UA126657C2 - ОДНОЛАНЦЮГОВА КОНСТРУКЦІЯ АНТИТІЛА ДО BCMA І CD3<font face="Symbol">e</font> - Google Patents

ОДНОЛАНЦЮГОВА КОНСТРУКЦІЯ АНТИТІЛА ДО BCMA І CD3<font face="Symbol">e</font> Download PDF

Info

Publication number
UA126657C2
UA126657C2 UAA201809054A UAA201809054A UA126657C2 UA 126657 C2 UA126657 C2 UA 126657C2 UA A201809054 A UAA201809054 A UA A201809054A UA A201809054 A UAA201809054 A UA A201809054A UA 126657 C2 UA126657 C2 UA 126657C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
antibody
domain
cells
human
amino acid
Prior art date
Application number
UAA201809054A
Other languages
English (en)
Inventor
Тобіас Раум
Тобиас Раум
Маркус Мюнц
Йоганнес Брозі
Йоганнес Брози
Петер КУФЕР
Патрик ГОФМАН
Матіас Фрідріх
Матиас Фридрих
Бено Ратель
Памела Боґнер
Памела Богнер
Андреас Вольф
Корнеліус Помпе
Корнелиус Помпе
Original Assignee
Емджен Рісерч (Мюнік) Ґмбг
Емджен Рисерч (Мюник) Гмбг
Емджен Інк.
Эмджен Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=57965930&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=UA126657(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Емджен Рісерч (Мюнік) Ґмбг, Емджен Рисерч (Мюник) Гмбг, Емджен Інк., Эмджен Инк. filed Critical Емджен Рісерч (Мюнік) Ґмбг
Publication of UA126657C2 publication Critical patent/UA126657C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2878—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
    • C12N5/16—Animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/524—CH2 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/526—CH3 domain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/64—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising a combination of variable region and constant region components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Description

фармацевтичної композиції, способу лікування або зменшення інтенсивності В-клітинного порушення та терапевтичного набору.
Рівень техніки
МЇ Отримані з біспецифічних антитіл молекули, такі як конструкції антитіл ВіТЕФ (біспецифічні антитіла, які залучають Т-клітини), являють собою рекомбінантні білкові конструкції, що складаються з двох гнучко зв'язаних отриманих з антитіл зв'язуючих доменів.
Один зв'язуючий домен конструкцій антитіл ВіТЕеЕЖ є специфічним щодо обраного пухлиноасоційованого поверхневого антигена на клітинах-мішенях; другий зв'язуючий домен є специфічним щодо СОЗ - субодиниці комплексу Т-клітинного рецептора на Т-клітинах. За своєю конкретною структурою конструкції антитіл ВіІТЕФ винятково підходять для тимчасового сполучення Т-клітин з клітинами-мішенями і, у той же час, для того, щоб ефективно активувати характерний для Т-клітин цитолітичний потенціал проти клітин-мішеней. Важливою додатковою розробкою першого покоління конструкцій антитіл ВіІТЕФ (дивіться УМО 99/54440 і УМО 2005/040220), що увійшли до клінічної практики у вигляді АМС 103 ї АМО 110, було забезпечення біспецифічних конструкцій антитіл, що зв'язуються з незалежним від оточення епітопом у М-кінці ланцюга СОЗеє (МО 2008/119567). Конструкції антитіл ВІТЕФ), які зв'язуються з цим вибраним епітопом, не лише демонструють міжвидову специфічність щодо ланцюга СЮОЗЄ людини та Саїїйнгіх іасспи5, Задиіпиє оейдіри5 або баїтігі 5сіигецє5, але також, завдяки розпізнаванню цього конкретного епітопа (замість раніше описаних епітопів зв'язуючих СОЮЗ компонентів у біспецифічних здатних залучати Т-клітини молекулах), не активують Т-клітини неспецифічним чином у тому ж ступені, який спостерігається для попередніх поколінь антитіл, що залучають Т-клітини. Це зниження активації Т-клітин було пов'язане та корелює з меншим або зниженим перерозподілом Т-клітин у пацієнтів, причому останнє було пов'язане з ризиком виникнення побічних явищ.
І2) Описані в УМО 2008/119567 конструкцій антитіл, ймовірно, схильні до швидкого виведення з організму; отже, хоча вони здатні швидко досягати більшості частин тіла, швидко виробляються та легкі у поводженні, їх іп мімо застосування можуть бути обмежені їх короткочасною присутністю іп мімо. Внаслідок короткого іп мімо часу напівжиття цієї невеликої одноланцюгової молекули для досягнення терапевтичної дії використовували тривале введення шляхом тривалої внутрішньовенної інфузії. Проте такі тривалі внутрішньовенні інфузії вважаються незручними для пацієнтів і, отже, у разі зручніших альтернативних лікувальних
Зо підходів, перешкоджають вибору сполуки, яка продемонструвала більшу ефективність у лікуванні відповідного захворювання. Отже, у цій галузі техніки існує потреба у біспецифічних терапевтичних засобах, які зберігають аналогічну терапевтичну ефективність, які мають формат, що забезпечує просте виробництво, і які мають сприятливі фармакокінетичні властивості, включаючи більший час напівжиття.
ІЗЇ Підвищений час напівжиття в цілому корисний у іп мімо застосуваннях імуноглобулінів, особливо антитіл, і конкретно - фрагментів антитіл невеликого розміру. Описані у цій галузі техніки підходи для досягнення такого ефекту включають злиття невеликої біспецифічної конструкції антитіла з більшими білками, які переважно не перешкоджають терапевтичній дії
ВІіТЕФ. Приклади таких додаткових розробок біспецифічних здатних залучати Т-клітини молекул включають біспецифічні Ес-молекули, наприклад, описані у 5 2014/0302037, 05 2014/0308285,
УМО 2014/144722, УМО 2014/151910 і УМО 2015/048272. Альтернативною стратегією є застосування ЛСА, злитого з біспецифічною молекулою або просте злиття зв'язуючих пептидів людського альбуміну (дивіться, наприклад, УУМО2013/128027, МО2014/140358).
І4Ї ВСМА (антиген дозрівання В-клітин, ТМЕК5Е17, СО269) являє собою трансмембранний білок, що належить до суперсімейства рецепторів ТМЕ. Встановлено, що він є В-клітинним маркером, суттєвим для В-клітинного розвитку та гомеостазу (Зспіетапп еї аї., (2001) Зсіепсе 293 (5537):2111-2114), завдяки своїй імовірно суттєвій взаємодії з його лігандами ВАРЕЕ (фактор, що активує В-клітини, який також позначається як ТАЇЇ-1 або ТМЕЗЕ13В) і АРКІГ!. (ліганд, що індукує проліферацію).
ІБ Експресія ВСМА обмежена В-клітинною лінією диференціювання та відбувається, головним чином, на плазматичних клітинах і плазмабластах і, деякою мірою, на В-клітинах пам'яті але практично відсутня на периферичних і наївних В-клітинах ВСМА також експресується на клітинах множинної мієломи (ММ) і пов'язаний з лейкозом і лімфомами. Разом з представниками свого сімейства ТАСІ (трансмембранний активатор і партнер ліганда циклофіліну) ії ВАРЕ-К (рецептор фактора активації В-клітин, також відомий як представник суперсімейства рецепторів фактора некрозу пухлин 130) ВСМА регулює різні аспекти гуморального імунітету, розвиток і гомеостаз В-клітин. Експресія ВСМА проявляється скоріше на пізніх стадіях диференціювання В-клітин і сприяє довгостроковій виживаності плазмабластів і плазматичних клітин у кістковому мозку. Спрямоване вилучення гена ВСМА у мишей 60 призводить до істотного зниження числа довгоживучих плазматичних клітин у кістковому мозку,
що вказує на значущість ВСМА для їх виживаності.
ІЄЇ Разом з цим відкриттям ВСМА також підтримує ріст і виживаність клітин множинної мієломи (ММ). Момак еї аІ. Виявили, що лінії клітин ММ ії свіжовиділені клітини ММ експресують
ВСМА і білок ТАСІ на клітинній поверхні та мають варіабельну експресію білка ВАРЕ-К на клітинній поверхні (Момак еї а!., (2004) Віоса 103(2):689-694).
Ї/Ї Множинна мієлома (ММ) є другим за рахунком найбільш поширеним гематологічним злоякісним утворенням і складає 295 від усіх смертей внаслідок раку. ММ є гетерогенним захворюванням, а його причиною є, головним чином, хромосомні транслокації, окрім іншого «11; 14), К4; 14), (8;14), аеК13) і аеК17). Уражені ММ пацієнти можуть відчувати безліч пов'язаних із захворюванням симптомів внаслідок інфільтрації кісткового мозку, руйнування кісток, ниркової недостатності, імунодефіциту та психологічного навантаження, пов'язаного з діагнозом раку.
ІЗ) Мієлома є невиліковним захворюванням, яке, як правило, відрізняється рецидивуючою течією, причому багатьом пацієнтам (пцт) потрібно декілька ліній терапії. Результат лікування у разі РРММ залишається несприятливим, зокрема, після невдалого застосування варіанту лікування на основі інгібітору протеасом (РІ)- іьиабо імуномодулюючого препарату (МІВ).
І ММ все ще є важким для лікування захворюванням і залишається невиліковною. Як правило, вона відрізняється рецидивуючою течією, причому багатьом пацієнтам потрібно декілька ліній терапії. Стають доступними такі варіанти терапії, як хіміотерапія та підходи на основі трансплантації стовбурових клітин, які мають поліпшений рівень виживаності, але часто несуть небажані побічні явища. На даний момент двома найчастіше застосовними варіантами лікування для пацієнтів з множинною мієломою є комбінації стероїдів, талідоміду, леналідоміду, бортезомібу або різних цитотоксичних агентів і, для молодших пацієнтів, високодозові хіміотерапевтичні підходи з трансплантацією аутологічних стовбурових клітин. 101 Більшість трансплантатів мають аутологічний тип, тобто використовують власні клітини пацієнтів. Було показано, що такі трансплантати, хоча не забезпечують повне виліковування, подовжують життя окремих пацієнтів. їх можна застосовувати в якості початкового варіанту терапії для вперше діагностованих пацієнтів або під час рецидиву. Іноді, у випадку окремих пацієнтів, може рекомендуватися застосування більше одного трансплантата для нормального регулювання захворювання. Трансплантація стовбурових клітин може не бути варіантом для
Зо багатьох пацієнтів через літній вік, наявність серйозної хвороби або інших фізичних обмежень.
Хіміотерапія тільки частково регулює множинну мієлому та рідко призводить до повної ремісії.
Результат лікування у разі рецидивної рефрактерної ММ залишається несприятливим, зокрема, після невдалого застосування варіанту лікування на основі інгібітору протеасом (Рі)- і/або імуномодулюючого препарату (ІМіб). Таким чином, існує гостра необхідність у нових, інноваційних варіантах лікування. 11) ВейПиссі еї аіІ. (Віоса. 2005 Мау 15;105(10)) визначили ВСМА-специфічні антитіла у пацієнтів з множинною мієломою після отримання ними інфузії донорських лімфоцитів.
Сироватка цих пацієнтів була здатна опосередковувати ВСМА-специфічний клітинний лізис за допомогою АЗКЦ і КЗЦ, що було виявлено виключно у пацієнтів з протипухлинними відповідями (4/9), але не у пацієнтів без відповіді (0/6). Автори припускають, що індукція ВСМА-специфічних антитіл сприяє елімінації клітин мієломи та довгострокової ремісії пацієнтів. Куап еї аї. (Мої
Сапсег Тнег. 2007 Мом;6(11):3009-18) повідомили про створення антагоністичного специфічного до ВСМА антитіла, яке запобігає активації МЕ-кВ, яка пов'язана з ефективним сигнальним шляхом, що сприяє виживанню, в нормальних і злоякісних В-клітинах. 112) Незважаючи на факт, що ВСМА; ВАРР-К і ТАСІ, тобто рецептори В-клітин, що належать до суперсімейства рецепторів ТМЕ, і їх ліганди ВАЕЕ і АРКІ!. є ціллю варіантів терапії у боротьбі проти раку і/або аутоїммунних порушень, все ще існує необхідність у доступних додаткових варіантах для лікування таких патологічних станів. Одним з таких підходів є здатна залучати Т- клітини сполука, отримана з біспецифічного антитіла.
Короткий опис суті винаходу 13) Описані у цій галузі техніки формати біспецифічних здатних залучати Т-клітини молекул, що подовжують час напівжиття (НІ Е-формати (від англ. "Паї-Іїе ехієепаіпд")), які включають гетеро-Гс (також позначуваний як гетеродимерний Ес, пес або пес) формат і злиття людського сироваткового альбуміну (також позначуваного Н5ЗА або ПАЇ! В), мають індивідуальні недоліки, такі як неспецифічна активація Т-клітин, активація комплементу, нестабільність або фармакокінетичний профіль, який не відповідає необхідному подовженню часу напівжиття молекул. Отже, метою цього винаходу є забезпечення формату ВСМАХСОЗ біспецифічних здатних залучати Т-клітини молекул, що подовжує час напівжиття, в якому усунено щонайменше один і, звичайно, переважно більше одного цих індивідуальних недоліків, бо спостережуваних для молекул існуючого рівня техніки. Відповідно, у цьому винаході запропоновано конструкції антитіл із специфічною модальністю Ес, які характеризується вмістом першого домену, що зв'язується з ВСМА, другого домену, що зв'язується з позаклітинним епітопом ланцюга СОЗє людини і/або Масаса (макака), і третього домену, що відповідає специфічній модальності Ес. Крім того, у винаході запропоновано полінуклеотид, який кодує конструкцію антитіла, вектор, який містить цей полінуклеотид, клітини-хазяї, які експресують конструкцію, і фармацевтична композиція, яка містить вищезазначене.
Опис фігур 14) Фігура 1: На ФІГ. та зображено діаграму одного варіанту реалізації конструкції антитіла згідно з винаходом. На Фіг. 165 зображено конструкцію антитіла з гетеродимерним Ес, а на фіг. 1с зображено конструкцію Х- тіла, описану у цій галузі техніки. Зазначені заряджені пари внесені для посилення гетеродимеризації. На Фіг. 14 зображено продукт злиття конструкції антитіла з людським сироватковим альбуміном (НЗА/АЇ В). 15) Фігура 2: Оцінка мішень-незалежної активації Т-клітин конструкціями антитіл мішень А
НГЕ ВІТЕФ). 2(а) конструкція антитіла згідно з винаходом у 48 год аналізі активації людськими
МКПК (Зх); серійні розведення НІ Е ВІіТЕФ (починаючи з 20 нМ; 1:5, 7хкконтроль); без або з блокуванням ЕсК |10 мг/мл пиЇдс (Кіомод, Вахіег)|; ЕАСЗ-вимірювання експресії СО69 і С025
Іне показано| на Т-клітинах СО4-, СОв. 2(р) гетеро-Ес конструкція антитіла у 48 год аналізі активації лодськими МКПК і МКПК з відсутністю клітин СО14-/СО033-- (Зх); серійні розведення
НГЕ ВІТЕФ (починаючи з 20 нм; 1:5, 7хяконтроль); ЕАС5-вимірювання експресії СО69 і 2025 Іне показане) на Т-клітинах СО4-, СОв ж. 16) Фігура 3: Оцінка мішень-незалежної активації Т-клітин конструкціями антитіл НІ Е ВіТЕФ).
З(а) конструкція антитіла до мішені В згідно з винаходом у 48 год аналізі активації людськими
МКПК (Зх); серійні розведення НГ Е ВІіТЕФ (починаючи з 20 нМ; 1:5, 7хнконтроль); без або з блокуванням ЕсК |10 мг/мл пиЇдс (Кіомод, Вахіег)|; ЕАСЗ-вимірювання експресії СО69 і С025
Іне показане) на Т-клітинах СО4-, СОв'к. З(Б) конструкція антитіла мішень В гетеро-Ес у 48 год аналізі активації людськими МКПК і МКПК з відсутністю клітин СО14-4/С033- (Зх); серійні розведення НІ Е ВІіТЕФ (починаючи з 20 нМ; 1:5, 7хнконтроль); ЕАС5-вимірювання експресії сО69 ії 2025 Іне показане) на Т-клітинах СО4, СОв. З(с) конструкція мішень В Х-тіло у 48 год аналізі активації людськими МКПК і МКПК з відсутністю клітин СО14-/СО03З- (Зх); серійні
Зо розведення НГЕ ВІіТЕФ (починаючи з 20 нМ; 1:5, /7хкконтроль); ЕАС5З-вимірювання експресії
СОб69 ї СО25 |не показане) на Т-клітинах СО4-, СОв8-- зЗ(а) - З3()) виділені МКПК від трьох різних здорових донорів-людей впродовж 48 год культивували із зростаючими концентраціями біспецифічних НІ Е-конструкцій антитіл, специфічних щодо мішені В. Експресію маркера активації СО69 на Т-клітинах СО4- і СОвж- визначали методом аналізу проточної цитометрії, використовуючи кон'юговане з РЕ-Су/7 тАб, специфічне щодо СОб9. 17 Фігура 4: Зв'язування комплементу С14 Ес-злитими конструкціями антитіл ВІТЕФ. Ес- злиті конструкції антитіл ВІТЕЮЖ (одноланцюговий Ес ВіТЕеЕФ (трикутники), гетеро-Рс ВІіТЕФ (квадрати), канонічне ВІТЕФ (кола)) наносили на планшет Махізогр (у серійних розведеннях) перед інкубацією з об'єднаною людською сироваткою та інкубацією з поліклональним мишачим антитілом проти людського СС14, що візуалізується козячим антимишачим Ес-АР кон'югатом. 18) Фігура 5: Середні ФК-профілі двох різних націлених на ВСМА конструкцій антитіл ВІТЕФ після введення однієї дози яванським макакам. У цілях порівняння сироваткові концентрації нормалізовані щодо дози до 15 мкг/кг і вказані у нмолях. 191 Фігура 6: Середні ФК-профілі дев'яти різних конструкцій антитіл ВІТЕФ, кожна з яких злита з компонентом 5сЕс, що подовжує час напівжиття. У цілях порівняння сироваткові концентрації нормалізовані щодо дози до 15 мкг/кг і вказані у нмолях. (20) Фігура 7: Біспецифічні зсЕс-варіанти ОРЕ (ЗЕО ІО МО: 105), 20 (5ЕО ІО МО: 106), ОЗІ. (ЗЕО ІЮ МО: 107), Т7І (5ЕО ІЮ МО: 108) ії КбС (ЗЕО ІО МО: 109). Переважний третій домен конструкції антитіла згідно з цим винаходом являє собою доменом, описаний 5ЕО ІЮ МО: 105. (211 Фігура 8: Визначення методом поверхневого плазмонного резонансу (ППР) зв'язування з людським ЕсКп. Кожну з конструкцій СОР, Т120, ОЗ, 171 ї КбС досліджували щодо їх здатності до зв'язування з людським ЕсКп у ППР (Віасоге) експериментах. Максимальне зв'язування під час фази інжекції вимірювали для всіх конструкцій у відповідних одиницях відповіді (ОВ), еквівалентних збільшенню молекулярної маси на покритому ЕсКп чіпі СМ5 внаслідок наявності зв'язаної конструкції. Усі конструкції вимірювали у дуплікатах. Середні значення визначення у дуплікатах наведені на Фігурі 8А і 88. (22) Фігура 9: Кожну з конструкцій СОР, 120, ОЗ, Т7І ї КбС і людське Ідс1-каппа антитіло
МТ201 досліджували щодо їх здатності до зв'язування з людським ЕсКп у ППР (Віасоге) експериментах. Максимальне зв'язування під час фази інжекції вимірювали для всіх конструкцій 60 у відповідних одиницях відповіді (ОВ), еквівалентних збільшенню молекулярної маси на покритому ЕсКп чіпі СМ5 внаслідок наявності зв'язаної конструкції. Усі конструкції вимірювали у дуплікатах. Наведено середні значення визначення у дуплікатах, включаючи планки похибок, які вказують на стандартне відхилення.
Детальний опис винаходу (23) Окрім істотного подовження часу напівжиття біспецифічних конструкцій антитіл згідно з винаходом, злиття специфічної модальності Ес також відповідає за несподівану істотну дію на перший і другий зв'язуючий домен конструкції антитіла згідно з винаходом. Таким чином, тоді як інші модальності здатних залучати Т-клітини конструкцій антитіл, що подовжують час напівжиття, демонструють індивідуальні переважні риси, вибір представленої специфічної модальності Ес дозволяє забезпечувати біспецифічні молекули, які, як правило, демонструють широкий спектр переважних характеристик функціонального молекулярного формату і, отже, роблять можливою розробку перспективних фармацевтичних композицій. (24) Таким чином, у цьому винаході запропоновано конструкцію антитіла, яка містить: - перший домен, що зв'язується з ВСМА, - другий домен, що зв'язується з позаклітинним епітопом ланцюга СОЗє людини і/або
Масаса; і - третій домен, що містить два поліпептидні мономери, кожен з яких містить шарнірну область, домен СНЕІ2 і домен СНЗ, причому зазначені два поліпептидні мономери злиті один з одним за допомогою пептидного лінкера. (25) Термін "конструкція антитіла" відноситься до молекули, чиї структура і/або функція грунтовані на структурі і/або функції антитіла, наприклад, повнорозмірної або цілісної молекули імуноглобуліну, і/або отримані з варіабельних доменів важкого ланцюга (МН) і/або варіабельних доменів легкого ланцюга (МІ) антитіла або його фрагмента. Отже, конструкція антитіла здатна зв'язуватися зі своєю специфічною мішенню або антигеном. Крім того, зв'язуючий домен конструкції антитіла відповідно до винаходу містить мінімальні структурні вимоги антитіла, які забезпечують зв'язування мішені. Ця мінімальна вимога може, наприклад, визначатися наявністю щонайменше трьох СОК легкого ланцюга (тобто СОКІ, СОК2 і СОКЗ Мі -області) іМабо трьох СОМ важкого ланцюга (тобто СОКІ, СОМК2 і СОКЗ МН-області), переважно усіх шести СОК. Альтернативним підходом для визначення мінімальних структурних вимог антитіла
Зо є визначення епітопа антитіла у межах структури специфічної мішені, відповідно, білкового домену білка-мішені, який складає область епітопа (кластер епітопа), або шляхом зазначення специфічного антитіла, яке конкурує за епітоп певного антитіла. Антитіла, на яких грунтовані конструкції відповідно до винаходу, включають, наприклад, моноклональні, рекомбінантні, химерні, деімунізовані, гуманізовані та людські антитіла.
І26Ї Зв'язуючий домен конструкції антитіла відповідно до винаходу може, наприклад, містити вищезазначені групи СОК. Переважно СОМ знаходяться у каркасній області варіабельної області легкого ланцюга (МІ) антитіла та варіабельної області важкого ланцюга (МН) антитіла; проте воно не має містити їх обидві. Га-фрагменти, наприклад, мають дві МН-області та часто зберігають деякою мірою антигензв'язуючу функцію інтактного антигензв'язуючого домену.
Додаткові приклади формату фрагментів антитіл, варіантів антитіл або зв'язуючих доменів включають (1) фрагмент Раб, моновалентний фрагмент, що містить домени МІ, МН, СІ. і СНІ; (2) фрагмент РЕ(аб)2, бівалентний фрагмент, що містить два фрагменти Раб, зв'язані дисульфідним містком у шарнірній області; (3) фрагмент Еа, що містить два домени МН і домен
СНІ; (4) фрагмент Ем, що містить домени Мі і МН одного плеча антитіла, (5) фрагмент 4дАБ (УУага еї аї., (1989) Маїшгте 341:544-546), що містить домен МН; (6) виділену область, що визначає комплементарність (СОК) і (7) одноланцюговий Ем (5сЕм), причому останній є переважним (наприклад, отриманим з 5сЕМ-бібліотеки). Приклади варіантів реалізації конструкцій антитіл відповідно до винаходу описані, наприклад, у МО 00/006605, УМО 2005/040220, МО 2008/119567, МО 2010/037838, МО 2013/026837, МО 2013/026833, 5 2014/0308285, 5 2014/0302037, УМО 2014/144722, МО 2014/151910 ї УМО 2015/048272. (27| Також у рамках визначення "зв'язуючий домен" або "домен, що зв'язує" знаходяться фрагменти повнорозмірних антитіл, такі як МН, УНН, МІ, (5)аАБ, Ем, га, Раб, Раб", Е(абв)2 або "г
ІцОе" ("напівантитіло"). Конструкції антитіл відповідно до винаходу також можуть містити модифіковані фрагменти антитіл, які також називаються варіантами антитіл, такі як 5сЕм, аі-бсЕм або брі(5)-5СЕм, 5сЕм-Ес, зсЕм-блискавка, 5сЕБабр, ЕРар2, Рабв3, діатіла, одноланцюгові діатіла, тандемні діатіла (Тапдаб'5), тандемні аі-5сЕм, тандемні ігі-5сЕм, "мультитіла", такі як тріатіла або тетратіла, і однодоменні антитіла, такі як нанотіла або антитіла з одним варіабельним доменом, які містять тільки один варіабельний домен, що може бути УНН, МН або МІ, які специфічно зв'язують антиген або епітоп незалежно від інших М-областей або доменів. бо (28) У контексті цього документу терміни "одноланцюговий ЕуУ", "одноланцюгові антитіла" або
"СЕМ" відносяться до фрагментів антитіл, що містять один поліпептидний ланцюг, які містять варіабельні області як з важкого, так і з легкого ланцюгів, але в яких відсутні константні області.
Загалом одноланцюгове антитіло додатково містить поліпептидний лінкер між МН- і Мі- доменами, який забезпечує можливість утворення необхідної структури, яка дозволяє зв'язувати антиген. Одноланцюгові антитіла детально обговорюються Рійск(йип у Те
Рпагтасоїоду ої Мопосіопаї! Апііродієв, мої. 113, Козепригуд апа Мооге єдвз. Зргіпдег-Мепад, Мем
Мої, рр. 269-315 (1994). Відомі різні способи створення одноланцюгових антитіл, включаючи описані у патентах США Мо 4694778 і 5260203; публікації заявки на міжнародний патент Мо УМО 88/01649; Віга (1988) Зсієпсе 242:423-442; Нивіоп вії а!. (1988) Ргос. Маї!. Асад. сі. ОБА 85:5879- 5883; УУага еї аІ. (1989) Маїште 33454454; ЗКета єї аІ. (1988) Зсієпсе 242:1038-1041. У конкретних варіантах реалізації одноланцюгові антитіла також можуть бути біспецифічними, мультиспецифічними, людськими і/або гуманізованими і/або синтетичними. (29) Крім того, визначення терміну "конструкція антитіла" включає моновалентні, бівалентні та полівалентні/мультивалентні конструкції і, отже, біспецифічні конструкції, що специфічно зв'язуються тільки з двома антигенними структурами, а також поліспецифічні/мультиспецифічні конструкції, які специфічно зв'язують більше двох антигенних структур, наприклад, три, чотири або більше, за допомогою різних зв'язуючих доменів. Більше того, визначення терміну "конструкція антитіла" включає молекули, які складаються тільки з одного поліпептидного ланцюга, а також молекули, які складаються із більш ніж одного поліпептидного ланцюга, причому ланцюги можуть бути ідентичними (гомодимери, гомотримери або гомоолігомери) або різними (гетеродимери, гетеротримери або гетероолігомери). Приклади визначених вище антитіл і їх варіантів або похідних описані, окрім іншого, у Нагпом/ апа І апе, Апіїрбодіє5 а
Іабогаїюгу тапиа), СНІ Ргев5 (1988) апа Овіпд Апіїродієз: а Іабогаїту тапиа!, СОНІ Ргевз5 (1999), Копіегтапп апа роабеї, Апібоду Епдіпеегіпуд, Зргіпдег, 2па ед. 2010 ї ГішШе, Кесотрбіпапі
Апііродієвз ог ІттипоїНегару, Сатбгідде Опімегейу Ргезз 2009.
ЗОЇ У контексті цього документу термін "біспецифічний" відноситься до конструкції антитіла, яка є "щонайменше біспецифічною", тобто містить щонайменше перший зв'язуючий домен і другий зв'язуючий домен, причому перший зв'язуючий домен зв'язується з одним антигеном або мішенню (у даному випадку: ВСМА), другий зв'язуючий домен зв'язується з іншим антигеном або мішенню (у даному випадку: СОЗ). Відповідно, конструкції антитіл відповідно до винаходу мають специфічність щодо щонайменше двох різних антигенів або мішеней. Наприклад, перший домен переважно не зв'язується з позаклітинним епітопом СОЗє одного або більше видів, описаних у цьому документі. Термін "антиген-мішень клітинної поверхні" відноситься до антигенної структури, що єкспресується клітиною, яка знаходиться на клітинній поверхні, тобто, доступна для описаної у цьому документі конструкції антитіла. Він може бути білком, переважно позаклітинною частиною білка, або вуглеводною структурою, переважно вуглеводною структурою білка, такою як глікопротеїн. Переважно він є пухлинним антигеном. Термін "біспецифічна конструкція антитіла" згідно з винаходом також включає мультиспецифічні конструкції антитіл, такі як триспецифічні конструкції антитіл, які містять три зв'язуючі домени, або конструкції, що мають більше трьох (наприклад, чотири, п'ять...) специфічностей.
ЇЗ1Ї Враховуючи, що конструкції антитіл відповідно до винаходу є (щонайменше) біспецифічними, вони не присутні у природі та помітно відрізняються від продуктів природного походження. Отже, "біспецифічна" конструкція антитіла або імуноглобуліну є штучним гібридним антитілом або імуноглобуліном, що має щонайменше дві різні зв'язуючі ділянки з різною специфічністю. Біспецифічні конструкції антитіл можна отримувати різними способами, включаючи злиття гібридом або зв'язування фрагментів Раб'. Дивіться, наприклад, Зоподвіміїаі 8
ІГасптапп, Сіїп. Ехр. Іттипої!. 79:315-321 (1990).
ІЗ2| Щонайменше два зв'язуючі домени та варіабельні домени (МНЛ/І) конструкції антитіла згідно з цим винаходом можуть містити або не містити пептидні лінкери (спейсерні пептиди).
Термін "пептидний лінкер" відповідно до цього винаходу включає амінокислотну послідовність, за допомогою якої зв'язані між собою амінокислотні послідовності одного (варіабельного і/або зв'язуючого) домену та іншого (варіабельного і/або зв'язуючого) домену конструкції антитіла.
Пептидні лінкери також можна використовувати для злиття третього домену з іншими доменами конструкції антитіла згідно з винаходом. Важливою технічною характеристикою такого пептидного лінкера є те, що у нього відсутня активність полімеризації. До відповідних пептидних лінкерів відносяться описані у патентах США 4751180 і 4935233 або МО 88/09344. Пептидні лінкери також можна використовувати для приєднання інших доменів або модулів або областей (таких як домени, що подовжують час напівжиття) до конструкції антитіла згідно з винаходом.
ІЗЗІЇ Конструкції антитіл згідно з винаходом переважно є "іп міго створеними конструкціями 60 антитіл". Цей термін відноситься до конструкції антитіла відповідно до наведеного вище визначення, в якій уся або частина варіабельної області (наприклад, щонайменше одна СОК) створена за допомогою відбору неімунної клітини, наприклад, іп мійго фагового дисплея, білкового чіпа або будь-якого іншого способу, в якому кандидатні послідовності можна досліджувати щодо їх здатності зв'язуватися з антигеном. Переважно цей термін виключає послідовності, створені виключно шляхом геномної перебудови в імунній клітині тварини. "Рекомбінантне антитіло" являє собою антитіло, створене за допомогою застосування технології рекомбінантних ДНК або генетичної інженерії.
ІЇЗ4) У контексті цього документу термін "моноклональне антитіло" (тАБ) або моноклональна конструкція антитіла відноситься до антитіла, отриманого з популяції по суті гомогенних антитіл, тобто окремі антитіла, що складають популяцію є ідентичними за винятком можливих природних мутацій і/або посттрансляційних модифікацій (наприклад, ізомеризації, амідування), які можуть бути присутніми у незначних кількостях. Моноклональні антитіла є високоспецифічними, спрямовані проти однієї антигенної ділянки або детермінанти на антигені, на противагу препаратам традиційних (поліклональних) антитіл, які, як правило, містять різні антитіла, спрямовані проти різних детермінант (або епітопів). Окрім своєї специфічності, перевагою моноклональних антитіл є те, що їх синтезують за допомогою гібридомної культури, отже, вони не містять домішок інших імуноглобулінів. Обставина "моноклональне" вказує на характер антитіла, як отриманого із по суті гомогенної популяції антитіл, і її не слід сприймати, як таку, що вимагає отримання антитіла будь-яким конкретним чином.
ІЗ5Ї Для отримання препарату моноклональних антитіл можна використовувати будь-який спосіб, що забезпечує отримання антитіл за допомогою стабільних культур клітинних ліній.
Наприклад, призначені для застосування моноклональні антитіла можна створювати методом гібридоми, уперше описаним КоепПіег еї аїЇ., Маїшге, 256: 495 (1975), або можна створювати методами рекомбінантних ДНК (дивіться, наприклад, патент США Мо 4816567). Приклади додаткових методик для отримання людських моноклональних антитіл включають методику тріоми, методику людської В-клітинної гібридоми (Ко2бог, Іттипоіоду Тодау 4 (1983), 72) і методику ВЕБ-гібридоми (Соїе еї аїЇ., Мопосіопаї! Апіїродієх апа Сапсег Тегару, Аїап К. І ів5, Іпс. (1985), 77-96).
ЇЗ6Ї Після цього можна проводити скринінг гібридом стандартними методами, такими як
Зо імуноферментний аналіз (ІФА) і аналіз методом поверхневого плазмонного резонансу (ВІАСОКЕ"М), для виявлення однієї або більше гібридом, які виробляють антитіло, що специфічно зв'язується з конкретним антигеном. В якості імуногена можна використовувати будь-яку форму відповідного антигена, наприклад, рекомбінантний антиген, природні форми, будь-які їх варіанти або фрагменти, а також їх антигенні пептиди. Поверхневий плазмонний резонанс, застосовний у системі ВіАсоге, можна використовувати для підвищення активності фагових антитіл, які зв'язуються з епітопом антигена-мішені клітинної поверхні (Зспіег, Нитап
Апіїродієз Нубгідотавз 7 (1996), 97-105; Ма!тброга, у. Іттипої. Метоаз 183 (1995), 7-13).
ЇЗ7| Інший типовий метод отримання моноклональних антитіл включає скринінг бібліотек білкової експресії, наприклад, бібліотек фагового дисплея або рибосомного дисплея. Фаговий дисплей описано, наприклад, у І адпег еї аІ., патенті США Мо 5223409; тій (1985) З5сіепсе 228:1315-1317, Сіаскзоп еї аї!., Майшге, 352: 624-628 (1991) і Магкз еї аї., У. Мої. Віо!., 222: 581-597 (1991).
ІЗ8ІЇ Окрім застосування дисплейних бібліотек відповідний антиген можна використовувати для імунізації відмінної від людини тварини, наприклад, гризуна (такого як миша, хом'як, кролик або щур). В одному варіанті реалізації винаходу відмінна від людини тварина містить щонайменше частину гена людського імуноглобуліну. Наприклад, можна сконструювати мишачі штами з дефіцитом вироблення мишачого антитіла з великими фрагментами локусів людського
Ід (імуноглобуліну). Використовуючи технологію гібридоми, можна отримувати та проводити відбір антиген-специфічних моноклональних антитіл, отриманих з генів з необхідною специфічністю. Дивіться, наприклад, ХЕМОМОШ5БЕ М, Сгееп еї аї. (1994) Маїшге Сепеїйіс5 7:13- 21, 05 .2003-0070185, МО 96/34096 і УМО 96/33735.
ІЗ9|Ї Моноклональне антитіло також можна отримати від відмінної від людини тварини, а потім модифікувати, наприклад, гуманізувати, деімунізувати, зробити химерними і таке інше, використовуючи відому у цій газузі техніки технологію рекомбінантних ДНК. Приклади модифікованих конструкцій антитіл включають гуманізовані варіанти нелюдських антитіл, антитіла "із дозрілою афінністю" (дивіться, наприклад, НамуКіп5 еї аї. У. Мої. ВіоІ. 254, 889-896 (1992) і Ї оумлпап еї а!., Віоспетівігу 30, 10832-10837 (1991)) і мутантні антитіла зі зміненою (ими) ефекторною (ими) функцією (ями) (дивіться, наприклад, патент США 5648260, Копіегтапп апа рабеї (2010), Іос. сії. і ГішШе (2009), Іос. сії). бо І4О) В імунології дозрівання афінності - це процес, за допомогою якого В-клітини виробляють антитіла з підвищеною афінністю щодо антигена під час імунної відповіді. У разі повторної дії такого самого антигена організм-хазяїн вироблятиме антитіла зі все більшою афінністю. Як і природний прототип, іп міго дозрівання афінності грунтоване на принципах мутації та відбору.
Іп міго дозрівання афінності успішно застосовували для оптимізації антитіл, конструкцій антитіл і фрагментів антитіл. Випадкові мутації усередині СОК вводять, використовуючи опромінення, хімічні мутагени або ПЛР із внесенням помилок. Крім того, генетичну різноманітність можна підвищувати шляхом перестановки ланцюгів. Два або три цикли мутації та відбору із застосуванням дисплейних методів, таких як фаговий дисплей, зазвичай призводять до отримання фрагментів антитіл з афінністю у вузькому наномолярному діапазоні.
ІЇ41| Переважний тип варіації конструкцій антитіл з амінокислотними замінами включає заміщення одного або більше залишків гіперваріабельної області батьківського антитіла (наприклад, гуманізованого або людського антитіла). Загалом отримані у результаті варіанти, відібрані для додаткової розробки, повинні мати поліпшені біологічні властивості порівняно з батьківським антитілом, з якого вони отримані. Зручний шлях створення таких замісних варіантів включає дозрівання афінності із застосуванням фагового дисплея. Коротко, мутують декілька ділянок гіперваріабельної області (наприклад, 6-7 ділянок) для створення усіх можливих амінокислотних замін у кожній ділянці. Створені таким чином варіанти антитіл відображаються моновалентним чином з частинок ниткоподібного фагу у вигляді продуктів злиття з продуктом гена ЦП М'13, упакованих у кожній частинці. Потім проводять скринінг відображених фагом варіантів щодо їх біологічної активності (наприклад, афінності зв'язування), як описано у цьому документі. Щоб визначити кандидатні ділянки гіперваріабельної області для проведення модифікації можна проводити аланін-скануючий мутагенез для визначення залишків гіперваріабельної області, які вносять істотний вклад у зв'язування антигена. В альтернативному або додатковому варіанті може бути корисно проаналізувати кристалічну структуру комплексу антиген-антитіло для визначення точок контакту між зв'язуючим доменом і, наприклад, людським ВСМА. Такі контактні залишки та сусідні залишки є кандидатами для проведення замін відповідно до застосовних у цьому документі методик. Після створення таких варіантів панель варіантів піддають описаному у цьому документі скринінгу, а антитіла з перевершуючими властивостями в одному або більше релевантному аналізі відбирають для
Зо додаткової розробки.
І42| Моноклональні антитіла та конструкції антитіл згідно з цим винаходом включають, зокрема, "химерні" антитіла (імуноглобуліни), в яких частина важкого і/або легкого ланцюга ідентична або гомологічна з відповідними послідовностями в антитілах, отриманих від конкретного виду або належних конкретному класу або підкласу антитіл, тоді як залишок ланцюга (ів) ідентичний або гомологічний відповідним послідовностям в антитілах, отриманих від іншого виду або належних іншому класу або підкласу антитіл, а також фрагменти таких антитіл, у тому випадку, якщо вони проявляють необхідну біологічну активність (патент США Мо 4816567; Моттізоп єї аї., Ргос. Маї). Асад. 5сі. ОБА, 81: 6851-6855 (1984)). Химерні антитіла, що представляють у даному випадку інтерес, включають "приматизовані" антитіла, які містять антигензв'язуючі послідовності варіабельного домену, отримані від відмінного від людини примату (наприклад, мавпи Старого Світу, мавпи і таке інше), і людські послідовності константної області. Було описано безліч підходів для створення химерних антитіл. Дивіться, наприклад, Могтізоп еї аїЇ., Ргос. Май. Асай. сі Ш.5.А. 81:6851 , 1985; ТаКеда еї аї., Маїшге 314:452, 1985, СаршШу еї аІ., патент США Мо 4816567; Во55 еї аЇ., патент США Мо 4816397;
Тападисні ега!., ЕР 0171496; ЕР 0173494; і В 2177096.
І43) Антитіло, конструкцію антитіла, фрагмент антитіла або варіант антитіла також можна модифікувати шляхом спеціального вилучення людських Т-клітинних епітопів (метод, званий "деімунізацією") способами, описаними, наприклад, у УМО 98/52976 або МО 00/34317. Коротко, варіабельні домени важкого та легкого ланцюга антитіла можна проаналізувати щодо наявності пептидів, які зв'язуються з ГКГС класу ІІ; ці пептиди представляють потенційні Т-клітинні епітопи (за визначенням у УМО 98/52976 і УМО 00/34317). Для виявлення потенційних Т-клітинних епітопів можна застосовувати підхід комп'ютерного моделювання, що називається "пептидним простяганням", і, додатково, можна проводити пошук за базою пептидів, які зв'язують людський
ГКГС класу ІІ, щодо мотивів, присутніх у послідовностях МН і МІ, як описано у МО 98/52976 і УМО 00/34317. Ці мотиви зв'язуються з будь-яким з 18 основних ОК-алотипів ГКГС класу ЇЇ і, таким чином, складають потенційні Т-клітинні епітопи. Виявлені потенційні Т-клітинні епітопи можна усувати за допомогою заміни невеликої кількості амінокислотних залишків у варіабельних доменах або, переважно, за допомогою поодиноких амінокислотних замін. Як правило, здійснюють консервативні заміни. Часто, але не виключно, може використовуватися бо амінокислота, зазвичай присутня у цій позиції у послідовностях антитіл людської зародкової лінії. Послідовності людської зародкової лінії описані, наприклад, у Топтіїпзоп, еї аї. (1992) 3.
МОо1. Віої. 227:776-798; СоокК, а.Р. єї аї. (1995) Іттипої. Тодау Мої. 16 (5): 237-242; і Тотіїпзоп еї ам. (1995) ЕМВО 3. 14: 14:4628-4638. Директорія М ВАЗЕ представляє вичерпну директорію послідовностей варіабельних областей людського імуноглобуліну (складена Топтіїпзоп, І А. еї аї.
МКС Сепіге ог Ргоївіп Епдіпеегіпд, Сатргідде, ОК). Ці послідовності можна використовувати в якості джерела людських послідовностей, наприклад, каркасних областей або СОБК. Також можна використовувати консенсусні людські каркасні області, наприклад, описані у патенті США
Мо 6300064.
І44) "Гуманізовані" антитіла, конструкції антитіл, їх варіанти або фрагменти (такі як Ем, Раб,
Еар', К(аб)2 або інші антигензв'язуючі підпослідовності антитіл) являють собою антитіла або імуноглобуліни переважно людських послідовностей, які містять (а) мінімальну (ї) послідовність (ості), отриману (ї) з нелюдського імуноглобуліну. Переважно гуманізовані антитіла є людськими імуноглобулінами (реципієнтне антитіло), в яких залишки з гіперваріабельної області (також
СОР) реципієнта заміщені залишками з гіперваріабельної області нелюдського (наприклад, гризуна) виду (донорське антитіло), такого як миша, щур, хом'як або кролик, які мають необхідну специфічність, афінність і ємність. У деяких випадках залишки Ем каркасної області (ЕК) людського імуноглобуліну заміщено відповідними нелюдськими залишками. Крім того, у контексті цього документу "гуманізовані антитіла" також можуть містити залишки, не властиві ні реципієнтному антитілу, ні донорському антитілу. Ці модифікації проводять для додаткового поліпшення та оптимізації характеристик антитіла. Гуманізоване антитіло також може містити щонайменше частину константної області імуноглобуліну (Ес), як правило, з людського імуноглобуліну. Додаткові деталі дивіться у допез еї аї., Маїшгтє, 321: 522-525 (1986); Веісптапп еї аї., Маїшиге, 332: 323-329 (1988); і Ргезіа, Сигт. Ор. 5ігисі. Віо!., 2: 593-596 (1992).
І45) Гуманізовані антитіла або їх фрагменти можна створювати, заміщаючи послідовності варіабельного домена Ем, які не беруть прямої участі у зв'язуванні антигена, еквівалентними послідовностями з людських варіабельних доменів Ем. Типові способи створення гуманізованих антитіл або їх фрагментів запропоновано у Могїтізоп (1985) Зсіепсе 229:1202-1207; у ОЇ еї аї. (1986) ВіоТесппіднез 4:214; і у 05 5585089; 05 5693761; ШШ5 5693762; 005 5859205; і 005 6407213.
Ці способи включають виділення, обробку та експресію нуклеотидних послідовностей, які
Зо кодують всі або частину варіабельних доменів Ем імуноглобуліну із щонайменше одного з важкого або легкого ланцюга. Такі нуклеїнові кислоти можна отримати з гібридоми, яка виробляє антитіло проти заданої мішені, як описано вище, а також з інших джерел. Потім рекомбінантну ДНК, яка кодує молекулу гуманізованого антитіла, можна клонувати у відповідний експресійний вектор.
І46)| Гуманізовані антитіла також можна отримувати, використовуючи трансгенних тварин, таких як миші, які експресують гени людського важкого та легкого ланцюга, але не здатні експресувати ендогенні гени важкого та легкого ланцюга мишачого імуноглобуліну. М/іпіег описує типовий спосіб прищеплення СОЖК, який можна використовувати для отримання описаних у цьому документі гуманізованих антитіл (патент США Мо 5225539). Усі СОК конкретного людського антитіла можуть бути заміщені щонайменше частиною нелюдської СОК або тільки деякі СОК можуть бути заміщені нелюдськими СОМ. Необхідно лише замінити ту кількість СОЕ, яка потрібна для зв'язування гуманізованого антитіла із заданим антигеном.
І47| Гуманізоване антитіло можна оптимізувати шляхом внесення консервативних замін, замін консенсусної послідовності, замін зародкової лінії і/або зворотних мутацій. Такі змінені молекули імуноглобуліну можна створювати за допомогою будь-якої з декількох методик, відомих у цій галузі техніки (наприклад, Тепод еї аї., Ргос. Маї!. Асай. осі. 0О.5.А., 80: 7308-7312, 1983; Ко?бог вї а!., Іттипоіоаду Тодау, 4: 7279, 1983; ОіІв50оп єї аї!., Мей. Епгутої., 92: 3-16, 1982, і ЕР 239 400).
І48| Термін "людське антитіло", "людська конструкція антитіла" і "людський зв'язуючий домен" включає антитіла, конструкції антитіл і зв'язуючі домени, що мають області антитіла, такі як варіабельні та константні області або домени, які по суті відповідають відомим у цій галузі техніки послідовностям імуноглобуліну людської зародкової лінії включаючи, наприклад, описані у Кабаї еї а). (1991) (Іос. сії.). Людські антитіла, конструкції антитіл або зв'язуючі домени згідно з винаходом можуть містити амінокислотні залишки, які не кодуються послідовностями імуноглобуліну людської зародкової лінії (наприклад, мутації, внесені за допомогою випадкового або сайт-специфічного мутагенезу іп міго або за допомогою соматичної мутації іп мімо), наприклад, у СОР, і, зокрема, у СОКЗ. Людські антитіла, конструкції антитіл або зв'язуючі домени можуть містити щонайменше одну, дві, три, чотири, п'ять або більше позицій, заміщених амінокислотним залишком, який не кодується послідовністю імуноглобуліну людської зародкової бо лінії. При цьому у контексті цього документу визначення людських антитіл, конструкцій антитіл і зв'язуючих доменів також має на увазі "повністю людські антитіла", які містять тільки штучно іабо генетично не змінені людські послідовності антитіл, такі як ті, які можна отримати, використовуючи технології або системи, такі як Хепотоизе. Переважно "повністю людське антитіло" не містить амінокислотних залишків, які не кодуються послідовностями імуноглобуліну людської зародкової лінії.
І49| У деяких варіантах реалізації конструкції антитіл згідно з винаходом є "виділеними" або "по суті чистими" конструкціями антитіл. У разі вживання для опису представлених у цьому документі конструкцій антитіл "виділена" або "по суті чиста" означає конструкцію антитіла, яка була визначена, відокремлена і/або ізольована від компонента середовища, у якому вона виробляється. Переважно конструкція антитіла не зв'язана або по суті не зв'язана з усіма іншими компонентами із середовища, у якому вона виробляється. Домішковими компонентами середовища, у якому відбувається вироблення, такі як залишаються від рекомбінантних трансфікованих клітин, є матеріали, які, як правило, заважають діагностичному або терапевтичному застосуванню поліпептиду, і можуть включати ферменти, гормони та інші білкові або небілкові розчинені речовини. Конструкції антитіл можуть, наприклад, складати щонайменше близько 595 або щонайменше близько 5095 за масою від загального білка у цьому зразку. Зрозуміло, що виділений білок може складати від 595 до 99,995 за масою від загального вмісту білка залежно від обставин. Поліпептид можна отримувати в істотно більшій концентрації за допомогою застосування індуцибельного промотора або промотора високої експресії так, щоб він вироблявся на підвищеному концентраційному рівні. Це визначення включає отримання конструкції антитіла у широкому ряді організмів і/або клітин-хазяїв, які відомі у цій галузі техніки.
У переважних варіантах реалізації винаходу конструкцію антитіла очищують (1) до міри, достатньої для отримання щонайменше 15 залишків М-кінцевої або внутрішньої амінокислотної послідовності, використовуючи секвенатор із стаканом, що обертається, або (2) до гомогенності за ДСН-ПААГ у невідновних або відновних умовах із застосуванням фарбування блакитним кумасі або, переважно, сріблом. При цьому зазвичай конструкцію антитіла отримують за допомогою щонайменше одного етапу очищення.
Ї5ОЇ Термін "зв'язуючий домен" у зв'язку із цим винаходом характеризує домен, який (специфічно) зв'язує/взаємодіє з/розпізнає даний епітоп-мішень або дану ділянку-мішень на
Зо молекулах-мішенях (антигенах), у даному випадку: ВСМА і СОЗ відповідно. Структура та функція першого зв'язуючого домену (що розпізнає ВСМА) і переважно також структура і/або функція другого зв'язуючого домену (що розпізнає СОЗ) грунтовані на структурі і/або функції антитіла, наприклад, повнорозмірної або цілісної молекули імуноглобуліну, і/або отримані з варіабельних доменів важкого ланцюга (МН) і/або варіабельних доменів легкого ланцюга (МІ) антитіла або його фрагмента. Переважно перший зв'язуючий домен характеризується наявністю трьох СОЄ. легкого ланцюга (тобто СОМКІ, СОК2 і СОКЗ Мі -області) і/або трьох СОК важкого ланцюга (тобто СОК1І, СОМ2 ії СОКЗ МН-області). Другий зв'язуючий домен переважно також містить мінімальні структурні вимоги антитіла, які забезпечують зв'язування мішені.
Прийнятніше другий зв'язуючий домен містить щонайменше три СОК легкого ланцюга (тобто
СОМ, СО2 їі СОКЗ Мі області) і/або три СОК важкого ланцюга (тобто СОМКІ, СОК2 і СОКЗ УН- області). Мається на увазі, що перший і/або другий зв'язуючий домен виробляють або отримують методами фагового дисплея або скринінгу бібліотек, а не шляхом прищеплення послідовностей СОК із передіснуючого (моноклонального) антитіла у каркас.
ІЗ1| Відповідно до цього винаходу зв'язуючі домени мають форму одного або більше поліпептидів. Такі поліпептиди можуть містити білкові частини та небілкові частини (наприклад, хімічні лінкери або хімічні перехресно-зшиваючі агенти, такі як глутаральдегід). Білки (включаючи їх фрагменти, переважно біологічно активні фрагменти, і пептиди, що зазвичай мають менше 30 амінокислот) містять дві або більше амінокислоти, сполучені одна з одною ковалентним пептидним зв'язком (що призводить до отримання ланцюга з амінокислот). 52) У контексті цього документу термін "поліпептид" описує групу молекул, яка зазвичай складається із понад 30 амінокислот. Поліпептиди можуть додатково утворювати мультимери, такі як димери, тримери та вищі олігомери, тобто такі, що складаються із понад однієї поліпептидної молекули. Поліпептидні молекули, які утворюють такі димери, тримери і таке інше, можуть бути ідентичними або неідентичними. Відповідні структури вищого порядку таких мультимерів, відповідно, називаються гомо- або гетеродимерами, гомо- або гетеротримерами і таке інше. Прикладом гетеромультимера є молекула антитіла, яка у своїй природній формі складається з двох ідентичних легких поліпептидних ланцюгів і двох ідентичних важких поліпептидних ланцюгів. Терміни "пептид", "поліпептид" і "білок" також відносяться до модифікованих природним чином пептидів/поліпептидів/білків, у яких модифікація зумовлена, 60 наприклад, посттрансляційними модифікаціями, такими як глікозилювання, ацетилювання,
фосфорилювання і таке інше. У контексті цього документу "пептид", "поліпептид" або "білок" також можуть бути хімічно модифікованими, наприклад, пегільованими. Такі модифікації добре відомі у цій галузі техніки та описані нижче у цьому документі.
І53ЗЇ Переважно зв'язуючий домен, який зв'язується з ВСМА, і/або зв'язуючий домен, який зв'язується з СЮОЗЄ, є людськими зв'язуючими доменами. Антитіла та конструкції антитіл, які містять щонайменше один людський зв'язуючий домен, дозволяють уникнути деяких проблем, пов'язаних з антитілами або конструкціями антитіл, які мають нелюдські, наприклад такі, що належать гризуну (наприклад, миші, щуру, хом'яку або кролику), варіабельні і/або константні області. Присутність таких білків з організму гризуна може призводити до швидкого виведення антитіл або конструкцій антитіл або може призводити до генерації імунної відповіді проти антитіла або конструкції антитіла у пацієнта. Щоб уникнути застосування отриманих від гризунів антитіл або конструкцій антитіл, можна створювати людські або повністю людські антитіла/конструкції антитіл шляхом внесення в організм гризуна функції людського антитіла так, щоб у гризуна вироблялися повністю людські антитіла.
І54| Можливість клонувати та відновлювати людські локуси розміром близько мільйона пар основ у УАС і вносити їх у мишачу зародкову лінію забезпечує ефективний підхід для вивчення функціональних компонентів дуже великих або грубо мапованих локусів, а також для створення корисних моделей людських захворювань. Крім того застосування такої технології для заміщення мишачих локусів їх людськими еквівалентами може забезпечити унікальну інформацію про експресію та регулювання людських генних продуктів під час розвитку, їх взаємодію з іншими системами та їх ролі в індукції та прогресуванні захворювань.
ІБ55| Важливим практичним застосуванням такої стратегії є "гуманізація" мишачої гуморальної імунної системи. Внесення локусів людського імуноглобуліну (Ід) в організм мишей, у яких було інактивовано ендогенні гени Ід, забезпечує можливість для вивчення механізмів, що лежать в основі програмованої експресії та складання антитіл, а також їх ролі у розвитку В- клітин. Крім того, така стратегія може забезпечити ідеальне джерело для отримання повністю людських моноклональних антитіл (тАбБ) - ключової точки у напрямку виконання обіцянки створення терапії на основі антитіл для людських захворювань. Очікується, що повністю людські антитіла або конструкції антитіл зведуть до мінімуму імуногенні та алергічні відповіді, властиві мишачим або отриманим від мишей пАБб, і, отже, підвищать ефективність і безпеку антитіл/уконструкцій антитіл, що вводяться. Можна очікувати, що застосування повністю людських антитіл або конструкцій антитіл забезпечить істотну перевагу у лікуванні хронічних і рецидивних людських захворювань, таких як запалення, аутоїмунність і рак, за яких потребуються повторні введення сполук.
І5б| Один підхід у напрямку цієї мети полягав у конструюванні мишачих штамів з дефіцитом вироблення мишачих антитіл з великими фрагментами локусів людського Ід в очікуванні, що такі миші вироблятимуть широкий репертуар людських антитіл у відсутності мишачих антитіл.
Великі фрагменти людського Ід повинні зберігати широку різноманітність варіабельних генів, а також належне регулювання вироблення та експресії антитіла. У разі застосування мишачого апарату для розширення різноманітності та відбору антитіл і відсутності імунологічної толерантності до людських білків, відтворений репертуар людських антитіл у цих мишачих штамах повинен призвести до отримання високоафінних антитіл проти антигена, що представляє інтерес, включаючи людські антигени. Використовуючи технологію гібридоми, можна легко отримувати та проводити відбір антиген-специфічних людських тАб з необхідною специфічністю. Ця загальна стратегія була продемонстрована у зв'язку із створенням перших мишачих штамів ХепоМоизе (дивіться Сгееп еї а). Маїшге Сепеїййс5 7:13-21 (1994)). Були сконструйовані штами ХепоМоизе з дріжджовими штучними хромосомами (ХАС), що містять фрагменти розміром 245 т. п. о. і 190 т. п. о. конфігурації зародкової лінії людського локусу важкого ланцюга та локусу каппа легкого ланцюга відповідно, які містили внутрішні послідовності варіабельної та константної області. МАС, що містять людський Ід, виявилися сумісними з мишачою системою щодо перебудови та експресії антитіл, і були здатні заміщати інактивовані гени мишачого Ід. Це було продемонстровано їх здатністю індукувати розвиток В- клітин, виробляти людський репертуар дорослого типу повністю людських антитіл і генерувати антиген-специфічні людські тАбБ. Ці результати також дозволяють припустити, що внесення великих частин локусів людського Ід, які містять більшу кількість М-генів, додаткових регуляторних елементів і константних областей людського Ід, може відтворювати по суті повний репертуар, характерний для людської гуморальної відповіді на інфекцію та імунізацію. Роботу
Сгееп еї ам. було нещодавно розширено до внесення більш ніж приблизно 8095 людського репертуару антитіл шляхом внесення фрагментів МАС розміром близько мільйона пар основ бо конфігурації зародкової лінії людського локусу важкого ланцюга та локусу каппа легкого ланцюга відповідно. Дивіться Мепае? еї аїЇ. Маїшге Сепеїіс5 15:146-156 (1997) і заявку на патент
США, серійний Мо 08/759620.
І57| Отримання мишей ХепоМоизе додатково обговорюється та описується у заявках на патент США, серійний Мо 07/466008, серійний Мо 07/610515, серійний Мо 07/919 297, серійний Мо 07/922649, серійний Мо 08/031801, серійний Мо 08/112848, серійний Мо 08/234145, серійний Мо 08/376279, серійний Ме 08/430938, серійний Мо 08/464584, серійний Мо 08/464582, серійний Мо 08/463191, серійний Ме 08/462837, серійний Мо 08/486853, серійний Мо 08/486857, серійний Мо 08/486859, серійний Мо 08/462513, серійний Мо 08/724752, і серійний Мо 08/759620; і патентах
США Мо 6162963; 6150584; 6114598; 6075181 і 5,939598, і патентах Японії Мо З 068 180 В2, З 068 506 82 і 3 068 507 В2. Дивіться також Мепае? еї аїЇ. Маїшге Сепеїййсз 15:146-156 (1997) ії Сгееєеп апа ЧаКороміїв У. Ехр. Мед. 188:483-495 (1998), ЕР 0 463 151 ВІ, МО 94/02602, МО 96/34096,
УМО 98/24893, УМО 00/76310 ї УМО 03/47336.
І58| В альтернативному підході інші, включаючи СепРіапт Іпіегпайопаї, Іпс., використовували підхід "мінілокусу". У підході мінілокусу локус екзогенного Ід імітують шляхом включення шматочків (окремих генів) з локусу Ід. Таким чином, один або більше генів УН, один або більше генів ОН, один або більше генів УН, мю константна область і друга константна область (переважно гамма константна область) утворюють конструкцію для вставки в організм тварини. Цей підхід описано у патенті США Мо 5545807 авторства зигапі еї аї. і патентах США Мо 5545806; 5625825; 5625126; 5633425; 5661016; 5770429; 5789650; 5814318; 5877397; 5874299; і 6255458, кожен авторства Гопрегуд і Кау, патентах США Мо 5591669 і 6023010 авторства
Ктгітрепіогі і Вегп5, патентах США Мо 5612205; 5721367; і 5789215 авторства Вегп5 еї аї., |і патенті США Мо 5643763 авторства Спої і Юипп, і заявці на патент США від СепРіагт
Іптептаїййопаї, серійний Мо 07/574748, серійний Мо 07/575962, серійний Мо 07/810279, серійний Мо 07/853408, серійний Ме 07/904068, серійний Мо 07/990860, серійний Мо 08/053131, серійний Мо 08/096762, серійний Ме 08/155301, серійний Мо 08/161739, серійний Мо 08/165699, серійний Мо 08/209741. Також дивіться ЕР 0 546 073 В1, УМО 92/03918, МО 92/22645, МО 92/22647, МО 92/22670, МО 93/12227, УМО 94/00569, УМО 94/25585, УМО 96/14436, УМО 97/13852 і УМО 98/24884 і патент США Мо 5981175. Дивіться також Тауїог еї аІ. (1992), Спеп еї аї. (1993), Тоайоп еї аї. (1993), Спо єї а!. (1993), І опрега єї а!. (1994), Тауїог еї а. (1994) і Тиайоп еї аї. (1995), Рієпм/йа еї а!. (1996).
ІЗ59Ї Кігіп також продемонстрував створення людських антитіл із застосуванням мишей, яким було внесено великі шматки хромосом або цілі хромосоми за допомогою мікроклітинної інфузії.
Дивіться заявки на європейський патент Мо 773 288 і 843 961. Хепегех Віозсіепсе5 розробляють технологію для потенційного створення людських антитіл. У цій технології мишей ВКІД відновлюють за допомогою людських лімфатичних клітин, наприклад, В- і/або Т-клітин. Потім мишей імунізують антигеном і вони можуть генерувати імунну відповідь проти цього антигена.
Дивіться патенти США Мо 5476996; 5698767; і 5958765.
ІБОЇ Відповіді людського антимишачого антитіла (НАМА) привели цю галузь до створення химерних або іншим чином гуманізованих антитіл. При цьому очікується, що спостерігатимуться відповіді деяких людських анти-химерних антитіл (НАСА), зокрема, у разі постійного або багатодозового застосування антитіла. Таким чином, було б бажано забезпечити конструкції антитіл, які містять людський зв'язуючий домен проти ВСМА і людський зв'язуючий домен проти
СО3, щоб спростувати сумніви щодо і/або результати відповідей НАМА або НАСА.
ІЄ!1Ї Терміни "(специфічно) зв'язується 3", "(специфічно) розпізнає", "(специфічно) спрямований на" і "(специфічно) реагує з" означають відповідно до цього винаходу, що зв'язуючий домен взаємодіє або специфічно взаємодіє з даним епітопом або даною ділянкою- мішенню на молекулах-мішенях (антигенах), у даному випадку: ВСМА і СОЗе відповідно.
І62| Термін "епітоп" відноситься до ділянки на антигені, з якою специфічно зв'язується зв'язуючий домен, такий як антитіло або імуноглобулін, або похідне, фрагмент або варіант антитіла або імуноглобуліну. "Епітоп" є антигенним і, отже, у цьому документі термін епітоп іноді називається "антигенною структурою" або "антигенною детермінантою". Таким чином, зв'язуючий домен є "ділянкою взаємодії з антигеном". Також мається на увазі, що вказане зв'язування/взаємодія визначає "специфічне розпізнавання".
ІЄЗ| "Епітопи" можуть утворюватися як суміжними амінокислотами, так і не суміжними амінокислотами, розташованими поруч у результаті згортання білка у третинну структуру. "Лінійний епітоп" являє собою епітоп, у якому первинна амінокислотна послідовність містить розпізнаваний епітоп. Лінійний епітоп, як правило, містить щонайменше З або щонайменше 4, і частіше щонайменше 5 або щонайменше 6, або щонайменше 7, наприклад, від близько 8 до близько 10 амінокислот в унікальній послідовності. бо І64) "Конформаційний епітоп", на противагу лінійному епітопу, являє собою епітоп, у якому первинна послідовність амінокислот, що складають епітоп, не є єдиним визначальним компонентом розпізнаваного епітопа (наприклад, епітоп, у якому первинна послідовність амінокислот не обов'язково розпізнається зв'язуючим доменом). Як правило, конформаційний епітоп містить більшу кількість амінокислот у порівнянні з лінійним епітопом. Щодо розпізнавання конформаційних епітопів зв'язуючий домен розпізнає тривимірну структуру антигена, переважно пептид або білок або його фрагмент (у контексті цього винаходу антигенна структура для одного із зв'язуючих доменів міститься у рамках цільового білка антигена клітинної поверхні). Наприклад, коли молекула білка згортається з утворенням тривимірної структури, певні амінокислоти і/або поліпептидний скелет, які утворюють конформаційний епітоп, виявляються розташовані поруч, що робить можливим розпізнавання епітопа антитілом.
Способи визначення конформації епітопів включають, але не обмежуються цим, рентгеноструктурну кристалографію, спектроскопію на основі двомірного ядерного магнітного резонансу (20-ЯМР) і спектроскопію на основі сайт-спрямованих спінових міток і електронного парамагнітного резонансу (ЕПР).
І65| Спосіб мапування епітопів описаний наступним чином: Коли область (безперервна ділянка амінокислот) у людському білюу ВСМА замінюють/заміщують відповідною областю
ВСМА, яка не належить людині та примату (наприклад, мишачого ВСМА, хоча допускаються також і інші, такі як курячі, щурячі, хом'ячі, кролячі і таке інше), очікується, що станеться зниження у зв'язуванні зв'язуючого домену, якщо зв'язуючий домен не є таким, що перехресно реагує щодо вживаного ВСМА, який не належить людині та примату. Зазначене зниження переважно складає щонайменше 1095, 2095, 3095, 4095 або 5095; прийнятніше щонайменше 6095, 7095 або 8095, і найприйнятніше 9095, 9595 або навіть 10095 у порівнянні із зв'язуванням з відповідною областю у людському білку ВСМА, причому зв'язування з відповідним людським білком ВСМА встановлюється як 10095. Мається на увазі, що вищезазначені химерні структури людський ВСМА/нелюдський ВСМА експресуються у клітинах СНО. Також мається на увазі, що химерні структури людський ВСМА/нелюдський ВСМА злиті з трансмембранним доменом і/або цитоплазматичним доменом відмінного мембранозв'язаного білка, такого як ЕРСАМ.
І66| В альтернативному або додатковому способі мапування епітопів можна створювати декілька усічених версій позаклітинного домену людського ВСМА, щоб визначити конкретну
Зо область, яка розпізнається зв'язуючим доменом. У цих усічених версіях поетапно вилучають різні позаклітинні домени/субдомени або області ВСМА, починаючи з М-кінця. Мається на увазі, що усічені версії ВСМА можна експресувати у клітинах СНО. Також мається на увазі, що усічені версії ВСМА можна зливати з трансмембранним доменом і/або цитоплазматичним доменом відмінного мембранозв'язаного білка, такого як ЕРСАМ. Також мається на увазі, що усічені версії ВСМА можуть включати домен сигнального пептиду в М-кінці, наприклад, сигнальний пептид, отриманий з сигнального пептиду важкого ланцюга мишачого ідо. Додатково мається на увазі, що усічені версії ВСМА можуть включати домен м5 у М-кінці (після сигнального пептиду), який дозволяє підтвердити їх правильну експресію на клітинній поверхні. Очікується, що зниження або припинення зв'язування спостерігатиметься для тих усічених версій ВСМА, які більше не включають область ВСМА, розпізнавану зв'язуючим доменом. Зниження зв'язування переважно складає щонайменше 1095, 2095, 3095, 4095, 5090; прийнятніше щонайменше 60965, 7095, 8095, і найприйнятніше 9095, 9595 або навіть 10095, причому зв'язування з повним людським білком ВСМА (або його позаклітинною областю або доменом) встановлюється як 100.
І67| Додатковим способом визначення вкладу конкретного залишку ВСМА у розпізнавання конструкцією антитіла або зв'язуючим доменом є аланін-скануючий мутагенез (дивіться, наприклад, Могтізоп КІ 8 МУеіз5 (ЗА. Сиг Оріп Спет Віої. 2001 дип;5(3):302-7), у якому кожен призначений для аналізу залишок заміщають аланіном, наприклад, за допомогою сайт- спрямованого мутагенезу. Аланін використовують через його необ'ємну, хімічно інертну, метильну функціональну групу, яка при цьому імітує вторинну структуру, яку мають багато інших амінокислот. Іноді можна використовувати об'ємні амінокислоти, такі як валін або ізолейцин, у випадках, коли потрібне збереження розміру мутованого залишку. Аланінове сканування є перевіреною технологією, яку використовують вже довгий час. 68) Взаємодія між зв'язуючим доменом і епітопом або областю, яка містить епітоп, означає, що зв'язуючий домен демонструє прийнятну афінність щодо епітопа/області, яка містить епітоп, у конкретному білку або антигені (у даному випадку: ВСМА і СОЗ відповідно) і, загалом, не демонструє істотної реактивності з білками або антигенами, відмінними від ВСМА або СО3. "Прийнятна афінність" включає зв'язування з афінністю близько 10-6 М (КД) або вище.
Переважно зв'язування вважається специфічним, коли афінність зв'язування складає від близько 10-12 до 10-8 М, від 10-12 до 10-9 М, від 10-12 до 10-10 М, від 10-11 до 10-8 М, бо переважно від близько 10-11 до 10-9 М. Чи вступає специфічно зв'язуючий домен у реакцію або чи зв'язується з мішенню, можна легко перевірити, окрім іншого, порівнюючи реакцію вказаного зв'язуючого домену з цільовим білком або антигеном з реакцією вказаного зв'язуючого домену з білками або антигенами, відмінними від ВСМА або СО3. Переважно зв'язуючий домен згідно з винаходом практично або по суті не зв'язується з білками або антигенами, відмінними від ВСМА або СОЗ (тобто перший зв'язуючий домен не здатний зв'язуватися з білками, відмінними від
ВСМА, а другий зв'язуючий домен не здатний зв'язуватися з білками, відмінними від СОЗ).
Припустимою характеристикою конструкцій антитіл відповідно до цього винаходу є те, що вони мають перевершуючі характеристики афінності у порівнянні з іншими НІ Е-форматами. Отже, така перевершуюча афінність передбачає подовжений час напівжиття іп мімо. Більший час напівжиття конструкцій антитіл відповідно до цього винаходу може зменшити тривалість і частоту введення, що, як правило, впливає на поліпшення дотримання пацієнтом режиму лікування. Це є виключно важливим, оскільки конструкції антитіл згідно з цим винаходом є виключно корисними для сильно ослаблених або навіть поліморбідних ракових пацієнтів.
ІБ9| Термін "практично/по суті не зв'язує" або "не здатний зв'язуватися" означає, що зв'язуючий домен згідно з цим винаходом не зв'язує білок або антиген, відмінний від ВСМА або
СО3, тобто не демонструє реактивність більше 3095, переважно не більше 2095, прийнятніше не більше 1095, зокрема, переважно не більше 995, 8905, 795, б9о або 595 з білками або антигенами, відмінними від ВСМА або СОЗ, причому зв'язування з ВСМА або СОЗ відповідно встановлено як 10095. (Ї/О| Вважається, що на специфічне зв'язування впливають конкретні мотиви в амінокислотній послідовності зв'язуючого домену та антигена. Таким чином, зв'язування досягається у результаті їх первинної, вторинної і/або третинної структури, а також у результаті вторинних модифікацій вказаних структур. Специфічна взаємодія ділянки взаємодії з антигеном з його специфічним антигеном може призводити до простого зв'язування вказаної ділянки з антигеном. Більше того, специфічна взаємодія ділянки взаємодії з антигеном з його специфічним антигеном може в альтернативному або додатковому варіанті призводити до ініціації сигналу, наприклад, внаслідок індукції зміни конформації антигена, олігомеризації антигена і таке інше.
Г/11) Термін "варіабельний" відноситься до частин доменів антитіла або імуноглобуліну, які
Зо демонструють варіабельність у послідовності та які залучені у визначення специфічності та афінності зв'язування конкретного антитіла (тобто "варіабельний (ї) домен (и)"). Спаровування разом варіабельного важкого ланцюга (УН) і варіабельного легкого ланцюга (МІ) призводить до утворення однієї антигензв'язуючої ділянки.
І/21) Варіабельність нерівномірно розподілена між варіабельними доменами антитіл; вона сконцентрована у субдоменах кожної з варіабельних областей важкого та легкого ланцюга. Ці субдомени називаються "гіперваріабельними областями" або "областями, що визначають комплементарність" (СОК). Консервативніші (тобто не гіперваріабельні) частини варіабельних доменів називаються "каркасними" областями (ЕКМ або ЕЕ) і забезпечують каркас для шести
СОК у тривимірному просторі з утворенням антигензв'язуючої поверхні. Кожен з варіабельних доменів важкого та легкого ланцюгів природного походження містить чотири ЕКМ-області (ЕК1,
ЕК2, ЕКЗ ї ЕК4), які приймають переважно р-складчасту конфігурацію, сполучені трьома гіперваріабельними областями, які утворюють петлі, що сполучають, і в деяких випадках утворюють частину ДВ-складчастої структури. Гіперваріабельні області у кожному ланцюзі утримуються разом у безпосередній близькості ЕКМ і разом з гіперваріабельними областями з іншого ланцюга вносять свій вклад в утворення антигензв'язуючої ділянки (дивіться КаБбаї еї аї.,
Іос. сії.).
Ї73| Терміни "СОМ" ії форма множини "СОМ" відносяться до областей, що визначають комплементарність, із яких три зумовлюють характер зв'язування варіабельної області легкого ланцюга (СОБК-І1, СОВ-І2 ії СОК-І3) і три зумовлюють характер зв'язування варіабельної області важкого ланцюга (СОБК-НІ, СОВ-Н2 і СОБ-НЗ). СО містять більшість залишків, які відповідають за специфічну взаємодію антитіла з антигеном і, отже, вносять свій вклад у функціональну активність молекули антитіла: вони є основними детермінантами специфічності до антигена.
Ї74| Точне визначення меж і розмірів СОК є предметом різних класифікацій і систем нумерації. Отже, СОК можуть бути позначені відповідно до визначень Кабаї, Сппоїпйіа, контактних або будь-яких інших визначень меж, включаючи описану у цьому документі систему нумерації. Незважаючи на межі, що відрізняються, кожна з цих систем має деяку міру перекриття у тому, що складає так звані "гіперваріабельні області" у межах варіабельних послідовностей. Отже, визначення СОК відповідно до цих систем можуть відрізнятися за 60 довжиною та граничними ділянкам по відношенню до прилеглої каркасної області. Дивіться,
наприклад, Кабаї (підхід на підставі міжвидової варіабельності послідовностей), Споїйіа (підхід на підставі кристалографічних досліджень комплексів антиген-антитіло), і/або МасСаїїшт (Кабаї єї аї., Іос. сії.; Споїніа єї аї., 9. Мої. Віої, 1987, 196: 901-917; і МасСаїшт еї аї., У. Мої. Віої, 1996, 262: 732). Ще одним стандартом для характеристики антигензв'язуючої ділянки є визначення
АРМ, застосовне у програмному забезпеченні для моделювання антитіл ОхТога МоіІесшаг5 АВМ.
Дивіться, наприклад, Ргоївіп Зедиепсе апа 5ігисіиге Апаїузіз ої Апіїбоду Магіаріе ботаїпв5. В:
Апіїбоду Епдіпеетгіпа Га; Мапиаї (Ед.: Оцебеї, 5. апа Копієттапп, В., 2ргіпдег-Мепйад, НеїдеїІрега).
У випадку якщо дві методики ідентифікації залишків визначають залишки областей, що перекриваються, але не є ідентичними, їх можна комбінувати для визначення гібридної СОМ.
При цьому переважною є нумерація відповідно до так званої системи КаБбаї.
Ї75| Як правило, СОК утворюють петлеву структуру, яка може бути класифікована як канонічна структура. Термін "канонічна структура" відноситься до основної конформації ланцюга, яку приймають антигензв'язуючі (СОМ) петлі. За результатами порівняльних структурних досліджень було виявлено, що п'ять із шести антигензв'язуючих петель мають тільки обмежений набір доступних конформацій. Кожну канонічну структуру можна охарактеризувати за кутом кручення поліпептидного скелета. Отже, відповідні петлі серед антитіл можуть мати дуже схожі тривимірні структури, незважаючи на високу амінокислотну варіабельність у більшості частин петель (Споїйіа апа І е5К, 9. Мої. Вісо!., 1987, 196: 901; Споїпіа еї аї., Майшге, 1989, 342: 877; Мапіп апа Тпогпіоп, 9. Мої. Віої, 1996, 263: 800). Крім того, існує взаємозв'язок між структурою, яка приймається петлею, і амінокислотними послідовностями, що її оточують. Конформація конкретного канонічного класу визначається довжиною петлі та амінокислотними залишками, які знаходяться у ключових позиціях у межах петель, а також у межах консервативної каркасної області (тобто за межами петлі). Віднесення до конкретного канонічного класу, отже, можна проводити на підставі присутності цих ключових амінокислотних залишків.
І/6Ї Термін "канонічна структура" також може включати фактори, пов'язані з лінійною послідовністю антитіла, наприклад, каталогізовані Кабаї (Кабаї еї аї., Іос. сії). Схема (система) нумерації Кара! є широко поширеним стандартом нумерації амінокислотних залишків варіабельного домену антитіла послідовним чином і є переважною схемою, вживаною у цьому
Зо винаході, що також згадується у іншому місці цього документу. Для визначення канонічної структури антитіла також можна використовувати додаткові структурні фактори. Наприклад, ті відмінності, які не повністю відображені у нумерації Караї, можна описати за допомогою системи нумерації СПпоїпіа еї а). (або виявити за допомогою інших методик, наприклад, кристалографії та дво- або тривимірного комп'ютерного моделювання. Відповідно, задану послідовність антитіла можна віднести до канонічного класу, що дозволяє, окрім іншого, ідентифікувати відповідні шасі-послідовності (наприклад, на підставі необхідності включати різноманітні канонічні структури у бібліотеку). Нумерація амінокислотних послідовностей антитіл за Кабаї і структурні фактори, описані Споїйпіа еї аї., Іос. сії., і їх значення для конструювання канонічних аспектів структури антитіла описані у літературі. Субодиничні структури та тривимірні конфігурації різних класів імуноглобулінів добре відомі у цій галузі техніки. Огляд структури антитіл можна подивитися у Апііродіез: А І абогаїогу Мапиа!ї, Со 5ргіпд Нагрог
І арогаїйогу, єд5. Напоуу єї а!., 1988.
Ї7/7| СОКЗ легкого ланцюга та особливо СОКЗ важкого ланцюга можуть складати найбільш важливі детермінанти у зв'язуванні антигена у межах варіабельних областей легкого та важкого ланцюга. У деяких конструкціях антитіл СОКЗ важкого ланцюга складає основну площу контакту між антигеном і антитілом. п мйго схеми відбору, в яких варіюється тільки СОКЗ, можна використовувати, щоб варіювати зв'язуючі властивості антитіла або щоб визначити, які залишки вносять вклад у зв'язування антигена. Отже, СОКЗ, як правило, є найбільшим джерелом молекулярної різноманітності у межах зв'язуючої ділянки антитіла. Наприклад, НЗ3 може мати довжину всього у два амінокислотні залишки або більше 26 амінокислот.
Ї/8| У класичному повнорозмірному імуноглобуліні кожен легкий (Г) ланцюг зв'язаний з важким (Н) одним ковалентним дисульфідним зв'язком, тоді як два Н-ланцюги зв'язані один з одним одним або більше дисульфідними зв'язками залежно від ізотипу Н-ланцюга. Домен СН, розташований найближче до МН, зазвичай позначається як СНІ. Константні ("С") домени безпосередньо не залучені у зв'язування антигена, але проявляють різні ефекторні функції, такі як антитілозалежна клітинноопосередкована цитотоксичність і активація комплементу. Ес- область антитіла знаходиться у межах константних доменів важкого ланцюга і, наприклад, здатна взаємодіяти з розташованими на поверхні Ес-рецепторами.
ІЇ79| Послідовність генів антитіла після збирання та соматичної мутації сильно варіюється та бо за оцінками ці гени, що варіюють, кодують 1010 різних молекул антитіл (Іттиподіобиїйп Сепев,
2па єй., ед5. допіо еї а!І., Асадетіс Ргез55, Зап Оіедо, СА, 1995). Відповідно, імунна система забезпечує деякий репертуар імуноглобулінів. Термін "репертуар" відноситься до щонайменше однієї нуклеотидної послідовності, цілююм або частково отриманої з щонайменше однієї послідовності, яка кодує щонайменше один імуноглобулін. Послідовність (ості) можна отримувати шляхом перебудови іп мімо М, О і ) сегментів важких ланцюгів і М і У сегментів легких ланцюгів. В альтернативному варіанті послідовність (ості) можна отримувати з клітини у відповідь на яку відбувається перебудова, наприклад, іп міго стимуляція. В альтернативному варіанті частину або всю (всі) послідовність (ості) можна отримувати за допомогою сплайсингу
ДНК, синтезу нуклеотидів, мутагенезу та інших способів, дивіться, наприклад, патент США 5565332. Репертуар може включати тільки одну послідовність або може включати безліч послідовностей, включаючи ті, що знаходяться у генетично різноманітній колекції.
ІВФОЇ У зв'язку з цим винаходом термін "Рсо-частина" або "Ес-мономер" означає поліпептид, який містить щонайменше один домен, що має функцію домену СН2, і щонайменше один домен, що має функцію домену СНЗ молекули імуноглобуліну. Як очевидно з терміну "Ес- мономер", поліпептид, який містить ці домени СН, є "поліпептидним мономером". Ес-мономер може являти собою поліпептид, який містить щонайменше фрагмент константної області імуноглобуліну за винятком першого домену константної області важкого ланцюга імуноглобуліну (СНІ), але який зберігає щонайменше функціональну частину одного домену
СНІ ї функціональну частину одного домену СНЗ, причому домен СНаІ2 є аміно-кінцневим щодо до домену СНЗ. У переважному аспекті цього визначення Ес-мономер може являти собою поліпептидну константну область, яка містить частину шарнірної області ІдД-Ес, область СН2 і область СНЗ, причому шарнірна область є аміно-кінневою щодо до домену СН2. Мається на увазі, що шарнірна область згідно з цим винаходом стимулює димеризацію. Такі молекули Ес- поліпептидів можна отримувати, наприклад і без обмеження, шляхом розщеплювання папаїном області імуноглобуліну (що, звичайно, призводить до отримання димера з двох Ес- поліпептидів). В іншому аспекті цього визначення Ес-мономер може являти собою поліпептидну область, яка містить частину області СН2 і області СНЗ. Такі молекули Ес-поліпептидів можна отримувати, наприклад і без обмеження, шляхом розщеплювання пепсином молекули імуноглобуліну. В одному варіанті реалізації винаходу поліпептидна послідовність Ес-мономеру
Зо по суті аналогічна послідовності Ес-поліпептиду: Ес-області ЇДО1, Есо-області Ідс2, Ес-області
Ід23, Ес-області Ід04, Ес-області ІМ, Ес-області ІДА, Ес-області ІдО і Ес-області ІДЕ. (Дивіться, наприклад, Радіап, МоїІесшаг Іттипоіоду, 31(3), 169-217 (1993)). Внаслідок наявності деякої варіації між імуноглобулінами та виключно для ясності Ес-мономер відноситься до останніх двох доменів константної області важкого ланцюга імуноглобуліну ІдА, ІдО і до ії останніх трьох доменів константної області важкого ланцюга імуноглобуліну ІДЕ і (ДМ. Як згадувалося, Ес- мономер також може містити гнучку шарнірну область, розташовану М-термінально до цих доменів. У випадку ІА і (ЯМ Ес-мономер може містити У-ланцюг. У випадку дО Ес-частина містить домени імуноглобуліну СН2 їі СНЗ їі шарнірну область між першими двома доменами і
СнН2г. Хоча межі Ес-частини можуть варіюватися, приклад Ес-ч-астини важкого ланцюга людського ІДС, яка містить функціональну шарнірну область, домен СН? і СНЗ, може, наприклад, за визначенням містити залишки від 0231 (шарнірного домену, який відповідає 0234 у Таблиці 1, нижче) до Р476, відповідно 1476 (у випадку Ідс4) карбокси-кінця домену СНЗ, де нумерація наведена відповідно до Кабраї. Дві Ес-частини або два Есо-мономери, злиті один з одним за допомогою пептидного лінкера, визначають третій домен конструкції антитіла згідно з винаходом, який також може бути визначений як домен 5сЕс.
ІВ1) В одному варіанті реалізації винаходу мається на увазі, що описаний у цьому документі домен 5сЕс, відповідно Ес-мономери, злиті один з одним, знаходяться тільки у третьому домені конструкції антитіла.
