PL160904B1 - Sposób wytwarzania amidów PL PL - Google Patents
Sposób wytwarzania amidów PL PLInfo
- Publication number
- PL160904B1 PL160904B1 PL1988274710A PL27471088A PL160904B1 PL 160904 B1 PL160904 B1 PL 160904B1 PL 1988274710 A PL1988274710 A PL 1988274710A PL 27471088 A PL27471088 A PL 27471088A PL 160904 B1 PL160904 B1 PL 160904B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- nitrile
- reaction
- formula
- hours
- compound
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 40
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 title claims abstract description 24
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 18
- 108010024026 Nitrile hydratase Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 20
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 claims abstract description 14
- 230000036571 hydration Effects 0.000 claims abstract description 11
- 229910001429 cobalt ion Inorganic materials 0.000 claims abstract description 8
- XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N cobalt(2+) Chemical compound [Co+2] XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 241000187693 Rhodococcus rhodochrous Species 0.000 claims abstract 2
- -1 aromatic nitrile Chemical class 0.000 claims description 21
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 18
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 6
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 5
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- NLHHRLWOUZZQLW-UHFFFAOYSA-N Acrylonitrile Chemical compound C=CC#N NLHHRLWOUZZQLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052760 oxygen Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000001301 oxygen Chemical group 0.000 claims description 2
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 80
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 49
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 24
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 23
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 21
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 20
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 16
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 13
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 12
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 12
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 10
- PMSVVUSIPKHUMT-UHFFFAOYSA-N cyanopyrazine Chemical compound N#CC1=CN=CC=N1 PMSVVUSIPKHUMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical compound CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 8
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 8
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- KXDAEFPNCMNJSK-UHFFFAOYSA-N Benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC=C1 KXDAEFPNCMNJSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 6
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 6
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 229960005206 pyrazinamide Drugs 0.000 description 6
- IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N pyrazinecarboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CC=N1 IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerol Natural products OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 4
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 4
- 150000001869 cobalt compounds Chemical class 0.000 description 4
- WFKAJVHLWXSISD-UHFFFAOYSA-N isobutyramide Chemical compound CC(C)C(N)=O WFKAJVHLWXSISD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 4
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 4
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 4
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- FFNVQNRYTPFDDP-UHFFFAOYSA-N 2-cyanopyridine Chemical compound N#CC1=CC=CC=N1 FFNVQNRYTPFDDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWPNXBQSRGKSJB-UHFFFAOYSA-N 2-methylbenzonitrile Chemical compound CC1=CC=CC=C1C#N NWPNXBQSRGKSJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GZPHSAQLYPIAIN-UHFFFAOYSA-N 3-pyridinecarbonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CN=C1 GZPHSAQLYPIAIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 2
- 241000316848 Rhodococcus <scale insect> Species 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- NKKMVIVFRUYPLQ-NSCUHMNNSA-N crotononitrile Chemical compound C\C=C\C#N NKKMVIVFRUYPLQ-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 2
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940047889 isobutyramide Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N pyrazine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CN=CC=N1 NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 2
- BEOUGZFCUMNGOU-UHFFFAOYSA-N tuberculostearic acid Chemical compound CCCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O BEOUGZFCUMNGOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-2-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)C(CN1CC2=C(CC1)NN=N2)=O HMUNWXXNJPVALC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNUYOWCKBJFOGS-UHFFFAOYSA-N 2-[[10-(2,2-dicarboxyethyl)anthracen-9-yl]methyl]propanedioic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(C(=O)O)C(O)=O)=C(C=CC=C3)C3=C(CC(C(O)=O)C(O)=O)C2=C1 DNUYOWCKBJFOGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GJNGXPDXRVXSEH-UHFFFAOYSA-N 4-chlorobenzonitrile Chemical compound ClC1=CC=C(C#N)C=C1 GJNGXPDXRVXSEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940090248 4-hydroxybenzoic acid Drugs 0.000 description 1
- XDJAAZYHCCRJOK-UHFFFAOYSA-N 4-methoxybenzonitrile Chemical compound COC1=CC=C(C#N)C=C1 XDJAAZYHCCRJOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBFXLLVZNBYAOM-UFLZEWODSA-N 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoic acid;calcium Chemical compound [Ca].N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 DBFXLLVZNBYAOM-UFLZEWODSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241001136792 Alle Species 0.000 description 1
- 101100420946 Caenorhabditis elegans sea-2 gene Proteins 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910021580 Cobalt(II) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127463 Enzyme Inducers Drugs 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 description 1
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108010033272 Nitrilase Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- TZRXHJWUDPFEEY-UHFFFAOYSA-N Pentaerythritol Tetranitrate Chemical compound [O-][N+](=O)OCC(CO[N+]([O-])=O)(CO[N+]([O-])=O)CO[N+]([O-])=O TZRXHJWUDPFEEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241001115903 Raphus cucullatus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N butanamide Chemical compound CCCC(N)=O DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002079 calcium pantothenate Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940044175 cobalt sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000361 cobalt sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- KTVIXTQDYHMGHF-UHFFFAOYSA-L cobalt(2+) sulfate Chemical compound [Co+2].[O-]S([O-])(=O)=O KTVIXTQDYHMGHF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- WEZJBAOYGIDDLB-UHFFFAOYSA-N cobalt(3+);borate Chemical compound [Co+3].[O-]B([O-])[O-] WEZJBAOYGIDDLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BZRRQSJJPUGBAA-UHFFFAOYSA-L cobalt(ii) bromide Chemical compound Br[Co]Br BZRRQSJJPUGBAA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000005336 cracking Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 125000004093 cyano group Chemical group *C#N 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 238000002169 hydrotherapy Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WOFDVDFSGLBFAC-UHFFFAOYSA-N lactonitrile Chemical compound CC(O)C#N WOFDVDFSGLBFAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- IJFXRHURBJZNAO-UHFFFAOYSA-N meta--hydroxybenzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=CC(O)=C1 IJFXRHURBJZNAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 description 1
- QVRVXSZKCXFBTE-UHFFFAOYSA-N n-[4-(6,7-dimethoxy-3,4-dihydro-1h-isoquinolin-2-yl)butyl]-2-(2-fluoroethoxy)-5-methylbenzamide Chemical compound C1C=2C=C(OC)C(OC)=CC=2CCN1CCCCNC(=O)C1=CC(C)=CC=C1OCCF QVRVXSZKCXFBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N nitrous oxide Inorganic materials [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- GPHQHTOMRSGBNZ-UHFFFAOYSA-N pyridine-4-carbonitrile Chemical compound N#CC1=CC=NC=C1 GPHQHTOMRSGBNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- KYKFCSHPTAVNJD-UHFFFAOYSA-L sodium adipate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CCCCC([O-])=O KYKFCSHPTAVNJD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001601 sodium adipate Substances 0.000 description 1
- 235000011049 sodium adipate Nutrition 0.000 description 1
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 description 1
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 description 1
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 125000005480 straight-chain fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N trisodium borate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]B([O-])[O-] BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010977 unit operation Methods 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
- C08J9/0014—Use of organic additives
- C08J9/0023—Use of organic additives containing oxygen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/78—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2325/00—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by an aromatic carbocyclic ring; Derivatives of such polymers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
1. Sposób wytwarzania amidów na drodze biologicznej, polegajacy na hydratacji nitrylu do odpowiedniego amidu w wyniku dzialania hydratazy nitrylowej wytwarzanej przez drobno- ustrój, znamienny tym, ze jako hydrataze nitrylowa stosuje sie hydrataze nitrylowa wytworzona przez hodowle szczepu J - 1 gatunku Rhodococcus rhodochrous, FERM B P -1478, w obecnosci jonów kobaltu. PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku Jest sposób wytwarzania amidów, polegający na hydratacji nitrylu 1 przekształceniu go w odpowiedni amid w wyniku działania hydratazy niti^^^H^wej wytwarzanej przez drobno^ sroo e. Dok ładnie j , jest to sposób biologicznego w/t^isrzaniLa amidów, wyróżniający się stosowanym drobnoustrojem i sposobem wytwarzania hydratazy nitrylowej.
Niższy am.d allfarγczny, taki Jak akryloamid, wytwarza się przez hydratację nitrylu, takiego jak akrylorntryl, przy czym zaproponowano szereg sposobów hydratacj1 poprzez działanie enzymów, takich jak nitrylaza lub hydrataza ntrylooa, wytwarzanych przez drobnoustroje /patrz np. opublikowane japońskie zgłoszenie patentowe nr 21519/87, opis patentowy Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 4 001 081, nie nadane, opublikowane japońskie zgłoszenie patentowe nr 162193/86 1 91189/87, europejskie opisy patentowe nr 0 188 316 1 0 204 555 oraz japońskie zgłoszenia patentowe nr 17918/81 1 37951/84, a także opisy patentowe Stanów Zjedno czonych Ameryki nr 4 248 968 1 4 637 982. Takie sposoby wytwarzania amidu na drodze biologicznej zostały wykorzystane w skali przemysłowej przy czym zwrócono na nie uwagę jako na korzystne sposoby wytwarzania akryloamidu.
