HU212730B

HU212730B - Process for producing inclusion complexes of cyclodextrine or its derivative and 3-morpholino-sydnonimine or its salt or its tautomer and pharmaceutical compositions containing them

Info

Publication number: HU212730B
Application number: HU901869A
Authority: HU
Inventors: Jozsef Gaal; Istvan Hermecz; Ferencne Munkacsi; Jozsef Szejtli; Andrasne Vikmon; Agnes Horvath; Gabor Horvath; Tamasne Marmarosi; Lajos Szente
Original assignee: Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet
Priority date: 1990-03-28
Filing date: 1990-03-28
Publication date: 1996-10-28
Also published as: MW6891A1; HU901869D0; MD940334A; RO109336B1; BG61812B1; CZ285695B6; HU211648A9; PL293020A1; TJ189R3; EP0478732A1; CZ85291A3; FI915570A0; CA2054213A1; NO914650L; NO303634B1; ES2121780T3; MD776B2; MC2186A1; OA09522A; CN1055928A

Description

(54) Eljárás 3-morfolino-sydnonimin vagy sója vagy tautomer izomerje valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexeinek és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítményeknek az előállítására (57) KIVONAT

A találmány tárgya eljárás 3-morfolino-sydnonimin vagy sója vagy tautomer izomerje valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexeinek és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítményeknek az előállítására.

A találmány szerinti eljárással előállított zárványkomplexeket tartalmazó készítmények stabilak, injektábilisak, orálisan és lokálisan is alkalmazhatóak.

A leírás terjedelme: 6 oldal

HU 212 730 B

Atalálmány a 3-morfolino-sydnonimin (SIN 1) vagy sója vagy tautomer izomerje valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexeinek, és az azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítási eljárására vonatkozik.

A SIN 1-nek a SIN 1A (N-nitrozo-N-morfolinoamino-acetoniril) tautomer izomerje. A biológiai hatásért feltehetően a SIN 1A a felelős.

A Molsidomin (N-etoxikarbonil-3-morfolinosydnonimin, SIN 10) jól ismert, antianginás hatású szer. A gyógyászatban széles körben alkalmazzák angina kezelésére, megelőzésére, szívelégtelenségben, szívinfartkus állapotában. A Molsidomin terápiás hatása azonban főként első aktív metabolitja a 3-morfolinosydnoniminnak tulajdonítható, ami a Molsidominból enzimatikus hidrolízis, majd azt követően dekarboxiláz enzim hatására főleg a májban keletkezik. így a SIN 1 terápiás előnnyel is bír a Moslidominnal szemben, vagyis hatása gyorsabb és kifejezettebb. Hátránya azonban, hogy csak intravénás injekcióban alkalmazva hatásos.

A sydnonimin származékok rendkívül fényérzékenyek. Már aránylag rövid ideig tartó mesterséges, vagy természetes fénnyel való besugárzásra gyorsan elbomlanak, farmakológiailag inaktív, de veszélytelen bomlástermékek, mint pl. morfolin, ammónia, etanol, széndioxid keletkeznek a fotolízis során. Néhány szabadalom tárgya a sydnonimin származékok fotostabilizálása különböző adalékokkal. (206 219 számú európai szabadalmi leírás, 3 346 638 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírás). A fényérzékenység azonban mind száraz állapotban, mind oldatban könynyen kivédhető megfelelő tárolással. (Jól záródó sötét üvegben, vagy fekete papírba csomagolva.

A sydnonimin-származékokról általában elmondható, hogy érzékenyek extrém pH értékekre, gyorsan elbomlanak. Mind a kémiai, mind a metabolitikus bomlás végterméke a SIN IC (cianometilén-amino-morfolin), inaktív metabolit. A SIN 1 gyógyszerként való alkalmazásával a kémiai stabilitás problémái kerülnek előtérbe. Az anyag neutrális-vizes oldatban gyorsan bomlik, pH-ra érzékeny, csak erősen savas közegben (pH 1-2) stabil, pH 2 fölött gyorsan bomlik, a SIN IC inaktív metabolittá, ami a terápiás hatás elvesztésével jár. A SIN 1 —> SIN IC átalakulás báziskatalizált hidrolitikus bomlás eredménye, A folyamat erősen pH függő, pl. 10%-nyi bomlás (SIN IC) eléréséhez pH = 8on 53 sec., pH 6-on 15 óra, pH 4-en 67 nap, pH 1-2-n, 13 év szükséges. (Chem. Pharm. Bull. 19/6 1079, 1971.)

