TWI274752B

TWI274752B - Substituted pyrroles, processes for preparing the same and pharmaceutical compositions comprising the same

Info

Publication number: TWI274752B
Application number: TW089126995A
Authority: TW
Inventors: Nader Fotouhi; Emily Aijun Liu; Allen John Lovey; John Guilfoyle Mullin Jr; Giuseppe Federico Weber
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1999-12-16
Filing date: 2000-12-16
Publication date: 2007-03-01
Also published as: RU2264398C2; YU43302A; EP1242408A1; KR100507422B1; RU2002119209A; CO5050293A1; CN1229374C; HRP20020513A2; DE60023182D1; PE20011034A1; MA26856A1; UY26485A1; HRP20020513B1; CN1409709A; KR20020063215A; BRPI0016329B8; MXPA02005560A; ES2249314T3; ATE306484T1; US6313143B1

Description

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五、發明說明（1 ) 簡要本發明係關於特定的抗複製試劑之經取代吡咯。該化合 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) $及其於醫藥上可接受的鹽可用在治療或控制細胞複製異吊’特別是癌症。本發明係關於包括該化合物的醫藥組合物及冶療及/或預防癌症的，特別是治療或控制實質的瘤。曼明背景癌症的彳示纪疋播法控制的細胞複製。癌化的瘤是細胞中通常於調節細胞分裂循環的基因有直接或間接的損害。有許多的研究都是關於抗複製試劑的探討。雖然許多試劑被確認具有所需的抗複製活性，大部份的試劑具有多種缺點’包括溶解度差，分子複雜性等，而使其不適用於或不万便做爲人類患者的治療使用。目前對於能易於合成的小刀子化。物有持、％性的需求，其可有效的做爲癌症治療試劑，而且適合持續的以輸液方式輸入至患者。所以本發明目標是提供該化合物及包括該化合物的醫藥組合物。定義做爲本篇使用的下述名詞之定義如下。 “烯基’’代表直鏈或支鏈的脂族不飽和羥，具有i至丨5個經濟部智慧財產局員工消費合作社印製碳原子，較佳爲具有1至10個碳原子，最佳是具有1至6個碳原子。 “烷氧基，，代表烷基或烯基基團，其以氧原子相連在其分子上（如，R〇_，如甲氧基，乙氧基等）。 “芳基”代表具有5至1〇個料的芳族環，而且組成】或2 -4- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐) ------ 1274752 A7 ___B7____ 五、發明說明（2 ) 個環，其可選擇性包括一個或多個相同或相異的雜原子。爲定義目的，芳基包括雜芳基。較佳的，雜原子包括氮、硫、或氧，或單獨或以組合方式存在，取代一個或多個碳原子。足義中的芳基實例是苯基、p比淀、味唆、p比略、三唑、吱喃、嘧啶。 “環fe基”代表非芳族的，部份飽和和或完全飽和的包括 3至8個原子的環脂烴。環烷基的實例包括環丙基、環戊基及環己基。 “有效劑量”代表至少一種式I化合物或其於醫藥上可接受的鹽的劑量可顯著的抑制人類腫瘤細胞的複製及/或預方分化，包括人類腫瘤細胞株。 “雜原子”代表選自氮、硫及氧原子。可分別選擇雜原子並且可取代一個或多個碳原子。 “雜環’’代表3 -至1 〇 -員非芳族，部份飽和或完全飽和的烴，其包括至少一個雜原子。該環系統包括，嗎啡、吡咯啶、六氫吡啶、六氫吡畊。 IC5〇 ’係指抑5 0 %特定的測定活性所需之根據本發明化合物濃度。IC5G的測定可如下實例1 5中所描述。經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -11·——：----：——— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) “低碳數烷基”係指直鏈或支鏈飽和脂族烴，其具有1至 6，較佳是1至4個碳原子。低碳數烷基可經如下提供的專一性取代。另外該烷基可包括一個或多個雜原子以取代一個或多個碳原子。典型的低碳數烷基包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、第三丁基、2-丁基、戊基、己基，及其相似者。 -5-

1274752 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（3 ) “醫藥上可接受的鹽”代表保有式〗化合物之生物有效性及性質之傳統酸加成鹽或鹼加成鹽，而且其可由適當的無毒有機或無機酸或有機或無機鹼生成。樣品酸加成鹽包括衍生自無機酸如，鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸及硝酸，以及衍生自，機酸如，醋酸、酒石酸、水楊酸、甲磺酸、琥珀酸、檸檬酸、韻果酸、乳酸、反丁二酸，及其相似者。樣品鹼加成鹽包括衍生自銨、鉀、鈉及四級氯氧化錄，例如四甲基氫氧化铵。醫藥上可接受的”如醫藥上可接受的載體、賦型劑等，代表醫藥上可接受的且實質上對施予特定化合物的接受者不具毒性的。 •fc'藥上活性代謝物”代表式I化合物的代謝產物是於醫藥上可接受的且有效的。 “聚乙二醇，，或“PEG，，基團代表通式爲_R9(〇CH2CH2)n〇H 的結構’其中η平均是介於2至1500，較佳是介於^ 5至 150，其平均分子量是由5〇〇至5 〇〇〇道耳呑，且其中R9是羧基或低碳數烷基，以甲基或乙基爲佳。削藥物”代表在生理條件下或以溶離方式轉換爲醫藥上具活性化合物的一種化合物。前藥物在給予接受者時可不具活性，但可在活體中轉換爲具活性的化合物。 “經取代”如經取代烷基，除非特別提及，代表該取代反應可在一個或多個位置發生，且每一個取代位置上的取代基可分別選自特定的選擇。 “經取代胺基”代表胺基，其經其他基團做單_或二-取 -6 - 本紙張尺度顧巾關家鮮（CNS)A4規格（210 X 297公釐) " — I#—— — 訂---------線--# (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（4 ) 代’以低碳數燒基爲佳（如，甲基，或乙基）。發明詳述- 本發明係專一的關於如下式之經取代p比略：

