TW442453B

TW442453B - Amidino sulphoxide and sulphone derivatives method for their preparation, pharmaceutical composition containing them and their use as inhibitor of inducible nitric oxide synthase

Info

Publication number: TW442453B
Application number: TW084107349A
Authority: TW
Inventors: Harold Francis Hodson; Richard Michael John Palmer; David Alan Sawyer; Richard Graham Knowles; Karl Witold Franzmann
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1994-06-15
Filing date: 1995-07-15
Publication date: 2001-06-23
Also published as: NZ289157A; JP2000026402A; MY115437A; JP3614711B2; CY2455B1; SI0957087T1; DE69529101T2; AU2891795A; IL114142A0; EP0765308B1; CN1070849C; USRE39576E1; RU2162841C2; AU692892B2; KR100430207B1; DK0765308T3; SI0765308T1; CA2192668A1; HUT77407A; MX9606136A

Description

442453 A7 ____B7 五、發明説明（I ) 一~~ 本發明相關於一種脉基亞ί風衍生物，其製法，含其之藥劑組合物及其供醫療之用途，特别以其做爲誘發的氧化氮合成酹之選擇性抑制劑。自從1980年代早期就已知’乙醯膽鹼造成的血管放鬆是受内皮存在的影響且此活性被歸因於一種稱之爲,,内皮衍生之放鬆因子"（EDRF)之不安定的荷爾蒙因子。以甘油基三硝酸酯的活性做爲血管放鬆劑已有一百年^^上的^史，而目前所知，亞硝酸戊酯，三亞硝酸甘油醋及其他硝基血管放鬆劑均是以NO爲其活性成分。隨著迎年所發現的生化路徑，精胺酸之胺基酸受NO合成S每之酵素作用可生成N〇 , 已可論證EDRF即爲NO。 NO是種可溶的烏糞核茌酸環化醏酵素之内生的興奮劑，除了在受内皮影響的放鬆作用產生外，也被包括在許多的生化作用裡，包括呑噬細胞的細胞毒性及在中樞神經系統裡，細胞對細胞的交流（見Moncada等人，Bi〇chemicai

Pharmacology,拉，1709-1715(1989)與Moncada等人， Pharmacological Reviewws, 43, 109-142(1991))。目前認爲’過量NO之生成可能被包括於許多的狀況裡，包括全身性的低i壓’例如敗血症休克及使用某些細胞分解素治療之狀態，以及許多發炎性疾病，例如關節炎方面。由L-精胺酸合成N0可被L-精胺酸同功異質體（NG-單甲基-L-精胺酸（L-MMA)〕抑制，且已有人提出，使用L-NMMA用於治療敗血症休克及其他類型的全身性低血壓（w〇 91/04024與GB-A-2240041)。也有人提出使用異於L- 本紙張尺度適用中國國家標準{ CNS ) A4规格{ 210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -訂經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 ^ 442 45 3 at B7 五、發明説明（2) NMMA之NO合成酹抑制劑以達此目的，見91/04024與 EP-A-0446699。最近已漸明瞭，N0合成5每至少有三種同功酹（Kn〇ffies與

Moncada在Biochem· J. (1994)298,249-258發表之回顧）如下： (i) 組成分，Ca++/受转調素（calmodulin)影響之酵素（ eNOS)，存在於血管内皮細胞，對受體或物理刺激起反應釋出N0。 (ii) 組成分，Ca++/受#5調素（calmodulin)影響之酵素 (nNOS)，存在於腦及一些周園神經系統中，對受體或物理刺激起反應以釋出N0。 (iii) 組成分，受Ca++影響之酵素（iNOS)，爲一種被謗發的酵素，係因▲管平滑肌，巨喊細胞，内皮細胞，及許多其他細胞被内毒素及細胞分解素活化之後所謗發者。一但產生此種謗發的N0酵素後，會有一段時間合成NO。經由eNOS與nNOS釋出，係一種傳導機製進行著許多的生理反應。經iNOS而生產的N0釋出，係作爲一種胞毒分子用於對抗入侵的微生物。產生過多的N0也會有不利影響，特别是病理性的血管擴張，血管裂開與組織受損之情沉，就會因iNOS之作用而大量合成N0。目前被提出以NO合成5每抑制劑用於治療者，例如L-NMMA 與硝基精胺酸，爲不具選擇性的抑制劑，會抑制所有的N0 合成转之同功S每類。使用這類非選擇性的NO合成酹抑制劑需極爲小心以避免潛在的過度抑制eNOS之嚴重結果，包括本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） -----：-----i II - 广·'· (請先閱讀背面之注$項再填寫本頁) -·# 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 442453 A7 B7 五、發明説明（3 ) 高血壓及可能發生血栓及組織損害。特别是，於使用 L-NMMA治療敗血症及/或毒性休克之情況，已有建議，在治療期間，病人需予速績監控血壓。故，雖然非選擇性的 NO合成酹抑制劑於適當處置下有治療的用處，但選用對抑制iN0S要更高於抑制eNOS之NO合成酹抑制劑將有更佳效益及更易使用。 PCT/GB9202387的專利申請案揭示一種具式（0)之一類脒基衍生物 R· Η ΧΟ,Η ⑼ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製包括其鹽類，及其生理容許之酯類及醯胺類，式中 R1爲Cl-6直鍵或支鏈燒基，C2-6烯基，C2-6坱基， C3-6環燒基或C3-6環燒基Cl-6燦基； Q爲具3-6個碳原子之伸烷基，伸烯基或伸坱基，且其可選擇地經一或多個Cl-3烷基取代；或 Q爲具_(CH2 )pX(CH2 )q_之基，其中的ρ爲2或3，q爲 1或2且X爲S(0)x，其中的X爲0, 1或2, 0或M2，其中的R2爲Η或Ci-6垸基；或 Q爲具_(CH2 )rA(CH2 )s-之基，其中的1·爲0，1或2， s爲0，1或2且A爲三至六元碳環或雜環，其或可經取代一個或多個適當的取代基，例如Cl-6燒基，Cl-6燒氧基，羥基，鹵素，硝基，氰基，三氟Cl-6坑基，胺基，Cl-6燒訂本紙張尺度適用中國國家標準（CMS > A4規格（210X2.97公嫠） 442453 A7 B7 五、發明説明（4) 基胺基或二C1-6垸基胺基，其具有做爲NO合成酹酵素之抑制劑的活性。本發明已發現一群特殊的化合物，其爲iNOS的選擇性抑制劑，對eNOS的影響極微或沒有影響。因此本發明提供一種具式（I)之化合物

