TWI232239B - Novel method for integrating genes at specific sites in mammalian cells via homologous recombination and vectors for accomplishing the same - Google Patents

Novel method for integrating genes at specific sites in mammalian cells via homologous recombination and vectors for accomplishing the same Download PDF

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TWI232239B
TWI232239B TW087103778A TW87103778A TWI232239B TW I232239 B TWI232239 B TW I232239B TW 087103778 A TW087103778 A TW 087103778A TW 87103778 A TW87103778 A TW 87103778A TW I232239 B TWI232239 B TW I232239B
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Mitchell E Reff
Richard Spence Barnett
Karen Retta Mclachlan
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Description

1232239 A7 B7 五、發明説明（1 發明範疇 本發明係關於標的所需之外源DNA嵌入於哺乳類細胞基 因組之特定位置之方法。更特定言之，本發明係描述確定 哺乳類基因組中轉錄活性目標位置（"熱點π )，並藉同質性 重組將所需DNA插入此位置之新穎方法。本發明亦視需要 提供經由共嵌入可放大之選擇性標示物，例如DHFR加上 外源DNA而在此位置將所需DNA行基因放大之方法。本發 ψ 明額外描述適於完成上述者之新穎載體之建構法，並進一 步提供在目標熱點包含嵌入之所需外源DNA之經此方法產 生之哺乳類細胞株。 發明背景 在原核與真核生物中表現重組蛋白質係已經發展完善之 技術。哺乳類細胞於蛋白質生產比細菌或酵母菌提供明顯 優點，其原因在於正確組合，St化與後轉譯修飾重組表現 之蛋白質的能力。經轉感染入宿主細胞後，重組表現之建 構物可維持外染色體原素型式或可嵌入宿主細胞。欲生成 # 穩定轉感染之哺乳類細胞株通常涉及後者，其係將編碼吾 人感興之基因加上藥物抗性基因（優勢之可選擇標示物）之 DNA建構物導入宿主細胞，其後並令之生長於含藥物環境 使吾人可選取已成功嵌入該外源DNA之細胞。在很多實例 中，吾人感興趣之基因係連接於稍後得進行基因放大之抗 藥性可選擇標示物。為此目的最常使用編碼二氫葉酸還原 S每（DHFR)之基因。在含DHFR競爭性抑制劑胺甲喋呤條件 下培養細胞可藉DHFR基因之放大選成DHFR生產之增加。 -4- 本泜張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐）
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‘ D N A兩邊的置亦細# p a ] λ, i I、，，二放大佼，則造成之轉感染細胞株中 DHFR連接基因之业％ | |，土 + . , /、攻大a以成蛋白質生產增加，藉此造 成吾人感興趣基因之高量表現。 儘管此方法經證實很成功，因為整合進行時逢機之特性 此系統有-些問題。這些問題存在係因表現之量受基因區 位义邵局基因環境的效應很大之影響，此係文獻中記錄很 清楚的現象’通常各為”位置效應，，(例如，參照祕…等， Mol. Cell. Biol., 10：1 1 92-1 198 (1990)； Yoshimura φ , Mol. Cell· Biol” 7:1296-1299 (1987))。因大多數哺乳類DNA係處 於轉錄不活性化狀態’故逢機嵌人方法無法控制嵌入的 DNA之轉錄命運。因此，視整合位置而定，嵌人的基因之 表現的量差異很大。例如’將外源DNA嵌入基因組之不活 轉錄”寂靜，’區域會造成少量表現或不表現。相對地， 若嵌入轉錄活性位置則可能引起高表現。 因而，正如典型之遺傳工程方法所需結果之所取得高量 基因表現做為工作時目標，則通常需要筛選大量轉錄物俾 發現此高產量選殖株。此外，將外源DNA逢機嵌入基因組 在某些情形會破壞重要的基因使表現型改變。這些因素會 使得生成咼表現之穩定的哺乳類細胞株式為複雜與發力之 過程。 最近，我們實驗室曾說明在哺乳類基因表現時使用含轉 譯受損之顯性可選擇標示物之DNA載體。（此揭示於新通 過之美國序號08/147,696，1993年11月3日建檔）。 這些載體包含轉譯受損之新黴素磷酸轉移酶（ne〇)基因作 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210〕
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五、發明説明（3 為顯示可選擇標示物，其係經人工工程操作而包含一個插 入序列，並於該序列内插入DHFR基因加上吾人感興趣之 一或多種基因。頃發現以這些載體為表現建構物會明顯減 少抗藥菌落生成之總數，藉此促進關於傳統哺乳類表現哉 體之篩選方法。甚且，有明顯比例之利用本系統取得之選 殖系為高表現選殖系。這些結果明顯地歸因於對之選 擇性標示物的修飾。因neo基因之轉譯受損，在藥物選取 時轉感染細胞無法生成足量的neo蛋白質維生，因此減低 抗藥菌落之總數。此外，有明顯比例之存活選殖系會包含 嵌入基因組中位置之表現載體，在此之基礎轉譯量很高， 引起neo過表現，藉此，使細胞克服neo基因之受損。同 時’吾人感興之與neo連接的基因會產生類似之增高的轉 錄結果。此相同優點亦真的是在ne〇中所創設之人工插入 序列之結果，存活率視功能性ne〇基因之合成而定，後者 反過來視neo插入序列之正確與有效剪接而定。甚且，若 載體DNA已嵌入本身即是高轉錄活性之區域時，更易符合 這些基準。 在載體歲入轉錄活性區域後，便利用選取DHFR基因方 式放大基因。利用此系統，便可能取得利用低量胺甲喋呤 (50毫微莫耳濃度）選取之選殖系，包含很少（< 1〇)之分泌高 量蛋白質（>5 5微微克/細胞/天）載體之複製數。甚且，此可 在極短時間冤成。然而，能否成功放大變化很大。一些轉 錄活化位置無法放大，因而特定位置之放大頻率與程序無 法預測。 -6- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公爱）
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五、發明説明（4 整體言之，使用這些轉錄受損載體代表對其他逢機嵌入 之明顯改善。然而，如所討論者，缺少對嵌入位置之控制 仍是吾人主要關切點。 有一種克服逢機嵌入問題之方法係利用基因標的之方 法，藉此而將外源DNA標的至宿主基因組内之特定區位。 外源DNA之插入係利用表現載體中之DNa與基因組中對應 之同系序列間之同質性重組行之。然而，儘管此型重組在 酵母和其他真菌中自然發生率很高，在較高真核生物其發 生卻很少。在哺乳類細胞中據報導同系對非同質性（逢機 嵌入）重組之比例範圍為由1/100〜1/5000(其例參見Capecchi，
Science，244:1288-1292 (1989); Morrow與 Kuchedapati，Cunr. 〇ρ· Biotech.，4:577-582 (1993))。 最早一篇說明哺乳類細胞同質性重組之報先包括以小氣 纖維母細胞創造之人工系統（Th〇mas等，ceu，44:419-428 (1986))。吾人創造一種嵌入宿主基因組之突變的，非-功 能性neo基因，並於其後以包含不同突變之第二個非-功能 性neo複製物為標的。僅藉基因標的方能重建功能性之ne〇 基因。利用選取G4 1 8抗性細胞可無識同質性重組，並利用 分離自该抗性選殖系之基因組DNA分析證實之。 最近已有報告利用同質性重.組進行抗體分泌細胞之内生 區位重與輕免疫球蛋白基因之取代（美國專利號碼 5,202,238，Fell等，（1993)。）然而，因為此特定方法限於内 生性即令表現免疫球蛋白之細胞，例如B細胞與骨髓瘤細 胞之免疫球蛋白生產，故其應用性不廣。而且，因未含同 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐）
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》性重組後之共-放大’故表現限於單複製數之基因吾。 此万法因需要兩個分別之嵌入事實方可生產功能性免疫球 蛋白而複雜化：其一係針對輕鏈基因，隨之進行另一供重 鍵基因者。 斫有人報先在NS/0細胞中使用本系統型態之額外實例， 其中重組之免疫球蛋白係利用重組於免疫球蛋白r 2a區位 而表現（Holh#，國際專利_請# pcT/IB95 (〇〇〇14)。）由 此位置所得〈表現量極高_其量^由單一複製數整合物 微微克/細胞/天。然而，如上例者，因在此系統未共嵌入 可放大基因，表現僅限此量。再者，其他研究者亦報導在 NS/0細胞表現之重組蛋白的異常糖化（例如參照等，
Biotech· and Bioeng.，48:399-407 (1995)),因此限制此方法 之適用性。
取近有人改變源於嗤菌體p 1之cre-l〇xp重組系統並以之 做為真核細胞基因標的之方法。特定言之，其說明使用 重組酶與一系列包含1〇χ之載體之外源DNA位置特異嵌入 中國蒼乳印巢（CH0)細胞基因組之方法（Fukushige與Sauer
Proc· Natl. Acad. Sci. USA，89:7905-7909 (1992)。）因為其 才疋供可重覆生產之表現於相同染色體位置，故本系統很引 人。然而，無人努力辨識那一個染色體位置之基因表現最 佳，而且如上例者，在此系統中表現限於單一複製體水 準。而且，因其必須提供哺乳類細胞功能性，重組酶表現 之事實而更複雜。 據報告使用導入之DNA序列及其内生染色體區位間之同 -8- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐） 1232239 A7 ______ B7 五、發明説明（6 ) 質性重組可提供哺乳類細胞以及酵母細胞之基因操作的有 用方法（其例參照 Bradley 等，Meth. Enzymol.，223:855-879 (1 993)； Capecchi, Science, 244:1288- 1292 (1989); Rothstein 等，Meth· Enzymol·，194-28 1-30 1 (1 991))。迄今，多數哺乳 類基因標的研究皆針對小鼠胚胎幹（ES)細胞之選定的目標 基因區位之基因破壞擊倒”）或位置-特異突變生成。這 些"擊倒’’小鼠橫型之創造使科學家能檢查無數小鼠基因之 # 特定細構-功能組織並檢查其生物重要性。此研究範疇就 潛在之基因治療應用而言亦具重要意義。 而且，最近在Cell-tech (Knet，U.K.)報告有針對NSO細胞 之轉錄活性位置者’ NSO細胞係不需基因放大者（Peakman 等，Hum. Antibod· Hybridomas，5:65-74 (1994))。然而，這 些未放大細胞中免疫球蛋白之分泌未有報導逾2 〇微微克/ 細胞/天者，至於在放大之CHO細胞，可得高達100微微克 /細胞/天之量(Id.)。 若能發展可重複提供外源DNA整合入基因組中已知為轉 • 錄活化之預定位置之基因標的系統很令人滿意。而且，若 此一基因標的系統可進一步促成整合後之插入的Dna之共 放大亦令人滿意。若能設計此種系統便可允許在哺乳類細 胞重複與高量表現任何吾人感興趣之基因，而且無疑地對 諸多研究者亦有明顯利益。 此應用中’吾人提供根據同質性重組而發生於包含於兩 種不同載體之兩種人工受質問者之新穎的哺乳類表現系 統。特定言之，本系統乃是利用兩種各為”標示"載體與,，標 -9- 本紙浪尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（7 ) 的"載體之新穎哺乳類表現載體之組合。 實質上，標示載體使吾人可共識與標示哺乳類基因組中 轉錄活性之位置，亦即基因表現量高之位置。吾人可認定 此位置係基因組中之"熱點"。標示載體嵌入後，本發明之 表現系統藉前者與標的載體二者中央共通之DNA序列間之 同質性重組使DNA可嵌入此位置亦即標的載體。此系與其 他同質性重組系統比較具明顯優點。 fb 不像哺乳類中所用之其他多數同質性系統，本系統未表 現背景。因而，僅進行逢機嵌入之載體無法在選取條件後 存活。因此，選殖入標的質體之任何吾人感興趣基因皆可 使標示之熱點表現高量。據此，本基因表現方法實質上或 完全消減上文詳述之逢機嵌入系統天生之問題。甚且，本 系統提供哺乳類基因組相同轉錄活性位置之任何重組蛋白 之重複與高量表現。此外，藉包括可放大之顯性選擇性標 示物（例如DHFR)作為標示載體之部份後此特別之轉錄活 性位置之基因放大可能受影響。 φ 發明目的 因此，本發明目的之一是提供標的所需之DNA至哺乳類 細胞特定位置之改良方法。 本發明更特定目的之一係提供藉由同質性重組標的所需 DNA至哺乳類細胞特定位置之新穎方法。 本發明另一特定目的係提供在哺乳類細胞中達成所需 DNA位置特異嵌入之新穎載體。 本發明之又一目的係提供包含嵌入可提供高表現之預定 -10 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐） 1232239
'發明説明（ 位置之所需DNA之新穎哺乳類細胞株。 “么月更特疋目的之一係提供在中國蒼鼠卵巢(CHOV 胞中達成所泰mTA、 队即莱（CH〇）細 士成斤位置特異嵌入之新穎方法。 芙另更特定目的係提供將免疫球蛋白基因或任何 ί方：。細胞中提供高表現之預定染色體位置之新 :月$特疋目的係提供適於將免疫球蛋白基因嵌入 合。 〃问表見之預定位置的新穎載體與載體組 ^發：的另一目的係提供包含已在提供高表現之預定位 且敗入免疫球蛋白基因之哺乳類細胞株。 本發月更4争定目的係提供將免疫球蛋白淚入提供高表現 之CHO細胞之新穎方法以及提供免疫球蛋白基此種嵌入 CHO細胞之新穎載體與載體組合。 此外’本發明特定目的係提供包含嵌入提供高表現之預 足位置之兄疫球蛋白質基因之Ch〇細胞株，並經胺甲嗓呤 (選取而放大俾分泌更大量之功能性免疫球蛋白。 圖式簡要說明 圖1闡述根據本發明名為Desmond之標示質體圖。該質體 以壤型（la)以及轉感染用之直線型（lb)表示。 圖2(a)顯示名為"Molly”之標的質體圖。M〇Uy在此以編 抗-CD2 0免疫球蛋白基因表示，該基因之表現說明請見實 例1 0 圖2(b)顯示利用限制酶Kpnl與pacl消化後之直線型 -11 - 本紙浪尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（9 )
Molly。此直線型係供轉感染之用。 圖3闡述嵌入CHO基因組之Desmond序列與將來之標的 Molly序列間之潛在排列。其亦呈現經同質性重組之嵌入 Desmond之Molly之潛在排歹ij。 圖4顯示單一複製數之Desmond選殖系之南氏分析。樣本 如下： 第1行：AHindlll DNA大小的標示物 • 第2行：Desmond選殖系10F3 第3行：Desmond選殖系10C 12 第4行：Desmond選殖系1 5C9 第5行：Desmond選殖系14B5 第6行·· Desmond選殖系9F2 圖5顯示單一複製數之Desmond選殖系之北方分析。樣本 如下·· A測試：如圖所示經CAD與DHFR探針檢測之北方分 析。B測試：如所示以CAD及HisD為探針之二重覆北方分 析。 ψ 負載於測試A與B之RNA樣本如下： 第1行：選殖系9B2，第2行：選殖系10Ci2，第3行：選殖 系14B5，第4行：選殖系i5C9，第5行：選殖系HisD& DHFR之質體轉感染之CHO之對照組RNA，第6行，未轉感 染之CHO。 圖6顯示源於Molly同質性嵌入Desmond所生選殖系之南 氏分析，樣本如下： 第1行：久Hindlll DNA大小標示物，第2行：20F4，第3 -12- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（10 行；5F9，第 4行；21C7第 5 行；24G2，第 6行；25E1，第 7行；28C9 ;第8行；29F9，第9行；39G11，第丄〇行； 42F9，第 1 1 行；50G10，第 12 行；Molly 質體 DNA 之經
Bglll切式直線（上方帶狀）並經Bglll與ΚρηΙ切斷者（下方帶 狀），第1 3行；未轉感染Desmond。 圖7A至7G包含Desmond之序列表列。 圖8 A至81包含具有Molly之抗CD20序列表列。 圖9包含指示質體圖nMandyM，此處顯示編碼抗_匸〇23基 因，其表現揭示於實例5。 圖10A至10N包含具有如實例5揭示之抗_CD23基因之 "Mandy"之序列表列。 發明詳述 本發明提供藉同質性重組將所需之外源DNA嵌入哺乳類 細胞基因組中目抓位置之新顿方法。本發明亦提供在哺乳 類細胞基因組之目標位置達成位置特異嵌入之新穎載體。
更特定言之，本選殖方法提供所需DNA位置特異嵌入哺 乳類細胞之方法，其係藉"標示質體”轉感染該細胞，該標 示質體包含哺乳類細胞基因組外來之獨特基因並提供同質 性重組之受質；隨之以含具有標示質體所含之獨特序列提 供之同質性重組序列之”目標質體”轉感染，並進一步包括 欲嵌入哺乳類細胞之所需DNA。典型地，嵌入之Dna會編 碼諸如免疫球蛋白或其他分泌性哺乳類醣蛋白之吾人感興 趣之蛋白質。 省例同質性重組系統使用新黴素磷酸轉化酶基因作為 -13-
1232239 A7 _______ B7 五、發明説明（彳1 ) 顯性可選擇標示物。此標示物之使用係根據下列之先前已 經出版之觀察結果： (〇顯示具有標的與恢復ne〇基因（先前引用者）突變體功 能之能力，與
(11)使吾人可發展轉譯受損之表現載體，其中該ne〇基因 係經人工創選為具有吾人感興趣之基因插入於插入序列之 兩個表現序列者，neo之表現序列經正確之體内切剪與轉 #生成種功旎性蛋白質並藉此賦予對生成之細胞族群 之G4 1 8杬性。在此應用中，ne〇基係分成三個表現序列。 neo<第二個表現序列位於"標示物，，質體並於標示物質體 欣入哺礼類細胞時而嵌入宿主細胞基因組。表現序列丨與2 存在於指示質體並由一個插入序列分離，後者至少選殖入 一種吾人感興趣基因。具有嵌入之標示載體之標的載體經 同質性重組會使得neo基因之全部三個表現序列皆有正確 剪切藉此表現功能性neo蛋白質（以選取之G418抗性菌落定 之）。在設計目前之表現系統前，我們已經在哺乳類細胞 中實驗試此種經三次剪切之ne〇建構物之功能性。此對照 組男之結果顯示所有三個ne〇表現序列皆終適當剪切， 故其意謂本發明係可行者。 然而，僅管本發明以neo基因為例示，或更特定言之係 以二次男切之neo基因為例，本通常方法對其他顯性選擇 性標不物亦應很有效。 正如下文將更詳細討論者，本發明本傳統基因表現法提 供典數優點傳統方法，包括逢機嵌入與基因標的法。特定 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（21〇x 297公釐） 1232239 A7
:〈I發明提供可重複允許所需dna位置特異嵌入哺乳 =細胞之轉錄活性功㈣位之方法。甚且，由於本發明引 ’種做為同貝性重組之獨特受質之”同質性，，人造區域 ’入所而DNA ’故本發明之效率不需要細胞本身即包含 或表現特定DNA。因ά卜，太士 + , 此 本万法一般適用於所有哺乳類細 胞；而且可用以表現任何型態之重組蛋白。 使用三重剪切之選擇性標示物，例如本例示之三重剪切 全建構物，保过所有產之G4丨8抗性菌落皆源於同質性重 ，（逢機肷入均不會產生功能性ne〇基因，故經以18選取後 無2存活）。因此，本發明使筛選所需之同質性條件變得 很谷易。甚且’已經進行過同質性重組之細胞進行額外之 逢機嵌入之機率亦很低。 /據前述結|，很顯然地本發明之明顯優點之一為其實 貝上減辨認高生產菌落之需要篩選的菌落數目，亦即指 彼^必问I (對應蛋白質之包含所需dna之細胞株。平均 而。’或终可利用筛選5_2Q個菌落辨識出包含嵌入之所需 A的系（比較利用標準嵌入技術者必須篩選數千個， 或疋利用先則戶斤述〈插入序列插入載體可能需數百個）。 此外，因嵌人位置係預選者，並心轉錄活性功能部位， 所有在此位置表現之外源DNA皆應有相當量，亦即高量之 吾人感興趣基因。 甚且，本發明之進一步優點在其使可放大之某因在標示 載體嵌入時即可行插入。因&，當所需之基因經同質性重 組標的於此位置時，本發明允許該基因之表現經由基因放 -15- 本紙悵尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（21〇x 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（13 - ^ - 一 --- 大而進一步增強。就此方面言，據文獻報導不同之基因組 位置對基因放大有不同能力（Meink〇th等，Mol. Cell Biol.， 7:1415-1424 (1987))。因而’本技術因允許吾人將有利的 所需基因放在特定之既是轉錄活性又是易於放大之特定位 置而具進一步優點。因而，此應會顯著減低分離此類高生 產物所需之時間。 待足了之’儘管傳統建構高表現哺乳類細胞株所需時間
可能為6 - 9個月，本發明平均僅需約3 _ 6個月後即可分離 出此種選殖株。此係應傳統之分離的選殖株典型地需進行 二回合以上之抗藥性基因放大才會達令人滿意之基因展現 水準足事實。因該同質性產生之選殖株係源於預定之高表 現位置’故在達到滿意之生產水準前所需之放大次數較 少〇 本發明更進一步使得其嵌入之載體為較低複製數（典型 地為單複製數）之高生產性選殖系可供重複選取。當其可 增強選殖系安定性並避免與高複製數有關之其他負面負作 砂用時特別有利。如上述，本發明之同質性重組系統係利用 下文將詳述之"標示物質體"與，，指列質體，，之組合。 該"標示物質體，，係用以標示與并識轉譯熱點，其至少包 括下列序列·· (丨）與哺乳類細胞基因組異質性或為獨特之DNA區域，其 作為同貝性之之來源，提供同質性重組之進行（與包含於 第一個目標質體足DNA)。更特定者，該DNA⑴之獨特區 域通常包括哺乳類基因組不常有之細菌 '病毒、酵母合成 -16 -
1232239 A7 B7 五、發明説明（15 因、腺菩去胺酶基因、魏胺酸合成酶基因與次黃嘌吟鳥嘌 呤磷酸核糖轉移酶。
(i i i)編碼功能性可選擇之標示物的蛋白質之D N A，該可 選擇標示物與可選擇的標示物DNA (ii)不同。本可選擇標 示物提供吾人可成功選擇被其中之標示物質體已成功嵌入 細胞DNA之哺乳類細胞。更特定言之，該標示物質體包括 兩個此類位於載體不同端之可選擇的標示物DNAs而為吾 人所需要者。由於其允許吾人利用不同選取試劑選擇嵌入 物並進一步使吾人可選取包含全部載體之細胞而具優點。 此外’為促進如前述之基因放大，標示物得為可放大者。 任何列於（ii)之顯性可選擇標示物以及其他此技藝所熟知 者皆可使用。
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甚且，該標示物質體得視情形進一步包括稀有的核酸内 切酶位置。因其可促進切斷而具吾人所需之潛力。若存在 時，此種罕見限制位置應靠近於做為同質性重組之受質之 獨特區域的中間。較佳者為此類序列至少有約1 2個核答 酸。具報導藉類似方法引入之雙股破裂亦可增強同質性重 組之頻率（Choulika 等，MoL Cell· Bi〇1，15:1 868_1973 (1 995))。然而，此類序列之存在係非必要者。 "標的質體"至少包括下列序列： (1)具有與標不物質體所含之相同的獨特區域之DNA或與 其具足夠同質性或序列一致性者，故該dna足以藉同質性 重組與標示物質體之獨特位置⑴進行組合。適當型態之 DNAs係如上述之標示物質體之獨特的DNA (1)區域^述 -18 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公 玎
1232239 A7 B7__ 五、發明説明（16 ) 者。 (2) 顯示可選擇標示物之剩餘表現序列，其中一個表現序 列係包括作為上列標示物質體之（ii)。該DNA片段之必要特 徵為其造成之功能性（可選擇）標示物蛋白質僅在該標的質 體係經同質性重組嵌入時（其中該重組選成此DNA和標示 物質體所含之可選擇的標示物DNA之其他片段的聯合）且 其進一步允許所需之外源DNA之插入。典型地，本DNA會 φ 包括彼由插入序列所分離之可選擇的標示的DNA之剩餘表 現序列。例如，本DNA可能包括neo基因之前二個表現序 列而該標示物質體可能包括第三個表現.序列（neo之倒數第 三個）。 (3) 該標的質體亦包括所需DNA，例如編碼所需多肽者， 以插入質體所含之可選擇的標示物DNA片段者較佳。典型 地，該DNA會插入由可選擇之標示物DNA之表現序列所構 成之插入序列中。此確保若標的質體與標示物質體之同質 性重組發生時，所需之DN A亦已嵌入。本插入序列可為自 φ 然發生或其可植入顯性之可選擇標示物DNA片段。 此DNA可編碼任何所需之蛋白質，以具醫藥或其他所需 性質者較佳。.最典型者為該DNA可編碼哺乳類蛋白質，目 前所舉例者為免疫球蛋白或免疫黏附蛋白。然而，本發明 無論如何皆非僅限於生產免疫球蛋白。 正如上文討論者，本選殖方法由於不需任何特定之哺乳 類序列故其適合任何哺乳類細胞。一般而言，此類哺乳類 細胞包括彼典型用以表現蛋白質者，例如CHO細胞、骨髓 -19 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（17 瘤細胞，C〇s細胞、BHK細胞、Sp2/0細胞' NIH 3T3與
HeLa細胞。下列實例中係使用CH〇細胞。其優點包括可取 得適當生長培養基，可有效生長與高密度培養之能力以及 可表現生物活性型式之諸如免疫球蛋白之哺乳類蛋白質的 能力。
甚至，多數情形係選用CHO細胞，因為發明者先前即使 用此種細胞表現免疫球蛋白（使用含前述載體之轉譯受損 的顯性可選擇標示物）。因此，本實驗室有很多使用此細 胞進行表現之經驗。然而，根據下列實例可合理地預期以 其他哺乳類細胞亦可取得類似結果。 通常根據本發明之哺乳類細胞轉型或轉感染會根據傳統 方法行之。故可更易了解本發明，範例載體之建構及其生 產嵌合物之用法請見下列實例說明。 實例1 檨—示物輿標的質鳢DNA#體之設計盥皁j， 本文名為"Desmond"之標示物質體係由下列DNA元素組 +成： (a) |類二氫董醢澴厗酶基因（dhfw，併A轉畔障中，包 括小鼠/3 -球蛋白啟動子，位於DHFR起始位置之5 ",與位 於停止密碼子之3 "的牛生長激素多腺荅訊號。該DHFR轉 錄臣係分離自TCAE6，後者係本實驗室先前所創之表現載 體（Newman等，1992，Biotechnology，10:1455-1460)。 (b) 太％桿囷/3-半乳糖芬酶基因-市講自Promega之pSV-半 乳糖荅酶對照組載體，目錄# E 108 1。 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（18 ) (c) 桿狀病喜DNA，予購自Clontech之pBAKPAK8，目錄# 6145-1 〇 (d) 匣包括源自巨細胞病毒與SV40病毒之起動子輿強化子 立—素，該匣係利用表現載體TCAE8之衍生物經pcr生成 (Reff等，Blood，8 3:43 5-455 (1994))。該強化子匣係插入先 前已經插入多選殖位置修飾過之桿狀病毒序列中。 (e) 大腸桿菌GUS〔葡糖醛酸甞酶）基因，市購自Clontech之 m ρΒΙΟΙ 目錄# 6017-1。 (f) 螢火蟲螢光基因，其於商業上可得，購自promega出 品 pGEM-Luc(目錄 #E1541)。 (g) 鼠傷寒沙門氏菌組胺醇去g.酶某因mkm。此基因最 初由Donahue等，Gene，18:47-59 (1982)所贈，其後經併入轉 錄匣，包括位於該基因5’之小鼠f球蛋白主要起動子，與 其V端之SV40聚腺甞訊號。 將上述（a)-(g)之DNA元素組合於pBR衍生之質體骨架生 成7.7kb之連續段的DNA，即附屬圖中名為”同質體，，者。 此思我下’同i體意指非為哺乳類基因組之部份且係用以 促進分享相同同質性DNA序列之轉感染質體間之同質性重 組之DNA序列。 (h) 源於TN5之新黴素轉磷酸醃某因（；r^vpc命Smith> Ann.
