PL161959B1 - Sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej PL PL - Google Patents
Sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej PL PLInfo
- Publication number
- PL161959B1 PL161959B1 PL88293521A PL29352188A PL161959B1 PL 161959 B1 PL161959 B1 PL 161959B1 PL 88293521 A PL88293521 A PL 88293521A PL 29352188 A PL29352188 A PL 29352188A PL 161959 B1 PL161959 B1 PL 161959B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- reaction
- nitrile hydratase
- hours
- moles
- cells
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 28
- 102000004867 Hydro-Lyases Human genes 0.000 title 1
- 108090001042 Hydro-Lyases Proteins 0.000 title 1
- 108010024026 Nitrile hydratase Proteins 0.000 claims abstract description 50
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 20
- 229910001429 cobalt ion Inorganic materials 0.000 claims abstract description 14
- XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N cobalt(2+) Chemical compound [Co+2] XLJKHNWPARRRJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 241000187693 Rhodococcus rhodochrous Species 0.000 claims abstract description 9
- 238000012258 culturing Methods 0.000 abstract description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 90
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 48
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 43
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 29
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 23
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 21
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 20
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 19
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 19
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N benzonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC=C1 JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N Nicotinamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CN=C1 DFPAKSUCGFBDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- -1 acrylonitrile Chemical class 0.000 description 16
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 16
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 16
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 14
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 12
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 11
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- GZPHSAQLYPIAIN-UHFFFAOYSA-N 3-pyridinecarbonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CN=C1 GZPHSAQLYPIAIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000008057 potassium phosphate buffer Substances 0.000 description 10
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical compound CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KXDAEFPNCMNJSK-UHFFFAOYSA-N Benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC=C1 KXDAEFPNCMNJSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- PMSVVUSIPKHUMT-UHFFFAOYSA-N cyanopyrazine Chemical compound N#CC1=CN=CC=N1 PMSVVUSIPKHUMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000005152 nicotinamide Nutrition 0.000 description 8
- 239000011570 nicotinamide Substances 0.000 description 8
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 7
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 7
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229960003966 nicotinamide Drugs 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 6
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 6
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 6
- 229960005206 pyrazinamide Drugs 0.000 description 6
- IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N pyrazinecarboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CC=N1 IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N Phosgene Chemical compound ClC(Cl)=O YGYAWVDWMABLBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- FQPSGWSUVKBHSU-UHFFFAOYSA-N methacrylamide Chemical compound CC(=C)C(N)=O FQPSGWSUVKBHSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- FFNVQNRYTPFDDP-UHFFFAOYSA-N 2-cyanopyridine Chemical compound N#CC1=CC=CC=N1 FFNVQNRYTPFDDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LSBDFXRDZJMBSC-UHFFFAOYSA-N 2-phenylacetamide Chemical compound NC(=O)CC1=CC=CC=C1 LSBDFXRDZJMBSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SMGLHFBQMBVRCP-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxypropanamide Chemical compound NC(=O)CCO SMGLHFBQMBVRCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 4
- WFKAJVHLWXSISD-UHFFFAOYSA-N isobutyramide Chemical compound CC(C)C(N)=O WFKAJVHLWXSISD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- BEOUGZFCUMNGOU-UHFFFAOYSA-N tuberculostearic acid Chemical compound CCCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O BEOUGZFCUMNGOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BNBRIFIJRKJGEI-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluorobenzonitrile Chemical compound FC1=CC=CC(F)=C1C#N BNBRIFIJRKJGEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXDXXGXWFJCXEB-UHFFFAOYSA-N 2-furonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CO1 YXDXXGXWFJCXEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSGYTJNNHPZFKR-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxypropanenitrile Chemical compound OCCC#N WSGYTJNNHPZFKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NLHHRLWOUZZQLW-UHFFFAOYSA-N Acrylonitrile Chemical compound C=CC#N NLHHRLWOUZZQLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- GYCMBHHDWRMZGG-UHFFFAOYSA-N Methylacrylonitrile Chemical compound CC(=C)C#N GYCMBHHDWRMZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000316848 Rhodococcus <scale insect> Species 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001869 cobalt compounds Chemical class 0.000 description 3
- NKKMVIVFRUYPLQ-NSCUHMNNSA-N crotononitrile Chemical compound C\C=C\C#N NKKMVIVFRUYPLQ-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 3
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- FVSKHRXBFJPNKK-UHFFFAOYSA-N propionitrile Chemical compound CCC#N FVSKHRXBFJPNKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- CUPOOAWTRIURFT-UHFFFAOYSA-N thiophene-2-carbonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CS1 CUPOOAWTRIURFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- UVKXJAUUKPDDNW-NSCUHMNNSA-N (e)-pent-3-enenitrile Chemical compound C\C=C\CC#N UVKXJAUUKPDDNW-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YHYLDEVWYOFIJK-UHFFFAOYSA-N 1h-indole-5-carbonitrile Chemical compound N#CC1=CC=C2NC=CC2=C1 YHYLDEVWYOFIJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GRUHREVRSOOQJG-UHFFFAOYSA-N 2,4-dichlorobenzonitrile Chemical compound ClC1=CC=C(C#N)C(Cl)=C1 GRUHREVRSOOQJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWPNXBQSRGKSJB-UHFFFAOYSA-N 2-methylbenzonitrile Chemical compound CC1=CC=CC=C1C#N NWPNXBQSRGKSJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBAZINRZQSAIAY-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzonitrile Chemical compound NC1=CC=C(C#N)C=C1 YBAZINRZQSAIAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CVNOWLNNPYYEOH-UHFFFAOYSA-N 4-cyanophenol Chemical compound OC1=CC=C(C#N)C=C1 CVNOWLNNPYYEOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XDJAAZYHCCRJOK-UHFFFAOYSA-N 4-methoxybenzonitrile Chemical compound COC1=CC=C(C#N)C=C1 XDJAAZYHCCRJOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- CFEYBLWMNFZOPB-UHFFFAOYSA-N Allylacetonitrile Natural products C=CCCC#N CFEYBLWMNFZOPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- 229940127463 Enzyme Inducers Drugs 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 2
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 2
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 2
- DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N butanamide Chemical compound CCCC(N)=O DNSISZSEWVHGLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KVNRLNFWIYMESJ-UHFFFAOYSA-N butyronitrile Chemical compound CCCC#N KVNRLNFWIYMESJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- ALBYIUDWACNRRB-UHFFFAOYSA-N hexanamide Chemical compound CCCCCC(N)=O ALBYIUDWACNRRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AILKHAQXUAOOFU-UHFFFAOYSA-N hexanenitrile Chemical compound CCCCCC#N AILKHAQXUAOOFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001822 immobilized cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 2
- DMCPFOBLJMLSNX-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetonitrile Chemical compound C1=CC=C2C(CC#N)=CNC2=C1 DMCPFOBLJMLSNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940047889 isobutyramide Drugs 0.000 description 2
- LRDFRRGEGBBSRN-UHFFFAOYSA-N isobutyronitrile Chemical compound CC(C)C#N LRDFRRGEGBBSRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QHDRKFYEGYYIIK-UHFFFAOYSA-N isovaleronitrile Chemical compound CC(C)CC#N QHDRKFYEGYYIIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N pyrazine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1=CN=CC=N1 NIPZZXUFJPQHNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GPHQHTOMRSGBNZ-UHFFFAOYSA-N pyridine-4-carbonitrile Chemical compound N#CC1=CC=NC=C1 GPHQHTOMRSGBNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- CDVZCUKHEYPEQS-SNQKNWKTSA-N (2r,3s,4r)-2,3,4,5-tetrahydroxypentanal;(2r,3s,4s)-2,3,4,5-tetrahydroxypentanal Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O CDVZCUKHEYPEQS-SNQKNWKTSA-N 0.000 description 1