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CO,H (I) 經濟部中央楼準局員工消費合作社印製式中： R1爲Cl-6直鍵或支鏈烷基，C2-6婦基，C2-6缺基， C3-6環垸基或C3-6環烷基Cl-6垸基，各可選擇地經一至三個分别獨立的以下基取代：鹵素；-CN; -N〇2 ;-C0R2基，其R2爲氫，Ci-6烷基，-0R3，其R3爲氫或Ci-6烷基，或NIMR5，其R4與R5分别獨立地選自氫或d-6烷基 ;-S(0)mR6基，其中之m爲0，1或2，R6爲氫，Ci-6烷基，經基或NR7R8，其中的R7及R8分别獨立地爲氫或 Cl-6烷基；P0(0R9 ) 2基，其中的R9爲氫或d-6烷基； NR10R11，其中的R10與R11分别獨立地選自氫，Ci-6烷基 ;-C0R12，其中的R12爲氫或Ci-6烷基，或-S(0)m’Ri3，其中之1)1’爲0，1或2且1^3爲氳或(：1-6烷基；或-(^14之基，其中的RW爲氫，Ci-6烷基，選擇地經取代一至三個鹵素原子，Ce-io芳基或-C0R15，其中的RK爲氫或Ci-6烷基； p爲2或3，q爲1或2且η爲0或1， (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4规格（210X297公釐）鯉濟部中央標準局貝工消費合作杜印製 f 442 4 5 3 a7 B7 五、發明説明（5 ) 並包括其所有鹽類，酯類，醯胺類及生理容許之前體禁物。適當的fi1爲Cl-6烷基，C2-6烯基或坱基或C3-6環垸基，其各可選擇地經一至三個分别獨立的以下基取代：-CN; -N02 ;-COR2a*，其R2a爲氫，Ci-4垸基，雞基或胺基； -S(0)mR6a基，其中之m値同前且R&爲氫，Ci-4烷基，羅基或胺基；-P〇(〇R9a) 2基，其中的R9a爲氫或Ci-4烷基； NRlOaRlla基，其中的RlOa與Rlla分别獨立地選自氫，d-4 烷基，-(：01112&或-3(0)11^13&，其中之m’値同前且『“與 R13a分别爲氫或Ci-4烷基；-〇R14a之基，其中的R14a爲氫，Cl-4烷基，選擇地經取代一至三個#素原子，苯基，苄基或-C0R15a，其中的R15a爲氫或Ci-4烷基；更佳地，R1爲Cl-4烷基或C2-4烯基或坱基，其各可選擇地經一至三個分别獨立的以下基取代：-CN; -C0K2基，其R2同前，-S(0)mR6基，其中之m與R6同前； M10Rn基，其中的R 1〇與R η之定義同前；鹵素；或-OR Μ 之基，其中的R14之定義同前。最佳地，R1爲甲基或乙基，其各可選擇地經一至三個分别獨立的以下基取代；鹵素，-ORw基，其中的RW定義同前，或_S(0)mR6基，其中之m與R6之定義同前。一群較佳的化合物爲具式（IA)者 -VCH2)p〇VCH2Wr琴(-) 0 NHj -7 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（21 OX297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 f 442453 A7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 B7 五、發明説明（6 ) 其中的R1 ,R2，p與q等之定義如前。較佳地，R1爲不帶取代基或僅帶有一個取代基者。較佳的化合物包括： 2-胺基-6-(卜並胺基已基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸 2-胺基-6-(l-亞胺基乙基胺基）-4-氧-4-硫雜己酸 2-胺基-7-(1-亞胺基乙基胺基）-5-氧-5-硫雜庚酸 2-胺基-7-(1-亞胺基乙基胺基）-5,5_二氧-5-硫雜庚酸 2-胺基-6-(1 -亞胺基-2-氟乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜庚酸 2-胺基-6-(1-亞胺基-2-曱氧基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸胺基-6-(2-乙酸基-1-亞胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸 2-胺基-6-(2-苄酸基-1-亞胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸 2-胺基-6-(2-甲基硫-1-亞胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸 2-胺基-6-(2-羥基-1-亞胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸。並包括其所有鹽類，酯類，鏟胺類及生理容許之前體藥物0 特佳的化合物爲2-胺基-6-(卜亞胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸與2-胺基-6-U-亞胺基-2-氧乙基胺基）-4, 4-二氧-4-硫雜己酸。此化合物宜爲R構型者。本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X2.97公釐） (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 厂裝_ 訂 442453 A7 B7 五、發明説明（7 ) 式（I)的化合物，其分子中因各種不同群組而可能包括許多不對稱中心。全部式（I)的化合物均包含不對稱中心於丫 co2h ，雖然以天然的或（S)不對稱性的精胺酸爲較佳者，但此化學式涵蓋其所有各種可能的異構物，包括單獨存在或混合存在者。本發明的其中一種實體例爲具式（IB)之化合物 I (〇) Η \\ 0 Η (IB) 以及其鹽類，及生理容許之酯類與醢胺類，其中的R1爲Cl-6直鏈或支鏈烷基，C2-6烯基，C2-6坱基，C3-6環烷基或C3-6環垸基Cl-6垸基；p爲2或3，q爲 1或2且η爲0或1。本發明的另種實體例爲具式（1C)之化合物 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

^N.(CH2)pJ^(CH2)q^/C〇2H (1C) 0 其中的η爲0或l;p爲2或3;q爲1或2;R1爲Cl-6直鏈或文键燒基，C2-6烯基，C2-6坱基，C3-6環燒基或〇3_6 環垸基Cl-S烷基，各可選擇地經一至三個分别獨立的以下本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） "442 4 5 3 a? B7 五、發明説明（8 ) 基取代；-CN ; -NO 2 ;-COR 2基，其R 2爲氫，C1-6烷基， -OR 3，其R3爲氫或C〗-6垸基，或NR4 ，其R4與Κ5 分别獨立地選自氫或Ci-6烷基；-S(0)mR6基，其中之m 爲0，1或2，R6爲氫，c〗-6烷基，羥基或NR 7 R 8，其中的R7及R8分别獨立地爲氫或d-6烷基；P0(0R9 ) 2基，其中的R9爲氫或Ci-6垸基；NR10RU，其中的與RU分别獨立地選自氫，Ci-6烷基；_C0R〗2，其中的R12爲氫或 Ci-6烷基，或-S(0)m’Rl3，其中之m’爲〇，1或2且R13爲氫或Ci-6烷基；鹵素；或-0R14之基，其中的RW爲氫，Ci-6 烷基，選擇地經取代一至三個卣素原子，C6-1G芳基或 -COE】5，其中的R1S爲氫或Ci-6烷基；以及其鹽類，酯類，醯胺類及生理容許之前體禁物。 "南素: 一詞意指氟、氯、溴或碘，以氟爲較佳。經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先間讀背面之注意事項再填寫本頁) 適當的鹽類包括其與有機酸及無機酸所形成者。通常使用的酸加成鹽類爲生理容許者，雖然於製備及純化化合物過程也可使用生理不容許之酸加成鹽。故，較佳的鹽類包括與鹽酸，氫溴酸，硫酸，擰檬酸，酒石酸，磷酸，乳酸，丙酮酸，乙酸，三氟乙酸，琥珀酸，草酸，富馬酸，馬來酸，草醯乙酸，甲磺酸，乙磺酸，對T苯磺酸，苯磺酸與羥基乙磺酸作用而得者。式（I )化合物之鹽類可使呈游離基態的適當化合物與適當的酸反應而得。藥理可接受的式（I)化合物之酯類與醯胺類可以是其酸基被-C02 R3基取代者，R3可爲，例如Cl-6烷基，芳基或芳基Ci-3烷基或-C0IM基，其中的R4爲適當的天然或本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2I0X297公釐） 442 45 3 a? B7 五、發明説明（9 ) 合成的胺基酸之殘基。 "生理容許的前體禁物"一詞意指與具式（I)的化合物具同樣生理作用的式（I)化合物之衍生物，例如，在體内被轉換者。這類前體禁物本身可能具活性或不具活性。本發明也提供前面所定義的式（I)化合物及其所有鹽類、酯類、醯胺類與生理容許之前體藥物作爲醫禁品之用法，特别是用於治療受NO合成S每的作用而從L-精胺酸抑制NO 之產生，更明確地説係有利於抑制NO藉iNOS同功f每產生而非抑制由eNOS產生。另一方面，本發明提供具式（I)之化合物及其所有鹽類、酯類、醯胺類與生理容許之前體藥物，用於製備一種醫藥品，使用於治療受NO合成S每的作用而從L-精胺酸抑制NO 產生之狀態，更明確地説，用於抑制iNOS之作用。另一方面，本發明提供一種由具式（I)之化合物及其所有鹽類、酯類、醯胺類與生理容許之前體禁物所製備之醫禁品，使用於治療受iNOS影響而導致的遇量NO產生所致之休克狀態，例如敗血性休克，或因猛爆性肝衰竭所引起之休克，或因使用細胞分解素（例如，TNFJL-1及IL-2)或使用可謗發細胞分解素的試劑（例如，5,6_二甲基咭蜂酮醋酸）進行治療時所5丨起之休克。本發明之另一目的爲提供具式（I)之化合物或其鹽類、酯類、醯胺類或生理容許之前體藥物用於製備供治療發炎狀態（例如關節炎）之醫藥品之用途。或者，本發明也提供一種供治療一種狀況的方法，其能本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X297公嫠） (請先閲請背面之注意事項再填寫本頁)