其前述化合物於醫藥上可接受的鹽，其中： R是選自如下組成的基團，包括氺〇3RlR2、_chr3〇c〇r4、 -CHR30C02R4、-CHR30C0NHR4及-COR4 ; R及R係、選自如下組成的基團，包括H、n a及皿4，而且除非R或R疋Η，不然雨者相同，或可相異，或另外的，R1及R2共同代表Ca ; R3係選自由Η或甲基組成的基團； R4係選自如下基團，低碳數烷基，其選擇性經一個或多個取代基所取代，該取代基選自-C02R5、-NR6R7、聚乙二醇、-OPC^R1!^、羥基、烷氧基，及芳基，烯基’其選擇性經一個或多個取代基所取代，該取代基選自-C〇2R5、-NR6R7、聚乙二醇、_〇p〇3RiR2、輕基、烷氧基，及芳基，環燒基，其選擇性經一個或多個取代基所取代，該取代基選自-C〇2R5、-NR6R7、聚乙二醇、-OPC^RiR2、輕基、烷氧基，及芳基，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐 —一---Γ--------------訂---------線— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（5 ) 雜環，當包括N做爲雜原子時，該N可選擇性的經 -COR8所取代，以及芳基’其選擇性經一個或多個取代基所取代，該取代基選自_C02R5、羥基、烷氧基、聚乙二醇、-〇p〇3RiR2，及烷基，其可經羥基、羧基，及經取代胺基所取代； R5係選自由Η、N a，或低碳數烷基組成的基團； R 6及R 7係分別選自如下的基團，包括H、低碳數烷基、及-COR8，或另外的，_nr6r7生成5或6員雜環；以及 R8是低碳數燒基’其選擇性經聚乙二醇取代。本發明化合物具有抗複製活性，特別是抑制細胞循環在 G2/M期的細胞分裂，而且一般被稱爲“G2/M期細胞循環” 抑制劑。該化合物爲美國專利5,〇57,614 (Davisetal)中的抗癌治療劑的活性代謝物之可溶的前藥物，因此適用在連續的輸液傳送。、本發明係關於醫藥組合物，其中包括有效量的任何一種或多種前述的化合物及於醫藥上可接受的載體或賦型劑。本發明係關於使用任何一種或多種前述的化合物製備产療細胞複製異常的藥物，特別是癌症，如實質的腫瘤，^ 癌’直腸癌或肺癌。本發明係關於治療實質的腫瘤，特別是乳房腫瘤或直腸腫瘤，其係給予需要該治療的患者有效量的式合物及/ 或其於醫藥上可接受的鹽。較佳的，式工化合物中RS_chr3〇c〇r4，更佳的反3是Η 且R4是經聚乙二醇取代的低碳數烷基。 -8 - ‘紙張I度適用規格⑽X 297公釐） ------訂—-------- --- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 Α7 Β7 五、發明說明（6) 較佳的，式I化合物中R是-COR4，更佳的R4是選自雜環及低碳數烷基組成的基團，最佳的是低碳數烷基係經_ NR6R7所取代。較佳的，式I化合物中聚乙二醇的分子量是由約7 5 〇至約 5000道耳呑，最佳是約2〇〇〇道耳吞。下述爲式I化合物較佳的實例： 3-[2-(2-甲氧基-乙氧基）-乙氧基]_丙酸3-[4-(1·甲基-6-硝基-1Η-吲哚-3-基）-2,5-二氧基_2,5-二氫基_1Η·吡咯-3- 基]•啕哚-1 -基甲酯；〇-[2_[[2,5_二氫基·3·[4·(1_甲基_6_ 硝基」Η·吲哚-基） 2,5-二氧基-2,5-二氫基-吡咯-3 ·基]-峭哚_ 1 -基]甲氧基羰基]乙基甲基聚乙二醇2000 ; 2,3-二甲氧基-苯甲酸3-[4·(1_甲基-6-硝基_ιη-吲哚-3-基）-2,5 -二氧基-2,5-二氫基-111-?比洛_3-基]-4卜朵-1-基甲酯； 3 -二乙基胺基甲基-苯甲酸3_[4-(1_甲基-6 _硝基-1H-W1嗓 -3 -基）-2,5-一氧基-2,5-二氫基-111-11比洛-3-基]-4|嗓-1-基甲酯鹽酸鹽； 3-（1Η-吲哚-3 -基）_4-(1-甲基-6-硝基-1Η-吲哚-3 -基）-1-十八-9_醯胺基-吡咯-2,5-二酮； {3-[4_(1·甲基-6-硝基-1H-吲哚-3 -基）-2,5-二氧基-2,5·二氫基-1Η-峨ρ各-3-基]丨嗓-1-基}_膦酸； 3-(1-乙醯基-1Η-4丨嗓-3 -基）-4-(1-甲基-6 -硝基·1Η-W嗓· 3-基）-吡咯-2,5-二酮； -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -IL——rm——-秦— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ;線· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1274752

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製三氣乙酸3-(1-甲基_6Hih斗朵 … 哫-4 _羰基）-1H-吲哚-3 ·基卜吡咯 ·基）-4-[ 1 -(穴氫吡 3-(1-胺基乙醯基巧嗓· $夷酉同’ 吲哚_3-基）-吡咯-2,5-二酮鹽酸·土）Μ1·甲基_6_硝基_1H- 乙酸3·[4仆甲基_6_硝>;·ιη“ 2,5-二氫基-1Η-吡咯-3_ 基]_ 基）-2,5-二氧基 _ 戊二酸單]3_[4·(1_甲基_6_硝基^甲基酯；氧基-2,5-二氫基-1Η-吡咯3装^ 土 -喲哚-3-基）-2，夂二 2,3_二甲氧基-苯甲酸丨♦二 3-基）-2,5-二氧基-2,5_二邀其/甲基硝基-1H，哚_ 乙基酯；及土_ _吡咯·3·基丨哚-1-基卜 3-二乙胺基乙基苯甲酸 -3-基）_2,5-二氧基-2,5-二$其-甲基_6-硝基-1Η-吲哚基} _乙基酯鹽酸。 “ 1Η Ρ比略-3 -基]-W哚-1 - 本發明化合物及前式所包涵異構現象。本發明包括㈣異構現象或結構構異構物，或其混合物，而且二二物的互變異構物或結構物或結構異’構物。艮於任前述畫出的互變異本發明化合物可利用已知的技術製備。實例中提供了人成孩化合物的適當方法。_般而言，該化合物係 : 利範園第18項製備。 T明寻特別是式I化合物，其中R代表_p〇3RlR2，且其如前述，其製備係如下流程I所述。 -10 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐) 〜 "〜-- ——訂---------^ —AW. (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁} A7

N

N \ 〇 1274752 五、發明說明（8 )

流程I

//

N

\ 〇一，基M_(卜甲基-6-硝基 1H-吲咪_3_基）-吡咯_2,5_二酮（丨）（其製備如懸置uss> 09/268,887中所描述，其相關部份列入本篇參考文獻)於強鹼，如雙（二甲基矽烷基）醯胺鋰存在下，在適當的溶劑中如T H F，以經適當保護的氣化膦酸處理，可獲得經適當保護的膦酸衍生物2，其中X代表已知的適當保護基，如笨甲基。保護基的去除可利用已知的標準方法以獲得膦酸 3。特別是當X代表苯甲基，則以環己二烯及在碳上的知做爲催化劑來除去保護基。再將化合物3以已知的標準方法轉換爲其鹽4，如單鈉鹽。 -11 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公餐） --------------------訂---------*5^ —^w. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1274752 A7

五、發明說明（9 ) 式I化合物，其中R表-C0R4的製備可根據如下流程π。流程11

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製一般而言，將將3·(1Η-吲哚-3-基）-4_(1-甲基硝基_ 1Η-啕哚-3-基）_吡咯_2,5-二酮（化合物1，如前述流程工製備）在-60 C下，於質子惰性的溶劑中如THF，以強鹼如雙 (二甲基矽烷基）醯胺鋰使去質子。將所得的陰離子以已知的氯化醯或利用已知方法製備的氯化醯進行處理。另外，將化合物1與已知的羧酸，或利用已知方法製備的羧酸以標準醯胺鍵生成方法，如二異丙基碳二醯胺及H〇Bt進行耦合。化合物5，其中R4包括經適當保護的羧基、羥基烷基、胺基或單烷基胺基，可利用已知的方法去除保護基做進一步的修飾，再利用已知的方法選擇性的將所得的羧基、經基’或胺基加以修飾爲所欲的醯胺或酯。通式I的化合物，其中R代表_CHR3〇c〇R4，可根據下述流程III製備。流程111 -12· 本紙張尺錢針關家鮮(CNS)A4規格（2iG X 297公釐） 1274752 五、發明說明（10)

