KR102025260B1 - 대나무 발효 추출물의 제조 방법 - Google Patents

대나무 발효 추출물의 제조 방법 Download PDF

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Abstract

새로운 기능에 근거한 대나무의 새로운 용도를 제공하는 것이다. 대나무 발효 추출물의 제조 방법은, 대나무를 분쇄하여 대나무 가루를 얻는 분쇄 공정과, 대나무 가루를 유산균에 의해 발효시켜 대나무 발효물을 얻는 발효 공정과, 대나무 발효물을 열수 추출하여 추출액을 얻는 추출 공정을 가지고 있다.

Description

대나무 발효 추출물의 제조 방법
본 발명은 대나무를 젖산 발효시킨 대나무 발효물을 추출 처리하여 얻어진 대나무 발효 추출물의 제조 방법에 관한 것이다.
대나무는 주로 일본을 포함한 아시아 지역에서 많이 볼 수 있는 벼과 식물이다. 대나무는 성장이 빠르고 벌채도 용이하기 때문에, 예부터 건축재나 공예품, 일 용품의 재료로 널리 사용되어 왔다. 그러나, 합성수지 등 화학 재료의 출현으로 인해 대나무재의 이용은 감소하고 있어, 벌목되지 않은 채 방치된 대나무 숲이 야산이나 농지를 침식하고 있다는 문제가 발생하고 있다. 또한, 관리된 대나무 숲에 있어서도 벌채 대나무의 인수자가 없기 때문에, 폐기 비용이 발생하게 된다는 문제가 있었다.
그래서, 대나무를 유효하게 활용할 수 있도록, 대나무의 새로운 용도에 관한 연구 개발이 진행되고 있다. 예를 들어, 특허 문헌1에는 대나무재의 표피 부분에 항균 작용이 있는 것, 대나무재의 표피 부분에서 얻어진 대나무 미분말을 탈취 항균재로 이용하는 것이 기재되어 있다. 또한, 본 출원 발명자에 의한 특허 문헌2~4에는 대나무를 분쇄 가공하여 얻은 대나무 가루를 젖산 발효시켜 얻어진 젖산 발효 대나무 가루가 기재되어, 해당 젖산 발효 대나무 가루는 가축 사료, 식물 비료, 토질 개량제, 소취 제품 및 항균 제품 등에 적용 가능한 것이 기재되어 있다.
일본 등록특허 제2524944호 공보 일본 등록특허 제5357459호 공보 일본 공개특허 제2014-64564호 공보 일본 공개특허 제2014-64565호 공보
상술한 바와 같은 대나무의 새로운 용도는 다양하게 제안되고 있으나, 한층 더 대나무의 이용을 도모하기 위하여, 대나무의 가치를 높인다는 새로운 기능에 근거한 용도가 기대되고 있다.
본 발명은 상술한 점을 감안하여 안출된 것으로, 그 목적은 새로운 기능에 근거한 대나무의 새로운 용도를 제공하는 것에 있다.
또한, 본 발명의 다른 목적은, 본 출원 발명자가 지금까지 제안해 온 젖산 발효 대나무 가루에 관한 기술에 근거한 대나무의 새로운 용도를 제공하는 것에 있다.
본 출원 발명자는, 대나무를 유산균 발효시켜 얻어진 대나무 발효물에 대하여 열수(熱水) 추출 처리를 실시함으로써, 면역 부활 작용을 가진 추출물이 얻어지는 것을 발견하고, 본 발명을 완성시켰다. 따라서, 상기 과제를 해결하는 본 발명의 대나무 발효 추출물의 제조 방법은, 대나무를 분쇄하여 대나무 가루를 얻는 분쇄 공정과, 대나무 가루를 유산균에 의해 발효시켜 대나무 발효물을 얻는 발효 공정과, 대나무 발효물을 열수 추출하여 추출액을 얻는 추출 공정을 가지고 있다. 이에 따라, 면역 부활 작용을 가진 대나무 발효 추출물을 용이하게 얻는 것이 가능하다. 대나무를 분쇄한 대나무 가루를 발효 원료로 함으로써, 균체가 접촉하는 표면적이 증가함과 동시에 분쇄에 의해 세포 내부에 포함되어 있는 당류, 아미노산, 비타민 등이 대나무 가루 내로 용출하고, 미세한 허니콤 구조 모양의 연조직 등 내에 서식하고 있던 유산균도 대나무 가루 내에 분산되기 때문에, 유산균이 효율 좋게 증식하고 발효도 촉진된다. 그리고, 이 대나무 발효물을 열수 추출함으로써 면역 부활 작용을 가진 대나무 발효 추출물을 얻음으로써, 안전성도 높고, 식품, 음료, 화장품 및 의약을 비롯해 축산 사료, 수산용 첨가제 또는 농업용 제제 등의 다양한 제품에 안심하고 적용하는 것이 가능하다.
