TW305846B

TW305846B -

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Publication number: TW305846B
Application number: TW081107995A
Authority: TW
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1991-10-11
Filing date: 1992-10-08
Publication date: 1997-05-21
Also published as: KR930007972A; AU656230B2; NZ244644A; NO975023L; NO304523B1; CN1225473C; NO975023D0; CA2080272C; DK0536741T3; EP0536741A3; IL117252A; GR3019326T3; AU2622892A; IL103396A0; NO980377D0; JPH05213996A; JP2515473B2; US5677419A; RU2095368C1; CN1198841C

Description

305846 A6 B6 修正. 2 本年月ΗΓ 補充 82. 4. 23 五'發明説明（/) 本發明有闞環狀肽，是一種血管作用胜肽（VIP )同類物，及有關含該環狀肽之藥劑姐合物。該藥劑組合物可用於治療支氣管收縮病症。首先自豬小腸發現，分離及純化血管作用性小腸呔。〔美國專利號3879371 〕。此肽具有28個胺基酸，具有與小腸内泌素及高血糖原質分解因子廣泛的同質性〔卡奎斯特 (Car 1 qiust )等人，Η〇rm. Metab. Res., 14 > 28 — 29 (1982) 〕。VIP之胺基酸次序如下： ! 〆

His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-

Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-

Leu-Asn-NH2 [ (SEQ ID NO:l)-NH2] (請先聞Ϊ*背面之注意事項再填窩本頁) •災. 已知VIP具有遍及戽腸道及循。鑑於其與胃腸道荷爾蒙的相似膽分泌，肝性糖原質分解，高血泌，並活化胰碳酸根釋出〔凱利

得（Said) ，S.I, Proc. E

X P 1014— 1017 (1972);多許克（ Gastroenterology, 73，4 7 8 — 在内分泌及外分泌系統，小腸疫檢測分離含V I P之神經元〔波等人，Gut, 15 ， 720 — 724 ( 一種神遝作用器，引起數種荷爾弗勞力（F r a w 1 e y ) ，L . S 等人 3 3 - 7 9 - 8 3 ( 1 9 8 1 )〕，甲狀腺環系统的廣範圍生物活性性，已發現V I P刺激胰及糖糖原質分解及胰島素分因（Kerr丨ns )， C.及塞 Biol. Med ., 142 - Domschke) ，S 等人， 480 ( 1 977 )〕。及平滑肌之细胞中已由免泣克（Polak ) ，J. Μ. 1 9 7 4 )〕。已發現V I Ρ是蒙之釋出，包括激乳素〔 'Neuroendocrinology ，素〔阿倫（A h r e n ) B .等 •打. 甲 4(210Χ 297 2 .¾)

五、發明說明（>) 人，Nature , 287 ，343 — 345 ( 1980 )〕，及胰島素與高血糖糖原子分解因子〔許貝林（Schebalin ) ，M.等人 'Am. J. Physiology E., 232 ， 197 — 200 (1977) 3 。亦已發現VIP在活體内及活體外剌激腎臟釋出腎酵素° 〔波特（Porter) * J. P.，等人 * Neuroendocrinology· 36，404 — 40,8 ( 1 983)〕。已知V I P存在於各種物種及人類之氣道的神經及神經末端。〔迪（Dey ) ，R.D.,及塞得（Said) ，S. I ., Fed, Proc39，1062 ( 1980)；塞德，S.I.,等人，Ann. N.Y. Acad. Sci., 221 * 103 — 1 14 ( 1974) 〕。VIP的心血管及支氣管肺作用具重要性，因為已發現VIP為強力的血管舒張劑及強效的平滑肌放鬆劑，作用在週圍*肺*及冠狀血管床〔塞德，S.I等人，Clin.Res., 20， 29 (1972)]。已發現 VIP 在腦血管具有血管舒張作用〔李（Lee ) ，T.J,及貝辛（

Berszin ) ，I.，Science, 2 2 4 > 898 一 900 ( 1 984)〕。活體外研究已證明血管作用性小腸肽，外源性施用至腦動脈，引發血管擴張，推論VIP對腦血管舒張為一種可能的傳遞物質。〔李，T.及塞托（Saito) ，Α·.

Science, 224 > 898 - 9pl ( 1 984)〕。在眼睛，亦已發現VIP為強效血管擴張劑〔尼爾生（Nilsson )， S.F.E.及比爾（Bill) ，A.，Acta Physiol. Scand·， 121 , 385 — 392 ( 1 984 ) 〕 ° V I P可能對免疫糸統具調節作用。歐多利西歐（〇 · D 〇「丨s i 〇 )等人已示V I P調節淋巴球之增生及移動。〔 J. Immunol. 135 · 792s—796s (1985) ] ° _一 4 —_ ________ 甲 4f 210X 297 W 沒) {請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) _装· •打.

五、發明說明（ A6 B6 氣道中，如上所的內生性調介因 Fed. P r 〇 c .. 者之姐織與來自此可顯示VIP或勒雄（ J. Med., 320 · 測試已顯示VIP 如姐織胺及前列 .A.等人， Raven Press, .等人* Amn， 1974)〕。當由 (請先閲讀背面之注意事邛再填寫本页) .^· 既已發現VIP鬆弛平滑肌且正常存在於知，已假說VIP是支氣管平滑肌鬆弛作用子。〔迪（Dey.) ，R.D·及塞德，S· I.， 39，1962 (1980)〕。已顯示來自氣喘患正常者之組織比較不含免疫反應性VIP 。 VIP性神經纖雄之喪失與氣喘有闞。〔歐 0 1 1 e r e n s h a v# ) ，S .等人，N e w E n g 1 a n d 1 244— 1248 ( 1 989)〕。活體外及活體内放鬆氣管平滑肌並保護對抗支氣管收縮劑腺素 Fz« 。〔瓦舍門（Wasserman ) * Μ

Vasoactinal Peptide, S. I.塞德，ed. N.Y., 1 982· 177 — 184 頁；塞德，S. I N . Y . Acad . Sc i. , 221 · 103 — 114 ( •打· 靜脈内給予時*已發現VIP保護對抗支氣管收縮劑，如姐織胺，前列腺素Fze ，白三稀類（丨eukot「ienes)，血小板活化因子K及抗原引發的支氣管收縮。〔塞德· S. I ,等人，同上，（1982)〕。亦已發現VIP於活體外抑制人類氣道姐織之粘液分泌。〔科立斯（Ciles ) * S.J.等人，Am. Rev. Re?pi「. Dis., 124， 531 — 536 ( •線. 1981) 〕〇在人類，當由靜脈输注至氣喘患者時，已發琨VIP引起尖峰呼氣流速度增加並保護對抗姐織胺引發的支氣管收縮〔摩利斯（Morice) ， A.H 及希凡（Sover ) * P.S..

Peptides， 7 · 279 —280 (1986);摩利斯，A 等人，

The Lancet, I 1225—1227 (1983)〕。但是由此VIP 靜甲 4ί210Χ 29了乂发）補充 82. 4. 23 Α6 Β6 五、發明説明（々脈輸注所觀察得之肺作用*伴生心血管副作用*以低血壓及心律過速最著，亦有險潮紅。當靜脈内投予不引起心血管作用之劑量時· VIP無法改變特異的氣道傳専性。〔帕默（Pulmer) ， J.B.D,等人，Thorak, 41， 663 —666 ( 1986)〕。活性之缺乏解釋為因為投用低劑量，可能因為此化合物快速退變所致。當Μ氣溶膠投至人類時，原生的VIP僅邊際性有效地保護對抗組織胺所引發的支氣管收縮。〔亞提爾利（ Altieri )等人，Pharmacologist， 25， 123 (1983)] 。已發現VIP對基底線氣道參數無具意義作用，但當吸入投藥至人類時具有保護作用對抗姐織胺引發的支氣管收縮 ° 〔巴尼斯（Bavnes) ，P.J·及迪克生（Dixon ) * C.M.S, Am. Rev. Respir. Dis., 130 * 162 —166 ( 1984) 〕。V IP ·當由氣溶氣管擴張併生的心律過速或 in Vasoactive Intestinal Peptid Raven press, N.Y., 1928 ， 185 —191 頁〕。由於VIF>之令人注意及潛質已成為數個經報告的合成膠投藥時*已有報告未有因支低血壓。〔塞德，S.I.等人， S . I .塞德 * e d ., (請先閲讀背面之注意事項再填窵本頁) .^· .打· 進一個或多個本分子之特性已報在位置8具有麩胺酸替現本化合物比天生的V I P效 28 ， 2265—2269 ( e n d 1 b e r g e r )等人已揭述甲硫胺酸之V I P同類物之製在臨床可用的生物活性，此物計削之目標，計剷的目的是增。塔哥亞馬（Takeyama)等人代天冬胺酸之V I P同類物。發力較低。〔Chem. Pharm. 1 9 8 0 )〕。王德伯格（具有於位置1 7處新甶胺酸取代備 ° 〔Peptide, Proc. 16th •哚. Ψ4Ι210Χ 297 ^'j#)

A6 B6 五、發明说明（夯） Eur. Pept. Spmp . , 290 — 295 ( 1 980 )〕。發現此胜脉其自肝膜製備物置換經放射碘化的VIP之能力與先天VIP 等效。華特斯（Watts )及吳通（Woo ton)已報告一糸列線性及環狀VIP片段，含六至十二個次序之殘基。〔 Eur. Pat. Nos. 184309 及 325044;美國專利第 4737487 及4866039號〕。特樂（Turner)等人已報告片段VIP ( 10—28)是對 VIP 之括抗劑。〔Pept 丨 des, 7，849 — 854 (1986)〕。經取代之同類物〔4 — Cl— D — PheeLeu17〕一 VIP亦已報告與VIP受體结合並拮抗VIP 之活性。〔帕多（Pandol) ，S.等人，Gastrointest, Liver Physiol.， 13， G553—G557 (1986)〕。苟斯（ Gozes )等人已報告同類物〔Lys1* Pro2，Arg3* Arg4， P「〇5，Ty「e〕一 VIP是一種結合於神經膠質上其受體的 VIP 之競爭性抑制劑。〔Endocrinology ，125 ，2945 — 2949 ( 1 989 )〕。羅伯許特（Robberecht)等人已報告於天生VIP之N—端中具D —殘基取代的數種VIP 。〔 Peptides· 9 >339 —345 (1988)〕。所有此等同類物與V I P受體结合較鬆，比C 一 AMP活化作用中的土生V I P 顯示活性較低。塔奇巴那（Tachibana )及尹多（Ito ) 已報告有數個先質分子之VIP同類物。〔於Peptide Chem·, T. Shiba 及 S. Sakakibara， eds·, Prot. Res. Foundation, 1988 ， 481 —486 ，日本專利第 1083012 號，美國專利第4 8 2 2 7 7 4號〕。此等化合物顯示為比V I P 強1至3倍效力的支氣管擴張劑，且具有1至2倍更高程 (請先W"背面之注意事邛再填寫本页) •^· •幻· .ί?· 甲 4ί210Χ 29了乂发） -7- 305S46 五、發明説明（6 ) (清屯間-背面之：;1悉枣項冉塡寫本頁) 度的低血K活性·。木所（Musso )等人亦已報告數種於位置6 — 7，9一13，15— 17，及19-28處其取代的VIP同類物。[Biochemistry, 27， 8174—8181 (1988);歐洲專利第827 1 1 41號；美國專利第4835252號〕。已發現此等化合物在结合VIP受體及生物反應上與土生VIP效力相等或較低。巴特發（Batfai)等人已報告一糸列多取代之〔Leu17〕一VIP同類物〔圔際專利申請案V0 89105857 號〕° 本發明含環狀血管作用肽同類物。環狀肽是一種胜肽，其中肽鍵中一個胺基酸之側鍵羧基蠼經由醚胺鐽之形成共價連接至肽鐽中另一個胺基酸之側鍵胺基端。肽鍵中兩個胺基酸殘基間的共價结合環狀结構。環狀肽的生物活性與親代線性同類物比較大體不同。環狀呔構形較穗固，提供界定良好的構造。此等改變反應在環狀肽的生物廓圈上。胜肽同類物的環化作用可延伸胜狀作用之持久性，因為穩固性增加，使其較不易受到化學及酵素退變。由於结構棰固化之結果造成胜肽物理特性之改變，增加環狀肽之生物可用率。此外，良好界定的環狀肤之形狀比線性呔對檷的受器有較大的特異性•因此減低伴釀所懦者產生不良生物活性的傾向。本發明含下式之新穎環狀肽：經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -8- 81.9.20,000 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（21〇 X 297公楚） Αβ ΒΓ» S05S46 五、發明説明（7) (清":'4-、背面之·"-賡碣冉塡寫本頁) X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Re-Asn-Tyr-Thr-R^-

Leu-Arg-Lys-GIn-R17-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [x-(SEQ ID NO: 2)-Y]

Leu-Asp-Ser-R26-Leu-R28-Y 其中 Re 是 Asp ，G 1 u 或 Lys ; R 12 是 Arg ，Ly s . 0 r n 或 Asp ; R17 是 Met 或 Nle ; R2e 是 lie 或 Val ; R28 是

As n或Thr ; X是氫或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧基保護基團；或其槩劑合格鹽。較佳者為下式之胜肽： Γ- | X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Ra-Asn-Tyr-Thr-Ri2-

Leu-Arg-Lys-GIn-Nle-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [x- (SEQ ID N〇：3)-Y]

Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-Y 其中X，Y，及R12如上述式I 本發明亦含下式之斬穎環狀肽：經濟部中央標準局員工消費合作社印製本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 X釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 ΒΓ) 五、發明説明（8) II.

I I X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Ra-Asp-Tyr-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-GIn-Rτ7-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [X- (SEQ ID NO: 4) -Y]

Leu-Asp-Ser-R26'Leu-R28"Y 其中 Ra是 Asp 或 Asn ; Riy 是 Met 或 Nle ; Rze 是 lie 或 Va 1 ; R 2 8是A s n或T h r ; X是氫SB可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧基保護基或其藥劑合格鹽〇較佳者為下式之胜肽： X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asn-Asp-Tyr-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-GIn-Nle-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [X- (SEQ ID NO: 5) -Y]

Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-Y 其中X及Y如上述式U 。本發明亦含下式之新穎環狀肽： —1 0 — 本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ----Γ---^---------U ------裝-------玎------^ 5凊":,4"背面之·;ίώ荠項冉塡寫本頁) A 6 ΗΓ) 305846 五、發明説明（9 ) III .

I X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Lys-

I

Leu-Arg-Ly s-Glu-R ί 7-Ala-V al-Lys-Lys-T yr- [x- (SEQ ID N0:6)-Y]

Leu-Asp-Ser-R26*Leu-R28-Y 其中 R1.7 是 Met 或 Nle ; Rati 是 lie 或 Val ; Rze 是 Asn 或Th r ; X是氫或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧基保ϋ基團；或其槩劑合格鹽。較佳者為下式之胜肽： I~ X-His-Ser-Asp-Ala-Val- Phe-Thr-Asp-Asn-T yr-Thr-Ly s-

I

Leu-Arg-Lys-Glu-Nle-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr* [X—(SEQ ID NO : 7 ) -Y]

Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-Y 其中X及Y如上述式111 。本發明亦含下式之新穎瑣狀肽： IV. X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Ri2- Γ

Leu-Arg-Ly s-GIn-R! 7-Ala-V al-Lys-Lys-T yr- [x- (SEQ ID NO: 8) -Y]

Leu-Asp-Ser-R26'Leu-R28_Y -11 - 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么、箸）丨裝· -一IT. _丨飧經濟部中央標準局員工消費合作社印製 81.9.20,000 Αβ ΗΓ) S05846 五、發明説明（10) 其中 Ri2 是 Arg 或 Lys ; Ri7 是 Met 或 Hie ; R2e 是 lie 或Val ;R2β是Asrl或Thr ;X是氣或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧基保譜基圈；或其藥劑合格鹽。較佳者為下式之胜肽： X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-nir-Lys-

I

Leu-Arg-Lys-GIn-Nle-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [X- (SEQ ID NO: 9) -Y]

Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-Y 其中X及Y如上述式丨V。本發明亦含下式之新穎環狀肽： V. X-RrF<2-AsP'Ala'Va,*B6'Trir'R8-Asn-R1〇'Thr'R12-

I

Leu-Arg-Lys-Ri6-RirA|a-Ri9-Lys*LVs'R22- [X- (SEQ ID NO: 10) -Y]

I 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

LeU'R24-Asp-R26"R2r^28"Y 試中 R !是 II i s ，N - H 3 -- Λ 1 a ; R 2 M S e r 或 A 1 a ; R ϋ 是 —1 2 — 81.9.20,000 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) T 4規格（210 X 297公釐） S05846 Λβ ΒΓ) 五、發明説明（13·: Q 人C〆 Η δ a 是 A S p ，G 1 U 或 ys ;Rie 是 Gin 是Va 1或A丨a ; 2 b 是 I 1 e * V a 1 其中Q是環己基低烷基或芳基低烷基； Ala ; Ri。是 Tyr 或 Ra; Ri2 是 Arg 8¾ Ala ; (ί 1 7 是 M e t ’ N 1 e 或 A 1 a ; R Rm 是 Tyr 或 Re; R24 是 Asn 或 Ala ; R2B 或 l.eu ; R27 是 Leu 或 Lys ; R2a 是 Asri ，Thr 或 Lys ;X是氯或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之梭

基保請基團；或R

K R 3 1 Ζ ；是（Π y或

Ala ;R3〇是（31y 或 Ala ;R31 是 Ala ，Met ， C y s ( A c m )，或T h r ; Z是羥基或可水解之羧基保護基團或其藥劑合格鹽。 Q Μ下列較佳 -CH2 -(ch2):

-ch2

----τ---^---------I-------裝------ίτ------46 {清先閲"背面之;,",項冉填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製其中η = •Cl- 1 1 ，2 ; X,及X2單獨為相等之Μ，ϋΗ · OCIi .(:II 3 - CF3 ，Ν ϋ 2 · Ν ( C II a ) a ，Ν II (:()(: II，

F 13 本紙張尺度適用中國國家標準（CKS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ΒΓ) 五、發明説明（12 ) N H C 0 C « Η B，或 C ( C Η 丄。更佳者為，Q是苄基.對一氟笨基、對一胺基帑基，對 —_基1?基，〇 —甲基，1 一甲基萘基或2 一甲基蔡基。 Q Μ苄基最佳。較佳者為下式之胜肽： -•''"閲-背而之，;1*麥^再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐〉 81.9.20,000 五、發明説明（13) X- R1-R2-Asp-Al3* V si- Rg-Thr- Rq-Asn-R -j 〇-Thr- R ^ 2" 1L6u-Arg-Lys-R-|g-R^7~Al3-Ri9*Lys-Lys*R22"

Leu-R24-Asp-Val-R2rThr-Y A 6 ΒΓ» [X-(SEQ ID NO:11)-Y] X-R^-R2-Asp-Al3-V3l-Rg-Thr-R3-Asn-Ri〇-Thf-R^2·

Leu~Arg'Lys*R^5'Nle-Al3-Rig-Lys*Lys*R22* [X-(SEQ ID NO:12)-Y]

Leu-R24~Asp-Val-R27~Thr-Y X-R1 -R2-Asp~ AI3-V sl-Rg-Thr- Rg-Asn-R ^Q-Thr-Leu*

Leu-Arg-Lys-R16-Nle-Ala-A!a-Lys-Lys-R22* [X-(SEQ ID N〇：13)-Y]

Leu-R24-Asp-Vai-R27-Thr-Y X-Ri-R2~Asp-Ala~V3l-Rg-Thr-Rg-Asn-Ri〇-Thr-Lys· ILeu-Arg-Lys-Ri6-Nl8-Ala-Rig-Lys*Lys-R22~ [X-(SEQ ID NO;14)-Y] ----r---^-----------------裝------訂 S (;st閱二：背曲之：i'u'f項杏塡寫衣π)

Leu-R24-Asp-Val-R2rThr-Y 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 X-R1 -R2*Asp-AI3-V sl-Rg-Thr-Re-Asn- R1 〇-Thr-Lys*

Leu-Arg-Lys-Rig-Nl6-Al3-A!a-Lys-Lys-R22· [X-(SEQ ID NO:15>-Y】

Leu-R24-Asp-Vai-R2rThr-Y 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297父釐） 81.9.20,000 A6 五、發明説明（14 ) X-Ri*R2"Asp-Ala-Val- Re-Thr-RQ-Asn-Ri〇-Thr-R-j2*

Leu· Arg-Ly s-R 1 s*R i y-Ala-R) 9-Lys-Lys-R22' [X-(SEQ ID NO:16)-Y]

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y f^"^···'1背而之;isi項冉塡寫本頁) X-Ri*R2*Asp-Ala-Vai-Rg-Thr-RQ-Asn-Ri〇-Thr-Lys-

Leu~ Arg-Ly s-RiQ-Ai3-Al3-Al3-Lys_Lys-R22- [X-(SEQ ID NO:17)-Y]

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y X-Ri-R2'Asp*Alct-Vsl-Rg-Thr"Ra-Asn-R^Q-Thr-Lys- I Leu-Arg-Lys-Ri6-NIe-AIa-R19-Lys-Lys-R22- [X-(SEQ ID NO:18)-Y] .裝· ,1T.

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y X-R1 *R2~Asp-Ala-Vel-Rg-TTir-Rs-Asn- R ] 〇-Thf-Lys-

I

[X-(SEQ ID NO：19)-Y] Λ

Leu-Arg-Lys-Ri6-N!e-Ala-Ala-Lys-Lys-R22*

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 X-R ^ -R2*Asp-Als-Val-Rg-Thr-Rg-Asn- R·) 〇-Thr-Lys-

Leu-Aig-Lys-GIn-Nle-Aia-AIa-Lys-Lys-R22-

Leu-R24-Asp-Leu-Lys*Lys-Y

[X-SEQ ID NO：70-Y1 本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（2〖0 X四7公釐） 81.9.20,000 Αβ ΗΓ. 五、發明説明（15) X-RrSer-Asp-Ala-Val-Re-Thr-Ra-Asn-R^o-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-Gln-NIe-Ala-Ala-Lys-Lys-R22-

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-V [x-SEQ ID No：7l-Y] X-RT-Ala-Asp-Ala-Vai-Re-Thr-Ra-Asn-R^o-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-R22-

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y [X-SEQ ID NO:72-Y] X-R^~R2~Asp-Al3*V3i-Rg-Thr*Rg*-Asn-R^〇-Thr_Lys-

Leu-Arg-Lys-Ala-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-R22*

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y [X-SEQ ID NO:73-Y] ——-I---^---------i-------裝------.玎------46 (-":,4"背面之·;1念事頊冉塡寫本?,:) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製本紙張尺渡適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐）_ 17 _ 81.9.20,000

五 '發叼説明（I厶） A6 B6 其中 X，Y ，Ri，最佳之，As p 2 5 VIP 環（ NH2 ]。本發明有心血管本發明增進可持文中所鏈飽和脂文中所 2’ R Θ ' R 8 * Rio ' R 1 2 ' R 1 β ' R 1 R22 ，R24 *及R27如上述式V。環狀呔是 A c - 〔 G 1 U 8，L y s 1 2 * H 丨 e 1 7 ，Leu20 ，L y s 2 7 * 2 8 ' G1y 2 0·3 0 * Thr3 Lys21 — Asp25 ) [ Ac- ( SEQ ID HO ： 52)

Ala1 〕一之胜肽副作用有關新續之支用"低族烴基用 '"芳一或多個位置未基，單一或二一代。、、芳個前述部單取代，文中，基端胺基之胺基保有關'' 團々，任。此等基基"亦份取代或未經 X是胺酸之羰護基圑可水解何可由團之實產生持 *且因穎血管氣管擴烷基" 團。較基"意經取代低烷胺意多核。較佳取代之基端胺基基團。Y可之胺基水解去例出現續的氣管支此可用於支作用性小腸張活性而無包括含1 佳之低烷基為單核芳族或經低烷基基*低烷基芳基基團，之芳基圑苯菴基。基酸之胺基氮上之取代為羥基或可保護基團" 除之習用保於後，較佳氣管平滑氣管收縮肽（VIP 可見之副 6個碳原是甲基。烴基團，，低烷氧醯胺基或如萘基，基，未羥弛而未氣喘。物，其肌之鬆病症如 )同類作用。子直鍵及分支如苯基基，胺苯基醢其可經取代或氮上之取代基，基。X可為氫或水解之羧基保護及可水解之梭基護基團可依本發之胺基保護苺團，可於基，硝胺基取一或多用氟作 Y是羧可水解基團。保_基明使用為 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) _災. *打· •哚. 甲 4(210X 297 乂; 18 〇05S46 Λ6 B6 五、發明説明（17) Λ χ3, 其中X 3是低烷基或鹵低烷基。此等保誰韃中，以其中χ 3是 ,~ C 3烷基或鹵c i — C 3烷基尤佳。較佳之羧基保_基團為低烷基酯· N IU及低烷基醯胺， M C , — C 3烷基酯N IU及C i — C 3烷基醯胺尤佳。本發明含下式之新穎環狀肽： X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-R8-Asn-Tyr*Thr-R12-

Leu-Arg-Lys-Gln-R17-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [X-(SEQ ID N0:2)-Y] 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Leu-Asp-Ser-R26-Leu-R28-Y 其中 R « 是 A s p ，β 1 υ 成 h y s ; R it 2 是 A r g * L y s ，〇 r n 或 Asp ; Κι?是 Met 或 Nle ; Rae Mile 3艾 Val ; Rzs 是 Asn或Thr ; X是M或可水解之胺基保謅基團；Y是羥基或可水解之羧基保護基團；或其藥劑合格鹽。較佳者為下式之胜肽： 19 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格m〇 X 297么'釐） 81.9.20,000 五、發明説明（18) X-Hi$-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Re-Asn-Tyr-Thr-Ri2* Leu-Arg-Lys-GIn-Nle-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-Y 其中X ，Y ，R a及R i 2如上述式[ 本發明亦含下式之新穎環狀肽： A6 Β(ϊ [X-(SEQ ID N0:3)-Y]

II {'"t問·’七背面之：-1¾麥項冉塡寫本頁) X-HiS'Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Re-Asp-Tyr-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-Gln-RirAla'Val-Lys-Lys-Tyr· [X- (SEQ ID NO:4)-Y]

Leu-Asp-Sef-R26~Leu-R28*Y 其中 R» 是 Asp 或 Asri ; R17 是 Met 成 Hie ; 是 I le 8戈 Val ; Km是Asu或Thr ; X是饈或可水解之胺基保護基 ;Y是羥基或可水解之羧基保護基團；或其藥劑合格播團較佳者為下式之胜肽經濟部中央標準局員工消費合作社印製 X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asn-Asp-Tyr-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-AIa-Val-Lys-Lys-Tyr- [X-(SEQ ID NO:5)-Y]

Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-Y 2 0 本紙張尺Λ適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 Λ6 ΒΓ) 五、發明説明（19) 其中X及Y如上述式Π 。本發明亦含下式之新穎環狀肽： III . I X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Lys-I Leu-Arg-Lys-Glu-RTrAla-Val-Lys-Lys-Tyr- [x- (SEQ ID NO ： 6) -Y]Leu-Asp-Ser-R26-Leu_R28-Y 其中 R i 7 是 M e t 或 N 1 e ; R 2 b 是 I 1 e 成 V a 1 ί R 2 a 是 A s π m Thr ; X是氫或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧基保護基團；或其藥劑合格鹽°較佳者為下式之胜肽： ----------------i-------裝------.玎------46 〈清"""背面之注念參項再塡寫本页) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Lys-Γ Leu-Arg-Lys-Glu-Nle-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [X- (SEQ ID NO:7) - Y] Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-Y 其中X及Y如ii述式HI ° 本發明亦含下式之新穎環狀狀： _- 21 - _ 衣紙張尺·度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公楚） 81.9.20,000 Λ 6 HG 五、發明説明（20 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 IV. X-His-Ser-Asp-Ala-Val*Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-R12-I Leu-Arg-Lys-Gln-R17-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [X-(SEQ ID NO:8)-Y]I Leu-Asp-Ser-R26~Leu-R20'Y 其中 R12 是 Arg 或 Lys ; R1.7 是 Met 或 Nle ; Rza 是 lie 或V a丨；R 2 a是A s n或T h r ; X是1¾成可水解之胺基保護基刚；Y是羥基或可水解之羧基保護基3¾其藥劑合格 1«。較佳者為下式之胜肽： X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Lys-I Leu-Arg-Lys-GIn-Nle-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- [X- (SEQ ID NO:9)-Y] Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-Y 其中X及Y如丨:.述式丨V ύ 本發明亦含下式之新潁瑁狀肽：一 2 2 一本紙張又度適用令國國家標準（CNS)甲4規格（以0 X 297公釐） 81.9.20,000 f-t^、'·'-"面之·;1念麥項冉塡寫本頁) 五、發明説明（21> X- -R2-Asp* Als-V si* R^-Thr- Rg-Asn- R1 〇-Thf- R12*

Leu-Arg-Lys-R t q-R 17-AI3-R -|9-Lys-Lys-R22-

Leu-R^4~Asp-RyQ"Rg7-R2Q-Y A6 m ν· [X-(SEQ ID NO:10)-Y] 其中 R i 是 II i s ，N - Cll3 — Ala ; 是 Ser gi^Ala ; Re 是

Q 其中Q是環己基低烷基或芳基低烷基；R a是As P ，G 1 U或 Ala ; Ki〇是 Tyr 或 Re; Rw 是 Arg ，Lys ; Rie 是 Gin §SAIa ; R17 是 Met ’ Nle S^Ala ; Kie 是 Val 或 Ala ; Raa 是 Tyr 或Ke; 是 Asn 或 Ala ; Raa 是 lie ’ Val 或 Leu ; R27 是 Leu 成 Lys ; ha 是 Asri ，Thr 或 Lys ; X是氫或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧

基保護基團；或R 2 a R

R Z ；是G 1 y或 -----------------^ ------裝------訂------^f清'"間.，'-!!背面之注念麥^冉塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Ala ; (?3。是 Gly 或 Ala ; R31 是 Ala ’ Met ’Cys ( Acm>，或Thr ; Z是羥基或可水解之羧基保護基團或其藥劑合格馥^ 2 3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 S05S46 Λβ Bf；五、發明説明（22) Q Μ下列較佳

其中η = 1 , 2 ; X,及）(2單獨為相等之氫，〇丨丨，〇c丨丨a * F .(；1 . I . C H 3 · C F 3 · Η 0 a · Η ( C H a ) 2 · N II C 0 C 11 *N li Γ (H： u H b，或（：（ΠΙ a ) 3 。更佳者為，Q是苄基，對一氟笨基、對_胺基节基’對一 If基节基，（）-甲基，1 --甲基萘基或2 —甲基蔡基。 Q K苄基最佳。較佳者為下式之胜肽： X-R1-R2* Asp-Ala*V 3l- Rg-Th r- Rq-Asn- R ^ 〇-Thr- R \ 2* I Leu-Arg-LyS'Ri6'RirAla-Ri9-Lys-Lys-R22* [X- (SEQ ID NO : 11) -Y] I Leu-R24'Asp-V3l-R27-Thr-Y 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -24 -_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CN’S)甲4規格（210 X 297公釐) 81.9.20,000 五、發明説明（23) X-Ri-R2*Asp-Ala-Val-RQ-Thr-Rg'Asn-Ri〇-Thr-Ri2" Λ6 B6

Leu-Arg-Lys-Ri6_Nte"Ala-Ri9-Lys-Lys-R22- [X- (SEQ ID NO : 12) - Y]

L8u-R24'Asp-Vai-R27~Thr-Y X-R i -Rg'Asp-Ala-Val-Rg-Thr-Rg-Asn-R iQ-Thf-Leu-

Leu-Arg-Lys-Ri6-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-R22- [X- (SEQ ID NO : 13) - Y]

L6U-R24*Asp-Val-R27~Thr-Y X-RrfVAsf^Ala-Val-FVThr-Ra-Asn-RwThr-Lys·

Leu-Arg-Lys*Ri6'N*e_Ala-Ri9rLys-Lys-R22* [X- (SEQ ID NO : 14 ) -Y】

Leu-R24*Asp-Val-R27~Thr-Y X-R ^ -R2~ Asp*Ala-V 3l-Rg-Thr-RQ-Asn- R \ 〇-Thr*Lys-

Leu-Arg-Lys-Ri6_Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-R22_ [X- (SEQ ID NO : 15) -Y]

Leu-R24'Asp*V 3l-R27-Thr*Y ----------------u ------裝------.玎------^ i靖t w^t¾之：;.rt事項冉罐寫本頁) 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 X- R ^ -R^ Asp-AI3-V si- R^-Tti γ-Rq-Asn- R -¾ 〇*Th r- R ^ 2**

Leu-Arg-Lys-Ri6-Ri7-Ala-Rig-Lys*Lys-R22- [X- (SEQ ID NO : 16) -Y]

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 25 81.9.20,000 五、發明説明（24) X.RrR2-Asp-Ala-Val-R6-Thr-Ra-Asn-R10-Thr-Lys-

Afi ΒΓ»

Leu-Arg-Lys-RwAla-Ala-Ala-Lys-Lys-R；^- [x- (SEQ ID NO: 17) -ϊ]

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y X-RrR2-Asp-Ala-Val-R6-Thr-R8-Asn-R10-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-Ri6-Nle-Ala-Ri9-Lys-Lys-R22- [X- (SEQ 工D NO:18>-Y]

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y X-RrR2-Asp"Ala'Val-R6-Thr-Re-Asn-R10-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-Ri6-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-R22* [X- (SEQ ID MO :19)-Y]

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y X-R, -R2-Asp-Ala-Val-R6-Thr-R8-Asn- R! 〇-Thr-Lys-

Leu-Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-R22-

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y [X-SEQ ID NO: 70-Y] ---1-------------Γ ------裝------iT------f (-tr^-片曲之注-私項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 X-RrSer-Asp-Ala-Val-R6-Thr-Re-Asn-Ri〇-Thr-Lys-

Leu-Afg-Lys-Gln-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-R22·

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y [X-SEQ ID NO :71-Y] 本紙張尺渡適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 26 五、發明説明（25) X-RrAIa-Asp-Ala-Val-Re-Thr-Re-Asn-Rio-Thf-Lys-

LeU'Arg-Lys-Gln-Nle-AIa-AIa-Lys-Lys*R22- Α(ι ΒΓ»

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y [x-SEQ ID NO: 72-Y] X-R i -R2* Asp-Ala-V al- Rg-Thr- Rq-Asn- R) 〇-Thr-Ly s-

Leu-Arg-Lys-Ala-Nle-Ala-Ala-Lys-Lys-R22'

Leu-R24-Asp-Leu-Lys-Lys-Y [X-SEQ ID NO: 73-Y] f-tu4"mr而之；1‘-麥項冉塡寫本頁) 經濟部中央標準局B工消費合作社印製本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'釐） _ „ 7 _ 81.9.20,000

t請先«讀背面之注意事項再填其本页) 其中 X ’ Y * Ri* R2* Re* R 8 ' Ri〇 * R12 ' Rie * Riv

Ris > R22 ，r24 ，及 R27 如上述式 V。本發明進一步有翮製備該肽之方法，有關含此種肽之藥劑姐合物及使用此肽及一種無毒*鈍性，藥劑合格載劑治療支氣管氣管收縮病症。製備環狀肽之該方法特點為 (a) —種具相當胺基酸次序之經保護且樹脂結合肽選擇性的去保護產生一種游離側鏈胺基基團及游離側鐽羧基基團； (b】此游離側鐽胺基基團及游離側鏈羧基基團用一種適當之醢胺形成試劑共價連接；及用適當之去保護作用及斷裂劑處理，脫去保護並自樹脂斷裂環狀肽*若需要，在其它適當添加劑如陽離子清除劑之存在下，及若箱要，將環狀肽轉化成藥劑合格鹽。訂. 本發明亦有關使用該環狀呔製造一種藥劑姐合物用於治療支氣管氣管收縮病症。用K定義胜肽之命名法為一般用於本技藝者，其中位於 N —端之胺基基團出現在左邊，位於C 一端之羧基基團出現在右邊，天然胺基酸意為蛋白質中天然發現之胺基酸， BP * G 1 y * Ala · V a 1 ，'Leu ，Ile ，Ser ，Thr > L y s ，A r g ，A s n > Glu > Cys ，Met ，P h e ，T y r ，Pro ， Trp ，及His 。胺基酸是異構形時，其代表呈L型.除非另有指示。除上述代表胺基酸外，用下列縮寫或苻號代衷保護基，溶劑，試劑等等。 —2 8 一甲 210X 297乂发) 305846 Λβ ΗΓ) 五、發明説明（27) 符SL 意義— Ac 乙醯基 Π r η 鳥胺酸 Η 1 e 新白胺酸 F ID 0 C 9 — 呋喃饰基甲氧基羰基 F m 9 - 呋喃烯基甲基 Boo 第二 — 丁氧基羰基 Bom 苄氧基甲基 CH?C U 二氯甲烷 C H 3 C N 乙晴 DMF ___- 甲基甲醯胺 D I PE A N $ N — ' 異丙基乙胺 TF A —. 氟醏酸 HOBT Η — m 基笨駢二唑 DCC Ν * N ' — --一環己基碳醯亞 DIG Ν » N， — — 異丙基碳醯亞 BOP 氟 m 酸笨駢三唑一― 1 — 基 ) 膦甲胺 -----------------------t-------.玎------^ "'•'''"^-‘-v'r-gti,^^.^1、冉塡."本汀) 經濟部中央標準局員工消费合作杜印製 29 本紙張KJi適用中國國家標準（CNS)屮4規格（210 X 297 ) 81.9.20,000

p-F-Phe (-"'"-片而之;1-^項冉塡寫本|1:)

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 FAB-MS 快速原子撞擊質譜計天生V 1 P肽次序之同類物由設定經取代的胺基酸於v V ί P "前面之枯弧内表示。N —端胺基Μ圃之衍生化，即，如由卜述X ，示於加上括弧的取代基之左邊°出琨在" V I Ρ "右邊桶句中之次序數目_示胺基酸缺失及對天生次序數目添加。即，例如，A c — 〔 L y s 1 2 * N le17 ，G丨y 2 β

〕一V I P ( 1 - 2 9 ) — N丨丨2顯示·補具有相當於天生人類V I P 之胺基酸次序之多狀，其中於N --端已由乙酿基基_替代氫，於位置1 2之精胺酸已由溶胺酸替代’位置1 7之甲硫胺酸已由新白胺酸取代。此外•甘胺酸已偶合至天冬胺酸 28之羧酸部位，定為位置29。接於、、V 1 P "或括弧後之字一 3 0 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么、釐） 81.9.20,000

Bfi 五、發明説明（29) ί請1間"背面之注6麥項再場寫本") 尾* 一 ΟI厂及、、一Ν丨丨2 —分別指多呔的游離酸及酸胺形式。無字尾使用之狀況下，意表示包含各棰形式。如七述，環狀肽*如本文所定義，是一棰其中狀中一個胺基酸側鏈羧基端烴由形成一棰醯胺踺共價連接於狀謎中另一個胺基_之胺基端。利用數棰命名法及符號W代表環狀肽。下列為實例：

Ac-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Lys-Leu*Arg-Lys-Gln-Nle-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr- a

Leu-Asp-Ser-Val-Leu-Thr-NH2 [Ac- (SEQ ID bJO:20)-MH2】

Ac-[Lys12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo(8->12> b.