Rev. Micro·，32:469-5 1 8 (1 978))。將完整之 neo 基團再選殖 入 pBluescript SK-(Stratagene catalog # 212205)俾促進基因 之處理。然fe將一個合成連接子插入發生於跨越ne〇胺基 酸5 1與5 2之密碼子之獨特的Pstl位置。此連接子編碼創造 -21 - 度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（19 人工剪切捐助者位置之必要DNA元素，插入neo基因之插 入序列與男切接受者位置’因此創選兩個分別之表現序 列，目七名為neo表現序列1與2。neo表現序列1編碼ne〇之 前5 1個胺基酸，至於編碼剩餘之203個胺基酸加上蛋白質 A Notl選殖位置之停止密碼子之表現序列2亦創選於插入 序列中。 進一步分隔neo表現序列產生neo表現序列2與3。此係經 Φ 下列達成：設計一組PCR引子俾放大一段編碼neo表現序列 1之DNA區域插入序列與表現序列2之前111 2/3胺基酸。 該V PCR引子選成在表現序列2胺基酸1.11之密碼子的第二 個核甞酸之後即導入一新的V剪切位置，因而生成新的較 小表現序列2。現在將編碼原始表現序列1、插入序列與新 的表現序列2之DNA片段再選殖入pBR為基礎之載體並靠 之傳佈。剩餘之原始表現序列2則做另一回合PCR放大模 版之用，此會產生”表現序列3 "。此回合放大之5，引子在 新創造之表現序列3之5 ’端導入一新的剪切接受者位置， Λ 亦即在胺基酸1Π之密碼子之終核备酸前。生成之neo的3 個表現序列編碼下列資訊··表現序列1 -neo之前5 1個胺基 酸，表現序列2-後111 2/3個胺基酸與表現序列3-終91 1/3 個胺基酸加上neo基因之轉譯停止密碼子。 neo表現序列3係陪同上述DNA元素併入標示質體 ’’Desmond’’。neo表現序列1與2係併入標的質體"Molly”。在 表現序列1與2間之插入序列内創造之Notl選殖位置係在後 續選殖步驟中使用俾將有利益之基因插入該標的質體中。 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐）
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線 1232239 A7 ____ B7 五、發明説明（20 ) 亦生成第二種標的質體"]yiandy’’。除"Molly，，所含之原始 HisD與DHFR基因經抑活性外，此質體幾乎與”M〇iiy，，相同 (載體之某些限制經過改變）。這些改變已併入，因為 Desmond細胞株不再培養於含組胺醇條件，因而包含第二 個HisD基因複製體似乎不必要。此外，DHFR基因係經抑 活性俾確保在任何生成之細胞株中僅單一之DHFr基因， 亦即Desmond標示位置者方會被放大。，’Mandy1，係衍生自 φ "Molly”但經下列修飾： (i) 有一合成連接子插入DHF R編碼區域中。該連接子創 造一個停止密碼子並移轉剩餘之DHFR編碼區域脫離骨 架’因而使該基因無功能。 (ii) 刪除部份HisD基因並以缺少基因之起動子及起始密碼 子之PCR生成之HisD片段取代。 圖1說明這些DNA元素在標示質體"Desmond”之排列。圖 2說明這些元素在第一個標的質體，，Molly"中之排列。圖3 陳明不同DNA元素經由將Molly DNA標的與嵌入Desmond Φ 標示之CH〇細胞中CHO基因組之可能排列。圖9說明標的 質體 nMandyn。 由上述DNA元素建構指示與標的質體係在傳統選殖技術 後進行之（參照例如]Vlolecular Cloning，A Laboratory Manual，J. Sambrook 等，1987, Cold Spring Harbor Laboratory Press,與Current Protocols in Molecular Biology， F. M· Ausubel等·，編者·，1 987, John Wiley and Sons)。所有 %體皆以大知桿菌XLI blue傳佈及保存（Stratagene，目錄# -23- 本紙張尺度遑用中國國家標準(CMS) A4規格（210X297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（21 ) 20023 6)。大量之質體製備係根據製造商指示利用promega Wizard Maxiprep DNA Purification System® 〇 實例2 標示的CH〇細胞株之埭槿 1 ·生產之標示CH〇細胞株之細胞培養與轉感染方法。 利用Bstl 1071之37°C隔夜消化直線化標示物質體DNA。 直線化之載體經乙醇沈澱並再懸浮於無菌T E成濃度1毫克 Φ /毫升。將直線化載體利用下述電孔法導入DHFR-中國蒼 鼠印巢細胞（CHO細胞）DG44細胞（Urlaub等，Som· Cell and Mol. Gen.，12:555-556 (1986))。 離心收取對數生長期之細胞，以冰SBS(蔗糖缓衝溶液、 272毫莫耳濃度蔗糖、7毫莫耳濃度磷酸鈉pH 7.4、1毫莫耳 濃度氣化鎂）洗一次，然後懸浮於SBS至濃度成1〇7細胞/毫 升。冰中保溫1 5分鐘後，將0.4毫升細胞懸浮液混合4 0微 克直線化DNA於拋棄式電孔試管中。休克細胞係利用BTX 電細胞處理器（San Diego，CA)，230伏特，400微法拉第電 Φ 容，13歐姆電阻。然後以20毫升預溫之CHO培養液（CHO-34?乂11，〇比(：〇/31^，目錄# 3 103 3-012)混合休克細胞並塗 覆於96井槽之組織培養盤。電子後4 8小時後，所選取培養 基錁食培養盤（當以Desmond轉感染時，選取培養基係不含 次黃嘌呤或胸甞而補充2毫莫耳濃度組胺醇之CH〇-S-SFMII(Sigma目錄# H6647)。保持培養盤於選取培養基達 3 0天或直至某些井槽有細胞生長。然後將這些細胞自96井 槽盤中除去，最終擴散之Λ 120毫升旋轉燒瓶’在其中時 -24- 本紙張尺度適用中國國家標準(CMS) Α4規格（210 X 297公釐） 1232239 A7 _ B7 五、發明説明（22 ) 其一直是保持於選取培養基中。 實例3 標示的CHO細胞株之敘沭 (a) 南氏分析 基因組DNA皆分離自所有穩定生長之Desmond標示CHO 細胞。DNA係根據製造商指示利用Invitrogen Easy⑧DNA套 件分離出。然後以Hindlll隔夜消化基因組DNA並利用針對 φ DHFR基因之由異羥基羊地黃毒甞配基標識之PCR生成的 探針進行南氏分析。雜合與清洗根據製造商指示皆利用
Boehringer Mannheim’s DIG easy hyb(目錄 # 1603 558)與 DIG Wash和Block Buffer Set(目錄# 1 585 762)進行。吾人假 定包含單一帶狀之雜合於DHFR探針之DNA樣本皆為源於 已經嵌入單一複製數之質體之單一細胞之Desmond選殖 系。保持這些選殖系供進一步分析。由分離出之總數4 5個 HisD抗性細胞株，僅5個為單複製嵌入物。圖4顯示含此 所有5個單複製數Desmond選殖系之南氏污潰結果。選殖 m 系之名稱列於圖形說明中。 (b) 北方分析 總RNA係根據製造商指示利用丁riz〇i試劑（Gibco/BRL目 錄# 1 5596-026)分離自所有單複製數Desmond選殖株。取每 一選殖株10-20微克行甲醛膠之二重複分析。生成之污潰 的PCR生成之異羥基羊地黃毒:y：配基標定之DNA探針探其 (i)DHFR消息（ii)HisD消息與（iii)CAD消息。CAD係涉及尿 荅生物合成之三功能蛋白質（Wahl等，J. Biol. Chem.，254, -25- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（21〇x 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（23 ) 17:8679-8689 ( 1979))且在所有細胞型態中皆等量表現。其 在此做為内部控制用俾幫助定量負載之RNA。雜合與清洗 皆利用上述Boehringer Mannheim試劑進行。北方分析結果 列於圖5。單複製數Desmond選殖系之展現最高量之HisD 與DHFR消息者為選殖系15C9、列於圖4之兩列中。這選殖 系名為"標示細胞株"並用於將來在CHO之標的實驗中，其 實例列於下文。 # 實例4 D_esmond標示之CHO細胞中抗-CD20抗體之砉現 先前本實驗室已選殖並表現可，并識B -細胞表面抗原 CD20之變種抗體 C2B8(Reff等，Blood，83:434-45 (1994))。 將包括該C2B8輕與重鏈基因之4.1 kb DNA片段加上必要之 調節元素（真核起動子與多腺荅訊號）插入包含於pBR衍生 之選殖載體之由neo基因之表現序列1與2間所創造之人選 插入序列中。切出此新成生之5kb DNA片段（包括ne0表現 序列1，C2B8與neo表現序列2 )並用之組合標的質體 φ Molly。其他用以建構Molly之DNA元素係與先前所并識之 用以建構標示質體Desmond相同。Molly之完整圖形列於圖> 2。 轉感染前標的載體Molly先經Kpnl與Pacl消化直線化， 乙醇沈澱與再懸浮於無菌TE成濃度1.5毫克/毫升。除了在 每一電孔法中使用8 0微克外，實質上如所述將直線化質體 導入對數生長之Desmond標示的細胞中。電孔後4 8小時 後，以選取培養基補充9 6井槽之培養盤-增補以4 〇 〇微克/ -26- 本紙张尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（24 )
毫 Geneticin之 CH〇-SSFMII(G418，Gibco/BRL 目錄 # 10131-019)。保持培養盤於選擇培養基中達30天，或直至井槽中 有某些細胞生長止。此種生長據推側係單一 G4 1 8抗性細胞 選殖株擴散之結果。利用標準ELISA技術分析所有G4 18抗 性井槽上澄液之C2B8生產情形，實質上並將所有生產性選 殖株擴散至120毫升旋轉燒瓶並進一步分析。 抗體分泌之標的細胞的敘述 進行含Molly標的質體之總數5 0個電子之實驗將每個皆 接種入分別的96井槽培養盤中。取得總數1 0個小瓶之分泌 抗CD20抗體之選殖系並擴散之至120毫升旋轉燒瓶。基因 組DNA係分離自所有選殖株，並於其後進行南氏分析決定 該選殖系是否表示單一同質性重組結果或在相同細胞中有 另外逢機歲入發生。DNA分離與南氏雜合之方法係如前段 所述者。基因組DNA係以EcoRI消化並以PCR生成之異羥 基羊地黃毒菩配基標識之CD20重鏈恆定區域之片段的探 針進行探側。本南氏分析之結果示於圖6。如該圖可見， 1 0個選殖系中有8個顯示與CD20探針雜合之單一帶狀，顯 示這些細胞發生單一的同質性重組。1 〇個中有兩個，選殖 系24G2與2 8C9，顯示額外帶狀之存在，即意謂在基因組之 某處有額外的逢機嵌入。 我們檢驗所有1 0個選殖系抗-CD20抗體之表現量，其資 料列於下表1。 -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐）
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線 1232239 A7 B7 五、發明説明（25 ) 表1 : 抗-CD20之同質性嵌入物之表現量 選殖系 抗-CD20，微微克/細胞/天 20F4 3.5 25E1 2.4 42F9 1.8 39G1 1 1.5 21C7 1.3 50G10 0.9 29F9 0.8 5F9 0.3 28C9* .4.5 24G2* 2.1 *這些選殖系包含抗-CD20之額外的逢機嵌入複製物。 因而，這些選殖系之表現量反映源於同質性與逢機位 置之貢獻。
報導之表現量為個別選殖系所分泌之每天每個細胞的微微 克數（微微克/細胞/天），並表示由120毫升旋轉燒瓶取得 之樣本之三次分別的ELIS As的平均量。 如由資料可見者，在最高與最低表現之選殖系間分泌的 抗體約有十倍變化。此結果有些超乎預料；因為抗-CD20 基因皆嵌入相同之Desmond標示位置之事實故吾人預所有 選殖系皆有類似表現量。然而，此所見之表現範圍差異與 使用任何傳統逢機嵌入法或以吾人之轉譯受損載體系統所 見者比較皆極小。
選取表現最高之單一複製體嵌入物，選殖系20F4供進一 步研究。表2(下文）列出此選殖系7天之生產回合之ELISA -28- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（21〇x 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（26 ) 與細胞培養資料。 表2 ·· 20F4之7天生產回合資料 夭 存活％ 存活/毫升 (χίΟ5) Τχ2(小時） 毫克/升 微微克/ 細胞 1 96 3.4 31 1.3 4.9 2 94 6 29 2.5 3.4 3 94 9.9 33 4.7 3.2 4 90 17.4 30 6.8 3 5 73 14 8.3 6 17 3.5 9.5 在第0天時，約2X103毫升接種選殖系20F4於120毫升旋 轉燒瓶。其後6天，計算細胞數，採二重覆計算，並自 燒瓶取1毫升上澄液樣本且藉ELISA分析其分泌之抗-CD20。
根據E LIS A資料，此選殖系平均分泌3 - 5微微克抗體/細胞 /天。此與使用先前發展之轉譯受損逢機嵌入載體而在吾 人實驗室中取得之其他高表現的單一複製數選殖系所得之 Φ 量相同。此結果顯示下列： (1)經Desmond標示載體標示之CHO基因組的位置具高度 轉譯活性，因而表示其為可由之表現重組蛋白之極佳位 置，與 (2)被經由同質性重組之標的得利用本載體完成且其發生 頻率高到足以使此系統成為逢機嵌入法之有效與需要之替 代法。 為進一步顯示本系統之效率，吾人亦顯示此位置係可放 -29- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（27 大者，造成更高量之基因表現與蛋白質分泌。放大係利用 塗覆經系列稀釋之以密度為2.5 X 104細胞/毫升起始之20F4 細胞於9 6井槽組織培養皿中並培養這些細胞於補充以5， 10，15或20毫微莫耳濃度胺甲喋呤之培養基（CHO-SSFMII)。分泌抗體之選殖系係利用標準之ELISA技術篩選 之，擴展最高之生產選殖系並進一步分析。此放大實驗之 摘要列於下表3。 表3 : 20F4放大之摘述
πΜΜΤΧ 分析之 井槽# 表現量 毫克/升96井槽 擴散之 井槽# 旋轉燒瓶之表現量 微微克/細胞/天 10 56 3-13 4 10-15 10 27 2-14 3 15-18 20 17 4-11 1 ND 裝
玎
利用上表所示之胺甲喋呤濃度如文中所述安排20F4之胺 甲喋呤放大。藉ELISA分析所有存活之96井槽菌落之上 澄液，這些選殖系表現之抗-CD20-之範圍表示於第3 列。根據這些結果，將最高生產之選殖系擴散入120旋 轉燒瓶並進行數個對旋轉燒瓶上澄液之ELISA分析定微 微克/細胞/天之表現量列於第5列。 此處之資料清楚顯示此位置在含胺甲喋呤時可經放大。經 發現源於該1 0與1 5毫微莫耳濃度之選殖系生產量為15-20 微微克/細胞/天。 選取一名為20F4-15A5之1 5毫微莫濃度選殖系作為最高 表現之細胞株。此選殖系乃源於只有2 2個井槽生長之96井 槽培養盤，因而據推測係源於單一細胞。然後將該選殖系 -30 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（28 付諸另一回合之胺甲喋呤放大。如上述，將系列稀釋之培 養液塗覆於96井槽培養皿並培養於補充以200，3 00或400 毫微莫耳濃度胺甲喋呤之CHO-SS-FMII培養基。經ELISA 篩選存活之選殖系，並擴展數個高產量選殖系於旋轉培養 並進一步分析之。此第二次放大之實驗結果摘要於表4。 表4 :
20F4-15A5放大之摘述 nMMTX 分析之 井槽# 表現量 毫克/升96井槽 擴散之 井槽# 旋轉燒瓶之表現量 微微克/細胞/天 200 67 23-70 1 50-60 250 86 21-70 4 55-60 300 81 15-75 3 40-50
裝 如文中所述安排並分析20F4-15A5之胺甲喋呤放大。生 產量最高之井槽，其號碼顯示於第4列，將之擴散至 120毫升旋轉燒瓶。衍生自這些井槽之細胞株之表現量 係記錄成微微克/細胞/天，列於列5。 最高產量之選殖系來自250毫微莫耳濃度之放大。該250毫 || 微莫耳濃度選殖系20F4-15A5-250A6源於96井槽培養盤， 其中僅有一些井槽生長，因而推測其係源於單一細胞。综 合之，表3與4之資料強烈顯示兩回合之胺甲喋呤放大足以 達到6 0微微克/細胞/天之表現量，後者已接近哺乳類細胞 免疫球蛋白之最高分泌能力（Reff，M.E·，Curr. Opin. Biotech.，4:573-576 ( 1 993))。只需兩次放大步驟即可達到 此分泌量之能力進一步強化本同質性重組系統之利用性。 典型地，逢機嵌入需兩回合以上之放大方可達此表現量， 而且以放大容易性而言通常較不可靠。因此，本同質性系 -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐） 訂
1232239 A7 B7 五、發明説明（29 ) 統提供在哺乳類細胞達成高量基因表現之更有效率與省時 之方法。 實例5 D e s m ο n d標示之C Η〇細胞抗-人類C D 2 3抗體之表現 CD23係IgE之低親和力受體，其媒介IgE與Β和丁淋巴球 之結合（Sutton，B.J·，與 Gould，H.J.，Nature，366:42 1-428 (1 993))。抗人類CD23單株抗體5E8係本實驗室最近選殖與 w 表現之人類r -1單株抗體。此抗體揭示於序列號碼 08/803,085，1997年2 月 20 曰建檔。 吾人將5E8基因之重與輕鏈選殖入NEOSPLA載體 (Barnett等，Antibody Expression and Engineering, H.Y. Yang 與丁. Imanaka，編者.，27-40頁（1995))之衍生物即哺乳類表現 載體N5KG1，並將該基因做兩個修飾。然而最近在我們實 驗發現免疫球蛋白輕鏈與其他表現建構物之重鏈比較分泌 量較高（Reff等，1997，未公開資料）。為彌補此缺損，我們 利用在起始位置直接上游添加較強之啟動子/增強子元素而 ψ 改變5E8重鏈基因。在後續步驟中，吾人由N5KG1載體分 離一段包括5E8修飾的輕與重鏈基因之2.9kb DNA片段並插 入標的載體Mandy。製備含5E8之Molly並將之電孔入 Desmond 15C9 CH〇細胞之方法實質上與先前一段所述者同。 此處與先前所述方法之一個不同點乃在所用之培養基型 態。Desmond標示之CHO細胞係培養於不含蛋白質之補充 以3毫克/升重組胰島素（3毫克/毫升貯存液，Gibco-BRL， 目錄# AS220 5 7)與8毫莫耳濃度L -麩胺酸（200毫莫耳濃度 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（30 )
貯存液，Gibco-BRL，目錄 # 25030-081)之 CD-CHO培養基 (Gibco-BRL ’目錄# AS2 12 06)。其後，令轉感染細胞經上 述之補充以400微克/毫升抑基因素（Geneticin)之培養基選 取。此實驗中，進行2 0次電孔處理並塗覆之於9 6井槽組 織培養皿。有6 8個井槽細胞令生長並分泌抗-CD23，吾人 推測其全部皆為源於單一 G4 1 8細胞之選殖株。選取其中之 1 2井槽擴散至12 0毫升旋轉燒瓶進行進一步分析α我們深 信此實驗分離出較多數之選殖系（比較實例4所述之抗_ CD20此處為6 8 )係培養於CD-CHO培養基之細胞與培養於 CHO-SS-FMII培養基者具較高之選殖效率與存活率。旋轉 培養之選殖株經分析之表現量範圍為0.5-3微微克/細胞/ 天，與吾人所見抗-CD20選殖系者相近。將名為4Η12之最 高產量的抗-CD23品系付諸胺甲喋呤放大俾增加其表現 量。此放大所採方式與實例4所述之抗-CD20選殖系者相 似。將對數生長期之經系列稀釋的4Η12細胞塗覆於9 6井 槽組織培養皿並培養之於補充以3毫克/升胰島素，$毫莫 耳濃度麩胺酸與30，35或40毫微莫耳濃度之胺甲喋吟的 CD-CH〇：t|*養基中。此放大實例之摘述歹ij於表5。 表5 : 2H12放大之摘述 分析之 表現量 擴散之 旋轉燒瓶之表現量 nMMTX 井槽 毫克/升96井槽 井槽 微微克/細胞/夭3〇 Γ〇0 6^24 "8 Γ〇^25^ 35 64 4-27 2 10-1 5 40 96 4-20 1 ND 最高表i量之選殖系為得自有2 2個井槽生長 -33- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐）
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咸 1232239 A7 B7 五、發明説明（31 ) 之：)0宅彳政莫耳；辰度之選殖系。此選殖系名為4 Η 1 2 -30G5，可重複分泌1 8-22微微克抗體/細胞/天。此與所見 之k C D 2 0選殖系2 0 F 4首次之放大的表現範圍相同（如實 例4所述’選殖系20F4-15A5生產15_18微微克/細胞/ 天）。此資料得支持吾人對CHO之此標示位置之放大係 可重複性而且有效率之觀察。目前吾人進行此3 〇毫微 莫耳濃度細胞株之第二次放大。吾人預期抗_CD23抗體 之表現的飽和量如抗-CD20者般，只需兩個放大步驟即 可達成。 “ 實例6
Desmond標示之CHO細胞之务丨疝附著蛋白 CTLA-4係Ig超家族之一員並在T淋色球之表面可見，故 被認為在抗原-專一之τ細胞活化扮演某種角色（Dariavach 等，Eur. J. Immunol.，18:1901-1905 (1988);與 Linsley 等，j. Exp· Med·，174:561-569 (1991)。為進一步研究CTLA-4分子 在活化路徑之正確角色，我們創造了包括連接於切短型之 人類IgGl恆定區域之胞外功能部位之可溶的融合蛋白 (Linsley等（I上）)。最近吾人在NEOSPL A質體（Barnett等，
Antibody Expression and Engineering，Η. Y. Yang 與丁 Imanaka，編者.，27-40頁（1995))之衍生物；哺乳類表現載體 BLECH 1中表現此GTLA-4 Ig融合蛋白。由此載體分離編碼 泫（3丁]^八-4 18之一段8006口片段。並插入1^〇117之3&(：11與 Bglll位置中間。 CTLA-4Ig-Molly之製備與電孔入Desmond選殖系15C9 CHO細胞之方法係如先前所述關於抗-CD20之實例者。進 行20個電子處理並如先前所述塗覆於96井槽培養皿。由 -34- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐） 1232239 A7 B7 五、發明説明（32 ) 彼9 6井槽中分離出1 8個CTLA-4表現井槽進行至120毫升旋 轉燒瓶階段。然後進行每一種分離自這些選殖株之基因組 DNA的南氏分析決定有多少同質性選殖系包含額外之逢機 嵌入。基因組DNA以Bglll消化之並經PCR生成之異羥基羊 地黃毒荅配基標識之人類IgG H*亙定區域之探針進行探測。 本分析之結果顯示有85%之CTLA-4選殖系僅為同質性嵌入 物耳，剩餘之1 5%則包含一個額外之逢機嵌入物。此結果 # 證實上述抗-CD20表現所見結果，上述者中80%選殖系係 單同質性嵌入物。因而，我們可下結論即本表現系統至少 在其所產生之所有選殖系的80%中重複產生單標的之同質 性嵌入物。 該同質性（：1^八4-；^選殖系之表現量範圍為8-12微微克/細 胞/天。此略高於上文討論之抗-CD20抗體與抗-CD23抗體 選殖系之範圍。然而，吾人先前已發現本分子利用插入序 列插入載體系統之表現亦比免疫球蛋白所見者造成顯著較 高之表現量。目前我們仍無法對此觀察提出解釋。 W 實例7 將抗-CD20標的至替代地Desmond標示之CHO細胞株 如吾人在前段所述者，吾人取得5個單一複製數之 Desmond標示之CHO細胞株（參見圖4與5)。為顯示吾人之 標的策略會成功係非因Desmond 15C9選殖系之某些特性且 亦係限於此選殖系耳，我們將抗-CD20 Molly導入Desmond 選殖系9B2(圖4第6線，圖5第1線）。Molly DNA之製備與 電孔入Desmond 9B2確實與先前抗-CD20之實例所述者相 -35- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格（210 X 297公釐）
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線 1232239 A7 B7 五、發明説明（33 同。我們由此實驗取得一種同質性嵌入物。將此選殖系擴 政至120¾升之旋轉子燒瓶，在其中生產平均微微克抗_ CD20/細胞/天。此與吾人所見之標的入以―【⑽之 副卜者明顯表現偏低。’然而，根據吾人對Desmond品系之 北方分析結果此係預期結果。如圖5可見者，源於選殖系 9B2tmRNA量明顯低於彼源於15^者，顯示此㈣系之 孩位置不如其在15C9中之轉錄活性高。因而，本實驗不僅 顯示本系統之可重複性-假使任何標示之以刪以位置皆 可經Molly標的一其亦證實此位置 絲π工α曰，& 罝〈在Desmond 15C9者係 轉錄活性最高者之北方分析資料。 由前述者吾人應了解儘 鮮俭5為說明目的吾人陳述了 一些本 發明之特定具體實施例，仍可倣 _ 不偏離本發明範蜂之不同 6正。據此，本發明並不為附屬之令請專利範圍所限。
-36 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(21GX 297公酱可

Claims (1)

  1. 5¾¾03778號專利申請案 —中文申請專利範圍替換本(93年11月)
    公告本 、申請專利範園 L .一種將所欲DNA插人哺乳類細胞基因財目標位置之方 法，其包括下列步驟： 、⑴以包含下列序列之第一種賀體（”標示者質體”）轉 感染或·轉型哺乳類細胞·· 田所（a)第一種DNA片段，其包含與哺乳類細胞基因 、且.、貝性之區域，當其嵌入哺乳類細胞基因組時可提 供獨特位置供同質性重組； 其中該DNA區域，其與哺乳動物細胞基因組為 共貝性，並非正常存在於哺乳類細胞基因組且不包含 與哺乳類細胞基因組DN A顯著同質或相同之序列； (b) 第二種d N A片段，其包含編碼第一種選擇性 標示者蛋白質之基因之至少一個表現序列； 及 (c) 第三種D N A片段，其包含編碼第二種選擇性 標示者蛋白質之區域，其係與第一種選擇性標示者蛋 白貝不同且}疋供選取經该標示者質體歲入之哺乳類細 胞基因組； (ii)藉篩選該第三種D N A片段編碼之選擇性標示者蛋 白資之表現，選取一個在其基因組中嵌入標示者質體 之細胞； (in)以包含至少一種欲插入該細胞基因組之D N A及 另包含下列序列之第二種質體（”標的質體”）轉感染或 Ϊ232239
    轉形該經選取之細胞； (:第四種DNA片段，其包含一段與標示者質體 ^同貝重組獨特位置一致或同質性足夠之區域，故此 °°域可經同質性重組與該標示者質體DNA重组；及 ()第五種DNA片&，其包含編碼不存在於標示 2貝體中的第一種選擇性標示者蛋白質之基因 表現序列； ^ I 其中活性僅在當第-種選擇性標示者蛋白質之至 乂個表現序列（其編碼包含於標的質體中之第一種選擇 性標示者蛋白質）與其餘表現序列（其編 者質體之第-種選擇性標示者蛋白質）一起表現時才= t ;與 (IV)藉篩選第一種選擇性標示者蛋白質之表現，而選 取包含嵌入異質性重組之獨特位置之目標位置之標的 質體之細胞。 2.根據申請專利範圍第丨項之方法，其中插入該細胞基因 組之至少一段D N A係編碼所欲之蛋白質。 3·根據申請專利範圍第2項之方法，其中該所欲蛋白質係 哺乳類蛋白質。 4·根據申請專利範圍第3項之方法，其中該哺乳類蛋白質 係免疫球蛋白。 5.根據申請專利範圍第丨項之方法，其中插入該細胞基因 1232239 έ88
    組之至少一段DNA係插入介於包含於標的質體中該第-種選擇性標示者之2個表現序列之間。 根據申明專利範圍第！項之方法，#中該第一種選擇性 示者a白貝係選自新黴素轉磷酸酶、組胺醇去氫酶、 激轉素轉磷酸酶、癌渗病毒胸#激酶n去胺酶與次 黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶所组成之羣。 7·根據申請專利範圍第6项之方法，其中標示者質體中編 碼第-種選擇性標示者蛋白質之基因之至少—個表現序 列包含新黴素轉磷酸酶基因之—部份，而標的質體中其 餘表現序列則包含該新黴素轉磷酸酶基因之其他部份。 8·根據申請專利範圍第丨項之方法，其進一步包括在嵌入 標的載體之前，決定標示者質體之該第三種DNa片段所 含之選擇性標示者之RNA量。 9.根據申請專利範圍第丨.項之方法，其中與該第一種選擇 性標示者蛋白質不同之該第二種選擇性標示者蛋白質係 選自新黴素轉磷酸酶、組胺醇去氫酶、激酶素轉磷酸 酶、疱疹病毒胸甞激酶、腺:y：去胺酶與次黃嘌呤高嘌呤 磷酸核糖轉移酶所組成之羣。 1〇·根據申請專利範圍第1項之方法，其中標示者或標的質 體進一步包含編碼第三種主要選擇性標示者蛋白質之基 因，其係與第一及第二種選擇性標示者蛋白質不同。 η·根據申請專利範圍第ίο項之方法，其中編碼第三主要選 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1232239 as Β8 C8 ________D8 六、申請專利範圍 擇性蛋白質之D Ν Α表現係允許該所欲插入細胞基因組中 之DNA放大。. 12·根據申請專利範圍第1 1項之方法，其中第三主要選擇性 標示者.蛋白質係二氫葉酸還原酶。 13. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該哺乳類細胞係 選自中國蒼鼠卵巢（CHO)細胞 '骨髓瘤細胞、小蒼鼠腎 細胞、COS細胞、NSO細胞、HeLa細胞與NIH 3T3細胞 所組成之羣。 14. 根據申請專利範圍第丨3項之方法，其中該細胞係ch〇 細胞。 15·根據申凊專利範圍第丨項之方法，其中該標示者質體進 步包含一個插在同質性區域中之稀有的限制内切酶序 列。 16 ·根據申請專利範圍第丨項之方法，其中該提供同質性重 組之獨特的DNA區域至少為300個核:y：酸。 17.根據申請專利範圍第16項之方法，其中該獨特的dna 區域之大小範圍為由約3〇〇核：y：酸至2〇 kb。 18·根據申請專利範圍第17項之方法，其中該獨特的匪 區域之大小範圍為2-10 kb。 19.根據申請專利範圍第之方法，其中該提供同質性重 、组之獨特的DNA區域為細菌DNA、昆蟲DNA、病毒dna 或合成DNA。 準，s) A4規格(摩297』 A8 B8 C8
