PL200933B1 - Pirazolobenzodiazepiny, związki pośrednie, środek farmaceutyczny i zastosowanie pirazolobenzodiazepin - Google Patents

Pirazolobenzodiazepiny, związki pośrednie, środek farmaceutyczny i zastosowanie pirazolobenzodiazepin

Info

Publication number
PL200933B1
PL200933B1 PL354405A PL35440500A PL200933B1 PL 200933 B1 PL200933 B1 PL 200933B1 PL 354405 A PL354405 A PL 354405A PL 35440500 A PL35440500 A PL 35440500A PL 200933 B1 PL200933 B1 PL 200933B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
benzodiazepine
chlorophenyl
nitropyrazolo
methyl
compound
Prior art date
Application number
PL354405A
Other languages
English (en)
Other versions
PL354405A1 (pl
Inventor
Qingjie Ding
Jin-Jun Liu
Vincent Stewart Madison
Giacomo Pizzolato
Chung-Chen Wei
Peter Michael Wovkulich
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of PL354405A1 publication Critical patent/PL354405A1/pl
Publication of PL200933B1 publication Critical patent/PL200933B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D243/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D243/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4
    • C07D243/10—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D243/14—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines
    • C07D243/16—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals
    • C07D243/18—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals substituted in position 2 by nitrogen, oxygen or sulfur atoms
    • C07D243/22—Sulfur atoms

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Wynalazek dotyczy nowych pirazolobenzo- diazepin o ogólnym wzorze (I) i ich farmaceu- tycznie dopuszczalnych soli, gdzie R 1 , R 2 , R 3 i R 4 maja znaczenie podane w opisie, które hamuj a kinazy zale zne od cyklin (CDK), zw lasz- cza CDK2. Zwi azki te i ich farmaceutycznie dopuszczalne sole s a srodkami przeciwprolife- racyjnymi u zytecznymi w leczeniu lub zwalcza- niu proliferacyjnych zaburze n komórkowych, zw laszcza raka. Wynalazek dotyczy tak ze zwi azków po srednich przydatnych do wytwa- rzania powy zszych srodków przeciwprolifera- cyjnych. Ponadto wynalazek dotyczy srodka farmaceutycznego zawieraj acego powy zszy zwi azek i farmaceutycznie dopuszczalny no snik lub zaróbk e. Ponadto wynalazek dotyczy zasto- sowania powy zszych zwi azków jako leków, oraz ich zastosowania do wytwarzania leków do leczenia lub zwalczania nowotworów sutka, okr eznicy, p luc i gruczo lu krokowego. PL PL PL PL PL

