SK15792003A3 - Použitie Mycoplasma hyopneumoniae na výrobu liečiva - Google Patents

Použitie Mycoplasma hyopneumoniae na výrobu liečiva Download PDF

Info

Publication number
SK15792003A3
SK15792003A3 SK1579-2003A SK15792003A SK15792003A3 SK 15792003 A3 SK15792003 A3 SK 15792003A3 SK 15792003 A SK15792003 A SK 15792003A SK 15792003 A3 SK15792003 A3 SK 15792003A3
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
hyopneumoniae
vaccine
mycoplasma hyopneumoniae
proteins
piglets
Prior art date
Application number
SK1579-2003A
Other languages
English (en)
Other versions
SK288010B6 (sk
Inventor
Robin Lee Keich
Lisa Grace Sabbadini
Original Assignee
Pfizer Products Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23168589&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=SK15792003(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pfizer Products Inc. filed Critical Pfizer Products Inc.
Publication of SK15792003A3 publication Critical patent/SK15792003A3/sk
Publication of SK288010B6 publication Critical patent/SK288010B6/sk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/0241—Mollicutes, e.g. Mycoplasma, Erysipelothrix
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/52—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells
    • A61K2039/521—Bacterial cells; Fungal cells; Protozoal cells inactivated (killed)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/87—Mycoplasma

