MX2009002174A - Moleculas de union humanas capaces de neutralizar el virus de la influenza h5n1 y usos de las mismas. - Google Patents

Moleculas de union humanas capaces de neutralizar el virus de la influenza h5n1 y usos de las mismas.

Info

Publication number
MX2009002174A
MX2009002174A MX2009002174A MX2009002174A MX2009002174A MX 2009002174 A MX2009002174 A MX 2009002174A MX 2009002174 A MX2009002174 A MX 2009002174A MX 2009002174 A MX2009002174 A MX 2009002174A MX 2009002174 A MX2009002174 A MX 2009002174A
Authority
MX
Mexico
Prior art keywords
seq
region
heavy chain
binding molecule
light chain
Prior art date
Application number
MX2009002174A
Other languages
English (en)
Inventor
Cornelis Adriaan De Kruif
Mark Throsby
Edward Norbert Van Den Brink
Original Assignee
Crucell Holland Bv
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Crucell Holland Bv filed Critical Crucell Holland Bv
Publication of MX2009002174A publication Critical patent/MX2009002174A/es

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1018—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/00061—Methods of inactivation or attenuation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16061—Methods of inactivation or attenuation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/005—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from viruses
    • G01N2333/08—RNA viruses
    • G01N2333/11—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2469/00—Immunoassays for the detection of microorganisms
    • G01N2469/10—Detection of antigens from microorganism in sample from host

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)

Abstract

La presente invención se relaciona con moléculas de unión tales como anticuerpos monoclonales humanos que se unen a virus de la influenza H5N1 y que tienen actividad neutralizante contra el virus de la influenza H5N1. La descripción proporciona moléculas de ácido nucleido que codifican para los anticuerpos, sus secuencias y composiciones que comprenden a los anticuerpos así como métodos de identificación o producción de anticuerpos. Los anticuerpos se pueden utilizar en el diagnóstico, profilaxis y/o tratamiento de una infección de virus de la influenza H5N1. En una modalidad preferida, los anticuerpos proporcionan protección cruzada de subtipo in vivo de manera que se pueden evitar y/o tratar infecciones con subtipos de influenza basadas en H5, H2, H6, H9 y H1.

