MXPA02008819A - Inhibidor de actividad de alfa amilasa. - Google Patents

Abstract

Un inhibidor de actividad de a-amilasa que contiene como el ingrediente activo, polifenoles los cuales se obtienen al extraer hojas y/o frutos de guava con uno o mas solventes seleccionados de entre agua y solventes hidrofilos, eliminar materiales que tienen peso molecular inferior a 5000 mediante ultrafiltracion, utilizar cromatografia hidrofoba con el uso de una columna que porta butilo como la fase solida, eluir bajo gradiente de concentracion gradual de 0.02 ml/L de una solucion acuosa de fosfato diacido de sodio y 0.02 mol/L de una solucion acuosa de fosfato trisodico a una velocidad de fiujo de 1 mL/min, y luego recolectar una fraccion reconocida como el tercer pico sencillo en caso de medir la absorbancia a 260 nm; un inhibidor de actividad de a-amilasa que contiene como el ingrediente activo, polifenoles que tienen propiedades fisicoquimicas especificas; y alimentos y bebidas, etc. que contienen los mismos.

Description

milasa que contiene como un componente activo, poüfenotes que se originan de guava (Psidi?m guajava Linn.) (en lo sucesivo también llamados " oMfenoles de guava"), y alimentos y bebidas que contienen el inhibidor. 10 TÉCNICA ANTERIOR Recientemente, los consumidores han estado profundament .conscientes de limitar la ingestión de calorías, debido a que la ingestión «xeesiva de calorías es una causa principal de enfermedades de adultos i$ atribuibles a hábitos insalubres. Sin embargo, si existieran sustancias que - pudieran inhibir, o suprimir, la conversión de alimento ingerido en energía en * el cuerpo viviente, dichas sustancias serían útiles para gente en necesidad de ^iefe, debido a que las sustancias permitirían a la gente evitar tener que «educir su consumo de alimentos. En particular, inhibir la digestión de 0 ^rbohidratos dirigida mediante almidón se considera efectiva para 1a ?* revención y terapia de obesidad, y por lo tanto, en años recientes, se han vuelto de interés las sustancias que inhiben I actividad de &-amilasa, una ^nzima digestiva para el almidón. extracto obtenido al extraer hojas de guava Gon agua o un solvente hidrófilo !»Wbe la actividad de a-amilasa. La publicación de patente japonesa (kokoku) No. 60-36746 describe que el extracto se puede utilizar como un ingrediente de bebidas promotoras de salud, y la solicitud de patente Japonesa abierta al público (kok&i) No. 7-59539 describe que el extract se puede utilizar como un ' i ingrediente de alimentos y bebidas dietéticos. t? Sin embargo, los extractos de guava convencionales también contienen sesquiterpeno, tanina, y otros componentes, y además, su actividad \ inhibidora de a-amilasa no es necesariamente satisfactoria para el propósito *$te alcanzar un efecto dietético deseado. Por consiguiente, un objetivo de la presente invención es aislar a % partir de un extracto de guava, un componente que presenta actividad ty" inhibidora de a-amilasa particularmente notable y por lo tanto, que prometa fsroveer un efecto dietético más efectivo. Otro objetivo de la presente Invención es proveer alimentos y bebidas que contienen el componente.