A SIN 1 orálisan alkalmazva nem is hatékony, pH 1-2 között feltehetően a SIN 1-nek a kedvező kémiai stabilitású, erősen ionizált formája van jelen, ami viszont nem kedvez a G1 traktusból történő felszívódásának. A gyomorból tovább haladva lúgosabb pH-η pedig a fentiek értelmében a SIN 1 gyorsan az inaktív SIN IC metabolittá alakul át. A SIN 1 alkalmazott alacsony dózisa még kedvez is ennek az átalakulásnak, mivel a hidrolitikus bomlás alacsony (gg/ml-es nagyságrendű) koncentrációban még kifejezettebb.

A SIN 1 gyógyszerként hidroklorid sója formájában van forgalomban, intravénásán alkalmazandó 2 mg hatóanyagtartalmú, 40 mg szorbitot tartalmazó liofilezett porampullában. Az ampulla tartalma 1 ml desztillált vízben feloldandó alkalmazás előtt.

Célul tűztük ki olyan új anyag előállítását, amelynél a SIN 1 —» SIN IC átalakulást már neutrális-vizes, illetve fiziológiás pH-η is gátolni lehet. A SIN 1 híg vizes oldatban, szórt fényen tárolva 1-3 nap alatt elbomlik. A bomlás az UV-spektrumból közvetlen nyomon követhető. Az abszorpciós maximum értéke fokozatosan 291 ± 1 nm-ről 278 + 1 nm értékre tolódik el az abszorbancia értékének jelentős növekedése közben, ami összhangban van az irodalomban leírtakkal: A SIN 1 λ max. értéke 291 ± 1 nm, a fajlagos abszorpciós koefficines értéke A ^l% = 520, míg a SIN IC λ max. 278 ± 1 nm, moláris abszorpciós koefficiense λ max. 2718 ± 1 nm, moláris abszorpciós koefficiense ε = 17 000, A c^%m= 1220.

Ismert, hogy a ciklodextrines komplexálás alkalmas különböző anyagok stabilizálására hővel, fénnyel, lúgos vagy savas hidrolízissel szemben. (Szejtli: Cyclodextrin Technology, Kluwer, Dordrecht, 1988., 211-217 oldal). Vizsgálataink során azt tapasztaltuk, hogy a ciklodextrinek hatékonynak bizonyultak a SIN 1 injektábilis készítményből készített, híg vizes oldatok stabilizálására.

A SIN 1 és a ciklodextrinek kölcsönhatását a következő vizsgálatsorozat bizonyította:

A SIN 1 injektábilis készítményből mintegy 10pg/ml koncentrációjú vizes oldatot készítettünk, majd az oldatokban milliliterenként 20-40 mg ciklodextrint, vagy ciklodextrin-származékokat oldottunk fel kevertetéssel. Az oldatokat szobahőmérsékleten (2022 °C) szórt fényen tároltuk, majd időközönként (naponként) az oldatok UV-spekrtumát regisztráltuk 220350 nm közti hullámhossz tartományban. Kontrollként csak a vizes oldatot, illetve a 0,05 N sósavas oldatot használtuk. A ciklodextrines oldatok pH-ját ellenőriztük annak megállapítására, hogy a ciklodextrin, illetve az alkalmazott származék nem változtatja-e számottevően a desztillált víz pH-ját. Az alkalmazott legnagyobb töménységű ciklodextrin oldatok pH-ja is ±0,2 pH egységen belül különbözött csak a desztillált víz pH-jától. Azt tapasztaltuk, hogy az UV-spektrum eltolódását a CDPS1, ionos oldható β-ciklodextrin polimer (átlag molekulatömeg 3500, βCD tartalom: 54% COO tart: 4,2%) (191 101 számú magyar szabadalmi leírás) kiemelkedően jól gátolta. 2 hét tárolás után sem tapasztaltuk a spektrum eltolódását, míg a vizes oldat hasonlóan tárolva 2-3 nap alatt gyakorlatilag SIN 1Cvé alakult.

