RU2249593C2 - Пиразолбензодиазепины в качестве ингибиторов cdk2, промежуточные соединения для их получения и фармацевтическая композиция, их содержащая - Google Patents

Пиразолбензодиазепины в качестве ингибиторов cdk2, промежуточные соединения для их получения и фармацевтическая композиция, их содержащая Download PDF

Info

Publication number
RU2249593C2
RU2249593C2 RU2001130446/04A RU2001130446A RU2249593C2 RU 2249593 C2 RU2249593 C2 RU 2249593C2 RU 2001130446/04 A RU2001130446/04 A RU 2001130446/04A RU 2001130446 A RU2001130446 A RU 2001130446A RU 2249593 C2 RU2249593 C2 RU 2249593C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
benzodiazepine
chlorophenyl
nitropyrazolo
methyl
fluorophenyl
Prior art date
Application number
RU2001130446/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2001130446A (ru
Inventor
Циньи ДИН (US)
Циньи ДИН
Дзиньюнь ЛЮ (US)
Дзиньюнь ЛЮ
Винсент Стюарт МЭДИСОН (US)
Винсент Стюарт МЭДИСОН
Джакомо ПИЦЦОЛАТО (US)
Джакомо Пиццолато
Чунчэнь ВЭЙ (US)
Чунчэнь ВЭЙ
Питер Майкл ВОВКУЛИЧ (US)
Питер Майкл Вовкулич
Original Assignee
Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг filed Critical Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг
Publication of RU2001130446A publication Critical patent/RU2001130446A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2249593C2 publication Critical patent/RU2249593C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D243/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D243/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4
    • C07D243/10—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D243/14—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines
    • C07D243/16—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals
    • C07D243/18—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals substituted in position 2 by nitrogen, oxygen or sulfur atoms
    • C07D243/22—Sulfur atoms

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Abstract

Настоящее изобретение относится к новым пиразолобензодиазепинам, имеющим формулу:
Figure 00000001
где R1 означает водород, -NO2, -CN, галоид, -OR5, -COOR7, -CONR8R9, -NR10R11, -NHCOR12, -NHSO2R13; R2 и R4 каждый независимо друг от друга означает водород, галоид, -NO2, -CF3; R3 означает водород, циклоалкил, содержащий 3-8 атомов углерода, арил, представляющий собой ароматическую группу, содержащую 6-10 атомов углерода и состоящую из 1 или 2 колец, гетероарил, имеющий 5-10 атомов, 1 или 2 кольца и содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, О и S, -COOR7, -CN, алкенил, имеющий 2-6 атомов углерода, -CONR8R9, или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода, который необязательно замещен группой OR9, F или вышеуказанным арилом; R5 означает алкил, имеющий 1-6 атомов углерода; R7 означает водород или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода; R8 и R9 каждый независимо друг от друга означает водород или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода, который необязательно замещен гидроксигруппой или NH2; альтернативно R8 и R9 могут образовать морфолиногруппу; R10, R11 и R12 каждый независимо друг от друга означает водород или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода; R13 означает алкил, имеющий 1-6 атомов углерода, который необязательно замещен галоидом или -NR14R15; R14 и R15 каждый независимо друг от друга означает водород или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода, который необязательно замещен галоидом, или альтернативно -NR14R15 означает морфолиногруппу; или фармацевтически приемлемым солям упомянутых выше соединений. Кроме того, изобретение относится к определенным производным пиразолобензодиазепина, промежуточным тиолактамам для получения соединений формулы (I) и фармацевтической композиции на их основе. Соединения согласно изобретению и фармацевтическая композиция их содержащая ингибируют циклинзависимые киназы CDK2. Они являются антипролиферативными агентами, применяемыми в лечении или контроле нарушений клеточной пролиферации, в частности опухолей грудной железы, ободочной кишки, легкого и предстательной железы. 5 н. и 15 з.п. ф-лы, 16 табл.

