CN104725446B

CN104725446B - 一种从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素a和泰拉霉素b的方法

Info

Publication number: CN104725446B
Application number: CN201510135163.5A
Authority: CN
Inventors: 任勇
Original assignee: Ningxia Tairui Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Ningxia Tairui Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2015-03-26
Filing date: 2015-03-26
Publication date: 2017-10-27
Anticipated expiration: 2035-03-26
Also published as: CN104725446A

Abstract

本发明涉及一种从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其工艺步骤为将泰拉霉素粗品酸化溶解、吸附、解吸、淋洗、层吸和减压蒸馏得到泰拉霉素A和泰拉霉素B的固体产物。本发明实现了泰拉霉素A和B的有效分离，提高了其质量，使其含量分别在98%以上，降低生产成本；有利于增强产品的国内外市场竞争力。

Description

一种从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法

技术领域

本发明属于抗生素提取技术领域，特别是涉及一种从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法。

背景技术

泰拉霉素又被称为土拉霉素、托拉霉素，是由美国辉瑞动物保健品公司于上世纪90年代末期开发出来的一种新型的红霉素类半合成兽用抗生素，属于第三代大环内酷类抗生素。泰拉菌素的分子式为C₄₁H₇₉N₃0₁₂，分子量为806.1g/mol，由两个同分异构体组成，其中15元氮杂内酯环(A)含量约为90％，13元氮杂内酯环(B)含量约为10％。

目前，国内有关于泰拉霉素粗品提纯、除杂的文献报道，但没有分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的文献报道。

发明内容

本发明的目的就在于提供一种有效、安全分离泰拉霉素粗品中泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法。

为实现上述目的所采取的技术方案为：

一种从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于其工艺步骤为：

1)将泰拉霉素粗品酸化溶解，调整并控制泰拉霉素溶液pH5～6，泰拉霉素溶液体积：V_{泰拉霉素溶液}:M_泰拉霉素＝8～10:1(L/kg)；

2)以苯乙烯或二乙烯基苯为填充剂，采用二效串联的模式对过程1)所得的泰拉霉素溶液进行吸附处理，之后再用解吸剂进行解吸处理，所述解吸剂为醋酸丁酯和丁醇的混合物或者醋酸乙酯和丁醇的混合物，其中丁醇的含量控制在3～5％；

3)解吸液经淋洗和分离后，以纤维素粉为填充剂，醋酸丁酯或醋酸乙酯为洗脱剂进行层析处理，分层收集层析液并分别进行减压蒸馏得到泰拉霉素A和泰拉霉素B的固体产物。

过程1)中，所述酸化溶解是指用体积浓度为10～20％的盐酸溶液或硫酸溶液溶解泰拉霉素粗品。

过程2)中，所述吸附处理过程中，填充剂的用量为泰拉霉素粗品质量的3～5倍，填充柱高径比为3～4:1，泰拉霉素溶液流速控制在180～220L/h，溶液温度控制在20～30℃，吸附处理至吸附后过滤溶液中泰拉霉素含量＜0.5％为止。

过程2)中，所述填充剂填充到填充柱后，需要对其进行前处理后再用来完成泰拉霉素溶液进行吸附处理。

所述前处理过程为：

1)加入乙醇，加量为填充剂用量的3～4倍，低速搅动1～2小时后更换乙醇，重复2～3次操作；

2)用去离子水以80～100L/h的流速洗涤填充剂至流出液无乙醇味道。

过程2)中，所述解吸剂的总用量为泰拉霉素溶液体积的2～3倍，流速控制在30～50L/h。

过程3)中，所述淋洗是采用去离子水淋洗解吸液，去离子水的总用量为解吸液体积的40～50％。

过程3)中，所述层析处理过程中，纤维素粉用量为泰拉霉素粗品质量的1～2倍，填充柱的高径比控制在4～5∶1，解吸液流速控制在100～150L/h，溶液温度10～20℃。

所述减压蒸馏温度控制在70～75℃，压力控制在-0.01～－0.1MPa。

本发明的技术优势：

1本发明提供了一种有效提纯、分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法。

2本发明避免了常规提纯工艺中的有机溶媒的污染问题，降低了环保压力。

3本发明生产成本低，有利于增强产品的国内外市场的竞争力。

4本发明工艺简单，省时省力。

5本发明可提高了成品质量，泰拉霉素A和泰拉霉素B组份分别在98％以上。

具体实施方法

下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。

下述实施例中的粗品来源：

首先以红霉素A为起始原料，经过肟化反应、贝克曼重排、还原反应得到了重要中间体去甲基阿奇霉素。使用乙酰基作为保护基对9a-NH和2'-0H进行双保护，之后依次通过Swern氧化和Corey-Chaykovsky环氧化反应、脱保护、环氧开环反应得到粗品。