Description

Przedmiotem wynalazku są nowe pirazolobenzodiazepiny, które hamują kinazy zależne od cyklin (CDK), zwłaszcza CDK2, związki pośrednie, środek farmaceutyczny i zastosowanie pirazolobenzodiazepin.
Niekontrolowana proliferacja komórek jest cechą charakterystyczną raka. Rakowate komórki nowotworowe zazwyczaj zawierają pewną postać uszkodzeń w genach, które bezpośrednio lub pośrednio regulują cykl podziału komórki.
Kinazy zależne od cyklin (CDK) są enzymami odgrywającymi kluczową rolę w regulacji cyklu komórkowego. Enzymy te regulują przemiany pomiędzy różnymi fazami cyklu komórkowego, takimi jak przechodzenie z fazy G1 do fazy S (okres syntezy aktywnego DNA) lub przechodzenie z fazy G2 do fazy M, podczas którego następuje aktywna mitoza i podział komórki.
CDK składają się z katalitycznej podjednostki CDK i regulatorowej podjednostki cykliny. Podjednostka cykliny jest kluczowym regulatorem aktywności CDK, przy czym każda CDK oddziaływuje z określoną podgrupą cyklin: np. z cykliną A (CDK1, CDK2). Różne pary kinaza/cyklina regulują przemiany w określonych etapach cyklu komórkowego.
Zaburzenia w układzie regulacji cyklu komórkowego powiązano z niekontrolowanym wzrostem komórek rakowych. Istnieje obszerna literatura dotycząca zastosowania związków hamujących CDK jako przeciwproliferacyjnych środków terapeutycznych.
Wynalazek dotyczy pirazolobenzodiazepin zdolnych do hamowania aktywności jednej lub większej liczby CDK, zwłaszcza CDK2. Takie związki są użyteczne w leczeniu raka, zwłaszcza guzów litych. W szczególności związki według wynalazku są użyteczne zwłaszcza w leczeniu lub zwalczaniu nowotworów sutka, okrężnicy, płuc i gruczołu krokowego. Wynalazek dotyczy także związków pośrednich przydatnych do wytwarzania wyżej wspomnianych pirazolobenzodiazepin.
Wynalazek dotyczy pirazolobenzodiazepin o ogólnym wzorze I
R1 oznacza atom wodoru, -NO2, -CN, atom chlorowca, -OR5, -COOR7, -CONR8R9, -NH2, -NHCOR12 lub -NHSO2R13;
R2 oznacza atom wodoru, -atom chlorowca, -NO2, -CF3 lub -C1-C6-alkil o prostym łańcuchu podstawiony atomem chlorowca;
R3 oznacza atom wodoru, -C3-C8-cykloalkil, -fenyl, -naftyl, -pirolil, -pirazolil, -tiazolil, -imidazolil, -tiofenyl, -furanyl, -pirydynyl, -benzofuranyl, -indolil, -oksadiazolil, -izochinolinyl, C1-C2-alkilenodioksyfenyl, -COOR7, -CN, -C2-C6-alkenyl, -CONR8R9 lub -C1-C6-alkil ewentualnie podstawiony hydroksylem, -OR9, F i/lub fenylem;
R4 oznacza atom wodoru lub atom chlorowca;
R5 oznacza -C1-C6-alkil;
R7 oznacza atom wodoru lub -C1-C6-alkil;
R8 i R9 niezależnie oznaczają atom wodoru lub -C1-C6-alkil, który z kolei jest ewentualnie podstawiony hydroksylem; albo
R8 i R9 mogą tworzyć morfolinyl;
R12 oznacza -C1-C6-alkil; a
R13 oznacza -C1-C6-alkil, oraz farmaceutycznie dopuszczalnych soli powyższych związków.
PL 200 933 B1
W konkretnej postaci związków o wzorze I, według wynalazku, R1 oznacza atom wodoru, NO2,
CN, CONH2 lub atom chlorowca. Korzystniej R1 oznacza NO2, CN lub CONH2. R1 występuje korzystnie w pozycji 7 lub 8.
W innej korzystnej postaci związków o wzorze I, według wynalazku, R2 występuje w pozycji 2' i oznacza atom wodoru lub atom chlorowca.
W innej korzystnej postaci związków o wzorze I, R3 oznacza -C1-C6-alkil, -C1-C6-hydroksyalkil, -C3-C8-cykloalkil, -pirolil, -pirazolil, -tiazolil, -imidazolil, -tiofenyl, -furanyl, -pirydynyl, -benzofuranyl, -indolil, -oksadiazolil, -izochinolinyl lub -C1-C2-alkilenodioksyfenyl. Do korzystnych -C1-C6-alkili należą metyl, etyl lub hydroksymetyl. Korzystnymi -C3-C8-cykloalkilami są niepodstawione grupy C3-C5.
W innej korzystnej postaci związków o wzorze I, R4 występuje w pozycji 4' i oznacza atom wodoru lub atom chlorowca, najkorzystniej R4 oznacza atom wodoru.
W innej korzystnej postaci związków o wzorze I, R5 oznacza metyl lub etyl.
W innej korzystnej postaci związków o wzorze I, R7 oznacza atom wodoru, metyl lub etyl.
W innej korzystnej postaci zwią zków o wzorze I, R8 i R9 niezależ nie oznaczają atom wodoru, metyl, etyl lub hydroksyetyl.
W innej korzystnej postaci związków o wzorze I, R12 oznacza metyl lub etyl.
W innej korzystnej postaci związków o wzorze I, R13 oznacza metyl lub etyl.
Szczególnie korzystnym związkiem według wynalazku jest 3-metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
Innym szczególnie korzystnym związkiem według wynalazku jest 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karbonitryl.
Innym szczególnie korzystnym związkiem według wynalazku jest 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid.
Jeszcze innym szczególnie korzystnym związkiem według wynalazku jest 3-hydroksymetylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4][1,4]benzodiazepino-7-karbonitryl.
Ponadto szczególnie korzystnymi związkami o wzorze I według wynalazku są
5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-chlorofenylo)-7-aminopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-fenylo-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-chlorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2,4-dichlorofenylo)-7-chloropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-fenylopirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-chlorofenylo)-7-metoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-cyjanopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(3-nitrofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-trifluorometylofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-fenylo-7-karbometoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, sól sodowa kwasu (5-fenylopirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)karboksylowego,
5-(2-fluorofenylo)-7-jodopirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-karboetoksypirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina,
N-(2-hydroksyetylo)-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid,
5-(2-fluorofenylo)-7-morfolinylokarbonylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
N,N-bis-(2-hydroksyetylo)-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid, kwas (5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)karboksylowy, 5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid lub
5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
Innymi szczególnie korzystnymi związkami o wzorze I według wynalazku są
3-etylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-fenyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(1-metyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina,
3-(1-metyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-aminopirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina,
PL 200 933 B1
3-(fenylometylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-karboetoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-metylopropylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-trifluorometylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-hydroksymetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
N-(2-hydroksyetylo)-3-metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4][1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid, 3-(1-metylopropylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metoksymetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-etenylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-metoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-aminopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-fenylo-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
N-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)acetamid,
N-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)metanosulfonoamid,
3-metylo-5-fenylo-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-jodopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-morfolinylokarbonylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-fenylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-trifluorometylofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-fenylo-7-jodopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-fenylo-7-bromopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-cyklopropylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina lub
3-propylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
Jeszcze innymi szczególnie korzystnymi związkami o wzorze I według wynalazku są
3-karboetoksy-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid,
N,N-dimetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid lub
5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karbonitryl.
Dalszymi szczególnie korzystnymi związkami o wzorze I według wynalazku są
3-fenylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(1-naftyło)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina lub
3-(2-naftyło)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
Ponadto szczególnie korzystnymi związkami o wzorze I według wynalazku są
3-(1-tiazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina,
3-(1,3,4-oksadiazol-2-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(4-imidazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-pirazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(3-pirazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-tienylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-furanylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(indol-2-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(3-pirydynylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(4-pirydynylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-pirolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(4-izochinolinylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina,
3-(2-benzofuranylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(3-tienylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-imidazolilo)-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(3-pirydynylo)-5-fenylo-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina,
PL 200 933 B1
3-(1,3-benzodioksol-5-ilo)-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2,3-d1Hydro-1,4-benzodioksyn-6-ylo)-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina lub
3-(2,3-metylenedioksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina.
Ponadto wynalazek dotyczy związków wybranych z grupy obejmującej 5-fenylo-7-metanosulfonylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(N,N-dimetyloaminometylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, N-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)-2-propenoamid, N-amino-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid, 5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyaldehyd, N'-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4][1,4]benzodiazepin-7-ylo)-4-N,N-dimetyloaminosulfonoamid,
N'-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4][1,4]benzodiazepin-7-ylo)-4-N-chlorometyloaminosulfonoamid,
N'-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)-4-morfolinosulfonoamid,
N-[2-(4-morfolinylo)etylo]-3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-pirazolo[3,4][1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid,
3-(4-metylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3-(4-dimetyloaminofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3-(2-cyjanofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3-(2-metylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3-(2-nitrofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3-(2-trifluorometylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3-(3-trifluorometylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3-(2-metoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3-(4-(metylotio)fenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę,
3- 4-trifluorometoksyfenylo) -5- (2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepinę, 3-(4-hydroksy-2-metoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(3-hydroksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę,
3-((1,1'-bifenyl)-4-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(3-nitrofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(3-fenoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(3-cyjanofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(3-etoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(3-metylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(2-fluorofenylo)-5-fenylo-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepinę,
3-(4-metylopirazol-5-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(3-metylotien-2-ylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(1-metylo-1H-pirol-2-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(4-(1-pirolilo)fenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę, 3-(5-metylotien-2-ylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę i 3-(5-etylofuran-2-ylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepinę.
Ponadto wynalazek dotyczy związków pośrednich o wzorze 3
w którym R1 oznacza atom chlorowca
R2 oznacza atom chlorowca, a R4 oznacza atom wodoru.
PL 200 933 B1
Ponadto wynalazek dotyczy środka farmaceutycznego zawierającego substancję czynną i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub zaróbkę, którego cechą jest to, że jako substancję czynną zawiera określony powyżej związek lub jego farmaceutycznie dopuszczalną sól.
Ponadto wynalazek dotyczy określonych powyżej związków lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli do zastosowania jako leki.
Wynalazek dotyczy także zastosowania określonych powyżej związków lub ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli do wytwarzania leku do leczenia lub zwalczania nowotworów sutka, okrężnicy, płuc i gruczołu krokowego, a zwłaszcza nowotworów sutka i okrężnicy.
Związki według wynalazku mogą występować w postaci proleków oraz farmaceutycznie czynnych metabolitów.
Stosowane w opisie poniższe określenia mają następujące znaczenie.
„C2-C6-Alkenyl” oznacza prostołańcuchową lub rozgałęzioną, podstawioną lub niepodstawioną, nienasyconą alifatyczną grupę węglowodorową o 2-6, korzystnie 2-4, atomach węgla, zawierającą wiązania podwójne. Do typowych grup alkenylowych należą grupa etylenowa, propylenowa, izopropylenowa, butylenowa itp. Korzystne grupy alkenylowe są grupami o prostym łańcuchu.
„C3-C8-Cykloalkil” oznacza niearomatyczną, częściowo lub całkowicie nasyconą cykliczną alifatyczną grupę węglowodorową o 3-8 atomach. Do przykładowych grup cykloalkilowych należą cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl i cykloheksyl.
„Atom chlorowca” oznacza atom fluoru, chloru, bromu lub jodu. Do korzystnych atomów chlorowca należy atom fluoru lub chloru.
„IC50” oznacza stężenie konkretnej pirazolobenzodiazepiny niezbędne do zahamowania w 50% określonej mierzonej aktywności. IC50 można mierzyć między innymi w sposób opisany poniżej w przykładzie 4.
„C1-C6-alkil” oznacza prostołańcuchową lub rozgałęzioną, podstawioną lub niepodstawioną, nasyconą alifatyczną grupę węglowodorową o 1-6, korzystnie 1-4, atomach węgla. Do typowych C1-C6-alkil należą metyl, etyl, propyl, izopropyl, butyl, t-butyl, 2-butyl, pentyl, heksyl itp.
Określenie „farmaceutycznie dopuszczalna sól” odnosi się do zwykłych soli addycyjnych z kwasami lub soli addycyjnych z zasadami, które zachowują biologiczną skuteczność i właściwości związków o wzorze I i które wytwarza się z odpowiednich nietoksycznych kwasów organicznych lub nieorganicznych albo zasad organicznych lub nieorganicznych. Do przykładowych soli addycyjnych z kwasami należą sole pochodzące od kwasów nieorganicznych, takich jak kwas chlorowodorowy, kwas bromowodorowy, kwas jodowodorowy, kwas siarkowy, kwas amidosulfonowy, kwas fosforowy i kwas azotowy, oraz pochodzące od kwasów organicznych, takich jak kwas p-toluenosulfonowy, kwas salicyIowy, kwas metanosulfonowy, kwas szczawiowy, kwas bursztynowy, kwas cytrynowy, kwas jabłkowy, kwas mlekowy, kwas fumarowy itp. Do przykładowych soli addycyjnych z zasadami należą sole pochodzące od wodorotlenku amonu, potasu i sodu oraz od czwartorzędowych wodorotlenków amoniowych, takich jak np. wodorotlenek tetrametyloamoniowy.