Α7 Β7

基進行酯化。一般而言’將化合物6利用已知的瘦酸或以已知方法製備的羧酸，於室溫下，於E d C及二甲基胺基吡淀存在下，在溶劑中，如二氯甲烷中處理數小時。另外， &基中間產物6可以已知的氯化酿或利用已知方法製備的氣化驢進行處理。另外，羥基中間產物6可以已知的酸酐或利用已知方法製備的酸酐進行處理。製備化合物7，其中R4包括雜芳環，該雜原子，如n可利用碘化烷基，如-CHSI於溶劑，如乙腈中反應做進一步的修飾。另外，化合物7，其中R4包括適當保護的羧基、羥基烷基、胺基或單祝基胺基，可利用已知的方法除去保護基做進一步的修飾，再利用已知的方法，選擇性的將所得的羧基、每基，或胺基修飾爲所欲的酿胺或酉旨。起始物料ό，其中R3代表Η，其製備如us專利申請 09/268,887所描述（化合物11) ’其相關部份列入本篇參考文獻。起始物料6，其中R3代表甲基，其可根據如下流程1¥製 -13- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格（210 X 297公釐） --1---.---^-----1 -------訂---------線-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1274752 A7 B7 五、發明說明（11) 備0

流程I V

N 如通式I的化合物，其中R代表-CHR30C02R4，R3及R4如前述，其可根據下述流程V製備。

流程V —一---.---^-----1 ------—訂----------線— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1274752 A7 B7

五、發明說明（12) 一般而吕，將羥基烷基衍生物6利用已知的氯甲酸酯或以已知方法製備的氯甲酸酯，於_78至2〇。(：的溫度下，於一甲基胺基吡哫存在下，在溶劑中，如二氯甲烷中處理可獲得所欲的碳酸酯1 4。如通式I的化合物，其中R代表_chr3〇c〇nhr4，且R3及 r4如前述，其可根據下述流程VI製備。流程VI

(請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製一般而T ’將經基燒基中間產物6以強鹼如雙（三曱基矽烷基）胺鋰在溶劑中如T H F，於〇 °C中進行去質子反應。將所得的陰離子於相同的溶劑以雙（對-硝苯基）碳酸酯處理’再以已知的胺或利用已知方法製備的胺進行處理。可利用已知的方法，以適當的鹼將式I的酸性化合物轉換爲其於醫藥上可接受的鹽。合適的鹽不僅衍生自無機驗，例如鈉、鉀或鈣鹽，而且可衍生自有機鹼，如乙二胺’單乙醇胺或二乙醇胺。將驗性式I化合物轉換爲醫藥上可接受的鹽可利用已知方法以適當的酸處理。適當的鹽不僅衍生自無機酸，如鹽酸、氫溴酸、磷酸或硫酸，也衍 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） i線- 1274752

