RO109338B1

RO109338B1 - Derivati de o-metil ai azitromicinei a,procedeu de preparare a acestora si compus intermediar

Info

Publication number: RO109338B1
Application number: RO148016A
Authority: RO
Inventors: Kobrehel Gabrijela; Djokic Slobodan; Lazarevski Gorjana
Original assignee: Pliva Pharm & Chem Works
Priority date: 1990-07-18
Filing date: 1991-07-16
Publication date: 1995-01-30
Also published as: ES2081397T3; CZ280640B6; PL291130A1; CN1059728A; CA2046956C; ATE129715T1; HUT62307A; JPH05132497A; RU2045533C1; DE69114198T2; DK0467331T3; HRP920491A2; EP0467331B1; GR3018330T3; SK279075B6; HU211659A9; HUT59935A; HU221803B1; SI9011409A; HU9202619D0

Description

Invenția de față se referă la derivați de O-metil ai azitromicinei A și la un procedeu de obținere a acestora și compus intermediar.

Deci prezenta invenție conține noi antibiotice macrolide semisistemice ale seriei azalidei, în mod particular derivații O-metil ai azitromicinei A și la sărurile lor prin adiție acceptate din punct de vedere farmaceutic; un procedeu de realizare și intermediarii pentru prepararea lor, precum și utilizarea acestora la prepararea medicamentelor, care medicamente sunt în particular indicate ca agenți antimicrobieni.

Eritromicina A este un antibiotic macrolid. a cărui structură este caracterizată printr-un inel agliconic cu 14 membri (14 maxime), posedând o grupare cetonică în piziția 9 a carbonului (Brevet US 2653899/1953); până acum a fost cunoscut antibioticul macrolid de bază (conducător) în tratamentul infecțiilor umane. Totuși, în mediu acid este ușor transformată în anhidroeritromicină, care este metabolitul inactiv C-6/C-12 al structurii spirocetalice (Kurath P. și alții, Experientia 1971, 27 362). Se cunoaște faptul că spirociclizarea eritromicinei A este inhibată cu succes cu ajutorul unei transfomări chimice a cetonei C-9 după obținerea oximei C-9 (Djokic S. și colaboratorii. Tetrahedron Lett., 1967, 1945) sau aminelor C-9 (R) și C-9 (S) (Egan R.C. și colaboratorii, J. Org. Chem., 1974, 39, 2492), sau prin eliminarea cetonei C-9 după desfacerea (expansiunea) inelului agliconic (Brevet US 4328334; 5/1982).

Astfel, rearanjarea Beckmann a oximei eritromicinei A, urmată de reducerea imino eterului obținut (Djokic S. și colaboratorii, J. Chem. Soc. Parkin Trans 1, 1986, 1881) duce la obținerea ll-aza-10deoxo-10-dihidroeritromicinei A (9deoxo-9a-aza-9a-homo-eritromicina A), care are la bază un antibiotic macrolid cu maxime a seriilor azalidei.

După metilarea noii grupări amino secundare introduse în inelul agliconic, cu fonnaldehidă în prezența acidului formic prin procedeul modificat al lui EschweilerClark (Kebrehel) G. și Djokic S., BE brevet 892357; 7/1982), sau după protejarea preliminară a grupărilor amino printr-o transformare a lor în N-oxizii corespunzători, urmată de alchilarea și reducerea N-oxizilor obținuți, (Brevet US 4474768; 10/1984) se obține N-metil-1 l-aza-10-deoxo-10-dihidroeritromicina A (9-deoxo-9a-aza-9a-metil-9ahomoeritromicina A) (Nomenclatura IUPAC în Chimia Organică. 1979. 68-70. 459. 500-503). care a fost testată clinic sub numele impropriu de azitromicină. în comparație cu antibioticul de bază, azitromicina prezintă suplimentar, față de o stabilitate îmbunătățită în mediu acid, o activitate îmbunătățită in vitro față de microorganismele gama-negative și o concentrație semnificativ mai mare în țesuturi, și s-a testat chiar posibilitatea unei doze de o zi (Ratshema J. și colaboratorii, Antimicrob. Agents Chemother., 1987, 31, 1939).

Spirociclizarea C-6/C-12 a eritromicinei A este inhibată cu succes cu ajutorul Ometilării grupării hidroxilice în poziția C-6 a inelului agliconic (brevet SUA 4331803; 5/1982). Reacția eritromicinei A cu cloroformiatul de benzii, urmată de metilarea derivatului 2’-0,3’-N-bis(benziloxicarbonil) obținut, după eliminarea grupărilor de protecție în pozițiile 2’ și 3’ și N-metilarea grupării 3’-metilamino în condiții reductive, conduce la obținerea, suplimentar față de O-metileritromicina A, a unei semnificative cantități de 11-O-metil și 6.11-di-O-metileritromicină A (Morimeto S. și colaboratorii, J-Antibiotica 1984, 37, 187). O selectivitate mai ridicată este atinsă prin oximarea preliminară a cetonelor cu 9 atomi de carbon și O-metilarea derivaților benziloxiimina corespunzători substituiți sau nesubstituiți (brevet SUA

4680368; 7/1987). 6-O-metiIeritromicina A a fost testată sub numele impropriu de cloritromicină. în comparație cu eritromicina A, cloritromicină prezintă o activitate in vitro îmbunătățită față de microorganismele gram-pozitive (Kirist H.A. și colaboratorii, Agenți antihidrobieni și che moterapie, 1989. 1419).

Căutările titularilor prezentei invenții, nu au condus la existența O-metil derivaților eritromicinei A, în literatura de specialitate. 5 Prin urmare, primul obiectiv al prezentei invenții constă în derivații O-metilat și azitromicinei A. de formula I:

(I) în care, Ia reprezintă R, = R, = CO₂CH₂C₆H„ R,=CH„ R₄ = T, = H; lb reprezintă R, = R₂ = CO₂CH₂C₆H₅; R, = R₄ - CH,, Rj - H; Ic reprezintă R, - R₂= CO₂CH₂C₆H₅, R, = R, = H, R₄ = CH,; Id reprezintă R, = R₂ = CO₂CH₂-C₆H₅, R, = R₄ = R_s - CH,; Ie reprezintă R, -- R, R₄ = R₅ = H, R, = CH,; If reprezintă R, = R, = R, = H, R, = R₄ = CH,; Ig reprezintă R] = R₂ = R,= R_s = H, R₄ = CH,; Ih reprezintă R, - R, = H, R, - R₄ - R_s= CH,; Ii reprezintă R, = R₄ = R, = H; R₂ = R, = CH,; Ij reprezintă R, - R, H, R, = R, = R₄ = CH,; Ik reprezintă R,

R; = R₅ = H, R₂ - R₄ = CH,; II reprezintă R_l = H, R₂ = R, = R₄ = R. = CH, și săru10 rile lor acceptabile din punct de vedere farmaceutic rezultate prin adiție de acid.