- YOYAIZYFCNQIRF-UHFFFAOYSA-N 2,6-dichlorobenzonitrile Chemical compound ClC1=CC=CC(Cl)=C1C#N YOYAIZYFCNQIRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVRQBXVUUXHRMY-UHFFFAOYSA-N 2,6-difluorobenzamide Chemical compound NC(=O)C1=C(F)C=CC=C1F AVRQBXVUUXHRMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHWQMJMIYICNBP-UHFFFAOYSA-N 2-chlorobenzonitrile Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C#N NHWQMJMIYICNBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SWBDKCMOLSUXRH-UHFFFAOYSA-N 2-nitrobenzonitrile Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC=C1C#N SWBDKCMOLSUXRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BOHCMQZJWOGWTA-UHFFFAOYSA-N 3-methylbenzonitrile Chemical compound CC1=CC=CC(C#N)=C1 BOHCMQZJWOGWTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RUSAWEHOGCWOPG-UHFFFAOYSA-N 3-nitrobenzonitrile Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC(C#N)=C1 RUSAWEHOGCWOPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GJNGXPDXRVXSEH-UHFFFAOYSA-N 4-chlorobenzonitrile Chemical compound ClC1=CC=C(C#N)C=C1 GJNGXPDXRVXSEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940090248 4-hydroxybenzoic acid Drugs 0.000 description 1
- VCZNNAKNUVJVGX-UHFFFAOYSA-N 4-methylbenzonitrile Chemical compound CC1=CC=C(C#N)C=C1 VCZNNAKNUVJVGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BNVBGGSZOYFBKV-UHFFFAOYSA-N C(#N)N1CC=NC=C1.ClC1=C(C#N)C(=CC=C1)Cl Chemical compound C(#N)N1CC=NC=C1.ClC1=C(C#N)C(=CC=C1)Cl BNVBGGSZOYFBKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010033272 Nitrilase Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000008431 aliphatic amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 229960004050 aminobenzoic acid Drugs 0.000 description 1
- DVARTQFDIMZBAA-UHFFFAOYSA-O ammonium nitrate Chemical compound [NH4+].[O-][N+]([O-])=O DVARTQFDIMZBAA-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- BHXFKXOIODIUJO-UHFFFAOYSA-N benzene-1,4-dicarbonitrile Chemical compound N#CC1=CC=C(C#N)C=C1 BHXFKXOIODIUJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 229940011182 cobalt acetate Drugs 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940044175 cobalt sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229910000361 cobalt sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- KTVIXTQDYHMGHF-UHFFFAOYSA-L cobalt(2+) sulfate Chemical compound [Co+2].[O-]S([O-])(=O)=O KTVIXTQDYHMGHF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 description 1
- WEZJBAOYGIDDLB-UHFFFAOYSA-N cobalt(3+);borate Chemical compound [Co+3].[O-]B([O-])[O-] WEZJBAOYGIDDLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QAHREYKOYSIQPH-UHFFFAOYSA-L cobalt(II) acetate Chemical compound [Co+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O QAHREYKOYSIQPH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BZRRQSJJPUGBAA-UHFFFAOYSA-L cobalt(ii) bromide Chemical compound Br[Co]Br BZRRQSJJPUGBAA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOAMBXDOGPRZLP-UHFFFAOYSA-N indole-3-acetamide Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)N)=CNC2=C1 ZOAMBXDOGPRZLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- LAQPNDIUHRHNCV-UHFFFAOYSA-N isophthalonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC(C#N)=C1 LAQPNDIUHRHNCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SANOUVWGPVYVAV-UHFFFAOYSA-N isovaleramide Chemical compound CC(C)CC(N)=O SANOUVWGPVYVAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229910001437 manganese ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- IPWFJLQDVFKJDU-UHFFFAOYSA-N pentanamide Chemical compound CCCCC(N)=O IPWFJLQDVFKJDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- XQZYPMVTSDWCCE-UHFFFAOYSA-N phthalonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC=C1C#N XQZYPMVTSDWCCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920006391 phthalonitrile polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- JAMNHZBIQDNHMM-UHFFFAOYSA-N pivalonitrile Chemical compound CC(C)(C)C#N JAMNHZBIQDNHMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- QLNJFJADRCOGBJ-UHFFFAOYSA-N propionamide Chemical compound CCC(N)=O QLNJFJADRCOGBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940080818 propionamide Drugs 0.000 description 1
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004172 pyridoxine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019171 pyridoxine hydrochloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011764 pyridoxine hydrochloride Substances 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000019086 sulfide ion homeostasis Effects 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000344 thiamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019190 thiamine hydrochloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011747 thiamine hydrochloride Substances 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N trisodium borate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]B([O-])[O-] BSVBQGMMJUBVOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010977 unit operation Methods 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J9/00—Working-up of macromolecular substances to porous or cellular articles or materials; After-treatment thereof
- C08J9/0014—Use of organic additives
- C08J9/0023—Use of organic additives containing oxygen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/78—Hydrolases (3) acting on carbon to nitrogen bonds other than peptide bonds (3.5)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/02—Amides, e.g. chloramphenicol or polyamides; Imides or polyimides; Urethanes, i.e. compounds comprising N-C=O structural element or polyurethanes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
- C08J2325/00—Characterised by the use of homopolymers or copolymers of compounds having one or more unsaturated aliphatic radicals, each having only one carbon-to-carbon double bond, and at least one being terminated by an aromatic carbocyclic ring; Derivatives of such polymers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
1 . Sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej, znamienny tym, ze prowadzi sie hodowle drobnoustrojów z gatunku Rhodococcus rhodochrous w obecnosci jonów kobaltu. CD C L PL PL
Description
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej użytecznej w procesie hydratacji nitrylu do odpowiedniego amidu.
Niższy amid alifatyczny, taki jak akryloamid, wytwarza się przez hydratację nitrylu, takiego jak akrylonitryl, przy czym zaproponowano szereg sposobów hydratacji poprzez działanie enzymów, takich jak nitrylaza lub hydrataza nitrylowa, wytwarzanych przez drobnoustroje (patrz np. opublikowane japońskie zgłoszenie patentowe nr 21519/87, opis patentowy St. Zjedn. Am. nr 4 001 081, niebadane opublikowane japońskie zgłoszenie patentowe nr 162 193/86 i 91 189/87, europejskie opisy patentowe nr 0 188 316 i 0 204 555 orazjapońskie zgłoszenia patentowe nr 17 918/81 i37 951/84 a także opisy patentowe St. Zjedn. Am. nr 4 248 968 i 4 637 982. Takie sposoby wytwarzania amidu na drodze biologicznej zostały wykorzystane w skali przemysłowej, przy czym zwrócono na nie uwagę jako na korzystne sposoby wytwarzania akryloamidu.
Dotychczas zaproponowano wykorzystanie szeregu drobnoustrojów w sposobach wytwarzania amidów na drodze biologicznej. Jednakże stwierdzono, że jakkolwiek drobnoustroje te są skuteczne w hydratacji niższych nitryli alifatycznych, to nie zawsze są skuteczne w hydratacji nitryli aromatycznych. Tak np. przy wytwarzaniu amidu kwasu nikotynowego przez hydratację 3-cyjanopirydyny osiąga się zbyt małą wydajność z punktu widzenia zastosowań przemysłowych.
Znany jest sposób prowadzenia hodowli drobnoustrojów w obecności jonów żelaza lub jonów manganu. Sposób ten wykorzystuje się również w procesie wytwarzania amidu na drodze biologicznej. Przykładowo hodowla drobnoustrojów z rodzaju Rhodococcus w obecności jonów żelaza ujawniana jest w niebadanych opublikowanych japońskich zgłoszeniach patentowych nr 162 193/86 i 91 189/87.
W wyniku przeprowadzonych badań stwierdzono, że enzym hydratacji nitryli, czyli hydrataza nitrylowa, powstający w bakteriach z rodzaju Pseudomonas, zawiera jon Fe+++ w centrum aktywności i w związku z tym obecność jonów żelaza w środowisku hodowli ma decydujące znaczenie dla hodowli drobnoustrojów. W związku z tym w przypadku drobnoustrojów z rodzaju Rhodococcus w znanych przykładach opisanych powyżej również założono, że jony żelaza w środowisku hodowli drobnoustrojów mają decydujące znaczenie dla wytwarzania enzymu hydratacji nitrylu.
Wynalazek opiera się na odkryciu, że konkretny szczep z rodzaju Rhodococcus, to znaczy szczep J-1 gatunku rhodochrous nie wytwarza hydratazy nitrylowej w środowisku hodowlanym zawierającym jon żelaza oraz że szczep ten wytwarza hydratazę nitrylową w środowisku hodowlanym zawierającym jon kobaltu, a także że wytworzoną w ten sposób hydratazę nitrylową może wykorzystywać w reakcji z nitrylem aromatycznym jako substratem przekształcając go następnie w amid.
W związku z tym sposób wytwarzania amidu jest sposobem wytwarzania amidu na drodze biologicznej, w którym nitryl uwadnia się do odpowiedniego amidu w wyniku działania hydratazy nitrylowej wytwarzanej przez drobnoustroje, charakteryzującym się tym, że hydratazę nitrylową uzyskuje się w hodowli drobnoustrojów z gatunku Rhodococcus rhodochrous w obecności jonów kobaltu.
161 959
Zgodnie z wynalazkiem okazało się, że jakkolwiek hydrataza nitrylowa wykazuje zerową aktywność w środowisku hodowlanym zawierającym jon żelaza, to aktywność ta zwiększa się w środowisku hodowlanym zawierającym jon kobaltu. Nieoczekiwanie okazało się, że rozwój hydratazy nitrylowej w tych konkretnych drobnoustrojach w zdecydowany sposób zależy od rodzaju jonu metalu w środowisku hodowlanym.
Sposobem z użyciem hydratazy nitrylowej można również z powodzeniem przeprowadzić hydratazę nitrylu aromatycznego. Sposób ten ma znaczenie praktyczne ze względu na znaczenie produktu hydratacji 3-cyjanopirydyny, amidu kwasu nikotynowego - surowa do syntezy witamin, albo produktu hydratacji cyjanopirazyny, pirazynoamidu użytecznego jako lek przeciwgruźliczy.
1. Ogólna koncepcja sposobu wytwarzania amidu na drodze biologicznej
Opracowano sposób hydratacji nitrylu w celu przekształcenia go w odpowiedni amid w wyniku działania hydratazy nitrylowej wytworzonej w drobnoustrojach, przy czym proces obejmuje zasadniczo hodowlę drobnoustrojów, indukowanie hydratazy nitrylowej oraz spowodowanie aby wytworzona w ten sposób hydrataza nitrylowa działała na substrat nitrylowy.
