CN107213203B - 一种从番石榴叶中提取总多酚的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了从番石榴叶中提取总多酚的方法，其特征在于，将番石榴叶置于表面活性剂的水溶液中，在微波和超声的辅助下提取，随后经固液分离，即得到所述的包含总多酚的提取液；所述的表面活性剂的水溶液中，表面活性剂的质量百分数为1％～3％；微波的功率为100～300W；超声功率为200～500W。本发明以水溶液来代替有机溶剂，充分结合表面活性剂的润湿、增溶作用，微波萃取的“体加热”原理，以及超声波的空化效应，不仅解决了传统有机溶剂残留问题，同时够大大缩短提取时间，提高提取率，降低了企业的生产成本，具有广阔的推广前景。

Description

一种从番石榴叶中提取总多酚的方法
技术领域
本发明涉及植物活性组分提取领域，具体涉及一种从番石榴叶中提取总多酚的方法。
背景技术
番石榴(Psidium guajava)为桃金娘科番石榴属植物，原产于热带美洲，在我国福建、台湾、广东、广西等地均有分布或栽培。现代药理及临床研究表明，番石榴叶中富含多种重要的芳香类二级代谢产物，正是这些多酚类物质赋予番石榴叶多种功效，如软化血管、降低血糖和血脂、抗氧化、抗肿瘤等，对于腹泻、肠炎、肠胃溃疡、湿疹、咳嗽等症状也有明显的疗效。
目前，传统的番石榴叶多酚的提取方法有“水煎煮法”、“乙醇浸渍提取法”、“酶解法”等。但是，传统水煎法提取效率较低，而且高温水煮容易导致多酚物质失活；采用醇提法，多酚类成分提取率较高，但是乙醇消耗量大，回收率低，因此成本较高，且环境污染严重，产业化生产不可取；酶法提取要求酶具有高度专一性和极高的活性、而且酶法容易受到酶的种类、用量、酶解时间、温度等多种因素的影响，生产环节较难控制；因此，开发一种能耗低、时间短、过程清洁、工艺简单又高效，且易于工业化生产的番石榴叶多酚提取方法显得尤为重要。
多酚类物质传统提取法通常采用溶剂法、络合沉淀、层析法等方法进行提取分离。但提取分离效果并不理想。近年来，超声波及微波提取法被证实可以运用于工业生产，且能够有效提高提取率。卢晓霆等人(卢晓霆，王田田，王军.响应面法优化葡萄籽多酚提取工艺[J].食品工业科技，2013年24期)使用了超声波辅助提取技术，并运用响应面法优化提取技术，研究了葡萄籽中多酚的提取，其提取率达到了1.722％，比传统提取方法的提取率高2％～3％。阎海青等人(阎海青，陈相艳，程安玮，王文亮，曲静然.超声微波联用技术提取蓝莓多酚的工艺优化[J].中国食品添加剂，2014年1期)使用超声微波联用技术提取了新鲜蓝莓果中的多酚类物质，其提取率达到了14.56±0.2mg/g。超声波与微波技术的联用可以有效提高提取率，在表面活性剂的作用下，多酚类物质的提取率能够得到进一步的提升。
但现有的多酚提取技术仍然许多不足之处，如有机溶剂残留。有机溶剂多数对人体有害，且分离困难，耗时长，工序复杂，因此使用有机溶剂提取多酚类物质在食品加工中并不现实。本发明所采用的水提法结合微波与超声波的技术能够解决有机溶剂残留问题。
微波辅助提取是利用微波的温度效应及电磁场效应来提高植物活性物质的提取率。微波能通过直接作用于物料分子，使整个物料同时被加热，即“体加热”，与普通加热相比，更能达到能量充分利用的效果。微波辅助提取通过偶极离子旋转和离子传导两种方式里外同时加热，使细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的多酚化合物从细胞中释放出来，被周围的溶剂溶解，因此其热量传递和质量传递方向是一致的，这有助于多酚类化合物的快速溶出。超声波是一种弹性波，具有一系列的力学、热学、电磁学和化学的超声效应、空化效应、热效应和化学效应等。超声波的空化效应促使溶剂更大程度地渗入细胞中，提高物质的传递速度；而且它的次级效应如机械效应、机械振动、乳化、扩散、击碎和化学效应等可使细胞壁破裂而加速植物中多酚化合物的扩散和释放。
发明内容
针对以上问题，本发明的提供了一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，旨在简化提取操作，提高提取效率。
为实现上述目的，本发明所采取的技术方案为：
一种从番石榴叶中提取总多酚的方法，将番石榴叶置于表面活性剂的水溶液中，在微波和超声的辅助下提取，随后经固液分离，即得到所述的包含总多酚的提取液；
所述的表面活性剂的水溶液中，表面活性剂的质量百分数为1％～3％；
微波的功率为100～300W；超声功率为200～500W。
本发明人通过大量研究发现，采用表面活性剂的水溶液做溶媒，利用表面活性剂的增溶、润湿作用，同时结合微波的热效应和辐射作用以及超声波的空化效应于一体，不仅可以降低企业生产成本，解决了有机溶剂残留问题，同时可以大大缩短番石榴叶总多酚的提取时间，提高提取效率。本发明方法具有步骤简单、操作方便、成本低廉、提取效率高，且不存在有毒有机溶剂残留的问题，具有很大的发展潜力和应用价值。
本发明采用溶有少量表面活性剂的水溶液作为提取溶剂，利用表面活性剂增溶作用，同时结合微波的电磁效应和超声波的机械作用，有效促进番石榴叶中多酚化合物的提取效率。
研究表面，不同类别的表面活性剂对萃取效果具有一定影响。
作为优选，所述的表面活性剂为阴离子型表面活性剂。
进一步优选，所述的表面活性剂为吐温-40、吐温-60、司班-60、司班-80、十二烷基硫酸钠中的至少一种。
最优选，所述的表面活性剂为十二烷基硫酸钠。本发明所采用的表面活性剂十二烷基硫酸钠为阴离子表面活性剂，其在水中溶解度随温度升高而增大，在这种特定条件下，十二烷基硫酸钠作为表面活性剂的效果优于吐温。
作为优选，表面活性剂的水溶液中，表面活性剂的质量百分数为1％～2％，进一步优选为1.5～2％。
作为优选，微波的功率为200～300W。
进一步优选，微波的功率为250～300W。
作为优选，超声功率为300～500W。
作为优选，提取时间为5～20min。
本发明采用所述的表面活性剂以及微波、超声协同，可明显缩短提取时间。
作为优选，番石榴叶预先经干燥、粉碎处理。
作为优选，将番石榴叶干燥至含水量低于或等于2％。
作为优选，采用新鲜番石榴叶在50～70℃，恒温干燥至所述的含水量。
将干燥后的番石榴叶粉碎后过40目筛网，筛下物用作提取原料。
作为优选，所述的番石榴叶与表面活性剂的水溶液的质量比为1∶15～40。
本发明一种优选的表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，具体包括如下步骤：
步骤(1)番石榴叶的处理
将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
步骤(2)将番石榴叶粉碎物和蒸馏水质量比1∶15～1∶40充分混合后得到料液；
步骤(3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂与水溶液的质量百分比为1％～3％；
步骤(4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为100～300W，超声波功率为200～500W，提取时间为5～20min；