Ootychczas zaproponowano wykorzystane szeregu drobnoustrojów w sposobach wytwarzania amidów na drodze biologicznej. Jednakże stwierdzono, że Jakkolwiek drobnoussroje te są skuteczne w hydratacji niższych nitryli alifa^cnych, to ne zawsze są skuteczne w hydrata160 904 cji nitryli aromatycznych. Tak np. przy wytwarzaniu amidu kwasu nikotynowego przez hydratację 3-cyJanopirydyny osięga się zbyt małę wydajność z punktu widzenia zastosowań przemysłowych.
Znany Jest sposób prowadzenia hodowli drobnoustrojów w obecności jonów żelaza lub Jonów mannanu. Sposób ten wykorzystuje się również w procesie am.du na drodze biologicznej. Przykładowo, hodowla drobnoustrojów z rodzaju Rhodococcus w obecności Jonów żelaza ujawniona Jest w nie badanych opublikowanych Japońskich zgłoszeniach patentowych nr 162193/86 i 91189/87.
W wyniku przeprowadzonych badań stwierdzono, że enzym hydraaacji nitryli, czyli hydrataza nitkowa, pow^a^cy w bakteriach z rodzaju PtJudoeonaθ, zawiera jon Fe*** w centrum aktywności, i w zwlęzku z tym obecność Jonów żelaza w środowisku hodowH ma decyduJęce znaczenie dla hodowH drobnouutrojów. W zwlęzku z tym w przypadku drobnoustrojów z rodzaju RhodrcrcJut w znanych przykładach opisanych powyżej również założono, Ża Jony żelaza w środowisku hodowH drobnoustrojów maję decydujące znaczenie dla wytwarzania enzymu hydratacci nitrylu.
Wynnlazek opiera się na odkryciu, że konkretny szczep z rodzaju to znaczy szczap 3-1 gatunku R^<^<^<^c^f^rrut nie wytwarza hydratazy mityguj w środowisku hodowlanym zewierajęcym jon żelaza oraz, że szczep ten wytwarza hydratazę nitr^yroowę w środowisku hodowlanym zewierajęcym Jon kobaHu, a także że wytworzoną w ten sposób hydratazę nitryoowę może wykorzystywać w reak^ci z nitr^eem aromatycznym Jako substrtJem przekształcajęc go następnie w amid. W zwlęzku z tym sposób wytwarzania amidu według wynalazku jest sposobem wytwarzania amidu na drodze biologiczne, w którym nitryl rwania się od odpowiedniego ammdu w wyniku działania hydratazy nH^^^o^wej wytwarzanej przez drrbnorutrorθ, charakteryzującym się tym, że hydratazę nucr^oowę uzyskuje się w hodowH drobnoustrojów z gatunku RhodococJut rhodochrous w obecnt^^t^i jonów kobaHu.
Zgodnie z wynalazłem okazało się, że Jakkolwiek hydrataza nitryrowt wykazuje zerowę aktywność w środowisku hodowlanym zawierającym Jon żelaza, to aktywność ta zwiększa się środowisku hodowlanym zawierającym Jon kobaHu. Nieoczekiwanie okazało się, że rozwój hydratazy nit^^wej w tych konkretnych drrbnoustrojach w zdecydowany sposób zależy od rodzaju jonu mmealu w środowisku hodowlanym.
Sposobem według wynalazku można również z powodzeniem przeprowadzić hydratację nitrylu aromatycznego. Sposób według wynalazku ma znaczenie praktyczne ze względu na znaczenie produktu hyd^aacc! 3-Jyjanrplrydyny, aml.du kwasu nikotynowogo - surma do syntezy witamin, albo produktu hyd^aa^i cyjanopirazyny, pirazynoamidu użytecznego Jako lek przeciwgruźliczy.
1. Ogólna koncepcja sposobu wytwarzania amidu na drodze biologicznej.
Wynnlazek dotyczy sposobu hydratami nitrylu w celu przekształcenia go w odpowiedni amid w wyniku działania hydratazy yitryrooJj wytworzonej w durbnouutroJach, przy czym proces obejmuje zasadniczo hodowlę durbπoustrojów, indukowanie hydratezy yltryrowJj oraz tprwodowoniJ, aby wytworzona w ten sposób hydrataza nittyrowt działała na tubstuaJt nitkowy.
Etapy te sę znane Jako operacje Jednostkowe i wykorzystywane sę w odpowiedniej formie w sposobie według wynalazku. Określenie hydratazę nit^^wę uzyskuje się w hodowH drobnoustrojów w obecności jonu kobaltu w sposób oczywisty obejmuje również indukowanie hydratazy nitrylowej.
Określenie sposób hyd^aacci nitrylu w celu przekształcenia go w odpowiedni amio w wyniku działania hydratazy nitryluj wytworzonej przez drobnoustroje obejmuje dowolne rdρowlednie roznięzenia lub warianty powooduęce, ze hydrataza ni^yo^a działa na nitryl.
□ edno z takich rozwiązań obejmuje sposób zbierania enzymu wytworzonego przez durbπoustΓrje i zastosowanie tego enzymu jako preparatu enzymmaycznego. Zrozumiałe Jest, że taki sposób wykorzystania hydratazy nitrylowej, w którym enzym stosuje się w postaci preparatu enzymatycznego, stanowi pewnę kategorię sposobu wytwarzania na drodze biologicznej według wynalazku ·
160 904
2. Szczegóły reakcji hydratacji 1/ Drobnoustroje
Drobnoustrojem stosowanym w sposobie według wynalazku jest szczep 3-1 gatsnks Rhoducuccst rhodochross.
Szczegóły dotyczące tzczeps 3-1 tą następujące:
/1/ Pochodzenie i depozyt
Szczep 3-1 pobrano z gleby w Sakyo-ks, Kioto, Japonia i zdeponowano Jako międzynarodowy depozyt /zgodnie z Porozsmieniem Budapeszteńskim w sprawie międzynarodowego sznania depozyts drobnoustrojów dla celów postępowania patentowego/ w Fermnt^tlon Research Institste, Jepor^ia, Agency of Indussrial Sciences and Technology, zarejestoowany pod nr FERM BP-1478.
/1/ Właściwośći bakteriologiczne /a/ Moufolugia /1/ Kształt i wielkość komórek 0,9 - 1,0 sin x 3-10 sn /2/ Obecność polimorf^zmo komórek komórki są w kształcie dłsgich pręcików w początkowym stadium hodowli, rosną z pękaniem w kształcie zakrzywionym, po czym dzielą się na małe pałeczki /3/ Ruchliwość /4/ Obecność spor /5/ Zabarwienie wedłsg Grama /6/ Odporność na kwas /7/ Granulocyt heteruflUowy /b/ Stany wzrosts w różnych pożywkach hodowlanych bslUouowyz /2/ Hodowla na stoks agarowym z bslUoney /3/ Hodowla w bulionie ciekłym /4/ Hodowla w zagłębienis w żelatynie z bulions /5/ Mleczko ^Umcs^e /0/ Właściwości fizUoUoglcznθ /1/ Redukcja azotanów /2/ Oanitryfikacja /3/ Próba MR /4/ Próba VP /5/ Wyywarzanie indoly brak brak dodatnie sjemna wykryto /30°C/ koło o średnicy 1 mm /43 godzzn/, nietegslαrna i gładkie, powaeΓtchnia raczej sscha, płaska, nieprzezroczysta o zabarwienis blado pommrańczoworóżowym niteczki o gładkiej powwerzchniiraczej sschae , przekrój nieznacznie wyppsky, raczej sschy, zabaraianie blado-pomarańczowo-różowe.
bsjny tworzenie się bakteryjnej błony tumyrkowaa, wzrostowi towarzyszy syirtkowana zmętnienie, tworzy się osad wzrost cienką warstwą na , w kształcie stożka wzdłsż części zagłębienia, ale nie w dolnej warstwie, nie obserwuje się spłynniania żelatyny brak zm^an dodatnia sjemna sjemna sjemna dodatnie
160 904
| /6/ | Wytwarzanie siarkowodoru | dodatnia | |
| /7/ | Hydroliza skrobi | ujemna | |
| /0/ | Wykoozystania kwasu cytrynowego pożywka hodowlana Kocura | ujemna | |
| pożywka hodowlana Christensena | dodatnia | ||
| /9/ | Wykrrzyetanie nieograniczonego źródła azotu | ||
| azotan | dodatnia | ||
| sól amonowa | dodatnia | ||
| /10/ | Wytwarzanie masy barwnej | uJ emna | |
| /11 | Ureaza | dodatnia | |
| /12/ | Oksydaza | ujemna | |
| /13 | Katalaza | dodatnia | |
| /14/ | Hydroliza celulozy | ujemna | |
| /15/ | Zakres wzrostu | pH 5-10, | temperatura 10~41°c |
| /15/ | Zachowanie w stosunku do tlenu | aer^obowe | |
| /11/ | Rozkład tyrozyny | dodatnia | |
| /16 | Rozkład adeniny | dodatnia | |
| /11/ | Fosfataza | dodatnia | |
| /20/ | Hydroliza Tween 80 | dodatnia | |
| /21 | Próba 0-F | ujemna | |
| /22/ | Odporność cieplna /w 10% mleku Ciemnym w 12°C, 15 minut/ | brak | |
| /23/ | Wydarzanie kwasu i gazu z cukru: | Kwas Gaz | |
| L-arabinoza | - | - | |
| D-ksyloza | - | - | |
| O-glikoza | ♦ | - | |
| 0-mannoza | - | - | |
| D-fruktoza | 4 | - | |
| mitoza | 4 | - | |
| cukier | ♦ | - | |
| laktoza | - | - | |
| trabaloze | - | - | |
| D-sorbit | ♦ | - | |
| D-mannit | ♦ | - | |
| gliceryna +: próba dodatnia, -: próba uJemna | ♦ | ||
| /24/ | Wzrost w indywidualnych źródłach węgla | ||
| rnozyt | - | ||
| matoza | ♦ | ||
| D-mannit | ♦ | ||
| ramnoza | - | ||
| D-eorbit | 4 | ||
| kwas m-hydroksybenzoesowy | 4 | ||
| adypnian sodowy | V | ||
| benzoesan sodowy | 4 | ||
| cytrynian sodowy | 4 | ||
| mleczan sodowy | 4 | ||
| testotetron | 4 | ||
| L-tyrozyna | 4 | ||
| gliceryna /1%/wwagowo/objęteściowo/ | /♦/ | ||
| trehaloza kwas p-hydroksybenzoesowy | /♦/ | ||
| /1%/ /wtgoworobJ^trściowy/ | 4 |
160 904 ♦ i dodatnia, ujemna, /♦/« nieznacznie dodatnia /28/ Kwita tłuszczowy 1 analiza ścianki komórkowej
Zawiera nienasycona 1 nasycona kwasy tłuszczowe o prostym łańcuchu oraz kwas tuberkulostearynowy. TLC kwasu mikolowego daja pojedynczą plamę.