-1T 經濟部中央標準局員工消費合作社印製經濟部中央標準局員工消費合作社印袋 ^ 442 45 3 A7 ___ B7 五、發明説明（10) 抑制一種因L-精胺酸受N0合成S每，尤其是iN〇s之作用而過度產生N0之狀況，治療法係對哺乳動物施用具療效量，如前所定義的式（I )化合物或其鹽類、酯類、醯胺類或生理容許之前髏藥物。選擇性抑制iNOS的其他好處爲，可被廣範圍地用在自動免疫及/或發炎性疾病，例如關節疾病（如，風濕性關節炎，骨關節炎），胃腸道疾病（例如潰瘍性結腸炎與其他發炎的腸疾，胃炎及因感染所起之粘膜發炎，非類固醇的抗發炎禁物所引起之腸道疾病），肺部疾病（成人的呼吸困難症’氣嗔），心臟方面疾病（心肌炎），神經組織疾病（例如，多發性硬皮症），胰臟方面疾病（例如，糖尿病），腎臟病（例如，血管球性腎炎），皮膚方面疾病（例如，皮膚炎，乾癣，風疹塊）以及移植器官（排斥作用）與多器官疾病 (例如全身紅斑性狼瘡）。此外，已説明於動脈粥瘤硬化症中，有因iNOS所致的過量N0生成。故，本發明尚提供具式 (I )之化合物或其鹽類、酯類、醯胺類或生理容許之前體蔡物用於製備藥劑以處理上述狀沉之用途◊ 抑制nNOS及/或iNOS有利於治療因此種酵素而過度產生 N0時之神經系統方面疾病，特别是供治療腦之絶血症。其他疾病，包括CNS外傷’癲癇’ AIDS癡呆，慢性神經退化疾病與慢性痛，及非副腎素非膽素激導性的神經異常狀沉可能相當複雜，例如異常勃起’肥胖及攝食過度。本發明因此也提供使用具式（〇化合物或其鹽類、睹類、醯胺類或生理容許之前體藥物用於製備供治療上述病情之藥劑的 -12 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210X297公董） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂. A7 B7 442453 五經濟部中央標隼局貝工消費合作社印製 7^5^Τ"ΐϋ 用法0 ----------- ,1 (請先閲讀背面之法##項再填窝本頁) 此外，抑制NO合成薛可能有下述好處：防止因感染Ηιν ，於放射線治療時爲增加腫瘤之放射線敏感度及抑制腫瘤之暴大與移轉時所伴隨之淋巴球損失。當iNOS與eNOS兩種同功酹的角色一致時，例如同時因腦絶血而發生的狀況時，同時抑制兩種酵素將有好處。本夂中所稱的病人的"治療"，包括對其做預防處置；，，啸乳動物意指人類或某種動物。具式（I)之化合物及其所有鹽類、酯類、醯胺類或生理容許之前體藥物’被作爲NO合成酹抑制劑時，其活性可使用下述方法，使用單離的人類或老鼠的酵素，老鼠的大動脈緣戒於小老鼠活體内進行測定。雖然有可能直接使用具式（I)之化合物及其所有的里類、酯類、醯胺類或生理容許之前體裱物，但較好以之配成 _劑齡方施用。本發明之目的之一即爲提供一種禁劑配方，其包括具式（I)之化合物及其所有鹽類、酯類、酿胺類或生理容許之前體樂物’配合一種或多種禁理可接受的載劑及選擇加入的一種或多種其他具療效的成分。载劑需爲，可接受的"，意指可與配方中的其他成分相容且不會有害於患者。配方包括各種適於供口服，非經胃腸施用（包括經皮下、經皮膚、經肌肉、經靜脈與經關節），經直腸與局部（包括皮膚，大腸，舌下及經眼）等施用方式，但最適的路徑應視，例如病人的病沉與疾病而定。本配方可方便地被做 -13 本紙張尺度適用中國國家標準（[：>^)人4規格（21〇\297公釐> 442453 A7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Β7 五、發明説明（l2) 成單位劑量型式且可依任何製禁技藝上所熟知的方法製作。所有的方法包括，將具式（I)之化合物及其所有鹽類、酯類、醯胺類或生理容許之前體藥物（"活性成分"），與由一或多種辅助成分所成的載劑混合在一起β通常，此配方是將活性成分的液態載劑或研成極細的固態載劑均句而密切地混合著，有必要時，將產品定型成所要配方。適於供口服的本發明配方可能呈分立的單位，例如各含有預定量的活性成分之膠囊劑、藥包或錠劑；爲粉劑或粒费J ;爲溶解於水性液髏或非水性液體内的溶液或懸浮液；或爲呈油溶於水或水溶於油的液態乳劑。活性成分也可爲大丸禁，紙劑或膏狀樂。錠劑可由壓製或模製製得，可加入一或多種輔助成分。壓製的藥片可於適當的機器中將呈游離態（例如粉狀或顆粒狀）的活性成分，或可選擇性加入粘結劑，潤滑劑，惰性稀釋劑，亮光劑，表面活性劑或分散劑，一起壓製而成。模製的錠劑可於適當的機器裡，將經惰性液態稀釋劑潤濕之粉狀混合物予《模製。此錠劑可選擇地予以包衣或加註標記，且可將之配製成具緩慢釋出活性物質或可受控制下釋出活性成分者。供非經胃腸施用的配方包括水溶性及非水溶性之滅菌注射溶液，其可能含有抗氧化劑，緩衝液，制菌劑與助溶劑，以使配方與病人的血液達等滲性；且水溶性及非水溶性之滅菌懸浮液中，可能包括懸浮劑與增稠劑。此配方可存於單位劑量或多重劑量之容器中，例如，密封的安瓶瓶及禁水瓶裡，且可能呈被冷凍乾燥的狀態，於使用前僅需添 -14 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（2丨0父29?公釐） (請先間讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 4 42 4 5 3 Α7 Β7 五、發明説明（is) 加無菌液態载劑（例如’鹽水或供注射用水）者β臨時的注射溶液與懸浮液可由上述的滅菌的粉劑，顆验劑及錠劑製備0 供直腸施用的配方可使用習用的載劑，例如可可脂或衆 6二醇，做成坐樂使用。供〇腔局部施用的配方，例如抹於口腔或置於舌下者，包括，含活性成分於加了香味之基質（例如蔗糖與刺槐豆膝）之敍:片。較佳的劑量單位配方爲，含有如上所述之有效劑量之活性成分或經適當分劃者。應知道，除上述特别予以提及之成分外，毫無疑間地，本發明的配方裡也可能含有其他習用的試劑，例如適於供口服之配方中就可另含有香味成分。本發明的化合物可經口或經注射施用，對每公斤體重，其每曰的施用劑量可爲〇.卜1500毫克，宜爲0.1-500毫克。對成人的劑量範園通常每天可爲5毫克至35克，較宜爲每天施用5毫克至2克。錠劑或其他分立的單位可方便地含有具有療效的劑量，例如，每錠中含5毫克至500毫克者，通常爲10毫克至200毫克。本發明的化合物可與一種或多種他類活性成分一起施用。醫生很清楚這類活性成分爲何，但也可舉例説明如抗發炎試劑，例如，皮質類固醇，例如甲基強的松龍。具式（I) 的化合物與L-精胺酸互爲競爭性抑制劑，故可能不適於治本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） (請先閱讀背面之注項再填寫本頁)

442453 A7 B7 五、發明説明（Η) 療原以含有高量精胺酸之製劑治療中的病人，例如完全靠點滴供應營養者。具式（I)之化合物及其所有鹽類、酯類、醯胺類或生理容許之前體藥物，較好經口或經注射（靜脈或皮下）方式施用。正確的施用量需由病人的主治醫生決定。然而所用劑量仍需參照多種因素，包括，病人的年齡與性别，正確的治療程序，以及病情嚴重度。投禁的路徑可視情況與病的嚴重度而變動。式U)之化合物爲新穎化合物，本發明因此也相關於這類化合物之製法。具式（I)之化合物的製法爲： (a)將具式（II)之化合物予以氧化： (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 厂裝_

R Χϋ,Η (II)