Відповідно до цього винаходу шарнірну область ІдС можна визначити аналогічно, використовуючи нумерацію Кабраї, як показано у Таблиці 1. Відповідно до вищесказаного мається на увазі, що шарнірний домен/шарнірна область згідно з цим винаходом містить амінокислотні залишки, які відповідають ділянці послідовності Ід від 0234 до Р243 відповідно до нумерації Кабваї. Аналогічно, мається на увазі, що шарнірний домен/шарнірна область згідно з цим винаходом містить або складається з шарнірної послідовності (3931 ОКТНТСРРСР (5ЕО
ІО МО: 99) (яка відповідає ділянці від 0234 до Р243, як показано у Таблиці 1, нижче, - також маються на увазі варіації зазначеної послідовності, за умови, що шарнірна область продовжує стимулювати димеризацію). У переважному варіанті реалізації винаходу ділянку глікозилювання у позиції 314 за Караї доменів СН2 у третьому домені конструкції антитіла вилучено за допомогою заміни М314Х, де Х є будь-якою амінокислотою за винятком 0). Зазначена заміна бо переважно являє собою заміну М3140. У прийнятнішому варіанті реалізації винаходу зазначений домен СНІ додатково містить наступні заміни (позиції відповідно до Кара): М321сС і
КЗО9С (ці заміни вносять внутрішньодоменний цистеїновий дисульфідний місток у позиціях 309 і 321 за Кара). 821 Також мається на увазі, що третій домен конструкції антитіла згідно з винаходом містить або складається з, у порядку від аміно-кінця до карбокси-кінця: ОКТНТСРРСР (5ЕО ІО МО: 99) (тобто шарнірна область)-СН2-СНЗ-лінксер-ОКТНТСОРРСР (5ЕО ІО МО: 99) (тобто шарнірна область)-СН2-СНЗ. Пептидний лінкер у вищезгаданій конструкції антитіла у переважному варіанті реалізації характеризується амінокислотною послідовністю (зІу-спту-Ссіу-сіу-5ег, тобто
СіІу45ег (ЗЕО ІО МО: 1), або її полімерами, тобто (сіу45ег)х, де х є цілим числом, рівним 5 або більше (наприклад, 5, 6, 7, 8 і таке інше або більше), причому переважним варіантом є 6 (Сіу45ег)б). Вказана конструкція може додатково містити вищезазначені заміни М314Х, переважно М3140, і/або додаткові заміни М321С і К309С. У переважному варіанті реалізації конструкцій антитіл згідно з винаходом, визначених раніше, мається на увазі, що другий домен зв'язується з позаклітинним епітопом ланцюга СОЗе людини і/або Масаса.
Таблиця 1
Нумерація амінокислотних залишків шарнірної області за Кабаї області 11111111 61111111161111111111711111111111112341 в11Гт111111111111111236ссСс21
ОО 81Гн1111г1111г3сс1 22111111 17111111 20ссИс2с2 81111111 11111111 гсИс2с 51111111
У додаткових варіантах реалізації цього винаходу шарнірний домен/шарнірна область містить або складається з шарнірної послідовності підтипу (9052 ЕККССМЕСРРОСР (5ЕО ІО МО: 100), послідовності підтипу ідсСЗ ЕЇ!КТРІЮТТНТСРКСР (5ЕБО ОО МО: 101); або
ЕКТРІСОТТНТСРЕСР (5ЕО ІО МО: 103) і/або послідовності підтипу (904 ЕЗБКУСРРСРБСР (ЗЕБЕО 10 МО: 102). Шарнірна послідовність підтипу /|дс51 може бути наступною:
ЕРКЗСОКТНТСРРСР (як показано у Таблиці 1 і 5ЕО ІЮ МО: 104). Таким чином, ці основні шарнірні області також маються на увазі у контексті цього винаходу.
ІЗЗЇ Положення та послідовність домену СН2 ІдС і домену СОЗ дО можна визначити аналогічно, використовуючи нумерацію Кабаї, як показано у Таблиці 2:
Таблиця 2
Нумерація амінокислотних залишків області СН2 ії СНЗ дО за Кабаї
Підтипідб ак трансляція СН2 Пумерядя Со За ак трансляція СНЗ Нумерація СНУ за
ІДС АРЕ... ...КАК 244... ...360 СОР.....-РОК 361... ...478
ІС» АРР... ...КТК 244... ...360 СОР.....-РОК 361... ...478
ІЧСз АРЕ... ...КТК 244... ...360 СОР.....-РОК 361... ...478 да АРЕ... ...КАК 244... ...360 вОР.....1Г ак 361... ...478
І8З4) В одному варіанті реалізації винаходу виділені жирним амінокислотні залишки у домені
СНЗ першого або обох Ес-мономерів вилучено.
85) Пептидний лінкер, за допомогою якого поліпептидні мономери ("Рс-частина" або "Ес- мономер") третього домену злиті один з одним, переважно містить щонайменше 25 амінокислотних залишків (25, 26, 27, 28, 29, 30 і таке інше). Прийнятніше цей пептидний лінкер містить щонайменше 30 амінокислотних залишків (30, 31, 32, 33, 34, 35 і таке інше). Також переважно, щоб лінкер містив до 40 амінокислотних залишків, прийнятніше до 35 амінокислотних залишків, найприйнятніше точно 30 амінокислотних залишків. У переважному варіанті реалізації такий пептидний лінкер характеризується амінокислотною послідовністю сїу-
Спу-СТІу-Спіу-Зег, тобто сіІу45ег (ЗЕО ІЮ МО: 1), або її полімерами, тобто (сіу45ег)х, де х є цілим числом, рівним 5 або більше (наприклад, 6, 7 або 8). Переважно ціле число дорівнює 6 або 7, прийнятніше ціле число дорівнює 6.
ІЗ6) У випадку, якщо лінкер використовується для злиття першого домену з другим доменом або першого або другого домену з третім доменом, цей лінкер переважно має довжину та послідовність, достатню, щоб гарантувати, що кожен з першого та другого доменів може незалежно від іншого зберігати свою специфічність диференціального зв'язування. У випадку пептидних лінкерів, які сполучають щонайменше два зв'язуючі домени (або два варіабельні домени) у конструкції антитіла згідно з винаходом, переважними є пептидні лінкери, які містять всього декілька амінокислотних залишків, наприклад, 12 амінокислотних залишків. Таким чином, переважними є пептидні лінкери з 12, 11, 10, 9, 8, 7, б або 5 амінокислотних залишків.
Пептидний лінкер, що мається на увазі, з менш ніж 5 амінокислотами містить 4, 3, 2 або одну амінокислоту, причому переважними є Сіу-багаті лінксери. Переважний варіант реалізації пептидного лінкера для злиття першого та другого домену наведено у ЗЕБЕО ІЮ МО: 1.
Переважний варіант реалізації пептидного лінкера для злиття другого та третього домену являє собою (Сіу) 4-лінкер, який також називають с4-лінкером.
І87| Особливо переважною "єдиною" амінокислотою у контексті вищеописаного "пептидного лінкера" є Су. Відповідно, вказаний пептидний лінкер може складатися з єдиної амінокислоти
Су. У переважному варіанті реалізації винаходу такий пептидний лінкер характеризується амінокислотною послідовністю (зІу-спіу-сСІу-Ссіу-5ег, тобто Сіу4єбЗег (ЗЕБЕО ІЮО МО: 1), або її полімерами, тобто (СіІу45егх, де х є цілим числом, рівним 1 або більше (наприклад, 2 або 3).
Переважні лінкери наведено у 5ЕО ІО МО: від 1 до 12. Характеристики вказаного пептидного
Зо лінкера, які включають відсутність стимуляції утворення вторинних структур, відомі у цій галузі техніки та описані, наприклад, у БаІгАсдца еї аї. (Віоспет. (1998) 37, 9266-9273), Спеадіє еї аї. (Мої Іттипої! (1992) 29, 21-30) і Каад апа М/пйШоу" (ЕАБЕВ (1995) 9(1), 73-80). Переважними є пептидні лінкери, які, окрім іншого, не стимулюють утворення будь-яких вторинних структур.
Зв'язок вказаних доменів один з одним можна забезпечити, наприклад, за допомогою генетичної інженерії, як описано у прикладах. Способи отримання злитих і функціонально зв'язаних біспецифічних одноланцюгових конструкцій та їх експресії у клітинах ссавців або бактеріях добре відомі у цій галузі техніки (наприклад, М/УО 99/54440 або батьгоок еї аї.,
Моїіесшіаг Сіопіпа: А І арогаїюгу Мапиаї, Соїа бргіпд Натог І абогаюгу Ргезз, Соїй 5ргіпд Нагог,
Мем Могк, 2001). 88) У переважному варіанті реалізації конструкції антитіла згідно з цим винаходом перший і другий домен утворюють конструкцію антитіла у форматі, вибраному з групи, що складається з (5сЕм)2, зсгм-однодоменного ІттптАБ, діатіла та олігомерів будь-якого з цих форматів.
ІЗ9|Ї Відповідно до особливо переважного варіанту реалізації винаходу і як описано у прикладах, що додаються, перший та другий домени конструкції антитіла згідно з винаходом являють собою "біспецифічну одноланцюгову конструкцію антитіла", прийнятніше біспецифічний "одноланцюговий Ру" (5сЕм). Хоча два домени Ем-фрагмента, МІ. і МН, кодуються окремими генами, їх можна з'єднати, використовуючи рекомбінантні способи, синтетичним лінкером, - як було раніше описано у цьому документі, - який забезпечує можливість їх отримання у вигляді одного білкового ланцюга, в якому області МІ. ї МН спарені з утворенням моновалентної молекули; дивіться, наприклад, Нивіоп еї аІ. (1988) Ргос. Май. Асад. сі ОБА 85:5879-5883). Ці фрагменти антитіл отримують, використовуючи традиційні методики, відомі фахівцям у цій галузі техніки, та оцінюють фрагменти щодо функції так само, що й повнорозмірні антитіла. Отже, одноланцюговий варіабельний фрагмент (5сЕм) являє собою злитий білок варіабельної області важкого ланцюга (МН) і легкого ланцюга (МІ) імуноглобулінів, зазвичай сполучених коротким лінкерним пептидом завдовжки від близько десяти до близько 25 амінокислот, переважно від близько 15 до 20 амінокислот. Зазвичай лінкер насичений гліцином для гнучкості, а також серином або треоніном для розчинності та може сполучати М-кінець МН з
С-кінцем МІ, або навпаки. Цей білок зберігає специфічність оригінального імуноглобуліну, незважаючи на вилучення константних областей та внесення лінкера. бо ІЗ2ОЇ Біспецифічні одноланцюгові конструкції антитіл відомі у цій галузі техніки та описані у
МО 99/54440, Маск, 9. Іттипої. (1997), 158, 3965-3970, Маск, РМА5, (1995), 92, 7021-7025,
Киїег, Сапсег Іттипої. ІттипоїНег., (1997), 45, 193-197, | бтег, Віосод, (2000), 95, 6, 2098-2103,
Вгапі, Іттипої., (2001), 166, 2420-2426, Кірпуапом, 9. Мої. Віо!., (1999), 293, 41-56. Методики для отримання одноланцюгових антитіл (дивіться, окрім іншого, патент США 4946778, Копіеппапп апа Ойре! (2010), ос. сій. і (Ше (2009), ос. сій) можна адаптувати для отримання одноланцюгових конструкцій антитіл, які специфічно розпізнають вибрану (ї) мішень (Її).
І91| Бівалентні (які також називаються дивалентними) або біспецифічні одноланцюгові варіабельні фрагменти (рі-5сЕм або ді-5єсЕм, що мають формат (5сЕм)2 можна сконструювати шляхом зв'язування двох молекул 5сЕм (наприклад, лінкерами, як було описано раніше). Якщо ці дві молекули зсЕм мають однакову специфічність зв'язування, отримувана у результаті молекула (5сЕм)2 переважно буде називатися бівалентною (тобто вона має дві валентності щодо одного епітопа-мішені). Якщо дві молекули зсЕм мають різну специфічність зв'язування, отримувана у результаті молекула (5сЕм)2 переважно буде називатися біспецифічною.
Зв'язування можна здійснювати шляхом отримання одного пептидного ланцюга з двома областями УН і двома областями Мі, що призводить до отримання тандемних 5сЕм (дивіться, наприклад, Китег Р. еї аї., (2004) Тгепа5 іп ВіоїесппоЇоду 22(5):238-244). ІНШОЮ можливістю Є створення молекул 5сЕм з лінкерними пептидами, які є занадто короткими для того, щоб утримувати разом дві варіабельні області (наприклад, близько п'яти амінокислот), що змушує 5сЕм до димеризації. Цей тип відомий як діатіла (дивіться, наприклад, НоїІйпдег, РПйїрр еї аї., (ушу 1993) Ргосеєдіпд5 ої Ше Маїйопа! Асадету ої Зсієпсев ої Ше Опійей 5іагез5 ої Атегіса 90 (14): 6444-8).
І92| Відповідно до цього винаходу будь-який із першого, другого або перший та другий домени можуть складати однодоменне антитіло, відповідно варіабельний домен або щонайменше частину СОК однодоменного антитіла. Однодоменні антитіла містять тільки один (мономірний) варіабельний домен антитіла, який здатний вибірково зв'язуватися з конкретним антигеном, незалежно від інших М-областей або доменів. Перші однодоменні антитіла були сконструйовані з антитіл, що містять тільки важкі ланцюги, які можна виявити у верблюжих, і називаються МНН-фрагментами. Хрящові риби також мають антитіла, що містять тільки важкі ланцюги (МАК), з яких можна отримувати однодоменні антитіла, які називаються ММАК-
Зо фрагментами. Альтернативний підхід полягає у розбитті димерних варіабельних доменів із звичайних імуноглобулінів, які, наприклад, належать людині або гризуну, на мономери, отримуючи, таким чином, МН або Мі у вигляді однодоменного АБ. Хоча на даний момент більшість досліджень щодо однодоменних антитіл базуються на варіабельних доменах важкого ланцюга, також було показано, що нанотіла, отримані з легких ланцюгів, специфічно зв'язуються з епітопами-мішенями. Приклади однодоменних антитіл називаються заАБ, нанотілами або антитілами, які містять один варіабельний домен.
І23| Отже, однодоменне (тАбБ)2 являє собою моноклональну конструкцію антитіла, що складається з (щонайменше) двох однодоменних моноклональних антитіл, які окремо вибрані з групи, що включає МН, МІ, МНН їі ММАК. Лінкер переважно має форму пептидного лінкера.
Аналогічно, "хсСгм-однодоменное тАбБ" являє собою моноклональну конструкцію антитіла, яка складається з щонайменше одного описаного вище однодоменного антитіла та однієї описаної вище молекули 5сЕм. Знову, лінкер переважно має форму пептидного лінкера.
І94| Чи конкурує конструкція антитіла за зв'язування з іншою заданою конструкцією антитіла, можна визначити у конкурентному аналізі, такому як конкурентний ІФА або клітинний конкурентний аналіз. Також можна використовувати покриті авідином мікрочастинки (гранули).
Аналогічно з покриттям авідином планшета ІФА, у разі проведення реакції з біотинильованим білком кожну з цих гранул можна використовувати в якості субстрату для проведення аналізу.
Антиген наносять на гранулу, а потім заздалегідь наносять перше антитіло. Додають друге антитіло та визначають наявність будь-якого додаткового зв'язування. Можливі засоби для реєстрації даних включають проточну цитометрію. (95) Т-клітини або Т-лімфоцити є типом лімфоцитів (які самі по собі є типом білих кров'яних тілець), який грає основну роль у клітинноопосередкованому імунітеті. Існує декілька підгруп Т- клітин, кожна з яких має відмінну функцію. Т-клітини можна відрізнити від інших лімфоцитів, таких як В-клітини і МК-клітини, за наявністю Т-клітинного рецептора (ТКР) на клітинній поверхні. ТКР відповідає за розпізнавання антигенів, зв'язаних з молекулами головного комплексу гістосумісності (ГКГС), і складається з двох різних білкових ланцюгів. У 9595 Т-клітин
ТКР складається з альфа (с) і бета (В) ланцюга. Коли ТКР вступає у контакт з антигенним пептидом і ГКГС (комплексом пептид/ГКГС), відбувається активація Т-лімфоциту за допомогою серії біохімічних подій, опосередкованих асоційованими ферментами, ко-рецепторами, 60 спеціалізованими адапторними молекулами та активованими або вивільненими транскрипційними факторами.
І96|Ї Комплекс СОЗ-рецептора являє собою білковий комплекс і складається з чотирьох ланцюгів. У ссавців комплекс містить СОЗу (гамма) ланцюг, СОЗб (дельта) ланцюг і два СОЗє (епсілон) ланцюга. Ці ланцюги зв'язуються з Т-клітинним рецептором (ТРК) і так званим с (дзета) ланцюгом з утворенням комплексу Т-клітинного рецептора і СОЗ і генерацією сигналу активації у Т-лімфоцитах. Ланцюги СОЗу (гамма) СОЗб (дельта) і СОЗє (епсілон) є високоспорідненими білками клітинної поверхні суперсімейства імуноглобулінів, які містять один позаклітинний домен імуноглобуліну. Внутрішньоклітинні хвости молекул СОЗ містять один консервативний мотив, відомий як імунорецепторний тирозиновий активуючий мотив або, скорочено, ІТАМ, який є важливим для сигнальних можливостей ТРК. Молекула СОЗ епсілон являє собою поліпептид, який у людей кодується геном СОЗЕ, що знаходиться у хромосомі 11.
Найбільш прийнятний епітоп СОЗ епсілон знаходиться у межах амінокислотних залишків 1-27 позаклітинного домену людського СОЗ епсілон. Мається на увазі, що конструкції антитіл відповідно до цього винаходу, як правило та переважно, менше демонструють неспецифічну активацію Т-клітин, яка є небажаною у специфічній імунотерапії. Це призводить до зниження ризику виникнення побічних явищ.
І97| Перенаправлений лізис клітин-мішеней за допомогою залучення Т-клітин мультиспецифічною, щонайменше біспецифічною конструкцією антитіла включає утворення цитолітичного синапсу та доставку перфорину та гранзимів. Залучені Т-клітини здатні серійно здійснювати лізис клітин-мішеней і на них не впливають механізми ухилення від імунологічного нагляду, що створюють перешкоди для процесингу та презентації пептидних антигенів або клонального диференціювання Т-клітин; дивіться, наприклад, УМО 2007/042261.
І98| Цитотоксичність, опосередковану конструкціями антитіл згідно з винаходом, можна визначати різними шляхами. Ефекторні клітини можуть являти собою, наприклад, збагачені (людські) СО8-позитивні Т-клітини або нестимульовані (людські) мононуклеарні клітини периферичної крові (МКПК). Якщо клітини-мішені походять від або експресуються у макаків або трансфіковані ВСМА макака, який зв'язується першим доменом, ефекторні клітини також повинні походити від макака, наприклад, лінії Т-клітин макака, наприклад, 4119 пРХ. Клітини- мішені повинні експресувати (щонайменше позаклітинний домен) ВСМА, наприклад, ВСМА
Зо людини або макака. Клітини-мішені можуть являти собою лінію клітин (таку як СНО), стабільно або тимчасово трансфіковану ВСМА, наприклад, ВСМА людини або макака. В альтернативному варіанті клітини-мішені можуть являти собою ВСМА-позитивну лінію клітин з природною експресією, таку як лінія клітин людської множинної мієломи 363 або МСІ-НУО29. Зазвичай очікується, що значення ЕС50 будуть нижчими у випадку ліній клітин-мішеней, які експресують більш високі рівні ВСМА на клітинній поверхні. Співвідношення між ефекторними клітинами та клітинами-мішенями (ЕМ) зазвичай складає близько 10:11, але також може варіюватися.
Цитотоксичну активність біспецифічних конструкцій антитіл до ВСМАХСОЗ можна визначити в аналізі вивільнення 51сСг (час інкубації - близько 18 годин) або в аналізі цитотоксичності на основі ГАС (час інкубації - близько 48 годин). Також можливі модифікації часу інкубації (цитотоксичної реакції) в аналізі. Інші способи визначення цитотоксичності добре відомі фахівцям і включають МТТ- або МтТ5-аналіз, методи аналізу на основі АТФ, включаючи біолюмінесцентний аналіз, аналіз з сульфородаміном В (ЗЕ), аналіз МУ5Т, клоногенний аналіз і технологію ЕСІБ.
І99| Цитотоксичну активність, опосередковану біспецифічними конструкціями антитіл до
ВСМАХСЮОЗ згідно з цим винаходом, переважно визначають у клітинному аналізі цитотоксичності. Її також можна визначати в аналізі вивільнення 51сСтг. Її представляє значення
ЕС50О, яке відповідає напівмаксимальній ефективній концентрації (концентрації конструкції антитіла, яка індукує цитотоксичну відповідь посередині між початковим і максимальним рівнем). Переважне значення ЕС5О біспецифічних конструкцій антитіл до ВСМАХСОЗ складає
БО «5000 пМ або «4000 пМ, прийнятніше «3000 пМ або «2000 пМ, навіть прийнятніше «1000 пМ або «500 пМ, навіть прийнятніше х400 пМ або «300 пМ, навіть прийнятніше «200 пМ, навіть прийнятніше «100 пМ, навіть прийнятніше «50 пМ, навіть прийнятніше «20 пМ або «10 пМ і найприйнятніше х5 ПМ. 100) Наведені вище значення ЕС50 можна визначити у різних аналізах. Фахівцеві відомо, що можна очікувати, що значення ЕС5О буде нижчим, коли в якості ефекторних клітин використовують стимульовані/збагачені Т-клітини СО8ж, у порівнянні з нестимульованими
МКПК. Крім того, можна очікувати, що значення ЕС5О будуть нижчими, коли клітини-мішені експресують велику кількість ВСМА у порівнянні з низьким рівнем експресії мішеней.
Наприклад, коли в якості ефекторних клітин використовують стимульовані/збагачені Т-клітини бо Сов (і в якості клітин-мішеней використовують трансфіковані ВСМА клітини, такі як клітини
СНО, або ВСМА-позитивні людські клітинні лінії), значення ЕС5О біспецифічної конструкції антитіла до ВСМАХСОЗ переважно складає «1000 пМ, прийнятніше х500 пМ, навіть прийнятніше 5250 пМ, навіть прийнятніше х100 пМ, навіть прийнятніше 550 пМ, навіть прийнятніше «10 пМ і найприйнятніше «5 пМ. Коли в якості ефекторних клітин використовують людські МКПК, значення ЕС5О біспецифічної конструкції антитіла до ВСМАХСОЗ переважно складає «5000 пМ або «4000 пМ (зокрема, коли клітинами-мішенями є ВСМА-позитивні людські клітинні лінії), прийнятніше «2000 пМ (зокрема, коли клітинами-мішенями є трансфіковані ВСМА клітини, такі як клітини СНО), прийнятніше «1000 пМ або «500 пМ, навіть прийнятніше «200 пМ, навіть прийнятніше «150 пМ, навіть прийнятніше «100 пМ і найприйнятніше «50 пМ або менше.
Коли в якості ефекторних клітин використовують лінію Т-клітин макака, таку як І пРХ4119, а трансфіковану ВСМА макака лінію клітин, таких як клітини СНО, використовують у якості лінії клітин-мішеней, значення ЕС5О біспецифічної конструкції антитіла до ВСМАХСОЗ переважно складає «2000 пМ або «1500 пМ, прийнятніше «1000 пМ або «500 пМ, навіть прийнятніше «300
ПМ або «250 пМ, навіть прийнятніше «100 пМ і найприйнятніше «50 пМ. 101 Переважно біспецифічні конструкції антитіл до ВСМАХСОЗ згідно з цим винаходом не індукують/не опосередковують лізис або практично не індукують/не опосередковують лізис
ВСМА-негативних клітин, таких як клітини СНО або клітини НІГ 60, МЕ5-5А або 5МИ-16. Термін "не індукує лізис", "практично не індукує лізис", "не опосередковує лізис" або "практично не опосередковує лізис" означає, що конструкція антитіла згідно з цим винаходом не індукує або не опосередковує лізис більш ніж 3095, переважно не більше 2095, прийнятніше не більше 1095, особливо переважно не більше 995, 895, 795, 690 або 595 ВСМА-негативних клітин, при цьому лізис ВСМА-позитивної людської клітинної лінії встановлений як 10095. Це зазвичай відповідає концентраціям конструкції антитіла до 500 нМ. Фахівцеві відомо, як визначити клітинний лізис без зайвих зусиль. Крім того, у цьому описі наведено конкретні інструкції для визначення клітинного лізису. 1021 Різниця між цитотоксичною активністю мономерної та димерної ізоформи окремих біспецифічних конструкцій антитіл до ВСМАХСОЗ називається "різницею в активності". Цю різницю в активності можна розрахувати, наприклад, як відношення між значеннями ЕС5О мономерної та димерної форми молекули. Різниця в активності біспецифічних конструкцій антитіл до ВСМАХСОЗ згідно з цим винаходом переважно складає х 5, прийнятніше :х 4, навіть прийнятніше :х 3, навіть прийнятніше х 2 і найприйнятніше х 1. 103) Перший і/або другий (або будь-який додатковий) зв'язуючий домен конструкції антитіла згідно з винаходом переважно відрізняється міжвидовою специфічністю для представників приматів їз класу ссавців. СОЗ-зв'язуючі домени, що відрізняються міжвидовою специфічністю, описані, наприклад, у МО 2008/119567. Відповідно до одного варіанту реалізації винаходу перший і/або другий зв'язуючий домен, окрім зв'язування з люодським ВСМА і людським СОЗ відповідно, також зв'язується з ВСМА/СОЗ приматів, включаючи (але не обмежуючись цим) приматів Нового Світу (таких як СаййНгіх їасспи5, Задиіїпиє Оеєдіриє або Заїтігі 5сіцгеив5), приматів Старого Світу (таких як бабуїни та макаки), гібонів і відмінних від людини Ппотіпіпає. 1104) В одному варіанті реалізації конструкції антитіла відповідно до винаходу перший домен зв'язується з ВСМА людини та додатково зв'язується з ВСМА макака, таким як ВСМА Масаса
Тазсісціагізх, і прийнятніше з ВСМА макака, що експресується на поверхні клітин макака.
Афінність першого домену щодо ВСМА, переважно щодо ВСМА людини, переважно складає «100 нМ або «50 нМ, прийнятніше «25 НМ або «20 нМ, прийнятніше «15 НМ або «10 нМ, навіть прийнятніше «5 НМ, навіть прийнятніше «2,5 нМ або «2 нМ, навіть прийнятніше «1 НМ, навіть прийнятніше х0,6 нМ, навіть прийнятніше «0,5 НМ і найприйнятніше «0,4 нМ. Афінність можна визначити, наприклад, в аналізі ВіАсоге або в аналізі Скетчарда. Фахівцям також добре відомі інші способи визначення афінності. Афінність першого домену щодо ВСМА макака переважно складає «15 нМ, прийнятніше «10 НМ, навіть прийнятніше «5 НМ, навіть прийнятніше «1 НМ, навіть прийнятніше «0,5 НМ, навіть прийнятніше «0,1 нМ і найприйнятніше «0,05 нМ або навіть 0,01 НМ. 105) Переважно різниця в афінності конструкцій антитіл відповідно до винаходу щодо зв'язування ВСМА макака у порівнянні з ВСМА людини (та ВСМА : пи ВСМА) (яка визначається, наприклад, в аналізі ВіаСоге або аналізі Скетчарда) складає «100, переважно «20, прийнятніше «15, прийнятніше «10, навіть прийнятніше«8, прийнятніше «6 і найприйнятніше «2. Переважні діапазони різниці в афінності конструкцій антитіл відповідно до винаходу щодо зв'язування
ВСМА макака у порівнянні з ВСМА людини складають від 0,1 до 20, прийнятніше від 0,2 до 10, навіть прийнятніше від 0,3 до б, навіть прийнятніше від 0,5 до З або від 0,5 до 2,5 і найприйнятніше від 0,5 до 2 або від 0,6 до 2. бо М1О06| Другий домен конструкції антитіла згідно з винаходом зв'язується з СОЗ епсілон людини і/або СОЗ епсілон Масаса. У переважному варіанті реалізації винаходу другий домен додатково зв'язується з СЮОЗ епсілон Саййнгіх їіасспи5, Задиїпиє5 Оеєдіри5 або Заїтіїгі 5сіигецй5.
Сайпйнгіх їасспиз і Задиіїпиз оєедірих є приматами нового Світу, що належать до сімейства
СайПйгіспідає, тоді як Заїтігі 5сішген5 є приматом Нового Світу, що належить до сімейства
Себідає. 107) Для конструкції антитіла згідно з цим винаходом переважно, щоб другий домен, який зв'язується з позаклітинним епітопом ланцюга СОЗ епсілон людини і/або Масаса, містив МІ - область, яка містить СОБК-11, СОВ-12 і СОК-1І 3, вибрані з: (а) СОВ-11, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 27 у УМО 2008/119567, СОКБ-І 2, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 28 у МО 2008/119567, і СОБ-І 3, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 29 у УМО 2008/119567; (5) СОВ-І1, наведеної у ЗЕО ІЮО МО: 117 у МО 2008/119567, СОК-12, наведеної у 5ЕО ІЮ
МО: 118 у УМО 2008/119567, і СОК-І 3, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 119 у УМО 2008/119567; і (с) СОВ-І1, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 153 у УМО 2008/119567, СОВ-12, наведеної у 5ЕО ІЮ
МО: 154 у УМО 2008/119567, і СОК-І 3, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 155 у УМО 2008/119567.
М108| У додатковому переважному варіанті реалізації конструкції антитіла згідно з цим винаходом другий домен, який зв'язується з позаклітинним епітопом ланцюга СОЗ епсілон людини і/або Масаса, містить МН-область, яка містить СОК-НІ, СОВ-Н2 ії СОВ-НЗ, вибрані з: (а) СОВ-НІ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 12 у УМО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у 5ЕО І МО: 13 у МО 2008/119567, і СОБ-НЗ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 14 у УМО 2008/119567; (5) СОВ-НІ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 30 у УМО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у 5ЕО І МО: 31 у МО 2008/119567, і СОК-НЗ, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 32 у ММО 2008/119567; (с) СОВ-НІ, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 48 у МО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 49 у МО 2008/119567, і СОБ-НЗ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 50 у УМО 2008/119567; (4) СОВ-НІ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 66 у УМО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у 5ЕО І МО: 67 у МО 2008/119567, і СОБ-НЗ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 68 у УМО 2008/119567; (є) СОВ-НІ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 84 у УМО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у 5ЕО І МО: 85 у МО 2008/119567, і СОК-НЗ, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 86 у УМО 2008/119567; (У СОВ-НІ, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 102 у МО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у 5ЕО ІЮ
МО: 103 у УМО 2008/119567, і СОБ-НЗ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 104 у УМО 2008/119567;
Зо (9)у СОВ-НІ, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 120 у МО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у ЗЕО ІЮ
МО: 121 у МО 2008/119567, і СОБ-НЗ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 122 у УМО 2008/119567; (п) СОВ-НІ, наведеної у ЗЕО І МО: 138 у УМО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у ЗЕО ІЮ
МО: 139 у МО 2008/119567, і СОБ-НЗ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 140 у УМО 2008/119567; () СОВ-НІ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 156 у УМО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у 5ЕО ІЮ
МО: 157 у УМО 2008/119567, і СОК-НЗ, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 158 у УМО 2008/119567; і () СОВ-НІ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 174 у УМО 2008/119567, СОБ-Н2, наведеної у 5ЕО ІЮ
МО: 175 у МО 2008/119567, і СОБ-НЗ, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 176 у УМО 2008/119567. 109) У переважному варіанті реалізації конструкції антитіла згідно з винаходом описані вище три групи МГ СОК комбінують з описаними вище десятьма групами МН СОК у рамках другого зв'язуючого домену для отримання (30) груп, кожна з яких містить СОК-Ї. 1-3 ії СОК-Н 1- 3. 10) Для конструкції антитіла згідно з цим винаходом переважно, щоб другий домен, який зв'язується з СОЗ, містив Мі -область, вибрану з групи, що складається з наведених у ЗЕО ІЮ
МО: 17, 21, 35, 39, 53, 57, 71, 75, 89, 93, 107, 111, 125, 129, 143, 147, 161, 165, 179 або 183 у МО 2008/119567, або наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 13. 111) Також переважно, щоб другий домен, який зв'язується з СОЗ, містив МН-область, вибрану з групи, що складається з наведених у ЗЕО ІЮ МО: 15, 19, 33, 37, 51, 55, 69, 73, 87, 91, 105, 109, 123, 127, 141, 145, 159, 163, 177 або 181 у УМО 2008/119567, або наведеної у ЗЕО ІЮ
МО: 14. 112) Прийнятніше конструкція антитіла згідно з цим винаходом характеризується другим доменом, який зв'язується з СОЗ, що містить Мі -область і МН-область, вибрані з групи, що складається з: (а) МІ -області, наведеної у 5ЕО ІЮО МО: 17 або 21 у УМО 2008/119567, і МН-області, наведеної у БЕО ІО МО: 15 або 19 у МО 2008/119567; (р) МІ -області, наведеної у 5ЕО ІЮО МО: 35 або 39 у УМО 2008/119567, і МН-області, наведеної у БЕО ІО МО: 33 або 37 у УМО 2008/119567; (с) МІ -області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 53 або 57 у УМО 2008/119567, і МН-області, наведеної у БЕО ІО МО: 51 або 55 у МО 2008/119567; (9) МІ -області, наведеної у 5ЕО ІЮО МО: 71 або 75 у УМО 2008/119567, і МН-області, наведеної 60 у БЕО І МО: 69 або 73 у МО 2008/119567;
(є) МІ -області, наведеної у 5ЕО ІЮО МО: 89 або 93 у УМО 2008/119567, і МН-області, наведеної у БЕО ІО МО: 87 або 91 у МО 2008/119567; (Ї) МІ-області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 107 або 111 у МО 2008/119567, і МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 105 або 109 у МО 2008/119567; (9) Мі -області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 125 або 129 у МО 2008/119567, і МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 123 або 127 у ММО 2008/119567; (п) Мі-області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 143 або 147 у МО 2008/119567, і МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 141 або 145 у УМО 2008/119567; () Мі-області, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 161 або 165 у МО 2008/119567, і МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 159 або 163 у УМО 2008/119567; і () Мі-області, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 179 або 183 у МО 2008/119567, і МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 177 або 181 у УМО 2008/119567. 113) Також у зв'язку з конструкцією антитіла згідно з цим винаходом переважно, щоб другий домен, який зв'язується з СОЮЗ, містив МІ -область, наведену у 5ЕО ІЮ МО: 13, ї МН-область, наведену у ЗЕО ІЮО МО: 14. (114) Відповідно до переважного варіанту конструкції антитіла згідно з цим винаходом перший і/або другий домен мають наступний формат: Пари МН-областей і Мі -областей мають формат одноланцюгового антитіла (5сЕм). МН- і Мі -області розташовані у порядку МН-МІ. або
МІ-МН. Переважно, щоб МН-область була розташована М-термінально щодо до лінкерної послідовності, а МІ -область була розташована С-термінально щодо до лінкерної послідовності. 115) Переважний варіант описаної вище конструкції антитіла згідно 3 цим винаходом характеризується другим доменом, який зв'язується з СОЮЗ, що містить амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮО МО: 23, 25, 41, 43, 59,61, 77, 79, 95, 97, 113, 115, 131, 133, 149, 151, 167, 169, 185 або 187 у УМО 2008/119567, або наведеної у БЕО
ІО МО: 15. 116) Також мається на увазі, що перший зв'язуючий домен конструкції антитіла згідно з винаходом містить Мі -область, яка містить СОВ-11, СОВ-12 і СОВА-І 3, і МН-область, яка містить
СОВ-НІ, СОов-Н2 і СОВв-3, вибрані З групи, що складається 3: (а) СОВ-11, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 48, СОБ-І 2, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 49, СОК-І 3, наведеної
Зо у ЗЕО Ір МО: 50, СОК-НІ, наведеної у БЕО ІЮ МО: 45, СОК-Н2, наведеної у БЕО ІЮ МО: 46, ї
СОВв-НЗ, наведеної у ЗЕО ІО МО: 47; (5) СОВ-11, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 66, СОБ-І 2, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 67, СОК-І 3, наведеної у ЗЕО Ір МО: 68, СОК-НІ, наведеної у БЕО ІО МО: 63, СОК-Н2, наведеної у БЕО ІЮО МО: 64, і
СОВв-НЗ, наведеної у ЗЕО ІО МО: 65; і (с) СОВ-І1, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 84, СОВ-12, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 85, СОК-І 3, наведеної у ЗЕО Ір МО: 86, СОК-НІ, наведеної у БЕО ІЮ МО: 81, СОК-Н2, наведеної у БЕО ІЮО МО: 82, і
СОВ-НЗ, наведеної у 5ЕО ІО МО: 83.
І117| Додатково мається на увазі, що перший зв'язуючий домен конструкції антитіла згідно з винаходом містить МН-область і Мі-область, вибрані з групи, що складається з: (а) МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮО МО: 51, і Мі -області, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 52; (Б) МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮО МО: 57, і Мі -області, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 58; (с) МН-області, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 69, і Мі -області, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 70; (4) МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮО МО: 75, і Мі -області, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 76; (є) МН-області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 87, і Мі -області, наведеної у 5ЕО ІЮ МО: 88; і () МН-області, наведеної у БЕО ІО МО: 93, і МІ -області, наведеної у ЗЕО ІЮ МО: 94. 118) Додатково мається на увазі, що перший зв'язуючий домен конструкції антитіла згідно з винаходом містить амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з наведених у
ЗЕО ІЮ МО: 53, 59, 71, 77, 89 або 95. 119) Ковалентні модифікації конструкцій антитіл також включено в об'єм цього винаходу і загалом, але не завжди, проводяться після трансляції. Наприклад, декілька типів ковалентних модифікацій конструкції антитіла вносять у молекулу за допомогою проведення реакції між конкретними амінокислотними залишками конструкції антитіла з органічним дериватизуючим агентом, який здатен вступати у реакцію з обраними бічними ланцюгами М- або С-кінцевих залишків.
І120)| Залишки цистеїнілу найчастіше приводять у реакцію з а-галоацетатами (і відповідними амінами), такими як хлороцтова кислота або хлорацетамід, щоб отримати карбоксиметильні або карбоксиамідометильні похідні. Залишки цистеїнілу також дериватизують шляхом проведення реакції з бромтрифторацетоном, а-бром-В- (5-імідозоїл)упропіоновою кислотою, хлорацетилфосфатом, М-алкілмалеїмідами, З-нітро-2-піридилдисульфідом, метил-2- бо піридилдисульфідом, п-хлорртутьбензоатом, 2-хлорртуть-4-нітрофенолом або хлор-7-
нітробензо-2-окса-1,3-діазолом. 1211) Залишки гістидилу дериватизують шляхом проведення реакції з діетилпірокарбонатом за рН 5,5-7,0, оскільки цей агент є відносно специфічним щодо бічного ланцюга гістидилу. Також використовують пара-бромфенацилбромід; реакцію переважно проводять у 0,1 М какодилаті натрію за рН 6,0. Залишки лізинілу та аміно-кінцеві залишки приводять у реакцію з бурштиновим ангідридом або ангідридами інших карбонових кислот. Дериватизація цими агентами призводить до зміни заряду залишків лізинілу на протилежний. Інші відповідні агенти для дериватизації альфа-аміно-вмісних залишків, включають складні імідоефіри, такі як піколінімідат; піридоксальфосфат; піридоксаль; хлорборгідрид; тринітробензенсульфонову кислоту; О-метилізосечовину; 2,4-пентандіон; і каталізовану трансаміназою реакцію з гліоксилатом.
І122| Залишки аргінілу модифікують шляхом проведення реакції з одним з декількох традиційних реагентів, серед яких фенілгліоксаль, 2,3-бутандіон, 1,2-циклогександіон і нінгідрин.
Для дериватизації залишків аргініну вимагається, щоб реакція проводилася у лужних умовах через висоє значення рКа функціональної групи гуанідину. Крім того, ці реагенти можуть вступати у реакцію з групами лізину, а також епсілон-аміно-групою аргініну. 123) Можна здійснювати специфічну модифікацію залишків тирозилу, при цьому особливий інтерес представляє внесення спектральних міток у залишки тирозилу шляхом проведення реакції з ароматичними сполуками діазонію або тетранітрометаном. Найчастіше використовують М-ацетилімідизол і тетранітрометан для отримання молекул О-ацетилтирозилу і З-нітро похідних відповідно. Залишки тирозилу йодують, використовуючи 1251 або 1311, щоб отримати мічені білки для застосування у радіоіїмуноаналізі, при цьому підходить описаний вище метод із застосуванням хлораміну Т. 1124) Карбоксильні бічні групи (аспартильні або глутамільні) вибірково модифікують шляхом проведення реакції з карбодиїмідами (К--М-С-М--К), де К і К є необов'язково різними алкільними групами, такими як 1-циклогексил-3-(2-морфолінил-4-етил)карбодиїмід або 1-етил-3- (4-азоніа-4,4-диметилпентил)карбодиіїмід. Крім того, аспартильні та глутамільні залишки перетворюють на аспарагінільні та глутамінільні залишки шляхом проведення реакції з іонами амонію.
Зо М125| Дериватизацію біфункціональними агентами використовують для перехресного зшивання конструкцій антитіл згідно з цим винаходом з нерозчинною у воді імобілізуючою матрицею або поверхнею для застосування у різних способах. Зазвичай застосовні перехресно- зшиваючі агенти включають, наприклад, 1,1-біс(діазоацетил)-2-фенілетан, глутаральдегід, складні М-гідроксисукцинімідні ефіри, наприклад, складні ефіри з 4-азідосаліциловою кислотою, гомобіфункціональні складні імідоефіри, включаючи дисукцинімідилові складні ефіри, такі як 3,3'-дитіобіс(сукцинімідилпропіонат), і біфункціональні малеїміди, такі як біс-М-малеїімідо-1,8- октан. Дериватизуючі агенти, такі як метил-3-Кп-азідофеніл)дитіо|Іпропіоіїмідат, дозволяють отримувати фотоактивовані проміжні сполуки, які здатні утворювати перехресні зв'язки у присутності світла. В альтернативному варіанті для іммобілізації білків застосовують реактивні нерозчинні у воді матриці, такі як активовані ціаногенбромідом вуглеводи, та реактивні субстрати, описані у патентах США Мо 3969287; 3691016; 4195128; 4247642; 4229537; і 4330440.
І126)Ї Залишки глутамінілу та аспарагінілу часто деамідують до відповідних залишків глутамілу та аспартилу відповідно. В альтернативному варіанті ці залишки деамідують у помірних кислих умовах. Будь-яка форма цих залишків потрапляє в об'єм цього винаходу.
П127| Інші модифікації включають гідроксилювання проліну та лізину, фосфорилювання гідроксильних груп залишків серілу або треонілу, метилювання а-аміно-груп бічних ланцюгів лізину, аргініну та гістидину (Т. Е. Стеідпіоп, Ргоївеіпе: Зігисіиге апа Моїесшіаг Ргорепіє5, МУ. Н.
Егеетап 5 Со., Зап Егапсізсо, 1983, рр. 79-86), адетилювання М-кінцевого аміну та амідування будь-якої С-кінцевої карбоксильної групи.
І128| Інший тип ковалентної модифікації конструкцій антитіл, включений в об'єм цього винаходу, включає зміну профілю глікозилювання білка. Як відомо у цій галузі техніки, профілі глікозилювання можуть залежати як від послідовності білка (наприклад, наявності або відсутності конкретних амінокислотних залишків глікозилювання, що обговорюється нижче), так і від клітини-хазяїна або організму, в яких виробляється білок. Конкретні експресійні системи обговорюються нижче.
П129| Глікозилювання поліпептидів, як правило, буває М-зв'язаним або О-зв'язаним. М- зв'язане глікозилювання відноситься до приєднання вуглеводного компонента до бічного ланцюга залишку аспарагіну. Трипептидні послідовності аспарагін-Х-серин і аспарагін-Х- треонін, де Х є будь-якою амінокислотою за виключення проліну, являють собою послідовності 60 розпізнавання для ферментативного приєднання вуглеводного компонента до бічного ланцюга аспарагіну. Таким чином, наявність будь-якої з цих трипептидних послідовностей у поліпептиді створює потенційну ділянку глікозилювання. О-зв'язане глікозилювання відноситься до приєднання одного з цукрів М-ацетилгалактозаміну, галактози або ксилози до гідроксиамінокислоти, найчастіше серину або треоніну, хоча також можна використовувати 5- гідроксипролін або 5-гідроксилізин. 130) Додавання ділянок глікозилювання у конструкцію антитіла зручно здійснювати шляхом зміни амінокислотної послідовності так, щоб вона містила одну або більше з вищеописаних трипептидних послідовностей (для ділянок М-зв'язаного глікозилювання). Зміну також можна проводити шляхом додавання або заміни одним або більше залишками серину або треоніну у стартовій послідовності (для ділянок О-зв'язаного глікозилювання). Для зручності амінокислотну послідовність конструкції антитіла переважно змінюють за допомогою змін на рівні ДНК, зокрема, мутуючи ДНК, яка кодує поліпептид, в наперед вибраних основах, так щоб створити кодони, які транслюватимуться у необхідні амінокислоти. (131) Іншим засобом підвищення числа вуглеводних компонентів на конструкції антитіла є хімічне або ферментативне сполучення глікозидів з білюом. Перевага цих процедур полягає в тому, що для них не потрібно вироблення білка у клітині-хазяїні, у якій існує можливість для М- і
О-зв'язаного глікозилювання. Залежно від застосовного способу сполучення цукор (а) можна приєднувати до (а) аргініну та гістидину, (Б) вільних карбоксильних груп, (с) вільних сульфгідрильних груп, таких як у цистеїні, (4) вільних гідроксильних груп, таких як у серині, треоніні або гідроксипроліні, (е) ароматичних залишків, таких як у фенілаланіні, тирозині або триптофані, або (Її) амідної групи глутаміну. Ці способи описані у М/О 87/05330 і у Аріїп апа
МУгівіоп, 1981, СВО Сі. Веу. Віоснет., рр. 259-306.
І132| Вилучення вуглеводних компонентів, присутніх у початковій конструкції антитіла, можна здійснювати хімічним або ферментативним способом. Для хімічного деглікозилювання потрібна дія на білок сполуки трифторметансульфонової кислоти або еквівалентної сполуки.
Така обробка призводить до відщеплення більшості або усіх цукрів за винятком сполучного цукру (М-ацетилглюкозаміну або М-ацетилгалактозаміну), при цьому залишаючи поліпептид інтактним. Хімічне деглікозилювання описане у НакКітиааіп еї аї., 1987, Агсп. Віоспет. Віорпуз. 259:52 і у Едде еї аї., 1981, Апаї. Віоспет. 118:131. Ферментативне відщеплення вуглеводних компонентів на поліпептидах можна забезпечити шляхом застосування різних ендо- і екзоглікозидаз, як описано у ТпоїакКига еї аї., 1987, Ме. Еп7утої. 138:350. Глікозилюванню у потенційних ділянках глікозилювання можна запобігти шляхом застосування сполуки тунікаміцину, як описано у Юи5Кіп еї аї., 1982, 9. Віої. Спет. 257:3105. Тунікаміцин блокує утворення зв'язків білок-М-глікозид. 133 Інші модифікації конструкції антитіла також передбачені у цьому документі. Наприклад, інший тип ковалентної модифікації конструкції антитіла включає зв'язування конструкції антитіла з різними небілюовими полімерами, включаючи, але не обмежуючись цим, різні поліоли, такі як поліеєтиленгліколь, поліпропіленгліколь, поліоксиалкілени або сополімери поліетиленгліколю та поліпропіленгліколю, так, як це описано у патентах США Мо 4640835; 4496689; 4301144; 4670417; 4791192 або 4179337. Крім того, як відомо у цій галузі технікию, можна проводити амінокислотні заміни у різних позиціях у конструкції антитіла, наприклад, щоб полегшити додавання полімерів, таких як ПЕГ. (134) У деяких варіантах реалізації винаходу ковалентна модифікація конструкцій антитіл згідно з винаходом включає додавання однієї або більше міток. Група для мічення може бути зв'язана з конструкцією антитіла за допомогою спейсерних ніжок різної довжини для зниження потенційної стеричної невідповідності. У цій області техніки відомі різні способи мічення білків, які можна застосовувати під час реалізації цього винаходу. Термін "мітка" або "група для мічення", відноситься до будь-якої мітки, що виявляється. Загалом мітки діляться на безліч класів залежно від методу аналізу, в якому передбачене їх виявлення; наступні приклади включають, але не обмежуються цим: а) ізотопні мітки, які можуть представлятися собою радіоактивні або важкі ізотопи, такі як радіоіїзотопи або радіонукліди (наприклад, ЗН, 140, 15М, 355, 897, 90, 99Тс, 1111п, 125І, 1311) р) магнітні мітки (наприклад, магнітні частинки) с) редокс-активні компоненти а) оптичні барвники (включаючи, але не обмежуючись цим, хромофори, люмінофори та флуорофори), такі як флуоресцентні групи (наприклад, ФІТЦ, родамін, люмінофори на основі комплексів лантанідів), хемілюмінесцентні групи та флуорофори, які можуть бути як "низькомолекулярними" флуорофорами, так і білюоовими флуорофорами е) ферментативні групи (наприклад, пероксидазу хріну, В-галактозидазу, люциферазу, лужну бо фосфатазу)
І) біотинільовані групи 9) наперед визначені поліпептидні епітопи, які розпізнаються вторинним репортером (наприклад, парні послідовності лейцинових блискавок, ділянки зв'язування для вторинних антитіл, металзв'язуючі домени, епітопні мітки і таке інше)
І1351Ї Під "флуоресцентною міткою" мається на увазі будь-яка молекула, яку можна виявити завдяки властивим їй флуоресцентним властивостям. Відповідні флуоресцентні мітки включають, але не обмежуються цим, флуоресцеїн, родамін, тетраметилродамін, еозин, ерітрозин, кумарин, метилкумарини, пірен, малахітовий зелений, стільбен, жовтий Люцифер, блакитний каскад У, Техаський червоний, ІАЕСАМ5, ЕВАМ5, ВОБІРУ РІ, І С Кеа 640, Су 5, Су 5.5, І С Кей 705, зелений Орегон, барвники Аїеха - Рішог (Аіеха Рішог 350, АІеха Рішог 430, АІеха
Еіног 488, АІеха Рішог 546, АІеха Ріног 568, АіІеха Ріног 594, АІеха Рійог 633, АІеха Рішог 660, АІеха
Рісог 680), блакитний каскад, жовтий каскад і К-фікоеритрин (РЕ) (МоІесшаг Ргобе5, Еидепе,
ОК), ФІТЦ, родамін і техаський червоний (Ріегсе, Коскога, І), Суб, Су5.5, Су7 (Атегепат Ге
Зсіепсе, Рійб5ригой, РА). Відповідні оптичні барвники, включаючи флуорофори, описані у
Моїесшіаг Ргоре5 Напабсок Бу Віснага Р. Нацдіапа.
І1З36Ї Відповідні білкові флуоресцентні мітки також включають, але не обмежуються цим, зелений флуоресцентний білок, включаючи види ЗФБ Кепійа, Ріозагси5 или Аедиогеа (СВпаше еї аї., 1994, бсієпсе 263:802-805), ПЗФБ (Сіопіес! І арогайогієв5, Іпс., номер доступу Сепрапк 055762), синій флуоресцентний білок (ВЕР, Оцапішт Віогесппоіодієв5, Іпс. 1801 де Маізоппеиме
Віма. М/евзі, Вій Ріоог, МопітеаІ, Оцебрес, Сапада НЗН 199; еіаибег, 1998, Віоїесппідневз 24:462- 471; Неїт еї а!., 1996, Сит. Віо!. 6:178-182), посилений жовтий флуоресцентний білок (ПЖФБ,
СіІопіесп І арогайогіе5, Іпс.), люциферазу (Іспікі еї аїЇ., 1993, У. Іттипої. 150:5408-5417), |Д- галактозидазу (Моїап еї аї., 1988, Ргос. Май. Асаай. зЗсі. О.5.А. 85:2603-2607) і Кепійа (М/О92/15673, УМО95/07463, ММО98/14605, УМО98/26277, ММО99/49019, патенти США Мо 5292658; 5418155; 5683888; 5741668; 5777079; 5804387; 5874304; 5876995; 5925558).
І137| Конструкція антитіла згідно з винаходом також може містити додаткові домени, які, наприклад, допомагають у разі виділення молекули або мають відношення до адаптованого фармакокінетичного профілю молекули. Домени, які допомагають у разі виділення конструкції антитіла, можуть бути вибрані з пептидних мотивів або повторно внесених компонентів, які
Зо можуть бути захоплені у способі виділення, наприклад, у колонці для виділення. Необмежуючі варіанти реалізації таких додаткових доменів включають пептидні мотиви, відомі як Мус-мітка,
НАТ-мітка, НА-мітка, ТАР-мітка, о5Т-мітка, хітин-зв'язуючий домен (СВО-мітка), мальтоза- зв'язуючий домен (МВР-мітка), Ріад-мітка, 5ігер-мітка та її варіанти (наприклад, 5ігеріІ-мітка) і
Нівз-мітка. Описані у цьому документі конструкції антитіл можуть містити домен Нів-мітки, який у загальному випадку відомий як повтор послідовних залишків Ні в амінокислотній послідовності молекули, переважно з п'яти, і прийнятніше з шести залишків Ні (гекса-гістидин). Ніб-мітка може розташовуватись, наприклад, у М- або С-кінці конструкції антитіла, переважно вона розташована у С-кінці. Найприйнятніше гекса-гістидинова мітка (НННННН) (ЗЕО ІО МО : 16) зв'язана за допомогою пептидного зв'язку з С-кінцем конструкції антитіла відповідно до винаходу. Крім того, з полі-гістидиновою міткою можна комбінувати кон'югатну систему ПЛГК-
ПЕГ-ПЛГК для застосувань з уповільненим вивільненням і поліпшення фармакокінетичного профілю.
І138| Також передбачаються модифікації амінокислотних послідовностей описаних у цьому документі конструкцій антитіл. Наприклад, може вимагатися поліпшення афінності зв'язування мМабо інших біологічних властивостей конструкції антитіла. Варіанти амінокислотних послідовностей конструкцій антитіл отримують, вносячи відповідні нуклеотидні зміни у нуклеїнові кислоти конструкцій антитіл, або шляхом пептидного синтезу. Усі описані нижче модифікації амінокислотних послідовностей повинні призводити до отримання конструкції антитіла, яка зберігає необхідну біологічну активність (зв'язування з ВСМА і з СОЗ3) немодифікованої батьківської молекули.
І139| Термін "амінокислота" або "амінокислотний залишок", як правило, відноситься до амінокислоти, яка має відоме у цій галузі техніки визначення, такої як амінокислота, вибрана з групи, що складається з: аланіну (Аа або А); аргініну (Ага або К); аспарагіну (Ах5п або М); аспарагінової кислоти (Азр або 0); цистеїну (Су5 або С); глутаміну (СІп або СО); глутамінової кислоти (Сім або Е); гліцину (Су або 5); гістидину (Ні або Н); ізолейцину (Не або І): лейцину ( ем або І); лізину (Гуз або К); метіоніну (Меї або М); фенілаланіну (Рпе або Е); проліну (Рго або
Р); серину (Зег або 5); треоніну (Тиг або Т); триптофану (Тгтр або УМ); тирозину (Туг або ХХ); і валіну (Ма! або М), хоча модифіковані, синтетичні або рідкісні амінокислоти можна використовувати у разі потреби. Загалом амінокислоти можна розділити на групи, що мають 60 неполярний бічний ланцюг (наприклад, Аа, Суб, Не, Гей, Меї, Рпе, Рго, Маї); негативно заряджений бічний ланцюг (наприклад, Авр, бій); позитивно заряджений бічний ланцюг (наприклад, Аго, Ні, Гуз); або незаряджений полярний бічний ланцюг (наприклад, Авп, Сув,
Сп, Су, Ні, Меї, Рпе, зег, ТАг, Тгр і Туг). 1140) Амінокислотні модифікації включають, наприклад, делеції з і/або вставки в, і/або заміни залишків у межах амінокислотних послідовностей конструкцій антитіл. Для отримання кінцевої конструкції здійснюють будь-яку комбінацію з делеції, вставки та заміни, за умови, що кінцева конструкція має необхідні характеристики. Амінокислотні зміни також можуть міняти посттрансляційні процеси конструкцій антитіл, такі як зміна числа або позиції ділянок глікозилювання.
І141| Наприклад, можна проводити вставку, заміну або делецію 1, 2, 3, 4, 5 або 6 амінокислот у кожній з СОК (звичайно, залежно від їх довжини), тоді як у кожній з ЕК можна проводити вставку, заміну або делецію 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 або 25 амінокислот. Переважно вставки амінокислотної послідовності у конструкцію антитіла включають аміно- і/або карбокси-кінцеві злиття з довжиною у діапазоні 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 залишків у поліпептидах, які містять сто або більше залишків, а також вставки одного або декількох амінокислотних залишків усередині послідовності. Відповідні модифікації також можна проводити у межах третього домену конструкції антитіла згідно з винаходом. Інсерційний варіант конструкції антитіла згідно з винаходом включає злиття ферменту з М-кінцем або з С- кінцем конструкції антитіла або злиття з поліпептидом. 11421) Залишки, які представляють найбільший інтерес для замісного мутагенезу, включають (але не обмежуються цим) СОК важкого і/або легкого ланцюга, зокрема, гіперваріабельні області, але також передбачаються зміни ЕК у важкому і/або легкому ланцюзі. Заміни переважно є консервативними замінами, описаними у цьому документі. Переважно можна проводити заміну 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 або 10 амінокислот у СОК, тоді як у каркасних областях (ЕК) можна проводити заміну 1, 2, 3,4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 або 25 амінокислот, залежно від довжини СОМ або ЕК. Наприклад, якщо послідовність СОК включає 6 амінокислот, мається на увазі можливість заміни однієї, двох або трьох з цих амінокислот.
Аналогічно, якщо послідовність СОК включає 15 амінокислот, мається на увазі можливість заміни однієї, двох, трьох, чотирьох, п'яти або шести з цих амінокислот.
Зо 11431 Корисний спосіб ідентифікації певних залишків або областей конструкцій антитіл, які є переважними ділянками для мутагенезу, називається "аланін-скануючим мутагенезом" і описаний у Сиппіпойат апа Ууеїй5 їп Зсіепсе, 244: 1081-1085 (1989). В даному випадку визначають залишок або групу цільових залишків у межах конструкції антитіла (наприклад, заряджених залишків, таких як аг, ар, Пів, Туз і дій) і заміщають нейтральною або негативно зарядженою амінокислотою (найприйнятніше аланіном або поліаланіном) для впливу на взаємодію амінокислот з епітопом. 1144) Потім ті амінокислотні ділянки, які демонструють функціональну чутливість до замін, коригують, вносячи додаткові або інші варіанти у ділянках замін або для них. Таким чином, хоча ділянка або область для внесення варіації в амінокислотну послідовність визначені наперед, природа мутації рег зе не має бути наперед визначеною. Наприклад, щоб проаналізувати або оптимізувати характеристики мутації у цій ділянці, можна провести аланін-скануючий або випадковий мутагенез у цільовому кодоні або ділянці та провести скринінг варіантів конструкції антитіла, що експресуються, щодо оптимальної комбінації необхідної активності. Методики здійснення замісних мутацій у наперед визначених ділянках у ДНК з відомою послідовністю, добре відомі, наприклад, це мутагенез з праймером М13 і ПЛР-мутагенез. Скринінг мутантів проводять, застосовуючи аналіз антигензв'язуючої активності, наприклад, зв'язування ВСМА або СОЗ3. 1145) Загалом, якщо заміна амінокислот проведена в одній або більше, або в усіх СО важкого і/або легкого ланцюга, переважно, щоб отримана "заміщена" послідовність була щонайменше на 6095 або 6595, прийнятніше на 7095 або 7595, навіть прийнятніше на 8095 або 8595 і особливо переважно на 9095 або 9595 ідентичною "оригінальній" послідовності СОК. Це означає, що від довжини СОК залежить, якою мірою вона ідентична "заміщеній" послідовності.
Наприклад, СОК, що містить 5 амінокислот, переважно є на 8095 ідентичною до своєї заміщеної послідовності, щоб щонайменше одна амінокислота була замінена. Відповідно, СОК конструкції антитіла можуть мати різну міру ідентичності зі своїми заміщеними послідовностями, наприклад, СОКІ 1 може мати 8095, тоді як СОКІ З може мати 9095. (146) Переважні заміни (заміщення) є консервативними замінами. При цьому мається на увазі можливість будь-якої заміни (включаючи неконсервативну заміну або одну або більше з "типових замін", перерахованих у Таблиці 3, нижче) за умови, що конструкція антитіла зберігає 60 свою здатність зв'язуватися з ВСМА за допомогою першого домену та з СОЗ епсілон за допомогою другого домену, і/або її СОК мають ідентичність із заміщеною послідовністю (щонайменше на 6095 або 6595, прийнятніше на 7095 або 7595, навіть прийнятніше на 8095 або 8595 і особливо переважно на 9095 або 9595 ідентичні до "оригінальної" послідовності СОК).
І147| Консервативні заміни наведені у Таблиці З під заголовком "переважні заміни". Якщо такі заміни призводять до зміни біологічної активності, тоді можна вносити істотніші зміни, позначені у Таблиці З як "типові заміни" або додатково описані нижче з прив'язкою до класів амінокислот, а продукти досліджувати щодо необхідної характеристики.
Таблиця З
Амінокислотні заміни вує) 71777717 Аа |1771717171717171717171аассс27 777... еф 777771 | ем,майтевайв, ре. | -://// 6 77777177. їец( 77777770 | опопейсіпе,йе,ма, тераауД/ | 777 Ле 11111 РОЮ) | 77777771 Аа |Ї7771717171717171717171аасссщС 1148) Істотні модифікації біологічних властивостей конструкції антитіла згідно з цим винаходом здійснюють, вибираючи заміни, які істотно відрізняються за своєю дією на підтримання (а) структури поліпептидного скелета в області заміни, наприклад, у вигляді шару спіральної конформації, (б) заряду або гідрофобності молекули у цільовій ділянці або (с) об'єму бічного ланцюга. Залишки природного походження діляться на групи на підставі загальних властивостей бічних ланцюгів: (1) гідрофобні: норлейцин, тпеї, аїа, маї, Іемч, Пе; (2) нейтральні гідрофільні: суб, зег, їйг, азп, ап; (3) кислі: азр, дій; (4) основні: Пів, Іує, агу; (5) залишки, які впливають на орієнтацію ланцюга: діу, рго; і (6) ароматичні: ігр, туг, рпе.
І149| Неконсервативні заміни включають заміну представника одного з цих класів представником іншого класу. Будь-який залишок цистеїну, який не бере участі в підтриманні належної конформації конструкції антитіла, можна замінювати, у загальному випадку серином, для поліпшення стійкості молекули до окислення та попередження аберантного перехресного зв'язування. І навпаки, цистеїновий (ї) зв'язок (зки) можна додавати в антитіло для поліпшення його стабільності (зокрема, коли антитіло є фрагментом антитіла, таким як фрагмент Ем). 50) У випадку амінокислотних послідовностей ідентичність і/або схожість послідовностей визначають, використовуючи стандартні методики, відомі у цій галузі техніки, включаючи, але не обмежуючись цим, алгоритм локальної ідентичності послідовностей Сміта та Уотермана, 1981, Айм. Аррі. Май. 2:482, алгоритм вирівнювання для визначення ідентичності послідовностей Нідлмана та Вунша, 1970, 9. Мої. Вісі. 48:443, метод пошуку схожості Пірсона та
Ліпмана, 1988, Ргос. Маї. Асад. Зсі. 0.5.А. 85:2444, комп'ютеризовані реалізації цих алгоритмів
Зо (САР, ВЕЗТРІТ, ГАБТА і ТЕАЗТА у пакеті програмного забезпечення Умі5сопбіп Сепеїїсв,
Сепеїійс5 Сотршиїег (гоир, 575 Зсіепсе Огіме, Мадізоп, Уміз.), програму для послідовностей Веві
ЕЇїї, описану у Оемегеих еї аї., 1984, Мисі. Асій Кев5. 12:387-395, переважно із застосуванням установок за умовчанням або за розсудом. Переважно відсоток ідентичності розраховують за допомогою ЕазірВ на підставі наступних параметрів: штраф за незбіжність 1; штраф за геп 1;
штраф за розмір гепу 0,33; і штраф за з'єднання 30, "Сигтгепі Меїнподз іп Зедоепсе Сотрагізоп апа Апаїузівз," Мастготоїесціє Зедиепсіпуд апа БЗупіпевзі5, Зеієсіїєд Меїнодз апа Арріїсайоп5, рр 127-149 (1988), Ліап ПН. І 55, Іпс.
І151| Прикладом застосовного алгоритму є РІСГЕОР. РІГЕОР створює множинне вирівнювання послідовностей з групи споріднених послідовностей, використовуючи прогресивне, попарне вирівнювання. Також вона може будувати дерево, що показує об'єднувальні взаємозв'язки, які використовуються для створення вирівнювання. У РІГЕОР використовується спрощення методу прогресивного вирівнювання Фенга та Дуліттла, 1987, 5.
Мої. Емої. 35:351-360; цей метод аналогічний описаному Хіггінсом їі Шарпом, 1989, САВІО5 5:151-153. Застосовні параметри РІГЕОР включають вагу гепу за умовчанням 3,00, вагу продовження гепу за умовчанням 0,10, і зважені кінцеві гепи. (1521) Іншим прикладом застосовного алгоритму є алгоритм ВІ А5Т, описаний у: Айбспиці еї а!., 1990, У. Мої. Віої. 215:403-410; Айївспиї! еї а!., 1997, Мисівїс Асіа5 Невз. 25:3389-3402; і Кагіп еї а!., 1993, Ргос. Маї). Асад. 5сі. 0.5.А. 90:5873-5787. Особливо застосовною програмою ВІ А5Т є програма УМО-ВІ АБТ-2, яка була створена відповідно до Айбспи! еї аї., 1996, Меїйод5 іп
Епгутоіоду 266:460-480. У УМО-ВІ АЗТ-2 використовується декілька пошукових параметрів, значення більшості яких задані за умовчанням. Налаштовні параметри, встановлені з наступними значеннями: довжина перекривання - 1, доля перекривання - 0,125, порогова довжина слова (Т) - І. Параметри Н5Р 5 і Н5БР 52 є динамічними значеннями та встановлюються самою програмою залежно від складу конкретної послідовності та складу конкретної бази даних, за якою проводиться пошук послідовності, що представляє інтерес; при цьому ці значення можуть бути скоректовані для підвищення чутливості. (153) Додатковим застосовним алгоритмом є ВГА5Т з гепами, описаний у АйбсПиї еї аї., 1993, Мисі. Асід5 Не5. 25:3389-3402. У ВІ А5Т з гепами використовується матриця оцінок замін
ВІ ОБИМ-62; пороговий параметр Т встановлений на 9; використовується метод двох збігів для ініціації продовження без гепів, приписується гепам довжиною К вартість 10К; Хи встановлений на 16, і Худ встановлений на 40 для стадії пошуку за базою даних і на 67 для вихідної стадії алгоритмів. Вирівнювання з гепами ініціюються оцінкою, що відповідає близько 22 бітам. (154) Загалом амінокислотна гомологія, схожість або ідентичність між окремими варіантними
СОК або послідовностями МНЛ/І. складає щонайменше 6095 з послідовностями, наведеними у цьому документі, і, частіше, з переважно зростаючою гомологією або ідентичністю, що складає щонайменше 6595 або 7095, прийнятніше щонайменше 7595 або 8095, навіть прийнятніше щонайменше 8595, 9095, 9195, 9295, 9395, 9495, 9595, 96965, 9795, 9895, 9995 і майже 100965.
Аналогічним чином "відсоток (95) ідентичності нуклеотидних послідовностей" відносно нуклеотидної послідовності визначених у цьому документі зв'язуючих білків визначається як відсотковий вміст нуклеотидних залишків у кандидатній послідовності, які є ідентичними з нуклеотидними залишками у кодуючій послідовності конструкції антитіла. У конкретному методі використовується модуль ВІАЗТМ з МУМО-ВІАБТ-2 зі встановленими за умовчанням параметрами, з довжиною перекривання і долею перекривання встановленими на 1 і 0,125 відповідно.
І155| Загалом гомологія, схожість або ідентичність нуклеотидних послідовностей між нуклеотидними послідовностями, які кодують окремі варіантні СОМ або послідовності МНЛ/Ї, і нуклеотидними послідовностями, наведеними у цьому документі, складає щонайменше 6055 і, частіше, з переважно зростаючою гомологією або ідентичністю, що складає щонайменше 6595,
ТО9о, 7590, 8095, 8195, 8290, 8390, 8495, 8595, 8695, 879Ую, 8895, 8995, 9095, 9195, 9295, 9395, 9490, 9595, 9696, 9795, 9895 або 9995 і майже 10095. Таким чином, "варіантна СО" або "варіантна область МНЛ/І/" є областю з конкретною гомологією, схожістю або ідентичністю з батьківською
СОКЛ/НЛІ/. згідно з винаходом і має біологічну функцію, включаючи, але не обмежуючись цим, щонайменше 6095, 6595, 7095, 7595, 8095, 8195, 8295, 8395, 8495, 8595, 8695, 8795, 8895, 8995, 90905,
БО 9195, 9295, 9395, 9495, 9595, 96905, 9790, 9895 або 9995 специфічності і/або активності батьківської
СО або МНЛ/Л.. (156) В одному варіанті реалізації винаходу відсоток ідентичності з людською зародковою лінією конструкцій антитіл відповідно до винаходу складає 2 7095 або 2 7595, прийнятніше 2 8095 або 2 8595, навіть прийнятніше 2 9095 і найприйнятніше 2 91905, 2 92905, 2 93905, 2 94905, 2 95965 або навіть 2 9695. Вважається, що ідентичність з генними продуктами людського антитіла зародкової лінії Є важливим чинником для зниження ризику того, що терапевтичні білки викликатимуть імунну відповідь проти лікарського препарату у пацієнта під час лікування. Нул"апд 5 Еооїе ("(ттиподепісйу ої епдіпеегтейд апіібодієеєв"; Меїйоа5 36 (2005) 3-10) продемонстрували, що зменшення нелюдських частин лікарських конструкцій антитіл призводить до зниження ризику бо індукції антитіл проти лікарського препарату у пацієнтів під час лікування. Під час порівняння достатньої кількості клінічно оцінених лікарських препаратів на основі антитіл і відповідних даних по імуногенності, було виявлено тенденцію, що гуманізація М-областей антитіл робить білки менш імуногенними (у середньому для 5,195 пацієнтів), ніж антитіла, які несуть незмінені нелюдські М-області (у середньому для 23,5995 пацієнтів). Отже, для білкових терапевтичних
Б засобів на основі М-області у формі конструкцій антитіл потрібна велика міра ідентичності з людськими послідовностями. З метою визначення ідентичності зародкової лінії можна проводити вирівнювання М-областей МІ з амінокислотними послідовностями М-сегментів і - сегментів людської зародкової лінії (пЕр://миразе.ттіс - сре.сат.ас.ик/), використовуючи програмне забезпечення Месіог МТІ, і розраховувати амінокислотну послідовність шляхом ділення ідентичних амінокислотних залишків на загальне число амінокислотних залишків МІ. у відсотках. Те саме можна здійснювати щодо УН-сегментів (пер:/ибазе.тгс - сре.сат.ас.ик/) за винятком того, що МН СОКЗ може бути виключена внаслідок високої міри різноманітності та відсутності партнерів за вирівнюванням серед МН СОКЗ людської зародкової лінії. Потім можна застосовувати рекомбінантні технології для підвищення ідентичності послідовностей з генами людського антитіла зародкової лінії.
І157| Додатково мається на увазі, що біспецифічні конструкції антитілдо ВСМАХСОЗ згідно з цим винаходом (практично) не зв'язуються або не вступають у перехресну реакцію з ВАЕЕР-В людини і/або ТАСІ людини. Додатково мається на увазі, що біспецифічні конструкції антитіл до
ВСМАХСОЗ згідно з цим винаходом (практично) не зв'язуються або не вступають у перехресну реакцію з ВАЕРЕ-К макака/яванського макака і/або ТАСІ макака/яванського макака. 158| У додатковому варіанті реалізації біспецифічні конструкції антитіл згідно 3 цим винаходом демонструють високий вихід мономерів у стандартних умовах лабораторного масштабу, наприклад, в умовах стандартного двохетапного процесу очищення. Переважно вихід мономерів конструкцій антитіл відповідно до винаходу складає 2 0,25 мг/л супернатанту, прийнятніші 2 0,5 мг/л, навіть прийнятніше 2 1 мг/л і найбільш прийнятно 2 З мг/л супернатанту. (159) Аналогічно, можна визначити вихід димерних ізоформ конструкцій антитіл і, отже, відсотковий вміст мономерів (тобто мономер: (мономер - димер)) конструкцій антитіл.
Продуктивність мономерних і димерних конструкцій антитіл і розрахований відсотковий вміст мономерів можна, наприклад, отримати на етапі ЕХ-очищення культурального супернатанту від
Зо стандартизованого виробництва у лабораторному масштабі у ролерних флаконах. В одному варіанті реалізації винаходу відсотковий вміст мономерів конструкцій антитіл складає 2 80965, прийнятніше 2 8595, навіть прийнятніше 2 9095 і найприйнятніше 2 9595. (160) В одному варіанті реалізації винаходу конструкції антитіл переважно характеризуються плазмовою стабільністю (відношенням ЕС5О з плазмою до ЕС50 без плазми), що становить х 5 або « 4, прийнятніше « 3,5 або «х 3, навіть прийнятніше «х 2,5 або х 2 і найприйнятніше х 1,5 або « 1. Плазмову стабільність конструкції антитіла можна досліджувати, інкубуючи конструкцію у людській плазмі за 37 "С впродовж 24 годин з подальшим визначенням ЕС5О в аналізі вивільнення 5іхрому. Ефекторні клітини в аналізі цитотоксичності можуть являти собою стимульовані збагачені людські СО8-позитивні Т-клітини. Клітини-мішені можуть являти собою, наприклад, клітини СНО, трансфіковані людським ВСМА. Співвідношення між ефекторними клітинами та клітинами-мішенями (Е:М) може бути обране як 10:1. Вживаний у цих цілях пул людської плазми отримують з крові здорових донорів, зібраної у покриті ЕДТК шприци. Клітинні компоненти вилучають шляхом центрифугування, а верхню плазмову фазу збирають і після цього об'єднують. В якості контролю конструкції антитіл розводять безпосередньо перед аналізом цитотоксичності у середовищі КРМІ-1640. Плазмову стабільність розраховують як відношення ЕС5О (після інкубації плазми) до ЕС5О (контролю). 1161) Також переважно, щоб перетворення мономерів на димери конструкцій антитіл було низьким. Міру перетворення можна визначати у різних умовах й аналізувати за допомогою високоефективної ексклюзійної хроматографії. Наприклад, інкубацію мономерних ізоформ конструкцій антитіл можна проводити впродовж 7 діб за 37 "С і концентраціях, що складають, наприклад, 100 мкг/мл або 250 мкг/мл, в інкубаторі. У таких умовах переважно, щоб конструкції антитіл згідно з винаходом демонстрували відсотковий вміст димерів «595, прийнятніше «496, навіть прийнятніше х395, навіть прийнятніше х2,5956, навіть прийнятніше «295, навіть прийнятніше «1,595 і найприйнятніше «195 або «0,595 або навіть 0905.
І162| Також переважно, щоб біспецифічні конструкції антитіл згідно з цим винаходом характеризувалися низьким рівнем перетворення на димери після деякого числа циклів заморожування/розморожування. Наприклад, мономер конструкції антитіла доводять до концентрації 250 мкг/мл, наприклад, у генеричному буфері готової форми та піддають трьом циклам заморожування/розморожування (заморожування за -80"С впродовж 30 хв з бо подальшим розморожуванням впродовж 30 хв за кімнатної температури) з подальшим проведенням високоефективної ЕХ для визначення відсоткового вмісту початково мономерної конструкції антитіла, яка була перетворена на димерну конструкцію антитіла. Переважний відсотковий вміст димерів біспецифічних конструкцій антитіл складає «595, прийнятніше «495, навіть прийнятніше х395, навіть прийнятніше х2,5956, навіть прийнятніше «295, навіть прийнятніше «1,595 і найприйнятніше «195 або навіть «0,595, наприклад, після трьох циклів заморожування/розморожування.
І163) Біспецифічні конструкції антитіл згідно з цим винаходом переважно демонструють гарну термостабільність з температурою агрегації 245 "С або »50 "С, прийнятніше 252 "С або 254 "С, навіть прийнятніше 256 "С або 257 "С і найприйнятніше 258 "С або 259 "С. Параметр термостабільності можна визначити у контексті температури агрегації антитіла таким чином:
Розчин антитіла у концентрації 250 мкг/мл переносять в одноразову кювету та поміщають у пристрій для дослідження методом динамічного розсіяння світла (ДРС). Зразок нагрівають від 40"С до 70"С за швидкості нагрівання 0,5 "С/хв з постійним вимірюванням визначуваного радіусу. Збільшення радіусу, що вказує на плавлення та агрегацію білка, використовують для розрахунку температури агрегації антитіла. (164) В альтернативному варіанті температурні криві плавлення можна визначити методом диференціальної скануючої калориметрії (ДСК) для визначення характеристичної біофізичної стабільності білка конструкцій антитіл. Ці експерименти проводять, використовуючи пристрій
МістоСа! 1 С (Мопйпатріоп, МА, 0О.5.А) МР-О5С. Поглинання енергії зразком, який містить конструкцію антитіла, записують від 20 "С до 90 "С і порівнюють із зразком, який містить тільки буфер готової форми. Конструкції антитіл доводять до кінцевої концентрації 250 мкг/мл, наприклад, у рухомому буфері ЕХ. Для отримання відповідної кривої плавлення покроково підвищують загальну температуру зразка. За кожної температури Т записують поглинання енергії зразка та стандартного буфера готової форми. Різницю у поглинанні енергії Ср (ккал/"моль/"С) зразка мінус стандарт наносять на графік як функцію від відповідної температури. Температуру плавлення визначають як температуру у першому максимумі поглинання енергії. 1165) Також мається на увазі, що біспецифічні конструкції антитіл до ВСМАХСОЗ згідно з винаходом мають каламутність (визначувану за ОП340 після доведення концентрації очищеної
Зо мономерної конструкції антитіла до 2,5 мг/мл і інкубації впродовж ночі) х 0,2, переважно х 0,15, прийнятніше х 0,12, навіть прийнятніше х 0,1 і найприйнятніше х 0,08.
І166)| У додатковому варіанті реалізації конструкція антитіла відповідно до винаходу стабільна за фізіологічного або трохи меншого рн, тобто рН від близько 7,4 до 6,0. Чим краще конструкція антитіла витримує нефізіологічний рН, такий як рН близько 6,0, тим вище міра виділення конструкції антитіла, яка елююється з іонообмінної колонки, відносно загальної кількості завантаженого білка. Виділення конструкції антитіла з іонообмінної (наприклад, катіонообмінної) колонки за рН близько 6,0 переважно складає г 3095, прийнятніше 2» 4095, прийнятніше 2 5095, навіть прийнятніше 2 6095, навіть прийнятніше 2 7095, навіть прийнятніше 2 8095, навіть прийнятніше 2 9095, навіть прийнятніше 2 9595 і найприйнятніше 2 99965.
І167| Додатково мається на увазі, що біспецифічні конструкції антитіл згідно з цим винаходом демонструють терапевтичну ефективність або протипухлинну активність. Це можна, наприклад, оцінити в описаному у нижченаведеному прикладі дослідженні ксенотрансплантатної моделі людської пухлини на пізній стадії: 168)| На 1 добу дослідження 5х10б клітин з лінії клітин, позитивної щодо людського цільового клітинного антигена (у даному випадку: ВСМА), підшкірно ін'єктують у праву задню бічну частину самиць мишей МОБ/5СІЮ. Коли середній об'єм пухлин досягає близько 100 мм3, іп мйго розмножені людські СЮОЗ-позитивні Т-клітини трансплантують мишам за допомогою ін'єкції близько 2х107 клітин у черевну порожнину тварин. Миші з контрольної групи 1, яку оброблюють базовим розчином, не отримують ефекторні клітини та використовуються у якості контролю без трансплантата для порівняння з контрольною групою 2, яку оброблюють базовим розчином (і яка одержує ефекторні клітини), щоб відстежувати вплив самих Т-клітин на ріст пухлини. Обробку антитілом починають, коли середній об'єм пухлин досягає близько 200 мм3.
Середній об'єм пухлини для кожної групи обробки у день початку обробки не повинен статистично відрізнятися від будь-якої іншої групи (дисперсійний аналіз). Мишей оброблюють 0,5 мг/кг7/доба біспецифічної конструкції антитіла до ВСМАХСЮОЗ шляхом внутрішньовенної болюсної ін'єкції впродовж від близько 15 до 20 діб. Під час дослідження проводять вимірювання пухлин каліперами, а прогрес оцінюють шляхом порівняння об'єму пухлин (ТМ) між групами. Інгібування росту пухлини Т/С |(95| визначають, розраховуючи ТМ як Т/С95 - 100 х (медіанний ТУ в аналітичній групі) / (медіанний ТУ у контрольній групі 2). бо І169| Фахівцям відомо, як модифікувати або адаптувати певні параметри цього дослідження,
Зо такі як число пухлинних клітин, що ін'єктуються, місце ін'єкції, число людських Т-клітин, що трансплантуються, призначену для введення кількість біспецифічних конструкцій антитіл і графік, отримуючи при цьому відтворюваний результат, який має сенс. Переважне інгібування росту пухлини Т/С (95| складає х 70 або «х 60, прийнятніше «х 50 або «х 40, навіть прийнятніше х 30 або « 20 і найприйнятніше х 10 або « 5 або навіть «х 2,5. (170) У переважному варіанті реалізації конструкції антитіла згідно з винаходом конструкція антитіла є одноланцюговою конструкцією антитіла.
І171)| Також у переважному варіанті реалізації конструкції антитіла згідно з винаходом зазначений третій домен містить у порядку від аміно-кінця до карбокси-кінця: шарнір-СН2-СНЗ-лінкер-шарнір-СН2-СНЗ. (1721) В одному варіанті реалізації винаходу кожен з зазначених поліпептидних мономерів третього домену має амінокислотну послідовність, щонайменше на 9095 ідентичну послідовності, вибраній з групи, що складається з: ЗЕО ІО МО: 17-24. У переважному варіанті реалізації винаходу кожен з зазначених поліпептидних мономерів має амінокислотну послідовність, вибрану з БЕО ІЮ МО: 17-24. 173) Також в одному варіанті реалізації винаходу домен СН2 одного або переважно кожного (обох) поліпептидних мономерів третього домену містить внутрішньодоменний цистеїновий дисульфідний місток. Як відомо у цій галузі техніки, термін "цистеїновий дисульфідний місток" відноситься до функціональної групи із загальною структурою К-5-5-К. Такий зв'язок також називається З5-зв'язком або дисульфідним містком і отримується шляхом сполучення двох тіольних груп залишків цистеїну. Для конструкції антитіла згідно з винаходом особливо переважно, щоб цистеїни, які утворюють цистеїновий дисульфідний місток у зрілій конструкції антитіла, були внесені в амінокислотну послідовність домену СНІ, яка відповідає позиціям 309 і 321 (нумерація Кабраю. (174) В одному варіанті реалізації винаходу вилучено ділянку глікозилювання у позиції 314 за Караї домену СН2. Переважно, щоб це вилучення ділянки глікозилювання забезпечувала заміна МЗ314Х, де Х є будь-якою амінокислотою за винятком СО). Зазначена заміна переважно являє собою заміну М3140. У прийнятнішому варіанті реалізації винаходу зазначений домен
СНаІ2 додатково містить наступні заміни (позиції відповідно до Кара): М321сС і К309С (ці заміни
Зо вносять внутрішньодоменний цистеїновий дисульфідний місток у позиціях 309 і 321 за Кабрад. 1175) Передбачається, що переважні характеристики конструкції антитіла згідно з винаходом у порівнянні, наприклад, з відомою у цій галузі техніки біспецифічною конструкцією антитіла на основі гетеро-Ес (фігура 15) можуть бути, окрім іншого, зв'язані з внесенням вищеописаних модифікацій у домен СН2. Таким чином, для конструкції згідно з винаходом переважно, щоб домени СН2г у третьому домені конструкції антитіла згідно з винаходом містили внутрішньодоменний цистеїновий дисульфідний місток у позиціях 309 і 321 за КаБбаї і/або ділянку глікозилювання у позиції 314 за Караї було вилучено за допомогою описаної вище заміни МЗ314Х, переважно заміни М3140. (176) У додатковому переважному варіанті реалізації винаходу домени СН2 у третьому домені конструкції антитіла згідно з винаходом містять внутрішньодоменний цистеїновий дисульфідний місток у позиціях 309 і 321 за Кабаї, а ділянку глікозилювання у позиції 314 за
Караї вилучено за допомогою заміни М3140. Найприйнятніше поліпептидний мономер у третьому домені конструкції антитіла згідно з винаходом має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з БЕО ІО МО: 17 і 18.