« *- La figura 1 es una representación de los espectro© de bsofiojón infrarroja de polifenoles de guava. 5 La figura 2 es una representación de los espectos de rotación 4s ángulo mágico de polarización cruzada (CP-MAS) de poBfenoies de gaava La figura 3 es una representación de la curva de elución de polifenoles de guava purificados. La figura 4 es una representación de resultados obtenidos pon él 10 análisis de cromatografía líquida de polifenoles de guava.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA tNVBNCION En vista de to anterior, los inventóles de la presente han é realizado amplios estudios en componentes de afto contenido molecular de un extracto de guava, y han encontrado que una clase específica de pollfenoies obtenidos a través de un procedimiento como se define en la presente invención, presenta alta actividad inhibidora de a-amilasa. Brevemente, de acuerdo con el procedimiento de la presente invención, un extracto acuoso de 20 hojas de guava, o fruta de guava se somete a ultraflltración y las fracciones que tienen un peso molecular de 5,000 o más son sometidas a fraccionamiento por medio de cromatografía hidrófoba específica. La presente invención, ha sido realizada con base a este descubrimiento. polifenoles obtenidos a través del siguiente procedimiento; hojas de guav#|to fruta de guava se someten a extracción con uno o más solventes * 5 seleccionados de entre agua y solventes hidrófilos; el extracto resultante se somete a ultrafiltración, para remover así sustancias que tienen un peso molecular de menos de 5,000*, la fracción restante se aplica a la columna de **¿ n* i ßroinatografía hidrófoba de soporte de butilo, y se realiza la elución mediante , uso de una solución acuosa de fosfato diácido de sodio (0.02 mol/L) y una 10 Polución acuosa de fosfato de sodio (0.02 mol/L) (velocidad de flujo: 1 mL/minuto) bajo un gradiente de pH entre las dos soluciones; y se recupera una fracción de la sustancia eluída, cuya fracción corresponde al tercer pico sencHIo de una curva de elución obtenida cuando la absórbancia de la sustancia se mide a 260 nm. if La presente invención también provee un inhibidor de actividad a-amilasa que e r n e, como un componente efectivo, polffenotes que tienen las Siguientes propiedades fisicoquímicas: (a) contiene carbono (49.6%), hidrógeno (4.6%), y nitrógeno (0.6%). (b) tiene un peso molecular de 5,000-100,000; (c) presenta fuerte absorción infrarroja cerca de 3,428 cm"1, 1705 cm"1, 1 ,615 cm"1, y 1 ,220 cm*1; (d) presenta espectros de resonancia m^? fca nuclear <$e carbono sóHdo que corresponden a una señal de azúcar (certa de 76 ppm), una señal aromática (cerca de 115.0 ppm), una señal de fenol cerca de 144 y 156- ppm), y una señal de éster carbonilo (cerca de 168 ppm); y (e) presenta un solo pico en aproximadamente 10 minutos cuando se somete a cromatografía líquida feajo las siguientes condiciones: columna: una columna llena con ge! duro de distribución de fase inversa de tipo polímero sintético a la cual se unen químicamente grupos butilo (modelos: Shodex Asahipak C4P-50 4D (producto de S o a Denko , diámetro interno: 4.6 mm, longitud: 150 mm, o una columna similar a esta columna); velocidad de flujo: 1.5 mL/minuto; temperatura de columna: una temperatura específica alrededor de 40°C; detector: absorciómetro de rayos UV (longitud de onda: 260 nm); fase móvil : Solución A: una mezcla de solución de acetonítrtlo que contiene NaH PO4 (0.02 mol/L) y agua (15:85 (v v)) (pH=4.6) y, Solución B: una mezcla de solución de acetonitrilo que contiene Na3PO480.2 mol/L) y agua (15:85 (v/v)) (pH-11.4) y Método de análisis: un análisis de gradiente de etapa realizado oon base a los datos mencionados en el siguiente cuadro.

Ljnn., y la región en la cual crece la guava no está partteularme te limitada. t"fn ti presente invención, se puede emplear guava natural o que^e cultiva en las 2onas tropicales o subtropicales del sudeste de Asia, Asia dÜ Sur, Amérlqa 5 Sur, o Norteamérica. En la presente? invención, se emplean hojas o frute la guava. Se puede emplear guava pura, guava semiseea o guava seca, pero de pr ferencia, se emplea en particular hojas dé guava seca. Cuando se ÜSlíza la fruta de guava, de preferencia se utiliza fruta no madura. Dichas (R ftojas o fruta de guava, que sirven como materia prima, de preferencia se O pulverizan antes de uso. Por ejemplo, cuando se utilizan hojas de g^ava, las •isoias de preferencia se cortan en pedazos que tienen un tamaño de > roximadamente 3-5 mm. ientras tanto, la guava la cual seca y luego se s tuesta, puede ser utilizada con el fin de mejorar el sabor. Se utilizan uno o más solventes seleccionados de entre agua 15 -Ü lventes hidrófilos como el solvente de extracción. Ejemptos de solventes Hidrofitos incluyen metanol, etanol, alcohol n-propílico, acetona, y propBengJicól Estos solventes se pueden utilizar en combinación con dos o más especias. De manera alternativa, estos solventes se pueden combinar con agua en una relación arbitraria para usarse en forma de solvente que 20 itontiené agua. Con el fin de facilitar la operación y aumentar la seguridad, de refereßcia se utiza agua como el solvente de extracción. La cantidad del solvente de extracción empleada no está particularmente limitada. Sin embargo, cuando se emplean hojas de guava, la "- El extracto de guava obtenido a partir del paso 1, se somete a r tiltrafiltración, para remover así sustancias de bajo peso molecular que tterw» m peso molecular inferior a 5,000. Para ultrafiltración del extracto de guava, se puede utilizar un método que emplea un aparato de filtración de tipo prensa, diálisis, centrifugación, etc. Estos métodos y técnicas se pueden utilizar en combinación. Cuando se realiza diálisis, el extracto de guava se coloca en un tubo de diálisis formado de una membrana semipermeable que puede ser futrada por una sustancia que tiene un peso molecular de menos de 5,000, la membrana está conformada de un material tal como éster de celulosa o ífetofán. Posteriormente, el extracto de guava se dializa contra agua o un «^guiador de pH diluido (en los sucesivo referido como dializado) durante uno * siete días, de preferencia de dos a tres días, mientras el dializada es ^riódicamente intercambiado por un dializado fresco o se ocasiona que fluya agua constantemente. A través del procedimiento anterior, las sustancias de bajo peso molecular se difunden en el dializado para remoción di las sustancias a partir del extracto de guava.

