KR20170018982A

KR20170018982A - 신규 스테비올 배당체

Info

Publication number: KR20170018982A
Application number: KR1020177003869A
Authority: KR
Inventors: 도요시게 모리따; 이사오 후지따; 후미또 마쯔우라; 마사야 오따
Original assignee: 모리타 가가쿠 고교 가부시키가이샤
Priority date: 2008-10-03
Filing date: 2009-10-02
Publication date: 2017-02-20
Also published as: ES2592377T3; KR20110066962A; JP2012504552A; US20190357581A1; US20180077959A1; KR102061165B1; ES2959686T3; US9215889B2; JP2018118983A; EP3101023A1; CN107011397A; KR101918422B1; JP2014207899A; CN102216313A; KR20200000478A; MY158626A; KR101708068B1; CN116102603A; EP3101023B1; US20140187761A1

Abstract

본 발명은 새로운 스테비아 감미료 성분을 제공한다. 스테비아 추출물 및/또는 결정품에 포함되는 신규 스테비올 배당체 성분의 분석에 의해 감미료의 품질 관리를 용이하게 할 수 있음과 동시에, 감미료의 원료를 특정할 수 있어, 산지 표시의 적절성이나 권리 침해의 판단이 용이해진다.

Description

신규 스테비올 배당체{NEW STEVIOL GLYCOSIDE}

본 발명은 신규 스테비올 배당체(Steviol Glycoside), 레바우디오사이드 A를 고함량 포함하는 스테비아 레바우디아나 베르토니 품종에 포함되는 신규 스테비올 배당체와 레바우디오사이드 A를 포함하는 감미료, 식품, 의약품, 의약부외품, 화장품의 제조 방법, 스테비아 품종의 확인 방법, 및 신규 스테비올 배당체 분석 방법에 관한 것이다.

스테비아는 남미 파라과이를 원산지로 하는 국화과 다년생 식물로, 학명을 스테비아 레바우디아나 베르토니 (Stevia Rebaudiana Bertoni)라고 한다. 스테비아는 설탕의 300배 이상의 감미를 갖는 성분을 포함하기 때문에, 이 감미 성분을 추출하여 천연 감미료로서 이용하기 위하여 재배되고 있다.

스테비아의 감미 성분으로서는, 스테비오사이드(C₃₈H₆₀O₁₈), 레바우디오사이드 A(C₄₄H₇₀O₂₃), 레바우디오사이드 C, D, E, 둘코사이드 A 등이 알려져 있다. 일반적으로 재배되고 있는 스테비아 품종으로서는, 상기 감미 성분 중 스테비오사이드(이하, ST)가 주성분이고, 레바우디오사이드 A(이하, RA)의 함유량은 40 중량％ 정도, 레바우디오사이드 C의 함량은 그것보다 약간 적다. 그러나, 품종에 따라서는 레바우디오사이드 C를 주성분으로 하는 것 등 다양하다.

ST는 설탕의 300배의 감미도를 갖기 때문에 천연 감미료로서 식품 공업계에서 널리 이용되고 있고, 그 감미는 비교적 설탕과 닮아있지만, RA와 비교하면 쓴맛 등의 불쾌한 맛이 뒷맛에 남는 것이 알려져 있다. 이에 비하여, RA는 양질의 감미질과 ST에 대하여 1.3배 내지 1.5배의 감미도를 갖기 때문에, 일반적으로는 ST보다도 RA의 함유율이 높은 스테비아 감미료가 바람직하다고 되어 있다. 따라서, 본 발명자들은 종래 품종으로부터 교배 선발을 반복하여 품종 개량을 행하여, RA에 대하여 ST를 소량밖에 함유하지 않은 스테비아 품종을 얻고, 이들 품종으로부터 감미료를 개발하였다(예를 들면 후술한 특허출원 1 참조).

그러나, 떫은맛, 매운맛, 순한맛 등의 혀에서 지각되는 맛 중에서도 순한맛은 매우 미묘하다. 미묘한 순한맛은 ST와 RA의 비율에만 의존하는 것이 아니라, 스테비아에 포함되는 다양한 감미 성분의 화학 구조에 글루코오스를 부가하면 순한맛이 개선되는 것으로부터, 스테비아 감미 성분에 글루코오스를 구조적으로 부가하여 순한맛, 진한맛을 개선하는 방법이 개발되어 있다(후술한 특허문헌 2 및 3).

