SI9110909A

SI9110909A - Inkluzijski kompleksi 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli ali njegov tavtomerni izomer, postopek za njihovo pripravo in farmacevtski sestavki, ki jih vsebujejo

Info

Publication number: SI9110909A
Application number: SI9110909A
Authority: SI
Inventors: Maria Vikmon; Jozsef Szejtli; Lajos Szente; Jozsef Gaal; Istvan Hermecz; Agnes Horvath; Katalin Marmarosi; Gabor Horvath; Iren Munkasci
Original assignee: Therabel Industries S.A.
Priority date: 1990-03-28
Filing date: 1991-03-28
Publication date: 1998-06-30
Also published as: MW6891A1; HU901869D0; MD940334A; RO109336B1; HU212730B; BG61812B1; CZ285695B6; HU211648A9; PL293020A1; TJ189R3; EP0478732A1; CZ85291A3; FI915570A0; CA2054213A1; NO914650L; NO303634B1; ES2121780T3; MD776B2; MC2186A1; OA09522A

Abstract

Predloženi izum se nanaša na inkluzijske komplekse 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli ali njegov tavtomerni izomer, postopek za njihovo pripravo in farmacevtske sestavke, ki jih vsebujejo. Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tvorjen s ciklodekstrinskim derivatom pripravimo:a) z reakcijo 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli v vodnem mediju s ciklodekstrinskim derivatom in izoliranjem kompleksa iz raztopine z dehidratacijo, ali b) z mletjem z veliko močjo 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli in ciklodekstrinskega derivata.ŕ

Description

CHINOIN GYOGYSZER-ES VEGYESZETI TERMEKEK GYARA Rt.

Inkluzijski kompleksi 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli ali njegov tavtomemi izomer, postopek za njihovo pripravo in farmacevtski sestavki, ki jih vsebujejo

Predloženi izum se nanaša na inkluzijske komplekse 3-morfolino-sidnonimina (SIN1) ali njegove soli ali njegovo tavtomerno obliko odprtega obroča A (SIN-1A: N-nitrozo-N-morfolino-amino-acetonitril), tvorjeno z derivati ciklodekstrina, na postopek za njihovo pripravo in na farmacevtske sestavke, ki jih vsebujejo kot aktivno sestavino.

Oblika odprtega obroča A ima pomembno vlogo, njena tvorba je predominantna za sproščanje NO (dušikov monoksid) radikala.

Molsidomin (N-etoksikarbonil-3-morfolino-sidnonimin, SIN-10) je dobro znano antianginozno sredstvo. V terapiji se na široko uporablja za zdravljenje in preprečevanje angin v primeru srčne insuficience v stanju srčnega infarkta. Terapevtski učinek molsidomina lahko v glavnem pripišemo njegovemu prvemu aktivnemu metabolitu 3-morfolino-sidnoniminu, ki nastane v glavnem v jetrih z encimatsko hidrolizo in kasnejšim učinkom dekarboksilaznega encima. Tako ima SIN-1 terapevtsko prednost tudi v primerjavi z molsidominom, ker je njegova učinkovitost hitrejša in bolj definirana. Pomanjkljivost pa je ta, da ga je možno uporabljati samo v obliki intravenoznih injekcij.

Derivati sidnonimina so izredno občutljivi za svetlobo. Zaradi osvetljevanja z umetno ali naravno svetlobo, čeprav le kratek čas, ti derivati hitro razpadejo. Med fotolizo nastanejo farmakološko neaktivni ali škodljivi produkti razkroja, kot so npr. morfolin, amoniak, etilni alkohol, ogljikov dioksid. Cilj nekaterih patentov je fotostabilizacija derivatov sidnonimina z dodatkom raznih aditivov. (Evropska patentna specifikacija št. 206219 in GFR patentna specifikacija št. 3 346 638).

Občutljivosti za svetlobo se lahko izognemo v suhem stanju in v raztopini s prikladnim skladiščenjem (v dobro zaprti temni steklenici, zaviti v črn papir).

Na splošno lahko rečemo, da so derivati sidnonimina občutljivi za skrajne vrednosti pH in se hitro razkrojijo. Končni proizvod kemijskega in metaboličnega razkroja molsidomina je SIN IC (cianometilenamino-morfolin) neaktivni metabolit. Z uporabo SIN 1 kot zdravila pridejo v ospredje problemi kemijske stabilnosti. Substanca se hitro razkroji v nevtralni vodni raztopini, občutljiva je za vrednost pH in je stabilna samo v močno kislem mediju (pH 1-2). Nad pH 2 se hitro razkroji do neaktivnega metabolita SIN IC, kar je povezano z izgubo terapevtske aktivnosti. Preoblikovanje SIN 1 -► SIN IC je rezultat bazno kataliziranega hidrolitičnega razkroja. Postopek je strogo odvisen od pH, npr. 10% razpad (SIN IC) dosežemo v 53 sekundah pri vrednosti pH 8, v 15 urah pri pH 6, v 67 dneh pri pH 4 in v 13 letih pri pH 1-2, (Chem.Pharm.Bull, 19/61079,1971).