Description

MOLECULAS DE UNION HUMANAS CAPACES DE NEUTRALIZAR EL VIRUS DE LA INFLUENZA H5N1 Y USOS DE LAS MISMAS CAMPO DE LA INVENCION La invención se relaciona con el campo de la medicina. En particular, la invención se relaciona con el diagnóstico, profilaxis o tratamiento de una infección por virus de la influenza H5N1. ANTECEDENTES DE LA INVENCION El virus de la influenza consiste de tres tipos: A, B y C. El virus de la influenza A infecta una amplia variedad de aves y mamíferos, incluyendo a los humanos, caballos, mamíferos marinos, cerdos, hurones y pollos. En los animales la mayor parte de los virus de influenza A provocan infecciones localizadas ligeras de las vías respiratorias e intestinales. No obstante, existen cepas de influenza A muy patógenas tales como H5N1 que provocan infecciones sistémicas en aves de corral en las cuales la mortalidad puede llegar al 100%. Los animales infectados con influenza A con frecuencia constituyen un reservorio para los virus de influenza y se ha demostrado que ciertos subtipos cruzan la barrera de las especies hacia los humanos. Los virus de influenza A se pueden clasificar en los subtipos basados en variaciones alélicas en regiones antigénicas de dos genes que codifican para glucoproteínas de Ref.: 199873 superficie, específicamente hemaglutinina (HA) y neuraminidasa (NA) las cuales se requieren para unión viral y liberación celular. Otras proteínas virales principales incluyen la nucleoproteína, la proteína estructural del nucleocápside, proteínas de membrana (Mi y M2) , polimerasas (PA, PB y PB2 ) y proteínas no estructurales (NS1 y NS2) . Actualmente se conocen dieciséis subtipos de variantes antigénicas HA (H1-H16) y nueve NA (N1-N9) en el virus de influenza A. Previamente únicamente se sabía de tres subtipos que circulaban en humanos (H1N1, H1N2 y H3N2) . No obstante, en años recientes, el subtipo patógeno H5N1 de influenza A aviar se ha informado que cruza la barrera entre especies e infecta a humanos, como se documentó en Hong Kong en 1997 y 2003, lo que llevó a la muerte de varios pacientes. En los humanos, el virus de la influenza aviar infecta células de las vías respiratorias así como tracto intestinal, hígado, bazo, ríñones y otros órganos. Los síntomas de infección de influenza aviar incluyen fiebre, dificultades respiratorias que incluyen respiración entre cortada y tos, linfopenia, diarrea y dificultades en la regulación de las concentraciones de azúcar en sangre. En contraste con la influenza estacional, el grupo que se encuentra en mayor riesgo son los adultos sanos los cuales constituyen el grueso de la población. Debido a la elevada patogenicidad de algunos subtipos de influenza A aviar, particularmente H5N1 y su capacidad demostrada de atravesar para infectar a humanos, existe un riesgo económico y de salud pública significativos asociados con estas cepas virales que incluyen el peligro real de epidemia y pandemia. La escala del peligro se ilustró por la pandemia de influenza de 1918 que mató a más de 50 millones de personas. Actualmente no están disponibles vacunas eficaces para infección por H5N1, de manera que el inmunotratamiento pasivo con inmunoglobulina puede ser una estrategia alternativa. El uso de inmunización pasiva durante la pandemia de 1918 se supone que hubiera disminuido a la mitad en la tasa de muerte. En vista de su beneficio terapéutico en humanos, por lo tanto existe la necesidad de moléculas de unión, preferiblemente moléculas de unión humanas capaces de neutralizar H5N1. La presente invención proporciona estas moléculas de unión y muestras que se pueden utilizar en medicina, en particular para diagnóstico, prevención y/o tratamiento de infecciones por H5N1. En lo siguiente se presentan definiciones de los términos como se utilizan en la invención. Como se utiliza en la presente, el término "molécula de unión" se refiere a una inmunoglobulina intacta que incluye anticuerpos monoclonales tales como anticuerpos quiméricos, humanizados o anticuerpos monoclonales humanos o a un dominio que une antigeno y/o variable que comprende un fragmento de una inmunoglobulina que compite con una inmunoglobulina intacta por la unión especifica al asociado de unión de la inmunoglobulina, por ejemplo H5N1. Sin importar la estructura, el fragmento que se une a antigeno se une con el mismo antigeno que es reconocido por la inmunoglobulina intacta, ün fragmento que une antigeno puede comprender un péptido o polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos de por lo menos 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 200 o 250 residuos aminoácidos contiguos de la secuencia de aminoácidos de la molécula de unión. El término "molécula de unión" como se utiliza en la presente incluye todas las clases y subclases de inmunoglobulina conocida en la técnica. Dependiendo de la secuencia de aminoácidos del dominio constante de sus cadenas pesadas, las moléculas de unión se pueden dividir en cinco clases principales de anticuerpos intactos: IgA, IgD, IgE, IgG e IgM y varios de estos se pueden dividir adicionalmente en subclases (isotipos) , por ejemplo IgAl, IgA2, IgGl , IgG2, IgG3 e IgG4. Los fragmentos que unen antigeno incluyen, por ejemplo, Fab, F(ab' ) , F(ab')2, Fv, dAb, Fd, los fragmentos de región determinadora de complementariedad (CDR) , anticuerpos de cadena sencilla (scFv) , anticuerpos bivalentes de cadena sencilla, anticuerpos de fago de cadena sencilla, diacuerpos, triacuerpos, tetracuerpos , (poli ) péptidos que contienen por lo menos un fragmento de una inmunoglobulina que es suficiente para conferir unión de antigeno al (poli) éptido, etc. Los fragmentos anteriores se pueden producir de manera sintética o por separación enzimática o química de inmunoglobulinas intactas o se pueden someter a ingeniería genética por técnicas de ADN recombinante . Los métodos de producción son bien conocidos en la técnica y se describen, por ejemplo, en Antibodies: A Laboratory Manual, Editado por: E . Harlow and D, Lañe (1988), Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York, la cual se incorpora en la presente como referencia. Una molécula de unión o un fragmento que une antígeno de la misma puede tener uno o más sitios de unión. Si existe más de un sitio de unión, los sitios de unión pueden ser idénticos entre sí o pueden ser diferentes . La molécula de unión puede ser una molécula de unión desnuda o no conjugada, pero también puede ser parte de un inmunoconjugado . Una molécula de unión desnuda o no conjugada se considera que se refiere a una molécula de unión que no está conjugada, unida operativamente o asociada física o funcionalmente, o de alguna otra manera con una porción o etiqueta efectora, tal como, por ejemplo, una sustancia tóxica, una sustancia radioactiva, un liposoma, una enzima. Se comprenderá que las moléculas de unión desnudas o no conjugadas no excluyen moléculas de unión que han sido estabilizadas multimerizadas , humanizadas o manipuladas de cualquier otra forma diferente a la unión de una porción efectora o etiqueta. En consecuencia, todas las moléculas de unión desnudas y no conjugadas modificadas postraduccionalmente se incluyen en la presente e incluyen aquellas en las que se hacen modificaciones en el ambiente de célula productora de moléculas de unión natural o por una célula productora de moléculas de unión recombinante y que se introducen por la mano humana después de la preparación de la molécula de unión inicial. Por supuesto, el término molécula de unión desnuda o no conjugada no excluye la capacidad de la molécula de unión para formar asociaciones funcionales con células protectoras y/o moléculas después de su administración a, cuerpo, dado que algunas de dichas interacciones son necesarias con el fin de ejercer un efecto biológico. La carencia de un grupo aceptor asociado o etiqueta por lo tanto se aplica en la definición a una molécula de unión desnuda o no conjugada in vitro, no in vivo. Como se utiliza en la presente, el término "muestra biológica" abarca una diversidad de tipos de muestra, que incluyen sangre y otras muestras liquidas de origen biológico, muestras de tejido sólido tales como un espécimen de biopsia o cultivos de tejido, o células derivadas de las mismas y la descendencia de las mismas. El término también incluye muestras que se han manipulado de cualquier manera después de su obtención, por ejemplo por tratamiento con reactivos, solubilización o enriquecimiento de ciertos componentes, tales como proteínas o polinucleótidos . El término abarca varias clases de muestras químicas obtenidas de cualquier especie y también incluye células en cultivo, sobrenadantes celulares y lisados celulares. El término "regiones determinadoras de complementariedad CDR" , como se utiliza en la presente significan secuencias dentro de las regiones variables de moléculas de unión, tales como inmunoglobulinas que habitualmente contribuyen en mayor grado al sitio de unión a antígeno, el cual es complementario en forma y distribución de carga al epítopo reconocido en el antígeno. Las regiones CDR pueden ser específicas para epítopo señales, epítopos discontinuos o epítopos conformacionales de proteínas o fragmentos proteínicos, ya sea como están presentes en la proteína en su conformación nativa, o, en algunos casos como están presentes sobre las proteínas cuando están desnaturalizadas, por ejemplo por solubilización en SDS. Los epítopos también pueden consistir de modificaciones postraduccionales de proteínas. El término "supresión", como se utiliza en la presente, indica un cambio ya sea en el aminoácido o secuencia nucleotidica en la cual uno o más aminoácidos o residuos nucleotídicos, respectivamente, están ausentes en comparación con la molécula original, con frecuencia como se encuentra en la naturaleza. El término "secuencia de ácido nucleico que regula la expresión", como se utiliza en la presente se refiere a secuencias polinucleotidicas necesarias y/o que afectan la expresión de una secuencia codificante unida operablemente en un organismo hospedador particular. Las secuencias de ácido nucleico que regulan la expresión tales como, por ejemplo, un inicio de transcripción apropiado, terminación, promotor, secuencias mej oradoras ; secuencias represoras o activadoras ; señales de procesamiento eficaz de ARN tales como señales de empalme y poliadenilación; secuencias que estabilizan el ARNm citoplásmico; secuencias que incrementan la eficacia de traducción (por ejemplo sitios de unión de ribosoma) ; secuencias que incrementan la estabilidad de la proteína; y cuando se desee, secuencias que implementen la secreción de proteínas, puede ser cualquier secuencia de ácido nucleico que muestra actividad en el organismo hospedador de elección y que se pueden derivar de genes que codifican para proteínas las cuales son homologas o heterólogas para el organismo hospedador. La identificación y utilización de secuencias reguladoras de expresión es habitual para una persona experta en la técnica.
El término "variante funcional", como se utiliza en la presente se refiere a una molécula de unión que comprende una secuencia nucleotidica y/o de aminoácidos que es alterada por uno o más nucleótidos y/o aminoácidos en comparación con las secuencias nucleotidicas y/o de aminoácidos de la molécula de unión de origen y que aún es capaz de competir por la unión del asociado de unión, por ejemplo, H5N1, con la molécula de unión de origen. En otras palabras, las modificaciones en la secuencias de aminoácidos y/o nucleotidica de la molécula de unión de origen no afecta o altera de manera significativa las características de unión de la molécula de unión codificada por la secuencia nucleotidica o que contenga la secuencia de aminoácidos, es decir, la molécula de unión aún es capaz de reconocer y unir su objetivo. La variante funcional puede ser modificaciones de secuencia conservadoras que incluyen sustituciones, adicionales y supresiones nucleotidicas y de aminoácidos. Estas modificaciones se pueden introducir por técnicas estándar conocidas en el arte, tales como mutagénesis dirigida al sitio y mutagénesis aleatoria mediada por PCR y pueden comprender nucleótidos de aminoácidos naturales así como no naturales . Las sustituciones conservadoras de aminoácidos incluyen aquellas en las cuales el residuo aminoácido es sustituido con un residuo aminoácido que tiene propiedades estructurales o químicas similares. Las familias de residuos aminoácidos que tienen cadenas laterales similares se han definido en la técnica. Estas familias incluyen aminoácidos con cadenas laterales básicas (por ejemplo lisina, arginina, histidina) , cadenas laterales ácidas (por ejemplo ácido aspártico, ácido glutámico) , cadenas laterales polares sin carga (por ejemplo asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteina, triptofano) , cadenas laterales no polares (por ejemplo glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina y metionina) , cadenas laterales ramificadas ß (por ejemplo treonina, valina, isoleucina) y cadenas laterales aromáticas (por ejemplo tirosina, fenilalanina, triptofano) . Será evidente para los expertos en la técnica que también se pueden utilizar otras clasificaciones de familia de residuos aminoácidos a la que se utilizó antes. Además, una variante puede ser sustituciones de aminoácidos no conservadoras, por ejemplo sustitución de un aminoácidos con un residuo aminoácido que tiene propiedades estructurales o químicas diferentes. Las variaciones menores similares también pueden incluir supresiones o inserciones de aminoácidos, o ambas. La guía para determinar cual residuo aminoácido puede ser sustituido, insertado o suprimido sin bloquear actividad inmunológica se puede encontrar utilizando programas de computadora bien conocidos en la técnica.
Una mutación en una secuencia nucleotidica puede ser una alteración única realizada en locus (un punto de mutación) tales como mutaciones de transición o transversión, o de manera alternativa se pueden insertar, suprimir o cambiar en un locus único nucleótidos múltiples. Además, se pueden realizar una o más alteraciones en cualquier número de loci dentro de una secuencia nucleotidica. Las mutaciones se pueden realizar por cualquier método adecuado conocido en la técnica . El término "hospedador" , como se utiliza en la presente, se pretende que haga referencia a un organismo a una célula en la cual se ha introducido un vector tal como un vector de clonación o un vector de expresión. El organismo o la célula puede ser procariótica o eucariótica. Debe entenderse que este término hace referencia no solo al organismo o célula objeto particular sino a la descendencia de este organismo o célula también. Debido a que se pueden presentar ciertas modificaciones en generaciones sucesivas debido a mutaciones o influencias ambientales, la descendencia, de hecho, no será idéntica al organismo o células de origen, pero aún estará incluida dentro del alcance del término "hospedador" como se utiliza en la presente . El término "humano", cuando se aplica a moléculas de unión como se define en la presente, se refiere a moléculas que se derivan directamente de un humano o se basan en una secuencia humana. Cuando una molécula de unión se deriva o se basa de una secuencia humana y se modifica posteriormente, aún se considera humana como se utiliza en la especificación. En otras palabras, el término humano, cuando se aplica a moléculas de unión, se pretende que incluya moléculas de unión que tienen regiones variables y constantes derivadas de secuencias de inmunoglobulina de linea germinal humana o basadas en regiones variables o constantes que se encuentran en un humano o linfocitos humanos y modificados de alguna forma. De esta manera, las moléculas de unión humanas pueden incluir residuos aminoácidos no codificados por secuencias de inmunoglobulina de linea germinal humana, que comprenden sustituciones y/o supresiones (por ejemplo mutación introducida, por ejemplo, por mutagénesis aleatoria o especifica de sitio in vitro o por mutación somático in vivo) . Como se utiliza en la presente, el término "en base en" se refiere a la situación en donde una secuencia de ácido nucleico puede ser copiada exactamente de una plantilla, o con mutaciones menores, tales como métodos de PCR, susceptibles a error o se puede elaborar sintéticamente haciendo coincidir la plantilla con exactitud o con modificaciones menores. Las moléculas semisintéticas basadas en secuencias humanas también se considera que son humanas, como se utiliza en la presente.
El término "inserción" también conocido como el término "adición" indica un cambio en una secuencia de aminoácidos o nucleotidica que resulta en la adición de uno o más residuos aminoácidos o nucleotidicos , respectivamente, en comparación con la secuencia de origen. El término "aislado" cuando se aplica a moléculas de unión como se define en la presente, se refiere a moléculas de unión que son sustancialmente libres de otras proteínas o polipéptidos, particularmente libres de otras moléculas de unión que tienen especificidades antigénicas diferentes y que también están sustancialmente libres de otro material y/o sustancias químicas celulares. Por ejemplo, cuando las moléculas de unión se producen de manera recombinante, preferiblemente están sustancialmente libres de medio de cultivo, y cuando las moléculas de unión se producen por síntesis química, de manera preferible están sustancialmente libres de precursores químicos u otras sustancias químicas, es decir, están separadas de los precursores químicos u otras sustancias químicas las cuales están involucradas en la síntesis de la proteína. El término "aislado" cuando se aplica a moléculas de ácido nucleico que codifican para moléculas de unión como se define en la presente, se pretende que se refieran a moléculas de ácido nucleico en las cuales las secuencias nucleotídicas que codifican para las moléculas de unión están libres de otras secuencias núcleotídicas , particularmente secuencias nucleotidicas que codifican para moléculas de unión que se unen a asociados de unión diferentes de H5N1. Además, el término "aislado" se refiere a moléculas de ácido nucleico que están sustancialmente separadas de otros componentes celulares que acompañan de manera natural a la molécula de ácido nucleico nativa en su hospedador natural, por ejemplo ribosomas, polimerasas o secuencias genómicas con las cuales se le asocia de manera natural. Además, las moléculas de ácido nucleico "aisladas" tales como las moléculas de ADNc, pueden estar sustancialmente libres de otro material celular o medio de cultivo cuando se producen por técnicas recombinantes o sustancialmente libres de precursores químicos u otras sustancias químicas cuando se sintetizan químicamente. El término ."anticuerpo monoclonal" como se utiliza en la presente, se refiere a una preparación de moléculas de anticuerpo de composición molecular única. Un anticuerpo monoclonal muestra una especificidad de unión única y afinidad por un epítopo particular. En consecuencia, el término "anticuerpo monoclonal humano" se refiere a un anticuerpo que muestra una especificidad de unión única la cual tiene regiones variables y constantes derivadas o basadas de secuencias de inmunoglobulina de línea germinal humana o derivadas de secuencias completamente sintéticas. El método de preparación de anticuerpos monoclonales no es relevante . El término "como se encuentran de manera natural", como se utiliza en la presente aplicada a un objeto, se refiere al hecho de que un objeto puede ser encontrado en la naturaleza. Por ejemplo, una secuencia polipeptidica o polinucleotidica que está presente en un organismo que puede ser aislada de una fuente en la naturaleza y la cual no ha sido modificada intencionalmente por el hombre en el laboratorio, es la que se considera que se encuentra de manera natural. El término "molécula de ácido nucleico", como se utiliza en la presente invención, se refiere a una forma polimérica de nucleotidos e incluye las cadenas tanto directa como antisentido de ARN, ADNc, ADN genómico y formas sintéticas y polímeros mixtos de los anteriores. Un nucleótido se refiere a un ribonucleótido, desoxinucleótido o una forma modificada de cualquier tipo de nucleótido. El término también incluye formas de cadena sencilla y doble de ADN. Además, un polinucleótido puede incluir nucleotidos como se encuentran de manera natural o modificados, unidos por enlaces nucleotídicos como se encuentran de manera natural y/o que no se encuentran de manera natural. Las moléculas de ácido nucleico se pueden modificar química o bioquímicamente o pueden contener bases nucleotídicas no naturales o derivatizadas , como se apreciará fácilmente por una persona experta en la técnica. Dichas modificaciones incluyen, por ejemplo, marcas, metilación, sustitución de uno o más nucleótidos como se encuentran de manera natural con modificaciones internucleotidicas análogas tales como enlaces sin carga (por ejemplo fosfonatos de metilo, fosfotriésteres, fosforamidatos, carbamatos, etc.), enlaces cargados (por ejemplo fosforotioatos, fosforoditioatos, etc.), porciones que penden (por ejemplo polipéptidos) , intercaladores (por ejemplo acridina, psoraleno, etc.), quelantes, alquiladores y enlaces modificados (por ejemplo ácidos nucleicos o¡ anoméricos, etc. ) . El término anterior se pretende que incluya cualquier conformación topologica que incluye cadena sencilla, cadena doble, parcialmente doble, triple, en forma de horquilla, circular y de candado. También se incluyen moléculas sintéticas que imitan polinucleótidos en su capacidad para unirse a una secuencia designada y por medio de uniones de hidrógeno y otras interacciones químicas. Dichas moléculas se conocen en la técnica e incluyen, por ejemplo, aquellas en la cuales los enlaces fosfato son sustituidos por enlaces peptídicos en la estructura principal de la molécula. Una referencia a una secuencia de ácido nucleico abarca a su complemento, a menos que se especifique en otro sentido. De esta manera, una referencia a una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia particular debe entenderse que abarca su cadena complementaria, la cual es la secuencia complementaria. La cadena complementaria también es útil, por ejemplo, para tratamiento antisentido, sondas de hibridación y cebadores PCR. El término "unido operablemente" se refiere a dos o más elementos de secuencia de ácido nucleico que habitualmente están unidos físicamente y que se encuentran en una relación funcional entre si. Por ejemplo, un promotor está unido operablemente a una secuencia codificante, si el promotor es capaz de iniciar o regular la transcripción o expresión de una secuencia codificante en cuyo caso la secuencia codificante debe entender que están "bajo el control del" promotor. Mediante el término "excipiente farmacéuticamente aceptable" se quiere evitar cualquier sustancia inerte que se combine con una molécula activa tal como un medicamento, agente o molécula de unión para preparar una forma de dosificación concordante o conveniente. El "excipiente farmacéuticamente aceptable" es un excipiente que es no tóxico para quien lo recibe a las dosificaciones y concentraciones utilizadas y es compatible con otros ingredientes de la formulación que comprenden el medicamento, agente o moléculas de unión. Los excipientes farmacéuticamente aceptables se aplican ampliamente en la técnica.
El término "unión especifica", como se utiliza en la presente, con referencia a la interacción de una molécula de unión, por ejemplo un anticuerpo y su asociado de unión, por ejemplo un antigeno, significa que la interacción depende de la presencia de una estructura particular, por ejemplo un determinante antigénico o epitopo, sobre el asociado de unión. En otras palabras, el anticuerpo de manera preferible se une o reconoce el asociado de unión incluso cuando el asociado de unión está presente en una mezcla de otras moléculas u organismos. La unión puede ser mediada por interacciones covalentes o no covalentes o una combinación de las dos. En otras palabras, el término "unión especifica" significa unión inmunoespecifica a un antigeno o un fragmento del mismo y unión no inmunoespecifica a otros antigenos. Una molécula de unión que se une inmunoespecificamente a un antigeno se puede unir a otros péptidos o polipéptidos con una afinidad menor determinada, por ejemplo, por radioinmunoanálisis (RIA) , análisis inmunosorbente unido a enzima (ELISA) , BIACORE u otros análisis conocidos en la técnica. Las moléculas de unión o fragmentos de las mismas que se unen de manera inmunoespecifica a un antigeno pueden generar una reacción cruzada con antigenos relacionados. Preferiblemente, las moléculas de unión o fragmentos de las mismas que se unen inmunoespecificamente a un antigeno no dan reacción cruzada con otros antigenos.
Como se utiliza en la presente, una "sustitución" indica el reemplazo de uno o más aminoácidos o nucleótidos por aminoácidos o nucleótidos diferentes respectivamente. El término "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad de moléculas de unión como se define en la presente que es eficaz para evitar, disminuir y/o tratar una condición que resulta de infección con H5N1. El término "tratamiento" se refiere a un tratamiento terapéutico asi como medidas profilácticas o de prevención para curar o detener o por lo menos retardar el progreso de una enfermedad. Aquellos en necesidad de tratamiento incluyen a aquellos quienes padecen una condición que resulta de la infección con H5N1 asi como aquellos en los cuales debe evitar que la infección con H5N1. Los sujetos parcial o totalmente recuperado de infección con H5N1 también pueden estar en necesidad del tratamiento. La prevención abarca inhibición o reducción de la dispersión o diseminación de H5N1 o bien inhibición o reducción del inicio, desarrollo o progreso de uno o más de los síntomas relacionados con infección con H5N1. El término "vector" indica una molécula de ácido nucleico en la cual se puede insertar una segunda molécula de ácido nucleico para introducción en un hospedador en donde se replicará, y en algunos casos se expresará. En otras palabras, un vector es capaz de transportar una molécula de ácido nucleico la cual se ha unido. La clonación asi como los vectores de expresión se contemplan por el término "vector", como se utiliza en la presente. Los vectores incluyen, pero no se limitan a plásmidos, cósmidos, cromosomas artificiales bacterianos (BAC) y cromosomas artificiales de levadura (YAC) y vectores derivados de bacteriófagos o virus vegetales o animales (que incluyen a humanos) . Los vectores comprenden un origen de replicación reconocido por el hospedador propuesto y, en caso de vectores de expresión, promotores y otras regiones reguladoras reconocidas por el hospedador. Un vector que contiene una segunda molécula de ácido nucleico se introduce en una célula por transformación, transfección o haciendo uso de mecanismos de entrada viral. Ciertos vectores son capaces de replicación autónoma en un hospedador en el cual se introduce (por ejemplo vectores que tienen un origen de replicación bacteriano pueden replicarse en una bacteria) . Otros vectores se pueden integrar en el genoma de un hospedador por introducción en el hospedador y de esta manera se replican junto con el genoma del hospedador. SUMARIO DE LA INVENCION La invención proporciona moléculas de unión humanas capaces de unirse específicamente al virus de influenza H5N1 y mostrar actividad neutralizante contra H5N1. La invención también proporciona moléculas de unión que se unen a un epítopo en la proteína de hemaglutinina que es compartida entre subtipos de influenza y por lo tanto se relaciona con moléculas de unión que dan reacción cruzada entre los subtipos de influenza basados en H5, Hl, H2 , H6 y H9 tales como H5N1, HlNl y otros cepas de influenza que contengan la proteina HA con estos epitopos particulares. La invención también se relaciona con moléculas de ácido nucleico que codifican para por lo menos la región de unión de las moléculas de unión humanas. La invención proporciona además el uso de moléculas de unión humana de la invención en la profilaxis y/o tratamiento en un sujeto que tiene o que se encuentra en riesgo de desarrollar una infección por H5N1. Además de esto, la invención se relaciona con el uso de moléculas de unión humana de la invención en el diagnóstico/detección de H5N1. BREVE DESCRIPCION DE LAS FIGURAS En la figura 1 se muestran análisis de inmunotransferencia de diferentes hemaglutininas (HA) utilizando anticuerpos CR6307 (izquierda) , CR6323 (en medio) y CR5111 (derecha) . Las HA recombinantes se someten a análisis de SDS-PAGE reductor y análisis de inmunotransferencia. En el carril 1 se muestran las HA de H5N1TV; en el carril 2 se muestra HA recombinante, subtipo H5 (A/Vietnam/1203/2004 (H5N1) ) ; en el carril 3 se muestra HA recombinante, subtipo H3 (A/Wyoming/3/2003 (H3N2) ) ; y en el carril 4 se muestra HA recombinante, subtipo Hl (A/New Caledonia/20/99 (HlNl) ) . También se indica la posición en donde se puede encontrar HAO, HA1 y HA2. La figura 2 muestra la calificación clínica promedio, por grupo de ratones en un estudio (ejemplo 12) en donde, un día antes de la infección con virus de influenza H5N1, los ratones fueron tratados profilácticamente con tres anticuerpos monoclonales para H5N1 humano, CR6261, CR6323 y CR6325, en dosis diferentes. La figura 3 muestra el cambio en el peso corporal durante el tratamiento profiláctico de ratones con anticuerpos anti-H5Nl durante 21 días después de la infección (ejemplo 12) . La figura 4 muestra el número de ratones sobrevivientes en los diferentes grupos del estudio de la figura 2 y 3 (ejemplo 12) . La figura 5 muestra la tasa de mortandad en relación con la dosis administrada de anticuerpos anti-H5Nl en el estudio de las figuras 2-4 (ejemplo 12) . La figura 6 muestra la calificación clínica promedio por grupo de ratones en un estudio (ejemplo 13) en donde los ratones fueron infectados con una dosis mortal de virus de influenza H5N1 y se les trató en diferentes puntos en el tiempo después de la infección (4 h, 1, 2 y 3 días) con anticuerpo monoclonal anti-H5Nl, CR6261 o con un anticuerpo no relacionado, CR2006 (administrado el día 1 posterior a la infección) . La figura 7 muestra el número de animales sobrevivientes en cada grupo del estudio descritos en la figura 6. Todos los animales del grupo 1-4, excepto un animal en el grupo 1 sobrevivieron la totalidad del periodo de estudio hasta 21 días después de la infección. Todos los animales del grupo 5 habían muerto en el dia 9. La figura 8 muestra el peso corporal promedio de ratones en cada grupo durante el estudio como se describe para la figura 6. La medición del peso corporal de los ratones en el grupo 5 se detuvo en el día 9 dado que todos los ratones en ese grupo habían muerto en ese momento. Todos los ratones remanentes en los grupos 1-4 alcanzaron niveles normales de peso corporal al día 21 posterior a la infección, aunque dependió del tiempo de tratamiento el que tan rápido se recuperaba cada grupo. La figura 9 muestra el porcentaje de animales sobrevivientes en cada grupo de un estudio en donde se infectó a ratones con una dosis mortal de virus de influenza H1N1 y se les trató en puntos de tiempo diferentes (1 día antes, 1, 2 y 3 días después de la infección) con anticuerpo monoclonal anti-H5Nl, CR6261 o con un anticuerpo no relacionado, CR57 (administrado el día 1 posterior a la infección) . La figura 10 muestra el peso corporal promedio de ratones en cada grupo durante el estudio como se describe para la figura 9. La medición del peso corporal de los ratones en el grupo 5 se detuvo el dia 9 dado que todos los ratones en ese grupo habían muerto para ese momento. Todos 5 los ratones remanentes en los grupos 1-4 alcanzaron niveles normales de peso corporal al día 21 posterior a la infección, aunque dependía del tiempo de tratamiento que tan rápido se recuperó cada grupo. DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION ° En un primer aspecto, la presente invención abarca moléculas de unión capaces de unirse específicamente a virus A de influenza, particularmente virus A de influenza subtipo H5N1. Preferiblemente, las moléculas de unión son moléculas de unión humana. Preferiblemente, las moléculas de unión de 5 la invención muestran actividad neutralizante contra virus A de influenza subtipo H5N1. En un aspecto adicional, las moléculas de unión de la invención son capaces de unirse específicamente y/o tener actividad neutralizante contra diferentes cepas de virus de influenza H5N1. Estas cepas ° pueden ser un miembro de las cepas de virus de influenza H5N1 de línea 1, línea 2 o línea 3. El análisis filogenético de los genes HA de los ataques del 2004 y 2005 de H5N1 muestran dos líneas diferentes de genes HA, denominados líneas 1 y 2. Los virus en cada una de estas líneas se distribuyen en 5 regiones geográficas de Asia que no se superponen. El virus H5N1 de la península de Indochina está agrupado firmemente dentro de la linea 1 mientras que los aislados de H5N1 de varios países circundantes son distintos de los aislados de la línea 1 y pertenecen a la línea 2, más divergente. Los virus H5N1 de la línea 1 se aislaron de humanos y aves en Vietnam, Tailandia y Cambodia, pero solo de aves en Laos y Malasia. Los virus de la línea 2 se encontraron en virus aislados exclusivamente de aves en China, Indonesia, Japón y Corea del Sur. Los virus aislados de aves y humanos en Hong Kong en 2003 y 1997 constituyen las líneas 1' (también clasificada en la línea 1) y 3, respectivamente (véase WHO Global Influenza Program Surveillance Network, 2005) . Las hemaglutininas de las líneas difieren en sus secuencias de aminoácidos. Los ejemplos de cepas de la línea 1 incluyen, pero no se limitan a, A/Hong Kong/213/03, A (Vietnam/1194/04 , A(Vietnam/1203/04 y A/Thailand/1 (KAN-1) /2004. Los ejemplos de cepas de la línea 2 incluyen, pero no se limitan a A/Indonesia/5/05, A/bar headed goose/Qinghai/lA/05, A/turkey/Turkey/1/05 y A/Anhui/1/05. Los ejemplos de las cepas de la línea 3 incluyen, pero no se limitan a A/Hong Kong/156/97 y A/goose/Guangdong/1/96. Otras cepas se pueden encontrar, por ejemplo, en WHO Global Influenza Program Surveillance Network, 2005 y en http : //www. who . int/csr/disease/avian_influenza/guidelines/-recommendationvaccine.pdf. Preferiblemente, las moléculas de unión de la invención son capaces de unirse específicamente y tener actividad neutralizante contra las cepas de línea 1, línea 2 y línea 3. Las moléculas de unión de la invención pueden ser capaces de unirse específicamente a virus de influenza H5N1 que son viables, que están vivas y/o que son infecciosas o que están en forma inactivada/atenuada . Los métodos para inactívar/atenuar virus de influenza H5N1 son bien conocidos en la técnica e incluyen, pero no se limitan a tratamiento con formalina, ß-propiolactona (BPL) , mertiolato y/o luz ultravioleta. Las moléculas de unión de la invención también pueden ser capaces de unirse específicamente a uno o más fragmentos de virus de influenza H5N1 tales como, por ejemplo, una preparación de una o más proteínas y/o (poli) péptidos derivados de subtipo H5N1, o una o más proteínas y/o polipéptidos producidos de manera recombinante de H5N1. Para métodos de tratamiento y/o prevención de infecciones por H5N1 las moléculas de unión preferiblemente son capaces de unirse específicamente a proteínas accesibles en la superficie de H5N1 tales como las glucoproteínas de superficie, hemaglutinina (HA) y neuraminidasa (NA) , las cuales se requieren para unión viral y liberación celular, o proteínas de membrana (Mi y M2) . En una modalidad específica, las moléculas de unión de la invención son capaces de unirse específicamente a la molécula HA de las cepas H5N1. Estas pueden ser capaces de unirse de manera específica a la subunidad HAl y/o HA2 de la molécula de HA. Pueden ser capaces de unirse de manera específica a los epítopos lineales o estructurales y/o conformacionales en la subunidad HAl y/o HA2 de la molécula HA. La molécula HA puede ser purificada de virus o se puede producir de manera recombinante y opcionalmente se puede aislar antes de su uso. De manera alternativa, se puede expresar HA sobre la superficie de las células. Para propósitos de diagnóstico las moléculas de unión también pueden ser capaces de unirse específicamente a proteínas que no están presentes en la superficie de H5N1 que incluyen la nucleoproteína, la proteína estructural de nucleocápside, polimerasas (PA, PB y PB2) y proteínas no estructurales (NS1 y NS2) . La secuencia nucleotídica y/o de aminoácido de las proteínas de las diversas cepas H5N1 se puede encontrar en la base de datos de GenBank, la base de datos de NCBI Influenza Virus Sequence Datábase, y la base de datos Influenza Sequence Datábase (ISD) en ' la base de datos EMBL-Database y/u otras bases de datos. Esta dentro del ámbito de las personas expertas en la técnica encontrar dichas secuencias en las bases de datos respectivas. En otra modalidad, las moléculas de unión de la invención son capaces de unirse específicamente a un fragmento de las proteínas y/o polipéptidos mencionados en lo anterior, en donde el fragmento comprende por lo menos un determinante antigénico reconocido por las moléculas de unión de la invención. Como se utiliza en la presente, un "determinante antigénico" es una porción que es capaz de unirse a una molécula de unión de la invención con afinidad suficientemente alta para formar un complejo detectable de antigeno-molécula de unión. Las moléculas de unión de la invención pueden o no ser capaces de unirse de manera especifica a la parte extracelular de HA (también denominada en la presente HA soluble (HAs) ) . Las moléculas de unión de la invención pueden ser moléculas de inmunoglobulina intactas, tales como anticuerpos policlonales o monoclonales o las moléculas de unión pueden ser fragmentos que unan antigeno que incluyen, pero que no se limitan a Fab, F(ab'), F(ab')2, Fv, dAb, Fd, fragmentos de región determinadora de complementariedad (CDR) , anticuerpos de cadena sencilla (scFv) , anticuerpos bivalentes de cadena sencilla, anticuerpos de fago de cadena sencilla, diacuerpos, triacuerpos, tetracuerpos y (poli) péptidos que contienen por io menos un fragmento de una inmunoglobulina que es suficiente para conferir unión especifica a antigeno a las cepas de virus de influenza H5N1 o un fragmento de las mismas. En una modalidad preferida, las moléculas de unión de la invención son anticuerpos monoclonales humanos. Las moléculas de unión de la invención se pueden utiliza en forma no aislada o aislada. Además, las moléculas de unión de la invención se pueden utilizar solas o en una mezcla que comprende por lo menos una molécula de unión (o una variante o fragmento de la misma) de la invención. En otras palabras, las moléculas de unión se pueden utilizar en combinación, por ejemplo como una composición farmacéutica que comprende dos o más moléculas de unión de la invención, variantes o fragmentos de las mismas. Por ejemplo, las moléculas de unión que tienen actividades diferentes pero complementarias se pueden combinar en un tratamiento único para obtener el efecto profiláctico, terapéutico o de diagnóstico deseado, pero de manera alternativa también se pueden combinar moléculas de unión que tengan actividades idénticas en un tratamiento único para obtener el efecto profiláctico, terapéutico o de diagnóstico deseado. Opcionalmente, la mezcla comprende además por lo menos otro agente terapéutico. Preferiblemente, el agente terapéutico tal como, por ejemplo, inhibidores M2 (por ejemplo amantidina, rimantadina) y/o inhibidores de neuraminidasa (por ejemplo zanamivir, oseltamivir) son útiles en la profilaxis y/o tratamiento de una infección por virus de influenza H5N1. Típicamente las moléculas de unión de acuerdo con la invención se pueden unir a sus asociados de unión, es decir, a virus de influenza H5N1 o fragmentos del mismo con una constante de afinidad (valor Kd) que es menor de 0.2 x 10~4, 1.0 x 10"5 M, 1.0 x 10~6 M, 1.0 x 10"7 M, de manera preferible menor de 1.0 x 10-8 M, de manera más preferible menor de 1.0 x 10-9 M, más preferiblemente inferior a 1.0 x 10-10 M, incluso de manera más preferible menor de 1.0 x 10"11 M, y en particular inferior a 1.0 x 10"12 M. Las constantes de afinidad pueden variar para isotipos de anticuerpo. Por ejemplo, la afinidad de unión para un isotipo IgM se refiere a una afinidad de unión de por lo menos aproximadamente 1.0 x 10-7 M. Las constantes de afinidad se pueden medir, por ejemplo, utilizando resonancia de plasmón de superficie, por ejemplo utilizando el sistema BIACORE (Pharmacia Biosensor AB, üppsala, Suecia) . Las moléculas de unión de acuerdo con la invención se pueden unir a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo en forma soluble tal como por ejemplo en una muestra o en suspensión o se puede medir a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo unido o adosado a un portador o sustrato, por ejemplo placas de microtitulación, membranas y esferas, etc. Los portadores o sustratos se pueden fabricar de vidrio, plástico (por ejemplo poliestireno) , polisacáridos, nylon, nitrocelulosa o Teflón, etc. La superficie de dichos soportes puede ser sólida o porosa y de cualquier forma adecuada. Además, las moléculas de unión se pueden unir a virus de influenza H5N1 en forma purificada/aislada o no purificada/no aislada . Las moléculas de unión de la invención muestran actividad neutralizante. Se puede medir la actividad neutralizante, por ejemplo como se describe en la presente. Los análisis alternativos que miden la actividad neutralizante se describen, por ejemplo, en WHO Manual on Animal Influenza Diagnosis and Surveillance, Ginebra: World Health Organisation, 2005, versión 2002.5. La presente invención se relaciona con una molécula de unión humana aislada que es capaz de reconocer y unirse a un epitopo en la subunidad HA2 de la proteina de hemaglutinina (HA) de influenza, caracterizada porque la molécula de unión tiene actividad neutralizante contra un virus de influenza que comprende HA del subtipo H5. Los ejemplos de cepas de influenza que contienen dicho HA del subtipo H5 y que son cepas importantes en vista de su peligro pandémico son H5N1, H5N2 , H5M8 y H5N9. Se prefieren particularmente moléculas de unión que por lo menos neutralizan a la cepa de influenza H5N1. De manera preferible, la molécula de unión de acuerdo con la invención no depende de un epitopo en la subunidad HAl de la proteina HA para unión a la proteina HA. El anticuerpo murino conocido que se describe en la técnica (C179) también se une al mismo epitopo en el dominio HA2 y depende de la unión a un epitopo en el dominio HAl de la proteina HA. Esto no es adecuado debido a que agrega la posibilidad de que escapen mutantes que ya no son reconocidos por el anticuerpo. Además, muchos de los anticuerpos de la presente invención (tales como CR6307 y CR6323) no dependen de epitopos conformaciones y reconocen al epitopo HA2 incluso en una forma reducida (cuando se utiliza en transferencia Western) . Esta es una ventaja con respecto a los anticuerpos de la técnica debido a que cuando se induce un cambio conformacional en la proteina HA debido a cualquier mutación en otra parte de la proteina, dicho cambio conformacional probablemente no perjudique la unión de los anticuerpos de la presente invención al epitopo HA2, mientras que los anticuerpos que dependen de la conformación muy probablemente sean incapaces de unirse cuando se producen dichas mutaciones . En otra modalidad preferida, la molécula de unión de acuerdo con la invención también tiene actividad neutralizante contra un virus de influenza que comprende HA del subtipo Hl, y preferiblemente en donde la molécula de unión también tiene actividad neutralizante contra un virus de influenza que comprende HA del subtipo H2, H6 y/o H9. Se ha demostrado en la presente que las moléculas de unión de la presente invención interactúan con un epitopo presente en los epitopos HA2 presentes en los subtipos H5, Hl, H2, H6 y H9 y se ha demostrado que las moléculas de unión de la presente invención neutralizan de manera cruzada entre subtipos de influenza debido a que comparten este epitopo. Se concluye que las moléculas de unión de la presente invención que dependen de la unión a esa parte particular en el dominio HA2 (y no en otro epitopo - susceptible a mutación- en HAl) puede generar neutralización cruzada entre subtipos de virus de influenza en la medida en que no parece depender de la unión a dominios con HAl, lo cual puede ser alterado de manera significativa debido a las derivas antigénicas. Una persona experta en la técnica, en base en lo que se ha descrito en la presente, ahora puede determinar si un anticuerpo en realidad produce una reacción cruzada con proteínas HA de subtipos diferentes y también determinar si es capaz de neutralizar virus de influenza de diferentes subtipos in vivo. En otro aspecto preferido de la invención, la molécula de unión de la presente invención se une a un epitopo en la subunidad HA2 que se selecciona del grupo que consiste de la secuencia de aminoácidos: GVTNKVNSIIDK (SEC ID NO: 368), GVTNKVNSIINK (SEC ID NO: 369), GVTNKENSIIDK (SEC ID NO: 370), GVTNKVNRIIDK (SEC ID NO: 371), GITNKVNSVIEK (SEC ID NO: 372), GITNKENSVIEK (SEC ID NO: 373), GITNKVNSIIDK (SEC ID NO: 374) y KITSKVNNIVDK (SEC ID NO: 375) . Como se puede concluir de los datos que se muestran en la tabla 13, ciertas moléculas de unión de la presente invención, CR6261, CE6325 y CR6329 interactúan con el epitopo GVTNKVNSIIDK (SEC ID NO: 368) presente en H5N1, y no están obstaculizados por una mutación en el epitopo TGLRN en HAl que influye en la unión de C179. Además, algunas moléculas de unión, tales como CR6307 y CR6323 no están impedidas por un mutante que escape, como se describe en Okuno et al. (1993) con una mutación valina -> ácido glutámico en la posición 6 (ejemplificado por GVTNKEMSIIDK (SEC ID NO: 370)). Este epitopo es parte de una hélice a extendida en la región HA2. Los residuos en este epitopo putativo que se predicen son los más solventes expuestos están subrayados en negrillas: GVTNKENSIIDK (SEC ID NO: 370) . Estos aminoácidos pueden ser más accesibles a una molécula de unión y por lo tanto pueden formar la región más importante del epitopo. En concordancia con este concepto, los aminoácidos resaltados se conservan de manera absoluta en identidad y posición en todas las secuencias presentadas. Este conocimiento se puede utilizar para predecir epitopos de unión en subtipos de influenza que no presenten la misma secuencia que la indicada antes (es decir, las cepas H3, H7 y B) . Se prefiere una molécula de unión de acuerdo con la presente invención que se selecciona del grupo que consiste de : a) una molécula de unión que comprenda una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, b) una molécula de unión que comprenda una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 16, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 17 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 18, c) una molécula de unión que comprenda una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 22 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 23, d) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 27, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 28 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 29, e) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 39, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 40 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 41, f) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 45, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 46 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 47, g) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 49 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 50, h) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 52, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 53 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 54, i) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 262, una región CDR2 ' de cadena pesada de la SEC ID NO: 263 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 264, j ) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 268, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 269 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 270, k) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 274, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 275 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 276, 1) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 280, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 281 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 282, m) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 286, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 287 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 288, n) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 292, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 293 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 294, o) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 304, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 305 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 306, y p) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 310, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 311 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 312. En una modalidad preferida, la molécula de unión de acuerdo con la invención es para uso como un medicamento y preferiblemente para el diagnóstico, tratamiento terapéutico y/o tratamiento profiláctico de infección por influenza. En un aspecto de dicho uso, la infección por influenza es provocada por un virus de influenza que se asocia con un ataque pandémico o que tiene potencial de asociarse con un ataque pandémico (véase el documento O 2007/045674 y las tablas en el mismo) . Preferiblemente, la cepa de virus de influenza que se asocia con ataque pandémico y en donde la enfermedad causada por estas cepas puede ser tratada por las moléculas de unión de la presente invención se selecciona del grupo que consiste de virus basados en H1N1, H5N1, H5N2, H5N8, H5N9, H2 y H9N2. La presente invención también se relaciona con una composición farmacéutica que comprende una molécula de unión de acuerdo con la invención y un excipiente farmacéuticamente aceptable . En otra modalidad adicional, la invención se relaciona con el uso de una molécula de unión de acuerdo con la invención en la preparación de un medicamento para el diagnóstico, profilaxis y/o tratamiento de una infección por virus de influenza. Dichas infecciones se pueden presentar en poblaciones pequeñas pero también se pueden diseminar por todo el mundo en epidemias estacionales o, en un caso peor, en pandemias globales en donde se encuentran en riesgo millones de individuos. La invención proporciona moléculas de unión que pueden neutralizar la infección de cepas de influenza que causan dichas epidemias estacionales asi como pandemias potenciales. De manera importante, la protección y tratamiento se pueden diseñar ahora con las moléculas de unión de la presente invención en relación a cepas de influenza múltiples como se ha descrito que, debido a la unión de un epitopo que es compartido entre proteínas HA de cepas de influenza diferentes, la neutralización cruzada entre dichas cepas ahora es posible mediante la utilización de moléculas de unión de la presente invención. Esto es altamente ventajoso dado que las moléculas de unión pueden proteger a los mamíferos cuando se administran antes o después de la infección (como se describe en los ejemplos) y por lo tanto también cuando no es claro (en etapas tempranas de presentación) si la infección es causada por una cepa basada en Hl, H2, H5, H6 o H9. Las personas que trabajan en el ámbito de sanidad y salud, las personas que pertenecen a la fuerzas militares asi como la población general pueden ser tratadas de manera profiláctica o se pueden tratar cuando se hayan infectado, con las moléculas de unión de la presente invención. De manera potencial, las moléculas de unión de la presente invención se pueden preparar y almacenar en concentrados muy grandes debido a que proporcionarán protección contra cepas pandémicas diferentes y esto será benéfico par prepararse contra posibles pandemias de influenza en el futuro. En una modalidad preferida, las moléculas de unión humana de acuerdo con la invención se caracterizan porque las moléculas de unión humana se seleccionan del grupo que consiste de: a) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 4, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 5 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 6, b) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 7, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 8 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 9, c) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 10, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 11 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 12, d) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 13, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 14 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 15, e) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 16, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 17, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 18, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 19, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 20 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 21, f) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 22, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 23, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 24, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 25 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 26, g) una molécula de unión humana que comprende una región CDR1 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 27, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 28, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 29, una región CDR1 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 30, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 31 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 32, h) una molécula de unión humana que comprende una región CDR1 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3, una región CDR1 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 33, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 34 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 35, i) una molécula de unión humana que comprende una región CDR1 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 36, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 37 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 38, j) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 39, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 40, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 41, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 42, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 43 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 44, k) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 45, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 46, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 47, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 7, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 8 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 48, 1) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 49, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 50, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 33, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 34 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 51, m) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 52, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 53, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 54, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 55, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 56 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 57; n) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 262, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 263, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 264, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 265, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 266 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 267; o) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 268, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 269, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 270, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 271, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 272 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 273; p) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 274, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 275, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 276, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 277, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 278 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 279, q) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 280, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 281, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 282, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 283, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 284 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 285, r) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 286, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 287, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 288, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 289, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 290 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 291, s) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 292, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 293, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 294, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 295, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 296 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 297, t) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 304, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 305, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 306, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 307, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 308 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 309, u) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 310, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 311, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 312, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 313, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 314 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 315, v) una molécula de unión humana que comprende una región CDR1 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 238, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 239, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 240, una región CDR1 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 241, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 242 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 243, w) una molécula de unión humana que comprende una región CDR1 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 244, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 245, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 246, una región CDR1 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 247, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 248 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 249, x) una molécula de unión humana que comprende una región CDR1 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 250, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 251, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 252, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 253, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 254 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 255, y) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 256, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 257, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 258, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 259, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 260 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 261 y z) una molécula de unión humana que comprende una región CDRl de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 298, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 299, una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 300, una región CDRl de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 301, una región CDR2 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 302 y una región CDR3 de cadena ligera que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 303. En una modalidad especifica, las moléculas de unión de la invención comprenden una región CDR1 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 2 y una región CDR3 de cadena pesada que tiene la secuencia de aminoácidos de la SEC ID NO: 3. Las regiones CDR de las moléculas de unión de la invención se muestran en la tabla 7. Las regiones CDR son de acuerdo con Kabat et al. (1991) como se describen en Secuencias de Proteínas de Interés Inmunológico . En una modalidad de la presente invención, las moléculas de unión pueden comprender dos, tres, cuatro, cinco o la totalidad de las seis regiones CDR como se describe en la presente. Preferiblemente, una molécula de unión de acuerdo con la presente invención comprende por lo menos dos de las CDR descritas en la presente . En una modalidad, las moléculas de unión de la invención comprenden una línea germinal de VH, VH1-69 (véase Tomlinson IM, Williams SC, Ignatovich O, Corbett SJ, Winter G. V-BASE Sequence Directory. Cambridge United Kingdom: MRC Centre for Protein Engineering (1997)). En otra modalidad adicional, las moléculas de unión de acuerdo con la invención comprenden una cadena pesada que comprende la cadena pesada variable de la secuencia de aminoácidos que se selecciona del grupo que consiste de la SEC ID NO: 59, SEC ID NO: 61, SEC ID NO: 63, SEC ID NO: 65, SEC ID NO: 67, SEC ID NO: 69, SEC ID NO: 71, SEC ID NO: 73, SEC ID NO: 75, SEC ID NO: 77, SEC ID NO: 79, SEC ID NO: 81, SEC ID NO: 83, SEC ID NO: 317, SEC ID NO: 321, SEC ID NO: 325, SEC ID NO: 329, SEC ID NO: 333, SEC ID NO: 337, SEC ID NO: 341, SEC ID NO: 345, SEC ID NO: 349, SEC ID NO: 353, SEC ID NO: 357, SEC ID NO: 361 y SEC ID NO: 365. En una modalidad adicional, las moléculas de unión de acuerdo con la invención comprenden una cadena ligera que comprende la cadena ligera variable de la secuencia de aminoácidos que se selecciona del grupo que consiste de la SEC ID NO: 85, SEC ID NO: 87, SEC ID NO: 89, SEC ID NO: 91, SEC ID NO: 93, SEC ID NO: 95, SEC ID NO: 97, SEC ID NO: 99, SEC ID NO: 101, SEC ID NO: 103, SEC ID NO: 105, SEC ID NO: 107, SEC ID NO: .109 SEC ID NO: 319, SEC ID NO: 323, SEC ID NO: 327, SEC ID NO: 331, SEC ID NO: 335, SEC ID NO: 339, SEC ID NO: 343, SEC ID NO: 347, SEC ID NO: 351, SEC ID NO: 355, SEC ID NO: 359, SEC ID NO: 363 y SEC ID NO: 367. La tabla 8 especifica las regiones variables de la cadena pesada y ligera de la molécula de unión de la invención. Otro aspecto de la invención incluye variantes funcionales de las moléculas de unión como se definen en la presente. Se considera a las moléculas como variantes funcionales de una molécula de unión de acuerdo con la invención, si las variantes son capaces de competir para unirse específicamente a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo con las moléculas de unión de origen. En otras palabras, cuando las variantes funcionales aún son capaces de unirse a virus de influenza H5N1 o un fragmento de los mismos, preferiblemente las variantes funcionales son capaces de competir por unión específicamente en por lo menos dos (o más) cepas diferentes de virus de influenza H5N1 o fragmentos de las mismas que se unen específicamente por las moléculas de unión de origen. Además, se considera que las moléculas son variantes funcionales de una molécula de unión de acuerdo con la invención si tienen actividad neutralizante contra el virus de la influenza H5N1, preferiblemente contra por lo menos dos (o más) cepas de virus de influenza H5N1 contra las cuales la molécula de unión de origen muestra actividad neutralizante. Las variantes funcionales incluyen, pero no se limitan a derivados que son sustancialmente similares en secuencia estructural primaria pero las cuales contienen, por ejemplo, modificaciones in vitro o in vivo, químicas y/o bioquímicas que no se encuentran en la molécula de unión de origen. Dichas modificaciones incluyen, por ejemplo, acetilación, acilación, unión covalente de un nucleótido o derivado nucleotidico, unión covalente de un lipido o un derivado lipidico, reticulación, formación de un enlace disulfuro, glucosilación, hidroxilación, metilación, oxidación, pegilación, procesamiento proteolitico, fosforilación y similares. De manera alternativa, las variantes funcionales pueden ser moléculas de unión como se define en la presente invención que comprenden una secuencia de aminoácidos que contiene sustituciones, inserciones, supresiones o combinaciones de los mismos en uno o más aminoácidos en comparación con las secuencias de aminoácidos de la moléculas de unión de origen. Además, las variantes funcionales pueden comprender cortes de las secuencias de aminoácidos en cualquiera o ambas partes terminales, amino o carboxilo. Las variantes funcionales de acuerdo con la invención pueden tener afinidades de unión iguales o diferentes, mayores o menores, en comparación con la molécula de unión de origen pero aún serán capaces de unirse a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo. Por ejemplo, las variantes funcionales de acuerdo con la invención pueden tener afinidades de unión aumentadas o disminuidas por virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo en comparación con las moléculas de unión de origen. De manera preferible, las secuencias de aminoácidos de las regiones variables que incluyen, pero que no se limitan a regiones de infraestructura, regiones hipervariables, en particular las regiones CDR3, están modificadas. De manera general, la cadena ligera y las regiones variables de la cadena pesada comprenden tres regiones hipervariables, que comprenden tres CDR y regiones más conservadas, las denominadas regiones de infraestructura (FR, por sus siglas en inglés) . Las regiones hipervariables comprenden residuos aminoácidos de las CDR y residuos aminoácidos de bucles hipervariables. Las variantes funcionales que se considera que están dentro del alcance de la presente invención tienen por lo menos aproximadamente 50% a aproximadamente 99, de manera preferible por lo menos aproximadamente 60% a aproximadamente 99%, de manera más preferible por lo menos aproximadamente 70% a aproximadamente 99%, incluso de manera más preferible por lo menos aproximadamente 80% a aproximadamente 99%, de manera más preferible por lo menos aproximadamente 90% a aproximadamente 99%, en particular por lo menos aproximadamente 95% a aproximadamente 99% y en particular por lo menos aproximadamente 97% a aproximadamente 99% de homología en la secuencia de aminoácidos con las moléculas de unión de origen, como se definen en la presente. Los algoritmos de computadora tales como, por ejemplo, Gap o Bestfit conocidos por las personas expertas en la técnica se pueden utilizar para alinear de manera óptima las secuencias de aminoácidos que se van a comparar y definir residuos aminoácidos similares o idénticos. Las variantes funcionales se pueden obtener al alterar las moléculas de unión de origen o partes de las mismas por métodos de biología molecular generales conocidos en la técnica que incluyen, pero que no se limitan a PCR susceptible de error, mutagénesis dirigida a oligonucleótido, mutagénesis dirigida a sitio y barajado de cadena pesada y/o ligera. En una modalidad, las variantes funcionales de la invención tienen actividad neutralizante contra virus de influenza H5N1. La actividad neutralizante puede ser idéntica o puede ser mayor o menor en comparación con las moléculas de unión de origen. Por lo tanto, cuando se utiliza el término molécula de unión (humana) , esto también abarca variantes funcionales de la molécula de unión (humana) . En un aspecto adicional, la invención incluye inmunoconjugados, es decir, moléculas que comprenden por lo menos una molécula de unión como se define en la presente y que comprenden además por lo menos una etiqueta tal como, por ejemplo, una porción/agente detectable. También se contemplan en la presente invención mezclas de inmunoconjugados de acuerdo con la invención o mezclas de por lo menos un inmunoconjugado de acuerdo con la invención y otra molécula, tal como un agente terapéutico u otra molécula de unión o inmunoconjugado . En una modalidad adicional, los inmunoconjugados de la invención pueden comprender más de una etiqueta. Estas etiquetas pueden ser iguales o distintas entre si y se pueden unir/conjugar de manera no covalente a las moléculas de unión. Una o varias de las etiquetas también se pueden unir/conjugar directamente a las moléculas de unión humanas a través de unión covalente. De manera alternativa, una o varias de las etiquetas se pueden unir/conj ugar a las moléculas de unión por medio de uno o más compuestos enlazantes. Las técnicas para conjugar etiquetas a moléculas de unión son bien conocidas por los expertos en la técnica. Las etiquetas de los inmunoconjugados de la presente invención pueden ser agentes terapéuticos pero también pueden ser porciones/agentes detectables. Las etiquetas adecuadas en tratamiento y/o prevención pueden ser toxinas o partes funcionales de las mismas, antibióticos, enzimas u otras moléculas de unión que incrementen la fagocitosis o estimulación inmunitaria. Los inmunoconjugados que comprenden un agente detectable se pueden utilizar de manera diagnóstica, por ejemplo para determinar si un sujeto ha sido infectado con una cepa de virus de influenza H5N1 o para vigilar el desarrollo o progreso de una infección por virus de influenza H5N1 como parte de un procedimiento de prueba clínico, por ejemplo, para determinar la eficacia de un régimen de tratamiento dado. No obstante, también se puede utilizar para otros propósitos de detección, analíticos y/o de diagnóstico. Las porciones/agentes detectables incluyen, pero no se limitan a enzimas, grupos prostéticos, materiales fluorescentes, materiales luminiscentes, materiales bioluminiscentes, materiales radioactivos, metales emisores de positrones y iones metálicos paramagnéticos no radioactivos. Las etiquetas utilizadas para marcar las moléculas de unión para detección, propósitos analíticos y/o de diagnóstico dependen de las técnicas específicas de detección/análisis/diagnóstico y/o los métodos utilizados tales como, por ejemplo, tinción inmunohistoquímica de muestras (tejido) , detección citométrica de flujo, detección citométrica de exploración láser, inmunoanálisis fluorescentes, análisis inmunosorbentes unidos a enzima (ELISA, por sus siglas en inglés) , radioinmunoanálisis (RIA, por sus siglas en inglés) , bioanálisis (por ejemplo análisis de fagocitosis), aplicaciones de transferencia Western, etc. Las marcas adecuadas para las técnicas de detección/análisis/diagnóstico y/o los métodos conocidos en la técnica se encuentran dentro del alcance de una persona experta en la técnica. Además, las moléculas de unión humanas o los inmunoconjugados de la invención también se pueden unir a soportes sólidos los cuales son particularmente útiles para inmunoanálisis in vitro o purificación de virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo. Dichos soportes sólidos pueden ser porosos o no porosos, planos o no planos. Las moléculas de unión de la presente invención se pueden funcionar a secuencias marcadoras tales como un péptido para facilitar la purificación. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a la etiqueta hexa-histidina, la etiqueta hemaglutinina (HA) , la etiqueta myc o la etiqueta flag. De manera alternativa se puede conjugar un anticuerpo a un segundo anticuerpo para formar un heteroconjugado de anticuerpo. En otro aspecto, las moléculas de unión de la invención se pueden conjugar/unir a uno o más antigenos. Preferiblemente, estos antigenos son antigenos los cuales son reconocidos por el sistema inmunitario de un sujeto al cual se le administra el conjugado de molécula de unión-antigeno. Los antigenos pueden ser idénticos pero también pueden diferir entre si. Los métodos de conjugación para unir los antigenos y moléculas de unión son bien conocidos en la técnica e incluyen, pero no se limitan al uso de agentes reticulantes . Las moléculas de unión de la invención se unirán a virus de influenza H5N1 y los antigenos unidos a las moléculas de unión iniciarán un ataque poderoso a los linfocitos T sobre el conjugado lo que finalmente llevará a la destrucción del virus de influenza H5N1. Después de producir los inmunoconjugados químicamente por conjugación, directa o indirectamente por medio, por ejemplo, de un enlazante, se pueden producir inmunoconjugados como proteínas de fusión que comprenden las moléculas de unión de la invención y una etiqueta adecuada. Las proteínas de fusión se pueden producir por métodos conocidos en la técnica tales como, por ejemplo, de manera recombinante o por construcción de moléculas de ácido nucleico que comprenden secuencias nucleotídicas que codifican para las moléculas de unión en marco con secuencias nucleotídicas que codifican para una o varias etiquetas adecuadas y después expresar las moléculas de ácido nucleico. Otro aspecto de la presente invención es proporcionar una molécula de ácido nucleico que codifique para por lo menos una molécula de unión, variante funcional o inmunoconj ugado de acuerdo con la invención. Dichas moléculas de ácido nucleico se pueden utilizar como intermediarios para propósitos de clonación, por ejemplo en el procedimiento de maduración de afinidad como se describe en lo anterior. En una modalidad preferida, las moléculas de ácido nucleico se aislan o purifican. Una persona experta en la técnica apreciará que las variantes funcionales de estas moléculas de ácido nucleico también están diseñadas para ser una parte de la presente invención. Las variantes funcionales son secuencias de ácido nucleico que pueden ser traducidas directamente, utilizando código genético convencional o estándar, para proporcionar una secuencia de aminoácidos idéntica a la traducida a partir de las moléculas originales de ácido nucleico.