Un alt obiectiv, al prezentei invenții, este de a furniza un procedeu pentru prepararea C-metil derivaților azitromicinei A de 15 formula I și a sărurilor sale rezultate prin adiție de acid acceptate din punct de vedere farmaceutic, în care, azitromicină și derivații săi dihidrați. (Djokic S. și colaboratorii,

J. Chem. Research (S), 1988, 152-153; (M) 20 1988 1239-12621), de formula II:

(Π) în care, Ila reprezintă R, = H, R₂ = CH,, reacționează cu cloroformiatul de benzii în prezența unui exces de bază corespunzătoare, de exemplu, sodiu hidrogenocarbonat, în mediu de solvent inert de reacție, de exemplu, benzen, la o temperatură de la 25 la 60C, timp de la 3 la 24 h, depinzând de temperatura de reacție, urmată de O-metilarea grurpărilor hidroxi în pozițiile C-6, C-1 1 și C-4” ale intermediarului 2’-0,3‘-N-bis-(benziloxicarbonil)-N-dimetil-azitromicină A de formula II, în care Ilb reprezintă R) = R, = CCRCH₂C₆H,. cu un execes molar de la I la 18 agent corespunzător de metilare, de e.xemplu iodură de metil, dimetilsulfat. metilmetansulfonat sau metil-/?-toluensulfonat. în prezența unei baze corespunzătoare, de exemplu hidrură de sodiu, hidroxidul de potasiu apos sau hidroxidul de sodiu. în solvent corespunzător, de exemplu, dimetilsulfoxid sau N,N-dimetilformamidă, sau amestecurile lor cu un solvent inert de reacție, de exemplu, tetrahidrofuran, acetonitril, acetat de etil, 1,2dimetiloxietan și la o temperatură de la 0°C la temperatura camerei timp de la 3 la 30 h. obținându-se amestecul de Ometil-2'-6,3’-N-bis-(benziloxicarbonil)-Ndimetil-azitromicină A de formula I, în care Ia reprezintă R, = R₂ = CO₂CH₂C₆H₅. R, = CH,. R₄ = R, = H; Ib reprezintă R, = R, = CO₂CH₂C₆H₅, R, = R₄ = CH,. R_s = H. Ic reprezintă R, = R, = CO₂CH₂C₆H„ R, = R, = H, R₄ = CH,; Id reprezintă R, = R₂ CO₂CH₂C₆H₅, R, = R₄= R, = CH,, care este facultativ supusă la: A) separarea pe coloană cu silicagel (Silicagel 60, Merck Co., 70-230 mesh) cu amestec de solvent CH,CL/CH, OH/NH₄OH (90:9:0,5), obținându-se compușii omogeni cromatografie (Ia) ai unui R, 0,660, (Ib) ai unui R_f 0,811, (Ic) și a unui R_f 0,043 și (Id) ai unui R_f 0,881, care sunt apoi supuși la eliminarea grupărilor de protecție benziloxicarbonilice în poziția 2’ și 3' prin hidrogenoliză în soluție de alcool inferior, de exemplu, metanol sau etanol, în prezența unui catalizator, de exemplu, negru de platină pe cărbune, sau 5 platină pe cărbune, și în atmosefră de hidrogen la o presiune de 1...20 bari sub agitare a amestecului de reacție, timp de

2... 10 h. la temperatura camerei, obținânduse după filtrarea catalizatorului și izolarea 10 produsului cu mijloacele convenționale de extracție, cu gradient de /?H (/?H=5.0 și /?H=9.0), din apă, cu solvent hidrofobic corespunzător, de exemplu, cloroform, diclormetan, acetat de etil etc. derivații ΟΙ 5 metil-N-dimetil-azitromicina a. de formula

I. în care Ic reprezintă R, = R, = R₄ = R- H. R, = CH,. If reprezintă R] = R, = R, = H. R, = R₄ = CH,. Ig reprezintă R, = R, = R, = R, = H, R₄ = CH,. Ih reprezintă R, 20 = R₂ = H. R, = R₄ = R₅ = CH,. care este apoi supus la N-metilare reductivă a grupării 3’-aminometil cu 1 la 3 echivalenți de formaldehidă (37%) în prezența unei cantități egale sau duble de acid formic (9825 100%), sau a unei alte surse de hidrogen, în solvent inert de reacție ales din cadrul hidrocarburilor clorurate cum ar fi, de exemplu, cloroformul, sau ales din cadrul alcoolilor inferiori, cum ar fi, de exemplu, 30 etanolul sau metanol, cetonelor inferioare, cum ar fi, acetona, la temperatura de reflux a amestecului de reacție cu timpul de la 2 la 8 h. obținându-se după izolarea produsului prin mijloacele convenționale de extrac35 ție cu gradient de /?H (pH=5,0 și pH=9,0) derivații O-metil-azitromicinei de formula

I, în care: If reprezintă R, = R₄ = R₅ = H, R, = R, = CH,; Ij reprezintă R, = R, = H, R₂ = R, = R₄ - CH,; Ik reprezintă R, = R, 40 = R₅ = H, R₂ = R₄ = CH,; II reprezintă R_t = H. R₂ = R, = R₄ = R₅ = CH, sau B) eliminarea grupării protectoare benziloxicarbonil din pozițiile 2’ și 3’ prin hidrogenoliză, așa cum s-a descris în faza (A), 45 obținându-se un amestec de 6-O-metil-(Ie),

6,1 1-di-O-metil-(If), 1 1 -O-metil-(Ig) și

6,1 1,4-tri-O-metil-N-dimetilazitromicină A(Ih), care este supusă N-metilării reductive cu formaldehidă (37%) în prezența acidului t'ormic (98-100%) sau a unei alte surse de hidrogen, așa cum se descrie în faza (A), obținându-se un amestec dc 6-O-metil-(li), 6.1I-di-O-metil(Ij), 11-O-metiI-(Ik) și 6. II, 4-tri-0metilazitromicină A (II), care este supusă separării pe coloană cu silicagel cu sistem de solvent CH.CI7CH ,OH/NH₄OH (90:900,5), obținându-se un produs omogen din punct dc vedere cromatografie (TLC, același sistem de solvenți) reprezentat de derivații l-metil și azitromicinei A(Ii) ai unui Rf 0.346. (ij) și unui Rf 0,393, (Ik) a unui Rf 0.428 și (II) ai unui Rf 0,456.

Sărurile rezultate prin adiție de compuși acceptați din punct de vedere farmaceutic, ale compușilor de formula I, pot fi obținute prin reacționarea derivaților Ometil ai azitromicinei A (I) cu cel puțin o cantitate echimolară de acid anorganic sau organic corespunzător, ales dintre: acidul clorhidric. acidul iodhidric, acidul sulfuric, acidul fosforic, acidul acetic, acidul propionic. acidul trifluoracetic, acidul maloic, acidul citric, acidul etilsuccinic, acidul succinic, acidul metansulfonic, acidul benzensulfonic, acidul paratoluensulfonic, acidul laurilsulfonic și ai altor acizi, în mediu de solvent inert de reacție. Sărurile de adiție sunt izolate prin filtrare dacă ele sunt insolubile în solventul de reacție inert în care s-au lucrat, sau prin precipitare cu non-solvenți, cel mai des prin procedeul de liofilizare.