A Dimeb (2,6-di-O-metil^-ciklodextrin) bomlást lassító hatása is kifejezett. 20 mg/ml Dimeb jelenlétében az oldat spektruma is csak ± 1 nm-en belüli eltolódást mutatott 6 nap tárolás után.

Vizsgáltuk még a TRIMEB (2,3,6-tri-O-metil^ciklodextrin), γ-CD, β-CD és hidroxipropil^-CD stabilizáló hatását is. A hatékonysági sorrend az UV spektrum eltolódásból következtetve a következő volt:

HU 212 730 Β

CDPSI » DIMEB > TRIMEB > β CD > HP β CD

Meglepő módon oldatban az ΟΗ-ρΓορίΙ-β-CD nem mutatott stabilizáló hatást, sőt azonnal és úgy bontotta a SIN 1 -et, mint a híg lúgos közeg. A különböző ciklodextrinek de kiemelten a CDPSI-nek a SIN 1 hidrolitikus bomlására gyakorolt hatásából komplex kölcsönhatásra lehet következtetni.

A fenti kísérletsorozatban a ciklodextrineket, illetve a származékokat extrém nagy feleslegben alkalmaztuk (-10 gg/ml SIN 1 vs -20 mg/ml ciklodextrin).

A kísérletsorozatot megismételtük, oly módon, hogy a CDPSI-t csak 10-szeres, illetve 20-szoros feleslegben alkalmaztuk, ami megfelel 10, illetve 5% hatóanyagtartalmú komplexben lévő SIN 1 :CDPSI tömegaránynak. A SIN 1 alacsony terápiás dózisa megengedi még az 5%nál alacsonyabb hatóanyagtartalmú komplex alkalmazását is, ami közelítőleg 1:2 SIN 1:CDPSI mólaránynak felel meg. Ilyen koncentráció tartományban az UV-spektrofotometriás mérés nem ad olyan szemléletes képet, ezért vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálattal állapítottuk meg a bomlás mértékét a következő módon:

Az oldatokból 10 μΐ-t csepegtettünk Kieselgél 60 F254 lemezre, (10 x 10 cm, Merck). Futtató elegy: ciklodextrin :etilacetát 1:1 arányban. A futtató kádat 30 percig hagytuk telítődni. A lemezre felcseppentünk a SIN IC referencia oldatból is.

A felcseppentés helyén a lemezt hideg levegő áramban fénytől védetten megszárítjuk, majd 15 cm magasságra futtattuk. A futtatás ideje alatt a futtató kádat sötét helyre tettük. Az oldószer elpárologtatása után a lemezt UV fényben 254 nm-en vizuálisan értékeltük. A SIN 1 -0,05 Rf-nél, a SIN IC -0,36 Rf-nél jelentkezik.

Minden esetben azt tapasztaltuk, hogy az CDPSI tartalmú oldatokban a SIN IC folt intenzitása szemmel láthatóan kisebb, mint a vizes oldatokban.

Mivel a SIN 1 inaktív metabolittá való alakulása erősen pH függő, a méréseket elvégeztük a gyógyszerkönyvi pH 6,4, 7,0 és 7,6-os foszfát pufferben is. Minden esetben a pufferes és a 20 mg/ml CDPSI-t tartalmazó pufferes oldatokat hasonlítottuk össze, mind UVspektrofotometriás méréssel megfelelő vizes-alkoholos hígítás után, illetve vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel vizsgálva a SIN IC bomlástermék intenzitását.

A spektrofotometriás mérés eredményeit az 1. táblázatban foglaltuk össze.

