RU2001101454A

RU2001101454A - Способ получения иммуноглобулинов для внутривенного введения и другие иммуноглобулиновые продукты

Info

Publication number: RU2001101454A
Application number: RU2001101454A
Authority: RU
Inventors: Инга ЛАУРСЕН; Берге ТЕЙСНЕР
Original assignee: Статенс Серум Институт
Priority date: 1998-06-09
Filing date: 1999-06-09
Publication date: 2003-01-20
Also published as: EP1084147A1; RU2197500C2; WO1999064462A1; HU228076B1; SK18662000A3; HUP0101988A3; EP1084147B1; EP2270044B1; IL140155A0; EP2270044A1; SK288128B6; IL140155A; CN1196714C; JP5478519B2; KR100501263B1; KR20010052733A; CZ20004534A3; HK1151045A1; CA2330170A1; DE69920693T2

Claims

1. Способ очистки иммуноглобулина G (IgG) из содержащей иммуноглобулин белковой фракции сырой плазмы, включающий стадии (a) получения водной суспензии содержащей иммуноглобулин белковой фракции сырой плазмы; (b) добавления водорастворимого, неденатурирующего в значительной степени белок осадителя к упомянутой суспензии со стадии (а) в количестве, достаточном, чтобы вызвать осаждение большей части белков без иммуноглобулина G, агрегированных иммуноглобулинов и частиц, включая потенциально инфекционные частицы, как, например, вирусные частицы, не вызывая существенного осаждения мономерного иммуноглобулина G, образуя таким образом смесь твердого осадка и надосадочной жидкости; (c) выделения осветленной, содержащей иммуноглобулин G надосадочной жидкости из смеси со стадии (b); (d) нанесения осветленной, содержащей иммуноглобулин G надосадочной жидкости со стадии (с) на анионообменную смолу и затем на катионообменную смолу, где анионообменная смола и катионообменная смола соединены последовательно и где буфер, используемый для анионообменной хроматографии и катионообменной хроматографии является одним и тем же буфером, рН этого указанного того же самого буфера ниже 6,0; (e) вымывания белковых загрязняющих примесей и осадителя белка с катионообменной смолы после стадии (d) буфером, имеющим рН и ионную силу, достаточные для удаления загрязняющих примесей со смолы, не вызывая существенного элюирования иммуноглобулина G; (f) элюирования иммуноглобулина G с катионообменной смолы со стадии (е) фактически неденатурирующим буфером с значением рН и ионной силой, достаточными для того, чтобы вызвать эффективное элюирование иммуноглобулина G, получая при этом содержащий иммуноглобулин G элюат; (д) осуществления диафильтрации/ультрафильтрации содержащего иммуноглобулин G элюата со стадии (f) для концентрирования и/или диализа элюата и, не обязательно, добавления стабилизирующего средства; (h) добавления вирулицидного количества инактивирующего вирус средства к содержащей иммуноглобулин G, подвергнутой диафильтрации и ультрафильтрации и, не обязательно, стабилизированной фракции со стадии (д), приводящего, по существу, к безопасному в отношении вирусной активности раствору, содержащему иммуноглобулин G; (i) нанесения содержащего иммуноглобулин G раствора со стадии (h) на анионообменную смолу и затем на катионообменную смолу; (j) промывания катионообменной смолы со стадии (i) буфером с рН и ионной силой, достаточными для вымывания со смолы белковых загрязняющих примесей и инактивирующего вирус средства, не вызывая существенного элюирования иммуноглобулина G; (k) элюирования иммуноглобулина G с катионообменной смолы со стадии (j) с помощью в значительной степени неденатурирующего буфера с рН и ионной силой, достаточными, чтобы вызвать эффективное элюирование иммуноглобулина G, получая при этом содержащий иммуноглобулин G элюат и (l) обработки содержащего иммуноглобулин G элюата со стадии (k) путем диафильтрации/ультрафильтрации для понижения ионной силы и концентрирования раствора иммуноглобулина G и регулирования осмоляльности путем добавления сахарида.

2. Способ по п. 1, где содержащая иммуноглобулин G белковая фракция плазмы выбирается из группы, состоящей из фракции II по Кону, фракций II и III по Кону и фракций I, II и III по Кону.

3. Способ по п. 1 или 2, где суспензия на стадии (а) поддерживается при температуре от 0 до 12^oС и суспензия на стадии (а) поддерживается при рН ниже 6.

