SK284171B6 - Derivát 4''-substituovaného-9-deoxo-9a-aza-9a-homoerytromycínu A, spôsob a medziprodukty na jeho prípravu, jeho použitie a farmaceutická kompozícia s jeho obsahom - Google Patents

Description

Vynález sa týka derivátov 4-substituovaného-9-deoxo-9a-aza-9a-homoerytromycínu A, spôsobu a medziproduktov na jeho prípravu, jeho použitia na výrobu liečiva na liečbu bakteriálnych infekcií alebo protozoických infekcií pri cicavcoch, rybách alebo vtákoch a farmaceutickej kompozície s jeho obsahom.

Doterajší stav techniky

Makrolidové antibiotiká sú známe ako vhodné na liečbu širokého spektra bakteriálnych infekcií a protozoických infekcií cicavcov, rýb a vtákov. Takéto antibiotiká zahŕňajú rôzne deriváty erytromycínu A, ako je azitromycín, ktorý je komerčne dostupný a je uvádzaný v US patentoch číslo 4 474 768 a 4 517 359, ktoré sú tu obidva začlenené formou odkazu v celej svojej celistvosti. Ako azitromycín a iné makrolidové antibiotiká, nové makrolidové zlúčeniny tohto vynálezu majú silný účinok proti rôznym bakteriálnym infekciám z protozoickým infekciám, ako je ďalej opísané.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu je a) derivát 4-substituovaného-9-deoxo-9a-aza-9a-homoerytromycmu A všeobecného vzorca(1)

alebo jeho farmaceutický akceptovateľná soľ, kde

R¹ je vodík, hydroxy alebo metoxy,

R² je hydroxy,

R³ je -CH2S(O)nR⁸, kde n je celé číslo v rozmedzí od 0 do 2, alebo -CH2NR⁸R¹⁵, pričom predchádzajúce R³ skupiny sú prípadne substituované 1 a 3 R¹⁶ skupinami,

R⁴ je vodík, -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹, -C(O)NR⁹R¹⁰ alebo chrániaca skupina hydroxyskupiny,

R⁵ je -SR⁸, -(CH2)„C(O)R⁸, kde n je 0 alebo 1, (CrC₁₀)alkyl, (C₂-C|₀)alkenyl, (C₂-C₁₀)alkinyl, -(CH₂)_m((C₆-C₁₀)aryl), alebo -(CH₂)_m(5 - lOčlenný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4 a kde predchádzajúce R⁵ skupiny sú prípadne substituované 1 a 3 R¹⁶ skupinami, každé R⁶ a R⁷ je nezávisle vodík, hydroxy, (C -Cfjalkoxy, (C,-C₆)alkyl, (C₂-C₆)alkenyl, (C₂-C₆)alkinyl, -(CH₂)_m((C₆-C,o)aryl) alebo -(CH₂)_m(5 -1 Očlenný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do každé R⁸ je nezávisle vodík, (CrC10)alkyl, (C2-C10)alkenyl, (C2-C10)alkinyl, -(CH2)qCRR¹²(CH2)_rNR¹³R¹⁴, kde q a r sú každé nezávisle celé číslo v rozmedzí od 0 do 3 s výnimkou, že q a r nie sú obidva 0, -(CH₂)_m((C₆-Ci₀)aryl) alebo -(CH₂)_m(5 - 10 členný heteroaryl, kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4 a kde predchádzajúce R⁸ skupiny s výnimkou vodíka sú prípadne substituované 1 až 3 R¹⁶ skupinami, alebo R⁸ v -CH2NR⁸R¹⁵ je vzatý dohromady s R¹⁵, čím sa vytvorí 4-10 členný nasýtený monocyklický alebo polycyklický nasýtený kruh alebo 5-10 členný heteroarylový kruh, kde uvedené nasýtené a heteroarylové kruhy prípadne zahŕňajú 1 až 2 heteroatómy vybrané z O, S a -N(R⁸)- navyše k dusíku, ku ktorému sú R¹⁵ a R⁸ pripojené, pričom nasýtený kruh prípadne zahŕňa 1 až 2 dvojné alebo trojné väzby uhlík-uhlík, a tieto nasýtené a heteroarylové kruhy sú prípadne substituované 1 až 3 R¹⁶ skupinami, každé R⁹ a R¹⁰ je nezávisle vodík alebo (C,-C6)alkyl, každé R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ je nezávisle vybrané zo zvyšku vodík, (C,-C_l0)alkyl, -(CH₂)_m((C₆-C₁₀)aryl), a -(CH,)_m(5-10 členný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4 a kde predchádzajúce R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ skupiny, s výnimkou vodíka, sú prípadne substituované 1 - 3 R¹⁶ skupinami, alebo R¹¹ a R¹³ sú vzaté dohromady, čim sa vytvorí -(CH₂)p-, kde p je celé číslo od 0 do 3, takže sa vytvorí 4 až 7 členný nasýtený kruh, ktorý prípadne zahŕňa 1 až 2 dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík, alebo R¹³ a R¹⁴ sú vzaté dohromady, čím vytvorí 4 až 10 členný monocyklický alebo polycyklický nasýtený kruh alebo 5 až 10 členný heteroarylový kruh, pričom tieto nasýtené a heteroarylové kruhy prípadne zahŕňajú I až 2 heteroatómy vybrané z O, S a -N(R^s)-navyše k dusíku, ku ktorému sú pripojené R¹³ a R¹⁴, pričom tento nasýtený kruh prípadne zahŕňa 1 alebo 2 dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík a tento nasýtený a heteroarylový kruh jc prípadne substituovaný 1 až 3 R¹⁶ skupinami,

R¹⁵ je H, (C_rC₁₀)alkyl, (C₂-C₁₀)alkenyl, alebo (C₂-C₁₀)alkinyl, kde predchádzajúce R¹⁵ skupiny sú prípadne substituované 1 až 3 substituentmi nezávisle vybranými z halogénu a -OR⁹, každé R¹⁶ je nezávisle vybrané zo zvyšku halogén, kyano, nitro, trifluórmetyl, azido, -C(O)R¹⁷, -C(0)OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, NR⁶C(O)R⁷, -C(O)NR^SR⁷, -NR⁶R⁷, hydroxy, (CrC6)alkyl, (CrC6)alkoxy, -CH2)m((C6-CI0)aryl a -(CH2)m(5 - 10 členný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4 a kde arylové a heteroarylové substituenty sú prípadne substituované 1 alebo 2 substituentmi nezávisle vybranými zo zvyšku halogén, kyano, nitro, trifluórmetyl, azido, C(O)R¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, NR⁶C(O)R⁷, -C(O)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxy, (CrC_s)alkyl a (C_rC₆)alkoxy, každé R¹⁷ je nezávisle vybrané zo zvyšku vodík, (CpCio)alkyl, (C2-C10)alkenyl, (C2-C10)alkinyl, -(CH2)m((C6-C10)aryl) a -(CH2)m(5 - 10 členný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4, s podmienkou, že R⁸ nie je vodík, keď R³ je -CH2S(O)„-R^s.

Výhodné zlúčeniny všeobecného vzorca zahŕňajú

b) zlúčeniny podľa a), kde R⁴ je vodík, acetyl alebo benzyloxykarbonyl;

c) zlúčeniny podľa b), kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy a R³ je CH2NR¹⁵R⁸ alebo CH2SR⁸;

d) zlúčeniny podľa c), kde R³ je -CH2NR¹⁵R⁸, pričom R¹⁵ a R⁸ sú nezávisle vybrané zo zvyšku vodík, C|-C10)alkyl, (Ci-C_ic)alkenyl a (C₂-C₁₀)alkinyl, pričom predchádzajúce R¹⁵ a R⁸ skupiny s výnimkou vodíka sú prípadne substituované 1 alebo 2 substituentmi nezávisle vybranými z hydroxy, halogénu a (C|-C_e)alkoxy;

e) zlúčeniny podľa d), kde R¹⁵ a R⁸ sú každé nezávisle vybrané zo zvyšku vodík, metyl, etyl, alyl, n-butyl, izobutyl, 2-metoxyetyl, cyklopentyl, 3-metoxy- propyl, 3-etoxypropyl, n-propyl, izopropyl, 2-hydroxyetyl, cyklopropyl, 2,2,2-trifluóretyl, 2-propinyl, sek-butyl, terc-butyl an-hexyl;

f) zlúčeniny podľa b), kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je -CHiNHR⁸, pričom R⁸ je -(CH₂)_ra((C₆-C₁₀)aryl, kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4;

g) zlúčeniny podľa f), kde R je fenyl alebo benzyl;

h) zlúčeniny podľa b), kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je -CH₂NR¹⁵R⁸, pričom R¹⁵ a R⁸ sú vzaté dohromady na vytvorenie 4 až 10 členného nasýteného kruhu;

i) zlúčeniny podľa h), kde R¹⁵ a R⁸ sú vzaté dohromady na vytvorenie piperidinového, trimetylénimínového alebo morfolínového kruhu;

j) zlúčeniny podľa b), kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je -CH2NR^I5R⁸, pričom R¹⁵ a R⁸ sú vzaté dohromady na vytvorenie 5 až 10 členného heteroarylového kruhu prípadne substituovaného 1 alebo 2 (CrC₆)alkylovými skupinami;

k) zlúčeniny podľa j), kde R¹⁵ a R⁸ sú vzaté dohromady na vytvorenie pyrolidínového, triazolylového alebo imidazolylového kruhu, kde uvedené heteroarylové skupiny sú prípadne substituované 1 alebo 2 metylovými skupinami;

l) zlúčeniny podľa b), kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je -CHjSR⁸, pričom R⁸ je vybrané z (C2-C10)-alkylu, (C2-C10)alkenylu a (C2-Cl0)alkinylu, kde uvedené R⁸ skupiny sú pripadne substituované 1 alebo 2 substituentmi nezávisle vybranými z hydroxy, halogénu a (CrC₆)a1koxy;

m) zlúčeniny podľa 1), kde R⁸ je metyl, etyl alebo 2-hydroxyetyl; a

n) zlúčeniny podľa b), kde R³ je vybrané zo zvyšku nasledujúceho vzorca

kde X³ je O, S alebo -N(R¹⁵)-, R⁹ a R¹⁵ majú význam uvedený v nároku 1 a -OR⁹ skupina môže byť pripojená ku ktorémukoľvek dostupnému uhlíku na fenylovej skupine.

Ako osobitný derivát všeobecného vzorca (1) je možné uviesť (2R,3S,4R,5R,8R,10R,llR,12S,13S,14R)-(9-chlór)-13-[[2,6-dideoxy-3-C-metyl-3-0-metyl-4-C-[(propylamino)metyl]-a-L-ribohexopyranosyl]oxy]-2-etyl-3,4,10-trihydroxy-3,5,8,10,12,14-hexametyl-11 -[[3,4,6-trideoxy-3 -(dimetylamino)-B-D-xylohexopyranosylJoxy]-1 -oxa-6-azacyklopentadekan-15-ón vzorca

a jeho farmaceutický akceptovateľnú soľ.

Predmetom vynálezu je tiež farmaceutická kompozícia užitočná na liečbu bakteriálnych infekcií alebo protozoických infekcií cicavcov, rýb alebo vtákov, ktorej podstata spočíva v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo derivátu všeobecného vzorca (1) alebo jeho farmaceutický akceptovateľnej soli a farmaceutický akceptovateľný nosič.

Okrem toho je predmetom vynálezu tiež použitie derivátu všeobecného vzorca (1) alebo jeho farmaceutický akceptovateľnej soli na výrobu liečiva na liečbu bakteriálnych infekcií alebo protozoických infekcií cicavcov, rýb alebo vtákov.

Predmetom vynálezu je tiež spôsob prípravy derivátu všeobecného vzorca (I) alebo jeho farmaceutický akceptovateľnej soli, kde všeobecné symboly majú význam uvedený skôr, ktorého podstata spočíva v tom, že sa zlúčenina všeobecného vzorca (5)

kde R¹ a R⁴ majú význam uvedený v nároku 1, nechá reagovať so zlúčeninou vzorca HOR⁸, HSR⁸ alebo HNR¹³R⁸, kde n, R¹⁵ a R⁸ majú význam uvedený v nároku 1, pričom keď sa použije zlúčenina vzorca HSR⁸, výsledná R³ skupina vzorca -CH2SR⁸ sa prípadne oxiduje na -CH2S(O)R⁸ alebo -CH₂S(O)₂R⁸.

Zlúčenina vzorca (5) sa prednostne pripraví reakciou zlúčeniny vzorca (4)

kde R¹ a R⁴ majú význam uvedený v nároku 1, so zlúčeninou vzorca (CH3)3S(O)nX², kde n jc 0 alebo 1 a X² je halogén, -BF4 alebo -PF₆, v prítomnosti zásady.

Pri tomto spôsobe je X výhodne jód, alebo BF₄ a uvedená zásada sa vyberie z terc-butoxidu draselného, terc-butoxidu sodného, etoxidu sodného, hydridu sodného, 1,1,3,3-tetrametylguanidínu, 1,8-diazabicyklo[4,3,0]undec-7-enu, l,5-diazabicyklo[4,3,0]non-5-énu, hexametyldisilazidu draselného (KHMDS), etoxidu draselného a metoxidu sodného.

Predmetom vynálezu je tiež intermediáma zlúčenina vzorca(5)

alebo jej farmaceutický akceptovateľná soľ, kde

R' je vodík, hydroxy alebo metoxy, a

R⁴ je vodík H, -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹, -C(O)NR⁹R^W alebo skupina chrániaca hydroxyskupinu, a každý R⁹ a R¹⁰ je nezávisle vodík alebo (C|-C₆)alkyl; a vzorca (4)

alebo jej farmaceutický akceptovateľná soľ, kde

R¹ je vodík, hydroxy alebo metoxy, a

R⁴ je vodík, -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹, -C(O)NR⁹R¹⁰ alebo skupina chrániaca hydroxyskupinu, a každý R⁹ a R¹⁰ je nezávisle vodík alebo (C_rC₆)alkyl.

Výraz „liečba“, ako je tu použitý, pokiaľ to nie je označené inak, zahŕňa liečenie alebo prevenciu bakteriálnej infekcie alebo protozoickej infekcie, ako je zaistené v spôsobe tohto vynálezu.

Ako sú tu použité, pokiaľ to nie je stanovené inak, výrazy „bakteriálna infekcia“ a „protozoická infekcia“ zahŕňajú bakteriálne infekcie a protozoické infekcie, ktoré sa vyskytujú pri cicavcoch, rybách a vtákoch, rovnako ako poruchy vztiahnuté na bakteriálne infekcie a protozoické infekcie, ktoré sa môžu liečiť alebo sa im predchádzať podávaním antibiotík, ako sú zlúčeniny tohto vynálezu.