Derivații O-metil ai azitromicinei A de formulele (li-II) și sărurile lor acceptabile din punct de vedere farmaceutic, rezultate prin adiție au o activitate antimicrobiană, potentă. Activitatea antibacteriană preliminară in vitro a t-O-metilazitromicinei A (Ii), a fost determinată pe o serie de bacterii gram-pozitive și gram-negative și izolate clinic în comparație cu eritromicina A. Stabilirea a fost efectuată prin metoda diluției în tub. Pentru investigații s-au utilizat culturile de 24 h cu bulion de creier și inimă ale tulpinilor standard și tulpinilor proaspăt izolate dintr-o probă clinică. Rezultatele sunt exprimate ca și concentrații inhibitoare minime sau concentrații bactericide (MIC și MBC respectiv, în micro g/1) și sunt prezentate în tabelele 1 și 2, unde se poate vedea că 6-O-metil-azitromicina A prezintă o activitate oarecum îmbunătățită asupra tulpinilor investigate în comparație cu eritromicina A.

In tabelul 3 sunt prezentate testele in vitro ale 6-O-mctil-(li)-6,1 I -di-O-metiI-(I j). 1 I -O-metil-(Ik) și 6.1 1,4-tri-O-metil-azitromicină A (II). comparativ cu azitromicina. Concentrațiile minime inhibitorii (MIC; micrograme/ml) determinate pe o serie de tulpini standard, arată că 6-0-metil-azitromicina A (Ii) este de două ori mai activă pe Bacilhts substilis NCTC 8241 și Sarcina Iuțea ATCC 9341, și de patru ori mai activă pe Micrococcus flavtis ATCC 6538 P față de azitromicină. O activitate semnificativ mai ridicată a fost prezentată de către I I -O-metil-azitromicina A (Ik). Mai precis, majoritatea tulpinilor bacteriene investigate au fost de 2 la 4 ori mai sensibile comparativ cu antibioticul de origine (părinte).

în continuare un obiectiv al prezentei invenții este să asigure medicamentele cuprinzând doza efectivă și acceptabilă din punct de vedere fiziologic de compuși noi, conform prezentei invenții. Compușii (Ii...II) cât și sărurile acceptabile din punct de vedere farmaceutic, pot fi utilizate ca agenți terapeutici pentru tratarea infecțiilor umane sau animale cauzate de bacteriile gram-negative, microplasme sau bacterii patogene, care sunt sensibile la compușii (Ii...II). Astfel, compușii (Ii...II) și sărurile lor prin adiție acceptate din punct de vedere farmaceutic, pot fi administrate oral sau

10 parenteral. de exemplu, în forma a.c. sau cordanță cu practica farmaceutică obișnuii.m. ca injecții, tablete, capsule, pulberi și tă.

alte forme, prezentate și formulate în conTabelul 1

Activitatea antibacteriană in vitro a 6-O-metil-a~itroinicinei A (Ii) în comparație cu eritromicina A

Orgnism testat	Eritromicina A	6-O-metil-azitromicina A (Ii)
MIC	MBC	MIC	MBC
Staficlococcus aureus ATCC 6538-F	0,2	0,8	0.2	0.4
Staphilococcus faecalis ATCC-8043	0,2	0,8	0.2	0.4
Sarcina lulea ATCC-9341	0.2	0,4	0.1	0.2
Esclierichia coli ATCC-10536	50	>50	1.6	3.2
Elebsiella pneumoniae NCTC - 10499	>50	>50	12,5	50
Pseudomonas aeruginosa NCTC - 10490	>50	>50	>50	>50

Substrat: bulion de creier și inimă

Incubație: 24 h. 37C

MIC: Concentrația inhibitoare minimă (micrograme/ml)

MBC: Concentrația bactericidă minimă (micrograme/ml).

Tabelul 2

Activitatea antibacteriană in vitro a 6-O-metil-azitromicinei Afli) în comparație cu eritromicina A față de izolate clinice

Organismul testat	Eritromicina A	6-O-metil-azitromicina A (Ii)
MIC	MBC	MIC	MBC
Staphilococcus aureus 10099	0,1	0,2	0,05	0,1
Staphilococcus saprophyticus 3947	0,4	0,8	0,4	0,8
Streptococcus fecalis 10390	0,8	3,1	0,8	3,1
Staphylococcus aureus 10097	0.1	0,4	0,05	0,4
Streptococcus pneumoniae 405	0,1	0,4	0,025	0,1
Hemophyhts inflitenzae 4028	0,05	0,2	0,05	0,2

Substrat bulion de creier și inimă; incubație: 24 h la 37”C MIC: concentrația inhibitoare minimă (micrograme/ml) MBC: concentrație bactericidă minimă (micrograme/ml).

Tabelul 3

Activitatea antibacteriană in vitro la derivații noi O-metilazitromicină A în comparație cu azitromicina

Tulpina de testat	MIC (micrograme pe ml)
(Ha)	(li)	dj)	(Ik)	(ID
Micrococcus flavus ATCC 6538P	1,56	0,39	1,56	8,2	3,125
Corxnebacterium xerosis NCTC 9755	6.25	12.5	12.5	1.56	25,0
Staphylococcus attreus ATCC 10240	0.39	0,79	0.78	0.1	3,125
Bacillus subtilis NCTC 8241	0.39	0.2	0,78	0,1	3,125
Bacillus pumilus NCTC 8241	0.2	0.2	0,78	0,05	3,125
Bacillus cereus NCTC 10320	0.39	0.78	1.56	0,1	3,125
Sarcina Iuțea ATCC 9341	0.05	0,0125	0,05	0.0125	0,03
Staphylococcus epiderndia ATCC 12228	0.1	0.1	1,56	0,1	3,125
Staphylococcus faecalis ATCC 8043	0,05	0.05	0,78	0,05	0,78
Pseudomonas aeruginosa NCTC 10490	100,0	100,0	100,0	25,0	200,0
Escherichia coli ATCC 10536	0,78	3,125	6,25	0,78	6,25

Substrat: bulion de creier și inimă ', incubație 24-18 h la 37C. Inoculum: 10' - IO'⁶ cfu/ml.

Invenția de față prezintă avantajul obținerii unor derivați ai azitromicinei A, utilizați la prepararea medicamentelor, având activitatea antimicrobiană mărită.

Se dau. în continuare, exemple de reali- 5 zare a invenției.