[Ac-(SEQ ID NO:20>-NH2]

Ac-[Lys12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Asp8->Lys12) c. [Ac-(SEQ ID NO:20)-NH2] 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 I.述三棰構造（a -- c )，及伴隨使用SEQ ID NO :代表· M及下列次序表，各代表並定義具有相當於天生人類 V ϊ P之胺基酸次序•其中乙醻基團已替代N —端之氲，溶胺W已替代位置1 2之精胺酸，異白胺酸已替代位置1 7之甲碕胺酸，纈胺酸B替代位置26之異白胺酸，酥胺酸已替代位曹2 8之天冬胺酸。此外已於位置β之天冬酸之側鍵羧基一 3 1 一 81.9.20,000 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（21〇 χ 297公楚）修正 t „年月日· 補亦 82.4 2 ^ A6 BG • t···* -Ό 1 * 五、發明説明（30 ) 及位置12之溶肢酸的側鐽胺間形成醯胺鐽 > 如此形成環狀肽同類物〇上述胜肽结構之代表被認為是相當物或可交換的〇如文中所用 t 、、 Rn // 1 代表示於文中结構之 — 的位置 η 處之胺基酸 ) 、、 Xa a // 表下列次序表中相關次序中位置 η 的一個胺基酸 » 於彼等實例中為相當的且可交換的 > 其中 Xa a 代表白二或多個胺基酸之一種選擇〇本發明之環狀肽中，除非另有陳述 » 使用下列構形〇辩中胺華酹结 Η 形成環狀狀胺華稱末端 Ly S ε 胺基 C ε = 艾普西龍 ( e ρ si 1 〇 η ) ] Or η δ 胺基 C δ = 代爾他 ( d e It a ) ] A s Ρ β 羧基 C β = 貝塔 ( be t a ) ] G 1 U 7 羧基 C Ί =. 迦瑪 ( s amm a ) ] 本發明之代表性化合物包括具有下列胺基酸次序之呔 -32 - (-先.,¥,-舍面之注-爭^再塡寫本頁). 丨裝·

-1T 丨線· 本氓张KJH用中阀闻家找準（CNS) φ 4規格（210 X 297 乂兑） 81.9.20,000 S05S46 A 6 五、發明説明（31) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Ac-[Lys12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Asp8->Lys12) [Ac-(SEQ ID NO :20)-NH2] Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Glu8->Lys12) [Ac-(SEQ ID NO:21)-NH2] Ac-[Asn8,Asp9,Lys12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Asp9-^Ly512； [Ac-(SEQ ID NO:22)-NH2] Ac-[Orn12,Nle17,Val2 Thr28]-VIP cyclo (Asp8—>Orn12) [Ac-(SEQ ID NO:23)-NH2] Ac-[Lys8,Asp12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys8-^Asp12) [Ac-(SEQ ID N〇：24)-NH2] Ac-[Glu8,Orn12,Nle17,Val2^,Thr28]-VIP cyclo (Glu8-^Orn12) [Ac-(SEQ ID NO :25)-NH2] Ac-[Lys12,Glu16,Nle17,Val25,Thr28]-VIP cyclo (Lys12-^Glu1 5) [Ac-(SEQ ID NO:26)-NH2] Ac-[Lysl2, Nlel"7, Asp24 , val2 6, Thr28 ] _vip cyclo (Lys2〇—4) [Ac-(SEQ ID NO :27)-NH2] Ac-[Lysl2, Nlel"7, Asp25, val26, Thr28 】-VIP cyclo (Lys〗l-^Asp2 5) [Ac-(SEQ ID NO:28)-NH2] Ac-[Lysl2,Nlel7,Alal9,Asp25,val26,Thr28]_vip cyclo (Lys21—>Asp25) 33 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ~-^'"間·’'·''片而之"-麥碣冉塡寫本頁) 五、發明説明（32> A6 ΒΓ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 [Ac-(SEQ ID NO:29)-NH2] Ac_ [p-F_Phe6, 2-NallO, L.ysl2, Nlel7,Asp25,val26,Thr2 8, G]_y2 9, 30, Met] 1 ] - VIP cyclo (Lys^ >Asp^ 5) [Ac-(SEQ ID NO:30)-NH2] Ac-[Glu8,Orn12,Nle17,Asp25,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:31)-NH2] Ac-[p-F-Phe^,Lys12,Niel?,Alal9,Asp25,val2 6, Thr28, Giy2 9, 30, cys (Acm) 31 】- VIP cyclo (Lys^l—>Asp^^ ) [Ac-(SEQ ID NO:32)-NH2] Ac-[Ala2,Lys12,Niel?,Alal9,Asp25,val2 6,Thr28]—viP cyclo (Lys21—>Asp25 > [Ac-(SEQ ID NO:33)-NH2] Ac-[N-Me-Alal,Lysl2,Nlel7,Alal9,Asp25,val26,Thr28]_viP cyclo-(Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ 工D N〇：34>-NH2] Ac-[2-Nall〇,Leul2,Nlel7,Alal9,Asp25,val26,Thr28]—viP cyclo (Lys^1—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:35)-NH2] Ac-[Ο-ΟΗβ-ΤγΓ10,Leu12/Nle17/Ala19,Asp25, Val26, Thr28]-VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:36)-NH2] Ac- [p-F-Phe^p-NH2-Phel〇, Leu3·2, Nle1·?, Ala3·9, Asp2 5, Val2 6, Thr2 8 ] - viP cyclo (Lys^-^-^Asp^S) [Ac-(SEQ ID N〇：37)-NH2]-3 4 — --------^---------l ------裝-------玎------蜂 f-t間Λν片面之;t-i項再塡."本頁) 本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 A6 B6 五、發明説明（33 ) I ' i Ac-[Lys12,Nle17,Ala1^,Asp^S,Leu^S,Lys27^ 2®]-VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:38)-NH2].

Ac- [N-Me-Alal, Lysl2, Nlel、Alal \ Asp25, Leu26, Lys27'28 ] _vip cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:39)-NH2]

Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26,Lys27'28]-VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [AC-(SEQ ID NO:40)-NH2]

Ac-[O-Me-Tyr10,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Val26,Thr23]-VIP cyclo (Lys^^-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:41>-NH2]

Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26,Lys27^ 28,Ala29-31]-VIP cyclo (Lys?1—>Asp25) [AG-(SEQ ID NO：42)-NH2]

Ac-[Ala2,Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu25, Lys27/ 28,

Ala29-31]-VIP cyclo (Lys21-»Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:43)-NH2]

Ac-[N-Me-Ala1,Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu25, Lys27/ 28]-VI? cyclo (Lys^1—>Asp^^) [Ac-(SEQ ID NO:44)-NH2]

Ac-[p-F-Phe^,G1u8,Lysl2,Nlel7,Alal9,Asp25,Leu26,Lys27,28]_vip cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:45)-NH2]

Ac-[l-Nal6,Glu8,Lysl2,Nie17,Ala19,Asp25,Leu26,Lys27,28]_VIP cyclo (Lys21~^Asp25) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（2丨0><297公釐）-35 - ..................................ί .............:¾..............................^.............................A - - ^ (請先M讀计面之注意事項再瑱寫本頁) Λ6 B6 305846 五、發明説明（34 > (-屯閉-脊面之·i'-i^'冉塡寫本w) [Ac-(SEQ ID NO:46)-NH2l

Ac-[Glu8,p-NH2-Phe10,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26, Lys27, 28]-VIP cyclo (Lys^l—»Asp25).

[Ac-(SEQ ID NO:47)-NH2]

Ac-[Glu8,0-CH3-Tyr10,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu2S, Lys27^23]-VIP cyclo (Lys^ 1—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:48)-NH2]

Ac-[p-F-Phe6,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：49)-NH2]

Ac-[l-Nal^,Lys12,Nle17, Ala1Asp25,Val2 Thr2^]-VIP cyclo < Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:50)-NH2]

Ac- [Ala2,Glu8, Ly512,Nle17,Ala19,Asp25,Leu25,Lys27^8,

Gly2 9, 30, <jhr31 ]-VIP cyclo (Lys21—>Asp2 5) [Ac-(SEQ ID NO :51)-NH2]

Ac-[Glu^,Lys1^,Nle17,Ala1Asp2Leu2Lys27 ^ 28,

Gly29, 30,Thr31]-viP cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:52)-NH2]

Ac-[Ala2,Glu8,Lys12,Nle17,Ala13,Asp25,Leu2^,Lys27^28]-vip 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:53)-NH2]

Ac- [p-NH2-Phel〇, Lysl2, MleU/Alal^Asph'val^S/ThrSSj-vip cyclo (Lys2>Asp2 5) [Ac-(SEQ ID N〇：54)-NH2] -36 _ 81.9.20,000 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Λ 6 五、發明説明（35)

^c-[Lys12,Nle17/Ala19im-OCH3-Tyr22/Asp25,Val26,Thr28]-VIP ryclo (Lys21—»Asp25) [Ac- (SEQ ID NO:55>-NH；2] \c-[Lys12,Nle17,Ala19,m-F-L-Tyr22, Asp25, Val26,Thr28]-VIP cyclo ‘(Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：56)-NH2]

Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19/m-OCH3-Tyr22,Asp25,Leu26,

Lys27,28] _vip cyclo (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:57)-NH2]

Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,m-F-L-Tyr22, Asp25,Leu2。，Lys27, 28]- VIP cyclo (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO :58)-NH2]

Ac-[Ala8,Lys12,Nle17,Ala19, Ala24, Asp25, Leu26,Lys27'28]-VIP cyclo (Lys^l—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:59)-NH2】

Ac-[Glu8,Lys12, Ala1。17，19,Asp25, Leu2 6,Lys27，28]-VIP cyclo (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:60)-NH2]

Ac-[Ala8,Lys12,Ala15,Nle17,Ala19, Ala24,Asp25, Leu26,Lys27^ 28]-VIP cyclo (Lys2>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:61)-NH2]

Ac-[Ala8,Lys12,Ala16^19,Ala24, Asp25, Leu2 6,Lys27 ^ 28]-VIP cyclo (Lys^1—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:62)-NH2]

Ac-[Glu8,Lysl2,Alal6,Nlel7, AlaU，Asp25，Leu2 6,Lys27’28]-vip cyclo (Lys21—>Asp25) -37 本紙張&度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ----;l.----；--------^ ------裝------ir------^ (-1"01-"!!向之"-麥^冉塡.寫本頁) 五、發明説明（36 ) Μ ΗΓ) [Ac-(SEQ ID M〇：63)-NH2] Ac-[Glu8,LyS12,Alal6,17,19,Ala24,Asp25,Leu26,Lys27,28]-VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：64)-NH2】 Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Val26,Thr28, Gly29'30,Thr31]- VIP cyclo (Ly521->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO :65)-NH2] Ac-[p-F-Phe6,Glu8,Lys12,Nle17,Asp25,Val26,Thr28, Gly29, 30,Thr31]-viP cyclo (.Lys21—Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:66)-NH2] Ac-[Ala2,Glu8,Lys12,Nle17,Asp25,Leu26,Lys27'28, Gly29,30^Thr3l]_VIp CyCi〇 (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:67)-NH2] Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Asp25,Leu26,Lys27，28, Gly29, 30,Thr31]-VIP cyclo (Lys21-4Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:68)-NH2] Ac-[Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26,Lys27^ 28, Ala29-31]-VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:69)-NH2] ----'----；-------U ------裝------.玎----— If (請先閲"背面之;i"笋碩冉場寫本页) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 — ^ ft 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20 000 A(i [ί(；五、發明説明（37 ) 7T''l-:a,"mr.i,/ ,.:7?负項办塌.;,';本"、) 本發明化合物可由習用供形成胺基酸間呔接合的任何已知習用步驟迅速合成。此種習用步驟包括，例如，任何溶液相步驟*此步驟允許胺基酸之游離α胺基基團或其殘基 (其羧基團或其他反應性基團受保護，Μ及另-個胺基酸或其殘基（具有受保護的胺基基團或其他反應性基團。合成本發明化合物之方法可由一種其中各胺基酸接序另一個胺基酸或殘基Μ所需次序一次添加之步驟，或由其中具有所需胺基酸次序之胜肽Η段先習用法合成然後經縮聚 Μ得到所需胜肽之步驟進行。合成本發明化合物之習用步驟包括例如任何固相肽合成法。此棰方法中，新穎化合物之合成可由一次按序併入所需胺基酸殘基至成長的肽鏈中，依據固相法之一般原理進行[馬力非德（1^「「！『1614，1^.1^，1]./\1116「.（^116111·

Soc. 8 5 * 2149 - 2 1 5 4 ( 1 9 6 3):巴尼（Barany)等人，

The Peptides, Analysis, Synthesis and Biology,

Vol. 2，葛洛斯（Gross ) ， E 及梅霍福（Meienhofer) * J. Rds, Academie Press 1-284 < 1980) 0 經濟部中央標準局員工消費合作杜印变常見於呔之化學合成者為用適當保護基保護各種胺基酸部份的反應性側鏈基團，會防止化學反應於此部位發生直罕移除保護基為lh。亦常見的是於胺基酸成Η段上的α胺基基_之保護作用，同時整體於羧基基團上反應，接著選擇性去除《胺基保護基Μ允許於此部位發生接下來之反應。雖然已揭述有關固相合成法之特定保護基，應知各胺基酸可由習供溶液相合成的各別胺基酸所用之基團保護。 -39 -81.9.20,000 Λβ ΗΓ) S05S46 五、發明説明（38) „ 一胺基基團可由選自下列之適當保護基團保護；芳族尿烷型保護基團*如苄氧羰基（Z)及經取代之苄氧羰基 *如對一氯苄氧羰基，對一硝基苄氧羰基，對一溴苄氧羰基，對一二笨基一異丙氧羰基，9 呋喃烯基甲氧羰基（ Fmoc)，對一甲氧基苄氧羰基（Moz);脂族尿烷型保護基團，如第三-丁氧羰基（Boc )，二異丙基甲氧基羰基，異丙氧基羰基，烯丙氧基羰基，對α胺基保護以Boc最佳，梭基基團可由選自下列之適當保護基團保護：芳族酯如苄基（OBzl)或經烷基，鹵，硝基，硫基，或經取代硫基，即，低烷基（1 一 7碳原子）硫基取代之苄基；脂族酯如低烷基，第三—丁基（01 - B u )環戊基，環己基（ (1 c Η X )，環庚基，及9 一呋喃烯基甲基< 0 F ra )。對麩胺酸（G 1 u ) Μ 0 B z 1及0 F m為最佳。對天冬胺酸（A s p > K 0 C h X · OBzl 及 OFm 為最佳 15

羥基基圈可由選自下列之適當保護基團保護：醚類如苄基（B z 1 >或低烷基，鹵素，如2 ，6 —二氯苄基（D C B )，硝皋，或甲氧基取代之苄基；第三一丁基（t 一 Bui ，四氫哌喃基，及三笨基甲基。對酪胺酸（Ty r ) Μ B z 1 與D C Β最佳。側鏈胺基基團可由選自下列之適當保護基團保護：芳族尿烷型保護基團，如笮氧羰基（Ζ)及經取代之笮氧羰基，如對—氯苄氧羰基，2 —氯苄氧羰基（2 - C L - Ζ )，對一硝基苄氧羰基，對一溴苄氧羰基，對一二笨基一異丙 -40 - 衣紙張&度適用中阀阀家標平（CNS)甲4规格（:.ΜΠ X 297 X贷） -------------------------^------.玎------^ f-1"1-.·1111-。.m,f .,〔:!〕算項办塡.',';本；C-) 經濟部中央標準局員工消費合作杜印S衣 81.9.20,000 五、發明説明（39

Af； ΗΓ» 氣羰蓽，9 —呋喃烯基甲氧羰基（Fm〇c> 氧羰蓽（M〇Z> ;脂族尿烷型保護基團，基（Boc > ，二巽丙基甲氧基羰基，巽丙氧基羰基。對鳥胺酸（〇 r η ) Μ Z最佳。 > Μ 2 -— C 1 —- Ζ 及 F in o c 最佳。，對一甲氧基苄如第三一丁氧羰氧基羰基，烯丙對溶胺酸（L y s 基（Tos ) ， Z 。對精胺酸（護。對天冬醯胺 5ί f 項冉本 Τι 裝訂 Λ 經濟部中央標準局SS工消费合作杜印製眼基基團可由選自，金剛氧基羰基，及 A r g ) Μ T 〇 s 最佳，> 側鍵醢胺基團可由 (A s η >及麩醯胺（眯啤基箪_可由選苯磺醯基（ 2 ， 4 )•對姐胺除非另有，液體中之稽/體積* 試劑及儀器它供應者選所有溶劑二甲基甲醯 Fisher or 氟乙酸購自使用。二異 T 〇 s ) · 硝基笨基酸 M Tos 陳述，下液體，液重鼉/體之提供者則類似的，異丙醇胺（DMF Burdick 哈洛卡明丙基乙胺硝基，對-甲笨磺醯 Boc之適當基團保護夾氧Μ基（Xan )保 G 1 n ) Μ不保_較佳自下列之適當保護基 9 一呋喃烯基甲氧羰 (Dnp ) ， Boc 及苄及B 〇 m最佳。列所示百分比，對固體中之固體，分別為積計。此外•除非另並不意為委定。精於試劑及儀器。 (i P r 0 Η )，二氯甲 >皆購自漁人或貝的 & Jackson )，毋需 (Halocarbon) > 毋 (I) I P E A )購自法Η 團保護：對一甲基三笨基甲基，氧基甲基（Bom 體混合物之固體重量/重量，體有陳述，下述之本技藝者可自其烷（CH2C ] 2> 及克&傑克生（再蒸餾使用。三需進一步純化可與包爾（ 41 本纸張用中阀阀家標，（CNS) ψ .1規格（:川）X 207 乂、贷） 81.9.20,000 Λ(； Hfi 五、發明説明（4Q)

Pfaltz and Bauer)，使用前自CaO及印二嗣蒸鋪c二環己基碳二醯亞胺（D C C >及二異丙基碳二醯亞胺（D I C > 購自富卡（Pluka> ，毋需進一步純化可使用。羥基笨駢三啤（Η 0 B T )及1 ，2 -乙烷二硫醇（E D T )購自西格瑪 (S i g a m a )話學公司，毋需進一步純化可使用。經保護之胺基酸一般為L構形，購自化學代納密可公司或貝肯（ i: hem i fa 丨 Dynamics (:orp. or Bachem )。此等試劑之純度於使用前由薄層層析，NMR及熔點確定。Boc — Ο ：-h f jfl 办本

Me — Tyr > B o c 2

Na 1 及B o c 經濟部中央標準局員工消费合作杜印製告製備。丨保林（B ο丨i n ) ，D . R .美國專利申請案地 3 7 4 5 0 3 號 1 。B 〇 c /\sp(0Fm> 及 Boc - GIu(OFib)如報告製備.1 「保林（Bolin > ，D.R.等人，Org. Prep. Proc. T n t · , 2 1 > 6 7 — 7 4 ( 1 9 8 9 }] 二苯甲基胺樹脂 < B H A ) 是一種笨乙烯一1%二乙烯機苯之共聚物（100 —200或 200 — 400 鋪號〕，得自Biomega, Bachem， Omni 或 Advanced Chemt. ech 。此等樹脂之總氮含量一般為0 . 3 — 1 . 2當量/公克間。薄層層（TLC >於Μ玻璃為底，預先塗装矽膠60 F254 之盤h，利用適當溶劑系统進行。化合物之偵側由U V螢光猝滅（2 5 4 nm吸收）*碘染色，或萌三_噴霧（對一级及二级胺）進行。對胺基酸組合物分析，呔於115 °C，密封，抽空之水解試管中，於6NHC丨含1 - 4毫克酚中水解2 2 — 2 4小時。在目克們（Beckman > 121M胺基酸分析器或瓦特司（ 42 本紙張义度適用中阀國家桴肀（CNS)屮4峴格（2in X四7 λ'綾） moo(> 裝 π 經濟部中央標準局員工消费合作杜印製 A(. H(；五、發明説明（41 )

Wat. ers) HP l. C為基之胺基酸分析系統中利用瓦特司蓋特（ Waters Cat)樹脂，或皮爾斯（Puerce) AA511柱及印二 _偵測進行分析。高功率液體層析法（HPLC)在LDC由康嗣坦計I及I幫浦，一種梯度馬司特溶劑程式計（Gradient Master solvent programmer)與混合器，Μ及一個光譜監測器（ S p e c t. r 〇 m ο n i t 〇 r ) ffl SJ變波長I】V偵測器姐成之裝置上進行分析性Η P L C在利用瓦特司u朋達帕克（W a t e r s w Bonpak) C,«柱（0.4 X30公分）之逆相模型中進行。製備性H0LC分離作用在安装有瓦特司卡巴克C18前柱（ Waters Guard-Pak Cis preco丨um )之華特門馬根（

What; man Magnum)帕提希爾（part, isll)柱（2x25 公分或2 X 5 0公分）t.進行。凝膠層析使用2 X 8 5供分柱，一種I.KB variopepex (變沛克丨蠕動幫浦及一種IBM可變波長II V偵測器進行。肽Μ由梅瑞非德（Merrifield)所述之方法的固相合成製備較佳，[J. Arae「. Chem. Soc. , 85 - 5 1 49 ( 1 963 ) 1 ，唯亦可使用本技藝中已知的相當化學合成，如前述。罔相合成自肽的c -端著手，偶合一個經保護的胺基酸至 _當樹脂。此種起始物質可將α -胺基保護之胺基酸藉酯連接至氯甲基化樹脂或羥甲基樹脂，或藉醯胺鐽結合至二笨甲基胺（ΒΗΑ )或對一甲基二笨甲基胺（ΜΒΗΑ)樹脂製備。羥基甲基樹脂之製備為本技藝所熟知。氯甲基樹脂可購得，Η製備法為本技藝熟知 ΒΗ Α與MB Η Α樹脂支座可購 -43 - 本紙張&,¾適用中國國家標平UA’S)甲規格（:;川）X 297 Κ犛） 81.9.20,000 ----------------,—— ------裝-------訂---.——丨f -.1· $.ν4η - 經消部中央標準局員工消費合作杜印f A(i 五、發明説明（42) 得，fl —般當正合成的所需樹脂於C -端具有未經取代之醸胺時使闬。通常，欲偶合罕Β Η A樹脂上的第一個胺基酸呈Boc —胺皋酸對稱酐添加，每樹脂氮當量使用2 — 10當量活化胺基酸。偶合後，清洗樹脂，在真空下乾燥，至樹脂上的胺基稱負載可由一整份Boc —胺基酸樹脂之胺基酸分析測定。角載-般範園為0 . 2至0 . 4毫莫耳/公克樹脂。未經反應之樹脂，可由樹脂與醋酸酐及二異丙基乙胺在二氯甲烷中反應加罩。添加Boc -胺基酸後，樹脂進行數次重覆循環Μ按序添加胺基酸。在酸性條件下去除《 -胺基Β 〇 c保護。三氟醋酸（TFA )之二氯甲烷溶液，HC1之二噁烷或甲酸/醋酸混合物可供本目的使用。Κ利用50% TFA二氱甲烷溶液（ ν / ν )較佳。此亦含1 - 5 % Μ體積計EDT或二甲基硫作第三一 Τ基t離子之清除劑亦吋使用本技藝中已知的其他標準斷裂試劑。去除α -胺基保護基後，接讀的經保護之胺基酸Μ所需次序一步步偶合得到中間性，經保護之肽樹脂。於肽之固相合成中用Μ偶合胺基酸之活化試劑為本技藝中熟知。例如*供此棰合成用的適當試劑為六氟磷酸笨駢三唑-1 -蓽一三一（二甲基胺基）辚（Β 0 Ρ )，二瑁己基碳二醯亞胺（DCC )，及二環丙基碳二_亞胺（DIC )。較佳者為 I) C C及I)丨C 。可利用由巴拉尼（B a r a n y )及梅瑞非德（ Merrifie Id)所述之其他活化劑〔於The Peptides, -44 - 本紙張义Λ適用中围國家桴肀（（:NS) τ .1規格（:M() X的7公货） 81.9.20,000 ___ n n n n I— —i I— n I— I— —1 I n K n I n _ !____ _ _ _ _ _ _ _ _ 16. ,— — I — I i 1 I 1 ί ί .t I I ί — I i — — M-tJ I 会 --^^^4^^.^•''"贤項办塌.·Y,;本抒、) 經濟部中央標準局員工消费合作杜印" Λ 6 Β(; 五、發明説明（43) V 〇1 , 2，J. Meienhofer, ed , Academic Press, 1 979 ， b 2 84頁〕。可加各種試劑如1 一羥基苯駢三唑（ H0BT> ，N --羥基琥珀醯亞胺（HOSu >及3，4 一二氫-3—羥基一 4 —氧—1 ，2，3--笨駢三嗪（HOOBT ) Μ 充份運行合成循環。較佳者為Η 0 Β Τ。習用合成循環之方案如下：方案1 步Μ μ, m 時間 1 CHZC 1 2 2 X 30秒 2 50¾ TFA/CH2C12 1 分 3 50% TFA/CH2C12 15分 4 CHZC 1 2 2 X 30秒 5 i P r 0 H 2 X 30秒 fi CH2C 1 2 4 X 30秒 7 6 % DTPEA/CH2C 1 2 3 X 2分 8 CH2C 1 2 3 X 30秒 9 coupling 10分 —1 8小時 10 CH^C 1 z 2 X 30秒 11 i P r 0 H 1 X 30秒 12 C H 2 (： 1 2 1 X 30秒 13 DMF 2 X 3 0秒 14 CHaC 1 2 3 X 30秒 -45 - 本紙張又度適用中a國家標準（CNS)甲4規格（2111 X 297公犛） 81.9.20 000 -----------------------裝------#------f f-tri,‘.'背面>/ :;,-算項冉塡寫本頁) S05S46 Λ 6 Bfi 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Λ Λ 五、發明説明（）測最供所有清洗與偶合的溶劑至體積10-40毫升/公克樹脂。使用預先形成的Boc -胺基酸之對稱酐或呈Ο —醢基異尿素衍生物進行偶合。通常每當量胺樹脂添加2 — 10當最活化的Boc -胺基酸，使用二氯甲烷作溶劑。B 〇 c —Arg ( T 〇 s ) ，B 〇 c —Gin ，Boc — Asn ，Boc — His (Tos )，及 Boc -His ( Bom )於 20— 25%DMF / 中偶合。Boc — Asn ， Boc — Gin ，及 Boc —His (B 〇 m >呈其Η 0 B T活化酯偶合M使已知的副作用減至最少〇通常使用本技藝中已熟知之方法Μ下列方式環化肽。於肽中欲連接側鐽之處的胺基酸部位，使用不同的保護基。為胺基部位胺基酸，合併Lys及Orn ，N e —及N s — Fmoc衍生物至呔鍵。為羧基部位胺基酸，併入Asp及Glu ，Ο β -及Ο - — F n衍生物。肽，同時仍附著於樹脂，用 20 - 40%六氣吡啶之丨)MF溶液處理，Μ選擇性地去除 Fmod Pm保護基。然後用一棰適當的醯胺形成試劑如二笨基磷釀基II氮（DPP/U ，DCC ，DIC或Β0Ρ處理，使游離側鍵胺基與羧基基團在分子内共價連接。K DCC及Β0Ρ較徉。供習用環化法的方案如下：步驟_ 益直羞划 1 DMF 1 X 30秒 —4 6 — 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么、釐） 81.9.20,000 ------------------ ------裝------訂------城 -ΐ?Γ"背而 >/;;1-货项再塡.:1';衣订) 五、發明説明（45) 2 20 - 40%六氫吡啶/DMF 1 分：M 巧 3 DMF 1 X 30秒 ,7_ 1 n-, *J 面 4 20 — 40%六氫吡啶/ DMF 20分之 5 i P r 0 Η 1 X 30秒 1 jfl B DMF 1 X 30秒 # 塡 Μ 7 i P r 0 Η 2 X 30秒本 Τι: 8 DMF 2 X 30秒 9 6 % DIPEA/CH2C12 2 X 2分 1 0 CH?C 1 2 1 X 30秒 11 DMF 1 X 30秒 1 2 偶合 1 — 2 4小時 ' 13 i P r 0 H 1 X 30秒 14 CH2C U 1 X 30秒 1 5 DMF 2 X 30秒 1 R CH2C 1 2 3 X 30秒 81.9.20,000 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製整個合成中之偶合反應由開氏 ( Ka is e r ) 印二國試驗監潮細定完成的程度 C 開氏 ( Ka i s e r ) 等人 f An a 1 • R i 0 0 he m . » 34 t 59 5 — 598 ( 1970 ) ] 〇可見到 Bo C — Ar g ( To S ) 1 Bo C — As η 梦及 B 〇 c — G 1 η 之緩慢的反應動力〇任何未 TC 全的偶合反應可用新製備的活化胺基酸再偶合或用醋酸酐處理肽樹脂加罩 » 如前述〇完全嚇合的肽 — 樹脂在真空中乾燥數小時 0 對各化合物 » 由下列步驟去除阻斷基團 9 肽自樹脂裂開 -47 - Η(» 經濟部中央標準局=貝工消費合作杜印製五 '發明説明（46) 。通常呔一樹脂每公克樹脂用2 5 — 1 0 0微升乙烷二硫酵， 1毫升茼香醚，及9毫升液體氟化氫處理，於Ot:，45 — 60分鐘，於一棰特弗龍（Tef Un) HF装置〔潘尼素拉（ Peninsula >〕。另外，可使用經改良的兩階段斷裂步驟「湯(Tam )等人，Tetrahedron Letters, 23 > 2939— 2940(〗982> 1 *其中肽樹脂在用90%HF處理前，用3毫升二甲基硫及1毫升氟化氫於0 處理2小時，蒸發。然後於冰浴溫度，真空下去除揮發性試劑。殘餘物用二或三次20毫升（各為Et20及EtOAc )清洗並過濾。用三或四次 20毫升體積的10% Ac 0H清洗並過《，自樹脂萃取肽。凍乾合併的水性濾液得到粗產物。相呔初於西法德斯（Sephadex) G— 25柱基質上由凝膠層析纯化Μ自寡聚合物質分離單體。此肽溶於最低體積 10¾ AcOH中，施用至凝膠柱上。用10% AcOH溶離，流速為 0.5 — 1.5毫升/分。流出物於25 4 nm監拥I，收集含所需帶之餾份，凍乾得到半純產物。半純肽之純化一般由製備性HPLC進行。Μ最低體積之1 % A c 0 Η或0 . 1 % T F Α將呔施用至柱，梯度溶離一般W 1 0 % R鍰衝液開始，10— 2 5%B10分鐘，及25-35%B3小時 (緩衝液 A : 0.1 %TFA / H20 ，緩衝液 B : 0·] %TFA / C H 3 C N ) ，·流速為8 . 0毫升/分於2 2 0 η m作U V偵側。 Μ 1.5 - 2.5分鐘間隔收集餾份，由分析性HP LC檢査。收集姅判斷具高純度之豳份，凍乾。终牽物之純度由分析性H PLC在逆相柱上檢査，如上述， —4 8 — 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（2L0 X 297 X釐） 81.9.20,000 Λβ ΗΓ. S05S46 五 '發明説明（47 ) 20-- 40%Β之梯度溶離（緩衡液A : 0.022 %TFA / Η20 ，緩衝液 Β : 0.022 %TFA /'CH3CN )於 15 分鐘内，Μ 2 . 0毫升/分鐘。於2 1 0 n m作U V偵测。判斷所有產物之純度約97 — 9 9%。進行涸別肽之胺基酸分析，所得數值在可接受之限度内。通常，所有終產物亦接受快速原子撞擊質 _計（FAB — MS)。所有產物產生預期的母M + H離子在可接受之限度内。本發明之新穎化合物具有有價值的藥理特性。其具有氣管舒鬆性，R是強效的支氣管擴張劑。此化合物亦不具有心血管副作用。由此等新穎肽所產生支氣管擴張作用可持鑛超過兩小時。因此，由於是高度的活性支氣管擴張劑，此化合物是有價值的藥劑供治療支氣管收縮病症，例如，氣喘。式T 一 V之新穎化合物可與各種習用的藥劑載劑併用* Μ無毒，鈍性，治療t可用之載劑材料較佳，以提供適用於治療支氣管收縮症如氣喘的組合物。呈含數種有機成份投藥形式之此等化合物之劑量依據各種因素而定，如所用的特定化合物及特定調配物。原本精於本技藝者可自文中所述的有效濃度（ECft〇)決定有效劑量。於人類的習用劑最是0 . 0 1 — 1 0 0微克/公斤。對於具有低E D 5 〇如0 . 1微克之化合物，於人類的習用劑量約0 . 0 2 — 2 0微克/公斤。式T 一 V之新頴化合物與多種無機及有機酸形成藥劑合格酸加成鹽，此等酸如，硫酸，磷酸，氫氯酸•氫溴酸> 氣碘除，硝酸，胺基磺酸，檸檬酸•乳酸，丙_酸，草酸 -49 - —裝------訂------ Μ?'":ϊ,-''';,ι·ΓΛ>/卩-箅項冉塡寫本7'·-2 經濟部中央標準局員工消費合作社印製本紙張尺度適用中國國家標準（CN\S)甲4規格（2U) X 297公釐） 81.9.20,000 A(； H(；五、發明説明（4 8) ，圈丁烯二酸，琥珀酸，酒石酸，肉豆蔻酸，酸酸，三氛乙酸，笨甲酸，水楊酸，葡糖酸，抗壞血酸，及相關酸。本化合物可由經腸外施用法如靜脈内，皮下，肌肉内，口眼*或鼻内投藥至患者。經腸道外投藥的較佳途徑是經口的氣溶膠或》內投藥。本發明由下列實例進一步舉例證明。 -------------------* ------裝------訂------^ f:''":ϊ,"ΐ 向 >/-:"贤;;!冉堪寫本钉) 經濟部中失標準局員工消費合作社印製 -50 - 本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（2〖0 X 297公釐） 81.9.20,000 ΗΓ. 五、發明説明（49) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製實例1 Bo c. — Th r (B z 1 ) — BH A 樹脂之製備 __· 苯甲基胺共聚笨乙烯 — 1 % 二乙烯交連樹脂 C 9 . 5 公克 ♦ 3 . 6 當量 i 200 — 400 ASTM 篩 » 維加化學公司 ( Ve κ a B i 〇 c h e in ) ] 溶於 100 毫升二氯甲烷中膨脹 f 過 m • 清洗 % 使用方案 1 之步驟 7 — 8 〇 Bo C — Th r (B z 1 ) ( 3 . 3 5公克 » 10 .8 毫莫爾 ) 及 — 環己基碳醯亞胺 ( 1 . 12公克 t 5 . 4 3 毫莫爾 ) 在 50 毫升 —- 氯甲烷中反應 1 小時 t 過 m « 於 5 0 毫升二氯甲烷中加至此膨脹之樹脂中〇混合物於宰溫振搖 1 8小時 0 加 D I PEA ( 630 毫升 9 3 . 6 毫莫爾 ) * 再振搖 1 小時 * 過 m m /\w 後完成方案 1 之步驟 10 — 14 〇開氏 ( Ka i s e r ) 闭三嗣分析為陰性 C 用 1 毫升醋酸酐及 1 毫升 D I PE A 之 5 0 毫升二氯甲檢溶液處理樹脂 30分鐘將任何未反應之胺基基團加罩 * 過滤 * 清洗 » 使用方案 1 之步驟 13 —— 14 〇樹脂真空隔夜乾燥得到 9 . 8 公克 Bo C — Th r ( Β z 1 ) — BH A 樹 m 〇此樹脂 —一部份接受胺基酸分析 i 顯示負載 0 . 17 毫 m 爾 Th Γ / 公克〇賁例 2 A c — r L y s 1 2 1 N 1 e1 V » Va 1 2 β • Th Γ2 8 ] — VI P 環 ( A s P8 -> ly s 1 2 ) Γ A c — ( SRQ I D N 0 ： 20 ) — NH 2 之製備宵例 1 之 Bo C — Th r ( B z 1 ) — BH A ( 9 . 8 公克 » 1 . 7 毫莫爾 ) 樹 m 接受 K 述方案 1 之固相合成〇所有之偶合使用預先形成自 Bo C —— 胺基酸及二環己基碳 . 釀亞胺製備之對稱 -51- f Λ-":ϊ,ϋ'">/ .丨-'!:'#"!冉塡"本7!) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 S05846