I. táblázat

A λ max. értékének változása az idő függvényében (1 mg/ml SIN 1 +20 mg/ml CDPSI)

idő (nap)	pH 6,4	λ max pH 7,0	pH 7,6
puffer	+CDPS 1	puffer	+CDPS I	puffer	+CDPS 1
készí- téskor
0	291,5	291,9	290,6	291,0	291,2	290,9
1	289,0	290,5	280,4	285,5	276,4	278,8

idő (nap)	pH 6,4	λ max pH 7,0	pH 7,6
puffer	+CDPS 1	puffer	+CDPS I	puffer	+CDPS 1
4	284,9	288,5	-	-	-	-
6	279,8	283,9	277,3	278,8	277,6	277,9

Az UV maximum hullámhossz értékének mintegy nm-nyi csökkenése (291 nm-ről —» 278 nm-re) reprezentálja a SIN 1 teljes elbomlását SIN lC-vé.

A pH 6,4 pufferben CDPSI jelenlétében még 6 nap után is a Δλ = 7 nm volt, szemben a kontroll Δλ = 12 nm értékkel. Az UV maximum reprodukálhatósága az adott mérési körülmények között ± 0,5 nm-en belül volt, így a különbség szignifikánsnak tekinthető. pH 7-es pufferben a különbség 1 nap tárolás után még mérhető, ezzel szemben pH 7,6-nál a CDPSI stabilizáló hatása már alig érvényesül.

A vizsgált oldatokban a SIN 1 :CDPSI mólaránya közelítőleg 1:2 volt, ami miniálisan szükséges oldatban a komplexáláshoz. A CDPSI-re vonatkoztatott 10-szeres mennyiségű (10 mg/ml) közelítőleg 1:1 mólarányú komplexnek megfelelő CDPSI stabilizáló hatása oldatban alig érvényesült. A bomlás mértéke vékonyréteg-kromatográfiás módszerrel vizsgálva is követhető. A 0,36 Rf értéknél jelentkező SIN IC folt intenzitása pH 6,4-es pufferben még 1 hét tárolás után is észrevehetően különbözött. pH 7 és 7,6-os pufferben 1 nap tárolás után a 0,04 Rf-nél lévő SIN 1 folt inenzitásában mutatkozott inkább szemmel látható különbség. A pH 7-es pufferben még észrevehető, pH 7,6 -osban már gyakorlatilag nem detektálható változatlan SIN 1.

Oldatfázisban a komplex disszociációs egyensúlya eltolható, ha a ciklodextrint feleslegben alkalmazzuk. Extrém nagy CDPSI felesleg (1000-, illetve 2000-szeres) alkalmazásakor az injektábilis készítmény desztillált vízben 1 hét után is csak Δλ = +1 nm spektrum eltolódást mutatott, míg a kontroll oldat gyakorlatilag elbomlott.

A bomlás mértékének kvantitatív kimérését HPLC-s módszerrel is elvégeztük.

HPLC mérési körülmények a SIN I-SIN ] C szétválasztására

Készülék: Bechman 114 M Solvent Delivery Modulé, 165 Variable Wavelength Detektor, Hewlett-Packard 3396 A integrátor.

Oszlop: Ultrasphere ODS analitikai oszlop 4,6 x 150 mm, 5 μ.

Eluens: 0,05 M Na-acetát: 700 ml acetonitril: 300 ml tetrahidrofurán: 2 ml

Áramlási sebesség: l,0ml/min

Nyomás: 120 bar

Minta térfogat: 20 μΐ

Mérési hullámhossz: 278, 290 nm

Érzékenység: 0,1 AU (abszorbancia unit)

Papírsebesség: 0,5 cm/perc

HU 212 730 Β

Retenciós idők:

L_r SIN 1: 2,9 min

L_r SIN IC: 4,2 min

Eredmények:

1. pH 6,3 foszfát pufferben készült 0,5 mg/ml SIN 1 koncentrációjú oldatokat tároltunk fénytől védve, szobahőmérsékleten. 50 mg/ml (100 x mennyiségű) CDPSI-vel képeztünk komplexet. 5 hét tárolás után kapott HPLC kromatogramokat értékeltük.