De manera preferible, las moléculas de ácido nucleico codifican para moléculas de unión que comprenden las regiones CDR como se describe en lo anterior. En una modalidad adicional, las moléculas de ácido nucleico codifican para moléculas de unión que comprenden dos, tres, cuatro, cinco o la totalidad de las seis regiones CDR de las moléculas de unión de la invención. En otra modalidad, las moléculas de ácido nucleico codifican para moléculas de unión que comprenden una cadena pesada que comprende las secuencias variables de la cadena pesada como se describen en lo anterior. En otra modalidad, las moléculas de ácido nucleico codifican para moléculas de unión que comprenden una cadena ligera que comprende las secuencias variables de la cadena ligera como se describen en lo anterior. Las secuencias nucleotidicas de las moléculas de unión de la invención se proporcionan en la sección de ejemplos (véanse, por ejemplo, tablas 6 y 8) . Otro aspecto de la invención es proporcionar vectores, es decir, construcciones de ácido nucleico que comprenden una o más moléculas de ácido nucleico de acuerdo con la presente invención. Los vectores se pueden derivar de plásmidos tales como, por ejemplo, F, Rl, RP1, Col, pBR322, TOL, Ti, etc; cósmidos, fagos tales como ?, lambdoide, M13, Mu, Pl, P22, 0_ß, T-par, T-impar, T2, T4, T7, etc.; o virus de plantas. Los vectores pueden utilizarse para clonación y/o para expresión de las moléculas de unión de la invención incluso se pueden utilizar para propósito de genoterapia. Los vectores que comprenden una o más moléculas de ácido nucleico de acuerdo con la invención unidas operablemente a una o más moléculas de ácido nucleico reguladoras de expresión también están incluidas por la presente invención. La selección del vector depende de los procedimientos recombinantes seguidos y del hospedador utilizado. La introducción de los vectores en las células hospedadoras se puede llevar a cabo, por ejemplo, por transfección con fosfato de calcio, infección por virus, transfección mediada por DEAE-dextrano, transfección con lipofectamina o electroporación . Los vectores se pueden replicar de manera autónoma o se pueden replicar junto con el cromosoma en el cual se han integrado. Preferiblemente, los vectores contienen uno o más marcadores de selección. La selección de los marcadores puede depender de las células hospedadoras de selección, aunque esto no es critico para la invención, como es bien sabido por las personas expertas en la técnica. Los marcadores incluyen, pero no se limitan a canamicina, neomicina, puromicina, higromicina, zeocina, gen para timidina cinasa de virus de herpes simple (HSV-TK, por sus siglas en inglés) , gen para dihidrofolato reductasa de ratón (dhfr, por sus siglas en inglés) . Los vectores que comprenden una o más moléculas de ácido nucleico que codifican para las moléculas de unión humanas como se describe en lo anterior unidas operablemente a una o más moléculas de ácido nucleico que codifican para proteínas o péptidos que se pueden utilizar para aislar las moléculas de unión humanas también están abarcadas por la invención. Estas proteínas o péptidos incluyen, pero no se limitan a glutation-S-transferasa, proteína que se une a maltosa, polihistidina que se une a metal, proteína fluorescente verde, luciferasa y ß-galactosidasa . Los hospedadores que contienen una o más copias de los vectores mencionados en lo anterior son un objeto adicional de la presente invención. Preferiblemente, los hospedadores son células hospedadoras . Las células hospedadoras incluyen, pero no se limitan a células de origen de mamífero, vegetal, de insecto, micóticas o bacterianas. Las células bacterianas incluyen, pero no se limitan a células de bacterias grampositivas o de bacterias gramnegativas tales como varias especies de los géneros Escheríchia tales como E. coli y Pseudomonas. En el grupo de células micóticas se utilizan preferiblemente células de levadura. La expresión en levadura se puede obtener utilizando cepas de levadura tales como, por ejemplo, Pichia pastoris, Saccharomyces cerevisiae y Hansenula polymorpha. Además, también se pueden utilizar como células hospedadoras células de insecto tales como células de Drosophila y Sf9. Además de esto, las células hospedadoras pueden ser células vegetales tales como, por ejemplo, células de plantas de cosecha tales como plantas de bosque o células de plantas que proporcionen alimento y materias primas tales como plantas de cereal o plantas medicinales, o células de ornato o células de cosechas de bulbo de flor. Las plantas (transgénicas ) transformadas o células vegetales se producen por métodos conocidos, por ejemplo. La transferencia de gen mediada por Agrobacterium, la transformación de los discos de hojas, la transformación de protoplastos por transferencia de ADN inducido por polietilenglicol , la electroporación, sonicación, microinyección o transferencia de gen bolistico. De manera adicional, un sistema de expresión adecuado puede ser un sistema de baculovirus. Los sistemas de expresión que utilizan células de mamífero tales como células de ovario de hámster Chino (CHO, por sus siglas en inglés) , células COS, células BHK, células NSO o células de melanoma de Bowes se prefieren en la presente invención. Las células de mamífero proporcionan proteínas expresadas con modificaciones postraduccionales que son más similares a moléculas naturales de origen de mamífero. Dado que la presente invención se relaciona con moléculas que pueden tener que ser administradas a humanos, se prefiere particularmente un sistema de expresión completamente humano. Por lo tanto, incluso de manera más preferible, las células hospedadoras son células humanas. Los ejemplos de células humanas son, por ejemplo, células HeLa, 911, AT1080, A549, 293 y HEK293T. En modalidades preferidas, las células productoras humanas comprenden por lo menos una parte funcional de una secuencia de ácido nucleico que codifica para una región de adenovirus El en un formato expresable. En modalidades incluso más preferidas, las células hospedadoras se derivan de retina humana y han sido inmortalizadas con ácidos nucleicos que comprenden secuencias El adenovirales tales como células 911 o la linea de células depositada en la European Collection of Cell Cultures (ECACC) , CAMR, Salisbury, Wiltshire SP4 OJG, Gran Bretaña, el 29 de febrero de 1996 bajo el número 96022940 y comercializadas bajo la marca comercial PER.C6MR (PER.C6 es una marca comercial registrada de Crucell Holland B.V.). Para los propósitos de esta solicitud, las "células PER.C6" se refiere a las células depositadas bajo el número 96022940 o sus antecesores, pasajes posteriores o descendientes así como los descendientes de ancestros de células depositadas así como derivados de cualquiera de los anteriores. La producción de proteínas recombinantes en células hospedadoras se puede llevar a cabo de acuerdo con métodos bien conocidos en la técnica. El uso de las células comercializadas bajo el nombre comercial PER.C6MR como una plataforma de producción para proteínas de interés se ha descrito en el documento WO 00/63403, cuya descripción se incorpora en la presente como referencia en su totalidad.
Un método para producir una molécula de unión de acuerdo con la invención es una parte adicional de la invención. El método comprende las etapas de: a) cultivar una célula hospedadora de acuerdo con la invención bajo condiciones que lleven a la expresión de la molécula de unión, y b) opcionalmente, recuperar la molécula de unión expresada. Las moléculas de unión expresadas se pueden recuperar del extracto de células libres, pero de manera preferible se recuperan del medio de cultivo. El método anterior para producción también se puede utilizar para elaborar variantes funcionales de las moléculas de unión y/o inmunoconjugados de la presente invención. Los métodos de recuperación de proteínas tales como moléculas de unión a partir de extractos libres de células o medio de cultivos son bien conocidos por una persona experta en la técnica. Las moléculas de unión, las variantes funcionales y/o inmunoconjugados como se obtienen por el método descrito en lo anterior también son parte de la presente invención. De manera alternativa, después de la expresión en los hospedadores tales como células hospedadoras, las moléculas de unión e inmunoconjugados de la invención se pueden producir de manera sintética por sintetizadores peptídicos convencionales o en sistemas de traducción libres de células utilizando ácido nucleico ARN derivado de moléculas de ADN de acuerdo con la invención. Las moléculas de unión y los inmunoconjugados como se pueden obtener por los métodos de producción sintéticos descritos en lo anterior o los sistemas de traducción sin células también son parte de la presente invención. En otra modalidad adicional, las moléculas de unión de la presente invención también se pueden producir en mamíferos no humanos transgénicos tales como, por ejemplo, conejos, chivos o vacas, y se pueden secretar, por ejemplo, en la leche de los mismos. En otra modalidad alternativa adicional, las moléculas de unión de acuerdo con la presente invención, preferiblemente las moléculas de unión humanas se unen específicamente a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo y se pueden generar por mamíferos no humanos transgénicos, tales como, por ejemplo, ratones o conejos transgénicos que expresen genes de inmunoglobulina humana. Preferiblemente, los mamíferos no humanos transgénicos tienen un genoma que comprende un transgen de cadena pesada humana y un transgen de cadena ligera humana que codifica para la totalidad o una porción de las moléculas de unión humanas como se describen en lo anterior. Los mamíferos no humanos transgénicos pueden ser inmunizados con una preparación purificada o enriquecida de virus de influenza H5N1 o un fragmento de la misma. Los procedimientos para inmunización de mamíferos no humanos están bien establecidos en la técnica. Véanse Using Antibodies : A Laboratory Manual, Editado por: E. Harlow and D, Lañe (1988), Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York and Current Protocols in Immunology, Editado por J.E. Coligan, A.M. Kruisbeek, D.H. Margulies, E. M. Shevach, W. Strober (2001), John Wiley & Sons Inc., New York, cuyas descripciones se incorporan en la presente como referencia. Los procedimientos de inmunización con frecuencia incluyen inmunizaciones múltiples, ya sea con o sin adyuvantes tales como adyuvante completo de Freund y adyuvante incompleto de Freund, pero también pueden incluir inmunizaciones con ADN desnudo. En otra modalidad, las moléculas de unión humanas se producen por linfocitos B, células plasmáticas y/o de memoria derivadas de animales transgénicos . En otra modalidad adicional, las moléculas de unión humanas se producen por hibridomas, los cuales se preparan por fusión de linfocitos B que se obtienen de mamíferos no humanos transgénicos descritos en lo anterior a células inmortalizadas. Los linfocitos B, las células plasmáticas y los hibridomas como se pueden obtener de mamíferos no humanos transgénicos descritos en lo anterior y moléculas de unión humanas como se pueden obtener a partir de los mamíferos no humanos transgénicos descritos en lo anterior, los linfocitos B, las células plasmáticas y/o de memoria y los hibridomas también son parte de la presente invención.
En un aspecto adicional, la invención proporciona un método para identificar una molécula de unión tal como una molécula de unión humana, por ejemplo un anticuerpo monoclonal humano o un fragmento del mismo, que se une específicamente a virus de influenza H5N1 o moléculas de ácido nucleico que codifican para dichas moléculas de unión y que comprenden las etapas de: (a) poner en contacto una colección de moléculas de unión sobre la superficie de paquetes genéticos replicables con virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo bajo condiciones que generen la unión, (b) seleccionar por lo menos uno de un paquete genético replicable que se una a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo, (c) separar y recuperar el paquete genético replicable que se une a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo a partir de paquetes genéticos replicables que no se unan a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo, ün paquete genético replicable, como se utiliza en la presente, puede ser procariótico o eucariótico e incluye células, esporas, levaduras bacterias, virus, (bacterio) fagos, ribosomas y polisomas . ün paquete genético replicable preferido es un fago. Las moléculas de unión, tales como por ejemplo Fv de cadena sencilla se muestran sobre el paquete genético replicable, es decir, se unen a un grupo de molécula localizada en la superficie exterior del paquete genético replicable. El paquete genético replicable es una unidad susceptible de cribado que comprende una molécula de unión que va a ser cribada unida a una molécula de ácido nucleico que codifica para la molécula de unión. La molécula de ácido nucleico debe ser susceptible de ser cribada in vivo (por ejemplo como un vector) o in vitro (por ejemplo por PCR, transcripción y traducción) . La replicación in vivo puede ser autónoma (por ejemplo para una célula) con la asistencia de factores hospedadores (como para un virus) o con la asistencia tanto del hospedador como de un virus cooperador (por ejemplo para un fagémido) . Los paquetes genéticos replicables que muestran una colección de moléculas de unión se forman al introducir moléculas de ácido nucleico que codifican para moléculas de unión exógenas que se van a presentar en los genomas de los paquetes genéticos replicables para formar proteínas de fusión con proteínas endógenas que normalmente se expresan desde la superficie externa de los paquetes genéticos replicables. La expresión de las proteínas de fusión, transporte a la superficie externa y ensamblado resulta en la presentación de moléculas de unión exógenas desde la superficie externa de los paquetes genéticos replicables. Una o varias etapas de selección en el método de acuerdo con la presente invención se puede llevar a cabo con virus H5N1 de influenza que están vivos y aún son infecciosos o están inactivados. La inactivación de virus de influenza H5N1 se puede llevar a cabo por métodos de inactivación viral bien conocidos por los expertos en la técnica tales como, por ejemplo, el tratamiento con formalina, ß-propiolactona (BPL) , mertiolato y/o luz ultravioleta. Los métodos para determinar si aún esta vivo el virus de influenza H5N1, si aún es infeccioso y/o es viable o si ha sido inactivado parcial o completamente son bien conocidos por las personas expertas en la técnica. El virus de influenza H5N1 utilizado en el método anterior puede estar sin aislar, por ejemplo puede estar presente en suero y/o sangre de un individuo infectado. El virus de influenza H5N1 utilizado también puede ser aislado de un cultivo celular en un medio adecuado. En una modalidad, el virus de influenza H5N1 está en suspensión cuando se pone en contacto con los paquetes genéticos replicables. De manera alternativa, también se puede acoplar a un portador cuando se lleva a cabo el contacto. En una modalidad una primera selección y selección adicional se puede llevar a cabo contra una cepa de virus de influenza H5N1 de la misma linea. De manera alternativa, una primera ronda y rondas de selección adicionales se pueden realizar contra cepas de virus de influenza H5N1 de lineas diferentes (por ejemplo la primera selección en las cepas de la linea 1 y la segunda selección en las cepas de las lineas 2 ó 3) . De manera alternativa, una o varias etapas de selección se pueden llevar a cabo en presencia de un fragmento de virus de influenza H5N1 tal como, por ejemplo, preparaciones de membrana celular, proteínas o polipéptidos recombinantes de H5N1, proteínas de fusión que comprenden proteínas o polipéptidos de H5N1, células que expresan proteínas o polipéptidos recombinantes de H5N1 y similares. Las partes expuestas extracelularmente de estas proteínas o polipéptidos también se puede utilizar como material de selección. Los fragmentos de virus de influenza H5N1 se pueden inmovilizar en un material adecuado antes de su uso o se pueden utilizar en suspensión. En una modalidad, la selección se puede llevar a cabo sobre fragmentos diferentes de virus de influenza H5N1 o fragmentos de cepas diferentes de virus de influenza H5N1. El encuentro de las combinaciones de selección adecuadas se encuentra dentro del alcance de una persona experta en la técnica. Las selecciones se pueden realizar por ELISA o FACS. En un aspecto adicional, la invención proporciona un método para obtener una molécula de unión que se une específicamente a una cepa de virus de influenza H5N1 o un fragmento de la misma o una molécula de ácido nucleico que codifica para dicha molécula de unión, en donde el método comprende las etapas de: a) realizar el método descrito en lo anterior de identificación de moléculas de unión, y b) aislar del paquete genético replicable recuperado la molécula de unión y/o la molécula de ácido nucleico que codifica para la molécula de unión. La colección de moléculas de unión sobre la superficie de los paquetes genéticos replicables puede ser una recolección de scFv o Fab. Una vez que se ha establecido o identificado scFv o Fab nuevos con el método mencionado en lo anterior de identificación de moléculas de unión o moléculas de ácido nucleico que codifican para las moléculas de unión, se puede aislar el ADN que codifica para scFv o Fab de la bacteria o fagos y se puede combinar por medio de técnicas de biología molecular convencionales para elaborar construcciones que codifiquen para los scFv, los scFv divalentes, los Fab o inmunoglobulinas humanas completas de una especificidad deseada (por ejemplo IgG, IgA o IgM) . Estas construcciones se pueden transfectar en líneas de células adecuadas y se pueden producir finalmente anticuerpos monoclonales humanos completos (véase Huís et al., 1999; Boel et al. 2000) . Como se menciona en lo anterior, el paquete genético replicable preferido es un fago. Los métodos de presentación de fago para identificar y obtener moléculas de unión (humanas) , por ejemplo anticuerpos monoclonales (humanos) ahora son métodos bien establecidos conocidos por las personas expertas en la técnica. Estos métodos se describen, por ejemplo, en la patente de E.U.A. número 5,696,108; Burton y Barbas, 1994; de Kruif et al., 1995b; and Phage Display: A Laboratory Manual. Editado por: CF Barbas, DR Burton, JK Scott and GJ Silverman (2001), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York. Todas estas referencia se incorporan en la presente en su totalidad. Para la construcción de las bibliotecas de presentación de fago, las colecciones de los genes para las regiones variables de las cadenas pesada y ligera de anticuerpo monoclonal humano se expresan sobre la superficie del bacteriófago, preferiblemente bacteriófago filamentoso, partículas, por ejemplo, en Fv de cadena sencilla (scFv) o en formato Fab (véase de Kruif et al., 1995b). Las bibliotecas grandes de fagos que expresan fragmentos de anticuerpo típicamente contienen más de 1.0 x 109 especificidades de anticuerpo y se pueden ensamblar a partir de las regiones V de inmunoglobulina expresadas en los linfocitos B de individuos inmunizados o no inmunizados. En una modalidad especifica de la invención, la biblioteca de fago de las moléculas de unión, preferiblemente la biblioteca de fago scFv se prepara a partir de ARN aislado de células que se obtienen de un sujeto que ha sido vacunado contra virus de influenza (por ejemplo H5N1) , vacunado recientemente contra un patógeno no relacionado, que recientemente ha sufrido de una infección por virus de influenza H5N1 o de un individuo sano. Se puede aislar ARN, por ejemplo, de médula ósea o sangre periférica, preferiblemente linfocitos de sangre periférica o linfocitos B aislados o incluso subpoblaciones de linfocitos B tales como los linfocitos B de memoria. El sujeto puede ser un animal, preferiblemente un humano. En una modalidad preferida, las bibliotecas se pueden ensamblar de regiones V de inmunoglobulina expresadas por linfocitos B de memoria IgM. De manera alternativa, las bibliotecas de presentación de fagos se pueden construir a partir de regiones variables de inmunoglobulina que se han ensamblado parcialmente in vitro para introducir diversidad de anticuerpos adicionales en la biblioteca (bibliotecas semisintéticas) . Por ejemplo, las regiones variables ensambladas in vitro contienen cadenas de ADN producido de manera sintética, aleatorizado o parcialmente aleatorizado en aquellas ' regiones de las moléculas que son importantes para especificidad de anticuerpo, por ejemplo las regiones CDR. Los anticuerpos de fago específicos para virus de influenza H5N1 se pueden seleccionar de la biblioteca al exponer el virus o fragmento del mismo a una biblioteca de fago para permitir la unión de fagos que expresen fragmentos de anticuerpo específicos para el virus o fragmento del mismo. Los fagos no unidos se separan por lavado y los fagos unidos eluidos para infección de bacterias E. coli y propagación subsecuente. Habitualmente se requieren rondas múltiples de selección y propagación para enriquecer lo suficiente la unión de fagos específicamente a los virus o fragmentos de los mismos. Si se desea, antes de exponer la biblioteca de fago a los virus o fragmentos de los mismos, la biblioteca de fagos primero se puede sustraer al exponer la biblioteca de fago a material no objetivo tales como virus o fragmentos de los mismos de una cepa diferente, es decir, virus que no son de influenza H5N1. Los virus sustractores o fragmentos de los mismos se pueden unir a una fase sólida o pueden estar en suspensión. Los fagos también se pueden seleccionara para unión a antigenos complejos tales como mezclas complejas de proteínas H5N1 o (poli ) péptidos opcionalmente suplementados con otro material. Las célula hospedadoras que expresan una o más proteínas o (poli) éptidos de virus de influenza H5N1 también se pueden utilizar para propósitos de selección. Un método de presentación de fago que utiliza estas células hospedadoras se puede extender y mejorar al sustraer enlazantes no relevantes durante el cribado por adición de un exceso de células hospedadoras que no comprenden moléculas objetivo o moléculas que no son objetivos que son similares pero no idénticas al objetivo y de esta manera aumentan en gran medida la probabilidad de encontrar moléculas de unión relevantes. Por supuesto, la sustracción se puede realizar antes, durante o después del cribado con virus o fragmentos de los mismos. El procedimiento se denomina como el procedimiento MABS RACTMR (MABS RACTMR es una marca comercial registrada de Crucell Holland B.V., véase también la patente de E.U.A. número 6,265,150, la cual se incorpora en la presente como referencia) . En otro aspecto adicional, la invención proporciona un método para obtener una molécula de unión que potencialmente tiene actividad neutralizante contra virus de influenza H5N1 , preferiblemente por lo menos contra virus de influenza H5N1 cepas de la linea 1, linea 2 y linea 3, en donde el método comprende las etapas de (a) llevar a cabo el método de obtención de una molécula de unión que se una específicamente a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo o una molécula de ácido nucleico que codifique para dicha molécula de unión como se describe en lo anterior y (b) verificar si la molécula de unión aislada tiene actividad neutralizante contra el virus, preferiblemente contra el virus de influenza H5N1 , cepas de la línea 1 y la línea 2. Los análisis para verificar si una molécula de unión tiene actividad neutralizante son bien conocidos en la técnica (véase WHO Manual on Animal Influenza Diagnosis and Surveillance, Ginebra: Organización Mundial de la Salud, 2005, versión 2002.5). En un aspecto adicional, la invención se relaciona con una molécula de unión que tiene actividad neutralizante que se puede obtener por los métodos como se describe en lo anterior.
En un aspecto adicional, la invención proporciona composiciones que comprenden por lo menos una molécula de unión, preferiblemente un anticuerpo monoclonal humano de acuerdo con la invención, por lo menos una variante funcional del mismo, por lo menos un inmunoconjugado de acuerdo con la invención o una combinación de los mismos. Además de esto, las composiciones pueden comprender, por ejemplo, moléculas estabilizantes tales como albúmina o polietilenglicol o sales. Preferiblemente, las sales utilizadas son sales que retienen la actividad biológica deseada de las moléculas de unión y que no producen efecto toxicológico no deseado alguno. Si es necesario, las moléculas de unión humanas de la invención se pueden recubrir en o sobre un material para protegerlo de la acción de ácidos u otras condiciones naturales o no naturales que puedan inactivar a las moléculas de unión. En un aspecto adicional, la invención proporciona composiciones que comprenden por lo menos una molécula de ácido nucleico como se define en la presente invención. Las composiciones pueden comprender soluciones acuosas tales como soluciones acuosas que contengan sales (por ejemplo NaCl o sales como se describe en lo anterior) , detergentes (por ejemplo SDS) y/u otros componentes adecuados. Además, la presente invención se relaciona con composiciones farmacéuticas que comprenden por lo menos una molécula de unión tal como un anticuerpo monoclonal humano de la invención (o un fragmento funcional o variante del mismo) , por lo menos un inmunoconjugado de acuerdo con la invención, por lo menos una composición de acuerdo con la invención o combinaciones de los mismos. La composición farmacéutica de la invención comprende además por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. Los excipientes farmacéuticamente aceptables son bien conocidos por una persona experta. La composición farmacéutica de acuerdo con ia invención puede comprender además por lo menos otro agente terapéutico. Los agentes adecuados también son bien conocidos por un experto en la técnica. En una modalidad, las composiciones farmacéuticas pueden comprender dos o más moléculas de unión que tienen actividad neutralizante contra el virus de influenza H5N1. En una modalidad, la moléculas de unión muestran actividad neutralizante sinergistica, cuando se utilizan combinadas. En otras palabras, las composiciones comprenden por lo menos dos moléculas de unión que tienen actividad neutralizante, caracterizadas porque las moléculas de unión actúan de manera sinergistica en la neutralización del virus de influenza H5N1. Como se utiliza en la presente, el término "sinergistico" significa que el efecto combinado de las moléculas de unión, cuando se utilizan en combinación, es mayor que sus efectos aditivos cuando se utilizan individualmente. Las moléculas de unión que actúan de manera sinergistica se pueden unir a estructuras diferentes en fragmentos iguales o distintos de virus de influenza H5N1. Una manera de calcular la sinergia es por medio del índice de combinación. El concepto de índice de combinación (CI , por sus siglas en inglés) ha sido descrito por Chou y Talalay (1984). Las composiciones también comprenden una molécula de unión que tiene actividad neutralizante y una molécula de unión específica para H5N1 no neutralizante. Las moléculas de unión específicas para H5N1 no neutralizantes y neutralizantes también actúan sinergísticamente para neutralizar el virus de influenza H5N1. Una composición farmacéutica de acuerdo con la invención puede comprender además por lo menos otro agente terapéutico, profiláctico y/o de diagnóstico.
Preferiblemente, la composición farmacéutica comprende por lo menos otro agente profiláctico y/o terapéutico. De manera preferible, dichos agentes terapéuticos y/o profilácticos adicionales son agentes capaces de evitar y/o tratar una infección de virus de influenza H5N1 y/o una condición que resulte de dicha infección. Los agentes terapéuticos y/o profilácticos incluyen, pero no se limitan a agentes antivirales. Dichos agentes pueden ser moléculas de unión, moléculas pequeñas, compuestos orgánicos o inorgánicos, enzimas, secuencias polinucleotídicas , péptidos antivirales, etc. Otros agentes que actualmente se utilizan para tratar a pacientes infectados con virus de influenza H5N1 son inhibidores M2 (por ejemplo amantidina, rimantadina) y/o inhibidores de neuraminidasa (por ejemplo zanamivir, oseltamivi) . Estos se pueden utilizar combinados con las moléculas de unión de la invención. Los agentes capaces de evitar y/o tratar una infección con virus de influenza H5N1 y/o una condición que resulta de una infección que están en fase experimental también se pueden utilizar como otros agentes terapéuticos y/o profilácticos útiles en la presente invención . Las moléculas de unión o composiciones farmacéuticas de la invención se pueden probar en sistemas en modelos animales adecuados antes de su uso en humanos. Dichos sistemas de modelos en animales incluyen, pero no se limitan a ratón, hurón y mono. Típicamente, las composiciones farmacéuticas deben ser estériles y estables bajo las condiciones de fabricación y almacenamiento. Las moléculas de unión, inmunoconjugados, moléculas de ácido nucleico o composiciones de la presente invención pueden estar en forma de polvo para reconstitución en un excipiente apropiado farmacéuticamente aceptable antes o en el momento de suministro. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación preferidos son secado al vacio y liofilización que proporcionan un polvo del ingrediente activo más cualquier ingrediente deseado adicional a partir de una solución previamente esterilizada por filtración de la misma . De manera alternativa, las moléculas de unión, inmunoconj ugados , moléculas de ácido nucleico o composiciones de la presente invención pueden estar en solución y el excipiente apropiado farmacéuticamente aceptable se puede agregar y/o se puede mezclar antes o en el momento de suministro para proporcionar una forma de dosificación unitaria inyectable. Preferiblemente, el excipiente farmacéuticamente aceptable utilizado en la presente invención es adecuado para una concentración de medicamento elevada, puede mantener fluidez adecuada, y, si es necesario, puede retrasar la absorción. La selección de una vía de administración óptima de las composiciones farmacéuticas estará alterada por varios factores que incluyen propiedades fisicoquímicas de las moléculas activas dentro de las composiciones, la urgencia de la situación clínica y la relación de las concentraciones plasmáticas de las moléculas activas al efecto terapéutico deseado. Por ejemplo, si es necesario, las moléculas de unión de la invención se pueden preparar con portadores que las protegerán contra una liberación rápida, tal como una formulación de liberación controlada que incluye implantes, parches transdérmicos y sistemas de suministro microencapsulados . Los polímeros biocompatibles y biodegradables pueden ser utilizados también, por ejemplo, tales como vinilacetato de etileno, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres y ácido poliláctico. Además, puede ser necesario recubrir las moléculas de unión con, o administrar de manera conjunta las moléculas de unión con un material o compuesto que evite la inactivación de las moléculas de unión humanas. Por ejemplo, las moléculas de unión se pueden administrar a un sujeto en un portador apropiado, por ejemplo liposomas o un diluyente. Las vías de administración se pueden dividir en dos categorías principales, administración oral y parenteral. La vía de administración preferida es intravenosa o por inhalación. Se pueden formular formas de dosificación orales, por ejemplo, como comprimidos (tabletas) , trociscos, grageas, suspensiones acuosas u oleosas, polvos dispersables o gránulos, emulsiones , cápsulas duras, cápsulas de gelatina suave, jarabes o elíxires, pildoras, grageas, líquidos, geles o suspensiones. Estas formulaciones pueden contener excipientes farmacéuticos que incluyen pero que no se limitan a diluyentes inertes, agentes granulantes y desintegrantes, agentes de unión, agentes lubricantes, conservadores, agentes colorantes, saborizantes o edulcorantes, aceites vegetales o minerales, agentes humectantes y agentes espesantes. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención también se pueden formular para administración parenteral. Las formulaciones para administración parenteral pueden estar en forma, por ejemplo de soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas isotónicas estériles no tóxicas para inyección o infusión. Las soluciones o suspensiones pueden comprender agentes que son no tóxicos para quien las recibe a las dosificaciones y concentraciones utilizadas tales como 1, 3-butanodiol, solución de Ringer, solución de Hank, solución isotónica de cloruro de sodio, aceites, ácidos grasos, agentes anestésicos locales, conservadores, amortiguadores, agentes que incrementan la viscosidad o solubilidad, antioxidantes hidrosolubles, antioxidantes liposolubles y agentes quelantes de metal. En un aspecto adicional, las moléculas de unión tales como los anticuerpos monoclonales humanos (fragmentos funcionales y variantes de los mismos) inmunoconj ugados , composiciones o composiciones farmacéuticas de la invención se pueden utilizar como un medicamento. Asi, un método de tratamiento y/o prevención de una infección de virus de influenza H5N1 utilizando las moléculas de unión, inmunoconjugados, composiciones o composiciones farmacéuticas de la invención es otra parte de la presente invención. Las moléculas mencionadas en lo anterior se pueden utilizar, por ejemplo, en el diagnóstico, profilaxis, tratamiento o combinación de los mismos de una infección por virus de influenza H5N1. Son adecuadas para tratamiento de pacientes aún no tratados quienes padecen de una infección por virus de influenza H5N1 y pacientes quienes han sido o son tratados de alguna infección de virus de influenza H5N1. Se pueden utilizar para pacientes tales como personas del ámbito de sanidad y cuidado de la salud, parientes o sujetos infectados, granjeros (que trabajan con aves de corral), etc. Las moléculas o composiciones mencionadas en lo anterior se pueden utilizar junto con otras moléculas útiles en diagnóstico, profilaxis y/o tratamiento. Se pueden utilizar in vitro, ex vivo o in vivo. Por ejemplo, las moléculas de unión tales como los anticuerpos monoclonales humanos (o variantes funcionales de los mismos) , inmunoconjugados, composiciones o composiciones farmacéuticas de la invención se pueden administrar de manera conjunta con una vacuna contra el virus de influenza H5N1 (en caso de que esté disponible) . De manera alternativa, la vacuna también se puede administrar antes o después de la administración de las moléculas de la invención. En vez de una vacuna también se pueden utilizar agentes antivirales junto con moléculas de unión de la presente invención. Los agentes antivirales adecuados se mencionan en lo anterior. Las moléculas típicamente se formulan en las composiciones y composiciones farmacéuticas de la invención en una cantidad terapéutica o diagnósticamente eficaz. De manera alternativa, se pueden formular y administrar por separado. Por ejemplo, se pueden aplicar de manera sistemática otras moléculas tales como agentes antivirales mientras las moléculas de unión de la invención se pueden aplicar por vía intravenosa. Los regímenes de dosificación se pueden ajustar para proporcionar la respuesta deseada óptima (por ejemplo, una respuesta terapéutica) . Un intervalo de dosificación adecuado puede ser, por ejemplo 0.1-100 mg/kg de peso corporal, preferiblemente 0.5-15 mg/kg de peso corporal. Además, por ejemplo, se puede administrar un bolo único, se pueden administrar con el transcurrir del tiempo varias dosis divididas o la dosis se pueda reducir o aumentar de manera proporcional, según lo establezcan las exigencias de la situación terapéutica. Las moléculas y composiciones de acuerdo con la presente invención preferiblemente son estériles. Se conocen bien en la técnica los métodos para volver estériles a estas moléculas y composiciones. Las otras moléculas útiles en diagnóstico, profilaxis y/o tratamiento se pueden administrar en un régimen de dosificación similar como se propone para las moléculas de unión de la invención. Si se administran otras moléculas por separado, se pueden administrar a un paciente antes (por ejemplo 2 min, 5 min, 10 min, , 15 min, 30 min, 45 min, 60 min, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 8 horas, 10 horas, 12 horas, 14 horas, 16 horas, 18 horas, 20 horas, 22 horas, 24 horas, 2 días, 3 días, 4 días, 5 días, 7 días, 2 semanas, 4 semanas, 6 semanas antes) , de manera concomitante o posterior (por ejemplo 2 min, 5 min, 10 min, , 15 min, 30 min, 45 min, 60 min, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 8 horas, 10 horas, 12 horas, 14 horas, 16 horas, 18 horas, 20 horas, 22 horas, 24 horas, 2 días, 3 días, 4 días, 5 días, 7 días, 2 semanas, 4 semanas, 6 semanas después) de la administración de una o más moléculas de unión humanas o composiciones farmacéuticas de la invención. El régimen de dosificación exacto habitualmente se descarta utilizando ensayos clínicos en pacientes humanos. Las moléculas de unión humanas y las composiciones farmacéuticas que comprenden a las moléculas de unión humanas son particularmente útiles y con frecuencia se prefieren, cuando van a ser administradas a seres humanos como agentes terapéuticos in vivo, dado que la respuesta inmunitaria del receptor al anticuerpo administrado con frecuencia será sustancialmente menor que la ocasionada por administración de una molécula de unión monoclonal murina, quimérica o humanizada . En otro aspecto, la invención se relaciona con el uso de moléculas de unión tales como anticuerpos monoclonales humanos neutralizantes (fragmentos funcionales y variantes del mismo) , inmunoconjugados, moléculas de ácido nucleico, composiciones o composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención en la preparación de un medicamento para el diagnóstico, profilaxis, tratamiento o combinación de los mismos de una infección por virus de influenza H5N1. Después de esto, también son parte de la presente invención kits que comprenden por lo menos una molécula de unión tal como un anticuerpo monoclonal humano neutralizante (fragmentos funcionales y variantes de los mismos) , por lo menos un inmunoconjugado, por lo menos una molécula de ácido nucleico, por lo menos una composición, por lo menos una composición farmacéutica, por lo menos un vector, por lo menos un hospedador de acuerdo con la invención o una combinación de los mismos. De manera opcional, los componentes descritos en lo anterior de los kits de la invención se empacan en recipientes adecuados y se marcan para diagnóstico, profilaxis y/o tratamiento de las condiciones indicadas. Los componentes mencionados en lo anterior se pueden almacenar en recipientes unitarios o de dosis múltiples tales como una solución acuosa, preferiblemente estéril o como una formulación liofilizada, preferiblemente estéril, para dilución o reconstitución. Los recipientes se pueden fabricar en una diversidad de materiales tales como vidrio o plástico y pueden tener un orificio de acceso estéril (por ejemplo, el recipiente puede ser una bolsa de solución intravenosa o un frasco que tenga un tapón susceptible de ser perforado por una aguja para inyección hipodérmica) . El kit puede comprender además recipientes adicionales que comprenden un ' amortiguador farmacéuticamente aceptable. Puede incluir además otros materiales deseables desde un punto de vista comercial o de comodidad para el usuario que incluyen otros amortiguadores, diluyentes, filtros, agujas, jeringas, medio de cultivo para uno o más hospedadores adecuados y, posiblemente incluso por lo menos un agente terapéutico profiláctico o de diagnóstico. Asociado con los kits pueden existir instrucciones incluidas habitualmente en paquetes comerciales de productos terapéuticos, profilácticos o de diagnóstico que contienen información acerca, por ejemplo, de las indicaciones, uso, dosificación, fabricación, administración, contraindicaciones y/o advertencias respecto al uso de dichos productos terapéuticos, profilácticos o de diagnóstico. La invención se relaciona adicionalmente con un método para detectar virus de influenza H5N1 en una muestra, en donde el método comprende las etapas de (a) poner en contacto una muestra con una cantidad diagnósticamente eficaz de una molécula de unión (fragmentos funcionales y variantes de los mismos) o un inmunoconjugado de acuerdo con la invención, y (b) determinar si la molécula de unión o inmunoconjugado se une específicamente a una molécula de la muestra. La muestra puede ser una muestra biológica que incluye, pero que no se limita a sangre, suero, heces, esputo, aspirado nasofaríngeos, lavados bronquiales, orina, tejido u otro material biológico de sujetos (potencialmente) infectados, o una muestra no biológica tal como agua, una bebida, etc. Los sujetos (potencialmente) infectados pueden ser sujetos humanos pero también animales que se sospecha que son portadores de virus de influenza H5N1 se pueden probar para determinar la presencia de virus utilizando las moléculas de unión humanas o los inmunoconjugados de la invención. La muestra se puede manipular primero para adecuarla para el método de detección. La manipulación significa, por ejemplo, tratar la muestra sospechosa de contener y/o que contiene el virus de un modo tal que el virus se desintegrará en los componentes antigénicos tales como proteínas, (poli ) péptidos u otros fragmentos antigénicos. Preferiblemente, las moléculas de unión humanas o inmunoconjugados de la invención se ponen en contacto con la muestra bajo condiciones las cuales permiten la formación de un complejo inmunológico entre las moléculas de unión humanas y el virus o los componentes antigénicos del mismo que puedan estar presentes en la muestra. La formación de un complejo inmunológico, en caso de que exista, indican la presencia del virus en la muestra y después se detectan y miden por medios adecuados. Dichos métodos incluyen, por ejemplo, inmunoanálisis de unión homogéneos y heterogéneos tales como radioinmunoanálisis (RIA) , ELISA, inmunoflúorescencía, inmunohistoquímica, FACS, BIACORE y análisis de transferencia Western. La técnica de análisis preferidas, especialmente para un cribado clínico a gran escala de sueros y sangre de pacientes así como productos derivados de sangre son las técnicas de ELISA y transferencia Western. Se prefieren particularmente pruebas de ELISA. Para uso como reactivos en estos análisis, las moléculas de unión o inmunoconjugados de la invención se unen convenientemente a la superficie interior de los pozos de microtitulación . Las moléculas de unión o inmunoconjugados de la invención se pueden unir directamente al pozo de microtitulación. No obstante, la unión máxima de las moléculas de unión o inmunoconjugados de la invención a los pozos se puede llevar a cabo por tratamiento previo de los pozos con polilisina antes de la adición de las moléculas de unión o inmunoconjugados de la invención. Además, las moléculas de unión o inmunoconjugados de la invención se pueden unir covalentemente por medios conocidos a los pozos. Generalmente, las moléculas de unión o inmunoconjugados se utilizan entre 0.01 y 100 pg/ml de recubrimiento aunque también se pueden utilizar cantidades mayores así como menores. Las muestras después se agregan a ios pozos recubiertos con las moléculas de unión o inmunoconjugados de la invención. Además, la moléculas de unión de la invención se pueden utilizar para identificar estructuras de unión especificas de virus de influenza H5M1. Las estructuras de unión pueden ser epitopos sobre proteínas y/o polipéptidos . Pueden ser lineales, pero también estructurales y/o conformacionales . En una modalidad, las estructuras de unión se pueden analizar por medio de análisis PEPSCAN (véase, por ejemplo, WO 84/03564, WO 93/09872, Slootstra et al., 1996). De manera alternativa, una biblioteca peptídica aleatoria que comprende los péptidos de una proteína de virus de influenza H5N1 se puede cribar para 'péptidos capaces de unirse a las moléculas de unión de la invención. Las estructuras/péptidos/epítopos de unión se pueden utilizar como vacunas y para el diagnóstico de infecciones por virus de influenza H5N1. En caso de que fragmentos diferentes a proteínas y/o polipéptidos estén unidos por las moléculas de unión, las estructuras de unión se pueden identificar por espectrometría de masas, cromatografía líquida de alta resolución y resonancia magnética nuclear. En un aspecto adicional, la invención proporciona un método de cribado de una molécula de unión (o un fragmento funcional o variante del mismo) para unión específica del mismo epítopo de virus de influenza H5N1 , como el epítopo unido por una molécula de unión humana de la invención, en donde el método comprende las etapas de (a) poner en contacto una molécula de unión que se va a cribar, una molécula de unión de la invención y virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo, (b) medir si la molécula de unión que se va a cribar es capaz de competir por unión especifica a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo con la molécula de unión de la invención. En una etapa adicional se puede determinar si las moléculas de unión cribadas que son capaces de competir por unión especifica a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo tienen actividad neutralizante. Una molécula de unión que es capaz de competir por unión especifica a virus de influenza H5N1 o un fragmento del mismo con la molécula de unión de la invención es otra parte de la presente invención. En el método de cribado descrito en lo anterior, el término "unión especifica al mismo epitopo" también contempla unión especifica a sustancialmente o esencialmente el mismo epitopo como el epitopo unido por la molécula de unión de la invención. La capacidad de bloquear o competir por la unión de las moléculas de unión de la invención a virus de influenza H5N1 típicamente indica que la molécula de unión que se va a cribar se une a un epitopo o sitios de unión en el virus de influenza H5N1 que se superpone estructuralmente con el sitio de unión en el virus de influenza H5N1 que es reconocido inmunoespecífreamente por las moléculas de unión de la invención. De manera alternativa, esto puede indicar que la molécula de unión que se va a cribar se une a un epitopo o sitio de unión el cual se encuentra suficientemente cerca del sitio de unión reconocido inmunoespecificamente por las moléculas de unión de la invención para inhibir esféricamente o de alguna otra manera la unión de las moléculas de unión de la invención al virus de influenza H5N1. En general, la inhibición competitiva se mide por medio de un análisis, en donde la composición de antigeno, es decir, una composición que comprende virus de influenza H5N1 o fragmentos de los mismos se mezclan con moléculas de unión de referencia, es decir, las moléculas de unión de la invención y las moléculas de unión que se van a cribar. Habitualmente, las moléculas de unión que se van a cribar están presentes en exceso. Los procedimientos basados en las pruebas de ELISA y transferencia Western son adecuadas para uso en dichos estudios de competencia sencillos. Mediante la utilización de anticuerpos secundarios a especie o isotipo se tiene la capacidad para detectar únicamente las moléculas de unión de referencia unidas, cuya unión se reducirá por la presencia de la molécula de unión que se va a cribar que reconoce sustancialmente el mismo epitopo. Al llevar a cabo un estudio de competencia de moléculas de unión entre una molécula de unión de referencia y cualquier molécula de unión que se va a cribar (sin importar la especie o el isotipo) , uno puede marcar primero la molécula de unión de referencia con una marca detectable, tal como, por ejemplo, biotina, una marca enzimática, radioactiva o de otro tipo para habilitar la identificación subsecuente. Las moléculas de unión identificadas por los análisis de competencia ("moléculas de unión competitivas" o "moléculas de unión de reacción cruzada") incluyen, pero no se limitan a anticuerpos, fragmentos de anticuerpos y otros agentes de unión que se unen a un epitopo o sitio de unión unido por la molécula de unión de referencia, es decir, que se encuentran en una molécula de unión de la invención asi como anticuerpos, fragmentos de anticuerpo y otros agentes de unión que se unen a un epitopo o sitios de unión con proximidad suficiente a un epitopo unido por la molécula de unión de referencia para unión competitiva entre las moléculas de unión que se van a cribar y la molécula de unión de referencia. Preferiblemente, las moléculas de unión competitivas de la invención, cuando están presentes en exceso, inhibirán la unión especifica de una molécula de unión de referencia a una especie objetivo seleccionada por al menos 10%, preferiblemente por al menos 25%, de manera más preferible por al menos 50% y de manera mucho más preferible por al menos 75%-90% o incluso más. La identificación de una o más moléculas de unión competitiva que se unen aproximadamente, de manera sustancial o esencialmente en el mismo epitopo que las moléculas de unión de la invención es una materia técnica directa. Dado que la identificación de moléculas de unión competitivas se determina en comparación con una molécula de unión de referencia, es decir, una molécula de unión de la invención, se entenderá que la determinación real del epitopo al cual la molécula de unión de referencia y la molécula de unión competitiva se unen de ninguna manera se requiere con el fin de identificar una molécula de unión competitiva que se une al mismo o sustancialmente el mismo epitopo que la molécula de unión de referencia. EJEMPLOS Para ilustrar la invención se proporcionan los siguientes ejemplos. Los ejemplos no se pretende que limiten el alcance de la invención de manera alguna. Ejemplo 1 Construcción de bibliotecas de presentación de fago scFv utilizando ARN extraído de linfocitos B de memoria Se recolecta sangre periférica de donadores sanos normales por punción venosa en tubos de muestra anticoagulación con EDTA. Se diluyen 45 mi de muestra de sangre dos veces con PBS y las alícuotas se colocan en la parte inferior de 30 mi con 10 mi de Ficoll-Hypaque (Pharmacia) y se centrifuga a 900 x g durante 20 min a temperatura ambiente, sin interrupciones. El sobrenadante se retira con cuidado justo por encima de la capa blanca que contiene la fracción linfocitica y trombocitica . Después, esta capa se retira con cuidado (aproximadamente 10 mi) , se transfiere a un tubo nuevo de 50 mi y se lava tres veces con 40 mi de PBS y se centrifuga a 400 x g durante 10 min a temperatura ambiente para eliminar trombocitos. El sedimento que se obtiene contiene linfocitos y se resuspende en medio RPMI que contiene FBS 2% y se determina el número de células por conteo celular. Se tiñen aproximadamente 1 x 108 linfocitos para clasificación fluorescente de células utilizando CD24, CD27 e IgM de superficie como marcadores para el aislamiento de linfocitos B de memoria de IgM. Se utiliza un aparato Becton Dickinson Digital Vantage ajustado en modo de rendimiento para la clasificación y aislamiento de linfocitos B de memoria física. Los linfocitos se distribuyen como una población compacta pequeña del intervalo FSC/SSC. Los linfocitos B de memoria (CD24+/CD27+) posteriormente se separan de los linfocitos B previamente no expuestos (CD24+/CD27-) y los linfocitos T de memoria (CD24-/CD27+) . En la siguiente etapa se separan los linfocitos B de memoria IgM (IgM+) de los linfocitos B de memoria inactivados (IgM-) utilizando la expresión IgM. En esta etapa, los linfocitos B de memoria IgM se clasifican en un tubo de muestra separado. Se recolectan 1 x 105 células en DMEM/FBS 50% y después de completar la clasificación se centrifugan a 400 x g durante 10 min y se lisan en 500 µ? de una solución de extracción de ARN total TRIZOL (Invitrogen) . El ARN se extrae de la solución de lisis utilizando 200 µ? de cloroformo y precipitación con isopropanol como se indica en el protocolo de solución TRIZOL. Después se aplica 1 µ? de Pellet Paint (Novogen) para incrementar y visualizar el procedimiento de sedimentación. La preparación completa de ARN se disuelve en 23 µ? de agua ultrapura tratada con DEPC (Invitrogen) y se utiliza para conversión de ADNc con transcriptasa inversa SuperScript III Reverse Transcriptase (Invitrogen) . Se agregan 1 µ? de hexámeros aleatorios (500 ng/µ?) (Promega) a la muestra de ARN y se mezcla y se funde a 65°C durante 5 min en una máquina de PCR con tapa calentada. La muestra se enfria de manera instantánea en hielo húmedo y se agregan los siguientes componentes: 8 µ? de amortiguador RT 5X (Tris-HCl 250 mM, pH 8.3, KC1 375 mM, gCl2 15 mM) , 2 µ? de dNTP (10 mM de cada uno) (Invitrogen) , 2 µ? de DTT (100 mM) , 2 µ? de inhibidor de ribonucleasa (40 ?/µ?) (Promega) , 2 µ? de SuperScript III (200 U/µ?) (Invitrogen) . La mezcla que se obtiene primero se incuba durante 5 min a temperatura ambiente y después se transfiere a una máquina de PCR de tapa calentada a 50 °C durante una hora. La reacción se detiene al calentar a 75 °C durante 15 min. El ADNc que se obtiene se diluye a 200 µ? con agua ultrapura y se almacena a -20°C hasta uso posterior. se aplica un enfoque de amplificación de dos rondas de PCR utilizando los conjuntos de cebadores que se muestran en las Tablas 1 y 2 para aislar las regiones VH y VL de inmunoglobulina del repertorio del donador respectivo. La formulación de PCR para amplificación utilizada durante el procedimiento es la siguiente: 5 µ? de plantilla de ADNc, 32.75 µ? de agua ultrapura, 2.5 µ? de cada cebador (10 µ?) , 5 µ? de amortiguador PCR 10X (Tris-HCl 200 mM, pH 8.4, KC1 500 mM) , 1.5 µ? de MgCl2 (50 mM) , 0.5 µ? de dNTP (25 mM de cada uno), 0.25 µ? de polimerasa Taq (5 U/µ?) (Invitrogen) . La primera ronda de amplificación sobre el ADNc respectivo utilizando los conjuntos de cebador mencionados en la Tabla 1 proporciona 7, 6 y 9 productos de aproximadamente 650 pares de bases para las regiones respectivas VH, VK y ??. Para la amplificación de la región VH de los linfocitos B de memoria IgM, se utiliza el cebador constante OCM en combinación con OHl a OH7. El programa de ciclo térmico para la primera ronda de amplificaciones es: 2 min, 96°C (etapa de desnaturalización) , 30 ciclos de 30 seg a 96°C/30 seg a 55°C/60 seg a 72°C, 10 min a 72°C de elongación final y refrigeración a 4°C. Los productos se cargan y se aislan de un gel de agarosa 1% utilizando columnas de extracción en gel (Qiagen) y se eluyen en 50 µ? de Tris-HCl 1 mM, pH 8.0. 10% de los productos de la primera ronda (5 µ?) se someten a la amplificación de la segunda ronda utilizando los cebadores mencionados en la Tabla 2. Estos cebadores se extienden con sitios de restricción habilitando la clonación direccional en las regiones respectivas VL y VH en el vector de presentación de fago PDV-C06. El programa PCR para las amplificaciones de la segunda ronda es la siguiente: 2 min a 96°C (etapa de desnaturalización) , 30 ciclos de 30 seg a 96°C/30 seg a 60°C/60 seg a 72°C, 10 min de elongación final a 72°C y refrigeración a 4 °C . Los productos de la segunda ronda (aproximadamente 350 pares de bases) se acumulan primero de acuerdo con la presentación natural de segmentos J encontrados en productos de gen de inmunoglobulina, lo que resulta en los acumulados 7, 6 y 9 para, respectivamente, las regiones variables VH, VK y ?? (véanse las Tablas 3 y 4) . Para obtener una distribución normalizada de secuencias de inmunoglobulina en la biblioteca inmunitaria los 6 acumulados de cadena ligera VK y 9 ?? se mezclaron de acuerdo con los porcentajes mencionados en la Tabla 3. Este primer acumulado VL final único (3 g) se digiere durante la noche con enzimas de restricción Salí y Notl, se carga y aisla de un gel de agarosa 1.5% (aproximadamente 350 pares de bases) utilizando columnas de gel-extracción Qiagen y se liga en un vector PDV-C06 cortado con Sall-Notl (aproximadamente 5000 pares de bases) como sigue: 10 µ? de vector PDV-C06 (50 ng/µ?) , 7 µ? de inserto VL (10 ng/µ?) , 5 µ? de amortiguador de ligación 10X (NEB), 2.5 de ADN ligasa T4 (400 U/µ?) ( EB) , 25.5 µ? de agua ultrapura (la proporción de vector respecto a inserto es 1:2) . La ligación se realiza durante la noche en baño maria a 16°C . Después el volumen se duplica con agua, se extrae con un volumen igual de fenol-cloroformo-alcohol isoamilico (75:24:1) (Invitrogen) seguido por extracción con cloroformo (Merck) y se precipita con 1 µ? de Pellet Paint (Novogen) , 10 µ? de acetato de sodio (3 M, pH 5.0) y 100 µ? de isopropanol durante 2 horas a -20 °C. La muestra que se obtiene posteriormente se centrifuga a 20, OOOxg durante 30 min a 4 °C . El precipitado que se obtiene se lava con etanol 70% se centrifuga durante 10 min a 20, OOOxg temperatura ambiente. Se extrae el etanol por aspiración al vacio y el sedimento se seca al aire durante varios minutos y después se disuelve en 50 µ? de amortiguador que contiene Tris-HCl 50 mM, pH 8.0. Se utiliza 1 µ? de mezcla de ligación para la transformación de 40 µ? de células electrocompetentes TG-1 (Stratagene) en una cubeta de electroporación de 0.1 cm enfriada (Biorad) utilizando un aparato Genepulser II (Biorad) ajustado a 1.7 kV, 200 Ohmios, 25 iF (tiempo constante de aproximadamente 4.5 mseg) . Directamente después del pulso las bacterias se descargan de la cubeta con 1000 µ? de medio SOC (Invitrogen) que contiene glucosa 5% (p/v) (Sigma) a 37 °C y se transfiere a un tubo de cultivo de fondo redondo de 15 mi. Se utilizan otros 500 µ? de SOC/glucosa para descargar bacterias residuales de la cubeta y se agregan al tubo de cultivo. Las bacterias se recuperan por cultivo durante exactamente 1 h a 37 °C en un incubador con agitador a 220 rpm. Las bacterias transformadas se siembran en placa sobre cajas de Petri grandes, de 240 mm cuadrados (NUNC) que contienen 200 mi de agar 2TY (16 g/1 de bacto-triptona, 10 g/1 de extracto bacto-levadura, 5 g/1 de NaCl, 15 g/1 de agar, pH 7.0) suplementado con 50 g/ml de ampicilina y glucosa 5% (p/v) (Sigma) . Una dilución 1 a 1000 se siembra en placas para propósitos de conteo en cajas de Petri de 15 cm que contiene el mismo medio. Este procedimiento de transformación se repite secuencialmente 20 veces y la biblioteca completa se siembra en placas sobre un total de 30 cajas de Petri cuadradas y se hace crecer durante la noche en un horno de cultivo a 37 °C . Típicamente se obtienen aproximadamente 1 x 107 ÜFC (unidades formadoras de colonias) utilizando el procedimiento anterior. La biblioteca de la cadena ligera VL intermedia se cosecha de las placas mediante un ligero raspado de las bacterias en 10 mi de medio 2TY por placa. Se determina la masa celular por medición de D060o y dos veces D05oo de bacterias se utilizan para preparación de ADN de plásmido máximo utilizando dos columnas P500 maxiprep (Qiagen) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. De manera análoga a las regiones variables VL, los productos de la segunda ronda VH-JH se mezclan primero juntos para obtener la distribución de uso de segmento J normal (véase Tabla 4), lo que resulta en siete subacumulados de VH denominados PHl a PH7. Los acumulados se mezclan para adquirir una distribución de secuencia normalizada utilizando los porcentajes mostrados en la Tabla 4, obteniendo una fracción VH que se digiere con enzimas de restricción Sfil y Xhol y se ligan en la biblioteca intermedia PDV-VL cortada con Sfil-Xhol que se obtiene como se describe en lo anterior. El establecimiento de ligación, el método de purificación y la transformación subsecuente de TG1 y la cosecha de bacterias es exactamente como se describe para la biblioteca intermedia VL (véase antes) . Se verifica la biblioteca final (aproximadamente 5 x 106 ufe) para frecuencia de inserto con una PCR de colonia utilizando un cebador establecido franqueando las regiones VH-VL insertadas. Más de 95% de las colonias muestran un inserto de longitud correcta (véase la Tabla 5) . Se utilizan los productos PCR de colonia para subsecuente análisis de secuencia de ADN para verificar la variación de secuencia y para tener acceso al porcentaje de colonias que muestran un ORF (marco de lectura abierto) completo. Esto típicamente es por encima de 70% (véase la Tabla 5) . La frecuencia de mutaciones en los genes V también se analizó. De 50 secuencias, 47 (94%) no están en la configuración de línea germinal indicativo de un procedimiento de maduración y concordante con el fenotipo de memoria de los linfocitos B utilizados como fuente de ARN para la biblioteca. Finalmente, la biblioteca se rescata y amplifica mediante la utilización de fagos cooperadores (helper) CT (véase WO 02/103012) y se utilizan para selección de anticuerpo de fago por métodos de detección sistemática (panning) como se describe en lo siguiente. Ejemplo 2 Selección de fagos que presentan fragmentos Fv de cadena sencilla contra H5N1 Se seleccionan fragmentos de anticuerpo utilizando bibliotecas de presentación de fago de anticuerpo construidas esencialmente como se describe en lo anterior y la tecnología de presentación de fago general así como la tecnología MABSTRACTMR esencialmente como se describe en la patente de E.U.A. No. 6,265,150 y en el documento WO 98/15833 (ambas incorporadas como referencia en la presente) . Además, los métodos y los fagos cooperadores como se describe en WO 02/103012 (la cual se incorpora como referencia en la presente) se utiliza en la presente invención. Se realiza la selección contra la hemaglutinina (HA) recombinante subtipo H5 (A/Vientam/1203/2004 ; véase la SEC ID NO: 110) producida utilizando vectores de baculovirus en células de insecto (Protein Sciences, CT, USA) . La secuencia de aminoácidos de HA del aislado A/Vientam/1194/2004 (H5N1TV) y la secuencia de aminoácidos de consenso que representa las HA de las cepas aisladas en Indonesia y China (H5N1IC) se muestran en la SEC ID NO: 111 y SEC ID NO: 112, respectivamente. Las selecciones también se realizan contra HA recombinante soluble (HAs) a partir de H5N1. La secuencia que codifica para la parte extracelular (soluble) de HA (HAs) del aislado A/Vientam/1194/2004 (H5N1) , que representa las HA identificadas en cepas de influenza aisladas en Tailandia y Vietnam (HAs de H5N1TV, SEC ID NO: 113) en 2004 (linea 1) y una secuencia de consenso que representa las partes solubles de las HA de H5N1 cepas aisladas en Indonesia y China (HAs de H5N1IC, SEC ID NO: 114) en 2003/2004 (linea 2) se clonan en un vector de expresión que contiene etiqueta myc y his utilizando técnicas de clonación de ADN convencionales. Las HA de H5N1TV y H5N1IC difieren en 9 posiciones de aminoácidos, todos localizadas en la subunidad HAl de las moléculas. Las transfecciones de ADN se realiza en células PER.C6 para expresión transitoria y/o estable utilizando técnicas convencionales. Se purifica HAs del sobrenadante de cultivo utilizando cromatografía de afinidad de quelato de metal utilizando columnas HisTrapMR FF (Amersham Biosciences) de acuerdo con las instrucciones de los fabricantes. Los antigenos HA (HA recombinante y HAs de H5N1TV) se diluyen en PBS (5.0 g/ml ) , agregado a tubos MaxiSorpMR Nunc-Immuno Tubes (Nunc) y se incuba durante la noche a 4°C en una rueda giratoria. Los inmunotubos se vacian y se lavan tres veces en amortiguador de bloqueo (leche seca sin grasa 2% (ELK) en PBS) . Posteriormente, los inmunotubos se llenan completamente con amortiguador de bloque y se incuban durante 1-2 h a temperatura ambiente. Además, los inmunotubos se recubren durante la noche con anticuerpo anti-myc y se incuban con amortiguador de bloqueo que contiene 5 g/ l de HAs etiquetado con myc de H5N1TV. Las alícuotas de la biblioteca de presentación de fago acumuladas (500-1000 µ?, 0.5 x 1013 - 1 x 1013 ufe se amplificaron utilizando el fago cooperador CT (véase WO 02/103012) ) y se bloquean en amortiguador de bloqueo suplementado con suero bovino fetal no inactivado con calor 10% y suero de ratón 2% durante 1-2 h a temperatura ambiente. La biblioteca de fago bloqueado se agrega a los inmunotubos, se incuba durante 2 h a temperatura ambiente y se lava con amortiguador de lavado (tween-20 0.05% (v/v) en PBS) para retirar los fagos no unidos. Los fagos unidos se eluyen del antígeno respectivo por incubación con 1 mi de trietilamina (TEA) 100 mM durante 10 min a temperatura ambiente. Subsecuentemente, los fagos eluidos se mezclaron con 0.5 mi de Tris-HCl 1 M, pH 7.5, para neutralizar el Ph. Esta mezcla se utiliza para infectar 5 mi de un cultivo XLl-Blue de E. coli que ha crecido a 37 °C hasta una DO de 600 nm de aproximadamente 0.3. Se permite que los fagos infecten las bacterias XLl-Blue durante 30 min a 37 °C. Después, la mezcla se centrifuga durante 10 min a 3000xg a temperatura ambiente y el sedimento bacteriano se resuspende en 0.5 mi de medio de extracto de levadura 2-triptona (2TY) . La suspensión bacteriana que se obtiene se divide sobre dos placas de agar 2TY suplementadas con tetraciclina, ampicilina y glucosa. Después de incubación durante la noche de las placas a 37 °C se raspan las colonias de las placas y se utilizan para preparar una biblioteca de fago enriquecida, esencialmente como se describe por De Kruif et al. (1995a) y WO 02/103012. Brevemente, las bacterias raspadas se utilizan para inocular medio 2TY que contiene ampicilina, tetraciclina y glucosa y se hace crecer a una tempeartura de 37 °C hasta una DO a 600 nm de aproximadamente 0.3. Se agregan fagos cooperadores CT y se permite que infecten a las bacterias después de lo cual se cambia el medio a 2TY que contiene ampicilina, tetraciclina y canamicina. Se continúa la incubación durante la noche a 30 °C. Al dia siguiente se retiran las bacterias del medio 2TY por centrifugación después de lo cual los fagos en el medio se precipitan utilizando polietilenglicol (PEG) 6000/NaCl. Finalmente, los fagos se disuelven en 2 mi de PBS con albúmina sérica bovina (BSA, por sus siglas en inglés) 1%, se esteriliza por filtración y se utiliza para la siguiente ronda de selección. De manera alternativa, las selecciones de fago utilizando lineas de células que expresan HA de longitud completa se llevaron a cabo. Para este fin, se utilizaron vectores de expresión que contienen la secuencia codificante completa de HA de longitud completa a partir de aislado A/Vientam/1194/2004 (H5N1TV) y una secuencia de consenso que representa las HA de longitud completa de las cepas H5N1 aisladas de Indonesia y China (H5N1IC) para transfectar células PER.C6. Se realizó análisis de citometria de flujo utilizando anticuerpo anti-HA en paralelo con cada selección de fago para asegurar la expresión de HA por expresión por células PER.C6 transfectadas con H5N1TV o con H5N1IC (datos no mostrados). Se resuspenden 10 x 106 células PER.C6 no transfectadas en 0.5 mi de biblioteca de fago acumulada y 0.5 mi de medio de cultivo para PER.C6 suplementado con ELK 4% y se incuba durante 1 h en un rotor de extremo sobre extremo ajustado a 5 rpm a 4°C. Después de 5 min de centrifugación a 300 x g a 4°C de la mezcla de biblioteca de fago/células PER.C6 no transfectadas , el sobrenadante que contiene los fagos se sustraen por una segunda vez con 10 x 106 células PER.C6 no transfectadas . La preparación del fago sustraído se mezcla subsecuentemente con 1 x 106 células PERC.C6 que expresan HA y se incuba durante 2 h en un rotor de extremo sobre extremo ajustado a 5 rpm a 4 °C . Posteriormente, las células se centrifugan durante 2 min a 3000 x g y el sedimento celular se resuspende en 1 mi de PBS/Tween-20 0.05% para eliminar por lavado cualquier fago no unido. Las células se centrifugan durante 2 min a 3000 x g y se repite el lavado 5 veces más. Después de cada lavado se transfiere las células a un tubo nuevo. Los fagos unidos se eluyen del antigeno por incubación con 1 mi de TEA 100 mM durante 10 min en un rotor de extremo sobre extremo ajustado a 5 rpm a temperatura ambiente. Las células se centrifugan durante 2 min a 3000 x g y los fagos eluidos se transfieren a un tubo de 50 mi que contiene 0.5 mi de Tris-HCl 1 M, pH 7.5. La recuperación y propagación de los fagos eluidos se realiza como se describe en lo anterior. Se realizan dos rondas de selección antes del aislamiento de anticuerpos de fago de cadena sencilla individuales. Después de la segunda ronda de selección se utilizan las colonias de E. coli individuales para preparar anticuerpos de fago monoclonal. Esencialmente, se hacen crecer colonias individuales a fase logarítmica en un formato de placa de 96 pozos y se infectan con fagos cooperadores VCS-M13 después de lo cual se permite que la producción de anticuerpo de fago se lleve a cabo durante la noche. Los sobrenadantes que contienen los anticuerpos de fago se utilizan directamente en ELISA para unión a antígenos HA. De manera alternativa, los anticuerpos de fago se precipitan con PEG/ aCl y se esterilizan por filtración para análisis de citometria de flujo. Ej emplo 3 Validación de los anticuerpos de fago de cadena única específicos para HA Los anticuerpos de fago de cadena sencilla seleccionados que se obtienen en el cribado descrito en lo anterior se validan en ELISA para especificidad, es decir, la unión a antigenos HA. Para este propósito baculovirus que expresa HA recombinante (Protein Sciences, CT, USA) y los HAs purificados de H5N1TV y H5N1IC se recubren en placas MaxisorpMR ELISA. El anticuerpo anti-myc mA 9E10 (Roche) se inmoviliza en placas MaxisorpMR ELISA como antigeno de control negativo. Después del recubrimiento las placas se lavan tres veces con PBS que contiene Tween-20 0.1% v/v y se bloquean en PBS que contiene BSA 3% o ELK 2% durante 1 h a temperatura ambiente. Los anticuerpos de fago de cadena sencilla seleccionados se incuban durante 1 h en un volumen igual de PBS que contiene ELK 4% para obtener anticuerpos de fago bloqueados. Las placas se vacian, se lavan tres veces con PBS/Tween-20 0.1% y se agregan los anticuerpos de fago de cadena sencilla bloqueados a los pozos. Se permite que la incubación se lleve a cabo durante 1 h, se lavan las placas con PBS/Tween-20 0.1% y se detectan los anticuerpos de fago unidos (utilizando medición de DO a 492 nm) utilizando un anticuerpo anti-M13 unido a peroxidasa. Como un control, se realiza el procedimiento simultáneamente sin anticuerpo de fago de cadena sencilla y con anticuerpo de fago de cadena sencilla de control negativo. A partir de las selecciones de los diferentes antigenos de HA con la biblioteca de linfocitos B de memoria IgM, se obtienen 92 anticuerpos de fago de cadena sencilla únicos específicos para HA recombinante o HAs . De manera alternativa, se prueba la reactividad de anticuerpos de cadena sencilla que fueron seleccionados para unión a células PER.C6 que expresan HA utilizando análisis de citometría de flujo. Los fagos precipitados por PEG/NaCl se mezclan con un volumen igual de PBS/ELK 2% bloqueados durante 30 min en hielo. Los fagos bloqueados se agregan a células sedimentadas (células PER.C6 no transfectadas y PER.C6 que expresan HA) y se incuban durante 1 h en hielo. Las células se lavan tres veces con PBS/BSA 1%, seguido por una centrifugación durante 1 minuto a 300 x g y unión de los anticuerpos de fago de cadena sencilla a las células lo cual se visualiza utilizando anticuerpo anti-Ml3 biotinado (Fitzgerald) seguido por conjugado de estreptavidina-ficoeritrina (Caltag) . Las selecciones utilizando células PER.C6 que expresan HA proporciona 24 anticuerpos de fago de cadena sencilla únicos que no se identificaron durante las selecciones utilizando las diferentes proteínas de HA recombinantes . Ejemplo 4 Caracterización de los scFv específicos para HA A partir de los anticuerpos de fago de cadena sencilla específicos seleccionados (scFv) , se obtiene ADN plasmídico de clones y se determinan las secuencias nucleotidicas y de aminoácidos de acuerdo con técnicas convencionales. La secuencia nucleotidica y de aminoácidos asi como la identidad del gen VH y VL (véase Tomlinson IM et al. V-BASE Sequence Directory. Cambridge United Kingdom: MRC Centre for Protein Engineering (1997)) de los scFv se muestra en la Tabla 6. Las regiones CDR de las inmunoglobulinas especificas para HA se muestran en la Tabla 7. Ejemplo 5 Construcción de moléculas de inmunoglobulina completamente humanas (anticuerpos monoclonales humanos) de los Fv de cadena sencilla seleccionados Las regiones variables de cadena pesada y ligera de los scFv se clonan directamente por digestión de restricción para expresión en los vectores de expresión de IgG pIg-C911-HCyl (véase la SEC ID NO: 141), pIG-C909-CK (véase la SEC ID NO: 142) o pIg-C910-C (véase la SEC ID NO: 143) . Las secuencias nucleotidicas para todas las construcciones se verifican de acuerdo con técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica. Las construcciones de expresión resultante que codifican para las cadenas pesada y ligera de IgGl humana se expresan de manera transitoria en combinación en células 293T y los sobrenadantes que contienen anticuerpos IgGl humanos se obtienen y producen utilizando procedimientos de purificación convencionales. Los anticuerpos IgGl humanos se utilizan en un intervalo de concentración de entre 10 y 0.003 µg p?l contra H5 (datos no mostrados) . Se incluye un anticuerpo especifico para SARS-CoV como un anticuerpo control. Las moléculas de IgGl muestran el mismo patrón de reactividad que el demostrado para los anticuerpos de fago de cadena sencilla. En la Tabla 8 se proporcionan las secuencias nucleotidicas y de aminoácidos de la cadena pesada y ligera de los anticuerpos denominados CR6141, CR6255, CR6257, CR6260, CR6261, CR6262, CR6268, CR6272, CR6296, CR6301, CR6307, CR6310, CR6314, CR6323, CR6325, CR6327, CR6328, CR6329, CR6331, CR6332, CR6334, CR6336, CR6339, CR6342, CR6343 y CR6344 asi como sus regiones variables de cadena pesada y ligera. Posteriormente se investigó la unión de IgG anti-HA a células PER.C6 que expresan HA, por citometria de flujo. El análisis de citometria de flujo para anticuerpo que se une a HA demuestra que los anticuerpos CR6255, CR6257, CR6260, CR6261, CR6262, CR6268, CR6307, CR6310, CR6314, CR6323, CR6325, CR6331 y CR6344 unidos a células PER.C6 que expresan HA (H5N1TV) (véase la Tabla 9) . Los anticuerpos CR6261 y CR6344 también mostraron unión a células control no transfectadas , pero las señales obtenidas son aproximadamente 10 veces menores que las señales que se obtienen para unión a células PER.C6 que expresan HA (H5N1TV) (véase la Tabla 9) . No se observó unión de anticuerpo control CR3014 a células que expresan HA y células control no transfectadas .
