RO117699B1 - Derivati de benzimidazol, procedee analoage si intermediar pentru prepararea acestor derivati si compozitie farmaceutica cu acestia - Google Patents

Abstract

Inventia se refera la derivati de benzimidazol avand structura chimica corespunzatoare formulei (I) precum si la sarurile sau esterii lor acceptabili farmaceutic, la procedee analoage pentru prepararea lor, la intermediarul pentru prepararea derivatilor si la compozitia farmaceutica cu acesti derivati, care au efecte terapeutice si profilactice in infectiile virale produse de herpesvirus, virusul herpes simplex 1, herpes simplex 2, virusul varicelei si al zonei zoster, citomegalovirus, virusul Epstein Bar, virusul herpesului uman 6 si virusul herpesului uman 7.

Description

Invenția se referă la derivați de benzimidazol, la procedee analoge pentru prepararea acestor derivați, la un intermediar pentru prepararea derivaților de benzimidazol prin procedeele prezentate în invenție, precum și la o compoziție farmaceutică cu acești derivați de benzimidazol utilizați în tratamentul sau profilaxia infecțiilor virale și anume, infecții cu herpesvirusuri.

Se știe că dintre virusurile DNA, cele din grupul herpesvirusurilor reprezintă sursele celor mai multe boli virale la om. Grupul include virusul herpes simplex de tip 1 și 2(HSV), virusul varicela-zoster (VZV), citomegalovirusul (CMV), virusul Epstein-Barr(EBV), virusul herpesului uman de tip 6 (HHV-6) și virusul herpesului uman de tip 7 (HHV-7). HSV-1 și HSV-2 sunt unii dintre cei mai obișnuiți agenți infecțioși la om. Cele mai multe dintre aceste virusuri sunt capabile să persiste în celulele neurale ale gazdei; odată infectați, indivizii sunt expuși la riscul manifestărilor clinice frecvente ale infecției care pot provoca suferință, atât din punct de vedere fizic, cât și din punct de vedere mental.

Infecția cu HSV este adesea caracterizată prin leziuni extinse și epuizante ale pielii, gurii și/sau ale organelor genitale. Infecțiile primare pot fi subclinice, deși tind să fie mai severe decât infecțiile la indivizii expuși în prealabil la virus. Infecțiile oculare cu HSV pot duce la keratită sau cataractă prin aceasta punând în pericol vederea gazdei. Infecția la nounăscuți, la pacienții afectați imunologic sau penetrarea infecției în sistemul nervos central pot fi fatale.

VZV este un herpesvirus ce cauzează varicelă și zona zoster. Varicela este maladia primară produsă într-o gazdă fără imunitate, iar la copii este de obicei o boală ușoară caracterizată printr-o erupție veziculară și febră. Zona zoster sau zoster este forma recurentă a maladiei care apare la adulți care au fost infectați în prealabil, cu VZV. Manifestările clinice ale zonei zoster sunt caracterizate prin nevralgie și o erupție veziculară a pielii care este distribuită unilateral și dermatomal. Răspândirea inflamației duce la paralizie și convulsii. Coma poate apărea dacă este afectat meningele. VZV este o problemă seriosă la pacienții care primesc medicamente imunorepresive în vederea efectuării unui transplant sau pentru un tratament al neoplaziei maligne și este o complicație serioasă la pacienții cu SIDA datorită sistemului lor imunitar deteriorat.

Ca și celelalte herpesvirusuri, infecția cu CMV conduce la o simbioză pe viață între virus și gazdă. Infecția congenitală urmată de infecția mamei în timpul sarcinii pot da naștere efectelor clinice cum ar fi,moartea sau bolile însoțite de îngrășare (microcefalie. hepatosplenomegalie, icter, întârziere mentală), retinită conducând la orbire sau, în forme mai puțin grave, la imposibilitatea de a se dezvolta, și susceptibilitate la infecții ale pieptului și ale urechii. Infecția cu CMV la pacienții care sunt afectați imunologic, de exempl.u ca rezultat al unui caracter malign, tratamentului cu medicamente imunorepresive urmat de transplant sau infecție cu Virusul Imunodeficienței Umane poate da naștere la retinită, pneumonitis, tulburări gastrointestinale și afecțiuni neurologice.

Principala boală cauzată de EBV este mononucleoză acută sau infecțioasă (febră glandulară). Exemple de alte boli EBV sau asociate cu EBV includ boli limfoproliferative care apar în mod frecvent la persoane cu deficiență imunitară celulară congenitală sau dobândită, boli limfoproliferative X-linked(legate) care apar mai ales la băieții mici, tumori ale celulelor B asociate EBV, boala lui Hodgkin, carcinom nasofaringeal, limfom Burkitt, limfom al celulelor /3-non-Hodgkin, timom și leucoplazie orală. Infecții EBV s-au găsit și în asociație cu o varietate de tumori derivate de la celule epiteliale ale tractului respirator superior și inferior, incluzând plămânul.

HHV-6 s-a demonstrat a fi un agent ce cauzează infantum subitum la copii și, respectiv, respingerea rinichiului și pneumonia interstițială în transplantul de rinichi și măduvă osoasă la pacienți și poate fi asociat cu alte boli cum ar fi, scleroză multiplă. Există, de asemenea, dovezi ale represiei numărului de celule stern în transplantul de măduvă osoasă la pacienți. HHV-7 nu are etiologie determinată.

RO 117699 Β1

Virusul hepatitei B(HBV) este un patogen viral de importanță majoră pretutindeni în lume. Virusul este din punct de vedere etiologic asociat cu carcinomul primar hepatocelular și se crede că el cauzează 80% din cancerul ficatului. Efectele clinice ale infecției cu HBV se referă la dureri de cap, febră, greață, indispoziții, vomă, anorexie și dureri abdominale. 55 Replicarea virusului este de obicei controlată de răspunsul imun, cu o durată de însănătoșire de săptămâni sau luni la om, dar infecția poate fi mult mai gravă, ducând la boli cronice persistente ale ficatului descrise anterior.

în WO 92/07867 și 94/08456 se descriu anumiți analogi antivirali cu nucleozidbenzimidazol polisubstituiți incluzând analogi β-D-ribofuranozil ribozidă.60

WO 93/18009 descrie anumiți analogi antivirali cu benzimidazol, în care restul glucidic este înlocuit cu o grupare carbociclică.

S-a descoperit acum că, compușii L-glucid benzimidazol substituit așa cum sunt cei la care se face referire mai jos, sunt folositori în tratamentul sau profilaxia anumitor infecții virale.65

Problema, pe care o rezolvă invenția, este obținerea unor derivați de benzimidazol, procedee analoage pentru prepararea acestora, intermediar în procedeul pentru prepararea derivaților de benzimidazol și compoziție farmaceutică cu acești derivați.

Derivații de benzimidazol, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că în structura chimică corespunzătoare formulei I:70

OH OH (I)

R este hidrogen, un atom de halogen-NR¹R², în care: R¹ și R² pot fi identici sau diferiți, și fiecare este ales independent dintre hidrogen,

arii, arilalchiKC^Cg), heterociclicalchiKC^Cg), -CO-alchiKC^Cg), sau R¹ R² împreună cu 85 atomul de N la care sunt atașați formează un heterociclu cu 3, 4, 5 sau 6 atomi, precum și sărurile sau esterii lor acceptabili farmaceutic.

Procedeu pentru prepararea derivaților de benzimidazol cu formula I, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin acea că, cuprinde reacția unui compus având structura chimică corespunzătoare formulei II: 90

100

RO 117699 Β1 în care: L este hidrogen și R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată, cu un agent de halogenare cum ar fi N-bromsuccinimida într-un solvent aprotic cum ar fi, tetrahidrofuran sau 1,4-dioxan, încălzit la 60-150°C, sau când L este, un atom sau o grupare care se scindează, adecvate, și R³, R⁴ și R⁵ sunt așa cum s-a definit în revendicarea 1, cu o amină cu formula:

H-NR¹R² în care: R¹ și R² sunt așa cum s-a definit în revendicarea 1, într-un solvent organic cum ar fi etanol sau dimetilsulfoxid, urmată de, sau simultan efectuându-se una sau mai multe dintre următoarele etape.

- îndepărtarea oricărei grupe protectoare rămase,

- transformarea unui derivat cu formula I sau a unei forme protejate a acestuia într-o sare sau ester acceptabil farmaceutic al derivatului cu formula I sau o formă protejată a acestuia și când este necesar, separarea anomerilor a și β ai derivatului cu formula I sau ai unui derivat protejat al acestuia sau ai unor săruri și esteri acceptabili farmaceutic ai unui derivat cu formula I.

Procedeu pentru prepararea derivaților de benzimidazol cu formula I. conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că cuprinde reacția unui compus având structura chimică corespunzătoare formulei III:

în care: R este așa cum s-a definit în revendicarea 1, cu un compus cu formula IV:

în care: R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată și L¹ este o grupare scindabilă adecvată în poziția a sau β, eventual,în prezența unui acid Lewis cum ar fi trimetilsilil triflatul într-un solvent aprotic cum ar fi acetonitrilul, urmată de, sau simultan efectuânduse una sau mai multe dintre următoarele etape îndepărtarea oricărei grupări protectoare rămase, transformarea unui derivat cu formula I sau a unei forme protejate a acestuia într-o sare sau ester acceptabil al acestuia sau o formă protejată a acestuia și când este necesar, separarea anomerilor a și β, ai derivaților cu formula I sau ai unui derivat protejat al acestora sau a unei sări sau a unui ester acceptabil farmaceutic al unui derivat cu formula I.

Intermediar pentru prepararea derivaților cu formula I prin procedeele, conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că are structura chimică corespunzătoare formulei II:

ci

CI

I

L

R³ R⁴ (II)

RO 117699 Β1 în care: L este hidrogen sau un atom sau o grupare scindabilă alesă dintre hidrogen, un atom de halogen, un organosulfat, organosulfonă, cum ar fi, metilsulfonă, metilsulfonat sau tosilat și R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată.

Compoziție farmaceutică,conform invenției, înlătură dezavantajele de mai sus prin aceea că, cuprinde 0,01...0,1 g derivat de benzimidazol cu formula I, sau sărurile sau esterii 155 săi acceptabili farmaceutic și un purtător acceptabil farmaceutic.

Prin aplicarea invenției se obține următorul avantaj:

- prevenirea și tratarea infecțiilor virale, și, în special, a infecțiilor cu herpesvirusuri;

Un al grup adecvat de compuși cu formula I este cel cu formula la:

160

în care: R reprezintă hidrogen sau -NR¹R² care pot fi identici sau diferiți, fiecare fiind 170 independent selectat dintre hidrogen, diferiți sunt fiecare independent selectat dintre hidrogen, alchil C₁₄₅, cian alchil C^, hidroxi alchil Ο^θ, halo alchil C^, cicloalchil C_;_-, ciclo alchil C^alchil C^ alchenil C₂^, alchinil C_M, arii, arii alchil Ο^θ, alchil heterociclic, -COalchil 0,-6 (cu condiția ca R¹R² să nu fie ambii hidrogen) sau R¹R² împreună cu un atom de N la care sunt atașați formează un nucleu heterociclic cu 3,4,5 sau 6 atomi și derivați acceptabili 175 farmaceutic ai acestora.

Exemple de compuși cu formula I includ următorii anomeri β cu formula Ib:

OH OH (Ib) în care: R reprezintă un atom de halogen sau -NR¹R², în care: R¹ reprezintă hidrogen și R² este selectat din grupa alchil C^, hidroxi alchil C^, cicloalchil C^, alchil ciclo alchil C^, alchenil C^, alchinil C₂.₆ arii, arii alchil sau R¹ și R² 190 care pot fi identici sau diferiți sunt amândoi alchil sau R¹R² împreună cu atomul de N, la care sunt atașați formează un nucleu heterociclic cu 3,4,5 sau 6 atomi și derivați acceptabili farmaceutic ai acestora.

într-o variantă compușii cu formula Ib, în care R reprezintă un atom de halogen sau o monoamino alchil C^, monoamino(hidroxi alchil C^), diamino alchil C^, amino ciclo alchil 195 C₃.₇, alchil C^, aminocicloalchil C^, aminoalchenil C₂.₆, aminoalchinil C₂^. arii amino, arilalchilamino sau un grup cu formula:

-N(CH₂)„ în care: n este 2,3,4 sau 5 și derivați acceptabili farmaceutic ai acestora.

RO 117699 Β1

Exemple suplimentare de compuși cu formula I de mai sus includ exemplele 1 - 38 așa cum se descrie mai jos.

Așa cum s-a utilizat aici, termenul alchil ca o grupare sau o parte dintr-o grupare reprezintă o grupare alchil cu catenă liniară sau ramificată. Astfel de grupări alchil preferate au 1-6 atomi de carbon, cel mai preferabil 1-4 atomi de carbon și în particular indud metil, etil, Z-propil, t-butil. Referirile I grupările alchenil includ grupări ce pot fi în forma E- sau Z- sau amestecuri ale acestora și care atunci când ele conțin cel puțin trei atomi de carbon pot fi ramificate. Termenul halogen include dor, brom, fluor și iod. Termenul haloalchil C^, reprezintă o grupare alchil în care unul sau mai mulți hidrogeni este (sunt) înlocuit(i) printr-un halogen și de preferință conțin una, două sau trei grupări halogen. Exemple de astfel de grupări includ trifluormetil și fluorizopropil. Termenul arii ca o grupare sau o parte a unei grupări reprezintă fenil substituit opțional cu unul sau mai mulți substituenți selectați dintre alcoxi (de exemplu,metoxi), nitro, halogen (de exemplu, clor), amino, carboxilat și hidroxi. Termenul heterociclic înseamnă un nucleu saturat sau parțial saturat(nearomatic) cu 3, 4. 5 sau 6 atomi care conțin unul sau mai mulți (de exemplu, 1-4) heteroatomi selectați în mod independent dintre azot, oxigen și sulf. Exemple de astfel de grupări includ pirolidina.

Prezenta invenție include printre obiectele sale anomeri posibili a și β ai compușilor cu formula I și derivații lor funcționali fiziologic, în mod substanțial fără alt anomer. adică nu mai mult de circa 5% gr./gr. din alt anomer, de preferință, nu mai mult de circa 2% gr./gr., în particular mai puțin de 1% gr./gr. să fie prezent și amestecuri de astfel de anomeri σ și β în orice proporții. Sunt preferați compușii cu formula I în forma anomerică β.

Compușii preferați cu formula Ib includ pe aceea în care, R reprezintă -NR’R², în care: R¹ reprezintă hidrogen și R² este selectat dintre alchil C^, cicloalchil Cj_₇. haloalchil C^, și derivați acceptabili farmaceutic ai acestora.

Compușii preferați în particular cu formula Ib includ pe aceia în care R reprezintă izopropilamino, izobutilamino, sec-butil amino, ciclopropilamino, ciclopentilaminoși2-fluor-1metiletilamino și derivați acceptabili farmaceutic ai acestora.

Compușii cu formula I având configurație β care prezintă în mod special, interes ca agenți antivirali sunt 2-ciclopropilamino-5,6-diclor-1-(/3-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol, 5,6diclor-((2-fluor-1-metiletilamino)-1-(/3-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol și 5,6-didor-2-izopropilamino-1-(/3-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol și derivați acceptabili farmaceutic ai acestora.

Compusul 5,6-diclor-2-izopropilamino-1-(/3-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol a fost găsit a fi folositor în mod particular în tratamentul infecțiilor CMV.