步骤(5)将步骤(4)获得的产物冷却至室温，减压抽滤，所得滤液即为含有番石榴叶多酚的溶液。
上述方案中，所述表面活性剂为吐温-40、吐温-60、司班-60、司班-80、十二烷基硫酸钠(SDS)，优选十二烷基硫酸钠(SDS)。所述微波功率为200W，超声波功率为350W，提取时间为10min。
本发明研究表面，在所述的表面活性剂以及重量百分比作为溶媒；再配合于所述的功率下的微波和超声的穿透以及空化效果，可协同提升溶媒对提取成分的“增溶”的作用，有助于明显缩短提取时间，提升目的产物的提取率。
本发明的原理是：在所述的提取体系下，使有效成分可以轻易溶出。以溶有合适剂量的表面活性剂的水取代有机溶剂作为提取介质，对有效成分有“增溶”的作用。在所述的协同的微波和超声下，可使极性分子发生共振摩擦从而产生热效应，同时又有穿透性，可以使所述的表面活性剂水溶液和物料内部同时加热，这样不仅利用了热效应，同时由于细胞内部在加热，产生了压力，细胞更容易发生破裂，有效成分可以自由溶出。此外，在所述的协同的微波和超声下，在媒介中引起的“空穴作用”局部产生瞬间的高压来破坏细胞壁和细胞膜结构，从而促进细胞原生质通过细胞壁和细胞膜，溶解于媒介中，使有效成分进一步流出；所以将三者结合同时作用于番石榴叶提取工艺可以大大的提高提取效率，降低成本。
本发明的优点及有益效果：
(1)以溶有少量表面活性剂的蒸馏水溶液作为提取液，取代了传统的有机溶剂。且不属于有毒溶剂，不存在残留的问题。
(2)采用本发明所述方法提取番石榴叶总多酚，提取时间有传统的2h～5h缩短为5～20min，大大缩短了提取时间，大大降低了生产过程中的能耗及成本，提高了提取效率。
(3)采用本发明所述方法提取到的番石榴叶总多酚，由于避免了长时间的热效应，减少了多酚发生热分解及被氧化的程度。
(4)本发明所述方法对外部环境无过高要求，同时所需设备简单和操作方法简单，具有潜在的应用前景。
附图说明
图1是多酚浓度的标准曲线。
具体实施方法
为了更好理解本发明，下面结合实例进一步阐明本发明的内容，但本发明的内容不仅仅局限于下面的实例。
以下实施例以及对比例的番石榴叶总多酚的得率的测定方法如下：
采用Folin-ciocalteu(FC)比色法测定番石榴叶多酚的得率：
标准曲线的确定：准确称取没食子酸0.0100g，用蒸馏水溶解并定容至100ml，得到浓度为0.1mg/ml的没食子酸标准液，准确吸取0，0.5，1，2，3，4，5，6，7，8ml置于50ml的棕色容量瓶中，分别加入福林-酚试剂4.0ml，混匀，在0.5～5min内加入4ml的10％Na2CO3溶液，充分摇匀后定容，室温下于避光处放置1h，以蒸馏水代替标准液作为空白对照，在760nm波长下测定其吸光度值，每个样品平行测定三次。以没食子酸在反应体系中的质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
由图1的多酚浓度标准曲线可以看出，吸光值对标准溶液浓度的回归方程和相关系数分别为y＝50.538x+0.0558，R2＝0.999表明在该浓度范围内线性良好。
样品中多酚含量的测定：用移液枪准确吸取0.1ml提取液于10ml比色管中。加入1ml的福林酚试剂，摇匀；1-8min内，加入1ml10％的Na2CO3溶液，摇匀，加蒸馏水定容；待测液暗处处理1h，于760nm波长处测量样品溶液的吸光值，根据回归方程计算样品溶液总多酚的浓度，计算番石榴叶多酚的提取率。
实施例1
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：
1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为1％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为150W，超声波功率为250W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为5.03％。
实施例2
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为1.5％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为200W，超声波功率为300W，提取时间为10min；
采用采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为5.47％。
实施例3
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为250W，超声波功率为350W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为6.97％。
实施例4
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为100W，超声波功率为350W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为5.83％。
实施例5
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为300W，超声波功率为350W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为6.92％。
实施例6
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为300W，超声波功率为200W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为5.56％。
实施例7
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为300W，超声波功率为500W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为7.03％。
实施例8
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：
1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂吐温-60，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂吐温-60占吐温-60水溶液的质量百分比为1％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为150W，超声波功率为250W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为3.13％。
实施例9
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：