五、發明說明（13 ) 酒石酸生自有機酸，例如乙酸、擰檬酸、反丁烯二酸順丁晞二酸、甲磺酸或對-甲苯磺酸。組合物/詷劑

另外本發明係關於醫藥組合物，其化合物或其於醫藥上可接受的鹽。 y 種式I 該醫藥組合物可利用π服使用，例如以竣劑、錠劑、糖錢、硬或軟明膠膠囊、溶液、乳化液或丄: 敗。其可經肛門使用，例如以栓劑型態。特別是本發；：合物係適用在非經腸道方式使用，例如以注射溶液方"式。本發明之醫藥組合物包括式！化合物，該化合物的^藥物’或其鹽，其可利用已知的方法製備，例如以傳統的混合、膠囊充填、溶解、製粒、生成乳化劑、捕獲、製成糖衣錠，或冷凍乾燥方式製造。該醫藥製備物可與於治療上惰性的，無機或有機載體共同調劑。乳糖、玉米澱粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽可做爲載體使用在錠劑、經塗層的錠劑、糖衣錠、硬明膠膠囊。適用於軟明膠膠囊的載體包括蔬菜油、壤及脂肪。根據活性物質的本質。軟明膠膠囊一般不需要載體。適用於製造溶液及糖漿的載體包括水、多元醇、蔗糖、反轉糖及葡萄糖。適用在注射液的載體包括水、醇、多元醇、甘油、蔬菜油、磷脂質及界面活性劑。適用在栓劑的載體是天然或硬化的油、蠟、脂肪及半液體多元醇。醫藥組製備物包括防腐劑、溶解劑、安定劑、濕潤劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、加味劑、改變滲透壓的鹽、緩 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） —l —.---------------訂---------線— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1274752 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作杜印製五、發明說明（Μ) 1液、塗層劑或抗氧化劑。其包括其他於治療上具有價値的物質，包括除了式1化合物以外的活性組成份。、劑量，:述，本發明化合物可使用在治療或控制細胞複製異吊2別是癌症異常。該化合物及包含該化合療或控制實質的腫瘤，例如乳房及直腸腫瘤。 2=發明之於醫療上有效量的化合物代表該劑 =有效的預防、減輕或改善疾病的症狀或延長被處理 :的存活。治潦上有效劑量的決定係包括在本發明範園 ^據本發明化合物於醫療上的有效量或劑量係於廣泛的限制範圍中做變化，而且可根據個別的特殊需要做調整。 7用在重量㈣公斤的成人以口服或非經腸道使用，其曰的劑量是約10毫克至約10，_毫克，較佳由約2〇〇毫至約l’GGG毫克即屬適#，雖然若需要時可超過上限。該 :Μ，可利用早一劑量方式使用或分開使用，或以非經妨道万式使用時，可以連續輸液方式使用。實例本發明化合物可根據已知的技術進行合成，例如前述的 —般流程。下述㈣闡述合成該化合物的明的調劑。友及不釦 3-[2-(2_曱氧基_乙氧基）_乙氧基]-丙酸甲土 ·6-硝基-1Η_+朵.3_ 基）_2,5_ 二氧基 _2,5_ 二氫基 _ιη♦各 -3-基]吲哚基甲基酯 -17 - 本紙張尺度適用^家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）丨丨 ^9-------訂---------線！· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（15) 將溶於無水THF(12毫升）的1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基）碳二醯胺 HC1 (“EDC · HCL” ； Adrich，7 7 亳克，〇 4〇毫莫耳）於2 2 °C中以DMAP (Adrich)( 5 5毫克，〇·45亳莫耳）處理2分鐘。再加入3-(1-羥基甲基-1Η-吲哚-3 -基）-4-(1-甲基 -6-硝基-1H-啕哚-3-基）-吡咯-2,5-二酮（11〇毫克，〇26毫莫耳）（製備如下述）。將該混合物攪拌20分鐘，再加入2_ (2-甲氧基-乙氧基乙氧基]_丙酸（CAS: 2〇9542-49_4)(12〇亳克，0.62毫莫耳）。使攪拌於22。(：下持續4小時。將所有溶劑揮發，並以矽膠管柱層析純化產物可獲得丨3 〇亳克的 3·[2_(2-甲氧基-乙氧基）_乙氧基]_丙酸、[‘（卜甲基_6_硝基-1Η-5丨哚-3-基）-2,5-二氧基·2,5-二氫基·ιη-吡咯-3_基卜吲哚-1 -基甲酯。（產率8 〇 % )。 3-(1•羥基甲基-1Η-吲哚-3-基）-4-(1-甲基-6_硝基-1Η_吲哚一-基^吡咯一^-二酮的製備如^州㈧/^以^所述㈠匕合物11 )，其相關部份被列入本篇參考文獻。實例 2 · 〇-[2-[[2,5-二氫基-3-[4-(1-甲基-6 _ 硝基-1Η-4Ι 嗓_ 3 -基）-2,5·二氧基-2,5-二氫基-iH-吡咯_3 -基]•吲哚_丨_基] 甲氧基羰基]乙基]·〇’·甲基聚乙二醇2〇〇〇於-78°C中，對溶劑二氣甲烷的3_(1_羥基甲基_ih-吲哚_ 3 一基Μ·(1_甲基_6_硝基_1H_吲哚基）吡咯_2,5_二酮 (200笔克，0.5耄莫耳）（其製備如實例工所述）加入三乙胺 (0.6毫莫耳），再加入0-(2_羧基乙基）〇，·甲基聚乙二醇 2000氯化醯（0.6毫莫耳）（由單甲基聚乙醇2〇〇〇丙酸以標準方法製備）。將該溶液於室溫下攪拌3小時，並使溶劑揮 11 ---—--訂·-----------AW. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 18- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1274752 A7 ______ 五、發明說明（16) 發。以快速矽膠管柱層析純化殘餘物可獲得1克的〇_[2_ [[2,5-二氫基- 3-[4-(l -甲基-6-硝基-1H-啕哚-3 -基）-2,5_二氧基-2,5-二氫基- lH-p比洛-3 -基]-啕嗓-1 -基]甲氧基羰基] 乙基]·0’-曱基聚乙二醇2000(產率80%)。實例3_ :利用實例2的方法製備下述化合物： a) 2,3-二甲氧基·苯甲酸3-[4-(1•甲基-6-硝基-1H-啕哚-3-基）-2,5-二乳基-2,5-二氫基-11^-外1：洛-3-基]-'?3丨嗓-1-基甲基酯； b) 3-二乙胺基曱基-苯甲酸3-[4_(1-甲基-6-硝基-1H-啕哚_ 3 -基）-2,5 - —氧基-2,5·二氫基_ 1H- p比洛-3 -基]-卜朵-1 -基甲酯鹽酸。實迥土 ·· 3·(1Η•吲哚_3 -基）·4-(1-甲基-6-硝基·1Η·吲哚-3 -基）·1-十八-9 -晞基醯胺基· Ρ比洛_2,5_二酮將根據USSN 09/268,887所述而製備的3-(1Η吲哚_3_基）-4-(1-甲基-6 -硝基_ 1Η-啕哚-3 基）-吡咯-2,5·二酮（2 5 〇毫克，0.65毫莫耳）溶液溶解在thF(15毫升）中並卻至 -60 C。對该溶液加入雙（三甲基硬燒基）醯胺鐘（〇7亳莫耳，0.7毫升，1.〇]^於丁1^)，再加入溶於丁1^(5亳升）之氯化油醯（Aldrich)(0.300克，1 · 〇毫莫耳）。將所得的混合物於0 C攪拌1小時。使所有的溶劑揮發並將粗產物以矽膠管柱層析純化。將所得的產物以矽膠管柱層析利用乙酸乙酯及己烷梯度進行分離。其可獲得3丨〇毫克的3_(1H-P?I 哚-3 -基）-1 •十八_ 9 _埽醯胺基^比咯_ 2,5-二酮（產率7 〇 % )。龍5 : {3-[4-〇·甲基-6·硝基-1H-吲哚-3_基）-2,5-二氧基· -19 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------------訂---------線— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 A7 B7 五、發明說明（17) 閱讀背面之注意事項再填寫頁 2,5-二氫基-!Η·吡咯-3 -基]•啕哚-1 -基}-膦酸 3)將根據1^8>1 09/268,887所述而製備的3-(111-啕嗓_3_ 基）-4-(1-甲基-6-硝基-1Η-吲哚_3_基）-吡咯_2,5-二酮（2卫〇毫克’ 0.55¾莫耳）溶液溶解在thF(150毫升）中並冷卻至 _ 70 °C。對該溶液加入雙（三甲基矽烷基）醯胺鋰（15亳莫耳，1.5毫升，2.5當量，ΐ·〇 μ於THF)，再加入溶於 THF(54;升）之二苯甲基氯嶙酸（CAS: 538_37_4)(5〇〇毫克，1 · 6毫莫耳）。除取冰浴，而且當溶液的溫度達到 -40°C時，將該溶液倒入水中，並以乙酸乙酯/己烷（丨：* ) 萃取。以水洗去有機物，使乾燥後並揮發。利用乙酸乙酉旨 /己烷的梯度以矽膠管柱層析將殘餘加以純化及分離。其可獲得150毫的{3·[4_(1_甲基_6_硝基-m，嗓_3_基）2,5_ 叮二氧基-2,5-二氫基-1H-吡咯-3 -基]-啕哚_丨_基卜膦酸二笨甲基酯。（產率7 0 % )。 b)將溶於THF/乙醇（3毫升/6毫升）之{3_[4_(1_甲基硝基-1H-吲哚-3-基）-2,5_二氧基_2,5_二氫基_m-吡咯_3_基卜線吲％ - 1 -基}-膦酸一苯甲基酯（得自前述步驟a ) ) ( 5 〇毫，〇」〇8毫莫耳）溶液以丨0% Pd/C(7 5亳克）及丨，4環己二烯（〇 5 毫升）處理，並加熱至35_40。(：達2小時。使反應冷卻後，經濟部智慧財產局員工消費合作社印制衣經赛力特矽藻土過濾，並使揮發乾燥。由thf/己烷獲得結晶爲20毫克的{3·[4_(1—甲基_6_硝基-吲哚_3_基）_ 2,5_二氧基_2,5_二氫基_1H-吡咯_3_基卜啕哚基卜膦酸 (產率5 5 % )。 ϋΐΑ: 3-(1-乙醯基-1H-吲哚_3_基）_4_(ι•甲基·6_硝基· -20- 1274752 A7 B7 五、發明說明（18) 111-4卜朵-3-基）_咐1略-2,5-二酮將根據USSN 09/268,887所述而製備的3-(1Η-啕哚-3·基） 4-(1-甲基-6-硝基-1H-吲哚_3_基）-吡咯-2,5-二酮（5 1毫克’ 0.13¾莫耳）溶液溶解在thf(20毫升）中並卻至 _70 C。對该溶液加入雙（三甲基矽燒基）醯胺麵（〇5毫莫耳，0.5¾升，3.8當量，ΐ·〇 μ於THF)，再加入過量的氯化乙醢（ο · 1晕升）。將所得的溶液授拌至溫度達到_45 〇c 時。使反應揮發，並以矽膠管柱層析純化，可獲得3 3毫克的3-(1-乙醯基_1H_吲哚-3-基）-4-(1•甲基-6-硝基-1H-吲哚-3 -基）比洛-2,5-二酮。（產率65%)。 f :三氟乙酸3-(1•甲基-6-硝基-1H-啕哚-3 -基）-4-[l-(六氳批淀 4 -羰基）·1Η·吲嗓 3 _基]_ p比洛·2,5·二酉同將1.5當量的Ν-(第三-丁氧基羰基）·六氫吡啶_4_羧酸