SIN 1 se prav tako razkroji v razredčeni vodni raztopini pri skladiščenju pri difuznem osvetljevanju že v 1-3 dneh. Razkroj lahko direktno spremljamo z UV spektrom. Vrednost absorpcijskega maksimuma se pomika stopenjsko od 291 ±1 do 278±1 nm, dokler vrednost absorpcije kontinuirno raste, kar je v skladu z literaturnimi podatki: vrednost X_max za SIN 1 je 291 ±1, specifični absorpcijski koeficient A^1% = 520, medtem koje za SIN IC: X_max = 278±1 nm, njegov molski absorpcijski koeficient e = 17000 in A^1%. = 1220.

lem

SIN 1, uporabljen oralno, ni učinkovit, med pH 1-2 ima SIN 1 verjetno močno ionizirano stanje prikladne kemijske stabilnosti, kar po drugi strani ni prikladno za resorpcijo iz Gl-trakta. S premikanjem dalje iz želodca na bolj bazičen pH, glede na pred tem navedena dejstva, se SIN 1 hitro preoblikuje v neaktiven metabolit SIN IC. Uporabljena nizka doza SIN 1 je prikladna za to preoblikovanje, ker je hidrolitičen razpad v majhnih koncentracijah (velikosti μ/ml) bolj definiran.

SIN 1 je na tržišču v obliki svoje hidrokloridne soli, za intravenozno uporabo v obliki ampul liofiliziranega praška, ki vsebujejo 2 mg aktivne sestavine in 40 mg sorbita. Pred uporabo je treba vsebnost ampule raztopiti v 1 ml destilirane vode. Cilj predloženega izuma je, da bi pripravili tako novo sredstvo, s katerim bi lahko preprečili preoblikovanje SIN 1 -> SIN IC še v nevtralni vodni raztopini oz. pri fiziološki vrednosti pH.

Znano je, da je kompleksiranje s ciklodekstrinom prikladno za stabilizacijo različnih sredstev proti toploti, svetlobi in kisli ali bazni hidrolizi. (Szejtli: Cyclodextrin Technology, Kluwer, Dordrecht, 1988, str. 211-217).

Pri naših raziskavah smo ugotovili, da so sami ciklodekstrini učinkoviti pri stabilizaciji razredčenih vodnih raztopin, pripravljenih iz injekcijskega pripravka SIN 1.

Interakcija med SIN 1 in ciklodekstrini je potrjena z naslednjo serijo testov:

Iz injekcijskega pripravka SIN 1 pripravimo raztopino pribl. 10 Mg/ml in jo ob mešanju raztopimo v raztopinah 20-40 mg ciklodekstrina ali njegovega derivata.

Raztopine skladiščimo pri sobni temperaturi (20-22°C) pri difuzni svetlobi, v določenih periodah (dnevno) pa posnamemo UV spektre v intervalu med 220 in 350 nm. Kot kontrolo uporabimo samo vodno raztopino oz. 0,05N HC1 raztopino. pH vrednost ciklodekstrinskih raztopin preverimo, da ugotovimo, če uporabljeni ciklodekstrin ali njegov derivat znatno spremenita pH vrednost vode. pH vrednosti uporabljenih ciklodekstrinskih raztopin največjih koncentracij se razlikujejo samo za ±0,2 enoti od pH vrednosti destilirane vode. Ugotovili smo, da premik UV-spektra znatno preprečimo s CDPSI, ionsko topnim /3-ciklodekstrin-polimerom (povprečna molekulska masa 3500, vsebnost /3-CD 54%, vsebnost COO 4,2%) (madžarska patentna specifikacija št. 191 101). Premik spektra ne ugotovimo niti po dveh tednih skladiščenja, medtem ko je vodna raztopina, podobno skladiščena, praktično preoblikovana v SIN IC v 2-3 dneh.