따라서, 가령 함유량은 적더라도 스테비아에 포함되는 미지 성분을 해석하는 것은 매우 중요한 것이고, 특히 ST 이외에 글루코오스가 구조적으로 부가된 성분을 파악하고, 이들에 구조적으로 부가된 글루코오스를 정밀하게 조사하는 것은 미질(味質)의 관리상 매우 중요하다.

동시에 원료인 식물 자체에 포함되는 감미 성분의 종류에 따라 미질이 좌우되기 때문에 우수한 스테비아 품종을 개발하고 이것을 이용하기 위해서는, 상기 감미 성분을 정밀하게 파악하는 것이 중요하다. 금후 원료 식물의 개량은 점점더 성대해질 것인데, 개발된 식물에 포함되는 감미 성분을 세밀하게 특정함으로써 품종 개량 결과를 상세히 파악하는 것이 가능해진다.

한편, 새롭게 개발된 식물 품종에 대해서는 본 발명자가 유전자를 이용하는 품종 확정 방법(후술 특허문헌 4 및 5)을 개발하고 있지만, 이들 원료 식물로부터 추출 가공된 감미료 및 이것을 이용한 제품에 대해서는 원료 식물을 특정하는 수단이 없는 것이 실정이었다.

일본 특허 공개 제2002-262822호 공보 일본 특허 공고 (소)57-18779호 공보 일본 특허 공개 (평)9-107913호 공보 일본 특허 공개 제2003-009878호 공보 PCT 국제 공개 WO06/093229호 공보

스테비아 감미료는 5 성분 (ST, RA, 레바우디오사이드 C, 둘코사이드 A, 스테비올 바이오사이드)을 분석하여 규격이 정해져 왔지만, 그 밖의 미지 성분에 대해서는 어떤 지견도 얻어져 있지 않았다. 또한, 감미 성분으로서는 기지이어도 분석 방법이 확정되어 있지 않기 때문에, 그 존재를 확인할 방법이 없었다. 그러나 최근에는 7 성분의 스테비올 배당체에 의한 JECFA 규격이 설정되는 등, 스테비아에 포함되는 감미 성분을 확인하여, 미지 성분을 밝히고 이들 성분에 의한 미묘한 맛의 영향을 아는 중요성이 인식되게 되었다.

본 발명의 목적은 스테비아 품종에 포함되는 미량의 감미 성분의 구조를 결정하고, 스테비아 감미료에 대한 미각의 영향을 확인하는 것이다.

또한, 나아가서는 스테비아 감미료 및 이것을 이용한 제품에 대해서, 원료가 된 스테비아 식물체를 특정하는 수단을 제공하는 것이다.

본 발명자는 RA를 주성분으로 하는 스테비아 품종에 포함되는 신규 스테비올 배당체를 검색하여, 미질에 미묘한 영향을 줄 수 있는 신규 스테비올 배당체 10 성분을 발견하였다. 나아가서는, 이들 성분이 품종 간에 함유량에 차가 있고, 또한 특정한 성분이 RA를 주성분으로 하는 스테비아 품종에만 존재하는 사실을 발견하고, 그것이 해당 식물 유래 감미료의 마커로서 이용하는 것이 가능하다는 것을 확인하여, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

본 발명의 스테비올 배당체는 ST, RA보다도 많은 글루코오스가 부가된 구조를 갖고 있어, 이들을 포함함으로써 진한맛이 우수한 스테비아 감미료가 제공된다.

또한, 본 발명에 의한 스테비올 배당체 X를 추출물, 결정품에서 확인함으로써 원료 기원을 추측할 수 있기 때문에, 최종 제품을 분석하는 것으로 원료 식물이 특허 등의 권리에 저촉되는가 아닌가의 판단이 가능해진다.