Ejemplo 6 Neutralización in vitro de virus de influenza H5N1 por IgG específicas para H5N1 (análisis de neutralización de virus) Con el fin de determinar si las IgG seleccionadas son capaces de bloquear la infección por H5N1, se realizaron análisis de neutralización de virus (VNA, por sus siglas en inglés) in vitro. Los VNA se realizaron en células MDCK (ATCC CCL-34) . Las células MDCK se cultivan en medio de cultivo de células MDCK (medio MEM suplementado con antibióticos, Hepes 20 mM y bicarbonato de sodio 0.15% (p/v) (medio MEM completo) suplementado con suero bovino fetal 10% (v/v) ) . La cepa de restauración H5N1 NIBRG-14, la cual se utilizó en el análisis se diluyó a un titulo de 4 x 103 TCID50/ml (50% de dosis infecciosa de cultivo de tejido por mi) con el titulo calculado de acuerdo con el método de Spearman y Karber. Las preparaciones de IgG (200 yg/ml) se diluyeron de manera seriada al doble (1:2 - 1:16) en medio MEM completo en pozos por duplicado. Se mezclaron 25 µ? de la dilución IgG respectiva con 25 µ? de suspensión de virus (100 TCID50/25 µ?) y se incubó durante 1 h a 37 °C . La suspensión después se transfirió por duplicado en placas de 96 pozos que contienen cultivo MDCK confluentes en 50 µ? de medio MEM completo. Antes de su uso, se sembraron las células MDCK a 3 x 104 células por pozo en medio de cultivo de células MDCK, se hicieron crecer hasta que las células alcanzaron confluencia, se lavaron con 300-350 µ? de PBS, pH 7.4 y finalmente se agregó a cada pozo 50 µ? de medio MEM completo. Las células inoculadas se cultivaron durante 3-4 días a 33°C y se observaron diariamente para el desarrollo de efecto citopático (CPE, por sus siglas en inglés) . Se comparó el CPE con el control positivo (células inoculadas por NIBRG-14) y controles negativos (células inoculadas en falso) . La ausencia completa de CPE en un cultivo de células individuales se define como protección. Se utilizó virus de influenza de borrego anti-A/Vientam/1194/04 H5N1 HA (04/214, NIBSC) como un control positivo en el análisis. Además, los cultivos se probaron para determinar la presencia de virus utilizando inmunohistoquimica . Para este fin, el sobrenadante de cultivo se desecha y las células se fijan con acetona 40% (v/v) y metanol 60% (v/v) durante 15 min. Las células fijas se bloquean durante 30 min a 37 °C en amortiguador de bloqueo (NaCl 200 mM, albúmina sérica bovina 0.2% (p/v) (BSA, por sus siglas en inglés), timerolsa 0.01%, Tween-20 0.2% (v/v), Tris-HCl 20 mM, pH 7.45) suplementado con BSA 2% (p/v) y suero de chivo 5% (v/v) . De manera subsecuente, las células se incuban durante 1 h a 37 °C con 50 µ? de una combinación de anticuerpo monoclonal antiinfluenza A (Chemicon) 1:1000 en amortiguador de lavado. Después de tres lavados con amortiguador de lavado, se agregan 50 µ? de IgG de chivo anti-ratón conjugado con biotina ( Jackson) diluido 1:1000 en amortiguador de lavado y se incuba durante 1 h a 37 °C. Después de tres lavados con amortiguador de lavado, se agregaron 50 µ? de conjugado de estreptavidina-peroxidasa (Calbiochem) diluido 1:3000 en amortiguador de lavado y se incuba durante 30 min a 37 °C. Después de otros tres lavados con amortiguador de lavado, se visualiza la tinción utilizando una solución de AEC (3-amino-9-etilcarbazol 0.12% (p/v) , N, N-dimetilformamida 30% (v/v) y amortiguador acetato 70% (v/v) ) que contiene una solución de 1 µ? de H202/1 mi de AEC. Después de tres lavados con amortiguador de lavado se analiza la tinción bajo un microscopio . Los anticuerpos humanos anti-HA denominados CR6255, CR6257, CR6260, CR6261, CR6262, CR6268, CR6307, CR6310, CR6314, CR6323, CR6325, CR6331 y CR6344 se sometieron al VNA descrito antes. Todos los anticuerpos neutralizaron NIBRG-14 de la cepa de restauración H5N1. Las concentraciones (en g/ml ) a las cuales estos anticuerpos protegen los cultivos de MDCK contra cpe se proporcionan en la Tabla 10. En los pozos en donde se observa CPE, se confirma la presencia de virus por tinción inmunohistoquimica (datos no mostrados) . Con el fin de determinar la potencia neutralizante de las IgG específicas para H5N1 con mayor precisión, se repitieron los análisis de neutralización de virus in vitro con NIBRG-14, pero esta vez las preparaciones de IgG se diluyeron aún más. Las preparaciones de IgG (200 g/ml) se diluyeron de manera seriada dos veces (1:1 - 1:512) en medio MEM completo y se probaron en pozos por cuadruplicado en VNA como se describe en lo anterior. La potencia neutralizante de los anticuerpos anti-H5Nl humanos denominados CR6255, CR6257, CR6260, CR6261, CR6262, CR6268, CR6272, CR6307, CR6310, CR6314, CR6323, CR6325, CR6327, CR6328, CR6329, CR6331, CR6332, CR6334, CR6336, CR6339, CR6342, CR6343 y CR6344 se determinó en el VNA. Todos los anticuerpos, excepto CR6272 y CR6339, neutralizaron a NIBRG-14 como cepa restauradora de H5N1. Las concentraciones (en pg/ml, en presencia de 100 TCID50 de virus) a las cuales estos anticuerpos protegen los cultivos de MDCK contra CPE se indican en la Tabla 11. En los pozos en donde se observó CPE, se confirmó la presencia de virus por tinción inmunohistoquimica (datos no mostrados) . Ejemplo 7 Análisis de inmunotransferencia por IgG específicas para H5N1 Para investigar aún más la especificidad de anticuerpos anti-HA se sometieron diferentes antigenos de influenza A de hemaglutinina recombinante a SDS-PAGE bajo condiciones reductores seguido por análisis de inmunotransferencia anti-HA. El polipéptido HA0 está constituido de la subunidad HA1 y HA2. El anticuerpo CR5111, un anticuerpo control especifico para H5N1 reconocido por la subunidad HAl y el polipéptido intacto HAO (no separado) de HAs de H5N1TV (véase Fig 1, parte derecha, carril 1) . Además, CR5111 reconoce la subunidad HAl de HA recombinante, subtipo H5 (A/Vietnam/1203/2004 (H5N1) ; véase la SEC ID NO: 110) producida utilizando vectores de baculovirus en células de insecto (Protein Sciences, CT, USA) (fig. 1, parte derecha, carril 2) . El polipéptido HAO no separado no se detecta en esta preparación de HA. La diferencia en tamaño entre las subunidades HA en los carriles 1 y 2 se puede explicar por una glucosilación diferente de HA expresada en células de inserto y células PER.C6. CR5111 no reconoce los polipéptidos HAl y/o HAO de HA recombinante, subtipo Hl (A/New Caledonia/20/99 (H1N1) ) (véase la figura 1, parte derecha, carril 4) o de HA recombinante, subtipo H3 (A/Wyoming/3/2003 (H3N2) ) (Figura 1, parte derecha, carril 3). Los anticuerpos CR6307 y CR6323 reconocen las subunidades HA2 de HAs de H5N1TV (véase la figura 1, izquierda y parte media, carriles 1) y HA recombinante, subtipo H5 (A/Vietnam/1203/2004 (H5N1) (véase la figura 1, izquierda y parte media, carriles 2) . De manera interesante, la subunidad ??2 está presente en los polipéptidos HAO no separados intactos que no fueron reconocidos. Aparentemente, el epitopo reconocido por CR6307 y CR6323 se vuelve accesible ante la separación de HAO. Además, los anticuerpos CR6307 y CR6323 reconocen la subunidad HA2 de HA recombinante, subtipo Hl (A/New/Caledonia/20/99 (H1N1) ) (véase la figura 1, izquierda y parte media, carriles 4) , pero no la subunidad HA2 de HA recombinante, subtipo H3 (A/Wyoming/3/2003 (H3N2 ) ) (véase la figura 1, izquierda y parte media, carriles 3) , ambas HA recombinantes producidas utilizando vectores de baculovirus en células de insecto (Protein Sciences, CT, USA) . Debido a que el sitio de unión de los anticuerpos neutralizantes CR6307 y CR6323 se conserva dentro de cepas de influenza A del subtipo Hl y H5, una molécula que comprende el sitio de unión se puede considerar como (parte de) una vacuna capaz de inducir una respuesta de anticuerpo antiinfluenza de reacción cruzada amplia. Después de los anticuerpos CR6307 y CR6323, los anticuerpos denominados CR6141, CR6296 y CR6301 se utilizaron en análisis de inmunotransferencia . Cada uno de los tres anticuerpos es capaz de unirse a la subunidad HA2 de HAs de H5N1TV y HA recombinante, subtipo H5 (A/Vietnam/1203/2004 ; H5N1) (datos no mostrados) . Ejemplo 8 Análisis de FACS para determinar la especificidad de subunidad de las IgG específicas para H5N1 Con el fin de evaluar la contribución de la subunidad HA1 para unirse a anticuerpos anti-H5Nl se realizó un análisis en donde la subunidad HA1 se libera de células PER.C6 que expresan HA. Las células PER.C6 que expresan HA se lavan tres veces con PBS, pH 7.4 y se incuban durante 10 min en PBS acidificado, pH 4.9. Posteriormente, se lavan las células con PBS, pH 7.4 y se tratan durante 10 min con 10 g/ml de tripsina en PBS, pH 7.4 para separar moléculas ??0 en subunidades HA1 y HA2 unidas por enlace disulfuro. Finalmente, las células se incuban durante 20 min en DTT 20 inM en PBS, pH 7.4, para liberar la unidad HA1 de la subunidad HA2 anclada a membrana. Las células no tratadas asi como las tratadas con ácido/tripsina/DTT se lavaron dos veces con PBS que contiene BSA 1%, p/v. Para el análisis de citometria de flujo se utilizaron 2.5 x 105 células por tinción. No se observó tinción de células tratadas y no tratadas con el anticuerpo de control negativo CR3014. El anticuerpo CR5111, el cual se une a la subunidad HA1 en el análisis de inmunotransferencia, tiñó la población de células PER.C6 que expresan HA no tratadas, mientras que las células tratadas no fueron reconocidas (datos no mostrados) . Esto proporciona una prueba adicional de que CR5111 reconoce la subunidad HA1. Las células tratadas y sin tratar se tiñeron en un grado similar por los anticuerpos CR6307 y CR6323 (datos no mostrados) . La liberación de la subunidad HA1 evidentemente no altera la unión de estos anticuerpos lo que fundamenta aún más los resultados del análisis de inmunotransferencia de que los anticuerpos se unen a la subunidad HA2. Los anticuerpos CR6325 y CR6331 se unen a células no tratadas mientras que la unión a células tratadas se reduce perceptiblemente en comparación con la unión a células no tratadas (datos no mostrados) . Esto sugiere que la afinidad de los anticuerpos por su epitopo se reduce de manera significativa por el cambio conformacional inducido por tratamiento con ácido o por la reducción del enlace disulfuro que enlaza la subunidad HA1 y HA2. Ejemplo 9 Prueba de ELISA de competencia de hemaglutinina con anticuerpos de fago y las IgG Para identificar anticuerpos que se unen a epitopos no superpuestos y no competitivos se realiza una ELISA competitiva de hemaglutinina. Se recubren placas Nunc-ImmunoMR Maxisorp F96 durante la noche a 4°C con 0.5 g/ml de HA recombinante, subtipo H5 (A/Vientam/1203/2004 (H5N1) (Protein Sciences) en PBS . La proteina no recubierta se elimina por lavado antes de que los pozos se bloqueen con 300 µ? de PBS que contiene leche seca sin grasa 2% p/v (solución de bloqueo) durante 1 h a temperatura ambiente. La solución de bloqueo se desecha y 50 µ? de 10 µg/ml de IgG anti-H5Nl en solución de bloqueo se incuba por pozo durante 1 h a temperatura ambiente. Posteriormente 50 µ? del anticuerpo de fago en solución de bloqueo, en una concentración dos veces la concentración que resulta en 50% de unión máxima (determinada en un análisis previo) se agrega por pozo y se incuba durante otra hora a temperatura ambiente. Los pozos se lavan tres veces con PBS que contiene Tween-20 0.1% v/v. El anticuerpo de fago unido se detecta utilizando un anticuerpo anti- 13 conjugado a peroxidasa. Los pozos se lavan nuevamente como se describe en lo anterior y se desarrolla adicionalmente la prueba de ELISA por la adición de 100 µ? de reactivo OPD (Sigma) . La reacción se detiene al agregar 50 µ? de H2S04 1 M y después se mide la DO a 492 nm. La unión del anticuerpo de fago, en presencia de IgG, se expresa como porcentaje de unión en ausencia de IgG, la cual se establece como 100%. El anticuerpo de fago SC05-111 y la IgG correspondiente CR5111, la cual reconoce un epitopo en la subunidad HA1 de hemaglutinina H5 se incluyen como controles. Los resultados indican que la mayor parte de los anticuerpos de fago y las IgG se unen a un epitopo que se superpone sobre HA recombinante, subtipo H5 (A/Vientam/1203/2004 (H5N1) ) (datos no mostrados) . La unión del anticuerpo de fago SC05-111 se bloquea por IgG CR5111, pero no por otra IgG, lo que sugiere que las otras IgG reconocen un epitopo diferente de la región de unión de CR5111. Cinco IgG, CR6262, CR6272, CR6307, CR6339 y C46343 compiten en menor grado por la unión que el resto de las IgG (más de 25% de unión residual) . Para las IgG CR6262, CR6272, CR6339 y CR6343 esto se puede explicar por una afinidad menor por HA. Esto está fundamentado por la observación de que los anticuerpos de fago que corresponden a estos anticuerpos se eliminan por competencia más eficazmente por otras IgG. La unión del anticuerpo de fago SCO 6-307 se bloquea por la IgG CR6307 , pero de manera menos eficaz por las otras IgG. Esto sugiere que SC06-307 y CR6307 reconocen un epitopo único el cual difiere del epitopo reconocido por las otras IgG. Ejemplo 10 ELISA de reactividad cruzada utilizando las IgG anti-H5Nl Para determinar si el epitopo de los anticuerpos anti-H5Nl se conserva entre las HA diferentes del subtipo H5, se realizó una prueba de ELISA de reactividad cruzada de hemaglutinina . Se recubren placas Nunc-Iitimuno^ Maxisorp F96 (Nunc) durante la noche a 4°C con 0.5 g/ml de HA recombinante, subtipo Hl (A/New Caledonia/20/99 (HlNl) ) , subtipo H3 (A/Wyoming/3/03 (H3N2) ) , subtipo H5 (A/Vietnam/1203/04 (H5N1) ) , subtipo H7 (A/Netherlands/219/03 (H7N7)), y subtipo H9 (A/Hong Kong/1073/99 (H9N2) ) (Protein Sciences Corp.) en PBS . De manera adicional, las preparaciones de virus inactivadas por BPL que contienen 0.5 g/ml de HA de A/New Caledonia/20/99 (HlNl) y la cepa de reabastecimiento NIBRG-14 (A/Vientam/1194/04 (H5N1) ) se recubren sobre placas durante la noche en PBS. Los pozos se lavan tres veces con PBS que contiene Tween-20 0.1% v/v para eliminar la proteina no recubierta y posteriormente se bloquea con 300 µ? de PBS que contiene leche seca sin grasa 2% p/v (solución de bloqueo) durante 1 h a temperatura ambiente. La solución de bloqueo se desecha y 100 µ? por pozo de anticuerpos anti-5HNl, 5 pg/ml en solución de bloqueo se incuban durante 1 hora a temperatura ambiente. Los pozos se lavan tres veces con PBS que contiene Tween-20 0.1% v/v y los anticuerpos unidos se detectan utilizando un anticuerpo de ratón anti-IgG humana conjugado a peroxidasa (Jackson) . La reacción se revela y se mide como se describe en lo anterior. La tabla 12 muestra que todas las IgG anti-H5Nl unidas a HA recombinante subtipo H5 (A/Vietnam/1203/2004 (H5N1) ) y una preparación de virus inactivada por BPL de NIBRG-14 la cual contiene la HA de la cepa A/Vietnam/1194/2004 (H5N1) . Las HA recombinantes de subtipo H3 y H7 no son reconocidas por ninguna de las IgG anti-H5Nl probadas. De manera interesante, todas las IgG anti-H5Nl, con la excepción de CR5111 y CR6307 , se unen a HA recombinante de los subtipos Hl y H9 y una preparación de virus inactivada por BPL de la cepa A/New Caledonia/20/99 (H1N1) . Esto indica que el epitopo de la mayor parte de las IgG anti-H5Nl se conserva entre las moléculas de HA de subtipos diferentes. Ejemplo 11 Mapeo del epitopo de las IgG anti-H5Nl Okuno et al. (1993) y Smirnov et al. (1999) demuestran la existencia de un epitopo común compartido por las HA de virus de influenza A subtipos Hl, H2 y H5 y neutralización de estos subtipos por el anticuerpo monoclonal murino C179 dirigido contra este epitopo. Este epitopo conformacional está constituido de dos sitios diferentes los cuales se localizan en la subunidad HAl y HA2. Ambos sitios se localizan en proximidad cercana en la parte media de la región de tallo de la molécula HA. Con el fin de evaluar si los anticuerpos anti-HA descritos en lo anterior reconocen este epitopo, se fabrican moléculas HA que contienen sustituciones de aminoácidos en esta región. El epitopo reconocido por el anticuerpo C179 (Takara Bio Inc.) se ha atribuido a regiones que abarcan los residuos 318-322 de la subunidad HAl y los residuos 47-58 de la subunidad HA2 (numeración de aminoácidos como se describe por Okuno et al. 1999). El virus Escape que contiene las HA que presenta una sustitución Thr a Lys en la posición 318 en la subunidad HAl o una sustitución Val a Glu, en la posición 52 en la subunidad HA2 ya no son reconocidos y neutralizados por C179. Estas mutaciones (posición 318 Thr a Lys, mutante I; posición 52 Val a Glu, mutante II) , una sustitución Leu a Met en la posición 320 en la subunidad HAl (mutante III, et320 está presente en la región 318-322 de HAl del subtipo H3 y H7), una sustitución Ser a Arg en la posición 54 en la subunidad HA2 (mutante IV, Arg54 está presente en la región 47-58 de HA2 del subtipo H3 y H7 ) y una sustitución Asp a Asn en la posición 57 en la subunidad HA2 (mutante V, Asn57 está presente en la región 47-58 de HA2 de la cepa A/Hong Kong/156/97 (H5N1) ) se introduce en HA de longitud completa a partir del aislado A/Vientam/1194/2004 (H5N1TV) y se transfecta en células PER.C6. La unión de C179 y los anticuerpos anti-HA humanos para células PER.C6 que expresan estos mutantes se evalúa por análisis FACS como se describe en lo anterior. El anticuerpo CR5111, el cual se dirige contra un epitopo en la subunidad HA1 y un anti-H5 policlonal de suero de borrego confirman la expresión de H5N1TV y los mutantes de HA por células PER.C6 transfectadas (datos no mostrados) . No se observa tinción con el anticuerpo de control negativo CR3014 o en ausencia de anticuerpo (datos no mostrados) . Como se esperaba, el anticuerpo C179 no reconoce los mutantes I y II, los cuales muestran las mismas sustituciones de aminoácidos que las HA en el virus escape C179 (véase Okuno et al., 1993) . Además, C179 no se une al mutante IV mientras que la unión de C179 a los mutantes III y V no es afectada. Se observa un patrón de reactividad similar para el anticuerpo CR6342, lo que sugiere que el anticuerpo C179 y CR6342 reconocen un epitopo similar. Los anticuerpos CR6261, CR6325 y CR6329 reconocen todos los mutantes, con la excepción del mutante II. Esto sugiere que el epitopo de los anticuerpos CR6261, CR6325 y CR6329 es diferente del de C179. Dado que las sustituciones en la subunidad HA1 no suprime la unión de estos anticuerpos, es muy probable que su epitopo se localice en la subunidad HA2. Los anticuerpos CR6307 y CR6323 reconocen a todos los imitantes, lo que sugiere que también el epitopo de estos anticuerpos es diferente del de C179. En la Tabla 13 se muestra un resumen de la secuencia de los mutantes y la unión de los anticuerpos. En conclusión, los resultados indican que los anticuerpos CR6261, CR6325 , CR6329, CR6307 y CR6323 son candidatos ideales para unirse y neutralizar virus de influenza que tienen mutaciones en el epitopo reconocido por el anticuerpo monoclonal murino C179 y como una consecuencia del mismo ya no son neutralizados por este anticuerpo. Ejemplo 12 Actividad profiláctica de anticuerpos monoclonales IgG humanos contra una exposición mortal de H5N1 in vivo Se administró una dosis mortal de virus de influenza H5N1, cepa ?/Hong Kong/156/97 a ratones con el fin de estudiar el efecto profiláctico de los anticuerpos IgG monoclonales humanos CR6261, CR6323 y CR6325. Un dia antes de la infección a 8 grupos de 10 ratones cada uno se les inyectó intraperitonealmente con diferentes dosis de anticuerpo. Como un control negativo, a un grupo de ratones se le inyectó un anticuerpo control no relacionado (CR3014) . Se vigilaron los signos clínicos, la pérdida de peso y la mortandad hasta los 21 días después de la infección. Este estudio se llevó a cabo para determinar el efecto profiláctico de los anticuerpos IgG anti-H5Nl humanos monoclonales in vivo. La cepa H5N1 originalmente se obtiene de un niño de 3 años de edad quien padece de enfermedad respiratoria. El virus se somete a pasaje dos veces en células MDCK. El lote utilizado para infectar ratones [Titulo 8.1 unidades logarítmicas de TCID50/ml] se propagó una vez en huevos embrionados . 80 ratones hembra de 7 semanas de edad Balb/C se dividieron en los 8 grupos de 10 ratones, cada uno con las siguientes inyecciones antes de su exposición al virus H5N1. 1. 15 mg/kg de 6261. 2. 5 mg/kg de 6261. 3. 2 mg/kg de 6261. 4. 0.7 mg/kg de 6261. 5. 15 mg/kg de 6323. 6. 15 mg/kg de 6325. 7. Si en 500 µ? de suero inmunitario de conejo anti-H5N3 (diluido lOOx) 8. 15 mg/kg de 3014. Todos los animales se aclimataron y mantuvieron durante un período de 6 días antes del inicio del estudio. Un día antes de la infección con virus H5N1 se administró por inyección intraperitoneal 500 µ? de anticuerpo. A los animales se les inoculó intranasalmente en el día 0 con 25 DL50 de virus (aproximadamente 50 µ?) , y se les siguió durante 21 dias . Se calculó la dosis real del virus administrado al titular algunas muestras por duplicado del inoculo remanente después de que se completó la inoculación de los animales. Se determinaron los títulos de virus (TCID50/ml) del inoculo en células MDCK. Los resultados muestran que no se ha producido inactivación del virus de manera no intencional durante la preparación o administración del inoculo. El grupo 8 actuó como control negativo. A los animales en este grupo se les inyectó con un anticuerpo monoclonal no relacionado (CR3014) en el dia 0. Se supone que el grupo 7 actúa como un control positivo. Los ratones en este grupo se les inyectó con anticuerpo de conejo policlonal de suero generado contra el virus de influenza H5N3. Los signos clínicos y pesos se determinaron diariamente desde el día -1 hasta 21 días después de la inoculación del virus. Los signos clínicos se calificaron con un sistema de calificación (0 = sin signos clínicos; 1 = cubierta rugosa; 2 = cubierta rugosa, menos reactiva, pasiva durante el manejo; 3 = cubierta rugosa, se caían, dificultad para respirar, pasivos durante el manejo; 4 = cubierta rugosa, se caían, dificultad para respirar, no se enderezaban sobre su estómago cuando se colocaban de lado sobre el lomo) y se registró. Los animales que sobrevivieron se mataron y se extrajo la sangre en el día 21. Para el análisis de los niveles de anticuerpos IgG en suero se recolectaron muestras de sangre de cada ratón el día 0. Se prepararon sueros de acuerdo con un procedimiento estándar. Para generar sueros postinfección se recolectó sangre de los animales sobrevivientes el dia 21. Los sueros se almacenaron a -20°C ± 2°C hasta que se realizó el análisis para determinar la presencia de anticuerpos específicos de virus. Los sueros se probaron por duplicado utilizando 4 HAÜ del sustrato HK/97 de H5N1. Los títulos se expresan como el inverso de la dilución sérica más alta que muestra HI, comenzando con una dilución de 1/10. Todos los ratones eran activos y tenían una apariencia sana sin mostrar signos de enfermedad durante el período de aclimatación. Se calculó la calificación clínica en promedio (calificación clínica total dividida entre el número de animales sobrevivientes en cada grupo) por día y los resultados se indican en la figura 2 (calificación clínica promedio por grupo) , en la tabla 14 (calificaciones clínicas) y en la tabla 15 (malestar respiratorio) . El inicio de signos clínicos negativos se observa en el día 3 después de la infección en el grupo que se inoculó con el control negativo, Ab CR3014 (grupo 8) . La enfermedad respiratoria se registró primero en el día 6 y duró por 1 a 4 días. No se observaron signos clínicos en ratones que fueron tratados con 15 mg/kg de CR6325 (grupo 6) . En el grupo 5 (CR6323) un ratón mostró signos clínicos ligeros (calificación 1) del día 5 al 8 y murió al dia siguiente. En el grupo 1, un ratón murió al dia 13 sin haber mostrado ningún signo clínico previo. Las dosis más altas de Ab de CR6261 se relaciona con un inicio posterior y calificaciones clínicas menores en promedio. La dificultad para respirar se percibió con el grupo de dosis más baja (0.7 mg/kg) , pero no con los grupos de dosis más altas (2, 5 y 15 mg/kg) . Todos los ratones mostraron mejoría en su condición clínica entre los días 9 y 13 (grupo 2, 3 y 5) y desde el día 17 en adelante (grupo 4) . A los ratones que se les inyectó con anticuerpo policlonal de conejo (grupo 7) desarrollaron enfermedad grave en los siguientes 3 días y posteriormente murieron, lo que demuestra que el anticuerpo de conejo no protege contra infección in vivo. Se mató a dos animales (uno en el grupo 4 y uno en el grupo 8) en el día 10 y se les retiró del estudio, debido a que se consideró que los animales estaban gravemente enfermos (calificación 4). Los animales infectados con H5N1 mostraron grados variables de pérdida de peso (figura 3) . La pérdida de peso proporcional y el momento de inicio se relacionan con la dosis de anticuerpo. En los grupos tratados con la dosis más alta de anticuerpos el peso aumentó de manera estable durante el tiempo, lo que concuerda con la ganancia en peso relacionada con la edad. El grupo de animales inoculados con la dosis más baja de CR6261 perdió peso más rápidamente que los grupos de animales que recibieron dosis más altas de anticuerpo. La cantidad total de pérdida de peso es mayor en los grupos con dosis más bajas, con una pérdida de peso promedio de aproximadamente 15 y 40% del peso inicial en los grupos inoculados con 2 y 0.7 mg/kg de CR6261, respectivamente. En los grupos con dosis menores, el peso corporal promedio parece aumentar nuevamente al mismo tiempo que los animales muestran cierta mejoría clínica. La figura 4 muestra el número de ratones que sobreviven por grupo en cada día. Está presente una clara relación entre dosis y respuesta entre la cantidad de anticuerpo administrada y el tiempo de supervivencia promedio. La figura 5 muestra la mortandad de una manera que responde a la dosis. El primer ratón murió 7 días después de la inoculación en el grupo con la dosis más baja (0.7 mg/kg) y en el grupo de ratones que recibieron el control negativo: CR3014. Menos de 50% de los animales estaban protegidos contra la muerte cuando se administraron 0.7 mg/kg de anticuerpo CR6261. No obstante, 9 de 10 ratones sobrevivieron cuando se administró la dosis más alta de anticuerpo. Ningún ratón del grupo control negativo (CR3014) sobrevivió, lo que demuestra que, efectivamente, en este estudio se utilizó una dosis de exposición mortal al 100%. Para determinar si los anticuerpos IgG son capaces de producir protección completa contra la infección se realizó un análisis de HI con sueros recolectados el día 21 de ratones que habían recibido 15 mg/kg de CR6261 (grupo 1) . Estos datos indican que los ratones experimentaron una infección por H5N1, aunque sin manifestación clínica. Estos resultados muestran que por lo menos tres anticuerpos humanos anti-H5Nl, identificados y desarrollados como se describe en la presente (CR6261, CR6323 y CR6325) son cada uno capaces, por separado, de proporcionar protección contra una dosis mortal de influenza H5N1 in vivo. Se observa una clara relación dosis-respuesta entre la cantidad de anticuerpo CR6261 administrado y el tiempo de supervivencia promedio. Los resultados muestran que cada anticuerpo IgG monoclonal anti-H5Nl probado es capaz de evitar la manifestación clínica de infección de H5N1 en ratones cuando se administra un día antes de la infección a una dosis de 15 mg/kg. Ejemplo 13 Efectos protectores y terapéuticos de anticuerpos monoclonales humanos anti-H5Nl administrados después de una infección con una dosis mortal de virus de influenza H5N1 in vivo. Se realizó un estudio para probar el efecto terapéutico de los anticuerpos monoclonales como se describe en la presente, ejemplificado -por CR6261 en un modelo postinfección, contra una exposición mortal de virus de influenza H5N1 ?/??/97 in vivo. El lote del virus y el tipo así como la edad de los ratones son los mismos que se utilizaron en el Ejemplo 12. Como un control negativo, un grupo de ratones se inyectó con un anticuerpo control no relevante (CR2006) . Los signos clínicos, la pérdida de peso y la mortandad se monitorearon hasta 21 días después de la infección . Se dividieron 58 ratones hembra de 7 semanas de edad Balb/c en 5 grupos que recibieron el anticuerpo en diferentes etapas después de la infección, como sigue: 1. 10 ratones; 15 mg/kg de CR6261 4 h después de la infección. 2. 14 ratones; 15 mg/kg de CR6261 1 día después de la infección. 3. 10 ratones; 15 mg/kg de CR6261 2 días después de la infección. 4. 10 ratones; 15 mg/kg de CR6261 3 días después de la infección. 5. 14 ratones; 15 mg/kg de CR6261 1 día después de la infección. Todos los animales se aclimataron y mantuvieron durante un período de 6 días antes del inicio del estudio. Se inoculó a los animales intranasalmente en el día 0 con 25 LD50 de virus de influenza H5N1 (aproximadamente 50 µ?) y se monitoreó durante 21 días. La dosis real del virus administrado se calculó al titular algunas muestras por duplicado a partir del inoculo remanente después de que se completó la inoculación de los animales. Se determinaron los títulos de virus (TCID50/ml ) del inoculo en células MDCK. Los resultados muestran que no se produjo inactivación de virus de manera no intencional durante la preparación o administración del inoculo. En los puntos de tiempo especificados después de la inoculacdión se administraron 500 µ? de anticuerpo por inyección intraperitoneal . El grupo 5 actuó como un control negativo. Los animales en este grupo se les inyectó con un anticuerpo monoclonal no relacionado (CR2006) 1 día después de la infección. Se determinaron los signos clínicos y pesos cada día, desde el día -1 hasta el día 21. Los signos clínicos se calificaron como se describe en el ejemplo 12, con un intervalo de calificación de 0 a 4. Se mató a los animales sobrevivientes y se extrajo la sangre en el día 21. Para determinación de los cambios patológicos se mató a 4 animales de los grupos 2 y 5 en el día 6 después de la exposición. Estos animales habían sido seleccionados previamente en el día 0 y se les había separado de los demás. Por esta razón, los grupos 2 y 5 comenzaron con 14 animales, en donde 10 ratones permanecieron después de la selección. Los signos clínicos y los pesos se determinaron diariamente desde el día -1 hasta 21 días después de la inoculación del virus. Todos los ratones estaban activos y tenían una apariencia sana sin mostrar signos de enfermedad durante el periodo de aclimatación. La calificación clínica promedio (calificación clínica total dividida entre el número de animales sobrevivientes en cada grupo) se calculó por día y los resultados se indican en la figura 6 (calificación clínica promedio por grupo) , en la tabla 16 (calificaciones clínicas) y en la tabla 17 (malestar respiratorio) . Claramente, todos los grupos contenían ratones que mostraban signos clínicos ya en el día 1 después de la infección. Dependiendo del momento en el cual se administró el anticuerpo, los signos clínicos disminuyen en todos los grupos y los signos clínicos están ausentes de nuevo en el día 15. En el grupo 5 control todos los animales padecen de signos clínicos graves y todos los animales murieron o se les mató debido a que presentaban el nivel 4 en las calificaciones clínicas al día 9. Esto demuestra nuevamente que se administró una dosis mortal de virus de influenza a los animales. En el grupo 1, en donde los animales habían recibido el anticuerpo 4 h después de la infección, algunos animales no desarrollaron signos clínicos, mientras que otros sí. El número de animales que mostraron signos clínicos que pueden ser calificados se proporcionan en la tabla 16. Dado que el virus de influenza puede tener un efecto perceptible en los órganos respiratorios, también se midió el malestar respiratorio y aquí se proporciona en la Tabla 17. La figura 7 y la tabla 18 muestran el número de animales sobrevivientes y la tasa de mortandad respectivamente para todos los grupos. Por razones desconocidas, un animal en el grupo 1 que recibió el anticuerpo 4 h después de la infección murió en el día 10. Todos los animales restantes en los grupos que recibieron el anticuerpo después de la infección de influenza sobrevivieron y se encontraban sanos el dia 21. Esto se muestra claramente en los datos de peso corporal que se obtuvieron de todos los ratones. La figura 8 muestra la media de peso corporal en cada grupo de ratones durante los 21 días de estudio. Aunque el peso corporal de todos los ratones disminuye por la infección, el peso corporal regresa a los niveles normales después de la administración del anticuerpo. Claramente, el regreso a los niveles normales de peso corporal depende del momento en el que se inició el tratamiento de anticuerpo, en donde los animales que fueron tratados cuatro horas después de la exposición se recuperaron con rapidez y alcanzaron niveles normales al dia 7, los animales que fueron tratados 3 días después de la infección, alcanzaron su peso corporal normal en el dia 17. Todos los animales alcanzaron un peso corporal similar y sano al final del estudio, en el dia 21. Claramente, todos los animales que recibieron anticuerpo de control negativo no volvieron a ganar peso corporal y sus mediciones se detuvieron por la muerte en el dia 9. Estos resultados muestran que el tratamiento posterior a la infección con anticuerpo monoclonal dirigido contra el virus de influenza H5N1 , como se describe en la presente, y como se ejemplifica por el anticuerpo CR6261 puede rescatar a mamíferos, como se muestra en la presente en los ratones, después de exposición con una dosis mortal de virus de influenza H5N1. Incluso en la etapa tardía, 3 días después de la infección, el anticuerpo es capaz de revertir los síntomas clínicos a un nivel en el cual dichos signos clínicos ya no pueden ser analizados. De manera sorprendente, a los 21 días después de la infección todos los animales tratados con anticuerpo alcanzaron niveles de peso corporal normales y no mostraron signo clínico remanente alguno. Ejemplo 14 Protección cruzada in vivo contra exposición mortal por subtipos heterólogos de influenza utilizando anticuerpos monoclonales dirigidos contra HA de H5N1. Como . se describe en lo anterior (ejemplo 11) , algunos de los anticuerpos de la presente invención aparentemente reconocen un epítopo único en el dominio HA2 de la proteína de hemaglutinina H5. En el ejemplo 7 se demuestra que ciertas moléculas de unión de la presente invención pueden interactuar con el epítopo HA2 de una manera no conformacional, en otras palabras, la forma en la cual la proteína de hemaglutinina se pliega no parece impedir la actividad neutralizante y los efectos protectores de estos anticuerpos, como se describe en la presente. Las secuencias de las partes de proteina de hemaglutinina de influenza que no son susceptibles a deriva antigénica (= el cambio de regiones inmunodominantes dentro de la región HA1 de la proteina, lo que resulta en la necesidad de vacunas de influenza actualizadas anualmente) son conocidas en la técnica. El epitopo en H2 que es reconocido por CR6261, CR6325 y CR6329 está contenido en la secuencia de aminoácidos GVTNKVNSIIDK (SEC ID NO: 368, véase tabla 13) y también está presente en las protexnas de hemaglutinina de los subtipos Hl y H9, véase la tabla 22. Se ha demostrado en el ejemplo 10 que la interacción de las moléculas de unión de la presente invención al epitopo no se limita a HA de H5 sino que también se reconoce HA de Hl y H9 (véase la tabla 12) . Por lo tanto, las moléculas de unión de la presente invención reconocen un epitopo que está presente en proteínas HA múltiples de diferentes serotipos de influenza. Para estudiar la aplicabilidad cruzada de estos anticuerpos para terapia se llevó a cabo un experimento en ratones que concuerdan con el protocolo de dosificación del experimento descrito en el ejemplo 13. En este experimento se administró en ratones una dosis mortal muy alta de otro virus de influenza relacionado con el ataque pandémico de 1918 y que ahora circula cada estación en humanos, específicamente HlNl . Posteriormente, se trató a los ratones con un anticuerpo de la presente invención, ejemplificado por CR6261 y se vigilaron durante 3 semanas después de la infección los signos clínicos , el malestar respiratorio y el peso corporal. Se hizo evidente que estas moléculas de unión que pueden rescatar a ratones cuando se infectan con H5N1, también son capaces de rescatar mamíferos cuando se infectan con H1N1 como se indica en lo siguiente. Se llevó a cabo un estudio para probar el efecto terapéutico de los anticuerpos monoclonales, ejemplificados por CR6261 en un modelo post-infección contra una exposición mortal de virus de influenza HlNl A/WSN/33 in vivo. El lote de virus se obtiene de ATCC (VR-219) y se propaga una vez en huevos embrionados . El título es de 8.5 unidades logarítmicas de TCIDso/ml. Como un control negativo, a un grupo de ratones se le inyectó con un anticuerpo monoclonal irrelevante (IgGl, ? denominado "CR57", anticuerpo de control negativo pareado en isotipo) . Los signos clínicos, la pérdida de peso y la mortandad se vigilaron hasta 21 días después de la infección. Una cantidad de 50 ratones hembra de 6 a 8 semanas de edad Balb/c se dividieron en 5 grupos que recibieron el anticuerpo en etapas diferentes relacionadas con la infección, como sigue: 1. 10 ratones; 15 mg/kg de CR6261 1 día antes de la infección 2. 10 ratones; 15 mg/kg de CR6261 1 día después de la infección 3. 10 ratones; 15 mg/kg de CR6261 2 dias después de la infección 4. 10 ratones; 15 mg/kg de CR6261 3 dias después de la infección 5. 10 ratones; 15 mg/kg control negativo de CR6261 1 dia después de la infección Se aclimataron los animales y se mantuvieron durante un periodo de por lo menos 4 dias antes del inicio del estudio. Se inoculó a los animales intranasalmente el dia 0 con una dosis mortal de virus H1N1 (6.6 unidades logarítmicas de TCID50; equivalentes a 25 veces la DL50) en aproximadamente 50 µ? y se vigilaron. En momentos de tiempo específicos antes/después de la inoculación se administraron 500 µ? de anticuerpo por inyección interaperitoneal . Se vigiló la salud general de los ratones durante el estudio. Los signos clínicos y el peso se determinaron diariamente desde el día -1 hasta el día 21. Los signos clínicos se calificaron con las tasas de calificación como se han descrito en el ejemplo 12 y 13, que varían de 0 a 4. A los animales sobrevivientes se les mató y se extrajo la sangre el día 21. La tasa de mortandad para cada grupo se proporciona en la tabla 19, que demuestra el número de ratones vivos en cada grupo de estudio durante el estudio. Dos ratones murieron poco después del evento de inoculación (en el dia 1, uno en el grupo 2 y uno en el grupo 3) y se excluyeron del análisis como se había definido de antemano en el plan de estudio. Todos los ratones en el grupo 5 control murieron al día 9, de una manera similar al estudio previo con H5N1 (véase tabla 18) . El porcentaje de animales que sobrevivieron a esta dosis de exposición mortal de HlNl también se gráfica en la figura 9. El número de ratones que mostraron signos clínicos pertinentes en cada grupo se proporciona en la tabla 20. No se observaron signos clínicos en el grupo 1, mientras que en los grupos 2, 3 y 4 algunos ratones mostraron signos clínicos que desaparecieron por completo después del día 14 posterior a la inoculación. Todos los animales en el grupo 5 comenzaron mostrando signos clínicos en el día 2. Ningún ratón en este grupo se recuperó. El número de ratones que mostraron malestar respiratorio en la categoría 2 ó 3 se proporciona en la tabla 21. No se observó malestar clínico alguno después del día 13 en los grupos 1-4 mientras que todos los ratones remanentes en el grupo 5 control sufrieron de malestar respiratorio grave. La figura 10 muestra el peso corporal promedio en ratones en cada grupo de estudio. Es evidente que no se proporcionaron mediciones para los ratones en el grupo 5 después del día 8. Como se puede ver a partir de esta figura, todos los ratones que recibieron anticuerpo anti-H5Nl y que se recuperaron de los signos clínicos obtuvieron nuevamente su nivel de peso corporal esperado el día 21. Los anticuerpos pueden proteger a estos ratones cuando se administran antes de infección o después de infección. De manera perceptible, la dosis de infección es más bien alta: 25 veces la dosis DL50, lo que indica que los anticuerpos proporcionan una protección muy fuerte contra el virus incluso cuando está presente en títulos altos en el pulmón. Esto es clínicamente relevante dado que los virus altamente patogénicos como H5N1 se replican con un título elevado después de infección y estas cargas virales elevadas se han relacionado con un resultado frecuentemente grave en humanos infectados. Además, todos los ratones protegidos se recuperaban completamente de esta infección mortal con el transcurrir del tiempo. Se concluye que los anticuerpos anti-H5N1 de la presente invención (tales como CR6261, CR6325 y CR6329) que se unen a epitopos (solos) en la región HA2 , una región que es susceptible a deriva antigénica, proporcionan protección cruzada in vivo contra serotipos múltples de influenza, eliminando la necesidad de generar anticuerpos contra la región HA1 altamente sensible a mutación. Debe entenderse que las moléculas de unión de la presente invención no están limitadas por epitopos que estén presentes únicamente en HA de un serotipo de influenza H5, también se les puede utilizar en un tratamiento profiláctico o terapéutico de todos los serotipos de influenza que contengan el mismo epitopo en la región estable de HA2, tales como H1N1 y virus de influenza que comprenda las proteínas de hemaglutinina H2, H6 y H9. Ejemplo 15 Estudios de afinidad Se realizaron estudios de afinidad utilizando análisis de resonancia de plasmón de superficie con un sistema analítico BIAcore3000 entre 25°C y 37°C, utilizando HBS-EP (Biacore AB, Suecia) como amortiguador de corrida a un caudal de 75 µ?/min. Se inmovilizaron las IgG en un chip sensor de canal de 4 flujos (Fe) de investigación gradod CM5 (Biacore AB, Suecia) utilizando acoplamiento amina. Se inyectó una cantidad variable de HA desde un virus H5N1 (A/Vientam/1203/2004 ) para analizar la interacción de unión entre la proteína HA y las IgG inmovilizadas. La regeneración utilizando NaOH 20 mM, se realizó al final de cada medición para eliminar el HA unido mientras que se dejaba la IgG inmovilizada sobre el chip. se determinaron las constantes de afinidad para los anticuerpos CR6261 , CR6323 y CR6325. Se inyectaron cinco concentraciones en diluciones cuádruples de HA (100 µ? por inyección) seguido por una fase de disociación de 3600 seg y regeneración utilizando 10 µ? de NaOH 20 mM. Los datos resultantes se ajustan utilizando un modelo 1:1 (Langmuir) .
No obstante, no se puede calcular una constante de disociación (KD, por sus siglas en inglés) precisa. Esto se debe a las tasas de disociación extremadamente bajas a 25°C (incluso con una medición extendida) lo que genera un error inaceptable en el cálculo. Cuando se repitieron los experimentos a 37 °C se produjo disociación discernible pero aún no lo suficientemente para medir con precisión la KD. Se realizaron experimentos para establecer una KD definitiva para los anticuerpos. Estas se calculan que son por lo menos de un solo dígito en el intervalo de nM y muy probablemente en el intervalo de afinidad de pM. Estos experimentos muestran que las moléculas de unión de la presente invención tienen una afinidad muy alta por su epítopo presente en la proteína ?? del virus de influenza. A continuación, se proporcionan los detalles de las secuencias de ácido nucleico y de aminoácidos a las que se hace referencia en la presente como las SEC ID NO: 58-143, SEC ID NO: 21-237 y SEC ID NO: 316-367. SEC ID NO: 58 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cabccqbaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1320 acccagaaga gcctgagcct gagccccggc aag 1353 SEC ID NO: 59 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S c K A S G G P F R S Y A I S w V R Q A P G Q G P E W M G G I I P 1 F G T T Y A P K F Q G R V T I 1 A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A M Y Y C A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V S S A s T K G P S V F P L A P S s S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V s W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S S S L G T Q T Y I C N V N H ? P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y K C K V S N K A L P A P I E K T I s K A G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R W Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 60 caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaág cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gágcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1320 acccagaaga gcctgagcct gagccccggc aag 1353 SEC ID NO: 61 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G P F R S Y A I s w V R Q A P G Q G P E W M G G I I P I F G T T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A Y Y C A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S S S L G T Q T Y I C N V N H K P S N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T C V V V D V S H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N S T Y RV V S V L T V L H Q D W L N G K E Y K C K V S N K A L P A P I E K T I S K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V S L T C L V K G F Y P S D I A V E W E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L X S K L T V D K S R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 62 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 ajtcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1320 acccagaaga gcctgagcct gagccccggc aag 1353 SEC ID NO: 63 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V s C K A S G G P F R S Y A I S w V R Q A P G Q G P E W M G G I I P I F G T T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R s E D T A M Y Y C A K H M G Y Q V R E T M D V W G G T T V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S s S L G T Q T Y I C N V N H P s N T K V D K R V ? P K S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V F N W Y V D G V E V H N A T K P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P. V L D S D G s F F L Y s L T V D s R W Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 64 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaocactac 1320 acccagaaga gcctgagcct gagccccggc aag 1353 SEC ID NO: 65 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G P F R S Y A I S w V R Q A P G Q G P E W G G I I P I F G T T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A Y Y c A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T s G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L I S R T P E V T c V V V D V S H E D P E V K F N Y V D G V ? V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G K ? Y K C V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T C L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K s R w Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 66 caggtacagc tgcagcagtc aggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg tttccggagt cattttcagc ggcagtgcga tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag gccttgagtg gatgggaggg atcagccctc tctttggcac aacaaattac 180 gcacaaaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacc aatccacgaa cacaacctac 2 0 atggaggtga acagcctgag atatgaggac acggccgtgt atttctgtgc gcgaggtcca 300 aaatattaca gtgagtacat ggacgtctgg ggcaaaggga ccacggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 480 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtgtc cctcacctgt ctggtgaagg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 67 Q V Q L Q Q S G A E V K K P G S S V K V S c K V S G V I F S G s A I s w V R Q A P G Q G L E W M G G I S P L F G T T N Y A Q K F Q G R V T I T A D Q s T N T T Y M E V N S L R Y E D T A V Y F C A R G P K Y Y S E Y M D V W G K G T T V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T s G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P S C D K T H T c P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N w Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R W Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 68 caggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagt agttatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggagga atcatgggta tgtttggcac aactaactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aattcacgag cgcagcctac 240 atggagctga ggagcctgag atctgaggac acggccgtct actactgtgc gaggtctagt 300 ggttattacc ccgaatactt ccaggactgg ggccagggca ccctggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 80 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtgtc cctcacctgt ctggtgaágg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 69 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S S V K V s C K A s G G T F S s Y A I s w V R Q A P G Q G L E W G G 1 M G M F G T T N Y A Q K F Q G R V T I T A D E F T S A A Y M E L R S L R S E D T A V Y Y C A R S S G Y Y P E Y F Q D W G Q G T L V T V s S A S T K G P S V F P L A P S S K S T s G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S w N S G A L T S G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S s s L G T Q T Y 1 C N V N H K P S N T K V D K R V E P S C D T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E ? Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R W Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S 1¡ S P G K SEC ID NO: 70 caggtccagc tggtgcagtc tgggggaggc ctggtcaagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatagca tgaactgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatcc attagtagta gtagtagtta catatactac 180 gtagactcag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagaggtggt 300 gggagctacg gggcctacga aggctttgac tactggggcc agggcaccct ggtcaccgtc 360 tcgagtgcta gcaccaaggg ccccagcgtg ttccccctgg cccccagcag caagagcacc 420 agcagcggcc tgtacagcct gagcagcgtg gtgaccgtgc ccagcagcag cctgggcacc 600 cagacctaca tctgcaacgt gaaccacaag cccagcaaca ccaaggtgga caaacgcgtg 660 gagcccaaga gctgcgacaa gacccacacc tgccccccct gccctgcccc cgagctgctg 720 ggcggaccct ccgtgttcct gttccccccc aagcccaagg acaccctcat gatcagccgg 780 acccccgagg tgacctgcgt ggtggtggac gtgagccacg aggaccccga ggtgaagttc 840 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcac aacgccaaga ccaagccccg ggaggagcag 900 tacaacagca cctaccgggt ggtgagcgtg ctcaccgtgc tgcaccagga ctggctgaac 960 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtgagcaac aaggccctgc ctgcccccat cgagaagacc 1020 atcagcaagg ccaagggcca gccccgggag ccccaggtgt acaccctgcc ccccagccgg 1080 gaggagatga ccaagaacca ggtgtccctc acctgtctgg tgaagggctt ctaccccagc 1140 gacatcgccg tggagtggga gagcaacggc cagcccgaga acaactacaa gaccaccccc 1200 cctgtgctgg acagcgacgg cagcttcttc ctgtacagca agctcaccgt ggacaagagc 1260 cggtggcagc agggcaacgt gttcagctgc agcgtgatgc acgaggccct gcacaaccac 1320 tacacccaga agagcctgag cctgagcccc ggcaag 1356 SEC ID NO: 71 Q V Q L V Q s G G G L V K P G G S L R L S C A A S G F T F S S Y S M N W V R Q A P G K G L E W V S s I s S S S S Y I Y Y V D S V K G R F T I S R D N A K N S L Y L Q M N S L R A E D T A V Y Y c A R G G G S Y G A Y E G F D Y W G Q G T L V T V s S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V s w N s G A L T s G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S s s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T c P P c P A P E L L G G P S V F L F P P P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A T K P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D L N G K E Y K C K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V S L T c L V G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R w Q Q G N V F S c S V M H E A L H- N H Y T Q S L S L S P G K SEC ID NO: 72 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgoggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg -ctg'cctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gáccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccág 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1320 acccagaaga gcctgagcct gagccccggo aag 1353 SEC ID NO: 73 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G P F R S Y A 1 S w V R Q A P G Q G P E W M G G I I P I F G ? T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S s L R S E D T A M Y Y C A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V S S A s T K G P S V F P L A P S s K S T s G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V s W N S G A L T s G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P ? S S L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N w Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y K c K V S N K A 1 P A P I E T I s K A G Q P R E P Q V Y T L P P s R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 74 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gáccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccág 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1320 acccagaaga gcctgagcct gagccccggc aag 1353 SEC ID NO: 75 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S c K A S G G P F R S Y A I S V R Q A P G Q G P E W M G G I I P I F G T T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A M Y Y C A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V S S A S T K G P S V F P L A P S s K S T s G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S S S L G T Q T Y I C N V N H •K P S N T K V D K R V E P K S C D K T H T c P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H ? D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G K E Y K C K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K s R W Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q S L S L S P G K SEC ID NO: 76 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc cagggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgtaagg cctctggagg caccttctcc agctatggta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggagac atcatcggta gtttggttc aacaaactac 180 gcacagaact tccagggcag actcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaagtagt 300 ggttattacc ctgcatacct cccccactgg ggccagggca ccttggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 480 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtgtc cctcacctgt ctggtgaagg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 77 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G T F S s Y G I s w V R Q A P G Q G L E W M G D I I G M F G S T N Y A Q N F Q G R L T I T A D E s T S T A Y M E L S S L R S E D T A V Y Y c A R S S G Y Y P A Y L P H W G Q G T L V T V s S A s T K G P S V F P L A P s S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V s W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P P K D T L M 1 S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N w Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N S T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V S L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y S L T V D K S R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 78 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc cggggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc ttctattcta tgagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag gacttgagtg gatgggaggg atcatcccta tgtttggtac aacaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggtcg aatccacgag cacagcctac 240 atggaggtga gcagcctgag atctgaggac acggccgttt attactgtgc gagaggtgat 300 aagggtatct actactacta catggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 SEC ID NO: 79 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A s G G T F s F Y s M S W V R Q A P G Q G L E W M G G I 1 P M F G T T N Y A Q K F Q G R V T I T A V E s T S T A Y M E V S S L R S ? D T A V Y Y c A R G D K G I Y Y Y Y M D V W G K G T T V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V s W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S s s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D T H T c P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N w Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G E Y C K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P s R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R W Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 80 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcggta tgttcggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatttacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggaaat 300 tattactatg agagtagtct cgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 480 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtgtc cctcacctgt ctggtgaagg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 81 E V Q L V E S G A E V K P G S S V K V S C K A S G G T F S S Y A I s w V R Q A P G Q G L E W M G 'G I I G M F G T A N Y A Q K F Q G R V T I T A D E F T S T A Y M E L S s L R S E D T A V Y Y C A R G N Y Y Y E S S L D Y W G Q G T L V T V s S A S T K G P S V F P L A P S S K S T s G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S w N S G A L T s G V H T F P A V L Q S S G L Y S L s S V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D R V ? P K S C D K T H T C P P c P A P ? L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V ? V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y c K V S N A L P A P I E K T I s A K G Q P R E P Q V Y T L P P s R E E M T K N Q V S L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s L T V D K s R W Q Q G N V F s c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 82 caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgagagtc 60 tcctgcaagg cttctggaag catcttcaga aactatgcta tgagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcgcta tttttgggac accaaagtac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatcgacgag cactgtctac 240 atggaactga gcggactgag atctgaggac acggccatgt attactgtgc gaggattccc 300 cactataatt ttggttcggg gagttatttc gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360 gtctcgagtg ctagcaccaa gggccccagc gtgttccccc tggcccccag cagcaagagc 420 accagcggcg gcacagccgc cctgggctgc ctggtgaagg actacttccc cgagcccgtg 480 accgtgagct ggaacagcgg cgccttgacc agcggcgtgc acaccttccc cgccgtgctg 540 cagagcagcg gcctgtacag cctgagcagc gtggtgaccg tgcccagcag cagcctgggc 600 acccagacct acatctgcaa cgtgaaccac aagcccagca acaccaaggt ggacaaacgc 660 gtggagccca agagctgcga caagacccac acctgccccc cctgccctgc ccccgagctg 720 ctgggcggac cctccgtgtt cctgttcccc cccaagccca aggacaccct catgatcagc 780 cggacccccg aggtgacctg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaggaccc cgaggtgaag 840 ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cacaacgcca agaccaagcc ccgggaggag 900 cagtacaaca gcacctaccg ggtggtgagc gtgctcaccg tgctgcacca ggactggctg 960 aacggcaagg agtacaagtg caaggtgagc aacaaggccc tgcctgcccc catcgagaag 1020 accatcagca aggccaaggg ccagccccgg gagccccagg tgtacaccct gccccccagc 1080 cgggaggaga tgaccaagaa ccaggtgtcc ctcacctgtc tggtgaaggg cttctacccc 1140 agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaac ggccagcccg agaacaacta caagaccacc 1200 ccccctgtgc tggacagcga cggcagcttc ttcctgtaca gcaagctcac cgtggacaag 1260 agccggtggc agcagggcaa cgtgttcagc tgcagcgtga tgcacgaggc cctgcacaac 1320 cactacaccc agaagagcct gagcctgagc cccggcaag 1359 SEC ID NO: 83 Q V Q L V Q S G A E V P G S S V R V S C K A S G S I F R N Y A M S w V R Q A P G Q G L E W M G G I I A I F G T P K Y A Q K F Q G R V T I T A D E S T s T V Y M E L S G L R S E D T A Y Y C A R I P H Y N F G S G s Y F D Y W G Q G T L V T V S S A S T K G P S V F P L A P S s K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T s G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P D T L M I S R T P E V T c V V V D V S H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y c K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c I) V K G F Y P s D I A V E E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y S K L T V D K S R Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 84 tcctatgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60 tcttgttctg gaagcacgtt caacatcgga agtaatgctg tagactggta ccggcagctc 120 ccaggaacgg cccccaaact cctcatctat agtaataatc agcggccctc aggggtccct 180 gaccgattct ctggctccag gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240 tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acatcctgaa tgttccggta 300 ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggtgcggccg caggccagcc caaggccgct 360 cccagcgtga ccctgttccc cccctcctcc gaggagctgc aggccaacaa ggccaccctg 420 gtgtgcctca tcagcgactt ctaccctggc gccgtgaccg tggcctggaa ggccgacagc 480 agccccgtga aggccggcgt ggagaccacc acccccagca agcagagcaa caacaagtac 540 gccgccagca gctacctgag cctcaccccc gagcagtgga agagccaccg gagctacagc 600 tgccaggtga cccacgaggg cagcaccgtg gagaagaccg tggcccccac cgagtgcagc 660 SEC ID NO: 85 S Y V L T Q P P S A S G T P G Q R V T I S C S G S T F N I G S N A V D W Y R Q L P G T A P K L L I Y S N N Q R P S G V P D R F S G S R S G T S A S L A I S G L Q S E D E A D Y Y C A A D D I L N V P V F G G G T K L T V L G A A A G O P K A A P S V T L F P P S S E E L O A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T V A W K A D S S P V K A G V E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q W K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 86 cagtctgccc tgactcagcc tgccgccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60 tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120 cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180 tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240 caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cacttatgtc 300 ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggtgcggccg caggccagcc caaggccgct 360 cccagcgtga ccctgttccc cccctcctcc gaggagctgc aggccaacaa ggccaccctg 420 gtgtgcctca tcagcgactt ctaccctggc gccgtgaccg tggcctggaa ggccgacagc 480 agccccgtga aggccggcgt ggagaccacc acccccagca agcagagcaa caacaagtac 540 gccgccagca gctacctgag cctcaccccc gagcagtgga agagccaccg gagctacagc 600 tgccaggtga cccacgaggg cagcaccgtg gagaagaccg tggcccccac cgagtgcagc 660 SEC ID NO: 87 Q S A L T Q P A A V s G S P G Q S I T I s c T G T S s D V G G Y N Y V S Y Q Q H P G K A P K L M I Y E V S N R P s G V s N R F s G S K S G N T A S L T 1 S G L Q A E D E A D Y Y c S S Y T s s S T Y V F G T G T K V T V L G A A A G Q P K A A P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T V A w K A D S S P V K A G V E T T T P S~ K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q W S H R S Y s C Q v T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 88 tcctatgtgc tgactcagcc accctcagtc tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60 tcttgctctg gaagccgctc caacgtcgga gataattctg tatattggta tcaacacgtc 120 ccagaaatgg cccccaaact cctcgtctat aagaatactc aacggccctc aggagtccct 180 gcccggtttt ccggctccaa gtctggcact tcagcctccc tggccatcat tggcctccag 240 tccggcgatg aggctgatta ttattgtgtg gcatgggatg acagcgtaga tggctatgtc 300 ttcggatctg ggaccaaggt caccgtccta ggtgcggccg caggccagcc caaggccgct 360 cccagcgtga ccctgttccc cccctcctcc gaggagctgc aggccaacaa ggccaccctg 420 gtgtgcctca tcagcgactt ctaccctggc gccgtgaccg tggcctggaa ggccgacagc 480 agccccgtga aggccggcgt ggagaccacc acccccagca agcagagcaa caacaagtac 540 gccgccagca gctacctgag cctcaccccc gagcagtgga agagccaccg gagctacagc 600 tgccaggtga cccacgaggg cagcaccgtg gagaagaccg tggcccccac cgagtgcagc 660 SEC ID NO: 89 S YV L T Q P P S V S G T P G Q RV T I s c S G S R S N V G D N s V Y W Y Q HV P E MA P K L LV Y K N T Q R P s G V P A R F S G s K S G T s A S L A I I G L Q S G D E A D Y Y C VAW D D s V D G Y V F G S G T K V T V L G A A A G Q P KAA P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T VAW KA D S S PV KA GVE T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 90 cagtctgtgt tgacgcagcc gccctcagtg tctgcggccc caggacagaa ggtcaccatc 60 tcctgctctg gaagcagctc caacattggg aatgattatg tatcctggta ccagcagctc 120 ccaggaacag cccccaaact cctcatttat gacaataata agcgaccctc agggattcct 180 gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tcagccaccc tgggcatcac cggactccag 2 0 actggggacg aggccaacta ttactgcgca acatgggatc gccgcccgac tgcttatgtt 300 gtcttcggcg gagggaccaa gctgaccgtc ctaggtgcgg ccgcaggcca gcccaaggcc 360 gctcccagcg tgaccctgtt ccccccctcc tccgaggagc tgcaggccaa caaggccacc 420 ctggtgtgcc tcatcagcga cttctaccct ggcgccgtga ccgtggcctg gaaggccgac 480 agcagccccg tgaaggccgg cgtggagacc accaccccca gcaagcagag caacaacaag 540 tacgccgcca gcagctacct gagcctcacc cccgagcagt ggaagagcca ccggagctac 600 agctgccagg tgacccacga gggcagcacc gtggagaaga ccgtggcccc caccgagtgc 660 age 663 SEC ID NO: 91 Q S V L T Q P P S V S AA P G Q KV T I S C S G S S S N I G N D Y V S W Y Q Q L P G T A P K L L I Y D N N K R P S G I P D R F S G S S G T S A T L G I T G L Q T G D E A N Y Y C A T W D R R P T A Y VV F G G G T K L T V L GAA AG Q P KAA P S V T L F P P S S E E L Q AN K A T L V C L I S D F Y P GA V T VA W A D S S P VKAG V E T T T P S K Q S NN KY AA S S Y L S L T P E Q W K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T VA P T E C S SEC ID NO: 92 gacatecaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcgagtca gggcattagc agttatttag cctggtatca geagaageca 120 gggaaagttc ctacactcct gatctatgat gcatccactt tgcgatcagg ggtcccatct 180 cgcttcagtg gcagtggatc tgcgacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaaagg tataacagtg cccccccgat caccttcggc 300 caagggacac gactggagat taaacgtgcg gccgcaccca gcgtgttcat cttccccccc 360 tccgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420 ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480 gagagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctcacc 540 ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600 ctgagcagcc ccgtgaccaa gagettcaac cggggcgagt gt 642 SEC ID NO: 93 D I Q M T Q S P S S L S A s V G D R V T I T C R A S Q G I S S Y L A w Y Q Q K P G K V P T L L I Y D A s T L R S G V P s R F S G S G s A T D F T L T I S S L Q P E D V A T Y Y C Q R Y N S A P P I T F G Q G T R L E I K R A A A P S V F I -F P P s D E Q L K S G T A S V V c L L N N F Y P R E A K V Q W K V D N A L Q S G N s Q E s V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S K A D Y ? K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E c SEC ID NO: 94 cagtctgtgc tgactcagcc accctcagag tccgtgtccc caggacagac agccagcgtc 60 acctgctctg gacataaatt gggggataaa tatgtttcgt ggtatcagca gaagccaggc 120 cagtcccctg tattactcat ctatcaagat aacaggcggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttcataggct ccaactctgg gaacacagcc actctgacca tcagcgggac ccaggctctg 240 gatgaggctg actattactg tcaggcgtgg gacagcagca ctgcggtttt cggcggaggg 300 accaagctga ccgtcctagg tgcggccgca ggccagccca aggccgctcc cagcgtgacc 360 ctgttccccc cctcctccga ggagctgcag gccaacaagg ccaccctggt gtgcctcatc 420 agcgacttct accctggcgc cgtgaccgtg gcctggaagg ccgacagcag ccccgtgaag 480 gccggcgtgg agaccaccac ccccagcaag cagagcaaca acaagtacgc cgccagcagc 540 tacctgagcc tcacccccga gcagtggaag agccaccgga gctacagctg ccaggtgacc 600 cacgagggca gcaccgtgga gaagaccgtg gcccccaccg agtgcagc 648 EC ID NO: 95 Q S V L T Q P P S E S V S P G Q T A S V T C S G H K L G D K Y V S W Y Q Q K P G Q S P V L L I Y Q D N R R P S G I P E R F I G S N S G N T A T L T I S G T Q A L D E A D Y Y C Q A W D S S T A V F G G G T K L T V L G A A A G Q P K A A P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T V A W K A D S S P V A G V E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q W K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 96 gaaattgtgc tgactcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gcgtgttagc agctacttag cctggtacca acagaaacct 120 ggccaggctc ccaggctcct catctatggt gcatccacca gggccgctgg catcccagac 180 aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag actggagcct 240 gaagattctg cagtgtatta ctgtcagcag tatggtagga caccgctcac tttcggcgga 300 gggaccaagg tggagatcaa acgtgcggcc gcacccagcg tgttcatctt ccccccctcc 360 gacgagcagc tgaagagcgg caccgccagc gtggtgtgcc tgctgaacaa cttctacccc 420 cgggaggcca aggtgcagtg gaaggtggac aacgccctgc agagcggcaa cagccaggag 480 agcgtgaccg agcaggacag caaggactcc