Etapy te są znane jako operacje jednostkowe i wykorzystywane sa w odpowiedniej formie w tym procesie. Określenie hydratazę nitrylową uzyskuje się w hodowli drobnoustrojów w obecności jonu kobaltu w sposób oczywisty obejmuje również indukowanie hydratazy nitrylowej.
Określenie sposób hydratacji nitrylu w celu przekształcenia go w odpowiedni amid w wyniku działania hydratazy nitrylowej wytworzonej przez drobnoustroje obejmuje dowolne odpowiednie rozwiązania lub warianty powodujące, że hydrataza nitrylowa działa na nitryl. Jedno z takich rozwiązań obejmuje sposób zbierania enzymu wytworzonego przez drobnoustroje i zastosowanie tego enzymu jako preparatu enzymatycznego. Zrozumiałe jest, że taki sposób wykorzystania hydratazy nitrylowej, w którym enzym stosuje się w postaci preparatu enzymatycznego, stanowi pewną kategorię sposobu wytwarzania na drodze biologicznej.
2. Szczegóły reakcji hydratacji
1/ Drobnoustroje
Drobnoustrojem stosowanym w sposobie według wynalazku jest drobnoustrój z gatunku Rhodococcus rhodochrous.
Reprezentatywnym szczepem tego gatunku jest szczep J-l.
Szczegóły dotyczące szczepu J-l są następujące:
/1/ Pochodzenie i depozyt
Szczep J-1 pobrano z gleby w Sakyc-ku, Kioto, Japonia i zdeponowano jako międzynarodowy depozyt (zgodnie z porozumieniem Budapeszteńskim w sprawie międzynarodowego uznania depozytu drobnoustrojów dla celów postępowania patentowego) w Fermentation Research Institute, Japonia, Agency of Industrial Sciences and Technology, zarejestrowany pod nr
FERM BP-1478.
/2/ Właściwości bakteriologiczne laJ Morfologia /1/ Kształt i wielkość komórek /2/ Obecność polimorfizmu komórek /3/ Ruchliwość /4/ Obecność spor /5/ Zabarwienie według Grama /6/ Odporność na kwas /7/ Granulocyt heterofilowy
0,9-1,0 pm x 3-10 pm
- komórki pręcików w początkowym stadium hodowli, rosną z pękaniem w kształcie zakrzywionym, po czym dzielą się na małe pałeczki brak brak dodatnie ujemna wykryto /b/ Stany wzrostu w różnych pożywkach hodowlanych (30°C) /1/ Hodowla na płytkach z agarem bulionowym koło o średnicy 1 mm (48 godzin), nieregularne i gładkie, powierzchnia raczej sucha, płaska,
161 959 /2/ Hodowla na stoku agarowym z bulionem /3/ Hodowla w bulionie ciekłym /4/ Hodowla w zagłębieniu w żelatynie z bulionu /5/ Mleczko lakmusowe /c/ Właściwości fizjologiczne /1/Redukcja azotanów /2/ Denitryfikacja /3/ Próba MR /4/ Próba VP /5/ Wytwarzanie indolu /6/ Wytwarzanie siarkowodoru /7/Hydroliza skrobi /8/ Wykorzystanie kwasu cytrynowego pozywka hodowlana Kocura pożywka hodowlana Christensena /9/ Wykorzystanie nieorganicznego źródła azotu azotan sól amonowa /10/ Wytwarzanie masy barwnej /11/ Ureaza /12/Oksydaza /13/ Katalaza /14/ Hydroliza celulozy /15/ Zakres wzrostu /16/ Zachowanie w stosunku do tlenu /17/ Rozkład tyrozyny /18/ Rozkład adeniny /19/ Fosfataza /20/ Hydroliza /21/ Próba O-F /22/ Odporność cieplna/w 10% mleku zbieranym w 72°C, 15 minut) /23/ Wytwarzanie kwasu i gazu z cukru:
nieprzezroczysta, o zabarwieniu blado pomarańczowo- różowym niteczki o gładkiej powierzchni raczej suchej, przekrój nieznacznie wypukły, raczej suchy, zabarwienie blado pomarańczowo-różowe bujny wzrost, tworzenie się bakteryjnej błony komórkowej, wzrostowi towarzyszy umiarkowane zmętnienie, tworzy się osad wzrost cienką warstwą na powierzchni, w kształcie stożka wzdłuż części zagłębienia, ale nie w dolnej warstwie, nie obserwuje się upłynniania żelatyny brak zmian dodatnia ujemna ujemna ujemna dodatnia dodatnia ujemna ujemna dodatnia dodatnia dodatnia ujemna dodatnia ujemna dodatnia ujemna pH 5-10, temperatura 10-41°C aerobowe dodatnia dodatnia dodatnia
Tween 80dodatnia ujemna brak
| Kwas | Gaz | |
| L-arabinoza | - | - |
| D-ksyloza | - | - |
| D-glikoza | + | - |
| D-mannoza | - | - |
| D-fruktoza | + | - |
| maltoza | + | - |
| cukier | + | - |
| laktoza | - | - |
| trehaloza | - | - |
161 959
D-sorbit +
D-mannit + gliceryna + + : próba dodatnia, -: próba ujemna /24/ Wzrost w indywidualnych źródłach węgla inozyt maltoza +
D-mannit + ramnoza D-sorbit + kwas m-hydroksybenzoesowy adypinian sodowy benzoesan sodowy cytrynian sodowy mleczan sodowy testotetron +
+ +
+ +
+ +
L-tyrozyna gliceiyna/1%/ /wagowo/objętościowo/ l+l trehałoza /+/ kwas p-hydroksybenzoesowy /1%/ /wagowo/objętościowy/ + + : dodatnia, -: ujemna, /+/: nieznacznie dodatnia /25/ Kwas tłuszczowy i analiza ścianki komórkowej Zawiera nienasycone i nasycone kwasy tłuszczowe o prostym łańcuchu oraz kwas tuberkulostearynowy. TLC kwasu mikolowego daje pojedynczą plamę.
W wyniku sklasyfikowała wyżej opisanych właściwości bakteriologicznych na podstawie publikacji Barga Manuał of Systematic Bacteriology można stwierdzić, że szczep J-1 stanowią pałeczki aerobowe. Gramododatnie, słabo odporne na kwas, katalazo-dodatnie i nie wytwarzające andosporyny, bez flagellum. Micelium ma wydłużony kształt pałeczkowaty w początkowym stadium wzrostu, przy dalszym wzroście występują rozgałęzienia i następnie podział na krótkie pałeczki. Z tego względu uważa się, że szczep należy do bakterii typu Nocardia.
Analiza składowych kwasów tłuszczowych wykazuje, że bakteria zawiera nienasycone i nasycone kwasy tłuszczowe, w tym kwas tuberkulo-stearynowy. Analiza metodą TLC /chromatografii cienkowarstwowej/ kwasu mikolowego daje pojedynczą plamę o tej samej wartości Rf, co w przypadku wzorcowej bakterii Rhodococcus rhodochrous ŻFO 3338/, co od^^^i^i^ją od rodzaju Mycobacterium. Różni się ona również od rodzaju Nocardia składem /ilość atomów węgla/ kwasu mikolowego. W wyniku badania innych właściwości biochemicznych stwierdzono, że jest to bakteria Rhodococcus rhodochrous.
Drobnoustroje wykazują skłonność do mutacji. W związku z tym nie trzeba dodawać, że nawet mutant kwalifikowanego szczepu takiego jak szczep J-l można stosować w sposobie według wynalazku, o ile produkt hodowli wytwarza hydratazę nitrylową w obecności jonu kobaltu.
Nitrylami, które można stosować jako substraty dla hydratazy nitrylowej wytwarzanej przez opisane wyżej drobnoustroje, sa aromatyczne i alifatyczne mononitryle lub dwunitryle, a zwłaszcza mononitryle.
Nitrylami, które najlepiej nadają się do stosowania są nitryle aromatyczne, zwłaszcza te, które zawierają 4-10 atomów węgla tworzących pierścień aromatyczny. Szereg typowych przykładowych nitryli aromatycznych obejmuje związki przedstawione ogólnymi wzorami 1-6, w tym związek o wzorze 1, korzystnie 4-, 3- lub 2- cyjanopirydynę, i związek o wzorze 2, w którym Ri i R2 oznaczają atom wodoru, grupy CH3, OH, OCH3, Cl, F, CN, NH2 lub NCh.
161 959
Typowym takim związkiem jest benzonitryl, o-, m- oraz p-chlorobenzonitryle, 0-, m- i p-fluorobenzonitryle, o- i m-nitrobenzonitryle, p-aminobenzonitryl, o-, m- i p-tolunitryle, 4-cyjanofenol, anizonitryl, ftalonitryl, izoftalonitryl, tereftalonitryl, 2,6-dwuchlorobenzonitryl,
2,4-dwuchlorobenzonitryl i 2,6-dwufluorobenzonitryl. Typowymi przykładami związków o wzorze 3 są a i β-naftonitryle. Należą też do nich związki o wzorze 4, w którym X oznacza atom siarki lub tlenu, przykładowo 2-tiofenokarbonitiyl i 2-furonitryl, związki o wzorze 5, przykładowo 5-cyjanoindol, oraz związki o wzorze 6, przykładowo cyjanopirazyna.