Takéto bakteriálne infekcie a protozoická infekcia a poruchy vztiahnuté na tieto infekcie zahŕňajú nasledujúce ochorenia, ako je pneumónia, zápal stredného ucha, sinusitída, bronchitída, tonzilitida a mastoiditída vztiahnuté na infekciu vyvolanou Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus aureus alebo Peptostreptococcus spp., faryngitída, reumatická horúčka a glomerulonefritída vztiahnuté na infekciu vyvolanú Streptococcus pyogenes, skupiny C a G streptokokov, Clostridium diptheriae alebo Actinobacillus haemolyticum, infekcie respiračného traktu vztiahnuté na infekciu vyvolanú Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae alebo Chlamydia pneumoniae, nekomplikované kožné infekcie a infekcie mäkkých tkanív, abscesy a osteomyelitídy a puerperálna horúčka, vztiahnuté na infekciu vyvolanú Staphylococcus aureus, koagulazopozitívnymi stafylokokmi (tzn. S. epidermidis, S. hemolyticus atď.), Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, streptokokálnytni skupinami C-F (malobunkovými streptokokmi), viridantnými streptokokmi, Corynebacterium minutissimum, Clostridium spp. alebo Bartonella henselae, nekomplikované infekcie močového traktu vztiahnuté na infekciu vyvolanú Staphylococcus saprophyticus alebo Enterococcus spp., uretritída a cervicitída a sexuálne prenášané choroby vztiahnuté na infekciu vyvolanú Chlamydia trachomatis, Haemophilus ducreyi, Treponema pallidum, Ureaplasma urealyticum alebo Neiserria gonorrheae, toxínové choroby vztiahnuté na infekciu vyvolanú 5. aureus (otrava potravinami a syndróm toxického šoku) alebo skupinami A, B a C streptokokov, vredy vztiahnuté na infekciu vyvolanú Helicobacter pylori, syste mické febrilné syndrómy vztiahnuté na infekciu vyvolanú Borrelia recurrentis, Lymská choroba vztiahnutá na infekciu vyvolanú Borrelia burgdorferi, konjuktivitída, keratitída a dakrocystitída, vztiahnuté na infekciu vyvolanú Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, S. aureus, S. pneumoniae S. pyogenes, H. influenzae alebo Listeria spp., rozsievaná mycobacterium avium komplexná (MAC) choroba vztiahnutá na infekciu vyvolanú Mycobacterium avium alebo Mycobacterium intracellulare, gastroenteritída vztiahnutá na infekciu vyvolanú Campylobacter jejuni, intestinálna protozoá vztiahnutá na infekciu Cryptosporidium spp., odontogenická infekcia vztiahnutá na infekciu viridantnými streptokokmi, trvalý kašeľ vztiahnutý na infekciu vyvolanú Bordetella pertussis, plynová gangréna vyvolaná infekciou Clostridium perfringens alebo Bacteroides spp., a ateroskleróza vztiahnutá na infekciu vyvolanú Helicobacter pylori alebo Chlamydia pneumoniae.

Bakteriálne infekcie a protozoické infekcie a poruchy vztiahnuté na tieto infekcie, ktoré môžu byť liečené alebo predchádzané pri zvieratách zahŕňajú nasledujúce infekcie a poruchy: bovinnú respiračnú chorobu vztiahnutou na infekciu vyvolanú P. haem., P. multocida, Mycoplasma bovis alebo Bordetella spp., kravská enterická choroba vztiahnutá na infekciu vyvolanú E. coli alebo protozoami (tzn. kokcídiu, kryptosporídiu atď.), mastitída kravského vemena vztiahnutá na infekciu vyvolanú Staph. aureus, Strep. uberis, Strep. agalactiae, Strep. dysgalactiae, Klebsiella spp., Corynebacterium alebo Enterococcus spp., respiračná choroba ošípaných vztiahnutá na infekciu vyvolanú A. pleuro., P. multocida alebo Mycoplasma spp., enterická choroba ošípaných vztiahnutá na infekciu vyvolanú E. coli, Lawsonia intracellularis, Salmonella alebo Se-pulina hyodyisinteriae, krívačka kráv vztiahnutá na infekciu vyvolanú Fusobacterium spp., metritída kráv vztiahnutá na infekciu vyvolanú E. coli, kravské bradavice vztiahnuté na infekciu vyvolanú Fusobacterium necrophorum alebo Bacteroides nodosus, zápal spojiviek kráv vztiahnutý na infekciu vyvolanú Moraxella bovis, predčasná aborcia kráv vztiahnutá na infekciu protozoami (napríklad neosporium), infekcia urinámeho traktu pri psoch a mačkách vztiahnutá na infekciu vyvolanú E. coli, infekcia kože a mäkkých tkanív pri psoch a mačkách vztiahnutá na infekciu vyvolanú Staph. epidermidis, Staph. intermedius, coagulase neg. Staph. alebo P. multocida, a infekcie zubov alebo dutiny ústnej pri psoch a mačkách, vztiahnuté na infekciu vyvolanú Alcaligenes spp., Bacteroides spp., Clostridium spp. , Enterobacter spp., Eubacterium, Peptostreptococcus, Porphyromonas alebo Prevotella.

Iné bakteriálne infekcie a protozoické infekcie a poruchy vztiahnuté na tieto infekcie, ktoré môžu byť liečené alebo predchádzané spôsobom tohto vynálezu, sú odkázané na J. P. Sanford et al., „The Sanford Guide to Antimicrobial Therapy“, 26. vydanie, (Antimicrobial Therapy, Inc., 1996).

Výraz „chrániaca skupina hydroxy“, ako je tu použitý, pokiaľ nie je označené inak, zahŕňa acetyl, benzyloxykarbonyl a rôzne chrániace skupiny hydroxy, dobre známe odborníkom v odbore, vrátane skupín uvedených v T. W. Greene, P. G. M. Wuts „Protective Groups in Organic Synthesis“, (J. Wiley and Sons, 1991).

Výraz „halogén“, ako je tu použitý, pokiaľ nie je stanovené inak, zahŕňa fluór, chlór, bróm alebo jód.

Výraz „alkyl“, ako je tu použitý, pokiaľ nie je označené inak, zahŕňa nasýtené monovalentné uhľovodíkové skupiny majúce nerozvetvenú, cyklickú alebo rozvetvenú časť, alebo ich zmesi. Je potrebné rozumieť, že keď sú uvažované cyklické skupiny, aspoň 3 uhlíky v uvedenom alkyle musia byť prítomné. Také cyklické skupiny zahŕňajú cyklopropyl, cyklobutyl a cyklopentyl. Výraz „alkoxy“, ako je tu použitý, pokiaľ nie je označené inak, zahŕňa -O-alkylové skupiny, kde alkyl má uvedený význam.

Výraz „aryľ, ako je tu použitý, pokiaľ nie je označené inak, zahŕňa organickú skupinu odvodenú od aromatického uhľovodíka odstránením vodíka, ako je fenyl alebo naftyl.

Výraz „5 až 10 členný heteroaryl“, ako je tu použitý, pokiaľ nie je označené inak, zahŕňa aromatické heterocyklické skupiny obsahujúce 1 alebo viac heteroatómov, z ktorých každý je vybraný z O, S a N, pričom každá heterocyklická skupina má od 5 do 10 atómov vo svojom kruhovom systéme. Príklady vhodných 5 až 10 členných heteroarylových skupín zahŕňajú pyridinyl, imidazolyl, pyrimidinyl, pyrazolyl, (1,2,3)- a (1,2,4)triazolyl, pyrazinyl, tetrazolyl, furyl, tienyl, izoxazolyl, oxazolyl, pyrolyl a tiazolyl.

Výraz „farmaceutický akceptovateľná soľ“ alebo „farmaceutický akceptovateľné soli“, ako je tu použitý, pokiaľ nie je označené inak, zahŕňa soli kyslých alebo zásaditých skupín, ktoré môžu byť prítomné v zlúčeninách tohto vynálezu.

Zlúčeniny tohto vynálezu, ktoré sú vo svojej podstate zásadité, sú schopné tvoriť širokú rozmanitosť zlúčenín s rôznymi organickými a anorganickými kyselinami. Kyseliny, ktoré môžu byť použité na prípravu farmaceutický akceptovateľných adičných solí s kyselinou týchto zásaditých zlúčenín sú tie, ktoré tvoria netoxické adičné soli s kyselinou, tzn. soli obsahujúce farmakologicky akceptovateľné anióny, ako je hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, nitrát, sulfát, bisulfát, fosfát, kyslý fosfát, izonikotinát, acetát, laktát, salicylát, citrát, kyslý citrát, tartrát, pantotenát, bitartrát, askorbát, sukcinát, maleát, gentisinát, fumarát, glukonát, glukaronát, sacharát, formát, benzoát, glutamát, metánsulfonát, etánsulfonát, benzénsulfonát, p-toluénsulfonát a pamoatové [tzn. l,ľ-metylénbis(2-hydroxy-3-naftoátové)J soli. Zlúčeniny tohto vynálezu, ktoré zahŕňajú aminoskupiny, môžu tvoriť farmaceutický akceptovateľné soli s rôznymi aminokyselinami, navyše k uvedeným kyselinám.

Tie zlúčeniny tohto vynálezu, ktoré sú v svojej povahe kyslé, sú schopné tvoriť zásadité soli s rôznymi farmakologicky akceptovateľnými katiónmi. Príklady takýchto solí zahŕňajú soli alkalických kovov alebo kovov alkalických zemín a najmä vápnika, horčíka, sodíka a draslíka pre zlúčeniny tohto vynálezu.

Určité zlúčeniny tohto vynálezu môžu mať asymetrické centrá a preto existujú v rôznych enantiomémych a diastereoizomémych formách. Tento vynález sa týka použitia všetkých optických izomérov a stereoizomérov zlúčenín tohto vynálezu a ich zmesí a všetkých farmaceutických kompozícii a spôsobov liečby, ktoré ich môžu využívať a obsahovať.

Predložený vynález zahŕňa zlúčeniny tohto vynálezu a ich farmaceutický akceptovateľné soli, kde jeden alebo viac vodíkov, uhlík alebo iné atómy sú nahradené ich izotopmi. Takéto zlúčeniny môžu byť užitočné ako výskumné a diagnostické nástroje pri farmakokinetických štúdiách metabolizmu a pri väzbových skúškach.

Opis vynálezu

Zlúčeniny tohto vynálezu môžu byť pripravené podľa schém 1 až 3 uvedených ďalej a opisu, ktorý nasleduje.

Schátia 1

Schéma 1 (pokračovanie)

schéma 3 (pokračovanie)

Schéma. 2

Schéma 3

Schéma 3 (pokračovanie)

SK 284171 Β6

Zlúčeniny predloženého vynálezu sa ľahko pripravia. Pokiaľ ide o schémy uvedené skôr, východisková zlúčenina vzorca (2) môže byť pripravená podľa jednej alebo viacerých metód dobre známych odborníkom v odbore vrátane syntéznych metód opísaných v US patentoch 4 474 768 a 4 517 359, ktoré boli uvedené skôr.

V stupni 1 schémy 1, C-2' hydroxyskupina môže byť selektívne chránená spracovaním zlúčeniny vzorca (2) s jedným ekvivalentom acetanhydridu v dichlórmetáne v neprítomnosti vonkajšej zásady, čím sa vytvorí zlúčenina vzorca (3), kde R⁴ je acetyl. Chrániaca skupina acetylu môže byť odstránená spracovaním zlúčeniny vzorca (3) s metanolom pri 22 až 65 °C počas 10 až 48 hodín. C-2' Hydroxyskupina môže byť tiež chránená inými chrániacimi skupinami hydroxy dobre známymi odborníkom v odbore, ako je benzyloxykarbonylová (Cbz) skupina.

C-9a Aminoskupina môže tiež vyžadovať ochranu pred vykonaním ďalších syntéznych modifikácií. Výhodné chrániace skupiny pre aminoskupinu sú Cbz a t-butyloxykarbonylové (Boe) skupiny. Na chránenie C-9a aminoskupiny môže byť makrolid spracovaný s t-butyldikarbonátom v bezvodom tetrahydrofuráne (THF) alebo benzyloxykarbonyl-N-hydroxysukcínimidesterom alebo benzylchlórformátom na ochranu aminoskupiny ako jej t-butyl alebo benzylkarbamátu. Tak C-9a amino, ako aj C-2' hydroxy skupina môžu byť chránené Cbz skupinou v jednom stupni spracovaním zlúčeniny vzorca (2) s benzylchlórformátom v THF a vode.

Boe skupina môže byť odstránená kyslým spracovaním a Cbz skupina môže byť odstránená konvenčnou katalytickou hydrogenáciou. V nasledujúcom opise sa predpokladá, že C-9a aminoskupina a C-2' hydroxyskupina sú chránené a deprotektované tak, ako by považovali za vhodné odborníci v odbore.

V stupni 2 schémy 1 C-4 hydroxyskupina zlúčeniny vzorca (3) sa oxiduje na zodpovedajúci acetón spôsobmi známymi odborníkom v odbore vrátane jednej alebo viacerých metód opísaných v Joumal of Antibiotics, 1988, str. 1029-1047.

Napríklad ketón vzorca (4) môže byť pripravený s DMSO a vhodným aktivačným prostriedkom. Typické reakčné podmienky na oxidáciu zahŕňajú:

(a) Moffattovu oxidáciu, ktorá využíva N-etyl-N'-(N,N-dimetylaminopropyl)karbodiimid a DMSO v prítomnosti pyridiniumtrifluóracetátu, alebo (b) Swemovu oxidáciu, pri ktorej oxalylchlorid a DMSO v CH₂Cl₂je nasledované prídavkom trietylamínu alebo alternatívne anhydrid kyseliny octovej a DMSO v CH₂C1₂ je nasledované prídavkom trietylamínu.

V stupni 3 schémy 1 sa zlúčenina vzorca (4) spracuje R³MgX’ alebo R³-Li a Mg(X’)₂, kde X¹ je halogenid, ako je chlorid alebo bromid v rozpúšťadle, ako je THF, etylénglykoldimetyléter (DME), diizopropyléter, toluén, dietyléter alebo tetrametyletyléndiamín (TMEDA), hexány alebo zmes dvoch alebo viacerých predchádzajúcich rozpúšťadiel, výhodne éterovom rozpúšťadle, pri teplote v rozmedzí od asi -78 °C do asi teploty miestnosti (20 až 25 °C), čím sa vytvorí zlúčenina vzorca (1), kde R² je hydroxy a R¹, R³ a R⁴ majú uvedený význam.

Schéma 2 znázorňuje prípravu zlúčenín vzorca (1) pri použití epoxidového medziproduktu. V stupni 1 schémy 2 môže byť zlúčenina vzorca (5) vytvorená dvoma spôsobmi.

