз ТПї ТБбтг Рго Рго Уаі Іец Авгр 385 390 395 400 зект Авр біу бек РПе РпПе їпецп Тут бБегт Атгд Гецп ТПтІ Уаі1і Авр Гуз бек 405 410 415
Агуд о ТкЕр с1п сі с1у Авп Уа1! РіПе бек Сув бек Уа1 Меєсє Ніз сС1цп А1а 420 425 430
Пец Нів Авп Нів Тут ТПг сіп Гуз бег Іец бег Іец Бех Ієц С1Уу 435 440 445 «2105 81 «2115 450 «2125 БІЛОК «213» НС рівЕ1(с1) без С-кінцевого К «4005 81
Сіп Маї сбіп Гецш сіп біп Тгр б1у Аїа сіу Гей Гец Гув Рго бет бій 1 5 10 15
ТпПх Гец бБет Гецп ТПї Сув Аїа Уа1 Тук сіу с1у бБет РПпе Бек с1Уу Тук
Зо 20 25 30
Тут Ткр бет Тгр І1е Агд біп Рго Рго сбіу Ппув с1у Гей сі ТкЕр Ше
З5 сСіу б1іц І1їе Авзп Нів бБег Сіу бБет ТПрІ Авзп Тут Авп Рго бет Ієц Гуз бо 40 зек Агкд Уаі1і ТПїх Іїе бек УМаії Авр ТПт бБет Гув Авп сбіп РоПе бег Гей 65 70 75 80 45 Тпув Гец бБег бБет Уаі! ТПх Аза Аза Авр ТПтІ Аїа Уаї Тут Тут Сув Аї1а 85 90 935
Ат9д Гей Рго ТПтІ Акуд Ткр Уаї! ТПї ТПїІ Агуд Тут Робе Авр їец Тгр 01У 50 1600 195 110
Атуд б1у ТПт Гец Уаі ТПтІ Уаї бет бБехт Аїа бет ТПт пув С1у Рго 5бБег 115 120 125 55 уаї Рпе Рго Гец Аїа Рко бет бет Гуз бек ТПтІ бет біу с1у ТПтї А1а 130 135 140
А1їа тец с1у Сув Гец Уаії Гпув Авр Тут РпПе Рго біц Рго Уаі1! ТПт Уаї 145 150 155 160 бек Тер Авп бехт С1у Аїа їеец ТПт бегт с1у Уаї Ніз Трк Ріе Рго А1а 165 170 175
Ууаї Гей сбіп бБет бБет сіу Ге Тут бек Гец бет бБет Уаі1і Уаі1і ТПт Уаї 180 185 190
Рго бек бБет бек Гец С1у ТПт Сіп ТПт Тук І1ї1е Сув Авп Уаії Авп Нів 195 200 205
Туз Рко бБет Авп ТПтІ Гпуз Уаі Авр Гуз Агд Уаії біц Рго Гув бБетг Сув 210 215 220
Авр Гув ТПх Нів ТБт Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго Сбіц Іец Ієцш 01У 225 230 235 240 с1іу Рго бБет Маії РПпе Гец Рпе Рко Ркго Гуз Рго гув Авр ТПт Гец Меє 245 250 255
Зо
ІТ1е бБег Агд ТПт Рго Сі Уа1ї ТрІ Сув Уаї Уа1 Уаї Авр Уа1ї! бег Ніз 260 265 270 бі Авр Рго сіц Уаї Гпув Рпе Авп Тгтр Туг Уаі Авр с1у Уа1і! сіц Уаї 275 280 285
Ніз Авп Аїа пув ТПтІ Кпув Рго Агд Сі бі б1іп Туг Авп бек ТПг Туг 290 295 300
Атд Уаї Уаї бек Уаі1ї їец ТПг Уаї їец Нів сіп Авр Тгр Іец Авп с01уУ 305 310 315 320 туз січ Тут пув Сув гув Уа1і бек Авп Гув Аїа Гей Рго Аїа Рго Ше 325 330 335 біц пув ТПтІ Іїе бБегт Гув Аїа Гпув сіу сіп Рго Агкд бій Рго біп Уаї 340 345 350
Тут ТПг Гей Рго Рго Бек Агд сій біц Меє ТПг Гув Авп Сбіп Уаї 5ег 355 360 365 теп ТПт Сув гец Уаії пуз б1у РПпе Тут Ркго бБет Авр І1е Аї1а Уаї1ї б1ц 370 375 380
ТЕр сій бБег Авп о сбіу біп Рго сій Авп Авп Тут Гув ТПт ТПхг Рго Рго 385 390 395 400 уаї гейш Авр 5Бет Авр сіу бек РпПе РпПе Гей Тут бБет пув їецп ТПтІ Уаї 405 410 415
Авр Гув бБет Агд Тгтр сіп сіп с1у Азп Уа1і Рібе бет Сув бБет Уа! Меє 420 425 430
Ніз с1п АТїа Пец Ніз Авп Нів Тут ТПг біп Гуз бетг Пец бек Ієц 5бег 435 440 445
Рго У 450 «2105 82 «2115 450 «2125 БІЛОК «213» НС 2А6 (01) без С-кінцевого К
Зо «4005 82 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аїа сі Маї Ппув Ппув Ркго сб1у бег 1 5 10 15
З5
Ззек Уаії пуз Уа1ї бек Сув пув Аїа бек с1і1у с1у ТПтї РПпе бек бек Тук 20 25 30 40 Азїа Іїе Бек Тгр Уаі Агуд Ссіп Аза Рго сіу сіп с1у Гей сі Тгр Меє сіу б1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп гув РПе 45 50 зо бо сбіп б1у Акуд Маії ТПтІ Іїе ТПхт А1ї1а Авр Сі бетгт ТПт бет ТПтІ Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бет бій Авр ТПтІ Аїа Уаі1! Тут Тут Сув 85 Зо 935
Аза Атуд Тут РПпе Авр бБет бет Сс1і1у Тгр Тух гув біу б1іу Аїа Рпе Авгр 100 105 110
І1е ТЕр сіу сіп сі1у ТПї Мер Уа1ії ТПїх Уаі1ї бБет бБет Аїа бБет ТПтї Гуз 115 120 125 с1іу Рго бБет Маії РПпе Ркго Гец А1їа Ркго Сув бБет Агуд бет ТПт бет б1ц 130 135 140 5ет ТПтІ Азїа Аїа їеп с1у Сув Гец Уаі Пув Авр Тут Рпе Рго сб1іц Рго 145 150 155 160
Уа1ї Трт Уаї бег Тгр Азп бег с1іу Аїа їеєц ТПт бегт біу Уаї Нів ТПг 165 170 175
Рпе Рго Аїа Уаії гецп біп бек бек С1у Гей Тут бБет Гецп бек бек Уаї 180 185 190 уаї ТПтгІ Маї Рго бБет бБет бБет Гец сіу ТПх Ггув ТПтІ Тут ТПтг Сув Авп 195 200 205
Ууаї Авр Нів Кпув Рго бБет Авп ТПт Кпув Уа1і! Авр гув Акд Уаї Сі 5бег 210 215 220
Зо Кпув Тук сіу Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аза Рго сіц Рпе ей ШУ 225 230 235 240 с1іу Рго бБет Маії РПпе Гец Рпе Рко Ркго Гуз Рго гув Авр ТПт Іец Меє
З5 245 250 255
І1е бБет Акд ТПтІ Рко сіц Уа1і ТПї Сузв Уа1ї Уаї Уа1ї Авр Уаії бек сіп 260 265 270 січ Авр Рго біц Маі сіп Рпе Авзп Тктр Тут Уа1і1 Авр сСі1у Уаї біц Уаї 275 280 285
Ніз Авп Аїа пув ТПтІ Кпув Рго Агд Сі бі б1іп Рбе Авп бек ТіПг Туг 290 295 300
Атуд Уа1ї1 Уа1ї Бек Уа1і! Іец ТПг Уаї їец Нів Сіп Авр Тер їец Авп сС1Уу 305 310 315 320 туз січ Тут пув Сув пув Уаі1і бек Авп Гув С1у Гецп Рго бек бек Те 325 330 335 біц пув ТПтІ Іїе бБег Гув Аїа Гпув сіу сіп Рго Акд бій Рго біп Уаї
340 345 350
Тук ТПт Гец Ркго Рго бек біп біш бі Меєсє ТПтІ пув Авп сіп Уа1ї бек 355 360 365 теп ТПт Сув гец Уаії пуз б1у Рбпе Тук Рго бБет Авр Іїе Аїа Уа1ї с1ц 370 375 380
ТЕр сіц бБет Авп сб1у біп Рго бі Авп Авп Тут Пув ТПтї ТПкг Рго Рго 385 390 395 400 уаї гейш Авр 5Бет Авр сіу бБет РПе РПе Гей Тут бБет Агкд їец ТПт Уаї 405 410 415
Авр Гув Бек Агд Ттр Сбіп бі б1у Авп Уаі РПпе бек Сув Бек Уа! Меє 420 425 430
Ніз с1п АТїа Пец Нівз Авп Нів Тут ТПг біп Гуз бетг Гец бек Гєц 5бег 435 440 445
Те 1УуУ 450
Зо «2105 83 «2115 450 «2125 БІЛОК «213» Но 2А6б (01, 5102А, М119І) без С-кінцевого К «4005 83 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго сіу бег 1 5 10 15
Ззек Уаії пуз Уа1ї бек Сув пув Аїа бек с1і1у с1у ТПтї РПпе бек бек Тук 20 25 30
Аза Іїе Бех Тгтр Уаі Акд сіп Азїа Рго Ссіу біп біу Гец сіц Ткр Меє 35 40 45 сіу б1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп гув РПе 50 55 бо
Сбіп б1у Акд Уа1і ТПг І1їе ТПїІ Аїа Авр сій бек ТПг бег ТПтг Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бет бій Авр ТПтІ Аїа Уаі1! Тут Тут Сув 85 Зо 935
Аза Агуд Тут Рпе Авр Аза бет с1у Тгр Тут Гув с1у с1у Аїа РоПе Авр 100 105 110
І1е ТЕр сіу сіп с1і1у ТПтї Ге Уа1і ТПх Уаі1ї бБет бБет Аїа бБет ТПтї Гуз 115 120 125 с1іу Рго бБет Маії РПпе Рго Гец Аїа Рго Сув бБегт Атгуд бБет ТПт бет б1ц 130 135 140 бек ТПї Аїа Аза гец сбіу Сув Гей Маї Гув Авр Тут РПпе Рго с1ц Рго 145 150 155 160
Уа1ї Трт Уаї бег Тгр Авп бБет с1у Аїа їец ТПтх бегт біу Уаї Нів ТПг 165 170 175
Рпе Ркго Аїа Маії Гей сіп бег бек біу Ппецп Туг бек Гец бек бек Уаї 180 185 190 уаї ТПтгІ Маї Рго бБет бек бБет Гец сіу ТПх Ггув ТПтІ Тут ТПтг Сув Авп
Зо 195 200 205
Ууаї Авр Нів Кпув Рго бБет Авп ТПт Кпув Уа1і! Авр гув Акд Уаї Сі 5бег 210 215 220
З5
Гуз Тут сі1у Рко Ркго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго біц Рпе Гей щу 225 230 235 240 с1іу Рго бБет Маії РПпе Гец Рпе Рко Ркго Гуз Рго гув Авр ТПт Іец Меє 245 250 255
Іїе Бек Агуд ТПт Рго біц Уа1і ТПг Сув Уаії Уаї Уа1 Авр Уаї бек сСіп 260 265 270 січ Авр Рго біц Маі сіп Рпе Авзп Тктр Тут Уа1і1 Авр сСі1у Уаї біц Уаї 275 280 285
Ніз Авп Аїа пув ТПтІ Кпув Рго Агд Сі бі б1іп Рбе Авп бек ТіПг Туг 290 295 300
Атд Уаї Уаї бек Уаі1ї їец ТПг Уаї їец Нів сіп Азр Тер Іец Азп 01У 305 310 315 320 туз січ Тут пув Сув пув Уаі1і бек Авп Гув С1у Гецп Рго бек бек Те 325 330 335 біц пув ТПтІ Іїе бБег Гув Аїа Гпув сіу сіп Рго Акд бій Рго біп Уаї 340 345 350
Тук ТПт Гец Ркго Рго бек біп біш бі Меєсє ТПтІ пув Авп сіп Уа1ї бек 355 360 365