І177| В одному варіанті реалізації у винаході запропоновано конструкцію антитіла, в якій: () перший домен містить два варіабельні домени антитіла, а другий домен містить два варіабельні домени антитіла; (і) перший домен містить один варіабельний домен антитіла, а другий домен містить два варіабельні домени антитіла; (ії) перший домен містить два варіабельні домени антитіла, а другий домен містить один варіабельний домен антитіла; або (ім) перший домен містить один варіабельний домен антитіла, а другий домен містить один варіабельний домен антитіла. 178) Відповідно, перший і другий домени можуть бути зв'язуючими доменами, кожен з яких містить два варіабельні домени антитіла, таких як домени МН і МІ. Приклади таких зв'язуючих доменів, що містять два варіабельні домени антитіла, були описані вище у цьому документі та включають, наприклад, фрагменти Ем, фрагменти 5сЕм або фрагменти Раб, описані вище у цьому документі. В альтернативному варіанті один або обидва цих зв'язуючих домени можуть містити тільки один варіабельний домен. Приклади таких однодоменних зв'язуючих доменів бо були описані вище у цьому документі та включають, наприклад, нанотіла або антитіла, що містять один варіабельний домен, які містять лише один варіабельний домен, який може бути
МНН, МН або У, який специфічно зв'язує антиген або епітоп незалежно від інших М-областей або доменів. (179) У переважному варіанті реалізації конструкції антитіла згідно з винаходом перший і другий домени злиті з третім доменом за допомогою пептидного лінкера. Переважний пептидний лінкер був описаний вище у цьому документі та характеризується амінокислотною послідовністю (зІу-Стіу-Ссіу-Ссіу-Зег, тобто сСіудбЗег (ЗЕО ІЮ МО: 1), або її полімерами, тобто (Сіу4бЗег)х, де х є цілим числом, рівним 1 або більше (наприклад, 2 або 3). Особливо переважний лінкер для злиття першого та другого доменів з третім доменом наведено у 5ЕО ІЮ
МО: 1. 180| У переважному варіанті реалізації конструкція антитіла згідно з винаходом характеризується тим, що містить у порядку від аміно-кінця до карбокси-кінця: (а) перший домен; (Б) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з БЕО ІЮ МО: 1-3; (с) другий домен; (4) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ФЕО ІЮО МО: 1,2, 3,9, 10,11 їі 12; (є) перший поліпептидний мономер третього домену; () пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається
ЗЗЕОІЮО МО: 5,6, 7 ів; і (9) другий поліпептидний мономер третього домену. 181) Конструкція антитіла згідно з цим винаходом містить перший домен, який зв'язується з
ВСМА, переважно з позаклітинним доменом (ПКД) ВСМА. Мається на увазі, що термін "зв'язування з позаклітинним доменом ВСІМА" у контексті цього винаходу означає, що зв'язуючий домен зв'язується з ВСМА, який експресується на поверхні клітини-мішені. Отже, перший домен відповідно до винаходу переважно зв'язується з ВСМА, коли він експресується клітинами або лініями клітин з природною експресією і/або клітинами або лініями клітин, трансформованими або (стабільно/тимчасово) трансфікованими ВСМА. У переважному варіанті
Зо реалізації винаходу перший зв'язуючий домен також зв'язується з ВСМА, коли ВСМА використовується у якості молекули "мішені" або "ліганда" у іп міго аналізі зв'язування, такому як ВіАсоге або аналіз Скетчарда. "Клітина-мішень" може являти собою будь-яку прокаріотичну або еукаріотичну клітину, яка експресує ВСМА на поверхні; переважно клітина-мішень являє собою клітину, яка є частиною організму людини або тварини, таку як конкретні ракові або пухлинні клітини, що експресують ВСМА. (182! Переважно перший домен зв'язується з ВСМА/ЛКД ВСМА людини. Переважна послідовність ВСМА людини наведена у 5ЕО ІО МО: 41, а переважна послідовність ПКД ВСМА людини наведена у 5ЕО ІО МО: 42. У додатковому переважному варіанті реалізації винаходу він зв'язується з ВСМА/ЛКД ВСМА макака. Переважна послідовність ВСМА макака наведена у 5ЕО
ІО МО: 43, а переважна послідовність ПКД ВСМА макака наведена у 5ЕО ІЮО МО: 44. Відповідно до найбільш прийнятного варіанту реалізації винаходу перший домен зв'язується з ВСМА/ЛКД
ВСМА як людини, так і макака. "Позаклітинний домен ВСМА" або "ПКД ВСМА" відноситься до області або послідовності ВСМА, яка практично не містить трансмембранні та цитоплазматичні домени ВСМА. Фахівцеві у цій галузі техніки зрозуміло, що трансмембранний домен, визначуваний для поліпептиду ВСМА згідно з цим винаходом, визначається на підставі критеріїв, зазвичай застосовних у цій галузі техніки для визначення гідрофобного домену такого типу. Точні межі трансмембранного домену можуть варіюватися, але скоріше за все не більше ніж на близько 5 амінокислот у будь-якому кінці домену, спеціальним чином зазначеного у цьому документі. Переважна амінокислотна послідовність повнорозмірного ВСМА макака наведена у 5ЕО ІО МО: 41. Переважний ПКД ВСМА наведений у 5ЕО ІО МО: 42.
І183) Переважні зв'язуючі домени, які зв'язуються з ВСМА, описані у МО 2013/072406, УМО 2013/072415 ії МО 2014/140248. Будь-який зв'язуючий домен для ВСМА, описаний у цих заявках, можна застосовувати у контексті цього винаходу. (184) В одному аспекті винаходу конструкція антитіла містить у порядку від аміно-кінця до карбокси-кінця: (а) перший домен, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з
ЗЕО ІЮ МО: 53, 59, 71, 77, 89 або 95; (Б) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з БЕО ІЮ МО: 1-3; бо (с) другий домен, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з
ЗЕО ІО МО: 23, 25, 41, 43, 59,61, 77, 79, 95, 97, 113, 115, 131, 133, 149, 151, 167, 169, 185 або 187 з МО 2008/119567 або 5ЕО ІО МО: 15; (4) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з БЕО ІЮ МО: 1, 2, 3, 9, 10, 11 і 12; (є) перший поліпептидний мономер третього домену, який має поліпептидну послідовність, вибрану з групи, що складається з 5БЕО ІЮ МО: 17-24; (Ї) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається
ЗЗЕОІЮО МО: 5,6, 7 16; (9) другий поліпептидний мономер третього домену, який має поліпептидну послідовність, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮ МО: 17-24. (185) Разом з цим переважним варіантом реалізації, перший і другий домени, які злиті за допомогою пептидного лінкера з третім доменом, містять послідовність, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮО МО: 53, 59, 71, 77, 89 або 95. В одному аспекті винаходу конструкція антитіла згідно з винаходом характеризується тим, що має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІО МО: 55, 56, 61, 62, 73, 74, 79, 80, 91, 92,97 і 98. (186) У винаході додатково запропоновано полінуклеотид/молекулу нуклеїнової кислоти, які кодують конструкцію антитіла згідно з винаходом. Полінуклеотид являє собою біополімер, що складається з 13 або більше нуклеотидних мономерів, ковалентно зв'язаних у ланцюзі. ДНК (така як кКДНК) і РНК (така як мРНК) є прикладами полінуклеотидів з різною біологічною функцією. Нуклеотиди є органічними молекулами, які слугують в якості мономерів або субодиниць молекул нуклеїнових кислот, таких як ДНК або РНК. Молекула нуклеїнової кислоти або полінуклеотид може бути дволанцюговою або одноланцюговою, лінійною або коловою.
Переважно вона знаходиться у векторі, який переважно знаходиться у клітині-хазяїні. Вказана клітина-хазяїн, наприклад, після трансформації або трансфекції вектором або полінуклеотидом згідно з винаходом здатна експресувати конструкцію антитіла. З цією метою полінуклеотид або молекула нуклеїнової кислоти функціонально зв'язані з регуляторними послідовностями.
І187| Генетичний код являє собою набір правив, за допомогою якого інформація, закодована у генетичному матеріалі (нуклеїнових кислотах), транслюється у білок. Біологічна розшифровка у живих клітинах здійснюється рибосомою, яка зв'язує амінокислоти у порядку, що визначає
Зо МРНАК, використовуючи молекули тРНК для перенесення амінокислот і для прочитування тринуклеотидів мРНК за раз. Код визначає, як послідовності цих нуклеотидних триплетів, що називаються кодонами, визначають, яку амінокислоту слід додавати наступною під час синтезу білка. За деякими виключеннями тринуклеотидний кодон у послідовності нуклеїнової кислоти визначає одну амінокислоту. Оскільки переважна більшість генів кодуються абсолютно однаковим кодом, цей конкретний код часто називають канонічним або стандартним генетичним кодом. Хоча генетичний код визначає білкову послідовність для цієї кодуючої області, інші геномні області можуть впливати на те, коли і де виробляються ці білки. (188) Крім того, у винаході запропоновано вектор, який містить полінуклеотид/молекулу нуклеїнової кислоти згідно з винаходом. Вектор являє собою молекулу нуклеїнової кислоти, яку застосовують в якості носія для перенесення (стороннього) генетичного матеріалу у клітину.
Термін "вектор" включає, але не обмежується цим, плазміди, віруси, косміди та штучні хромосоми. Загалом сконструйовані вектори містять точку початку реплікації, ділянку мультиклонування та селективний маркер. Сам вектор у загальному випадку являє собою нуклеотидну послідовність, зазвичай послідовність ДНК, яка містить вставку (трансген), і більшу послідовність, яка слугує "скелетом" для вектора. Сучасні вектори можуть включати додаткові елементи окрім вставки трансгена та скелета: промотор, генетичний маркер, стійкість до антибіотиків, репортерний ген, націлюючу послідовність, мітку для очищення білка. Вектори, які називаються експресійними векторами (експресійними конструкціями) спеціально призначені для експресії трансгена у клітині-мішені та в загальному випадку містять регуляторні послідовності. 1189) Термін "регуляторні послідовності" відноситься до послідовностей ДНК, необхідних для експресії функціонально зв'язаної кодуючої послідовності у конкретному організмі-хазяїні.
Регуляторні послідовності, які підходять для прокаріот, наприклад, включають промотор, необов'язково, послідовність оператора та ділянку зв'язування рибосоми. Відомо, що в еукаріотичних клітинах використовуються промотори, сигнали поліаденілювання та енхансери. 190| Нуклеїнова кислота є "функціонально зв'язаною", коли вона знаходиться у функціональному взаємозв'язку з іншою послідовністю нуклеїнової кислоти. Наприклад, ДНК для передпослідовності або секреторної лідерної послідовності функціонально зв'язана з ДНК для поліпептиду, якщо вона експресується у вигляді білка-попередника, який бере участь у бо секреції поліпептиду; промотор або енхансер функціонально зв'язаний з кодуючою послідовністю, якщо він впливає на транскрипцію послідовності; або ділянка зв'язування рибосоми функціонально зв'язана з кодуючою послідовністю, якщо вона розташована так, щоб полегшувати трансляцію. Загалом "функціонально зв'язаний" означає, що зв'язані послідовності
ДНК є суміжними і, у разі секреторної лідерної послідовності, суміжними та у фазі зчитування.
При цьому енхансери не мають бути суміжними. Зв'язування здійснюється шляхом лігування у зручних рестрикційних ділянках. Якщо такі ділянки не існують, використовують синтетичні адаптори або лінкери відповідно до традиційної практики. 191) "Трансфекція" являє собою процес умисного внесення молекул нуклеїнових кислот або полінуклеотидів (включаючи вектори) у клітини-мішені. Цей термін використовується в основному для невірусних методів у еукаріотичних клітинах. Трансдукцію часто використовують для опису опосередкованого вірусом перенесення молекул нуклеїнових кислот або полінуклеотидів. Трансфекція клітин тварин, як правило, включає відкриття тимчасових пір або "дір" у клітинній мембрані для того, щоб зробити можливим поглинання матеріалу. Трансфекцію можна проводити, використовуючи фосфат кальцію, шляхом електропорації, шляхом стискання клітин або шляхом змішування катіонного ліпіду з матеріалом для отримання ліпосом, які зливаються з клітинною мембраною та залишають свій вантаж усередині. 11921) Термін "трансформація" використовують для опису невірусного перенесення молекул нуклеїнових кислот або полінуклеотидів (включаючи вектори) у бактерії та також у еукаріотичні клітини, що не належать тваринам, включаючи клітини рослин. Отже, трансформація являє собою генетичну зміну бактеріальної клітини або еукаріотичної клітини, що не належить тварині, у результаті прямого поглинання через клітинну (ї) мембрану (и) з довколишнього середовища та подальше включення екзогенного генетичного матеріалу (молекул нуклеїнових кислот).
Трансформацію можна проводити штучними засобами. Для того, щоб сталася трансформація, клітини або бактерії повинні знаходитися у стані компетенції, який може наставати у вигляді обмеженої у часі відповіді на зовнішні умови, такі як голодування та щільність клітин.
М9З| Крім того, у винаході запропоновано клітину-хазяїна, трансформовану або трансфіковану полінуклеотидом/молекулою нуклеїнової кислоти або вектором згідно з винаходом. У контексті цього документу мається на увазі, що терміни "клітина-хазяїн" або "реципієнтна клітина" включають будь-яку окрему клітину або культуру клітин, які можуть бути
Зо або були реципієнтами векторів, молекул екзогенних нуклеїнових кислот і полінуклеотидів, що кодують конструкцію антитіла згідно з цим винаходом; і/або реципієнтами самої конструкції антитіла. Внесення відповідного матеріалу у клітину проводять шляхом трансформації, трансфекції і таке інше. Також мається на увазі, що термін "клітина-хазяїн" включає потомство або потенційне потомство однієї клітини. Оскільки у подальших поколіннях можуть виникати певні модифікації внаслідок природної, випадкової або умисної мутації або внаслідок впливу з боку довколишнього середовища, таке потомство може насправді не бути повністю ідентичним (за морфологією або за комплектом геномної або загальної ДНК) з батьківською клітиною, але усе однаково у контексті цього документу включено в об'єм зазначеного терміну. Придатні клітини-хазяї включають прокаріотичні або еукаріотичні клітини та також включають, але не обмежуються цим, бактерії, клітини дріжджів, клітини грибів, клітини рослин і клітини тварин, такі як клітини комах і клітини ссавців, наприклад, мишей, щурів, макак або людини.
І194| Конструкцію антитіла згідно з винаходом можна отримувати у бактеріях. Після експресії конструкцію антитіла згідно з винаходом виділяють з клітинної пасти Е. соїї у розчинну фракцію і потім її можна очищувати за допомогою, наприклад, афінної або ексклюзійної хроматографії. Кінцеве очищення можна проводити аналогічно з процесом очищення антитіла, яке експресується, наприклад, у клітинах СНО. 195) Окрім прокаріот, еукаріотичні мікроби, такі як ниткоподібні гриби або дріжджі, є придатними хазяями для клонування або експресії конструкції антитіла згідно з винаходом.
Засспаготусев5 сегемізіае або звичайні пекарні дріжджі найчастіше використовуються серед мікроорганізмів-хазяїв з нижчих еукаріот. При цьому велике число інших родів, видів і штамів є загальноприйнятими та застосовними у даному випадку, наприклад, Зспі7озасспаготусев ротбре, хазяї з Кішумеготусев, такі як К. Іасії5, К. їШшадіїв (АТОС 12424), К. риїдагісиз (АТОС 16045), К. уісКегатії (АТОС 24178), К. майці (АТСС 56500), К. агозорніагит (АТС 36906), К.
ТпептогоїЇегап5 і К. тагхіапи5; уатоміа (ЕР 402 226); Ріспіа разіогіз (ЕР 183 070); Сапаїда;
Тісподетпта геевіа (ЕР 244 234); Меигозрога сгазза; Зспулаппіотусев, такі як Зспулхаппіотусев оссідепіаїї5; і ниткоподібні гриби, такі як Меигоз5рога, Репісіййшт, Тоїуросіадіит, і хазяї Азрегойив5, такі як А. підшапзв і А. підег. 196) Придатні клітини-хазяї для експресії глікозильованої конструкції антитіла згідно з винаходом отримані з багатоклітинних організмів. Приклади клітин безхребетних включають бо клітини рослин і комах. Були визначені численні бакуловірусні штами та варіанти та відповідні пермісивні клітини-хазяї комах, такі як 5родоріега Ігидірегаа (гусениця), Аедез аедурії (москіт),
Аеде5 аІрорісіш5 (москіт), Югозорпйа теІаподазхіег (плодова мушка) і Вотрух тогі.
Загальнодоступними є різні вірусні штами для трансфекції, наприклад, варіант І -1 Ашодгарна саїйогпіса МРМ ї штам Віт-5 Вотрух тогі МРМ, і такі віруси можна використовувати в якості вірусу відповідно до цього винаходу, зокрема, для трансфекции клітин 5роаоргіега Ігидірегаа. 197| Рослинні клітинні культури бавовни, кукурудзи, картоплі, сої, петунії, томату, арабідопсису та тютюну також можна використовувати в якості хазяїв. Клонуючі та експресійні вектори, застосовні для отримання білків у рослинній клітинній культурі, відомі фахівцям у цій галузі техніки. Дивіться, наприклад, Ніай еї аї., Маїшге (1989) 342: 76-78, Омеп еї аї. (1992)
Віо/ТесппоЇІоду 10: 790-794, Апзаєпко еї аї. (1995) Те Ріапі У 8: 745-750, і РескКег еї аї. (1996)
Ріапі Мої Віо! 32: 979-986. 198) Проте найбільший інтерес представляють клітини хребетних, а розмноження клітин хребетних у культурі (тканинній культурі) стало рутинною процедурою. Прикладами застосовних ліній клітин-хазяїв ссавців є лінія нирки мавпи СМ1, трансформована 540 (СО5-7, АТОС СВІ 1651); лінія нирки ембріона людини (клітини 293 або 293, субклоновані для росту у суспензійній культурі, сгапат еї аї. , У. еп МігоЇ. 36: 59 (1977)); клітини нирки новонародженого хом'яка (ВНК, АТСС СС 10); клітини яєчника китайського хом'яка/-ОНЕВ (СНО, Опацб еї а!., Ргос. Маї!.
Асайд. 5сі. ОБА 77: 4216 (1980)); клітини Сертолі мишей (ТМ4, Маїег, Віо!. Нергод. 23: 243-251 (1980)); клітини нирки мавпи (СМІ АТСС СС 70); клітини нирки африканської зеленої мавпи (МЕНО-76, АТОС СКІ 1587); клітини карциноми шийки матки людини (НЕГА, АТСС СС 2); клітини нирки собаки (МОСК, АТСС СС 34); клітини печінки сірого щура (ВКІ. ЗА, АТСС СКІ. 1442); клітини легені людини (М/138, АТСС СС 75); клітини печінки людини (Нер 52,1413 8065); клітини пухлини молочної залози мишей (ММТ 060562, АТСС СС 5 1); клітини ТКІ (Маїпег еї аї.,
Аппаїв М. М Асад. 5сі. (1982) 383: 44-68); клітини МКС 5; клітини ЕЗ4; і лінія гепатоми людини (Нер Сг). 1199) У додатковому варіанті реалізації у винаході запропоновано процес для отримання конструкції антитіла згідно з винаходом, який включає культивування клітини-хазяїна згідно з винаходом, в умовах, що забезпечують експресію конструкції антитіла згідно з винаходом, і виділення отриманої конструкції антитіла з культури.
Зо (200) У контексті цього документу термін "культивування" відноситься до іп міїго підтримання, диференціюванню, росту, проліферації і/або розмноження клітин у відповідних умовах у середовищі. Термін "експресія" включає будь-який етап, що проводиться для отримання конструкції антитіла згідно з винаходом, включаючи, але не обмежуючись цим, транскрипцію, посттранскрипційну модифікацію, трансляцію, посттрансляційну модифікацію та секрецію.
І2011| У разі застосуванні рекомбінантних технологій конструкцію антитіла можна отримувати усередині клітини, у периплазматичному просторі або вона може безпосередньо секретуватися у середовище. Якщо конструкцію антитіла отримують усередині клітини, на першому етапі вилучають дебрис у вигляді частинок, як клітин-хазяїв, так і лізованих фрагментів, наприклад, шляхом центрифугування або ультрафільтрації. У Сагег еї аї., Віо/ЛГесппоЇоду 10: 163-167 (1992) описано процедуру для виділення антитіл, які секретуються у периплазматичний простір
Е. Соїї. Коротко, клітинну пасту розморожують у присутності ацетату натрію (рН 3,5), ЕДТК і фенілметилсульфонілфториду (ФМОСФ) упродовж близько 30 хв. Клітинний дебрис вилучають шляхом центрифугування. Якщо антитіло секретується у середовище, супернатанти з таких експресійних систем у загальному випадку спочатку концентрують, використовуючи комерційно доступний фільтр для концентрації білка, наприклад, установку для ультрафільтрації Атісоп або Мійіроге Реїйсоп. На будь-якому з вищезгаданих етапів може бути включений інгібітор протеаз, такий як ФМСОФ, для інгібування протеолізу, а антибіотики можуть бути включені для попередження росту занесених забруднювачів. (2021) Конструкцію антитіла згідно з винаходом, отриману з клітин-хазяїв, можна виділяти або очищати, використовуючи, наприклад, хроматографію з гідроксилапатитом, гель-електрофорез, діаліз і афінну хроматографію. Також, залежно від призначеного для виділення антитіла, доступні інші методики очищення білка, такі як фракціонування на іонообмінній колонці, осадження етанолом, обернено-фазова ВЕРХ, хроматографія на силікагелі, хроматографія на гепарині-сефарозіТтМ, хроматографія на аніоно- або катіонообмінній смолі (такій як колонка з поліаспарагіновою кислотою), хроматофокусування, ДСН-ПААГ і осадження сульфатом амонію.
Якщо конструкція антитіла згідно з винаходом містить домен СНЗ, для очищення застосовують смолу ВаКегропа АВХ (.Т. Вакег, РпШір5риго, МУ).
І203| Афінна хроматографія є переважною методикою очищення. Матриця, до якої приєднується афінний ліганд, найчастіше є агарозою, але також доступні інші матриці. бо Механічно стабільні матриці, такі як скло з контрольованим розміром пір або полі(стіролдивініл)убензен, забезпечують велику швидкість потоку та менший час обробки у порівнянні з агарозою.
І204| Крім того, у винаході запропоновано фармацевтичну композицію, яка містить конструкцію антитіла згідно з винаходом або конструкцію антитіла, отриману відповідно до способу згідно з винаходом. Для фармацевтичної композиції згідно з винаходом переважно, щоб гомогенність конструкції антитіла складала 2 8095, прийнятніше 2 8195,» 8295,» 83905,» 8490 або 2 8595, ще прийнятніше 2 8695, 8795,» 8895, 8995 або г 9095, ще прийнятніше 2 9195,» 9295,» 9395,» 9495 або 2 9595 і найприйнятніше 2 9695,2 9795,» 9895 або 2 99965.
І205| У контексті цього документу термін "Фармацевтична композиція" відноситься до композиції, придатної для введення пацієнту, переважно пацієнту-людині. Особливо переважна фармацевтична композиція згідно з цим винаходом містить одну або безліч конструкцій антитіл згідно 3 винаходом, переважно у терапевтично ефективній кількості. Переважно фармацевтична композиція додатково містить відповідні готові форми одного або більше (фармацевтично ефективних) носіїв, стабілізаторів, допоміжних речовин, розчинників, солюбілізаторів, поверхнево-активних речовин, емульсифікаторів, консервантів і/або ад'ювантів. Прийнятні складові композиції переважно є нетоксичними для реципієнтів у застосовних дозуваннях і концентраціях. Фармацевтичні композиції згідно з винаходом включають, але не обмежуються цим, рідкі, заморожені та ліофілізовані композиції.
І206| Композиції згідно з винаходом можуть містити фармацевтично прийнятний носій.
Загалом у контексті цього документу "фармацевтично прийнятний носій" означає будь-який і усі водні та неводні розчини, стерильні розчини, розчинники, буфери, наприклад, розчини фосфатно-сольового буфера (ФСБ), воду, суспензії, емульсії, такі як емульсії олія/вода, різні типи змочуючих агентів, ліпосоми, дисперсійні середовища та покриття, які є сумісними з фармацевтичним введенням, зокрема, парентеральним введенням. Застосування таких середовищ і агентів у фармацевтичних композиціях добре відоме у цій галузі техніки, а композиції, що містять такі носії, можна готувати добре відомими традиційними способами.
І207| У певних варіантах реалізації винаходу запропоновано фармацевтичні композиції, які містять конструкцію антитіла згідно з винаходом і додаткову одну або більше допоміжних речовин, таких як ті, які в ілюстративних цілях описані у цьому розділі та у іншому місці цього
Зо документу. У зв'язку з цим допоміжні речовини можна застосовувати у винаході у багатьох цілях, таких як коригування фізичних, хімічних або біологічних властивостей готових форм, наприклад, коригування в'язкості, і/або процесів згідно з винаходом для поліпшення ефективності і/або для стабілізації таких готових форм і процесів проти деградації й псування внаслідок, наприклад, стресів, які виникають під час виробництва, перевезення, зберігання, приготування перед використанням, введення та згодом.
І208| У певних варіантах реалізації винаходу фармацевтична композиція може містити складові матеріали у цілях модифікації, підтримання або збереження, наприклад, рн, осмолярності, в'язкості, прозорості, кольору, ізотонічності, запаху, стерильності, стабільності, швидкості розчинення або вивільнення, всмоктування або проникнення композиції (дивіться
ВЕМІМатТОМ'є РНАВМАСЕШТІСАЇ 5СІЕМСЕ5, 18" Еайоп, (А.А. Сепгто, ейд.), 1990, Маск
Рибіїзпіпд Сотрапу). У таких варіантах реалізації винаходу відповідні складові матеріали можуть включати, але не обмежуються цим: - амінокислоти, такі як гліцин, аланін, глутамін, аспарагін, треонін, пролін, 2-фенілаланін, включаючи заряджені амінокислоти, переважно лізин, ацетат лізину, аргінін, глутамат і/або гістидин - протимікробні препарати, такі як антибактеріальні та протигрибкові агенти - антиоксиданти, такі як аскорбінова кислота, метіонін, сульфіт натрію або гідрогенсульфіт натрію; - буфери, буферні системи або буферні агенти, які використовують для підтримання композиції за фізіологічного рН або трохи меншого рН; прикладами буферів є борат, бікарбонат,
Тріс-НСЇ, цитрати, фосфати або інші органічні кислоти, сукцинат, фосфат і гістидин; наприклад,
Тріс-буфер з рН близько 7,0-8,5; - неводні розчинники, такі як пропіленгліколь, поліетиленгліколь, рослинні олії, такі як маслинова олія, та ін'єкційні складні органічні ефіри, такі як етилолеат; - водні носії, включаючи воду, спиртово-водні носії, емульсії або суспензії, включаючи сольові та забуферені середовища; - біорозкладані полімери, такі як складні поліефіри; - об'ємоутворюючі агенти, такі як маніт або гліцин; - хелатуючі агенти, такі як етилендиамінтетраоцтова кислота (ЕДТК); 60 - ізотонічні агенти та агенти, які уповільнюють всмоктування;
- комплексоутворюючі агенти, такі як кофеїн, полівінілпіролідон, бета-циклодекстрин або гідроксипропіл-бета-циклодекстрин; - наповнювачі; - моносахариди; дисахариди; і інші вуглеводи (такі як глюкоза, маноза або декстрин); вуглеводи можуть являти собою нередукуючі цукри, переважно трегалозу, сахарозу, октасульфат, сорбіт або ксиліт; - (низькомолекулярні) білки, поліпептиди або білкові носії, такі як людський або бичачий сироватковий альбумін, желатин або імуноглобуліни, переважно людського походження; - барвники та ароматизатори; - сірковмісні відновні агенти, такі як глутатіон, тіоктова кислота, тіогліколят натрію, тіогліцерин (альфа|-монотіогліцерин і тіосульфат натрію; - розчинники; - емульсифікатори; - гідрофільні полімери, такі як полівінілпіролідон; - солетворні протиїіони, такі як натрій; - консерванти, такі як протимікробні засоби, антиоксиданти, хелатуючі агенти, інертні гази та таке інше; прикладами є бензалконію хлорид, бензойна кислота, саліцилова кислота, тимеросал, фенетиловий спирт, метилпарабен, пропілпарабен, хлоргексидин, сорбінова кислота або перекис водню; - Комплекси металів, такі як комплекси 2п- білок; - розчинники та сорозчинники (такі як гліцерин, пропіленгліколь або полієтиленгліколь); - цукри та цукрові спирти, такі як трегалоза, сахароза, октасульфат, маніт, сорбіт або ксиліт, стахіоза, маноза, сорбоза, ксилоза, рибоза, міоінізитоза, галактоза, лактит, рібіт, міоінозит, галактит, гліцерин, цикліти (наприклад, інозит), поліетиленгліколь; і багатоатомні цукрові спирти; - суспендуючі агенти; - поверхнево-активні речовини або змочуючі агенти, такі як плюроніки, ПЕГ, складні ефіри сорбітану, полісорбати, такі як полісорбат 20, полісорбат, тритон, трометамін, лецитин, холестерин, тілоксапал; поверхнево-активні речовини можуть бути детергентами, переважно з молекулярною масою 21,2 кДа, і/або поліефірами, переважно з молекулярною масою »3 кДа; необмежуючими прикладами переважних детергентів є Твін 20, Твін 40, Твін 60, Твін 80 і Твін 85; необмежуючими прикладами переважних полімерів є ПЕГ 3000, ПЕГ 3350, ПЕГ 4000 і ПЕГ 5000; - агенти, що підвищують стабільність, такі як сахароза або сорбіт; - агенти, що підвищують тонічність, такі як галіди лужних металів, переважно хлорид натрію або калію, маніт, сорбіт; - засоби для парентеральної доставки, включаючи розчин хлориду натрію, декстрозу
Рінгера, декстрозу та хлорид натрію, лактат Рінгера або жирні олії; - засоби для внутрішньовенної доставки, включаючи поповнювачі рідини та поживних речовин, поповнювачі електролітів (наприклад, на основі декстрози Рінгера).
І209| Для фахівців у цій галузі техніки очевидно, що різні складові фармацевтичної композиції (наприклад, перелічені вище) можуть мати різну дію, наприклад, амінокислота може діяти в якості буфера, стабілізатора і/або антиоксиданту; маніт може діяти в якості об'ємоутворюючого агента і/або агента, що підвищує тонічність; хлорид натрію може діяти в якості засобу для доставки і/або агента, що підвищує тонічність. (210) Мається на увазі, що композиція згідно з винаходом може містити, окрім визначеного у цьому документі поліпептиду згідно з винаходом, додаткові біологічно активні агенти, залежно від передбачуваного застосування композиції. Такі агенти можуть являти собою лікарські препарати, які діють на шлунково-кишкову систему, цитостатичні лікарські препарати, лікарські препарати, які запобігають гіперурикемії, лікарські препарати, які інгібують імунореакції (наприклад, кортикостероїди), лікарські препарати, які модулюють запальну відповідь, лікарські препарати, які діють на систему кровообігу, і/або агенти, такі як цитокіни, відомі у цій галузі техніки. Також мається на увазі, що конструкцію антитіла згідно з цим винаходом, застосовують у сумісній терапії, тобто у комбінації з іншим протираковим медикаментом. (211| У певних варіантах реалізації винаходу оптимальна фармацевтична композиція визначається фахівцем у цій галузі техніки залежно, наприклад, від передбачуваного шляху введення, формату доставки та необхідного дозування. Дивіться, наприклад, КЕМІМОТОМ'Є
РНАКМАСЕШТІСАЇ. ЗСІЕМСЕ5, вище. У певних варіантах реалізації винаходу такі композиції можуть впливати на фізичний стан, стабільність, швидкість іп мімо вивільнення та швидкість іп мімо виведення конструкції антитіла згідно з винаходом. У певних варіантах реалізації винаходу 60 основний базовий розчин або носій у фармацевтичній композиції може бути за своєю природою як водним, так і неводним. Наприклад, придатний базовий розчин або носій може являти собою воду для ін'єкцій, фізіологічний сольовий розчин або штучну цереброспінальну рідину, можливо доповнені іншими матеріалами, звичайними у композиціях для парентерального введення.
Додатковими типовими базовими розчинами є нейтральний буферний сольовий розчин або сольовий розчин, змішаний з сироватковим альбуміном. У певних варіантах реалізації композиції конструкції антитіла згідно з винаходом можна готувати для зберігання шляхом змішування вибраної композиції, що має необхідну міру чистоти, з оптимальними складовими агентами (КЕМІМОСТОМ'5 РНАКМАСЕОТІСАЇ ЗСІЕЄМСЕ5, вище) у формі ліофілізованої таблетки або водного розчину. Крім того, у певних варіантах реалізації конструкцію антитіла згідно з винаходом можна готувати у вигляді ліофілізату, використовуючи відповідні допоміжні речовини, такі як сахароза. (212| Якщо передбачається парентеральне введення, терапевтичні композиції для застосування у цьому винаході можна отримувати у формі апірогенного, парентерально прийнятного водного розчину, який містить необхідну конструкцію антитіла згідно з винаходом у фармацевтично прийнятному базовому розчині. Особливо придатним базовим розчином для парентеральної ін'єкції є стерильна дистильована вода, в якій конструкцію антитіла згідно з винаходом готують у вигляді стерильного, ізотонічного розчину, що зберігається належним чином. У певних варіантах реалізації винаходу препарат може включати готову форму необхідної молекули з агентом, таким як ін'єкційні мікросфери, біорозкладані частинки, полімерні сполуки (такі як полімолочна кислота або полігліколева кислота), гранули або ліпосоми, що можуть забезпечувати контрольоване або уповільнене вивільнення продукту, який може доставлятися за допомогою депо-ін'єкції. У певних варіантах реалізації винаходу також можна використовувати гіалуронову кислоту, дія якої полягає у стимуляції подовження знаходження у циркуляції. У певних варіантах реалізації винаходу можна використовувати пристрої, що імплантуються, для внесення необхідної конструкції антитіла.
І213| Додаткові фармацевтичні композиції очевидні для фахівців у цій галузі техніки, включаючи готові форми, що містять конструкцію антитіла згідно з винаходом у формах для уповільненого вивільнення або контрольованої доставки/вивільнення. Методики приготування різних інших засобів для уповільненої або контрольованої доставки, таких як ліпосомні носії,
Зо біорозкладані мікрочастинки або пористі гранули та депо-ін'єкції, також відомі фахівцям у цій галузі техніки. Дивіться, наприклад, заявку на міжнародний патент Мо РСТ/О593/00829, в якій описано контрольоване вивільнення пористих полімерних мікрочастинок для доставки фармацевтичних композицій. Препарати з уповільненим вивільненням можуть містити напівпроникні полімерні матриці у вигляді формованих виробів, наприклад, плівок або мікрокапсул. Матриці для уповільненого вивільнення можуть містити складні поліефіри, гідрогелі, полілактиди (описані у патенті США Мо 3773919 і публікації заявки на європейський патент Мо ЕР 058481), сополімери І -глутамінової кислоти та гамма етил-і -глутамату (Зідчтап еї а!., 1983, Віороїтутеїв 2:547-556), полі(2-гідроксиетил-метакрилат) (І апдег еї аї., 1981, 9. Віотеа.
Маїег. Нев. 15:167-277 і І апдег, 1982, Спет. Тесп. 12:98-105), етиленвінілацетат (І апдег еї аї., 1981, вище) або полі-О(-)-3-гідроксимасляну кислоту (публікація заявки на європейський патент
Мо ЕР 133988). Композиції для уповільненого вивільнення також можуть містити ліпосоми, які можна готувати будь-яким з декількох способів, відомих у цій галузі техніки. Дивіться, наприклад, Еррзіеїп еї аї., 1985, Ргос. Маї). Асай. 5сі. 0.5.А. 82:3688-3692; публікації заявок на європейський патент Мо ЕР 036676; ЕР 088046 і ЕР 143949. (214) Конструкція антитіла також може міститися у мікрокапсулах, приготованих, наприклад, методами коацервації або міжфазної полімеризації (наприклад, мікрокапсули з гідроксиметилцелюлози або желатину та мікрокапсули з полі(метилметакрилату) відповідно), у колоїдних системах доставки лікарського препарату (наприклад, ліпосоми, альбумінові мікросфери, мікроемульсії, наночастинки та нанокапсули) або у макроемульсіях. Такі методики описані у Кетіпдіоп'є Рнаптасеціїса! Зсієпсев, 161п еайіоп, Оз5іо, А., Еа., (1980). (215) Фармацевтичні композиції, застосовні для іп мімо введення, як правило, надаються у вигляді стерильних препаратів. Стерилізацію можна проводити шляхом фільтрації через стерильні фільтрувальні мембрани. Якщо композиція є ліофілізованою, стерилізацію із застосуванням цього способу можна проводити до або після ліофілізації та відновлення.
Композиції для парентерального введення можна зберігати у ліофілізованій формі або у розчині. Парентеральні композиції у загальному випадку вміщують у контейнер, який має стерильний вхідний отвір, наприклад, пакет для внутрішньовенного розчину або флакон, що має пробку, яка проколюється гіподермічною голкою для ін'єкцій. (216) Інший аспект винаходу включає здатні до самобуферизації готові форми конструкції бо антитіла згідно з винаходом, які можна використовувати як фармацевтичні композиції, як описано у заявці на міжнародний патент УУО 06138181А2 (РСТ/О52006/022599). Доступні різні описи для стабілізації білків і складових матеріалів, а також способів, застосовних у зв'язку з цим, наприклад, Агакауга еї аї., "БЗоїЇмепі іпіегасіоп5 іп рпаппасешііса! тогтиайнопь5, Рпапгт Кезв. 8(3): 285-91 (1991); КепагіскК еї аї., "Рпузіса! «їарійгайноп ої ргоївіп5 іп адоеои5 зоЇшіоп' іп:
ВАТІОМАЇ ОЕБІСМ ОБ 5ТАВІЕ РАОТЕЇМ БЄОРБМИГАТІОМО: ТНЕОВУ АМО РРАЕАСТІСЕ,
Сагрепіег апа Маппіпод, ед5. Ріаптасешцшііса! Віотесппоіоду. 13: 61-84 (2002), і Капао!іри еї аї., "випасіапі-ргоївїп іпіегасіоп5", Рпагт Віоїтесппої. 13: 159-75 (2002), зокрема, дивіться частини, які стосуються допоміжних речовин і пов'язаних з ними процесів для здатних до самобуферизації готових білкових форм відповідно до цього винаходу, особливо до білкових фармацевтичних продуктів і процесів для застосувань у ветеринарії і/або медицині людини.
І217| Відповідно до деяких варіантів реалізації винаходу можна використовувати солі, наприклад, для коригування іонної сили і/або ізотонічності готової форми, і/або для поліпшення розчинності і/або фізичної стабільності білка або іншого інгредієнта композиції відповідно до винаходу. Як добре відомо, іони можуть стабілізувати нативний стан білків за допомогою зв'язування із зарядженими залишками на поверхні білка та шляхом екранування заряджених і полярних груп у білці та зменшення сили їх електростатичних взаємодій, взаємодій притягання та відштовхування. Іони також можуть стабілізувати денатурований стан білка за допомогою зв'язування, зокрема, з денатурованими пептидними зв'язками (--СОМН) білка. Крім того, іонна взаємодія із зарядженими та полярними групами у білці може зменшувати міжмолекулярні електростатичні взаємодії і, таким чином, запобігати або знижувати агрегацію та нерозчинність білка. (218) Іонні молекули істотно відрізняються за своєю дією на білки. Було розроблено велику кількість категорійних класифікацій іонів і їх дії на білки, які можна використовувати під час приготування фармацевтичних композицій відповідно до винаходу. Одним з прикладів є ряд
Гофмейстера, в якому іонні та полярні неіїонні розчинені речовини впорядковані відповідно до їх дії на конформаційну стабільність білків у розчині. Стабілізуючі розчинені речовини називаються "космотропними". Дестабілізуючі розчинені речовини називаються "хаотропними".
Космотропи зазвичай використовуються у високих концентраціях (наприклад »1-молярний сульфат амонію) для осадження білків з розчину ("висолювання"). Хаотропи зазвичай
Зо використовуються для денатурації і/або солюбілізації білків ("всолювання"). Відносна ефективність іонів щодо "всолювання" та "висолювання" визначає їх позицію у ряді
Гофмейстера. (2191) Вільні амінокислоти можна використовувати у готових формах конструкції антитіла згідно з винаходом відповідно до різних варіантів реалізації винаходу в якості об'ємоутворюючих агентів, стабілізаторів і антиоксидантів, а також для інших стандартних застосувань. Лізин, пролін, серин й аланін можна використовувати для стабілізації білків у готовій формі. Гліцин застосовують під час ліофілізації, щоб гарантувати правильну структуру та властивості таблетки. Аргінін можна застосовувати для інгібування агрегації білка, як у рідких, так і у ліофілізованих готових формах. Метіонін застосовують в якості антиоксиданту. (229) Поліоли включають цукри, наприклад, маніт, сахарозу та сорбіт, а також багатоатомні спирти, такі як, наприклад, гліцерин і пропіленгліколь, і, у цілях обговорення у цьому документі, поліетиленгліколь (ПЕГ) ії споріднені речовини. Поліоли є космотропними. Вони є корисними стабілізуючими агентами як у рідких, так і у ліофілізованих готових формах для захисту білків від процесів фізичної та хімічної деградації. Поліоли також застосовують для коригування тонічності готових форм. Серед поліолів, застосовних у вибраних варіантах реалізації винаходу, знаходиться маніт, який зазвичай використовується для гарантії структурної стабільності таблетки у ліофілізованих готових формах. Він гарантує структурну стабільність таблетки.
Загалом його використовують з ліопротектором, наприклад, сахарозою. Сорбіт і сахароза знаходяться серед переважних агентів для коригування тонічності та застосування в якості стабілізаторів для захисту від стресів у разі заморожування-розморожування під час перевезення або приготування нерозфасованих форм упродовж процесу виробництва.
Редукуючі цукри (які містять вільні альдегідні або кетонові групи), такі як глюкоза або лактоза, можуть глікувати поверхневі залишки лізину та аргініну. Отже, загалом вони не знаходяться серед переважних поліолів для застосування відповідно до цього винаходу. Крім того, цукри, які утворюють реактивні молекули, такі як сахароза, яка гідролізується до фруктози та глюкози у кислих умовах і згодом призводить до глікування, у зв'язку з цим також не знаходяться серед переважних поліолів згідно з винаходом. ПЕГ застосовують для стабілізації білків і в якості кріопротектору, і у зв'язку з цим його можна застосовувати у цьому винаході. (221| Варіанти реалізації конструкції антитіла згідно з винаходом додатково включають бо поверхнево-активні речовини. Білкові молекули можуть бути схильними до адсорбції на поверхні та денатурації та подальшої агрегації на поверхнях розділу повітря-рідина, тверда речовина-рідина та рідина-рідина. Ці ефекти загалом обернено пропорційні до концентрації білка. Ці шкідливі взаємодії загалом обернено пропорційні до концентрації білка і, як правило, посилюються фізичним збовтуванням, таким, яке виникає під час перевезення та роботи з продуктом. Поверхнево-активні речовини зазвичай використовують для попередження, мінімізації або зниження поверхневої адсорбції. У зв'язку з цим застосовні поверхнево-активні речовини згідно з винаходом включають полісорбат 20, полісорбат 80, інші складні ефіри жирних кислот поліетоксилатів сорбітану та полоксамер 188. Поверхнево-активні речовини також зазвичай використовують, щоб регулювати конформаційну стабільність білка.
Застосування поверхнево-активних речовин у зв'язку з цим є білок-специфічним, оскільки будь- яка задана поверхнево-активна речовина стабілізуватиме одні білки та дестабілізуватиме інші. (2221) Полісорбати чутливі до окислювальної деградації та часто у тому вигляді, в якому вони поставляються, містять достатні кількості пероксидів, щоб викликати окислення бічних ланцюгів білкових залишків, особливо метіоніну. Отже, полісорбати треба використовувати обережно, а у разі використання їх слід застосовувати у найнижчій ефективній концентрації. У зв'язку з цим полісорбати є прикладом загального правила, що допоміжні речовини слід застосовувати у найнижчій ефективній концентрації. (223) Варіанти реалізації готових форм конструкції антитіла згідно з винаходом додатково включають застосування одного або більше антиоксидантів. Шкідливому окисленню білків у фармацевтичних готових формах можна деякою мірою запобігти, підтримуючи належні зовнішні рівні кисню та температури й уникаючи дії світла. Також можна використовувати допоміжні речовини антиокиснювальної дії для попередження окиснювальної деградації білків. Серед застосовних у зв'язку з цим антиоксидантів знаходяться відновні агенти, пастки для кисню/вільних радикалів і хелатуючі агенти. Антиоксиданти для застосування у терапевтичних білкових готових формах відповідно до винаходу переважно розчинні у воді та зберігають свою активність протягом терміну придатності продукту. ЕДТК є переважним у зв'язку з цим антиоксидантом відповідно до винаходу. Антиоксиданти можуть ушкоджувати білки. Наприклад, відновні агенти, такі як, зокрема, глутатіон, можуть руйнувати внутрішньомолекулярні дисульфідні зв'язки. Таким чином, антиоксиданти для застосування у винаході вибирають так,
Зо щоб, окрім іншого, усунути або істотно зменшити можливість ушкодження ними білків у готовій формі. (224) Готові форми відповідно до винаходу можуть містити іони металів, які є кофакторами білків і потрібні для утворення координаційних комплексів білків, наприклад, як цинк, необхідний для утворення деяких суспензій інсуліну. Іони металів також можуть інгібувати деякі процеси, які руйнують білки. Проте іони металів також можуть каталізувати фізичні та хімічні процеси, які руйнують білки. Іони магнію (10-120 мМ) можна використовувати для інгібування ізомеризації аспарагінової кислоти до ізоаспарагінової кислоти. Іони Сат2 (до 100 мМ) можуть підвищувати стабільність людської дезоксирибонуклеази. Проте Мдя2, Мп-2 і 2п2 можуть дестабілізувати рекомбінантну людську ДНКазу. Аналогічно, Сат2 і Зг2 можуть стабілізувати фактор МІ, при цьому він може дестабілізуватися Муд2, Мпж2 і 7пя2, Сив2 і Без2, а його агрегація може підвищуватися іонами Аїн3. (225) Варіанти реалізації готових форм конструкції антитіла згідно з винаходом додатково включають застосування одного або більше консервантів. Консерванти потрібні у разі розробки багатодозових парентеральних готових форм, які передбачають більше одного набору з одного й того самого контейнера. Їх основною функцією є інгібування росту мікроорганізмів і гарантія стерильності продукту упродовж терміну придатності або терміну застосування лікарського продукту. Зазвичай використовувані консерванти включають бензиловий спирт, фенол і м- крезол. Хоча консерванти давно застосовують з низькомолекулярними парентеральними засобами, розробка білкових готових форм, які містять консерванти, може виявитися проблематичною. Консерванти майже завжди чинять дестабілізуючу дію (агрегація) на білки, і це стало основним чинником в обмеженні їх застосування у багатодозових білкових готових формах. На даний момент більшість білкових лікарських препаратів готують виключно для одного застосування. При цьому, у випадку можливості багатодозових готових форм, вони мають додаткову перевагу забезпечення зручності для пацієнта та підвищення конкурентоспроможності на ринку. Гарний приклад пов'язаний з людським гормоном росту (ПОН), коли розробка готових форм, які містять консерванти, призвела до комерційної реалізації зручніших, багаторазових шприців-ручок. На сьогодні щонайменше чотири такі пристрої-ручки, які містять готові форми ПОН з консервантами, доступні на ринку. Нордитропін (рідкий, Момо
Могаї5кК), нутропін АС (рідкий, Сепепіесп) і генотропін (ліофілізований, з двокамерним бо картриджем, Рпагтасіа 8 Оріопп) містять фенол, тоді як соматроп (Еїї Шу) приготований з м-
крезолом. Під час приготування та розробки дозованих форм, які містять консерванти, необхідно враховувати декілька аспектів. Ефективна концентрація консерванту у лікарському продукті має бути оптимізованою. Це вимагає тестування цього консерванту у дозованій формі у концентраційному діапазоні, який забезпечує протимікробну ефективність, не порушуючи стабільність білка. (226| Як можна очікувати, розробка рідких готових форм, які містять консерванти, є складнішою, ніж у разі ліофілізованих готових форм. Висушені сублімацією продукти можна ліофілізувати без консерванту та відновлювати за допомогою розчинника, що містить консервант, під час використання. Це зменшує час, впродовж якого консервант перебуває у контакті з білком, що істотно мінімізує пов'язаний з ним ризик щодо стабільності. У випадку рідких готових форм ефективність і стабільність консерванту повинні зберігатися впродовж усього терміну придатності продукту (від близько 18 до 24 місяців). Важливим моментом, який варто відмітити, є те, що ефективність консерванту повинна проявлятися у кінцевій готовій формі, яка містить активний лікарський препарат і усі допоміжні компоненти. (227| Описані у цьому документі конструкції антитіл також можна готувати у вигляді імуно- ліпосом. "Ліпосома" являє собою маленьку везикулу, яка складається з різного типу ліпідів, фосфоліпідів і/або поверхнево-активної речовини, яку використовують для доставки лікарського препарату в організм ссавців. Компоненти ліпосоми зазвичай мають бішарове впорядкування, аналогічно ліпідному впорядкуванню біологічних мембран. Ліпосоми, які містять конструкцію антитіла, готують відомими у цій галузі техніки способами, такими як описані у Ервзіеїп еї аї.,
Ргос. Маї. Асад. 5сі. ОБА, 82: 3688 (1985); Нулапд еї аї., Ргос. Маї! Асай. сі. О5А, 77: 4030 (1980); патентах США Мо 4485045 і 4544545 і МО 97/38731. Ліпосоми зі збільшеним часом знаходження у циркуляції описані у патенті США Мо 5013556. Особливо застосовні ліпосоми можна створювати методом обернено-фазового випарювання з ліпідною композицією, що містить фосфатидилхолін, холестерин і ПЕГ-дериватизований фосфатидилетаноламін (ПЕГ-
ФЕ). Ліпосоми пропускають через фільтри з певним розміром пір для отримання ліпосом з необхідним діаметром. Фрагменти Рар' конструкції антитіла згідно з цим винаходом можна кон'югувати до ліпосом, як описано у Магпіп еї аїЇ. 9. Віої. Спет. 257: 286-288 (1982), за допомогою реакції дисульфідного обміну. У ліпосомі необов'язково міститься
Зо хіміотерапевтичний агент. Дивіться Сабіоп еї аї. У. Майопаї Сапсег Іп5і. 81 (19) 1484 (1989). (228| Після приготування фармацевтичної композиції її можна зберігати у стерильних флаконах у вигляді розчину, суспензії, гелю, емульсії, твердої речовини, кристала або у вигляді зневодненого або ліофілізованого порошку. Такі готові форми можна зберігати у готовій для застосування формі або у формі (наприклад, ліофілізованій), яку відновлюють перед введенням.
І229| Біологічну активність визначеної у цьому документі фармацевтичної композиції можна визначити, наприклад, за допомогою аналізу цитотоксичності, як описано у нижченаведених прикладах, у МО 99/54440 або у 5спІегеїй еї аї. (Сапсег Іттипої. ІттипоїПпег. 20 (2005), 1-12). У контексті цього документу "ефективність" або "іп мімо ефективність" відноситься до відповіді на терапію фармацевтичною композицією згідно з винаходом, яка оцінюється за стандартизованими критеріями відповіді МС (Національного інституту раку). Успіх або іп мімо ефективність терапії із застосуванням фармацевтичної композиції згідно з винаходом відноситься до ефективності композиції щодо її передбачуваної мети, тобто здатності композиції чинити бажану дію, тобто знищення патологічних клітин, наприклад, пухлинних клітин. Іп мімо ефективність можна відстежувати за допомогою загальноприйнятих стандартних методів для відповідних нозологічних форм, включаючи, але не обмежуючись цим, число білих кров'яних тілець, лейкоцитарну формулу, сортування флуоресцентно-активованих клітин, аспірацію кісткового мозку. Крім того, можна використовувати різні специфічні для захворювання клінічні хімічні параметри та інші загальноприйняті стандартні методи. Крім того, можна використовувати комп'ютерну томографію, рентгенівське дослідження, ядерну магнітно- резонансну томографію (наприклад, для оцінки відповіді на підставі критеріїв Національного інституту раку |(Спезоп ВО, Нотіпа 5, Соїнієї В, Зпірр МА, Рівнег ВІ, Соппогв5 УМ, І івієг ТА,
Мове У, апШо-Іоре2 А, Надепреек А, Сабапійаз Е, Кііррепеієп 0, Ніддетапп МУ, Савіеїйпо В,
Наїгті5 МІ, Аппйаде 90, Сапег МУ, Норре К, Сапеїпо5 ОР. Доповідь на міжнародному семінарі із стандартизованих критеріїв відповіді для неходжкінських лімфом. МСІ Зропзогеа Іпіегпайопаї
УМогкіпд Сгоир. У Сіїп Опсої. 1999 Арг;/17(4):1244)), сканування методом позитронно-емісійної томографії, число білих кров'яних тілець, лейкоцитарну формулу, сортування флуоресцентно- активованих клітин, аспірацію кісткового мозку, біопсію/гістологію лімфатичних вузлів і різні специфічні щодо лімфоми клінічні хімічні параметри (наприклад, рівень лактат дегідрогенази) і 60 інші загальноприйняті стандартні методи.
Ї230| Іншим основним завданням під час розробки лікарських препаратів, таких як фармацевтична композиція згідно з винаходом, є прогнозована модуляція фармакокінетичних властивостей. З цією метою можна встановлювати фармакокінетичний профіль кандидатного лікарського препарату, тобто профіль фармакокінетичних параметрів, які впливають на здатність конкретного лікарського препарату лікувати заданий патологічний стан.
Фармакокінетичні параметри лікарського препарату, які впливають на здатність лікарського препарату лікувати певну нозологічну форму, включають, але не обмежуються цим: час напівжиття, об'єм розподілу, пресистемний метаболізм у печінці та міру зв'язування сироватки крові. На ефективність заданого лікарського агента може впливати кожен з вищезгаданих параметрів. Припустимою характеристикою конструкцій антитіл згідно 3 цим винаходом, які надаються із специфічною модальністю Ес, є те, що вони спричиняють, наприклад, різницю у фармакокінетичній поведінці. Націлююча конструкція антитіла з подовженим часом напівжиття відповідно до цього винаходу переважно демонструє несподівано збільшений час утримання іп мімо у порівнянні з "канонічними" не-НІ Е версіями зазначеної конструкції антитіла. (231| "Час напівжиття" означає час, за який виводиться 5095 введеного лікарського препарату за допомогою біологічних процесів, наприклад, метаболізму, екскреції і таке інше. Під "пресистемним метаболізмом у печінці" мається на увазі схильність лікарського препарату до метаболізму після першого контакту з печінкою, тобто під час першого проходження через печінку. "Об'єм розподілу" означає міру утримання лікарського препарату у різних компартментах організму, таких як, наприклад, внутрішньоклітинний і позаклітинний простір, тканини або органи і таке інше, і розподіл лікарського препарату у цих компартментах. "Міра зв'язування сироватки крові" означає схильність лікарського препарату до взаємодії та зв'язування з білками сироватки крові, такими як альбумін, що призводить до зниження або втрати біологічної активності лікарського препарату. (232| Фармакокінетичні параметри також включають біодоступність, часовий лаг (Тіад),
Ттах, швидкість всмоктування, початок дії і/або Стах для заданої кількості лікарського препарату, що вводиться. "Біодоступність" означає кількість лікарського препарату у кров'яному компартменті. "Часовий лаг" означає час запізнювання між введенням лікарського препарату та його виявленням і можливістю визначення у крові або плазмі. "тах" є часом, через який
Зо досягається максимальна концентрація лікарського препарату у крові, а "Стах" представляє максимальну концентрацію у крові, що отримується у разі застосування цього лікарського препарату. На час, необхідний для досягнення концентрації лікарського препарату у крові або тканині, яка потрібна для біологічної дії, впливають усі параметри. Фармакокінетичні параметри біспецифічних конструкцій антитіл, що демонструють міжвидову специфічність, які можна визначити у доклінічних дослідженнях на тваринах для відмінних від шимпанзе приматів, як вказано вище, також наведені, наприклад, у публікації 5спіегеїй еї аїЇ. (Сапсег Іттипої.
ІттипоїНег. 20 (2005), 1-12).
І233| У переважному аспекті винаходу фармацевтична композиція є стабільною щонайменше впродовж чотирьох тижнів за близько -20 С. Як очевидно з прикладів, що додаються, якість конструкції антитіла згідно з винаходом у порівнянні з якістю конструкцій антитіл, що відповідають існуючому рівню техніки, можна досліджувати, використовуючи різні системи. Зрозуміло, що ці дослідження узгоджуються з "ІСН Наптопізей Тгірагйе спідеїїпе: еабіїйу Тевіїпу ої Віоїесппоіодіса|/Віоіодіса! Ргодисів О5С апа 5ресіїісайопве: Теві ргоседигев апа
Ассеріапсе Стйегіа ог Віоїесп ВіоїесппоіІодіса|/Віоіодіса! Ргодисіє О6В" і, отже, обрані так, щоб забезпечувати профіль, що вказує на стабільність, який забезпечує достовірність виявлення змін у ідентичності, чистоті та ефективності продукту. Загальноприйнято, що термін чистота є відносним терміном. Внаслідок дії глікозилювання, деамідування або іншої гетерогенності абсолютну чистоту біотехнологічного/біологічного продукту, як правило, слід оцінювати більш ніж одним способом, а отримане значення чистоти залежить від способу. У цілях випробування стабільності, дослідження щодо чистоти повинні фокусуватися на способах визначення продуктів деградації. (234) Для оцінки якості фармацевтичної композиції, яка містить конструкцію антитіла згідно з винаходом, можна проводити аналіз, наприклад, аналізуючи вміст розчинних агрегатів у розчині (ВМК, що оцінюються за допомогою ексклюзійної хроматографії). Переважно, щоб стабільність упродовж щонайменше чотирьох тижнів за близько -20 "С характеризувалася вмістом менше 1,595 ВМК, переважно менше 195 ВМК.
І235| Переважна готова форма конструкції антитіла у вигляді фармацевтичної композиції може, наприклад, містити компоненти готової форми, описані нижче: - Готова форма А: бо фосфат калію, І -аргініну гідрохлорид, дигідрат трегалози, полісорбат 80 за рН 6,0
(236) Інші приклади оцінки стабільності конструкції антитіла згідно з винаходом у формі фармацевтичної композиції наведено у прикладах 4-12, що додаються. У цих прикладах варіанти реалізації конструкцій антитіл згідно з винаходом досліджують щодо різних стресових умов у різних фармацевтичних готових формах, а результати порівнюють з іншими форматами біспецифічної здатної залучати Т-клітини конструкції антитіла, що подовжують час напівжиття (НГЕ), відомими у цій галузі техніки. Загалом мається на увазі, що конструкції антитіл, які мають специфічну модальність Ес, відповідно до цього винаходу, як правило, є стабільнішими у широкому ряді стресових умов, таких як температурний та світловий стрес, у порівнянні з конструкціями антитіл, які мають різні НІ Е-формати, і у відсутності будь-якого НІ Е-формату (тобто "канонічними" конструкціями антитіл). Зазначена температурна стабільність може відноситися як до зниженої (нижче кімнатної температури, включаючи заморожування), так і до підвищеної (вище за кімнатну температуру, включаючи температури до або вище за температуру тіла) температури. Як зрозуміло фахівцеві у цій галузі техніки, така поліпшена стабільність щодо стресу, якого важко уникнути під час клінічної практичної реалізації, робить конструкцію антитіла безпечнішою, оскільки під час клінічної практичної реалізації виникає менше продуктів деградації. Відповідно, зазначена підвищена стабільність означає підвищену безпеку.
І237| В одному варіанті реалізації запропоновано конструкцію антитіла згідно з винаходом або конструкцію антитіла, отриману відповідно до способу згідно з винаходом, для застосування у попередженні, лікуванні або зменшенні інтенсивності В-клітинного порушення, що корелює з експресією ВСМА або надекспресією ВСМА, порушення, пов'язаного з плазматичними клітинами, і аутоїммунного порушення.
І238| Описані у цьому документі готові форми застосовні в якості фармацевтичних композицій у лікуванні, зменшенні інтенсивності і/або попередженні описаного у цьому документі патологічного стану у пацієнта, що потребує цього. Термін "лікування" відноситься як до терапевтичного лікування, так і до профілактичних або превентивних заходів. Лікування включає застосування або введення готової форми в організм, виділену тканину або клітину пацієнта, який має захворювання/порушення, симптом захворювання/порушення або схильність до захворювання/порушення, з метою лікування, вилікування, пом'якшення, полегшення, зміни, виправлення, зменшення інтенсивності, поліпшення або дії на захворювання, симптом захворювання або схильність до захворювання. (239) У контексті цього документу термін "зменшення інтенсивності" відноситься до будь- якого поліпшення стану захворювання у пацієнта, що має захворювання, зазначене нижче у цьому документі, за допомогою введення суб'єкту, що потребує цього, конструкції антитіла відповідно до винаходу. Таке поліпшення також може проявлятися як уповільнення або припинення прогресування захворювання пацієнта. У контексті цього документу термін "попередження" означає попередження появи або повторної появи пацієнта, що має пухлину або рак, або метастатичний рак, зазначені нижче у цьому документі, за допомогою введення суб'єкту, що потребує цього, конструкції антитіла відповідно до винаходу.
І240| Термін "захворювання" відноситься до будь-якого патологічного стану, на який лікування описаними у цьому документі конструкцією антитіла або фармацевтичною композицією чинило б сприятливу дію. Він включає хронічні та гострі порушення або захворювання, включаючи ті патологічні стани, які є причиною схильності ссавця до даного захворювання. (2411 "Новоутворення" являє собою аномальне розростання тканини, яке зазвичай, але не завжди утворює масу. У разі утворення маси воно також називається "пухлиною".
Новоутворення або пухлини можуть бути доброякісними, потенційно злоякісними (передраковими) або злоякісними. Злоякісні новоутворення зазвичай називають раком. Вони зазвичай інвазують і руйнують навколишню тканину та можуть утворювати метастази, тобто вони поширюються в інші частини, тканини або органи тіла. Отже, термін "метастатичний рак" включає метастази в інші тканини або органи окрім тих, де знаходиться початкова пухлина.
Лімфоми та лейкоз є лімфоїдними новоутвореннями. У цілях цього винаходу вони також включені у терміни "пухлина" або "рак".
І242| Термін "вірусне захворювання" описує захворювання, які виникають у результаті вірусної інфекції у суб'єкта.
І243| У контексті цього документу термін "імунологічне порушення" описує, разом із звичайним визначенням цього терміну, імунологічні порушення, такі як аутоїммунні захворювання, гіперчутливість, імунодефіцит. (244 В одному варіанті реалізації у винаході запропоновано спосіб лікування або бо зменшення інтенсивності В-клітинного порушення, що корелює з експресією ВСМА або надекспресією ВСМА, порушення, пов'язаного з плазматичними клітинами, або аутоїммунного захворювання, який включає етап введення суб'єкту, що потребує цього, конструкції антитіла згідно з винаходом або конструкції антитіла, отриманої відповідно до способу згідно з винаходом. (245) У разі порушень, пов'язаних з плазматичними клітинами, один з клонів плазматичних клітин неконтрольовано розмножується. У результаті цей клон виробляє величезну кількість одного (моноклонального) антитіла, відомого як М-протеїн. У деяких випадках, наприклад, у разі моноклональних гаммапатій, антитіло, що виробляється, є неповним і складається тільки з легких ланцюгів або важких ланцюгів. Ці аномальні плазматичні клітини та антитіла, що ними виробляються, зазвичай обмежені одним типом. (246 Переважне порушення, пов'язане з плазматичними клітинами, вибране з групи, що складається з множинної мієломи, плазмацитоми, плазмоклітинного лейкозу, макроглобулінемії, амілоїдозу, макроглобулінемії Вальденстрема, солітарної кістковою плазмацитоми, екстрамедулярної плазмацитоми, остеосклеротичної мієломи, хвороб важких ланцюгів, моноклональної гаммапатії неясного значення та в'ялотекучої множинної мієломи. В-клітинні порушення також можуть бути вибрані з групи, що складається з В-клітинної неходжкінської лімфоми, хронічного лімфоцитарного лейкозу та ходжкінської лімфоми. (247| Аутоїммунне захворювання являє собою, наприклад, системний червоний вовчак (СЧВ) або ревматоїдний артрит (РА). (248) Терміни "суб'єкт, що потребує" або що "потребує лікування" включають тих, у кого вже є порушення, а також тих, у кого необхідно запобігти порушенню. Суб'єкт, що потребує лікування, або "пацієнт" включає людей або інших суб'єктів-ссавців, які отримують профілактичне або терапевтичне лікування.
І249| Конструкція антитіла згідно з винаходом загалом сконструйована для конкретних шляхів і способів введення, для конкретних дозувань і частоти введення, для конкретних варіантів лікування конкретних захворювань, з певними діапазонами біодоступності та здатності збереження в організмі, окрім іншого. Матеріали композиції переважно готують у концентраціях, які є прийнятними для цієї ділянки введення. (250) Таким чином, готові форми та композиції можуть бути отримані відповідно до винаходу для доставки будь-яким відповідним шляхом введення. У контексті цього винаходу шляхи введення включають, але не обмежуються цим - місцеві шляхи (такі як нашкірний, інгаляційний, назальний, очний, аурикулярний/вушний, вагінальний, мукозальний); - ентеральні шляхи (такі як пероральний, шлунково-кишковий, під'язиковий, сублабіальний, букальний, ректальний); - парентеральні шляхи (такі як внутрішньовенний, внутрішньоартеріальний, внутрішньокістковий, внутрішньом'язовий, внутрішньомозковий, інтрацеребровентрикулярний, епідуральний, інтратекальний, підшкірний, внутрішньочеревинний, екстраамніотичний, внутрішньосуглобовий, внутрішньосерцевий, внутрішньошкірний, внутрішньоосередковий, внутрішньоматочний, інтравезикальний, інтравітреальний, трансдермальний, інтраназальний, трансмукозальний, інтрасиновіальний, інтралюмінальний).
І251| Фармацевтичні композиції та конструкції антитіл згідно з цим винаходом особливо застосовні для парентерального введення, наприклад, підшкірної або внутрішньовенної доставки, наприклад, шляхом ін'єкції, такої як болюсная ін'єкція, або шляхом інфузії, такої як безперервна інфузія. Фармацевтичні композиції можна вводити за допомогою пристрою медичного призначення. Приклади пристроїв медичного призначення для введення фармацевтичних композицій описані у патентах США Мо 4475196; 4439196; 4447224; 4447233; 4486194; 4487603; 4596556; 4790824; 4941880; 5064413; 5312335; 5312335; 5383851; і 5399163.
Ї252| Зокрема, у цьому винаході запропоновано безперервне введення відповідної композиції. В якості необмежуючого прикладу безперервне або по суті безперервне, тобто тривале введення можна реалізувати за допомогою невеликої насосної системи, яку носить пацієнт, для дозування подання терапевтичного агента в організм пацієнта. Фармацевтичну композицію, яка містить конструкцію антитіла згідно з винаходом, можна вводити, використовуючи зазначені насосні системи. Загалом такі насосні системи відомі у цій галузі техніки, а їх робота зазвичай грунтована на періодичній заміні картриджів, які містять призначений для інфузії терапевтичний агент. Заміна картриджа у такій насосній системі спричиняє тимчасове переривання або будь-яке інше переривання потоку терапевтичного агента в організм пацієнта. У такому разі фаза введення до заміни картриджа та фаза введення після заміни картриджа все однаково розглядаються у рамках значення фармацевтичних 60 засобів і способів згідно з винаходом, які разом складають одне "безперервне введення" такого терапевтичного агента. (253) Тривале або безперервне введення конструкцій антитіл згідно з винаходом може бути внутрішньовенним або підшкірним і здійснюватися за допомогою пристрою для доставки рідини або невеликої насосної системи, включаючи механізм направлення рідини для направлення рідини з резервуару та приводний механізм для приведення у дію направляючого механізму.
Насосні системи для підшкірного введення можуть містити голку або канюлю для проколювання шкіри пацієнта та доставки відповідної композиції в організм пацієнта. Зазначені насосні системи можуть бути безпосередньо прикріплені або приєднані до шкіри пацієнта незалежно від вен, артерій і кров'яних судин, забезпечуючи, таким чином, прямий контакт між насосною системою та шкірою пацієнта. Насосна система може бути приєднана до шкіри пацієнта впродовж від 24 годин до декількох діб. Насосна система може мати невеликий розмір з резервуаром для невеликих об'ємів. В якості необмежуючого прикладу об'єм резервуару для призначеної для введення відповідної фармацевтичної композиції може складати від 0,1 до 50 мл. (254)| Тривале введення також може здійснюватися трансдермальним шляхом за допомогою пластиру, що носиться на шкірі та замінюється через певні інтервали. Фахівцеві у цій галузі техніки відомі придатні для цієї мети системи на основі пластирів для доставки лікарського препарату. Слід зазначити, що трансдермальне введення особливо підходить для безперервного введення, оскільки заміну першого витраченого пластиру можна переважно здійснювати одночасно з розміщенням нового, другого пластиру, наприклад, на поверхні шкіри, безпосередньо поблизу першого витраченого пластиру та безпосередньо перед вилученням першого витраченого пластиру. Не виникає проблем з перериванням потоку або припиненням дії живлячої комірки.
І255| Якщо фармацевтичну композицію було ліофілізовано, ліофілізований матеріал спочатку відновлюють у відповідній рідині перед введенням. Ліофілізований матеріал можна відновлювати, наприклад, у бактеріостатичній воді для ін'єкцій (БВДІ), фізіологічному сольовому розчині, фосфатно-сольовому буфері (ФСБ) або у тому самому складі, у якому білок знаходився перед ліофілізацією. (256) Композиції згідно з цим винаходом можна вводити суб'єкту у відповідній дозі, яку
Зо можна визначити, наприклад, за допомогою досліджень з підвищенням дози шляхом введення зростаючих доз описаної у цьому документі конструкції антитіла згідно з винаходом, яка демонструє міжвидову специфічність, відмінним від шимпанзе приматам, наприклад, макакам.
Як зазначено вище, описану у цьому документі конструкцію антитіла згідно з винаходом, яка демонструє міжвидову специфічність, переважно можна використовувати в ідентичній формі у доклінічних дослідженнях на відмінних від шимпанзе приматах і в якості лікарського препарату на людях. Режим дозування визначається лікарем і клінічними чинниками. Як добре відомо в області медицини, дозування для будь-якого пацієнта залежать від багатьох чинників, включаючи масу пацієнта, площу поверхні тіла, вік, конкретну призначену для введення сполуку, стать, час і шлях введення, загальний стан здоров'я та інші лікарські препарати, що вводяться одночасно. (257| Термін "ефективна доза" або "ефективне дозування" визначається як кількість, достатня для досягнення або щонайменше часткового досягнення бажаного ефекту. Термін "герапевтично ефективна доза" визначається як кількість, достатня для лікування або щонайменше часткового переривання захворювання та його ускладнень у пацієнта, який вже страждає від захворювання. Кількості або дози, ефективні для цього застосування, залежать від призначеного для лікування патологічного стану (показу), конструкції антитіла, що доставляється, терапевтичного контексту та цілей, тяжкості захворювання, попередньої терапії, клінічної історії пацієнта та його відповіді на терапевтичний агент, шляху введення, розміру (маси тіла, поверхні тіла або розміру органів) і/або стану (віку та загального стану здоров'я) пацієнта, і загального стану власної імунної системи пацієнта. Належну дозу можна коригувати відповідно до рішення лікаря так, щоб її можна було вводити пацієнту за один раз або за допомогою серії введень і з метою отримання оптимального терапевтичного ефекту. (258) Типове дозування може знаходитися в діапазоні від близько 0,1 мкг/кг до близько 30 мг/кг або більше, залежно від вищезгаданих чинників. У конкретних варіантах реалізації винаходу дозування може знаходитися у діапазоні від 1,0 мкг/кг до близько 20 мг/кг, оптимально від 10 мкг/кг до близько 10 мг/кг або від 100 мкг/кг до близько 5 мг/кг.
І259| Терапевтично ефективна кількість конструкції антитіла згідно з винаходом переважно призводить до зниження тяжкості симптомів захворювання, підвищення частоти або тривалості безсимптомних періодів або попередження порушень або недієздатності внаслідок ураження бо захворюванням. Для лікування вищеописаних захворювань, що корелюють з ВСМА,
терапевтично ефективна кількість конструкції антитіла згідно з винаходом, у даному випадку конструкції анти-ВСМА/анти-СОЗ антитіла, переважно інгібує ріст клітин або ріст пухлини щонайменше на близько 2095, щонайменше на близько 4095, щонайменше на близько 5095, щонайменше на близько 6095, щонайменше на близько 7095, щонайменше на близько 8095 або щонайменше на близько 9095 у порівнянні з тими пацієнтами, які не проходять лікування.
Здатність сполуки інгібувати ріст пухлини можна оцінити у тваринній моделі, прогностичній щодо ефективності.
І260| Фармацевтичну композицію можна вводити у вигляді єдиного терапевтичного засобу або у комбінації з додатковими варіантами терапії, такими як протиракова терапія, у разі потреби, наприклад, іншими білковими та небілковими лікарськими препаратами. Ці лікарські препарати можна вводити одночасно з композицією, яка містить визначену у цьому документі конструкцію антитіла згідно з винаходом, або окремо, до або після введення вказаної конструкції антитіла у певні часові інтервали та у певних дозах. (261) У контексті цього документу термін "ефективна та нетоксична доза" відноситься до переносимої дози конструкції антитіла згідно з винаходом, яка є досить високою, щоб призводити до знищення патологічних клітин, елімінації пухлини, зменшення розмірів пухлини або стабілізації захворювання без або практично без основних токсичних явищ. Такі ефективні та нетоксичні дози можна визначити, наприклад, за допомогою досліджень з підвищенням дози, описаних у цій галузі техніки, і вони мають бути нижчими за дозу, яка індукує серйозні небажані побічні явища (дозолімітуюча токсичність, ДЛТ).
І262| У контексті цього документу термін "токсичність" відноситься до токсичної дії лікарського препарату, яка проявляється у небажаних явищах або серйозних небажаних явищах. Ці побічні явища можуть відноситися до відсутності переносимості лікарського препарату у цілому і/або відсутності локальної переносимості після введення. Токсичність також може включати тератогенну або карциногенну дію, викликану лікарським препаратом. (263) У контексті цього документу термін "безпека", "її мімо безпека" або "переносимість" визначає введення лікарського препарату без індукції серйозних небажаних явищ безпосередньо після введення (локальна переносимість) і упродовж тривалішого періоду застосування лікарського препарату. "Безпеку", "іп мімо безпеку" або "переносимість" можна
Зо оцінювати, наприклад, через регулярні інтервали під час лікування та в період, що слідує за ним. Виміри включають клінічну оцінку, наприклад, органні прояви, і дослідження лабораторних аномалій. Можна проводити клінічну оцінку та записувати"сзашифровувати відхилення від нормальних результатів відповідно до стандартів МСІ-СТС і/або МедОкКА. Органні прояви можуть включати такі критерії, як алергія/мунологія, кров/кістковий мозок, серцева аритмія, коагуляція і таке інше, як описано, наприклад, у загальних термінологічних критеріях небажаних явищ му3.0 (СТСАЕ). Лабораторні параметри, які можна досліджувати, включають, наприклад, гематологію, клінічну хімію, профіль коагуляції та аналіз сечі, а також дослідження інших рідин організму, таких як сироватка, плазма, лімфатична або спинномозкова рідина, ліквор і таке інше. Таким чином, безпеку можна оцінити, наприклад, за допомогою фізичного огляду, методів візуалізації (тобто ультразвукового дослідження, рентгенівського дослідження, КТ-сканів, магніто-резонансной томографії (МРТ), інших вимірювань за допомогою технічних пристроїв (тобто електрокардіограми), показників життєдіяльності, шляхом вимірювання лабораторних параметрів і запису небажаних явищ. Наприклад, небажані явища у відмінних від шимпанзе приматів у застосуваннях і способах згідно з винаходом можна досліджувати гістопатологічними і/або гістохімічними способами.
І264| Вищезазначені терміни також перераховані, наприклад, у Ргесіїпіса! загеїу емаїІнайоп ої
БіотесппоІоду-деймед рНнаптасешісаіє 56; ІСН Наптопізей Тіранне СпідеїЇйпе; ІСН 5ієєгіпд
Соттінее тееїїпа оп дшу 16, 1997. (265) І нарешті, у винаході запропоновано набір, який містить конструкцію антитіла згідно з винаходом або отриману відповідно до способу згідно з винаходом, фармацевтичну композицію згідно з винаходом, полінуклеотид згідно з винаходом, вектор згідно з винаходом і/або клітину- хазяїна згідно з винаходом. (266) У контексті цього винаходу термін "набір" означає два або більше компонентів, один з яких відповідає конструкції антитіла, фармацевтичній композиції, вектору або клітині-хазяїну згідно з винаходом, упакованим разом у контейнері, приймачі або будь-яким іншим чином.
Отже, набір може бути описаний як набір продуктів і/або приладдя, достатній для досягнення певної мети, який може надходити у продаж у вигляді окремої одиниці. (267| Набір може містити один або більше приймачів (таких як флакони, ампули, контейнери, шприци, пляшки, пакети) будь-якої відповідної форми, розміру та з будь-якого бо матеріалу (переважно водонепроникного, наприклад, пластику або скла), які містять конструкцію антитіла або фармацевтичну композицію згідно з цим винаходом у відповідному для введення дозуванні (дивіться вище). Набір може додатково містити вказівки із застосування (наприклад, у формі вкладиша або інструкції з застосування), засоби для введення конструкції антитіла згідно з цим винаходом, такі як шприц, насос, інфузійний пристрій і таке інше, засоби для відновлення конструкції антитіла згідно з винаходом і/або засоби для розведення конструкції антитіла згідно з винаходом. (268) У винаході також запропоновано набори для пристрою для однодозового введення.
Набір згідно 3 винаходом також може містити перший приймач, який містить висушену/ліофілізовану конструкцію антитіла, і другий приймач, який містить водну готову форму. У певних варіантах реалізації цього винаходу запропоновано набори, які містять однокамерні та багатокамерні наперед наповнені шприци (наприклад, шприци з рідиною або шприци з ліофілізатом). жк
І269| Слід зазначити, що у контексті цього документу форми однини включають множину, якщо інше чітко не випливає з контексту. Таким чином, наприклад, посилання на "реагент" включає один або більше таких різних реагентів, а посилання на "спосіб" включає посилання на еквівалентні етапи та способи, відомі фахівцям у цій галузі техніки, які можна модифікувати або замінити на описані у цьому документі способи. (270) Якщо не вказане інше, термін "цонайменше", який передує ряду елементів, слід розуміти як такий, що відноситься до кожного елементу у ряді. Фахівці у цій галузі техніки визнають наявність або зможуть визначити, використовуючи лише рутинні експерименти, багато еквівалентів конкретним варіантам реалізації винаходу, описаним у цьому документі.
Мається на увазі, що такі еквіваленти включено у цей винахід. (271) У контексті цього документу термін "І/або" включає значення "і", "або" і "всі або будь- яка комбінація елементів, що об'єднуються зазначеним терміном". (272) У контексті цього документу термін "близько" або "приблизно" означає у межах 20965, переважно у межах 1095 і прийнятніше у межах 595 від заданої величини або діапазону. При цьому він включає також конкретне число, наприклад, близько 20 включає 20. (273) Терміни "менше ніж" або "більше ніж" включають конкретне число. Наприклад, менше
Зо ніж 20 означає менше або рівне. Аналогічно, більш ніж або більше ніж означає більш або рівне або більше або рівне відповідно. (274| У тексті опису та у нижченаведеній формулі винаходу, якщо інше не випливає із контексту, слово "містити" та його варіації, такі як "містить" і "що містить" слід розуміти як такі, що мають на увазі включення вказаного цілого числа або етапу або групи цілих чисел або етапів, але не виключення будь-якого іншого цілого числа або етапу або групи цілих чисел або етапів. У контексті цього документу термін "що містить" можна замінити терміном "що вміщує" або "що включає" або іноді терміном "що має". (275) У контексті цього документу вираз "що складається з" виключає будь-який елемент, етап або інгредієнт, не вказаний у елементі, що заявляється. У контексті цього документу вираз "що складається переважно з" не виключає матеріали або етапи, які не чинять матеріального впливу на основні та нові характеристики предмета, що заявляється. (276) У кожному випадку будь-який з термінів "що містить", "що складається переважно з" і "що складається з" можна замінити будь-яким з двох термінів, що залишилися. (277| Слід розуміти, що цей винахід не обмежений конкретними методологіями, протоколами, матеріалами, реагентами та речовинами і таке інше, описаними у цьому документі, і, отже, може варіюватися. Вживана у цьому документі термінологія використовується тільки у цілях опису конкретних варіантів реалізації, і не має на увазі обмеження цього винаходу, який визначається виключно формулою винаходу. (278| Усі публікації та патенти, цитовані у тексті цього опису (включаючи усі патенти, патентні заявки, наукові публікації, специфікації виробників, інструкції і таке інше), вище або нижче, у повному обсязі включено у цей документ за допомогою посилання. Ніщо у цьому документі не слід сприймати як визнання того, що цей винахід не має права протиставляти такий опис на підставі більш раннього винаходу. У тих випадках, коли включений за допомогою посилання матеріал суперечить або не узгоджується з цим описом, цей опис має пріоритет щодо будь-якого такого матеріалу. (279| Краще розуміння цього винаходу та його переваг забезпечать наступні приклади, наведені виключно в ілюстративних цілях. Мається на увазі, що приклади не обмежують об'єм цього винаходу будь-яким чином. Описані нижче приклади можна проводити аналогічно, тобто дотримуючись таких самих протоколів, з іншими біспецифічними конструкціями антитіл 60 відповідно до винаходу.
І280| Приклад 1: Індукована ВІТЕФ експресія СОб6У на Т-клітинах у відсутності клітин- мішеней
Виділені МКПК від здорових людських донорів культивували із зростаючими кількостями біспецифічних НІ Е-конструкцій антитіл до мішені В/СОЗ або мішені А/СОЗ впродовж 48 год.
Експресію маркера активації СО69 на Т-клітинах визначали за допомогою імунозабарвлення та проточної цитометрії та антиген-специфічних кон'югатів тАбБ.
Незалежну від мішені активацію Т-клітин у контексті підвищеної регуляції СО69 спостерігали для усіх анти-СОН 19 конструкцій, але найбільш вираженою вона була для молекул гетеро-Ес і кросстіл. Підвищення регуляції СО69 5сЕс-конструкцією проти мішені В відбувалося за більш високих концентрацій, а амплітуда була трохи нижчою у порівнянні з іншими конструкціями на основі Ес.
У випадку конструкцій проти мішені А практично не спостерігали незалежну від мішені активацію Т-клітин для зсЕс-вмісної молекули, тоді як конструкція гетеро-Ес індукувала сильне підвищення регуляції СОб69 на клітинній поверхні Т-клітин у відсутності клітин-мішеней.
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану конструкціями ВІТЕЄ, які містять одноланцюговий Ес або гетеро-Ес злиття у С-кінці, оцінювали для наступних конструкцій:
Конструкції ВІТЕ? (серійні розведення: 0,1 пМ - 2 мкМ) а. Мішень А-І2С 5сЕс; 1,14 мг/мл; р. Мішень А гетеро-Ес; 1,02 мг/
Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори; 2065, 823, Ж836 (5сЕс) 401, 415, 433 (гетеро-Ес); 5590, 25595, 598, 2605 (Х-тіло)).
Час інкубації - 48 год.
Визначення експресії СО69 на Т-клітинах СО4-- ії Ов за допомогою проточного цитометру та антиген-специфічних кон'югатів тАб. Результати дивіться на Фігурі 2.
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану конструкціями антитіл ВІТЕ-, які містять одноланцюговий Ес, гетеро-Рс або злиття кросстіла у С-кінці, оцінювали для наступних конструкцій:
Конструкції ВІТЕ? (серійні розведення: 0,1 пМ - 2 мкМ) с. Мішень В х І20-5сЕс; 245,3 мг/мл ( а. Мішень В гетеро-ЕС; 1 мг/мл е. Мішень В кросстіло; 6,3 мг/мл
Ефекторні клітини - людські МКПК (від З до 4 донорів; 2386, 2392, Ж401 (5сЕс) 5282, 284, 287 (гетеро-Ес)).
Час інкубації - 48 год.