Preprečevanje razpada, upočasnjevalni učinek DIMEB-a (2,6-di-O-metil-/3ciklodekstrin) je prav tako nedvoumen. V prisotnosti 20 mg/ml DIMEB-a je iz spektra raztopine razviden premik samo 1 nm po 6 dnevih skladiščenja. Prav tako testiramo stabilizirni učinek TRIMEB-a (heptakis-2,3,6-tri-O-metil-/3ciklodekstrina), γ-CD, /3-CD in hidroksi-propil-jS-CD. Vrstni red učinkovitosti, izveden na osnovi UV spektra, je naslednji:

CDPSI > > DIMEB > TRIMEB > j8CD > HP/3CD.

Iz učinka, prikazanega pri hidrolitičnem razkroju SIN 1 z raznimi ciklodekstrini in posebno s CDPSI, lahko sklepamo o interakciji kompleksnega tipa.

Pri gornji vrsti testov uporabimo ciklodekstrine oz. njihove derivate v zelo velikem prebitku (10jug/ml SIN 1 proti pribl. 20 mg/ml ciklodekstrina).

Serije testov ponovimo tako, da CDPSI uporabimo samo v 10- in 20-kratnem prebitku, kar ustreza masnemu razmeju SIN 1: CDPSI v kompleksu, ki vsebuje 10% oz. 5% aktivne sestavine. Nizka terapevtska doza SIN 1 omogoča celo uporabo kompleksa, ki vsebuje manj od 5% aktivne sestavine, kar ustreza molskemu razmeiju SIN 1: CDPSI pribl. 1:2. V takem področju koncentracije spektrofotometrična merjenja ne dajo opisne slike, zaradi česar stopnjo razkroja ugotovimo s tankoplastno kromatografijo na naslednji način:

Iz raztopine po kapljicah dodamo 10 μ\ na ploščo Kieselgel 60 F₂₅₄ (10x10 cm, Merck). Zmes, ki potuje: cikloheksametil acetat v razmerju 1:1. Zaradi nasičenja izvajamo pretok skozi cev 30 minut. Na ploščo nakapamo tudi SIN IC kot referenčno raztopino. Na mestu nanosa kaplje posušimo ploščo s hladnim zrakom, zaščiteno pred svetlobo, in le-to pustimo, da potuje do višine 15 cm. Med tem potovanjem cev za pretok hranimo na temnem mestu. Po uparjenju topila ploščo vizualno ocenimo pri UV-svetlobi pri 254 nm. SIN 1 je sam predstavljen pri R_f = 0,05 in SIN IC pri R_f= 0,36. V vsakem primeru ugotovimo, da je v raztopinah, ki vsebujejo CDPSI, vizualno manjša intenziteta SIN lC-madeža kot v vodnih raztopinah.

Ker je preoblikovanje SIN 1 v neaktivni metabolit precej odvisno od pH, izvedemo merjenja v fosfornih pufrih pH = 6,4, 7,0 in 7,6 v skladu s farmakopejo. V vsakem primeru primerjamo pufer in pufmo raztopino, ki vsebuje 20 mg/ml CDPSI, z UVspektrofotometričnim meijenjem po prikladnem vodno alkoholnem razredčevanju, z raziskovanjem intenzitet razgradnega produkta SIN 1 s tankoplastno kromatografijo.

Rezultati spektrofotometričnih merjenj so navedeni v tabeli 1.

Tabela 1

Sprememba vrednosti	kot funkcija časa
(1 mg/ml	SIN 1 + 20	mg/ml CDPSI) χ
čas	pH = 6,4	max pH = 7,0	pH = 7,6
(dnevi)	pufer+CDPSI	pufer+CDPSI	pufer+CDPSI
priprave

291,5	291,9	290,6	291,0	291,2	290,9
289,0	290,5	280,4	285,5	276,4	278,8
284,9	288,5	-	-	-	-
279,8	283,9	277,3	278,8	277,6	277,9

Padec maksimuma valovne dolžine za pribl. 13 nm (od 291 na 278 nm) pomeni popoln razkroj SIN 1 v SIN IC.

V pufru s pH 6,4 je v prisotnosti CDPSI še po 6 dneh Δλ 7 nm v nasprotju z vrednostjo Δλ = 12 nm pri kontroli. Reproduktivnost UV-maksimuma v danih razmerah je v območju ±0,5 nm, tako da navedene razlike lahko smatramo za značilne. Po 1 dnevu skladiščenja še lahko izmerimo razliko Δλ, nasprotno pa je pri pH 7,6, kjer prevladuje učinek CDPSI, razlika komaj še merljiva. V testiranih raztopinah je molsko razmerje SIN 1:CDPSI pribl. 1:2, kar je potrebni minimum za kompleksiranje v raztopini. Stabilizacijski učinek v raztopini z 10-kratnim prebitkom (10 mg/ml) - kar odgovarja kompleksu z molskim razmerjem 1:1 - CDPSI komaj prevladuje. Stopnjo razkroja lahko prav tako spremljamo s tankoplastno kromatografijo. Intenziteta madeža SIN IC, prezentiranega samega pri vrednosti R_f = 0,36 v pufru s pH 6,4, se znatno razlikuje tudi po enem tednu skladiščenja, v pufrih s pH 7 in 7,6 pa je po enem dnevu skladiščenja vidna zaznavna razlika v intenziteti madeža SIN 1 pri R_f = 0,4. V pufru s pH 7 je še vedno zaznaven nespremenjen SIN 1, medtem ko v pufru s pH 7,6 praktično ni več zaznaven.