W wyniku sklasyfikowania wyżej opisanych właściwości bakteriologicznych na podstawie publikacji Berga Manuel of Systamaaic Becteriology* można stwierdzić, Ze szczep 0-1 stanowię pałeczki eerobowe, Gram-doodanie, słabo odporna na kwas, katalazo-dodatnie 1 nie wytwarzające endosporyny, baz flageiuum. Micaluum ma wydłuZony kształt pełaczkowaty w początkowym stadium wzrostu, przy dalszym wzroście występują rozgałęzienia i następnie podział na krótkie pałeczki. Z tego względu uweZa się, Ze szczep naleZy do bakkerH typu Nocardia.
Analiza składowych kwasów th^^^czi^wy^ch e, Ze bakteria zawiera nienasycone i nasycone kwasy tłuszczowe, w tym kwas tubartulo-steβtynooy. Analiza metodę TLC /chromatografii cienkkoar8toowoa/ kwasu mikolowego daje pojedynczę plamę o tej samej wartości Rf, co w przypadku wzorcowej bakkerii Rhkdockcces rhodochrous /IFO 3338/, co odróżnia ję od rodzaju Mycob^tenum. Różni się ona równieZ od rodzaju Nocardia składem /Mość atomów węgla/ kwasu mikolowego. W wyniku badania innych właściwości biochemicznych stwierdzono, Ze Jest to bakteria Rhodococcus Rhodoccwoue.
OrolnoketrkJa wykazuję skłonność do mu u taj. W związku z tym nie trzeba dodawać, Ze nawet mutant twaltttkowanago szczepu takiego jak szczep 0-1 można stosować w sposobie wadłu wynalazku, o ile produkt hodowH wytwarza hydra^zę nitryioowę w obecności jonu tobattu.
Nitrylami, które można stosować Jako substraty dla hydratazy nitrykooaj wytwarzanej przez opisane wyżej drkbnokutroka, sę aromatyczne i alfaatyczne lub dw^Mry^, a zwłaszcza mono^try^ye.
Nitrylami, które najlepiej nadaję się do stosowania w sposobie według wynalazku sę nitryle aromatyyzne, zwłaszcza te, które zawieraję 4-10 atomów węgla toorząyyyh pierścień aromatyczny. Szereg typowych przykaadowych nitryli aromatycznych obejmuje zwięzki przedstawione ogólnymi wzorami 1-6, w tym ulęzek o wzorze 1, korzystnie 4-, 3- lub 2-yyJ8nzpirydyię i związek o morze 2, w którym R^ i R^ oznaczaję atom wodoru, grupy CH^, OH, OCH^, Cl, I,
ON, NHg lub NOg· Typowym takim związkiem jest ^η^Μΐ^Ι, o-, m- oraz p-yhlzrobennzkitryla, o-, Z- 1 p-fluorolenzzoitryle, o- 1 m-nitrobenzokitryla, p-aminoOlezonlt, o-, m- i ptolunitryle, 4-ctJankfenol, anizonitryl, ftalonitry^, izof^^πΗΓγΣ, tereftalonntryl, 2,6dwuuyloroble^okitryt, 2,4-douchlorobeaizkitrtl i 2,6-doufluOΓobeenokltryl. Typowymi przykładami związków o wzorze 3 aę 4^- 1/3 -naf^nitryle. Należę teZ do nich zwięzki o wzorze 4, w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, pΓzyktβdowk 2-tiofθnotarbonitrtl i 2-furonntryl, związki o wzorze 5, prztktadooo 5-yyJankindzl oraz zw-ęzki o wzorze 6, przyka^i^i^wo cyjanopirazyna.
Inną grupą W tryli użytecznych w sposobie według wynalazku stanowią korzystnie nitryle alitatyczna, Jeszcze korzystniej mono- lub dwu^t^le zawierające 2-6 atomów węgla, a najkorzystniej mooonittyle. Z uwagi na przydatność wytwarzanych amidów typowym przykaadem nitrylu Jest akrylonmryl, ulegający przekształceniu w amid z dobrą nydeanością. Jest rzeczą oczywistą, Ze amidy zdpowoadaJąya nlttykmm są związkami uzyskanymi w wyniku przekształcenia grupy CN w nitrylach w grupą CONHg. W przypadku dwu^t^li odpowiednie amidy uzyskuje sią w wyniku przekształcenia co najmniej jednej grupy CIJ w grupą CONH?.
3/ HodowOa/oytoarzeπla hydra^zy nitrykooaJ
Hodowlą drobnoustrojów w gatunku Rhzdoczyyet rhzdzchrzut można prowadzić w dowolnych odpowiednich warunkach z tym, Ze w środowisku hodowlanym muszę znajdować się jony kobaltu.
Może okazać sią praktyczne wprowadzenie do środowiska hodowlanego induk^^ enzymu, szczegółowo opisanego poniżej tak, aby hydra^za nittykowe nagrzmaeziłe sią w komórkach bakkerri.
/1/ środowisko podstawowe
Przykłady kdpowOθdnlyh poZywek hodowlanych podane są ponnżee. Fachowcy mogą łatwo zmeniać ilości podanych składników, zastępować Jeden składnik innym oraz ellminooeć pewne składniki lub dodawać inna skłedniki.
160 904 którym nitryl uwadnla się ze pomocą preparatu enzymatycznego, a więc raczej nie na drodze biologicznej. Jest oczyiete, że reakcję hydratacji należy prowadzić w takich warunkach pH i temperaaury, aby enzym nie stracił swojej aktywności. Można stwierdzić, że sę to takie same warunki, w jakich prowadzi się wyżej opisane reakcje Bna drodze biologiczner*. Gak to opisano powyźże, rozwięzanie zgodnie z którym drobnouutroje nie występuję w czasie działa nia enzymu, również należy uważać za sposób wytwarzania na drodze biologicznej według wynalazku.
V sposobie według wynalazku korzystny zakres pH dla hydratazy nitrylowej wyios i 7-9, przy optymalnym pH 8,0. Gdy pH roztworu reakcyjnego Jest poniżej 7, aktywność enzymu wykazuje tendencję do gwwłtownego spadku. W zwięzku z tym pozędane Jest dodawanie buforu do roztworu reekcyjnegw. GeśCi zastosuje się dowolny spośród takich buforów jak fosforan prasowy, bufor Tris/KCl, bufor HEPES/KCH i boran sodowy, aktywność enzymatyczna hydratazy nitrylowej me będzie ulegać zmianom.
Stężenie substratu w środowisku hodowwi lub hydratacyjnym roztworze reakcyjnym wynosi zazwyczaj 4-7 moli/litr, a tem^^i^t^^ura reaki^ci jest najczęściej w zakresie 10-3Qec.
3. Przykaady
Sposób pomiaru aktywności hydratazy nitrylowej oraz jednostka aktywności, występujące w poniższych przykładach, zdefiniowane sę następująco.
/1/ Sposób pomiaru aktywności hydratazy nitrylowej
Aktywność hydratazy nitrylowej Marzy się prowadząc reakcję w 2 ml mieszaniny reakcyjnej zawierającej 10 milimoH bendzoitrylu, 30 milimoH fosforanu potasowego Jako buforu /pH 7,0/ oraz pewną ilość komórek drobnouutnju /wydzielonych ze środowiska hodowwi/ w 10°C przez 5 pw czym dodaje się 2 ml ln KC1 w celu przerwania reskeci.
/2/ Definicja jednostki □rdna jednostka j\1j aktywności hydratazy nitΓyJowrj określona Jest Jako ilość enzymu niezbędna do wytwarzania benzamidu z benzoiHrylu w wyżej wpisanych warunkach z szybkością 1 urnol/minutę.
Przykład I. Szczep 3-1 hodowano w pożywce o składzie podanym poniżer, w warunkach również określonych , przy czym ujawnienie się aktywności hydratazy nitrylowej badani dodając C0CI2 i/lub FrS04 do pożywki w czasie prowadzenia hodowwl.