Визначення експресії СО69 на Т-клітинах СО4-- ії СОв-- за допомогою проточного цитометру та антиген-специфічних кон'югатів тАб. Результати дивіться на Фігурі 3.
Незалежну від мішені активацію Т-клітин у контексті підвищеної регуляції СО69 спостерігали для декількох біспецифічних конструкцій, досліджуваних у цих аналізах. Підвищена регуляція
СО69 у загальному випадку була більш вираженою для канонічних конструкцій антитіл ВІТЕЄ, молекул гетеро-Бс і кросстіл у порівнянні з відповідними конструкціями 5сЕс. Підвищення регуляції СО69 конструкціями 5сЕс відбувалося за більш високих концентрацій, а амплітуда була трохи нижчою у порівнянні з іншими двома конструкціями на основі Ес.
У випадку 5зсЕс-конструкції проти мішені В не спостерігали незалежну від мішені активацію
Т-клітин, тоді як конструкції гетеро-Ес і Х-тіла індукували сильне підвищення регуляції СО69 на клітинній поверхні Т-клітин у відсутності клітин-мішеней.
Крім того, не спостерігали незалежне від мішені підвищення регуляції СО69 в аналізі із застосуванням конструкцій проти мішені С і мішені б. Через експресію мішені на клітинах мієлоїдної лінії диференціювання ці клітини вилучали перед проведенням аналізу. Ці дані свідчать про те, що взаємодія Ес-областей біспецифічних конструкцій з клітинами, які експресують Есук, може відповідати за незалежну від мішені індукцію СО69 на Т-клітинах.
Сильне підвищення регуляції СОбО на Т-клітинах 5сЕс-конструкцією проти мішені Н у відсутності пухлинних клітин відбувається внаслідок експресії мішені Н на Т-клітинах.
Матеріали та методи 1. Мішень І
Незалежна від мішені активація Т-клітин, індукована молекулою ВІіТЕ?, яка містить одноланцюговий Ес, для наступної конструкції: 1. Конструкція антитіла ВІіТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нм) 1. Мішень І-5сЕс 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори) 60 3. Час інкубації - 48 год
4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО69О на Т-клітинах СО4- і СОв із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб9. 2. Мішень Ю
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану молекулами ВІіТЕЄ, які містять одноланцюговий Ес, гетеро-бс або злиття кросстіла у С-кінці, оцінювали для наступних конструкцій: 1. Конструкції антитіл ВІТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нМ) 1. Мішень О-пеїЕс (гетеро-Ес) 2. Мішень О-5сЕс 3. Мішень О-Х-тіло (Мішень О-кросстіло) 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори) 3. Час інкубації - 48 год 4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО6У на Т-клітинах СО4- і СОв із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб9. 3. Мішень С
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану молекулами ВІіТЕЄ, які містять одноланцюговий Ес, гетеро-с або злиття кросстіла у С-кінці, оцінювали для наступних конструкцій: 1. Конструкції антитіл ВІТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нМ) 1. Мішень С-канонічна конструкція 2. Мішень С-5сЕс 3. Мішень С-ПпеїБс 4. Мішень С-Х-тіло 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори) 3. Час інкубації - 48 год 4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО69О на Т-клітинах СО4- і СОв із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб9. 4. Мішень В
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану молекулами ВІіТЕЄ, які містять
Зо одноланцюговий Ес, гетеро-бс або злиття кросстіла у С-кінці, оцінювали для наступних конструкцій: 1. Конструкції антитіл ВІТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нМ) 1. Мішень В-5сЕс 2. Мішень В-пеїЕс 3. Мішень В-Х-тіло 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори) 3. Час інкубації - 48 год 4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО69О на Т-клітинах СО4- і СОв із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб9. 5. Мішень А
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану молекулами ВІіТЕЄ, які містять одноланцюговий Ес, гетеро-с або злиття кросстіла у С-кінці, оцінювали для наступних конструкцій: 1. Конструкції антитіл ВІТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нМ) 1. Мішень А-5сЕс 2. Мішень А-пеїЕс
З. Мішень А-Х-тіло 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори) 3. Час інкубації - 48 год 4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО69 на Т-клітинах СО4- і СОв- із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб69. б. Мішень ГЕ
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану молекулами ВІіТЕЄ, які містять одноланцюговий Ес або гетеро-Ес, оцінювали для наступних конструкцій: 1. Конструкції антитіл ВІТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нМ) 1. Мішень Е-канонічна конструкція 2. Мішень Е-5сЕс
З. Мішень Е-пеїЕс 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори) 60 3. Час інкубації - 48 год
4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО69 на Т-клітинах СО4- і СОв- із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб69. 7. Мішень Е
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану молекулами ВІіТЕЄ, які містять одноланцюговий Ес або гетеро-Ес, оцінювали для наступних конструкцій: 1. Конструкції антитіл ВІТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нМ) 1. Мішень Е-канонічна конструкція 2. Мішень Е-5сЕс
З. Мішень Е-пеїЕс 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори) 3. Час інкубації - 48 год 4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО69 на Т-клітинах СО4- і СОв- із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб69. 8. Мішень Н
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану молекулою ВІТЕЯ, яка містить одноланцюговий Ес, оцінювали для наступної конструкції: 1. Конструкція антитіла ВІіТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нм) 1. Мішень Н-5сЕс 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори) 3. Час інкубації - 48 год 4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО69О на Т-клітинах СО4- і СОв із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб9. 9. Мішень о
Незалежну від мішені активацію Т-клітин, індуковану молекулою ВІіТЕ?, яка містить одноланцюговий Ес, оцінювали для наступної конструкції: 1. Конструкція антитіла ВІіТЕФ (серійні розведення: 1,3 пМ - 20 нм) 1. Мішень б-5сЕс 2. Ефекторні клітини - людські МКПК (З донори; без клітин СЮО14-4/С033-н) 3. Час інкубації - 48 год
Зо 4. Аналіз методом проточної цитометрії експресії СО69У на Т-клітинах СО4- і СОвх із застосуванням РЕ-Су7-кон'югованого тАб, специфічного щодо СОб9.
І281) Приклад 2:
Очищені конструкції антитіл ВіІТЕ? наносили на планшет Махізогт у зменшуваній концентрації (100 нМ, 1:4 розведення). Після Зх промивань ФСОБ-Т і блокування ФСОСБ/ЗоОо (мас./об.) БСА (60 хв, 37 "С) об'єднану людську плазму інкубували впродовж 60 хв, за 80 об/хв за кімнатної температури. Після Зх промивань додавали мишаче моноклональне антитіло, специфічне щодо субодиниці А людського С1д (СС14а) «(ТПпегто МА1-83963, 1:500) впродовж 60 хв, за 80 об/хв за кімнатної температури, після описаних етапів промивання козяче антимишаче
Ес-РОХ тАБ (1:5000) інкубували впродовж 60 хв, за 80 об/хв за кімнатної температури. Після додаткового промивання інкубували ТМБ-субстрат і припиняли після колориметричної реакції шляхом додавання Нег5О». Поглинання визначали на 450 нм.
Результат: Як зображено на фігурі 4, за високих концентрацій конструкція ВіТЕ? на основі гетеро-Ес (квадрати) демонструвала більш високі сигнали зв'язування щодо людського СС14 у порівнянні з конструкцією ВіТЕ? на основі одноланцюгового Ес (трикутники). В якості негативного контролю використовували канонічне ВІТЕ? (кола), яке не демонструвало істотного зв'язування СС14. (282) Приклад 3: Фармакокінетика конструкцій антитіл ВІТЕФ, злитих з модальностями, що подовжують час напівжиття
Різні конструкції антитіл ВІТЕР, які зв'язують мішень, зливали з чотирма різними компонентами, що подовжують час напівжиття. Усі різні НІ Е-варіанти, доступні для антитіла
ВІТЕЄ, досліджували на яванських макаках у контексті фармакокінетичних (ФК) досліджень. Їх послідовно назвали ВіТтЕФ-5сЕс, ВіТЕФ-пе(бс, ВІТЕФ-НАГ В, ВіТтЕеЕФ-Х-тіло відповідно до модальності, що подовжує час напівжиття, приєднаної до конструкції, що зв'язує мішень. Не злиту з НЕ молекулу ВІТЕ? назвали "канонічним" ВІіТЕЄ. Відповідна номенклатура цих молекул коротко узагальнена у Таблиці 4 нижче. 5О0
Таблиця 4
Номенклатура сполук однодозових молекул ВІіТЕ? сполуки
Сполука 16 Мішень С-пеїБс
Сполука 26 Мішень А-ПпеїБс
Сполука ЗБ Мішень В-пеїБс
Сполука за Мішень В-Нб
Сполука 4р Мішень О-пеїБс
Сполука 55 Мішень Е-пеїБс
Сполука бр Мішень Е-НАЇ В
Сполука 1ба ВСМА (сс)-5сЕс
Сполука 10р ВСМА (канонічне ВІТЕФ)
Молекули ВІіТЕ? вводили у вигляді внутрішньовенної болюсної ін'єкції (сполуки 160, 2а-й,
За/Ю, 4а/р, 5а-5с, 7-9) і внутрішньовенній інфузії (сполуки Та, 1с, Зс/йд, ба/р, кожна у вигляді 30- хвилинної інфузії). Молекули ВіТЕ? вводили у лінійному, фармакокінетично релевантному діапазоні доз, що становить від З мкг/кг до 6 мкг/кг, 12 мкг/кг і 15 мкг/кг, відповідно. Сполуку 1ба вводили у вигляді короткої внутрішньовенної болюсної ін'єкції, канонічну конструкцію (сполуку 105) - у вигляді безперервної внутрішньовенної інфузії. Для порівняння фармакокінетичних параметрів обох сполук, 1ба і 100, на Фігурі 5 зображено тільки кінцеву фазу, яка починається безпосередньо після завершення інфузії, для канонічного ВСМА-ВІТЕФ. Молекули ВСМА ВІіТЕ? вводили у лінійному, фармакокінетично релевантному діапазоні доз, що становить 15 мкг/кг.
Для можливості порівняння сироваткові концентрації, наведені на Фігурі 5, нормалізовані щодо дози та нормалізовані щодо молекулярної маси (описуваної у нмолях). У випадку кожної з наведених вище сполук досліджували групу з щонайменше двох-трьох тварин. Збирали зразки крові та готували сироватку для визначення сироваткових концентрацій. Сироваткові рівні антитіла ВІТЕ? визначали за допомогою імуноаналізу. Сироваткові рівні ВСМА ВІіТЕФ визначали за допомогою імуноаналізу, в якому використовується пара анти-СОЗ ідиотипічних антитіл для покриття та виявлення молекул ВітТЕФ. Профілі сироваткова концентрація - час використовували для визначення ФК-параметрів. Відповідну конфігурацію дослідження коригували щодо характеристик молекул ВІіТЕФ з урахуванням тривалості в 1 тиждень або 2 тижні. Моменти збору зразків крові можуть трохи варіюватися та наведені для обох конфігурацій у Таблиці 5 нижче.
Таблиця 5
Час збору зразків крові під час ФК-дослідження.
Час може варіюватися між окремими дослідженнями.
Час, позначений зірочкою, є обов'язковим і загальноприйнятим для усіх досліджень зродлять кровідпядтжнесог| Час збору зразків. | час збору зразків тижневої тривалості тривалості с да то, сполуки крові для сполуки . ; а; (годі після 105; Ггоді після дослідження дослідження початку інфузії початку інфузії
Ігоді Ігоді 77.7.7юЮ | 0бо5/бов6 0 0о5/бовБ | 0б085..Й.ЧЦ|| :::::/УКИ7ССу 111Ї77711111025.1777777 025... | 2 ..ЮюЮЙ025.ЙДЙ( | г Ф 1 1771111160665117177111111116065. | ....05Б (|! тт аа
Ка в1118111111181Ї11 24161116 ЇЇ 11111141 11111481 11111148 111
Сита 1 111196111111111961 11111111 120111 ЇЇ 41141 17771111168',777111171111111168' |77771711168 | 760011 в 11111111111111111111лвеї мого 1117 26411111 71755990 11115361 711111336 | вою
Фармакокінетика молекул ВіТЕ?9-НІ Е наведена у якості прикладу у Таблиці 6. Група кожної зі сполук представляє один білок ВіТтЕЄ, злитий з 5сЕс-, пеїЕс-, НБА- (людським сироватковим альбуміном, НАГВ), або кросстіло-Гс-формат, або залишену у вигляді канонічної молекули
ВІіТЕЄ. Для усіх білків сироваткові рівні підлягали кількісній оцінці для усіх моментів часу в усіх тварин після введення молекули ВіТЕЄУ-. ФК-профілі демонструють двофазне, експоненціальне зниження після введення кожної окремої досліджуваної сполуки.
Фармакокінетичні параметри визначали, використовуючи стандартні методи некомпартментного аналізу (НКА). Використовуючи некомпартментний аналіз, оцінили наступні
ФК-параметри: ПІПКнеск (площа під кривою сироваткова концентрація - час), М55 (об'єм розподілу у стаціонарному стані), СІ (системне виведення) і термінальний 11/2 (термінальний час напівжиття).
ФК-параметри для кожної досліджуваної сполуки узагальнено у вигляді середнього зап :2 і п - З відповідно у Таблиці 6 нижче.
Таблиця 6
Фармакокінетичні параметри різних НІ Е-варіантів для різних конструкцій ВІіТЕЄ, що зв'язують мішень, у яванських макаків
ППКуеск. . термінальний 1; | Нормалізація до Сї Ув5 досліджувана сполука и Ігоді ре мкг/кг Імл/год/кгі |Імл/кгі
Ігод"нг/млі
Таблиця 6
Фармакокінетичні параметри різних НІ Е-варіантів для різних конструкцій ВІіТЕЄ, що зв'язують мішень, у яванських макаків
ППКуеск. . термінальний 1; | Нормалізація до Сї Ув5 досліджувана сполука и Ігоді ре мкг/кг Імл/год/кгі |Імл/кгі год'нг/мл 1 Сполуаага.ї///// 17777213 | 41173. | 04 6 юЮюжф | 8 гФ 1 Сполуюа?ь//// 17777116 | 18745. | 08 2 2щЩщ РЗ"З| 78 2 Щ 1 бполукаЗсе///// 17777751 7772769 | (68 2 ЮюЮюж5Бкф|| .Ююрс2992щЩЧГ о Сполукабр.//// 17777 173 | 18299. | 2 щ- 08 | 1660 11 Сполукабс/// 777142 | 26418 | 06 727 -.ЮИСлоЗ 2
Сполулав.////// 17777122 | 17099, | 2 щ-Р09 | 119 о Сполукаїба,ї 7777112 | 187727 | 08 | мо
Як правило, ФК-профіль для канонічних молекул ВСМА-ВІТЕЄ демонструє дуже круте зниження профілю сироваткової концентрації, пов'язане з механізмом виведення цих канонічних білків. Націлена на ВСМА конструкція ВІТЕФ-5СЕс з подовженим часом напівжиття демонструє двофазне, експоненціальне зниження після після введення кожної окремої досліджуваної сполуки у яванських макаків.
У цілому, молекула ВСМА-ВІТЕФ, злита з зсЕс НІ Е-модальністю (сполука 10а), демонструє середню ППкукеск, що становить 18772 год"нг/мл, значення системного виведення 0,8 мл/год/кг, а також відповідний об'єм розподілу 110 мл/кг. Сполука 100, канонічна, націлена на ВСМА
ВІіІТЕФ без подовження часу напівжиття демонструє швидке виведення, що становить 62,6 мл/год/кг, яке призводить до низької присутності у сироватці, що становить 1677 год"нг/мл.
Різниця у фармакокінетичній поведінці двох різних досліджених модальностей ВСМА ВІіІТЕФ усебічно описує перевагу націленого на ВСМА ВІіТЕФ-5сЕс з подовженим часом напівжиття над відповідною канонічною версією, особливо у термінах часу утримання речовини в організмі.
У цілому, ППКнеск. для різних ВІТЕЄ, що зв'язують мішень, злитих з -5СЕс, -пеїЕс, НА5 або модальністю кросстіло-НІЕ, відповідно, знаходиться у діапазоні від 1971 год"нг/мл до 77271 год'нг/мл залежно від типу мішені ВіТЕ?У. Усі проаналізовані НІ Е-злиття досягали значень системного виведення від 0,4 до 7,6 мл/год/кг. Відповідний об'єм розподілу знаходився у діапазоні від 68 до 540 мл/кг. Сполуку За, канонічну сполуку З ВІТЕФ, що зв'язує мішень, без подовження часу напівжиття включено в якості стандарту. Молекули ВІТЕФ без подовження часу напівжиття демонструють швидке виведення, низьку сироваткову присутність і, як наслідок, короткий термінальний час напівжиття. Порівняння термінального часу напівжиття залежно від модальності узагальнено у Таблиці 7.
Таблиця 7
Порівняння термінального часу напівжиття залежно від модальності у дослідженнях на яванських макаках.
Після дослідження до чотирьох компонентів, що подовжують час напівжиття (НІ ЕЕ), для кожного націлюючого ВІТЕФ, стає зрозуміло, що компонент -5СЕс демонструє підвищення 1/2 у порівнянні з відповідними іншими компонентами, що подовжують час напівжиття, після введення однієї низької дози 6, 10, 12 і 15 мкг/кг (дивіться Фігуру 6).
І283) Приклад 4:
У наперед приготованих лікарських речовинах, які містять очищені конструкції мішень А-
ПАЇВ, мішень А-пЕс і мішень А-5сЕс відповідно, проводили заміну буфера за допомогою ультрафільтрації/діафільтрації із застосуванням мембран з номінальним відсіканням за молекулярною масою (НВММ) 10 кДа. Кінцеву готову форму отримували шляхом додавання концентрованих вихідних розчинів. Отримані у результаті готові форми для кожної конструкції наведено у Таблиці 8. Концентрація цільового білка складала 1,0 мг/мл Приготовані конструкції мішені А наливали до 1 мл у флакони із скла типу І, які закривали бутилкаучуковими пробками та обтискали алюмінієвими ковпачками. Наповнені флакони інкубували за -20, 5, 25 і 37 "76.
Один флакон з кожною версією піддавали п'яти циклам заморожування та розморожування (З/Р). Цільова температура заморожування складала -29"С. Цільова температура розморожування складала 2 "С. Швидкість зміни складала приблизно 0,3 К/хв.
Підготовлені співробітники оцінювали видимі частинки відповідно до методу, описаного Рі
Ешиг 2.9.20. Число видимих частинок на флакон наведено у Таблиці 8. Число видимих (більше 125 мкм) білкових частинок було більше для конструкції мішень А-пЕс у порівнянні як з конструкцією мішень А-ПАГ В, так і мішень А-5сЕс.
Таблиця 8
Число видимих білкових частинок на флакон для підданих і не підданих стресу (ТО) зразків, які містять різні конструкції ВІТЕ?У проти мішені А з подовженим часом напівжиття тої 0 ЇЇ 0 1 1 ЇЇ 0 1 0 о бБциклівЗз/Р |. 0... щЮ 2 | 2 | 0 | 1 215 | 0 ЇЇ 5 щ2 | 2 | 0 1 о 21256 | 0 | 2 | 1 | 0 1 о 237 | 0 | щ2 | 2 | 0 1 о агРос | 0 | щ2 | 1 | 0 1 0 45 | 0 ЇЇ 1 ЇЇ 2 | 0 1 0 4256 | 0 | 2 | 2 | 0 1 о і а37с | 0 | щ2 | 2 | 0 1 0
Вищеописані зразки також аналізували методом ексклюзійної ультрависокоефективної хроматографії (ЕХ-УЕРХ), щоб кількісно оцінити відсотковий вміст високомолекулярних компонентів (ВМК)У ЕХ-УЕРХ проводили на УЕРХ-системі АсдийунН-Сіазз /(Маїегв5), використовуючи 150 мм колонку Асдийу ОРІ С ВЕН2ОО 5ЕС (Умаїегв5). Температура колонки була встановлена на 25"С. Розділення розмірних варіантів забезпечували застосуванням
Зо ізократичного методу із швидкістю потоку 0,4 мл/хв. Рухома фаза складалася з 100 мМ фосфату натрію, 250 мМ Масі за рН 6,8. Час аналізу складав загалом 6,0 хвилин. Зразки тримали за 8 "С в автодозаторі до проведення аналізу. Інжектували загальну кількість білка З мкг. Щоб уникнути забруднення після кожного зразка проводили проміжну інжекцію 40905 ацетонітрилу. Виявлення базувалося на флуоресцентній емісії (збудження на 280 нм, емісія на 325 нм). Інтеграцію піків проводили за допомогою програмного забезпечення Етромег-.
Відносна площа під кривою ВМК представлена у Таблиці 9.
Конструкції на основі Ес демонстрували нижчий вміст ВМК у варіанті готової форми
С40М5ит, ніж у КбОКТІТ, незалежно від стресових умов. Стало очевидно, що конструкція мішень А-5сЕс містила менше ВМК, ніж мішень А-пЕс в обох препаратах 540М5иТт, а також
КОТ. Мішень А-5сЕс у своїй переважній готовій формі (540М5иТт) була менш схильною до утворення ВМК, ніж мішень А-ПАЇ В, приготована у КбОКТТТ. У попередніх експериментах цей буфер демонстрував поліпшений стабілізуючий потенціал для конструкцій на основі ПАЇ В.
Таблиця 9
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у підданих і не підданих стресу (ТО) препаратах мішень А-ПАЇГ В, -ПЕс і -5сЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ 2156 | нд. | ккд. | нд. | 29 | 1 21256 | нд. | 66 | 27 | 24 | 05 агро | 759 | 87 | 16 | 66 | 03 аг5'Є | 20 | 82 | 28 | 36 | 06 4256 | 22 | 68 | 26 | 27 | 04 н. д. 5 не досліджено
Поширеність хімічних модифікацій після теплового стресу (інкубації за 37 "С) відстежували за допомогою пептидного мапування. Зразки білка ферментативно розщеплювали, а отримані у результаті пептиди розділяли, використовуючи обернено-фазову хроматографію. Елюат з колонки інжектували безпосередньо у джерело іонів мас-спектрометра для ідентифікації та кількісного визначення пептидів.
Для досягнення максимального покриття проводили два окремі ферментативні розщеплювання: одне трипсином, а одне хімотрипсином. У кожному випадку білки денатурували гуанідиній хлоридом, а потім відновлювали дитіотреїтолом (ДТТ). Після інкубації у ДТТ вільні цистеїнові залишки алкілували шляхом додавання йодооцтової кислоти. Потім для зразків проводили заміну буфера на 50 мМ Тріс, рН 7,8, для розщеплювання. Трипсин і хімотрипсин додавали в окремі реакційні пробірки у співвідношенні 1:10 (зразок:фермент) кожного. Розщеплювання зразків проводили впродовж 30 хв за 37 "С і гасили реакцію додаванням трифтороцтової кислоти. 5 мкг кожного продукту розщеплювання окремо інжектували в обернено-фазову колонку 7ограх 5В-С18 (Аадіепі 25859700-902), урівноважену в 0,195 (06б./06.) мурашиної кислоти (МК).
Застосовували 156б-хвилинний градієнт з до 9095 ацетонітрилу, що містив 0,195 МК, для елюювання пептидів безпосередньо у джерело іонів для електророзпилювання мас- спектрометра О-Ехасіїме Ріи5 (Тпегто зсієпійіс). Дані отримували у залежному від даних режимі, використовуючи метод топ-12, в якому за повним скануванням (розділення 70 000; діапазон сканування 200-2000 т/) іде індукована високоенергетичним зіткненням дисоціація (НСО) 12 найбільш поширених іонів (розділення 17 500).
Пептиди ідентифікували на підставі точних мас- і тандемних мас-спектрів, використовуючи внутрішньолабораторне програмне забезпечення. Результати ідентифікації підтверджували вручну. Відносні кількості модифікованих і немодифікованих пептидів розраховували на підставі поширеності іонів, використовуючи програмне забезпечення Ріпроїпі (Тнегто бсієпійіс).
Відсотковий вміст хімічних модифікацій областей, що визначають комплементарність (СОК), і частини, що подовжує час напівжиття (ПАЇ! В або Ес), визначений у препаратах мішень А-ПАЇ В,
-пЕс ї -50Ес, наведено у Таблиці 10. У разі порівняння аналогічних умов приготування стає очевидно, що загалом хімічні модифікації були найменш поширені у 5сЕс-конструкціях.
Таблиця10
Узагальнена інформація по хімічним модифікаціям у підданих і не підданих стресу (ТО) препаратах мішень А-ПАЇ В, -НЕс і -«5СЕс, визначеним за допомогою пептидного мапування 237" | 07 | 08 | 30 | 07 | 32 і аг37"с | 713 | ккд. | 85 | нд. | 64 і ат37"с | 268. | ккд. | 37 | нд. | 41 то | 06 | 14 | 16 | 06 | 10 237" | 72 | 08 | 08 | 06 | 10 437 "с | 09 6 ю ю| кд. | 08 | нд. /| 06 то | 05 | з2 | 33 | 05 | 09 і ат37"Є | 228 | ккд. | 20 | нд. | 29 о 2т37"с | 66 | 7127 | 09 | 38 | 04 о ат37"с | 87 | ккд. | 08 | нд. /| 08 о 2т37"С | нзх | 90 | з | 40 | 43 437" | наз | ккд. | 34 | нд. | 35 о ат37"с | наз | ккд. | 69 | нд. | 8 о 2т37"С | нах | 60 | 28 | 21 | 25 437" | наз | ккд. | 26 2 | нд. | 20 то. 89 | нг | наз | нз | з.
н. 3. - не застосовно; н. д. - не досліджено
І284|) Приклад 5:
Конструкції мішень А-НПАГ В, -пЕс, -5СЕс, приготовані так, як описано у Прикладі 4, піддавали експерименту із стрибком рН. Концентрація вихідних матеріалів складала 1,0 мг/мл. У скляний флакон наливали об'єм 0,38 мл кожного стартового матеріалу. Після попереднього кондиціонування за 37 С розчини доповнювали 20-кратним об'ємом фосфатно-сольового буфера (ФСБ), який складався з 0,090 М фосфату калію, 0,480 М фосфату натрію (обидва двоосновні), 0,052 М хлориду калію і 2,76 М Масі. Доповнені зразки інкубували за 37 "С впродовж двох тижнів. Після інкубації їх аналізували за допомогою ЕХ-УЕРХ, використовуючи метод, описаний у Прикладі 4, а відсотковий вміст ВМК наведено у Таблиці 11. У разі порівняння всіх конструкцій, приготованих у КбОКТТТ, вміст ВМК зростав у наступному порядку:
ПАГВ «о 5сБс « ПЕС. Конструкція мішень А-5СЕс також демонструвала нижчий вміст ВМК, ніж мішень А-ПЕс у разі приготування в 540мМ5иТт.
Таблиця11
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у підданих стресу (стрибок рН я 2т 37 "С) препаратах мішень А-ПАЇГ В, -ПЕс і -5сЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ
І285) Приклад 6:
Конструкції мішень А-НПАГ В, -пЕс, -5СЕс, приготовані так, як описано у Прикладі 4, піддавали стресу, що викликається струсом. Концентрація вихідних матеріалів складала 1,0 мг/мл. Об'єм 0,5 мл кожного розчину фільтрували через фільтр, що відповідає 0,22 мкм, і наливали у флакони із скла Зсс. Флакони вміщували у пластикову коробку, переконавшись, що флакони не зміщуються усередині коробки під час струсу. Коробку поміщали на орбітальний струшувач.
Зразки струшували за 500 об/хв упродовж 65 годин. Видимі частинки оцінювали відповідно до методу, описаного Рі Еиг 2.9.20. Цей метод здійснювали підготовлені співробітники. Число видимих частинок на флакон наведено у Таблиці 12. Видимі білкові частинки спостерігали тільки у препаратах мішень А-ПЕс.
Таблиця12
Число видимих білкових частинок на флакон у підданих струсу зразках ше г 11111 об/хв
Вищезазначені зразки також аналізували методом ексклюзійної ультрависокоефективної
Зо хроматографії (ЕХ-УЕРХ), щоб кількісно оцінити відсотковий вміст високомолекулярних компонентів (ВМК). Застосовували такий самий метод, який описано у Прикладі 4. Вміст ВМК у зразках після струсу наведено у Таблиці 13. Утворення ВМК було найбільш вираженим для конструкції мішень А-ПЕс у разі порівняння препаратів КбОКТІТ. ВМК були більш поширеними у випадку конструкції мішень А-ПЕс, ніж мішень А-5сЕс.
Таблиця 13
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у підданих стресу (стрибок рН я 2т 37 "С) препаратах мішень А-ПАЇГ В, -ПЕс і -5сЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ
Конструкція ПАЇВ
КвОоВТТ КвОоВТТ с40М5итТ квот соми
УовмМК 65 год, 500
І286) Приклад 7:
Конструкції мішень А-ПАЇ В, -ПЕс і -5СЕс, приготовані так, як описано у Прикладі 4, піддавали дії видимого та УфФА-світла (фотострес). В усіх препаратах загальна концентрація білка складала 1 мг/мл. Білкові розчини фільтрували через фільтр з розміром пір 0,22 мкм і наливали у 0,5 мл флакони із скла типу І. Конструкції мішень А-пПАЇВ ії -5СЕс піддавали двом різним випробуванням, які включають 0,2 Млк видимого світла/25 Вт"год/м2 УФА-світла та 1,2 Млк видимого світла/173 Вт"год/м2 відповідно. Конструкцію мішень А-пЕс піддавали двом різним випробуванням, які включають 0,2 Млк видимого світла без УФА-світла та 1,2 Млк видимого світла/30 Вт"год/м? УФА-світла відповідно. Температуру у камері встановлювали на 25 "С. Після дії світла зразки аналізували шляхом візуального огляду (Таблиця 14), ЕХ-УЕРХ (Таблиця 15) і пептидного мапування (Таблиця 16). Вищезазначені методи здійснювали відповідно до процедур, описаних у Прикладі 4. Хоча конструкції мішень А-ПАЇ В ії -5СЕс піддавали дії більш високих доз УФА-світла, видимих білкових частинок не спостерігали, тоді як зразки мішень А- пЕс демонстрували по одній видимій білковій частинці на флакон в обох випробуваннях, незалежно від приготування.
Таблиця 14
Узагальнена інформація по числу видимих білкових частинок на флакон у препаратах мішень А-ПАЇ В, -ПЕс і -5СЕс, визначеному після дії світла
Конструкція ПАЇВ
КвОоВТТ квот с40М5итТ квот с40М5итТ
Число видимих (2125 мкм) білкових частинок на флакон 070.10 1 0 11 1 11 0 1 0
Випробовування 1
Випробовування 2 1) 0,2 Млк видимого світла/25 Вт"год/м2 УФА-світла, 2) 0,2 Млк видимого світла без УФА-світла, 3) 1,2 Млк видимого світла/173 Вт"год/м, 4)1,2 Млк видимого світла/30 Вт"год/м2
Кількість ВМК зростала у наступному порядку: мішень А-НАЇ В « -5СЕс « -ПЕс, коли білок був приготований у КбОЕКТІТ. Кількість ВМК могла бути зниженою для конструкцій на основі Ес у разі приготування в 540М5иТ. При цьому ВМК знову були менш вираженими для конструкції мішень
А-5сЕс. Виявилось, що конструкція мішень А-пЕс особливо чутлива до дії УФА-світла.
Таблиця 15
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у препаратах мішень А-ПАГ В, -пЕс і -5сЕс, визначеному після дії світла за допомогою ЕХ-УЕРХ 1) 0,2 Млк видимого світла/25 Вт"год/м2 УФА-світла, 2) 0,2 Млк видимого світла без УФА-світла, 3) 1,2 Млк видимого світла/173 Вт"год/м, 4)1,2 Млк видимого світла/30 Вт"год/м2
Відсотковий вміст хімічних модифікацій областей, що визначають комплементарність (СОК), і частини, що подовжує час напівжиття (ПАЇ В або Ес), визначений у препаратах мішень А-ПАЇ В, -пЕс і -5СЕс, наведено у Таблиці 16. У разі порівняння аналогічних умов приготування стає очевидно, що загалом хімічні модифікації були найменш поширені у 5сЕс-конструкціях.
Таблиця 16
Узагальнена інформація по хімічним модифікаціям у препаратах мішень А-ПАЇГ В, -пЕс і -5СЕс, визначеним після дії світла за допомогою пептидного мапування
Випробовування! | 027 о ндо | 0037 | нд. | 05
Випробовування2 | 02 | нд. | 069 | нд. | 073
Випробовування! | 3,07 | нд. | 217 | нд. | 27
Випробовування2 | 3,69 | нд. | ЗИ» | нд. | 283 70. 06 | 74 | 76 | 06 | 10
Випробовування! | 0,87... нд. | 2,67 | нд. | 06)
Випробовування2 | 1,09... | нд. | 635 | нд. | 073 70 05 | 32 | 33 | 05 | 09
Випробовування! | 047 | нд. | 277 | нд. | 02
Випробовування2 | 0,99. | нд. | 3995 | нд. | 023
Випробовування! | 047 | нд. | 207 | нд. | 037
Випробовування2 | 0,59. | нд. | 269 | нд. | 033
Випробовування! | н.3. | нд | 767 | нд. | З
Випробовування2 | н.з. | нд. | 2189 | нд. | 413
Випробовування! | н.3. | нд. | 6,57 (| нд. | 187
Випробовування2 | н.з. | нд. | 1789 | нд. | 27
Таблиця 16
Узагальнена інформація по хімічним модифікаціям у препаратах мішень А-ПАЇГ В, -пЕс і -5СЕс, визначеним після дії світла за допомогою пептидного мапування 111770. 89 | кг | нг | нз | нз н. 3. - не застосовно; н. д. - не досліджено
І287| Приклад 8:
Конструкцію мішень А-ПАЇ В готували у КбОКТІТ, а конструкцію мішень А-5сЕс готували у
С40М5иТ відповідно до процедури, описаної у Прикладі 4. Загальна концентрація білка складала 0,05 мг/мл. Скляні (боросилікат, тип І, 13 мм Зсс флакон від Умеві, арт. Мо 68000375) і поліпропіленові контейнери для випробувань (2 мл з О-кільцем, наприклад, від Загеїеаї, арт. Мо 72.694.005) наповнювали 500 мкл досліджуваного розчину. Досліджуваний розчин залишали на п'ять хвилин у першому контейнері для випробувань. Потім відбирали 150 мкл аліквоту для аналізу. Досліджуваний розчин (350 мкл), що залишився, послідовно переносили з одного контейнера для випробувань у наступний (всього п'ять контейнерів). У кожному флаконі розчин залишали на п'ять хвилин перед наступним перенесенням. На кожному етапі перенесення використовували один й той самий наконечник для піпетки. Таке саме випробування проводили, використовуючи 30 мл полікарбонатні пляшки (МаІдепе, РО5-000295 з кришкою, РР/20- 415/2ТРЕ). У випадку цього типу контейнера перший контейнер наповнювали 5 мл. Після відбору 150 мкл аліквоти об'єм, що залишився, переносили з одного контейнера для випробувань у наступний (відповідно до процедури, описаної вище). Зразки, отримані з контейнера Я і Ж5 аналізували за допомогою ЕХ-УЕРХ (методом, аналогічним описаному у
Прикладі 4). Додатково проводили виявлення білка за допомогою детектора з ФДМ (280 нм), щоб визначити концентрацію білків. Процентне відновлення білка з кожного контейнера для випробувань наведено у Таблиці 17. Було показано, що відновлення білка було більше виражене для конструкції мішень А-5СЕс, ніж для конструкції мішень А-ПАГ В, незалежно від типу контейнера.
Таблиця 17
Відновлення білка з різних типів контейнерів для конструкцій мішень А-ПАЇГ В і -5сЕс, визначене за допомогою ЕХ-УЕРХ оо Полкарбонат7/ | 77777777 87077777 17717171 96011СсС21С
І288) Приклад 9:
І289| Конструкцію мішень А-ПАЇГ В готували у КбОКТТТ, а конструкцію мішень А-5СЕс готували у КбОКТІТ ї 540М5ит відповідно до процедури, описаної у Прикладі 4. Загальна концентрація білка складала 1,0 мг/мл. 1950 мкл кожного досліджуваного розчину доповнювали 50 мкл 1000 м. д. кремнієвого стандартного розчину (Зресриге від АГадезаг, Арт. Мо 38717), що приводило до отримання 25 м. д. доповненого зразка. Не доповнений досліджуваний розчин слугував у якості контрольного зразка. Доповнений досліджуваний розчин з добавкою, а також контрольний зразок наливали у Зсс флаконів із скла типу І і інкубували за 37 "С впродовж 24 годин. Усі зразки аналізували за допомогою ЕХ-УЕРХ відповідно до методу, описаного у
Прикладі 4, щоб оцінити кількості ВМК (Таблиця 18). У разі приготуванні у КбОКТІТТ, конструкції мішень А-ПАЇВ і -50Ес демонстрували аналогічне підвищення числа ВМК після додавання кремнію.
Таблиця 18
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у препаратах мішень А-ПАГ-В і -5сЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ після доповнення 25 м. д. кремнію (290) Приклад 10:
У наперед приготованих лікарських речовинах, які містять очищені конструкції мішень С (сс)-
ПАЇВ, мішень С (сс)-пЕс і мішень С (сс)-5СЕс відповідно, проводили заміну буфера за допомогою ультрафільтрації/діафільтрації із застосуванням мембран з номінальним відсіканням за молекулярною масою (НВММ) 10 кДа. Кінцеву готову форму отримували шляхом додавання концентрованих вихідних розчинів. Отримані у результаті готові форми для кожної конструкції наведено у Таблиці 19. Концентрація цільового білка складала 1,0 мг/мл Приготовані конструкції мішені С (сс)- наливали до 1 мл у флакони із скла типу І!, які закривали бутилкаучуковими пробками та обтискали алюмінієвими ковпачками. Наповнені флакони інкубували за -20, 5, 25 і 37 "Сб. Один флакон з кожною версією піддавали п'яти циклам заморожування та розморожування (З3/Р). Цільова температура заморожування складала - 29"С. Цільова температура розморожування складала 2 "С. Швидкість зміни складала приблизно 0,3 К/хв. Вищеописані зразки також аналізували методом ексклюзійної ультрависокоефективної хроматографії (ЕХ-УЕРХ), щоб кількісно оцінити відсотковий вміст високомолекулярних компонентів (ВМК). ЕХ-УЕРХ проводили відповідно до методу, описаного у
Зо Прикладі 4. У разі приготування у КбОКТТТ кількість ВМК у зразках, що не піддавалися стресу, зростала у наступному порядку: 5сЕс « ПАЇ В « ПЕс. Найменш виражене підвищення кількості
ВМК після стресу, пов'язаного із заморожуванням і розморожуванням, спостерігали для 5сЕс- конструкції. пПРс-конструкція виявилася найбільш схильною до утворення ВМК за -20 "С. Вміст
ВМК підвищувався після чотирьох тижнів зберігання за 5 "С. Утворення ВМК у цих умовах було більш вираженим для конструкцій на основі Ес, ніж для конструкцій на основі альбуміну. У
КбОКТгІ не спостерігали істотного підвищення кількості ВМК за підвищених температур зберігання (25 і 37 "С). У разі приготування у 540М5ит усі конструкції продемонстрували схожий вміст ВМК у зразках, що не піддавалися стресу. Підвищення під час заморожування та розморожування більше відрізнялося у випадку конструкцій на основі Ес, якщо порівнювати з конструкціями на основі альбуміну. У 540М5иТт пЕс-конструкція була найменш стабільною у разі зберігання за -20 "С. Значне підвищення кількості ВМК у разі зберігання у рідкому вигляді спостерігали тільки для ПАЇ В-конструкції.
Таблиця 19
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у підданих і не підданих стресу (ТО) препаратах мішень С (сс)-ПАЇГ В, -ПЕс і -5сЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ 21-20" | нд. | нд. | нд | нд. | 15 | 05 2т57СЄ | нд. | нд. | нд. | нд. | 18 | 02 о 2т25"С | 77 | 06 | 23 | 02 | 13 | 02 ато | 16 | 04 | 42 | 15 | 717 | 098 о 4т25"С | 14 | 06 | 22 | 02 | 14 | 04 н. д. 5 не досліджено
Поширеність хімічних модифікацій після теплового стресу (інкубації за 37 "С) відстежували за допомогою пептидного мапування відповідно до методу, описаного у Прикладі 4. Відсотковий вміст хімічних модифікацій областей, що визначають комплементарність (СОК), визначений у препаратах мішень С (сс)-пПАЇВ, -пЕРс і -5С0Ес, наведено у Таблиці 20. Загалом, конструкції мішень С (сс)-50Ес демонстрували найменшу кількість хімічних модифікацій у СОК. Стало очевидним, що особливо деамідування в СОР. було найменш вираженим для 5сЕс-конструкції.
Таблиця 20
Узагальнена інформація по хімічним модифікаціям у підданих і не підданих стресу (ТО) препаратах мішень С (сс)-ПАЇ В, -пЕс і -«5сЕс, визначеним за допомогою пептидного мапування 2137" | 098 | 13 | 09 | 11 | 70 | 17 437 "С | нд. | нд. | нд. | 16 | нд | 18 0 | 08 | 08 | 08 | 08 | 06 | 06 437 "С | нд. | нд. | нд. | 80 | нд | 124 то | 07 | 714 | 08 | 1 | 13 | 4 2137 "с | 07 | 70 | 08 | 08 | 08 | їз / 437 "С | нд. | нд | нд. | ї2 | нд. | 16 о 2т37"с | 193 | 58 | 112 | 28 | 70 | 09 437 "С | нд. | нд | нд. | 29 | нд. | 22 (| 437" | нд. | нд | нд. | 14 | нд. | 07 н. 3. - не застосовно; н. д. - не досліджено
І291| Приклад 11:
Конструкції мішень С (сс)-пАЇГ В, -пЕс і -5СЕс, приготовані так, як описано у Прикладі 4, піддавали експерименту із стрибком рН. Концентрація вихідних матеріалів складала 1,0 мг/мл.
У скляний флакон наливали об'єм 0,38 мл кожного стартового матеріалу. Після попереднього кондиціонування за 37 "С розчини доповнювали 20-кратним об'ємом фосфатно-сольового буфера (ФСБ), який складався з 0,090 М фосфату калію, 0,480 М фосфату натрію (обидва двоосновні), 0,052 М хлориду калію і 2,76 М Масі. Доповнені зразки інкубували за 37 "С впродовж двох тижнів. Після інкубації їх аналізували за допомогою ЕХ-УЕРХ, використовуючи метод, описаний у Прикладі 4, а відсотковий вміст ВМК наведено у Таблиці 21. Конструкції мішень С (сс)-5сСЕс демонстрували найменший вміст ВМК після стрибка рН у порівнянні з конструкціями мішень С (сс)-пАГ-В і -НЕс, незалежно від приготування.
Таблиця 21
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у підданих стресу (стрибок рН « 2т 37 "С) препаратах мішень С (сс)-ПАЇГ В, -ПЕс і -5сЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ (2921) Приклад 12:
Конструкції мішень С (сс)-пАІ В, -пЕс ї -50Ес, приготовані так, як описано у Прикладі 4, піддавали стресу, що викликається струсом. Концентрація вихідних матеріалів складала 1,0 мг/мл. Об'єм 0,5 мл кожного розчину фільтрували через фільтр, що відповідає 0,22 мкм, і наливали у Зсс флакони із скла типу І. Флакони вміщували у пластикову коробку, переконавшись, що флакони не зміщуються усередині коробки під час струсу. Коробку поміщали на орбітальний струшувач. Зразки струшували за 500 об/хв упродовж 65 годин.
Зразки аналізували методом ЕХ-УЕРХ, щоб кількісно оцінити відсотковий вміст високомолекулярних компонентів (ВМК). Застосовували такий самий метод, який описано у
Прикладі 4. Вміст ВМК у зразках після струсу наведено у Таблиці 22. Утворення ВМК було найменш виражене для конструкції мішень С (сс)-5СЕс у будь-якій готовій формі.
Таблиця 22
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у підданих стресу (стрибок рН я 2т 37 "С) препаратах мішень С (сс)-ПАЇГ В, -ПЕс і -5сЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ 65 год, 500 бо | м | о | га 14 | з 1
І293| Приклад 13:
Конструкції мішень С (сс)-пАГ В, -пЕс і -5СЕс, приготовані так, як описано у Прикладі 4, піддавали дії видимого та УФА-світла (фотострес). В усіх препаратах загальна концентрація
Зо білка складала 1 мг/мл. Білкові розчини фільтрували через фільтр з розміром пір 0,22 мкм і наливали у 0,5 мл флакони із скла типу І. Конструкції мішень С (сс)-ПА|Г- В і -5СЕс піддавали двом різним випробуванням, які включають 0,2 Млк видимого світла/25 Вт"год/м? УФА-світла та 1,2
Млк видимого світла/173 Вт"год/м2 відповідно. Конструкцію мішень С (сс)-пЕс піддавали двом різним випробуванням, які включають 0,2 Млк видимого світла без УФА-світла та 1,2 Млк видимого світла/30 Вт"год/м7 УФА-світла відповідно. Температуру у камері встановлювали на 25"С. Після дії світла зразки аналізували методом ЕХ-УЕРХ (Таблиця 23) і пептидного мапування (Таблиця 24). Вищезазначені методи здійснювали відповідно до процедур, описаних у Прикладі 4. Незважаючи на більш високу інтенсивність УФА-світла, що застосовували до конструкції мішень С (сс)-5СЕс, ця конструкція була стабільною проти утворення ВМК. На противагу цьому, конструкції мішень С (сс)-пЕс і мішень С (сс)-пАІ-В демонстрували підвищення кількості ВМК після 2 умов випробувань.
Таблиця 23
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у препаратах мішень С (сс)-НАЇ В, -пЕс і -5сЕс, визначеному після дії світла за допомогою ЕХ-УЕРХ 1) 0,2 Млк видимого світла/25 Вт"год/м2 УФА-світла, 2) 0,2 Млк видимого світла без УФА-світла, 3) 1,2 Млк видимого світла/173 Вт"год/м, 4)1,2 Млк видимого світла/30 Вт"год/м2
Загалом, хімічні модифікації після дії світла були найменш вираженими для конструкції мішень С (сс)-5СЕс. Особливо деамідування СОК більшою мірою проявлялося у конструкціях мішень С (сс)-пПАЇВ і мішень С (сс)-пЕс. У порівнянні з конструкціями на основі Ес було виявлено, що конструкція мішень С (сс)-5СЕс була менш схильною до хімічних модифікацій Ес- частини, хоча 5сЕс-конструкцію піддавали більш високим дозам УФфА-світла, ніж ПпЕс- конструкцію. У Таблиці 24 також перераховано найбільш поширені хімічні модифікації альбумінової частини у конструкції мішень С (сс)-пАЇ В, демонструючи, що частина цієї конструкції, яка подовжує час напівжиття, була більш хімічно деградована, ніж Ес-частини конструкції мішень С (сс)-пЕс і -5СЕс.
Таблиця 24
Узагальнена інформація по хімічним модифікаціям у препаратах мішень С (сс)-ПАЇ В, -ПЕс і - 5сЕс, визначеним після дії світла за допомогою пептидного мапування
Випробовування!| 1,57 | нд. | 077 / 422 | 147 | те"
Випробовування2| 1,77 | нд. | 119 / 42 | 1959 | 77 то 777 | 08 | 08 | 08 | 08 | 06 | 06
Випробовування!| 0,87 | нд. | 099 / 097 | 089 / 70
Випробовування2| 113 | нд. | 129 | 147 | 109 | 759 то 7777777 | 107 | 14 | 08 | 1 | 13 | 14
Випробовування!| 117 | нд. | 057 / 33 | 1097 | 0,99
Випробовування2| 1,43 | нд. | 119 | 42 | 109 | 14
Випробовування!| 10,87 | нд. | 457 / 56 | 047 | 02
Випробовування2| 1249 | н.д. | 109395 | 36 | 069 | 02
Випробовування!| 8,87 | нд. | 347 | 357 | 0937 | 095
Випробовування2| 9,83 | нд. | 647 | 237 | 05 | 059
Таблиця 24
Узагальнена інформація по хімічним модифікаціям у препаратах мішень С (сс)-ПАЇ В, -ПЕс і - 5сЕс, визначеним після дії світла за допомогою пептидного мапування то 77777777 | внз | внз | 03 | 03 | 00 | 00 то 77777771 711710 | нд. | наз | нз | внз | нз.
Випробовування!| 2327 | нд. | н.з. | нз. | наз. | внз.
Випробовування2| 643 | нд. | н.з. | нз. | внз. | нз. то 77777771 717118 | нд. | наз | нз | внз | з.
Випробовування!| 3,57 | нд. | н.з. | нз. | наз. | внз.
Випробовування2| 8,33 | нд. | н.з. | нз. | наз. | нз. то 77777777 | 7128 | нд. | наз | нз | внз | з.
Випробовування!| 3207 | н.д. | н.з. | нз. | наз. | з.
Випробовування2| 61,7. | н.д. | н.з. | нз. | наз. | нз. то 77777777 лом | нд. | наз | нз | внз. | з.
Випробовування!| 1027 | нд. | н.з. | нз. | наз. | з. (Випробовування2| 9,99 | нд. | н.з. | нз. | внз. | нз. 1) 0,2 Млк видимого світла/25 Вт"год/м2 УФА-світла, 2) 0,2 Млк видимого світла без УФА-світла, 3) 1,2 Млк видимого світла/173 Вт"год/м, 4)1,2 Млк видимого світла/30 Вт"год/м2 (294) Приклад 14
Досліджували різні конструкції антитіл ВІТЕФ, сконструйовані для націлювання на мішень Е, включаючи мішень Є без подовження часу напівжиття (не-НІ Е, канонічну), мішень Е-ПАГЇ В і мішень Е-5сЕс. Концентрація цільового білка складала 1,0 мг/мл для ПАЇ В і 5сЕс і 0,4 мг/мл для не-НІ Е версії. Приготовані конструкції антитіл ВІТЕФ наливали до 1 мл у флакони із скла типу Ї, які закривали бутилкаучуковими пробками та обтискали алюмінієвими ковпачками. Наповнені флакони інкубували за - 20 С і 37 "С (без і з 25 м. д. кремнію, який відомий своїм потенціалом індукувати агрегацію білків) впродовж 4 тижнів. Вищезазначені конструкції також піддавали дії світла (1,2 Млк видимого світла/173 Вт"год/м2 УФА-світла). У випадку стресу, викликаного світлом, температуру у камері встановлювали на 25 "С. Зразки, що зберігалися за -70 С, слугували в якості контролю (10).
Вищеописані зразки також аналізували у дуплікатах методом ексклюзійної ультрависокоефективної хроматографії (ЕХ-УЕРХ), щоб кількісно оцінити відсотковий вміст високомолекулярних компонентів (ВМК). ЕХ-УЕРХ проводили на УЕРХ-системі Асдийу Н-Сіаз55 (Умаїег5), використовуючи 150 мм колонку Асдийу ОРС ВЕН2гОО 5ЕС (Умаїег5). Температура колонки була встановлена на 25С. Розділення розмірних варіантів забезпечували застосуванням ізократичного методу із швидкістю потоку 0,4 мл/хв. Рухома фаза складалася з 100 мМ фосфату натрію, 250 мМ Масі, рН 6,8. Час аналізу складав загалом 6,0 хвилин. Зразки тримали за 8 "С в автодозаторі до проведення аналізу. Інжектували загальну кількість білка З мкг. Щоб уникнути забруднення після кожного зразка проводили проміжну інжекцію 4095 АЦН.
Виявлення базувалося на флуоресценції (збудження на 280 нм, емісія на 325 нм). Інтеграцію піків проводили за допомогою програмного забезпечення Етроуегф. Представлена відносна площа під кривою ВМК (Таблиця 25).
Серед не підданих стресу зразків ВМК були найменш вираженими для 5сЕс-конструкції.
Утворення ВМК спостерігали виключно під час 4-тижневого зберігання за -20 "С. Вміст ВМК у цих умовах зростав у наступному порядку 5СЕс « ПАЇ В « не-НІ Е.
Таблиця 25
Узагальнена інформація по вмісту ВМК у підданих і не підданих стресу (ТО) препаратах мішень Е-не-НІ Е, -пАГ-В і -5сЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ.
На додаток зразки після теплового стресу у відсутності та присутності кремнію оцінювали щодо наявності невидимих неозброєним оком частинок методом мікрофлюїдної візуалізації (МФВ), використовуючи Ріож/сат від Рід Ітадіпуд Тесппоіодіє5, Іпс. Прилад був обладнаний проточною коміркою ЕС8ОРЕМ. Застосовували десятиразове оптичне збільшення. Застосовність системи підтверджували за допомогою води, яка не містила частинок. Застосовували швидкість автоматичного отримання зображень 20 кадрів на секунду. Тіньове та світлове порогові значення були встановлені на 25 і 20 пікселів відповідно. Загальний об'єм зразка для одного виміру складав 0,25 мл. Вимірювання зразків проводили у триплікатах. Перед кожним триплікатом систему промивали 0,5 мл відповідних розчинів зразків. На початку та між кожним з триплікатів проводили промивання 1,0 мл води, яка не містила частинок. Оцінку даних проводили за допомогою програмного забезпечення Мізцаі! Зргеаазпеєї. Вимірювання зразків проводили у триплікатах. Результати наведено у Таблиці 26.
Тепловий стрес призводив до утворення невидимих неозброєним оком частинок у препаратах, що містять конструкції не-НГЕ і пАГВ. 5сЕс-конструкція, навпаки, залишалася
Зо стабільною. Додавання кремнію не стимулювало утворення невидимих неозброєним оком частинок незалежно від природи конструкції антитіла ВІТЕФ.
Таблиця 26
Оцінка невидимих неозброєним оком частинок методом МФВ у препаратах мішень Е-не-НІ Е (канонічна), -ПАГ В і -5СЕс після теплового стресу у відсутності та присутності кремнію. частинок (мкм то 1146| 35 712 | 0 /281| 71 | 35 | 0 |298 | 150 з3 0 4т37"с | 40163 23 | 0 742|225| 11 | 0 | по 44| 0 о 4т 377 (25м. д. 35 11 272 91 34 146 55 11 кремнію)
Зразки, які піддавали тепловому стресу, також аналізували методом слабкої катіонообмінної (СКО) хроматографії, щоб кількісно оцінити вміст зарядових варіантів, використовуючи ОРІ С
Адийу Н-класу від УМаїег5. Застосовували 4,6 х 100 мм колонку Ргоїеіп-Рак Ні Ке5 СМ 7іт
(Умаїег5, кат. Мо 186004929). Температуру колонки встановлювали на 30 "С. Швидкість потоку встановлювали на 0,65 мл/хв. Вживаний градієнт був спроектований наступним чином (Таблиця 217). Температуру автодозатора підтримували за 2-8 С.
Таблиця 27
Градієнт, застосовний для СКО хроматографії о А Чо В
Час (хв:сі 20 мМ фосфату натрію, рН 6,5 20 мМ фосфату натрію 250 мМ хлориду натрію, рН 6,5 0000 | 7777777171717171111111700111111111Ї11111111111111111101111 040 | 7777777777717171111170011111111Ї11111111111111111101 аю Її 7777777777711111011111111111111117111111111111111111лоо1 2900 ЇЇ 77777171771717171717011111111111111117111111111111111111л10011 гаю 7777777777111111117об11111111Ї1111111111111111101 8300 | 7777717171717171717111117лоб111111111Ї111111111111111111101
Інжектували загальну кількість білка 3 мкг. Виявлення базувалося на флуоресценції (збудження на 280 нм, емісія на 325 нм). Інтеграцію піків проводили за допомогою програмного забезпечення Етромег?т). Відносні площі під кривими основного піку, а також для кислих і основних зарядових варіантів наведено у Таблиці 28.
Тепловий стрес призводив до зниження відсоткової долі, яка доводиться на основний пік, що повинно бути пов'язане з переважним утворенням кислих зарядових варіантів. Зменшення відсоткової долі, яка доводиться на основний пік, було найменш вираженим для 5сЕс- конструкції (7,595). Основні зарядові варіанти утворювалися в обох конструкціях з подовженням часу напівжиття після дії світла. Підвищення кількості основних зарядових варіантів знаходилося у діапазоні від 5 до бо у конструкціях ПАЇ В і зсЕс.
Таблиця 28
Оцінка зарядових варіантів методом СКО-хроматографії у препаратах мішень Е-не-НІ Е (канонічна), -ПАГ- В і -5СЕс після індукованого теплом і світлом стресу. ракція о КИСЛИХ! о КИСЛИХ) о КИСЛИХ) основний основнихіосновний основнихіосновний основних
І 4т37"с | 793 | 111 | 95 | 756 | 98 | 146 | 670 | 112 | 218
На додаток чистоту зразків оцінювали у підданих тепловому та світловому стресу зразках, використовуючи аналіз методом мікрофлюїдного капілярного електрофорезу у присутності додецилсульфату натрію (КЕ-ДСН) на основі системи ГарсСпір ОХ (РегКіп ЕїЇІтег).
Денатуруючий розчин для зразків складався з буфера для зразка НТ Ргоївіп Ехрге55 (що поставляється РегїКіп ЕІтег) з додаванням 34 мМ дитіотреїтолу. Кожен зразок розводили 1:8 денатуруючим розчином і нагрівали до 70 "С впродовж 10 хвилин разом з леддером ргоїеіп ехрге55. У 40 мкл денатурованого зразка додавали 35 мкл води для ін'єкцій (ВДІ). У 12 мкл леддера додавали 120 мкл ВДІ. Зразки, леддер, промивальний буфер ргоїєїп ехрге55, гелевий барвник і знебарвлювальний розчин переносили у відповідні резервуари. Зразки завантажували електрокінетичним способом з мікротитрувального планшета на чіп, об'єднуючи розділення, забарвлення, знебварвлення та виявлення білка та його розмірних варіантів. Оцінювали отримані у результаті електроферограми та записували зміни у чистоті. Загальну інформацію
Зо по вираженій у відсотках чистоті, зареєстрованій після стресу, наведено у Таблиці 29 і порівняно з не підданими стресу зразками (ТО).
Більш високу чистоту спостерігали для конструкцій ПАЇ В і 5сЕс у порівнянні з конструкцією не-НГЕ в усіх умовах. Невелике зменшення чистоти у порівнянні з ТО було зареєстроване для конструкцій ПАСВ ії 5сЕс після теплового та світлового стресу. Зменшення чистоти після 4- тижневого зберігання за 37 С складало загалом 8,495 для конструкції ПАЇВ і 6,695 для конструкцій 5сЕс. Зменшення після дії світла було порівнянне для конструкцій АГ В і 5сЕс.
Таблиця 29
Узагальнена інформація по вираженій у відсотках чистоті у підданих і не підданих стресу (ТО) препаратах мішень Е-не-НІ Е, -ПАГ- В і -5СЕс, визначеній за допомогою Гарспір СХІ! (Саїїрег). 000011111111111111111574.17171717171711960...Ю.Ю. | .ЮюЮюЮю922 6ю6Жюж ( 11111111413776777777711717711111160677171171717171717111876 | 77711856 2 щЩщ «ФГ (295) Приклад 15
Готували різні конструкції антитіл ВІТЕФ, сконструйовані для націлювання на мішень Е, включаючи мішень Е-ПАЇГ В і мішень Е-5СЕс, відповідно. Концентрація цільового білка складала 1,0 мг/мл для обох конструкцій. Приготовані конструкції антитіл ВІТЕЮ наливали до 1 мл у флакони із скла типу І, які закривали бутилкаучуковими пробками та обтискали алюмінієвими ковпачками. Наповнені флакони інкубували за 37 "С (мішень Е-ПАГ В) їі 40 "С (мішень Е-5сЕс) впродовж 4 тижнів. Зразки, що зберігалися за -70 "С, слугували в якості контролю (Т0). Зразки аналізували за допомогою ЕХ-УЕРХ відповідно до методу, описаного у Прикладі 13. Результати наведено у Таблиці 30. 5сЕс-конструкція демонструвала менше зниження кількості мономерів (2,390) після теплового стресу у порівнянні з конструкцією ПАЇВ (4,095), хоча температура інкубації була трохи вищою.
Таблиця 30
Узагальнена інформація по відсотковій долі, яка доводиться на мономерний пік, у підданих і не підданих стресу (ТО) препаратах мішень Е-ПАЇГ- В і -5СЕс, визначеній за допомогою ЕХ-УЕРХ. (296) Приклад 16:
Досліджували різні конструкції антитіл ВІТЕФ, сконструйовані для націлювання на мішень Ї, включаючи мішень Е-Х-тіло та мішень І-5СЕс. Концентрація цільового білка складала 1,0 мг/мл
Приготовані конструкції антитіл ВІТЕФ наливали до 1 мл у флакони із скла типу І, які закривали бутилкаучуковими пробками та обтискали алюмінієвими ковпачками. Наповнені флакони інкубували за -20 "С їі 37 "С впродовж 4 тижнів. Крім того, всі зразки піддавали дії 1,2 Млк видимого світла та 173 Вт"год/м? УФА-світла. Температуру у камері встановлювали на 25 "с.
Зразки, що зберігалися за -70 "С, слугували в якості контролю (Т0). Зразки, що зберігалися за - 207 їі 37 "С, аналізували за допомогою ЕХ-УЕРХ відповідно до методу, описаного у Прикладі 13. Результати наведено у Таблиці 31. 5сЕс-конструкція зберігала більш високий вміст мономерів у разі зберігання впродовж чотирьох тижнів за - 20 і 37 "С відповідно у порівнянні з Х-тілом.
Таблиця 31
Узагальнена інформація по вмісту мономерів у підданих і не підданих стресу (ТО) препаратах мішень І-Х-тіло і -«5СЕс, визначеному за допомогою ЕХ-УЕРХ.
Крім того, не піддані стресу зразки оцінювали щодо наявності невидимих неозброєним оком частинок за допомогою мікрофлюїдної візуалізації (МФВ), використовуючи метод, описаний у
Прикладі 13. Результати наведено у Таблиці 32. Препарат мішень І-5СЕс демонстрував істотно менші кількості невидимих неозброєним оком частинок у порівнянні з препаратом мішень 1-Х-
тіло. Це застосовано до усіх включених розмірних фракцій.
Таблиця 32
Оцінка невидимих неозброєним оком частинок методом МФВ у не підданих стресу конструкціях мішень І-Х-тіло і -5сЕс
Конструкція 2648
Зразки, які піддавали тепловому стресу, також аналізували методом слабкої катіонообмінної (СКО) хроматографії щоб кількісно оцінити відсотковий вміст зарядових варіантів, використовуючи ОРІ С Адийу Н-класу від Уасег5 відповідно до методу, описаного у Прикладі 13.
Відносні площі під кривими основного піку, а також для кислих і основних зарядових варіантів наведено у Таблиці 33. 5сЕс-конструкція продемонструвала підвищену стабільність після дії світла у порівнянні з Х- тілом, на що вказує менш виражене зменшення основного піку, яке загалом склало 1,495 у порівнянні з 5,595 для конструкції Х-тіла.
Таблиця 33
Оцінка зарядових варіантів методом СКО-хроматографії у препаратах мішень І-Х-тіло і -56СЕс після індукованого теплом і світлом стресу.
Конструкція основний основний (297| Приклад 17: Ексклюзійна хроматографія біспецифічних 5сЕс-варіантів
Конструкції С9Е, Т2а, ОЗІ,, 171 ї КбС (дивіться Фігуру 7) досліджували щодо їх поведінки під час випробувань методом ексклюзійної хроматографії відповідно до стандартних процедур.
Конкретніше, певну кількість, що становила 25 мкг, кожної конструкції аналізували (за 750 мкл/хв) у цитратному лізиновому буфері (10 мМ їі 75 мМ, рН?) на колонці Бирегаех 200 іпстєазе 10/30003Ї за кімнатної температури та записували ОП на 280 нм. Після цього проводили порівняння конструкцій щодо часу утримання. У результаті конструкція 09 демонструвала істотно уповільнене елюювання (Таблиця 34) у порівнянні з Т22, ОЗІ, Т7І ії КбС, що вказує на різницю у структурі/впорядкуванні Ес-доменів. Ця різниця у часі утримання була найбільш суттєвою у разі конструкції 17, яка містить неспарені цистеїни у шарнірній області та зв'язок
СН?2г ї СН2ОНЗ з СНЗ (18,98 хв і 18,62 хв, різниця 0,36 хв). При цьому різниця у часі утримання у 0,16 хв між 0ОБЕ і Т2а є істотною, враховуючи відповідний час утримання БСА-контролю. БСА- контроль показував час утримання 19,07 хв для мономерів і 16,82 хв для димерів, демонструючи різницю у 2,25 хв у часі утримання у разі подвоєної молекулярної маси. Отже, оскільки конструкції мають структурну різницю тільки у Ес-частині, різниця у часі утримання у 0,16 хв є істотною. У цілому, конструкція 09Е продемонструвала найбільший час утримання, що
Зо вказує на найсильніше зв'язування. Цей висновок дозволяє очікувати, що БУРЕ також має найбільший час напівжиття іп мімо.
Таблиця 34 (298) Приклад 18: Визначення методом поверхневого плазмонного резонансу зв'язування з людським ЕсКп (ЕСОКТ/В2М)
Кожну з конструкцій БОР, 20, ОЗ, Т7І ї КбС (Фігура 7) досліджували щодо їх здатності до зв'язування з людським ЕсКп у ППР (Віасоге) експериментах відповідно до стандартних процедур. Конкретніше, сенсорні чіпи СМ5 (СЕ Неайсаге) імобілізували 450-500 ОВ
ЕСОКТ/В2М (АСКО Віозузіетв5), використовуючи буфер на основі ацетату Ма, рН 4,5, і рухомий буфер, що складається з 200 мМ ГЕПЕС, 150 мМ Масі, З мМ ЕДТК, рн 6,0. Потім конструкції інжектували у послідовних дослідах у двох концентраціях 250 НМ і 125 нМ, розведених у 200 мМ
ГЕПЕС, 150 мм Масі, З мМ ЕДТК, рн 6,0, і за 36 "С. Асоціацію проводили впродовж 90 секунд із швидкістю потоку 30 мкл/хв з подальшою фазою дисоціації впродовж 90 секунд із швидкістю потоку ЗО мкл/хв у 200 мМ ГЕПЕС, 150 мМ Масі, З мМ ЕДТК, рН 6,0, за 36 "С. Подальше відновлення проводили впродовж 10 с за 30 мкл/хв за допомогою 10 мМ ГЕПЕС, 150 мм масі, З
ММ ЕДТК, рн 7,4.
Максимальне зв'язування під час фази інжекції вимірювали для всіх конструкцій у відповідних одиницях відповіді (ОВ), еквівалентних збільшенню молекулярної маси на покритому ЕсКп чіпі СМ5 внаслідок наявності зв'язаної конструкції. Усі конструкції вимірювали у дуплікатах. Середні значення визначення дуплікатів наведені на Фігурі 8А і 88 відповідно.
У результаті конструкція 09Е демонструвала істотно більше збільшення маси на покритому
ЕсКп чіпі СМ5 у порівнянні з Т20, ОЗ, 171 ї КбС, що вказує на велику афінність зв'язування С9Е з людським ЕсКп. Це спостереження мало місце для обох концентрацій відповідних конструкцій.
Зв'язування з ЕсКп опосередковане Ес-частиною у конструкціях. Сильніше зв'язування з людським ЕсКп, згідно з описом у літературі, є показником більшого часу напівжиття іп мімо завдяки більш високому внутрішньоклітинному збереженню відповідного білка і, отже, зниженого рівня деградації. З цієї причини сильніше зв'язування ЮУОЕ з людським ЕсКп у порівнянні з іншими конструкціями робить цю молекулу безперечно переважною в якості основи для терапевтичних молекул, яка забезпечує триваліше знаходження потенційного лікарського препарату в організмі пацієнта та меншу частоту введення лікарського препарату.
Зо І299| Приклад 19: Визначення методом поверхневого плазмонного резонансу зв'язування з людським ЕсКп (ЕСОКТ/В2М)
Кожну з конструкцій БОБ, Т205, 031, Т7І ії КбС і людське Ідс1-каппа антитіло МТ201 досліджували щодо їх здатності до зв'язування з людським ЕсКп у ППР (Віасоге) експериментах відповідно до стандартних процедур. Конкретніше, сенсорні чіпи СМ5 (СЕ Неайсагеє) імобілізували близько 350 ОВ ЕСОКТ/В2М (АСКО Віозузіетв5), використовуючи буфер на основі ацетату Ма, рН 4,5, і рухомий буфер, що складається з 200 мМ ГЕПЕС, 150 мМ Масі, 3 мм
ЕДТК, рН 6,0. Потім конструкції та людський ІдсС1-каппа контроль (МТ201) інжектували у концентрації 125 нМ, розведеній у 200 мМ ГЕПЕС, 150 мМ Масі, З мМ ЕДТК, рН 6,0, і за 36 "С.
Асоціацію проводили впродовж 90 секунд із швидкістю потоку 30 мкл/хв з подальшою фазою дисоціації впродовж 60 секунд із швидкістю потоку ЗО мкл/хв у 200 мМ ГЕПЕС, 150 мМ Масі, з
ММ ЕДТК, рН 6,0, за 36 "С. Подальше відновлення проводили впродовж 10 с за 30 мкл/хв за допомогою 10 мМ ГЕПЕС, 150 мМ Масі, З мМ ЕДТК, рн 7,4.
Максимальне зв'язування під час фази інжекції вимірювали для всіх конструкцій у відповідних одиницях відповіді (ОВ), еквівалентних збільшенню молекулярної маси на покритому ЕсКп чіпі СМ5 внаслідок наявності зв'язаної конструкції. Усі конструкції вимірювали у дуплікатах. На Фігурі 9 наведено середні значення визначення дуплікатів, включаючи планки похибок, які вказують на стандартне відхилення.
У результаті конструкція 09Е демонструвала істотно більше збільшення маси на покритому
ЕсКп чіпі СМ5 у порівнянні з Т20, ОЗ, 171 ї КбС, що вказує на велику афінність зв'язування С9Е з людським ЕсКп. Збільшення маси на покритому ЕсКп чіпі СМ5 для 0БОЕ добре порівнянне зі збільшенням маси людського Ідсі-каппа контрольного антитіла МТ201, що вказує на порівнянне зв'язування конструкції 09Е з людським ЕскКп.
Зв'язування з ЕсКп опосередковане Ес-частиною людського ЇдДС1 у конструкціях. Сильніше зв'язування з людським ЕсКп, згідно з описом у літературі, є показником більшого часу напівжиття іп мімо завдяки більш високому внутрішньоклітинному збереженню відповідного білка і, отже, зниженого рівня деградації. З цієї причини сильніше зв'язування 09Е з людським ЕсКп у діапазоні людського Ідс1-каппа антитіла (МТ201) у порівнянні з іншими конструкціями робить цю молекулу безперечно переважною в якості основи для терапевтичних молекул, яка забезпечує триваліше знаходження потенційного лікарського препарату в організмі пацієнта, імовірно у діапазоні повнорозмірного людського антитіла ДС1, і меншу частоту введення лікарського препарату. бою | 000011 пеня
Лінкер С45 | аСсОсОСс5 пев сесозоссс5 пев севсо5осоо5оосо5 пев сево5осоо5оссо5ообо5 пев севозсоссо5осоо5осоо5ооос5 в пев свасозасво5зовасо5ассозассо5асоО5 пев свасозасво5зсосо5ассозоосо5асоо5осос5 в пев смасвасзасавазаавсазавасзаавсаосвзасвсаавзаавсававасо з |до россов лінкер 13 се ча діммідерзПизрадімсоззідаміздпурпуудаКкроадаргаїїдаїкПардаїіранзовзіддкаанів
І М. У дудредеаєуусмжузплимТддаїкімі 14 се ча ехдімезадоімарддзінзсаазайтпзуатпумтдароКаемлиагівКуппуаїууаазукатівга
І УН У азКпіауїдтпи5іКіеадіахууусипапідпзухзмумаума домів
СО еудімездадімарддвіпзсааздайпзуатпумутдарокдіємматізКуппуаїууадзуУкатівга 15. | зв'язуючий азКпіауїдтпи5іКіеаіахмуууситпапідпзухзулмаумдавіміх55дада9задаазадаазаїмміа
І ВСУ ерзім5радіиШсодв55ідаміздпурпуудаКрддаргаііддкПардіранзовіїдаКаанізамадаре деавуусміжузппумідадікіїм! гекса- 16. І|гістидинова | НННННН мітка
Ес-мономер- актісррсрареїП даром їрркрКкайтівпремісуухамзпедрехКіпуухадмемппакіКрсе 17. | й едудвіутсузміміпдаміпаКеукскУзпКаІраріекіізКакддаргердмуПррогеетікпадмзіїсі ! зс/-9 мКатурзаіїахежезпддреппукИррміазадзшузкимМакзгиддадпмізсзмтпеаІНпппутакві 5іврак
Ес-мономер- актісррсрареїП даром їрркрКкайтівпремісуухамзпедрехукКіпуухадмемппакіКрсе 18. |» й едудвіутсузміміпдаміпаКеукскУзпКаІраріекіізКакддаргердмуПррогеетікпадмзіїсі ! зс/-ду/адеІоК мКатурзаіїахежезпддреппукИррміазадзшузкимМакзгиддадпмізсзмтпеаІНпппутакві вівр акіісррсрареїІддрзутррокркантів премісуууду5 педреукіпмумадуиеуппакікргев
ЗЕО . й
З дупвіугиузм м пдампоКеуксКУз пКаІраріектізКакддргердууПррогеетікпдмвїсім -с/-9 КотурзаїахежезпддареппукИррміазадзтувзкимакзпгудддпмї5с5мтпеаіНппуїаквівіІ зрак
Е актісррсрареїПддарзмі їрркрКкайтівпремісуухамзпедрехуКіпуухадмемппакікргеє с-мономер- ВД. дупвіугиузм м пдампоКеуксКУз пКаІраріектізКакддргердууПррогеетікпдмвїсім 20. |4 ,
КотурзаїахежезпддареппукИррміазадзтувзкимакзпгудддпмї5с5мтпеаіНппуїаквівіІ -с/-д/аєІ(ЯК 5
Е актісррсрареїПддарзмі їрркрКкайтівпремісуухамзпедрехукКіпуухадмемппакікргее с-мономер- ВД. ауавіугиуизміміпддмпоКеукскУизпКаїІраріекіізКакддргердхуПрротгеетікпдм5 сім 21. |5 , -с/-9 коїуредіауечевподрег пуккррміазадетузкимаквгидЯддпмізсзмт п еаі путі вра
Е актісррсрареїПддарзмі їрркрКкайтівпремісуухамзпедрехукКіпуухадмемппакікргее с-мономер- ВД. ауавіугиузміміпдампоКеукскУизпКаїІраріекіізКакддргердхуПрротгеетікпдм5 сім 22. |6 ,
КотурзаїахежезпддареппукИррміазадзтувзкимакзпгудддпмї5с5мтпеаіНппуїаквівіІ -с/-л/дае ск 5
Е актісррсрареїП даром трркрКкайтівпремісуухамзпедрехуКіпуухадмемппакікрсе с-мономер- т едупеїутсузміміпдаміпуокеукКсКУзпКаїІраріеКктізКаКоадргердмуПррогеетікпдмв сі 23. |7 ; зс/49 укоїурвсїауемевподреппукпрру свв пувкнускпиаа пмівсзмтпеаіІпппуїакві 5івро
Е актісррсрареїП даром трркрКкайтівпремісуухамзпедрехуКіпуухадмемппакікрсе с-мономер- т едупеїутсузміміпдаміпокеуксКУзпКаІраріеКктізКаКоадргердмуПррогеетікпдмв сі 24. |8 ; мКатурзаіїахежезпддреппукИррміазадзшузкимМакзгиддадпмізсзмтпеаІНпппутакві нс/нд/десєк вівО актісррсрареїП даром трркрКкайтівпремісуухамзпедрехуКіпуухадмемппакікрсе едудвіутсузміміпдаміпаКеукскУзпКаІраріектізКаКадргердууПррзгеетікпдм5і сі мКатурзаіїахежезпддреппукИррміазадзшузкимМакзгиддадпмізсзмтпеаІНпппутакві 25. |5сЕс-1 зігракОсСВвВсвасасвзасвсасзавасзаса,зассаввакісррераре Іщарвмії
ТрркрКайтізпремісуумамзпедреуктпуумхадиемппакіКрсеєедудвіугсувмі м пдаміп дкеуксКухпКаІраріектізКаКкдадргердууПррогеетікпдузПсімКкатурзаіїахемезпдаре ппукбррмУїазадзнувзкимакзгуддапуїзсзмтва|ІНнппуїдквівіврок актісррсрареїП даром трркрКкайтівпремісуухамзпедрехуКіпуухадмемппакікрсе едудвіутсузміміпдаміпаКеукскУзпКаІраріекіізКакддаргердмуПррзтеетікпдамві сі мКатурзаіїахежезпддреппукИррміазадзшузкимМакзгиддадпмізсзмтпеаІНпппутакві 26. |5сЕс-2 зіграссазасаазасавсзасасвзавасЗзасс(авактнтсррерареїїдарзмі тр ркеркайтізпремісуумамзпедреукіпуумхадмиемппакіКрсеєдудвіугсузмім пдаміпокК еуксКузпКаІраріеКкіізКаКддргердухуПрротгеетікпам5Псімкоїтурзаїамежезпддрепп кирруазадзтпузкимакзпидадпмиївсямтпеаІНнппуїдкзівівр актісрресрареї!дарзм тТрркркайтівзпремісуумамзпедреукіпуумадмемппакікргеє дупвіугиузм м пдампоКеуксКУз пКаІраріектізКакддргердууПррогеетікпдмвїсім
КотурзаїамежмезпддареппукИрруазадатувзкимакзгмддапмізсзмтпеаіНп пу ок 27. |в5сЕс-3 зракаса,аасзасасзаваазавасЗзавасФавоавактсррсрареї даремні рокркаЧтізпремісуихамзпедреукіплумадхемппакіКргеєдупеїугиивм мі пам
КеуксКуизпКаїІраріектізКакддргерадмуПррогеетікпоаузПсімкатурзаіїалемезпддреп пукиррмдзадзтузкимаквпидддпмізсямтПеа|нппуїдкзівіз рак актісрресрареї!дарзм тТрркркайтівзпремісуумамзпедреукіпуумадмемппакікргеє дупвіугиузм м пдампоКеуксКУз пКаІраріектізКакддргердууПррогеетікпдмвїсім
КотурзаїахежезпддареппукнррміазадатузкимаквгиаддпмізсзмтпеаіНп путі 28. |5сЕс-4 зрассазасаазававзасасвзавасзасссавакнтісррсрареїдарзміїрр
КркайтівпремісуумамзпедреуКіпуухадмемнпакікргеєдупвіуг умі м паампоКе укскуУзпКаІраріектізКакадргердамуйПррогеетіКпадмзіїсімКкотурзаіїалхемезпадреппу киррміазаадзшувкімМакзпиддапмізсзмтПпеаІпппуїаквівівр актісрресрареї!дарзм тТрркркайтівзпремісуумамзпедреукіпуумадмемппакікргеє ауавіугиувм м пдампоКеуксКкУз пКаІраріектізКакддргердууПррогеетікпдмвїсім
КотурзаїахежезпддареппукИррміазадатувзкимакзпгидддпмізсзмт п еаінппуквіві 29. |всЕс-5 зракаса,аасзасасзаваазавасЗзавасФавоавактсррсрареї даремні рокркаЧтізпремісуихамзпедреукіплумадхемппакіКргеєдудаіугиуивм мі пам
КеуксКузпКаІраріеКкіізКаКддргердмуПррогеетікпдмузПсімКкотурзаіаухеуезпдареп пукиррмдзадзтузкимакзпидадпмїзсзмтпеа|пппуїдкзівізрак актісрресрареї!дарзм тТрркркайтівзпремісуумамзпедреукіпуумадмемппакікргеє ауавіугиувм м пдампоКеуксКкУз пКаІраріектізКакддргердууПррогеетікпдмвїсім
КотурзаїахежезпддареппукИррміазадзтувзкимакзпгудддпмиї5с5мтпеа|ІНппутаквіві 30. |5сЕс-6 зрассазасаазававзасасвзавасзасссавакнтісррсрареїдарзміїрр
КркайтівпремісуумамзпедреуКіпуухадмемнпакікргеєдудвіуг умі м паампоКе укскуУзпКаІраріектізКакадргердамуйПррогеетіКпадмзіїсімКкотурзаіїалхемезпадреппу киррміазадзнувкмакзпиддапмізсзмтПпеаІпппуїаквівівр актісррсрареїП даром трркрКкайтівпремісуухамзпедрехуКіпуухадмемппакікрсе едупеїутсузміміпдаміпаКеукскУзпКаІраріекіізКакддаргердмуПррогеетікпадмзіїсі мКатурзаіїахежезпддреппукИррміазадзшузкимМакзгиддадпмізсзмтпеаІНпппутакві 31. |5сЕс-7 зігракОСсвазасасвасиасзасаозаваазасеасацвакіісррерареї дарзвмі!