V raztopini se ravnotežje disociacije kompleksa lahko premakne z uporabo ciklodekstrina v prebitku. Z uporabo skrajno velikega prebitka CDPSI (1000 - oz. 2000krat) je za injekcijske pripravke razviden samo majhen premik spektra Δλ ± 1 nm v destilirani vodi po enem tednu, medtem ko je kontrolna raztopina praktično razkrojena.

Kvantitativno merjenje stopnje razkroja izvedemo tudi s HPLC postopkom.

HPLC merjenje pri ločevanju SIN 1 - SIN IC.

Naprava: modul za dovajanje topila Bechman 114 M, detektor spremenljivih valovnih dolžin 165, integrator Hewlett-Packard 3396 A

Kolona: Ultrasferna analitična kolona ODS 4,6 x 150 nm, 5 μτη.

Eluent:

0,05 M natrijev acetat	700 ml
acetonitril	300 ml
tetrahidrofuran	2 ml
hitrost pretoka	1,0 ml/min
tlak	120 bar
pravilna valovna dolžina	278,290 nm
volumen vzorca	20 μΐ
občutljivost	0,1 AU
hitrost papirja	0,5 cm/min
zadrževalni čas	t_R SIN 1:2,9 min t_R SIN IC: 4,2 min

Rezultati:

1. Raztopine 0,5 mg/ml SIN 1, pripravljene v fosfatnem pufru s pH je 6,3, zaščitene pred svetlobo, skladiščimo pri sobni temperaturi. Kompleks tvorimo s 50 mg/ml (100-kratna količina) CDPSI. Po 5 tednih skladiščenja ocenimo kromatograme HPLC.

Ocena:

Vsebnost aktivne	kontrola*	CDPSI-kompleks
sestavine
SIN 1	0,016	0,17
SIN IC	0,23	0,16

* Opomba: Podatki za merjenje kontrole se nanašajo na destilirano vodo in ne na pufer.

CDPSI, uporabljen v 100-kratnem masnem prebitku (v molskem razmerju pribl. 10:1), znatno preprečuje razkroj SIN 1. Dobljeni rezultati so v skladu s tankoplastno kromatografskim testom.

2. Test prav tako izvedemo v fosfatnem pufru s pH 7, pri čemer izberemo podobna koncentracijska razmerja (0,5 mg/ml SIN 1,50 mg/ml CDPSI).

Ocenimo kromatograme, dobljene po 4 dneh skladiščenja.

Ocena:

Vsebnost aktivne kontrola sestavine mg/ml

CDPSI-kompleks

SIN 1 SIN IC

0,041

0,125

0,23

0,064 pH vrednosti raztopine po skladiščenju:

kontrola: 6,57

CDPSI: 6,2

Potrdimo lahko, da CDPSI v uporabljeni koncentraciji preprečuje tudi pri pH 7 preoblikovanje SIN 1 v SIN IC, kije neaktiven metabolit.

Nadalje testiramo stabilnost SIN 1 injekcije v razredčeni vodni raztopini.

Iz ampule liofiliziranega praška SIN 1 pripravimo raztopino s koncentracijo 50 gg/ml, nato pa dodamo 20 mg/ml CDPSI. Raztopine skladiščimo pri sobni temperaturi in občasno določimo količino razkrojenega produkta SIN IC.

Ocenimo kromatograme, dobljene po 1,4 in 11 dneh.

Ocena vsebnost SIN IC

Cas (dnevi) začetek

I dan dnevi

II dni kontrola

0,1

0,8

3,9

5,6

CDPSI-kompleks 0,1 0,6 0,94 1,8

Predmet predloženega izuma je SIN 1-ciklodekstrinski derivat in njegova priprava, ki je stabilen v vodnem sistemu tudi pri fiziološki vrednosti pH in ki preprečuje preoblikovanje v SIN IC neaktiven metabolit na osnovi uporabe derivata cik8 lodekstrina.