„Farmaceutycznie dopuszczalny”, np. farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, zaróbka, prolek itp., oznacza farmakologicznie dopuszczalny i zasadniczo nietoksyczny dla pacjenta, któremu podawany jest konkretny związek.
„Farmaceutycznie czynny metabolit” oznacza produkt metabolizmu związku o wzorze I, który jest farmaceutycznie dopuszczalny i skuteczny.
„Prolek” oznacza związek, który może ulec przemianie w warunkach fizjologicznych lub w wyniku solwolizy w dowolny ze związków o wzorze I lub w farmaceutycznie dopuszczalną sól związku o wzorze I. Prolek może być nieaktywny przy podawaniu pacjentowi, ale ulega przemianie in vivo w aktywny zwią zek o wzorze I.
„Podstawiony”, taki jak podstawiony alkil, oznacza, że podstawienie może występować w jednej lub większej liczbie pozycji, oraz, o ile nie zaznaczono inaczej, że podstawniki w każdym miejscu podstawienia są niezależnie wybrane z określonych wariantów.
Przykłady dodatkowych korzystnych związków stanowią również następujące związki pośrednie:
PL 200 933 B1
przy czym w każdym z wzorów podanych bezpośrednio powyżej R1, R2, R3 i R4 mają wyżej podane znaczenie. Takie związki pośrednie są przydatne w syntezie związków o wzorze I.
Ujawnione związki, określone powyższymi wzorami, mogą wykazywać tautomerię lub izomerię strukturalną. Zakres wynalazku obejmuje wszystkie tautomeryczne lub izomeryczne strukturalne postacie takich związków lub mieszaniny takich postaci i nie jest ograniczony do jakiejkolwiek konkretnej tautomerycznej lub izomerycznej strukturalnej postaci przedstawionej powyższymi wzorami.
Synteza związków o wzorze I
Związki według wynalazku można wytwarzać znanymi sposobami. Odpowiednie sposoby syntezy takich związków podano w przykładach. Ogólnie takie związki można wytwarzać zgodnie ze schematami syntezy przedstawionymi poniżej.
Schemat 1
a) Odczynnik Lawessona (znana reakcja w przypadku większości podstawników)
b) reakcja z Me2N-CH(OEt)2
c) reakcja z hydrazyną.
Związek l jest dostępny w handlu albo wytwarza się go znanymi sposobami.
PL 200 933 B1
Schemat 2
R3 ma znaczenie inne niż H
a) Odczynnik Lawessona (znana reakcja w przypadku większości podstawników)
d) reakcja z R3-CHO w obecności zasady, korzystnie piperydyny c) reakcja z hydrazyną
e) utlenianie dihydropriazolu do pirazolu (z użyciem powietrza, w DMSO, temperatura pokojowa-150°C albo w obecności powietrza i zasady (Cs2CO3/DMF).
Schemat 3
Alternatywny schemat w przypadku gdy R3 ma znaczenie inne niż H
PL 200 933 B1
a) Odczynnik Lawessona (znana reakcja w przypadku większości podstawników)
f) reakcja z R3-CHO, w obecności zasady korzystnie diazabicykloundekanu lub 2,2,6,6-tetrametylopiperydyny.
g) dehydratacja, przez podziałanie słabym kwasem (p-toluenosulfonianem pirydyniowym, octanem pirydyniowym itp.) lub chlorotrimetylosilanem w pirydynie, w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin
c) reakcja z hydrazyną
e) utlenianie dihydropriazolu do pirazolu (z użyciem powietrza, w DMSO, temperatura pokojowa-150°C albo w obecności powietrza i zasady (Cs2CO3/DMF)).
Schemat 4
Przemiana grup funkcyjnych R1 lub R3
gdzie R1 może stanowić dowolny z podstawników R1 zdefiniowanych powyżej oraz, podobnie, R3 może stanowić dowolny z podstawników R3 zdefiniowanych powyżej.
Różne podstawienia można osiągnąć drogą modyfikacji chemicznej istniejących grup funkcyjnych, sposobami przedstawionymi przykładowo na powyższym schemacie 4. Przykładowo gdy pożądana jest grupa R1 = NH2, takie podstawienie można osiągnąć drogą redukcji odpowiedniej grupy nitrowej. Podobnie, gdy pożądana jest grupa R1 = NHR' (gdzie R' = -COR12 lub -SO2R13), takie podstawienie można osiągnąć drogą reakcji odpowiedniego związku, w którym R1 = NH2, z halogenkiem lub bezwodnikiem kwasowym. Gdy pożądana jest grupa R1 = CONRR (gdzie R = atom wodoru lub -C1-C6-alkil, a R = -C1-C6-alkil), takie podstawienie można osiągnąć drogą reakcji odpowiedniego związku, w którym R1 = I, z tlenkiem węgla i pierwszo- lub drugorzędową aminą w obecności katalizatora palladowego.
Ponadto gdy R3 w związku wyjściowym oznacza CO2Et, w celu otrzymania związków zawierających następujące odpowiednie grupy R3 można stosować standardową modyfikację chemiczną:
CH2OH (redukcja); CHO (częściowa redukcja); CH2NMe2 (redukcyjne aminowanie aldehydu); CH2OMe (alkilowanie alkoholu); CH=CH2 (olefinowanie aldehydu); CONRR (gdzie R = H lub -C1-C6alkil, a R = H lub -C1-C6-alkil, aminoliza odpowiednią amin ą HNRR, w której R = H lub -C1-C6-alkil, a R = H lub -C1-C6-alkil); CONHNHR (gdzie R = H, -C1-C6-alkil lub aryl) (hydrazynoliza - reakcja z hydrazyną); CN (dehydratacja amidu CONH2).
Na powyższych schematach, związek o wzorze l jest dostępny w handlu, np. z Sigma albo można go łatwo wytworzyć znanymi sposobami. Tak więc związek o wzorze 2 wytwarza się z odpowiedniego laktamu (związku o wzorze 1) sposobem, który opisali Sternbach i inni, J. Org. Chem. 29:231 (1964), albo w reakcji z odczynnikiem Lawessona.
Środki/preparaty
Jak wspomniano powyżej, w innej postaci wynalazek dotyczy środków farmaceutycznych zawierających związki o wzorze I lub farmaceutycznie dopuszczalne sole związków o wzorze I.
Takie środki farmaceutyczne można podawać doustnie, np. w postaci tabletek, tabletek powlekanych, drażetek, twardych lub miękkich kapsułek żelatynowych, roztworów, emulsji lub zawiesin. Można je także podawać doodbytniczo, np. w postaci czopków, lub pozajelitowo, np. w postaci roztworów do iniekcji.
Środki farmaceutyczne według wynalazku, zawierające związki o wzorze I lub ich sole, można wytwarzać znanymi sposobami, np. przez zwykłe mieszanie, kapsułkowanie, rozpuszczanie, granulowanie, emulgowanie, otaczanie, wytwarzanie drażetek lub liofilizację. Takie preparaty farmaceutyczne
PL 200 933 B1 można formułować z terapeutycznie obojętnymi nośnikami nieorganicznymi lub organicznymi. Jako takie nośniki w przypadku tabletek, tabletek powlekanych, drażetek i twardych kapsułek żelatynowych można stosować laktozę, skrobię kukurydzianą lub jej pochodne, talk, kwas stearynowy lub jego sole. Do odpowiednich nośników w przypadku miękkich kapsułek żelatynowych należą oleje roślinne, woski i tł uszcze. W zależ noś ci od charakteru substancji czynnej, zazwyczaj nie ma potrzeby stosowania nośników w przypadku miękkich kapsułek żelatynowych. Do odpowiednich nośników przy wytwarzaniu roztworów i syropów należą woda, poliole, sacharoza, cukier inwertowany i glukoza. Do odpowiednich nośników do iniekcji należą woda, alkohole, poliole, gliceryna, oleje roślinne, fosfolipidy i środki powierzchniowo czynne. Do odpowiednich nośników w przypadku czopków należą naturalne lub utwardzane oleje, woski, tłuszcze i półstałe poliole.
Preparaty farmaceutyczne mogą również zawierać środki konserwujące, solubilizatory, stabilizatory, środki zwilżające, emulgatory, środki słodzące, środki barwiące, środki aromatyzujące, sole zmieniające ciśnienie osmotyczne, bufory, środki powłokowe lub przeciwutleniacze. Mogą one również zawierać inne substancje o działaniu terapeutycznym, w tym dodatkowe substancje czynne, inne niż związki o wzorze I.
Dawki
Jak to zaznaczono powyżej, związki o wzorze I i ich sole oraz środki zawierające takie związki są użyteczne w leczeniu lub zwalczaniu zaburzeń proliferacji komórek, zwłaszcza zaburzeń onkologicznych. Takie związki i preparaty zawierające takie związki są zwłaszcza użyteczne w leczeniu i zwalczaniu guzów litych, takich jak np. nowotwory sutka i okr ężnicy.
Terapeutycznie skuteczną ilość związku według wynalazku stanowi taka ilość związku, która jest skuteczna w profilaktyce, łagodzeniu choroby lub polepszaniu stanu, albo przedłużaniu okresu życia leczonego pacjenta. Określanie terapeutycznie skutecznej ilości leży w zakresie wiedzy fachowca.
Terapeutycznie skuteczna ilość lub dawka związku o wzorze I może zmieniać się w szerokich granicach i będzie dostosowywana do określonych wymagań w każdym konkretnym przypadku. Zazwyczaj w przypadku podawania doustnego lub pozajelitowego dorosłemu człowiekowi ważącemu około 70 kg, odpowiednia powinna być dzienna dawka około 10-10000 mg, korzystnie około 200-1000 mg, choć górna granica może być przekroczona, gdy będzie to wskazane. Dzienną dawkę można podawać jako pojedynczą dawkę lub w postaci dawek podzielonych albo, w przypadku podawania pozajelitowego, można ją podawać drogą ciągłej infuzji.
Przykłady
Związki według wynalazku można wytwarzać znanymi sposobami, np. przedstawionymi na powyższych ogólnych schematach. Poniższe przykłady ilustrują korzystne sposoby wytwarzania związków i środków według wynalazku.
W poniż szych przykł adach dane NMR podano w ppm w stosunku do tetrametylosilanu, w podanym rozpuszczalniku i przy wskazanej częstotliwości spektrometru.
P r z y k ł a d 1. Pirazole wytworzone zgodnie ze schematem 1
Etap a. Reakcja laktamu (związku 1) z odczynnikiem Lawessona, z wytworzeniem tiolaktamu (związku 2)
1.1 Związek A1: R1 = H, R2 = F, R4 = H
Do roztworu 5,085 g (20 mmoli) laktamu o wzorze 1 (w którym R1 = H, R2 = F i R4 = H) w 50 ml dimetoksyetanu w 75°C dodano 8,9 g (22 mmole) odczynnika Lawessona (2,4-disulfidu 2,4-bis(4-metoksyfenylo)-1,3-ditia-2,4-difosfetanu; Pedersen, B. S.; Scheibye, S.; Nilsson, N. H.; Lawesson, S-O., Bull. Soc. Chim. Belg., 1978, 87:223.). Mieszaninę mieszano przez 30 minut, po czym ją ochłodzono i wlano do 10% roztworu wodorowę glanu sodu (w wodzie). Wodn ą mieszaninę wyekstrahowano chlorkiem metylenu, a ekstrakty przemyto wodą, wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość poddano rekrystalizacji z chlorku metylenu-metanolu i otrzymano 4,0 g związku A1 (tiolaktamu o wzorze 2).
1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,56 (s, 1H, NH), 7,10-7,65 (m, 8H), 4,59 (s, 2H),
1.2 Związek A2: R1 - F, R2 = R4 = H
Związek A2 otrzymano w taki sam sposób jak opisano powyżej w odniesieniu do związku A1, 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,50 (s, 1H, NH), 7,37-7,56 (m, 7H), 7,06 (dd, J = 3, 9 Hz, 1H), 4,60 (br s, 2H).
Etap b. Reakcja tiolaktamu o wzorze 2 z acetalem DMF, z wytworzeniem pochodnej dimetyloaminometylenowej o wzorze 3
1.3 Związek A3: R1 = Cl, R2 = Cl, R4 = H
PL 200 933 B1
Roztwór 0,999 g (3,1 mmola) tiolaktamu o wzorze 2 (R1 = Cl, R2 = Cl, R4 = H), 10 ml bezwodnego tetrahydrofuranu i 10 ml dietyloacetalu dimetyloformamidu mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Składniki lotne usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i otrzymano czerwono-pomarańczową stałą pozostałość. Po krystalizacji z heksanu-octanu etylu otrzymano 0,716 g związku A3 (pochodnej o wzorze 3, w którym R1 = Cl, R2 = Cl, R4 = H) , w postaci czerwonej substancji stałej, t.t. 196-198°C. 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 10,21 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,43-7,56 (m, 4H), 7,32 (dd, J = 3, 9 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 3 Hz, 1H), 3,27 (s, 6H).
Etap c. Przeprowadzenie pochodnej dimetyloaminometylenowej o wzorze 3 w pirazol o wzorze 4
1.4 Związek A4: R1 = Cl, R2 = Cl, R3 = R4 = H
5-(2-Chlorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
Do roztworu 0,265 g (0,71 mmola) w 10 ml bezwodnego chlorku metylenu dodano około 39,8 μΐ (1,27 mmola) bezwodnej hydrazyny. Mieszaninę mieszano w atmosferze argonu przez 85 minut, po czym roztworzono ją w chlorku metylenu i przemyto wodą, wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 0,219 g związku A4 (pirazolu o wzorze 4, w którym R1 = Cl, R2 = Cl, R4 = H), w postaci brązowej substancji stałej. Próbkę analityczną przesączono przez krótkie złoże żelu krzemionkowego, z elucją octanem etylu, a następnie poddano rekrystalizacji z octanu etylu, t. t. > 300°C. 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,07 (s, 1H, NH), 8,03 (s, 1H, NH), 7,58 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 4H), 7,17 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,25 (s, 1H).
Zgodnie ze schematem 1 i w sposób opisany powyżej w etapach a-c otrzymano następujące pirazole (związki o wzorze 4).
1.5 Związek A5: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = H, R4 = H
5-(2-Chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 9,16 (s, 1H, NH), 7,90 (dd, J = 2, 8 Hz, 1H), 7,4-7,6 (m, 5H), 7,08 (d, J = 2 Hz, 1H), 6, 75 (d, J = 8 Hz, 1H).
1.6 Związek A6: R1 = Cl, R2 = H, R3 = H, R4 = H
5-Fenylo-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 200 MHz) 7,97 (s, 1H, NH), 7,62 (s, 1H), 7,35-7,60 (m, 5H), 7,29 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 2 Hz, 1H).
1.7 Związek A7: R1 = Cl, R2 = F, R3 = H, R4 = H
5-(2-Fluorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,10 (s, 1H, NH), 8,01 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,5 (m, 2H), 7,187,33 (m, 3H), 6,83 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,47 (s, 1H).
1.8 Związek A8: R1 = Cl, R2 = Cl, R3 = H, R4 = Cl
5- (2, 4-Dichlorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,09 (s, 1H, NH), 8,05 (s, 1H, NH), 7,68 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,52 (d, J = 10 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 10 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,27 (d, J = 2 Hz, 1H).
1.9 Związek A9: R1 = H, R2 = H, R3 = H, R4 = H
5-Fenylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,04 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,32-7,47 (m, 5H), 7,22 (dt, J = 2, 8 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,67 (dd, J = 1,8 Hz, 1H).
1.10 Związek A10: R1 = H, R2 = F, R3 = H, R4 = H
5-(2-Fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 200 MHz) 12,00 (s, 1H, NH), 7,79 (s, 1H), 7,32-7,56 (m, 3H), 7,00-7,32 (m, 3H), 6,78 (d, J = 6 Hz, 1H), 6,64 (t, J = 6 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 6 Hz, 1H).
1.11 Związek A11: R1 = F, R2 = F, R3 = H, R4 = H
5-(2-Fluorofenylo)-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 200 MHz) 12,10 (s, 1H, NH), 7,85 (s, 1H), 7,4-7,7 (m, 3H), 7,18-7,39 (m, 2H), 7,05 (m, 1H), 6,86 (m, 1H), 6,26 (br d, J = 8 Hz, 1H).
1.12 Związek A12: R1 = CH3O, R2 = Cl, R3 = H, R4 = H
5-(2-Chlorofenylo)-7-metoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 200 MHz) 12,00 (s, 1H, NH), 7,35-7,60 (m, 5H), 6,81 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 8 Hz, 1H), 5,89 (s, 1H), 3,46 (s, 3H).
1.13 Związek A13: R1 = NO2, R2 = F, R3 = H, R4 = H
5-(2-Fluorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
PL 200 933 B1 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,14 (s, 1H, NH), 9,06 (s, 1H, NH), 7,89 (dd, J = 2,9 Hz, 1H),
7,55 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 6,76 (d, J = 9 Hz, 1H).
1.14 Związek A14: R1 = CH3SO2, R2 = H, R3 = H, R4 = H
5-Fenylo-7-metanosulfonylopirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,18 (s, 1H, NH), 8,54 (s, 1H, NH), 7,72 (dd, J = 2,9 Hz, 1H),
7,64 (s, 1H), 7,43 (m, 5H), 7,14 (d, J = 2, Hz, 1H), 7,06 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,01 (s, 3H).
1.15 Związek A15: R1 = CN, R2 = F, R3 = H, R4 = H
5-(2-Fluorofenylo)-7-cyjanopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,16 (s, 1H, NH), 8,63 (s, 1H, NH), 7,59 (s, 1H), 7,4-7,58 (m, 3H), 7,2-7,37 (m, 2H), 6,82 (dd, J = 2,8 Hz, 1H), 6,78 (s, 1H).
1.16 Związek A16: R1 = NO2, R2 = H, R3 = H, R4 = H 5-Fenylo-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,19 (s, 1H, NH), 8,96 (s, 1H, NH), 8,03 (dd, J = 2,9 Hz, 1H),
7,62 (s, 1H), 7,35-7,5 (m, 6H), 6,94 (d, J = 9 Hz, 1H).
1.17 Związek A17: R1 = NO2, R2 = CF3, R3 = H, R4 = H
5-(2-Trifluorometylofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,12 (s, 1H, NH), 9,18 (s, 1H, NH), 7,45-7,9 (m, 6H), 7,00 (s, 1H), 6,71 (d, J = 9 Hz, 1H).
1.18 Związek A18: R1 = CO2CH3, R2 = H, R3 = H, R4 = H
5-Fenylo-7-karbometoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,15 (s, 1H, NH), 8,42 (s, 1H, NH), 7,78 (dd, J = 2,9 Hz, 1H),
7,62 (s, 1H), 7,35-7,45 (m, 5H), 7,29 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,66 (s, 3H).
1.19 Związek A19: R1 = I, R2 = F, R3 = H, R4 = H