/1/ Skład pożywki
Składniki mieszanka witamin K2HPO4 kh2po4
MgS04.7H20 pripionitryl wwda destylowana
Ilość /w 1 litrze poż^wk/ 3,0 ml 0,5 g 0,5 g 0,5 g 2 ml rrszta /pH 7,2/ /ii/ Warunki hwdowwi 28°C/70 - 80 godzin
Uzyskane przedstawiiu w tabeli 1.
Można stwierdzić, żr aktywność hydratazy nitrylowej nie ujawnia się. Jeśli FeSO^ dodaje się dw pożywki podsttwowyJ, aktywność hydratazy iitźilywej ujawnia się pw dodaniu CoClg wraz, żr dodanie FeS04 dw układu, dw którrgw dodani C0CI2· niekorzystnie wpływa na wymii.
160 904 /i/ Pożywka A
Składniki
X1 mieszanka witamin
K2HP04 kh2po4
NaCd
MgS04.7H20 woda destylowana xl Skład: biotyna pantotenian wapniowy mozyt kwas nikotynowy chlorowodorek tlaminy chlorowodorek pirydoksyny kwas p-amlnobenzoesowy ryboflawina kwas foliowy woda
Ilość /w 1 litrze pożywU/ 0,1 ml
13.4 g 6.5 g 1.0 g 0.2 g reszta /pH 7,0/ ug 0,4 mg 2 mg 0.4 mg 0,4 mg 0.4 mg 0.2 mg 0.2 mg 0.01 mg do 1 litra /ii/ Pożywka B gliceryna pepton ekstrakt słodowy ekstrakt drożdży woda destylowana /111/ Pożywka C ekstrakt drożdżowy kh2po4
K2HP04 g 5 g 3 9 3 g reszta /pH 7.2/ g 0.5 g 0.5 g 0.5 g reszta /pH 7.2/
MgS04.7H20 woda destylowana /2/ Induktor enzymu
Induktorem enzymu stosowanym w celu indukowania 1 wytwarzania hydratazy nitrylowej w drobnooutrojach Rhodiciccus rhidichrius może być dowolny induktor odpowiedni dla danego drobnoistroiu.
Typowymi induktoi^ami nadającymi sią do stosowania w sposobie według wynalazku eę nitryle 1 amidy.
Przykładami «duk^rów enzymu. których działanie zostało potwierdzone w odniesie^ mu do szczepu 3-1 są krotonam^. acetonitryl. prop^niry!. benzamid. «ΐγ^^^γΐ. izobutyromtryl. n-kaproontryl. 3-pentennm tryl. piwalorntryl. n-butyramid. izobutyramid. n-kaleΓamidl n-kaprinamid, merąkryliemid 1 fenylilcetamid.
/3/ źródło Jonów kobaltu
Hydratazy nitΓyiokej nie uzyskuje sią nawet Jeśli opisany powyżej induktor enzymu Jest obecny w środowisku hodowlanym tak. że istotne jest z punktu widzenia sposobu według wynalazku. aby w środowisku hodowlanym znajdowały się jony kobaatu. Ponieważ środowisko hodowU jest środowiskiem wodnym. jony kobaltu tworzą się zazwyczaj w wyniku dodania do tego środowiska związku kobaltu rozpuszczalnego w wodzie. Związki kobaltu rozpuszczalne » wodzie podane są w podręcznikach chemicznych. w związku z czym specjalista łatwo będzie m<5gł wybrać i zastosować iZpowkedni związek. w pewnych przypadkach wykonując prostą prófcę wstępną. Oo typowych związków kobaltu należą te. które dostarczają Jonu Co** lub Co^*. a zwłaszcza te. które dostarczają Jonu Co**. a konkret nie np. chlorek kobaatu. siarczan kobaltu. octan kobaatu. bromek kobaltu. boran kobaltu itp. Innymi przykładami związków kobaltu są witamina Bj? i kobalt metaliczny. które wytwarzają jony kobaltu ln situ w
160 904 środowisku hodowli przez Jonizację lub oksydacyjne działanie drobnoustroju podczas prowadzenia hodowli.
/4/ Hodowla
W celu wytworzenia i nagromadzenia hydratazy nltryoowej w komórkach bakteryjnych prowadzi się hodowlę stosowanego szczepu 3-1 w opisanym powyżej środowisku hodowli, w odpowiednich warunkach.
Induktor enzymu stosuje się w ilości rzędu 2-6 g/litr środowiska hodoowi, a Jon kobaltu w ilości rzędu 5-15 rng/litr środowiska hodowll, w przeliczeniu na CoC^·
Konktretne przykłady składu mieszaniny stanowiącej środowisko hodowU sę następujące i
| /V | Pożywka A | 1 litr |
| Ace^o^ry! /nnduktor/ | 2 9 | |
| CeClg | 10 mg | |
| /ϋ/ | Pożywka B | 1 litr |
| Izowa ae^om ryl | 2 9 | |
| C^t^3L2 | 10 mg | |
| /ni/ | Pożywka C | 1 litr |
| Krwtwnαaid | 2 g | |
| C0CI2 | 10 mg |
Hydratazę nitryoową można z powodzeniem wytwarzać przez wytrząsanie hodowU 9zczepu 3-1 w temperaturze 15 - 50°C, korzystnie 20 - 45°C, a najkorzystniej około 30°C przy pH 7 - 9 przez około 30 godzin lub dłużej, korzystnie przez 40 godzin lub dłużej, przy górnej granicy np. 120 godzin. Korzystne Jest, aby induktor enzymu był obecny od początkowego stadum dodoowi, a ponadto pożądane Jest wprawiazenie dodatkowych ilości induktora, Jeśli chce się uzyskać komóóki bakteryjne o dużej aktywnooci. Tak np. Jeśli hodowlę z wytrząsanym prowadzi się w 28°C przez 76 godzin, kolejne ilości krotonamidu dodaje się po 26 1 56 godzinach od rozpoczęcia reakeci tak, aby stężenie Jego wyGoo^o 0,;% wagowo/ objętościowych.
4/ Uwaddianie nitrylu
Użyte w opisie określenie sposób wytwarzania amidu na drodze biologicznej, zgodnie z którym nitryl uwadnia się do odpowiedniego amidu w wyniku działania hydratazy nitrylo wej wytwarzanej przez drobnouutroJe wbejauSr. Jak to stwierdzono powyyże, różne realne rozwiązania i warianty zapewr^niające działanie hydratazy nitkowej na nitryl.
3edno z takich rozwiązań obejmuje wytwarzanie amidu w środowisku hodowU wównas, gdy nitryl stanowiący substrat Jest obecny w środowisku hodowU drobnouusrojów.
Inne rozwiązanie zdpθwyiające działanie hydratazy nitΓyWowej na subssrat polega na tym, że w celu przeprowadzenia reakcj hydraaacc i dodaje się substrat nltΓyWowy do środowis ka hod^wl, w którym nagromadzona została hydrataza nitrylowa. Odmiana tego rozwiązania polega na zastosowaniu środowiska bodGow^ w którym komm^! drobnoustrojów zostały zniszczone, jako środowiska hodowli, w którym id/roaaaziłd się hydrataza iltryWowd',.
Kolejne rozwiązanie zapewniające działanie hydratazy nltryWoyrj na substrat polega na wydzieleniu kwmóóθk, w których nagΓomadzlłd się hydrataza nitryWoya, ze środowiska hodrnwi, korzystnie poprzez wprowadzenie komórek na odpowydni nośnik lub ich unieruchomienie , a następnie doprowadzenie do ich kontaktu z substratem. Ten sposób, a ułaszcza korzystne rozwiązanie, zgodnie z którym stosuje się unieruchomione komórki Jest uważany za odpowiedni dla zastosowania przemysłowego tak samo lub bardziej, niż inne rozwiązania opisa ne pw^^ie^. Taki sposób zastosowania unieruchomionych komórek jest powszechnie stosowany, prey czym odnosi się to zar^t^wno do doboru rodzaju nośnika sposobu unieruchomiania drobnoustrojów na nośniki Jak 1 zastosowania unieruchomionych drobnoustrojów w tak zwanym reaktorze biologicznym.
Jeszcze inne rozwiązanie zapeł^nnające działanie hydratami iitryWoyrj na substrat dotyczy sposobu, w którym wytwarza się preparat enzymatyczny hydratazy iltryWoyrj i w
160 904
Tabela 1
Dodany jon metalu I
| •*T’ | “Γ | ||||||||||||||||||
| CoClg | /mg/ 1 | 0 i 0 | 1 | 0 1 | 0 | i | 0 | , | 10 | 10 | 10 | 10 | « | 10 | |||||
| - « » - -I | - - r - | “I | - “ r | T | “ r | •ł | |||||||||||||
| FeS04 | /mg/ , | 0 , 5 | 1 | 10 , | 20 | 1 | 40 | 1 | 0 | 5 | 10 | 20 | I | 40 | |||||
| Mość | komórekχΑ' | - - r - | •| | • - Γ | “ T | “I | |||||||||||||
| 14* | 1,25* | ||||||||||||||||||
| /mg/ml/ ' | 1,06* 1, | 1. | 24* | 1. | 34 | 2,04 | 1,90 | 2,16 | 1,16 | 2,07 | |||||||||
| -___L— | __U | ---L. | —1. | —L. | .1. | t | 1 |
Aktywność enzymatyczna
| U/mg | komm óekx^ | T | 0 | L | 0 | ’ 0 | u | 0 | 0 | . 1 | 0,59 1 , | 0,26 1 | 0,34 | 0,32 | 0,16 1 | ||
| U/ml | pożywki | 0 | 0 | ' 0 | 0 | 0 | 1,20 ' | 0,49 | 0,73 | 0,69 | 0,33 | ||||||
| .1. | _L. | _L___ | _L. | ..1. | —J. | ------4. | - _ 1 _ | 1 |
xl Ilość komórek w przeliczeniu na suchę masę x2 U oznacza jednostkę aktywności zgodnie z podanę wyżej definicję, a Ilość komórek podano w przeliczeniu na suchę mmsę.