Inną grupą użytecznych nitryli stanowią korzystnie nitryle alifatyczne, jeszcze korzystniej mono- lub dwunitryle zawierające 2-6 atomów węgla, a najkorzystniej monitryle. Z uwagi na przydatność wytwarzanych amidów typowym przykładem nitrylu jest akrylonitryl, ulegający przekształceniu w amid z dobrą wydajnością.
Jest rzeczą oczywistą, że amidy odpowiadające nitrylom są związkami uzyskanymi w wyniku przekształcenia grupy CN w nitrylach w grupę CONH2. W przypadku dwunitryli odpowiednie amidy uzyskuje się w wyniku przekształcenia co najmniej jednej grupy CN w grupę CONH2.
3/ Hodowla/wytwarzanie hydratazy nitrylowej
Hodowlę drobnoustrojów z gatunku Rhodococcus rhodochrous można prowadzić w dowolnych odpowiednich warunkach, z tym że w środowisku hodowlanym muszą znajdować się jony kobaltu. Może okazać się praktyczne wprowadzenie do środowiska hodowlanego induktora enzymu, szczegółowo opisanego poniżej, tak aby hydrataza nitrylowa nagromadziła się w komórkach bakterii.
/1/ Środowisko podstawowe
Przykłady odpowiednich pożywek hodowlanych podane są poniżej. Fachowcy mogą łatwo zmieniać ilości podanych składników, zastępować jeden składnik innym oraz eliminować pewne składniki lub dodawać inne składniki.
/1/ Pożywka A
Składniki mieszanka witaminxl
K2HPO4
KH2PO4
NaCl
MgSO4 · 7H2O woda destylowana xl Skład: biotyna pentotenian wapniowy inozyt kwas nikotynowy chlorowodorek tiaminy chlorowodorek pirydoksyny kwas p-aminobenzoesowy ryboflawina kwas foliowy woda /ii/ Pożywka B gliceryna pepton ekstrakt słodowy ekstrakt drożdżowy woda destylowana /iii/ Pożywka C ekstrakt drożdżowy3 g KH2PO4 K2HPO4 MgSO4 · 7H2O woda destylowana
Ilość /w 1 litrze pożywki/ 0,1 ml 13,4 g 6,5 g 1,0 g 0,2 g reszta /pH 7,0/
2gg 0,4 mg 2 mg 0,4 mg 0,4 mg 0,4 mg 0,2 mg 0,2 mg 0,01 mg do 1 litra g
5g
3g
3g reszta /pH 7,2/
0,5 g 0,5 g 0,5 g reszta/pH 7,2/
161 959 /2/ Induktor enzymu
Induktorem enzymu stosowanym w celu indukowania i wytwarzania hydratazy nitrylowej w drobnoustrojach Rhodococcus rhodochrous może być dowolny induktor odpowiedni dla danego drobnoustroju.
Typowymi induktorami nadającymi się do stosowania w sposobie według wynalazku są nitryle i amidy.
Przykładami induktorów enzymu, których działanie zostało potwierdzone w odniesieniu do szczepu J-l, sąkrotonamid, acetonitryl, propionitryl, benzamid, butyronitryl, izobutyronitryl, n-kapronitryl, 3-pentenonitryl, piwalonitryl, n- butyramid, izobutyramid, n-waleramid, n-kapronamid, metakryloamid i fenyloacetamid.
/3/ Źródło jonów kobaltu
Hydratazy nitrylowej nie uzyskuje się nawet jeśli opisany powyżej induktor enzymu jest obecny w środowisku hodowlanym, tak że istotne jest z punktu widzenia sposobu według wynalazku, aby w środowisku hodowlanym znajdowały się jony kobaltu.
Ponieważ środowisko hodowli jest środowiskiem wodnym, jony kobaltu tworzą się zazwyczaj w wyniku dodania do tego środowiska związku kobaltu rozpuszczalnego w wodzie. Związki kobaltu rozpuszczalne w wodzie podane są w podręcznikach chemicznych, w związku z czym specjalista łatwo będzie mógł wybrać i zastosować odpowiedni związek, w pewnych przypadkach wykonując prostą próbę wstępną. Do typowych związków kobaltu należą te, które dostarczają jonu Co++ lub Co , a zwłaszcza te, które dostarczają jonu Co++, a konkretnie np. chlorek kobaltu, siarczan kobaltu, octan kobaltu, bromek kobaltu, boran kobaltu itp. Innymi przykładami związków kobaltu są witamina B12 i kobalt metaliczny, które wytwarzają jony kobaltu in situ w środowisku hodowli przez jonizację lub oksydacyjne działanie drobnoustroju podczas prowadzenia hodowli.
/4/ Hodowla
W celu wytwarzania i nagromadzenia hydratazy nitrylowej w komórkach bakteryjnych prowadzi się hodowlę stosowanego drobnoustroju, np. szczepu J-l w opisanym powyżej środowisku hodowli, w odpowiednich warunkach.
Induktor enzymu stosuje się w ilości rzędu 2-6 g/litr środowiska hodowli, a jon kobaltu w ilości rzędu 5-15 mg/litr środowiska hodowli, w przeliczeniu na C0CI2.
Konkretnie przykłady składu mieszaniny stanowiącej środowisko hodowli są następujące:
| /i/ Pożywka A | 1 litr |
| Acetonitryl /induktor/ | 2g |
| C0CI2 | 10 mg |
| /ii/ Pożywka B | 1 litr |
| Izowaleronitryl | 2g |
| C0CI2 | 10 mg |
| /iii/ Pożywka C | 1 litr |
| Krotonamid | 2g |
| C0CI2 | 10 mg |
| Hydratazę nitrylową można z | powodzeniem wytwarzać przez wytrząsanie hodowli J-1 w |
temperaturze 15-50°Ć, korzystnie 20-45°C, a najkorzystniej około 30°C przy pH 7-9 przez około 30 godzin lub dłużej, korzystnie przez 40 godzin lub dłużej, przy górnej granicy np. 120 godzin. Korzystne jest, aby induktor enzymu był obecny od początkowego stadium hodowli, a ponadto pożądane jest wprowadzanie dodatkowych ilości induktora, jeśli chce się uzyskać komórki bakteryjne o dużej aktywności. Tak np. jeśli hodowlę z wytrząsaniem prowadzi się w 28°C przez 76 godzin, kolejne ilości krotonamidu dodaje się po 26 i 56 godzinach od rozpoczęcia reakcji, tak aby stężenie jego wynosiło 0,2% wagowo/objętościowych.
4/ Uwalnianie nitrylu
Użyte w opisie określenie sposób wytwarzania amidu na drodze biologicznej, zgodnie z którym nitryl uwadnia się do odpowiedniego amidu w wyniku działania hydratazy nitrylowej wytwarzanej przez drobnoustroje obejmuje jak to stwierdzono powyżej, różne realne rozwiązania i warianty zapewniające działanie hydratazy nitrylowej na nitryl.
161 959
Jedno z takich rozwiązań obejmuje wytwarzanie amidu w środowisku hodowli wówczas, gdy nitryl stanowiący substrat jest obecny w środowisku hodowli drobnoustrojów.
Inne rozwiązanie zapewniające działanie hydratazy nitrylowej na substrat polega na tym, że w celu przeprowadzenia reakcji hydratacji dodaje się substrat nitrylowy do środowiska hodowli, w którym nagromadzona została hydrataza nitrylowa. Odmiana tego rozwiązania polega na zastosowaniu środowiska hodowli, w którym komórki drobnoustrojów zostały zniszczone, jako środowiska hodowli, w którym nagromadziła się hydrataza nitrylowa.
Kolejne rozwiązanie zapewniające działanie hydratazy nitrylowej na substrat polega na wydzieleniu komórek, w których nagromadziła się hydrataza nitrylowa, ze środowiska hodowli, korzystnie poprzez wprowadzenie komórek na odpowiedni nośnik lub ich unieruchomienie, a następnie doprowadzenie do ich kontaktu z substratem. Ten sposób, a zwłaszcza korzystne rozwiązanie, zgodnie z którym stosuje się unieruchomione komórki jest uważany za odpowiedni dla zastosowania przemysłowego tak samo lub bardziej, niż inne rozwiązania opisane powyżej. Taki sposób zastosowania unieruchomionych komórekjest powszechnie stosowany, przy czym odnosi się to zarówno do doboru rodzaju nośnika, sposobu unieruchomiania drobnoustrojów na nośniki jak i zastosowania unieruchomionych drobnoustrojów w tak zwanym reaktorze biologicznym.
Jeszcze inne rozwiązanie zapewniające działanie hydratazy nitrylowej na substrat dotyczy sposobu, w którym wytwarza się preparat enzymatyczny hydratazy nitrylowej i w którym nitryl uwadnia się za pomocą preparatu enzymatycznego, a więc raczej nie na drodze biologicznej. Jest oczywiste, że reakcję hydratacji należy prowadzić w takich warunkach pH i temperatury, aby enzym nie stracił swojej aktywności. Można stwierdzić, że są to takie same warunki, w jakich prowadzi się wyżej opisane reakcje na drodze biologicznej. Jak to opisano, rozwiązanie, zgodnie z którym drobnoustroje nie występują w czasie działania enzymu, również należy uważać, za sposób wytwarzania na drodze biologicznej.