Értékelés:

Hatóanyagtart:	Kontroll’	CDPSI-komplex
SIN 1	0,016	0,17
SIN IC	0,23	0,16

* Megjegyzés: A kontroll mérés adatai desztillált vízre, nem pufferre vonatkoznak.

ACDPSI 100-szoros tömegfeleslegben (közelítőleg 10:1 mólarányban) alkalmazva jelentős mértékben gátolja a SIN I bomlását. A kapott eredmény összhangban van a VRK-s vizsgálattal.

2. A vizsgálatot elvégeztük pH 7-es foszfát pufferben is, hasonló koncentráció viszonyokat választva. (0,5 mg/ml SIN 1, 50 mg/ml CDPSI). A 4 nap tárolás után kapott kromatogramokat értékeltük.

Értékelés:

Hatóanyag mg/ml	Kontroll	CDPSI-komplex
SIN 1	0,041	0,23
SIN IC	0,125	0,064

Az oldatok pH-ja tárolás után:

Kontroll: 6,57

VDPSI: 6,2

Bizonyítottnak tekinthető, hogy a CDPSI az alkalmazott koncentrációban még pH 7-en is gátolja a SIN IC inaktív metabolittá való átalakulást.

Vizsgáltuk továbbá a SIN 1 injekció stabilitását híg vizes oldatban: A SIN 1 liofilezett porampullából 50 pg/ml koncentrációjú vizes oldatot készítettünk, majd 20 mg/ml CDPSI-t adtunk hozzá. Az oldatokat szobahőmérsékleten tároltuk, majd időközönként meghatároztuk a SIN IC bomlástermék mennyiségét.

Az ]., 4. és 11. nap után kapott kromatogramokat értékeltük.

Értékelés:

idő (nap)	kontroll	CDPSI-komplex
kiindulái	<0,1	<0,1
1 nap	0,8	0,6
4 nap	3,9	0,94
11 nap	5,6	1,8

Találmányunk tárgya tehát olyan SIN 1 ciklodextrin származék és annak előállítása, ami vizes rendszerben fiziológiás pH-η is stabil, és amelyben a

SIN IC inaktív metabolittá való átalakulást az alkalmazott ciklodextrin lelassítja.

Meglepő módon úgy találtuk, hogy a ciklodextrinekkel, különösen a CDPSI-vel komplexált SIN 1 jelentős mennyiségű SIN 1A tautomer intermediert tartalmaz a komplex előállítása után.

A SIN 1 —> SIN 1A —> SIN IC átalakulási folyamatát ciklodextrinek jelenlétében ugyancsak 0,02 M acetát pufferben pH 5,5-nél vizsgáltuk. Meglepő módon a PCD hatása volt a legkifejezettebb, több mint 7-szer több SIN ΙΑ-t találtunk PCD jelenlétében, mint a kontroliban (a SIN 1A meghatározást HPLC-n végeztük).

A találmány szerinti készítmények biológiai hatását in vitro vizsgálva azt találtuk, hogy míg a SIN 1 p.o. alkalmazva 1 mg/kg dózisban gyakorlatilag nem fejt ki hatást (kardioprotektív hatás patkányon 11%), addig a SIN-l-CDPSI kardioprotektív hatása p. o. alkalmazva, azonos hatóanyag mellett 42,2%.

A SIN 1 - CDPSI komplexnek az orális kezelés utáni kardioprotektív tesztben talált jó biológiai hatása a szilárd komplexben jelenlévő SIN 1 A-nak tulajdonítható. Az ,Λ” tautomer forma, amely meghatározó szerepet játszik a biológiai hatásban, a gyomomedvek pH-ján nem tud kialakulni, de generálható a SIN 1-ből inkubálással, alkalikus pH-η. A CDPSI komplex desztillált vízben való oldásakor jelentős mennyiségű SIN 1A mutatható ki a vizes oldatban.

Úgy tűnik, hogy a SIN 1 —> SIN 1A átalakulást a ciklodextrin elősegíti, és ugyanakkor a nagyon instabil, oxigén-érzékeny SIN 1A komplexálódással stabilizálódik, ami lassúbb SIN 1A —» SIN IC átalakulást eredményez.