Compușii cu formula I care includ compuși cu formula la și Ib de mai sus și derivații lor acceptabili farmaceutic sunt prezentați în continuare drept compuși, conform invenției.

Prin termenul “un derivat acceptabil farmaceutic” se înțelege orice sare, ester sau sare a unui astfel de ester acceptabile farmaceutic sau farmacologic ale unui compus, conform invenției, sau orice compus care la administrare la pacient este capabil să furnizeze (direct sau indirect) un compus, conform invenției, sau un metabolit sau un rest activ antiviral.

Esterii preferați ai compușilor, conform invenției, sunt selectați în mod independent din grupările care urmează (1) esteri de acid carboxilic obținuți prin esterificarea grupărilor 2'-, 3'- și/sau 5'-hidroxi, în care restul necarbonilic al grupării esterice a porțiunii de acid carboxilic este selectată dintre alchil cu catenă liniară sau ramificată (de exemplu, n-propil, t-butil sau n-butil), alcoxialchil (de exemplu, metoximetil), aralchil (de exemplu, metoxi metil), aralchil (de exemplu, benzii), ariloxi alchil (de exemplu, fenoximetil), arii (de exemplu, fenil substituit opțional prin, de exemplu, halogen, alchil C_1J( sau alcoxi C_M sau amino); (2) esteri sulfonați cum sunt alchil sau aralchil sulfonil (de exemplu, metansulfonil); (3) esteri de

RO 117699 Β1 aminoacid (de exemplu, L-valil sau L-izoleucil); (4) esteri fosfonați și (5) esteri mono-,di- sau trifosfați. Esterii fosfați pot fi esterificați suplimentar prin, de exemplu, un alcool sau un 250 derivat reactiv al acestora sau printr-un 2,3-di(C₆.₂₄)acil glicerol.

în astfel de esteri, dacă nu se specifică altfel, orice radical alchil prezent conține în mod avantajos.de la 1 la 18 atomi de carbon, de preferință, de la 1 la 6 atomi de carbon, opțional, de la 1 la 4 atomi de carbon. Orice radical cicloalchil prezent în astfel de esteri conține în mod avantajos, de la 3 la 6 atomi de carbon. Orice radical arii prezent în astfel de 255 esteri cuprinde în mod avantajos o grupare fenil.

Esteri de acid carboxilic preferați, conform cu prezenta invenție, includ acetatul, butiratul și valeratul L-valil este un ester de aminoacid preferat în mod particular.

Orice referire la oricare dintre compușii de mai sus include și o referire la sărurile acceptabile farmaceutic ale acestora. 260

Sărurile acceptabile farmaceutic includ săruri ale acizilor carboxilici organici cum sunt, acidul ascorbic, acetic, citric, lactic, tartric, malic, maleic, izotionic, lactobionic, p-aminobenzoic și succinic, săruri ale acizilor sulfonici organici cum sunt: acidul metansulfonic, etansulfonic, benzen sulfonic și p-toluensulfonic și săruri ale acizilor anorganici cum sunt acidul clorhidric, sulfuric, fosforic, sulfamic și pirofosforic. 265

Pentru uzul terapeutic, sărurile compușilor cu formula I vor fi acceptabile farmaceutic. Totuși, săruri ale acizilor și bazelor care nu sunt acceptabile farmaceutic pot fi folosite, de exemplu, în prepararea sau purificarea unui compus acceptabil farmaceutic. Toate sărurile, derivate sau nu de la un acid sau de la o bază acceptabilă farmaceutic sunt cuprinse în scopul invenției. 270

Sărurile preferate includ săruri formate de la acidul clorhidric, sulfuric, acetic, succinic, citric și ascorbic.

într-un aspect suplimentar al invenției sunt prevăzuți compuși, conform cu invenția, pentru utilizarea în terapia medicală. în particular în tratamentul sau profilaxia infecțiilor virale cum sunt infecțiile cu herpesvirusuri. Compușii invenției s-au găsit a fi activi împotriva infec- 275 țiilor CMV, deși rezultatele timpurii sugerează că acești compuși pot fi, de asemenea, activi împotriva altor infecții cu herpesvirusuri cum sunt infecțiile cu HSV-1 și -2,HHV 6 și 7, VZV, EBV și HBV.

Alte stări virale care pot fi tratate în conformitate cu invenția au fost discutate în introducerea anterioară. Compușii prezentei invenții sunt în mod particular adecvați pentru trata- 280 mentul sau profilaxia infecțiilor CMV sau a stărilor asociate. Exemple de stări CMV care pot fi tratate în conformitate cu invenția au fost discutate în introducerea anterioară.

Conform cu un alt aspect, prezenta invenție prevede o metodă pentru tratamentul sau prevenirea simptomelor sau efectelor unei infecții virale la un animal infectat, la un mamifer incluzând omul, care cuprinde tratarea animalului menționat cu o cantitate eficientă 285 terapeutic dintr-un compus, conform invenției. Conform cu o variantă particulară a acestui aspect al invenției, infecția virală este o infecție cu herpesvirusuri, cum sunt CMV, HSV-1, HSV-2, VZV, EBV, HHV 6 sau HHV 7. Un aspect suplimentar al invenției include o metodă pentru tratamentul sau prevenirea simptomelor sau efectelor unei infecții HBV.

Prezenta invenție prevede în mod suplimentar o metodă pentru tratamentul unei stări 290 clinice la un animal, la un mamifer incluzând omul, stări clinice care le includ pe acelea care au fost discutate în introducerea anterioară, care cuprinde tratarea animalului menționat cu o cantitate eficientă terapeutic dintr-un compus, conform invenției. Prezenta invenție include, de asemenea, o metodă pentru tratamentul sau profilaxia oricăror infecții sau stări menționate până acum. 295 într-un aspect suplimentar, prezenta invenție prevede folosirea unui compus, conform cu invenția, sub forma unui medicament pentru tratamentul sau profilaxia oricăror infecții sau stări virale menționate mai sus.

RO 117699 Β1

Compușii, conform cu invenția, și derivații lor acceptabili farmaceutic pot fi folosiți în combinație cu alți agenți terapeutici pentru tratamentul infecțiilor sau stărilor menționate mai sus. Terapiile de combinație,conform prezentei invenții, cuprind administrarea a cel puțin unui compus cu formula I sau a unui derivat acceptabil farmaceutic al acestuia și a cel puțin unui alt ingredient activ farmaceutic. Ingredientul(ții) activ(i) și agenții activi farmaceutic pot fi administrați simultan,fie în aceeași formulare farmaceutică sau în formulări farmaceutice diferite sau succesiv în orice ordine. Cantitățile de ingredient(i) activ(i) și agent(i) activ(i) farmaceutic și timpul de administrare se vor stabili pentru a obține efectul terapeutic dorit. De preferință, terapia de combinație implică administrarea unui compus conform cu invenția și a unuia dintre agenții menționați mai jos.

Exemple suplimentare de astfel de agenți terapeutici care sunt eficienți în tratamentul infecțiilor virale sau al stărilor asociate cum sunt (1 alfa, 2 beta, 3 a/fa)-9-[2,3-bis(hidroximetil) ciclobutil]guanină [(-)-BHCG, SQ-34514],oxetanocin-G(3,4-bis-(hidroximetil)-2-oxetanozil] guanină), nucleozide aciclice (de exemplu, aciclovir, valaciclovir, famciclovir, ganciclovir, penciclovir), nucleozide aciclice fosfonate (de exemplu, (S)-1-(3-hidroxi-2-fosfonil-metoxipropil)citozină(HPMC), inhibitori ai ribonucleotid reductazei cum sunt 2-acetilpiridină 5-[(2cloranilină)tiocarbonil)tiocarbonhidrazonă,3'-azido-3'-deoxitimidină, alte 2',3'-dideoxinucleozide cum sunt 2',3'-dideoxicitidină, 2’.3'-dideoxiadenozină și 2', 3'-dideoxiinozină, 2',3'didehidrotimidină, inhibitori ai proteazelor cum sunt N-terț-butil-dehidro-2-[-2(R)-hidroxi-4fenil-3(S)-[[N-(2-chinolilcarbonil)-L-asparginil]butil]-(4aS,8aS)-izochinolină-3(S)-carboxamidă (Ro 31-8959), analogi oxatiolan nucleozidă cum sunt (-)c/s-1-(2-(hidroximetil)-1,3-oxatiolan5-il)-citozină (3TC) sau c/s-1-(2-hidroximetil)-1,3-oxatiolan-5-il)-5-fluor-citozină (FTC), 3'deoxi-3'-fluorotimidină, 5-clor-2',3'-dideoxi-3'-fluororidină, (-)c/s-4-[2-amino-6-(dclopropilamino)-9H-purin-9-il]-2-ciclopenten-1-metanol, ribavirin, 9-[4-hidroxi-2-(hidroximetif)but-1-il]guanină (H2G), inhibitori tat cum sunt 7-clor-5-(2-piril)-3H-1,4-benzodiazepin-2(H)-onă(Ro 5-3335) sau 7-clor-1,3-dihidro-5-(1H-pirol-2-il)-3H-1,4-benzodiazepin-2-amină (Ro 24-7429), interferoni cum sunt α-interferoni, inhibitori ai excreției renale cum sunt probeneddul, inhibitori ai transportului nucleozidelor cum sunt dipiridamolul; pentoxifinilină, N-acetilcisteină(NAC), procisteină, σ-tricosantin, acid fosfonoformic precum și imunomodulatori cum sunt interleukina II sau timozina, factori de stimulare a coloniei de granulocite macrofage, eritropoietină, CD, solubil și derivați ai acestora obținuți prin inginerie genetică sau inhibitori ai non-nucleozidreverstranscriptazei cum sunt nevirapină(BI-RG-587), lovirid(o-APA) și delavuridină(BHAP) și acid fosfonoformic.

De preferință, terapia de combinație implică administrarea unuia dintre agenții menționați mai sus și a unui compus din cadrul unui sub-grup preferat sau în mod particular cu formula I așa cum s-a descris mai sus. Opțional, terapia de combinație implică folosirea împreună a unuia dintre agenții numiți mai sus și a unuia dintre compușii cu formula I numiți aici în mod specific.

Prezenta invenție include, în continuare, folosirea unui compus, conform invenției, sub forma unui medicament pentru administrarea simultană sau succesivă cu cel puțin un alt agent terapeutic, cum sunt cei definiți mai înainte.

Compușii, conform cu invenția, la care se face aici referire ca ingredient activ, pot fi administrați pentru terapie pe orice cale adecvată incluzând cale orală, rectală, topică (incluzând calea transdermică, bucală și sublinguală), vaginală și parenterală (incluzând calea subcutanată, intramusculară, intravenoasă, intradermică și intravitreală). Se va aprecia că, calea preferată va varia cu starea și vârsta pacientului, cu natura infecției și cu ingredientul activ ales.

RO 117699 Β1

350 în general, o doză adecvată pentru fiecare dintre stările menționate mai sus va fi în domeniul, de la 0,01 la 250 mg/kg corp al pacientului (de exemplu, un om) pe zi, de preferat, în domeniul, de la 0,1 la 100 mg/kg corp pe zi și, în mod opțional, în domeniul, de la 0,5 la 30 mg/kg corp pe zi și, în mod particular, în domeniul, de la 1,0 la 20 mg/kg corp pe zi (dacă nu se indică altfel, toate greutățile ingredientului activ sunt calculate drept compus cu formula I; pentru săruri sau esteri ai acestuia, greutățile se vor mări în mod proporțional). Dozele dorite pot fi prezentate ca una, două, trei, patru, cinci, șase sau mai multe sub-doze administrate la intervale adecvate în timpul zilei. în unele cazuri doza dorită poate fi administrată în zile alternative. Aceste sub-doze pot fi administrate în formă de dozaj unitar, de exemplu, conținând 10 până la 1000 mg sau 50 până la 500 mg, preferabil, 20 până la 500 mg și, opțional, 100 până la 400 mg de ingredient activ/formă de dozaj unitar.

în mod ideal, ingredientul activ ar trebui administrat pentru a atinge concentrațiile de vârf din plasmă ale compusului activ de la circa 100 μΜ, preferabil, de la circa 0,1 la circa 70 μΜ, opțional, de la circa 0,25 la 50 μΜ. Aceasta se poate realiza, de exemplu, prin injectarea intravenoasă a unei soluții de ingredient activ, de la 0,1 la 5%, opțional salină sau prin administrare orală ca un bol conținând, de la circa 0,1 la circa 250 mg/kg din ingredientul activ. Nivelurile dorite ale sângelui pot fi menținute prin infuzie continuă pentru a asigura, de la circa 0,01 la circa 5,0 mg/kg/h sau prin infuzii intermitente conținând de la circa 0,4 la circa 15 mg/kg din ingredientul activ.

De vreme ce este posibil ca ingredientul activ să fie administrat singur, este de preferat să fie prezentat ca o formulare farmaceutică. Formulările prezentei invenții cuprind cel puțin un ingredient activ, așa cum s-a definit mai sus, împreună cu unul sau mai mulți purtători acceptabili ai acestora și, în mod opțional, alte agente terapeutice. Fiecare purtător trebuie să fie “acceptabil” în sensul de a fi compatibil cu alte ingrediente ai formulării și să nu fie dăunător pacientului. Formulările le includ pe acelea adecvate administrării orale, rectale, nazale, topice (incluzând transdermică, bucală și sublinguală), vaginală sau parenterală (incluzând subcutanee, intramusculară, intravenoasă, intradermică și intravitreală). Formulările pot fi prezente în mod convenabil în formă de dozaj unitar și pot fi preparate prin orice metodă binecunoscută în domeniul farmaciei. Astfel de metode includ etapa asocierii ingredientului activ cu purtătorul care constituie unul sau mai multe ingrediente suplimentare, în general, formulările se prepară prin asocierea uniformă și intimă a ingredientului activ cu purtători lichizi sau purtători solizi fin divizați, sau ambele și apoi dacă este necesar, prin ambalarea produsului.

Prezenta invenție include, în continuare, o formulare farmaceutică așa cum s-a descris mai sus, în care, un compus cu formula I sau derivat acceptabil farmaceutic al acestuia și cel puțin un alt agent terapeutic sunt prezentați separat unul de altul și ca un ansamblu.

Compoziții adecvate administrării transdermale pot fi prezentate ca plasturi discreți adaptați pentru a rămâne în contact intim cu epiderma pacientului pentru o perioadă lungă de timp. Astfel de plasturi conțin în mod adecvat compusul activ 1) într-o soluție apoasă în mod opțional tamponată sau 2) dizolvat și/sau dispersat într-un adeziv sau 3) dispersat întrun polimer. O concentrație adecvată a compusului activ este, de circa 1 la 25%, preferabil, de la circa 3 la 15%. Ca o posibilitate particulară, compusul activ poate fi scos din plasture prin electrotransport sau ionoforeză așa cum se descrie, în general, în Pharmaceutical Research 3(6), 318 (1986).

Formulările prezentei invenții adecvate administrării orale pot fi prezentate ca unități discrete cum sunt capsulele, cașetele sau tabletele fiecare conținând o cantitate predeterminată de ingredient activ; ca o pulbere sau ca granule; ca o soluție sau o suspensie într-un

355

360

365

370

375

380

385

390

RO 117699 Β1 lichid apos sau neapos, sau ca o emulsie lichidă de ulei în apă sau o emulsie lichidă de apă în ulei. Ingredientul activ poate fi, de asemenea, prezentat ca un bol, excipient sau pastă.