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka použitia vakcíny Mycoplasma hyopneumoniae na výrobu liečiva na liečenie alebo prevenciu choroby alebo poruchy zvieraťa, ktorá je vyvolaná infekciou Mycoplasma hyopneumoniae.
Doterajší stav techniky
M. hyopneumoniae je bakteriálny patogén, ktorý vyvoláva enzootickú pneumóniu pri ošípaných. Enzootická pneumónia je chronická choroba, ktorá vedie k špatnej konverzii krmiva, zakrpatenému rastu a predispozícii k druhotným pľúcnym infekciám. M. hyopneumoniae sa ľahko prenáša sekrétmi respiračného traktu a z prasnic na prasiatka, a v chovoch ošípaných má vysokú prevalenciu. V USA je infikovaných približne 99 % chovov ošípaných, čo v odvetví produkcie bravčového vyvoláva ročné náklady asi 300 miliónov dolárov.
Väčšina známych vakcín proti M. hyopneumoniae je založená na prípravkoch obsahujúcich inaktivované celé bunky M. hyopneumoniae a adjuvans. Okrem toho je možné synteticky alebo klonovaním a rekombinantnou expresiou génov M. hyopneumoniae pripraviť vakcíny založené na imunogénnych polypeptidoch alebo proteínoch. Ako vakcínu je možné tiež použiť gény M. hyopneumoniaer ktoré sú schopné exprimovať také polypeptidy alebo proteíny in vivo.
Ako príklady celobunkových inaktivovaných vakcín M.
hyopneumoniae je možné uviesť RESPISURE a STELLAMUNE, ktoré sú dostupné na trhu od firmy Pfizer Inc., USA.
Okrem toho bolo opísaných niekoľko rekombinantné získaných imunogénnych polypeptidov a proteínov M. hyopneumoniae, ktoré môžu byť užitočné ako podjednotkové vakcíny. V medzinárodnej patentovej prihláške zverejnenej ako WO 96/28472 je opísaných šesť proteínových antigénov proti M. hyopneumoniae s molekulovými hmotnosťami 46 až 48, 52 až 54, 60 až 64, 72 až 75, 90 až 94 a 110 až 114 kilodaltonov a ďalej čiastočná proteínová sekvencia antigénov s molekulovou hmotnosťou 52 až 54, 60 až 64 a 72 až 75 kilodaltonov a celá nukleotidová a aminokyselinová sekvencia antigénu s molekulovou hmotnosťou 46 až 48 kilodaltonov.
V publikácii Futo et al. (1995; J. Bacteriol 177: 1915 až 1917) bolo tiež opísané klonovanie génu pre proteín M. hyopneumoniae P46, tzn. p46. Rovnaká skupina autorov preukázala, že tento in vitro exprimovaný génový produkt je užitočný pri stanovovaní protilátkových odpovedí na infekcie M. hyopneumoniae bez skríženej reaktivity s inými druhmi Mycoplasma (Futo et al., 1995, J. Clin. Microbiol. 33: 680 až 683) . Sekvencie a diagnostické použitie génu p46 opísané v publikácii Futo et al. je ďalej opísané v európskej patentovej prihláške č. 0 475 185 Al.
V publikácii Wise a Kim (1987, J. Bacteriol., 169: 5546 až 5555) sa uvádza, že v M. hyopneumoniae sa vyskytujú štyri integrálne membránové proteíny označené ako p70, p65 (hore uvedený P46), p50 a P44 a že tri posledne uvedené proteíny sú modifikované kovalentnými lipidovými väzbami a indukujú silnú humorálnu imunitnú odozvu. Ochranné účinky tejto imunitnej odpovedi neboli skúmané. Gén pre proteín P65 bol klonovaný a jeho sekvencie a použitie vo vakcínach a diagnostike sú opísané v US patente č. 5 788 962.
V medzinárodnej patentovej prihláške zverejnenej ako WO 91/15593 je opísaných päť proteínov M. hyopneumoniae so zdanlivou molekulovou hmotnosťou 105, 90, 85, 70 a 43 kilodaltonov. V tejto publikácii je uvedená úplná sekvencia génu pre 85kDa proteín (proteín C), ako tiež čiastočné nukleotidové sekvencie pre zostávajúce štyri proteíny.
V US patente č. 5 252 328 (Faulds) sú opísané aminoterminálne sekvencie imunoreaktívnych proteínov M. hyopneumoniae, ktorých molekulová hmotnosť je 34, 41, 44, 48, 64, 68, 74,5,
79, 88,5, 96 a 121 kDa. V tomto patente sú tiež opísané iné proteíny identifikované na základe elektroforetickej pohyblivosti so zdanlivou molekulovou hmotnosťou 22,5, 34 a 52 kDa; v ich prípade nie je uvedená proteínová sekvencia. Hoci sa v US patente č. 5 252 328 uvažuje o použití týchto proteínov vo vakcínových formuláciách, nie sú v ňom uvedené žiadne vakcinačné pokusy.
V medzinárodnej patentovej prihláške zverejnenej ako WO 95/09870 sú opísané biochemické spôsoby purifikácie adhezinov M. hyopneumoniae, mykoplazmových integrálnych membránových proteínov, ktoré sú zodpovedné za adhéziu k riasinkam epitelu horných ciest dýchacích hostitela. Vo WO 95/09870 sú tiež navrhnuté stanovenia a použitia týchto proteínov napríklad vo vakcínach a diagnostických prípravkoch.
Vo výskumnej správe King et al. (1997; Vaccine 15: 25 až
35) je opísaný Mhpl, 124kDa adhezin, ktorý je kmeňovým variantom P97.
95kDa variant P97 bol identifikovaný skupinou Wilton et al. (1993, Microbiology 144: 1931 až 1943). Okrem toho sa ukázalo, že gén p97 je súčasťou operónu, ktorý tiež kóduje druhý proteín označený ako P102 s predpokladanou molekulovou hmotnosťou asi 102 kDa (Ksu et al., 1998, Gene 214: 13 až 23) . V medzinárodnej patentovej prihláške zverejnenej ako WO 99/26654 Minion a Hsu navrhujú použitie P102 vo vakcínach, ale neuvádzajú žiadne vakcinačné skúšky.
žiadnej z opísaných vakcín M. hyopneumoniae sa neuvádza, že by bola účinná pri jednorázovom ošetrení prasiatok starých asi 3 až 10 dní. Taká vakcína by umožňovala vylúčiť potrebu viacnásobnej aplikácie, a preto by výrazne znižovala náklady a prácnosť súvisiacu s masívnou vakcináciou chovov ošípaných na celom svete. Existuje preto potreba vyvinúť účinnú vakcínu M. hyopneumoniae, ktorú by ošípaným bolo možné podávať jednorázovou vakcináciou vo veku asi 3 až asi 10 dní za účelom ochrany pred chorobami alebo poruchami vyvolanými M. hyopneumoniae a ich prevencie.
Podstata wnálezu
Predmetom vynálezu je použitie Mycoplasma hyopneumoniae na výrobu vakcíny na liečenie alebo prevenciu choroby alebo poruchy zvieraťa, ktorá je vyvolaná infekciou Mycoplasma hyopneumoniae, ktorá je vhodná na jednorázové podanie zvieraťu starému 3 až 10 dní.
S touto vakcínou sa eliminuje nutnosť podávať ďalšie dávky, aby sa vytvorila a/alebo udržala imunita proti M. hyopneumoniae. Spôsobom jednorázovej vakcinácie sa dosiahne ochrana s éronegat ívnych a s éropoz i t ívnych prasiat proti infekcii virulentnou M. hyopneumoniae. Spôsob je účinný pri liečení alebo prevencii symptómov vyvolaných infekciou M. hyopneumoniae, ako je napríklad prevencia a zmenšovanie pľúcnych lézií pri ošípaných.
S vakcínou vyrobenou podľa vynálezu sa ošípaným podá účinné množstvo jednorazovej dávky vakcíny M. hyopneumoniae, pričom vakcína M. hyopneumoniae zahŕňa prípravok z celých buniek M. hyopneumoniae alebo ich častí, ako bakterin, alebo živý prípravok, podjednotkovú vakcínu, ako vakcínu, ktorá obsahuje jeden alebo viac polypeptidov alebo proteínov pochádzajúcich z M. hyopneumoniae alebo imunogénnych fragmentov takých proteínov alebo polypeptidov alebo jeden alebo viac génov pre také proteíny, polypeptidy alebo imunogénne fragmenty, pričom tieto gény alebo nukleové kyseliny sú schopné
Polypeptidy a proteíny pochádzajúce z imunogénne fragmenty takých polypeptidov a proteínov alebo gény alebo nukleové kyseliny M. hyopneumoniae, ktoré je možné použiť vo vakcíne, je možné syntetizovať alebo získať metódami génového inžinierstva, ktoré sú známe.
modifikovaný podjednotkovú expresie m vivo. M. hyopneumoniae a
Vakcína M. hyopneumoniae môže obsahovať; ďalšie zložky, ako adjuvanty.Je možné použitá rôzné adjuvanty, ako sú adjuvanty opísané v tomto texte a známe v tomto obore.
Za účelom sprehľadnenia je opis ďalej členený na podkapitoly, v ktorých sú opísané alebo ilustrované niektoré znaky, realizácie alebo použitia tohto vynálezu, na ktoré sa však vynález neobmedzuje.
V niektorých realizáciách vakcína obsahuje inaktivovaný prípravok z celých buniek M. hyopneumoniae alebo ich častí (bakterin), alebo modifikovanú živú vakcínu a farmaceutický vhodný nosič alebo inaktivovaný prípravok z celých buniek M. hyopneumoniae alebo ich častí (bakterin) a adjuvans.
iných,realizáciách vakcína obsahuje imunogénny protein alebo polypeptid alebo ich fragment a farmaceutický vhodný nosič, alebo imunogénny protein alebo polypeptid alebo ich fragment a adjuvans.
Definície a skratky
Pod pojmom liečenie alebo prevencia sa v tomto texte v súvislosti s infekciou Mycoplasma hyopneumoniae rozumie inhibícia replikácie baktérie Mycoplasma hyopneumoniae, inhibícia prenosu Mycoplasma hyopneumoniae, alebo zabránenie Mycoplasma hyopneumoniae v kolonizácii hostiteľa, a zmiernenie symptómov choroby alebo poruchy vyvolanej infekciou Mycoplasma hyopneumoniae. Liečenie je považované za terapeutické, pokiaľ dochádza k zníženiu bakteriálnej nálože, poklesu bakteriálnych infekcií a/alebo vzostupu hmotnosti a/alebo rastu. Spôsob podía vynálezu je napríklad účinný pri prevencii alebo redukcii plúcnych lézií.
Pod pojmom vakcína M. hyopneumoniae sa v tomto texte rozumie vakcína, ktorá je užitočná pri prevencii alebo liečení poruchy alebo choroby vyvolanej infekciou M. hyopneumoniae. Do rozsahu tohto pojmu spadá akákolvek vakcína, ktorá je účinná pri liečení alebo prevencii M. hyopneumoniae pri ošípaných. Ako vakcínu M. hyopneumoniae, ktorú je možné použiť, je možné napríklad uviesť prípravky z celých buniek M. hyopneumoniae alebo ich častí, inaktivované alebo modifikované živé vakcíny, podjednotkové vakcíny obsahujúce jeden alebo viac polypeptidov alebo proteínov pochádzajúcich z M. hyopneumoniae alebo imunogénnych fragmentov takých proteínov alebo polypeptidov alebo jeden alebo viac génov alebo nukleových kyselín pre jeden alebo viac polypeptidov alebo proteínov pochádzajúcich z M. hyopneumoniae alebo ich imumogénnych fragmentov, pričom tieto gény alebo nukleové kyseliny môžu byť pri ošípaných exprimované in vivo. Polypeptidy a proteíny pochádzajúce z M. hyopneumoniae, imunogénne fragmenty takých polypeptidov a proteínov, alebo gény alebo nukleové kyseliny M. hyopneumoniae je možné syntetizovať alebo získať metódami génového inžinierstva, ktoré sú známe. Pri spôsobe podía tohto vynálezu sa ako vakcína M. hyopneumoniae prednostne používa bakterin.
Pod pojmom zviera sa rozumie živočích, ako cicavec, nie však človek.
Pod pojmom ošípané sa rozumejú prasiatka (mláďatá ošípanej), brav, prasnice, mladé prasnice, kastrované diviaky, diviaky a príslušníci čeladi Suidae.
Spôsob podlá vynálezu sa prednostne aplikuje na živočícha, ktorým je cicavec (avšak nie človek), najvýhodnejšie ošípané.
Pod pojmom bakterin sa rozumie prípravok z inaktivovaných buniek M. hyopneumoniae alebo ich častí vhodný na použitie ako vakcína.
Pod pojmom účinné množstvo sa rozumie také množstvo vakcíny M. hyopneumoniae, ktoré je dostatočné na vyvolanie imunitnej odozvy pri subjekte, ktorému je podané. Ako neobmedzujúce príklady imunitnej odozvy je možné uviesť vyvolanie prirodzenej bunkovej a/alebo humorálnej imunity.