A következő táblázat a különböző ciklodextrinek a

2. példa szerint előállított SIN 1 komplexek SIN 1A tartalmát mutatja, közvetlenül az előállítás után, HPLC-vel mérve. Referenciaként laktózzal, azonos módon előállított, ugyanolyan SIN 1 tartalmú fizikai keveréket használtunk.

(minta) Komplex	SIN 1A tartalom % (SIN IC ekvivalensben megadva)
SIN 1-CDPSI	1,27
SIN l-PCD	0,08
SIN 1-DIMEB	0,06
SIN l-HPPCD	0,115
SIN 1-laktóz referencia	-

A kísérletek tapasztalatai szerint tehát a ciklodextrinek komplexképzéssel katalizálják a SIN 1 gyűrűfelbontását és ezzel az ismeretlen, biológiailag aktív SIN 1A tautomer kialakulását, amelyet extrém instabilitása miatt korábban sohasem mutattak ki és állítottak elő. így a SIN 1A aktív intermediernek, „prodrog”-nak nevezhető, ciklodextrinek nélkül meg sem jelenő tautomer. A SIN 1A ciklodextrines kompenzálása az egyetlen mód arra, hogy gyógyászati alkalma4

HU 212 730 Β zásra megfelelő formában aktív SIN ΙΑ-t formulázhassuk.

Fentieknek megfelelően a találmány tárgya eljárás 3-morfolino-sydnonimin vagy sója vagy tautomer izomeqe valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott komplexe és az azt tartalmazó gyógyászati készítmény előállítására.

Ciklodextrin-származékként a találmány szerinti zárványkomplexek előnyösen ionos vízoldható ciklodextrin-polimert (CDPSI, molekulatömeg <10 000) heptakis-2,6-O-di-metil-P-ciklodextrint (Dimeb), heptakis-2,3,6-trim-O-metil-P-ciklodextrint, (Trimeb) βvagy γ-ciklodextrint tartalmaznak.

Szilárd állapotú zárványkomplex előállítására alkalmazható továbbá a hidroxipropil-p-ciklodextrin is.

A találmány szerinti zárványkomplexeket oly módon állítjuk elő, hogy a 3-morfolino-sydnonimint vagy sóját vagy tautomer izomerjét vizes közegben valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal reagáltatjuk, és kívánt esetben a komplexet az oldatból víztelenítéssel kinyerjük.

A komplexet az oldatból előnyösen liofilezéssel, porlasztva szárítással, alacsony hőmérsékleten való vákuumbepárlással, vákuumszárítással izolálhatjuk.

A SIN 1-et 1 mmól hatóanyagra számolva 140 mmól CDPSI-vei, vagy Dimeb-bel 1-500 ml desztillált vízzel közös oldatba visszük, majd a víztelenítést a már említett módon végezzük.

A CDPSI polimer mólarányát a bevitt β-ciklodextrin tartalom figyelembevételével a pCD-re számoljuk, így a 3500-as átlagos molekulatömegű kb. 50%-os PCD tartalmú polimert használva az 1:1 mólarányú komplex összetétele 8%-osnak (g/100 g), a 2:1 mólarányúé 4,5%-osnak felel meg.

A találmány szerinti eljárással előállított zárványkomplexek felhasználhatók stabil injektábilis vagy orálisan és lokálisan alkalmazható gyógyászati készítmények, illetve kombinációk előállítására oly módon, hogy a 3-morfolino-sydnonimin vagy sója vagy tautomer izomerje valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexét a szokásos gyógyászati vivő- vagy segédanyagokkal összekeverjük és gyógyászati készítménnyé alakítjuk.

A találmány részleteit az alábbiakban néhány komplex előállítási, alkalmazási és formulázási példán szemléltetjük, anélkül, hogy találmányunkat csak ezekre korlátoznánk.