1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂司班-60，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂司班-60占司班-60水溶液的质量百分比为1％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为150W，超声波功率为250W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为3.21％
实施例10
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：
1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为3％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为150W，超声波功率为250W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为4.98％。
对比例1
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)与水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行超声波提取，超声波功率为300W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为2.06％。
对比例2
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)与水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波提取，微波功率为200W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为1.97％。
对比例3
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)将步骤(2)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为200W，超声波功率为300W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为2.13％。
对比例4
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)与水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为50W，超声波功率为300W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为2.32％。
对比例5
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)与水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为350W，超声波功率为300W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为1.67％。
对比例6
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)与水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为200W，超声波功率为150W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为1.86％。
对比例7
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)与水溶液的质量百分比为2％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为200W，超声波功率为550W，提取时间为10min
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为1.53％。
对比例8
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：
1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为0.5％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为150W，超声波功率为250W，提取时间为10min
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为2.77％。
对比例9
一种表面活性剂协同微波-超声波提取番石榴叶总多酚的方法，包括以下步骤：
1)将新鲜番石榴叶放在电热恒温干燥箱中，温度调节至60℃，恒温干燥，当含水率低于2％时，放入手提式粉碎机中，粉碎6分钟后，过40目筛，得到番石榴叶粉碎物；
2)准确称量将番石榴叶粉碎物5g，和蒸馏水按质量1∶30充分混合后得到料液；
3)向步骤(2)的料液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)，混匀后得到混合溶液，所述表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)占SDS水溶液的质量百分比为4％；
4)将步骤(3)的混合溶液进行微波-超声波提取，微波功率为150W，超声波功率为250W，提取时间为10min；
采用Folin-ciocalteu(FC)法测定上述提取得到的番石榴叶总多酚的含量，结果显示：总多酚提取率为3.16％。
上述实施例及对比例仅是为说清楚地说明所做的实例，但本发明的实施方式并不受上述实施例与对比例的限制，其他的任何未违背本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种从番石榴叶中提取总多酚的方法，其特征在于，将番石榴叶置于表面活性剂的水溶液中，在微波和超声的辅助下提取，随后经固液分离，即得到所述的包含总多酚的提取液；
所述的表面活性剂的水溶液中，表面活性剂的质量百分数为1％～3％；
微波的功率为100～300W；超声功率为200～500W；
所述的表面活性剂为十二烷基硫酸钠。
2.如权利要求1所述的从番石榴叶中提取总多酚的方法，其特征在于，微波的功率为200～300W。
3.如权利要求1所述的从番石榴叶中提取总多酚的方法，其特征在于，超声功率为300～500W。
4.如权利要求1所述的从番石榴叶中提取总多酚的方法，其特征在于，提取时间为5～20min。
5.如权利要求1～4任一项所述的从番石榴叶中提取总多酚的方法，其特征在于，番石榴叶预先经干燥、粉碎处理。
6.如权利要求5所述的从番石榴叶中提取总多酚的方法，其特征在于，将番石榴叶干燥至含水量低于或等于2％；
将干燥后的番石榴叶粉碎后过40目筛网，筛下物用作提取原料。
7.如权利要求1所述的从番石榴叶中提取总多酚的方法，其特征在于，所述的番石榴叶与表面活性剂的水溶液的质量比为1：15～40。
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