Тецп ТПг Сув Гец Уаї Гуз с1у Рпе Тут Рго бБег Авр І1е Аїа Уа1 с1ц 370 375 380
ТЕр сіц бБет Авп сб1у біп Рго бі Авп Авп Тут Пув ТПтї ТПкг Рго Рго 385 390 395 400 уаї гейш Авр 5Бет Авр сіу бБет РПе РПе Гецп Тут бБет Агд їец ТПтІ Уаї 405 410 415
Авр Гув бБет Агд Тгтр сіп сі с1у Авзп Уа1і Рібе бет Сув бБет Уа! Меє 420 425 430
Зо
Ніз с1п АТїа Пец Нівз Авп Нів Тут ТПг біп Гуз бетг Пец бек Ієц 5бег 435 440 445
Тїецш 51У 450 «2105 84 «2115 450 «2125 БІЛОК «213» НО 2А6 (01, 01015, М119І) без С-кінцевого К «4005 84 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго сб1у бБег 1 5 10 15 зет Уаії пув Маі1ії Бек Сув Гпув Аїа бБет Ссіу сіу ТПт РпПе бБект бек Туг 20 25 30
Аза Іїе Бех Тгтр Уаі Акд сіп Азїа Рго сСіу біп сбіу їец біц Тгр Меє 35 40 45 сіу б1у Іїе Іїе Рго Іїе Рпе сіу ТПтІ Аза Авп Тут Аїа біп гув РПе
50 55 бо сбіп б1у Акуд Маії ТПтІ Іїе ТПтІ А1їа Авр Сі бетгт ТПт бет ТПтІ Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бет бій Авр ТПтІ Аїа Уаі1! Тут Тут Сув 85 Зо 935
Аза Ату Тут РПе бБет бет бет Сс1і1у Тгр Тух гув біу б1іу Аїа РоПе Авгр 100 105 110
І1е ТЕр сіу сіп с1і1у ТПтї Ге Уа1і ТПх Уаі1ї бБет бБет Аїа бБет ТПтї Гуз 115 120 125 сС1у Рго Бек Ма1 Рпе Рго Гец Аїа Рго Сув бБет Агд бБетг ТПтг бет сі1ц 130 135 140 бек ТПї Аїа Аза гец сбіу Сув Гей Маї Гув Авр Тут РПпе Рго с1ц Рго 145 150 155 160
Уа1ї Трт Уаї бег Тгр Азп бег с1іу Аїа їец ТПтх бегт сі1у Уаї Нів ТПг 165 170 175
Зо
Рпе Рго Аїа Уаії гецп біп бек бек С1у Гей Тут бБет Гецп бек бек Уаї 180 185 190
З5 уаї ТПтгІ Маї Рго бБет бБет бБет Гец с1іу ТПг пув ТПт Тут ТПкг Сув Авп 195 200 205
УуУаї Авр Нів пув Рго бБегт Авп ТПт Кув Уа1ії Авр Гуз Акд Уа1 Сі 5ег 210 215 220
Гуз Тут сі1у Рко Ркго Сув Ртго Рго Сув Рго Аїа Ркго бі Рпе Гей ШУ 225 230 235 240 с1іу Рго бБет Маії РПпе Гец Рпе Рко Ркго Гуз Рго гув Авр ТПт Іец Меє 245 250 255
І1е бБет Акд ТПтІ Рко сі Уа1 ТПг Сув Уаї Уаії Уаії Авр Уаії бек сіп 260 265 270 січ Авр Рго біц Маі сіп Рпе Авзп Тктр Тут Уа1і1 Авр сСі1у Уаї біц Уаї 275 280 285
Ніз Авп Аїа пув ТПтІ Гпув Рго Агд Сі бі б1іп Рбе Авп бек ТіПг Туг 290 295 300
Атд Уаї Уаї бек Уаі1ї їец ТПг Уаї їец Нів сіп Азр Тер Іец Азп 01У 305 310 315 320 пув сі Тук пув Сув КГув УМа1і бБег Авп пув сіу Гец Рго бБет бек Іїе 325 330 335 біц пув ТПтІ Іїе бБег Гув Аїа Гпув сіу сіп Рго Акд бій Рго біп Уаї 340 345 350
Тук ТПт Гец Ркго Рго бек біп біш бі Меєсє ТПтІ пув Авп сіп Уа1ї бек 355 360 365 теп ТПт Сув гец Уаії пуз б1у Рбпе Тук Рго бБет Авр Іїе Аїа Уа1ї с1ц 370 375 380
ТЕр сіц бБет Авп сб1у біп Рго бі Авп Авп Тут Пув ТПтї ТПкг Рго Рго 385 390 395 400
Зо Ууаї Гей Авр бБег Авр біу бек РПпе РПпе Гей Тухк бек Акад Гец ТПт Уаї 405 410 415
Авр Гув бБет Агд Тгтр сіп сі с1у Авзп Уа1і Рібе бет Сув бБет Уа! Меє
З5 420 425 430
Ніз с1п АТїа Пец Нівз Авп Нів Тут ТПг біп Гуз бетг Пец бек Ієц 5бег 435 440 445
Те 1УуУ 450 «2105 85 «2115 448 «2125 БІЛОК «2135 Но 3607 (015) без С-кінцевого К «4005 85 сі Маї б1іп Гец Маі сіц бехт с1у сі1у с1у Уаї Уаії біп Рго с1у Акгд 1 5 10 15
Ззек Гей Агд Ггецп бек Сув Аїа Аїа бек с1у РПпе ТПтІ РПе бек бек Тук 20 25 30
А1ї1а Меє Ніз Тер уаї Агд біп Аза Рго сбі1у Гуз СсС1у їец с1іц Тгр Уаї 35 40 45
А1їа Маї Іїе бБет Тут Авр сіу бБет Авп Гуз Тут Тут Аїа Авр бБет Уаї 50 55 бо туз с1у Акд РпПе ТПї Іїе бек Агуд Авр Авп о бет Пув Авп ТПтх Гец Тук 65 70 75 80 теп сіп Месб Авзп о 5ет Гей Агд Аїа сій Авр ТПт Аза Уаї Тут Тук Сув 85 Зо 935
Аза Атуд Уаії сіу сіц Тер І1е сіп Гей Тгр бег Рго Рпе Авр Тут Ттгр 1600 105 110 сіу біп сб1у ТПт Гец Уаі ТПт Уаї бет бек Аза бет ТПт пув С1Уу Ркго 115 120 125
Ззек Уаі Рібе Рго гец Азїа Рго Сув бБегт Атгуд бБетї ТПтІ Бек сі бек ТЕПкК 130 135 140
Зо
А1їа Аїа Гец сіу Сув Гец Уаії Гпув Авр Тут Рпе Рго біц Рго Уаї ТПг 145 150 155 160
Уаї Бек Тгр Авп бек с1у А1ї1а Іец ТПг бБег сС1у Уа1 Нів ТПхг Ріре Рго 165 170 175
А1їа уаії Гец сіп бет бБет сіу Ге Тут бек Гей бет бБет Уаі1і Уаї ТПг 180 185 190 уаї Рко бБет бБет бБет Гец сіу ТПї Гпуз ТПх Тут ТПт Сув Авп Уаії Авр 195 200 205
Нівз пув Рго бБет Авп ТПг пув Уа1ї Авзр Гуз Агд Уаї бі бек Ппув Туг 210 215 220 сіу Ркго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Рго біц Рпе їец сбіу с1у Ркго 225 230 235 240 зек Уаії Рпе Пец Рпе Рго Рго Гув Рго Пув Авр ТПтІ Гецп Меє І1е 5ег 245 250 255
Атуд ТПг Рго сіц Уаі ТПт Сув Уа1і Уаї Уаїії Авр Уаї бек біп б1Ч Авгр 260 265 270
Рго сі Уаї сСіп Рпе Авп Тгр Тут Уаї Авр сСі1іу Уа1ї сід Уаї Нів Авп 275 280 285
А1їа пув ТПт Гув Рго Акд сі бі біп Рбе Авп бет ТПтІ Тут Акд Уаї 290 295 300
Уаї бек Уаї їец ТПт Уаї Гц Нівз Сіп Авр Тгр Геєц Авп с1у Гпув б1ци 305 310 315 320
Тук гув Сув пув Уа1ї бек Авп гув біу Пец Рго бБет бБет І1е січ Гуз 325 330 335
ТпПї Іїе бБет Гпув Аїа гуз С1у біп Рго Агд бід Рго сіп Уаі1і Тук Тік 340 345 350
Тецп Рго Ркго бБет біп бі сіц Мес ТПї пув Авп біп Уаі! бБет Гец ТіПг 355 360 365
Сув Гец Уаї пув с1у Рбе Тухк Рго Бех Авр Іїе Аїа Уаі сій Тгр с1ц
Зо 370 375 380 зект Авп біу біп Рго бій Авп Авп Тут Гуз ТПх ТБ Рго Рго Уаї Ієц 385 390 395 400
З5
Авр бБег Авр сіу бБет РПе РпПе Гецп Тут бек Агд Гец ТПт Уаї Авр Гуз 405 410 415 бек Агд Тгр б1п Сіц б1у Авзп Уаї Рібе бек Сув бБет Уаї Меє Ніз с1ц 420 425 430
А1а пец Нів Авп Нівз Тугк ТПт СсСіп пув бБетг ТІТец бБет Іец бехг Ієц С1Уу 435 440 445 «2105 86 «2115 455 «2125 БІЛОК «2135» Но 2с21 (01) без С-кінцевого К «4005 86 сі Маї біп Гец Маі сіп бехт с1у Аї1а сій Уаї пув пув Рго С1у А1а 1 5 10 15
Ззек Уаї пувз Уа1і бек Сув КГув Маії бек сіу Тук ТПх Ггец ТПкг сій Гей 20 25 30 бек Меє Нів Тгр Уаї Агд сіп Аїа Рго с1у пув б1у Те Сі Ткгр Меє 35 40 45 с1у бі1у Рпе Авр Рго біц Авр сіу бій ТПг І1їе Тут Аїа сіп ув РПе 50 55 бо сбіп б1у Акту Маії ТПт Меє ТПтІ с1п Авр ТПї бетгт ТПтІ Авр ТПтІ Аїа Туг 65 70 75 80
Меє бій Гец бБет бБет Гец Акд бехт бій Авр ТПтІ Аїа Уаії Тут Тук Сув 85 Зо 935
Аза Ату Аза сіу Рко Гец Тут ТПїІ І1ї1е Рпе сСіу Уаї Уаі Ії1е Іїе Ркго 100 105 110
Авр Авп о ТтІр Рпе Авр Рго Тгр сіу Сіп сб1іу ТПт Ге Уаі ТПт Уаї 5бег 115 120 125
Зо зет Аїа бБет ТПтї пув с1у Рго Бек Уаі Рпе Рго Гец Аїа Ркго Сувз 5Бег 130 135 140
Атуд бБет ТПт бБет сі бек ТПх Аїа Аїа гей с1у Сув Пец Уаії Гув Авр 145 150 155 160
Тук Рпе Рко сіц Ркго Уаі1ії ТПх Уа1і бек Тгр Авп бБет с1у Аїа Гец Тік 165 170 175 бек сіу Ма1ї Ніз ТПк Рре Рго Аїа Уаї їєц Сіп бет бек С1у Гец Туг 180 185 190
Ззек Гецп бек бек Уаі1і Уа1 ТПг Ма1 Рго бБет бБет Бек Гецп с1у ТПкК Гуз 195 200 205
ТВІ Тук ТПк Сув Авп Уаі1ї Авр Нів Пув Рго бБет Авп ТПт Кув Уа1 Авр 210 215 220
Туз Акд Уаї сі бек Кпуз Тук б1у Рго Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа 225 230 235 240
Рто бі Рбе Ггец біу біу Рго бек Маі1ї Рпе Гецп Рпе Рго Рго Гув Рго
245 250 255
Туз Авр ТПІ Ггецп Ме Іїе бек Агуд ТПх Рго біц Уаі! ТПтї Сувз Уа1ї Уаї 260 265 270 уаї Авр Уаії Бек сіп сіц Авр Ркго бі Уаі біп Рпе Авп Ттгр Тут Уаї 275 280 285
Авр сбіу Уаї біцш уаї Ніз Авп Аза Гуз ТПг туз Рго Агд сі Сі б1іп 290 295 300
Рпе Азп бет ТПІ Тугк Агуд Уа! Уаї бБет Уа1ї гц ТПтІ Уаї Ієц Ніз сіп 305 310 315 320
Авр Тгр Гецп Авп о сіу пув бі Тук Гпув Сув Гув Уаі1і бБег Авп Гув Щ1Уу 325 330 335
Те Рко бБет бет І1е бі пув ТПх Іїе Бех їув Аїа Гув с1у сіп Рго 340 345 350
Атд бі Рго сіп Уаії Тут ТПтї Ге Рго Рго бБет біп біц сбіц Меє ТПг 355 360 365
Зо