5-(2-Fluorofenylo)-7-jodopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,09 (s, 1H, NH), 7,99 (s, 1H, NH), 7,58 (s, 1H), 7,4-7,55 (m, 3H), 7,19-7,35 (m, 2H), 6,76 (s, 1H), 6,62 (d, J = 8 Hz, 1H).
1.20 Związek A20: R1 = CO2Et, R2 = F, R3 = H, R4 = H
5-(2-Fluorofenylo)-7-karboetoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,08 (s, 1H, NH), 8,50 (s, 1H, NH), 7,62 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,18-7,35 (m, 2H), 7,14 (s, 1H), 6,80 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,15 (q, J = 6 Hz, 2H), 1,17 (t, J = 6 Hz, 3H).
1.21 Związek A21: R1 = H, R2 = Cl, R3 = H, R4 = H
5-(2-Chlorofenylo)pirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,95 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,38-7,48 (m, 4H), 7,09 (t, J = 8 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,61 (t, J = 8 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 8 Hz, 1H).
P r z y k ł a d 2. Przeprowadzenie tiolaktamu o wzorze 2 w podstawiony pirazol o wzorze 7, zgodnie ze schematami 2 i 3
2.1 Związek B1: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = 2-pirolil, R4 = H; schemat 2
3-(2-Pirolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
Mieszaninę 0,995 g (3 mmole) tiolaktamu o wzorze 2 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = 2-pirolil, R4 = H),
0,571 g (6 mmoli) pirolo-2-karboksyaldehydu, 0,383 g (4,5 mmola) piperydyny (Aldrich) i 10 ml dimetoksyetanu mieszano w atmosferze argonu przez 2 godziny. Mieszaninę roztworzono w octanie etylu i przemyto kolejno 0,1 M kwasem siarkowym, wodą i solanką, wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Odpowiednią olefinę o wzorze 5 wyodrębniono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym (z elucją mieszaniną heksan/octan etylu (1:1)) w postaci czerwonej substancji stałej (0,309 g) i użyto jej bezpośrednio w następnym etapie. Olefinę o wzorze 5 (0,309 g) rozpuszczono w 6 ml dimetylosulfotlenku i poddano reakcji z 72,5 mg (2,2 mmola) hydrazyny w atmosferze argonu. Po 20 minutach mieszaninę roztworzono w octanie etylu i przemyto kolejno wodą, a nastę pnie solanką, wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano mieszaninę dihydropriazoli o wzorze 6 (0,296 g). Mieszaninę związków o wzorze 6 rozpuszczono w dimetylosulfotlenku i ogrzewano w atmosferze powietrza w 130°C przez 2 godziny, po czym ja ochłodzono, roztworzono w octanie etylu i przemyto kolejno woda, a nastę pnie solanką . Ekstrakt wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Produkt, związek B1 o wzorze 7, oczyszczono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym (z elucją mieszaniną heksan-octan etylu 25/75).
PL 200 933 B1 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,12 (s, 1H, NH), 10,39 (s, 1H, NH), 9,07 (s, 1H, NH), 7,96 (dd,
J = 2,8 Hz, 1H), 7,4-7,65 (m, 4H), 7,15 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,79 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,48 (s,
1H), 6,12 (d, J = 2 Hz, 1H).
2.2 Związek B2: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CO2Et, R4 = H; schemat 3
3-Karboetoksy-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
Mieszaninę 5,0 g (15,1 mmola) tiolaktamu o wzorze 2 (R1 = NO2, R2 = Cl), 6 ml 50% roztworu glioksylanu etylu w toluenie, 4,5 ml (31 mmoli) diazabicykloundekanu i 100 ml dimetoksyetanu mieszano w atmosferze argonu przez 30 minut w temperaturze pokojowej. Mieszaninę zakwaszono 0,005 M H2SO4 i wyekstrahowano octanem etylu. Połączone ekstrakty wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Addukt aldolowy o wzorze 8 otrzymano w postaci mieszaniny diastereoizomerów (5,6 g) metodą chromatografii na żelu krzemionkowym (z elucją mieszaniną heksan-octan etylu 60/40).
Mieszaninę 4,7 g (10,8 mmola) otrzymanego powyżej adduktu aldolowego o wzorze 8, 100 ml pirydyny i 6,9 ml (54,4 mmola) chlorotrimetylosilanu mieszano przez 10 minut w temperaturze pokojowej, po czym ogrzewano w 120°C przez 1,5 godziny. Mieszaninę ochłodzono, roztworzono w 1 litrze octanu etylu i przemyto kolejno wodą i solanką, po czym warstwę octanu etylu wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu. Po przesączeniu i odparowaniu składników lotnych pod zmniejszonym ciśnieniem surową pozostałość przesączono przez żel krzemionkowy, z elucją mieszaniną heksanoctan etylu (1:1), w wyniku czego otrzymano 4,3 g olefiny o wzorze 5.
Roztwór 4,3 g olefiny o wzorze 5, otrzymanej powyżej, w 210 ml dichlorometanu, mieszano z 0,68 ml (21,6 mmola) bezwodnej hydrazyny przez 30 minut. Mieszaninę wymieszano następnie z wodą i fazę wodną wyekstrahowano dichlorometanem. Połączone ekstrakty wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość, zawierającą mieszaninę dihydropriazoli o wzorze 6, rozpuszczono w 50 ml dimetylosulfotlenku i ogrzewano w 130°C w atmosferze powietrza przez 3 godziny. Mieszaninę reakcyjną ochł odzono, roztworzono w octanie etylu i przemyto wodą. Warstwę organiczną wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Produkt wyodrębniono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym, z elucją mieszaniną heksan-octan etylu (40/60) i otrzymano 0,580 g związku B2 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CO2Et, R4 = H).
1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 13,33 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,02 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 7,46-7,55 (m, 4H), 7,18 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,25 (q, J = 7 Hz, 2H), 1,27 (t, J = 7 Hz, 3H).
Zgodnie ze schematem 2 lub 3, w sposób opisany powyżej otrzymano następujące pirazole (związki o wzorze 7).
2.3 Związek B3: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,85 (s, 1H, NH), 9,04 (s, 1H, NH), 7,83 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,39-7,52 (m, 4H), 7,05 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 9 Hz, 1H), 1,98 (s, 3H).
2.4 Związek B4: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Etylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,91 (s, 1H, NH), 9,05 (s, 1H, NH), 7,85 (dd, J = 2,8 Hz, 1H), 7,35-7,58 (m, 4H), 7,04 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8 Hz, 1H), 2,41 (q, J = 7 Hz, 2H), 1,06 (t, J = 7 Hz, 3H).
2.5 Związek B5: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2CH2Ph, R4 = H (schemat 2)
3-(2-Fenyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 200 MHz) 11,95 (s, 1H, NH), 9,05 (s, 1H, NH), 7,82 (dd, J = 2, 8 Hz, 1H), 7,05-7,60 (m, 10H), 6,70 (d, J = 8 Hz, 1H), 2,82 (m, 2H), 2,64 (m, 2H).
2.6 Związek B6: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = i-Pr, R4 = H (schemat 2)
3-(1-Metyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,90 (s, 1H, NH), 9,02 (s, 1H, NH), 7,84 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 7,35-7,55 (m, 4H), 7,04 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,86 (sept, J = 9 Hz, 1H), 1,14 (d, J = 9 Hz, 6H).
2.7 Związek B7: R1 = CN, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karbonitryl 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,05 (s, 1H, NH), 8,55 (s, 1H, NH), 7,45 (m, 3H), 7,25 (m, 2H), 6,78 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,71 (s, 1H), 2,03 (s, 3H).
2.8 Związek B8: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2Ph, R4 = H (schemat 2)
PL 200 933 B1
3-(Fenylometylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,08 (s, 1H, NH), 9,08 (s, 1H), 7,85 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,40-7,56 (m, 4H), 7,16-7,34 (m, 5H), 7,06 (br s, 1H), 6,71 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,71 (s, 2H).
2.9 Związek B9: R1 = CO2Et, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-karboetoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,81 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,59 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,39-7,51 (m, 2H), 7,16-7,31 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 6,74 (d, J = 9 HZ, 1H), 4,08 (q, J = 7 Hz, 2H), 2,04 (s, 3H), 1,12 (t, J = 7 Hz, 3H).
2.10 Związek B10: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = 5-(4-Me)-pirazolil, R4 = H (schemat 2)
3-(4-Metylopirazol-5-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,58 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,75 (brs, 1H), 7,95 (d, J = 8 Hz, 1H),
7,42-7,6 (m, 5H), 7,12 (s, 1H), 6,81 (d, J = 8 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H).
2.11 Związek B11: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2-iPr, R4 = H (schemat 2)
3-(2-Metylopropylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 11,91 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 7,87 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 7,4-7,56 (m, 4H), 7,08 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,28 (d, J = 7 Hz, 2H), 1,89 (n, J = 7 Hz, 1H), 0,88 (d, J = 7 Hz, 6H).
2.12 Związek B12: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CF3, R4 = H (schemat 3)
3-Trifluorometylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (CDCl3+DMSO-d6, 300 MHz) 7,98 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 7,2-7,6 (m, 6H), 7,02 (br s,
1H), 6,62 (d, J = 9 Hz, 1H).
2.13 Związek B13: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = 1-tiazolil, R4 = H (schemat 3)
3-(1-Tiazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 13,08 (s, 1H), 9,21 (s, 1H), 7,88-7,92 (m, 2H), 7,84 (d, J = 3 Hz,
1H), 7,42-7,62 (m, 4H), 7,12 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 8 Hz, 1H).
2.14 Związek B14: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = 4-imidazolil, R4 = H (schemat 2) 3-(4-Imidazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,33 (s, 1H), 12,29 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 7,90 (dd, J = 2, 9 Hz,
1H), 7,76 (s, 1H), 7,44-7,63 (m, 4H), 7,35 (s, 1H), 7,11 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 9Hz, 1H).
2.15 Związek B15: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = 2-pirazolil, R4 = H (schemat 2) 3-(2-Pirazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 13,11 (s, 1H), 12,48 (s, 1H), 9.12 (s, 1H), 7,93 (d, J = 9 Hz, 1H),
7,76 (s, 1H), 7,39-7,60 (m, 4H), 7,11 (s, 1H), 6,78 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,59 (s, 1H).
2.16 Związek B16: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = 3-pirazolil, R4 = H (schemat 2) 3-(3-Pirazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 13,09 (s, 1H), 12,31 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 7,80-8,05 (m, 4H),
7,40-7,62 (m, 3H), 7,13 (s, 1H), 6,78 (d, J = 9 Hz, 1H).
2.17 Związek B17: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH(Me)CH2Me, R4 = H (schemat 2) 3-(1-Metylopropylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,90 (s, 1H), 9,04 (s, 1H), 7,85 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,38-7,55 (m, 4H), 7,05 (d, J = 2Hz, 1H), 6,72 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,65 (m, 1H), 1,52 (m, 2H), 1,13 (d, J = 7 Hz, 3H), 0,79 (t, J = 8 Hz, 3H).
2.18 Związek B18: R1 = MeO, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-metoksypirazolo[3,4] [1,4]-benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,69 (s, 1H), 7,34-7,50 (m, 5H), 6,77 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 9 Hz, 1H), 5,86 (d, J = 9 Hz, 1H), 5,86 (d, J = 2 Hz, 1H), 3,44 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).
2.19 Związek B19: R1 = Cl, R2 = H, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2) 3-Metylo-5-fenylo-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 11,85 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,46-7,52 (m, 2H), 7,39-7,44 (m, 3H), 7,29 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 69,92 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 2Hz, 1H), 2,16 (s, 3H).
2.20 Związek B20: R1 = Cl, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,78 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,38-7,55 (m, 4H), 7,17 (dd, J = 2,9
Hz, 1H), 6,75 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,22 (d, J = 2 Hz, 1H), 2,03 (s, 3H).
2.21 Związek B21: R1 = H, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2) 3-Metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
PL 200 933 B1 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,75 (s, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,36-7,52 (m, 2H), 7,04-7,30 (m, 3H),
6,77 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,63 (t, J = 8 Hz, 1H), 6,50 (d, J = 8 Hz, 1H), 2,07 (s, 3H).
2.22 Związek B22: R1 = F, R2 = H, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Metylo-5-fenylo-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,85 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,46-7,55 (m, 2H), 7,35-7,43 (m, 2H), 7,11 (dt, J = 3,9 Hz, 1H), 6,92 (dd, J = 5,9 Hz, 1H), 6,41 (dd, J = 3,10 Hz, 1H), 2,14 (s, 3H).
2.23 Związek B23: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = fenyl, R4 = H (schemat 2) 3-Fenylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,65 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 7,95 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,32-7,63 (m, 7H), 7,14 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 9 Hz, 1H).
2.24 Związek B24: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = n-propyl, R4 = H (schemat 2) 3-Propylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 11,91 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 7,86 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,41-7,53 (m,
4H), 7,08 (s, 1H), 6,72 (d, J = 8 Hz, 1H), 2,38 (t, J = 8 Hz, 2H), 1,54 (tq, J = 8, 7 Hz, 2H), 0,88 (t, J = 7 Hz, 3H).
2.25 Związek B25: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = cyklopropyl, R4 = H (schemat 2)
3-Cyklopropylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 11,72 (s, 1H), 9,05 (s, 1H), 7,87 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,41-7,55 (m, 4H), 7,08 (d, J = 2Hz, 1H), 6,72 (d, J = 9 Hz, 1H), 1,79 (p, J = 7 Hz, 1H), 0,88 (d, J = 7 Hz, 4H).
2.26 Związek B26: R1 = F, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2) 3-Metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,82 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,41-7,58 (m, 2H), 7,18-7,35 (m, 2H), 7,05 (dt, J = 3, 9 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 6, 9 Hz, 1H), 6,25 (dd, J = 3,9 Hz, 1H), 2,08 (s, 3H).
2.27 Związek B27: R1 = NO2, R2 = H, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2) 3-Metylo-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
2.28 Związek B28: R1 = H, R2 = H, R1 = CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Metylo-5-fenylopirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,78 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,47 (m, 2H), 7,39 (m, 3H), 7,20 (dt,
J = 1,8 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,75 (t, J = 8 Hz, 1H), 6,68 (dt, J = 1,8 Hz, 1H), 2,14 (s, 3H).
2.29 Związek B29: R1 = I, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H M (schemat 2) 3-Metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-jodopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,81 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,39-7,57 (m, 3H), 7,18-7,36 (m, 2H),
6,75 (s, 1H), 6,59 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,07 (s, 3H).
2.30 Związek B30: R1 = H, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2) 3-Metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
2.31 Związek B31: R1 = NO2, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2) 3-Metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,90 (s, 1H), 9,00 (s, 1H), 7,87 (dd, J = 3, 9 Hz, 1H), 7,47 (m, 2H), 7,18-7,32 (m, 3H), 6,73 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,02 (s, 3H).
2.32 Związek B32: R1 = Cl, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2)
3-Metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,81 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,40-7,55 (m, 2H), 7,17-7,32 (m, 3H),
6,79 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,42 (s, 1H), 2,08 (s, 3H).
2.33 Związek B33: R1 = I, R2 = H, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2) 3-Metylo-5-fenylo-7-jodopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,82 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,36-7,55 (m, 6H), 6,91 (d, J = 2 Hz,