    1232239 2〇·根據申請專利範圍第19項之方法，其中該獨特的ο· 區域不含任何功能性基因。 21· —種將所欲£^人插入哺乳類細.胞基因組中目標位置之 載體系·統，其至少包括下列： ⑴至少包含下列序列之第一種質體（”標示者質體 ”）： (a) 第一種D N A片段，其包含一段與哺乳類細胞 基因組異質性之DNA區域，且當其嵌入哺乳類細胞基 因組時可提供獨特位置供同質性重組； 中違D N A區域，其與p甫乳動物細胞基因組為 異質性，並非正常存在於哺乳類細胞基因組且不包含 與哺乳類細胞基因組D N A顯著同質或相同之序列； (b) 第二種D n A片段，其包含編碼第一種選擇性 標示者蛋白質之基因之至少一個表現序列一段編碼一 部份之第一種選擇性標示者蛋白質之區域；與 (c) 第二種D N A片段’其包含編碼第二種選擇性 標示者蛋白質之區域，其係與第一種選擇性標示者蛋 白質不同且提供選取經該標示者質體嵌入之哺乳類細 胞基因組；及 (ii)第二種質體（標的質體），其包含至少一種欲插入 該細胞基因組之D N A，且另包含下列序列： (a)第四種d N A片段，其包含一段與標示者質體 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） -5- 1232239 t、申請專利範固 之同質重組獨特位置一致或 从， 致次问質性足夠之DNA區域， = 區域可經同質性重組與該標示者質體職重 者⑽(中b)=種DNA片段，其包含編碼不存在於標示 肴貝體中的弟一種選搓攸濟 選释性‘不者蛋白質之基因之並餘 表現序列； ^ 〃中在私不者質體中編碼第一種選擇性標示者 白貝〈基因〈至少一個表現序列與在標的質體中編碼 第-種選擇性標示者蛋白質之其餘表現序列，共同編 碼一活性第一種選擇性標示者蛋白質。 22.根據申請專利範圍第21項之載體系統，其中插入該細胞 基因組之至少一段D N A係編碼所欲之蛋白質。 23·根據申請專利範圍第22項之載體系統，其中該所欲之蛋 白質係哺乳類蛋白質。. 24·根據申請專利範圍第2 3項之載體系統，其中該蛋白質 係免疫球蛋白。 25. 根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中插入該細胞 基因組之至少一段DNA係插入介於包含於標的質體中該 第一種選擇性標示者之2個表現序列之間。 26. 根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中該第一種選 擇性標示者蛋白質係選自新黴素轉磷酸酶、組胺醇去氫 酶、激黴素轉磷酸酶、疱疹病毒胸苷激酶、腺：y :去胺 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) Α4規格(210X 297公釐） 1232239 λ8 B8 C8 -------- -- D8 六、申請專利範圍 酶、魏胺酸合成酶、與次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶 所組成之羣。 27.根據申請專利範圍第2 6項之載體系統，其中標示者質體 中編碼·第一種選擇性標示者蛋白質之基因之至少一個表現 序列包含新黴素轉磷酸酶基因之一部份，而標的質體中其 餘表現序列則包含該新黴素轉磷酸酶基因之其他部份。 28·根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中與該第一種 選擇性標示者蛋白質不同之該第二種選擇性標示者蛋白 質係選自新黴素轉磷酸酶、組胺醇去氫酶、激酶素轉磷 酶、疱疹病毒胸甞激酶、腺爷去胺酶與次黃嘌呤鳥嘌 呤磷酸核糖轉移酶所組成之羣。 29·根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中標示者或標 的質體進一步包含編碼第三種主要選擇性標示者蛋白質 之基因’其係與第一及第二種選擇性標示者蛋白質不 同。 30.根據申請專利範圍第2 9項之載體系統，其中編碼第三主 要選擇性蛋白質之DNA表現係允許該所欲插入細胞基因 組中之DNA放大。 31·根據申請專利範圍第3 〇項之載體系統，其中第三主要選 擇性標示者蛋白質係二氫葉酸還原酶。 32·根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其提供所欲 DNA插入選自下列哺乳類細胞基因組之目標位置，其 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 - C8 D8 六、申請專利範圍 包括中國蒼鼠卵巢（CHO)細胞、骨髓瘤細胞、小蒼鼠腎 細胞、COS細胞、NSO細胞、HeLa細胞與NIH 3T3細 胞。 33. 根據申·請專利範圍第3 2項之載體系統，其中該哺乳類 細胞係CHO細胞。 34. 根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中該標示者質 體進一步包含插在同質性區域中之稀有的限制核酸内切 酶序列。 35. 根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中該包含於提 供同質性重組之標示者質體之載體系統之獨特的DNA (a) 區域至少為300個核甞酸。 36. 根據申請專利範圍第3 4項之載體系統，其中該獨特的 DNA區域大小範圍係由約300核甞酸至20 kb。 37. 根據申請專利範圍第3 5項之載體系統，其中該獨特的 DNA區域大小範圍為2至10 kb。 38. 根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中該提供同質 性重組之獨特的DN A區域為細菌DN A、昆蟲DN A、病毒 DNA或合成DNA。 39. 根據申請專利範圍第3 8項之載體系統，其中該獨特的 DNA區域不含任何功能基因。 40. 根據申請專利範圍第1項之方法，其中該標示者質體包含 「Desmond」質體之如下列所示之核嘗酸序列： _-8- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1232239 έ88 C8 D8 六、申請專利範圍 10 Z0 30 40 50 60 TTTCTAGACC TAGGGCGGCC AGCTAGTAGC TTTGCTTCTC AATTTCTTAT TTGCATAATG 70 80 90 100 110 12Cl AGAAAAAAAG GAAAAHAAT TTTAACACCA ATTCAGTAGT TGAUGAGCA AATGCCTTGd. 130 14.0 150 160 170 180: CAAAAAGGAT GCTTTAGAGA CAGTGTTCTC TGCACAGATA AGGACAAAa TTATTCAGAG： 190 Z00 210 Z20 230 240： GGAGTACCCA GAGCTGAGAC TCCTAAGCCA CTGAGTG^CA CAGCATCCAG GGAGAAATAT； Z50 260 Z70 Z80 290 300 GCTTGTCA了C ACCGAAGCCT GATTCCGTAC AGCCACACCC TGGTAASGGC CAATCTGCTC B10 320 330 340 350 360 ACACAGGATA GAGAGGGaG GAGCCAGGGC AGAGaTATA AGGTGAGGTA GGATCAGTTG 370 380 39Θ 400 410 420, CTCCTCACAT TTGCmTGA CATAGTTGTG TTGCGAGCTT* GGATAGCTTG CGGGGGGGAC: 430 4-40' 450 460 470 480 AGCTCAGGGC TGCGATTTCG CGCCA^ACTT GACGGCAATC CTAGCGTGAA 6GCTGGTAGG； 490 5的 510 520 530 540 i ATTTTATCCC CGCTGCCATC ATGGTTCGAC OrTTGAAC丁G CA丁CGTCGCC GTGTCCCAAA 550 560 S70 S80 590 600 ATATGGGGAT TGCCAACAAC GGAGACCJAC CCTGGCCTCC GCTCAGGAAC GAGTTCAAGT 610 6Z0 630 640 650 660 ACTTCCAAAG AATGACCAa ACCTCTTCAG TGGAAGCTAA ACAGAATCTG GTGATTATGG • « 67❼ 6S0 690 700 710 720 ： GTAGGAAAAC CTGGTTCTCC ATTCCTGAGA ACAATCGACC TTTAAAGGAC AGAATTAATA 730 v 740 750 760 770 780 ； TA6TTCTCAG TAGAGAACTC AAAGAACCAC CACGAGGACC TCATTTTCTT GCCAAAACnT ； 790 SO0 810 ZZZ S30 S40 : TGGATGA丁GC CTTAAGACTT ATTGAACAAC CGGAAHGGC AAGTAAAGTA GACA丁GGTTT 850 E60 870 820 890 900 GGATAGTCG6 AGGCAGTTCT GTTTACaGG AACCCATGAA TCAACCAGGC CACCTCAGAC 910 9Z0 930 940 950 960 TCTTTGTGAC AAGGATCATG CAGGAATTTG AAAGTGACAC GTTTTTCCCA GAAATTGATT 970 9S0 990 1000 1010 1020 TGGGGAAATA TAAACTTC丁C CCAGAATACC CAGGCG丁CCT CTCTGAGGTC CAGGAGGAAA 1 1030 1040 1050 1060 1070 1080 AAGGCATCAA GTATAACTTT GAAGTCTAdAGAAGAAAGA CTAACAGGAA GATGCTTTCA 1090 1100 1110 1120 1130 1U0 AGTTCTCTGC TCCCCTCCTA AAGCTATGCA TTTTTATAAG ACCATGGGAC TTTTGCTGGC 1150 1160 1170 1180 1190 12.00 TTTAGATCAG CCTCGACTGT GCCTTCTAGT TGCCAGCCAT CTGTTGTTTG CCCCTCCCCC U10 1220 1230 124Θ 1250 1260 GTGCCTTCCT TGACCCTGGA AGGTGCCACT CCCACTGTCC TTTCCTAATA AAATGAGGAA 1270 1280 1290 1300 1310 1320 AHGCATCGC ATTQTCTGAG TAGGTGTCAT TGXTTCTGG GGCCTGGCGT GWGCAGGAC -9- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 ·· 1 1330 1340 1350 1360 1370 1380 ACCAACGGGG AGCATTGGGA AGACAATAGC AC6CATGCT6 CCGATCCGCT GGGCTCTAT1G 1390 1400 1410 U20 143Θ 144^ GCTTCTGAGG CGGAAAGAAC CAGCTGGGGC TCGAA6CGGC CGccamrc GCTGGTCCTC 145C 1460 1470 1«0 1490 150P AGATGCGGGA TGGCGTGGGA CGCGCCGGGG AGCGTCACAC TGAGCTTTTC CGCCAGACGjC 1510 1520 1530 15« 1550 156P CACTGCTGCC AGGCCCTGAT GTGCCCGGCT TCIGACCATG CGCTCGCCTT CGGTTGCAClT 1570 1580 1590 1600 1610 1620 ACGCGTACTG TGAGCCAGAG TTGCCCGGCG CTCTCCGGa GCGGTAGTTC AGGCAGTTCA 1630 1640 1650 •1660 1670 168b ATCAACTGTT TACCTTCTGG AGCGAaiCC AGAGGCACTT aCCGCTTGC CAGCGGCTTA 1690 1700 1710 1720 1730 1740 CCATCCAGCG CCACCATCCA GTGCAGGAGC TCGTTATCGC TATGACGGU CAGGTATTCG , 1750 1760 1770 1780 1790 UW CTGCTCACTT CGATCGTTTG CCCGGATAAA CGGAACTCGA AAAACTGCTG CT6GTGTTTT 1810 1820 1830 1840 1850 1860 GCTTCCGTCA GCGCTCCATC CGGCGTGCGG TCGGCAAAGA CCAGACCCTT CATACAGAAt 1870 X8S0 1890 1900 1910 1920 TGGCGATCGT TCGGCGTATC GCCAAAATCA CCGCCGTAAG CCCACCACCG CTTGCCGTTt 1930 194.0 1950 I960 1970 198b TCATCATATT TAATCAGCGA CTGATCCACC CAGTCCCAGA CGAAGCCGCC CTGTAAACGf； :1990 Z000 2010 2020 2050 2州 GGATACTGAC GAAACGCCTG CCAGTATTTA GCGAfACCGC CAAGACTGTT ACCCATCGCG Z050 Z060 2070 Z080 2090 2100 TGGGCGTATT CGCAAAGGAT CAGCGGGCGC GTCTCTCaG GTAGCGAAAC CCATTTTTTG 2110 2120 2130 2140 2150 2160 ATGGACCATT TCGGCACAGC CGGGAAGGGC TGGTCTTCAT CCACGCGCGC GTACATCGG6 2170 2180 2190 2200 2210 2220 CAAATAA丁AT CGG丁GGCCG丁 GGTGTCGGC了 CCGCCGCCTT CATACTGaC CGGGCGGGAA 2230 2240 2250 2Ζ6Θ Z270 2280 GGATCGACAG ATTTGATCCA GCGATACAGC GCGTCGTGAT TAGCGCCCTC GCCTGATTCA ZZ90 2300 Z310 Z320 233Θ 2340 TTCCCCAGCG ACCAGATGAT CACACTCGGG TGATTACGAT CGCGCIGCAC CATTCGCGTT Z350 2360 2370 2380 2390 2400 ACGCGTTCGC TCATCGCCGG TAGCCAGCGC GGATCATCCG TCAGACGATT CATTGGCACC 2410 2420 2430 2440 24S0 2460 ATGCCGTGGC TTTCAATATT GGCTTCATCC ACCACATACA GGCCGTAGCG GTCGCACAGC 2470 2480 2490 ZSM 2510 2S20 CTGTACCACA GCGGATGGTT CGGATAATGC GAACAGCGCA CGGCGTTAAA GTrCTTCTGC 2530 2540 2550 Z560 Z570 25S0 TTCATCAGCA GGATATCCTG CACCATCGTC TGCTCATCCA TGACCTGACC ATGCAGAGGA Z590 2600 2610 2620 2630 ZG40 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 TCATGCTCGT GACGGTTAAC GCCTCGAATC 2650 Z660 2670 CamTCAA TCCGCACCTC GCGGAAACCG Z710 2720 2730 CCGTCGGCGG TGTGCAGTTC AACCACCGCA 2770 2780 2790 AGTTTCGGGT TTTCGACGTT CAGACGTAGT Ζ83β 2840 2850 TCGATAATTT CACCGCCGAA AGGCCCGGTG 2S90 2900 2910 AAAGAAACTG TTACCCGTAG GTAGTCACGC 2950 Z960 2970 AGTACAGCGC GGCTGAAATC ATCATTAAAG 3010 3020 3030 GTAGTCGGTT TATGCAGCAA CGAGACGTCA * 3070 30S0 TGATCTTCCA GATAACTGCC GTCACTCCAG 3130 314« 3150 CCGGCGCGTA AAAATGCGCT CAGGTCAAAT 3190 3200 3210 CCGACCCAGC GCCCGTTGCA CCACACATGA •3Z50 3Z60 3270 CGCGTCTGGC CTTCCTGTAG CCAGCTTTCA 3310 3320 3330 GTCGCATTCT 'CCGTCGGAAC AAACGGCGGA 3370 3380 3390 TAGATGGGCG CATCGTAACC GTGCATCTGC 3430 3440 345θ TCAGGAAGAT CGCACTCCAG CCAGCTTTCC BA90 B500 3510 AAGCGCCATT CGCCATTCAG GCTGCGCAAC 3550 . 3560 3570 TCGCTATTAC GCCAGCTGGC GAAAGGG6GA 3610 3620 3630 CCAGGGTTTT CCCAGTCACG ACGTTGTAAA 3670 3680 B690 AGCAAACGAC CTTCCGTTGT 6CAGCCAGCG 3730 3740 B750 GAACAAACTA AACCAGAACA AATTATACCG ..3790 38抑 3810 CCTAACAm CAGCGCCTCC ACCACCACCA 385C 3860 3870 CCACCAATGC CCACGGAACC TCAACCCGCT AGCAACCGCT TGCCGTTCAC CAGCAGCAGA Z6SC Z690 270d AaTCGCAGG CTTCTGCTTC AATacCGTq 27« 2750 2760* CGATACAGAT TCGGGATTTC GGCGCTCCAC Z800 Z810 zszej CTGACGCGAT CGGCATAACC ACCACGCTCA' 2S60 2870 ZS80 CCGCTGGCGA CCTGCGTTTC ACCCTGCCAt 2920 2930 2940 AACTCCCCGC ACATCTGAAC TTCACCCTCC 29S0 Z990 B000 CGAGTGGCAA CA丁GGAAATC GCTCATTTG丁 3^40 3050 396^1 CGGAAAATGC CGCTCATCCG CCACATATCG 31M 311® 312¾ CGCAGCACCA TCACCGCGAG GCGGTTTTCT 3160 3170 3180 TCAGACGGCA AACGACTGTC CTGGCCGTAA 3Z20 .3Z30 324Q AACGCCGAGT TAACGCCATC ΑΑΛΑΑΤΑΑπ 3Z80 BZ90 3300 TCAACATTAA ATGTGAGCCA GTAAaACCC 3340 3350 3360 TTGACCGTAA TGGGATAGGT CACGTTGGTG 3400 3410 3420 CACTTTGtAGG GGACGACGAC AGTATCGGCC 3 斗 3470 34SQ GGCACCGCTT CTGGTGCCGG AAACCAGGCA BS20 3530 B540 TGTTGGGAAC GGCGATCGGT GCGGGCCTCT 3580 3590 3600 TGTGCTGCAA GGCGATTAAG TTGGGTAACG 3640 3650 3660 ACGACTTAAT CCGTCGAGGG GCTGCCTCGA 37^0 3710 37Z0 GCGCCTGCGC CGGTGCCCAC AATCGTGCGC 37G0 3770 B7S0 GCGGCACCGC CGCCACCACC TTCTCCCGTG B8Z0 3830 3840 CCACCATCGA TCTCTGAATT GCCGCCCGCT 3S50 3830 3900 GCACCTTTAG ACGACAGACA ACAATTGTTG -11 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(21〇x 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 々、申請專利範園 3910 3920 3930 3940 3950 3960 GAAGCTATTA GAAACGAAAA AAATCGCACT CCTCTCACAC CCCCTCTOT AAGCTACCT(： 3970 3989 3990 4000 4010 402^ AAACCAAAAA CGGCGCCCGA AACQGTAa ATAGTTGAGG TGCCGACTGT GTTGCCTAAA 4-030 4040 4050 4060 4070 408^ CAGAaTTTG ACCCTAAACC GCCGTCTCa TCACCGCCAC aCCTCCGCC TCCGCCTCCd 4030 4100 4110 4120 4130 4140 CCGCCAGCCC CGCCTGCGCC TCCACCGATG GTAGATTTAT aTCAGCTCC ACaCCGCCG 4150 4160 4170 4180 4190 Λ2Θ0 CCAUAGTAG ATTTGCCGTC TGAAATGUA CCACCGCC丁G CACCATCGCT TTCTAACGTt 4210 4Z20 ^230 4240 4250 4Z6^ TTGTCTGAAT TAAAA丁CGGG CACAGTTAGA HGAAACC.CG CCCAAAAACG CCCGCAATd 4-270 4280 4290 4300 4310 432? GAAATAATTC CAAAAAGCTC AACTAaAAT TTGATCGCGG ACGTCTTACC CGACACAATJ I 4330 4340 4350 4360 4370 4380 AATAGGCGTC GTGTG6CTAT GGCAAAATCG TCTTCGGAAG CAACTTCTAA CGACCAGGcf 4390 4-400 4410 4420 4430 444^ T6GGACGACG ACGATAATCG GCCTAATAAA GCTAACACGC CCGATGTTAA ATATCTCCAA 4450 4460 4470 4480 4490 450^ GCTACTAGTG G丁ACCTTAAT TAAGGGGCCG AGAATGGGCG GAACTGGGCG GAGTTAGGGfc ： ·· . 4510 4-520 4530 4540 4550 456p CGGGATGGGC GGAGHAGGG GCGGGACTAT GGUGCTGAC 丁AAHGAGAT GCATGCTITp 4570 4580 4590 4600 4610 462^ CATACTTCTG CCTGCTGGGG AGCCTGGGGA CTTTCCACAC CTGGTTGCTG ACTAATTGAG 4630 4640 4-650 ' *4660 i670 4680 ATGaTGCTT TGCATACTTC TGCCTGCTCG GGAGCCTGGG GACTTTCCAC ACCCTAACTG 4690 4700 4710 4720 4730 474J0 AaCACATTC CACAGAATTA ATTCCCCTAG TTATTAATAG TAATCAATTA CGGGGTCAltT 4750 斗 760 4770 4780 4790 48010 AGTTCATAGC CCATATATGC ACTTCCGCGT TACATAACTT ACGGTAAATG GCCCGCCTqG 4810 48Z0 4830 4840 4SS0 · 4S60 CTGACCGCCC AACGACCCCC GCCCATT6AC GTCAATAATG ACGTATGTTC CCATACTAAC 4870 4880 4S90 4900 4910 4920 GCCAATAGGG ACTTTCCATT GACGTCAATG GCTGGAGTAT TTACGCTAAA CTGCCCACTT 4930 4940 4950 4960 4970 4950 GGCAGTACAT CAAGTGTATC ATATGCCAAG TACGCCCCCT ATTGACGTCA ATGACGGTAA .A990 5000 5010 5020 5030 5W0 ATGGCCCGCC TGGCATTATG CCCAGTACAT GACCTTATGG GACTTTCCTA mGGCACTA 5050 5060 ' 5070 5080 5090 5100 CATCTACGTA TTAGTCATCG CTATTACCAT GGTGATGCGG TTTTGGCAGT ACATCAATGG 5110 5120 5130 5140 5150 5160 GCGTGGATAG CGGTTTGACT CACGGGGATT TCCAAGTCTC CACCCCAnG ACGTCAAT(；G .5170 5180 5190 520B 5210 SlU GAGTTTGTTT TGAAGCTTGC CCGGCCAGCT TTATTTAACG TGTTTACGTC GAGTCAATTG -12- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) I232239 A8 B8
    5230 5Z40 5250 5260 5270 5280 TACACTAACG ACACTGATCA AAGAAATAa AAACCCCATA ATATTTTGAA CGACCTCGAA 5290 5300 5310 5329 5330 534¾ CCTTTATTAC AAAACAAAAC ACAAACGAAT ATCGAaAAG CTAGATTGCT GCTACAAGAt 5350 5360 5370 5380 5390 5400 HGGCAAGTT HGTGGCGn GAGCGAAAAT CCAHAGATA GTCCAGCCAT CGGTTCGGAA: 5410 54Z0 5430 54S0 546€( AAACAACCCT TGTTTGAAAC TAATCGAAAC CTATTITACA AATCTAUGA GGATmATA 5470 54S0 5490 S500 5510 5520 TTTAAATTCA GATATAAAGA CGCTGAAAAT CATTTGATTT TCGCTCTAAC ATACCACCCT： 5530 5540 5550 5560 5570 558^； AAAGATTATA AATTTAAT6A ATTATTAAAA TACATaGCA ACTATATATT GATAGACATT： 5590 5600 5610 5620 5630 5640； TCCAGTTTGT GATA7TAGTT TGTGCGTCTC ATTACAATGG CTGTTATTTT TAACAACAAA； . 5650 5660 5670 5680 5690 5700； CAACTGCTCG CAGACAATAG TATAGAAAAG GGAGCTGAAC TGTTTTTGTT TAACGGTTCGi 5710 5720 5730 S746 5750 5760j TACAACATTT TGGAAACTTA TCTTAATCCG CTCCTGCTAA AAAATGGTCT AATTGAACTA! I 5770 5780 5790 5800 5810 5820： GAAGAAGCTG CGTACTATGC CGGCAACATA TTGTAaAAA CCGACGATCC CAAATTCATT; S8B0 S840 5850 5860 5870 5880 GATTATATAA ΑΊΓΤΤΑΑΤΑΑΤ TAAAGCAAa CACTCCGAAG AACTACCAGA AAATAGCACT 5890 5900 5910 5920 5930 5940： GTTGTAAATT ACAGAAAAAC TATGCGCAGC GGTACTATAC ACCCCATTAA AAAAGACATA: V 5950 5960 5970 5980 5990 6000： TATATTTATG ACAACAAAAA ATTTACTCTA TACGATAGAT AaTATATGG ATACGATAAT； 6010 60Z0 6030 6040 6050 6060; aaCTATCTTA atttttatga GGAGAAAAAT gaaaaagaga aggaatacga agaagaagac 6070 6080 6090 GACAAGGCGT CTACTTTAT<； TGAAAATAAA 6130 6140 6150 TTTGAAAATG ATTTTAAATA TTACCTCA6C 6190 6200 6210 AATACTACAA ATGTTCTTGT T6CGTTTGGT 6250 6Z60 6270 TTTATAATTG TTTTATTATT CAATAATTAC 6310 6320 6BB® CAAACGGACA GAGCmTCG AGGAGAGTTG 6370 6380 6390 TTTTCACCGA AGTTCATGCC AGTCCAGCGT 6430 644-0 6450 HGCGGTCGC GACTUAGAT CCCTTTCm &490 6500 6510 6100 6110 6120 AHATATTGT CGCAAATHU CTCTGAA丁CA 6160 6170 6180 GAHATAACT ACGCGTTTTC AAHATAGA丁 * 6220 6230 624-0 TTGTATCfTT AATAAAAiUC AAATTTGACA 6Z80 6Z90 6300i AAATAGGATT GAGACCCTTG CAGTTGCCAG： 6340 6350 636C TTGATTCATT GTTTGCCTCC CTGCTGCG<TT 6490 6410 6420 TTTTGCAGCA GAAAAGCCGC CGACmGGT 6460 6470 6480. TTACCGCCAA CGCGCAATAT GCCTTGCGAG' 6520 6530 6540 -13- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐)
    裝
    七、申請專利範園 CTCGCAAAAT CGGCGAAATT CCATACCTGT TCACCGACGA CGGCGCTGAC GCGATaAAC 6550 6560 6570 65^0 6590 6600 ACGCGCTGAT ACATATCCAG CCATGCACAC TGATACTOT CACTCCAaT GTCGGTGTA(f e : 6610 6620 6630 6640 6650 6660 ATTGAGTGCA GCCCGGCTAA CGTATCCACG CCCTATTCCG TGATGATAAT CGGCTGATGC 6670 6680 6690 6700 6710 6720 AGTTTCTCCT GCCAGGCCAG AAGTTCTTTT TCCAGTACCT TCTCTGCCCT TTCCAAATCC 6730 6740 6750 6760 6770 6780 CCGCTTTGGA CATACCATCC GTAATAACGG TTCAGGCACA 6CACATCAAA GAGATCGCTG 6790 6800 6810 6S20 6830 6840 ATGGTA丁CGG TGTGAGCGTC GCAGAACAU ACAUGACGC AGGTGATCGG ACGCCTCGG< 6850 6860 6S70 6880 6890 69 糾 TCGAGTTTAC GCGTTGCTTC CGCCACTGGC GCGAAATATT CCCGTGCACC TTGCGGACGG 6910 6920 69B0 694-0 6950 6960 GTATCCGGTT CGTTGGCAAT ACTCCACATC ACCACGCTTG GGTGU Π IT GTCACCCGCT # 6970 6980 699Θ 7000 7010 70Z€| ATCA6CTCTT TAATCGCCTG TAAGTGCGCT TGCTGAGTTT CCCCGTTGAC TCCCTCTTCG 7030 7040 7050 7060 7070 7080 CTGTACAGTT CTTTCGGCTT GTTGCCCGCT TCGAAACCAA TGCCTAAAGA GAGGTTAAAG 7090 7100 7110 7120 7130 7140 CCGACAGCAG CAGTTTCATC AATCACCACG ATGCCATGTT CATCTGCCCA GTCGAGCATC 7150 7160 7170 71S0 7190 7Z00 iCTTCAGCGT AAGGGTAATG CGAGGTACGG TAGGACTTGG CCCCAATCCA GTCCATTAAT 7210 7220 7230 ,7240 7250 726θ GCG丁GGTCGT tCACCATCAG CACGTTATCG AATCCTTTGC CACGCAAGTC CGCATCTTCA. 7270 7280 7290 7300. 7310 7320 TGACGACCAA AGCCACTAAA GTACAACGGT TTGTGGTTAA TCAGCAACTG TTCGCCCTTC 7330 73神 7350 7360 7370 7350i ACTGCCACTG ACCGGATGCC GACGCGAAGC GGGTAGATAT CACACTCTCT CTGGCTTTTG' 7390 7400 7410 74Z0 7430 7440 GCTGTGACGC ACAGTTCATA GAGATAACCT TCACCC6GTT GCCAGAGGTG CGGATTCACC'· 7450 7460 7470 7480 7490 7500 ACTTGCAAAG TCCCGCTAGT GCCTTGTCCA CTTGCAACCA CCTGTTGATC CGCATCACGC 7510 7520 7530 7540 7550 7S60 AGTTCAACGC TGACATCACC ATTGGCCACC ACCTGCCAGT CAAaGACGC GTGGIfTACAG t 7570 7580 7590 7600 7610 7620- TCTTGCGCGA CATGCCTCAC CACGGTGATA TCGTCCACCC 4GGT(HTC(；(； CGTGGTGTAG· ?630 7640 7650 7660 7670 7680 AGCATTACGC TGCGATGGAT TCCGGCATAG TTAAAGAAAT CATGGAAGTA AGACTGCTTT -7690 7700 7710 7720 7730 7740 TTCTTGCCGT TTTCGTCGGT AATCACCATT CCCGGCGGGA TAGTCTGCCA GTTCAGTTCG： 7750 7760 · 7770 7780 7790 7800· TTGTTCACAC AAACGGTGAT ACCCCTCGAC GGATTAAAGA CTTCAAGCGC TCAACTATGA- -14- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) 申請專利範園 7810 7820 7830 7M0 7850 7860; AGAAGTGHC gtcttcgtcc cagtaagcta tgtctccaga atctagccat CCATCCrTGT! 7870 CAATCAAG6C 7S80 7890 7900 7910 79Z0j GTT6GTCGCT TCCGGATTGT TTACATAACC GGACATAATC ATAGCTCCTC! 7930 7940 79S0 7960 7970 7980： 丁GACACATAA TTCGCCTCTC TGATTAACGC CCAGCGTTTT CCCGGTATCC AGATCCACAA: 7990 80ΘΘ 8010 8020 80B0 S040: CCTTCGCTTC AAAAAATGGA ACAACTTTAC CGACCGCCCC CGCTTTATCA TCCCCCTCGG. 3050 8Θ60 8070 8080 5090 SlW (JTGTAATCAG AATAGCTGAT GTAGTCTCAG TGAGCCCATA TCCTHTTCGT 人TCCCTGGAA 8110 8120 E130 8140 8150 8160: GATCGAAGCG TTTTGCAACC CCTTCCCCGA CTTCTTTCGA AAGAGGTGCG CCCCCAGAAG； 8170 8180 Z192 820Θ 8Z10 8220: CAATTTCGTG TAAATTAGAT AAATCGTATT TGTCAATCAG AGTGCTTTTG GCGAAGAATG- 3Z30 8240 SZ56 8260 8270 S280: AAAATAGGGT TGGTACTAGC AACGCAC7TT GAArTTTGTA ATCCTGAAGG GATCCTAAAA . SZ90 SB0O 8310 8320 8330 834θ| ACACCTCTTC TTCAAATCTA TACATTAAGA CGACTCGAAA TCCACATATC AAATATCCGA: 8350 8360 8370 83S0 . 