ME01846B

ME01846B - Mikroorganizmi kao nosači nukleotidnih sekvenci koje kodiraju antigene i proteinske toksine, postupak njihove proizvodnje i korišćenja

Info

Publication number: ME01846B
Application number: MEP-2010-387A
Authority: ME
Inventors: Ivaylo Gentschev; Joachim Fensterle; Ulf R Rapp; Werner Goebel
Original assignee: Aeterna Zentaris Gmbh
Priority date: 2006-11-13
Filing date: 2007-11-13
Publication date: 2011-02-28
Also published as: BRPI0719003A2; CN101595219A; AU2007321266A1; US20110287037A1; NZ576947A; DK2092067T3; ZA200903022B; EP1921149A1; JP2010508861A; CA2669219A1; RU2009122560A; ATE469971T1; KR20090092803A; JP5479102B2; SI2092067T1; US8669091B2; DE602007006985D1; TW200837193A; EP2092067B1; CY1111035T1

Claims

1. Mikroorganizam kao nosač nukletidnih sekvenci, koje kodiraju antigene i proteinske toksine, koje obuhvataju sledeće komponente: (I) najmanje jednu nukleotidnu sekvencu, koja kodira najmanje kompletan ili parcijalni antigen najmanje jednog proteina divljeg tipa ili mutiranog proteina; i (II) najmanje jednu nukleotidnu sekvencu, koja kodira najmanje jedan proteinski toksin i/ili najmanje jednu subjedinicu proteinskog toksina; i (III) a) najmanje jednu nukleotidnu sekvencu, koja kodira najmanje jedan transportni sistem, koji omogućuje ekspresiju ekspresionih proizvoda komponente (I) i komponente (II) na spoljašnjoj površini mikroorganizma i/ili omogućuje sekreciju ekspresionih proizvoda komponente (I) i komponente (II); i/ili koja kodira najmanje jednu signalnu sekvencu, koja omogućuje sekreciju ekspresionih proizvoda komponente (I) i komponente (II); i/ili b) opciono, najmanje jednu nukleotidnu sekvencu, koja kodira najmanje jedan protein za liziranje mikroorganizma u citosolu ćelija sisara i za intracelularno oslobađanje plazmida ili ekspresionih vektora, koji su sadržani u liziranom mikroorganizmu; i (IV) najmanje jednu nukleotidnu sekvencu za najmanje jednu aktivacijsku sekvencu za ekspresiju jedne ili više od komponenti (I) do (III), pri čemu navedena aktivacijska sekvenca može biti aktivirana u mikroorganizmu i/ili je specifična za tkivnu ćeliju, specifična za tumorsku ćeliju, specifična za makrofag, specifična za dendrit, specifična za limfocit, specifična za funkciju ili nije ćelijski specifična”; pri čemu bilo koja od komponenti (I) do (IV) može biti prisutna ili jednom ili nekoliko puta, a ukoliko je komponenta komponenti (I) do (IV) prisutna nekoliko puta, ona može biti, nezavisno jedna od druge, ili identična ili različita; a kada komponenta (I) i komponenta (II) nisu identične, to znači da komponenta (I) ne kodira najmanje jednu nukleotidnu sekvencu, koja kodira najmanje jedan proteinski toksin i/ili najmanje jednu subjedinicu proteinskog toksina.

2. Mikroorganizam, kao u patentnom zahtevu 1, pri čemu je mikroorganizam odabran iz grupe, koju sačinjavaju “bakterija, gram-pozitivna bakterija, gram-negativna bakterija, eukariotske ćelija”, a poželjno je odabran iz grupe, koju čine: “Escherichia spp., Escherichia coli, Salmonella spp., Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Yersinia spp., Yersinia enterocolitica, Vibrio spp., Vibrio cholerae, Listeria spp., Listeria monocytogenes, Shigella spp., Shigella flexneri, Yersinia spp, Pseudomonas spp ”, pri čemu je poželjno virulentnost mikroorganizma atenuirana.