acctacagcc tgagcagcac cctcaccctg 540 agcaaggccg actacgagaa gcacaaggtg tacgcctgcg aggtgaccca ccagggcctg 600 agcagccccg tgaccaagag cttcaaccgg ggcgagtgt 639 SEC ID NO: 97 E I V L T Q S P G T L S L S P G E R A T L S C R A S Q R V S S Y L A Y Q Q K P G Q A P R L L I Y G A S T RAA G I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D S A V Y Y C Q Q Y G R T P L T F G G G T K V E I K R A A A P S V F I F P P S D E Q L K S G T A S V V C L L N N F Y P R E A K V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 98 tcctatgtgc tgactcagcc accctcggtg tcagtggccc caggacagac ggccaggatt 60 acctgtgggg gaaacaacat tggaagtaaa agtgtgcact ggtaccagca gaagccaggc 120 caggcccctg tgctggtcgt ctatgatgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttctctggct ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcagggt cgaagccggg 240 gatgaggccg actattactg tcaggtgtgg gatagtagta gtgatcatgc tgtgttcgga 300 ggaggcaccc agctgaccgt cctcggtgcg gccgcaggcc agcccaaggc cgctcccagc 360 gtgaccctgt tccccccctc ctccgaggag ctgcaggcca acaaggccac cctggtgtgc 420 ctcatcagcg acttctaccc tggcgccgtg accgtggcct ggaaggccga cagcagcccc 480 gtgaaggccg gcgtggagac caccaccccc agcaagcaga gcaacaacaa gtacgccgcc 540 agcagctacc tgagcctcac ccccgagcag tggaagagcc accggagcta cagctgccag 600 gtgacccacg agggcagcac cgtggagaag accgtggccc ccaccgagtg cagc 654 SEC ID NO: 99 S Y V L T Q P P S V S VA P G Q T A R I T c G G N N I G S K S V H w Y Q Q K P G Q A P V L VV Y D D S D R P S G I P E R F S G S N S G N T A T L T I s R V E AG D E A D Y Y C QVW D S S S D H A V F G G G T Q L T V L G A A A G Q P KAA P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T V AW K A D S S PV KA GV E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q W K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 100 tcctatgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60 tcttgttctg gaagcagctc caacatcgga agtaattatg tatactggta ccagcagctc 120 ccaggcacgg cccccaaact cctcatctat agggatggtc agcggccctc aggggtccct 180 gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tggactccgg 240 tccgatgatg aggctgatta ttactgtgca acatgggatg acaacctgag tggtccagta 300 ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta ggtgcggccg caggccagcc caaggccgct 360 cccagcgtga ccctgttccc cccctcctcc gaggagctgc aggccaacaa ggccaccctg 420 gtgtgcctca tcagcgactt ctaccctggc gccgtgaccg tggcctggaa ggccgacagc 480 agccccgtga aggccggcgt ggagaccacc acccccagca agcagagcaa caacaagtac 540 gccgccagca gctacctgag cctcaccccc gagcagtgga agagccaccg gagctacagc 600 tgccaggtga ' cccacgaggg cagcaccgtg gagaagaccg tggcccccac cgagtgcagc 660 SEC ID NO: 101 S Y V L T Q P P S A S G T P G Q RV T I S C S G S S S N I G S N Y V Y W Y Q Q L P G T A P K L L I Y R D G Q R P S G V P D R F S G S K S G T S A S L A I S G L R S D D E A D Y Y C A T W D D N L S G P V F G G G T K L T V L GAAA G Q P KAA P S V T L F P P S S E E L Q AN KA T L V C L I S D F Y P G AV T VAW K A D S S P VKA GV E T T T P S K Q S N N K Y AA S S Y L S L T P E Q W K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T VA P T E C S SEC ID NO: 102 gaaattgtgt tgacccagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcacccag aactttcggc 300 ggagggacca aggtggagat caaacgtgcg gccgcaccca gcgtgttcat cttccccccc 360 tccgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420 ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480 gagagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctcacc 540 ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600 ctgagcagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642 SEC ID NO: 103 E I V L T Q S P G T L S L S P G E R A T L S C R A s Q S V S S s Y L A W Y Q Q K P G Q A P R L L I Y G A S S RA T G I P D R F s G s G S G T D F T L T I S R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y G S S P R T F G G G T K V E 1 K R A A A P s V F I F P P S D E Q L K S G T A S V V C L L N N F Y P R E A K V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 104 cagtctgcco tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60 tcctgcactg gaaccagcag tgacgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120 cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgaggtca gtaatcggcc ctcaggggtt 180 tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240 caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cactcttgtc 300 ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggtgcggccg caggccagcc caaggccgct 360 cccagcgtga ccctgttccc cccctcctcc gaggagctgc aggccaacaa ggccaccctg 420 gtgtgcctca tcagcgactt ctaccctggc gccgtgaccg tggcctggaa ggccgacagc 480 agccccgtga aggccggcgt ggagaccacc acccccagca agcagagcaa caacaagtac 540 gccgccagca gctacctgag cctcaccccc gagcagtgga agagccaccg gagctacagc 600 tgccaggtga cccacgaggg cagcaccgtg gagaagaccg tggcccccac cgagtgcagc 660 SEC ID NO: 105 Q S A L T Q P A S V S G S P G Q S I T I S C T G T S S D V G G Y N Y V S W Y Q Q H P G K A P K L M I Y E V S N R P S G V S N R F S G S K S G N T A S L T I S G L Q A E D E A D Y Y C S S Y T S S S T L V F G T G T V T V L G A A A G Q P K A A P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T V A W K A D S S P V K A G V E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q W K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 106 cagtctgtcg tgacgcagcc gccctcggtg tcagtggccc caggacagac ggccaggatt 60 acctgtgggg gaaacaacat tggaagtaaa agtgtgcact ggtaccagca gaagccaggc 120 caggcccctg tgctggtcgt ctatgatgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttctctggct ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcagggt cgaagccggg 240 gatgaggccg actattactg tcaggtgtgg gatagtagta gtgatcatta tgtcttcgga 300 actgggacca aggtcaccgt cctaggtgcg gccgcaggcc agcccaaggc cgctcccagc 360 gtgaccctgt tccccccctc ctccgaggag ctgcaggcca acaaggccac cctggtgtgc 420 ctcatcagcg acttctaccc tggcgccgtg accgtggcct ggaaggccga cagcagcccc 480 gtgaaggccg gcgtggagac caccaccccc agcaagcaga gcaacaacaa gtacgccgcc 540 agcagctacc tgagcctcac ccccgagcag tggaagagcc accggagcta cagctgccag 600 gtgacccacg agggcagcac cgtggagaag accgtggccc ccaccgagtg cagc 654 SEC ID NO: 107 Q s V V T Q P P s V S V A P G Q T A R I T c G G N N I G S K S V H w Y Q Q K P G Q A P V L V V Y D D S D R P S G I P E R F S G S N S G N T A T L T I s R V E A G D E A D Y Y C Q V W D S S S D H Y V F G T G T K V T V L G A A A G Q P A A P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T V A w K A D S S P V K A G V E T T T P S Q S N N K Y A A S S Y L s L T P E Q w K S H R S Y s C Q V T H E G S T V E T V A P T E C S SEC ID NO: 108 actgtgttga cacagccgcc ctcagtgtct ggggccccag ggcagagggt caccatctcc 60 tgcactggga gcagctccaa catcggggca ggttatgatg tacactggta ccagcagctt 120 ccaggaacag cccccaaact cctcatctat ggtaacagca atcggccctc aggggtccct 180 gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tcagccaccc tgggcatcac cggactccag 240 actggggacg aggccgatta ttactgcgga acatgggata gcagcctgag tgcttatgtc 300 ttcggaactg ggaccaaggt caccgtccta ggtgcggccg caggccagcc caaggccgct 360 cccagcgtga ccctgttccc cccctcctcc gaggagctgc aggccaacaa ggccaccctg 420 gtgtgcctca tcagcgactt ctaccctggc gccgtgaccg tggcctggaa ggccgacagc 480 agccccgtga aggccggcgt ggagaccacc acccccagca agcagagcaa caacaagtac 540 gccgccagca gctacctgag cctcaccccc gagcagtgga agagccaccg gagctacagc 600 tgccaggtga cccacgaggg cagcaccgtg gagaagaccg tggcccccac cgagtgcagc 660 SEC ID NO: 109 T V" L T Q P P S V S G A P G Q R V T I S C T G S S S N I G A G Y D V H W Y Q Q L P G T A P K L L I Y G N S N R P S G V P D R F S G S K S G T S A T L G I T G L Q T G D E A D Y Y C G T W D S S L S A Y V F G T G T K V T V L G A A A G Q P K A A P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T V A W K A D S S P V K A G V E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 110 M E K I V L L F A I V S L V K s D Q I C I G Y H A N N S T E Q V D T I M E K N V T V T H A Q D I E K K H N G K L C D L D G V P L I L R D C S V A G w L L G N P M C D E F I N V P E W S Y I V E K A N P V N D L C Y P G D F N D Y E E L K H L L S R I N H F E K I Q I 1 P K S S S s H E A S L G V S S A C P Y Q G K S S F F R N V V W L I K K N s T Y P T I K R S Y N N T N Q E D L L V L w G I H H P N D A A E Q T K L Y Q N P T T Y I s V G T S T L N Q R L V P R I A T R S K V N G Q S G R M E F F w T I L K P N D A I N F E S N G N F I A P E Y A Y K I V K K G D S T I M K s E L E Y G N C N T C Q T P M G A I N S S M P F H N I H P L T I G E c P K Y V K S N R L V L A T G L R N S P Q R ? R R R K K R G L F G A I A G F I E G G W Q G M V D G W Y G Y H H S N E Q G S G Y A A D E S T Q K A I D G V T N K V N S I I D K M N T Q F E A V G R E F N N L E R R I E N L N K K M E D G F L D V w T Y N A E L L V L M E N E R T L D F H D S N V K N L Y D K V R L Q L R D N A K E L G N G C F E F Y H K C D N E C M ? S V R N G T Y D Y P Q Y S E E A R L K R E E I S G V K L E S I G I Y Q I L S I Y S T V A s S L A L A I M V A G L s L M C S N G S L Q C R SEC ID NO: 111 M E K I V L L F A I V S L V K s D Q I C I G Y H A N N S T E Q V D T I M E K N V T V T H A Q D I L E T H N G L C D L D G V K P L I L R D C s V A G w L L G N P M C D E F I N V P E W S Y I V E K A N P V N D L C Y P G D F N D Y E ? L K H L L S R I N H F E K I Q I I P K s S W S S H E A s L G V S S A C P Y Q G K S s F F R N V V W L I K K N s T Y P T I K R S Y N N T N Q E D L L V L W G I H H P N D A A E Q T K L Y Q N P T T Y I s V G T S T L N Q R L V P R I A T R S K V N G Q S G R M E F F W T I L K P N D A I N F E S N G N F I A P E Y A Y K I V K K G D S T 1 M K S E L E Y G N C N T K C Q T P M G A I N S S M P F H N I H P L T I G E C P K Y V K s N R L V L A T G L R N S P Q R E R R R K K R G II F G A I A G F I E G G w Q G M V D G W Y G Y H H S N E Q G S G Y A A D E s T Q K A I 0 G V T N K V N S I I D K M N T Q F E A V G R E F N N L E R R I E N L N K K M E D G F L D V w T Y N A E L L V L M E N E R T L D F H D S N V K N L Y D K V R L Q L R D N A K E L G N G C F E F Y H K C D N E C M E S V R N G T Y D Y P Q Y S E E A R L K R E E I S G V K L E S I G I Y Q I L S I Y S T V A S S L A L A I M V A G L s L M C S N G S L Q C R SEC ID NO: 112 M E K I V L L L A I V s XJ V K s D Q I C I G Y H A N N S T E Q V D T I M E K N V T V T H A Q D I L E K ? H N G K L C D L D G V K P L I L R D C s V A G w L L G N P M C D E F I N V P E W S Y I V E K A N P A N D L C Y P G N F N D Y E E L K H L L S R I N H F E K I Q I I P K s S W S D H E A S S G V S S A C P Y Q G K S S F F R N V V W L I K N s s Y P T I K R S Y N N T N Q E D L L V L w G I H H P N D A A E Q T R L Y Q N P T T Y I s V G ? S T L N Q R L V P K I A T R S K V N G Q S G R M E F F w T I L K P N D A I N F E S N G N F I A P E Y A Y K I V K K G D S A I K s E L E Y G N c N T K C Q T P M G A 1 N S s M P F H N I H P L T I G E c P K Y V K S N R L V L A T G L R N S P Q R E R R R K K R G L F G A I A G F I E G G w Q G M V D G W Y G Y H H S N E Q G S G Y A A D K E S T Q K A I D G V T N K V N S I I D K M N T Q F E A V G R E F N N L E R R I E N L N K K M E D G F L D V W T Y N A E L L V L M E N E R T L D F H D S N V K N L Y D K V R L Q L R D N A K E L G N G C F E F Y H K C D N E C M E S V R N G T Y D Y P Q Y S E E A R L K R E E 2 S G V K L E S I G I Y Q I L S 1 Y S T V A s S L A L A I M V A G L s L W M C S N G S L Q c R SEC ID NO: 113 M E K I V L L F A I V S L V K S D Q I c I G Y H A N N S T E Q V D T I M E N V T V T H A Q D I L E T H N G K L c D L D G V K P L I L R D C s V A G w L L G N P M C D E F I N V P E W S Y I V E K A N P V N D L C Y P G D F N D Y E E L K H L L S R I N H F E K I Q I I P K S S W S s H E A S L G V S S A C P Y Q G K S S F F R N V V W L I K K N s T Y P T I K R S Y N N T N Q E D L L V L G I H H P N D A A E Q T K L Y Q N P T T Y I s V G T S T L N Q R L V P R I A T R S K V N G Q S G R M E F F T I L P N D A I N F ? S N G N F I A P E Y A Y K I V K K G D S T I M K S E L E Y G N C N T K C Q T P M G A I N S S P F H N I H P L T I G E C P K Y V K s N R L V L A T G L R N S P Q R E R R R K R G L F G A I A G F I E G G w Q G M V D G W Y G Y H H S N E Q G S G Y A A D K E S T Q K A I D G V T N K V N s I I D K M N T Q F E A V G R E F N N L E R R I E N L N K M E D G F L D V w T Y N A E L L V L M E N E R T L D F H D S N V N L Y D K V R L Q ll R D N A K E L G N G C F E F Y H K C D N E C M E S V R N G T Y D Y P Q Y S E E A R L K R E ? I S G V K L E S I G I Y Q I Q H S G G R S S L E G P R F E Q K L I S E E D L N M H T G H H H H H H SEC ID NO: 114 M E K I V L L L A I V S L V K S D Q I c I G Y H A N N S T E Q V D T I E N V T V T H A Q D I L E K T H N G K L c D L D G V K P L I L R D C S V A G w L L G N P M C D E F I N V P E W S Y I V E K A N P A N D L C Y P G N F N D Y E E L H L L S R I N H F E K I Q I I P K S S W S D H E A S S G V S S A C P Y Q G K S S F F R N V V W L I K N S s Y P T I R S Y N N T N Q E D h L V L W G I H H P N D A A E Q T R L Y Q N P T T Y I S V G T S T L N Q R L V P K I A T R S K V N G Q S G R M E F F w T I L K P N D A I N F E S N G N F I A P E Y A Y K I V K G D S A I K S E L E Y G N C N T K C Q T P M G A I N S s M P F H N I H P L T I G E c P K Y V K S N R L V L A T G L R N S P Q R E R R R K R G L F G A I A G F I E G G W Q G M V D G W Y G Y H H S N E Q G S G Y A A D E S T Q K A I D G V T N K V N S I I D K M N T Q F E A V G R E F N N L E R R I E N L N K K M E D G F L D V w T Y N A E L L V L M E N E R T L D F H D S N V K N L Y D V R L Q L R D N A K E L G N G C F E F Y H K C D N ? C M E S V R N G T Y D Y P Q Y S E E A R L K R E E I S G V K L E S I G I Y Q I Q H S G G R S S L E G P R F E Q K L I S E E D L N M H T G H H H H H H SEC ID NO: 115 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gtcctatgtg 420 ctgactcagc caccctcagc gtctgggacc cccgggcaga gggtcaccat ctcttgttct 480 ggaagcacgt tcaacatcgg aagtaatgct gtagactggt accggcagct cccaggaacg 540 gcccccaaac tcctcatcta tagtaataat cagcggccct caggggtccc tgaccgattc 600 tctggctcca ggtctggcac ctcagcctcc ctggccatca gtgggctcca gtctgaggat 660 gaggctgatt attactgtgc agcatgggat gacatcctga atgttccggt attcggcgga 720 gggaccaagc tgaccgtcct aggt 744 SEC ID NO: 116 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G P F R S Y A I S W V R Q A P G Q G P E W M G G I I P I F G T T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A M Y Y C A K H M G Y Q V R E T M D V W G G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T S Y V L T Q P P S A S G T P G Q R V T I S C S G S T F N I G S N A V D W Y R Q L P G T A P L L I Y S N N Q R P S G V P D R F S G S R S G T S A S L A I S G L Q S E D E A D Y Y C A A W D D I L N V P V F G G G T K L T V L SEC ID NO: 117 caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc . 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gcagtctgcc 420 ctgactcagc ctgccgccgt gtctgggtct cctggacagt cgatcaccat ctcctgcact 480 ggaaccagca gtgacgttgg tggttataac tatgtctcct ggtaccaaca gcacccaggc 540 aaagccccca aactcatgat ttatgaggtc agtaatcggc cctcaggggt ttctaatcgc 600 ttctctggct ccaagtctgg caacacggcc tccctgacca tctctgggct ccaggctgag 660 gacgaggctg attattactg cagctcatat acaagcagca gcacttatgt cttcggaact 720 gggaccaagg tcaccgtcct aggt 744 SEC ID NO: 118 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G P F R S Y A I S V R Q A P G Q G P E M G G I 1 P I F G T T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A M Y C A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T Q S A L T Q P A A V S G S P G Q S I T I S C T G T S S D V G G Y N Y V S W Y Q Q H P G K A P K L M I Y E V S N R P S G V S N R F S G S K S G N T A S L T I S G L Q A E D E A D Y Y C S S Y T S S S T Y V F G T G T K V T V L G SEC ID NO: 119 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gtcctatgtg 420 ctgactcagc caccctcagt ctctgggacc cccgggcaga gggtcaccat ctcttgctct 80 ggaagccgct ccaacgtcgg agataattct gtatattggt atcaacacgt cccagaaatg 540 gcccccaaac tcctcgtcta taagaatact caacggccct caggagtccc tgcccggttt 600 tccggctcca agtctggcac ttcagcctcc ctggccatca ttggcctcca gtccggcgat 660 gaggctgatt attattgtgt ggcatgggat gacagcgtag atggctatgt cttcggatct 720 gggaccaagg tcaccgtcct aggt 744 SEC ID NO: 120 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V s C K A s G G P F R S Y A I S W V R Q A P G Q G P E W M G G I 1 P I F G T T Y A P F Q G RV T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A M Y Y c A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V s S G T G G S G G T G S. G T G G S T S Y V L T Q P P S V S G T P G Q R V T I S C S G S R S N V G D N S V Y W Y Q H V P E A P K L L V Y K N T Q R P S G V P A R F S G S K S G T S A S L A I I G L Q S G D E A D Y Y C V A W D D S V D G Y V F G S G T K V T V L G SEC ID NO: 121 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gcagtctgtg 420 ttgacgcagc cgccctcagt gtctgcggcc ccaggacaga aggtcaccat ctcctgctct 480 ggaagcagct ccaacattgg gaatgattat gtatcctggt accagcagct cccaggaaca 540 gcccccaaac tcctcattta tgacaataat aagcgaccct cagggattcc tgaccgattc 600 tctggctcca agtctggcac gtcagccacc ctgggcatca ccggactcca gactggggac 660 gaggccaact attactgcgc aacatgggat cgccgcccga ctgcttatgt tgtcttcggc 720 ggagggacca agctgaccgt cctaggt 747 SEC ID NO: 122 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G P F R S Y A I S W V R Q A P G Q G P E W G G I I P I F G T T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A M Y Y C A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T Q S V L T Q P P S V S A A P G Q V 1 I S C S G S S S N I G N D Y V S Y Q Q L P G T A P K L L I Y D N N K R P S G I P D R F S G S K S G T S A T L G I T G L Q T G D E A N Y Y C A T D R R P T A Y V V F G G G T K L T V L G SEC ID NO: 123 caggtacagc tgcagcagtc aggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg tttccggagt cattttcagc ggcagtgcga tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag gccttgagtg gatgggaggg atcagccctc tctttggcac aacaaattac 180 gcacaaaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacc aatccacgaa cacaacctac 240 atggaggtga acagcctgag atatgaggac acggccgtgt atttctgtgc gcgaggtcca 300 aaatattaca gtgagtacat ggacgtctgg ggcaaaggga ccacggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgga catccagatg 420 acccagtctc catcctccct gtctgcatct gtaggagaca gagtcaccat cacttgccgg 480 gcgagtcagg gcattagcag ttatttagcc tggtatcagc agaagccagg gaaagttcct 540 acactcctga tctatgatgc atccactttg cgatcagggg tcccatctcg cttcagtggc 600 agtggatctg cgacagattt cactctcacc atcagcagcc tgcagcctga agatgttgca 660 acttattact gtcaaaggta taacagtgcc cccccgatca ccttcggcca agggacacga 720 ctggagatta aacgt 735 SEC ID NO: 124 Q V Q L Q Q S G A E V K K P G S S V K V S C K V S G V I F S G S A I S W V R Q A P G Q G L E M G G I S P L F G T T N Y A Q K F Q G R V T I T A D Q S T N T T Y M E V N S L R Y E D T A V Y F C A R G P K Y Y S E Y M D V W G K G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T D I Q M T Q S P S S L S A S V G D R V T I T C R A S Q G I S S Y L A W Y Q Q K P G K V P T L L I Y D A S T L R S G V P S R F S G S G S A T D F T L T I S S L Q P E D V A T Y Y C Q R Y N S A P P I T F G Q G T R L E I K R SEC ID NO: 125 caggtccagc tggtacagto tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagt agttatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggagga atcatgggta tgtttggcac aactaactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aattcacgag cgcagcctac 240 atggagctga ggagcctgag atctgaggac acggccgtct actactgtgc gaggtctagt 300 ggttattacc ccgaatactt ccaggactgg ggccagggca ccctggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgca gtctgtgctg 420 actcagccac cctcagagtc cgtgtcccca ggacagacag ccagcgtcac ctgctctgga 480 cataaattgg gggataaata tgtttcgtgg tatcagcaga agccaggcca gtcccctgta 540 ttactcatct atcaagataa caggcggccc tcagggatcc ctgagcgatt cataggctcc 600 aactctggga acacagccac tctgaccatc agcgggaccc aggctctgga tgaggctgac 660 tattactgtc aggcgtggga cagcagcact gcggttttcg gcggagggac caagctgacc 720 qtcctaqat 729 SEC ID NO: 126 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G T F S S Y A I S W V R Q A P G Q G L E W M G G I M G M F G T T N Y A Q K F Q G R V T I T A D E F T S A A Y M E L R s L R S E D T AV Y Y C A R S S G Y Y P E Y F Q D W G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T Q S V L T Q P P S E S V S P G Q T A S V T c S G H K L G D K Y V S W Y Q Q K P G Q S P V L L I Y Q D N R R P s G I P E R F I G s N S G N T A T L T I S G T Q A L D E A D Y Y C Q A W D s s T A V F G G G T K L T V L G SEC ID NO: 127 caggtccagc tggtgcagtc tgggggaggc ctggtcaagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatagca tgaactgggt ccgccaggct 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatcc attagtagta gtagtagtta catatactac 180 gtagactcag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgtat 240 ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagaggtggt 300 gggagctacg gggcctacga aggctttgac tactggggcc agggcaccct ggtcaccgtc 360 tcgagcggta cgggcggttc aggcggaacc ggcagcggca ctggcgggtc gacggaaatt 420 gtgctgactc agtctccagg caccctgtct ttgtctccag gggaaagagc caccctctcc 480 tgcagggcca gtcagcgtgt tagcagctac ttagcctggt accaacagaa acctggccag 540 gctcccaggc tcctcatcta tggtgcatcc accagggccg ctggcatccc agacaggttc 600 agtggcagtg ggtctgggac agacttcact ctcaccatca gcagactgga gcctgaagat 660 tctgcagtgt attactgtca gcagtatggt aggacaccgc tcactttcgg cggagggacc 720 aaggtggaga tcaaacgt 738 SEC ID NO: 128 Q V Q L V Q S G G G L V K P G G S L R L S C A A S G F T F S S Y S M N w V R Q A P G K G L E W V S S I S S S S S Y I Y Y V D S V K G R F T I S R D N A K N S L Y L Q M N S L R A E D T A V Y Y C A R G G G S Y G A Y E G F D Y G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T E I V L T Q S P G T L s L S P G E R A T L S C RA S fi R V S S Y I) A W Y Q Q K P-JG Q A P R L L I Y G A S T R A A G I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D S A V Y Y C Q Q Y G R T P L T F G G G T V E I K R SEC ID NO: 129 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gtcctatgtg 420 ctgactcagc caccctcggt gtcagtggcc ccaggacaga cggccaggat tacctgtggg 480 ggaaacaaca ttggaagtaa aagtgtgcac tggtaccagc agaagccagg ccaggcccct 540 gtgctggtcg tctatgatga tagcgaccgg ccctcaggga tccctgagcg attctctggc 600 tccaactctg ggaacacggc caccctgacc atcagcaggg tcgaagccgg ggatgaggcc 660 gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt agtgatcatg ctgtgttcgg aggaggcacc 720 cagctgaccg tcctcggt 738 SEC ID NO: 130 E V Q L V E S G A E V K P G S S V K V S C K A S G G P F R S Y A I s w V R Q A P G Q G P E W M G G I I P I F G T T K Y A P K F Q G R V T I T A D D F A G T V Y M E L S S L R S E D T A M Y Y C A K H G Y Q V R E T M D V G G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T S Y V L T Q P P S V S V A P G Q T A R I T C G G N N I G S K S V H W Y Q Q K P G Q A P V L V V Y D D S D R P S G I P E R F S G S N S G N T A T L T I S R V E A G D E A D Y Y C Q V D S S S D H A V F G G G T Q L T V L G SEC ID NO: 131 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaagtc 60 tcttgcaagg cttctggagg ccccttccgc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcctgagtg gatgggaggg atcatcccta tttttggtac aacaaaatac 180 gcaccgaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg atttcgcggg cacagtttac 240 atggagctga gcagcctgcg atctgaggac acggccatgt actactgtgc gaaacatatg 300 gggtaccagg tgcgcgaaac tatggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gtcctatgtg 420 ctgactcagc caccctcagc gtctgggacc cccgggcaga gggtcaccat ctcttgttct 480 ggaagcagct ccaacatcgg aagtaattat gtatactggt accagcagct cccaggcacg 540 gcccccaaac tcctcatcta tagggatggt cagcggccct caggggtccc tgaccgattc 600 tctggctcca agtctggcac ctcagcctcc ctggccatca gtggactccg gtccgatgat 660 gaggctgatt attactgtgc aacatgggat gacaacctga gtggtccagt attcggcgga 720 gggaccaagc tgaccgtcct aggt 744 SEC ID NO: 132 E V Q L V E s G A E V K K P G S S V K V S C K A s G G P F R S Y A I S V R Q A P G Q G P E W M G G I I P I F G T T K Y A P K F Q G RV T I T A D D FA G T V Y M E L S s L R S E D T A Y Y c A K H M G Y Q V R E T M D V W G K G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G s T S Y V L T Q P P S A S G T P G Q R V T I S C S G S S S N I G S N Y V Y W Y Q Q L P G T A P K L L I Y R D G Q R P S G V P D R F S G S K S G T S A S L A I s G L R S D D E A D Y Y C A T W D D N L s G P V F G G G T K L T V L SEC ID NO: 133 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc cagggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgtaagg cctctggagg caccttctcc agctatggt tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggagac atcatcggta tgtttggttc aacaaactac 180 gcacagaact tccagggcag actcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaagtagt 300 ggttattacc ctgcatacct cccccactgg ggccagggca ccttggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgga aattgtgttg 420 acccagtctc caggcaccct gtctttgtct ccaggggaaa gagccaccct ctcctgcagg 480 gccagtcaga gtgttagcag cagctactta gcctggtacc agcagaaacc tggccaggct 540 cccaggctcc tcatctatgg tgcatccagc agggccactg gcatcccaga caggttcagt 600 ggcagtgggt ctgggacaga cttcactctc accatcagca gactggagcc tgaagatttt 660 gcagtgtatt actgtcagca gtatggtagc tcacccagaa ctttcggcgg agggaccaag 720 gtggagatca aacgt 735 SEC ID NO: 134 E V Q L V E s G A E V K P G S S V V S C K A S G G T F S S Y G I s W V R Q A P G Q G L E M G D I I G M F G S T N Y A Q N F Q G R L T I T A D E s T S T A Y M E L S S L R S E D T A V Y Y C A R S S G Y Y P A Y L P H W G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T E I V L T Q S P G T L s L S P G E R A T L S C R A S Q S V S S S Y L A Y Q Q K P G Q A P R L L I Y G A S S R A T G 1 P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y G S S P R T F G G G T K V E I K R SEC ID NO: 135 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc cggggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc ttctattcta tgagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag gacttgagtg gatgggaggg atcatcccta tgtttggtac aacaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggtcg aatccacgag cacagcctac 240 atggaggtga gcagcctgag atctgaggac acggccgttt attactgtgc gagaggtgat 300 aagggtatct actactacta catggacgtc tggggcaaag ggaccacggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gcagtctgcc 420 ctgactcagc ctgcctccgt gtctgggtct cctggacagt cgatcaccat ctcctgcact 480 ggaaccagca gtgacgttgg tggttataac tatgtctcct ggtaccaaca gcacccaggc 540 aaagccccca aactcatgat ttatgaggtc agtaatcggc cctcaggggt ttctaatcgc 600 ttctctggct ccaagtctgg caacacggcc tccctgacca tctctgggct ccaggctgag 660 gacgaggctg attattactg cagctcatat acaagcagca gcactcttgt cttcggaact 720 gggaccaagg tcaccgtcct aggt 744 SEC ID NO: 136 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A s G G T F S F Y S M S W V R Q A P G Q G L E W M G G I I P M F G T T N Y A Q K F Q G R V T I T A V E s T S T A Y M E V S S L R S E D T A V Y Y c A R G D K G I Y Y Y Y M D V W G K G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T Q s A L T Q P A S V S G S P G Q S I T I S C T G T S S D V G G Y N Y V S w Y Q Q H P G K A P K L M I Y E V S N R P S G V S N R F S G S K S G N T A S L T I s G L Q A E D E A D Y Y C S S Y T S S S T L V F G T G T K V T V L G SEC ID NO: 137 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcggta tgttcggtac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatttacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggaaat 300 tattactatg agagtagtct cgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgca gtctgtcgtg 420 acgcagccgc cctcggtgtc agtggcccca ggacagacgg ccaggattac ctgtggggga 480 aacaacattg gaagtaaaag tgtgcactgg taccagcaga agccaggcca ggcccctgtg 540 ctggtcgtct atgatgatag cgaccggccc tcagggatcc ctgagcgatt ctctggctcc 600 aactctggga acacggccac cctgaccatc agcagggtcg aagccgggga tgaggccgac 660 tattactgtc aggtgtggga tagtagtagt gatcattatg tcttcggaac tgggaccaag 720 gtcaccgtcc taggt 735 SEC ID NO: 138 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G T F S S Y A I S W V R Q A P G Q G L E W M G G I I G M F G T A N Y A Q K F Q G R V T I T A D E F T S T A Y M E L S S L R S E D T AV Y Y C A R G N Y Y Y E S S L D Y G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T Q S V V T Q P P S V S V A P G Q T A R I T C G G N N I G S K S V H W Y Q Q K P G Q A P V L V V Y D D S D R P S G I P E R F S G S N S G N T A T L T I S R V E A G D E A D Y Y C Q VW D S S S D H Y V F G T G T K V T V L G SEC ID' NO : 139 caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgagagtc 60 tcctgcaagg cttctggaag catcttcaga aactatgcta tgagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcgcta tttttgggac accaaagtac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatcgacgag cactgtctac 240 atggaactga gcggactgag atctgaggac acggccatgt attactgtgc gaggattccc 300 ' cactataatt ttggttcggg gagttatttc gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360 gtctcgagcg gtacgggcgg ttcaggcgga accggcagcg gcactggcgg gtcgacgact 420 gtgttgacac agccgccctc agtgtctggg gccccagggc agagggtcac catctcctgc 480 actgggagca gctccaacat cggggcaggt tatgatgtac actggtacca gcagcttcca 540 ggaacagccc ccaaactcct catctatggt aacagcaatc ggccctcagg ggtccctgac 600 cgattctctg gctccaagtc tggcacgtca gccaccctgg gcatcaccgg actccagact 660 ggggacgagg ccgattatta ctgcggaaca tgggatagca gcctgagtgc ttatgtcttc 720 ggaactggga ccaaggtcac cgtcctaggt 750 SEC ID NO: 140 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S S V R V s C K A s G s I F R N Y A M S W V R Q A P G Q G L E M G G I I A I F G T P K Y A Q K F Q G R V T I T A D E S T S T V y M E L S G L R S E D T A M y Y c A R I P H Y N F G S G s Y F D Y w G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G s T T V L T Q P P S V S G A P G Q R V T I s C T G s S S N I G A G Y D V H W Y Q Q L P G T A P K L l¡ I Y G N S N R P S G V P D R F S G s K S G T s A T L G I T G L Q T G D E A D Y Y C G T W D S S L s A y V F G T G T K V T V L G SEC ID NO: 141 tcgacggatc gggagatctc ccgatcccct atggtgcact ctcagtacaa tctgctctga 60 tgccgcatag ttaagccagt atctgctccc tgcttgtgtg ttggaggtcg ctgagtagtg 120 cgcgagcaaa atttaagcta caacaaggca aggcttgacc gacaattgca tgaagaatct 180 gcttagggtt aggcgttttg cgctgcttcg ctaggtggtc aatattggcc attagccata 240 ttattcattg gttatatagc ataaatcaat attggctatt ggccattgca tacgttgtat 300 ccatatcata atatgtacat ttatattggc tcatgtccaa cattaccgcc atgttgacat 360 tgattattga ctagttátta atagtaatca attacggggt cattagttca tagcccatat 420 _Q atggagttcc gcgttacata acttacggta aatggcccgc ctggctgacc gcccaacgac 480 ccccgcccat tgacgtcaat aatgacgtat gttcccatag taacgccaat agggactttc 540 cattgacgtc aatgggtgga gtatttacgg taaactgccc acttggcagt acatcaagtg 600 tatcatatgc caagtacgcc ccctattgac gtcaatgacg gtaaatggcc cgcctggcat 660 tatgcccagt acatgacctt atgggacttt cctacttggc agtacatcta cgtatt.agtc 720 atcgctatta ccatggtgat gcggttttgg cagtacatca atgggcgtgg atagcggttt 780 gactcacggg gatttccaag tctccacccc attgacgtca atgggagttt gttttggcac 840 caaaatcaac gggactttcc aaaatgtcgt aacaactccg ccccattgac gcaaatgggc 900 ggtaggcgtg tacggtggga ggtctatata agcagagctc gtttagtgaa ccgtcagatc 960 gcctggagac gccatccacg ctgttttgac ctccatagaa gacaccggga ccgatccagc 1020 ctccgcggcc gggaacggtg cattggaagc tggcctggat atcctgactc tcttaggtag 1080 ccttgcagaa gttggtcgtg aggcactggg caggtaagta tcaaggttac aagacaggtt 1140 _. ¡- taaggagatc aatagaaact gggcttgtcg agacagagaa gactcttgcg tttctgatag 1200 gcacctattg gtcttactga catccacttt gcctttctct ccacaggtgt ccactcccag 1260 ttcaattaca gctcgccacc atgggatgga gctgtatcat cctcttcttg gtactgctgc 1320 tggcccagcc ggccagtgac cttgaccggt gcaccacttt tgatgatgtt caagctccta 1380 attacactca acatacttca tctatgaggg gggtttacta tcctgatgaa atttttagat 1440 cggacactct ttatttaact caggatttat ttcttccatt ttattctaat gttacagggt 1500 ttcatactat taatcatacg tttggcaacc ctgtcatacc ttttaaggat ggtatttatt 1560 ttgctgccac agagaaatca aatgttgtcc gtggttgggt ttttggttct accatgaaca 1620 acaagtcaca gtcggtgatt attattaaca attctactaa tgttgttata cgagcatgta 1680 actttgaatt gtgtgacaac cctttctttg ctgtttctaa acccatgggt acacagacac 1740 atactatgat attcgataat gcatttaatt gcactttcga gtacatatct gatgcctttt 1800 cgcttgatgt ttcagaaaag tcaggtaatt ttaaacaott acgágagttt gtgtttaaaa 1860 ataaagatgg gtttctctat gtttataagg gctatcaacc tatagatgta gttcgtgatc 1920 taccttctgg ttttaacact ttgaaaccta tttttaagtt gcctcttggt attaacatta 1980 caaattttag agccattctt acagcctttt cacctgctca agacatttgg ggcacgtcag 2040 ctgcagccta ttttgttggc tatttaaagc caactacatt tatgctcaag tatgatgaaa 2100 atggtacaat cacagatgct gttgattgtt ctcaaaatcc acttgctgaa ctcaaatgct 2160 ctgttaagag ctttgagatt gacaaaggaa tttaccagac ctctaatttc agggttgttc 2220 cctcaggaga tgttgtgaga ttccctaata ttacaaactt gtgtcctttt ggagaggttt 2280 ttaatgctac taaattccct tctgtctatg catgggagag aaaaaaaatt tctaattgtg 2340 ttgctgatta ctctgtgctc tacaactcaa catttttttc aacctttaag tgctatggcg 2400 tttctgccac taagttgaat gatctttgct tctccaatgt ctatgcagat tcttttgtag 2460 tcaagggaga tgatgtaaga caaatagcgc caggacaaac tggtgttatt gctgattata 2520 attataaatt gccagatgat ttcatgggtt gtgtccttgc ttggaatact aggaacattg 2580 atgctacttc aactggtaat tataattata aatataggta tcttagacat ggcaagctta 2640 ggccctttga gagagacata tctaatgtgc ctttctcccc tgatggcaaa ccttgcaccc 2700 cacctgctct taattgttat tggccattaa atgattatgg tttttacacc actactggca 2760 ttggctacca accttacaga gttgtagtac tttcttttga acttttaaat gcaccggcca 2820 cggtttgtgg accaaaatta tccactgacc ttattaagaa ccagtgtgtc aattttaatt 2880 ttaatggact cactggtact ggtgtgttaa ctccttcttc aaagagattt caaccatttc 2940 aacaatttgg ccgtgatgtt tctgatttca ctgattccgt tcgagatcct aaaacatctg 3000 aaatattaga catttcacct tgctcttttg ggggtgtaag tgtaattaca cctggaacaa 3060 atgcttcatc tgaagttgct gttctatatc aagatgttaa ctgcactgat gtttctacag 3120 caattcatgc agatcaactc acaccagctt ggcgcatata ttctactgga aacaatgtat 3180 tccagactca ggcaggctgt cttataggag ctgagcatgt cgacacttct tatgagtgcg 3240 acattcctat tggagctggc atttgtgcta gttaccatac agtttcttta ttacgtagta 3300 ctagccaaaa atctattgtg gcttatacta tgtctttagg tgctgatagt tcaattgctt 3360 actctaataa caccattgct atacctacta acttttcaat tagcattact acagaagtaa 3420 tgcctgtttc tatggctaaa acctccgtag attgtaatat gtacatctgc ggagattcta 3480 ctgaatgtgc taatttgctt ctccaatatg gtagcttttg cacacaacta aatcgtgcac 3540 tctcaggtat tgctgctgaa caggatcgca acacacgtga agtgttcgct caagtcaaac 3600 aaatgtacaa aaccccaact ttgaaatatt ttggtggttt taatttttca caaatattac 3660 ctgaccctct aaagccaact aagaggtctt ttattgagga cttgctcttt aataaggtga 3720 cactcgctga tgctggcttc atgaagcaat atggcgaatg cctaggtgat attaatgcta 3780 gagatctcat ttgtgcgcag aagttcaatg gacttacagt gttgccacct ctgctcactg 3840 atgatatgat tgctgcctac actgctgctc tagttagtgg tactgccact gctggatgga 3900 catttggtgc tggcgctgct cttcaaatac cttttgctat gcaaatggca tataggttca 3960 atggcattgg agttacccaa aatgttctct atgagaacca aaaacaaatc gccaaccaat 4020 ttaacaaggc gattagtcaa attcaagaat cacttacaac aacatcaact gcattgggca 4080 agctgcaaga cgttgttaac cagaatgctc aagcattaaa cacacttgtt aaacaactta 4140 gctctaattt tggtgcaatt tcaagtgtgc taaatgatat cctttcgcga cttgataaag 4200 tcgaggcgga ggtacaaatt gacaggttaa ttacaggcag acttcaaagc cttcaaacct 4260 atgtaacaca acaactaatc agggctgctg aaatcagggc ttctgctaat cttgctgcta 4320 ctaaaatgtc tgagtgtgtt cttggacaat caaaaagagt tgacttttgt ggaaagggct 4380 accaccttat gtccttccca caagcagccc cgcatggtgt tgtcttccta catgtcacgt 4440 atgtgccatc ccaggagagg aacttcacca cagcgccagc aatttgtcat gaaggcaaag 4500 catacttccc tcgtgaaggt gtttttgtgt ttaatggcac ttcttggttt attacacaga 4560 ggaacttctt ttctccacaa ataattacta cagacaatac atttgtctca ggaaattgtg 4620 atgtcgttat tggcatcatt aacaacacag tttatgatcc tctgcaacct gagcttgact 4680 cattcaaaga agagctggac aagtacttca aaaatcatac atcaccagat gttgattttg 4740 gcgacatttc aggcattaac gcttctgtcg tcaacattca aaaagaaatt gaccgcctca 4800 atgaggtcgc taaaaattta aatgaatcac tcattgacct tcaagaactg ggaaaatatg 4860 agcaatatat taaatggcct ctcgacgaac aaaaactcat ctcagaagag gatctgaatg 4920 ctqtgqgcca ggacacgcag gaggtcatcg tggtgccaca ctccttgccc tttaaggtgg 4980 tggtgatctc agccatcctg gccctggtgg tgctcaccat catctccctt atcatcctca 5040 tcatgctttg gcagaagaag ccacgttagg cggccgctcg agtgctagca ccaagggccc 5100 cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc ggcggcacag ccgccctggg 5160 ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg agctggaaca gcggcgcctt 5220 gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc agcggcctgt acagcctgag 5280 cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag acctacatct gcaacgtgaa 5340 ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag cccaagagct gcgacaagac 5400 ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc ggaccctccg tgttcctgtt 5460 cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc cccgaggtga cctgcgtggt 5520 ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga 5580 ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac aacagcacct accgggtggt 5640 gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc aaggagtaca agtgcaaggt 5700 gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc agcaaggcca agggccagcc 5760 ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag gagatgacca agaaccaggt 5820 gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac atcgccgtgg agtgggagag 5880 caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct gtgctggaca gcgacggcag 5940 cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg tggcagcagg gcaacgtgtt 6000 cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac acccagaaga gcctgagcct 6060 gagccccggc aagtgataat ctagagggcc cgtttaaacc cgctgatcag cctcgactgt 6120 gccttctagt tgccagccat ctgttgtttg cccctccccc gtgccttcct tgaccctgga 6180 aggtgccact cccactgtcc tttcctaata aaatgaggaa attgcatcgc attgtctgag 6240 taggtgtcat tctattctgg ggggtggggt ggggcaggac agcaaggggg aggattggga 6300 ágacaatagc aggcatgctg gggatgcggt gggctctatg gcttctgagg cggaaagaac 6360 cagctggggc tctagggggt atccccacgc gccctgtagc ggcgcattaa gcgcggcggg 6420 tgtggtggtt acgcgcagcg tgaccgctac acttgccagc gccctagcgc ccgctccttt 6480 cgctttcttc ccttcctttc tcgccacgtt cgccggcttt ccccgtcaag ctctaaatcg 6540 ggggctccct ttagggttcc gatttagtgc tttacggcac ctcgacccca aaaaacttga 6600 ttagggtgat ggttcacgta gtg'ggccatc gccctgatag acggtttttc gccctttgac 6660 gttggagtcc acgttcttta atagtggact cttgttccaa actggaacaa cactcaaccc 6720 tatctcggtc tattcttttg atttataagg gattttgccg atttcggcct attggttaaa 6780 aaatgagctg atttaacaaa aatttaacgc gaattaattc tgtggaatgt gtgtcagtta 6840 gggtgtggaa agtccccagg ctccccagca ggcagaagta tgcaaagcat gcatctcaat 6900 tagtcagcaa ccaggtgtgg aaagtcccca ggctccccag caggcagaag tatgcaaagc 6960 atgcatctca attagtcagc aaccatagtc ccgcccctaa ctccgcccat cccgccccta 7020 actccgccca gttccgccca ttctccgccc catggctgac taattttttt tatttatgca 7080 gaggccgagg ccgcctctgc ctctgagcta ttccagaagt agtgaggagg cttttttgga 7140 ggcctaggct tttgcaaaaa gctcccggga gcttgtatat ccattttcgg atctgatcaa 7200 gagacaggat gaggatcgtt tcgcatgatt gaacaagatg gattgcacgc aggttctccg 7260 gccgcttggg tggagagg'ct attcggctat gactgggcac aacagacaat cggctgctct 7320 gatgccgccg tgttccggct gtcagcgcag gggcgcccgg ttctttttgt caagaccgac 7380 ctgtccggtg ccctgaatga actgcaggac gaggcagcgc ggctatcgtg gctggccacg 7440 acgggcgttc cttgcgcagc tgtgctcgac gttgtcactg aagcgggaag ggactggctg 7500 ctattgggcg aagtgccggg gcaggatctc ctgtcatctc accttgctcc tgccgagaaa 7560 gtatccatca tggctgatgc aatgcggcgg ctgcatacgc ttgatccggc tacctgccca 7620 ttcgaccacc aagcgaaaca tcgcatcgag cgagcacgta ctcggatgga agccggtctt 7680 gtcgatcagg atgatctgga cgaagagcat caggggctcg cgccagccga actgttcgcc 7740 aggctcaagg cgcgcatgcc cgacggcgag gatctcgtcg tgacccatgg cgatgcctgc 7800 ttgccgaata tcatggtgga aaatggccgc ttttctggat tcatcgactg tggccggctg 7860 ggtgtggcgg accgctatca ggacatagcg ttggctaccc gtgatattgc tgaagagctt 7920 ggcggcgaat gggctgaccg cttcctcgtg ctttacggta tcgccgctcc cgattcgcag 7980 cgcatcgcct tctatcgcct tcttgacgag ttcttctgag cgggactctg gggttcgaaa 8040 tgaccgacca agcgacgccc aacctgccat cacgagattt cgattccacc gccgccttct 8100 atgaaaggtt gggcttcgga atcgttttcc gggacgccgg ctggatgatc ctccagcgcg 8160 gggatctcat gctggagttc ttcgcccacc ccaacttgtt tattgcagct tataatggtt 8220 acaaataaag caatagcatc acaaatttca caaataaagc atttttttca ctgcattcta 8280 gttgtggttt gtccaaactc atcaatgtat cttatcatgt ctgtataccg tcgacctcta 8340 gctagagctt ggcgtaatca tggtcatagc tgtttcctgt gtgaaattgt tatccgctca 8400 caattccaca caacatacga gccggaagca taaagtgtaa agcctggggt gcctaatgag 8460 tgagctaact cacattaatt gcgttgcgct cactgcccgc tttccagtcg ggaaacctgt 8520 cgtgccagct gcattaatga atcggccaac gcgcggggag aggcggtttg cgtattgggc 8580 gctcttccgc ttcctcgctc actgactcgc tgcgctcggt cgttcggctg cggcgagcgg 8640 tatcagctca ctcaaaggcg gtaatacggt tatccacaga atcaggggat aacgcaggaa 8700 agaacatgtg agcaaaaggc cagcaaaagg ccaggaaccg taaaaaggcc gcgttgctgg 8760 cgtttttcca taggctccgc ccccctgacg agcatcacaa aaatcgacgc tcaagtcaga 8820 ggtggcgaaa cccgacagga ctataaagat accaggcgtt tccccctgga agctccctcg 8880 tgcgctctcc tgttccgacc ctgccgctta ccggatacct gtccgccttt ctcccttcgg 89 0 gaagcgtggc- gctttctcat agctcacgct gtaggtatct cagttcggtg taggtcgttc 9000 gctccaagct gggctgtgtg cacgaacccc ccgttcagcc cgaccgctgc gccttatccg 9060 gtaactatcg tcttgagtcc aacccggtaa gacacgactt atcgccactg gcagcagcca 9120 ctggtaacag gattagcaga gcgaggtatg taggcggtgc tacagagttc ttgaagtggt 9180 ggcctaacta cggctacact agaagaacag tatttggtat ctgcgctctg ctgaagccag 9240 ttaccttcgg aaaaagagtt ggtagctctt gatccggcaa acaaaccacc gctggtagcg 9300 gtttttttgt ttgcaagcag cagattacgc gcagaaaaaa aggatctcaa gaagatcctt 9360 tgatcttttc tacggggtct gacgctcagt ggaacgaaaa ctcacgttaa gggattttgg 9420 tcatgagatt atcaaaaagg atcttcacct agatcctttt aaattaaaaa tgaagtttta 9480 aatcaatcta aagtatatat gagtaaactt ggtctgacag ttaccaatgc ttaatcagtg 9540 aggcacctat ctcagcgatc tgtctatttc gttcatccat agttgcctga ctccccgtcg 9600 tgtagataac tacgatacgg gagggcttac catctggccc cagtgctgca atgataccgc 9660 gagacccacg ctcaccggct ccagatttat cagcaataaa ccagccagcc ggaagggccg 9720 agcgcagaag tggtcctgca actttatccg cctccatcca gtctattaat tgttgccggg 9780 aagctagagt aagtagttcg ccagttaata gtttgcgcaa cgttgttgcc attgctacag 9840 gcatcgtggt gtcacgctcg tcgtttggta tggcttcatt cagctccggt tcccaacgat 9900 caaggcgagt tacatgatcc cccatgttgt gcaaaaaagc ggttagctcc ttcggtcctc 9960 cgatcgttgt cagaagtaag ttggccgcag tgttatcact catggttatg gcagcactgc 10020 ataattctct tactgtcatg ccatccgtaa gatgcttttc tgtgactggt gagtactcaa 10080 ccaagtcatt ctgagaatag tgtatgcggc gaccgagttg ctcttgcccg gcgtcaatac 10140 gggataatac cgcgccacat agcagaactt taaaagtgct catcattgga aaacgttctt 10200 cggggcgaaa actctcaagg atcttaccgc tgttgagatc cagttcgatg taacccactc 10260 gtgcacccaa ctgatcttca gcatctttta ctttcaccag cgtttctggg tgagcaaaaa 10320 caggaaggca aaatgccgca aaaaagggaa taagggcgac acggaaatgt tgaatactca 10380 tactcttcct ttttcaatat tattgaagca tttatcaggg ttattgtctc atgagcggat 10440 acatatttga atgtatttag aaaaataaac aaataggggt tccgcgcaca tttccccgaa 10500 aagtgccacc tgacg 10515 SEC ID NO: 142 tcgacggatc gggagatctc ccgatcccct atggtgcact ctcagtacaa tctgctctga 60 tgccgcatag ttaagccagt atctgctccc tgcttgtgtg ttggaggtcg ctgagtagtg 120 cgcgagcaaa atttaagcta caacaaggca aggcttgacc gacaattgtt aattaacatg 180 aagaatctgc ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgct aggtggtcaa tattggccat 240 tagccatatt attcattggt tatatagcat aaatcaatat tggctattgg ccattgcata 300 cgttgtatcc atatcataat atgtacattt atattggctc atgtccaaca ttaccgccat 360 gttgacattg attattgact agttattaat agtaatcaat tacggggtca ttagttcata 420 gcccatatat ggagttccgc gttacataac ttacggtaaa tggcccgcct ggctgaccgc 480 ccaacgaccc ccgcccattg acgtcaataa tgacgtatgt tcccatagta acgccaatag 540 ggactttcca ttgacgtcaa tgggtggagt atttacggta aactgcccac ttggcagtac 600 atcaagtgta tcatatgcca agtacgcccc ctattgacgt caatgacggt aaatggcccg 660 cctggcatta tgcccagtac atgaccttat gggactttcc tacttggcag tacatctacg 720 tattagtcat cgctattacc atggtgatgc ggttttggca gtacatcaat gggcgtggat 780 agcggtttga ctcacgggga tttccaagtc tccaccccat tgacgtcaat gggagtttgt 840 tttggcacca aaatcaacgg gactttccaa aatgtcgtaa caactccgcc ccattgacgc 900 aaatgggcgg taggcgtgta cggtgggagg tctatataag cagagctcgt ttagtgaacc 960 gtcagatcgc ctggagacgc catccacgct gttttgacct ccatagaaga caccgggacc 1020 gatccagcct ccgcggccgg gaacggtgca ttggaatcga tgactctctt aggtagcctt 1080 gcagaagttg gtcgtgaggc actgggcagg taagtatcaa ggttacaaga caggtttaag 1140 gagatcaata gaaactgggc ttgtcgagac agagaagact cttgcgtttc tgataggcac 1200 ctattggtct tactgacatc cactttgcct ttctctccac aggtgtccac tcccagttca 1260 attacagctc gccaccatgc ggctgcccgc ccagctgctg ggccttctca tgctgtgggt 1320 gcccgcctcg agatctatcg atgcatgcca tggtaccaag cttgccacca tgagcagcag 1380 ctcttggctg ctgctgagcc tggtggccgt gacagccgcc cagagcacca tcgaggagca 1440 ggccaagacc ttcctggaca agttcaacca cgaggccgag gacctgttct accagagcag 1500 cctggccagc tggaactaca acaccaacat caccgaggag aacgtgcaga acatgaacaa 1560 cgccggcgac aagtggagcg ccttcctgaa ggagcagagc acactggccc agatgtaccc 1620 cctgcaggag atccagaacc tgaccgtgaa gctgcagctg caggccctgc agcagaacgg 1680 cagcagcgtg ctgagcgagg acaagagcaa gcggctgaac accatcctga acaccatgtc 1740 caccatctac agcaccggca aagtgtgcaa ccccgacaac ccccaggagt gcctgctgct 1800 ggagcccggc ctgaacgaga tcatggccaa cagcctggac tacaacgagc ggctgtgggc 1860 ctgggagagc tggcggagcg aagtgggcaa gcagctgcgg cccctgtacg aggagtacgt 1920 ggtgctgaag aacgagatgg ccagggccaa ccactacgag gactacggcg actactggag 1980 aggcgactac gaagtgaacg gcgtggacgg ctacgactac agcagaggcc agctgatcga 2040 ggacgtggag cacaccttcg aggagatcaa gcctctgtac gagcacctgc acgcctacgt 2100 gcgggccaag ctgatgaacg cctaccccag ctacatcagc cccatcggct gcctgcccgc 2160 ccacctgctg ggcgacatgt ggggccggtt ctggaccaac ctgtacagcc tgaccgtgcc 2220 cttcggccag aagcccaaca tcgacgtgac cgacgccatg gtggaccagg cctgggacgc 2280 ccagcggatc ttcaaggagg ccgagaagtt cttcgtgagc gtgggcctgc ccaacatgac 2340 ccagggcttt tgggagaaca gcatgctgac cgaccccggc aatgtgcaga aggccgtgtg 24~Ó0 ccaccccacc gcctgggacc tgggcaaggg cgacttccgg atcctgatgt gcaccaaagt 2460 gaccatggac gacttcctga ccgcccacca cgagatgggc cacatccagt acgacatggc 2520 ctacgccgcc cagcccttcc tgctgcggaa cggcgccaac gagggctttc acgaggccgt 2580 gggcgagatc atgagcctga gcgccgccac ccccaagcac ctgaagagca tcggcctgct 2640 gagccccgac ttccaggagg acaacgagac cgagatcaac ttcctgctga agcaggccct 2700 gaccatcgtg ggcaccctgc ccttcaccta catgctggag aagtggcggt ggatggtgtt 2760 taagggcgag atccccaagg accagtggat gaagaagtgg tgggagatga agcgggagat 2820 cgtgggcgtg gtggagcccg tgccccacga cgagacctac tgcgaccccg ccagcctgtt 2880 ccacgtgagc aacgactact ccttcatccg gtactacacc cggaccctgt accagttcca 2940 gttccaggag gccctgtgcc aggccgccaa gcacgagggc cccctgcaca agtgcgacat 3000 cagcaacagc accgaggccg gacagaaact gttcaacatg ctgcggctgg gcaagagcga 3060 gccctggacc ctggccctgg agaatgtggt gggcgccaag aacatgaatg tgcgccccct 3120 gctgaactac ttcgagcccc tgttcacctg gctgaaggac cagaacaaga acagcttcgt 3180 gggctggagc accgactgga gcccctacgc cgaccagagc atcaaagtgc ggatcagcct 3240 gaagagcgcc ctgggcgaca aggcctacga gtggaacgac aacgagatgt acctgttccg 3300 gagcagcgtg gcctatgcca tgcggcagta cttcctgaaa gtgaagaacc agatgatcct 3360 gttcggcgag gaggacgtga gagtggccaa cctgaagccc cggatcagct tcaacttctt 3420 cgtgaccgcc cccaagaacg tgagcgacat catcccccgg accgaagtgg agaaggccat 3480 ccggatgagc cggagccgga tcaacgacgc cttccggctg aacgacaact ccctggagtt 3540 cctgggcatc cagcccaccc tgggccctcc caaccagccc cccgtgagca tctggctgat 3600 cgtgtttggc gtggtgatgg gcgtgatcgt ggtgggaatc gtgatcctga tcttcaccgg 3660 catccgggac cggaagaaga agaacaaggc ccggagcggc gagaacccct acgccagcat 3720 cgatatcagc aagggcgaga acaaccccgg cttccagaac accgacgacg tgcagaccag 3780 cttctgataa tctagaacga gctcgaattc gaagcttctg cagacgcgtc gacgtcatat 3840 ggatccgata tcgccgtggc ggccgcaccc agcgtgttca tcttcccccc ctccgacgag 3900 cagctgaaga gcggcaccgc cagcgtggtg tgcctgctga acaacttcta cccccgggag 3960 gccaaggtgc agtggaaggt ggacaacgcc ctgcagagcg gcaacagcca ggagagcgtg 020 accgagcagg acagcaagga ctccacctac agcctgagca gcaccctcac cctgagcaag 4080 gccgactacg agaagcacaa ggtgtacgcc tgcgaggtga cccaccaggg cctgagcagc 4140 cccgtgacca agagcttcaa ccggggcgag tgttaataga cttaagttta aaccgctgat 4200 cagcctcgac tgtgccttct agttgccagc catctgttgt ttgcccctcc cccgtgcctt 4260 ccttgaccct ggaaggtgcc actcccactg tcctttccta ataaaatgag gaaattgcat 4320 cgcattgtct gagtaggtgt cattctattc tggggggtgg ggtggggcag gacagcaagg 4380 gggaggattg ggaagacaat agcaggcatg ctggggatgc ggtgggctct atggcttctg 4440 aggcggaaag aaccagctgg ggctctaggg ggtatcccca cgcgccctgt agcggcgcat 4500 taagcgcggc gggtgtggtg gttacgcgca gcgtgaccgc tacacttgcc agcgccctag 4560 cgcccgctcc tttcgctttc ttcccttcct ttctcgccac gttcgccggc tttccccgtc 4620 aagctctaaa tcgggggctc cctttagggt tccgatttag tgctttacgg cacctcgacc 4680 ccaaaaaact tgattagggt gatggttcac gtagtgggcc atcgccctga tagacggttt 4740 ttcgcccttt gacgttggag tccacgttct ttaatagtgg actcttgttc caaactggaa 4800 caacactcaa ccctatctcg gtctattctt ttgatttata agggattttg gccatttcgg 4860 cctattggtt aaaaaatgag ctgatttaac aaaaatttaa cgcgaattaa ttctgtggaa 4920 tgtgtgtcag ttagggtgtg gaaagtcccc aggctcccca gcaggcagaa gtatgcaaag 4980 catgcatctc aattagtcag caaccaggtg tggaaagtcc ccaggctccc cagcaggcag 5040 aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccata gtcccgcccc taactccgcc 5100 catcccgccc ctaactccgc ccagttccgc ccattctccg ccccatggct gactaatttt 5160 ^ ttttatttat gcagaggccg aggccgcctc tgcctctgag ctattccaga agtagtgagg 5220 aggctttttt ggaggcctag gcttttgcaa aaagctcccg ggagcttgta tatccatttt 5280 cggatctgat cagcacgtga tgaaaaagcc tgaactcacc gcgacgtctg tcgagaagtt 5340 tctgatcgaa aagttcgaca gcgtctccga cctgatgcag ctctcggagg gcgaagaatc 5400 tcgtgctttc agcttcgatg taggagggcg tggatatgtc ctgcgggtaa atagctgcgc 5460 cgatggtttc tacaaagatc gttatgttta tcggcacttt gcatcggccg cgctcccgat 5520 tccggaagtg cttgacattg gggaattcag cgagagcctg acctattgca tctcccgccg 5580 tgcacagggt gtcacgttgc aagacctgcc tgaaaccgaa ctgcccgctg ttctgcagcc 5640 ggtcgcggag gccatggatg cgatcgctgc ggccgatctt agccagacga gcgggttcgg 5700 cccattcgga ccacaaggaa tcggtcaata cactacatgg cgtgatttca tatgcgcgat 5760 tgctgatccc catgtgtatc actggcaaac tgtgatggac gacaccgtca gtgcgtccgt 5820 cgcgcaggct ctcgatgagc tgatgctttg ggccgaggac tgccccgaag tccggcacct 5880 cgtgcacgcg gatttcggct ccaacaatgt cctgacggac aatggccgca taacagcggt 5940 ¦^- cattgactgg agcgaggcga tgttcgggga ttcccaatac gaggtcgcca acatcttctt 6000 ctggaggccg tggttggctt gtatggagca gcagacgcgc tacttcgagc ggaggcatcc 6060 ggagcttgca ggatcgccgc ggctccgggc gtatatgctc cgcattggtc ttgaccaact 6120 ctatcagagc ttggttgacg gcaatttcga tgatgcagct tgggcgcagg gtcgatgcga 6180 cgcaatcgtc cgatccggag ccgggactgt cgggcgtaca caaatcgccc gcagaagcgc 6240 ggccgtctgg accgatggct gtgtagaagt actcgccgat agtggaaacc gacgccccag 6300 cactcgtccg agggcaaagg aatagcacgt gctacgagat ttcgattcca ccgccgcctt 6360 ctatgaaagg ttgggcttcg gaatcgtttt ccgggacgcc ggctggatga tcctccagcg 6420 cggggatctc atgctggagt tcttcgccca ccccaacttg tttattgcag cttataatgg 6480 ttacaaataa agcaatagca tcacaaattt cacaaataaa gcattttttt cactgcattc 6540 tagttgtggt ttgtccaaac tcatcaatgt atcttatcat gtctgtatac cgtcgacctc 6600 tagctagagc ttggcgtaat catggtcata gctgtttcct gtgtgaaatt gttatccgct 6660 cacaattcca cacaacatac gagccggaag cataaagtgt aaagcctggg gtgcctaatg 6720 agtgagctaa ctcacattaa ttgcgttgcg ctcactgccc gctttccagt cgggaaacct 6780 gtcgtgccag ctgcattaat gaatcggcca acgcgcgggg agaggcggtt tgcgtattgg 6840 gcgctcttcc gcttcctcgc tcactgactc gctgcgctcg gtcgttcggc tgcggcgagc 6900 ggtatcagct cactcaaagg cggtaatacg gttatccaca gaatcagggg ataacgcagg 6960 aaagaacatg tgagcaaaag gccagcaaaa ggccaggaac cgtaaaaagg ccgcgttgct 7020 ggcgtttttc cataggctcc gcccccctga cgagcatcac aaaaatcgac gctcaagtca 7080 gaggtggcga aacccgacag gactataaag ataccaggcg tttccccctg gaagctccct 7140 cgtgcgctct cctgttccga ccctgccgct taccggatac ctgtccgcct ttctcccttc 7200 gggaagcgtg gcgctttctc atagctcacg ctgtaggtat ctcagttcgg tgtaggtcgt 7260 tcgctccaag ctgggctgtg tgcacgaacc ccccgttcag cccgaccgct gcgccttatc 7320 cggtaactat cgtcttgagt cca cccggt aagacacgac ttatcgccac tggcagcagc 7380 cactggtaac aggattagca gagcgaggta tgtaggcggt gctacagagt tcttgaagtg 7440 gtggcctaac tacggctaca ctagaagaac agtatttggt atctgcgctc tgctgaagcc 7500 agttaccttc ggaaaaagag ttggtagctc ttgatccggc aaacaaacca ccgctggtag 7560 cggttttttt gtttgcaagc agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc 7620 tttgatcttt tctacggggt ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt 7680 ggtcatgaga ttatcaaaaa ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa aatgaagttt 7740 taaatcaatc taaagtatat atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag 7800 tgaggcacct atctcagcga tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt 7860 cgtgtagata actacgatac gggagggctt accatctggc cccagtgctg caatgatacc 7920 gcgagaccca cgctcaccgg ctccagattt atcagcaata aaccagccag ccggaagggc 7980 cgagcgcaga agtggtcctg caactttatc cgcctccatc cagtctatta attgttgccg 8040 ggaagctaga gtaagtagtt cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctac 8100 aggcatcgtg gtgtcacgct cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg 8160 atcaaggcga gttacatgat cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc 8220 tccgatcgtt gtcagaagta agttggccgc agtgttatca ctcatggtta tggcagcact 8280 gcataattct cttactgtca tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc 8340 aaccaagtca ttctgagaat agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaat 8400 acgggataat accgcgccac atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc 8460 ttcggggcga aaactctcaa ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac 8520 tcgtgcaccc aactgatctt cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa 8580 aacaggaagg caaaatgccg caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat gttgaatact 8640 catactcttc ctttttcaat attattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg 8700 atacatattt gaatgtattt agaaaaataa acaaataggg gttccgcgca catttccccg 8760 aaaagtgcca cctgacg 8777 SEC ID NO: 143 tcgacggatc gggagatctc ccgatcccct atggtgcact ctcagtacaa tctgctctga 60 tgccgcatag ttaagccagt atctgctccc tgcttgtgtg ttggaggtcg ctgagtagtg 120 cgcgagcaaa atttaagcta caacaaggca aggcttgacc gacaattgtt aattaacatg 180 aagaatctgc ttagggttag gcgttttgcg ctgcttcgct aggtggtcaa tattggccat 240 tagccatatt attcattggt tatatagcat aaatcaatat tggctattgg ccattgcata 300 cgttgtatcc atatcataat atgtacattt atattggctc atgtccaaca ttaccgccat 360 gttgacattg attattgact agttattaat agtaatcaat tacggggtca ttagttcata 420 gcccatatat ggagttccgc gttacataac ttacggtaaa tggcccgcct ggctgaccgc 480 ccaacgaccc ccgcccattg acgtcaataa tgacgtatgt tcccatagta acgccaatag 540 ggactttcca ttgacgtcaa tgggtggagt atttacggta aactgcccac ttggcagtac 600 atcaagtgta tcatatgcca agtacgcccc ctattgacgt caatgacggt aaatggcccg 660 cctggcatta tgcccagtac atgaccttat gggactttcc tacttggcag tacatctacg 720 tattagtcat cgctattacc atggtgatgc ggttttggca gtacatcaat gggcgtggat 780 agcggtttga ctcacgggga tttccaagtc tccaccccat tgacgtcaat gggagtttgt 840 tttggcacca aaatcaacgg gacttt'ccaa aatgtcgtaa caactccgcc ccattgacgc 900 aaatgggcgg taggcgtgta cggtg'ggagg tctatataag cagagctcgt ttagtgaacc 960 gtcagatcgc ctggagacgc catccacgct gttttgacct ccatagaaga caccgggacc 1020 gatccagcct ccgcggccgg gaacggtgca ttggaatcga tgactctctt aggtagcctt 1080 gcagaagttg gtcgtgaggc actgggcagg taagtatcaa ggttacaaga caggtttaag 1140 gagatcaata gaaactgggc ttgtcgagac agagaagact cttgcgtttc tgataggcac 1200 ctattggtct tactgacatc cactttgcct ttctctccac aggtgtccac tcccagttca 1260 attacagctc gccaccatgc ggttctccgc tcagctgctg ggccttctgg tgctgtggat 1320 tcccggcgtc tcgagatcta tcgatgcatg ccatggtacc aagcttgcca ccatgagcag 1380 cagctcttgg ctgctgctga gcctggtggc cgtgacagcc gcccagagca ccatcgagga 1440 gcaggccaag accttcctgg acaagttcaa ccacgaggcc gaggacctgt tctaccagag 1500 cagcctggcc agctggaact acaacaccaa catcaccgag gagaacgtgc agaacatgaa 1560 caacgccggc gacaagtgga gcgccttcct gaaggagcag agcacactgg cccagatgta 1620 ccccctgcag gagatccaga acctgaccgt gaagctgcag ctgcaggccc tgcagcagaa 1680 cggcagcagc gtgctgagcg aggacaagag caagcggctg aacaccatcc tgaacaccat 1740 gtccaccatc tacagcaccg gcaaagtgtg caaccccgac aacccccagg agtgcctgct 1800 gctggagccc ggcctgaacg agatcatggc caacagcctg gactacaacg agcggctgtg 1860 ggcctgggag agctggcgga gcgaagtggg caagcagctg cggcccctgt acgaggagta 1920 cgtggtgctg aagaacgaga tggccagggc caaccactac gaggactacg gcgactactg 1980 gagaggcgac tacgaagtga acggcgtgga cggctacgac tacagcagag gccagctgat 2040 cgaggacgtg gagcacacct tcgaggagat caagcctctg tacgagcacc tgcacgccta 2100 cgtgcgggcc aagctgatga acgcctaccc cagctacatc agccccatcg gctgcctgcc 2160 cgcccacctg ctgggcgaca tgtggggccg gttctggacc aacctgtaca gcctgaccgt 2220 gcccttcggc cagaagccca acatcgacgt gaccgacgcc atggtggacc aggcctggga 2280 cgcccagcgg atcttcaagg aggccgagaa gttcttcgtg agcgtgggcc tgcccaacat 2340 gacccagggc ttttgggaga acagcatgct gaccgacccc ggcaatgtgc agaaggccgt 2400 gtgccacccc accgcctggg acctgggcaa gggcgacttc cggatcctga tgtgcaccaa 2460 agtgaccatg gacgacttcc tgaccgccca ccacgagatg ggccacatcc agtacgacat 2520 ggcctacgcc gcccagccct tcctgctgcg gaacggcgcc aacgagggct ttcacgaggc 2580 cgtgggcgag atcatgagcc tgagcgccgc cacccccaag cacctgaaga gcatcggcct 2640 gctgagcccc gacttccagg aggacaacga gaccgagatc aacttcctgc tgaagcaggc 2700 cctgaccatc gtgggcaccc tgcccttcac ctacatgctg gagaagtggc ggtggatggt 2760 gtttaagggc gagatcccca aggaccagtg gatgaagaag tggtgggaga tgaagcggga 2820 gatcgtgggc gtggtggagc ccgtgcccca cgacgagacc tactgcgacc ccgccagcct 2880 gttccacgtg agcaacgact actccttcat ccggtactac acccggaccc tgtaccagtt 2940 ccagttccag gaggccctgt gccaggccgc caagcacgag ggccccctgc acaagtgcga 3000 catcagcaac agcaccgagg ccggacagaa actgttcaac atgctgcggc tgggcaagag 3060 cgagccctgg accctggccc tggagaatgt ggtgggcgcc aagaacatga atgtgcgccc 3120 cctgctgaac tacttcgagc ccctgttcac ctggctgaag gaccagaaca agaacagctt 3180 cgtgggctgg agcaccgact ggagccccta cgccgaccag agcatcaaag tgcggatcag 3240 cctgaagagc gccctgggcg acaaggccta cgagtggaac gacaacgaga tgtacctgtt 3300 ccggagcagc gtggcctatg ccatgcggca gtacttcctg aaagtgaaga accagatgat 3360 cctgttcggc gaggaggacg tgagagtggc caacctgaag ccccggatca gcttcaactt 3420 cttcgtgacc gcccccaaga acgtgagcga catcatcccc cggaccgaag tggagaaggc 3480 catccggatg agccggagcc ggatcaacga cgccttccgg ctgaacgaca actccctgga 3540 gttcctgggc atccagccca ccctgggccc tcccaaccag ccccccgtga gcatctggct 3600 gatcgtgttt ggcgtggtga tgggcgtgat cgtggtggga atcgtgatcc tgatcttcac 3660 cggcatccgg gaccggaaga agaagaacaa ggcccggagc ggcgagaacc cctacgccag 3720 catcgatatc agcaagggcg agaacaaccc cggcttccag aacaccgacg acgtgcagac 3780 cagcttctga taatctagaa cgagctcgaa ttcgaagctt ctgcagacgc gtcgacgtca 3840 tatggatccg atatcgccgt ggcggccgca ggccagccca aggccgctcc cagcgtgacc 3900 ctgttccccc cctcctccga ggagctgcag gccaacaagg ccaccctggt gtgcctcatc 3960 agcgacttct accctggcgc cgtgaccgtg gcctggaagg ccgacagcag ccccgtgaag 4020 gccggcgtgg agaccaccac ccccagcaag cagagcaaca acaagtacgc cgccagcagc 4080 tacctgagcc tcacccccga gcagtggaag agccaccgga gctacagctg ccaggtgacc 140 cacgagggca gcaccgtgga gaagaccgtg gcccccaccg agtgcagcta atagacttaa 4200 gtttaaaccg ctgatcagcc tcgactgtgc cttctagttg ccagccatct gttgtttgcc 4260 cctcccccgt gccttccttg accctggaag gtgccactcc cactgtcctt tcctaataaa 4320 atgaggaaat tgcatcgcat tgtctgagta ggtgtcattc tattctgggg ggtggggtgg 4380 ggcaggacag caagggggag gattgggaag acaatagcag gcatgctggg gatgcggtgg 4440 gctctatggc ttctgaggcg gaaagaacca gctggggctc tagggggtat ccccacgcgc 4500 cctgtagcgg cgcattaagc gcggcgggtg tggtggttac gcgcagcgtg accgctacac 4560 ttgccagcgc cctagcgccc gctcctttcg ctttcttccc ttcctttctc gccacgttcg 4620 ccggctttcc ccgtcaagct ctaaatcggg ggctcccttt agggttccga tttagtgctt 4680 tacggcacct cgaccccaaa aaacttgatt agggtgatgg ttcacgtagt gggccatcgc 4740 cctgatagac ggtttttcgc cctttgacgt tggagtccac gttctttaat agtggactct 4800 tgttccaaac tggaacaaca*ctcaacccta tctcggtcta ttcttttgat ttataaggga 4860 ttttggccat ttcggcctat tggttaaaaa atgagctgat ttaacaaaaa tttaacgcga 4920 attaattctg tggaatgtgt gtcagttagg gtgtggaaag tccccaggct ccccagcagg 4980 cagaagtatg caaagcatgc atctcaatta gtcagcaacc aggtgtggaa agtccccagg 5040 ctccccagca ggcagaagta tgcaaagcat gcatctcaat tagtcagcaa ccatagtccc 5100 gcccctaact ccgcccatcc cgcccctaac tccgcccagt tccgcccatt ctccgcccca 5160 tggctgacta atttttttta tttatgcaga ggccgaggcc gcctctgcct ctgagctatt 5220 ccagaagtag tgaggaggct tttttggagg cctaggcttt tgcaaaaagc tcccgggagc 5280 ttgtatatcc attttcggat ctgatcagca cgtgatgaaa aagcctgaac tcaccgcgac 5340 gtctgtcgag aagtttctga tcgaaaagtt cgacagcgtc tccgacctga tgcagctctc 5400 ggagggcgaa gaatctcgtg ctttcagctt cgatgtagga gggcgtggat atgtcctgcg 5460 ggtaaatagc tgcgccgatg gtttctacaa agatcgttat gtttatcggc actttgcatc 5520 ggccgcgctc ccgattccgg aagtgcttga cattggggaa ttcagcgaga gcctgaccta 5580 ttgcatctcc cgccgtgcac agggtgtcac gttgcaagac ctgcctgaaa ccgaactgcc 5640 cgctgttctg cagccggtcg cggaggccat ggatgcgatc gctgcggccg atcttagcca 5700 gacgagcggg ttcggcccat tcggaccgca aggaatcggt caatacacta catggcgtga 5760 tttcatatgc gcgattgctg atccccatgt gtatcactgg caaactgtga tggacgacac 5820 cgtcagtgcg tccgtcgcgc aggctctcga tgagctgatg ctttgggccg aggactgccc 5880 cgaagtccgg cacctcgtgc acgcggattt cggctccaac aatgtcctga cggacaatgg 5940 ccgcataaca gcggtcattg actggagcga ggcgatgttc ggggattccc aatacgaggt 6000 cgccaacatc ttcttctgga ggccgtggtt ggcttgtatg gagcagcaga cgcgctactt 6060 cgagcggagg catccggagc ttgcaggatc gccgcggctc cgggcgtata tgctccgcat 6120 tggtcttgac caactctatc agagcttggt tgacggcaat ttcgatgatg cagcttgggc 6180 gcagggtcga tgcgacgcaa tcgtccgatc cggagccggg actgtcgggc gtacacaaat 6240 cgcccgcaga agcgcggccg tctggaccga tggctgtgta gaagtactcg ccgatagtgg 6300 aaaccgacgc cccagcactc gtccgagggc aaaggaatag cacgtgctac gagatttcga 6360 ttccaccgcc gccttctatg aaaggttggg cttcggaatc gttttccggg acgccggctg 6420 gatgatcctc cagcgcgggg atctcatgct ggagttcttc gcccacccca acttgtttat 6480 tgcagcttat aatggttaca aataaagcaa tagcatcaca aatttcacaa ataaagcatt 6540 tttttcactg cattctagtt gtggtttgtc caaactcatc aatgtatctt atcatgtctg 6600 tataccgtcg acctctagct agagcttggc gtaatcatgg tcatagctgt ttcctgtgtg 6660 aaattgttat ccgctcacaa ttccacacaa catacgagcc ggaagcataa agtgtaaagc 6720 ctggggtgcc taatgagtga gctaactcac attaattgcg ttgcgctcac tgcccgcttt 6780 ccagtcggga aacctgtcgt gccagctgca ttaatgaatc ggccaacgcg cggggagagg 6840 cggtttgcgt attgggcgct cttccgcttc ctcgctcact gactcgctgc gctcggtcgt 6900 tcggctgcgg cgagcggtat cagctcactc aaaggcggta atacggttat ccacagaatc 6960 aggggataac gcaggaaaga acatgtgagc aaaaggccag caaaaggcca ggaaccgtaa 7020 aaaggccgcg ttgctggcgt ttttccatag gctccgcccc cctgacgagc atcacaaaaa 7080 tcgacgctca agtcagaggt ggcgaaaccc gacaggacta taaagatacc aggcgtttcc 7140 ccctggaagc tccctcgtgc gctctcctgt tccgaccctg ccgcttaccg gatacctgtc 7200 cgcctttctc ccttcgggaa gcgtggcgct ttctcatagc tcacgctgta ggtatctcag 7260 ttcggtgtag gtcgttcgct ccaagctggg ctgtgtgcac gaaccccccg ttcagcccga 7320 ccgctgcgcc ttatccggta actatcgtct tgagtccaac ccggtaagac acgacttatc 7380 gccactggca gcagccactg gtaacaggat tagcagagcg aggtatgtag gcggtgctac 7440 agagttcttg aagtggtggc ctaactacgg ctacactaga agaacagtat ttggtatctg 7500 cgctctgctg aagccagtta ccttcggaaa aagagttggt agctcttgat ccggcaaaca 7560 aaccaccgct ggtagcggtt tttttgtttg caagcagcag attacgcgca gaaaaaaagg 7620 atctcaagaa gatcctttga tcttttctac ggggtctgac gctcagtgga acgaaaactc 7680 acgttaaggg attttggtca tgagattatc aaaaaggatc ttcacctaga tccttttaaa 7740 ttaaaaatga agttttaaat caatctaaag tatatatgag taaacttggt ctgacagtta 7800 ccaatgctta atcagtgagg cacctatctc agcgatctgt ctatttcgtt catccatagt 7860 tgcctgactc cccgtcgtgt agataactac gatacgggag ggcttaccat ctggccccag 7920 tgctgcaatg ataccgcgag acccacgctc accggctcca gatttatcag caataaacca 7980 gccagccgga agggccgagc gcagaagtgg tcctgcaact ttatccgcct ccatccagtc 8040 tattaattgt tgccgggaag ctagagtaag tagttcgcca gttaatagtt tgcgcaacgt 8100 tgttgccatt gctacaggca tcgtggtgtc acgctcgtcg tttggtatgg cttcattcag 8160 ctccggttcc caacgatcaa ggcgagttac atgatccccc atgttgtgca aaaaagcggt 8220 tagctccttc ggtcctccga tcgttgtcag aagtaagttg gccgcagtgt tatcactcat 8280 ggttatggca gcactgcata attctcttac tgtcatgcca tccgtaagat gcttttctgt 8340 gactggtgag tactcaacca agtcattctg agaatagtgt atgcggcgac cgagttgctc 8400 ttgcccggcg tcaatacggg ataataccgc gccacatagc agaactttaa aagtgctcat 8460 cattggaaaa cgttcttcgg ggcgaaaact ctcaaggatc ttaccgctgt tgagatccag 8520 ttcgatgtaa cccactcgtg cacccaactg atcttcagca tcttttactt tcaccagcgt 8580 ttctgggtga gcaaaaacag gaaggcaaaa tgccgcaaaa aagggaataa gggcgacacg 8640 gaaatgttga atactcatac tcttcctttt tcaatattat tgaagcattt atcagggtta 8700 ttgtctcatg agcggataca tatttgaatg tatttagaaa aataaacaaa taggggttcc 8760 gcgcacattt ccccgaaaag tgccacctga cg 8792 SEC ID NO: 212 gaggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctgggta caccttcacc ggctactatg tgtactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaagac acggctgtgt attactgtgc gagaagtaga 300 tccctggacg tctggggcca agggaccacg gtcaccgtct cgagcggtac gggcggttca 360 ggcggaaccg gcagcggcac tggcgggtcg acggatgttg tgatgactca gtctccagac 420 tccctggctg tgtctctggg cgagagggcc accatcaact gcaagtccag ccagagtgtt 480 ttatacagct ccaacaataa gaactactta gcttggtacc agcagaaacc aggacagcct 540 cctaagctgc tcatttactg ggcatctacc cgggaatccg gggtccctga ccgattcagt 600 ggcagcgggt ctgggacaga tttcactctc accatcagca gcctgcaggc tgaagatgtg 660 gcagtttatt actgtcagca atattatagt actcctctca ctttcggcgg agggaccaaa 720 gtggatatca aacgt 735 SEC ID NO: 213 E V Q L V Q S G A E V K K P G A S V K V S C K A S G Y T F T G Y Y V Y W V R Q A P G Q G L E W M G W I S A Y N G N T N Y A Q K F Q G R V T I T A D K S T S T A Y M E L S S L R S E D T A V Y Y C A R S R S L D V W G Q G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T D V V M T Q S P D S L A V S L G E R A T I N C K S S Q S V L Y S S N N K N Y L A W Y Q Q K P G Q P P K L L I Y W A S T R E S G V P D R F S G S G S G T D F T L T I S S L Q A E D V A V Y Y C Q Q Y Y S T P L T F G G G T K V D I K R SEC ID NO: 214 cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttctcc agttatgcta tcacctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcggta tgtttggttc aacaaactac 180 gcacagaact tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctcag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaagtact 300 ggttattacc ctgcatacct ccaccactgg ggccagggca ccctggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgca gtctgccctg 420 actcagcctc gctcagtgtc cgggtctcct ggacagtcag tcaccatctc ctgcactgga 480 accagcagtg atgttggtgg ttataactat gtctcctggt accaacagca cccaggcaaa 540 gcccccaaac tcatgattta tgatgtcagt aagcggccct caggggtccc tgatcgcttc 600 tctggctcca agtctggcaa cacggcctcc ctgaccatct ctgggctcca ggctgaggat 660 gaggctgatt attactgcag ctcatataca agcagcagca ctcatgtctt cggaactggg 720 accaaggtca ccgtcctagg t 741 SEC ID NO: 215 Q M Q L V Q S G A E V K P G S S V K V S C K A S G G T F S S Y A I T W V R Q A P G Q G L E W M G G I I G M F G S T N Y A Q N F Q G R V T I T A D E S T S T A Y M E L S S L R S E D T A V Y Y C A R S T G Y Y P A Y L H H W G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T Q S A L T Q P R S V S G S P G Q S V T I S C T G T S S D V G G Y N Y V S W Y Q Q H P G K A P K L M I Y D V S R P S G V P D R F S G S K S G N T A S L T I S G L Q A E D E A D Y Y C S S Y T S S S T H V F G T G T K V T V L G SEC ID NO: 216 gaggtgcagc tggtggagac cggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60 tcctgcaagg catctggata caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180 gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240 atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagagggg 300 aaatggggac ctcaagcggc ttttgatatc tggggccaag ggacaatggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac ggaaattgtg 420 atgacgcagt ctccaggcac cctgtctttg tctccagggg aaagagccac cctctcctgc 480 agggccagtc agagtgttag cagcagctac ttagcctggt accagcagaa acctggccag 540 gctcccaggc tcctcatcta tgatgcatcc agcagggcca ctgacatccc agacaggttc 600 agtggcagtg ggtctgggac agacttcact ctcaccatca gcagactgga gcctgaagat 660 tttgcagtgt attactgtca gcagtatggt agctcacttt ggacgttcgg ccaagggacc 720 aaggtggaga tcaaacgt 738 SEC ID NO: 217 E V Q L V E T G A E V K K P G A s V K V S C K A S G Y T F T S Y Y M H V R Q A P G Q G L E W M G W I N P N s G G T N Y A 0 K F Q G R V T M T R D T S I S T A Y M E L S R L R S D D T A V Y Y c A R E G K G P Q A A F D I G Q G T M V T V S S G T G G S G G T G s G T G G S T E I V M T Q S P G T L S L S P G E R A T L S C R A S Q S V S S s Y L A W Y Q Q P G Q A P R L L I Y D A S S R A T D I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y G S S L W T F G Q G T K V E I K R SEC ID NO: 218 gaggtgcagc tggtagagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc atctatgcca tgagctgggt ccgccaggca 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtagta gtggtgatag cacatactac 180 gcagactccg tgaágggccg gttcaccatc tccagagaca acgccaggaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac .'acggctgtgt attactgtgc gagagcgtat 300 ggctacacgt tcgacccctg .gggccaggga accctggtca ccgtctcgag cggtacgggc 360 ggttcaggcg gaaccggcag cggcactggc gggtcgacgg aaattgtgct gactcagtct 420 ccactctccc tgcccgtcac ccctggagag ccggcctcca tctcctgcag gtctagtcag 480 agcctcctgc atagtaatgg atacaactat tggattggt acctgcagaa gccagggcag 540 tctccacagc tcctgatcta tttgggttct aatcgggcct ccggggtccc tgacaggttc 600 agtggcagtg gatcaggcac agattttaca ctgaaaatca gcagagtgga ggctgaggat 660 gttggggttt attactgcat gcaagctcta caaactcccc tcactttcgg cggagggacc 720 aaggtggaga tcaaacgt 738 SEC ID NO: 219 E V Q L V E S G G G L V Q P G G s L R L S C A A S G F T F S I Y A M S V R Q A P G K G L E W V S A I s S S G D S T Y Y A D S V G R F T I S R D N A R N T L Y L Q M N s L R A E D T A V Y Y C A R A Y G Y T F D P W G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T E I V L T Q S P L S L P V T P G E P A S 1 S C R S S Q S L L H S N G Y N Y L D W Y L Q K P G Q S P Q L L I Y L G S N R A S G V P D R F S G S G S G T D F T L K I S R V E A E D V G V Y Y C M Q A L Q T P L T F G G G T K V E I K R SEC ID NO: 220 gaggtgcagc tggtggagac cggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctctggagg caccttcagg acccatgcta tcagttgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcgcta tcttcggaac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag aatcacgatt accgcggacg aatccacgag tacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt atttctgtgc gagaggcagt 300 ggttatcata tatcgacacc ctttgacaac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gtcctatgtg 420 ctgactcagc caccctcggt gtcagtggcc ccaggacaga cggccaggat tacctgtggg 480 ggaaacaaca ttggaagtaa aggtgtgcac tggtaccagc agaagcctgg ccaggcccct 540 gtgctggtcg tctatgatga tagcgaccgg ccctcaggga tccctgagcg attctctggc 600 tccaactctg ggaacacggc caccctgacc atcagcaggg tcgaagccgg ggatgaggcc 660 gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt agtgatcatg tggtattcgg cggagggacc 720 aagctgaccg tcctaggt 738 SEC ID NO: 221 E V Q L V E T G A E V K K P G s S V V S C K A S G G T F R T H A I S V R Q A P G Q G L E W M G G I I A I F G T A N Y A Q K F Q G R I T I T A D E S T S T A Y M E L S S L R S E D T A V Y F C A R G S G Y H I S T P F D N W G Q G T L V T V S S G T G G s G G T G S G T G G S T S Y V L T Q P P S V S V A P G Q T A R I T C G G N N I G S K G V H W Y Q Q K P G Q A P V L V V Y D D S D R P S G I P E R F S G S N S G N T A T L T I S R V E A G D E A D Y Y C Q V W D s S S D H V V F G G G T K L T V L G SEC ID NO: 222 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggaca catcttcagc ggctatgcaa tcagttgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac aacaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacc aatccacgag cacagcctac 240 atggacctga gcaacttgag atctgaggac acggccgtct attactgtgc gagagtgaaa 300 gatggatatt gtactcttac cagctgccct gtcggctggt acttcgatct ctggggccgt 360 ggcaccctgg tcactgtctc- gagcggtacg ggcggttcag gcggaaccgg cagcggcact 420 ggcgggtcga cggaaattgt gatgacgcag tctccaggca ccctgtcttt gtctccaggg 480 gaaagagcca ccctctcgtg cagggccagt cagagtgtta gcagcagcta cttagcctgg 540 taccagcaga aacctggcca ggctcccagg ctcctcatct ttggtgcctc cagcagggcc 600 actggcatcc cagacaggtt cagtggcagt gggtctggga cagacttcac tctcaccatc 660 agcagactgg agcctgaaga ttttgcagtg tattactgtc agcagtatgg tagctcactc 720 actttcggcg gagggaccaa gctggagatc aaacgt 756 SEC ID NO: 223 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C A S G H I F S G Y A I S W V R Q A P G Q G L E W M G G I I P I F G T T N Y A Q F Q G R V T I T A D Q S T S T A Y M D L S N L R S E D T A V Y Y c A R V D G Y C T L T S C P V G w Y F D L G R G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T E I V M T Q s P G T L S L S P G E R A T L S C R A S Q s V S S S Y L A W Y Q Q K P G Q A P R L L I F G A S S R A T G I P D R F S G s G S G T D F T ll T I S R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y G S S L T F G G G T K L E I K R SEC ID NO: 224 gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gttaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg catcttcaga agcaattcta tcagttgggt gcgacaggcc 120 cctgggcaag ggcttgagtg gatgggaggg atcttcgctc ttttcggaac aacagactac 180 gcgcagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatcttcgac cacagtctac 240 ctggagctga gtagcctgac atctgaggac acggccgttt attactgtgc gagaggcagt 300 ggctacacca cacgcaacta ctttgactac tggggccagg gcaccctggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcggttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac ggaaattgtg 420 ctgactcagt ctccaggcac cctgtctttg tctccagggg aaagagccac actctcctgc 480 agggccagtc agagtgttag cagcaactac ttaggctggt accagcagaa acctggccag 540 gctcccaggc tcctgatcta tggtgcatcc agcagggcca gtggcatccc agacaggttc 600 agtggcggtg ggtctgggac agacttcact ctcaccatca gcagactgga gcctgaagat 660 tttgcagtgt attactgtca gcagtatggt agctcacccc tcactttcgg cggagggacc 720 aaggtggaga tcaaacgt 738 SEC ID NO: 225 E V Q L V Q S G A E V K K P G S S Y K V S C K A S G G I F R S N S I S W V R 2 A P G Q G L E W M G G I F A L F G T T D Y A Q K F Q G R V T I T A D E S S T T V Y L E L S S L T S E D T A V Y Y C A R G S G Y T T R N Y F D Y W G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T E I V L T Q S P G T L S L S P 3 E R A T L S C R A S Q S V S S N Y L G W Y Q Q K P G Q A P R L L I Y G A S S R A S G I P D R F S G G G S G.T D F T L T I S R L E P E D F AV Y Y C Q Q Y G S S P L T F G G G T K V E I K R " SEC ID NO: 226 caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtaaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg ccccttccgc aattttgcta tcaactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcgctg tctttgggac gacaaagtac 180 gcacataagt tccagggcag agtcaccatc accgcggacg actccacaaa tacagcttac 240 atggagctgg gcagcctgaa atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggtccc 300 cactactact cctcctacat ggacgtctgg ggcgaaggga ccacggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgga catccagttg 420 acccagtctc catcctccct gtctgcatct gtaggagaca gagtcaccat cacttgccgg 480 gcgagtcagg gcattagcac