도 1은 RA-C 추출물의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 2는 RA-A 결정의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 3은 RA-B 결정의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 4는 RA-C 결정의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 5는 RA-A 추출물의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 6은 RA-B 추출물의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 7은 RA-C 추출물의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 8은 ST 추출물의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 9는 ST-ST 결정의 HPLC 분석 차트를 도시한다.
도 10은 ST-RA 결정의 HPLC 분석 차트를 도시한다.

본 발명에서 말하는 RA를 주성분으로 하는 스테비아 품종은 ST보다 RA가 많이 포함되는 품종, 및 특허출원 2001-200944호, 일본 특허 출원 2007-506004호 등에 기재된 품종이고, 건조엽(乾燥葉)으로부터 얻어지는 추출물은 ST의 함량보다 RA의 함량이 높고, 레바우디오사이드 D(R-D), 스테비올 배당체 III, V, VI, VII, X가 포함되고, ST 및/또는 RA보다 글루코오스를 구조적으로 많이 부가한 성분이 함유됨으로써 진한맛이 우수한 감미료가 얻어진다.

또한, 이들을 재결정하면 ST, 스테비올 배당체 X를 극미량 포함하는 고순도의 RA 감미료가 효율적으로 얻어진다.

본 발명의 제1 양태는, 하기 식으로 표시되는 스테비올 배당체 I 내지 X이다.

(식 중, R₁ 및 R₂는 수소 원자 또는 아래 표의 당쇄를 나타냄)

또한, 식 중의 기호는 이하의 당을 나타낸다:

glc: D-글루코피라노실(D-glucopyranosyl)

rha: L-람노피라노실(L-rhamnopyranosyl)

xyl: 자일로피라노실(xylopyranosyl)

본 발명의 제2 양태는 레바우디오사이드 A를 주성분으로 하는 국화과 식물 스테비아 레바우디아나 베르토니의 식물체 또는 그의 건조엽을 물, 또는 함수 용매로 추출하여 얻어지는, 스테비올 배당체 X(레바우디오사이드 O)를 포함하는 추출물이다.

본 발명의 제3 양태는 상기 양태의 추출물로부터 재결정 등에 의해 스테비올 배당체 X(레바우디오사이드 O)를 포함하는 고순도 레바우디오사이드 A를 얻는 방법이다.

본 발명의 제4 양태는 상기 제2 양태의 방법으로 얻어진 추출물을 식품에 대하여 1％ 이하 첨가하는 식품의 제조 방법이다.

본 발명의 제5 양태는 상기 제3 양태에서 얻어진 고순도 레바우디오사이드 A를 식품에 대하여 1％ 이하 첨가하는 식품의 제조 방법이다.

ST를 주성분으로 하는 원료 품종으로부터 얻어진 추출물에는 스테비올 배당체 X가 존재하지 않지만, RA를 주성분으로 하는 원료 품종으로부터 얻어진 추출물은 배당체 X가 존재한다는 것 때문에, ST, RA 중의 어느 것을 주성분으로 하는 원료 품종인지의 판정이 가능해진다. 즉, ST을 주성분으로 하는 품종으로부터 얻어진 추출물로부터 ST를 결정화에 의해 제거하여 RA를 주성분으로 하는 추출물, 또는 이들로부터 재결정에 의해 얻어진 고순도 제품에는, 배당체 X가 존재하지 않는다는 것 때문에 원료 품종의 확인이 가능해진다. 본 발명의 제6 양태는 스테비올 배당체 X에 의한 스테비아 품종 확인 방법이다.

본 발명의 제7 양태는 고속 액체 크로마토그래피(이하 HPLC)에 의한 스테비올 배당체 I 내지 X의 분석 방법이다.

이들 목적을 달성하기 위해서, 본 발명자는 RA 주성분으로 하는 품종, 및 일본 특허 출원 2001-200944호, 일본 특허 출원 2007-506004호 등의 품종에 포함되는 감미 성분을 탐색하고, 신규 감미 성분을 발견하여, 그의 화학 구조를 결정하였다. 또한, 이들 성분이 감미료로서 유용한 것을 확인함과 함께, 이들의 성분에 의한 품종 확인 방법, 분석 방법을 완성시켰다.