Una fracción que tiene un peso molecular de 5,000 o mis Obtenida a través del paso 2, se somete a cromatografía hidrófoba de oport de butilo. El material se aplicó a la columna y la elución (velocidad de flujo: i mL/min) de la muestra se realizó en el gradiente de pH a partirle solución de fosfato de ácido de sodio (0.02 mol/L) a solución de fosfato de sodio (0*02 mol/L). ** :*- El llenador empleado en cromatografía hidrófoba como una fase estacionaria no está particularmente limitado, siempre que el llenador porte grupos butilo como grupos funcionales y tenga resistencia mecánica satisfactoria. Ejemplos del llenador incluyen poliestiren^, poliestireno oarboxilado, acrilato de polimetilo y derivados de celulosa. Una solución acuosa de fosfato diácido de sodte» (0.02 mol/L) y una solución acuosa de fosfato de sodio (0.02 mol L) utüfean como una fase móvil, y se realiza la elución bajo un gradiente de conceftiación entre las dos soluciones. Los solventes pasan a través de la columna (velocidad de flujo: 1 «L/min), y se obtiene el patrón de separación de la sustancia eluída al medir la absorbencia de la sustancia eluída a 260 nm. Posteriormente, se recupera una fracción la cual corresponde al tercer pico sencillo del patrón, y la fraccióh así recuperada se seca al vacío o se seca por congelamiento, para obtener así los polifénoles de la presente invención.

Análisis elemental Se realizó análisis elemental a través de un método habitual. Loe fesultados se muestran en el cuadro 2.

CUADRO 2 Resultados de análisis elemental * En vista del contenido de nitrógeno muy bajo, se considera que lá fracción no contiene proteína.

Peso molecular El peso molecular de la fracción se determinó a través de GPO QLfsR mediante el uso de un detector de dispersión de luz de ángutos múltiples de acuerdo con un método habitual. Se encontré qué el peso molecular de la fracción es de 5,000-100,000, y se encontró que el peso molecular promedio es de 70,000.