Vakcína obsahujúca inaktivované bunky (celé bunky alebo ich časti) a modifikovaná živá vakcína
Spôsoby výroby obvyklých inaktivovaných alebo živých vakcín na použitie pri spôsobe podľa tohto vynálezu sú známe.
Bakteriny, ktoré je možné použiť pri spôsobe jednorázovej vakcinácie podľa vynálezu, je možné získať z verejne dostupných zdrojov. Napríklad bakteriny M. hyopneumoniae je možné pripravovať z izolátov M. hyopneumoniae. Odborníkom v tomto odbore je známy rad izolátov M. hyopneumoniae, ktoré sú napríklad dostupné zo zbierky American Type Culture Collection, 1801 University Boulevard, Manassas, VA 201102209, USA. Ako príklady takých izolátov je možné uviesť ATCC č. 25095, 25617, 25934, 27714 a 27715.
Izoláty M. hyopneumoniae je tiež možné známymi spôsobmi získať priamo z prirodzene alebo experimentálne infikovaných pľúc ošípaných.
Izoláty M. hyopneumoniae je možné inaktivovať rôznymi známymi spôsobmi, napríklad tak, že sa na bakteriálny izolát pôsobí binárnym etylénimínom (ΒΕΙ), ako je opísané v US patente č. 5 565 205, alebo napríklad vodným roztokom formaldehydu, teplom, BPL, žiarením alebo glutaraldenydom.
Bakteriny M. hyopneumoníae vhodné na použitie pri spôsobe podľa tohto vynálezu je tiež možné získať z rôznych zdrojov na trhu. Ako neobmedzujúce príklady takých zdrojov je možné uviesť RESPIFEND (Fort Dodge, American Home Products), HYORESP (Merial Ltd.), M + PAC (Shering Plough), PROSYSTEM M (Intervet), INGLEVAC M (Boehringer), RESPISURE (Pfizer Inc.) a STELLAMUNE MYCOPLASMA (Pfizer Inc.).
Ako zdroju bakterinu M. hyopneumoníae pri použití pri spôsobe podľa tohto vynálezu sa venuje prednosť prípravkom RESPISURE a STELLAMUNE MYCOPLASMA.
Osobitne prednostným zdrojom bakterinu M. hyopneumoníae pri použití pri spôsobe podľa vynálezu je RESPISURE-1 (Pfizer Inc.), ktorý obsahuje kmeň P-5722-3 (NL1042), získaný od Purdue University, USA.
V prednostnom uskutočnení sa kmeň P-5722-3 inaktivuje pôsobením BEI a zmieša s adjuvansom dostupným na trhu, prednostne látkou AMPHIGEN (Hydronics, USA). Prednostná dávka je asi 2,0 ml. Ako obvyklú konzervačnú prísadu je možné uviesť mertiolát/EDTA. Je možné pridať nosič, prednostne PBS. Príprava modifikovaných živých vakcín, ako príprava atenuácií virulentných kmeňov pasážovaním v kultúre, je v tomto odbore známa.
Podjednotkové vakcíny
Spôsob podľa vynálezu je tiež možné vykonávať pri použití podjednotkových vakcín, ktoré obsahujú purifikované imunogénne proteíny a polypeptidy M. hyopneumoníae a imunogénne fragmenty takých proteínov a polypeptidov. Také proteíny a polypeptidy je možno pripravovať pri použití známych spôsobov. Spôsoby, ktoré sú odborníkom v tomto odbore dobre známe, sa ďalej môžu použiť pri stanovovaní čistoty alebo homogenity proteínov, ako je elektroforéza vzorky na polyakrylamidovom géle a následná vizualizácia jediného pásu polypeptidu na farbiacom géle. Vysoké rozlíšení je možné stanoviť pri použití HPLC alebo iných podobných spôsobov, ktoré sú odborníkom v tomto odbore známe.
V konkrétnom rozpracovaní vakcína, ktoré sa používa podľa tohto vynálezu, obsahuje aspoň jeden proteín M. hyopneumoniae, ktorého neobmedzujúcim príkladom je P46, P65, P97, P102, P70,
P50 a P44.
V iných realizáciách vakcína, ktoré sa používa pri spôsobe podľa tohto vynálezu, obsahuje bakterin M. hyopneumoniae (inaktivované bunky alebo ich časti alebo modifikované živé bunky) alebo proteín alebo polypeptid M. hyopneumoniae alebo fragment takého proteínu alebo polypeptidu a aspoň jeden ďalší imunogén (z inaktivovaných buniek alebo ich častí alebo modifikovaných živých buniek) alebo imunogénny alebo antigénny proteín alebo polypeptid alebo imunogénny fragment takého proteínu alebo polypeptidu, prednostne vírusový, bakteriálny alebo parazitárny polypeptid. Ako neobmedzujúce príklady takých ďalších patogénov a proteínov a polypeptidov a ich fragmentov je možné uviesť vírus chrípky ošípaných (SIV), vírus reprodukčnej a respiračnej choroby ošípaných (PRRS alebo záhadné choroby ošípaných), diareu po odstavení (PWD) a proliferačnú enteritídu ošípaných (PPE). Také kompozície sú užitočné ako kombinované vakcíny.
V ďalšom konkrétnom rozpracovaní imunogénne fragmenty takých proteínov alebo polypeptidov majú sekvenciu, ktorá obsahuje aspoň 10, aspoň 20, aspoň 30, aspoň 40, aspoň 50 alebo aspoň 100 po sebe idúcich aminokyselín imunogénnych proteínov a polypeptidov, ktoré sa používajú pri spôsobe podľa vynálezu, ktorých neobmedzujúcimi príkladmi sú P46, P65, P97, P102, P70, P50 a P44.
Proteíny M. hyopneumoníae na použitie vo vakcínach sú v podstate čisté alebo homogénne. Pri spôsobe podľa vynálezu sa používajú proteíny alebo polypeptidy, ktoré sú typicky purifikáciou zbavené hostiteľských buniek, ktoré exprimujú rekombinantné nukleotidové sekvencie kódujúce tieto proteíny. Takú purifikáciu proteínov je možné vykonávať radom dobre známych spôsobov (pozri napríklad Methods In Enzymology; 1990, Academic Press, Inc., San Diego, Protein Purification: Principles and practice, 1982, Springer-Verlag, New York, USA) .
Purifikované polypeptidy a proteíny M. hyopneumoníae a ich imunogénne fragmenty je možné tiež pripravovať známymi syntetickými spôsobmi.
Vakcínové prípravky
Ako vhodné prípravky vakcín podľa vynálezu je možné uviesť prípravky na injekčné podávanie, ako kvapalné roztoky alebo suspenzie; tiež je možné pripravovať pevné formy vhodné na prípravu kvapalného roztoku alebo kvapalné suspenzie pred aplikáciou. Prípravok tiež môže byť emulgovaný. Aktívne imunogénne zložky sa často miešajú s adjuvansmi, ktoré sú farmaceutický vhodné a kompatibilné s aktívnou zložkou.
Polypeptidy je možné formulovať na vakcíny v neutrálnych alebo soľných formách. Ako farmaceutický vhodné soli je možné uviesť adičné soli s kyselinami (vznikajúce na voľných aminoskupinách peptidov) a soli s anorganickými kyselinami, ako kyselinou chlorovodíkovou alebo fosforečnou, alebo organickými kyselinami, ako kyselinou octovou, šťavelovou, vínnou, maleínovou apod. Soli vznikajúce na voľných karboxyskupinách môžu byť odvodené od anorganických báz, ako sú napríklad hydroxidy draselný, amónny, vápenatý a železitý, a takých organických báz, ako je izopropylamín, trimetylamín, 2-etylaminoetanol, histidín, prokaín apod.
Vakcínové prípravky, ktoré sa používajú pri spôsobe podlá tohto vynálezu, obsahujú účinné imunizačné množstvo imunogénu M. hyopneumoniae a farmaceutický vhodný nosič. Vakcínové prípravky obsahujú účinné imunizačné množstvo jedného alebo viacerých antigénov a farmaceutický vhodný nosič. Farmaceutický vhodné nosiče sú v tomto odbore dobre známe a ako ich neobmedzujúce príklady je možné uviesť soľný roztok, tlmený soľný roztok, dextrózu, vodu, glycerol, sterilný izotonický vodný tlmivý roztok a ich zmesi. Ako príklad takého vhodného nosiča je možné menovať fyziologicky vyvážené kultivačné médium, ktoré obsahuje jedno alebo viac stabilizačných činidiel, ako sú stabilizované, hydrolyzované, proteíny, laktóza apod. Nosič je prednostne sterilný. Formulácia by mala byť prispôsobená spôsobu podávania.
Použitie purifikovaných antigénov ako vakcínových prípravkov sa uskutočňuje štandardnými spôsobmi. Purifikovaný proteín (alebo proteíny) by napríklad mal byť upravený na vhodnú koncentráciu, formulovaný s akýmkoľvek adjuvasom vhodným pre vakcíny a balený na použitie. Ako neobmedzujúce príklady vhodných adjuvansov je možné uviesť minerálne gély, napríklad hydroxid hlinitý; povrchovo aktívne látky, ako lyzolecitín; glykosidy, napríklad saponín a deriváty saponínu, ako Quii A alebo GPI-0100; katiónové povrchovo aktívne látky, napríklad DDA (kvartérne hydrokarbyl-amóniumhalonigenidy, polyoly typu Pluronic; polyanióny a viacatómové ióny; polyakrylové kyseliny, neiónové blokové polyméry, napríklad Pluronic F-125 (B.A.S.F., USA); Avridine a Rantidíne; peptidy;
rekombinantné mutantné labilné toxíny, napríklad leukotoxín (rmLT) alebo cholerový toxín (CT); chemicky viazané alebo close proximity molekulárne prenášače; minerálne oleje, napríklad Montanide ISA-50 (Seppic, Paríž, Francia), karbopol, Amphígen (Hydronics, USA, Omaha, NE, USA), Alhydrogel (Superfos Biosector, Frederikssund, Dánsko) , olejové emulzie, napríklad emulzie minerálnych olejov, ako BayolF/Arlacel A, a vody, alebo emulzie rastlinných olejov, vody a emulgátoru, ako lecitínu; kamenec, MDP, N-acetylmuramyl-L-treonyl-D-izoglutamín (thr-MDP), N-acetyl-nor-muramyl-L-alanyl-D-izoglutamín, N-acetyl-muramyl-L-alanyl-D-izoglutaminyl-L-alanín-2-(1', 2'-dipalmitoyl-sn-glycero-3-hydroxyfosforyloxy)etylamín; cholesterol cytokíny a kombinácie adjuvansov. Viacatómové ióny tiež môžu fungovať ako dispergačné, zahusťovacie a protispekavé činidlá, ktoré umožňujú vakcínu resuspendovať po dlhšom čase usadzovania ako monodisperznú suspenziu. Kombinácie adjuvansov môžu byť vo vodnej, zapuzdrenej (riadené alebo odložené uvoľňovanie) alebo mikrozapuzdrenej forme.
Imunogén tiež môže byť začlenený do lipozómov alebo konjugovaný s polysacharidmi a/alebo inými polymérmi na použitie v očkovacej formulácii. V prípade, že je rekombinantným antigénom haptén, tzn. molekula, ktorej antigenickosť spočíva v tom, že môže selektívne reagovať s rozpoznávanými protilátkami, ale nie je imunogénny, pretože nevyvoláva imunitnú odozvu, haptén môže byť kovalentné viazaný k nosiči alebo imunogénnej molekule; napríklad velký proteín, ako sérový albumín, hapténu, ktorý je k nemu kopulovaný, dodá imunogenickosť. Hapténové nosiče môžu byť formulované na použitie ako vakcína.
Génové vakcíny a NA vakcíny
Spôsob podía vynálezu je možné tiež realizovať pri použití génov alebo nukleových kyselín M. hyopneumoniae, ktoré kódujú imunogénne proteíny, polypeptidy a imunogénne fragmenty takých proteínov a polypeptidov. Také gény a nukleové kyseliny môžu byť exprimované in vivo a je možné ich pripravovať známymi spôsobmi.
V konkrétnych rozpracovaniach vakcína, ktorá sa používa pri tomto vynáleze, obsahuje aspoň jeden gén alebo nukleovú kyselinu kódujúcu proteín M. hyopneumoniae, ktorého neobmedzujúcimi príkladmi sú P46, P65, P997, P102, P70, P50 a P44.
V ďalšom konkrétnom rozpracovaní gény alebo nukleové kyseliny, ktoré sa používajú pri spôsobe podlá vynálezu, kódujú imunogénne fragmenty proteínov alebo polypeptidov M. hyopneumoniae a majú sekvenciu, ktorá obsahuje aspoň 10, aspoň 20, aspoň 30, aspoň 40, aspoň 50 alebo aspoň 100 po sebe idúcich aminokyselín imunogénnych proteínov a polypeptidov, ktoré sa používajú pri spôsobe podía vynálezu, ktorých neobmedzujúcimi príkladmi sú P46, P65, P997, P102, P70, P50 a P44.