O tabletă poate fi fabricată prin comprimare sau modelare în tipar, opțional cu unul sau mai multe ingrediente suplimentare. Tabletele comprimate se pot prepara prin comprimarea într-o mașină adecvată a ingredientului activ într-o formă liberă cum sunt granulele sau pulberea, opțional, amestecat cu un liant (de exemplu, povidonă, gelatină, hidroxipropilmetil celuloză), un lubrifiant, un diluant inert,un conservant, un dezintegrant (de exemplu, amidon glicolat de sodiu, povidonă ramificată, carboximetil celuloză de sodiu ramificată), un agent tensioactiv sau un agent de dispersare. Tabletele modelate pot fi fabricate prin modelarea într-o mașină adecvată a unui amestec de compus umectat sub formă de pulbere cu un diluant lichid inert. Tabletele pot fi acoperite în mod opțional sau pot fi numerotate și pot fi formulate, astfel, încât să asigure eliberarea înceată sau controlată a ingredientului activ folosind, de exemplu, hidroxipropilmetil celuloză în proporții care variază pentru a asigura profilul de eliberare dorit. Tabletele pot fi prevăzute, opțional, cu o acoperire enterică pentru a asigura eliberarea în segmentele tractului digestiv, altele decât stomacul.

Formulări adecvate administrării topice în gură includ tablete cuprinzând ingredientul activ într-o bază aromată, de obicei sucroză și salcâm sau gumă; pastile cuprinzând ingredientul activ într-o bază inertă cum sunt gelatina și glicerina sau sucroză și salcâm, și apă de gură cuprinzând ingredientul activ într-un purtător lichid adecvat.

Formulările pentru administrarea rectală pot fi prezentate ca un supozitor cu o bază adecvată cuprinzând, de exemplu, unt de cacao sau un salicilat.

Formulările adecvate pentru administrarea vaginală pot fi prezentate ca formulări sub formă de pesar, tampoane, creme, geluri, paste, spume sau spray, conținând în plus față de ingredientul activ astfel de purtători care sunt cunoscuți în domeniu ca fiind adecvați.

Formulările farmaceutice adecvate administrării rectale în care purtătorul este un solid, prezentate, preferabil ca supozitoare în doză unitară. Purtătorii adecvați includ unt de cacao și alte materiale folosite în mod uzual în domeniu. Supozitoarele pot fi formate în mod convenabil prin amestecarea combinației active cu purtătorul(rii) înmuiat(i) sau topitfi) urmată de răcire și modelare în tipare.

Formulările adecvate administrării parenterale includ soluții sterile izotonice injectabile apoase sau neapoase care pot conține antioxidanți,substanțe tampon, factori bacteriostatici și soluții care conferă soluției izotonicitate cu sângele pacientului, suspensii sterile apoase și neapoase care pot include agenți de suspendare și agenți de îngroșare. Formulările pot fi prezentate în containere sigilate de o doză unică sau de doză multiplă, de exemplu, fiole și sticluțe și pot fi păstrate într-o stare de îngheț uscat(liofilizată) care necesită numai adăugarea unui purtător steril lichid, de exemplu, apă pentru injecții, chiar înaintea folosirii. Soluții pentru injectare improvizate și suspensiile pot fi preparate din pulberi, granule și tablete sterile de tipul celor prezentate anterior.

Formulările preferate sub formă de dozaj unitar sunt cele care conțin o doză sau o unitate zilnică, așa cum s-a menționat mai sus, o fracțiune adecvată a acesteia dintr-un ingredient activ.

Trebuie înțeles faptul că, în plus față de ingredientele menționate, în particular, mai sus, formulările invenției pot include alți agenți convenționali în domeniu având în vedere tipul formulării dorite, de exemplu, cele adecvate administrării orale pot include alți agenți cum sunt agenții de îndulcire, îngroșare și aromatizare.

Prezenta invenție include, în continuare, următoarele procedee pentru prepararea compușilor cu formula I de mai sus și a derivaților acestora care cuprinde:

RO 117699 Β1

445 (A) reacția unui compus cu formula II:

450 (II) în care: L este hidrogen și R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată, cu un agent de halogenare adecvat cum ar fi, N-bromsuccinamida sau când L este un atom sau o grupare scindabilă adecvată, de exemplu, un atom de halogen cum este bromul sau o organo(de exemplu, alchil) sulfonă sau un organo (de exemplu, alchil sau aralchil) sulfat cum sunt metilsulfonă (MeS(O)₂). metilsulfonat (MeS(O)₂O) sau o grupare tosilat (4MePhS(O)₂O și R³, R⁴ și R⁵ sunt așa cum s-a descris mai înainte, cu o amină cu formula HNR¹R² (în care, R¹ și R² sunt așa cum s-a descris anterior); sau (B) reacția unui compus cu formula III:

455

460

465 în care; R este așa cum s-a descris anterior, un compus cu formula IV:

cu

470

R³ R⁴ (IV)

475 în care: R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare, hidroxi sau hidroxi protejată și L¹ este o grupare scindabilă adecvată în poziția a- sau β-, de exemplu, un halogen (de exemplu, fluor, clor sau brom), un alchil- sau ariltio (de exemplu, feniltio, sau un arii sau o grupare esterică alifatică cum sunt benzoatul sau acetatul.

După aceea, sau efectuându-se simultan, se pot realiza una sau mai multe din etapele următoare în orice ordine dorită sau necesară:

(i) (ii)

480 îndepărtarea oricărei (oricăror) grupări protectoare care au rămas; conversia unui compus cu formula I sau a unei forme protejate a acestuia într-un alt compus cu formula I su o formă protejată a acestuia;

conversia compusului cu formula I sau a unei forme protejate a acestuia întrun derivat acceptabil farmaceutic al compusului cu formula I sau al unei forme protejate a acestuia;

conversia unui derivat acceptabil farmaceutic al compusului cu formula I sau a unei forme protejate a acestuia într-un compus cu formula I sau o formă protejată a acestuia;

485

490 (iii) (iv)

RO 117699 Β1 (V) (vi) conversia unui derivat acceptabil farmaceutic al compusului cu formula I sau a unei forme protejate a acestuia într-un alt derivat acceptabil farmaceutic al compusului cu formula I sau o formă protejată a acestuia;

unde este necesar, separarea anomerilor alfa și beta ai compusului cu formula I sau ai unei forme protejate a acestuia sau a unui derivat acceptabil farmaceutic al unui compus cu formula I.

Procedeul A poate fi utilizat pentru prepararea unui compus cu formula I, în care, R este halogen. Astfel de compuși pot fi preparați în mod convenabil prin reacția dintre un compus cu formula II, în care, L este hidrogen și R³, R⁴ și R⁵ sunt grupări hidroxi protejate, preferabil OC(O)CH₃, cu un agent de halogenare. Halogenarea poate fi efectuată într-o manieră convențională, de exemplu, bromurarea utilizând un agent de bromurare cum ar fi, N-bromsuccinimida (NBS) într-un solvent aprotic cum ar fi THF sau preferabil 1,4-dioxan încălzit, la 60-150°C, preferabil, 100°C.

Compușii cu formula I, în care. R este -NR¹R² (în care, R¹ și R² sunt așa cum s-a definit anterior) pot fi preparați în mod avantajos din compuși cu formula II, în care, L este un atom de halogen cum ar fi, atomii de brom sau clor prin reacția cu o amină H-NR¹R² (în care,R¹ și R² sunt așa cum s-a definit anterior). Reacția se efectuează în mod avantajos la temperatură ridicată, de exemplu, 70-80°C într-un solvent organic cum ar fi, etanol sau dimetilsulfoxid.

Grupările protectoare pot fi îndepărtate prin tehnici chimice convenționale binecunoscute persoanelor în domeniu.

Compușii cu formula II,în care.R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi pot fi,de exemplu, preparați dintr-un compus corespunzător cu formula II, în care, R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi protejată. Grupările protectoare convenționale pot fi folosite drept R³, R⁴ și R⁵. Grupări esterice avantajoase cum sunt cele descrise mai sus în legătură cu esterii compușilor cu formula I pot fi utilizate. Aceste grupări protectoare pot fi îndepărtate, fie prin tehnici chimice convenționale cum ar fi, carbonatul de sodiu în metanol, fie enzimatic, de exemplu, utilizând enzime din ficat de porc. în mod alternativ R³, R⁴ și R⁵ pot indude grupări protectoare de silii, cum ar fi, grupări fert-butildifenil-, tert-butildimetil-, triizopropilsilil care pot fi îndepărtate utilizând o sursă adecvată de fluorură, de exemplu, HF/Piridină. n-Bu₄NF sau Et₄NF sau grupări acetal ciclice sau cetal, cum ar fi, benziliden sau izopropiliden care pot fi îndepărtate în condiții de aciditate, de exemplu, utilizând acid tosic și metanol.

în mod alternativ, compusul cu formula II, în care, R³, R⁴ și R⁵ sunt grupări hidroxi protejate poate reacționa cu un agent sau în condiții prin care gruparea scindabilă L este convertită în gruparea R,dorită simultan cu îndepărtarea grupărilor protectoare. Exemple de astfel de agenți includ ciclopropilamină și alte amine primare și secundare cu condiția ca acești agenți să fie suficient de nucleofilici și să nu fie nepotriviți steric.

Compușii cu formula I, în care, R este așa cum s-a definit anterior și compușii cu formula II în care L este așa cum s-a definit anterior pot fi preparați prin reacția unui compus cu formula V:

H (V)

RO 117699 Β1 (în care, X este echivalent cu R sau L definiți ca mai înainte) cu un compus cu formula IV:

540

R³ R⁴ [IV]

545 (în care, R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată și L* este așa cum s-a definit anterior).

Reacția compușilor cu formula IV și V poate fi efectuată utilizând un acid Lewis, cum 550 ar fi, trimetilsilil triflat, tetraclorură de staniu sau trifluorură de bor, primul fiind preferat. Reacția este, în general, efectuată într-un solvent aprotic și, la temperatură ridicată, de exemplu, în acetonitril, la 15-30°C sau 1,2-dicloretan, la 70-90°C.

Compusul cu formula V este în mod avantajos trimetilsililat în poziția N, în procedeele de mai sus pentru a îmbunătăți solubilitatea; de exemplu, prin tratamentul cu clorură de 555 trimetilsilil, hexametil disilazan sau cel mai preferabil Ν,Ο-bis-trimetilsilil acetamidă (BSA). Această sililare poate fi efectuată într-un solvent, preferabil, 1,2-dicloretan sau acetonitril, preferabil, la 70-80°C. După terminarea reacției de sililare, un acid Lewis poate fi adăugat urmat de adiția compusului cu formula IV.

Compușii cu formula IV pot fi preparați prin metode binecunoscute unei persoane din 560 domeniu într-o manieră analoagă cetei cunoscute pentru derivații D-ribozei sau prin metode deja disponibile în literatura chimică, de exemplu, prin metode descrise în Acton și colab., J.Am.Chem.Soc., 1964,86,5352. Un compus cu formula IV preferat este compusul, în care, R³, R⁴, R⁵ și L¹ sunt fiecare OCfOJCHj. Acest compus poate fi preparat într-o manieră analogă celei descrise pentru D-riboză(R.D. Guthrie și S.C. Smith., Chemistry and Industry, 565 1968, pp.547-548), urmată în mod avantajos de recristalizare din metanol.

Compușii cu formula V, în care, X este L sau o grupare -NR¹R²(în care, L, R¹ și R² sunt așa cum s-a definit anterior) pot fi preparați, conform cu metodele descrise în WO 92/07867, încorporată aici ca referință.

în mod alternativ, compușii cu formula V, în care X este R și R este o grupare - 570

NR¹R²,în care, R¹ și R² sunt așa cum s-a definit anterior pot fi preparați prin reacția unui compus cu formula VI:

CI

575

CI cu un agent sau agenți capabili să dclizeze diamina în benzimidazol.

Compușii tipici cu formula I pot reacționa cu un izotiocianat cu formula VII:

580 (VI)

S=C=NR¹R² (VII) în care: R¹ și R² sunt așa cum s-a definit mai înainte.

585

RO 117699 Β1

Reacția poate fi efectuată în prezența unei carbodiimide cum ar fi diciclohexil carbodiimida sau 1-ciclohexil-3-(2-morfolinoetil)carbodiimida meto-p-toluen-sulfonatîn mod convenabil în prezența unui solvent aromatic aprotic cum ar fi, toluenul și cel mai preferabil piridină și,la o temperatură ridicată, preferabil 75-150°C.

Compușii cu formula V în care X este hidrogen pot fi obținuți pe cale comercială sau în mod alternativ pot fi preparați prin reacția unui compus cu formula VI cu formamidină în condiții apoase acide, la temperatura camerei, până la 80°C.

Compușii cu formula VI și VII pot fi preparați prin metode binecunoscute unei persoane în domeniu sau disponibile deja în literatura chimică sau pot fi obținuți comercial.

Esterii, conform invenției, pot fi preparați prin metode binecunoscute în domeniu, de exemplu, un compus cu formula I poate fi convertit într-un ester acceptabil farmaceutic prin reacția cu un agent de esterificare adecvat, de exemplu, o halogenură acidă adecvată sau o anhidridă.

Un compus cu formula I poate fi convertit într-un eter cu formula I corespunzător, acceptabil farmaceutic prin reacția cu un agent de alchilare adecvat într-o manieră convențională.

Compușii cu formula I incluzând esterii acestora pot fi convertiți în săruri acceptabile farmaceutic ale acestora într-o manieră convențională, de exemplu, prin tratamentul cu un acid adecvat. Un ester sau o sare a unui ester cu formula I pot fi convertiți în compusul inițial, de exemplu, prin hidroliză.

Anomerii alfa și beta pot fi separați și izolați în formă pură prin cromatografie pe silicagel utilizând un singur solvent sau o combinație de solvenți, cum ar fi, 1:20 metanokdiclormetan.

Prezenta invenție include, în continuare, compuși cu formula II, așa cum s-a definit anterior, ca, intermediari noi. Compușii cu formula II, preferați, includ pe cei, în care. L este hidrogen sau un atom de halogen, preferabil, clor sau brom și R³, R⁴ și R⁵ sunt grupări hdiroxi sau hidroxi protejate, preferabil, OC(O)CH₃.

Compuși cu formula II, preferați, în mod particular, sunt 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-triO-acetil-0-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol și 2-brom-5,6-diclor-1-(/3-L-ribofuranozil)-1 Hbenzimidazol.

Prezenta invenție include, de asemenea, intermediari cu formula V, în care, X este R și R este o grupare -NR¹R², în care, R¹ și R² sunt așa cum s-a definit anterior, cu mențiunea că, R¹ și R² nu sunt ambii hidrogen sau metil. Compușii cu formula V, preferați, includ

2-(ciclopropilamino)-5,6-diclor-1 H-benzimidazol; 5,6-diclor-2-(izopropilamino)-1 H-benzimidazol și 5,6-diclor-2-(2-fluor-1-metiletilamino)-1 H-benzimidazol.

Exemplele următoare intenționează doar să ilustreze și nu să limiteze scopul invenției în orice fel. Termenul “ingredient activ’ așa cum este folosit în exemplele farmaceutice înseamnă un compus cu formula I sau un derivat acceptabil farmaceutic al acestuia. Termenul acoperă, de asemenea, un compus cu formula I sau un derivat acceptabil farmaceutic al acestuia în combinație cu unul sau mai mulți agenți terapeutici.