Exemplul 1. 2’-0,3’-N-bis(benziloxicarbonil)-N-dimetil-azitromicină A (Ilb)

Metoda A. După audăugarea hidrogenocarbonatului de sodiu (48 g) într-o 10 soluție de 30 g (0,38 moli) azitromicin dihidrat în 140 ml de benzen anhidru, amestecul de reacție se încălzește sub agitare la 55-60°C, după care se adaugă în picături gradat pe parcursul a 1 h, 75 15 ml (89,63 g; 0,53 mol) de benzii cloroformiat. Amestecul de reacție se menține sub agitare la această temperatură, timp de 3 h și se lasă să stea peste noapte la tempe ratura camerei. Suspensia de benzen se extrage de 3 ori cu câte 150 ml acid clorhidric 0,25 n, soluția benzenică obținută se usucă pe clorură de calciu și se evaporă la presiune redusă, în final obținându-se un ulei subțire. Reziduul obținut se adaugă picătură cu picătură sub agitare completă în 500 ml de eter de petrol răcit, suspensia amestecului de reacție se agită sub răcire timp de 4 h, precipitatul format se filtrează și se spală cu eter de petrol, se usucă, obținându-se 27,5 g (71,6%) de produs din titlu, iar după recristalizarea din amestec de eter/eter de petrol se obține un produs cu punctul de topire de 148...154°C EI-MS m/s 1003 (M⁺).

TLC, CH₂C1₂/CH,OH/NH₄OH(90:90:0,5) Rf

0,704

IR (CHC1,): 3510, 3350, 2950, 1740, 1690,

1605, 1450, 1380. 1330. 1290, 1255, 1160. 1115, 1055. 995 cm'¹ 'H NMR (CDCI,): 2.301 (3H. 9a-NCH,), 2,844, 2,802 (3H. 3'-NCH,). 3,397 (3H, 3-OCH,).

^I!CNMR(CDCI₃): 177.260(C-l). 100.115 (C-Γ). 95,149 (C-Γ), 75.028 (C-6), 74,607 (C-l 2), 69.4l5(C-9). 64.617 (C10), 36.964 (9a-HCH, și 26.016 (C-8) ppm.

Metoda B. După adăugarea hidrogenocarbonatului de sodiu (22g). sub agitare într-o soluție de 30 ml (0,21 mol) benzii clorformiat în 50 ml de benzen uscat, se adaugă gradat pe parcursul a 3 h 15 g (0.019 mol) azitromicină. In momentul în care s-au adăugat aproximativ 3/4 din cantitatea totală de azitromicină. se mai adaugă încă o cantitate de 15 ml (0.106 mol) de cloroformiat de benzii. Amestecul de reacție de ține sub agitare timp de 24 h la temperatura camerei, se filtrează, se extrage filtratul de 3 ori cu câte 150 ml de soluție de acid clorhidric. 0.25N. după care se usucă pe sulfat de magneziu și se evaporă la presiune redusă. După adăugarea eterului de petrol, precipită 2’-0,3’bis (benziloxicarbonil)-N-dimetilazitromicina A, brută. Precipitatul format se filtrează și imediat se suspendă sub agitare în 50 ml de eter rece. Amestecul suspendat se agită la temperatura camerei timp de I h, apoi precitptatul se filtrează, se spală și se usucă, obținându-se 8,67 g (43,09%) produs omogen (TLC) de substanță identificată după caracteristicile fizico-chimice ca fiind cea din metoda A).

Exemplul. 2. O-metilarea 2’-0,3’-N-bis (benziloxicarbonH)-N-dimetil-azitromicinei A (Ia), (Ib), (Ic) și (Id)

Metoda A. După adăugarea iodurii de metil (6 ml, 0,106 mol) într-o soluție de produs obținut în exemplul 1 (6 g 0,006 mol), în 64 ml de dimetilsulfoxid și tetrahidrofuran (1:1), se adaugă 6,6 ml (0,106 mol) iodură de metil și apoi gradat pe par14 cursul a 4 h, la temperatura camerei. 2.4 g (aproximativ 0,06 mol) de NaH (55-60%) în ulei. Suspensia amestecului de reacție se agită încă 5 h. se lasă să stea peste noapte, se toarnă în soluție maturată de clorură de sodiu (100 ml) și se extrage de două ori cu câte 100 ml de acetat de etil. Extractele organice combinate se spală de trei ori cu câte 10 mi de soluție saturată de clorură de sodiu, se usucă pe carbonat de potasiu și se evaporă obținându-se 6.35 g de produs brut, care se supune la hidrogenoliză în concordanță cu procedeu] expus în exemplul 9 sau, facultativ, la purificarea prin cromatografiere pe coloană de silicagel (Silicagel Marck 60, 70-230 mesh. utilizând un sistem de solvenți compus din CH.CI,/ CH,OH/NH₄CH (90:9:1.5).

Din 1.5 g de produs brut se obțin, după concentrarea și evaporarea fracțiunilor de Rf 0,881 (TLC: identic sistemul de solvenți). 0,12 g de 2’-0,3’N-/jz5 (benziloxicarboxil)-N-metil-6,1 1, 4-tri-O-metil-azitromicină A (Id) pură, cu următoarele date cromatografice.

'HNMR(CDC1,): 2,246 (3H,9a-NCH,), 2,831,2,798 (3H, 3’-NCH)„ 3,367 (3H. 3OCH,), 3,305 (3H, 6-OMe), 3,465 (3H.4CCH,), și 3,485 (3H, 11-OCH,) ppm.

¹³C NMR(CDC1,): 176,975 (C-l),

69,920 (C-9), 35-967 (9a-NCH,), 79.1 (C6), 52,8(6-OCH₃), 89,0 (C-l 1), 62.0 (11OCH„ 87,35 (C-4), 61,131 (4-OCH,), 49.176 și 49,526 (3-OCH, și 36,457 (3’NCH); ppm.

După combinarea și evaporarea fracțiunilor de Rf 0,843, rezultă 0,1 g de compus pur 2’-0,3’-N-bis(benziloxicarbonil)-Ndimetil-l 1-O- metilazitromicină A (10), având următoarele date cromatografice EIMS m/s 1016 (M⁺)

Ή NMR (CDCI,): 2,239 (3H, 9a-NCH₃), 2,805, 2,847 (3H-3’NCH,), 3,347 (3H, 3OCH,) și 3,573 (3H, 11-OCH,) ppm.

După evaporarea fracțiunilor Rf 0,316 a 2’-3-0,3-N-bis(benziloxicarbonil)-N-dime109338 til-6,1 1-di-O-metil-azitromicină A (Ib) se obține:

IR (CHC1J: 3570, 3490, 1740, 1690, 1455, 1380. 1330, 1295, 1260, 1200, 1160, 1120, 1095. 1055, 1005, 990. 980 cm¹;

Ή NMH (ODCL,): 2.292 (3H.9aNCH,), 2.838. 2,795 (3H. 3’-NCH,), 3,380 (6H. 6-OCH, și 3-OCH₃) și 3, 488 (3H. 1 I -OCHj ppm.