Ariafüs de com oneÉtes ' Sí -$?" El contenido de azúcar de la fracción se obtuvo de la siguief manera: una muestra se calentó y se descompuso en 4 mol/L de ácido ífluoroacétíco a 100°C durante dos horas; se formó un derivado de acetato S s nitrilo aldóníco de acuerdo con un métedo habitual; y luego se calculó el contenido de azúcar a través de análisis de cromatografía de gas. Los Insultados: glucosa (2.1%). arabinosa (2.0%), galactosa (1.3%), mañosa fT.4%), rhamnosa (0.3%), y xitosa (0.3%). 1 Contenido de ácido gálico, contenido de . ácido eláaico. v ntenido deoroantocianidina Se determinó el contenido de ácido gálico y el contenido de fekJo elágico de la muestra al calentar la muestra en una mezcla de butaroü- ácido clorhídrico (95:5 V/V) que contiene sulfato de hierro de amonio (lll), a *< ^^5 ' 00°C durante 24 horas para descomponer así la muestra; y analizar la muestra d scompuesta a través de CLAR. Se encontró e el contenido d# ÉCido gálico y el contenido de ácido elágico es de 0.6% y 5.2%, •* Üspectivamente. El contenido de proantocianídina de la muestra se determinó ¿ **<,-" # „ al calentar la muestra mediante el uso del mismo reactivo a 95*C durante 40 "Ütinutos para descomponer así la muestra, y calcular el contenido a partir de f> : absorbancia de la solución descompuesta. Se encontró que el contenido de * lfoantocianfdina, reducido a cianidina es de 6.8%. leí* *- ^* * ? Espectro de absorción infrarroja La muestra se intercaló entre cristales de Bif 2 y se nrollé ba|> presión. Se realizó la medición a través del método de transmisión. En el espectro de absorción de IR obtenido, los picos fuertes* de absorción 5 atribuidos a la fracción se corrfirmaron en aproximadamente 3428 cm*1, 1705 an"1, 1615 cm'1, y 1220 cm"1. El espectro de absorción de IR se muestra en la figura 1.

Espectro de resonancia magnética nuclear de carbono sólido 10 R N de 13C sólido) Se utilizó un método habitual, específicamente, rotación de ángulo mágico de polarización cruzada (CP-MAS). En el espectro de CP- AS ©btenido, se observaron señales atribuidas a sustancias tales como azúcar, aromáticos, fenol, y éster carbonilo. El espectro confirmó que la fracción se 15 formó de polifenoles que contienen principalmente un grupo de elagitaninas. El espectro de CP-MAS se muestra en la figura 2. Los polifenoles de guava antes mencionados presentan, como se muestra en los ejemplos abajo descritos, una excelente actividad inhibidora de a-amilasa y también una actividad inhibidora de a-glucosidasa. Por 20 consiguiente, cuando se ingiere alimento en el cual se han incorporado los polifenoles, se previene de manera efectiva la degradación de almidón en dextrina y maltosa, y además, se previene la degradación de disacáridos (maltosa, isomaltosa, sacarosa) en glucosa. De esta forma, la incorporación Hiateriales que se pueden incorporar incluyen vitaminas tales como vitamina 0 , vitamina B, vitamina C, y vitamina E; componentes minerales tales como Üctato de calcio, gluconato de calcio, pantotenato de calcio; compuestos de Magnesio, y compuestos de zinc; y extractos herbales.

* Cuando los pottfenoles de la presente inventen st incorporan en alimentos y bebidas, la cantidad total de los polifenoles, la cugii puede vaÉÉr dependiendo de la forma de alimento y bebida, de preferenefe es de Q.oéÉ- 0.5% en peso. La cantidad de dichos alimentos y bebWas que serán ingeridas por día de preferencia es de 5-500 mg, reducidos ß tes pollfenoles, particularmente de preferencia de 10-100 mg.

EJEMPLOS La presente invención será descrita ahora con más detalle por medio de ejemplos, los cuales no deben ser interpretados como limitantes de la ¡nvención.

EJEMPLO 1 Preparación <te extracto de ouava (1) Hojas de guava (producidas en la República Popular de China, Kuanhsi) se secaron, se tostaron a 121°C durante 15 minutos, y se cortaron diminutamente en pedazos pequeños de aproximadamente 5 mm. Las hojas rotas así obtenidas (100 kg) se sumergieron en agua caliente (80°C, 3000 kg), para efectuar así la extracción durante 25 minutes. El extracto resultante se enfrío a 30°C o menos, y se centrifugó a 1500 fm durante 10 uava. (2) Se preparó extracto de fruta de guava no madura al so ^T « la fruta de guava no madura (1 parte en peso) a extracción mediante uso * ]e un solvente (aproximadamente 10 partes en peso) a 90°C durante 25 minutos. (3) Se añadió el extracto de fruta de g?ava no madura al exfraéi* cte hoja de guava así obtenido en una cantidad de aproximadamente 0.1- ;§.2%, preparando así extracto de guava.