Przykład II· Wpływ różnych nitryli lub amidów jako induktorów enzymu na szczep 0-1 podano w tabeli 2 poniżej.
podane w tabeli 2 uzyskano przez wstępnę hodowlę szczepu 0-1 w podanej pożywce B w 28°C, dodanie nitrylu lub emidu Jako induktora w ilości odpowiednio 0,1% objętościowego lub .0,% wagtow/objętościowego, po odpowwedniej proliferencji szczepu, e następnie lnokulację szczepu w wyżej wspomnianej pożywce hodowanej C, do której dodano 0,(011% wagowiWoWjętoścWowegw CoCl? 1 prowadzenie hodowwi przez 36-48 godzin.
Tabela 2
| 1 1 | Aktywność właściwa /U/mg/ | Aktywność całkowita /U/ml/ | 1 “ , | Ilość komórek /mg suchych ^imórk^m/ | 1 | ||
| 1 | 4 - | ||||||
| Krotonamid | 1 | 2,22 | 4,48 | 2,02 | |||
| Αοθ^πΙι^Ι | 1 | 1.41 | 3,47 | 2,46 | |||
| Proplonntryl | , | 1,36 | 4,44 | 3,26 | |||
| Benzamid | 0,84 | 2,75 | 3,26 | ||||
| Prwllonanid | , | 0,79 | 2,29 | 2,90 | |||
| Acetamid | ł | 0,71 | 1,55 | 2,18 | |||
| n-Butyronit ryl | , | 1,40 | 0,38 | 3,70 | |||
| Izwbυtyronitryl | , | 0,41 | 1.24 | 3,06 | |||
| Izow^llerom. t ryl | 1 | 0,34 | 1,05 | , | 3,07 | ||
| n—Kappooiiry1 | t | 0,28 | 1,04 | , | 3,71 | ||
| 3-P en te mom t ryl | I | 0,32 | 1,42 | , | 4,49 | ||
| Piw^lor^it ryl | , | 0,35 | 0,24 | , | 0,69 | ||
| 5 | n*--Sut yroarnd | 1 | 0.43 | 1,55 | 1 | 3,62 | |
| Izobutyroamid | , | 0,09 | 0,33 | 1 | 3,48 | ||
| Izwwaierantd | 1 | | 0.44 | 1,08 | , | 1,81 | ||
| r-Kapronamid | 1 | 0,30 | 1,06 | , | 3,52 | ||
| Metek rylamid | , | 0,20 | 0,62 | , | 3,12 | ||
| Fjnylwajetamtd | 1 | 0,29 | 0,28 | 0,95 | |||
| k |
Przyk ład III. Kommóki szczepu 0-1 otrzmmanw w wyniku hodowiania szczepu w pożywce będącej wyżej wsporniacą pożywkę C z dodatkiem C0CI2 1 krot^^na^^du, odpowiednlw w ilościach 0,01 g i 2 g/litr pożywwi. W pożywce poddawano reakcji różne nitryle stosowane jako suootraty. Reakcję prowadzono stosujęc 2 ml roztworu reakcyjnego zawierającego iwmmΓłil uzyskane z 2 ml ^doowi, 10 mimoi buforu fosforanu potasowego Jako buforu pH 8,0 oraz 200 mmmoi substratu, w 25°C przez 76 godzin. Reakcję przerwano dodajęc do mieszaniny 0,2 ml
160 904 ln HCI. Aktywność hydratazy nitrylowej w odniesieniu do poszczególnych substratów wyrażono Jako stosunek aktywności względem aktywności hydratezy nitr^ylo^wej zmierzonej dla 3-*cyJanopirydyny jako substratu, czyli aktywność właściwą w %, przy czym ilości produktu reakcji lub pozostałego substratu analizowano metodę HPLC /wysokosprawnej chrommtoogafii cieczowej/. Uzyskane wyniki przedstawiono poniżej w tabeli 3.
Tabela 3
| Substrat | i i | Aktywność właściwa /%/ | |
| • 3-Cyjanopirydyna | i | 100 | |
| Akrylonitryl | I | 106 | |
| 1 4-Cyjanopirydyna | i | 129 | |
| 1 2-CyJanopirydynt | i | 64 | |
| * 5-Cyjanzlndol | i | 9 | |
| 2-TiofBornit ryl | i | 116 | |
| 2-Furonettyl | i | 71 | |
| 1 Benzooitryl | 1 | 80 | |
| • 4-CyJtioienol | i | 24 | |
| 1 p-AmlnobbniiZitryl | I | 16 | |
| m-Ni ^benzo^ iryl | i | | 7 | |
| , o-Nitrobenzenni ryl | i | 16 | |
| 1 m-ChloΓobennzzitryl | i | 29 | |
| • p-Tolunmtryl | i | 5 | |
| o-Tolunitryl | i | 46 | |
| m-ToZunitryl | i | 32 | |
| , Anlzonittyl | i | 20 | |
| 1 o-Chlorobenzozitryl | i | 41 | |
| • p-Chlorobenzonitryl | i | 7 | |
| 2,4-OoucClorobeeiiOiiryl | i | 2 | |
| 2,6-DwuchhoΓobeeizoetryl | i | 1 | |
| i Cyjanopirazyna | 1 | 80 |
Przykład IV. V Minowej kolbie Sakeguchi umieszczono 400 ml pożywki będącej wyżej podaną pożywką C z dodatkiem CoClg 1 krotonamidu, w ilościach odpowiednio 0,01 g 1 2 g/litr pożywki, po czym f^rowa^ono hodowlą mieszaniny na wstr^sarce w 28°C. Hodowlą kontynuowano dodając do brzeczki 0,«% wagowooobjątoścoowego krotonamidu /800 mg/
400 ml/ po 30 i 60 godzinach od momentu zapoczątkowania hodowwi. Proces zakończono po upływie 80 godzin od momentu zapoczątkowania hodowwi.
Kommrki bakteryjne oddzielono przez wirowanie brzeczki przy przeciązeniu 12 000 przez 15 minut, w separatorze wirówkowym /model Hitachi SCR 20 B/, po czym przemyto Je 0,85% Nad, ponownie odwirowano 1 zdyspergowano w 40 ml wyżej opisanego roztworu. Niewielką porcją zawiesiny pobrano jak próbkę, którą użyto do oznaczania suchej masy komórek bak teryjnych w zawiesinie.
Zawiesiną zawierającą komórki /w ilości odpowwedającej 2,33 mg suchych komó^k/ dodano do 7 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 m^mZ^. fosforanu potasowego jako buforu /PH 8,0/ i 7,57 mola 3-cyjanopirydyny. Reakcję prooαdionz w 25°C w ciągu nocy, dodając do roztworu reakcyjnego 0,55 mola 1 0,79 mola 3-cyJampirydyny po odpowoednlz 316 godzinach od zapoczątkowania reakcji.
Po 18 godzinach od zapoczątkowania tetkcJl uzyskano 5,58 mola amidu kwasu nikotynowego. W związku z tym stopień przemiany wyniósł 99,5%, co odpowiada nagromadzeniu sif amidu kwasu nikotynowego w ilości 681 g. Przy takim stążeniu mieszanina reakcyjna sią w wyniku osadzenia sią amidu kwasu nikotynowego.
160 904
Uzyskany w ten sposób amid kwasu nikotynowego zidentyfikowano wydzielając produkt w postaci kryształów, które analioowano metodami analizy elementarnne, IR /spektroskopia w podzczrwieen/, NMR /rezonans maagntyczny Jądrowy/ i βρβΗηΒ^ρϋ masowwj. Nie wykryto kwasu nikotynowego·
Przykład V· Zawiesinę zawierającą komórki /w ilości kdpowiadaJąceJ 2,33 mg suchych komór^/, otrzymaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mm© fosforanu potasowego Jako buforu /pH 0,0/ oraz cyjanopirazyną w różnych stężeniach. Reakcją prowadzono w 25°C. 4 mole cyjanopirazyny uległy przemianie w pirazynamid przy stopniu przemiany 100% w ciągu 6 goddin, a 6 moi cyjanopirazyny w ciągu 9 godzin. N^^omast gdy zawiesiną zawierającą koi^rkl bak feryjne w ilości oZpowiadβjącJj
4,66 mg suchych komórek zamiast 2,:33 mg suchych komórek zastosowanych powyżej dodano do 4 ml podobnego roztworu reakcyjnego, po 6 godzinach reakcji 7 moi cyjanopirazyny uległo przemianie w pirazynamid przy stopniu przemiany 100%, a po 9 godzinach 9 moH cyjanopirazyny. Nie stwierdzono powstawania kwasu pirazynokarboisylowego·
Pirazynamid wykrysttalzo^wywał z roztworu w marą tworzenia sią. Krystaliczny osad bezpośrednio zbierano i rJkrystaiikowano z ^^j^i^o1.u. Kryształy ziZJttyiikowano Jako pirazynamid na podstawie analizy metodami analizy elJóβJtarnθr , IR, NMR i spektroskop© ι^βοο^. Analizą cyjanopirazyny, pirazynamidu i kwasu pirezynokarboksykowego prowadzono metodą wysoiosprewtθJ chroimtokrafii ©jczowcJ. Takie same analizy wykonywano również w nastąpnych przykładach.