^|!C NMR (CDCL,): 177.939 (C-l). 69.471 (C-9). 35.271 (9a-NCH,). 88.994 (C-ll). 52.892 (6-OCH,). 61.09 (IIOCH,). 36.851 (3'-NCH,). și 49.549.

49.154 (3”-OCH_;) ppm.

După concentrarea și evaporarea la sec a fracțiunilor Rf 0.661, 0,384 a 2’-0.3’-Nbis( benzi loxicarbonil-)-N-di metil-6-Ometil-azitromicina A (Ia) se obține: ElMS m/s 1016 (M⁺).

IR (CHC1,): 3570. 3500. 2960. 2920, 1740. 1690. 1450. 1380. 1325. 1290, 1255. 1200. 1160. 1120. 1050. 995 cm¹.

Ή NMR (CDC1,): 2.288 (3H, 9aNCH,), 2,805. 2.847 (3H-3’-NCH,), 3,380 (6H, 6-OCH, și 3-OCH,) ppm.

C NHR (CDC1,): 177.764 (C-l).

69.850 (C-9), 34,851 (9a-NCH_?), 78.106 (C-6), 74,661 (C-ll), 73.873 (C-12), și 52,822 (6-O-CH,) ppm.

Metoda B. Intr-o soluție de produs obținut, conform exemplului I (6 g), în 60 ml de dimetilsulfoxid și tetrahidrofuran (1:1) se adaugă, sub agitare, gradat, timp de 2 h la temperatura de 0-5°C metil iodură (3 ml) și 2.1 g de NaH (55-60%). Amestecul de reacție se agită timp de 1 h la 0-5C, suspensia se toarnă în soluție saturată de clorură de sodiu și se extrage cu acetat de etil. Extractele organice se spală cu o soluție saturată de clorură de sodiu, se usucă pe carbonat de potasiu și se evaporă la sec cu ajutorul presiunii reduse. Produsul obținut (2g) se supune purificării cu ajutorul cromatografiei pe coloană cu silicagel, utilizând sistemul de solvenți CH₂C1₂/CH,OH/NH₄OH (90:9:1,5) și obținându-se 0,89 g de 6-O-metil derivat (Ia), 0,11 g de 6,11 -di-O-metiI derivat (Ib) și 0.48 g de derivat I l-O-metil (Ic).

Metoda C. După adăugarea iodurii de metil (6 ml) în soluție de produs obținut în exemplul 1 (6 g) în 60 ml de N.N-dimetilformamidă, se adaugă sub agitare, gradat, pe parcursul a 2 h, la temperatura camerei.

2.4 g de NaOH (55-60%). Amestecul se agită încă timp de 2 h la temperatura amintită și se lasă să stea peste noapte. După izolarea produsului în concordanță cu procesul descris la metoda A), se obțin 4,54 g de amestec de 6.11-di-O-metil derivat (Ib) și 6.1 1,4-tri-0-metil derivat (Id). Amestecul se supune hidrogenolizei în metanol (60 ml) în prezența unui tampon NaOAc/HOAc (/?H=5) și paladiu pe cărbune (2 g; 5%) drept catalizator, conform procedeului descris în exemplul 3.

După izolarea produsului și evaporarea solventului la pH=9,0 izolează un amestec de 2,33 g de 6,1 1-di-O-metil-N-dimetilazitromicină A (If) cu Rf 0,220 și 6,11-4tri-O-metil-N-dimetil azitromicina A (Ih) de Rf 0,263, care după separarea pe coloană cu silicagel în sistemul de solvent CH₂C1₂/CH,OH/NH₄OH (90:91:1), dă produsul omogen cromatografie pur (If) și (Ih).

Exemplul 3. 6-O-metil-N-dimetil-az.itromicina A (le)

2,0 g (0,002 mol) de 2’-O,3’-N-/%s-(benzil-oxicarbonil)-N-6-0-metil-azitromicinaA (Ia) se dizolvă în 30 ml de etanol, 10 ml apă, care conține 0,185 ml de acid acetic și 0,3 g de acetat de sodiu (pH=5) și 0,57 g de paladiu pe cărbune (10%) care deja au fost introduse în vas. Amestecul de reacție se agită sub presiune de hidrogen (10 bari) timp de 10 h, catalizatorul se filtrează și se evaporă la sec. Reziduul se dizolvă în CHCl,(30 ml) și după adăugarea de apă (30 ml) și ajustarea pH-ului amestecului de reacție cu acid clorhidric IN la pH=5.

straturile se separă și stratul apoi se extrage de două ori cu CHCI,(fiecare extracție cu câte 15 ml).

La amestecul de reacție se adaugă cloroform (30 ml). /?H-ul se ajustează la 9,0 prin agitare cu soluție 2N de hidroxid de sodiu. Straturile se separă, și stratul apos se extrage din nou de două ori cu cloroform (de fiecare dată cu câte 15 ml). Extractele organice combinate (/>H=9.0) se usucă pe carbonat de potasiu, se filtrează și se evaporă obținându-se 1.03 g (70%) de produs din titlu: EI-RS m/s 748 TLC. Rf 0.182

IR (CHCL.): 3670. 3500. 2960. 2920. 1725. 1460. 1375. 1345. 1320. 1280. 1260. 1165. 1120. 1085. 1045. 1010. 995, 900 cm¹.

Ή NMR(CDCI,): 2.278 (3H, 9a-NCH,), 2,406 (3H, 3’-NCH,). 3.312 (3H. 3OCH₂). 3.384 (3H.6-OCH,) ppm.

Exemplul. 4. 5,11 .-di-O-metil-N-dimetil-azit romi ci na A (If) în concordanță cu procedeul din cadrul exemplului 3, din 0.165 g (0,16 mol) de 2^?-0,3’-N-Zris-(benziloxicarbonil)-N-dimetil-6,11-di-O-metil-azitromicina A (Ib) prin hidrogenoliza cu paladiu carbon (10%) în etanol în prezența acetatului de sodiu/acid acetic ca tampon, de /?H=5. se obțin 0,093 g (76,2%) de produs cromatografic pur, produs din titlu, cu punctul de topire de 98...98°C.

EI-MS m/s 762

TLC, Rf 0.331

Ή NMR (CDCI,): 2.265 (3H, 9a-CH,), 2.422 (3H. 3’-NCH,). 3,312 (3H. 3OCH,). 3,574 (3H, 6-OCH,) și 3,521 (3H, I 1-OCH,) ppm.

^L,C NMR (CDCI,): 177,7 (C-l). 65-9 (C-9), 36,8 (9-a-NCH,), 79,3 (C-6). 88,9 (C-ll), 52,7 (6-OCH,) 62,0 (11-OCH,),

33,1 (3’-NCH,) și 49,7 (3-OCH,) ppm.