实施例1

配置10％的硫酸溶液(体积浓度)溶解泰拉霉素粗品100kg，得到泰拉霉素溶液，pH控制在5.1％。泰拉霉素溶液体积为800L。

填充柱内加入苯乙烯吸附剂(填充剂)，其加量为300kg，填充柱高径比为3:1。加入乙醇900L，低速搅动1小时后更换乙醇，重复2次操作。用去离子水以80L/h的流速洗涤吸附剂至流出液无乙醇味道。采用二效串联的模式将泰拉霉素溶液过填充柱进行吸附处理，泰拉霉素溶液流速控制在180L/h，溶液温度控制在20℃，收集过滤溶液，泰拉霉素含量为0.4％。再将解吸液过填充柱，解吸过程中，解吸剂流速控制在30L/h，收集解吸液570L。解吸剂采用为醋酸丁酯和丁醇的混合物其中丁醇的含量控制在3％。

解析结束，采用去离子水淋洗泰拉霉素有机溶液(解吸液)，其总用量为230L。淋洗结束，进行液液分离。然后层析：层析是以纤维素粉为填充剂，纤维素粉用量为泰拉霉素粗品质量的1倍，填充柱的高径比控制在4∶1。将泰拉霉素有机溶液加入填充柱中，其流速控制在100L/h，之后再加入洗脱剂醋酸丁酯。当出现分层现象时，开始收集溶液，出现在最底层的物质为泰拉霉素B。层吸过程中，控制溶液温度10℃。分离结束，收集到泰拉霉素A溶液410L，收集到泰拉霉素B溶液330L。分别将收集到的泰拉霉素A和泰拉霉素B有机溶液进行减压蒸馏，温度控制在70～75℃，压力控制在-0.01～－0.1MPa。减压蒸馏结束，分别得到固体泰拉霉素A 84.2kg，含量为98.7％，泰拉霉素B 8.1kg，含量为98.5％。

实施例2

配置12％盐酸溶液溶解泰拉霉素粗品100kg，得到泰拉霉素溶液，pH控制在5.3％。泰拉霉素溶液体积为850L。

填充柱内加入二乙烯基苯吸附剂(填充剂)，其加量为350kg，填充柱高径比为3.2:1。加入乙醇1120L，低速搅动1.2小时后更换乙醇，重复2次操作。用去离子水以85L/h的流速洗涤吸附剂至流出液无乙醇味道。采用二效串联的模式将泰拉霉素溶液过填充柱进行吸附处理，泰拉霉素溶液流速控制在190L/h，溶液温度控制在22℃，收集过滤溶液，泰拉霉素含量为0.3％。再将解吸液过填充柱，解吸过程中，解吸剂流速控制在35L/h，收集解吸液550L。解吸剂采用为醋酸丁酯和丁醇的混合物其中丁醇的含量控制在5％。

解析结束，采用去离子水淋洗泰拉霉素有机溶液(解吸液)，其总用量为237L。淋洗结束，进行液液分离。然后层析：层析是以纤维素粉为填充剂，用量为泰拉霉素粗品用量为泰拉霉粗品数量的1.2倍，填充柱的高径比控制在4.2∶1。将泰拉霉素有机溶液加入填充柱中，其流速控制在120L/h，加入洗脱剂醋酸丁酯。当出现分层现象时，开始收集溶液，出现在最底层的物质为泰拉霉素B。层吸过程中，控制溶液液温度12℃。分离结束，收集到泰拉霉素A溶液385L，收集到泰拉霉素B溶液310L。分别将收集到的泰拉霉素A和泰拉霉素B有机溶液进行减压蒸馏，温度控制在70～75℃，压力控制在-0.01～－0.1MPa。减压蒸馏结束，分别得到固体泰拉霉素A 84.5kg，含量为98.9％，泰拉霉素B 8.3kg，含量为98.6％。