Korzystny zakres pH dla hydratazy nitrylowej wynosi 7-9, przy optymalnym pH 8,0. Gdy pH roztworu reakcyjnego spadnie poniżej 7, aktywność enzymu wykazuje tendencję do gwałtownego spadku. W związku z tym, pożądane jest dodawanie buforu do roztworu reakcyjnego. Jeśli zastosuje się dowolny sposób takich buforów jak fosforan potasowy, bufor Tris/HCl, bufor HEPS/KOH i boran sodowy, aktywność enzymatyczna hydratazy nitrylowej nie będzie ulegać zmianom.
Stężenie substratu w środowisku hodowli lub hydratacyjnym roztworze reakcyjnym wynosi zazwyczaj 4-7 moli/litr, a temperatura reakcji jest najczęściej w zakresie 10-30°C.
3. Przykłady:
Sposób pomiaru aktywności hydratazy nitrylowej orazjednostka aktywności, występujące w poniższych przykładach, zdefiniowane są następująco.
/1/ Sposób pomiaru aktywności hydratazy nitrylowej
Aktywność hydratyzy nitrylowej mierzy się prowadząc reakcję w 2 ml mieszaniny reakcyjnej zawierającej l0 milimoli benzonitrylu, 30 milimoli fosforanu potasowegojako buforu /pH 7,0/, oraz pewną ilość komórek drobnoustroju /wydzielonych ze środowiska hodowli/ w 10°C przez 5 minut, po czym dodaje się 2 ml ln HC1 w celu przerwania reakcji.
/2/ Definicja jednostki
Jedna jednostka /U/ aktywności hydratazy nitrylowej określona jest jako ilość enzymu niezbędna do wytwarzania benzamidu z benzonitrylu w wyżej opisanych warunkach z szybkością 1 gmol/minutę.
Przykład I. Szczep J-1 hodowano w pożywce o składzie podanym poniżej, w warunkach również określonych poniżej, przy czym ujawnianie się aktywności hydratazy nitrylowej badano dodając CoCl i/lub FeSO4 do pożywki w czasie prowadzenia hodowli.
/i/ Skład pożywki
Składniki Ilość /w 1 litrze pożywki/ mieszanka witamin 3,0 ml
K2HPO4 0,5 g
KH2PO4 0, g
MgSO4 7H2O 0, g propionitryl 2 ml woda destylowana reszta/pH 7,2/
161 959 /ii/ Warunki hodowli 28°C/70-80 godzin
Uzyskane wyniki przedstawiono poniżej w tabeli 1.
Można stwierdzić, że aktywność hydratazy nitrylowej nie ujawnia się, jeśli FeSOą dodaje się do pożywki podstawowej, aktywność hydratazy nitrylowej ujawnia się po dodaniu C0CI2, oraz że dodanie FeSOą do układu, do którego dodano C0CI2, niekorzystnie wpływa na wyniki.
Tabela 1
| Dodany jon metalu | ||||||||||
| C0CI2 /mg/ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 10 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| FeSOą /mg/ | 0 | 5 | 10 | 20 | 40 | 0 | 5 | 10 | 20 | 40 |
| Dość komfrek xl /mg/ml/ | 1,06 | 1,14 | 1,25 | 1,24 | 1,34 | 2,04 | 1,90 | 2,16 | 2,16 | 2,07 |
| Aktywność enzymatyczna | ||||||||||
| U/mg komórek *2 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0,59 | 0,26 | 0,34 | 0,32 | 0,16 |
| U/ml pożywki | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 1,20 | 0,49 | 0,73 | 0,69 | 0,33 |
xl Dość komórek w przeliczeniu na suchą masę x2 U oznacza jednostkę aktywności zgodnie z podaną wyżej definicją, a ilość komórek podano w przeliczeniu na suchą masę.
Przykład Π. Wpływ różnych nitryli lub amidów jako induktorów enzymu na szczep J-1 podano w tabeli 2 poniżej.
Tabela 2
| Aktywność właściwa /U/mg/ | Aktywność całkowita /U/ml/ | Dość komórek /mg suchych komórek /ml/ | |
| Krotonamid | 2,22 | 4,48 | 2,02 |
| Acetonitryl | 1,41 | 3,47 | 2,46 |
| Propionitryl | 1,36 | 4,44 | 3,26 |
| Benzamid | 0,84 | 2,75 | 3,26 |
| Propionamid | 0,79 | 2,29 | 2,90 |
| Acetamid | 0,71 | 1,55 | 2,18 |
| n-Butyronitryl | 1,40 | 0,38 | 3,70 |
| Izobutyronitryl | 0,41 | 1,24 | 3,06 |
| Izowaleronitryl | 0,34 | 1,05 | 3,07 |
| n-Kapronitryl | 0,28 | 1,04 | 3,71 |
| 3-Pentenonitryl | 0,32 | 1,42 | 4,49 |
| Piwalonitryl | 0,35 | 0,24 | 0,69 |
| n-Butyroamid | 0,43 | 1,55 | 3,62 |
| Izobutyroamid | 0,09 | 0,33 | 3,48 |
| Izowaleramid | 0,44 | 1,08 | 1,81 |
| n-Kapronamid | 0,30 | 1,06 | 3,52 |
| Metakrylamid | 0,20 | 0,62 | 3,12 |
| Fenyloacetamid | 0,29 | 0,28 | 0,95 |
161 959
Wyniki podane w tabeli 2 uzyskano przez wstępną hodowlę szczepu J-1w wyżej podanej pożywce B w 28°C, dodanie nitrylu lub amidu jako induuktora w ilości odpowiednio 0,1% objętościowego lub 0,2% wagowo/objętościowego, po odpowiedniej proliferencji szczepu, a następnie inokulację szczepu w wyżej wspomnianej pożywce hodowanej C, do której dodano 0,001% wagowo/objętościowego C0CI2 i prowadzenie hodowli przez 36-48 godzin.
Przykład ΙΠ. Komórki szczepu J-l otrzymano w wyniku hodowania szczepu w pożywce będącej wyżej wspomnianą pożywką C z dodatkiem C0CI2 i krotonamidu, odpowiednio w ilościach 0,01 g i 2 g/litr pożywki. W pożywce poddawano reakcji różne nitryle stosowane jako substraty. Reakcje prowadzono stosując 2 ml roztworu reakcyjnego zawierającego komórki uzyskane z 2 ml hodowli, 10 mmoli buforu fosforanu potasowego jako buforu pH 8,0 oraz 200 mmoli substratu, w 25°C przez 76 godzin. Reakcję przerwano dodając do mieszaniny 0,2 ml ln HC1. Aktywność hydratazy nitrylowej w odniesieniu do poszczególnych substratów wyrażono jako stosunek aktywności względem aktywności hydratazy nitrylowej zmierzonej dla 3-cyjanopirydyny jako substratu, czyli aktywność własną, w %, przy czym ilości produktu reakcji lub pozostałego substratu analizowano metodą HPLC /wysokosprawnej chromatografii cieczowej/.
Uzyskane wyniki przedstawiono poniżej w tabeli 3.
Tabela 3
| Substrat | Aktywność właściwa |
| 3-Cyjanopirydyna | 100 |
| Akrylonitryl | 106 |
| 4-Cyjanopirydyna | 129 |
| 2-Cyjanopirydyna | 64 |
| 5-Cyjanoindol | 9 |
| 2-Tiofenonitryl | 116 |
| 2-Furonitryl | 71 |
| Benzonitryl | 80 |
| 4-Cyjanofenol | 24 |
| p-Aminobenzonitryl | 16 |
| m-Nitrobenzonitryl | 7 |
| o-Nitrobenzonitryl | 16 |
| m-Cblorofcenzonitryl | 29 |
| p-Tolunitryl | 5 |
| o-Tolunitryl | 46 |
| m-Tolunitryl | 32 |
| Anizonitryl | 20 |
| o-Chlorobenzonitryl | 41 |
| p-Chlorobenzonitryl | 7 |
| 2,4-Dwuchlorobenzonitryl | 2 |
| 2,6-Dwuchlorobenzonitryl | 1 |
| Cyjanopirazyna | 80 |
Przykład IV. W 1-litrowej kolbie Sakaguchi umieszczono 400 ml pożywki będącej wyżej podaną pożywką C z dodatkiem C0CI2 i krotonamidu, w ilościach odpowiednio 0,01 g i 2 g/litr pożywki, po czym prowadzono hodowlę mieszaniny na wstrząsarce w 28°C. Hodowlę kontynuowano dodając do brzeczki 0,2% wagowo/objętościowego krotonamidu /800 mg/400 ml/ po 30 i 60 godzinach od momentu zapoczątkowania hodowli. Proces zakończono po upływie 80 godzin od momentu zapoczątkowania hodowli.
Komórki bakteryjne oddzielono przez wirowanie brzeczki przy przeciążeniu 12 000 g przez 15 minut, w seperatorze wirówkowym /model Hitachi SOR 20 B/, po czym przemyto je
161 959
0,85% NaCl, ponownie odwirowano i zdyspergowano w 40 ml wyżej opisanego roztworu. Niewielką porcję zawiesiny pobranojak próbkę, którą użyto do oznaczenia suchej masy komórek bakteryjnych w zawiesinie.