Exemplul 5. 11-O-metil-N-dimetilazitromicina A (Ig) în concordanță cu procedeul descris în cadrul exemplului 3. din 0,250 g (0,246 mol) de 2’-0,3’-N-/?/.s-(benziloxicarboniI)N-dimetil-1 l-O-metil-azitromicină A (Ic) cu ajutorul hidrogenolizei cu paladiu pe cărbune (10%) în prezența soluției tampon de acetat de sodiu/acid acetic (/?H=5,0) se obțin 0,168 g (89,5%) de 11 -O-metil-Ndimetil-azitromicină A (Ig).

TLC, Rf 0,244

IR (CDCI,): 3500, 2970, 2940, 1736, 1460. 1380, I 165 cm¹.

Ή NMR (CDCI,): 2,44 (3H, 9a-HCH,). 2.458 (3H. 3’-NCH,). 3.336 (3H, 3-OCH,) și 3,590 (3H. 1 1-OCH,) ppm.

^L'C NMR (CDCI,): 177.6 (C-l), 70,7 (C9), 35.8 (9a-NCH,). 74.4 (C-6). 85.0 (C11), 62.7(1 1-OCH,). 36.7(3’-NCH,) și 49.4 (3-OCH,) ppm.

Exemplul 6. 6-O-metil-azitromicina A (H)

Metoda A. într-o soluție de 0,78 g (0,00104 mol) de 6-O-metil-N-dimetilazitromicina A (Ia) în cloroform (50 ml) se adaugă 0,085 ml (0,001 13 mol) de formaldehidă (37%) și 0,078 ml (0,00203 mol) acid formic (98...100%). Amestecul de reacție se agită la reflux timp de 8 h, se răcește la temperatura camerei, se toarnă în 50 ml de apă. După reglarea /?H-ului amestecului de reacție, cu acid clorhidric IN la pH=5, straturile se separă și stratul apos se extrage de două ori cu cloroform (de fiecare dată cu câte 20 ml). La porțiunea apoasă se adaugă din nou 20 ml cloroform, /?H-ul se ajustează la 9,0 cu soluție de hidroxid de sodiu 2N, prin agitare, straturile se separă, și stratul apos se extrage din nou de două ori cu cloroform (de fiecare dată cu câte 20 ml). Extracțiile cloroformice combinate având /?H=9, se usucă pe carbonat de potasiu obținându-se 0,495 g (62,74%) produs din titlu, care se purifică facultativ prin cromatografie pe silicagel, utilizând sistemul de solvenți CH₂CI₂/ CH,OH/NH₄OH (90:9:0,5) și conținând produsul omogen cromatografie (Ii) cu punctul de topire de 103... 109 °C.

EI-MB m/s 762 TLC, Rf 0,346 IR(KBr): 3500. 2980. 2940. 1740. 1462. 1385. 1330. 1330. 1280. 1260, 1170. 1112, 1039. 1018, și 1055 cm¹.

Ή NMR (CDC1,): 2,300 (3H, 9a-NCH₃), 2.316(6H. 3’-N(CH,)₂, 3.333 (3H. 3OCH J și 3.384 (3H. 6-OCH.) ppm.

Activitatea biologică: 1 mg conține 754 micrograme de azitromicină.

Metoda B. Intr-o soluție de 0,5 g (0.668 mol) de 6-0-metil-N-dimetilazitromicină A în acetonă (30 ml) se adaugă 0.128 ml (1.71 mol) de formaldehidă (37%) și 0.118 ml (3.06 mmol) de acid formic (98...100%) și se refluxează cu agitare timp de 2 h. Amectecul de reacție se răcește la temparatura camerei și acetona se evaporă obținându-se un sirop subțire. După ce se adaugă 20 ml apă. produsul se izolează cu ajutorul extracției prin gradient de pH cu clorură de metilen așa cum s-a descris la Metoda A. Randamentul: 0.46 g (90.3%).

Exemplul 7. 6,11 -di-O-metil-azitromicina A (Ij) în concordanță cu procedeul din cadrul exemplului 6. din 0,49 g (6,43 mmol) de

6,1 1-di-O-metil-N-dimetilazitromicină A (If) prin N-metilare reductivă cu formaldehidă (37%: 0,083 ml) în prezența acidului formic (98... 100%;), se obțin 0.46 g (92,3%) produs din titlu.

EI-MB m/s 776 (M⁺): TLC, Rf 0,391 Ή NMR (CDCI,): 2,295 (3H, 9a-NCH,), 2,316 (6H. 3'-N(CH;)₂), 3,321 (3H, 3OCH.). 3.38 (3H, 6-OCH,) și 3.524 (3H, I 1-OCH,) și 3,524 (3H, 1 l-OCH,) ppm.

^I?'C NMR (CDC1;): 177,540 (C-l),

68.237 (C-9). 36,739 (9a-NCH,). 88.112 (C-l 1). 52,653 (6-OCH,) și 61,852 (11OCH;) ppm.

Exemplul 8. 1I-O-metilazitromicina A ^(Ikl în concordanță cu procedeul descris în cadrul exemplului 6, din 0,32 g (0,43 mmol) de 1 1 -O-metil-N-dimetil-azitromicina A (Ig), prin metilarea reductivă cu formaldehidă (37%) în prezența acidului formic (98...100%c) se obțin 0,238 g 5 (72.44%) de compus din titlu.

I 1-O-metiI derivat (Ik):

IR (KBr): 3510, 2975. 2940, 1738, 1350, 1460. 1165. 1054 cm¹.

Ή NMR (CDC1,): 2,246 (3H, 9a-NCH,), 10 2.307 (6H. 3’-N(CH,)₂). 3.325 (3H. 3OCH_;) și 3.591 (3H, 11-OCH,) ppm.

Exemplul 9. 6-O-metil-azitromicina A (li). 6.11 -di-O-metil-azitromicina A (Ij). IIO-metil-azitromicina A (Ik) și 6, / /-4-tri-O15 metil-azitromicina A (Ij) (1) într-o soluție de 2,16 g de produs brut obținut în exemplul 2, în 30 ml de etanol. se adaugă 10 ml de apă conținând 0,183 ml acid acetic și 0.3 g de acetat de sodiu și 0,7 g de paladiu pe cărbune (10%). după care amestecul de reacție se supune hidrolizei așa cum se descrie în exemplul 3. La un /?H=9,0 se obțin 0,98 g de amestec de 6-O-metil-(Ie), 6,11-di-O25 metil (If), 1 l-O-metil-(Ig), și 6,1 l,4-tri-Ometil-N-dimetil-azitromicină A (Ih).

(2) După dizolvarea a 0,98 g din amestecul obținut, conform descrierii (1) de mai sus. în 50 ml cloroform se adaugă 0,106 ml de formaldehidă (37%) și 0,096 ml de acid formic (98...100%) și se supune Nmetilării, conform exemplului 6. La un PH =9,0 se izolează 0,537 g de amestec, care este supus la crematografiere pe silica35 gel în coloană (Silicagel 60, Merck, Co., 70-230 mesh), utilizând sistemul de solvent CH₂C1₂/CH,OH/NH₄OH (90:9:1,3) și dând 0,238 g de produs omogen cromatografie (Ii) cu Rf 0,346, 0,065 g cu Rf 0,391, 40 0,105 g de (Ik) cu Rf 0,428 și 0,094 g (II) cu Rf 0,456.