Presenetljivo smo ugotovili, da s ciklodekstrini, posebno s CDPSI kompleksiran SIN 1 vsebuje znatno količino SIN IA intermediata po pripravi kompleksa. Postopek preoblikovanja SIN 1 -* SIN IA -> SIN IC v prisotnosti ciklodekstrina prav tako raziščemo v 0,02 M acetatnem pufru pri pH 5,5. Presenetljivo je učinek j8-CD najbolj izrazit; več kot 7-krat več SIN IA ugotovimo v prisotnosti β-CD kot v kontroli (SIN IA detektiramo s HPLC).

S testiranjem biološkega učinka pripravka v smislu izuma in vivo smo ugotovili, da dokler SIN 1, uporabljen p.o. v dozi 1 mg/kg, ne kaže aktivnosti (kardioprotektivna aktivnost pri podganah je 11%), je kardioprotektivna aktivnost SIN-l-CDPSI, uporabljenega p.o. poleg iste aktivne sestavine, 42,2%.

Dobro biološko učinkovitost SIN 1-CDPSI kompleksa v kardioprotektivnem testu po oralnem dajanju lahko pripišemo SIN IA, prisotnemu v trdnem kompleksu. A oblika, ki ima pomembno vlogo v biološkem učinku, se ne more tvoriti pod pH želodčnega medija, lahko pa se tvori in vitro iz SIN 1 substance z inkubacijo pri alkalnem pH. Pri raztapljanju CDPSI kompleksa v destilirani vodi lahko detektiramo znatne količine SIN IA v vodni raztopini.

Kaže, da je prehod SIN 1 - SIN IA olajšan s ciklodekstrini, istočasno pa se zelo nestabilen SIN IA, občutljiv za kisik, stabilizira s kompleksiranjem, kar vodi do počasnejšega preoblikovanja SIN IA -> SIN IC. Tako sta enakomernejše in daljše trajanje delovanja posledica zadržanega sproščanja dušikovega monoksida izkompleksiranega SIN 1.

Naslednja tabela prikazuje vsebnost SIN IA v SIN-l-kompleksih z različnimi ciklodekstrini, pripravljenem po primeru 2, izmerjeno s HPLC po kompleksiranju. Fizikalno zmes SIN 1 z enako sestavo, pripravljeno na isti način z laktozo, uporabimo kot referenco.

Tabela (vzorec) kompleks vsebnost SIN IA [%] (podano v ekvivalentu SIN IC)

SIN 1-CDPSI SIN 1-/3-CD SIN 1-DIMEB SIN 1-HP-/3-CD

1,27

0,08

0,06

0,115

SIN 1-laktoza (referenca) Rezultati in sklepi

Relaksacijske učinke SIN 1-ciklodekstrin kompleksov in normalnega SIN 1 smo preučevali v koncentraciji 1 ali 2 μΜ.

Vsi štirje kompleksi relaksirajo zadržano kontrakcijo trakov, depolariziranih s kalijem, z maksimalnim učinkom od 43 do 53%. SIN 1 (1 μΜ) je nekoliko učinkovitejši z relaksacijo 58%.

Do maksimalne relaksacije s SIN 1 kompleksi pride 23 do 32 minut po dajanju, medtem ko je T/maks za SIN 1 pri 18 minutah. Ta razlika je statistično pomembna. Trajanje delovanja, kot ga izmerimo s T/2, je daljše s ciklodekstrinskimi kompleksi (62 do 88 minut) kot s SIN 1 (47 minut). Ta razlika je prav tako statistično pomembna. Tako imajo SIN 1-ciklodekstrin-kompleksi enakomernejše vzpostavljanje in daljše trajanje delovanja od normalnega SIN 1.

Ker smatramo, da je relaksirni učinek SIN 1 izzvan z dušikovim monoksidom, sproščenim s postopkom oksidativnega razkroja, lahko sklepamo, da kompleksiranje SIN 1 s ciklodekstrini upočasnjuje postopek tega razkroja. Takšno enakomernejše vzpostavljanje in daljše trajanje delovanja pa je posledica zadržanega sproščanja dušikovega monoksida iz SIN 1-ciklodekstrin-kompleksov.

V skladu z dejstvi, navedenimi pred tem, se predloženi izum nanaša na inkluzijske komplekse 3-morfolino-sidnonimina ali njegovih soli, ali na njegove tavtomerne izomere v obliki odprtega obroča A, tvorjene s ciklodekstrinskimi derivati.

Inkluzijski kompleksi v smislu izuma prikladno vsebujejo kot ciklodekstrinski derivat ionski vodotopni ciklodekstrinski polimer (CDPSI) (molekulska masa manjša od 10000), kot je 2,6-di-O-metil-jS-ciklodekstrin (Dimeb), heptakis-2,3,6-tri-O-metil-/3ciklodekstrin(Trimeb) in β- ali -γ-ciklodekstrin.