EJEMPLO 2 Preparación de polifenoles de ouava B extracto de guava que se preparó en el ejemplo 1 se filtró por medio de un ultrafiltrador (para fraccionar peso molecular de 5000), para ßiDtener así una fracción de peso motecuiar de 5000 o más. La fracción así obtenida se dializó contra una membrana de diálisis (para fraccionar peso niolecular de 6000-8000), y el líquido interno separado se secó por <fc>ngelamiento, para preparar así polifenoles crudos. Los polifenoles crudos se disolvieron en 0.02 mol/L de solución acuosa de fosfato diácido de sodio, y la 'solución se purificó por medio de cromatografía hidrófoba (columna de macro- rep que contiene un llenador enlazado al grupo butilo). Específicamente, después de que el llenador se lavó con 0.02 mol/L de una solución acuosa de fosfato diácido de sodio en un volumen el doble del volumen de la columna, se í»» -# volumen de la columna, que contiene 0.02 mol/L de una solución d ^ fésf paci o de sodio y 0.02 mol/L de una solución acuosa de fosfift) trisódteo bife ? éin gradiente de concentración (es decir, cambio proporcional en 5 concentración) entre las dos soluciones. Posteriorm nte, se aplicó 0.02 mol/L i una solución acuosa de fosfato trisódico a la columna. La absorbancia bt ' la fracción restante se midió en 260 nm, para trazar así una curva de elución, se investigó la actividad inhibidora de amilasa (figura 3). Como«s evidente a partir de las curvas en la figura 3, el pico sencillo Anal de elución traslapó el 10 pico de actividad inhibidora. Una fracción correspondiente a ese pico sencillo «e recolectó y se sometió a electrodiálisis, seguido de secado por congelamiento, para obtener así un producto que sirve como polifenoles de- puava purificados. Los polifenoles de guava purificados así obtenidos, se analizaron * ' 15 por cromatografía bajo las condiciones de medición antes mencionadas (f). Los resultadas se muestran en la figura 4. Como se aprecia en la figura 4, los , p liten les de guava purificados de la presente invención presentan un solo JÉGG en el cromatograma medido bajo las condiciones anteriores. 4» .

Activl^ | ibi £>ra de Se investigaron los efectos, en a-amilasa, del extracto de guava y tos polifenoles de guava purificados obtenidos en los ejemplos 1 y 2, - respectivamente. Se midió la actividad inhibidora de a-amilasa a través de un método habitual. Específicamente, se mezcló a-amilasa derivada de jugo pancreático de cerdo con 0.02 M de regulador de fosfato de sodio (pfr 6.5), para preparar así una solución de amilasa. Se preparó una solución de substrato a partir de almidón soluble al 8% y 0.08 M de regulador de fosfató de sodio (pH 6.5). Mezclas de la enzima, solución de substrato y una so jcróh tte prueba, o una mezcla déla enzima, solución de substrato, y agua que sirve Como un control se dejaron reaccionar a 37°C durante siete minutos. La reacción se terminó a 100°C. La maltosa formada se determinó a través de CLAR mediante uso de arabinosa como una sustancia estándar interna. Se calculó la actividad inhibidora a través de la siguiente ecuación. Los resultados §e muestran en el cuadro 3. Actividad inhibidora (%) = {1 - (cantidad de maltosa formada -en muestra de prueba )/(cantidad de maltosa formada en muestra de control)} x 100 CUAgRO *g i *f 4 X Como se muestra en el cuadro 3, los pollfenoles de guava purificados de la presente invención presentaron mayor actividad inhibidora 10 aproxímadamente 30% más elevada) en comparación con extracto de guava.

EJEMPLO 4 Actividad inhibidora cte «-qfwsesidasa 15 Se investigaron los efectos, en maitasa - un tipo de a- jucosidasa - del extracto de guava y los polifenoles de guaya purificados obtenidos enjos ejemplos 1 y 2, respectivamente. Se midió la actividad inhibidora de maitasa a través de un método habitual. Específicamente, se preparó una solución de maltasa cruda 20 al homogeneizar polvo de acetona intestinal de rata (SIGMA) con 56 M de r gulador de maleato (pH 6.0) en una cantidad nueve veces el polvo, y recolectando el sobrenadante centrífugo. Se preparó una solución de substrato mediante uso de 224 mM de regulador de maleato (pH 6.0) de modo la concentración de enzima, solución de subst enzima, solución de subs fraccionar a 37°C, duran |ucosa formada se deter ©orno una sustancia está través de la siguiente ecuación. Los resultados se muestran en el cuadro 4. ' *ft* Actividad inhibidora (%) = {1 - (cantidad de glucosa formada en muestra de prueba )/(cantidad de glucosa formada en muestra dé control)} x 100 CUADRO 4 Mediante el uso de los polifenoles de guava purificados que " -epararon en el ejemplo 2, se elaboró pan con base a la siguiente 5 formulación.