3. Mikroorganizam, kao u patentnom zahtevu 2, pri čemu se Vibrio cholerae isključuje kao mikroorganizam.

4. Mikroorganizam, kao u bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, u kome je najmanje jedan kompletni ili parcijalni antigen najmanje jednog proteina divljeg tipa ili mutiranog proteina, u skladu sa komponentom (I) odabran iz grupe, koju sačinjavaju sledeći proteini divljeg tipa ili njihovi poznati mutanti: “receptor; ekstracelularni, transmembranski ili intracelularni deo receptora; adhezivni molekul; ekstracelularni, transmembranski ili intracelularni deo adhezivnog molekula; protein signalne transdukcije; protein ćelijskog ciklusa; transkripcioni faktor; protein diferencijacije; embrionski protein; virusni protein; alergen; protein mikrobnog patogena; protein eukariotskog patogena; protein antigena raka testisa; protein tumorskog antigena i/ili protein, specifičan za tkivnu ćeliju”, pri čemu je tkivna ćelija odabrana iz grupe koju čine “štitna žlezda, mlečna žlezda, pljuvačna žlezda, limfni čvor, mlečna žlezda, tunica mucosa gastris, bubreg, jajnik, prostata, cerviks, tunica serosa vesicae urinariae i nevus”.

5. Mikroorganizam, kao u patentnom zahtevu 4, pri čemu se najmanje jedan potpuni ili delimični antigen najmanje jednog proteina divljeg-tipa ili mutiranog, koji je u skladu sa komponentom (I), bira iz grupe, koja se sastoji od sledećih proteina divljeg-tipa i njihovih poznatih mutanata: “Her-2/neu, androgeni receptor, estrogeni receptor, midkin receptor, EGF receptor, ERBB2, ERBB4, TRAIL receptor, FAS, TNFalfa receptor, TGF-beta receptor, laktoferinski receptor, bazni mijelin, alfa-laktalbumin, GFAP, fibrilarni kiseli protein, tirozinaza, EGR-1, MUC1, c-Raf (Raf-1), A-Raf, B-Raf, B-Raf V599E, B-Raf V600E, B-Raf KD, B-Raf V600E domen kinaze, B-Raf V600E KD, B-Raf V600E domen kinaze KD, B-Raf domen kinaze, B-Raf domen kinaze KD, N-Ras, K-Ras, H-Ras, Bcl-2, Bcl-X, Bcl-W, Bfl-1, Brag-1, Mcl-1, A1, Bax, BAD, Bak, Bcl-Xs, Bid, Bik, Hrk, Bcr/abl, Myb, C-Met, IAP1, IA02, XIAP, ML-IAP, LIVIN, survivin APAF-1. ciklin DM-3V ciklin E. ciklin A. ciklin B, ciklin H. Cdk-1. Cdk-2. Cdk-4, Cdk-6, Cdk-7, Cdc25C, p16, p15, p21, p27, p18, pRb, p107, p130, E2F(1-5), GAAD45, MDM2, PCNA, ARF, PTEN, APC, BRCA, Akt, PI3K, mTOR, p53 i homolozi, C-Myc, NFkB, c-Jun, ATF-2, Sp1, specifični prostatični antigen (PSA), karcinoembrioni antigen, aifa-fetoprotein, PAP; PSMA; STEAP; MAGE, MAGE-1, MAGE-3, NY-ESO-1, PSCA, MART, Gp100, tirozinaza, GRP, TCF-4, virusni antigeni od virusa: HIV, HPV, HCV, HPV, EBV, CMV, HSV, virus influence, virus influence tip A, virus influence tip A (H5N1) i (H3N2), virus influence tip B, virus influence tip C; hemaglutinini, hemmaglutinin H1, hemaglutinin H5, hemaglutinin H7, hemaglutinin HA1 (poželjno od virusa influence A (A/Tajiand/1 (KAN-1)2004(H5N1), hemaglutinin HA12 (poželjno od virusa influence A (A/Tajland/1 (KAN-1)2004(H5N1), hemaglutinin HA12C (poželjno od virusa influence A (A/Tajland/1 (KAN-1)2004(H5N1), neuramidaza, p60, LLO, ureaza, CSP, kalflagin i/ili CPB" ili pri čemu se najmanje jedan potpuni ili delimični antigen najmanje jednog proteina divljeg-tipa ili mutiranog, koji je u skladu sa komponentom (I), bira iz grupe kinaza, koja se sastoji od sledećih proteina