8390 8400； G丁GTAG丁AAA CATTCCAAAA CCGTGATGGA ATGGAACAAC ACTTAA$ATC GCAGTATCCG: 84ie 8420 8430 S440 8450 8460； GAATGAJTTG ATTGCCAAAA ATAGGATCTC TGGCATCCGA GAATCTGACC CAGdCACTTCi S470 84S0 8490 8500 8510 85Z0 tatgcgg'aag ggccacaccc ttagctaacc cagtagatcc AGAGGAATTG TTTTCTCACG 8530 8540 8550 S560 8570 S5S0 ATCAAAGGAC TCTGGTACAA AATCGTATTC AUAAAACCG GGAGGTAGAT GAGATGTCiAC：· 8590 E600 S610 8620 86B0 3640； GAACGTGTAC ATCGACTGAA ATCCCTGGTA ATCCGTTTTA GAATCCATGA ΤΑΑΤΑΑΤΠΠΓ 8650 B660 S670 8680 S690 8700! CTGGATTATT GGTAATTTTT TTTGCACGTT CAAAATTT7T TGCAACCCCT TTTTGGAAAC ： 8710 87Z0 87B0 8740 8750 8760 AAACACTACG GTAGGCTGCG AAATCTKAT ACTGHGAGC AATTCACGTT CATTATAAAT 8770 8780 8790 . SS00 8S10 8820 GTCGTTCGCG «CGCAACTG CAACTCCGAT AAATAACGCG CCCAACACCG GCATAAAGAA S8B0 SS40 8850 S860 E870 8880 . TTGAAGAGAG TTTTCACTGC ATACGACGAT TCTGTGATTT GTATTCAGCC CATATCGTTT: 8890 £900 8910 8920 8930 8940 ; CATAGCTTC丁 GCCAACCGAA CGGACATTTC GAAGTATTCC GCGTACGTGA TGTTCACCTC : 8950 $960 8970 S9S0 8990 9000 GATATG丁GCA TOTG丁AAAAd GAATTGTTCC AGGAACCAGd GCGTATCTCT TCATAGCCTT ， Λ 9010 9020 96BG 994*0 9050 9060 ATGCAGTTGC TCTCCAGCGG TTCCATCCTC TAGCTTTGCT TCTCAATTTC nATTTGCA丁 9070 908Θ 9990 9100 9110 9120 . AATGAGAAAA AAAGGAAAAT TAATTTTAAC ACCAATTCAG TAGTTGAnG AGCAAATGCG · 1232239 C8 D8 六、申請專利範園 • · 9130 9140 9150 9160 9170 9180: TTGCCAAAAA GGATGCTTTA GAGACAGTGT TCTCTGCACA GATAAGGAa AACATTATTC · 9190 9Z00 9210 9Z20 9230 9240! AGAGGGAGTA CCCAGAGCTG AGACTCCTAA GCCAGTGAGT GGCACAGCAT CCAGGGAGAA 9250 9260 9270 9ZS0 9290 9300 ATATGCTTGT aTCACCGAA GCCTGATTCC GTA6AGCCAC ACCCTCGTAA GGGCCAATCT 9310 9320 9330 93^0 9B50 93S9 ; GCTCACACAG CATAGAGAGG GCAGGAGCCA G6GCAGAGCA TATAAGCTGA GCTAGGATa · 9370 9380 9390 9400 9410 9420 ' GTTGCTCC丁C ACATTTGCTT CTGACA丁AGT TGTGTTGGGA GCTTUGA丁CG A丁CCACCATG : 9430 9440 9450 9460 9470 9480 : GGCTTCAATA CCCTGATTGA CTGGAACAGC TGTAGCCCT6 AACAGaGCG TGCGCTGCTG ； 9490 9500 9510 9520 9530 9540 ! ACGCGTCCGG CGATTTCCGC CTCTGACAGT ATTACCCGGA CGiTTCAGCGA TATTTTGGAT | 丨· 9550 9560 9570 95S0 9590 9600 : AATGTAAAAA CGCGCGCTGA CGATGCCCTG CCTGAATACA GCGCTAAATT TGATAAAACA ； 9610 9620 9630 9640 9650 9660 ； GAAGTGACAG CGCTACGCGT CACCCCTGAA GAGATCGCCG CCGCCGGCGC GCGTCTGAGC j 9670 9680 9690 9700 9710 9Γ2Θ 1 GACGAATTAA AACAGGCGAT GACCGCTGCC GTCAAAAATA TTGAAACCTT CCATTCCGCG . 9730 9740 9750 9760 9770 9780 CAGACGCTAC CGCCTGTAGA TGTGGAAACC CAGCCAGGCG 了GCGTTCCCA GCAGCTTACG 9790 9800 9810 98Z0 9S30 9840 丨 CGTCCCCTCT CCTCTGTCGG TCTGTATATT CCCGGCGGCT CGGCTCCGCT CTTCTCAACG ； 9S50 9860 9870 9880 9^90 9900 . CTGCTGATGC TGGCGACGCC GGCGCGCATT 、· GCGGGATGCC AGAAGGTGCT TCTGTGCTCG 9910 9920 9930 9940 9950 9960 CCCCCGCCCA TCCCTGATGA AA 丁 CC 丁 CTAT GCGGCGCAAC TGT6TGGCG丁 CCACGAAATC 9970 9980 9990 19000 10010 10020 TTTAACGTCG GCGGCGCGCA GGCGATTGCC GCTCTGGCCT TCGGCAGCGA GTCCGTACCG 10030 10040 10050 10060 10070 10080 AAACTGGATA AAATTTTTGG CCCCGGCAAC GCCTTTGTAA CCGAAGCCAA ACGTCAGCTC : 10090 10100 10110 10120 10130 10148 · AGCCAGCGTC TCGACGGCGC GGCTATCGAT ATGCCAGCqG GGCCGTCTGA AGTACTGGTG ' 10150 10160 10170r 10180 18190 10200 ATCGCAGACA GCGGCGCAAC ACCGGATTTC GTCGCTTCTG ACCTGCTCTC CaGGCTGAG 10210 10220 10ZB0 10240 10250 10Z60 CACGGCCCCG ATTCCCAGGT GATCCTGCTG ACGCCTGATG CTGACA7TGC CCGCAAGCTG 10270 10280 10Z9O 10300 10310 103Z0. GCGGAGGCGG TAGAACGTCA ACTGGCGGAA CTGCCGCGCG CGGACACCGC CCGGCAGGCC 10330 10340 10350 10360 10370 10380 CTGAGCGCCA GTCGTCTGAT TGTGACCAAA GAHTAGCGC AGTGCGTCGC CATCTCTAAT 10390 10400 10410 10420 104-30 10440 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 C8 D8 六、申請專利範園 » · CASTATGGGC CCGAACACTT AATCATCCAG ACGCGCAATG CGCGCGATTT GGTGGATGCG； 10450 104G0 1^470 19480 19490 10500! ATTACCAGCG CAGCCTCGGT ATTTCTCGGC GACTGGTCGC CGGAATCCGC CCGTGAnAC； 10510 10520 10530 10540 10550 10560! GCTTCCGGAA CCAACCA了GT TTTACCGACC 丁 ATGGCTATA CTGCTACCTG TTCaGCCTT 10570 10530 10590 10600 10610 1062G； GGGUAGCGG ATTTCCAGAA ACGGA丁GACC GTTCAGGAAC TGTCGAAAGC CGGCTTTTCC. 10630 10640 1065Θ 1Θ660 10670 10680* GCTCTGGCAT CAACCATTGA AACAnGGCG GCGGCAGAAC GTCTGACCGC CCATAAAAAT 10690 10700 10710 10720 10730 10740j GCCCTGACCC TGCGCGTAAA CGCCCTCAAG GAGCAAGCAT GAGCACTGAA AACACTCTCA 10750 10760 10770 10780 10790 10800； GCGTCGCTGA CTTAGCCCGT GAAAATCTCC GCAACCTGGA GATCCAGACA TGGATAAGAT: 10810 108Z0 10S30 10S40 108S0 10860 ,· ACAmA 丁 GA GTTTGGACAA ACCACAACTA GAATGCAGTG AAAAAAATGC mATTTCK ； 10S70 1OSS0 10890 10900 10910 10920 ： 人AATTTGTGA TGCTAHGCT TTAITTG丁AA CCATTATAAG CTGCAATAAA CAACTTAACA 10930 10940 10950 10960 10970 10980 . ACAACAATTG CATTCATTTT ATCTTTCAGG TTCAGCGGGA GGTGTGGGAG biiJ 11 lAAA 10990 11000 11010 11020 11030 11040 ： GCAAGTAAAA CCTCTACAAA. TGTGGTATGG CTGATTATGA TCTCTAGGGC CGGCCCTCGA · 11*050 11060 11070 11080 11090 11100 ： CGGCGCGCCT % GGCCGCTACT AACTCTC丁CC TCCCTCCTTT TTCCTGCAGG CTCAAGGCGC *: nil® 11120 11130 11140 11150 11160 ’· GCA丁GCCCGA OGGCGAGGAT CTCGTCGTGA CCCATGGCGA TGCCTGCTTG CCGAA丁ATCA 11170 11180 11190 11200 11210 11ZZ0 '； 丁GG丁GGAAAA TGGCCCCTTT TCTGGATTCA TCGACTGTGG CCGGCTCGGT GTGGCGGACC · 11230 11240 11250 11260 11270 11Z80 | GCTATCAGGA CATAGCGm GCTACCCGTG ATATTGCTa AGAGCTTGCC GGCGAATGGG ： 1 11290 11300 11310 11320 11330 11340 ΐ CTGACCGCTT CCTCGTGCTT TACGGTATCG CCGCTCCCGA TTCGCAGCGC ATCGCCTTCT 11350 11360 11370 11B80 11390 11柳 ATCGCCTTCT TGACGAGTTC TTCTGAGCGG GACTCTGGGG TTCGAAATGA CCGACCAAGC 11410 11420 11430 11440 114S0 11460 GACGCCCAAC CTCCCATCAC GAGATTTCGA TTCCACCGCC GCCTTCTATG AAAGGTTGGG . 11470 11480 11490 11500 11510 115Z0 CTTCGGAATC GTTTTCCGGG ACGCCGGCTG GATGATCCTC CAGCGCGGGG ATCTaTGCT · 11530 11540 11550 11560 11570 11580 GGA GTTCTTC GCCCACCCCA ACTTGTTTAT TGCAGCTTAT AATGGTTACA AATAAAGCAA ： 11590 11600 11610 11620 116B0 11640 TAGCATCACA AATTTCACAA ATAAAGCA7T mTTCACTG CATTCTAGTT GTGGTTTGTC 11650 11660 11670 11680 11690 117抑 CAAACTCATC AATCTATCTT ATCATGTCTG GATCCCGGCC GCTCTCTCTC TAGCCCTAGG · -17- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1232239 C8 D8 六、申請專利範園 :11710 11720 11730 11740 11750 11760 ： TCTAGACTTG GCAGAACATA TCCATCCCCT CCGCCATCTC aGCAGCCCC ACGCGGCGCA ：； 11770 11780 11790 11800 11810 11820 ； TCTCGGGCAG CCTTGGGTCC TGCCCACC6G TGCGCATGAT CCTCCTCCTG TCGTTGAGGA 11830 11S40 1X8S0 11S60 11870 11S80 CCCGGCTAGG CTGGCGGGCT TGCCTTACTG GTTAGCAGAA 丁GAATCACCG ATACGCGAGC . 11890 11900 11910 11920 11930 11940 · GAACGTGAAC CGACTGCTGC TGCAAAACGT C丁GCGACCTG AGCAACAACA TGAATGGTCT 11950 11960 11970 11980 11990 12000 : 丁CGCTTTCCG TGTTTCG丁 AA AGTCTGGAAA CGCGGAACTC AGCGCCCTGC ACCATTATCT 12010 12020 12030 12040 12050 12060 : TCCCGATCTG CATCGCAGGA TGCTGCTGGC TACCCTGTGG AACACCTACA TCTGTAHAA 1Z070 120S0 12090 12100 1Z110 12120 · CGAAGCGCTG GCATTGACCC TGlAGTGATTT ttctctggtc CCGCCGCATC aTACCGCCA · 12130 1Z140 12150 12160 1Z170 1Z180 ： GTTGTTTACC CTCACAACCT TCCAGTAACC CCGCA 丁 GTTC A丁CA丁CAGTA ACCCGTATCG ： 12190 1Z200 1Z210 1ZZ20 1Z2B0 12240 TGAGCATCCT CTCTCGTTTC ATCGCTATCA TTAccccaT GAACAGAAA丁 CCCCCTTACA 12250 12260 12270 12250 1ZZ90 123^0 CGGAGGCATC AGTGACCAAA CACGAAAAAA CCGCCCTTAA CATGGCCCGC TTTATCAGAA ： 12310 1ZBZ0 12330 1234-0 12350 12360 ； GCCAGACATT AACGCTTCTG GAGAAACTCA ACGAGCTGGA CGCGGATGAA CAGGCAGACA ； 12370 123E0 12390 12400 12410 1242Θ 丁CTGTGAAyC GCTTCACGAC CACGCTGATG AGOTTACCG CAGCTGCCTC GCGCGTTTCG ； 12430 v 12440 12450 12460 12470 12480 GTGATGACGG TGAAAACCTC TGACACATGC AGCTCCCGGA GACGGTCACA GCTTCTCTGT : 12490 12500 12510· 12520 12530 12540 AAGCGGATGC CGGGAGCAGA CAAGCCCGTC AGGGCGCGTC AGCGGGTGTT GGCGGCTGTC 1Z550 12560 12570 125X0 12590 12600 ： GGGGCGCACC CATGACCCAG TCACGTAGCG ATAGCGGAGT GTATACTGGC TTAACTATGC 12610 12620 12630 126Λ0 12650 12660 GGCATCAGAG CAGATTGTAC TGAGAGTGCA CCATATGCGG TGTGAAATAC CGCACAGATG 1Z670 12680 X2690 1Ζ7Θ0 12710 1Z720 CGTAAGGAGA AAATACCGCA TCAGGCGCTC TTCCGCTTCC TCGCTCACTG ACTCGCTGCG 12730 1Ζ74Θ 12750 12760 12770 12750 · CTCGGTCGTT CGGCTGCGGC GAGCGGTATC AGCTCACTCA > AAGGCGGTAA TACGCTTATC ; 12790 1ZS00 1Z810 12820 12830 12840 CACAGAATCA GGGGATAACG CACGAAAGAA CATGTGAGCA AAAGGCCAGC AAAAGGCCAG 12850 12860 12870 12S80 1Z890 12900 GAACCCTAAA AAGGCCGCGT TGCTGGCGTT TTTCCATAGG CTCCGCCCCC CTGACGAGCA 12910 1292Θ 12930 1Z940 12950 12960 TCACAAAAAT CGACGCTCAA GTCAGAGGTG GCGAAACCCG ACAGGACTAT AAAGATACCA · 12970 12980 12990 13000 13010 1B020 : GGCGTTTCCC CCTGGAAGCT CCCTCGTGCG CTCTCCTGTT CCGACCCTGC cgcttaccgg -18 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 C8 D8 六、申請專利範圍 1 13Θ30 13⑽ 13050 13060 13070 13086 ATACCTG 丁 CC GCCTTTCTCC CTTCGGGAAG CGTGGCGCTT TCTaTACCT CACGCTGTAf 13090 13100 13110 13120 13130 1314« GTATCTCAGT TCGGTGTAGG TCGTTCGCTC CAAGCTC66C TGTGTGCACC AACCCCCCGt 13150 13160 1Β17Θ 131B0 13190 13200 TCAGCCCGAC CGCTGCGCCT TATCCGGTAA CTAiccTcrr gagtccaacc CGCTAAGACA 13210 1BZ20 13230 13240 13250 1326€i CGACTTATCG CCACTGGCAG CAGCCACTGC TAACAGGATT AGCAGAGCCA GGTATCTAGa 13270 1B2S0 1Β29Θ 13300 13310 13B2Q CGCTGCTACA GAGTTCTTGA AGTGGTGGCC TAACTACGGC TACACTAGAA GGACAGTATT 13330 13340 13350 13360 13370 13380 TCGTATCTGC GCTCTGCTGA AGCCAGTTAC CTTCGGAAAA AGAGTTGGTA GCTCTTGATC 13390 134.00 13410 13420 13430 13⑽： CGGCA&ACAA ACCACCGCTG GTA6CGGTGG· TTTTTTTGTT TGCAAGCAGC AGATTACGCG: 13450 13460 13470 13480 13490 IB 5001 4cagaaaaaaa 6GATCTCAAG AAGATCCTTT CATCTTTTCT ACWGGTCTC ACGCTCAGTG； 13510 13520 13530 13S40 13550 135601 GAACGAAAAC TCACGHAAG GGATTTTGCT CATGAGATTA TaAAAAGGA TCTTCACCTA : 13570 135S0 13590 13600 13610 13620 GATCCTTTTA ΑΑΤΤΑΑΑΑΑΤ GAAGTTTTAA ATCAA丁CTAA AGHTATA丁ATG AGTMACTTG· 13630 13640 1365Θ 13660 1367C 13680： GTCTGACAGT TACCAATCCT TAATCACTGA GGCACCTATC TCAGCGATCT GTCTATTTCG 13690 13700 13710 13720 13730 13740 ： TTCATCCATA CTTGCCTGAC TCCCCGTCGT (TTAGAT^ACT ACGATACGGG AGGGCTTACC * \ 13750 13760 13770 13780 13790 13800 ATCTGGCCCC AGTGCTGCAA TGATACCGCG AGACCCACGC TCACCGGCJC CAGAITTATC 13S10 13820 13830 13S40 138S0 13S60 i AGCAATAAAC CACCCAGCCG 6AAGCGCCGA GCGCAGAACT GGTCCTGCAA CTTTATCCGC ·· 13870 13880 13890 13900 13910 13920 ; CTCCATCCAG TCTATTAATT CTTGCCGGCA AGCTAGAGTA AGTAGTTCGC CAGTTAATAG 1 13930 13940 13950 13960 13970 13980 TTTGCGCAAC GTTGTTGCCA TTGCTGCAGG CATCGTGGTG TCACGCTCGT CCTTTGGTAT 13990 14000 14010 Ϊ4020 14030 14040 GGCTTCATTC AGCTCCGCTT CCCAACGATC AAGGCGAGTT ACATGATCCC CCATCTTGTG 14050 14060 14070， 14080 Ϊ 祕 90 14100 CAAAAAAGCG GTTAGCTCCT TCGGTCCTCC GATCCTTGTC AGAAGTAAGT TCGCCGCAGT 14110 14120 14130 1414.0 14150 1416C GTTATCACTC ATGGTTATGG CAGCACTGa TAATTCTCTT ACTGTCATGC CATCCGTAAG 14170 141S0 1419Θ 14200 14210 1 14ZZ0· ATGCTTTTCT GTGACTGGTG AGTACTCAAC CAAGTCATTC TGAGAATAGT GTATGCGGCG 14230 14Z40 14Z50 14260 14270 142S0 ACCGAGTTGC TC丁TGCCCGG CG丁CAACACG GGATAATACC GCGCCACATA GCAGAACTTT 14Z90 14300 14310 14320 14330 14340 ； -19 丨- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 申請專利範園 AAAAGTGCTC ATCATTGGAA AACCTTCTTC GGG6CGAAAA CTCTCAAG6A TCTTACCGCjr 14B5C 14360 14370 14380 14B90 14400 mGAGATCC AGTTCGATCT AACCCACTCG TGCACCCAAC TGATCTTCAG CATCTTTTAt 14410 14429 1443Θ 1444« 14459 14Λ60 TTTCACCAGC GTTTCTGGGT GAGCAAAAAC AGGAAGGCAA AATGCCGCAA AAAAGGGAAT 14470 14480 14490 1A5M 14S10 14520 AAGCGCGACA CGGAAATQT GAATACTaT ACTCTTCCTT TTTCAATATT ATTGAACaT 145B0 1454« 14550 1ASS9 1457Θ 145S0 TTATCA66GT TATTGTCTa TGAGCGGATA CATATTTGAA TGTATTTAGA AAAATAAACA* 14590 14600 14610 146Z0 14630 14640. AATAGGGGTT CCGCGCACAT 1TCCCCGAAA AGTGCCACCT GACGTCTAAG AAACCATTA丫 14650 14660 14670 14680 14690 14700 TATCATCACA TTAACCTATA AAAATAGGCG TATCACGAGG CCCTTTCGTC TTCAAGAA./ 41.根據申請專利範圍第1項之方法，其中該標的質體包含 「Μ ο 11 y」質體之如下所示之核甞酸序列，及其中該 標的質體視需要不具有編碼抗-C D 2 0抗體多肽之核苷 酸序列： 本紙張尺度適用中國國家檩準(CNS) A4規格(21〇X297公釐） 90 . 1232239 έ88 C8 D8 六、申請專利範圍 10 Z0 30 40 50 60 TTAATTAAGC GGCCGAGAAT C6GCG6AACT GGGCGGAGTT AGGGGCCGGA TGGCCGCACT 70 8C 90 100 110 120 .TAGGCGCCGG ACTATGGm CTGACTAATT GAGATGaTG CTTTGCATAC TTCTGCCTGC 130 140 150 16e 179 180： TGGGCAGCCT GGGGACTTTC CACACCTGGT TGCTGACTAA TTGAGATGCA TGCTTTGaT 190 zee zi0 220 230 ACTTCTGCCT GCTGGGGAGC CTGGGGACTT TCCACACCCT AACTGAaCA CATTCCACAG 250 260 Z70 Z80 290 300 AATTAAnCC CCTAGTTATT AATACTAATC AATTACGGGG TCATTAGTTC ATACCCCATA 310 320 330 340 350 360: TATGGAGTTC CGCGTTACAT AACTTACGGT AAATGGCCCG CCT6GCTGAC CGCCCAACGA 370 380 390 400 410 420 CCCCC6CCCA TTGACGTCAA TAATGACGTA TGTTCCCATA CTAACGCCAA TAGGGACTTT 430 440 . 450 460 470 480 ^CCATTGACGT CAATGGGTGG AGTATTTACG GTAAACTGCC CACTTGGCAG TACATCAAGT 490 500 510 S29 530 540 GTATCATATG CCAAGTACGC CCCCTAHGA CGTCAA丁GAC CGTAAATGGC CCGCC丁GGCA 550 560 570 580 590 600 TTATGCCCAG TACATGACCT TATGGGACTT TCCTACTTGG CAGTAaTCT ACGTATTAGT 610 6Z0 639 640 650 €60 CATCGCTATT ACCATGGTGA TGCGG7TTTG GCAGTACATC AATGGGCGTG GATAGCGCTT 670 680 690 700 710 720 TGACTCACGG GGATTTCCAA CTCTCCACCC CATTGACGTC AATGGGAGTT TGITITGAAC 730 v 740 750 760 770 780 CTTGCCCGGC CAGCTTTATT TAACCTCTTT ACGTCGAGTC AATTGTACAC TAACGACAGT 790 800 S10 8Z0 8B0 840 GATGAAAGAA ATACAAAAGC GCATAATATT TTGAACGACG TCGAACCTTT ATTACAAAAC 850 S60 870 880 S90 900 AAAACACAAA CGAATATCGA CAAAGCTAGA TTGCTGCTAC AAGATTTGCC AAGTTTTCTG 910 920 9B0 940 950 960 GCGTTGAGCG AAAATCCATT AGATAGTCCA GCCATCGGTT CGGAAAAACA ACCCTTCTTT 970 980 990 1000 1019 · 1020 GAAACTAATC GAAACCTATT TTACAAATCT ATTGAGGATT TAATATTTAA ATTCAGATAT 1030 1040 1050 1060 .1070 1080 .AAAGACGCTG AAAATCATTT GATTTTCGCT CTAACATACC ACCCTAAAGA TTATAAATTT 1090 1100 1110 1120 1130 114.0 AATGAATTAT TAAAATACAT CAGCAACTAT ATATTGATAG ACATTTCCAG TTTGTGATA丁 1150 1160 1170 1180 1190 1200 TACTTTGTGC GTCTCATTAC AATGGCTGTT ATTTTTAACA ACAAACAACT GCTCGCAGAC 1Z20 1230 1240 1250 1260 AATAGTATAG AAAAGGGAGG TGAACTGT7T TTGTTTAACG GTTCCTACAA CATTTTGGAA 1270 1Z80 1290 1300 1310 1320 AGTTATGTTA ATCCGGTGCT GCTAAAAAAT GGTGTAATTG AACTAGAAGA AGCTGCGTAC -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1232239 A8 B8 C8 D8 々、申請專利範圍 1330 1340 1350 1360 1370 1380! TATGCCGGU ACATATTGTA CAAAACCGAC CATCCCAAAT TCATTGATTA TATAAA7TTA: 1390 1480 1410 1420 1430 1440： ATAATTAAAG CAACAaCTC CGAAGAACTA CCAGAAAATA GCACKTTTGT AAATTACAGA： 1450 1460 1470 1480 1490 1509： AAAACTATGC GaGCGCTAC TATACACCCC ATTAAAAAAG ACA TATA TAT TTATGACAAC: 1510 1520 1530 1540 1550 1560 ； AAAAAATTTA CTCTATACGA TAGATACATA TATCGATACG ATAATAACTA TGTTAATTTT 1570 15S0 1590 1600 1610 16Z0 . TATGAGGAGA AAAATGAAAA AGAGAAGGAA TACGAAGAAC AAGACGACAA GCCCTCTAGT 1630 1640 1650 1660 1670 1680 TTATGTGAAA ATAAAATTAT ATTGTCGCAA ATTAACTGTG AATCATTTGA AAATGATTTT 1690 1700 1710 172C 1730 1740 AAATATTACC TCAGCGATTA TAACTACGCG TTTTCAATTA TAGATAATAC TACAAATGTT • 1750 1760 1770 1780 1790 180Θ CTTGTTGCGT TTGGTTTGTA TCGTTAATAA AAAACAAATT TGACATTTAT AATTGnTTA 1810 1820 1S30 1S40 1850 1S60 TTATTCAATA ATTACAAATA GGATTGAGAC CCTTGCAGTT GCCAGCAAAC GGACAGAGCT 1870 1880 1890 1900 1910 1920 TG丁CGAGGAG ACTTGTTGAT 丁CATTGTTTG CCTCCC丁GCT GCGGTTTTTC ACCGAAGTTC 1930 19« 19S0 1960 1970 1980 ATGCCAGTCC AGCGTTTTTG CA6CAGAAAA GCCGCCGACT TCGCTTTGCG GTCGCGAGTG 1990 2090 2019 ΖΒΖ0 Ζ0Β0 2040 AAGATCCCTT TCTTGTTACC GCCAACGCGC AATATGCCTT GCCAGCTCGC AAAATC6GCG 2050 Z060 2070 Z080 Z090 2100 AAATTCCATA cctgttcacc gacgacggcg ctgacgcgat caaagacgcg GTGATACATA 2110 2120 2130 Z140 Z150 Z160 TCCAGCCATG CACACTGATA CTCTTCACTC CACATGTCGG TGTACATTGA GTGCAGCCCG Z170 Z180 2190 2200 Z210 .2220 GCTAACCTAT CCACGCCGTA TTCGGTGATG ATAATCGGCT GATCCAGTTT CTCCTGCCAG Ζ23Θ 2240 Z250 2260 Z270 2280 GCCAGAAGTT CTTTTTCCAG TACCTTCTCT GCCGTTTCCA AATCGCCGCT TTGGACATAC Z290 2300 Z310 232^ 2330 2340 CATCCGTAAT AACGGTTCAG GCACAGCAa TCAAAGAGAT'CGCTGATGGT ATCGGTGTGA 2350 Z360 Z370 Z380 2390 2400 GCGTCGCAGA ACATTACATT GACGCAGGTG ATCGGACGCG TCGGGTCGAG TTTACGCGTT 2410 24-Z0 Z430 Z440 Z450 2460 GCTTCCGCCA GTGGCGCGAA ATATTCCCGT GaCCTTGCG GACGGGTATC CGGTTCGTTG ^ 2470 24S0 2490 Z5O0 2510 2520 GCAATACTCC ACATCACCAC GCTTGGGTGG TTTTTGTCAC GCGCTATCAG CTCTTTAATC Z5B0 2540 2550 Z5GQ Z570 2S80 GCCTGTAAGT gcgcttgctg agtttccccg ttgactgcct cttcgctgta cagttctttc Z590 2600 2610 2620 Ζ63Θ Z640 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) k 訂 # 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 GGCTTGTTGC CCGCTTCCAA ACCAATGCCT AAAGAGAGCT TAAAGCCGAC AGCAGCAGTT； Z650 2660 2670 2680 2690 2700·. 