Description

Настоящее изобретение относится к новым пиразолбензодиазепинам, обладающим способностью ингибировать циклинзависимые киназы (CDK), прежде всего CDK2. Эти соединения и их фармацевтически приемлемые соли, а также пролекарства указанных соединений представляют собой антипролиферативные агенты, которые могут применяться для лечения или приостановления развития болезней, связанных с пролиферацией клеток, прежде всего рака. Изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к способам лечения и/или предупреждения рака, прежде всего для лечения или приостановления развития солидных опухолей. Предпочтительно соединения по изобретению могут применяться для лечения или приостановления развития опухолей грудной железы, ободочной кишки, легкого или предстательной железы. Изобретение относится также к промежуточным продуктам, которые могут применяться для получения указанных выше антипролиферативных агентов.
Неконтролируемая пролиферация клеток является отличительным признаком рака. Клетки раковых опухолей обычно характеризуются определенной формой нарушения генов, которые прямо или косвенно регулируют цикл клеточного деления.
Циклинзависимые киназы (CDK) представляют собой ферменты, которые имеют решающее значение для контроля клеточного цикла. Эти ферменты регулируют переходы между различными фазами клеточного цикла, например переход от фазы G1 к фазе S (период активного синтеза ДНК) или переход от фазы G2 к фазе М, при которой происходит активный митоз и деление клеток.
CDK состоят из каталитической субъединицы CDK и регуляторной циклиновой субъединицы. Циклиновая субъединица является наиболее важным регулятором активности CDK, при этом каждая CDK взаимодействует с определенным поднабором циклинов: например, с циклином A (CDK1, CDK2). Различные пары киназа/циклин регулируют прохождение через определенные стадии клеточного цикла.
Нарушения системы контроля клеточного цикла приводят к неконтролируемому росту раковых клеток. Имеется обширная литература, посвященная применению соединений, обладающих способностью ингибировать CDK, в качестве антипролиферативных терапевтических агентов.
Настоящее изобретение относится к пиразолбензодиазепинам, обладающим способностью ингибировать активность одной или нескольких CDK, прежде всего CDK2. Такие соединения могут применяться для лечения рака, прежде всего твердых опухолей. В частности, соединения по настоящему изобретению предпочтительно могут применяться для лечения или приостановления развития опухолей грудной железы, ободочной кишки, легкого и предстательной железы. Изобретение относится также к промежуточным соединениям, которые могут применяться при получении вышеуказанных пиразолбензодиазепинов.
Соединения по настоящему изобретению имеют формулу I, приведенную ниже
Figure 00000002
где
R1 означает водород, -NO2, -CN, галоид, -OR5, -R6OR7, -COOR7, -CONR8R9, -NR10R11, -NHCOR12, -NHSO2R13 или линейный (низш.)алкил, который необязательно замещен гидроксигруппой и/или галоидом;
R2 и R4 каждый независимо друг от друга означает водород, галоид, -NO2, -СF3 или линейный (низш.)алкил;
R3 означает водород, циклоалкил, арил, гетероциклил, гетероарил, -COOR7, -CN, алкенил, -CONR8R9, алкинил или (низш.)алкил, который необязательно замещен гидроксигруппой, OR9, F и/или арилом;
R5 означает (низш.)алкил, который необязательно замещен галоидом;
R6 означает (низш.)алкил;
R7 означает водород или (низш.)алкил;
R8 и R9 каждый независимо друг от друга означает водород или (низш.)алкил, которые необязательно замещены гидроксигруппой и/или -NH2; альтернативно R8 и R9 могут образовать пяти- или шестичленный гетероцикл, который необязательно замещен гидроксигруппой, -NH2 и/или (низш.)алкилом;
R10, R11 и R12 каждый независимо друг от друга означает водород или (низш. )алкил;
R13 означает (низш.)алкил, который необязательно замещен галоидом и/или -NR14R15; и
R14 и R15 каждый независимо друг от друга означает водород или (низш.)алкил, который необязательно замещен галоидом, или альтернативно -NR14R15 означает гетероциклил.
Кроме того, изобретение относится к пролекарствам и фармацевтически активным метаболитам соединений формулы I и к фармацевтически приемлемым солям упомянутых выше соединений.
Кроме того, настоящее изобретение относится к применению соединений формулы I или пролекарств и фармацевтически активных метаболитов соединений формулы I и фармацевтически приемлемых солей упомянутых выше соединений в качестве медикаментов; и к фармацевтическим композициям, включающим фармацевтически эффективное количество одного или нескольких вышеописанных соединений или фармацевтически приемлемую соль пролекарства и фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель.
Настоящее изобретение направлено также на применение соединений формулы I, пролекарств или фармацевтически активных метаболитов соединений формулы I или фармацевтически приемлемых солей упомянутых выше соединений в производстве препарата для лечения солидных опухолей, в частности опухолей грудной железы, ободочной кишки, легкого и предстательной железы, более конкретно опухолей грудной железы и ободочной кишки.
В контексте настоящего изобретения следующие термины будут иметь следующие значения.
Термин “арил” означает ароматическую группу, содержащую 6-10 атомов углерода и состоящую из 1 или 2 колец. Примеры арильных групп включают фенил и 1- или 2-нафтил.
Термин “алкенил” означает линейный или разветвленный замещенный или незамещенный алифатический ненасыщенный углеводород, имеющий 2-6, предпочтительно 2-4, атомов углерода и содержащий двойные связи. Типичные алкенильные группы включают этиленовую, пропиленовую, изопропиленовую, бутиленовую и тому подобное. Предпочтительные алкенильные группы являются линейными.
Термин “алкинил” означает линейный или разветвленный замещенный или незамещенный алифатический ненасыщенный углеводород, имеющий 2-6, предпочтительно 2-4 атомов углерода и содержащий тройные связи. Типичные алкинильные группы включают ацетиленовую группу и тому подобное. Предпочтительные алкинильные группы являются линейными.
Термин “циклоалкил” означает неароматическую, частично или полностью насыщенную циклическую алифатическую углеводородную группу, содержащую 3-8 атомов. Примеры циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.
Термин “эффективное количество” означает количество по меньшей мере одного соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, пролекарства или метаболита, которое значительно подавляет пролиферацию опухолевых клеток, включая линии человеческих опухолевых клеток.
Термин “галоид” означает фтор, хлор, бром или йод. Предпочтительными галоидами являются фтор и хлор.
Термин “гетероарильные” группы означает ароматические группы, имеющие 5-10 атомов, один или 2 кольца и содержащие один или несколько гетероатомов. Примерами гетероарильных групп являются 2-, 3- или 4-пиридил, тетразолил, оксадиазолил, пиразинил, хинолил, пирролил и имидазолил.
Термин “гетероатом” означает атом, выбранный из N, О и S.
Термин “гетероциклил” означает 3-10-членную неароматическую, частично или полностью насыщенную углеводородную группу, такую как тетрагидрохинолил, которая содержит одно или два кольца и по меньшей мере один гетероатом.
Термин “IC50” относится к концентрации конкретного пиразолобензодиазепина, необходимой для ингибирования 50% специфической измеряемой активности. Величина IС50 может быть измерена, среди прочего, как описано в примере 4 ниже.
Термин “(низш.)алкил” означает линейный или разветвленный, замещенный или незамещенный, насыщенный алифатический углеводород, содержащий 1-6, предпочтительно 1-4, атомов углерода. Типичные (низш.)алкильные группы включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, трет.-бутил, 2-бутил, пентил, гексил и тому подобное.
Термин “фармацевтически приемлемая соль” относится к обычным кислотно-аддитивным солям или к солям присоединения оснований, сохраняющим биологическую эффективность и свойства соединений формулы I и полученным из приемлемых нетоксичных органических или неорганических кислот либо органических или неорганических оснований. Пример кислотно-аддитивных солей включает соли, полученные из неорганических кислот, таких как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, йодистоводородная кислота, серная кислота, сульфаминовая кислота, фосфорная кислота и азотная кислота, и соли, полученные из органических кислот, таких как n-толуолсульфокислота, салициловая кислота, метансульфокислота, щавелевая кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, яблочная кислота, молочная кислота, фумаровая кислота и тому подобное. Пример солей присоединения оснований включает соли, полученные из гидроксидов аммония, калия, натрия и четвертичного аммония, такие как, например, гидроксид тетраметиламмония.
Термин “фармацевтически приемлемый”, такой как фармацевтически приемлемые носитель, наполнитель, пролекарство и т.д., означает фармакологически приемлемые и фактически нетоксичные для субъекта, которому вводится отдельное соединение.
Термин “фармацевтически активный метаболит” означает продукт метаболизма соединения формулы I, который является фармацевтически приемлемым и эффективным.
Термин “пролекарство” относится к соединению, которое в физиологических условиях или путем сольволиза может превращаться в любое из соединений формулы I или в фармацевтически приемлемую соль соединения формулы I. Пролекарство может быть неактивным при введении субъекту, но in vivo превращаться в активное соединение формулы I.
Термин “замещенный”, как в замещенном алкиле, означает, что замещение может проходить по одному или нескольким положениям и что заместители в каждом положении замещения являются выбранными независимо друг от друга из определенных вариантов, если не указано иначе.
Соединения
В одном варианте воплощения настоящее изобретение направлено на соединения, имеющие формулу:
Figure 00000003
и пролекарства и фармацевтически активные метаболиты соединений формулы I и фармацевтически приемлемые соли упомянутых выше соединений, где R1 и R15 имеют описанные выше значения.
В предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R1 означает водород, -NO2, -CN, -CONH2, галоид или незамещенный (низш.)алкил. Предпочтительными (низш.)алкилами являются метил и этил. Более предпочтительно R1 означает -NO2, -CN или -CONH2. Предпочтительно R1 находится в положении 7 или 8.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R2 находится в положении 2' и означает водород или галоид.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R3 означает незамещенный (низш.)алкил, гидрокси(низш.)алкил, циклоалкил, гетероциклил или гетероарил. Предпочтительными (низш.)алкильными группами являются метил, этил и гидроксиметил. Предпочтительными циклоалкильными группами являются незамещенные группы С3-C5.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R4 находится в положении 4' и означает водород или галоид, наиболее предпочтительно R4 означает водород.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R5 и R6 означают независимо друг от друга метил, этил, каждый из которых необязательно может быть замещен галоидом. Более предпочтительно R5 означает трифторметил.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R7 означает водород, метил или этил.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R8 и R9 означает каждый независимо друг от друга водород, метил, этил или гидроксиэтил. Когда R8 и R9 образуют гетероцикл, предпочтительными гетероциклическими группами являются 6-членные незамещенные группы, которые наиболее предпочтительно включают два гетероатома. Наиболее предпочтительные гетероатомы выбирают из О и N.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R10, R11 и R12 означает каждый независимо друг от друга водород, метил или этил.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R13 означает (низш.)алкил, который необязательно может быть замещен водородом, наиболее предпочтительно R13 означает метил, этил или трифторметил.
В другом предпочтительном варианте воплощения соединений формулы I R14 и R15 означает каждый независимо друг от друга водород, метил, этил или гетероцикл. Предпочтительными гетероциклами являются 3-7-членные кольца, которые включают по меньшей мере один азот.
Следующие промежуточные производные являются также примерами дополнительных предпочтительных соединений по настоящему изобретению:
Figure 00000004
где
R1, R2 и R4 имеют приведенные выше значения;
Figure 00000005
Figure 00000006
и
Figure 00000007
где в каждой из непосредственно предшествующих формул каждый из R1, R2, R3 и R4 имеет значения, приведенные в описании ранее. Эти промежуточные производные применимы в синтезе соединений формулы I.
Соединения, раскрываемые в описании и защищаемые вышеприведенными формулами, могут обладать таутомерией или структурной изомерией. Предполагается, что изобретение охватывает любую таутомерную или изомерную структурную форму этих соединений или смеси этих форм и не ограничено какой-либо одной таутомерной или структурной изомерной формой, использованной выше при написании формул.
Синтез соединений формулы I
Соединения по изобретению могут быть получены способами, известными в этой области. Соответствующие способы синтеза этих соединений приведены в примерах. Как правило, эти соединения можно получать в соответствии с приведенными ниже схемами.
Схема 1
R3=H
Figure 00000008
а) реагент Лоуссона (известная реакция для большинства замещений);
б) реакция с Me2N-CH(OEt)2;
в) реакция с гидразином.
Соединение 1 или является коммерчески доступным, или его синтезируют способами, известными специалистам.
Схема 2
R3 не означает H
Figure 00000009
а) реагент Лоуссона (известная реакция для большинства замещений);
г) реакция с R3-CHO в присутствии основания, предпочтительно пиперидина;
в) реакция с гидразином;
д) окисление дигидропиразола в пиразол (в присутствии воздуха в ДМСО, от КТ до 150° С или в присутствии воздуха и основания (Cs2CO3/ДMФ).
Схема 3
Альтернативная схема, когда R3 не означает Н
Figure 00000010
а) реагент Лоуссона (известная реакция для большинства замещений);
е) реакция с R3-CHO в присутствии основания, предпочтительно диазабициклоундекана или 2,2,6,6-тетраметилпиперидина;
ж) дегидратация путем обработки слабой кислотой (пиридиниевой солью n-толуолсульфокислоты, пиридиниевой солью уксусной кислоты и т.д.);
в) реакция с гидразином;
д) окисление дигидропиразола в пиразол (в присутствии воздуха в ДМСО, от КТ до 150° С или в присутствии воздуха и основания (Сs2СО3/ДМФ).
Схема 4
Трансформация функциональных групп R1 или R3
Figure 00000011
где R1' может иметь любое из приведенных выше значений для R1, и подобным образом R3' может иметь любое из приведенных выше значений для R3.
Некоторые замещения могут быть осуществлены химической модификацией имеющихся функциональных групп с использованием известных способов, как представлено выше на схеме 4. Например, если требуемый R1=NH2, такое замещение может быть осуществлено восстановлением соответствующей нитрогруппы. Аналогично, если требуемый R1=NHR' (где R' означает -COR12, -SO2R13 или -R10R11), это замещение может быть осуществлено взаимодействием соответствующего соединения, в котором R1=NH2, с хлорангидридом или ангидридом кислоты. Если требуемый R1=CONRR'' (где R означает водород или (низш.)алкил и R'' означает (низш.)алкил), это замещение может быть осуществлено взаимодействием соответствующего соединения, в котором R1 означает йод, с моноксидом углерода и первичным или вторичным амином в присутствии палладиевого катализатора.
Кроме того, если R3 в исходном веществе означает -CO2Et, может быть использована стандартная химическая модификация для получения соединений, содержащих следующие соответствующие группы R3:
-СН2OН (восстановление); -СНО (частичное восстановление); -CH2NMe2 (восстановительное аминирование альдегида); -CH2OMe (алкилирование спирта); -СН=СН2 (олефинирование альдегида); -CONRR'' (где R означает Н или (низш.)алкил и R'' означает Н или (низш.)алкил, аминолиз с соответствующим амином HNRR'', в котором R означает Н или (низш.)алкил и R'' означает Н или (низш.)алкил); -CONHNHR (где R означает Н, (низш.)алкил или арил, гидразинолиз - реакция с гидразином); -CN (дегидратация амида -CONH2).
В предшествующих схемах соединение 1 или является коммерчески доступным, например от фирмы Sigma, или может быть легко синтезировано способами, известными специалистам. Так, соединение 2 получают из соответствующего лактама (соединение 1) по способу Sternbach et al., J. Org. Chem., 29:231 (1964) или взаимодействием с реагентом Лоуссона.
Композиции/препаративные формы
В альтернативном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, включающим по крайней мере одно соединение формулы I или его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль соединения формулы I или пролекарство такого соединения.
Такие фармацевтические композиции могут вводиться перорально, например в форме таблеток, филмтаблеток, драже, желатиновых капсул с твердым или мягким покрытием, растворов, эмульсий или суспензий. Они могут вводиться также ректально, например в форме суппозиториев, или парентерально, например в форме растворов для инъекций.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, включающие соединения формулы I, пролекарства таких соединений или их соли, могут быть получены известным в данной области методом, например с помощью общепринятых процессов смешения, калсулирования, растворения, гранулирования, эмульгирования, включения, дражирования или лиофилизации. Такие фармацевтические композиции могут быть приготовлены с использованием терапевтически инертных неорганических или органических носителей. В качестве таких носителей для таблеток, филмтаблеток, драже и желатиновых капсул с твердым покрытием могут применяться лактоза, кукурузный крахмал или его производные, тальк, стеариновая кислота или ее соли. Приемлемые носители для желатиновых капсул с мягким покрытием включают растительные масла, воски и жиры. В зависимости от природы действующего вещества в случае желатиновых капсул с мягким покрытием обычно не требуется никакого носителя. Пригодными носителями для изготовления растворов и сиропов являются вода, полиолы, сахароза, инвертный сахар и глюкоза. Пригодными носителями для растворов для инъекций являются вода, спирты, полиолы, глицерин, растительные масла, фосфолипиды и поверхностно-активные вещества. Пригодными носителями для суппозиториев являются природные или гидрогенизированные масла, воски, жиры и полужидкие полиолы.