V iných realizáciách spôsobu podlá tohto vynálezu sa použité gény alebo nukleové kyseliny podávajú známymi spôsobmi, ako je napríklad technika nastrieľania gene gun.
V ešte ďalších uskutočneniach spôsobu podľa tohto vynálezu je génovou alebo NA vakcínou DNA vakcína. Nukleová kyselina alebo gény môžu byť prítomné spolu s lipozómami alebo inými činidlami uľahčujúcimi transfekciu, ktoré sú známe.
v tomto odbore
Spôsoby prípravy a dodávky DNA vakcín sú známe (pozri napríklad Krishnan, B. R., Current Status of DNA vaccines in veterinary medicíne, Advanced Drug Delivery Reviews, Elsevier Science (2000)).
Expresné systémy ktoré po transformácii nukleotidovýmí kódujúcimi produkty M. hyopneumoniae,
Pri expresii antigénových proteínových sekvencií podľa vynálezu je možné použiť rôzne systémy hostitel-expresný vektor. Také hostiteľské expresné systémy predstavujú vektory, ktorých prostredníctvom je možné produkovať a následne čistiť kódujúce sekvencie, ktoré sú predmetom záujmu, ale tiež bunky, alebo transfekcii vhodnými sekvenciami, vykazujú génové ktoré sa používajú pri spôsobe podľa vynálezu, in situ. Ako neobmedzujúce príklady takých mikroorganizmov je možné uviesť baktérie (napríklad E. coli, B. subtilis) transformované rekombinantnou bakteriofágovou DNA, plazmidovými DNA alebo kozmidovými DNA expresnými vektormi, ktoré obsahujú kódujúce sekvencie mhp3; kvasinky (napríklad Saccharomyces, Pichia) transformované rekombinantnými kvasinkovými expresnými vektormi, ktoré obsahujú sekvencie kódujúce génové produkty M. hyopneumoniae;
systémy založené na rekombinantnými vírusovými hmyzích bunkách infikovaných expresnými vektormi (napríklad baculovírusovými) obsahujúcimi kódujúce sekvencie M. hyopneumoniae; systémy založené na rastlinných bunkách infikovaných rekombinantnými vírusovými expresnými vektormi (ako je napríklad vírus mozaiky karfiolu, CaMV; vírus tabakovej mozaiky, TMV) alebo transformované rekombinantnými plazmidovými expresnými vektormi (ako je napríklad Ti plazmid) obsahujúcimi kódujúce sekvencie M. hyopneumoniae; alebo systémy založené na cicavčích bunkách (napríklad bunkách COS, CHO, BHK, 293, 3T3), ktoré obsahujú rekombinantné expresné konštrukty s promótormi odvodenými od genómu cicavčích buniek (ako je napríklad metalotioneínový promotor) alebo cicavčích vírusov (ako je napríklad adenovírusový neskorý promotor; vakcíniový vírusový 7,5K promotor). V prednostnom rozpracovaní je expresným systémom bakteriálny systém.
Polypeptidy a proteíny M. hyopneumoniae a ich imunogénne fragmenty je tiež možné exprimovať a dodávať pri použití živých rekombinantných a bakteriálnych vektorov, ako je adenovírus alebo Salmonella. Príslušné vektory sú v tomto odbore tiež známe a sú dostupné, alebo je možné ich pripraviť známymi spôsobmi.
Dávkovanie, spôsoby podávania a liečenia
Podía tohto vynálezu jednorázová dávka účinného množstva vakcíny M. hyopneumoniae podaná ošípaným starým asi 3 až 10 dní poskytuje efektívnu imunitu voči neskoršej expozícii M. hyopneumoniae. Vakcína M. hyopneumoniae sa prednostne podáva vo veku asi 6 až asi 8 dní, najvýhodnejšie vo veku asi 7 dní.
Množstvo bakterinovej vakcíny M. hyopneumoniae, ktoré je účinné pri jednorázovom podaní obsahuje asi lxlO6 až asi 5xlO10 jednotiek meniacich farbu (CCD) na dávku. V prednostnom rozpracovaní bakterinová vakcína, ktorá poskytuje efektívnu imunitu pri jednorázovom podaní, obsahuje asi lxlO8 až asi 5xlO10 CCU na dávku, výhodnejšie asi 5xl08 až asi 5xlO10 CCU na dávku.
Podľa tohto vynálezu, v prípade, že sa podáva bakterinový produkt RESPISURE-1, je množstvo RESPISURE-1 na jednorázové podanie dávky asi 0,5 až asi 3,0 ml, prednostne asi 1,5 ml až asi 2,5 ml, výhodnejšie asi 2 ml.
Množstvo vakcíny M. hyopneumoniae, ktorá je podjednotkovou vakcínou obsahujúcou jeden alebo viac proteínov alebo polypeptidov alebo imunogénnych fragmentov takých proteínov alebo polypeptidov, účinné pri spôsobe podľa vynálezu je asi 0,01 pg až asi 200 pg.
Množstvo vakcíny M. hyopneumoniae, ktorá je vakcínou obsahujúcou jeden alebo viac génov alebo nukleových kyselín (prednostne DNA) kódujúcich imunogénne proteíny alebo polypeptidy alebo imunogénne fragmenty takých proteínov alebo polypeptidov M. hyopneumoniae, ktoré je účinné pri spôsobe podľa vynálezu je asi 0,1 pg až asi 200 mg.
Podľa tohto vynálezu je podávanie možné uskutočňovať známymi spôsobmi, ako je podávanie perorálne, intranazálne, mukozálne, topické, transdermálne a parenterálne (napríklad intravenózne, intraperitoneálne, intradermálne, subkutánne alebo intramuskulárne). Podávanie je možné tiež vykonávať pri použití bezihlových aplikačných zariadení. Možné je tiež kombinované podávanie, pri ktorom sa napríklad použije najskôr parenterálny spôsob a potom mukozálny spôsob. Prednosť má podávanie intramuskulárne.
Účinné dávky (imunizačné množstvo) vakcín podľa vynálezu je možné tiež extrapolovať z kriviek závislosti odpovedi od dávok odvodených z modelových skúšobných systémov.
Spôsobmi podľa tohto vynálezu sa dosahuje ochranná imunita pri ošípaných, ktoré sú séropozitívne i pri ošípaných, ktoré sú séronegatívne na M. hyopneumoniae. Prívlastok séropozitívny sa vzťahuje k ošípaným, v ktorých sére sú prítomné protilátky proti M. hyopneumoniae. Prívlastok séronegatívny sa vzťahuje k ošípaným, v ktorých sére nie sú dekovateľné hladiny protilátok proti M. hyopneumoniae.
Vynález je bližšie objasnený v nasledujúcich príkladoch uskutočnenia. Tieto príklady majú výhradne ilustratívny charakter a rozsah vynálezu v žiadnom ohlade neobmedzujú.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad
Príprava bakterinu M. hyopneumoniae
Kmeň M. hyopneumoniae NL1042 sa inaktivuje binárnym etylénimínom (BEI).
Na konci kultivačného obdobia sa pH kultúry zvýši na hodnotu 7,8±2,0, ktorá sa v tomto rozmedzí udržuje počas aspoň hodiny. Potom sa pridá vodný roztok hydrobromidu (BEA) sterilizovaný filtráciou (konečná koncentrácia asi 4,0mM). Pri zvýšenom pH sa BEA chemicky zmení na BEI. Kultúra sa aspoň 24 hodín za konštantného miešania inkubuje pri teplote 37 ± 2°C.
jednej 2-brómetylamínu
Po inaktivácii, ale pred neutralizáciou tiosíranom sodným sa odoberú reprezentatívne vzorky, ktoré sa skúšajú na úplnosť inaktivácie. Čerstvé médium obsahujúce 0,0026% fenolovú červeň sa zaočkuje 5 až 20% inokulom a aspoň jeden týždeň inkubuje pri teplote 37 ± 2°C. Potom sa hodnotí zmena farby, ktorá je indikátorom neúspešnej inaktivácie. Voľné vzorky sa skúšajú na sterilitu v tioglykolátovej pôde pri teplote 37 ± 2°C a tryptikázovej sójovej pôde pri teplote miestnosti.
Inaktivovaná kultúra sa premiestni do sterilných zásobníkov a až do stanovenia uchováva pri 2 až 8°C.
Sila účinku (potency) sa stanoví in vitro sérologickým stanovením za účelom kvantifikácie antigénu v konečnom obale. Sila účinku vakcín použitých pri hodnoteniach účinnosti predurčuje minimálnu silu účinku, ktorá musí byť prítomná vo vakcíne k dátumu exspirácie.
Vzorky volného produktu alebo produktu v konečnom obale z každej série alebo prvej podsérie sa skúšajú na M. hyopneumoniae pri použití nasledujúceho postupu.
Bakterin sa skladuje v 100mi fiaštičkách pri -50°C. Obsah fiaštičiek sa nechá roztopiť a 15ml subalikvóty sa až do použitia skladujú pri teplote 5 ± 2°C.
Za účelom hodnotenia sily účinku zostavenej série sa vzorka série porovná s referenčnou vzorkou a stanoví sa RP jednotky pre sériu. Séria alebo podséria by prednostne mala obsahovať 6,33 RP na počiatku a aspoň 5,06 RP v priebehu starnutia.
RP označuje relatívnu silu účinku. RP je možné stanoviť relatívnou kvantifikáciou antigénu v porovnaní s referenčnou vakcínou. V tomto prípade má referenčná vakcína RP definovanú ako 1. Jednorázový produkt podlá vynálezu má RP prednostne
6,33, čo je 6,33násobok hodnoty referenčného produktu.
Ako konzervačné činidlo sa pridá mertiolát (konečná
hustotná koncentrácia nie j e vyššia ako 0,01 % (hmotnosť/
obj em)).
Ako konzervačné činidlo sa pridá roztok etyléndiamíntetraoctovej kyseliny (EDTA, dvojsodné alebo štvorsodné soli) v konečnej hustotnej koncentrácii asi 0,07 % (hmotnosť/objem) .
Príklad 2
Zvieratá
Na vakcináciu sa vyberú prasiatka staré asi jeden týždeň. Sérolotický status z hľadiska M. hyopneumoniae sa stanoví pomocou ELISA. Prasiatka, ktoré majú hodnotu ELISA 0,50 sú považované za negatívne na M. hyopneumoniae. Prasiatka s hodnotou ELISA vyššou ako 0,50 sú považované na sérologicky pozitívne na M. hyopneumoniae.
Vakcíny
Prasiatka sa vakcínujú bakterinom M. hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer Inc.). Pred použitím sa stanoví sila účinku vakcíny relatívnou kvantifikáciou antigénu v porovnaní s referenčným bakterinom M. hyopneumoniae. Referenčná vakcína (RP = 1,0) obsahuje asi 8000 jednotiek antigénu (asi 1 až 2 x 108 CCU viditeľných buniek zberaných pred inaktiváciou) na dávku, podía imunostanovenia v pevnej fáze, ktorým sa mieri množstvo antigénu proti M. hyopneumoniae vo vakcíne.
Rovnaký kvapalný adjuvans (AMPHIGEN), ktorý sa používa pri formulácii prípravku RESPISURE-1, slúži ako placebo (tzn. bez bakteriálnych buniek).
Expozičné inokulum
Expozičné vehikulum sa pripraví ako 10ml alikvóty pľúcneho homogenátu, zmrazí a označí ako derivát kmeňa M. hyopneumoniae (Ll 36) . Inokulum sa nechá roztopiť a zriedi pôdou Friis Mycoplasma tak, aby sa dosiahlo zriedenie 1:25 a až do podania sa uchováva na ľade. Každému prasiatku sa v dňoch konkrétne uvedených v nasledujúcich príkladoch podá 5ml intranazálna dávka (2,5 ml na nozdru) suspenzie 1:25. Každý deň expozície sa uskutoční kultivácia alikvótu pľúcneho inokula, aby sa potvrdila neprítomnosť bakteriálnej kontaminácie. Druhý alikvót sa spätne titruje každé tri dni; výsledky ukazujú, že inokulum obsahuje asi 106 až 107 jednotiek meniacich farbu (CCU) M. hyopneumoniae/ταΐ.
Skúšobný postup
Prasiatka sa označia ušnými známkami ešte pri prasnici [deň (-1)]. Prasiatka sa na základe generalizovanej blokovej randomizačnej schémy pridelia do ohrád a ošetrovaných skupín. Bloky sa tvoria na základe vrhu a odšťavovačej ohrady.
V deň 0 sa prasiatka vakcínujú 2ml intramuskulárnou dávkou bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer Inc.) alebo 2ml intramuskulárnou dávkou placeba. Každému prasiatku sa v dňoch uvedených v nasledujúcich príkladoch podá 5ml intranazálna dávka suspenzie 1:25 expozičného inokula. Všetky prasiatka sa sledujú a denne sa kontrolujú príznaky klinického ochorenia.