Тув Авп сіп Уаї бек Гей ТПх Сув Ге Уа1! Гув с1у РПпе Тук Ркго бек 370 375 380
З5
Авр чІ1їе Аїа Уаі сіц Ткр сіц бБет Авп б1у біп Рго біц Авп Авп Тут 385 390 395 400
Тув ТПг ТПг Рго Рго УМаії Гецп Авр бБет Авр сіу Бек РПпе РПпе Іец Туг 405 410 415 зек Акд Гей ТПх Уа1і Авр пув бБегхт Агд Ттр сбіп бій с01у Авп Уа1ї! РБГе 420 425 430 бек Сув бБет Уа! Меє Нів сіц Аїа Пец Ніз Авп Ніз Тугк ТПг с1іп Гув 435 440 445
Ззек Гецп бек Ггецп бек Гей Ш1У 450 455 «2105 87 «2115 1404 «2125 ДНК
«213» Нуклеотидна послідовність НС 11 (04) «4005 87 асдаадсасс Ед9ФЕЧдДЕСсСсСЕС сстодстЕЧдсСсЯ дсдодсеєдсесС ссаддсддаєс дседЕССсСдад бо чЧЕдсадсвдс адсадсддда адсрддссод ссбдаадсссо ссдааассс деЕСссвдасс 120 гдсдстЕдсЧдеЕ асуддсуддсеЕс сЕсссссододс бастастода одстддаєсад дсадсстссь 180 часаадддсс гдчаасддає сддсдадаєс аассасдссд дссссассаа стасаасссс 240
Есссідаадеі сссодддаєдас сасрсіссуєбд дасассесса адаассадеЕс сЕСССвЕДдаад 300 сЕдЕСсСсСсссЯ Едасадссудс сдасасадсс деЕдтасвтасос дсдссаддсс дсссассадд
З6о гдддсдасса ссаддрассс сдасстдсда додсаддддаа сссеЕддсдас сдудЕССТсс 420 дстадсасса адддсссаєс сассЕссссс сеЕддсдсссІ дсессаддад сасстссдад 480 адсасадссу сссіддоассд сстддеЕсаад дастасессс ссдаассддс дасоддеЕдссд 540
Зо гддаасссад дсодссстідас садсддсуаєд сасасстеЕєсс сддсеЕдсссе асадеЕсстсса бо ччасссстасе сссісадсад сдсддеЕдасс дсдсссесса дсадсссддад сасдаадасс
З5 6бб6о гбасасссдса асчдсрадаєса саадсссадс аасассаадд гєддасаададч адссдадссс 720 ааагаєдудус ссссагрдссс ассаєдссса дсасстдаде ссстддддадоа ассаєссадеіс 780 гЕсстдсесс ссссаааасс сааддасасе сісаєдаєсеі сссддасссс Едаддесасд 840 гЧдсоасодЧдеда єдчдасаєдад ссаддаадас сссдаддеЕсс адсеєсаастд деЕасдеЕдває 900 часавсддадд єдсаєаасдс саадасааад ссдсдддадда адсадсссаа садсасдбсас 960 сЯчЕДдсдЧдеЕса дсодсссісас сдсстдсас саддасеєддс єдаасоддсаа ддадесасаад 1020
Едсааддессе ссаасааадд ссісссдЕсс Ессаєсдада ааассаєсес сааадссааа 1080 чадсадсссс дададссаса ддсдсасасс срдсссссає сссаддадда дасдассаад аассаддеса дссідасстд ссрддЕСааа додсЕссвасс ссадсдасає сдссдЯдЕддвад 1200 гдддадчадса асдддсадсс ддадаасаас сбасаадасса сддссЕСсСссдЯдс дсгддасессс 1260 часуддсеЕссеЕ ссСЕєсСсСЕСва садсаддста ассдєсддаса ададсаддєд дсаддачоадЧд 1320 ааєдесесессі сасдсессудс дчаєсдсаєдад дсЕСсдсаса ассастсасас асадаададс 1380 сЕсСЕСССтЯДЄ сЕССддЧдсаа аєва 1404 «2105 88 «2115 711 «2125 ДНК «213» Нуклеотидна послідовність ІС 11 (04) «4005 88 асддссгдда дсссЕСТдсеЕ дседассстід седдсссасос дсассододаад сеЕдддссдад бо адсдсдседа сасадссссс бадсдеЕдадс додсодсосссоід дасаааддді дассаєсадс
Зо 120 гдсассуддсс ссіссадсаа сасрсддсодсс додстасдасд гдсассддта ссадсадсед 180 ссгддсассуд сссстаадсє дседаєстас ддсдасссса асаддсессс суададесдссе 240 часаддеесе ссдсдсссаа дЕССддадсе сссдссадсс гддссаєстас содадаседсад 300 чЧдсЕЧдадчдас аддссдасса стассдссад сссЕссдаса асадсссдад сдсстасаед
З6о
Ессоддсуддад дсасссадсо дасадедссд ддасадссса аадссдсссс ЕЕССсСЯдЕдасс 420 сСЕдЕСЕсСссс ссіссссда ддадседсад дстеаасаадда ссасассдадс дедеЕстдаєс 480 адсчасеЕєсст ассссудддадс сдєдассдеЕс дсстддааадч седасадсад ссссаєдаад 540 чссоддадедуд адассассас ссссадсаад садесссааса асаадсасдс сдеосЕсстсс бо бассрдсссс єдасссстіда дсадсддаад ссссасаддс сстасссстд ссаддедасс 6бб6о саєдчадчддаа дсасадсдда чаадассдєд дсеЕсссассу адсдсадсвд а «2105 89 «2115 3727 «2125 БІЛОК «213» Константний домен Ідб4 (5228Р) людини «4005 89
А1їа бБет ТПт Гув сіу Рко бБет Уаі РпПе Рго гейш Аза Рго Сув бБет Агд 1 5 19 15
Зек ТПтї бек бі бек ТПх Аїа Аїа їецй с1у Сув Ге Уаі1і Гуз Авр Тук 20 Рпе Ркго біц Рго УМа1ії ТПг Уаї бБет Тгр Авп Бех с1у Аїа Гецп ТПкК 5ег сіу Маї Ніз ТПкг Рібе Рго Аїа Уаї їєц Сіп бет бек С1у Гец Тук бег 25 50 зо бо теп бБет бБет Уаії Уаі1ї ТПїх Уаі1ї Рго бек бек бБет Гец с1у ТПК Гуз ТЕПкК 65 70 75 80
Зо
Тут ТПпхї Сув Авп Уа! Авр Нів Кпуз Рго бБет Авп ТПт Гуз Уа1! Авр Гуз 85 30 35
З5
Атд уаї бі бек Ппув Тут сі1у Рко Рго Сув Рго Рго Сув Рго Аїа Ркго 1600 195 110 40 бі Рпе Гецп сіу сіу Рко бБет Маі1і Рпе Гей Рпе Рго Рго Пув Рго Гув 115 120 125
Авр ТПІ Гец Меєсє Іїе бБет Акуд ТПтІ Рго бі Уа1ї ТПт Сув Уаї Уаї Уаї 45 130 135 140
Авр уаії Бек сіп сіц Авр Ркто сі Уаі біп Рпбе Авп Тгр Тут Уаї Авр 145 150 155 160 сіу Ммаї сіц Уаї Нів Авп Аїа Пув ТПтІ Гпув Рго Агд бі с1ц Сіп РБе 165 170 175
Авп о бБет ТПтї Тут Агуд Уа1ї Уа1! Бек Уаї їецш Трх Уаї їец Нів Ссіп Авр 180 185 190
ТЕр Гец Авп с1у пузв бі Тук гув Сув Пув Уаії бБет Авп Гуз с1уУу Іец 195 200 205
Рхко бек бек Іїе бі пув ТПхг Іїе Бех Гув Аїа Гув с1у сіп Рго Агд 210 215 220 бі Рго сбіп УМа1ї Туг ТПї Гей Рго Ркго бБехт біп бі бі Меєс ТПг Гув 225 230 235 240
Авп о біп Маії бБет Гец ТПт Сув Гец Уа1і гуз б1іу Рпе Тут Рго 5Бетї Авр 245 250 255
І1ї1е Аїа Уаі сіЧ Ткр сі бек Авп б1у біп Рго біц Авп Авп Тут Гуз 260 265 270
ТПЕ ТПт Рко Рко Уаії Гей Авр бек Авр сіу бБет РПе РпПе Гецпп Тук бек 275 280 285
Атд Гей ТПт Уаі Авр ув бБет Агкуд Тгр біп біц біу Авп Уаі РпПе 5ег 290 295 300
Зо Сув бек Уаї Меє Нів СсСіц Аїа Іец Нів Авп Нів Тук ТПтг сСіп Гуз бег 305 310 315 320 теп бБет Гец бет Ггец с1Уу Гуз
З5 325 «2105 190 «2115 106 40 «2125 БІЛОК «213» Константний домен лямбда людини «4005 90 45 с1у біп Рко пув Аїа Аїа Рго Бек Уа1і ТПг Гей Рпе Рго Рго бет 5бБег 1 5 10 15 січ бій Геш біп Аза Авзп пув Аїа ТПтїІ Гей Уаї Сув Гец Іїе 5Бетг Авр 50 20 25 30
Рпе Тут Рго бі1у Аїа Уа1 ТПпх Уаі1ії Аїа Тгр ув Аїа Авр бек бек Рго 55 уаї пгув Аїа сіу Маі сі ТПтї ТПтї ТБї Рго бБет гув біп бБет Авп Авп бо
Туз Тут Аїа А1їа бет бБет Тут Гей бек Гей ТПтІ Рго біц сіп Тгр Гувг 65 70 75 80 бек Нів Агд бБет Тук бБет Сув Сіп Уа1ї ТрІ Нів біц с1у бБетг Тіт Уаї 85 30 35 біц пув ТПт Маі Аїа Рго ТПт сіц Сув бег

Claims (5)

100 105 ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з ІЇ.Т4 людини, що містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить: СОВ-НІ: аУУМу/5 (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2О: ЕІМНХОЗТМУМРЗІ КЗ, де Х є 5 або А (ЗЕО ІЮ МО: 17), і СОВ-НЗ: І РТКУУМТТЕМРОЇ (ЗЕО ІЮ МО: 18); і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить: СОоВв-І 1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (ЗЕО ІЮ МО: 19), СОВ-І2: аХХ2МеРЗ, дехі ЄМ, О, Е або О, і Хе є 5 або А (5ЕО ІО МО: 20), і СОВ-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (5ЕО ІЮО МО: 21).
2. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить: СОВ-НІ: аУУМу/5 (5ЕО ІО МО: 16), СОВ-Н2: ЕІМНАЄЗТМУМРЗІ КЗ (ЗЕО ІЮ МО: 48), і СОВ-НЗ: І РТКУУМТТЕМРОЇ (ЗЕО ІЮ МО: 18); і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить: СОоВв-І 1: ТаЗЗЗМІБАСМОМН (ЗЕО ІЮ МО: 19), СОВ-І2: ОО5МАРБ(ЗЕО ІЮ МО: 52), і СОВ-І 3: ОБЕОМ5І БАММ (5ЕО ІЮО МО: 21).
3. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить: легкий ланцюг імуноглобуліну, що має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в ХЕО ІЮО МО: 3, 4, 5, 6, 7 або 45, і/або важкий ланцюг імуноглобуліну, що має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮО МО: 1, 2, 8, 44, 79, 80 або 81.
4. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить: легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить варіабельний домен легкого ланцюга, що має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної БО послідовності, наведеної в 5ЕБО ІЮО МО: 70, 71, 72, 73, 58 або 77, або важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить варіабельний домен важкого ланцюга, що має щонайменше 90 95 ідентичності амінокислотних послідовностей відносно амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 63, 57 або 69.
5. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить: легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 3, 4, 5, 6, 7 або 45; і/або важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 1,2, 44, 79, 80 або 81.
6. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить:
варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 70, 71, 72, 73, 58 або 77, і/або варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗХЕО ІО МО: 63, 57 або 69.
7. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить: (1) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 1 або 79; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: З; (2) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: 4; (3) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: 9; (4) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО: 6; (5) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 7; або (б) важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 2 або 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ХЕО ІЮ МО:
3. Зо 8. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить: (1) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗБОЮ МО: 63; і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 70; (2) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗБОЮ МО: 57; і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 71; (3) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗБОЮ МО: 57; і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 72; (4) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗБОЮ МО: 57; і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 73; (5) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕОІЮ МО: 57; і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 58; або (б) варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗБОЮ МО: 57; і варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 70.
9. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить: варіабельний домен важкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗХЕО ІО МО: 57; варіабельний домен легкого ланцюга, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 58. бо 10. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить:
важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 2; легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЗЕО ІЮ МО: 7.
11. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за п. 1, що містить: важкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІЮ МО: 80; і легкий ланцюг імуноглобуліну, що містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЗЕО ІЮ МО: 7.
12. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за будь-яким із пп. 1-11, де антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, є глікозилованим з використанням М-зв'язаних гліканів сконструйованих дріжджів або М-зв'язаних гліканів СНО.
13. Фармацевтична композиція, яка містить антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за будь-яким із пп. 1-12.
14. Фармацевтична композиція за п. 13, яка додатково містить терапевтичний засіб.
15. Фармацевтична композиція за п. 13 або 14, яка додатково містить фармацевтично прийнятний носій.
16. Полінуклеотид, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує важкий ланцюг імуноглобуліну і легкий ланцюг імуноглобуліну антитіла, або антигензв'язувального фрагмента, за будь-яким із пп. 1-11.
17. Вектор, який містить полінуклеотид за п. 16.
18. Клітина-хазяїн, яка містить полінуклеотид за п. 16 або вектор за п. 17.
19. Спосіб блокування зв'язування І/Т4 з НІ А-С, НІ А-А, НІ А-В і/або НІ А-Е у людини, яка потребує цього, що включає введення людині ефективної кількості антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента, за будь-яким із пп. 1-12.
20. Спосіб лікування злоякісного новоутворення у людини, яка потребує цього, що включає введення людині ефективної кількості антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента, за будь-яким із пп. 1-12.
21. Спосіб за п. 19 або 20, який додатково включає здійснення терапевтичного способу і/або Зо введення терапевтичного засобу людині.
22. Спосіб отримання антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента, за будь-яким із пп. 1-42, що включає культивування клітини-хазяїна за п. 18 для експресії антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента.
23. Спосіб отримання антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента, за будь-яким із пп. 1-12, що включає експресію полінуклеотиду за п. 16.
24. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, що зв'язується з І/Т4 людини і є продуктом способу за п. 22 або 23.
25. Спосіб детекції пептиду І-Т4 або його фрагмента в зразку, який включає приведення зразка в контакт з антитілом, або його антигензв'язувальним фрагментом, за будь-яким із пп. 1-12 і детекцію наявності комплексу між антитілом, або його антигензв'язувальним фрагментом, і пептидом ІТ4 або його фрагментом; де детекція комплексу свідчить про наявність пептиду ІТ4 або його фрагмента.
26. Застосування антитіла, або його антигензв'язувального фрагмента, за будь-яким із пп. 1-12 в лікуванні злоякісного новоутворення.
27. Антитіло, або його антигензв'язувальний фрагмент, за будь-яким із пп. 1-12 для застосування в лікуванні злоякісного новоутворення.
28. Антитіло, яке складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 58, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮО МО: 57.
29. Антитіло за п. 28, де легкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в ЗЕО ІО МО: 90, і/або важкий ланцюг додатково містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІЮ МО: 89.
30. Антитіло, яке складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІО МО: 7, і кожний важкий ланцюг містить амінокислотну послідовність, наведену в 5ЕО ІО МО: 2.
31. Антитіло, яке складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 7, і кожний важкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮО МО: 2.
32. Фармацевтична композиція, яка містить:
(Ї) антитіло, що складається з двох важких ланцюгів і двох легких ланцюгів, де кожний легкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮ МО: 7, і кожний важкий ланцюг складається з амінокислотної послідовності, наведеної в ЗЕО ІЮО МО :2, і (і) пембролізумаб.
РОБ шо Б я 5 В ок ОВ ж ЛЬ ОБОВ 5 Е ФТІ ВЕР.
ЯМКУ ЗМІ БА БОИЮ ЕМ КУМ ЖЕК ВОК НОВЕ ЗК ОЕНІВ БІ НТОКЯ ЗО ВАН І КМУ зве ЯОСЕК МОМ Ме Ве ШО КОХ ОО ПОХОКОк БООея Ж ув о я аж ЩЕ 5. Босн в а З м ЯКЕ вки БИХноя БОКАХ МОЖЕ а Сон В ОО ПН Б у щООО9 5 ОМ бо ЗАКО вХО3ООО 65015519 35 ОЇ Б ОО МИТ КРТ АЦОХ РМ БОЖУ МКК ШУКНІ ОР КСЕЄ БОС ЗНЕМР МАМОЮ КАТЕ ЖОРЖ ЯРЩКК ЖО пом, МОРЕ ЖЕ МУК Мем ОМ ШИМИ МОВИ ПОМ МИ Прак ПОЛО Ко МОВ КАК МА ЗИ Киае МОШОНКИ МИ ОЕи ШКНиКІ КЕ НК Я ПОМ ПОД МЕ ММКНКВК ПН КЕ ТК Зо В МВ З Я ОД К рес і ПЕН п о ОБ Моно КОД Я ее НН кі І я в я Ме 5 же БО МО 6 Мб Ж що 5 95 555 050 085 ШАБЬ БЖАСМ БАК ГУК ОКА ВОЛА ТБЖСУ А ШМЯ ЗАБОЮ МЕНО ІРОН МДЖХ.