Pri jednom spôsobe (spôsob A) sa zlúčenina vzorca (4) spracuje s (CH₃)₃ s (O)X², kde X² je halogén, -BF₄ alebo -PF₆, výhodne jód, v prítomnosti zásady ako je terc.-butoxid draselný, etoxid sodný, tere.-butoxid sodný, hydrid sodný, 1,1,3,3-tetra-metylguanidín, 1,8-diazabicyklo [5,4,0]undec-7-én, l,5-diazabi-cyklo[4,3,0]non-5-én, etoxid draselný, alebo metoxid sodný, výhodne sodík obsahujúca zásada, ako je hydrid sodný, v rozpúšťadle, ako je THF, éterové rozpúšťadlo, dimetylformamid (DMF) alebo metylsulfoxid (DMSO) alebo zmes dvoch alebo viacerých predchádzajúcich rozpúšťadiel pri teplote v rozmedzí asi 0 °C až asi 60 °C, čím sa vytvorí zlúčenina vzorca (5), v ktorej prevažuje nasledujúca konfigurácia epoxidovej skupiny

Pri druhom spôsobe (spôsob B) sa zlúčenina vzorca (4) spracuje s (CH₃)₃SX², kde X² je halogén, -BF₄ alebo -PF₆, výhodne -BF₄, v prítomnosti zásady, ako je tere.-butoxid draselný, tere.-butoxid sodný, etoxid sodný, hydrid sodný, 1,1,3,3-tetrametylguanidín, l,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-én, l,5-diazabicyklo[4,3,0]non-5-én, etoxid draselný, hexametyldisilazid draselný (KHMDS) alebo metoxid sodný, výhodne KHMDS, v rozpúšťadle, ako je THF, éterové rozpúšťadlo, DMF alebo DMSO alebo zmes dvoch alebo viacerých predchádzajúcich rozpúšťadiel, pri teplote v rozmedzí -78 °C až asi 60 °C, čím sa vytvorí zlúčenina vzorca (5), kde prevažuje nasledujúce usporiadanie epoxi-

V stupni 2 schémy 2 zlúčenina vzorca (5) môže byť premenená na zlúčeninu vzorca (1), kde R² je hydroxy a R³ je skupina, ktorá je pripojená k C-4 uhlíku cez metylénovú skupinu, rovnako ako kde R³ je -CH2NR¹⁵R⁸ alebo -CH2S(O)„R⁸, kde n, R¹⁵ a R⁸ majú uvedený význam.

Na prípravu zlúčeniny vzorca (1), kde R³ je -CH₂NR^,5R⁸ zlúčenina vzorca (5) môže byť spracovaná so zlúčeninou vzorca HNR^1SR⁸, kde R¹⁵ a R⁸ majú uvedený význam, v neprítomnosti alebo prítomnosti polárneho rozpúšťadla, ako je voda, metanol alebo THF alebo zmes predchádzajúcich rozpúšťadiel, pri teplote v rozmedzí od asi teploty miestnosti do asi 100 °C, výhodne asi 60 °C, prípadne v prítomnosti halogenidového reakčného činidla, ako je jodid draselný, chloristan lítny, chloristan horečnatý, tetrafluórborát lítny, pyridíniumhydrochlorid alebo tetraal kylamóniumhalogenidové činidlo, ako je tetrabutylamóniumjodid.

Na prípravu zlúčeniny vzorca (1), kde R³ je -CH2S(O)nR³, kde N a R⁸ majú uvedený význam, sa zlúčenina vzorca (5) môže spracovať so zlúčeninou vzorca HSR⁸ v prítomnosti K2CO₃, KI alebo metoxidu sodného v aromatickom rozpúšťadle, ako je metanol, benzén alebo toluén pri teplote v rozmedzí asi teploty miestnosti do asi 120 °C. Vhodne môže byť sírová skupina oxidovaná na -SO- alebo -SO₂- spôsobmi známymi odborníkom v odbore.

Na prípravu zlúčeniny vzorca (1), kde R³ je -CH2SR⁸ a R⁸ je -(CH2)_aCRⁿR¹²(CH2)rNR¹³R¹⁴, kde substituenty skupiny R⁸ sú definované skôr, môže byť zlúčenina vzorca (5) spracovaná so zlúčeninou vzorca HS-(CH2)_QCR^l,R¹²(CH2)rNPhth, kde NPhth predstavuje ftalimido, a jodid draselný, čím sa vytvorí zlúčenina vzorca (1), kde R³ je CH2S (CH₂)_eCRR¹²(CH₂)_rNH₂, po odstránení ftalimidovej skupiny, môže byť ďalej nodifikovaná podľa potreby.

Pri analogickom spôsobe sa zlúčenina vzorca (1), kde R³ je -CH2NR¹⁵R⁸ a R⁸ je -(CH2)_aCRR¹²(CH2)rNR¹³R¹⁴, môže byť pripravená spracovaním zlúčeniny vzorca (5) s buď zlúčeninou vzorca HNR⁹-(CH2)_qCR¹¹R^,2(CH2)rNR^,3R¹⁴ alebo so zlúčeninou vzorca H2N-(CH₂)qCR^llR¹²(CH₂)_r-NH₂ a potom nasleduje redukčná alkylácia atómov dusíka.

Pri použití rovnakej alebo analogickej metódy môže byť pripravená zlúčenina vzorca (1), kde R³ je -CH₂OR⁸ a R⁸ má uvedený význam, spracovaním zlúčeniny vzorca (5) so zlúčeninou vzorca HOR⁸.

Schéma 3 znázorňuje prípravu zlúčenín vzorca (1), v ktorom R² a R³ sú vzaté dohromady na vytvorenie oxazolylovej skupiny. V stupni 1 schémy 3 sa zlúčenina vzorca (5) spracuje s azidom sodným v prítomnosti NH₄C1 v metanole alebo vode alebo v zmesi dvoch rozpúšťadiel pri teplote v rozmedzí od asi 0 °C do asi 100 °C, výhodne asi 80 °C, čím sa vytvorí zlúčenina vzorca (6).

V stupni 2 schémy 3 môže byť zlúčenina vzorca (6) premenená na zodpovedajúci amin vzorca (7) pomocou bežnej katalytickej hydrogenácie. Výhodne sa táto hydrogenácia vykoná pri použití Pd (10 % na uhlíku) prášku pod H₂ atmosférou /latm/. Výsledný amin vzorca (7) môže byť premenený na rôzne zlúčeniny vzorca (1), kde R³ je -CH₂NR^I5R⁸ pri použití konvenčných syntéznych metód, ako je redukčná aminácia.

V stupni 3 schémy 3 zlúčenina vzorca (7) môže byť premenená na zlúčeninu vzorca (1), kde R² a R³, sú vzaté dohromady, ako je znázornené pri spracovaní zlúčeniny vzorca (7) so zlúčeninou vzorca R⁵-CN, R⁵-C=N(OCH3), R⁵-ON(OC2H₅), R⁵-C(O)C1, alebo R⁵-COOH, kde R⁵ má uvedený význam s výnimkou, že nie je NH₂, v prítomnosti alebo neprítomnosti kyseliny, ako je HCl alebo Lewisova kyselina, ako je ZnCl₂ alebo BF₄Et₃O alebo zásady, ako je NaOH alebo TEA v rozpúšťadle, ako je THF, chlórovaný uhľovodík (ako je CH₂C1₂ alebo chlórbenzén) pri teplote v rozmedzí od asi teploty miestnosti k refluxu.

Pri príprave zodpovedajúcej zlúčeniny, kde R^s je amino, zlúčenina vzorca (5) sa spracuje s BrCN a octanom sodným v metanole pri teplote v rozmedzí od asi teploty miestnosti k refluxu.

V alternatívnom prípade sa zlúčenina vzorca (7) môže spracovať, ako je označené v stupňoch 4 a 5 schémy 3. V stupni 4 schémy 3 sa zlúčenina vzorca (7) spracuje s tiokarbonyldiimidazolom v metylénchloride pri teplote v rozmedzí od asi 0 °C do teploty miestnosti, čim sa vytvorí zlúčenina vzorca (13). V stupni 5 schémy 3 sa zlúčenina vzorca (13) spracuje s R⁵-X', kde X¹ je halogenid, ako je bróm alebo jód, a zásadou, ako je metoxid sodný v rozpúšťadle, ako je metanol alebo acetón alebo ich zmes, pri teplote v rozmedzí od 0 °C do teploty miestnosti.

Zlúčeniny predloženého vynálezu môžu mať asymetrické atómy uhlíka, a preto existujú v rôznych enantiomérnych a diastereoizomémych formách. Diastereoizoméme zmesi môžu byť oddelené na svoje jednotlivé diastereoizoméry na základe ich fyzikálne chemických rozdielov spôsobmi známymi odborníkom v odbore, napríklad chromatografiou alebo fŕakčnou kryštalizáciou. Enantioméry môžu byť oddelené premenením enantiomémych zmesi na diastereoizomému zmes reakciou s vhodnou opticky aktívnou zlúčeninou, (napríklad alkoholom), čím sa oddelia diastereoizoméry a jednotlivé diastereoizoméry sa premenia (napríklad hydrolýzou) na zodpovedajúce čisté enantioméry.

Využitie všetkých takýchto izomérov vrátane diastereoizomémych zmesi a čistých enantiomérov, sa považuje za súčasť predloženého vynálezu.

Zlúčeniny tohto vynálezu, ktoré sú svojou povahou zásadité, sú schopné vytvárať rozsiahle množstvo rozdielnych solí s rôznymi anorganickými a organickými kyselinami. Hoci takéto soli musia byť farmaceutický akceptovateľné na podávanie cicavcom, je často žiaduce v praxe spočiatku izolovať zlúčeninu tohto vynálezu z reakčnej zmesi ako farmaceutický neakceptovateľnú soľ a potom jednoducho premeniť túto soľ späť na zlúčeninu vo forme voľnej bázy spracovaním s alkalickým reakčným činidlom a následne premeniť túto voľnú bázu na farmaceutický akceptovateľnú adičnú soľ s kyselinou.

Adičné soli s kyselinou zásaditých zlúčenín tohto vynálezu sa ľahko pripravia spracovaním zásaditej zlúčeniny s v podstate ekvivalentným množstvom zvolenej minerálnej alebo organickej kyseliny vo vodnom rozpúšťači o vom médiu alebo vo vhodnom organickom rozpúšťadle, ako je metanol alebo etanol. Po starostlivom odparení rozpúšťadla sa ľahko získa požadovaná tuhá soľ. Požadovaná soľ môže byť takisto vyzrážaná z roztoku voľnej bázy v organickom rozpúšťadle prídavkom roztoku vo vhodnej minerálnej alebo organickej kyseline.

Tie zlúčeniny predloženého vynálezu, ktoré majú kyslú povahu, sú schopné tvoriť zásadité soli s rôznymi katiónmi. Pre zlúčeniny, ktoré majú byť podávané cicavcom, rybám alebo vtákom musia byť takéto soli farmaceutický akceptovateľné.

Tam, kde sa požaduje farmaceutický akceptovateľná soľ, môže byť žiaduce spočiatku izolovať zlúčeninu tohto vynálezu z reakčnej zmesi ako farmaceutický neakceptovateľnú soľ a potom jednoducho premeniť túto soľ na farmaceutický akceptovateľnú soľ v postupe analogickom postupu opísanému vo vzťahu ku konverzii farmaceutický neakceptovateľnej adičnej soli s kyselinou na farmaceutický akceptovateľnú soľ.

Príklady zásaditých solí zahŕňajú soli alkalického kovu alebo soli kovu alkalických zemín a najmä sodné, amínové a draselné soli. Tieto soli sa všetky pripravia konvenčnými postupmi. Chemické bázy, ktoré sa použijú ako reagensy na prípravu farmaceutický akceptovateľných zásaditých solí tohto vynálezu sú tie, ktoré tvoria netoxické zásadité soli s kyslými zlúčeninami tohto vynálezu. Takéto netoxické zásadité soli zahŕňajú tie, ktoré sú odvodené od farmaceutický akceptovateľných katiónov, ako sú sodík, draslík, vápnik, horčík, rôzne amínové katióny apod.

Tieto soli môžu byť ľahko pripravené spracovaním zodpovedajúcich kyslých zlúčenín s vodným roztokom obsahujúcim požadované farmaceutický akceptovateľné bázy s katiónmi, ako je sodík, draslík, vápnik, horčík, rôzne amínové katióny atď., a potom sa výsledný roztok odparí dosucha, výhodne pri zníženom tlaku.

Alternatívne môžu byť pripravené zmiešaním nižších alkanolických roztokov kyslých zlúčenín a spoločne požadovaného alkoxidu alkalického kovu a potom odparením výsledného roztoku dosucha rovnakým spôsobom ako skôr. V každom prípade sa výhodne použijú stechiometrické množstvá reagensov, aby sa zaistila kompletnosť reakcie a maximálne výťažky požadovaného finálneho produktu.

Antibakteriálna a antiprotozoická aktivita zlúčenín tohto vynálezu proti bakteriálnym a protozoálnym patogénom demonštrovaná schopnosťou zlúčenín inhibovať rast definovaných kmeňov ľudských (skúška I) alebo živočíšnych (skúšky II a III) patogénov.

Skúška I

Skúška I opísaná ďalej, využíva konvenčnú metodológiu a interpretačné kritériá a je určená na zaistenie usmernenia pre chemické modifikácie, ktoré môžu viesť k zlúče ninám, ktoré obchádzajú definované mechanizmy makrolidovej rezistencie.

V skúške I je ustavený panel bakteriálnych kmeňov na zaistenie rôznych cieľových patogénnych druhov vrátane reprezentantov mechanizmov makrolidovej rezistencie, ktoré boli vyznačené. Použitie tohto panelu umožňuje určenie vzťahu chemická štruktúra/aktivita s ohľadom na potenciu, spektrum aktivity a štrukturálne elementy alebo modifikácie, ktoré môžu byť nutné na odstránenie mechanizmov rezistencie.

Bakteriálne patogény, ktoré zahŕňajú skríningový panel sú uvedené v nasledujúcej tabuľke. V mnohých prípadoch ako makrolidovo citlivý materský kmeň a makrolidovo rezistentný kmeň z nej odvodený sú dostupné na vytvorenie presnejšieho vyskúšania schopnosti zlúčenín obísť mechanizmus rezistencie. Kmene, ktoré obsahujú gén s označením ermA/ermB/ermC, sú rezistentné proti makrolidom, linkosamidom a streptograminu B, ako antibiotikám, vplyvom modifikácií (metylácie) 23 S rRNA molekúl Erm metylázou, čím sa všeobecne zabráni väzbe všetkých troch štrukturálnych tried.