1H), 6,70 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,15 (s, 3H).
2.34 Związek B34: R1 = Br, R2 = H, R3 = CH3, R4 = H (schemat 2) 3-Metylo-5-fenylo-7-bromopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 7,89 (s, 1H), 7,49 (m, 2H), 7,38 (m, 4H), 6,85 (d, J = 9 Hz, 1H),
6,74 (d, J = 2 Hz, 1H), 2,15 (s, 3H).
2.35 Związek B35: R1 = CN, R2 = F, R3 = -CH2OH, R4 = H (schemat 3) 3-Hydroksymetylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karbonitryl
PL 200 933 B1
P r z y k ł a d 3. Modyfikacja grup funkcyjnych, zgodnie ze schematem 4
Jak to wspomniano powyżej w odniesieniu do schematu 4, pewne związki można łatwo otrzymać drogą przemiany istniejących grup funkcyjnych. Przykłady szeregu takich przemian przedstawiono poniżej.
A. Podstawienie atomu jodu karbonylem: R1 = I do R1 = CONRR'
3.1 Związek C1: R1 = CON(-CH2CH2-O-CH2CH2-), R2 = F, R3 = H, R4 = H
5-(2-Fluorofenylo)-7-morfolinylokarbonylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
Mieszaninę 0,0712 g (0,17 mmola) pirazolu o wzorze 4 (R1 = I, R2 = F, R3 = H, R4 = H), 0,0082 g (0,0012 mmola) katalizatora, dichlorku bis(trifenylofosfina)palladu i 1 ml morfoliny mieszano i ogrzewano (75°C) w atmosferze tlenku węgla przez 90 minut. Mieszaninę ochłodzono, a następnie oczyszczono na żelu krzemionkowym metodą chromatografii z odwróconymi fazami (elucja gradientowa, woda-acetonitryl) i otrzymano 0,06 g związku C1 (pirazolu o wzorze 4, w którym R1 = CON(-CH2CH2-O-CH2CH2-), R2 = F, R3 = H, R4 = H).
1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,05 (s, 1H, NH), 8,18 (s, 1H, NH), 7,59 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,18-7,35 (m, 3H), 6,84 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,25 (m, 8H).
Zgodnie z powyższym sposobem A otrzymano następujące związki.
3.2 Związek C2: R1 = CONHCH2CH2OH, R2 = F, R3 = H, R4 = H
N-(2-Hydroksyetylo)-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,08 (s, 1H, NH), 8,20 (s, 1H, NH), 8,16 (m, 1H, NH), 7,61 (d,
J = 9 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,14-7,3 (m, 2H), 7,11 (s, 1H), 6,89 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,63 (m, 1H, OH), 3,40 (m, 2H), 3,18 (m, 2H).
3.3 Związek C3: R1 = CON (CH2CH2OH)2, R2 = F, R3 = H, R4 = H
N,N-bis-(2-Hydroksyetylo)-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4][1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,10 (s, 1H, NH), 8,11 (s, 1H, NH), 7,59 (s, 1H), 7,4-7,52 (m, 2H), 7,15-7,3 (m, 3H), 6,80 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,58 (s, 1H), 4,65 (m, 2H, OH), 3,30 (m, 8H).
B. Redukcja grupy nitrowej do grupy aminowej: R1 = NO2 do R1 = NH2
3.4 Związek C4: R1 = NH2, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H
3-Metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-aminopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
Roztwór 0,20 g (0,57 mmola) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H) w 8 ml etanolu mieszano w temperaturze pokojowej w atmosferze wodoru w obecności niklu Raney'a (0,5 ml 50% zawiesiny w wodzie, przemytej etanolem tuż przed użyciem). Po 4 godzinach mieszaninę przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem, w wyniku czego otrzymano 0,177 g związku C4 (pochodnej aminowej o wzorze 7, w którym R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H). t.t. 260-263°C.
1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,62 (s, 1H), 7,38-7,47 (m, 4H), 7,07 (s, s, 1H), 6,53 (d, J = 8
Hz, 1H), 6,38 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 5,74 (d, J = 2 Hz, 1H), 4,52 (s, 2H), 2,06 (S, 3H).
Zgodnie z powyższym sposobem B otrzymano następujące związki.
3.5 Związek C5: R1 = NH2, R2 = Cl, R3 = H, R4 = H
5-(2-Chlorofenylo)-7-aminopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (CD3OD, 300 MHz) 7,35-7,55 (m, 5 H), 6,72 (dd, J = 3, 7 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 7Hz,
1H), 6,13 (d, J = 3Hz, 1H).
3.6 Związek C6: R1 = NH2, R2 = Cl, R3 = i-Pr, R4 = H
3-(1-Metyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-aminopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,65 (2, 1H), 7,38-7,4 (m, 4H), 7,08 (s, 1H), 6,75 (d, J = 8 Hz,
1H), 6,39 (dd, J - 2, 8 Hz, 1H), 5,74 (d, J = 2 Hz, 1H), 2,98 (sept, J = 7 Hz, 1H), 1,18 (d, J = 7Hz, 6H).
C. Przeprowadzenie związków aminowych w pochodne: R1 = NH2 do R1 = NHR' (jak to zdefiniowano powyżej na schemacie 4)
3.7 Związek C7: R1 = NHAc, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H
N-(3-Metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)acetamid
Zawiesinę 0,323 g (1 mmol) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NH2, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H) w 20 ml dichlorometanu poddawano reakcji z 0,112 g (1,1 mmola) bezwodnika octowego w obojętnej atmosferze w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Mieszaninę następnie rozcieńczono octanem etylu i przemyto kolejno wodą i solanką . Warstwy wodne wyekstrahowano octanem etylu i połączone ekstrakty wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Produkt wyodrębniono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym, z elucją mieszaniną heksan-octan etylu (30/70) i otrzymano 0,175 g związku C7.
1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,71 (s, 1H), 9,56 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,38-7,57 (m, 5H), 6,67 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 2 Hz, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,83 (s, 3H).
PL 200 933 B1
W sposób analogiczny jak zwią zek C7, zgodnie z powyż szym sposobem C otrzymano nastę pujące związki.
3.8 Związek C8: R1 = Akryloilo-NH, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H
N-(3-Metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)-2-propenoamid 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,71 (s, 1H), 9,78 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,52 (dd, J = 2,9 Hz,
1H), 7,35-7,50 (m, 4H), 6,71 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,23 (dd, J = 10,18 Hz, 1H), 6,08 (dd, J = 2,18 Hz, 1H), 5,60 (dd, J = 2,10 Hz, 1H), 2,05 (s, 3H).
3.9 Związek C9: R1 = CH3SO2NH, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H N-(3-Metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)metanosulfonoamid Mieszaninę 0,323 g (1 mmol) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NH2, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H), 0,122 g (1 mmol) 4-dimetyloaminopirydyny i 5 ml tetrahydrofuranu mieszano w obojętnej atmosferze w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Mieszaninę rozcieńczono octanem etylu i przemyto kolejno wodą i solanką , przy czym fazy wodne wyekstrahowano octanem etylu. Połączone ekstrakty w octanie etylu wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Produkt wyodrębniono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym, z elucją mieszaniną heksan-octan etylu (10/90) i otrzymano 0,244 g związku C9 (pirazolu o wzorze 7, w którym R1 = CH3SO2NH, R2 = Cl, R3 = CH3, R4 = H) (rekrystalizacja z octanu etylu). T.t. 196-198°C.
1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,74 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7,36-7,46 (m, 4H), 6,94 (dd, J = 2,8 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 8 Hz, 1H), 6,31 (d, J = 2 Hz, 1H), 2,70 (s, 3H), 2,05 (s, 3H).
D. Aminoliza R3 = CO2Et do R3 = CONRR'
3.10 Związek C10: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CONH2, R4 = H
5-(2-Chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid
Porcję 0,15 g (0,36 mmola) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CO2Et, R4 = H) mieszano z roztworem amoniaku (15 ml) w etanolu (50 ml) w temperaturze pokojowej przez 48 godzin. Składniki lotne usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem, a produkt oczyszczono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym. Po elucji mieszaniną octan etylu-izopropanol (95/5) otrzymano 0,074 g związku C10 (pirazolu o wzorze 7', w którym R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CONH2, R4 = H), w postaci substancji stałej, t. t. >340°C (rekrystalizacja z octanu etylu).
1H NMR: (DMSO-d6, 400 MHz) 12,95 (br s, 1H), 9,23 (br s, 1H), 7,92 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,45-7,61 (m, 4H), 7,21 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,75 (d, J = 8 Hz, 1H).
W sposób analogiczny jak zwią zek C10, zgodnie z powyż szym sposobem D, otrzymano nastę pujące związki.
3.11 Związek C11: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CONMe2, R4 = H N,N-Dimetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid 1H NMR: (DMSO-d6 300 MHz) 12,65 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 7,91 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,41-7,55 (m,
4H), 7,08 (s, 1H), 6,75 (d, J = 9 Hz, 1H), 3,01 (s, 3H), 2,88 (s, 3H).
3.12 Związek C12: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CONHNH2, i R4 = H
N-Amino-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 13,02 (s, 1H), 9,19 (s, 1H), 8,58 (t, J = 5 Hz, 1H), 7,91 (dd, J =
2,9 Hz, 1H), 7,41-7,62 (m, 4H), 7,09 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 5 Hz, 2H).
E. Redukcja R3 = CO2Et do R3 = CHO, a R3 = CH2OH
3.13 Związek C13: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CHO, R4 = H; i
Związek C14 R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2OH, R4 = H
Do mieszaniny 0,48 g (1,17 mmola) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CO2Et, R4 = H) i 30 ml tetrahydrofuranu w -15°C w oboję tnej atmosferze dodano w cią gu 30 minut 1,52 ml 1 M roztworu wodorku litowo-glinowego w tetrahydrofuranie. Mieszaninę następnie rozcieńczono octanem etylu i przemyto kolejno wodnym roztworem siarczanu potasu i solanką, z ekstrakcją organicznych roztworów przemywających octanem etylu. Połączone ekstrakty w octanie etylu wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po oczyszczeniu metodą chromatografii na żelu krzemionkowym, z elucją mieszaniną heksan-octan etylu otrzymano 0,21 g związku C13 (pirazolu 7', w którym R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CHO, R4 = H) w postaci czerwonej substancji stałej i 0,11 g związku C14 (pirazolu o wzorze 7', w którym R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2OH, R4 = H), również w postaci czerwonej substancji stałej.
Związek C13:
5-(2-Chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyaldehyd
PL 200 933 B1 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 13,29 (s, 1H), 9,66 (s, 1H), 9,27 (s, 1H), 7,96 (dd, J = 2,9 Hz,
1H), 7,45-7,59 (m, 4H), 7,13 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 9 Hz, 1H).
Związek C14:
3-Hydroksymetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,11 (s, 1H), 9,08 (s, 1H), 7,85 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,42-7,50 (m, 4H), 7,06 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 9 Hz, 1H), 5,23 (t, J = 5 Hz, 1H), 4,27 (d, J = 5 Hz, 2H).
F. Redukcyjne aminowanie aldehydu: R3 = CHO do R3 = CH2NR2
3.14 Związek C15: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2NMe2, R4 = H
3-(N,N-Dimetyloaminometylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
Zawiesinę 0,142 g (0,39 mmola) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CHO, R4 = H),
0,0631 g (0,78 mmola) chlorowodorku dimetyloaminy, 0,11 ml (0,78 mmola) trietyloaminy, 0,165 g (1 mmol) triacetoksyborowodorku sodu, 0,2 sit molekularnych 4A i 20 ml dichlorometanu mieszano w obojętnej atmosferze przez 3 godziny. Mieszaninę przesączono, rozcieńczono octanem etylu i przemyto kolejno wodą i solanką, z ekstrakcją faz wodnych octanem etylu. Połączone ekstrakty w octanie etylu wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po oczyszczeniu na żelu krzemionkowym metodą chromatografii z odwróconymi fazami (elucja gradientowa, woda-acetonitryl-kwas trifluorooctowy) otrzymano 0,147 g związku C15 (pirazolu o wzorze 7', w którym R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2NMe2, R4 = H) w postaci trifluorooctanu.
1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,54 (s, 1H), 9,92 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 7,91 (dd, J = 2,8 Hz, 1H), 7,45-7,55 (m, 4H), 7,10 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 8 Hz, 1H), 4,08 (s, 2H), 2,75 (s, 6H).
G. Alkilowanie alkoholi: R3 = CH2OH do R3 = CH2OCH3
3.15 Związek C16: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2OCH3, R4 = H
3-Metoksymetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
Mieszaninę 0,075 g (0,2 mmola) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2OH, R4 = H), 0,2 g żelu krzemionkowego i 20 ml tetrahydrofuranu mieszano z roztworem diazometanu w eterze (50 ml, około 9,2 mmola). Po 2 godzinach mieszaninę przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Produkt oczyszczono chromatograficznie na żelu krzemionkowym, z elucją mieszaniną heksan-octan etylu i otrzymano związek C16 (pirazol o wzorze 7', w którym R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CH2OCH3, R4 = H), w postaci czerwonej substancji stałej.
1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,27 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 7,86 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,43-7,50 (m, 4H), 7,06 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,20 (s, 2H), 3,25 (s, 3H).
H. Metylenowanie aldehydu: R3 = CHO do R3 = CHCH2
3.16 Związek C17: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CHCH2, R4 = H
3-Etenylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina
Do roztworu metylenotrifenylofosforanu, otrzymanego w reakcji 0,109 g (0,31 mmola) bromku metylotrifenylofosfoniowego w 5 ml tetrahydrofuranu z 0,29 ml 1 M roztworu t-butanolanu potasu w tetrahydrofuranie, w -78°C w obojętnej atmosferze dodano 0,080 g (0,22 mmola) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CHO, R4 = H). Mieszaninę ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin i mieszano przez noc, po czym mieszaninę ochłodzono do temperatury pokojowej, rozcieńczono octanem etylu i przemyto kolejno wodą i solanką. Ekstrakt w octanie etylu wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po oczyszczeniu metodą chromatografii na żelu krzemionkowym, z elucją mieszaniną heksan-octan etylu (70/30) M otrzymano 0,043 g związku C17 (pirazol o wzorze 7', w którym R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CHCH2, R4 = H), w postaci czerwonej substancji stałej.
1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 12,33 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 7,88 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,40-7,50 (m, 4H), 7,08 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 9 Hz, 1H), 6,40 (dd, J = 12,18 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 18 Hz, 1H), 5,36 (d, J = 12 Hz, 1H)
I. Dehydratacja amidu: R3 = CONH2 do R3 = CN
3.17 Związek C18: R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CN, R4 = H
5-(2-Chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karbonitryl
Mieszaninę 0,47 g (1,23 mmola) pirazolu o wzorze 7 (R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CONH2, R4 = H), 0,34 g (2,46 mmola) węglanu potasu, 0,94 g (6,15 mmola) tlenochlorku fosforu i 20 ml acetonitrylu ogrzewano w temperaturze wrzenia w warunkach powrotu skroplin przez 4 godziny w obojętnej atmosferze. Mieszaninę ochłodzono do temperatury pokojowej, rozcieńczono octanem etylu i przemyto kolejno nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu, wodą i solanką, z ekstrakcją faz wodnych octanem etylu. Połączone ekstrakty w octanie etylu wysuszono nad bezwodnym siarczanem
PL 200 933 B1 sodu, przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Pozostałość poddano chromatografii na żelu krzemionkowym, z elucją mieszaniną heksan-octan etylu (70/30) i otrzymano 0,24 g związku C18 (pirazolu o wzorze 7', w którym R1 = NO2, R2 = Cl, R3 = CN, R4 = H) w postaci pomarańczowej substancji stałej (rekrystalizacja z dichlorometanu). T.t. 193-196°C.