Se prezintă, în continuare, 47 de exemple de realizare ale invenției:

Exemplul 1. 2-Brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol g (3,8 mmol) de 2-brom-5,6-benzimidazol, 0,94 ml (3,8 mmol) de N,O-bis(trimetilsilil) acetamidă (Aldrich) și 25 ml de acetonitril (Aldrich Sure Seal) se combină și se refluxează în atmosferă de azot, timp, de 1 h. Soluția se răcește, la temperatura camerei și se adaugă 1,5 ml (7,6 mmol) de trimetilsilil triflat (Aldrich). După 15 min se adaugă 1,2 g (3,8 mmol) de 1,2,3,5-tetra-O-acetil-L-ribofuranoză solidă, preparată prin metoda lui Guthrie și Smith (Chemistry and Industry, 1968, pp.547-548) cu excepția că L-riboza se folosește

RO 117699 Β1 ca materie primă. Soluția se agită în atmosferă de azot, la temperatura camerei, timp de 18 h, apoi se trece în 100 ml de soluție apoasă 10% de bicarbonat de sodiu și se extrage cu 2 x 150 ml de diclormetan. Straturile organice se usucă cu sulfat de magneziu anhidru, se filtrează și se evaporă. Reziduul brut se purifică pe o coloană cu silicagel (5 x 20 cm, 230400 mesh) cu un amestec 1:30 de acetonă: CH₂CI₂ pentru a da 1,2 g (2,2 mmol, 60%) 2brom-5,6-diclor-1-(3,4,5-tri-0-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol, cu p.t.= 145°C;

[a]^2OD=(+)87,4(c=0,5 DMF); UV 1^^=7,0:298 nm(7600), 289(7400), 254(8800); 0,1N NaOH; 298(7800), 289(7600), 256(7300); MS(EI); m/z (intensitate relativă) 524(0,15, M⁺); ¹H RMN (DMSO-d₆) d 8,08(s, 1H, Ar-H), 8,01 (s,1H, Ar-H), 6,22 (d, 1H,H-1', J = 7,1 Hz), 5,56(dd,1H,H-2',J=7,1Hz, J=7,2Hz), 5,45(dd, 1H,H-3',J=7,2Hz, J=4,5Hz),4,55-4.47(m,2H,H4' și 5’), 4,37(d,1H,H-5,J=9,7Hz), 2,15(s,3H,OAc), 2,14(s,3H,OAc), 2,01(s,3H. OAc). Analiza pentru C₁₈H₁₇N₂O₇CI₂Br:

-calculat: C=41,25; H = 3,27; N=5,34

-găsit: C=41,16; H=3,39; N=5,20 în plus, se obține o cantitate mică de 0,11 g (0,22 mmol, 6%) anomer a/fa(2-brom-

5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetil-a/fa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol): p.t. <65'C: [a]²⁰D= (-)

206,8 (c=0,5 DMF); MS(AP+): m/z (intensitate relativă) 524(0,8, M⁺);

¹H RMN (DMSO-d₆) d 7,95(s, 1H, Ar-H), 7,91 (s,1H, Ar-H), 6,66 (d, 1H,H-1‘. J = 4,2 Hz), 5,68(t,1H, H-2’,J=4,6Hz), 5,52(t,1H,H-3’,J=5,9Hz), 4,87-4,81 (m,1H,H-4'), 4,37-4.24(m,2H,H5', 2,08 (s,3H,OAc), 2,03(s,3H,OAc), 1,51(s,3H, OAc).

Analiza pentru C₁₈H₁₇N₂O₇CI₂Br:

-calculat: C=41,25; H = 3,27; N=5,34

-găsit: C=41,39; H=3,35; N=5,29

Exemplul 2. 2-Brom-5,6-didor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol

0,28 g(2,65 mmol) de carbonat de sodiu și 1,39 g (2,65 mmol) de 2-brom-5,6-diclor1-(2,3,5-tri-0-acetil-befa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 4 ml de apă, 20 ml de metanol și 20 ml de etanol și se agită, la temperatura camerei, timp, de 1,5 h. Se adaugă 0,3 ml (5,3 mmol) de acid acetic și suspensia se concentrează până la formarea unui solid. Purificarea reziduului pe o coloană cu silicagel (2,5 x 20 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:9 de etanol: CH₂CI₂ dă 0,79 g (2 mmol, 75%) 2-brom-5,6-didor-1-ibete-Lribofuranozil-1H-benzimidazol; p.t.= 169°C.

[a]²°D=(+)105(c=0,5 DMF); UV l_mai(e)pH=7: 298 nm (6700), 289(6500), 255(6900); 0,1N NaOH: 298(6700), 295(5400), 256(6700); MS(CI): m/z 399(M+1) ¹H RMN (DMSO-d₆) d 8,57(s, 1H, Ar-H), 7,96(s,1H, Ar-H), 5,89 (d, J=7,9 Hz, H-1'), 5,48(d,1H, J=6,3 Hz), 5,42(t, 1H, OH, J=4,5 Hz),5,29 (d,1H, OH, J=4,2Hz), 4,43(dd aparent, 1H,H-2',J=13,3Hz,J=6,1Hz), 4,14(t aparent, 1H,H-3', J = 4,3 Hz), 4,01 (d aparent, 1H, H-4', J=1,7Hz), 3,77-3,63 (m,2H,H-5').

Analiza pentru C^H^N^C^BrO^HgO:

- calculat: C=36,57; H = 3,02; N=6,88

- găsit; C=36,68; H=2,85; N=7,05

Exemplul 3. 2-(Ciclopropilamino)-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol 5 ml de ciclopropilamină și 0,1 g (0,25 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-Oacetil-befa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 5 ml de etanol absolut și se agită, la 75°C, timp de 24h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 14 cm, 230-4.00 mesh) cu un amestec 1:20 de metanokdiclormetan pentru a da 0,073 g de produs. Acest material se purifică pe o a doua coloană de purificare cu silicagel (2,5 cm x 10 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:5:5 de metanol: acetat de etil: hexani pentru a da 0,051 g (0,14, 55%) de solid alb; p.t.=228-230°C (dec).

635

640

645

650

655

660

665

670

675

680

RO 117699 Β1 [a]²°D=(-)17,4(c=0,5 Etanol, absolut); UV l_max(e)pH=7: 303 nm (10400), 274(1700),

259(9100); 0,1N NaOH: 304(10700), 295(1900), 259(8800); MS(CI): m/z (intensitate relativă)

374(13,2, M+1) ¹H RMN (DMSO-d₆) d 7,6(s, 1H, Ar-H), 7,42(s,1H, Ar-H), 5,71 (d, 1H, J=7,6 Hz, H-Γ), 5,65(t, 1H, OH,J=4,3Hz), 5,25-5,21 (m, 2H, OH), 4,22(dd aparent, 1H,H-2',J=13,4Hz,J=7,6Hz), 4,02(t aparent, 1H.H-3', J=7,1 Hz), 3,95(s,1H,H-4'), 3,67-3,62(m, 2H,H-5'), 2,78-2,74(m, 1H, ciclopropil-CH), 0,67(d, 2H, J=7,1Hz, ciclopropil-CH₂),0,53-0,47 (m,2H,ciclopropil-CH₃). Analiza pentru C_1SH₁₆N₃O₄CI₂O,5 C₄H_SO₂O,15 C₆H₁₄:

-calculat: C=49,98; H = 5,18; N=9,77

-găsit: C=49,86; H=5,18; N=9,8

Exemplul 4. 2-(Alilamino)-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol ml de alilamină și 0,6 g (1,14 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetil-befaL-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la 75°C timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 20 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:9 de metanokdiclormetan pentru a da 0,325 g (0,87, 76%) de solid alburiu; p.t. = 220°C(dec);

[a]²°D=(-)16(c=0,5 DMF); UV lmax(e):pH=7: 303 nm (11200), 275(2000), 259(9900); 0,1N NaOH: 304 nm(11300), 275(2000), 259(9200); MS(CI): m/z (intensitate relativă) 374(100, M+1),¹H RMN (DMSO-d6) d 7,66(s, 1H. Ar-H), 7,35(s,1H, Ar-H), 5,98-5,85 m,1H,CH=CH₂), 5,76(d, 1H, J=7,6 Hz, H-1'), 5.62(t,1H,OH,J=4,3Hz), 5,28(d,1H, OH,J=7,6Hz),

5,23(d,1H,OH,J=4,2Hz) 5,16(d,1H,CH=CH₂, J=18,6 Hz), 5,05(d, 1H, CH=CH₂, J=10,2 Hz), 4,3(dd aparent, 1H, H-2', J=13,1Hz, J = 7,6 Hz), 4,06 (t) aparent, 1H,H-3', J=5,6Hz), 3,97(br.s, 1H,H-4', CH₂CH=CH₂), 3,71-3.6(m, 2H.H-5').

Analiza pentru C₁₅H₁₇N₃O₄CI₂O,3 H₂O:

-calculat: C=47,46; H = 4,67; N=11,07

-găsit: C=47,5; H=4,68; N=11,02

Exemplul 5. 5,6-Diclor-2-(izopropilamino)-1-(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol ml de izopropil și 1 g (1,9 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetil-deta-Lribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 20 ml de etanol absolut și se agită, la 75°C, timp, de 48 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:20 de metanokdiclormetan pentru a da produs contaminat cu o cantitate mică de material cu R_f mai mare. Acesta se repurifică pe un cromatotron, antrenat cu un rotor, de 2 mm de silicagel, cu un amestec 1:25 de metanokdiclormetan pentru a da 0,43 g (1,15 mmol, 60%) de solid alb: [a]²°D=(-)22,4(c=0,5DMF); UV lmax(e)pH=7; 304 nm (9500), 275(1800), 260(8300); 0,1N NaOH: 304 nm(9900), 275(1900), 260(8100); MS(CI): m/z (intensitate relativă) 376(100, M+1), ¹H RMN (DMSO-d6) d7,59(s, 1H, Ar-H), 7,35(s,1H, Ar-H), 6.9 (d,1H,NH, J=7,8Hz), 5,73(d,1H,H-1'J=6,5Hz), 5,62 (t,1H,OH,J=4,2Hz), 5,27-5,23(m,2H,OH), 4,27(dd aparent, 1H J=13,4 Hz, J=7,6Hz), 4,113,99 (m,2H), 3,97(br.s, 1H), 3,72-3,61 (m,2H,H-5'), 1,18(d,6H, CH(CH₃)₂, J=6,6Hz). Analiza pentru C₁₅H₁₉N₃O₄CI₂-1,00 H₂O:

-calculat: C=45,7; H = 5,37; N=10,66

-găsit: C=45,75; H=4,98; N=10,5

Exemplul 6. 2-(Ciclopentilamino}-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofurazonil)-1 H-benzimidazol ml de ciclopentilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetilbeta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la

70°C timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:9 de etanokdiclormetan pentru a da 0,27 g (0,68 mmol, 59%) de solid alb; p.t.= 140°C; [a]^2oD=(-)24(c=O,5 DMF); UV

RO 117699 Β1 l_max(e)pH=7: 305 nm (12700), 276(2400), 260(10,600, 245(7,400); 0,1N NaOH: 305 nm (12,600), 276(2200), 200 (9900); 247(7300); MS(CI): m/z (intensitate relativă) 402(100, M+1), ¹H RMN (DMSO-d6) d 7,6(s, 1H, Ar-H), 7,36(s,1H, Ar-H), 6,91 (d,1H,NH,J=6,8 Hz), 5,74(d,1H,H-1'J=7,6Hz), 5,61 (t,1H,OH,J=4,2Hz), 5,26(d,1H,OH,J=8,1Hz). 5,23 (d,1H, OH,J= 5,5Hz), 4,3-4,14(m,2H,NHCH,H-2^,),4,05(t aparent, 1H.H-3’, J=4,9 Hz, 3.96 (br.s 1H, H-4'),3,72-3,59(m, 2H.H-5'), 1,91(brs,2H, CH2),1,66(br.s, 2H,CH₂), 1,52 (br.s. 4H,CH₂). Analiza pentru C₁₇H₂₁N₃O₄CI₂-0,20 H₂O:

-calculat: C=50,31; H = 5,31; N=10,38

-găsit: 0=50,13; H=5,31; N=10,05

Exemplul 7. 2-(Benzilamino)-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de benzilamină și 1 g (1.9 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetil-betaL-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 20 ml de etanol absolut și se agită, la 70°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:9 de etanokdiclormetan. Produsul brut conține benzilamină. Acest material se purifică în continuare pe o a doua coloană de purificare cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 3:7 de acetonă: hexani pentru a da un produs cu o cantitate mică de impurități. Se folosește o a treia coloană de purificare cu silicagel, identică cu cea de-a doua, pentru o purificare finală pentru a da 0,26 g (0,62 mmol, 32%) de solid alburiu; p.t.=123°C;

[a]²°D=(-)4,6(c=0,5 DMF); UV lmax(e)pH=7: 304 nm (10600), 276(1800), 260(9600); 0,1N NaOH: 305nm (10500), 276(1500). 260(8500); MS(CI): m/z (intensitate relativă) 424(100, M+1), ¹H RMN (DMSO-d6) d 7,78(t.1 H, J=5,9Hz, NH); 7,68(s, 1H,Ar-H), 7,34(s. 1H, Ar-H), 7,34-7,18(m,5H,Ar-H), 5,8(d,1H,H-1’,J=7,6Hz), 5,67(t,1H,OH.J=4,1Hz),

5,32(d,1H,OH,J=7,6Hz), 5,25(d,1H.OH,J =4,6Hz), 4,55(d,2H,PhCH₂,J=5,7Hz), 4,34(dd aparent, 1H, H-2',J= 13,1Hz, J=7,4 Hz), 4,08(t aparent, 1H, H-3; J=3,8 Hz), 4(br.s, 1H.H-4'), 3,73-3,61 (m, 2H, H-5').

Analiza pentru C₁₉H₁₉N₃0₄CI₂-0,10 H₂O:

-calculat: C=53,56; H = 4,54; N=9,86

- găsit: C=53,23; H=4,62; N= 9,71

ExempluI 8. 2-Azetidino-5,6-diclor-1 -(beta-L-ribofuranozil)-lH-benzimidazol g de azetidină și 0,6 g(1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetil-beta-Lribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la 75°C, timp, de 72 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:20 de metanokdiclormetan pentru a da 0,35 g (0,93 mmol, 82%) de solid alburiu; p.t.=244-245°C; [a]²⁰D=(+)69,6(c=0,5 DMF); UV lmax(e)pH=7: 305 nm (9900), 275(1500), 260(9800); 0,1N NaOH: 305 nm (9800), 276 (1600), 260 (7800), MS(CI): m/z (intensitate relativă) 376(100, M+1), ¹H RMN (DMSO-d6) d 8,6(s, 1H, Ar-H), 7,49(s,1H, Ar-H), 5,43 (d,1H,H-T, J=7,6 Hz), 5,33(d,1H,OH, J=6,6Hz), 5,26 (t,1H,OH,J= 4,7Hz), 5,13(d,1H,OH,J=4,7Hz), 4,35(dd aparent, 1H,H-2',J=12,6 Hz, J=6Hz), 4,17(t, 4H,CH₂, J=7,6Hz), 4,07(t aparent, 1H, H-3‘, J=6,1 Hz), 3,88(d, 1H, H-4', J=2,4Hz), 3,64((br s,2H,H-5') 2,39-2,29(m, 2H. CHJ.