신규 성분의 확인은 실시예 1에서의 RA를 주성분으로 하는 품종(이하 A 품종), 일본 특허 출원 2001-200944호(이하 B 품종), 일본 특허 출원 2007-506004호(이하 C 품종)의 건조엽으로부터 물 또는 함수 용매로써 추출을 행한다.

이어서 추출액을 그대로 농축하거나, 또는 필요에 따라서 양이온 교환 수지, 음이온 교환 수지, 활성탄 등으로 이온성 불순물을 제거하고, 흡착 수지에 감미 성분을 흡착시켜 친수성 용매로 용리하고, 필요에 따라서 용리액을 재차 양이온 교환 수지, 음이온 교환 수지, 활성탄 등으로 처리하고, 용리액을 농축, 건조하여 얻어진 추출물, 또는 기타 탈색 등의 관용 정제 수단을 적절하게 실시함으로써 얻어진 추출물일지라도 확인할 수 있다.

후술한 실시예 1 (1)에서 얻어진 RA-C 추출물의 신규 스테비올 배당체를 실시예 5에 따라서 고속 액체 크로마토그래피 질량 분석 장치(HPLC-MS)로 분리하여 질량 분석함으로써 각 배당체의 구조 I-X를 결정하였다.

(식 중, R₁ 및 R₂는 각각 수소 원자 또는 상기 당쇄를 나타냄)

스테비올 배당체 I(둘코사이드 B)은 도 1의 HPLC의 크로마토그램의 유지 시간(이하 R.T.) 13분 부근에 확인되는 분자량 788의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 II(레바우디오사이드 G)는 도 1의 HPLC의 R.T. 15분 부근에 확인되는 분자량 804의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 III(레바우디오사이드 I)은 도 1의 HPLC의 R.T. 28분 부근에 확인되는 분자량 1128의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 IV(레바우디오사이드 H)는 도 1의 HPLC의 R.T. 29분 부근에 확인되는 분자량 1112의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 V(레바우디오사이드 L)는 도 1의 HPLC의 R.T. 34분 부근에 확인되는 분자량 1128의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 VI(레바우디오사이드 K)은 도 1의 HPLC의 R.T. 34분 부근에 확인되는 분자량 1112의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 VII(레바우디오사이드 J)은 도 1의 HPLC의 R.T. 34분 부근에 확인되는 분자량 1112의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 VIII(레바우디오사이드 M)은 도 1의 HPLC의 R.T. 34분 부근에 레바우디오사이드 D와 중복하여 확인되는 분자량 1290의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 IX(레바우디오사이드 N)는 도 1의 HPLC의 R.T. 43분 부근에 확인되는 분자량 1274의 구조를 갖는 배당체이다.

스테비올 배당체 X(레바우디오사이드 0)은 도 1의 HPLC의 R.T. 51분 부근에 확인되는 분자량 1436의 구조를 갖는 배당체이다.

다만, 상기한 R.T.는 구배 용출에 의한 분석이기 때문에 변동하는 것은 당업자가 주지하는 대로이다.

상술한 바와 같이, 최종 제품에 있어서의 스테비올 배당체 X의 존재의 유무는 원료 품종의 특정에 중요한 정보를 제공하게 된다.

동시에, 이들 신규 스테비올 배당체는 HPLC에 의해 확인할 수 있기 때문에, 감미료로서 사용하는 경우에도 HPLC 분석에 의해 종합적인 미질 관리 및 품질 관리가 용이하게 가능해진다.

얻어진 추출물 또는 그의 결정은 캔디, 젤리, 분말 음료, 인스턴트면, 잼, 빙과, 츄잉검, 일본 과자, 건강 식품, 초코렛, 탁상 감미료, 튀김 과자, 진미, 물로 끊인 식품, 락트산 발효 음료, 커피 음료, 코코아 음료, 차 음료, 리큐어, 와인, 샤베트, 시리얼 식품, 식물 섬유 함유 식품, 소스, 간장, 된장, 식초, 드레싱, 마요네즈, 켓첩, 카레, 스프, 쌀과자, 아라레류, 빵류, 비스켓, 크래커, 핫케익의 재료, 과일 통조림, 야채 통조림, 식육 제품, 어육 가공 식품, 염성 식품, 절임 식품, 복합 조미료, 기호성 식품, 화장품 등에 감미료로서 사용할 수 있고, 칼로리 저하, 당류 삭감, 융점 강하, 감미질 개선, 및 마스킹 효과 등이 얻어지고, 또한 다른 천연, 인공 감미료, 희석제 등을 더 첨가할 수도 있다.