ТрркрКайтізпремісуумамзпедреуктпуумхадиемппакіКрсеєдупвіугсувзмі м пдаміп дкеуксКухпКаІраріеКкіізКаКддргердхмуПррогеетікпдузпсімКотурзаіаухеуезпдадаре ппукбррмУїазадзнувзкимакзгуддапуїзсзмтва|ІНнппуїдквівіврок актісррсрареїП даром трркрКкайтівпремісуухамзпедрехуКіпуухадмемппакікрсе едупеїутсузміміпдаміпаКеукскУзпКаІраріекіізКакддаргердмуПррогеетікпадмзіїсі мКатурзаіїахежезпддреппукИррміазадзшузкимМакзгиддадпмізсзмтпеаІНпппутакві 32. |5сЕс-8 зіграссазасаазавсавзасасвзавасзасаавакнтсррерареПадрзмір ркеркайтізпремісуумамзпедреукіпуумхадмиемппакіКрсеєдупвіугсузмім пдаміпокК еуксКузпКаІраріеКкіізКаКддргердухуПррогеетікпдузПсімкатурзаіїамежезпддарепп киррміазадзтузкимакзпидадпмівзсямтеаІНнппуїдкзівівр дидаімездадіхКрдазінзсаазданвзауутімігдароКаіемізуізззазіууаазукатівгапак пЗндтпвігаєдіамуусагат5 п аумодаймім55ададздаааздаадозаіїдтідзрозузавзма агишйсгаздадіпомаумудакракаркіїудазадзамрензазазагйннівзвідреататгуусддакві
Мішень /А- рідддікмеікздддаземкдімезддаімарадзікізсаазаштКуатпулмтдародкаїемматітвКу 33 НГЕ ппуаїууадзукатівгаазКпіау!дтппіКієдтамуусу папідпзуізулаумддаїмім55ддча " |Гетеро-Ес, |з5аддозададзаїмідерзймзрдаїмйсозвзідаміздпурпуудакродаргаїїддікПароарат ланцюг 1 595ідоКааніздхдредеаеуусумжузплачмадакімададактісррсрареї!дарзміїрркр
КаЧтізпремісиухамзпедреукіпиумадхемппакікрсеедудвіутсизм міпдаміпоукеук сКУузпКаІраріектізКакадргердамуПрроиКетікпдуизПсімкатурзаіаумеезпддареппукиї ррукзадзншувзкимакзплиддд пмізсзмтпеаіІпппуїдквівіврок
Мішень А-актісррсрареїїІдарзмтрркрКайтізпремісуумахмзпедреукіпуумхадмемппакікрсе з4 НГЕ едудвіутсузміміпдаміпаКеукскУзпКаІраріекіізКакддаргердмуПррогеетікпадмзіїсі "|Гетеро-Ес, |УКоїурзаїамежезпадреппудірруазадзтшузанмакзгудадпмиїзсзмтпеаіНнппуїакві ланцюг 2 зіврак
ОмдімезддахКроадвінзсаазданвауутімігдароКаемізуізз5дваіууаазукатівгапак пЗндтпвігаєдіамуусагат5 п аумодаймім55ададздаааздаадозаіїдтідзрозузавзма агишйсгаздадіпомаумудакракаркіїудазадзамрензазазагйннівзвідреатагуусддакві ропдадікуеікздддазекдімезддаімарадзіКізсаазаштКуатпулмтдародкаемматітвКу ппуагууаазукатівгаазКпіау!дтппікієачтамуусупдпідпзуізумлаухдадіїміи559949 здддазаддазаїммідерзм5радаімсо55ідаміздпурпуудакрадарга їдаіклараїрат
Мішень /А-зазіддкаанвздхадредеаєуусмжузпгалм дам рададзаанкземапнка!деепікамії 35. |НЕ агадуї(ддсрієднУкіипемівтакісухадезаепсакзіпнн ндакісімангеудетаадссакдерете
ПАЇ В-злиття)| спанКадпрпірпмтеремамтсіаїпапееніккуІувіатттруїуареШакКтукаапйессдааакКаасі
ІрКідеікаеоаКаззакадиКсавзідкдегаїКауаматздірКкаєтаємзкімайкинесспааїесай агадіакуісепдазіз5КІікессекріеКоПсіаеємепаетрадірзіаадімезКамискпуаєакамііу тпПуеуатраузуимШнакіуеєшШекссааадрпесуакмдеїКрімеерадпіїкдпсеГГедідеук дп аймтукКирамвіріїмемвгпідкидокесКкпреаКптрсаєаду!зуміпдісміпеКкірузагмікссіеввім пітреоїзаІемаєїухрКеттаенннадісіізеКегдіККаїаїмеммкиКкрКаїкедікамтаатаамексс
КадакеїстаєведКкКімааздааідіпниний ехдімезаддімарддзікізсаазуЧиКуатпмут"дараКаіємчиаттвзКкуппуагууаадзукатівг аазКпіауІдтппіківдіахуусупдпідпзуізумлаумдддіїміиззададдзадааззуейдррвімв
Мішень В- мзроадіазісзаапдекуїзмудагрдаазрімудаїкгрздіренздзпзопіашіздідатаєадуус зв НІГ Еа дажезвіммддаікІміазікарзміріарззк5ізадіааідсімкау рермімзмпздайзампЕрамі
ОО Х-тіло, аззаїузівзуміирзззідідуїспипиКропікхаккмиеркзсакітсррсрареїдарзмітррКркаї ланцюг 1 ІтізпремісуухамзпедреукіпмухадмиемппакікрсеедуазвіугсуивмімМіпдДдУлпуКкеукскм зпКаІраріеКкіізКакддргердхуПррогеетікпду5Псімкатурзаїамежезпдареппуайррми
ІавадзШузанмакзпиддодпмізсзмтпеаІпппуїдквіві рок дудімездадууардовізсааздпвзудтнммгдараКаієммаймуєдзпКууаєзукатівга пеКпПуЇдтпвігаєдіамууса!тадіідіідууудутаууддднмімзздаддаздадазаїммідервіїмв
Мішень В- раддімШсоззідаміздпурпуудакроадаргіідаїкПараїратнзозідоКааніздухдредеавєуу 37 НГЕБ сміжмузпрум дак мМідарКаарзміїррозевідапкаймсіїзагтурдамімамКадззриКадмей
ОТ Х-тіло, Ір5КазппКуааззуізПреджмк5пг5узсодміпедзімекімаріесзакіпїсррерареїІдарзмтрр ланцюг 2 кркайтізпремісииумамзпедреукіпиухадмемппакікрсеедудвіугсувмімМІпаампдкКе укскуУзпКаІраріектізКакадргердамуПрреіКкетікпам5ПсімКкотурзаіїахежмезпдареппу
КкКиррмікзадзшувзкимакзпгуддапмізсзмтпеа!Іпппуїдквівіврак дудімездадууардовізсааздпвзудтнммгдараКаієммаймуєдзпКууаєзукатівга пеКпПуЇдтпвігаєдчіамууса!тадіідіідууудутауудаднмімзздддазаддазададззуєа рроузузрддіазіїсзданпдекуїзумудагрдазріїміудаїкирздірензазпздпіашіздідатає
Мішень В- адуусдамжеззіммідадікиміздддозекдімезадамардазікізсааздашнпКуатпммутдарок з8 НГЕ дієммагігзКуппуаїууаазукатівгаазКпіауІдтппікіедіахуусуипдпідпзуізуллаумоаа " ІГетеро-Ес, |дімімвздадазаддазадаазаїмідерзпмзрадімсоззідаміздпурпиудакроддаргаіїд ланцюг 1 ЯІкПардаранзаовзіїддаКаанізахдредеавеуусимузпла м дааїкІміададактісррсрареїЇ адрзмПрркркаїтізпремісиумамзпедреукіпиумхадхемппакікрсеедудвіутсувміїмі падмж/іпоКеуксКУз пКаІраріекіізКакаддргердууПрраіКкетіКпамзсімкатурзаїамеме впадреппукиррмікзадзШузкимакзпгидддпмізсзмт п еаІпппуїдквівіврак
Мішень В-актісррсрареїїІдарзмтрркрКайтізпремісуумахизпедреукіпуумхадмемппакікрсе 39 НГЕ едудвіутсузміміпдаміпаКеукскУзпКаІраріекіізКакддаргердмуПррогеетікпадмзіїсі "|Гетеро-Ес, |УКоїурзаїамежезпадреппудірруазадзтшузанмакзгудадпмиїзсзмтпеаіНнппуїакві ланцюг 2 зізрок дудімдаздаєхККрдезуКизсКаздушпудтпмуКдарддсіємтуміпіуудеріуаактддтит
ПНаївієтаутеіїпіддаатахуусапизмзадуулху дукдадівміи55дадо9заддадзаддаазаїмті азравзімв5ідептшіпск55ав5міа55іпКи5іамудакрдадрркіївуазігездіранзазазайнніав
Мішень С- рдаредзаїуусддзаптріасотейкзддаазекдімезддаімараазікізсаазайшткуатпммт 40 НГЕ дчарокадІеммагі5КуппуагууаазукатівиаазКиіауІдтппікіеатамхуусутпдпідпвзуівум " |Гетеро-Ес, |аумададіміувзададздадаздадазаїумідерзпизрадімнсазвідамізапурпиудакрда ланцюг 1 аргайчдаіКПароранзазіддкааніздхадредеаеуусмжузпгумдааікмідвддакнтсрр срареїїдарзмїррКрКкаЧтізпремісуухамзпедреукіпуумхадмиемппакіКрсеєдудвіуг сузміміпдаміпоаКеуксКУизпКаїІраріектізКакадргердхуйррзКетікпдуиз ПсімКкатурзаї амежезпддреппукіррмікзадз тузкимакзпиддопмізсзмт п еаіпппуїдківІіроак
Людський тідтаддсздпеуїазіІпасірсдігсззпірріїсдгуспазміпзуКаїпаї мсідівіїїТамімітйкі 41. ВСМА пзерікаєїКпідзаїІдтапідіекзпдаейргдієуїмеесіседсікоКркмазансіріратеедаїййм
НКІпауск5іраа!заївіекКвіваг з. подвнию. (фОМАооовочеу ов НАОРос ово Мт Тов очА тет 42. |людського МА
ВСМА
КЕ
43. тв5зерікаеїКкпідздіїдптапіаіекдпадає| міргуієуїмеесіседсікпикркКмазанстріратееда макака . я
ТПмиКкІпауспвізаа!змівіеКвізаг
Мн Сов . "ІТВСМА-08 5аївівімуте | 55Ігзеаіамуусагаадуугаамідумадаймім55 о ІВСМА-О8 |рейіаіуусдадпірийодатікїГ 77777711 дудімдаздаєхККрдазуКизсКазаушип піп дардддіємтауіпрурдупаупектддгайті 5З СЕМ ваївібімуте!55Ігзеаїамуусагадуучамідумоддаймімз5ададздаадзададзаідтідвр "|ВСМА-08 55івазудагмійсдаздаізпуіпиудакраКаркіїїууїПиідирзпздаздазаанніззіередіаїуу садапірУндааікієїк дудімдаздаєхККрдазуКизсКаздуйтиппіїпмуг"дараддддіемтадуіпрурдупаупеКтддгаїті
Біспецифічн заївівімуте|55іїгзеатахуусагадуугатміаумодоанммззддаазодаозаадозаідтідвр а молекула 55івазудагмійсдаздаізпуіпиудакраКаркіїїууїПиідирзпздаздазаанніззіередіаїуу 54. ВСМА-08 садопіруддакКієїкКздаддзекдімездадіхарадвікізсаазашиКуатпммтгдаракаїєм хірс магіг5КуппуаїууадзукаптівгаазКиїауІдтппіківдіахуусми пдпідпзуізулаума дамі мизздадазадддздадазаїммідерзпмзрадімсо5зідамізапурпуудакрадаргаї дак ардфранзазіддкаанвдхидредеавєуусміжуз пам дак! дудімдаздаєхККрдазуКизсКаздуйтиппіїпмуг"дараддддіемтадуіпрурдупаупеКтддгаїті ваївібімуте!55Ігзеаїамуусагадуучамідумоддаймімз5ададздаадзададзаідтідвр 55івзазудагмійсдаздаізпуіпиудакроаКаркіїїууїПРідирзпздздзаанніввіередіаїуу садопіруудакКієїкКздаддземкдімезаддімардодзікізсаазуиКуатпмутдароакадієм
Біспецифічн мап5КуппуаїууаадзукатізгаазКпіауЇдтппіКіеаіамуусупопідпзуізулаумдааімі а молекула мизздадазадддздадазаїммідерзпмзрадімсо5зідамізапурпуудакрадаргаї дак
ББ. |всЕс ародірагпзозідокаанізоуаредеавуусумузпгим ддакимовоадактісррерареїПодор
І ВСМА-08 зм рркркаЧтізпремісуумамзпедреукіпуумхадиемппакіКрсеєдудвіугсувміміпда
ХІ?С -5сЕс мІпукеуксКУизпКаїІраріекіізКаКадргердууПррогеетікпдузПсімкатурзаіїахежезпд дреппукИррміазадзшузкимакзиуддапмізсзмтпеаінпппуїдКзізіІзградУкКаФ9995999959 адазаадчазададзддадзактїсррсрареїдарзмітррокркантізпремісуумамзпедрем
КіпжумхадмиемппакіКрсеедудвіугсувммпдаміпуКеуксКизпКаїІрарієекіізКаКодргер дамиуПррогеетікпдузПсімкатурзаіїамежезпддреппукнррміазадзтузкимакзгудади мізс5мтПпеаІпппуїдквівів рак дудімдаздаєхККрдазуКизсКаздуйтиппіїпмуг"дараддддіемтадуіпрурдупаупеКтддгаїті ваївібімуте!55Ігзеаїамуусагадуучамідумоддаймімз5ададздаадзададзаідтідвр 55івзазудагмійсдаздаізпуіпиудакроаКаркіїїууїПиідирзпздздзаїанніввієередіаїуу садопіруудакКієїкКздаддземкдімезаддімардодзікізсаазуиКуатпмутдароакадієм
Біспецифічн | магіт5КуппуагууаазукатівгаазКпіауІдтппіКієдтамуусу поапідпзуізуллаумдаадімі а молекула ухздаддздадазаддазаммідерзіїмзрадімШшсаззідамізапурпиудаКрддаргаіддвікт!
Бб 5сЕс ардфранзазіддкааніздхаредеаєуусміжузпгуим дамі аддаЧактисррсрареїдар "ух ВСМА-08 зм рркркаЧтізпремісуумамзпедреукіпуумхадиемппакіКрсеєдудвіугсувміміпда хІ2б //-всеБс| міпаКеуксКкУзпКаїІраріекіізКакадргердамхуПррегеетікпам5йсімкатурзаіїахежезпа аесєскК дреппукиррміазаденшувзкимаквгидддпмізсзмтпеаІпппуїдкзізІігрдда9:599995999 дзаддазаддазададзактїсррсрареї! дарзміїтрркркайтівиремісуумамзпедрехкттп мжухадмемппакіКрсеедудвіугсузмім і пддмпоКеукскизпКаїраріекіізКакддртгерду упПрротеетікпду5ПсімкоїтурзаіїамежезпддареппукИррмазадатузкимаквгмадапмі 5сзумтПпеаІпппуїдквівіврок 57 во дудімаздаєукКрдазукуизсКаздауйтп пі пмугдарадсіємтдуіпрурдупаупектддгаїті
І ов сс ваївібїмуте 55Ігзеаїамуусагадуугаамідумадзаймім55 58 вок дідтідзреьзізазудагійсдаздаізпуІ пяудакроКаркіїууїв пп дУрзздзоазаїанніввіе
І ов сс редіаїуусддапіруинасакіеїк
СЕМ (СС) дудімаздаєукКрдазукуизсКаздауйтп пі пмугдарадсіємтдуіпрурдупаупектддгаїті
Бо, |ВСМА- ваївібїхуте!55Ігзеаїамуусагадуугамідумадайміиззддачазададзаадозаідтідзр
І ов сс 55ізазудаміійсдаздаізпу!пудакраКаркіїууїз ПРдмрзпзаздзоагатніввіереаіаїуу т садапір»унасаквїк дудімаздаєукКрдазукуизсКаздауйтп пі пмугдарадсіємтдуіпрурдупаупектддгаїті
Біспецифічн заївівімуте|55іїгзеатахуусагадуугатміаумодоанммззддаазодаозаадозаідтідвр а молекула звізазудагйсдаздаізпуІпмудакрокаркіїууївпрідурзгізозозо іа Піззіередіатуу (СС) ВСМА- садопірмносодіківїкзддаозекдімездадімароодзікізсаазо п пкуатпмутдарокоему
Ов ссхес мап5КуппуаїууаадзукатізгаазКпіауЇдтппіКіеаіамуусупопідпзуізулаумдааімі - мизздадазадддздадазаїммідерзпмзрадімсо5зідамізапурпуудакрадаргаї дак ардфранзазіддкаанвдхидредеаєуусміжузпгуимі дак!
а молекула) заї5ібімуте!55Ігзеаїамуусагадуучамідумдданмімззададздааозададзаідтідвр 5еЕс (Сб) 55івзазудагмійсдаздаізпуіпиудакроаКаркіїїууїПиідирзпздздзаїанніввієередіаїуу
ВСМА- садопіруусаїКієїкКздддадзекдімездадімарадвіКізсаазашиКуатпммтгдарокаєм 08 СС хіІ2Оі магізКкуппуагууаадзукапівгаазКпіау!дтппіківєдїахуусуипопідпзуізумлаумадаймі -8сЕс мизздадазадддздадазаїммідерзпмзрадімсо5зідамізапурпуудакрадаргаї дак ардфранзазіддкааніздхаредеаєуусміжузпгимЯадакИмаддааактисррсрареїдар 5мітрркркайтівпремісуумамзпедреукіпуумадмемнпакікрсеєдудеугсувзміміпда мІпукеуксКУизпКаїІраріекіізКаКадргердууПррогеетікпдузПсімкатурзаіїахежезпд дреппукИррміазадзшузкимакзииддапмізс5мтпеаіНпппуїдкзізізгрдаікКаЯ995999959 адазаадчазададзддадзактїсррсрареїдарзмітррокркантізпремісуумамзпедрем
КіпжумхадмиемппакіКрсеедудвіугсувммпдаміпуКеуксКизпКаїІрарієекіізКаКодргер дамиуПррогеетікпдузПсімкатурзаіїамежезпддреппукнррміазадзтузкимакзгудади мізс5мтПпеаІпппуїдквівіврок дуидімдаздаєхККрдазуКизсКаздуйтиппіїпмугдарддсіємтдуіпрурдупаупекКтддгаїті ваївібімуте!55Ігзеаїамуусагадуучамідумоддаймімз5ададздаадзададзаідтідвр 55івазудагмійсдаздаізпуіпиудакроКаркіїїууїПиідмирзздзазаїатіввіередіаїуу садопіруусаїКієїкКздддадзекдімездадімарадвіКізсаазашиКуатпммтгдарокаєм
Біспецифічн | магіт5КуппуагууаазукатівгаазКпіауІдтппіКієдтамуусу поапідпзуізуллаумдаадімі а молекула ухздаддздадазаддазаммідерзіїмзрадімШшсаззідамізапурпиудаКрддаргаіддвікт! во 5сЕс(СС) |ародірагіздозіддкааніздухдредеаеуусмжузпгумдда кім даддодакйісрресрареї!Ідар " ТВСМА- зм рркркаЧтізпремісуумамзпедреукіпуумхадиемппакіКрсеєдудвіугсувміміпда 08 СС хі2Оі м/поКеуксКизпКаїІраріекіізКакодргердмуПррзгеетікпдмзйсімкагурзаїахежезпд -86сЕс де(аК| ареппукіррмідзадзнузкімакзпгудддпмізсзмтеа|Іпппуїдквізізгрдд99599995999 дзаддазаддазададзактїсррсрареї! дарзміїтрркркайтівиремісуумамзпедрехкттп мжухадмемппакіКрсеедудвіугсузмім і пддмпоКеукскизпКаїраріекіізКакддртгерду упПрротеетікпду5ПсімкоїтурзаіїамежезпддареппукИррмазадатузкимаквгмадапмі 5сзмтПпеа|Іпппуїдквівіврок
Мн Сов
М СоВ1 . фе 00000000 оби (ее п 9 Блнное ГНН ен
ВСМА-06 КзПуЇдтавзігзеаїахуусутпоууадупаумчдааіймім55
ВСМА-06 ІдредіаїуусадчіїзірунааадіківїК ехдімезаддімарддвінзсаазайзпідтамутдарукдіумуз5знаддагууаазукатівтапа 74 СЕМ К5Пуїдтавігзеаіахуусупоуудаупнаучдадіміизздадазадаазададзаідтідзрзьвзів "|ВСМА-06 азмудатйстапддаізппіпуудакрокаркКріїууївпідзамрездзоазаїауПіззідреагатууса анзірунадаківїК ехдімезаддімарддвінзсаазайзпідтамутдардкдіммиззйндадагууаазУукатнівзгапа
БІ «| К5Пуїдтавізеаіахуусуипаууадупнаумадаїміивзададзададздааозаідтідврзьвів іспецифічн ; ; , ' а молекула азудагийсгападізппіпудакрокаркріїууївпідзоурзгізозоздідушіззідреататууса 72. ВСМА-06 апеірунддаікіеїкздддазекдімезадамардовікізсаазайтКуатпммугдаракаеумагі х?с гзКуппуаїууайзукатівгаадзКкпіауїдтппікіеаіамууситопідпзуізумаумадіміув59 ддазаадазададздаіммідерзПизрдааїмсоззідаміздапурпиудакроадаргаї їдаїкПараї ранздвіїдаКаапізамдредеавуусміжуз пам адакім!
Біспецифічн | ехдімезаддімарддвінзсаазайзпідтамутдардкдіммиззйдадагууаазУкатівзгапа 73, |а молекула К5Пуїдтавігзеаіахуусупоуудаупнаучдадіміизздадазадаазададзаідтідзрзьвзів 8сЕс азудатйстапддаізппіпуудакроКаркКріїууївпідзамрездзазаїауіз5ідреатагууса
ВСМА-06 анеІрундадікієїкзддадзекдімездадімародозікізсаазашиКуатпумгдарокКа!еєммагі хі2б -5сЕс | т5КуппуаїууайдзуканізгаазКпіауІдтппіКіедтахуусуиПпапідпзуізулаумдадіїмімзза ддазаадазададздаіммідерзПизрдааїмсоззідаміздапурпиудакроадаргаї їдаїкПараї рапзазіддКкааніздудредеаєуусміжузпгуим ддакИмідвдчактисррсрареїдарзмнї рокркаЧтізпремісуихамзпедреукіпуумадхемппакіКрсеедудвіугтсивзммпДампа
КеуксКузпКаІраріеКкіізКаКддргердмуПррогеетікпдмузПсімКкотурзаіаухеуезпдареп пукитррмідзадзтузкімакзпидддпмізсзмтпеаІпппуїакзівігракад9959999599995 ддчазададздадазакіпсррсрареїїддрзу трркркайтізпремісмумамепеарехукіпмиу ухадхемппакікрсеєдудвіугсувмімпдДаміпоКеуксКУиз пКаІраріектізКаКодргераму! ррогеетікпдузпсімкатурзаіїахеезпддреппукИррмазадатувзкимакзгмдддпмівс вмтпеєаіІпппуїдквівіврок ехдімезаддімарддвінзсаазайзпідтамутдардкдіммиззйндадагууаазУукатнівзгапа
К5Пуїдтавігзеаіахуусупоуудаупнаучдадіміизздадазадаазададзаідтідзрзьвзів азудатйстапддаізппіпуудакроКаркКріїууївпідзамрездзоаза ау шШіввідреатагууса ангзІірунадаківікзаддазекдімезддаімараазікізсаазайпкуатпутдароКаеммагі
Біспецифічн | г«КуппуаїууадзукатнівгаазКпіау!дтппіКіечамуусуи попідпзуізумаумдддімім55а9 а молекула| ддд5даддзадддзаїмдаерзмзрадімнсо5зідаміздпурпиудакрддаргаїїддікПараді 74 5сЕс рапзазіддкааніздхаредеаєуусмжузпгим ддакімідаакгтисррсрареїдарзмї "ух ВСМА-06 рокркаЧтізпремісуихамзпедреукіпуумадхемппакіКрсеедудвіугтсивзммпДампа хіго -І КеукскузпКаІраріекіізКакддргердууПррогеетікпам5Псімкатурзаіїахежмезпдареп 5сЕс ае(саК | пукеррмадзадзтузкимаквпидддпмізсвмитеа|ІНнпнуїдкзізізраддазаддазададзда дазддааздддозакіпісррсрареїдарзм трркрКкайтівпремісуумамзпедрехукКіпмума дмемппакікрсеедудваіутсузміміпдаміпоаКеуксКУизпКаїІраріектізКакадргерамуПрро геетіКпам5ПсімкоїтурзаїамежезпадреппукррмідзадатувзкимаквгиаддпмізсвМт пеаІНпруїдквівіврок ун (со) | | Ін нівпіа ксімлуввійдддатууаазукатнівга 7в. |ВСМА- ма хмезаддімарддвінзсаазайзпідтамутдардуксіммуззнНадааууаазукатівгапа об сс 5ПуЇдтавігзеаїахуусупдуудаупаумжадаймімв5 76 вок дідтідзреьзізазудагийстападізппіпиудакроКаркріїууїзпідздурзздзозагушівв
І об сс ІдреагатуусаднеІрундсакіеїк еудімездадімардовіпзсаазанізпідтамутдардксімуувзіндадатууаазукатівгапа 5сЕм (СС) Кк : 77. |ВСМА- зпуїдтавігзедтамуусуппоууачупаумоааіммззд999599995999954ід тід5р5ів об сс азудатйстапддаізппіпуудакроКаркКріїууївпідзамрездзоаза ау шШіввідреатагууса - айвірунасаїківїК еудімездадімардовіпзсаазанізпідтамутдардксімуувзіндадатууаазукатівгапа
БІ «| К5Пуїдтавізеаіахуусуипаууадупнаумадаїміивзададзададздааозаідтідв5рзьвів іспецифічн ; ; , ! а молекула азудагийсгападізппіпудакрокаркріїууївпідзоурегізозозоідуШіввідресатаїууса 78. (СС) ВСМА- апвіруносодіківїікзадаоземдімезддоімароозікізсаазоПтпкуатпмутдарокоіеммагі
Ов ссхес гзКуппуаїууайзукатівгаадзКкпіауїдтппікіеаіамууситопідпзуізумаумадіміув59 - ддазаадазададздаіммідерзПизрдааїмсоззідаміздапурпиудакроадаргаї їдаїкПараї рапзазіїдоКааніздудредеавуусміжмузплимідадікіїм! еудімездадімардовіпзсаазанізпідтамутдардксімуувзіндадатууаазукатівгапа
К5Пуїдтавігзеаіахуусупоуудаупнаучдадіміизздадазадаазададзаідтідзрзьвзів азудатйстапддаізппіпуудакроКаркКріїууївпідзамрездзазааушіввідреатагууса анеІрунасоїКіІєїкздаддзекдімезаддаімардозікізсаазуаиКуатпммгдаракКаіемматі
Біспецифічн | г«КуппуаїууадзукатнівгаазКпіау!дтппіКіечамуусуи попідпзуізумаумдддімім55а9 а молекула| ддд5даддзадддзаїмдаерзмзрадімнсо5зідаміздпурпиудакрддаргаїїддікПараді 79 5сЕс(СС) |рапзовіїдаКааніздухдредеаєуусумузпгамдадікІмідддаактсррсрареї даремні? " ТВСМА- рокркаЧтізпремісуихамзпедреукіпуумадхемппакіКрсеедудвіугтсивзммпДампа 06 СС хі2Сі КеукскузпКаІраріекіізКакддргердмуПррогеетікКпамзіїсімкотурзаіїамемезпдареп -5сЕс пукитррмідзадзтузкимакзпидддпмізсзмтпеаІпппуїдквізіІзгракад9959999599995 ддчазададздадазакіпсррсрареїїддрзу трркркайтізпремісмумамепеарехукіпмиу ухадхемппакікрсеєдудвіугсувмімпдДаміпоКеуксКУиз пКаІраріектізКаКодргераму! ррогеетікпдузпсімкатурзаіїахеезпддреппукИррмазадатувзкимакзгмдддпмівс вмтпеаіІпппуїдквівіврак
Біспецифічн | ендімезадамардовіпзсаазапізпідтамутдардксімуувзінадаатууаазукатівгапа а молекула; КеПуїдтаві"зеаіалуусуипаууадупнаумадаїміивзададзададздааозаідтідврзьвів 5сЕс (С азмдагмійстапдаізппіпиудакроКаркріїууїзпідзамрзгізазозаідуйіввідреагаїууса
ВСМА- анеІрунасоїКіІєїкздаддзекдімезаддаімардозікізсаазуаиКуатпммгдаракКаіемматі 06 СС хі2Сі гзКуппуаіууадзукапівгаазКпіау!дтппіківєчіахуусуитпапідпзуізумаумдддїімім559 -56сЕс аеісКк| дадздаддзаадозаїмідерзизрадімнсоззідаміздпурпиудакрододаргаїїдаікПарадаі рапзазіддкааніздхидредеаєуусмжузпламадакімдааактисррсрареїІдарзмї рокркаЧтізпремісуихамзпедреукіпуумадхемппакіКрсеедудвіугтсивзммпДампа
КеуксКузпКаІраріеКкіізКаКддргердмуПррогеетікпдмузПсімКкотурзаіаухеуезпдареп пукитррмідзадзтузкімакзпидддпмізсзмтпеаіІпппуїдквізізградда95999959999599 дазддааздддозакіпісррсрареїдарзм трркрКкайтівпремісуумамзпедрехукКіпмума дмемппакікрсеедудваіутсузміміпдаміпоаКеуксКУизпКаїІраріектізКакадргерамуПрро геетіКпам5Псімкоїтурзаїамежезпадреппукррмідзадатувкимаквгмиаддпмізсвмт пеаІНпруїдквівіврок "ІТВСМА-14
М совЗ , овеоІвсмала ем "ІТВСМА-14 гаївіпіаутв!55Ії5еаамуїсазіудудмуїдуУмадаїтмм55 "ІТВСМА-14 Ікізгуиєаєдумаіуусзаззіурунадаїйківїк дудімдаздаєхККрдазуКизсКаздузіраууі пи утдарддадіємтаулутазапзеупаКкИдеититі
СЕМ гаївіпіауте!55Ії5еаїамуїсазіудудуїдучудадітум55дадазаадазаддадзаімтіогрів
ВСМА-14 Іємірддразізскозазімизпопіу пугуїдКрдазраїїукузпиздхранздздзаанікістиєава мдіуусздззіуриНадакіеїк дудімдаздаєхККрдазуКизсКаздузіраууі пи утдараддіемтодміутаздпзеупакптдтмті
Біспецифічн гаївіпіауте!55Ії5еаїамуїсазіудудуїдучудадітум55дадазаадазаддадзаімтіогрів а молекула Івмірддравзізскезазімпзпо пу пугуїдакроазрапіукузпиіздурагізозозоїанікізгуєава
ВСМА-1А удіуусзазвіурдадіківікзаддозеудімездодімародозікізсаазоПпкуатпмутдаро х?с Каїеммагітзкуппуатууаазукатівгаазкпіау!дтппіківедтахуусутпопідпзуїзумауму адіміузздддазаддазададзаїммідерзймзрдаїмйсоззідамізапурпиудакраддаргоїї аЧчікПарограгнзавзіїдаКаайзамдредеавуусумузппрумідаакм! дудімдаздаєхККрдазуКизсКаздузіраууі пи утдараддіемтодміутаздпзеупакптдтмті гаївіпіауте!55Ії5еаїамуїсазіудудуїдучудадітум55дадазаадазаддадзаімтіогрів
Іємірддравзізскозазімизпопіу пугуїдКрдазраїїукузпиздхранздздзаанікізгуиєаєа мдіуусзаззіуриНудакіІєїкКзаддазекдімездддімардазікізсаазуиКуатпмутдарад
БІ «| КоїєммагігзКуппуаїууаазуканівгаазКпіау! дтппіківадтахууситпдпідпзуізулаума іспецифічн . а молекула адіміузздддазаддазададзаїммідерзймзрдаїмйсоззідамізапурпиудакраддаргоїї 91, | всЕс доікПароїрагзозідокаанізоуаредеаеуусумузпгим ддаікимовдоадактісрресраре
ВСМА-14 Подрзміїрркркайтівпремісуууаузпедреукіпмумуадуеуй пакікрсееадуовіутсувмім
ХІ?С -5сЕс ІпаджпоКеукскУизпКаїІраріекіізКаКкадргердууПррзтгеетікпам5 Псімкатурзаїамемжме впадреппукиррмідзадзшузкимакзгиаддпмізсзмтпеа|Інппуїаквізізгракад995999 азадаазададзаддаздаадазакіпісрресрареП драмі тррокркайтізпремісиумаменей реуКіпуумадмемппакікрсеедудваіутсузміміпдампоКеукскУзпКаїІраріекіізКакадр гердмуПррзтгеетікпам5ПсімКотурзаіїамежезпддареппукИрруазадзтувкимаквгиа допмізсзмтпеаІпппуїакКвівІірак
Біспецифічн | ахдімдздаєукКрдазукузсКаздузіраууі пут дардддіємтдулутаздпзеупакпдмті а молекула) гаїзіпіауте!55веаїамуїсазіудуймуїдумддаїтмімзздадазадаазададзаїмтідірів до 5сЕс Іємірддравзізскозазімизпопіу пугуїдКрдазраїїукузпиздхранздзазанікізгуиєаєа "ух ВСМА-14 мдіуусзаззіуриНудакіІєїкКзаддазекдімездддімардазікізсаазуиКуатпмутдарад хіго -І Катем/магіг5КуппуаїууадзукатівгаазКиїауІдтппіКієдтамууси попідпзуізумаума 5сЕс авіакК | адіміузздддадздадазадддазаїммідерзймзрадімйсаззідамізапурпуудакрдааргоії даїКПараїранздвідаКааніздхдредеавуусммжуз прим ддааікімддадактісррсраре
ПодроміїрркрКкайтівпремісуумамзпедреуКіпуухадиемппакікрсеедудаіутсувміїм
ІпаджпоКеукскУизпКаїІраріекіізКаКкадргердууПррзтгеетікпам5 Псімкатурзаїамемжме впадреппукиррмідзадзшузкимакзгиаддпмізсзмтпеаІпппуїдквізізграддаа599995 ддчазададздадаздадазактісррсрареПадрзмітрркркайтізпремісиумамепедре мКІпиумадухемппакікрсеедудвіугсивзм мМіпадміпоуКкеукКсКизпКаїІраріектізКаКддрге рамуїПррогтеетікпам5Псімкоїтурзаіїамежезпддареппукрруазадатувзкімаквгмааа пмізсзмтпеаІпппуїдкзівів рок 93 УНСО) дуидімдаздаєхККрдазуКизсКаздузіраууі пи утдарддсіємтамугазапзеупаКкпденті 14 СС гаїбвіпіауте!55Ії5ейїамуїсазіудуду у дуУмдадітммв 94 вок дімтідірізІізмірддразізскозазімизпапіу пугуїдКрдазраїукизпиздмиранздздзаан
І 14 СС Ікізгуеєаєдудіуусзаззіур»нусаківїк
СЕМ (СС) дуидімдаздаєхККрдазуКизсКаздузіраууі пи утдарддсіємтамугазапзеупаКкпденті ов. |ВСМА- гаївіпіауте!55іїзетамуїсазіудудм у дум дадітумзз5додоз99995999954іМ тідїрі5 14 СС Івмірддразізскезазімпепопіуїпугуїакродзраїукузпизоурагізозозоіанікізгуєаей - маіуусзда5ззіуриНасакіеїк дуидімдаздаєхККрдазуКизсКаздузіраууі пи утдарддсіємтамугазапзеупаКкпденті
Біспецифічн гаївіпіауте!55іїзеатамуїсазіудудм у дум дадітумзз5додоз999959999501іМ тідїрі5 а молекула Іємірддравзізскозазімизпапіу пугуїдКрдазраїїйукизпиздхирапнзаздзданікКізгуєава (СС) ВСМА- удіуусзазвіурмПосоіківікздддозема мезодоімароозікізсаазопіпкуатпмутдаро 14 СС Х2С КаїемумагітзКуппуаїууаазуканізгаазКпіау!дтппіКіедіамууситптодпідпзуізумаума - адіміузздадазаадазададзаїммідерзймзрадімнсаззідаміздпурпуудакроадаргаїї аЧчікПарогранзавзіїдаКаайзамдредеавуусміжузплимідадаікімі дуидімдаздаєхККрдазуКизсКаздузіраууі пи утдарддсіємтамугазапзеупаКкпденті гаївіпіауте!55Ії5еаїгамуїсазіудудуїдучдадітуїззададзадаазададзаїмтідірів
Іємірддразізскозазімизпопіу пугуїдКрдазраїїукузпиздхранздздзаанікістиєава мдіуусзаззіуриНосаіКієїкКздаддзекдімезаддаімарддзікізсаазуниКуатпммтдарад
Біспецифічн | Каїеммагіг5КуппуаїууадзукатівгаазКкпіау!дтппіКкіечтахууси попідпзуізумаума а молекула! адіїміх55даддзаддадзадаазаїммідерзпизрддімнсодззідамізапурпуудакрадаргоії 97 5еЕс (Сб) даікПардаїранзодвзіїдоКкааніздухдредеаеуусмжузпгим дак міддадактсррераре " ІТВвВСМА- ПодроміїрркрКкайтівпремісуумамзпедреуКіпуухадиемппакікрсеедудаіутсувміїм 14 СС хі2ОС пдам/поКеуксКизпКаїраріекіізКакддргердууПррогеетікКпамзПсімкаїтурзаїамеме -5сЕс впадреппукиррмідзадзшузкимакзгиаддпмізсзмтпеаінппуїКзізіІзгРОЧДКОЯ995999 азадаазададзаддаздаадазакіпісрресрареП драмі тррокркайтізпремісиумаменей реуКіпуумадмемппакікрсеедудваіутсузміміпдампоКеукскУзпКаїІраріекіізКакадр гердмуПррзтгеетікпам5ПсімКотурзаіїамежезпддареппукИрруазадзтувкимаквгиа додпмізсзмтПпеаІпппуїдквівізрак дуидімдаздаєхККрдазуКизсКаздузіраууі пи утдарддсіємтамугазапзеупаКкпденті гаївіпіауте!55Ії5еагамуїсазіудуджудумдадітум55дадазаадазададзаїмтісгрів
Іємірддразізскозазімизпопіу пугуїдКрдазраїїукузпиздхранздздзаанікістиєава мдіуусзаззіуриНосаіКієїкКздаддзекдімезаддаімарддзікізсаазуниКуатпммтдарад
Біспецифічн | Каїеммагіг5КуппуаїууадзукатівгаазКкпіау!дтппіКкіечіахуусуипдпідпзуізулаума а молекула! адіїміх55даддзаддадзадаазаїммідерзпизрддімнсодззідамізапурпуудакрадаргоії 5еЕс (Сб) даікПардаїранзодвзіїдоКкааніздухдредеаеуусмжузпгим дак міддадактсррераре
ВСМА- ПодроміїрркрКкайтівпремісуумамзпедреуКіпуухадиемппакікрсеедудаіутсувміїм 14 СС хі2ОС пдам/поКеуксКизпКаїраріекіізКакддргердмуПррзгеетікпадамзіїсімкатурзаїамеме -86сЕс де(аК| зпддреппукиррмідзадзнувзкимакзгуддадпмиї5сзмтпеаіІнпнуїдквізігрдддд5а9995 ддчазададздадаздадазактісррсрареПадрзмітрркркайтізпремісиумамепедре мКІпиумадуемппакікрсеедудвіугсивзм мМіпадміпоуКеукскизпКа!раріекіізКакКоддрге рамуїПррогтеетікпам5Псімкоїтурзаіїамежезпддареппукрруазадатувзкімаквгмааа пмізсзмтпеаІпппуїдквівіврок 99. (ШарнірюсС!|ОКТНнТСРРСР 77777771
ОМОЇГ МЕЗ2аХСИаММОаИнзІ ВІ ЗСААБОЄТЕРАММОМНУУВОАРИКСІ ЕМУМАМІ
МмУравокуУМАрзУвавеЕтІЗАОМЗКМТІ М ОММ5І ААЕОТАМУУСАврампії тамМмРАрЕрУусості мтиззБОасасЗаааозаса5ОТУММТОТРІ З5НМТІ.
СОРАБІБСАЗБЗОБВІ УНЗООМТМІ БУМ ООАРЕОРРАЦШІУВІЗААЕЗОУРОВЕЗ аЗаАаТтоОгТтІ ЕІЗАУЕАЕрОМамУуСМоОТНУєРАТРОСатТкМвІКЗасасавЕМ
Мішень Е ОЇ МЕЗИСОИЇ МОРОЗІ КІ БЗСААЗИГТЕМКМАММУ/МВОАРИЕКИЇ ЕУМУМАВІНЬ (сс) х 12С- КУМММАТУМАОЗУКОВЕТІЗАрОЗКМТАМІ ОМММІ КТЕОТАУУУСУВНОИМЕСИ шарнір-СНО- ММА СсОоСсТтІ МТУ сСаазавасвавоааОГММТОЕРБІ ТУ5РО
СНЗ-лінкер- ступ Ттса5ЗТОАУТ5амМмиРМУМООКРООАРАСІ ІССТКЕГАРСТРАНЕЗОЗ 105. | шарнір-СНО- ПаскКААГТІЗаМОРЕОЕАЕМУСМІ М МЗМАМУУгРсасетКкі тм ссасоктнт сн СРРОРАРЕГ аСаРБЗМЕГЕРРКРКОТІ МІЗВТРЕМТОСМУМОУМЗНЕОРЕМКЕМУ/ У
Біспецифічн МООМЕМНМАКТКРСЕєОМСОаЗТУАСУЗМІТМ НОМ МаКЕУКСКУЗМКАГ РА а молекула РІЕКТІЗКАКООРВЕРОМУТІ РРЗАЕЕМТКМОМБІ ТС МКОЕМРБОІАМЕМЕЗМ
НІ Е (ОЕ9) СОРЕММУКТТРРМ'ОБОСЗЕРІ УК ТМОКЗРУМООСММЕЗСЗММНЕАЇІ НМНУ тТОКБІ БІ зЗРОКОСОСОСЗОООЗОСВОЗОССаЗасааБасСОаОКТНТСРР
СРАРЕЇ СаРЗМЕГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТСМУМОМЗНЕОРЕМКЕММ УМОС
МЕМНМАКТКРСЕєОМОЗТУАСУЗМІСТМІ НОМ МОКЕМКСКУЗМКАСРАРІЕК
ТІЗКАКИОРРЕРОММТІ РРОВЕЕМТКМОМЗІ ТС УКОЕМРБОІАМЕМЕЗМСООР
ЕММУКТТРРМІ'ОБОСОЗЕР ЗК МОКВАМООСММЕЗСЗУММНЕАІ НМНУТОК
ЗІ БІ РОК
ОМОЇГ МЕЗ2аХСИаММОаИнзІ ВІ ЗСААБОЄТЕРАММОМНУУВОАРИКСІ ЕМУМАМІ
МмУравокуУМАрзУвавеЕтІЗвОМЗКМТІ МГ ОММ5І ААЕОТАМУУСАврампії тамМмРАрЕрУуусості мтизБОсСОвсЗасаасасОсооО г ММтТОТРІ З5НМТІ.
СОРАБІБСАЗБЗОБВІ УНЗООМТМІ БУМ ООАРЕОРРАЦШІУВІЗААЕЗОУРОВЕЗ аЗаАаТтоОгТтІ ЕІЗАУЕАЕрОМамУуСМоОТНУєРАТРОСатТкМвІКЗасасавЕМ
Мішень Е ОЇ МЕЗИСОИЇ МОРОЗІ КІ БЗСААЗИГТЕМКМАММУ/МВОАРИЕКИЇ ЕУМУМАВІНЬ (сс) х 12С- КУМММАТУМАОЗУКОАЕТІЗАРОЗКМТАМІ ОМММІ КТЕОТАУУУСУВНОИМЕСИ шарнір-СНО- ММА СсОоСсТІ МТУ ОСВОЗОСООоВаСаСЗОГММТОЕРБІ ТУБРО
СНЗ-лінкер- ступ Ттса5ЗТОАУТ5амМмиРМУМООКРООАРАСІ ІССТКЕГАРСТРАНЕЗОЗ 106. сНно-СсНЗ ПаскКААГТІЗаМОРЕОЕАЕМУСМІ М МЗМАМУУгРсасетКкі тм ссасоктнт
Біспецифічн СРРОРАРЕГ аСаРБЗМЕГЕРРКРКОТІ МІЗВТРЕМТОСМУМОУМЗНЕОРЕМКЕМУ/ У а молекула МООМЕМНМАКТКРСЕєОМОаЗТУАСУМІ ТМ НОСОМ. МаКЕУКСКУЗМКАГ РА
НЕ (Т2О) РІЕКТІЗКАКООРВЕРОМУТІ РРОЗАВЕЕМТКМОМБІ ТС МКОЕМРБОІАМЕМЕЗМ
СОРЕММУКТТРРМ'ОБОСЗЕРІ УК ТМОКЗРУМООСММЕЗСЗММНЕАЇІ НМНУ тТОКБІ БІ зЗРОКОССОСЗвОООоЗОСВОЗОСоаБасасБасОаЗАРЕГІЇ СОР
ЗМЕГЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМУТСМУМУМОУМЗНЕОРЕУКЕМУ УМО МЕМНМАКТКР
СЕЕєОМавтуУвАсМУБМІ ТМ НООМ/Л МОКЕУКСКМУЗМКАЇ РАРІЕКТІЗКАКСОРА
ЕРОМУТ РРІАВЕЕМТКМОМУБІ ТОЇ МКОЕМРБОІАМЕМЕЗМИаОРЕММУКТТРРМУ г оБООЗЕР УВК ТМОКЗАУМООСММЕЗСЗММНЕАСНМНУТОКВІ БІ РОК
ОМОЇГ МЕЗ2аСИаММОаИНВЗІ ВІ ЗСААБОЄТЕРАММОМНУУВОАРИКСІ ЕМУМАМІ
МмУравокуУМАрзУвавеЕтІЗАОМЗКМТІ М ОММ5І ААЕОТАМУУСАврампії тамМмРАрЕрУуусості мтизБОсСОвсЗасаасасОсооО г ММтТОТРІ З5НМТІ.
СОРАБІБСАЗБЗОБВІ УНЗООМТМІ БУМ ООАРЕОРРАЦШІУВІЗААЕЗОУРОВЕЗ
Мішень Назалато ТТ ЕІЗАМЕАєрМамУУСсМоО5ТНУРАТРаСаТткМвІквасааЕмМ (сс) х 20-01 МЕБОСИЇ МОРССБІ КІ БЗСААБОЕТЕМКУАММУММ ОА РОКИ ЕММАВІНЗ шарнір-СН2-Ї КУМММАТУМАОЗУМКОВЕТІЗАВОЗКМТАМ ОМММІ КТЕОТАУУМСоУННО МЕС лінкер- ММА СсОоСсТІ МТУ ОСВОЗОСООоВаСаСЗОГММТОЕРБІ ТУБРО 107 шарнір-СН2- ТУТ тов аАМТЗОаМУРМММООКРООАРВИГ ІСОТКРІ АРОТРАНЕЗИ5 "|СНЗ-лінкер- ПГОССаКААТІ БОМОРЕОЕАЕМУСМІ МУЗМАМУРОСИЯаТтКІ ТМ аСсСООКТНТ сн СРРОРАРЕГ аСаРБЗМЕГЕРРКРКОТІ МІЗВТРЕМТОСМУМОУМЗНЕОРЕМКЕМУ/ У
Біспецифічн | МОСМЕУНМАКТКРСЕєОМОаЗТУАСУМІ ТМ НОБУ/ МаКЕУКСКУЗМКАГ РА а молекула РІЕКТІЗКАКССОССс9ЗССОССООСОСЗаИаСавЗОКТНТСРРОРАРЕЇ ЇЇ СОРБЗМБІ.
НГЕ(03І) ГТЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕУТСМУМОУМЗНЕОРЕУКЕМУ УМраТамЕМНМАКТКРСЕЕ о УАСУБМІТМ НОМ МСКЕМКСКУЗМКАЇ РАРІЕКТІЗКАКЕОРВЕРО
МУТГРРІВЕЕМТКМОМБІТОСІ УК ЕМРЗБВІАМЕМЕЗМЕОРЕММУКТТРРМІ О5 разЕгзКкІтоКкБАУМОСамММЕЗСЗММНЕАЇІ НМНУТОКБІ 5І ЗЗРОКОССОС завасзсасовБассазаОРАЕРОММУТІ РРОАВЕЕМТКМОМУБЗІ-ТСІ Кар
1 ОБО тоютсовнин
ММНЕА-НМНУТОКБІ І Рак
ОМОІЇ МЕЗЗСаССУМОБаНВБІ ВІ БСААЗОЕТЕАМУаМНУУАОАРОКСІ ЕМУМАМІ мУуравркууАрвУВавЕТІЗАОМЗКМТІ М ОММ5І ВАЕОТАУУУСАВрамоі!. тамМмРєРАргриусоаті мтиззБасаоазасасзассааоо ГУМОРІ З5НМТІ.
СОРАБІЗБСАНЗБЗОБІ УНЗрОаМТМІ БУГ ОСОАРЕОРРАГМВІЗААЕБаМРОВЕ5 аваАдатТОгТЕІЗАМЕАЕОУаУУУСМОЗТНУРАТРаСаИткУвІкЗасвасяоємМ
Мішень Е ОЇ МЕЗОСаСаЇ МОРССБІ КІ БСААЗИаєТЕМКУМАММУМУОАРОКаИїЇ ЕМУМАВІНЬ (сс) х І2С- КУММУАТУМАВЗУКОВЕТІЗАВОЗКМТАМІ ОМММІ КТЕОТАУУУСУВНОаМЕС шарнір-СНО- МЗМІЗУМмАММУСОСТІ МТУЗОСИОЗСОССИВИСИСЗОГТММТОЕРБІ ТУРИ лінкер-СНО- стуУут тса5ЗТадУтамиРМУМООКРООАРВИаГІСаТКкКРІАРИИТРАНЕбИа5 108. |СНЗ-лінкер- ПП асйкАА ТІ ЗамОоРЕОЕАЕМУСМІ МУМЗМАМУРССЯТтКІ ТМ асасоКктТнтТ
І сн СРРОРАРЕЇЇ ааРЗУРГ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕУТСУММОУЗНЕОРЕМКЕММУ/У
Біспецифічн МОаТмЕУНМАКТКРСЕЕОУавзТтУАСУЗМІ ТМ НОБУУЛІ МОКЕУКСКУЗМКАЇ РА а молекула РІЕКТІЗКАКССССОСЬВСОСЗвИасосацавАРЕЇ ЇЇ СОаРЗМЕГЕРРКРКОТІ М
НІ Е (771) ІЗАТРЕМТСМУМОУЗНЕОРЕУКЕМУУУраМЕМНМАКТКРСЕЕОаЗТУВСУЗ
МТМ НОЖІ МЕОКЕУКСКУЗМКАЇ РАРІЕКТІЗКАКСОРАЕЕРОММТІ РРОВЕЕ
МІТКМОУБІ ТС УКаЕМРЗВІАМЕМЕЗМСООРЕММУКТТРРМІ ОБОСОЗЕРІ УК. тУрКЗАМОбаММЕЗСЗУМНЕАЇ НМНУТОКБІ І ЗРОКССОССЬвИаБИСИ азасайваоРАВЕРОМУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТС УКаЕМРЗОІАМЕМЕЗМ
СОРЕММУКТТРРМІ О5БрОаЗЕРІ ЗК ТМОКЗАМОаММЕЗСОСЗУМНЕАІ НМНУ тТОКБІ І ЗРхгаТак
ОМОІЇ МЕЗЗСаССУМОБаНВБІ ВІ БСААЗОЕТЕАМУаМНУУАОАРОКСІ ЕМУМАМІ мУуравркууАрвУВавЕТІЗАОМЗКМТІ М ОММ5І ВАЕОТАУУУСАВрамоі!. тамМмРєРАргриусоаті мтиззасаазасвазааиайеОоТуМтТОтРІ З5НМТІ.
СОРАБІЗБСАНЗБЗОБІ УНЗраМТмМІ БУГ ОСОАРЕОРРАГИМВІЗААЕ5аМУРОВЕ5 аваАдатТОгТЕІЗАМЕАЕОУаУУУСМОЗТНУРАТРаСаИткУвІкЗасвасяоємМ
Мішень Е ОЇ МЕЗОСаСаЇ МОРССБІ КІ БСААЗИаєТЕМКУМАММУМУОАРОКаИїЇ ЕМУМАВІНЬ (сс) х І2С- КУММУАТУМАВЗУКОВЕТІЗАВОЗКМТАМІ ОМММІ КТЕОТАУУУСУВНОаМЕС
СНО-лінкер- МЗМІЗУМмАММУСОСТІ МТУЗОСИОЗОСССИСЗИаСИОЗОГММТОЕРБІТУБРО сНно-сНЗ- стуУут тса5ЗТадУт5амиРМУМООКРОаОАРВИаГІССаТКРІ АРИИТРАНЕБИ5 109. лінкер-СНЗ ПП асСКкААІ ТІ ЗаМОРЕСЕАЕМУСМІ МуМЗМАМУРСсСатТКкІ ТМ вДассАРЕ Га
Біспецифічн СРОЗМУРГ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕУТСМУМОУЗНЕОРЕУКЕМУ УМО, МЕМНМАКТ а молекула КРСЕЕОМазТУВСУБМІ ТМ НОБУ/ЛІ МЕАКЕМКСКМУ5МКАЇ РАРІЕКТІЗКАКООС
НІ Е (КвС) азассазасасосаацавАРЕЇ ЇЇ СаРБЗМЕГЕРРКРКОТІ МІЗВТРЕМТСУММУ
ВОМЗ5НЕОРЕУКЕМУ УМВИМЕМНМАКТКРСЕЕєООаЗТМАСУБМІ ТМ НОМ М
СКЕУКСКУЗМКАЇ РАРІЕКТІЗКАКИОРАЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТОЇ М
КагУРЗОІАМЕМЕЗМИООРЕММУКТТРРМІ О5БОСОЗЕРІ ЗК ТУОКЗеУОССМ
МЕБСЗУМНЕАЇ НМНУТОКБІ БІ ЗРОКОССИЇИЗТЯСсОЗСС,аазасасеаоРА
ЕРОММТГ РРОВЕЕМТКМОМУБІ ТОЇ УК ЕМРЗОІАМЕЖМЕЗМИОРЕММУКТТРРМ г о5разЕєг Зк тУокКЗАМОСамММЕЗСЗУМНЕАНМНУТОКБІ ЗІ Рак
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1105 АМОЕМ ІМС.
АМОЕМ КЕЗБЕАКСН (МОМІСН) СМВН «120» БІСПЕЦИФІЧНІ КОНСТРУКЦІЇ АНТИТІЛ ДО ВСМА І СО3, ЯКІ ЗАЛУЧАЮТЬ Т-КЛІТИНИ «1305 АМО15674РСТ «150» 62/290,831 «1515 2016-82-83 «1605 189 «170» РабепсІп версія 3.5
«210» 1 «2115 5 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«220» «223» Синтетичний пептид «400» 1 о1у о1у о1у о1у 5ег 1 5 «210» 2 «2115 16 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 2 с1у о01у с1у с1у 5ег б1у ос1у о1у о1у 5ег 1 5 18 «2105» З «2115» 15 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» з с1у о1у сб1у о1у 5ег с01у с1у с1у с1у бег с1у о01у ос1у с1у 5ег 1 5 18 15 «210» 4 «2115» 209 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
«400» 4 с1у о1у с1у с1у бег осо1у сб1у о1у сб1у 5ег б1у с1у сб1у ос1у 5ег ос1у 1 5 18 15 о1у о1у о1у 5ег 20
«210» 5 «2115» 25 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 5 со1у о1у с1у о1у 5ег о01у с1у с1у о1у бег о1у с1у оІ1у с1у 5ег о01у 1 5 18 15 со1у о1у с1у бег с1у о1у с1у с1у 5ег 20 «210» 6 «2115» 396 «212» Білок «2135 Штучна послідовність 25 «220» «223» Синтетичний пептид «400» 6
Зо с1у о01у с1у с1у 5ег б1у сб1у с1у о1у 5ег сб1у с1у о1у о1у 5ег О1у 1 5 18 15 со1у о1у с1у бег с1у ос01у с1у с1у 5ег о01у ос1у о1у ос1у 5ег 20 25 за «210» 7 «2115» 35 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 7 со1у о1у с1у о1у 5ег о01у с1у с1у о1у бег о1у с1у оІ1у с1у 5ег о01у 1 5 18 15 со1у о1у с1у бег с1у о01у с1у с1у бег сб1у о1у с01у о1у 5ег с1у ос1у 20 25 за о1у о1у бег 35
«2105» 8 «2115» 40 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 8 со1у о1у с1у о1у 5ег о01у с1у с1у о1у бег о1у с1у оІ1у с1у 5ег о01у 1 5 18 15 с1у о01у с1у 5ег сбі1у б1у с1у с1у бег б1у с1у с01у о1у 5ег о1у Оо1у за со1у о1у бег о01у с1у о1у о1у 5ег 20 35 40 «210» 9 «2115 6 25 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 9
Рго с1у сб1у о1у о1у бег 1 5 «2105» 16 «2115 6 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 16
Рго о1у с1у Азр о1у 5ег 1 5 «210» 11 «2115 6 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 11 б5ег б1у о1у с1у о1у 5ег 1 5 «2105 12 «2115 4 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 12 о1у с1у с1у с1у 1 «2105 13 «2115 189 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 13
Зо біп Тис Маї Маї Те б1п бій Рго бег Гей Тпг Маї бег Рго о1у о1у 1 5 18 15
Тиг о Маї Тиг Ге Тис Суз б1у бег 5ег Тиг с1у АТїа Маї Тпг бег о01у 20 25 36
Абзп о Туг Рго Азп Тер Ма! б1п б1п Гу Рго о1у б1п А1а Рго Аг» О1Уу 35 4 45
Ге ІІе с1у с1у Тйг Гу Ре Гей А1Та Рго с01у Тиг Рго АТа Аге Ре 58 55 ва б5ег с01у бег Ге їеи с1у с1у Гуз АІї1а А1їа Ге Тиг їеи бег о1у Маї 65 78 75 ва бІіп Рго бій Азр 610 Аїа біи Туг Туг Суз Маї Ге Тер Туг 5ег Азп 85 90 95
Аге Тер Ма! Рпе б01у с1у с1у Тпг Гу Гец Тиг Маї Ге 188 185 «2105 14 «2115 125
«212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 14 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а б5ег б1у Рпе Тийг Ріпе Ап 5ег Туг 20 25 30
А1їа Меє Ахп Тер Маї Аге б1п Аїа Рго о1у Гу5 с1у Гей с1и Тер Маї! 35 4 45
А1а Аге І1е Аге бег Гуз Туг Азп Азп Туг АТа Тйг Туг Туг АТа дор 58 55 ва б5ег Ма! Гу5х б1у Аг» Ре Тиг І1е 5ег Аге Ар Ар бег Гуз Азп ТАг 65 78 75 ва
А1Т1а Туг Геи б1п Меї Азп бег Ге Гуз Тйг бІи Азр Тпг АТа Маї Туг
Зо 85 90 95
Туг Суз Ма! Аг» Ні5 б1у Ахп Рпе б1у Азп 5ег Туг Ма! бег Тер Тер 188 185 118
А1а Туг Тер б01у бІ1п с1у Тиг Ге Маї Тиг Маї 5ег 5ег 115 129 125 «2105 15 «2115 249 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 15 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а б5ег б1у Рпе Тийг Ріпе Ап 5ег Туг 20 25 30
А1їа Меє Ахп Тер Маї Аге б1п Аїа Рго о1у Гу5 с1у Гей с1и Тер Маї!
35 40 45
А1а Аге І1е Аге бег Гуз Туг Азп Азп Туг АТа Тйг Туг Туг АТа дор 58 55 60 б5ег Ма! Гу5х б1у Аг» Ре Тиг І1е 5ег Аге Ар Ар бег Гуз Азп ТАг 65 70 75 80
А1Т1а Туг Геи б1п Меї А5зп бег Ге Гуз Тйг бІ1и Азр Тйг Аа Маї Туг 85 90 95
Туг Суз Ма! Аг» Ні5 б1у Ахп Рпе б1у Азп 5ег Туг Ма! бег Тер Тер 166 185 116
А1ї1а Туг Тер 01у біп с1у Тйг Ге Ма! Тиг Маї 5ег 5ег б1у с1у О1Уу 115 1208 125 со1у бег б1у о1у с1у о01у б5ег с1у ос1у с1у о1у бег бІіп Тиг Маї Маї 138 135 140
Тиг б1іп бТ1и Рго бег Ге Тйг Ма! бег Рго б1у с1у Тиг Маї Тиг Ге 145 158 155 160
Зо
Тиг о Суз о1у 5ег бег Тпг б1у Аїа Ма! Тиг бег о01у Ап Туг Рго Ап 165 176 175
Тер Ма! б1п б1п Гу Рго о1у б1п А1ї1а Рго Аг» б01у Ге Іе о1у с1у 188 185 199
Те Гуз Рпе Ге АТа Рго б1у Тйг Рго Аї1а Аг» Рпе бег Оо1у 5ег Геи 195 290 295
Їеци сбІ1у о1у Гуз Аїа А1ї1а Гей Тпг Ге б5ег б1у Маї бІп Рго о01и дА5р 216 215 229 бі АТа бій Туг Туг Су5х Маї Ге Тер Туг 5ег Азп Ага Тгр Ма1ї! РПе 225 230 235 240 о1у о1у о1у Тиг Гуз Гей Тиг Маї Ге 245 «2105 16 «2115 6 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«223» Синтетичний пептид «4005 16
Ні Ні Ні Ні Ні Ні 1 5 «2105 17 «2115 227 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 17
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
О1у Рго 5ег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні
Зо 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 ва
Ні Азп АТа Гуз Тпг Гуз Рго Суз 01 б0Ти б1п Туг с1у бег Тиг Туг 65 78 75 ва
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Гуз бІи Туг Гуз Суб Гуз Маї бег Азп Гуз АТа Ге Рго АІТа Рго І1е 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тйг Гуз Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 1509 155 160
Тер бІи бег Азп б1у б1п Рго 01 Ап Азп Тугс Гуз Те Те Рго Рго 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п б1у Азп Маї Ре 5ег Су бег Маї Мет 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 216 215 229
Рго о1у Гуз 225 «2105 18 «2115 225 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
Зо «4005 18
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Маї Рпе Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Гей Мей 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 60
Ні Азп АТа Гуз Тийг Гуз Рго Суз 010 б1и бІ1п Туг с1у бег Тиг Туг 65 78 75 ва
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ніх бі Аїа Гей Ні Абхп Ніх Туг ТПйг біп Гу бег Ге б5ег Гей 5ег 216 215 220
Рго
Зо 225 «2105 19 «2115 227 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 19
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бі Ар Рго б1и Ма! Гу5 Рпе Ахп Тгр Туг Ма! Азр о1у Маї о1и Маї 58 55 ва
Ні Азп АТїа Гу5 Тийг Гу Рго Аге бІи бій біп Туг Ап бег Тг Туг
65 78 75 ва
Аге Маї Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні5 біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Су5х Гец Маї Гуз о1у Ре Туг Рго бег Азр І1е АТа Маї о01и 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз ей Тиг Маї 1809 185 199
Зо
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз бег Їеу бег Геи бег 216 215 220
Рго о1у Гу 225 «2105 29 «2115 225 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 29
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Ге Гей о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аг Тг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 ва
Ні Азп АТїа Гух5 Тиг Гуз Рго Аг» бій бі біп Туг Азп бег Тс Туг 65 78 75 ва
Аге Маї Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні5 біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї б5ег Азп Гуз АІТа Геи Рго АІа Рго І1е 188 185 116 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Зо
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 1509 155 160
Тер 61 б5ег Ап б1у біп Рго бій Азп Азп Тугсб Губ5 Тс ТВге Рго Рго 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 216 215 220
Рго 225 «2105 21 «2115 227 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«223» Синтетичний пептид «4005 21
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
О1у Рго 5ег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 ва
Ні Азп АТїа Гу5 Тийг Гу Рго Аге бІи бій біп Туг о01у бег Тиг Туг 65 78 75 ва
Аге Маї Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні5 біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Зо Гуз бІи Туг Гуз Суб Гуз Маї бег Азп Гуз АТа Ге Рго АІТа Рго І1е 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 178 175
Уаї Гей Ар бег Ар б1у 5ег Рпе Рпе Ге Туг 5ег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
А5зр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Маї Ре 5ег Су 5ег Ма! Меє 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 216 215 220
Рго о1у Гуз 225 «2105 22 «2115 225 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 22
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр о1у Ма! оїи Маї
Зо 58 55 60
Ні Азп АТїа Гу5 Тийг Гу Рго Аге бІи бій біп Туг о01у бег Тиг Туг 65 78 75 ва 35
Аге Маї Маї бег Маї Ге Тпг Маї Гей Ні5 біп Азр Тер Геци Азп о1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гуз АТа Гу о1у б1п Рго Аг» б1и Рго б1іп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Суз Гей Маї Гуз о1у Рпе Туг Рго бег Азр ІІе АІа Маї с1и 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 178 175
Уаї Гей Азр бег Азр с01у 5ег Ріпе Ріпе Гей Туг бег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ніх бі Аїа Гей Ні Абхп Ніх Туг ТПйг біп Гу бег Ге б5ег Гей 5ег 216 215 220
Рго 225 «2105 23 «2115 227 «2125» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 23
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Зо
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бі Ар Рго б1и Ма! Гу5 Рпе Ахп Тгр Туг Ма! Азр о1у Маї о1и Маї 58 55 ва
Ні Азп АТа Гуз Тийг Гуз Рго Суз 010 01 бІп Туг Азп бег Тиг Туг 65 78 75 80
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Су5х Гец Маї Гуз о1у Ре Туг Рго бег Азр І1е АТа Маї си 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 216 215 220
Рго о1у Гу 225 «2105 24
Зо «2115 225 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 24
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тиг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 ва
Ні Азп АТїа Гу5 Тег Гу Рго Суз бІи бій біп Туг Абзп бег Тиг Туг 65 78 75 ва
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у
85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІТа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 116 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Ге Рго Рго бег Аге бій бі Меє Тпг о Гу5 Ап б1п Маї! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 1509 155 160
Тер 61 б5ег Азп б1у біп Рго бій Азп Азп Туг Губ5 Тс ТВе Рго Рго 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п біп б1у Ахп Маї Рпе бег Суб5 5ег Маї Мет 195 290 295
Зо
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 216 215 220
Рго 225 «2105 Й -725 «2115» 484 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 КЖ225
Азр Гуз Тис Ні Тс Су Рго Рго Суб Рго АІТа Рго с1и Гей Ге о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Маї Рпе Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи Мей 20 25 36
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго б1и Маї Гуз Рпе Азп Тгр Туг Маї Азр с1у Маї си Маї 50 55 60
Ні Азп АТа Гуз Тийг Гуз Рго Суз 010 б1и бІ1п Туг с1у бег Тиг Туг 65 70 75 80
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Гуз бІи Туг Гуз Суб Гуз Маї бег Азп Гуз АТа Ге Рго АІТа Рго І1е 166 185 116 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 1308 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 158 155 160
Зо
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 176 175
Уаї Гей Ар бег Ар б1у 5ег Рпе Рпе Ге Туг 5ег Гуз Гей Тиг Маї 188 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 2168 215 229
Рго с01у Гуз с01у о1у с1у о1у бег о01у сб1у о1у сб1у бег ос1у с1у ос1у 225 230 235 240 о1у бег б1у о1у с1у о01у б5ег с1у о1у с01у о1у бег о01у с1у с1у ос1у 245 258 255 б5ег Азр Гу5 Тийг Ні Тйг Суб Рго Рго Суб Рго АІа Рго б01и Геи Геи 260 265 279 с1у о1у Рго бег Маї Ре Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи
275 2808 285
Мет ІТ1е 5ег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег 290 295 309
Ні5 бІи Ар Рго бій Маї Гуз Рпе Азп Тгр Туг Маї Азр о1у Маї си 395 316 315 329
Маї Ні5 Азп ДІа Гух5 Тйг Гуз Рго Суз 01 010 б1п Туг о1у бег Тиг 325 339 335
Туг Аге Суб Маї бег Маї Ге Тпг Маї Гей Ні біп Ар Тер Гей Азп 340 345 359 с1у Гуз бІи Туг Гуз Суб Гуз Маї бег Азп Гуз Аа Гецй Рго АІа Рго 355 зва 365
Іе 01 Гу5 Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу5 с1у б1п Рго Аг» б1и Рго біп 379 375 389
Мма1ї! Туг Тиг Гец Рго Рго 5ег Аг» біи біи Мет Тйг Гуз Азп сп Маї 385 399 395 4ев
Зо б5ег Ге Тиг Суз Ге Ма! Гуз о1у Рпе Туг Рго 5ег Азр ІІе А1а Маї 405 416 415 бІ1и Тер бІ1и бег Азп б01у біп Рго бТ1и Абп Азп Тугс Гуз Тс Тег Рего 420 425 430
Рго Маї Ге Ар бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг 5ег Гуз Гец Тиг 435 44о 445
Мма1 Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п б1у Азхп Маї! Рпе 5ег Суб 5ег Маї 450 455 460
Меє Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ніх Туг Тиг біп Гуз 5ег Геи бег Ге 465 470 475 480 б5ег Рго о1у Гуз «2105 26 «2115» 480 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«223» Синтетичний пептид «4005 726
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Маї Рпе Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Гей Мей 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 60
Ні Азп АТа Гуз Тийг Гуз Рго Суз 010 б1и бІ1п Туг с1у бег Тиг Туг 65 78 75 ва
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Зо
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег
2168 215 229
Рго сб1у сб1у с01у о1у бег о01у сі1у о1у сб1у бег б1у о01у ос1у су 5ег 225 230 235 240 со1у о1у с1у о1у 5ег о0І1у с1у с1у о1у бег о01у с1у оІ1у ос1у 5ег Ар 245 258 255
Гуз Те Ні Тс Су Рго Рго Су Рго АТа Рго сб1и Геи Гей о1у о1у 260 265 279
Рго бег Маї Рпе Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Ге Меє Пе 275 2808 285 б5ег Аге Тпг о Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні би 2908 295 309
Азр Рго бї1и Маї Гу5 Рпе Азп Тгр Туг Ма! Азр сІ1у Маї оїи Маї Ні 305 319 315 329
Азп АТїа Гу Тийг Гу Рго Суз б1и бій біп Туг б1у 5ег Тиг Туг Аге 325 339 335
Зо
Суз Маї бег Ма! Ге Тиг Маї Геу Ні бІ1п Ар Тер Геи Ап Оо1у Гуз 340 345 359 бІи Туг Гуз Суз Гуз Маї 5ег Ап Гуз АТа Гец Рго Аїа Рго І1е с1и 355 зва 365
Гуз Тс ІІе 5ег Гуз АТа Гу 01у б1п Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг 3708 375 389
Те Гей Рго Рго бег Аге бі біи Меє Тийг Гу Азп біп Ма! б5ег Геи 385 390 395 4ев
Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 5ег Азр Іе АІа Маї со1їи Тер 405 416 415 бІ1и бег Азп б1у б1п Рго 01 Абп Азп Тугс Гуз Тс Тс Рго Рго Маї 420 425 430
Ге Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Рпе Гей Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Ар 435 44о 445
Гуз 5ег Аг» Тер біп біп б1у Ахп Ма! Рпе 5ег Суб5х бег Ма! Меє Ні 450 455 460 бі АТа Гей Ні Азп Ніх Туг Тиг біп Гу5 5ег Гей бег Гец 5ег Рго 465 470 475 4808 «2105 27 «2115» 484 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 27
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 4 45
Зо бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр о1у Ма! о1и Маї 58 55 ва 35 Ні Азп АТїа Гу5 Тийг Гу Рго Аге бІи бій біп Туг Ап бег Тг Туг 65 78 75 ва
Аге Маї Маї бег Маї Ге Тис Маї Гей Ні б1іп Азр Тер Геци Азп Оо1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 118 бі Гух Тс І1е б5ег Гуз АТа Гуз с1у б1п Рго Аге б1іи Рго сп Маї1 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тс Су5 Ге Маї Гуз б1у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІїа Маї о1и 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего
165 176 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз Гей Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 2168 215 229
Рго с01у Гуз с01у о1у с1у о1у бег о01у сб1у о1у сб1у бег ос1у с1у ос1у 225 230 235 240 с1у бег б1у с1у с1у с1у б5ег с01у о01у с1у с1у б5ег с01у о1у с1у о1у 245 258 255 б5ег Азр Гуз Тиг Ні Тйг Су Рго Рго Су Рго АІа Рго соЇи Геи Ге 260 265 279 с1у о1у Рго бег Маї Ре Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи 275 2808 285
Зо
Мет ІТ1е 5ег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег 2908 295 309
Ні5 бІи Ар Рго бій Маї Гуз Рпе Азп Тгр Туг Маї Азр о1у Маї си 395 316 315 329
Мма1ї Ніб5 Ахп АТа Гу Тйг Гуз Рго Аг» бі бі б1п Туг Азп б5ег Тг 325 339 335
Туг Аге Ма! Маї б5ег Маї Ге Тпг Маї Гей Ні біп Ар Тер Гей Азп 340 345 359
Оо1у Гуз бТи Туг Гуз Суб Гуз Ма! бег Ап Гуз АІа Гей Рго АІа Рго 355 зва 365
Іе 01 Гу5 Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу5 с1у б1п Рго Аг» б1и Рго біп 3708 375 389
Мма1ї! Туг Тиг Гец Рго Рго 5ег Аг» біи біи Мет Тйг Гуз Азп сп Маї 385 399 395 4ев б5ег Ге Тиг Суз Ге Ма! Гуз о1у Рпе Туг Рго 5ег Азр ІІе А1а Маї 485 416 415 бі Тер 610 5ег Азп б1у біп Рго бі Азп Азп Тубс Гу Тс Те Рго 420 425 430
Рго Маї Ге Азр бег Азр о1у бег Ре Рпе Гей Туг бег Гуз Гей Тиг 435 дда 445 ма1 Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п б1у Азхп Ма! Рпе 5ег Су5 5ег Маї 450 455 460
Меє Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ніх Туг Тиг біп Гуз 5ег Геи бег Ге 465 470 475 4808 б5ег Рго о1у Гуз «2105 28 «211» 486 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
Зо «220» «223» Синтетичний пептид «4005 28
Азр Гуз Тис Ні Тс Су Рго Рго Суб Рго АІТа Рго с1и Гей Ге о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи Меє 20 25 36
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Рпе Азп Тгр Туг Ма! Азр сІ1у Ма! о1и Маї 58 55 ва
Ні Азп АТїа Гу5 Тийг Гу Рго Аге бІи бій біп Туг Ап бег Тг Туг 65 78 75 ва
Аге Маї Маї бег Маї Гей Тиг Маї Гец Ні б1п Азр Тер Ге Азп 01у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе
166 185 116 бі Гуз Тс Пе бег Гу5 АТа Гуз с1у б1п Рго Аге б1и Рго сп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 1308 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 158 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 176 175
Уаї Гей Ар бег Ар б1у 5ег Рпе Рпе Ге Туг 5ег Гуз Гей Тиг Маї 188 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 2168 215 229
Зо
Рго сб1у сб1у с01у о1у бег о01у сі1у о1у сб1у бег б1у о01у ос1у су 5ег 225 230 235 240 со1у о1у с1у о1у 5ег о0І1у с1у с1у о1у бег о01у с1у оІ1у ос1у 5ег Ар 245 258 255
Гуз Те Ні Тс Суб Рго Рго Су Рго АІїа Рго б1и Гец Ге о1у с1у 260 265 279
Рго бег Маї Рпе Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Ге Меє Пе 275 2808 285 б5ег Аге Тпг о Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні би 2908 295 309
Азр Рго бї1и Маї Гу5 Рпе Азп Тгр Туг Ма! Азр сІ1у Маї оїи Маї Ні 395 316 315 329
Азп АТїа Гу Тиг Гу Рго Аге бій бій біп Туг Азп 5ег ТАг Туг Аге 325 339 335
Ммаї Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Ге Ніх5 бІп Азр Тер Гей Ахзп Осо1у Гу 340 345 3509 бі Туг Гуз Суз Гуз Ма! бег Ап Гу5 А1Та Гей Рго АІіа Рго Пе б1и 355 зво 365
Гуз Тс ІІе 5ег Гуз АТа Гу 01у б1п Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг 379 375 389
Те Гей Рго Рго бег Аге бі біи Меє Тийг Гу Азп біп Ма! бег Геи 385 390 395 4ев
Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 5ег Азр Іе АІа Маї со1їи Тер 485 416 415 б1и бег Азп б1у бІ1п Рго бі Абп Азп Туг Гуз Тс ТВгс Рго Рго Маї 420 425 430
Гей Азр бег Азр б1у бег Ре Ре Гей Туг бег Гу5 Ге Тиг Маї Азр 435 дда 445
Гуз 5ег Ага Тер біп біп б01у Азп Ма! Рпе бег Суб5 б5ег Маї Меє Ні
Зо 450 455 460 б1и АТа Гей Ні Ап Ніх Туг Тйг б1п Гуз бег Ге бег Ге бег Рго 465 470 475 4808 «2105 29 «2115» 484 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 29
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15 о1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи Меє 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр оІу Маї оїи Маї
50 55 60
Ні Азп АТїа Гу5 Тийг Гу Рго Аге бІи бій біп Туг о01у бег Тиг Туг 65 78 75 80
Аге Маї Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні5 біп Азр Тер Гей Ап о1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 166 185 116 бі Гух Тс І1е 5ег Гуз АТа Гу о1у біп Рго Аг» біи Рго біп Маї! 115 1208 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 1308 135 140
Їеч Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е Аїа Маї си 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 176 175
Зо
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Рпе Ге Туг бег Гуз Гей Тиг Маї 188 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ніх бій Аїа Ге Ні Ап Ні Туг Тйг біп Гу5 5ег Ге 5ег Гец 5ег 2168 215 229
Рго с01у Гуз с01у о1у с1у о1у бег о01у сб1у о1у сб1у бег ос1у с1у ос1у 225 230 235 240 о1у 5ег сб1у с1у сб1у с1у бег с1у сб1у с1у с1у 5ег с01у ос1у с1у ос1у 245 258 255 б5ег Азр Гуз Тиг Ні Тйг Су Рго Рго Су Рго АІа Рго соЇи Геи Ге 260 265 279 с1у о1у Рго бег Маї Ре Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи 275 2808 285
Мет ІТ1е 5ег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег 298 295 380
Ні б1и Азр Рго біи Маї Гу Рпе Азп Тер Туг Ма! Азр о1у Маї си 305 319 315 320
Мма1ї Ніб5 Ахп АТа Гу Тйг Гуз Рго Аг» бі бі б1п Туг сб1у б5ег Тиг 325 330 335
Туг Аге Ма! Маї б5ег Маї Ге Тпг Маї Гей Ні біп Ар Тер Гей Азп 340 345 3509
Оо1у Гуз бТи Туг Гуз Суб Гуз Ма! бег Ап Гуз АІа Гей Рго АІа Рго 355 зво 365
Іе 01 Гу5 Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу5 с1у б1п Рго Аг» б1и Рго біп 379 375 380
Мма1ї! Туг Тиг Гец Рго Рго 5ег Аг» біи біи Мет Тйг Гуз Азп сп Маї 385 390 395 4ев б5ег Ге Тиг Суз Ге Ма! Гуз о1у Рпе Туг Рго 5ег Азр ІІе А1а Маї
Зо 485 416 415 бІ1и Тер бІ1и бег Азп б01у біп Рго бТ1и Абзп Азп Тугс Гуз Тс Тег Рего 420 425 430
Рго Маї Ге Азр бег Азр о1у бег Ре Рпе Гей Туг бег Гуз Гей Тиг 435 дда 445
Мма1 Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п б1у Ахп Ма! Рпе 5ег Су 5ег Маї 450 455 460
Мет Ні бі А1Та Гей Ні Ап Ніх Туг Тйг б1п Гу б5ег Гецй 5ег Ге 465 470 475 4808 б5ег Рго о1у Гуз «2105 38 «211» 486 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
«4005 30
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 29 25 36
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 40 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Ма! Азр о1у Маї оїи Маї 50 55 60
Ні Азп АТїа Гу5 Тийг Гу Рго Аге бІи бій біп Туг о01у бег Тиг Туг 65 70 75 80
Аге Маї Маї бег Маї Ге Тпг Маї Ге Ніх5 біп Азр Тер Геци Азп о1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 166 185 116
Зо бі Гух Тс І1е 5ег Гуз АТїа Гух оО1у б1п Рго Аг» біи Рго б1іп Маї! 115 1208 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 1308 135 140
Ге Тйг Су5х Гец Маї Гуз б1у Рпе Туг Рго 5ег Азр І1е А1а Маї си 145 158 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б01у 5ег Рпе Ріпе Гей Туг бег Гуз Гей Тиг Маї 188 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Гей Ні Ап Ніх Туг Тиг бІп Гу бег їецу 5ег Геци 5ег 2168 215 229
Рго сб1у сб1у с01у о1у бег о01у сі1у о1у сб1у бег б1у о01у ос1у су 5ег 225 230 235 240 с1у о01у с1у с1у 5ег б1у сб1у с1у о1у 5ег сб1у с1у о1у о1у 5ег Азр 245 258 255
Гуз Те Ні Тс Су Рго Рго Су Рго АТа Рго сб1и Геи Гей о1у о1у 260 265 2708
Рго бег Маї Рпе Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Ге Меє Пе 275 2808 285 б5ег Аге Тпг о Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні би 2908 295 зев
Азр Рго бї1и Маї Гу5 Рпе Азп Тгр Туг Ма! Азр сІ1у Маї оїи Маї Ні 395 316 315 329
Азп АТїа Гу Тиг Гу Рго Аге бій бій біп Туг б1у 5ег Тиг Туг Аг: 325 330 335
Ммаї Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Ге Ніх5 бІп Азр Тер Гей Ахзп Осо1у Гу
Зо 340 345 359 бІи Туг Гуз Суз Гуз Маї 5ег Ап Гуз АТа Гец Рго Аїа Рго Пе с1и 355 360 365
Гуз Тс ІІе 5ег Гуз АТа Гу 01у б1п Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг 3708 375 389
Те Гей Рго Рго бег Аге бі біи Меє Тийг Гу Азп біп Ма! бег Геи 385 399 395 4ев
Те Суз Ге Маї Гух о1у Ре Туг Рго бег Азр І1е АТа Маї со1и Тер 405 416 415 бІ1и бег Ап б1у б1п Рго 01 Абоп Азп Тугсб Гуз Тс Тс Рго Рго Маї 420 425 430
Ге Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Рпе Гей Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Ар 435 44о 445
Гуз 5ег Ага Тер біп біп б01у Азп Ма! Рпе бег Суб5 бег Маї Меє Ні 450 455 460 б1и АТа Гей Ні Ап Ніх Туг Тйг б1п Гуз бег Ге бег Ге бег Рго 465 470 475 4808 «2105 31 «2115» 484 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 31
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
О1у Рго 5ег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 ва
Зо
Ні Азп АТа Гуз Тийг Гуз Рго Суз 010 01 бІп Туг Азп бег Тиг Туг 65 78 75 ва 35
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95 40 Гуз бІи Туг Гуз Суб Гуз Маї бег Азп Гуз АТа Ге Рго АІТа Рго І1е 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» бІіи Рго бІп Маї 45 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азхр Іе АІа Маї си 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг бег Гуз Гей Тиг Маї 188 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу 5ег Геи 5ег 216 215 229
Рго с01у Гуз с01у о1у с1у о1у бег о01у сб1у о1у сб1у бег ос1у с1у ос1у 225 230 235 240 о1у бег б1у о1у с1у с1у 5ег с1у с1у о1у с1у бег ос1у о1у ос1у а1у 245 258 255 б5ег Азр Гуз Тиг Ні Тйг Су Рго Рго Су Рго АІа Рго соЇи Геи Ге 260 265 279 с1у б01у Рго б5ег Ма! Рпе Гец Ріпе Рго Рго Гу Рго Гуз Азр ТПг Ге 275 2808 285
Мет ІТ1е 5ег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег
Зо 298 295 309
Ні5 бІи Ар Рго бТи Маї ух Ріпе Азп Тгр Туг Ма! Азр су Маї с1и 395 316 315 329
Маї Ні5 Азп ДІа Гух5 Тйг Гуз Рго Суз б01и 010 б1п Туг Азп бег Тпг 325 339 335
Туг Аге Суб Маї бег Маї Ге Тпг Маї Гей Ні біп Ар Тер Гей Азп 340 345 359 с1у Гуз бІи Туг Гуз Суб Гуз Маї бег Азп Гуз АІа Гецй Рго АІа Рго 355 зва 365
Іе 01 Гу5 Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу5 с1у б1п Рго Аг» б1и Рго біп 379 375 389
Мма1ї! Туг Тиг Гец Рго Рго 5ег Аг» біи біи Мет Тйг Гуз Азп сп Маї 385 399 395 4ев б5ег Ге Тиг Суз Ге Ма! Гуз о1у Рпе Туг Рго 5ег Азр ІІе А1а Маї 405 416 415 бІ1и Тер бІ1и бег Азп б01у біп Рго бТ1и Абзп Азп Тугс Гуз Тс Тег Рего 420 425 430
Рго Маї Ге Азр бег Азр о1у бег Ре Рпе Гей Туг бег Гуз Гей Тиг 435 дда 445
Мма1 Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п б1у Ахп Ма! Рпе 5ег Су 5ег Маї 450 455 460
Меє Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ніх Туг Тиг біп Гуз 5ег Геи бег Ге 465 470 475 480 б5ег Рго о1у Гуз «2105 32 «211» 486 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
Зо «4005 32
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 60
Ні Азп АТа Гуз Тийг Гуз Рго Суз 010 01 бІп Туг Азп бег Тиг Туг 65 78 75 ва
Аге Суз Ма! бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні5 біп Азр Тер Гей Азп с1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АТа Гу о1у б1п Рго Аг» б1и Рго біп Маї 115 1208 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 1308 135 140
Їеч Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго б5ег Азр І1е АІїа Ма! си 145 1509 155 160
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 165 176 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Ре Ге Туг бег Гуз Ге Тиг Маї 188 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ніх бі Аїа Гей Ні Абхп Ніх Туг Тйг б1іп Гу5 бег Гецч 5ег Гецй 5ег 2168 215 229
Рго сб1у сб1у с01у о1у бег о01у сі1у о1у сб1у бег б1у о01у ос1у су 5ег
Зо 225 230 235 240 с1у с1у с1у о1у 5ег ос01у сб1у о1у сб1у бег сб1у с1у сб1у о1у 5ег А5р 245 258 255
Гуз Те Ні Тс Су Рго Рго Су Рго АТа Рго сб1и Геи Гей о1у о1у 260 265 279
Рго бег Маї Ре Ге Ре Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Гей Мет Пе 275 2808 285 б5ег Аге Тпг о Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні би 2908 295 309
Азр Рго бї1и Маї Гу5 Рпе Азп Тгр Туг Ма! Азр сІ1у Маї оїи Маї Ні 305 319 315 329
Азп АТїа Гу Тийг Гу Рго Суз б1и бій біп Туг Азп 5ег Тиг Туг Аге 325 339 335
Суз Маї бег Ма! Ге Тиг Маї Геу Ні бІ1п Ар Тер Геи Ап Оо1у Гуз 340 345 359 бІи Туг Гуз Суз Гуз Маї 5ег Ап Гуз АТа Гец Рго Аїа Рго Пе с1и 355 зво 365
Гуз Тс ІІе 5ег Гуз АТа Гу 01у б1п Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг 379 375 380
Тис Сей Рго Рго 5ег Аг» біи біи Мет Тийг Гуз Азп б1п Маї 5ег Гец 385 390 395 4ев
Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 5ег Азр Іе АІа Маї со1їи Тер 485 416 415 бІ1и бег Ап б1у б1п Рго 01 Абоп Азп Тугсб Гуз Тс Тс Рго Рго Маї 420 425 430
Ге Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Рпе Гей Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Ар 435 дда 445
Гуз 5ег Ага Тер біп біп б01у Азп Ма! Рпе бег Суб5 бег Маї Меє Ні 450 455 460
Зо бі АТа Гей Ні Азп Ніх Туг Тиг біп Гу5 5ег Гей бег Гец 5ег Рго 465 470 475 4808 «2105 33 «2115 725 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 33 б1іп Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Ге Ма! Гуз Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе б5ег Ар Туг 20 25 30
Туг Меє Тиг Тер І1е Аг» біп А1а Рго о1у Гух5 о1у Гец о1и Тер Ге 35 4 45 б5ег Туг Іе 5ег бег 5ег б1у бег Тпг І1е Туг Туг А1а Азр 5ег Маї! 58 55 ва
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аг Ар Азп АТа Гу5 Азп бег Гей Ре 65 70 75 80 ей б1п Меє Азп бег Ге Аге А1ї1а бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
А1а Аг А5р Агв Абп бег Ні Рпе Азр Туг Тгр б1у б1п с1у Тиг Гец 188 185 116
Ммаї Тиг Маї бег бег б1у с01у сб1у с01у 5ег сб1у с1у с1у о1у б5ег О1у 115 1208 125 со1у о1у сб1у бег Азр ІІе біп Меї Тиг б1іп бег Рго бег 5ег Ма1! 5ег 1308 135 140
А1а бег Маї о1у Ар Аге Ма! Тпг І1е Тиг Су5 Аге А1а 5ег сІп О1Уу 145 158 155 160
І1е Азхп Тйг Тер Гей Аїа Тер Туг б1п б1п Гух5 Рго су Гу5 АІа Рго 165 176 175
Гуз Ге Ге І1е Туг с01у ДАіа бег с1у Ге б1п 5ег с1у Маї Рго 5ег
Зо 1809 185 199
Аге Рпе бег 01у бег б1у 5ег с1у Тпг Ар Ре ТПг Ге Тпг Пе 5ег 195 290 295 б5ег Ге біп Рго бій Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Су5 бІп б1іп Аа Гуз 2168 215 229 б5ег Рпе Рго Аг» Тпг Ріпе б1у біп сб1у Тйг Гу5х Маї б1и Іе Гу 5ег 225 230 235 240 с1у о01у с1у с1у 5ег біи Ма! біп Ге Маї б1и 5ег с1у о1у о1у Гец 245 258 255