实施例3

配置15％硫酸溶液溶解泰拉霉素粗品100kg，得到泰拉霉素溶液，pH控制在5.5％。泰拉霉素溶液体积为900L。

填充柱内加入苯乙烯吸附剂(填充剂)，其加量为400kg，填充柱高径比为3.5:1。加入乙醇1400L，低速搅动1.5小时后更换乙醇，重复3次操作。用去离子水以90L/h的流速洗涤吸附剂至流出液无乙醇味道。采用二效串联的模式将泰拉霉素溶液过填充柱进行吸附处理，泰拉霉素溶液流速控制在200L/h，溶液温度控制在25℃，收集过滤溶液，泰拉霉素含量为0.2％。再将解吸液过填充柱，解吸过程中，解吸剂流速控制在40L/h，收集解吸液540L。解吸剂采用为醋酸丁酯和丁醇的混合物其中丁醇的含量控制在4％。

解析结束，采用去离子水淋洗泰拉霉素有机溶液(解吸液)，其总用量为243L。淋洗结束，进行液液分离。然后层析：层析是以纤维素粉为填充剂，用量为泰拉霉素粗品用量为泰拉霉粗品数量的1.5倍，填充柱的高径比控制在4.5∶1。将泰拉霉素有机溶液加入填充柱中，其流速控制在130L/h，加入洗脱剂醋酸丁酯。当出现分层现象时，开始收集溶液，出现在最底层的物质为泰拉霉素B。层吸过程中，控制溶液温度15℃。分离结束，收集到泰拉霉素A溶液380L，收集到泰拉霉素B溶液300L。分别将收集到的泰拉霉素A和泰拉霉素B有机溶液进行减压蒸馏，温度控制在70～75℃，压力控制在-0.01～－0.1MPa。减压蒸馏结束，分别得到固体泰拉霉素A 85.1kg，含量为99.0％，泰拉霉素B 8.9kg，含量为98.9％。

实施例4

配置17％盐酸溶液溶解泰拉霉素粗品100kg，得到泰拉霉素溶液，pH控制在5.8％。泰拉霉素溶液体积为950L。

填充柱内加入二乙烯基吸附剂(填充剂)，其加量为450kg，填充柱高径比为3.7:1。加入乙醇1700L，低速搅动1.8小时后更换乙醇，重复2次操作。用去离子水以95L/h的流速洗涤吸附剂至流出液无乙醇味道。采用二效串联的模式将泰拉霉素溶液过填充柱进行吸附处理，泰拉霉素溶液流速控制在210L/h，溶液温度控制在28℃，收集过滤溶液，泰拉霉素含量为0.3％。再将解吸液过填充柱，解吸过程中，解吸剂流速控制在45L/h，收集解吸液554L。所述解吸剂采用醋酸乙酯和丁醇的混合物，其中丁醇的含量控制在5％。

解析结束，采用去离子水淋洗泰拉霉素有机溶液(解吸液)，其总用量为260L。淋洗结束，进行液液分离。然后层析：层析是以纤维素粉为填充剂，用量为泰拉霉素粗品用量为泰拉霉粗品数量的1.7倍，填充柱的高径比控制在4.8∶1。将泰拉霉素有机溶液加入填充柱中，其流速控制在140L/h，加入洗脱剂醋酸丁酯。当出现分层现象时，开始收集溶液，出现在最底层的物质为泰拉霉素B。层吸过程中，控制溶液液温度18℃。分离结束，收集到泰拉霉素A溶液390L，收集到泰拉霉素B溶液310L。分别将收集到的泰拉霉素A和泰拉霉素B有机溶液进行减压蒸馏，温度控制在70～75℃，压力控制在-0.01～－0.1MPa。减压蒸馏结束，分别得到固体泰拉霉素A 85.0kg，含量为98.8％，泰拉霉素B 8.7kg，含量为98.7％。

实施例5

配置20％硫酸溶液溶解泰拉霉素粗品100kg，得到泰拉霉素溶液，pH控制在6％。泰拉霉素溶液体积为1000L。

填充柱内加入苯乙烯基吸附剂(填充剂)，其加量为500kg，填充柱高径比为4:1。加入乙醇2000L，低速搅动2小时后更换乙醇，重复3次操作。用去离子水以100L/h的流速洗涤吸附剂至流出液无乙醇味道。采用二效串联的模式将泰拉霉素溶液过填充柱进行吸附处理，泰拉霉素溶液流速控制在220L/h，溶液温度控制在28℃，收集过滤溶液，泰拉霉素含量为0.4％。再将解吸液过填充柱，解吸过程中，解吸剂流速控制在50L/h，收集解吸液560L。所述解吸剂采用为醋酸乙酯和丁醇的混合物，其中丁醇的含量控制在4.5％。