[실시예]

실시예 1 RA 추출물의 제조

(1) 추출

RA를 주성분으로 하는 A 품종, 동 B 품종, 동 C 품종으로부터 얻어진 건조엽각 100g을 20배량의 물로 감미가 느껴지지 않게 될 때까지 수회 추출하였다. 추출액을 흡착 수지〔다이야이온 HP-20) 300 ml 충전한 칼럼에 통과시켜서 감미 성분을 흡착시키고, 충분히 수세한 후 메탄올 900 ml로 용리하였다. 이온 교환 수지(다이야이온 WA-30) 200 ml를 충전한 칼럼에 해당 용리액을 통과시키고, 통과액에 활성탄 10g을 가하여 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 농축, 건조하여 담황백색의 레바우디오사이드 A를 주성분으로 하는 RA-A 추출물 13.0g(ST 35.4％, RA 41.7％, RC 9.8％), RA-B 추출물 11.5g(ST 19.5％, RA 58.1％, RC 8.8％) 및 RA-C 추출물 12g(ST 5.4％, RA 72.3％, RC 8.1％)을 각각 얻었다.

(2) RA 재결정

상기한 RA-B 추출물, RA-C 추출물 5g을 10배량의 90％ 메탄올에 가열 용해한 후에, 4℃에 6일간 냉각 방치하고, 얻어진 결정을 분리하고, 냉메탄올로 세정한 후, 감압 건조하여, 백색의 RA-B 결정 3.9g(ST 0.2％, RA 95.0％, RC 0.2％) 및 RA-C 결정 4.5g(ST 0.2％, RA 95.6％, RC 0.1％)을 각각 얻었다.

실시예 2 ST 추출물의 제조

비교를 위해 ST를 주성분으로 하는 품종으로부터도 동일한 처리를 하여 ST 추출물 11.3g(ST 51.9％, RA 23.7％, RC 7.4％)을 얻었다.

실시예 3 RA-A 모액, ST 모액

상기한 RA-A 추출물 및 ST 추출물 각 10g을 10배량의 90％ 메탄올 수용액에 가열 용해한 후에, 4℃에 6일간 냉각 방치하고, 얻어진 결정을 분리하고, 냉 98％ 메탄올로 세정한 후, 감압 건조하여, 스테비오사이드의 백색 결정인 RA-ST 결정을 2.1g 및 ST-ST 결정 3.8g을 각각 얻었다.

RA를 주성분으로 하는 RA-A 모액 8.8g(ST 15.7％, RA 43.8％, RC 6.9％) 및 ST 모액 6.1g(ST 20.0％, RA 37.1％, RC 11.2％)을 농축, 건조하여, 각각 담황색의 RA를 주성분으로 하는 모액 분말을 얻었다.

실시예 4 RA-A 결정, ST-RA 결정

실시예 3의 모액 분말을 각각 10배량의 90％ 메탄올 수용액에 가열 용해하고, 4℃에 6일간 냉각 방치하고, 얻어진 결정을 분리하고, 냉 98％ 메탄올로 세정한 후, 감압 건조하여, 백색의 RA-A 결정 2.2g(ST 1.6％, RA 90.4％, RC 1.4％) 및 ST-RA 결정 1.2g(ST 1.6％, RA 96.9％, RC 1.4％)을 얻었다.