Фармацевтические композиции могут содержать также консерванты, солюбилизирующие агенты, стабилизаторы, смачивающие агенты, эмульгаторы, подслащивающие вещества, красители, корригенты, соли для изменения осмотического давления, буферы, агенты для нанесения покрытия или антиоксиданты. Они могут содержать также другие обладающие терапевтической активностью вещества, включая дополнительные действующие вещества, отличные от соединений формулы I.
Дозы
Как было указано выше, соединения формулы I, их пролекарства и их соли, а также композиции, содержащие эти соединения, могут применяться для лечения или приостановления развития болезней, связанных с пролиферацией клеток, прежде всего онкологических болезней. Эти соединения и композиции, содержащие эти соединения, предпочтительно могут применяться для лечения или приостановления развития твердых опухолей, таких как, например, опухоли молочной железы и ободочной кишки.
В контексте настоящего изобретения понятие “терапевтически эффективное количество соединения” обозначает количество соединения, которое является эффективным в отношении предупреждения, облегчения или улучшения симптомов болезни или увеличивает выживаемость пациента, подвергающегося лечению. Определение терапевтически эффективного количества находится в компетенции специалиста в данной области.
Терапевтически эффективное количество или доза соединения формулы I может варьироваться в широких пределах, и они должны быть выбраны в соответствии с индивидуальными требованиями в каждом отдельном случае. В целом для перорального или парентерального введения взрослым людям весом приблизительно 70 кг может использоваться суточная доза от приблизительно 10 мг до приблизительно 10000 мг, предпочтительно от приблизительно 200 мг до приблизительно 1000 мг, хотя верхний предел может быть превышен при соответствующих показаниях. Суточная доза может вводиться в виде одной дозы или в виде разделенных доз, или в случае парентерального введения она может вводиться путем непрерывной инфузии.
Пример 1: пиразолы, полученные в соответствии со схемой 1
Этап а: реакция лактама (соединения 1) с реагентом Лоуссона с образованием тиолактама (соединения 2)
1.1 Соединение A1: R1=H, R2=F, R4=H
К раствору 5,085 г (20 ммолей) лактама 1 (где R1=H, R2=F и R4=H) в 50 мл диметоксиэтана при 75° С прибавляли 8,9 г (22 ммоля) реагента Лоуссона (2,4-бис(4-метоксифенил)-1,3-дитиа-2,4-дифосфетан-2,4-дисульфида; Pedersen B.S., Schheibye S., Nilsson N.H., Lawesson S.-O., Bull. Soc. Chim. Belg., 1978, 87:223). Смесь перемешивали в течение 30 минут, охлаждали и затем выливали в 10% водный раствор бикарбоната натрия. Водную смесь экстрагировали хлористым метиленом, экстракты промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток перекристаллизовали из смеси хлористый метилен-метанол, получая 4,0 г соединения A1 (тиолактам 2).
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,56 (s, 1Н, NH), 7,10-7,65 (m, 8H), 4,59 (s, 2H).
1.2 Соединение А2: R1 =F, R2=R4=H
Соединение А2 получали тем же способом, который описан выше для соединения A1. 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,50 (s, 1H, NH), 7,37-7,56 (m, 7H), 7,06 (dd, J=3,9 Гц, 1H), 4,60 (уш. s, 2H).
Этап б: реакция тиолактама 2 с ацеталем ДМФ с образованием диметиламинометиленового производного 3
1.3 Соединение A3: R1=Сl, R2=Cl, R4=H
Раствор 0,999 г (3,1 ммоля) тиолактама 2 (R1=Cl, R2=Cl, R4=H), 10 мл безводного тетрагидрофурана и 10 мл диэтилацеталя диметилформамида перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении, получая остаток красно-оранжевого цвета. Кристаллизация из смеси гексан-этилацетат дала 0,716 г соединения A3 (производное 3, где R1=Cl, R2=Cl, R4=H) в виде красного твердого вещества, tпл 196-198° C.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 10,21 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,43-7,56 (m, 4H), 7,32 (dd, J=3,9 Гц, 1H), 7,00 (d, J=9 Гц, 1H), 6,60 (d, J=3 Гц, 1Н), 3,27 (s, 6H).
Этап в: превращение диметиламинометиленового производного 3 в пиразол 4
1.4 Соединение А4: R1=Cl, R2=Cl, R3=R4=H
5-(2-хлорфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
К раствору 0,265 г (0,71 ммоля) в 10 мл безводного метиленхлорида прибавляли примерно 39,8 мкл (1,27 ммоля) безводного гидразина. Смесь перемешивали в атмосфере аргона в течение 85 минут, затем растворяли в метиленхлориде и промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая 0,219 г соединения А4 (пиразол 4, где R1=Cl, R2=Cl, R3=R4=H) в виде желтовато-коричневого твердого вещества. Аналитический образец фильтровали через невысокий слой силикагеля, элюируя этилацетатом, и затем перекристаллизовали из этилацетата, tпл>300° C.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 12,07 (s, 1H, NH), 8,03 (s, 1H, NH), 7,58 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 4H), 7,17 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 6,79 (d, J=9 Гц, 1Н), 6,25 (s, 1H).
Следующие пиразолы (соединение 4) получали в соответствии со схемой 1 и как описано выше в этапах а-в.
1.5 Соединение А5: R1=NO2, R2=Cl, R3=H, R4=H
5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
 1Н-ЯМР (AMCO-d6, 300 МГц): 9,16 (s, 1H, NH), 7,90 (dd, J=2,8 Гц, 1H), 7,4-7,6 (m, 5Н), 7,08 (d, J=2 Гц, 1H), 6,75 (d, J=8 Гц, 1Н).
1.6 Соединение А6: R1=Cl, R2=H, R3=H, R4=H
5-фенил-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 200 МГц): 7,97 (s, 1H, NH), 7,62 (s, 1 H), 7,35-7,60 (m, 5H), 7,29 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 6,93 (d, J=9 Гц, 1H), 6,60 (d, J=2 Гц, 1H).
1.7 Соединение А7: R1=Cl, R2=F, R3=H, R4=H
5-(2-фторфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 400 МГц): 12,10 (s, 1H, NH), 8,01 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,5 (m, 2H), 7,18-7,33 (m, 3H), 6,83 (d, J=8 Гц, 1H), 6,47 (s, 1H).
1.8 Соединение А8: R1=Cl, R2=Cl, R3=H, R4=Cl
5-(2,4-дихлорфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 400 МГц): 12,09 (s, 1H, NH), 8,05 (s, 1H, NH), 7,68 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,52 (d, J=10 Гц, 1H), 7,48 (d, J=10 Гц, 1H), 7,19 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 6,78 (d, J=9 Гц, 1H), 6,27 (d, J=2 Гц, 1H).
1.9 Соединение А9: R1=H, R2=H, R3=H, R4=H
5-фенилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 12,04 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,32-7,47 (m, 5H), 7,22 (dt, J=2, 8 Гц, 1H), 6,92 (d, J=8 Гц, 1H), 6,76 (d, J=8 Гц, 1H), 6,67 (dd, J=1, 8 Гц, 1H).
1.10 Соединение А10: R1=H, R2=F, R3=H, R4=H
5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 200 МГц): 12.00 (s, 1H, NH), 7,79 (s, 1H), 7,32-7,56 (m, 3H), 7,00-7,32 (m, 3H), 6,78 (d, J=6 Гц. 1H), 6,48 (d, J=6 Гц, 1H).
1.11 Соединение A11: R1=F, R2=F, R3=H, R4=H
5-(2-фторфенил)-7-фторпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1H-ЯМР (ДМСО-d6, 200 МГц): 12,10 (s, 1H, NH), 7,85 (s, 1H), 7,4-7,7 (m, 3H), 7,18-7,39 (m, 2H), 7,05 (m, 1H), 6,86 (m, 1H), 6,26 (уш. d, J=8 Гц, 1H).
1.12 Соединение А12: R1=СН3О, R2=Cl, R3=H, R4=H
5-(2-хлорфенил)-7-метоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 200 МГц): 12,00 (s, 1H, NH), 7,35-7,60 (m, 5H), 6,81 (d, J=8 Гц, 1H), 6,75 (d, J=8 Гц, 1H), 5,89 (s, 1H), 3,46 (s, 3H).
1.13 Соединение А13: R1=NO2, R2=F, R3=H, R4=H
5-(2-фторфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 12,14 (s, 1H, NH), 9,06 (s, 1H, NH), 7,89 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 6,76 (d, J=9 Гц, 1Н).
1.14 Соединение А14: R1=СН3SO2, R2=H, R3=H, R4=H
5-фенил-7-метансульфопилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 12,18 (s, 1H, NH), 8,54 (s, 1 H, NH), 7,72 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,43 (m, 5H), 7,14 (d, J=2 Гц, 1Н), 7,06 (d, J=9 Гц, 1H), 3,01 (s, 3H).
1.15 Соединение А15: R1=CN, R2=F, R3=H, R4=H
5-(2-фторфенил)-7-цианопиразоло[3,3][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 12,16 (s, 1H, NH), 8,63 (s, 1H, NH), 7,59 (s, 1H), 7,4-7,58 (m, 3H), 7,2-7,37 (m, 2H), 6,82 (dd, J=2,8 Гц, 1Н), 6,78 (s, 1H).
1.16 Соединение А16: R1=NO2, R2=H, R3=H, R4=H
5-фенил-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 12,19 (s, 1H, NH), 8,96 (s, 1H, NH), 8,03 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,35-7,5 (m, 6Н), 6,94 (d, J=9 Гц, 1Н).
1.17 Соединение А17: R1=NO2, R2=CF3, R3=H, R4=H
5-(2-трифторметилфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 12,12 (s, 1H, NH), 9,18 (s, 1H, NH), 7,45-7,9 (m, 6H), 7,00 (s, 1H), 6,71 (d, J=9 Гц, 1Н).
1.18 Соединение А18: R1=CO2CH3, R2=H, R3=H, R4=H
5-фенил-7-карбометоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 12,15 (s, 1H, NH), 8,42 (s, 1H, NH), 7,78 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,35-7,45 (m, 5H), 7,29 (d, J=2 Гц, 1H), 6,93 (d, J=9 Гц, 1H), 3,66 (s, 3H).
1.19 Соединение А19: R1=I, R2=F, R3=H, R4=H
5-(2-фторфенил)-7-иодпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1H-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 12,09 (s, 1H, NH), 7,99 (s, 1H, NH), 7,58 (s, 1H), 7,4-7,55 (m, 3H), 7,19-7,35 (m, 2H), 6,76 (s, 1H), 6,62 (d, J=8 Гц, 1Н).
1.20 Соединение А20: R1=CO2Et, R2=F, R3=H, R4=H
5-(2-фторфенил)-7-карбоэтоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,08 (s, 1H, NH), 8,50 (s, 1H, NH), 7,62 (d, J=8 Гц, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,18-7,35 (m, 2H), 7,14 (s, 1H), 6,80 (d, J=8 Гц, 1Н), 4,15 (q, J=6 Гц, 2Н), 1,17 (t, J=6 Гц, 3Н).
1.21 Соединение A21: R1=H, R2=Cl, R3=H, R4=H
5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 11,95 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,38-7,48 (m, 4H), 7,09 (t, J=8 Гц, 1H), 6,78 (t, J=8 Гц, 1H), 6,61 (t, J=8 Гц, 1H), 6,34 (d, J=8 Гц, 1H).
Пример 2: превращение тиолактама 2 в замещенный пиразол 7 в соответствии со схемами 2 и 3
2.1 Соединение Б1: R1=NO2, R2=Cl, R3=2-пирролил, R4=H (схема 2)
3-(2-пирролил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
Смесь 0.995 г (3 ммоля) тиолактама 2 (R1=NO2, R2=Cl, R3=2-пирролил, R4=H), 0,571 г (6 ммолей) пиррол-2-карбоксальдегида, 0,383 г (4,5 ммоля) пиперидина (Aldrich) и 10 мл диметоксиэтана перемешивали под аргоном в течение 2 часов. Смесь растворяли в этилацетате и промывали последовательно 0,1 М серной кислотой, водой, затем насыщенным раствором соли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Соответствующий олефин 5 выделяли хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан/этилацетат (1:1)) в виде красного твердого вещества (0,309 г) и непосредственно использовали на следующем этапе. Олефин 5 (0,309 г) растворяли в 6 мл диметилсульфоксида и вводили в реакцию с 72,5 мг (2,2 ммоля) гидразина в атмосфере аргона. Через 20 мин смесь растворяли в этилацетате и промывали последовательно водой и насыщенным раствором соли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая смесь дигидропиразолов 6 (0,296 г). Смесь соединений 6 растворяли в диметилсульфоксиде и нагревали в присутствии воздуха при 130°С в течение 2 часов, охлаждали, растворяли в этилацетате и промывали последовательно водой и затем насыщенным раствором соли. Экстракт сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Продукт 7 (соединение Б1) очищали хроматографией на силикагеле (элюирование смесью гексан-этилацетат, 25/75).
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,12 (s, 1Н, NH), 10,39 (s, 1H, NH), 9,07 (s, 1H, NH), 7,96 (dd, J=2, 8 Гц, 1H), 7,45-7,65 (m, 4H), 7,15 (d, J=2 Гц, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,79 (d, J=8 Гц, 1H), 6,48 (s, 1H), 6,12 (d, J=2 Гц, 1H).
2.2 Соединение Б2: R1=NO2, R2=Cl, R3=CO2Et, R4=H (схема 3)
3-карбоэтокси-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
Смесь 5,0 г (15,1 ммоля) тиолактама 2 (R1=NO2, R2=Cl), 6 мл 50% раствора этилового эфира глиоксалевой кислоты в толуоле, 4,5 мл (31 ммоль) диазабициклоундекана и 100 мл диметоксиэтана перемешивали в атмосфере аргона в течение 30 минут при комнатной температуре. Смесь подкисляли 0,005 М серной кислотой, экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Альдольный аддукт 8 получали в виде смеси диастереомеров (5,6 г) с помощью хроматографии на силикагеле (элюирование смесью гексан-этилацетат, 60/40).
Смесь 4,7 г (10,8 ммоля) альдольного аддукта 8, полученного выше, 100 мл пиридина и 6,9 мл (54,4 ммоля) триметилхлорсилана перемешивали в течение 10 минут при комнатной температуре и затем нагревали при 120° С в течение 1,5 часа. Смесь охлаждали, растворяли в 1 л этилацетата и промывали последовательно водой и насыщенным раствором соли, органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. После фильтрации и упаривания летучих веществ при пониженном давлении неочищенный остаток фильтровали через слой силикагеля, элюируя смесью гексан-этилацетат (1:1), получали 4,3 г олефина 5.
Раствор 4,3 г олефина 5, полученного выше, в 210 мл дихлорметана перемешивали с 0,68 мл (21,6 ммоля) безводного гидразина в течение 30 минут. Затем смесь распределяли между водой и дихлорметаном, водную фазу экстрагировали дихлорметаном. Объединенные экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при уменьшенном давлении. Остаток, который содержал смесь дигидропиразолов 6, растворяли в 50 мл диметилсульфоксида и нагревали при 130° С в присутствии воздуха в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали, растворяли в этилацетате и промывали водой. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Продукт выделяли хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гексан-этилацетат (40/60), получали 0,580 г соединения Б2 (R1=NO2, R2=Cl, R3=CO2Et2, R4=H).
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 13,33 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,02 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 7,46-7,55 (m, 4H), 7,18 (d, J=2 Гц, 1H), 6,89 (d, J=9 Гц, 1 Н), 4,25 (q, J=7 Гц, 2Н), 1,27 (t, J=7 Гц, 3Н).
Следующие пиразолы (соединение 7) получены в соответствии со схемой 2 или 3, как описано выше.
2.3 Соединение Б3: R1=NO2, R2=Cl, R3=CH3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,85 (s, 1H, NH), 9,04 (s, 1H, NH), 7,83 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,39-7,52 (m, 4H), 7,05 (d, J=2 Гц, 1Н), 6,69 (d, J=9 Гц, 1Н), 1,98 (s, 3H).
2.4 Соединение Б4: R1=NO2, R2=Cl, R3=СН2СН3, R4=H (схема 2)
3-этил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,91 (s, 1H, NH), 9,05 (s, 1H, NH), 7,85 (dd, J=2,8 Гц, 1H), 7,35-7,58 (m, 4H), 7,04 (d, J=2 Гц, 1H), 6,71 (d, J=8 Гц, 1H), 2,41 (q, J=7 Гц, 2Н), 1,06 (t, J=7 Гц, 3Н).
2.5 Соединение Б5: R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2CH2Ph, R4=H (схема 2)
3-(2-фенилэтил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 200 МГц): 11,95 (s, 1H, NH), 9,05 (s, 1H, NH), 7,82 (dd, J=2,8 Гц, 1H), 7,05-7,60 (m, 10Н), 6,70 (d, J=8 Гц, 1H), 2,82 (m, 2Н), 2,64 (m, 2H).
2.6 Соединение Б6: R2=NO2, R2=Cl, R3=i-Pr, R4=H (схема 2)
3-(1-метилэтил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,90 (s, 1H, NH), 9,02 (s, 1H, NH), 7,84 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 7,35-7,55 (m, 4H), 7,04 (d, J=2 Гц, 1H), 6,74 (d, J=9 Гц, 1H), 2,86 (sept, J=9 Гц, 1H), 1,14 (d, J=9 Гц, 6Н).
2.7 Соединение Б7: R1=CN, R2=F, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбонитрил.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,05 (s, 1H, NH), 8,55 (s, 1H, NH), 7,45 (m, 3Н), 7,25 (m, 2H), 6,78 (d, J=8 Гц, 1H), 6,71 (s, 1H), 2,03 (s, 3Н).
2.8 Соединение Б8: R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2Ph, R4=H (схема 2)
3-(фенилметил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,08 (s, 1H, NH), 9,08 (s, 1H), 7,85 (d, J=9 Гц, 1H), 7,40-7,56 (m, 4H), 7,16-7,34 (m, 5Н), 7,06 (уш. s, 1 Н), 6,71 (d, J=9 Гц, 1Н), 3,71 (s, 2H).
2.9 Соединение Б9: R1=CO2Et, R2=F, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-карбоэтоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): Rl=CO2Et, R2=F, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-карбоэтоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,81 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,59 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,39-7,51 (m, 2H), 7,16-7,31 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 6,74 (d, J=9 Гц, 1H), 4,08 (q, J=7 Гц, 2H), 2,04 (s, 3Н), 1,12 (t, J=7 Гц, 3Н).
2.10 Соединение Б10: R1=NO2, R2=Cl, R3=5-(4-Ме)пиразолил, R4=H (схема 2)
3-(4-метилпиразол-5-ил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 400 МГц): 12,58 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,75 (уш. s, 1H), 7,95 (d, J=8 Гц, 1H), 7,42-7,6 (m, 5H), 7,12 (s, 1H), 6,81 (d, J=8 Гц, 1H), 2,32 (s, 3Н).
2.11 Соединение Б11: R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2-iPr, R4=H (схема 2)
3-(2-метилпропил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 11,91 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 7,87 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,4-7,56 (m, 4H), 7,08 (d, J=2 Гц, 1H), 6,74 (d, J=9 Гц, 1H), 2,28 (d, J=7 Гц, 2H), 1,89 (d, J=7 Гц, 1H), 0,88 (d, J=7 Гц, 6Н).
2.12 Соединение Б12: R1=NO2, R2=Cl, R3=СF3, R4=H (схема 3)
3-трифторметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (CDCl3+ДMCO-d6, 300 МГц): 7,98 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,2-7,6 (m, 6H), 7,02 (уш. s, 1H), 6,62 (d, J=9 Гц, 1H).
2.13 Соединение Б13: R1=NO2, R2=Cl, R3=1-тиазолил, R4=H (схема 3)
3-(1-тиазолил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 13,08 (s, 1H), 9,21 (s, 1H), 7,88-7,92 (m, 2H), 7,84 (d, J=3 Гц, 1H), 7,42-7,62 (m, 4H), 7,12 (d, J=2 Гц, 1H), 6,79 (d, J=8 Гц, 1H).