Po uplynutí príslušného času od prvého dňa expozície sa prasiatka ohľaduplne usmrtia a podrobia pitve. Pľúca sa vyberú a hodnotia. Skúmanie post-mortem zahŕňa patologických zmien, ku ktorým došlo v mykoplazmovou respiračnou chorobou. Skúma sa každý pľúcny lalok a lézie sa zaznamenajú, aby bolo možné odhadnúť percentuálne postihnutie každého laloku. Zaznamená sa stupeň makroskopických lézií.
odhad rozsahu súvislosti s
Analýza údajov
Účinnosť sa hodnotí na základe percenta pľúcnych lézií, ktoré je typické pre infekciu M. hyopneumoniae. Stanoví sa, že prasiatka v ošetrovaných skupinách (vakcínované) majú percentuálny podiel celých pľúc s léziami, ktorý je významne (P^0,05) menší ako pri prasiatkach zo skupiny ošetrenej placebom.
Percentuálny podiel celých pľúc s léziami
Percentný podiel makroskopického postihnutia sa váži pri použití nasledujúcich podielov jednotlivých pľúcnych lalokov na celkovej hmotnosti pľúc: ľavý kraniálny - 10 %, ľavý stredný - 10 %, ľavý kaudálny - 25 %, pravý kraniálny - 10 %, pravý stredný - 10 %, pravý kaudálny - 25 % a prídavný 10 %. Vážené hodnoty pľúcnych lalokov sa sčítajú za celé pľúca, čím
sa získa percentuálny podiel celých pľúc s léziami (Pointon et
al., 1992).
Príklad 3
Ochrana proti infekcii virulentnou M. hyopneumoniae sa
hodnotí pri prasiatkach sérologicky pozitívnych na M.
hyopneumoniae pri použití jednorázovej dávky bakterinu M.
hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer Inc.) podanej prasiatkom
starým 3 až 8 dní.
V čase vakcinácie alebo v čase jemu blízkom sa vykoná päť opakovaných hodnotení RESPISURE-1. Relatívna sila účinku (RP) sa stanoví relatívnou kvantifikáciou antigénu v porovnaní s referenčnou vakcínou. Referenčná vakcína s RP = 1,0 obsahuje asi 8000 jednotiek antigénu M. hyopneumoniae. Hodnoty RP z týchto stanovení boli 5,42, 3,96, 4,71, 5,49 a 4,36.
V deň O sa prasiatka v ošetrovanej skupine T02 (pozri tabuľku 1 ďalej) vakcínujú 2ml intramuskulárnou dávkou bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1 (Pfizer Inc.). Prasiatka v skupine T01 sa vakcínujú intramuskulárne 2 ml placeba. Každému prasiatku sa v dňoch 178, 179 a 180 podá 5ml intranazálna dávka suspenzie 1:25 expozičného inokula. Každé tri dni sa v čase inokulácie kultivuje alikvót expozičného materiálu, aby sa potvrdila neprítomnosť bakteriálnej kontaminácie. Druhý alikvót sa spätne titruje každé tri dni, aby sa potvrdilo, že inokulum obsahuje asi 107 CCU M. hyopneumoniae/ml. Všetky prasiatka sa sledujú a denne kontrolujú z hľadiska príznakov klinického ochorenia.
Tridsať dní po prvom dni expozície sa všetky prasiatka podrobia pitve. Plúca sa post-mortem zahŕňa odhad došlo
Skúma aby bolo ku ktorým ohľaduplne usmrtia a hodnotia. Skúmanie patologických zmien, mykoplazmovou respiračnou chorobou lalok a lézie sa zaznamenajú, vyberú a rozsahu v súvislosti s sa každý plúcny možné odhadnúť percentuálne postihnutie každého laloku. Zaznamená sa stupeň makroskopických lézií.
Tabulka 1
Ošetrovaná skupina T01 T02
Vakcinácia Placebo vakcína
Počet 26 26
Vakcínované Deň 0 26 26
Expozícia Deň 1781 26
Expozícia Deň 1791 26 22?
Expozícia Deň 1801 26 2Σ5
1 Virulentné inokulum M. hyo 2 Prasiatka 71 a 73 boli zo štúdie vyradené pred expozíciou, pretože obidve stratili všetky ušné známky, a nebolo možné ich identifikovať.
3 Prasiatko 36 bolo v deň 178 nájdené mŕtve kvôli anestetickým komplikáciám. Prasiatko 31 bolo v deň 179 nájdené mŕtve kvôli anestetickým komplikáciám.
Výsledky hodnotení pľúcnych lézií sú súhrnne uvedené v tabulke 2. Výsledky ukazujú, že vakcínované prasiatka (T02) majú významne (P = 0,0385) nižší stredný percentný podiel, stanovené metódou najmenších štvorcov, pneumonických pľúcnych lézií ako prasiatka, ktorým bolo podané placebo (T01) (2,0 proti 4,5 %).
Tabulka 2
Súhrnný prehlad percenta celkových pľúcnych lézií
Ošetrovaná skupina Ošetrenie Počet prasiatok Stredná hodnota LS Rozmedzie
T01 placebo 26 4,5a 0 až 36,75
T02 vakcína 22 2,0b 0 až 13,75
LS stanovená pomocou najmenších štvorcov a,b Hodnoty označené rôznymi indexmi sa štatisticky líšia (P = 0,0385) .
Výsledky tejto štúdie ukazujú, že jednorázová vakcinácia prasiatok starých asi 1 týždeň bakterinom M. hyopneumoniae RESPISURE - 1 vyvoláva ochranu pri následnej expozícii virulentnou M. hyopneumoniae.
Príklad 4
Ochrana hodnotí pri hyopneumoniae hyopneumoniae starým 3 až 8 proti infekcii prasiatkach pri použití RESPISURE-1 dní.
virulentnou sérologicky jednorázovej Pfizer Inc.)
M. hyopneumoniae sa negatívnych na M. dávky bakterinu M. podanej prasiatkom
V čase vakcinácie alebo v čase jemu blízkom sa uskutoční päť opakovaných hodnotení RESPISURE-1. Relatívna sila účinku (RP) sa stanoví relatívnou kvantifikáciou antigénu v porovnaní s referenčnou vakcínou. Referenčná vakcína s RP = 1,0 obsahuje asi 8000 jednotiek antigénu M. hyopneumoniae. Hodnoty RP z týchto stanovení boli 5,42, 3,96, 4,71, 5,49 a 4,36.
V deň O sa prasiatka v ošetrovanej skupine T02 vakcínujú 2ml intramuskulárnou dávkou bakterinu M. hyopneumoniae RESPISURE-1. Prasiatka v skupine T01 sa vakcínujú intramuskulárne 2 ml placeba. Každému prasiatku sa v dňoch 173, 174 a 175 podá 5ml intranazálna dávka suspenzie 1:25 expozičného inokula. Každé tri dni sa v čase inokulácie kultivuje alikvót expozičného materiálu, aby sa potvrdila neprítomnosť bakteriálnej kontaminácie. Druhý alikvót sa spätne titruje každé tri dni, aby sa potvrdilo, že inokulum obsahuje asi 108 CCU M. hyopneumoniae/ml. Všetky prasiatka sa sledujú a denne kontrolujú z hľadiska príznakov klinického ochorenia.
a hodnotia, patologických odhad rozsahu súvislosti s
Dvadsať deväť dní po prvom dni expozície sa všetky prasiatka ohľaduplne usmrtia a podrobia pitve. Pľúca sa vyberú Skúmanie post-mortem zahŕňa zmien, ku ktorým došlo v mykoplazmovou respiračnou chorobou. Skúma sa každý pľúcny lalok a lézie sa zaznamenajú, aby bolo možné odhadnúť percentuálne postihnutie každého laloku. Zaznamená sa stupeň makroskopických lézií.
Schému skúšky súhrnne vyjadruje tabuľka 3.
Tabulka 3
Ošetrovaná skupina T01 T02
Vakcinácia placebo vakcína
Počet 26 26
Vakcínované Deň 0 26 26
Expozícia Deň 1731 252 17
Expozícia Deň 1741 ΊίΡ W
Expozícia Deň 1751 24 20
1 Virulentný M. hyo 2 Prasiatko 123 bolo v deň 19 ohľaduplne usmrtené vzhľadom na chronickú septickú polyartritídu.
3Prasiatko 222 bolo v deň 40 nájdené mŕtve. Pri pitve bolo zistené veľké množstvo perikardiálnej kvapaliny a hemoragia na epikardiu. Prasiatko 102 bolo ohľaduplne usmrtené v deň 95 kvôli prolapsu rekta. Prasiatko 204 bolo v deň 145 nájdené mŕtve. Pitva nebola vykonaná s ohľadom na pokročilý rozklad zdochliny.
4Prasitko 244 bolo v deň 174, po prvom dni po expozícii, nájdené mŕtve kvôli anestetickým komplikáciám.
SNEEA počítané na 3 prasiatka
Výsledky hodnotenia pľúcnych lézií sú súhrnne uvedené v tabulke 4. Celková analýza ukazuje, že vakcínované prasiatka (T02) majú významne (P = 0,0001) nižší stredný percentný podiel, stanovené metódou najmenších štvorcov, pneumonických pľúcnych lézií ako prasiatka, ktorým bolo podané placebo (T01) (0,3 proti 5,9 %).
Tabulka 4
Súhrnný prehľad percenta celkových pľúcnych lézií
Ošetrovaná skupina Ošetrenie Počet prasiatok Stredný hodnota LS Rozmedzie
T01 Placebo 24 5, 9a 0 až 36
T02 Vakcína 20 0,3b 0 až 6
LS stanovená pomocou najmenších štvorcov a,b Hodnoty označené rôznymi indexmi sa štatisticky líšia (P = 0,0001).
Výsledky tejto štúdie ukazujú, že jednorázová vakcinácia prasiatok bakterinom M. hyopneumoniae RESIPURE ONE vyvoláva ochranu proti následnej experimentálnej expozícii virulentnou M. hyopneumoniae.
Pri klad 5
Ochrana proti infekcii virulentnou M. hyopneumoniae sa
hodnotí pri prasiatkach sérologicky negatívnych na M.
hyopneumoniae pri použití jednorázovej dávky bakterinu M.
hyopneumoniae RESPISURE-1 podanej prasiatkam starým 3 až 8 dní.
V čase vakcinácie alebo v čase jemu blízkom sa uskutoční päť opakovaných hodnotení RESPISURE-1. Relatívna sila účinku (RP) sa stanoví relatívnou kvantifikáciou antigénu v porovnaní s referenčnou vakcínou. Referenčná vakcína s RP = 1,0 obsahuje asi 8000 jednotiek antigénu M. hyopneumoniae. Hodnoty RP z týchto stanovení boli 5,42, 3,96, 4,71, 5,49 a 4,36.
V deň O sa prasiatka v ošetrovanej skupine T02 vakcínujú 2ml intramuskulárnou dávkou bakterinu M. hyopneumoníae. Prasiatka v skupine T01 sa vakcínujú intramuskulárne 2 ml placeba. Každému prasiatku sa v dňoch 7 6, 77 a 78 podá 5ml (2,5 ml na nozdru) intranazálna dávka suspenzie 1:25 expozičného inokula. Každé tri dni sa v čase inokulácie kultivuje alikvót expozičného materiálu, aby sa potvrdila neprítomnosť bakteriálnej kontaminácie. Druhý alikvót sa spätne titruje každé tri dni, aby sa potvrdilo, že inokulum obsahuje asi 106 CCU M. hyopneumoníae/ml. Všetky prasiatka sa sledujú a denne kontrolujú z hľadiska príznakov klinického ochorenia.
Dvadsať deväť dní po prvom dni expozície sa všetky prasiatka ohľaduplne usmrtia a podrobia pitve. Pľúca sa vyberú a hodnotia. Skúmanie post-mortem zahŕňa odhad rozsahu patologických zmien, ku ktorým došlo v súvislosti s respiračnou chorobou vyvolanou M. hyopneumoníae. Skúma sa každý pľúcny lalok a lézie sa zaznamenajú, aby bolo možné odhadnúť percentuálne postihnutie každého laloku. Zaznamená sa stupeň konsolidácie.
Schému skúšky súhrnne vyjadruje tabuľka 5.
Tabuľka 5
Ošetrovaná skupina T01 T02
Vakcinácia Placebo vakcína
Počet 26 26
Vakcínované Deň 0 26 26
Expozícia Deň 1761 ~23^ 213
Expozícia Deň 1771 23 21
Expozícia Deň 1781 23 21
1 Virulentné inokulum M. hyo 2 Prasiatka 237 a 239 boli v deň -1 určené ako pozitívne na pneumóniu vyvolanú M. hyopneumoniae. Tieto prasiatka boli zo štúdie vyradené v deň 14 a ohľaduplne usmrtené. Prasiatko 220 bolo v deň 3 nájdené mŕtve, zaľahnuté prasnicou.
3Prasiatka 238, 240 a 277 boli v deň -1 stanovené ako pozitívne na pneumóniu vyvolanú M. hyopneumoniae. Tieto prasiatka boli v deň 14 vyradené zo štúdie a ohľaduplne usmrtené. Prasiatko 280 bolo v deň 7 ohľaduplne usmrtené, pretože bolo anorektické a neduživé. Prasiatko 177 bolo v deň 40 ohľaduplne usmrtené kvôli chronickému syndrómu chradnutia.
Výsledky hodnotenia pľúcnych lézií sú súhrnne uvedené v tabulke 6. Celková analýza ukazuje, že vakcínované prasiatka (T02) majú významne (P = 0,0001) nižší stredný percentný podiel, stanovené metódou najmenších štvorcov, pneumonických pľúcnych lézií ako prasiatka, ktorým bolo podané placebo (T01) (0,5 proti 9,9 %).
Tabuľka 6
Súhrnný prehľad percenta celkových pľúcnych lézií
Ošetrovaná skupina Ošetrenie Počet prasiatok Stredná hodnota LS Rozmedzie
T01 Placebo 23 9, 9a 0 až 40,5
T02 Vakcína 21 0,5b 0 až 5
LS stanovená pomocou najmenších štvorcov a'^ Hodnoty označené rôznymi indexmi sa štatisticky líšia (P = 0,0001) .