Pri pripravi trdnih inkluzijskih kompleksov lahko prav tako uporabimo hidroksipropil-j3-ciklodekstrin.

Inkluzijske komplekse v smislu izuma pripravimo z reakcijo 3-morfolino-sidnonimina ali njegovih soli v topilnem mediju z derivatom ciklodekstrina in po potrebi kompleks pridobimo iz raztopine z dehidratacijo ali mletjem z veliko močjo 3-morfolinosidnonimina ali njegovih soli in derivatov ciklodekstrina.

Kompleks lahko prikladno izoliramo iz raztopin z liofilizacijo, s sušenjem z razprševanjem, z uparevanjem v vakuumu pri nizki temperaturi in vakuumskim sušenjem.

SIN 1 raztopimo z 1-40 mmol CDPSI ali Dimeb-a v 1-500 ml destilirane vode, izračunano za 1 mmol aktivne sestavine, nato pa izvedemo dehidratacijo, kot je navedeno pred tem. Molsko razmerje CDPSI polimera je izračunano na /3-CD. Tako pri uporabi polimera s pribl. 50% vsebnostjo /3-CD in s povprečno molekulsko maso 3500, sestava kompleksa za razmerje 1:1 ustreza količini 8% in za molsko razmerje 2:1 količini pribl. 4,5%.

Interakcija kompleksa je prikazana s testom s prepustno membrano.

Uporabimo celofansko membrano tipa Visking (s povprečnim premerom por 240 nm). Vodno raztopino SIN 1 pri koncentraciji 1 mg/ml damo v donorsko celico, destilirano vodo pa v receptorski predelek naprave celice s prepustno membrano. Raztopine mešamo z magnetnimi mešali in vzdržujemo pri 37±1°C. Pri ustreznih časovnih intervalih vzamemo vzorce iz receptorske raztopine in izmerimo koncentracijo SIN 1, kije pronical iz donorske celice, z UV spektrometrijo.

Test ponovimo v prisotnosti raznih ciklodekstrinov pri raznih koncentracijah v predelku donorske celice.

Čas, potreben za difuzijo 50% SIN 1 (T_50%) v prisotnosti CDPSI pri različni koncentraciji, je naveden v spodnji tabeli.

Difuzijske razpolovne dobe SIN 1 v prisotnosti CDPSI

0,9

3,5

5,0

SIN sam

SIN + CDPSI 25 mg/ml mg/ml

Inkluzijske komplekse, pripravljene v smislu izuma, lahko uporabimo za pripravo farmacevtskih pripravkov oz. kombinacij za stabilne injekcije, oralno ali lokalno uporabo.

Doze inkluzijskih kompleksov v smislu izuma lahko variirajo glede na starost, telesno maso in stanje subjekta, način dajanja, število dajanj ipd., vendar so v območju od 6 do 50 mg telesne mase na dan, prednostno 10-20 mg telesne mase na dan.

Učinek zadrževanja prevladuje posebno v primerih uporabe farmacevtskega pripravka v obliki ene tablete - dnevno, mikrokapsul ali mazil, posebno prikladno za perkutano uporabo. Farmacevtske pripravke v smislu izuma dobimo na običajen način. Dodatki in nosilci so takšni, kot se navadno uporabljajo na področju farmacevtskih pripravkov.

Podrobnosti izuma so ponazorjene spodaj v primerih, ki pa ne omejujejo izuma.

PRIMERI

1. Priprava SIN 1-CDPSI kompleksa z liofilizacijo g (6,6 mmol) CDPSI polimera raztopimo v 200 ml destilirane vode, nato pa dodamo v raztopino 1,1 g (5,3 mmol) SIN 1-HC1. Snovi se skoraj takoj raztopijo in nastane čista bistra raztopina, ki jo takoj zamrznemo in dehidratiramo z liofilizacijo, pri čemer pazimo, da je med postopkom snov izpostavljena čim manjšemu osvetljevanju. Prikladno je, da ovijemo reakcijsko posodo s temnim papirjem med raztapljanjem. Dobljeni produkt je zelo lahek, sipek prašek, vsebnost aktivne sestavine, določena s spektrofotometričnim postopkom pa je 6,5±0,5%, kar ustreza molskemu razmerju pribl. 1:1.