Exemplul 10. 6,11,4-tri-O-metil-Ndimetil-azitromicina A (Ih) în concordanță cu procedeul descris în 45 exemplul 3, din 3,35 g (3,21 mmol) de 2’0,3’-N-£>A- (benziloxicarbonil)-N-dimetil109338

6,11,4-tri-O-rnetil-azitromicina A (ld) prin hidrogenoliză cu paladiu pe cărbune (10%, I g) în 50 ml etanol în prezența soluției tampon acetat de sodiu/acid acetic (/?H=5), se obțin 1,41 g (56,7%) produs din titlu care a fost supus facultativ pe coloană de silicagel utilizând sistemul de solvent CH₂C1₂/CH,OH/NH₄OH (90:9:0,5) și prezentând prin analiza TLC un produs omogen (Ih): EI-MS m/s 775; TLC, Rf 0,263.

Ή NMR (CDCI,): 2,262 (3H, 9a-NCH,), 2.393 (3H. 3’-NCH_;). 3.308 (6H. 3OCH, .și 6-OCH-), 3,475 (4-OCH_; și

3.521 (I 1-OCH,) ppm. 15 ^l3C NMR (CDCI,): 175.0 (C-l). 64.8 (C9), 79.8 (C-6), 50.6 (6-OCH,) 86.1 (CII). 59,1 (11-OCH,), 87.7 (C-4) și 60.9 (4-OCH,) ppm.

Exemplul 11. 6,11,4'-tii-O-metil-azi- 20 tromicina A (II) în concordanță cu procedeul din cadrul exemplului 6, din 1,2 g (1,55 mmol) de

6.1 1,4-tri-O-metil-N-dimetil-azitromicină A (Ih) 0.131 ml de formaldehidă (37%;

1.71 mmol) și 0.121 ml (3,15 mmol de acid 5 formic (98... 100%), se obțin 0.75 g (64,4%) produs din titlu.

EI-MS 789; TLC, Rf 0,456.

Ή NMR (CDCI,): 2.216 (3H, 9a-NCH,). 2.311 (6H, 3’-N(CH,)₂), 3,321 (3H, 310 OCH,). 3,302 (6-OCH,). 3.482 (4-OCH,) și 3.521 (1 1-OCH,) ppm.

^I3C NMR (CDCI,): 177,859 (C-l). 68.6 (C9). 36.8 (9a-NCH,). 80.7 (C-6). 51.0 (6OCH,). 89 (C-l 1), 62,0 (11-OCH,), 87.3 (C-4) și 61.3 (4-OCH,) ppm.

Claims

1. Derivați de O-metil ai azitromicinei A. caracterizați prin aceea că au formula generală structurală (I):

(I) în care: (Ia) R¹ = R² = CO2CH2C6H„ R³= CH,, R⁴ = R⁵ = H; (Ib) R¹ = R² = CO2CH₂ C₆H₅, R’ = R⁴ = CH., R⁵ = H; 25 (Ic) R¹ = R² = CO2CH2C6H5, R⁵ - R⁵ = H, R⁴ = CH,; (ld) R' = R² = CO2CH₂C₆H₅, R³= R⁴ = R^? = CH,; (Ie) R¹ = R² = R⁴ = R⁵= H, R³ - CH,; (If) R¹ = R² = R⁵ = H, R³= R⁴ = CH,; (Ig) R¹ = R² = R³ - R⁵ = H, 30 R⁴ = CH,; (Ih) R¹ = R² = H, R³ = R⁴ - R⁵ =

CH,; (Ii) R¹ = R⁴ = R⁵ = H, R² = R³ = CH,;

(Ij) RA H, R² = R³ = R⁴ = CH,; (Ik) R¹ = R³ = R⁵ = H, R² = R⁴ = CH,; (II) R¹ = H, R² = R' = R⁴ - R⁷¹ = CH„ și sărurile lor de adiție cu acizi anorganici și acizi organici acceptate din punct de vedere farmaceutic.

2. Derivat, conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că R, și R₂ sunt identici și reprezintă o grupare benziloxi109338 carbonil, R. este reprezentat de metil, în timp ce R₄ și R₅ reprezintă hidrogen.

3. Derivat, conform revendicării I, caracterizat prin aceea că R, și R, sunt identici și reprezintă o grupare benziloxicarbonil. R_; și R₄ reprezintă metil. în timp ce R₅ reprezintă hidrogen.

4. Derivat, conform revendicării 1. caracterizat prin aceea că R, și R₂ sunt identici și reprezintă o grupare benziloxicarbonil. R_; și R₅ sunt hidrogen. R₄ reprezintă metil.

5. Derivat, conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că R₍ și R, sunt identici și reprezintă o grupare benziloxicarbonil, iar R_;, R₄ și R., sunt reprezentați de metil.

6. Derivat, conform revendicării I, caracterizat prin aceea că R], R₂, R₄ și R_s sunt identici și reprezintă hidrogen, și R₃ reprezintă metil.

7. Derivat, conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că R_p R, și R, reprezintă hidrogen și sunt identici. în timp ce R, și R₄ reprezintă metil.

8. Derivat, conform revendicării 1, ca racterizat prin aceea că R,. R,. R, și R_ssunt identici și reprezintă hidrogen, și R₄reprezintă metil.

9. Derivat, conform revendicării I, ca5 racterizat prin aceea că R, și R, sunt identici și reprezintă hidrogen, iar R„ R₄, și R_s reprezintă metil.

10. Derivat, conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că R,. R₄ și R..

10 sunt identici și reprezintă hidrogen, iar R, și R, sunt reprezentați de metil.

11. Derivat, conform revendicării I, caracterizat prin aceea că R, și R_s sunt identici și reprezintă hidrogen, iar R,. R_; și

15 R₄ reprezintă metil.

12. Derivat, conform revendicării I, caracterizat prin aceea că R., R, și R₅sunt identici și reprezintă hidrogen, iar R, și R₄ reprezintă metil.

20

13. Derivat, conform revendicării 1.

caracterizat prin aceea că R, reprezintă hidrogen, iar R₂. R,, R₄ și R_s sunt identici și reprezintă metil.

14. Compus intermediar, caracterizat

25 prin aceea că are formula generală II:

(Π) în care: (Ilb) R'=R²=CO₂CH₂C₆H_S.