divljeg-tipa i njihovih poznatih mutanata (pristupni brojevi su u zagradama): AAK1 (NM 014911), AATK (NM 004920), ABL1 (NM 005157), ABL2 (NM 005158), ACK1 (NM 005781), ACVR1 (NM 301105). AC VRI B (NM 020328) ACVR2 (NM 001616). ACVR2B (NM 001106:, ACVRL' (NM 000020) ADCKt (NM 020421). ADCK2 (NM 052853). ADCK4 (NM 024876). ADCK5 (NM -74922), ADRBK1 (NM 301819), ADRBK2 (NM 005160). AKTI (NM 005163). AKT2 (NM 001626), AKT3 (NM 005465). ALK (NM 004304), ALK7 (NM '45259). ALS2CR2 (NM 018571) ALS2CR7 (NM 139158), AMHR2 (NM 020547) ANKK1 (NM 178510). ANKRD3 (NM 0206%), APEG1 (NM 005876), ARAF (NM 00-654;, ARK5 (NM 014840), ATM (NM 000051), ATR (NM 001184), AURKA (NM003600).AURKB(NM004217),AURKC(NM003160) AXL(NM001699).BCKDK (NM305S61) BCR(NM 004327), BIKE (NM 017593), BLK (NM 001715), BMPR1 A (NM 004329) BMPR1 B (NM 301203). BMPR2 (NM 001204). BMX (NM 001721), BRAF (NM 004333) BRD2 (NM 005104). BRD3 (NM 007371) BRD4 (NM014299). BRDT {NM 001726) BRSK1 (NM 032430). BRSK2 (NM 003957). BTK (NM 003061) BUB1 (NM 004336) BUB1 B (KM 001211), CABC1 (NM 020247). CAMK1 (NM 033656). CaMKIb(NM '98452), CAMK1 D (NM 320397), CAMK1 G (NM 020439), CAMK2A (NM 015981). CAMK2B(NM001220).CAMK2D(NM001221). CAMK2G(NM 001222) CAMK4 (NM001744), CAMKK1(NM 032294). CAMKK2 (NM 006649), CASK (NM 003888). CORK (NM 312119). CDC2 (NM 001786). CDC2L1 (NM 001787), CDC2L5 (NM 003718). CDC42BPA(NM 014828). CDC42BPB (NM 006035). CDC7L1 (NM 003503). CD« 10 (NM 003674). CDK1' (NM015076), CDK2 (NM001798). CDK3 (NM 001258), CDK4 (NM 000075),CDKE (NM 004935) CDK6 (NM 001259). CDK7 (NM 001799), CDKB (NM 001260), CDK9 (NM 001261). CDKL1 (NM 004198), CDKL2 (NM 003948), CDKL3 (NM 016508) CDKL4 (NM 001009565) CDKL5 (NM 003159), CHEK1 (NM 001274), CHUK (NM 001278), CIT (NM 007174). CLK1 (NM 004071). CLK2 (NM 003993), CLK3 (NM 003992). CLK4 (NM 020666). CRK7 (NM 016507), CSF1 R (NM 005211), CSK (NM 004383), CSNK1A1 (NM 301892), CSNK1 D (NM 001893). CSNK1E (NM 001894). CSNK1G1 (NM 022048). CSNK1G2 (NM 001319). CSNK1G3 (NM 004384), CSNK2A1 (NM 001895). CSNK2A2 (NM 001696), DAPK1 (NM 004938), DAPK2 (NM 014326). DAPK3 (NM 001348). DCAVKL1 (NM 004734) DCAMKL2 (NM 152619), DCAMKL3 (XM 047355) DDR1 (NM 013993}, DDR2 (NM 306182). DMP< (NM 004409) DMPK2 (NM 017525.1). DYRK1 A (NM 00'396), DYRK1 B (NM 306484). DYRK2 (NM 006482). DYRK3 (NM 303582) DYRK4 (NM 003845). EEF2K (NM 013302), EGFR (NM 005228), ESF2AK3 (NM 004836). EIF2AK4 (NM_301013703) EPHA1 (NM 005232) EPHA10 (NM 001004338), EPHA2 (NM 004431), EPHA3 (NM 005233), EPHA4 (NM 004438). EPHA5 (NM 004439), EPKA6 (XM 114973). EPHA7 (NM 00444C), EPHA8 (NM 020526) EPHB1 (NM 004441). EPHB2 (NM 017449), EPHB3 (MM 004443), EPHB4 (NM 004444). EPHB6 (NM 004445). ERBB2 (NM 004448:, ERBB3 (NM 001982), ERBB4 (NM 005235), ERK8 (NM 139021). ERN1 (NM 001433). ERN2 (NM 033268). FASTK (NM 025096) FER (NM 0052«), FES (MM 002005), FGFR1 (NM 000604). FGFR2 (NM 022970) FGFR3 (NM 000142). FGFR4 (NM 022963), FGR (NM 005248), FLJ23C74 (NM 025052), FLJ23119 (NM 024652). FU23356 (NM 032237). FLT' (NM 002019), FLT3 (NM 0C4119), FLT4 (NM 002020), FRAP1 (NM 004958). FRK (NM 002031;, FYN {NM 002037), GAK (NM 005255), GPRK5 (NM 005308), GPRK6 (NM 002082) GPRK7 (NM 139209). GR«4 (NM 005307), GSG2 (NM 0319%), GSK3A (NM 019884), GSK3B (NM 002093). GUCY2C (NM 