(Bachem，CA)加入溶解在THF中的3_(1Η_吲哚-3_基）-4-(1-甲基-6 硝基· 1H·吲哚_ 3 -基）-吡咯 2,5·二酮（將根據USSN 09/268,887所述而製備的（化合物1 )，其相關部份列入本篇參考文獻）中，再加入1.3當量的二異丙基碳二醯胺及Ν· 羥基苯幷三唑。將該溶液於室溫下攪拌6 · 5小時。加入少量的碳酸免及0.5毫升的DMF。使反應攪拌20分鐘。以 CH2C12稀釋反應混合物，再以飽和nh4C1及水淋洗。以快速管柱層析純化產物（產率92%)。將所得的BOC經保護胺溶於CH'l2，並以三氟乙酸在室溫中處理1小時。使溶劑揮發，再以HPLC純化殘餘物，可獲得三氟乙酸3-(1-甲基-6 -硝基-1H-4丨嗓_ 3 -基）·4-[1-(六氫p比咬_ 4 _羧基）_ih_吲 -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 —I—訂·----——-------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1274752 A7 _____^B?___ 五、發明說明（19) 哚-3-基]-吡洛·2,5-二酮。（產率54%)。宜皇[ ·· 3-(1_胺基乙醯基-1Η-吲哚-3-基）-4-(1-甲基_6_硝基-1H_P?丨嗓· 3 -基）·ρ比洛-2,5_二酮鹽酸將1.05當量的Ν-(第三·丁氧基羰基）·甘胺酸（Bachem，c 加入溶解在THF中的3-(1Η_吲哚-3 -基）4-(1-甲基-6 _硝基-1H·峭哚·3-基）_吡咯_2,5-二酮（將根據前述而製備）。再加入1.3當量的Ν·羥基苯幷三唑及二異丙基碳二醯胺，並將該反應攪拌5小時。加入少量的碳酸鈀及d M F。使反應攪捽3 0分鐘。以乙酸乙酯及醚稀釋反應混合物，再以水淋洗，再於硫酸鈉上乾燥。將所得的3-[Ν-丁基氧基羰基-(1-胺基乙醯基-1Η·啕哚-3 _基）_4-[1-甲基-6 -硝基-1Η-峭哚-3 基]-吡咯-2,5-二酮以製備級TLC板純化（產率53%)。將經 Β Ο C保護的產物溶於T H F中，再滴加12Ν HC1。使反應於室溫中攪拌2小時。使反應於氮氣中濃縮，並以HPLC純化可獲得0.026克的3-(1-胺基乙醯基-1Η-啕哚-3 ·基）-4_[1-甲基-6 -硝基-1H-W嗓-3 -基]-p比洛-2，5 二酮（產率9 5 % )。 :乙酸3-[4_(1-甲基-6-硝基-1H-啕哚-3-基）-2,5-二氧基-2,5-二氫基-1H-吡咯-3 -基]-吲哚-1 -基甲酯將溶解在3毫升乙酸酐（Aldrich)中的3-(1•羥基甲基-1H-W 哚-3 -基）-4-(1-甲基-6 -硝基-1H-吲哚-3 -基）-吡咯_ 2,5-二酮 (120毫克，〇·288毫莫耳）（將根據USSN 09/268,887所述而製備的（化合物11)的摻合物於室溫下攪拌1 9小時，再於 l〇〇°C中攪拌2 _ 5小時。將所得的溶液冷卻，以水稀釋後，以EtOAc萃取。將EtOAc層以水、鹽水淋洗，以硫酸鎂乾 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------訂---------線— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 1274752 __B7_____ 五、發明說明（20) 燥後揮發。以快速管柱層析利用Et0Ac/己燒純化殘餘物可獲得77· 1毫克的乙酸甲基_ 6 -硝基•吲嗓-3 -基）- 2.5- 二氧基-2,5-二氫基·1Η-ρ比洛-3-基]丨嗓-1-基甲酉旨（產率 53%)。實例1 〇 :戊二酸單-{3·[4_(1·甲基-6 -硝基_1Η-峭嗓-3 -基）-2,5·二氧基·2,5-二氫基-1Η-吡咯-3 -基]-吲哚_ 1 -基甲基酯將3-(1-羥基甲基-1Η·㈣哚-3-基）-4-(1-甲基-6-硝基-1Η-啕哚-3-基）·吡咯·2,5-二酮（103毫克，0.248毫莫耳）（根據實例1所述而製備的），戊二酸酐（35.1毫克，〇·3〇8莫耳）（Aldrich)，及三乙胺（〇·〇3毫升，0.924莫耳）在5毫升的 EtOAc中加熱迴流6小時。將該溶液冷卻後，以EtOAc稀釋，以0·5Ν HC1、水、鹽水淋洗，再於硫酸鎂上乾燥及揮發。以快速管柱層析利用EtOAc/丙酮純化殘餘物可獲得3 5 毫克的戊二酸單-{3-[4·(1-甲基-6_硝基-1H-吲哚-3-基）- 2.5- 二氧基_2,5_二氫基-1Η·吡洛-3 -基]-朵-1 _基}甲基酯 (產率2 7 % )。實例1 1 : 2,3-二甲氧基-苯甲酸1-{3_[4-(1-甲基-6-硝基-嗓-3 -基）-2,5-二氧基-2,5_二氯基-1Η-ρ比哈-3 -基]-p3l 哚-1 -基}乙基酯 a)加入4丨嗓（4·68克，40毫莫耳）（Aldrich)至溶於7 5毫升 DMF中的NaH(1.92克之6 0%油中分散液）。在〇°C中攪拌混合物1 5分鐘，再滴加1 -氯乙基甲基醚（4毫升）。將所得的混合物於0 °C中攪拌1小時，再倒入冰/水中，並以甲苯萃取。將有機層於硫酸鎂上乾燥及揮發。以快速管柱層析利 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準 /(CNS)A4規格（210 X 297公釐） I 暴------tr---------爷—· (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1274752 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（21) 用EtOAc/己fe純化殘餘物可獲得4克的•甲氧基乙基]啕哚（產率5 8 % )。 b)在0C中，在5分鐘内，對溶於無水二乙醚的丨_(卜甲氧基乙基）㈣嗓（4克，23毫莫耳）加入氣化草醯（42毫升， 4 8毫莫耳）。將所得的摻合物於〇 t中攪拌$小時，並過濾可得1 .9克的[1-(1_甲氧基-乙基）_1H^哚-3 基卜氧基-氯化乙疏（產率3 1 % )。該物料不需再經純化即可使用。〇在(TC中，對溶於75毫升的CH2Cl2之π_(1_甲氧基乙基）·1Η·吲嗓-3-基]氧基-氯化乙醯（1_9克，7.15毫莫耳）（得自前述步驟b)及[1-甲基_6_硝基-1Η_吲哚]_3_乙晞亞胺酸1·甲基乙基醋鹽酸（2.3克，7.3毫莫耳）（USSN 〇9/268,887之流程2的化合物15)，於3分鐘内加入三乙胺 (3 · 6耄升，2 5 · 8氅莫耳）。將該混合物於〇 °c中擾拌4小時，再以0.5N HC1萃取。以（：1^(：12萃取水層，並將所得的 ChCl2層以水、鹽水淋洗，於硫酸鎂上乾燥後，使揮發。將殘餘溶解在7 0毫升的甲苯中，並將所得的溶液冷卻至 o°c，加入對-甲苯磺酸水合物（14克，7·36毫莫耳），並使混合物0 °C中攪拌1小時。以飽和NaHC03淋洗掺合物並以2 X 50晕升的EtOAc萃取。將所得的EtOAc層於硫酸鍰上乾燥’揮發後可得4 _ 1克（產率1〇〇%)紅色膠狀物固體的％ [1-(1-甲氧基乙基）-1Η-吲哚·3-基]-4-(1-甲基·6_硝基_1H_ ’嗓-3 -基）-吡嘻-2,5-二酮，該物料不需經純化即可使用0 d)將溶於100毫升THF中的3-[1-(1-甲氧基乙基 -24- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------------訂---------線—AWI (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明說明（22) 嗓-3-基]-4-(1-甲基·6·硝基- ΙΗ·17?