Boli opísané dva typy makrolidového efluxu, msrA kóduje komponentu efluxného systému pri stafylokokoch, ktorý bráni vstupu makrolidov a streptograminov, zatiaľ čo mefA/E kóduje transmembránový proteín, ktorý vedie len k efluxu makrolidov. Inaktivácia makrolidových antibiotík sa môže vyskytnúť a môže byť sprostredkovaná buď fosforyláciou 2'-hydroxylu (mph) alebo štiepením makrocyklického laktónu (esterázou).

Tieto kmene môžu byť charakterizované pomocou konvenčnej polymcrázovcj reťazovej reakčnej (PCR) technológie a/alebo sekvenovaním rezistentného determinantu. Použitie PCR technológie v tejto prihláške je opísané v J. Sutcliffe et al., „Detection of Erythromycin-Resistant Determinants by PCR“, Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 40(11), 2562-2566 (1966).

Skúška sa uskutočňuje v mikrotitračných miskách a je interpretovaná podľa Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests - 6. vydanie, Approved Štandard, publikovanej The National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) Guidelines, pričom sa používa minimálna koncentrácia inhibítora (MIC) na porovnanie kmeňov. Zlúčeniny sa najskôr rozpustia v dimetylsulfoxide (DMSO) ako 40 mg/ml rezervné roztoky.

Označenie kmeňa Mechanizmy makrolidovej rezistencie
Staphylococcus aureus 1116	citlivý materský
Staphylococcus aureus 1117	ermB
Staphylococcus aureus 0052	citlivý materský
Staphylococcus aureus 1120	ermC
Staphylococcus aureus 1032	msrA, mph, esteráza
Staphylococcus heaolyticus 1006	msrA, mph
Streptococcus pyogenes 0203	citlivý materský
Streptocoacus pyogenes 1079	ermB
streptococcus pyogenes 1062	citlivý materský
Streptococcus pyogenes 1061	ermB
Streptocoacus pyogenes 1064	ermB
Streptococcus agalactiae 1024	citlivý materský
Streptococcus agalactiae 1023	ermB
Streptococcus pneuaoniae 1016	citlivý
Streptococcus pneuaoniae 1046	ermB
Streptococcus pneuaoniae 1095	ermB
Streptocoacus pneuaoniae 1175	mefE
Streptococcus pneuaoniae 0085	citlivý
Haeaophylus influenzae 0131	citlivý
Moraxella catarrhalis 0040	citlivý
Moraxella catarrhalis 1055	erytromycínová stredná rezistencia
Escherichia coli 0266	citlivý

Skúška II je použitá na testovanie aktivity proti Pasteurella multocida a skúška III je využitá na testovanie aktivity proti Pasteurella haemolytica.

Skúška II

Táto skúška je založená na kvapalinovej zrieďovacej metóde v mikrolitrovom formáte. Jedna kolónia P. multocida (kmeň 59A067) sa inokuluje do 5 ml mozgo-srdcového infúzneho (BH1) bujónu. Skúšané zlúčeniny sa pripravia rozpustením 1 mg zlúčeniny v 125 mikrolitroch dimetylsulfoxidu (DMSO). Zriedenie testovanej zlúčeniny sa pripraví pomocou inokulovaného BHI bujónu. Použitý rozsah koncentrácií skúšanej zlúčeniny je od 200 mikrogramov/ml do

O, 098 mikrogramu/ml dvojnásobným postupným zriedením. BHI inokulovaný P. multocida sa zriedi neinokulovaným BHI bujónom, čím sa získa suspenzia 10⁴ buniek na 200 mikrolitrov. BHI bunkové suspenzie sa zmiešajú s ohľadom na postupné zriedenia skúšanej zlúčeniny a inkubujú pri 37 °C počas 18 hodín. Minimálna inhibičná koncentrácia (MIC) sa rovná koncentrácii zlúčeniny majúcej 100 % inhibíciu rastu P. multocida, ako je určené porovnaním s neinokulovanou kontrolou.

Skúška III

Táto skúška je založená na agarovej zrieďovacej metóde pri použití Steers Replicatoru. Dve až päť kolónií izolovaných z agarovej platne sa inokuluje do BHI bujónu a inkubuje cez noc pri 37 °C za trepania (200 otáčok/min). Budúce ráno sa inokuluje 300 mikrolitrov plne narastenej predkultúry P. haemolytica do 3 ml čerstvého BHI bujónu a inkubuje sa pri 37 °C za trepania (200 otáčok za minútu).

Príslušné množstvo testovaných zlúčenín sa rozpustí v etanole a pripravia sa série dvojnásobných postupných zriedení. Dva ml príslušného postupného zriedenia sa zmiešajú s 18 ml roztopeného BHI agaru a nechajú stuhnúť. Keď inokulovaná kultúra P. haemolytica dosiahne 0,5 Mc Farlandovej štandardnej hustoty, asi 5 mikrolitrov kultúry

P. haemolytica sa inokuluje na BHI agarové platne obsahujúce rôzne koncentrácie testovanej zlúčeniny pri použití Steers Replicatoru a inkubuje sa počas 18 hodín pri teplote 37 °C. Počiatočná koncentrácia testovanej zlúčeniny je v rozmedzí od 100 do 200 mikrogramov/ml. MIC zodpovedá koncentrácii testovanej zlúčeniny majúcej 100 % inhibíciu rastu P. haemolytica, ako je určené porovnaním s neinokulovanou kontrolou.

In vivo aktivita zlúčenín vzorca (1) môže byť určená konvenčnými živočíšnymi ochrannými štúdiami dobre známymi odborníkom v odbore, zvyčajne uskutočňovanými na myšiach.

Myši sa rozdelia do klietok (10 na klietku) po ich dodaní a ponechajú sa aklimatizovať počas minimálne 48 hodín predtým, ako sa použijú. Zvieratá sa naočkujú 0,5 ml 3 x 10³ CFU/ml bakteriálnej suspenzie (P. multocida kmeň 59A006) intraperitoneálne. Každý experiment má aspoň 3 nemedikované kontrolné skupiny vrátane jednej infikovanej 0,1-násobnou podnetnou dávkou a dvoch infikovaných 1-násobnou podnetnou dávkou, skupina s 10-násobnou podnetnou dávkou môže byť takisto použitá.

Všeobecne všetky myši v danej štúdii môžu byť podnietené počas 30 až 90 minút, najmä keď sa použije opätovná injekčná striekačka, ako je Comwall^R striekačka na podávanie podnetu.

minút po začatí podnetu sa podáva prvá liečebná zlúčenina. Môže byť nutné, aby druhá osoba začala dávkovanie tejto zlúčeniny, keď všetky zvieratá neboli podnietené na konci 30 minút. Cesty podávania sú subkutánne alebo orálne dávky. Subkutánne dávky sa podávajú do voľnej ko že vzadu na krku, zatiaľ čo orálne dávky sa podávajú kŕmnou ihlou. V obidvoch prípadoch sa použije objem 0,2 ml na myš. Zlúčeniny sa podávajú 30 minút, 4 hodiny a 24 hodín po podnetu. Kontrolná zlúčenina so známou účinnosťou sa podáva rovnakou cestou aje začlenená v každom teste. Zvieratá sa prezerajú denne a počet zvierat, ktoré prežijú v každej skupine sa zaznamenáva. P. multocida modelové monitorovanie pokračuje počas 96 hodín (4 dni) po podnetu.

PD₅₀ je vyrátaná dávka, pri ktorej skúšaná zlúčenina chráni 50 % skupiny myší od smrti vplyvom bakteriálnej infekcie, ktorá by bola letálna v neprítomnosti liečenia týmto liečivom.

Zlúčeniny vzorca (1) a ich farmaceutický akceptovateľné soli (tu „aktívne zlúčeniny“) môžu byť podávané orálnou, parenterálnou, topickou, alebo rektálnou cestou pri liečbe bakteriálnych a protozoických infekcií. Všeobecne sa tieto zlúčeniny najlepšie podávajú v dávkach v rozmedzí od asi 0,2 mg na kg telesnej hmotnosti za deň (mg/kg/deň) do asi 200 mg/kg/ deň v jednej alebo rozdelených dávkach (tzn. od 1 do 4 dávok na deň), hoci sa nutne vyskytnú zmeny v závislosti od druhu, hmotnosti a stavu subjektu, ktorý má byť liečený a od príslušného spôsobu zvoleného podávania. Ale dávkovacia úroveň, ktorá je v rozmedzí asi 4 mg/kg/deň do asi 50 mg/kg/deň sa využíva najčastejšie.

Variácie sa môžu napriek tomu vyskytnúť v závislosti od druhu cicavca, ryby alebo vtáka, ktoré majú byť liečené a od ich individuálnej reakcie k uvedenému liečivu, rovnako ako od typu farmaceutickej formulácie, ktorá bola zvolená a časovej periódy a intervalu, pri ktorých sa takéto podávanie vykonáva. V niektorých prípadoch dávkovacie úrovne pod spodným limitom uvedeného rozmedzia môžu byť viac ako zodpovedajúce, zatiaľ čo v iných prípadoch ešte vyššie dávky môžu byť použité bez vyvolania akýchkoľvek škodlivých vedľajších účinkov za predpokladu, že takéto vyššie dávky sú najskôr rozdelené do niekoľkých malých dávok na podávanie počas dňa.

Aktívne zlúčeniny môžu byť podávané samotné alebo v kombinácii s farmaceutický akceptovateľnými nosičmi alebo riedidlami uvedenými spôsobmi a takéto podávanie sa môže vykonávať v jednej alebo viacerých dávkach. Osobitne tieto aktívne zlúčeniny môžu byť podávané v širokom rozmedzí rôznych dávkovacích foriem, to znamená, že môžu byť kombinované s rôznymi farmaceutický akceptovateľnými inertnými nosičmi vo forme tabliet, toboliek, pastiliek, piluliek, tvrdých bonbónov, práškov, postrekov, krémov, balzamov, čapíkov, želé, gélov, pást, roztokov, mastí, vodných suspenzií, injektovateľných roztokov, elixírov, sirupov a podobne. Takéto nosiče zahŕňajú tuhé riedidlá alebo plnivá, sterilné vodné médiá a rôzne netoxické organické rozpúšťadla a pod. Navyše orálne farmaceutické kompozície môžu byť vhodne osladené a/alebo ochutené. Všeobecne aktívne zlúčeniny sú prítomné v takých dávkovacích formách a koncentračných úrovniach v rozmedzí od asi 5,0 % do asi 70 % hmotnostných.

Na orálne podávanie sa môžu použiť tablety obsahujúce rôzne excipienty, ako je mikrokryštalická celulóza, citran sodný, uhličitan vápenatý, fosforečnan dvojvápenatý a glycín, spolu s rôznymi dezintegračnými látkami, ako je škrob (a výhodne kukuričný, zemiakový alebo tapiokový škrob), algínová kyselina a rôzne komplexné silikáty, spolu s granulačnými spojivami, ako je polyvinylpyrolidón, sacharóza, želatína a akácia. Navyše sú užitočné lubrikačné prostriedky, ako je stearan horečnatý, laurylsíran sodný a talk na tabletovacie účely. Tuhé kompozície podobného typu môžu byť tiež použité ako plnivá v želatínových tobolkách, výhodné látky v tomto spojení tiež zahŕňajú laktózu alebo mliečny cukor rovnako ako vysokomolekulárne polyetylénglykoly.

Keď sú požadované vodné suspenzie a/alebo elixíry na orálne podávanie, aktívna zlúčenina môže byť kombinovaná s rôznymi sladidlami alebo vonnými prostriedkami, farbiacimi látkami alebo farbivami a keď je to potrebné, emulgačnými a/alebo suspendačnými prostriedkami spoločne s takými riedidlami, ako je voda, etanol, propylénglykol, glycerín a rôzne ich kombinácie.

Na parenterálne podávanie môžu byť použité roztoky aktívnej zlúčeniny v buď sezamovom alebo arašidovom oleji alebo vo vodnom propylénglykole.

Vodné roztoky by mali byť vhodne tlmené (výhodne pH vyššie ako 8), keď je to nutné, a kvapalné riedidlo by malo najskôr byť izotonizované. Tieto vodné roztoky sú vhodné na intravenózne injekčné účely. Olejové roztoky sú vhodné na intraartikuláme, intramuskuláme a subkutánne injekčné účely. Príprava všetkých týchto roztokov za sterilných podmienok sa ľahko vykonáva štandardnými farmaceutickými technikami dobre známymi odborníkom v odbore.

Ďalej je možné podávať aktívnu zlúčeniny tohto vynálezu topicky, a to môže byť uskutočnené pomocou krémov, rôsolov, gélov, pást, váčkov, mastí a podobne podľa štandardnej farmaceutickej praxe.

Pri podávaní živočíchom iným ako je človek, ako je dobytok alebo domácke zvieratá, môžu byť aktívne zlúčeniny podávané v krmive zvierat alebo orálne v kŕmnych zmesiach.

Aktívne zlúčeniny môžu byť tiež podávané vo forme lipozomálnych dávkovacích systémov, ako sú malé unilameláme vezikuly, veľké unilameláme vezikuly a multilameláme vezikuly. Lipozómy môžu byť vytvorené z rôznych fosfolipidov, ako je cholesterol, stearylamín alebo fosfatidylcholíny.

Aktívne zlúčeniny môžu byť tiež združené s rozpustnými polymérmi ako cielenými nosičmi liečiva. Takéto polyméry môžu zahŕňať polyvinylpyrolidón, pyránový kopolymér, polyhydroxypropylmetakrylamidfenol, polyhydroxyetylaspartamidfenol alebo polyetylénoxidpolylyzín substituovaný palmitoylovými rezíduami.

Ďalej môžu byť aktívne zlúčeniny združené do triedy biodegradovateľných polymérov užitočných pri dosahovaní riadeného uvoľňovania liečiva, napríklad s polymliečnou kyselinou, polyglykolovou kyselinou, kopolymérmi polymliečnej a polyglyrolovej kyseliny, polyepsylonkaprolaktónom, polyhydroxybutyrovou kyselinou, nolyortoestermi, polyacetalmi, polydihydropyránmi, polykyánakrylátmi a zositovanými a amfipatickými blokovými kopolymérmi hydrogélov.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúce príklady uskutočnenia ďalej ilustrujú spôsob a medziprodukty tohto vynálezu. Je potrebné vedieť, že predložený vynález nie je obmedzený na konkrétne detaily príkladov uvedených ďalej.

Tabuľka I

Zlúčeniny z príkladov 1 až 32 majú všeobecný vzorec (8), ktorýje uvedený ďalej s R substituentmi označenými v nasledujúcej tabuľke. Zlúčeniny boli pripravené ďalej ako jc opísané v prípravách 1 až 7. V tabuľke sú výťažky a hmotnostné spektrá („hmotn. spektrum“) aplikované na konečný produkt.