004963). GUCV2D (NM 000'80). GUCY2F (NM 001522), H11 (NM 014365), HAK (NM 052947), HCK (NM 002110). HIPK1 (NM 152898). HIPK2 (NM 022740), H(PK3 (NM 005734) HFPK4 (NM 144685). HRI (NM 014413). HUNK (NM 014586). :CK (NM 016613), IGF1R (NM 000875). IKBKB (NM 001556). IKBKE (NM 014002). <LK (NM 004517). INSR (NM 000206). INSRR (NM 014215), IRAK1 (NM 001569), ;RAK2 (NM 001570), IRAK3 (NM 007199}, IRAK4 (NM 016123), ITK (KM 005546) JAKI (NM 002227). JAK2 (NM 004972). JAK3 (NM 0002151. KDR (NM 002263;, KIS (NM 1446241 K T (NM 0002221, K.SR (XM 230793). KSR2 (NM 173598). LAK (NM 025144) LATS1 (NM 004890) LATS2 (NM 014572), LCK (NM 005358). LIMK1 (NM C' 8735), LiMK2 (NM 005583). LMR3 (XM 055868). LMTK2 (NM 0149'6). LOC149420 (NM 152835). l6c5'.Q86 (NM C'5376) LRRK2(XM05e513). LTK (NM002344), LYN (NM002350). MA«(NM 005908), MAP2K1 (NM002755) MAP2K2 (NM 030662), MAP2K3 (NM 002758). MAP2K4 (NM 003010), MAP2K5 (NM 002757). MAP2K6 (NM 002753), MAP2K7 (NM 005043), MAP3K1 (XM042066). MAP3K10 (NM 002448). MAP3K1 • (NM 002419), MAP3K12 (NM 008301). MAP3K13 (NM 004721). MAP3K14 (NM 003954), MAP3K2 i NM 006609; MAP3K3 (NM 00240'). MAP3K4 ;NM 005922). MAP3K5 {NM 005923), MAP3K6 (NM 004672). MAP3K7 (NM 003188). MAP3K8 (NM 005204). MAP3K3 (NM 033141), MAP4K’ (NM 007181). MAP4K2 (NM 004579). MAP4K3 (NM 003618), MAP4K4 (NM '45688), MAP4K5 (NM 006575). MAPKt (NM 0027«), MAPK10 (NM 002753), MAPK11 (NM 002751}. MAP«12 (NM 002969), MAPK13 (NM 002754). MAPK14 (NM 001315). MAPK3 (NM 002746). MAPKt (NM 002747), MAPK6 (NM 002746), MAPK7 .NM 002749). MAPK8 (NM 002750), MAPKB (NM 002752), MAPKAPK2 (NM 002960). MAPKAPK3 (NM 004635). MAPKAPKE (NM 003868). MARK (NM C'8650). MARK2 (NM 017490), MARK3 (NM 002376) MARK4 (NM 031417). MA3T1 (NM 0149751. MAS"205 (NM 015112), MAST3 (XM 036150). MAST4 (XM 291141;, MASTL (NM 032844). MATK (NM 139355), MELK (NM 014791), MERTK (NM 006343). MET iNM 000245). MGC33182 (NM 145203). MGC42105 (NM 153361), MGC433G8 (C9CH96). MGC8407 (NM 024046). M;DORI (NM 02G7781), MIN« (NM C’5716) MKNK1 (NM 003684), MKNK2 (NM 017572), MLCK (NM 162493). MLK4 (NM 032435). ML<L (NM 152649). MOS (NM 035372), MST1 R (NM 002447). MST4 (NM 016542) MUSK (NM 005592), MYLK (NM 053025). MYLK2 (NM 033118). MY03A (NM 017433) MY03B (NM 138995) NEK1 (NM 012224), NEK10(NM 152534). NEK11 (NM 024800), NEK2(NM002497). NEK3(NM002498) NEK4 (NM 003157), NE<5 (MGC75495). NEK6 (NM 014397). NEK7 (NM 133494). NEK8 (NM 170’70). NEK9 (NM 033118), NLK (NM 016231). NPR1 (NM 000906). NPR2 (NM 003995), NRBP (NM 013392), NRBP2 (NM 176564). KRK (NM 198465). NTRK1 (NM 0C2529), N7RK2 (NM 006180) NTRK3 (NM 002530), OBSCN (NM 052643). OSR1 (NM 005109), PACE-1 (NM 020423). PA«’ (NM 002576), PA«2 (NM 002577). PAK3 (NM 002578). PAK4 (NM 005884) PAK6 (NM 020168), PAK7 (NM 020341), PAS« (NM 015148) PCT«1 (NM 006201). PCTK2 (NM 002595), PCTO (NM 212503). PDGFRA (NM 006206;, PDGFRB (NM 002609). PDK1 (NM002610). PDK2 (NM 00261'), PDK3fNM 005391). PDK4(NM 002612) PDPK1 (NM 002613). PFTK1 (NM 012395). PHKG1 (NM 006213), PHKG2 (NM 000294), PIK3R4 (NM 014602), PIM1 (NM 002648), PIM2 (NM 006875), PIM3 (NM 001001652), PIKK1 (NM 032409), PKE (NM 173575) PKMYT1 (NM004203). pknbeta (NM 013355), PLK(NM 005030). PLK3(NM004073). PRKAAl (NM006251) PRKAA2 (NM 006252). PRKACA (NM 