IR (KBr) 2240 cm-1. 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 9,36 (s, 1H), 7,96 (dd, J = 2,9 Hz, 1H), 7,487,58 (m, 4H), 7,11 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 9 Hz, 1H).
J. Hydroliza nitrylu: R1= CN do R3= CONH2.
3.18 Związek C19: R1 = CONH2, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H
3-Metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid
Do roztworu 0,5 g (1,6 mmola) pirazolu o wzorze 7 (R1 = CN, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H) w 79 ml dimetylosulfotlenku dodano 47 ml lodowatego nadtlenku wodoru (30% wodny roztwór) i 24 ml 1 M wodorotlenku sodu. Po zajściu reakcji do końca mieszaninę wyekstrahowano octanem etylu i ekstrakty przemyto kolejno wodą, solanką, a następnie wysuszono nad bezwodnym siarczanem sodu. Mieszaninę przesączono i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem. Po oczyszczeniu metodą chromatografii na żelu krzemionkowym (z elucją mieszaniną octan etylu/metanol (95:5)) otrzymano 0,5 g związku C19 (pirazol o wzorze 7, w którym R1 = CONH2, R2 = F, R3 = CH3, R4 = H) w postaci żółtej substancji stałej, t.t. 323-324°C. 1H NMR: (DMSO-d6, 300 MHz) 11,79 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,58 (dd, J = 2, 9 Hz, 1H), 7,38-7,52 (m, 2H), 7,02-7,30 (m, 4H), 6,73 (d, J = 9 Hz, 1H), 2,05 (s, 3H).
Zgodnie ze sposobami opisanymi powyżej otrzymano dodatkowe związki nie wymienione konkretnie w powyższych przykładach 1-3. Związki te, oznaczone symbolem „D”, podano poniżej w tabelach I-IV.
P r z y k ł a d 4. Działanie przeciwproliferacyjne
Działanie przeciwproliferacyjne związków według wynalazku wykazano poniżej. Działanie to wskazuje, że związki według wynalazku są użyteczne w leczeniu raka, a zwłaszcza guzów litych, takich jak nowotwory sutka i okrężnicy.
Test na płytkach FlashPlate z CDK2
Dla zbadania hamowania aktywności CDK2, oczyszczonym zrekombinowanym białkiem glejaka siatkówki (Rb) powleczono 96 studzienkowe płytki FlashPlate (New England Nuclear, Boston, MA). Rb jest naturalnym substratem dla fosforylowania przez CDK2 (Herwig i Strauss Eurr. J. Biochem., tom 246 (1997), 581-601 i przytoczone tam pozycje literaturowe). Zrekombinowane aktywne kompleksy ludzka cyklina E/CDK2 częściowo oczyszczono od ekstraktów komórek owadzich. Aktywny kompleks cyklina E/CDK2 dodano do powleczonych Rb płytek FlashPlate wraz z 33P-ATP i badanymi związkami w odpowiednim rozcieńczeniu. Płytki inkubowano przez 25 minut w temperaturze pokojowej w trakcie wytrząsania, po czym przemyto i zliczono za pomocą licznika scyntylacyjnego Topcount (Packard Instrument Co., Downers Grove, IL). Oznaczenia dla badanych związków w każdym rozcieńczeniu w każdej próbie wykonywano dwukrotnie. Procentowe hamowanie fosforylowania Rb, będące miarą hamowania aktywności CDK2, obliczano z następującego wzoru:
100 χ badany związek - niespecyficzne całkowite - niespecyficzne gdzie „badany związek” odnosi się do średniej liczby impulsów/minutę z dwóch pomiarów dla badanego związku, „niespecyficzne” odnosi się do średniej liczby impulsów/minutę w przypadku gdy nie dodano kompleksu cyklina E/CDK2, a „całkowite” odnosi się do średniej liczby impulsów/minutę w przypadku gdy nie dodano związku.
Wyniki powyższych doświadczeń in vitro przedstawiono poniżej w tabelach IA-IC.
T a b e l a IA
Hamowanie CDK2 - Zakres IC50 0,01 - 0,99 pM
Związek nr R1 (pozycja 7) R2 (pozycja 2') * R3 R4 (pozycja 4')
1 2 3 4 5
A5 NO2 Cl H H
A13 NO2 F H H
A15 CN F H H
PL 200 933 B1 cd. tabeli IA
1 2 3 4 5
A16 NO2 H H H
A17 NO2 CF3 H H
A20 CO2Et F H H
A21 H Cl H H
B1 NO2 Cl 2-pirolil H
B3 NO2 Cl CH3 H
B4 NO2 Cl CH2CH3 H
B6 NO2 Cl i-Pr H
B7 CN F CH3 H
B9 CO2Et F CH3 H
B10 NO2 Cl 5-(4-Me)-pirazolil H
B12 NO2 Cl CF3 H
B13 NO2 Cl 1-tiazolil H
B14 NO2 Cl 4-imidazolil H
B15 NO2 Cl 2-pirazolil H
B16 NO2 Cl 3-pirazolil H
B17 NO2 Cl CH(Me)CH2Me H
B18 MeO Cl CH3 H
B19 Cl H CH3 H
B20 Cl Cl CH3 H
B21 H F CH3 H
B22 F H CH3 H
B23 NO2 Cl Ph H
B24 NO2 Cl propyl H
B25 NO2 Cl cyklopropyl H
B26 F F CH3 H
B27 NO2 H CH3 H
B28 H H CH3 H
B29 I F CH3 H
B30 H Cl CH3 H
B31 NO2 F CH3 H
B32 Cl F CH3 H
B35 CN F CH2OH H
C1 CON-morfolinoamid F H H
C2 CONHCH2CH2OH F H H
C4 NH2 Cl CH3 H
C6 NH2 Cl i-Pr H
PL 200 933 B1 cd. tabeli IA
1 2 3 4 5
C7 Ac-NH Cl CH3 H
C8 Akryloilo-NH Cl CH3 H
C9 MsNH Cl CH3 H
C10 NO2 Cl CONH2 H
C12 NO2 Cl CONHNH2 H
C13 NO2 Cl CHO H
C14 NO2 Cl CH2OH H
C16 NO2 Cl CH2OMe H
C17 NO2 Cl CH=CH2 H
C18 NO2 Cl CN H
C19 CONH2 F CH3 H
D1 NO2 m-NO2** H H
D2 NO2 CF3 CH3 H
D3 Me2NSO2NH Cl CH3 H
D4 CICH2NHSO2NH Cl CH3 H
D5 morfolinylo-SO2NH Cl CH3 H
D6 NO2 Cl 2-tiofenyl H
D7 NO2 Cl 2-furanyl H
D8 NO2 Cl 2-(3-Me)-tiofenyl H
D9 NO2 Cl 3-pirydynyl H
D10 NO2 Cl 4-pirydynyl H
D11 NO2 Cl p-MeSPh H
D12 NO2 Cl p-CF3OPh H
D13 NO2 Cl o,m-metylenodioksy-Ph H
D14 NO2 Cl p-OH-o-MeOPh H
D15 NO2 Cl 3-tiofenyl H
D16 NO2 Cl p-Ph-Ph H
D17 NO2 Cl m-NO2Ph H
D18 NO2 H cyklopropyl H
D50 CONH2 F H H
D51 CON-morfolinoamid F CH3 H
D52 CONHCH2CH2OH F CH3 H
D53 CONHCH2CH2-N-morfolinyl F CH3 H
* O ile nie zaznaczono inaczej.
** Pozycja 3'.
W pozostał ych tabelach pozycje podstawników R1, R2, R3, R4 są takie jak w powyż szej tabeli IA.
PL 200 933 B1
T a b e l a IB
Hamowanie CDK2 - Zakres IC50 1-9,99 μΜ
Związek nr R1 R2 R3 R4
1 2 3 4 5
A6 Cl H H H
A7 Cl F H H
A9 H H H H
A10 H F H H
A11 F F H H
A14 CH3SO2 H H H
A18 CO2CH3 H H H
A19 I F H H
B2 NO2 Cl CO2Et H
B5 NO2 Cl CH2CH2Ph H
B8 NO2 Cl CH2Ph H
B11 NO2 Cl CH2-iPr H
B33 I H CH3 H
C3 CON(CH2CH2OH)2 F H H
C5 NH2 Cl H H
C11 NO2 Cl CONMe2 H
D19 NO2 Cl 2-benzofuranyl H
D20 NO2 Cl 2-indoilil H
D21 NO2 Cl 2-N-Me-pirolil H
D22 CO2H F H H
D23 NO2 Cl m-OH-Ph H
D24 NO2 Cl p-MePh H
D25 NO2 Cl m-CNPh H
D26 NO2 Cl 2-(5-Me)-tiofenyl H
D27 NO2 H 3-pirydynyl H
D28 NO2 Cl p-Me2N-Ph H
D29 NO2 Cl o-CNPh H
D30 NO2 Cl m-MePh H
D31 NO2 Cl m-EtO-Ph H
D32 NO2 Cl 2-(5-Et)-furanyl H
D33 NO2 Cl 2-naftyl H
D34 NO2 H 2-imidazolil H
D35 CO2Na H H H
D37 NO2 Cl o-MePh H
PL 200 933 B1
T a b e l a IC
Hamowanie CDK2 - Zakres IC50 10-30 μΜ
Związek nr R1 R2 R3 R4
A4 Cl Cl H H
D38 NO2 Cl 1-oksadiazolil H
D39 NO2 Cl o-NO2Ph H
D40 NO2 Cl o-CF3Ph H
D41 NO2 Cl m-CF3Ph H
D42 NO2 Cl o-MeOPh H
D43 NO2 Cl 4-N-pirolil-Ph H
D44 NO2 Cl m-PhOPh H
D45 NO2 H m,p-metylenodioksy-Ph H
D46 NO2 H m,p-etylenodioksy-Ph H
D47 NO2 H o-F-Ph H
Testy oparte na komórkach
Linię ujemnych względem receptora estrogenowego komórek nabłonka raka sutka (MDA-MB-435) otrzymano z American Type Cell Culture Collection (ATCC; Rockville, MD) i hodowano ją w poż ywce zalecanej przez ATCC. Dla oznaczania wpł ywu badanych zwią zków na wzrost tych komórek, komórki wysiano w ilości 2000 komórek/studzienkę na 96 studzienkowej płytce do hodowli tkankowej inkubowano przez noc w 37°C w atmosferze z 5% CO2. Następnego dnia badane związki rozpuszczono w 100% dimetylosulfotlenku (DMSO) dla otrzymania 10 mM roztworu podstawowego. Każdy związek rozcieńczano jałową pożywką do stężenia 1 mM, w ilości wystarczającej do osiągnięcia końcowego stężenia 120 μΜ. Związki rozcieńczano następnie pożywką z 1,2% DMSO. Rozcieńczone związki w ilości odpowiadającej ¼ końcowej objętości przenoszono na 96 studzienkowe płytki. Badane związki oceniano na dwóch próbkach. DMSO dodawano do rzędu „komórek kontrolnych”, tak aby końcowe stężenie DMSO w każdej studzience wynosiło 0,3%. Studzienki, do których nie dodano komórek, służyły jako „ślepa próba”. Studzienki, do których nie dodano inhibitora, służyły jako „studzienki kontrolne bez inhibitora”. Płytki ponownie wstawiono do inkubatora i po 5 dniach od dodania badanych związków, zanalizowano je w sposób opisany poniżej.
Do każdej studzienki dodano bromek 3-(4,5-dimetylotiazol-2-ilo)-2,5-difenylo-2H-tetrazolium (błękit tiazolilowy; MTT), do osiągnięcia końcowego stężenia 1 mg/ml. Płytki następnie inkubowano w 37°C przez 3 godziny. Płytki odwirowano z szybkością 1000 obrotów/minutę przez 5 minut, przed odessaniem pożywki zawierającej MTT. Następnie usunięto pożywkę zawierającą MTT i do każdej studzienki dodano 100 μl 100% etanolu w celu rozpuszczenia powstałego formazanowego metabolitu. Dla zapewnienia całkowitego rozpuszczenia płytki wytrząsano przez 15 minut w temperaturze pokojowej. Absorbancję rejestrowano za pomocą czytnika płytek do mikromianowania (Molecular Dynamics) przy długości fali 570 nm wobec 650 nm jako wzorca. Procentowe hamowanie obliczano przez odjęcie absorbancji dla studzienek ze ślepą próbą (bez komórek) od wartości dla wszystkich studzienek, a następnie odjęcie ilorazu średniej absorbancji dla każdej z dwóch studzienek z badanym związkiem przez średnią dla studzienek kontrolnych od 1,00. Stężenia hamujące (IC50) wyznaczano metoda regresji liniowej wykresu logarytmu stężenia w funkcji procentowego hamowania.
Wyniki powyższego testu opartego na komórkach MDA-MB-435 podano poniżej w tabelach IIA-IIC.
T a b e l a IIA
Przeciwproliferacyjne działanie na MDA-MB435 (rak sutka) Zakres IC50 0,01 -1 μM
Związek nr R1 R2 R3 R4
1 2 3 4 5
B3 NO2 Cl CH3 H
B4 NO2 Cl CH2CH3 H
PL 200 933 B1 cd. tabeli IIA
1 2 3 4 5
B6 NO2 Cl i-Pr H
B7 CN F CH3 H
B22 F H CH3 H
B25 NO2 Cl cyklopropyl H
B29 NO2 H CH3 H
B31 NO2 F CH3 H
B35 CN F CH2OH H
C4 NH2 Cl CH3 H
C7 AcNH Cl CH3 H
C8 Akryloilo-NH Cl CH3 H
C9 MsNH Cl CH3 H
C13 NO2 Cl CHO H
C14 NO2 Cl CH2OH H
C17 NO2 Cl CH=CH2 H
D3 Me2NSO2NH Cl CH3 H
T a b e l a IIB
Przeciwproliferacyjne działanie na MDA-MB435 (rak sutka)
Zakres IC50 1,1-9,99 μΜ
Związek nr R1 R2 R3 R4
A15 C F H H
B9 CO2Et F CH3 H
B10 NO2 Cl 5-(4-Me)-pirazolil H
B12 NO2 Cl CF3 H
B14 NO2 Cl 4-imidazolil H
B16 NO2 Cl 3-pirazolil H
B18 MeO Cl CH3 H
B19 Cl H CH3 H
B20 Cl Cl CH3 H
B21 H F CH3 H
B30 H Cl CH3 H
C6 NH2 Cl i-Pr H
C16 NO2 Cl CH2OMe H
D4 ClCH2NHSO2NH Cl CH3 H
D5 morfolinylo-SO2NH Cl CH3 H
D51 CON-morfolinoamid F CH3 H
D52 CONHCH2CH2OH F CH3 H
D53 CONHCH2CH2-N-morfolinyl F CH3 H
PL 200 933 B1
T a b e l a IIC
Przeciwproliferacyjne działanie na MDA-MB435 (rak sutka) Zakres IC50 10-30 pM
Związek nr R1 R2 R3 R4
A5 NO2 Cl H H
A13 NO2 F H H
B2 NO2 Cl CO2Et H
B5 NO2 Cl CH2CH2Ph H
B8 NO2 Cl CH2Ph H
B13 NO2 Cl 1-tiazolil H
B15 NO2 Cl 2-pirazolil H
B24 NO2 Cl propyl H
C5 NH2 Cl H H
C10 NO2 Cl CONH2 H
C15 NO2 Cl CH2NMe2 H
C18 NO2 Cl CN H
D38 NO2 Cl 1-oksadiazolil H
Linię gruczolakoraka okrężnicy SW480 i linię raka okrężnicy HCT-116 również otrzymano z ATCC i zbadano zgodnie z taką samą procedurą, którą podano powyżej w odniesieniu do testu opartego na komórkach MDA-MB-435, z następującymi modyfikacjami. Linię komórek SW480 wysiano w ilości 1000 komórek/studzienkę, a analizę wykonano w 6 dni po dodaniu badanych związków. Linię komórek HCT-116 wysiano w ilości 1000 komórek/studzienkę, a analizę wykonano w 4 dni po dodaniu badanych związków.
Wyniki testów opartych na SW480 (okrężnica) i HCT-116 (okrężnica) podano poniżej odpowiednio w tabelach IIIA-IIIC i IVA-IVC.
T a b e l a IIIA
Przeciwproliferacyjne działanie na SW480 (okrężnica) Zakres IC50 0,01-1 pM
Związek nr R1 R2 R3 R4
1 2 3 4 5
B3 NO2 Cl CH3 H
B4 NO2 Cl CH2CH3 H
B6 NO2 Cl i-Pr H
B7 CN F CH3 H
B10 NO2 Cl 5-(4-Me)-pirazolil H
B21 H F CH3 H
B26 F F CH3 H
B27 NO2 H CH3 H
B31 NO2 F CH3 H
B35 CN F CH2OH H
C1 CON-morfolinoamid F H H
C4 NH2 Cl CH3 H
PL 200 933 B1 cd. tabeli IIIA
1 2 3 4 5
C7 AcNH Cl CH3 H
C8 Akryloilo-NH Cl CH3 H
C9 MsNH Cl CH3 H
C14 NO2 Cl CH2OH H
C19 CONH2 F CH3 H
D2 NO2 CF3 CH3 H
D51 CON-morfolinoamid F CH3 H
D52 CONHCH2CH2OH F CH3 H
D53 CONHCH2CH2-N-morfolinyl F CH3 H
T a b e l a IIIB
Przeciwproliferacyjne działanie na SW480 (okrężnica)
Zakres IC50 1,1 - 9,99 μΜ
Związek nr R1 R2 R3 R4
A5 NO2 Cl H H
A13 NO2 F H H
A15 CN F H H
B1 NO2 Cl 2-pirolil H
B9 CO2Et F CH3 H
B18 MeO Cl CH3 H
B19 Cl H CH3 H
B20 Cl Cl CH3 H
B22 F H CH3 H
B25 NO2 Cl Cyklopropyl H
B29 I F CH3 H
B30 H Cl CH3 H
B32 Cl F CH3 H
D3 Me2NSO2NH Cl CH3 H
D4 ClCH2NHSO2NH Cl CH3 H
D5 morfolinylo-SO2NH Cl CH3 H
D50 CONH2 F H H
T a b e l a IIIC
Przeciwproliferacyjne działanie na SW480 (okrężnica)
Zakres IC50 10-30 μΜ
Związek nr R1 R2 R3 R4
1 2 3 4 5
A9 H H H H
A10 H F H H
A11 F F H H
A21 H Cl H H
B5 NO2 Cl CH2CH2Ph H
PL 200 933 B1 cd. tabeli IIIC
1 2 3 4 5
B8 NO2 Cl CH2Ph H
B23 NO2 Cl Ph H
B24 NO2 Cl Propyl H
B33 I H CH3 H
C5 NH2 Cl H H
C12 NO2 Cl CONHNH2 H
D6 NO2 Cl 2-tiofenyl H
D7 NO2 Cl 2-furanyl H
D9 NO2 Cl 3-pirydynyl H
D10 NO2 Cl 4-pirydynyl H
D20 NO2 Cl 2-indoilil H
B34 Br H CH3 H
D37 NO2 Cl o-MePh H
D40 NO2 Cl o-CF3Ph H
D48 NO2 Cl 1-naftyl H
T a b e l a IVA
Przeciwproliferacyjne działanie na HCT 116 (okrężnica) Zakres IC50 0,01-1 μM
Związek nr R1 R2 R3 R4
B3 NO2 Cl CH3 H
B4 NO2 Cl CH2CH3 H
T a b e l a IVB
Przeciwproliferacyjne działanie na HCT 116 (okrężnica) Zakres IC50 1,1-9,99 μM
Związek nr R1 R2 R3 R4
A15 CN F H H
B1 NO2 Cl 2-pirolil H
B6 NO2 Cl i-Pr H
B7 CN F CH3 H
B9 CO2Et F CH3 H
B10 NO2 Cl 5-(4-Me)-pirazolil H
B25 NO2 Cl Cyklopropyl H
C12 NO2 Cl CONHNH2 H
D50 CONH2 F H H
T a b e l a IVB
Przeciwproliferacyjne działanie na HCT 116 (okrężnica) Zakres IC50 10-30 μM
Związek nr R1 R2 R3 R4
1 2 3 4 5
A5 NO2 Cl H H
PL 200 933 B1 cd. tabeli IVB
1 2 3 4 5
A9 H H H H
A10 H F H H
A13 NO2 F H H
A14 CH3SO2 H H H
A16 NO2 H H H
A21 H Cl H H
B5 NO2 Cl CH2CH2Ph H
B8 NO2 Cl CH2Ph H
B23 NO2 Cl Ph H
B24 NO2 Cl Propyl H
C1 CON-morfolinoamid F H H
C2 CONHCH2CH2OH F H H
C5 NH2 Cl H H
D6 NO2 Cl 2-tiofenyl H
D7 NO2 Cl 2-furanyl H
D8 NO2 Cl 2-(3-Me)-tiofenyl H
D9 NO2 Cl 3-pirydynyl H
D10 NO2 Cl 4-pirydynyl H
D11 NO2 Cl p-MeSPh H
D12 NO2 Cl p-CF3OPh H
D13 NO2 Cl o,m-metylenodioksy-Ph H
D14 NO2 Cl p-OH-o-MeOPh H
D18 NO2 H cyklopropyl H
D19 NO2 Cl 2-benzofuranyl H
D20 NO2 Cl 2-indoilil H
D37 NO2 Cl o-MePh H
D41 NO2 Cl m-CF3Ph H
D43 NO2 Cl 4-N-pirolilo-Ph H
D48 NO2 Cl 1-naftyl H
D49 NO2 Cl 4-izochinolinyl H
P r z y k ł a d 5. Preparat w postaci tabletek
Nr Składniki mg/tabletkę
1 Związek 1* 5 25 100 250 500 750
2 Laktoza bezwodna 103 83 35 19 38 57
3 Sól sodowa kroskarmelozy 6 6 8 16 32 48
4 Povidone K30 5 5 6 12 24 36
5 Stearynian magnezu 1 1 1 3 6 9
Masa całkowita 120 120 150 300 600 900
* Zwią zek 1 jest zwią zkiem wedł ug wynalazku
PL 200 933 B1
Sposób wytwarzania
1. Mieszać składniki 1, 2 i 3 w odpowiedniej mieszarce przez 15 minut.
2. Granulować mieszankę proszkową z etapu 1 z 20% roztworem Povidone K30 (składnik 4).
3. Wysuszyć granulat z etapu 2 w 50°C.
4. Przepuścić granulat z etapu 3 przez odpowiednie urządzenie mielące.
5. Dodać składnik 5 do zmielonego granulatu z etapu 4 i mieszać przez 3 minuty.
6. Sprasować granulat z etapu 5 w odpowiedniej prasie.
P r z y k ł a d 6. Preparat w postaci kapsułek
Nr Składniki mg/tabletkę
1 Związek 1* 5 25 100 250 500
2 Laktoza bezwodna 159 123 148 - -
3 Skrobia kukurydziana 25 35 40 35 70
4 Talk 10 15 10 12 24
5 Stearynian magnezu 1 2 2 3 6
Masa całkowita wypełnienia 200 200 300 300 600
* Zwią zek 1 jest zwią zkiem wedł ug wynalazku
Sposób wytwarzania:
1. Mieszać składniki 1, 2 i 3 w odpowiedniej mieszarce przez 15 minut.
2. Dodać składniki 4 i 5, po czym mieszać przez 3 minuty.
3. Napełnić odpowiednią kapsułkę.
P r z y k ł a d 7. Preparat w postaci roztworu/emulsji do iniekcji
Nr Składnik mg/ml
1 Związek 1* 1 mg
2 PEG400 10 - 50 mg
3 Lecytyna 20 - 50 mg
4 Olej sojowy 1 - 5 mg
5 Gliceryna 8 - 12 mg
6 Woda tyle ile potrzeba do 1 ml
* Zwią zek 1 jest zwią zkiem wedł ug wynalazku Sposób wytwarzania
1. Rozpuścić składnik 1 w składniku 2.
2. Dodać składniki 3, 4 i 5 do składnika 6 i mieszać do otrzymania dyspersji, potem homogenizować.
3. Dodać roztwór z etapu 1 do mieszaniny z etapu 2 i homogenizować aż do otrzymania przeświecającej dyspersji.
4. Przesączyć w warunkach jałowych przez filtr 0,2 μm i napełnić dyspersją fiolki.
P r z y k ł a d 8. Wytwarzanie roztworu/emulsji do iniekcji
Nr Składnik mg/ml
1 Związek 1 * 1 mg
2 Glikofurol 10 - 50 mg
3 Lecytyna 20 - 50 mg
4 Olej sojowy 1 - 5 mg
5 Gliceryna 8 - 12 mg
6 Woda tyle ile potrzeba do 1 ml
* Zwią zek 1 jest zwią zkiem wedł ug wynalazku
PL 200 933 B1
Sposób wytwarzania:
1. Rozpuścić składnik 1 w składniku 2.
2. Dodać składniki 3, 4 i 5 do składnika 6 i mieszać do otrzymania dyspersji, potem homogenizować.
3. Dodać roztwór z etapu 1 do mieszaniny z etapu 2 i homogenizować aż do otrzymania przeświecającej dyspersji.
4. Przesączyć w warunkach jałowych przez filtr 0,2 μm i napełnić dyspersją fiolki.