Zawiesinę zawierającą komórki /w ilości odpowiadającej 2,33 mg suchych komórek/ dodano do 7 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ i 7, 57 mola 3-cyjanopirydyny. Reakcję prowadzono w 25°C w ciągu nocy, dodając do roztworu reakcyjnego 0,55 mola i 0,79 mola 3-cyjanopirydyny po odpowiednio 3 i 6 godzinach od zapoczątkowania reakcji.
Po 18 godzinach od zapoczątkowania reakcji uzyskano 5,58 mola amidu i kwasu nikotynowego. W związku z tym stopień przemiany wyniósł 99,5%, co odpowiada nagromadzeniu się amidu kwasu nikotynowego w ilości 681 g. Przy takim stężeniu mieszanina reakcyjna zestala się w wyniku osadzenia się amidu kwasu nikotynowego.
Uzyskany w ten sposób amid kwasu nikotynowego zidentyfikowano wydzielając produkt w postaci kryształów, które analizowano metodami analizy elementarnej. IR /spektroskopia w podczerwieni/, NMR /rezonans magnetyczny jądrowy/ i spektroskopii masowej, nie wykryto kwasu nikotynowego.
Przykład V. Zawiesinę zawierającą komórki /w ilości odpowiadającej 2,33 mg suchych komórek/, otrzymaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ oraz cyjanopirazynę w różnych stężeniach. Reakcję prowadzono w 25°C. 4 mole cyjanopirazyny uległy przemianie w pirazynamid przy stopniu przemiany 100% w ciągu 6 godzin, a 6 moli cyjanopirazyny w ciągu 9 godzin. Natomiast gdy zawiesinę zawierającą komórki bakteryjne w ilości odpowiadającej 4,66 mg suchych komórek zamiast 2,33 mg suchych komórek zastosowanych powyżej dodano do 4 ml podobnego roztworu reakcyjnego, po 6 godzinach reakcji 7 moli cyjanopirazyny uległo przemianie w pirazynamid przy stopniu przemiany 100%, a po 9 godzinach 9 moli cyjanopirazyny. Nie stwierdzono powstawania kwasu pirazynokarboksylowego.
Pirazynamid wykrystalizowywał z roztworu w miarę tworzenia się. Krystaliczny osad bezpośrednio zbierano i rekrystaliżowano z metanolu. Kryształy zidentyfikowano jako pirazynamid na podstawie analizy metodami analizy elementarnej, IR, NMR i spektroskopii masowej.
Analizę cyjanopirazyny, pirazynamidu i kwasu pirazynokarboksylowego prowadzono metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej.
Takie same analizy wykonywano również w następnych przykładach.
Przykład VI. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 4,66 mg suchych komórek/, uzyskaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/, oraz 3 mole metakrylonitrylu, po czym reakcję prowadzono w 35°C dodając 3 mole metakrylonitrylu do roztworu reakcyjnego po 1 godzinie i po 3 godzinach zapoczątkowania reakcji. Po 12 godzinach od zapoczątkowania reakcji uzyskano 9 moli metakrylamidu przy stopniu przemiany 100%.
W powyższej reakcji, gdy wprowadzono dodatkowo 1 ml metakrylonitrylu po 5 godzinach od zapoczątkowania reakcji, uzyskano 10 moli metakrylamidu przy stopniu przemiany 100% po upływie 24 godzin od zapoczątkowania reakcji. Oznacza to, że wytworzono i nagromadzono 851 g metakrylamidu na 1 litr roztworu reakcyjnego.
Roztwór reakcyjny rozcieńczono wodą, po czym komórki bakteryjne usunięto przez wirowanie przy przeciążeniu 12 000 g przez 15 minut. Roztwór nie zawierający komórek zatężono w wyparce rotacyjnej, a następnie krystalizowano. Kryształy rozpuszczono i rekrystalizowano z wody uzyskując kryształy metakrylamidu.
Przykład VII. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 4,66 mg suchych komórek/, otrzymaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ i 1 mol krotonitrylu, po czym reakcję prowadzono w 25°C dodając pięciokrotnie po 1 molu krotonitrylu do roztworu reakcyjnego co godzinę. Po 6 godzinach od zapoczątkowania reakcji uzyskano 6 moli krotonamidu przy stopniu przemiany 100%. Gdy dodatkowo dodano po 1 molu krotonitrylu do roztworu reakcyjnego po 6 i 10 godzinach uzyskano 7 moli i 8 moli krotonamidu przy stopniu przemiany 100%. Odpowiada to wytworzeniu i nagromadzeniu się 681 g krotonamidu w 1 litrze roztworu.
161 959
Krystalizację krotonamidu przeprowadzono w ten sam sposób jak w przykładzie VI.
Przykład VIII. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 4,66 mg suchych komórek/, uzyskaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ i 3 mole acetonitrylu, po czym rekcję prowadzono w 25°C dodając po 3 mole acetonitrylu do roztworu reakcyjnego po 1 i 3 godzinach od rozpoczęcia reakcji i 5 moli acetonitrylu po 6 godzinach od rozpoczęcia reakcji. Po 12 godzinach od rozpoczęcia reakcji uzyskano 14 moli acetamidu przy stopniu przemiany 100%. Innymi słowy wytworzono i nagromadzono acetamid w ilości 827 g/litr roztworu reakcyjnego.
Roztwór reakcyjny rozcieńczono wodą, po czym odwirowano w celu usunięcia komórek bakteryjnych. Ciecz zatężono do sucha w wyparce rotacyjnej, rozpuszczono w metanolu i krystalizowano uzyskując kryształy acetamidu.
Przykład IX. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 4,66 mg suchych komórek/, otrzymaną w przykładzie IV, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego, jako buforu /pH 8,0/ i 3 mole 3-hydroksypropionitrylu, po czym reakcję prowadzono w 25°C dodając czterokrotnie po 3 mole
3-hydroksypropionitrylu w odstępach czasu co 1 godzinę. Po 5 godzinach od rozpoczęcia reakcji uzyskano 15 moli 3-hydroksypropionamidu przy stopniu przemiany 100%. Gdy na tym etapie dodano jeszcze 3 mole 3-hydroksypropionitrylu, po 11 godzinach od rozpoczęcia reakcji uzyskano 18 moli 3-hydroksypropionamidu przy stopniu przemiany 100%. Oznacza to, że wytworzono i nagromadzono 3-hydroksypropionamid w ilości 1600 g/litr roztworu reakcyjnego.
Roztwór reakcyjny rozcieńczono wodą i odwirowano w celu usunięcia komórek. Roztwór nie zawierający komórek zatężono w wyparce rotacyjnej i krystalizowano w temperaturze -20°C. Kryształy rozpuszczono w izopropanolu i po rekrystalizacji z tego rozpuszczalnika uzyskano kryształy 3-hydroksypropionamidu.
Przykład X. W 1-litrowej kolbie Sakaguchi umieszczono 400 ml pożywki będącej wyżej podaną pożywką C z dodatkiem C0CI2 i krotonamidu, w ilościach odpowiednio 0,01 g i 2 g/litr pożywki, po czym prowadzono hodowlę mieszaniny na wstrząsarce w 28°C. Hodowlę kontynuowano dodając do brzeczki 0,2% wagowo/objętościowego krotonamidu /800 mg/444 ml/ po 36 i 56 godzinach od zapoczątkowania hodowli. Proces zakończono po 76 godzinach od zapoczątkowania hodowli.
Komórki bakteryjne oddzielono przez wirowanie brzeczki przy przeciążeniu 10 000 g przez 20 minut w separatorze wirówkowym /model Hitachi SCR 203/, po czym przemyto je 0,85% NaCl, ponownie odwirowano i zdyspergowano w 40 ml wyżej opisanego roztworu. Niewielką porcję zawiesiny pobrano jako próbkę, którą użyto do oznaczenia suchej masy komórek.
Zawiesinę zawierającą komórki /w ilości odpowiadającej 2,96 mg suchych komórek/ dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ i cyjanopirydynę w różnych stężeniach. Reakcję prowadzono w 25°C. 8 moli
3-cyjanopirydyny uległo przemianie w nikotynianie przy stopniu przemiany 100% w ciągu 9 godzin, a 9 moli cyjanopirydyny w ciągu 22 godzin. Natomiast gdy zawiesinę zawierającą komórki bakteryjne w ilości odpowiadającej 5,92 mg suchych komórek zamiast 2,96 mg suchych komórek dodano do 4 ml podobnego roztworu reakcyjnego, po 5 godzinach reakcji 9 moli
3-cyjanopirydyny uległo przemianie w nikotynamid przy stopniu przemiany 100%, a po 9 godzinach reakcji 12 moli 3-cyjanopirydyny, co oznacza, że wytworzono i nagromadzono 1, 785 g nikotynamidu na litr roztworu reakcyjnego.
Nikotynamid wykrystalizowywał z roztworu w miarę tworzenia się. Krystaliczny osad zebrano i rekrystalizowano z metanolu.
Przykład XI. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 5,92 mg suchych komórek/, uzyskaną w przykładzie X, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu/pH 8,(^/ i 1 mol benzonitrylu, po czym reakcję prowadzono w 25°C dodając 1 mol benzonitrylu do roztworu reakcyjnego po 1, 2, 3, 4, 5 i 7 godzinach od zapoczątkowania reakcji. Po 24 godzinach od zapoczątkowania reakcji otrzymano 7 moli /848 g/litr/ benzamidu przy stopniu przemiany 100%.