丨嗓-3-基）峨洛_2,5 -二酮（3·75克）（得自前述步驟c)加入2N HC1(75毫升）。將該溶液下攪掉3小時，再倒入EtOAc及鹽水。使分層後，以 EtOAc萃取水層。將所得EtOAc層於硫酸鍰上乾燥，並使揮發。以快速管柱層析利用EtOAc/己烷純化殘餘物可獲得 1 · 1克的3-[1-(1-羥基-乙基）-1Η_啕哚·3_基]-4-(1-甲基_6_ 硝基-1Η-Θ丨嗓-3 -基）·ρ比洛-2,5-二酮（產率3 3 % )。 e)將溶於20亳升的CH2Cl2i3_[l_(l·羥基乙基嗓 -3-基]_4-(1-甲基-6-硝基-111-1?5丨嗓-3-基）-峨洛-2,5-二酮 (165.3毫克，0.678毫莫耳）（得自前述步驟d)，EDC · HCL(284.5毫克，1.484亳莫耳），及二乙胺p比淀（185 5毫克，1·58毫莫耳）中加入2,3-二甲氧基苯甲酸（287.4亳克， 0.668毫莫耳）。將該溶液於室溫下攪拌〇 · 5小時，以飽和 NaHC03、鹽水淋洗，再於硫酸鎂上乾燥並揮發。以快速管柱層析利用EtOAc/己烷純化殘餘物可獲得2 〇 3亳克的 2,3-二甲氧基-苯甲酸1·{3_[4·(1-甲基-6-硝基·1Η-吲哚_3_ 基）-2,5-二氧;^ ·2,5-二氫基 1Η·吡咯-3 基]•吲哚-1 _基卜乙基醋（產率50%)。實例1 2 : 3_二乙基胺基甲基_苯甲酸1-{3-[4-(1-甲基-6-硝基-1Η-41嗓-3-基）-2,5-二氧基-2,5-二氫基-111-外匕洛-3-基]· 啕哚_ 1 -基} •乙基酯鹽酸利用3 -二乙基胺基甲基·苯曱酸（CAS: 137605-77-7)做爲起始物，根據前述實例1 1 e的步驟製備3 -二乙基胺基甲基 -苯甲故3-[4-(1甲基-6-硝基-1H-W嗓-3-基）·2,5-二氧基· -25- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------------訂---------線—AW. (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 A7 五、發明說明（23) 2广二氣基_1H-P比略·3_基]十呆]-基}-乙基醋鹽酸。（產率 5 0 〇/〇 ) (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 复ϋΙΣ:碳酸單-甲基聚，一龄λλ 土灰乙一知2000酯，3-[4-(ΐ·甲基-6-硝基-1Η-吲哚-3-基）-2 5 - ft I。c )，5_—虱基·2,5.二氫基_1H_吡咯_3_基卜吲哚_ 1 -基卜甲基酯於下，將單甲基聚乙二醇（平均分子量=2000)( 1克， j笔莫耳）以過量的落於甲苯溶液之2 〇 %光氣處理2 4小寺後使揮發。將所知之溶於二氣甲燒的氯甲酸醋加入至經乾冰/丙酉同冷卻的溶於二氯甲燒之3仆減甲基-1Hn 3基2·4-(1_甲基-6_硝基]H_吲哚_3_基卜吡咯_2,5_二酮 (208¾克’ 〇·5毫莫耳）（如實例1中所述製備）及仁二甲基胺基比足（2 4 4毫克，2耄莫耳）混合物。除去冷卻後。將混合物至溫下攪拌1小時。將反應混合物以快速管柱層析利用甲醇/二氣甲烷純化，再以THF/乙醚由產物的分液中結晶可獲得0 · 8克的橘紅色固體之碳酸單甲基聚乙二醇2 〇〇〇酯，3-[4-(1-甲基 _6_ 硝基·111_<哚_3_基）-2,5_二氧基-2,5_ 二氫基-1H-吡咯-3·基]•啕哚基甲基酯，mp 46_48(產率 6 5%) 〇經濟部智慧財產局員工消費合作社印製兔例1 4 :單-甲基聚乙二醇2000胺基甲酸，3-[4_(1-甲基·6_ 硝基-1H-吲哚-3-基）-2,5-二氧基-2,5-二氳基·1Η-吡咯-3-基] 吲哚-1 -基甲基酯於0°C下，將雙（三甲基矽烷基）醯胺鋰（0_25亳升，0.25 毫莫耳，1M於THF中）滴加至溶於THF(5毫升）之3-(1-幾基甲基-1H·啕哚-3-基）-4-(1-甲基-6-硝基-1H-啕哚-3-基）_ 26- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1274752 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 Α7 Β7 五、發明說明（24) 吡咯-2,5-二酮（104毫克，0.25毫莫耳）（如實例1中所述製備）。於1 0分鐘後，加入雙（對-硝苯基）碳酸酯（8 4亳克， 0.275毫莫耳）’並將該溶液於〇。(：中攪拌1〇分鐘。加入甲氧基-PEG2000-胺（〇·6克，0.3毫莫耳）（Shearwater高分子公司）’並將該混合物加溫至〜4〇°C以溶解該固體。將所得溶液於室溫下攪拌2小時，使揮發後以除去溶劑。將殘餘物以快速管柱層析利用甲醇/二氯甲烷純化，再以thf/乙醚由產物的分液中結晶可獲得0.425克的橘紅色固體之單_ 甲基聚乙二醇2000-胺基甲酸，3·[4-(1·甲基-6-硝基-mi 哚_ 3 -基）_2,5_二氧基-2,5-二氫基-1Η-吡咯-3 _基]吲哚_ 1 _ 基甲基酯，mp 49_5 1°C (產率7 0 % )。實例1 5 ：抗複製活性本發明化合物的抗複製活性的實證如下。該效果指出本發明化合物可使用治療癌症，特別是固體腫瘤，如乳房及直腸腫瘤。 MPAMB-435以細胞爲主的試驗乳房上皮癌細胞株（MDAMB-435)係購自ATCC(美國形態細胞庫），並以ATCC建議的培養進行培養。爲了分析多種式I化合物對該細胞生長的效應，將細胞於9 6盤孔的組織培養盤（“試驗盤，，）中以每孔15〇〇個細胞的濃度進行培養。於細胞培養1天後’將欲分析的化合物溶於1 〇〇% DMSO(二甲基亞砜）中爲10 mM儲存溶液。將每一種化合物以h2〇稀釋爲1 mM，並加入包含培養基的9 6孔主培養盤的第一行中的三個孔中，使其最終濃度爲40 μΜ。將該化合物在“主 •27· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） ---------------------訂---------線— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 A7 ________Β7_____ 五、發明說明（25) 培養盤”中以培養基進行系列稀釋。將機稀釋的化合物轉 •移至包含細胞的試驗盤中。“控制細胞，，行僅加入DMSO。每一孔中的DMS0最終濃度是〇. 1 %。於藥物加入後5天，以下述方式分析培養盤。加入MTT (3-(4-5甲基嘧唑-2-基）-2,5_二苯基溴化四唑； 4峻基藍）至每一孔中使其最終濃度是1毫克/毫升。使該培養盤於37 °C中培養2 1/2-3小時。除去包含MTT的培養液，再加入50 μΐ之1〇〇%乙醇至每一盤孔中以溶解福瑪狀 (formazan)。利用培養盤自動讀數計（Biotek孔培養盤計數器（Biotek microplate reader))讀取吸光度。利用 Ree(j 及 Munsch方程式’參見 Am. J. Hygiene Vol. 27 pgs. 493-497， 1938計算IC5Q結果。前述生理試驗結果如表I所示。表I的每一個化合物之IC5Qs〇.3 μΜ。