Claims (7)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Použitie Mycoplasma hyopneumoniae na výrobu vakcíny na liečenie alebo prevenciu choroby alebo poruchy zvieraťa, ktorá je vyvolaná infekciou Mycoplasma hyopneumoniae, ktorá je vhodná na jednorázové podanie zvieraťu starému 3 až 10 dní.
  2. 2. Použitie podľa nároku 1, kde vakcína Mycoplasma hyopneumoniae je inaktivovaným prípravkom, ktorý obsahuje celé bunky Mycoplasma hy opneumoniae alebo ich časti.
  3. 3. Použitie podľa nároku 2, kde jednorázová dávka vakcínového prípravku Mycoplasma hyopneumoniae obsahuje asi lxlO6 až asi 5xlO7 * * 10 jednotiek meniacich farbu (CCU) na dávku.
  4. 4. Použitie podľa nároku 2, kde množstvo podaného vakcínového prípravku je asi 0,5 až asi 3,0 ml.
  5. 5. Použitie podľa nároku 2, kde prípravkom ktorý obsahuje bunky Mycoplasma hyopneumoniae je Respisure-1.
  6. 6. Použitie podľa nároku 2, kde vakcína Mycoplasma hyopneumoniae ďalej obsahuje vírusový alebo bakteriálny antigén odlišný od Mycoplasma hyopneumoniae.
  7. 7. Použitie podľa nároku 6, kde vírusové alebo bakteriálne antigény sa volia z vírusu chrípky ošípaných (SIV), vírusu reprodukčnej a respiračnej choroby ošípaných (PRRS alebo záhadné choroby ošípaných), diarey po odstavení (PWD) a proliferačnej enteritídy ošípaných (PPE).
SK1579-2003A 2001-07-02 2002-06-07 Use of Mycoplasma hyopneumoniae for the manufacture of a medicament SK288010B6 (sk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US30263601P 2001-07-02 2001-07-02
PCT/IB2002/002121 WO2003003941A2 (en) 2001-07-02 2002-06-07 One dose vaccination with mycoplasma hyopneumoniae