Przykład VI. Zawiesiną komórek bakteryjnych /w ilości oZpowiadafącej
4,66 mg suchych iomóreJ/, uzyskaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmmki fosforanu potasowego Jako buforu /pH 8,0/ oraz 3 mmle mm^a/υΉπ^^lu, po czym reakcją prowadzono w 35°C dodając 3 mole mytotkytoltirylu do roztworu reakcyjnego po 1 godzinie i po 3 godzinach od zapoczątkowania reskoci. Po 12 godzinach od zapoczątkowanie reskeci uzyskano 9 moH merakrylamlZu przy stopniu przemiany 100%.
W powyższej reskoci, gdy dodatkowo 1 ml metotkytonttrylu wprowadzono po 5 godzinach od zapoczątkowania resk^i, uzyskano 10 mm© mei^t^ryl^^mldu przy stopniu przemiany 100% po upływie 24 godzin od zapoczątkowania reskeci. Oznacza to, że wytworzono i nagromadzono 851 g metakrylemldu na 1 litr roztworu reakcyjnego. Roztwór reakcyjny rozcieńczono wodę, po czym kommóki bak feryjne usuniąto przez wirowania przy przeciążeniu 12 000 g przez 15 minut. Roztwór nie zawierający komórek zatężono w wyparce rotacyjne© a nastąpnie krysOαlioowαtl· Kryształy rozpuszczono 1 rtkrystalikowato z wody uzyskując kryształy ^^et^l^^yl^a^^du.
Przykład VII. Zawiesiną komórek bakteryjnych /w ilości lZpowiadatącej
4,66 mg suchych otzzymaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mm© fosforanu potasowego Jako buforu /pH 8,0/ i 1 mol krotonitrylu, po czym reakcją prowadzono w 25°C dodając iiącikirottie po 1 mmlu irltonltrylu do roztworu reakcyjnego co goZdin^. Po 6 godzinach od zapoczątkowania reakeci uzyskano 6 mm© krotonamidu przy stopniu przemiany 100%. Gdy dodatkowo dodano po 1 mmlu krotonitrylu do roztworu reakcyjnego po 6 i 10 godzinach uzyskano 7 mli i 8 m© krltltamiZu przy stopniu przemiany 100%. Odpowiada to wytworzeniu i nagromadzeniu sią 681 g krltlnamiZu w 1 litzze roztworu. Krystalizacją krktktαylZu przeprowadzono w ten sam sposób Jak w przykładzie VI.
Przyk ład VCXI. Zawiesiną komórek bakteryjnych /w ilości oZpowiadβtącej
4,66 mg suchych kommóre/, uzyskaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 m^moi fosforanu potasowego jako buforu / pH 8,0/ i 3 mole acetonmtryłu, po cz^m reakcją prowadzono w 25°C dodając po 3 mole acetonitrylu do roztworu reakcyjnego po 1 i 3 godzinach od rozpoczącia reakcji i 5 mdi acetonitrylu po 6 godzinach od rozpoczęcia reskoci. Po 12 godzinach od rozpoczęcia reakcji uzyskano 14 moll acetamidu przy stopniu przemiany 100%. Innymi słowy wytworzono i nagromadzono acetamid w ilości 827 g/litr roztworu reakcyjnego. Roztwór reakcyjny rozcieńczono wodą, po czym odwirowano w celu usurnącia komórek bakteryjnych. Ciecz zatężono do sucha w wyparce rotacyjnej , rozpuszczono w metanolu i irysoalioowano uzyskując kryształy acetamidu.
160 904
Przyk ład IX. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadajęcej 4,66 mg suchych kornmrre/, otrzymana w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierajęcego 10 mmmli fosforanu potasowego, jako buforu /pH 8,0/ i 3 mole 3-hydroksypropionitrylu, po czym realccję prowadzono w 25°C dodając czterokrotnie po 3 mole 3-hydolksy-* propionitrylu w odstępach czasu co 1 godzinę. Po 5 godzinach od rozpoczęcia reakcji uzyskano 15 mdi 3^h^dr^^^sy^pr^^po^r^^mi^du przy stopniu przemiany 100%. Gdy na tym etapie dodano jeszcze 3 mola 3-hydmksyprooiooitrylu, po 11 godzinach od rozpoczęcia reakcji uzyskano 18 moi 3-hydroksyproplonaoidu przy stopniu przemiany 100%. Oznacza to, ze wytworzono i nagromadzono 3-hydro/syprorlOlαold w ilości 1600 g/litr roztworu reakcyjnego.
Roztwór reakcyjny rozcieńczono wodę i odwirowano w celu usunięcia komórek. Roztwór nie zawierający komórek zatęzono w wyparce rotacyjnej i krystainwwano w tem^pr^tuo^θ -20°C. Kryształy rozpuszczono w izo^opam^ i po rekrystalizacji z tego rozpuszczalnika uzyskano kryształy 3-hydroksyrrorloneoidu.
Przykład X. W 1-liroowej kolbie Sakaguchi umieszczono 400 ml pożywki bęoą cej wyżej podanę pożywkę C z dodatkiem C0CI2 i krotonamidu, w ilościach odpowiednio 0,01 g 1 2 ^1-itr pozywkk, po czym prowadzono hodowlę meszaniny na wstrzęsarce w 28°C. Hodowlę kontynuowano dodajęc do brzeczki 0,25 iagowi/objętlέclowego krotonamidu /800 mg/400 ml/ 00 36 1 56 godzinach od zaroczętkowania hodoowi. Proces zakończono po 76 godzinach od zapoczątkowania hodo^l.
KomOóki bakteryjne oddzielono przez wirowanie brzeczki przy przeciążeniu 10000 g przez 20 minut w separatorze wirówkowym /model Hitachi SCR 208/, po czym przemyto je 0,85 NaCl, plnlinle odwirowano i zdyspergowano w 40 ml wyżej opisanego roztworu, Niewielkę porcję zaw.esny pobrano jako próbkę, którę użyto do oznaczana suchej masy komórek. Zawiesinę zawierającę komórki /w ilości odpowiadajęcβj 2,96 mg suchych komórek/ dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 ornoU fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ 1 cyjan^rydy^ w różny^cfi stęzeniachi. Reakcję prowe^ono w 25°C. 8 ooh 3-cyjallplrydyny uległo rrzam.alle w nlkotyllenle przy stopniu przemiany 10C% w cięgu 9 godzin, a 9 m>o^ cyjanopirydyny w ciągu 22 godzin. Natomiast gdy zawiesinę zawierającę kooOóki bale feryjne w ilości ldpowiβdaJącaj 5,92 mg suchych komórek zamiast 2,96 mg suchych komórek dodano do 4 ml podobnego roztworu reakcyjnego, po 5 godzinach reakcji 9 moU 3-cyjanoriΓydyly uległo przemianie w nikltynαmίd przy stopniu przemiany 100%, a po 9 godzinach reakcji 12 mdi 3-cyja., pirydyny, co oznacza, że wytworzono i nagromadzono 1,765 g ni/otyn^mldu na litr roztworu reakcyj nego.
Nikotynamid wykrystalioowywał z roztworu w marę tworzenia się. Krystaliczny osad zebrano 1 oe/oystallOiwanl z metanolu.
Przykład XI. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości ldpowiadająceJ
5,92 mg suchych komórek/, uzyskanę w przykładzie X, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego z3 witającego 10 mmoU fosforanu potasowego Jako buforu /pH 8,0/ i 1 mol benzzoUrylu, po czym otakcJę prowadzono w 25°C Udając 1 mol benzomtr^u do roztworu rea^y^ego po 1, 2,
3, 4, 5 i 7 godzinach od iapocięt/lwania reakcji. Po 24 godzinach od zapoczętklw3nia otalc.l:^ otrzomano 7 mdi /848 g/litr/ btniaoidu przy stopniu przemiany 100%.
Przykład XII. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadająco,;
5,92 mg suchych komórek/, uiys/enę w przykładzie X, dodano do 4 ol roztworu reakcyjnego zawieraj ęcego 10 omoH fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ 1 0,5 mola 2,6-dwuflu'or~IcenzooUrylu, po czym prowadzono realccję w 25°C dodając 0»5 mola 2,6-^υί J.uorobenzcri.rfydo roztworu reakcyjnego po 2, 4, 6 1 8 godzinach od zapoczątkowania reskeci. Po 22 godzinach od zαroczątkowanlα reakcji otrzymano 2,5 mola /393 g/litr/ 2,6-dwufluocobenzamidu przy stopniu przemiany 100%.