ttatttagcc tggtatcagc agaaacccgg gaaagttcct 540 aaactcctga tctatgctgc atccactttg caatcagggg tcccatctcg gttcagtggc 600 agtggatctg ggacagattt cactctcacc atcagcagcc tgcagcctga agatgttgca 660 acttattact gtcaaaagta taacagtgcc ccttctttcg gccctgggac caaagtggat 720 atcaaacgt 729 SEC ID NO: 227 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G P F R N F A I N W V R Q A P G Q G L E W M G G I I A V F G T T K Y A H K F Q G R V T I T A D D S T N T A Y M E L G S 1 S E D T A V Y Y C A R G P H Y Y S S Y M D V W G E G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T D I Q Ii T Q S P S S L S A S V G D R V T I T C R A S Q G I S T Y L A W Y Q Q K P G K V P K L L I Y A A S T L Q S G V P S R F S G S G S G T D F T L T I S S L Q P E D V A T Y Y C Q K Y N S A P S F G P T T K V D I K R SEC ID NO: 228 gaggtgcagc tggtggagac tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 ccctgcaaat cttctggaag ccccttcagg agtaatgctg tcagctgggt gcgacaggcc 120 cccggacaag ggcttgagtg ggtgggagga atcctcggtg tctttggttc accaagctac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccaccaa cacagtccac 240 atggagctga gaggtttgag atctgaggac acggccgtgt attattgtgc gagaggtcct 300 acctactact actcctacat ggacgtctgg ggcaaaggga ccacggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgtc ctatgtgctg 420 actcagccac cctcggagtc agtggcccca ggacagacgg ccaggattac ctgtggggga 480 aataacattg gaagaaatag tgtgcactgg tatcagcaga agccaggcca ggcccctgtg 540 ctggtcgtgt atgatgatag cgaccggccc tcagggatcc ctgagcgatt ttctggctcc 600 aagtctggga acacggccac cctgattatc agcagggtcg aagtcgggga tgaggccgac 660 tactactgtc aggtgtggca tagtagtagt gatcattatg tcttcggaac tgggaccaag 720 gtcaccgtcc taggt 735 SEC ID NO: 229 E V Q L V E T G A E V K K P G s S V K V P C K S S G S P F R S N A V S W V R Q A P G Q G L E W V G G I L G V F G s P s Y A Q K F Q G R V T I T A D E S T N T V H M E L R G L R S ? D T A V Y Y c A R G P T Y Y Y S Y M D V W G G T T V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T S Y V L T Q P P S E S V A P G Q T A R I T C G G N N I G R N S V H w Y Q Q K P G Q A P V L V V Y D D S D R P S G I P E R F S G S K S G N T A T L I I S R V E V G D E A D Y Y C Q V W H S S S D H Y V F G T G T V T V L G SEC ID NO: 230 cagatgcagc tggtacaatc tggagctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcttcggta tgtttgggac agcaaactac 180 gcgcagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aattcacgag cgcggcctac 240 atggagctga gcagcctggg atctgaggac acggccatgt attactgtgc gaggtctagt 300 ggttattacc cccaatactt ccaggactgg ggccagggca ccctggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgga aattgtgatg 420 acacagtctc caggcaccct gtctttgtct ccagggcaaa gagccaccct ctcctgcagg 480 gccagtcaga gtgttagcag cagctactta gcctggtacc agcagaaacc ' tggccaggct 540 cccagactcc tcatgtatgg tgcatccagc agggccactg gcatcccaga caggttcagt 600 ggcagtgggt ctgggacaga cttcactctc accatcagca gactggagcc tgaagatttt 660 gcagtgtatt actgtcagca gtatggtagc tcatcgctca ctttcggcgg agggaccaag 720 ctggagatca aacgt 735 SEC ID NO: 231 Q M Q L V Q S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G T F S S Y A I S W V R Q A P G Q G L E W M G G I F G M F G T A N Y A Q K F Q G R V T I T A D E F T S A A Y M E L S S L G S E D T A M Y Y C A R S S G Y Y P Q Y F Q D W G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T E I V M T Q S P G T L S L S P G Q R A T L S C R A S Q S V S S S Y L A W Y Q Q K P G Q A P R L L M Y G A S S R A T G I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y G S S S L T F G G G T K L E I K R SEC ID NO: 232 gaggtgcagc tggtggagtc cggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg catcttcaac agttatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggc atcatcgcta tctttcatac accaaagtac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgaa cacagcctac 240 atggaactga gaagcctgaa atctgaggac acggccctgt attactgtgc gagagggtcc 300 acttacgatt tttcgagtgg ccttgactac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcg 360 agcggtacgg gcgcfttcagg cggaaccggc agcggcactg gcgggtcgac gcaggcaggg 420 ctgactcagc caccctcggt gtcagtggcc ccaggacaga cggccaggat tacctgtggg 480 ggaaacaaca ttggaagtaa aagtgtgcac tggtaccagc agaagccagg ccaggcccct 540 gtcctagtcg tctatgatga tagcgaccgg ccctcaggga tccctgagcg attctctggc 600 tccaactctg ggaacacggc caccctgacc atcagcaggg tcgaagccgg ggatgaggcc 660 gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt agtgatcatg tggtattcgg cggagggacc 720 aagctgaccg tcctaggt 738 SEC ID NO: 233 E V Q L V E S G A E V K K P G s s V V S c A s G G I F N S Y A I S W V R Q A P G Q G L E W M G G I I A I F H T P K Y A Q K F Q G R V 1PI T A D E S T N T A Y M E L R S L K S E D T A L Y Y c A R G S T Y D F S S G L D Y W G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S T Q A G L T Q P P S V S V A P G Q T A R I T C G G N N I G S K S V H w Y Q Q K P G Q A P V L V V Y D D S D R P S G I P E R F S G S N S G N T A T L T I S R V E A G D E A D Y Y C Q V D S S S D H V V F G G G T K L T V L G SEC ID NO: 234 caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg cttcttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgccaggcc 120 cctggacaag gacttgagtg gatggggggg gtcatcccta tctttcgtac agcaaactac 180 gcacagaact tccagggcag agtcaccatt accgcggacg aattcacatc gtatatggag 240 ctgagcagcc tgagatctga cgacacggcc gtgtattact gtgcgaggtt gaattaccat 300 gattcgggga cttattataa cgccccccgg ggctggttcg acccctgggg ccagggaacc 360 ctggtcaccg tctcgagcgg tacgggcggt tcaggcggaa ccggcagcgg cactggcggg 420 tcgacggaca tccagatgac ccagtctcca gactccctgg ctgtgtctct gggcgagaag 480 gccaccatca actgcaagtc cagccagagt attttaaaca gctccaacaa taagaactac 540 ttagcttggt accagcagaa accaggacag cctcctaagc tgctcattta ctgggcatct 600 acccgggaat ccggggtccc tgaccgattc agtggcagcg ggtctgggac agatttcact 660 ctcaccatca gcagcctgca ggctgaagat gtggcagttt attactgtca gcaatattat 720 agtagtccgc cgacgttcgg ccaagggacc aaggtggaaa tcaaacgt 768 SEC ID NO: 235 Q V Q L V Q s G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G F F S S Y A I S W V R Q A P G Q G L E W M G G V I P I F R T A N Y A Q N F Q G R V T 1 T A D E F T S Y M E L S s L R S D D T A V Y Y C A R L N Y H D S G T Y Y N A P R G W F D P w G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G S .T D I Q M T Q S P D S L A V S L G E K A T I N C K S S Q S I L N S S N N K N Y L A W Y Q Q K P G Q P P L L I Y w A s T R E S G V P D R F S G S G S G T D F T L T I S S L Q A E D V A V Y Y c Q Q Y Y S S P P T F G Q G T V E I K R SEC ID NO: 236 caggtccagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagt caccttcagt tactatgcta tgagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggagga atcagcccta tgtttgggac aacaacctac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt actgcggacg actccacgag tacagcctac 240 atggaggtga ggagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagatcttcg 300 aattactatg atagtgtata tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcgagc 360 ggtacgggcg gttcaggcgg aaccggcagc ggcactggcg ggtcgacgca gtctgtcgtg 420 acgcagccgc cctcggagtc agtggcccca ggacagacgg ccaggattac ctgtggggga 480 cataacattg gaagtaatag tgtgcactgg taccagcaga agccaggcca ggcccctgtg 540 ctggtcgtgt atgataatag cgaccggccc tcagggatcc ctgagcgatt ctctggctcc 600 aactctggga acacggccac cctgaccatc agcagggtcg aagccgggga tgaggccgac 660 tattactgtc aggtgtgggg tagtagtagt gaccattatg tcttcggaac tgggaccaag 720 gtcaccgtcc taggt 735 SEC ID NO: 237 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S S V K V s C K A S G V T F S Y Y A M s W V R Q A P G Q G L E W M G G I S P M F G T T T Y A Q K F Q G R V T I T A D D s T S T A Y M E V R S L R S E D T A V Y Y c A R S ? N Y Y D S V Y D Y W G Q G T L V T V S S G T G G S G G T G S G T G G s T Q S V V T Q P P s E s V A P G Q T A R I T C G G H N I G S N S V H W Y Q Q K P G Q A P V L V V Y D N S D R P S G I P E R F S G S N S G N T A T L T I S R V E A G D E A D Y Y C Q V W G s S S D H Y V F G T.G T K V T V L G SEC ID NO: 316 gaggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctgggta caccttcacc ggctactatg tgtactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaagac acggctgtgt attactgtgc gagaagtaga 300 tccctggacg tctggggcca agggaccacg gtcaccgtct cgagtgctag caccaagggc 360 cccagcgtgt tccccctggc ccccagcagc aagagcacca gcggcggcac agccgccctg 420 ggctgcctgg tgaaggacta cttccccgag cccgtgaccg tgagctggaa cagcggcgcc 480 ttgaccagcg gcgtgcacac cttccccgcc gtgctgcaga gcagcggcct gtacagcctg 540 agcagcgtgg tgaccgtgcc cagcagcagc ctgggcaccc agacctacat ctgcaacgtg 600 aaccacaagc ccagcaacac caaggtggac aaacgcgtgg agcccaagag ctgcgacaag 660 acccacacct gccccccctg ccctgccccc gagctgctgg gcggaccctc cgtgttcctg 720 ttccccccca agcccaagga caccctcatg atcagccgga cccccgaggt gacctgcgtg 780 gtggtggacg tgagccacga ggaccccgag gtgaagttca actggtacgt ggacggcgtg 840 gaggtgcaca acgccaagac caagccccgg gaggagcagt acaacagcac ctaccgggtg 900 gtgagcgtgc tcaccgtgct gcaccaggac tggctgaacg gcaaggagta caagtgcaag 960 gtgagcaaca aggccctgcc tgcccccatc gagaagacca tcagcaaggc caagggccag 1020 ccccgggagc cccaggtgta caccctgccc cccagccggg aggagatgac caagaaccag 1080 gtgtccctca cctgtctggt gaagggcttc taccccagcg acatcgccgt ggagtgggag 1140 agcaacggcc agcccgagaa caactacaag accacccccc ctgtgctgga cagcgacggc 1200 agcttcttcc tgtacagcaa gctcaccgtg gacaagagcc ggtggcagca gggcaacgtg 1260 ttcagctgca gcgtgatgca cgaggccctg cacaaccact acacccagaa gagcctgagc 1320 ctgagccccg gcaag 1335 SEC ID NO: 317 E V Q L V Q S G A E V K K P G A S V K V S C K A S G Y T F T G Y Y V Y W V R Q A P G Q G L E W M G W I S A Y N G N T N Y A Q K F Q G R V T I T A D K s T S T A Y M E L S S L R s ? D T A V Y Y C A R S R S L D V W G Q G T T V T V s S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S w N S G A L T S G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S s s L G T Q T Y I C N V N H P s N T V D K R V E P K s C D T H T c P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N S T Y R V V s V 1 T V L H Q D L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V •Y T L P P S R E E M T K N Q V S L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y S K L T V D K S R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 318 gatgttgtga tgactcagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60 atcaactgca agtccagcca gagtgtttta tacagctcca acaataagaa ctacttagct 120 tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180 gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240 atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtact 300 cctctcactt tcggcggagg gaccaaagtg gatatcaaac gtgcggccgc acccagcgtg 360 ttcatcttcc ccccctccga cgagcagctg aagagcggca ccgccagcgt ggtgtgcctg 420 ctgaacaact tctacccccg ggaggccaag gtgcagtgga aggtggacaa cgccctgcag 480 agcggcaaca gccaggagag cgtgaccgag caggacagca aggactccac ctacagcctg 540 agcagcaccc tcaccctgag caaggccgac tacgagaagc acaaggtgta cgcctgcgag 600 gtgacccacc agggcctgag cagccccgtg accaagagct tcaaccgggg cgagtgt 657 SEC ID NO: 319 D V V M T Q S P D S L A V S L G E R A T I N C K S S Q S V L Y S S N N K N Y L A W Y Q Q K P G Q P P K L L I Y W A S T R E S G V P D R F S G S G S G T D F T L T I S S L Q A E D V A V Y Y C Q Q Y Y S T P L T F G G G T K V D I K R A A A P S V F I F P P S D E Q L K S G T A S V V C L L N N F Y P R E A V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S D S T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 320 cagatgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttctcc agttatgcta tcacctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcggta tgtttggttc aacaaactac 180 gcacagaact tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240 atggagctga gcagcctcag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaagtact 300 ggttattacc ctgcatacct ccaccactgg ggccagggca ccctggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 480 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtgtc cctcacctgt ctggtgaagg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 321 Q M Q L V Q S G A E V K P G S S V K V S C A S G G T F S S Y A I T V R Q A P G Q G L E W M G G I I G M F G S T N Y A Q N F Q G R V T I T A D E S T S T A Y M E L S S L R S E D T A V Y Y C A R S T G Y Y P A Y L H H W G Q G T L V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S GG T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S VV T V P S S S L G T Q T Y I C N V N H K P S N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T C V V V D V S H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N S T Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y K C K V S N K A L P A P I E K T I S K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V S L T C L V K G F Y P S D I A V E W E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y S K L T V D K S R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G SEC ID NO: 322 cagtctgccc tgactcagcc tcgctcagtg tccgggtctc ctggacagtc agtcaccatc 60 tcctgcactg gaaccagcag tgatgttggt ggttataact atgtctcctg gtaccaacag 120 cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca gtaagcggcc ctcaggggtc 180 cctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240 caggctgagg atgaggctga ttattactgc agctcatata caagcagcag cactcatgtc 300 ttcggaactg ggaécaaggt caccgtccta ggtgcggccg caggccagcc caaggccgct 360 cccagcgtga ccctgttccc cccctcctcc gaggagctgc aggccaacaa ggccaccctg 420 gtgtgcctca tcagcgactt ctaccctggc gccgtgaccg tggcctggaa ggccgacagc 480 agccccgtga aggccggcgt ggagaccacc acccccagca agcagagcaa caacaagtac 540 gccgccagca gctacctgag cctcaccccc gagcagtgga agagccaccg gagctacagc 600 tgccaggtga cccacgaggg cagcaccgtg gagaagaccg tggcccccac cgagtgcagc 660 SEC ID NO: 323 Q S A L T Q P R S V S G S P G Q S V T 1 S C T G T S S D V G G Y N Y V S W Y Q Q H P G K A P K L M I Y D V S K P S G V P D R F S G S K S G N T A S L T I S G L Q A E D E A D Y Y C S S Y T S S S T H V F G T G T K V T V L G A A A G Q P K A A P S V T L F P P S S E E L Q A N A T L V C L I S D F Y P G A V T V A W K A D S S P V K A G V E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q W K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 324 gaggtgcagc tggtggagac cggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60 tcctgcaagg catctggata .caccttcacc agctactata tgcactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaactat 180 gcacagaagt ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagcctac 240 atggagctga gcaggctgag atctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagagggg 300 aaatggggac ctcaagcggc ttttgatatc tggggccaag ggacaatggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1320 SEC_ID NO: 325 E V Q L V E T G A E V K P G A S V K V S C K A S G Y T F T S Y Y H V R Q A P G Q G L E W M G W I N P N S G G T N Y A Q K F Q G R V T M T R D T S I S T A Y M E L S R L R S D D T A V Y Y C A R E G K G P Q A A F D I W G Q G t ? V T V s S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D y F P E P V T V S W N S G A L T s G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S s V V t V P S s s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H t C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T P R E E Q Y N s T Y R V V S V II T V L H Q D L N G K E Y c K V S N K A L P A P I E K T I s K A ? G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V S L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y S K L T V D K s R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 326 gaaattgtga tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc ou ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatctat gatgcatcca gcagggccac tgacatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcactttg gacgttcggc 300 caagggacca aggtggagat caaacgtgcg gccgcaccca gcgtgttcat cttccccccc 360 tccgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420 ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480 gagagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctcacc 540 ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600 ctgagcagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642 SEC ID NO: 327 É I V T Q S P G T L S L S P G E R A T L S C R A S Q S V S S S Y L A W Y Q Q K P G Q A P R L L I Y D A S S R A T D I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y G S S L T F G Q G T V E I K R A A A P S V F I F P P S D E Q L ¾ S G T A S V V C L L N N F Y P R E A K V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 328 gaggtgcagc tggtagagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60 tcctgtgcag cctctggatt cacctttagc atctatgcca tgagctgggt ccgccaggca 120 ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagct attagtagta gtggtgatag cacatactac 180 gcagactccg tgaagggccg gttcaccatc tccagagaca acgccaggaa cacgctgtat 240 ctgcaaatga acagtctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagagcgtat 300 ggctacacgt tcgacccctg gggccaggga accctggtca ccgtctcgag tgctagcacc 360 aagggcccca gcgtgttccc cctggccccc agcagcaaga gcaccagcgg cggcacagcc 420 gccctgggct gcctggtgaa ggactacttc cccgagcccg tgaccgtgag ctggaacagc 480 ggcgccttga ccagcggcgt gcacaccttc cccgccgtgc tgcagagcag cggcctgtac 540 agcctgagca gcgtggtgac cgtgcccagc agcagcctgg gcacccagac ctacatctgc 600 aacgtgaaco acaagcccag caacaccaag gtggacaaac gcgtggagcc caagagctgc 660 gacaagaccc acacctgccc cccctgccct gcccccgagc tgctgggcgg accctccgtg 720 ttcctgttcc cccccaagcc caaggacacc ctcatgatca gccggacccc cgaggtgacc 780 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaggac cccgaggtga agttcaactg gtacgtggac 840 ggcgtggagg tgcacaacgc caagaccaag ccccgggagg agcagtacaa cagcacctac 900 cgggtggtga gcgtgctcac cgtgctgcac caggactggc tgaacggcaa ggagtacaag 960 tgcaaggtga gcaacaaggc cctgcctgcc cccatcgaga agaccatcag caaggccaag 1020 ggccagcccc gggagcccca ggtgtacacc ctgcccccca gccgggagga gatgaccaag 1080 aaccaggtgt ccctcacctg tctggtgaag ggcttctacc ccagcgacat cgccgtggag 1140 tgggagagca acggccagcc cgagaacaac tacaagacca ccccccctgt gctggacagc 1200 gacggcagct tcttcctgta cagcaagctc accgtggaca agagccggtg gcagcagggc 1260 aacgtgttca gctgcagcgt gatgcacgag gccctgcaca accactacac ccagaagagc 1320 ctgagcctga gccccggcaa g 1341 SEC ID NO: 329 E V Q L V E S G G G L V Q P G G S L R L S c A A S G F T F s I Y A M S W V R Q A P G K G L E W V S A I S S S G D S T Y Y A D S V G R F T I S R D N A R N T L Y L Q M N S L R A E D T A V Y Y C A R A Y G Y T F D P W G Q G T L V T V S s A S T K G P S V F P L A P S S K S T s G G T A A L G c L V K D Y F P E P V T V S w N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S s V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L I S R T P ? V T c V V V D V s H E D P E V F N W Y V D G V E V H N A K T P R E E Q Y N s T Y R V V S V L T V L H Q D L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R W Q Q G N V F S c S V H E A L H N H Y T Q K S h S L S P G. K SEC ID NO: 330 gaaattgtgc tgactcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60 atctcctgca ggtctagtca gagcctcctg catagtaatg gatacaacta tttggattgg 120 tacctgcaga agccagggca gtctccacag ctcctgatct atttgggttc taatcgggcc 180 tccggggtcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgaaaatc 240 agcagagtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcaagctct acaaactccc 300 ctcactttcg gcggagggac caaggtggag atcaaacgtg cggccgcacc cagcgtgttc 360 atcttccccc cctccgacga gcagctgaag agcggcaccg ccagcgtggt gtgcctgctg 420 aacaacttct acccccggga ggccaaggtg cagtggaagg tggacaacgc cctgcagagc 480 ggcaacagcc aggagagcgt gaccgagcag gacagcaagg actccaccta cagcctgagc 540 agcaccctca ccctgagcaa ggccgactac gagaagcaca aggtgtacgc ctgcgaggtg 600 acccaccagg gcctgagcag ccccgtgacc aagagcttca accggggcga gtgt 654 SEC ID NO: 331 E I V L T Q S P L S L P V T P G E P A S I S C R S S Q S L L H S N G Y N Y L D W Y L Q K P G Q S P Q L L 1 Y L G S N R A S GV P D R F S G S G S G T D F T L K I S R V E A E DV G V Y Y C M Q A L Q T P L T F G G G T KV E I K R A A A P S V F I F P P S D E Q L K S G T A S V V C L L N N F Y P R E A K V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S KA D Y E H K V Y A C E V T H Q G Ii S S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 332 gaggtgcagc tggtggagac cggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cctctggagg caccttcagg acccatgcta tcagttgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcgcta tcttcggaac agcaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag aatcacgatt accgcggacg aatccacgag tacagcctac 240 atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt atttctgtgc gagaggcagt 300 ggttatcata tatcgacacc ctttgacaac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac acccagaaga gcctgagcct gagccccggc aag SEC ID NO: 333 ? V Q L V E T G A E V K P G S S V K V S C K A S G G T F R T H A I S W V R Q A P G Q G L E W M G G I I A I F G T A N Y A Q K F Q G R I T I T A D E S T S T A Y M E L S S L R S E D T A V Y F C A R G S G Y H I S T P F D N W G Q G T L V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T s G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P S C D K T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R ? E Q Y N S T Y R V V s V L T V L H Q 0 W L N G E Y K C K V S N A L P A P I E K T I s K A G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K s R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO 334 tcctatgtgc tgactcagcc accctcggtg tcagtggccc caggacagac ggccaggatt 60 acctgtgggg gaaacaacat tggaagtaaa ggtgtgcact ggtaccagca gaagcctggc 120 caggcccctg tgctggtcgt ctatgatgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttctctggct ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcagggt cgaagccggg 240 gatgaggccg actattactg tcaggtgtgg gatagtagta gtgatcatgt ggtattcggc 300 ggagggacca agctgaccgt cctaggtgcg gccgcaggcc agcccaaggc cgctcccagc 360 gtgaccctgt tccccccctc ctccgaggag ctgcaggcca acaaggccac cctggtgtgc 420 ctcatcagcg acttctaccc tggcgccgtg accgtggcct ggaaggccga cagcagcccc 480 gtgaaggccg gcgtggagac caccaccccc agcaagcaga gcaacaacaa gtacgccgcc 540 agcagctacc tgagcctcac ccccgagcag tggaagagcc accggagcta cagctgccag 600 gtgacccacg agggcagcac cgtggagaag accgtggccc ccaccgagtg cagc 654 SEC ID NO: 335 S Y V L T Q P P S V S VA P G Q T A R I T C G G N N I G S K G V H w Y Q Q K P G Q A PV L VV Y D D S D R P S G I P E R F S G S N S G N T A T L T I S R VE A G D E A D Y Y C QV W D S S S D H VVF GG G T K L T V L G A A A G Q P K AA P S V T L F P P S S E E L QAN KA T LV C L I S D F Y P G A V T V AW K A D S S PV KAGV E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q W K S H R S Y S C QVT H E G S T V E K T VA P T E C S SEC ID NO: 336 gaggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggaca catcttcagc ggctatgcaa tcagttgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tctttggtac aacaaactac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacc aatccacgag cacagcctac 240 atggacctga gcaacttgag atctgaggac acggccgtct attactgtgc gagagtgaaa 300 gatggatatt gtactcttac cagctgccct gtcggctggt acttcgatct ctggggccgt 360 ggcaccctgg tcactgtctc gagtgctagc accaagggcc ccagcgtgtt ccccctggcc 420 cccagcagca agagcaccag cggcggcaca gccgccctgg gctgcctggt gaaggactac 480 ttccccgagc ccgtgaccgt gagctggaac agcggcgcct tgaccagcgg cgtgcacacc 540 ttccccgccg tgctgcagag cagcggcctg tacagcctga gcagcgtggt gaccgtgccc 600 agcagcagcc tgggcaccca gacctacatc tgcaacgtga accacaagcc cagcaacacc 660 aaggtggaca aacgcgtgga gcccaagagc tgcgacaaga cccacacctg ccccccctgc 720 cctgcccccg agctgctggg cggaccctcc gtgttcctgt tcccccccaa gcccaaggac 780 accctcatga tcagccggac ccccgaggtg acctgcgtgg tggtggacgt gagccacgag 840 gaccccgagg tgaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcacaa cgccaagacc 900 aagccccggg aggagcagta caacagcacc taccgggtgg tgagcgtgct caccgtgctg 960 caccaggact ggctgaacgg caaggagtac aagtgcaagg tgagcaacaa ggccctgcct 1020 gcccccatcg agaagaccat cagcaaggcc aagggccagc cccgggagcc ccaggtgtac 1080 accctgcccc ccagccggga ggagatgacc aagaaccagg tgtccctcac ctgtctggtg 1140 aagggcttct accccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaacggcca gcccgagaac 1200 aactacaaga ccaccccccc tgtgctggac agcgacggca gcttcttcct gtacagcaag 1260 ctcaccgtgg acaagagccg gtggcagcag ggcaacgtgt tcagctgcag cgtgatgcac 1320 gaggccctgc acaaccacta cacccagaag agcctgagcc tgagccccgg caag 1374 SEC ID NO: 337 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G H I F S G Y A I S W V R Q A P G Q G L E W M G G I I P I F G T T N Y A Q K F Q G R V T I T A D Q S T S T A Y M D L S N L R S E D T A V Y Y C A R V K D G Y C T L T S C P V G w y P D L G R G T L V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S S S L G T Q T Y I C N V N H K P S N T K V D R V E P K S C D K T H ? C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V S H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N S T Y R V. V s V L T V L H Q D W L N G K E Y K C K V S N K A L P A P 1 E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V S L T C L V K G F Y P s D I A V ? W E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F I> Y S K L T V D K S R w Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P SEC ID NO: : 338 gaaattgtga tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60 ctctcgtgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctcatcttt ggtgcctcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcactcac tttcggcgga 300 gggaccaagc tggagatcaa acgtgcggcc gcacccagcg tgttcatctt ccccccctcc 360 gacgagcagc tgaagagcgg caccgccagc gtggtgtgcc tgctgaacaa cttctacccc 420 cgggaggcca aggtgcagtg gaaggtggac aacgccctgc agagcggcaa cagccaggag 480 agcgtgaccg agcaggacag caaggactcc acctacagcc tgagcagcac cctcaccctg 540 agcaaggccg actacgagaa gcacaaggtg tacgcctgcg aggtgaccca ccagggcctg 600 agcagccccg tgaccaagag cttcaaccgg ggcgagtgt 639 SEC ID NO: 339 E I V M T Q S P G T L S L S P G E R A T L S C R A S Q S V S S S Y L A W Y Q Q K P G Q A P R L L I F G A S S R A T G I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y G S S L T F G G G T L E I K R A A A P S V F I F P P S D E Q L K S G T A S V V C L L N N F Y P R E A K V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 340 gaggtccagc tggtacagtc tggggctgag gttaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg catcttcaga agcaattcta tcagttgggt gcgacaggcc 120 cctgggcaag ggcttgagtg gatgggaggg atcttcgctc ttttcggaac aacagactac 180 gcgcagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatcttcgac cacagtctac 240 ctggagctga gtagcctgac atctgaggac acggccgttt attactgtgc gagaggcagt 300 ggctacacca cacgcaacta ctttgactac tggggccagg gcaccctggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1320 acccagaaga gcctgagcct gagccccggc aag 1353 SEC ID NO: 341 E V Q L V Q S G A E V K P G S S V V S C K A S G G I F R S N S I S W V R Q A P G Q G L E W M G G I F A L F G T T D Y A Q K F Q G R V T 1 T A D E s S T T V Y L E L S S L T S E D T A V Y Y C A R G S G Y T T R N Y F D Y G Q G T L V T V s S A S T G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S' S G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P S N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V S H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s 1 Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y K C V S N K A L P A P I E T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s L T V D K s R W Q Q G N V F S C S V M H E A L H N H Y T Q S L S L S P G K SEC ID NO: 342 gaaattgtgc tgactcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccaca 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcaactact taggctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccaggct cctgatctat ggtgcatcca gcagggccag tggcatccca 180 gacaggttca gtggcggtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcacccct cactttcggc 300 ggagggacca aggtggagat caaacgtgcg gccgcaggcc agcccaaggc cgctcccagc 360 gtgaccctgt tccccccctc ctccgaggag ctgcaggcca acaaggccac cctggtgtgc 420 ctcatcagcg acttctaccc tggcgccgtg accgtggcct ggaaggccga cagcagcccc 480 gtgaaggccg gcgtggagac caccaccccc agcaagcaga gcaacaacaa gtacgccgcc 540 agcagctacc tgagcctcac ccccgagcag tggaagagcc accggagcta cagctgccag 600 gtgacccacg agggcagcac cgtggagaag accgtggccc ccaccgagtg cagc 654 SEC ID NO: 343 E I V L T Q S P G T L S L S P G E RA T L S C R A S Q S V S S N Y L G W Y Q Q K P G Q A P R L L I Y G A S S R A S G I P D R F S G G G S G T D F T L T I S R L E P E D FA V Y Y C Q Q Y G S S P L T F G G G T K V E I K RA AA G Q P K A A P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G AV T V A.W K A D S S P V K A G V E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 344 caggtgcagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtaaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg ccccttccgc aattttgcta tcaactgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcgctg tctttgggac gacaaagtac 180 gcacataagt tccagggcag agtcaccatc accgcggacg actccacaaa tacagcttac 240 atggagctgg gcagcctgaa atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggtccc 300 cactactact cctcctacat ggacgtctgg ggcgaaggga ccacggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 480 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtgtc cctcacctgt ctggtgaagg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 345 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G P F R N F A I N w V R Q A P G Q G L E W M G G I I A V F G T T K Y A H K F Q G R V T I T A D D s T N T A Y M E L G S L K S E D T A V Y Y C A R G P H Y Y S S Y M D V W G E G T T V T V s S A S T K G P S V F P L A P s S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S w N S G A L T S G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T Y I c N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N w Y V D G V E V H N A K T K P R ? E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G K E Y c V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R ? P Q V Y T L P P s R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R W Q Q G N V F s C S V H E A L H N H Y T Q S L S L S P G K SEC ID NO: 346 gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60 atcacttgcc gggcgagtca gggcattagc acttatttag cctggtatca gcagaaaccc 120 gggaaagttc ctaaactcct gatctatgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180 cggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctgcagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaaaag tataacagtg ccccttcttt cggccctggg 300 accaaagtgg atatcaaacg tgcggccgca cccagcgtgt tcatcttccc cccctccgac 360 gagcagctga agagcggcac cgccagcgtg gtgtgcctgc tgaacaactt ctacccccgg 420 gaggccaagg tgcagtggaa ggtggacaac gccctgcaga gcggcaacag ccaggagagc 480 gtgaccgagc aggacagcaa ggactccacc tacagcctga gcagcaccct caccctgagc 540 aaggccgact acgagaagca caaggtgtac gcctgcgagg tgacccacca gggcctgagc 600 agccccgtga ccaagagctt caaccggggc gagtgt 636 SEC ID NO: 347 D I Q L T Q S P S S L S A S V G D R V T I T C R A S Q G I S T Y L A W Y Q Q K P G K V P K L L I Y AA S T L Q S G V P S R F S G S G S G T D F T L T I S S L Q P E D V A T Y Y C Q K Y N S A P S F G P G T K V D I K R A A A P S V F I F P P S D E Q L K S G T A S V V C L L N N F Y P R E A K V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 348 gaggtgcagc tggtggagac tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 ccctgcaaat cttctggaag ccccttcagg agtaatgctg tcagctgggt gcgacaggcc 120 cccggacaag ggcttgagtg ggtgggagga atcctcggtg tctttggttc accaagctac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccaccaa cacagtccac 240 atggagctga gaggtttgag atctgaggac acggccgtgt attattgtgc gagaggtcct 300 acctactact actcctacat ggacgtctgg ggcaaaggga ccacggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 480 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtgtc cctcacctgt ctggtgaagg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgCgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 349 E V Q L V E T G A E V K K P G S S V K V P C K S S G S P F R s N A V s V R Q A P G Q G L E W V G G I L G V F G S P S Y A Q K F Q G R V T I T A D E S T N T V H M E L R G L R S E D T A V Y Y C A R G P T Y Y Y S Y M D V W G G T T V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S. T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S N S G A L T S G V H T F P A V L Q S s G L Y S L S S V V T V P S s s L G T Q T Y I C N V N H K P S N T K V D K R V E P S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P D T M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q v Y T L P P S R E ? M T K N Q V S L T c L V K G F Y P s D I A V E E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K s R W Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 350 tcctatgtgc tgactcagcc accctcggag tcagtggccc caggacagac ggccaggatt 60 acctgtgggg gaaataacat tggaagaaat agtgtgcact ggtatcagca gaagccaggc 120 caggcccctg tgctggtcgt gtatgatgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttttctggct ccaagtctgg gaacacggcc accctgatta tcagcagggt cgaagtcggg 240 gatgaggccg actactactg tcaggtgtgg catagtagta gtgatcatta tgtcttcgga 300 actgggacca aggtcaccgt cctaggtgcg gccgcaggcc agcccaaggc cgctcccagc 360 gtgaccctgt tccccccctc ctccgaggag ctgcaggcca acaaggccac cctggtgtgc 420 ctcatcagcg acttctaccc tggcgccgtg accgtggcct ggaaggccga cagcagcccc 480 gtgaaggccg gcgtggagac caccaccccc agcaagcaga gcaacaacaa gtacgccgcc 540 agcagctacc tgagcctcac ccccgagcag tggaagagcc accggagcta cagctgccag 600 gtgacccacg agggcagcac cgtggagaag accgtggccc ccaccgagtg cagc 654 SEC ID NO: 351 S Y V L T Q P P S E S V A P G Q T A R I T C G G N N I G R N S.V H W Y Q Q K P G Q A P V L V V Y D D S D R P S G I P E R F S G S K S G N T A T L I I S R V E V G D E A D Y Y C Q V W H S S S D H Y V F G T G T K V T V L G A AA G Q P K A A P S V T L F P P S S E E L Q A N K A T L V C L I S D F Y P G A V T V A K A D S S P V K A G V E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q K S H R S Y S C Q V T H E G S T V E K T V A P T E C S SEC ID NO: 352 cagatgcagc tggtacaatc tggagctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcttcggta tgtttgggac agcaaactac 180 gcgcagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aattcacgag cgcggcctac 240 atggagctga gcagcctggg atctgaggac acggccatgt attactgtgc gaggtctagt 300 ggttattacc cccaatactt ccaggactgg ggccagggca ccctggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 480 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accággtgtc cctcacctgt ctggtgaagg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 353 Q M Q L V Q S G A E V K P G S S V K V S C K A S G G T F S s Y A I s V R Q A P G Q G L E W G G I F G M F G T A N Y A Q K F Q G R V T I T A D E F T S A A Y M E L S S L G S E D T A M Y Y C A R S S G Y Y P Q Y F Q D W G Q G T L V T V S S A S T K G P S V F P L A P s S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T S G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V ? V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G E Y c K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V E w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y S K L T V D K S R W Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 354 gaaattgtga tgacacagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggca aagagccacc 60 ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120 cctggccagg ctcccagact cctcatgtat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180 gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240 cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcatcgct cactttcggc 300 ggagggacca agctggagat caaacgtgcg gccgcaccca gcgtgttcat cttccccccc 360 tccgacgagc agctgaagag cggcaccgcc agcgtggtgt gcctgctgaa caacttctac 420 ccccgggagg ccaaggtgca gtggaaggtg gacaacgccc tgcagagcgg caacagccag 480 gagagcgtga ccgagcagga cagcaaggac tccacctaca gcctgagcag caccctcacc 540 ctgagcaagg ccgactacga gaagcacaag gtgtacgcct gcgaggtgac ccaccagggc 600 ctgagcagcc ccgtgaccaa gagcttcaac cggggcgagt gt 642 SEC ID NO: 355 E I V M T Q S P G T L S L s P G Q R A T L S C R A S Q S V S S S Y L A W Y Q Q K P G Q A P R L L Y G A s S R A T G I P D R F S G S G S G T D F T L T I S R L E P E D F A V Y Y C Q Q Y G S S S L T F G G G T K L E I K R A AA P S V F I F P P S D E Q L K S G T A S V V C L L N N F Y P R E A K V Q K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D S T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L S S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 356 gaggtgcagc tggtggagtc cggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg catcttcaac agttatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggc atcatcgcta tctttcatac accaaagtac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgaa cacagcctac 240 atggaactga gaagcctgaa atctgaggac acggccctgt attactgtgc gagagggtcc 300 acttacgatt tttcgagtgg ccttgactac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcg 360 agtgctagca ccaagggccc cagcgtgttc cccctggccc ccagcagcaa gagcaccagc 420 ggcggcacag ccgccctggg ctgcctggtg aaggactact tccccgagcc cgtgaccgtg 480 agctggaaca gcggcgcctt gaccagcggc gtgcacacct tccccgccgt gctgcagagc 540 agcggcctgt acagcctgag cagcgtggtg accgtgccca gcagcagcct gggcacccag 600 acctacatct gcaacgtgaa ccacaagccc agcaacacca aggtggacaa acgcgtggag 660 cccaagagct gcgacaagac ccacacctgc cccccctgcc ctgcccccga gctgctgggc 720 ggaccctccg tgttcctgtt cccccccaag cccaaggaca ccctcatgat cagccggacc 780 cccgaggtga cctgcgtggt ggtggacgtg agccacgagg accccgaggt gaagttcaac 840 tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcacaac gccaagacca agccccggga ggagcagtac 900 aacagcacct accgggtggt gagcgtgctc accgtgctgc accaggactg gctgaacggc 960 aaggagtaca agtgcaaggt gagcaacaag gccctgcctg cccccatcga gaagaccatc 1020 agcaaggcca agggccagcc ccgggagccc caggtgtaca ccctgccccc cagccgggag 1080 gagatgacca agaaccaggt gtccctcacc tgtctggtga agggcttcta ccccagcgac 1140 atcgccgtgg agtgggagag caacggccag cccgagaaca actacaagac caccccccct 1200 gtgctggaca gcgacggcag cttcttcctg tacagcaagc tcaccgtgga caagagccgg 1260 tggcagcagg gcaacgtgtt cagctgcagc gtgatgcacg aggccctgca caaccactac 1320 acccagaaga gcctgagcct gagccccggc aag 1353 SEC ID NO: 357 E V Q L V E S G A E V K K P G S S V K V S C K A S G G 1 F N S Y A I S w V R Q A P G Q G L E W G G I I A I F H T P K Y A Q K F Q G R V T I T A D E s T N T A Y M E L R S L K S E D T A L Y Y C A R G S T Y D F S s G L D Y W G Q G T L V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G C L V K D Y F P E P V T V s N S G A L T S G V H T F P A V L Q ? S G L Y S L S S V V T V P S s s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P D T L M I S R T P E V T c V V V D V s H E D P E V K F N w Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V s V L T V L H Q D W L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E K T I s K A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P s D I A V ? w E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R Q Q G N V F S c S V H ? A ll H N H Y T Q K s I) S L S P G K SEC ID NO: 358 .ggcagggc tgactcagcc accctcggtg tcagtggccc caggacagac ggccaggatt 60 :ctgtgggg gaaacaacat tggaagtaaa agtgtgcact ggtaccagca gaagccaggc 120 .ggcccctg tcctagtcgt ctatgatgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180 .ctctggct ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcagggt cgaagccggg 240 .tgaggccg actattactg tcaggtgtgg gatagtagta gtgatcatgt ggtattcggc 300 /agggacca agctgaccgt cctaggtgcg gccgcaggcc agcccaaggc cgctcccagc 360 .gaccctgt tccccccctc ctccgaggag ctgcaggcca acaaggccac cctggtgtgc 420 icatcagcg acttctaccc tggcgccgtg accgtggcct ggaaggccga cagcagcccc 480 :gaaggccg gcgtggagac caccaccccc agcaagcaga gcaacaacaa gtacgccgcc 540 rcagctacc tgagcctcac ccccgagcag tggaagagcc accggagcta cagctgccag 600 igacccacg agggcagcac cgtggagaag accgtggccc ccaccgagtg cagc 654 SEC ID NO: 359 A G L T Q P P s V s V A P G Q T A R I T c G G N N I G s S V H w Y Q Q K G Q A P V L V V Y D D s D R P S G I P E R F S G s N' S G N X A T L T I S R E A G D E A D Y Y C Q V W D S s S D H V V F G G G T K L T V L G A A A G Q K A A P S V T L F P P s S E E L Q A N A T L V C L I S D F Y P G A V T V w K A D s S P V K A G V E T T T P S K Q S N N K Y A A S S Y L S L T P E Q K S H R s Y S C Q V T H E G S T V E T V A P T E C S caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagg cttcttcagc agctatgcta tcagctgggt gcgccaggcc 120 cctggacaag gacttgagtg gatggggggg gtcatcccta tctttcgtac agcaaactac 180 gcacagaact tccagggcag agtcaccatt accgcggacg aattcacatc gtatatggag 240 ctgagcagcc tgagatctga cgacacggcc gtgtattact gtgcgaggtt gaattaccat 300 gattcgggga cttattataa cgccccccgg ggctggttcg acccctgggg ccagggaacc 360 ctggtcaccg tctcgagtgc tagcaccaag ggccccagcg tgttccccct ggcccccagc 420 agcaagagca ccagcggcgg cacagccgcc ctgggctgcc tggtgaagga ctacttcccc 480 gagcccgtga ccgtgagctg gaacagcggc gccttgacca gcggcgtgca caccttcccc 540 gccgtgctgc agagcagcgg cctgtacagc ctgagcagcg tggtgaccgt gcccagcagc 600 agcctgggca cccagaccta catctgcaac gtgaaccaca agcccagcaa caccaaggtg 660 gacaaacgcg tggagcccaa gagctgcgac aagacccaca cctgcccccc ctgccctgcc 720 cccgagctgc tgggcggacc ctccgtgttc ctgttccccc ccaagcccaa ggacaccctc 780 atgatcagcc ggacccccga ggtgacctgc gtggtggtgg acgtgagcca cgaggacccc 840 gaggtgaagt tcaactggta cgtggacggc gtggaggtgc acaacgccaa gaccaagccc 900 cgggaggagc agtacaacag cacctaccgg gtggtgagcg tgctcaccgt gctgcaccag 960 gactggctga acggcaagga gtacaagtgc aaggtgagca acaaggccct gcctgccccc 1020 atcgagaaga ccatcagcaa ggccaagggc cagccccggg agccccaggt gtacaccctg 1080 ccccccagcc gggaggagat gaccaagaac caggtgtccc tcacctgtct ggtgaagggc 1140 ttctacccca gcgacatcgc cgtggagtgg gagagcaacg gccagcccga gaacaactac 1200 aagaccaccc cccctgtgct ggacagcgac ggcagcttct tcctgtacag caagctcacc 1260 gtggacaaga gccggtggca gcagggcaac gtgttcagct gcagcgtgat gcacgaggcc 1320 ctgcacaacc actacaccca gaagagcctg agcctgagcc ccggcaag 1368 SEC ID NO: 361 Q V Q L V Q S G A E V K K P G S s V K V S C K A S G G F F S s Y A I S w V R Q A P G Q G L E W M G G V I P I F R T A N Y A Q N F Q G R V T I T A D E F T S Y M E L S S L R S D D T A V Y Y C A R L N Y H D S G T Y Y N A P R G F D P W G Q G T L V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T s G G T A A L G c L V K D Y F P E P V T V S w N S G A L T s G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S s s L G T Q T Y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P S C D K T H T C P P c P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T C V V V D V s H E D P E V K F N W Y V D G V E V H N A K T K P R E E Q Y N s T Y R V V S V L T V L H Q D L N G K E Y K C V S N K A L P A P I E K T I S K A K G Q P R ? P Q V Y T L P P S R E E M T K N Q V s L T c L V K G F Y P S D I A V E E S N G Q P E N N Y T T P P V L D S D G S F F L Y s K L T V D K S R w Q Q G N V F S c S V M H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 362 gacatccaga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gaaggccacc 60 atcaactgca agtccagcca gagtatttta aacagctcca acaataagaa ctacttagct 120 tggtaccagc agaaaccagg acagcctcct aagctgctca tttactgggc atctacccgg 180 gaatccgggg tccctgaccg attcagtggc agcgggtctg ggacagattt cactctcacc 240 atcagcagcc tgcaggctga agatgtggca gtttattact gtcagcaata ttatagtagt 300 ccgccgacgt tcggccaagg gaccaaggtg gaaatcaaac gtgcggccgc acccagcgtg 360 ttcatcttcc ccccctccga cgagcagctg aagagcggca ccgccagcgt ggtgtgcctg 420 ctgaacaact tctacccccg ggaggccaag gtgcagtgga aggtggacaa cgccctgcag 480 agcggcaaca gccaggagag cgtgaccgag caggacagca aggactccac ctacagcctg 540 agcagcaccc tcaccctgag caaggccgac tacgagaagc acaaggtgta cgcctgcgag 600 ataacccacc aqqqcctqaq caqccccqtq accaaqaqct tcaaccqqqq cqaqtqt 657 SEC ID NO: 363 D I Q M T Q S P D S L A V S L G E K A T I N c K S S Q S I L N S S N N K N Y L A w Y Q Q K P G Q P P K L L I Y w A s T R E s G V P D R F S G s G S G T D F T L T I S S L Q A E D V A V Y Y c Q Q Y Y S s P P T F G Q G T K V E I K R A A A P s V F I F P P S D E Q L K s G T A s V V C L L N N F Y P R E A V Q W K V D N A L Q S G N S Q E S V T E Q D S K D s T Y S L S S T L T L S K A D Y E K H K V Y A C E V T H Q G L s S P V T K S F N R G E C SEC ID NO: 364 caggtccagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60 tcctgcaagg cttctggagt caccttcagt tactatgcta tgagctgggt gcgacaggcc 120 cctggacaag ggcttgagtg gatgggagga atcagcccta tgtttgggac aacaacctac 180 gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt actgcggacg actccacgag tacagcctac 240 atggaggtga ggagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagatcttcg 300 aattactatg atagtgtata tgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcgagt 360 gctagcacca agggccccag cgtgttcccc ctggccccca gcagcaagag caccagcggc 420 ggcacagccg ccctgggctg cctggtgaag gactacttcc ccgagcccgt gaccgtgagc 480 tggaacagcg gcgccttgac cagcggcgtg cacaccttcc ccgccgtgct gcagagcagc 540 ggcctgtaca gcctgagcag cgtggtgacc gtgcccagca gcagcctggg cacccagacc 600 tacatctgca acgtgaacca caagcccagc aacaccaagg tggacaaacg cgtggagccc 660 aagagctgcg acaagaccca cacctgcccc ccctgccctg cccccgagct gctgggcgga 720 ccctccgtgt tcctgttccc ccccaagccc aaggacaccc tcatgatcag ccggaccccc 780 gaggtgacct gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaggacc ccgaggtgaa gttcaactgg 840 tacgtggacg gcgtggaggt gcacaacgcc aagaccaagc cccgggagga gcagtacaac 900 agcacctacc gggtggtgag cgtgctcacc gtgctgcacc aggactggct gaacggcaag 960 gagtacaagt gcaaggtgag caacaaggcc ctgcctgccc ccatcgagaa gaccatcagc 1020 aaggccaagg gccagccccg ggagccccag gtgtacaccc tgccccccag ccgggaggag 1080 atgaccaaga accaggtgtc cctcacctgt ctggtgaagg gcttctaccc cagcgacatc 1140 gccgtggagt gggagagcaa cggccagccc gagaacaact acaagaccac cccccctgtg 1200 ctggacagcg acggcagctt cttcctgtac agcaagctca ccgtggacaa gagccggtgg 1260 cagcagggca acgtgttcag ctgcagcgtg atgcacgagg ccctgcacaa ccactacacc 1320 cagaagagcc tgagcctgag ccccggcaag 1350 SEC ID NO: 365 Q v Q L V Q S G A E V K K P G S S V. K V S c A S G V T F S Y Y A M S W V R Q A P G Q G L E W M G G I S P M F G T T T Y A Q K F Q G R V T I T A D D S T S T A Y M E V R S L R S E D T A V Y Y C A R S S N Y Y D S V Y D Y G Q G T L V T V S S A S T K G P S V F P L A P S S K S T S G G T A A L G c L V K D Y F P E P V T V S W N S G A L T s G V H T F P A V L Q S S G L Y S L S S V V T V P S S s L G T Q T y I C N V N H K P s N T K V D K R V E P K S C D K T H T C P P C P A P E L L G G P S V F L F P P K P K D T L M I S R T P E V T C V V V D V S H E D P ? V K F N W Y V D G V E V H N A T K P R E E Q Y N S T Y R V V S V L T V L H Q D W L N G K E Y K c K V S N K A L P A P I E K T I s A K G Q P R E P Q V Y T L P P S R E E M T N Q V s L T c L V G F Y P s D I A V E E S N G Q P E N N Y K T T P P V L D s D G S F F L Y s K L T V D s R W Q Q G N V F S c S V H E A L H N H Y T Q K S L S L S P G K SEC ID NO: 366 cagtctgtcg tgacgcagcc gccctcggag tcagtggccc caggacagac ggccaggatt 60 acctgtgggg gacataacat tggaagtaat agtgtgcact ggtaccagca gaagccaggc 120 caggcccctg tgctggtcgt gtatgataat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180 ttctctggct ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcagggt cgaagccggg 240 gatgaggccg actattactg tcaggtgtgg ggtagtagta gtgaccatta tgtcttcgga 300 actgggacca aggtcaccgt cctaggtgcg gccgcaggcc agcccaaggc cgctcccagc 360 gtgaccctgt tccccccctc ctccgaggag ctgcaggcca acaaggccac cctggtgtgc 420 ctcatcagcg acttctaccc tggcgccgtg accgtggcct ggaaggccga cagcagcccc 480 gtgaaggccg gcgtggagac caccaccccc agcaagcaga gcaacaacaa gtacgccgcc 540 agcagctacc tgagcctcac ccccgagcag tggaagagcc accggagcta cagctgccag 600 gtgacccacg agggcagcac cgtggagaag accgtggccc ccaccgagtg cagc 654 SEC ID NO: 367 Q SVVTQ P P S E SVAPGQTA RI T CGGHN I GSN SVHWYQQK PGQA PVLVV Y DNS DRPS G I PE RFS G SNSGNTAT LT I S R VEAGDEADY YC QVWG S S S DH YVFGTGT KVTVLGAAAGQ PKAA P SVT L FP P S S E E LQ ANKATLVC L I S DFYPGAVTV AWKADS S PV KAGVE T TT P S KQ SNNKYAAS S Y L S LT PE Q W-K S H R S Y S C QVT H EG S TV E KTVAPTEC S Tabla 1: Primera ronda de amplificaciones VK, VX y VH Nombre del Secuencia nucleotidica del SEC ID cebador cebador NO: OKI (HuVKlB) GAC ATC CAG WTG ACC CAG TCT CC 144 OK2 (HuVK2) GAT GTT GTG ATG ACT CAG TCT CC 145 OK3 (HuVK2B2) GAT ATT GTG ATG ACC CAG ACT CC 146 0K4 (HuVK3B) GAA ATT GTG WTG ACR CAG TCT CC 147 OK5 (HuVK5) GAA ACG ACA CTC ACG CAG TCT CC 148 OK6 (HuVK6) GAA ATT GTG CTG ACT CAG TCT CC 149 OCK (HuCK) ACA CTC TCC CCT GTT GAA GCT CTT 150 OLI (HuVLlA) * CAG TCT GTG CTG ACT CAG CCA CC 151 OLI (HuVLlB) * CAG TCT GTG YTG ACG CAG CCG CC 152 OLI (HuVLIC) * CAG TCT GTC GTG ACG CAG CCG CC 153 OL2 (HuVL2B) CAG TCT GCC CTG ACT CAG CC 154 OL3 (HuVL3A) TCC TAT GWG CTG ACT CAG CCA CC 155 OL4 (HuVL3B) TCT TCT GAG CTG ACT CAG GAC CC 156 OL5 (HuVL4B) CAG CYT GTG CTG ACT CAA TC 157 OL6 (HuVL5) CAG GCT GTG CTG ACT CAG CCG TC 158 OL7 (HuVL6) AAT TTT ATG CTG ACT CAG CCC CA 159 OL8 (HuVL7/8) CAG RCT GTG GTG ACY CAG GAG CC 160 OL9 (HuVL9)# CWG CCT GTG CTG ACT CAG CCM CC 161 OL9 (HuVL10)# CAG GCA GGG CTG ACT CAG 162 OCL (HuCL2)X TGA ACA TTC TGT AGG GGC CAG TG 163 OCL (HuCL7)X AGA GCA TTC TGC AGG GGC CAC TG 164 OH1 (HuVHlB7A)+ CAG RTG CAG CTG GTG CAR TCT GG 165 OH1 (HuVHlC)+ SAG GTC CAG CTG GTR CAG TCT GG 166 OH2 (HuVH2B) CAG RTC ACC TTG AAG GAG TCT GG 167 OH3 (HuVH3A) GAG GTG CAG CTG GTG GAG 168 OH4 (HuVH3C) GAG GTG CAG CTG GTG GAG WCY GG 169 OH5 (HuVH4B) CAG GTG CAG CTA CAG CAG TGG GG 170 OH6 (HuVH4C) CAG STG CAG CTG CAG GAG TCS GG 171 OH7 (HuVH6A) CAG G A CAG CTG CAG CAG TCA GG 172 OC (HuCIg ) TGG AAG AGG CAC GTT CTT TTC TTT 173 * Mezclado en una proporción 1:1:1 # Mezclado en una proporción 1:1 X Mezclado en una proporción 1:1 + Mezclado en una proporción 1:1 Tabla 2: Segunda ronda de amplificaciones VK, VA y VH Nombre del Secuencia nucleotxdica del SEC ID cebador cebador NO: 0K1S (HuVKlB-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG GAC ATC 174 CAG WTG ACC CAG TT CC OK2S (HuVK2-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG GAT GTT 175 GTG ATG ACT CAG TCT CC 0K3S (HuVK2B2- TGA GCA CAC AGG TCG ACG GAT ATT 176 SAL) GTG ATG ACC CAG ACT CC 0K4S (HuVK3B-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG GAA ATT 177 GTG WTG ACR CAG TCT CC OK5S (HuVK5-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG GAA ACG 178 ACA CTC ACG CAG TCT CC 0K6S (HUVK6-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG GAA ATT 179 GTG CTG ACT CAG TCT CC 0JK1 (HuJKl-NOT) GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC 180 ACG TTT GAT TTC CAC CTT GGT CCC OJK2 (HuJK2-NOT) GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC 181 ACG TTT GAT CTC CAG CTT GGT CCC OJK3 (HuJK3-N0T) GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC 182 ACG TTT GAT ATC CAC TTT GGT CCC OJK4 (HuJK4-NOT) GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC 183 ACG TTT GAT CTC CAC CTT GGT CCC OJK5 (HuJK5-N0T) GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC 184 ACG TTT AAT CTC CAG TCG TGT CCC OL1S (HuVLlA- TGA GCA CAC AGG TCG ACG CAG TCT 185 SAL) * GTG CTG ACT CAG CCA CC OL1S (HuVLlB- TGA GCA CAC AGG TCG ACG CAG TCT 186 SAL) * GTG YTG ACG CAG CCG CC OL1S (HuVLlC- TGA GCA CAC AGG TCG ACG CAG TCT 187 SAL) * GTC GTG ACG CAG CCG CC OL2S (HuVL2B-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG CAG TCT 188 GCC CTG ACT CAG CC OL3S (HuVL3A-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG TCC TAT 189 GWG CTG ACT CAG CCA CC OL4S (HuVL3B-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG TCT TCT 190 GAG CTG ACT CAG GAC CC OL5S (HuVL4B-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG CAG CYT 191 GTG CTG ACT CAA TC OL6S (HuVL5-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG CAG GCT 192 GTG CTG ACT CAG CCG TC OL7S (HuVL6-SAL) TGA GCA CAC AGG TCG ACG AAT TTT 193 ATG CTG ACT CAG CCC CA OL8S (HuVL7/8- TGA GCA CAC AGG TCG ACG CAG RCT 194 SAL) GTG GTG ACY CAG GAG CC OL9S (HuVL9-SAL) # TGA GCA CAC AGG TCG ACG CWG CCT 195 GTG CTG ACT CAG CCM CC OL9S (HuVLlO- TGA GCA CAC AGG TCG ACG CAG GCA 196 SAL)# GGG CTG ACT CAG OJL1 (HuJLl-NOT) GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC 197 ACC TAG GAC GGT GAC CTT GGT CCC OJL2 (HuJL2/3- GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC 198 NOT) ACC TAG GAC GGT CAG CTT GGT CCC OJL3 (HuJL7-NOT) GAG TCA TTC TCG ACT TGC GGC CGC 199 ACC GAG GAC GGT CAG CTG GGT GCC OH1S (HuVHlB- GTC CTC GCA ACT GCG GCC CAG CCG 200 SFI) + GCC ATG GCC CAG RTG CAG CTG GTG CAR TCT GG OH1S (HuVHlC- GTC CTC GCA ACT GCG GCC CAG CCG 201 SFI) + GCC ATG GCC SAG GTC CAG CTG GTR CAG CT GG OH2S (HuVH2B-SFI) GTC CTC GCA ACT GCG GCC CAG CCG 202 GCC ATG GCC CAG RTC ACC TTG AAG GAG TCT GG OH3S (HUVH3A-SFI) GTC CTC GCA ACT GCG GCC CAG CCG 203 GCC ATG GCC GAG GTG CAG CTG GTG GAG OH4S (HuVH3C-SFI) GTC CTC GCA ACT GCG GCC CAG CCG 204 GCC ATG GCC GAG GTG CAG CTG GTG GAG WCY GG OH5S (HuVH4B-SFI) GTC CTC GCA ACT GCG GCC CAG CCG 205 GCC ATG GCC CAG GTG CAG CTA CAG CAG TGG GG OH6S (HuVH4C-SFI) GTC CTC GCA ACT GCG GCC CAG CCG 206 GCC ATG GCC CAG STG CAG CTG CAG GAG CS GG OH7S (HuVH6A-SFI) GTC CTC GCA ACT GCG GCC CAG CCG 207 GCC ATG GCC CAG GTA CAG CTG CAG CAG TCA GG OJH1 (HuJHl/2- GAG TCA TC TCG ACT CGA GAC RGT 208 XHO) GAC CAG GGT GCC OJH2 (HuJH3-XHO) GAG TCA TTC TCG ACT CGA GAC GGT 209 GAC CAT TGT CCC OJH3 (HuJH4/5- GAG TCA TC TCG ACT CGA GAC GGT 210 XHO) GAC CAG GGT TCC OJH4 (HuJH6-XHO) GAG TCA TC TCG ACT CGA GAC GGT 211 GAC CGT GGT CCC * Mezclado en una proporción 1:1:1 # Mezclado en una proporción 1:1: + Mezclado en una proporción 1:1: Tabla 3. Segunda ronda, generalidades de la amplificación las regiones VL Plantilla cebador cebador Producto Compartido Acumulado Compartido ' 3' en P /PL en VL (%) (%) OK1S OJK1 K1J1 25 Kl 0K1S OJK2 1J2 25 PK1 30 OK1S OJK3 1J3 10 OK1S OJK4 K1J4 25 OK1S OJK5 K1J5 15 O 2S OJK1 K2J1 25 2 OK2S OJK2 2J2 25 PK2 4 OK2S OJ 3 K2J3 10 OK2S OJK4 2J4 25 OK2S OJ 5 2J5 15 OK3S OJK1 K3J1 25 K3 OK3S OJK2 3J2 25 PK3 1 OK3S OJK3 3J3 10 OK3S OJK4 K3J4 25 OK3S OJK5 K3J5 15 OK S OJK1 K J1 25 K4 OK4S OJK2 K4J2 25 PK4 19 OK4S OJK3 4J3 10 OK4S OJK4 K4J4 25 OK4S OJK5 K4J5 15 OK5S OJK1 K5J1 25 K5 OK5S OJK2 K5J2 25 ??5 1 OK5S OJK3 K5J3 10 OK5S OJ 4 5J4 25 OK5S OJK5 K5J5 15 OK6S OJK1 K6J1 25 ?6 O 6S OJ 2 K6J2 25 ? 6 5 OK6S OJK3 K6J3 10 O 6S OJ 4 K6J4 25 OK6S OJK5 K6J5 15 OL1S OJL1 LUI 30 L1 OL1S OJL2 L1J2 60 PL1 14 OL1S OJL3 L1J3 10 OL2S OJL1 L2J1 30 L2 OL2S OJL2 L2J2 60 PL2 10 OL2S OJL3 L2J3 10 OL3S OJL1 L3J1 30 L3 OL3S OJL2 L3J2 60 PL3 10 OL3S OJL3 L3J3 10 OL4S OJL1 L4J1 30 L4 OL4S OJL2 L4J2 60 PL4 1 OL4S OJL3 L4J3 10 OL5S OJL1 L5J1 30 L5 OL5S OJL2 L5J2 60 PL5 1 OL5S OJL3 L5J3 10 OL6S OJL1 L6J1 30 L6 OL6S OJL2 L6J2 60 PL6 1 OL6S OJL3 L6J3 10 OL7S OJL1 L7J1 30 L7 OL7S OJL2 L7J2 60 PL7 1 OL7S OJL3 L7J3 10 OL8S OJL1 L8J1 30 L8 OL8S OJL2 L8J2 60 PL8 1 OL8S OJL3 L8J3 10 OL9S OJL1 L9J1 30 L9 OL9S OJL2 L9J2 60 PL9 1 OL9S OJL3 L9J3 10 VL 100% Tabla 4. Segunda ronda de revisión de amplificación regiones VH Plantilla cebador cebador Producto Compartido Acumulado Compartido 5' 3' en P /PL en VH (%) (%) OH1S OJH1 HUI 10 Hl OH1S OJH2 H1J2 10 PH1 25 OH1S OJH3 H1J3 60 OH1S OJH4 H1J4 20 OH2S OJH1 HUI 10 H2 OH2S OJH2 H1J2 10 PH2 2 OH2S OJH3 H1J3 60 OH2S OJH H1J4 20 OH3S OJH1 H1J1 10 H3 OH3S OJH2 H1J2 10 PH3 25 OH3S OJH3 H1J3 60 OH3S OJH4 H1J4 20 OH4S OJH1 H1J1 10 H4 OH4S OJH2 H1J2 10 PH 25 OH4S OJH3 H1J3 60 OH4S OJH4 H1J4 20 OH5S OJH1 H1J1 10 H5 OH5S OJH2 H1J2 10 PH5 2 OH5S OJH3 H1J3 60 OH5S OJH4 H1J4 20 OH6S OJH1 H1J1 10 H6 OH6S OJH2 H1J2 10 PH6 20 OH6S OJH3 H1J3 60 OH6S OJH4 H1J4 20 OH7S OJH1 H1J1 10 Hl OH7S OJH2 H1J2 10 PH7 1 OH7S OJH3 H1J3 60 OH7S OJH4 H1J4 20 VH 100% Tabla 5. Características de las bibliotecas de linfocitos B memoria IgM individual Bibliotecas de memoria IgM Donador Células Bibliotecas PBL % de tamaño % de % de marco total linfocitos (xlO6) frecuencia de lectura único (xlO6) B de de inserto abierto memoria Individuo 3 96 74 98 1 Individuo 72.5 1.7 5 98 79 98 2 Individuo 67.5 1.4 3 96 79 98 3' Individuo 132.5 2.3 6 98 69 99 4 Tabla 6: Datos de las Fv de cadena sencilla especificas HA.
Nombre de SEC ID NO: SEC ID NO: Locus VH locus VL scFv (secuencia (secuencia de nucleotidica) aminoácidos ) * SC06-141 212 213 VH1 (1-18) VKIV (B3) (Vh 1-115; VI 132-245) SC06-255 115 116 VH1 (1-69) VL1 (VI-16) (Vh 1-121; VI 138-248) SC06-257 117 118 VH1 (1-69) VL2 (VI-4) (Vh 1-121; VI 138-248) SC06-260 119 120 VH1 (1-69) VL1 (VI-17) (Vh 1-121; VI 138-248) SC06-261 121 122 VH1 (1-69) VL1 (VI-19) (Vh 1-121; VI 138-249) SC06-262 123 124 VH1 (1-69) VKI (?20) (Vh 1-120; VI 137-245) SC06-268 125 126 VH1 (1-69) VL3 (V2-1) (Vh 1-120; VI 137-243) SC06-272 214 215 VH1 (1-69) VL2 (VI-3) (Vh 1-120; VI 137-247) SC06-296 216 217 VH1 (1--2) VKIII (A27) (Vh 1-121; VI 138-246) SC06-301 218 219 VH1 (3-23) VKII (?3) (Vh 1-117; VI 134-246) SC06-307 127 128 VH3 (3-21) VKIII (A27) (Vh 1-122; VI 139-246) SC06- 310 129 130 VH1 (1- 69) VL3 (V2-14) (Vh 1-121; VI 138-246) SC06- 314 131 132 VH1 (1- 69) VL1 (VI-17) (Vh 1-121; VI 138-248) SC06-•323 133 134 VH1 (i- 69) VKIII (A27) (Vh 1-120; VI 137-245) SC06--325 135 136 VH1 (1- 69) VL2 (VI-4) (Vh 1-121; VI 138-248) SC06--327 220 221 VHY1 (1 -69) VL3 (V2-14) (Vh 1-121; VI 138-246) SC06-328 222 223 VH1 (1-69) VKIII (A27) (Vh 1-128; VI 145-252) SC06-329 224 225 VH1 (1-69) VKIII (A27) (Vh 1-121; VI 138-246) SC06-331 137 138 VH1 (1-69) VL3 (V2-14) (Vh 1-120; VI 137-245) SC06-332 226 227 VH1 (1-69) VK1 (?20) (Vh 1-120; VI 137-243) SC06-334 228 229 VH1 (1-69) VL3 (V2-14) (Vh 1-120; VI 137-245) SC06-336 230 231 VH1 (1-69) VKIII (A27) (Vh 1-120; VI 137-245) SC06-339 232 233 VH1 (1-69) VL3 (V2-14) (Vh 1-121; VI 138-246) SC06-342 234 235 VH1 (1-69) VKIV (B3) (Vh 1-126; VI 143-256) SC06-343 236 237 VH1 (1-69) VL3 (V2-14) (Vh 1-120; VI 137-245) SC06-344 139 140 VH1 (1-69) VL1 (VI-13) (Vh 1-123; VI 140-250) *entre paréntesis se muestran los aminoácidos que constituyen la región variable de cadena pesada (VH) y 'la región variable de cadena ligera (VL) Tabla 7: Datos de las regiones CDR de las inmunoglobulinas especificas para HA. La SEC ID NO: se proporciona entre paréntesis Nombre de HCDR1 HCDR2 HCDR3 LCDR1 LCDR2 LCDR3 scFv SC06-141 GYYVY WISAYNGNTNY SRSLDV (240) KSSQSVLYSSN WASTRES QQYYSTPLT (243) (238) AQKFQG (239) NKNYLA (241) (242) SC06-255 SYAIS (1) GIIPIFGTTKY HMGYQVRET SGSTFNIGSNA SNNQRPS AAWDDILNV PV (6) APKFQG (2) DV (3) VD (4) (5) SC06-257 SYAIS (1) GIIPIFGTTKY HMGYQVRET TGTSSDVGGYN EVSNRPS SSYTSSSTY V (9) APKFQG (2) MDV (3) YVS (7) (8) SC06-260 SYAIS (1) GIIPIFGTTKY HMGYQVRET SGSRSNVGDNS KNTQRPS VAWDDSVDG YV APKFQG (2) MDV (3) VY (10) (11) (12) SC06-261 SYAIS (1) GIIPIFGTTKY HMGYQVRET SGSSSNIGNDY DNNKRPS ATWDRRPTA YVV APKFQG (2) MDV (3) VS (13) (14) (15) SC06-262 GSAIS GISPLFGTTNY GPKYYSEYM DV RASQGISSYLA DASTLRS QRYNSAPPI T (21) (16) AQKFQG (17) (18) (19) (20) SC06-268 SYAIS (1) GIMG FGTTNY SSGYYPEYF QD SGHKLGDKYVS QDNRRPS QAWDSSTAV (26) AQKFQG (22) (23) (24) (25) SC06-272 SYAIT GIIGMFGSTNY STGYYPAYL HH TGTSSDVGGYN DVSKRPS SSYTSSSTH V (249) (244) AQNFQG (245) (246) YVS (247) (248) SC06-296 SYY H WINPNSGGTNY EGKWGPQM RASQSVSSSYL DASSRAT QQYGSSLW (255) (250) AQKFQG (251) FDI (252) A (253) (254) SC06-301 IYAMS AISSSGDSTYY AYGYTFDP RSSQSLLHSNG LGSNRAS MQALQTPL (261) (256) ADSVKG (257) (258) YNYLD (259) (260) SC06-307 SYS N SISSSSSYIYY GGGSYGAYE RASQRVSSYLA GASTRAA QQYGRTPLT (32) (27) VDSVKG (28) GFDY (29) (30) (31) SC06-310 SYAIS (1) GIIPIFGTTKY HMGYQVRET GGNNIGSKSVH DDSDRPS QVWDSSSDH AV APKFQG (2) MDV (3) (33) (34) (35) SC06-314 SYAIS (1) GIIPIFGTTKY HMGYQVRET SGSSSNIGSNY RDGQRPS ATWDDNLSG PV APKFQG (2) MDV (3) VY (36) (37) (38) SC06-323 SYGIS DIIGMFGSTNY SSGYYPAYL PH RASQSVSSSYL GASSRAT QQYGSSPRT (44) (39) AQNFQG (40) (41) A (42) (43) SC06-325 FYSMS GIJPMFGTTNY GDKGIYYYY TGTSSDVGGYN EVSNRPS SSYTSSSTL V (48) (45) AQKFQG (46) MDV (47) YVS (7) (8) SC06-327 THAIS GIIAIFGTANY GSGYHISTP GGNIGSKGVH DDSDRPS QVWDSSSDH VV (262) AQKFQG (263) FDN (264) (265) (266) (267) SC06-328 GYAIS GIIPIFGTTNY VKDGYCTLT RASQSVSSSYL GASSRAT QQYGSSLT (273) (268) AQKFQG (269) SCPVGWYFD L A (271) (272) (270) SC06-329 SNSIS GIFALFGTTDY GSGYTTRNY RASQSVSSNYL GASSRAS QQYGSSPLT (279) (274) AQKFQG (275) FDY6 (276) G (277) (278) SC06-331 SYAIS (1) GIIGMFGTANY GNYYYESSL DY GGNNIGSKSVH DDSDRPS QVWDSSSDH YV AQKFQG (49) (50) (33) (34) (51) SC06-332 NFAIN GIIAVFGTTKY GPHYYSSYM RASQGISTYLA MSTLQS QKYNSAPS (285) (280) AHKFQG (281) DV (282) (283) (284) SC06-334 SNAVS GILGVFGSPSY GPTYYYSY DV GGNNIGRNSVH DDSDRPS QVWHSSSDH YV (286) AQKFQG (287) (288) (289) (290) (291) SC06-336 SYAIS GIFGMFGTANY SSGYYPQYF QD RASQSVSSSYL GASSRAT QQYGSSSLT (297) (292) AQKFQG (293) (294) A (295) (296) SC06-339 SYAIS GIIAIFHTPKY GSTYDFSSG GGNNIGSKRSVH DDSDRPS QVWDSSSDH VV (298) AQKFQG (299) LDY (300) (301) (302) (303) SC06-342 SYAIS GVIPIFRTANY LNYHDSGTY KSSQSILNSSN WASTRES QQYYSSPPT (309) (304) AQNFQG (305) YNAPRGWFD P NKNYLA (307) (308) (306) SC06-343 YYAMS GISPMFGTTTY SSNYYDSVY DY GGHNIGSNSVH DNSDRPS QVWGSSSDH YV (310) AQKFQG (311) (312) (313) (314) (315) SC06-344 NYAMS GIIAIFGTPKY IPHYNFGSG TGSSSNIGAGY GNSNRPS GTWDSSLSA YV (52) AQKFQG (53) SYFDY (54) DVH (55) (56) (57) Tabla 8. Datos de las IgG especificas para HA. Nombre SEC ID NO de SEC ID NO de SEC ID NO de SEC ID NO de de la la cadena la cadena la cadena la cadena IgG pesada de la pesada de la ligera de ligera de la secuencia secuencia* de secuencia secuencia* de nucleotidica aminoácidos nucleotidica aminoácidos CR6141 316 317 (Vh 1-115) 318 319 (VI 1-114) CR6255 58 59 (Vh 1-121) 84 85 (VI 1-111) CR6257 60 61 (Vh 1-121) 86 87 (VI 1-111) CR6260 62 63 (Vh 1-121) 88 89 (Vl-1-111) CR6261 64 65 (Vh 1-121) 90 91 (Vl-1-112) CR6262 66 67 (Vh 1-120) 92 93 (Vl-1-109) CR6268 68 69 (Vh 1-120) 94 95 (VI 1-107) CR6272 320 321 (Vh 1-120) 322 323 (Vl-1-111) CR6296 324 325 (Vh 1-121) 326 327 (Vl-1-109) CR6301 328 329 (Vh 1-117) 330 331 (Vl-1-113) CR6307 70 71 (Vh 1-122) 96 97 (Vl-1-108) CR6310 72 73 (Vh 1-121) 98 99 (Vl-1-109) CR6314 74 75 (Vh 1-121) 100 101 (Vl-1-111) CR6323 76 77 (Vh 1-120) 102 103 (Vl-1-109) CR6325 78 79 (Vh 1-121) 104 105 (Vl-1-111) CR6327 332 333 (Vh 1-121) 334 335 (Vl-1-109) CR6328 336 337 (Vh 1-128) 338 339 (Vl-1-108) CR6329 340 341 (Vh 1-121) 342 343 (Vl-1-109) CR6331 80 81 (Vh 1-120) 106 107 (Vl-1-109) CR6332 344 345 (Vh 1-120) 346 347 (VI-1-107) CR6334 348 349 (Vh 1-120) 350 351 (VI 1-109) CR6336 352 353 (Vh 1-120) 354 355 (VI 1-109) CR6339 356 357 (Vh 1-121) 358 359 (VI 1-109) CR6342 360 361 (Vh 1-126) 362 363 (VI 1-114) CR6343 364 365 (Vh 1-120) 366 367 (VIL 1- 109) CR6344 82 83 (Vh 1-123) 108 109 (VI 1-111) *entre paréntesis se muestran los aminoácidos que constituyen la región variable (VH) de la cadena pesada y la región variable (VL) de la cadena ligera.
Tabla 9. Unión de las IgG a células PER.C6 que expresan HA (H5N1TV) . Células PER.C6 que Células PER.C6 control expresan HA (H5N1TV) Anticuerp 10 1 g/ml 0.1 10 1 µg/ml 0.1 o g/ml g/mi µg/ml g/ml CR6255 414.18 257.13 60.43 3.16 2.64 2.48 CR6257 365.17 283.87 62.08 2.59 2.44 2.53 CR6260 323.42 168.49 31.06 5.42 3.34 2.57 CR6261 330.77 278.81 85.82 29.43 13.22 3.89 CR6262 84.29 20.91 8.06 2.71 2.53 2.48 CR6268 421.70 218.70 43.71 3.82 2.74 2.50 CR6307 484.78 266.55 82.42 4.87 3.02 2.48 CR6314 399.54 166.98 44.51 5.99 3.49 2.64 CR6323 445.08 116.52 33.38 5.05 2.92 2.71 CR6325 478.29 239.28 64.36 4.00 3.11 2.57 CR6344 768.25 328.16 106.65 80.90 26.33 10.17 CR3014 13.10 10.00 6.21 3.11 2.69 2.55 CR6310* 597.04 290.93 86.91 14.92 6.05 4.42 CR6331* 421.14 165.43 41.04 7.87 4.59 4.55 CR3014* 9.15 7.95 10.51 4.74 4.12 4.57 *Indica análisis FACS que se realizó en un experimento separado Tabla 10. Potencia de los anticuerpos anti-HA en el análisis de titulo de anticuerpo neutralizante. Anticuerpo Concentración ( g/ml) CR6255 25 CR6257 12.5 CR6260 12.5 CR6261 12.5 CR6262 100 CR6268 50 CR6307 50 CR6314 12.5 CR6323 50 CR6325 12.5 CR6344 25 CR6310 25 CR6331 100 CR4098 _* *A 50 g/ml no se observó neutralización.
Tabla 11. Potencia de anticuerpos anti-HA en el análisis de titulo de anticuerpo neutralizante. Anticuerpo Concentración (pg/ml) CR6255 3.12 CR6257 1.56 CR6260 3.12 CR6261 0.78 CR6262 25 CR6268 6.25 CR6272 - CR6307 25 CR6310 6.25 CR6314 3.12 CR6323 6.25 CR6325 6.25 CR6327 6.25 CR6328 25 CR6329 3.12 CR6331 25 CR6332 12.5 CR6334 6.25 CR6336 25 CR6339 - CR6342 6.25 CR6343 50 CR6344 25 - significa que a 100 µg/ml no se observó neutralización Tabla 12. Reactividad cruzada de las IgG anti-H5Nl moléculas HA de diferentes subtipos HA medidas por ELI (DO 492 nm) . ND: No determinada Hl H3 H5 H7 H9 BPL-inact . BPL- A/NC/20/99 intact . (H1N1) NIBRG14 (H5N1) CR6255 1.91 0.08 1.44 0.22 1.97 1.38 1.18 CR6257 1.93 0.08 1.37 0.16 2.06 1.34 1.21 CR6260 1.88 0.08 1.45 0.19 2.00 1.34 1.17 CR6261 2.04 0.07 1.44 0.31 2.32 1.46 1.41 CR6262 1.48 0.09 1.02 0.17 1.93 0.51 0.35 CR6268 1.78 0.08 1.30 0.15 2.16 1.39 1.13 CR6272 0.81 0.07 0.58 0.15 0.96 0.92 0.79 CR6307 0.22 0.11 0.99 0.22 0.17 0.23 0.50 CR6310 1.92 0.08 1.37 0.18 2.17 1.31 1.00 CR6314 1.93 0.07 1.48 0.25 2.21 1.37 1.42 CR6323 2.32 0.07 1.89 0.15 2.27 1.40 0.93 CR6325 1.42 0.07 1.30 0.17 2.04 1.09 1.20 CR6327 1.75 0.08 1.11 0.14 1.93 1.16 0.73 CR6328 2.43 0.07 1.78 0.16 2.38 1.39 0.98 CR6329 1.98 0.08 1.43 0.17 2.16 1.04 1.01 CR6331 1.75 0.06 1.32 0.16 2.02 1.25 0.92 CR6332 2.20 0.15 1.65 0.26 2.11 1.20 1.11 CR6334 2.04 0.07 1.19 0.15 1.82 1.13 0.91 CR6336 1.92 0.10 1.41 0.18 2.02 1.09 0.94 CR6339 1.25 0.07 0.81 0.14 1.96 0.94 0.50 CR6342 1.99 0.09 1.25 0.17 2.13 1.32 0.90 CR6343 1.28 0.07 0.76 0.15 1.88 0.91 0.64 CR6344 1.80 0.09 1.31 0.18 2.15 1.31 0.96 CR5111 0.08 0.07 1.57 0.15 0.17 0.09 0.81 CR3014 0.08 0.07 0.09 0.17 0.16 0.09 0.11 No IgG 0.13 0.08 0.09 0.15 0.16 0.09 0.14 anti-H5 ND ND ND 0.90 2.07 2.62 2.93 de borrego Tabla 13. Mapeo de epitopo de anticuerpos anti-HA humanos. HA1 HA2 CR5111 CR6342 CR6307 CR6261 C179 CR6323 CR6325 CR6329 H5N1TV TGLRN GVTNKVNSIIDK + + + + Mutante I K + - + + Mutante + - + - II Mutante —M— + + + + III Mutante + - + + IV Mutante V N- + + + + Tabla 14. Calificaciones clínicas de ratones pretratados con anticuerpo, seguido por exposición mortal con virus de influenza H5N1 Número de ratones que muestran signos clínicos3 Día del estudio ID de Dosis de Ab -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Grupo (mg/kg) 1 CR6261-15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 2 CR6261-5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2/9 2/9 1/8 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 3 CR6261-2 0 0 0 0 0 0 0 i 2 5 ' 5 3/8 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 0/7 10 " 8/8 7/7 w.. " "_" 4/4 ~ 4/4 4/4 474 ~ 4/ 4/4 /4 1/4 t 4 CR6261-0.7 0 0 0 0 0 0 1/4 1 5 CR6323-15 0 0 0 0 0 0 1 1 1 1 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 10 6 CR6325-15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 RaH5N3 0 0 0 0 0 0 5 10 10 6/6 1/1 i/i ; 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 8 CR6261-15 0 0 0 0 ; io 10 " 10 10 9/9 5/5 1/1 1/1 j 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 0/0 ade 10, a menos que se indique de otra manera Tabla 15. Enfermedad respiratoria de ratones pretratados con anticuerpo, seguido por exposición mortal con virus de influenza H5N1 Número de ratones que muestran enfermedad respiratoria21 Día del estudio ID de Dosis de Ab 0 ? 2 3 4 5 6 7 8 9 10 ?? 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Grupo (mg/kg) ~? CR6261-15 0 0 0 0 0 0 0 Ó 0 0 6 0 0 6 Ó 0 0 Ó 0 6 6 6 ?" 2 CR6261-5 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2~ 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 CR6261-2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 ;" ? ; 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 CR6261-0.7 0 0 0 0 0 0 0 0 [ 8 7 7 6 .4 ; '; 4 ' 4 _ ' 0 0 0 0 CR6323-15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 6 CR6325-15 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 7 RaH5N3 0 0 0 0 0 0 0 0 '?? "ß CD"'I 8 CR3014-15 0 0 0 0 0 0 0 10 9 5 ?~?~ Tabla 16. Calificaciones clínicas de ratones infectados con virus H5N1 y tratados con anticuerpo en diferentes momentos en el tiempo después de la infección Número de ratones que muestran signos clínicos Día del estudio ID de Inter- 6 7 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Grupo valo de tiempo 4 h i 4 4 2 2 2 : 0 0 0 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 0/9 10 10 " 10 " 10~ 0 0 0 0 0 0 0 0 o o 0 0 0 1 d 9 9_ 8 5 . 4.. 2 0 o o 0 0 0 2 d 1 3 - ! 10 10 10 8 Yo" : !l0 10 . 10 10 10 "io ío ""3" "3 2. o o 0 0 0 3 d 7 10~ " 10 _ 6/6 ?/1 0 0 0 0 0 0 o o 0 0 0 CR2006 con 14 ratones en los grupos 2 y 5 hasta dia 6 p.i.
Tabla 17. Enfermedad respiratoria de ratones infectados con virus H5N1 y tratados con anticuerpo en diferentes momentos en el tiempo después de la infección Número de ratones que muestran enfermedad respiratoria3 Dia del estudio ID de Inter- -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Grupo valo de tiempo 1 4 h 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2 1 d 0 0 0 0 0 0 2_ 2. j 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 3 2 d 0 0 0 0 0 0 ¦ 10 10 2 ! 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 4 3 d 0 0 0 0 0 0 10 10 "5 7.:" '"7 ' 4" 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 CR2006 0 0 0 0 0 0 ' ió 10 ' 6 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 a calificación 3 Tabla 18. Mortandad de ratones infectados con virus H5N1 y tratados con anticuerpo en diferentes momentos en el tiempo después de la infección Número de ratones vivos en cada dia del estudio Dia del estudio ID Inter- ~ 0 ? 2 3 4 5 6 7 8 9 10 ? ?2 13 ?4 15 16 ?7 18 19 20 21 de valo Gru- de po tiempo p.i. 1 4 h 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 2 1 d 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 3 2 d 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 4 3 d 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 CR2006 10 10 10 10 10 10 10 10 6 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Tabla 19. Mortandad de ratones infectados con virus HlNl y tratados con anticuerpo en diferentes puntos en tiempo antes y después de la infección Número de ratones vivos en cada dia de estudio Dia del estudio Inter- -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 valo de tiempo p.i.. -Id 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 Id 10 10 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 2d 10 10 9 9 9 9 9 9 9 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 3d 10 10 10 10 10 10 10 9 9 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 8 control 10 10 10 10 10 10 10 10 5 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Tabla 20. Calificaciones clínicas de ratones infectados con virus H1N1 y tratados con anticuerpo en diferentes momentos en el tiempo antes y después de la infección Número de ratones que muestran signos clínicos Día del estudio ID de Intervalo de -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 Grupo tiempo p.i. 6 d-1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 d1 0 0 0 n¾ 9 9 9 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 9 d2 0 0 0 9 9 9 i ; 9 a/8 8/8 j 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 8 d3 0 0 0 nc 10 10 10 9/9 9/9 8/8 " 8/8 8/8" 8/8 8/8 4/8 3/8 ; 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 0/8 7 control 0 0 0 10 10 10 ... 10 10 5/5 2/21 a con 9 ratones en los grupos de tratamiento Id y 2d p.i.
Tabla 21. Enfermedad respiratoria de ratones infectados con virus H1N1 y tratados con anticuerpo en diferentes momentos en el tiempo antes y después de la infección Número de ratones que muestran enfermedad respiratoria3 Dia del estudio Inter- 0 ? 2 3 4 5 6 7 8 9 ?? ? 12 13 14 15 ?6 17 18 19 20 21 valo de tiempo p.i. -Id 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 Id 0 0 o í " 7 10 2 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 2d 0 0 o 10 4 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 - 3d 0 0 o ! L " 9 10 ..9~ .9~ 8 8 8 . J.....J 0 0 0 0 0 0 0 0 0 control 0 0 0 1 7 10 10 5 : 2j a una calificación de 2 ó 3 Tabla 22. Secuencia del epitopo ??2 en diferentes subtipos de influenza. El aminoácido subrayado representa la sustitución valina (V) - ácido glutámico (E) en el mutante escape H2N2 (mutante II; Tabla 13) HA2 SEC ID NO: H5N1: ¦ A/Vientam/1203/2004 GVTNKVNSIIDK 368 H5N1 : A/Hong Kong/156/97 GVTNKVNSIINK 369 H5N2: A/mald/PA/84 GVTNKVNSIIDK 368 H1N1: A/PR/8/34 GITNKVNSVIEK 372 A/South Carolina/1/1918 A/WSN/33 A/New Caledonia/20/99 A/Bangkok/10/83 A/yamagata/120/86 H2N2: A/Okuda/57 GITNKVNSVIEK 372 A/Kumamoto/1/65 A/Korea/426/68 A/Izumi/5/65 H2N2: A/Izumi/5/65 (R) GITNKENSVIEK 373 H6N2: A/Mallard/Netherlands/16/9 GITNKVNSIIDK 374 9 H9N2: A/Hong Kong/1073/99 KITSKVNNIVDK 375 H3N2: A/Aichi/2/68 QINGKLNRVIEK 376 H3N2: A/Fukuoka/C29/85 QINGKLNRLIEK 377 REFERENCIAS Boel E et al. (2000), Functional human monoclonal antibodies of all isotypes constructed from phage display library-derived single-chain Fv antibody fragments. J. Immunol . Methods 239:153-166 Burton DR and Barbas CF (1994), Human antibodies from combinatorial librarles. Adv. Immunol. 57:191-280 Chou TC and P Talalay (1984) Quantitative analysis of dose-effect relationships : the combined effects of múltiple drugs or enzyme inhibitors. Adv Enzyme Regul 22:27-55 De Kruif J et al. (1995a), Rapid selection of cell subpopulation-specific human monoclonal antibodies from a synthetic phage antibody library. Proc Nati Acad Sci USA 92:3938 De Kruif J et al. (1995b) Selection and application of human single-chain Fv antibody fragments from a semi-synthetic phage antibody display library with designed CDR3 regions. J. Mol. Biol. 248:97-105. Huís G et al. (1999) Antitumor immune effector mechanisms recruited by phage display derived fully human IgG 1 and IgAl monoclonal antibodies. Cáncer Res 59:5778-5784 Okuno Y et al (1993) A common neutralizing epitope conserved between the hemagglutinins of Influenza A virus Hl and H2 strains . J. Virol . 67:2552-2558. Slootstra JW et al. (1996) Structural aspects of antibody-antigen interaction revealed through small random peptide librarles. Mol. Divers . 1 : 87-96. Smirnov YA et al (1999) An epitope shared by the hemagglutinins ofHl, H2, H5 and H6 subtypes of influenza A virus. Acta Virol. 43:237-244. The World Health Organization Global Influenza Program Surveillance Network (2005) , Evolution ofH5N1 Avian Influenza Viruses in Asia. Emerg Infect Dis 11:1515-1521 Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (15)