解析结束，采用去离子水淋洗泰拉霉素有机溶液(解吸液)，其总用量为280L。淋洗结束，进行液液分离。然后层析：层析是以纤维素粉为填充剂，用量为泰拉霉素粗品用量为泰拉霉粗品数量的2倍，填充柱的高径比控制在5∶1。将泰拉霉素有机溶液加入填充柱中，其流速控制在150L/h，加入洗脱剂醋酸丁酯。当出现分层现象时，开始收集溶液，出现在最底层的物质为泰拉霉素B。层吸过程中，控制溶液液温度20℃。分离结束，收集到泰拉霉素A溶液420L，收集到泰拉霉素B溶液320L。分别将收集到的泰拉霉素A和泰拉霉素B有机溶液进行减压蒸馏，温度控制在70～75℃，压力控制在-0.01～－0.1MPa。减压蒸馏结束，分别得到固体泰拉霉素A 84.6kg，含量为98.5％，泰拉霉素B 8.4kg，含量为98.6％。

Claims

1.一种从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于其工艺步骤为：

1）将泰拉霉素粗品酸化溶解，调整并控制泰拉霉素溶液pH5～6，泰拉霉素溶液体积：V_{泰拉霉素溶液}:M_泰拉霉素=8～10:1(L/kg)；

2）以苯乙烯或二乙烯基苯为填充剂，采用二效串联的模式对过程1）所得的泰拉霉素溶液进行吸附处理，之后再用解吸剂进行解吸处理，所述解吸剂为醋酸丁酯和丁醇的混合物或者醋酸乙酯和丁醇的混合物，其中丁醇的含量控制在3～5%；

3）解吸液经淋洗和分离后，以纤维素粉为填充剂，醋酸丁酯或醋酸乙酯为洗脱剂进行层析处理，分层收集层析液并分别进行减压蒸馏得到泰拉霉素A和泰拉霉素B的固体产物；

上述泰拉霉素粗品是以红霉素A为起始原料，经过肟化反应、贝克曼重排、还原反应得到了重要中间体去甲基阿奇霉素，使用乙酰基作为保护基对9a-NH和2'-0H进行双保护，之后依次通过Swern氧化和Corey-Chaykovsky环氧化反应、脱保护、环氧开环反应得到。

2.按照权利要求1所述的从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于过程1）中，所述酸化溶解是指用体积浓度为10～20%的盐酸溶液或硫酸溶液溶解泰拉霉素粗品。

3.按照权利要求1所述的从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于过程2）中，所述吸附处理过程中，填充剂的用量为泰拉霉素粗品质量的3～5倍，填充柱高径比为3～4:1，泰拉霉素溶液流速控制在180～220L/h，溶液温度控制在20～30℃，吸附处理至吸附后过滤溶液中泰拉霉素含量＜0.5%为止。

4.按照权利要求1所述的从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于过程2）中，所述填充剂填充到填充柱后，需要对其进行前处理后再用来完成泰拉霉素溶液进行吸附处理。

5.按照权利要求4所述的从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于所述前处理过程为：

1）加入乙醇，加量为填充剂用量的3～4倍，低速搅动1～2小时后更换乙醇，重复2～3次操作；

2）用去离子水以80～100L/h的流速洗涤填充剂至流出液无乙醇味道。

6.按照权利要求1所述的从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于过程2）中，所述解吸剂的总用量为泰拉霉素溶液体积的2～3倍，流速控制在30～50L/h。

7.按照权利要求1所述的从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于过程3）中，所述淋洗是采用去离子水淋洗解吸液，去离子水的总用量为解吸液体积的40～50%。

8.按照权利要求1所述的从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于过程3）中，所述层析处理过程中，纤维素粉用量为泰拉霉素粗品质量的1～2倍，填充柱的高径比控制在4～5∶1，解吸液流速控制在100～150L/h，溶液温度10～20℃。

9.按照权利要求1所述的从泰拉霉素粗品中分离泰拉霉素A和泰拉霉素B的方法，其特征在于所述减压蒸馏温度控制在70～75℃，压力控制在-0.01～－0.1MPa。