Ммаї біп Рго сб1у о1у бег їеи їуз Гей 5ег Суз Аїа ДАіа бег с1у Рпе 260 265 279
Те Рпе Азп Гу Туг АТа Меї Азп Тер Маї Аг» біп АТа Рго с1у Гуз 275 2808 285 о1у Ге бі Тер Ма! Аї1а Аг» І1е Аге 5ег Гуз Туг Азп Азп Туг А1ІТа 2908 295 309
Те Тус Туг АТїа Ар бег Маї Гуз Азр Аг» Рпе Тиг І1е 5ег Аге А5р 395 316 315 329
Азр бег Гуз Азп ТиИг Аїа Туг Ге б1іп Меї Ап Азп Ге Гуз Тиг си 325 339 335
Азр Тс АТа Маї Туг Туг Суб Маї Аг» Ні5 б1у Азп Рпе о1у Азп 5ег 340 345 359
Туг І1е б5ег Туг Тгр Аїа Туг Тер б1у б1п сб1у Тиг Ге Ма! Тиг Маї 355 зво 365 б5ег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у о1у с1у о1у б5ег о1у с1у о1у о1у 3708 375 389 б5ег біп Тиг Ма! Маї Тис б1п 01 Рго 5ег Ге Тиг Ма! бег Рго о1у 385 399 395 4ев с1у Тиг Маї Тис Ге Тис Суз о1у бег 5ег Тпг с1у А1а Маї Тиг 5ег 405 416 415
Зо б1у Ахп Туг Рго Азп Тер Маї біп б1іп Гу5 Рго о01у б1іп АІа Рго Аге 420 425 430 с1у Ге І1е с1у с1у Тпйг Гу5 Ре Ге А1а Рго о1у Тиг Рго АІа Аге 435 дда 445
Рпе бег с1у бег Гец Їїеи о1у с1у Гу5 АІ1а АТа Ге Тиг Ге 5ег о1у 4506 455 460
Ммаї біп Рго 01 Азр 01 Аїа б1и Туг Туг Суз Ма! Ге Тер Туг бег 465 470 475 480
Азп Аг Тер Ма! Рпе с1у с1у с1у Тпг Гу5 Ге Тйг Маї Гей с1у с1Уу 485 490 495 с1у о01у Азр Гуз Те Ні Тс Суб Рго Рго Су Рго АІа Рго с1и Гец 580 505 518
Їец бІ1у ос1у Рго бег Ма1! Рпе Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тпг 515 528 525 еи Меє ІТ1е бег Аг» Тиг Рго біи Ма! Тийг Суб5х Маї Маї Маї Ар Маї 539 535 540 б5ег Ні бІТи Азр Рго б01и Маї ух Рпе Азп Тгр Туг Маї Азр о1у Маї 545 559 555 569 бІіи Маї Ні5 Азп АТа Гу Тиг Гуз Рго Суз бІ1и 010 бІ1п Туг о1у 5ег 565 579 575
Те Туг Аг Суб Маї бег Маї Гей Тиг Маї Гец Ні5 біп Ар Тер Ге 589 585 599
Азп б1у Гу5 бІи Туг Гуз Суз Гу5 Ма! бег Ахп Гуз А1Іа Гей Рго АІа 595 6о0 605
Рго І1е 01 Гу5 Тиг І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аге сІи Рго 618 615 620 біп Маї Туг Тс Гей Рго Рго б5ег Аге Гуз бІи Меє Тиг Гу Азп б1п 625 630 635 640
Уаї бег Ге Тпг Су5з Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІа 645 6509 655
Зо
Ммаї бій Тер 010 бег Азп б1у бІп Рго 01 Ап Азп Тугс Гуз Те Твг 6в6О 665 679
Рго Рго Маї Ге Гу 5ег Азр с1у бег Ре Рпе Гей Туг 5ег Гу Гец 675 680 685
Те Маї Азр Гуз б5ег Аге Тгр біп б1п б1у Ап Маї Рпе 5ег Су 5ег 690 695 700
Ммаї Меє Ні5 б1и АТа Ге Ні Азп Ні Туг Тпг б1п Гуз бег Гец 5ег 785 718 715 728
Геч 5ег Рго с1у Гуз 725 «2105 34 «2115 227 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 34
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Ге Гей о1у 1 5 16 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 29 25 36
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тйг Сух Маї Маї Маї Азр Маї! 5ег Ні 35 40 45 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 58 55 60
Ні Азп АТа Гуз Тиг Гуз Рго Суз бТ1и 01 бІ1п Туг о1у 5ег Тиг Туг 65 70 75 80
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Гуз бІи Туг Гуз Суз Гуз Маї 5ег Азп Гуз АТа Геи Рго АІа Рго І1е 166 185 116
Зо бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 1208 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІіа Ма! си 145 158 155 160
Тер бІи бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Туг Азр Те ТвВгс Рго Рего 165 176 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Ре Рпе Ге Туг б5ег Азр Гей Тиг Маї 188 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 216 215 229
Рго о1у Гуз 225
«2105 35 «2115 1891 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 35 б1іп Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Ге Ма! Гуз Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе б5ег Ар Туг 20
Туг Меє Тиг Тер І1е Аг» біп А1а Рго о1у Гух5 о1у Гец о1и Тер Ге 4 45 25 б5ег Туг І1е 5ег б5ег бег б1у бег Тйг І1е Туг Туг АІТа Ар 5ег Ма1! 58 55 ва
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аг Ар Азп АТа Гу5 Азп бег Гей Ре
Зо 65 78 75 80 ей б1п Меє Азп бег Ге Аге А1ї1а бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95 35
А1а Аг А5р Агв Абп бег Ні Рпе Азр Туг Тгр б1у б1п с1у Тиг Гец 188 185 118
Ммаї Тиг Маї бег бег б1у с01у сб1у с01у 5ег сб1у с1у с1у о1у б5ег О1у 115 129 125 с1у с01у сб1у 5ег Азр І1е біп Меї Тиг б1п 5ег Рго 5ег 5ег Маї 5ег 138 135 140
А1а бег Маї о1у Ар Аге Ма! Тпг І1е Тиг Су5 Аге А1а 5ег сІп О1Уу 145 1509 155 160
Те Азп Тиг Тер Ге АТа Тер Туг сп б1п Гу Рго с1у Гуз Аа Рго 165 178 175
Гуз Ге Ге І1е Туг с01у ДАіа бег с1у Ге бІ1п 5ег с1у Маї Рго бег 1809 185 199
Аге Рпе бег 01у бег б1у 5ег с1у Тпг Ар Ре ТПг Ге Тг Пе 5ег 195 290 295 б5ег Ге біп Рго бій Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Су5 бІп біп А1а Гуз 2168 215 229 б5ег Рпе Рго Аг» Тпг Ріпе б1у біп сб1у Тпйг Гу5 Маї б1и Іе Гу 5ег 225 230 235 240 со1у о1у б1у о1у 5ег бІ1и Маї б1п Ге Маї сб1и бег с1у с1у (у Геи 245 2509 255
Ммаї біп Рго сб1у о1у бег їеи уз Гей 5ег Суз Аїа ДАіа 5ег с1у Ре 260 265 279
Те Рпе Азп Гу Туг АТа Меї Азп Тер Маї Аг» біп АТа Рго Оо1у Гуз 275 2808 285
Оо1у Ге бі Тер Ма! Аї1а Аг» І1е Аге бег Гуз Туг Азп Азп Туг АІа 2908 295 309
Зо Те Туєс Туг АТїа Ар бег Маї Гуз Азр Аг» Рпе Тиг І1е 5ег Аге Ар 395 316 315 329
Азр бег Гуз Азп Тпг АТїа Туг Гей б1п Меї Ап Ап Гец Гуз Тиг о 325 330 335
Азр Тс АТа Маї Туг Туг Суз Ма! Аг» Ні5 о01у Азп Рпе с1у Азп 5ег 340 345 359
Туг І1е бег Туг Тер Аїа Туг Тгр 01у бІп о01у ТПг Гей Маї Тиг Маї 355 зва 365 б5ег 5ег сб1у с1у сб1у с1у бег о01у сб1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 3708 375 389 б5ег біп Тпг Маї Маї Тиг біп бій Рго бег Гей Тиг Маї б5ег Рго с1у 385 399 395 4ев о1у Тиг Маї Тиг Ге Тиг о Суз с1у бег бег Тиг с01у АТа Маї Тиг 5ег 485 416 415 б1у Ахп Туг Рго Азп Тер Маї біп б1іп Гу5 Рго о01у б1іп АІа Рго Аге 420 425 430 с1у Ге І1е с1у с1у Тпйг Гу5 Ре Ге А1а Рго о1у Тиг Рго АІа Аге 435 44о 445
Рпе бег с1у бег Гец Їїеи о1у с1у Гу5 АІ1а АТа Ге Тиг Ге 5ег о1у 4506 455 460
Ммаї біп Рго 01 Азр 01 Аїа б1и Туг Туг Суз Ма! Ге Тер Туг бег 465 470 475 480
Азп Аг Тер Ма! Рпе с1у с1у с1у Тпг Гу5 Ге Тйг Маї Гей Рго о1у 485 490 495 с1у Ар сб1у 5ег Азр АІ1а Ні Гу5 бег б1и Маї Аїа Ні5 Аге Ріе Гу 589 5095 518
Азр Ге с1у б1и обТи Азп Ре Гуз АІіа Ге Маї Ге І1е Аіїа Рпе Аа 515 529 525 б1іп Туг Гей б1п б1п Су5х Рго Ре бІ1и Азр Ні Маї Гуз Ге Маї Азп 539 535 540
Зо бІи Маї Тпг оТи Рпе АТа Гу Тиг Сух Маї АТїа Азр оби 5ег АІа с1и 545 550 555 560
Абзп о Субз Ар Гу бег Гей Ні Тпг Ге Ріпе о1у Азр Гуз Гей Суб Тиг 565 5708 575
Мма1ї! Аїа Тиг Ге Аг» бі Тйг Туг б1у б1и Меї А1а Ар Сух Су АІа 589 585 599
Гуз б1п бій Рго бій Аге Азп бій Сух Рпе Гей біп Ні Гуз Ар Азр 595 ве 605
Абзп о Рго Азп Гец Рго Аге Гей Ма! Аг» Рго бі Ма! Азр Маї Мей Су 618 615 620
Тиг АТа Ре Ні Ар Ап б1и б1и Те Рпе Ге Гуз Гуз Туг Геи Туг 625 630 635 640 бій ІІе АТїа Аг» Аге Ні Рго Туг Рпе Туг А1Т1а Рго б1и Гец Гец РПе 645 659 655
Рпе АТа Гу5 Аге Туг Гуз А1ї1а Аїа Рпе Тиг 01 Су Су5 б1п Аїа А1Та
66О 665 670
Азр Гуз АТа АТа Су5 Гей Гей Рго Гу Гецч Ар б1и Гей Аге А5р би 675 680 685 с1у Гу5 А1ї1а 5ег 5ег Аїа Гу5 біп Аге Гей Гуз Су5 АІа 5ег Гецч біІп 690 695 700
Гуз Рпе о01у бій Аг» АТа Ріпе Гуз А1а Тер А1а Маї АІа Аге Геци 5ег 705 716 715 729 бІіп Агсе Рпе Рго Гуз Аї1а біи Ріе Аїа б1и Маї 5ег Гу Гец Ма1ї! Тиг 725 730 735
Азр Гей Тиг Гуз Маї Ніх Тпг с1и Сух5 Суб Ні с1у Ар Гей Гецй би 740 745 7506
Суз А1Та Ар Ар Аг» АТа Ар Гей АТа Гу Туг Те Су5 би Азп сб1п 755 760 765
Азр бег І1е бег бег Їуз їей Гуз оби Суз Суз си Гуз Рго Геи Ге 779 775 780
Зо бІ1и Гуз бег Ні5 Сух ІІе АТа бІи Маї обоТ1и Ап Азр об1и Меї Рго АІа 785 798 795 зе
Азр Гей Рго бег Гей Аіа Аїа Азр Рпе Маї б1и б5ег Гуз Азр Маї Су 805 810 815
Гуз Азп Туг АТїа бій АТа Гуз Азр Ма! Рпе Ге ос1у Меє РПе Геци Туг 820 825 830 бі Туг А1ї1а Аг Аге Ні Рго Ар Туг 5ег Маї Маї Гецй Гецй Геи Аге 835 840 845
Ге АТїа Гуз Тиг Туг сТи Тиг Тис Гей си Гуз Суз Су5 АїІа АІа А1а 859 855 860
Азр Рго Ні5 б1и Су Туг Аїа Гуз Маї Рпе Ар сТ1и РПпе Гу Рго Ге 865 870 875 880 маї оТїи 01 Рго б1п Ахп Ге ІІе Гу5 бІп Азп Су5 01 Гей Ре оси 885 890 895 біп Ге б1у бі Туг Гу5 Рпе біп Ахп А1ї1а Гей Ге Маї Аг» Туг Тиг 980 985 910
Гуз Гуз Маї Рго біп Ма! бег Тйг Рго Тиг Гей Маї 01 Маї бег Аге 915 920 925
А5п Ге с1у Гуз Маї о1у бег Гуз Су5 Суз Гу5 Ні Рго си Аа Гу 930 935 940
Аге Ме Рго Су5 АТїа бій Азр Туг Гей бег Маї Маї Гей Ап сп Гец 945 950 955 960
Суз Маї Ге Ні5 бій Гу Тийг Рго Маї 5ег Ар Аге Ма! Тиг Гуз Сув 965 970 975
Су Тис бій 5ег Ге Маї Ап Аге Аге Рго Су5 Ре 5ег АІа Гей си 9808 985 990
Мма1 Азр бі Тийг о Туг Маї Рго Гуз бі Рпе Ахп А1а бій Тег Ре Тиг 995 16868 1885
Рпе Ні5 АТїа Ар І1е Су5х Тйг о Їеци б5ег бі Гуз 610 Аге бІп Пе
Зо 1016 1015 19820
Гуз Гуз біп Тиг Аїа Ге Ма! Ти Ге Маї Гу5 Ні5 Гуз Рго Гуз 1825 1830 1835
А1Т1а Тйг о Гуз 01 біп Ге Гуз АТа Маї Меї Азр Азр Ріе А1а А1Та 16840 1845 18509
Рпе Маї си Гуз Суз Суз Гуз АТа Ар Азр Гуз б1и Тиг Суз Ре 1855 1660 1865
А1ї1а бій Ти о1у Гуз Гуз Ге Маї Аїа А1їа бег б1п Аа діа гей 1876 1875 1689
Оо1у Ге Ні Ні Ні Ні Ні Ні 1885 1890 «2105 36 «2115 571 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
«4005 36 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Ге Гуз Ге бег Суз Діа Аїа бег с1у Рпе Тиг Ріпе Азп Гуз Туг 29 25 36
А1їа Меє Ахп Тер Маї Аге б1п Аїа Рго о1у Гу5 с1у Гей с1и Тер Маї! 35 40 45
А1а Аге І1е Аге бег Гуз Туг Азп Азп Туг Аїа Тйг Тусб Тугс Аа Азр 50 55 60 б5ег Маї Гуз Ар Аг» Ре Тиг І1е 5ег Аге Ар Ар бег Гуз Азп ТАг 65 70 75 80
А1Т1а Туг Ге б1іп Мет Ап Ап Гей Гуз Тйг бі Азр ТВг Аа Маї Туг 85 90 95
Туг Суз Ма! Аг» Ні5 б1у Ахп Ре б1у Азп 5ег Туг І1е бег Туг Тер 166 185 116
Зо
А1а Туг Тер о01у б1п о1у Тийг Гей Маї Тиг Маї бег 5ег о1у о1у а1Уу 115 1208 125 о1у бег б1у о1у с1у о1у бег 5ег Туг бІи Ге Тпг бІп Рго Рго 5ег 1308 135 140
Уа1ї! б5ег Маї бег Рго б1у б1п Тпг А1їа бег І1е Тйг Суб 5ег о1у А5р 145 158 155 160
Аге Ге о01у бІи Гу Туг Тс б5ег Тер Туг біп б1п Аге Рго с1у бІп 165 178 175 б5ег Рго Гей Ге Ма! Те Туг біп Азр Тпг Гу Аге Рго бег О01у І1е 188 185 199
Рго бій Аге Ре бег б1у б5ег Абп бег б1у Азхп Тйг А1Та ТПг Гей Тиг 195 290 295
Іе 5ег бІ1у Тиг б1п АТа Мет А5р сб1и АТа Азр Туг Туг Суз б1п А1а 2168 215 229
Тер 610 бег б5ег Тйг Ма! Маї Рпе сб1у с1у с1у Тиг Гуз Гей Тиг Маї 225 230 235 240
Гей Аїа бег Тйг Гуз о1у Рго бег Ма! Ре Рго Гец АІТа Рго 5ег 5ег 245 258 255
Гуз 5ег Тиг 5ег б1у с1у Тпг А1а ДАІа Ге с1у Су5 Ге Маї Гуз Аз5р 260 265 279
Туг Рпе Рго 01 Рго Ма! Тийг Маї бег Тер Азп 5ег с1у Аа Геи Тиг 275 2808 285 б5ег б1у Маї Ніх Тийг Рпе Рго Аїа Ма! Ге бІп 5ег б5ег О1у Геи Туг 2908 295 309 б5ег Ге бег 5ег Ма! Маї Тиг Маї Рго 5ег бег 5ег їеу о1у Тиг бІп 395 316 315 329
Те Туг ІІе Суб Абзп Маї Ап Ні Гуз Рго бег Азп Тиг Гу Ма1! Азр 325 339 335
Гуз Гуз Маї бІТи Рго Гуз бег Суз Ар Гуз Тпг Ні Тпг Су Рго Рго
Зо 340 345 359
Суз Рго Аїа Рго бій Ге еп с01у б1у Рго бег Маї Рпе Гей Рпе Рго 355 зва 365
Рго Гуз Рго Гуз Азр Тйг Гей Меє ІТ1е бег Аге Тйг Рго бІи Маї Тиг 3708 375 389
Суз Маї Маї Маї Азр Маї бег Ніх бІи Азр Рго бі Маї Гуз Ре Ап 385 399 395 4ев
Тер Туг Маї Азр с1у Маї бІ1и Маї Ні5 Ахп Аїа Гу5 Тиг Гу Рго Сув 405 416 415 бі бі б1п Тугс б1у б5ег Тйг о Туг Аге Су Маї б5ег Маї Гец Тиг Маї 420 425 430
Ге Ні біп Азр Тер Ге Азп о1у Гуз 01 Туг Гуз Суз Гуз Маї бег 435 44о 445
А5п Гуз А1а Гей Рго Аіа Рго І1е си ух Тиг І1е бег Гуз Аа Гу 4506 455 460 с1у б1п Рго Аге бій Рго біп Маї! Туг Тйг Гей Рго Рго 5ег Аге б1и 465 470 475 4808 бІи Меє Тийг о Гуз Азп біп Маї бег Ге Тйг Сух Ге Маї Гуз с1у Ре 485 499 495
Туг Рго бег Азр ІІе Аїа Маї б1и Тер б1іи 5ег Азхп о01у біп Рго си 589 595 518
Азп Абзп о Туг Азр Тс Те Ргсо Рго Маї Ге Азр 5ег Азр о1у 5ег Ре 515 528 525
Рпе Гей Туг бег Ар Гей ТПг Маї Азр Гуз 5ег Аге Тгр б1п с1п о1у 5308 535 5409
А5п Ма! Рпе бег Суб бег Ма! Мет Ні5 01 ДАІа Ге Ні Ап Ні Туг 545 559 555 569
Тиг б1п Гуз 5ег Геу 5ег Ге бег Рго о1у Гуз 565 579
Зо «2105 37 «2115 577 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 37 біп Маї б1п Ге Ма! б1и б5ег сб1у о01у с1у Ма! Ма! б1п Рго о1у о1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тиг Ріпе 5ег 5ег Туг 20 25 36 с1у Меї Ні Тер Маї Аг» б1іп АІїа Рго с1у ух о1у Геци би Тер Маї 35 4 45
А1а Рпе І1їе Тер Туг бІи о1у бег А5п Гуз Туг Туг Аїа бІи б5ег Маї 58 55 ва
Гуз Азр Аге Рпе Тпг І1е бег Аг Ар Ап бег Гуз Азп Тиг Гей Туг 65 78 75 ва
Гей б1п Меє Ахп бег Ге Аге Аї1а бій Азр Тиг АТа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аге Аге АТа б01у І1е І1е с1у Тпг І1е о01у Туг Туг Туг с1у Мей 166 185 116
Азр Ма! Тер с1у бІп сб1у Тийг Тйге Маї Тис Маї 5ег б5ег о1у ос1у О1Уу 115 129 125 со1у бег б1у о1у с1у о01у б5ег біп Тиг Маї Маї Тиг бІп со1и Рго 5ег 1308 135 140
Їеч Тйг Маї 5ег Рго с1у б1у Тиг Маї Тиг Ге Тиг Суз о1у 5ег 5бег 145 158 155 160
Тиг б1у АТа Маї Тийг б5ег б1у Азп Туг Рго Азп Тер Маї біп сп Гуз 165 176 175
Рго б1у біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у ТПг Гу Рпе Геи Аа 188 185 199
Рго б1у Тийг Рго АТа Аге Рпе б5ег о1у бег Гец Гей с1у с1у Гу АІа
Зо 195 290 295
А1а Гей Типг Ге бег б1у Маї обо1п Рго с1и Азр с01и АІа с1и Туг Туг 2168 215 229
Суз Маї Гей Тер Туг бег Ап Аге Тгр Ма! Рпе б1у о1у о1у Тиг Гуз 225 230 235 240
Їеч Тпйг Маї Ге о1у сб1п Рго Гуз АІа Аїа Рго 5ег Маї Тиг Гей Ре 245 258 255
Рго Рго бег бег біч б1и Гей біп А1ї1а Ахп Гу5 А1ї1а ТПг Геи Маї Су 260 265 279
Їеч І1е 5ег Азр Ре Туг Рго с1у Аїа Ма! Тиг Ма! Аа Тер Гуз А1а 275 2808 285
Азр бег 5ег Рго Ма! Гуз Аїа с1у Ма! бІи Тийг Тег Тйг Рго 5ег Гу 2908 295 309 б1п бег Ап Азп Гуз Туг Аїа Аїа бег 5ег Туг Гец бег Гец Тиг Рго 395 316 315 329 бі біп Тер губ б5ег Ні Аг 5ег Туг 5ег Су біп Ма! Тиг Ні б1и 325 339 335 о1у бег Тпг Маї сб1и ух Тиг Маї АТа Рго Тиг си Су5 5ег Ар Гуз 340 345 359
Те Ні Тс Суб Рго Рго Суб Рго А1а Рго біи Ге Ге о1у о1у Рго 355 зва 365 б5ег Маї Ре Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг їеу Меї І1е 5ег 379 375 389
Аге Тс о Рго бі Маї Тйг Су Ма! Маї Маї Ар Маї 5ег Ні си дА5р 385 399 395 4ев
Рго бІ1и Маї Гуз Ре Азп Тгр Туг Ма! Азр оІу Ма! о1и Маї Ні Автп 405 416 415
А1їа Гу5 Тиг Гу Рго Суз бі б1и біп Туг о01у 5ег Тиг Туг Аге Су 420 425 430
Зо Уаї! 5ег Маї Ге Тиг Маї Ге Ні5 б1іп Ар Тер Гей Азп с1у Гу би 435 44о 445
Туг Гуз Суз Гуз Маї 5ег Ап Гуз АІа Гец Рго АІїа Рго Іе си Гуз 450 455 460
Тис І1е 5ег Гуз АТа Гух о1у б1іп Рго Аг» біи Рго біп Маї Туг ТАпг 465 470 475 480
Гей Рго Рго бег Аг Гуз бі Меє Тйг Гуз Азп біп Маї бег Геи Тпг 485 490 495
Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е Аїа Маї оЇи Тер си 580 505 518 б5ег Азп б1у біп Рго бі Ап Ап Туг Губ5 Тс Тс Рго Рго Маї Ге 515 529 525
Гуз бег Азр б01у бег Ре Рпе Ге Туг б5ег Гуз Ге ТПг Маї Авр Гуз 5308 535 540 б5ег Аге Тгр біп біп б01у Ахп Ма! Рпе бег Суб5 бег Маї Мет Ні би 545 550 555 560
А1а Гей Ні Ап Ні Туг Тиг бІп Гуз 5ег Ге 5ег Ге бег Рго о1у 565 579 575
Гуз «2105 38 «2115 732 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 38 б1іп Маї б1п Гей Маї бої б5ег с1у о1у ос1у Маї Маї! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тиг Ріпе 5ег 5ег Туг 20 25 30 с1у Меї Ні Тер Маї Аг» б1іп АІїа Рго с1у ух о1у Геци би Тер Маї
Зо 35 40 45
А1а Рпе І1їе Тер Туг бІи о1у бег Ап Гуз Туг Туг Аїа би 5ег Маї 58 55 ва
Гуз Азр Аге Рпе Тпг І1е бег Аг Ар Ап бег Гуз Азп Тиг Гей Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азп бег Ге Аге А1ї1а бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
А1а Аге Аге АТа б01у І1е І1е с1у Тпг І1е о01у Туг Туг Туг с1у Мей 188 185 118
Азр Ма! Тер с1у бІп сб1у Тийг Тйг Маї Тис Маї бег 5ег о1у ос1у с1у 115 129 125 о1у бег б1у о1у с1у с1у 5ег с1у с1у о0І1у с1у бег 5ег Туг оЇи Ге 138 135 140
Тиг о біп Рго Рго бег Ма! бег Ма! бег Рго б1у біп Тпг Аїа 5ег Пе 145 1509 155 160
Те Суз 5ег б1у Ар Аг Ге б1у бІи Гу5 Туг Тиг бег Тгр Туг бІп 165 176 175 бІіп Агсе Рго б1у б1п бег Рго еп Ге Ма! І1е Туг біп Азр Тиг Гуз 188 185 199
Аге Рго бег б1у І1е Рго 610 Аг» Рпе бег б01у 5ег Ап 5ег О1у Авп 195 290 295
Тиг АТа ТигоГеи Тс І1е бег с1у Тпг б1п Аїа Меї Азр с01и Аа Ар 216 215 229
Туг Туг Суз5 б1п ДАіа Тер 010 бег бег Тиг Ма! Маї Рпе о1у о1у о1У 225 230 235 240
Тиг Гуз Ге Типг Маї Ге бег с1у с1у с1у о1у б5ег о1и Маї б1п Ге 245 258 255
Ммаї бій 5ег б1у оІ1у с1у Гей Маї біп Рго с1у (1у бег ей уз Ге 260 265 279
Зо б5ег Су5х А1ї1а Аїа бег б1у Рпе Тпг Рпе Азп Гуз Туг А1ї1а Меє Азп Тер 275 2808 285
Мма1ї! Аг» біп АТа Рго с1у Гуз с1у Ге бі Тер Ма! А1а Аг Пе Аг; 298 295 309 б5ег Гуз Туг Азп Азп Туг АІїа Тиг Туг Туг АТїа Азр 5ег Маї Гуз Аз5р 395 316 315 329
Аге Рпе Тиг ІТе бег Аг Ар Ар б5ег Гу5 Ап Тг А1Іа Туг Гецй бІп 325 339 335
Мект Абп Азп Гей Гуз Тйг бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Суб Маї Аге 340 345 359
Ні с1у Азп Рпе б1у Ахп бег Туг І1е 5ег Туг Тгр АІїа Туг Тер с1у 355 зва 365 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 379 375 389 со1у о1у бег о01у с1у о0І1у с1у б5ег б1п Тпйг Маї Маї Тиг бІ1п си Рго 385 399 395 4ев б5ег Ге Тиг Маї бег Рго б1у с1у Тпг Маї Тйг Ге Тйг Суз о1у бег 405 416 415 б5ег Тпг о1у Аїа Маї Тпг бег о1у Ап Туг Рго Азхп Тгр Маї бІп сп 420 425 430
Гуз Рго б1у біп Аїа Рго Аге б1у Гей І1е с1у о01у Тиг Гу5 Ріе Ге 435 44о 445
А1а Рго б01у Тиг Рго А1а Аге Рпе бег 01у бег Гей Гей с1у су Гу 4506 455 460
А1а А1а Ге Тпг Гей б5ег с0І1у Маї б1іп Рго си Азхр си Аа с1и Туг 465 470 475 480
Туг Суз Маї Гей Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Ре о1у о1у о1у Тиг 485 490 495
Гуз Ге Тиг Маї Ге с1у с1у с1у с1у Азр Гуз Тиг Ні Тиг Су Рго 580 505 518
Зо
Рго Су Рго Аїа Рго бІи Гей Ге с01у сб1у Рго бег Ма1ї! Ріе Гей Ріе 515 529 525
Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тг Гец Меє І1е бег Аге Тиг Рго сІи Маї 539 535 540
Тиг Суз Маї Маї Маї Азр Маї бег Ні с01и Ар Рго бІи Маї Гуз Рпе 545 559 555 560
Азп Тер Туг Маї Азр сб1у Маї оби Маї Ні5 Ап АТа Гу Тиг Гуз Рго 565 5708 575
Суз бі бій біп Туг о01у бег Тйг Туг Аге Суб Маї бег Маї Ге Тиг 5808 585 599
Ммаї Гец Ніх бІ1п Азр Тгр Гей Азп с1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 595 ве 605 б5ег Азп Гуз АТ1а Гей Рго АТїа Рго І1е бій Гух5 Тиг І1е 5ег Гуз А1Та 618 615 620
Гуз б1у біп Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тиг Геи Рго Рго 5ег Аге
625 630 635 640
Гуз бІи Межє Тиг Гуз Азп б1п Ма! бег Ге Типг Су Ге Маї Гуз о1У 645 6509 655
Рпе Туг Рго бег Азр ІІе Аїа Ма! о1и Тер об01и бег Азп о1у сбІп Рго 6в6О 665 679 бІ1и Ап Абп Тубсб Гуз Тис Тс Рго Рго Маї Ге Гуз б5ег Азр о1у бег 675 680 685
Рпе Рпе Ге Туг бег Гуз Гей Тиг Маї Ар Гуз 5ег Аге Тгр б1п б1п 690 695 788 б1у Ахп Ма! Рпе 5ег Суб бег Ма1ї Меї Ні5 бій АІТа Гей Ні Ап Ні 785 718 715 728
Туг Тпг бІп Гу5 бег Геу бег Гецу 5ег Рго а1у Гу 725 730 «2105 39 «2115 227
Зо «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 39
Азр Гуз Тайг Ні Тс Суз Рго Рго Су Рго АІа Рго си Гей Геи о1у 1 5 18 15
Оо1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ріпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр ТПг Геи Мет 20 25 30
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 35 4 45 бі Ар Рго б1и Маї Гу5 Рпе Азхп Тгр Туг Ма! Азр о1у Маї си Маї 58 55 ва
Ні Азп АТа Гуз Тийг Гуз Рго Суз 010 б1и бІ1п Туг с1у бег Тиг Туг 65 78 75 80
Аге Суз Ма! бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ніх біп Азр Тер Гей Азп о1у 85 90 95
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 188 185 118 бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 115 129 125
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 138 135 140
Ге Тйг Сух Гец Маї Гуз о1у Ре Туг Рго бег Азр І1е А1а Маї си 145 1509 155 160
Тер бІи бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Туг Азр Те ТвВгс Рго Рего 165 178 175
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Ре Ге Туг бег Азр Ге Тиг Маї 1809 185 199
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 195 290 295
Зо
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ніх Туг Тиг б1п Гу бег Їеци б5ег Гей 5ег 216 215 220
Рго о1у Гу 225 «2105 40 «2115 736 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 40 б1іп Маї б1п Ге Маї б1п бег о1у АІ1а си МаїЇ Гуз Гуз Рго с1у о1и 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с1у Туг Тиг Рпе Тиг Азп Туг 20 25 30 с1у Меє Ап Тгр Ма! ух б1п Аїа Рго о01у б1п Су5х Ге б01и Тер Мет 35 4 45 о1у Тер І1е Азп Тиг Тубс Тс о1у оТи Рго Тиг Туг АТа Азр Гуз Рпе 50 55 60 біп б1у Аге Ма! Те Меє Тиг Тис А5р Тс б5ег Тс о бег Тис Аа Туг 65 70 75 80
Мет бі І1е Аг Азп Гей б1у с01у Ар Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аг Тер бег Тер 5ег Азр с1у Туг Туг Маї Туг Рпе Ар Туг Тер 188 185 116 со1у б1п б1у Тийг об5ег Ма! Тиг Маї бег бег о01у с1у о1у с1у 5ег о01у 115 1208 125 со1у о1у с1у бег с1у о01у с1у с1у бег Азр ІІе Ма! Ме Тиг сбІп 5ег 1308 135 140
Рго Азр бег Ге Тиг Маї 5ег Гец б1у бі Аге Тйг Тйг І1е Ап Су 145 158 155 160
Зо Гуз 5ег бег біп бег Маї Ге Азр бег бег ТИг Азп Гу Азп бег Ге 165 176 175
А1а Тер Туг бІп б1п Гу Рго со1у біп Рго Рго Гуз Ге Гей Геи бег 1809 185 199
Тер АТа 5ег Тпг Аг» бі бег б1у І1е Рго А5р Аге Рпе бег О1у 5ег 195 290 295 о1у бег б01у Тиг Азр Рпе Тийг Гей Тиг ІІе Ар бег Рго бІп Рго с1и 2168 215 229
Азр бег А1ї1а Тиг Туг Туг Суб бІп біп 5ег ДАІіа Ні5 Рпе Рго І1е Тиг 225 230 235 240
Рпе сб1у Суб5 о1у Тиг Аг Гей бій І1е Гу5 бег б1у б1у с1у с1у 5ег 245 258 255 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 260 265 279 б5ег Ге Гуз Ге бег Суз Діа Аїа бег с1у Рпе Тиг Рпе Азп Гуз Туг 275 2808 285
А1їа Меє Ахп Тер Маї Аге б1п Аїа Рго о1у Гу5 с1у Гей с1и Тер Маї! 2908 295 309
А1а Аге І1е Аге бег Гуз Туг Азп Азп Туг Аїа Тйг Туг Туг А1Та Ар 395 316 315 329 б5ег Маї Гуз Ар Аг» Ре Тиг І1е 5ег Аге Ар Ар бег Гуз Азп ТАг 325 339 335
А1ї1а Туг Ге біп Мет Ап Азп Гей Гу5 Тийг бі Азр Тйг А1Та Маї Туг 340 345 359
Туг Суз Ма! Аг» Ні5 б1у Ахп Ре б1у Азп 5ег Туг І1е бег Туг Тер 355 зво 365
А1а Туг Тер с1у бІп с1у Тийг Ге Маї Тиг Маї бег б5ег о1у ос1у О1Уу 3708 375 389 о1у бег б1у о1у с1у с1у 5ег с01у с1у о0І1у с1у бег біп ТПг Маї Маї 385 399 395 4ев
Зо
Тиг б1іп бТ1и Рго бег Ге Тйг Ма! бег Рго б1у с1у Тиг Маї Тег Ге 405 416 415
Те Суз с1у бег б5ег Тиг б1у Аїа Ма! Тйг б5ег 01у Ап Туг Рго Азп 420 425 430
Тер Ма! б1п б1п Гух5 Рго о01у біп А1а Рго Аге оО1у Ге І1е с1у о1у 435 дда 445
Те Гуз Рпе Ге АТа Рго б1у Тйг Рго Аї1а Аг» Ре бег Оо1у 5ег Геи 4506 455 460
Їеци сбІ1у о1у Гуз Аїа А1ї1а Геи Тпг Гей б5ег с0Т1у Ма! бІп Рго би Ар 465 470 475 480 бі АТа бій Туг Туг Су5 Маї Ге Тер Туг 5ег Азп Аг» Тер Ма1ї! Ріе 485 490 495 с1у о01у с1у Тис Гу5 Ге Тиг Маї Ге с01у с1у о1у о1у Ар Гу5 Тиг 580 505 518
Ні Тис Суб Рго Рго Суз Рго Аїа Рго сб1и Ге Ге б1у о1у Рго бег
515 529 525
Ма1 Рпе Гец Ре Рго Рго Гу Рго Гуз Азр ТИг Ге Меї І1е 5ег Аге 5308 535 540
Тиг о Рго бІТи Ма! Тйг Суз Маї Маї Ма1ї! Азр Ма1! 5ег Ні 01и Ар Рго 545 550 555 560 бІи Маї Гуз Ре Азп Тгр Туг Ма! Азр о1Іу Маї оТи Маї Ні Ап А1а 565 5708 575
Гуз Те Гуз Рго Сух бі бі біп Туг с1у бег Тиг Туг Аге Су Маї 5808 585 599 б5ег Маї Ге Тиг Маї Ге Ні б1іп Азр Тер Ге Азхп о1у Гу5 01и Туг 595 ве 605
Гуз Суз Гуз Маї бег Азп Гуз АТ1а Ге Рго АІа Рго І1е о0Їи Гуз Тиг 618 615 620
І1е бег Гуз А1ї1а Гуз о1у біп Рго Аге б1и Рго біп Ма! Туг Тиг Ге 625 630 635 640
Зо
Рго Рго бег Агв Гуз бІи Меє Тийг Гуз Азп біп Ма! 5ег Гей Тиг Су 645 659 655
Їеч Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго бег Азр І1е АІа Маї си Тер о1Їи 5ег 66О 665 670
Азп б1у біп Рго бі Азп Азп Туг Гу Тс Тс Рго Рго Маї Гецй Гу 675 680 685 б5ег Азр с1у 5ег Рпе Рпе Гей Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Авор Гуз 5бег 690 695 700
Аге Тер біп біп б1у Азп Ма! Рпе б5ег Суб5х бег Ма! Меє Ні си АТа 705 716 715 729
Їец Ні Азп Ні Туг Тпг б1п Гуз бег Геу бег Гец 5ег Рго Оо1у Гуз 725 730 735 «2105 А41 «2115 184 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«223» Синтетичний пептид «4005 41
МеєЄ Геи б1п Меє АТїа с01у б1іп Су5х бег біп Азп 01 Туг Ріе Азр 5ег 1 5 18 15
Гей Гей Ні5 Аїа Су5 І1е Рго Су5 б1п Гей Аг» Суб бег бег Азп ТАг 20 25 30
Рго Рго Ге Тийг Суб б1п Аге Туг Суб Азп Аїа 5ег Ма! Тпг Азп 5ег 35 4 45
Ммаї Гуз с1у Тпг Азп АІї1а ІІе Ге Тер Тийг Суз Гец О1у Гей 5ег Ге 58 55 60
І1е І1е 5ег Гей А1ї1а Ма! Рпе Маї Ге Меє Рпе Гей Гей Аг» Гуз Пе 65 78 75 ва
А5п бег 01 Рго Гей Гуз Азр 01 Рпе Гуз Азп Тиг с1у бег Оо1у Ге 85 90 95
Зо
Геи с1у Меє Аїа Ахп І1е Ар Гей бій Губ5 бег Аге Тиг о1у Азр со1и 188 185 118
І1е ІІе Гей Рго Аге б1у Гей бі Туг Тйг Маї бІи бІи Сух5 Тиг Су 115 129 125 бІ1и Ар Суз ІІе Гуз бег Гуз Рго Гуз Маї Азр бег Ар Ні Су Ре 138 135 140
Рго Гей Рго Аїа Меє бій б1и с1у Аїа Тпйг ІТе Ге Маї Тиг Тиг Гуз 145 1509 155 160
Тиг о Азп Азр Туг Суз Гуз бег Їеу Рго Аїа АІа Ге 5ег Аіа Тиг си 165 178 175
І1е 01 Гу5 5ег І1е 5ег АІа Аге 1809 «2105 842 «2115 54 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«223» Синтетичний пептид «4005 842
МеєЄ Геи б1п Меє АТїа с01у б1іп Су5х бег біп Азп 01 Туг Ріе Азр 5ег 1 5 18 15
Гей Гец Ніб5 Аїа Су5х І1е Рго Суб5 біп Ге Аге Суб 5ег бег Азп Тиг 20 25 30
Рго Рго Ге Тийг Суб б1п Аге Туг Суб Азп Аїа 5ег Ма! Тпг Азп 5ег 35 4 45
Ммаї Гуз с1у Тиг Ахзп АІа 58 «2105 43 «2115 183 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
Зо «4005 43
Меї Ге б1п Меє А1а Аг» біп Суб5х бег б1п Ап біи Туг Ре Ар 5ег 1 5 18 15
Гей Гей Ні Ар Суб Гу5 Рго Су б1п Гей Аг» Суб бег бег Тг Рго 20 25 30
Рго Ге Тиг Суб біп Аге Туг Суб Азп Аїа бег Меє ТПг Азп 5ег Маї 35 4 45
Гуз сб1у Меї Азп АІіа І1е Гей Тер Тиг Сузх Ге о1у Ге бег Ге Пе 58 55 ва
І1е б5ег Гей А1їа Ма! Рпе Маї Ге Тиг Рпе Гей Гей Аг» Гу Мет 5ег 65 78 75 ва б5ег бІи Рго Ге Гуз Азр бІи Рпе Гуз Азп Тпйг о1у 5ег О1у Геи Ге 85 90 95 с1у Меї А1ї1а Азхп І1е Ар Гей б1и Гу5 б1у Аге Тиг о1у Азр б1и Пе 188 185 118
Маї Гей Рго Аге б1у Ге бі Туг Тйг Маї 01 бій Сух Тйг Суб бІц 115 129 125
Азр Суб ІТе Гу5 Ап Гуз Рго Гу5 Ма! Ар бег Ар Ні Суб Рпе Рго 138 135 140
Ге Рго Аїа Меєї б1и б01и с01у А1їа Тпйг І1е Ге Маї Тег Тиг Гуз Тпг 145 1509 155 160
Азп Ар Туг Суб Азп бег їеи бег Аіа А1а Ге 5ег Ма! Тиг оїи Пе 165 178 175 бі ух 5ег І1е 5ег АІа Аге5 1809 «2105 44 «2115 53 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 44
Зо
Меї Ге б1п Меє А1а Аг» біп Су5 5ег б1п Азп бі Туг Рпе Ар 5ег 1 5 18 15
Гей Гей Ні Ар Суб Гу5 Рго Су б1п Гей Аг» Суб бег бег Тг Рго 20 25 30
Рго Ге Тийг Су бІп Аг» Туг Субз Азп А1ї1а бег Ме Тпг Азп бег Маї 35 4 45
Гуз с1у Меї Азп АІа 58 «2105 45 «2115 5 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 45
Азп Ні5 Те Пе Ні 1 5
«2105» 46 «2115 17 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 46
Туг ІІе Азп Рго Туг Рго б1у Туг Ні5 Аїа Туг Азхп бІи Гуз Рпе бІп 1 5 18 15 о1У «210» 47 «2115 12 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 47
Зо Азр б1у Туг Туг Аге Азр ТАйг Ар Маї Геи Ар Туг 1 5 18 «2105» 48 «2115 11 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 48 б1іп АТїа бег бІ1п Азр І1е 5ег Азп Туг Гецй Авп 1 5 18 «210» 49 «2115 7 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 849
Туг Те 5ег Ага Гец Ні ТЕиг 1 5
«2105 58 «2115 9 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 5,58 б1іп б1п с01у Азп Тс Гей Рго Тер Твг 1 5 «2105 51 «2115 121 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 51 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15
Зо б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с01у Туг Тиг Рпе Тиг Азп Ні 20 25 30
Іе Іе Ні Тер Маї Аг» біп Аїа Рго с1у б1п о1у Гей б1и Тер Меї 35 4 45 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АТа Туг Азп б1и Гуз Ре 58 55 ва біп с01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг обег Азр Тйг об5ег Тис обег Тис Маї Туг 65 78 75 ва
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Азр Туг Тер О1У 188 185 118 біп с01у Тс Гей Маї Тис Маї 5ег 5ег 115 129 «2105 52
«2115 187 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 52
Азр І1е біп Меї Тиг о б1іп 5ег Рго бег бег Гей 5ег А1а 5ег Маї о1у 1 5 18 15
Азр Аге Ма! Тиг ІТе Тпг Су б1п А1ї1а бег біп Азр І1е 5ег Ап Туг
Ге Азп Тер Туг бІп с1п Гуз Рго о1у Гуз Аа Рго Гуз Ге їеи Пе 4 45 20
Туг Туг Тс о б5ег Аге Ге Ні Тйг б1у Маї Рго бег Аге Ріе 5ег б1у 58 55 ва 25 б5ег б01у бег с1у Тиг Азр Рпе Типг Ріпе Тпг І1е 5ег бег Ге о1и Рго 65 78 75 ва
Зо бі Азр І1е А1їа Тпйг Тугс Тус Су5 біп б1п сб1у Азп Тис Гецй Рго Тер 85 90 95
Тиг Рпе о1у с1п о1у ТиИг Гуз Ге 01 Пе Гуз 35 188 185 «2105 53 «2115 243 «2125» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 53 б1іп Маї б1п Гей Маї б1п 5ег с1у АТа си Маї Гуз Гу5 Рго с1у Аа 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с01у Туг Тиг Рпе Тиг Азп Ні 20 25 30
Іе ІІе Ні Тер Маї Аг» біп Аїа Рго с1у б1п с1у Гей б1и Тер Меї 35 4 45 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АТа Туг Азп б1и Гуз Ре 58 55 ва біп с01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг обег Азр Тйг об5ег Тс о бег Тис Маї Туг 65 78 75 ва
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Ар Туг Тер О1У 188 185 118 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 129 125 с1у о1у бег с01у с1у с1у с1у бег Азр ІІе біп Меї Тиг біп 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су бІп 145 1509 155 160
А1а бег б1п А5зр ІІе б5ег Азп Туг Ге Азп Тгр Туг бІп бІп Гу Рго
Зо 165 178 175 с1у Гуз АТа Рго Гуз Гей Ге І1е Туг Туг Тг 5ег Аге Гец Ні ТЕиг 1809 185 199 с1у Маї Рго б5ег Аг» Рпе бег б1у 5ег б1у бег 01у Тиг Азр Ре Тиг 195 290 295
Рпе Тиг І1е бег бег Гец бІ1и Рго бІ1и Азр ІІе Аіїа Тиг Туг Туг Су 216 215 220 біп б1п б1у Азп Тс о Ге Рго Тер Тс Рпе с1у біп б1у ТПг Гу Гец 225 230 235 240 ої Пе Гуз «2105 54 «2115» 498 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
«4005 54 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с01у Туг Тиг Рпе Тиг Азп Ні 29 25 36
Іе Іе Ні Тер Маї Аг» біп Аїа Рго с1у б1п о1у Гей б1и Тер Меї 35 40 45 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АТа Туг Азп б1и Гуз Ре 50 55 60 біп с01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг обег Азр Тйг об5ег Тис обег Тис Маї Туг 65 70 75 80
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Азр Туг Тер О1У 166 185 116
Зо б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 1208 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго 1308 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су бІп 145 158 155 160
А1а бег б1п А5зр І1е бег Ап Туг Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гу Рго 165 178 175 с1у Гуз АТа Рго Гуз Гей Ге І1е Туг Туг Тг 5ег Аге Гец Ні ТЕиг 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тийг Азр Ре Тиг 195 290 295
Рпе Тиг І1е бег бег Гец бІ1и Рго бІ1и Азр ІІе Аіїа Тиг Туг Туг Су 2168 215 229 б1іп б1п б1у Азп Тс о Гей Рго Тер Тиг Рпе с1у бІп о1у ТПг Гуз Ге 225 230 235 240 бі І1е ух 5ег б1у б1у с1у с1у бег бі Ма! б1п Геци Маї о1и 5ег 245 258 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец їу5 Гец 5ег Су5 А1а 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа Ар бег Маї Гу Азр Аге Ре Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Суб Маї Аге Ні с1у Ап
Зо 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аї1а Туг Тер о1у сб1п с1у Тиг 355 зва 365
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у б1у ос1у су 5ег 3708 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 399 395 4ев
Мма1ї! 5ег Рго б1у б01у Тийг Маї Тс Ге Тиг Суз сб1у б5ег 5ег Тиг о1у 405 416 415
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 бІіп АТа Рго Аг» б1у Ге І1е б1у с1у Тпг Гу Ріе Ге А1а Рго о1у 435 44о 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге 4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго 01 Азр 01 Аїа бІи Туг Туг Су Маї1 465 470 475 4808
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 499 495
Уа1ї Гец «2105 555 «2115» 986 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 -ч55 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с01у Туг Тиг Рпе Тиг Азп Ні 20 25 30
Зо
Іе Іе Ні Тер Маї Аг» біп Аїа Рго с1у б1п о1у Гей б1и Тер Меї 4 45 35 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АТа Туг Азп б1и Гуз Ре 58 55 ва біп с01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг обег Азр Тйг об5ег Тис обег Тис Маї Туг 65 78 75 ва
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Азр Туг Тер О1У 188 185 118 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 129 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су бІп 145 158 155 160
А1а бег біп Азр І1е 5ег Азп Туг Гей Ап Тер Туг б1п сп Гу Рго 165 176 175 с1у Гуз АТа Рго Гуз Гей Ге І1е Туг Туг Тг 5ег Аге Гец Ні ТЕиг 1809 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тийг Азр Ре Тиг 195 290 295
Рпе Тиг І1е бег бег Гец бІ1и Рго бІ1и Азр ІІе Аіїа Тиг Туг Туг Су 2168 215 229 б1іп б1п б1у Азп Тс о Гей Рго Тер Тиг Рпе с1у бІп о1у ТПг Гуз Ге 225 230 235 240 бі І1е Гу5 5ег бі1у б1у с1у с1у бег б1и Маї б1п Гец Маї о1и 5ег 245 258 255 со1у о1у о1у Гей Маї бІп Рго с1у о1у бег Гей Гуз Їеци 5ег Су АІа
Зо 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гуз Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Гей б1п Меє Абп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні Оо1у Азп 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аїа Туг Тер о1у бІп о1у Тиг 355 зва 365
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 3708 375 389 со1у о1у с1у о1у 5ег б1п Тиг Маї Маї Тиг б1п оТи Рго бег Ге Тиг 385 399 395 4ев
Ммаї бег Рго б1у с01у Тпг Маї Тийг Гей Тийг Суз с1у бег бег Тиг О1Уу 405 416 415
А1ї1а Маї! Тиг бег 01у Азп Туг Рго Азп Тер Ма! б1п б1п Гу Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у Тйг Гу5 Ре Гец Аа Рго о1у 435 дда 445
Те Рго А1а Аг» Рпе бег с1у 5ег Гей Ге о1у с1у Гу Аа Аа Ге 4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бої Азр бі Аї1а б1и Туг Туг Суз Маї 465 470 475 480
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе б1у б1у с1у ТПг Гу Ге Тиг 485 490 495
Зо Ммаї! Гей с1у о01у о1у с1у Азр Гу5 Тпг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 580 505 518
А1а Рго с1и Гец Гей сб1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи Рпе Рго Рго Гу 515 528 525
Рго Гуз Ар Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго бій Ма! Тиг Су Маї 539 535 540
Ммаї Маї Азр Маї бег Ні5 бІи Азр Рго б01и Маї Гу Рпе Азп Тгр Туг 545 550 555 560
Ммаї Азр с1у Маї оТи Маї Ніх5 Азп АІіа Гуз Тпг Гуз Рго Су5 ої си 565 5708 575 біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 5808 585 599 бІіп Ар Тер Гей Азп о1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 5ег Ап Гуз 595 6о0 605
А1а Гей Рго АІа Рго І1Іе б1и їу5 Типг І1е бег Туз АІа Гуз о1у бІп 618 615 620
Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тйг Гец Рго Рго 5ег Аге б1и сІи Мей 625 630 635 640
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 645 659 655 б5ег Азр ІІе А1а Маї с1и Тер б01и бег Азп б1у біп Рго б1и Ап Ап 66О 665 670
Туг Гуз Те Те Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр б1у бег Ріпе РПе Геи 675 680 685
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Ар Гуз 5ег Аг» Тер біп біп о1у Азп Маї 690 695 700
Рпе бег Суз бег Ма! Меє Ніх сб1и АТа Ге Ні Азп Ніх Туг Тиг сп 705 716 715 729
Гуз бег Ге б5ег Їеи б5ег Рго б01у Гуз с1у б1у с1у с1у бег о1у а1Уу 725 730 735
Зо со1у о1у бег о01у с1у о01у с1у б5ег о1у с1у о1у с1у бег с1у с1у ос1у 740 745 7506 со1у бег б1у сб1у с1у с01у бег Ар Гу5 Тйг Ні Тиг Суб Рго Рго Су 755 760 765
Рго Аїа Рго бІ1и Гей Ге с01у с1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ре Рго Рго 779 775 780
Гуз Рго Гуз Азр Тйг Ге Меї І1е 5ег Аг» Тиг Рго бі Маї Тиг Су 785 798 795 зе
Ммаї Маї Маї Азр Маї бег Ніх бІи Ар Рго бІ1и Маї Гух Рпе Азп Тер 805 810 815
Туг Маї Азр с1у Маї с1и Маї Ні5 А5п АТа Гуз Тиг Гуз Рго Суз си 820 825 830 бі біп Туг сб1у 5ег Тйг о Туг Аге Су5х Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Гец 835 840 845
Ні бІп Азр Тер Гей Азп б1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї бег Ап
850 855 вва
Гуз А1а Гец Рго АІа Рго І1е о1и Гуз Тиг І1е 5ег їуз Аа Гуз Оо1Уу 865 870 875 880 бІіп Рго Аге бі Рго біп Ма! Туг Тиг Гей Рго Рго 5ег Аге б1Ч би 885 890 895
Меє Тиг Гуз Азп б1п Маї бег ей Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Ре Туг 980 985 910
Рго бег Азр ІІе Аїа Маї оТи Тер об01и бег Ап б1у біп Рго о1и Ап 915 920 925
Азп о Тугс Гуз Тс Тс о Рго Рго Маї Гей Ар бег Азр б1у 5ег Рпе Ре 930 935 940
Ге Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Азр Гу б5ег Аге Тгр б1п б1п о1у Азбп 945 950 955 960
Маї Рпе 5ег Су бег Ма! Меї Ні5 б1и А1а Гей Ні5 Ап Ні Туг Тиг 965 970 975
Зо б1п Гуз бег Геу бег Геу 5ег Рго а1у Гуз 9808 985 «2105 56 «2115» 984 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 56 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Ма! Гух Маї бег Суб5х Гуз Аї1а 5ег б1у Туг Тиг Ріпе Тиг Азп Ні 20 25 30
Іе Іе Ні Тер Маї Аг» біп Аїа Рго с1у б1п о1у Гей б1и Тер Меї 35 40 45 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АТа Туг Азп б1и Гуз Ре 58 55 ва біп б01у Агв А1ї1а Тс Ме Тийг обег Азр Тйг об5ег Тис о бег Тис Маї Туг 65 70 75 80
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Ар Туг Тер О1У 166 185 116 біп с01у Тйг Ге Ма! Тис Маї б5ег бег б1у с1у с01у о1у 5ег о1у О1у 115 1208 125 с1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у бег Азр І1е б1п Меє Тиг біп 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су бІп 145 158 155 160
А1а бег б1п А5зр ІТе бег Азп Туг Гей Азп Тгр Туг бІп бІ1п Гуз Рго 165 176 175
Зо с1у Гуз АТа Рго Гуз Гей Ге І1е Туг Туг Тг 5ег Аге Гец Ні ТЕиг 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у бег б1у Тпг Ар Ре Тпг 195 290 295
Рпе Тиг І1е бег бег Гец бІ1и Рго бІ1и Азр ІІе Аіїа Тиг Туг Туг Су 216 215 229 б1іп б1п б1у Азп Тс Ге Рго Тер Тпг Рпе с1у б1п с1у Тиг Туз Ге 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІи Маї б1п Гей Маї си 5ег 245 258 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго о1у с1у 5ег Їеи Гуз Ге 5ег Су Аа 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг
2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 305 319 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні Оо1у Азп 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аї1а Туг Тер о1у сб1п с1у Тиг 355 зва 365 еи Ма! Тис Маї бег бег б1у б1у с1у с1у бег б01у о1у о1у о1у 5ег 3708 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 390 395 4ев
Ммаї бег Рго б1у с01у Тпг Маї Тийг Гей Тийг Суз с1у бег бег Тиг О1Уу 405 416 415
Зо
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у Тйг Гу5 Ре Гец Аа Рго о1у 435 44о 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге 4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бої Азр бі Аї1а б1и Туг Туг Суз Маї 465 470 475 480
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 490 495
Ммаї Ге с1у с1у оІу с1у Ар Гуз Тпг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 580 505 518
А1а Рго с1и Гец Гей сб1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи Рпе Рго Рго Гу 515 529 525
Рго Гуз Ар Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго бій Ма! Тиг Су Маї 539 535 540
Мма1ї! Маї Азхр Маї бег Ні бій Азр Рго бі Маї Гу5 Рпе Азп Тер Туг 545 550 555 560
Ммаї Азр с1у Маї оТи Маї Ніх5 Азп ДАІіа Гуз Тпг Гуз Рго Су5 ом с01и 565 579 575 біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 5808 585 599 бІіп Ар Тер Гей Азп о1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 5ег Ап Гуз 595 ве 605
А1а Гей Рго АІа Рго І1Іе б1и їу5 Типг І1е бег Туз АІа Гуз о1у бІп 618 615 620
Рго Аге бій Рго біп Маї Туг Тиг Геи Рго Рго 5ег Аге бІи б1и Мет 625 630 635 640
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго
Зо 645 6509 655 б5ег Азр ІІе А1а Маї с1и Тер б01и бег Азп б1у біп Рго би Ап Ап 66О 665 670
Туг Гуз Тиг Тс Рго Рго Маї Ге Ар 5ег Азр с1у 5ег Рпе Ре Ге 675 680 685
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Ар Гуз 5ег Аг» Тгр біп біп с1у Ап Маї 690 695 700
Рпе бег Суб бег Маї Меє Ні бій Аїа Ге Ні Азп Ні Туг Тиг б1п 705 716 715 729
Гуз бег Ге 5ег Їец б5ег Рго с1у б1у с1у с01у 5ег о01у ос1у с1у с1у 725 730 735 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег б1у о01у сб1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 740 745 7506 со1у о1у с1у о1у бег Ар Гуз Тиг Ні Тйг Суз Рго Рго Су Рго АІа 755 760 765
Рго бІ1и Ге Ге оІ1у б1у Рго бег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго 779 775 780
Гуз Азр Тс Ге Меї І1е 5ег Аг Типг Рго біи Ма! Тйг Су Маї Маї 785 798 795 зе
Мма1 Азр Маї бег Ні бій Ар Рго біи Маї губ Рпе Азп Тгр Туг Маї! 805 810 815
Азр б1у Маї би Маї Ні5 Ап А1а ух Тиг Гуз Рго Суз оби о1и б1п 820 825 830
Туг б1у 5ег Тйг Туг Аге Суб5 Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Гецч Ні сІп 835 840 845
Азр Тер Ге Азп оТу Гуз бІТи Туг Гуз Суз Гуз Ма! бег Авзп Гуз АІа 859 855 860
Ге Рго Аїа Рго ІІе си Гуз Тиг І1е 5ег Гуз Аа Гуз Оо1у бІп Рго 865 870 875 880
Зо Агв бій Рго біп Маї Туг Тпг Гец Рго Рго 5ег Аг біи бІи Меє Тиг 885 890 895
Гуз Азп біп Ма! бег Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго бег 980 985 910
Азр І1е А1ї1а Маї оТи Тер б1и бег Азп с1у б1іп Рго бІи Азп Азп Туг 915 929 925
Гуз Те Тис о Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Рпе Геи Туг 939 935 940 б5ег Гуз Ге Тпйг о Маї Ар Гу бег Аге Тер біп біп б01у Ап Ма1! РПе 945 950 955 960 б5ег Су 5ег Ма! Ме Ніх бі АТїа Гей Ні Ап Ні Туг Тиг бІп Гуз 965 970 975 5ег Ге бег Ге бег Рго Оо1у Гуз 9808 «2105 57 «2115 121
«212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 57 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа 0Іи Маї Гуз Гуз Рго о1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с01у Туг Тиг Рпе Тиг Азп Ні 20 25 30
І1е ІІе Ні Тер Маї Аг» біп АІїа Рго с1у сб1п Сух5х Ге 01 Тер Меє 35 4 45 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АТа Туг Азп б1и Гуз Ре 58 55 ва біп б01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг о бег Азр Тйг обег Тс о бег Тиг Маї Туг 65 78 75 ва
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су
Зо 85 90 95
А1а Аг Азр о1у Туг Туг Аге Ар Тйг Ар Маї Гей Азр Туг Тер О01у 188 185 118 б1іп о1у Тйг Ге Маї Тиг Маї 5ег 5ег 115 129 «2105 58 «2115 187 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 58
Азр І1е б1п Меє Тиг бІп бег Рго бег 5ег Їец 5ег ДАІіа бег Маї а1у 1 5 18 15
Азр Аге Ма! Тиг ІТе Тпг Су б1п А1ї1а бег біп Азр І1е 5ег Ап Туг 20 25 30
Ге Азп Тер Туг біп сб1п Гу Рго о1у Гуз АІа Рго Гуз Гей Ге Пе
35 4 45
Туг Туг Тс о б5ег Аге Ге Ні Тйг б1у Маї Рго бег Аге Ріе 5ег б1у 58 55 60 б5ег б01у бег с01у Типг Азр Рпе Тпг Рпе Тиг І1е 5ег 5ег Гей 01и Рго 65 78 75 ва бІ1и Азр І1е АТїа Тиг Туг Туг Суб б1п б1іп о1у Ап Тис Геци Рго Тер 85 90 95
Тиг Рпе о1у Су о1у Тиг Гуз Ге 01 Пе Гуз 188 185 «2105 59 «2115 243 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 59
Зо біп Маї б1п Ге Ма! б1п б5ег с01у Аїа сб1и Маї Гу5 Гу5 Рго о1у А1Та 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с01у Туг Тиг Рпе Тиг Азп Ні 20 25 36
Іе ІІе Ні Тер Маї Аг» біп АІїа Рго с1у сб1п Сух5х Гей б1и Тер Меї 35 4 45 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АТа Туг Азп б1и Гуз Ре 58 55 ва біп с01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг обег Азр Тйг об5ег Тис обег Тис Маї Туг 65 78 75 ва
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Азр Туг Тер О1У 188 185 116 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 129 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су бІп 145 1509 155 160
А1а бег б1п А5зр І1е бег Ап Туг Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гу Рго 165 178 175 с1у Гуз АТа Рго Гуз Гей Ге І1е Туг Туг Тг 5ег Аге Гец Ні ТЕиг 1809 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тийг Азр Ре Тиг 195 290 295
Рпе Тиг І1е бег бег Гец бІ1и Рго бІ1и Азр ІІе Аіїа Тиг Туг Туг Су 216 215 220 б1іп б1п б1у Азп Тс о Гей Рго Тер Тиг Рпе с1у Сух о1у ТПг Гуз Ге 225 230 235 240
Зо ої Пе Гуз «2105 60 «2115» 498 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 60 біп Маї б1п Ге Ма! б1п б5ег с01у Аїа сб1и Маї Гу5 Гу5 Рго о1у А1Та 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Ма! бег Суз Гуз Аїа бег с1у Туг Тиг Ріпе Тиг Азтп Ні 20 25 36
Іе ІІе Ні Тер Маї Аг» біп АІїа Рго с1у сб1п Сух5х Гей б1и Тер Меї 35 4 45 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АІа Туг Азп бІи Гуз Ре 58 55 ва біп с01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг обег Азр Тйг об5ег Тис обег Тис Маї Туг 65 70 75 80
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аге бег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Азр Туг Тер О1У 166 185 116 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг о Маї бег б5ег о01у с1у о1у с1у бег о1у а1Уу 115 129 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго 1308 135 140 б5ег 5ег Ге б5ег Аїа бег Ма! с1у Азр Аге Маї! Тйг І1е Тиг Су бІп 145 158 155 160
А1а бег б1п А5зр І1е бег Ап Туг Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гу Рго 165 176 175
Зо с1у Гуз АТа Рго Гух Ге Ге І1е Туг Туг Тиг бег Аге Гей Ні Тиг 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тийг Азр Ре Тиг 195 290 295
Рпе Тиг І1е бег бег Гец бІ1и Рго бІ1и Азр ІІе Аіїа Тиг Туг Туг Су 2168 215 229 б1іп б1п б1у Азп Тс о Гей Рго Тер Тиг Рпе с1у Сух о1у ТПг Гуз Ге 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІи Маї б1п Гей Маї си 5ег 245 258 255 с1у о01у с1у Ге Ма! б1п Рго с1у о1у 5ег Гей Гу5 Гей 5ег Су5 А1Іа 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні Оо1у Азп 340 345 359
Рпе б1у Ахп бег Туг І1е 5ег Туг Тер Аїа Туг Тер б1у б1п сІ1у Тиг 355 зва 365
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 379 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 399 395 4ев
Ммаї бег Рго б1у с01у Тпг Маї Тийг Гей Тийг Суз с1у бег бег Тиг О1Уу 405 416 415
Зо
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у Тйг Гу5 Ре Гец Аа Рго о1у 435 44о 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге 450 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бої Азр бі Аї1а б1и Туг Туг Суз Маї 465 470 475 480
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Ге Тиг 485 490 495
Уа1ї Гец «2105 61 «211» 986 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«223» Синтетичний пептид «4005 61 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТа оТи Маї Гуз Гуз Рго о1у А1а 1 5 18 15 б5ег Ма! Гух Маї бег Суб5х Гуз Аї1а 5ег б1у Туг Тиг Ріпе Тиг Азп Ні 20 25 30
Іе ІІе Ні Тер Маї Аг» біп АІїа Рго с1у сб1п Су5 Гей б1и Тер Меї 35 4 45 о1у Туг ІТ1е Азп Рго Туг Рго с1у Туг Ні5 АТа Туг Азп б1и Гуз Ре 58 55 ва біп с01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг обег Ар Тиг о бег Тис обег Тйг Маї Туг 65 78 75 ва
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
Зо А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Ар Туг Тер 01у 188 185 118 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 129 125 с1у о1у бег с01у с1у с1у с1у бег Азр ІІ1е б1п Меї Тпг б1іп 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су бІп 145 1509 155 160
А1а бег бІп Азр І1е бег Азп Туг Гец Азп Тгр Туг бІп біп Гу Рго 165 178 175 с1у Гуз АТа Рго Гуз Гей Ге І1е Туг Туг Тг 5ег Аге Гец Ні ТЕиг 1809 185 199 с1у Маї Рго б5ег Аг» Ре бег б1у 5ег б1у бег 01у Тиг Азр Ре Тиг 195 290 295
Рпе Тиг І1е бег бег Гец бІ1и Рго бІ1и Азр ІІе Аіїа Тиг Туг Туг Су 216 215 220 б1іп б1п б1у Азп Тс о Гей Рго Тер Тиг Рпе с1у Сух о1у ТПг Гуз Ге 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІи Маї б1п Гей Маї си 5ег 245 258 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец їу5 Гец 5ег Су5 А1а 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 298 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 339 335
Зо
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні Оо1у Азп 340 345 359
Рпе б1у Ахп бег Туг І1е 5ег Туг Тер Аїа Туг Тер б1у б1п сІ1у Тиг 355 зва 365
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 379 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 399 395 4ев
Ммаї бег Рго б1у с01у Тпг Маї Тийг Гей Тийг Суз с1у бег бег Тиг О1Уу 405 416 415
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у Тйг Гу5 Ре Гец Аа Рго о1у 435 44о 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге
4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бої Азр бі Аї1а б1и Туг Туг Суз Маї 465 470 475 480
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 490 495
Ммаї Ге с1у с1у оІу с1у Ар Гуз Тийг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 580 505 518
А1а Рго с1и Гец Гей сб1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи Рпе Рго Рго Гу 515 529 525
Рго Гуз Ар Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго бІи Маї Тиг Су Маї 539 535 540
Ммаї Маї Азр Маї бег Ні5 бІи Азр Рго б01и Маї Гу Рпе Азп Тгр Туг 545 559 555 560
Ммаї Азр с1у Маї оТи Маї Ніх5 Азп ДАіа Гуз Тийг Гуз Рго Су5 ої си 565 5708 575
Зо біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 5808 585 599 бІіп Ар Тер Гей Азп о1у Гуз сТи Туг Гуз Су Гуз Маї бег Азтп Гуз 595 ве 605
А1а Гей Рго АТа Рго І1е 610 Гу5 Тпг І1е бег Гуз А1Т1а Гуз су бІп 618 615 620
Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тйг Геци Рго Рго 5ег Аге біи б1и Мет 625 630 635 640
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 645 659 655 б5ег Азр ІІе А1їа Маї с1и Тер сб1и бег Азп с01у бІп Рго 01 Ап Авп 66О 665 670
Туг Гуз Тиг Тс Рго Рго Маї Ге Ар 5ег Азр с1у 5ег Рпе Ре Ге 675 680 685
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Азр Гу5 б5ег Аге Тгр б1п б1п о1у Ап Маї 690 695 700
Рпе бег Суб бег Маї Меє Ні бій Аїа Ге Ні Азп Ні Туг Тиг б1п 705 716 715 729
Гуз бег Ге бег Ге бег Рго б1у ух б1у о01у сб1у с1у 5ег (1у с1у 725 730 735 со1у о1у бег о01у с1у о01у с1у б5ег о1у с1у о1у с1у бег с1у с1у ос1у 740 745 7506 о1у бег б1у о1у с1у о1у б5ег Ар Гу5 Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Су 755 760 765
Рго Аїа Рго бІ1и Гей Ге с01у с1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ре Рго Рго 779 775 780
Гуз Рго Гуз Азр Тйг Ге Меї І1е 5ег Аг» ТИг Рго бі Маї Тиг Сув 785 798 795 зе
Ммаї Маї Маї Азр Маї бег Ніх бІи Ар Рго бІ1и Маї Гух Рпе Азп Тер
Зо 805 8108 815
Туг Маї Азр с1у Маї с1и Маї Ні5 А5п АТа Гуз Тиг Гуз Рго Суз си 820 825 830 бі біп Туг сб1у 5ег Тйг о Туг Аге Су5х Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Гец 835 840 845
Ні бІп Азр Тер Гей Азхп б1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї бег Ап 859 855 860
Гуз АТ1а Гец Рго Аїа Рго І1е бій Гу5 Тпг І1е б5ег Гуз АІТа Гуз с1у 865 870 875 880 бІіп Рго Аге б1и Рго біп Ма! Туг Тиг Гей Рго Рго 5ег Аге 01 б1и 885 890 895
Меє Тиг Гуз Азп б1п Маї бег ей Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Ре Туг 900 905 910
Рго бег Азр ІІе Аїа Маї оТи Тер о1и бег Азп б1у біп Рго си Авп 915 929 925
Азп о Туг Гуз Тс Тс Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе 930 935 940
Ге Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Азр Гуз б5ег Аг» Тгр біп б1п о1у Азп 945 950 955 960
Мма1! Рпе бег Суб5 бег Ма! Меє Ні5 бій АТа Ге Ні5 Ап Ні Туг Тпг 965 970 975 б1п Гуз бег Ге 5ег їеи 5ег Рго о1у Гуз 9808 985 «2105 62 «2115» 984 «2125» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 62 б1іп Ма! б1п Ге Маї б1п бег с01у АІа си Маї Гу5 Гуз Рго с1у А1Та 1 5 18 15
Зо б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с01у Туг Тиг Рпе Тиг Азп Ні 20 25 30
Іе ІІе Ні Тер Маї Аг» біп АІїа Рго с1у сб1п Сух5х Гей б1и Тер Меї 35 4 45 с1у Туг І1е Азп Рго Туг Рго б01у Туг Ні5 А1ї1а Туг Ап бІи Гу5 Ріе 58 55 ва біп с01у Аге А1ї1а Тс Ме Тийг обег Азр Тйг об5ег Тис обег Тис Маї Туг 65 78 75 80
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Аг б5ег бі Азр ТПг Аїа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Туг Агв Азр Тс Ар Маї Гей Азр Туг Тер О1У 188 185 118 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 129 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго 1308 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су бІп 145 158 155 160
А1а бег б1п А5зр І1е бег Ап Туг Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гу Рго 165 178 175 с1у Гуз АТа Рго Гуз Гей Ге І1е Туг Туг Тг 5ег Аге Гец Ні ТЕиг 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тийг Азр Ре Тиг 195 290 295
Рпе Тиг І1е бег бег Гец бІ1и Рго бІ1и Азр ІІе Аіїа Тиг Туг Туг Су 2168 215 229 біп б1іп б1у Азп Тс Гей Рго Тер Тйг Рпе с1у Сух5 о1у Тиг Гу Гец 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІи Маї б1п Гей Маї си 5ег
Зо 245 2509 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец їу5 Гец 5ег Су5 А1а 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 330 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Суб Маї Аг» Ні о1у Азп 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аї1а Туг Тер о1у сб1п с1у Тиг 355 зва 365
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у с1у бег 3708 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 399 395 4ев
Мма1ї! 5ег Рго б1у б1у Тйг Маї Тис Ге Тиг Сух б1у 5ег 5ег Тиг о1у 405 416 415
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о01у Тиг Гуз Рпе Гей Аа Рго о1у 435 44о 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге 4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бі Азр бі Аїа бІи Туг Туг Су Маї 465 470 475 480
Зо Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 490 495
Ммаї Ге с1у с01у с1у о1у Азр Гу5 Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 589 595 518
А1а Рго с1и Гец Гей сб1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи Рпе Рго Рго Гу 515 529 525
Рго Гуз Ар Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго бій Ма! Тиг Су Маї 539 535 540
Ммаї Маї Азр Маї бег Ні5 бІи Азр Рго б01и Маї Гу Рпе Азп Тгр Туг 545 550 555 560
Мма1 Азр о01у Маї бІ1и Маї Ні5 Ахп Аїа Гу5 Тиг Гуз Рго Су5 би би 565 5708 575 біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 589 585 599 бІіп Ар Тер Гей Азп о1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 5ег Ап Гуз 595 ве 605
А1а Гей Рго АІа Рго І1Іе б1и їу5 Типг І1е бег Туз АІа Гуз о1у бІп 618 615 620
Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тйг Гец Рго Рго 5ег Аге б1и сІи Мей 625 630 635 640
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 645 659 655 б5ег Азр І1е Аїа Ма! б1и Тер бій 5ег Азп б1у біп Рго 01 Азп Азп 66О 665 670
Туг Гуз Тиг Тс Рго Рго Маї Ге Ар 5ег Азр с1у 5ег Рпе Ре Ге 675 680 685
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Ар Гуз 5ег Аг» Тер біп біп о1у Азп Маї 690 695 700
Рпе бег Суз бег Ма! Меє Ніх сб1и АТа Ге Ні Азп Ніх Туг Тиг сп 705 716 715 729
Зо
Гуз бег Ге 5ег їеи б5ег Рго б1у б1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а(1Уу 725 730 735 б5ег біу б1у с1у с1у бег б1у б1у с1у с1у 5ег б01у о1у о1у о1у 5ег 740 745 7506 со1у о1у с1у о1у 5ег Азр Гуз Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Суз Рго А1а 755 760 765
Рго бІ1и Ге Ге оІ1у б1у Рго бег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго 779 775 780
Гуз Азр Тс Ге Меє І1е бег Аге Тг Рго біи Ма! Тиг Су Маї Маї 785 798 795 зе
Ммаї Азр Маї бег Ніх бІи Азр Рго бій Ма! Гуз Ре Азп Тер Туг Маї 805 810 815
Азр б1у Маї бІи Маї Ні Азп Аїа Гух Тиг Гу5 Рго Су би си б1Іп 820 825 830
Туг б1у 5ег Тйг Туг Аге Суб5 Маї 5ег Маї Геци Тиг Маї Гецч Ні сІп
835 840 845
Азр Тер Ге Азп оТу Гуз бІТи Туг Гуз Суз Гуз Ма! бег Авзп Гуз АІа 850 855 860
Ге Рго Аїа Рго ІІе си Гуз Тиг І1е 5ег Гуз АІТа Гуз Оо1у бІп Рго 865 870 875 880
Аге біи Рго біп Ма! Туг Тйг Геи Рго Рго бег Аге бІи бІи Меє Тиг 885 890 895
Гуз Азп біп Ма! бег Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго бег 980 985 910
Азр І1е Аїа Маї бІ1и Тер б1и бег Азп б01у біп Рго бІи Ап Азп Туг 915 920 925
Гуз Те Тис о Рго Рго Маї Гец Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Ріе Геи Туг 930 935 940 б5ег Гуз Ге Тпйг о Маї Ар Гу бег Аге Тер біп біп б01у Ап Ма1! РПе 945 950 955 960
Зо б5ег Суз бег Ма! Меє Ніх обоТ1и АТа Ге Ні Азп Ні Туг Тиг сп Гу 965 970 975 5ег Ге бег Ге бег Рго Оо1у Гуз 9808 «2105 63 «2115 5 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 63
Азп Рпе Азр Меї А1Та 1 5 «2105 64 «2115 17 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220»
«223» Синтетичний пептид «400» 64 б5ег І1е Тпг Тис с1у о01у о1у Азр Тйг Тугс Туг АТа Ар б5ег Маї! Гуз 1 5 18 15 о1У «2105» 65 «2115 12 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 65
Ні5х с1у Туг Туг Азр с1у Туг Ні Ге Ріе Ар Туг 1 5 18 «2105» 66 «2115 11 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 66
Аге А1а Ахп біп б01у І1е 5ег Абп Ап Гец Авп 1 5 18 «210» 67 «2115 7 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 67
Туг ТАйг бег Азп Ге біп 5ег 1 5 «2105» 68 «2115 9 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«223» Синтетичний пептид «4005 68 б1іп б1п Рпе Тиг б5ег Гей Рго Туг Тиг 1 5 «2105 69 «2115 121 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 69 бі Маї б1п Ге Ма! бій бег с01у о01у с1у Гей Ма! б1п Рго о1у о1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 20 25 30
Азр Меїє АТа Тер Маї Аге б1п Аїа Рго б01у Гу5 с1у Гей Ма! Тер Маї! 4 45
Зо б5ег 5ег І1е Тийг Тпг с1у с1у о1у Ар Тиг Туг Туг А1а Азр 5ег Маї! 58 55 ва 35
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аге Ар Азп АТа Гу5 бег Тиг Геци Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Мма1 Аг» Ні5 01у Туг Туг Азр сІ1у Туг Ні Гец Рпе Азр Туг Тер О1Уу 188 185 118 б1іп о1у Тйг Ге Маї Тиг Маї 5ег 5ег 115 129 «2105 70 «2115 187 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
«4005 70
Азр І1е б01п Меє ТиИг бІп б5ег Рго бег 5ег Ге бег Аїа б5ег Ма! с1у 1 5 18 15
Азр Аге Ма! Тиг ІТе Тийг Суб Аг» АТїа Ахп біп б1у І1е 5ег Ап Ап 20 25 30
Ге Азп Тер Туг бІ1п с1п Гуз Рго о1у Гуз АТа Рго Гуз Рго Ге І1е 35 4 45
Туг Туг Тс о бег Азп Ге біп бег б1у Ма! Рго бег Аге Ріпе 5ег б1у 58 55 ва б5ег б01у бег с01у Тпг Азр Туг Тиг Ге Тиг І1е 5ег 5ег Гей бІп Рго 65 78 75 80 б1и Азр Рпе АТа Тиг Туг Туг Суз б1п б1п Рпе Тпг бег Геци Рго Туг 85 90 95
Тиг Рпе о1у с1п о1у ТиИг Гуз Ге 01 Пе Гуз 188 185
Зо «2105 71 «2115 243 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 71 бІіи Маї б1п Гей Маї б1и б5ег с1у о1у о01у Гей Ма! бІп Рго с1у с1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 20 25 30
Азр Меїє АТа Тер Маї Аге б1п Аїа Рго б01у ух о1у Гей Ма! Тер Маї! 35 4 45 б5ег 5ег І1е Тийг Тпг с1у с1у о1у Ар Тиг Туг Туг А1а Азр 5ег Маї! 58 55 ва
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аг Ар Азп АІТа Гу5 бег Тиг Геци Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Мма1 Аг» Ні5 о1у Туг Туг Азр сІ1у Туг Ні Гей Рпе Азр Туг Тгр о1у 188 185 118 біп с01у Тйг Ге Ма! Тис Маї б5ег бег б1у с1у с01у о1у 5ег о1у О1у 115 129 125 с1у о1у бег о1у с1у с1у сб1у бег А5зр ІІе б1п Меї Тпг б1п 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су Аге 145 1509 155 160
А1а Азп б1п о01у І1е бег Ап Ап Гец Азп Тгр Туг бІ1п біп Гуз Рго 165 178 175 о1у Гуз Аїа Рго Гуз Рго Ге ІІе Туг Туг Тиг бег Азп Гец бІп 5ег 1809 185 199
Зо с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тиг Ар Туг Тиг 195 290 295
Їеч Тйг ІІе 5ег бег Ге б1п Рго 010 Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Суз 216 215 229 б1іп б1п Рпе Тиг об5ег Гей Рго Туг Тиг Ре ос1у бІп о1у ТПг Гуз Ге 225 230 235 240 ої Пе Гуз «2105 72 «2115» 498 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 72 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 29 25 36
Азр Меїє АТа Тер Маї Аге б1п Аїа Рго б01у Гу5 с1у Гей Ма! Тер Маї! 35 40 45 б5ег 5ег І1е Тийг Тпг с1у с1у о1у Ар Тиг Туг Туг А1а Азр 5ег Маї! 58 55 60
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аге Ар Азп АТа Гу5 бег Тиг Геци Туг 65 70 75 80 ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Мма1 Аг» Ні5 01у Туг Туг Азр сІ1у Туг Ні Гец Рпе Азр Туг Тер О1Уу 166 185 116 біп с01у Тйг Ге Ма! Тис Маї б5ег бег б1у с1у с01у о1у 5ег о1у О1у 115 1208 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго
Зо 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су Аге 145 158 155 160
А1а Азп б1п б1у ІТе бег Абзп Азп Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гуз Рго 165 176 175 о1у Гуз Аїа Рго Гуз Рго Ге ІІе Туг Туг Тиг бег Азп Гец бІп 5ег 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тиг Ар Туг Тиг 195 290 295
Їеч Тйг ІІе 5ег бег Ге біп Рго 010 Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Су 216 215 229 б1іп б1п Рпе Тиг об5ег Гей Рго Туг Тиг Ре ос1у бІп о1у ТПг Гуз Ге 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІи Маї б1п Ге Маї си 5ег 245 258 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец їу5 Гец 5ег Су5 А1а 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азхп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тугс Туг АТа Азр бег Маї Гуз Азр Аг» Рпе Тиг 305 319 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні о1у Авп 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аї1а Туг Тер о1у сб1п с1у Тиг 355 зва 365
Зо еи Ма! Тис Маї бег бег біу б1у с1у о01у 5ег сб1у с1у с1у с1у 5ег 3708 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 390 395 4ев
Ммаї бег Рго с1у с1у Типг Маї Тйг Ге Тиг Сух о1у бег бег Тиг О1Уу 405 416 415
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 бІіп А1а Рго Аг» б1у Ге І1е с1у с1у Тпг Гу5 Ріе Гей А1а Рго о1у 435 44о 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге 4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бої Азр бі Аї1а б1и Туг Туг Суз Маї 465 470 475 480
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 490 495
Уа1ї Гец «2105 73 «2115» 986 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 73 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 20 25 30
Азр Меїє АТа Тер Маї Аге б1п Аїа Рго б01у Гу5 с1у Гей Ма! Тер Маї! 4 45 б5ег 5ег І1е Тийг Тпг с1у с1у о1у Ар Тиг Туг Туг А1а Азр 5ег Маї!