-IT 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

NtL, 此氧化反應可利用文獻中已知的方法，例如，以富於氧之化合物，例如，30%之過氧化氫與0.5M之鉬酸銨，在過氣酸中進行。式（II)的化合物可由具式（ΠΙ)的胺基酸或其經保護的衍生物 1、s—% 丫…γ (m) NH, 與具式（IV)之化合物反應 -16 -本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 ^ 442453 B7 五、發明説明（is) R1 HN^L (IV) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 式中之L爲一種釋離基，R1，p與q之含義同前，接著，將任何存在的保護基團除去，可得具式（II)之化合物。適當的釋離基L包括-OR 5與-SR 5，其中的R5爲低級烷基，例如，Ch4烷基，較好爲甲基或乙基。式（III)的化合物通常使用其胺基酸功能基被適當基保護著者，可依T.W· Greene and P.G.M. Wuts， Protective Groups in Organic Synthesis, 2nd Edition, John Wiley and Son.s Inc. ,1991.之方法進行保護。待最後製出式（I)之化合物後，再依習用方式將保護基除去。例如，可用銅鹽將胺基酸之官能基予以保護，再於離子交換柱層中從反應混合物中除去無機離子的方式聪除保護。式（IV)的化合物可呈游離鹽基態或酸加成鹽（如氫氣酸或氫碘酸鹽）之型式被使用。經濟部中央標準局員工消費合作社印製本反應通常於適當的溶劑内，鹼（例如氫氧化鈉之鹼金屬氫氧化物）存在下，pH較好爲約9-11，0eC至溶劑迴流的溫度，較好爲0°C至50°C之溫度下反應。較佳的溶劑爲水，但也可於極性溶劑，例如低級醇（甲醇或乙醇），或醯胺（二曱基甲醯胺）中，或與水成混合液中反應。具式（III)的化合物通常爲已知之化合物，可依已知方法將之轉變成經適當保護著的衍生物。式（IV)之亞醯 -17 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（2I0X297公釐） 442453 A7 B7 五、發明説明（16) 胺與硫亞醯胺（其L分别爲-⑽5與-SR5者）’通常也爲已知化合物，這類化合物與一級胺之反應可參見，例如 > The Chemistry of Amidines and Imidates, V〇j 2，Eds. Saul Patai and Zvi Rappaport, Wiley and Sons Inc·，1991〇請先閲 (b)式〇〇的化合物之脱保護作用 HN* Ο C02Q (V) 之注意項再 % 經濟部中央標準局員工消費合作社印製其中的，n，p與q等的定義同前，Q爲氫或羧基保護基且Q’爲保護基，選擇地可將之轉變成另種式（I)化合物。適當的保護基群包括特丁氧基羰基，笮氧基後基，烷基，特丁基，苄基等。從事本行工作者都知道何者爲其他可予採用的適當基群。當保護基爲對酸不穩定者時，例如，Q爲烷基之情沉，則反應可經酸水解達到，例如，於二噁燒中之氣化氫，冰酷酸中的HBr/醋酸或二氣f烷中的三氟醋酸中，於非絶對限制的溫度，〜5¾至 lOOti，較好爲室溫下爲之，而若爲可經氫解反應脱除之保護基’例如苄氧基鞔基時，其脱除反應可使用氫氣及催化劑，例如Pd/C。式（V)之化合物可利用式（VI)之化合物頁訂 V· Ο NHQ, 18 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS > A4規格（210X297公嫠} 4 4 2 4 5 3 A7 B7 (VII) 五、發明説明（Π) 其中的n,P，q,Q與Q，等的定義同前與具式（VII)之化合物反應而得 R1 HN 人 YR16 其中的R1之含義同前，Y爲0或S iU16爲Ci-6垸基，苯基Ci-e烷基，或萘基-cw烷基，例如苄基。此反應適於在極性溶劑中，何如醇，有如甲醇或乙醇中，於非絶對限制的溫度，至150*C，例如~5ec至50*C 間之室溫下爲之〇式（Π)的中間物及其游離胺基被保護著的奸生物是種新穎化合物，本發明包括道類化合物。特佳的中間物爲特丁基-6-苄氧基羰基胺基-2-特丁氧基羰基胺基-4,4-二氧-4-硫雜己酸醏。某些其Y爲S之具式（VII)之化合物爲新穎化合物，且可依上述方法製之。具式（VI)之之化合物可利用氧化具式II)之化合物 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

、1T

.q,hn-(chA's，(洱νγ NHQ

C07Q (VIII) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製其中的p，q，Q與Q;等的定義同前，且Q"爲適當的保護基，例如辛氧基默基，接著將保護基Q"除去而得。氧化反應可依標準技術進行，例如依Tet. Lett. (1981)益（14),1287中所述方法， -19-本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 442453 A7 B7 五、發明説明（18) 或與鄰-氣過苯酸反應以得亞颯產品，若欲得颯製品，則接著使之與’〇xone"反應。此反應適於在極性溶刺中進行，例如於水或低級醇，如乙醇，或其混合物中進行。脫除保護基的反應可依從事本行工作者所熟知的標準技術進行，例如，使用催化氫化反應，於醇（例如甲醇）中的甲酸裡，適當催化劑存在下，例如1〇%的鈀附碳，使之進行氫化作用。具式（VIII)的化合物的製法爲： (0令具下式之化合物 M S'

.CO；M (IX) 其中q的定義同前，m+爲適當的陽離子，例如Na. 使與具式（X)之化合物反應 Q"HN' 'CCH2)d oso7r 17 (X) ------------i, - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂- 經濟部中央椟準局貝工消費合作社印製其中的P與Q"等的定義同前，且以^爲^巧垸基或芳基，接著以保護基Q與Q，，將羧基與憨基困予以保護，或反向進行。式（IX)之化合物通常不予單離出來，且可由具式（χϊ) 之化合物經還原裂解而得：、

H〇2CT (XI) of 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4規格（21〇X297公釐） 442453 A7 B7 五、發明説明（19) 其中q的舍義同前。此裂解反應可依已知方法進行，例如，使用在液氨中的鈉，在-78它至〇°€1間的溫度，較好於-4〇eC附近之溫度下進行。式（IX)的化合物也可能經由處理具式（XII)之化合物而得， HS·

-(CH2)q-vv,C02H (XII) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製是於適當的溶劑中，例如DMF，以適當的無機鹼處理，例如碳酸氫納。 (ii)令具式（XII)之化合物與適當的無機鹼（例如DBU)反應，此反應是於適當的溶劑裡，例如甲苯，在o-iooic 間，非絶對限制的溫度，較好爲室溫下反應之。式（X)，（XI)與（XII)之化合物爲可購得或可輕易依已知方法製得之化合物。大部分其Y爲S之式（ΠΙ)化合物係新穎化合物。因此本發明也包括提供具式（VII ’）之中間物 R1 人 16 (VII;) HN SR 其中的K1與R16的定義同前，以及其製法，但是： (a)式（1ΠΙ’）的化合物不是2,2-二氣硫丙酸亞醯胺，苄基酯；且 -21 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297'公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 442453 at B7 ·、五、發明説明（20) (b)Ri不是C1-5烷基，環丙基或環己基。較佳的中間物包括： S-苄基-2-甲氧基硫代乙醯亞胺酯 S-苄基-2-氟硫代乙醯亞胺酯 S-(2-萘基甲基）-2,2-二氟硫代乙醯亞胺酯 S-(2-萘基甲基）-2-硫甲基硫代乙醯亞胺酯式（VIP)之中間物化合物之製法可爲，令具式（XIII)之化合物 R1 人（χπι)

f^N^S 與具式Ri6 1/之試劑（較好爲PhCH2I/)反應，其中的 R16之含義同前，且1/爲一種適當的離基，例如氣之類的鹵素原子。式（XIII)之化合物爲可買到或可依已知方法製得之化合物。本發明將以下列實例進行説明：

中間物A 製備特丁基-6-胺基-2-特丁氣基羰基胺基-4,4-二氣-4-硫雜己酸酯甲酸鹽將特丁基-6-苄氧基羰基胺基-2-丁氧基羰基胺基-4,4-二氧-4-硫雜己酸酯（152毫克）溶解於5%的甲酸/甲醇（8 毫升）之溶液，在0¾下，逐滴加入攪拌中，懸浮於2毫升 5%甲酸/甲醇溶液之10%Pd/C懸浮液。在0eC下攪拌一小本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨OX297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