  1. REIVINDICACIONES
  2. Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones : 1. Una molécula de unión aislada capaz de reconocer y unirse a un epitopo en la subunidad HA2 de la proteina de hemaglutinina (HA) de influenza, caracterizada porque tiene actividad neutralizante contra un virus de influenza que comprende HA del subtipo H5 tal como H5N1, H5N2, H5N8 y H5N9 y en donde la molécula de unión comprende el gen VHl-69 de la linea germinal VH. 2. La molécula de unión de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque no depende de un epitopo en la subunidad HAl de la proteina HA para unión a la proteina HA. 3. La molécula de unión de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizada porque la molécula de unión también tiene actividad neutralizante contra un virus de influenza que comprende HA del subtipo Hl, tal como H1N1 y preferiblemente en donde la molécula de unión también tiene actividad neutralizante contra un virus de influenza que comprende HA del subtipo H2, H6 y/o H9. 4. La molécula de unión de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el epitopo en la subunidad ??2 se selecciona del grupo que consiste de la secuencia de aminoácidos: 1. GVTNKVNS11DK (SEC ID NO: 368) , 2. GVTNKVNSIINK (SEC ID NO: 369) , 3. GVTNKENSIIDK (SEC ID NO: 370) , 4. GVTNKVNRIIDK (SEC ID NO: 371) , 5. GITNKVNSVIEK (SEC ID NO: 372) , 6. GITNKENSVIEK (SEC ID NO: 373) , 7. GITNKVNSIIDK (SEC ID NO: 374) y 8. KITSKVNNIVDK (SEC ID NO: 375) . 5. La molécula de unión de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque se selecciona del grupo que consiste de: a) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, b) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 16, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 17 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 18, c) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 22 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 23, d) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 39, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 40 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 41, e) una molécula de unión que comprende una región
  3. CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 45, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 46 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 47, h) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 49 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 50, i) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 52, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 53 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 54, j ) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 262, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 263 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 264, k) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 268, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 269 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 270, i) Una molécula de unión que comprende una región
  4. CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 274, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 275 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 276, m) una molécula de unión que comprende una región 5 CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 280, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 281 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 282, n) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 286, una región CDR2 ° de cadena pesada de la SEC ID NO: 287 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 288, o) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 292, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 293 y una región CDR3 de 5 cadena pesada de la SEC ID NO: 294, p) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 304, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 305 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 306, y 0 q) una molécula de unión que comprende una región
  5. CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 310, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 311 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 312. 6. La molécula de unión de conformidad con la 5 reivindicación 5, caracterizada porque la molécula de unión se selecciona del grupo que consiste de una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3; y una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 39, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 40 y una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 41. 7. La molécula de unión de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la molécula de unión se selecciona del grupo que consiste de: a) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, una región CDR1 de cadena ligera de la SEC ID NO: 4, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 5 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 6, b) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 7, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 8 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 9, c) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 10, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 11 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 12, d) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 13, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 14 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 15, e) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 16, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 17, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 18, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 19, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 20 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 21, f) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 22, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 23, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 24, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 25 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 26, g) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, una región CDR1 de cadena ligera de la SEC ID NO: 33, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 34 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 35, h) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, una región CDR1 de cadena ligera de la SEC ID NO: 36, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 37 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 38, i) una molécula de unión que comprende una región CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 39, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 40, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 41, una región CDR1 de cadena ligera de la SEC ID NO: 42, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 43 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 44, j ) una molécula de unión que comprende una región
  6. CDR1 de cadena pesada de la SEC ID NO: 45, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 46, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 47, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 7, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 8 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 48, k) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 49, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 50, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 33, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 34 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 51, 1) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 52, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 53, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 54, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 55, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 56 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 57, m) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 262, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 263, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 264, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 265, una región CDR2 de cadena ligera de .la SEC ID NO: 266 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 267, n) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 268, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 269, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 270, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 271, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 272 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 273, o) una molécula de unión que comprende una región
  7. CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 274, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 275, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 276, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 277, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 278 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 279, p) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 280, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 281, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 282, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 283, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 284 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 285, q) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 286, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 287, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 288, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 289, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 290 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 291, r) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 292, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 293, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 294, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 295, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 296 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 297, s) una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 304, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 305, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 306, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 307, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 308 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 309, y t) una molécula de unión que comprende una región
  8. CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 310, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 311, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 312, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 313, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 314 y una región CDR3 de cadena ligera la
  9. SEC ID NO: 315. 8. La molécula de unión de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada porque se selecciona del grupo que consiste de una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 1, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 2, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 3, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 13, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 14 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 15; y una molécula de unión que comprende una región CDRl de cadena pesada de la SEC ID NO: 39, una región CDR2 de cadena pesada de la SEC ID NO: 40, una región CDR3 de cadena pesada de la SEC ID NO: 41, una región CDRl de cadena ligera de la SEC ID NO: 42, una región CDR2 de cadena ligera de la SEC ID NO: 43 y una región CDR3 de cadena ligera de la SEC ID NO: 44. 9. La molécula de unión de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizada porque la molécula de unión es un anticuerpo monoclonal humano .
  10. 10. Una molécula de ácido nucleico, caracterizada porque codifica para una molécula de unión de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9.
  11. 11. La molécula de unión de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizada porque es para uso como un medicamento y preferiblemente para el diagnóstico, tratamiento terapéutico y/o profiláctico de infección por influenza.
  12. 12. La molécula de unión de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque la infección por influenza es causada por un virus de influenza que se asocia con un ataque pandémico o que tiene el potencial que se asocia con un ataque pandémico.
  13. 13. La molécula de unión de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada porque la cepa de virus de influenza que se asocia con un ataque pandémico se selecciona del grupo que consiste de H1N1, H5N1, H5N2, H5N8, H5N9, una cepa basada en H2 y H9N2.
  14. 14. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende una molécula de unión de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
  15. 15. El uso de una molécula de unión de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 en la preparación de un medicamento para el diagnóstico, profilaxis y/o tratamiento de una infección por virus de influenza.
MX2009002174A 2006-09-07 2007-09-06 Moleculas de union humanas capaces de neutralizar el virus de la influenza h5n1 y usos de las mismas. MX2009002174A (es)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US84293006P 2006-09-07 2006-09-07
EP06120316 2006-09-07
EP06120644 2006-09-14
EP06125107 2006-11-30
EP07111235 2007-06-28
PCT/EP2007/059356 WO2008028946A2 (en) 2006-09-07 2007-09-06 Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus h5n1 and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
MX2009002174A true MX2009002174A (es) 2009-03-12