Зо 58 55 60
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аге Ар Азп АТа Гу5 бег Тиг Геци Туг 65 78 75 ва 35 ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Мма1 Аг» Ні5 01у Туг Туг Азр сІ1у Туг Ні Гец Рпе Азр Туг Тер О1Уу 188 185 118 біп с01у Тйг Ге Ма! Тис Маї б5ег бег б1у с1у с01у о1у 5ег о1у О1у 115 129 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су Аге 145 1509 155 160
А1а Азп б1п б1у ІТе бег Абзп Азп Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гуз Рго 165 178 175 о1у Гуз Аїа Рго Гуз Рго Ге ІІе Туг Туг Тиг бег Азп Гец бІп 5ег 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тиг Ар Туг Тиг 195 290 295
Ге Тйг Іе 5ег б5ег Ге біп Рго бій Азр Рпе Аїа Тиг Туг Туг Сув 2168 215 229 б1іп б1п Рпе ТиИг обег Гей Рго Туг Тиг Рпе о1у бІп о1у Тиг Гуз Ге 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІи Маї б1п Гей Маї си 5ег 245 258 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец уз Гей 5ег Су5 А1а 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
Зо А1а Рго б1у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 305 319 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тийг АТа Туг Ге біп Мет Абтп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні Оо1у Азп 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аїа Туг Тер о1у бІп Ф1у Тпг 355 зва 365 еи Ма! Тис Маї бег бег б1у б1у с1у с1у бег б01у о1у о1у о1у 5ег 3708 375 389 со1у о1у с1у о1у 5ег б1п Тпг Маї Маї Тиг бІп оТи Рго бег Ге Тиг 385 390 395 4ев
Ммаї бег Рго б1у с01у Тпг Маї Тийг Гей Тийг Суз с1у бег бег Тиг О1Уу 405 416 415
А1а Маї Тпг бег с01у Ап Туг Рго Азхп Тгр Маї бІп сб1п Гуз Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у Тйг Гу5 Ре Гец Аа Рго о1у 435 44о 445
Те Рго А1а Аге Рпе 5ег с1у 5ег Гей Ге о01у с1у Гу5 Аа Аа Ге 4506 455 460
Те Ге 5ег б1у Ма! б1п Рго бій Азхр біи Аїа б1и Туг Туг Су Маї! 465 470 475 4806
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 499 495
Ммаї Ге с1у с1у оІу с1у Ар Гуз Тпг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 580 505 510
А1а Рго с1и Гец Гей сб1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи Рпе Рго Рго Гу 515 529 525
Зо
Рго Гуз Ар Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго бій Ма! Тиг Су Маї 539 535 540
Мма1ї! Маї Азхр Маї бег Ні бій Азр Рго бі Маї Гу5 Рпе Азп Тер Туг 545 550 555 560
Ммаї Азр с1у Маї оТи Маї Ніх5 Азп АІіа Гуз Тпг Гуз Рго Су5 ої си 565 570 575 біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 5808 585 599 бІіп Ар Тер Гей Азп о1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 5ег Ап Гуз 595 ве 605
А1а Гей Рго АІа Рго І1Іе б1и їу5 Типг І1е бег Туз АІа Гуз о1у бІп 618 615 620
Рго Аге бій Рго біп Маї Туг Тиг Геи Рго Рго 5ег Аг» бІи бІи Мес 625 630 635 640
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго
645 659 655 б5ег Азр ІІе А1а Маї с1и Тер б01и бег Азп б1у біп Рго б1и Ап Ап 6в6О 665 670
Туг Гуз Тиг Тс Рго Рго Маї Ге Ар 5ег Азр с1у 5ег Рпе Ре Ге 675 680 685
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Ар Гуз 5ег Аг» Тер біп біп о1у Азп Маї 699 695 700
Рпе бег Суз бег Ма! Меє Ніх сб1и АТа Ге Ні Азп Ніх Туг Тиг сп 705 716 715 729
Гуз 5ег Ге бег Ге бег Рго б1у ух сб1у с1у о1у о1у бег о1у с1у 725 730 735 со1у о1у бег о01у с1у о01у с1у б5ег о1у с1у о1у с1у бег с1у с1у ос1у 740 745 7506 о1у бег б1у о1у с1у о1у б5ег Ар Гу5 Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Су 755 760 765
Зо
Рго Аїа Рго бІ1и Гей Ге с01у с1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ре Рго Рго 779 775 780
Гуз Рго Гуз Азр Тйг Ге Меї І1е 5ег Аг» Тиг Рго біи Маї Тиг Сув 785 798 795 зе
Ммаї! Маї Маї Ар Маї 5ег Ні бій А5зр Рго бі Маї Гу5 Ре Азп Тер 805 810 815
Туг Маї Азр с1у Маї с1и Маї Ні5 А5п АТа Гуз Тиг Гуз Рго Суз си 820 825 830 бі біп Туг сб1у 5ег Тйг о Туг Аге Су5х Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Гец 835 840 845
Ні бІ1п Азр Тер Гей Азхп б1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 5ег Авп 859 855 860
Гуз А1а Гец Рго АІа Рго І1е о1и Гуз Тиг І1е 5ег їуз Аа Гуз Оо1Уу 865 870 875 880 біп Рго Аге б1и Рго біп Ма! Туг Тиг Геи Рго Рго 5ег Аг» бІи би 885 890 895
Мет ТиИг Гуз Азп б1п Маї бег еп Тиг Сухз Гей Маї Гух о1у Ре Туг 980 985 910
Рго бег Азр ІІе А1а Маї с1и Тер сб1и бег Азхп Оо01у б1іп Рго о1и Ап 915 920 925
Азп о Туг Гуз Тс Тс Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе 930 935 940
Ге Туг бег Гу5 Ге Тйг Маї Азр Гу бег Аге Тгр б1п б1п о1у Ап 945 950 955 960
Маї Рпе 5ег Су бег Ма! Меї Ні5 б1и А1а Гей Ні5 Ап Ні Туг Тиг 965 970 975 біп Гу5х б5ег Ге 5ег Гец б5ег Рго О1у Гуз 9808 985 «2105 74
Зо «2115» 984 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 74 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 20 25 30
Азр Меє АТа Тер Маї Аге сб1п Аїа Рго б1у Гу5 с1у Гей Ма! Тер Маї 35 4 45 б5ег 5ег І1е Тийг Тпг с1у с1у о1у Ар Тиг Туг Туг А1а Азр 5ег Маї! 58 55 ва
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аге Ар Азп АТа Гу5 бег Тиг Геци Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув
85 90 95
Мма1 Аг» Ні5 01у Туг Туг Азр сІ1у Туг Ні Гец Ріе Азр Туг Тер О1Уу 188 185 116 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 1208 125 с1у о1у бег о01у с1у с1у с1у бег Азр ІІе біп Меї Тиг біп 5ег Рго 1308 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су Аге 145 158 155 160
А1а Азп біп б01у ІТе 5ег Аб5п Азп Гей Ап Тер Туг б1п б1п Гу Рго 165 176 175 о1у Гуз Аїа Рго Гуз Рго Ге ІІе Туг Туг Тиг бег Азп Гец бІп 5ег 1809 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аг» Рпе бег б1у 5ег б1у бег 01у Тиг Ар Туг ТАг 195 290 295
Зо
Їеч Тйг ІІе 5ег бег Ге б1п Рго 010 Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Суз 2168 215 229 б1іп б1п Рпе Тийг бег Ге Рго Туг Тпг Ріе б1у бІ1п с1у Тиг Гуз Ге 225 230 235 240 бі І1е Гу5 5ег бі1у б1у с1у с1у бег б1и Маї б1п Гец Маї о1и 5ег 245 258 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец їу5 Гец 5ег Су5 А1а 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні Оо1у Азп 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аї1а Туг Тер о1у сб1п с1у Тиг 355 зво 365
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 3708 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 399 395 4ев
Ммаї бег Рго б1у с01у Тпг Маї Тийг Гей Тийг Суз с1у бег бег Тиг О1Уу 405 416 415
А1ї1а Маї! Тиг бег 01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї б1п сб1п Гу Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у Тйг Гу5 Ре Гец Аа Рго о1у
Зо 435 дда 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге 4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бої Азр бі Аї1а б1и Туг Туг Суз Маї 465 470 475 480
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 490 495
Ммаї! Гей с1у о01у о1у с1у Азр Гу5 Тпг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 580 505 518
А1а Рго с1и Гец Гей сб1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи Рпе Рго Рго Гу 515 528 525
Рго Гуз Азр Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго бій Ма! Тиг Су Маї 539 535 540
Ммаї Маї Азр Маї бег Ні5 бІи Азр Рго б01и Маї Гу Рпе Азп Тгр Туг 545 550 555 560
Ммаї Азр с1у Маї оТи Маї Ніх5 Азп АІіа Гуз Тпг Гуз Рго Суз5 оси си 565 5708 575 біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 5808 585 599 бІіп Ар Тер Гей Азп б1у Гу5 б1и Туг Гуз Суб Гуз Ма! 5ег Азвтп Гу 595 ве 605
А1а Гей Рго АІа Рго І1Іе б1и їу5 Типг І1е бег Туз АІа Гуз о1у бІп 618 615 620
Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тйг Гей Рго Рго 5ег Аге бІіи бІи Мей 625 630 635 640
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 645 659 655 б5ег Азр ІІе А1їа Маї с1и Тер об0Ти бег Ап б1у б1іп Рго б1и Ап Авп 66О 665 670
Зо Туг Гуз Те Те Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр б1у бег Ріпе РПе Геи 675 680 685
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Ар Гуз 5ег Аг» Тгр біп б1п с1у Ап Маї 690 695 700
Рпе бег Суз бег Ма! Меє Ніх сб1и АТа Ге Ні Азп Ніх Туг Тиг сп 705 716 715 729
Гуз бег Ге 5ег Ге 5ег Рго с1у б01у с1у о1у б5ег о1у с1у о1у о1у 725 730 735 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег б1у о01у сб1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 740 745 7506 с1у о01у с1у с1у бег Ар Гу5 Тг Ні Тийг Суб Рго Рго Су Рго АІа 755 760 765
Рго бІ1и Ге Ге оІ1у б1у Рго бег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго 779 775 780
Гуз Азр Тс Ге Меє І1е бег Аге Тг Рго біи Ма! Тиг Су Маї Маї 785 798 795 зе
Ммаї Азр Маї бег Ніх бІи Азр Рго бій Ма! Гуз Ре Азп Тгр Туг Маї 805 8108 815
Азр б1у Маї би Маї Ні5 Ап А1а ух Тиг Гуз Рго Суз оби о1и б1п 820 825 830
Туг б1у 5ег Тйг Туг Аге Суб5 Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Гецч Ні сІп 835 840 845
Азр Тер Ге Азп б1у Гуз 61 Туг Гуз Суб5 Гу Ма! 5ег Ап Гуз АІа 850 855 вва
Ге Рго Аїа Рго ІІе си Гуз Тиг І1е 5ег Гуз Аа Гуз Оо1у бІп Рго 865 870 875 880
Аге біи Рго біп Ма! Туг Тйг Геи Рго Рго бег Аге бІи бІи Меє Тиг 885 890 895
Гуз Азп біп Ма! бег Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго бег 980 985 910
Зо
Азр І1е А1ї1а Маї оТи Тер б1и бег Азп с1у б1іп Рго бІи Азп Азп Туг 915 920 925
Гуз Те Те Ргсо Рго Маї Ге Азр бег Азр б01у бег Ріпе Рпе Геи Туг 930 935 940 б5ег Гуз Ге Тпйг о Маї Ар Гу бег Аге Тер біп біп б01у Ап Ма1! РПе 945 950 955 960 б5ег Суз бег Ма! Меє Ні5 б1и АТа Ге Ні Азп Ніх Туг Тиг бІп Гуз 965 970 975 5ег Ге бег Ге бег Рго Оо1у Гуз 9808 «2105 75 «2115 121 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 75 бІи Маї б1п Геи Маї б1и 5ег б1у с1у о1у Геи Маї сб1п Рго ос1у о1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 20 25 30
Азр Меї АТа Тер Маї Аге біп А1їа Рго о1у ух Су5 Гец Ма! Тер Маї 35 4 45 б5ег 5ег І1е Тийг Тпг с1у с1у о1у Ар Тиг Туг Туг А1а Азр 5ег Маї! 58 55 60
Гуз б1у Аг» Рпе Тийг І1е 5ег Аг» Ар Азп АТа Гуз 5ег Тиг Гецй Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Мма1 Агв Ні5 б01у Туг Туг Азр о1у Туг Ні Гей Ре Ар Туг Тер с01у 188 185 118
Зо біп с01у Тс Гей Маї Тис Маї 5ег 5ег 115 129 «2105 76 «2115 187 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 76
Азр І1е б1п Меє Тиг бІп бег Рго бег 5ег Їец 5ег ДАІіа бег Маї а1у 1 5 18 15
Азр Аге Ма! Тиг ІТе Тийг Суб Аг» АТїа Ахп біп б1у І1е 5ег Ап Ап 20 25 30
Ге Азп Тер Туг біп б1п Гуз Рго с1у Гуз АІа Рго Гуз Рго Ге Пе 35 4 45
Туг Туг Тс о бег Азп Ге біп бег б1у Ма! Рго бег Аге Рпе 5ег О01у 58 55 ва б5ег б01у бег с01у Тпг Азр Туг Тиг Ге Тиг І1е 5ег 5ег Гей бІп Рго 65 78 75 ва бі Азр Рпе А1ї1а Тийг Туг Тугс Су5 біп б1п Рпе Тиг 5бег Гецй Рго Туг 85 90 95
Тиг Рпе о1у Су о1у Тиг Гуз Ге 01 Пе Гуз 188 185 «2105 77 «2115 243 «2125» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 77 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 20 25 30
Зо
Азр Меїє АТа Тер Маї Аге б1п Аїа Рго с1у Гу5 Су5 Гей Ма! Тер Маї! 4 45 35 б5ег б5ег І1е Тпг Тпг о1у с01у б1у Азр Тйг Туг Туг АТа Ар 5ег Маї! 58 55 ва
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аге Ар Азп АТа Гу5 бег Тиг Геци Туг 65 78 75 80 ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Мма1 Аг» Ні5 01у Туг Туг Азр сІ1у Туг Ні Гец Рпе Азр Туг Тер О1Уу 188 185 118 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 129 125 с1у о01у 5ег сб1у сі1у б1у сб1у б5ег Азр І1е б1п Меє Тиг б1п 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су Аге
145 1509 155 160
А1а Азп б1п б1у ІТе бег Абзп Азп Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гуз Рго 165 178 175 о1у Гуз Аїа Рго Гуз Рго Ге ІІе Туг Туг Тиг бег Азп Гец бІп 5ег 1809 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тиг Ар Туг Тиг 195 290 295
Їеч Тйг ІІе 5ег бег Ге б1п Рго 010 Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Сув 216 215 220 б1іп б1іп Рпе Тйг о бег Гей Рго Туг Тиг Рпе с1у Су5 о1у Тиг Гу Гец 225 230 235 240 ої Пе Гуз «2105 78 «2115» 498
Зо «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 78 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Су5х Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 20 25 30
Азр Меїє АТа Тер Маї Аге б1п Аїа Рго с1у Гу5 Су5 Гей Ма! Тер Маї! 35 4 45 б5ег б5ег І1е Тпг Тпг о1у с01у с1у Азр Тйг Туг Туг АТа Азр 5ег Маї 58 55 ва
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аге Ар Азп АТа Гу5 бег Тиг Геци Туг 65 78 75 80
Гей б1п Меє Ар б5ег Гец Аге 5ег бій Азр Тиг АТа Ма! Туг Туг Су 85 90 95
Мма1 Аг» Ні5 01у Туг Туг Азр сІ1у Туг Ні Гец Рпе Азр Туг Тер О1Уу 166 185 116 б1іп о1у Тйг о Гей Маї Тиг Маї бег бег о01у сб1у с1у с1у 5ег с1у (1УуУ 115 1208 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго 1308 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег Аїа 5ег Ма! с1у Азр Аге Ма! Тйг І1е Тиг Су Аге 145 158 155 160
А1а Азп б1п б1у ІТе бег Абзп Азп Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гуз Рго 165 178 175 о1у Гуз Аїа Рго Гуз Рго Ге ІІе Туг Туг Тиг бег Азп Гец бІп 5ег 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тиг Ар Туг Тиг 195 290 295
Зо
Їеч Тйг ІІе 5ег бег Ге б1п Рго 010 Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Суз 2168 215 229 б1іп б1іп Рпе Тйг о бег Гей Рго Туг Тиг Рпе с1у Су5 о1у Тиг Гу Гец 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІи Маї б1п Гей Маї си 5ег 245 2509 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец їу5 Гец 5ег Су5 А1а 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп
325 330 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні Оо1у Азп 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аї1а Туг Тер о1у сб1п с1у Тиг 355 зво 365
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 379 375 380 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 390 395 4ев
Мма1ї! бег Рго б1у б1у Тпг Маї Тис Ге Тиг Суз б1у 5ег 5ег Тиг О1у 485 416 415
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у Тйг Гу5 Ре Гец Аа Рго о1у 435 дда 445
Зо
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег о1у бег Гей Ге о1у о1у Гуз АТа Аа Гец 450 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бої Азр бі Аї1а б1и Туг Туг Суз Маї 465 470 475 4808
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геи Тпг 485 499 495
Уа1ї Гец «2105 79 «2115» 986 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 79 бІи Маї б1п Гей Маї б1и б5ег с1у о1у о1у Ге Маї бІп Рго с1у а1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 29 25 36
Азр Меї АТа Тер Маї Аге б1п Аїа Рго с1у Гу5 Су5 Гей Ма! Тер Маї! 35 40 45 б5ег 5ег І1е Тийг Тпг с1у с1у о1у Ар Тиг Туг Туг А1а Азр 5ег Маї! 50 55 60
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аге Ар Азп АІТа Гу5 бег Тиг Гецй Туг 65 70 75 80 ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Мма1 Аг» Ніх о1у Туг Туг Азр с1у Туг Ні Гей Рпе Ар Туг Тгр о1у 166 185 116 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 1208 125
Зо с1у о1у бег о1у сб1у о1у сб1у бег Ар ІІ1е б1п Меї Тпг б1іп 5ег Рго 1308 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су Аге 145 158 155 160
А1а Ахп б1п о01у І1е бег Ап Ап Гец Азп Тгр Туг б1п біп Гуз Рго 165 178 175 о1у Гуз Аїа Рго Гуз Рго Ге ІІе Туг Туг Тиг бег Азп Гец бІп 5ег 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тиг Ар Туг Тиг 195 290 295
Їеч Тйг ІІе 5ег бег Ге б1п Рго 010 Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Суз 2168 215 229 б1іп б1іп Рпе Тйг о бег Гей Рго Туг Тиг Рпе с1у Су5 о1у Тиг Гу Гец 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІи Маї б1п Гей Маї си 5ег
245 258 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец їу5 Гец 5ег Су5 А1а 260 265 279
А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 2908 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа А5зр бег Маї Гуз Азр Аге Рпе Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні Оо1у Азп 340 345 359
Рпе с01у Ап бег Туг І1е бег Туг Тгр Аї1а Туг Тер о1у сб1п с1у Тиг 355 зва 365
Зо
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 3708 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 399 395 4ев
Мма1ї! бег Рго б1у б1у Тпг Маї Тис Ге Тиг Суз б1у 5ег 5ег Тиг О1у 405 416 415
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 біп АТа Рго Аге с1у Гей І1е с1у о1у Тйг Гу5 Ре Гец Аа Рго о1у 435 44о 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге 4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго б1и Азр бі Аї1а б1и Туг Туг Су Маї1 465 470 475 480
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 490 495
Ммаї! Гей с1у о01у о1у с1у Азр Гу5 Тпг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 580 505 518
А1а Рго с1и Гец Гей сб1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи Рпе Рго Рго Гу 515 528 525
Рго Гуз Ар Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго біи Ма! Тиг Су Маї 539 535 540
Ммаї Маї Азр Маї бег Ні5 бІи Азр Рго б01и Маї Гу Рпе Азп Тгр Туг 545 550 555 560
Ммаї Азр с1у Маї оТи Маї Ніх5 Азп АТа Гуз Тиг Гуз Рго Суз оби си 565 5708 575 біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 5808 585 599 бІіп Ар Тер Гей Азп о1у Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Азп Гуз
Зо 595 6о0 605
А1а Гей Рго АІа Рго І1Іе б1и їу5 Типг І1е бег Туз АІа Гуз о1у бІп 618 615 620
Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тийг Ге Рго Рго бег Аг» бі бІи Мет 625 630 635 640
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 645 659 655 б5ег Азр І1е Аїа Маї б1и Тер бій бег Азхп 01у б1п Рго бій Абзп Азп 66О 665 670
Туг Гуз Тиг Тс Рго Рго Маї Ге Ар 5ег Азр с1у 5ег Рпе Ре Ге 675 680 685
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Ар Гуз 5ег Аг» Тер біп біп о1у Азп Маї 690 695 700
Рпе бег Суз бег Ма! Меє Ніх сб1и АТа Ге Ні Азп Ніх Туг Тиг сп 705 716 715 729
Гуз бег Ге б5ег Їеи б5ег Рго б01у Гуз с1у б1у с1у с1у бег о1у а1Уу 725 730 735 со1у о1у бег о01у с1у о01у с1у б5ег о1у с1у о1у с1у бег с1у с1у ос1у 740 745 7506 со1у бег б1у сб1у с1у с01у бег Ар Гу5 Тйг Ні Тиг Суб Рго Рго Су 755 760 765
Рго Аїа Рго бІ1и Гей Ге с01у с1у Рго бег Ма! Рпе Гей Ре Рго Рго 779 775 780
Гуз Рго Гуз Азр Тйг Ге Меї І1е 5ег Аг» ТИг Рго бі Маї Тиг Сув 785 798 795 зе
Ммаї Маї Маї Азр Маї бег Ніх бІи Ар Рго бІ1и Маї Гух Рпе Азп Тер 805 810 815
Туг Маї Азр с1у Маї с1и Маї Ні5 А5п АТа Гуз Тиг Гуз Рго Суз си 820 825 830
Зо бі біп Туг сб1у 5ег Тйг о Туг Аге Су5х Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Гец 835 840 845
Ні бІп Азр Тер Гей Азхп б1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї бег Ап 850 855 860
Гуз А1а Гец Рго АІа Рго І1е о1и Гуз Тиг І1е 5ег їуз Аа Гуз Оо1Уу 865 870 875 880 бІіп Рго Аге б1и Рго біп Ма! Туг Тиг Гей Рго Рго 5ег Аге 01 б1и 885 890 895
Меє Тиг Гуз Азп б1п Маї бег ей Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Ре Туг 900 905 910
Рго бег Азр І1е Аїа Ма! сб1и Тер бій бег Азхп б1у б1п Рго сбІи Авп 915 929 925
Азп о Туг Гуз Тс Тс Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе 930 935 940
Ге Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Азр Гуз б5ег Аг» Тгр біп б1п о1у Азп 945 950 955 960
Маї Рпе 5ег Су бег Ма! Меї Ні5 б1и А1а Гей Ні Ап Ні Туг ТАг 965 970 975 б1п Гуз бег Ге 5ег їеи 5ег Рго о1у Гуз 9808 985 «2105 88 «2115» 984 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 88 бІіи Маї б1п Гей Маї об1и б5ег с1у о1у о1у Геи Ма! б1п Рго с1у ос1у 1 5 18 15 б5ег Гей Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тийг Ріпе бег Азп Ре 20 25 30
Азр Меїє АТа Тер Маї Аге б1п Аїа Рго с1у Гу5 Су5 Гей Ма! Тер Маї!
Зо 35 4 45 б5ег 5ег І1е Тийг Тпг с1у с1у о1у Ар Тиг Туг Туг А1а Азр 5ег Маї! 58 55 ва
Гуз б1у Аг» Рпе Тйг І1е бег Аге Ар Азп АТа Гу5 бег Тиг Геци Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азр 5ег Гец Аге бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Мма1 Аг» Ні5 01у Туг Туг Азр сІ1у Туг Ні Гец Рпе Азр Туг Тер О1Уу 188 185 118 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 115 129 125 со1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег Азр І1е бІ1п Меє Тиг біп 5ег Рго 138 135 140 б5ег б5ег Ге б5ег А1а бег Ма! б1у Азр Аг» Ма! Тиг Іе Тиг Су Аге 145 1509 155 160
А1а Азп б1п б1у ІТе бег Абзп Азп Гей Азп Тгр Туг бІп біп Гуз Рго 165 176 175 о1у Гуз Аїа Рго Гуз Рго Ге ІІе Туг Туг Тиг бег Азп Гец бІп 5ег 188 185 199 с1у Маї Рго 5ег Аге Рпе бег б1у бег б1у 5ег б01у Тиг Ар Туг Тиг 195 290 295
Їеч Тйг ІІе 5ег бег Ге б1п Рго 010 Азр Рпе Аїа ТПг Туг Туг Суз 216 215 229 б1іп б1п Рпе Тиг обег Гей Рго Туг Тиг Рпе с1у Су5 о1у ТПг Гуз Ге 225 230 235 240 бій ІІе Гуз бег с1у о01у с1у с1у бег бІ1и Маї б1п Гей Маї си 5ег 245 258 255 со1у о1у о1у Геи Маї б1п Рго с1у с1у бег їец їу5 Гец 5ег Су5 А1а 260 265 279
Зо А1а бег б1у Рпе Тиг Рпе Азп Гух Туг Аїа Меї Азп Тгр Маї Аге бІп 275 2808 285
А1а Рго с01у ух о01у Гей б1и Тер Ма! Аїа Аг» І1е Аге 5ег Гу Туг 298 295 309
Абзп Азп Туг АТа Тйг о Тубс Тугс АТа Ар бег Маї губ Ар Аге Рпе Тиг 395 316 315 329
І1е бег Аг Ар Ар бег Гуз Азп Тиг АТа Туг Ге біп Меє Абзп Азп 325 339 335
Гей Гуз Тис бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су5 Маї Аге Ні с1у Азп 340 345 359
Рпе б1у Ахп бег Туг І1е 5ег Туг Тер Аїа Туг Тер б1у б1п сІ1у Тиг 355 зва 365
Їец Маї Тиг Маї бег 5ег б1у с1у с1у с1у бег с1у сб1у ос1у с1у 5ег 379 375 389 с1у о1у с1у о1у 5ег біп Тиг Маї Маї Тиг б1п 01 Рго 5ег Гей Тиг 385 399 395 4ев
Маї бег Рго б1у с01у Тпг Ма! Тйг Гей Тис Суз с1у бег 5ег Тиг о1у 405 416 415
А1а Маї Тис бег о01у Азп Туг Рго Азп Тер Маї сб1п бІп Гуз Рго о1у 420 425 430 бІіп АТа Рго Аге б1у Ге І1е б1у с1у Тйг Гу Ріе Ге А1а Рго с1у 435 44о 445
Те Рго Аї1а Аг» Рпе бег О01у бег Гей Ге о1у оО1у Гуз АІТа А1а Ге 4506 455 460
Тиг Ге бег с1у Маї б1п Рго бі Азр 01 АТа бІи Туг Туг Су Маї1 465 470 475 480
Ге Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Рпе с1у с1у о1у Тиг Гуз Геци Тпг 485 490 495
Ммаї Ге с1у с1у оІу с1у Ар Гуз Тпг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 580 505 518
Зо
А1а Рго с1и Гец Гей сб1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи Рпе Рго Рго Гу 515 529 525
Рго Гуз Ар Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго бій Ма! Тиг Су Маї 539 535 540
Ммаї Маї Азр Маї бег Ні5 бІи Азр Рго б01и Маї Гу Рпе Азп Тгр Туг 545 559 555 560
Ммаї Азр с1у Маї оТи Маї Ніх5 Азп АІіа Гуз Тпг Гуз Рго Су5 ої си 565 5708 575 біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 5808 585 599 бІіп Ар Тер Гей Азп о1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 5ег Ап Гуз 595 ве 605
А1а Гей Рго АТа Рго І1е 610 Гу5 Тпг І1е бег Гуз А1Т1а Гуз су бІп 618 615 620
Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тйг Гец Рго Рго 5ег Аге б1и сІи Мей
625 630 635 640
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 645 6509 655 б5ег Азр ІІе А1а Маї с1и Тер б01и бег Азп б1у біп Рго б1и Ап Ап 66О 665 670
Туг Гуз Тиг Тс Рго Рго Маї Ге Ар 5ег Азр с1у 5ег Рпе Ре Ге 675 680 685
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Ар Гуз 5ег Аг» Тер біп біп о1у Азп Маї 690 695 700
Рпе бег Суб бег Маї Меє Ні бій Аїа Ге Ні Азп Ні Туг Тиг б1п 705 716 715 729
Гуз бег Ге 5ег їеи б5ег Рго б1у б1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а(1Уу 725 730 735 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег б1у о01у сб1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 740 745 7506
Зо со1у о1у с1у о1у 5ег Азр Гуз Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Суз Рго А1а 755 760 765
Рго би Ге Гей оІ1у с01у Рго бег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго 779 775 780
Гуз Азр Тс Ге Меє І1е бег Аге Тг Рго біи Ма! Тиг Су Маї Маї 785 798 795 зе
Ммаї Азр Маї бег Ніх бІи Азр Рго бій Ма! Гуз Ре Ап Тгр Туг Маї 805 8108 815
Азр б1у Маї би Маї Ні5 Ап А1а ух Тиг Гуз Рго Суз оби о1и б1п 820 825 830
Туг б1у 5ег Тйг Туг Аге Суб5 Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Гецч Ні сІп 835 840 845
Азр Тер Ге Азп оТу Гуз бІТи Туг Гуз Суз Гуз Ма! бег Авзп Гуз АІа 859 855 860
Ге Рго Аїа Рго ІІе си Гуз Тиг І1е бег Гуз АІТа Гуз о1у бІп Рго 865 870 875 880
Агв бій Рго біп Маї Туг Тпг Гец Рго Рго 5ег Аг біи бІи Меє Тиг 885 890 895
Гуз Азп біп Ма! бег Ге Тйг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 5ег 980 985 910
Азр І1е А1ї1а Маї оТи Тер б1и бег Азп с1у б1іп Рго бІи Азп Азп Туг 915 920 925
Гуз Те Тис о Рго Рго МаїЇ Гей Азр бег Азр с01у бег Рпе Ріе Геи Туг 930 935 940 б5ег Гуз Ге Тпйг о Маї Ар Гу бег Аге Тер біп біп б01у Ап Ма1! РПе 945 950 955 960 б5ег Суз бег Ма1! Меї Ні5х бій А1Та Гей Ні Абхп Ні Туг Тиг біІп Гу 965 970 975 5ег Ге бег Ге бег Рго Оо1у Гуз
Зо 9808 «2105 81 «2115 5 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 81
Азр Туг Туг Те Авп 1 5 «2105 82 «2115 17 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 82
Тер ІІе Туг Рпе Діа 5ег б1у Азп бег 01 Туг Азп бІп Гуз Рпе Тиг 1 5 18 15 о1У «2105» 83 «2115 16 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 83
Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Ріе Ар Маї 1 5 18 «2105» 84 «2115 16 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 84
Зо Гуз 5ег бег біп бег Ге Маї Ні 5ег Азп б1у Азхп Тиг Туг Геци Ні 1 5 18 15 «2105» 85 «2115 7 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005» 85
Гуз Ма! 5ег Абзп Аге Ре 5ег 1 5 «2105» 86 «2115 9 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 86 б5ег б1п бег 5ег І1е Туг Рго Тер ТПг 1 5
«2105 87 «2115 119 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 87 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с1у Туг 5ег Ре Рго Ар Туг 20
Туг ІІе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго сб1у біп о01у Ге б1и Тер Мет 4 45 25 с1у Тер І1е Туг Рпе Аіа 5ег 01у Абхп 5ег бІи Туг Азп біп Гу5 Ріе 58 55 ва
Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Ап Тиг А1а Туг
Зо 65 78 75 80
Меє оІ1и Гей бег о б5ег Гей Типг о бег бі Азр Тиг АТа Маї Туг Ре Су 85 90 95 35
А1а бег Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у бІп о1Уу 188 185 118
Те Меє Маї Тиг Маї 5ег 5ег 115 «2105 88 «2115 112 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 88
Азр І1е Ма! Меї Тиг б1іп Тс Рго Гей бег Ге б5ег Ма! Тиг Рго о1у 1 5 18 15 б1іп Рго Аіа бег І1е бег Су5 Гуз бег бег біп бег Гей Маї Ні 5ег
20 25 30
А5зп б1у Азп Тйг о Тугс Ге Ні Тер Туг Ге б1п Гуз Рго о1у бІп бег 35 40 45
Рго біп Ге Ге І1е Туг Гуз Ма! бег Азп Аге Рпе 5ег б1у Маї Рго 58 55 ва
Азр Аге Ре бег б1у 5ег б1у бег б1у Тийг Ар Рпе ТПг Гей Гух Пе 65 78 75 ва б5ег Аге Ма! бій Аїа бі Азхр Ма! с1у І1е Туг Туг Су5 бег бІп 5ег 85 90 95 б5ег І1е Туг Рго Тер Тиг Рпе о01у б1п о1у Тпг Гу5 Гец би І1е Гуз 188 185 118 «2105 89 «2115 246 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220»
Зо «223» Синтетичний пептид «400» 89 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с1у Туг 5ег Ре Рго Ар Туг 20 25 30
Туг Іе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго сб1у біп о01у Ге б1и Тер Меє 35 4 45 о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа б5ег с1у Ап бег бІи Туг Азп біп Гуз Ре 58 55 ва
Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Азп Тиг А1а Туг 65 78 75 ва
Меє оІ1и Гей бег о б5ег Гей Типг о бег бі Азр Тиг АТа Маї Туг Ре Су 85 90 95
А1а бег Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у бІп о1Уу 188 185 118
Тиг Мет Маї Тиг Маї 5ег бег с01у сб1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 115 129 125 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег Азр І1е Ма! Меї Тпг біп Тпг Рго Геи 5бег 138 135 140
Їеч бег Маї Тйг Рго с1у б1п Рго Діа 5ег І1е 5ег Су Гу5 5ег бег 145 1509 155 160 біп бег Ге Маї Ні бег Азп б1у Азп Тйг Туг Гец Ні Тер Туг Гец 165 178 175 б1іп Гуз Рго о1у б1п бег Рго біп Ге ей І1е Туг Гуз Маї 5бег Азп 1809 185 199
Аге Рпе бег б1у Маї Рго Азр Аг» Рпе бег б1у 5ег б1у 5ег с1у Тиг 195 290 295
Азр Рпе Тиг Ге Гуз І1е 5ег Аг» Ма! бі Аїа бій Азр Ма! с1у Пе 216 215 220
Зо
Туг Туг Суз 5ег біп 5ег бег І1е Туг Рго Тгр Тиг Рпе о1у бІп о1у 225 230 235 240
Те Гуз Гец б1и Пе Гу 245 «2105 98 «2115 581 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 98 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Ма! бег Суз Гуз Аїа бег с1у Туг 5ег Ре Рго Ар Туг 20 25 30
Туг Іе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго сб1у біп о01у Ге б1и Тер Меє 35 4 45 о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа бег о01у Ап бег бІи Туг Азп б1п Гуз Рпе 50 55 60
Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Азп Тиг А1а Туг 65 70 75 80
Мет бі Гей бег бег Ге Тиг бег бій Азр Тпг АТа Маї Туг Рпе Су 85 90 95
А1а бег Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у бІп о1Уу 188 185 116
Тиг Мет Маї Тиг Маї 5ег бег с01у сб1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 115 1208 125 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег Азр І1е Ма! Меї Тпг біп Тпг Рго Геи 5бег 1308 135 140
Їеч бег Маї Тйг Рго с1у б1п Рго Діа 5ег І1е 5ег Су Гу5 5ег бег 145 158 155 160
Зо біп бег Ге Маї Ні бег Азп б1у Азп Тйг Туг Гец Ні Тер Туг Гец 165 176 175 б1іп Гуз Рго о1у б1п бег Рго біп Ге ей І1е Туг Гуз Маї 5бег Азп 1809 185 199
Аге Рпе бег б1у Маї Рго Азр Аг» Рпе бег б1у 5ег б1у 5ег с1у Тиг 195 290 295
Азр Рпе Тиг Ге Гуз І1е 5ег Аг» Ма! бі Аїа бій Азр Ма! с1у Пе 2168 215 229
Туг Туг Суз 5ег біп 5ег бег І1е Туг Рго Тгр Тиг Рпе о1у бІп о1у 225 230 235 240
Те Гуз Ге бій І1е ух бег б1у с1у с1у о1у бег 01и Маї бІп Ге 245 258 255
Ммаї бій 5ег б1у оІ1у с1у Гей Маї біп Рго с1у (1у бег ей уз Ге 260 265 279 б5ег Суз Аїа А1а бег с01у Рпе Тпг Рпе Азп Гуз Туг Аїа Меї Азп Тер 275 2808 285
Мма1ї! Аг» біп АТа Рго с1у Гуз с1у Ге бі Тер Ма! А1а Аг Пе Аг; 2908 295 309 б5ег Гуз Туг Азп Азп Туг АІїа Тиг Туг Туг АТїа Азр 5ег Маї Гуз Аз5р 395 316 315 329
Аге Рпе Тиг ІТе бег Аг Ар Ар б5ег Гу5 Ап Тг А1Іа Туг Гецй бІп 325 339 335
Мект Абп Азп Гей Гуз Тйг бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Суб Маї Аге 340 345 359
Ні5 с01у Азп Рпе б1у Ап бег Туг І1е 5ег Туг Тгр АІїІа Туг Тер а1Уу 355 зво 365 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 3708 375 389 с1у о1у бег с01у с1у о0І1у с1у б5ег б1п Тйг Маї Маї Тиг бІ1п си Рго 385 399 395 4ев
Зо б5ег Ге Тиг Маї бег Рго б1у с1у Тпг Маї Тйг Ге Тйг Суз о1у бег 405 416 415 б5ег Тпг б1у Аїа Ма! Тийг бег б1у Азп Туг Рго Азхп Тгр Ма! б1п сІп 420 425 430
Гуз Рго б1у біп Аїа Рго Аге б1у Гей І1е с1у о01у Тиг Гу5 Ріе Ге 435 дда 445
А1а Рго б01у Тиг Рго А1а Аге Рпе 5ег о01у бег Гец Гец с1у с1у Гуз 4506 455 460
А1а А1а Ге Тпг Гей б5ег с0І1у Маї б1іп Рго си Азхр си Аа с1и Туг 465 470 475 480
Туг Суз Маї Гей Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Ре о1у о01у с1у Тиг 485 490 495
Гуз Гей Тиг Маї Гец 580 «2105 91
«2115 989 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 91 біп Маї б1п Ге Маї б1іп бег о01у А1а б1и Маї Гу5 Гу5 Рго с1у Аа 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с1у Туг 5ег Ре Рго Ар Туг 36
Туг Ше Ап Тер Маї Аге б1п Аїа Рго б01у б1п с1у Гей б1и Тер Меї 4 45 20 о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа б5ег с1у Ап бег бІи Туг Азп біп Гуз Ре 58 55 ва 25
Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Азп Тиг А1а Туг 65 78 75 ва
Зо Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Тпг о бег бі Азр Тпг Аїа Ма! Туг Ре Су 85 90 95
А1а бег Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у бІп о1Уу 35 188 185 116
Тиг Мет Маї Тиг Маї 5ег бег с01у сб1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 115 129 125 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег Азр І1е Ма! Меї Тпг біп Тпг Рго Геи 5бег 138 135 140
Їеч бег Маї Тйг Рго с1у б1п Рго Діа 5ег І1е 5ег Су Гу5 5ег бег 145 1509 155 160 біп бег Ге Маї Ні бег Азп б1у Азп Тйг Туг Гец Ні Тер Туг Гец 165 178 175 б1іп Гуз Рго о1у б1п бег Рго біп Ге ей І1е Туг Гуз Маї 5бег Азп 1809 185 199
Аге Рпе бег б1у Маї Рго Азр Аг» Рпе бег б1у 5ег б1у 5ег с1у Тиг 195 290 295
Азр Рпе Тиг Ге Гуз І1е 5ег Аг» Ма! бі Аїа бій Азр Ма! с1у Пе 2168 215 229
Туг Туг Суз 5ег біп 5ег бег І1е Туг Рго Тгр Тиг Рпе о1у бІп о1у 225 230 235 240
Тиг Гуз Ге 01 І1е Гуз бег о01у б1у с1у с1у 5ег би Маї бІп Ге 245 258 255
Ммаї! б1и б5ег 01у о01у с1у Ге Ма! б1п Рго о1у с1у 5ег Гей Гу Гец 260 265 279 б5ег Суз Аїа А1а бег с01у Рпе Тпг Рпе Азп Гуз Туг Аїа Меї Азп Тер 275 2808 285
Мма1ї! Аг» біп АТа Рго с1у Гуз с1у Ге бі Тер Ма! А1а Аг Пе Аг; 2908 295 309 б5ег Гуз Туг Азп Азп Туг Аїа Тийг Туг Туг АТа Азр 5ег Маї1 Гуз Ар 395 316 315 329
Зо
Аге Рпе Тиг ІТе бег Аг Ар Ар б5ег Гу5 Ап Тг А1Іа Туг Гецй бІп 325 339 335
Мект Абп Азп Гей Гуз Тйг бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су Маї Аге 340 345 359
Ні5 с01у Азп Рпе б1у Ап бег Туг І1е 5ег Туг Тгр АІїІа Туг Тер а1Уу 355 зво 365 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у о1у с1у 5ег с1у ос1у 3708 375 389 со1у о1у бег о01у с1у о0І1у с1у б5ег б1п Тпйг Маї Маї Тиг бІ1п си Рго 385 399 395 4ев б5ег Ге Тиг Маї бег Рго б1у с1у Тпг Маї Тпг Ге Тйг Суз о1у бег 405 416 415 б5ег Тпг б1у Аїа Ма! Тийг бег б01у Азп Туг Рго Азхп Тгр Ма! б1п сІп 420 425 430
Гуз Рго б1у біп Аїа Рго Аге б1у Гей І1е с1у о01у Тиг Гуз Ре Гец
435 44о 445
А1а Рго б01у Тиг Рго А1а Аге Рпе бег 01у бег Гей Гей с1у су Гу 450 455 460
А1а А1а Ге Тпг Гей б5ег о01у Маї б1іп Рго со1и Азхр сТи АТа си Туг 465 470 475 480
Туг Суз Маї Гей Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Ре о1у о1у о1у Тиг 485 490 495
Гуз Ге Тиг Маї Ге с1у ос1у с1у о1у Азр Гу5 Тпг Ні Тиг Су Рго 580 505 518
Рго Суб Рго Аїа Рго бій Гей Гец бІ1у б01у Рго 5ег Ма! Рпе Гей Ре 515 529 525
Рго Рго Гу Рго Гуз Азр ТИг Ге Меї І1е 5ег Аг» Тиг Рго бІи Маї 5308 535 540
Тиг Суз Маї Маї Маї Азр Маї бег Ні с01и Ар Рго бІи Маї Гуз Рпе 545 550 555 560
Зо
Азп Тер Туг Маї Азр сб1у Маї оби Маї Ні5 Ап АТа Гу Тиг Гуз Рго 565 5708 575
Суз бі бій біп Туг о01у бег Тйг Туг Аге Суб Маї бег Маї Геи Тпг 5808 585 599
Уаї Гей Ні5 біп Ар Тер Гей Ахп с1у Гу5 б1и Туг Гуз Су Гу Маї 595 ве 605 б5ег Азп Гуз АТ1Іа Гей Рго АІа Рго І1е сб1и Гуз Тиг І1е бег Гуз АІа 618 615 620
Гуз б1у біп Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тиг Геи Рго Рго 5ег Аге 625 630 635 640 б1іи соТи Меє Тиг Гуз Азп біп Маї бег Ге Тиг Суз Гей Маї Гуз о1у 645 659 655
Рпе Туг Рго бег Азр ІІе Аїа Ма! о1и Тер об01и бег Азп о1у сбІп Рго 66О 665 670 б1и Ап А5п о Тубс Гуз Тс Тс Ргсо Рго Маї Гей Азр бег Азр Оо1у 5ег 675 680 685
Рпе Рпе Ге Туг бег Гуз Гей Тиг Маї Ар Гуз 5ег Аге Тгр б1п б1п 690 695 700 о1у Азп Ма! Ре 5ег Суб5 5ег Ма! Меї Ніх5 01 АІТа Гей Ні Ап Ні 785 718 715 729
Туг Тйг бІп Гуз бег Ге бег Геу бег Рго с1у Гуз сб1у о1у ос1у а1у 725 730 735 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег б1у о01у сб1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 740 745 7506 со1у о1у с1у о1у 5ег о01у с1у с1у с1у бег Азр Гуз Тиг Ні Тиг Су 755 760 765
Рго Рго Суб5 Рго АТа Рго б1и Гей Гец б01у 01у Рго 5ег Ма1! Рпе Гец 779 775 780
Рпе Рго Рго Гу Рго Гуз Азр ТИг Ге Меї І1е 5ег Аге Тиг Рго би
Зо 785 798 795 зе
Ммаї Тиг Суз Маї Маї Маї Азр Ма! бег Ніх 01и Ар Рго о1Їи Маї Гу 805 810 815
Рпе Азп Тгр Туг Маї Азр о1у Ма! оТи Маї Ніх5 Азп АІа Гуз Тиг Гуз 820 825 830
Рго Сух5 бі бі біп Туг б1у бег Тйг Туг Аге Су5 Ма! 5ег Маї Ге 835 840 845
Тис Маї Гей Ні біп Ар Тер Гей Азп о1у Гу б1и Туг Гуз Су Гуз 859 855 860
Ммаї бег Азп Гуз АТа Гей Рго Аї1а Рго І1е бІ1и їу5 Тйг Пе 5ег Гу 865 870 875 880
А1ї1а Гуз о1у біп Рго Аге бі Рго біп Ма! Туг Тйг Гей Рго Рго 5ег 885 890 895
Аге бі бі Мет Тиг Гуз Азп біп Маї бег Ге Тиг Су5 Гей Маї Гу 900 905 910
Оо1у Ре Туг Рго 5ег Азр І1е ДАІа Маї о1и Тер о1и 5ег Азп о1у сп 915 920 925
Рго бІ1и Азп Азп Тубсб Гуз Тс Тс Ргсо Рго Маї Ге Азр 5ег А5р п01у 930 935 940 бег Рпе Рпе Гей Туг бег Гу5 Гей Тиг Маї Ар Гуз 5ег Аге Тер бІп 945 950 955 960 б1іп о1у Ап Ма! Рпе бег Суз бег Маї Меї Ні о1и АТа Гей Ні Ап 965 970 975
Ні Туг Тиг б1п Гуз 5ег Ге бег Ге 5ег Рго о1у Гуз 9808 985 «2105 92 «2115 987 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
Зо «4005 92 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа б5ег о1у Туг бег Ріпе Рго Азр Туг 20 25 30
Туг Іе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго сб1у біп о01у Ге б1и Тер Меє 35 4 45 о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа б5ег с1у Ап бег бІи Туг Азп біп Гуз Ре 58 55 60
Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Азп Тиг А1а Туг 65 78 75 ва
Меє оІ1и Гей бег о б5ег Гей Типг о бег бі Азр Тиг АТїа Маї Туг Ре Су 85 90 95
А1а бег Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у бІп о1Уу 188 185 118
Тиг Мет Маї Тиг Маї 5ег бег о1у сб1у о1у сб1у 5ег сб1у ос1у с1у а1у 115 1208 125 б5ег біу б1у с1у с1у бег Азр І1е Ма! Меє Тпг біп Тиг Рго Гей 5ег 1308 135 140
Їеч бег Маї Тйг Рго с1у б1п Рго Діа 5ег І1е 5ег Су Гу5 5ег 5ег 145 1509 155 160 б1п бег Ге Маї Ні5 бег Азп 01у Азп Тиг Туг Гей Ні Тер Туг Ге 165 176 175 бІіп Гуз Рго о1у б1п бег Рго біп Ге ей І1е Туг Гуз Маї бег Ап 188 185 199
Аге Рпе бег б1у Маї Рго Азр Аг» Рпе бег б1у 5ег б1у 5ег с1у Тиг 195 290 295
Азр Рпе ТиИг Гей Гуз І1е 5ег Аге Ма! б1и А1ї1а бій Ар Маї о1у І1е 2168 215 229
Туг Туг Суз 5ег біп 5ег бег І1е Туг Рго Тгр Тиг Рпе о1у бІп о1у
Зо 225 230 235 240
Тиг Гуз Ге б0їи ІІе Гуз бег б1у о1у с1у о01у 5ег оЇи Маї с1п Ге 245 258 255
Ммаї бій 5ег б1у оІ1у с1у Гей Маї біп Рго с1у (1у бег ей уз Ге 260 265 279 б5ег Суз Аїа А1а бег с01у Рпе Тпг Рпе Азп Гуз Туг Аїа Меї Азп Тер 275 2808 285
Мма1ї! Аг» біп АТа Рго с1у Гуз с1у Ге бі Тер Ма! А1а Аг Пе Аг; 2908 295 309 б5ег Гуз Туг Азп Азп Туг АІїа Тиг Туг Туг АТїа Азр 5ег Маї Гуз Аз5р 305 319 315 329
Аге Рпе Тиг ІТе бег Аг Ар Ар б5ег Гу5 Ап Тг А1Іа Туг Гецй бІп 325 339 335
Мект Абп Азп Гей Гуз Тйг бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Суб Маї Аге 340 345 359
Ні5 с01у Азп Рпе б1у Ап бег Туг І1е 5ег Туг Тгр АІїІа Туг Тер а1Уу 355 зва 365 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег б1у о1у с1у о1у 5ег с1у ос1у 3708 375 389 с1у о01у 5ег сб1у сі1у с1у с1у б5ег біп Тйг Маї Маї Тис б1п си Рго 385 399 395 4ев б5ег Ге Тиг Маї бег Рго б1у с1у Тпг Маї Тйг Ге Тйг Суз о1у бег 405 416 415 б5ег Тпг о1у Аїа Маї Тпг бег о1у Ап Туг Рго Азхп Тгр Маї бІп сп 420 425 430
Гуз Рго б1у біп Аїа Рго Аге б1у Гей І1е с1у о01у Тиг Гу5 Ріе Ге 435 44о 445
А1а Рго б01у Тиг Рго А1а Аге Рпе бег 01у бег Гей Гей с1у су Гу 4506 455 460
Зо А1ї1а А1ї1а Ге Тиг Гец б5ег б1у Ма! б1п Рго 01 Азр б1и А1а сІи Туг 465 470 475 480
Туг Суз Маї Гей Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Ре о1у о1у о1у Тиг 485 499 495
Гуз Ге Тиг Маї Ге с1у с1у с1у с1у Азр Гуз Тиг Ні Тиг Су Рго 580 505 518
Рго Су Рго Аїа Рго бій Гей Ге о01у с01у Рго бег Маї Ріе Гей Ріе 515 529 525
Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тг Гец Меє І1е бег Аге Тиг Рго сІи Маї 539 535 540
Те Суз Маї Маї Маї Азр Маї бег Ні бій Ар Рго бі Маї Гу РПе 545 550 555 560
Азп Тер Туг Маї Азр сб1у Маї оби Маї Ні5 Ап АТа Гу Тиг Гуз Рго 565 579 575
Суз бі бій біп Туг о01у бег Тйг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Маї Геи Тпг 5808 585 599
Ммаї Гец Ніх бІ1п Азр Тгр Гей Азп с1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 595 ве 605 б5ег Азп Гуз АТ1Іа Гей Рго АІа Рго І1е сб1и Гуз Тиг І1е бег Іїуз АІа 618 615 620
Гуз б1у біп Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тиг Геи Рго Рго 5ег Аге 625 630 635 640 бі бі Меє Тйг Гуз Азп біп Ма! бег Гей ТПг Су5 Ге Маї Гуз с1у 645 659 655
Рпе Туг Рго бег Азр ІІе Аїа Ма! о1и Тер об01и бег Азп о1у сбІп Рго 6в6О 665 670 бІ1и Ап Абп о Тубсб Гуз Тс Тс Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр с01у бег 675 680 685
Рпе Рпе Ге Туг бег Гуз Гей Тиг Маї Ар Гуз 5ег Аге Тгр б1п б1п 690 695 700
Зо о1у Азп Маї Ре бег Суз бег Ма! Меє Ніх5 01 Аа Ге Ні Ап Ні 705 716 715 729
Туг Те біп ух бег Ге бег Гей 5ег Рго біу б1у о1у о1у бег с1у 725 730 735 с1у о1у с01у бег бі1у с1у с1у о1у бег с1у сб1у с1у с1у 5ег с1у о1у 740 745 7506 со1у о1у бег о01у с1у о0І1у с1у б5ег Ар Гуз Тиг Ні Тиг Су Рго Рго 755 760 765
Суз Рго Аїа Рго бій Ге еп с01у б1у Рго бег Маї Рпе Гей Рпе Рго 779 775 780
Рго Гуз Рго Гуз Азр Тйг Гей Меє ІТ1е бег Аге Тйг Рго бІи Маї Тиг 785 798 795 зе
Сузх Ма! Ма! Маї Азр Маї бег Ні бій А5р Рго бі Маї Гу5 Ре Азп 805 810 815
Тер Туг Маї Азр с1у Маї би Маї Ні5 Ахп АІа Гу5 Типг Гуз Рго Суз
820 825 830 бі бі б1п Тугс б1у бег Тйг о Туг Аге Суз Маї бег Маї Геци Тиг Маї 835 840 845
Ге Ні біп Азр Тер Ге Азп о1у Гуз 01 Туг Гуз Суз Гуз Маї бег 850 855 вва
А5п Гуз АТ1а Гей Рго Аіа Рго І1е о1и ух Тиг І1е бег Гуз Аа Гу 865 870 875 880 с1у б1п Рго Аге бій Рго біп Маї! Туг Тйг Гей Рго Рго 5ег Аге б1и 885 890 895 бі Мет Тпг Гуз Азп біп Ма! бег Ге Тйг Су5з Гец Маї Гух о1у Ріе 980 985 910
Туг Рго бег Азр ІІе А1ї1а Маї о0їи Тер сб1и бег Азп б1у біп Рго си 915 920 925
Азп Азп о Туг Гуз Тс Те Ргсо Рго Маї Ге Ар 5ег Азр о1у 5ег Рпе 930 935 940
Зо
Рпе Гей Туг бег Гу5 Гей Тпг Маї Азр Гуз 5ег Аге Тгр б1п с1п о1у 945 950 955 960
Азп Ма! Рпе бег Суб бег Ма! Меї Ні5 01 ДАІа Ге Ні Азп Ні Туг 965 970 975
Те б1п Гу5 5ег Гец бег Гец бег Рго О1у Гу 9808 985 «2105 93 «2115 119 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 93 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с1у Туг 5ег Ре Рго Ар Туг 20 25 30
Туг ІІе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго с1у біп Сух Ге б1и Тер Меє 35 4 45 о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа б5ег с1у Ап бег бІи Туг Азп біп Гуз Ре 58 55 ва
Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Азп Тиг А1а Туг 65 78 75 ва
Мет бі Гей б5ег б5ег Гей Тпг о бег бі Азр Тпг Аїа Ма! Туг Ре Су 85 90 95
А1а бег Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у бІп о1Уу 188 185 116
Те Меє Маї Тиг Маї 5ег 5ег 115 «2105 94 «2115 112 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 94
Азр І1е Ма! Меє Тиг бІп Тиг Рго Гей 5ег їец б5ег Ма! Тиг Рго о1у 1 5 18 15 б1іп Рго Аіа бег І1е бег Су5 Гуз бег бег біп бег Гей Маї Ні 5ег 20 25 30
Азп б1у Ахп Тйг о Туг Гей Ні Тер Туг Ге біп Гу5 Рго с1у сп 5ег 35 4 45
Рго біп Ге Ге І1е Туг Гуз Ма! бег Азп Аге Рпе 5ег б1у Маї Рго 58 55 60
Азр Аге Ре бег б1у 5ег б1у бег б1у Тийг Ар Рпе Тиг Гей Гух Пе 65 78 75 ва б5ег Аге Ма! бій Аїа бі Азхр Ма! с1у І1е Туг Туг Су5 бег бІп 5ег 85 90 95 б5ег І1е Туг Рго Тер Тпг Рпе о1у Сузх с1у Тпг Гуз Ге ої Пе Гуз 188 185 118 «2105 95 «2115 246 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 95 б1іп Маї б1п Гей Маї б1п 5ег с1у АТа си Маї Гуз Гу5 Рго с1у Аа 1 5 18 15 б5ег Ма! Гух Маї бег Су5 Гуз Аї1а 5ег б01у Туг бег Ріпе Рго Ар Туг 20 25 30
Туг Іе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго с1у біп Сух Ге б1и Тер Меє о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа б5ег с1у Ап бег бІи Туг Азп біп Гуз Ре 58 55 ва
Зо
Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег ІТе Азхп Тиг А1а Туг 65 78 75 ва 35
Меє оІ1и Гей бег о б5ег Гей Типг о бег бі Азр Тиг АТа Маї Туг Ре Су 85 90 95 40 А1а б5ег еп Туг Ар Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у бІп о1у 188 185 118
Тиг Мет Маї Тиг Маї 5ег бег с01у сб1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 45 115 129 125 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег Азр ІІ1е Ма! Меї Тпг біп Тпг Рго Геци 5ег 138 135 140
Їеч бег Маї Тйг Рго с1у б1п Рго Діа 5ег І1е 5ег Су Гу5 5ег бег 145 1509 155 160 б1п бег Ге Маї Ніб5 бег Азп о1у Азп Тиг Туг Гец Ні Тер Туг Ге 165 178 175 б1іп Гуз Рго о1у б1п бег Рго біп Ге ей І1е Туг Гуз Маї 5бег Азп 1809 185 199
Аге Рпе бег б1у Ма! Рго Ар Аге Ре 5ег б1у 5ег б1у бег о1у ТАпг 195 290 295
Азр Рпе Тиг Ге Гуз І1е 5ег Аг» Ма! бі Аїа бій Азр Ма! с1у Пе 216 215 229
Туг Туг Суз бег біп бег бег І1е Туг Рго Тер Тпг Ріе су Су а1у 225 230 235 240
Тиг Гуз Ге си Пе Гуз 245 «2105 96 «2115 581 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 96
Зо б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Ма! Гух Маї бег Су5 Гуз Аї1а 5ег б01у Туг бег Ріпе Рго Ар Туг 20 25 30
Туг ІІе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго с1у біп Сух Ге б1и Тер Меє 35 46 45 о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа б5ег с1у Ап бег бІи Туг Азп біп Гуз Ре 58 55 ва
Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Азп Тиг А1а Туг 65 78 75 ва
Меє оІ1и Гей бег о б5ег Гей Типг о бег бі Азр Тиг АТа Маї Туг Ре Су 85 90 95
А1а б5ег еп Туг Ар Туг Азр Тер Туг Ре Азр Ма! Тер с1у с1п о1Уу 188 185 118
Тиг Мет Маї Тиг Маї 5ег бег с01у сб1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу
115 1208 125 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег Азр І1е Ма! Меї Тпг біп Тпг Рго Геи 5бег 138 135 140
Їеч бег Маї Тйг Рго с1у б1п Рго Діа 5ег І1е 5ег Су Гу5 5ег 5ег 145 158 155 160 б1п бег Ге Маї Ні5 бег Азп 01у Азп Тиг Туг Гей Ні Тер Туг Ге 165 176 175 б1іп Гуз Рго о1у б1п бег Рго біп Ге ей І1е Туг Гуз Маї бег Азп 188 185 199
Аге Рпе бег б1у Маї Рго Азр Аг» Рпе бег б1у 5ег б1у 5ег с1у Тиг 195 290 295
Азр Рпе Тиг Ге Гуз І1е 5ег Аг» Ма! бі Аїа бі Азр Ма! с1у Пе 216 215 229
Туг Туг Суз 5ег біп 5ег бег І1е Туг Рго Тгр Тиг Рпе о1у Суз о1У 225 230 235 240
Зо
Тиг Гуз Ге 01 І1е Гуз бег о01у сб1у оІ1у с1у 5ег б01и Маї сп Гец 245 258 255
Ммаї бій 5ег б1у оІ1у с1у Гей Маї біп Рго с1у (1у бег ей уз Ге 260 265 279 б5ег Суз А1а А1ї1а бег б1у Ре Тийг Рпе Азп Гух Туг АТа Меє Азп Тер 275 2808 285
Мма1ї! Аг» біп АТа Рго с1у Гуз с1у Ге бі Тер Ма! А1а Аг Пе Аг; 298 295 309 б5ег Гуз Туг Азп Азп Туг АТїа Типг Туг Туг АТїа Азр бег Маї Гуз Ар 395 316 315 329
Аге Рпе Тиг ІТе бег Аг Ар Ар б5ег Гу5 Ап Тг А1Іа Туг Гецй бІп 325 339 335
Мет Ап Азп Гец ух Тйг бі Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Су Маї Аг5 340 345 359
Ні5 с01у Азп Рпе б1у Ап бег Туг І1е 5ег Туг Тгр АІїІа Туг Тер а1Уу 355 зво 365 біп с1у Тс Ге Маї Тиг Маї 5ег б5ег б1у с1у о01у о1у 5ег с1у О1Уу 379 375 380 со1у о1у бег о01у с1у о0І1у с1у б5ег б1п Тпйг Маї Маї Тиг бІ1п си Рго 385 390 395 4е0 б5ег Ге Тиг Маї бег Рго б1у с1у Тпг Маї Тйг Ге Тйг Суз о1у бег 485 416 415 б5ег Тпг о1у Аїа Маї Тпг бег о1у Ап Туг Рго Азхп Тгр Маї бІп сп 420 425 430
Гуз Рго б1у біп Аїа Рго Аге б1у Гей І1е с1у о01у Тиг Гу5 Ріе Ге 435 дда 445
А1а Рго б01у Тиг Рго А1а Аге Рпе бег 01у бег Гей Гей с1у су Гу 450 455 460
А1а А1а Ге Тпг Гей б5ег с0І1у Маї б1іп Рго си Азхр си Аа с1и Туг
Зо 465 470 475 480
Туг Суз Маї Гей Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Ре о1у о1у о1у Тиг 485 490 495
Гуз Геч Тиг Маї Ге 589 «2105 97 «2115 989 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 97 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Ма! Гух Маї бег Су5 Гуз Аї1а 5ег б01у Туг бег Ріпе Рго Ар Туг 20 25 30
Туг ІІе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго с1у біп Сух Ге б1и Тер Меє
35 40 45 о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа б5ег с1у Ап бег бІи Туг Азп біп Гуз Ре 58 55 60
Те б1у Аге Ма! Те Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Азп Тиг А1Та Туг 65 70 75 80
Меє оІ1и Гей бег о б5ег Гей Типг о бег бі Азр Тиг АТа Маї Туг Ре Су 85 90 95
А1а бег Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у с1п о1Уу 166 185 116
Те Меє Ма! Тис Маї бег бег б1у с1у с1у о1у бег о1у о1у о1у с1у 115 1208 125 б5ег б1у с1у с1у б1у 5ег Азр І1е Ма! Меє Типг бІп Тиг Рго Геи 5ег 138 135 140
Їеч бег Маї Тйг Рго с1у б1п Рго Діа 5ег І1е 5ег Су Гу5 5ег бег 145 158 155 160
Зо б1п бег Ге Маї Ні5 бег Азп 01у Азп ТПг Туг Гей Ні Тер Туг Ге 165 176 175 б1іп Гуз Рго о1у б1п бег Рго біп Ге ей І1е Туг Гуз Маї 5бег Азп 188 185 199
Аге Рпе бег б1у Маї Рго Азр Аг» Рпе бег 01у 5ег б1у б5ег О1у Тиг 195 290 295
Азр Рпе Тиг Ге Гуз І1е 5ег Аг» Ма! бі Аїа бій Азр Ма! с1у Пе 216 215 229
Туг Туг Суз 5ег біп 5ег бег І1е Туг Рго Тер Тиг Рпе о1у Суз о1у 225 230 235 240
Тиг Гуз Ге 01 І1е Гуз бег о01у б1у с1у с1у 5ег би Маї бІп Ге 245 258 255
Ммаї бій 5ег сб1у с1у о1у Ге Маї б1п Рго с1у о1у 5ег їецй Гуз Ге 260 265 279 б5ег Суз Аїа А1а бег с01у Рпе Тпг Рпе Азп Гуз Туг Аїа Меї Азп Тер 275 2808 285
Мма1! Агв біп А1їа Рго сб1у ух о1у Ге б1и Тер Маї А1а Аге І1е Аге 2908 295 309 б5ег Гуз Туг Азп Азп Туг АІїа Тиг Туг Туг АТїа Азр 5ег Маї Гуз Аз5р 305 319 315 320
Аге Рпе Тиг ІТе бег Аг Ар Ар б5ег Гу5 Ап Тг А1Іа Туг Гецй бІп 325 339 335
Мект Абп Азп Гей Гуз Тйг бій Азр Тйг АТа Маї Туг Туг Суб Маї Аге 340 345 358
Ні5 с01у Азп Рпе б1у Ап бег Туг І1е 5ег Туг Тгр АІїІа Туг Тер а1Уу 355 зва 365 біп с01у Тйг Ге Ма! Тис Маї б5ег бег б1у с1у с01у о1у 5ег о1у О1у 3708 375 388 со1у о1у бег о01у с1у о0І1у с1у б5ег б1п Тпйг Маї Маї Тиг бІ1п си Рго
Зо 385 390 395 4ев б5ег Ге Тиг Маї бег Рго б1у с1у Тпг Маї Тйг Ге Тйг Суз о1у бег 405 416 415 б5ег Тпг о1у Аїа Маї Тпг бег о1у Ап Туг Рго Азхп Тгр Маї бІп сп 420 425 430
Гуз Рго б1у біп Аїа Рго Аге б1у Гей І1е с1у о01у Тиг Гу5 Ріе Ге 435 дда 445
А1а Рго б01у Тиг Рго А1а Аге Рпе бег 01у бег Гей Гей с1у су Гу 4506 455 460
А1а А1а Ге Тпг Гей б5ег с0І1у Маї б1іп Рго си Азхр си Аа с1и Туг 465 470 475 480
Туг Суз Маї Гей Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Ре о1у о1у о1у Тиг 485 490 495
Гуз Ге Тиг Маї Ге с1у с1у с1у с1у Азр Гуз Тиг Ні Тиг Су Рго 580 505 518
Рго Су Рго Аїа Рго бІи Гей Ге с01у сб1у Рго бег Ма1ї! Ріе Гей Ріе 515 529 525
Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тг Гец Меє І1е бег Аге Тиг Рго сІи Маї 5308 535 540
Те Суз Маї Маї Маї Азр Маї бег Ні бій Ар Рго бі Маї Гуз Ре 545 550 555 560
Азп Тер Туг Маї Азр сб1у Маї оби Маї Ні5 Ап АТа Гу Тиг Гуз Рго 565 579 575
Суз бі бій біп Туг о01у бег Тйг Туг Аге Суб Маї бег Маї Геи Тпг 5808 585 599
Ммаї Гец Ні бІ1п Азр Тгр Гей Азп о1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 595 ве 605 б5ег Азп Гуз АТ1Іа Гей Рго АІа Рго І1е сб1и Гуз Тиг І1е бег Гуз АІа 618 615 620
Зо Гуз б1у біп Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тиг Ге Рго Рго 5ег Аге 625 630 635 640 б1іи соТи Меє Тиг Гуз Азп біп Маї бег Ге Тиг Суз Гей Маї Гуз о1у 645 6509 655
Рпе Туг Рго бег Азр І1Іе Аїа Ма! осо1и Тер с0Т1и б5ег Азп о1у сбІп Рго 66О 665 670 б1и Ап А5п о Тубс Гуз Тс Тс Ргсо Рго Маї Гей Азр бег Азр Оо1у 5ег 675 680 685
Рпе Рпе Ге Туг бег Гуз Гей Тиг Маї Ар Гуз 5ег Аге Тгр біп б1п 690 695 700 б1у Ахп Ма! Рпе 5ег Суб бег Ма1ї Меї Ні5 б1и АІ1а Гец Ні Азп Ні 705 716 715 729
Туг Тйг бІп Гуз бег Ге бег їеу бег Рго с01у Гуз сб1у ос1у с1у о1у 725 730 735 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег б1у о01у сб1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 740 745 7506 с1у о1у сб1у о1у 5ег о1у сб1у о1у с1у бег Азр Гу5 Тпг Ні Тиг Суз 755 760 765
Рго Рго Суз Рго АТа Рго б1и Ге ей б1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи 779 775 780
Рпе Рго Рго Гуз Рго Гу5 Азр Тйг Ге Меє І1е 5ег Аге Тиг Рго си 785 798 795 зе
Мма1ї! Тис Сух Маї Маї Маї Азр Ма! 5ег Ні5 01 Ар Рго с1и Маї Гу 805 810 815
Рпе Азп Тгр Туг Маї Азр о1у Ма! оТи Маї Ніх5 Азп АІа Гуз Тиг Гуз 820 825 830
Рго Сух5 бі бі біп Туг б1у бег Тйг Туг Аге Су Ма! 5ег Маї Гец 835 840 845
Тиг Маї Геци Ні б1іп Азр Тер Ге Азп о1у Гуз си Туг Гуз Суз Гуз 859 855 860
Зо
Ммаї бег Азп Гуз АТа Гей Рго Аї1а Рго І1е бІ1и їу5 Тийг Пе 5ег Гу 865 870 875 880
А1ї1а Гуз о1у біп Рго Аге бі Рго біп Ма! Туг Тйг Гей Рго Рго 5ег 885 890 895
Аге бі бі Мет Тиг Гуз Азп біп Ма! бег Ге Тг Су5 Гей Маї Гу 980 985 910
Оо1у Ре Туг Рго 5ег Азр І1е ДАІа Маї о1и Тер о1и 5ег Азп о1у сп 915 929 925
Рго бІТи Азп Азп Тубсб Гуз Тс Те Ргсо Рго Маї Ге Азр 5ег А5р о1у 939 935 940 бег Рпе Рпе Гей Туг бег Гу5 Гей Тиг Маї Ар Гуз 5ег Аге Тер бІп 945 950 955 960 біп б1у Азп Ма! Рпе бег Суб 5ег Маї Меє Ніх бі Аа Гецй Ні Азп 965 970 975
Ні Туг Тиг б1п Гуз 5ег Ге бег Ге 5ег Рго о1у Гуз
9808 985 «2105 98 «2115 987 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 98 б1іп Маї б1п Геи Маї б1п 5ег с01у АТїа оси Маї Гуз Гуз Рго (1у А1а 1 5 18 15 б5ег Маї Гуз Маї бег Суз Гуз Аїа бег с1у Туг 5ег Ре Рго Ар Туг 20
Туг ІІе Азп Тер Маї Аг» біп А1ї1а Рго с1у біп Сух Ге б1и Тер Меє 4 45 25 о1у Тер І1е Туг Рпе Аїа б5ег с1у Ап бег бІи Туг Азп біп Гуз Ре 58 55 ва
Зо Те б1у Аге Ма! Тис Мет Тиг Аг Азр Тс о бег І1е Азп Тиг А1а Туг 65 78 75 ва
Меє оІ1и Гей бег о б5ег Гей Типг о бег бі Азр Тиг АТа Маї Туг Ре Су 35 85 90 95
А1а бег Ге Туг Азр Туг Азр Тер Туг Рпе Азр Ма! Тер о1у бІп о1Уу 188 185 118
Тиг Мет Маї Тиг Маї 5ег бег с01у сб1у с1у с1у 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 115 129 125 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег Азр І1е Ма! Меї Тпг біп Тпг Рго Геи 5бег 138 135 140 ей 5ег Ма! Тиг Рго о1у біп Рго А1ї1а 5ег І1е бег Су5 Гу5 б5ег 5ег 145 1509 155 160 б1п бег Ге Маї Ні5 бег Азп 01у Азп Тиг Туг Гей Ні Тер Туг Ге 165 178 175 б1іп Гуз Рго о1у б1п бег Рго біп Ге ей І1е Туг Гуз Маї 5бег Азп 1809 185 199
Аге Рпе бег б1у Маї Рго Азр Аг» Рпе бег б1у 5ег б1у 5ег с1у Тиг 195 290 295
Азр Рпе Тиг Ге Гуз І1е 5ег Аг» Ма! бі Аїа бій Азр Ма! с1у Пе 2168 215 229
Туг Туг Суз 5ег біп 5ег бег І1е Туг Рго Тгр Тиг Рпе о1у Суз о1У 225 230 235 240
Те Гуз Ге бій І1е ух бег б1у с1у с1у о1у бег 01и Маї бІп Ге 245 258 255
Ммаї бій 5ег б1у оІ1у с1у Гей Маї біп Рго с1у (1у бег ей уз Ге 260 265 279 б5ег Суз Аїа А1їа бег с1у Рпе Тийг Рпе Азп Гуз Туг АТа Меє Азп Тер 275 2808 285
Мма1ї! Аг» біп АТа Рго с1у Гуз с1у Ге бі Тер Ма! А1а Аг Пе Аг; 2908 295 309
Зо б5ег Гуз Туг Азп Азп Туг АІїа Тиг Туг Туг Аа Азр б5ег Маї Гу Ар 395 316 315 329
Аге Рпе Тиг ІТе бег Аг Ар Ар б5ег Гу5 Ап Тг А1Іа Туг Гецй бІп 325 339 335
Межт Ап Азп Гей Гуз Тйг бій Азр Тйг АТїа Маї Туг Туг Су Маї Аге 340 345 359
Ні5 с01у Азп Рпе б1у Ап бег Туг І1е 5ег Туг Тгр АІїІа Туг Тер а1Уу 355 зва 365 б1іп о1у Тйг Гей Маї Тиг Маї б5ег бег с1у с1у с01у о1у бег о1у ос1у 3708 375 389 со1у о1у бег о01у с1у о0І1у с1у б5ег б1п Тпйг Маї Маї Тиг бІ1п си Рго 385 399 395 4ев б5ег Ге Тйг о Маї бег Рго б1у б1у Тпйг Маї Тис Ге Тиг Суз о1у 5ег 405 416 415 б5ег Тпг о1у Аїа Маї Тпг бег о1у Ап Туг Рго Азхп Тгр Маї бІп сп
420 425 430
Гуз Рго б1у біп Аїа Рго Аге б1у Гей І1е с1у о1у ТПг Гуз Ре Гец 435 дда 445
А1а Рго б01у Тиг Рго А1а Аге Рпе бег 01у бег Гей Гей с1у су Гу 4506 455 460
А1а Аї1а Ге Тпг Ге бег с01у Ма! б1п Рго сб1и Азр си АІа со1и Туг 465 470 475 480
Туг Суз Маї Гей Тер Туг бег Азп Аге Тгр Ма! Ре о1у о1у о1у Тиг 485 490 495
Гуз Ге Тийг о Маї Ге б1у сб1у с1у о01у А5зр Гу5 Тг Ні Тиг Су Рго 580 505 518
Рго Су Рго Аїа Рго бІи Гей Ге с01у сб1у Рго бег Ма1ї! Ріе Гей Ріе 515 528 525
Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тг Гец Меє І1е бег Аге Тиг Рго сІи Маї 539 535 540
Зо
Тиг Суз Маї Маї Маї Азр Маї бег Ні с01и Ар Рго бІи Маї Гуз Рпе 545 550 555 560
Азп Тер Туг Маї Азр сб1у Маї оби Маї Ні5 Ап АТа Гу Тиг Гуз Рго 565 5708 575
Суз бі бій біп Туг о01у бег Тйг Туг Аге Суб Маї бег Маї Геи Тпг 5808 585 599
Ммаї Гец Ніх бІ1п Азр Тгр Гей Азп с1у Гуз б0Ти Туг Гуз Су Гуз Маї 595 6о0 605 б5ег Азп Гуз АТ1Іа Гей Рго АІа Рго І1е сб1и Гуз Тиг І1е бег Гуз АІа 618 615 620
Гуз б1у біп Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тиг Геи Рго Рго 5ег Аге 625 630 635 640 б1іи соТи Меє Тиг Гуз Азп біп Маї бег Ге Тиг Суз Гей Маї Гуз о1у 645 659 655
Рпе Туг Рго бег Азр ІІе Аїа Ма! о1и Тер об01и бег Азп о1у сбІп Рго 66О 665 670 бі Ап Азп о Тугс Гуз Те Те Рго Рго Маї Гей Азр 5ег Азр Оо1у 5ег 675 680 685
Рпе Рпе Ге Туг бег Гуз Гей Тиг Маї Ар Гуз 5ег Аге Тгр б1п б1п 690 695 700 о1у Азп Ма! Ре 5ег Суб5 5ег Ма! Меї Ніх5 01 АІТа Гей Ні Ап Ні 705 716 715 729
Туг Тйг бІп Гуз бег Ге бег Ге бег Рго б1у с1у сб1у о1у б5ег Оо1у 725 730 735 со1у о1у с1у бег с1у о01у с1у с1у бег сб1у о1у с01у о1у 5ег с1у ос1у 740 745 7506 с1у о01у 5ег сб1у сі1у сб1у с1у 5ег Ар Гу5 ТПг Ні Тиг Су Рго Рго 755 760 765
Суз Рго Аїа Рго бій Ге еп с01у б1у Рго бег Маї Рпе Гей Рпе Рго
Зо 779 775 780
Рго Гуз Рго Гуз Азр Тйг Гей Меє ІТ1е бег Аге Тйг Рго бІи Маї Тиг 785 798 795 зе
Суз Маї Маї Маї Азр Маї бег Ніх би Азр Рго бі Маї Гуз Ре Ап 805 810 815
Тер Туг Маї Азр с1у Маї би Маї Ні5 Ахп АІа Гу5 Типг Гуз Рго Суз 820 825 830 бі бі б1п Тугс б1у бег Тйг о Туг Аге Суз Маї бег Маї Гец Тиг Маї 835 840 845
Ге Ні біп Азр Тер Ге Азп о1у Гуз 01 Туг Гуз Суз Гуз Маї бег 850 855 860
А5п Гуз АТ1а Гей Рго Аіа Рго І1е б0Т1и ух Тиг ІПе бег Гуз Аа Гу 865 870 875 880 с1у б1п Рго Аге бій Рго біп Маї! Туг Тйг Гей Рго Рго 5ег Аге б1и 885 890 895 бІи Меє Тиг о Гуз Азп б1п Маї бег Ге Тиг Суз Гей Маї Гуз о1у Рпе 980 985 910
Туг Рго бег Азр ІІе А1ї1а Маї о0їи Тер сб1и бег Азп б1у біп Рго си 915 920 925
Абзп Азп о Туг Гуз Тс Те Рго Рго Маї Ге Ар 5ег Азр о1у 5ег Ріе 930 935 940
Рпе Гей Туг бег Гу5 Гей Тпг Маї Азр Гуз 5ег Аге Тгр б1п с1п о1у 945 950 955 960
А5п Ма! Рпе бег Суз бег Маї Меї Ніх с01и АІа Ге Ні Азп Ні Туг 965 970 975
Тиг б1п Гуз 5ег Геу 5ег Ге бег Рго о1у Гуз 9808 985 «2105 99 «2115 16 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
Зо «220» «223» Синтетичний пептид «4005 99
Азр Гуз Тайг Ні Тс Су Рго Рго Су Рго 1 5 18 «2105 186 «2115 12 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 186 бі Аге Гуз Сух Сух Маї оби Су Рго Рго Су Рго 1 5 18 «2105 181 «2115 16 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220»
«223» Синтетичний пептид «400» 181 бі Ге Гуз Те Рго Гей Ар Тийг Тис Ні Тс Суб Рго Аге Су Рго 1 5 18 15 «210» 182 «2115 12 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 182 б1и бег Гуз Туг Ту Рго Рго Суб Рго бег Су Рго 1 5 18 «210» 183 «2115 17 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 183 бІш Ге Гуз Те Рго Гец б1у Ар Тиг Тс Ні Тс Суб Рго Аге Су 1 5 18 15
Рго «210» 184 «2115» 15 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «400» 184 бІ1и Рго Гуз бег Суз Азр Гуз Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго 1 5 18 15 «210» 1865 «211» 994 «212» Білок «2135 Штучна послідовність
«223» Синтетичний пептид «4005 185 біп Маї б1п Ге Ма! бій бег сб1у б1у с1у Ма! Ма! б1п 5ег О1у Аге 1 5 18 15 б5ег Ге Аг Гей бег Суз А1а А1ї1а бег б1у Ріпе ТПг Ре Аге Азп Туг 20 25 30 с1у Мет Ні Тер Маї Аг» б1іп АІїа Рго с1у Гу Су5 Гей бІи Тер Маї 35 4 45
А1а Маї! І1е Тер Туг Азр с1у бег Азр Гуз Туг Туг АТа Азр 5ег Маї! 58 55 ва
Аге б1у Аг Ре Тиг І1е 5ег Аге А5р Ап бег Гуз Азп Тиг Геци Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азп бег Ге Аге А1ї1а бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
Зо А1а Аге Азр б1у Туг Азр І1е Гей Тпг о01у Азп Рго Аге Ар Рпе д5р 188 185 118
Туг Тер о1у б1п с01у Тйг Ге Ма! Тпг Маї бег 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 115 129 125 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег б1у с1у сб1у с1у бег Азр ТПйг Маї Меє Тиг 138 135 140 б1іп Тис о Рго Гей б5ег бег Ні5х Ма! Тиг Ге о1у бІ1п Рго Аїа 5ег Пе 145 1509 155 160 б5ег Суз Аге бег бег біп бег Ге Маї Ніб5 б5ег Азр О01у Азхп Тиг Туг 165 178 175
Гей 5ег Тгр Ге б1іп б1п Аге Рго о1у біп Рго Рго Аге Геи Ге Іе 1809 185 199
Туг Агв І1е 5ег Аг Аге Ріпе бег б1у Ма! Рго Азр Аге Ріпе 5ег б1у 195 290 295 б5ег б1у Аїа сб1у Тпг Ар Ре ТПг Гей біи І1е бег Аге Ма! 01и А1Та 216 215 220 бі Азр Ма! с1у Ма! Туг Туг Суб5х Меї б1п 5ег Тиг Ні Маї Рго Аге 225 230 235 240
Тис Рпе о1у Сузх с01у Типг Гуз Ма! бої Іе Гуз 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 245 258 255 б5ег бІи Маї сб1п Ге Ма! б1и бег б1у с1у с1у Гец Маї б1п Рго с1у 260 265 279 со1у бег Гей Гуз Ге бег Су5х Аїа Аїа 5ег б1у Рпе Тпг Рпе Азп Гу 275 2808 285
Туг АТа Меє Азп Тер Маї Аг» біп А1а Рго о1у Гу5 о1у Ге 01и Тер 290 295 309
Мма1ї! Аї1а Аг ІТ1е Аг» 5ег Гуз Туг Азп Азп Туг А1ї1а ТПг Туг Туг Аа 395 316 315 329
Азр бег Маї Гуз Ар Аге Рпе Тпг І1е бег Аге Ар Ар 5ег Гу Авп 325 339 335
Зо
Тиг АТа Туг Ге б1п Мет Ап Ап Ге Гуз Тйг бі Азр ТВйг А1а Маї 340 345 359
Туг Туг Суб Маї Аг» Нібх б1у Ап Рпе б1у Ахп бег Туг І1е 5ег Туг 355 зва 365
Тер Аїа Туг Тер б1у б1п с01у Тис Ге Маї Тиг Маї 5ег бег о1у о1Уу 379 375 389 с1у о1у бег о1у с1у с1у с1у бег с1у о01у с1у о01у бег бІ1п Тиг Маї 385 399 395 4ев
Ммаї Тиг б1п 010 Рго бег їеи Тйг Маї 5ег Рго с1у сб1у Тиг Маї Тиг 405 416 415
Їеч Тйг Суз с01у бег 5ег Тпг с1у ДАіа Ма! Тпг бег б1у Азп Туг Рго 420 425 430
Азп Тер Маї б1п біп Гу5 Рго с1у біп Аїа Рго Аге с1у Гей Пе О1Уу 435 44о 445 с1у Тийг Гуз Ре Гей Аїа Рго б01у Тийг Рго А1а Аг» Рпе бег О1у 5ег
4506 455 460
Ге Ге с1у с1у Гуз А1їа ДАІіа Ге Тпг Ге бег с01у Ма! біп Рго си 465 470 475 480
Азр бій АТа бІи Туг Туг Суз Маї Гей Тер Туг 5ег Азп Аге Тгр Маї 485 490 495
Рпе с01у сб1у о1у Тиг Гуз Гей Тиг Маї Ге о1у с1у о1у о1у Ар Гу 580 505 518
Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Су5 Рго Аїа Рго бІ1и Ге їеи с1у о1у Рго 515 529 525 б5ег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Ге Меї І1е 5ег 539 535 540
Аге Тс о Рго біи Ма! Тис Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні5 01и Ар 545 559 555 560
Рго бІ1и Маї Гуз Ре Азп Тгр Туг Ма! Азр оІу Ма! о1и Маї Ні Автп 565 5708 575
Зо
А1Та Гу Тиг Гуз Рго Су5 бі бі біп Туг с1у бег Тиг Туг Аге Сув 5808 585 599
Уаї бег Маї Ге Тиг Маї Гей Ні біп Азр Тер Геи Азп ОоТ1у Гуз си 595 ве 605
Туг Гуз Суб Гуз Маї бег Азп Гуз А1Та Гец Рго Аїа Рго Пе О1и Гуз 618 615 620
Тис І1е 5ег Гуз АТа Гух о1у б1іп Рго Аг» біи Рго біп Маї Туг ТАпг 625 630 635 640
Гей Рго Рго бег Аг» бі бі Меє Тйг Гуз Азп біп Маї бег Геи Тпг 645 659 655
Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е Аїа Маї оЇи Тер си 66О 665 670 б5ег Азп б01у бІ1п Рго 01 Ап Азп Тугс Гуз Те Те Рго Рго Маї Ге 675 680 685
Азр бег Азр б01у бег Рпе Ре Ге Туг бег Гуз Геу Тиг Маї Авор Гуз 690 695 700 б5ег Аге Тгр біп біп б01у Ахп Ма! Рпе бег Суб5 бег Маї Мет Ні би 705 716 715 729
А1а Гей Ні Ап Ні Туг Тиг бІп Гуз 5ег Ге 5ег Ге бег Рго о1у 725 730 735
Гуз б1у с1у сб1у о01у 5ег сб1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 740 745 7506 со1у о1у с1у о1у 5ег о0І1у с1у с1у о1у бег о01у с1у оІ1у ос1у 5ег Ар 755 760 765
Гуз Те Ні Тс Су Рго Рго Су Рго АТа Рго сб1и Геи Гей о1у о1у 779 775 780
Рго бег Маї Ре Ге Рпе Рго Рго Гу Рго Гуз Азр Тг Гей Меє Пе 785 798 795 зе б5ег Аге Тпг о Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні би
Зо 805 8108 815
Азр Рго бї1и Маї Гу5 Рпе Азп Тгр Туг Ма! Азр сІ1у Маї оїи Маї Ні 820 825 830
Азп АТїа Гу Тийг Гу Рго Суз б1и бій біп Туг б1у 5ег Тиг Туг Аг: 835 840 845
Суз Маї бег Ма! Ге Тиг Маї Гец Ні б1п Ар Тер Геи Азтп Оо1у Гуз 859 855 860 бі Туг Гуз Суз Гуз Ма! бег Ап Гу5 А1Та Гей Рго АІіа Рго Пе б1и 865 870 875 880
Гуз Тс ІІе 5ег Гуз АТа Гу 01у б1п Рго Аг» б1и Рго біп Маї Туг 885 890 895
Те Гей Рго Рго бег Аге бі біи Меє Тийг Гу Азп біп Ма! бег Геи 900 905 910
Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 5ег Азр ІІе АТа Маї со1їи Тер 915 929 925 бІ1и бег Ап б1у б1п Рго 01 Абоп Азп Тугсб Гуз Тс Тс Рго Рго Маї 930 935 940
Ге Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Рпе Гей Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Ар 945 950 955 960
Гуз 5ег Ага Тер біп біп б01у Азп Ма! Рпе бег Суб5 бег Маї Меє Ні 965 970 975 бІ1и АТа Гей Ні Азп Ніх Туг Тйг б1іп Гуз б5ег їеци б5ег Їеци бег Рго 9808 985 990 о1у Гуз «2105 186 «2115» 984 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид
Зо «4005 186 біп Маї б1п Ге Ма! б1и бег сб1у б1у с1у Ма! Ма! б1п б5ег Оо1у Аге 1 5 18 15 б5ег Ге Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тиг Ріпе Аге Азп Туг 20 25 30 с1у Мет Ні Тер Маї Аге біп Аїа Рго сі1у Гу Су5 Гецч 01и Тер Маї! 35 4 45
А1а Ма! І1е Тер Туг Азр о1у бег Ар Гуз Туг Туг АІа Азр 5ег Маї 58 55 60
Аге б1у Аг Ре ТПг І1е бег Агв Ар Азп 5ег Гу Азп Тиг Гей Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азп бег Ге Аге А1ї1а бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
А1а Аге Азр б1у Туг Азр І1е Гей Тпг о01у Азп Рго Аге Ар Рпе д5р 188 185 118
Туг Тер о1у б1п с01у Тйг Ге Ма! Тпг Маї бег 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 115 1208 125 б5ег біу б1у с1у с1у бег б1у б1у с1у с1у бег Азр Тийг Маї Меє Тпг 1308 135 140 б1іп Тис о Рго Гей б5ег бег Ні5х Ма! Тиг Ге о1у бІ1п Рго Аїа 5ег Пе 145 1509 155 160 б5ег Суз Аге бег бег біп бег Ге Маї Ніб5 б5ег Азр О01у Азхп Тиг Туг 165 176 175
Ге 5ег Тер Гей біп б1п Аге Рго с1у біп Рго Рго Аге Геци Гей І1е 188 185 199
Туг Агв І1е 5ег Аг Аге Ріпе бег б1у Ма! Рго Азр Аге Ріпе 5ег б1у 195 290 295 б5ег б1у Аїа сб1у Тпг Ар Ре ТПг Гей біи І1е бег Аге Ма! 01и А1Та 2168 215 229 бі Азр Ма! с1у Ма! Туг Туг Суб5х Меї б1п 5ег Тиг Ні Маї Рго Аге
Зо 225 230 235 240
Тис Рпе о1у Сузх с01у Типг Гуз Ма! бої Іе Гуз 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 245 258 255 б5ег бІи Маї сб1п Ге Ма! б1и бег б1у с1у с1у Гец Маї б1п Рго с1у 260 265 279 о1у бег Гей Гуз Ге бег Суз АІіа Аїа бег с1у Рпе Тиг РПе Азп Гуз 275 2808 285
Туг АТа Меє Азп Тер Маї Аг» біп А1а Рго о1у Гу5 о1у Ге 01и Тер 2908 295 309
Мма1ї! Аї1а Аг ІТ1е Аг» 5ег Гуз Туг Азп Азп Туг А1ї1а ТПг Туг Туг Аа 305 319 315 329
Азр бег Маї Гуз Ар Аге Рпе Тпг І1е бег Аге Ар Ар 5ег Гу Авп 325 339 335
Тиг АТа Туг Ге б1п Мет Ап Ап Ге Гуз Тйг бі Азр ТВйг А1а Маї 340 345 359
Туг Туг Суб Маї Аг» Ніб5 б1у Ап Рпе б1у Азп бег Туг І1е 5ег Туг 355 зва 365
Тер Аїа Туг Тер б1у бІ1п б1у Тийг Ге Маї Тиг Маї 5ег б5ег с1у о1у 3708 375 389 с1у о01у 5ег сб1у с1у с1у с1у 5ег б01у с1у с1у о01у 5ег біп Тиг Маї 385 399 395 4ев
Ммаї Тиг б1п 010 Рго бег їеи Тйг Маї 5ег Рго с1у с1у Тиг Маї Тиг 405 416 415
Їеч Тйг Суз с01у бег 5ег Тпг с1у ДАіа Ма! Тпг б5ег б1у Азп Туг Рго 420 425 430
Азп Тер Маї б1п біп Гу5 Рго с1у біп Аїа Рго Аге Оо1у Гей І1е с1у 435 44о 445 с1у Тийг Гуз Ре Гей Аїа Рго б01у Тийг Рго А1а Аг» Рпе 5ег Оо1у 5ег 4506 455 460
Зо Гей Геи с1у с1у Гу5 АТїа АТа Гей Тйг Гей бег 01у Маї б1п Рго си 465 470 475 480
Азр бій АТа бІи Туг Туг Суз Маї Гей Тер Туг 5ег Азп Аге Тгр Маї 485 499 495
Рпе с01у с1у о1у Тиг Гуз Ге Тиг Маї Ге о1у с1у о1у с1у А5р Гуз 580 505 518
Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго АІа Рго бІи Ге їеи о1у о1у Рго 515 529 525 б5ег Маї Ре Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг їеи Меї Пе 5ег 539 535 540
Аге Тс о Рго бі Маї Тйг Су Ма! Маї Маї Ар Маї 5ег Ні си дА5р 545 550 555 560
Рго бІ1и Маї Гуз Ре Азп Тгр Туг Ма! Азр с1у Маї оїи Маї Ні Азп 565 579 575
А1їа Гу5 Тиг Гу Рго Суз бі б1и біп Туг о01у 5ег Тиг Туг Аге Су 5808 585 599
Уаї бег Маї Ге Тиг Маї Ге Ніх5 сп Азр Тер Гей Ахзтп о1у Гуз си 595 ве 605
Туг Гуз Суз Гуз Маї 5ег Ап Гуз АІа Гец Рго АІїа Рго Іе си Гуз 618 615 620
Тис І1е 5ег Гуз АТа Гух о1у б1іп Рго Аг» біи Рго біп Маї Туг ТАпг 625 630 635 640
Ге Рго Рго 5ег Аг» бі біи Меє Тийг Гуз Азп біп Ма! 5ег Ге Тиг 645 659 655
Суз Ге Маї Гуз с01у Рпе Туг Рго бег Азр І1е Аїа Маї оЇи Тер си 6в6О 665 670 б5ег Азп б01у бІ1п Рго 01 Ап Азп Тугс Гуз Те Те Рго Рго Маї Ге 675 680 685
Азр бег Азр б01у бег Рпе Ре Ге Туг бег Гуз Геу Тиг Маї Авор Гуз 690 695 700
Зо б5ег Аге Тгр біп біп б01у Ахп Ма! Рпе бег Суб5 бег Маї Мет Ні би 705 716 715 729
А1а Гей Ні Ап Ніх Туг Тпг б1іп Гух5 бег Гец 5ег Гей 5ег Рго о1у 725 730 735
Гуз б1у с1у сб1у о01у 5ег сб1у с1у с1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 740 745 7506 со1у о1у с1у о1у 5ег с01у с1у с1у с1у бег с1у о1у ос1у с1у 5ег А1а 755 760 765
Рго бІ1и Ге Ге оІ1у б1у Рго бег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго 779 775 780
Гуз Азр Тс Ге Меє І1е бег Аге Тг Рго біи Ма! Тиг Су Маї Маї 785 798 795 зе
Мма1 Азр Маї бег Ні бій Ар Рго біи Маї губ Рпе Азп Тгр Туг Маї! 805 810 815
Азр б1у Маї би Маї Ні5 Ап А1а ух Тиг Гуз Рго Суз оби о1и б1п
820 825 830
Туг б1у 5ег Тйг Туг Аге Суб5 Маї 5ег Маї Ге Тиг Маї Гецч Ні сІп 835 840 845
Азр Тер Ге Азп оТу Гуз бІТи Туг Гуз Суз Гуз Ма! бег Авзп Гуз АІа 850 855 вва
Ге Рго Аїа Рго ІІе си Гуз Тиг І1е 5ег Гуз Аа Гуз Оо1у бІп Рго 865 870 875 880
Аге біи Рго біп Ма! Туг Тйг Геи Рго Рго бег Аге бІи бІи Меє Тиг 885 890 895
Гуз Азп біп Маї бег Ге Тийг Сузх Ге Маї Гу5х о1у Ріпе Туг Рго 5ег 980 985 910
Азр І1е А1ї1а Маї оТи Тер б1и бег Азп с1у б1іп Рго бІи Азп Азп Туг 915 920 925
Гуз Те Тис о Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр б1у 5ег Ріе Рпе Геи Туг 930 935 940
Зо б5ег Гуз Ге Тпйг о Маї Ар Гу бег Аге Тер біп біп б01у Ап Ма1! РПе 945 950 955 960 б5ег Суз бег Ма! Меє Ні5 б1и АТа Ге Ні Азп Ні5 Туг Тиг бІп Гуз 965 970 975 б5ег Ге 5ег Гец 5ег Рго О1у Гуз 9808 «2105 187 «2115 1864 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 187 біп Маї б1п Ге Ма! бій бег сб1у б1у с1у Ма! Ма! б1п 5ег О1у Аге 1 5 18 15 б5ег Ге Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тиг Ріпе Аге Азп Туг 20 25 30 с1у Мет Ні Тер Маї Аг» б1іп АІїа Рго с1у Гу Су5 Гей бІи Тер Маї 35 40 45
А1а Ма! І1е Тер Туг Азр о1у бег Ар Гуз Туг Туг АІа Азр 5ег Маї 50 55 60
Аге б1у Аг Ре Тиг І1е 5ег Аге А5р Ап бег Гуз Азп Тиг Геци Туг 65 70 75 80 ей б1п Меє Азп бег Ге Аге А1ї1а бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
А1а Аге Азр б1у Туг Азр І1е Гей Тпг о01у Азп Рго Аге Ар Рпе д5р 188 185 116
Туг Тер о1у б1п с01у Тйг Ге Ма! Тпг Маї бег 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 115 1208 125 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег б1у с1у сб1у с1у бег Азр ТПйг Маї Меє Тиг 1308 135 140
Зо б1іп Тис о Рго Гей б5ег бег Ні5х Ма! Тиг Ге о1у бІ1п Рго Аїа 5ег Пе 145 158 155 160 б5ег Суз Аге бег бег біп бег Ге Маї Ніб5 б5ег Азр О01у Азхп Тиг Туг 165 176 175
Ге 5ег Тер Гей біп б1п Аге Рго с1у біп Рго Рго Аге Геци Гей І1е 1809 185 199
Туг Агв І1е 5ег Аг Аге Ріпе бег б1у Ма! Рго Азр Аге Ріпе 5ег б1у 195 290 295 б5ег б1у Аїа б1у Тпг Ар Ре ТПг Гей біи І1е бег Аге Ма! 01и А1а 2168 215 229 бі Азр Ма! с1у Ма! Туг Туг Суб5х Меї б1п 5ег Тиг Ні Маї Рго Аге 225 230 235 240
Те Рпе с1у Сух5 с1у Тиг Гух Ма! 61 І1е Гу5 б5ег о01у о1у о1у о1у 245 258 255 б5ег бІи Маї сб1п Ге Ма! б1и бег б1у с1у с1у Гец Маї б1п Рго с1у
260 265 279 о1у бег Гей Гуз Ге бег Суз АІіа Аїа бег с1у Рпе Тиг РПе Азп Гуз 275 2808 285
Туг АТа Меє Азп Тер Маї Аг» біп А1а Рго о1у Гу5 о1у Ге 01и Тер 2908 295 309
Мма1ї! Аї1а Аг ІТе Аг» 5ег Гуз Туг Азп Азп Туг А1ї1а ТПг Туг Туг Аа 395 316 315 329
Азр бег Маї Гуз Ар Аге Рпе Тпг І1е бег Аге Ар Ар 5ег Гу Авп 325 339 335
Те АтТа Туг Ге біп Мет Абп Азп Гей ух Тпг бі Ар Тйг А1Та Маї 340 345 359
Туг Туг Суб Маї Аг» Ніб5 б1у Ап Рпе б1у Азп бег Туг І1е 5ег Туг 355 зво 365
Тер Аїа Туг Тер б1у бІ1п б1у Тйг Ге Маї Тис Маї бег б5ег о1у ос1у 3708 375 389
Зо с1у о1у бег о1у с1у с1у с1у бег с1у о01у с1у о01у бег бІ1п Тиг Маї 385 399 395 4ев
Ммаї Тиг б1п 01 Рго бег Ге Тпг о Маї бег Рго обІ1у ос1у Тиг Маї ТАиг 405 416 415
Ге Тйг Суб о1у бег бег Тиг б1у А1їа Ма! Тийг бег о1у Ап Туг Рго 420 425 430
Азп Тер Маї б1п б1п Гух5 Рго с01у біп А1а Рго Аг» о1у Ге І1е с1у 435 дда 445 с1у Тийг Гуз Ре Гей Аїа Рго б01у Тийг Рго А1а Аг» Рпе 5ег Оо1у 5ег 4506 455 460
Ге Ге с1у с1у Гуз А1їа ДАІіа Ге Тпг Ге бег с01у Ма! біп Рго си 465 470 475 480
Азр бій АТа бІи Туг Туг Суз Маї Гей Тер Туг 5ег Азп Аге Тгр Маї 485 490 495
Рпе с01у сб1у о1у Тиг Гуз Гей Тиг Маї Ге о1у с1у о1у о1у Ар Гу 580 505 518
Те Ні Тс Суб Рго Рго Суб Рго А1а Рго біи Ге Ге о1у о1у Рго 515 529 525 б5ег Маї Ре Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг їеу Меї І1е 5ег 5308 535 540
Аге Тс о Рго бі Маї Тйг Су Ма! Маї Маї Ар Маї 5ег Ні си дА5р 545 550 555 560
Рго бІ1и Маї Гуз Ре Азп Тгр Туг Ма! Азр оІу Ма! о1и Маї Ні Автп 565 5708 575
А1їа Гу5 Тиг Гу Рго Суз бі б1и біп Туг о01у 5ег Тиг Туг Аге Су 5808 585 599
Уаї! 5ег Маї Ге Тиг Маї Ге Ні5 б1іп Ар Тер Гей Азп с1у Гу би 595 ве 605
Туг Гуз Суз Гуз Маї 5ег Ап Гуз АІа Гец Рго АІїа Рго Іе си Гуз
Зо 618 615 620
Тиг І1е б5ег Гуз АІа Гуз сб1у с1у сб1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 625 630 635 640 со1у о1у с1у о1у 5ег о01у с1у с1у с1у бег Азр Гуз Тиг Ні Тиг Су 645 659 655
Рго Рго Суз Рго АТа Рго б1и Ге ей б1у о1у Рго бег Ма! Рпе Геи 66О 665 670
Рпе Рго Рго Гу Рго Гуз Азр ТИг Ге Меї І1е 5ег Аге Тиг Рго би 675 680 685
Ммаї Тиг Суз Маї Маї Маї Азр Ма! бег Ніх 01и Ар Рго о1Їи Маї Гу 690 695 700
Рпе Азп Тгр Туг Маї Азр о1у Ма! оТи Маї Ніх5 Азп АІа Гуз Тиг Гуз 705 716 715 729
Рго Сух5 бі бі біп Туг б1у бег Тйг Туг Аге Су Ма! 5ег Маї Гец 725 730 735
Тиг Маї Геци Ні б1іп Азр Тер Ге Азп о1у Гуз си Туг Гуз Су Туз 740 745 7506
Ммаї бег Азп Гуз АТа Гей Рго Аї1а Рго І1е бІ1и їу5 Тийг Пе 5ег Гу 755 760 765
А1ї1а Гуз о1у біп Рго Аге бі Рго біп Ма! Туг Тйг Геи Рго Рго 5ег 779 775 780
Аге бі бі Мет Тиг Гуз Азп біп Ма! бег Ге Тг Су5 Гей Маї Гу 785 798 795 зе
Оо1у Ре Туг Рго 5ег Азр І1е ДАІіа Маї о1и Тер бІи бег Азп о1у сб1Іп 805 810 815
Рго бІТи Азп Азп Тубсб Гуз Тс Те Ргсо Рго Маї Ге Азр 5ег А5р о1у 820 825 830 б5ег Рпе Рпе Гей Туг бег Гу5 Гей Тиг Маї Азр Гуз 5ег Аге Тгр сп 835 840 845
Зо біп б1у Азп Ма! Рпе бег Суб 5ег Маї Меє Ніх бі Аа Гецй Ні Азп 859 855 860
Ні Туг Тиг бІ1п Гуз 5ег Ге бег Геу 5ег Рго с1у Гуз о1у с1у о1у 865 870 875 880 о1у бег б1у о1у с1у о01у б5ег с1у о1у с01у о1у бег о01у с1у с1у ос1у 885 890 895 б5ег б1у біп Рго Аг» бі Рго б1п Ма! Туг Тиг Геи Рго Рго 5ег Аге 900 905 910 б1іи соТи Меє Тиг Гуз Азп біп Маї бег Ге Тиг Суз Гей Маї Гуз о1у 915 929 925
Рпе Туг Рго бег Азр І1е Аїа Ма! б1и Тер б1и бег Азп оО1у бІп Рго 939 935 940 б1и Ап А5п о Тубс Гуз Тс Тс Ргсо Рго Маї Гей Азр бег Азр Оо1у 5ег 945 950 955 960
Рпе Рпе Ге Туг 5ег Гуз Гей Тиг Маї Азр Гу б5ег Аге Тгр бІіп сІп 965 970 975 о1у Азп Ма! Ре 5ег Суб5 5ег Ма! Меї Ніх5 01 АІТа Гей Ні Ап Ні 9808 985 990
Туг Тйг бІп Гуз бег Їеу бег о Їїеу 5ег Рго а1у Гу 995 16868 «2105 188 «2115 994 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 188 біп Маї б1п Ге Ма! бій бег б1у б1у с1у Ма! Ма! б1п 5ег О1у Аге 1 5 18 15 б5ег Ге Аг Гей бег Сух Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тиг Ріпе Аге Азп Туг 20 25 30 с1у Мет Ні Тер Маї Аг» б1іп Аїа Рго о01у Гу Су5 Гей 01и Тер Маї!