161 959
Przykład ΧΠ. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 5,92 mg suchych komórek/, uzyskaną w przykładzie X, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ i 0,5 mola 2,6-dwufluorobenzonitrylu, po czym prowadzono reakcję w 25¾ dodając 0,5 mola 2,6-dwufluorobenzonitrylu do roztworu reakcyjnego po 2,4,5 i 8 godzinach od zapoczątkowania reakcji. Po 22 godzinach od zapoczątkowania reakcji otrzymano 2,5 mola /393 g/litr/ 2,6-dwufluorobenzamidu przy stopniu przemiany 100%.
Przykład ΧΠΙ. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 5,92 mg suchych komórek/, uzyskaną w przykładzie X, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ i 1 mol 2-tiofenokarbonitrylu, po czym reakcję prowadzono w 25°C dodając 1 mol 2-tiofenokarbonitrylu do roztworu reakcyjnego po 1 godzinie od zapoczątkowania reakcji. Po 5 godzinach od zapoczątkowania reakcji otrzymano 2 mole /254 g/litr/ 2-tiofenokarbonamidu przy stopniu przemiany 100%.
Przykład XIV. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 5,92 mg suchych komórek/, uzyskaną w przykładzie X, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowegojako buforu/pH 8,0/i 1 mol 2-furonitrylu, po czym reakcję prowadzono w 25°C dodając 1 mol 2-buronitrylu do roztworu reakcyjnego po 1,2,4,6, 8,11 i 23 godzinach od zapoczątkowania reakcji. Po 30 godzinach od zapoczątkowania reakcji otrzymano 8 moli /888 g/litr/ 2-furanokarbonamidu przy stopniu przemiany 100%.
Przykład XV. Zawiesinę komórek bakteryjnych /w ilości odpowiadającej 5,92 mg suchych komórek/, uzyskaną w przykładzie X, dodano do 4 ml roztworu reakcyjnego zawierającego 10 mmoli fosforanu potasowego jako buforu /pH 8,0/ i 4 mole 3-indoloacetonitrylu, po czym reakcję prowadzono w 25°C. Po 24 godzinach od zapoczątkowania reakcji otrzymano 4 mole /697 g/litr/ 3-indoloacetamidu przy stopniu przemiany 100%.
161 959
C^CN
Wzór 1
OKDCnn
Wzór 3
O-CN
Wzór 4
CN
CN
Wzór 5
Wzór 6
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 90 egz. Cena 10 000 zł
Claims (2)
- Zastrzeżenia patentowe1. Sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej, znamienny tym, że prowadzi się hodowlę drobnoustrojów z gatunku Rhodococcus rhodochrous w obecności jonów kobaltu.
- 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że jako drobnoustrój stosuje się szczep J-l gatunku Rhodococcus rhodochrous, FERM BP- 1478.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23459787 | 1987-09-18 | ||
| JP7276688 | 1988-03-26 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL161959B1 true PL161959B1 (pl) | 1993-08-31 |
Family
ID=26413903
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL1988274710A PL160904B1 (pl) | 1987-09-18 | 1988-09-16 | Sposób wytwarzania amidów PL PL |
| PL88293521A PL161959B1 (pl) | 1987-09-18 | 1988-09-16 | Sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej PL PL |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL1988274710A PL160904B1 (pl) | 1987-09-18 | 1988-09-16 | Sposób wytwarzania amidów PL PL |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5334519A (pl) |
| EP (1) | EP0307926B1 (pl) |
| JP (1) | JPH0655148B2 (pl) |
| KR (1) | KR0134094B1 (pl) |
| CN (1) | CN1015473B (pl) |
| AT (1) | ATE85082T1 (pl) |
| BG (1) | BG48934A3 (pl) |
| BR (1) | BR8804804A (pl) |
| CA (1) | CA1298222C (pl) |
| DD (1) | DD274631A5 (pl) |
| DE (1) | DE3877869T2 (pl) |
| DK (1) | DK174516B1 (pl) |
| ES (1) | ES2043752T3 (pl) |
| FI (1) | FI93858C (pl) |
| HU (1) | HU204099B (pl) |
| MX (1) | MX169933B (pl) |
| NO (1) | NO175489C (pl) |
| PL (2) | PL160904B1 (pl) |
| PT (1) | PT88540B (pl) |
| RO (1) | RO101578B (pl) |
| RU (1) | RU1838416C (pl) |
Families Citing this family (60)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP3009421B2 (ja) * | 1990-02-28 | 2000-02-14 | 秀明 山田 | 有機酸の生物学的製造法 |
| AU627648B2 (en) * | 1990-02-28 | 1992-08-27 | Teruhiko Beppu | Dna fragment encoding a polypeptide having nitrile hydratase activity, a transformant containing the gene and a process for the production of amides using the transformant |
| US5648256A (en) * | 1990-02-28 | 1997-07-15 | Nitto Chemical Industry Co., Ltd. | Gene encoding a polypeptide having nitrile hydratase activity, a transformant containing the gene and a process for the production of amides using the transformant |
| EP0486289B1 (en) * | 1990-11-14 | 1997-07-09 | Nitto Chemical Industry Co., Ltd. | Biological process for producing alpha-hydroxyamide or alpha-hydroxy acid |
| US5753472A (en) * | 1991-05-02 | 1998-05-19 | Nitto Chemical Industry Co. Ltd. | DNA fragment encoding a polypeptide having nitrile hydratase activity, a transformant containing the gene and a process for the production of amides using the transformant |
| JPH05244968A (ja) * | 1991-08-16 | 1993-09-24 | Mitsui Toatsu Chem Inc | α−ヒドロキシイソブチルアミドの製造法 |
| GEP20012441B (en) * | 1993-04-02 | 2001-05-25 | Lonza Ag | Process for Preparing 3-Methylpiperidine and 3-Methylpyridine |
| RU2053300C1 (ru) * | 1993-12-17 | 1996-01-27 | Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов | Штамм бактерий rhodococcus rhodochrous - продуцент нитрилгидратазы |
| KR100339723B1 (ko) * | 1994-02-01 | 2002-09-25 | 스미또모 가가꾸 고오교오 가부시끼가이샤 | 미생물을사용한아미드화합물의제조방법 |
| JP3235934B2 (ja) | 1994-08-04 | 2001-12-04 | 三菱レイヨン株式会社 | ロドコッカス属細菌由来カナマイシン耐性遺伝子 |
| JP3163224B2 (ja) * | 1994-10-14 | 2001-05-08 | 三菱レイヨン株式会社 | 菌体または固定化菌体の懸濁液の保存方法 |
| CH689831A5 (de) * | 1995-11-07 | 1999-12-15 | Eprova Ag | Stabile kristalline Tetrahydrofolsaeure-Salze. |
| ZA968485B (en) * | 1995-11-01 | 1997-05-20 | Lonza Ag | Process for preparing nicotinamide |
| GB9525372D0 (en) * | 1995-12-12 | 1996-02-14 | Allied Colloids Ltd | Enzymes, their preparation and their use in the production of ammonium acrylate |
| CN1243825C (zh) | 1996-02-14 | 2006-03-01 | 三井化学株式会社 | 新型腈水合酶 |
| US5728556A (en) * | 1996-03-14 | 1998-03-17 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Production of ω-cyanocarboxamides from aliphatic α,ω-dinitriles using pseudomonas putida-derived biocatalysts |
| US5863750A (en) * | 1996-12-18 | 1999-01-26 | Cytec Tech Corp | Methods for the detoxification of nitrile and/or amide compounds |
| US5866379A (en) * | 1997-01-28 | 1999-02-02 | Novus International | Enzymatic conversion of α-hydroxynitriles to the corresponding .alpha. |
| HU226274B1 (en) * | 1997-07-22 | 2008-07-28 | Lonza Ag | Process for preparing amides |
| JP3428404B2 (ja) * | 1997-10-23 | 2003-07-22 | 三菱レイヨン株式会社 | アミド化合物の製造方法 |
| US6153415A (en) * | 1998-04-29 | 2000-11-28 | Board Of Trustees Operating Michigan State University | Method for producing amide compounds using a nitrile hydratase from a thermophilic bacillus |
| NL1011867C2 (nl) * | 1999-04-22 | 2000-10-24 | Dsm Nv | Werkwijze voor de bereiding van een lineair, onverzadigd C3 - C8 carbonzuur. |
| WO2000064995A1 (en) | 1999-04-27 | 2000-11-02 | Nok Corporation | Gasket |
| CN1316009C (zh) * | 2000-03-21 | 2007-05-16 | 三菱丽阳株式会社 | 微生物的培养方法 |
| US6562603B2 (en) | 2000-08-04 | 2003-05-13 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | 3-hydroxycarboxylic acid production and use in branched polymers |
| KR100407470B1 (ko) * | 2000-08-08 | 2003-11-28 | 동서석유화학주식회사 | 로도코커스 로도크로스의 유가식 회분 배양방법 및 상기배양방법에 의해 배양된 로도코커스 로도크로스를이용하여 니트릴 화합물로부터 아미드 화합물을 제조하는방법 |
| KR100547080B1 (ko) | 2000-12-20 | 2006-01-31 | 다이야니트릭스 가부시키가이샤 | 미생물 촉매를 이용한 아미드 화합물의 제조 방법 |
| HU229283B1 (en) | 2001-01-09 | 2013-10-28 | Lonza Ag | Microbiological method for producing amides |