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經濟部中央標準局員工消費合作社印裝五、發明説明（21) 時後，再於室溫下挽拌卜2小時。反應混合物經予以過滅，催化刺^醇（25毫升）與水（25毫升）洗過。在抽眞空下將遽液濃縮成四分之-體積，再加入25毫升的水。此操作重覆-次後’於眞空下濃縮至幾乎乾。將殘存物溶解於水中，進行冷康乾燥，得到灰白色固體（111毫克）。中間物1B 製備酸里將氟硫代己酿胺（3.39克）與节基溪（6 23克）一同置於氣仿（40¾升）中’於氮氣層中迴流16小時。冷卻後以2〇〇毫升的乙謎稀釋，遽下橘色固體，以更多㈣洗過，在眞空中，利用五氧化二_將之乾燥’可得519克所要產品。下述中間物係依類似方法製之者：物名稱熔點/eC 2B S苄基2-甲氧基硫代乙驢亞胺酶氫溴酸鹽製自2-甲氧基硫代乙醯胺 3BS- +基2-苄氧基硫代乙酿亞胺酯氲溴酸鹽製自2-苄氧基硫代乙醯腰 5B S-下基2-甲基琬硫代乙酿亞胺醋氳溴酸鹽wo 製自2-甲基硫硫代乙醯胺中間物C 代6醯亞胺皇氫氣酸皤（中間物）將硫代乙醯胺（15.0克，0,20莫耳）與苄基氣（25,3克， 0_20莫耳）一同置於氣仿（75亳升）中，予以加熱迴流9〇分鐘（硫代已醯胺約需40分鐘才能溶化於溶液中）。待溶液冷 23 - 本紙張尺度適用中國國家椟準（CNS > Α4^_ (21〇χ297公楚 (請先閲婧背面之注意事項再填寫本頁) 裝_ r Α7 Β7 442^53 五、發明説明（22) 卻至室溫後，置於0ec中過夜，有無色結晶於表面形成。濾下產品，以冷的10%乙酸_氣仿洗過，弄乾後可得標的化合物（25.55克）’爲無色角柱形結晶。熔點=161-163°〇其氫溴酸鹽可依類似方法製取，雇率爲85% ; 熔點=184-186°C (分解）。實例1 製備2-胺基氟乙基磨基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸二氤溴酸t (a)特丁基特ΐΑ·基羰某脉甚-6- Π-並胺基-2-氟乙基嚴碁·)_4,4-二氧己醴氤溴酸i 對在0¾下，10毫升乙醇中的中間物α(609毫克）溶液，分批加入中間物1Β(407毫克）。在ye下將混合物攪拌一小時，再於室溫下將其攪拌二小時。在眞空中將溶劑除去，殘留物置於水與乙醚的混合液中分配。水溶液層以更多的乙醚洗過二次後，於眞空中造行濃縮。殘存的膠質物經矽膠柱層層析，以二氣甲垸-甲醇（8:1)流洗，可得無色泡沫狀物（317毫克）◊ 亞胺甚_2_盗7其赂某）_4 4_二氣-4-硫 .雜己酸二__氳溴酸鹽將特丁基~2-特丁氧基羰基胺基-6-(卜亞胺基-2-氟乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸氫溴酸鹽（300毫克）溶解於冰醋酸（4.5毫升），冷卻之並加入溶於醋酸之HBr(45% if/v，1.5亳升）。然後將混合物置於室溫下攪拌二小時。在眞空中連行濃縮至幾乎乾，重覆此步驟二次。對殘存 -24 - 本紙張又度適用中國國家擦準（CNS > Α4规格（210Χ 297公釐） ---------1.裝-- (請先閎讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂- Γ 經濟部中央橾準局負工消費合作社印製 44245 3 A7 經濟部中央標準局男工消費合作社印製 B7 五、發明説明（23) 物加入乙醇並將混合物置於眞空濃縮，得到灰白色的泡沫。所得物質可進一步予以純化，將其溶解在很少量的溫乙醇並以乙醚將產品沈澱，可得白色具吸濕性的固體 (220毫克）之二水合物。下述化合物可依類似方法製備：實例編號中間物名稱熔點/eC 2 2-胺基-6-(1-亞胺基-2-甲氧基乙基胺玻璃狀樹脂基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸二氫溴酸二水鹽，製自中間物A與2B。丽R(D2 0) 5 3.48(3H，s)，3,77-4.14(6H，m)，4.39 (2H，s)，4.53(lH，d)。 3 2-胺基-6-(2-乙酸基-1-亞胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸二氫溴酸鹽，製自中間物A與3B。實例4 製備2-胺基-6-(2-苄氧基-1-亞胺乙基胺基）-4,4-二氣 -4-硫雜己酸1.67氫氣酸0.33氳溴酸鹽特丁基-6-(2-苄氧基-1-亞胺基乙基胺基）-2-特丁氧基羰基胺基-4,4-二氧-4-硫雜己酸酯氫溴酸鹽（0.97克）（依實例1A的類似方法，由中間物A與3B製之），在室溫下攪入4M的HC1/二噁垸（12毫升）中經六小時。將溶劑蒸發去除後，將殘存的膠質物分散於乾乙醚（20毫升）裡。放置後慢慢生成白色固體。傾去乙醚，以新鮮6醚將此極具吸濕性固體洗過，於加溫至65¾的溫度下，眞空中進行乾燥。 -25 - I--------7·^裴-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) .m 、1T.

Mr 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） A7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 442453 B7 五、發明説明（24) 下述化合物可依類似方法製備：

實例編號中間物名稱熔點/"C 5 2-胺基-6-(2-甲硫基-2-亞胺基乙基胺玻璃狀樹脂基）-4,4-二氧_4_硫雜己酸，製自中間物A與5B 實例6 盤備2-胺基-6-(2-鲽基-1-亞胺乙基胺基）-4,4-二氣-4-硫雜己酸1.67氫氣酸0.33氫溴酸鹽將實例4產品（350毫克，0.81毫莫耳）置於由乙醇（15毫升）與水（5毫升）所成混合物中，在室溫及常壓下，5%鈀附碳（Degussa type E101 NO/W，80毫克）存在下予以進行氫化反應經18小時。濾下催化劑後，以水洗過。再使用新鮮的催化劑（100毫克）進行氫化反應經18小時。濾下催化劑後，以水洗過，濃縮除去溶劑。將殘存的膠質物分散於少量乙醇裡，慢慢會生成淡黄色固體。除去乙醇後，將此極具吸濕性固體洗過，於室溫下，眞空中乾燥，產率 240毫克。實例7 製備2-胺基-6-(1-亞胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己直

方法A (a)S- C 2-(1-亞胺基乙基胺基）乙基]丰胱胺酸將S-〔2-胺基乙基）半胱胺酸氫溴酸鹽（12.25克，50 毫莫耳）溶解於溫水（50毫升）裡並以鹼性碳酸銅（5,85克本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 2们公釐） (請先閲讀贫面之注意事項再填寫本頁)

A7 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 442453 五、發明説明（25) )處理。溶液冷卻後，經Hyflo過濾，殘留物以水洗過。將經銅保護的半胱胺酸衍生物之藍色溶液予以攪拌並冷卻至10¾。添加2N的氫氧化鈉將pH調整至10至Π，並分批加入乙基乙醯亞胺鹽酸鹽（9.375克，75毫莫耳）。回溫至室溫，添加2N的里酸使pH達3。將溶液置入Dowex AG50WX8拄層（體積爲100毫升），以水洗過，再以0.2N的氨水流洗。收集水合節三酮會呈色劃分，於眞空中除去氨溶液。將殘留溶液的pH以2N鹽酸調節至4。於迴轉濃縮器中將溶液蒸發至幾乎乾，可得3克的S〔2-(卜亞胺基乙基胺基）乙基〕半胱胺酸鹽酸鹽，於眞空乾燥皿中乾燥。 _(b)2-胺基-6-(1-胺基己基胺基）-4.4-二氣-4-硫雜己酸將置於1M遇氣酸（20毫升）中的S-〔2-(1-亞胺基乙基胺基）乙基〕半恍胺酸（3.25克，1〇毫莫耳）溶液，以 30%過氧化氫溶液（6.8毫升’ 60亳莫耳）與0.5M鉬酸鍵 (1毫升）處理。以水冷卻的方式將反應的溫度維持於 30°C。反應混合物在25°C下挽拌二小時，其後將之置於 AG 1X8(乙酸鹽）離子交換柱層（50亳升，6〇毫莫耳）中。以水將胺基酸從柱層中溶離，再將水合部三銅呈正反應之割分的溶劑蒸發除去，得到油質物。以乙醇處理，再予進行眞空濃縮。殘留物（約4克）以快速柱層層析法純化，以甲醇/氨（9 : 1)流洗，可得〇 8克的2-胺基亞胺基乙基胺基）-4，4-二氧-4、碟雜己酸。 -27 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS } A4规格（210X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 44245 3 Α7 Β7 五、發明説明（26)