Testi, ki potrjujejo tvorbo kompleksa:

termogravimetrijski (TG), diferencialna - vrstična kalorimetrija (DSC) in toplotna evolucijska analiza (TEA) kažejo karakteristične razlike med SIN 1, fizikalnimi zmesmi SIN 1-CDPSI in SIN 1-CDPSI-kompleksi. Iz aktivne sestavine SIN 1 se pri temperaturi 60-110°C odstrani pribl. 8% neorganske snovi, možno je, da je to voda. Razkroj snovi s taljenjem se začne pri temperaturi 170-180°C z eksplozijsko silovitostjo in v zelo ozkem temperaturnem intervalu se 70% uvedenega sredstva odstrani iz sistema. Med 220 in 230°C je razkroj počasnejši, pri 350°C lahko zaznamo 87% izgubo mase. Za identifikacijo nekompleksirane aktivne sestavine lahko uporabimo vrh DSC med 190 in 200°C in vrh TEA pri 190°C, ki izzoveta celo v atmosferi argona eksotermno spremembo entalpije.

Toplotne krivulje fizikalne zmesi SIN 1-CDPSI, pripravljene tik pred merjenjem, lahko smatramo kot rezultante prehodnih snovi.

Iz krivulj kompleksov so razvidne značilne neskladnosti s tistimi, navedenimi pred tem, z označenimi vrhovi razkroja SIN 1, kar pomeni, da SIN 1 dejansko tvori inkluzijski kompleks s CDPSI.

Rentgenski difraktogram praška:

V skladu z rentgenskimi difrakcijskimi testi ima SIN 1-CDPSI amorfno strukturo. Karakteristični refleksijski vrhovi za SIN 1 izginejo. Amorfna struktura CDPSI je znana. Stopnja kristaliničnosti SIN 1, tretiranega podobno, vendar brez CDPSI, je zmanjšana, prehod v popolnoma amorfno strukturo pa je možen samo z liofilizacijo. Dva © refleksijska vrhova, ki nakazujeta rahlo kristalno obliko, značilno za prost (nekompleksiran) SIN 1, ni mogoče najti v diagramu kompleksa.

2. Priprava kompleksa SIN 1-CDPSI z liofilizacijo g CDPSI polimera (6,6 mmol) (vsebnost β-CD 53%, vsebnost COO' 4,2%) raztopimo v 200 ml destilirane vode. V dobljeni raztopini raztopimo 0,7 g (3,3 mmol) SIN 1, nato pa raztopino obdelamo kot v primeru 1. Vsebnost dobljenega aktivnega produkta je 4,5 ±0,2%, kar ustreza molskemu razmerju pribl. 1:2.

3. Priprava kompleksa SIN 1-CDPSI z visoko in kontrolirano vsebnostjo SIN IA

Po postopku v skladu s primerom 2 dobljeni trdi produkt izpostavimo drugemu sušenju, da odstranimo vodo, vezano v kompleksu. Produkt sušimo pri 60°C v vakuumu 3 ure do konstantne mase. Izguba pri sušenju: 4,5±0,2%.

Vsebnost SIN IA se poveča za približno 5-krat med segrevanjem, naraste od 1,08 do 5,1%, medtem ko se razmerje SIN 1A/SIN IC prav tako ugodno spremeni (spremenjeno je od 10 na 17). S skladiščenjem suhih kompleksov pri sobni temperaturi, zaščitenih pred svetlobo več kot 3 mesece, se vsebnost SIN IA in razmerje SIN 1A/SIN IC praktično ne spremeni.

V kontrolnem vzorcu (ni toplotno obdelan) se med skladiščenjem tudi poveča SIN IA od 1,08 do 1,9% ob istočasnem zmanjšanju razmerja SIN 1A/SIN IC (spremenjeno od 10 na 3).

Priprava SIN 1-CDPSI-kompleksa z visoko vsebnostjo SIN IA in kontrolirano sestavo je možna s kratkotrajno toplotno obdelavo liofiliziranega SIN 1-CDPSIkompleksa.

4. Priprava SIN 1-Dimeb-kompleksa g Dimeb-a (10,3 mmol) (vsebnost vlage 2%) raztopimo v 100 ml destilirane vode. Ob mešanju damo v raztopino 1,03 g (5 mmol) SIN 1. Dobljeno bistro raztopino obdelamo kot v primeru 1, zaščiteno pred svetlobo. Produkt je sipek bel prašek, vsebnost aktivne sestavine je 6,5±0,2%, molsko razmerje ustreza pribl. 1:2 SIN l:Dimeb.