丁CATCAATCA CCACGATGCC ATGTTCATCT GCCCAGTCGA GCATC丁CTTC AGCQVUGGG 2710 2720 2730 2740 Z7S0 Z7601 TAATGCGAGG TACGGTAGGA GHGGCCCCA ATCCAGTCa TTAATGCGTG GTCGTGCACC Z770 27E0 2790 Z8 的 Z810 Z820 ATCAGCACGT TATCGAATCC HTGCCACGC AAGTCCGCAT CTTCATGACG ACCAAAGCCA Ζ83Θ Z840 2850 ZS60 ZS70 Z880 ： GTAAAGTAGA ACGGTTT^TG GTTAATCAGG AACTGTTCGC CCTTaCTGC CACTGACCGG · 2890 2900 2910 2920 2930 Z9A0 ：： A丁GCCGACGC GAAGCGGGTA GATATCACAC TCTGTCTGGC TITTGGCTG丁 GACGCACAG丁 ： Z950 2960 2970 2980 2990 3000 TaTAGAGAT AACCTTCACC CGGTTGCCAG AGGTGCGGAT TCACCACTTG CAAAGTCCCG 3010 3020 3030 CTAGTGCCTT GTCCA6TTGCAACCACCTCT 3070 3080 3090 TCACCAUGG CCACCACCTG CCAGTCAACA 3130 3140 3150 GTCACCACGG TGATATCGTC CACCCAGGTG 3190 3200 3210 TGGATTCCGG CATAGTTAAA GAAATCATGG 3250 3260 3Z70 TCGGTAATCA CCATTCCCGG CGGGATAGTC 3310 33Z0 3330 GTGATACCCC TCtACGGATT AAAGACTTCA 3370 3380 3390 CGTCCCAGTA ACCTATGTCT CCAGAATGTA 3430 344-0 3450 TCGCTTCCGG ATTGTTTACA TAACCGGACA 3490 3500 3510 CTCTCTGAn AACGCCCAGC GTTTTCCCGG 3550 3S60 B570 ATGGAACAAC TTTACCGACC GCGCCCGGTT 3610 3620 3630 CTGATGTAGT CTCAGTGAGC CCATATCCTT 3670 B6S9 3690 CAACCGCTTC CCCGACTTCT TTCGAAAGAG 3730 3740 3750 TAGATAAATC GTATTTGTCA ATCAGAGTGC 3790 3800 3810 CTAGCAACGC ACTTTGAAn HGTAATCCT 3850 38G0 3870 ATCTATACA了丁AAGACGACT CGAAATCCAC 3040 3050 3060 TGATCCGCAT CACGCAGTTC AACGCTGACA 3100 31X0 3120 GACGCGTGGT TACAGTCTTG CGCGACATGC 3160 3170 3180 TTCGGCGTGG TCTAGAGCAT TACGCTGCGA 3Z20 3230 3Z40 AAGTAAGACT GCTTTTTCTT GCCGTTTTCG B2S0 3290 3300 TGCCAGTTCA GTTCGTTGTT CACACAAACG 3B40 3350 336C AGCGGTCAAC TATGAAGAAC TGTTCGTCTT / 3400 3410 3420 GCCATCCATC CTTGTCAATC AAGGCGTTGG 3460 3470 3480 TAATaTAGG TCCTCTGACA CATAATTCGC 3520 3530 3540 TATCCAGATC CACAACCTTC 6CTTCAAAAA 3580 B590 3600 TATCATCCCC CTCGGGTGTA ATCAGAATAG 3640、 3650 3660 GTCGTATCCC TGGAAGATGG AAGCGTTTTG > 3700 3710 37Z0 GTGCGCCCCC AGAAGCAATT TCGTGTAAAT 3760 3770 37S0 TTTTGGCGAA GAATGUAAT AGGGTTGGTA 3820 3830 3840 GAAGGGATCG 了AAAAACAGC TCTTCTTCAA 3S80 3890 B900 ATATCAAATA TCCGAGTGTA GTAAACATTC -23- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 C8 D8 六、申請專利範園 ; - 3910 3920 3939 3940 -3950 3960 CAAAACCGTG ATGGAATCGA ACAACACTTA AAATCCCAGT ATCCGGAATC ATTTGATTGG 3970 3980 3990 Λ0ΘΘ 4010 4020 CAAAAATAGG ATCTCTGGCA TGCGAGAATC TGACGCAGGC AGTTCTATGC GGAAG6GCCA: 4030 4040 405^ 4^60 4070 4080： aCCCTTAGG TAACCCACTA GATCCAGAGG AATTGTTinrG TCACGATCAA AGGACTCTGG； 4090 4100 4110 <120 4130 41401： TACAAAATCG 丁 A 丁丁 CAUAA AACCGGGAGG TAGATGAGAT GTGACGAACG TGTACATCGA· 4150 4160 4170 4180 4199 «00 CTGAAATCCC TGGTAATCCG TTTTAGAATC CATGATAATA ΑΪΊΊ iCTGGA TTATTGGTAA 4210 4Z20 4230 4240 «50 4260 TTTTTTTTGC ACGTTCAAAA r i 1 i 1 Ti>LAA μ i iTG GAAACAAACA CTACGGTAGG· 4Z70 4280 4290 4300 4310 4320 ：. CTGCGAAATG TTCATACKT TGAGCAATTC ACGTTCATTA TAAATCTCGT TCGCGGGCGC ； * 4330 4350 4360 4370 «80 AACTGCAACT CCGATAAATA ACGCGCCCAA CACCGCaTA AACAATTGAA GACAGTTTTC 4390 4綱 4410 4-420 4430 4440 ACTGCATACG ACGATTCTGT GATTTGTATT CAGCCCATAT CGTTTCATAG CTTCTGCCAA 4450 4460 4470 4.4.80 4490 4500 CCGAACGGAC ATTTCGAAGT ATTCCGCGTA CGTGATGTTC ACCTCGATAT GTGCATCTGT 4510 4520 4530 4540 4550 4560 AAAAG6AATT GTTCCAGGAA CCAGGGCGTA TCTCTTCATA GCCTTATGCA GTTGCTCTCC 4570 4580 斗590 4W0 4610 4620 ACCGCTTCCA TCCTCTAGCT TTGCTTCTCA ATTTCTTATT TGCATAATGA GAAAAAAAGG 4630 '4640 4650 4660 4670 斗680 AAAATTAATT TTAACACCAA TTCAGTAGTT GATTGAGCAA ATGCGTTGCC AAAAAGGATG 4690 4700 4710 4720 4730 4740 CTTTAGAGAC AGTCTTCTC丁 GCACAGATAA GGACAAACA了了ATTCAGAGG GACTACCCAG 4750 4760 4770 47S0 4790 4800 AGCTGAGACT CCTAAGCCAG TGAGTGGCAC AGCATCCAGG CAGAAATATG CTTGTCATCA 4810 «Ζ0 4830 4540 4850 4860 CCGAAGCCTG ATTCCGTAGA GCCACACCCT GGTAAGGGCC AATCTGCTCA CACAGGATAG 4870 4880 4-890 4900 4910 49Z0 AGACGGCAGG AGCCAGGGCA GAGCATATAA CGTGAGGTAG 1 GATCACTTGC TCCTaCATT 斗930 4940 4950 γ Λ960 4970 49S0 TGCTTCTGAC ATACTTGTGT TGGGAGCTTG GATCGATCCA CCA 丁 GGGCTT CAATACCCTG 4990 5000 5010 5020 5030 S04O ATTGACTGGA ACAGCTG丁AG CCCTGAAQG CAGCGTGCGC TGCTGACGCG TCCGGCGATT 5050 5060 5070 5080 5090 5100 TCCGCCTCTG ACAGTATTAC CCGGACGGTC AGCGATATTC TGGA丁AATGT AAAAACGCGC . 5110 5120 5130 5U0 5150 5160 GGTGACGATG CCCTGCGTGA ATACACCGCT AAATTTGATA AAACAGAAGT GACAGCCCTA 5170 5180 5190 5200 5Z10 5ZZ0 CGCGTCACCC CTGAAGAGAT CGCCGCCGCC GCCGCGCGTC 丁GAGCGACGA attaaaacag -24- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 5ZB0 5Z40 5250 5Z60 S27B S280 GCGATGACCG CTGCCGTCAA AAATATTGAA ACCTTCCATT CCCCGaCAC GCTACCGCCT 5290 5300 5310 5320 5330 5349 CTAGATGTGG AAACCCAGCC AGGCGTGCGT TGCaGCAGG TTACGC(；TCC CGTCTCGTCt 5350 5360 5370 5380 S390 5400 GTCGGTCTGT ATATTCCCGG CGGCTCGCCT CCGCTCTTCT CAACGGTGCT GATGCTGGCG 5410 5420 5430 54^0 5450 5460 ACGCCGGCGC GCAmCGGG ATGCCAGAAG GTGCTTCTCT CCTCGCCGCC GCCCATCGCT 5470 5480 5490 55抑 5510 5520 GATGAAATCC TCTATGCGGC GaACTGTCT GGCGTGCAGG AAATCinrTAA CCTCGGCGGC 5530 5540 5550 5560 5570 S580： GCGCAGGCGA TTGCCGCTCT GGCCTTCGGC AGCGACTCCG TACCGAAAGT CGATAAAATT 5590. 5600 5610 5620 5630 5640 TTTGGCCCCG GCAACGCCTT TGTAACCGAA GCCAAACGTC AGGTaGCCA GCGTCTCGAC 5650 5660 5670 5686 S690 5700 GGCGCGGCTA TCGATATGCC AGCCGGGCCG TCTGAAGTAC TGGTGATCGC AGACAGCGGC 5710 5720 5730 5740 5750 576» GCAACACCGC ATTTCGTCGC TTCTGACCT6 CTCTCCCAGC CTGAGCACGG CCCGGATTCC 5770 S780 5790 5800 5810 5S20 CAGGTGATCC TGCTGACGCC TGATGCTGAC AHGCCCGCA AGGTGGCGGA GGCGGTAGAA 5830 SS40 5850 S860 5870 5880 CGKAACTGG CGGAACTGCC GCGCGCGGAC ACCGCCCGGC AGGCCCTGAG CGCCAGTCGT 5890 5990 5910 5920 S9B0 5940 CTGATTGTGA CCAAAGATTT AGCGCAGTGC GTCGCCATCT CTAATCAGTA TGGGCCGGAA 5950 5960 5970 5930 5990 6000 CACTTAATCA TCCAGACGCG CAATGCGCGCGATTTGGTGG ATGCGATTAC CAGCGCAGGC 6010 6020 6ΘΒ0 6040 6050 6060 TCGGTATTTC TCGGCGACTG GTCGCCGGAA TCCGCCGGTG AmCGCTTC CGGAACCAAC 6070 6080 6090 6100 6110 . 6120 CATGTTTTAC CGACCTATGG CTATACTGCT ACCTGTTCCA GCCTTGGGTT AGCGGATTTC 6130 6140 6150 6160 6170 6180 CAGAAACGCA TGACCGTTCA GGAACTGTCG AAAGCGGGCT TTTCCGCTCT GCCATCAACC 6190 6200 6Z10 6Z20 6230 6240 AHGAAACAT TGGCGGCGGC AG入ACCTCTG ACCGCCCA丁Λ AAAATGCCGT GACCCTGCGC 6Z50 6Z60 6270 6Z80 62M 6300 GTAAACGCCC TCAAGGAGCA AGCATGAGGC ACTGAAAACA CTCTCAGCGT CGCTGACTTA 6310 63Z0 6330 6340 6350 6360 GCCCGTGAAA ATGTCCGCAA CCTGGAGATC CAGACATGAT AAGATACATT CATGAGTTTG 6370 6380 6390 64^0 6410 6420 GACAAACCAC AACTAGAATG CAGTGAAAAA AATGOTTAT TTGTGAAATT TGTGATGCTA 6430 6440 G450 6A60 64?0 6480 TTGCTTTATT TGTAACCATT ATAAGCTGCA ATAAACAAGT TAACAACAAC AATTGCATTC 6490 6500 6510 6520 6530 6540 -25- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐)
    訂 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 ATTTTATGTT TCAGGTTCAG GGGGAGGTGT GGGAGGTTTT TTAAAGaAG TAAAACCTCT 6550 6560 6570 6580 6590 6600 ACAAATGTCG TATGGCTGAT TATGATCTCT ACGGCCGGCC CTCGACGGCG CGCCTCTAGA 6610 66Z0 6630 6640 6650 6660, GCAGTGT6GT TTTGaAGAG GAAGCAAAAA CCCTCTCCAC CCAGGCCTGG AATGTTTCa 6670 6680 6690 6700 6710 S719 CCCAATGTCG AGCAGTGTGG TTTTGCAAGA GGAAGCAAAA AGCCTCTCa CCCAGGCCTG 6730 6740 6750 6760 6770 6780; GAATCTTTCC ACCCAATGTC GAGOUACCC CGCCCAGCGT CTTGTCATTC GCGAATTCGA· 6790 6800 6810 SZZO 6830 6340 ACACGCAGAT GCAGTCGGGG CGGCGCGGTC CCAGGTCCAC TTCGCATATT AAGCTGACGC； 6SS0 6360 6870 6SS0 6890 6900 GTGTGGCCTC GAACACCGAG CGACCCTGCA GCCAATATGG GA丁CGGCCAT TGAACAAGA丁· 6910 6920 6930 6940 6950 6960 ； GGATTGCACG CAGGTTCTCC' GGCCGCTTGG GTGGAGAGGC TATTCGGCTA TGACTGGGCA : * * 6970 6980 6990 . 7000 7010 7020 '· CAACAGACAA TCGGCTGCTC TGATGCCGCC CTGTTCCGGC TGTCAGCGCA GGGGCGCCCG ·: 7030 7040 7050 7060 7070 70S0 GTTCTTTTTG TCAAGACCGA CCTGTCCGGT GCCCTGAATG AACTGCAGGT AAGTGCGGCC 7090 7100 7110 7120 7130 7140 ： GTCGATG.GCC GAGGCGGCCT CGGCCTCTGC ATAAATAAAA AAAAmGTC AGCCA丁GCAT 7150 7160 7170 7180 7190 7200 1 GGGGC6GAGA ATGGGCGGAA CTGGGCGGAG TTAGGGGCGG GATGCGCGGA GTTAGGGGCG 气 · 7Z10 7ZZ0 7230 7Z40 7Z50 7260 GGACTATGGT TGCTGACTAA HGAGATGCA 丁GCTTTGCA丁 ACTTCTGCCT GCTGGGGAGC 7270 7280 7290 7300 7310 73Z0 CTCGGGACTT TCCACACCTG GTTGCTGACT AATTGAGATG CATGCTTTGC ATACTTCTGC 7330 73A0 7350 7360 7370 7380 CTGCTGGGGA GCCT66GGAC TTTCCACACC CTAACTGACA CACATTCCAC AGAATTAATT 7390 7400 7410 74Z0 7430 7440 CCCCTACTTA TTAATAGTAA TCAATTACGG GCTCATTAGT TCATAGCCCA TATATGGACT 74-50 7460 7470 7480 7490 75®0 TCCGCGTTAC ATAACTTACG GTAAATGGCC CGCCTGGCTG ACCGCCCAAC GACCCCCGCC > 7510 7520 7530 7540 7550 7560 CATTGACGTC AATAATGACG TATGTTCCCA TACTAACGCC AATAGGGACT TTCCATTGAC 7570 7580 7590 7600 7610 76Z0 GTCAATGGGT GGACTATTTA CGGTAAACTG CCCACTTGGC AGTACATCAA GTGTATCATA 7630 7640 7650 7660 7670 7680 . TGCCAAGTAC GCCCCCTATT GACGTCAATG ACGGTAAATG GCCCGCCTGG CATTATGCCC 7690 7700 7710 7720 7730 7740 AGTACAKAC CTTATGGaC TTTCCTACTT GGCAGTACAT CTACGTAHA GTCATCGCTA 7750. 7760 7770 7780 7790 7800 TTACCATGCTT GATGCGGTTT TGGCAGTACA TCAA丁GGGCG TGGATAGCGG TTTGACTCAC -26- 本紙張尺度通用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 7810 78Z0 7830 7S40 7850 786|0 GGGGATTTCC AAGTCTCCAC CCCATTGACG TCAATGQGAC TTTGTTTTGG CACCAAAATC AACGG 7870 GACTT 7SS0 7S90 7900 7910 7920 TCCAAAATCT CGTAACAACT CCGCCCCATT GACGCAAATG CGCGGTAGGC 7930 7940 7950 7960 7970 7989 GTGTACGGTG GGAGGTCTAT ATAAGaGAG CTGGGTACGT GAACCGTCAG ATCCCCTCGA 7990 8^00 S010 S020 8030 8040 GACGCCATCA CAGATCTCTC ACTATGGATT TTCAGGTGCA GATTATCAGC nCCTGCTAA 8050 8060 8070 S080 S090 8100 了CAGTGCTTC AGTCATAATG TCCAGAGGAC AAATTGTTCT CTCCCAGTCT CCAGCAATCC 8110 8120 8130 8140 8150 8160; 丁GTCTGCATC TCCAGGGGAG AAGGTCACAA TGACTTGCAG GGCCAGCTCA AGTGTAACTT 8170 8180 8190 8200 S210 8220 ACATCCACTG GTTCCAGCAG AAGCCA6GAT CCTCCCCaA ACCCTGGATT TATGCCACAT 8230 824.0 8Z50 S260 8270 S2SC CCAACCTGGC TTCTGGAGTC CCTGTTCGCT TCAGTGGCA6 TGGGTCTGGG ACTTCTTACT 8Z90 8300 SB10 CTCTCACAAT CAGCAGAGTG GAGGCTGAAG S350 SB60 8370 CTACTAACCC ACCCACGTTC GGAGGGGGGA 8410 8ΛΖ9 8430 CACCATCTGT CTTCATC7TC CCGCaTCTG 8470 S480 S490 TTGTGTGCCT GCTGAATAAC TTCTATCCCA \ 8530 8540 8550 ACGCCCTCCA ATCGGCTAAC TCCCAGGAGA 8590 8600 8610 CCTACAGCCT CAGCAGCACC CTGACGCTGA 8650 8660 8670 ACGCCTGCGA AGTCACCCAT CAGGGCCTGA 8710 87Zd S730 GAGACTGTTG AATTaGATC CCTTAACGGT 8770 S780 8790 CATGCGGCCG TGATATCTAC GTATGATCAG 8830 8840 S850 CTGnGTTTG CCCCTCCCCC GTGCCTTCCT S890 8900 8910 TTTCCTAATA AAATGAGG/^A ATTGCATCGC 8950 8960 S970 GGGGTGGGGT GGGGCAGGAC AGCAAGGGGG 9010 9020 9030 GGGATGCGGT GCGCTCTATG GAACCAGCTG 83Z0 8330 S340 ATCCTGCCAC TTATTACTGC CACaGTGGA ： S3S0 8390 8400 CCAAGCTGGA AATCAAACCT ACGCTGGCTG S440 8450 8460 . ATGAGaCTT GAAATCTGGA ACTGCCTCTG * 850Θ S510 8520 GAGAGGCCAA AGTACAGTGG AAGGTGGATA S560 8570 8580 CTGTCACAGA GCAGGACAGC AAGGACAGCA ; S620 8630 S640 GCAAAGCAGA CTACGACAAA CACAAAGTC丁 ： &680 S690 8700 CCTCGCCCGT CACAAAGACC TTCAACAGGG 8740 8750 8760 TACCAACTAC CTAGACTGGA TTCGTGACAA 8800 8810 8SZ0 CCTCGACTCT GCCHCTAGT TGCCAGCCA丁 ^ 8860 8870 8880 TGACCCTGGA AGGTGCCACT CCCACTGTCC 8920 B930 8940 ATTGTCTGAG TAGGTGTCAT TCTATTCTGG 8980 8990 9000 AGGATTGGGA AGACAATAGC AGGCATGCTG 9040 9050 9060 GGGCTCGACA GCTATGCCAA GTACGCCCCC . 9070 9080 sese 9100 9110 9120 TAHGACGTC AATGACGGTA AATGGCCCGC CTGGCAHAT GCCCAGTACA TGACOTAK -27- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公漦) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 9130 9140 9150 9160 9170 9180 GGACTTTCCT ACTTGGCACT AaTCTACGT ATTACTCATC GCTAnACU TGGTGATGCG _ 3190 9200 9210 9ZZ0 9230 9240； CTTTTGGCAG TACATCAATG GGCGTGGATA GCGGTTTGAC TCACGGGGAT TTCCUGTCT 9250 9260 9Z70 9280 9290 9300： CCACCCCATT GACGTaATG GGAGTTTCTT TT6GCACCAA AATCAACGGC ACTTTCCAAA， 9310 9320 933Θ 9340 9350 9360 ATGTC(TrAAC AACTCCGCCC CATTGACGCA AATGGGCGCT AGGCGTGTAC GGTGGGAGGT： 9370 93S0 9390 9400 9410 9420 OTATATAAGC AGAGCTGGGT ACGTCCTCAC ATTCAGTGAT CAGCACTGAA CACAGACCCG 94ΒΘ 94Λ0 9450 9460 9470 9480 TCGACATGGG HGGAGCCTC ATCTTGCTCT TCCTTCTCGC TGTTGCTACG CCTCTCCTGT 9490 9500 9510 9520 9530 9540 CCCAGGTACA ACTGCAGCAG. CCTGGGGCTG AGCTGGTGAA GCCKGGGCC 了CAG丁GAAGA ’ • 9550 9560 9570 9580 9590 9600 TGTCCTGCAA GGCTTCTGGC TACACATTTA CCAGTTACAA TATGCACTGG GTAAAACAGA 9610 9620 9630 9640 9650 9660 CACCTGGTCC GGGCCTGGAA TGGATTGGAG CTATTTATCC CGGAAATGGT GATACTTCCT 3670 9680 9690 9700 9710 9720 ： ACAATCAGAA GTTCAAAGGC AAGGCCACAT TGACTGCAGA CAAATCCTCC AGCACAGCC丁 9730 9740 9750 9760 9770 9780 ACATGCAGCT CAGCAGCCTG ACATCTGAGG ACTCTGCGCT CTAHACHTT GCAAGATCGA . 9790 9800 9819 9820 9830 9840 : CTTACTACGG CGtGTGACTGG TACTTCAATG TCTGGGGCGC AGGGACCACG GTCACCGTCT 9850 9860 9879 9SS0 9890 9900 CTGCAGCTAG CACCAAGGGC caTCGGTCT TCCCCCTGGC ACCCTCCTCC AACAGCACCT 9910 9920 99ΒΘ 994-0 9950 9960 CTGGGGGCAC AGCGGCCCTG GGCTCCCTGG TCAAGGACTA CTTCCCCGAA CCGCTGACGG 9970 9980 9990 10000 10010 1^020 TCTCGTGCAA CTCAGGCGCC CTGACCAGCG GCGTGCACAC CTTCCCGGCT GTCCTACAGT 10030 1Θ040 10050 10060 10070 10080 CCTCAGGACT CTACTCCCTC AGCAGCGTGG TGACCGTGCC CTCCAGCAGC TTGGGCACCC 10090 10100 10110 10120 10130 10140 AGACCTACAT CTGCAACGTG AATCACAAGC CCAGCAACAC'CAAGGTGGAC AAGAAAGCAG 10150 10160 10170 10180 10190 10200 AGCCCAAATC UGTGACAAA AC丁CACACAT GCCCACCGTG CCCAGCACCT GAACTCCTGG 10210 10Z20 10Z30 10240 10Z50 10Z60 GGGGACCGTC AGTCTTCCTC TTCCCCCCAA AACCCWGGA CACCCTCATG ATCTCCCGGA 10270 10280 1029C 10300 10310 10320 CCCCTGAGGT CACATGCGTG GTGGTGGACG TGAGCCACGA AGACCCTGAG GTCAAGTTCA 10330 10340 10350 10360 10370 103S0 ACTGGTACGT GGACGGCGTG GlAGGTGCATA ATGCCAAGAC AAAGCCGCGG GAGGAGCAGT 10390 1040C 10410 1^4-20 10430 1044-0 -28- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1232239