Claims (20)

1. Pirazolobenzodiazepiny o ogólnym wzorze I w którym
R1 oznacza atom wodoru, -NO2, -CN, atom chlorowca, -OR5, -COOR7, -CONR8R9, -NH2,
-NHCOR12 lub -NHSO2R13;
R2 oznacza atom wodoru, -atom chlorowca, -NO2, -CF3 lub -C1-C6-alkil o prostym łańcuchu podstawiony atomem chlorowca;
R3 oznacza atom wodoru, -C3-C8-cykloalkil, -fenyl, -naftyl, -pirolil, -pirazolil, -tiazolil, -imidazolil, -tiofenyl, -furanyl, -pirydynyl, -benzofuranyl, -indolil, -oksadiazolil, -izochinolinyl, C1-C2-alkilenodioksyfenyl, -COOR7, -CN, -C2-C6-alkenyl, -CONR8R9 lub -C1-C6-alkil ewentualnie podstawiony hydroksylem, -OR9, F i/lub fenylem;
R4 oznacza atom wodoru lub atom chlorowca;
R5 oznacza -C1-C6-alkil;
R7 oznacza atom wodoru lub -C1-C6-alkil;
R8 i R9 niezależnie oznaczają atom wodoru lub -C1-C6-alkil, który z kolei jest ewentualnie podstawiony hydroksylem; albo
R8 i R9 mogą tworzyć morfolinyl;
R12 oznacza -C1-C6-alkil; a
R13 oznacza -C1-C6-alkil, oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole powyższych związków.
2. Związek według zastrz. 1, w którym R1 oznacza atom wodoru, NO2, CN, CONH2 lub atom chlorowca.
3. Związek według zastrz. 2, w którym R1 oznacza NO2, CN, lub CONH2.
4. Związek według zastrz. 1 albo, 2 albo 3, w którym R2 występuje w pozycji 2' i oznacza atom wodoru lub atom chlorowca .
5. Związek według zastrz. 1, w którym R3 oznacza -C1-C6-alkil, -C1-C6-hydroksyalkil, -C3-C8-cykloalkil, -pirolil, -pirazolil, -tiazolil, -imidazolil, -tiofenyl, -furanyl, -pirydynyl, -benzofuranyl, -indolil, -oksadiazolil, -izochinolinyl lub -C1-C2-alkilenodioksyfenyl.
6. Związek według zastrz. 5, w którym R3 oznacza metyl, etyl lub hydroksymetyl.
7. Związek, który stanowi 3-metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
8. Związek, który stanowi 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karbonitryl.
9. Związek, który stanowi 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid.
10. Związek, który stanowi 3-hydroksymetylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karbonitryl.
PL 200 933 B1
11. Związek o wzorze 1 według zastrz. 1, który stanowi
5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-chlorofenylo)-7-aminopirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-fenylo-7-chloropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-chlorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2,4-dichlorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-fenylopirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo) pirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-chlorofenylo)-7-metoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-fluorofenylo)-7-cyjanopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(3-nitrofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-(2-trifluorometylofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
5-fenylo-7-karbometoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, sól sodowa kwasu(5-fenylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)karboksylowego, 5-(2-fluorofenylo)-7-jodopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 5-(2-fluorofenylo)-7-karboetoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, N-(2-hydroksyetylo)-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid, 5-(2-fluorofenylo)-7-morfolinylokarbonylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, N,N-bis-(2-hydroksyetylo)-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid, kwas (5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)karboksylowy, 5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid lub 5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
12. Związek o wzorze I według zastrz. 1, który stanowi
3-etylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-fenyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(1-metyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(1-metyloetylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-aminopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(fenylometylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-karboetoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(2-metylopropylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-trifluorometylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-hydroksymetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
N-(2-hydroksyetylo)-3-metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid, 3-(1-metylopropylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metoksymetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-etenylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-metoksypirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-aminopirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-fenylo-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-chlorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-metylo-5-(2-fluorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
N-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)acetamid,
N-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)metanosulfonoamid, 3-metylo-5-fenylo-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-jodopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-morfolinylokarbonylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-fenylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-chloropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-trifluorometylofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
PL 200 933 B1
3-metylo-5-fenylo-7-jodopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-fenylo-7-bromopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-7-fluoropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-cyklopropylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina lub 3-propylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
13. Związek o wzorze I według zastrz. 1, który stanowi 3-karboetoksy-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid, N,N-dimetylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid lub 5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karbonitryl.
14. Związek o wzorze I według zastrz. 1, który stanowi 3-fenylo-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(1-naftylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina lub 3-(2-naftylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
15. Związek o wzorze l według zastrz. 1, który stanowi 3-(1-tiazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(1,3,4-oksadiazol-2-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(4-imidazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina, 3-(2-pirazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-pirazolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-tienylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-furanylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(indol-2-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-pirydynylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(4-pirydynylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-pirolilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(4-izochinolinylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-benzofuranylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-tienylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-imidazolilo)-5-fenylo-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-pirydynylo)-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(1,3-benzodioksol-5-ilo)-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2,3-d1Hydro-1,4-benzodioksyn-6-ylo)-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina lub 3-(2,3-metylenedioksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo [3,4] [1,4]benzodiazepina.
16. Związek, który stanowi
5-fenylo-7-metanosulfonylopirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(N,N-dimetyloaminometylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, N-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)-2-propenoamid, N-amino-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyamid, 5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-3-karboksyaldehyd, N'-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)-4-N,N-dimetyloaminosulfonoamid,
N'-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)-4-N-chlorometyloaminosulfonoamid,
N'-(3-metylo-5-(2-chlorofenylo)pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepin-7-ylo)-4-morfolinosulfonoamid, N-[2-(4-morfolinylo)etylo]-3-metylo-5-(2-fluorofenylo)-pirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepino-7-karboksyamid, 3-(4-metylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
3-(4-dimetyloaminofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-cyjanofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-metylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-nitrofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-trifluorometylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-trifluorometylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-metoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(4-(metylotio)fenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4][1,4]benzodiazepina, 3-(4-trifluorometoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina,
PL 200 933 B1
3-(4-hydroksy-2-metoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-hydroksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo-[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-((1,1'-bifenyl)-4-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-nitrofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-fenoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-cyjanofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-etoksyfenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-metylofenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(2-fluorofenylo)-5-fenylo-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(4-metylopirazol-5-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(3-metylotien-2-ylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(1-metylo-1H-pirol-2-ilo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(4-(1-pirolilo)fenylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina, 3-(5-metylotien-2-ylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina lub 3-(5-etylofuran-2-ylo)-5-(2-chlorofenylo)-7-nitropirazolo[3,4] [1,4]benzodiazepina.
17. Związki pośrednie o wzorze 3 w którym R1 oznacza atom chlorowca, R2 oznacza atom chlorowca, a R4 oznacza atom wodoru.
18. Środek farmaceutyczny zawierający substancję czynną i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub zaróbkę, znamienny tym, że jako substancję czynną zawiera związek określony w zastrz. 1 albo 7, albo 8, albo 9, albo 10, albo 16.
19. Związki określone w zastrz. 1 albo 7, albo 8, albo 9, albo 10, albo 16, do zastosowania jako leki.
20. Zastosowanie związku określonego w zastrz. 1 albo 7, albo 8, albo 9, albo 10, albo 16, do wytwarzania leku do leczenia lub zwalczania nowotworów sutka, okrężnicy, płuc i gruczołu krokowego
PL354405A 1999-04-21 2000-04-14 Pirazolobenzodiazepiny, związki pośrednie, środek farmaceutyczny i zastosowanie pirazolobenzodiazepin PL200933B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13037099P 1999-04-21 1999-04-21
PCT/EP2000/003394 WO2000064900A1 (en) 1999-04-21 2000-04-14 Pyrazolobenzodiazepines as cdk2 inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL354405A1 PL354405A1 (pl) 2004-01-12
PL200933B1 true PL200933B1 (pl) 2009-02-27