15. Procedeu, pentru prepararea derivaților O-metil ai azitromicinei A cu formula generală (I):

(I) în care: (Ia) R¹ = R² = CO2CH2C6H5. R³= CH,. R⁴ = R⁵ = H: (Ib) R' = R² = CO2 CH₂C_hH₅. R^; = R¹ = CH,. R⁵ = H; (Ic) R¹= R² = CO2CH2CftH5. R’ = R⁵ = H. R⁴ = CH, și (Id) R' = R² = CO2CH₂C₆H„ R³ = 5

R⁴ = R⁵ = CH,; (Ie) R¹ = R² = R⁴ = R⁵ = H. R³ = CH.; (If) R¹ = R² = R⁵ = H, R³ = R⁴ = CH,; (Ig) R¹ = R² = R³ = R⁵ = H, R⁴= CH,; (Ih) R¹ = R² = H, R³ = R⁴ = R⁵ =

CH,; (Ii) R¹ = R⁴ = R⁵ = H. R² - R’CH,; (Ij) R¹ = R⁵ = H, R² = R³ = R⁴=

CH,; (Ik) R¹ = R³ = R⁵ = H, R² = R⁴=

CH.; (II) R¹ = H. R² = R³ = R⁴ = R⁵ =CH„ și sărurile lor rezultate prin adiția cu acid, acceptate din punct de vedere farmaceutic, caracterizat prin aceea că azitromicină sau dihidratul ei este corespunzător formulei (II):

(Π) în care: (Ila) R, = H. R₂ = CH,, se supune reacției cu benzii cloroformiatul în prezența unui exces corespunzător de bază, ca, hidroxidul de sodiu, în solvent inert de reacție, ca benzen, la o temperatură de la 25 la 60°C, timp de la 3 la

10 24 h, urmat de O-metilarea grupărilor hidroxilice în poziția C-6, C-l I și C-4 a intermediarului 2’-0,3’N-i>/x-(benziloxicarbonil)-N-dimetil-eritromicin A de formula (II), în care, (Ilb) R¹ = R² = CO₂CH₂C₆H₅

15 cu un exces moral de 1-18 moli agent de metilare corespunzător, ca iodură de metil, dimetil sulfat, metil metan sulfonat sau metil'/J-toluensulfonat, în prezența unei baze corespunzătoare, cum ar fi, hidroxidul de sodiu, hridrura de sodiu, hidroxidul de sodiu sau potasiu în soluție apoasă. în solvent corespunzător, cum ar fi, de exemplu, dimetilsulfoxidul sau N’Ndimetilformamida. sau amestecurile lor cu un solvent inert de reacție, de exemplu, tetrahidrofuranul. acetonitrilul, acetatul de etil, 1.2-dimetoxiletanu). la o temperatură între 0C și temperatura camerei, timp de la 3 la 30 h. obținându-se un amestec de O-met il-2‘-0.3'-Ν-ύζν-Ι benzi loxicarbonil)N-dimetil-azitromicină A. cu formula (I). în care:

(la) reprezintă R¹ - R^: = CO₇CH,C₍,H_S. R’ = CH,. R⁴ = R- = H:

(lb) reprezintă R¹ = R² - CO₂CH₂C₆H₅, R' = R⁴ = CH„ R⁵ = H;

(lc) reprezintă R¹ = R' = CC)₂CH,C₆H_S. R' = R⁵ = H. R⁴ = CH,.

(ld) reprezintă R¹ = R² - CO₂CH^C₆H_S, R’ - R⁴ = R² = CH,. care se separă pe coloană cu silicagel obținându-se compuși omogeni cromatografici (Ia) ... (Id), din care apoi se elimină grupările de protecție în pozițiile 2’ și 3’ cu ajutorul hidrogenolizei în soluție de alcooli inferiori, metanol sau etanol, în prezența unui catalizator ca negru de platină sau paladiu pe cărbune, în atmosferă de hidrogen, la o presiune de 1 ... 20 bari, prin agitarea amestecului de reacție, timp de 2 ... 10 h, la temperatura camerei, obținându-se derivații de O-metil-N-dimetil-azitromicina A cu formula (I), în care: (Ie) reprezintă R¹ = R² = R⁴ = R⁵ = H, R’ = CH,; (If) reprezintă R¹ = R² = R⁵ = H, R' = R⁴= CH,; (Ig) reprezintă R¹ = R² = R⁵ = R⁵= H, R⁴ = CH,; (Ih) reprezintă R¹ = R² = H, R³ - R⁴ = R² = CH,; și care sunt apoi supuși la N-metilarea reductivă ă grupării 3’-metilamino cu 1 ... 3 echivalenți de formaldehidă (37%) și o cantitate egală sau dublă de acid formic (98 ... 100%) sau altă sursă de hidrogen. în mediu de solvent inert de reacție, ales din cadrul hidrocarburilor halogenate, cum ar fi: cloroformul, sau a alcoolilor inferiori, cum ar fi. metanolul sau etanolul, a cetonelor inferioare, cum ar fi, acetona. Ia temperatura de reflux amestecului de reacție timp de la 2 la 8 h, obținându-se derivații O-metil-azitromicinei cu formula (I). în care: I, ... I, și radicalii corespondenți.

16. Procedeu, conform revendicării 15. caracterizat prin aceea că . după obținerea amestecului de derivați O-metil-2’-0,3’N-/%v-(benziloxicarbonil)-N-dimetil-azitromicină A cu formula I. în care. (1.,) reprezintă R¹ = R² = CO2CH2CftH5. R²' = CH„ R⁴ = R⁵ = H; (lb) reprezintă R¹ - R² = CO2CH₂C₆H_s, R²' = R⁴ = CH,, R⁵ = H; (Ic) reprezintă R¹ = R² - CO2CH2C6H5. R² = R²= H. R⁴ - CH,; (Id) reprezintă R¹ = R² = CO2CH₂C_ftH₅, R²' = R⁴ = R⁵ = CH,; se elimină gruparea de protecție benzoiloxicarbonil din pozițiile 2’ și 3’ prin hidrogenoliză ca mai sus, obținându-se un amestec de derivați de O-metil-azitromicină A cu formula (I), în care I_e ... I_h cu radicalii corespondenți, care apoi este supus separării pe coloană cu silicagel obținând cromatografie derivații omogenici O-metil ai azitromicinei A (I_e) ... (I_h), și care sunt apoi supuși la N-metilarea reductivă a grupării 3’ -metil-amino cu I ...3 echivalenți de formaldehidă (37%) și o cantitate egală sau dublă de acid formic (98 ... 100%) sau altă sursă de hidrogen, în mediu de solvent inert de reacție, ales din cadrul hidrocarburilor halogenate, cum ar fi, cloroformul, sau a alcoolilor inferiori, cum ar fi, metanolul sau etanolul, a cetonelor inferioare, cum ar fi, acetona, la temperatura de reflux a amestecului de reacție timp de la 2 la 8 h, obținându-se derivații Ometil-azitromicinei cu formula (I).în care 1; ... I, și radicalii corespondenți, supuși facultativ reacționării cu cel puțin un echi109338 valent de acid anorganic sau organic, obținându-se sărurile de adiție acceptabile farmaceutic,

17. Derivați, de O-metil ai azitromici nei A, caracterizați prin aceea că se utilizează la fabricarea preparatelor farmaceutice antibacteriene.