    本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公漦) 裝 訂 1232239 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 • 11710 11720 11730 11740 11750 U76tf TTTAGAGACA GTGTTCTCTG CACAGATAAG GACAAACATT ATTCAGAGGC AGTACCCAGA 11770 11780 11790 11890 11810 118Z0: GCTGAGACTC CTAAGCCAGT GAGTGGCACA GCATCCAGGG AGAAATATGC TTGTaTCAC 11830 11840 11850 11860 11S70 11880 CGAAGCCTGA TTCCGTAGAG CCACACCCTG GTAAGGGCCA ATCTGCTCAC AaGGATAGA 11890 11900 11910 11920 11930 11940 GAG6GCAGGA CCCAGG6CAG AGCATATAAG CTGAGGTAGG ATCAGTTGCT CCTCACATTT 11950 11960 11970 11980 11990 12000 GCTTCTGACA TAGTTGTCTT CGGAGCTTGG ATAGCTTGGG GGCGGGACAC CTCAGGGCTG 12010 izoze 1Z030 12^40 12050 12060 CGATTTCGC6 CCAAACTTGA CGGCAATCCT AGCG丁GAAGG CTGGTAGGAT TTTATCCCCG 12070 120S0 12090 12100 12110 12120 CTGCCATCA 丁 GGTTCGACCA TTGAACTGU TCGTCGCCGT GTCCCAAAAT A丁GGGGATTG 1Z130 1Z140 12150 12160 12170 12180 CCAAGAACGG AGACCTACCC TGGCCTCCGC TCAGGAACGA CTTCAAGTAC TTCCAAAGAA 12190 12200 12210 1Z220 12Z30 12240 TGACCACAAC CTCTTCAGTG GAAGGTAAAC agaatctggt gattatgggt AGGAAAACCT 12250 1Z260 12270 12280 12290 1Z300 GGTTC了CCAT TCC丁GAGAAG AA丁CGACCTT TAAAGGACAG AATTAATATA GTTCTCAGTA 12310 12320 1Z330 12340 12350 12360 GAGAACTCAA AGAACCACCA CGAGCAGCTC ATTTTCTTGC CAAAAGTTTG GATGATGCC丁 12370 1ZB80 12390 12400 1Z410 12420 丁AAGACTTAT TGAACAACCG GAATTGGCAA GTAAACTAGA % aTGGTTTGG ATAGTCGGA6 12430 '12440 12450 124-60 12470 12480 GCAGTTCTGT TTACCAGGAA GCCATGAATC AACCAGGCCA CCTaGACTC TTTGTGACAA 12490 12500 12510 12520 12530 12540 GGATCATGCA GGAATTTGAA AGTCACACCT TTTTCCCAGA AATTGATITG GGGAAATATA 12550 12560 12570 12580 12590 12600 AACTTCTCCC AGAATACCCA GGCGTCCTCT CTGAGGTCCA GGA GGAAAAA GCCATCAAGT 12610 1Z620 126B0 12640 12650 12660 ATAAGTTTGA AGTCTACGAG AAGAAAGACT AACAGGAAGA TGCTTTCAAG TTCTCTGCTC 12670 12680 12690 12700 12710 12720 CCCTCCTAAA GCTATGCATT TTTATAAGAC CATGGGACTT TTGCTGGCTT TAGATCAGCC 1 12730 1Z740 12750 , 12760 1Z770 12780 TCGACTGTGC CTTCTAGTTG CCAGCCATa GTTGTTTGCC CCTCCCCCG丁 GCCTTCCTTG 12790 12500 12810 1Z8Z0 12830 12840 ACCCTGGAAG CTGCCACTCC CACTGTCCTT TCCTAATAAA ATGAGGAAAT TGCATCGCAT 12850 12860 12870 12880 12890 12900 TGTCTGAGTA GGTGTCATTC TATTCTGGGG GGTGGGGTGG GGCAGGACAG CAAGGGGGAG 12910 12920 12930 12940 12950 1Z960 CATTGG GAAG ACAATAGCAG GCA丁GC丁GCG GA丁GCGGTGG GCTCTATGGC TTCTGAGGCG 12970 12980 12990 13000 13010 130Z0 GAAAGAACCA GCTGGGGCTC GAAGCGGCCG CCCADTCGC TGGTGGTCAG ATGCGGCATG -30- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 1303C 13040 13050 1306C 13070 13080 GCGTGGGACG CGGCGGGGAG CCTaCACTG AGGTTTTCCC CCAGACGCCA CTGCTGCCAG 13090 13100 13110 13120 1B130 13140 GCGCTGATGT GCCCGGCTTC TGACCATGCG CTCGCGTTCG GTTGCACTAC GCGTAC丁GTG 13150 13160 13176 13180 13190 13ZO0 AGCCAGAGTT GCCCGGCGCT CTCCGGCTGC GCTACTTCAG GC^GTTCAAT CAAC丁GTTTA 1BZ10 132Z0 13Z30 13240 13250 13260 CCTTGTCGAG CGACATCCAG AGGaCTTa CCGCTTGCCA GCGGCTTACC ATCaGCGCC 13270 13280 13290 133⑽ 1331Θ 13329 ACCATCCAGT GCAGGAGCTC CTTATCGCTA TGACG.GAACA G<TTATTCGCT GGTCACTTCG 13330 13340 13350 13360 13370 13380 ATGGTTTGCC CGGATAAACG GAACTGGAAA AACTGCTGCT GGTGTTTTGC TTCCGTCAGC 13390 13400 13410 1B420 13430 13440 GCTGGATGCG CCG丁GCGCTC GGCAAAGACC AGACCG丁TCA TACAGAACTG GCGATCGTTC • 13450 13460 13470 134S0 13490 13500 GGCGTATCGC CAAAATCACC GCCCTAAGCC GACCACGGGT TGCCGTTTTC ATCATATTTA 13510 135Z0 13530 13540 13550 1356« ATCAGCGACT GATCCACCCA GTCCCAGACG AAGCCGCCCT GTAAACGGGG ATACTGACGA 13570 a3580 13590 13600 . 13610 13620 AACGCCTGCC AGTAT7TAGC GAAACCGCCA AGACTGTTAC CCATCCCGTG GCCCTATTCC 13630 1364C 13650 13660 13670 1B6S0 CAAAGGAT.CA GCGGGCGCGT CTCTCaGGT AGCGAAAGCC ATTTTTTGAT GGACCATTTC 13690 13700 13710 13720 13730 13740 GGCACAGCCG GGAAGGGCTG GTCTTCATCC ACGCGCGCGT ACATCGGGCA AATAATATCG · % V 1B750 13760 13770 13780 13790 13800 (TTGGCCGTGG TGTCGGCTCC GCCGCCTTCA ,TACTGCACCG GGCGGGAAGG ATCGACAGAT 13810 13820 13830 13840 13850 13860 TTGATCCAGC GATACACCGC CTCCTGATTA GCGCCCTGGC CTGA7TCATT CCCCAGCGAC ·: 13870 13S80 13890 13900 13910 13920 CAGATGATCA CACTCGGCTG ATTACGATCG CGCTGCACCA TTCGCGTTAC GCGTTGGCTC 13930 13940 13950 13960 13970 13980 ATCGCCGGTA GCCAGCGCGG ATCATCGGTC AGACGATTa TTGGCACaT GCCCTGGGTT 13990 14000 14010 14020 14030 14040 TCAATATTGG CnCATCCAC CACATACAGG CCGTAGCCGT, CGCACAGCGT GTACCACAGC 14050 14060 14-070 , 1408« 14090 14100 GGATGGTTCG GATAATGCGA ACAGCGCACG GCGTTAAAGT TGTTCTGCTT CATCAGCAGG 14110 14120 14130 1A1A^ 14150 14160 ATATCCTGCA CCATCGTCTG CTCATCCATG ACCTGACCAT GCAGAGGATG ATGCTCCiTGA 14170 141S0 14-190 14-Z00 14210 14Z20 CGGTTAACGC CTCGAATCAG CAACGGCTTG CCGTTCAGCA GCAGCAGACC ATTTTCAATC 14230 14240 14Z50 14Z60 14270 14280 CGCACCTCGC GGAAACCGAC ATCGCAGGCT TCTGCTTCAA TCAGCCTGCC GTCG6CGGTG 14290 14300 14310 14B20 14330 1A340 •31 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 TGCAGTTCAA CCACCGCACC ATAGAGATTC GGGATTTCCG CGCTCCAaG TTTCGGCTTT： 143S0 14360 14370 14380 14390 14400· TCGACGTTCA GACGTAGTGT GACGCGATCd GCATAACCAC CACGCTCATC GA丁AATTTCA 14410 14420 14430 14440 14^50 14Λ60· CCGCCGAAAG GCGCGGTGCC GCTGGCGACC TGCGTTTCAC CCTGCCATAA AGAAAGTGTT 14470 14480 14490 14500 14510 W520： ACCCGTAGGT ACTCACGCAA CTCGCCGCAC ATCTGAACTT CAGCCTCCAG TACAGCGCGG 1A530 1454Θ 14550 14560 14570 14S80 GTGAAATCAT CATTAAAGCG ACTGGaACA TGGAAATC6C TGATTTCTCT AGTCGGTTTA 14590 14600 14610 14620 U630 146« TGCACCAACG AGACGTCACG GAAAATGCCG CTCATCC6CC ACATATCCTG ATCTTCCAGA 14650 14660 14670 146S0 14690 14700. TAACTGCCGT aCTCCAGCG CACCACCATC ACCGCGAGGC GGTTTTCTCC GGCGCGTAAA ； 14710 1^7Z0 K730 14740 U75C 14760 AATCCGCTCA GGTCAAATTC AGACGGCAAA CGACTGTCGT GGCCCTAACC GACCacCGC ； * 14770 14780 14790 14500 14810 14820 CCGTTGCACC ACA6ATGAAA CGCCGAGnA ACGCaTCAA AAATAATTCG CGTCTGGCCT . 14830 14840 14850 14860 1487Θ 1^80: TCCTGTAGCC AGCTTTCATC AACATTAAAT GTGAGCGAGT AACAACCCGT CGGATTCTCC 14890 14900 14910 14920 149B0 14940 GTGGGAACAA ACGGCGGATT GACCGTAATG GGA丁AGGTGA CGTTGGTGTA GATGGGCGCA : 1495β 14960 14970 14980 14990 15000 . TCGTAACCGT GCATCTGCCA GTTTCSAGGGG ACGACGACAG TATCGGCCTC AGGAAGATCG ·; % 1S010 15020 15030 15040 15050 15060 ·· CACTCCAGCC AGCTTTCCGG CACCGCTTCT GCTCCCGGAA ACCAGGCAAA GCGCCATTCG ： 15070 15080 15090 15100 15110 15120 ： CCATTCAGGC TGCGCAACTG TTGGGAAGGG CGATCGGT6C GGGCCTCTTC GCTATTACGC 151B0 15140 15150 15160 X5170 15150 CAGCTG6CGA AAGGGGGATG TGCTGCAAGG CGATTAACTT GGCTAACGCC AGGGTTTTCC 1519Θ 1S200 15210 15220 15Z30 · 15240 * CAGTCACGAC CTTGTAAAAC GACTTAATCC GTCGAGGCGC TGCCTCGAAG CAGACGACCT 15Z50 15260 15270 15280 15290 15300 TCCGTTGTGC AGCCAGCGGC GCCTGCGCCG GTGCCCACAA TCGTGCGCGA ACAAACTAAA 15310 15320 15330 153紗 15B50 1S36® CCAGAACA^A TTATACCGGC GGCACCGCCG CCACCACCTT CTCCCGTGCC TAACATTCCA 15370 15380 15390 15400 15410 1S420 GCGCCTCCAC CACCACCACC ACaTCGATG TCTGAATTGC CGCCCGCTCC ACCAATGCCG 15430 15440 15450 15460 15470 15480 ACGGAACCTC AACCCGCTGC ACCTTTAGAC GACAGACAAC AATTCTTGGA AGCTATTAGA 15490 15500 15S10 15520 15530 15S40 AACGAAAAAA ATCGCACTCG TCTCAGACCG GTCAAACCAA AAACGGCGCC CGAAACCAGT _ 15550 15560 15570 15580 15590 156⑽ ACAATAGTTG AGGTGCCGAC TCTGTTGCCT AAAGAGACAT TTGAGCCTAA ACCGCCGTCT -32- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐） 1232239 Λ8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 15610 1S620 15630 156« 15650 1566? GCATCACCGC CACCACCTCC GCCTCCGCCT CCGCCGCCAG CCCCGCCTGC GCCTCCACCO 15670 15680 15690 15706 15710 15720 ATGGTA6ATT TATCATCAGC TCCACCACCG CCGCCATTAG TAGATTTGCC GTCTGAAATG; 15730 15740 15750 15760 15770 15780 TTACCACCCC CTCCACCATC GCTTTCTAAC CTCTTGTCTC AATTAAAATC GGGCACACTT 15790 15800 15«10 15S20 15830 1S840 AGAHGAAAC CCGCCCAAAA ACGCCCGCAA 丁CAGAAATAA TTCCAAAAAG CTCAACTACA 15850 15860 15Z?d 1S8S0 L5890 15900 AATTTGATCG CGGACGTGTT AGCCGACACA ATTAATAGGC GTCGTGTGGC TATGGCAAAA 15910 15920 15930 15940 1S950 15960 TCCTCTTCGG AAGCAACTTC .TAACGACGAG GGTTGGGACG ACGACGATAA TCGGCCTAAT 15970 1S9S0 15990 16000 16010 16020 AAAGCTAACA CGCCCGATGT TAAATATGTC CAAGCTACTA GTGGTACCGC TTGGCAGAAC 16030 16040 16050 16060 16070 16080 .ATATCCATCG CGTCCGCCAT CTCCAGCAGC CGCACGCGGC GCATCTCGG6 CAGCGTTGGG 16090 16100 16110 161Z0 16130 1614-0 TCCTGGCCAC GGGTGCGCAT GATCGTGCTC CTGTCGTTGA GGACCCGGCT AGGCTGGCGG 16150 16160 16170 16180 16190 16200 GGTTGCCTTA CTGCTTAGCA GAATGAATCA CCGATACGCG AGCGAACGTG ^AGCGACTGC 16210 16220 16Z30 16Z40 16250 16260 丁GCTGCAAAA CGTC丁GCGAC CTGAGCAACA ACATCAATGG TCTTCGGTTT CCGTGTTTCG 16Z70 16ZS0 16290 16300 16310 163Z0 TAAAGX-CTGG AAACGCGGAA GTCAGCGCCC TGCACaTTA TGTTCCGGAT CTGCATCGCA 16330^ 16340 16350 16360 16370 16380 GGATGCTGCT GGCTACCCTG TGGAACACCT ACATCTGTAT TAACGAAGCC CTGGCAHGA 16B90 16400 16410 16420 16430 1644.0 CCCTGAGTGA TTTTTCTCTG GTCCCGCCGC ATCCATACCG CCAGTTGTTT ACCCTCACAA 164-50 16460 16470 16«0 16490 16500 CGTTCCAGTA ACCGGGCATC； TTCATCATCA GTAACCCGTA TCGTGAGCAT CCTCTCTCGT 16510 165Z0 16530 16540 16550 16560 TTCATCGGTA TCAnACCCC CATGAACAGA AATCCCCCn ACACGGAGGC ATCAGTGACC 16570 16580 · 16590 16600 16610 16620 AAACAGGAAA AAACCGCCCT TAACATG6CC CGCTTTATCA GAAGCCA6AC ATTAAC6CTT 16630 166^0 16650 1^660 16670 16680 CTGGAGAAAC TCAACGAiSCT GGACGCGGAT QAACAGGCAG ACATCTGTGA A丁CGCTTCAC 16690 167^0 16710 16720 16730 16740 GACCACGCTG ATGAGCTTTA CCGCAGCTGC CTCGCGCGTT TCGGTGATGA CGGTGAAAAC 16750 16760 16770 16780 16790 16800 CTCTGACACA TGCAGCTCCC GGAGACGGTC ACAGCTTGTC TGTAAGCGGA TGCCGGGAGC 16810 16Ε2» 16830 16840 16SS0 16S60 AGACAAGCCC GTCAGGGCGC GTCAGCGGGT GTTGGCGGGT GTCGGGGCGC AGCCATGACQ 16870 16880 16890 16909 16910 16920 CAGTCACGTA GCGATAGCGG AGTGTATACT GGCTTAACTA TGCGGCATCA GAGCAGATTG -33- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 B8 C8 D8 六、申請專利範園 擊 鲁 16930 16940 16950 16960 1 16970 169β0 TACTGAGAGT GCACCATATG C6GTGTGAAA TACCGCACAG ATGCGTAAGG AGAAAATACC 16990 17刚 17010 17020 17030 17040 GCATCAGGCG CTCTTCCGCT TCCTCGCTCA CTGACTCGCT GCGCTCGGTC GTTCGGCTGC 170S0 17060 17070 17080 17090 1710Θ GGCGAGCG<TT ATCAGCTCAC TaAAGGCGC TAATACGGTT ATCCACAGAA TCAGGGGATA 17110 17120 17130 17140 17150 17160 ACGaGGAAA GAACATGTGA GCAAAAGGCC AGCAAAAGGC aGCAACCGT AAAAAGGCC6 17170 17180 17190 17290 17210 17220 CGTTGCTGGC GTTT7TCCAT AGGGTCCGCC CCCCTGACGA GCA丁CACAAA AATCGACGCT 17230 17Z40 1725Θ 17260 17Z70 17280* CAAGTCAGAG GTGGCGAAAC CCGACAGGAC TATAAAGATA CCAGGCGTTT CCCCCT6GAA. 17192 17300 17310 17320 17330 17340 GCTCCC丁CGT GCGCTCTCCT GTTCCGACCC TGCCGCTTAC CGGATACCTG TCCGCCTTTC • 17350 17360 17370 173S0 17390 17400： TCCCTTCGGC AAGCGT6GCG CTiTCTCATA GCTCACGCTG TAGGTATCTC AGTTCGCTCT： 17410 17420 17430 17440 17450 17460 AGGTCGTTCG CTCCAAGCTG GGCTGTGTGC ACGAACCCCC CGTTCAGCCC GACCGCTGCG . 17470 17480 17490 17500 17510 17520 CCTTATCCGG TAACTATCGT CTTGAGTCCA ACCCGGTAAG ACACGACTTA TCGCCACTGG 17530 17540 17550 17560 17570 17580 CAGCAGC*CAC TGGTAACAGG ATTAGaGAG CGAGGTATGT AGGCGGTGCT ACAGACTTCT 17590 17600 17610 17620 17630 17640 ： TGAAGTGGTG GCCTAACTAC GGCTACACTA GAAGGAiAGT ATTTGGTATC TGCGCTC了GC ； 17650 17660 17670 17680 17690 17700 TGAAGCCAGT TACCTTCGGA AAAAGAGUV CTAGCTCTTG ATCCGCCAAA CAAACCACCG 17710 177Z0 17730 17740 17750 17760 CTGGTAGCGG TG6 i 1 i i ΊΓΙ CTTTGCAAGC AGCAdATTAC GCGCAGAAAA UAGGATCTC 17770 17780 17790 17800 17810 17820 AAGAAGATCC TTTGATCTTT TCTACGGGGT CTGACGCTCA GTGGAACGAA AACTCACGTT 17830 17840 17850 17860 17870 17880 AAGGGATTTT GGTCATGAGA HATCAAAAA GGATCTTCAC CTAGATCCTT TTAAATTAAA 1789Θ 17900 17910 17920 17930 .17940 AATGAAGTTT TAAATCAATC TAAAGTATAT ATGAGTAAAC HGGTCTGAC AGHACCAA丁 17950 17960 17970 、17980 17990 18000 GCTTAATCAG TGAGGCACCT ATCTUGCGA TCTCTCTA7T TCGTTCATCC ATAGTTGCCT 1S010 18020 15030 18040 18050 18060 GACTCCCCGT CGTGTAGATA ACTACGATAC GGGAGGGCTT ACCATCTGGC CCCAGTGCTG 18070 18080 18090 18100 18110 18120 CAATGATACC GCGAGACCCA CGCTCACCGG CTCCAGATTT ATCAGCAATA AACCAGCCAG 18130 18140 18150 18160 18170 18180 CCGGAAGGGC CGAGCGCAGA AGTGGTCCTG CAACTTTATC CGCCTCCATC CAGTCTATTA 18190 18200 18Z10 18Z20 1EZ30 182⑽ -34- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公酱) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 ATTGTTGCCC GGAAGCTAGA GTAAGTAGTT CGCCAGTTAA TAGTTTGCGC AACGTTGTTG 18250 1EZ60 1E270 18ZS0 1S290 18B00 CCATTGCTGC AGGCATCGTG GTGTCACGCT CGTCGTTT6C TATGGCTTCA TTCAGCTCCG 18310 18320 18330 18340 1SB50 18360 GTTCCCAACG ATCAAGCCGA GUACATGAT CCCCCATGH GTGCAAAAAA GCGnTAGC：T 18370 18380 18390 18400 18410 18420 CCTTCGGTCC TCCGATCGTT GTCAGAAG丁A AGTTGGCCGC AGTGKATCA CTCATGGTT^ 18430 18440 1S450 18460 18470 18480 丁GGCAGCACT GCATAATTCT OTACTCTrCA TGCCATCCGT AAGATGCTTT TCTGTGACTG 18490 1S500 18510 1S520 18530 18540 GTGAGTACTC AACCAAGTCA TTCTGAGAAT AGTGTATGCG GCGACCGAGT TGCTCTTGCC 18550 18560 18570 18550 18590 18600 CGGCGTCAAC ACGGGATAAT ACCGCGCCAC ATAGCAGAAC TTTAAAAGTG CTCATCATTG 18610 1E6Z0 186B0 1S640 ' 18650 18660 GAAAACGTTC TTCGG6GCGA AAACTCTCAA GGATCTTACC GCTGTTGAGA TCCAGTTCGA 18670 18680 18690 18700 18710 1Z7^^ TCTAACCCAC TCGTGCACCC AACTGATCTT CAGCATCTTT TACTTTCACC AGCGTTTCTC 18730 18740 18750 18760 IS770 18780 GGTGA^CAAA AACAGGAAGG CAAAATGCCG CAAAAAAGGG AATAAGGGCG ACACGGAAAT _ 1S790 1S800 13810 18820 1S830 18840. (TTTGAATACT CATACTCTTC CTTTTTCAAT ATTATTGAA6 CATTTATCAG GGTTATTGTC： 18850 1ES60 18870 1SSS0 1S890 18900： 丁CATGAGCGG ATACATATTT GAAT(prATTTAGAAAAATAA ACAAATACGG GTTCCGCGCA. 18910 ‘ ；. ,15920 18930 18940 18950 18960 CATTTCCCCG AAAAGTGCCA CCTGACGTCT AAGAAACCAT TATTATCATG ACATTAACCT 1B970 18980 18990 1900Θ 19010 19020 ATAAAAATAG GCGTATCACG AGGCCCTTTC CTCTTCAAGA A................... 42.根據申請專利範圍第i項之方法，其中該標的質體包含 「M a n d y」質體之如下所示之核荅酸序列，及其中該 標的質體視需要不具有編碼抗-C D 2 3之抗體多肽。 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) A8 B8 C8 D8 1^32239 六、申請專利範圍 10 Z0 30 40 50 60 TTAATTAAGG GGCGGAGAAT GGGCGGAACT GGCCGGAGTT AGGGGCGGGA TGGGCCGACX 70 80 90 100 110 12» TAGCGGCGCG ACTATCGTTG CTGACTAATT GAGATGCATG CTTTGCATAC 7TCT6CCTGC 130 14® 1S0 160 170 180 TGGGGAGCCT GGGCACTTTC CACACCT6GT TGCTGACTAA TTGAGATGCA. TGCTTTGCAT 190 200 210 ACTTCTGCCT GCTGGGGAGC CTGGGGACTT Z50 260 270 AATTAATTCC CCTAGTTATT AATAGTAATC 310 Β2Θ 33Θ TATGGAGTTC CGCGTTACAT AACTTACGGT 370 380 390 CCCCCGCCCA mACCTCAA TAATGACGTA 430 440* 450 CCAmACGT CAATGGG丁GG AGTA7TTACG 220 230 Ζ4Θ TCCACACCCT AACTGACACA CATTCCACAG Z80 290 300 AATTACGCGG TCATTAGTrC ATAGCCaTA 340 350 369. AAATGGCCCG CCTGGCTGAC CGCCCAACGA 400 410 420 TGTTCCCATA GTAACGCCAA TAGGGACTTT 460 470 480 GTAAACTGCC CACTTGGCAG TACATCAAGT 490 500 510 520 530 540 GTATCATATG CCAAGTACGC CCCCTA7TGA CGTCAATGAC G6TAAATGGC CCGCCTGGCA 55Θ 560 570 5B0 S90 600 TTATGCCCAG TACATGACCT TATGGCACTT TCCTACTTGG CAGTACATCT ACGTATTAGT 610 620 630 640 650 660 aTCGCTATT ACCATGGTGA TGCGGTTTTG GCAGTACATC AATGGGCGTG GATAGCGGTT 670 680 690 700 710 720 TGACTCACGG GGATTTCCAA GTCTCCACCC CATTGACGTC AATGG6AGTT TGTTTTGAAG 736 740 750 1 760 770 780 CTCTTTAAAC ACCTTGGCCG GCCAGCTTTA TTTAACCTGT TTACGTCGAG TCAATTGTAC 790 S00 S10 SZO S30 8铋 ACTAACGACA GTGA丁GAAAG AAATACAAAA GCGCATAATA TITTGAACGA CGTCGAACCT 850 860 870 S80 890 900 TTATTACAAA ACAAAACACA AACGAATATC GACAAAGCTA GATTGCTGCT ACAAGATTTG 910 9Z0 9B0 940 950 960 GCAAGTTTTG TGGCGHGAG CGAAAATCCA UAGATAGTC CAGCCATCGG TTCGGAAAAA 970 980 990 1000 1010 1020 CAACCCTTGT TTGAAACTAA TCGAAACaA TTTTACAAAT CTATTGAGGA TTTAATATTT 1030 10Λ0 1050 '106Θ 1070 1080 AAATTCAGAT ATAAAGACGC TGAAAATCAT HGATTTTCG CTCTAACATA CCACCCTAAA 1090 1100 1110 1120 1130 1140 GATTATAAAT TTAATGAATT AnAAUTAC ATCAGCAACT ATATATTGAT AGACATTTCC 1150 1160 1170 1180 1190 1200 AGTTTGTGAT AnAGTTTGT GCGTCTCAH ACAATGGCTG ΤΤΑΤΤΠΠΓΑΑ CAACAAACAA 1210 1220 1230 1240 1250 1260 CTGCTCGCAG ACAATAGTAT AGAAAAGGGA GGTGAACTGT TTTTGTTTAA CGGTTCGTAC • 1270 1280 1290 1300 1310 13Ze AACATTTTGG AAAHTATGT TMTCCGGTG CTGCTAAAAA ATGGTGTAAT TGAACTAGAA -36- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) A8 B8 C8 D8 1232239 六、申請專利範園 1330 134β 1350 1360 1370 1380 GAAGCTGCGT ACTATGCCGG CAACATATTG TACAAAACCG ACGATCCCAA ATTCA7JGA丁 1390 1400 1410 1420 1430 1440 TATATAAATT TAATAATTAA AGCAAaCAC TCCGAAGAAC TACaGAAAA TAGaCTCTT 1450 1460 1470 1480 1490 1500 GTAAATTACA GAAAAAC丁AT GCGCAGCGGT ACTATACACC CCATTAAAAA AGACATATA丁 1510 1520 1530 1540 1550 1560 ATTTATGACA ACAAAAAATT TACTCTATAC GATAGATACA TATATGCATA CGATAATAAC 1570 1580 1590 1S00 1610 1620 . TATGTTAATT TTTATGAGGA GAAAAATGAA AAAGAGAAGG AATAC6AAGA AGAAGACGAC 16B0 1640 1650 1660 1670 1680 AAGGCGTCTA GTTTATGTGA AAATAAAA7T ATATTGTCGC AAATTAACTG TGAATCATTT 1690 1700 1710 1720 1730 1740 GAAAATGATT πΑΑΑΤΑπΑ CCTCAGCGAT TA丁AACTACC CCTTTTCAAT TATAGATAA丁 » 1750 1760 1770 1780 1790 1S00 ACTACAAA了G TTCUGTTGC GTTTGGTTTG TATC(HTAAT AAAAAACAAA TTT<iACATTT 1S10 1820 1SB0 1840 1850 1860 ATAATTGTTT TATTATTCAA TAATTACAAA TAGGATTGAG ACCCTTGCAG TTGCCAGaA 1870 1SS0 1890 1900 1910 1920 ACGGACAGAG CTTGTCGAGG AGACTTGTTG ATTCATTGTT TGCCJCCCT.G CTGCGGTTTT 1930 1940 1950 I960 1970 1980 TCACCGAAGT TCATGCCAGT CCAGCGTTTT TGCAGCAGAA AAGCCGCCGA CTTCGGTTTG 1990 2Θ0Θ Z010 ΖΘΖ0 2030 2040 CGGTCGCGAG TGAAGATCCC TTTCTTGTTA CCGCCAACGC GCAATATGCC TTGCGAGGTC Z050 2060 2070 , 20S0 2090 210C GCAAAATCGG CGAAATTCCA TACCTCTTCA CCGACGACGG CGCTGACGCG ATCAAAGACG 2110 Z120 2130 Z140 Z150 2160 CGGTGATACA TATCCAGCCA TGCACACTGA TACTCTTCAC TCCACATGTC GCTGTACATT Zl?e Z1S0 2190 2Z00 2210 2220 GAGTGCAGCC.CGGCTAACGT ATCCACGCCG TATTCGGTGA TGATAATCGC CTGATGCAGT Z230 Ζ14Λ Z250 2260 2270 Z28& TTCTCCTGCC AGGCCAGAAG TTCTTTTTCC AGTACCTTCT CTGCCGTTTC aAATCGCCG 2290 2300 2310 2320、 2336 2340 CTTTGGACAT ACCATCCGTA ATAACGGTTC A6GCACAGCA CATCAAAGAG ATCGCTGATG Ί Z350 Z360 Z370 Z380 2390 2400 GTATCGGTGT GACCGTCGCA GAACATTACA TTGACGCAGG TGATCGGACG CCTCGGGTCG 2410 24Z0 2430 2440 2450 24-6® ACTTTACGCG TTGCTTCCGC CAGTGGCGCG AAATAnCCC GTGCACCTTG CGGACGGGTA 2470 24-50 2490 2500 2510 Z5Z0 TCCGCTTCciT TGGCAATACT CCACATCACC ACGCTTGGGT GGTnTTGTC ACGCGCTA丁C Ζ53Θ Z540 2550 2560 Z570 2580 AGCTCTTTAA TCGCCTGTAA CTGCGCTTGC TGAGTTTCCC CGTTGACTGC CTCTTCGCTG Z590 2600 Z610 2620 2630 Z64C -37 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1232239 B8 C8 D8 六、申請專利範園 TACAGTTCTT TCGGCTTGTT GCCCGCTTCG AAACCAATGC CTAAAGAGAG 6TTAAAGCCQ Z650 Z660 2670 Z68d 2690 2700 ACAGCAGCAC TTTCATCAA丁 CACCACGATG CCA丁CHTCA丁 CTGCCCAGTC GAGCATCTCT Z710 2720 2730 2740 2750 2760 TUGCCTAAG GGTAATGCGA GGTACGGTAC GAGTTGGCCC CAATCCAGTC CATTAATGCG 2776 2780 2790 Z800 2810 Z8Z0 TGCTCCTGCA CCATCAGCAC GTTATCCAAT CCTTTGCCAC GCAAGTCCGC ATCTTCATGA 2830 2S40 ZS50 2S60 2S70 2S80 CGACCAAAGC CAGTAAAGTA GAACGGTTTG TGGTTAATCA GGAACTGTTC GCCCTTCACT 2890 2900 2910 2920 . 