表I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

1 V V R CH3 / \ CT 實例 R ICso (UM) 流程 1 0.02 III 2 Jl P^2000 0.04 III 3 b ch2/〇Y^^^n^ 0 0.01 III -28 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -----Γ---------------訂---------線-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 A7 B7 五、發明說明（26 ) 表1(績）經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 O^y^O Ν Ν 〇 j A iH3 實例 R IC50 (μΜ) 流程 12 I 0 0.01 lll/IV 3a CH2/〇Y^X0/ 〇〇、 0.02 III 11 1 〇 0、 · 0.02 lll/IV 9 〇 0.02 III 10 -r°Y^YOH 〇 0 0.02 III 0 0 0.01 III 4 0.3 II 5 P〇3N^2 0.2 I 6 coch3 0.01 II 7 0.01 II 8 ' C〇/^NH2 0.01 II iu.——rI—I:——! ΛΎΙ (睛先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -29 - 訂： -線· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1274752 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（27 ) 該化合物適合以連續輸液方式用於患者。實例1 6 :錠劑調劑項目組成份毫克/錠劑 1 組合物A* 5 25 100 250 500 750 2 無水乳糖 103 83 35 19 38 57 3 交聯卡美纖微素納 (Croscarmellose Sodium) 6 6 8 16 32 48 4 普維酮(Povidone) K30 5 5 6 12 24 36 5 硬脂酸鎂 1 1 1 3 6 9 總重 120 120 150 300 600 900 *化合物A代表本發明化合物。製造方法: 1 .將項目1，2及3於適當的混合中混合1 5分鐘。 2.以2 0 %普維酮K 3 0溶液（項目4 )將取自步驟1的粉末混合物製成顆粒。 3 .將取自步驟2的顆粒於5 0 °C中乾燥。 4 .將得自步驟3的顆粒通過適當的研磨設備。 5 .將項目5加入步驟4的研磨顆粒中，並混合3分鐘。 6 .將取自步驟5的顆粒於適當的壓模器中壓製。實例1 7 :錠膠囊調劑項目組成份毫克/膠囊 1 組合物A* 5 25 100 250 500 2 無水乳糖 159 123 148 一· __ -30- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） I ---^------I I --------訂---------線-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1274752 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製五、發明說明（28 ) 3 玉米澱粉 25 35 40 35 70 4 滑石 10 15 10 12 24 5 硬脂酸鎂 1 2 2 3 6 總填充重量 200 200 300 300 600 *化合物A代表本發明化合物。製造方法： 1 ·將項目1，2及3於適當的混合中混合1 5分鐘。 2 ·加入項目4 & 5並混合3分鐘。 3·充填至適當的膠囊。實例1 8 :注射溶液/乳化製備物項目組成份毫克/膠囊 1 組合物 1毫克 2 PEG 400 10-50毫克 3 卵磷質 20-50毫克 4 黃豆油 1-5毫克 5 甘油 8-12毫克 6 水 q.s. 1毫升 *化合物A代表本發明化合物。製造方法： 1 ·將項目1溶解在項目2中。 2 ·將項目3，4及5加入項目6中。並使混合至分散，再使均質化。 3 ·將步驟1的溶液加入步驟2的混合物中，再使均質化至 -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公餐^ "~--- I U.---^---------------訂---------線-- (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 1274752 Α7 Β7 五、發明說明（29 ) 分散液呈透明。 4 ·以0.2 μιη濾膜進行無菌過濾，再充填至小試管中。實例1 9 :注射溶液/乳化製備物_ 項目組成份毫克/膠囊 1 組合物A+ 1毫克 2 糖基呋喃醇(GlycofUrol) 10-50毫克 3 卵磷質 20-50毫克 4 黃豆油 1-5毫克 5 甘油 8-12毫克 6 水 q.s· 1毫升化合物A代表本發明化合物。製造方法： — Ui — L ——I——;slf (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1 ·將項目1溶解在項目2中。 2 ·將項目3，4及5加入項目6中。並使混合至分散，再使均賢化。 3 ·將步驟1的溶液加入步驟2的混合物中，再使均質化至分散液呈透明。 4 ·以0·2 μιη濾膜進行無菌過濾，再充填至小試管中。雖然本發明已經特殊及較佳的參考文獻闡述，熟知技術的人員均可瞭解本發明在一般的實驗操作可經過改變及修改。因此，本發明並不被設限在前述範圍中，本發明範圍包括所附的申請專利範圍及其相當者。 32- 本紙張f?ii^NS)A4規格⑵〇 χ挪公髮）訂公告叫

類

只74752 ------中文說明書替換頁（92年12月）發明 (i上各櫚由本局填註）專利説明書

中文經取代之吡咯、其製備方法及包含該化合物之醫藥組合物 SUBSTITUTED PYRROLESTPROCESSES FOR PREPARING THE— SAME AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS COMPRISING THE SAME 雲|名稱英文二、A#

1.納德佛托希 2.艾蜜麗艾珍琉姓名 NADER FOTOUHI EMILY AIJUN LIU 3.艾倫約翰勒夫利 ALLEN JOHN LOVEY 4·約翰蓋爾佛慕林，二世國籍 JOHN GUILFOYLE MULLIN, JR. 5.蓋斯彼費德利可威柏 GIUSEPPE FEDERICO WEBER 住所居 lfm 士ifl9if21號號 5.¾m大利5119 街山克取道爾歷希丘森尼亞市夫德國丹市爾高參美市利威市¥-肩森特坎森達 -4.卻納北豪塞 2. 州州州州州西西西西西澤澤澤澤澤新新新新新國1'®·®'國國 *41^ vllt^£ty /g^,£ly 户g^ >3^ >3^ 1· 1· 2 3 45.