실시예 5 스테비올 배당체의 구조 결정

하기와 같이, HPLC를 이용하여 분석을 하였다. 각 추출물 중의 스테비올 배당체의 분리는, TSKgel Amide-80(4.6 x 250 mm, 도소사 제조) 칼럼을 이용하는 시마즈 LC-10Advp HPLC를 이용하여 행하였다. 용매는 아세토니트릴과 물을 이용하여, 60분에 아세토니트릴과 물의 농도가 82:18로부터 66:34로 되는 구배 용출을 행하였다. 유속은 0.65 ml/분이고, 칼럼 온도는 40℃이고, 검출은 210 nm의 자외선 흡수 스펙트럼으로 행하였다.

분자량 측정은, 워터즈 알리언스 HPLC 시스템 2695와 워터즈 쿼트로 마이크로(트리플 4중극 매스) 일렉트로스프레이 이온화(ESI)-질량 분석계를 사용하였다. HPLC는 칼럼으로 TSKgeL Amide-80 (2.0 x 250 mm, 도소사 제조)를 이용하고, 용매는 아세토니트릴과 물을 이용하여, 60분에 아세토니트릴과 물의 농도가 82:18로부터 66:34로 되는 구배 용출을 행하였다. 유속은 0.2 ml/분이고, 칼럼 온도는 40℃에서 행하였다. 탈용매 가스로는 질소 가스를, 충돌 가스로는 아르곤 가스를 이용하였다. 모세관 전압은 스테비올 배당체의 분석에서는 네가티브 모드로 15.0 kV를 이용하고, ABEE-올리고당의 분석에서는 포지티브 모드로 13.5 kV를 이용하였다. 콘 전압 및 MS/MS 분석 시의 충돌 전압은 10 V 내지 80 V의 전압을 사용하였다. 소스 온도는 100℃, 탈용매 온도는 400℃, 콘 가스 유량은 50 l/hr, 탈용매 가스 유량은 900 l/hr로 행하였다.

도 1 내지 10에 각 추출물 및 결정에 대한 HPLC 분석 결과를 나타내었다.

하기의 표 1 내지 표 9는 각각 도 2 내지 10에 도시한 크로마토그래피의 각 피크의 분석 결과를 나타낸다.

상기한 각 표 중에서 이용한 약호는 다음과 같다.

PKNO: 피크 번호

T: 시간(분)

A: 피크 면적

H: 피크 높이

CONC: 농도(％)

N: 배당체명

TOT: 합계

Stev mono : 스테비올 모노사이드

Stev bio: 스테비올 바이오사이드

Rebuso : 루보소사이드

Rebau : 레바우디오사이드

Stev: 스테비오사이드

Dulco: 둘코사이드

농도는 자외선 210 nm 흡수 스펙트럼의 토탈 면적으로부터 산출한 농도이고, 용량을 측정하기 위해서는 분자량 보정을 할 필요가 있다. 또한, 크로마토그램 중의 I 내지 X는 신규 스테비올 배당체 I 내지 X를 나타낸다.

실시예 6 미질의 평가

각 추출물의 0.05％ 수용액 및 결정체의 0.03％ 수용액을 스테비아의 관능 검사에 주지한 자 10인에 의해 평가하고, 그 평가 결과의 평균을 하기의 표 10에 나타내었다: 평가 5: 대단히 양호, 4: 양호, 3: 보통, 2: 약간 불량, 1: 불량

스테비올 배당체 II 내지 X(레바우디오사이드 G 내지 O)를 포함하는 3종의 RA 추출물은 순한맛이 3종의 RA 결정보다 우수하지만, RA 결정은 다른 평가에서는 우수하다. ST 추출물은 순한맛 이외의 평가는 ST-RA 결정보다 떨어진다. 이들 결과로부터, 신규 스테비올 배당체 II 내지 X는 순한맛에 영향을 주는 것을 알 수 있다.

실시예 7 품종의 확정 방법

각 추출물 및/또는 각 결정체를 HPLC로 분석하면, RA를 주성분으로 하는 품종(이하, RA 품종)으로부터 얻어진 추출물에는 ST을 주성분으로 하는 품종(이하, ST 품종)으로부터 얻어진 추출물에 비하여 레바우디오사이드 D가 많이 함유되고, 또한 스테비올 배당체 X(레바우디오사이드 O)가 포함되어 있다. 그리고, 이 스테비올 배당체 X는 RA 품종의 추출물로부터 정제하여 얻어지는 RA 결정체에도 미량이나마 포함된 것을 알 수 있었다.