2930 2940 GCCACTGACC GGATGCCGAC GCGAAGCGGG TAGATATCAC ACTCTGTCTG CCTTTTGGCT * Z950 2960 Z970 2980 2990 3000 ： GTGACGCACA GTTCATAGAG ATAACCTTCA CCCGGTTGCC AGAGGTGCG6 ATTCACCACT ； 3010 3020 3030 3Θ4Θ 3050 3060 TGCAAAGTCC CGCTAGTGCC TTGTCCAGTT GCAACCACCT GnGATCCGG ATCACGCAGT 3070 3080 3090 3100 3110 312& TCAACGCTGA CA丁CACCATT GGCCACCACC TGCCACTCAA CAGACGCGTG GTTACAGTCT 3130 3140 3150 3160 3170 B1S0 TGCGCGACA丁 CCGTCACCAC GGTGATATCG TCCACCCAGC TGTTCGGCGT GGTGTAGAGC 3190 3200 3210 3220 3230 BZ40 ATTACGCTGC GATGGATTCC GGCATAGTTA AAGAAA丁CAT GGAAOAAGA CTGCTTTTTC 3250 3260 3270 3Z80 3290 3300 TTGCCGTTTT CGTCGGTAAT CACCATTCCC GCCCGGATAC TCTGCCAGTT CAGTTCGTTG 3310 v 3320 B330 3340 3350 3360 _ TTCACACAAA CGGTGATACC CCTCGACGGA TTAAAGACTT CAAGCGGTCA ACTATGAAGA 3370 3B80 3B90 3400 3410 34Z0 AGTGTTCGTC TTCGTCCCAG TAAGCTATGT CTCCAGAATG TAGCCATCCA TCCTTCTCAA 3430 3440 B450 3冬60 3470 3480 TCAAGGCCTT GGTCGCTTCC GGATTGTTTA CATAACCGGA CATAATCATA GGTCCTCTGA 3490 3500 3510 3520 3530 3540 CACATAATTC GCCTCTCTGA TTAACGCCCA GCGTmrCCC GCTATCCAGA TCCACAACCT 3550 3560 3570 3580 3590 3600 TCGCTTCAAA AAATGGAACA ACTTTACC6A CCGCGCCCGG TTTATCATCC CCCTCGGGTG 3610 3620 3630 3640 3650 3660 丁AATCAGAAT AGC丁GATGTA GTCTCAGTGA ^CCATATCC TTGTCGTATC CCTGGAAGA丁 3670 3680 3690 B700 3710 37Ze GGAAGCGTTT TGCAACCGCT TCCCCGACTT CTTTCGAAAG AGGTGCGCCC CCAGAAGCAA 3730 3740 3750 3760 3770 3780 . TTTCGTGTAA AHAGATAAA TCGTATTTCT aATCAGAGT GCTTTTGGCG AAGAATGAAA 3790 3800 3810 3826 3830 3840 ATACGGTTGG TACTAGCAAC GCACTTTGAA Μ I 1ΌΑΑ了C CTGAAC^jGAT CGTAAAAACA 3850 3860 3870 3880 3890 3900 GCTCTTCTTC AAATCTATAC ATTAAGACGA CTCGA^ATCC ^CATATCAAA TATCCGAGTG -3i 5- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 3910 3920 3930 3940 3950 3960 TAGTAAACAT TCCAAAACCG TCAKGAATG GAACAAaCT TAAAATCGCA CTATCCGGAA 3970 3930 3990 4Θ00 4010 40Ζ» 丁GATrTGATT GCCAAAAATA GGATCTCTGG CATGCGAGAA TCTGACGCAG GCACTTCTA丁 4030 404« 4050 4Θ6Θ 407Θ 4080 GCGGAAGGGC CACACCCTTA GCTAACCCAG TAGATCCAGA CGAATTGTTT TGTCACGATC 4090 4100 4110 4120 4130 4140 AAAGGACTCT GG丁ACAAAAT CCTAUCAH AAAACCGGGA GG丁AGA丁GAG ATGTGACGAA 4150 4160 4170 4180 4190 4200 CGTGTACATC GACTGAAATC CCTGGTAATC CGTTTTAGAA TCCATGATAA TAAT7TTCTG 4210 4220 4-230 GATTATTGG了 ΑΑΤΠΓΠΤΤΤ GCACGTTCAA 4270 4ZS0 4Z90 aCTACGGTA GGCTGCGAAA TCTTCATACT 4330 4B40 4350 -GTTCGCGGGC GCAACTCCAA CTCCGATAAA 4390 4400 4410 AAGAGAGT7T TCACTGCATA CGACGATTCT 4450 4460 4470 AGCTTCT6CC AACCGAACGG ACATTTCGAA 4510 4520 4530 GGCCGGGCTT CAATACCCTG ATTGACTGGA 4570 4580 4590 TGCTGACGCG TCCG<；CGATT TCCGCCTCTG 4630 4S40 4650 TGGATAATGT AAAAACGCGC GGTGACGATG. 4690 4700 4710 AAACAGAAG丁 GACAGCGCTA CGCG丁CACCC 475C 4760 4770 TGAGCGACGA ATTAAAACAG GCGATGACCG 4810 4820 «30 CCGCGCAGAC GCTACCGCCT GTAGATGTGC 4870 4880 4890 TTACGCGTCC CGTCTCGTCT GTCGGTCTGT 4240 4250 4260 AATTTTTTGC AACCCCTTTT TGGAAACAAA' 4300 4310 43Z0 GTTGAGCAAT TCACGTTCAT TA丁AAATG丁C 4360 4370 4.3S0 TAACGCGCCC AACACCGGCA TAAAGAATTG 4420 4430 4440 GTGATTTGTA TTCAGCCCAT ATCGTTTCA丁 44-80 4490 4580 . GTATTCCGCC TACAGCCCGG CCGTTTAAAC 4540 4550 4560 ACAGCTGTAG CCCTGAACAC CAGCGTGCGC 460C 4610 4620 ACAGTATTAC CCGGACGGTC AGCGATATTC 4660 4670 4680 CCCTGCGTGA ATACAGCGCT AAATTTGATA 47ΖΘ 4730 4740 CTGAAGAGAT CGCCGCCGCC GGCGCGCCTC 4780 4790 CTGCCGTCAA AAATATTGAA ACGTTCCATT 4840 4850 4S60 AAACCaGCC AGGCGTGCGT TGCCAGCAGG 4900 4910 4920 ATATTCCCGC CGGCTCGGCT CCGCTCTTCT 4930 494^ Λ950 ' 496& 4970 4980 CAACGGTGCT GATGCTG6CG ACGCCGGCGC GCAHGCGGG ATGCCAGAAG GTGGTTCTGT 4990 5000 5010 50Z0 5030 5W0 GCTCGCCGCC GCCCATCGCT GATGAAATCC TCTATGCGGC GCAACTGTGT GGCGTGCAGC 5050 S0G0 5070 5080 S090 5190 AAATCTTTAA CGTCGGCGGC GCGCAGGCGA TTGCCGCTCT GGCCTTCGGC AGCGAGTCCG 5110 51Z0 5130 53Λ0 5150 5160 TACCGAAACT GGATAAAATT TTTGGCCCCG GCAACGCCTT TGTAACCGAA GCCAAACGTC 5170· 5180 5190 5200 5210 5220 AGGTaGCCA GCGTCTCGAC GCCGCCGCTA TCGATATGCC AGCCGGGCCG TCTGAAGTAC -39- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 f 5Z30 5240 5250 5Z69 527β 5280 TGGTGATCGC AGACAGCGGC GCAACACCGG ATTTCCTCGC TTCTGACCTG CTCTCCCAGG 5290 5300 5310 5320 S33G 5340 CTGAGCACGC CCCGGA7TCC aGGTGATCC TGCTGACGCC TGATCaCAC ATTGCCCGCA 5350 5360 5370 S3S0 5399 5400 AGCTGGCGGA GGCGGTAGAA CGTCAACTGG CGGAACTGCC GCGCGCGGAC ACCGCCCGGC 5410 5420 5430 545Θ 5460 ACGCCCTGAG CGCCAGTCGT CTGATTGTGA CCAAAGATTT AGCGaGTGC GTCCCCATCT 5470 5«0 5490 5500 5510 5520 CTAATCAGTA TGGGCCGGAA CACTTAATCA TCCAGACGCG CAATGCGCGC GATTTGGTGG S530 5540 5550 5560 5570 5580 ATCCGATTAC CAGCGCAGGC TC6GTATTTC TCGGCGACTC GTCGCCCGAA TCCGCCGGTG 5590 5600 5610 5620 5630 5640 ! ATTACGCTTC CGGAACCAAC CATCTTTTAC CGACCTATGG CTATACTGCT ACCTGTTCCA * 5650 5660 5670 5630 5690 5700 GCCTTGGGTT AGCGGATTTC CAGAAACGGA TGACCGTTCA 6GAACTGTCG AAAGCGGGCT S710 5720 5730 5740 5750 5760 TTTCCGCTCT GGCATCAACC ATTGAAAaT TGGCGGCGGC AGAACCTCTG ACCGCCCATA 5770 S7S0 5790 5S00 5810 5820 AAAATGCCGT GACCCTGCGC GTAAACGCCC TCAAGGAGCA AGCATGAGCA C丁GAAAACAC 5830 5840 5850 586& 5870 5880 TCTCACCGTC GCTGACTTAG CCCGTGAAAA TGTCCGCAAC CTGGAGATCC AGACATGGAT 5930 5940 CAG丁GAAAAA AATiGCTTTA丁 5890 v S900 5910 5920 AAGATACATT GATGACTTTG GACAAACCAC AACTAGAATG 5950 · 5960 5970 5980 599Θ 6000 TTCTGAAATT TGTGATaCTA TTGCTTTATT TGTAACCATT ATAAGCTGCA ATAAACAAGT ' 6010 βα20 6030 6040 6059 6060 TAACAACAAC AATTGCATTC ATTTTATGTT TCAGGTTCAG GGGGAGGTGT GGGAGCTTTT 6070 6080 6090 6100 €110 6120 TTAAAGCAAG TAAAACCTCT ACAAATGTGG TATGGCTGA了 TATGATCTCT AGGGCCGGCC 6130 6140 6150 6160 6170 6180 CTCGACGGCG CGTCTAGAGC AGTGTGGTTT TCAAGAGGAA GaAAAAGCC TCTCCACCCA 6190 6200 6210 6Z2'0 «30 €240 GGCCTGGAAT GTTTCCACCC AATGTCGAGC yAGTGTGGTTT TGCAAGAGGA ACCAAAAAGC 6250 6260 6270 €2δθ 6Z90 6300 CTCTCCACCC AGGCCTGGAA TCTTTCCACC CAATGTCGAG CAAACCCCGC CaGCCTCTT 6310 63Z0 6B30 6ΒΛΘ 6350 6360 GTCATTGGCG AATTGGAAa CGCATATGCA GTCGGGGCGG CGCGGTCCCA GGTCCACnC · 6370 6380 6390 6400 6410 6420 GCATATTAAG GTGGCGCGTC TGGCCTCGAA CACCGAGCGA CCCTGCAGCC AATATGGGAT 6430 6440 6450 6460 6470 6480 CCGCCATTGA ACAAGATGGA TTGCACGCAG GTTCTCCGGC CGCTTGGGTG GAGAGGCTAT 649C 6500 6510 6520 6530 6540 -40- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 穴、申請專利範圍 TC6GCTATGA CTGGGCACAA 6550 6560 CAGCGCAGGG GCGCCCGCTT 6610 66Z0 TGCAGCTAAG TGCGGCCGTC 6670 66S0 ATTACTCAGC CATGCATGGG 6730 6740 GGGCGGAGTT AGGGGCGGGA 6790 6S00 TCTGCCTGCT GGGGAGCCTG 6850 6S60 GCTTTGCATA CTTCTGCCTG 6910 6920 ATTCCACAGA ATTAATTCCC 6970 6980 TAGCCCATAT ATGGAGTTCC 7030 70« GCCCAACGAC CCCCGCCCAT 7090 7100 AGGGACTTTC CATTGACGTC 7150 7160 ACATCAACTG TATCATATGC 7210 » 7220 CGCCTGGCAT TATGCCCAGT 7Z70 7280 CGTATTAGTC ATCGCTATTA 7330 A 丁 ACCGGTTT 7340 GACTCACGGG 7390 7400 GTTTTGGCAC CAAAA丁CAAC 7450 7460 GCAAATGGGC GGTAGGCGTG 7510 75Z0 CCGTCAGATC GCCTGGAGAC 7570 758Θ TCAGCTCCTG GGGCTCCTTC 7630 76« CCAGTCTCCA TCTTCCCTGT 7690 7700 AAGTCAGGAC ATTAGGTATT 7750 7760 CCTCCTGATC TA 丁 GHGCA 丁 CAGACAATCG GCTGCTCTGA 6570 esse CTTTTT€TCA AGACCGACCT 6630 6640 GATGGCCGAG GCGGCCTCGG 6690 6700 GCGGAG入A丁G GGCGGAACTG 6750 6760 CTATGGHGC TGACTAAHG 6810 6SZ0 GGGAGTTCC ACACCTG'CTT 6870 6m CTGGGGAGCC TGGGGACTTT 6930 6940 CTACTTATTA ATAGTAATCA 6990 7000 GCGTTACATA ACTTACGGTA 7050 7®60 TGACGTCAAT AATGACCTAT 7110 7120 AATGGCTCGA GTATTTACCG 717d 7180 CAAGTACGCC CCCTATTGAC 7230 7240 ACATGACCTT ATGGGACTTT 7Z90 7300 CCATGGTGAT GCG(a i Ϊ i i GG 7350 7360 GATTTCCAAG TCTCCACCCC 7410 7420 GGGACTTTCC AAAATGTCGT 7470 7480 TACGGTGGGA GGTCTATATA 7530 7540 GCCATCACAC ATCTCTCACC Γ590 7600 TGCTCTGGCT CCCAGCTGCC 7650 7660 CTGCATCTGT AGGGGACAGA 7710 7720 ATTTAAATTG GTATCAGCAG 7770 7780 CCAGTTTGCA AAGTGGGGTC TGCC6CCGTG TTCCGGCTGT 6590 6600 CTCC6CTGCC CTGAATGAAC 6650 €669 ccraccATA λΑΤΛΑΑΑΑΑΑ. 671C 6720 GGCGGAGTTA GG6GCGGGAT .6770 6780. AGATGCATGC TTTGCATACT 6830 6840 GCTGACTAAT TGAGAT6CAT 6890 6900 CCACACCCTA ACTCACACAC 6950 6960 ATTACGGGGT CATTAGTTCA 7010 70Z0 AATGGCCCGC CTGGCTGACC 7070 7080 GTTCCCATAG TAACGCCAAT 7130 7140 TAAACTGCCC ACTTGGCACT 7190 7200 GTCAATGACG GTAAATGGCC 7250 7260 CCTACTTGGC AGTACATCTA 7310 73Z0 cACTAarcA ATGGGCCTGG 7370 7380 ATTGACGTCA ATGGGAGTTT 7430 7440 AACAACTCCG CCCCATTGAC 7490 750Θ AGCAGAGCTG > GGTACGTGAA 7550 7560 ATGGACATGA GGGTCCCCGC 7610 7620 AGATCTGACA TCCAGATGAC 7670 7680 CTCACCATCA CTTGCAGGGC 7730 7740 AAACCAGGAA AAGCTCCTAA 7790 7800 CCATCAAGGT TCAGCGGCAG -41 -- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 7810 7820 7^30 7840 7850 7860 TGGATCTGGG ACAGACTTCA CTCTCACCGT CAGCAGCCTG CAGCCTGAAS ATTTTGCGAC 7870 7E80 7890 7900 7910 7920 TTATTACTCT CTAaGGTTT ATAGTACCCC TCGGACGTTC CGCCAAGGGA CCAAGGTGGA 7930 7940 7959 7960 7970 7980 AATCAAACCT ACGGTGGCTG CACCATCTGT CTTCATCTTC CCGCCATCTG atgagcagtt. 7990 8000 8010 S020 8030 8040 GAAATCTGGA ACTGCCTCTG TTGTGTGCCT GCTGAATAAC TTCTATCCCA GAGAGGCCAA 8050 8060 8070 8030 $090 S100 AGTACACTGG AAGGTGGATA ACGCCCTCCA ATCGGGTAAC TCCCAGGAGA GTGTaCAGA 8110 8120 8130 8U0 8150 8160 GCAGGACAGC AAGGACAGCA CCTACAGCCT CAGCAGCACC CTGACGCTGA GCAAAGCAU 8170 8180 819C SZ00 5210 8Z20 CTACGAGAAA CACAAACTCT ACGCCTGCGA AGTCACCCAT CAGGGCCTGA GCTCGCCCGT 8239 8240 SZ50 8260 8270 8280 CACAAAGAGC TTCAACAGGG GAGAGTGTTG AATTCAGATC CGTTAACGGT TACCAACTAC 8290 8300 8310 8320 8330 8340 CTAGACTGGA TTCGTGACAA CATGCGGCCG TGATATCTAC GTATGATCAG CCTCGACTGT 8350 8360 S370 8380 8390 8400 GCCTTCTAGT TGCCAGCCAT CTGTTGTTTG CCCCTCCCCC GTGCCTTCCT TGACCCTGGA 8410 84Z0 843G 8440 8450 S4G0 AGGTGCCACT CCCACTCTCC TTTCCTAATA AAATGAGGAA ATTGCATCGC A7TCTCT6AG 8470 8489 8490 8500 8510 8520 TA6GTGTCAT TCTATTCTGG GGGGTGGGGT GGGGCAGGAC AGCAAGGGGG AGGATTCGGA 8530 8540 8550 8560 8570 8SS0 AGACAATAGC AGGCA丁GCTG GGGA丁GCGGT G$GCTCTATG GCTTCTGAGG CGGAAAGAAC 8590 8600 861Θ 8620 8630 8640 CAGCTGGGAC TAGTCGCAAT TGGGCGGAGT TAGGGGCGGG ATGGGCGGAG TTAGGCCCGG 8650 8660 8670 S68Q 8690 8700 GACTATGGTT GCTGACTAAT TGAGATGCAT CCTTTGCATA OTCTGCCTG CTGGGGAGCC 8710 8720 8730 874« 8750 8760 TGGGGACTTT CCACACCTGG TTGCTGACTA ATTGAGATGC ATGCTTTCCA TACTTCTGCC 8770 8780 8790 8909 S810 S8Z0 TGCTGGCGAG CCTGGGGACT TTCCACACCC 丁AACTGACAC ACATTCCACA GAATTAATTC S830 8Ε4Θ 8850 ^ 8860 8870 8S80 CCC丁ACHAT TAATAGTA^J CAAmCGGG GTCATTAGTT CATAGCCCAT A丁ATGGAOT 8890 8 ⑽0 8910 3920 8930 8940 CCGCGTTACA TAACTTACGG TAAATGGCCC GCCTGGCTGA CCGCCCAACG ACCCCCGCCC 8950 E960 8970 8980 8990 9000 ATTGACGTCA ATAATGACGT ATGTTCCCAT AGTAACGCCA ATAGGGACTT TCCATTGACC 9010 TCAATGGCTG 9020 9030 9040 * 90SO 9060 GAGTATTTAC CCTAAACTGC CCACTTGGCA GTACATCAAG TGTATCATAT 9110 9120 CCCGCCTGGC ATTATGCCCA 9070 90S0 9Θ90 9100 SCCAAGTACG CCCCCTATTG ACGTCAATGA CGGTAAATGG -42- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公资) 1232239 C8 D8 六、申請專利範園 •1 9130 9140 9150 9160 9170 91S0 ' GTACATGACC TTATGGGACT TTCCTACm GCAGTACATC TACGTAUAG TCATCGC丁GT 9190 9200 9210 9ZZe 9Z30 9240 TACCATGCTC ATGCGCTTIT GGCACTACAT CAATGGGCGT CGATACCGCT TTGACTCACG 9250 9260 9Z70 9Ζ8Θ 9290 9300 GGGATTTCCA ACTCTCCACC CCATTGACCT CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA 9310 9320 9330 9Β4Θ 9350 936ft ACGGGACTTT CCAAAATGTC (JTAACAACTC CGCCCaTTG ACGCAAATGG GCGGTACGCG 9370 9380 9390 9410 9420 TCTACGGTGG GAGGTCTATA TAAGCAGA6C TGGGTACGTG AACCCTaGA TCGcrreGAG 9430 9440 9450 9460 9470 9480 ACGCCGTCGA CATGGGTTGG AGCCTCATCT TGCTCTTCCT TGTCGCTGTT GCTACGCGTG . 9490 95Θ0 9510 9520 9530 9540 TCCTGTCCGA GGTGCAGCTG GTGGAGTCTG GGGGCGGCTT GGCAAAGCCT CGGGGCTCCC • 9550 9560 9570 9SS0 9590 9600 TGAGACTCTC CTGCGCAGCC TCCGGGTTCA GGTTCACCTT CAATAACTAC TACATGGACT 9610 9620 96ΒΘ 9640 9650 9660 GCGTCCGCCA GGCTCCAGGG CAGGGGCTGG AGTGGGTCTC ACGTATTAGT AGTAGTGGTG 9670 9680 9690 $700 9710 9720 A 丁 CCCACA 丁 G GTACGCAGAC TCCG丁GAAGG GCAGATTCAC CA丁CTCCAGA GA6AACGCCA 9Γ30 974Θ 975® 9760 9770 9780 AGAACACACT GTTTCTTCAA ATGAACAGCC 丁GAGAGCTGA GGACACGGCT CTCTATTACT 9790 9800 9819 9S20 9830 9840 G丁GCGAGCTT GACTACAGGG TCTGACTCCT GGGGCCAGGG AGTCCTGGTC ACCGTCTCCT 9850 9860 9870 988Θ 9890 9900 CAGCTAGCAC CAAGGGCCCA TCGCTCTTCC CCCTGGCACC CTCCTCCAAG AGCACCTCTG 9910 9920 9930 9940 9950 9960 •GGGGCACAGC GGCCC丁GGGC TGCCTGGTa ACGACTACTT CCCCGAACCG GTGACGGTGT 9970 9980 9990 10000 10010 1002Θ CGTGGAACTC AGGCGCCCTG ACCAGCGGCG TGCACACCTT CCCGGCTGTC CTACAGTCCT 10030 10040 1^050 10060 10070 1ΘΟΒ0 CAGGACTCTA CTCCCTCAGC AGCGTGGTGA CCGTGCCCTC CAGCAGCTTG G6CACCCAGA 10090 10100 10110 10120 ' 10130 10140 CCTACATCTG CAACGTGAAT CACAAGCCCA GCAACACCAA GGTGGACAAG AAA€TTGAGC t 10150 10160 10170 101S0 ici9e 10200 CCAAATCTTG TGACAAAACT CACACATGCC CACCGTGCCC AGCACCTGAA CTCCTGGCGG 1Θ210 10220 10Z30 1024Θ 1CZ50 10260 GACCGTCAGT cnccTcrrc CCCCCAAAAC CaAGGACAC CCTCATGATC TCCCGGACCC 10270 10280 10Z90 1Ο30Θ 10310 10BZ0 CTGAGGTCAC* ATGCGTGGTG GTGGACGTGA GCCACGAAGA CCCTGAGGTC AAGTTCAAC了 10330 10340 10350 10360 10370 10380 GGTACGTGGA CGGCGTGGAG CTGCATAATG CCAAGACAAA GCCGCGGGAG GAGCACTACA 10390 10400 10410 104Z0 10430 10440 - 43- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 x 297公釐) 1232239 B8 C8 D8 六、申請專利範園 ACAGCACG丁A CCCTCTCGTC AGCCTCCTCA CCGTCCTGCA CCA6GACTGG CTGAATGGCA 10450 10460 10470 10480 10490 1050Θ AGGACTACAA GTGCAAGCTC TCCAACAAAG CCCTCCCAGC CCCCATC GAG AAAACCATCT 10510 10520 10530 1054.0 10550 10560 CCAAAGCCAA AGGGCAGCCC CGAGAACCAC AGGTGTACAC CCTGCCCCU TCCCGGGATG 10S70 1^580 10S90 10600 10610 10620 AGCTGACCAA GAACaGCTC AGCCTGACCT GCCTCCTCAA AGGCTTCTAT CCCAGCGACA W630 10840 10650 10660 10670 106S9 TCGCCGTGGA GTGGGAGA6C AAT6GGCA6C CGGAG^ACAA CTACAAGACC ACGCCTCCCG 10690 10700 1071C 10720 10730 W7斗❺. TGCT6GACTC CGACGGCTCC TTCTTCCTCT ACAGCAA-GCT CACCGTGGAC AAGAGCAGGT . 10750 10760 10770 10780 10790 10300 CGCAGCAGGC GAACGTCTTC 丁CATGCTCCG TGATGCATGA GGCTCTGaC AACCACTACA 10810 108Z0 X0830 10840 1OS50 10S60 CGCAGAAGAC CCTCTCCCTG TCTCCGGGTA AATGAGGATC CGTTAACGGT TACCAACTAC • 10S70 10S80 10890 10900 10910 10920 CTAGACTGGA TTCGTGACAA CATGCGGCCG TGATATCTAC GTATGATCAG CCTCGACTGT 10930 10940 10950 10960 10970 .1098Θ GCCTTCTAGT TGCCAGCCAT CTCTTCFTTG CCCCTCCCCC GTGCCTTCCT TGACCCTGGA 10990 12000 11010 11020 11030 11040 AGGT6CCACT CCCACTCTCC TTTCCTAATA AAATGAGGAA ATTGCATCGC ATTGTCTGAG 11050 11060 11070 11980 11090 11190 TAGGTGTCAT TCTATTCTGG GGGGTGGGG丁 GGGGCAGGAC AGCAAGGGGG AGGATTGGGA 11110 、11120 11130 11140 11150 11160 AGACAATAGC AGGCATGC丁G GGGATGCGCT GGGCTCTATG GCTTCTGAGG CGGAAAGAAC 11170 11180 11190 " 11ZM 11Z10 11ZZ0 CAGCTGGGGC TCGACACCAA CGCTAGGTCG AGGCCGCTAC TAACTCTCTC CTCCCTCCTT 11230 11240 11250 1126Θ 11270 11280 TTTCCTGCAG GACGAGGCAG CGCGGCTATC GTGGCTGGCC ACGACGGGCG nccmcGc 11290 11300 11310 11320 11330 11340 AGCTGTGCTC GACGTTGTCA CTGAAGCGGG AAGGGACTGG CTGCTATTGG GCGAAGTGCC 11350 11360 11370 11380 11390 11400 GGGGCAGGAT CTCCTGTCAT CTCACCTTGC TCCTGCCGAC AAAGTATCCA TCATGGCTGA 11410 11420 11430 11440 * 11450 11460 TGCAATGCGG CGGCTGCATA CGCTTGATCC GGCTACCTGC CCATTCGACC ACCAAGCGAA 11470 11480 11斗90 11500 11510 11520 ACATCGCATC GAGCGAGaC GTACTCGGAT GGAAGCCGGT CTTGTCGATC AGGATGATCT 11530 11540 11550 11560 11570 11580 GGACGAAGAG CATCAGGGGC TCGCGCCAGC CGAACTGTTC GCCAGGTAAG TGAGCTCCAA 11590 11600 11610 11620 11630 116A0 TTCAAGCTCT CGAGCTAGGG CGGCCAGCTA GTAGCTTTGC TTCTCJUTTT CTTATTTGCA 11650 11660 11670 11680 11690 11700 TAATGAGAAA AAAAGGAAAA TTAATTTTAA CACCAATTCA GTACTTGATT GAGCAAATGC -44- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公蝥)