Зо 35 40 45
А1а Ма! І1е Тер Туг Азр о1у бег Ар Гуз Туг Туг АІа Азр 5ег Маї 58 55 ва
Аге б1у Аг Ре Тиг І1е 5ег Аге А5р Ап бег Гуз Азп Тиг о Геи Туг 65 78 75 ва ей б1п Меє Азп бег Ге Аге А1ї1а бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Сув 85 90 95
А1а Аг Азр б1у Туг Азр І1е Ге Тийг о1у Ап Рго Аге Азр Ре Азр 188 185 118
Туг Тер о1у б1п с01у Тйг Ге Ма! Тпг Маї бег 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 115 129 125 б5ег б1у с1у с1у с1у 5ег с01у с1у о0І1у сб1у бег Азр Тиг Маї Меє Тпг 138 135 140 б1іп Тис о Рго Гей б5ег бег Ні5х Ма! Тиг Ге о1у бІ1п Рго Аїа 5ег Пе 145 1509 155 160 б5ег Суз Аге бег бег біп бег Ге Маї Ніб5 б5ег Азр О01у Азхп Тиг Туг 165 176 175
Ге 5ег Тер Гей біп б1п Аге Рго с1у біп Рго Рго Аге Геци Гей І1е 188 185 199
Туг Агеб І1е 5ег Аг Аг» Рпе 5ег б1у Маї Рго Азр Аг» Рпе 5ег О1Уу 195 290 295 б5ег б1у Аїа сб1у Тпг Ар Ре ТПг Гей біи І1е бег Аге Ма! 01и А1Та 216 215 229 бі Азр Ма! с1у Ма! Туг Туг Суб5х Меї б1п 5ег Тиг Ні Маї Рго Аге 225 230 235 240
Тис Рпе о1у Сузх с01у Типг Гуз Ма! бої Іе Гуз 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 245 258 255 б5ег бІи Маї сб1п Ге Ма! б1и бег б1у с1у с1у Гец Маї б1п Рго с1у 260 265 279
Зо со1у бег Гей Гуз Ге бег Су5х Аїа Аїа 5ег б1у Рпе Тпг Рпе Азп Гу 275 2808 285
Туг АТа Меє Азп Тер Маї Аг» біп А1а Рго о1у Гу5 о1у Ге 01и Тер 298 295 309
Мма1ї! Аї1а Аг ІТ1е Аг» 5ег Гуз Туг Азп Азп Туг А1ї1а ТПг Туг Туг Аа 395 316 315 329
Азр бег Маї Гуз Ар Аге Рпе Тпг І1е бег Аге Ар Ар 5ег Гу Авп 325 339 335
Тиг АТа Туг Ге б1п Мет Ап Ап Ге Гуз Тйг бі Азр ТВйг А1а Маї 340 345 359
Туг Туг Суб Маї Аг» Ніб5 б1у Ап Рпе б1у Азп бег Туг І1е 5ег Туг 355 зва 365
Тер Аїа Туг Тер б1у б1п с01у Тис Ге Маї Тиг Маї 5ег бег о1у о1Уу 379 375 389 с1у о1у бег о1у с1у с1у с1у бег с1у о01у с1у о01у бег бІ1п Тиг Маї 385 399 395 4ев
Ммаї Тиг б1п 010 Рго бег їеи Тйг Маї 5ег Рго с1у сб1у Тиг Маї Тиг 405 416 415
Їеч Тйг Суз с01у бег 5ег Тпг с1у ДАіа Ма! Тпг б5ег б1у Азп Туг Рго 420 425 430
Азп Тер Маї б1п біп Гу5 Рго с1у біп Аїа Рго Аге с1у Гей Пе с1у 435 44о 445 с1у Тийг Гуз Ре Гей Аїа Рго б01у Тийг Рго А1а Аг» Рпе 5ег Оо1у 5ег 4506 455 460
Ге Ге с1у с1у Гуз А1їа ДАІіа Ге Тпг Ге бег с01у Ма! б1п Рго си 465 470 475 480
Азр бій АТа бІи Туг Туг Суз Маї Гей Тер Туг 5ег Азп Аге Тгр Маї 485 490 495
Рпе с01у сб1у о1у Тиг Гуз Гей Тиг Маї Ге о1у ос1у с1у о1у Ар Гуз 580 505 518
Зо
Тиг Ні Тиг Су Рго Рго Су Рго АІа Рго бІи Ге їеи о1у о1у Рго 515 529 525 б5ег Ма! Рпе Гей Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тийг Ге Меє І1е 5ег 539 535 540
Аге Тс о Рго бі Маї Тйг Су Ма! Маї Маї Ар Маї 5ег Ні си дА5р 545 559 555 560
Рго бІ1и Маї Гуз Ре Азп Тгр Туг Ма! Азр оІу Маї оїи Маї Ні Ап 565 5708 575
А1їа Гу5 Тиг Гу Рго Суз бі б1и біп Туг о01у 5ег Тиг Туг Аге Су 5808 585 599
Уаї бег Маї Ге Тиг Маї Гец Ні бІп Ар Тер Ге Ахзтп с1у Гуз Оо1и 595 ве 605
Туг Гуз Суб Гуз Маї бег Азп Гуз А1Та Гец Рго Аїа Рго Пе О1и Гуз 618 615 620
Тиг І1е бег Туз АТа Гуз с1у с1у с1у с1у бег б1у о1у сб1у о1у 5ег
625 630 635 640 с1у о1у с1у о1у 5ег о01у с1у с1у о1у бег АІа Рго си Геи Гей о01у 645 6509 655
Оо1у Рго бег Маї Рпе Ге Рпе Рго Рго Гуз Рго Гуз Азр Тиг Гей Мей 66О 665 670
І1е бег Аге ТПг Рго біи Ма! Тийг Сух Маї Маї Маї Азр Маї 5ег Ні 675 680 685 бІ1и Ар Рго бТи Маї ух Ре Азп Тгр Туг Маї Азр ос1у Маї оїи Маї 690 695 700
Ні Азп АТїа Гу5 Тег Гу Рго Суз бІи бій біп Туг о01у бег Тг Туг 705 716 715 729
Аге Суз Маї бег Маї Гей Тпг Маї Гей Ні біп Азр Тер Гей Азп о1у 725 730 735
Гуз бТи Туг Гуз Суз Гуз Маї бег Ап Гуз АІа еп Рго Аїа Рго Пе 740 745 7506
Зо бі Гух Тс І1е 5ег Гу5 АІТа Гу о1у б1п Рго Аг» біи Рго біп Маї 755 760 765
Туг Те Гец Рго Рго бег Аге бій бІи Меє Тиг о Гу5 Азп біп Ма! 5ег 779 775 780
Ге Тйг Су5х Гец Маї Гуз о1у Ре Туг Рго бег Азр І1е АТа Маї си 785 798 795 зе
Тер 61 бег Азп б1у б1п Рго бі Ап Азп Тугс Гуз Те Тс Рго Рего 805 8108 815
Ммаї Гей Азр бег Азр б1у бег Рпе Рпе Ге Туг б5ег Гуз Гей Тиг Маї 820 825 830
Азр Гуз бег Аге Тгр б1п б1п с1у Азп Ма! Ре 5ег Су 5ег Ма! Мей 835 840 845
Ні5 01 АТа Ге Ні Ап Ні Туг Тпг б1п Гуз 5ег Їеу бег Геи бег 859 855 860
Рго с01у Гуз с01у о1у с1у о1у бег о01у сб1у о1у сб1у бег ос1у с1у ос1у 865 870 875 880 с1у бег б1у с1у с1у с1у бег о01у біп Рго Аге біи Рго біп Ма1! Туг 885 890 895
Те Гей Рго Рго бег Аге бі біи Меє Тийг Гу Азп біп Ма! бег Геи 980 985 910
Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 5ег Азр Іе АІа Маї со1їи Тер 915 920 925 бІ1и бег Ап б1у б1п Рго 01 Абоп Азп Тугсб Гуз Тс Тс Рго Рго Маї 930 935 940
Ге Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Рпе Гей Туг бег Гуз Ге Тиг Маї Ар 945 950 955 960
Гуз 5ег Аг Тгр біп біп б01у Азп Ма! Рпе бег Суб5 бег Маії! Меї Ні 965 970 975 б1и АТа Гей Ні Ап Ніх Туг Тйг б1п Гуз бег Ге бег Ге бег Рго
Зо 9808 985 990 о1у Гуз «2105 189 «2115» 984 «212» Білок «2135 Штучна послідовність «220» «223» Синтетичний пептид «4005 189 біп Маї б1п Ге Ма! бій бег сб1у б1у с1у Ма! Ма! б1п 5ег О1у Аге 1 5 18 15 б5ег Ге Аг Гей бег Су5х Аїа А1ї1а 5ег б1у Рпе Тпг Ріе Аге Азп Туг 20 25 30 с1у Мет Ні Тер Маї Аг» б1іп АІїа Рго с1у Гу Су5 Гей бІи Тер Маї 35 4 45
А1а Ма! І1е Тер Туг Азр о1у бег Ар Гуз Туг Туг АІа Азр бег Маї
50 55 60
Аге б1у Аг Ре Тиг І1е 5ег Аге А5р Ап бег Гуз Азп Тиг Геци Туг 65 78 75 80
Гей б1п Меє Азп бег Ге Аге АТа бій Азр Тпг АТа Маї Туг Туг Су 85 90 95
А1а Аге Азр б1у Туг Азр І1е Гей Тпг о01у Азп Рго Аге Ар Рпе д5р 166 185 116
Туг Тер о1у б1п сб1у Тйг Гей Ма! Тпг Маї б5ег б5ег о01у ос1у с1у о1у 115 1208 125 б5ег біу б1у с1у с1у бег б1у б1у с1у с1у бег Азр Тийг Маї Меє Тпг 1308 135 140 б1п Тис о Рго Ге бег бег Ні Ма! Тпг Ге б1у б1п Рго Аї1а 5ег Пе 145 1509 155 160 б5ег Суз Аге бег бег біп бег Ге Маї Ніб5 б5ег Азр О01у Азхп Тиг Туг 165 176 175
Зо
Ге бег Тер Ге біп б1п Аге Рго о1у біп Рго Рго Аг» Геци Ге Пе 188 185 199
Туг Агв І1е 5ег Аг Аге Ріпе бег б1у Ма! Рго Азр Аге Ріпе 5ег б1у 195 290 295 б5ег б1у Аїа сб1у Тпг Ар Ре ТПг Гей біи І1е бег Аге Ма! 01и А1Та 2168 215 229 бі Азр Ма! с1у Ма! Туг Туг Суб5х Меї б1п 5ег Тиг Ні Маї Рго Аге 225 230 235 240
Тис Рпе о1у Сузх с01у Типг Гуз Ма! бої Іе Гуз 5ег сб1у о1у ос1у а1Уу 245 258 255 б5ег бІи Маї сб1п Ге Ма! б1и бег б1у с1у с1у Гец Маї б1п Рго с1у 260 265 279 о1у бег Гей Гуз Ге бег Суз АІіа Аїа бег с1у Рпе Тиг РПе Азп Гуз 275 2808 285
Туг АТа Меє Азп Тер Маї Аг» біп А1а Рго о1у Гу5 о1у Ге 01и Тер 2908 295 309
Мма1ї! Аї1а Аг ІТ1е Аг» 5ег Гуз Туг Азп Азп Туг А1ї1а ТПг Туг Туг Аа 395 316 315 329
Азр бег Маї Гуз Ар Аге Рпе Тпг І1е бег Аге Ар Ар 5ег Гу Авп 325 330 335
Тиг АТа Туг Ге б1п Мет Ап Ап Ге Гуз Тйг бі Азр ТВйг А1а Маї 340 345 359
Туг Туг Суб Маї Аг» Ніб5 б1у Ап Рпе б1у Азп бег Туг І1е 5ег Туг 355 зва 365
Тер Аїа Туг Тер б1у б1п с01у Тис Ге Маї Тиг Маї 5ег бег о1у о1Уу 3708 375 389 с1у о01у 5ег сб1у с1у с1у с1у 5ег б01у с1у с1у о01у 5ег біп Тиг Маї 385 399 395 4ев
Ммаї Тиг б1п 010 Рго бег їеи Тйг Маї 5ег Рго с1у сб1у Тиг Маї Тиг
Зо 485 416 415
Їеч Тйг Суз с01у бег 5ег Тпг с1у ДАіа Ма! Тпг б5ег б1у Азп Туг Рго 420 425 430
Азп Тер Маї б1п біп Гу5 Рго с1у біп Аїа Рго Аге с1у Гей Пе О1Уу 435 44о 445 с1у Тийг Гуз Рпе Гей Аїа Рго с01у Тийг Рго А1а Аг» Рпе 5ег о1у 5ег 4506 455 460
Гей Геи с1у с1у Гу5 АТїа АТа Гей ТПг Гей бег 01у Маї б1п Рго си 465 470 475 480
Азр бій АТа бІи Туг Туг Суз Маї Гей Тер Туг 5ег Азп Аге Тгр Маї! 485 499 495
Рпе с01у сб1у о1у Тиг Гуз Гей Тиг Маї Ге о1у с1у о1у ос1у Аа Рго 580 505 518 б1и Гей Ге о1у с1у Рго 5ег Ма! Ріпе Гей Ріе Рго Рго Гу Рго Гуз 515 529 525
Азр Тс Ге Меї ІТ1е 5ег Аге ТИг Рго бі Ма! Тйг Су Ма! Маї Маї 539 535 540
Азр Маї 5ег Ні б0Ти Ар Рго бІ1и Маї Гу5 Рпе Азп Тгр Туг Маї Ар 545 550 555 560 с1у Маї бі Маї Ні5 Ахп Аїа Гу Тиг Гуз Рго Су5 бІи бІи б1п Туг 565 5708 575
Оо1у бег Тиг Туг Аге Суб Маї 5ег Маї Гей Тиг Маї Гей Ні біп Ар 589 585 599
Тер Ге Ахп с1у Гуз си Туг Гуз Суз Гуз Ма! 5ег Азп Гуз А1а Ге 595 ве 605
Рго Аїа Рго ІІїе оТи Гуз Тиг І1е бег їу5 Аїа Гуз с1у ос1у с1у а1у 618 615 620 б5ег б1у с1у с1у сб1у 5ег б1у о01у сб1у с1у бег с1у с1у о1у о1у бег 625 630 635 640
Зо А1а Рго бі Ге Ге с1у б1у Рго бег Маї Рпе Геци Ре Рго Рго Гуз 645 659 655
Рго Гуз Ар Тийг Ге Меє І1е б5ег Аг» Тиг Рго бій Ма! Тиг Су Маї 6в6О 665 670
Ммаї Маї Азр Маї 5ег Ніх с01и Ар Рго бІи Маї Гуз Ріе Азп Тер Туг 675 680 685
Ммаї Азр с1у Маї оТи Маї Ніх5 Азп АІіа Гуз Тпг Гуз Рго Су5 ої си 690 695 700 біп Туг б1у 5ег Тийг Туг Аг» Су5 Маї 5ег Ма! Ге Тиг Маї Геци Ні 705 716 715 729 бІіп Ар Тер Гей Азп б1у Гу5 б1и Туг Гуз Су Гу Маї 5ег Ап Гу 725 730 735
А1а Гей Рго АІа Рго І1Іе б1и їу5 Типг І1е бег Туз АІа Гуз о1у бІп 740 745 7506
Рго Аг» бі Рго біп Ма! Туг Тйг Гец Рго Рго 5ег Аге б1и сІи Мей 755 760 765
Тиг Гуз Азп б1п Маї 5ег їеи Тиг Суз Ге Маї Гуз с1у Рпе Туг Рго 779 775 780 б5ег Азр ІІе А1а Маї с1и Тер б01и бег Азп б1у біп Рго б1и Ап Ап 785 798 795 зе
Туг Гуз Тиг Тс Рго Рго Маї Ге Ар 5ег Азр с1у 5ег Рпе Ре Ге 805 810 815
Туг 5ег Гуз Ге Тиг о Маї Ар Гуз 5ег Аг» Тер біп біп о1у Азп Маї 820 825 830
Рпе бег Суз бег Ма! Меє Ніх сб1и АТа Ге Ні Азп Ніх Туг Тиг сп 835 840 845
Гуз бег Ге б5ег Їеи б5ег Рго б01у Гуз с1у б1у с1у с1у бег о1у а1Уу 859 855 860 со1у о1у бег о01у с1у о01у с1у б5ег о1у с1у о1у с1у бег о1у бІп Рго 865 870 875 880
Зо
Аге біи Рго біп Ма! Туг Тйг Геи Рго Рго бег Аге бІи бІи Меє Тиг 885 890 895
Гуз Азп біп Маї бег Ге Тиг Суз Гей Маї Гух о1у Ріпе Туг Рго 5ег 900 905 910
Азр І1е А1ї1а Маї оТи Тер б1и бег Азп с1у б1іп Рго бІи Азп Азп Туг 915 920 925
Гуз Те Тис о Рго Рго Маї Гей Азр бег Азр б1у 5ег Рпе Рпе Геи Туг 939 935 940 б5ег Гуз Ге Тпйг о Маї Ар Гу бег Аге Тер біп біп б01у Ап Ма1! РПе 945 950 955 960 б5ег Суз бег Ма! Меє Ні5 б1и АТа Ге Ні Азп Ніх Туг Тиг бІп Гуз 965 970 975 б5ег Ге 5ег Гец 5ег Рго О1у Гуз 980

Claims (18)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Одноланцюгова конструкція антитіла, яка містить: - перший домен, що зв'язується з ВСМА, - другий домен, що зв'язується з позаклітинним епітопом ланцюга СОЗє людини і/або Масаса; і - третій домен, що містить два поліпептидні мономери, кожен з яких містить шарнір, домен СН2 і домен СНЗ, де зазначені два поліпептидні мономери злиті один з одним за допомогою пептидного лінкера, де зазначений третій домен містить у порядку від амінокінця до карбоксикінця: шарнір-СН2-СНЗ-лінкер-шарнір-СН2-СНЗ.
2. Конструкція антитіла за п. 1, де кожен із зазначених поліпептидних мономерів має амінокислотну послідовність, яка щонайменше на 90 95 ідентична послідовності, вибраній з групи, що складається з БЕО ІЮ МО: 17-24.
3. Конструкція антитіла за п. 1 або 2, де кожен із зазначених поліпептидних мономерів має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮ МО: 17-24.
4. Конструкція антитіла за будь-яким з попередніх пунктів, де домен СН2 містить внутрішньодоменний цистеїновий дисульфідний місток.
5. Конструкція антитіла за будь-яким з попередніх пунктів, де () перший домен містить два варіабельні домени антитіла, а другий домен містить два варіабельні домени антитіла; (і) перший домен містить один варіабельний домен антитіла, а другий домен містить два варіабельні домени антитіла; (ії перший домен містить два варіабельні домени антитіла, а другий домен містить один варіабельний домен антитіла; або (м) перший домен містить один варіабельний домен антитіла, а другий домен містить один варіабельний домен антитіла.
6. Конструкція антитіла за будь-яким з попередніх пунктів, де перший і другий домени злиті з третім доменом за допомогою пептидного лінкера. Зо
7. Конструкція антитіла за будь-яким з попередніх пунктів, яка містить у порядку від амінокінця до карбоксикінця: (а) перший домен; (Б) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ЗЕО І МО: 1-3; (с) другий домен; (а) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ЗЕО ІЮО МО: 1, 2, 3, 9, 10, 11 ї 12; (є) перший поліпептидний мономер третього домену; (Ї) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ЗЕОІЮО МО: 5,6, 718; (9) другий поліпептидний мономер третього домену.
8. Конструкція антитіла за будь-яким з попередніх пунктів, яка містить у порядку від амінокінця до карбоксикінця: (а) перший домен, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ЗЕО ІО МО: 53, 59, 71, 77, 89 або 95; (р) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ЗЕО І МО: 1-3; (с) другий домен, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з БЕО ІО МО: 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129 або 5ЕО ІО МО: 15; (а) пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ЗЕО ІЮО МО: 1, 2, 3, 9, 10, 11 ї 12; (є) перший поліпептидний мономер третього домену, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з 5БЕО ІЮ МО: 17-24; (0 пептидний лінкер, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з ЗЕОІЮО МО: 5,6, 718; (9) другий поліпептидний мономер третього домену, який має амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮ МО: 17-24.
9. Конструкція антитіла за будь-яким з попередніх пунктів, яка має амінокислотну послідовність, 60 вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮ МО: 55, 56, 61, 62, 73, 74, 79, 80, 91, 92, 97 і 98.
10. Полінуклеотид, який кодує конструкцію антитіла, визначену у будь-якому з попередніх пунктів.
11. Вектор, який містить полінуклеотид, визначений у п. 10.
12. Клітина-хазяїн, трансформована або трансфікована полінуклеотидом, визначеним у п. 10, або вектором, визначеним у п. 11.
13. Спосіб отримання конструкції антитіла за будь-яким з пп. 1-9, який включає культивування клітини-хазяїна, визначеної у п. 12, в умовах, які роблять можливою експресію конструкції антитіла, визначеної у будь-якому з пп. 1-9, і виділення отриманої конструкції антитіла з культури.
14. Фармацевтична композиція, яка містить конструкцію антитіла за будь-яким з пп. 1-9 або конструкцію антитіла, отриману відповідно до способу за п. 13.
15. Фармацевтична композиція за п. 14, яка є стабільною впродовж щонайменше чотирьох тижнів за близько -20 "С.
16. Конструкція антитіла за будь-яким з пп. 1-9 для застосування у попередженні, лікуванні або зменшенні інтенсивності захворювання, вибраного з В-клітинного порушення, що корелює з експресією ВСМА, порушення, пов'язаного з плазматичними клітинами, або автоїммунного захворювання.
17. Спосіб лікування або зменшення інтенсивності В-клітинного порушення, що корелює з експресією ВСМА, порушення, пов'язаного з плазматичними клітинами, або автоїммунного захворювання, який включає стадію введення суб'єкту, що потребує цього, конструкції антитіла за будь-яким з пп. 1-9.
18. Терапевтичний набір, який містить конструкцію антитіла за будь-яким з пп. 1-9, полінуклеотид, визначений у п. 10, вектор, визначений у п. 11, і/або клітину-хазяїна, визначену у п. 12.
я) Біспецифічна одлиоланинюгова ВУ Біспецифічна конструктя конструкція антитіла на основі Ес антитіла на основі гетеро с ма хол Бех я у у що МУ В М й у М, У Ко І/ Ка се
Ой. / У павній ж, -- , , у ям і рр ОБ - - шарнір Б Я Я ї ї а. есть і У ІА Я ач й і. І я і сна ШЕ Осно а / й снз їй . І й МОм КЕ ВН МЕНЕ ВВ і; у о с ї ЕЕ снз ше о» що і ще ей лінкер ж фо внугрішньоляннюгсвнй дисульфідний зв'язак І п аз Дивани спаровування зарядів Х з Вилучена ділянка глікозилювання с) Біспецинфічна конструкція Ж-тіла 0) Біспецифічня конструкція, злита з людевкиві вальс ІНК ЗО сус І с ЩЕ Зоо око ях М ОО що 0 я МК з Мо юю й ік Т/ че сна ЧИ ее у СА фе 7 ВТ Пп Й сова ЩО 00 зе з Ділянки спаровування зарядів
Фіг. 1
За! (в) кет то: - « ВІВ с ВЕ о ВО ж йо ВО. «овЯ и Ж ев еВ дя я во. КА ж : є й х 40 4 т -- ; х й Я в оре А 7 настфся Де в нин о ча чо Я 405 це поча Яви Яаї рр ВІТЕ яєбо Ге МІ ВІТЕ гетереєтє | пЯ
Фіг. 2
За) (В) ОК сея 100;
В. їж 65 - Ва ї- во ж З З жаль «ща о Вщ Щи то во их - і я М 40 Ж й - їх: Як Ме М ВО УЖ мя
БОЇ. дек вовками ню В с пеня о олояає б? зо бо Я: 302 4010 лоз ВЕБ зеБе ТОМІ) ВІТЕ хотеро-Ке ні зіс! я о» МУ ЗОЇ жк ЯБЗЕ з ЯБаВ дня
60. во и 40 А, де" 20 я аю х з сей 0 «бе нене Фо ни лег за; не Біспецифеке Жетіло ПМ
Фіг. З З) Донор | Е - ТК - Ще! Донор 2 шо 398 я ча А Р Б-о ре -вово зав - 6 ру-ВОГо пращ тк зві -Неївс й т. аа х -Вее явка ш те «К-ТіЛО З Е -е--Ко ТІЛО по х х З Її го і -воге поз, 5 гу ре -вогб поз. а с ля «Небо поз. «ї у «внесе поз. є я Ж о аві Хот че 7 щ св. Ж.т ла ПО ! я з: -Ж-ТІО ТЗ. зі я я виз -Ж-ТІЛО ПОЗ, ке св я т! й Е ю й Її Бо о4оебрруеенейеЖеКи. 00000002 розовноаве ввчьявсво. Бо ие оче ла? 409 ях Конструкція антитіла проти Мішені В рт | Конструкція антитіла проти Мішені В (пі) ЗІЙ Донор З С 1994 . - ях «всге Ше . т-щ-що Як «Веїре си : їх 7 я 1 «К-тіло т х Бо «вого поз. і. Х т з «Вес поз. ї і що 4 -Жпла нах Сх т Бо п я вояк Яа забої з; Конструкція антитіла проти Мішені В |(нМ
Фіг. З продовж.
др дно сеосеснеесссестсссесттсевсссесвесессєсвесєссоососеосссєсессосссссссвосовссосовссосососвоюсовс ці : З - 3 з | у , я Ту пренннтртюенеекетекевнвснненевнвостеювенентвеютевєетнеснеснн і ВІТЕ взсгс В | х «веканонічне ВТЕ Е я «во ВІТЕ гетеро-Го дО 1 рення їі й У їн- зу ї
О,5. дення Лідери нення з й 0 бен фонерноі МВ ері фауні каканекК 1000 2500 85025 155 0395 010 002 М
Фіг. 4 в т К ка ЩЕ В З а і ж й о у - Фе М, т е й ; -к-- Сполука 108 Ще 0 що зе Сполука ІБ Вон щ - Он шо - ут с ОБ ян і І с ЖОВ В
ЩО. ВШ я. Ге ЕХЯ Янь. 4 що З в З х 4 Е -4 о - - ж те їх ме в заяв Час |годі
Фіг. 5
Вод -Сполука З ! -«-«Сполука за - --Сполука 18. Ах «Сполука 8 к Ж ее КтрОлуУКА ЗВ В я зе полука За 2; Ж чееСполука ба і ВХ й чеСполука 7 - Уж поет фен теСтполука 28. схо й Ж 0 ення, пеня 4 що К тех х ем Пенали, ПО фуксмекскмчаку ші в й я етан па ня пох свя пло р-н жо ання тра ножі ТОД Шо ан фо пня не . ск, ні -- х тних зе те Тим ОБО дденсу "Кн о оф в ко -ф в Ма, х дек Ши щ ! ск еевфен ! ДОСОфенкнантннннчлядчнто ЕЕ ха -- "що ; че я ! : - - ! я «т у ча ЕОЗ «ж - ! Таун жо у З Ту т, б о ва ше м 4 ді ЖК є ї ПВ ФО Ух Ка 2 ше у, но Б - ня ча І Є я Її ї х пер те є о шк Ї і ше ' і . яв г та т зв зів хе Час годі о Контріоо0 й й. В с о Е х ПО Я ща 7 і ОК м же зач 3 И ДОМ ОХ ід Познач) Ж. то | п. тА кс ра вв юне ель Х КЕШ КК 5 х В зв и я і тів аа сг ! я Ь г о Е З ВН о ! | ; ! я К жі з Я КОКО Я ЕН ї у гІЗ я КЕН УКХ ЩА й Ї І УА Ду КУ ме к пи ро у КК Мн кх де зі с ХК да ) ту -З 5 ї У і дж я БК Ї Ко в СО сис» о БИ» Кк зе РО щ ! и: Б | ва ! НО Ї ве Ох Ко ВОоо | ОН ! Я г М юль З й В В КОНЯ ї ов У Не о ОО Х КОХ М ЕХ ГКУ т ВН и ХО ТММ я Я БИКА - МКК : УМ І і КО БСК ! шо я о 0. я ОКО В СУ їх БЖ ооо: ОК і ВОК КОН ОО Мох НЯ о я ОХ КЗ ОМ і п в ОО В і п ! ООХ не о ї о. МОНО хх ЗК М З МВ: ! о ЧЕ З З ОО КО Х КОВО Е ХУ і 5 МУ ХХ і «8 о ЗІ ОХ СОН о Ї ог КАХ ОХ З і М Б ; ЗО КО ще З. ) во п В їх КВ | п Б п. ; . ї і ОККО КЕ Ї ; КК СХ я. НИМ ї х чн г ; у З ; о вах ! Х КАК | З Ї у М ! їв
Фіг. 7
ГО ! ден ОЖя ши "кн Концептрашщія 50 М з ЕК І ку ОХ Ко С м о п Ох СЕ о пен ші
5 . в о І шрев тв возі ет вк
Фіг. ЗА ГОВІ ши Концентрація 125 мМ 14 сек ОО за щ 10
Ж о. КО о. о а І о. о ТІМ ето о. денвннння КК Я я ден БІ Ь сок 5 НН ОО ЕТ о В в пе БО о о ТОБ -пеР штТУв шо шт КБ
Фіг. 6
16 т
«1 щ о шЩЩ ш бно ше 0 МІ201 поє кос ОЗ. 26 ти «Фіг. 9 ДО "Український національний офіс інтелектуальної власності та інновацій", вул.
Глазунова, 1, м.
Київ - 42, 01601
UAA201809054A 2016-02-03 2017-02-02 ОДНОЛАНЦЮГОВА КОНСТРУКЦІЯ АНТИТІЛА ДО BCMA І CD3<font face="Symbol">e</font> UA126657C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662290831P 2016-02-03 2016-02-03
PCT/EP2017/052202 WO2017134134A1 (en) 2016-02-03 2017-02-02 BCMA and CD3 Bispecific T Cell Engaging Antibody Constructs

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA126657C2 true UA126657C2 (uk) 2023-01-11

Family

ID=57965930

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201809054A UA126657C2 (uk) 2016-02-03 2017-02-02 ОДНОЛАНЦЮГОВА КОНСТРУКЦІЯ АНТИТІЛА ДО BCMA І CD3<font face="Symbol">e</font>

Country Status (37)

Country Link
US (2) US10301391B2 (uk)
EP (2) EP4039709A1 (uk)
JP (2) JP6959011B2 (uk)
KR (1) KR20180103084A (uk)
CN (2) CN116063544A (uk)
AR (1) AR107521A1 (uk)
AU (2) AU2017216230B2 (uk)
BR (1) BR112018015715A2 (uk)
CA (1) CA3010704A1 (uk)
CL (1) CL2018002057A1 (uk)
CO (1) CO2018007552A2 (uk)
CR (1) CR20180420A (uk)
CY (1) CY1125277T1 (uk)
DK (1) DK3411402T3 (uk)
EA (1) EA039594B1 (uk)
ES (1) ES2905361T3 (uk)
HR (1) HRP20220081T1 (uk)
HU (1) HUE057220T2 (uk)
JO (1) JOP20170027B1 (uk)
LT (1) LT3411402T (uk)
MA (1) MA43955B1 (uk)
MD (1) MD3411402T2 (uk)
MX (1) MX2018009108A (uk)
MY (1) MY190421A (uk)
PE (1) PE20181536A1 (uk)
PH (1) PH12018501536A1 (uk)
PL (1) PL3411402T3 (uk)
PT (1) PT3411402T (uk)
RS (1) RS62841B1 (uk)
SG (1) SG11201805770UA (uk)
SI (1) SI3411402T1 (uk)
TN (1) TN2018000263A1 (uk)
TW (1) TWI748984B (uk)
UA (1) UA126657C2 (uk)
UY (1) UY37106A (uk)
WO (1) WO2017134134A1 (uk)
ZA (1) ZA201804450B (uk)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010037838A2 (en) 2008-10-01 2010-04-08 Micromet Ag Cross-species-specific single domain bispecific single chain antibody
TWI679212B (zh) * 2011-11-15 2019-12-11 美商安進股份有限公司 針對ｂｃｍａ之e3以及ｃｄ３的結合分子
JO3519B1 (ar) 2013-01-25 2020-07-05 Amgen Inc تركيبات أجسام مضادة لأجل cdh19 و cd3
GB201317928D0 (en) * 2013-10-10 2013-11-27 Ucl Business Plc Molecule
TW201609812A (zh) 2014-07-31 2016-03-16 安美基研究（慕尼黑）公司 最佳化之跨物種特異性雙特異性單鏈抗體構築體
TWI796283B (zh) 2015-07-31 2023-03-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｍｓｌｎ及ｃｄ３抗體構築體
TWI744242B (zh) 2015-07-31 2021-11-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Egfrviii及cd3抗體構築體
TW202346349A (zh) * 2015-07-31 2023-12-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Dll3及cd3抗體構築體
TWI829617B (zh) 2015-07-31 2024-01-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｆｌｔ３及ｃｄ３抗體構築體
TWI717375B (zh) 2015-07-31 2021-02-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｃｄ７０及ｃｄ３抗體構築體
US11713358B2 (en) 2015-08-28 2023-08-01 Amunix Pharmaceuticals, Inc. Chimeric polypeptide assembly and methods of making and using the same
DK3411402T3 (da) * 2016-02-03 2022-02-07 Amgen Res Munich Gmbh Bcma- og cd3-bispecifikke t-celle-engagerende antistofkonstruktioner
EA039859B1 (ru) 2016-02-03 2022-03-21 Эмджен Рисерч (Мюник) Гмбх Биспецифические конструкты антител, связывающие egfrviii и cd3
EP3411404B1 (en) 2016-02-03 2022-11-09 Amgen Research (Munich) GmbH Psma and cd3 bispecific t cell engaging antibody constructs
WO2017143069A1 (en) 2016-02-17 2017-08-24 Seattle Genetics, Inc. Bcma antibodies and use of same to treat cancer and immunological disorders
US11623958B2 (en) 2016-05-20 2023-04-11 Harpoon Therapeutics, Inc. Single chain variable fragment CD3 binding proteins
WO2017201488A1 (en) 2016-05-20 2017-11-23 Harpoon Therapeutics, Inc. Single domain serum albumin binding protein
JOP20190189A1 (ar) * 2017-02-02 2019-08-01 Amgen Res Munich Gmbh تركيبة صيدلانية ذات درجة حموضة منخفضة تتضمن بنيات جسم مضاد يستهدف الخلية t
US11535668B2 (en) 2017-02-28 2022-12-27 Harpoon Therapeutics, Inc. Inducible monovalent antigen binding protein
CN113896792A (zh) 2017-05-12 2022-01-07 哈普恩治疗公司 间皮素结合蛋白质
CA3063905A1 (en) 2017-05-16 2018-11-22 The Johns Hopkins University Manabodies and methods of using
JP7079171B2 (ja) 2017-08-03 2022-06-01 アムジエン・インコーポレーテツド インターロイキン－２１ムテイン及び治療方法
CA3075046A1 (en) 2017-09-08 2019-03-14 Amgen Inc. Inhibitors of kras g12c and methods of using the same
MX2020003915A (es) 2017-10-13 2020-10-08 Harpoon Therapeutics Inc Proteinas trispecificas y metodos de uso.
MX2020003856A (es) 2017-10-13 2020-08-13 Harpoon Therapeutics Inc Proteinas de union a antigenos de maduracion de celulas b.
AU2018393076A1 (en) 2017-12-19 2020-07-02 Surrozen Operating, Inc. Anti-LRP5/6 antibodies and methods of use
JP7330977B2 (ja) 2017-12-19 2023-08-22 スロゼン オペレーティング， インコーポレイテッド Ｗｎｔサロゲート分子及びその使用
JOP20200157A1 (ar) 2017-12-22 2022-10-30 Teneobio Inc أجسام مضادة ذات سلسلة ثقيلة ترتبط بـ cd22
JOP20200172A1 (ar) 2018-01-12 2020-07-12 Amgen Inc الأجسام المضادة لـ pd-1 وطرق العلاج
CN112119099A (zh) 2018-03-02 2020-12-22 Cdr-生物科技股份有限公司 三特异性抗原结合蛋白
CR20200571A (es) 2018-06-01 2021-01-18 Novartis Ag Moléculas de únion contra bcma y usos de las mismas
EP3823664A1 (en) 2018-07-19 2021-05-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Bispecific anti-bcma x anti-cd3 antibodies and uses thereof
EP3830122A1 (en) * 2018-07-31 2021-06-09 Amgen Research (Munich) GmbH Dosing regimen for bcma-cd3 bispecific antibodies
CA3114038A1 (en) 2018-09-25 2020-04-02 Harpoon Therapeutics, Inc. Dll3 binding proteins and methods of use
MA53732A (fr) 2018-09-28 2022-01-05 Amgen Inc Anticorps dirigés contre bcma soluble
BR112021008486A2 (pt) * 2018-11-01 2021-10-26 Shandong New Time Pharmaceutical Co., Ltd Anticorpo biespecífico e seu uso
CN113412124A (zh) * 2018-12-19 2021-09-17 希望之城 Baff-r双特异性t细胞衔接子抗体
US20220195053A1 (en) * 2019-03-11 2022-06-23 Surrozen Operating Inc. Modulation of wnt signaling in gastrointestinal disorders
MX2021011141A (es) 2019-03-21 2022-01-19 Regeneron Pharma Combinacion de inhibidores de la via de il-4/il-13 y ablacion de celulas plasmaticas para el tratamiento de alergia.
AU2020270298A1 (en) 2019-05-07 2021-12-23 Gracell Biotechnologies (Shanghai) Co., Ltd. Engineered immune cell targeting BCMA and use thereof
UY38748A (es) 2019-06-14 2021-01-29 Teneobio Inc Anticuerpos multiespecíficos de cadena pesada que se unen a cd22 y cd3
KR20210043475A (ko) * 2019-10-10 2021-04-21 주식회사 와이바이오로직스 다중 특이적 융합 단백질 및 이의 용도
CN114599394A (zh) * 2019-10-25 2022-06-07 安进公司 用于在低蛋白浓度下使蛋白损失最小化的组合物和方法
JP2023500869A (ja) * 2019-11-06 2023-01-11 アムジェン リサーチ （ミュニック） ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 増殖性疾患での使用のための多重標的化抗原結合分子
EP3819007A1 (en) 2019-11-11 2021-05-12 Amgen Research (Munich) GmbH Dosing regimen for anti-bcma agents
CA3183565A1 (en) 2020-06-30 2022-01-06 Harbour Biomed (Shanghai) Co., Ltd Binding protein having h2l2 and hcab structures
CA3194771A1 (en) 2020-09-16 2022-03-24 Amgen Inc. Methods for administering therapeutic doses of bispecific t-cell engaging molecules for the treatment of cancer
WO2022103781A1 (en) 2020-11-10 2022-05-19 Amgen Inc. Methods for administering a bcma x cd3 binding molecule
CA3202891A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Kara Olson Compositions and methods for treating cytokine release syndrome
WO2023275621A1 (en) 2021-07-01 2023-01-05 Compugen Ltd. Anti-tigit and anti-pvrig in monotherapy and combination treatments
US20230357446A1 (en) 2022-04-11 2023-11-09 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for universal tumor cell killing

Family Cites Families (189)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1985A (en) 1841-02-18 Charles m
US556A (en) 1838-01-09 Machine foe
US5013A (en) 1847-03-13 Improvement in apparatus for the manufacture of malleable iron
US3180193A (en) 1963-02-25 1965-04-27 Benedict David Machines for cutting lengths of strip material
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US3691016A (en) 1970-04-17 1972-09-12 Monsanto Co Process for the preparation of insoluble enzymes
CA1023287A (en) 1972-12-08 1977-12-27 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Process for the preparation of carrier-bound proteins
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4195128A (en) 1976-05-03 1980-03-25 Bayer Aktiengesellschaft Polymeric carrier bound ligands
US4330440A (en) 1977-02-08 1982-05-18 Development Finance Corporation Of New Zealand Activated matrix and method of activation
CA1093991A (en) 1977-02-17 1981-01-20 Hideo Hirohara Enzyme immobilization with pullulan gel
US4229537A (en) 1978-02-09 1980-10-21 New York University Preparation of trichloro-s-triazine activated supports for coupling ligands
US4263428A (en) 1978-03-24 1981-04-21 The Regents Of The University Of California Bis-anthracycline nucleic acid function inhibitors and improved method for administering the same
JPS6023084B2 (ja) 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
IE52535B1 (en) 1981-02-16 1987-12-09 Ici Plc Continuous release pharmaceutical compositions
US4475196A (en) 1981-03-06 1984-10-02 Zor Clair G Instrument for locating faults in aircraft passenger reading light and attendant call control system
US4447233A (en) 1981-04-10 1984-05-08 Parker-Hannifin Corporation Medication infusion pump
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
US4640835A (en) 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
EP0088046B1 (de) 1982-02-17 1987-12-09 Ciba-Geigy Ag Lipide in wässriger Phase
US4439196A (en) 1982-03-18 1984-03-27 Merck & Co., Inc. Osmotic drug delivery system
US4447224A (en) 1982-09-20 1984-05-08 Infusaid Corporation Variable flow implantable infusion apparatus
US4487603A (en) 1982-11-26 1984-12-11 Cordis Corporation Implantable microinfusion pump system
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4486194A (en) 1983-06-08 1984-12-04 James Ferrara Therapeutic device for administering medicaments through the skin
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
EP0143949B1 (en) 1983-11-01 1988-10-12 TERUMO KABUSHIKI KAISHA trading as TERUMO CORPORATION Pharmaceutical composition containing urokinase
US4496689A (en) 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
US4694778A (en) 1984-05-04 1987-09-22 Anicon, Inc. Chemical vapor deposition wafer boat
JPS6147500A (ja) 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
US4879231A (en) 1984-10-30 1989-11-07 Phillips Petroleum Company Transformation of yeasts of the genus pichia
US4596556A (en) 1985-03-25 1986-06-24 Bioject, Inc. Hypodermic injection apparatus
US4751180A (en) 1985-03-28 1988-06-14 Chiron Corporation Expression using fused genes providing for protein product
EP0206448B1 (en) 1985-06-19 1990-11-14 Ajinomoto Co., Inc. Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide)
US4935233A (en) 1985-12-02 1990-06-19 G. D. Searle And Company Covalently linked polypeptide cell modulators
WO1987005330A1 (en) 1986-03-07 1987-09-11 Michel Louis Eugene Bergh Method for enhancing glycoprotein stability
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
GB8610600D0 (en) 1986-04-30 1986-06-04 Novo Industri As Transformation of trichoderma
US4791192A (en) 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US5260203A (en) 1986-09-02 1993-11-09 Enzon, Inc. Single polypeptide chain binding molecules
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
DE3785186T2 (de) 1986-09-02 1993-07-15 Enzon Lab Inc Bindungsmolekuele mit einzelpolypeptidkette.
DE3883899T3 (de) 1987-03-18 1999-04-22 Sb2 Inc Geänderte antikörper.
DE3853515T3 (de) 1987-05-21 2005-08-25 Micromet Ag Multifunktionelle proteine mit vorbestimmter zielsetzung.
US4790824A (en) 1987-06-19 1988-12-13 Bioject, Inc. Non-invasive hypodermic injection device
US4941880A (en) 1987-06-19 1990-07-17 Bioject, Inc. Pre-filled ampule and non-invasive hypodermic injection device assembly
EP0320015B1 (en) 1987-12-09 1994-07-20 Omron Tateisi Electronics Co. Inductive data communicating apparatus
US5476996A (en) 1988-06-14 1995-12-19 Lidak Pharmaceuticals Human immune system in non-human animal
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
GB8823869D0 (en) 1988-10-12 1988-11-16 Medical Res Council Production of antibodies
US5175384A (en) 1988-12-05 1992-12-29 Genpharm International Transgenic mice depleted in mature t-cells and methods for making transgenic mice
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
EP0402226A1 (en) 1989-06-06 1990-12-12 Institut National De La Recherche Agronomique Transformation vectors for yeast yarrowia
US5683888A (en) 1989-07-22 1997-11-04 University Of Wales College Of Medicine Modified bioluminescent proteins and their use
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5312335A (en) 1989-11-09 1994-05-17 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
US5064413A (en) 1989-11-09 1991-11-12 Bioject, Inc. Needleless hypodermic injection device
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US5292658A (en) 1989-12-29 1994-03-08 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Boyd Graduate Studies Research Center Cloning and expressions of Renilla luciferase
ATE356869T1 (de) 1990-01-12 2007-04-15 Amgen Fremont Inc Bildung von xenogenen antikörpern
US6673986B1 (en) 1990-01-12 2004-01-06 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US6075181A (en) 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US6150584A (en) 1990-01-12 2000-11-21 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
ES2108048T3 (es) 1990-08-29 1997-12-16 Genpharm Int Produccion y utilizacion de animales inferiores transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos.
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
ATE352612T1 (de) 1990-08-29 2007-02-15 Pharming Intellectual Pty Bv Homologe rekombination in säugetier-zellen
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US6300129B1 (en) 1990-08-29 2001-10-09 Genpharm International Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US6255458B1 (en) 1990-08-29 2001-07-03 Genpharm International High affinity human antibodies and human antibodies against digoxin
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
WO1992015673A1 (en) 1991-03-11 1992-09-17 The University Of Georgia Research Foundation, Inc. Cloning and expression of renilla luciferase
WO1992022670A1 (en) 1991-06-12 1992-12-23 Genpharm International, Inc. Early detection of transgenic embryos
AU2235992A (en) 1991-06-14 1993-01-12 Genpharm International, Inc. Transgenic immunodeficient non-human animals
LU91067I2 (fr) 1991-06-14 2004-04-02 Genentech Inc Trastuzumab et ses variantes et dérivés immuno chimiques y compris les immotoxines
WO1993004169A1 (en) 1991-08-20 1993-03-04 Genpharm International, Inc. Gene targeting in animal cells using isogenic dna constructs
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
EP0746609A4 (en) 1991-12-17 1997-12-17 Genpharm Int NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS CAPABLE OF PRODUCING HETEROLOGOUS ANTIBODIES
WO1993015722A1 (en) 1992-02-07 1993-08-19 Syntex (Usa) Inc. Controlled delivery of pharmaceuticals from preformed porous microparticles
NZ253943A (en) 1992-06-18 1997-01-29 Genpharm Int Transfering polynucleotides into eukaryotic cells using co-lipofection complexes of a cationic lipid and the polynucleotide
US5383851A (en) 1992-07-24 1995-01-24 Bioject Inc. Needleless hypodermic injection device
WO1994002602A1 (en) 1992-07-24 1994-02-03 Cell Genesys, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US5981175A (en) 1993-01-07 1999-11-09 Genpharm Internation, Inc. Methods for producing recombinant mammalian cells harboring a yeast artificial chromosome
AU6819494A (en) 1993-04-26 1994-11-21 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
KR960705209A (ko) 1993-09-10 1996-10-09 잭 엠. 그랜노위츠 녹색 형광 단백의 용도
US5625825A (en) 1993-10-21 1997-04-29 Lsi Logic Corporation Random number generating apparatus for an interface unit of a carrier sense with multiple access and collision detect (CSMA/CD) ethernet data network
WO1995021191A1 (en) 1994-02-04 1995-08-10 William Ward Bioluminescent indicator based upon the expression of a gene for a modified green-fluorescent protein
US5643763A (en) 1994-11-04 1997-07-01 Genpharm International, Inc. Method for making recombinant yeast artificial chromosomes by minimizing diploid doubling during mating
US6214388B1 (en) 1994-11-09 2001-04-10 The Regents Of The University Of California Immunoliposomes that optimize internalization into target cells
US5777079A (en) 1994-11-10 1998-07-07 The Regents Of The University Of California Modified green fluorescent proteins
AU5632296A (en) 1995-04-27 1996-11-18 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
WO1996034096A1 (en) 1995-04-28 1996-10-31 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5811524A (en) 1995-06-07 1998-09-22 Idec Pharmaceuticals Corporation Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof
EP0859841B1 (en) 1995-08-18 2002-06-19 MorphoSys AG Protein/(poly)peptide libraries
CA2230759C (en) 1995-08-29 2012-02-21 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Chimeric animal and method for producing the same
US5874304A (en) 1996-01-18 1999-02-23 University Of Florida Research Foundation, Inc. Humanized green fluorescent protein genes and methods
US5804387A (en) 1996-02-01 1998-09-08 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University FACS-optimized mutants of the green fluorescent protein (GFP)
US5876995A (en) 1996-02-06 1999-03-02 Bryan; Bruce Bioluminescent novelty items
US5925558A (en) 1996-07-16 1999-07-20 The Regents Of The University Of California Assays for protein kinases using fluorescent protein substrates
US5976796A (en) 1996-10-04 1999-11-02 Loma Linda University Construction and expression of renilla luciferase and green fluorescent protein fusion genes
WO1998024893A2 (en) 1996-12-03 1998-06-11 Abgenix, Inc. TRANSGENIC MAMMALS HAVING HUMAN IG LOCI INCLUDING PLURAL VH AND Vλ REGIONS AND ANTIBODIES PRODUCED THEREFROM
ATE290205T1 (de) 1996-12-12 2005-03-15 Prolume Ltd Vorrichtung und verfahren zum nachweis und identifizieren von infektiösen wirkstoffen
AU736549B2 (en) 1997-05-21 2001-08-02 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Method for the production of non-immunogenic proteins
WO1999049019A2 (en) 1998-03-27 1999-09-30 Prolume, Ltd. Luciferases, fluorescent proteins, nucleic acids encoding the luciferases and fluorescent proteins and the use thereof in diagnostics
AU761587B2 (en) 1998-04-21 2003-06-05 Amgen Research (Munich) Gmbh CD19xCD3 specific polypeptides and uses thereof
ATE251181T1 (de) 1998-07-28 2003-10-15 Micromet Ag Heterominikörper
US7254167B2 (en) 1998-10-30 2007-08-07 Broadcom Corporation Constellation-multiplexed transmitter and receiver
CN1202128C (zh) 1998-12-08 2005-05-18 拜奥威神有限公司 修饰蛋白的免疫原性
US6833268B1 (en) 1999-06-10 2004-12-21 Abgenix, Inc. Transgenic animals for producing specific isotypes of human antibodies via non-cognate switch regions
US7230167B2 (en) 2001-08-31 2007-06-12 Syngenta Participations Ag Modified Cry3A toxins and nucleic acid sequences coding therefor
ES2645563T3 (es) 2001-11-30 2017-12-05 Amgen Fremont Inc. Animales transgénicos que portan genes de cadena ligera de Ig humana
US8486859B2 (en) 2002-05-15 2013-07-16 Bioenergy, Inc. Use of ribose to enhance plant growth
US7904068B2 (en) 2003-06-06 2011-03-08 At&T Intellectual Property I, L.P. System and method for providing integrated voice and data services utilizing wired cordless access with unlicensed spectrum and wired access with licensed spectrum
DE602004030811D1 (de) 2003-10-16 2011-02-10 Micromet Ag Multispezifische deimmunisierte cd3-bindende moleküle
US20050249723A1 (en) 2003-12-22 2005-11-10 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel Fc ligand binding sites
DE602006017460D1 (de) 2005-03-14 2010-11-25 Omron Tateisi Electronics Co Programmierbares Steuersystem
WO2006138181A2 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
US8234145B2 (en) 2005-07-12 2012-07-31 International Business Machines Corporation Automatic computation of validation metrics for global logistics processes
BRPI0604215A (pt) 2005-08-17 2007-04-10 Biosigma Sa método para projetar oligonucleotìdeos para técnicas de biologia molecular
JP5686953B2 (ja) 2005-10-11 2015-03-18 アムゲン リサーチ （ミュンヘン） ゲーエムベーハー 交差種特異的（ｃｒｏｓｓ−ｓｐｅｃｉｅｓ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ）抗体を含む組成物および該組成物の使用
JP2007122396A (ja) 2005-10-27 2007-05-17 Hitachi Ltd ディスクアレイ装置及びその障害対応検証方法
US7919297B2 (en) 2006-02-21 2011-04-05 Cornell Research Foundation, Inc. Mutants of Aspergillus niger PhyA phytase and Aspergillus fumigatus phytase
US7574748B2 (en) 2006-03-07 2009-08-18 Nike, Inc. Glove with support system
US7990860B2 (en) 2006-06-16 2011-08-02 Harris Corporation Method and system for rule-based sequencing for QoS
US8430938B1 (en) 2006-07-13 2013-04-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Control algorithm for autothermal reformer
GB0614780D0 (en) 2006-07-25 2006-09-06 Ucb Sa Biological products
KR101146588B1 (ko) 2006-08-11 2012-05-16 삼성전자주식회사 Ｆｉｎ 구조체 및 이를 이용한 핀 트랜지스터의 제조방법
CN100589507C (zh) 2006-10-30 2010-02-10 华为技术有限公司 一种拨号提示系统及方法
ES2695047T3 (es) 2007-04-03 2018-12-28 Amgen Research (Munich) Gmbh Dominio de unión específico entre especies
TR201816277T4 (tr) 2007-04-03 2018-11-21 Amgen Res Munich Gmbh Çapraz-tür-spesifik bağlama alanı.
CA2682605A1 (en) * 2007-04-18 2008-10-30 Zymogenetics, Inc. Single chain fc, methods of making and methods of treatment
WO2008143954A2 (en) 2007-05-14 2008-11-27 Biogen Idec Ma Inc. Single-chain fc (scfc) regions, binding polypeptides comprising same, and methods related thereto
US8209741B2 (en) 2007-09-17 2012-06-26 Microsoft Corporation Human performance in human interactive proofs using partial credit
US8464584B2 (en) 2007-10-19 2013-06-18 Food Equipment Technologies Company, Inc. Beverage dispenser with level measuring apparatus and display
WO2009067987A1 (de) 2007-11-29 2009-06-04 Luk Lamellen Und Kupplungsbau Beteiligungs Kg Kraftübertragungsvorrichtung, insbesondere zur leistungsübertragung zwischen einer antriebsmaschine und einem abtrieb
US8376279B2 (en) 2008-01-23 2013-02-19 Aurora Flight Sciences Corporation Inflatable folding wings for a very high altitude aircraft
AU2009239437B2 (en) 2008-04-25 2014-11-13 University Of Washington Levels of BCMA protein expression on B cells and use in diagnostic methods
WO2010037838A2 (en) 2008-10-01 2010-04-08 Micromet Ag Cross-species-specific single domain bispecific single chain antibody
JP4956801B2 (ja) 2009-03-04 2012-06-20 日産自動車株式会社 排気ガス浄化触媒及びその製造方法
PL2406284T3 (pl) * 2009-03-10 2017-09-29 Biogen Ma Inc. Przeciwciała anty-bcma
US8463191B2 (en) 2009-04-02 2013-06-11 Qualcomm Incorporated Beamforming options with partial channel knowledge
US20130129723A1 (en) 2009-12-29 2013-05-23 Emergent Product Development Seattle, Llc Heterodimer Binding Proteins and Uses Thereof
TW201138821A (en) * 2010-03-26 2011-11-16 Roche Glycart Ag Bispecific antibodies
US9238080B2 (en) 2010-05-21 2016-01-19 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Bi-specific fusion proteins
WO2012066058A1 (en) * 2010-11-16 2012-05-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Agents and methods for treating diseases that correlate with bcma expression
KR102244173B1 (ko) 2010-11-30 2021-04-26 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 세포상해 유도 치료제
US9409950B2 (en) * 2010-12-23 2016-08-09 Biogen Ma Inc. Linker peptides and polypeptides comprising same
US9676298B2 (en) 2010-12-30 2017-06-13 C. Rob. Hammerstein Gmbh & Co. Kg Longitudinal adjustment device for a motor vehicle seat, comprising two pairs of rails
US20130078250A1 (en) 2011-08-23 2013-03-28 Oliver Ast Bispecific t cell activating antigen binding molecules
UA116192C2 (uk) 2011-08-23 2018-02-26 Рош Глікарт Аг Активуюча т-клітини біоспецифічна антигензв'язуюча молекула
TWI679212B (zh) * 2011-11-15 2019-12-11 美商安進股份有限公司 針對ｂｃｍａ之e3以及ｃｄ３的結合分子
ES2680151T3 (es) 2012-03-01 2018-09-04 Amgen Research (Munich) Gmbh Moléculas de unión de polipéptidos de larga duración
AU2013289883B2 (en) 2012-07-13 2018-11-01 Zymeworks Bc Inc. Bispecific asymmetric heterodimers comprising anti-CD3 constructs
US9243058B2 (en) * 2012-12-07 2016-01-26 Amgen, Inc. BCMA antigen binding proteins
KR102211837B1 (ko) 2013-01-14 2021-02-03 젠코어 인코포레이티드 신규한 이형이량체 단백질
EP2953972B1 (en) * 2013-02-05 2020-07-08 EngMab Sàrl Method for the selection of antibodies against bcma
US9458245B2 (en) * 2013-03-06 2016-10-04 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. ANTI-C-MET tandem Fc bispecific antibodies
US9546203B2 (en) * 2013-03-14 2017-01-17 Amgen Inc. Aglycosylated Fc-containing polypeptides with cysteine substitutions
US20140308285A1 (en) 2013-03-15 2014-10-16 Amgen Inc. Heterodimeric bispecific antibodies
US11634502B2 (en) * 2013-03-15 2023-04-25 Amgen Inc. Heterodimeric bispecific antibodies
LT2970449T (lt) 2013-03-15 2019-11-25 Amgen Res Munich Gmbh Viengrandės surišančios molekulės, apimančios n galo abp
US20140302037A1 (en) 2013-03-15 2014-10-09 Amgen Inc. BISPECIFIC-Fc MOLECULES
AR095374A1 (es) 2013-03-15 2015-10-14 Amgen Res (Munich) Gmbh Moléculas de unión para bcma y cd3
EP3049440B1 (en) 2013-09-25 2020-03-25 Amgen Inc. V-c-fc-v-c antibody
US9300829B2 (en) 2014-04-04 2016-03-29 Canon Kabushiki Kaisha Image reading apparatus and correction method thereof
US10105142B2 (en) 2014-09-18 2018-10-23 Ethicon Llc Surgical stapler with plurality of cutting elements
EP3223845B1 (en) 2014-11-26 2021-05-19 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd20
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
TW202311292A (zh) 2015-04-17 2023-03-16 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｃｄｈ３與ｃｄ３之雙特異性抗體構築體
TWI796283B (zh) 2015-07-31 2023-03-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｍｓｌｎ及ｃｄ３抗體構築體
TWI717375B (zh) 2015-07-31 2021-02-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｃｄ７０及ｃｄ３抗體構築體
TWI829617B (zh) 2015-07-31 2024-01-21 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Ｆｌｔ３及ｃｄ３抗體構築體
TWI744242B (zh) 2015-07-31 2021-11-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Egfrviii及cd3抗體構築體
TW202346349A (zh) 2015-07-31 2023-12-01 德商安美基研究（慕尼黑）公司 Dll3及cd3抗體構築體
EA039859B1 (ru) 2016-02-03 2022-03-21 Эмджен Рисерч (Мюник) Гмбх Биспецифические конструкты антител, связывающие egfrviii и cd3
DK3411402T3 (da) * 2016-02-03 2022-02-07 Amgen Res Munich Gmbh Bcma- og cd3-bispecifikke t-celle-engagerende antistofkonstruktioner
EP3411404B1 (en) 2016-02-03 2022-11-09 Amgen Research (Munich) GmbH Psma and cd3 bispecific t cell engaging antibody constructs
EP3535295A1 (en) 2016-11-02 2019-09-11 EngMab Sàrl Bispecific antibody against bcma and cd3 and an immunological drug for combined use in treating multiple myeloma
KR20190141243A (ko) 2017-05-05 2019-12-23 암젠 인크 개선된 저장 및 투여를 위한 이중특이적 항체 구축물을 포함하는 약제학적 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
KR20180103084A (ko) 2018-09-18
US20170218077A1 (en) 2017-08-03
JOP20170027B1 (ar) 2021-08-17
BR112018015715A2 (pt) 2019-02-05
EP4039709A1 (en) 2022-08-10
EP3411402A1 (en) 2018-12-12
AR107521A1 (es) 2018-05-09
LT3411402T (lt) 2022-01-25
CY1125277T1 (el) 2023-06-09
DK3411402T3 (da) 2022-02-07
MA43955B1 (fr) 2022-02-28
MA43955A (fr) 2021-04-28
SI3411402T1 (sl) 2022-03-31
TWI748984B (zh) 2021-12-11
PT3411402T (pt) 2022-02-01
WO2017134134A1 (en) 2017-08-10
AU2023237216A1 (en) 2023-10-26
CO2018007552A2 (es) 2018-07-31
CA3010704A1 (en) 2017-08-10
TN2018000263A1 (en) 2020-01-16
MX2018009108A (es) 2019-03-11
CN109219617A (zh) 2019-01-15
SG11201805770UA (en) 2018-08-30
EA039594B1 (ru) 2022-02-15
EA201891755A1 (ru) 2019-02-28
EP3411402B1 (en) 2021-12-22
RS62841B1 (sr) 2022-02-28
JP6959011B2 (ja) 2021-11-02
US10301391B2 (en) 2019-05-28
HRP20220081T1 (hr) 2022-04-15
TW201731874A (zh) 2017-09-16
CN116063544A (zh) 2023-05-05
PH12018501536A1 (en) 2019-05-15
US20200048357A1 (en) 2020-02-13
AU2017216230A1 (en) 2018-07-19
UY37106A (es) 2017-08-31
PE20181536A1 (es) 2018-09-26
US11352433B2 (en) 2022-06-07
ZA201804450B (en) 2021-03-31
CL2018002057A1 (es) 2019-02-15
ES2905361T3 (es) 2022-04-08
HUE057220T2 (hu) 2022-04-28
PL3411402T3 (pl) 2022-02-28
AU2017216230B2 (en) 2023-07-06
MY190421A (en) 2022-04-21
JP2017186301A (ja) 2017-10-12
MD3411402T2 (ro) 2022-05-31
JP2022017277A (ja) 2022-01-25
CR20180420A (es) 2018-12-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA126657C2 (uk) ОДНОЛАНЦЮГОВА КОНСТРУКЦІЯ АНТИТІЛА ДО BCMA І CD3&lt;font face=&#34;Symbol&#34;&gt;e&lt;/font&gt;
AU2016302575B2 (en) Bispecific antibody constructs binding mesothelin and CD3
EP3411404B1 (en) Psma and cd3 bispecific t cell engaging antibody constructs
EP3328892B1 (en) Bispecific antibody constructs binding egfrviii and cd3
JP6879998B2 (ja) Ｃｄ７０及びｃｄ３に対する抗体構築物
UA125717C2 (uk) Конструкція антитіла до flt3 і cd3
UA126280C2 (uk) Біспецифічні конструкції антитіл, які залучають т-клітини
AU2015295239B2 (en) Antibody constructs for CDH19 and CD3
ES2929276T3 (es) Constructos de anticuerpo para CDH19 y CD3
EP3618864A1 (en) Pharmaceutical composition comprising bispecific antibody constructs for improved storage and administration
EP4276116A2 (en) Bispecific antibody constructs for cdh3 and cd3
US11066471B2 (en) Antibodies to MICA and MICB proteins
UA121844C2 (uk) Людське антитіло до cd27, спосіб його одержання та застосування
US20210163592A1 (en) Continuous manufacturing process for bispecific antibody products
US20210130465A1 (en) Bispecific Antibody Construct Directed to MUC17 and CD3
CN113825771A (zh) 针对密蛋白18a2的抗体及其应用
AU2020377483A1 (en) Multitargeting antigen-binding molecules for use in proliferative diseases
US20220017636A1 (en) Mageb2 binding constructs
WO2024059675A2 (en) Bispecific molecule stabilizing composition
AU2022269312A1 (en) Cd20 and cd22 targeting antigen-binding molecules for use in proliferative diseases
KR20230061429A (ko) 항-abcc1 항체 및 이의 용도