Analiza pentru C₁₅H₁₇N₃O₄CI₂:

-calculat: C=48,14; H = 4,58; N=11,23

-găsit: C=48,00; H=4,59; N=11,15

Exemplul 9. 5,6-Diclor-2-(propargilamino)-1-(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol ml de propargilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetilbefa-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită la

70°C timp de 4 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu

735

740

745

750

755

760

765

770

775

RO 117699 Β1 silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:20 de etanokdiclormetan pentru a da 0,18 g de produs brut. Acest material se purifică în continuare pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:9 de metanol:diclormetan pentru a da 0,135 g (0,36 mmol, 32%) de solid galben deschis; p.t.=182-184°C; [a]^2oD=(-)9,2(c=O,5 DMF); UV l_max(e): pH=7: 7300 nm (8900), 272(1700), 258(8300); 0,1 N NaOH: 301 nm (8700), 272(1800), 259(7500); MS(CI): m/z (intensitate relativă) 372(100, M+1). Ή RMN (DMSO-d₆) d 7,73(s, 1H, Ar-H), 7,58(t,1H,J=5,5Hz,NH), 7,43(s,1H,Ar-H), 5,75(d,1H,H1’,J=5Hz), 5,66(t,1H,OH,J=4,3Hz), 5,29(d, 1H, OH, J=7,6 Hz),5,24(d, 1H,OH.J=4,2Hz), 4,28(dd aparent, 1H,H-2',J=13,2Hz, J=7,4Hz), 4,11-4,04(m,3H,H-3', CH₂), 3,97(br.s, 2H,H4'), 3,73-3,61 (m,2H,H-5'), 3,1(s,1H,CH).

Analiza pentru C₁₅H₁₅N₃O₄CI₂-0,75 H₂O:

-calculat: C=46,71; H = 4,31; N=10,89

-găsit: C=46,52; H=4,23; N=10,72

Exemplul 10. 5,6-Diclor-2-(n-pmpilamino)-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de propilamină și 0,6 g (1.1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetilbefa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la 70°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:9 de etanokdiclormetan pentru a da 0,36 g (0,96 mmol, 84%) de solid alburiu; p.t.=231-233°C; [a]²°D=(-)23,6(c=0.5 DMF); UV lmax(e): pH=7: 7305 nm (9900), 275(1500), 260(9800); 0,1 N NaOH: 305 nm (9800), 276(1600), 260(7800); MS(CI): m/z (intensitate relativă) 376(100, M+1), ¹H RMN (DMSO-d6) d 7,6(s, 1H, Ar-H), 7,35(s,1H,Ar-H), 7,15 (t,1H,J=5,4Hz,NH), 5,74 (d.1H,H-1', J=7,6Hz),5,66(t,1H,OH,J=4,OHz), 5,28(d, 1H, OH, J=7,6 Hz),5,24(d, 1H,OH,J=4,2Hz), 4,344,25(m,1H,H-2'), 4,06(t aparent, 1H, H-3’, J=4,7Hz), 4(br.s, 1H.H-4'), 3,72-3,61 (m.2H,H-5'), 3,31-3,24(m,2H, NH₂CH₂), 1,57(q, 2H J=7,3Hz, CH₂), 0,88(t,3H,J=7,5Hz, CH₃). Analiza pentru C₁₅H₁₉N₃O₄CI₂-0,25 H₂O:

-calculat: C=47,32; H = 5,16; N=11,04

-găsit: C=47,43; H=5,2; N=10,74

Exemplul 11.5,6-Diclor-2-(izobutilamino)-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de izobutilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetilbeta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 50 ml de etanol absolut și se agită, la 75°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu 500 ml dintr-un amestec 1:20 de metanokdiclormetan, apoi cu un amestec 1:9 de metanokdiclormetan pentru a da 0,39 g (1 mmol, 90%) de solid de culoare cafenie; p.t.=136°C; [a]²⁰D= (-)28,4(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₆H₂₁N₃O₄CI₂:

-calculat: C=48,13; H = 5,55; N=10,52

-găsit: C=48,08; H=5,57; N=10,41

Exemplul 12. 2-((5,6-Diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol-2 il)amino) etanol ml de etanolamină și 0,62 g (1,2 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetilbeta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 50 ml de etanol absolut și se agită, la

80°C,timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 1Q crrj_t-230„-400 mesh) cu 500 ml dintr-un amestec 1:20 de metanok.diclormetan, apoi cu un amestec 1:9 de metanokdiclormetan. Produsul brut care se obține se purifică mai departe pe un strat filtrant cu silicagel cu un amestec 1:1 de acetonă:diclormetan și apoi cu un amestec 1:2 de etanokdiclormetan. în continuare, prin

RO 117699 Β1 purificare pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:6 de etanokacetat de vinii se obțin 0,064 g (0,17 mmol, 14%) de produs pur [a]²°D=(-)14,2(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₄H₁₇N₃O₅CI₂O,5 H₂O:

-calculat: C=43,43; H = 4,69; N=10,85

-găsit: 0=43,74; H=5,02; N=10,53

ExempluI 13. 5,6-Diclor-2-((1 -etilpropil)amino)-1 -(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol

5mlde 1-etilpropilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetilbefa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 20 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 24h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:15 de metanokdiclormetan pentru a da 0,31 g produs cu o mică cantitate de impurități. Acest produs a fost în continuare purificat pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:2 acetonă, diclormetan se obține 0,24 g (0,59 mmol, 52%) de solid alb; [a]²°D=(-)39,4(c=0,5 DMF). Analiza pentru C₁₇H₂₃N₃O₄Cl₂:

-calculat: C=50,5; H = 5,73; N=10,39

-găsit: C=50,44; H=5,88; N=10,14

Exemplul 14.2-(Ciclohexilamino)-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de ciclohexilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetilbeia-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 20 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:15 de metanokdiclormetan pentru a da 0,38 g de produs cu o cantitate mică de impuritate. Acest material se purifică mai departe pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:2 de acetonă:diclormetan pentru a da 0,25 g de material ușor impur, 0,059 g (0,14 mmol, 12%) de produs pur ca un solid alb;

[a]²°D=(-)24(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₈H₂₃N₃O₄CI₂-0,3 H₂O:

-calculat: C=51,27; H = 5,64; N=9,96

-găsit: C=51,18; H=5,68; N=9,88

Exemplul 15. 2-Anilino-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de anilină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetil-beta-Lribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 35 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 14 zile. Amestecul de reacție se concentrează și se distila anilina sub vacuum ridicat, la 80°C. Reziduul de culoare maro se dizolvă în 50 ml de metanol și se adaugă K₂CO₃. Această soluție se agită,timp, de 18 h. Soluția se filtrează, se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec T.15 de metanokdiclormetan pentru a da 0,024 g (0,06 mmol, 5%) de solid alb. MS(AP+):m/z(intensitate relativă) 410(19,39,M+1), ¹H RMN (DMSO-d₆) d 9,09(s,1H,NH), 7,83(s,1H,Ar-H), 7,83(s,1H,Ar-H), 7,78(d,1H,Ar-H,J=7,9Hz), 7,58(s,2H,Ar-H),7,31(t,2H,Ar-H,J=7,9Hz),

6,99(t,1H,Ar-H, J=7,5Hz), 5,95(d, 1H, H-Γ, J=7,8 Hz),5,86(t, 1H,OH,J=4,4Hz),

5,38(d,1H,OH, J=7,6Hz), 5,3(d,1H,OH, J=4,2 Hz), 4,33(dd aparent, 1H,H-4’,J=13,4Hz,

J=7,8Hz), 4,11(t apparent, 1H,H-2', J=4,8Hz), 4,05(s,1H,H-4'), 3,79-3,71 (m,2H,H-5').

Exemplul 16. 5,6-Diclor-2-(n-pentilamino)-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de n-pentilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetilbeta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la

80°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu

830

835

840

845

850

855

860

865

870

875

RO 117699 Β1 silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:15 de metanokdiclormetan pentru a da 0,55 g de produs cu câteva impurități. Acest material se repurifică pe o a doua coloană cu silicagel (2,5 cm x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:20 de metanokdiclormetan pentru a da 0,4 g (0,99 mmol, 87%) de solid alburiu; p.t. = 102-103’C; [a]²°D=(-)22(c=0,5

DMF).

Analiza pentru C₁₇H₂₃N₃O₄CI₂:

-calculat: C=50,5; H = 5,73; N=10,4

-găsit: C=50,25; H=5,85; N=10,26

Exemplul 17. 2-((5,6-Diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol-2-il)amino) acetonitril

1,2 g (13 mmol) de clorhidrat de amino acetonitril, 5 ml de trietilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2_l3.5-tri-0-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 40 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C,timp, de 3 zile. Amestecul de reacție se concentrează și reziduul se diluează cu 150 ml de acetat de etil și se extrage cu 25 ml de soluție 10% de bicarbonat de sodiu, apoi cu 2 x 25 ml de apă. Stratul de acetat de etil se usucă pe Na₂SO₄, se decantează, se concentrează pentru a obține 0,67 g de ulei de culoare maro și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 18 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:15 de metanokdiclormetan. Cele două produse principale din coloană sunt: 0,32 g de 2-brom-5,6-diclor-1-(5-0-acetil-ăeta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol și 0,14 g de 2brom-5,6-diclor-1-(ăeta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol. De asemenea, se izolează și 0,19 g de material cu R_f mai mic care, în continuare, se purifică pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:20 de metanokdiclormetan pentru a da 0,024 g (0,06 mmol, 5%) de solid alburiu. MS(AP-): m/z (intensitate relativă) 371(80, M-2), ¹H RMN (DMSO-d₆) d 7,87(t,1H,NH, J=5.9Hz), 7,83(s,1H,Ar-H), 7,52(s,1H, Ar-H), 5.74(d,1H, H-1', J=7,6Hz), 5,68(t, 1H, OH, J=4,1Hz). 5,32(d,1H, OH, J=7,1Hz), 5,23(d,1H,OH, J=4,2Hz), 4,37(d,2H,CH₂CN, J=5,3 Hz), 4,28(dd apparent, 1H,H-4',J=13Hz, J=7,2Hz), 4,07(t aparent, 1H,H-3’, J=3,5Hz), 3,98(s, 1 H.H-3'), 3,73-3,63(m,2H,H-5').

Analiza pentru C₁₄H₁₄N₄O₄CI₂O,3 CH₄O, 0,15CH₂CI₂:

-calculat: C=43,88; H = 3,95; N=14,16

-găsit: C=43,81; H=3,90; N=14,21

Exemplul 18. 2-(n-Butilamino)-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de n-butilamină 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetil-betaL-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 18 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 18 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:9 de metanokdiclormetan. Se obțin 0,73 g de produs brut care se purifică mai departe pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:2 de acetonă:didormetan pentru a da 0,2 g (0,51 mmol, 45%) de solid alburiu; p.t.=220-222°C;

[a]^2oD=(-)17,2(c=O,5 DMF).

Analiza pentru C₁₆H₂₁N₃O₄CI₂-1/10 H₂O.% C₃H₆O

-calculat: C=49,91; H = 5,79; N=9,98

-găsit: C=49,75; H=5,90; N=10,16

Exemplul 19. 2-(sec-Butilamino)-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de sec-butilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetilbeta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu-1Q ml de etanol absolut și se agită, la

80°C, timp, de 18 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 18 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:20 de metanokdiclormetan. Se obțin 0,37 g de produs brut care se purifică mai departe pe un cromatotron prevăzut cu un

RO 117699 Β1 rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:20 de metanokdiclormetan pentru a da 0,21 g (0,55 mmol, 48%) de solid alburiu care este un amestec de diastereomeri; p.t. = 121-122°C; 925 [a]²°D=(-)23,8(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₆H₂₁N₃O₄CI₂-7/10 H₂O:

-calculat: C=47,70; H = 5,60; N=10,43

-găsit: C=47,76; H=5,51; N=10,16

Exemplul 20. 2-(Ciclobutilamino)-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol 930 ml de ciclobutilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetil6eta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp.de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 18 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 2:1 de acetat de etil: hexani. Se obțin 0,42 g de produs brut care se purifică mai departe prin cicluri multiple pe un cromato- 935 tron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:20 de metanol.diclormetan pentru

a da 0,26 g (0,67 mmol, 59%) de solid alb;
[a]2oD=(-)22,4(c=0,5 DMF). Analiza pentru C16H19N3O4CI2: - calculat: C=49,50;	H = 4,93;	N=10,82	940
- găsit: C=49,22;	H=4,90;	N=10,61

Exemplul21.2-(CicloheptHamino)-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol ml de cicloheptilamină și 0.4 g (1,0 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană de silicagel (2,5 945 cm x 18 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:20:20 de metanol: acetat de etil: hexani pentru a da 0,13 g (0,3 mmol, 30%) de solid alburiu; p.t.= 137 - 138°C;

[3^0=(-)21,6(0=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₆H₁₉N₃O₄CI₂-11/10 H₂O:

- calculat: C=50,70; H = 6,09; N=9,33 950

-găsit: C=50,91; H=5,91; N=9,13

Exemplul 22. 5,6-Diclor-2((2-(1-pirolidinil)etil)amino)-1-(beta-L-ribofuranozil)-1Hbenzimidazol ml (13,5 mmol) de 1-(2-aminoetil)pirolidină, 2 ml de trietilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol 955 absolut și se agită, la 80°C, timp, de 18 h. Amestecul de reacțe se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 18 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:20 de metanol: diclormetan. Produsul principal din coloană se dizolvă în apă deionizată, se neutralizează și se extrage din diclormetan pentru a da 0,26 g (0,6 mmol, 53%) de solid alburiu;

p.t.= 123-124°C; 960 [a]²°D=(-)20,4(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₈H₂₄N₄O₄CI₂-3/2H₂O-1/2C₄H₈O₂:

-calculat: C=47,82; H = 6,22; N=11,15

-găsit: C=47,79; H=6,06; N=10,97

Exemplul 23.2-((Ciclopropilmetiljaminoj-b, 6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozîi)-1 H-benzi- 965 midazol

1,6 g (15 mmol) de clorhidrat de (aminometil) ciclopropan, 2 ml de trietilamină și

0,55 g (1,05 mmol) de 2-brom-5,6-didor-1-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 6 h. Amestecul de reacțe se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 18 cm, 230-400 mesh) cu un 970 amestec 1:20 de metanol: diclormetan. Produsul principal din coloană se repurifică pe o

RO 117699 Β1 coloană cu silicagel (2,5 cm x 18 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:10:10 de metanokacetat de etil: hexani pentru a da 0,30 g (0,77 mmol,74%)de solid alburiu; p.t.= 22923O°C;[a]^2oD=(-) 24,8 (c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₆H₁₉N₃O₄CI₂:

-calculat: C=49,50; H = 4,93; N=10,83

-găsit: C=49,30; H=5,02; N=10,66

Exemplul 24. 2-(terț)-Butilamino)-5,6-dic!or-1-(beta-L-ribofuranozi!)-1 H-benzimidazol g (3,9 mmol) dintr-o soluție de 2-(terț-butilamino)-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetilbefa-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol în 40 ml de metanol și 40 ml de etanol se combină cu 0,61 g (5,8 mmol) dintr-o soluție de carbonat de sodiu în 10 ml de apă. Soluția se agită, la temperatura camerei, timp, de 5 h, apoi metanolul și etanolul se îndepărtează pe un evaporator rotativ. Apoi, soluția se extrage cu 150 ml de acetat de etil cu 20 ml de NaCI saturată. Straturile organice se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 14 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:20 de metanol: diclormetan pentru a da 1,25 g (3,2 mmol, 83%) de solid alb; p.t. = 118-120°C; [a]²°D=(-)30,2(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₆H₂₁H₃O₄CI₂-2/5 H₂O-2/5 CH₄O:

-calculat: C=48,01; H = 5,75; N=10,24

-găsit: C=48,20; H=5,73; N=10,05

Exempiu 125. 2-(terț-Butilamino)-5,6-diclor-1 -(2,3,5-tri-O-acetil-beta-L-ribofuranozil)1 H-benzimidazol ml 1,2-dicloretan anhidru, 1,5g(5,84 mmol) de 2-(terț-butilamino)-5,6-didorbenzimidazol și 2,2 ml(8,8 mmol) de Ν,Ο-bistrimetilsililacetamidă se combină și se agită, la 80°C, timp, de 30 min. Se adaugă 1,1 ml (5.84 mmol) de trimetilsilil triflat și soluția se agită, la 80°C, timp, de 45 de min. Se adaugă 2 g (6,42 mmol) de 1,2,3,4-tetra-O-acetil- beta-Lribofuranozil)(L-TAR) și agitarea s-a continuat,la 80°C pentru 3h. Mai mult s-a adăugat 0,5 g (1,6 mmol) L-TAR în acest timp. După 1h reacția se stinge cu 40 ml de bicarbonat de sodiu saturat, rece, apoi se extrage cu 2 x 150 ml de diclormetan. Straturile organice combinate se usucă pe sulfat de sodiu, se decantează și se concentrează pentru a da 4 g de solid de culoare aurie. Acest material se purifică pe o coloană cu silicagel (5 cm x 16 cm. 230-400 mesh) cu un amestec 1:30 de metanokdiclormetan pentru a da 2,21 g (4,3 mmol. 73%) de solid alburiu;

[a]²⁰D=(-)28,4(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₂₂H₂₇N₃O₇CI₂-1 CH₄O:

-calculat: C=50,37; H = 5,70; N=7,66

-găsit: C=50,74; H=5,41; N=7,28

Exemplul 26. 2-terț-Butilamino)-5,6-diclor-1 H-benzimidazol g (45,2 mmol) de 4,5-diclorfenilendiamina (Aldrich, Milwaukee, Wl) se combină cu

6,3 ml (49,7 mmol) de terț-butil izotiodanat (Aldrich, Milwaukee, Wl) în 100 ml de piridină anhidră. Soluția se încălzește, la 80^QC, timp, de 1 h în atmosferă de azot. Se adaugă 24,9 g (58,8 mmol) de 1-ciclohexil-3-(2-morfolinoetil)carbodiimidă meto-p-toluen-sulfonat (Fluka Chemika) împreună cu 90 ml de piridină anhidră. Această soluție se încălzește, la 90°C,timp, de 2,5 h. Piridină se îndepărtează prin evaporare rotativă și reziduul se dizolvă în 300 μΜ de acetat de etil și se extrage cu 4 x 100 ml de apă. Stratul de acetat de etil se tratează cu cărbune decolorant și se spală pe un strat filtrant de silicagel (4x8 cm, 230 - 400 mesh) folosind acetat de etil. Produsul brut se purifică pe o coloană cu silicagel (5x16 cm, 230 400 mesh) folosind un amestec 1:4 de acetat de etil: hexani. Fracțiile brute se repurifică pe o a doua coloană identică folosind un amestec 1:3 de acetat de etikhexani. Fracțiunile pure de la cele două coloane se combină pentru a da 3,13 g (12,1 mmol, 27%) de solid de

RO 117699 Β1 culoare cafenie; p.t. =219-221°C; MS(API+):m/z (intensitate relativă) 258(100, M+1); ¹H RMN (DMSO - d₆) d 10,31(s, 1H, NH), 7,31(s,2H,Ar-H), 6,61(s,1H,NH), 1,38(s, 9H, f-butil). Analiza pentru C^H^NaClji

-calculat: C=51,18; H = 5,08; N=16,28

-găsit: 0=51,11; H=5,12; N=16,18

Exemplul 27. 2-Amino-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol g (2,2 mmol) de 2-amino-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1Hbenzimidazol în 10 ml de metanol și 17 ml de etanol se combină cu 0,25 g (2,4 mmol) dintr-o soluție de carbonat de sodiu în 4 ml de apă. Soluția se agită, la temperatura camerei, timp, de 64 h, apoi se îndepărtează metanolul și etanolul pe un evaporator rotativ. Apoi, soluția se extrage cu 2 x 100 ml de acetat de etil și 20 ml de NaCI saturată. Straturile organice se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 cm x 14 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:10 de metanokdiclormetan pentru a da 4,1 g (1,24 mmol, 57%) de solid alb; p.t. = 110-112°C; [a]²°D=(-)4,2(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₂H₁₃N₃O₄Cl₂-3/5 H₂O-2/5 CH₄O:

-calculat: C=41,63; H = 4,45; N=11,74

-găsit: C=41,47; H=4,27; N=11,58

Exem pl u 128.2-(Amino)-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol

100 ml 1,2-dicloretan anhidru, 10 g (49,5 mmol) de 2-amino-5,6-diclor-benzimidazol (preparat prin metoda lui Homerand Henry din J.Med.Chem. 1986, 11,946-949) și 18,3 ml (74,2 mmol) de Ν,Ο-bistrimetilsililacetamidă se combină și se agită, la 80°C, timp, de 30 min când se dizolvă toate solidele. Se adaugă 9,3 g (48,3 mmol) de trimetilsilil triflat și soluția se agită, la 80°C, timp, de 20 min. Se adaugă în 4 porții peste, un timp, de 3h, 17,3 g (54,4 mmol) de 1,2,3,4-tetra-O-acetil-L-ribofuranozidă (L-TAR) în timp ce se continuă agitarea, la 80°C. După 45 min, după ultima adăugare, reacția se stinge cu 100 ml de soluție saturată rece de bicarbonat de sodiu, apoi se extrage cu 200 ml de diclormetan. Straturile organice combinate se usucă pe sulfat de sodiu, se decantează și se concentrează pentru a da 24,8 g de ulei consistent de culoare roșie. Acest material se purifică pe o coloană cu silicagel (5 x 20 cm, 230 - 400 mesh) cu un amestec 1:40 de metanol: diclormetan RMN arată un produs de la coloană cu R, ridicat, conținând o grupă trimetilsilil. Aceste fracțiuni reacționează cu fluorură de tetrabutilamoniu în THF, timp, de 24h și se filtrează printr-un strat filtrant cu silicagel cu un amestec 1:10 de metanol: diclormetan. Toate produsele conținând fracțiunile se combină și se repurifică pe o coloană cu silicagel (5 x 14 cm, 230 400 mesh) cu un amestec 1:1 de acetonă:diclormetan pentru a da 3,4 g(7,4 mmol, 15%) de solid alburiu; [a]²°D=(+)48(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₈H₁₉N₃O₇CI₂-1/4 CH₂CI₂-1/2 C₃H₆O:

- calculat: C=46,46; H = 4,44; N=8,23

- găsit: C=46,59; H=4,35; N=8,07

Exemplul 29. 5,6-Diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-2-(2,2,2-trifluoretil)amino)-1 H-benzimidazol ml de trietilamină, 2 ml de 2,2,2-trifluoretilamină și 0,4 g (1 mmol) de 2-brom-5,6diclor-1-(befa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 10 ml de DMSO într-un tub etanșat,la 80°C,timp, de 17 zile. Amestecul de reacție se extrage cu 30 ml de apă și 3 x 100 ml de diclormetan. Straturile organice se concentrează și se purifică prin cicluri multiple pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec 1:4 de acetonă.diclormetan, apoi un amestec 1:15 de metanokdiclormetan pentru a da 0,02 g (0,05 mmol, 5%) de solid alburiu. MS(API+):m/z (intensitate relativă) 416 (100, M⁺).

1020

1025

1030

1035

1040

1045

1050

1055

1060

1065

RO 117699 Β1

Analiza pentru C₁₄H₁₄N₃O₄FCI₂-1/2 H₂O-4/5 CH₄O:

-calculat: C=39,42; H = 4,13; N=9,25

- găsit: C=39,34; H=3,95; N=9,08

Exemplul 30. 5,6-Diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol

0,43 g (0,96 mmol) dintr-o soluție de 5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetil-dete-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol în 10 ml de metanol și 10 ml de etanol se combină cu 0,15 g (1,4 mmol) din soluție de carbonat de sodiu în 2,5 ml de apă. Soluția se agită, la temperatura camerei, timp de 24 h, apoi se îndepărtează metanolul și etanolul pe un evaporator rotativ. Apoi, soluția se extrage cu 4 x 100 ml de acetat de etil și 20 ml de NaCI saturată. Straturile organice se concentrează pentru a da 0,27 g (0,85 mmol, 88%) de solid alb pur analitic; p.t. = 209-210°C;[a]²°D=(+)63(c=0,5 DMF): Analiza pentru C₁₂H₁₂N₂O₄CI₂-2,5 H₂O-1/10 C₄H₈O₂:

- calculat: C=44,44; H = 4,09; N=8,36

-găsit: C=44,49; H=3,91; N=8,14

Exemplul 31. 5,6-Diclor-1-(2,3 5-tri-O-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol ml de acetonitril anhidru, 0.59 g (3,1 mmol)de 5,6-diclor-benzimidazol (EMSDottikon AG) și 0,77 ml (3,1 mmol) de Ν,Ο-bistrimetilsililacetamidă se combină și se agită, la 80°C,timp, de 30 min. Toate solidele se dizolvă. Se adaugă 0,75 ml (3,9 mmol) de trimetilsilil triflat și soluția se agită, la temperatura, camerei, timp, de 15 min, timp în care se formează o cantitatea mare de solide. Se adaugă 1 g (3,1 mmol) de 1,2,3,4-tetra-O-acetil-Lribofuranozidă (L-TAR) și apoi soluția se încălzește, la 80°C. Toate solidele se dizolvă. După

1,5 h amestecul de reacție se stinge cu 10 ml de soluție saturată rece de bicarbonat de sodiu, apoi se extrage cu 100 ml de diclormetan. Straturile organice se usucă pe sulfat de sodiu, se decantează și se concentrează pentru a da 1,7 g de ulei galben. Acest material se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 x 18 cm, 230 - 400 mesh) cu un amestec I: 40 de metanokdiclormetan pentru a da 1,37 g de produs parțial pur. O a doua purificare printr-o coloană cu silicagel (2,5 x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 2:3 de hexan: acetat de etil dă 0,8 g (1,78 mmol, 57%) de produs pur ca un solid alb; [a]²°D=(+)46,8(c=0,5 DMF). Analiza pentru C₁₈H₁₈N₂O₇CI₂:

-calculat: 0=48,56; H = 4,07; N=6,29

-găsit: C=48,45; H=4,11; N=6,19

Exemplul 32. 2-Acetamidă-5,6-diclor-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol

0,35 g (0,75 mmol) dintr-o soluție de 2-acetamidă-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetil-befaL-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol în 8 ml de etanol se combină cu 0,12 g (1,1 mmol) dintr-o soluție de carbonat de sodiu în 2 ml de apă. Soluția se agită, la temperatura camerei, timp, de 24 h, apoi metanolul și etanolul se îndepărtează pe un evaporator rotativ. Soluția se extrage apoi cu 2 x 150 ml de acetat de etil și cu 20 ml de NaCI saturată. Straturile organice se concentrează și se purifică prin cicluri multiple pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 2 mm, folosind un amestec T.10 de metanol: diclormetan pentru a da 0,067 g (0.18 mmol, 23%) de solid alb. Acest produs se identifică prin ¹H RMN, MS și HPLC, el conține circa 7% de 2-amino-5,6-diclor-befa-L-ribofuranozil-1 H-benzimidazol identificat prin ¹H RMN. Analiza HPLC arată 2 impurități mici (-5%).

Exempl ul 33. 5,6-Diclor-2-(metilamino)- 1 -(beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol g (45 mmol) de clorhidrat de metilamină, 3 ml de trietilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de

2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 25 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se separă între 50 ml de bicarbonat de sodiu saturat și 150 ml de acetat de etil. Stratul organic se usucă pe sulfat de sodiu, se concentrează și absoarbe pe 15 g de silicagel. Acest material

RO 117699 Β1 se încarcă uscat într-o coloană cu silicagel (5 cm x 10 cm, 230 - 400 mesh) și se purifică cu un amestec 1:10 de metanol:diclormetan. Produsul principal din coloană este în cantitate de 0,22 g (0,62 mmol, 54%) sub formă de solid alb; p.t. = 238-240°C;[a]²⁰D=(-)15,2(c=0,5 DMF). Analiza pentru C₁₃H₁₅N₃O₄CI₂-1/2CH₄O:

-calculat: C=44,52; H = 4,7; N=11,54

-găsit: C=44,43; H=4,58; N=11,36

Exemplul 34. 5,6-Diclor-2-(etilamino)-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol

3,7 g (46 mmol) de clorhidrat de etilamină, 7 ml de trietilamină și 0,6 g (1.1 mmol) de

2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol se combină cu 20 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se separă între 2 x 50 ml de bicarbonat de sodiu saturat și 200 ml de acetat de etil. Straturile organice se usucă pe sulfat de sodiu, se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 x 18 cm, 230-400) cu un amestec 1:20 de metanol: diclormetan. Produsul principal din coloană este în cantitate de 0,30 g (0,96 mmol, 87%) sub formă de solid alb; p.t. = 155 - 157°C; [a]²⁰D = (-)20,6(c=0,5 DMF).

Analiza pentru C₁₄H₁₇N₃O₄CI₂-1/2H₂O:

-calculat: C=45,3; H = 4,89; N=11,32

-găsit: C=45,44; H=4,78; N=11,18

Exemplul 35. 2-Ciclopropilamino-5,6-diclor-1-(alfa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de ciclopropilamină și 0,6 g (1,1 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0acetil-alfa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol (obținut ca produs minor în sinteza anomerului beta, de la exemplul 1) se combină cu 50 ml de etanol absolut și se agită, la 80^cC, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 x 16 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:9 de metanol: diclormetan pentru a da 0,25 g de produs brut. Acest material se purifică mai departe prin cicluri multiple pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de silicagel de 1 mm, cu un amestec 1:15 de metanol: diclormetan pentru a da 0,06 g (0,14 mmol, 14%) de solid alb; p.t. = 140-141°C;[a]²°D=(-)51,8(c=0,5 DMF) UV l_max(e): pH = 7:303 nm (10600), 274(1700);0,1N NaOH: 304 nm(10800), 275(2400), MS(CI): m/z (intensitate relativă) 374(29,7, M+1); ¹H RMN (DMSO-d₆) d 7,48(s, 1H, Ar-H), 7,38(s,1H, Ar-H), 7,08 (br.s, 1H, NH), 5,86(d, 1H, H-1', J=3,4 Hz), 5,5(d, 1H, OH, J=4,5Hz), 5,22(d, 1H, OH, J=7,1Hz), 4,84 (t, 1H, OH, J=5,7Hz). 4,15 (dd, 1H,H-2',J=7,9Hz, J=4Hz), 4,10(dd, 1H,H-3', J=7,3 Hz, J=4,5Hz), 4,05-4,01 (m, 1H.H-4'), 3,66-3,61 (m,1H,H-5'), 3,47-3,41(m, 1H, H-5), 2,74-2,71 (dd,1H, ciclopropil-CH,J=6,7Hz, J=3,3Hz), 0,69(d,2H,J=6,9Hz, ciclopropilCH₂),0,51-0,45 (m,2H,ciclopropil-CH₂).