1. példa

A SIN-l-CDPSI komplex előállítása liofilezéssel:

g (6,6 mmól) CDPSI-polimert feloldunk 200 ml desztillált vízben, majd az oldathoz 1,1 g SIN 1-HCl-t adunk. (5,3 mmól). Az anyagok szinte pillanatszerűen oldódnak, tiszta éles oldatot kapunk, amit azonnal lefagyasztunk és liofilezéssel víztelenítünk, ügyelve arra, hogy az egyes munkafolyamatok során a lehető legkisebb fénybehatás érje az anyagot. Célszerű pl. a lombikot fekete papírba csomagolni az oldás ideje alatt. A kapott termék nagyon könnyű, laza por, hatóanyagtartalma spektrofotometriás módszerrel meghatározva : 6,5 ± 0,5%.

Közelítőleg: 1:1 mólaránynak felel meg.

A komplexképzés tényét bizonyító vizsgálok:

A termogravimetriás (TG), a differenciál-scanning kolorimetriás (DSC) és a Thermal Evolution Analysis (TEA) vizsgálatok jellegzetes különbségeket mutattak SIN 1, a SIN 1-CDPSI komplex, illetve a SIN 1CDPSI fizikai keverék között. A SIN 1 hatóanyagból 60-110 °C között kb. 8%-nyi szervetlen anyag távozik el, lehetséges, hogy víz. Az anyag olvadás közbeni bomlása 170-180 ’C körül robbanásszerű hevességgel indul el, és igen szűk hőmérséklet intervallumban a bemérés 70%-a távozik el a rendszerből. 220-230 °C körül a bomlás lelassul, 350 °C-ig 87% tömegveszteség olvasható le. A nem komplexálódott hatóanyag azonosításához a még argon atmoszférában is exoterm entalpia változást okozó 190-200 ’C közötti DSC és a 190 °C-os TEA csúcs használható fel.

Közvetlenül a mérés előtt készített SIN 1-CDPSI fizikai keverék termikus görbéi az alapanyagok eredőjének tekinthetők. Jól szemléltetik ezt a 190-200 C közötti DSC és a 190 °C-os TEA csúcsok. A fentiektől jelentős eltérést mutatnak a komplex görbéi, nem jelentkeznek a SIN 1 éles bomlási csúcsai, ami azt jelenti, hogy a SIN 1 ténylegesen zárványkomplexet képez a CDPSI-vel.

Röntgendiffrakciós porfelvételek:

A SIN 1-CDPSI a röntgendiffrakciós vizsgálatok szerint amorf szerkezetű. A SIN 1 jellegzetes reflexiós csúcsai eltűnnek. A CDPSI amorf szerkezete ismert. A hasonló módon, de CDPSI nélkül kezelt SIN 1 kristályossági foka ugyan csökken, de teljesen amorf szerkezetbe való átmenet nem lehetséges csupán liofilezéssel. Szabad (nem komplexált) SIN 1-re jellemző enyhén kristályosságra utaló 2 Θ reflexiós csúcsok egyáltalán nem láthatók a komplex pordiagramján.

2. példa g CDPSI polimert (6,6 mmól) β-CD tart: 53%, COO' tart: 4,2%) feloldunk 200 ml desztillált vízben. 0,7 g (2,2 mmól) SIN 1 -et oldunk fel a kapott oldatban, majd az oldatot az 1. példában leírtak szerint dolgozzuk fel. A kapott termék hatóanyagtartalma: 4,5 ± 0,2% közelítőleg 1:2 mólaránynak felel meg.

3. példa

SIN 1 HCl-Dimeb komplex előállítása:

g Dimeb-et (10,3 mmól) (nedvességtartalma 2%) 100 ml desztillált vízben oldunk. Az oldathoz 1,03 g (5 mmól) SIN 1 HCI-t adunk keverés közben. A kapott éles oldatot az 1. példában leírtak szerint fénytől védetten dolgozzuk fel. A termék laza fehér por, hatóanyagtartalma 6,5 ± 0,2%, közelítőleg az 1:2 SIN 1 :Dimeb mólaránynak megfelelő.

4. példa

Perkután alkalmazásra szolgáló gél előállítása 2 g gélben 10 mg SIN 1 hatóanyagtartalommal.