002730) PRKACB (NM 002731) PRKACG(NM 002732). PRKCA(NM 002737). PRKCB1 (NM 002736). PRKCD (NM 006254). PRKCE (NM 005400). PRKCG (NM 002739). PRKCh (NM 008255). PR«CI (NM 002740). PRKCL1 (NM 002741). PRKCL2 (NM 006256), PRKCM (NM 002742). PRKCN (NM 005613), PRKCQ (NM 006257), PRKCZ (NM 002744), PRKD2 (NM 016457), PR«DC (NM 006904), PRKG1 (NM 006256). PRKG2 (NM 0062%). PRKR (NM 002759) PRKWNK' (NM 018979). PRKVVNK2 (NM008848). PRKWNK3 (NM 020922), PRKWNK4 (NM 032387). PRI« (NM 005044), PRKY (NM 002760). PRPF4B (N\1 003913). PSKH1 (NM 006742), PSKN2 (NM 033126), PTK2 (NM 005607). PTK2B (NM 004103). PTKfi (NM 005975), PTK7 (NM 002821). PT«9 (NM 002822). PTK9L (NM 037284), PXK (NM 017771). OSK (NM 025164). RAD53 (NM 007194), RAF' (NM 002880). RAGE (NM 014228), RET (NM 020975). RHOK (NM 002929). RIOK1 (NM 031480), RFOK2 (NM 018343) RIPK1 (NM 003604). R1PK2 (NM 003821). RfPK3 (NM 006871), RPK5 (NM C’5375). RNASEL (NM 021133), ROCK1 (NM 005406), ROCK2 (NM 004650). ROR1 (NM 005012). ROR2 (NM 004560). ROS1 (NM 002944). RPS6KA1 (NM 002953). RPS6KA2 (NM 021135). RPS6KA3 (NM 004586), RPS6KA4 (NM 003942), RPS6KA5 (NM 004755). RPS6KA6 (NM 014496), RPS6KB' (NM 003’ 61). RPS6KB2 (NM 003952). RPS6KC1 (NM 012424) RPS6KL1 (NM 031464) RYK (NM 002958). SBK (XM 370948), SCYL1 (NM 020680), SCY1_2 (NM 017968). SGK (NM 005627). SgK069 (SU SgK069), SgK085 (MM 373109). SgK110 (SU SgK110). SGK2 (NM 016276). SgK223 (XM 261277). SgK269 (XM 370878). SgK424 (CGP Sg«424) SgK493 (SU_SgK493). SgK494 (NM 144610). SgK495 (NM 032017). SGKL (NM 013257). SK681 (NM 301001671) SLK (NM 014720). SMG1 (NM 015092). SNARK (NM 030952). SNF1 LK (NM ’73354) SNF1 LK2 (NM 015191). SNK (NM006622). SNRK (NM 017719). SRC (NM 005417). SRMS (NM060823). SRPK1 (NM 003137). SRPK2 (NM 003138). SSTK(NM032037). STK10(NM 005990), STK11 (NM 000455). STK16 (NM 003691), S^KUA(NM 004760). ST<’7B (NM 004226). STK18 (NM 014264), ST« 19 (NM 032454), STK22B (NM 053006), STK22C (NM 052841). STK22D (NM 032028), STK23 (KM 014370), STK24 (NM 003576). STK25 (NM 006374). STK3 (NM 036281). STK31 (NM 031414) STK32B (NM 018401). STK33(NM 030906).STK35 (NM080836) STK36 (NM 0156901, STK38 (NM 007271), STK35L (NM 015000) STK39 (NM 013233), STK4 (NM 006282). STLKE (NM 001003767). STYK1 (NM 016423), SUDD (NM 003831), SYK (NM 003177), TAF’ (NM 138923), TAF* L (NM 153809). TA01 (NM 004783), TAOK1 (NM 020791). TAOK3 (NM 016281). TBCK (NM 033115), TBK1 (NM 013254). TEC (NM 003215), TEK (NM 000459). TESK1 (NM 006285), TESK2 (NM 007170). TEX14 (NM 031272). TGFBR1 (NM 004612), TGFBR2 (NM 003242), TIE (NM 0)5424). TIF1 (NM 003852). TLK1 (NM 012290). TLK2 (NM 006852) TNK (NM 0'5028), rNKT (NM 003985). TOPK (NM 018492), TP53RK (NM 033550). TRAO (NM 007064), TRIBl (NM 025195). TR B2 (NM 021643). TRŠB3 (NM 021158). TRIM28 (NM 005762), TRIM33 (NM 015906). TR'0(NM 007118). TRPM6 (NM 017662). "RPM7 (NM 017672), TRRAP (NM 003496). TSSK4 (NM 174944). TTBK1 (NM 032538). TTBK2 (NM 173500), TT« (NM 003318). TTN (NM 003319). TXK (NM 003328). TYK2 (NM 003331). TYR03 (NM 006293). ULK1 (NM 003565). ULK2 (NM 014883). ULK3 (NM 015518), ULK4 (NM 017886). VRK1 (NM 003384), VRK2 (NM 006296). VRK3 (NM 016440). WEE1 (NM 003390). Wee1B (NM 173677), YANK1 (NM 145001). YES1 (NM 305433). ZA« (NM 016653). and or ZAP70 (NM 001079)”