Príkl.	R substituent	príprava	výťažok *	hmotn. spektrum
1	n-butylamino	1	48	820
2	2-metoxyetylamino	1	52	822
3	piperidino	1	61	832
4	norfolino	1	39	634
5	t-butylamino	1	23	821
6	benzylami.no	1	34	854
7	cyklopantylanino	2	23	832
8	propylamino	2	11	806
9	anilino	1	21	841
10	2-metoxypropy1ami no	1	46	835
11	azido	3	46	790
12	hexylami.no	1	56	847
13	3-etoxypropylamino	1	52	851
14	dietylamino	2	53	821
15	t-metylbutylamino	1	76	835
16	N-metylpropylamino	2	59	819
17	etylamino	5	18	792
18	cyklopropylanino	2	50	804
19	etylmetylanino	2	92	806
20	2,2,2-trifluóretylamlno	2	67	846
21	alylamino	1	59	804
22	2-hydroxyetyltio	6	44	826
23	dimetylamino	1	71	793
24	imidazol-l-yl	4	42	815
25	bis(2-hydroxyetyl)amino	7	21	853
26	pyrolidino	2	40	818
27	2-hydroxyetylrcetylamino	2	23	822
28	1,2,3-triazol-l-yL	4	69	817
29	2-propinylamino	2	51	802
30	2-dialylamino	4	14	829
31	dialylamino	2	29	844
32	1,2,4-triazol-l-yl	4	34	816

Spôsob prípravy pre tabuľku 1

S odkazom na uvedenú schému zlúčenina vzorca (11), kde R je H a R⁴ je H [25 g (34,01 mmol, 1,0 ekv.)] bola zmiešaná v roztoku s fenolovou červeňou v 250 ml THF a 125 ml vody. Do tohto ružového roztoku bolo pomaly pridaných 29 ml (204,1 mmol, 6,0 ekv.) benzylchlórformátu a 2N NaOH, aby sa udržal roztok zásaditý. Reakcia bola ponechaná miešať pri teplote miestnosti cez noc. Reakčná zmes bola koncentrovaná na odstránenie THF a vodná fáza bola nastavená na pH 9,5 a extrahovaná 3 x 500 ml EtOAc. Zlúčené organické vrstvy boli premyté 500 ml solanky a potom vysušené nad uhličitanom sodným. Filtrácia, koncentrácia filtrátu a vysušenie poskytli surovú látku.

Ďalšie čistenie bolo vykonané stĺpcovou chromatografiou (100 % metylénchlorid na odstránenie nečistôt a potom 5 % MeOH/ CH₂C1₂ na získanie produktu), čím sa získalo 32,5 g (95 %) žltastej tuhej látky, ktorá bola zlúčeninou vzorca (11), kde R a R⁴ boli obidva Cbz (MS (FAB) m/z

003). 32,5 g (32,49 mmol, 1,0 ekv.) tohto produktu bolo rozpustených v 216,6 ml metylénchloridu a 27,3 ml DMSO. Do tohto roztoku bolo pridaných 21,2 g (110,5 mmol, 3,4 ekv.) EDC a 24,1 g (124,8 mmol, 3,3 ekv.) PTFA. Po miešaní cez noc bola reakcia schladená 150 ml vody a pH nastavené na 9,5 prídavkom 2N NaOH. Organická vrstva bola extrahovaná 3 x 150 ml CH₂C1₂ a vysušená nad síranom sodným. Filtrácia, koncentrácia filtrátu a vysušenie poskytli surový žltý olej. Ďalšie vyčistenie na silikagélovom stĺpci (2 % MeOH/CHCl₃) poskytlo 25,6 g (79 %) žltastej tuhej látky, ktorá bola zlúčeninou vzorca (12), kde obidva R, a R⁴ boli Cbz.

g (13,98 mmol, 1,0 ekv.) zlúčeniny vzorca (12) pripravenej, ako bolo uvedené skôr, bolo rozpustených v 1 2-propanolu a do toho bolo pridaných 14 g 10 % Pd/C.

Zmes bola hydrogenovaná pri 345 kPa počas 3 dní. 14 g 10 % Pd/C bolo pridaných do reakcie a ponechaných miešať počas ďalšieho dňa. To bolo opäť opakované a miešané ďalší deň. Katalyzátor bol odstránený filtráciou cez Celit a minimálne premytie 2-propanolom viedlo k výťažku

4,8 g (47 %) zlúčeniny vzorca (12), kde obidve R a R⁴ boli H (MS (APCi) m/z 734).

6,7 g (169,17 mmol, 6,2 ekv.) NaH (60 % disperzia v oleji) bolo premytých dvakrát 150 ml hexánov na odstránenie minerálneho oleja. Tuhá látka bola zriedená v 335 ml DMSO a 38,4 g (174,62 mmol, 6,4 ekv.) Me₃SOI bolo pridaných v 3 podieloch. Roztok bol miešaný počas 1 hodiny alebo kým sa nestal číry. 20 g (27,29 mmol, 1,0 ekv.) zlúčeniny vzorca (12), kde obidva R a R⁴ boli H, bolo rozpustených v 200 ml THF. Ketón bol premiestnený pomocou kanyly do reakčnej banky a ponechaný miešať počas 20 minút. Reakcia bola schladená 500 ml nasýteného hydrogenuhličitanu sodného, extrahovaná 4 x 500 ml EtOAc a vysušená nad síranom sodným. Filtrácia, koncentrácia filtrátu a vysušenie poskytli surový olej.

Ďalšie čistenie na 750 g silikagélu (5 % MeOH/CHCl₃, 0,3 % NH₄OH) poskytlo 8,8 g (43 %) bielej tuhej látky, ktorá bola zlúčeninou vzorca (13) (MS (TS) m/z 747).

Príprava 1

250 až 500 mg uvedenej zlúčeniny vzorca (13) bolo rozpustených v 1 až 2 ml amínu zodpovedajúceho R substituentu špecifikovanému v tabuľke 1. Bolo pridané katalytické množstvo (20 mg) pyridíniumhydrochloridu a roztok bol zahrievaný na 50 až 85 °C počas 1 až 7 dní. Reakcia bola spracovaná schladením 50 ml nasýteného hydrogenuhličitanu sodného, extrahovaná 3 x 50 ml metylénchloridu a vysušená nad síranom sodným.

Filtrácia, koncentrácia filtrátu a vysušenie poskytli surový olej alebo tuhú látku. Ďalšie čistenie na silikagélovom stĺpci (2 až 4 %; MeOH/CHCl₃, 0,2 % NH₄OH) poskytlo konečný produkt.

Príprava 2

250 až 500 mg uvedenej zlúčeniny vzorca (13) bolo rozpustených v 1 až 2 ml amínu zodpovedajúceho R substituentu špecifikovanému v tabuľke 1 v utesnenej skúmavke. Bolo pridané katalytické množstvo pyridíniumhydrochloridu a roztoku bol zahriaty na 50 až 75 °C počas 1 až 5 dní. Reakcia bola spracovaná schladením 50 ml nasýteného hydrogenuhličitanu sodného, extrahovaná 3 x 50 ml metylénchloridu a vysušená nad síranom sodným. Filtrácia, koncentrácia filtrátu a vysušenie poskytli surový olej alebo tuhú látku. Ďalšie čistenie na silikagélovom stĺpci (2 až 4 % MeOH/CHCl₃, 0,2 % NH₄OH) poskytlo konečný produkt.

Príprava 3

100 mg uvedenej zlúčeniny vzorca (13) bolo rozpustených v MeOH/H₂O (8 : 1). Bol pridaný azid sodný (7 ekv.) a chlorid amónny (5,5 ekv.) a roztok bol zahrievaný na 60 °C počas 2 dní. Reakcia bola spracovaná schladením 50 ml nasýteného NaHCO₃, extrahovaná 3 x 50 ml metylénchloridu a vysušená nad síranom sodným. Filtrácia, koncentrácia filtrátu a vysušenie poskytli surový olej alebo tuhú látku. Ďalšie čistenie na silikagélovom stĺpci (2 % MeOH/CHCl₃, 0,2 % NH₄OH) poskytlo konečný produkt.

Príprava 4

150 až 250 mg uvedenej zlúčeniny vzorca (13) bolo rozpustených v 1 až 2 ml MeOH/H₂O alebo MeOH. Do toho bol pridaný heteroaromatický reagens zodpovedajúci R substituentu špecifikovanému v tabuľke 1 (10 až 50 ekv.) a katalytické množstvo (20 mg) pyridíniumhydrochloridu. Reakčná zmes bola zahrievaná pri 45 až 50 °C počas 1 až 3 dní. Reakcia potom bola schladená 100 ml nasýteného NaHCO₃, extrahovaná 3 x 25 ml metylénchloridu, vysušená nad síranom sodným, sfiltrovaná a koncentrovaná na tuhú látku. Tuhá látka bola opäť rozpustená v 100 ml EtOAc a premytá 3 x 25 ml 2N NaOH na odstránenie prebytku reagensu. Ďalšie čistenie na silikagélovom stĺpci (2 až 5 % McOH/CHCI j, 0,2 % NH₄OH) poskytlo konečný produkt.

Príprava 5 mg uvedenej zlúčeniny vzorca (13) bolo rozpustených v 1 ml amínu zodpovedajúceho R substituentu špecifikovanému v tabuľke 1. Bola pridaná malá lyžička neutrálnej aluminy a zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas 7 dní. Reakcia bola spracovaná filtráciou Celitom (rozsievková zemina) a koncentrovaná na surovú tuhú látku. Ďalšie čistenie na silikagélovém stĺpci (5 % MeOH/CHC/, 0,2 % NH₄OH) poskytlo konečný produkt.

Príprava 6

270 mg hore uvedenej zlúčeniny vzorca (13) bolo rozpustených v 4 ml benzénu. K tomu bol pridaný prebytok uhličitanu draselného a 0,5 ml tiolu. Zmes bola miešaná pri teplote miestnosti počas 16 hodín. Reakcia bola schladená 100 ml nasýteného NaHCO₃, extrahovaná 3 x 25 ml metylénchloridu, vysušená nad síranom sodným, sfiltrovaná a koncentrovaná na tuhú látku. Ďalšie čistenie na silikagélovom stĺpci (2 % MeOH/CHCl₃, 0,2 % NH₄OH) poskytlo konečný produkt.

Príprava 7

250 mg uvedenej zlúčeniny vzorca (13) bolo rozpustených v 0,5 ml bis(2-hydroxyetyl)amínu a 2 ml 2-propanolu v utesnenej skúmavke. Bolo pridané katalytické množstvo (20 mg) pyridíniumhydrochloridu a roztok bol zahrievaný na 75 °C počas 7 dní. Reakcia bola spracovaná schladením 50 ml nasýteného NaHCO₃, extrahovaná 3 x 50 ml metylénchloridu a vysušená nad síranom sodným. Filtrácia, koncentrácia filtrátu a vysušenie poskytli surový olej alebo tuhú látku. Ďalšie čistenie na silikagélovom stĺpci (2 % MeOH/CHCl₃, 0,2 % NH₄OH) poskytlo konečný produkt.

Nasledujúce príklady opisujú prípravu zlúčenín majúcich všeobecnú štruktúru vzorca (9), kde R je definované v jednotlivých príkladoch.

Príklad 33

Do roztoku zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,059 g, 0,08 ml) v THF (2 ml) pri 0 °C bol pridaný alylmagnéziumbromid v Et₂O (1,0 M, 0,5 ml). Po 2 hodinách miešania pri 0 °C, pokračovalo miešanie pri teplote miestnosti počas 12 hodín. Reakcia bola zriedená nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a EtOAc (20 ml). Po oddelení vodnej vrstvy bola táto premytá EtOAc (2 x 15 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a solankou (25 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂CI₂: NH₄OH, (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : : 1) poskytla 0,011 g (10 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je alyl. MS: 776 (TS).

Príklad 34

Do roztoku zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,059 g, 0,08 mol) pri 0 °C bol pridaný vinylmagnéziumbromid v THF (1,0 M, 0,56 ml). Po miešaní pri 0 °C počas 1 hodiny a pri teplote miestnosti počas 1 hodiny bola reakčná zmes zriedená nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a EtOAc (10 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3x10 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (20 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1) poskytla 0,016 g (26 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je vinyl. MS: 762 (FAB).

Príklad 35

Do banky obsahujúcej MgCl₂ (0,095 g, 1 mmol) a DME (1 ml) pri teplote 0 °C bolo pridané 2-tienyllítium (1,0 M, 1,0 ml). Po 0,5 hodine bol zavedený roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,073 g, 0,1 mmol) v DME (2 ml) a miešanie pokračovalo pri 0 °C počas 1 hodiny, potom pri teplote miestnosti počas 0,5 hodiny. Reakčná zmes bola zriedená nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a EtOAc (15 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3x10 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (15 ml) a solankou (20 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1) poskytla 0,012 g (15 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 2-tienyl. MS: 817 (TS).

Príklad 36

Do roztoku zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,147 g, 0,2 mmol) v DME (10 ml) pri 0 °C bol pridaný etinylmagnéziumbromid v THE (0,5 M, 2,8 ml). Po miešaní pri 0 °C počas 1 hodiny a pri teplote miestnosti počas 1 hodiny bola reakčná zmes zriedená vodou (20 ml) a EtOAc (35 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 25 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a solankou (30 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂C1₂: NH4OH (6 : 93 : 1 až až 10 : 89 : 1) poskytla 0,068 g (45 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je etinyl. MS: 759 (API).

Príklad 37

Do zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,220 g, 0,3 mmol) v DME (15 ml) pri 0 °C bol pridaný 1-metyl-1-propenylmagnéziumbromid v THF (0,5 M, 4,2 ml). Po miešaní pri teplote miestnosti počas 3 hodín bola reakčná zmes zriedená nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a EtOAc (30 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3x10 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (25 ml) a solankou (30 ml) vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂C1₂ : : NH4OH (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,068 g (25 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 1-metyl-1-propenyl. MS: 790 (API).

Príklad 38

Do roztoku butylmagnéziumbromidu v THF (2,0 M, 1,0 ml) pri 0 °C bol pridaný roztok metylpropargyléteru (0,154 g, 0,2 mmol) v DME (3 ml). Po miešaní pri 0 °C počas 0,5 hodiny bol pridaný roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,147 g, 0,2 mmol) v DME (7 ml). Po miešaní pri 0 °C počas 0,5 hodiny a teplote miestnosti počas 4 hodín bola reakčná zmes zriedená vodou (20 ml) a EtOAc (25 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 20 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a solankou (25 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : : 1) poskytla 0,081 g (50 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 3-metoxy-1-propinyl. MS: 803 (API).