Family

ID=39027173

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MX2009002174A MX2009002174A (es) 2006-09-07 2007-09-06 Moleculas de union humanas capaces de neutralizar el virus de la influenza h5n1 y usos de las mismas.

Country Status (16)

Country Link
US (5) US8192927B2 (es)
EP (2) EP2059532B1 (es)
JP (2) JP5161882B2 (es)
KR (1) KR101485197B1 (es)
AU (1) AU2007293662B2 (es)
CA (1) CA2663388C (es)
EA (1) EA017203B1 (es)
HK (1) HK1126799A1 (es)
HR (1) HRP20130163T1 (es)
IL (2) IL197390A (es)
MX (1) MX2009002174A (es)
MY (1) MY170607A (es)
NO (1) NO20091321L (es)
PL (1) PL2059532T3 (es)
WO (1) WO2008028946A2 (es)
ZA (1) ZA200901171B (es)

Families Citing this family (144)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160279239A1 (en) 2011-05-02 2016-09-29 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of anti-cd74 antibody for systemic lupus erythematosus and autoimmune disease
USRE47770E1 (en) 2002-07-18 2019-12-17 Merus N.V. Recombinant production of mixtures of antibodies
PT2314629E (pt) 2002-07-18 2014-01-22 Merus B V Produção recombinante de misturas de anticorpos
ES2408582T3 (es) 2003-05-30 2013-06-21 Merus B.V. Biblioteca de Fab para la preparación de una mezcla de anticuerpos
US20100069614A1 (en) 2008-06-27 2010-03-18 Merus B.V. Antibody producing non-human mammals
KR101206206B1 (ko) * 2003-07-22 2012-11-29 크루셀 홀란드 비.브이. 사스-코로나바이러스에 대한 결합분자 및 그것의 용도
DK1749029T3 (da) 2004-05-27 2011-06-06 Crucell Holland Bv Bindemolekyler, der kan neutralisere rabiesvirus, og anvendelser deraf
JP4852046B2 (ja) * 2004-10-12 2012-01-11 クルセル ホランド ベー ヴェー 癌の治療及び検出に用いる結合分子
US20160355591A1 (en) 2011-05-02 2016-12-08 Immunomedics, Inc. Subcutaneous anti-hla-dr monoclonal antibody for treatment of hematologic malignancies
AU2006245734C1 (en) 2005-05-12 2012-05-24 Crucell Holland B.V. Host cell specific binding molecules capable of neutralizing viruses and uses thereof
US8148085B2 (en) 2006-05-15 2012-04-03 Sea Lane Biotechnologies, Llc Donor specific antibody libraries
EA031202B1 (ru) 2006-06-06 2018-11-30 Янссен Вэксинс Энд Превеншн Б.В. Антитело человека, обладающее фагоцитарной активностью против стафилококков, и его применение
MY170607A (en) 2006-09-07 2019-08-20 Crucell Holland Bv Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus h5n1 and uses thereof
WO2008110937A2 (en) * 2007-03-13 2008-09-18 Humabs Llc Antibodies against h5n1 strains of influenza a virus
MX2009009912A (es) 2007-03-27 2010-01-18 Sea Lane Biotechnologies Llc Constructos y colecciones que comprenden secuencias de cadena ligera sustitutas de anticuerpos.
EP2036045A1 (en) * 2007-07-11 2009-03-18 Cairos technologies AG Video tracking method and appartus arrangement for performing the method
JP5490695B2 (ja) * 2007-09-13 2014-05-14 テマセック・ライフ・サイエンシズ・ラボラトリー・リミテッド インフルエンザウイルスｈ５亜型からのヘマグルチニンに特異的なモノクローナル抗体およびそれらの使用
JP5490696B2 (ja) 2007-09-13 2014-05-14 テマセック・ライフ・サイエンシズ・ラボラトリー・リミテッド インフルエンザウイルスｈ５亜型またはｎ１亜型からのヘマグルチニンおよびノイラミニダーゼに特異的なモノクローナル抗体ならびにそれらの使用
EP2222701B1 (en) 2007-12-06 2017-11-01 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibodies against influenza virus and methods of use thereof
ITTO20080204A1 (it) 2008-03-17 2009-09-18 Pomona Biotechnologies Llc Anticorpi monoclonali atti a reagire con una pluralita di sottotipi del virus influenzale a
WO2009121004A2 (en) 2008-03-28 2009-10-01 Sea Lane Biotechnologies, Llc Neutralizing molecules to viral antigens
CN101550188B (zh) * 2008-04-01 2012-05-02 南方医科大学 H5亚型禽流感病毒h5n1血凝素单克隆抗体及其核苷酸序列和制备方法
ITTO20080398A1 (it) 2008-05-27 2009-11-28 Pomona Biotechnologies Llc Anticorpi monoclonali aventi proprieta' di cross-neutralizzazione omosubtipica per virus influenzali di tipo a sottotipo h1
JP2011528902A (ja) * 2008-07-25 2011-12-01 インスティテュート・フォー・リサーチ・イン・バイオメディシン 抗ａ型インフルエンザウイルス中和抗体およびその使用
US8871207B2 (en) 2008-07-25 2014-10-28 Humabs, LLC Neutralizing anti-influenza A virus antibodies and uses thereof
GB0818356D0 (en) * 2008-10-07 2008-11-12 Istituto Superiore Di Sanito Antibodies
TWI381848B (zh) * 2008-10-20 2013-01-11 Imclone Llc 抗纖維母細胞生長因子受體-3 (fgfr-3) 抗體及包含其之醫藥組合物
US9347043B2 (en) 2008-10-22 2016-05-24 Institute For Research In Biomedicine Methods for producing antibodies from plasma cells
BRPI0921845A2 (pt) * 2008-11-12 2019-09-17 Medimmune Llc formulação aquosa estéril estável, forma de dosagem unitária farmacêutica, seringa pré-carregada, e, métodos para tratar uma doença ou distúrbio, para tratar ou prevenir rejeição, para esgotar células t que expressam icos em um paciente humano, e para interromper arquitetura central germinal em um órgão linfóide secundário de um primata
AU2008365616A1 (en) * 2008-12-24 2011-08-11 Temasek Life Sciences Laboratory Limited Monoclonal antibodies specific to the fusion peptide from hemagglutinin from influenza A viruses and uses thereof
CA2787099A1 (en) 2009-03-30 2010-10-14 Anice C. Lowen Influenza virus hemagglutinin polypeptides containing stem domains, vaccines and uses thereof
CA2760553A1 (en) * 2009-04-30 2010-11-04 Jr. James E. Crowe Monoclonal antibodies to influenza h1n1 virus and uses thereof
BRPI1012749B1 (pt) * 2009-05-11 2022-01-11 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Anticorpo monoclonal humano, seu uso e seu método de produção, imunoconjugado, e composição farmacêutica
AU2010249046A1 (en) 2009-05-13 2011-12-01 Sea Lane Biotechnologies, Llc Neutralizing molecules to influenza viruses
JP5941841B2 (ja) 2009-05-26 2016-06-29 アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ 周期的投与によって作製されたインフルエンザウイルスに対するモノクローナル抗体及びその使用
AU2010282415A1 (en) * 2009-08-14 2012-03-08 Theraclone Sciences, Inc. Compositions and methods for the therapy and diagnosis of influenza
US9458226B2 (en) 2009-10-09 2016-10-04 Emory University Recombinant antibodies against H1N1 influenza
JP6210685B2 (ja) * 2010-01-27 2017-10-11 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー 標的化された広域スペクトルのインフルエンザ中和のための操作されたポリペプチド剤
MX342716B (es) 2010-02-18 2016-10-11 Sinai School Medicine Vacunas para su uso en la profilaxis y tratamiento de la enfermedad del virus de influenza.
WO2011111966A2 (en) * 2010-03-08 2011-09-15 Celltrion, Inc. Human monoclonal antibodies derived from human b cells and having neutralizing activity against influenza a viruses
CA2792537A1 (en) 2010-03-30 2011-10-06 Mount Sinai School Of Medicine Influenza virus vaccines and uses thereof
CN102241768B (zh) * 2010-05-14 2013-12-25 中国科学院上海生命科学研究院 一种抗甲型h1n1流感病毒血凝素蛋白的抗体
WO2011160083A1 (en) * 2010-06-17 2011-12-22 Trellis Bioscience, Inc. Antibodies useful in passive influenza immuization
EP2596017B1 (en) 2010-07-22 2019-04-03 John W. Schrader Cross-protective antibody against influenza viral infection
US8822663B2 (en) 2010-08-06 2014-09-02 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
JP2013540701A (ja) * 2010-08-12 2013-11-07 セラクローン サイエンシーズ， インコーポレイテッド 抗赤血球凝集素抗体組成物およびその使用方法
US9534042B2 (en) 2010-09-03 2017-01-03 Fujita Health University Influenza virus-neutralizing antibody and screening method therefor
US8883171B2 (en) 2010-09-14 2014-11-11 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Computationally optimized broadly reactive antigens for influenza
HUE058896T2 (hu) 2010-10-01 2022-09-28 Modernatx Inc N1-metil-pszeudo-uracilt tartalmazó ribonukleinsavak és azok felhasználásai
WO2012096994A2 (en) * 2011-01-10 2012-07-19 Emory University Antibodies directed against influenza
BR112013020743A2 (pt) * 2011-02-14 2016-10-18 Theraclone Sciences Inc composições e métodos para a terapia e diagnóstico de influenza
WO2012118903A2 (en) * 2011-03-01 2012-09-07 Amgen Inc. Bispecific binding agents
US8710200B2 (en) 2011-03-31 2014-04-29 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids encoding a modified erythropoietin and their expression
JP6024025B2 (ja) 2011-05-02 2016-11-09 イミューノメディクス、インコーポレイテッドＩｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ， Ｉｎｃ． 少容量投与用のアロタイプ選択抗体の限外濾過濃縮
JP6113155B2 (ja) 2011-06-20 2017-04-12 ユニバーシティ オブ ピッツバーグ − オブ ザ コモンウェルス システム オブ ハイヤー エデュケイション 計算で最適化した広い反応性を示すｈ１ｎ１インフルエンザの抗原
MX346206B (es) 2011-07-14 2017-03-09 Crucell Holland Bv Moleculas de enlace humanas capaces de neutralizar los virus de la influenza a del grupo filogenetico 1 y grupo filogenetico 2 y virus de la influenza b.
DK3418300T3 (da) 2011-07-18 2020-12-07 Inst Res Biomedicine Neutralisering af anti-influenza-a-virusantistoffer og anvendelser deraf
EP2736928B1 (en) 2011-07-28 2019-01-09 i2 Pharmaceuticals, Inc. Sur-binding proteins against erbb3
WO2013033319A2 (en) * 2011-08-30 2013-03-07 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University A cluster of neutralizing antibodies to hepatitis c virus
GB201115214D0 (en) 2011-09-02 2011-10-19 Health Prot Agency Influenza virus antibody compositions
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP2758075B1 (en) 2011-09-20 2023-05-03 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Influenza virus vaccines and uses thereof
CA2791109C (en) 2011-09-26 2021-02-16 Merus B.V. Generation of binding molecules
RS62993B1 (sr) 2011-10-03 2022-03-31 Modernatx Inc Modifikovani nukleozidi, nukleotidi, i nukleinske kiseline, i njihove upotrebe
AU2012326025B2 (en) * 2011-10-18 2017-08-31 Emory University Antibodies directed against influenza
SG11201402633UA (en) 2011-11-28 2014-09-26 Crucell Holland Bv Influenza virus vaccines and uses thereof
KR20140112495A (ko) 2011-12-02 2014-09-23 에임 쎄라퓨틱스 비.브이. 인플루엔자 a 바이러스 특이적 항체
CA2861515A1 (en) 2011-12-05 2013-06-13 Trellis Bioscience, Llc Antibodies useful in passive influenza immunization
KR101749316B1 (ko) 2011-12-15 2017-06-21 (주) 에이프로젠 Ｈ１ｎ１―감염된 환자들로부터 유도된 매우 잠재력 있는 넓은-스펙트럼 중화 단일클론 항체 및 이를 포함하는 바이러스의 치료용 조성물
CN104114572A (zh) 2011-12-16 2014-10-22 现代治疗公司 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物
US9975956B2 (en) 2011-12-22 2018-05-22 I2 Pharmaceuticals, Inc. Surrogate binding proteins which bind DR4 and/or DR5
WO2013119683A1 (en) 2012-02-07 2013-08-15 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Computationally optimized broadly reactive antigens for h3n2, h2n2, and b influenza viruses
CA2863949C (en) 2012-02-13 2021-06-29 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education Computationally optimized broadly reactive antigens for human and avian h5n1 influenza
WO2013132007A1 (en) 2012-03-08 2013-09-12 Crucell Holland B.V. Human binding molecules capable of binding to and neutralizing influenza b viruses and uses thereof
RU2639551C2 (ru) 2012-03-30 2017-12-21 Юниверсити Оф Питтсбург - Оф Зе Коммонвэлс Систем Оф Хайе Эдьюкейшн Оптимизированные с помощью вычислительных средств антигены с широким спектром реактивности для вирусов гриппа h5n1 и h1n1
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
DE18200782T1 (de) 2012-04-02 2021-10-21 Modernatx, Inc. Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen
US9303079B2 (en) 2012-04-02 2016-04-05 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
NZ772318A (en) 2012-04-20 2023-06-30 Merus Nv Methods and means for the production of ig-like molecules
US9969794B2 (en) 2012-05-10 2018-05-15 Visterra, Inc. HA binding agents
EP2712626A1 (en) * 2012-09-28 2014-04-02 Fabentech Passive immunisation against influenza, in particular H5N1
MX2015005860A (es) 2012-11-13 2015-08-10 Genentech Inc Anticuerpos de antihemaglutinina y metodo de uso.
EP4074834A1 (en) 2012-11-26 2022-10-19 ModernaTX, Inc. Terminally modified rna
US9309290B2 (en) 2012-11-27 2016-04-12 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Computationally optimized broadly reactive antigens for H1N1 influenza
NZ627796A (en) 2012-12-18 2017-07-28 Icahn School Med Mount Sinai Influenza virus vaccines and uses thereof
AU2014236508A1 (en) 2013-03-14 2015-09-17 Contrafect Corporation Composition and methods based on neutralizing antibodies delivered intranasally for enhanced therapeutic efficacy
WO2014159960A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Antibodies against influenza virus hemagglutinin and uses thereof
WO2014152946A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 University Of Washington Through Its Center For Commercialization Polypeptides for treating and/or limiting influenza infection
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
CN104098692B (zh) 2013-04-02 2018-11-30 厦门大学 识别流感病毒血凝素蛋白ha1结构域的广谱单克隆抗体
CA2913859C (en) 2013-05-30 2021-11-30 Crucell Holland B.V. Influenza virus vaccines and uses thereof
EP3037819A4 (en) * 2013-08-23 2017-03-29 Fujita Health University Method of determining resistance to influenza virus
EP3037533A4 (en) 2013-08-23 2017-07-05 Fujita Health University Anti-influenza virus-neutralizing antibody
EP3052106A4 (en) 2013-09-30 2017-07-19 ModernaTX, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
DK3052192T3 (da) 2013-10-02 2020-09-28 Medimmune Llc Neutraliserende anti-influenza a-antistoffer og anvendelser deraf
MX2016004249A (es) 2013-10-03 2016-11-08 Moderna Therapeutics Inc Polinulcleotidos que codifican el receptor de lipoproteina de baja densidad.
US20160264648A1 (en) * 2013-11-06 2016-09-15 Osaka University Antibody having broad neutralization activity against group 1 influenza a viruses
US10639370B2 (en) 2014-02-04 2020-05-05 Contrafect Corporation Antibodies useful in passive influenza immunization, and compositions, combinations and methods for use thereof
EP3102598A2 (en) 2014-02-04 2016-12-14 Contrafect Corporation Antibodies useful in passive influenza immunization, and compositions, combinations and methods for use thereof
KR102378289B1 (ko) 2014-02-10 2022-03-23 아이쥐엠 바이오사이언스 인코포레이티드 IgA 다중-특이적 결합 분자
WO2015143194A2 (en) * 2014-03-19 2015-09-24 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Immunogenetic restriction on elicitation of antibodies
PT3134131T (pt) 2014-04-23 2022-03-24 Modernatx Inc Vacinas de ácidos nucleicos
CN107074912B (zh) 2014-07-10 2021-10-29 扬森疫苗与预防公司 流行性感冒病毒疫苗及其用途
BR112017000257A2 (pt) 2014-07-10 2017-10-31 Janssen Vaccines & Prevention Bv vacinas contra o vírus da gripe e usos das mesmas
RU2739952C2 (ru) 2014-07-15 2020-12-30 МЕДИММЬЮН, ЭлЭлСи Нейтрализующие антитела к вирусу гриппа b и пути их применения
TWI702229B (zh) 2014-12-19 2020-08-21 美商再生元醫藥公司 流行性感冒病毒血球凝集素之人類抗體
JP2018504412A (ja) 2015-01-23 2018-02-15 アイカーン スクール オブ メディシン アット マウント サイナイ インフルエンザウイルスワクチン接種レジメン
EP3253787B1 (en) 2015-02-05 2020-10-07 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Human neutralizing antibodies binding to influenza neuraminidase
CA2975655C (en) 2015-02-05 2023-09-19 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Binding molecules directed against influenza hemagglutinin and uses thereof
EA201792482A1 (ru) 2015-05-11 2018-02-28 Янссен Вэксинс Энд Превеншн Б.В. Соединения-пептидомиметики, нейтрализующие вирус гриппа
AU2016271323B2 (en) 2015-06-01 2022-08-25 Medimmune, Llc Neutralizing anti-influenza binding molecules and uses thereof
WO2017083627A1 (en) 2015-11-13 2017-05-18 Visterra, Inc. Compositions and methods for treating and preventing influenza
SG11201805001UA (en) 2016-01-13 2018-07-30 Medimmune Llc Method of treating influenza a
EP3423484B1 (en) 2016-03-01 2021-01-13 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Human neutralizing antibodies binding to influenza b neuraminidase
US11266734B2 (en) 2016-06-15 2022-03-08 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Influenza virus hemagglutinin proteins and uses thereof
KR101835009B1 (ko) 2016-08-19 2018-03-07 주식회사 하이딥 터치 입력 장치
JP7265984B2 (ja) 2016-10-21 2023-04-27 アディマブ， エルエルシー 抗呼吸器合胞体ウイルス抗体、及び、それらの生成及び使用の方法
KR20190103147A (ko) 2016-10-21 2019-09-04 아디맵 엘엘씨 항-호흡기 세포융합 바이러스 항체, 그리고 이의 생성 방법 및 사용 방법
WO2018075974A2 (en) * 2016-10-21 2018-04-26 Adimab, Llc Anti-respiratory syncytial virus antibodies, and methods of their generation and use
CN110234337A (zh) 2016-10-27 2019-09-13 扬森疫苗与预防公司 中和流感病毒的化合物
US11566064B2 (en) 2017-01-27 2023-01-31 National Research Council Of Canada Hemagglutinin-specific antibodies and uses thereof
EP3577107A1 (en) 2017-02-02 2019-12-11 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Piperazine derivatives for influenza virus inhibition
WO2018141854A1 (en) 2017-02-02 2018-08-09 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Piperazine derivatives for influenza virus inhibition
SG11201907299XA (en) 2017-02-08 2019-09-27 Dragonfly Therapeutics Inc Multi-specific binding proteins for activation of natural killer cells and therapeutic uses thereof to treat cancer
ES2955074T3 (es) 2017-02-20 2023-11-28 Dragonfly Therapeutics Inc Proteínas que se unen a HER2, NKG2D Y CD16
WO2018187074A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of antibody-drug conjugates for cancer therapy
WO2018187706A2 (en) 2017-04-07 2018-10-11 Icahn School Of Medicine At Mount Sinai Anti-influenza b virus neuraminidase antibodies and uses thereof
WO2019035630A2 (ko) * 2017-08-14 2019-02-21 사회복지법인 삼성생명공익재단 인간 상피 성장 인자 수용체 변이체 ⅲ에 결합하는 항체 및 그의 항체 단편
US10501539B2 (en) * 2017-09-15 2019-12-10 Lentigen Technology Inc. Compositions and methods for treating cancer with anti-CD19 immunotherapy
HRP20220980T1 (hr) 2018-01-23 2022-11-11 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Cjepiva protiv virusa influence i njihova uporaba
WO2019147867A1 (en) 2018-01-26 2019-08-01 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Human antibodies to influenza hemagglutinin
WO2019157366A1 (en) 2018-02-08 2019-08-15 Dragonfly Therapeutics, Inc. Antibody variable domains targeting the nkg2d receptor
CN111057718A (zh) * 2018-10-17 2020-04-24 南京大学 一种稳定表达绿色荧光蛋白的egfp-sp2/0细胞株及其构建方法
KR102113302B1 (ko) * 2018-12-24 2020-05-20 원광대학교산학협력단 상보성결정부 기반 조류 인플루엔자 바이러스의 h5 아형에 특이적으로 결합하는 펩티드 및 이의 용도
JP2022521819A (ja) 2019-03-25 2022-04-12 ビステラ， インコーポレイテッド インフルエンザを処置および予防するための組成物および方法
CA3152957A1 (en) 2019-09-05 2021-03-11 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Influenza virus vaccines and uses thereof
US11642407B2 (en) 2020-02-28 2023-05-09 Massachusetts Institute Of Technology Identification of variable influenza residues and uses thereof
CN111440228B (zh) * 2020-03-09 2021-08-24 扬州大学 多种亚型流感病毒ha2蛋白共同抗原表位、抗体、鉴定方法和应用
WO2021201677A1 (en) 2020-04-01 2021-10-07 Kiadis Pharma Intellectual Property B.V. Compositions and methods targeting influenza
US20210325367A1 (en) * 2020-04-20 2021-10-21 Satish Mahna Controlled Exposure to Pathogens for Generating Immunity
CN116761605A (zh) 2021-02-04 2023-09-15 四川海思科制药有限公司 Ha抑制剂化合物的盐及晶型
WO2022232557A1 (en) * 2021-04-30 2022-11-03 Adagio Therapeutics, Inc. Compounds specific to coronavirus s protein and uses thereof
WO2024104947A2 (en) 2022-11-14 2024-05-23 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Influenza b virus vaccines and uses thereof

Family Cites Families (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4625015A (en) * 1982-08-23 1986-11-25 Scripps Clinic & Research Foundation Broad spectrum influenza antisera
ZA836080B (en) * 1982-08-23 1984-04-25 Scripps Clinic Res Broad spectrum influenza antisera
NZ207394A (en) 1983-03-08 1987-03-06 Commw Serum Lab Commission Detecting or determining sequence of amino acids
NL9101953A (nl) 1991-11-21 1993-06-16 Seed Capital Investments Testinrichting omvattende een plaat met een veelvoud van putjes met een bijbehorende doseerinrichting, alsmede een kit die deze inrichtingen omvat en toepassing van de inrichtingen.
JP3037554B2 (ja) * 1993-04-20 2000-04-24 寳酒造株式会社 免疫原性人工ポリペプチド
US5589174A (en) * 1992-09-17 1996-12-31 Takara Shuzo Co., Ltd. Anti-human influenza virus antibody
JP3061960B2 (ja) * 1992-09-17 2000-07-10 寳酒造株式会社 抗ヒトインフルエンザウイルス抗体
US5624949A (en) 1993-12-07 1997-04-29 Eli Lilly And Company Protein kinase C inhibitors
JP3584990B2 (ja) * 1994-05-09 2004-11-04 タカラバイオ株式会社 抗ヒトインフルエンザウイルス抗体
US6265150B1 (en) 1995-06-07 2001-07-24 Becton Dickinson & Company Phage antibodies
AU4474497A (en) 1996-10-08 1998-05-05 U-Bisys B.V. Methods and means for selecting peptides and proteins having specific affinity for a target
US6440736B1 (en) 1998-10-16 2002-08-27 U-Bisys B.V. Altering the properties of cells or of particles with membranes derived from cells by means of lipid-modified proteinaceous molecules
US20030161813A1 (en) 1998-04-30 2003-08-28 Ton Logtenberg Altering the properties of cells or of particles with membranes derived from cells by means of lipid-modified proteinaceous molecules
US7091324B2 (en) * 1998-11-05 2006-08-15 Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University Prevention and treatment of HCV infection employing antibodies directed against conformational epitopes
ES2237420T5 (es) 1999-04-15 2010-03-03 Crucell Holland B.V. Produccion de proteina recombinante en una celula humana.
US7521220B2 (en) 1999-11-26 2009-04-21 Crucell Holland B.V. Production of vaccines
EP1224943A1 (en) 2001-01-19 2002-07-24 Crucell Holland B.V. Fibronectin as a tumor marker detected by phage antibodies
EP1402025B1 (en) 2001-06-15 2006-02-01 Crucell Holland B.V. Chimaeric phages
US7070926B2 (en) 2001-06-15 2006-07-04 Crucell Holland B.V. Chimaeric phages
CA2481747A1 (en) * 2002-04-12 2003-10-23 Medimmune, Inc. Recombinant anti-interleukin-9 antibodies
US20100069614A1 (en) 2008-06-27 2010-03-18 Merus B.V. Antibody producing non-human mammals
WO2005012337A2 (en) 2003-07-15 2005-02-10 Crucell Holland B.V. Antigenic peptides of sars coronavirus and uses thereof
KR101206206B1 (ko) 2003-07-22 2012-11-29 크루셀 홀란드 비.브이. 사스-코로나바이러스에 대한 결합분자 및 그것의 용도
WO2005063819A2 (en) 2003-12-23 2005-07-14 Crucell Holland B.V. Human binding molecule against cd1a
WO2005111623A1 (en) 2004-05-17 2005-11-24 Crucell Holland B.V. Methods for diagnosis of acute myeloid leukemia
DK1749029T3 (da) 2004-05-27 2011-06-06 Crucell Holland Bv Bindemolekyler, der kan neutralisere rabiesvirus, og anvendelser deraf
JP4852046B2 (ja) 2004-10-12 2012-01-11 クルセル ホランド ベー ヴェー 癌の治療及び検出に用いる結合分子
US8106170B2 (en) 2004-11-11 2012-01-31 Crucell Holland B.V. Compositions against SARS-coronavirus and uses thereof
AU2005318171B2 (en) 2004-12-20 2011-09-29 Crucell Holland B.V. Binding molecules capable of neutralizing West Nile virus and uses thereof
JP4580338B2 (ja) 2004-12-23 2010-11-10 エーエスエムエル ネザーランズ ビー．ブイ． リソグラフィ装置、エキシマ・レーザ、およびデバイス製造方法
AU2006245734C1 (en) 2005-05-12 2012-05-24 Crucell Holland B.V. Host cell specific binding molecules capable of neutralizing viruses and uses thereof
JP4758148B2 (ja) * 2005-06-14 2011-08-24 泰三 宇田 インフルエンザウイルスのヘマグルチニンに対する抗体酵素
US20090130652A1 (en) 2005-06-23 2009-05-21 Crucell Holland B.V. Optimization of West Nile Virus Antibodies
EP1907536B1 (en) 2005-07-22 2010-04-07 Crucell Holland B.V. Cell line for producing coronaviruses
WO2007031550A2 (en) 2005-09-15 2007-03-22 Crucell Holland B.V. Method for preparing immunoglobulin libraries
EA031202B1 (ru) 2006-06-06 2018-11-30 Янссен Вэксинс Энд Превеншн Б.В. Антитело человека, обладающее фагоцитарной активностью против стафилококков, и его применение
CA2654502C (en) 2006-06-06 2015-07-14 Crucell Holland B.V. Human binding molecules having killing activity against enterococci and uses thereof
MY170607A (en) 2006-09-07 2019-08-20 Crucell Holland Bv Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus h5n1 and uses thereof
US8802089B2 (en) 2008-01-03 2014-08-12 Genmab A/S Monoclonal antibodies against CD32B
US8148797B2 (en) 2008-06-26 2012-04-03 Taiwan Semiconductor Manufacturing Co., Ltd. Chip pad resistant to antenna effect and method
BRPI1012749B1 (pt) 2009-05-11 2022-01-11 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Anticorpo monoclonal humano, seu uso e seu método de produção, imunoconjugado, e composição farmacêutica
CA2791109C (en) 2011-09-26 2021-02-16 Merus B.V. Generation of binding molecules
NZ772318A (en) 2012-04-20 2023-06-30 Merus Nv Methods and means for the production of ig-like molecules

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20130163T1 (hr) 2013-03-31
US20120276115A1 (en) 2012-11-01
US20120093823A1 (en) 2012-04-19
NO20091321L (no) 2009-03-31
EP2059532A2 (en) 2009-05-20
ZA200901171B (en) 2010-02-24
EA200970255A1 (ru) 2009-10-30
US9109017B2 (en) 2015-08-18
IL249291B (en) 2018-11-29
IL197390A (en) 2017-11-30
EA017203B1 (ru) 2012-10-30
KR20090059121A (ko) 2009-06-10
WO2008028946A2 (en) 2008-03-13
HK1126799A1 (en) 2009-09-11
EP2059532B1 (en) 2012-12-26
EP2450377A1 (en) 2012-05-09
JP5161882B2 (ja) 2013-03-13
JP2010502207A (ja) 2010-01-28
IL197390A0 (en) 2011-08-01
US8192927B2 (en) 2012-06-05
US20140065156A1 (en) 2014-03-06
US10005831B2 (en) 2018-06-26
CA2663388A1 (en) 2008-03-13
JP5701827B2 (ja) 2015-04-15
AU2007293662B2 (en) 2012-10-04
US8691223B2 (en) 2014-04-08
WO2008028946A3 (en) 2008-10-16
US20160024188A1 (en) 2016-01-28
MY170607A (en) 2019-08-20
PL2059532T3 (pl) 2013-05-31
JP2012245003A (ja) 2012-12-13
CA2663388C (en) 2017-01-17
US9011848B2 (en) 2015-04-21
US20090311265A1 (en) 2009-12-17
AU2007293662A1 (en) 2008-03-13
IL249291A0 (en) 2017-01-31
KR101485197B1 (ko) 2015-01-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2007293662B2 (en) Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus H5N1 and uses thereof
DK2731967T3 (en) HUMAN BINDING MOLECULES CAPABLE OF NEUTRALIZING INFLUENZA A VIRUS FROM PHYLOGENETIC GROUP 1 AND PHYLOGENETIC GROUP 2 AND INFLUENZA B VIRUS
KR101790354B1 (ko) 인플루엔자 바이러스 ｈ3ｎ2를 중화시킬 수 있는 인간 결합 분자 및 그것의 용도
CN101541832B (zh) 能中和流感病毒h5n1的人结合分子及其应用
DK2450378T3 (da) Humane bindingsmolekyler, der er i stand til at neutralisere influenzavirus h5n1, og anvendelser deraf
AU2012216734B2 (en) Human binding molecules capable of neutralizing influenza virus H5N1 and uses thereof
NZ618530B2 (en) Human binding molecules capable of neutralizing influenza a viruses of phylogenetic group 1 and phylogenetic group 2 and influenza b viruses

Legal Events

Date Code Title Description
FG Grant or registration