A 3. példa szerint előállított SIN 1-Dimeb komp5

HU 212 730 Β lexből (hatóanyagtartalma: 6,5%) 1510 mg-ot feloldunk 20 ml desztillált vízben, az oldat perkután alkalmazható készítmény. Gél állagú készítmény előállítása érdekében a fénytől védett oldathoz 50 mg KLUCELHF-t (hidroxipropilcellulóz) adunk intenzív keverés közben. Viszkózus, nehezen keverhető oldatot kapunk, állni hagyjuk másnapig szobahőmérsékleten. Átlátszó gél képződik, aminek 2 g-ja 10 mg SIN 1 -et tartalmaz.

5. példa

SIN 1 tabletta, tablettánként 2 mg-os hatóanyagtartalommal.

g SIN 1-CDPSI komplex,

2,5% hatóanyagtartalmú mg kukoricakeményítő

128 mg tejcukor mg magnéziumsztearát

A tabletta összsúlya: 250 mg

A tablettákat önmagában ismert módon, közvetlenül préseléssel készítjük.

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. Eljárás 3-morfolino-sydnonimin vagy sója vagy tautomer izomerje valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexe előállítására, azzal jellemezve, hogy a 3-morfolinosydnonimint vagy sóját vagy tautomer izomerjét vizes közegben valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal reagáltatjuk, és kívánt esetben a komplexet az oldatból víztelenítéssel kinyerjük.

(Elsőbbsége: 1990. 06. 27.)
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy ciklodextrin-származékként ionos vízoldható-ciklodextrin-polimert (molekulatömeg <10 000); hidroxipropil^-ciklodextrint, heptakis-2,6-O-dimetil-P-ciklodextrint, heptakis-2,3,6-tri-O-metil-p-ciklodextrint, β-ciklodextrint vagy γ-ciklodextrint alkalmazunk.

(Elsőbbsége: 1990. 06. 27.)
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 3-morfolino-sydnonimin vagy sója vagy tautomer izomerje ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexét liofilezéssel, porlasztva szántással, alacsony hőmérsékleten való vákuumlepárlással, vákuumszárítással izoláljuk.

(Elsőbbsége: 1990. 06. 27.)
4. Eljárás 3-morfolino-sydnonimint vagy sóját vagy tautomer izomerjét tartalmazó gyógyászati készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerint előállított 3-morfolino-sydnonimin vagy sója vagy tautomer izomerje valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexét a szokásos gyógyászati vivő- és segédanyagokkal öszszekeverjük és gyógyászati készítménnyé alakítjuk.

(Elsőbbsége: 1990. 06. 27.)
5. Eljárás 3-morfolino-sydnonimin vagy sója valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexe előállítására, azzal jellemezve, hogy a 3-morfolino-sydnonimint vagy sóját vizes közegben valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrinszármazékkal reagáltatjuk, és kívánt esetben a komplexet az oldatból víztelenítéssel kinyerjük.

(Elsőbbsége: 1990. 03. 28.)
6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy ciklodextrin-származékként ionos vízoldhatóciklodextrin-polimert (molekulatömeg <10 000); hidroxipropil^-ciklodextrint, heptakis-2,6-O-dimetil^ciklodextrint, heptakis-2,3,6-tri-O-metil^-ciklodextrint, β-ciklodextrint vagy γ-ciklodextrint alkalmazunk.

(Elsőbbsége: 1990. 03. 28.)
7. Az 5. vagy 6. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 3-morfolino-sydnonimin vagy sója ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkozott zárványkomplexét liofilezéssel, porlasztva szárítással, alacsony hőmérsékleten való vákuumlepárlással, vákuumszárítással izoláljuk.

(Elsőbbsége: 1990. 03. 28.)
8. Eljárás 3-morfolino-sydnonimint vagy sóját tartalmazó gyógyászati készítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy az 5. igénypont szerint előállított 3morfolino-sydnonimin vagy sója valamely ciklodextrinnel vagy ciklodextrin-származékkal alkotott zárványkomplexét a szokásos gyógyászati vivő- és segédanyagokkal összekeverjük és gyógyászati készítménynyé alakítjuk.