方法B

IgjS-(2-午氧基默基胺基乙基）气i胺酸硫疲皇在反應容器中攪拌著6升的液態教，小心地加入l-胱胺酸（300克，1.25莫耳）。將反應混合物攪拌一小時。以二小時的期間，加入一片片的辦（共U5先，5莫耳）。形成灰色溶液。以15分鐘分批加入2-(苄氧基織基胺基）乙烷苯基磺酸鹽（836克，2.5莫耳）。將反應混合物與氨加熱迴流過夜。經關掉循環後，將氨蒸發去除。令反應過夜。再加入9升的水，挽拌中，將之加溫至。將反應混合物冷卻至室溫後，過濾，以稀硫酸將滤液中和。濾下白色/黄色固體，於80。〇的眞空烘箱中乾燥，可得715克的標的化合物，其熔點爲220-221.5t!。氧基羰基-胺基乙基）-N-丁氧基羧基丰腌肽_ 將丁氧基默基肝（24克，0.11莫耳），於1.5小時的期間分三次加入挽拌中並以冰冷卻著的，由研細的S-(2-苄氧基羰基胺基乙基）半胱胺酸硫酸鹽（39.5克，0.1莫耳）懸浮於二噁烷（400毫升）與水（200毫升），經添加约 200毫升，1M氫氧化鋼將pH調節於9.5之懸浮液中。於眞空下抽除二喝炫，加乙酸乙酯至水溶液被。經添加硫酸水溶液將水溶液層的pH調至2·8後，過據。以乙酸乙醋萃取濾液。萃出液經水、鹽水洗過後，以硫酸納弄乾並予過濾。於眞空中蒸發去除溶劑後，可得42.95克標的化合物。 -28 - 本紙張尺度適用中國國家樣準（CNS ) Α4規格（210χ297公釐）

(請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁J 訂 A7 B7 442453 五、發明説明（27) 竽氳基羰基胺基氧基羰基半胱胺酸# 丁甚將寘於15毫升的苯中的S-(2-苄氧基羰基胺基-乙基）丁氧基羰基半胱胺酸（3.卵克，1〇毫莫軀）溶液加熱迴流速蒸德少量苯以帶走最後殘留的水分。對上述適流中的溶液以20分鐘的時間逐滴加入Ν，Ν-二甲基甲醯胺二特丁基半縮醛（8 2克，40毫莫耳）。將其加熱迴熱30分鐘直至以TLC檢測不再有變化。將反應混合物冷卻至室溢，加入15毫升水，攪拌之。分層後，有機層以10%碳酸氫鉀（3Χ 毫升）與鹽水（210毫升）洗過。水溶液層以新鮮的乙醚-苯（1 : 1)(2χ15毫升）洗過並將萃取液併合，以硫酸鈉乾燥’以活性碳處理，過濾並濃縮至幾乎乾以得淡棕色油質物，置於Si〇 2上將粗製品經快速層析法純化，使用65%的環己烷-乙酸乙酯爲流洗劑。可得 2.56克幾乎無色的標的產品。 (丁氣基羰基胺基）-6-(苄氧基羰基胺基）-4.4-二翁 ^破雜己酸特丁基酯對置於5毫升甲醇中的S-(2-苄氧基羰基胺基）-Ν-τ 氧基羰基半胱胺酸特丁基酯（454毫克，1.0毫莫耳）溶液，於〇°C下，以十分鐘的期間逐滴加入溶解於5毫井水中的"0xone"(925毫克，3.0毫莫耳）溶液。添加過程，爲放熱反應，以冰浴使溫度保持在2¾以下。於〇*c將反應混合物攪拌四小時後，在15°C下攪拌10小時。由於反應混合物變得非常粘，另加入4毫升甲醇與2毫升水使揽本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公酱） 1裝— 一，「 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 0. 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 442453 A7 B7 五、發明説明（別）拌變得容易。另加入一份溶解於1.5毫升水中的"Oxone" (308毫克，1.0毫莫耳）溶液，於室溫下再予攪拌14小時。再將反應混合物以乙醚處理（3x25毫升），取出乙醚層，以硫酸鈉异乾後，過濾並濃縮至幾乎乾，可得0.428 克呈無色的標的化合物，其很快即硬化成白色固體，熔點爲116-118¾。 (e)2-(丁氣基羰基胺基）-6-胺基-4,4-二氣-4-硫雜己酸特丁基酯對溶解於5毫升甲醇中的2-(丁氧基羰基胺基）-6-(苄氧基羰基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸特丁基酯（200毫克）溶液，加入Pd/C(50%)(Degussa type)(200毫克），，於室溫下將混合物進行氫化至不再有變化。使反應混合物經由Hyplo墊過濾，殘留物以新鮮甲醇（2x2毫升）洗過。將濾液濃縮至幾乎乾，可得119毫克，幾乎無色玻璃狀的標的化合物。丁氣基续基胺基）-6-(1-亞胺基己基胺基）-4,4-二氣-4-硫雜己酸特丁基酯鹽酸鹽對溶解於10毫升甲醇的中的2-(丁氧基羰基胺基）-6-胺基-4,4-二氧-4-硫雜己酸特丁基酯（340毫克）溶液，經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 分批加入中間物C(202毫克）。於0¾將反應混合物攪拌 30分鐘後，使回溫至室溫並濃縮至幾乎乾。加入2毫升的水後，以乙醚萃取（4X4毫升），除去苄基硫醇。將有機層以新鮮的水（2毫升）洗過，在40eC的眞空烘箱中濃縮，可得396毫克，無色玻璃狀的標的化合物。 -30 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 B7 442453 五、發明説明（四） (g)2-胺基-6-(1-亞胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸二鹽酸鹽 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 對溶解於15毫升二噁烷的2-(丁氧基羰基胺基）-6-(1-克胺基乙基胺基）-4,4-二氧-4-硫雜己酸特丁基酯鹽酸鹽（300毫克）溶液，加入4N的HCI/二噁烷Pd/C(10毫升），於室溫下放置24小時。然後將反應混合物濃縮至幾乎乾，對所得半固體加入2毫升的水，濃縮得無色玻璃質物。於二氧化矽上將粗製品進行快速層析，以 CE3CN:CH3C02H:H20(5:2:2)流洗。可得172.5毫克之標的化合物。實例8 製備2-胺基-6-(1-亞胺基乙基胺基）-4-氣-4-硫雜己酸

方法A (a) S-〔 2-(亞胺基乙基胺基）乙基]丰胱胺酸依上述實例7,方法A，步驟（a)之方法製備S-〔2-(亞胺基乙基胺基）乙基〕半胱胺酸（3克，0.0113莫耳）。 (b) 2_胺基-6-(1-亞胺基乙基胺基）-4-氧-4-硫雜己酸經濟部中央標準局J工消費合作社印製將置於1M鹽酸（30毫升）的S-〔2-亞胺基乙基胺基）乙基〕半胱胺酸（3克，0·0113莫耳）溶液攪拌著，以30% 過氧化氳溶液（1.5毫升，11·6毫莫耳）處理。反應過夜後，以薄層層析顯示反應已完全。將反應混合物置於 AG50WX8柱層，以水洗過後，以0.5Μ的氨溶液流洗。將水合茚三酮呈正反應之劃分收集並溶液蒸發除去。粗製品經快速柱層層析法純化，以甲醇/氨（9 : 1)流洗，可 -31 -本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 442453 B7

得200毫克的2-胺基-6-(卜亞胺基乙基胺基）氧_4—疏雜己酸。

方法B (a) g:(：T氧基莰基疲蓋氣硫雜己酸转丁基晚對溶解於25毫升二氣甲垸的S-(2-苄氧基默基胺基）_ N-丁氧基羔基半胱胺酸特丁基酯（454毫克，1 〇毫莫驅 )溶液，（依上述實例7，方法B，步驟（a)至（c)之方法製備者），於-2eC下加入鄰-氣過苯甲酸（426亳克@ 85% b2.10毫莫耳），爲一種略爲放熱的反應，溫度约上升 2eC。於0¾將反應混合物攬拌1.5小時，一小時後，反應幾乎已完全。以5%的碳酸氫鉀萃取（3χ25亳升），萃取液以硫酸鈉弄乾，過濾，濃縮至幾乎乾可得淺棕色之油質物。粗製化合物置於二氧化矽上，以快逡柱層廣析法純化，以1.25%的甲醇-乙酸乙s旨流洗，可得396毫克的標的化合物。 (b) k(丁氧基羰基胺基氧基羰基胺臬j^4,4-二-氧 -4-硫雜己酸特丁基經濟部中央橾準局負工消費合作社印製本化合物可依上述實例7,方法B，步驟（e)至（g)之類似方法製備〇實例9 生物活俾測試經純化的人類N0合成酹之抑制作用，其製備方法爲，人類nNOS(Furfine et al·(1993)BiocheIn·M,8512- - 32 -本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Μ规格（210X297公釐） 442453 a? B7 五、發明説明（31) 8517),iN0S(Sherman et al.(1993)Biochem.32,11600-11605)與eN0S(Garvey et al.(1994)Arch. Bioch. Biophys ·,付印中）。其活性係依據Schmidt等人所述之方法（1991)Proc. Natl. Acad· Sci. USA 88,365-369) » 在 30*C下，於含50mM HEPES pH 7.0，8uM四氫生物噪呤， ImM MDPH與0.5/iM〔wC〕-L-精胺酸（30,000cpm)的反應混合物（100微升）中，監測由〔w C〕-L-精胺酸轉變瓜胺酸之量而得。結果示於下面的表1 ◊ 純化的人類N0S同功馘類之抑制作用實例编號純化的人類酵素 Ki(aM) iNOS對eNOS間之選擇性〔相對於LNMMA〕 iNOS eNOS nNOS 1 1.9 23 2.6 12[33] 7 2.9* 79 18 27[73] 8 9.1 100 68 11[30] 此種抑制作用對iNOS，極受時間影響；測得〇.1紅]«下的Kd値顯示iNOS對nNOS的選擇性爲790〔較L-NMMA大於 2000倍以上〕 ---------1 裝— 厂/. (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂經濟部中央橾準局員工消費合作杜印製重靡的人類iNOS之抑制作用係於baculoviru$ 昆蟲細胞系統中之表現測定（Charles et al(1994)In:The Biology of Nitric Oxide 4, Moncada S., Feelisch M., Busse R. and Higgs E.A., eds., Portland Press, London, pp 316-320),於微滴定板上分析昆蟲細胞液之 NO合成酹，以已發表方法（Knowles et al(1990)Biochem. -33 一本紙浪尺度適用中國國家榡準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 442453 A7 B7 五、發明説明（於）