2.14 Соединение Б14: R1=NO2, R2=Cl, R3=4-имидазолил, R4=H (схема 2)
3-(4-имидазолил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 12,33 (s, 1H), 12,29 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 7,90 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,44-7,63 (m, 4H), 7,35 (s, 1H), 7,11 (d, J=2 Гц, 1H), 6,78 (d, J=9 Гц, 1Н).
2.15 Соединение Б15: R1=NO2, R2=Cl, R3=2-пиpaзoлил, R4=H (схема 2)
3-(2-пиразолил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 13,11 (s, 1H), 12,48 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 7,93 (d, J=9 Гц, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,39-7,60 (m, 4H), 7,11 (с, 1Н), 6,78 (d, J=9 Гц, 1H), 6,59 (s, 1H).
2.16 Соединение Б16: R1=NO2, R2=Cl, R3=3-пиразолил, R4=H (схема 2)
3-(3-пиразолил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 13,09 (s, 1H), 12,31 (s, 1H), 9,13 (s, 1H), 7,80-8,05 (m, 4H), 7,40-7,62 (m, 3Н), 7,13 (s, 1H), 6,78 (d, J=9 Гц, 1Н).
2.17 Соединение Б17: R1=NO2, R2=Cl, R3=CH(Me)CH2Me, R4=H (схема 2)
3-(1-метилпропил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 11,90 (s, 1H), 9,04 (s, 1H), 7,85 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,38-7,55 (m, 4H), 7,05 (d, J=2 Гц, 1H), 6,72 (d, J=9 Гц, 1H), 2,65 (m, 1H), 1,52 (m, 2H), 1,13 (d, J=7 Гц, 3Н), 0,79 (t, J=8 Гц, 3Н).
2.18 Соединение Б18: R1=MeO, R2=Cl, R3=CH3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-хлорфенил)-7-метоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 11,69 (s, 1H), 7,34-7,50 (m, 5H), 6,77 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 6,72 (d, J=9 Гц, 1H), 5,86 (d, J=9 Гц, 1H), 5,85 (d, J=2 Гц, 1H), 3,44 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).
2.19 Соединение Б19: R1=Cl, R2=H, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-фенил-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 400 МГц): 11,85 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,46-7,52 (m, 2H), 7,39-7,44 (m, 3Н), 7,29 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 6,92 (d, J=9 Гц, 1Н), 6,62 (d, J=2 Гц, 1H), 2,16 (s, 3Н).
2.20 Соединение Б20: R1=Cl, R2=Cl, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-хлорфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,78 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,38-7,55 (m, 4H), 7,17 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 6,75 (d, J=9 Гц, 1Н), 6,22 (d, J=2 Гц, 1Н), 2,03 (s, 3H).
2.21 Соединение Б21: R1=H, R2=F, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,75 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,36-7,52 (m, 2H), 7,04-7,30 (m, 3H), 6,77 (d, J=8 Гц, 1H), 6,63 (t, J=8 Гц, 1Н), 6,50 (d, J=8 Гц, 1H), 2,07 (s, 3H).
2.22 Соединение Б22: R1=F, R2=H, R3=CH3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-фенил-7-фторпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 11,85 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,46-7,55 (m, 2H), 7,35-7,43 (m, 2H), 7,11 (dt, J=3, 9 Гц, 1H), 6,92 (dd, J=5,9 Гц, 1H), 6,41 (dd, J=3, 10 Гц, 1H), 2,14(s, 3H).
2.23 Соединение Б23: R1=NO2, R2=Cl, R3=фенил, R4=H (схема 2)
3-фенил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1H-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 12,65 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 7,95 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,78 (d, J=8 Гц, 2H), 7,32-7,63 (m, 7H), 7,14 (d, J=2 Гц, 1H), 6,85 (d, J=9 Гц, 1H).
2.24 Соединение Б24: R1=NO2, R2=Cl, R3=н-пропил, R4=H (схема 2)
3-пропил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 400 МГц): 11,91 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 7,86 (d, J=8 Гц, 1H), 7,41-7,53 (m, 4H), 7,08 (s, 1H), 6,72 (d, J=8 Гц, 1H), 2,38 (t, J=8 Гц, 2H), 1,54 (tq, J=8, 7 Гц, 2H), 0,88 (t, J=7 Гц, 3Н).
2.25 Соединение Б25: R1=NO2, R2=Cl, R3-циклопропил, R4=H (схема 2)
3-циклопропил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 400 МГц): 11,72 (s, 1H), 9,05 (s, 1 Н), 7,87 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 7,41-7,55 (m, 4H), 7,08 (d, J=2 Гц, 1H), 6,72 (d, J=9 Гц, 1H), 1,79 (p, J=7 Гц, 1H), 0,88 (d, J=7 Гц, 4Н).
2.26 Соединение Б26: R1=F, R2=F, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-фторпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,82 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,41-7,58 (m, 2H), 7,18-7,35 (m, 2H), 7,05 (dt, J=3, 9 Гц, 1H), 6,84 (dd, J=6,9 Гц, 1H), 6,25 (dd, J=3,9 Гц, 1H), 2,08 (s, 3H).
2.27 Соединение Б27: R1=NO2, R2=H, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-фенил-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
Соединение Б28: R1=H, R2=H, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-фенилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,78 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,47 (m, 2H), 7,39 (m, 3Н), 7,20 (dt, J=1,8 Гц, 1Н), 6,88 (d, J=8 Гц, 1Н), 6,75 (t, J=8 Гц, 1H), 6,68 (dt, J=1,8 Гц, 1H), 2,14 (s, 3Н).
2.29 Соединение Б29: R1=I, R2=F, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-йодпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,81 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,39-7,57 (m, 3Н), 7,18-7,36 (m, 2H), 6,75 (s, 1H), 6,59 (d, J=9 Гц, 1H), 2,07 (s, 3Н).
2.30 Соединение Б30: R1=H, R2=Cl, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
2.31 Соединение Б31: R1=NO2, R2=F, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1H-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,90 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 7,87 (dd, J=3,9 Гц, 1H), 7,47 (m, 2H), 7,18-7,32 (m, 3Н), 6,73 (d, J=9 Гц, 1H), 2,02 (s, 3Н).
2.32 Соединение Б32: R1=Cl, R2=F, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,81 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,40-7,55 (m, 2H), 7,17-7,32 (m, 3Н), 6,79 (d, J=9 Гц, 1H), 6,42 (s, 1H), 2,08 (s, 3Н).
Соединение БЗЗ: R1=I, R2=H, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-фенил-7-йодпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1H-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,82 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,36-7,55 (m, 6H), 6,91 (d, J=2 Гц, 1H), 6,70 (d, J=9 Гц, 1H), 2,15 (s, 3Н).
2.34 Соединение Б34: R1=Br, R2=H, R3=СН3, R4=H (схема 2)
3-метил-5-фенил-7-бромпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 7,89 (s, 1H), 7,49 (m, 2H), 7,38 (m, 4H), 6,85 (d, J=9 Гц, 1H), 6,74 (d, J=2 Гц, 1H), 2,15 (s, 3Н).
2.35 Соединение БЗЗ: R1=CN, R2=F, R3=CH2OH, R4=H (схема 3)
3-гидроксиметил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбонитрил.
Пример 3: модификация функциональных групп в соответствии со схемой 4
Как упомянуто выше со ссылкой на схему 4, некоторые соединения могут быть легко получены трансформацией имеющихся функциональных групп. Некоторые из этих трансформаций дополнительно приведены ниже в виде примеров.
А. Замещение йода карбонилом: R1=I в R1=CONRR'
3.1 Соединение B1: R1=CONC(-CH2CH2-O-CH2CH2-), R2=F, R3=H, R4=H
5-(2-фторфенил)-7-морфолинилкарбонилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
Смесь 0,0712 г (0,17 ммоля) пиразола 4 (R1=I, R2=F, R3=H, R4=H), 0,0082 г (0,0012 ммоля) катализатора дихлорида бис(трифенилфосфин)палладия, 1 мл морфолина перемешивали и нагревали (75° С) в атмосфере моноксида углерода в течение 90 минут. Смесь охлаждали и затем очищали хроматографией на обращенной фазе силикагеля (градиентное элюирование смесью вода-ацетонитрил), получая 0,06 г соединения B1 (пиразол 4, в котором R1=CON(-CH2CH2-O-CH2CH2-), R2=F, R3=H, R4=H).
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,02 (s, 1H, NH), 8,18 (s, 1H, NH), 7,59 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,18-7,35 (m, 3H), 6,84 (d, J=9 Гц, 1Н), 3,25 (m, 8H).
Следующие соединения получены с использованием приведенного выше метода А.
3.2 Соединение В2: Rl=CONHCH2CH2OH, R2=F, R3=H, R4=H
N-(2-гидроксиэтил)-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,08 (s, 1H, NH), 8,20 (s, 1H, NH), 8,16 (m, 1H, NH), 7,61 (d, J=9 Гц, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,14-7,3 (m, 2H), 7,11 (s, 1H), 6,89 (d, J=9 Гц, 1H), 4,63 (m, 1H, ОН), 3,40 (m, 2H), 3,18 (m, 2H).
3.3 Соединение В3: R1=CON(CH2CH2OH)2, R2=F, R3=H
N,N-бис(2-гидроксиэтил)-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,10 (s, 1H, NH), 8,11 (s, 1H, NH), 7,59 (s, 1H), 7,4-7,52 (m, 2H), 7,15-7,3 (m, 3H), 6,80 (d, J=9 Гц, 1H), 6,58 (s, 1H), 4,65 (m, 2H, ОН), 3,30 (m, 8H).
Б. Восстановление нитрогруппы в аминогруппу: R1=NO2 в R1=NH2
3.4 Соединение В4: R1=NH2, R2=Cl, R3=СН3, R4=H
3-метил-5-(2-хлорфенил)-7-аминопиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
Раствор 0,20 г (0,57 ммоля) пиразола 7 (R1=NO2, R2=Cl, R3=СН3, R4=H) в 8 мл этанола перемешивали при комнатной температуре в атмосфере водорода с Ni-Ренея (0,5 мл 5-% суспензии в воде, промытой этанолом непосредственно перед использованием). Через 4 часа смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая 0,177 г соединения В4 (аминопроизводного 7, в котором R1=NH2, R2=Cl, R3=СН3, R4=H), tпл 260-263° С.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,62 (s, 1H), 7,38-7,47 (m, 4H), 7,07 (s, 1H), 6,53 (d, J=8 Гц, 1H), 6,38 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 5,74 (d, J=2 Гц, 1Н), 4.52 (s, 2H), 2,06 (s, 3Н).
Следующие соединения получены с использованием приведенного выше метода Б.
3.5 Соединение В5: R1=NH2, R2=Cl, R3=H, R4=H
5-(2-хлорфенил)-7-аминопиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (CD3OD, 300 МГц): 7,35-7,55 (m, 5H), 6,72 (dd, J=3,7 Гц, 1H), 6,62 (d, J=7 Гц, 1H), 6,13 (d, J=3 Гц, 1H).
3.6 Соединение В6: R1=NH2, R2=Cl, R3=i-Pr, R4=H
3-(1-метилэтил)-5-(2-хлорфенил)-7-аминопиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,65 (s, 1H), 7,38-7,4 (m, 4H), 7,08 (s, 1H), 6,75 (d, J=8 Гц, 1H), 6,39 (dd, J=2, 8 Гц, 1H), 5,74 (d, J=2 Гц, 1Н), 2,98 (sept, J=7 Гц, 1H), 1,18 (d, J=7 Гц, 6Н).
В. Превращение аминосоединений в производные: R1=NH2 в R1=NHR' (как показано выше на схеме 4)
3.7 Соединение В7: R1=NHAc, R2=Cl, R3=СН3, R4=H
N-(3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)ацетамид.
Суспензию 0,323 г (1 ммоль) пиразола 7 (R1=NH2, R2=Cl, R3=СН3, R4=H) в 20 мл дихлорметана вводили в реакцию с 0,112 г (1,1 ммоля) уксусного ангидрида в инертной атмосфере при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем смесь разбавляли этилацетатом и промывали последовательно водой и насыщенным раствором соли. Водные слои экстрагировали этилацетатом, объединенные экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Продукт выделяли хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гексан-этилацетат (30/70), получали 0,175 г соединения В7.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,71 (s, 1H), 9,56 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,38-7,57 (m, 5H), 6,67 (d, J=8 Гц, 1H), 6,57 (d, J=2 Гц, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,83 (s, 3H).
Следующие соединения получены аналогично соединению В7 в соответствии с описанным выше методом В.
3.8 Соединение В8: R1=акрилоил-NН, R2=Cl, R3=СН3, R4=H
N-(3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)-2-пропенамид.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,71 (s, 1H), 9,78 (s, 1H), 7,63 (s, 1 Н), 7,52 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,35-7,50 (m, 4H), 6,71 (d, J=9 Гц, 1H), 6,69 (d, J=2 Гц, 1H), 6,23 (dd, J=10,18 Гц, 1H), 6,08 (dd, J=2,18 Гц, 1H), 5,60 (dd, J=2,10 Гц, 1H), 2,05 (s, 3H).
3.9 Соединение В9: R1=СН3SO2NН, R2=Cl, R3=СН3, R4=H
N-(3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)метансульфонамид.
Смесь 0,323 г (1 ммоль) пиразола 7 (R1=NH2, R2=Cl, R3=СН3, R4=H), 0,122 г (1 ммоль) 4-диметиламиноиридина и 5 мл тетрагидрофурана перемешивали в инертной атмосфере при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь разбавляли этилацетатом и промывали последовательно водой и насыщенным раствором соли при повторной экстракции водных слоев этилацетатом. Объединенные органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Продукт выделяли хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гексан-этилацетат (10/90), получали 0,244 г соединения В9 (пиразол 7, в котором R1=СН3SO2NН, R2=Сl, R3=СН3, R4=H) (перекристаллизация из этилацетата), tпл 196-198° С.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,74 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,36-7,46 (m, 4H), 6,94 (dd, J=2, 8 Гц, 1H), 6,72 (d, J=8 Гц, 1H), 6,31 (d, J=2 Гц, 1H), 2,70 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).
Г. Аминолиз R3=CO2Et в R3=CONRR'
3.10 Соединение B10: R1=NO2, R2=Cl, R3=CONH2, R4=H
5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбоксамид.
Перемешивали 0,15 г (0,36 ммоля) пиразола 7 (R1=NO2, R2=Cl, R3=CO2Et, R4=H) с раствором аммиака (15 мл) в этаноле (50 мл) при комнатной температуре в течение 48 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении, продукт очищали хроматографией на силикагеле. Элюирование смесью этилацетат-изопропанол (95/5) дало 0,074 г соединения В 10 (пиразол 7', в котором R1=NO2, R2=Cl, R3=CONH2, R4=H) в виде твердого вещества, tпл&γτ; 340° C (перекристаллизация из этилацетата).
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 400 МГц): 12,95 (уш. s, 1H), 9,23 (уш. s, 1H), 7,92 (d, J=8 Гц, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,45-7,61 (m, 4H), 7,21 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,75 (d, J=8 Гц, 1H).
Следующие соединения получены аналогично соединению В10 с использованием приведенного выше метода Г.
3.11 Соединение В11: R1=NO2, R2=Cl, R3=CONMe2, R4=H
N,N-диметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбоксамид
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 12,65 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 7,91 (d, J=9 Гц, 1H), 7,41-7,55 (m, 4H), 7,08 (s, 1H), 6,75 (d, s=9 Гц, 1H), 3,01 (s, 3H).
3.12 Соединение В12: R1=NO2, R2=Cl, R3=CONHNH2, R4=H
N-амино-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбоксамид.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 13,02 (s, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,58 (t, J=5 Гц, 1H), 7,91 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 7,41-7,62 (m, 4H), 7,09 (d, J=2 Гц, 1Н), 6,75 (d, J=9 Гц, 1H), 4,54 (d, J=5 Гц, 2Н).
Д. Восстановление R1=CO2Et в R3=CHO и R3=СН2ОН
3.13 Соединение В13: R1=NO2, R2=Cl, R3=CHO, R4=H; и
Соединение В14: R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2OH, R4=H
Смесь 0,48 г (1,17 ммоля) пиразола 7 (R1=NO2, R2=Cl, R3=CO2Et, R4=H) и 30 мл тетрагидрофурана при -15° С в инертной атмосфере обрабатывали 1,52 мл 1 M раствора алюмогидрида лития в тетрагидрофуране в течение 30 минут. Затем смесь разбавляли этилацетатом, промывали последовательно водным раствором сульфата калия и насыщенным раствором соли, повторно экстрагируя промывки этилацетатом. Объединенные органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очистка хроматографией на силикагеле при элюировании смесью гексан-этилацетат дала 0,21 г соединения В 13 (пиразол 7', в котором R1=NO2, R2=Cl, R3=СНО, R4=Н) в виде красного твердого вещества и 0,11 г соединения В 14 (пиразол 7', в котором R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2OH, R4=H) также в виде красного твердого вещества.
Соединение В13:
5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбоксальдегид.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 13,29 (s, 1H), 9,66 (s, 1H), 9,27 (s, 1 Н), 7,96 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,45-7,59 (m, 4H), 7,13 (d, s=2 Гц, 1H), 6,79 (d, J=9 Гц, 1Н).
Соединение В14:
3-гидроксиметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,11 (s, 1H), 9,08 (s, 1H), 7,85 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,41-7,50 (m, 4H), 7,06 (d, J=2 Гц, 1H), 6,71 (d, J=9 Гц, 1H), 5,23 (t, J=5 Гц, 1H), 4,27 (d, J=5 Гц, 1H), 4,27 (d, J=5 Гц, 2Н).
Е. Восстановительное аминирование альдегида: R3=CHO в R3=CH2NR2
3.14 Соединение В15: R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2NMe2, R4=H
3-(N,N-диметиламинометил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
Суспензию 0,142 г (0,39 ммоля) пиразола 7 (R1=NO2, R2=Cl, R3=CHO, R4=H), 0,0631 г (0,78 ммоля) гидрохлорида диметиламина, 0,11 мл (0,78 ммоля) триэтиламина, 0, 165 (1 ммоль) триацетоксиборгидрида натрия, 0,2 г молекулярных сит
Figure 00000012
и 20 мл дихлорметана перемешивали в инертной атмосфере в течение 3 часов. Смесь фильтровали, разбавляли этилацетатом и промывали последовательно водой и насыщенным раствором соли, повторно экстрагируя водные слои этилацетатом. Объединенные органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очистка хроматографией на обращенной фазе силикагеля (градиентное элюирование смесью вода-ацетонитрил-трифторуксусная кислота) дала 0,147 г соединения В 15 (пиразол 7', в котором R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2NMe2, R4=H) в виде соли с трифторуксусной кислотой.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12.54 (s, 1Н), 9,92 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 7,91 (dd, J=2,8 Гц, 1H), 7,45-7,55 (m, 4H), 7,10 (d, J=2 Гц, 1H), 6,76 (d, J=8 Гц, 1H), 4,08 (s, 2H), 2,75 (s, 6H).
Ж. Алкилирование спиртов: R3=CH2OH в R3=СН2ОСН3
3.15 Соединение В16: R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2OCH3, R4=H
3-метоксиметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
Смесь 0,075 г (0,2 ммоля) пиразола 7 (R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2OH, R4=H), 0,2 г силикагеля и 20 мл тетрагидрофурана перемешивали с раствором диазометана в эфире (50 мл, примерно 9,2 ммоля). Через 2 часа смесь фильтровали, концентрировали при пониженном давлении. Продукт очищали хроматографией на силикагеле, элюируя смесью гексан-этилацетат, получали соединение В 16 (пиразол 7', в котором R1=NO2, R2=Cl, R3=CH2OCH3, R4=H) в виде красного твердого вещества.
 1Н-ЯМР (ДMCO-d6, 300 МГц): 12,27 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 7,86 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,43-7,50 (m, 4H), 7,06 (d, J=2 Гц, 1H), 6,72 (d, J=9 Гц, 1Н), 4,20 (s, 2H), 3,25 (s, 3H).