БААНЕ ЗБРХ ЗКУ БОТЯЄ ТОЖ БУ сек од БЛЕМИ МИ ВИНА 0 СИ МО ТОежри ше Спо М КН ее КЕНЕ ОВ о Мило ВЕ вв КО НЯКМЖКІХ КООАТМЕеМ ик МИМО ОКУ М МКМ Кс ЗК РЕ НОЇ ВОК ЗУМВ СМТЖА ЗБЕ БІВ УБКЕ НІ ТКА ВОК ЯКО! НЕЯРК УОВЕР ВЕУ ТАКА СТУС ХУ Ж МИС КОФОМИВ ДИ КИ ВИН ММНННЯ ВОЯ ж у нн ой Бо Зно ОН «КУКОК у Ко ПОШИ ВИНИ Кен МК КО КК рони Я ХЕ Бош ни МК КОНЯ ЛІВЖКНОК ЗУСКИНКИТиК ККИХИМКи УХОДУ ПУТ ЖКи МКК «ак ІЕЕ я зх «в як чкх з тей и «їх Зв «ак Ж «ІК їх ем Б 5 зх Ж й ом Ще Б шо 5 55 ЗБ 5 З МО КО жде Ж ВО Со сн В БУК 55 ХВ ЯМОК РЕБІО ВІЗИ АОРЕФ ДКЗ ЗОВ СХ ЯНЦОХ ЕК ЯКЕ НЕК ЯН ЩЕ «Бе я. ож ен о о нен и й ОБО ще не НЕК МОИКЕ ДИМУ ОК КК о КК ВИСКА ШИ а ,
ЖАХ їх ди ШИК УЖ - «ріг. 1 кін вп вв МОР (59-62) ; В ь . сх зх. х че з Фе 00 диня ТАКЕ, (50-58) ОН как - в » ЗО 505 ох Зх Я а У ОКХ пу ше в ча 5 ши йч в і 5 ТОН п.
В пове Кн ХМ ОО ще еко зі бек НТОВУБСЮ (71-78) з -ЕУНЕККВАУМ (39-48) нн і щи ЇМ ОА Ж З о що я Во Я на ої Ко МОУ ОМ ЕХ, А и МКМ КЗ З Ху КУ Хо х . 7 пін.
Аа Хек пр З ее ШО М в а но р: к Бо ов - Б пари. вика ря ї свВіг.
А се Ето ще кн 7. зву кни Е о Ж : вета-- МІК ОГ ЛЬ Зо В сват -- ; Х сл же « У я с НИ СКУ ке ж: я МВ х че : о що» шк її» ПО ох о у що ВМЕ и ОО бе ОВ ВВ я СО КО ОО, Хід го яю У З ха У о КУКК збут Зх. 5 В ОО У.
поь. ОО К. ЗМ ж В хе о б КОХ 0 ВО В Чек Чен нн М щд-б Не ЕВ, КО М ЗУ ж ТК й: З шоп св М в ши пе шен ши Ко Ж 5 ж КЕ КІ ше І і. - -а ах КК Ко яз Ж КУ ОК В же ші, щі ШК МКК. ах МК кп ОХ От «ВЕР ? Я ще сор ев ще Ол ям о ТК ве перу ди КИ : явка я ; ОК ее я г ЕМ я ; дует В СІК ОО с ВТМ осн дежнн ОООооо В й и ри ОО о еВ т ДИМ Іди КОКО ек КК М са їх о ОО Ка Ж ак фіг. В Зв'язування ЗБІ14рз3 Г-китинами ЗА з ТЯ 2 жа М ' ; щ Д400- ТЕ йо ож ї ре поюОЯ жа ; г ядим, й х : ме Х ї ї зо в че -Е : ї як 1800- і і т я ги х -- 14 / ; Кс і : КУ І ; : ко Во » І х ї ЩА Ка їх Ко ї й : їх 4. й ; ке - ї т а й ; В шток Ж му т му ому с є є ї вЕвВЕЗашита я зх Фк де ої , й мкг анІВТІЯ МЛ те, у м Ба , дв сх КСО з ВИ ин ВО мктума
Фіг. ЗА
Інгжтування зв'язування НІ А-Сх з Т-юлітиначи ЗАЗ зн таз дапомагов ТЕЗ) кв О0 НАТЕ ОО ож «ММА г ї За о 80. у ї ВЕН не І мкг антитиве мл ШОО х 025 4И- 006 меми фіг. ЗБ АН АТАЄЦИ -дексамерур'єт (01) ж НА" В 02 -даксамерл СТ 97) ее НЕА-Е тетрамерлют ЕТ 11) зн Сіла тетрамер/вт 1 (61) А НЕА"Аг--дексамер/підс У МНЕА" ВУ -дексамер/підей 40005 Фе НЕА-к-тетрамер/ поси о Б а-в-тетрамер/тіде! юю т че 2000- к 5 1000- У 1 10 00 1000 0000 10000Ю анІНТІЛОНІМЛІ
Фіг. 4 фівдередния ік. : у Шут - ке « ПО піти ї а хі х ВЕК ів юн Я АК і нкувачія х Е щи , : я її Од ї х роту що й і водії ОБ оз Роя- ВИК, ЯН шани БТ. к Со- 0 ВІ ДВ ков ООН ж що В | МЕ у Дб покладів з й че подюютуєюєчюччккр В | Ук. Я жеуентекеетентентннкі Я і й Я, чі сей Х і КН й Ку Я оо ою ооо ом ово па ВХ-Я НІ-Я АВ) у рутин Ой дну дуття Ді дееерттуту 8 М щі І а ВЕН я МКК Т ж ЕК Ме рощом шій - ІЙ оо : я ше Ву з м ШОЕ НН у Е чі ля ! , ри Б у М КОН х с М у її « Же З - й ї Я НКИ ой» ; сш нм м т Б зви я, ії кх ІВ Бо рн ром хе Кя Я шко же 1-45 Же рок ни ях бу, -й й ші мно м що б я 0 тя оо о ШИ оо ож оо ше ок пан пн ва ВЕ
Фіг. 5А «т ще у Гідяме яв зууваних ОТО я тфт- ей яд бро ех Гу - Ж щі Кк ОМ --- рН з я з ' с оо ве
Фіг. 58 их (УТА Бкен. База. - хз з ЗАЙ вектав Коен З Я Гоо-АИ 5 і ши мк св КО ВО А , В до мяч петттенеткв ї лит А я оо --яюто пів
Фіг. 555
Тозе. Блок. ПУЛ 1зотипних вуст зт кпешвтне жжттат проти ТОК -31 2 58 ДО др дв вт тт Щ р т, в в: кВ ! ЩІ: Ж в я ще я я А ї 5 2 я - і ш 3 В жк 13 МОЯ А й і ке им її і Е с с з ! в о НК йшов з і ПОНЕко бно, ше м ДК шо сні ові м як Ко я ев шо ХК їв і я їх с а і Й ДОК ЕК нн етно я РКК ВИ серии й АЙ ї «ий г ск й : бай юю ою обои пІ-Я ТІ-Н г ВО О-ТА 0225 ОВ За-ЩШ в В: ву і а і во В Кк. і БІ КОВІ кох ! а В ях аю м В, ор Би а в ' Й Б СЕКТ КВ отиту у дя КК соту у дян 1 ; ДІ - й З 5 з оби? йо-К ІН В Пт в дпа п ноя ХА ОК що а ! Ох г ББЖ - ацз Ух РО Ск і Е т їм ох іо о і ОК жк б Рщ АВ Я ка ! з я у бом м ЗК ! ЦО Кв они В - Й ВК ОНХЮ ек ен ПЕН енер прах вію юю? бою? жів Яе-В ВАН
Фіг. бА Білл Базал КО іотнпвьнчЕ КО НгООлЬ «се Єпенювфічне антІнило прати ЩО ше ТК ОКА
КН. Я вх ЗАВАЕ с в. ай мой ЖК че ак Е й МОЖ кт К с о, а ких, вх : АНЯ сх мом ко Я дощ ТОК тик, г зу ко роки - ЦБ ВД нтів юоглеент В ЗЕ В корсету 0 «а? й Я Я чайові й 1 4 Не В ю Не 10 ще НУ Не 19 15 ІН ЙІ-Н я Не КО васлацввю0000 ї ХОЛЛА АЛЛА ЛА ЛА лАл Алл л ля лнтя ! о00ЖачАНВ ШЕ ЗдО-яоктов В БЕ еЩЖІ У І м - Я пи х КУ бу у В че с 5 73 уче їй ГЕ рий яй пуття . Ю КК я М 18 НгеВ Юа 16 па-Я ни
Фіг. БЕ ек --же- ШіоСЯ в 1500 кт -к- ЕІ (с) є я 500 / ї Ії жк пек ее ї і 0 05010510 5090 77 мкг антнтлимл ЕС50: 045 и 014 мкгмп (по)
Фіг. 7
0.7 . щі очно 8 05. 5 й ж -к 1ЕІ (09) їх В, 4. - й о ке НЕ (04) Й 7 --п--в е 0 кт Я т
0. Зо «он ртнтннуннннння й юю! юю тав (нг/мл)
Фіг. 8 гМ-коФ 2500: ш 1500. и Б тю. У : я - оженя по дет Очне В ав г ОЗ 5 ко 7 Концентранія 1 імкрими
Фіг. А
ФІН водо ; ко що т, н АКА ї й шу - Е : шиті х, 2 | й. - І х т о 5 Об нн ше: Кв і щ уж веною В 0 Ж МКК уд ? Я: ро ; о скечуктустт у сусо му ду жк тк рот студ З В В 5 8 27 8 БЕ ща з « я З 7 Концентрація ТЕТ(вК) (мкм)
Фіг. 88 ЕМАКФ Й 1 т ї 400от он і : і; з іо у 7 БЕ ! о фе . 8 ! дин нн 4) оростетчотутучамкуєчьккюрсстохоттдвтчтуссюткнєкккрєчууємх В З - Ж нен Ей : 274 а У Концентрашя ЗЕ (мкгям
Фіг. 10А и ОВ фНОа 1000 до. / дося - і і ря ях ї і /; в дев ют пе ння, з - - є во ду . пт Ах наван Концентрація ТЕЗ: пМКГАМА)
Фіг. 10
55 -- ГОтвЦцічний контраль м Е: Є ко - ДЕ (Б о щ-й З» То ї щи що Кк і ї що ЖК я 56 ей о Кй й Шк : 0 5 30 15 20 Б 0 5 4 Дні після імплантації