Przykład XIII. Zewiθsilą komórek bak teryj nych /w ilości odpowiadajęcs,,
5,92 mg suchych kod^r^lc/, uzyskaną w przykładzie X, dodano do 4 ol roztworu reakcyjnego zawierającego 10 ornoU fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ 1 1 ool 2-tioftlllj^ιrbl— nitrylu, po czyo realccję prowadzono w 25°C dodajc 1 ool 2-t^^no^r^nitr^u do roz^oi·
160 904 reakcyjnego po 1 godzinie od zapoczątkowania reakcji· Po 5 godzinach od zapoczątkowania reakcji otrzymano 2 mole /254 g/litr/ 2-tiofnookrronnamidu przy stopniu przemiany 100%·
Przykład XIV· Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 5.92 mg suchych kimmrθkO, uzyskaną w przykładzie X, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmmoi fosforanu potasowego Jako buforu /pH 8,0/ i 1 mol 2-0uronitrylu, po czym reakcję prowadzono w 25°0 dodając 1 mol 2-furonitrylu do roztworu realtcyj nego po 1, 2, 4, 6, 8, 11 i 23 godzinach od zapoczątkowanie reskoci. Po 30 godzinach od zapoczątkowania reakcji otrzymano 8 /888 g/litr/ 2-furanokarbonamidu przy stopniu przemiany 100%.
Przykład XV· Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowwadającej
5,92 mg suchych komórek/, uzyskaną w przykładzie X, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmmU fosforanu potasowego jako buforu'/pH 8,0/ i 4 mole 3-indolircetomtrylu, po czym reakcję prowadzono w 25°0· Po 24 godzinach od zapocz^^wania reakcji otrzymano 4 mole /697 g/litr/ 3-indoloacetamidu przy stopniu przemiany 100%· (o3-cn
Wzór 1
Wzór 3
CN r4o3r2
Wzór 2
O-CN
Wzór 4 (^CN
Wzór 6
Zakład Wydawnictw UP RP. Cakład 90 egz.
Cena 10 000 zł
Claims (4)
1. Sposób wytwarzania amidów na drodze biologicznej, polegający na hydratacji nitrylu do odpowiedniego amidu w wyniku działania hydratazy nitrylowej wytwarzanej przez drobnoustrój, znamienny tym, że Jako hydratazę nitryoowę stosuje się hydratazę nitry^Ną wytworzoną przez hodowlę szczepu 3-1 gatunku Rhodococcus rhodochrous, FERM BP-1478, w obecności Jonów kobaltu·
2. Sposób według zas^z.!, znamienny t y n, że Jako nitryl stosuje się nitryl aromatyczny zawierający 4 - 10 atomów węgla w pierścieniu aromatycznym.
3. Sposób według zastrz.2, znamienny tym, że Jako nitryl aromatyczny stosuje się związek wybrany z grupy obejmującej związek o wzorze 1, związek o wzorze 2, w 1 2 którym R i R oznaczają atom wodoru, chloru lub fluoru albo grupę Ch?, OH, OCH?, CN, NH? lub NO?, związek o wzorze 3, związek o wzorze 4, w którym X oznacza atom siarki lub tlenu oraz związek o wzorze 5·
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23459787 | 1987-09-18 | ||
| JP7276688 | 1988-03-26 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL274710A1 PL274710A1 (en) | 1989-05-02 |
| PL160904B1 true PL160904B1 (pl) | 1993-05-31 |
Family
ID=26413903
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL88293521A PL161959B1 (pl) | 1987-09-18 | 1988-09-16 | Sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej PL PL |
| PL1988274710A PL160904B1 (pl) | 1987-09-18 | 1988-09-16 | Sposób wytwarzania amidów PL PL |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL88293521A PL161959B1 (pl) | 1987-09-18 | 1988-09-16 | Sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej PL PL |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5334519A (pl) |
| EP (1) | EP0307926B1 (pl) |
| JP (1) | JPH0655148B2 (pl) |
| KR (1) | KR0134094B1 (pl) |
| CN (1) | CN1015473B (pl) |
| AT (1) | ATE85082T1 (pl) |
| BG (1) | BG48934A3 (pl) |
| BR (1) | BR8804804A (pl) |
| CA (1) | CA1298222C (pl) |
| DD (1) | DD274631A5 (pl) |
| DE (1) | DE3877869T2 (pl) |
| DK (1) | DK174516B1 (pl) |
| ES (1) | ES2043752T3 (pl) |
| FI (1) | FI93858C (pl) |
| HU (1) | HU204099B (pl) |
| MX (1) | MX169933B (pl) |
| NO (1) | NO175489C (pl) |
| PL (2) | PL161959B1 (pl) |
| PT (1) | PT88540B (pl) |
| RO (1) | RO101578B (pl) |
| RU (1) | RU1838416C (pl) |
Families Citing this family (60)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU627648B2 (en) * | 1990-02-28 | 1992-08-27 | Teruhiko Beppu | Dna fragment encoding a polypeptide having nitrile hydratase activity, a transformant containing the gene and a process for the production of amides using the transformant |
| JP3009421B2 (ja) * | 1990-02-28 | 2000-02-14 | 秀明 山田 | 有機酸の生物学的製造法 |
| US5648256A (en) * | 1990-02-28 | 1997-07-15 | Nitto Chemical Industry Co., Ltd. | Gene encoding a polypeptide having nitrile hydratase activity, a transformant containing the gene and a process for the production of amides using the transformant |
| DE69126762T2 (de) * | 1990-11-14 | 1997-10-23 | Nitto Chemical Industry Co Ltd | Biologisches Verfahren zur Herstellung von Alpha-Hydroxyamid und Alpha-Hydroxysäure |
| US5753472A (en) * | 1991-05-02 | 1998-05-19 | Nitto Chemical Industry Co. Ltd. | DNA fragment encoding a polypeptide having nitrile hydratase activity, a transformant containing the gene and a process for the production of amides using the transformant |
| JPH05244968A (ja) * | 1991-08-16 | 1993-09-24 | Mitsui Toatsu Chem Inc | α−ヒドロキシイソブチルアミドの製造法 |
| GEP20012441B (en) * | 1993-04-02 | 2001-05-25 | Lonza Ag | Process for Preparing 3-Methylpiperidine and 3-Methylpyridine |
| RU2053300C1 (ru) * | 1993-12-17 | 1996-01-27 | Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов | Штамм бактерий rhodococcus rhodochrous - продуцент нитрилгидратазы |
| KR100339723B1 (ko) * | 1994-02-01 | 2002-09-25 | 스미또모 가가꾸 고오교오 가부시끼가이샤 | 미생물을사용한아미드화합물의제조방법 |
| JP3235934B2 (ja) | 1994-08-04 | 2001-12-04 | 三菱レイヨン株式会社 | ロドコッカス属細菌由来カナマイシン耐性遺伝子 |
| JP3163224B2 (ja) * | 1994-10-14 | 2001-05-08 | 三菱レイヨン株式会社 | 菌体または固定化菌体の懸濁液の保存方法 |
| ZA968485B (en) * | 1995-11-01 | 1997-05-20 | Lonza Ag | Process for preparing nicotinamide |
| CH689831A5 (de) * | 1995-11-07 | 1999-12-15 | Eprova Ag | Stabile kristalline Tetrahydrofolsaeure-Salze. |
| GB9525372D0 (en) * | 1995-12-12 | 1996-02-14 | Allied Colloids Ltd | Enzymes, their preparation and their use in the production of ammonium acrylate |
| EP0790310B1 (en) | 1996-02-14 | 2008-10-08 | Mitsui Chemicals, Inc. | Nitrile hydratase, derivatives thereof and methods of producing compounds |
| US5728556A (en) * | 1996-03-14 | 1998-03-17 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Production of ω-cyanocarboxamides from aliphatic α,ω-dinitriles using pseudomonas putida-derived biocatalysts |
| US5863750A (en) * | 1996-12-18 | 1999-01-26 | Cytec Tech Corp | Methods for the detoxification of nitrile and/or amide compounds |
| US5866379A (en) * | 1997-01-28 | 1999-02-02 | Novus International | Enzymatic conversion of α-hydroxynitriles to the corresponding .alpha. |
| JP4302876B2 (ja) * | 1997-07-22 | 2009-07-29 | ロンザ ア−ゲ− | アミドの調製方法 |
| JP3428404B2 (ja) * | 1997-10-23 | 2003-07-22 | 三菱レイヨン株式会社 | アミド化合物の製造方法 |
| US6153415A (en) | 1998-04-29 | 2000-11-28 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Method for producing amide compounds using a nitrile hydratase from a thermophilic bacillus |
| NL1011867C2 (nl) * | 1999-04-22 | 2000-10-24 | Dsm Nv | Werkwijze voor de bereiding van een lineair, onverzadigd C3 - C8 carbonzuur. |
| EP1174482B1 (en) | 1999-04-27 | 2015-08-05 | Nok Corporation | Gasket |
| DE60129547T2 (de) * | 2000-03-21 | 2008-04-17 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Verfahren zur kultivierung von mikroorganismen |