Analiza pentru C₁₅H₁₇N₃O₄CI₂-0,6 CH₄OO,2 CH₂CI₂:

-calculat: C=46,24; H = 4,86; N=10,24

-găsit: C=46,13; H=4,83; N=10,28

Exemplul 36. 5,6-Diclor-2-(rzopropilamino)-1-(alfa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol ml de izopropilamină și 0.6 g (1,14 mmol) de 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-0acetil-a/fa-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol (obținut ca produs minor în sinteza anomerului beta), se combină cu 10 ml de etanol absolut și se agită, la 80°C, timp, de 24 h. Amestecul de reacție se concentrează și se purifică pe o coloană cu silicagel (2,5 x 18 cm, 230-400 mesh) cu un amestec 1:15 de metanol: diclormetan pentru a da 0,39 g de produs brut. Acest material se purifică mai departe pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de silicagel de 1 mm, cu un amestec 1:2 de acetonă: diclormetan pentru a da 0,29 g (0,78 mmol, 68%) de solid alb;

1120

1125

1130

1135

1140

1145

1150

1155

1160

RO 117699 Β1

p.t. = 131-133°C;[a]^2oD=(-)41,4(c=0,5 DMF) UV lmax(e): pH = 7:304 nm (11000), 276(2000):0,1N NaOH: 306 nm(11500), 277(2500), MS(CI): m/z (intensitate relativă) 376(34,8, M+1); ¹H RMN (DMSO-d6) d 7,46(s, 1H, Ar-H), 7,31 (s, 1H, Ar-H), 6,63 (d, 1H, NH,J=7,4Hz), 5,94(d, 1H, H-1', J=3,4 Hz), 5,53 (d,1H,OH, J=4,4Hz), 5,22(d, 1H, OH, J=7,1Hz), 486 (t, 1H, OH, J=5,7Hz), 4,15 (dd, 1H,H-2',J=7,7Hz, J=4Hz), 4,10(dd, 1H.H-3', J=7,3 Hz, J=4,3Hz), 4,05-3,94 (m, 2H, izopropil-CH,H-4'), w3,69-3,63(m,1H,H-5'), 3,49-

3,41 (m,1H,H-5), 1,19 (d,3H,J=6,5Hz.izopropil-CH₃), 1,18(m,3H, izopropil-CH₃).

Analiza pentru C₁₅H₁₇N₃O₄CI₂O,4 CH₂CI₂:

-calculat: C=45,09; H = 4,86; N=10,24

-găsit: C=45,10; H=4,97; N=10,10

Exemplul 37. 5,6-Diclor-2-((2-fluor-1-metilamino)-1-(beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol

0,032 g (0,30 mmol) de carbonat de sodiu, și 0,10 g (0,20 mmol) de 5,6-diclor-2-(2fluoroizopropilamino)-1-(2,3,5-tri-O-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 1 ml de apă, 2,5 ml de metanol și 2.5 ml de etanol și se agită, la tamperatura camerei, timp, de 3 h. Soluția se concentrează pentru a îndepărta cea mai mare parte de metanol și etanol și apoi se combină cu 75 ml de acetat de etil. Această soluție se extrage cu 2 x 5 ml de NaCI saturată. Straturile organice se usucă (Na₂SO₄), se decantează și se concentrează. Purificarea reziduului pe un cromatotron prevăzut cu un rotor de 1 mm, cu un amestec 1:10 de metanol: CH₂CI₂ dă 0,066 g (0,17 mmol, 84%) de solid alb; [a]²⁰D= (-)24,8(c=0,5 DMF) MS(AP+): m/z (intensitate relativă) 394 (98, M⁺); ¹H RMN (DMSO-d₆) d 7,64(s, 1H, Ar-H), 7,37(s,1H, Ar-H), 7,13 (d, 0,5H, NH, J=7,9Hz), 7,07(d, 0,5H, NH, J=7,6 Hz), 5.76 (d,1H, J=7,9Hz, H-T), 5,69(m, 1H, OH), 5.31-5,23(m, 2H.OH), 4,51-4,45(m,1H,CH₂F), 4,354,32(m,1H,CH₂F), 4,29-4,17(m,2H,H-2'și H-3'),4,06-3,97(m,1H, NHCH), 3,97(br.s. 1H.H-4'),

3,70-3,31 (m,2H,H-5'), 1,22-1,18(m,3H.CH(CH₃)).

Analiza pentru C₁₅H₁₈N₃O₄CI₂FO,4 H₂O:

-calculat: C=44,88; H = 4,72; N=10,47

-găsit: C=44,98; H=4,76; N=10,46

Exempl u I 38. 5,6-Diclor-2-((2-fluor-1 -metilamino)-1 -(2,3,5-tri-O-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol g de fluoracetonă și 0,38 g (0.82 mmol) de 5,6-diclor-2-amino-1-(2,3,5-tri-0-acetilbeta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol se combină cu 0,050 g (0,26 mmol) de acid tosic și se agită la reflux într-un balon cu un separator Dean Stark. După 4 h se adaugă 0,16 g (2,4 mmol) de cianoborohidrură de sodiu și se continuă refluxarea, timp de 6 h. Soluția se diluează cu 200 ml de acetat de etil și se spală cu 2 x 50 ml de NaCI saturată și cu 50 ml de apă. Straturile organice se usucă (Na₂SO₄), se decantează și se concentrează. Produsul brut se purifică pe o coloană cu silicagel (230-400 mesh, 2,5 x 18 cm) cu un amestec 1:25 de metanol: CH₂CI₂ pentru a da 0,19 g de produs brut. Acest material se purifică în continuare pe un cromatotron (rotor 2 mm) cu un amestec 1:1 de acetat de etil: hexani pentru a da 0,10 g (0,20 mmol, 24%) de solid de culoare galben deschis; MS(API⁺): m/z (intensitate relativă) 520 (62,63, M⁺); ¹H RMN (DMSO-d₆) d 7,66(s, 1H, Ar-H), 7,51(s,1H, Ar-H), 7,30 (d. 1H, NH, J=7,6Hz), 6,25(d, 1H„H-T, J=7,5 Hz). 5,31-5,23(m,1H,H-2'), 5,48-4,44(m,1H,H-3'), 4,63-

4,26(m,6H,CH2F, CH.H-4' și 5'),	2,21(s,3H,OAc),2,19(s,3H,OAc), 2,02 (s.3H,OAc),
1,24(d,3H,CH(CH3), J=7,5Hz).
Analiza pentru C21H24N3O7CI2F:
- calculat: C=48,47;	H = 4,65;	N=8,08
- găsit: C=48,60;	H=4,73;	N=7,94

RO 117699 Β1

1210

Exemplul 39. 5,6-Diclor-2-(izopropilamino)-1H-benzimidazol

0,61 g (3,4 mmol) de 5,6-diclor-1,2-fenilendiamină și 0,39 g (3,8 mmol) de izotiocianat de izopropil se combină cu 10 ml de piridină anhidră și se încălzesc, la 80°C, timp de 15 min. Apoi se adaugă 1,06 g (5,14 mmol) de diciclohexilcarbodiimidă și amestecul rezultant se lasă să se agite, la 100°C timp,de 5 h. Se adaugă 30 ml de toluen și amestecul se concentrează prin evaporare rotativă conducând la un reziduu de culoare maro. în continuare, produsul se purifică prin cromatografie pe coloană cu silicagel folosind un amestec 6,5:3:0,5 de acetat de etil:hexan:trietilamină pentru a obține un solid rășinos care se recristalizează din acetonitril pentru a da 0,46 g (60%) de solid de culoare cafenie, p.t. = 218-220°C.

Analiza pentru C^H^NjC^:

-calculat: C=49,20; H = 4,54; N=17,21

-găsit: C=49,31; H=4,59; N=17,33

Procedura generală I.

Sinteza de 2-(alchilamino)-1H-benzimidazoli folosind 1-ciclohexil-3-(2-morfolinoetil) carbodiimidă meto-p-toluensulfonat ca agent de desulfurare

1,2-fenildiamina corespunzătoare se combină cu 1-1,25 mmol de izotiocianat corespunzător/mmol de diamină și cu 3-5 mmol de piridină anhidră/mmol de diamină. Amestecul rezultat se încălzește, la 80°C, timp, de 30 min, apoi se adaugă ca un solid într-o singură porție 1,1-1,35 mmol de 1-ciclohexil-3-(2-morfolinoetil)carbodiimidă meto-p-toluensulfonat/mmol de diamină. Amestecul rezultat se lasă să se agite, la 80-90°C, timp, de 3-20 h, după care se lasă să se răcească, la temperatura camerei. Restul procedurii este același după cum s-a detaliat mai sus, cu excepția că produsul se purifică prin cromatografie pe coloană cu silicagel sau prin recristalizare din acetonitril sau din 1,4-dioxan.

5,6-Diclor-2-(izopropilamino}-1H-benzimidazol

200 g (1,13 mmol) de 5,6-didor-1,2-fenilendiamină, 122 g (1,21 mmol) de izopropil izotiocianat, 622 g (1,47 mmol) de 1-ciclohexil-3-(2-morfolinoetil)carbodiimidă meto-ptoluensulfonat și 4 ml de piridină se folosesc, conform cu procedura generală I. Produsul se recristalizează din acetonitril pentru a da 184 g (67%) de solid de culoare maro. Rezultatele analitice sunt comparabile cu acelea prezentate mai sus.

2-( Ciclopropilamino)-5,6-diclor-1 H-benzimidazol

6,04 g (34,1 mmol) de 4,5-didor-1,2-fenilendiamină, 3,69 g (37,2 mmol) de ciclopropil izotiocianat, 20,1 g (47,4 mmol) de 1-ciclohexil-3-(2-morfolinoetil)carbodiimidă meto-ptoluensulfonat și 135 ml de piridină se folosesc, conform cu procedura generală I. Produsul se recristalizează din acetonitril pentru a obține 5,82 g (70%) de solid de culoare galbenă; p.t.=223-225°C.

Analiza pentru C₁₀H₉N₃CI₂:

-calculat: C=49,61; H = 3,75; N=17,36

-găsit: C=49,53; H=3,78; N=17,12

Procedura generală II.

Cuplarea 2-(alchilamino)-1H-benzimidazolilor cu 1,2,3,5-tri-O-acetil-L-ribofuranoză

2-(alchilamino)-1H-benzimidazolul corespunzător se combină cu 2-3 ml de 1,2dicloretan/mmol de benzimidazol și cu 1-1,25 mmol de N,0-bis(trîmetilsilil)acetamidă/mmol de benzimidazol și amestecul care rezultă se încălzește, la 80°C, timp, de 30 min. Se adaugă 0,5-0,7 mmol de trimetilsilil trifluormetansulfonat/mmol de benzimidazol și amestecul se lasă să se agite, la 80°C, timp, de încă 15 min, după care se adaugă ca un solid într-o singură porție 1-1,25 mmol de 1,2,3,5-tetra-O-acetil-L-ribofuranoză/mmol de benzimidazol.

Amestecul rezultat se lasă să se agite, la 80°C, timp, de 2-20 h, după care se lasă să se

1215

1220

1225

1230

1235

1240

1245

1250

1255

RO 117699 Β1 răcească, la temperatura camerei. Acesta se diluează apoi cu 10 ml de soluție 5% de bicarbonat de sodiu apos/mmol de benzimidazol și cu 3-5 ml de diclormetan/mmol de benzimidazol și amestecul în 2 faze se agită, la temperatura camerei, timp, de 30 min. Stratul organic se colectează și stratul apos se reextrage cu o porție suplimentară de 3-5 ml de diclormetan/mmol de benzimidazol și straturile organice combinate se usucă peste sulfat de magneziu, se filtrează și solvenții se îndepărtează sub presiune redusă folosind un evaporator rotativ. în continuare, produsele se purifică prin cromatografie pe coloană cu silicagel.

5.6- Diclor-2-(izopropilamino)-1-(2,3,5-tri-O-acetH-beta-L-ribofuranozil)-1Hbenzimidazol g (102 mmol) de 5,6-diclor-2-(izopropilamino)-1 H-benzimidazol, 25,9 ml (21,3 g, 105 mmol, 1,03 echivalenți) de N,O-bis(trimetilsilil)acetamidă, 300 ml de 1,2-dicloretan,

12,8 ml (14,7 g, 66,2 mmol, 0,65 echivalenți) de trimetilsilil trifluormetansulfonat și 34,1 g (107 mmol, 1,05 echivalenți) de 1,2,3.5-tri-O-acetil-L-ribofuranoză se folosesc, conform cu procedura generală II. Cromatografia pe coloană cu silicagel folosind un amestec 35:1 de diclormetan: metanol conduce la obținerea a 39,6 g(77%) de spumă de culoare galbenă. MS(CI):m/z501(M+1).

Procedura generală III.

Deprotejarea 2-( a!chilamino)-1 -(2,3,5-th-O-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazolilor

2-(alchilamino)-1-(2,3,5-tri-O-acetil-beta-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazolul corespunzător se dizolvă în 4-5 ml de etanol/mmol de triacetat. într-un balon separat se introduc 1-1,3 mmol de carbonat de sodiu/mmol de triacetat, 1-2 mmol de apă/mmol de triacetat și 3 ml de metanol/mmol de triacetat. Se adaugă suspensia de carbonat de sodiu la soluția etanolică de triacetat, la temperatura camerei, într-o singură porție. Amestecul rezultat se lasă să se agite, la temperatura camerei, timp de 18 h. Apoi, amestecul se diluează cu 25 ml de acetat de etil/mmol de triacetat. Se colectează stratul organic și se spală cu 100 ml de soluție apoasă saturată salină/mmol de triacetat, se usucă peste sulfat de magneziu, se filtrează și solvenții se îndepărtează prin evaporare rotativă. în continuare, produsele se purifică prin cromatografie pe coloană cu silicagel.

5.6- Diclor-2-(izopropilamino)-1-(beta-L-nbofuranozil)-1 H-benzimidazol

7,5 g (14,93 mmol) de 5,6-diclor-2-(izopropilamino)-1-(2,3,5-tri-O-acetil-befa-Lribofuranozil)-1 H-benzimidazol, 1,72 g (16,23 mmol) de carbonat de sodiu, 29 ml de apă, 100 ml de metanol și 100 ml de etanol se folosesc, conform cu procedura generală III. Produsul se purifică prin cromatografie pe coloană cu silicagel folosind un amestec 55:45 de diclormetammetanol pentru a obține 4,72 g (84%) de spumă albă. Rezultatele analitice sunt, conform cu structura desemnată.

Exemplul 40. Testul cu citomegalovirusul uman (HCMV)

Tulpina AD169 de HCMV se crește pe monostraturi de celule pulmonare din embrionul uman (celule MRC 5) în 96 de plăcuțe cu godeuri. După infectarea celulelor la o rată de aproximativ 0,01 particule virale infecțioase per celulă, compușii de testat se adaugă în godeurile selectate în șase concentrații diferite, fiecare de câte trei ori. Aceleași concentrații de compus se aplică, de asemenea, în godeuri conținând monostraturi de celule neinfectate pentru a testa citotoxicitatea compusului. Plăcuțele se incubează, timp de 5 zile și doza minimă de citotoxicitate se estimează din examinarea la microscop. IC50 pentru efectul antiviral se estimează din măsurători de ADN al HCMV în fiecare godeu prin spoturi și hibridizare specifică cantitativă a ADN similar cu metoda lui Gadler (Antimicrob. Agents Chemother. 1983, 24,370-374).