З. Метиленирование альдегида: R3=CHO в R3=CHCH2
3.16 Соединение В17: R1=NO2, R2=Cl, R3=CHCH2, R4=H
3-этенил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
К раствору метилентрифенилфосфорана, полученного взаимодействием 0,109 г (0,31 ммоля) бромида метилтрифенилфосфония в 5 мл тетрагидрофурана и 0,29 мл 1 М раствора трет.-бутоксида калия в тетрагидрофуране при -78° С в инертной атмосфере прибавляли 0,080 г (0,22 ммоля) пиразола 7 (R1=NO2, R2=Cl, R3=CHO, R4=H). Смесь нагревали до кипения и перемешивали в течение ночи, после чего смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали последовательно водой и насыщенным раствором соли. Органический экстракт сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очистка хроматографией на силикагеле при элюировании смесью гексан-этилацетат (70/30) дала 0,043 г соединения В 17 (пиразола 7', в котором R1=NO2, R2=Cl, R3=CHCH2, R4=H) в виде красного твердого вещества.
 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 12,33 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 7,88 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,40-7,50 (m, 4H), 7,08 (d, J=2 Гц, 1H), 6,74 (d, J=9 Гц, 1H), 6,40 (dd, J=12,18 Гц, 1H), 5,85 (d, J=18 Гц, 1H), 5,36 (d, J=12 Гц, 1Н).
И. Дегидратация амида: R3=CONH2 в R3=CN
3.17 Соединение В18: R1=NO2, R2=Cl, R3=CN, R4=H
5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбонитрил.
Смесь 0,47 г (1,23 ммоля) пиразола 7 (R1=NO2, R2=Cl, R3=CONH2, R4=H), 0, 34 г (2,46 ммоля) карбоната калия, 0,94 г (6,15 ммоля) хлорокиси фосфора и 20 мл ацетонитрила нагревали при кипении в течение 4 часов в инертной атмосфере. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли этилацетатом и промывали последовательно насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором соли, дополнительно экстрагируя водные слои этилацетатом. Объединенные органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя смесью гексан-этилацетат (70/30), получали 0,24 г соединения В 18 (пиразола 7', в котором R1=NO2, R2=Cl, R3=CN, R4=H) в виде оранжевого твердого вещества (перекристаллизация из дихлорметана), tпл 193-196° С.
ИК-спектр (КBr): 2240 см-1. 1Н-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 9,36 (s, 1H), 7,96 (dd, J=2, 9 Гц, 1H), 7,48-7,58 (m, 4H), 7,11 (d, J=2 Гц, 1H), 6,77 (d, J=9 Гц, 1H).
К. Гидролиз нитрила: R1=CN в R1=CONH2
3.18 Соединение В19: R1=CONH2, R2=F, R3=СН3, R4=H 3-метил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид.
К раствору 0,5 г (1,6 ммоля) пиразола 7 (R1=CN, R2=F, R3=СН3, R4=H) в 79 мл диметилсульфоксида прибавляли 47 мл охлажденной льдом перекиси водорода (30% водный раствор) и 24 мл 1 М раствора гидроксида натрия. После завершения реакции смесь экстрагировали этилацетатом, экстракты промывали последовательно водой, насыщенным раствором соли и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Смесь фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Очистка хроматографией на силикагеле (элюирование смесью этилацетатметанол (95/5)) дала 0,5 г соединения В 19 (пиразол 7, в котором R1=CONH2, R2=F, R3=CH3, R4=H) в виде желтого твердого вещества, tпл 323-324° С.
 1H-ЯМР (ДМСО-d6, 300 МГц): 11,79 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,58 (dd, J=2,9 Гц, 1H), 7,38-7,52 (m, 2H), 7,02-7,30 (m, 4H), 6,73 (d, J=9 Гц, 1H), 2,05 (s, 3Н).
Дополнительные соединения, конкретно не внесенные выше в примеры 1-3, получены с применением методов, описанных выше. Данные соединения, обозначенные буквой “Г”, включены ниже в таблицы I-IV.
Пример 4. Антипролиферативная активность
Ниже приведены данные, характеризующие антипролиферативную активность соединений по изобретению. Представленные результаты свидетельствуют о том, что соединения по настоящему изобретению могут применяться для лечения рака, прежде всего твердых опухолей, таких как опухоли молочной железы и ободочной кишки.
Определение активности CDK2 с использованием планшета для экспресс-анализа
Для определения ингибирования активности CDK2 очищенным рекомбинантным протеином ретинобластомы (Rb) сенсибилизировали лунки 96-луночных планшетов для экспресс-анализа (фирма New England, Бостон, штат Массачусетс). Rb представляет собой природный субстрат для фосфорилирования с помощью CDK2 (см. Herwig и Strauss, Eur. J. Biochem., том 246, стр.581-601 (1997) и приведенные в работе ссылки). Рекомбинантные комплексы человеческий циклин E/CDK2 частично очищали из экстрактов клеток насекомых. Комплексы активный циклин E/CDK2 добавляли к сенсибилизированным с помощью Rb планшетам для экспресс-анализа в сочетании с 33Р-АТФ и соответствующими разведениями тестируемых соединений. Планшеты инкубировали при встряхивании в течение 25 мин при комнатной температуре, затем промывали и подсчитывали радиоактивность с помощью сцинтилляционного счетчика типа Topcount (фирма Packard Instrument Co., Даунерс Гров, штат Иллинойс). Разведения тестируемых соединений оценивали в каждом анализе с дублированием. Процент ингибирования фосфорилирования с помощью Rb, являющийся мерой ингибирования активности Rb, определяли с помощью следующей формулы:
Figure 00000013
где “тест. соедин.” обозначает среднее количество импульсов в минуту в опытах с дублированием, “неспециф.” обозначает среднее количество импульсов в минуту для варианта, когда не добавляли комплекс циклин E/CDK2, а "общ." обозначает среднее количество импульсов в минуту для варианта, когда не добавляли соединение.
Результаты описанных выше экспериментов in vitro представлены ниже в таблицах IA-IB.
Figure 00000014
Figure 00000015
Figure 00000016
В остальных таблицах положения заместителей R1, R2, R3 и R4 соответствуют таковым, указанным выше в таблице IA.
Таблица IБ
Ингибирование активности CDK2 - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 1-9,99 мкМ
Соед. № R1 R2 R3 R4
А6 Cl H H H
А7 Cl F H H
А9 H H H H
А10 H F H H
А11 F F H H
А14 СН3SO2 H H H
А18 СO2СН3 H H H
А19 I F H H
Б2 NO2 Cl CO2Et H
Б5 NO2 Cl CH2CH2Ph H
Б8 NO2 Cl CH2Ph H
Б11 NO2 Cl СН2-изо-Pr H
Б33 I H СН3 H
В3 CON(CH2CH2OH)2 F H H
В5 NH2 Cl H H
В11 NO2 Cl CONMe2 H
Г19 NO2 Cl 2-бензофуранил H
Г20 NO2 Cl 2-индоилил H
Г21 NO2 Cl 2-N-Me-пирролил H
Г22 CO2H F H H
Г23 NO2 Cl Мета-ОН-Ph H
Г24 NO2 Cl Пара-MePh H
Г25 NO2 Cl Мета-CNPh H
Г26 NO2 Cl 2-(5-Ме)-тиофенил H
Г27 NO2 H 3-пиридинил H
Г28 NO2 Cl Пара-
Me2NPh		 H
Г29 NO2 Cl Орто-CNPh H
Г30 NO2 Cl Мета-MePh H
Г31 NO2 Cl Мета-ЕtO-Ph H
Г32 NO2 Cl 2-(5-Et)-фуранил H
Г33 NO2 Cl 2-нафтил H
Г34 NO2 H 2-имидазолил H
Г35 CO2Na H H H
Г37 NO2 Cl Орто-MePh H
Figure 00000017
Анализ с использованием клеток
Негативную в отношении рецептора эстрогена линию клеток эпителиальной карциномы молочной железы (MDA-MB-435) получали из Американской коллекции типовых клеточных культур (АТСС, Роквилл, штат Мэриленд) и выращивали в среде, рекомендованной АТСС. Для анализа влияния тестируемых соединений на рост этих клеток клетки высевали в 96-луночные планшеты для культур ткани в количестве 2000 клеток на лунку и инкубировали в течение ночи при 37° С в атмосфере, содержащей 5% СO2. На следующий день тестируемые соединения растворяли в 100%-ном диметилсульфоксиде (ДМСО), получая 10 мМ маточный раствор. Каждое соединение разводили стерильной средой до 1 мМ в количестве, достаточном для получения конечной концентрации 120 мкМ. Затем соединения серийно разводили средой с добавлением 1,2% ДМСО. Одну четвертую часть конечного объема разведенных соединений переносили в 96-луночные планшеты. Тестируемые соединения анализировали с дублированием. В ряд лунок, содержащих "контрольные клетки", добавляли ДМСО в таком количестве, чтобы конечная концентрация ДМСО в каждой лунке была равна 0,3%. Лунки, в которые не вносили клетки, служили в качестве "чистого контроля". Лунки, в которые не добавляли ингибитор, служили в качестве "контроля без ингибитора". Планшеты вновь помещали в термостат и через 5 дней после добавления тестируемого соединения проводили анализ согласно описанному ниже методу.
В каждую лунку добавляли бромид 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2Н-тетразолия (тиазолиловый голубой; МТТ), получая конечную концентрацию в каждой лунке 1 мг/мл. Затем планшеты инкубировали в течение 3 ч при 37° С. Планшеты центрифугировали при 1000 об/мин в течение 5 мин перед аспирацией содержащей МТТ среды. Затем содержащую МТТ среду удаляли и в каждую лунку добавляли по 100 мкл 100%-ного этанола для того, чтобы растворить образовавшийся формазановый метаболит. Для того чтобы гарантировать полное растворение, планшеты встряхивали в течение 5 мин при комнатной температуре. С помощью планшет-ридера для титрационных микропланшетов (фирма Molecular Dynamics) измеряли величины абсорбции при длине волны 570 нм, используя в качестве эталонной длину волны 650 нм. Процент ингибирования вычисляли путем вычитания из величин абсорбции, измеренных для всех лунок, величин абсорбции, измеренных для лунок чистого контроля (не содержащих клеток), и последующего вычитания из 1,00 коэффициента, полученного делением средней величины абсорбции для каждых двух повторностей опыта на среднюю величину абсорбции, измеренной для контролей. Ингибирующие концентрации (IC50) получали методом линейной регрессии с использованием графика зависимости логарифма концентрации от процента ингибирования.
Результаты описанного выше анализа с использованием клеток линии MDA-MB-435 представлены ниже в таблицах IIA-IIB.
Таблица IIА
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии MDA-MB-435 (карцинома молочной железы) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 0,01-1 мкМ
Соед.№ R1 R2 R3 R4
Б3 NO2 Cl СН3 H
Б4 NO2 Cl СН2СН3 H
Б6 NO2 Cl Изо-Pr H
Б7 CN F СН3 H
Б22 F H СН3 H
Б25 NO2 Cl Циклопропил H
Б29 NO2 H СН3 H
Б31 NO2 F СН3 H
Б35 CN F СН2OН H
В4 NH2 Cl СН3 H
В7 AcNH Cl СН3 H
В8 Акрилоил-NH Cl СН3 H
В9 MsNH Cl СН3 H
В13 NO2 Cl СНО H
В14 NO2 Cl СН2OН H
В17 NO2 Cl СН=СН2 H
Г3 Me2NSO2NH Cl СН3 H
Таблица IIБ
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии MDA-MB-435 (карцинома молочной железы) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 1,1-9,99 мкМ
Соед.№ R1 R2 R3 R4
А15 CN F H H
Б9 Co2Et F СН3 H
Б10 NO2 Cl 5-(4-Ме)пиразол H
Б12 NO2 Cl СF3 H
Б14 NO2 Cl 4-имидазолил H
Б16 NO2 Cl 3-пиразолил H
Б18 MeO Cl СН3 H
Б19 Cl H СН3 H
Б20 Cl Cl СН3 H
Б21 H F СН3 H
Б30 H Cl СН3 H
В6 NH2 Cl Изо-Pr H
В16 NO2 Cl СН2Ome H
Г4 ClCH2NHSO4NH Cl СН3 H
Г5 Морфолинил-SO2NH Cl СН3 H
Г51 CON-морфолинамид F СН3 H
Г52 CONHCH2CH2ОН F СН3 H
Г53 CONHCH2CH2-N-морфолинил F СН3 H
Таблица IIB
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии MDA-MB-435 (карцинома молочной железы) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 10-30 мкМ
Соед. № R1 R2 R3 R4
А5 NO2 Cl H H
А13 NO2 F H H
Б2 NO2 Cl CO2Et H
Б5 NO2 Cl CH2CH2Ph H
Б8 NO2 Cl CH2Ph H
Б13 NO2 Cl 1-тиазолил H
Б15 NO2 Cl 2-пиразолил H
Б24 NO2 Cl Пропил H
В5 NO2 Cl H H
В10 NO2 Cl CONH2 H
В15 NO2 Cl CH2NMe2 H
В18 NO2 Cl CN H
В38 NO2 Cl 1-оксадиазолил H
Линию клеток аденокарциномы ободочной кишки SW480 и линию клеток карциномы ободочной кишки НСТ-116 получали также от АТСС и тестировали согласно такому же протоколу, который описан выше для анализа с использованием линии клеток MDA-MB-435, со следующими модификациями. Линию клеток SW480 высевали в количестве 1000 клеток на лунку и анализировали через 6 дней после добавления тестируемого соединения. Клетки линии НСТ-116 высевали в количестве 1000 клеток на лунку и анализировали через 4 дня после добавления тестируемого соединения.
Результаты указанного выше анализа с использованием линий клеток SW480 (аденокарцинома ободочной кишки) и НСТ-116 (карцинома ободочной кишки) представлены ниже в таблицах IIIA-IIIB и IVA-IVB соответственно.
Таблица IIIA
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии SW480 (аденокарцинома ободочной кишки) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 0,01-1 мкМ
Соед. № R1 R2 R3 R4
Б3 NO2 Cl СН3 Н
Б4 NO2 Cl СН2СН3 Н
Б6 NO2 Cl Изо-Pr Н
Б7 CN F СН3 Н
Б10 NO2 Cl 5-(4-Ме)пиразолил Н
Б21 H F СН3 Н
Б26 F F СН3 Н
Б27 NO2 H СН3 Н
Б31 NO2 F СН3 Н
Б35 CN F CH2OH Н
B1 CON-морфолинамид F Н Н
В4 NH2 Cl СН3 Н
В7 AcNH Cl СН3 Н
В8 Акрилоил-NH Cl СН3 Н
В9 MsNH Cl СН3 Н
В14 NO2 Cl CH2OH Н
В19 CONH2 F СН3 Н
Г2 NO2 CFs СН3 Н
Г51 CON-морфолинамид F СН3 Н
Г52 CONHCH2CH2OH F СН3 Н
Г53 CONHCH2CH2-N-морфолинил F СН3 Н
Таблица IIIБ
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии SW480 (аденокарцинома ободочной кишки) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 1,1-9,99 мкМ
Соед.№ R1 R2 R3 R4
А5 NO2 Cl H Н
А13 NO2 F H Н
А15 CN F H Н
Б1 NO2 Cl 2-пирролил Н
Б9 CO2Et F СН3 Н
Б18 Meo Cl СН3 Н
Б19 Cl H СН3 Н
Б20 Cl Cl СН3 Н
Б22 F H СН3 Н
Б25 NO2 Cl Циклопропил Н
Б29 I F СН3 Н
Б30 H Cl СН3 Н
Б32 Cl F СН3 Н
Г3 Me2NSO2NH Cl СН3 Н
Г4 ClCH2NHSO4NH Cl СН3 Н
Г5 Морфолинил-SO4-NH Cl СН3 Н
Г50 CONH2 F Н Н
Таблица IIIB
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии SW480 (аденокарцинома ободочной кишки) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 10-30 мкМ
Соед. № R1 R2 R3 R4
А9 Н Н Н Н
А10 Н F Н Н
A11 F F Н Н
А21 Н Cl Н Н
Б5 NO2 Cl CH2CH2Ph Н
Б8 NO2 Cl CH2Ph Н
Б23 NO2 Cl Ph Н
Б24 NO2 Cl Пропил Н
Б33 I Н СН3 Н
В5 NH2 Cl Н Н
В12 NO2 Cl CONHNH2 Н
Г6 NO2 Cl 2-тиофенил Н
Г7 NO2 Cl 2-фуранил Н
Г9 NO2 Cl 3-пиридинил Н
Г10 NO2 Cl 4-пиридинил Н
Г20 NO2 Cl 2-индолил Н
Г34 Br H СН3 Н
Г37 NO2 Cl Орто-MePh Н
Г40 NO2 Cl Орто-СF3Ph Н
Г48 NO2 Cl 1-нафтил Н
Таблица IVA
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии НСТ 116 (карцинома ободочной кишки) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 0,01-1 мкМ
Соед. № R1 R2 R3 R4
Б3 NO2 Cl СН3 Н
Б4 NO2 Cl СН2СН3 Н
Таблица IVБ
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии НСТ 116 (карцинома ободочной кишки) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 1,1-9,99 мкМ
Соед. № R1 R2 R3 R4
А15 CN F H Н
Б1 NO2 Cl 2-пирролил Н
Б6 NO2 Cl Изо-Pr Н
Б7 CN F СН3 Н
Б9 CO2Et F СН3 Н
Б10 NO2 Cl 5-(4-Ме)пиразолил Н
Б25 NO2 Cl Циклопропил Н
В12 NO2 Cl CONHNH2 Н
Г50 CONH2 F Н Н
Таблица IVB
Анализ антипролиферативной активности с использованием клеток линии НСТ 116 (карцинома ободочной кишки) - соединения, для которых значение IC50 находится в диапазоне 10-30 мкМ
Соед. № R1 R2 R3 R4
А5 NO2 Cl Н Н
А9 Н Н Н Н
А10 Н F Н Н
А13 NO2 F Н Н
А14 СН3SO2 Н Н Н
А16 NO2 Н Н Н
А21 Н Cl Н Н
Б5 NO2 Cl CH2CH2Ph Н
Б8 NO2 Cl CH2Ph Н
Б23 NO2 Cl Ph Н
Б24 NO2 Cl Пропил Н
В1 CON-морфолинамид F Н Н
В2 CONHCH2CH2OН F Н Н
В5 NH2 Cl Н Н
Г6 NO2 Cl Нил Н
Г7 NO2 Cl 2-фуранил Н
Г8 NO2 Cl 2-(3-Ме)тиофенил Н
Г9 NO2 Cl 3-пиридинил Н
Г10 NO2 Cl 4-пиридинил Н
Г11 NO2 Cl Пара-MeSPh Н
Г12 NO2 Cl Пара-СF3ОPh Н
Г13 NO2 Cl Орто, мета-метилендиокси-Ph Н
Г14 NO2 Cl Пара-ОН-орто-MeOPh Н
Г18 NO2 Н Циклопропил Н
Г19 NO2 Cl 2-бензофуранил Н
Г20 NO2 Cl 2-индоилил Н
Г37 NO2 Cl Орто-MePh Н
Г42 NO2 Cl Мета-СF3Ph Н
Г43 NO2 Cl 4-N-пирролил-Ph Н
Г48 NO2 Cl 1-нафтил Н
Г49 NO2 Cl 4-изохинолинил Н
Пример 5: Состав таблеток
№ Ингредиенты Мг/таблетку
1 Соединение 1* 5 25 100 250 500 750
2 Безводная лактоза 103 83 35 19 38 57
3 Кросскармелоза натрия 6 6 8 16 32 48
4 Повидон КЗО 5 5 6 12 24 36
5 Стеарат магния 1 1 1 3 6 9
  Общая масса 120 120 150 300 600 900
*соединение 1 представляет собой соединение по изобретению
Процедура изготовления:
1. Смешивают ингредиенты 1, 2 и 3 в пригодном смесителе в течение 15 мин.
2. Гранулируют порошкообразную смесь, полученную на стадии 1 вместе с 20%-ным раствором повидона КЗО (ингредиент 4).
3. Гранулят, полученный на стадии 2, сушат при 50° С.
4. Гранулят, полученный на стадии 3, пропускают через пригодное устройство для размалывания.
5. К размолотому грануляту, полученному на стадии 4, добавляют ингредиент 5 и смешивают в течение 5 мин.
6. Прессуют гранулят, полученный на стадии 5, с помощью пригодного пресса.
Пример 6: Состав капсул
№ Ингредиент Мг/капсулу
1 Соединение 1* 5 25 100 250 500
2 Безводная лактоза 159 123 148 - -
3 Кукурузный крахмал 25 35 40 35 70
4 Тальк 10 15 10 12 24
5 Стеарат магния 1 2 2 3 6
  Общая масса наполнителя 200 200 300 300 600
*соединение 1 представляет собой соединение по изобретению
Процедура изготовления:
1. Смешивают ингредиенты 1, 2 и 3 в пригодном смесителе в течение 15 мин.
2. Добавляют ингредиенты 4 и 5 и смешивают в течение 3 мин.
3. Полученным продуктом заполняют пригодную капсулу.
Пример 7: Состав раствора/эмульсии для инъекций
№ Ингредиент Мг/мл
1 Соединение 1* 1 мг
2 ПЭГ 400 10-50 мг
3 Лецитин 20-50 мг
4 Соевое масло 1-5 мг
5 Глицерин 8-12 мг
6 Вода q.s. 1 мл
* соединение 1 представляет собой соединение по изобретению
Процедура изготовления:
1. Ингредиент 1 растворяют в ингредиенте 2.
2. Добавляют ингредиенты 3, 4 и 5 к ингредиенту 6 и смешивают до получения дисперсии, после чего гомогенизируют.
3. К смеси, полученной на стадии 2, добавляют раствор, полученный на стадии 1, и гомогенизируют до получения полупрозрачной дисперсии.
4. Продукт стерилизуют путем фильтрации через фильтр с размером пор 0,2 мкм и продуктом заполняют пузырьки.
Пример 8: Состав раствора/эмульсии для инъекций
№ Ингредиент Мг/мл
1 Соединение 1* 1 мг
2 Гликофурол 10-50 мг
3 Лецитин 20-50 мг
4 Соевое масло 1-5 мг
5 Глицерин 8-12 мг
6 Вода q.s. 1 мл
* соединение 1 представляет собой соединение по изобретению
Процедура изготовления:
5. Ингредиент 1 растворяют в ингредиенте 2.
6. Добавляют ингредиенты 3, 4 и 5 к ингредиенту 6 и смешивают до получения дисперсии, после чего гомогенизируют.
7. К смеси, полученной на стадии 2, добавляют раствор, полученный на стадии 1, и гомогенизируют до получения полупрозрачной дисперсии.
8. Продукт стерилизуют путем фильтрации через фильтр с размером пор 0,2 мкм и продуктом заполняют пузырьки.
Хотя изобретение было описано со ссылкой на конкретные и предпочтительные варианты осуществления, специалистам в данной области должно быть очевидно, что с помощью стандартных экспериментов и опытов могут быть разработаны другие варианты и модификации. Таким образом, подразумевается, что объем изобретения не ограничивается приведенным выше описанием, а определяется приведенными ниже пунктами формулы изобретения и их эквивалентами.