6. Mikroorganizam, kao u bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5, pri čemu je komponenta (II) odabrana iz grupe, koja se sastoji od: "bakterijskog toksina, enterotoksina, egzotoksina, tip I toksina, tip II toksina, tip III toksina, tip IV toksina, tip V toksina, RTX toksina, AB toksina, A-B toksina, A/B toksina, A+B toksina, A-5B toksina i/ili AB5 toksina.

7. Mikroorganizam, kao u patentnom zahtevu 6, pri čemu je komponenta (II) odabrana iz grupe, koja se sastoji od: "toksina adenilat cikiaze, toksina antraksa, toksina antraksa (EF), toksina antraksa (LF), toksina botulinuma, toksina kolere (CT, Ctx), podjedinice B toksina kolere (CTB, CtxB), toksina difterije (DT, Dtx), LT toksina E. coli, termolabilnog enterotoksina E. coli (LT), podjedinice B termolabilnog enterotoksina E. coli (LTB), ST toksina E. coli, termostabilnog toksina E. coli (ST), eritrogenog toksina, toksin eksfoliatina, egzotoksina A, enterotoksina Perfringens, toksina velikog kašlja (PT, Ptx), Shiga toksina (ST, Stx), podjedinice B Shiga toksina (STB, StxB), Shiga-sličnog toksina, stafiiokoknih enterotoksina, tetanusnog toksina (TT), toksina toksičnog šok sindroma (TSST-1), Vero toksina (VT), toksina A (TA) i toksina B (TB) Clostridium difficile, letalnog toksina (LT) i hemoragijskog toksina (HT) Clostridium sordeliii, alfa toksina (AT) Clostridium novyi”.