Biophys. Res. Commun.1^_，1〇42-1〇48)進行光譜分析。分析係於37亡下，於含有!^£3(：1〇1|^),017(0.11111!)，四氫生物喋呤（5 wM) ’ ΜϋΡΗ(100ωΜ)，紅血球（5aM)，L-精胺酸（3〇ωΜ)與抑制劑（0-300ωΜ)的反應混合物中，測定在405-420nm之吸光變化，並測定於15-30分鐘培育中之穩定狀態抑制作用，結果列於下面表2。在老鼠主動脈環上之eNOS與iNOS之抑制作用之評估，係測定受NO合成酹抑制作用所起之環張力之增加〇爲測定基本狀態（反映著eNOS) ’使用依前述方法製備（Rees etal (1989)Br· J，Pharmacol. %，418-424)之帶整個内皮的胸動脈環並測定在苯基腎上腺素的闕濃度（ED10〜1〇ηΜ)存在下，因抑制劑所蓄積之濃度曲線。爲測定謗發的平滑肌狀態（反應著⑶⑽），將脱去内皮之環，如前所述地，在苯基腎上腺素爲约⑽存在下’曝於LPS(0.1ag/ml,得自泛· typhosa)經6 小時（Rees et al.(1990)Biochem.Biophys. Res· Commun. 12^,541-547)。當此期間’因 iNOS誘發而使張力漸弱。測定抑制劑的蓄積濃度曲線。結果被列於下面表2。 --------3裝-- (請先閣讀背面之注意事項再填寫本頁)

,1T

Jr 經部中央樣準局貝工消費合作印製 -34 本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) Α4規格（210Χ2.97公釐） 442 45 3 A7 B7 五、發明説明（33) 實例編號 ICso(aM 對iNOS選擇性重組的老鼠主動脈老鼠主動脈人類iNOS 環上之iNOS 環上之iNOS 1 5.5士0.7(3) 1.7士0.7(3) >>300(3) 》200倍 (300WM下有 8 %抑制作用） 2 30士3(3) 33士13(3) >300(2) >10倍 (300/zM 下有 26%抑制作用） 3 >300(3) - - - 4 >300(3) - - - 5 95士3(3) - - - 6 >300(3) - - 7 14±0.6(3) 1.5士0.3(6) 101±21(6) 67倍 8 - 2.7士0.2(3) 300(2) >100 倍 ... (30〇uM下有 42%抑制作用）此種NO合成5#的效力及選擇性數據爲得自（η)次實驗之平均値土 SEM，或，如果無栝弧内數値則爲得自一次實驗之平均値士 SD。 (請先閣讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 eNOS與iNOS在活體内之抑制作用，是測定正常eNOS或受内毒素感染（iNOS)的有意識小老鼠的血壓，評估其受抑制劑之影響而定。以2%的異氟燒（isofluorane)將雌CD-1 小老鼠（25-35克）做簡單麻醉，將套管植入其大腿靜脈，本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X：297公釐） 442453 A7 B7 五、發明説明（34) 經皮下通至背部頂端出口，連接至監測系統以供監測血壓及施用的抑制费I量。經手術回收後，使用具正常血壓範圍 (90-110毫米汞柱）之老鼠，測定抑制劑對不經處理（"正常老鼠或經施用脂質多醣（經靜脈注入30秒，取自大腸菌 026 : B6之LPS ’ 12.5毫克/公斤）被謗發休克（"休克的老鼠"）七小時後情況下老鼠之血壓所得之蓄積濃度曲線。於正常的老鼠，實例7在卜1000毫克/公斤的劑量範園，對血壓無影響。然而對已休克的老鼠，能將其血壓慢慢儲回正常範園。實例7對内毒素謗發之血管裂解之影響係以Laszlo等人 ((1994)Brit. J.Pharmacol. 1Π 1309-1315)之方法，於大老鼠做評估。實例7，劑量達5毫克/公斤，與内毒素一起施用下，不像非選擇性的抑制劑（例如L-NMMA)般，其並不會引起由内毒素所謗發之血漿裂解之惡化。然而，實例7在1毫克/公斤的ED50下，不會消除受iNOS影響之延缓之血漀裂解。 ---------裝-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 mr 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 36 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 442453 A7 B7 修正

五、發明説明（）專利申請案第84107349號 ROC Patent Appln. No.84107349 中文說明書修正頁-附件㈢，、

Amended Pages of the Chinese Specification - Encl. (Ill) (民國89年2月M曰修正並送呈） (Amended & Submitted on February^ , 2000) (請先閣讀背面之注意事項再填寫本頁) - - li- -4ΪΕ·, · 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印装實例號 IC50_) 選擇性 eNOS iNOS 1 於30〇βΜ之最大抑制性38% 1.1 ' >300 7 於300/ζΜ之最大抑_制性46% 1.0 -300 L-S-2-C1-亞胺基乙基胺基）乙基半胱躁酸鹽酸鹽_ . 4.3 • 0.13 33 . 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐）

Claims

442453 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍

{請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 專利申請案第84107349號 —-η ROC Patent Appln. No. 84107349 ..1修正之申請專利範圍中文本-附件㈠ Amended Claims in Chinese - End. (I) C民國89年2为匀日送呈)~~ —一一 (Submitted on February-Η , 2000) [.式（I)化合物，或其之鹽類或酯類 0) 其中 R1 係甲基或氟代甲基。 & 2. 根據申請專利範圍第1項之式（I)化合物，其中化合物係選自於 2-胺基-6-[l-亞胺基乙基胺基]-4, 4-二氧-4-硫雜己酸；以及 ’ 胺基-6-(1~亞胺基-2-氟代乙基胺基）-4, 4-二氧硫雜己酸。 3. 2-胺基-6-[l-亞胺基乙基胺基]-4, 4-二氧-4-硫雜己酸。 . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 4. (R)-2-胺基-6-[l-亞胺基乙基胺基]-4, 4-二氧-4-硫雜己酸。 5. 根據申請專利範圍第1至4項中任一項之式（I)化合物，或其之鹽類或酯類，其係用於製備供治療受NO合成酶的作用而從精胺酸抑制NO產生之症狀的藥物。 6. —種供治療受NO合成酶的作用而從精胺酸抑制NO產生 37 - K:\CHARLES\WL84216-CLAlM-CH.doc 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 442453 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍之症狀的醫藥組合物，其係包括根據申請專利範圍第1 至4項中任一項之式（I)化合物或其之鹽類或酯類，並結合一或多種醫藥上可接受之載體，與任選地，一或多種其他治療成份。一種製備根據申請專利範圍第1至4項中任一項之式（I) 化合物，以及其之鹽類或酯類的方法，菩係包括 (a)氧化式（II)化合物 VH OD (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 其中R1係如前.述之定義； (b)將式（V)化合物去保護丸.ill 丨矸-人-I (V) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製其中R1係如前述之定義，Q係氫或羧基保護基，且 Q係保護基；接著選擇性地轉換成其他式（I)化合物。 8,式（VI)中間物，或其經保護之衍生物