5. Priprava mazila za perkutano uporabo z vsebnostjo 10 mg SIN 1 in vsebnostjo 1/2 g mazila

Od SIN 1-Dimeb-kompleksa, pripravljenega po primeru 3 (vsebnost aktivne sestavine 6,5%), raztopimo 151 mg v 20 ml destilirane vode. V raztopino, zaščiteno pred svetlobo, dodamo ob močnem mešanju 50 mg KLUCHEL-HF (hidroksipropilceluloza). Tako dobimo viskozno raztopino, ki je težko mešljiva, in jo pustimo, da stoji pri sobni temperaturi en dan. Dobimo presojen gel, in 2 g le-tega vsebujeta 10 mg SIN 1.

6. SIN 1 tableta z vsebnostjo 2 mg aktivne sestavine/tableto.

Tableto dobimo na znan način z direktnim stiskanjem.

Za

CHINOIN GYOGYSZER-ES VEGYESZETITERMEKEK GYARA Rt.

PATENTNA PISARNA, LJUBLJANA, ČOPOVA H

Claims

PATENTNI ZAHTEVKI

1. Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, označen s tem, daje tvorjen z derivatom ciklodekstrina.
2. Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, označen s tem, da je tvorjen z ionskim vodotopnim ciklodekstrinskim polimerom (CDPSI) (molekulska masa < 10 000).
3. Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, označen s tem, daje tvorjen s hidroksipropil-/3-ciklodekstrinom.
4. Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, označen s tem, daje tvorjen z 2,6-di-O-metil-jS-ciklodekstrinom.
5. Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, označen s tem, daje tvorjen s heptakis-2,3,6-tri-0-metil-/3-ciklodekstrinom.
6. Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, označen s tem, daje tvorjen s β- ali 7-ciklodekstrinom.
7. Postopek za pripravo inkluzijskega kompleksa 3-morfolino-sidnonimina, tvorjenega z derivatom ciklodekstrina, označen s tem, da obsega

a) reakcijo 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli v vodnem mediju z derivatom ciklodekstrina in izoliranje kompleksa iz raztopine z dehidratacijo ali

b) mletje z veliko močjo 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli z derivatom ciklodekstrina.
8. Postopek po zahtevku 7, označen s tem, da kot derivat ciklodekstrina uporabimo ionski vodotopni ciklodekstrinski polimer (molekulska masa < 10 000); hidroksipropil-ciklodekstrin, 2,6-di-0-metil-/3-ciklodekstrin, heptakis-2,3,6-tri-Ometil-/3-ciklodekstrin ali /3-ciklodekstrin.
9. Postopek po zahtevkih 7 in 8, označen s tem, da inkluzijski kompleks 3-morfolinosidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, tvorjen s ciklodekstrinom, izoliramo z liofilizacijo, sušenjem z razprševanjem, vakuumskim koncentriranjem pri nizki temperaturi in sušenjem v vakuumu.
10. Farmacevtski pripravek, označen s tem, da vsebuje kot aktivno sestavino inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, tvorjen s ciklodekstrinom, in običajne farmacevtske nosilce in druge pomožne snovi.
11. Farmacevtski pripravek po zahtevku 10, označen s tem, da ga formuliramo v oralno obliko.
12. Farmacevtski pripravek po zahtevku 10, označen s tem, da vsebuje kot derivat ciklodekstrina ionski vodotopni polimer (molekulska masa < 10 000); hidroksipropil-/3-ciklodekstrin, 2,6-di-0-metil-/3-ciklodekstrin, heptakis-2,3,6-tri-Ometil-/3-ciklodekstrin, /3-ciklodekstrin ali γ-ciklodekstrin.
13. Postopek za pripravo farmacevtskega pripravka, označen s tem, da inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tavtomerni izomer, tvorjen s ciklodekstrinskim derivatom, zmešamo z običajnimi farmacevtskimi nosilci in drugimi pomožnimi snovmi.
14. Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tvorjen z derivatom ciklodekstrina, za uporabo pri zdravljenju anginskih in ishemijskih obolenj pri ljudeh.

Za

THERABEL INDUSTRIES S.A.:

F** '- Ušti· ·

POVZETEK

Inkluzijski kompleksi 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli ali njegov tavtomerni izomer, postopek za njihovo pripravo in farmacevtski sestavki, ki ga vsebujejo

Predloženi izum se nanaša na inkluzijske komplekse 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli ali njegov tavtomerni izomer, postopek za njihovo pripravo in farmacevtske sestavke, ki jih vsebujejo.

Inkluzijski kompleks 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli, tvorjen s ciklodekstrinskim derivatom pripravimo:

a) z reakcijo 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli v vodnem mediju s ciklodekstrinskim derivatom in izoliranjem kompleksa iz raztopine z dehidratacijo, ali

b) z mletjem z veliko močjo 3-morfolino-sidnonimina ali njegove soli in ciklodekstrinskega derivata.