Af> ΗΓ, 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（ m ο Bo C — 精胺酸 y Bo C — 麩胺酸 1 Bo c 一姐胺酸 ( 苄氧苺甲基 ) 如個別之 _ T活性酯 —. 樣偶合 ο 兀成偶合步驟之反應時間般為 1 一 1 8小時〇完成五個偶合循環 i 各單環具 Bo C — L e U ( 1 . 5 公克 > 6 . 0 毫莫爾 ) > Bo C — Va 1 ( 1 . 3 公克 * 6 _ 0 毫莫爾 ) > Bo C — Se r ( Β ζ 1 ) ( 1 . 8 公克 t B . 0 毫尊耳 ) * Bo c — As η ( 773 毫克 > 3 . 3 毫莫爾 ) t Bo c. — L e U ( 1 . 5 克 » 6 . 0 毫莫爾 ) 完成〇真空下乾燥樹脂得到 12 .2公克 Bo c — -j— 肽樹脂〇本樹脂 8 . 2 公克 ( K 13 毫莫爾 ) 部份用次循環偶合，各單環具 Bo C — Ty Γ ( 2 . 6 — DCB ) ( 1 · 77公克 ) 4 . 0 毫 η 爾 ) Bo C — Ly s ( 2 C 1 — Z ) ( 1 . 67公克 t 4 . 0 毫尊爾 ) Bo C — Ly s ( 2 — C 1 —- Z ) ( 1 . 67公克 » 4 . 0 毫 Μ 爾 ) » Bo C — Va 1 ( 876 毫克 * 4 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — A I a ( 762 毫克 » 4 . 0 毫莫 m ) » 及 Bo C — N 1 e ( 932 毫克 » 4 . 0 毫 m 爾 ) > 得到 10 .2公克 Bo C — 十二肽樹脂〇本樹脂 1 . 26公克 ( 0 . 1 39 毫莫爾 ) 部份進行 —* 次循環偶合各單環具 Bo c — G 1 η ( 205 毫克 ♦ 0 . 93 毫莫爾 ) Bo C — Ly s ( 2 — Cl ——L Ζ ) ( 627 毫克 » 1 . 5 毫莫爾 ) C· 本樹脂一半 ( 0 . 069 毫莫爾 ) 部份進行十四次循環偶合，各單環具 Bo C — Ar g (T 0 S ) ( 324 毫克 » 0 . 76 毫莫爾 ) ， Bo C — L e υ ( 188 毫克 * 0 . 76 毫莫爾 ) * Bo C — ly S ( F m 0 c ) ( 3 54 毫克 > 0 . 76 奄莫爾 ) > Bo C — Th Γ ( B 7. ]) ( 234 毫克 9 0 . 76 毫 m 爾 ) t Bo c — Ty Γ ( 2 1 6 D ( 3 33 毫克 » 0 . 7 6 毫莫爾 ) » Bo c — A s η ( To s ) ( -52 - -r'iy>r·'-!^^冉增.^本.π、) 本紙張尺Λ適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Λ6 H(；五、發明説明（51) 97 毫克，0.76 毫莫爾），Boc — Asp(OFm) (311 毫克， 0.76 毫莫爾 >，Boc -Thr(Bzl) (234 毫克，0.76 毫莫爾 > ，B 〇 c — Phe (201 毫克，0.76毫莫爾 >，Boc - Val (1 6 4毫克，0 . 7 6毫莫爾），B o c — A丨a ( 1 4 3毫克， 0.7β毫莫爾），Boc -Asp(OcHx) (238 毫克，0.76毫莫爾> ，Boc -Ser(Bzl) (223 毫克，0.76毫莫爾）及 Boc —H (15ft毫克，0.76毫莫爾}。此肽樹脂進行方案1之步驟]—8 *用1.0毫升醋酸酐及66毫升DIPEA ( 0.38毫草爾）之20毫升二氯甲烷溶液處理樹脂30分鐘。使用步驟1 0 - 1 4清洗樹脂。然後用方案2之步驟1 - 1 1處理樹脂，選擇性去阻斷，並與DCC (49毫克，0.24毫莫爾）及Η0ΒΤ (32毫克， 0.24毫莫爾）於20毫升經蒸餾之DMF溶液反懕7次《歷 24小時，開氐（KaiserO闭三嗣分析為陰性。樹脂使用方案2之步驟1 3 — 1 6。真空乾燥得到0 . 7 2公克。樹脂用6毫升二甲基硫及2毫升液態HF在Ot：處理2小時。蒸發反應混合物，殘餘物用苯甲醚及6毫升液態HF在 Ο 1Π處理4 5分鐘。蒸發反應混合物，殘餘物用1 X 1 5毫升 R b 0及3 X 1 5毫升E t 0 A c清洗。樹脂用3 X 2 0毫升1 0 % AcOH萃取。合併之水性濾液經凍乾產生227毫克白色固體〇相物質由製備性HPLC，在華特們（Whatman )馬根一 20 (Magnum — 20) 0DS — 3 柱（2x25公分）進行，用線件梯度之10—40%8(緩衡液六：0.1%丁？/\/1120，緩 -53 - 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 X釐） 81.9.20,000 ----------------- ------裝------訂-------始* (-^^--^:^.^:-:-^^4^^41) :13〇5δ4β Λ 6 Η(；五、發明説明（ 52 衝液Β :0.1 %ΤΡΑ / CH3CN )溶離4小時。將收集之餾份作分析性HP LC分析切下主尖峰，聚集並凍乾產生26.7毫克半純產物。此物質再施用至馬根一20 ( Magnum— 20) 0DS —杵（2 X25公分），用相同梯度溶離。切下主尖峰，聚集並凍乾產生9.5毫克白色，非晶形粉末辉HPLC均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB 算侑3277.8，實驗值3276.1。此化合物 MS ·· ΜΗ 計曲 # 塡寫木 π A c — G I u 8 * L y s H 1 e 實例3 7 * Va 1

Thr G 1 u 8 4 L y s 1 2 ) [Ac- ( S E Q ID No ： 21) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製製備二笨甲基胺共聚笨乙烯_ 克，2.6 當量，200 -400 Vega Biochem)]溶於 160 清洗，使用方案〗之步驟7 二氡甲综中，加B 〇 c — T h r 爾）及二環己基碳二醯亞胺合物於室溫振搖1 8小時，過 10 — 14 開氏（Kaiser)閉三酐及5毫升IHPRA之150毫耱將任何未反應之胺基基團 1 3 — 1 4。樹脂真空隔夜乾燥 ]%二乙烯 ASTM篩，維毫升二氯甲 8。樹脂 (B z 1 ) ( 6 . (2 . 1 0公克滤，然後完酮分析為陰升二氯甲烷加罩，過濾得到1 8 . 0公 T h r ( Β ζ 1) - Β Η Α樹脂。此樹脂一部份接示負載0 . 1 7毫莫爾T h r /公克。交連樹脂加化學公烷中膨脹再懸浮於 25公克，，10 . 1毫成方案1 性。用5 溶液處理，清洗，克 Β 〇 c ~ 受胺基酸 [1 7 · 7 公司（，過據， 160毫升 20 . 2毫奠莫爾）混之步驟毫升醋酸樹脂6 0分使用步驟分析，顯裝訂 54 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'釐） 81.9,20,000 S05S46 A6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（53) Bo C — Th r ( B z 1 ) — BH A ( 18 .0公克 « 3 · 06 毫莫爾 ) 接受卜. 述方案 1 之固相合成〇所有之偶合使用預先形成白 Bo C — 胺基 m 及二環己基碳二醯亞胺製備之對稱酐〇 Bo C — 精胺酸 » Bo c — 麩胺酸 Bo C — 組胺酸 ( 苄氧基甲基 ) 如個別之 Η 0 B T 活性酯一樣偶合〇完成五個偶合循環 * 各單環具 Bo c — L e u ( 6 . 1 公克 > 24.5 毫莫爾 ) > Bo C — Va 1 ( 5 . 3 2公克 24 .5 毫莫爾 ) » Bo C — Se r ( Β ζ 1 ) ( Ί · 23公克 ) 2 4 • Γ) 毫 m 耳 ) » Bo C — As η ( 3 . 1 3公克 » 3 . 3 毫莫爾 ) ♦ Bo c 一 L e u ( 6 · 1 公克 ♦ 24 .5 毫莫爾 ) 完成 0 真空下乾燥樹 B旨得到 2 2 . 9 公克 Bo 0 — Jl·. 肽樹脂 r, 本樹脂 7 . 4 8公克 ( 1 . 0 毫莫爾 ) 部份用十次循環偶合 * 各單瑁具 Bo c 一 Ty Γ ( 2 . 6 —— DCB ) ( 1 . 76公克 4 . 0 毫 m 爾 ) % Ro c — Ly S ( 2 …- C 1 - Ζ ) ( 1 . 6 6公克 9 4 . 0 毫 m 爾 ) * Bo c — Ly S ( 2 ―― C ] Ζ ) ( 1 . 66公克 i 4 . 0 毫 m 爾 ) 9 Bo c. — Va 1 ( 869 毫克 * 4 . 0 毫莫爾 ) 9 Bo C — A 1 a ( 1 . 5 公克 » 4 . 0 毫莫蹯 ) > 及 Bo C — N 1 e ( 9 25 毫克 * 4 . 0 毫 m 爾 ) 9 Bo C — G 1 η ( 1 . 0 8公克 » 4 . 4 毫莫爾 } * Bo c — ly S ( 2 — C 1 —— Z ) ( 1 . 66公克 > 4 . 0 毫莫爾 ) 1 Bo c — Ar g ( To S ) ( 1 . 71 公克 » 4 . 0 奄莫爾 ) » Bo C — L e U ( 988 毫克 * 4 . 0 毫莫爾 ) » 得到 9 . 6 公克 Bo C 一十 A . 狀樹脂 O 本樹脂 7 . 6 8公克 ( 0 . 8 毫莫爾 ) 部份進行與 Bo 'c — l-y S ( F τη 0 c ) ( 1 . 5 公克 t 3 . 2 毫 m 爾 ) 之一次循環偶合 » 得到 8 . •3 2公克 Bo c — 十七肽樹脂〇一 5 5 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 :??'ι:ϊ!-„.ϊΐ-5>/:,1息椤^!冉塡艿本1) .裝- --°. 丄 305846

AfS H(i 經濟部中央標準局員工消费合作社印$ 五、發明説明（54 ) 本樹脂6 . 2 4公克（0 . 6毫莫爾）部份進行二次循環偶合，各單環具Boc - Thr(Bzl) (742毫克，2.4毫莫爾）， Boc - Tyr (2 ，6 — D(:B ) (1.06公克，2.4 毫莫爾），得到6 . 2 8公克B 〇 c —十九呔樹脂本樹脂2 . 0 9公克< 0 . 2毫莫爾 > 部份進行九次循環偶合，各輩瑁具Boc - Asn (204毫克，0.88毫莫爾），Boc -Asp(0Fm> (340 毫克，0.8 毫莫爾），Boc -Thr(Bzl) (248 毫克，0.8 毫莫爾 > ，Boc — Phe ( 212 毫克，0.8毫莫爾），Boc-Va] (174毫克，0.8毫莫爾），Boc— Ala (1.5 1 毫克，0.8 毫莫爾），Boc — Asp (OcHx ) (2 5 8 毫克，0.8 毫莫爾），Boc - Ser(Bzl) (236 毫克，0.8 毫莫爾 > 及 Boc — His(Bom)( 330毫克，0 . 8毫莫爾）。此肽樹脂進行方案1之步驟1 —8 ，用0.2 5毫升醋酸酐及70毫升DIPEA之20毫升二氯甲烷溶液處理樹脂2 0分鐘。使用步驟〗0 — 1 4清洗樹脂。用方案2之步驟〗-11處理樹脂選擇性地去阻斷。樹脂之四分之三（0.15毫莫爾）與DCC (77毫克· 0.37毫莫爾 > ί5Η0ΒΤ (51毫克，0.37毫莫爾）於20毫升經蒸豳之DMF 溶液中反應歷2 4小時，開氏（K a i s e r )筘三酮分析為陰性。樹陏使用方案2之步驟1 3 - 1 6清洗，真空乾燥得到 1 . 7 2公克。本樹脂1 . 1 4公克（0 . 9 9毫莫爾）部份如實例2處理去阻斷，伸1毫升闻香醚及9毫升H F用於第二階段。蒸發反應潖合物，殘餘物用1 Χ15毫升Et20及3 Χ15毫升EtOAc清 -56- 本紙張適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 W釐〉 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Af； ΒΓ» 五、發明説明（55 ) 洗。樹脂用.3 X20毫升10%Ac0H萃取。合併之水性濾液經凍乾產牛535毫克白色固體。相物質由西法得斯（Sephadex) G — 25精细（2 — 100 公分杵 > 卜.凝膠過滤純化，由1 0 % A c 0 Η溶離。將收集之餾份作分析性HP丨分析切下單體尖峰，聚集並凍乾產生 8 3 . 5毫克半純產物。此物質用製備性Η P L C再純化，如實例 2 ·樣，但於3小時中使用線性梯度20 — 40%。將收集之 _份作分析性Η P L C分析切下單體尖峰，聚集並凍乾產生 1 8 . 9毫克白色，非晶形粉末。此化合物經Η P L C均質化，得到7Ε確之胺基酸分析。FAB - MS: ΚΗ計算值3292.0，實驗值 3 2 9 1 _ 8。實例4 he — Γ A s η 8 · Asp® ，I, y s 1 z ，Hie37 ，V a 1 2 β ，T h r 2 8 Ί —VIP 環(Asp8-^ Lys12 ) 〔Ac- f SEQ ID No ： 22) —N H p ]之製備實例3之Boc —十九肽樹脂1.55公克（0.15毫莫爾）部份進行九次循環偶合，各單環具Boc — Asn ( 247毫克， O.fi毫草爾> ，Boc - Asn (15 3毫克，0.6 6毫莫爾）， Boo —Thr(Bzl> (248 毫克，0.8 毫莫爾），Boc -- Phe M59毫克，0.6毫莫爾），Boc — Val (130毫克， O.ft毫莫爾），Boc-A】a (Π3毫克，0.6毫莫爾）， Boc — Asp(OcHx) (189 毫克，0.6 毫莫爾 > ，Boc —

Ser(Bzl) (177 毫克，0.6 毫莫爾）及Boc — His(Bom)( 248毫克，0. β6毫莫爾）。此肽樹脂進行方案1之步驟1 -57 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'釐） 81.9.20,000 ---------------------- -------裝------訂------46 (凊1"···-'1曲之:,'&f 項办填寫本F、) 經濟部中央標準局Η工消費合作社印製 ΛΓ) ΗΓ» 五、發明説明（56 ) --fi ，用0.25毫升醋酸酐及70毫升DIPEA之20毫升二氯甲烷溶液處理樹脂3 0分鐘。使用步驟1 0 — 1 4清洗樹脂。用方案2之步驟]- U處理樹脂選擇性地去阻斷，並與 DCC (77毫克，0.37毫莫爾 > 及1<(〕81'(51毫克，0.37毫莫爾 > 於20毫升姅蒸豳之DMF溶液中反應二次歷2 4及72小時，於20毫升甲笨中二次歷24小時及48小時，開氏（ K a i s e r >闭三_分析為陰性。樹脂使用方案2之步驟1 3 — 1 6清洗，真空乾燥得到1 . 5 4公克。本樹脂1.26公克（0.99毫莫爾 > 部份如實例3用HF處理去阳斷。蒸發反應混合物，殘餘物用1 X 1 5毫升E 12 0及3 X 毫升Et(Ue清洗。樹脂用3 X20毫升10%Ac0H萃取。合併之水件濾液經凍乾產生485毫克白色固體。相物質由西法得斯（S e p h a d e X ) G — 2 5精细（2 X 1 0 0 公分柱丨卜.凝膠過濾純化，如實例3 ，得到8 3 . 5毫克半纯產物。此物質用製備性HPLC再純化，如實例3 —樣，但於 3小時中使用線性梯度20 — 45%。將收集之餾份作分析性 HP LC分析切下單體尖峰《聚集並凍乾產生11.5毫克白色，非晶形粉末。此化合物經HPLC均質化，得到正確之胺基酸分析。卩61^-»^:>111計算值3277.8，實驗值3266.6。實例5 A c - 「0「n12 ，Nle17 ，Val2e ，Thr28 ] — VIP 環（ Asp8-> l.ys12 ) i Ac— (SEQ ID No :23) — HH2 ]之製備實例3之B o c —十六呔樹脂〗.9 2公克（0 . 2毫莫爾 > 部 ----------------- ------裝—------訂------ '^"'"--'•讣而乙：：·：^私項冉塡寫本7!、) 本紙張&度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 305846 ΑΓ. 五、發明説明（57 ) 份進行+ .二次循環偶合，各單環具B 〇 c - 0 r n ( F m 〇 c )( 364 毫克，0.8 毫莫爾），Boc — Thr(Bz]) (495 毫克， 1.6 毫莫爾），Boc - Tyr· (2，6 — DCB) (35 毫克， 0.8毫莫爾），Boc— Asn (102毫克，0.44毫莫爾）， Boc —Asp(OFm) (329 毫克，0.8 毫莫爾），Boc — Thr(Bzl)«495 毫克，1.6 毫莫爾），Boc— Phe ( 212 毫克，0.8毫莫爾），Boc-Val (Ϊ74毫克，0.8毫莫爾> ，B〇c-A]a (15]毫克，1.6 毫莫爾），Boc— A s p ( 0 c H X ) (252 毫克，0.8 毫莫爾），Boc — Ser(BH) (2 3 6 毫克，0.8 毫奠爾）及 Boc — His(Bom)( 3 30毫克，0.88毫莫爾）。此肽樹脂進行方案1之步驟1 …8 ，用0.2毫升醋酸酐及70毫升DIPEA之20毫升二氯甲烷溶液癍珲樹脂30分鐘。使用步驟10 - 14清洗樹脂。本樹脂3 8公克（0 . 1 1毫莫爾）用方案2之步驟1 一 11處理樹脂選擇性地去阻斷，並與DCC (55毫克，0.27毫奠爾）及Η0ΒΤ (37毫克，0.27毫莫爾）於20毫升經蒸餾之 DMF溶液中反應歷24小時，於20毫升甲笨中24小時及於 20毫并姅蒸餾之DMF溶液中歷24小時，開氏（Kaiser)師三酮分析為微陽性。樹脂使用方案2之步驟1 3 — 1 6清洗，真空乾燥。本樹脂0.8公克（0.05毫莫爾）部份如實例3用HF處理夫P目斷。蒸發反應混合物|殘餘物用1 X 15毫升Et20及3 X 15毫升EtOAc清洗樹脂用3 X20毫升10%Ac0.H萃取。合併之水件濾液姅凍乾產生429毫克樹膠固體。 (^""♦-斥曲之""餐項冉場.:,?本?!、) -59 - 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)屮4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 3u5846 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A 6Bf, 五、發明説明（58) 粗物質由西法得斯（Sephadex：) G — 25精细（2X100 公分柱）t凝膠過濾純化，如實例3 ，得到1 0 7毫克半純產物。此物質用製備性Η P L C再純化，如實例3 —樣，但於 3小時中使用線性梯度1 0 — 40%收集之餾份作分析性 HP LC分析切下單體尖峰，聚集並凍乾產生〗7.5毫克白色，非晶形粉末。此化合物經Η P L C均質化，得到正確之胺基酸分析‘ F A Β — M S : Μ Η計算值3 2 6 3 . 7，實驗值3 2 6 4 . 1。實例6 A 〇 * * ΓΙ, ysa ' Asp12 ' Nle17 * Val2® ' Thr28 )— VIP 環（l,ys8— Asp12 ) [Ac- ( SEQ ID No ： 24) 一 NH7 ]之製備實例3之Boc —十六肽樹脂].0公克（0.1毫莫爾）部份進行十二次循環偶合，各單環具Boc — Asp(OFm) (165 毫克，0.4 毫莫爾 > ，Boc —Thr(Bzl) (124 毫克，0.4 毫奠爾 > ，Boc-Tyr (2，6 — DCB) (176 毫克， 0.4毫莫爾），Boc-Asn <102毫克，0.44毫莫爾）， Roc — I.ys(Fraoc) (187 毫克，0.4 毫莫爾），Boc — Thr(Bzl) (124 毫克，0.4 毫莫爾），Boc - Phe ( 106 毫克，0.4毫莫爾），Boc — Val (87毫克，0.4奄莫爾 )'Boc — A I a (76毫克，0.4 毫莫爾），Boc — Asp ( 0 ο Η x ) (126 毫克，0.4.毫莫爾），Boc — Ser(Bzl) (118 毫克，0.4 毫莫爾）及 Boc — His(Bom)( 1 5 0毫克，0 . 4毫莫爾）。此肽樹脂進行方案1之步驟1 8 ，用0.5毫升醋酸酐及35毫升DIPEA之20毫升二氯甲 (:Λ''1"·.""面>/ :丨"〕负項冉碣寫本") -60 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 305846 ,\β Η(；經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（59 ) 烷溶液處理樹脂3 0分鏞。使用步驟10 - 14清洗樹脂，S隔夜乾燥得到1 . 2公克。本樹脂0 . 8公克（0 . 0 6 6毫莫爾）用方案2之步驟1 — 11處珲樹脂選擇性地去阻斷，並與BOP (58毫克，0.13毫尊爾）於20毫升經蒸餾之DMF溶液反應歷24小時，開氏（ Kaiser)闭三酮分析為陰性。樹脂使用方案2之步驟13 — 1 Γν凊洗，真空乾燥。本樹脂如實例3用H F處理去阻斷。蒸發反應混合物，殘餘物用1 X 15毫升Et2〇及3 X 15毫升EtOAc清洗。樹脂用 3 X20毫升10%Ac0H萃取。合併之水性濾液經凍乾產生樹睽固體。相物質由西法得斯（Sephadex) G - 2 5精细（2 X 10 0 公分杵> h凝膠過濾純化，如實例3 ，得到4 3 . 8毫克半純牽物。此物質用製備性Η P L C再純化，如實例3 —樣，但於 3小時中使用線性梯度10-40%。將收集之餾份作分析性 Η Ρ 1. C分析切下主要尖峰，聚集並凍乾產生7 . 5毫克白色，非晶形粉末。此化合物經Η P L C均質化，得到正確之胺基酸分析。F A Β — M S : Μ Η計算值3 2 7 7 . 8，實驗值3 2 7 6 . 4。實例7 Ar— 「Glu8 ，0「n12 ，Nle1.7 ，Val2e ，Thr28 〕一 VIP m ( G 1 u8-^ Orn1 2 ) 〔Ac - ( S E Q ΐ D N o : 2 5 ) — Nh ]之製備二笨甲基胺共聚苯乙烯一1 %二乙烯交連樹脂i 2 5 . 0公克，1 7 . 5當最，200 - 400 AS TM篩，維加化學公司（ -61- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 五、發明説明（60) Λ 6 BC) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Ve g a B i 〇 c h e m ) :丨於 160 毫升二氯甲烷中膨脹，過 m * 清洗 > 使用方案 1 之步驟 7 — 8 此樹脂再懸浮於二氯甲烷中 i 其内加 Bo C — Th r (B z 1 ) ( 1 6 .2 公克 * 52.5 毫莫爾 ) 一 m 己華碳 —. 醢亞胺 ( 5 . 4 公克 2 6 • 2 毫莫爾 ) 〇混合物於宰溫振榣 6 小時 > 過滤 1 m 後完成方案 1之步驟 10 — 14 <：< 開氏 ( Ka i s e r ) W m 分析為陰性〇用 5毫升醋酸酐及毫升 0 1 PR A 之 1 50 毫升二氛甲烷溶液處理樹脂 60分鐘將仵何来反 IB 之胺基基團加罩過濾 1 清洗 ’使用方案 1 之步揉 13 ---- 14 ο 樹脂真空隔夜乾煉得到 29 .6公克 Bo C — Th r ( B z I ) — BH A 樹脂〇此樹脂一-. 部份接受胺基酸分析 1 顯示負載 0 . 21 毫莫爾 Th Γ / 公克 - 樹脂 14 • 0公克 ( 2 . 94 毫莫爾 ) 部份接受上述方案 1 之固相合成〇如實例 2 〇完成十 . 個偶合循環 * 各單環具 Bo C — L e U ( 5 . 9 公克 • 23 .5 毫莫爾 ) I Bo C — Va 1 ( 5 . 1 公克 * 2 3 .5 毫 Μ 爾 ) * Bo C — Se r ( B z 1 ) ( 6 . 9 公克 * 23 .5 毫 Μ 耳 ) » Bo c. — As η ( 3 . 0 公克 * 13 .0 毫莫爾） » Bo C — K e U ( 5 . 9 公克 * 23 .5 毫莫爾 ) * Bo C — Ty Γ ( 2 6 — DCB ) ( 10 .3公克 ♦ 23 .5 毫莫爾 ) » Bo C — L y s ( 2 Cl Z ) ( 9 . 8 公克 9 23 .5 ，毫莫爾 ) » Bo C -Ly S ( 2 — C 1 -…- Z ) ( 9 . 8 公克 • 2 3 .5 ，毫莫爾 ) i Bo C —V a 1 ( 5 . 1 克 » 2 3 .5 毫 m 爾 ) i Bo C — A 1 a ( 4 . 4 公克， 23 .5 毫莫爾、 > 及 Bo C — N 1 e { 5 . 4 公克， 23.5 毫莫爾） * 得到 2 6公克 Bo c — 十 — 肽樹脂〇本樹脂 5 . 5 公克 ( 0 . 61 毫莫爾 ) 部份用四次循環偶合 » -62 - (-":^二.斤而>/ '丨>.;菸^冉飧.,5木7,:) 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 BC. 五、發明説明（61) 各單瑁具Boc — Gin (655公克*2.7毫莫爾> ，Boc — l.ys ( 2 - C 1 ~ Z ) ( 2 · 0 公克，4 · 8 毫莫爾），B o c — Arg(Tos丨（2.1 公克，4.8 毫莫爾），Boc —Leu (1.2 毫克，4 . 8毫莫爾 >，樹脂經真空乾煉得到6 . 1 2公克B o c —十二狀樹脂。此樹脂2 . 0公克（0 . 2毫莫爾）部份進行十二次循環偶合，各循環具Boc — Orn(Fmoc) (91毫克，0.2毫莫爾），B()c - Thr(Bzl) (250 毫克，0.8 毫莫爾），Boc -Tyr (2 · 6 - DCB ) (352 毫克，0.8 毫莫爾 > ，Boc -Asn (102 毫克，0.44毫莫爾），Boc — Glu(OFin)( 3 40 毫克，0.8 毫莫爾），Boc - Thr(Bzl) (248 毫克， 0.8毫莫爾），Boc - Phe (212毫克，0.8毫莫爾）， Ron - Va 1 <174 毫克，0.8 毫莫爾 >，Boc — Ala ( 152 毫克，0.8 毫莫爾 > ，Boc -Asp(OcHx) (252 毫克，0.8 毫莫爾 > ，Boc -Se「（Bzl> (236 毫克，0.8 毫莫爾 > 及B 〇 c - His(Bom) (150毫克· 0.4毫莫爾）。此狀樹脂進行方案1之步驟1— 8 ，用0.5毫升醋酸酐及38毫升1HPRA之30毫升二氯甲烷溶液處理樹脂180分鐘。使用步驟1 0 — 1 4清洗樹脂，經真空乾煉得到2 . 4公克。本樹脂1 . 1 5公克（0 . 1毫莫爾 > 用方案2之步驟1 一 11處理樹脂選擇性地去阻斷，並與Β0Ρ (58毫克，0.1 3毫莫爾）及4 0 0毫升D I P E A於2 0毫升經蒸餾之D M F溶液中反應二次，歷2 4及6小時，開氏（K a i s e r )郎三酮分析為陰件。樹脂使用方案2之步驟1 3 — 1 6清洗，真空乾燥，得到 '.;,',1算項#塡.:<;本7!) 裝· -· -63 - 本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 S〇5S4e Λ(； Βί; 五、發明説明（62) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 1 . Ο 5公克。本樹脂用 9 毫升 HF » 1 毫升茴香醚 * 及 100 毫升乙综二碲酵於 0 處理 1 小時去阻斷 G 蒸發反應混合物，殘餘物用 1 X 15 毫升 Et 2 〇及 3 X 15 毫升 EtOA C 清洗 0 樹脂用 4 X 20 毫升 10% A c OH萃取〇合併之水性 m 液經凍乾產生 385 毫克淡黃色固體〇枏物質由西法得斯 ( Se p h ad e X ) G — 25精细柱上凝膠過 m 純化 * 如實例 3 > 得到 134 毫克半純產物〇此物質用製備性 Η P L C 再純化 * 如實例 3 — 樣 * 但於 3 小時中使用線性梯度 26 — 36% 〇將收集之豳份作分析性 HPLC 分析切下主要尖峰 * 聚集並凍乾產生 23 • 2 毫克白色非晶形粉末〇此化合物 Η P L {:均質化 • 得到正確之胺基酸分析〇 FAB — MS MH計算值 32 7 7 .8 > 實驗值 3 276 .4 〇實例 8 A 〇 — Γ L y s 1 2 > G 1 ua > N 1 e 1 7 t Va 1 2 e > Th Γ2 8 ] ~~ VI P 環 ( Ly s1 2 G 1 u1 β ) Γ Ac — ( SEQ ID N 0 : 26) — NH 2 1 之製備二苯甲基胺共聚苯乙 4ΰΚ m 一 1 % — 乙烯交連樹脂[ 30公克 t 21 .4 當量 t 200 — 400 ASTM 篩 1 B i 0 C he m ] 如實例 22處理 » 但使用 1 9 .9公克 Bo c 一 Th r f Β z ]) ( 64 .3 毫箅爾 ) 及 6 · 6 公克環己基碳二 ϋ 亞胺 ( 32 .1 毫莫爾 ) 。混合物於室溫振搖 18小時 * 過濾 t 妖後完成方案 1 之步驟10 — 14 〇開氏 ( Ka is e r ) 酮分析為陰性〇用 8 毫升醋酸酐及 8 毫升〇 r PEA 之 200 毫升二氯甲院溶液處理樹脂 60分鐘將任 -----------------U ------^------、玎------ 7J,,t:v,-.-,!if-i >/ .;'"參項冉碣"本") -64 ~ 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公楚） 81.9.20,000 五、發明説明（63 )

AG H(I 經濟部中央標準局員工消費合作社印製何未反應之胺基基團加罩 > 過 m 清洗 1 使用方案 1 之步驟 1 3 14 ο 樹脂真空隔夜乾煉得到 34 • 2公克 Bo C — Th Γ ( Βζ 1 ) — ΒΗ A 樹脂〇此樹脂 — 部份接受胺基酸分析 t 顯示負載 0 . 4 7 毫莫爾 Th Γ / 公克〇此 Bo C 一 Th Γ ( B z 1 ) — ΒΗ A 0 . 85公克 ( 0 . 4 毫莫爾 ) 樹脂於應用牛物糸横型 430A ( A p pi i e d B i 0 S y s t e m mo d e 1 4 30 A ) 胜狀合成器 h 接受固相合成〇所有之偶合使用預先形成 Bo C — 胺基酸及二環己基碳二醯亞胺製備之對稱酐 Bo C — 天冬胺酸 > Bo C — 麩胺酸 » Bo C — 精胺酸 ( 甲笨磺醯基 ) 如個別之 _T活性酯 —* 樣偶合 0 完成十 __. 個偶合循環各循環具 Bo C — L e U ( 499 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) 1 Bo C — Va 1 ( 435 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — Se Γ ( B z 1 ) ( 59 0 毫克 t 2 . 0 毫莫耳 ) Bo C — As η ( 464 毫克， 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C - L e U ( 499 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo 0 — Ty r ( 2 . 6 — DCB ) ( 830 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) t Bo C — l-y S ( 2 — C 1 — Z ) ( 830 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C. — Ly S ( 2 C 1 Z ) ( 830 毫克 y 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Va 1 ( 435 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — A 1 a ( 37 8 毫克 2 · 0 毫莫爾 ) 及 Bo C — N 1 e ( 462 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) t 得到 Bo C — 十一„- 肽樹脂 0 本樹脂進行五次循環偶合如實例 2 * 各循環具 Bo C — G 1 η ( 3 40 毫克 * 0 . 8 毫莫爾 ) • Bo C — Ly S ( 2 —- C 1 — Z ) ( 664 毫克 * 1 . 6 毫莫爾 ) t Bo C — A r g ( To S ) ( 685 公克 1 1 . 6 毫莫爾 ) > Bo C — L e U ( 398 毫克 * 1 . 6 毫莫 65 :-h ：y.i

U’U f 項 # 本 Τί 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（2UI X 297公釐） 81.9.20,000 五、發明説明（64〕爾 Λ(; Ηίϊ 及 Boc — Lys(Fmoc) (37 5 毫克 > 0.8 毫莫爾）樹脂經真本樹脂 1 1處理樹毫莫爾> 反應二次微陽性。液處理樹，使用方 T h r ( B z 1 ) 應用生物 >胜肽合 Tvr (2 —A s η ( 6 30毫克空乾燁 1 . 0 6 公脂選擇及200 ，歷2 用0 . 5 脂1 0分案2之 (495 系模型成器上 ,6 — 464毫 >2.0 得到2 . 1 2公克B 〇 c —十七肽樹脂。克<0.2毫莫爾 > 用方案2之步驟1 性地去阻斷，並與毫升IHPEA於20毫及8小時，開氏（毫升醋酸酐於2 0毫鐘將未反應之胺基 BOP ( 1 17 毫克，0 . 4 升經蒸餾之DMP溶液中 Ka i ser )印三酮分析為升DIPEA /二氯甲烷溶基團加罩，過滤，清洗步驟13 — 16。然後樹脂進行一次與Boc — 毫克，].6毫莫爾）循環偶合，然後放回 4 3 0 A ( Applied Bio-system model 4 3 0 A 。進行十次循環偶 DCB ) (880 毫克克，2 . 0毫莫爾）毫奠爾> ，B 〇 c — 各循環具Boc