Фіг. 11А Ізатипчний кантроль «т В ж в ВО. й. зас що я /й х З я й Й 4 м й л Шк ж МК СК 8 0 Де м, ЩЕ 0 5 0 5 20 25 30 35 40 45 50 Дні після імплантації
Фіг. 116 віг! (8 50 ОВ в а
БОЮ. ЯН о
50. ей Ав
200. шете ВКви В 5 350. овен ян я ВО, я - ок ст тен 0 5 3615 Ж 25 30 35 40 55 50 Дні після імплантат Фіг ІС вівса пуклинНи дх | м В щ 08. а ях ! и ПА во 2 Іотнпічний БІБ! (9 кантроль
Фіг. 110 Втрата маси х 105 Ботипений Е | жк хонТХТЬ Зв --Е1 її ХЕ ТОЮ ренні Ш р і 3 що З з -- се 9. чи а ; зт в ВО. ж 7 о юЮ 20 З 0 З
Фіг. 11Е в'ЮЮ «а Ватнп. контроль - ВЮ г (68 - МЮ КА в БО Йони кю Мод
МЮ. вже ! ие Ж й СХ Иф рр го 0 7491985 -е2 Яніпісля імплантації (ріг. 12А - З зміни маси тіла затипічний то и не Се ле В ІБ; «в ВОНО ЛЬ ши ех ЗЕ БЕ З ХХ я их т - З тфті и зт7милжвие но Дн після імплантації
Фіг. 128
Кінценз маса пухлини - 15 море ГчЯ пером да шк 125 ри х т зе що ЯКОДДЯК ння " Попшюзний ОК (4 контроль
Фіг. 120 Кінцевз магз селен м п 505 я БНО ОВ - блю - х ОБ пе ба Нотнпячний ЗБОЮ контроль фіг. 120 я ВО. ЗАЧ актор : Познач Назва В г З : ! п да Ж яп. ' т- вівся ї х/ А - 12159 Фр есхї трун З 10 КУ 16 НГ НІ-н в те дв таро . м ЗА талии? б Б Ба Я д ОЗ ях то за йо їх 7 і шо ЕН гом 1 ди УК ви / хх А щі ка АЙ З КІ ) бою ви юний ви пІ-Н до-н а тк ОЗАб-гаплоти? ох юЕ ЗАв-галлоти я яз у | ї зо: 24 г Киї М щі, г ВОК нтюн 0 нти однини ХМ Є ї Є Що «жи 4 Фо юю є Фо пІ-М Мпя-Н ВО дует ететсеотсстссся я Дитя «Ов 00 ЗАбогаплотнп 5 в пи ЗАО-танлотип 10 як 0 Ж і - я Я А : Я ннідннне 019 об нет биті, б я ою ою Фо па-Н пя-н
Фіг. 13 три чеккх пот ТБ зу тм ую БЕРКМгенадля ЛІ КНО за лим пухлини Ж - п и а ов кві и р ВИ ВН Ж Кока в АК Ви я яв св КА х ІВ совок МЕ) фо ЕВ сЗоВАІІНННЬ відкс КЕ и СІБНес в ковий Мои о ТИВИ ЩА - зв іні й данина іній Не я. ак пін ВНС ВНВМВИИНИЯ а Є ША чок - м о ПИТ хх М аж -ВОдихивв в ПММ а ф-ю ЗА) ОС нини в ВМО є е ох дане ові НЕ зрада олова ЗЕ я з моя о ай що КБ. ож ой о ж ко в йо жк ж що че ак пів сс ВМО Как са ко МК. око за ЧИНИ оо ВИМИ ВЙДА їж ОВК З якові Нонна ж - КН. я че ж ВЕК сдодежннв Ж БО вх а В Вс і ча вк щ- п - черв юю Ой ОО я а км мое яко я жо жав МАВ косо іК5 зт с-м ЕК А і вт ЖЕК й сс МИ й ж М; опа схо ІНЬ а КЕН жо ва ве. КОВО аа. ж ж НЕени Б двьннн З се нний ж Ж РЕМ - в в ИИь як й Позначення шопите збо пухлини: іду аа ВС анннймка ав ка с Норма ЖЕ я Я арк С МЕ ВК ттотетоя ТА Й - ше В ісхлних ЗА, ппллгггг В НИЦІ тан Ж о ни Щит ттріттт т платити, В м У ї З -4 -й й ? їх К й Я я асля задо поки Какит Я БЕкспреся гнали РК Г а. ДА зрітий нактисшик - епМЕНТОЕЛЕННИ НОКЗЮОЦЕ ХЕТВОВОРХ МОЗ зт швкеми тя лек ТТ Зк
2. , складку хнннннентнннкнннутни ЕРЖМ тен для ТНК ВО за типом пухлини нейткофітьи. метиж власть ювокя евро нн КК Боня ХІІ т хм - СОМ опе, СЕМ бек хдясечн мя І зеходуюкксе зрукя возжжацня ин нн п п в в и Ех а Ї - зхяльним макфат хіти скстоохофвомсь Ї кежОопоОетк. плеуаєстотен.о виш но-пеперелк. Ша жлжтжуєквв во ї тЕВНулкнт во Оник. КІН. пОопереля. Й З КИ жизни нн ни і : в Н-люєфоткх ТЕНи о Й НЕО ї зи Івах дили тТ. ЖЕ --2 ІБ ге ї тгежоловт. стр кейтрефи мелодит ПП ПУНШ ння в КК і Теми Е, ТІВ. КТ. 2х 7 ІВ ПРИЙТИ ЙТИ злевсій я меді стартів Там АЛО тут вів со ї шк зашлавих. денці жлеряна ССЦ ВЕНИ НІІИЦИИ п СОЯ шини Ї - х Звгал.олУужсі КЛІК топ ееци. ПІН ПЕКістипІ тт пт тт Ї тов занялняа дешсувт тина ПІФБ 1 ри ких ї ; ПРЕЕЛРЕБЦИМНИпишиШі ї . дЕежизначенс піци ВХ - : - МЕТ КЛ НчЕА пер. ре ІІТ ІПН Н ї рве; т. Вам тут ДЯ СМ Нтт тт ДЕПІІИНН НЕД чек ще експерт : яритуропим вурстоутванюаакьк ота ни ка ди ЕЕ ЗК З У Пухлинзаосворма і се жід мед квт житт и ВЕ ТЕЕЗКИНЕТІ атак 7 ї МЕМНКВУКЛ. КЛІК КТК ОМЕаКУ Котов Злюда аа ск. І ІЕЕ І сНорма ЗАГ ЗБІЕЛО Й. КТК ПИВ, ет Б НВК етоханнаї - зд ЖЖ п еххустум тт р Кл. -доашенжя. М ІЕВОНеК і «П я ї яфенторі Бб-познт апьша-оеха їни ням ят переносне 1 ТНБ МК АК и Я, - петит-нереключена М-юат яз яті ПИ Я Я й й й 5 В 15 еритТрОвляст злютжи актЕБОЗНН мрових кл дяМм ят Б ТЕКЕОКО (те кер. ЯКІ сЕНОожоВаум ї ТЕВКНВЕЖЕ учив п енер Ваші й СЕІІІІІІІІІІІІШІІШІШШШ ее Бкепресії гена Обама тт «КИ. паж яті Сеть - піт іщ Ве СНИ ВЕМИ п нетжрекл.о скло. пам окт ЗХ ежедтлтяяв В-кліг. ел Б-мліг. ПОВІК Трав ЕндотТелоклтНерех. 1... пити ВК ВВЕ СТ позив лож хм сиРопяЗт п шт КМ : Н я з Вк МТК: пежетютьфа-бета і-ктв дентр хм. іно пласт пла Кт С ешротанліюх БНВО пупсани. ваним іякепокояштьияі -Блр.КЕКжацьн девтка ее КВК шлях : сей ше - и чани НИ Ст-катвт ТМ. позет СТ спуант ТкппвюК с екшрдоталізл. кпотЕна плопювни. вант праві У пеоя Ї і НЯ шот ТЯ отрут Упр, т шуй пум'яті ««Пютотокоюя. СЕУ аква природни атер А подкхажатнч хіх. ння сектор. С ТК-позит. злвфа-йзта- і-ктянна мам яті х - Кр я вени М ср вхо о. " ли. АБ яекат. СБМІ-познтк. СБК пози жегаклуют ТИПА, нн СЕК повну Зльфа- бета ї-клпика невту. пам БЕ а ст Є опи й вв ІДД дю ст х ти кот в ейектори. СІМ пожст.альфа-петв- З-Злі. Пам жті 7 ЯМ ПО позитивних завфа-бота тюмапих ух : - - . вала УМА. СТИКУ. КІ. КетК ЖОЖиХ ХЕ уст Що я ши п врНнІОЗхОфОІлЬН. іхслІкраМУгУ НОржинти 00 пезкт. хнозеа тка. МК СЕ павнукВниХ хахев- тата укмнк регулятивна Бехляивх Кт а ля СЕ повнтив. СТ сотник. СІ сознумв. Т- катишх
Нирковахлітнина я і
ТЯ. ТЕКА тя в в емо ІЩЕ каршинома і (Єва СНя мав Її саві Е ; їОНеЯ т834 : і З я. ; 3 і 2 де Встанєроїлн клітини - що іяйІ Я мої М щ й ТЯ село А у пла й пря Щі 5 ху КР сук в МИ сьоме Ка : 3 «Ко КЕ. т і о УТ ТИ МТкТММТІ Ві ща МК о пе и ЯН Не ВЕ п. 14 ПОТОКИ КИМ м ОО БО фуЛ У : - Ві Ве . 5 СЕ ди я 3 А ОКА 3 ШТ я ол В ОВО. о зна Ва 5 - і 7 Шен ТЯ: 00 Р Я 53 165 ОО шо !