Claims (20)

1. Пиразолобензодиазепины формулы
Figure 00000018
где R1 означает водород, -NO2, -CN, галоид, -OR5, -COOR7, CONR8R9, -NR10R11, -NHCOR12, -NHSO2R13;
R2 и R4 каждый независимо друг от друга означает водород, галоид, -NO2, -СF3;
R3 означает водород, циклоалкил, содержащий 3-8 атомов углерода, арил, представляющий собой ароматическую группу, содержащую 6-10 атомов углерода и состоящую из 1 или 2 колец, гетероарил, имеющий 5-10 атомов, 1 или 2 кольца и содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, О и S, -COOR7, -CN, алкенил, имеющий 2-6 атомов углерода, -CONR8R9, или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода, который необязательно замещен группой OR9, F или вышеуказанным арилом;
R5 означает алкил, имеющий 1-6 атомов углерода;
R7 означает водород или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода;
R8 и R9 каждый независимо друг от друга означает водород или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода, который необязательно замещен гидроксигруппой или NH2; альтернативно R8 и R9 могут образовать морфолиногруппу;
R10, R11 и R12 каждый независимо друг от друга означает водород или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода;
R13 означает алкил, имеющий 1-6 атомов углерода, который необязательно замещен галоидом или -NR14R15;
R14 и R15 каждый независимо друг от друга означает водород или алкил, имеющий 1-6 атомов углерода, который необязательно замещен галоидом, или альтернативно -NR14R15 означает морфолиногруппу,
или фармацевтически приемлемые соли упомянутых выше соединений.
2. Соединение по п.1, где R1 означает водород, -NO2, -CN, -CONH2, галоид.
3. Соединение по п.1 или 2, где R1 означает -NO2, -CN или -CONH2.
4. Соединение по любому из пп.1-3, где R2 находится в положении 2' и означает водород или галоид.
5. Соединение по любому из пп.1-4, где R3 означает алкил, содержащий 1-6 атомов углерода, гидрокси(С1-С6)алкил, циклоалкил, содержащий 3-8 атомов углерода или гетероарил, имеющий 5-10 атомов, 1 или 2 кольца и содержащий 1-3 гетероатома, выбранных из N, О или S.
6. Соединение по любому из пп.1-4, где R3 означает метил, этил или гидроксиметил.
7. Соединение по п.1, представляющее собой 3-метил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
8. Соединение по п.1, представляющее собой 3-метил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбонитрил.
9. Соединение по п.1, представляющее собой 3-метил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид.
10. Соединение по п.1, представляющее собой 3-гидроксиметил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбонитрил.
11. Соединение формулы I по п.1, которое означает 5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-хлорфенил)-7-аминопиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-фенил-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-фторфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-хлорфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2,4-дихлорфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-фенилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-фторфенил)-7-фторпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-хлорфенил)-7-метоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-фторфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-фторфенил)-7-цианопиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-фенил-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(3-нитрофенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-трифторметил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-фенил-7-карбометоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
натриевая соль (5-фенилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)карбоновой кислоты,
5-(2-фторфенил)-7-йодпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-фторфенил)-7-карбоэтоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
N-(2-гидроксиэтил)-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид,
5-(2-фторфенил)-7-морфолинилкарбонилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
N,N-бис(2-гидроксиэтил)-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид,
(5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)карбоновая кислота,
5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид или
5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
12. Соединение формулы I по п.1, которое означает
3-этил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-фенилэтил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(1-метилэтил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(1-метилэтил)-5-(2-хлорфенил)-7-аминопиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-фенилметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-карбоэтоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-метилпропил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-трифторметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-гидроксиметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
N-(2-гидроксиэтил)-3-метил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид,
3-(1-метилпропил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метоксиметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-этенил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-хлорфенил)-7-метоксипиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-хлорфенил)-7-аминопиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-фенил-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-хлорфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
N-(3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)ацетамид,
N-(3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)метансульфонамид,
3-метил-5-фенил-7-фторпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-фенил-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-йодпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-морфолинилкарбонилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-фенилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-хлорпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-трифторметилфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-фенил-7-йодпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-фенил-7-бромпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-метил-5-(2-фторфенил)-7-фторпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-циклопропил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-циклопропил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин или
3-пропил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
13. Соединение формулы I по п.1, которое означает
3-карбоэтокси-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбоксамид,
N,N-диметил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбоксамид, или
5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбонитрил.
14. Соединения, выбранные из ряда:
3-(4-метилфенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(4-диметиламинофенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-цианофенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-метилфенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-нитрофенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-трифторметилфенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-трифторметилфенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(1-нафтил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-метоксифенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(4-(метилтио)фенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(4-трифторметоксифенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(4-гидрокси-2-метоксифенил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-гидроксифенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-((1,1'-бифенил)-4ил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-нитрофенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-феноксифенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-цианофенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-этоксифенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-метилфенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин
или
3-(2-фторфенил)-5-фенил-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
15. Соединение формулы I по п.1, представляющее собой
3-фенил-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин
или
3-(2-нафтил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
16. Соединение формулы I по п.1, которое означает
3-(4-метилпиразол-5-ил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(1-тиазолил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(1,3,4-оксадиазол-2-ил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(4-имидазолил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-пиразолил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-пиразолил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-тиенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-фуранил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-метилтиен-2-ил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(индол-2-ил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(1-метил-1Н-пиррол-2-ил)5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-пиридинил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(4-пиридинил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(4-(1-пирролил)фенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-пирролил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(4-изохинолинил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-бензофуранил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-тиенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(5-метилтиен-2-ил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2-имидазолил)-5-фенил-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(3-пиридинил)-5-фенил-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(1,3-бензодиоксол-5-ил)-5-фенил-7-нитропиразоло[3,4] [1,4]бензодиазепин,
3-(2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил)-5-фенил-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(2,3-метилендиоксифенил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин или
3-(5-этилфуран-2-ил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин.
17. Соединения, выбранные из ряда
5-фенил-7-метансульфонилпиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
3-(N,N-диметиламинометил)-5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин,
N-(3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)-2-пропенамид,
N-[2-(4-морфолинил)этил]-3-метил-5-(2-фторфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-карбоксамид,
5-(2-хлорфенил)-7-нитропиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-3-карбоксальдегид,
N'-(3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)-N,N-диметиламинсульфонамид,
N'-(3-метил-5-(2-хлорфенил)пиразоло[3,4][1,4]бензодиазепин-7-ил)-N,N-хлорметиламинсульфонамид,
N'-(3-мeтил-5-(2-xлopфeнил)пиpaзoлo[3,4][l,4]бeнзoдиaзeпин-7-ил)-4-морфолинсульфонамид или
N-aминo-5-(2-xлopфeнил)-7-нитpoпиpaзoлo[3,4][l,4]бeнзoдиaзeпин-3-карбоксамид.
18. Тиолактамы формул
Figure 00000019
или
Figure 00000020
где R2 и R4 имеют значения, как указано в п.1;
R1 обозначает Н, -NO2, -CN, галоген, -OR5 или -COOR7;
R5 и R7 имеют значения, указанные в п.1;
R3 имеет значения; как в п.1, за исключением группы -CONR8R9.
19. Фармацевтическая композиция, ингибирующая циклинзависимые киназы CDR2, включающая в качестве активного ингредиента соединение по любому из пп.1-17 и фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель.
20. Соединения по любому из пп.1-17, предназначенные для лечения и профилактики опухолей грудной железы или ободной кишки.
RU2001130446/04A 1999-04-21 2000-04-14 Пиразолбензодиазепины в качестве ингибиторов cdk2, промежуточные соединения для их получения и фармацевтическая композиция, их содержащая RU2249593C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13037099P 1999-04-21 1999-04-21
US60/130370 1999-04-21
US60/130,370 1999-04-21