한편, ST 품종으로부터 얻어진 추출물에는 스테비올 배당체 X가 포함되어 있지 않다. 당연하지만, ST 품종으로부터 얻어진 ST-RA 결정에도 스테비올 배당체 X가 포함되지 않는다는 것으로부터, 스테비올 배당체 X의 존재를 확인하면 RA 품종으로부터 얻어진 추출물 또는 그것으로부터 얻어지는 결정체인 것을 확정할 수 있다.

실시예 8 스테비올 배당체의 분석 방법

상기 실시예 5에 기재한 HPLC의 측정 조건에 의해 각 스테비올 배당체 I 내지 X를 확인할 수 있다. 원칙적으로는 HPLC 분석 차트의 R.T.로부터 스테비올 배당체의 존재를 확인할 수 있는데, 각 배당체를 분취하여 분자량을 측정함으로써 각 스테비올 배당체 I 내지 X를 확인할 수 있다.

실시예 9 탁상 설탕

1) RA-A 결정체 1g 및 분말당 99g을 혼합하여 탁상 설탕을 제조하였다.

2) RA-B 결정체 1g 및 에리트리톨 99g을 혼합하여 탁상 설탕을 제조하였다.

3) RA-C 결정체 1g 및 포도당 과당 액당 99g을 혼합하여 탁상 설탕을 제조하였다.

실시예 10 캔디

RA-C 추출물 0.3g, 팔라티니트 100g 및 적량의 향료로 캔디를 제조하였다.

실시예 11 밀크 젤리

설탕 15g, RA-B 추출물 0.08g, 우유 250g, 젤라틴 5g 및 적량의 밀크 향미료로 밀크 젤리를 제조하였다.

실시예 12 스포츠 음료

RA-B 결정체 0.075％, 락트산칼슘 0.11％, 시트르산 0.045％, 시트르산삼나트륨 0.03％, 염화마그네슘 0.015％, 글루타민산 0.0055％ 및 물 99.72％로 스포츠음료를 제조하였다.

실시예 13 탄산음료

RA-B 결정체 0.012％, 과당 8.4％, 시트르산 0.6％, 아르기닌 0.12％, 이노시톨 0.1％, 카페인 0.0025％, 판토텐산칼슘 0.0034％, 나이아신아미드 0.003％, 비타민 B6 0.002％, 비타민 B2 0.00009％, 비타민 B12 0.000002％, 적량의 향료 및 물로 전체 구성 성분이 100 ％가 되게 하고, 이산화탄소 가스를 주입하여 탄산음료를 제조하였다.

본 발명에 의해 제공되는 감미료에 포함되는 신규 스테비올 배당체 성분을 HPLC로 측정함으로써, 감미료의 제조에 있어서의 일정 감미도, 감미질, 순한맛을 포함하는 감미료 및 다른 식품을 제조할 수 있고, 또한 원료 품종의 추측이 가능해져, 스테비아 품종에 관한 산지 표시의 적절성이나 권리 침해의 판단이 용이해진다.

Claims

하기 식으로 표시되는 스테비올 배당체 IX (레바우디오사이드 N) 및 스테비올 배당체 X (레바우디오사이드 O)를 포함하는 군으로부터 선택되는 스테비올 배당체.

(식 중, R₁ 및 R₂는 아래 표의 당쇄를 나타냄)
분리된 제1항에 기재된 스테비올 배당체 중 하나 이상을 포함하는, 감미료.
제2항에 기재된 감미료를 첨가하는 공정을 포함하는, 식품의 제조 방법.
제3항에 있어서, 상기 식품이 음료인, 식품의 제조 방법.
제4항에 있어서, 상기 음료가 탄산 음료인, 식품의 제조 방법.
스테비아 레바우디아나 베르토니로부터 제1항에 기재된 스테비올 배당체 중 어느 하나를 분리하는 공정을 포함하는, 감미료의 제조 방법.
제6항에 있어서, 상기 스테비올 배당체의 양을 확인하는 공정을 추가로 포함하는, 감미료의 제조 방법.