1 . ї ЧІ і М ; щі і Синя Є «и Мхенючентеке нет М дююутунюк тертку Інни. Нива он ее Ж з їй ї ї їх хх хх В КО щі 5 і БОР не вони не аз контроль НК - МОХ СХ У т мом си 5 В ОО ЗНУ Б 121 В НУ ви п БЕ Теле тк «кре 1 ях р КоВЕв С ПМЖ щ ЕК Мі птесовстетеоовтеттеооттнт КОВРКАЖНУМ ; и ж ММ ї Е Ї ще | Не ї Ін ГЙ 31 сетей Когготіттня їх - : 1 с : «ДВ зах че ї -о і с . : 1 шо ї ІН ЗВ: МР М я Її «ай Я Сотню в 1 ОК а у 7 Х З й х 1 пики. МК воза Ві і с М У ОО ІЙОЛЕ шої ОВ по е Її «Ай КЕ ї шик мої х ШЕ. їоваямя Б ї и - 1 ро СУ : ЦЕХ с ТООПЛюКЖК Кн Зі 8 хі в п в ОВ домо, ш З ее Кл : А ре Р ; ее ще | х ї же і тетуу стр ттерттсютя Унаккрутечк яю кю аск : ос зв я хх а: х у вах З ях д як. но 8 ЩО КОН Он е ще - пжеєкєюєєєюєюсюююєюююкяєюєкєя яю юю юю в кт а ета АктЕпло прот ІЕОЯ-АКС іпроти лікарського засобі)
Фіг. 15А Коламевтальнни пак ; ГІВ х ї ректальних рак і (ЖИ говесовЕи я у юю ють ут ють т 11054 ро Ї і і р : ІК поїюВ КЛіЖННИ оо . Її й Я : . -к х роя СО ї спа ра ЖІ 1 і ! З «ЕЕ : (ОВНА я и г - ВЕ Ї ХІІ о СХ голу ККЗ СКК " ї ФК З ЩО. т З ЖК, і скік ни мо а І М : ідчаявАв ЦЕ же 1-30 і. зі : тив БІ СК З вит 00 ОТИТ хонро ПТО ЕК. | ХХІ їй І хо ад -- З Бо и вому вх пах ОН 5 Оле АХ -- 1095 Ан ої Іекмку вмч : 1 Ах я 109 ОБОВ Ві ЖИВ НЯ Пен їх іа о й нн КОМ ОБВУ) оо ДВ о сшдлю ДОСЛІ 2 ОД ; КД ЗЕ З ВО зво а ТТ ТО Я дО М ! 1 3 п -щ ! : -140545 У Зоннтвву Ві : : хи З З зах і зАЙЇ - ж - с - ж ' Я КІ - я здй чний й ві. йо і : В Я ж це БО: і і Ії з : ця «ЖИ ' її СИМ ща і - ши ш нш їх мо х З СЯ . ! т ШИМИ 1 в й Ка ой ОА :-НМ шо Б З с сти : : І хоокло зда ал 308. ! вон фо У ся с се т. лнтютла проти ідбЗ АВС проти пЕВровкото звосоу)
Фіг. 158
UAA201910947A 2017-04-07 2018-04-05 Антитіла проти ilt4 і антигензв'язувальні фрагменти UA126865C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762483019P 2017-04-07 2017-04-07
PCT/US2018/026160 WO2018187518A1 (en) 2017-04-07 2018-04-05 Anti-ilt4 antibodies and antigen-binding fragments

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA126865C2 true UA126865C2 (uk) 2023-02-15

Family

ID=62063229

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201910947A UA126865C2 (uk) 2017-04-07 2018-04-05 Антитіла проти ilt4 і антигензв'язувальні фрагменти

Country Status (27)

Country Link
US (3) US11053315B2 (uk)
EP (1) EP3606958A1 (uk)
JP (2) JP7045392B2 (uk)
KR (1) KR102357823B1 (uk)
CN (1) CN110719917A (uk)
AR (1) AR111362A1 (uk)
AU (2) AU2018248294B2 (uk)
BR (1) BR112019021000A2 (uk)
CA (1) CA3057378A1 (uk)
CL (1) CL2019002855A1 (uk)
CO (1) CO2019011155A2 (uk)
CR (1) CR20190459A (uk)
DO (1) DOP2019000253A (uk)
EA (1) EA201992402A1 (uk)
EC (1) ECSP19072235A (uk)
GE (1) GEP20227440B (uk)
IL (1) IL269593A (uk)
JO (1) JOP20190236B1 (uk)
MX (1) MX2019011927A (uk)
NI (1) NI201900103A (uk)
PE (1) PE20191813A1 (uk)
PH (1) PH12019502275A1 (uk)
SG (1) SG11201909081YA (uk)
TN (1) TN2019000272A1 (uk)
TW (1) TWI796329B (uk)
UA (1) UA126865C2 (uk)
WO (1) WO2018187518A1 (uk)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU2008266951B2 (en) 2007-06-18 2013-12-12 Merck Sharp & Dohme B.V. Antibodies to human programmed death receptor PD-1
SG11202004806SA (en) 2017-12-22 2020-06-29 Jounce Therapeutics Inc Antibodies to lilrb2
EP3820904A2 (en) * 2018-07-09 2021-05-19 Five Prime Therapeutics, Inc. Antibodies binding to ilt4
US20210301020A1 (en) * 2018-07-24 2021-09-30 Amgen Inc. Combination of lilrb1/2 pathway inhibitors and pd-1 pathway inhibitors
CN113543804A (zh) * 2018-09-17 2021-10-22 西奈山伊坎医学院 抗lilrb2抗体及其使用方法
WO2021028921A1 (en) 2019-08-12 2021-02-18 Biond Biologics Ltd. Antibodies against ilt2 and use thereof
CN112442527B (zh) * 2019-08-27 2022-11-11 深圳市英马诺生物科技有限公司 孤独症诊断试剂盒、基因芯片、基因靶点筛选方法及应用
CA3162311A1 (en) * 2019-12-20 2021-06-24 Philip E. Brandish Methods for treating cancer using a combination of a pd-1 antagonist, an ilt4 antagonist, and chemotherapeutic agents
WO2021138079A1 (en) * 2020-01-02 2021-07-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Combination cancer treatment using a pd-1 antagonist, an ilt4 antagonist, and lenvatinib or salts thereof.
WO2021158413A1 (en) * 2020-02-05 2021-08-12 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Novel lilrb2 antibodies and uses thereof
BR112022021684A2 (pt) 2020-05-01 2023-01-17 Ngm Biopharmaceuticals Inc Agente de ligação, anticorpo que liga especificamente ilt2 e ilt4 humanos, agente de ligação ou anticorpo, anticorpo, composição farmacêutica, polinucleotídeo isolado ou polinucleotídeos, vetor ou vetores, célula isolada, método para interromper, inibir ou bloquear a ligação de ilt2 e/ou ilt4, método para interromper, inibir ou bloquear a supressão induzida por ilt2 e/ou ilt4, método para inibir ou diminuir a atividade de células supressoras, método para intensificar ou aumentar a atividade de célula, método para intensificar ou aumentar a atividade de linfócito t citolítico (ctl), método para interromper, inibir ou bloquear a atividade de ilt2 e/ou ilt4, método para interromper, inibir ou bloquear ilt2 ou supressão induzida por ilt4, método para inibir ou diminuir a atividade de mdsc, método para intensificar ou aumentar a atividade de ctl, método para tratar câncer em um sujeito, método para inibir o crescimento tumoral em um sujeito, método para aumentar ou intensificar uma resposta imune, método para inibir o relapso de tumor ou reaparecimento de tumor em um sujeito, método para induzir uma imunidade persistente ou a longo prazo, método para ativar células mieloides, uso do agente de ligação ou anticorpo, composição farmacêutica e combinação
US20230365678A1 (en) * 2020-09-17 2023-11-16 Merck Sharp & Dohme Llc Dosing regimens of anti-ilt4 antibody or its combination with anti-pd-1 antibody for treating cancer
CN117545773A (zh) * 2021-04-09 2024-02-09 塞德斯医疗公司 抗ilt4的抗体、双特异性抗ilt4/pd-l1抗体及其用途
WO2023012348A1 (en) 2021-08-05 2023-02-09 Immunos Therapeutics Ag A modified hla-b57 with increased expression levels
EP4380605A1 (en) 2021-08-05 2024-06-12 ImmunOs Therapeutics AG Combination medicaments comprising hla fusion proteins
WO2023077521A1 (en) * 2021-11-08 2023-05-11 Celldex Therapeutics, Inc Anti-ilt4 and anti-pd-1 bispecific constructs
WO2023114346A2 (en) * 2021-12-16 2023-06-22 Merck Sharp & Dohme Llc Biomarkers for predicting eligibility for an anti-ilt4 and anti-pd-1 combination therapy
WO2023170434A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Macomics Limited Compositions and methods for modulation of macrophage activity
WO2023192798A2 (en) * 2022-03-28 2023-10-05 Coherus Biosciences, Inc. Anti-ilt4 compositions and methods
WO2023211868A1 (en) * 2022-04-29 2023-11-02 Merck Sharp & Dohme Llc Stable formulations of anti-ilt4 antibodies or antigen-binding fragments thererof in combination with anti-pd-1 antibodies and methods of use thereof
TW202409088A (zh) * 2022-07-08 2024-03-01 中國商科望（蘇州）生物醫藥科技有限公司 抗lilrb2抗體及其用途
WO2024022462A1 (zh) * 2022-07-29 2024-02-01 盛禾(中国)生物制药有限公司 一种抗ilt4的单域抗体及其应用
WO2024041315A1 (en) * 2022-08-22 2024-02-29 Antengene (Hangzhou) Biologics Co., Ltd. Novel anti-lilrb2 antibodies and uses thereof
WO2024051804A1 (zh) * 2022-09-08 2024-03-14 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗ilt4抗体及其医药用途
WO2024120526A1 (zh) * 2022-12-09 2024-06-13 诺纳生物（苏州）有限公司 抗ilt4抗体及其制备方法和应用

Family Cites Families (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
EP0154316B1 (en) 1984-03-06 1989-09-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified lymphokine and production thereof
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
EP0307434B2 (en) 1987-03-18 1998-07-29 Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. Altered antibodies
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US5677425A (en) 1987-09-04 1997-10-14 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibody
ATE135370T1 (de) 1988-12-22 1996-03-15 Kirin Amgen Inc Chemisch modifizierte granulocytenkolonie erregender faktor
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
AU4116793A (en) 1992-04-24 1993-11-29 Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant production of immunoglobulin-like domains in prokaryotic cells
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
JPH08511420A (ja) 1993-06-16 1996-12-03 セルテック・セラピューテイクス・リミテッド 抗 体
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6121022A (en) 1995-04-14 2000-09-19 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US6277375B1 (en) 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
US6448035B1 (en) 1997-04-24 2002-09-10 Immunex Corporation Family of immunoregulators designated leukocyte immunoglobulin-like receptor (LIR)
US6194551B1 (en) 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
PT1071700E (pt) 1998-04-20 2010-04-23 Glycart Biotechnology Ag Modificação por glicosilação de anticorpos para melhorar a citotoxicidade celular dependente de anticorpos
GB9818110D0 (en) 1998-08-19 1998-10-14 Weston Medical Ltd Needleless injectors and other devices
US6096002A (en) 1998-11-18 2000-08-01 Bioject, Inc. NGAS powered self-resetting needle-less hypodermic jet injection apparatus and method
AU771908C (en) 1998-12-09 2005-03-10 Phyton Holdings, Llc A method for manufacturing glycoproteins having human-type glycosylation