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2001130446A RU2001130446A (ru) 2003-09-10
RU2249593C2 true RU2249593C2 (ru) 2005-04-10

Family

ID=22444382

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001130446/04A RU2249593C2 (ru) 1999-04-21 2000-04-14 Пиразолбензодиазепины в качестве ингибиторов cdk2, промежуточные соединения для их получения и фармацевтическая композиция, их содержащая

Country Status (33)

Country Link
US (3) US6440959B1 (ru)
EP (1) EP1185529B1 (ru)
JP (1) JP3746680B2 (ru)
KR (1) KR100481757B1 (ru)
CN (2) CN1196703C (ru)
AR (1) AR023542A1 (ru)
AT (1) ATE279413T1 (ru)
AU (1) AU768667B2 (ru)
BR (1) BR0009887A (ru)
CA (1) CA2367704C (ru)
CO (1) CO5170444A1 (ru)
CZ (1) CZ20013738A3 (ru)
DE (1) DE60014893T2 (ru)
DK (1) DK1185529T3 (ru)
ES (1) ES2228522T3 (ru)
HK (1) HK1046278B (ru)
HR (1) HRP20010742A2 (ru)
HU (1) HUP0300318A3 (ru)
IL (1) IL145764A0 (ru)
JO (1) JO2248B1 (ru)
MA (1) MA26782A1 (ru)
NO (1) NO20015065D0 (ru)
NZ (1) NZ514523A (ru)
PE (1) PE20010054A1 (ru)
PL (1) PL200933B1 (ru)
PT (1) PT1185529E (ru)
RU (1) RU2249593C2 (ru)
SI (1) SI1185529T1 (ru)
TR (1) TR200103016T2 (ru)
TW (1) TW585866B (ru)
WO (1) WO2000064900A1 (ru)
YU (1) YU73101A (ru)
ZA (1) ZA200108016B (ru)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2394826C2 (ru) * 2004-10-13 2010-07-20 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Дизамещенные пиразолобензодиазепины, используемые в качестве ингибиторов cdk2 и ангиогенеза, а также для лечения злокачественных новообразований молочной железы, толстого кишечника, легкого и предстательной железы
RU2551848C2 (ru) * 2009-09-18 2015-05-27 ПАЙОН ЮКей ЛИМИТЕД Способ получения метилового эфира 3-[(4s)-8-бром-1-метил-6-(2-пиридинил)-4н-имидазо[1,2-а][1,4]бензодиазепин-4-ил]пропионовой кислоты или его бензолсульфонатной соли и соединения, применяемые в этом способе
US9656987B2 (en) 2013-03-04 2017-05-23 Paion Uk Limited Process for preparing 3-[(S)-7-bromo-2-((2-oxopropyl)amino)-5-pyridin-2-yl-3H-1,4-benzodiazepin-3-yl]Propionic acid methyl ester
US9777007B2 (en) 2006-07-10 2017-10-03 Paion Uk Limited Short-acting benzodiazepine salts and their polymorphic forms
RU2723985C1 (ru) * 2016-12-13 2020-06-18 Нанкин Транстера Биосайенсиз Ко. Лтд. Соединение-ингибитор мультикиназ и его кристаллическая форма и применение
RU2837452C1 (ru) * 2020-05-08 2025-03-31 Транстера Сайенсиз (Наньцзин), Инк. Способ синтеза противоопухолевого соединения и его промежуточных соединений