RO 117699 Β1

Exemplu	HCMV	MRC5
	IC 50	CC 50
Exemplul 3	0,06-0.23 μΜ	30 μΜ
Exemplul 4	0,91-2.5 μΜ	100 μΜ
Exemplul 5	0,03-0.05 μΜ	100 μΜ
Exemplul 10	1,1-1,3	100 μΜ
Exemplul 8	41 μΜ	100 μΜ
Exemplul 12	3,5-5,8 M	100 μΜ
Exemplul 34	0,75-0.85 μΜ	100 μΜ

1305

1310

Exemplul 41. Formulări pentru tablete

Următoarele formulări A și B se prepară prin granularea umedă a ingredientului cu

1315 o soluție de povidonă, urmată de adăugarea stearatului de magneziu și de comprimare. Formularea A

Componente	mg/tabletă	mg/tabletă
(a) Ingredient activ	250	250
(b) Lactoză B.P.	210	26
(c) Povidonă B.P.	15	9
(d) Amidon glicolat de sodiu	20	12
(e) Stearat de magneziu	5	3
TOTAL	500	300

Formularea B

1320

1325

Componente	mg/tabletă	mg/tabletă
(a) Ingredient activ	250	250
(b) Lactoză	150	-
(c) Avicel PH 101	60	26
(d) Povidonă B.P.	15	9
(e) Amidon glicolat de sodiu	20	12
(f) Stearat de magneziu	5	3
TOTAL	500	300

Formularea C

1330

1335

Componente	mg/tabletă
Ingredient activ	100
Lactoză	200
Amidon	50
Povidonă	5
Stearat de magneziu	4
TOTAL	359

1340

RO 117699 Β1

Următoarele formulări D și E se prepară prin comprimarea directă a ingredientelor amestecate. Lactoza folosită în formularea E este de tip comprimare directă (Dairy CrestZeparox”).

Formularea D

Componente	mg/tabletă
Ingredient activ	250
Amidon pregelatinizat NF15	150
TOTAL	400

Formularea E

Componente	mg/tabletă
Ingredient activ	250
Lactoză	150
Avicel	100
TOTAL	500

Formularea F (Formularea cu eliberare controlată)

Formularea se prepară prin granularea umedă a ingredientelor (de mai jos) cu o soluție de povidonă urmată de adăugarea stearatului de magneziu și de comprimare.

Componente	mg/tabletă
(a) Ingredient activ	500
(b) Hidroxipropilmetil celuloză (Methocel K4M Premium)	112
(c) Lactoză B.P.	53
(d) Povidonă B.P.C.	28
(e) Stearat de magneziu	7
TOTAL	700

Exemplul 42.

Formulări pentru capsule

Formularea A

O formulare petru capsule se prepară prin amestecarea ingredientelor din Formularea D din exemplul 1 de mai sus și prin umplerea capsulei tari din gelatină cu două părți. Formularea B (infra) se prepară într-o manieră similară.

Formularea B

Componente	mg/tabletă
(a) Ingredient activ	250
(b) Lactoză B.P.	143
(c) Amidon glicolat de sodiu	25
(d) Stearat de magneziu	2
TOTAL	420

RO 117699 Β1

Formularea C

Componente	mg/tabletă
(a) Ingredient activ	250
(b) Macrogol 4000 BP	350
TOTAL	600

1390

1395

Capsulele se prepară prin topirea macrogolului 4000 BP dispersând ingredientul activ în topitură și umplând cu topitură o capsulă tare din gelatină cu două părți.

Formularea D

Componente	mg/tabletă
Ingredient activ	250
Lecitină	100
Ulei de arahide	100
TOTAL	450

1400

Capsulele se prepară prin dispersarea ingredientului activ în lecitină și ulei de arahide și prin umplerea cu dispersie a unor capsule moi, elastice de gelatină.

Formularea E (Capsulă de eliberare controlată)

Următoarea formulare pentru capsule cu eliberare controlată se prepară prin extrudarea ingredientelor a,b și c utilizând un extruder, urmată de sferonizarea extrudatului și uscare. Pilulele uscate se acoperă apoi cu o membrană cu eliberare controlată (d) și umplu capsule tari de gelatină cu două părți.

1405

Componente	mg/tabletă
(a) Ingredient activ	250
(b) Celuloză microcristalină	125
(c) Lactoză B.P.	125
(d) Etiiceluloză	13
TOTAL	513

1410

1415

Exemplul 43.

Formulare injectabilă

Formulare A

Ingredient activ	0,200
Soluție de acid clorhidric 0,1M	q.s. la pH=4,0 până la 7,0
Soluție de hidroxid de sodiu 0,1M	q.s. la pH=4,0 până la 7,0
Apă sterilă	q.s. la 10 ml

1420

1425

Ingredientul activ se dizolvă în cea mai mare parte din apă (35 - 40°C) și pH-ul se ajustează, între 4,0 și 7,0 cu acidul dorhidric sau hidroxidul de sodiu după cum este adecvat.

Proba se aduce apoi la semn cu apă și se filtrează printr-un filtru steril cu micropori într-o fiolă sterilă de 10 ml din sticlă de culoarea chihlimbarului (tipul 1) și se sigilează cu dopuri și sigilii sterile.

RO 117699 Β1

Formularea Β

Ingredient activ	0,125 g
Tampon fosfat steril, fără pirogen, soluție tampon fosfat pH=7	q.s. până la 25 ml

Exemplul 44.

Injectare intramusculară

Ingredient activ	0,20 g
Alcool benzilic	0,10g
Glicofurol	1,45 g
Apă pentru injecție	q.s. până la 3,00 ml

Ingredientul activ se dizolvă în glicofurol. Alcoolul benzilic se adaugă și apoi, se dizolvă și se adaugă apă până la 3 ml. Amestecul se filtrează apoi printr-un filtru steril cu micropori și se sigilează în fiole sterile de 3 ml din sticlă de culoarea chihlimbarului (tip 1).

Exemplul 45.

Sirop

Ingredient activ	0,2500 g
Soluție de sorbitol	1,500 g
Glicerol	2,000 g
Benzoat de sodiu	0,0050 g
Aromă, Piersică 17.42.3169	0,0125 ml
Apă purificată	q.s. până la 5,0000 ml

Ingredientul activ se dizolvă într-un amestec de glicerol și cea mai mare parte din apa purificată. O soluție apoasă de benzoat de sodiu se adaugă la soluție, urmat de adăugarea soluției de sorbitol și în final, a aromei. Volumul se aduce la semn cu apă purificată și se amestecă bine.

Exemplul 46.

Supozitor

Componente	mg/supozitor
Ingredient activ (631 m)*	250
Grăsime solidă, BP (Witepsol H15-Dynamite Nobel)	1770
TOTAL	2020

‘Ingredientul activ se utilizează ca o pulbere în care cel puțin 90% din particule au un diametru de 631 m sau mai puțin.

O cincime din Witepsol H15 se topește, la maximum 45°C într-o etuvă cu manta de aburi. Ingredientul activ este cernut printr-o sită 1001 m și se adaugă la baza topită cu amestecare, folosind un silverson cu un capăt cu tăiș până când se realizează o dispersie omogenă. Menținând amestecul, la 45°C, Witepsolul H15 rămas se adaugă la suspensie și

RO 117699 Β1 se agită pentru a asigura amestecarea omogenă. întreaga suspensie se trece pe o sită de oțel inoxidabil 2501 m și, agitarea continuă, apoi se lasă să se răcească, la 40°C. La temperatura, de 38°C până la 40°C. 2,02 g din ameste se toarnă în tipare de plastic de 2 ml. Supozitoarele se lasă să se răcească, la temperatura camerei.

Exemplul 47.

Pesari

1475

Componente	mg/pesar
Ingredient activ (631 m)	250
Dextroză anhidră	380
Amidon din cartof	363
Stearat de magneziu	7
TOTAL	1000

1480

Ingredientele de mai sus se amestecă în mod direct și pesarii se prepară prin comprimarea directă a amestecului rezultat.

Claims (4)

1. Derivați de benzimidazol având structura chimică corespunzătoare formulei (I):

1490

1495 caracterizați prin aceea că, R este hidrogen, un atom de halogen, -NR¹R², în care R¹ și R² pot fi identici sau diferiți, și fiecare este ales independent dintre hidrogen, alchilțCȚ-Cg), cianalchilțCȚ-Ce), hidroxialchiKCȚ-Cg), haloalchil^-Cg), cicloalchil(C₃-C₇), alchi^C^Cg) cicloalchil(C₃-C₇), alchenil(C₂-C₆), cicloalchil(C₃-C₇)alchil(C₁-Cg), alchinil(C₂-C₆), arii, arilalchilfCȚ-Cg), heterociclicalchil(C.-C₆), -CO-alchilfC^Cg), sau R¹ R² împreună cu atomul de N la care sunt atașați formează un heterociclu cu 3, 4, 5 sau 6 atomi,precum și sărurile sau esterii lor acceptabili farmaceutic.

2. Derivați de benzimidazol, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că sunt sub formă de /3-anomer.

3. Derivați de benzimidazol, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că sunt sub formă de a-anomeri.

4. Derivați de benzimidazol, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că are structura chimică corespunzătoare formulei (Ib):

1500

1505

1510

OH OH (Ib)

1515

RO 117699 Β1

în care: R este un atom de halogen sau -NR¹R²,în care, R¹ este hidrogen șl R² este selectat dintre alchil(C₁-C₆)_l hidroxialchilțCȚ-CJ, cicloalchil(C₃-C₇), alchilțC^CJ 1520 cicloalchil(C₃-C₇), alchenil(C₂-C₆), alchinil(C₂-C₆), arii, aril-alchil sau R¹ și R², care pot fi identici sau diferiți, sunt ambii alchil(C.-C₆), sau R¹ R² împreună cu atomul de N la care sunt atașați formează un nucleu heterociclic cu 3, 4, 5 sau 6 atomi precum și sărurile sau esterii lor acceptabili farmaceutic. 5. Derivați de benzimidazol, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că, R 1525 este -NR¹R², în care, R¹ este hidrogen și R² este selectat dintre alchilfC^Cg), cicloalchil (C₃-C₇), și haloalchilțC^Cg), precum și sărurile sau esterii lor acceptabili farmaceutic. 6. Derivați de benzimidazol, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că, R este izopropilamino, izobutilamino, sec-butilamino, ciclopropilamino, ciclopentilamino sau 2fluor-1-metiletilamino și precum și sărurile sau esterii lor acceptabili farmaceutic. 1530 7. Derivați de benzimidazol, conform revendicării 1, caracterizați prin aceea că sunt aleși dintre 5,6-diclor-2-izopropilamino-1-(j3-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol, 2-ciclopropilamino-5,6-diclor-1-(/3-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol și 5,6-diclor-2-((2-fluor-1-metil-etilamino)-1-(/3-L-ribofuranozil)-1H-benzimidazol, precum și sărurile sau esterii lor acceptabili farmaceutic. 1535 8. Derivați de benzimidazol, conform revendicării 1 caracterizați prin aceea că, sărurile acceptabile farmaceutic sunt alese dintre sărurile acizilor carboxilici organici, acizilor sulfonici organici și ale acizilor anorganici. 9. Derivați de benzimidazol, conform revendicării 1 caracterizați prin aceea că, esterii acceptabili farmaceutic sunt selectați dintre esteri de acizi carboxilici, sulfonați, amino- 1540 acizi, fosfonați și mono- di- sau tri-fosfat. 10. Procedeu pentru prepararea derivaților de benzimidazol, cu formula I, caracterizat prin aceea că, cuprinde reacția unui compus având structura chimică corespunzătoare formulei II: 1545 ^cYry__{L 5} 1550 \—/ R³ R⁴

(IO în care: L este hidrogen și R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată, cu un agent de halogenare cum ar fi N-bromsuccinimida într-un solvent aprotic cum ar fi 1555 tetrahidrofuran sau 1,4-dioxan, încălzit, la 60-150°C, sau când L este, un atom sau o grupare care se scindează, adecvat, și R³, R⁴ și R⁵ sunt, așa cum s-a definit în revendicarea 1, cu o amină cu formula H-NR¹R², în care, R¹ și R² sunt,așa cum s-a definit în revendicarea 1, într-un solvent organic cum ar fi, etanol sau dimetilsulfoxid, urmată de, sau simultan efectuându-se una sau mai multe dintre următoarele etape:

1560 - îndepărtatarea oricărei grupe protectoare rămase,

- transformarea unui derivat cu formula I sau a unei forme protejate a acestuia într-o sare sau ester acceptabil farmaceutic al derivatului cu formula I sau o formă protejată a acestuia și când este necesar, separarea anomerilor a și β ai derivatului cu formula I sau ai unui derivat protejat al acestuia sau ai unor săruri și esteri acceptabili farmaceutic ai unui

1565 derivat cu formula I.

RO 117699 Β1

11. Procedeu pentru obținerea derivaților cu formula I, caracterizat prin aceea că, cuprinde reacția unui compus,având structura chimică corespunzătoare formulei

III:

1570

1575 în care: R este așa cum s-a definit în revendicarea 1, cu un compus cu formula IV:

1580

1585 în care: R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată și L¹ este o grupare scindabilă adecvată în poziția a sau β, eventual,în prezența unui acid Lewis cum ar fi, trimetilsilil triflatul într-un solvent aprotic cum ar fi, acetonitrilul, urmată de, sau simultan efectuându-se una sau mai multe dintre următoarele etape îndepărtarea oricărei grupări protectoare rămase, transformarea unui derivat cu formula I 1590 sau a unei forme protejate a acestuia într-o sare sau ester acceptabil al acestuia sau o formă protejată a acestuia și când este necesar, separarea anomerilor σ și β, ai derivaților cu formula I sau ai unui derivat protejat al acestora sau a unei sări sau a unui ester acceptabil farmaceutic al unui derivat cu formula I.

12. Intermediar pentru prepararea derivaților, definiți în revendicarea 1 ,prin procedeul 1595 definit în revendicările 10 sau 11, cu structura chimică corespunzătoare formulei II:

1600

R³ R⁴ (II)

1605 caracterizat prin aceea că, L este hidrogen sau un atom sau o grupare scindabilă aleasă dintre hidrogen, un atom de halogen, un organosulfat, organosulfonă, cum ar fi, metilsulfonă, metilsulfonat sau tosilat și R³, R⁴ și R⁵ sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată.^ .1610

13. Intermediar, conform revendicării 12, caracterizat prin aceea că,L este hidrogen sau atom de halogen șl R³, R⁴ și R^s sunt fiecare o grupare hidroxi sau hidroxi protejată, preferabil OC(O)CH₃.

RO 117699 Β1

14. Intermediar, conform revendicării 12, caracterizat prin aceea că, acesta este 1615 2-brom-5,6-diclor-1-(2,3,5-tri-O-acetil-^-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol.

15. Intermediar, conform revendicării 12, caracterizat prin aceea că, acesta este 2-brom-5,6-diclor-1-(/3-L-ribofuranozil)-1 H-benzimidazol.

16. Compoziție farmaceutică, caracterizată prin aceea că, cuprinde 0.01 ...0,1g derivat de benzimidazol cu formula I, sau sărurile sau esterii săi acceptabili farmaceutic și

1620 un purtător acceptabil farmaceutic.

17. Compoziție farmaceutică, conform revendicării 16, caracterizată prin aceea că se administrează în tratamentul sau profilaxia unei infecții virale alese dintre infecțiile cu herpesvirus, virusul herpes simplex 1, virusul herpes simplex 2, virusul varicelei și al zonei zoster, citomegalovirusul, virusul Epstein Barr, virusul herpesului uman 6 și virusul

1625 herpesului uman 7.