    1232239 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 11710 11720 11730 117M 1175Θ 117G0 CTTCCCAAAA AGGATGCTTT AGAGACAGTC miCTCCAC AGATAAGGAC AAACATTAn 11770 11780 1179Θ 11800 US10 11S20 cagaggcagt acccagagct gagactccta AGCCAGTGAG TGGCACAGCA TCCAGGGAGA 11830 11840 11850 11860 11870 118S0 AATATGCTTG 丁CATCACCGA AGCCTGATTC CGTAGAGCCA CACCCTGGTA AGGGCCAATC 11890 ii9〇e H9ie X19Z0 11930 11940 TGCTCACACA GGATAGAGAC CCUGGAGCC AGGGCAGAGC ATATAAGGTG AGGTAGGATC 11950 11960 11970 11980 11990 12000 AGTT6CTCCT CACA*nTGCT TC丁GACATAG TTGTGTTGGG AGCTTGGATA GCTT6GGGGG 12010 120Z0 12030 1Z040 120S0 12060 GGGACACCTC AGGGCTGCGA TTTCGCGCCA AACTTGACGG CAATCCTACC CTGAAGGCTG 12070 12080 1Z090 12100 12110 12120 GTAGGATTTT ATCCCCGCTG CaTCATGGT TCGACCATTC AACTGCATCG TCGCCGTGTC 12130 1Z140 12150 12160 12170 121S0 CCAAAATATG GGGATTGGCA AGAACGGAGA CCTACCCTGG ccTccGcra GGAACGACTT 12190 12200 1Z210 1222¾ 1223C 12240 CAAGTACTTC CAAAGAAKA CaCAACCTC TTCAGTGGAA GGTAAACAGA ATCTGGTGAT 12250 12260 12270 12280 122M 12300 TATGGCTAGG AAAACCTGGT TCTCCATTCC TGAGAACAAT CGACOTTAA AGGACAGAAT： 12310 12320 1Z330 1234-0 12350 12B60 TAATATAGTT CTCAGTAGAG AACTCAAAGA ACCACCACGA GGAGCTCATT TTCTTGCCAA 12370 123S0 1Z390 12400 12410 12420 AAGTTTGGAT GATGCCTTAA CGTAGGCGCG CCATTAAGAC TTATTGAACA ACCGGAATTG 12430 、 12440 12450 124G0 12470 12A80 GCAAGTAAAG TAGACATGGT TTCGATAGTC GGAGGCAGTT CTGTTTACa GGAAGCCATG 12490 12500 12510 1Z520 12530 12540 AATCAACCAG GCCACCTCAG ACTCTTTGTG ACAAGGATa TGCAGGAATT TGAAAGTGAC 12550 12560 12570 12580 12590 12600 ACGTTTTTCC CAGAAATTGA T7TGGCGAAA TATAAACTTC TCCCAGAATA CCCAGGCGTC 1Z610 12620 12630 12640 1265Θ 12660 CTCTCTGAGG TCCAGGAGGA AAAAGGCATC AAGTATAAGT TTGAAGTCTA CGAGAAGAAA 12670 1Z6S0 12690 12700 12710 12720 GACTAACAGG AAGATGCTTT CAAGTTCTCT GCTCCCCTCC TAAAGCTATG » CATTTTTATA 12730 12740 1Z7S0 1Z760 12770 12780 AGACCATGGG ACTTTTGCTG GCTTTAGATC AGCCTCGACT GTGCCTTCTA CTTGCCAGCC 1Z7M 1Z800 12810 1ZE20 12830 12840 ATCTGTTGTT TGCCCCTCCC CCGTGCCTTC CTTGACCCTG GAAGGTGCCA CTCCCACTGT 1Z850 12860 12870 1Z8S0 12H90 12900 CCTTTCCTAA TAAAATCAGG AAATTGCATC GCATTGTCTG AGTAGGTGTC ATTCTATTCT' 12910 12920 12930 12940 12950 12960 GGGGGGTGGG GTGGGGCAGG ACAGCAAGGG GGAGGATTGG GAAGACAATA CCACGCATGC 1Z970 129S0 1299Θ 13000 13010 13020 TGGGGATGCG GTGGGCTCTA TGGCTTCTGA GGCGGAAAGA ACCAGCTGGG GCTCGAAGCG -45-’ 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 13030 13040 13050 13060 13070 130M GCCGCCCATT TCGCTGGTGG TCAGATGCGG GATGGCGTGG GACGCGGCGG GGAGCCTCAC 13090 13100 13110 13120 1313C 1314« ACTGAGGT7T TCCGCCACAC CCCACTGCTG CCAGGCGCTG ATGTGCCCGG CTTCTGACCA 13150 13160 13170 13180 13190 13200 TGCGGTCGCG TTCGCTTGCA CTACGCGTAC TGTGACCCAG AGTTGCCCGC CGCTCTCCGC 13Z10 13ZZ0 13Z30 13240 13Z50 13260 CTGCGGTACT TCAGGCAGTT CAATCAACTG TTTfCCTTCT GGAGCGACAT CCAGAGGCAC 13270 132⑽ 13290 13300 13310 13328 TTCACCGCTT GCCA6CCGCT TACCATCCAG CGCCACCATC aGTGCAGGA GCTCCTTATC 13330 13B40 13350 13360 13370 13380. GCTATGACGG AACAGGTATT CGCTGGTCAC TTCGATGGTT TGCCCGGATA AACGGAACTG 13390 13400 13410 13420 13430 13440 GAAAAACTGC TGCTGCTGTT TTGCTTCCGT CAGCCCTCGA TGCGGCGTGC 6GTCGGCAAA . 134S0 13460 13470 13480 13490 1B500 GACCAGACCG TTCATACAGA ACTGGCGATC GITCGGCGTA TCGCCAAAAT CACCGCCGTA 13510 13520 13530 13540 13S50 13560 AGCCGACCAC GGGTTGCCGT TTTCATCATA TTTAATCAGC GACTGATCa CCCAGTCCCA 13570 13580 13590 13600 13610 136Z0 GACGAAGCCG CCCTGTAAAC GGGGATACTG AC6AAACGCC TGCCAGTATT TAGCGAAACC 13630 13640 13650 13660 13670 .13680 GCCAAGACTG TTACCCATCC CGTCGCCGTA TTCGCAAAGG ATCAGCGGGC GCGTCTCTCC 參 13S90 1B700 13710 13720 13730 13740 AGCTAGCGAA AGCCATTTTT TGATGGACCA TTTCGGCACA GCCGGGAACG GCTGGTCTTC 13750 13760 13770 13780 13790 13800 ATCCACGCGC GCGTACATCG GGCAAATAAT ATCGG丁GGCC GTGGTGTCGG CTCCGCCGCC 13810 13820 13R30 IBM 13S59 13S60 TTCATACTGC ACCGGGCGGG AAGGATCGAC AGATTTGATC CAGCGATAa GCGCGTCGTG 13870 13SS0 13890 13900 13910 13920 ATTAGCGCCG TGCCCT(iATT CATTCCCCAG CGACaGATG ATCACACTCG GCTGA7TACG 13930 13940 13950 13960 13970 13980 ATCCCGCTGC ACCATTCGCG TTACGCGTTC GCTCATCGCC CGTAGCCAGC GCGGATCATC 13990 14000 14010 14020 14030 14W0 GGTCAGACGA TTCATTGGCA CCATGCCGTG GGTTTCAAfA TTGGCTTCAT CCACCACATA U050 14-060 14070^ 14080 14090 141 ⑽ CAGGCCCTAG CGGTCGCACA GCGTGTACCA CAGCCGATGG TTCGGATAAT GCGAACAGCG 1AH0 14120 14130 14140 14150 14160 CACGGCGHA AAGHGTTCT GCTTCATCAG a«ATATCC TGCACCATCG TCTGCTCATC 14170 14-1S0 14190 14200 14Z10 14Z20 CATGACCTGA CCATGCAGAG GATGATGCTC GTGACGGm ACGCCTCGAA TCAGCAACGG 14230 1Λ240 14250 14-Z60 14270 14280 CTTGCCGnC AGCAGCAGCA GACCATTTTC AATCCGCACC TCG-CGGAAAC CGACATCGCA 14Z9® 14300 14310 14320 U33C 14340 -46- 本紙張尺度適用中國國家標準(CMS) A4規格(210X297公釐) 1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 GCCTTCT€CT TCAATCA6CG TGCCGTCGCC GCTGTGCACT TCAACaCCG CACGATA6AG 14350 143S0 14370 14380 14390 144^0 ATTCGGGATT TCGGCGCTCC ACACTTTCGG CTTTTCGACG TTCAGACGTA GTCTGACCCG 1441C 14420 14430 14ΛΑ0 14450 14460 ATCGGCATAA CCACCACCCT CA丁CGATAAT TTCACCGCCG AAAGGCGC6G TGCCGCTGGC 14470 14480 1449Θ 14500 14518 14520 GACCTGCCTT TCACCC丁GCC ATAAAGAAAC TGTTACCCGT AGGTAGTCAC GCAACTCGCC 14530 14540 14550 14560 14570 14580 GCA CATC丁GA ACTTCAGCCT CCAGTACAGC GCGGCTGAAA 丁 CA 丁 CATTAA ACCGACTGGC 14590 14600 14G10 14620 14630 14640 AACATGGAAA TCGCTGATTT GT6TAGTCGG TTTATGCAGC AACGAGACGT CACCGAAAAT 14650 14660 14670 14650 14690 14700 GfCGCTCATC CGCCACATAT CCTGA丁CTTC CAGA丁AACTG CCGTCACTCC AGCGCAGCAC 14710 14720 14730 147« 14750 14760 j CATCACCGCG A6GCGGTTTT CTCCGGCGCG TAAAAATGCG CTCAGGTCAA ATTCAGACGG j 14770 14780 14790 148Θ0 14S10 14SZ0 ； CAAACGAC丁G TCC丁GGCCGT AACCGACCa GCGCCCGTTG CACCACAGAT GAAACGCCGA 1«30 14840 14850 14^60 1«70 14S80 GTTAACGCCA 丁 CAAAAA丁AA TTCGCGTGTG GCCTTCCTGT ACCCAGCTTT CATCAACATT 1«90 14900 14910 14920 14930 14940 AAATCTGAGC GAGTAACAAC CCGTCGCATT CTCCGTGGGA ACAAACGGCG GATTGACCiT· 14950 14960 1«70 14980 14990 15000 AATGGGATAG GTCACGTTGG TGTAGAT6GG CCCATCCTAA CCCTGCATCT 6CCAGTTTGA 15010 » 1S0Z0 15030 15040 15050 15060 GGGGACGACG ACAGTATCGG CCTCAGGAAG ATCGCACTCC AGCCAGCTTT CCGGCACCGC 15070 1S0SO 15M0 15100 15110 15120 TTCTGGTGCC GGAAACCAGC CAAAGCGCCA TTCGCCATTC AGGCTCCGCA ACTGTTCGGA . 15130 15140 15150 1516Θ 15170 15180 AGGGCGATCG GTGCGGGCC丁 CTTCGCTATT ACGCCAGCTG GCGAAAGGGG GA 丁 CTGCTGC 1S190 15200 15Z10 15229 152B0 15240 AAGGCGATTA AGTTGGCTAA CGCCAGGGTT TTCCCAGTCA CGACGTTGTA AAACGACTTA 15Z50 15260 15270 152S0 15290 15300 ATCCGTCGAG GGGCTGCCTC GAAGaGACC ACCTTCCGTT GTGCAGCCAG CGGCGCCTGC 15310 15320 15330 15340 15350 15360 GCCGGTGCCC ACAATCGTGC GCG AA CA AA C > TAAA Ca GAA CAAATTATAC CGGCGGCACC 15370 15580 1539^ 15400 15410 15420 GCCGCCACCA CCTTCTCCCG TGCC丁 AACAT TCCAGCGCCT CCACaCCAC CACCACCATC 15430 154Λ0 15450 15460 15470 1548C GATGTCTGAA TTGCCGCCCG GTCCACCAAT GCCGACGGAA CCTCAACCCG CTGCACCTTT· 15490 15500 15S10 15520 15530 15540 AGACGACAGA CAACAAnGT TGGAAGCTAT TAGAAACGAA AAAAATCGCA CTCCTCTCAG 15550 15560 15570 15580 15590 15600 ACCGGTCAAA CCAAAAACGG CGCCCGAAAC CAGTACAATA GTTGAGGTGC CGACTGTGn -47- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐)
    裝 玎
    1232239 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範園 15610 15620 15630 15G40 15650 15660. GCCTAAAGA6 ACATTTGAGC CTAAACCGCC GTCIGUTCA CCGCaCCAC CTTCCGCCTCC 15670 15680 1569Θ lS?ee 15710 1572Θ GCCTCCGCCG CCAGCCCCGC CTGCGCCTCC ACCGATGGTA GATTTATCAT CAGCTCCACC 15730 1574Θ 15750 1576^ 15770 157R0 ACCGCCGCCA TTACTAGATT TGCCGTCTGA AATGTTACCA CCGCCTGCAC aTCGCTTTC 15790 15800 15810 158Z0 15E30 15840 TAACGTCTTG TCTGAATTAA AATCGGGCAC AGTTAGATTG AAACCCGCCC AAAAACGCCC 158S0 1SS6C 15870 15M0 15590 15900 GCAATCAGAA ATAATTCCAA AAAGCTCAAC TACAAATTTG ATCGCCGACG TGTTAGCCGA 15910 15920 15930 15940 15950 15960 CACAAHAAT AGGCGTCGTG TGGCTATGGC AAAATCCTCT TCGGAAGCAA CTTCTAACGA 1S970 15980 15990 16000 1601Θ 16G20 CGAGGGTTGG GACGACGACG ATAATCGGCC TAATAAAGCT AACACGCCCG ATGTTAAATA 16030 16040 16050 16060 16070 160S0 .TGTCCAAGCT ACTACTGCTA CCGCTTGGCA CAACATATCC ATCGCCTCCG CCATCTCCAG 16090 16100 16110 16120 16130 16U0 CAGCCGCACG CGGCGCATCT CGGGCAGC.GT TGGGTCCTGG CCACGGCTGC GCATGATCGT 16150 16160 16170 16180 16190 16209 · GCTCCTGTCG TTGAGGACCC GGCTAGGCT(； GCGGGGTTGC CTTACTGGTT AGCA6AATGA 16Z10 16Z20 16Z30 16240 162S0 16260 ATCACCGATA CGCGAGCGAA CGTGAAGCGA CTGCTGCTGC AAAACGTCTG CGACCTGAGC 16Z70 16ZS0 16Z90 . 16300 16319 16320: AACAACATGA ATG6TCTTCG GTTTCCGTGT TTCGTAAAGT CTGGAAACCC CGAACTCACC 16330 1 16340 16B50 16360 16370 16380 GCCCTGCACC ATTATGTTCC GGATCTGCAT CGCAGGATGC TGCTGGCTAC CCTCTGGAAC 16390 1S400 1G410 1W20 16430 16440 . ACCTACATCT GTATTAACGA AGCGCTGGCA TTGACCCTGA GTGATTTiTC TCTGGTCCCG 16450 1S460 16470 16480 16490 16500 i CCGCATCCAT ACCGCCAGH GTTTACCCTC ACAACGTTCC AGTAACCGGG CATCrrTCATC I · 16510 16520 16530 16540 16550 16560 A丁CAGTAACC CGTATCGTGA GCATCC丁CTC 丁CGTTTCATC GGTATCAHA CCCCCATGAA 16570 165S0 16590 16600 16610 16620 CAGAAATCCC CCTTACACGG AGGCATCAGT 6ACCAAACAG CAAAAAACCG CCCnAACAT 166B0 16640 16650 16669 16679 16680 GGCCCGCTTT ATCAGAAGCC AGACATTAAG GCTTCTGGAC XAACTCAACG AGCTGGACGC 16690 16TO0 16710 16720 16730 16740 ： GGATGAACAG aCAGACATCT GTGAATCGCT TCACGACCAC GCTGATGAGC TTTACCGCAG 167S0 16760 16770 16780 16790 ,16S00 CTGCCTCGCG CGTTTCGGTC ATGACGGTGA AUCCTCTGA aCATGCAGC TCCCGGAGAC 1GE50 1G860 GCCCGTCAGG GCGCGTCAGC 16910 16920 CGTAOCGATA GCGGAGTGTA 16810 168Z0 16X30 16«40 CGTCACAGCT TGTCTGTAAG CGGATGCCGG GAGCAGACAA 16870 16S80 16890 16900 GGGTGTTGGC GGCTGTCGGG GCGCAGCCAT GACCCAGTCA -48- 本紙張尺度通用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐) 1232239 韶 C8 D8 六、申請專利範園 16930 16940 16950 16960 16970 169SO TACTGGCTTA ACTATGCGGC ATCACAGaC ATTCTACTGA GA6TGCACCA TATCCGGTGT 1699« 17000 17010 17929 1703Θ 170 幼 GAAATACCGC ACAGATGCGT AAGGAGAAAA TACCCCATCA GGCGCTOTC CCCTTCCTCG 17C59 17060 17070 170S0 1709Θ 17100 CTCACTGACT CGCTGCGCTC GGTCCTTCCG CTGCGGCGAG CGGTATaGC TCACTCAAAG 17110 17120 17130 17140 171S0 ' 17160 GCGGTAATAC 6CTTATCCAC AGAATCAG^G GATUCGaG GAAAGAACAT CTGAGCAAAA 17170 17180 17190 17200 17210 17220 GGCCAGCAAA AGGCCAGGAA CCGTAAAAAG GCCGCOT6C TGGCCTmT CCATAGGCTC 17Z30 17240 172SC 172βθ 17270 17280 CGCCCCCCTG ACGAGCATCA CAAAAATCGA CGCTCAAGTC AGAGGT6GCG AAACCCGACA i 17290 17300 17310 17320 17330 17340 I GGACTATAAA GATACCAGGC GTTTCCCCCT WAAGCTCCC TCGTGCCCK TCCTGTTCCG • 17350 17360 17370 17380 17390 17400 ACCCTGCCGC TTACCGGATA CCTGTCCGCC TTTCTCCCTT CGGGAAGCGT GGCGCTTTCT 17410 17420 17430 17440 17450 174-60 CATAGCTCAC GC丁G丁AGGTA TCTCAGTTCG GTG丁AGG丁CG TTCGCTCCAA GC丁GGGC丁G丁 17472 17480 17490 17509 17510 17520 GTGCACGAAC CCCCCGTTCA GCCCGACCCC TGCCCCTTAT CCGGTAACTA TCGTCTTGAG 17530 17540 17550 17560 17570 17580 TCCAACCCGG TAAGAUCGA CTTATCGCCA CTGCCAGCAG CCACTGCTAA CAGGATTAGC 17590 17600 17610 17620 17630 17640 AGAGCGAGGT ATGTAGGCGG TGCTACAGAG TTCTTGAACT CGTGCCCTAA CTACGGCTAC I 17650 17660 17670 17680 17690 17700 ACTAGAAGGA CAGTATTTGG TATCTGCGCT CTGCTGAAGC CAGTTACCTT CCCAAAAAGA 17710 17720 17730 17740 17750 ^' 17760 CTTGCTAGCT CTTGATCCGG CAAACAAACC ACCGCTGGTA GCGGTGGTTT TTTTGTTTGC 17770 17780 17790 17800 17810 17820 AAGCAGCAGA HACGCGCAG AAAAAAAGdA TCTGAAGAXii ATCCTTTGAT CTTtTCTACG 17830 17S40 17850 17860 17S70 17S80 GGGTCTGACG CTCACTGGAA CGAAAACTCA CGTTAAGGGA TTTTGGTCAT GAGATTATCA 17 玫 90 17900 17910 17929 17930 17940 AAAAGGATCT TCACCTAGAT CCTTTTAAAT TAAAAATGAA GTTTTAAATC AATCTAAAGT 17950 17960 17970 ' 17980 17990 18000 ATATATGAGT AAACTTGGTC TGACAGTTAC CAATGCTTAA TaGTGAGGC ACCTATCTCA 18010 18020 18030 1附0 18050 18060 GCGATCTGTC TATTTCGTTC ATCCATAGTT GCCTGACTCC CCCTCGT^TA GATAACTACG 18070 18080 1809Θ 1819Θ 18110 18120 ATACGGGAGG GCTTACCATC TGGCCCCAGT GCTGCAATGA TACCCCGAGA CCCACGCTCA 18130 18140 18150 18160 18170 181S0 CCGGCTCCAG ATTTATCAGC AATAAACCAG CaGCCGGAA GGGCCGAGCG CAGAAGTGGT IS 190 1S200 18210 18ZZ0 1S230 1E240 -49- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐) 1232239 as B8 C8 D8 々、申請專利範圍 CCTGCAACTT TATCCGCCTC CATCCAGTCT ATTAATTGTT CCCCGGAAGC TAGAGTAAGT 18250 1SZ60 1S270 1$I80 LB 290 183M AGTTCGCCAG HAATAGTTT GCGCAACCTT OTGCCATTG CTGCAGGCAT CCTGCTCTCA 18310 18320 18330 1&340 1R350 1836Θ CGCTCGTCGT 7TGGTAT6GC TTCATTCACC TCCGGTTCCC AACGATCAAG GCGACTTAa 18370 18380 1239Θ 1S«0 18410 1S4Z0 TGATCCCCCA TGTTGTGCAA AAAAGCGCTT AGCTCCTTCG GTCCTCCGAT CCTTGTCAGA 18430 1844« 13450 1M60 1S479 1Z4ZB A<rTAACTTGG CCGCAGTGTT ATCACTCATG GTTATCGaG aCTGCATAA TTCTCTTAa A. • . 18490 18509 1S510 185Z? 18530 1854^ GTCATGCCAT CCGTAAGATG CTTTTCTGTG ACTGGTGAGT ACTCAACCAA CTCATTCTGA 18550 18560 11572 18580 18590 18600 GAATAGTGTA TGCGGCGACC GAGTTGCTCT TGCCCGGCGT CAACACGGGA TAATACCGCC 18610 18620 18630 18640 18650 18660 CaaTAGCA GAACTTTAAA ACTTGCTCATC ATTGGAAAAC CTTCTTCGGG GCGAAAACTC 1S670 1S680 IS690 18700 18710 18720 TaAGGATCT TACCGCTGTT GAGATCCAGT TCGATGTAAC CCACTCGTGC ACCCAACTGA 18730 1874C 18750 18760 18770 18780 TCTTCAGaT CTTTTACTTT CACCAGCGTT TC丁GGCTGAG CAAAAACAGG AAGGCAAAA丁 18790 18S09 1SS10 IZZZd , 1S830 GCCGCAAAAA AGGGAATAAG GGCGACACG6 AAATGTTGAA TACTCATACT CTTCCTTITT 18850 18S60 18870 188S0 18S90 189 的 ΟΑΑΤΑΤΤΑπ GAAGOVTTTA TaGGGTTAT TGTCTCATGA GCGCATACAT ATTTGAA丁CT 18910 18920 .18930 18940 189S0 18960 ATTTAGAAAA ATAAACAAAT AGGGOTCCG CGCACATTTC CCCGAAAAGT GCCACCTGAC 18970 1S980 18990 19000 1901C 190Z0 GTCTAAGAAA CaTTATTAT CATGACA7TA ACCTATAAAA ATAGGCGTAT CACGAGGCCC 19030 1964Q 1^050 19060 19070 19080 TTTCGTCTTC AAGAA............................................. 43·根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中該標示者 質體包含如申請專利範圍第4 0項所示「D e s m ο n d」質 體之核苷酸序列。 44·根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中該標的質 體包含如申請專利範圍第4 1項所示「Μ ο 11 y」質體之 I —-----50- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X297公釐） 1232239 A8 B8 C8 D8 々、申請專利範圍 核甞酸序列，及其中該標的質體視需要不具有編碼抗-C D 2 0之抗體多肽之核甞酸序列。 45.根據申請專利範圍第2 1項之載體系統，其中該標的質 體包含如申請專利範圍第4 2項所示「M a n d y」質體之 核苷酸序列，及其中該標的質體視需要不具有編碼抗… C D 2 3抗體多肽之核甞酸序列。， _-51 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐） 1232239 第087103778號專利申請案 中文圖式替換頁(93年4月） “ a補充 1 丨一 」 12 3 4
    圖4 號專利申請案 中文圖式替換頁(93年4月） ♦"補充 1 _____________ 、一 123456 1 2 3 4 5 6
    1232239 第087103778號專利申請案 中文圖式替換頁(93年4月）
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