(Partes en peso) Formulación Harina de trigo 52 Azúcar refinada 3 Leche condensada 4 t Mantequilla sin sal 3 Huevo 3 10 Sal refinada 1 Levadura fresca 1.5 Agua 31.5 Polifenoles de guava 1 -%> Después de cocción, el pan tenía un sabor herbal característico y t§ un buen gusto al paladar, y fue comparable con el sabor de productos de pan convencionálmente disponibles en el mercado.

Aplicación industrial El inhibidor de actividad a-amilasa de la presente invención 20 nuestra notablemente una excelente actividad inhibidora de a-amilasa e? comparación con extracto de guava, y también muestra una actividad Inhibidora de a-glucosidasa. Por consiguiente, al incorporar los polífenoles en alimentos y bebidas, se pueden proveer aquellos que tengan un efecto para el nivel de aíÉ ar en *§#ngre y un efecto anß-otesídad, Hspecífica értte, al incorp W tos polifenoles en alimentos que fhucho almidón tales como harina condimentada,, tallarines» pan y gañías, S ajerien proveer alimentos y bebidas dietéticos adecuados para gente con ß nivel de azúcar en sangre o hipßrHpidemia. ' ' » t <*

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES V á- 5 1.- Un inhibidor de actividad de a-amilasa que c mpr n , wé . , íb> ? un componente efectivo, polifenoles obtenidos a través - del signieáte * ; procedimiento: hojas de guava y/o fruta de guava se someten « extracción con , jrSBíf uno o más solventes seleccionados de entre agua y solventes hidWifés; ef * f extracto resultante se somete a ultrafiltración, para remover así sustancias . 10 que tienen un peso molecular de menos de 5,000; la fracción restante se aplica a la columna de cromatografía hidrófoba de soporte de butilo, y se realiza la elución mediante uso de una solución aoupsa de fosfato diácido de .. sodio (0.02 mol/L) y una solución acuosa de fosfato de sodio (0.02 mol/L) (velocidad de flujo: 1 mL/minuto) bajo un gradiente de pH entre las dos 15 soluciones; y se recupera una fracción de la sustancia eluída, cuya fracción corresponde al tercer pico sencillo de una curva de elución obtenida cuando la absorbancia de la sustancia se mide a 260 nm. 2.- El inhibidor de actividad de a-amilasa de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque los polifef?éfe 'están dotados 20 oon las siguientes propiedades fisicoquímicas: (a) contiene carbono (49.6%), nldrógeno (4.6%), y nitrógeno (0.6%); (b) tiene un peso molecular de 5,000- 100,000; (c) presenta fuerte absorción infrarroja cerca de 3,428 cm*1, 1,705 cm'1, 1,615 cm"1, y 1,220 cm"1; (d) presenta espectros de resonancia a una señal de azúcar (cerca de 76 ppm), una serial aromática (cerca de 115.0 ppm), una serial tte * * ?*' ' fenol (cerca de 144 y 156 ppm), y una señal de éster carbonilo (eercaf e 1613 ppm y (e) presenta un solo pico en aproximadamente 10 minitos cuando se 5 somete a cromatografía líquida bajo las siguientes condiciones: columna: una ^lumna llena con gel duro de distribución de fase inversa de tipo polímero ^ntético a la cual se unen químicamente grupos butilo (modelos: Shodex Asahípak C4P-50 40 (producto de Showa Denko), diámetro interno: 4.6 mm, longitud: 150 mm, o una columna similar a esta columna); velocidad de flujo: 10 1.5 mL/minuto; temperatura de columna: una temperatura específica alrededor de 40°C; detector: absorciómetro de rayos UV (longitud de onda: 260 nm); se móvil : Solución A: una mezcla de solución de acetonitrilo que contiene WaH2PO (0.02 moi/L) y agua (15:85 (v/v)) (pH»4.6) y, Solución B: una mezcla * de solución de acetonitrilo que contiene Na3P04 80.2 mol/L) y agua (15:85 15 (y/v)) (pH=11.4) y método de análisis: un análisis de gradiente de etapa realizado con base a los siguientes datos mencionados: con un tiempo de análisis de 0 (a 4) minutos, 100% para la solución A y 0% para la solución B; de 4 (a 8) minutos, 65% para la solución A y 35% para la solución B; de 8 (a 12) minutos, 0% para la solución A y 100% para la solución B; de 12 (a 20) 2 minutos, 100% para la solución A y 0% para la solución B. 3.