KR100940380B1 (ko) 1999-01-15 2010-02-02 제넨테크, 인크. 효과기 기능이 변화된 폴리펩티드 변이체
ES2571230T3 (es) 1999-04-09 2016-05-24 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Procedimiento para controlar la actividad de una molécula inmunofuncional
US7449308B2 (en) 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
AU7684201A (en) 2000-06-28 2002-01-08 Glycofi Inc Methods for producing modified glycoproteins
US7795002B2 (en) 2000-06-28 2010-09-14 Glycofi, Inc. Production of galactosylated glycoproteins in lower eukaryotes
US7632983B2 (en) 2000-07-31 2009-12-15 Biolex Therapeutics, Inc. Expression of monoclonal antibodies in duckweed
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
WO2003000199A2 (en) 2001-06-25 2003-01-03 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Ilt3 and ilt4-related compositions and methods
AU2002337935B2 (en) 2001-10-25 2008-05-01 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
PL374463A1 (en) 2001-11-14 2005-10-17 Immunex Corporation Modulation of lir function to treat rheumatoid arthritis
CN102911987B (zh) 2002-04-09 2015-09-30 协和发酵麒麟株式会社 基因组被修饰的细胞
AU2003226356A1 (en) 2002-04-12 2003-10-27 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Prevention of brain inflammation as a result of induced autoimmune response
US7410483B2 (en) 2003-05-23 2008-08-12 Novare Surgical Systems, Inc. Hand-actuated device for remote manipulation of a grasping tool
DK1648507T3 (en) 2003-07-24 2017-05-01 Innate Pharma Sa PROCEDURES AND COMPOSITIONS FOR INCREASING THE EFFECTIVENESS OF THERAPEUTIC ANTIBODIES USING COMPOUNDS THAT POTENTATE NK CELLS
EP2295588B1 (en) 2004-05-27 2018-03-07 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Novel artificial antigen presenting cells and uses thefor
WO2005120571A2 (en) 2004-06-07 2005-12-22 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Method of passive immunization against disease or disorder characterized by amyloid aggregation with diminished risk of neuroinflammation
DE102004034416A1 (de) 2004-07-15 2006-02-02 "Stiftung Caesar" (Center Of Advanced European Studies And Research) Flüssige, strahlunghärtende Zusammensetzungen
CA2598454C (en) 2005-02-18 2013-04-09 Medarex, Inc. Monoclonal antibodies against prostate specific membrane antigen (psma) lacking in fucosyl residues
PE20071101A1 (es) 2005-08-31 2007-12-21 Amgen Inc Polipeptidos y anticuerpos
NZ573646A (en) 2006-06-12 2012-04-27 Wyeth Llc Single-chain multivalent binding proteins with effector function
JP2010509612A (ja) 2006-11-14 2010-03-25 ジェネンテック インコーポレイテッド ニューロン再生の活性調節因子
WO2012012716A2 (en) 2010-07-23 2012-01-26 Regulus Therapeutics, Inc. Targeting micrornas for the treatment of fibrosis
TW201247700A (en) 2011-05-05 2012-12-01 Baylor Res Inst Immunoglobulin-like transcript (ILT) receptors as CD8 antagonists
US20130071403A1 (en) 2011-09-20 2013-03-21 Vical Incorporated Synergistic anti-tumor efficacy using alloantigen combination immunotherapy
WO2013066765A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Mutation of tup1 in glycoengineered yeast
SI3421601T1 (sl) 2011-12-30 2020-03-31 Cellscript, Llc Izdelava in uporaba in vitro-sintetizirane ssRNA za uvajanje v celice sesalca, da se inducira biološki ali biokemijski učinek
WO2013181438A2 (en) 2012-05-30 2013-12-05 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Compositions and methods for modulating pro-inflammatory immune response
CA2877441A1 (en) 2012-07-02 2014-01-09 Medizinische Universitat Wien Complement split product c4d for the treatment of inflammatory conditions
EP2730588A1 (en) 2012-11-12 2014-05-14 Intelectys Antibodies and fragments thereof raised against the alpha-3 domain of HLA-G protein, methods and means for their preparation, and uses thereof
WO2014103534A1 (ja) 2012-12-28 2014-07-03 国立大学法人大阪大学 コラーゲン結合性分子を付加した改変ラミニンおよびその利用
US10138286B2 (en) * 2013-03-12 2018-11-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for inhibiting the effects of amyloid beta oligomers
AU2014338864C1 (en) 2013-10-25 2020-07-16 Akamis Bio Limited Oncolytic adenoviruses armed with heterologous genes
KR20170007449A (ko) 2014-05-22 2017-01-18 프레드 헛친슨 켄서 리서치 센터 조혈 전구체 세포의 lilrb2 및 노치 매개 증식
JO3663B1 (ar) 2014-08-19 2020-08-27 Merck Sharp & Dohme الأجسام المضادة لمضاد lag3 وأجزاء ربط الأنتيجين
WO2016044022A1 (en) 2014-09-16 2016-03-24 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Blocking pirb upregulates spines and functional synapses to unlock visual cortical plasticity and facilitate recovery from amblyopia
US20160200815A1 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
WO2016127247A1 (en) 2015-02-11 2016-08-18 University Health Network Methods and compositions for modulating lilr proteins
KR102129107B1 (ko) * 2015-03-06 2020-07-02 더 보드 오브 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 항-lilrb 항체 및 암의 검출 및 치료를 위한 이의 용도
WO2017042814A1 (en) 2015-09-10 2017-03-16 Yeda Research And Development Co. Ltd. Use of perforin positive immature dendritic cells in disease treatment
WO2018013534A1 (en) 2016-07-11 2018-01-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods for treating pten deficient epithelial cancers using a combination of anti-pi3kbeta and anti-immune checkpoint agents
WO2018022881A2 (en) 2016-07-29 2018-02-01 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Methods for identifying lilrb-blocking antibodies
WO2018027197A1 (en) 2016-08-04 2018-02-08 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Cancer antigen targets and uses thereof
WO2018035503A1 (en) 2016-08-18 2018-02-22 The Regents Of The University Of California Crispr-cas genome engineering via a modular aav delivery system
WO2018035710A1 (en) 2016-08-23 2018-03-01 Akeso Biopharma, Inc. Anti-ctla4 antibodies
CA3038475A1 (en) 2016-09-28 2018-04-05 Immpact-Bio Ltd. A universal platform for car therapy targeting a novel antigenic signature of cancer
SG11202004806SA (en) 2017-12-22 2020-06-29 Jounce Therapeutics Inc Antibodies to lilrb2
EP3820904A2 (en) 2018-07-09 2021-05-19 Five Prime Therapeutics, Inc. Antibodies binding to ilt4

Also Published As

Publication number Publication date
AU2021225143A1 (en) 2021-09-30
ECSP19072235A (es) 2019-12-27
NI201900103A (es) 2019-10-31
AU2018248294A1 (en) 2019-10-10
TN2019000272A1 (en) 2021-01-07
US20220033496A1 (en) 2022-02-03
JP7045392B2 (ja) 2022-03-31
GEP20227440B (en) 2022-11-25
JOP20190236B1 (ar) 2023-09-17
BR112019021000A2 (pt) 2020-05-05
CA3057378A1 (en) 2018-10-11
DOP2019000253A (es) 2019-12-15
JP7394160B2 (ja) 2023-12-07
US20180298096A1 (en) 2018-10-18
EP3606958A1 (en) 2020-02-12
AU2018248294B2 (en) 2021-08-05
AR111362A1 (es) 2019-07-03
KR102357823B1 (ko) 2022-01-28
EA201992402A1 (ru) 2020-02-19
MX2019011927A (es) 2020-02-10
SG11201909081YA (en) 2019-10-30
PH12019502275A1 (en) 2020-09-21
JP2020519235A (ja) 2020-07-02
KR20190136064A (ko) 2019-12-09
CN110719917A (zh) 2020-01-21
TW201839014A (zh) 2018-11-01
PE20191813A1 (es) 2019-12-26
US11053315B2 (en) 2021-07-06
US20220002403A1 (en) 2022-01-06
US11897957B2 (en) 2024-02-13
CL2019002855A1 (es) 2020-02-21
TWI796329B (zh) 2023-03-21
WO2018187518A1 (en) 2018-10-11
CR20190459A (es) 2020-02-14
JOP20190236A1 (ar) 2019-10-06
JP2022084773A (ja) 2022-06-07
CO2019011155A2 (es) 2019-10-21
IL269593A (en) 2019-11-28
US11897956B2 (en) 2024-02-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA126865C2 (uk) Антитіла проти ilt4 і антигензв'язувальні фрагменти
EP3250611B1 (en) Car t-cells recognizing cancer-specific il 13r-alpha2
UA127515C2 (uk) Антитіло до всма, біспецифічна антигензв'язувальна молекула, що зв'язує всма і cd3, і їх використання
CN104822705B (zh) M971嵌合抗原受体
US7820174B2 (en) T cell receptors and related materials and methods of use
UA126854C2 (uk) Антитіло до тім-3
UA127050C2 (uk) Ahtи-lag-3 антитіло i композиція, що містить його
UA126280C2 (uk) Біспецифічні конструкції антитіл, які залучають т-клітини
US20150274826A1 (en) Therapeutic cd47 antibodies
KR20190008171A (ko) 항-bcma 폴리펩티드 및 단백질
UA127888C2 (uk) Композиція, що містить антитіло проти lag3 людини
UA122395C2 (uk) Антитіло проти tigit
UA126657C2 (uk) ОДНОЛАНЦЮГОВА КОНСТРУКЦІЯ АНТИТІЛА ДО BCMA І CD3<font face="Symbol">e</font>
UA118749C2 (uk) Конструкція антитіла до cdh19 і cd3
UA128113C2 (uk) Анти-sirpa антитіла і способи їхнього застосування
UA103297C2 (uk) Спосіб лікування захворювання, пов'язаного з імунітетом, шляхом одночасного націлювання на il-17a і il-17f антитіл-антагоністів
UA126275C2 (uk) Конструкція антитіла для cd70 та cd3
UA120357C2 (uk) Виділене біспецифічне антитіло, що специфічно зв'язується з klb і fgfr1 та спосіб його застосування
EA029793B1 (ru) Антитела к ох40 и способы их применения
KR101886890B1 (ko) 항인간 ｃｃｒ７ 항체, 하이브리도마, 핵산, 벡터, 세포, 의약 조성물 및 항체 고정화 담체
UA124732C2 (uk) Введення біспецифічної конструкції, що зв'язується з сd33 і сd3, для використання в способі лікування мієлоїдного лейкозу
US20210213055A1 (en) Compositions and methods for inducing phagocytosis
JP2022526194A (ja) Ｆｌｔ３特異的キメラ抗原受容体およびその使用方法
US20240228614A1 (en) Anti-ilt4 antibodies and antigen-binding fragments
CN114456267A (zh) 一种抗cd73人源化单克隆抗体及其应用