-Π丨 t I I i ! 而 I if) \ 冉！ t

I

裝 ! I 2 . 0毫草爾> ，Boc

Phe I 531

Roc - V a 1 (435 毫克，2.0 毫莫 378毫克，2 . 0毫莫爾），Boc — ，2.0 毫莫爾 > ，Boc —Ser(Bzl) 爾）及Boc Η (Τ o s ) ( 8 1 9 毫克經濟部中央標準局R工消費合作社印製，2 . 0毫莫爾> ，Boc ，Boc — Asp(OcHx)( Thr(Bzl) (618 毫克，毫克，2 . 0毫莫爾），爾）* B o c — A 1 a ( Asp (OcHx) (6 3 0 毫克 (5 90毫克，2.0毫莫，2 · 0毫莫爾）。此呔 0.5毫升醋酸酐及100 處理樹脂3 0分鐘。使用樹脂進行方案1之步驟1 _- 8 ，用毫井DIPRA之20毫升二氯甲烷溶液步驟10 - 14清洗樹脂，真空乾燥。此肽-樹脂如實例7去阻斷得到340毫克粗肽。此胜呔 66 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 訂 I I I I I I 緩 ^05846 A 6 五、發明説明（65) 如實例3中由凝膠過濾純化產生35毫克半純產物。此物質用製備性Η P L C再純化，如實例3 —樣•但使用線性梯度 2 5 — 3 5 %，產生1 5 · 6毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HPI.C均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB — MS : ΜΗ計算堉3276，實驗値3278.0。實例9 f--""斤而 >/丨-,:''-#^#填舄本?'、) 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 A c ――_— Γ Ly s 1 2 * Η 1 e1 V t A s P 2 4 ♦ Va 1 2 Θ « Th r2 8 ] — V I Ρ 環 ( L y s2 〇 — As ρ2 4 ) [ Ac ( SEQ ID N 0 : 27 ) — NH Ί 之製備實例 8 之 Bo 0 — Th r ( Β z 1 ) 樹脂 0 . 42公克 ( 0 . 2 毫莫爾 ) 進行九個偶合循環 f 各循環具 Bo C ~ L e U ( 200 毫克 * 0 . 8 毫 m 爾 ) « Bo c 一 Va 1 ( 174 毫克 > 0 . 8 毫莫爾 ) f Bo C — S e r ( Β ζ 1 ) ( 2 3 6 毫克 9 0 . 8 毫莫爾 ) « Bo C — As n (OF m ) ( 329 毫克 » 0 . 8 毫莫爾 ) ， Bo C — L e U ( 200 毫克 • 0 . 8 毫莫爾 ) » Bo C 一 Ty Γ ( 2 · 6 — DCB ) ( 352 毫克 0 . 8 毫莫爾 ) > Bo C — Ly S ( 2 — Cl — z ) ( 232 毫克 * 0 . 8 毫莫爾 ) * Bo C 一 L y S ( F m 0 C ) ( 375 毫克 t 0 . 8 毫 m 爾 ) » Bo c ~ Va 1 ( 174 毫克 9 0 . 8 毫奠爾 ) 〇本樹脂狀 /ί\\ 後用方案 2 之步驟 1 — 11 處理樹脂 * 選擇性地去 m 斷 1 並與 Β0Ρ ( 177 毫克 * 0 . 4 毫莫爾 ) 及 200 毫升 D I PR A 於 20 毫升經蒸餾之 DMF 溶液反應歷 6 小時 > 開氐 ( Ka is e r ) 印 —Γ 嗣分析為陰性〇此樹脂 m 後 ntc 臑闬於生物糸模型 430A ( A ρ Pi i e d Β ί ο - s y St e m m 〇 d el 43 0 A ) 胜肽合成器上接受固相合成 -67- 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 S05S46 Λβ ΒΓ» 五、發明説明（66 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製如實例 8 〇進行十七個偶合循環 « 各循環具 Bo C — A 1 a ( 378 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) • Bo C — Ν 1 e ( 462 毫克 » 2 · 0 毫莫爾 ) * Bo C, — G 1 η ( 493 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — l.y S ( 2 — C 1 — Z ) ( 830 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) t Bo C — A r g ( To S ) ( 856 毫克 • 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — L e υ ( 499 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — 1 y S ( 2 ——— C 1 — Z ) ( 8 30 毫克 * 1 . 0 毫 m 爾 ) > Bo C — Th r ( B z 1 ) ( 61 8 毫克 ♦ 2 . 06 毫 m 爾 ) » Bo C — Ty Γ ( 2 » 6 — DCB ) ( 880 毫克 t 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C — As η ( 464 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — As P ( 0c Hx ) ( 630 毫克 * 2 · 0 毫莫爾 ) * Bo C — Th r ( B z 1 ) ( 61 8 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) f Bo C — Ph e ( 531 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Va 1 ( 435 毫克 f 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C — A 1 a ( 372 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — A s P ( 0 c Hx ) ( 630 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — Se r ( R 7 1 ) ( 590 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) 本樹脂進行 —„· 次與 Bo c — Hi s ( To S ) ( 1 64 毫克 » 0 . 4 毫莫爾 ) 偶合 1 m /l%\ 後進行方案 1 之步驟 1 — 8 t 用 1 毫升醋酸酐及 20 毫升 6 % D I PR A / 一氯甲烷溶液處理樹脂 30分鐘〇使用方案 1 之步驟 1 0 — 1 4清洗樹脂經真空乾燥得到 1 . 9 4公克眈狀 — 樹脂 0 . 9 7公克 ( 0 . 1 毫莫爾 ) 部份如實例 7 去阻斷得到 265 毫克相肽〇此胜呔如實例 3 中由凝 tra礓膠過濾純化產牛 1 49 毫克半純產物〇此物質用製備性 HPLC 再純化 » 如實例 3 --一樣 » 但使用線性梯度 25 — 35% t 產生 28 .1 毫克白色 * 非晶形粉末〇此化合物經 Η P L C 均質化 > 得到正確之胺一 6 8 一本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ----------------- ------裝------訂------^ (':''屯叨-·背而之 d&^)?!冉墙"本7,0 五、發明説明（67) "''""••ΰΓ.?之：'!£赘項冉塡·"本π) 基酸分析。FAB - MS: MH計算值3278.6，實驗值3278.8。實例1 0 A c — 「l,ys12 > N 1 e 1 7 ，A s p 2 ，V a 1 2 β ，T h r 2 8〕一 VTP 環（Lys21 ->Asp25 ) [ A c— (SEQ ID No : 28)--NH?]之製備二笨甲箪胺共聚苯乙烯一 1 %二乙烯交連樹脂〔5 . 0公克，2.6當鼉，200 - 400 ASTM篩，維加化學公司（ V e g a B i 〇 c h e m ) 1於5 0毫升二氯甲烷中膨脹，過濾，清洗，使用方案1之步驟7 - 8。此樹脂再懸浮於二氯甲烷中 •其内加Β 〇 c -- T h r ( Β z 1 > I 2 · 3 2公克* 7 . 5毫莫爾 > 及二瑁己苺碳二醯亞胺（7 7 4毫克，3 . 7 5毫莫爾）。混合物於室溫振搖4小時，過濾《然後完成方案1之步驟1 0 -1 4。開氏（K a i s e r )茚三酮分析為陰性。用5毫升醋酸酐及β毫升DIPEA之50毫升二氯甲烷溶液處理樹脂60分鐘將仟何未反應之胺基基團加罩，過濾，清洗，使用方案1之步驟1 3—1 4。樹脂真空隔夜乾燥得到5 . 8公克Β 〇 c —

Thr (Βζ 1 ) — ΒΗΑ樹脂。此樹脂部份接受胺基酸分析，顯示負載0.276毫莫爾Thr /公克。此樹脂1 . 4 4公克（0 . 4毫莫爾}部份接受上述方案1之固相合成，如實例2。進行三偶合循環，各循環具Boc — I. e u (3 99 毫克，1.6 毫莫爾} ，Boc — Val (348 毫克經濟部中央標準局員工消費合作社印製，l.fi 毫莫爾），Boc —Asp(OFm) (329 毫克，0.8 毫莫爾 > 。其中一半樹脂（199毫克，0.8毫莫爾 > 進行四次偶合循環，各循環具Boc — Asn (204毫克，0.88毫莫爾 -69 - 81.9.20,000 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'釐） B() 五、發明説明（68) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ) f Bo C 一 L e υ ( 199 毫克， 0 . 8 毫莫爾 ) » Bo C 一 Ty Γ ( 2 • 6 — DCB ) ( 3 52 毫克 0 · 8 毫莫爾 ) « Bo C — L y s ( F hi 0 C ) ( 37 5 毫克 9 0 . 8 毫莫爾 ) 〇本樹脂然後用方案 2 之步驟 1 -- 1 1 處理樹脂選擇性去 m 斷 > 並與 Β0Ρ ( 1 77 毫克 0 . 4 毫莫爾 ) 於 20 毫升 1 % D I PEA / DMF 溶液反應歷 2 小時開氏 ( Ka is e r ) 印二酮分析為陰性笨樹脂進行與 Bo C — Ly S ( 2 — C 1 - Z ) ( 332 毫克 » 0 . 8 毫 m 爾 ) -一次循環偶合 > 然後於應用於生物系模型 4 30 A ( Ap Pi ϊ e d B i 0 - s y s t e π ID 〇 d el 430A ) 胜肽合成器上接固相合成 » 如實例 8 〇進行十九個偶合循環 * 各循環具 Bo C — Va I ( 435 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C 一 A 1 a ( 378 毫克 « 2 . 0 毫 Μ 爾 ) » Bo C — Η 1 e ( 462 毫克 * 2 . 0 毫 m 爾 > » Bo C — G 1 η ( 49 3 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) Bo c — I.y S ( 2 Cl Ζ ) ( 830 毫克 ♦ 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo c — Ar g ( To S ) ( 856 毫克 ϊ 2 . 0 奄莫爾 ) » Bo C — L e u ( 499 毫克 • 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Ly S ( 2 — C 1 — Z ) ( 8 30 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — Th Γ ( B ζ 1 ) ( 61 8 毫克， 2 . 06 毫莫爾 ) » Bo C — Ty Γ ( 2 i 6 — DCB ) ( 880 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) 9 Bo C — As η ( 464 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — A s P ( 0c Hx ) ( 630 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) t Bo c — Th r ( B z 1 ) ( 6 1 8 毫克 9 2 . 0 毫莫爾 ) > Bo C Ph e ( 531 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — Va 1 ( 435 毫克 ♦ 2 . 0 毫 m 爾 ) * Bo C 一 A J a ( 372 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo c 一 70 一本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 -----------------------裝------，玎------ (-'"^-'',;背而>/;7-#項冉塡寫本?!) 五、發明説明（6ί Λ 6 \Μ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 — A s p ( 0 c Hx ) ( 630 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Se Γ ( Bz 1 ) ( 590 毫克 2 · 0 毫莫爾 ) > Bo C 一 Hi s (To S ) ( 81 9 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) 秋 v>\\ 後進行方案 1 之步驟 1 一― 8 * 用 1 毫升醋酸酐於 20 毫升 6 % D I PEA / 二氯甲院溶液處理樹 m 30分鐘〇使用方案 1 之步驟 10 — 14 清洗樹脂 > 真空乾燥 0 此呔一樹脂如實例 7 去阻斷得到 21 0 毫克粗肽〇此胜肽如實例 3 中由凝膠過濾純化產生 9 3 毫克半純產物 C 此物質用製備性 Η P L C 再純化 * 如實例 3 . 樣 » 但使用線性梯度 27 — η % » 產生 2 6 .2 毫克白色非晶形粉末 0 此化合物經 HPI.C 均質化 » 得到正確之胺基酸分析〇 F AB — MS = MH計算倩 3 3 0 5 .8 實驗值 3 3 0 5 .8 〇莨例 11 A c Γ Ly s 1 2 i N 1 e1 Ύ • A 1 a 1 t A s P 2 5 » Va 1 2 & 4 Th r 2 8 1 —- V I P 環 ( Ly s2 1 As P2 & ) C A c ( SEQ ID No ：29) -ΝΗ2 ：3 之製備 0 . 4 公克 ( 0 . 1 毫莫爾 ) 部份二笨甲基胺樹脂 ( 100 — 200 ASTM 蹄 » B 5 0 C h e m ] 接受上述方案之固相合成 0 所有之偶合使用等克分子當量 Bo C — 胺基酸及二環己基碳 __. 觸亞胺形成〇 Bo C — 精胺酸 * Bo C — 麩胺酸 1 如添加 1 . 5 克過最 H0BT 俩別活性酯一樣併入〇偶合步驟之反應時間般為 2 —— 1 8小時完成九個偶合循環赘各循環具 Bo C — Th Γ ( R ζ 1 ) ( 30 9 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — L e U ( 249 毫克， 1 . 0 毫莫爾 ) « B 〇 C 一 Va 1 ( 21 7 毫克 ♦ 1 . 0 毫奠一 7 1 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297父犛） 81.9.20,000 -----j------------- ------^------,玎------f (^-^^-,-11ΐ .g >/ d-i)!1冉塡"本π) [M) 五、發明説明（70) 經濟部中央標準局員工消費合作杜印« 爾 ) 9 Bo C — As P ( 0F Π1 ) ( 206 毫克 » 0 . 5 毫莫爾 ) * Bo C — As n ( 2 32 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) * Bo c —L e u ( 249 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Ty r ( 2 . 6 — DCB ) ( 440 毫克 t 1 . 0 毫莫爾 ) > Bo C — Ly s ( Fra o C ) ( 234 毫克 * 0 . 5 毫 m 爾 ) ， Bo C. — 1- y s ( 2 — Cl — Z ) ( 415 毫克 » 1 . 0 毫莫耳 ) 〇本樹脂妖 >Λ\\ 後用方案 2 之步驟 1 — 11 處理樹脂 » 選擇性去 m 斷 ♦ 並與 Β0Ρ ( 88 毫克 » 0 . 2 毫莫爾 ) 於20 毫升 1 % D I PR A / DMF 溶液反應歷 2 小時 » 開氐 ( K a i s e r ) 三酮分析為陰性 0 進行十九個偶合循環 » 各循環具 Bo c — A 1 a ( 189 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) « Bo C — A 1 a ( 189 毫克 > 1 . 0 毫奠爾 ) » Bo 0 — Ν 1 e ( 231 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) ，Bo c — G 1 η ( 24R 毫克 > 1 . 0 毫 m 爾 ) > Bo c — L y S ( 2 — Cl — Z ) ( 4 1 5 毫克 1 1 . 0 毫莫爾 ) * Bo c 一 Ar g ( T o s ) ( 428 毫克 ♦ 1 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — L e u ( 249 毫克， 1 . 0 毫莫爾 ) « Bo C — Ly S ( 2 — C 1 — Z ) ( 41 5 毫克， 1 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo a — Th Γ ( B z 1 ) ( 309 毫克 1 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Ty r ( 2 y 6 DCB ) ( 4 40 毫克 y 1 · 0 毫莫爾 ) » Bo C — A s η ( 232 毫克 1 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — As P ( 0 c Hx ) ( 31 5 毫克 * 1 . 0 毫莫爾 ) » Bo c — Th r ( B z 1)( 309 毫克 1 . 0 毫莫爾 ) ， B 〇 C — ?h 1 e ( 265 毫克 » 1.0 毫莫爾 ) I Bo c — Va 1 ( 21 7 毫 » 1 . 0 毫莫爾 ) > B o c — A 1 a ( 1 89 毫克 ♦ 1 . 0 毫莫爾 ) • Bo c — A s P ( 0 c Hx ) ( 3 1 5 毫克一 Ί2 一裝- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Τ 4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（71) ，1.0 毫奠爾 > ，Boc — Ser(Bzl) (295 毫克，1.0 毫莫爾），Boc - His(Tos：)(409 毫克，1.0 毫莫爾）。然後進行方案1之步驟1 一8 ，用0.毫升醋酸酐於10毫升6% IH P R A /二氯甲烷溶液處理樹脂3 0分鐘使用步驟1 0 — 1 4清洗樹脂，真空乾燥。此肽—樹脂如實例7去阻斷得到3 0 4毫克粗肽。此胜肽如實例3中由凝膠過濾純化產生215毫克半純產物。此物罾闬製備性Η P L C再純化，如實例3 ·樣，但使用線性梯度 2 6 — 3 6 % •產生2 0 . 1毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HPLC均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB - MS : ΜΗ計算堉 3 2 7 7 . 6，宵驗值 3 2 7 7 . 7。實例1 2 A c·「p - F 1 h e β — 2 — N a 1 1 0 * Lys12 - N 1 e 1 7 ， Asp2B ，Va 1 20 ，Thr28 ，G 1 y20 · 30 * Met,31 〕一VIP ( 1 - 31 ) -- NHa·環(Lys21 -> A s p 2 5 ) 〔Ac.- (SEQ ID N 〇 : 3 0 ) -H ]之製備 0 . 4克（0 .〗毫莫爾）部份二笨甲基胺脂（1 0 0 - 2 0 0 ASTM鋪，Biochem 〕接受上述方案之固相合成。完成三個偶合循環，各單瓖具Boc — Met (249毫克，1.0毫莫爾 )-B 〇 c - G 1 y (17 5 毫克，1.0 毫莫爾），及 Boc — G I y Μ 7 5毫克，1 . 0毫莫爾）如實例1 1完成九次偶合循環及環化。如實例Π完成十九次偶合循環，但第十環之 Bor· — A丨a由Boc — Val (217毫克，1.0毫莫爾）取代，第十九環之 Boc — Tyr <2 ，6 — DCB )由 Boc — 2 — (Λ, -‘"^.^办艰：^本1·':) .裝- -73- 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 5υ564β ΛΓ)

BG 五、發明説明（72 ) N ^ I ( 1 5 8 毫克〇. 5 毫奠爾 ) 取代第二十三環之 Bo C — Ph e 由Bo 0 — P ----- F —- Ph e ( 142 毫克 t 0 . 5 毫莫爾 ) 取代 1：此狀一樹脂如實例 7 去阻斷得到 345 毫克粗肽〇此胜肽如音例 ·?中由凝膠過 m 純化產生 21 5 毫克半純產物〇此物質闬製備件 HPI,C 再純化 > 如實例 3 一樣 » 但使用線性梯度 3 0 — 40¾ * 產生 16 .4 毫克白色 » 非晶形粉末〇此化合物經 Η P L C 均質化 » 得到正確之胺基酸分析〇 FAB — MS ·· MH計算值 3 5 7 4 • 7，莨驗值 357 5 • Ί 〇實例 13 A c 厂 G 1 u 8 t Or η 1 2 * N 1 e1 7 < A s P2 5 9 Va 1 2 © * Th Γ2 8 1 — VI P環 ( L y s2 1 -> A s P 2 B ) [ A c ( SEQ ID N 0 : 3 1 ) — ΝΗβ Ί 之製備 0 . 4 克（ 0 . 1 毫莫爾 ) 部份 — 笨甲基胺樹脂 ( 100 — 200 ASTM 篩 « B i 0 0 he m ] 如實例 11 接受上述方案之固相合成 ° 如實例 11 完成十九次偶合循環 * 但第十環之 Bo C — A I a 由 Β 〇 c — Va 1 ( 21 7 毫克 I 1 . 0 毫莫爾 ) 取代 t 第十七環之 Β 〇 c — Ly S ( 2 — C 1 — Z ) 由 Bo 丨C — Or η ( Z ) ( 366 毫克， 1 . 0 毫莫爾 ) 取代，第十一環之 Bo C — A s P ( 0c Η X ) 由 Bo C — G 1 u ( B z 1 ) ( 337 毫克 * 1 · 0 毫莫爾 ) 取代〇此肽 -樹脂如實例 7 去阻斷得到 255 毫克粗肽〇此胜肽如實例 3中由凝 m 過 m 純化產生 200 毫克半純產物〇此物皙用製備性 HPLC 再純化 > 如實例 3 一樣 « 但使用線性梯度一 7 4 — .裝· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公犛） 81.9.20,000 73 五、發明説明（）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 28 — 38% * 產生 30 .7 毫克白色 ♦ 非晶形粉末〇此化合物經 I1PI.C 均質化 » 得到正確之胺基酸分析〇 F AB — MS MH計算值 3 3 0 5 .8 » 實驗值 3 3 0 5 .5 〇實例 14 A C ί P —— F — Ph ee i L y s 1 2 > Η 1 e 1 V * Ala1 〇 > A s P2 5 » Va 1 2 Θ ， Th r2 8 » G 1 y2 〇 , 3 Ο t Cy s ( Ac m ) 3 1 ] VI P ( 1 — 31 ) -- NH 2 環 ( Ly s 2 1 -> As p 2 5 ) [ A c — ( SEQ ID Η 0 : 3 2 ) HH 2 "1 之製備 —* 苯甲基胺樹脂 ( (K 4 克 t 0 . 1 奄莫爾 * 100 一 200 ASTM 篩 » B i 0 0 h e m ] 接受如實例 11 之固相八 Γ3 成〇完成 . 個偶合循環 » 各單環具 Bo C 一 Cy s ( A c ΠΙ ) ( 292 毫克 1 1 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C 一 G 1 y ( 175 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) » 及 Bo C — G 1 y ί 1 7 5 毫克 * 1 . 0 毫莫爾 ) ：1 如實例 11 完成九次偶合循環及環化如實例 11 完成十九次偶八 in 循環 * 但第二十環之 Bo C — Ph e 由 Bo C — P F - Ph e ( 142 毫克 i 0 . 5 毫 Μ 爾 ) 取代〇此肽 — 樹脂如實例 7 去阻斷得到 268 毫克粗肽。此胜肽如實例 3 中由凝 m 過 m 純化產生 1 6 5 毫克半純產物此物質用製備性 Η P L C 再純化 « 如實例 3 - 樣 » 但使用線性梯度 25 — 3 5% * 產生 28 .1 毫克白色 .1 非晶形粉末〇此化合物經 HPI.C 均質化 t 得到正確之胺基酸分析〇 FAB — MS : ΜΗ計算倌 3 5 8 4 .1 » 實驗值 3 5 8 4 .0 I 〇霣例 1 5 A r. Γ A I a2 » Ly si 2 ， N 1 e 1 7 Ala1 Q » A s P2 5 * Va I2 6 一 75 一本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公犛） 81.9.20,000 -----------------------裝------，玎------娘 f;Λ;,-^-.'βΑ,>/ :;1^贤項冉塡"本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A6 B(；五、發明説明（74 ) ，Thr28 Ί —VTP 環（Lys21 ->Asp2!5 ) 〔Ac— (SEQ I 1) N 〇 : 3 3 ) - N H 2 〕之製備二笨甲基胺樹脂（〗.5克，0 . 4毫莫爾，1 0 0 — 2 0 0 ASTM篩，Biochem 〕於應用生物糸模型430A (Applied Biosystem model 4 3 0A)胜狀合成器t接受如實例11之固相合成。完成八個偶合循環，各單環具Boc — Thr (Bz 1 )( β19 毫克，2.0 毫莫爾）’ Boc — Leu (499 毫克，2.0 毫莫爾），Boc — Val (435毫克，2.0毫莫爾），Boc —Asp ( OFm> ( 8 2 2 毫克，2·0 毫莫爾），Boc —Asn ( 4M 毫克 * 2.0 毫莫爾 > ，Boc — Leu (499 毫克，2.0 畢尊爾），Boc— Tyr (2.6 -- DCB) (880 毫克，2.0 毫尊爾），Boc — Lys (Fmoc) (938毫克，2.0毫莫爾 )° 本樹脂然後用方案2之步驟1 - 1 1處理樹脂，選擇性去 B目斷，並與Β0Ρ (36 5毫克，0.8毫莫爾）於20毫升1 % Dl P R A / D M F溶液反應歷2小時，開氏（K a i s e r >印三_ 分析為陰性。樹脂使用方案2步驟1 3 — 1 6。真空乾燥得到 1 . 9公克B 〇 c —八肽樹脂。本樹脂0 . 9 5公克（0 . 2毫莫爾）部份再於應用生物系模型 430A (Applied Bio-system model 430A )胜狀合成器卜.接受如實例1 1之固相合成。進行十八個偶合循環，各循環具 Boc -l.ys (2 — Cl — Z) <830 毫克，2.0 毫莫爾 )· Boc -Ala (378 毫克，2·0 毫莫爾 > ，Boc-Ala <3 78 毫克，2.0 毫莫爾 > ，Boc — Hie (462 毫克， ------------------ ------裝------，玎------Μ (清""-’""面之^念赛唄冉塡^^本頁) — 76 — 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)蘩4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ΛΓ) Β(; ^05846 五、發明説明（75 ) 2.0毫莫爾），Boc - Gin (493毫克，2.0毫莫爾）， B 〇 c - L y s ( 2 — C 卜--Z ) ( 8 3 0 毫克，2 . 0 毫莫爾）， Boc — Arg (Tos ) ( 856 毫克，2.0 毫莫爾），Boc — Leu <499 毫克，2.0 毫莫爾），Boc — Lys (2 — Cl — Z ) (830 毫克，2.0 毫莫爾），Boc -Thr(Bzl) (618 毫克，2.06毫莫爾），Boc~Tyr (2，6— DCB)( 880 毫克，2.0 毫箅爾 >，Boc — Asn (464 毫克，2.0 毫莫爾> ，Boc — Asp(OcHx) (630毫克，2.0毫莫爾），Boc -Thr(Bzl) (618 毫克，2.0 毫莫爾），Boc — Phe (531 毫克，2.0 毫莫爾），Boc -Val (435 毫克，2.0毫莫爾），Boc - Ala ( 3 78毫克，2.0毫莫爾） > Boc - Asp (OcHx) (630 毫克，2.0 毫莫爾），得到 1 . 5 4公克B o c -二十六肽樹脂。本樹脂0.77公克（0.1毫莫爾）部份接受如實例2所用之方案之固相合成。進行二涸偶合循環，各循環具有Boc 一 Ala (76毫克，0.4 毫莫爾），Boc — His (Tos) (328 毫克，0 . 8毫莫爾）。此肽樹脂進行方案1之步驟1 — 8 ，用0.5毫升醋酸酐於20毫升6%DIPEA /二氯甲烷溶液處理樹脂60分鐘。使用步驟10 — 14清洗樹脂，真空乾燥得到0 . 7 4公克。經濟部中央標準局員工消費合作社印製此肽-樹脂如實例7去阻斷得到1 7 2毫克粗肽。此胜狀如實例3中由凝膠過濾純化產生U 0毫克半純產物。此物質用製備性Η P L C再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 22- 3 7% *產生40.0毫克白色*非晶形粉末。此化合物經 -77 - 81.9.20,000 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ΛΓ» Β(；五、發明説明（76 ) H PLC均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB - MS : ΜΗ計算堉 3 2 . 7，實驗值 3 2 fi 1 . 8。實例16 A c - Γ N —. Me— Ala2，Lys12 > Nle17 > Ala10 - Asp25 ，Va 1 20 ，Thr28 〕一VIP 環(Lys21 Asp2B ) 〔Ac — (SEQ TD No : 34) ]之製備啻例1 5之B o c -二f六樹脂0 . 7 7公克（0 . 1毫莫爾）接捺受如宵例2所用之方案之固相合成。進行二個偶合循環，各循環具有Boc -Ser(Bzl) (118毫克，0.4毫莫爾），B o c - N - M e - Ala (81毫克·0·4毫莫爾）。此肽樹脂進行方案1之步驟丨—8，用Β0Ρ (442毫克，1.0毫莫爾），醋酸（57毫克，1.0毫莫爾）及DIPEA (523毫克，3.0毫莫爾 > 於20毫升DM F中處理，然後用0.5毫升 _酸酐於2 0毫升6 % IH P E A /二氯甲烷溶液處理樹脂6 0分 _。使用步驟】0 — 1 4清洗樹脂，真空乾燥得到〇 . 7 3公克。此肽-樹脂如實例7去阻斷得到1 9 1毫克粗肽。此胜狀如宵例3中由凝膠過濾純化產生1 3 8毫克半純產物。此物曹用製備件Η P L C再純化|如實例3 —樣*但使用線性梯度 2 2 — 3 7 %，產生2 8 . 0毫克白色 > 非晶形粉末。此化合物經 HPI.C均皙化，得到正確之胺基酸分析。FAB — MS ·· ΜΗ計算堉 3 2 2 5 . 4，實驗值 3 2 2 5 . 8。實例17 A c. — Γ 2- Nal10 * Lys12 * Nle17 > Ala1® * Asp2B Val2e ，Thr28 :] — VIP 環（Lys21 — Asp25 ) 〔Ac—( ------------------------^------..玎------線 (''v''L;y,二.-^'"之^立私巧再塡寫本耵) -78 - 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'犛） 81.9.20,000

Bf；經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（77) SRQ iD Ho ： 3 5) - Ν Η 2 ] 二笨甲苺胺樹脂（4 . 0克 ASTM篩，Biochem 〕接受方完成八個偶合循環，各單環，4.3 毫《爾 > ，Boc-Le -Boc - Va1 (938 毫克， A s p ( f) F m 丨（8 8 9 毫克，2 . 1 牽克，2 . 4奄莫爾），B o c 爾），Boc —Tyr (2 · 6 草爾），Boc — Lys ( F m o c 本樹脂然後用方案2之步阴斷，並與B 0 P ( 8 8 5毫克 D1PRA / DMF溶液反應歷2 分析為陰性、樹脂使用方案本樹脂進行與Boc —Lys 4 . 3毫莫爾）一次偶合循環 B 〇 c —九狀樹脂本樹I旨1 . 8 9公克（0 . 3毫循瑁具Boc - A]a (227毫 Ala ( 227毫克，1 . 2毫莫，1.2 毫莫爾 > ，Boc—G1 'Boc —Lys ( 2 -- Cl — Z * Boc — A r g ( T o s ) (51

之製備 > 1 . 08 毫莫爾 9 100 — 200 案 1 之固相合成 » 如實例 2 〇具 Bo C — Th r ( B z 1 ) ( 1 . 34公克 U ( 925 毫克 4 . 3 毫莫爾 ) 4 . 3 毫莫爾 ) * Bo C — 毫莫爾 ) > Bo C — A s π ( 557 — L e U ( 925 毫克 9 4 . 3 毫莫 — DCB ) ( 1 . 9 公克 « 4 . 3 毫 ) ( 1 . 1 公克 t 4 . 3 毫莫爾 ) 驟 1 —— 11 處理樹脂 9 選擇性去 « 2 . 0 毫莫爾 ) 於 20 毫升 1 % 小時 * 開氏 ( Ka i s e r ) 印二 m 2 步驟 13 — 1 6 〇 ( 2 C 1 — Z ) ( 1 . 79公克 t * 真空下乾燥得到 6 . 3 公克莫爾 ) 部份九個偶合循環 » 各克 » 1 . 2 毫莫爾 ) » Bo C — 爾 ) 1 Bo C — N 1 e ( 278 毫克 η ( 325 毫克 S 1 . 32 毫莫爾 ) ) ( 498 毫克 f 1 . 2 毫莫爾 ) 4 毫克 1 . 2 毫莫爾 ) Bo C 79 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么、釐） 81.9.20,000 ("'·ι:ΰ,"片.？>/ 办塡"本-7,0 裝- 、-η . 經濟部中央標準局員工消f合作社印製 ΛΓ,

Hfi 五、發明説明（78) -Leu (299 毫克，1.2 毫奠爾），Boc — Lys (498 毫克，2.0 毫莫爾），Boc - Thr(Bzl) (371 毫克，1.2 毫草爾 > 得到Boc —十八肽樹脂。本樹脂0 . 68公克（0 . 1毫箅爾）部份進行十個偶合循環，各單環具Boc — 2 — Nal <12 6毫克，0.4毫莫爾> ，

Boc — A s η (Ί02 毫克，0.44毫莫爾 >，Boc —

Asp ( Π c Η x 1 (12fi 毫克，0.4 毫莫爾），Boc —

Th「（Rz 丨丨（124 毫克，0.4 毫莫爾 > ，Boc - - P h e (106 毫克，0.4毫莫爾> ，Boc— Val (87毫克，0.4毫莫爾 )* Boo — A I a (76晕克，0.4 毫莫爾），Boc —

Asp (OcHx ) M 26 毫克，0 . 4 毫莫爾），Boc —

Spr(Bzl) 1118 毫克，0.4 毫莫爾），Boc — His(Tos)( 1 ft 4毫克，0 . 4毫莫爾）。此樹脂然後進行方案1之步驟 1 -- 8 ，用0 . 5毫升醋酸酐於2 0毫升6 % D I P E A /二氯甲烷溶液處理樹脂6 0分鐘。使用步驟1 0 - 1 4清洗樹脂，真空乾燥得到〇 . 8 2公克。此肽-樹脂如宵例7去阻斷得到2 6 1毫克粗呔此胜狀如宵例3中由凝膠過滹純化產生1 8 6毫克半純產物·此物質用製備件Η P I. C再純化*如實例3 ·樣，但使用線性梯度 3 0 — 4 0 <%，產牛6 0 . 1毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HPLC均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB — MS : ΜΗ計算堉 3 2 9 fi . 8，實驗值 3 2 9 5 . 6。實例1 8 A c - 「Ο -- M e — Tyr2，I, ys12 * Nlelv > Ala10 * Asp26 -80 - 屯:y,l,.:;;i。向>/ :;,-赉項冉塡.:4';本订) I裝. -6. 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 AG Βί; 五、發明説明（79 ) ，Va12e ， Thr28 〕一 V1P 環（Lys21 —Asp25 ) [Ac (S R Q T D N ο : 3 6 ) — N Η 2 1 之製備啻例1 7之B o c -十八肽樹脂0 . fi 8公克（0 . 1毫莫爾）部份進行如啻例1 7之偶合循環，但第十九循環具B 〇 c — 2 - Nal 由 Boc — Tyr(0-Me> (59毫克，0.2 毫莫爾 > 替代，得到0 . 6 1公克、此狀-樹_如實例7去阴斷得到1 7 5毫克粗肽。此胜肽如啻例.3中由凝膠過濾純化產生136毫克半純產物。此物曹用製備件.Η P I. C再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 2 8 — 3 8 %，產生4 2 . 4毫克白色*非晶形粉末。此化合物經 HPI.C均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB — MS : ΜΗ計算倌 3 2 7 Γ) . 7，宵驗值 3 2 7 6 . 0。實例19 A c - 「P --. F P h e β，ρ - Ν Η ζ Ρ h e 1 ° ，L y s 1 2 ’ NU17 ，Alaie ，Asp25 ，Val2e ，Thr28〕一 VIP 環（ I,vs21 ^ Asp25 ) ί Ac- ( SEQ ID No ： 37) — NH2 〕之製備 B 〇 c —十八狀樹脂0 . 6 2 5公克（0 . 0 9毫莫爾）部份進行如實例1 7之十次偶合循環，但第卄九循環具Β 〇 c — 2 — Nal 由 Boc - p — NH(Z) — Phe (166 毫克，0·4 毫莫爾 1替代，第二十三循環之Β o c — P h e由Β o c ~ ρ — F — Phe ( 11 3毫克，0 . 4毫莫爾）取代。得到0 . 8 4公克。此肽-樹脂如實例7去阻斷得到1 8 2毫克粗肽。此胜狀如實例3中由凝膠過濾純化產生160毫克半純產物。此物 ------^-------------------裝------訂------線 f Α^^-'ϋ曲之：-:-,13^增寫本Η ) -81 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 S05S4 A 6 Hfi 五、發明説明（80) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製質闬製備性 HPLC 再純化如實例 3 — 樣 > 但使用線性梯度 2 5 ― 3 5 % » 產生 47 .2 毫克白色非晶形粉末〇此化合物經 HP1.C 均質化 * 得到 Έ. 確之胺基酸分析〇 FAB ― MS ： ΜΗ計算信 3 279 .7 * 賓驗值 3279 .8 〇實例 20 A c ---- Γ Ly s 1 2 t Ν I e 1 V i A 1 a 1 Q » As P2 5 t L e u2 © t K v s 2 7 . 2 8 1 - V Ϊ Ρ 環 ( Ly s2 1 ― As p2 5 ) [ Ac ―― ( SEQ ID N 0 * 3 8 ) ΝΗ ] 之製備 . 苯甲華胺樹脂 ( 1 . 25克， I . 0 毫莫爾， 100 -- 200 ASTM 篩 » B i 0 C he m 1 接受方案 I 之固相 △ a 成 ♦ 如實例 2 〇完成八俩偶合循環 t 各單環具 Bo C ― L y S ( 2 ― C 1 ―― Z ) ( 1 . 6 6公克 * 4 . 0 毫 m 爾 ) 1 Bo C ― Ly S ( 2 C 1 ―――. Z ) ( 1 . 66 克 » 4 . 0 毫莫爾 ) 9 Bo C ― L e U ( 92 5 毫克 > 4 . 3 毫尊爾 ) * Bo C A s P ( 0F m ) ( 823 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C ― A s η ( 5 1 1 毫克 * 2 . 2 毫莫爾 ) Bo C ― L e U ( 9 2 5 毫克， 4 . 3 毫 m 爾 ) ♦ Bo C ― Ty r ( 2 . 6 ―― DCB ) ( 1 . 76 公克 4 . 0 毫轉爾 ) * Bo C - L y S ( F m 0 C ) ( 937 毫克 * 2 . 0 毫 Μ 爾 ) ι；· 本樹脂 m 後用方案 2 之步驟 1 11 處理樹脂 » 選擇性去 m 斷並與 Β0Ρ ( 885 毫克 * 2 · 0 毫莫爾 ) 20 毫升 1 % D I PR A / DMF 溶液反 gtg 應歷 2 小時 » 開氏 ( Ka is e r ) 二 m 分析為陰件 Ο 樹脂使用方案 2 步驟 1 3 ― 1 6 〇本樹脂進行與 Bo C ― L y S ( 2 (:1 ― Z ) ( 1 . 66公克 * 4 . 0 毫莫爾 ) -―-* 次偶合循環 » 真空 F 乾燥得到 2 . 7 公克 —8 2 一本紙張疋度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 X釐） 81.9.20,000 —---------------- ------裝--------訂------^ ^'面 >/ :''^货項#填.,5本1!) 五、發明説明（81 ) ΛΓ) Ηΐί 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 β o c —九狀樹脂、本樹 m 0 . 5 4公克 ( 0 . 2 毫莫爾 ) 於應用生物系模型 430 A ( A p pi i e d R i 〇 - s y s t e in m o d e 1 430 A ) 胜肽合成器上接岡相合成 1 如宵例 8 〇進行十八個偶匕 η 循環 « 各循環艮 Bo c — A 1 a ( 37 8 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) 9 Bo C — A 1 a ( 37 8 毫克 * 2 . 0 毫 m 爾 ) * Bo C — N 1 e ( 462 毫克 » 2 . 0 牽 Μ 爾 ) * Bo c — G 1 η ( 493 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — l.y s ( 2 —L Cl —— Z ) ( 830 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — Ar g ( To s ) ( 856 毫克 • 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — L e U ( 499 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — 1 y S ( 2 C 1 — Z ) ( 8 30 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C — Th Γ ( Bz 1 ) ( 61 8 毫克 * 2 . 0 毫 m 爾 ) * Bo C — Ty Γ ( 2 赘 6 —— DCB ) ( 880 毫克 » 2 · 0 毫 m 爾 ) » Bo C — A s .η ( 464 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) f Bo c 一 A s P ( 0c Hx ) ( 630 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) 1 Bo C Th r ( B 7‘ η ( 6 1 8 毫克 ♦ 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Ph e ( 531 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) y Bo C — Va 1 ( 43 5 毫克 t 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo c _ A 1 a ( 378 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — As p ( 0c Hx) ( 630 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) $ Bo C Sh r ( B z t ) ( 590 毫克 i 2 . 0 毫莫爾 ) * 得到 Bo C — 二十七呔樹脂 1 . 1 6公克本樹脂 0 . 4 5公克 ( 0 . 1 毫莫爾 ) 部份進行 -一個與 Bo c — Hi s ( To s ) ( 81 9 毫克 • 2 . 0 毫莫爾 ) 偶合循環 m /U\ 後進行方案 1 之朱驟 1 - 8 ，用 0 . 5 毫升醋酸酐於 20 ，毫升 6 % D I PR A / 氯甲溶液處理樹脂 60分鐘〇使用步驟 1 0 1 — -83 一本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ---- ------裝------訂------^ ~-LTt:y,'-';::r.g >/ rv;i菸項典埽"本1!) 經濟部中央標準局R工消費合作社印製 -84 - IU；五、發明説明（) 82 1 4清洗樹脂，真空乾燥得到〇 . 5公克。此呔-樹陏如實例7去阻斷，但使用5毫升HF及0.5毫升Μ番醚，得到127毫克粗肽。此胜肽如實例3中由凝膠過濾純化產生74.6毫克半純產物。此物質用製備性HPLC再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度2 4 — 3 4 %，產生 1 7 毫克白色，非晶形粉末。此化合物經HPLC均質化，得到7F確之胺基酸分析。FAB - MS: MH計算值333 3.8，實驗堉：⑴3 . 4。實例21 A c — Γ N 一― Me 一 A 1 a 1 » Ly s 1 2 » N 1 e 1 > A 1 a1 Θ 9 As P2 5 * L e U2 β 1 Ly S2 V , 2 a ] — VI P 環 ( Ly s2 1 As P2 5 ) [ ft c — ( SEQ ID N 0 3 9 ) —- N Η 2 ：1 之製備官例 20之 Bo C — 二十七肽樹脂 0 . 58公克 ( 0 . 1 毫莫爾 ) 進行 — 次與 Bo e — N —— Me — A 1 a ( 81 毫克 0 . 4 毫莫爾 ) 之偶合循環 « 狄後進行方案 1 之步驟 1 —— 8 » 用 Β0Ρ ( 4 43 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) » 醋酸 ( 5 7 毫克 i 1 . 毫莫爾 ) • 及 D 1 PF A ( 52 3 毫克 » 3 . 0 毫莫爾 ) 於 20 毫升 DMF 中處理 fi 小時 * 目. 用 0 . 5 毫升醋酸酐於 20 毫升 6 % D I PEA / —-* 氯甲溶液處理樹脂 60分鐘〇使用步驟 10 — 14 清洗樹脂 • 真乾燥得到 0 . 4 公克〇此狀 — 樹脂如實例 2 0去阻斷得到 165 毫克粗肽〇此胜肽如實例 3 中由凝膠過 m 純化產生 10 ] 毫克半純產物〇此物質用製備性 HPLC 再純化 * 如實例 3 一樣 > 但使用線性梯度 2 4 一 3 4% * 產生 1 9 丨· 8 毫克白色非晶形粉末〇此化合物經本紙張又度適用中國國家標準（CN\S)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ------------------------裝------.玎----— 1^ (-'""'-.'"T-i >::'π-ί^冉塡"本钉) BG 經濟部中央標準局員工消費合作社印$ 五、發明説明（83) Η P L C 均質化 » 得到正確之胺基酸分析 •j F AB 一 MS : ΜΗ計算倌 328 1 .8 * 實驗值 328 1 .9 ο 實例 22 Ac — r G 1 ua Ly s1 2 » Ν 1 e 1 7 * Ala1 Θ f As p2 5 1 L e u2 β * I.y s2 7 · 2 8 Ί — V I P 環 ( Ly s 2 1 — As P2 5 ) c Ac — ( SEQ if) N 0 ： 40 ) -- NH 2 j 之製備實例 20之 Bo C 一九肽樹脂 o. 5 4公克 ( 0 , 2 毫莫爾 ) 於應用牛物系模型 4 30 A ( A p ρ 1 i e d B i ο - s y S t e m πι 〇 d el 430 A ) 胖狀合成器 h 接受固相合成 » 如實例 8 ° 進行十八個偶合循環 ♦ 各循環具 Bo 0 — A 1 a ( 378 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) 1 Ro C. — A 1 a ( 37 8 毫克 ♦ 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — N 1 e ( 4 62 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo c 一 G 1 η ( 493 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) > Bo c — Ly S ( 2 — Cl Z ) < 830 毫克 t 2 . 0 毫 m 爾 ) 參 Bo c Ar g ( To s ) ( 8 56 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) » Ro c — K e U ( 499 毫克 i 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — L y S ( 2 Cl Z ) ( 830 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo c — Th Γ ( Rz 1 ) ( 6 1 8 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) Bo c — Ty r ( 2 i 6 --- DCR ) ( 880 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) t Bo c — As η ( 464 牽克 » 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo c ~ A s ρ ( 0 c Hx ) ( 630 毫克 ♦ 2 . 0 毫 m 爾 ) • Bo C Th r ( B z ]) ί 61 8 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) 1 Ro C — Phe ( 5 3 1 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo c — Va 1 ( 4 3 5 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo c — A 1 a ( 37 8 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) * Bo c — A s ρ ΐ 0c Hx ) ( 630 毫克 1 1 · 0 毫莫爾 ) i Bo C, Sh Γ ( B z 1 ) ( 590 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) r 得到 Bo C — 一 85 - 本紙張尺度適用中國國家標準（OVS)甲4規格（210 X 297 i：釐） 81.9.20,000 ----------------'— ------裝------訂·------續 Μ?'·ι-^ΛΤ:'-‘而>/ .rv-贤項冉塡*^本页) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Afi 五、發明説明（84) 二十七呔樹脂Ο . 5 8公克。本樹脂部份進行一俩與B 〇 c - H i s < T 〇 s ) ( 1 6 4毫克，〇 . 4毫莫爾）偶合循環，然後進行方案1之步驟1 一 8 ，用0.5毫升醋酸酐於20毫升6%DIPEA /二氯甲烷溶液處理樹脂fi〇分鐘。使用步驟〗0—14清洗樹脂，真空乾烽得到 0 . 5 3公克。此呔-樹脂如實例7去阻斷，但使用5毫升H F及0 . 5毫升同番醚，得到1 2 7毫克粗呔。此胜肽如實例3中由凝膠過嫌純化產生15〗毫克半純產物。此物質用製備性HPLC再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度2 3 . 5 - 3 3 . 5 %，產牛2 2 . 8毫克白色，非晶形粉末。此化合物經Η P L C均質化，得到iF確之胺基酸分析。F A Β - M S : Μ Η計算值3 3 4 7 · 9，實驗倌 3 3 4 7 . 0 . 實例23 Ae — 「0 --- Me — Tyr^o , Lys12 , Niei7 ，Ala1'** , Asp2*5 ，|,eu2S ，|ys27.28〕— yip 環（Lys21 — Asp25 )「A c (SEQ iDNo :41) - NH2 ]之製備啻例17之Boc -九肽樹脂1.84公克（0.3毫莫爾）於應用牛物系模型 4.3 0A (App 丨 ied Bio-system model 430A ) 胖呔合成器卜.接受固相合成，如實例8 -進行九個偶合循環，各循環具Boc - Ala (378毫克，2.0毫莫爾）， Roc - A 1 a <3 78 毫克，2.0 毫莫爾），Boc - Nle ( 46 2 毫克，2.0 毫莫爾 >，Boc — Gin (493 毫克，2.0 牽草爾），B <) c —丨，y s ( 2 - C 1 - Z ) ( 8 3 0 毫克，2 . 0 ------------------------ 裝------"------織 '''-'ι^ϋΓ'"":''"莽項冉塡寫本1!) 一 8 6 一本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 AG ΗΓ) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製五、發明説明（85) 毫 m 爾 ) » Bo C — hr g ( To s ) ( 856 毫克 * 2. 0 毫莫爾 ) » Bo c — L e U ( 499 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) i Bo C — Ly S ( 2 一 Γ l -- 7 ) ( 8 30 毫克 1 2 · 0 毫莫爾 ) t Bo C — Th Γ ( Rz I ) ( 61 8 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) 得到 Bo c — 十八肽樹脂〇本樹脂 0 . 7 3公克 ( 0 . 1 毫莫爾 ) 部份進行十個偶合循環 » 俩循環具 Bo (* 一 Ty Γ ( 0 1 Me ) ( 59 毫克 * 0 . 2 毫莫爾 ) Bo (' 一 A s η ( 1 02 毫克 * 0 . 44 毫莫爾 ) ♦ Bo C — A s p ( 0〇 Hx ) ( 1 26 毫克 » 0 . 4 毫轉爾 ) * Bo C Th r ( B z 1 ) ( 124 毫克 * 0 . 4 毫莫爾 ) ， Bo C — Ph e ( 106 毫克 1 0 . 4 毫莫爾 ) 1 Bo C — Va 1 ( 87 毫克 * 0 . 4 毫莫爾 ) * Bo C — A t a ( 76 毫克 * 0 . 4 毫莫爾 ) » Bo C - A s P ( 0c Hx ) ( 126 毫克 » 0 . 4 毫莫爾 ) 1 Bo C Sh r ( B z ]) ( 11 8 毫克 * 0 . 4 毫 Μ 爾 ) C 此樹脂進行方案 1 之步驟 1 一 8 ，用 0 . 5 毫升醋除酐於 20 毫升 6 % D I PEA / 二氯甲综溶液處理樹脂 60分鐘 ο 使用步驟 10 — 1 4清洗樹脂 » 真空乾 m 得到 0 . 7 7公克〇此呔 — 樹脂如實例 7 去阻斷得到 187 毫克粗肽〇此胜呔如啻例 3 中由凝 m 過濾純化產生妥 1妥Μ克少純產延〇此延詈用槃 Μ Μ M h Η P 丨X 再純化 * 如實例 3 —一樣 * 但使用線性梯度 26 — 36¾ 產生 5 . 3 毫克白色 ♦ 非晶形粉末〇此化合物經 H PI乂均質化 » 得到正確之胺基酸分析〇 FABMMMMMM7MH迪算倩 3 ! 1 .8 { 實驗迪 ( • 7 〇實例 24 A c — [ G 1 U8 Ly s 1 2 * N 1 e 1 7 » A 1 a 1 〇 » A s P2 & t L e U2 ：β ------------------------裝------訂------^ f-t'^-.ir面之：;,-务項冉塡."本页) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)平4規格（210 X 297公犛） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（86 ) » l,y s 2 V , 2 8 > ή 1 a2 Ο - 3 1 -j — V 1 P ( 1 y s2 1 — A s P2 5 { c A 〇 — ( SRQ II) Ν 0 42 ϊ — ΝΗ 2 .1 之製備 _. 笨甲募胺樹脂 ( 1 . 1 公克 » 0 . 5 毫莫爾 » 100 200 ASTM 篩 1 B i 0 Π! e g a 1 接受方案 1 之固相合成 t 如實例 2 〇完成十三俩偶合循環 ♦ 各單瑁具 Bo C — A 1 a ( 378 毫克 ♦ 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C — A 1 a ( 378 毫克 » 2 . 0 毫奠爾 ) ， Ro r 一 A 1 a ( 378 毫克 » 2 . 0 毫 m 耳 ) » Bo c — Ly S ( 2 - Γ 1 -- 7. ) ( 8 30 毫克 9 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo c — Ly S ( 2 Π 1 Z ) ( 8 30 毫克 i 2 . 0 毫 η 爾 ) * Bo c — L e U ( 499 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — As p ( 〇c Hx ) ( 630 毫克 * 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C As η ( 51 1 毫克 > 2 . 2 毫莫爾 ) » Bo c. — 1, e u ( 499 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) Bo c — Ty Γ ( 2 * R — DCB Ϊ ( 81 1 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Ly S ( F m 0 c ) ( 9 36 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) Bo C — Ly S ( 2 Cl 7 ) ( 830 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo c — A 1 a ( 37 8 m 克 » 2 . 0 毫莫爾 ) 本樹脂然後用方案 2 之步驟 1 -- 11 處理樹脂 1 選擇性去昍斷 » 並與 Β0Ρ ( 4 43 毫克 » 1 . 0 奄莫爾 ) 於 20 毫升 1 % D I PF A / 0HF 溶液反 gfc m 歷 2 小時 * 開氏 ( K a is e r ) m 二 _ 分析為陰忡〇樹脂使用方案 2 步驟 13 一 1 6 清洗 > 真空下乾 m 得到 2 . 0 2公克 Bo C - 十 :: 肽樹脂本樹脂 0 . 8 公克 ( 〇. 2 毫莫爾 ) 部份於應用生物糸模型 430 A ( A p p 1 i e d B i 0 - s y s t e m ϊ m od el 430 A ) 胜呔合成器上接受固相合成 t 如實例 8 〇進行十 -.1— y λ 個偶合循環各循環 ------------------- ------裝------訂------44 •'^""i···1-"面，，/ •;,"麥項#埙."本") —8 8 — 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'釐） 81.9.20,000 ΗΓ) 五、發明説明（87 ) 經濟部中央標準局8工消費合作杜印製具 Bo 0 一 A 1 a ( 37 8 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) 9 Bo C — Ν 1 e ( 4R2 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) > Bo C — G 1 η ( 493 毫克 9 2 · 0 毫 m 爾 ) * Bo C. — Ly K ( 2 C 1 -- 7. ) ( 830 毫克 « 2 . 0 毫 m 爾 ) 1 Bo C —— Ar g ( To s ) ( 856 毫克 » Ϊ · 0 毫莫爾 ) » Bo c. — L e υ ( 499 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Ly S ( 2 — C 1 — Z ) ( 83 0 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) 1 Bo C — Th r ( B 7 1 ) ( 6 1 8 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) > Bo C — Ty Γ ( 2 t 6 — DCR ) ( 880 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) 贅 Bo c — A s η f 464 牽克 * 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — A s P ( OcHx ) ( 630 毫克 t 2 . 0 毫 m 爾 ) * Bo C Th Γ ( B 2 1 ) ( 618 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) * B 〇 r — Ph e ( 5 3 1 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) > Bo C — Va 1 ( 435 毫克 ♦ 2 . 0 毫莫爾 ϊ « Bo C — ή ! a ( 378 毫克 * 2 . 0 牽 M 爾 ) ♦ Bo 0 — A s P ( 0 c Hx ) ( 6 30 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) » 得到 1 . 2 公克 Bo C — * 十九肽樹脂〇本樹脂 0 . 6 公克 ( 0 . 1 毫莫爾 ) 部份如上述進行兩個與 Bo c — S e r ( B z 1 ) ( 590 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) 及 Bo C — Η ί s ( To s ) ( 8 1 9 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) 〇偶合循環得到 0 . 7 2公克此樹 m 進行方案 1 之步驟 1 8 » 用 0 . 5 毫升醋 fit 酐於 20 毫升 6 % D IPEA / —^ 氯甲烷溶液處理樹脂 60分 m 〇使用方案之步驟 10 一 1 4 清洗樹脂真空乾燦得到〇. 645 公克 ο 此呔 — 樹脂如實例 7 去阻斷得到 280 毫克粗肽〇此胜肽如官例 3 中由凝 m 過 m 純化產生 280 毫克半純產物 0 此物質用製備性 HPLC 再純化 > 如實例 3 一樣 » 但使用線性梯度 —8 9 一本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297父釐） 81.9.20,000 ----------------- ------裝------訂------綺 M^t!y,-.;;:,'',u>/ :;τ-ί % 冉塡肖本页) Λ 6 ΗΓ> 經濟部中央標準局8工消費合作社印製五、發明説明（88) 22 — Z1%，產生 23.1 毫克白色非晶形粉末 0 此化 △ C3 物經 HPI.C均質化 » 得到 iF. 確之胺基酸分析〇 F AB — MS : ΜΗ計算值 3561.8 * 實驗值 3 5 6 0 .8 〇實例 2 5 A c --- f A 1 a2 i G 1 u 8 » Ly s 1 2 > N 1 e 1 .7 « Ala1 3 » A s Ρ2 5 « u2 β ，L γ s 2 7 , 2 8 i A 1 a 2 Q - 3 1 j V I P 環 ( L y s2 1 A s P 2 5 ) f A c -- ( SF.Q [[) Ν 0 ： 4 3 ) — NH 2 ϊ 之製備窖例24之 Bo c 一二十九呔樹脂 0 · 6 公克 ( 0 · 1 毫莫爾 ) 部份進行兩俩與 Bo Γ — Se r ( Bz 1 ) ( 590 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) 及 Β 〇 c — Hi s ( To s ) ( 819 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) 之偶合循環得到0 . 7 2公克 ·；' 此樹脂進行方案 1 之步驟 1 — 8 » 用 0 . 5 毫升醋 m 酐於 20 毫升 6 % D I PEA / 一一氯甲烷溶液處理榭 m B0分鐘使用方案 1 之步驟 10 — 1 4 清洗樹脂真空乾燥得到0 . 5 6公克〇此呔—樹脂如實例 7 去阻斷得到 1 6 0 毫克粗肽此胜肽如宵例3中由凝膠 vpt, 3¾ 滹純化產生 70 毫克半純產物 0 此物質用製備件Η P L C 再純化 » 如實例 8 一樣，但使用線性梯度 2 5 — 35% « 產生 2 3 .1 毫克白色非晶形粉末〇此化八 α 物經 HPLC均質化 » 得到 E 確之胺基酸分析 Γ', F AB — MS Μ Η計算 m 3545.8, 實驗值 35 4 5 .3 實例 26 A c —- ί 0 -- Me A 1 a 1 » ϋ 1 υ 8 » L y s 1 2 N 1 e 1 7 ， A 1 a 1 G t A s P2 5 * 1, e u2 ! β * Ly S 2 V . 2 a ϊ VI P 環 ( Ly s2 1 A s P 2 ：& Ϊ 厂 A r —( SRQ I D N 0 : 44 ) NH ί> ) 之製備 ----------------- ------裝-------訂------線 (^.^^,.^"面>/ πώ菸項办塡舄本頁) -90 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公犛） 81.9.20,000 ύ〇5β4β Λί； ΗΓ» 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（89 ) 實例 20 之 Bo C — 九肽樹脂 1 . 1 公克 ( 0 . 4 毫莫爾 ) 於應用牛物系樽型 4 3 0 A ( A p P 1 ί e d B i 〇 - S y St e m m o d e 1 430 A ) 胖狀合成器卜. 接受固相合成 * 如實例 8 ο 進行十七個偶合循環 » 各循 H9 環具 Bo C — A 1 a ( 378 毫克 t 2 . 0 毫莫爾 ) j Ro C — A 1 a ( 3 78 毫克 « 2 . 0 毫 m 爾 ) ， Bo c — N 1 e ( 462 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C 一 G 1 η ( 493 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) 1 Bo C — L y S ( 2 —— C 1 — Z ) ( 830 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) > Bo C — Ar g ( To s ) ( 856 奄克 * 2 . 0 毫 Μ 爾 ) * Bo C — 1. 9 U ( 499 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) y Bo c — L y S ( 2 Cl Z ) ( 830 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo c 一 Th Γ ( B z ! ) ( 61 8 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo c — Ty r ( 2 * 6 — DCB ) ( 880 毫克 * 2 · 0 毫莫爾 ) y Bo c - A s η ( 464 牽克 * 2 . 0 毫 m 爾 ) * Bo c — A s P ( 0 c Hx) ( 630 毫克， 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C Th r ( B z 1 ) ( 6 1 8 毫克 t 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C. — Ph e ( 5 3 1 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) i Bo C — Va 1 ( 4 3 5 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) > Bo C — ή 1 a ( 378 毫克 1 2 · 0 毫 Μ 爾 ) » Ro C — A s P ( 0 c Hx ) ( 6 30 毫克 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ 得到 1 . 2 公克 Bo c — 二十 —1— 肽樹脂〇本樹脂 1 . 1 公克 ( 0 . 2 毫莫爾 ) 邰份進行兩個與 Bo C — S e r ( B 7, 1 ) ( 238 毫克 0 . 8 奄莫爾 ) 及 Bo c — N — Me — A 1 a ( 1 6 3 毫克 * 0 . 8 毫莫爾 ) 之偶合循環 y m 後進行方案 1 之驟 1 — 8 1 用 Β0Ρ — C 1 ( 100 毫克 j 〇. 2 毫莫爾 ) * 醋 m ( 2 3 毫升 * 0 . 2 毫莫爾 ) 及 I) I PEA ( 1 4 0 毫升 ♦ 0 . 4 毫 Μ 爾 » 於 20 毫升 DMF 溶液處理樹脂 1 小時〇使用方 -91 一本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'犛） 81.9.20,000 -----------------------裝------，玎------^ Β(»五、發明説明（90) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製案 1 之驟 10 — 1 4清洗樹脂 * 真空乾燥得到 0 . 95公克〇什呔 — 樹脂如實例 7 去 m 斷得到 2 4 5 毫克粗呔此胜肽如啻例中由凝 m m 纯化產牛 2 4 5 毫克半純產物此物質 m 製備忡 HPI.C 再純化 ♦ 如實例 3 -- 樣 » 但使用線性梯度 2 5 — 3 5 % ί 產生 3 3 .7 毫克白色 t 非晶形粉末〇此化 U 物經 Η P 1. C 均質化 » 得到丨F. 確之胺基酸分析〇 FAB - MS MH計算值 3 2 9 5 .9 * 實驗值 3 29 4 .5 實例 27 A c — Γ Ω -- F — A 1 a 1 i G I u8 » Ly s 1 2 t N 1 e 1 V » A 1 a 1 3 t A s P2 & • L θ U2 〇 1 Ly s2 7 . 2 a ] 一— VI P 環 ( Ly S2 1. -> A s P2 S ) Γ A c —- ( SRQ ID N 0 ； 45 ) NH 2 ] 之製備一苯甲基胺樹脂 ( 2 . 4 9公克 ♦ 2 . 0 毫莫爾 * 100 —_- 200 ASTH 締 » R i 〇 m e g a 1 接受方案 1 之固相合成如實例 2 〇成 .丄. 俩偶合循環 » 各單環具 Bo C — S ( 2 — C 1 — Z ) ί 3 , 3 2公克 t 8 . 0 毫 m 爾 ) * Bo C — L e U ( 1 . 85 公克 » 8 . 0 毫 Μ 爾 ) ♦ Bo c — As P ( 0F m ) ( 823 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C A s η ( 1 . 0 2公克 » 4 . 4 毫莫爾 ) 9 Bo C — L e U ( 1 . 0 5 |公克 1 8 . 0 毫 η 爾 ) 1 此樹脂經乾燥 f 去除 0 · 4 毫莫爾 0 完成 .1. > J、 m 偶合循環 » 各單環具 Bo C 一 Ty Γ ( 2 6 DCR ) ( 2 . 52 毫克 6 . 4 毫莫爾 ) Bo C - Ly S ( F m 0 C ) ( 1 . 8 7公克 * 6 . 4 毫莫爾 ) » Bo C — Ly S ( 2 C 1 -- Z ) ( 2 . 6 5公克 ♦ 6 . 4 毫 m 爾 ) 〇本樹 m m 後用方案 2 之步驟 1 11 處理樹脂 > 選擇性去 m 斷 • 並與 BOP ( I . 4 2公克 ♦ 3 . 2 毫莫爾 ) 於 20 毫升 1 % -92 - 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 W犛） 81.9.20,000 ------------------ ------裝------訂-------織 …"'''""•竹面 >/3"杯項冉填."本?!) 五、發明説明（91 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印絮 [HPRA / DMF溶液反應歷45分鐘，開氐（Kaiser)印三_ 分析為陰性 ο 樹 m 使用方案 2 步驟 13 — 16 清洗 » 真空乾燥得到 6 , 5 6 克 Bo c — 九呔樹脂 O 本樹脂 1 . 6 4公克 ( 0 . 4 毫莫爾 ) 部份於應用生物糸模型 4 30 A ( A p pl i e d B i 0 - s y s t e m m o d el 430Α ) 胜肽合成器上接受固相合成 1 如寅例 8 ο 進行十三次偶合循環 » 各循環具 Bo C — ή 1 a ( 378 毫克 ♦ 2 . 0 毫莫爾 ) ， Bo C — A 1 a ( 37 8 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo c — Ν 1 e ( 462 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) > Bo c — G 1 η ( 493 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — Ι,ν ( 2 Cl — Z ) ( 830 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C - Ar r ( To s ) ( 8 5 R 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) > Bo C — L e υ ( 499 牽克 * 2 · 0 毫莫爾 ) i Bo C 一 Ly S ( 2 C 1 --- ζ ) ( 830 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) t Bo C — Th Γ ( Bz ] ) ( 6 1 8 毫克 2 . 0 毫 M 爾 ) » Bo C — Ty Γ ( 2 ♦ 6 — DCB ) ( 880 豪克 1 2 . 0 毫 M 爾 ) * Bo c — As η ( 464 毫克 • 2 . 0 毫莫爾 ) 4 Bo c — As P ( 0c Hx ) ( 6 30 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo c — Th Γ ( Bz 1 ) ( 6 1 8 毫克 » 2 . 0 毫轉爾 ) 得到 Bo c — 二十 —· 狀樹脂 ° 本樹 m o . 64公克 ( 0 . 1 毫莫爾 ) 部份進行次偶合循環 * 各具 Bo c — P — F —- Ph e ( 283 毫克 ♦ 1 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — Va 1 ( 21 8 毫克 * 1 . 0 毫莫爾 ) * Bo C 一 A I a ( 1 89 毫克 » 1 . 0 毫 m 爾 ) Bo C — A s P ( 0c Hx ) ( 31 5 毫克 1 1 . 0 毫 Μ 爾 ) 1 Bo C — S e r < B z 1 ) ( 2 95 毫克， 1 . 0 毫莫爾 ) 及 Bo c — Hi s ( To s ) ( 81 8 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) ο 此樹一 9 3 — ""'""•••''开而之”^^麥^，办塡."本π、) 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Afi

HG 五、發明説明（92) _旨_行方案1之步驟1 — 8 ，用0.5毫升醋酸酐於20毫升 6 % D I P R A /二氯甲烷溶液處理樹脂6 0分鐘。使用方案1 之步驟1 0 - 1 4清洗樹脂，真空乾燥得到0 . 6 9公克。此呔一樹脂如實例7去阻斷得到2 2 4毫克粗呔。此胜肽如實例3中由凝膠過濾純化產生2]3毫克半純產物。此物皙用製備性Η P L C再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 2 7 — 3 7 %，產牛7 0 . 5毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HPI.C均曹化，得到正確之胺基酸分析· FAB - MS : ΜΗ計算堉 3 3 Γ) 5 . 8，實驗值 3 3 6 5 . 6 . 實例28

Ac -— 「1 - Nale，Glu8，Lys12 . Nle17 ，Alaie ，

Asp25 ，Leu2e ，Lys2Y.28，Ala20-31〕 - V I P 環（ I vs21 ^ Asp25 ) 「Ac— ( SEQ ID No ： 46)—關2 〕之製備啻例2 7之B o c -二十二肽樹脂1 . 2 8公克（0 . 2毫莫爾）部份進行如實例2 7之六次偶合循環，但第一循環中之B 〇 c -P — F — Phe 由 Βο(· — INal (315 毫克，1.0 毫莫爾）取代。此樹脂進行方案1之步驟1 - 8 ，用0 . 5毫升醋酸酐於2 0毫升R % [)丨P R A /二氯甲烷溶液處理樹脂6 0分鐘。使用方案1之步驟1 0 — 1 4清洗樹脂，真空乾燥得到1 . 4 1公此狀-樹脂如宵例7去阴斷得到4 2 0毫克粗肽。此胜肽如實例2中由凝膠過滤純化產生3 0 5毫克半純產物。此物 β用製備性HP LC再純化，如實例3 —樣*但使用線性梯度 -94- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ----------------- ------裝------訂------緩 ί清电閲.*.'''!背*之;1*麥項冉填寫本頁) Βί；經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（93) 2 5 一 3b% • 產生 66 .9 毫克白色 9 非晶形粉末 ο 此化合物經 HPl.Cft 質化 1 得到 ΪΗ 確之胺基酸分析〇 F AB — MS : MH計算俏 3 3 9 8 .8 t 宵驗值 3 3 9 8 .8 〇實例 29 A 〇 r G 1 u8 i P — NH P — Ph e1 Ο » Ly s 1 2 1 Ν 1 e 1 Ύ A 1 a 1 0 « As P2 5 * L e u2e » Ly s2 •7 · 2 8 J V IP 環 ( 1 y S2 1 — A s P2 B ) Γ ft c ( SEQ I D N 0 47 ) NH 2 ) 之製備實例 27 之 Bo c — 九狀樹脂 1 . 64公克 ( 0 . 4 毫莫爾 ) 部份於 m 用牛物系椹型 430 A ( A p Pi i e d B i 〇 - s y s t e m m 〇 d el 430 A ) 胜肽含成器 h 接受固相合成 » 如實例 8 ΰ 進行九次偶合循環 i 各循環具 Bo C 一 A 1 a ( 378 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) Bo C 一 A 1 a ( 37 8 毫克 $ 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — N 1 e ( 462 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) t Bo C 一 G 1 η ( 493 毫克 » 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C — iy S ( 2 —— C 1 — Ζ ) ( 830 毫克 * 2 · 0 毫莫爾 ) f Bo C Ar g ( To s ) ( 856 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — L e u ( 4 99 毫克 ♦ 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — L y S ( 2 ―― C 1 - Z ) ( 830 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Th Γ < B z 1 ) ( 6 1 8 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) * 得到 2 . 2 公克 Bo C — 十八樹脂 O 本樹脂 1 . 1 公克 ( 0 . 2 毫莫爾 ) 部份進行十次偶合循環 * m 循環具 Bo c — P NH ( 41 5 毫克 2 · 0 毫莫爾 ) ) Bo c — A s η ( 5 1 2 毫克 » 2 . 2 毫莫爾 ) » Bo c — A s P ( 0〇 Hx ) ( 620 毫克 « 2 . 0 毫莫爾 ) > Bo c Th r ( B ζ 1 ) ( 620 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) t Bo c — Ph e ( 532 毫克 * 2 · 0 -95 - (':ίΓ-:ΰ,"ΐΛ,>/ rv.u'iI?!冉增：:ti本π、) 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81,9.20,000 ΛΓ, ΛΓ, -Ala (378 毫克，2.0 毫 B30 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) , 毫 m 爾 ) 及 Bo c — N -- Me 一 ) 0 此樹 m 進行方案 1 之步於 20 毫升 R % D I PEA / 二氯用方案 1 之步驟 10 — 1 4清洗丨比狀 — 樹脂如實例 7 去阻如官例 .Ί 中由凝 P 過 m 純化曹闬脚備忡 HPLC 再純化如 2 2 — 32¾ * 產牛 60 .9 毫克白 HPLC 均 m ίκ * 得到 W. 確之胺堉 3 3 4 6 .9 » 宵驗價 3 3 4 6 .8 1: ‘ 實 A c. — ί G 1 u8 * P — M e ―― Ty r 1 « A s Ρ2 5 » L e U2 » l-y s2 1 . A s P2 5 ) r A c ( SRQ i D N 啻例 29之 Bo C. — 十八肽樹份進行如實例 29 之十偶合 P ----- ΝΗ (CBZ ) Ph e 由 Bo C 0 . 5 毫 m 爾 ) 取代 ο 此樹脂 0 . 5 毫升醋酸酐於 20 毫升 6 榭陏6 0分鎳。使用方案1之五、發明説明（94 )毫莫爾> ，Boc — Val (436毫克，2.0毫奠爾），Boc ------------------------^------.玎------^ (-'"問"-1^'(1,>/ :'!-负項冉塡寫本1!') 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製莫爾），Boc —Asp(OcHx)( Boc —Ser (590 毫克，2.0 A 1 a ( 1 . 6 4公克，4 . 0毫莫爾驟1 一 8 *用0.5毫升醋酸酐甲烷溶液處理樹脂6 0分鐘。使樹脂，真空乾燥得到1 . 4 5公克斷得到5 8 0毫克粗肽。此胜肽產生4 0 0毫克半純產物。此物宵例3 —樣，但使用線性梯度色，非晶形粉末。此化合物經基酸分析。F A B - M S : Μ Η計算例30 ° > I. y s 1 2 ' N 1 e 1 7 > ή 1 a 1 s 28 ] —VIP 環（L y s 2 1 〇 o : 4 8 > - N H 2 〕之製備脂1 . 1公克（0 . 2毫莫爾 > 部循環，但第一循環中之B 〇 c --Ο — M e — T y r ( 1 4 8 毫克，進行方案1之步驟1 一 8 ，用 % D I P E A /二氯甲烷溶液處理步驟10 — 14清洗樹脂，真空乾 96 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 塗） 81.9.20,000 五、發明説明（” ΛΓ, R(i 經濟部中央標準局員工消費合作社印f m 得到 1 . 4 5公克〇此肽 — 樹脂如實例 7 去咀斷得到 5 55 毫克粗肽 - 此胜呔如實例 3 中由凝膠過滤純化產生 460 毫克半純產物 c. 此物質用製備性 HPLC 再純化 » 如實例 3 -- 樣 » 但使用線性梯度 2 5 — 3 Γ) % I 產牛 15 2. 9 毫克白色 1 非晶形粉末〇此化合物 m Η P L C 均曹化得到 iF. 確之胺基酸分析〇 F AB 一 MS ; ΜΗ計算偵 3 3 6 1 .9 * 實驗值 3 3 6 1 .7 〇實例 3 1 A c …― r P F --- Ph ee ♦ G 1 U8 * 1 y s 1 2 * N 1 e 1 Ύ « A 1 a 1 0 » A r Ρ2 5 « 1. e u2 s * Ly s2 V . 2 8 ] V I Ρ 環 ( Ly s 2 1 A s ρ 2 ) Γ Ac < SRQ I D Η 0 : 49 ) ----- NH 2 1 之製備啻例 17 之 Bo C — 九肽樹脂 1 . 2 公克 ( 0 . 2 毫莫爾 ) 部份於用牛物系模 m 4 30 A ( A ρ pi i e d B i 〇 - s y s t e m m 〇 d el 430 A I ) 胜狀合成器 h 接受固相八 π 成 » 如實例 8 〇進行十 -二次偶合循環 » 各循環具 Bo C — A 1 a ( 378 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) * Bo C 一 A 1 a ( 378 毫克 « 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo c — N 1 e ( 4B2 毫克 « 2 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — G 1 η ( 493 毫克 2 . 0 毫 M 爾 ) 1 Bo Γ — Ly S ( 2 — C 1 -- Z ) ( 830 毫克 1 2 . 0 毫 M 爾 ) > Bo C — Ar g ( To s ) ( 856 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — L e U ( 499 毫克 t 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo c — i v r ( 2 -- C 1 —— Z ) ( 830 毫克 1 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — Th Γ ( R z 1 ) ( 61 8 毫克 • 2 . 0 毫 m 爾 ) > Bo C — Ty r ( 2 9 fi — DCB ) ( 880 毫克 » 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo c — A s η ( 4R4 毫克 > 2 . 0 毫莫爾 ) > Bo c — A s P ( 0c Hx ) ( 630 毫 · ^1裝 . 線 (^""••."rrfu>/ ::1"麥項冉塡."本") -97 - 衣紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局g工消費合作社印f Λ 6 ΗΓ. 五、發明説明（96 ) 克，2.0 毫莫爾），Boc Thr(Bzl) (618 毫克，2.0 毫莫爾），得到B 〇 c —二十二肽樹脂· 本樹腊0 . 6 5公克< 0 . 1毫莫爾 > 部份進行如實例2 7之六次偶合循環。此樹脂進行方案1之步驟1 一 8 ，用0 · 5毫升醋酸酐於20毫升6 % DIPEA /二氯甲烷溶液處理樹脂 6 0分鐘。使用方案1之步驟〗0 — 14清洗樹脂，真空乾煉得到0 . 8 5 6 公克_ 此肽-樹脂如實例7去阻斷得到5 5 0毫克粗肽。此胜呔如實例3中由凝膠過濾純化產生225毫克半純產物。此物質用製備性Η P L C再純化，如賁例3 —樣，但使用線性梯度 27 - 37%，產生80.9毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 Η P L C均質化，得到正確之胺基酸分析。F A Β — M S : M H計算值 3295.9，實驗值 3396.7。實例32 Ac — [ 1 ~ Η a 10 - L y s 1 2 ’ N 1 e 1 7 * A 1 a 1 e ’ Asp25 · L e u 2 e ，L y s2 7 · 2 8〕 VIP 環（Lys21 — Asp25 > 〔Ac — (SEQ ID No : 50) — 〕之製備實例3 1之B o c -二卄二呔樹脂0 . 6 5公克（0 . 1毫莫爾）部份進行如實例2 7之六次偶合循環，但第一循環中之B 〇 c —p — F-- Phe 由 Boc — 1. -— Nal (315 毫克，1.0 毫莫爾）取代此樹脂進行方案1之步驟1 - 8 ，用0 . 5毫升醋酸酐於2 0毫升6 % D ]: P E A /二氯甲烷溶液處理樹脂6 0分鐘使用方案1之步驟〗〇 — 1 4清洗樹脂，真空乾燥得到 0.801 公克： ------------------ ------^------，玎------線 ί1-"1""-"'''·^''""•""贺項再場巧本") -9 8 — 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ^05846 Λ 6 ΒΓ, 五、發明説明（97 ) (-^"-.'^^，-•"^私^再碣寫本^,' ) 此狀-樹_如實例7去阱斷得到2 5 0毫克粗肽。此胜肽加啻例：彳中由凝膠過嫌純化產牛1 8 8毫克半純產物。此物霄用製備性Η P L C再純化，如實例3 —樣*但使用線性梯度 2 7- 3 7%，產牛28.0毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HPLC均質化，得到ίΕ確之胺基酸分析。FAB — MS : ΜΗ計算倌 3 3 2 7 . 9，宵驗值 3 3 2 8 . 5 ' 實例33 A。「Ala2，GU8，l,ys12 ，Nle17 ，Ala19 ，Asp2e ， leu2e ，l.ys2.7·28，GIy20.30，Thr31 〕- VIP 環（ I,vs21 ^ Asp25 ) [Ac— (SEQ ID No : 51) -- NH2〕之製備二苯甲華胺酸酯（1 . 1公克，0 . 5奄莫爾，2 0 0 — 4 0 0 A S T Μ篩，B i 〇 m e g a ]接受方案1之固相合成，如實例2 | 完成十=俩偶合循環，如實例2 4，但第一循環中之Boc — AU 由 Boc -Thr (Bzl > (619 毫克，2.0 毫莫爾）取代，第二循環中之B 〇 c — A I a由B 〇 c — G 1 y ( 3 5 0毫克， 2.0毫莫爾）取代，第三循環中之Boc - Ala由8〇(；-G U ( 3 5 0毫克，2 . 0毫莫爾）取代，得到2 . 0 3公克B 〇 c —十Η呔樹脂。本樹脂1 . 2 2公克（0 . 3毫箅爾）部份於應用生物糸模型 430Α (Applied Bio-system mode丨 430Α )胜狀合成器上經濟部中央標準局員工消費合作社印製接令固相合成，如實例8 。進行如實例2 4之十六次偶合循環，彳日第+ —循環中之Boc — Asp(OcHx) *Boc — fi 1 » ( B 7 Π ( 6 7 5毫克，2 . 0毫莫爾 > 取代，得到1 · 9 5公克 -99 - 81.9.20,000 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐）經濟部中央標準局員工消费合作社印S衣 ΗΓ> 五、發明説明（98 ) Bor —二-f 九呔樹本榭脂0.975公克（0.〗5毫莫爾 > 部份進行兩個與Boc -Ala <378 毫克，2.0 毫莫爾）及 Boc - His(Tos)( 8 1 9毫克· 2 . 0毫莫爾）之偶合循環，得到1 . 〇 5公克。然後進行方案1之步驟1 一 8 ，用0.5毫升醋酸酐於20毫升 R % IH P E A /二氮甲烷溶液處理樹脂6 0分鐘。使用方案1 之步驟1 0 - 1 4清洗樹脂，真空乾燥得到0 . 8 9 7公克什狀-樹_如實例7去阻斷得到2 7 0毫克粗肽|此胜肽如宵例3中由凝膠過濾純化產生1 5 0毫克半純產物。此物質用製備件Η P丨,C再纯化，如宵例3 _ ·樣，但使用線性梯度 24 - 34% *產牛2 8 . 7毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HP1.C均質彳h，得到正確之胺基酸分析。> FAB — MS : ΜΗ計算堉 3 5 4 7 . 9，實驗俏 3 5 4 β . 9。實例34 hr'— 「Glu8* i, y s 1 2 > N 1 e 1 7 ，Ala10 ，Asp25 ，L e u 2 e -I.ys27·28* Gly20·30- Thr31] VIP 環（I, y s2 1 Θ Asp2B ) 「A c - (SEQ ID No : 5 2) - N H 2 ]之製備宵例3 3之B 〇 c -二卜九樹脂0 . 9 7 5公克（0 . 1 5毫莫爾）部份進行二次偶合循環*如實例3 3，但第u循環中之B 〇 c -AU由Boc — Ser(Bzl) (590毫克，2.0毫莫爾）取代，得到0 . 9 1 5公克' 1比呔一樹脂如苜例7去阻斷得到3 0 3毫克粗肽。此胜狀如宵例3中由凝P過濾純化產生1 8 0毫克半純產物。此物曹用製備忡Η P I. C再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 ----------------- ------裝------訂------缝 (^^^面之：;,*荠項#塡寫本W ) -100- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 五、發明説明（9 9 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 2 5 — 35% » 產生 42 .8 毫克白 HP Ι.Γ J*I 雪化 t 得到 iH 確之胺堉 3 56 3 .9 » 實驗堉 3 5 6 2 .6 〇實 A c — r A l a 2 » G I U8 > L y s1 2 1, e ϋ2 e Ly s2 V , 2 8 Ί - V I P ( SFQ I D N 0 52 ) — HH i? 宵例 20之 Bo C — 九呔樹脂於用牛物系椹 4 30 A ( A p 4 30 A ) 种肽合成器 L 接受固次偶八 ri 循環 * 各循環具 Bo C 潑 } * Bo r — A I a ( 37 8 毫 N I e ί 4 62 毫克 * 2 . 0 毫莫 1 2 . 0 牽 m 爾 ) 9 Bo Γ — l-y 1 2 . 0 毫 m 爾 ) t Bo c. - Ar 爾 ) * Bo c — L e u ( 499 毫 l，y s ( 2 - C ] Z ) ( 830 Th r ( Bz ] ) ( 6 1 8 毫克 t 2 » 6 DCB ) ( 880 毫克 ( 46 4 毫克 y 2 · 0 毫莫爾 ) ♦ 2 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C — Th 爾 ) ♦ Bo c — Ph e ( 5 3 1 毫 Vs I ( 435 毫克 » 2 . 0 毫莫 t 2 · 0 毫 m 爾 ) i Bo C. —— As 色，非晶形粉末。此化合物經基酸分析 O FAB MS ： MH計算例 3 5 » N 1 e1 7 * A 1 a 1 Q * As p2 & 1 環 ( Ly s2 1 — As P2 5 ) Γ Ac — ] 之製備 0 . 2 7公克 ( 0 . 1 毫莫爾 ) 部份 p 1 i e d B i O - s y s t e m m od e 1 相 △ ΠΙ 成 1 如實例 8 O 進行十九 — A 1 a ( 37 8 毫克， 2 . 0 毫莫克 * 2 · 0 毫莫爾 ) i Bo c — 爾 ) « Bo c — G 1 n ( 493 毫克 S ( 2 — Cl ——— Z ) ( 830 毫克 g ( To s ) ( 856 毫克 » 2 . 0 毫莫克 > 2 . 0 毫 m 爾 ) Bo c — 毫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) > Bo C — 2 . 0 毫 M 爾 ) t Bo c — Ty r ( t 2 . 0 毫莫爾 ) 9 Bo c — A s η » Bo c — G 1 u ( B z 1 ) ( 675 毫克 Γ ( fiz 1 ) ( 6 1 8 毫克 ♦ 2 . 0 毫莫克 * 2 . 0 毫莫爾 ) » Bo c — 爾 ) Bo c — A 1 a ( 378 毫克 P ( 0c Hx ) ( 630 毫克 t 2 . 0 毫 10 1- (^""--'ΐ'".,/ :;,"?麥項再填"本-?!、) 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 ί ) 81.9.20,000 經濟部中央標準局8工消費合作社印製 B(; 五、發明説明（1(^ «爾），Boc — Ser(Bzl) <590 毫克，2.0 毫莫爾）及 B 〇 r — Hi s ( T 〇 s > ( 8 1 8毫克，2 · 0毫莫爾），得到一二十八狀樹陏。本樹脂進行方案〗之步驟1 - 8 ，用0.5毫升醋酸酐於 20毫升fi%IHPRA /二氛甲烷溶液處理樹脂60分鐘。使用方案1之步驟1 0 — 14清洗樹脂 > 真空乾燥得到0 . 5 0 6公克此肽一樹脂如實例7去阻斷得到1 60毫克粗肽。此胜呔如啻例.3中由凝膠過濾純化產生100毫克半純產物。此物曹用製備件Η P丨,C再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 2 5 - 3 5 9^，產牛2 7 . 1毫克甶色•非晶形粉末。此化合物經 HPLC均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB _ MS : ΜΗ計算信 3 3 31 .9，啻驗堉 33 3 2 . 0。實例36 A r — Γ p -- N H Phe10 * L y s 1 2 · K 1 e 1 7 * Ala1® ’

Asp25 ， Ι』υ2β ， Lys27.28] - VfP 環（Lys21 —Asp25 )「Ar· ( SRQ [ 1) No : 54 > — ΝΗ2 ]之製備實例1 7之B 〇 c -九狀樹脂0 . 6公克（0 . 1毫莫爾）部份於應用牛物'系横型 4.30A (Applied Bio-system model 4 3 0 A)胜狀合成器h接受固相合成，如實例8。進行九次偶合循環，如實例2 3，得到0 . 7 2毫克B 〇 c —十八肽樹脂。仕樹_進行一次與Boc — p - NH ( CBZ > — Phe ( 166毫克，0 . 4毫草爾）之偶合，得到0 . 7 9毫克B 〇 c —十九樹脂：此樹陏於應用牛：物系模型430A (Applied Bio-system -102- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 W釐） 81.9.20,000 -----------------------^------,玎丨_丨，---^ ί-"^Λ-打初>/ ';,"贤項冉塡.^本7!) Λ 6 ΗΓ. 五、發明説明（101) m o d ρ 1 4 3 0 A )胜肽合成器h接受固相合成，如實例8。進行九欠偶合循環，如實例2 3，得到0 . 7 2毫克B 〇 c —十八肽榭陏。丨比樹脂於應闬牛物系模型4 3 0 A ( A p p 1 i e d R i o m t e m m o d e丨4 3 0 A ) W肽合成器上接受固相合成，如啻例8。進行九次偶合循瑁，個具B o c — A s η ( 4 6 4毫克，2 ' 0 毫》爾），B 〇 c - A s f> ( 0 (、Η X > ( 6 3 0 毫克，2 . 0 奉草酾），Boc-Thr ( B z 1 ) (618毫克，2.0毫莫爾 -'Π 而 ;£· f 塡寫 Τί )，Boo — P h (435毫克， 2 . 0毫草爾） (53 1毫克，2.0毫莫爾），Boc .0 毫莫爾），Boe—A]a (378 毫 B 〇 c - A s p ( 0 c Η X ) (630 毫克，2. 爾 > > Β ο (，一 S p r ( Β ζ I ) ( 5 9 0 毫克，2 . 0 毫莫爾）一 H i s ( T 〇 s > ( 8 1 8 毫克，2 . 0 毫莫爾），得到 0 . 9 1 -Va 1 克， 0毫莫及B 〇 c 公克。裝木樹陏進行方案1之步驟〗-8 ，用0 . 5毫升醋酸酐於 2 0辜升R % 1)丨P K A / 一.氯甲烷溶液處理樹脂6 0分鐘。使用方案1之步驟1 0 - 1 4清洗樹脂*真空乾燥得到0 . 8 5公克。訂經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ft呔-樹脂如實例7去阻斷得到3 5 0毫克粗肽此胜呔如啻例2中由凝P過瀘純化產牛：1 3 8毫克半純產物。此物霄用製備件HP1X再純化，如實例3 —樣*但使用線性梯度 2 5 - 35% *產生2 5 . 2毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 ΗΡΚΠ均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB — MS : MH計算堉 3 2 7 6 . 9，實驗值 3 2 7 6 . 2。實例3 7 Η 1 A l rn CCH3 — Ty「織 103 81.9.20,000 本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐）

BG 五、發明説明（10? -'-'t問-..--7而之：:,-莽項再塡寫本7'·、) A s P 2 5 ，V a 1 2 β ，T h r 2 8 ] — V I P 環（L y S 2 1 A s P 2 5 ! Ac - ( SRO ID No ： 5 5) N H ?〕之製備二呆甲蓽胺樹醋（0 .〗2 5公克，0 · 1毫莫爾，100 — 200 ASTM 篩 » B i 〇 m eg a 1 接受方案 1 之固相合成 y 如實例 7T. 成九俩偶合循環 » 各單環具 Bo C — Th Γ ( Β ζ 1 ) ( 309 毫克 » 1 . 0 毫 m 爾 ) 4 Ro C — L e U ( 267 毫克 * 1 . 0 毫莫爾 ) » Va I » Bo C — Va 1 ( 2 1 7 毫克 ♦ 1 . 0 毫莫爾 ) I Bo r — As Ρ ( 0F m ) ( 21 2 毫克 0 . 5 毫莫爾 ) i Bo c — As η ( 255 毫克 » 1 . 1 毫 η 爾 ) « Bo C — L e U ( 249 毫克 * 1 . 0 毫 Μ 爾 ) 及 Bo 0 一 m ---- 0CH.·, Ty r ( B ζ 1 ) ( 80 毫克 * 0 . 2 毫 m 爾 ) 1 Ro C — 1. y S ( F m 0 c ) ( 234 毫克 1 0 . 5 毫莫爾 ) > 及 Bo 0 — u S ( 2 C 1 - Ζ ) ( 41 5 毫克 ♦ 1 . 0 毫 m 爾 ) 0 本樹脂 m 1 · 後用方案 2 之步驟 1 —— 1 1 處理樹脂 » 選擇性去阳斷 » 並與 R0P ( 1 3 2 毫克 t 0 . 3 毫莫爾 ) 於 10 毫升 1 % η τ PR A / DMF 溶液反 gfc 懕歷 3 . 5 小時 » 開氏 ( Ka is e r ) 印 -二 m 分析為陰性〇此樹脂用方案 2 之步 m 13 一 16 清洗〇 m 行 + 九俩偶八 ΙΊ 循環 » 各循環具 Bo C — A 1 a ( 189 毫克 f 1 . 0 毫 m 爾 ) * Bo C — A 1 a ( 189 毫克 1 . 0 毫莫爾 ) i Ro C — N 1 e ( 2 3 1 毫克 * 1 . 0 毫莫爾 ) * Bo C — G 1 η ( 270 毫克 1 1 . 1 毫莫爾 ) * Bo c — I.y S ( 2 — Cl Z ) ( 41 5 毫克 1 . 0 毫莫爾 ) » Bo c Ar g ( Τ 〇 S ) ( 428 毫克 » 1 . 0 毫 Μ 爾 * 9 Bo C — L e U ( 26 7 毫克 9 1 . 0 毫莫爾 ) ， Ro c — I. γ S ( 2 Γ 1 Z ) ( 4 1 Γ) 毫克 » 1 0 毫莫爾 ) » 經濟部中央標準局員工消費合作社印f -104- 81.9.20,000 本紙張尺度適用中國國家標苹（CNS)甲4覘格（210 X 297公釐）

Hf；五、發明説明（10Ϊ 經濟部中央標準局員工消費合作社印f

Ro C — Th Γ ( Bz 1 ) ( 3 1 0 毫克 « 1 . 0 毫奠爾 ) » Bo C — Tv r ( 2 R [)CB ) ( 220 毫克 0 . 5 毫莫爾 ) ♦ Bo C — A s n ( 2 36 毫克 9 1 . 0 毫莫爾 ) « Bo C — As P ( 0c Hx ) ( 3 1 5 毫克 ♦ 1 . 0 毫莫爾 ) * Bo C Th r ( Β z 1 ) ( 3 1 0 毫克 » 1 . 0 牽 η 爾 } * Bo C — Ph e ( 265 毫克 > 1 . 0 毫莫爾 ) * Ro c — Va 1 ( 21 7 毫克 » 1 . 0 毫 m 爾 ) » Bo C — A 1 a ( 1 89 毫克 i 1 . 0 毫莫爾 ) ♦ Bo C — As P ( 0 c Hx ) ( 31 5 毫克 * 1 . 0 毫 m 爾 ) Bo C — Se Γ ( Β z 1 ) ( 2 95 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) * Bo c — Hi s ( To S ) ( 409 毫克 1 1 . 0 毫莫爾 ) ο 然後進行方案 1 之步驟 1 — 8 » 用 0 . 5 毫升醋酸酐於 10 毫并 B % D Ϊ PRA / 氯甲溶液處理樹 m 60分鐘 c· 使用方案 1 之步驟 10 — 14 清洗樹脂 » 真空乾燥 * 得到 0 . 81 4 公 ιί-h 狀 — 樹脂如啻例 7 去 m 斷得到 265 毫克粗肽〇此胜肽如啻例中由凝 m 4JH. m 純化產生 150 毫克半純產物 c 此物曹用製備性 HPKC 再纯化如寅例 8 一樣 * 但使用線性梯度 2 3 — 33% 1 產牛 8 . 1 毫克白色 t 非晶形粉末〇此化合物經 ΗΡΙ.Γ 均質化 * 得到 if 確之胺基酸分析〇 F AB — MS ΜΗ計算憤 3 207 .8 » 宵驗堉 3 3 0 6 .8 賁例 3 8 A r -- Γ l.y s 1 2 ♦ N 1 e 1 Ύ ♦ A 1 a 1 〇 » ΓΠ 一 F — L Ty r 2 2 » A s P2 ：5 * Va 1 2 ：C5 » Th P 2 β 3 — VI P 環 ( L y s2 ：1 — A s Ρ 2 5 ) r A c ( SEQ ί Π N 0 ： 5 6 ) — NH 2 —1 之製備二笨甲基胺樹脂（0 . 1 2 5公克，0 . 1毫莫爾，1 0 0 — -105- 本紙張又度適用中國國家標苹（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ----------------- --------裝------訂------ (^''""'"^•'"."''"ΐ^# 塡"本7|0 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（1 〇 4) 200 ASTM 篩 t B i 0 IB eg a 1 接受方案 1 之固相 △ η 成 ♦ 如實例 2 完成 ___. 十八個偶 △ n 循環 9 如宵例 3 7 但第七循環中之 Bo c 一 m -- n c η s Ty r ( Bz 1 ) 由 Bo C — m —— F —- DL — Tv r ( Rz 1 ) ( 78 毫克 » 0 . 2 毫莫爾 ) 取代 I 得到 0 · 754 公克 Ith 肽 — 樹 3旨如實例 7 去阻斷得到 254 毫克粗肽〇此胜肽如宵例 3 中由凝膠過滤純化產生 11 4 毫克半純產物〇此物曹用製備件 HPLC 再純化如實例 3 -一樣 * 但使用線性梯度 27 — 37¾ ，產生 1 5 .1 毫克白色 % 非晶形粉末〇此化合物經 HPI.C 均質化 t 得到正確之胺基酸分析 0 F AB — MS 二 MH 計蓴堉 3295 .7 ，實驗值 3 2 9 5 .8 實例 39 A c -- r l.y s 1 2 * N 1 e1 7 < A 1 a 1 » » rn — 0CH3 —- Ty r 2 2 > A s P2 & * L e u2 Θ * Ly s 2 .7 , 2 S 1 - V T P 環 ( L y s 2 1 — A s p 2 5 ) r A(> -- ( SRQ I D N 0 - 5 7 ) NH 2 ] 之製備一甲蓽胺樹 m ( 0 . 1 2 5 公克 0 . 1 毫莫爾 » 100 — 200 ASTM 篩 » B i 0 C h e in ] 接受方案 1 之固相合成 » 如實例 2 完成二 + 八侗偶合循環 » 如實例 37 » 但第一- 循環中之 Ro c — Ty r ( B z 1 ) 由 Bo (、 — Ly S ( 2 - C 1 — Z ) ( 415 毫克 1 1 . 0 毫尊爾 ) 取代 1 第 — 循環中之 Bo e — L e U 由 Bo C — l，y ( 2 一 C 1 —- Z ) ( 4 1 5 毫克 ♦ 1 . 0 毫莫爾 ) 取代 * 第一循環中之 Bo C — Va 1 由 B 〇 C — L e IJ ( 268 毫克 1 1 . 0 毫 M 爾 ) 取代 » 第十一循環中之 Bo C — A s ,P ( 0c Ηχ ) 由 Bo ，C 一 G 1 U ( 0 …一 B 7· I ) ( 3 37 毫克 * 1 . 0 毫莫爾 ) 取代 » 得一 106 一本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 -----------------------^------‘玎-------線 ί-ι^.ώ"'"之：ϊν-f 項 #塡寫本τ,:) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ΛΓ,

Hfi 五、發明説明（L〇5) 到0 . 9 0公克'

Ift呔一樹脂如實例7去眼斷得到2 7 0毫克粗肽。此胜呔如窖例3中由凝膠過濾純化產生1 5 5毫克半純產物。此物曹用備件Η P丨,C再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 2 5 - 3 5 %，產牛2 9 . 6毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 ΗΡΙ,Π均質化，得到正確之胺基酸分析。F ΑΒ - MS : ΜΗ計算堉 3 3 7 7 . 9，實驗悄 3 3 7 7 . 9。實例40

Ac「Glua, Lys12 > K 1 e17 ' Ala10 ，m — F--L — T y r 2 2 ，A s p 2 5 ，L e u 2 e ，L y s 2 7 . 2 8〕 - \Π P 環（L y s 2 1 ^ Asp25 ) 「Ac— (SEQ ID No : 5 8> — N H 2 〕之製備二笨甲蓽胺樹脂（0 . 1 2 5公克，0 . 1毫莫爾，1 0 〇 — 2 0 0 A S T Μ篩，B i 〇 c h e m Ί接受方案1之固相合成，如實例 2 :完成二+八個偶合循環，如實例39，但第七循環中之 R 〇 (· — m D C Η 3 - Tyr(Bzl)由 Boc — m - - p --- 〇 L - T γ r ( B z H ( 7 8毫克，0 . 2毫莫爾）取代，得到0 . 8 3公克。此呔一樹脂如實例7去阴斷得到2 4 0毫克粗肽。此胜狀如首例2中由凝P過滤純化產生1 0 0毫克半純產物此物朁用製備性Η P丨,C再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 2 5 — ,35 %，產生3 7 . 2毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HPI.C均質化，得到ιΕ確之胺基酸' 分析。FAB — MS : ΜΗ計算堉3 3 H 9，宵驗值3 3 β 5 . 8。實例41 -107- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 --------------------裝-------玎------ (^^^-.^:::曲 >/ ,:1"赉項再塡·"本頁) Λ 6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（1Q6) Ar fAla8* i.ys12 > N 1 e17 * Ala10 ，m —. F L — Tvr22 ，Asp25 ，Leu2S ，Lys27·28] -- V IP 環（L y s 21 Asp2& ) 「Ac - (SEQ ID No : 59) — NH2 〕之製備二笨甲蓽胺樹脂（〇 . 1 2 5公克，0 . 1毫莫爾，1 0 0 — 200 ASTM篩，Biochem 1接受方案1之固相合成，如實例 2 .完成二十八俩偶合循環，如實例3 9，但第五循環之 Boc - Asn由Boc — Ala (18 9毫克，1.0毫莫爾）取代，第七俩循環中之 Bo(、一m-- OCH3 --Tyr( Bzl)由 Boc — Tvr (2 - 6 - DCB ) (440 奄克，1.0 毫莫爾 >，第二 f- 一循環中之 Boc — G 1 u ( OBz I )由 Boc — /U a (189 毫克，1 . 〇毫草爾）取代，得到0 . 8 5公克。 1比肽-樹脂如實例7去眼斷得到2 5 5毫克粗肽。此胜狀如啻例3中由凝膠過_純化產牛1 1 2毫克半純產物此物質用恝備件Η P IX再纯化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 ? Γ> - 3 5 %，產生1 2 . 0毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 Η P L C均質化，得到ΐ確之胺基酸分析 F A Β — M S : Μ Η計算堉 3 2 4 Γ) . 8，啻驗值 3 2 4 6 . 7。實例42 Arr/Ua^’l'ys12 ’Ala1*5·1?·10 ，Asp2S ,Leu2(i ， 1 vsm ) — V ϊρ 環（！ ys21 — Asp25 ) "c — ( SEQ Η) N 0 : 6 0 ) - N H 2 ]之製備二笨甲基胺樹胞（0 . 1 2 5公克，0 . 1毫莫爾，1 0 0 — 2 0 0 A S T Μ篩，B i 〇 c h e m 1接受方案1之固相合成，如實例 2。完成二十八俩偶合循環，如實例41，但第五循環之一丨 0 8 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 -----------------------裝------.玎------f f^l·"""面之·;,"麥項冉塡寫木页) HG 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（107) Bo e — Ala 由 Bo C — As η ( 2 56 毫克 » 1 . 1 毫莫爾取代 1 第 Ι 一俩循環中之 Bo c — Ν 1 e 由 Bo C — A 1 a ( 189 毫克 « 1 , ο m m 爾 ) > 第 .卜三循環中之 Bo C — G 1 η 由 Bo C — A 1 a ( 1 89 m 克 t 1 . 0 奄莫爾 ) 取代 t 第二十一循環中之 Bo c — A 1 a 由 Bo C — G 1 U ( 0B z 1 ) ( 337 毫克 $ 1 . 0 毫莫爾 ) 取代 * 得到 0 . 8 0公克 ith 狀 — 樹脂如宵例 7 去阻 Mr 斷得到 254 毫克粗肽〇此胜肽如甯 m 中由凝 m 過 m 純化產生 11 5 毫克半純產物〇此物皙用製備件 Η P U:再純化 » 如實例 3 -- 樣 » 但使用線性梯度 20 — 30% 1 產生 3 2 • 1 毫克白色 ♦ 非晶形粉末〇此化合物經 Η P 1, C 均質化 * 得到正確之胺基酸分析〇 F AB — MS MH計算信 3 2 48 .7 » 宵驗值 3 2 4 8 .3 (：實例 4 3 A c Γ A 1 a8 * I.y s 1 2 * A 1 a 1 β * Η 1 e 1 Ύ ♦ A 1 a 1 〇 » A 1 a 2 Λ 1 A s ρ2 & t L e u2 1 I.y s2 2 8 --- V ί P 環 ( Ly S2 1 -> A s Ρ2 5 ) r A 〇 — ί SEQ T D N 0 ： 6 1 ) NH 2 ；之製備一笨甲苺胺樹脂 ( 0 . 1 2 5 公克 » 0 . 1 毫莫爾 100 — 200 ASTM 篩 * B i 0 C h e ιπ 3 接受方案 1 之固相合成 > 如實例 2 完成 /V 俩偶 △ η 循環如宵例 41 * 但第十循 Tial 環之 Bo c - G 1 η 由 B 〇 — A 1 a ( 1 89 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) 取代 m 到 0 . 9 3公克此狀 — 樹 m 如宵例 7 去阻斷得到 250 毫克粗肽 Cl 此胜肽如甯例中由凝 m 過濾純化產牛: 100 毫克半純產物 0 此物皙用製備性 HPLC 再純化如實例 3 樣 * 但使用線性梯度 -109- 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 -----------------------裝------.玎------46 f-''L:y,<-r曲>/:''^^-)?!典塡"本7'0 五、發明説明（108)

Af； W; 2 7 - 3 7 %，產生2 3 . 6毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HPI.C均質化，得到正確之胺基酸分析。FAB — MS : MH計算堉：Π 8 9 . 8，實驗堉 3189.9。實 A 1 a 1 8 · VIP NH^

Ac「Ala8，I, ys12 ， !,euze · l.vs2'7-2Rl (SRQ I D No ： R2) 二笨甲蓽胺樹脂（（）.〗2 5 200 A S T Η P · Biorhem 1 接 2 I完成二十八俩偶合循環之 Bon — Nle 由 Boc — Ala 例44 ι7.,〇 -Ala24 -Asp2B · 環(1. y s2 1 Asp25 ) [Ac—. 〕之製備公克，0 . 1毫莫爾，1 0 0 _ 受方案1之固相合成，如實例 •如實例43，但第十三循環中 Μ 8 9毫克，1 . 0毫莫爾）取 r-n Μ f 塡本 Τί I 裝代得到0 . 7 R 2公克 I比呔-樹脂如宵例7去阻斷得到2 40毫克粗肽。此胜肽產生1 5 0毫克半純產物。此物宵例.3 ·樣*但使用線性梯度色，非晶形粉末。此化合物經如實例3中由凝膠過滤純化曹用製備性HPLC再純化，如 22 - 32¾，產牛5 5 . 3毫克白 HP LC均質化，得到正確之胺憤：Π 4 7 . 7，實驗堉 31 4 8 . 0。實 hr.「Ala8 - Lys12 ，A 1 a 1 e l.pu2e ，l.y s2'7 · 28 Ί VIP (SRQ ID No ： 63) KHZ 二苯甲蓽胺樹脂（0 . 1 2 5 ? 0 0 ASTM蹄 > B i o c h e m 1 接訂始經濟部中央標準局Β工消費合作社印製

基酸分析。F A B MS ： MH計算例45 N 1 e

Ala1

Asp: 環（Lys21 ->Asp25 > [Ac ]之製備公克，0 . 1毫莫爾，1 0 0 — 受方案1之固相合成 > 如實例 1 10 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么、釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（109) 2。完成二十八俩偶合循環，如實例4 2，但第十二循環中之Roc - Ala由Boc - NU (231毫克> 1.0毫莫爾）取代《得到0 . 7 7 Γ>公克。此狀-樹脂如實例7去阻斷得到2 03毫克粗肽此胜肽如宵例.3中由凝膠過_純化產生丨0 0毫克半純產物。此物曹用製備件HPLC再純化，如實例3 ·樣，但使用線性梯度 2 7 — 3 7 % >產牛4 0 . 0毫克甶色|非晶形粉末。此化合物經 HPI.C均質仆，得到ίΚ確之胺基酸分析。FAB — MS : ΜΗ計算堉 3 ：? 9 0 . 8，啻驗偵 3 2 9 0 . 5。實例46 Αγ Γ GIu8 - Lvs1 2 * Ala1®·17·10 -Ala24 * Asp26 * 1. pU2e ，Us27 . 28Ί - VTP 環（Lys21 -^Asp25 ) 〔Ac- (SRO ID No ： 64) N H 2 ]之製備二笨甲苺胺樹_ ( () . 1 2 5公克，0 . 1毫莫爾，1 0 0 — 200 ASTM篩，Biochem 1接受方案1之固相合成，如實例 2。完成二+八侗偶合循環，如實例43，但第二十一循環中之 B 〇 c - A I a 由 B 〇 c — G I u ( 0 B z 1 ) ( 3 3 7 毫克，1 · 0 毫 «爾）取代，得到0 . 8 3 7公克此狀-樹脂如宵例7去阻斷得到〗7 8毫克粗呔。此胜狀如啻例3中由凝P過濾純化產生1 2 6毫克半純產物「此物筲用製備件H P L C再純化，如實例3 ·樣•但使用線性梯度 2 0 - 3 0 % ，牽牛2 4 . 9毫克R色，非晶形粉末。此化合物經 Η P 1「均質化，得到if確之胺基酸分析。P A B - M S : Μ Η計算堉 2 2 0 Γ) . 7，宵驗堉 3 2 0 5 . 2。 ώ. -菸'^冉增^本") .裝. *τ -111- 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ΗΓ. 五、發明説明（110 經濟部中央標準局員工消費合作社印製實例47 A c -- ί G 1 u8 « Ly s 1 2 1 H 1 e 1 7 t A 1 a 1 9 * A s pz 5 * Va 1 2 β * Th r2 8 * G 1 y2 〇 , 3 0 1 Th r 3 1 1 — VI P 環 ( Ly s2 1 -> As P2 5 ) Γ A c ( SRQ ID N 〇 6 5 ) ----- NH 2 ) 之製備 —* 苯甲基胺樹脂 ( 0 . 125 公克 1 0 . 1 毫莫爾 9 100 — 200 ASTH 篩 y B i 0 C he m ! 接受方案 1 之固相合成 1 如實例 2 1 進行：：：：次偶合循環 » 個與 Bo c — Th Γ ( Be 1 ) ( 31 0 毫克 1 1 , 0 毫 m 爾 ϊ t Bo c — G 1 y ( 175 毫克 > 1 . 0 毫莫爾 ) » Bo C — G 1 V ( 1 7 5 毫克 » 1 . 0 毫轉爾 ) ο 兀成 ~ 十八俩偶合循環 * 如普例 3 7 » 但第七循環中之 Bo C — m — η ο η ν -- Tv Γ ( Rz 1 ) 由 Ro c — Ty Γ ( 2 ， 6 — DCB ) ( 440 毫克贅 1 . 0 毫 m 爾 ) 取代 » 第 . 十 --* 循環中之 Bo C — A s p ( Πχ Hx > 由 Bo C — G 1 u ( OB z 1 ) ( 3 37 毫克 » 1 . 0 毫莫爾 ) 取代 » 得到 0 . 89 5 公克 ο 此呔 — 樹 m 如實例 7 去阻斷得到 440 毫克粗肽〇此胜呔如實例中由凝 m 過 m 純化產生 120 毫克半純產物此物 m 用製備件 HPLC 再純化，如實例 3 -一樣 * 但使用線性梯度 2 5 — 35% 牽牛 27.7 毫克 ft 色非晶形粉末〇此化合物經 HPLC 均質 fh j 得到 iF 確之胺基酸分析〇 FAB — MS : MH計算堉 3 5 0 6 .9 實驗值 3 2 0 5 .8 ：Ί 實例 48 A c — r Ό F --- Ph ee n G 1 u 8 * l.y s1 2 » N 1 e 1 7 t As P2 B » Vr 1 2 〇 * 下h r 2 S G 1 y2 O t 3 0 * Th r 3 i 1 Ί — VIP 環 ( L y S2 ：1 — A s P2 ί5 ) Γ A c -—— ( SEQ I D K 0 ： 66 | ) NH 2 ] 之製備 -112- 本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297么'釐） 81.9.20,000 --------------------------裝-------玎------ (^'"^-疔而.，/ :”-箏項冉塡：^-本") 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ΛΓ> Β6 五、發明説明（ill·) 二呆甲箪胺樹脂（Ο · 1 2 5公克，Ο . 1毫莫爾，1〇〇 — ? 0 0 A S T Μ篩，B i 〇 r h e m 1接受方案1之固相合成*如實例 2 完成二. .俩偶it循環，如宵例4 7，但第十三循環之 — Ala由Boc — Vaj (217毫克，〗·0毫莫爾}取代，第十六循環中之 Boc — Phe 由 Boc - p — F —_ P h e ( 1 4 2毫克，0 . 5毫莫爾}取代，得到〇 . 7 5 4公克。此呔-樹脂如官例7去阻斷得到2 8 0毫克粗肽。此胜肽如啻例.3中由凝_過滤純化產生1 5 2毫克半純產物•此物宵用_備忡Η P I. C再純化，如實例3 ·樣，但使用線性梯度 2 7 — 3 8 % *產牛5 3 . 4毫克白色，非晶形粉末。此化合物經 HPI Cft筲化，得到（Κ確之胺基酸分析。FAB - MS : ΜΗ計算堉3 5 H 0，窖驗堉3 Γ) 5 2 . 2 實例49

Ap... 「Ala2，fllu8，l,ys12 ，Nle17 ，Asp25 ，Leu2e ’ I. π 2 7 · 2 8，G 1 y 2 θ 3 °，T h r 3 1 ] -- \Π P 環（L y s 2 1 — Akp25 ) 「Ac—- (SEQ TD No :67) — NH2 〕之製備二苯甲皋胺樹脂（0 . 1 2 5公克，0 . 1毫莫爾，]0 0 _ 200 ASTM篩，Biochem 〕接受方案1之固相合成，如實例 2 完成三十一個偶合循環，如實例47，但第四循環中之 B 〇 c — Thr(Bzl)由 Boc — Lys (2 - C 1 — Z ) (414 毫克，1.0毫莫爾）取代，第五循環中之Boc — Leu由Boc - I, vs ( 2 - Γ I ...... 7. ) ( 41 4毫克，1 . 0毫莫爾）取代，第六循環中之Bor· — Val由Boc — Leu (249毫克，1.0毫 «爾）取代，第十三循環之Boc -/Ua由Boc — Val ( -113- 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 --------------------------裝------，玎------46 (^'ι"ϋΛ,>/::τΐ漭項再塡"本Hr) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明（113 217毫克，1 .0毫 Ser(Bzl)Fi3 Boc — 得到0 . 8 3 8公克。此肽-樹脂如實如實例3中由凝膠質用製備性Η P L C再 2 3 - 3 3 %，產牛 4 8 Η P L C均質化•得到值3 5 7 5 . 1，實驗值 Ac— [Glus, Lys1 Lys27·28， Gly2e· A s p 2 B ) ： Ac ( 二笨甲基胺樹脂 200 ASTM篩· Bioc 2 。完成三十一個之 B 〇 e — A 1 a 由 B 〇 )取代，得到0 . 9 1 此肽-樹脂如實如實例3中由凝膠質用製備性丨IP1.C再 2 5 - 3 5 96，產生 2 8 Η P L C均質化，得到值3 5 9 1 . 1，實驗值莫爾 ) 取代第十 A 1 a ( 189 毫克 % 1 . 例 7 去阻斷得到 370 過濾純化產生 196 毫純化 » 如實例 3 ..^ 樣 .4 毫克白色 1 非晶形正確之胺基酸分析 3 5 7 4 .0 〇賁例 5 0 2 < Ν 1 e 1 7 » As P2 5 3 0 » Th r3 1 ) -… VI P SEQ ID Ν 〇 6 8 ) -- ( 0 . 125 克 * 0 . 1 h e m ] 接受方案 1 之偶么 α 循環 ♦ 如實例 47 C — S Θ r ( Bz ]) ( 295 3 克 .；例 7 去阻斷得到 378 過滤純化產牛. 24 0 毫純化 « 如實例 3 樣 .8 毫克白色非晶形正確之胺基酸分析 r, 3590.3 循環中之Boc — 0毫莫爾）取代，毫克粗呔。此胜肽克半純產物。此物，但使用線性梯度粉末。此化合物經 FAB —MS: ΜΗ計算，1, e u 2 β ，環（L y s 2 1 N H 2〕之製備毫莫爾，1 00 — 固相合成，如實例，但第三十循環中毫克* ]. 0毫莫爾毫克粗肽。此胜狀克半純產物。此物，但使用線性梯度粉末。此化合物經 FAB -MS: ΜΗ計算 ------------------------裝------ίτ------½ f-""二J1--r而Λ/"·"^^# 塡寫本頁) -114- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Λ6 Η(; 五、發明説明（113) 實例5 1 A r riys12 * Nle17 · Ala10 * Asp2B ' Leu28 1 vf - 28，G 1 y2t)-3厂丨—v iP 環（Lys21 — Asp2S )〔 A r ( S R Q Ϊ D N 〇 : 9 ) N H 2 〕之製備二苯甲基胺樹脂（0 . 1 2 5公克，0 . 1毫莫爾，1 〇〇 — 2 0 0 A S T Μ篩，B i 〇 c h e m Ί接受方案1之固相合成，如實例 2 完成=十-俩偶合循環，如實例47，但第一循環中之 Roc — Thr(Bzl)由 Bo(. — Ala (189 毫克，1.0 毫莫爾）取代，第二循環中之R » c — G丨y由B 〇 c — A丨a ( 1 8 9毫克，1 . 0毫草爾 > 取代，第三循環中之B 〇 c — G 1 y *Boc_ A 1 a Μ 8 9毫克，1 . 0毫莫爾）取代，第四循環中之B o c —T h r ( B 7. 1 > 由 B o c — L y s (2 Cl Z ) ( 4 1 4 毫克’ 1 , 0牽草爾 > 取代•第五循環中之B (> c — L e u由B o c — !. vs ( 2 - Γ 1 -- 7. ) ( 41 4毫克，1 . 0毫莫爾）取代，第六循環中之B o c — V a 1由B o c — I, e u ( 2 4 9毫克，1 · 0毫草爾 > 取代，第二十四循環中之B o c — G 1 u ( 0 B z 1 >由B o c A s p ( 0 c H x I ( 3〗5毫克，1 . 0毫莫爾）取代*得到 0 , 8 4 4公克> I比狀一樹脂如實例7去m斷得到3 6 0毫克粗肽。此胜昧如窖例3中由凝膠過滤純化產生11 5毫克半純產物。此物質用製備件Η P丨,C再純化，如實例3 —樣，但使用線性梯度 2 4 - 3 4 % •產牛：3 4 . 7毫克甶色1非晶形粉末。此化合物經 Η Ρ Κ Γ均朁化，得到ιΕ確之胺基酸分析。F A Β — M S : Μ Η計算信：? 5 4 7 . 1，宵驗偵 3 5 4 β . 0 -115- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4覘格（2丨0 X 297公釐） 81.9.20,000 ------------------------------裝-------，可------始 (""'ν,-.;;;:^而>/:''6箅項冉塡寫本") Λ 6 H(i 五、發明説明（L14) 實例52 V f P同類物之氣管舒鬆性利用天@鼠氣胥模式研究V丨P同類物之氣管舒鬆性〔瓦斯門（Wasserman ) ， M.A.等人，於Vasoactive intestinal Peptide, S. I.Said, ed., Raven Press, N.Y. 1982 · 177 — 1 8 4頁]'所有姐織採自重4 0 0 — R00分克，用尿烷府i醉之雄性白天竺鼠。取出氣管，分成四俩瑁状片段（3毫米長）。各環由3 0標準計量不綉鋼圈懸散於1 0毫井枣_姐織浴中，並姅由4 - 0絲線附著格拉斯（Grew )力冒換傳導器ί型FT03C ，格拉斯儀器公司 -Quincy, ΜΑ)，作等積的伸張記錄。平滑肌浸浴於具有下列組合物的姅改良之克伯氐（K r e b s >溶液中：N a c 1， 1 ?0 πιΜ ； Kc 1 · 4.7 mH ； CaCU * 2.5 mM； HgS04.7H20> 1? mM; NaHd，25mM; K2HP〇4 單鹼，1.2 mM;及右旋糖，1 0 ni M 娲織浴保持在3 7 _ Γ ，恆定通9 5 % 0 2及5 % C 0 2氣 n存8埔路及4通路亥為特一沛卡得（H e w 1 e 11 Packard )(型分別為7702B及7754A )記錄器〔亥為特 —沛卡得，P a r a m u s 1 N J ]卜.記錄在休息張力].5公克 T詈氣管環，其姅測定處於初步宵驗之最適當或接近最適當處_泎接後的6 0分鐘安定期期間需要頻繁的重整張力。 W 1 5分鏡間隔漂洗組嫌「由V丨P或V丨P同類物之浸浴濃度連績增加微升*依據凡洛聖（V a n R 〇 s S u m >之方法對各姐織取得積蓄性濃度反應曲線「Arrh. I n t. . P h a r m a c o d y η . , 143，299 — 3 30 ( -11 6 - 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） ::&麥項冉sr-i-iJ 本n) 裝— --訂--- 經濟部中央標準局8工消費合作社印製 81.9.20,000 五、發明説明P5) 1 9 R 3) 1 . 俩單獨娲織僅得到一個蓄積性劑量反應曲線為使姐織間變異性減罕最小，Μ所得的最大反應對於各灣电反應啻驗終丫時所加的V ί Ρ Μ 0 — β Μ = 1 0 0 % )之百分卜h弄示舒張反應。收集三個姐織中所得之反應，由線性減退測定R [ 5。堉。表Τ中總結之結果顯示V I Ρ同類物與天生的VI Ρ比較之舒張件 M?:L:^-. ν·-:ί'"之：;,<?,項冉塌冩本fi·) 經濟部中央標準局S工消費合作社印製 -117- 81.9.20,000 本紙張义度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297 X釐）五、發明説明U6 >

Afi ΒΓ, 表I VIP同類物於天竺鼠氣管平濟肌之舒鬆活性 EC5〇經濟部中央標準局員工消費合作杜印" iba¥S ,_________(nM) VIP[(Seq ID NO:1)-NH2] 10 Ac-[Lys12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Asp8— [Ac-(SEQ ID NO:20)-NH2] 14 Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Glu8-^Lys12) [Ac-(SEQ ID NO:21)-NH2] 34 Ac- [Asn8, Asp9, Lysl2,Nlel7, Val2 6, <phr28 ] - VIP cyclo (Asp9-4Lys12) [Ac-(SEQ ID NO:22)-NH2] 17 Ac-[Orn12,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Asp8-^Orn12) [Ac-(SEQ ID NO:23)-NH2] 40 Ac-[Lys8,Aspl2,Niel?,Val?6,Thr28]-viP cyclo (Lys8-^Asp12) [Ac-(SEQ ID NO:24)-NH2] 38 Ac-[Glu8,〇rnl2,Nlel7,Val26,Thr28]_viP cyclo (Glu8-^Orn12) [Ac-(SEQ ID NO:25)-NH2] 16 Ac-[Lys12,Glu16,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys12-^Glu16) [Ac-(SEQ ID NO:26)-NH2] 37 Ac-[Lysl2,Nlel7,Asp2 4,val2 6f Thr28]-viP cyclo (Lys20->Asp24) [Ac-(SEQ ID NO:27)-NH2] 5.3 --1111¾.·.··片面之;I-f 項冉塡."本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 118 81.9.20,000

五、發明説明（llJ A 6 ΒΓ»

Ac-[Lys12,Nle17,Asp25,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys21-»Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:28)-NH2] Ac-[Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:29)~NH2] Ac-[p-F-Phe6,2-Nal10,Lys12,Nle17, Asp25, Val26, Thr28, Qiy29, 30, jyjet31]-VIP cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO :30)-NH2] 3. 0.70

Ac-[Glu8,Orn12,Nle17,Asp25,Val26,Thr28】-VIP cyclo (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:31)-NH2] 2.2 Ac-[p-F-Phe6,Lys12,Nle17,Alal^,A5P25,val25,Thr28, Giy29, 30,cyS(Acm)31]_VIP cyclo (Lys^l—>Asp25 > [Ac-(SEQ ID NO:32)-NH2] 0.44

Ac-[Ala2,Lysl2,Nie17,Aia19,Asp25,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys21^Asp25) [Ac- (SEQ ID NO : 33)-NH2 ] Ac- [N-Me-Ala1, Lys12,Nle17; Ala19, Asp25, Val26, Thr^S ] -VIP cyclo (Lys^^-—>Asp^^) [Ac-(SEQ ID NO:34)-NH2] 0.71 ---------；--------- ------裝------.玎------線 ->,,^閱冶背面之，;1^_^冉塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Ac-[2-Nal10,Leu12,Nle17,Ala19,Asp25,Val26, Thr28]-VIP cyclo (Lys21-»Asp25) [Ac-(SEQ ID NO ·· 3 5)-NH2 ] Ac-[0-CH3~Tyr10,Leu12,Nle17,Ala19, Asp25, Val26, Thr^S]-VIP cyclo (Lys^1—>Asp^^) [Ac-(SEQ ID NO:36)-NH2] 4.2 0.84 本紙張又度適用中國國家標準（CN'S)甲4规格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 119 五、發明説明（11# A6

Ac- [p-F-Phet p-MHs-PhelO, Leul2, Nlel'Alal9, Asp2 5, Val_2 6, *phr2 8 ] -yip cyci〇 (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：37)-NH2]. .4

Ac- [ I<ysl2, , Alai 9, Asp2 5, Leu2 6, Lys27 / 28 ] — viP cyclo (Lys21->Asp25) [Ac- (SEQ ID NO :38) -NH2] 0.13

Ac- [M-Me-Alal 'LyslS^lel'AlalD, Asp25 , Leu2 6 丨 Lys27,28 ] _viP cyclo (Lys^l->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:39)-NH2] 0.95

Ac- [ Glu8' ；Lysl2'Nlel7,Alal9' Asp2 5 'Leu26' Lys27 / 28] _ VIP cyclo (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:40)-NH2] 0.45

Ac-[〇-Me-Tyrl〇,Lysl2,wiel7,Alal^ Asp2 5,val2 6, Thr28] -vip cyclo (Lys^-^—>Asp^^) [Ac-(SEQ ID NO:41)-NH2] Ac- [GluS'LyslS/NleU/Alal^ Asp2 5' Leu%' Lys27 / 28' Ala2 9-31 ] _v工p Gyclo (Lys^l—>Asp^5) [Ac-(SEQ ID NO :42)-NH2] 0.61 -----------------------裝------.玎------^ (清tr4"·背面>/"念菸項冉塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Ac-[Ala2,Glu8,Lysl2,Nlel7,Alal9,Asp25,Leu26, LyS27,28' Ala? 9-31 ] 一v工p cyclo (Lys〗1—>Asp25) [Ac- (SEQ 工D NO:43>-NH2] Ac-[N-Me-Alal,G1u8,Lys 丄2,Nle17, Ala19,Asp2 5,Leu2 ^ LyS27,28 ] 一yip cyclo (Lys^>Asp^^) [Ac-(SEQ ID NO:44)-NH2]

Ac-[p —F-Phe 6,Glu8,Lysl2,Nlel7r 9,Asp2 5,Leu2 6,LyS27,28 】—yip CyCi〇 <Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：45)-NH2】本紙張又度適用中國國家標準（CNS) T 4規格（210 X 297公釐） 0.55 0.36 0.47 81.9.20,000 120 五、發明説明（119)

Λ6 BO 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Ac-[1-Nal6,Glua,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26, Lys27,28 ] _viP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:46)-NH2] . 0.26 Ac- [Glu8/P-NH2_Phel〇, Lys^Nlel7,八1丑19, Asp25, Leu2 6, Lys2 7,28】—viP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:47)-NH2] 0.32 Ac-[Glu8/O-CH3-Tyr10/Lys12,Nle17, Ala19,Asp25, Leu26, Lys。？，28]一vip cyclo (Lys^1—>Asp^^) [Ac-(SEQ ID NO:48)-NH2] 0.41 Ac-[p-F-Phe6,Lysl2'Niel?,Alal9'Asp2 5'Val2 6'Thr28]- VIP cyclo (Lys21—>Asp25> [Ac-(SEQ ID NO :4 9)-NH2] Ac-[1-Nal6,Lysl2'Nlel7'Alal9'Asp25'va!2 6'Thr28]- VIP cyclo (Lys^1—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO :50) —NH2] Ac-[Ala2,Glu8/Lys12/Nle17/Ala19/Asp25/Leu26/ Lys2 7,28,Gly2 9,30/Thr31】 _VIP Cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：51>-MH2】 Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26,Lys27/28, Gly29,30,Thr31]_VIP cyclo Lys21—>Asp2 5) [Ac-(SEQ ID NO:52)-NH2] Ac-[Ala2,Glu^,Lys12,Nle17,Ala1^,Asp25,Leu26, Lys2 7,28]_viP cyclo (Lys21—^Asp25) [Ac-(SEQ 工D N〇：53)-NH2] Ac-[p-NHg-PhelO,Lysl2,Nlel' Aia19, Asp25,val2 6, Thr28】 - VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:54)-NHo] 0.39 2.9 0.92 0.35 0.78 0.96 -----------------：------裝------IT------ιέ . « (清^閱-背面之-汔阜^冉塡寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 121 Λ 6 ΗΓ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製五、發明説明 (12()

Ac_[Lysl2,/Alal9,m-〇cH3_Tyr22, Asp2 5,val2 6,

Thr28]-viP cyclo (Lys^-^-^Asp^S) [Ac-(SEQ ID N〇：55)-NH2】. 0.31

Ac- [Lys 12, Niel?, Alal^ m-F-L-Tyr22 , Asp2 5, vaJ_2 6,

Thr28]-vip cyclo (Lys^l—>Asp^5) [Ac-(SEQ ID NO:56)-NH2] 0.52

Ac-[Glu8,Lysl2,Nlel7,Alal9, m-〇CH3-Tyr22,Asp25,

Leu%, Lys2 7,28】-viP cyclo (Lys^l—>Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：57)-NH2】 0.29

Ac- [GluS/Lys^-2/Nle^^,Ala^^,m-F-L-Tyr22 / Asp^S^

Leu2 6,LyS27,28 】一vip cyclo (Lys^ >Asp^ ^) [Ac-(SEQ ID NO:58)-NH2] 0.31

Ac- [ Ala8,Lysl2,Nlel7,Alal9, Ala24,Asp2 5, Leu〗6,

Lys27,28]_viP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO :59)-NH2] 1.1

Ac-[Glu8,Lysl2'Alal6,17,19'Asp25'Leu〗6'Lys27'28] — VIP cyclo (Lys21->Asp25) [Ac- (SEQ ID NO:60)-NH2] 0.26

Ac-[Ala8,Lysl2,Alal6,Alal9,Ala24,Asp25,

Leu2 6,Lys27,28】_viP cyclo <Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:61)-NH2] 2.4

Ac_Ala8, Lysl2 , Alal^, 17 , 1 9, Ala。，Asp2 5, Leu〗6,

Lys^^/28 j-vip cyclo (Lys^l—>Asp^^) [Ac-(SEQ ID N〇：62)-NH2] 0.1 本紙張又度適用中國國家標準（CN\S)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 ----------------- ------裝------訂------線 -- f清屯間-背面之；;1念麥項冉塡寫本頁) 122 五、發明説明 Λ6 ΗΓ) 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製

Ac- [Glua'LyslS'Alal^Nlel?, Alal9, Asp25, Leu2 6, Lys2 7'28]-vip cyclo (Lys^>Asp25) [Ac-SEQ ID NO:63)-NH2] 0.9 Ac-[Glu8,Lys12,Ala16,17'19,Ala24, Asp25,Leu26, Lys2 7,28] _v工p cyclo《Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:64)-NH2] 0.22 Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19Asp25,Val26,Thr28, G]_y2 9, 30, Thr31] - VIP cyclo (Lys^^-^Asp^S) [Ac-(SEQ ID NO:65)-NH2] 0.88 Ac-[p-F-Phe6,Glu8,Lysl2,Niel?,Asp2 5,val2 6,Thr2 8' Gly29,30,Thr31]-VIP cyclo Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:66)-NH2] 0.57 Ac- [ Ala2 'Glu'Lysl^Nle17, AspM' Leu2 6' Lys27'28 ' Gly29, 30,Thr31]一VIP cyclo Lys21->Asp25 ) [Ac-(SEQ 工D NO:67)-NH2] 0.19 Ac-[Glu8,Lys1?,Nle17,Asp25,Leu26,Lys27'28, Giy29, 30, Thr31 ] - VIP cyclo Lys^·^—>Asp^^ ) Ac-(SEQ ID NO:68)-NH2] 0.43 Ac-[Lys12,Nle17, Ala1Asp2Leu2^/Lys^7/28/^ia2 9-31】-vip cyclo (Lys—>Asp25) Ac-(SEQ ID NO:69)-NH2] 0.42 -----------------------裝------ir------^ < I (¾先間-:-tr面之、;1&f項冉塡寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 123 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Α6

BG 五、發明説明（122) 實例2 3 VTP间類物之支氣管擴張活性由氣管滴灌投_途徑於天竺鼠評估VIP及VIP同類物之 •活91内支氣管擴張活性。本技術使用雄性天竺鼠〔哈得利 (Hart ly)株 ’ Charles River 〕，重 400 - 600 公克。動物用尿g (2公克/公斤）經腹腔内麻醉，並插聚乙烯管入頸哌內供靜臟内投藥Λ t7] W # % $管’計最蒸餾水或溶於蒸餾水中之試驗化合物溶液人氣管，隆凸的距離約四分之三處，用滴量管 ° 2瀵度調整成输送恆定體積100毫升。動物躺平1 j箱Μ幫肋藥物_送至肺。〗分鐘後，靜脈投用琥珀蓽I® #氣U . 2毫克/公斤 > 自發地停止呼吸，動物用哈 ίΓ特680型（HarVard Mode丨680 >小動物呼吸器換氣，設定為40次呼吸/分鐘及4.0 cm3反銜體積。動物用組織麻f #大收縮劑最（5 〇毫克/公斤，丨.v )挑戰，自史塔汗 (Statham ) ®力傳導器（p 32 AA )記錄氣管壓力（公分水）。氣胃變至少就3個控制組及3個經藥物處理動物平均’計算百分比抑制作用。滴灌途徑所投用的化合物之相對效力由投用各棰劑量試驗化合物並計算中間有效劑 # (^^值）测定。ΕΙ)β〇由引起抑制作用10%至90%的至 Φ 3侗劑量產生的對數劑量—反應曲線測定。各化合物之退縮線之枏關係數必定大於0 . 9 5 „ 為_定各棟化合物抑制作用的時間歷程，化合物之投藥 -124- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 -----------------------裝——----.玎------^ ί清"^-•"而之注-荠項冉塡寫本頁)

Λ 6 BG 五、發明説明（L23 ) 及組嫌的桃戰間之時間不同。活性的時間過程於當抑制作用降罕40%時之時間計算。總结於表Π中之结果顯示活體外VIP同類物之支氣管擴張活性，與天生的VI P比較。 -----------------；-------^------，玎----HM f清1^.-背面之"-夢項冉塡.寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -125- 81.9.20,000 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） ^05846 Λβ

五、發明説明（124) 表 U VIP同類物在天竺鼠之支氣管擴張性ED5〇化合物______ VIP[(Seq ID N0:1)**NH2] 7.3 Ac-[Lys12/Glu16,Nle17,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys^-^aiu16) [AC-(SEQ ID NO:26)-NH2] 39 Ac-[Lys12, Nle^7,Asp24,Val2 6,Thr28]-viP cyclo (Lys20_>Asp24) [Ac-(SEQ ID NO:27)-NH2) 2.3 Ac-[Lys12,Nle17,Asp25,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys21-4Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:28)-NH2] 1.2 Ac-[Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Val26,Thr28]-VIP cyclo (Lys21-^Asp25) [AC-(SEQ ID NO:29)-NH2] 0.34 i清tw-、背而之注念卞項冉塡寫本页) -—裝‘ .訂. 經濟部中央標準局員工消费合作社印f

Ac-[p-F-Phe6,2-Nal10,Lys12,Nle17,Asp25,Val26, Thr28, Gly29'30, jyjet31】-VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:30)-NH2] 0.90 Ac- [GluS/Orn3·2, Niel7, Asp^ val2 6,Thr28] _vtp cyclo (Lys2i—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:31)-NH2] 0.19 Ac- [p-F-Phe6, Lysl2, Nlel' Alal9, Asp25, Val2 6, Gly29'30, cys(Acm)31]-VIP cyclo (Lys^1—) [AC-(SEQ ID NO:32)-NH2】 0.19 Λ 本纸張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 126 S05S46 Λ6 ΗΓ» 五、發明説明（ 125" 經濟部中央標準局R工消費合作社印製

Ac-[Ala2,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Val2 6,Thr28]-VIP cyclo (Lys2l->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:33)-NH2] 〇· Ac-[N-Me-Alal/Lys12,Niel?, Alai9,ASp2 5,val2 6, Thr^8] -VIP cyclo (Lys^^—>Asp25) [Ac-(SEQ 工D NO:34)-NH2] Ac- [Lysl2, Nle”，Alai 9, Asp2 5 f Leu2 6, hyS2 7, 28 ] - v工p cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac- (SEQ ID NO :38) -NH2] Ac-[N-Me-Alai,Lysl2,, Alai 9,Asp25 , Leu2 6, Lys27,28 j -viP cyclo (Lys^l—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:39)-NH2] Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26,Lys27/28]-VIP cyclo (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:40)-NH2] Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25, Leu26,Lys27'28, Ala。9-31 】—vip cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：42)-NH2】 0.072 Ac-[Ala2/Glu8/Lys12,Nle17^Ala1Asp25, Leu26, Lys27/ 28'Aia2 9-31] _v工p cycl〇 (Lysh-^AspM) [Ac-(SEQ ID NO:43)-NH2] 0·14 Ac-[N-Me-Ala1,Glu8/Lys12/Nle17,Ala19,Asp25/Leu26/ Lys2 7,28 】工p cyclo (Lys。1—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:44)-NH2l 0.097 Ac-[p-F-Phe^,Glu8,Lys12,Nle17,Ala19, Asp2 5, Leu2 6, Lys27/ 28] -vip cyclo (Lys21-»Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：45)-NH2】 0.026 .0 0.09 0.06 0.022 -----------------------------訂^ (請也MA背面之:1.-¾卞項再塡寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 81.9.20,000 -127 - 305846 A6 H6 五、發明説明w 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製

Ac-[l-Nal6,Glu8,Lys12,Nle17, Ala19,Asp25,Leu26, LyS27,28] _VIP cydo (Lys21->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:46)-MH2] 0.036 Ac-[Glu8,p-NH2-Phe10,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25, Leu26,Lys27^ 28]-VIP cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:47)-NH2] 0.075 Ac-[Glu8,0-CH3-Tyr10,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25, Leu2Lys2"7,28] _v!p cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:48)-NH2] 0.094 Ac-[p-F-Phe6,Lys12,Nle17, Ala19,Asp25,Val26,Thr28]- VIP cyclo (Lys21-^Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:49)-NH2] 0.26 Ac- [Ala2,Glu3,Lys^2/Niel"7,Ala1^/Asp25,Leu2 6, LyS27,28,ciy29, 30,Thr31]-VIP cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:51)-NH2] 0.1 Ac-[Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26,Lys27，28, Gly29, 30, Thr31】-vip cyclo Lys2:L->Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:52)-NH2] 〇 · 1 Ac-[Ala2,Glu8,Lys12,Nle17,Ala19,Asp25,Leu26, Lys”，28] _▽工p cyclo (Lys21—>Asp25) [Ac-(SEQ ID NO:53>-NH2] 0.14 Ac-[p-NHz-PhelO,Lysl2,Nlel' Alal9, Asp25, val2 6, Thr^S]-VIP cyclo (Lys^^—^Asp^S) [Ac-(SEQ ID NO:54)-NH2] 0.35 -----------------------裝------.玎------^ (清先聞‘-νί背面之;.t*i項再塡寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐）_ 128 _ 81.9.20,000 ΒΓ) 五、發明説明（12 ^ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

Ac-CLya12^!®17, Ala19,m-OCH3-Tyr22/Asp2S, Val2S, Thr28]-vi? cycle (Lys之>Asp25) [Ac- (SEQ ID N〇:55)-NH2] 0.1-5 Ac- [Lys12, Nle17, Ala19, in-F-L-Tyr22, Asp25, Val2 6, Thr^ ^]-VI? cyclo (Lys^l—>A3p^S) [Ac-(SEQ ID NO:56}-NH2】 7.2 Ac-【Glu8rLyal2,Nlel7, Alal9,m-〇CH3-Tyr：22., Asp25, Leu26,1^27,28】_vip cyclo <Ly321_^Sp25〉 [Ac-(SEQ ID NO :57)-NH2] 0.019 Ac-[Glu8,Lys12, Nle17,Ala1^,m-F-L-Tyr22,Asp25, Leu·^ Lys^7/ 28 ] -vi? cyclo >Asp2 5) [Ac-(SEQ ID NO:53)-NH2] 〇,〇3 AC-[Ala8,Ly312,Nla17,Ala19/Alai4/Asp25,Leu2S, LyS27,28j _yjp CyCx〇 (Lys^l—>Asp^5) [Ac-(SEQ ID NO:59>-NH2] 0.17 Ac- [Glu®,Ly312, Ala1^/17,19,Asp^5/Leu2 6iLy327,23^ _ VIP cyclo (Ly321->A3p25) [Ac- (SEQ ID NO: 60) -N«2 3 0.17 Ac-[Ala8/Lysl2,Alal6/Nle17/Alal9,Ala24,Asp25, Leu〗6, Lys27,28 ] _vip cyclo (Lys^^·—)Ά3ρ^^) [Ac-(SEQ ID NO:61)-NH2] 0.045 Ac-Ala®, Lysl2,Alal6，17,19,Aia24,ASp25,Leu25, LyS27,28 j _vjp CyCT.0 (Lys^1'-»Asp2S) [Ac- (SEQ ID NO:62)-NH2] 0.24 -·請先閱"背面之:t-^J-fi-冉塥寫本頁) M3 t ,-°

T 紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公犛） t ir· l ?' π.-

Λ6 BG 五、發明説明（ΐ28)

Ac - [Glu8' Lys!2, Ala1、17, 19, Ala”，Asp2 5, Leu2 6, Lys2 7,28]_vjp CyCj_0 (LyS2l_^^Sp25) [Ac-(SEQ ID NO:64)-NH2] Ag-[G1u8, Lysl2/Nle17/Alal*9Asp25/val26/Thr28, Gly2 9/ 30, Thr31 】一VIP cyclo (Lys。1—>Asp25> [Ac-(SEQ ID NO;65)-NH2] Ac-[p-F-Phe^, Glut Lysl2, Niel?,Asp25,Val2 6,Thr28， Gj_y2 9, 30, Thr31 J - VIP cycl。Lys21—>Asp25 > [Ac- (SEQ ID ΝΟ:66)-·2] Gly29/30,Thr31]-VlP cycl。LysH—>Asp25) [Ac-(SEQ ID N〇：67)-NH2] Ac_[Glu8,Lysl2/Nlel7,Asp25/Leu26,jjys27/28/ Gly2 9,30,Thr31]-VTP cyclo Lys^l—>Asp25) Ac-(SEQ ID NO:68)-NH2] Ac-[Lysl2,Nlel7/Alal9'Asp25,Leu2 6, Lys27'28,Ala2 9- •31]- viP cyclo (Lys^Asp25) Ac-(SEQ ID NO:69)-NH2] 0.13 0.84 0.12 0.07 7 0.04 0.04 ------------------------裝------#----——梭. - ! (諸先聞-·.···背面之;±*.事項再堵寫本頁) 闽家^準（CNS)甲 4 規格（2ί0 x 297 〉 81 .9.：!υ.000 -130 年月^ .ΛΤ~ 第si ίο7"5號專利申請案 84· 11. 1 〇補充中文補充説明書(Μ年11月) A Β C Ε F α Η 1 J K t Seq β 實例# Ro痛 Ajcp Thr Ser G)u GtY Ala Val 〇Y% 2 3 20 2 23-9000 3.97 2. Μ 2.02 1.17 - 2,14 2.82 • 4 21 3 23-9977 3.13 2. as UW 2.09 - 2.06 3.14 • 5 22 4 24-0166 3.ββ 2.β7 1.57 1.0ί • 1.98 3.01 _ β 23 5 2Λ-Ο70β 3·ω 2.Τ2 1.β0 1.08 - 2.10 2.99 • 7 24 6 24-1751 3.81 2.73 U9 1.02 - 2.05 3.04 • β 25 7 24-25Β0 3.00 2.72 1.5β 2.02 - 2.01 3.09 • 9 2fl a 2Λ-5387 2. Μ 1.β« 1.03 - 2.05 3.03 • 1 0 27 9 24-6291 3.91 2.78 t.73 Ο.ββ - 2.13 3.0β 1 1 28 1 0 24-6583 5.05 3.02 0.84 1.03 - 3.04 • 12 29 11 24-8472 (81 2.87 0.83 1.03 - 2.89 1.98 • 13 30 12 24-3478 4.81 2.90 α.βΛ 1.<Μ 1.34 2.98 1.ββ • 1 A 3 1 13 Γ24-8207 3.β3 2.89 0.87 1.99 - 1.90 2.81 籍 1 5 32 1 4 24-a47S A.7S 2.7» 1 0.73 0.99 α.»3 2.87 1.89 0.68 1 β 33 IS 24-fltOS 4.β3 2.93 • 1.02 • a.oe 1.95 • 17 34 1 β 24-910« 4.1S 2.70 0.95 1.04 - 3.08 2.02 • 1 β 35 17 24<9680 2.89 0.87 1.03 - 2.96 1.M t 9 36 18 24-3651 4.7β 2.92 0.90 1.07 • 3.01 2.02 • 2α 37 1 9 24-9679 4.96 2.80 ο.ββ 1.03 3.05 1.92 • 2 1 3β 20 24-9682 4.5β 1.β« 0.90 1.04 m 3.<K 0.98 22 39 21 24-βββ3 4.77 1.85 Ο-Μ 1.03 • 3.M Q.Q9 • 23 40 22 25-0350 3.94 1.89 0.87 2.02 - 2.96 0·9β • 24 41 23 25-0349 5.1-4 2.a5 0.93 1J1 - 3.22 2.04 25 Λ2 I 24 25-0858 3.Q6 1.β9 0.8« 1.S9 - β.33 1.00 - 26 43 25 2S-0622 4.01 1.83 - 2.04 - 7.12 1.01 - 27 Αλ 2β 25-004β 3.96 1.90 0.78 2.QS - 3.03 1.00 - 28 45 27 25-1395 3.92 !.ββ 0.β5 2.10 - 2.97 0.96 - 29 46 2β 25-1394 3.91 1.87 0.87 2.Π - 2,99 0.99 脅 30 47 29 25-139Τ 4.04 1.98 0.89 2.22 - 3.14 1.03 31 4β 30 25-1392 4.05 1.9β 0.89 2-ia 3.12 1.02 - 32 49 31 25-139S 4.84 2.Β2 0.8β 1.07 - 3.03 2.00 • 33 5α 32 25-1 55S 4.67 2.89 σ.β3 1.0« - 2.93 t.91 - 34 51 33 25-lSO<3 3. 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Μ 1.^β 1.03 - 2.05 3.03 1 0 27 9 24-6291 3.91 Ζ.78 t.73 α.0β - 2.13 3·0β 1 1 28 10 24-β583 5.05 3·α2 0.84 1.03 - 1.09 3.04 1 2 29 1 1 2Λ-8472 (81 2.S7 0.83 1.03 - 2.β9 1.Μ 1 3 30 12 24-847S 4.81 2.90 α.^Λ 1.<Η 1.34 2.9β 1.3β 1 A 3 1 1 3 24-8207 3.83 2.89 0.87 1-99 - 1.90 2.81 15 32 Μ 2Λ-3475 (7β 2.79 0.73 0.99 α.Μ 2,87 1.89 0- 1 β 33 、5 24-8105 4.63 2.93 - 1.02 - 3.98 1.95 1 7 3-4 1 5 24-9106 4.75 2.70 0.95 1.04 - 3.08 2.02 1 β 35 17 24-9680 4-.83 2.8U 0.87 1.03 - 2.96 1.Μ 1 » 36 18 24-0&81 4.7β 2.32 0.90 1.07 - 3.01 2.02 20 37 19 I 24-9679 4.95 2.80 0.83 1.03 - 3.05 1.82 2 1 3a 20 24-8682 4.5β 1.ββ O.flO 1.04 - 3.<Μ 0.98 22 39 21 24-βββ3 4.77 1.85 O.iW 1.03 - 3.04 α.〇9 23 4Q 22 25-0350 3.04 1.89 0.β7 2.02 - 2.96 0·3β 24 41 23 25-03Η9 5-14 2.S5 0.93 1.11 - 3.22 2.04 25 42 24 250858 3.96 1.Β9 Ο.ββ 1.99 - β.3^ 1.00 26 43 25 25-0622 4.01 1,93 - 2·(Μ - 7.12 1.01 27 A4 2β 25-004β 3.95 1.90 0.7β 2.05 - 3.03 1.00 2S 45 27 25-1395 3.92 ιββ 0.85 2.10 - 2.97 0·Μ 29 46 2β 25-1394 3-91 1.07 0.Θ7 2." - 2.99 0.99 30 47 29 25-139Τ 4.04 1.98 0.89 2-22 - 3.14 1.03 3 1 43 30 25-1392 4.05 1·9β 0.89 2.19 - 3.12 1.C2 32 49 31 25-1308 4.84 2. ff2 Ο,θβ 1.07 - 3.03 2,00 33 50 32 25-1 555 4.67 2·β9 0.SJ 1.0β - 2,93 1-91 34 51 33 25-1500 3·Μ 2.81 - 2.10 2.at 3.83 0.9β 35 52 34 | 25-1553 3.72 2.72 0.81 2.05 1.9« 2.92. 0.90 3β 53 35 25-155^ 3.73 <93 • 2.15 - 3.89 0.97 37 5Λ 36 25-2101 4.87 3.00 0,01 1.11 - 3.01 2.03 3 θ 55 37 25-1863 A.S2 2.69 0.84 i.〇g 3.11 1.97 39 5β 38 25-1 867 4.71 2-ββ 0.8β 1.12 - 3.12 2.15 40 57 39 25-1 955 3.76 1.91 a,a« 2.αβ - 2.92 0.07 — A 1 5β 40 25-1β6β 3.Θ9 1.93 Ο.Μ 2.14 - 3.13 1-07 42 59 Λ 1 25-1Q57 2_Μ 2.00 0.99 t.Ofl - 4.87 1.02 43 βα 42 25-195S 3.a5 2.00 0.93 1.07 - 5.00 1.02 4 4 6 ) Λ3 25-2101 4.87 3.00 α·9ΐ 1.11 - 3.01 2.03 4 5 62 44 25-20Q4 2.85 1.37 0.90 - - 7.0β 1.<Μ 4 6 03 4S 25-2293 3JM 1.^2 0.94 - - 3.91 0.Α8 47 θ-i 4 θ 25-21 嗲 3 ΐ.^Α «9Θ 0.91 - - <5.02 1.07 — A 9 Θ5 4 7 25-Ζ234 3.β2 3.7β 0.»2 2.1 1 C99 2.96 1.98 4 9 Ββ 4 a 25-2194 3.7¾ 3.99 0.S4 2.12 2.10 2.01 2.Q0 3 0 67 4 9 2S-21 3.9G 3.05 - 2-1β 2-12 5.13 2.t5 — 3 1 ββ 50 25-2 t 46 3 82 2.91 a.eg 2.14 2.02 2.0β 2.〇β 5 2. 64 5 \ 2 5-21)2 4 71 1.Q1 0.Ά0 ί .09 - 5 9β 1 .04

VC ID ANALYSIS DATA AAA Uatm

K u Ν ο Ρ Q R 3 了 U 1 cy» Leo Mel Νίβ Tyr Ptw His Ly翥 Arg Oliver Hot· - 13.09 一 0.95 1.99 0.93 1.12 3.79 1.04 - 3.15 o.g7 1.94 0·9β α.9β (02 1 .01 - 3.13 • !.0€ 1.9S 0.^5 0.92 (06 1.02 - ^.oa 亀 1.06 1.90 α.97 0.90 3.03 1.04 0.95 i〇m) - 3.06 • ι.αβ 2.02 1.00 α.βι 3.as καο - 3.08 一 1.00 2.01 0.88 0.97 2.80 0.89 0u37 (Om) - 3.M 0.99 1·8β 1.02 1.06 3 0.90 * 3^2 1.00 2.\Ω 0.91 t.oo 3.75 α.οο 3.23 - α,92 t.97 1.05 0.05 3.7S 0.97 3.13 - 1.02 2.07 Q.94 0.99 4.W ι·σβ - 3.1Q 0.7β 1.01 1.01 - 1.02 (08 K0S α.ίΜ (pF-Ph«) - 3.13 • \.04 1.89 0.89 1.19 3.M 1.05 1.14 (Om) 0.68 3.08 - 1.01 2·0β - 1,20 4.ia 1川 0,81 (pP-Phe) - 3.12 1.03 2.0« 0.99 Κ07 (10 1.05 3.09 - 1.03 2.02 0-37 - 3.33 1.01 - 4.09 - 1.03 1.04 \.00 1.07 2.SS 1.07 - 4.11 - 1.02 2.00 1.00 1.12 2.S3 1.02 4.W • 0.07 1.00 - 2.00^ 2.91 1.11 0.7¾ (pF-Pba) * ♦ pMH2-Phe 3.17 - 0.9β 2.04 0,99 1.01 β.17 1.01 - s.ts - 0.98 2.02 0.Α7 - β·οβ 0.95 - 3.11 - 0.96 1.99 0.^4 1.10 5.92 0.89 - 3.21 - 1.00 2.02 1.01 ι.ιβ 3.M 0.97 - 3.12 - 1.10 1.79 0.98 1.17 a· 〇3 0.7S • 3.07 - 1.01 1.87 0,Μ 1.08 5.85 O.flS l » ^ 3.11 • 1,01 2.00 1.01 - 5.80 1.01 - 3.05 - 1.0S 2.01 - <.13 5.81 1.00 0.78 (pF-Ptx»i - 3.02 - ι.οβ 2.04 - 1.04 5.75 1.07 ' 3.11 - t.oa 1.05 1-αι 1.9β· 5.29 1.0β -+ ρΝΗ24>Ι»« * 3.11 - 1.0β 1.90 1.00 1.09 5.33 1.04 1 _ 3.05 - 1.05. 2.01 - 1.03 3.ββ 1.02 0-9S (pf-Pt»«) * 3.αβ - 1.041 1.97 - ΐ.αβ 4.20 1.08 - 3.05 - Ϊ.07 ί.93 0.97 1.05 5.Q3 1.01 3.01 • 1.03 2.00 α,Μ 1.07 β.22 t.oe -. _ 3.07 - 1.02 2.03 0.99 Q.99 101 1.12 - 3.08 1.07 1.01 0.99 1·β9· 3.75 0.93 * ♦ p«H2-PS« - 3.45 -' U04 1.12 0.97 1.10 3_β9 0.94 ---- 3.Π - 1.09 2.06· ί.〇1 1.03 3β1 0.Q8 + mF-Tyi ~ _ 3.87- - 1.03 1.07 0.95 t.oe 5.45 (,02 * ♦ »nOCH3-Tyr 3.14 - t.08 2.04^ 1.01 1.03 5.<4 1.02 • ♦ ir^-TyT —1 — 3,06 - 1.05 t.09 0.Μ 1.04 5 44 1.00 3.0Θ - - 2.01 0.9« 1.Q2 5.4α 0.35 _· 3.08 - 1.07 I.Ot 0.99 t.89- 3.7S 0.93 -* pNH2-Pb· * 3.17 - 2.06 1.03 1.0S 5.71 Γ〇.3β ' 2.97 - 1.05 1.90 0.9β 1.0β 5.90 f.t3 - 3.21 ~ - 2.0Θ 1.CK t J 1 5.31 1-11 - 3.01 - 1.06 1.97 0·ΰβ Κ04 3.9β 1·0β _ 3.13 - ι.οβ 2-0β - ι.αι 3β7 Τ.03 0.97 (pF-Phel — 3-23 导 1.13 2.1 1 1 (Μ 1.11 5.87 1.12 • 3.1 1 1.08 2.05 101 1.05 5, Μ 1.04 3.〇g ' ^ 1 .Οβ 1 2.0t I 1 01 1.0Θ 5 β1 1.09 I

Claims

中文申琦專利範匾修正本（86年3月） A 8 B8 C8 D8 申請專利範圍r· 年月曰 86. ；]. 1 7 修正補充

L 一種具下式之環吠肽： X-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Tnr-Re-Asn-Tyr-Thr-Rir Lei j-Arg-Lys-GIn-RTT-Ala-Val-Lys-Lys -Tyr- CX-(SEQ ID N0:2)-Y] Leu-Asp-Ser-R26*Leu-R28*Y 其中Re是Asp ， Glu或Lys R 是 A r g · L y s Orn 或 Asp ; 是 Met 或 Nle ; Rze 是 lie 或 Val ; R2S是Asn或Thr ; X是氫或可水解之胺基保護基團； Y是羥基或可水解之羧基保護基團；或其S藥上可接受鹽 9 a. 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 4. 根據申請專利範園第1項之瑁狀肽，其中R17是Mle ， R2e 是 Va 丨，及 R2e 是 Thr 。根據申謫專利範圍第2項之環狀肽，其中該肽是Ac—〔 Lys12 ，Nle17 ，Val2e ，Thr2β ] - V IP 環（Aspβ — Lys12 ) ( Ac— ( SEQ ID Ho ： 20) - HH2 } 〇根撺申謫專利範圍第2項之環狀肽，其中該肽是Ac—〔 Glu8， Lys12 ， Nle17 * Val2e ， Thr2e 〕一VIP 瑁（ Glu8^ Lys12 ) 〔 Ac- ( SEQ ID No : 21) — MH2、]。 δ- 根撺申請專利範園第2項之環狀肽，其中該肽是Ac—〔 0「n12 ， Nle17 ， Val2e ， Thr2e ] —VIP 環（Aspe〇本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） m n ' It i— tmt 1 i ^^^^1 —^ϋ \ ^^^^1 1 ^ 一 V (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 6 4 s 5 o 3 8 8 88 ABCD 經濟部中央樣準局員工消費合作社印裝六、申請專利範圍 Orn12 )C Ac — (SEQ ID Ho : 23)— nh2 i O 根據申請專利範圍第2 項之環狀肽*其中該肽是Ac — ( L y s a， Asp12 * Hie17 > Va l2 O ，Thr2 8 j — VIP 環 ( L y s 8 Asp12 ) C Ac — (SEQ ID No ： 24) — HH2 ] 0 7. 根據申請專利範圍第2項之環吠肽，其中該呔是Ac—〔 G lua * Orn12 > K 1 e17 » Va 1 2β , Thr28 J — VIP m ( G 1 ua ^ 0 r n 12 ) [Ac- (SEQ ID No ： 25) -HH2 j 〇 S. —種下式之環状呔： II . X-His-Ser-Asp-Aia-Va(-Phe-Thr-Re-Asj>Tyr-Thr-Lys- L^-Arg-Lys-Gln-R^AIa-Vai-Lys-Lys-Tyr- [X-(SEQ ID NO:4)-Y] Leu-Asp-Ser-R26-Leu-R28-Y ' 其中是 Asp 或 Asn : R17 是 Met 或 Nle ; R2e 是 I]e 或Val ;R2S是Asn或Thr ;X是氫或可水解之胺基保護基剛；Y是羥基或可水解之羧基保護基團；或其K蕖上可接受鹽。 ^ a 根撺由請專利範圍第8項之環狀狀，其中該肽是Ac — 〔 As η 8 > Asp® · Lys 1 2 ，N 1 e 1 7 ，Va 1 20 ，Thr28 〕— 本紙伕尺度適用中國國家梯準（CNS ) A4現格（210 X 297公釐） m vm ml ^^^^1 nn *^—^1 ^^^^1 i i nn ^^^^1 ^^^^1 ^^^^1 —· ?^’vd (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) A8 δδ C8 D8 六、申請專利範圍 VIP 環（Asps— Lys12 ) 〔Ac— (SEQ ID No : 22)— NH2 J 〇 id —種下式之環吠肽： 4 III. X-His-Ser-Asp-Ais-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Lys- [ ' Leu-Arg-Lys-Glu-Ri7-A!a-Val-Lys-Lys-Tyr- Leu-Asp-Ser-A26-Leu-A2B-Y [X-(SEQ ID N0:6)-Y] 其中 R17 是 Met 或 Nle ; R2e 是 lie 或 Val ; R2e 是 Asn或Thr ; X是氫或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧基保護基團；或其醫藥上可接受鹽。 11 根據申請專利範圍第10項之環吠肽，其中該肽是Ac—〔 Lys12 ，Gluie ，Nlew ，Val2e ，Thr23 ] - VIP 環 i Lys12 ^Glu10 ) [Ac- (SEQ ID No ： 26) -HH2 j 〇 12 —種下式之環狀狀：經濟部t央標準局負工消費合作社印製 Ϊ - - 1----1 _ - I 11--1 - I— I J x^--- . - - - i —I— - - I— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) IV. X-His-Ser-Asp-AIs-V sl-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-R 12- I Leu-Arg-Lys-Gln-RvrAIa-Vai-Lys-Lys-Tyr- I Leu-Asp-Ser-R26-Leu-R2s-Y [X二（SEQ ID NO:3)_Y】本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4说格（210X 297公釐） 305546 !8s D8六、申請專利範圍經濟部4-央標準局負工消費合作社印策其中;R17 是 Met 或 Kle ;R2e 是 lie 或 Val ;R2e是Asn或Th「；X是氫或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧基保護基團；或其«蕖上可接受鹽。 13- 根捸由請專利範圍第12項之環狀呔，其中該肽是Ac—〔 Lys12 ， Nle17 ， Asp24 ， Val2e , Thr2e ] —VIP 環 (Lys20 —Asp24) [Ac- (SEQ ID No : 27) -NH2 J 。 W.—種下式之環狀肽·· V. X-R1 - R 2* Asp» Ala· Vai-R^~Th r-Rg-Αέη~ R1 〇-Th r-R12" I L&ij-Ar〇-Lys-R^s-Ri7-AJa-R15-Lys-Lys-R22-.j Leu-R24-Asp-R26-R2rR2B-Y [X-(SEQ ID NO:10)-Y] 其中 Ri 是 His ，N — CH3 — Ala ; Rz 是 Ser 或 Ala〜； Re是 Phe，丨-Nal 戎對- F- Phe; Re是 Asp ，Giu 或 Ala; Rw 是 Tyr，2-Nal, 0-Me-Tyr 或對-NH2-Phe; 是 A r j? ，L y s ; R α © 是 G 1 n 或 A 1 a ; R i 7 是 M e t ，ΚΙ e 或 —/¾ — 裝1τ^ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙乐尺度適用中國國家標準（CNS ) A4現格（210X297公釐） 305846 A8 δ$ C8 D8 六、申請專利範圍 HI ml m^i ata^n ^vm —HI— fm nn i ^—.^1— —HI— 一. 々、ys (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) Ala ; Rie 是 Val 或 Ala ; R22 是 Tyr, CH3-Tyr或間 -F-L-Tyr ； R24 是 Asη 或 A 1 a ; R2β 是 I 1e * V a 1 或 Leu ; R27 是 Leu 或 Lys ; Rza 是 Asn * T h r 或 Lys ； X是氫或可水解之胺基保護基團；Y是羥基或可水解之羧基保護基丽；或R20 -R3〇 _R31 — Z ; R2e是Gly 或 Ma ; R3〇是 G1y 或 A 1 a ; R31 是 A1a ，Met ， Cys(Acm)，或Thr ;Z是羥基或可水解之羧基保護基團 :或其B輻上可接受锂。- 1& 根撺申請專利範圍第14項之環狀肽，其中％是Phe。 ia 根揀申請專利範圍第14項之環狀呔，其中R6是對 -F - P h e 0 17. 根撺申請專利範園第1 4項之環狀肽，其中R6是1 - N a 1。 18. 根撺申請專利範圃第14項之環狀狀，其中R2e是Va 1且 R28 是 Thr 〔X- (SEO ID NO : 11) -Y〕。 19. 根撺申請專利範圍第14項之環狀肽，其中是Nle ， R2« 是 Val 且 R2a 是 Thr 〔X— (SEQ ID HO : 12) — Y ] ° 經濟部中央標隼局男工消費合作社印製 2Q 根揀申請專利篛園第19項之環狀呔•其中該肽是Ac-〔 G 1 u8 · Orn 12 * N le17 , Asp 2 85 > Val2e ，Thr28 〕— V IP 環（Lys21 -> Asp2s ) 〔Ac- (SEQ ID Ho ： 31) —N H 2 ] 0 2L 根撺申謫專利範圍第19項之環狀呔》其中R12是Leu ， R17 是 Nle ’ Rie是 A1 a且 Rze 是 Val ，R2e 是 Thr 〔X -(SEQ ID NO ： 13) - Y ) 〇本紙張尺度逋用中國國家無準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A8 B8 C8 D8 經濟部中央梂準局員工消費合作社印製六、申請專利範圍 22. 根撺申請專利範圍第21項之環狀狀，其中該肽是Ac — [
2-Hal10 >[.eu12 - Hie17 *Ala10 >Asp25 * Va 1 2 Ο * Th p 2 S j - VIP 環 ( Ly s 2 1 4 A s P2 S ) L A c — (SEQ ID N 0 ： 35) -NF i 2 J 〇 2a 根據 Φ 請專利範圍第 21項之環狀肽，其中該肽是 Ac -L ο — Me —Ty r 10 ，L e u12 » N 1 e 1 7 » Ala1 Θ t A s Pz 5 , Va 1 2 © • Th p 2 e 〕一 VIP 環 L A c 一 (SEQ ID H 0 ： 36) -NH J ° 24 根棟由請專利範圍第 21項之環狀肽，其中該狀是 A c -〔對一 F -Ph e 0 » 對一 NHZ — Ph e 1 ο * L e u1 z > HI e1 7 , Ala1 〇 * As p25 • V a j 2 O Th r2 8 ! —— J VIP 環 ( Ly s2 1 -> As P 2 5 ) [Ac -( SEQ ID N 0 ： 37 ) — NH 2 ] 0 2& 根據由請專利範圍第19項之環狀肽，其中R12是Lys 是 Nle *R2e 是卩31 且 R28 是 Thr 〔X — (SEQ ID HO ： 14) - Y 3 〇 26. 根撺申請專利範圍第25項之環狀肽，其中該肽是Ac-〔 Lys12 ，NU17 ，Asp2s ，Val2e ，Thr28〕一VIP 環 (Lys21 — Asp2s ) 〔 Ac - ( SEQ ID Κ·ο : 2S) — HH2 ，J 。 27. 根撺由請專利範圍第25項之環狀肽，其中該肽是Ac-〔對—f? — P h e ° * 2 -K a 1 1 ° ，L y s 1 2 ， N 1 e 1 7 ，A_s p 2 s ，Va1“ •丁hr2S ,G 1 y20· 30 > Met31 j —V IP Π-31)-ΝΗ2 瓖（Lys21 — Asp2S ) 〔Ac— (SEQ ID No ： 3 0) — N H 2 j 〇本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4現格（210X297公釐） ---------$------iT------^ , I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 8〇5846 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 2a 根據申請專利範圍第2 5項之環狀肽，其中該呔是Ac-[ 對—p — p h e β * G1υ a » L y s 1 2 ，Hie17 ，Asp25 ， Val2e ， Thr2e ， Gly2e·30， Thr31 〕一VIP 環（ Lys21 -> Asp28 ) 〔Ac- (SEQ ID Ho : 66) — HH2〕 O 2a 根據申請專利範圍第19項之環狀肽•其中R12是Lys ， Ri7 是 Nle ，Rig 是 Ala 且 ί?2β 是 Val 且 R28 是 Thr 〔 X - ( SEQ ID HO ： 15) - Y ) 〇 3d 根據申請專利範圍第29項之瑁狀肽，其中該肽是Ac —〔 Lys12 ，N 1 e17 ，Alaie , Asp25 , Val2e , Thr2e 3 —VIP 環（Lys21 4Asp2B ) 〔Ac— (SEQ ID No : 29) - NH2 〕。根搏申請專利範画第29項之環状肽，其中該肽是Ac-〔

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F—Phe®> Lys12 · Nle17 * Ala19 > Asp26 * Val2e · Thrza « Gly20·30· Cys(Acm)31j -VIP (卜 31) - N H 2 環（L y s 2 1 -> As p 2 e ) 〔Ac— (SEQ ID Ho ： 32) — Η H 2 ) 〇根據申請專利範園第29項之環吠呔，其中該肽是Ac-〔 ^------—...、彡’，Lys12 ，Nle17 ，Alaie ，Asp2S ，Val2'e ， Thr2e ] — VIP 環（Lys21 ~>Asp2S ) 〔Ac- (SEQ ID No ： 33) - NH2 ] 〇，根捸申請專利範圍第29項之環狀肽，其中該狀'是Ac — 〔 N — Me — Ala1 · Lys12 * Hie17 * Ala1® * Asp28 * Val2e » Thr28〕一 VIP 環（Lys21 4 Asp2s ) [ Ac- -7 - 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4礼格（210X 297公釐） 305S46 A8 B8 CS D8 申請專利範圍 i SEQ ID Ho ： 34) - HH2 J 〇 34. 根撺申請專利範圍第29項之環狀呔，其中該呔是Ac — C 〇 — He — Tyr10 ，L y s 1 2 ，N 1 e 1 7 ，Ala1® * Asp25 * Va ] 2e ，Thr28 ] - V IP 環（Lys21 4 Asp25 ) [ Ac - (SEQ ID No : 41) — NH2 〕。 3& 根撺申請專利範圍第29項之瑁状肽，其中該呔是Ac-〔對一F — P h e β > L y s 1 2 N 1 e 17 A 1 a Asp 2 5 經濟部中央標隼局員工消费合作社印裝 Val2e ， Th「28 〕一 VIP 環（Lys21 — Asp25 ) Γ Ac-f SEQ ID No ： 49) - NH2 J 〇 36. 根揀申請專利範圍第29項之環狀肽，其中該呔是Ac—〔 1 —Nale> Lys12 * Kle17 * Ala10 > Asp25 > Val2e ，Thr28 ] — VΐP 環（Lys21 — Asp25 ) [Ac - ( SEQ ID No ： 50) - HH2 ] ° 37. 根撺申請專利範圍第29項之環吠肽，其中該肽是Ac-〔對一NHz —Phe10， Lys12 ， Nle17 ， Ala10 ， Asp25 * Val2® . Thr28 ] -VIP m (Lys21 -»Asp25 )〔 Ac— (SEQ ID Mo *· 5 4) — Η H 2 } 0 38. 根揀申請專利範圍第29項之環狀肽，其中該肽是AC-〔 .Lys12 , Nle17 , Alaie ，間一〇CH3—Tyr22 , Asp2s -Val2e . Thr28 ] -VIP Μ (Lys21 -^Asp25 )〔 Ac— (SEQ ID No :55) — N H 2 j 。、 sa 根撺申請專利範圍第29項之環狀肽，其中該肽是Ac-〔 Lys12 Asp25 Nle17. ，Alale ，間一F — L—Tyr22 , Val2e ， Th「2a 〕一VIP 環（Lys21 —Asp2b 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4現格（210 X 297公釐） ---------1----.--IT------、 I -« (請先w讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 305846 六、申請專利範圍 )t Ac - f SEQ ID Ko :56)- NHZ J 0 4a 根據申請專利範圍第29項之瑁狀肽，其中該肽是 Ac — c G 1 u8 * Lys12 ， Hie17 ， A la10 > Asp26 ，V £ 1 l2 ThrZ8 ,g 1 yze·30 > Thr31 ]— VIP 環 ( L y s £ Ϊ 1 — Asp25 )〔Ac - ( SEQ ID No ： 65) — Η\ { 2 3 0 41 根據申請專利範圍第14項之環狀呔，其中 R 2 β 是 Leu 且 R 2 7及 R28 皆是 Lys 〔 X — -SEQ ID NO ： 16)- -Y〕 o 42 根撺申請專利範圍第41項之瑁狀肽丨，其中 R 1 2 是 Lys » R 1 7是 Ala * Riq、是 Ala ， R 2 β 是L e ! U 且 R 2 Τ 及 R 2 8 皆是L y s C X - SEQ ID NO ： 17)- -Y J < 43. 根撺申請專利範圍第42項之 xga fi ^ .現狀肽，其中該狀是 A c — ( (Hu8, Lys12 ' · Ala10·17· i β , Asp2 5 » Leu2 β > Lys27 · 2β〕, 一 VIP 環（Lys: 21 Asp2 5 ) [Ac 一 (SEQ ID No ：6 0) — Η H 2 J 0 44. 根撺申 _專利範圍第42項之 .環狀肽，其中該呔是 Ac — c Ala8， Lys12 » A l a 1 β · 1 7·: 1 β , Ala2 4 Asp2 5 > L e u 2 e ,L y s 2 7 . 2 8 'j _ v j p 環（ Lys2 1 Asp2 5 )t Ac —( SEQ ID No ： 62)- nh2 ]° 4S 根據申請專利範圍第42項之環狀肽，其中該肽是'A c - c G 1 u8 * Lys12 * A 1 a 1 β · 1 7·3 ιβ · A la24 > A SP25 I Leu28 * Lys27,2ej — VIP 瑁（ Lys2 1 -> Asp2 5 )、〔 Ac—( SEQ ID Ho : 64)- KH2 〕、。 4a 根揀申請專利範園第41項之環狀肽，其中 R 1 2 是: Lys » R 1 7是 Hie ’ Rze.是 Leu.且 R 2 v 及R 2 β 皆是L y S 〔X — -9 - — — —— — — — — i 裝訂— 線 . I, (請先聞讀背面之注意事項再"1「本頁) 本紙張尺度逋用中國國家標率（CNS ) A4说格（210X29?公釐） 305S46 S D8六、申請專利範圍 SEQ ID NO ： 18) - Y 3 〇幻.根撺由請專利範圍第46項之環狀呔*其中該肽是Ac — 〔 Ala2，G1υ 8 * L y s 1 2 ， N 1 e 1 7 ，Asp26 ，Leu2® ， » ' Lys27.2e， Gly2e·30， Thr31 〕一VIP 環（Lys21 4 Aspzs ) C Ac - ( SEQ ID Ho :67) — NH2 j 〇 48. 根撺申請專利範園第46項之環狀呔，其中該肽是Ac-〔 Glue, Lys12 Nle17 » Asp2B » Leu2® * Lys27·28 » Gly20·30 . Thr31 〕一 VIP 環（Lys21 — Asp2S )〔 Ac - ( SEQ ID No ： 68) — NH2 3 〇 49. 根據申請專利範圍第46項之環狀肽，其中R12是Lys ， R17 是 Hie ，R19，.是 Ala ，R2e 是1^〇，及 R2e 皆是 Lys C X - SEQ ID NO ： 19) - Y ] 〇肌根棟申請專利範面第49項之環狀肽，其中該肽是Ac — 〔 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Lys1 2 ，Nle: 17 , A I a 1β · A s P2 ：5 > L e u2 Ο » Lys2 7 .2 8 j 一 VIP 環 (Lys2 1 As p2 & ) c Ac — (SEQ TD N 0 ：38) -NH 3Ϊ 1 ° 51. 根撺串請專利範圍第 49項之環狀呔 ♦ 其中該呔是 Ac - 1 N - Me — Ala1* L y s 1 2 · N1 e 1 7 t A1 a1 > Asp2 e , 1 Leu2 V, Lys27.28 ) -VIP 環 ( Ly s2 1 -4 As p25 )c Ac — f SEQ ID No ·· 39)— NH 2 J 〇 52 根揀諝專利範圍第 49項之環狀狀 » 其中該肽是 A-c - i G 1 u8 » Lys12 * ΚΙ e 1 7 , A 1 a1 Q > As P2 5 > Leu2 e , Lys2 7 . 28 J - VIP 環 (Lys2 1 — As P2 5 ) c Ac — (SEQ ID N 0 ：40) -ΜΗ 2 ]° -10 - 本紙張又度逍用中國國家揉準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐）經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ^05846 g D8 六、申請專利範圍 sa 根據申請專利範圍第49項之環狀肽，其中該肽是 A c — c G 1 ue， Ly s1 2 • N 1 e 1 7 » Ala1 Q ，A sp2 ：S > Le ：u 2 ! β , L y s 2 7 · 2 8 > AI a29' 31〕一 VIP 環 [A c 一 ( SEQ ID 丨No : 42)— NH 2 j 〇 54.' ^根據申請專利範圍第49項之瑁狀肽，其中該肽是 Ac — c N — Me — A1 a 1 * G 1 u 8 ·» L y ! s12 K 1 e 1 7 » A1 a 1 Θ > Aspzb L e u2 e L y s 2 7 ·: 2 β〕一 VIP 環 Ly s2 1 Asp25 ) c Ac — ( SEQ ID Ho 44) — NH 2 J o 55.. 根據申請專利範鬮第4 9項：之環狀肽，其中該肽是 Ac — c 對一F — Ph ee 1 G 1 υ 8 » L y s 1 2 i Hie 1 7 > A 1 a 1 9 * A s p 2 B > L e u2 β t L y s 2 7 · 2 s〕一 VIP 環 ( Ly s 2 1 — Asp25 ) c A c ( SEQ ID No ： 45 ) — HH 2 ] o S6W 根裤申 m 專利範園第49項之環狀肽。，其中該肽是 A c — c 1 — Ka 1° * G 1 u8 L y s 1 2 * N1 e 1 7 , Ala1 Θ 1 As P25 t Leu2e i Ly s2 7 . 28J - V IF ，環 ( Lys: 2 1 As P2 5 i )C Ac- ( SEQ ID N 0 :46)- -NH 2 ]0 57. 根撺申謫專利範圃第49項之環狀肽，其中該肽是Ac-〔 Glue t 對 -nh2 一 P h e 1 〇 • L y s 1 2 , K 1 e1 7 • A： laie · • Asp2 5 * Leu2e ，L y s 2 7 . 2 β j — VIP 環 ( Ly s 2 1 V、 Asp2 6 ) [Ac — (SEQ ID No ： 47) — HH 2 ) O sa 根揀請專利範圍第49項之環狀，肽，其中該肽是 A_c —〔 G 1 u8 9 0 —Me — Tyr 10 » Lys12 ，N] 1 e1 7 Ala3 Asp2 5 L e u 2 e ，Ly s 2 7 . 2 8 J 一 VIP 環 ( Ly s2 1 -> Asp2 B ·) 〔Ac — i SEQ ID No : 48) — NH 2 0 -11 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度逋用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公釐） S0S846 A8 B8 C8 D8 申請專利範圍 59. 根撺申請專利範圍第49項之瑁狀肽4其中該肽是Ac-〔 Glua ， Lys12 N le 1 7 Ala Lys27.2e, , Gjy2S.30, Th] 3 1 Asp25 » L e u 2 ® * UP 環（Lys21 — Asp25 ) [Ac- ( SEQ ID No ： 52) -NH2 J 〇50. /根撺申請專利範圍第49項之環狀肽-，其中該肽是纟(：一〔 Glu8，Lys12" fUe17 , Alaie ，間一0CH3— Tyr22 / Asp25 ， Leu2e ， Lys27·28] —VIP 環（Lys21 4 Asp25 ) [Ac- (SEQ ID No :57) - NH2 j 〇 51. 根撺申請專利範圍第49項之環狀肽，其中該肽是Ac-〔 GUs，Lys12 ,Nle17 ,Alaie ,間一F — L—Tyr*22 ，Asp25 ， Leu2e ， Lys27·28〕'—VIP 環（Lys21 4 Asp28 ) L Ac - (SEQ ID No ： 58) — NH2 ]。根撺由請專利範圍第49項之環狀肽，其中該肽是Ac — 〔* 62 A ! a I, y s Nle17 · Ala1® · Ala24 Asp 2 5 \ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) Leu 2 0 Lys 2 7.23 VIP 瑁（Lys21 ->Asp2 63. Ac— (SEQ ID No : 59) — Η H 2 ] 〇根撺申請專利範圍第49項之環狀呔，其中該呔是Ac__ 〔經濟部中央標準局員工消費合作社印製 S4 Lys12, Lys27·28 Nle1* ， Alals ， Asp28 ， Leu2e ，-'，Ala2e-31'J — VIP 環（Lys21 — Asp25 )〔 Ac— ( SEQ ID Ho :69) — Η H 2 J 。根據申請專利範圍第59項之環狀肽〃，其中該肽是^_ 〔 Ala2» Glu8* Lys12 > Nle17 · Ala1® » Asp25 Λ Leu2e，， Lys27·2*， Ala2e_31〕，VIP 環（Lys21 +. Asp25 ) 〔Ac- ( SEQ ID Ho ： 43) — NH2 j 〇 -12 - 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 305846 ABCD 六、申請專利範圍 65 根據申請專利範圍第49項之環狀版*其中該肽是Ac — 〔經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Ala2, Glu8 ?>Lys12 ,N 1 e17 ，A1 a1' 3， Α: 5P25 » Leu2® * Lys27· «- ,2 S t Gly2a-3 ° * Thr 3 1 ]， -1 /IP環 ( Lys21 〇 -> Asp25 )C Ac - ( SEQ ID Ho ·· 51) 一 \ 2 ) 66. 根據申請專利範圍第 49項之環狀肽 t 其中該肽是 Ac — C Ala2 * Glu8* r s 1 2 * Kle17 * A i ! a 19 « Asp2 ：5 » L e u 2 e • L y s 2 7 · 2 S J —VIP 環（ L> ^ s 2 1 Asp2 ：5 ) C Ac—( SEQ ID N 10 : 53) —NH2 3 O 67. 根據申請專利範圍第 49項之環狀狀 • 其中該肽是 A c C Ala8 > Lys12 Ala1 β · Nle17 A la 1 β 梦 A 1 a2 » Asp25 ，Leu2® ，Ly g 2 7 . 2 β j 一 VIP 環 { ly s 2 1 Asp25 )[Ac — (SEQ ID No ： 61 ) — ΗΚ 2 ] 〇 sa 根據申請專利範圍第 67項之環狀呔 9 其中該肽是 A c — C Glu8， Lys12 * Ala1 β ，H le17 » A la1 9 » As P2 & * L e u z e * L y s 2 7 · 2e) -V IP 環（ Ly s21 — As P2 5 ) C Ac -( SEQ ID N o ： 63) -HH2 ] 〇 6a 一種用於支氣管掮張之«藥組合物 • 其包含申請專利範圍第1 * 8 > 10 • 1 2或1 4項中任一項之環吠肽〇 τα 一種用於支氣管擴張之B蕖組合物 » 其包含環狀肽 Ac — [Glu8 ,L y s 1 2 ，Η 1 e1T » Ala1 9 » As Ρ2 B » Leo·? 〇 1 Lys27· 28 * G1y2 9,30 ，Thr31 ) — VIP 環 ( Ly S2 1 Asp25 )[Ac — (SEQ ID No ： 52) — ΝΗ 2 3 0 71. 一種用於治療氣管支氣管收縮病症之醫藥組合物 * 其包 -13 - 本紙張尺度逋用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 305S46 ab! C8 D8 六、申請專利範圍含申諝專利範圍第1至68項中任一項之環狀狀及一棰無毒惰性，治療上可接受之載劑物質。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 -14 - 本紙張尺度逋用中國國家梂準（CNS > A4規格（210X297公釐）