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK15792003A3 true SK15792003A3 (sk) 2005-09-08
SK288010B6 SK288010B6 (sk) 2012-10-02

Family

ID=23168589

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK1579-2003A SK288010B6 (sk) 2001-07-02 2002-06-07 Use of Mycoplasma hyopneumoniae for the manufacture of a medicament

Country Status (42)

Country Link
US (3) US6846477B2 (sk)
EP (3) EP1474067B2 (sk)
JP (1) JP2005515162A (sk)
KR (1) KR20040030785A (sk)
CN (3) CN1551781B (sk)
AP (1) AP2003002937A0 (sk)
AR (1) AR034678A1 (sk)
AT (1) ATE412426T2 (sk)
AU (1) AU2002309109B2 (sk)
BG (1) BG66481B1 (sk)
BR (1) BR0210804A (sk)
CA (1) CA2451626C (sk)
CY (1) CY1108749T1 (sk)
CZ (1) CZ305781B6 (sk)
DE (1) DE60229666D1 (sk)
DK (3) DK1474067T4 (sk)
DO (1) DOP2002000431A (sk)
EA (1) EA009901B1 (sk)
ES (3) ES2312580T5 (sk)
GT (1) GT200200138A (sk)
HK (4) HK1068250A1 (sk)
HR (1) HRP20031079A2 (sk)
HU (1) HU230246B1 (sk)
IL (1) IL159349A0 (sk)
IS (1) IS7076A (sk)
MA (1) MA27047A1 (sk)
MX (1) MXPA03011599A (sk)
NO (1) NO342654B1 (sk)
NZ (1) NZ530106A (sk)
OA (1) OA12638A (sk)
PA (1) PA8549701A1 (sk)
PE (1) PE20030285A1 (sk)
PL (1) PL209773B1 (sk)
PT (3) PT2027873E (sk)
SK (1) SK288010B6 (sk)
TN (1) TNSN03155A1 (sk)
TW (1) TWI329514B (sk)
UA (1) UA78707C2 (sk)
UY (1) UY27366A1 (sk)
WO (1) WO2003003941A2 (sk)
YU (1) YU102203A (sk)
ZA (1) ZA200309698B (sk)

Families Citing this family (52)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY129765A (en) * 2000-12-19 2007-04-30 Wyeth Corp Improved mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine
WO2006056841A1 (en) * 2004-11-24 2006-06-01 Pharmacia & Upjohn Company Llc Multiple-strain mycoplasma hyopneumoniae vaccines
US7700285B1 (en) 2005-12-29 2010-04-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. PCV2 immunogenic compositions and methods of producing such compositions
US7833707B2 (en) 2004-12-30 2010-11-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of overexpression and recovery of porcine circovirus type 2 ORF2
UA95602C2 (ru) 2004-12-30 2011-08-25 Берингер Ингельхейм Ветмедика, Инк. Иммуногенная композиция цвс2 и способы приготовления такой композиции
US8834891B2 (en) 2005-03-14 2014-09-16 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Immunogenic compositions comprising Lawsonia intracellularis
EP2371382B1 (en) 2005-12-29 2016-03-02 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Use of a PCV2 immunogenic composition for lessening clinical symptoms in pigs
EP2275132B1 (en) 2005-12-29 2021-03-03 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Multivalent PCV2 immunogenic compositions and methods of producing them
CN101448521A (zh) * 2006-03-03 2009-06-03 梅瑞尔有限公司 猪肺炎支原体疫苗
WO2008064299A2 (en) * 2006-11-22 2008-05-29 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Methods of reducing porcine circovirus-associated disease outbreaks
EP2859900A1 (en) * 2006-12-11 2015-04-15 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Effective method of treatment of porcine circovirus and lawsonia intracellularis infections
KR101619730B1 (ko) 2006-12-15 2016-05-12 베링거잉겔하임베트메디카인코퍼레이티드 Ｐｃｖ2 항원을 이용한 돼지의 치료
EP1941903A1 (en) 2007-01-03 2008-07-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prophylaxis and treatment of PRDC
EP1958644A1 (en) 2007-02-13 2008-08-20 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Prevention and treatment of sub-clinical pcvd
US7829274B2 (en) 2007-09-04 2010-11-09 Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. Reduction of concomitant infections in pigs by the use of PCV2 antigen
UA98812C2 (ru) * 2007-11-06 2012-06-25 Вайет Ллк Авирулентная активированная живая вакцина mycoplasma hyopneumoniae
KR20100103535A (ko) * 2007-12-31 2010-09-27 베링거잉겔하임베트메디카인코퍼레이티드 외래 아미노산 삽입물을 갖는 ｐｃｖ２ ｏｒｆ２ 바이러스 유사 입자
CN101236206B (zh) * 2008-01-17 2014-10-15 中国兽医药品监察所 一种猪肺炎支原体重组抗原elisa检测试剂盒
KR20100113582A (ko) * 2008-01-23 2010-10-21 베링거잉겔하임베트메디카인코퍼레이티드 Ｐｃｖ2 마이코플라즈마 히오뉴모니에 면역원성 조성물 및 당해 조성물의 생산 방법
US8444989B1 (en) * 2008-04-18 2013-05-21 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh One dose vaccination against mycoplasma infections of pigs
ES2569907T3 (es) * 2008-06-27 2016-05-13 Zoetis Services Llc Composiciones adyuvantes novedosas
CA2764424C (en) 2009-06-04 2019-12-31 National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology Vaccine for mycoplasma infection
AR078253A1 (es) 2009-09-02 2011-10-26 Boehringer Ingelheim Vetmed Metodos para reducir la actividad antivirica en composiciones pcv-2 y composiciones pcv-2 con mejor inmunogenicidad
EP2550362B1 (en) 2010-03-25 2017-01-04 Oregon Health&Science University Cmv glycoproteins and recombinant vectors
WO2011141443A1 (en) 2010-05-11 2011-11-17 Intervet International B.V. Vaccine against mycoplasma hyopneumoniae, suitable for administration in the presence of maternally derived antibodies
CN103140238B (zh) * 2010-07-26 2016-03-16 Qu生物制药公司 免疫原性抗炎组合物
US8546149B2 (en) 2010-08-27 2013-10-01 Intervet Inc. Potency test for vaccine formulations
DK2609428T3 (en) * 2010-08-27 2016-05-17 Intervet Int Bv STRENGTH TEST FOR VACCINE FORMULATIONS
CA2832109C (en) 2011-06-10 2021-07-06 Oregon Health & Science University Cmv glycoproteins and recombinant vectors
BR112014022067B1 (pt) * 2012-03-07 2022-05-31 Ceva Sante Animale Composição compreendendo antígeno e lipopolissacarídeo
UA114504C2 (uk) 2012-04-04 2017-06-26 Зоетіс Сервісіз Ллс Комбінована вакцина pcv, mycoplasma hyopneumoniae та prrs
US9120859B2 (en) 2012-04-04 2015-09-01 Zoetis Services Llc Mycoplasma hyopneumoniae vaccine
UA114503C2 (uk) 2012-04-04 2017-06-26 Зоетіс Сервісіз Ллс Комбінована вакцина pcv та mycoplasma hyopneumoniae
MX2015007729A (es) 2012-12-28 2015-09-07 Boehringer Ingelheim Vetmed Composicion inmunogenica que comprende antigenos de mycoplasma.
EP2938747B1 (en) 2012-12-28 2019-05-01 Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH Method of making a mycoplasma vaccine
WO2014121433A1 (zh) * 2013-02-05 2014-08-14 财团法人农业科技研究院 抗霉浆菌的亚单位疫苗
CN104338125A (zh) * 2013-07-29 2015-02-11 普莱柯生物工程股份有限公司 一种猪肺炎支原体抗原在预防和治疗猪呼吸道疾病综合征方面的应用
CN109675029A (zh) 2013-09-19 2019-04-26 硕腾服务有限责任公司 油基佐剂
MX2016004063A (es) 2013-10-02 2016-06-06 Boehringer Ingelheim Vetmed Variante de la proteina pcv2 orf2 y particulas similares al virus compuestas por esta.
DK3072523T3 (en) * 2013-11-21 2019-04-08 Agricultural Tech Res Inst COMPOSITION FOR PREVENTION AND TREATMENT OF INFECTIONS WITH MYCOPLASMA
CN105012948B (zh) * 2014-04-18 2019-07-30 普莱柯生物工程股份有限公司 一种疫苗组合物及其应用
CN104248753B (zh) * 2014-05-15 2017-07-28 普莱柯生物工程股份有限公司 一种疫苗组合物及其应用
BR102014014727B1 (pt) * 2014-06-16 2018-04-03 Ouro Fino Saúde Animal Ltda COMPLEXO DE POLIPROTEÍNAS IMUNOGÊNICAS DE M. hyopneumoniae, GENE SINTÉTICO CODIFICANTE DO COMPLEXO DE POLIPROTEÍNAS IMUNOGÊNICAS DE M. hyopneumoniae, COMPOSIÇÃO ANTIGÊNICA, PROCESSO DE OBTENÇÃO DE UM COMPLEXO DE POLIPROTEÍNAS IMUNOGÊNICAS DE M. hyopneumoniae
US9814769B2 (en) 2014-09-30 2017-11-14 Qatar University Vaccines against pathogenic Escherichia coli and methods of using the same
HUE063288T2 (hu) 2015-01-16 2024-01-28 Zoetis Services Llc Száj és körömfájás betegség vakcina
KR20160099223A (ko) * 2015-02-12 2016-08-22 강원대학교산학협력단 마이코플라스마 하이오뉴모니애 박테린 백신 및 이의 제조방법
KR101846478B1 (ko) * 2016-08-12 2018-04-06 주식회사 이노백 재조합 단백질을 포함하는 돼지 마이코플라즈마 감염 예방용 백신 조성물
RU2668799C1 (ru) * 2017-09-08 2018-10-02 Эгрикалчурал Текнолоджи Рисерч Инститьют Субъединичная вакцина против mycoplasma spp.
CN108101969A (zh) * 2017-11-13 2018-06-01 南京大爻网络科技有限公司 一种与猪支原体肺炎相关的抗原及其应用
RU2695679C1 (ru) * 2018-09-11 2019-07-25 Эгрикалчурал Текнолоджи Рисерч Инститьют Субъединичная вакцина против mycoplasma spp.
RU2759427C2 (ru) * 2019-07-08 2021-11-12 Эгрикалчурал Текнолоджи Рисерч Инститьют Субъединичная вакцина против mycoplasma spp
CN117305192A (zh) * 2023-12-01 2023-12-29 北京瑞阳瑞泰生物科技有限公司 一种猪肺炎支原体rt02株、疫苗组合物及其应用