姓名 (名稱）

瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 F. HOFFMANN-LA ROCHE AG 國籍瑞士三、申請人住、居所 (事務所）瑞士貝士勞市格蘭山查街124號本紙張尺度適用1 代表人姓名中國國家楹. 1.菲杜林·克勞士納 2.羅蘭·包爾 FRIDOLIN KLAUSNER ROLAND BORER -1 - A XM ir,_____ ……

Claims

127伞7(5326995號專利申請案 g 中文申請專利範圍替換本(95年10月）E 六、申請專辦範菌—公告泰 1. 一種妨的化合物，止獮充 η

及該化合物於醫藥上可接受的鹽’其中： R是選自如下組成的基團’包括-P〇3Na2 、 CHR3OCOR4及-COR4 ; R3為 Η ; R4係選自如下基團，（^.6烷基，其可包括一個或多個選自S及Ο之雜原子以取代一個或多個碳原子且選擇性經一個或多個取代基所取代，該取代基選自-C Ο Ο Η、-ΝΗ2及聚乙二醇， C 1 - 1 5婦基，雜環基，其代表3 -至1 0 -員包括Ν做為雜原子之飽合烴，以及苯基’其選擇性經一個或多個取代基所取代，該取代基選自C i - 6烷氧基及C i _ 6烷基，其可經經C i _ 6烷基單-或雙-取代之胺基所取代；其中該聚乙二醇代表通式為·;^9(〇(^Η2(：Η2)ηΟΗ的結構，其中η平均是介於2及1500之間，其平均分子量是由5〇〇至5000道耳呑，且其中R9是羧基或Ci6烷基；该C i -6烷氧基代表c i _6烷基或c i i 5烯基基團，其以氧 67811-951005.DOC 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公董) 1274752

原子相連在其分子上。根據申請專利範圍第1項的化合物，其中R是 •CHR3〇c〇r4 〇 3 •根據申請專利範圍第2項的化合物，其中R4是 C 1 - 6烷基。 4·根據申請專利範圍第3項的化合物，其中R4是經聚乙二醇取代（^_6烷基。 5·根據申請專利範圍第4項的化合物，其中聚乙二醇的分子夏是由約7 5 0至約5000道耳吞（Daltons)。 6·根據申請專利範圍第5項的化合物，其中聚乙二醇的分子量是約2000。 7·根據申請專利範圍第1項的化合物，其中R是_C〇R4。 8·根據申請專利範圍第7項的化合物，其中R4是六氫吡啶基。 9·根據申請專利範圍第7項的化合物，其中R4是經-NH2M 代的q.6烷基。瓜根據申請專利範圍第1項的化合物，其中聚乙二醇分子量是由約7 5 0至約5000道耳呑（Daltons)。 11·根據申請專利範圍第1 〇項的化合物，其中聚乙二醇分子里疋約2000道耳呑（Daltons)。 12·根據申請專利範圍第1項之化合物，其係選自卞述所組成之群·· 3·[2-(2-甲氧基·乙氧基）·乙氧基]-丙酸3-[4-(l-f基_6_ 硝基·1Η4Ι哚_3 -基）·2,5-二氧基-2,5·二氫基比洛-3 _ 67811-951005.DOC 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 8 8 8 8 A B c D 1274752 r、申請專利範圍基]_沔丨哚-1 -基甲酯； 0-[2-[[2,5-二氮基-3_[4-(1-甲基-6-硝基-111-11?丨嗓-3-基）-2,5-二乳基-2,5-二氯基-p比洛-3-基]-4丨嗓-1-基]甲氧基羰基]乙基]-〇’甲基聚乙二醇2000 ; 2,3-二甲氧基-苯甲酸3-[4_(1-甲基-6-硝基-1H-啕哚-3-基）-2,5 -二氧》基-2,5_二氣基- lH-p比嘻-3-基]-嗓-1·基甲酯； 3-二乙基胺基甲基·苯甲酸3-[4-(1-甲基-6-硝基-1H-吲嗓_ 3 -基）-2,5 -二乳基-2,5_二氮基_1Η·ρ比哈-3 基]· 丨嗓_ 1 -基甲酯鹽酸鹽； 3-(1Η-㈣哚-3 -基）-4-(1-甲基_ 6 -硝基-1H-吲哚-3 -基）-1-十八-9-醯胺基-吡咯-2,5-二酮； {3-[4-(1-甲基-6-硝基-1H-啕哚-3-基）-2,5·二氧基-2,5-二氫基·1Η_吡略-3-基]-吲哚-1-基}_膦酸；及 3 - (1 -乙酿基-1Η - 1 嗓-3 -基）_4-(1-甲基-6 -硝基-1Η -1 哚-3_基）-吡咯-2,5-二酮。 13.根據申請專利範圍第1項之化合物，其係選自下述所組成之群：三氟乙酸3-(1-甲基-6-硝基-1H-吲哚_3_基）-4-[1-(六氫 p比淀-4 ·談基）-1Η -丨嗓-3 -基]-p比嘻_ 2，5 -二酉同； 3-(1-胺基乙醯基-1H-吲哚-.3 基）-4-(1-甲基-6-硝基-1H-吲哚-3-基）-吡咯-2,5·二酮鹽酸鹽；乙酸3-[4-(1-甲基-6·硝基-1Η-ΗΙ哚-3·基）-2,5_二氧基-2,5-二氫基-1Η-吡咯-3-基]-吲哚-1-基甲酯； -3- 67811-951005.DOC 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1274752 as B8 C8 ________ D8 六、申請專利範圍戊二酸單]3-[4-(1-甲基-6-硝基-1H-啕哚·3乂基）_2,5_二 -氧基-2,5-二氫基·1Η•吡咯-3_基卜吲哚」_基甲基}酯； 2,3·二甲氧基-苯甲酸1-{3-[4-(1-甲基-6-硝基_m-钊哚 3 _基）_2,5_二氧基-2,5-二氫基_ 1H-说咯 3 -基]·吲哚_ 1 -基}乙酿；及 3_二乙胺基甲基苯甲酸3-[4-(1-甲基-6·硝基-im哚· )2,5 一氧基_2,5 -二氮基-1H- ?比p各-3 -基]-4丨噪 1 · 基}-乙酿鹽酸。 14· 一種製備根據申請專利範圍第1-13項中任一項所定義化合物的方法，其中包括 &)當式1中的化是-1>〇3>^2或-〇：0114，以能產生該基團的試劑處理以加入該基團至如下式的起始化合物中，

或 b)當式I中的R是-CHR3OCOR4時，以能產生該基團的試劑處理以加入該基圓至如下通式的起始化合物中，其中R3如申請專利範圍第1項， -4- 67811-951005.DOC 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1274752

或其係才1 15 1Γ式1化合物轉換為其於醫藥上可接受的鹽= •，申請專利範圍第M3項中任_項的化合物申請專利範圍第丨4項的方法製備。其係 16·根，申請專利範圍第1-13項中任-項的化合物於製備治療細胞複製異常的醫藥品。其係 17·根據申請專利範圍第1-13項中任-項的化合物於製備治療癌症的醫藥品。 18·—種治療細胞複製異常的醫藥組合物，#包括於治療 $效劑量的根據申請專利範圍第丨_13項中任—項=化根據申睛專利範圍第丨8項的醫藥組合物，其中該細胞複製異常是癌症。 2〇·根據申請專利範圍第i 9項的醫藥組合物，其中該癌症是實質的瘤。 21.根據申請專利範圍第2 〇項的醫藥組合物，其中該癌症是乳癌、直腸癌，或肺癌。 22·根據申請專利範圍第1 8項的醫藥組合物，其適用於非經腸道方式投予。 67811-951005.DOC 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐)