TW201339230A - 包含酵素之水溶性組合物及其製備方法 - Google Patents

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Abstract

本文揭示包含第一水溶性樹脂、酵素及酵素穩定劑(其包括酵素之功能受質)之混合物之水溶性組合物(例如膜)、製備該等組合物之方法及使用該等組合物(例如)製備含有功能成份之封包之方法。該等酵素可包含蛋白酶及蛋白酶與其他酵素之混合物，且該等組合物在膜處理及儲存後提供酵素功能之良好保留。

Description

包含酵素之水溶性組合物及其製備方法
本揭示內容概言之係關於水溶性膜。更特定而言，本揭示內容係關於包括第一水溶性樹脂、酵素及酵素穩定劑(其包括酵素之功能受質)之混合物之水溶性膜。
水溶性膜在業內已眾所周知。水溶性膜具有許多應用(例如封裝材料)，其中膜自身可構成水溶性封包。該等組合物之優點在於其易於供給、處置、傳輸及儲存。
水溶性封包極其適用於單一劑量應用(其中封包包封衣用洗滌劑、漂白劑或其他衣用添加劑)、織物護理、餐具洗滌、硬表面清潔、美觀護理、皮膚護理、其他個人護理或食品組合物。通常在水溶性封包中包封可在其他活性劑存在下變得不穩定或可導致其他成份變得不穩定之活性劑，由此限制了可以單一劑型一起預封裝之活性劑之種類。
先前已知膜中之酵素活性往往較低且隨儲存時間而降低。在酵素組合物包含蛋白酶時，此活性損失往往尤為嚴重，此乃因蛋白酶可自身分解或分解其他酵素。為試圖補償酶活性之降低，在膜組合物中包含較大濃度之酵素，且此方式不能始終成功地產生至少具有中等活性之膜。因此，極其期望產生維持高酵素活性值且無需始於高酵素濃 度(亦即，在處理及儲存之後具有高酵素恢復百分比)之膜。
通常用作衣用及餐具洗滌應用中之添加劑之活性劑包含酵素，例如蛋白酶、澱粉酶、脂肪酶及氧化還原酶(包含但不限於催化漂白劑之形成之氧化還原酶)。因此，含有尤其在蛋白酶存在下維持高活性值之酵素之水溶性膜將有利地用於包封洗滌劑或其他衣用或餐具洗滌添加劑之水溶性單一劑量封包中。
本揭示內容之一態樣係包含第一水溶性樹脂、酵素及酵素受質之水溶性混合物之水溶性組合物。組合物可採用(例如)膜形式。
本揭示內容之另一態樣係包含水溶性樹脂(其包括丙烯醯胺基-2-甲基丙磺酸鹽)及酵素之水溶性混合物之水溶性組合物(例如膜)，其中膜形成後之酵素活性恢復率為至少87%。
本揭示內容之另一態樣係形成水溶性膜之方法，其包含以下步驟：提供溶於水中之本揭示內容水溶性混合物；將水溶性混合物澆注於預加熱至小於77℃、視情況在約66℃至約77℃範圍內或約74℃之溫度之表面上；經小於24小時、視情況小於12小時、視情況小於8小時、視情況小於2小時、視情況小於1小時、視情況小於45分鐘、視情況小於30分鐘、視情況小於20分鐘、視情況小於10分鐘、例如在約6分鐘至約10分鐘範圍內或8分鐘之時段自澆注混合物乾燥水以形成水溶性膜。
本揭示內容之另一態樣係形成水溶性膜之方法，其中水溶性膜係根據以下步驟自水溶性混合物製得之澆注物： 提供水溶性樹脂、水及任一可選添加劑(不包含酵素)之混合物；將混合物煮沸並保持30分鐘；將混合物在至少40℃、視情況在40℃至70℃範圍內、例如約65℃之溫度下於烘箱中脫氣； 在65℃或更低之溫度下向混合物中添加至少一種酵素、視情況 至少一種塑化劑及視情況額外水；及視情況在無渦旋情況下攪拌混合物直至混合物之顏色及稠度看起來實質上均勻為止；視情況攪拌在30分鐘至90分鐘範圍內、視情況至少1小時之時間段；及在攪拌時間段(例如在4小時內或2小時或在1小時內或更短)之後迅速澆注混合物。
視情況，本文所闡述之水溶性膜可熱成型(例如)為小袋。
儘管本揭示內容提供膜實例，但組合物可採用其他形式及形狀，包含彼等厚度實質上大於通常視為膜之厚度者。
對於本文所闡述之組合物及方法而言，可選特徵(包含但不限於組份、其組成範圍、成份、條件及步驟)預計可選自本文所提供之各種態樣、實施例及實例。
彼等熟習此項技術者自下列詳細說明之綜述將明瞭其他態樣及優點。儘管組合物及方法可具有各種形式之實施例，但下文之說明包含具體實施例，應理解，本揭示內容係闡釋性，且並不意欲將本發明限於本文所闡述之具體實施例。
本文揭示包含第一水溶性樹脂、酵素及酵素穩定劑(其係酵素之功能受質)之水溶性混合物之水溶性組合物(例如膜)。視情況，水溶性膜包含兩種或更多種類型之酵素。本揭示內容之一態樣之水溶性膜可尤其有利之處在於，其可經設計以便在形成膜後有較高百分比之酵素保留活性。本揭示內容水溶性膜可視情況經設計以便在將膜在約5℃至約45℃範圍內之溫度下儲存至少2週或在約2週至2年範圍內、例如3個月時有較高百分比之酵素保留活性。本文中之本揭示內容水溶性膜可具有一或多個其他可選優點，包含含有蛋白酶及第二酵素之膜中之酵素活性具有格外高之恢復率、可熱成型(例如，可熱成型為小袋或 封包)、用於將酵素遞送至受質之無粉塵固體形式。
除非另有所述，否則膜、封包及其製造及使用之方法預計包含如下實施例：其包含下文進一步所闡述其他可選要素、特徵及步驟(包含彼等展示於任一圖中者)中之一或多者之任一組合。
如本文中所使用，術語「包括」指示除彼等所指定者外其他試劑、要素、步驟或特徵之潛在包含。
如本文中所使用且除非另外指定，否則所有以厘泊(cP)表示之黏度量測皆係針對20℃下之4%溶液。
如本文中所使用，「酵素恢復百分比」係指在一或多個處理步驟或儲存時間後(例如在水溶性組合物(例如膜)處理步驟(例如混合、澆注及乾燥)及在約5℃下儲存約1個月之時段後)保留活性之酵素之百分比。因此，如本文中所使用，「酵素活性恢復率」(recovery of enzyme activity或enzyme activity recovery)係指水溶性組合物中在處理或儲存時間後與原始酵素活性(例如在添加至膜中之原材料酵素組合物之代表性試樣中所量測之酵素活性)相比維持之酵素活性。因此，舉例而言，酵素活性恢復率可為在製備組合物(例如膜)之處理步驟及在約5℃下儲存約一個月時段後之酵素活性與在膜中所添加原始酵素組合物之酵素活性的比率。所涵蓋處理步驟個別地或組合包含本文所闡述步驟中之每一者，例如但不限於加熱步驟、溶解步驟、混合步驟(例如，濕混合步驟)及乾燥步驟(例如視情況在施加熱下)。可藉由任一適宜方法量測酵素活性，只要酵素原材料量測及加載酵素之經處理組合物(例如，含酵素膜)量測使用相同或等效方法即可。在一類實施例中，可藉由比色法測定酵素活性。下文結合實驗闡述蛋白酶、澱粉酶及脂肪酶活性之比色量測。
如本文中所使用且除非另外指定，否則術語「wt.%」及「wt%」意欲係指以整個膜中之「乾」(無水)重量份數(在適用時)或 小袋內所包封整個組合物之重量份數(在適用時)表示之所鑑別要素的組成。如本文中所使用且除非另外指定，否則術語「phr」意欲係指以一定份所鑑別要素/100份水溶性聚乙烯醇(PVOH)樹脂表示的組成。
水溶性膜、用於其中之可選成份及其製備方法在業內已眾所周知。在一類實施例中，水溶性膜包含PVOH。PVOH係通常藉由聚乙酸乙烯酯之醇解(通常稱為水解或皂化)製得之合成樹脂。完全水解之PVOH(其中實際上所有乙酸酯基團皆已轉化成醇基團)係僅溶於熱水(大於約140℉(60℃))中之強氫鍵高結晶聚合物。若足夠數量之乙酸酯基團在聚乙酸乙烯酯水解之後保留，則PVOH聚合物稱為部分水解，其具有較弱氫鍵及較小結晶性且可溶於冷水(小於約50℉(10℃))中。中間體冷/熱水溶性膜可包含(例如)中間體部分水解PVOH(例如，水解度為約94%至約98%)，且僅易於可溶於溫水中(例如，在約40℃及更高之溫度下快速溶解)。完全及部分水解之PVOH類型通稱為PVOH均聚物，但部分水解之類型在技術上係乙烯醇-乙酸乙烯酯共聚物。
本揭示內容水溶性膜中所包含之PVOH之水解度可為約75%至約99%。隨著水解度減小，自樹脂製得之膜之機械強度亦有所減小，但在低於約20℃之溫度下可較快溶解。隨著水解度增加，自樹脂製得之膜往往在機械上較強且可熱成型性往往會降低。可選擇PVOH之水解度以便樹脂之水溶性具有溫度依賴性，且由此亦影響自樹脂及其他成份製得之膜之溶解度。在一類實施例中，膜係冷水溶性。可在小於10℃之溫度下溶於水中之冷水溶性膜可包含水解度在約75%至約90%範圍內或在約80%至約90%範圍內或在約85%至約90%範圍內之PVOH。在另一類實施例中，膜具有熱水溶性。可在至少約60℃之溫度下溶於水中之熱水溶性膜可包含水解度為至少約98%之PVOH。
與PVOH一起使用或作為其替代方式之其他成膜樹脂可包含但不限於經改質聚乙烯醇、聚丙烯酸酯、水溶性丙烯酸酯共聚物、聚丙烯醯胺、聚乙烯基吡咯啶酮、普魯蘭多糖(pullulan)、水溶性天然聚合物(包含但不限於瓜爾膠(guar gum)、黃原膠、角叉菜膠及澱粉)、水溶性聚合物衍生物(包含但不限於乙氧基化澱粉及羥丙基化澱粉)、聚(丙烯醯胺基-2-甲基丙磺酸鈉)、聚馬來酸單甲酯、其共聚物及前述物質中之任一者之組合。在一類實施例中，成膜樹脂係由乙烯醇、乙酸乙烯酯及丙烯醯胺基-2-甲基丙磺酸鈉組成之三元聚合物。出人意料地，在基於乙烯醇、乙酸乙烯酯及丙烯醯胺基-2-甲基丙磺酸鈉三元聚合物之水溶性膜中包含及不包含酵素受質之情形下，該等水溶性膜皆顯示高恢復率百分比之酵素活性。
水溶性樹脂可以任一適宜量(例如在約35 wt%至約90 wt%範圍內之量)包含於水溶性膜中。水溶性樹脂量與所有酵素、酵素穩定劑及二級添加劑之組合量之較佳重量比率可為任一適宜比率，例如比率在約0.5至約5或約1至3或約1至2範圍內。
用於本文所闡述膜中之水溶性樹脂(包含但不限於PVOH樹脂)之特徵可在於針對期望膜性質之任一適宜黏度，視情況黏度在約5.0 cP至約30.0 cP或約10.0 cP至約25 cP範圍內。藉由如英國標準EN ISO 15023-2：2006 Annex E布魯克菲爾德(Brookfield)測試方法中所闡述使用具有UL承接器之布魯克菲爾德LV型黏度計量測新製溶液來測定PVOH樹脂之黏度。按照國際慣例，陳述4%聚乙烯醇水溶液在20℃下之黏度。除非另外指定，否則在本文中以cP指定之所有PVOH黏度應理解為係指4%聚乙烯醇水溶液在20℃下之黏度。
在業內眾所周知，PVOH樹脂之黏度與同一PVOH樹脂之重量平均分子量()相關，且通常使用黏度來代表。因此，水溶性樹脂之重量平均分子量視情況可在約35,000至約190,000或約80,000至約 160,000範圍內。樹脂之分子量僅需足以使得其能夠藉由適宜技術模製以形成薄塑膠膜。
酵素
預計任一期望類型之酵素皆可用於本文所闡述之膜中。
舉例而言，該等酵素包含歸類為以下六種習用酵素委員會(Enzyme Commission，EC)種類中之任一者中之酵素：亦即，氧化還原酶EC 1(其催化氧化/還原反應)、轉移酶EC 2(其轉移諸如甲基或磷酸酯基團等官能基)、水解酶EC 3(其催化各種鍵之水解)、裂解酶EC 4(其藉由除水解及氧化外之方式解離各種鍵)、異構酶EC 5(其催化分子內之異構化變化)及連接酶EC 6(其使用共價鍵連結兩個分子)。該等酵素之實例包含EC 1中之去氫酶及氧化酶、EC 2中之轉胺酶及激酶、EC 3中之脂肪酶、纖維素酶、澱粉酶、甘露聚糖酶及肽酶(亦稱為蛋白酶或蛋白水解酵素)、EC 4中之去羧酶、EC 5中之異構酶及變位酶及EC 6中之合成酶及合酶。
氧化還原酶
氧化還原酶包含但不限於：彼等作用於供體之CH-OH基團上者；彼等作用於供體之醛或側氧基基團上者；彼等作用於供體之CH-CH基團上者；彼等作用於供體之CH-NH2基團上者；彼等作用於供體之CH-NH基團上者；彼等作用於NADH或NADPH上者；彼等作用於作為供體之其他含氮化合物上者；彼等作用於供體之硫基團上者；彼等作用於供體之血紅素基團上者；彼等作用於作為供體之二酚及相關物質上者；彼等作用於作為受體之過氧化物上者；彼等作用於作為供體之氫上者；彼等作用於單一供體上且包含分子氧者(氧合酶)；彼等作用於成對供體上且包含或還原分子氧者；彼等作用於作為受體之超氧化物基團上者；彼等氧化金屬離子者；彼等作用於CH或CH2基團上者；彼等作用於作為供體之鐵硫蛋白上者；彼等作用於作為供體之經 還原黃素氧化還原蛋白上者；彼等作用於供體中之磷或砷上者；彼等作用於X-H及Y-H上以形成X-Y鍵者；及彼等作用於供體中之鹵素上者。
作用於供體之CH-OH基團上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(包含乙醇去氫酶、乙醇去氫酶(NADP+)、高絲胺酸去氫酶、(R,R)-丁二醇去氫酶、甘油去氫酶、丙二醇-磷酸去氫酶、甘油-3-磷酸去氫酶(NAD+)、D-木酮糖還原酶、L-木酮糖還原酶、D-阿拉伯糖醇4-去氫酶、L-阿拉伯糖醇4-去氫酶、L-阿拉伯糖醇2-去氫酶、L-艾杜糖醇2-去氫酶、D-艾杜糖醇2-去氫酶、半乳糖醇2-去氫酶、甘露醇-1-磷酸5-去氫酶、肌醇2-去氫酶、葡萄糖醛酸還原酶、葡萄糖醛酸內酯還原酶、乙醛還原酶、UDP-葡萄糖6-去氫酶、組胺醇去氫酶、奎尼酸去氫酶、莽草酸去氫酶、乙醛酸還原酶、L-乳酸去氫酶、D-乳酸去氫酶、甘油酸去氫酶、3-羥基丁酸去氫酶、3-羥基異丁酸去氫酶、3-羥-3-甲戊醛酸還原酶、3-羥-3-甲戊醛酸還原酶(NADPH)、羥甲基戊二醯基-CoA還原酶(NADPH)、3-羥基醯基-CoA去氫酶、乙醯乙醯基-CoA還原酶、蘋果酸去氫酶、蘋果酸去氫酶(草醯乙酸-去羧)、蘋果酸去氫酶(去羧)、蘋果酸去氫酶(草醯乙酸-去羧)(NADP+)、異檸檬酸去氫酶(NAD+)、異檸檬酸去氫酶(NADP+)、磷酸葡萄糖酸2-去氫酶、磷酸葡萄糖酸去氫酶(去羧)、L-古洛糖酸3-去氫酶、L-阿拉伯糖1-去氫酶、葡萄糖1-去氫酶、半乳糖1-去氫酶、葡萄糖-6-磷酸去氫酶、3α-羥基類固醇去氫酶(B-特異性)、3(或17)β-羥基類固醇去氫酶、3α-羥基膽烷酸去氫酶、3α(或20β)-羥基類固醇去氫酶、烯丙基-醇去氫酶、乳酸醛還原酶(NADPH)、核糖醇2-去氫酶、果糖醛酸還原酶、塔格糖醛酸還原酶、3-羥基丙酸去氫酶、2-羥基-3-側氧基丙酸還原酶、4-羥基丁酸去氫酶、雌二醇17β-去氫酶、睪固酮17β-去氫酶、睪固酮17β-去氫酶 (NADP+)、吡哆醇4-去氫酶、ω-羥基癸酸去氫酶、甘露醇2-去氫酶、葡萄糖酸5-去氫酶、乙醇去氫酶[NAD(P)+]、甘油去氫酶(NADP+)、辛醇去氫酶、(R)-胺基丙醛去氫酶、(S,S)-丁二醇去氫酶、乳酸醛還原酶、甲基乙二醛還原酶(NADH依賴性)、乙醛酸還原酶(NADP+)、異丙醇去氫酶(NADP+)、羥基丙酮酸還原酶、蘋果酸去氫酶(NADP+)、D-蘋果酸去氫酶(去羧)、二甲基蘋果酸去氫酶、3-異丙基蘋果酸去氫酶、乙酮醇酸還原異構酶、高異檸檬酸去氫酶、羥甲基戊二醯基-CoA還原酶、芳基-醇去氫酶、芳基-醇去氫酶(NADP+)、草醯羥乙酸還原酶(去羧)、酒石酸去氫酶、甘油-3-磷酸去氫酶[NAD(P)+]、磷酸甘油酸去氫酶、二碘苯基丙酮酸還原酶、3-羥基苄基-醇去氫酶、(R)-2-羥基-脂肪酸去氫酶、(S)-2-羥基-脂肪酸去氫酶、3-側氧基醯基-[醯基載體蛋白]還原酶、醯基甘油酮-磷酸還原酶、3-去氫鞘胺醇還原酶、L-蘇胺酸3-去氫酶、4-側氧基脯胺酸還原酶、全反式視黃醇去氫酶(NAD+)、泛解酸4-去氫酶、吡哆醛4-去氫酶、肉鹼3-去氫酶、吲哚乳酸去氫酶、3-(咪唑-5-基)乳酸去氫酶、茚滿醇去氫酶、L-木糖1-去氫酶、洋芹糖1-還原酶、核糖1-去氫酶(NADP+)、D-阿拉伯糖1-去氫酶、D-阿拉伯糖1-去氫酶[NAD(P)+]、葡萄糖1-去氫酶(NAD+)、葡萄糖1-去氫酶(NADP+)、半乳糖1-去氫酶(NADP+)、醛糖1-去氫酶、D-蘇醛糖1-去氫酶、山梨糖5-去氫酶(NADP+)、果糖5-去氫酶(NADP+)、2-去氧-D-葡萄糖酸3-去氫酶、2-去氫-3-去氧-D-葡萄糖酸6-去氫酶、2-去氫-3-去氧-D-葡萄糖酸5-去氫酶、L-艾杜糖酸2-去氫酶、L-蘇糖酸3-去氫酶、3-去氫-L-古洛糖酸2-去氫酶、甘露糖醛酸還原酶、GDP-甘露糖6-去氫酶、dTDP-4-去氫鼠李糖還原酶、dTDP-6-去氧-L-塔羅糖4-去氫酶、GDP-6-去氧-D-塔羅糖4-去氫酶、UDP-N-乙醯基葡萄糖胺6-去氫酶、核糖醇-5-磷酸2-去氫酶、甘露醇2-去氫酶(NADP+)、山梨醇-6-磷酸2-去氫酶、15-羥基前列腺素去氫酶(NAD+)、D-松醇去氫酶、 紅杉醇去氫酶、紫蘇乙醇去氫酶、3β-羥基-△5-類固醇去氫酶、11β-羥基類固醇去氫酶、16α-羥基類固醇去氫酶、雌二醇17α-去氫酶、20α-羥基類固醇去氫酶、21-羥基類固醇去氫酶(NAD+)、21-羥基類固醇去氫酶(NADP+)、3α-羥基-5β-雄甾烷-17-酮3α-去氫酶、墨喋呤還原酶、脲基羥乙酸去氫酶、甘油2-去氫酶(NADP+)、3-羥基丁醯基-CoA去氫酶、UDP-N-乙醯基胞壁酸去氫酶、7α-羥基類固醇去氫酶、雙氫丁萘酮去氫酶、膽甾烷四醇26-去氫酶、赤藻酮糖還原酶、環戊醇去氫酶、十六醇去氫酶、2-炔-1-醇去氫酶、羥基環己烷甲酸去氫酶、羥基丙二酸去氫酶、2-去氫泛酸內酯還原酶(A-特異性)、2-去氫泛解酸2-還原酶、3β-羥基-4α-甲基膽甾烯甲酸3-去氫酶(去羧)、2-側氧基己二酸還原酶、L-鼠李糖1-去氫酶、環己烷-1,2-二醇去氫酶、D-木糖1-去氫酶、12α-羥基類固醇去氫酶、甘油-3-磷酸酯1-去氫酶(NADP+)、3-羥基-2-甲基丁醯基-CoA去氫酶、D-木糖1-去氫酶(NADP+)、膽甾-5-烯-3β,7α-二醇3β-去氫酶、香葉醇去氫酶、羰基還原酶(NADPH)、甘油L-乙二醇去氫酶、dTDP-半乳糖6-去氫酶、GDP-4-去氫-D-鼠李糖還原酶、前列腺素-F合酶、前列腺素-E2 9-還原酶、吲哚-3-乙醛還原酶(NADH)、吲哚-3-乙醛還原酶(NADPH)、長鏈醇去氫酶、5-胺基-6-(5-磷酸核糖基胺基)尿嘧啶還原酶、松柏醇去氫酶、肉桂醇去氫酶、15-羥基前列腺素-D去氫酶(NADP+)、15-羥基前列腺素去氫酶(NADP+)、(+)-冰片去氫酶、(S)-地衣酸還原酶、醛糖-6-磷酸還原酶(NADPH)、7β-羥基類固醇去氫酶(NADP+)、1,3-丙二醇去氫酶、糖醛酸去氫酶、IMP去氫酶、托品酮還原酶I、(-)-薄荷醇去氫酶、(+)-新薄荷醇去氫酶、3(或17)α-羥基類固醇去氫酶、3β(或20α)-羥基類固醇去氫酶、長鏈3-羥基醯基-CoA去氫酶、3-側氧基醯基-[醯基載體蛋白]還原酶(NADH)、3α-羥基類固醇去氫酶(A-特異性)、2-去氫泛酸內酯還原酶(B-特異性)、葡萄糖酸2-去氫酶、法尼醇去氫酶、苄基-2-甲基-羥基 丁酸去氫酶、嗎啉6-去氫酶、二氫堪非醇4-還原酶、6-丙酮醯基四氫生物蝶呤2'-還原酶、吐葉醇4'-去氫酶、(R)-4-羥基苯基乳酸去氫酶、異薄荷烯醇去氫酶、甘露糖-6-磷酸6-還原酶、十氯酮還原酶、4-羥基環己烷甲酸去氫酶、(-)-冰片去氫酶、(+)-香檜醇去氫酶、2-甲基-3-側氧基琥珀酸二乙酯還原酶、3α-羥基甘草亭酸去氫酶、15-羥基前列腺素-I去氫酶(NADP+)、15-羥基二十碳四烯酸去氫酶、N-醯基甘露糖胺1-去氫酶、黃烷酮4-還原酶、8-側氧基助間型黴素還原酶、托品酮還原酶II、羥基苯基丙酮酸還原酶、12β-羥基類固醇去氫酶、3α(17β)-羥基類固醇去氫酶(NAD+)、N-乙醯基己糖胺1-去氫酶、6-內-羥基桉葉素去氫酶、香芹醇去氫酶、甲醇去氫酶、環己醇去氫酶、紫檀素合酶、可待因酮還原酶(NADPH)、沙羅泰裏啶還原酶(salutaridine reductase)(NADPH)、D-阿拉伯糖醇2-去氫酶、半乳糖醇-1-磷酸5-去氫酶、四羥基萘還原酶、(S)-肉鹼3-去氫酶、甘露醇去氫酶、茀-9-醇去氫酶、4-(羥甲基)苯磺酸去氫酶、6-羥基己酸去氫酶、3-羥基庚二醯基-CoA去氫酶、甲基庚烯酮還原酶、sn-gl甘油-1-磷酸去氫酶、4-羥基蘇胺酸-4-磷酸去氫酶、1,5-無水-D-果糖還原酶、L-艾杜糖酸5-去氫酶、3-甲基丁醛還原酶、dTDP-4-去氫-6-去氧葡萄糖還原酶、1-去氧-D-木酮糖-5-磷酸還原異構酶、2-(R)-羥丙基-CoM去氫酶、2-(S)-羥丙基-CoM去氫酶、3-酮-類固醇還原酶、GDP-L-岩藻糖合酶、(R)-2-羥基酸去氫酶、維洛斯明鹼去氫酶(vellosimine dehydrogenase)、2,5-二去氫葡萄糖酸還原酶、(+)-反式-香芹醇去氫酶、絲胺酸3-去氫酶、3β-羥基-5β-類固醇去氫酶、3β-羥基-5α-類固醇去氫酶、(R)-3-羥基酸酯去氫酶、(S)-3-羥基酸酯去氫酶、GDP-4-去氫-6-去氧-D-甘露糖還原酶、奎尼酸/莽草酸去氫酶、甲基乙二醛還原酶(NADPH依賴性)、S-(羥甲基)麩胱甘肽去氫酶、3"-去胺基-3"-側氧基菸鹼醯胺還原酶、異檸檬酸-高異檸檬酸去氫酶、D-阿拉伯糖醇去氫酶(NADP+)、黃氧 素去氫酶、山梨糖還原酶、4-磷酸蘇糖酸去氫酶、2-羥甲基戊二酸去氫酶、1,5-無水-D-果糖還原酶(形成1,5-無水-D-甘露醇)、葉綠素(酸酯)b還原酶、稻殼酮-A合酶、二氫香芹醇去氫酶、檸檬烯-1,2-二醇去氫酶、3-羥基丙酸去氫酶(NADP+)、蘋果酸去氫酶[NAD(P)+]、NADP-視黃醇去氫酶、D-阿拉伯糖醇-磷酸去氫酶、2,5-二胺基-6-(核糖基胺基)-4(3H)-嘧啶酮5'-磷酸還原酶、二乙醯基還原酶[形成(R)-乙偶姻]、二乙醯基還原酶[形成(S)-乙偶姻]、UDP-葡糖醛酸去氫酶(UDP-4-酮-己糖醛酸去羧)、S-(羥甲基)真菌硫醇去氫酶、D-木糖還原酶、磷酸乙醛還原酶(NADH)、磺基丙二醇3-去氫酶、(S)-磺基乳酸去氫酶、(S)-1-苯基乙醇去氫酶、2-羥基-4-羧基黏康酸酯半醛半縮醛去氫酶、磺基乙醛還原酶、吉瑪烯A醇去氫酶、及11-順式-視黃醇去氫酶)；或使用細胞色素作為受體者(包含甘露醇去氫酶(細胞色素)、L-乳酸去氫酶(細胞色素)、D-乳酸去氫酶(細胞色素)、D-乳酸去氫酶(細胞色素c-553)、聚乙烯醇去氫酶(細胞色素)、甲醇去氫酶(細胞色素c)及乙醇去氫酶(細胞色素c))；或使用氧作為受體者(包含蘋果酸氧化酶、葡萄糖氧化酶、己糖氧化酶、膽固醇氧化酶、芳基-醇氧化酶、L-古洛糖酸內酯氧化酶、半乳糖氧化酶、吡喃糖氧化酶、L-山梨糖氧化酶、吡哆醇4-氧化酶、乙醇氧化酶、兒茶酚氧化酶(二聚合)、(S)-2-羥基酸氧化酶、蛻化素氧化酶、膽鹼氧化酶、二級醇氧化酶、4-羥基扁桃酸氧化酶、長鏈醇氧化酶、甘油-3-磷酸氧化酶、硫胺素氧化酶、羥基植烷酸氧化酶、核苷氧化酶、N-醯基己糖胺氧化酶、聚乙烯基-醇氧化酶、D-阿拉伯糖-1,4-內酯氧化酶、香草基-醇氧化酶、核苷氧化酶(形成H2O2)及D-甘露醇氧化酶、醛醣醇氧化酶)；或使用二硫化物作為受體者(包含維他命-K-過氧化物還原酶(對華法林(warfarin)敏感)或維他命-K-過氧化物還原酶(對華法林不敏感))；或使用醌或類似化合物作為受體者(包含醌蛋白葡萄糖去氫酶、甘油-3-磷酸去氫 酶、蘋果酸去氫酶(醌)、醇去氫酶(醌)、甲酸去氫酶-N、環狀醇去氫酶(醌)及奎尼酸去氫酶(奎寧(quinine)))；或使用其他已知受體者(包含乙醇去氫酶(天青蛋白)及葡萄糖-6-磷酸去氫酶(輔酶-F420))；或使用其他受體者(包含膽鹼去氫酶、2-羥基戊二酸去氫酶、葡萄糖酸2-去氫酶(受體)、去氫葡萄糖酸去氫酶、D-2-羥基酸去氫酶、乳酸-蘋果酸轉氫酶、吡哆醇5-去氫酶、葡萄糖去氫酶(受體)、果糖5-去氫酶、山梨糖去氫酶、葡萄糖苷3-去氫酶、羥乙酸去氫酶、纖維二醣去氫酶(受體)、烷烴-1-醇去氫酶(受體)、D-山梨糖醇去氫酶(受體)、甘油去氫酶(受體)、羥基酸-側氧基酸轉氫酶、3-羥基環己酮去氫酶、(R)-泛酸內酯去氫酶(黃素)、葡萄糖-果糖氧化還原酶、吡喃糖去氫酶(受體)、2-側氧基酸還原酶、(S)-扁桃酸去氫酶、L-山梨糖1-去氫酶、甲酸去氫酶(受體)、可溶性醌蛋白葡萄糖去氫酶、NDMA依賴性乙醇去氫酶及NDMA依賴性甲醇去氫酶)。
作用於供體之醛或側氧基基團上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(包含甲酸去氫酶、乙醛去氫酶(NAD+)、乙醛去氫酶(NADP+)、乙醛去氫酶[NAD(P)+]、苯甲醛去氫酶(NADP+)、甜菜鹼-醛去氫酶、甘油醛-3-磷酸去氫酶(NADP+)、乙醛去氫酶(乙醯化)、天冬酸鹽-半醛去氫酶、甘油醛-3-磷酸去氫酶(磷酸化)、甘油醛-3-磷酸去氫酶(NADP+)(磷酸化)、丙二酸-半醛去氫酶、琥珀酸-半醛去氫酶[NAD(P)+]、乙醛酸去氫酶(醯化)、丙二酸-半醛去氫酶(乙醯化)、胺基丁醛去氫酶、戊二酸酯-半醛去氫酶、羥乙醛去氫酶、乳酸醛去氫酶、2-側氧基醛去氫酶(NAD+)、琥珀酸-半醛去氫酶(NAD+)、2-側氧基異戊酸去氫酶(醯化)、2,5-二側氧基戊酸去氫酶、甲基丙二酸-半醛去氫酶(醯化)、苯甲醛去氫酶(NAD+)、芳基-醛去氫酶、芳基-醛去氫酶(NADP+)、L-胺基己二酸-半醛去氫酶、胺基黏康酸-半醛去氫酶、(R)-去氫泛解酸去氫酶、視黃醛去氫酶、N-乙醯 基-γ-麩胺醯基-磷酸還原酶、苯基乙醛去氫酶、3α,7α,12α-三羥基膽甾烷-26-醛26-氧化還原酶、麩胺酸-5-半醛去氫酶、十六醛去氫酶(醯化)、甲酸去氫酶(NADP+)、肉桂醯基-CoA還原酶、甲醛去氫酶、4-三甲基胺基丁醛去氫酶、長鏈乙醛去氫酶、2-側氧基乙醛去氫酶(NADP+)、長鏈脂肪-醯基-CoA還原酶、丙酮酸去氫酶(NADP+)、側氧基戊二酸去氫酶(NADP+)、4-羥基苯基乙醛去氫酶、γ-胍基丁醛去氫酶、丁醛去氫酶、苯基乙醛酸去氫酶(醯化)、甘油醛-3-磷酸去氫酶(NAD(P)+)(磷酸化)、5-羧基甲基-2-羥基黏康酸-半醛去氫酶、4-羥基黏康酸半醛去氫酶、4-甲醯基苯磺酸去氫酶、6-側氧基己酸去氫酶、4-羥基苯甲醛去氫酶、柳基乙醛去氫酶、香草醛去氫酶、c松柏醛去氫酶、氟乙醛去氫酶、麩醯胺基-tRNA還原酶、琥珀醯基麩胺酸-半醛去氫酶、赤蘚糖-4-磷酸去氫酶、磺基乙醛去氫酶、松香二烯醛去氫酶、丙二醯基CoA還原酶(形成丙二酸酯半醛)、琥珀酸-半醛去氫酶(乙醯化)、3,4-去氫己二醯基-CoA半醛去氫酶(NADP+)、2-甲醯基苯甲酸去氫酶、琥珀酸-半醛去氫酶(NADP+)、長鏈醯基-[醯基載體蛋白]還原酶、磺基乙醛去氫酶(醯化)及β-apo-4'-胡蘿蔔醛氧合酶)；或使用細胞色素作為受體者(包含甲酸去氫酶(細胞色素)、甲酸去氫酶(細胞色素-c-553)及一氧化碳去氫酶(細胞色素-b-561))；或使用氧作為受體者(包含乙醛氧化酶、丙酮酸氧化酶、草酸氧化酶、乙醛酸氧化酶、丙酮酸氧化酶(CoA-乙醯化)、吲哚-3-乙醛氧化酶、吡哆醛氧化酶、芳基-醛氧化酶、視黃醛氧化酶、4-羥基苯基丙酮酸氧化酶及脫落醛氧化酶)；或使用二硫化物作為受體者(包含丙酮酸去氫酶(乙醯基轉移)、側氧基戊二酸去氫酶(琥珀醯基轉移)及3-甲基-2-側氧基丁酸去氫酶(2-甲基丙醯基轉移))；或使用醌或類似化合物作為受體者(包含丙酮酸去氫酶(醌))；或使用鐵硫蛋白作為受體者(包含丙酮酸合酶、2-側氧基丁酸合酶、2-側氧基戊二酸合酶、一氧化碳去氫酶(鐵氧化還 原蛋白)、乙醛鐵氧化還原蛋白氧化還原酶、甘油醛-3-磷酸去氫酶(鐵氧化還原蛋白)、3-甲基-2-側氧基丁酸去氫酶(鐵氧化還原蛋白)、吲哚丙酮酸鐵氧化還原蛋白氧化還原酶及草酸氧化還原酶)；或使用其他受體者(包含一氧化碳去氫酶(受體)、乙醛去氫酶(吡咯并喹啉-醌)、甲醛歧化酶、甲醯基甲烷呋喃去氫酶、甲酸還原酶及乙醛去氫酶(FAD獨立性))。
作用於供體之CH-CH基團上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，二氫嘧啶去氫酶(NAD+)、二氫嘧啶去氫酶(NADP+)、△4-3-側氧基類固醇5β-還原酶、可的松α-還原酶(cortisone α-reductase)、葫蘆素△23-還原酶、富馬酸還原酶(NADH)、內消旋-酒石酸去氫酶、醯基-CoA去氫酶(NADP+)、烯醯基-[醯基載體蛋白]還原酶(NADH)、烯醯基-[醯基載體蛋白]還原酶(NADPH，B-特異性)、2-香豆酸還原酶、預苯酸去氫酶、預苯酸去氫酶(NADP+)、二氫乳清酸去氫酶(NAD+)、二氫乳清酸去氫酶(NADP+)、β-硝基丙烯酸還原酶、3-亞甲基羥吲哚還原酶、犬尿喹啉酸-7,8-二氫二醇去氫酶、順式-1,2-二氫苯-1,2-二醇去氫酶、反式-1,2-二氫苯-1,2-二醇去氫酶、7-去氫膽固醇還原酶、膽甾烯酮5α-還原酶、膽綠素還原酶、1,6-二羥基環己-2,4-二烯-1-甲酸去氫酶、二氫吡啶二甲酸還原酶、2-十六烷烯醛還原酶、2,3-二氫-2,3-二羥基苯甲酸去氫酶、順式-1,2-二氫-1,2-二羥基萘去氫酶、孕酮5α-還原酶、2-烯酸還原酶、馬來醯乙酸還原酶、原葉綠素酸酯還原酶、2,4-二烯醯基-CoA還原酶(NADPH)、磷脂醯膽鹼去飽和酶、縫籽嗪去氫酶、順式-2-烯醯基-CoA還原酶(NADPH)、反式-2-烯醯基-CoA還原酶(NADPH)、烯醯基-[醯基載體蛋白]還原酶(NADPH，A-特異性)、2-羥基-6-側氧基-6-苯基己-2,4-二烯酸還原酶、眼黃素還原酶、12-側氧基植物二烯酸還原酶、阿羅酸去氫酶、反式-2-烯醯基-CoA還原酶(NAD+)、2'-羥 基異黃酮還原酶、鷹嘴豆芽素-A還原酶、α-山道年1,2-還原酶(α-santonin 1,2-reductase)、15-側氧基前列腺素13-氧化酶、順式-3,4-二氫菲-3,4-二醇去氫酶、2'-羥基大豆異黃酮苷素還原酶、2-甲基-具支鏈-烯醯基-CoA還原酶、(3S,4R)-3,4-二羥基環己-1,5-二烯-1,4-二甲酸去氫酶、前咕啉-6A還原酶、順式-2,3-二氫聯苯-2,3-二醇去氫酶、間苯三酚還原酶、2,3-二羥基-2,3-二氫-對-異丙基苯甲酸甲酯去氫酶、二苯并噻吩二氫二醇去氫酶、對苯二甲酸1,2-順式-二氫二醇去氫酶、庚二醯基-CoA去氫酶、2,4-二氯苯甲醯基-CoA還原酶、鄰苯二甲酸4,5-順式-二氫二醇去氫酶、5,6-二羥基-3-甲基-2-側氧基-1,2,5,6-四氫喹啉去氫酶、順式-二氫乙基兒茶酚去氫酶、順式-1,2-二羥基-4-甲基環己-3,5-二烯-1-甲酸去氫酶、1,2-二羥基-6-甲基環己-3,5-二烯甲酸去氫酶、玉米素還原酶、△14-類固醇還原酶、△24(241)-類固醇還原酶、△24-類固醇還原酶、1,2-二氫吐楞寧還原酶、2-烯醛還原酶、二乙烯基葉綠素酸酯a 8-乙烯基-還原酶、前咕啉-2去氫酶、花色素還原酶、阿羅酸去氫酶(NADP+)、阿羅酸去氫酶[NAD(P)+]、紅色葉綠素代謝產物還原酶、(+)-胡薄荷酮還原酶、(-)-異薄荷二烯酮還原酶、櫳牛兒基櫳牛兒基二磷酸還原酶、丙烯醯基-CoA還原酶(NADPH)、巴豆醯基-CoA羧酶/還原酶、巴豆醯基-CoA還原酶、3-(順式-5,6-二羥基環己-1,3-二烯-1-基)丙酸去氫酶、tRNA-二氫尿苷16/17合酶[NAD(P)+]、tRNA-二氫尿苷47合酶[NAD(P)+]、tRNA-二氫尿苷20a/20b合酶[NAD(P)+]及tRNA-二氫尿苷20合酶[NAD(P)+])；或使用細胞色素作為受體者，例如L-半乳糖酸內酯去氫酶；或使用氧作為受體者(例如，糞卟啉原氧化酶、原卟啉原氧化酶、膽紅素氧化酶、醯基-CoA氧化酶、二氫尿嘧啶氧化酶、四氫小蘖鹼氧化酶、斷馬錢子甙合酶、色胺酸α,β-氧化酶、吡咯并喹啉-醌合酶及L-半乳糖酸內酯氧化酶)；或使用奎寧或相關化合物作為受體者(例如，琥珀酸去氫酶(泛醌)、二氫乳 清酸去氫酶(醌)、原卟啉原IX去氫酶(甲基萘醌)、富馬酸還原酶(甲基萘醌)、15-順式-八氫番茄紅素去飽和酶及9,9'-二順式-ζ-胡蘿蔔素去飽和酶)；或使用鐵硫蛋白作為受體者(例如，6-羥基菸鹼酸還原酶、15,16-二氫膽綠素：鐵氧化還原蛋白氧化還原酶、藻紅素：鐵氧化還原蛋白氧化還原酶、植物光敏膽色素：鐵氧化還原蛋白氧化還原酶、藻藍素：鐵氧化還原蛋白氧化還原酶、藻紅素合酶、鐵氧化還原蛋白：原葉綠素酸酯還原酶(ATP依賴性)、苯甲醯基-CoA還原酶及4-羥基苯甲醯基-CoA還原酶)；或使用黃素作為受體者(例如，丁醯基-CoA去氫酶或4,4'-雙阿樸八氫番茄紅素去飽和酶)；或使用其他已知受體者(例如二氫乳清酸去氫酶(富馬酸酯))或使用其他受體者(例如，琥珀酸去氫酶、醯基-CoA去氫酶、3-側氧基類固醇1-去氫酶、3-側氧基-5α-類固醇4-去氫酶、3-側氧基-5β-類固醇4-去氫酶、戊二醯基-CoA去氫酶、2-呋喃甲醯基-CoA去氫酶、異戊醯基-CoA去氫酶、2-甲基醯基-CoA去氫酶、長鏈醯基-CoA去氫酶、環己酮去氫酶、異喹啉1-氧化還原酶、喹啉2-氧化還原酶、喹哪啶酸4-氧化還原酶、喹啉-4-甲酸2-氧化還原酶、(R)-苄基琥珀醯基-CoA去氫酶、糞卟啉原去氫酶、全反式-視黃醇13,14-還原酶、2-胺基-4-去氧分支酸去氫酶、香芹酮還原酶、全反式-ζ-胡蘿蔔素去飽和酶、1-羥基類胡蘿蔔素3,4-去飽和酶、八氫番茄紅素去飽和酶(形成鏈孢紅素)、八氫番茄紅素去飽和酶(ζ-胡蘿蔔素形成)、八氫番茄紅素去飽和酶(形成3,4-二去氫番茄紅素)及八氫番茄紅素去飽和酶(形成番茄紅素))。
作用於供體之CH-NH2基團上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，丙胺酸去氫酶、麩胺酸去氫酶、麩胺酸去氫酶[NAD(P)+]、麩胺酸去氫酶(NADP+)、L-胺基酸去氫酶、絲胺酸2-去氫酶、纈胺酸去氫酶(NADP+)、亮胺酸去氫酶、甘胺酸去氫酶、L-赤型-3,5-二胺基己酸去氫酶、2,4-二胺基戊酸去氫酶、 麩胺酸合酶(NADPH)、麩胺酸合酶(NADH)、離胺酸去氫酶、二胺基庚二酸去氫酶、N-甲基丙胺酸去氫酶、離胺酸6-去氫酶、色胺酸去氫酶、苯基丙胺酸去氫酶及天冬酸去氫酶)；或使用細胞色素作為受體者(例如甘胺酸去氫酶(細胞色素))；或使用氧作為受體者(例如D-天冬酸氧化酶、L-胺基酸氧化酶、D-胺基酸氧化酶、胺氧化酶、吡哆醛5'-磷酸酯合酶、D-麩胺酸氧化酶、乙醇胺氧化酶、腐胺氧化酶、L-麩胺酸氧化酶、環己烷氧化酶、蛋白質-離胺酸6-氧化酶、L-離胺酸氧化酶、D-麩胺酸(D-天冬酸)氧化酶、L-天冬酸氧化酶、甘胺酸氧化酶、L-離胺酸6-氧化酶、一級胺氧化酶、二胺氧化酶及7-氯-L-色胺酸氧化酶)或使用二硫化物作為受體者(例如甘胺酸去氫酶(去羧))；或使用奎寧或類似化合物作為受體者(例如D-胺基酸去氫酶(醌))；或使用鐵硫蛋白作為受體者(例如麩胺酸合酶(鐵氧化還原蛋白))；或使用銅蛋白作為受體者(例如甲胺去氫酶(阿米亞因(amicyanin))及芳烷基胺去氫酶(天青蛋白))；及使用其他受體者(例如D-胺基酸去氫酶、牛磺酸去氫酶及甘胺酸去氫酶(形成氰化物))。
作用於供體之CH-NH基團上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，吡咯啉-2-甲酸還原酶、吡咯啉-5-甲酸還原酶、二氫葉酸還原酶、亞甲基四氫葉酸去氫酶(NADP+)、甲醯基四氫葉酸去氫酶、酵母胺酸去氫酶(NAD+，形成L-離胺酸)、酵母胺酸去氫酶(NADP+，形成L-離胺酸)、酵母胺酸去氫酶(NAD+，形成L-麩胺酸)、酵母胺酸去氫酶(NADP+，形成L-麩胺酸)、D-章魚鹼去氫酶、1-吡咯啶-5-甲酸去氫酶、亞甲基四氫葉酸去氫酶(NAD+)、D-賴章胺酸去氫酶、阿蘭鹼去氫酶、麻黃鹼去氫酶、D-胭脂鹼去氫酶、亞甲基四氫葉酸還原酶[NAD(P)H]、△1-六氫吡啶-2-甲酸還原酶、N-羥甲基-L-丙胺酸去氫酶、牛磺奧品去氫酶、N 5-(羧基乙基)鳥胺酸合酶、硫代嗎啉-甲酸去氫酶、β-阿蘭鹼去氫酶、1,2-去氫 瑞枯靈還原酶(NADPH)、冠癭胺基酸去氫酶、黃素還原酶(NADPH)、小蘖鹼還原酶、吐楞寧還原酶、喋啶還原酶、6,7-二氫喋啶還原酶、黃素還原酶(NADH)、FAD還原酶(NADH)、FMN還原酶(NADPH)、FMN還原酶[NAD(P)H]、8-羥基-5-脫氮黃素：NADPH氧化還原酶、核黃素|還原酶[NAD(P)H]及FMN還原酶(NADH))；使用氧作為受體者(例如，肌胺酸氧化酶、N-甲基-L-胺基酸氧化酶、N 6-甲基-離胺酸氧化酶、(S)-6-羥基菸鹼氧化酶、(R)-6-羥基菸鹼氧化酶、L-六氫吡啶甲酸氧化酶、二甲基甘胺酸氧化酶、二氫苯并啡啶氧化酶、N 1-乙醯基多胺氧化酶、多胺氧化酶(形成丙烷-1,3-二胺)、N 8-乙醯基精脒氧化酶(形成丙烷-1,3-二胺)、精胺氧化酶、非特異性多胺氧化酶及L-酵母胺酸氧化酶)；使用二硫化物作為受體者(例如嘧啶并二氮呯合酶)；使用奎寧或類似化合物作為受體者(例如電子轉移黃素蛋白去氫酶)；使用鐵硫蛋白作為受體者(例如亞甲基四氫葉酸還原酶(鐵氧化還原蛋白))；使用黃素作為受體者(例如二甲胺去氫酶及三甲胺去氫酶)；及使用其他受體者(例如，肌胺酸去氫酶、二甲基甘胺酸去氫酶、L-六氫吡啶甲酸去氫酶、菸鹼去氫酶、甲基麩胺酸去氫酶、精脒去氫酶、脯胺酸去氫酶、亞甲基四氫甲烷蝶呤去氫酶、5,10-亞甲基四氫甲烷蝶呤還原酶、細胞分裂素去氫酶及D-脯胺酸去氫酶)。
作用於NADH或NADPH上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，NAD(P)+轉氫酶(B-特異性)及NAD(P)+轉氫酶(AB-特異性))；使用血紅素蛋白作為受體者(例如細胞色素-b 5還原酶、NADPH-血紅素蛋白還原酶、NADPH-細胞色素-c 2還原酶及豆血紅蛋白還原酶)；使用氧作為受體者(例如NAD(P)H氧化酶)；使用奎寧或類似化合物作為受體者(例如，NAD(P)H去氫酶(醌)、NADH：泛醌還原酶(轉移H+)、單去氫抗壞血酸還原酶(NADH)、NADPH：醌還原酶、對苯醌還原酶(NADPH)、2-羥基-1,4-苯醌還原 酶、NADH：泛醌還原酶(傳輸Na+)、NADH：泛醌還原酶(不生電)及NADPH去氫酶(醌))；使用含氮基團作為受體者(例如三甲胺-N-氧化物還原酶)；使用鐵硫蛋白作為受體者；使用黃素作為受體者；及使用其他受體者(例如，NADPH去氫酶、NADH去氫酶、NADH去氫酶(醌))。
作用於作為供體之其他含氮化合物上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，硝酸還原酶(NADH)、硝酸還原酶[NAD(P)H]、硝酸還原酶(NADPH)、亞硝酸還原酶[NAD(P)H]、連二次硝酸還原酶、偶氮苯還原酶、GMP還原酶、硝基喹啉-N-氧化物還原酶、羥基胺還原酶(NADH)、4-(二甲基胺基)苯基氧化偶氮苯還原酶、N-羥基-2-乙醯胺基茀還原酶、preQ1還原酶及一氧化氮還原酶[NAD(P)，形成一氧化二氮])；使用細胞色素作為受體者(例如亞硝酸還原酶(形成NO)、亞硝酸還原酶(細胞色素；形成氨)、三甲胺-N-氧化物還原酶(細胞色素c)、一氧化二氮還原酶及一氧化氮還原酶(細胞色素c))；使用氧作為受體者(例如，硝基烷氧化酶、乙醯吲哚氧化酶、因子獨立性尿酸羥化酶、羥基胺氧化酶及3-酸式-硝基丙酸氧化酶)；使用醌或類似化合物作為受體者(例如硝酸還原酶(醌)及一氧化氮還原酶(甲基萘醌))；使用含氮基團作為受體者(例如亞硝酸歧化酶)；使用鐵硫蛋白作為受體者(例如，鐵氧化還原蛋白-亞硝酸還原酶及鐵氧化還原蛋白-硝酸還原酶)；及使用其他受體者(例如，羥基胺還原酶、硝酸還原酶及肼氧化還原酶)。
作用於供體之硫基團上之氧化還原酶可包含但不限於彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，亞硫酸還原酶(NADPH)、亞牛磺酸去氫酶、二氫硫辛醯基去氫酶、2-側氧基丙基-CoM還原酶(羧化)、胱胺酸還原酶、麩胱甘肽-二硫化物還原酶、蛋白質-二硫化物還原酶、硫氧化還原蛋白-二硫化物還原酶、CoA-麩胱甘肽還原酶、天冬酸還 原酶、麩胱甘醯亞精胺-二硫化物還原酶、雙-γ-麩胺醯半胱胺酸還原酶、CoA-二硫化物還原酶、真菌硫酮還原酶、麩胱甘肽醯胺還原酶及二甲基碸還原酶)；使用細胞色素作為受體者(例如，亞硫酸去氫酶、硫代硫酸去氫酶硫化物-細胞色素-c還原酶(黃素細胞色素c)及二甲基硫化物：細胞色素c 2還原酶)、使用氧作為受體者(例如亞硫酸氧化酶、硫醇氧化酶、麩胱甘肽氧化酶、甲硫醇氧化酶、異戊二烯基半胱胺酸氧化酶及法尼半胱胺酸裂解酶)、使用二硫化物作為受體者(例如，麩胱甘肽-高胱胺酸轉氫酶、蛋白質-二硫化物還原酶(麩胱甘肽)、麩胱甘肽-CoA-麩胱甘肽轉氫酶、麩胱甘肽-胱胺酸轉氫酶、酵素-硫醇轉氫酶(麩胱甘肽-二硫化物)、磷酸腺苷醯-硫酸還原酶(硫氧化還原蛋白)、腺苷醯-硫酸還原酶(麩胱甘肽)、腺苷醯-硫酸還原酶(硫氧化還原蛋白)、肽-甲硫胺酸(S)-S-氧化物還原酶、肽-甲硫胺酸(R)-S-氧化物還原酶、L-甲硫胺酸(S)-S-氧化物還原酶及L-甲硫胺酸(R)-S-氧化物還原酶)；使用奎寧或類似化合物作為受體者(例如，麩胱甘肽去氫酶(抗壞血酸酯)、硫代硫酸去氫酶(醌)、二甲基亞碸還原酶及硫化物：醌還原酶)；使用含氮基團作為受體者；使用鐵硫蛋白作為受體者(例如亞硫酸還原酶(鐵氧化還原蛋白)及鐵氧化還原蛋白：硫氧化還原蛋白還原酶)；使用其他已知受體者(例如CoB-CoM異二硫化物還原酶及硫氧化還原蛋白)；及使用其他受體者(例如亞硫酸還原酶、腺苷醯-硫酸還原酶及亞硫酸氫還原酶)。
作用於供體之血紅素基團上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用氧作為受體者(例如細胞色素-c氧化酶)；使用含氮基團作為受體者(例如硝酸還原酶(細胞色素))及使用其他受體者(例如鐵-細胞色素-c還原酶)。
作用於作為供體之二酚及相關物質上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如反式-苊-1,2-二醇去 氫酶)；使用細胞色素作為受體者(例如L-抗壞血酸-細胞色素-b 5還原酶及泛醇-細胞色素-c還原酶)；使用氧作為受體者(例如，兒茶酚氧化酶、漆酶、L-抗壞血酸氧化酶、鄰-胺基苯酚氧化酶、3-羥基鄰胺基苯甲酸氧化酶、利福黴素-B氧化酶(rifamycin-B oxidase)、光系統II、泛醇氧化酶(傳輸H+)、泛醇氧化酶及甲基萘醌氧化酶(傳輸H+))；及使用其他受體者(例如，質體醌醇一質體藍素還原酶、核糖基二氫菸鹼醯胺去氫酶(醌)及堇菜黃質去環氧酶)。
作用於作為受體之過氧化物上之氧化還原酶可包含但不限於過氧化物酶(例如，NADH過氧化物酶、NADPH過氧化物酶、脂肪酸過氧化物酶、細胞色素-c過氧化物酶、過氧化氫酶、過氧化物酶、碘化物過氧化物酶、麩胱甘肽過氧化物酶、氯化物過氧化物酶、L-抗壞血酸過氧化物酶、磷脂-氫過氧化物麩胱甘肽過氧化物酶、錳過氧化物酶、木質素過氧化物酶、過氧化物還原酶、多功能過氧化物酶、麩胱甘肽醯胺依賴性過氧化物酶、溴化物過氧化物酶、染料去色過氧化物酶、前列腺醯胺/前列腺素F2α合酶、過氧化氫酶-過氧化物酶)及彼等使用H2O2(其一個氧原子包含於產物中)作為受體者(例如非特異性過氧酶、髓過氧酶、植物種子過氧酶及脂肪酸過氧酶)。
作用於作為供體之氫上之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，氫去氫酶、氫去氫酶(NADP+)及氫化酶(NAD+，鐵氧化還原蛋白))；使用細胞色素作為受體者(例如細胞色素-c 3氫化酶)；使用奎寧或類似化合物作為受體者(例如氫：醌氧化還原酶)；使用鐵硫蛋白作為受體者(例如鐵氧化還原蛋白氫化酶)；使用其他已知受體者(例如，輔酶F420氫化酶、5,10-次甲基四氫甲烷蝶呤氫化酶及甲烷八疊球菌-吩嗪氫化酶(Methanosarcina-phenazine hydrogenase))及使用其他受體者(例如氫化酶(受體))。
作用於單一供體上且包含分子氧之氧化還原酶(氧合酶)可包含但 不限於：彼等包含兩個氧原子者(例如，兒茶酚1,2-二氧合酶、兒茶酚2,3-二氧合酶、原兒茶酸3,4-二氧合酶、龍膽酸1,2-二氧合酶、尿黑酸1,2-二氧合酶、3-羥基鄰胺基苯甲酸3,4-二氧合酶、原兒茶酸4,5-二氧合酶、2,5-二羥基吡啶5,6-二氧合酶、7,8-二羥基犬尿喹啉酸8,8a-二氧合酶、色胺酸2,3-二氧合酶、亞油酸13S-脂氧合酶、抗壞血酸2,3-二氧合酶、2,3-二羥基苯甲酸3,4-二氧合酶、3,4-二羥基苯基乙酸2,3-二氧合酶、3-羧基乙基兒茶酚2,3-二氧合酶、吲哚2,3-二氧合酶、硫二氧合酶、半胱胺二氧合酶、半胱胺酸二氧合酶、咖啡酸3,4-二氧合酶、2,3-二羥基吲哚2,3-二氧合酶、槲皮素2,3-二氧合酶、3,4-二羥基-9,10-閉聯雄-1,3,5(10)-三烯-9,17-二酮4,5-二氧合酶、肽-色胺酸2,3-二氧合酶、4-羥基苯基丙酮酸二氧合酶、2,3-二羥基苯甲酸2,3-二氧合酶、羧基-γ-吡喃酮丙胺酸合酶、羧基-α-吡喃酮丙胺酸合酶、花生四烯酸12-脂氧合酶、花生四烯酸15-脂氧合酶、花生四烯酸5-脂氧合酶、焦性沒食子酸1,2-氧合酶、氯草敏-兒茶酚二氧合酶(chloridazon-catechol dioxygenase)、苯三酚1,2-二氧合酶、1-羥基-2-萘甲酸1,2-二氧合酶、聯苯-2,3-二醇1,2-二氧合酶、花生四烯酸8-脂氧合酶、2,4'-二羥基苯乙酮二氧合酶、木質二苯乙烯αβ-二氧合酶、亞油酸二醇合酶、亞油酸11-脂氧合酶、4-羥基扁桃酸合酶、3-羥基-4-側氧基喹啉2,4-二氧合酶、3-羥基-2-甲基-喹啉-4-酮2,4-二氧合酶、亞氯酸O2-裂解酶、乙醯基丙酮解離酵素、9-順式-環氧類胡蘿蔔素二氧合酶、吲哚胺2,3-二氧合酶、酸式還原二氧合酶(需要Ni2+)、酸式還原二氧合酶[需要鐵(II)]、硫氧合酶/還原酶、1,2-二羥基萘二氧合酶、沒食子酸二氧合酶、亞油酸9S-脂氧合酶及紅酵母烯二氧合酶)；包含一個氧原子者(內單氧合酶或內混合功能氧化酶)(例如，精胺酸2-單氧合酶、離胺酸2-單氧合酶、色胺酸2-單氧合酶、乳酸2-單氧合酶、花蟲螢光素2-單氧合酶(Renilla-luciferin 2-monooxygenase)、海螢火蟲螢光素2-單 氧合酶(Cypridina-luciferin 2-monooxygenase)、螢火蟲螢光素4-單氧合酶(Photinus-luciferin 4-monooxygenase)(水解ATP)、烏賊螢光素2-單氧合酶(Watasenia-luciferin 2-monooxygenase)、苯基丙胺酸2-單氧合酶、apo-β-類胡蘿蔔素-14',13'-二氧合酶、刺蝦螢光素2-單氧合酶(Oplophorus-luciferin 2-monooxygenase)、3,4-二羥基苯基丙胺酸氧化去胺酶、氮酸單氧合酶、二氯空黴菌黃素A合酶(dichloroarcyriaflavin A synthase)、甲藻螢光素酶及2-側氧基戊二酸二氧合酶(形成乙烯))；肌醇氧合酶及色胺酸2'-二氧合酶。
作用於成對供體上且包含或還原分子氧之氧化還原酶可包含但不限於：彼等使用抗壞血酸酯作為一個供體、使用經還原喋啶作為一個供體、使用2-側氧基戊二酸作為一個供體且在兩個供體中各包含一個氧原子者(例如γ-丁基甜菜鹼二氧合酶、前膠原-脯胺酸二氧合酶、嘧啶-去氧核苷2'-二氧合酶、前膠原-離胺酸5-二氧合酶、胸腺嘧啶二氧合酶、前膠原-脯胺酸3-二氧合酶、三甲基離胺酸二氧合酶、黃烷酮3-二氧合酶、嘧啶-去氧核苷1'-二氧合酶、莨菪鹼(6S)-二氧合酶、赤黴素-44二氧合酶、赤黴素2β-二氧合酶、6β-羥基莨菪鹼環氧酶、赤黴素3β-二氧合酶、肽-天冬酸β-二氧合酶、牛磺酸二氧合酶、植烷醯基-CoA二氧合酶、無色矢車菊素氧合酶、去乙醯氧基文多靈4-羥化酶(deacetoxyvindoline 4-hydroxylase)、棒烷酸合酶、黃酮合酶、黃酮醇合酶、2'-去氧麥根酸2'-二氧合酶、麥根酸3-二氧合酶、去乙醯氧基頭孢菌素-C羥化酶、[組蛋白-H3]-離胺酸-36去甲基酶、脯胺酸3-羥化酶、低氧誘導因子-脯胺酸二氧合酶、低氧誘導因子-天門冬醯胺酸二氧合酶、蒂巴因6-O-去甲基酶、可待因3-O-去甲基酶、DNA氧化去甲基酶及2-側氧基戊二酸/L-精胺酸單氧合酶/去羧酶(形成琥珀酸酯))；使用NADH或NADPH作為一個供體且在一個供體中包含兩個氧原子者(例如，鄰胺基苯甲酸1,2-二氧合酶(去胺、去羧)、苯1,2-二氧合酶、 3-羥基-2-甲基吡啶甲酸二氧合酶、5-吡哆酸二氧合酶、鄰苯二甲酸4,5-二氧合酶、4-硫苯甲酸3,4-二氧合酶、4-氯苯基乙酸3,4-二氧合酶、苯甲酸1,2-二氧合酶、甲苯二氧合酶、萘1,2-二氧合酶、2-氯苯甲酸1,2-二氧合酶、2-胺基苯磺酸2,3-二氧合酶、對苯二甲酸1,2-二氧合酶、2-羥基喹啉5,6-二氧合酶、一氧化氮二氧合酶、聯苯2,3-二氧合酶、3-苯基丙酸二氧合酶、脫鎂葉綠酸a氧合酶、苯甲醯基-CoA2,3-二氧合酶及咔唑1,9a-二氧合酶)；使用NADH或NADPH作為一個供體且包含一個氧原子者(例如，水楊酸1-單氧合酶、4-羥基苯甲酸3-單氧合酶、黃木樨酸3-單氧合酶、咪唑乙酸4-單氧合酶、地衣酸2-單氧合酶、苯酚2-單氧合酶、含有黃素之單氧合酶、犬尿胺酸3-單氧合酶、2,6-二羥基吡啶3-單氧合酶、反式-肉桂酸4-單氧合酶、苯甲酸4-單氧合酶、骨化二醇1-單氧合酶、反式-肉桂酸2-單氧合酶、膽甾烷三醇26-單氧合酶、環戊酮單氧合酶、膽固醇7α-單氧合酶、4-羥基苯基乙酸1-單氧合酶、黃杉素8-單氧合酶、2,4-二氯苯酚6-單氧合酶、類黃酮3'-單氧合酶、環己酮單氧合酶、3-羥基苯甲酸4-單氧合酶、3-羥基苯甲酸6-單氧合酶、甲烷單氧合酶(可溶)、磷脂醯膽鹼12-單氧合酶、4-胺基苯甲酸1-單氧合酶、3,9-二羥基紫檀烷6a-單氧合酶、4-硝基苯酚2-單氧合酶、白三烯-B4 20-單氧合酶、2-硝基苯酚2-單氧合酶、阿苯達唑單氧合酶(albendazole monooxygenase)、4-羥基苯甲酸3-單氧合酶[NAD(P)H]、白三烯-E4 20-單氧合酶、鄰胺基苯甲酸3-單氧合酶(去胺)、5-O-(4-香豆醯基)-D-奎尼酸3'-單氧合酶、甲基四氫原小蘖鹼14-單氧合酶、無水四環素單氧合酶、一氧化氮合酶、鄰胺基基苯甲醯基-CoA單氧合酶、酪胺酸N-單氧合酶、大黃素-8-單甲醚單氧合酶、2-羥基聯苯3-單氧合酶、(-)-薄荷醇單氧合酶、(S)-檸檬烯3-單氧合酶、(S)-檸檬烯6-單氧合酶、(S)-檸檬烯7-單氧合酶、五氯苯酚單氧合酶、6-側氧基桉葉素去氫酶、異黃酮3'-羥化酶、4'-甲氧基異黃酮 2'-羥化酶、酮類固醇單氧合酶、原阿片鹼6-單氧合酶(protopine 6-monooxygenase)、二氫血根鹼10-單氧合酶、二氫白屈菜玉紅鹼12-單氧合酶、苯甲醯基-CoA 3-單氧合酶、L-離胺酸6-單氧合酶(NADPH)、27-羥基膽固醇7α-單氧合酶、2-羥基喹啉8-單氧合酶、4-羥基喹啉3-單氧合酶、3-羥基苯基乙酸6-羥化酶、4-羥基苯甲酸1-羥化酶、2-羥基環己酮2-單氧合酶、奎寧3-單氧合酶、4-羥基苯基乙醛肟單氧合酶、烯烴單氧合酶、類固醇14-去甲基酶、N-甲基烏藥鹼3'-單氧合酶、甲基類固醇單氧合酶、水甘草鹼16-羥化酶、7-去氧番木鼈苷7-羥化酶、維諾任鹼羥化酶、紫杉烷10β-羥化酶、紫杉烷13α-羥化酶、對映-貝殼杉烯氧化酶、對映貝殼杉烯酸氧化酶、(R)-檸檬烯6-單氧合酶、鎂-原卟啉IX單甲酯(氧化)環化酶、香草酸單氧合酶、前咕啉-3B合酶、4-羥基苯乙酮單氧合酶、大豆抗毒素合酶、2-羥基異黃酮合酶、番茄二酮合酶、類黃酮3',5'-羥化酶、異黃酮2'-羥化酶、玉米黃質環氧化酶、去氧蛇根精羥化酶、苯基丙酮單氧合酶、(+)-脫落酸8'-羥化酶、石膽酸6β-羥化酶、7α-羥基膽甾-4-烯-3-酮12α-羥化酶、5β-膽甾烷-3α,7α-二醇12α-羥化酶、牛磺鵝去氧膽酸6α-羥化酶、膽固醇24-羥化酶、24-羥基膽固醇7α-羥化酶、25-羥基膽固醇7α-羥化酶、千里光寧鹼N-氧合酶、補骨脂素合酶、8-二甲基烯丙基柚配質2'-羥化酶、(+)-薄荷呋喃合酶、單環單萜酮單氧合酶、表-異菰烯5-單氧合酶(epi-isozizaene 5-monooxygenase)、檸檬烯1,2-單氧合酶、松香二烯羥化酶、松香二烯醇羥化酶、櫳牛兒基櫳牛兒醇18-羥化酶、甲磺酸單氧合酶、3-表-6-去氧長春花甾酮23-單氧合酶、FAD依賴性尿酸羥化酶、6-羥基菸鹼酸3-單氧合酶、異補骨脂素合酶、櫳牛兒基氫醌3"-羥化酶、異白胺酸N-單氧合酶、纈胺酸N-單氧合酶、5-表馬兜鈴烯1,3-二羥化酶、木香烴內酯合酶、臭黃荊螺二烯氧合酶(premnaspirodiene oxygenase)、葉綠素酸酯-a氧合酶、吉瑪烯A羥化酶、苯基丙胺酸N- 單氧合酶、色胺酸N-單氧合酶、維他命D3 24-羥化酶、3-(3-羥基苯基)丙酸羥化酶、7-甲基黃嘌呤去甲基酶、β-胡蘿蔔素3-羥化酶、吡咯-2-甲酸單氧合酶、二甲硫醚單氧合酶及角鯊烯單氧合酶；使用經還原黃素或黃素蛋白作為一個供體且包含一個氧原子者(例如，非特異性單氧合酶、烷醛單氧合酶(連接FMN)、烷磺酸單氧合酶、色胺酸7-鹵化酶、鄰胺基苯甲酸3-單氧合酶(FAD)、4-羥基苯基乙酸3-單氧合酶及氮基三乙酸單氧合酶)；使用經還原鐵硫蛋白作為一個供體且包含一個氧原子者(例如，樟腦5-單氧合酶、樟腦1,2-單氧合酶、烷1-單氧合酶、類固醇11β-單氧合酶、皮質酮18-單氧合酶、膽固醇單氧合酶(解離側鏈)、膽鹼單氧合酶及類固醇15β-單氧合酶)；使用經還原喋啶作為一個供體且包含一個氧原子者(例如，苯基丙胺酸4-單氧合酶、酪胺酸3-單氧合酶、鄰胺基苯甲酸3-單氧合酶、色胺酸5-單氧合酶、烷基甘油單氧合酶及扁桃酸4-單氧合酶)；使用經還原抗壞血酸酯作為一個供體且包含一個氧原子者(例如，多巴胺β-單氧合酶、肽基甘胺酸單氧合酶及胺基環丙烷甲酸氧化酶)；使用另一化合物作為一個供體且包含一個氧原子者(例如，單酚單氧合酶、CMP-N-乙醯基神經胺酸單氧合酶及甲烷單氧合酶(微粒))；供體對發生氧化以使得分子氧還原成兩個水分子(例如，硬脂醯基-CoA 9-去飽和酶、醯基-[醯基載體蛋白]去飽和酶、亞油醯基-CoA去飽和酶、△8-脂肪酸去飽和酶、△11-脂肪酸去飽和酶、△12-脂肪酸去飽和酶及(S)-2-羥丙基膦酸環氧酶)；使用2-側氧基戊二酸作為一個供體且使另一供體去氫化者(例如去乙醯氧基頭孢菌素-C合酶)；使用NADH或NADPH作為一個供體且使另一供體去氫化者(例如，(S)-人血草鹼合酶、(S)-碎葉紫堇鹼合酶、黃蘆木鹼合酶、沙羅泰裏啶合酶(salutaridine synthase)、(S)-四氫小蘗鹼合酶、7-烯膽烷醇氧化酶、比伐韋林合酶(biflaviolin synthase)、假靛黃素合酶)；及其他氧化還原酶，包含前列腺素-內過 氧化物合酶、犬尿胺酸7,8-羥化酶、血紅素氧合酶、孕酮單氧合酶、類固醇17α-單氧合酶、類固醇21-單氧合酶、雌二醇6β-單氧合酶、4-雄烯-3,17-二酮單氧合酶、孕酮11α-單氧合酶、4-甲氧基苯甲酸單氧合酶(O-去甲基化)、烷醯基甘油磷酸乙醇胺去飽和酶、葉綠醌單氧合酶(2,3-環氧化)、拉丁螢光素單氧合酶(Latia-luciferin monooxygenase)(去甲基化)、蛻化素20-單氧合酶、3-羥基苯甲酸2-單氧合酶、類固醇9α-單氧合酶、2-羥基吡啶5-單氧合酶、胡桃醌3-單氧合酶、沈香醇8-單氧合酶、去氧輔蛋白單氧合酶、肉豆蔻醯基-CoA 11-(E)去飽和酶、肉豆蔻醯基-CoA 11-(Z)去飽和酶、△12-脂肪酸去氫酶、單異戊二烯基異黃酮環氧酶、噻吩-2-羰基-CoA單氧合酶、β-胡蘿蔔素15,15'-單氧合酶、紫杉烯5α-羥化酶、膽固醇25-羥化酶、氨單氧合酶、5,6-二甲基苯并咪唑合酶、全反式-8'-apo-β-胡蘿蔔醛15,15'-氧合酶、玉米黃質7,8-二氧合酶、β-芸香素24-羥化酶、雙阿樸番茄紅素氧合酶及胡蘿蔔素ε-單氧合酶。
作用於作為受體之超氧化物上之氧化還原酶可包含但不限於超氧化物歧化酶及超氧化物還原酶。
作用於金屬離子上之氧化還原酶可包含但不限於彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，汞(II)還原酶、二鐵-轉鐵蛋白還原酶、水鈷胺素還原酶、鈷(II)胺素還原酶、水鈷胺素還原酶(NADPH)、氰基鈷胺素還原酶(消除氰化物)、三價鐵螯合物還原酶(NADH)、[甲硫胺酸合酶]還原酶及三價鐵螯合物還原酶(NADPH))；使用氧作為受體者(例如亞鐵氧化酶)、使用醌或類似化合物作為受體者(例如抗壞血酸高鐵還原酶(跨膜))；使用黃素作為受體者(例如鈷(II)啉酸酸a,c-二醯胺還原酶)；使用其他受體者(例如鐵：鐵硫菌藍蛋白還原酶)。
作用於CH或CH2基團上之氧化還原酶可包含但不限於彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，CDP-4-去氫-6-去氧葡萄糖還原 酶、4-羥基-3-甲基丁-2-烯基二磷酸還原酶、無色花色素還原酶、黃嘌呤去氫酶及菸鹼酸去氫酶)；使用細胞色素作為受體者(例如菸鹼酸去氫酶(細胞色素))；使用氧作為受體者(例如，喋啶氧化酶、黃嘌呤氧化酶及6-羥基菸鹼酸去氫酶)；使用二硫化物作為受體者(例如，核糖核苷-二磷酸還原酶及核糖核苷-三磷酸還原酶)；使用奎寧或類似化合物作為受體者(例如，苯基乙醯基-CoA去氫酶及咖啡因去氫酶(caffeine dehydrogenase))；使用鐵硫蛋白作為受體者(例如，(E)-4-羥基-3-甲基丁-2-烯基-二磷酸合酶)；及使用其他受體者(例如，4-甲基苯酚去氫酶(羥基化)、乙基苯羥化酶、3α,7α,12α-三羥基-5β-膽甾烷醯基-CoA 24-羥化酶、尿嘧啶/胸腺嘧啶去氫酶及膽汁酸7α-去羥化酶)。
作用於作為供體之鐵硫蛋白上之氧化還原酶可包含但不限於彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如，紅氧化還原蛋白-NAD+還原酶、鐵氧化還原蛋白-NADP+還原酶、鐵氧化還原蛋白-NAD+還原酶及紅氧化還原蛋白-NAD(P)+還原酶)；使用H+作為受體者及使用二氮作為受體者(例如，固氮酶)。
作用於作為供體之經還原黃素氧化還原蛋白上之氧化還原酶可包含但不限於彼等使用二氮作為受體者(例如固氮酶(黃素氧化還原蛋白))。
作用於供體中之磷或砷上之氧化還原酶可包含但不限於彼等使用NAD(P)+作為受體者(例如膦酸去氫酶)；使用細胞色素作為受體者(例如，砷酸還原酶(細胞色素c))；使用二硫化物作為受體者(例如，砷酸還原酶(麩氧化還原蛋白)、甲基胂酸還原酶及米克多辛(mycoredoxin))；使用銅蛋白作為受體者(例如砷酸還原酶(天青蛋白))及使用其他受體者(例如砷酸還原酶(供體))。
作用於X-H及Y-H上以形成X-Y鍵之氧化還原酶可包含但不限於彼等使用氧作為受體者(例如，異青黴素-N合酶(isopenicillin-N synthase)、非洲防己鹼氧化酶、牛心果鹼氧化酶、硫赭麴菌素氧化酶[形成(+)-雙去氯地麯黴素(bisdechlorogeodin)]、硫赭麴菌素氧化酶[形成(-)-雙去氯地麯黴素]及金魚草素合酶)；使用二硫化物作為受體者(例如，D-脯胺酸還原酶(二硫酚)、甘胺酸還原酶、肌胺酸還原酶及甜菜鹼還原酶)；及使用其他受體者(例如β-環匹阿尼酸去氫酶)。
作用於供體中之鹵素上之氧化還原酶可包含但不限於彼等使用NAD+或NADP+作為受體者(例如碘酪胺酸去碘酶)。
其他氧化還原酶可包含但不限於氯酸還原酶、焦性沒食子酸羥基轉移酶、硫還原酶、[甲酸-C-乙醯基轉移酶]-活化酵素、四氯乙烯還原去鹵酶、硒酸還原酶、甲狀腺素5'-去碘酶、甲狀腺素5-去碘酶及光系統I。
適宜氧化還原酶包含各種糖氧化酶、漆酶、過氧化物酶及鹵代過氧化物酶。
糖基化酶
糖基化酶包含糖苷酶，亦即水解O-糖基及S-糖基化合物之酵素，包含但不限於α-澱粉酶、β-澱粉酶、葡聚糖1,4-α-葡糖苷酶、纖維素酶、內-1,3(4)-β-葡聚糖酶、菊糖酶、內-1,4-β-木聚糖酶、寡-1,6-葡糖苷酶、右旋糖酐酶、殼質酶、聚半乳糖醛酸酶、溶菌酶、外-α-唾液酸酶、α-葡糖苷酶、β-葡糖苷酶、α-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶、α-甘露糖苷酶、β-甘露糖苷酶、β-呋喃果糖苷酶、α,α-海藻糖酶、β-葡萄糖醛酸苷酶、內-1,3-β-木聚糖酶、澱粉-1,6-葡糖苷酶、透明質酸葡糖胺酶、透明質酸葡萄糖醛酸苷酶、木聚糖1,4-β-木糖苷酶、β-D-岩藻糖苷酶、葡聚糖內-1,3-β-D-葡糖苷酶、α-L-鼠李糖苷酶、普魯蘭多糖酶、GDP-葡糖苷酶、β-L-鼠李糖苷酶、墨角藻聚糖水解酶、葡苷基神經醯胺酶、半乳糖基神經醯胺酶、半乳糖基半乳糖基葡苷基神經醯胺酶、蔗糖α-葡糖苷酶、α-N-乙醯基胺基半乳糖苷酶、α-N-乙醯基胺 基葡糖苷酶、α-L-岩藻糖苷酶、β-L-N-乙醯基胺基基己糖苷酶、β-N-乙醯基胺基半乳糖苷酶、環麥芽糖糊精酶、α-N-阿拉伯呋喃糖苷酶、葡糖醛醯基-二硫葡萄糖胺葡萄糖醛酸苷酶、異普魯蘭多糖酶、葡聚糖1,3-β-葡糖苷酶、葡聚糖內-1,3-α-葡糖苷酶、葡聚糖1,4-α-麥芽四糖水解酶、黴菌葡聚糖酶、糖基神經醯胺酶、1,2-α-L-岩藻糖苷酶、2,6-β-聚果糖6-左聚糖生物水解酶、左聚糖酶、槲皮苷酶、半乳聚糖1,4-α-半乳糖醛酸酶、異澱粉酶、葡聚糖1,6-α-葡糖苷酶、葡聚糖內-1,2-β-葡糖苷酶、木聚糖1,3-β-木糖苷酶、地衣澱粉酶(licheninase)、葡聚糖1,4-β-葡糖苷酶、葡聚糖內-1,6-β-葡糖苷酶、L-艾杜糖苷酸酶、甘露聚糖1,2-(1,3)-α-甘露糖苷酶、甘露聚糖內-1,4-β-甘露糖苷酶、聚果糖β-果糖苷酶、β-瓊脂糖酶、外-聚-α-半乳糖醛酸苷酶、κ-角叉聚糖酶、葡聚糖1,3-α-葡糖苷酶、6-磷酸-β-半乳糖苷酶、6-磷酸-β-葡糖苷酶、莢膜-多糖內-1,3-α-半乳糖苷酶、β-L-阿拉伯糖苷酶、阿拉伯半乳聚糖內-1,4-β-半乳糖苷酶、纖維素1,4-β-纖維二糖糖苷酶(非還原端)、肽聚糖β-N-乙醯基胞壁酸酶、α,α-磷酸海藻糖酶、葡聚糖1,6-α-異麥芽糖苷酶、右旋糖酐1,6-α-異麥芽三糖苷酶、甘露糖基-糖蛋白內-β-N-乙醯基胺基葡糖苷酶、內-α-N-乙醯基胺基半乳糖苷酶、葡聚糖1,4-α-麥芽六糖苷酶、聚阿拉伯糖內-1,5-α-L-聚阿拉伯糖酶、甘露聚糖1,4-甘露二糖苷酶、甘露聚糖內-1,6-α-甘露糖苷酶、血型物質內-1,4-β-半乳糖苷酶、角質素-硫酸內-1,4-β-半乳糖苷酶、甾基-β-葡糖苷酶、異胡豆苷β-葡糖苷酶、甘露糖基-寡糖葡糖苷酶、蛋白質-葡苷基半乳糖基羥基離胺酸葡糖苷酶、乳糖酶、內胺基半乳糖苷酶、1,3-α-L-岩藻糖苷酶、2-去氧葡糖苷酶、甘露糖基-寡糖1,2-α-甘露糖苷酶、甘露糖基-寡糖1,3-1,6-α-甘露糖苷酶、具支鏈-右旋糖酐外-1,2-α-葡糖苷酶、葡聚糖1,4-α-麥芽三糖水解酶、苦杏仁苷β-葡糖苷酶、野黑櫻苷β-葡糖苷酶、蠶豆氰苷β-葡糖苷酶、寡木糖葡聚糖β-糖苷酶、聚甘露糖醛 酸水解酶、麥芽糖-6'-磷酸葡糖苷酶、內糖基神經醯胺酶、3-去氧-2-辛酮糖苷酶(3-deoxy-2-octulosonidase)、蘿卡辛β-葡糖苷酶(raucaffricine β-glucosidase)、松柏苷β-葡糖苷酶、1,6-α-L-岩藻糖苷酶、甘草酸β-葡萄糖醛酸苷酶、內-α-唾液酸酶、糖蛋白內-α-1,2-甘露糖苷酶、木聚糖α-1,2-葡萄糖苷酸酶、脫乙醯幾丁質酶、葡聚糖1,4-α-麥芽糖水解酶、二果糖酐合酶、新普魯蘭多糖酶、葡糖醛酸阿糖基木聚糖內-1,4-β-木聚糖酶、甘露聚糖外-1,2-1,6-α-甘露糖苷酶、α-葡萄糖醛酸苷酶、乳糖-N-二糖糖苷酶、4-α-D-{(1→4)-α-D-葡聚糖基}海藻糖水解酶、極限糊精酶、聚(ADP-核糖)糖基水解酶、3-去氧辛酮糖酸酶(3-deoxyoctulosonase)、半乳聚糖1,3-β-半乳糖苷酶、β-呋喃半乳糖苷酶、硫葡糖苷酶、β-櫻草苷酶、寡木糖葡聚糖還原端特異性纖維二糖水解酶、木糖葡聚糖-特異性內-β-1,4-葡聚糖酶、甘露糖基糖蛋白內-β-甘露糖苷酶、聚果糖β-(2,1)-果糖苷酶、聚果糖β-(2,6)-果糖苷酶、木糖葡聚糖-特異性外-β-1,4-葡聚糖酶、寡糖還原端木聚糖酶、ι-角叉聚糖酶、α-瓊脂糖酶、α-新瓊寡糖水解酶、β-芹菜糖基-β-葡糖苷酶、λ-角叉聚糖酶、1,6-α-D-甘露糖苷酶、半乳聚糖內-1,6-β-半乳糖苷酶、外-1,4-β-D-胺基葡糖苷酶、肝素酶、貝加靈-β-D-葡萄糖醛酸苷酶(baicalin-β-D-glucuronidase)、橙皮苷6-O-α-L-鼠李糖基-β-D-葡糖苷酶、蛋白質O-GlcNAcase、甘露糖基甘油酸水解酶、鼠李聚糖半乳糖醛酸水解酶、不飽和鼠李聚糖半乳糖醛基水解酶、鼠李聚糖半乳糖醛酸半乳糖醛酸水解酶(rhamnogalacturonan galacturonohydrolase)、鼠李聚糖半乳糖醛酸鼠李聚糖水解酶(rhamnogalacturonan rhamnohydrolase)、β-D-吡喃葡萄糖基阿伯西斯酸β-葡糖苷酶(β-D-glucopyranosyl abscisate β-glucosidase)、纖維素1,4-β-纖維二糖糖苷酶(還原端)、α-D-木糖苷木糖水解酶及β-紫菜酶(β-porphyranase)。
糖基化酶亦包含水解N-糖基化合物，包含但不限於嘌呤核苷 酶、肌苷核苷酶、尿苷核苷酶、AMP核苷酶、NAD+核苷酶、NAD(P)+核苷酶、腺苷核苷酶、核糖基嘧啶核苷酶、腺苷高半胱胺酸核苷酶、嘧啶-5'-核苷酸核苷酶、β-天門冬胺醯基-N-乙醯基胺基葡糖苷酶、肌苷核苷酶、1-甲基腺苷核苷酶、NMN核苷酶、DNA-去氧肌苷糖基化酶、甲硫腺苷核苷酶、去氧核糖二嘧啶內核苷酶、ADP-核糖基精胺酸水解酶、DNA-3-甲基腺嘌呤糖基化酶I、DNA-3-甲基腺嘌呤糖基化酶II、rRNA N-糖基化酶、DNA-甲醯胺基嘧啶糖基化酶、ADP-核糖基-[二氮還原酶]水解酶、N-甲基核苷酶、氟他西因水解酶(futalosine hydrolase)、尿嘧啶-DNA糖基化酶、雙鏈尿嘧啶-DNA糖基化酶及胸腺嘧啶-DNA糖基化酶及水解S-糖基化合物。
水解酶
水解酶EC 3包含但不限於：彼等作用於酯鍵上者；糖基化酶；彼等作用於醚鍵上者；彼等作用於肽鍵上者(肽酶/蛋白酶)；彼等除肽鍵外作用於碳-氮鍵上者；彼等作用於酸酐上者；彼等作用於碳-碳鍵上者；彼等作用於鹵化物鍵上者；彼等作用於磷-氮鍵上者；彼等作用於硫-氮鍵上者；彼等作用於碳-磷鍵上者；彼等作用於硫-硫鍵上者；及彼等作用於碳-硫鍵上者。
作用於酯鍵上之水解酶EC 3可包含但不限於羧酸酯水解酶(例如脂肪酶，包含三醯基甘油脂肪酶、磷脂酶A1、磷脂酶A2、溶血磷脂酶、乙醯基甘油脂肪酶、半乳糖脂酶、脂蛋白脂肪酶；及磷酸二酯水解酶，包含磷脂酶C、磷脂酶D、磷酸肌醇磷脂酶C、糖基磷脂醯肌醇磷脂酶D及N-乙醯基磷脂醯乙醇胺-水解磷脂酶D)及糖基化酶(包含糖苷酶，亦即水解O-及S-糖基化合物之酵素，例如澱粉酶(包含α-澱粉酶、β-澱粉酶及異澱粉酶)、纖維素酶及甘露聚糖酶)。
適宜脂肪酶及角質酶包含彼等來自細菌或真菌來源者。包含經化學改質或蛋白質改造之突變體。實例包含來自嗜熱真菌 (Thermomyces)(例如來自疏棉狀嗜熱真菌(T.lanuginosus)(先前稱為柔毛腐質黴(Humicola lanuginosa)))之脂肪酶(如EP 258 068(及美國專利第4,810,414號)及EP 305 216(及美國專利第5,766,912號、第5,874,558號、第5,965,384號、第7,517,668號、第5,536,661號及第5,863,759號)中所闡述)、來自腐質黴(Humicola)(例如特異腐質黴(H.insolens))之角質酶(如WO 96/13580中所闡述)、假單胞菌(Pseudomonas)脂肪酶(例如來自產鹼假單胞菌(P.alcaligenes)或類產鹼假單胞菌(P.pseudoalcaligenes)(EP 218 272、美國專利第5,766,912號、第5,863,759號、第5,874,558號、第5,965,384號、第7,517,668號及第5,536,661號)、洋蔥假單胞菌(P.cepacia)(EP 331 376及美國專利第5,290,694號)、施氏假單胞菌(P.stutzeri)(GB 1,372,034)、螢光假單胞菌(P.fluorescens)、假單胞菌屬菌株SD 705(WO 95/06720、美國專利第5,827,718號、WO 96/27002及美國專利第5,942,431號)、威斯康星假單胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012))、芽胞桿菌(Bacillus)脂肪酶(例如來自枯草芽胞桿菌(B.subtilis)(Dartois等人，1993,Biochemica et Biophysica Acta,1131：253-360)、嗜熱芽胞桿菌(B.stearothermophilus)(JP 64/744992)或短小芽孢桿菌(B.pumilus)(WO 91/16422及美國專利第5,427,936號))。其他實例係脂肪酶變體，例如彼等闡述於以下文件中者：WO 92/05249、WO 94/01541、EP 407225、EP 260105、WO 95/35381、WO 96/00292、WO 95/30744、WO 94/25578、WO 95/14783、WO 95/22615、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/060063、WO2007/087508、WO 2009/109500及美國專利第5,892,013號、第5,869,438號、第5,976,855號、第6,020,180號、第6,074,863號、第5,658,871號、第4,760,025號、第5,155,033號、第5,182,204號、第5,185,258號、第5,204,015號、第5,244,791號、第5,264,366號、第5,310,675號、第5,316,941號、第5,346,823 號、第5,352,594號、第5,371,008號、第5,371,190號、第5,411,873號、第5,441,882號、第5,472,855號、第5,652,136號、第5,700,676號、第5,763,257號、第5,801,038號、第5,939,315號、第5,955,340號、第5,972,682號、第6,465,235號及第RE34,606號。較佳市售脂肪酶包含LipolaseTM、Lipolase UltraTM及LipexTM、LecitaseTM、LipolexTM、LipocleanTM、LipoprimeTM(Novozymes A/S)。其他市售脂肪酶包含Lumafast(Genencor Int公司)、Lipomax(Gist-Brocades/Genencor Int公司)及來自Solvay之芽胞桿菌屬脂肪酶。
適宜澱粉酶(α及/或β)包含彼等來自細菌或真菌來源者。包含經化學改質或蛋白質改造之突變體。澱粉酶包含(例如)更詳細闡述於GB 1,296,839中之自芽胞桿菌(例如特定菌株蘚樣芽胞桿菌(Bacillus licheniformis))獲得之α-澱粉酶。有用澱粉酶之實例係闡述於以下文件中之變體：WO 94/02597、WO 94/18314、WO 96/23873、WO 97/43424、美國專利第5,824,532號、第5,849,549號、第6,297,037號、第6,093,562號、第6,297,038號、第6,867,031號及美國公開案第2002/0098996號、第2003/0064908號、第2004/0253676號、第2005/0059131號、第2005/0250664號、第2006/0035323號、第2009/0280527號、第2010/0099597號、第2010/0099598號及第2011/0177990號，尤其係在下列位置中之一或多者處經取代之變體：15、23、105、106、124、128、133、154、156、181、188、190、197、202、208、209、243、264、304、305、391、408及444。市售澱粉酶係DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM及BANTM(Novozymes A/S)、RapidaseTM及PurastarTM(來自Genencor International公司)。
適宜纖維素酶包含彼等來自細菌或真菌來源者。包含經化學改質或蛋白質改造突之變體。適宜纖維素酶包含美國專利第4,435,307號、第5,648,263號、第5,691,178號、第5,776,757號及第WO 89/09259 號中所揭示來自芽胞桿菌屬、假單胞菌屬、腐質黴屬、鐮刀菌(Fusarium)屬、梭孢殼(Thielavia)屬、枝頂孢(Acremonium)屬之纖維素酶，例如自異孢腐質黴(Humicola insolens)、嗜熱毀絲菌(Myceliophthora thermophila)及尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)產生之真菌纖維素酶。尤其適宜之纖維素酶係具有色彩護理益處之鹼性或天然纖維素酶。該等纖維素酶之實例係闡述於以下文件中之纖維素酶：EP 0 495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940、美國專利第5,520,838號、第5,443,750號、第5,668,073號、第5,948,672號、第6,423,524號、第5,919,691號、第6,071,735號、第6,001,639號、第6,387,690號、第6,855,531號、第7,226,773號及美國公開案第2001/0036910號、第2003/0119167號、第2003/0054539號、第2005/0070003號、第2008/0145912號及第2010/0107342號。其他實例係(例如)彼等闡述於以下文件中之纖維素酶變體：WO 94/07998、EP 0 531 315、WO 95/24471、WO 98/12307、PCT/DK98/00299、美國專利第5,457,046；5,686,593號、第5,763,254號、第5,792,641號、第6,114,296號、第5,457,046號、第5,912,157號、第6,117,664號、第7,993,898號、第8,017,372號及美國公開案第2003/0092097號、第2005/0009166號、第2008/0206836號、第2009/0170747號及第2011/0250674號。市售纖維素酶包含CelluzymeTM及CarezymeTM(Novozymes A/S)、ClazinaseTM及Puradax HATM(Genencor International公司)及KAC-500(B)TM(Kao公司)。
肽酶/蛋白酶
作用於肽鍵上之水解酶EC 3(肽酶/蛋白酶)可包含但不限於胺基肽酶(包含白胺醯基胺基肽酶、膜丙胺醯基胺基肽酶、半胱胺醯基胺基肽酶、三肽胺基肽酶、脯胺醯基胺基肽酶、精胺醯基胺基肽酶、麩胺醯基胺基肽酶、Xaa-Pro胺基肽酶、細菌白胺醯基胺基肽酶、梭 菌胺基肽酶、細胞溶質丙胺醯基胺基肽酶、離胺醯基胺基肽酶、Xaa-Trp胺基肽酶、色胺醯基胺基肽酶、甲硫胺醯基胺基肽酶、D-立體特異性胺基肽酶、胺基肽酶Ey、天門冬胺醯基胺基肽酶、胺基肽酶I、PepB胺基肽酶、胺基肽酶S、β-肽基胺基肽酶及中間體解離肽酶55)；二肽酶(包含Xaa-Arg二肽酶、Xaa-甲基-His二肽酶、Glu-Glu二肽酶、Xaa-Pro二肽酶、Met-Xaa二肽酶、非-立體特異性二肽酶、細胞溶質非特異性二肽酶、膜二肽酶、β-Ala-His二肽酶、二肽酶E及D-Ala-D-Ala二肽酶)；二肽基-肽酶及三肽基-肽酶(包含二肽基-肽酶I、二肽基-肽酶II、二肽基-肽酶III、二肽基-肽酶IV、二肽基-二肽酶、三肽基-肽酶I、三肽基-肽酶II、Xaa-Pro二肽基-肽酶及脯胺醯基三肽基胺基肽酶)；肽基-二肽酶(包含肽基-二肽酶A、肽基-二肽酶B、肽基-二肽酶Dcp及藻青素酶)；絲胺酸型羧基肽酶(包含溶酶體Pro-Xaa羧基肽酶、絲胺酸型D-Ala-D-Ala羧基肽酶、羧基肽酶C及羧基肽酶D)；金屬羧基肽酶(包含羧基肽酶A、羧基肽酶B、離胺酸羧基肽酶、Gly-Xaa羧基肽酶、丙胺酸羧基肽酶、胞壁醯五肽羧基肽酶、羧基肽酶E、麩胺酸羧基肽酶、羧基肽酶M、胞壁醯四肽羧基肽酶、鋅D-Ala-D-Ala羧基肽酶、羧基肽酶A2、膜Pro-Xaa羧基肽酶、微管蛋白基-Tyr羧基肽酶(tubulinyl-Tyr carboxypeptidase)、羧基肽酶T、羧基肽酶Taq、羧基肽酶U、麩胺酸羧基肽酶II、金屬羧基肽酶D及血管緊張素-轉化酵素2)；半胱胺酸型羧基肽酶，包含組織蛋白酶X；ω肽酶(包含乙醯基胺基醯基-肽酶、肽基-甘胺醯胺酶、焦麩醯胺基-肽酶I、β-天門冬醯胺基-肽酶、焦麩醯胺基-肽酶II、N-甲醯基甲硫胺醯基-肽酶、γ-麩醯胺基水解酶、γ-D-麩醯胺基-內消旋-二胺基庚二酸肽酶I及泛素基水解酶1(ubiquitinyl hydrolase 1))；絲胺酸內肽酶(包含糜蛋白酶、糜蛋白酶C、美裏丁(metridin)、胰蛋白酶、凝血酶、凝血因子Xa、纖溶酶、腸肽酶、精蟲頭粒蛋白、α-裂解內肽酶、麩醯胺基內肽酶、組 織蛋白酶G、凝血因子VIIa、凝血因子Ixa、黃瓜素、脯胺醯基寡肽酶、凝血因子Xia、短尾類(brachyuran)、血漿激肽釋放酶、組織激肽釋放酶、胰彈性蛋白酶、白細胞彈性蛋白酶、凝血因子XIIa、凝乳酶、補體亞組份、補體亞組份、經典補體路徑C3/C5轉化酶、補體因子I、補體因子D、替代補體路徑C3/C5轉化酶、乾酵母菌、皮蠅素C、離胺醯基內肽酶、內肽酶La、γ-腎素、腹蛇毒素AB、白胺醯基內肽酶、類胰蛋白酶、燈盞乙素、可辛(kexin)、枯草桿菌蛋白酶、水稻素、肽酶K、嗜熱黴菌素、熱酶、內肽酶So、t-纖溶酶原活化劑、蛋白質C(經活化)、胰內肽酶E、胰彈性蛋白酶II、IgA-特異性絲胺酸內肽酶、u-纖溶酶原活化劑、腹蛇毒素A、弗林蛋白酶(furin)、成髓細胞蛋白酶、西米拉色(semenogelase)、粒酶A、粒酶B、斯特立新A(streptogrisin A)、斯特立新B(streptogrisin B)、麩醯胺基內肽酶II寡肽酶B、鱟凝血因子、鱟凝血因子、鱟凝血酵素、抑制物LexA、信號肽酶I、塔哥委因(togavirin)、弗拉委因(flavivirin)、內肽酶Clp、前蛋白轉化酶1、前蛋白轉化酶2、蛇毒因子V活化劑、拉科西因(lactocepin)、組裝蛋白(assembling)、何帕委因(hepacivirin)、斯波西因(spermosin)、西多西因(sedolisin)、山莫西因(xanthomonalisin)、C-末端處理肽酶、菲沙西因(physarolisin)、甘露聚糖結合凝集素相關絲胺酸蛋白酶-2、斜切蛋白酶、合浦西因(hepsin)、肽酶Do、HtrA2肽酶、馬瑞酶(matriptase)、C5a肽酶、阿奎西因1(aqualysin 1)、位點-1蛋白酶、瘟疫病毒NS3聚蛋白肽酶、馬動脈病毒絲胺酸肽酶、傳染性胰壞死雙rna病毒Vp4肽酶、SpoIVB肽酶、角質層糜蛋白酵素、激肽釋放酶8、激肽釋放酶13及輸卵管蛋白)；半胱胺酸內肽酶(包含組織蛋白酶B、木瓜蛋白酶、無花果蛋白酶、木瓜凝乳蛋白酶、蘿摩蛋白酶、梭菌蛋白酶、斯瑞帕因(streptopain)、奇異果蛋白酶、組織蛋白酶L、組織蛋白酶H、組織蛋白酶T、甘胺醯基內肽酶、癌症促凝 素、組織蛋白酶S、匹克納音3C(picornain 3C)、匹克納音2A(picornain 2A)、卡裏卡因(caricain)、阿娜因(ananain)、莖菠蘿蛋白酶、水果菠蘿蛋白酶、裏格馬因(legumain)、衣多撒因(histolysain)、半胱天冬酶-1、牙齦菌蛋白酶R、組織蛋白酶K、阿迪納音(adenain)、博來黴素水解酶(bleomycin hydrolase)、組織蛋白酶F、組織蛋白酶V、組織蛋白酶O、核內含體a內肽酶、輔助組份蛋白酶、L-肽酶、牙齦菌蛋白酶K、斯塔帕因(staphopain)、分離酶、V-cath內肽酶、克魯茲蛋白酶(cruzipain)、鈣蛋白酶-1、鈣蛋白酶-2、鈣蛋白酶-3、半胱天冬酶-2、半胱天冬酶-3、半胱天冬酶-4、半胱天冬酶-5、半胱天冬酶-6、半胱天冬酶-7、半胱天冬酶-8、半胱天冬酶-9、半胱天冬酶-10、半胱天冬酶-11、肽酶1(蟎蟲)、卡利委因(calicivirin)、紫極帕因(zingipain)、Ulp1肽酶、SARS冠狀病毒主蛋白酶、分選酶A及分選酶B)；天冬酸內肽酶(包含胃蛋白酶A、胃蛋白酶B、胃亞蛋白酶、凝乳酶、組織蛋白酶D、豬籠草蛋白酶、腎素、HIV-1瑞羅思因(HIV-1 retropepsin)、丙鴉片黑素皮質素轉化酵素、麯黴胃蛋白酶I、麯黴胃蛋白酶II、青黴胃蛋白酶、根黴菌屬胃蛋白酶(rhizopuspepsin)、內座殼胃蛋白酶(endothiapepsin)、毛黴菌胃蛋白酶(mucorpepsin)、念珠菌胃蛋白酶(candidapepsin)、糖胃蛋白酶、紅酵母蛋白酶(rhodotorulapepsin)、阿克思因(acrocylindropepsin)、普羅思因(polyporopepsin)、普諾思因(pycnoporopepsin)、斯塔思因A(scytalidopepsin A)、斯塔思因B(scytalidopepsin B)、組織蛋白酶E、障壁胃蛋白酶(barrierpepsin)、信號肽酶II、瘧原蟲天冬酸蛋白酶I、瘧原蟲天冬胺酸蛋白酶II、大麥液泡天冬酸蛋白酶、亞思因1(yapsin 1)、特莫思因(thermopsin)、前菌毛素肽酶、野田村病毒內肽酶(nodavirus endopeptidase)、邁普素1(memapsin 1)、邁普素2(memapsin 2)、HIV-2瑞羅思因(HIV-2 retropepsin)、纖溶酶原活化劑 Pla、奧普汀(omptin)、人類內源性逆轉錄K內肽酶、及HycI肽酶)；金屬內肽酶(包含衲脊蛇溶血素A、微生物膠原酶、白細胞溶素、間質膠原酶、腦啡肽酶、艾維思因(envelysin)、IgA-特異性金屬內肽酶、前膠原N-內肽酶、甲拌磷寡肽酶、溶神經素、基質溶解素1、甲基多巴A(meprin A)、前膠原C-內肽酶、肽基-Lys金屬內肽酶、蝦紅素、基質溶解素2、基質裂解蛋白、明膠酶A、弧菌溶血素、假單胞菌素、致熱溶解酶、枯草桿菌蛋白酶、金屬蛋白酶、明膠酶(coccolysin)、米克思因(mycolysin)、β-裂解金屬內肽酶、肽基-Asp金屬內肽酶、嗜中性白細胞膠原酶、明膠酶B、利什曼溶蛋白(leishmanolysin)、薩哈思因(saccharolysin)、加米思因(gametolysin)、迪特思因(deuterolysin)、黏質沙雷氏菌酶、衲脊蛇溶血素B、衲脊蛇溶血素C、阿洛薩西(atroxase)、衲脊蛇溶血素E、衲脊蛇溶血素F、去整合素基質金屬蛋白酶、透明質酸裂解酶(horrilysin)、魯比思因(ruberlysin)、波帕思因(bothropasin)、波羅思因(bothrolysin)、奧菲思因(ophiolysin)、吹米思因I(trimerelysin I)、吹米思因II(trimerelysin II)、母羅思因(mucrolysin)、溶加壓素、胰島素溶酶、O-唾液酸糖蛋白內肽酶、盧瑟思因(russellysin)、線粒體中間體肽酶、達克思因(dactylysin)、苯乙肼裂解酶、馬格思因(magnolysin)、甲基多巴B(meprin B)、線粒體處理肽酶、巨噬細胞彈性蛋白酶、低絨毛酶(choriolysin L)、高絨毛酶(choriolysin H)、特西思因(tentoxilysin)、波西思因(bontoxilysin)、寡肽酶A、內皮素轉化酵素、蛇毒纖溶酶、加拉格因(jararhagin)、法拉思因(fragilysin)、溶葡萄球菌素、法拉他因(flavastacin)、思帕思因(snapalysin)、gpr內肽酶、帕帕思因-1(pappalysin-1)、膜型基質金屬蛋白酶-1、ADAM10內肽酶、ADAMTS-4內肽酶、炭疽致死因子內肽酶、Ste24內肽酶、S2P內肽酶、ADAM 17內肽酶及ADAMTS13內肽酶)；及蘇胺酸內肽酶(包含蛋白酶體內肽酶複合物及HSlU-HslV肽 酶)。
適宜蛋白酶包含彼等來自動物、植物或微生物來源者。微生物來源較佳。包含經化學改質或蛋白質改造之突變體。蛋白酶可為絲胺酸蛋白酶或金屬蛋白酶，較佳係鹼性微生物蛋白酶或類胰蛋白酶蛋白酶。鹼性蛋白酶之實例係枯草桿菌蛋白酶，尤其係彼等源自芽胞桿菌者，例如枯草桿菌蛋白酶Novo、枯草桿菌蛋白酶Carlsberg、枯草桿菌蛋白酶309、枯草桿菌蛋白酶147及枯草桿菌蛋白酶168(闡述於WO 89/06279、美國專利第6,506,589號、第6,808,913號、第6,835,821號及美國公開案第2003/0148495號、第2003/0175933號、第2003/0186378號及第2005/0003986號中)。類胰蛋白酶蛋白酶之實例係WO 89/06270、WO 94/25583及美國專利第5,288,627號及第5,693,520號中所闡述之胰蛋白酶(例如豬或牛來源)及鐮刀菌蛋白酶。有用蛋白酶之實例係WO 92/19729、WO 98/20115、WO 98/20116、WO 98/34946及美國專利第5,858,757號、第6,300,116號、第7,098,017號、第6,159,731號及美國公開案第2002/0102702號中所闡述之變體，尤其係在下列位置中之一或多者處經取代之變體：27、36、57、76、87、97、101、104、120、123、167、170、194、206、218、222、224、235及274。較佳市售蛋白酶包含AlcalaseTM、SavinaseTM、PrimaseTM、DuralaseTM、EsperaseTM及KannaseTM(Novozymes A/S)、MaxataseTM、MaxacalTM、MaxapemTM、ProperaseTM、PurafectTM、Purafect OxPTM、FN2TM及FN3TM(Genencor International公司)。
用於洗衣及餐具洗滌應用中之酵素可包含以下中之一或多者：蛋白酶、澱粉酶、脂肪酶、去氫酶、轉胺酶、激酶、纖維素酶、甘露聚糖酶、肽酶、去羧酶、異構酶、變位酶、合成酶、合酶及氧化還原酶(包含催化漂白劑之形成之氧化還原酶)。
預計用於本文所闡述之組合物中之酵素可來自任一適宜源或源 組合，例如細菌、真菌、植物或動物源。在一類實施例中，兩種或更多種酵素之混合物將來自至少兩種不同源類型。舉例而言，蛋白酶及脂肪酶之混合物可來自細菌(蛋白酶)及真菌(脂肪酶)源。
在一類實施例中，預計用於本文所闡述之組合物中之酵素並非澱粉酶。在另一類實施例中，在僅一類酵素包含於組合物中時，酵素並非澱粉酶。在又一類實施例中，在兩種或更多種類型之酵素包含於組合物中時，兩種或更多種酵素並非澱粉酶。在再一類實施例中，在兩種或更多種類型之酵素包含於組合物中時，一類酵素係澱粉酶且另一類酵素並非澱粉酶。
視情況，用於本文中(例如用於洗滌劑應用，包含衣用洗滌劑及/或餐具洗滌劑)之酵素(包含但不限於本文所闡述之任一酵素種類或成員)係在鹼性pH條件(例如但不限於約7至約12或大於7至約12或約8至約12或約8至約11之pH範圍)中發揮作用者。視情況，用於本文中之酵素(包含但不限於本文所闡述之任一酵素種類或成員)係在約5℃至約45℃之溫度範圍中發揮作用者。
在業內眾所周知，任一應用中所使用之酵素量隨具體酵素之活性而變化。儘管酵素活性係重要參數，但可易於瞭解，此參數並非可易於用於生產中之量度單位。因此，業內已知根據每克乾燥酵素混合物之活性來描述酵素。乾燥酵素混合物可具有高純度且基本上係100%活性酵素或其可含有發酵副產物。因此，市售酵素混合物可具有寬範圍之純度，但仍可基於每單位重量之所報告活性用於調配物中。如本文中所使用，片語「酵素混合物」係指活性酵素及可選殘餘發酵產物之乾燥混合物。水溶性膜中所包含之活性酵素(或視情況兩種或更多種酵素之混合物)之總量可為至少約0.1 phr、視情況在約0.1至約20 phr或至約2 phr、4 phr、5 phr、10 phr或15 phr範圍內，包含該等個別值及藉由該等值形成之任一範圍組合。在包含蛋白酶及不同 第二酵素之實施例中，蛋白酶活性對第二酵素活性之比率可在任一適宜範圍內，例如在約0.2：1至約10：1或約0.25：1至約10：1或約0.2：1至約3：1範圍內。並不始終期望處置乾燥酵素粉末，特定而言此係由於處置酵素粉塵之安全危害。通常，獲得呈酵素溶於載劑溶劑中之液體形式之酵素混合物。考慮每批次中酵素混合物之比重量或體積，藉由每單位重量(或體積)之酵素活性來描述酶溶液。適宜活性酵素可以溶液形式購自包含Novozymes、Genencor Int公司、Kao公司及Gist-Brocades之供應商。
酵素受質
本揭示內容之水溶性膜可進一步包含酵素穩定劑，其係酵素組合物中一或多種酵素之功能受質。在包含於本揭示內容之水溶性膜中時，酵素受質之實施例已展示得到約20%至100%恢復率之酵素恢復百分比範圍。在一類實施例中，包含酵素受質可得到至少70%之酵素活性恢復率。亦即，在形成膜後可維持至少70%之酵素活性。在另一態樣中，相對於並未包含酵素受質之膜，包含酵素受質可使得酵素恢復率增加至少5%、10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%或更高(例如高達250%或更高)，如下文實例中所顯示。
熟習此項技術者根據本揭示內容將熟知酵素受質。舉例而言，受質可選自上文結合各種類型酵素所闡述之彼等供體及受體種類。根據具體實例，澱粉酶受質包含複合糖及澱粉，脂肪酶受質包含脂質(例如甘油單油酸酯)，蛋白酶受質包含蛋白質(例如大豆蛋白)，纖維素酶受質包含纖維素(例如甲基纖維素)，且甘露聚糖酶受質包含甘露聚糖(例如瓜爾膠(guar gum))。
包含於膜中之酵素受質之量可為任一適宜量以在膜處理及儲存期間提供具有功能受質材料之酵素。因此，擬包含於膜中之酵素受質之量係有效增加酵素穩定性且由此增加處理(例如膜形成)後之酵素活 性恢復率之量。在一類實施例中，視情況，酵素受質之量並不遠遠超過有效增加酵素穩定性之量；舉例而言，實施例中之酵素受質之量可不超過有效量之1.5倍，或不超過有效量之2倍，或不超過有效量之3倍。另一選擇為，組合物可含有過量酵素受質以確保組合物中有足量酵素負荷，條件係該過多量不會危害組合物之其他期望性質(例如膜強度)。舉例而言，可以至少約1phr或至少2 phr、視情況在約2 phr至約8 phr範圍內之量將酵素受質包含於膜中。在其他實施例中，可以以下量將酵素受質包含於組合物或膜中：1 phr或更低、或2 phr或更低、或2.5 phr或更低、或3 phr或更低、或3.5 phr或更低、或4 phr或更低、或4.5 phr或更低、或5 phr或更低、或5.5 phr或更低、或6 phr或更低、或6.5 phr或更低、或7 phr或更低、或7.5 phr或更低、或8 phr或更低、或8.5 phr或更低、或9 phr或更低。受質對酵素混合物之比率可為與本文之揭示內容一致之任一適宜量，例如至少約0.5：1.0或至少約2：0：1.0、在約0.5：1.0至約2.0：1.0範圍內或至少約0.5：1.0至約10：1。不期望受限於任一特定理論，據信，水溶性組合物中穩定酵素所需之受質之量可取決於一或多個變量，包含但不限於受質重量、莫耳濃度、空間可用率及處理溫度。可藉由常規實驗(例如使用本文所闡述之酵素活性量測技術)來確定組合物中之適宜酵素量及適宜受質對酵素比率。因此，舉例而言，在使用甘油單油酸酯作為脂肪酶受質時，可以甘油單油酸酯重量對酵素活性之比率來提供甘油單油酸酯。另一選擇為，舉例而言，在使用甘油二油酸酯作為脂肪酶受質時，可以一半甘油二油酸酯重量對酵素活性之比率來提供甘油二油酸酯(亦即，兩個可用結合位點)，然而若結合位點中之一者不可在空間上達到，則可能需要更多受質之量。類似地，舉例而言，在蛋白質-蛋白酶相互作用之情形下，據信，在蛋白質對酵素活性之給定重量比率下，低分子量蛋白可提供優於中等分子量蛋白之保護(亦即，有更多蛋白質可用 於與低分子量蛋白之相互作用)。在高分子量蛋白之情形下，對於蛋白質對酵素活性之給定重量比率而言，所提供保護可優於中等分子量蛋白(亦即，較大蛋白質可在空間上用於一種以上之酵素)。
在一類實施例中，酵素受質在膜中並不提供除用作酵素活性受質外之任一其他功能。因此，舉例而言，在一類實施例中，酵素受質並不用作表面活性劑。在另一非排他性類型之實施例中，酵素受質並不用作塑化劑。
在另一類實施例中，酵素受質可為向膜提供除用作酵素活性受質外之二級功能性之類型，且在此類實施例中，可以小於二級功能所需之彼等量或大於提供二級功能所需之彼等量之量包含酵素受質。因此，舉例而言，儘管澱粉可作為複合劑影響膜性能，但澱粉可以以下量包含於本文之膜中：此量對於膜之機械性質並無實際效應，但此量足以用作酵素穩定劑以用作酵素活性受質。
不期望受限於任一特定理論，據信，酵素受質藉由兩種機制中之一者或兩者來改良酵素活性恢復率。首先，據信，在將酵素提供至使其發揮作用之受質且由此酵素與受質複合時，酵素不太可能因多種機制(例如熱、酸、鹼、輻射)中之一或多者而變性。第二，據信，在將酵素提供至使其發揮作用之受質且由此酵素與受質複合時，酵素不太可能由蛋白酶裂解，此乃因用於裂解之結合位點被佔據或以其他方式在空間上受阻。因此，舉例而言，在下文之實例6中，脂肪酶(真菌酵素)顯而易見對於蛋白酶(細菌酵素)並無固有阻力，且由此脂肪酶活性之恢復率不可檢測。然而，在膜中提供脂肪酶受質會得到令人吃驚且極大之脂肪酶活性恢復率。
本揭示內容之水溶性膜可(例如)以適用於預期目的之量包含其他可選添加劑成份，包含但不限於塑化劑、表面活性劑、消泡劑、成膜劑、抗結塊劑、苛性鈉、內部脫模劑、抗變黃劑、著色劑(包含但不 限於染料及顏料)及其他功能成份(包含但不限於含有香料組份之載劑及/或囊封劑、漂白劑或漂白觸媒)。
業內公認水係PVOH及其他聚合物(包含但不限於水溶性聚合物)之極有效塑化劑，然而，水之揮發性使得其應用受限，此乃因聚合物膜需要對於各種環境條件(包含低及高相對濕度)具有至少一定之抵抗性(穩健性)。甘油之揮發性遠小於水且已被廣泛接受為PVOH及其他聚合物之有效塑化劑。若在膜調配物中所使用含量過高，則甘油或其他該等液體塑化劑自身可導致表面「出汗」且油膩。若不以某種方式(例如表麵粉化)減輕出汗，此可在膜中引起諸多問題，例如消費者不可接受之手感，及甚至使膜黏結在捲筒上或片材堆疊中。可將此描述為過度塑化。然而，若向膜中添加之塑化劑過少，則膜可能缺乏足夠延展性及撓性而無法用於多種最終應用，例如無法轉化成最終使用格式(例如小袋)。
用於本揭示內容之水溶性膜中之塑化劑包含但不限於山梨醇、甘油、二甘油、丙二醇、乙二醇、二乙二醇、三乙二醇、四乙二醇、至多MW 400之聚乙二醇、2甲基1,3丙二醇、乳酸、單乙酸甘油酯、三乙酸甘油酯、檸檬酸三乙酯、1,3-丁二醇、三羥甲基丙烷(TMP)、聚醚三醇及其組合。在使用較少塑化劑時，膜可變得較脆，而在使用較多塑化劑時，膜可失去拉伸強度。塑化劑可以(例如)約25 phr至約50 phr或約30 phr至約45 phr或約32 phr至約42 phr範圍內之量包含於水溶性膜中。
用於水溶性膜中之表面活性劑在業內已眾所周知。視情況，包含表面活性劑以有助於在澆注時分散樹脂溶液。用於本揭示內容之水溶性膜中之適宜表面活性劑包含但不限於磺基琥珀酸二烷基酯、甘油及丙二醇之乳酸化脂肪酸酯、脂肪酸乳醯酯、烷基硫酸鈉、聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯60、聚山梨酸酯65、聚山梨酸酯80、烷基聚乙二醇 醚、卵磷脂、甘油及丙二醇之乙醯化脂肪酸酯、月桂基硫酸鈉、脂肪酸之乙醯化酯、肉豆蔻基二甲基氧化胺、三甲基牛脂烷基氯化銨、四級銨化合物、其鹽及前述物質中之任一者之組合。過少表面活性劑有時可得到具有孔之膜，而過多表面活性劑可得到具有脂性或油性感覺(來自存在於膜表面上之過量表面活性劑)之膜。因此，表面活性劑可以(例如)小於約2 phr、例如小於約1 phr或小於約0.5 phr之量包含於水溶性膜中。
涵蓋使用之一類二級組份係消泡劑。消泡劑可有助於發泡劑泡沫之聚結。用於本揭示內容之水溶性膜中之適宜消泡劑包含但不限於疏水性二氧化矽，例如具有精細顆粒大小之二氧化矽或發煙二氧化矽，包含可自Emerald Performance Materials獲得之Foam Blast®消泡劑，包含Foam Blast® 327、Foam Blast® UVD、Foam Blast® 163、Foam Blast® 269、Foam Blast® 338、Foam Blast® 290、Foam Blast® 332、Foam Blast® 349、Foam Blast® 550及Foam Blast® 339，該等發泡劑係專屬非礦物油消泡劑。在實施例中，可以0.5 phr或更低(例如0.05 phr、0.04 phr、0.03 phr、0.02 phr或0.01 phr)之量使用消泡劑。較佳地，避免大量二氧化矽以避免應力致白。
業內已知製備水溶性物件(包含膜)之製程，包含澆注、吹塑模製、擠壓及吹塑擠壓。所涵蓋之一類實施例之特徵在於藉由澆注形成本文所闡述之水溶性膜，舉例而言，混合本文所闡述之成份與水以產生水性混合物(例如具有視情況分散固體之溶液)，將混合物施加至表面，及乾燥掉水以產生膜。類似地，可藉由在將混合物限制於期望形狀的同時對其進行乾燥來形成其他組合物。
儘管本揭示內容提供膜實例，但組合物可採用其他形式及形狀，包含彼等厚度實質上超過通常視為膜之厚度者。膜及非膜實施例之組合物厚度(亦即在其薄點處或平均厚度)可在任一期望範圍內，包 含(例如)以下值及範圍：至少0.1 μm、至少10 μm、至少50 μm、至少100 μm、至少1 mmm、至少2 mm、至少3 mm、至少4 μm、至少5 mm、至少10 mm及在0.1 μm至100 μm或0.1 μm至1000 μm範圍內。
在所涵蓋之一類實施例中，藉由澆注水溶性混合物來形成水溶性膜，其中根據以下步驟來製備水溶性混合物：(a)提供水溶性樹脂、水及任一可選添加劑(不包含酵素)之混合物；(b)將混合物煮沸並保持30分鐘；(c)將混合物在至少40℃、視情況在40℃至70℃範圍內、例如約65℃之溫度下於烘箱中脫氣；(d)在65℃或更低之溫度下向混合物中添加至少一種酵素、視情況至少一種塑化劑及視情況額外水；及(e)視情況在無渦旋下將混合物攪拌視情況在30分鐘至90分鐘範圍內、視情況至少1小時之時間段，直至混合物之顏色及稠度看起來實質上均勻為止；及在攪拌時間段(例如在4小時內或2小時或在1小時內或更短)之後迅速澆注混合物。若過早向混合物中添加酵素以及(例如)二級添加劑或樹脂，則恢復之酵素活性量可較低。不期望受限於任一特定理論，據信，將混合物與酵素煮沸會使得酵素變性且在溶液中儲存延長時間段亦使得恢復之酵素活性有所減小。
在一類實施例中，藉由在中等至溫和條件下快速乾燥膜在本揭示內容之水溶性膜中維持高酵素活性。如本文中所使用，快速乾燥係指乾燥時間小於24小時、視情況小於12小時、視情況小於8小時、視情況小於2小時、視情況小於1小時、視情況小於45分鐘、視情況小於30分鐘、視情況小於20分鐘、視情況小於10分鐘，例如在約6分鐘至約10分鐘範圍內或8分鐘。如本文中所使用，中等至溫和條件係指乾 燥溫度小於170℉(77℃)、視情況在約150℉至約170℉(約66℃至約77℃)範圍內、例如165℉(74℃)。隨著乾燥溫度增加，酵素往往較快地發生變性，而隨著乾燥溫度降低，乾燥時間有所增加，由此將酵素暴露於溶液延長時間段。
膜可用於產生含有組合物(例如衣用或餐具洗滌組合物)之封包，由此形成小袋。本文所闡述之膜亦可用於製備具有兩個或更多個隔室之封包，該等隔室係由相同膜或該膜與其他聚合材料膜之組合製得。其他膜可(例如)藉由澆注、吹塑模製、擠壓或吹塑擠壓相同或不同聚合材料來獲得，如業內所已知。在一類實施例中，適於用作其他膜之聚合物、共聚物或其衍生物係選自聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯啶酮、聚環氧烷、聚丙烯酸、纖維素、纖維素醚、纖維素酯、纖維素醯胺、聚乙酸乙烯酯、聚羧酸及鹽、聚胺基酸或肽、聚醯胺、聚丙烯醯胺、馬來酸/丙烯酸之共聚物、多糖(包含澱粉及明膠)、天然膠(例如黃原膠及角叉菜膠)。舉例而言，聚合物可選自聚丙烯酸酯及水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、糊精、乙基纖維素、羥乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、麥芽糊精、聚甲基丙烯酸酯及其組合，或選自聚乙烯醇、聚乙烯醇共聚物及羥丙基甲基纖維素(HPMC)及其組合。
本揭示內容之小袋及/或封包包括至少一個密封隔室。因此，小袋可包括單一隔室或多個隔室。小袋可具有含有及不含酵素之區域。在包含多個隔室之實施例中，每一隔室可含有相同及/或不同組合物。組合物繼而可採用任一適宜形式，包含但不限於液體、固體及其組合(例如懸浮於液體中之固體)。在一些實施例中，小袋包括第一、第二及第三隔室，其中之每一者分別含有不同之第一、第二及第三組合物。在一些實施例中，可目測區分組合物，如歐洲專利申請案第09161692.0號(2009年6月2日提出申請且轉讓給Procter & Gamble公 司，公開為EP 2258820(及對等美國專利公開案第2010/0305020號))中所闡述。
多隔室小袋及/或封包之隔室可具有相同或不同大小及/或體積。本發明多隔室小袋之隔室可以任一適宜方式分隔或連接。在一些實施例中，第二及/或第三及/或隨後隔室與第一隔室重疊。在一實施例中，第三隔室可與第二隔室重疊，第二隔室繼而以夾心式組態與第一隔室重疊。另一選擇為，第二隔室及第三隔室可與第一隔室重疊。然而，亦同樣設想可將第一隔室、第二隔室及視情況第三隔室及隨後隔室以並排關係彼此附接。可以串形式填充隔室，每一隔室可個別地藉由穿孔線分隔。因此，每一隔室可藉由最終使用者個別地自剩餘部分撕開。
在一些實施例中，多隔室小袋及/或封包包含三個由較大第一隔室及兩個較小隔室組成之隔室。第二及第三較小隔室與第一較大隔室重疊。選擇隔室之大小及幾何結構以便可達成此配置。隔室之幾何結構可相同或不同。在一些實施例中，第二隔室及視情況第三隔室與第一隔室相比各自具有不同幾何結構及形狀。在該等實施例中，第二隔室及視情況第三隔室以第一隔室上之設計進行配置。該設計可裝飾性、教示性或闡釋性以(例如)闡釋概念或說明，及/或用於指示產品來源。在一些實施例中，第一隔室係具有兩個在四周密封之大面之最大隔室，且第二隔室較小並覆蓋第一隔室中一個面之表面積之小於約75%或小於約50%。在存在第三隔室之實施例中，上文所提及結構可相同但第二隔室及第三隔室覆蓋第一隔室中一個面之表面積之小於約60%或小於約50%或小於約45%。
本揭示內容之小袋及/或封包可包括一或多個不同膜。舉例而言，在單一隔室實施例中，封包可自一個自身摺疊且在邊緣處密封之壁製得，或另一選擇為自兩個在邊緣處一起密封之壁製得。在多隔室 實施例中，封包可自一或多個膜製得以便任一給定封包隔室可包括自單一膜或多個具有不同組合物之膜製得之壁。在一實施例中，多隔室小袋包括至少三個壁：外上壁、外下壁及分區壁。外上壁及外下壁通常相對且形成小袋之外部。分區壁位於小袋內部且沿密封線固定至大致相對之外壁上。分區壁將多隔室小袋之內部至少分隔成第一隔室及第二隔室。在一類實施例中，分區壁可為之唯一含酵素膜，由此最小化消費者對於酵素之暴露。
小袋及封包可使用任一適宜設備及方法製得。舉例而言，單一隔室小袋可使用業內通常已知之垂直形式填充、水平形式填充或轉筒填充技術製得。該等製程可為連續或間歇製程。可將膜弄濕及/或加熱以增加其展性。該方法亦可涉及使用真空將膜汲取至適宜模具中。在膜位於表面之水平部分上後，可施加將膜汲取至模具中之真空約0.2至約5秒或約0.3至約3或約0.5至約1.5秒。此真空可使得提供(例如)在10毫巴至1000毫巴範圍內或在100毫巴至600毫巴範圍內之減壓。
端視小袋之所需尺寸，模具(封包可在其中製得)可具有任一形狀、長度、寬帶及深度。若期望，則模具之大小及形狀亦可彼此有所變化。舉例而言，最終小袋之體積可為約5 ml至約300 ml或約10 ml至150 ml或約20 ml至約100 ml，且相應得調節模具大小。
在一實施例中，封包包含第一密封隔室及第二密封隔室。第二隔室與第一密封隔室呈大致重疊關係以便第二密封隔室及第一密封隔室共用小袋內部之分區壁。
在一實施例中，包含第一隔室及第二隔室之封包進一步包含第三密封隔室。第三密封隔室與第一密封隔室呈大致重疊關係以便第三密封隔室及第一密封隔室共用小袋內部之分區壁。
在各種實施例中，第一組合物及第二組合物係選自下列組合中之一者：液體、液體；液體、粉末；液體、凝膠；液體、膏；粉末、 粉末；粉末、液體；粉末、凝膠；粉末、膏；凝膠、液體；凝膠、粉末；凝膠、凝膠；凝膠、膏；膏、液體；膏、粉末；膏、凝膠；及膏、膏。
在各種實施例中，第一組合物、第二組合物及第三組合物係選自下列組合中之一者：粉末、液體、液體；粉末、液體、粉末；粉末、液體、凝膠；粉末、液體、膏；粉末、粉末、液體；粉末、粉末、粉末；粉末、粉末、凝膠；粉末、粉末、膏；粉末、凝膠、液體；粉末、凝膠、粉末；粉末、凝膠、凝膠；粉末、凝膠、膏；粉末、膏、液體；粉末、膏、粉末；粉末、膏、凝膠；粉末、膏、膏；液體、液體、液體；液體、液體、粉末；液體、液體、凝膠；液體、液體、膏；液體、粉末、液體；液體、粉末、粉末；液體、粉末、凝膠；液體、粉末、膏；液體、凝膠、液體；液體、凝膠、粉末；液體、凝膠、凝膠；液體、凝膠、膏；液體、膏、液體；液體、膏、粉末；液體、膏、凝膠；液體、膏、膏；凝膠、液體、液體；凝膠、液體、粉末；凝膠、液體、凝膠；凝膠、液體、膏；凝膠、粉末、液體；凝膠、粉末、粉末；凝膠、粉末、凝膠；凝膠、粉末、膏；凝膠、凝膠、液體；凝膠、凝膠、粉末；凝膠、凝膠、凝膠；凝膠、凝膠、膏；凝膠、膏、液體；凝膠、膏、粉末；凝膠、膏、凝膠；凝膠、膏、膏；膏、液體、液體；膏、液體、粉末；膏、液體、凝膠；膏、液體、膏；膏、粉末、液體；凝膠、粉末、粉末；凝膠、粉末、凝膠；凝膠、粉末、膏；膏、凝膠、液體；膏、凝膠、粉末；膏、凝膠、凝膠；膏、凝膠、膏；膏、膏、液體；膏、膏、粉末；膏、膏、凝膠；及膏、膏、膏。
在一實施例中，單一隔室或複數個密封隔室含有組合物。複數個隔室可各自含有相同或不同組合物。組合物係選自液體、粉末、凝膠、膏或其組合。
可在通常稱為熱成型之製程中向膜施加熱。可使用任一適宜方式施加熱。舉例而言，在將膜供給至表面上之前或位於表面上之後，可藉由使其通過加熱元件下方或穿過熱空氣來直接加熱。另一選擇為，可(例如)藉由加熱表面或在膜上施加熱零件來將其間接加熱。可使用紅外光加熱膜。可將膜加熱至至少50℃之溫度，例如約50℃至約150℃、約50℃至約120℃、約60℃至約130℃、約70℃至約120℃或約60℃至約90℃。
另一選擇為，可藉由任一適宜方式來潤濕膜，例如藉由在將膜供給至表面上之前或位於表面上之後在膜上噴霧潤濕劑(包含水、膜組合物溶液、用於膜組合物之塑化劑或前述物質之任一組合)來直接潤濕，或藉由潤濕表面或藉由在膜上施加濕零件來間接潤濕。
在將膜加熱及/或潤濕之後，可較佳地使用真空將其汲取至適當模具中。可使用(例如)至少約1.5之汲取比率及視情況(例如)高達2之汲取比率將膜熱成型。可藉由利用任一適宜方式來填充模製膜。在一些實施例中，最佳方法將取決於產品形式及所需填充速度。在一些實施例中，藉由直列式填充技術填充模製膜。然後使用第二膜藉由任一適宜方法封閉經填充開口封包以形成小袋。此可在水平位置及連續恆定運動中達成。可藉由以下方式來達成封閉：在開口封包上方及上面連續供給第二膜、較佳地水溶性膜且然後較佳地通常在模具之間及由此封包之間之區域中將第一膜及第二膜一起密封。
可利用密封封包及/或其個別隔室之任一適宜方法。該方式之非限制性實例包含熱密封、溶劑焊接、溶劑或濕密封及其組合。可在至少200℉(93℃)之溫度下(例如在約220℉(約105℃)至約290℉(約145℃)或約230℉(約110℃)至約280℉(約140℃)範圍內)將水溶性封包及/或其個別隔室熱密封。通常，僅使用熱或溶劑處理擬形成密封之區域。可藉由任一方法將熱或溶劑施加於(通常)封閉材料上及(通 常)僅施加於擬形成密封之區域上。若使用溶劑或濕密封或焊接，則較佳地亦可施加熱。較佳濕或溶劑密封/焊接方法包含藉由(例如)以下方式將溶劑選擇性施加於模具之間之區域上或施加於封閉材料上：將此溶劑噴霧或印刷於該等區域上，且然後在該等區域上施加壓力以形成密封。可使用(例如)如上文所闡述之密封輥及帶(視情況亦提供熱)。
然後可藉由切割裝置切割所形成之小袋。可使用任一已知方法達成切割。較佳地亦可以連續方式及較佳地以恆定速度及較佳地在水平位置中來進行切割。切割裝置可(例如)為尖銳零件或熱零件或雷射，其中在後兩種情形下，熱零件或雷射「燒穿」膜/密封區域。
多隔室小袋之不同隔室可以並排方式一起製得，其中所得連接小袋可能或可能不藉由切割分隔。另一選擇為，可單獨製備隔室。
在一些實施例中，可根據包含以下步驟之製程來製備小袋：a)形成第一隔室(如上文所闡述)；b)在步驟(a)中所形成之封閉隔室之一部分或所有部分內形成凹部以在第一隔室上方生成重疊之第二模製隔室；c)填充第二隔室且藉助第三膜進行封閉；d)密封第一、第二及第三膜；及e)切割該等膜以產生多隔室小袋。
可藉由向在步驟(a)中所製得之隔室施加真空來達成步驟(b)中所形成之凹部。
在一些實施例中，第二隔室及/或第三隔室可在單獨步驟中製得且然後與第一隔室組合，如歐洲專利申請案第08101442.5號或第WO 2009/152031號(2008年6月13日提出申請且轉讓給Procter & Gamble公司)中所闡述。
在其他實施例中，可根據包含以下步驟之製程來製備小袋： a)視情況使用熱及/或真空、使用第一膜在第一形成機器上形成第一隔室；b)使用第一組合物填充第一隔室；c)在第二形成機器上視情況使用熱及真空使第二膜變形以製備第二模製隔室及視情況第三模製隔室；d)填充第二隔室及視情況第三隔室；e)使用第三膜密封第二隔室及視情況第三隔室；f)將密封之第二隔室及視情況第三隔室置於第一隔室上；g)密封第一隔室、第二隔室及視情況第三隔室；及h)切割該等膜以產生多隔室小袋。
可基於實施上述製程之適應性來選擇第一形成機器及第二形成機器。在一些實施例中，第一形成機器較佳係水平形成機器，且第二形成機器較佳係轉筒形成機器且較佳地位於第一形成機器上方。
應理解，藉由使用適當供給站，可製造包含諸多不同或區別性組合物及/或不同或區別性粉末、液體、凝膠或膏組合物之多隔室小袋。
可根據下列實例來更佳地理解本揭示內容之水溶性膜，該等實例僅意欲闡釋水溶性膜及水溶性封包且並不意欲以任一方式限制其範圍。
實例 蛋白酶活性之比色量測
所用蛋白酶已知可水解N,N-二甲基酪蛋白(DMC)。藉由水解肽鍵，產生羧酸及一級胺。所產生胺與三硝基苯-磺酸(TNBS)在鹼性條件下反應形成有色複合物。在405 nm下檢測有色複合物。假設一級胺與TNB之間之反應快於DMC之解離。因此，可假設在過量受質存在下之反應僅隨酵素濃度而變化。
相對於酵素標準測定蛋白酶活性。標準係用於根據本文中之實例製備膜組合物之原材料蛋白酶組合物試樣。以便利酵素活性單位(例如開特(katal))形式報告結果(Eur.J.Biochemistry，第97卷，319-320,1979)。使用已知活性之酵素經由連續稀釋來製備一組標準。將標準緩衝至pH 8.3，在40℃下攪拌9分鐘，且量測405 nm下之吸光度。校正吸光度以補償空白，且藉由繪製活性對校正吸光度之圖線來獲得校正曲線(線性)。若r2大於0.995，則校正曲線可接受。將相應實例之含酵素膜之試樣稱重且溶於DMC及TNBS之標準溶液中，緩衝至pH 8.3，且在40℃下攪拌9分鐘。在40℃下量測405 nm下之吸光度。使用吸光度值測定每克膜之活性。一式多份重複測試每一膜組合物，且在本文中報告平均值。
澱粉酶活性之比色量測
藉由α-澱粉酶將受質4,6-亞乙基-(G7)-p-硝基苯基-(G1)-α-D-麥芽庚糖苷(亞乙基-G7pNP)水解成G2pNP、G3pNP及G4pNP。藉由α-葡萄糖苷酶將該等片段完全水解成對硝基苯酚(pNP)及葡萄糖。所形成pNP之強度與試樣之α-澱粉酶活性成正比。在405 nm下檢測pNP。
相對於酵素標準測定α-澱粉酶活性。標準係用於根據本文中之實例製備膜組合物之原始澱粉酶組合物試樣。在pH 7.35下製備標準，在27℃下攪拌4分鐘，且在405 nm下量測吸光度。獲得校正曲線(線性)，如上文所闡述。將相應實例之含酵素膜之試樣稱重且溶於亞乙基-G7pNP及α-葡萄糖苷酶之標準溶液中，緩衝至pH 7.35，且在27℃下攪拌4分鐘。在27℃下量測405 nm下之吸光度。使用吸光度值測定每克膜之活性。一式多份重複測試每一膜組合物，且在本文中報告平均值。
脂肪酶活性之比色量測
所用脂肪酶已知可水解對硝基苯酚-戊酸酯(pNP-val)。水解會解 離戊酸酯與對硝基苯酚(pNP)之間之酯鍵。所形成pNP之強度與試樣之脂肪酶活性成正比。在405 nm下檢測pNP。
相對於酵素標準測定脂肪酶活性。標準係用於製備膜組合物之原始脂肪酶組合物試樣。在pH 7.70下製備標準，在40℃下攪拌4.2分鐘，且在405 nm下量測吸光度。獲得校正曲線(線性)，如上文所闡述。將相應實例之含酵素膜之試樣稱重且溶於pNP-val之標準溶液中，緩衝至pH 7.70，且在40℃下攪拌4.2分鐘。在40℃下量測405 nm下之吸光度。使用吸光度值測定每克膜之活性。一式多份重複測試每一膜組合物，且在本文中報告平均值。
實例1
使用下文之表及說明中所指定之成份以展示量來製備一組水溶性膜。除非另外指定，否則各量係以phr表示。
每一膜亦包含約35 phr塑化劑、390 phr水及少量一或多種處理助劑(其可視為並不影響酵素恢復率，例如抗結塊劑、表面活性劑、苛性鈉、成膜劑、消泡劑、抗變黃劑等，其總量小於約2.5 phr)。如下所述來製備配方1之水溶性膜。在燒杯中，將處理助劑及水攪動10分 鐘。向混合物中添加水溶性樹脂且加熱混合物。將溶液煮沸並保持30分鐘。將溶液在65℃下於烘箱中脫氣過夜。在不高於65℃之溫度下將酵素、塑化劑及額外水混合至溶液中。將混合物攪拌1小時且立即澆注配方1之混合物。藉由相同程序製備配方2之水溶性膜，只是添加大豆蛋白蛋白酶受質。將大豆蛋白引入系統中且添加處理助劑及水。
使用醫用刮刀將膜澆注於經加熱澆注床上並在約74℃下乾燥大約8分鐘。然後自澆注床取出所得水溶性膜，切割成約8.5 in×12 in(21.59 cm×30.48 cm)之片材並密封至儲存用氣密袋中。將個別片材置於可重新密封之拉鏈型塑膠袋中，或置於箔小袋中且輕輕擠出空氣，然後熱密封並儲存在5℃冰箱中直至測試活性時為止。
如上文所闡述測定基於PVOH之水溶性膜中之酵素活性之恢復百分比。酵素恢復百分比係在混合、澆注、乾燥及儲存過程之組合後保留活性之酵素之百分比。不含酵素受質之水溶性膜(膜1)顯示恢復44%之蛋白酶活性。含有蛋白酶受質之水溶性膜(膜2)顯示恢復72%之蛋白酶活性。在此實例中，包含蛋白酶受質使得恢復之蛋白酶活性增加63%。
實例2
使用下文之表及說明中所指定之成份以展示量來製備一組水溶性膜。除非另外指定，否則各量係以phr表示。
每一膜亦包含約35 phr塑化劑、400 phr水及少量一或多種處理助劑(其可視為並不影響酵素恢復率，例如抗結塊劑、表面活性劑、苛性鈉、成膜劑、消泡劑、抗變黃劑等，其總量小於約6 phr)。遵循實例1之程序。如上文所闡述測定基於乙烯醇/丙烯酸甲酯共聚物之水溶性膜中之酵素活性之恢復百分比。不含酵素受質之水溶性膜(膜3)顯示恢復41%之蛋白酶活性。含有蛋白酶受質之水溶性膜(膜4)顯示恢復84%之蛋白酶活性。在此實例中，包含蛋白酶受質幾乎使蛋白酶活性之恢復%加倍。
實例3
使用下文之表及說明中所指定之成份以展示量來製備一組水溶性膜。除非另外指定，否則各量係以phr表示。
每一膜亦包含約35 phr塑化劑、390 phr水及少量一或多種處理助劑(其可視為並不影響酵素恢復率，例如抗結塊劑、表面活性劑、苛性鈉、成膜劑、消泡劑、抗變黃劑等，其總量小於約2.5 phr)。遵循實例1之程序。如上文所闡述測定基於乙烯醇/乙酸乙烯酯/丙烯醯胺基-2-甲基丙磺酸鹽三元聚合物之水溶性膜中之酵素活性之恢復百分比。不含酵素受質之水溶性膜(膜5)顯示恢復87%之蛋白酶活性。含有蛋白酶受質之水溶性膜(膜6)顯示恢復99%之蛋白酶活性。在此實例中，包含蛋白酶受質使得恢復之蛋白酶活性增加14%。
實例4
使用下文之表及說明中所指定之成份以展示量來製備一組水溶性膜。除非另外指定，否則各量係以phr表示。
每一膜亦包含約35 phr塑化劑、390 phr水及少量一或多種處理助劑(其可視為並不影響酵素恢復率，例如抗結塊劑、表面活性劑、苛性鈉、成膜劑、消泡劑、抗變黃劑等，其總量小於約2.5 phr)。遵循實例1之程序。如上文所闡述測定基於乙烯醇/乙酸乙烯酯/馬來酸單甲 酯三元聚合物之水溶性膜中之酵素活性之恢復百分比。不含酵素受質之水溶性膜(膜7)顯示恢復79%之蛋白酶活性。含有蛋白酶受質之水溶性膜(膜8)顯示恢復83%之蛋白酶活性。在此實例中，包含蛋白酶受質使得恢復之蛋白酶活性增加5%。
實例5
使用下文之表及說明中所指定之成份以展示量來製備一組水溶性膜。除非另外指定，否則各量係以phr表示。
每一膜亦包含約25 phr塑化劑、380 phr水及少量一或多種處理助劑(其可視為並不影響酵素恢復率，例如抗結塊劑、表面活性劑、苛性鈉、成膜劑、消泡劑、抗變黃劑等，其總量小於約4 phr)。遵循實例1之程序。如上文所闡述測定基於乙烯醇/乙酸乙烯酯/馬來酸單甲酯三元聚合物之水溶性膜中之酵素活性之恢復百分比。不含酵素受質之水溶性膜(膜9)顯示恢復41%之蛋白酶活性。含有蛋白酶受質之水溶性膜(膜10)顯示103%之蛋白酶活性標稱恢復。在此實例中，包含蛋白酶受質使得恢復之蛋白酶活性增加約240%。
實例6
使用下文之表及說明中所指定之成份以展示量來製備一組水溶性膜。除非另外指定，否則各量係以phr表示。
每一膜亦包含約35 phr塑化劑、410 phr水及少量一或多種處理助劑(其可視為並不影響酵素恢復率，例如抗結塊劑、表面活性劑、苛性鈉、成膜劑、消泡劑、抗變黃劑等，其總量小於約4 phr)。遵循實例1之程序。如上文所闡述測定基於PVOH之水溶性膜中之酵素活性之恢復百分比。不含酵素受質之水溶性膜(膜11)顯示並不恢復脂肪酶活性。含有脂肪酶受質之水溶性膜(膜12)顯示恢復22%之脂肪酶活性。在此實例中，令人吃驚地，包含脂肪酶受質使得恢復大量活性脂肪酶。蛋白酶恢復率未受影響。並不意欲受限於任一特定理論，據信，脂肪酶用作抵抗蛋白酶自降解之穩定用酵素受質。
實例7
在下文實例中，酵素在混合期間之暴露條件可影響最終組合物(例如膜)中之酵素活性。使用下文之表及說明中所指定之成份以展示量來製備一組水溶性膜。除非另外指定，否則各量係以phr表示。
膜亦包含約25 phr塑化劑、380 phr水及少量一或多種處理助劑(其可視為並不影響酵素恢復率，例如抗結塊劑、表面活性劑、苛性鈉、成膜劑、消泡劑、抗變黃劑等，其總量小於約4 phr)。
方法A
在燒杯中，將處理助劑、大豆蛋白及水攪動10分鐘。向混合物中添加乙烯醇/乙酸乙烯酯/馬來酸單甲酯三元聚合物且加熱混合物。將溶液煮沸並保持30分鐘。將溶液在65℃下於烘箱中脫氣過夜。在不高於65℃之溫度下將酵素、塑化劑及額外水混合至溶液中。將混合物攪拌1小時且立即澆注配方13之混合物以形成水溶性膜A。
對比方法B
在燒杯中，將酵素、塑化劑、處理助劑、大豆蛋白及水攪動10分鐘。向混合物中添加乙烯醇/乙酸乙烯酯/馬來酸單甲酯三元聚合物且加熱混合物。將溶液煮沸並保持30分鐘。將溶液在65℃下於烘箱中脫氣過夜。澆注配方13之混合物以形成水溶性膜B。
使用醫用刮刀將膜澆注於經加熱澆注床上並在約74℃下乾燥大 約8分鐘。然後自澆注床取出所得水溶性膜(標稱地3密耳(0.076 mm)厚)，切割成約8.5 in×12 in(21.59 cm×30.48 cm)之片材並密封至儲存用氣密袋中。將個別片材置於可重新密封之拉鏈型塑膠袋中，或置於箔小袋中且輕輕擠出空氣，然後熱密封並儲存在5℃冰箱中直至測試活性時為止。
如上文所闡述測定水溶性膜中之酵素活性之恢復百分比。方法A得到顯示103%之蛋白酶活性標稱恢復及111%之澱粉酶活性標稱恢復之水溶性膜。與之相比，根據方法B製得之水溶性膜顯示恢復1%之蛋白酶活性且恢復93%之澱粉酶活性。該等實例顯示，與藉由在混合製程早期混入酵素且由此將酵素暴露於極端加熱條件(尤其對於蛋白酶而言)所形成之水溶性膜相比，在即將澆注時將酵素混合至水溶性混合物中使得所得水溶性膜中之酵素活性較高。
實例8
在下文之實例中，乾燥水溶性膜之方法可影響所得膜之酵素活性。使用下文之表及說明中所指定之成份以展示量來製備一組水溶性膜。除非另外指定，否則各量係以phr表示。
膜亦包含約25 phr塑化劑、380 phr水及少量一或多種處理助劑(其可視為並不影響酵素恢復率，例如抗結塊劑、表面活性劑、苛性鈉、成膜劑、消泡劑、抗變黃劑等，其總量小於約4 phr)。如實例7之方法A中所闡述來製備膜。使用醫用刮刀澆注膜且在三種不同條件下乾燥。
乾燥條件1
將膜澆注於預加熱至165℉(74℃)之澆注床上且在約74℃下乾燥大約8分鐘。
乾燥條件2(環境)
在環境條件下將水溶性膜混合物澆注於Mylar膜上。然後在環境實驗室條件(約20℃至約25℃)下將水溶性膜混合物乾燥16小時。
乾燥條件3(苛刻條件)
將膜澆注於預加熱至200℉(94℃)之澆注床上且在約94℃下乾燥大約45分鐘。
如上文所闡述測定水溶性膜中之酵素之恢復百分比。結果再現於下表中。
結果展示，在本文所闡述之中等條件下乾燥膜時，相對於在溫和環境條件或苛刻條件下之乾燥，所得水溶性膜中之酵素活性得以大大改良。同樣有利的為，將膜暴露於熱之時間最小化。
在整個本說明書及下文申請專利範圍中，除非上下文另有要求，否則詞語「包括(comprise)」或變化形式(例如，(comprises)或(comprising))應理解為暗指包含所述整數或步驟或整數群組或步驟群組，但並不排除任何其他整數或步驟或整數群組或步驟群組。
在將組合物闡述為包含組份或材料之整個說明書中，除非另有所述，否則其涵蓋組合物亦可基本上由所列舉組份或材料之任一組合組成或由其組成。本文以闡釋方式所揭示之發明適宜地可在不存在本文具體揭示之任一要素或步驟下實踐。
可人工及/或藉助由電子設備所提供之自動化來實踐本文所揭示之方法及其個別步驟。儘管已參照特定實施例闡述製程，但熟習此項技術者易於瞭解，可使用實施與該等方法有關之動作之其他方式。舉例而言，除非另有所述，否則可改變各種步驟之順序，此並不背離該方法之範圍或精神。此外，可組合、刪除一些個別步驟或進一步再分成其他步驟。

Claims (24)

  1. 一種水溶性膜，其包括以下物質之水溶性混合物：水溶性樹脂、酵素及酵素受質。
  2. 一種水溶性膜，其包括以下物質之水溶性混合物：包括丙烯醯胺基-2-甲基丙磺酸鹽之水溶性樹脂，及酵素組合物其中在形成之後該膜中之酵素活性恢復率為該酵素組合物原材料中之該酵素活性之至少87%。
  3. 如請求項1之水溶性膜，其中該水溶性樹脂由乙烯醇/乙酸乙烯酯/丙烯酸甲酯三元聚合物組成。
  4. 如請求項2之水溶性膜，其中該水溶性樹脂由乙烯醇/丙烯醯胺基-2-甲基丙磺酸鹽共聚物組成。
  5. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該酵素組份由單一酵素組成且該酵素並非澱粉酶。
  6. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該酵素係蛋白酶。
  7. 如請求項1至4或6中任一項之水溶性膜，其進一步在該膜中包括第二酵素。
  8. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該酵素或第二酵素係選自由澱粉酶、脂肪酶、蛋白酶、氧化還原酶、纖維素酶、甘露聚糖酶及其組合組成之群。
  9. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該水溶性膜中所包含酵素之總量為至少約0.1 phr，視情況在約0.1 phr至約20 phr範圍內，例如2 phr。
  10. 如請求項6至9中任一項之水溶性膜，其中該蛋白酶活性對第二酵素活性之比率在約0.2：1至約10：1範圍內。
  11. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該酵素包括蛋白酶且該酵素受質包括蛋白質、視情況大豆蛋白；或該酵素包括脂肪酶且該酵素受質包括脂質、視情況甘油單油酸酯；或該酵素包括澱粉酶且該受質包括複合碳水化合物、視情況澱粉；或該酵素包括纖維素酶且該受質包括纖維素、視情況甲基纖維素；或該酵素包括甘露聚糖酶且該受質包括甘露聚糖、視情況瓜爾膠(guar gum)。
  12. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該酵素受質係大豆蛋白。
  13. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該酵素受質係以至少約2 phr、視情況在約2 phr至約8 phr範圍內之量存在於該膜中。
  14. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該水溶性樹脂係選自由以下組成之群：聚乙烯醇、經改質聚乙烯醇、水溶性丙烯酸酯共聚物、聚丙烯酸酯、聚丙烯醯胺、聚乙烯基吡咯啶酮、普魯蘭多糖(pullulan)、瓜爾膠、黃原膠、角叉菜膠、澱粉、乙氧基化澱粉、羥丙基化澱粉、聚(丙烯醯胺基-2-甲基丙磺酸鈉)、聚馬來酸單甲酯、其共聚物及前述物質中之任一者之組合。
  15. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中該水溶性樹脂係基於該水溶性膜之總重量以至少約35 wt%、視情況在約35 wt%至約90 wt%範圍內之量存在於該膜中。
  16. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其進一步包括塑化劑。
  17. 如請求項16之水溶性膜，其中該塑化劑係選自由以下組成之群：山梨醇、甘油、二甘油、丙二醇、乙二醇、二乙二醇、三乙二醇、四乙二醇、至多MW 400之聚乙二醇、2甲基-1,3丙二 醇、乳酸、單乙酸甘油酯、三乙酸甘油酯、檸檬酸三乙酯、1,3-丁二醇、三羥甲基丙烷(TMP)、聚醚三醇及其組合。
  18. 如請求項16或17中任一項之水溶性膜，其中該塑化劑或塑化劑組合係以至少約25 phr、視情況在約25 phr至約50 phr範圍內之量存在。
  19. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其進一步包括表面活性劑。
  20. 如請求項19之水溶性膜，其中該表面活性劑係選自由以下組成之群：磺基琥珀酸二烷基酯、甘油及丙二醇之乳酸化脂肪酸酯、脂肪酸乳醯酯、烷基硫酸鈉、聚山梨酸酯20、聚山梨酸酯60、聚山梨酸酯65、聚山梨酸酯80、烷基聚乙二醇醚、卵磷脂、甘油及丙二醇之乙醯化脂肪酸酯、月桂基硫酸鈉、脂肪酸之乙醯化酯、肉豆蔻基二甲基氧化胺、三甲基牛脂烷基氯化銨、四級銨化合物、其鹽及前述物質中之任一者之組合。
  21. 如請求項19至20中任一項之水溶性膜，其中該表面活性劑係以至少約0.05 phr、視情況在約0.05 phr至約2 phr範圍內之量存在於該水溶性膜中。
  22. 如前述請求項中任一項之水溶性膜，其中在形成之後該膜中之該酵素活性恢復率為用於製備該膜之該酵素組合物原材料中原始酵素活性之至少70%。
  23. 一種形成水溶性膜之方法，其包括以下步驟：提供溶於水中之如前述請求項中任一項之水溶性混合物；將該溶解混合物澆注於預加熱至小於77℃、視情況在約66℃至約77℃範圍內或約74℃之溫度之表面上；經小於24小時、視情況小於12小時、視情況小於8小時、視情況小於2小時、視情況小於1小時、視情況小於45分鐘、視情況 小於30分鐘、視情況小於20分鐘、視情況小於10分鐘、例如在約6分鐘至約10分鐘範圍內或8分鐘之時段自該澆注混合物乾燥水以形成水溶性膜。
  24. 一種形成水溶性膜之方法，其中該水溶性膜係由根據以下步驟製得之水溶性混合物澆注而得：提供水溶性樹脂、水及不包含酵素之可選添加劑之混合物；將該混合物煮沸並保持至少約30分鐘；將該混合物在至少40℃、視情況在40℃至70℃範圍內、例如約65℃之溫度下於烘箱中脫氣；在65℃或更低之溫度下向該混合物中添加至少一種酵素、視情況至少一種塑化劑及視情況額外水；及視情況在無渦旋情況下攪拌該混合物直至該混合物之顏色及稠度看起來實質上均勻為止；視情況攪拌在30分鐘至90分鐘範圍內、視情況至少1小時之時間段；及在該攪拌時間段之後迅速澆注該混合物。
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