- Un inhibidor de actividad de a-amilasa que comprende, como un componente efectivo, poßtfcW-teß qtre tienen las siguientes propiedades fisicoquímicas: (a) contiene carbono (49.6%), hidrógeno (4.6%), y nitrógeno i absorción infrarroja cerca de 3,428 cm"1, 1,705 cm*1, ,016 cm"1, y 1 ,220 cm*1; ) presenta espectros de resonancia magnética nuclear de fsarbooo sólido íe corresponden a una señal de azúcar (cerca de 76 ppm), una señal 5 aromática (cerca de 115.0 ppm), una señal de fenol cerca de 144 y 156 ppf?), ' -**. y una señal de éster carbonilo (cerca de 168 ppm); y (e) presenta un sotó pido r . #n aproximadamente 10 minutos cuando se somete a cro atografía líquida feajo las siguientes condiciones: Golumna: una columna llena con gel duro de distribución de fase inversa de tipo polímero sintético a la cual se unen 10 químicamente grupos butilo (modelos: Shodex AsaWpak C4P-504D (produütb 4e Showa Denko), diámetro interno: 4.6 mm, longitud: 150 mm, o una columna similar a esta columna); velocidad de flujo: 1.5 mUminuto; temperatura de columna: una temperatura específica alrededor de 40*C; Ifetector: absorciómetro de rayos UV (longitud de onda: 260 n ); fase móvil : 16 Solución A: una mezcla de solución de acetonitrilo que contiene NaH2PCt (0.02 mol/L) y agua (15:85 (v/v)) (pH=4.6) y, Solución B: una mezcla de solución de acetonitrilo que contiene Na3P?4 80.2 mot/L) y agua (15:85 (v/v)) (pH=11.4) y método de análisis: un análisis de gradiente de. tapa realizado con base a los siguientes datos mencionados: con un tiempo cte análisis de 0 20 (a 4) minutos, 100% para ia solución A y 0% para la solución B; de 4 (a 8) minutos, 65% para la solución A y 35% para la solución ?; de 8 (a 12) minutos, 0% para la solución A y 100% para la solución B; de 12 (a 20) minutos, 100% para la solución A y 0% para la solución B. cualquiera lie las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado además porque e tóf ,4 otado adícionalmente con actividad inhibidora de a-glucosidasa. t 5.- Alimentos y bebidas que contienen un inhibidor de actividad *. de a-amilasa de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4. 6.- El uso de tos poKfenoles como se Relaman ? cualquiera de »* s reivindicaciones 1 a 3, para producir alimentos y bebidas dietéticos. 7.- Un método de dieta que comprenda consumir tos alimentos y bebidas de conformidad con la reivindicación 5. fíidrófiqs, eliminar materiates que tienen peso molecular inferior a 500TJ medente ultraf Bteación, utilizar cromatografía hidrófoba con él uso de una columna que porta butilo cómo la fase sólida, eluír bajo gradiente de goncentración gradual de 0.02 ml/L de una solución acuosa de fosfato diácido " f?e & sodio y 0.02 mol L de una solución acuosa de fosfato ftisódico a una ir' Velocidad de flujo de 1 mL/min, y luego recolectar una fracción reconocida tomo el tercer pico sencillo en caso de medir la absorbancia a 260 nm; uh Inhibidor de actividad de a-arttilasa que contiene como el ingrediente activo, ^ lifenoleá que tienen propiedades fisicoquímicas específicas; y alimentos y . ? ?sebidas, etc. que contienen tos mismos. PA/a 2002 \ fc* n |ty?nmfflu*kra*mmr*aom* #02/1298F * J i