8. Mikroorganizam, kao u bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, pri čemu su komponenta (I) i komponenta (II) povezani zajedno kako bi omogućili ekspresiju i/ili sekreciju fuzionog proteina kog kodiraju obe komponente.

9. Mikroorganizam, kao u patentnom zahtevu 8, pri čemu je ovaj fuzioni protein odabran iz grupe, koja se sastoji od: “CtxB-PSA, CtxB-B-Raf V600E KD, CtxB-B-Raf V600E kinazni domen, CtxB-B-Raf V600E kinazni domen KD, CtxB-B-Raf, CtxB-B-Raf KD, CtxB B-Raf kinazni domen KD, CtxB-HA1, CtxB-HA12C”.

10. Mikroorganizam, kao u bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9, pri čemu je komponenta (III) a) odabrana iz grupe, koju čine: “tip I sekretorni sistem, tip II sekretorni sistem, tip III sekretorni sistem, tip IV sekretorni sistem, tip V sekretorni sistem, hemolizinski transportni sistem (signalni) kod Escherichiae coli (nukleotidne sekvence sadrže HlyA, HlyB i HlyD pod kontrolom hly-specifičnog promotera), hemolizinski transportni sistem (signalni) kod Escherichiae coli (nukleotidne sekvence sadrže HlyA, HlyB i HlyD pod kontrolom ne-hly-specifičnog bakterijskog promotera), transportni signal za proteinski S-sloj (Rsa A) kod Caulobacter crescentus, transportni signal za TolC protein Escherichia coli, sekrecioni signal Vtgss i/ili sekrecioni signali poreklom od listeriolizina, p60 i/ili ActA” i pri čemu je komonenta (III) b) odabrana iz grupe, koju čine: “endolizini, litički protein Gram-pozitivnih bakterija, litički protein Listeriae monocytogenes, PLY551 Listeriae monocytogenes i/ili holin Listeriae monocytogenes”.

11. Mikroorganizam, kao u patentnom zahtevu 10, pri čemu komponenta (III) a) je najmanje jedna nukleotidna sekvenca koja kodira za samo jedan transportni sistem, koji omogućava istovremenu ekspresiju proizvoda ekspresije komponente (I) i komponente (II) na spoljašnjoj površini mikroorganizma i/ili omogućava istovremenu sekreciju proizvoda ekspresije komponente (I) i komponente (II), pri čemu je takva poželjna komonenta (III) a) najmanje jedna nukleotidna sekvenca koja kodira za hemolizinski transportni sistem (signalni) Escherichia coli (nukleotidne sekvence sadrže HlyA, HlyB i HlyD pod kontrolom hly-specifičnog promotera) ili hemolizinski transportni sistem (signalni) Escherichia coli (nukleotidne sekvence sadrže HlyA, HlyB i HlyD pod kontrolom ne-hly-specifičnog bakterijskog promotera).

12. Mikroorganizam, kao u bilo kom od patentnih zahteva 1 do 11, gde se, u skladu sa komopnentom (III) a) sekretuju proizvodi ekspresije komponente (I) i komponente (II).