Príklad 39

Do roztoku metylmagnéziumbromidu v Ete₂O (3,0 M,

1,8 ml) pri 0 °C bol pridaný roztok 1 -dimatylamino-2-propínu (0,154 g, 0,2 mmol) v THF (5 ml). Po miešaní pri 0 °C počas 6 hodín bol pridaný roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,147 g, 0,2 mmol) v DME (10 ml) pri teplote miestnosti. Po miešaní pri teplote miestnosti počas 3 hodín bola reakčná zmes zriedená vodou (40 ml) a EtOAc (50 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (40 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 8 : 91 : 1) poskytla 0,140 g (57 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde Rje 3-dimetylamino-l-propinyl. MS: 817 (API).

Príklad 40

Do roztoku metylmagnéziumbromidu v Ete₂O (3,0 M,

1,8 ml) a DME (1 ml) pri 0 °C bol pridaný roztok 1-etynilpyridínu (0,186 g, 1,8 mmol) v DME (2 ml). Po miešaní pri 0 °C počas 1 hodiny a pri teplote miestnosti počas 1 hodiny bol pridaný roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,110 g, 0,15 mmol) v DME (7 ml) pri teplote miest nosti. Po miešaní pri teplote miestnosti počas 3 hodín bola reakčná zmes zriedená vodou (20 ml) a EtOAc (40 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 30 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : l) poskytla 0,066 g (53 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 2-pyridyletinyl. MS: 836 (API).

Príklad 41

Do banky s guľatým dnom obsahujúcej MgBr₂ (0,552 g, 3,0 mmol) a propinyllítium (0,069 g, 1,5 mmol) pri 0 °C bol THF (5 ml). Po 4 hodinách bol zavedený roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,110 g, 0,15 mmol) v DME (10 ml) pri teplote miestnosti a miešanie pokračovalo 3 hodiny. Reakčná zmes bola zriedená vodou (30 ml) a EtOAc (30 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 30 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 7 : 92 : 1) poskytla 0,060 g (52 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde Rje 1-propinyl. MS: 817 (TS).

Príklad 42

Do roztoku metylmagnéziumbromidu v Et₂O (3,0 M, 0,60 ml) pri 0 °C bol pridaný roztok propargylalkoholu (0,346 ml, 0,289 g, 2,25 mmol) v THF (5 ml). Po miešaní pri 0 °C počas 3 hodín bol pridaný roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,110 g, 0,15 mmol) v DME (10 ml) pri teplote miestnosti. Po miešaní pri teplote miestnosti počas 2 hodín bola reakčná zmes zriedená vodou (35 ml) a EtOAc (50 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 40 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia pomocou MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 15 : 84 : : 1) poskytla 0,038 g (32 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde Rje 3-hydroxy-1-propinyl. MS: 790 (API).

Príklad 43

Paládiový katalyzátor (20 mg, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny z príkladu 42 v izopropanole (8 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 2 hodín. Filtrácia alikvotu reakčnej zmesi cez Celit a koncentrácia za vákua poskytli zlúčeninu vzorca (9), kde R, je 3-hydroxy-l-propenyl. MS: 791 (API).

Príklad 44

Paládiový katalyzátor (20 mg, 10 % Pd/C) bol pridaný k zvyšnému roztoku zlúčeniny z príkladu 43 a reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 48 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 8:91 : 1) poskytla 0,018 g (57 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde Rje 3-hydroxypropyl. MS: 793 (API).

Príklad 45

Paládiový katalyzátor (15 mg, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku titulnej zlúčeniny z príkladu 38 v izopropanole (8 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom

SK 284171 Β6 (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Filtrácia alikvotu reakčnej zmesi cez Celit a koncentrácia za vákua poskytli zlúčeninu vzorca (9), kde R je 3-metoxy-1-propenyl. MS: 806 (API).

Príklad 46

Paládiový katalyzátor (15 mg, 10 % Pd/C) bol pridaný k zvyšnému roztoku z príkladu 45 a reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 48 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia pri pomoci MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : : 93 : 1 až 7 : 92 : 1) poskytla 0,017 g (73 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 3-metoxypropyl. MS: 808 (API).

Príklad 47

Do roztoku zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je benzyloxykarbonyl (0, 520 g, 0,6 mmol) v DME (6 ml) a TMEDA (2 ml) pri -40 °C bolo pridané propinyllítium (0,414 g, 9,0 mmol). Po miešaní pri -40 °C počas 2,5 hodiny bola reakčná zmes zriedená nasýteným vodným roztokom chloridu amónneho (30 ml) a EtOAc (30 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3x10 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (25 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua.

Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : NH₄OH (4 : 95,6 : 0,4 až 6 : 93,6 : 0,4) poskytla 0,157 g (13 % výťažok) rýchlejšie eluujúceho diastereoizoméru a 0,070 g (13 % výťažok) zmesi diastereoizomérov.

Roztok rýchlejšie eluujúceho diastereoizoméru (0,157 g, 0,17 mmol) v MeOH (5 ml) bol ponechaný miešať pri 30 °C počas 6 dní. Po koncentrácii za vákua silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (4 : 95,6 : 0,4 až 6 : 93,6 : 0,4) poskytla 0,102 g (78 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 1-propinyl s nasledujúcou konfiguráciou v C-4 uhlíku. (MS: 774 (API)).

Ä./O^CH, /V OH HjCO CH₃

Roztok pomalejšie eluujúceho diastereoizoméru (0,071 g, 0,078 mmol) v MeOH (5 ml) bol ponechaný miešať pri 30 °C počas 6 hodín. Po koncentrácii za vákua silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : NH₄OH (4 : 95,6 : 0,4 až 6 : 93,6 : 0,4) poskytla 0,041 g (68 % výťažok) látky identickej s látkou opísanej zlúčeniny z príkladu 41, ktorá zodpovedá zlúčenine vzorca (9), kde R je 1-propinyl s nasledujúcou konfiguráciou v C-4 uhlíku. (MS: 774 (API)).

Príklad 48

Do suspenzie trimetylsulfóniumtetrafluórborátu (1,03 g, 6,3 mmol) v THF (40 ml) pri -10 °C bol pridaný K.HMDS (1,20 g 6,0 mmol). Po miešaní pod 0 °C počas 0,5 hodiny bola reakčná nádoba ochladená na -78 °C a bol pridaný roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R¹⁴ je benzyloxykar bonyl (2,60 g, 3 mmol) v DME (10 ml). Po 0,5 hodine bola reakčná zmes zriedená nasýteným vodným roztokom chloridu amónneho (40 ml) a EtOAc (50 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 30 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté solankou (40 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (2 : 97,6 : 0,4 až 4 : 95,5 : 0,5) poskytla 0,834 g (32 % výťažok) zlúčeniny vzorca (5), kde R⁴ je benzyloxykarbonyl. MS: 881 (API).

Príklad 49

Roztok zlúčeniny z príkladu 48 (0,176 g, 0,2 mmol) v MeOH (5 ml) bol ponechaný miešať pri 50 °C počas 4 dní. Po koncentrácii silikagélová chromatografia s MeOH : : CH₂CI₂: NH₄OH (4 : 95,6 : 0,4 až 6 : 93,6 : 0,4) poskytla 0,107 g (72 % výťažok) zlúčeniny vzorca (5), kde R⁴ je vodík a epoxidová skupina v C-4 má nasledujúce usporiadanie. MS: 748 (API).

Príklad 50

Roztok zlúčeniny z príkladu 48 (0,176 g, 0,2 mmol), jodidu draselného (2,32 g, 14 mmol) a cyklopropylamínu (2,43 ml, 2,00 g, 35 mmol) v MeOH (30 ml) bol ponechaný miešať pri 50 °C počas 2 dní. Po koncentrácii bol zvyšok rozpustený vo vode (25 ml) a EtOAc (100 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (40 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : : NH₄OH (4 : 95,6 : 0,4 až 6 : 93,5 : 0,5) poskytla 0,0377 g (69 % výťažok) zlúčeniny vzorca 9, kde R je cyklopropylaminometyl, s nasledujúcou konfiguráciou v C-4 uhlíku. MS: 805 (API).

Príklad 51

Roztok zlúčeniny z príkladu 48 (0,176 g, 0,2 mmol), tetrabutylamóniumjodidu (0,739 g, 2,0 mmol) a butylamínu (0,395 ml, 0,293 g, 4 mmol) v MeOH (5 ml) bol ponechaný miešať pri 50 °C počas 2 dní. Po koncentrácii bol zvyšok rozpustený vo vode (20 ml) a EtOAc (20 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 20 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté solankou (40 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH: CH₂C1₂: NH₄OH (4 : 95,6 : : 0,4 až 6 : 93,5 : 0,5) poskytla 0,088 g (54 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je propylaminometyl, s nasledujúcou konfiguráciou v C-4 uhlíku. MS: 821 (API).

HjCO' CH₃° ^CH3

Príklad 52

Do roztoku zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je benzyloxykarbonyl a vodík pripojený k C-9a dusíku ja nahradený benzyloxykarbonylom (0,500 g, 0,499 mmol) v THF (15 ml) pri 0 °C bol pridaný metylmagnéziumbromid v Et₂O (3,0 M, 1,2 ml). Po 20 minútach bola reakčná zmes zriedená EtOAc (30 ml) a vodou (50 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a solankou (120 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua, čím sa získalo 0,500 g (98 % výťažok) šedastej peny. MS: 1017, 845 (API).

Do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,500 g, 0,491 mmol) v izopropanole (50 ml) bol pridaný paládiový katalyzátor (0,250 g, 10 % Pd/C). Reakčná nádoba bola vymytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 48 hodín. Ďalší paládiový katalyzátor (0,250 g, 10 % Pd/C) bol pridaný a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 24 hodín. Reakčná zmes bola prefiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Výsledný olej bol rozpustený v izopropanole (50 ml), bol pridaný paládiový katalyzátor (0,312 g, 10 % Pd/C) a hydrogenácia pokračovala pri 45 kPa počas 24 hodín. Bol pridaný ďalší paládiový katalyzátor (0,170 g, 10 % Pd/C) a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 24 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua.

Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : : NH₄OH (8 : 91 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,120 g (33 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je metyl, s nasledujúcim usporiadaním v C-4 uhlíku. MS: 749 (API).

A.

L.,ch₃

OH HjCO CH,

Príklad 53

Do roztoku zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je benzyloxykarbonyl a vodík pripojený k C-9a dusíku je nahradený banzyloxykarbonylom (0,101 g, 0,101 mmol) v THF (2 ml) pri -78 °C bol pridaný fenylmagnéziummbromid v THP (1,01 M, 1,0 ml). Po 15 minútach miešanie pokračovalo pri 0 °C počas 1 hodiny potom pri teplote miestnosti počas 12 hodín. Reakcia bola zriedená 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a EtOAc (20 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3x15 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a solankou (25 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : NH₄OH (5 : 94 : 1 až 25 : 74 : 1) poskytla 0,048 g (45 % výťažok) bielej peny. MS: 1080 (LSIMS).

Paládiový katalyzátor (0,024 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,024 g, 0,022 mmol) v metanole (15 ml). Reakčná nádoba bola vymytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : NH₄OH (5 : 94,5 : 0,5 až 10 : 89 : 1) poskytla

0,010 g (28 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je fenyl. MS: 811 (LSIMS).

Príklad 54

Do roztoku východiskovej zlúčeniny použitej v príklade 53 (0,300 g, 0,30 mmol) v THF (3 ml) pri 0 °C bol pridaný n-butylmagnéziumchlorid v THF (2,0 M, 1,5 ml). Po 20 minútach bola reakčná zmes zriedená vodou a EtOAc (20 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (55 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua, čím sa získalo 0,295 g (93 % výťažok) šedastej peny. MS: 1060 (FAB).

Paládiový katalyzátor (0,087 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,087 g, 0,082 mmol) v izopropanole (15 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Ďalší paládiový katalyzátor (0,087 g, 10 % Pd/C) bol pridaný a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 60 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : NH₄OH (5 : 94,5 : 0,5 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,010 g (28 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je n-butyl. MS: 792 (API).

Príklad 55

Do roztoku východiskovej zlúčeniny použitej v príklade 53 (0,200 g, 0,20 mmol) v THF (2 ml) pri 0 °C bol pridaný etylmagnéziumbrorid v THF (1,0 M, 2,0 ml). Po 20 minútach bola reakčná zmes zriedená vodou a EtOAc (20 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 30 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (55 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : : CH₂C1₂: NH₄OH (5 : 94,5 : 0,5 až 20 : 79 : 1) poskytla 0,079 g (38 % výťažok) bielej peny. MS: 1033 (LSIMS).

Paládiový katalyzátor (0,035 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,079 g, 0,77 mmol) v etanole (15 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Ďalší paládiový katalyzátor (0,036 g, 10 % Pd/C) bol pridaný a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 24 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua, čím sa získalo 0,056 g (96 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je etyl. MS: 763 (TS).

Príklad 56

Do roztoku východiskovej zlúčeniny použitej v príklade 53 (0,300 g, 0,30 mmol) v THF (3 ml) pri 0 °C bol pridaný izopropenylmagnéziumchlorid v THF (0,5 M, 6 ml). Po 20 minútach bola reakčná zmes zriedená vodou a EtOAc (20 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 30 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (3 : 96,9 : 0,1 až 20 : 79,9 : 0,1) poskytla 0,063 g (20 % výťažok) bielej peny. MS: 1045 (LSIMS).

Paládiový katalyzátor (0,075 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,150 g, 0,165 mmol) v etanole (30 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Ďalší paládiový katalyzátor (0,075 g, 10 % Pd/C) bol pridaný a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,024 g (19 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je izopropenyl. MS: 775 (TS).

Príklad 57

Do roztoku východiskovej zlúčeniny použitej v príklade 53 (0,750 g, 0,75 mmol) v THF (12 ml) pri 0 °C bol pridaný alylmagnéziumchlorid v THF (2,0 M, 3,0 ml). Po 15 minútach bola reakcia zriedená vodou a EtOAc (40 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a solankou (100 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 15 : 84 : 1) poskytla 0,530 g (68 % výťažok) šedastej peny. MS: 1044, 910 (API).

Paládiový katalyzátor (0,075 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,350 g, 0,335 mmol) v izopropanole (10 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Ďalší paládiový katalyzátor (0,150 g, 10 % Pd/C) bol pridaný a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 24 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: ΝΗ,ΟΗ (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,148 g (57 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je propyl. MS: 778 (TS).

Príklad 58

Do roztoku zlúčeniny použitej ako východisková látka v príklade 53 (0,750 g, 0,75 mmol) v THF (12 ml) pri 0 °C bol pridaný alylmagnéziumchlorid v THF (2,0 M, 3,0 ml). Po 15 minútach bola reakcia zriedená vodou a EtOAc (40 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a solankou (100 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 15 : 84 : 1) poskytla 0,530 g (68 % výťažok) šedastej peny. MS: 1044 (API).