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5252328A (en) * 1987-03-26 1993-10-12 Martin Marietta Energy Systems, Inc. Mycoplasma hyopneumoniae antigen and uses therefor
EP0283840A3 (en) * 1987-03-26 1989-08-09 Ml Technology Ventures, L.P. Mycoplasma hyopneumoniae antigen and uses therefor
DE3881993T2 (de) 1987-09-18 1993-09-30 Akzo Nv Mycoplasma-Impfstoff.
CA2078131A1 (en) 1990-04-02 1991-10-03 Jerry M. Kuner Polypeptides useful in diagnosis of and treatment against mycoplasma infections in animals
US6113916A (en) * 1990-05-29 2000-09-05 American Cyanamid Company Method of enhancing cell mediated immune responses
WO1991018627A1 (en) * 1990-05-29 1991-12-12 Smithkline Beecham Corporation Swine pneumonia vaccine and method for the preparation thereof
US5565205A (en) 1990-08-16 1996-10-15 Solvay Animal Health, Inc. Inactivated Mycoplasma hypopneumoniae bacterin and method of use thereof
EP0475185A1 (en) 1990-08-27 1992-03-18 Nippon Flour Mills Co., Ltd. DNA's encoding surface antigen of mycoplasma hyopneumoniae, DNA fragments for primer, recombinant antigenic peptides and diagnostic method of mycoplasmal pneumoniae of swine using same
US5338543A (en) * 1992-02-27 1994-08-16 Ambico, Inc. Thimerosal inactivated mycoplasma hyopneumoniae vaccine
ES2225825T3 (es) * 1992-09-28 2005-03-16 Wyeth Holdings Corporation Procedimiento de mejora de las respuestas inmunitarias mediadas por celulas.
US5530874A (en) 1993-02-02 1996-06-25 3Com Corporation Network adapter with an indication signal mask and an interrupt signal mask
WO1995009870A1 (en) 1993-10-07 1995-04-13 Iowa State University Research Foundation, Inc. Characterization of mycoplasma hyopneumoniae adhesins
PT1820512E (pt) 1994-05-10 2013-10-09 Boehringer Ingelheim Vetmed Vacina viva modificada melhorada contra brsv
US5788962A (en) 1995-01-17 1998-08-04 The Curators Of The University Of Missouri DNA sequences coding for mycoplasma hyopneumoniae surface antigens, corresponding proteins and use in vaccines and diagnostic procedures
AUPN178995A0 (en) 1995-03-16 1995-04-13 University Of Melbourne, The Antigen composition
JP4113588B2 (ja) 1996-09-30 2008-07-09 ユニヴァーシティ・オヴ・アーカンサス ワクチン結合物を用いて免疫活性を産生する方法
EP0846468B1 (en) 1996-12-05 2004-06-09 Akzo Nobel N.V. Non-virulent mycoplasma synoviae and vaccine thereof
HUP0100130A2 (hu) 1997-11-26 2001-05-28 Iowa State University Research Foundation, Inc. Rekombináns Mycoplasma hyopneumoniae vakcina
AU6128900A (en) * 1999-09-29 2001-04-05 Pfizer Products Inc. Nucleic acids and proteins of the mycoplasma hyopneumoniae mph3 gene and uses thereof
US6585981B1 (en) * 2000-07-27 2003-07-01 Regents Of The University Of Minnesota Temperature-sensitive live vaccine for Mycoplasma hyopneumoniae
UA114504C2 (uk) 2012-04-04 2017-06-26 Зоетіс Сервісіз Ллс Комбінована вакцина pcv, mycoplasma hyopneumoniae та prrs

Also Published As

Publication number Publication date
UY27366A1 (es) 2003-04-30
IL159349A0 (en) 2004-06-01
ES2312580T5 (es) 2017-12-11
BR0210804A (pt) 2005-05-03
ES2312580T3 (es) 2009-03-01
MA27047A1 (fr) 2004-12-20
EP2027873B8 (en) 2015-11-11
UA78707C2 (en) 2007-04-25
EA200301323A1 (ru) 2005-06-30
PL373367A1 (en) 2005-08-22
DK2027873T3 (en) 2015-11-09
BG108546A (bg) 2005-02-28
IS7076A (is) 2003-12-15
DOP2002000431A (es) 2003-01-15
CN102872456A (zh) 2013-01-16
HUP0400434A2 (en) 2007-08-28
CN1551781B (zh) 2013-01-02
EP1474067A2 (en) 2004-11-10
NO342654B1 (no) 2018-06-25
EP2027873A1 (en) 2009-02-25
CA2451626C (en) 2011-05-31
AP2003002937A0 (en) 2003-12-31
HU230246B1 (hu) 2015-11-30
OA12638A (en) 2006-06-15
US6846477B2 (en) 2005-01-25
CZ305781B6 (cs) 2016-03-16
NO20035762L (no) 2004-02-02
PL209773B1 (pl) 2011-10-31
CN1551781A (zh) 2004-12-01
HK1180224A1 (zh) 2013-10-18
ES2550458T3 (es) 2015-11-10
KR20040030785A (ko) 2004-04-09
ZA200309698B (en) 2014-04-30
CA2451626A1 (en) 2003-01-16
SK288010B6 (sk) 2012-10-02
AU2002309109B2 (en) 2007-12-13
WO2003003941A2 (en) 2003-01-16
BG66481B1 (bg) 2015-02-27
PE20030285A1 (es) 2003-03-27
AR034678A1 (es) 2004-03-03
EP2842569A1 (en) 2015-03-04
PT2027873E (pt) 2015-11-03
ATE412426T2 (de) 2008-11-15
CN101524532A (zh) 2009-09-09
DK1474067T3 (da) 2008-12-08
DK2842569T3 (da) 2019-05-20
GT200200138A (es) 2003-05-15
PA8549701A1 (es) 2003-01-24
HK1207584A1 (en) 2016-02-05
EP1474067A4 (en) 2005-08-10
ES2729579T3 (es) 2019-11-04
EP2842569B1 (en) 2019-04-10
NZ530106A (en) 2007-06-29
CY1108749T1 (el) 2014-04-09
DE60229666D1 (de) 2008-12-11
MXPA03011599A (es) 2005-03-07
PT2842569T (pt) 2019-06-17
CN101524532B (zh) 2014-03-19
USRE44399E1 (en) 2013-07-30
PT1474067E (pt) 2008-11-14
WO2003003941A3 (en) 2004-07-29
TWI329514B (en) 2010-09-01
HK1134900A1 (en) 2010-05-20
HK1068250A1 (en) 2005-04-29
EP1474067B2 (en) 2017-08-16
CN102872456B (zh) 2016-01-20
YU102203A (sh) 2006-05-25
EA009901B1 (ru) 2008-04-28
US20030109473A1 (en) 2003-06-12
TNSN03155A1 (fr) 2005-12-23
DK1474067T4 (en) 2017-10-16
JP2005515162A (ja) 2005-05-26
EP1474067B1 (en) 2008-10-29
EP2027873B1 (en) 2015-09-09
HRP20031079A2 (en) 2005-10-31
US20050013823A1 (en) 2005-01-20
CZ20033466A3 (cs) 2005-06-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
USRE44399E1 (en) One dose vaccination with Mycoplasma hyopneumoniae
AU2002309109A1 (en) One dose vaccination with mycoplasma hyopneumoniae
US7056492B2 (en) Mycoplasma hyopneumoniae vaccine and methods for reducing Mycoplasma bovis pneumonia in cattle
JP2004536106A (ja) マイコプラズマ・ボビスワクチンおよび動物の肺炎を減少させる方法
WO2006056841A1 (en) Multiple-strain mycoplasma hyopneumoniae vaccines
AU2002304305A1 (en) Mycoplasma hyopneumoniae vaccine and methods for reducing mycoplasma bovis pneumonia in cattle

Legal Events

Date Code Title Description
PC4A Assignment and transfer of rights

Owner name: PAH USA 15 LLC, NEW YORK, NY, US

Free format text: FORMER OWNER: PFIZER PRODUCTS INC., GROTON, CT, US

Effective date: 20130703

TC4A Change of owner's name

Owner name: ZOETIS P LLC, FLORHAM PARK, NEW JERSEY, US

Effective date: 20130704

PC4A Assignment and transfer of rights

Owner name: ZOETIS SERVICES LLC, FLORHAM PARK, NJ, US

Free format text: FORMER OWNER: ZOETIS P LLC, FLORHAM PARK, NEW JERSEY, US

Effective date: 20151009

TE4A Change of owner's address

Owner name: ZOETIS SERVICES LLC, PARSIPPANY, NEW JERSEY, US

Effective date: 20170314