Family

ID=22444382

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL354405A PL200933B1 (pl) 1999-04-21 2000-04-14 Pirazolobenzodiazepiny, związki pośrednie, środek farmaceutyczny i zastosowanie pirazolobenzodiazepin

Country Status (33)

Country Link
US (3) US6440959B1 (pl)
EP (1) EP1185529B1 (pl)
JP (1) JP3746680B2 (pl)
KR (1) KR100481757B1 (pl)
CN (2) CN1279029C (pl)
AR (1) AR023542A1 (pl)
AT (1) ATE279413T1 (pl)
AU (1) AU768667B2 (pl)
BR (1) BR0009887A (pl)
CA (1) CA2367704C (pl)
CO (1) CO5170444A1 (pl)
CZ (1) CZ20013738A3 (pl)
DE (1) DE60014893T2 (pl)
DK (1) DK1185529T3 (pl)
ES (1) ES2228522T3 (pl)
HK (1) HK1046278B (pl)
HR (1) HRP20010742A2 (pl)
HU (1) HUP0300318A3 (pl)
IL (1) IL145764A0 (pl)
JO (1) JO2248B1 (pl)
MA (1) MA26782A1 (pl)
NO (1) NO20015065L (pl)
NZ (1) NZ514523A (pl)
PE (1) PE20010054A1 (pl)
PL (1) PL200933B1 (pl)
PT (1) PT1185529E (pl)
RU (1) RU2249593C2 (pl)
SI (1) SI1185529T1 (pl)
TR (1) TR200103016T2 (pl)
TW (1) TW585866B (pl)
WO (1) WO2000064900A1 (pl)
YU (1) YU73101A (pl)
ZA (1) ZA200108016B (pl)

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6520951B1 (en) 1996-09-13 2003-02-18 Scimed Life Systems, Inc. Rapid exchange catheter with detachable hood
ES2309209T3 (es) * 2001-11-13 2008-12-16 Ortho-Mcneil-Janssen Pharmaceuticals, Inc. 1,4-benzodiazepinas sustituidas y uso de las mismas para el tratamiento del cancer.
FR2847253B1 (fr) * 2002-11-19 2007-05-18 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives de pyridazinones a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques les renfermant
JP2006519236A (ja) * 2003-02-27 2006-08-24 アボット・ラボラトリーズ 複素環式キナーゼ阻害剤
DK1802625T3 (da) * 2004-10-13 2008-09-01 Hoffmann La Roche Disubstituerede pyrazolobenzodiazepiner der er nyttige som inhibitorer af CDK2 og angiogenese og til behandling af bryst-, tyktarms-, lunge- og prostatacancer
CA2624025A1 (en) * 2005-10-14 2007-04-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Regimen of administration for 5-(2-chlorophenyl)-1 ,2-dihydro-7-fluoro-8-methoxy-3-methyl-pyrazolo [3, 4.-b] [1, 4] benzodiazepine
KR20150081370A (ko) 2006-07-10 2015-07-13 파이온 유케이 리미티드 속효형 벤조디아제핀 염 및 이의 중합체 형태
KR20100073454A (ko) * 2008-12-23 2010-07-01 국립암센터 트란스글루타미나제 억제제로 사용되는 신규한 피라졸로디아제핀계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 조성물
EP2305647A1 (en) 2009-09-18 2011-04-06 PAION UK Limited Process for preparing 3-[(4S)-8-bromo-1-methyl-6-(2-pyridinyl)-4 H-imidazo[1,2-a][1,4]benzodiazepine-4-yl] propionic acid methyl ester or the benzene sulfonate salt thereof, and compounds useful in that process
EP2450039A1 (en) 2010-11-08 2012-05-09 PAION UK Ltd. Dosing regimen for sedation with CNS 7056 (Remimazolam)
SG11201404596UA (en) * 2012-02-02 2014-10-30 Senex Biotechnology Inc Cdk8/cdk19 selective inhibitors and their use in anti-metastatic and chemopreventative methods for cancer
CN103288830A (zh) * 2012-02-24 2013-09-11 中国科学院大连化学物理研究所 一种合成手性二氢-5H-吡咯并[2,1-c][1,4]-苯并二氮杂卓的方法
CN102603743B (zh) * 2012-02-24 2014-05-28 南京天易生物科技有限公司 抗肿瘤的氮杂苯并[f]薁衍生物其制备方法及其用途
CN103288828A (zh) * 2012-02-24 2013-09-11 中国科学院大连化学物理研究所 一种合成手性二氢-6H-吲哚并[2,1-c][1,4]-苯并二氮杂卓的方法
AR094963A1 (es) 2013-03-04 2015-09-09 Ono Pharmaceutical Co Reacción de oxidación excelente en el índice de conversión
CN106608877B (zh) * 2015-10-21 2018-11-13 新发药业有限公司 一种依鲁替尼中间体4-氨基-3-（4-苯氧基）苯基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶的制备方法
JP7139323B2 (ja) * 2016-11-01 2022-09-20 エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー Ｃｎｓ関連疾患を処置するための１，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジアゼピン－２－チオン
AU2017376353B2 (en) 2016-12-13 2020-02-06 Transthera Sciences (Nanjing), Inc. Multi-kinase inhibitor compound, and crystal form and use thereof
CN109020980B (zh) * 2017-06-09 2020-11-20 华东师范大学 一类抗肿瘤作用的吡唑并嘧啶二氮*衍生物
US11066404B2 (en) 2018-10-11 2021-07-20 Incyte Corporation Dihydropyrido[2,3-d]pyrimidinone compounds as CDK2 inhibitors
US11384083B2 (en) 2019-02-15 2022-07-12 Incyte Corporation Substituted spiro[cyclopropane-1,5′-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin]-6′(7′h)-ones as CDK2 inhibitors
TW202100520A (zh) 2019-03-05 2021-01-01 美商英塞特公司 作為cdk2 抑制劑之吡唑基嘧啶基胺化合物
WO2020205560A1 (en) 2019-03-29 2020-10-08 Incyte Corporation Sulfonylamide compounds as cdk2 inhibitors
US11447494B2 (en) 2019-05-01 2022-09-20 Incyte Corporation Tricyclic amine compounds as CDK2 inhibitors
US11440914B2 (en) 2019-05-01 2022-09-13 Incyte Corporation Tricyclic amine compounds as CDK2 inhibitors
CN116348458A (zh) 2019-08-14 2023-06-27 因赛特公司 作为cdk2抑制剂的咪唑基嘧啶基胺化合物
CN119930611A (zh) 2019-10-11 2025-05-06 因赛特公司 作为cdk2抑制剂的双环胺
US20230212167A1 (en) * 2020-05-08 2023-07-06 Transthera Sciences (Nanjing), Inc. Method for synthesizing anti-tumor compound and intermediates thereof
WO2022113003A1 (en) 2020-11-27 2022-06-02 Rhizen Pharmaceuticals Ag Cdk inhibitors
WO2022149057A1 (en) 2021-01-05 2022-07-14 Rhizen Pharmaceuticals Ag Cdk inhibitors
AU2022271290A1 (en) 2021-05-07 2023-11-23 Kymera Therapeutics, Inc. Cdk2 degraders and uses thereof
US20240245704A1 (en) * 2021-05-10 2024-07-25 Transthera Sciences (Nanjing), Inc. Pharmaceutical composition and use of multi-kinase inhibitor
US11981671B2 (en) 2021-06-21 2024-05-14 Incyte Corporation Bicyclic pyrazolyl amines as CDK2 inhibitors
US11976073B2 (en) 2021-12-10 2024-05-07 Incyte Corporation Bicyclic amines as CDK2 inhibitors
WO2024030399A2 (en) * 2022-08-02 2024-02-08 Lab1636, Llc Use of a gaba-a pam for reduction of tactile hypersensitivity
WO2026024674A1 (en) 2024-07-22 2026-01-29 Genesis Therapeutics, Inc. Methods of treating skp2-associated cancers

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2071092A1 (en) * 1991-06-14 1992-12-15 Roger M. Freidinger 1,4-benzodiazepines with 5-membered heterocyclic rings
ES2239779T3 (es) 1996-10-02 2005-10-01 Novartis Ag Derivados de pirimidina y procedimientos para la preparacion de los mismos.
US6350786B1 (en) * 1998-09-22 2002-02-26 Hoffmann-La Roche Inc. Stable complexes of poorly soluble compounds in ionic polymers

Also Published As

Publication number Publication date
BR0009887A (pt) 2002-01-22
CA2367704A1 (en) 2000-11-02
CN1348455A (zh) 2002-05-08
HRP20010742A2 (en) 2002-12-31
JO2248B1 (en) 2004-10-07
CA2367704C (en) 2008-06-17
JP3746680B2 (ja) 2006-02-15
AU768667B2 (en) 2003-12-18
SI1185529T1 (en) 2005-02-28
IL145764A0 (en) 2002-07-25
CN1196703C (zh) 2005-04-13
YU73101A (sh) 2004-05-12
HK1046278A1 (en) 2003-01-03
CZ20013738A3 (cs) 2002-08-14
HUP0300318A3 (en) 2004-11-29
DE60014893T2 (de) 2005-10-13
TR200103016T2 (tr) 2002-04-22
HUP0300318A2 (hu) 2003-06-28
JP2002543081A (ja) 2002-12-17
ATE279413T1 (de) 2004-10-15
NO20015065D0 (no) 2001-10-18
HK1046278B (zh) 2005-08-12
TW585866B (en) 2004-05-01
US6916923B2 (en) 2005-07-12
KR20010112435A (ko) 2001-12-20
AU4748000A (en) 2000-11-10
US6838558B2 (en) 2005-01-04
NZ514523A (en) 2003-11-28
ZA200108016B (en) 2003-03-26
RU2249593C2 (ru) 2005-04-10
US6440959B1 (en) 2002-08-27
CN1603314A (zh) 2005-04-06
WO2000064900A1 (en) 2000-11-02
NO20015065L (no) 2001-10-18
PL354405A1 (pl) 2004-01-12
EP1185529B1 (en) 2004-10-13
KR100481757B1 (ko) 2005-04-11
US20020183514A1 (en) 2002-12-05
DK1185529T3 (da) 2005-02-07
CN1279029C (zh) 2006-10-11
MA26782A1 (fr) 2004-12-20
CO5170444A1 (es) 2002-06-27
PE20010054A1 (es) 2001-02-07
US20040198976A1 (en) 2004-10-07
PT1185529E (pt) 2005-02-28
EP1185529A1 (en) 2002-03-13
ES2228522T3 (es) 2005-04-16
AR023542A1 (es) 2002-09-04
DE60014893D1 (de) 2004-11-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1185529B1 (en) Pyrazolobenzodiazepines as cdk2 inhibitors
US4774245A (en) Imidazoquinoxaline compounds
US5792766A (en) Imidazo 1,5-c! quinazolines; a new class of GABA brain receptor ligands
BG106026A (bg) 1-АМИНОТРИАЗОЛО/4,3-а/ХИНАЗОЛИН-5-ОНИ И/ИЛИ -5-ТИОНИ ИНХИБИРАЩИ ФОСФОДИЕСТЕРАЗА IV
EP0407342A2 (de) Neue Pyrimidin Derivate
EP1149105A1 (en) 4,5-pyrazinoxindoles as protein kinase inhibitors
EP1149106B1 (en) 4,5-azolo-oxindoles
KR100508392B1 (ko) 5-치환-3-옥사디아졸릴-1,6-나프티리딘-2(1에이치)-온유도체
US5922731A (en) 5- (heteroaryl)alkyl!-3-oxo-pyrido 1,2-a!benzimidazole-4-carboxamide derivatives useful in treating central nervous system disorders
MXPA01010545A (en) Pyrazolobenzodiazepines as cdk2 inhibitors
US6197804B1 (en) 4,5-azolo-oxindoles
EP4658262A1 (en) Bicyclic imide compounds as trpa1 inhibitors
WO2025091010A1 (en) Organic compounds
WO2006084835A1 (en) N-(3-(imidazo [1,5-a]pyrimidin-4-yl)phenyl]-sulfonamides and n-[3-(imidazo[1,5-a]pyrimidin-4-yl)-phenyl]-carboxamides and their use as gabaa receptor modulators
MXPA01005933A (en) 4,5-azolo-oxindoles

Legal Events

Date Code Title Description
RECP Rectifications of patent specification
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20130414