Roztok opísanej zlúčeniny (0,104 g, 0,100 mmol) a (lS)-(+)-10-kamforsulfónovej kyseliny (0,046 g, 0,200 mmol) v MeOH (4 ml) bol ochladený na -78 °C a spracovaný s 0zónom až zostávala sýtomodrá farba. Reakcia bola prečistená kyslíkom, bol pridaný dimetylsulfoxid (0,13 ml, 1,76 mmol) a pyridín (0,20 ml, 2,42 mmol) a miešanie pokračovalo počas 12 hodín. Bol pridaný metylénchlorid (30 ml) a 10 % vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného, vrstvy boli oddelené a vodná vrstva bola extrahovaná metylénchloridom (3 x 30 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,024 g (23 % výťažok) šedastej peny. MS: 912 (API).

Do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,22 g, 0,024 mmol) v MeOH (1 ml) bol pridaný tetrahydroborát sodný (0,001 g, 0,024 mmol). Ďalší tetrahydroborát sodný (0,004 g, 1,0 mmol) bol pridaný počas periódy 3 hodín. Reakčná zmes bola zriedená metylénchloridom (30 ml) a 10 % roztokom hydrogenuhličitanu sodného (20 ml). Po separácii bola vodná vrstva extrahovaná metylénchloridom (3 x 30 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua, čím sa získalo 0,022 g (100 % výťažok) žltej peny. MS: 914 (API).

Paládiový katalyzátor (0,012 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,022 g, 0,24 mmol) v izopropanole (10 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Ďalší paládiový katalyzátor (0,20 g, 10 % Pd/C) bol pridaný a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 24 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (8 : 91 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,005 mg (23 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 2-hydroxyetyl. MS: 779 (TS).

Príklad 59

Do roztoku východiskovej zlúčeniny použitej v príklade 53 (0,750 g, 0,75 mmol) v THF (12 ml) pri 0 °C bol pridaný alylmagnéziumchlorid v THF (2,0 M, 3,0 ml). Po 15 minútach bola reakcia zriedená vodou a EtOAc (40 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a solankou (10 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : : NH₄OH (6 : 93 : 1 až 15 : 84 : 1) poskytla 0,530 g (68 % výťažok) šedastej peny. MS: 1044 (API).

Roztok opísanej zlúčeniny (0,104 g, 0,100 mmol) a (lS)-(+)-10-karnforsulfónovej kyseliny (0,046 g, 0,200 mmol) v MeOH (4 ml) bol ochladený na -78 °C a spracovaný s 0zónom, kým nezostávala sýtomodrá farba. Reakcia bola prečistená kyslíkom, bol pridaný dimetylsulfoxid (0,13 ml, 1,76 mmol) a pyridín (0,20 ml, 2,42 mmol) a miešanie pokračovalo počas 12 hodín. Bol pridaný metylénchlorid (30 ml) a 10 % vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (10 ml), vrstvy boli oddelené a vodná vrstva bola extrahovaná metylénchloridom (3 x 30 ml). Zlúčené organické extrakty boli premyté 10 % vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,024 g (23 % výťažok) šedastej peny. MS: 912 (API).

Paládiový katalyzátor (0,040 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,057 g, 0,63 mmol) v izopropanole (15 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Bol pridaný ďalší paládiový katalyzátor (0,040 g, 10 % Pd/C) a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 24 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,010 mg (15 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je formylmetyl. MS: 777 (TS).

Príklad 60

Do roztoku 2-brómpyridínu (0,474 g, 3,0 mmol) v THF (5 ml) pri -78 °C bolo pridané n-butyllítium (3,0 M, 1,20 ml) pri -78 °C. Po 40 minútach bol roztok premiestnený pomocou kanyly chladenej plášťom suchého ľadu do banky obsahujúcej MgCl₂ (0,428 g, 4,5 mmol) a éter (4 ml) pri -78 °C. Po 15 minútach bol zavedený roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je benzyloxy-karbonyl (0,260 g, 0,3 mmol) v THF (3 ml) pri -78 °C a miešanie pokračovalo, pričom bolo dovolené, aby sa reakcia ohriala na teplotu miestnosti počas niekoľkých hodín. Po 3,5 hodinách bola reakčná zmes zriedená nasýteným vodným roztokom hyd rogenuhličitanu sodného (20 ml) a EtOAc (30 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml).

Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (60 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93,3 : 0,7 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,023 g (9,5 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 2-pyridyl. MS: 812 (API).

Príklad 61

Do banky s guľatým dnom obsahujúcej n-butyllítium (3,0 M, 1,62 mmol) v dietyléteri (15 ml) pri -78 °C bol pridaný schladený (-78 °C) 3-brómpyridín (0,790 g, 5 mmol) pomocou kanyly chladenej plášťom suchého ľadu. Miešanie pokračovalo pri -78 °C počas 35 minút. Bola pridaná suspenzia MgBr₂ dietyléterátu (0,114 g, 0,440 mmol) v dietyléteri (3 ml) pri -78 °C pomocou kanyly chladenej plášťom suchého ľadu, do roztoku 3-pyridyllítia. Roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je benzyloxykarbonyl (0,347 g, 0,400 ml) v dietyléteri (3 ml) pri -78 °C bol zavedený pomocou kanyly. Miešanie pokračovalo pri -78 °C počas 2 hodín a pomaly dochádzalo k otepľovaniu na 0 °C počas 3 hodín. Reakčná zmes bola zriedená nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a EtOAc (30 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 50 ml).

Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (60 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : : CH₂C1₂: NH₄OH (4 : 95,4 : 0,6 až 20 : 79 : 1) poskytla 0,075 g (26 % výťažok) bielej peny. MS: 947, 812 (API).

Paládiový katalyzátor (0,073 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej skôr (0,073 g, 0,077 mmol) v izopropanole (30 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 48 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 8 : 91 : 1) poskytla 0,032 mg (51 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 3-pyridyl. MS: 812 (API).

Príklad 62

Do roztoku metylmagnéziumbromidu v dietyléteri (3,0 M, 1,8 ml) pri 0 °C bol pridaný roztok 5-hexylénnitrilu (0,63 ml, 6,00 mmol) v THF (5 ml). Po miešaní pri teplote 0 °C počas 8 hodín bol pridaný roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je H (0,220 g, 0,300 mmol) v DME (10 ml) a miešanie pokračovalo pri 0 °C počas 0,5 hodiny, potom pri teplote miestnosti počas 4 hodín. Reakčná zmes bola zriedená vodou, (20 ml) a EtOAc (25 ml), vrstvy boli oddelené a vodná vrstva bola premytá EtOAc (3 x 20 ml).

Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a solankou (25 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 10 : 89 : 1) poskytla 0,035 g (14 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 6-kyán-l-pentinyl. MS: 827 (API).

Príklad 63

Do roztoku zlúčeniny z príkladu 49 s výnimkou, že R⁴ je benzyloxykarbonyl (0,101 g, 0,115 mmol) v DME (3 ml) bol pridaný LiAlH₄ (1,0 M, 2,1 ml) po kvapkách. Po 10 minútach bola reakčná zmes postupne spracovaná vodou (0,04 ml), 15 % roztokom NaOH (0,044 ml) a vodou (0,132 ml), potom miešaná pri teplote miestnosti počas 0,5 hodiny. Zmes bola zriedená EtOAc (20 ml) a vodou (20 ml). Po separácii bola vodná vrstva extrahovaná EtOAc (3 x 30 ml).

Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (60 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (3 : 96,5 : 0,5 až 3,5 : 95 : 0,5) poskytla 0,042 g (49 % výťažok) zlúčeniny vzorca 9, kde R je metyl, s nasledujúcou konfiguráciou v C-4 uhlíku. MS: 749 (API).

X

I L*CHj

OH H3CO CH,

Príklad 64

Do roztoku 1-metylimidazolu (0,41 g, 4,99 mmol) v THF (5 ml) pri -78 °C bolo pridané n-butyllítium (2,5 M, 1,02 ml). Po 45 minútach pri -78 °C bol pridaný roztok pomocou kanyly do banky obsahujúcej MgCl₂ (0,71 g, 7,49 mmol) a THF (5 ml) pri 0 °C. Po 1,5 hodine pri 0 °C bol zavedený roztok východiskovej zlúčeniny použitej v príklade 53 (0,500 g, 0,499 mmol) v DME (2 ml) a miešanie pokračovalo pri 0 °C počas jednej hodiny. Reakčná zmes bola zriedená nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a EtOAc (100 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 100 ml).

Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a solankou (100 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua, čím sa získalo 0,660 g žltej peny. MS: 949 (API).

Paládiový katalyzátor (0,700 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej v izopropanole (60 ml). Reakčná nádoba bola premytá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Bol pridaný ďalší paládiový katalyzátor (0,500 g, 10 % Pd/C) a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 24 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : NH₄OH (1 : 98 : 1 až 8 : 91 : 1) poskytla 0,052 g (13 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je l-metylimidazol-2-yl. MS: 816 (API).

Príklad 65

Do roztoku furánu (0,34 g, 4,99 mmol) v THF (5 ml) pri -78 °C bolo pridané n-butyllítium (2,5 M, 1,98 ml). Po 0,5 hodine pri -78 °C bol pridaný roztok do banky obsahujúcej MgCl₂ (0,71 g, 7,49 mmol) a THF (5 ml) pri 0 °C. Po 1,5 hodine pri 0 °C bol zavedený roztok východiskovej zlúčeniny použitej v príklade 53 (0,500 g, 0,499 mmol) v DME (2 ml) a miešanie pokračovalo pri 0 “C počas 1 hodiny, potom pri teplote miestnosti počas 1 hodiny. Reakčná zmes bola zriedená nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a EtOAc (100 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 100 ml).

Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a solankou (100 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂: NH₄OH (1 : 98 : 1 až 8 : 91 : 1) poskytla 0,096 g (24 % výťažok) bielej peny. MS: 935 (API).

SK 284171 Β6 („hmotn. spektrá“), pokiaľ ide o ich údaje, aplikované k finálnemu produktu.

Paládiový katalyzátor (0,100 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej v izopropanole (15 ml). Reakčná nádoba bola prepláchnutá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 72 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : : NH₄OH (1 : 98 : 1 až 8 : 91 : 1) poskytla 0,053 g (13 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde R je 2-furyl. MS: 802 (API).

Príklad 66

Do roztoku N-metylpyrolu (0,184 g, 2,31 mmol) v THF (5 ml) pri -78 °C bolo pridané n-butyllítium (2,5 M, 0,93 ml). Roztok bol ohriaty na teplotu miestnosti počas 1 hodiny a potom bol pridaný pomocou kanyly do banky roztok obsahujúci MgCl₂ (0,3 29 g, 8,46 mmol) a EtO₂ (4 ml) pri teplote miestnosti. Po 1 hodine bol zavedený roztok zlúčeniny vzorca (4), kde R⁴ je benzyloxykarbonyl (0,200 g, 0,231 mmol) v THF (2 ml) a miešanie pokračovalo pri teplote miestnosti počas 45 minút. Reakčná zmes bola zriedená nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a EtOAc (50 ml). Po separácii bola vodná vrstva premytá EtOAc (3 x 100 ml).

Zlúčené organické extrakty boli premyté nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a solankou (50 ml), vysušené nad síranom sodným a koncentrované za vákua, čím sa získalo 0,293 g žltej peny. MS: 949 (API).

Paládiový katalyzátor (0,324 g, 10 % Pd/C) bol pridaný do roztoku zlúčeniny opísanej v izopropanole (30 ml). Reakčná nádoba bola prepláchnutá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Bol pridaný ďalší paládiový katalyzátor (0,300 g, 10 % Pd/C) a hydrogenácia pokračovala pri 345 kPa počas 24 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná cez Celit a koncentrovaná za vákua. Silikagélová chromatografia s MeOH : : CH₂CI₂: NH₄OH (6 : 93 : 1 až 8 : 91 : 1) poskytla 0,033 g (18 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde Rje l-metyl-2-pyrolyl. MS: 814 (API).

Príklad 67

Do roztoku nečistenej zlúčeniny pripravenej spôsobom opísaným v príklade 39 (0,480 g) v izopropanole (40 ml) bol pridaný oxid platiny (0,115 g, 0,505 mmol). Reakčná nádoba bola prepláchnutá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Filtrácia alikvotu reakčnej zmesi cez Celit a koncentrácia za vákua poskytla zlúčeninu vzorca (9), kde Rje 3-dimetylamino-l-propenyl. MS: 819 (API).

Príklad 68

Oxid platiny (0,076 g, 0,3 35 mmol) bol pridaný do zvyšného roztoku z príkladu 67 a reakčná nádoba bola prepláchnutá a naplnená vodíkom (345 kPa) a trepaná pri teplote miestnosti počas 96 hodín. Silikagélová chromatografia s MeOH : CH₂C1₂ : NH₄OH (4 : 95 : 1 až 6 : 93 : 1) poskytla 0,069 g (15 % výťažok) zlúčeniny vzorca (9), kde Rje 3-dimetyl-propyl. MS: 821 (API).