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6520951B1 (en) 1996-09-13 2003-02-18 Scimed Life Systems, Inc. Rapid exchange catheter with detachable hood
CA2466055A1 (en) * 2001-11-13 2003-05-22 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Substituted 1,4-benzodiazepines and uses thereof for the treatment of cancer
FR2847253B1 (fr) * 2002-11-19 2007-05-18 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de pyridazinones a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques les renfermant
ES2545666T3 (es) * 2003-02-27 2015-09-14 Abbvie Inc. 5,10-Dihidro-11H-dibenzo[b,e][1,4]diazepin-11-ona como inhibidores de quinasa
EP1940410A1 (en) * 2005-10-14 2008-07-09 F.Hoffmann-La Roche Ag Regimen of administration for 5-(2-chlorophenyl)-1 ,2-dihydro-7-fluoro-8-methoxy-3-methyl-pyrazolo [3, 4.-b] [1, 4] benzodiazepine
KR20100073454A (ko) * 2008-12-23 2010-07-01 국립암센터 트란스글루타미나제 억제제로 사용되는 신규한 피라졸로디아제핀계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 조성물
EP2450039A1 (en) 2010-11-08 2012-05-09 PAION UK Ltd. Dosing regimen for sedation with CNS 7056 (Remimazolam)
US9321737B2 (en) * 2012-02-02 2016-04-26 Senex Biotechnology Inc CDK8-CDK19 selective inhibitors and their use in anti-metastatic and chemopreventative methods for cancer
CN103288830A (zh) * 2012-02-24 2013-09-11 中国科学院大连化学物理研究所 一种合成手性二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]-苯并二氮杂卓的方法
CN102603743B (zh) * 2012-02-24 2014-05-28 南京天易生物科技有限公司 抗肿瘤的氮杂苯并[f]薁衍生物其制备方法及其用途
CN103288828A (zh) * 2012-02-24 2013-09-11 中国科学院大连化学物理研究所 一种合成手性二氢-6H-吲哚并[2,1-c][1,4]-苯并二氮杂卓的方法
CN106608877B (zh) * 2015-10-21 2018-11-13 新发药业有限公司 一种依鲁替尼中间体4-氨基-3-（4-苯氧基）苯基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备方法
JP7139323B2 (ja) * 2016-11-01 2022-09-20 エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー Ｃｎｓ関連疾患を処置するための１，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジアゼピン－２－チオン
CN109020980B (zh) * 2017-06-09 2020-11-20 华东师范大学 一类抗肿瘤作用的吡唑并嘧啶二氮*衍生物
US11066404B2 (en) 2018-10-11 2021-07-20 Incyte Corporation Dihydropyrido[2,3-d]pyrimidinone compounds as CDK2 inhibitors
US11384083B2 (en) 2019-02-15 2022-07-12 Incyte Corporation Substituted spiro[cyclopropane-1,5′-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin]-6′(7′h)-ones as CDK2 inhibitors
US11472791B2 (en) 2019-03-05 2022-10-18 Incyte Corporation Pyrazolyl pyrimidinylamine compounds as CDK2 inhibitors
WO2020205560A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 Incyte Corporation Sulfonylamide compounds as cdk2 inhibitors
US11447494B2 (en) 2019-05-01 2022-09-20 Incyte Corporation Tricyclic amine compounds as CDK2 inhibitors
US11440914B2 (en) 2019-05-01 2022-09-13 Incyte Corporation Tricyclic amine compounds as CDK2 inhibitors
MX2022001940A (es) 2019-08-14 2022-05-10 Incyte Corp Compuestos de imidazolil pirimidinilamina como inhibidores de cdk2.
CN119930610A (zh) 2019-10-11 2025-05-06 因赛特公司 作为cdk2抑制剂的双环胺
AU2021267622A1 (en) * 2020-05-08 2022-12-15 Transthera Sciences (Nanjing), Inc. Synthesis method for anti-tumor compound and intermediate thereof
AR124154A1 (es) 2020-11-27 2023-02-22 Rhizen Pharmaceuticals Ag Inhibidores de cdk
WO2022149057A1 (en) 2021-01-05 2022-07-14 Rhizen Pharmaceuticals Ag Cdk inhibitors
KR20240020735A (ko) 2021-05-07 2024-02-15 카이메라 쎄라퓨틱스 인코포레이티드 Cdk2 분해제 및 그 용도
TW202304427A (zh) * 2021-05-10 2023-02-01 大陸商藥捷安康(南京)科技股份有限公司 多激酶抑制劑的藥物組合物及其用途
US11981671B2 (en) 2021-06-21 2024-05-14 Incyte Corporation Bicyclic pyrazolyl amines as CDK2 inhibitors
US11976073B2 (en) 2021-12-10 2024-05-07 Incyte Corporation Bicyclic amines as CDK2 inhibitors
WO2024030399A2 (en) * 2022-08-02 2024-02-08 Lab1636, Llc Use of a gaba-a pam for reduction of tactile hypersensitivity
WO2026024674A1 (en) 2024-07-22 2026-01-29 Genesis Therapeutics, Inc. Methods of treating skp2-associated cancers

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0523846A2 (en) * 1991-06-14 1993-01-20 Merck & Co. Inc. 1,4-Benzodiazepines with 5-membered heterocyclic rings
WO1998014450A1 (en) * 1996-10-02 1998-04-09 Novartis Ag Pyrimidine derivatives and processes for the preparation thereof

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6350786B1 (en) * 1998-09-22 2002-02-26 Hoffmann-La Roche Inc. Stable complexes of poorly soluble compounds in ionic polymers

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0523846A2 (en) * 1991-06-14 1993-01-20 Merck & Co. Inc. 1,4-Benzodiazepines with 5-membered heterocyclic rings
WO1998014450A1 (en) * 1996-10-02 1998-04-09 Novartis Ag Pyrimidine derivatives and processes for the preparation thereof

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
формула, п.1. *
формула. *

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2394826C2 (ru) * 2004-10-13 2010-07-20 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Дизамещенные пиразолобензодиазепины, используемые в качестве ингибиторов cdk2 и ангиогенеза, а также для лечения злокачественных новообразований молочной железы, толстого кишечника, легкого и предстательной железы
US9777007B2 (en) 2006-07-10 2017-10-03 Paion Uk Limited Short-acting benzodiazepine salts and their polymorphic forms
US12365684B2 (en) 2006-07-10 2025-07-22 Paion Uk Limited Short-acting benzodiazepine salts and their polymorphic forms
US10961250B2 (en) 2006-07-10 2021-03-30 Paion Uk Limited Short-acting benzodiazepine salts and their polymorphic forms
US10472365B2 (en) 2006-07-10 2019-11-12 Paion Uk Limited Short-acting benzodiazepine salts and their polymorphic forms
US10000464B2 (en) 2009-09-18 2018-06-19 Paion Uk Limited Process for preparing 3-[(4S)-8-bromo-1-methyl-6-(2-pyridinyl)-4H-imidazo[1,2-A][1,4]benzodiazepine-4-yl]propionic acid methyl ester or the benzene sulfonate salt thereof, and compounds useful in that process
US9512078B2 (en) 2009-09-18 2016-12-06 Paion Uk Limited Process for preparing 3-[(45)-8-bromo-1-methyl-6-(2-pyridinyl)-4H-imidazo[1,2-A][1,4]benzodiazepine-4-yl]propionic acid methyl ester or the benzene sulfonate salt thereof, and compounds useful in that process
US9156842B2 (en) 2009-09-18 2015-10-13 Paion Uk Limited Process for preparing 3-[(4S)-8-bromo-1-methyl-6-(2-pyridinyl)-4H-imidazo[1,2-A][1,4]benzodiazepine-4-YL]propionic acid methyl ester or the benzene sulfonate salt thereof, and compounds useful in that process
RU2551848C2 (ru) * 2009-09-18 2015-05-27 ПАЙОН ЮКей ЛИМИТЕД Способ получения метилового эфира 3-[(4s)-8-бром-1-метил-6-(2-пиридинил)-4н-имидазо[1,2-а][1,4]бензодиазепин-4-ил]пропионовой кислоты или его бензолсульфонатной соли и соединения, применяемые в этом способе
US9656987B2 (en) 2013-03-04 2017-05-23 Paion Uk Limited Process for preparing 3-[(S)-7-bromo-2-((2-oxopropyl)amino)-5-pyridin-2-yl-3H-1,4-benzodiazepin-3-yl]Propionic acid methyl ester
RU2723985C1 (ru) * 2016-12-13 2020-06-18 Нанкин Транстера Биосайенсиз Ко. Лтд. Соединение-ингибитор мультикиназ и его кристаллическая форма и применение
RU2723985C9 (ru) * 2016-12-13 2020-09-21 Нанкин Транстера Биосайенсиз Ко. Лтд. Соединение-ингибитор мультикиназ и его кристаллическая форма и применение
RU2837452C1 (ru) * 2020-05-08 2025-03-31 Транстера Сайенсиз (Наньцзин), Инк. Способ синтеза противоопухолевого соединения и его промежуточных соединений

Also Published As

Publication number Publication date
HUP0300318A3 (en) 2004-11-29
NZ514523A (en) 2003-11-28
HUP0300318A2 (hu) 2003-06-28
ES2228522T3 (es) 2005-04-16
MA26782A1 (fr) 2004-12-20
CZ20013738A3 (cs) 2002-08-14
AU4748000A (en) 2000-11-10
PL354405A1 (en) 2004-01-12
JP2002543081A (ja) 2002-12-17
SI1185529T1 (en) 2005-02-28
PE20010054A1 (es) 2001-02-07
CN1603314A (zh) 2005-04-06
US6838558B2 (en) 2005-01-04
CN1279029C (zh) 2006-10-11
CN1348455A (zh) 2002-05-08
KR20010112435A (ko) 2001-12-20
KR100481757B1 (ko) 2005-04-11
ZA200108016B (en) 2003-03-26
BR0009887A (pt) 2002-01-22
CA2367704A1 (en) 2000-11-02
US6440959B1 (en) 2002-08-27
ATE279413T1 (de) 2004-10-15
DK1185529T3 (da) 2005-02-07
HK1046278B (zh) 2005-08-12
DE60014893T2 (de) 2005-10-13
WO2000064900A1 (en) 2000-11-02
HK1046278A1 (en) 2003-01-03
EP1185529B1 (en) 2004-10-13
CO5170444A1 (es) 2002-06-27
DE60014893D1 (de) 2004-11-18
JP3746680B2 (ja) 2006-02-15
AU768667B2 (en) 2003-12-18
PL200933B1 (pl) 2009-02-27
AR023542A1 (es) 2002-09-04
TW585866B (en) 2004-05-01
JO2248B1 (en) 2004-10-07
HRP20010742A2 (en) 2002-12-31
NO20015065L (no) 2001-10-18
US6916923B2 (en) 2005-07-12
CN1196703C (zh) 2005-04-13
EP1185529A1 (en) 2002-03-13
TR200103016T2 (tr) 2002-04-22
NO20015065D0 (no) 2001-10-18
YU73101A (sh) 2004-05-12
PT1185529E (pt) 2005-02-28
IL145764A0 (en) 2002-07-25
US20020183514A1 (en) 2002-12-05
CA2367704C (en) 2008-06-17
US20040198976A1 (en) 2004-10-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2249593C2 (ru) Пиразолбензодиазепины в качестве ингибиторов cdk2, промежуточные соединения для их получения и фармацевтическая композиция, их содержащая
CN107001283B (zh) Flt3受体拮抗剂
EP1202734B1 (en) 3(5)-ureido-pyrazole derivatives, process for their preparation and their use as antitumor agents
DE60315062T2 (de) Triazolverbindungen zur behandlung von dysmenorrhoe
CA2978823A1 (en) Small molecule inhibitors of lactate dehydrogenase and methods of use thereof
JPH0753731B2 (ja) 複素環式キノキサリン化合物、その製造方法並びその用途
BR112019011825A2 (pt) composto, enantiômero isolado, composição farmacêutica, método para inibir a atividade do transportador de monocarboxilato mct4, ou um mutante do mesmo, em uma amostra biológica, método para inibir a atividade do transportador de monocarboxilato mct4, ou um mutante do mesmo, em relação ao transportador de monocarboxilato mct1, ou um mutante do mesmo, em um paciente, método para tratar um distúrbio mediado por transportador de monocarboxilato mct4 em um sujeito que necessite do mesmo, uso de um composto e método para obter um efeito em um paciente
IL296413A (en) gpr52 modulator compounds
JPH0873439A (ja) １−ベンジル−１，３−ジヒドロ−２ｈ−ベンズイミダゾール−２−オン誘導体、これらの調製およびこれらを含有する薬学的組成物
CN102316738A (zh) 作为激酶抑制剂的酰胺类
JP2007538068A (ja) 新規な縮合複素環およびそれらの使用
AU765213B2 (en) Tetrahydroindazole derivatives as ligands for gaba-a alpha 5 receptors
CN110753691A (zh) 化合物
US4596799A (en) 9H-pyrrolo[2,1-c]-1,2,4-triazolo[4,3-a][1,4]benzodiazepines
TW202417429A (zh) 用於抑制yap-tead交互作用的新穎雜雙環化合物及包含其之藥學組成物
EP0725776B1 (en) 3-aryl-4-alkyl and 4,5-dialkyl-4h-1,2,4-triazoles useful as memory enhancers
MXPA01010545A (en) Pyrazolobenzodiazepines as cdk2 inhibitors
JP2007332034A (ja) 複素環化合物
JP5297663B2 (ja) 複素環化合物
CN113493436A (zh) 胺基取代吡啶衍生物及其制法和药物组合物与用途
HK40022857B (zh) 用於治疗性和/或预防性治疗癌症的化合物

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20130415