其中Q與Q’係如根據申請專利範圍第7項中所界定者。 -38 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） i普:三摘充 SB. .4!，奸 a；申請曰期沙·？> /r 案號類別 (以上各攔由本局填註）專利申請索第84107349號 ROC Patent Appln. No.84107349 中文説明書修正頁-附件㈢ Amended Pages of the Chinese Specification - Enel. (HI)______年ii月:Ϊ9曰修it並k呈) (Amended & Submitted on November 29 , 1996) 公告 442453 ft專利説明書發明名稱中文之醫藥组合物以及轉英文 Amidino Sulphoxide and Sulphone Derivatives, Method for Their Preparation, Pharmaceutical Composition Containing Them and Their Use as Inhibitor of Inducible Nitric Oxide Synthase 姓

\4 國發明人住、居所經濟部中央摞準扃員工消費合作社印製三、申請人姓名 (名稱）國籍住、居所 (事務所）代表人姓名 1 候哈斯（Harold Francis HODSON) '·馬理查•参可(Richard Michael John PALMER) t孫大衛•亞 A (David Alan SAWYER) 理去· •葛漢（Richard Graham KNOWLES) ^ 卡衛特（Karl Witold FRANZMANN) 行'零'5 丁 (Martin James DRYSDALE) 7.史密斯•蒂茶（Steven SMITH) S.斯派西亞（Patricia Ifeyirwa DAVIES) 9·克海儉（Helen Alice Rebecca CLARK) 瓜瑞伯治丨Skrry George SHEARER) i 一 £>.爲英國籍，m爲美國籍 J. — 9.均居住於英商咸爾康基i股份有限公司英國白漢市南伊頓公園路莱禮大廈 -The Wellcome Ροχιηά3'Έϊ^ΐΐ_：17£ΒΓ±ΐ©'(3·—Ιϊ3·-η9-1-〇γ—€ο_ατ4:— South Eden Park Road Beckenham Kent BR3 3BS m美國北卡羅納州溫特街203號‘G]：eat B]ritain 203 wintermist Drive, Cary, North Carolina 27413, United States of America 英國

英國倫敦伊斯頓路一六0號 Unicorn House, 160 Euston Road London, NW1 2BPy England 羅倫斯.大衛*金肯 LAURENCE DAVID JENKINS 本紙浪尺度適用中國國家榡準（CNS > A4現格（2丨〇X297公浼）裝訂線 442453 A7 B7 修正

五、發明説明（）專利申請案第84107349號 ROC Patent Appln. No.84107349 中文說明書修正頁-附件㈢，、 Amended Pages of the Chinese Specification - Encl. (Ill) (民國89年2月M曰修正並送呈） (Amended & Submitted on February^ , 2000) (請先閣讀背面之注意事項再填寫本頁) - - li- -4ΪΕ·, · 訂經濟部智慧財產局員工消費合作社印装實例號 IC50_) 選擇性 eNOS iNOS 1 於30〇βΜ之最大抑制性38% 1.1 ' >300 7 於300/ζΜ之最大抑_制性46% 1.0 -300 L-S-2-C1-亞胺基乙基胺基）乙基半胱躁酸鹽酸鹽_ . 4.3 • 0.13 33 . 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X297公釐）修 i 85. K29補充泰年巧s * 442453 g — 丨 Βιιι —丨丨丨._riIlilninnTrrr-_i—— - . 四、中文發明摘要（發明之名稱：具式（I)之化合物 HN_ ‘ίί CH,), \\ 0

CO,H (I) 經濟部中央標準扃員工消費合作社印製式中爲Cl-δ直鏈或支鏈烷基，C2-6烯基，C2-6块基， C3-6環烷基或C3-6環垸基Cl-6垸基，各可選擇地經一至三個分别獨立的以下基取代；-CN; -N〇2 ;-COR2基，其R2 爲氫，Ch垸基，-OR3，其R3爲氫或Ci-6烷基，或 NR4 R5，其R4與R5分别獨立地選自氣或Ci-6境基； -S(0)niR6基，其中之m爲〇，1或2，R 6爲氫，（；卜6烷基，殍基或NR 7 R 8，其中的R 7及R 8分别獨立地爲氫或C卜6 烷基；P0(0R9 ) 2其中的R9爲氫或C卜说基；NR10RU，其中的R10與R11分别獨立地選自氬，C卜δ烷基；-C0R12，其中的R12爲氫或C卜6燒基，或-S(〇)m’R13 ’其中之m’爲0 ,1或2且RB爲氫或0卜6烷基；鹵素；或-〇Ri4之基，其中的爲氫，Ci-6垸基，選擇地經取代一至三個由素原子， U-i〇芳基.或-C0R6，其中的R15爲氪或C卜6烷基；p爲2 或3, q爲1或2且η爲0或1，並包括其所有鹽類，a旨類，醢胺類及生理容許之前體藥物；其藥劑用途及其配製劑 ;以及其製法。國國家標準(CNS > Α4規格（2丨0X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁各櫊) -訂 1______ -· •一經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 442453 A5 B5 四、英文發明摘要（發明之名稱：Μ1ί1:ίηο sulphox and s p vatives’ Method for Their Preparation, Pharmaceutical Composition Containing Them and Their Use as 工nhibitor of Inducible Nitric Oxide Synthase A compound of formula (I) HN* •ίί CO:Ii \\ o

(I) wherein R! is a C].^ straight or branched chain alkyl group, a C2_6^kenyl group, a C7,6 alkvnyi group，a Cj-ficycloafkyl group or a Cj.gcycloalkyiCi.galkyl group, each optionally substituted by one to three groups independently selected from; -CN; -NO?； a group -COR- wherein R- is hydrqgea, €[.5 alkyl, -OR-* wherein is hydrogen or C 1,5 aJk>l or NR^R^ wherein R"* and are independently selected from hydrogen or alkyl; a group -S(0)mR6 wherein m is 0，1 or 2，R6 is hydrogen，Ci _6 alkyl, hydroxy or ME17r3 wherein R7 and axe independently hydrogen or pj„6 alkyl; a group PO(OR^)9 wherein R1^ is hydrogen or C^.g alkyl; a group NR^R* * wherein R*® and ^ are independently selected from hydrogen, C1.5 alkyl, -COR^ wherein is hydrogen or Cj.g alkyf, or "S<G)pyR^ wh-rcin m' is 0; l or 2 and is hydrogen or C].6 alkyl;(halo; or a group -OR14^wherein^R^ is hydrogen, alkyl optionally substituted by one lo three halo atoms, 〇6.j〇 aryl or -COR*^ wherein is hydrogen or alkyl; p is 2 or 3, q is l or 1 and n is 0 or l and ail salts, esters, amides and physiologically acceptable prodmgs thereof; pharmaceutical uses and formulations therefor; and processes for their preparation aic Jisctosed. * -2-1 本紙張尺度適用中國國家襟準（CNS ) A4说格（210X297公釐） — I I I I ^裝 i I I ―. - I 訂— I __ I —.r··'.、線 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁各欄) 442453 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍

{請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 專利申請案第84107349號 —-η ROC Patent Appln. No. 84107349 ..1修正之申請專利範圍中文本-附件㈠ Amended Claims in Chinese - End. (I) C民國89年2为匀日送呈)~~ —一一 (Submitted on February-Η , 2000) [.式（I)化合物，或其之鹽類或酯類 0) 其中 R1 係甲基或氟代甲基。 & 2. 根據申請專利範圍第1項之式（I)化合物，其中化合物係選自於 2-胺基-6-[l-亞胺基乙基胺基]-4, 4-二氧-4-硫雜己酸；以及 ’ 胺基-6-(1~亞胺基-2-氟代乙基胺基）-4, 4-二氧硫雜己酸。 3. 2-胺基-6-[l-亞胺基乙基胺基]-4, 4-二氧-4-硫雜己酸。 . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 4. (R)-2-胺基-6-[l-亞胺基乙基胺基]-4, 4-二氧-4-硫雜己酸。 5. 根據申請專利範圍第1至4項中任一項之式（I)化合物，或其之鹽類或酯類，其係用於製備供治療受NO合成酶的作用而從精胺酸抑制NO產生之症狀的藥物。 6. —種供治療受NO合成酶的作用而從精胺酸抑制NO產生 37 - K:\CHARLES\WL84216-CLAlM-CH.doc 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）