13. Mikroorganizam, kao u bilo kom od patentnih zahteva 1 do 12, gde se komponenta (I) bira iz grupe koju čine: “B-Raf V600E, B-Raf V600E kinazni domen, B-Raf V600E KD, B-Raf V600E kinazni domen KD, B-Raf KD, B-Raf kinazni domen, B-Raf kinazni domen KD, prostatični specifični antigen (PSA), hemaglutinin HA1 (poželjno od virusa influence A (AIThailand/1 (KAN-1)2004(H5N1), hemaglutinin HA12 (poželjno od virusa influence A (A/Thailand/1 (KAN-1)2004(H5N1), hemaglutinin HA12C (poželjno od virusa influence A (A/Thailand/1 (KAN-1) 2004(H5N1)"; komponenta (II) bira se iz grupe koju čine: “podjedinica B toksina kolere (CTB, CtxB), podjedinice B termolabilnog enterotoksina E. coli (LTB), tetanusni toksin (TT)"; komponenta (III) a) bira se iz grupe koju čine: “HlyA hemolizinski transportni signal Escherichia coli zajedno sa komponentama Hly sekretomog sistema (nukleotidne sekvence koje sadrže HlyA, HlyB i HlyD pod kontrolom hly-specifičnog promotera)"; komponenta (IV) bira se iz grupe koju čini: ‘endogeni promoter E. coli h!y lokus"; gde su komponenta (I) i komponenta (II) povezane zajedno da omoguće ekspresiju fuzionog proteina kog kodiraju obe komponente i gde se fuzioni protein sekretuje.

14. Farmaceutska smeša koja sadrži najmanje jedan mikroorganizam, poželjno najmanje jedan liofilizovan mikroorganizam , kao u ma kom od patentnih zahteva 1 do 13 i farmaceutski prihvatljiv nosač, poželjno kapsule.

15. Lek koji obuhvata najmanje jedan mikroorganizam, kao u ma kom od patentnih zahteva 1 do 13 ili najmanje jednu farmaceutsku smešu, kao u patentnom zahtevu 14.

16. Upotreba mikroorganizma, kao u ma kom od patentnih zahteva 1 do 13, za proizvodnju leka za lečenje i/ili profilaksu fizioloških i/ili patofizioloških stanja, odabranih iz grupe, koju sačinjavaju: “nekontrolisana deoba ćelije, maligni tumori, benigni tumori, solidni tumori, sarkomi, karcinomi, hiperproliferativni poremećaji, karcinoidi, Ewing sarkomi, Kapoši sarkomi, tumori mozga, tumori, koji potiču iz mozga i/ili nervnog sistema i/ili meninga, gliomi, neuroblastomi, rak želuca, rak bubrega, karcinomi bubrežnih ćelija, rak prostate, karcinomi prostate, tumori vezivnog tkiva, sarkomi mekog tkiva, tumori pankreasa, tumori jetre, tumori glave, tumori vrata, rak jednjaka, rak štitne žlezde, osteosarkomi, retinoblastomi, timom, rak testisa, rak pluća, karconimi bronhija, rak dojke, karcinomi dojke, rak creva, kolorektalni tumori, karcinomi kolona, karcinomi rektuma, ginekološki tumori, tumori jajnika/ovarijalni tumori, rak materice, rak cerviksa, karcinomi cerviksa, rak tela uterusa, karcinomi korpusa, karcinomi endometrijuma, rak mokraćne bešike, rak bešike, rak kože, bazaiiomi, spinaliomi, melanomi, intraokulami melanomi, leukemija, hronična leukemija, akutna leukemija, limfomi, infekcija, virusna ili bakterijska infekcija, grip, hronično zapaljenje, odbacivanje organa i/ili autoimune bolesti”.

17. Plazmid ili ekspresioni vektor koji sadrži komponente (I) do (IV), kao u ma kom od patentnih zahteva 1 do 13.

18. Postupak za proizvodnju mikroorganizma, kao u ma kom od patentnih zahteva 1 do 13, u kome se proizvodi plazmid ili ekspresioni vektor, kao u patentnom zahtevu 17, i mikroorganizam se transformiše sa ovim plazmidom ili ekspresionim vektorom.

19. Farmaceutski kit, koji sadrži najmanje jedan mikroorganizam, kao u patentnim zahtevima 1 do 13, ili farmaceutska smeša, kao u patentnom zahtevu 14 ili lek, kao u patentnom zahtevu 15 i farmaceutski prihvatljiv pufer, poželjno karbonatni pufer.