Tabuľka 2

Zlúčeniny z príkladov 69-81 majú všeobecnú štruktúru vzorca (10), uvedeného ďalej, s R substituentmi označenými v tejto tabuľke. Zlúčeniny z príkladov 69 - 82 boli pripravené podľa postupu z príkladov 50 a 51 uvedených skôr, s reakčnou periódou špecifikovanou v ďalej uvedenej tabuľke. V tabuľke sú výťažok a hmotnostné spektrá

Príklad	R	reakčný čas (h)	výťažok	hmotn. spektrum
69	l-imidazol	72	60	816
70	n-propylamino	48	55	807
71	dimetylamino	24	42	793
72	metylamino	120	55	779
73	etylamino	120	58	793
74	1 zopropy lantino	48	44	806
75	izobutylanino	48	27	821
76	trimetylénimino	24	31	804
77	alylamino	24	22	804
78	cyklopropylmetylanino	24	34	818
79	N-etylmetylamino	48	16	820
80	t-butylamino	96	30	821
81	dietylamino	168	25	820
81(a)		48	75	818,5

81(b)

832,6

Tabuika 2 (pokračovanie)

Príklad	R	reakčný čas (h)	výťažok (g)	hmotn. spektrum
82	4-metoxybenzylamino	48	21,7	884,6
83	4-nitrobenzylaniino	48	8,0	899 ,7
84	4-chlórbenzylanlno	48	25,5	838,6
85	3,4-difluôrbenzylamino	48	14,5	890,6
86	3-pyridylmetylamino	48	21,0	855,6
87	4-trifluórmetylhenzylanino	48	16,5	922 ,6
88	2,6-difluôrbenzylamino	48	11,0	890 ,6
89	benzylamino	96	62,0	854,7
90	4-fluôrbenzylamino	48	50,9	872,7
91	3-fluôrbenzylamino	48	32,7	872,7
92	2-fluôrbenzylamino	48	39,6	872,7
93	2,4-difluôrbenzylamino	48	24,6	890,1
94	2,5-difluôrbenzylamino	48	28,1	890,1
95	3,5-difluôrbenzylamino	48	35,6	890,1
96	l-(4-fluórfenyl)piperazín	48	44,7	927,6
97	2-trifluórmetylbenzylaiiino	48	32,7	922,5
98	4-trifluôraetylbenzylaiiino	48	28,6	938,1
99	3-trifluórmetylbenzylanino	48	26,2	922,6
ÍOO	2-flôrfenyletylamino	48	33,5	886,2
101	3-flôrfenyletylamino	48	28,7	886,1
102	4-pyridylmetylamino	72	46,0	855,2
103	netyl-3-pyridylmetylamino	72	28,8	869,6
104	4-hydroxy-3-metoxybenzylanino 48	12,0	900,1
305	piperonylamino	48	14,0	898,1
106	3-metoxybenzylamino	48	33,0	884,1
107	2-netoxybenzylamino	48	24,0	884,5
108	2-pyridylmetylamino	48	28,9	855,1

Claims (24)

1. Derivát 4-substituovaného-9-deoxo-9a-aza-9a-homoerythromycínu A všeobecného vzorca (1) alebo jeho farmaceutický akceptovateľná soľ, kde

R¹ je vodík, hydroxy alebo metoxy,

R² je hydroxy,

R³ je -CH2S(O)nR⁸, kde n je celé číslo v rozmedzí od 0 do 2, alebo -CH2NR⁸R¹⁵, pričom predchádzajúce R³ skupiny sú prípadne substituované 1 a 3 R¹⁶ skupinami,

R⁴ je vodík, -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹, -C(O)NR⁹R¹⁰ alebo chrániaca skupina hydroxyskupiny,

R⁵ je -SR⁸, -(CH2)„C(O)R⁸, kde n je 0 alebo 1, (CrC₁₀)alkyl, (C₂-Ci₀)alkenyl, (C₂-C|₀)alkinyl, -(CH₂)_m((C₆-Ci₀)aryl), alebo -(CH₂)_m(5 - 10 členný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4 a kde predchádzajúce R⁵ skupiny sú prípadne substituované 1 a 3 R¹⁶ skupinami, každé R⁶ a R⁷ je nezávisle vodík, hydroxy, (C_rC₆)alkoxy, (C_rC₆)alkyl, (C₂-C₆)alkenyl, (C₂-C₆)alkinyl, -(CH₂)_m((C₆-Cio)aryl) alebo -(CH₂)_m(5 - 10 členný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4, každé R⁸ je nezávisle vodík, (C|-C10)alkyl, (C2-C10)alkenyl, (C2-C10)alkinyl, -(CH2)aCR^llR^l2(CH2)_rNR'³R¹⁴, kde q a r sú každé nezávisle celé číslo v rozmedzí od 0 do 3 s výnimkou, že q a r nie sú obidva 0, -(CH₂)_m((C₆-C₁o)aryl) alebo -(CH₂)_m(5 - 10 členný heteroaryl, kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4 a kde predchádzajúce R⁸ skupiny s výnimkou vodíka sú prípadne substituované 1 až 3 R¹⁶ skupinami, alebo R⁸ v -CH2NR⁸R¹⁵ je vzatý dohromady s R¹⁵, čím sa vytvorí 4-10 členný nasýtený monocyklický alebo polycyklický nasýtený kruh alebo 5-10 členný heteroarylový kruh, kde uvedené nasýtené a heteroarylové kruhy prípadne zahŕňajú 1 až 2 heteroatómy vybrané z O, S a -N(R⁸)- navyše k dusíku, ku ktorému sú R¹⁵ a R⁸ pripojené, pričom nasýtený kruh prípadne zahŕňa 1 až 2 dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík, a tieto nasýtené a heteroarylové kruhy sú prípadne substituované 1 až 3 R¹⁶ skupinami, každé R⁹ a R¹⁰ je nezávisle vodík alebo (CrC₆)alkyl, každé R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ je nezávisle vybrané zo zvyšku vodík, (C_rC₁₀)alkyl, -(CH₂)_nl((C₆-C₁₀)aryl)₎ a -(CH₂)_m(5 -10 členný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4 a kde predchádzajúce R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ skupiny, s výnimkou vodíka, su prípadne substituované 1 - 3 R¹⁶ skupinami, alebo R¹¹ a R¹³ sú vzaté dohromady, čim sa vytvorí -(CH₂)_D-, kde p je celé číslo od 0 do 3, takže sa vytvorí 4 až 7 členný nasýtený kruh, ktorý prípadne zahŕňa 1 až 2 dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík, alebo R¹³ a R¹⁴ sú vzaté dohromady, čím vytvorí 4 až 10 členný monocyklický alebo polycyklický nasýtený kruh alebo 5 až 10 členný heteroarylový kruh, pričom tieto nasýtené a heteroarylové kruhy prípadne zahŕňajú 1 až 2 heteroatómy vybrané z O, S a -N(R⁸)-navyše k dusíku, ku ktoré mu sú pripojené R¹³ a R¹⁴, pričom tento nasýtený kruh prípadne zahŕňa 1 alebo 2 dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík a tento nasýtený a heteroarylový kruh je prípadne substituovaný 1 až 3 R¹⁶ skupinami,

R¹⁵ je H, (C_rC|o)alkyl, (C₂-C₁₀)alkenyl, alebo (C₂-C_lo)- alkinyl, kde predchádzajúce R¹⁵ skupiny sú prípadne substituované 1 až 3 substituentmi nezávisle vybranými z halogénu a -OR⁹, každé R¹⁶ je nezávisle vybrané zo zvyšku halogén, kyano, nitro, trifluórmetyl, azido, -C(O)R¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -OC(0)OR¹⁷, NR^SC(O)R⁷, -C(O)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxy, (CrC6)alkyl, (CrC6)alkoxy, -CH2)m((C6-Ci0)aryl a -(CH2)m(5 - 10 členný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4 a kde arylové a heteroarylové substituenty sú prípadne substituované 1 alebo 2 substituentmi nezávisle vybranými zo zvyšku halogén, kyano, nitro, trifluórmetyl, azido, C(O)R¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, NR⁶C(O)R⁷, -C(O)NR^fR⁷, -NR⁵R⁷, hydroxy, (CrC₆)alkyl a (C_rC₆)alkoxy, každé R¹⁷ je nezávisle vybrané zo zvyšku vodík, (C|-C₁₀)-alkyl, (C₂-Cio)alkenyl, (C₂-Ci₀)alkinyl, -(CH₂)_m((C₆-Ci₀)aryl) a -(CH₂)_m(5 - 10 členný heteroaryl), kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4, s podmienkou, že R⁸ nie je vodík, keď R³ je -CH₂S(O)_nR⁸.

2. Derivát podľa nároku 1, kde R⁴ je vodík, acetyl alebo benzyloxykarbonyl.

3. Derivát podľa nároku 2, kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je CH2NR¹⁵R⁸ alebo CH2SR⁸.

4. Derivát podľa nároku 3, kde R³ je -CH2NRⁱ⁵R⁸, pričom R¹⁵ a R⁸ sú nezávisle vybrané zo zvyšku vodík, C,-C10)alkyl, (C_rC₁₀)alkenyl a (C₂-C₁₀)alkinyl, pričom predchádzajúce R¹⁵ a R⁸ skupiny s výnimkou vodíka sú prípadne substituované 1 alebo 2 substituentmi nezávisle vybranými z hydroxy, halogénu a (Ci-C₆)alkoxy.

5. Derivát podľa nároku 4, kde R¹⁵ a R⁸ sú každé nezávisle vybrané zo zvyšku vodík, metyl, etyl, alyl, n-butyl, izobutyl, 2-metoxyetyl, cyklopentyl, 3-metoxy- propyl, 3-etoxypropyl, n-propyl, izopropyl, 2-hydroxyetyl, cyklopropyl, 2,2,2-trifluóretyl, 2-propinyl, sek-butyl, terc-butyl a n-hexyl.

6. Derivát podľa nároku 2, kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je -CH2NHR⁸, pričom R⁸ je -(CH2)_ra((C₆-C)o)aryl, kde m je celé číslo v rozmedzí od 0 do 4.

7. Derivát podľa nároku 6, kde R je fenyl alebo benzyl.

8. Derivát podľa nároku 2, kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je -CH₂NR¹⁵R⁸, pričom R¹⁵ a R⁸ sú vzaté dohromady na vytvorenie 4 až 10 členného nasýteného kruhu.

9. Derivát podľa nároku 8, kde R¹⁵ a R⁸ sú vzaté dohromady na vytvorenie piperidinového, trimetylénimínového alebo morfolínového kruhu.

10. Derivát podľa nároku 2, kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je -CH2NR¹⁵R⁸, pričom R¹⁵ a R⁸ sú vzaté dohromady na vytvorenie 5 až 10 členného heteroarylového kruhu prípadne substituovaného 1 alebo 2 (CrC₆)alkylovými skupinami.

11. Derivát podľa nároku 10, kde R¹⁵ a R⁸ sú vzaté dohromady na vytvorenie pyrolidínového, triazolylového alebo imidazolylového kruhu, kde uvedené heteroarylové skupiny sú pripadne substituované 1 alebo 2 metylovými skupinami.

12. Derivát podľa nároku 2, kde R¹ je hydroxy, R² je hydroxy, R³ je -CH2SR⁸, pričom R⁸ je vybrané z (C!-C10)-alkylu, (C₂-C₁₀)alkenylu a (C₂-C₁₍))alkinylu, kde uvedené R⁸ skupiny sú prípadne substituované 1 alebo 2 substituentmi nezávisle vybranými z hydroxy, halogénu a (Cj-C₆)alkoxy.

13. Derivát podľa nároku 12, kde R⁸ je metyl, etyl alebo 2-hydroxyetyl.

14. Derivát podľa nároku 2, kde R³ je vybrané zo zvyšku nasledujúceho vzorca kde X³ je O, S alebo -N(R¹⁵)-, R⁹ a R¹⁵ majú význam uvedený v nároku 1 a -OR⁹ skupina môže byť pripojená ku ktorémukoľvek dostupnému uhlíku na fenylovej skupine.

15. Farmaceutická kompozícia užitočná na liečbu bakteriálnych infekcií alebo protozoických infekcií pri cicavcoch, rybách alebo vtákoch, vyznačujúca sa t ý m , že obsahuje terapeuticky účinné množstvo derivátu podľa nároku 1 alebo jeho farmaceutický akceptovateľnej soli a farmaceutický akceptovateľný nosič.

16. Použitie derivátu podľa nároku 1 alebo jeho farmaceutický akceptovateľnej soli na výrobu liečiva na liečbu bakteriálnych infekcií alebo protozoických infekcií pri cicavcoch, rybách alebo vtákoch.

17. Spôsob prípravy derivátu všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1 alebo jeho farmaceutický akceptovateľnej soli, kde všeobecné symboly majú význam uvedený v nároku 1,vyznačujúci sa tým, že sa zlúčenina všeobecného vzorca (5)

18. Spôsob podľa nároku 17, vyznačujúci sa t ý m , že sa zlúčenina vzorca (5) pripraví reakciou zlúčeniny vzorca (4) kde R¹ a R⁴ majú význam uvedený v nároku 1, so zlúčeninou vzorca (CH3)3S(O)„X², kde n je 0 alebo 1 a X² je halogén, -BF4 alebo -PF₆, v prítomnosti zásady.

alebo jej farmaceutický akceptovateľná soľ, kde

R¹ je vodík, hydroxy alebo metoxy, a

R⁴ je vodík, -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹, -C(O)NR^<’R^I() alebo skupina chrániaca hydroxyskupinu, a každý R⁹ a R¹⁰ je nezávisle vodík alebo (C_t-C₆)alkyl.

19. Spôsob výroby podľa nároku 18, vyznačujúci sa t ý m , že X² je jód, alebo BF₄ a uvedená zásada sa vyberie z terc-butoxidu draselného, terc-butoxidu sodného, etoxidu sodného, hydridu sodného, 1,1,3,3-tetrametylguanidínu, l,8-diazabicyklo[4,3.0]undec-7-énu, 1,5-diazabicyklo[4,3,0]non-5-énu, hexametyldisilazidu draselného (KHMDS), etoxidu draselného a metoxidu sodného.

20. Zlúčenina vzorca (5) alebo jej farmaceutický akceptovateľná soľ, kde

R¹ je vodík, hydroxy alebo metoxy, a

R⁴ je vodíkH, -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹, -C(O)NR⁹R^W alebo skupina chrániaca hydroxyskupinu, a každý R⁹ a R¹⁰ je nezávisle vodík alebo (C_rC₆)alkyl.

21. Zlúčenina vzorca (4) kde R¹ a R⁴ majú význam uvedený v nároku 1, nechá reagovať so zlúčeninou vzorca HOR , HSR⁸ alebo HNR¹⁵R⁸, kde n, R¹⁵ a R⁸ majú význam uvedený v nároku 1, pričom keď sa použije zlúčenina vzorca HSR⁸, výsledná R³ skupina vzorca -CH2SR⁸ sa prípadne oxiduje na -CH2S(O)R⁸ alebo -CH₂S(O)₂R⁸.

22. Derivát podľa nároku 1, ktorým je (2R,3S,4R, 5R,8R, 1 OR, 11 R,12S, 13S, 14R)-(9-chlór)- 13-[[2,6-dideoxy-3-C-metyl-3-O-metyl-4-C-[(propylamino)metyl]-a-L-ribohexopyranosyl]oxy]-2-etyl-3,4,10-trihydroxy-3,5,8,10,12, 14-hexa-metyl-l l-[[3,4,6-trideoxy-3-(dimetylamino)-B-D-xylohexopyranosyl]oxy]-l-oxa-6-azacyklopentadekán-15-ón vzorca a jeho farmaceutický akceptovateľná soľ.

23. Farmaceutická kompozícia užitočná na liečbu bakteriálnych infekcií alebo protozoických infekcií pri cicavcoch, rybách alebo vtákoch, vyznačujúca sa t ý m , že obsahuje terapeuticky účinné množstvo derivátu podľa nároku 22 alebo jeho farmaceutický akceptovateľnej soli a farmaceutický akceptovateľný nosič.

24. Použitie derivátu podľa nároku 22 alebo jeho farmaceutický akceptovateľnej soli na výrobu liečiva na liečbu bakteriálnych infekcií alebo protozoických infekcií pri cicavcoch, rybách alebo vtákoch.