| US6562603B2 (en) * | 2000-08-04 | 2003-05-13 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | 3-hydroxycarboxylic acid production and use in branched polymers |
| KR100407470B1 (ko) * | 2000-08-08 | 2003-11-28 | 동서석유화학주식회사 | 로도코커스 로도크로스의 유가식 회분 배양방법 및 상기배양방법에 의해 배양된 로도코커스 로도크로스를이용하여 니트릴 화합물로부터 아미드 화합물을 제조하는방법 |
| JP4708677B2 (ja) * | 2000-12-20 | 2011-06-22 | ダイヤニトリックス株式会社 | 微生物触媒を用いたアミド化合物の製造方法 |
| ES2319875T3 (es) | 2001-01-09 | 2009-05-14 | Lonza Ag | Procedimiento microbiologico para la producion de amidas. |
| DE10120555A1 (de) * | 2001-04-26 | 2002-10-31 | Stockhausen Chem Fab Gmbh | Verfahren zur Herstellung einer wässrigen Acrylamidlösung mit einem Biokataysator |
| DE10120550A1 (de) | 2001-04-26 | 2002-10-31 | Stockhausen Chem Fab Gmbh | Verfahren zur Herstellung einer wässrigen Acrylamidlösung mit einem Biokatalysator |
| DE10120546A1 (de) * | 2001-04-26 | 2002-10-31 | Stockhausen Chem Fab Gmbh | Verfahren zur Herstellung einer wässrigen Acrylamidlösung mit einem Biokatalysator |
| JPWO2003033716A1 (ja) * | 2001-10-12 | 2005-02-03 | ダイヤニトリックス株式会社 | 微生物触媒によるアクリルアミド及び／又はメタクリルアミドの製造方法 |
| JP2004194588A (ja) | 2002-12-19 | 2004-07-15 | Mitsui Chemicals Inc | 新規なニトリルヒドラターゼ |
| GB0327901D0 (en) | 2003-12-02 | 2004-01-07 | Ciba Spec Chem Water Treat Ltd | Process for producing polymers |
| GB0327906D0 (en) * | 2003-12-02 | 2004-01-07 | Ciba Spec Chem Water Treat Ltd | Biocatalyst composition |
| BRPI0417244B1 (pt) | 2003-12-02 | 2015-05-26 | Ciba Spec Chem Water Treat Ltd | Métodos para cultivo e armazenamento de rhodococcus rhodochrous, bem como para melhorar atividade biocatalítica do mesmo, e processo para preparação de amida |
| DE602004024329D1 (de) | 2003-12-02 | 2010-01-07 | Ciba Spec Chem Water Treat Ltd | Herstellung von amiden |
| GB0327900D0 (en) | 2003-12-02 | 2004-01-07 | Ciba Spec Chem Water Treat Ltd | Process for preparing unsaturated amides and carboxylic acids |
| JP2005328787A (ja) * | 2004-05-21 | 2005-12-02 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | ニトリルヒドラターゼ活性を有する新規な微生物、ニトリルヒドラターゼをコードする遺伝子及びアミド化合物の製造方法 |
| JP4493011B2 (ja) * | 2004-06-11 | 2010-06-30 | 三菱レイヨン株式会社 | ロドコッカス属細菌由来トリメトプリム耐性ジヒドロ葉酸還元酵素及びその遺伝子 |
| JP2008306928A (ja) * | 2005-10-06 | 2008-12-25 | Mitsui Chemicals Inc | コバルト型ニトリルヒドラターゼ産生微生物の培養方法 |
| CA2676926C (en) | 2006-01-30 | 2017-10-10 | Georgia State University Research Foundation, Inc. | Induction of enzymatic activity in nitrile hydratase-producing bacteria |
| US7943549B2 (en) | 2007-04-02 | 2011-05-17 | Georgia State University Research Foundation, Inc. | Biological-based catalyst to delay plant development processes |
| JP5132979B2 (ja) * | 2007-04-27 | 2013-01-30 | ダイヤニトリックス株式会社 | ポリアクリルアミド及びその製造方法 |
| WO2009009117A2 (en) * | 2007-07-11 | 2009-01-15 | Bioverdant, Inc. | Chemoenzymatic processes for preparation of levetiracetam |
| US8569012B2 (en) * | 2008-03-14 | 2013-10-29 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Method for stabilization of aqueous acrylamide solution |
| CN101481713B (zh) * | 2008-12-30 | 2011-12-21 | 浙江工业大学 | 生物催化2-氰基吡嗪生产吡嗪酰胺的方法及其菌株 |
| CN102844295B (zh) | 2010-02-22 | 2015-05-20 | 大野绿水株式会社 | 稳定的丙烯酰胺水溶液 |
| KR101878012B1 (ko) | 2011-05-19 | 2018-07-12 | 미쯔비시 케미컬 주식회사 | 아크릴아미드 수용액의 제조 방법 |
| US9102590B2 (en) | 2011-05-19 | 2015-08-11 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Method for producing acrylamide aqueous solution |
| CN103687845A (zh) | 2011-05-19 | 2014-03-26 | 三菱丽阳株式会社 | 丙烯酰胺水溶液、丙烯酰胺水溶液的稳定化剂、丙烯酰胺水溶液的稳定化方法 |
| KR101736018B1 (ko) | 2012-02-28 | 2017-05-15 | 미쯔비시 케미컬 주식회사 | 효소의 보존 방법 |
| FR3002542B1 (fr) * | 2013-02-28 | 2016-01-22 | Servier Lab | Procede de synthese enzymatique de l'acide (7s) 3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-triene 7-carboxylique et application a la synthese de l'ivabradine et de ses sels |
| US10004237B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-06-26 | Georgia State University Research Foundation, Inc. | Inhibiting or reducing fungal growth |
| EP2970889A4 (en) | 2013-03-14 | 2016-10-19 | Univ Georgia State Res Found | PREVENTING OR DELAYING RESPONSE TO COLD-DAMAGE IN PLANTS |
| EP3155089A4 (en) | 2014-06-10 | 2017-11-22 | Georgia State University Research Foundation, Inc. | Inhibiting or reducing fungal infections |
| CN104762338A (zh) * | 2015-03-17 | 2015-07-08 | 安徽国星生物化学有限公司 | 一种红球菌催化生产烟酰胺的方法 |
| GB201601558D0 (en) * | 2016-01-28 | 2016-03-16 | Verdant Bioproducts Ltd | Method for producing 3-hydroxypropionamide |
| CN113025671B (zh) * | 2020-06-23 | 2023-01-31 | 浙江恒康药业股份有限公司 | 苜蓿中华根瘤菌来源的腈水合酶在制备酰胺吡嗪类化合物中的应用 |
| CN112625065A (zh) * | 2020-12-22 | 2021-04-09 | 北京师范大学 | 锝-99m标记含肼基尼古酰胺基的FAPI衍生物及制备方法和应用 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4629700A (en) * | 1983-11-30 | 1986-12-16 | Standard Oil Company (Indiana) | Selective conversion of cyano compounds to amides and carboxylic acids |
| JPS61162193A (ja) * | 1985-01-08 | 1986-07-22 | Nitto Chem Ind Co Ltd | 微生物によるアミド類の製造法 |
| JPH0740948B2 (ja) * | 1985-06-04 | 1995-05-10 | 旭化成工業株式会社 | アミドの微生物学的製造法 |
| JP3009421B2 (ja) * | 1990-02-28 | 2000-02-14 | 秀明 山田 | 有機酸の生物学的製造法 |
-
1988
- 1988-09-14 DD DD88319783A patent/DD274631A5/de unknown
- 1988-09-14 MX MX013025A patent/MX169933B/es unknown
- 1988-09-15 CA CA000577427A patent/CA1298222C/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 BG BG085446A patent/BG48934A3/xx unknown
- 1988-09-16 JP JP63231744A patent/JPH0655148B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 NO NO884114A patent/NO175489C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 PL PL88293521A patent/PL161959B1/pl unknown
- 1988-09-16 DK DK198805166A patent/DK174516B1/da active
- 1988-09-16 PL PL1988274710A patent/PL160904B1/pl unknown
- 1988-09-16 KR KR1019880011974A patent/KR0134094B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 BR BR8804804A patent/BR8804804A/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 HU HU884887A patent/HU204099B/hu unknown
- 1988-09-16 RO RO135188A patent/RO101578B/ro unknown
- 1988-09-16 DE DE8888115182T patent/DE3877869T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 FI FI884279A patent/FI93858C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 PT PT88540A patent/PT88540B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 RU SU884356476A patent/RU1838416C/ru active
- 1988-09-16 AT AT88115182T patent/ATE85082T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 EP EP88115182A patent/EP0307926B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 ES ES88115182T patent/ES2043752T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-17 CN CN88106735A patent/CN1015473B/zh not_active Expired
-
1991
- 1991-10-15 US US07/777,641 patent/US5334519A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL160904B1 (pl) | Sposób wytwarzania amidów PL PL | |
| PL161863B1 (en) | Method of cultivating bacteriae of rhodococcus rhodochrus species | |
| US7556956B2 (en) | Enzymes for the preparation of amides | |
| DE69738080T2 (de) | Biokatalysatoren mit amin-acylase aktivität | |
| JP4307837B2 (ja) | アミド類を生成するための微生物学的方法 | |
| JPH02227069A (ja) | 細菌の培養法 | |
| JPH02100674A (ja) | 細菌の培養法 | |
| JPH0773503B2 (ja) | アミドの生物学的製造法 |