| DE10120546A1 (de) | 2001-04-26 | 2002-10-31 | Stockhausen Chem Fab Gmbh | Verfahren zur Herstellung einer wässrigen Acrylamidlösung mit einem Biokatalysator |
| DE10120550A1 (de) | 2001-04-26 | 2002-10-31 | Stockhausen Chem Fab Gmbh | Verfahren zur Herstellung einer wässrigen Acrylamidlösung mit einem Biokatalysator |
| DE10120555A1 (de) * | 2001-04-26 | 2002-10-31 | Stockhausen Chem Fab Gmbh | Verfahren zur Herstellung einer wässrigen Acrylamidlösung mit einem Biokataysator |
| WO2003033716A1 (fr) * | 2001-10-12 | 2003-04-24 | Dia-Nitrix Co., Ltd. | Procede de production d'acrylamide et/ou de methacrylamide au moyen d'un catalyseur de micro-organismes |
| JP2004194588A (ja) | 2002-12-19 | 2004-07-15 | Mitsui Chemicals Inc | 新規なニトリルヒドラターゼ |
| GB0327906D0 (en) * | 2003-12-02 | 2004-01-07 | Ciba Spec Chem Water Treat Ltd | Biocatalyst composition |
| GB0327901D0 (en) | 2003-12-02 | 2004-01-07 | Ciba Spec Chem Water Treat Ltd | Process for producing polymers |
| GB0327900D0 (en) | 2003-12-02 | 2004-01-07 | Ciba Spec Chem Water Treat Ltd | Process for preparing unsaturated amides and carboxylic acids |
| EP1689861B1 (en) | 2003-12-02 | 2011-11-09 | Ciba Specialty Chemicals Water Treatments Limited | Strain of rhodococcus rhodochrous ncimb 41164 and its use as producer of nitrile hydratase |
| EP1689875B2 (en) | 2003-12-02 | 2017-02-22 | Ciba Specialty Chemicals Water Treatments Limited | Manufacture of amides |
| JP2005328787A (ja) * | 2004-05-21 | 2005-12-02 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | ニトリルヒドラターゼ活性を有する新規な微生物、ニトリルヒドラターゼをコードする遺伝子及びアミド化合物の製造方法 |
| JP4493011B2 (ja) * | 2004-06-11 | 2010-06-30 | 三菱レイヨン株式会社 | ロドコッカス属細菌由来トリメトプリム耐性ジヒドロ葉酸還元酵素及びその遺伝子 |
| JP2008306928A (ja) * | 2005-10-06 | 2008-12-25 | Mitsui Chemicals Inc | コバルト型ニトリルヒドラターゼ産生微生物の培養方法 |
| NZ599631A (en) | 2006-01-30 | 2013-08-30 | Univ Georgia State Res Found | Induction and stabilization of enzymatic activity in microorganisms |
| US7943549B2 (en) | 2007-04-02 | 2011-05-17 | Georgia State University Research Foundation, Inc. | Biological-based catalyst to delay plant development processes |
| JP5132979B2 (ja) * | 2007-04-27 | 2013-01-30 | ダイヤニトリックス株式会社 | ポリアクリルアミド及びその製造方法 |
| WO2009009117A2 (en) * | 2007-07-11 | 2009-01-15 | Bioverdant, Inc. | Chemoenzymatic processes for preparation of levetiracetam |
| KR101598643B1 (ko) * | 2008-03-14 | 2016-02-29 | 다이야니트릭스 가부시키가이샤 | 아크릴아마이드 수용액의 안정화 방법 |
| CN101481713B (zh) * | 2008-12-30 | 2011-12-21 | 浙江工业大学 | 生物催化2-氰基吡嗪生产吡嗪酰胺的方法及其菌株 |
| AU2011218576B2 (en) | 2010-02-22 | 2015-12-03 | Mitsubishi Chemical Corporation | Stable aqueous acrylamide solution |
| US9102590B2 (en) | 2011-05-19 | 2015-08-11 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Method for producing acrylamide aqueous solution |
| US9057084B2 (en) | 2011-05-19 | 2015-06-16 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Method for producing aqueous acrylamide solution |
| US9370571B2 (en) | 2011-05-19 | 2016-06-21 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Aqueous acrylamide solution, stabilizer for aqueous acrylamide solution, and stabilization method for aqueous acrylamide solution |
| EP2821483B1 (en) | 2012-02-28 | 2017-03-29 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Method for preserving enzyme |
| FR3002542B1 (fr) * | 2013-02-28 | 2016-01-22 | Servier Lab | Procede de synthese enzymatique de l'acide (7s) 3,4-dimethoxybicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-triene 7-carboxylique et application a la synthese de l'ivabradine et de ses sels |
| US9993005B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-06-12 | Georgia State University Research Foundation, Inc. | Preventing or delaying chill injury response in plants |
| CA2903704A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-10-02 | Georgia State University Research Foundation, Inc. | Inhibiting or reducing fungal growth |
| CA2951900A1 (en) | 2014-06-10 | 2015-12-17 | Georgia State University And Research Foundation, Inc. | Inhibiting or reducing fungal infections |
| CN104762338A (zh) * | 2015-03-17 | 2015-07-08 | 安徽国星生物化学有限公司 | 一种红球菌催化生产烟酰胺的方法 |
| GB201601558D0 (en) * | 2016-01-28 | 2016-03-16 | Verdant Bioproducts Ltd | Method for producing 3-hydroxypropionamide |
| CN111662938B (zh) * | 2020-06-23 | 2021-05-04 | 浙江恒康药业股份有限公司 | 腈水合酶在催化氰基吡嗪类化合物水合反应生成酰胺吡嗪类化合物中的应用 |
| CN112625065A (zh) * | 2020-12-22 | 2021-04-09 | 北京师范大学 | 锝-99m标记含肼基尼古酰胺基的FAPI衍生物及制备方法和应用 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4629700A (en) * | 1983-11-30 | 1986-12-16 | Standard Oil Company (Indiana) | Selective conversion of cyano compounds to amides and carboxylic acids |
| JPS61162193A (ja) * | 1985-01-08 | 1986-07-22 | Nitto Chem Ind Co Ltd | 微生物によるアミド類の製造法 |
| JPH0740948B2 (ja) * | 1985-06-04 | 1995-05-10 | 旭化成工業株式会社 | アミドの微生物学的製造法 |
| JP3009421B2 (ja) * | 1990-02-28 | 2000-02-14 | 秀明 山田 | 有機酸の生物学的製造法 |
-
1988
- 1988-09-14 DD DD88319783A patent/DD274631A5/de unknown
- 1988-09-14 MX MX013025A patent/MX169933B/es unknown
- 1988-09-15 CA CA000577427A patent/CA1298222C/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 BR BR8804804A patent/BR8804804A/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 PL PL1988274710A patent/PL160904B1/pl unknown
- 1988-09-16 RO RO135188A patent/RO101578B/ro unknown
- 1988-09-16 RU SU884356476A patent/RU1838416C/ru active
- 1988-09-16 PT PT88540A patent/PT88540B/pt not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 FI FI884279A patent/FI93858C/fi not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 KR KR1019880011974A patent/KR0134094B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 PL PL88293521A patent/PL161959B1/pl unknown
- 1988-09-16 JP JP63231744A patent/JPH0655148B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 DE DE8888115182T patent/DE3877869T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 NO NO884114A patent/NO175489C/no not_active IP Right Cessation
- 1988-09-16 ES ES88115182T patent/ES2043752T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 HU HU884887A patent/HU204099B/hu unknown
- 1988-09-16 BG BG85446A patent/BG48934A3/xx unknown
- 1988-09-16 DK DK198805166A patent/DK174516B1/da active
- 1988-09-16 EP EP88115182A patent/EP0307926B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-09-16 AT AT88115182T patent/ATE85082T1/de not_active IP Right Cessation
- 1988-09-17 CN CN88106735A patent/CN1015473B/zh not_active Expired
-
1991
- 1991-10-15 US US07/777,641 patent/US5334519A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL161959B1 (pl) | Sposób wytwarzania hydratazy nitrylowej PL PL | |
| AU622489B2 (en) | Method for cultivation of bacteria | |
| US9605241B2 (en) | Induction and stabilization of enzymatic activity in microorganisms | |
| Watanabe et al. | Screening, isolation and taxonomical properties of microorganisms having acrylonitrile-hydrating activity | |
| CA2155635C (en) | Strain of rhodococcus rhodochrous as a producer of nitrile hydratase | |
| KR100339723B1 (ko) | 미생물을사용한아미드화합물의제조방법 | |
| JPH04304892A (ja) | グリシンの生物学的製造法 | |
| CA2432060C (en) | Microbiological method for producing amides | |
| JP4302876B2 (ja) | アミドの調製方法 | |
| EP1266962A2 (en) | Method for producing amide compounds | |
| Sharma et al. | Development of effective biotransformation process for benzohydroxamic acid production using Bacillus smithii IIIMB2907 | |
| MXPA00000440A (es) | Procedimiento para la preparacion de amidas | |
| JPH0681597B2 (ja) | アミド化合物の製造法 | |
| JPH0773503B2 (ja) | アミドの生物学的製造法 | |
| UA74768C2 (en) | Method for preparing amides |