4. Способ по любому из предшествующих пунктов, где осадитель белка на стадии (Ь) выбирается из группы, состоящей из полиэтиленгликоля (ПЭГ), каприловой кислоты и сульфата аммония.

5. Способ по п. 4, где осадитель белка выбирается из группы, состоящей из ПЭГ с молекулярной массой в диапазоне 3000-8000 Да, как, например, ПЭГ 3350, ПЭГ 4000, ПЭГ 5000 и ПЭГ 6000.

6. Способ по любому из предшествующих пунктов, где анионообменная смола и катионообменная смола на стадии (i) соединены последовательно.

7. Способ по п. 6, где используемым буфером для анионообменной хроматографии и катионообменной хроматографии является один и тот же буфер и рН этого упомянутого буфера ниже 6,0.

8. Способ согласно любому из предшествующих пунктов, где анионообменная смола на стадии (d) и/или стадии (i) содержит диэтиламиноэтильные группы и/или катионообменная смола на стадии (d) и/или стадии (i) содержит карбоксиметильные группы, являясь предпочтительно такими смолами, как ДЭAЭ-сефароза EF^® и KM-сефароза EF^®.
9. Способ согласно любому из предшествующих пунктов, где буфером, используемым везде на стадиях от (b) до (1), является ацетатный буфер, как, например, ацетатный буфер с рН 5,0-6,0 и имеющий молярность 5-25 мМ.

10. Способ по любому из предшествующих пунктов, где инактивирующим вирус средством на стадии (h) является смесь, как минимум, одного неионогенного или ионогенного детергента и, как минимум, одного растворителя.

11. Способ по любому из предшествующих пунктов, где инактивирующим вирус средством на стадии (h) является смесь, как минимум, одного неденатурирующего в значительной степени детергента и, как минимум, одного растворителя в виде три(низший алкил)фосфата.

12. Иммуноглобулиновый продукт, получаемый способом по любому из пп. 1-11.

13. Иммуноглобулиновый продукт, получаемый способом по любому из пп. 6-8.

14. Иммуноглобулиновый продукт, имеющий следующие характеристики a) чистота более 98%, b) содержание мономеров и димеров IgG более 98,5%, c) содержание IgA менее 4 мг IgA/л и d) содержание IgGI, IgG2, IgG3 и IgG4.

15. Иммуноглобулиновый продукт по п. 14, который не включает детергент, ПЭГ или альбумин в качестве стабилизатора.

16. Иммуноглобулиновый продукт по пп. 14 или 15, который содержит менее 3 мг/л IgA.

17. Иммуноглобулиновый продукт по любому из пп. 14-16, который содержит IgGI между 55 и 65%, IgG2 между 30 и 40%, IgG3 между 2 и 5% и IgG4 между 1 и 4%.

18. Иммуноглобулиновый продукт по любому из пп. 14-17, который содержит менее 0,5% полимеров и агрегатов.

19. Жидкий иммуноглобулиновый продукт по любому из пп. 14-18.

20. Иммуноглобулиновый продукт по любому из пп. 14-19 для непосредственного внутривенного введения.

21. Иммуноглобулиновый продукт по любому из пп. 14-20 для использования в медицине.

22. Применение иммуноглобулинового продукта по любому из пп. 14-21 для получения лекарственного средства для лечения млекопитающего с PID (первичной иммунологической недостаточностью), SID (вторичной иммунологической недостаточностью), ITP (тромбоцитопенической пурпурой неясного происхождения), полирадикулоневритом, периферическими полиневропатиями, болезнью Кавасаки, полимиозитом, серьезными хроническими аутоиммунными заболеваниями, хронической воспалительной демиелинизирующей полиневропатией (CIDP), многоочаговой двигательной невропатией, рассеянным склерозом, тяжелой миастенией, синдромом Итона-Ламберта, ретробульбарным невритом, эпилепсией, привычным абортом, первичным антифосфолипидным синдромом, ревматоидным артритом, системной красной волчанкой, системной склеродермией, васкулитом, гранулематозом Вегенера, синдромом Шегрена, юношеским ревматоидным артритом, аутоиммунной нейтропенией, аутоиммунной гемолитической анемией, нейтропенией, болезнью Крона, язвенным колитом, брюшными заболеваниями, астмой, синдромом септического шока, синдромом хронической усталости, псориазом, синдромом токсического шока, диабетом, синуситом, расширенной кардиомиопатией, эндокардитом, атеросклерозом и со СПИДом и бактериальными инфекциями у взрослых.

23. Применение по п. 22, где млекопитающим является человек.