또한, 본 발명의 대나무 발효 추출물의 제조 방법은, 게다가 추출액 또는 그 농축액에 알코올을 첨가하고, 침전을 얻는 침전 생성 공정을 가지는 것도 바람직하다. 이에 따라, 향상된 면역 부활 작용을 가진 대나무 발효 추출물이 얻어진다
또한, 상술한 침전 생성 공정에 있어서, 알코올의 최종 농도가 60~80 중량%가 되도록 알코올이 첨가되는 것도 바람직하다. 이에 따라, 침전 형성을 위하여 첨가되는 알코올의 바람직한 농도가 선택된다.
게다가, 상술한 추출 공정에 있어서, 대나무 발효물의 열수 추출이 80℃~130℃, 0.1~0.3MPa 조건 하에서 행해지는 것도 바람직하다. 이에 따라, 바람직한 열수 추출의 온도 및 압력 조건이 선택된다.
또한, 본 발명의 대나무 발효 추출물의 제조 방법에 있어서 대나무는, 대나무의 줄기 부분인 것도 바람직하다. 대나무의 줄기 부분만을 발효 재료로 이용함으로써, 미생물의 증식이 활발해지고 발효가 촉진된다. 또한, 발효를 위한 수분 조정도 용이하게 되기 때문에 발효 상태가 안정된다.
또한, 본 발명의 면역 부활용 식품 조성물은, 상술한 공정에 의해 얻어진 대나무 발효 추출물을 유효 성분으로 함유한다. 본 발명의 면역 부활용 식품 조성물은, 특히 자연 면역 기능을 활성화시키는 작용을 가지기 때문에, 식품으로 섭취함으로써 장관(腸管) 면역 기구를 통해 자연 면역 기능, 다시 말해 바이러스나 세균 등에 대한 신속한 감염 방어나 악성 종양에 대한 공격 등의 작용을 활성화 하고, 증강하는 것이 가능하다.
게다가, 본 발명의 면역 부활제는, 대나무를 분쇄하여 대나무 가루를 얻는 분쇄 공정, 대나무 가루를 유산균에 의해 발효시켜 대나무 발효물을 얻는 발효 공정, 대나무 발효물을 열수 추출하여 추출액을 얻는 추출 공정 및 추출액 또는 그 농축액에 알코올을 첨가하여 침전을 얻는 침전 생성 공정을 순차적으로 거쳐 얻어진 대나무 발효 추출물을 유효 성분으로 함유한다. 본 발명의 면역 부활제는, 특히 자연 면역 기능을 활성화시키는 작용을 가진다. 이에 따라, 생물의 자연 면역 기능, 다시 말해 바이러스나 세균 등에 대한 신속한 감염 방어나 악성 종양에 대한 공격 등의 작용을 활성화 하고, 증강하는 것이 가능하다.
또한, 본 발명의 대나무 발효 추출물의 제조 방법은, 상술한 발효 공정에 있어서, 적어도 웨이셀라(Weissella) 속의 유산균을 포함하는 배양물을 첨가하는 것도 바람직하다. 이에 따라, 스타터로서 본 발명의 대나무 발효 추출물을 얻기 위한 바람직한 미생물 종(種)이 첨가되기 때문에, 발효 공정에 소요되는 시간이 단축된다.
또한, 본 발명의 대나무 발효 추출물의 제조 방법은, 상술한 발효 공정 전에, 대나무 가루를 유산균에 의해 발효시켜 대나무 발효물을 얻는 종균 준비 공정을 구비하고, 발효 공정에 있어서 종균 준비 공정에서 얻어진 대나무 발효물을 첨가하는 것도 바람직하다. 이에 따라, 스타터로서 대나무 가루의 발효에 순화한 발효 미생물이 첨가되기 때문에, 발효 공정에 소요되는 시간이 단축된다.
본 발명에 따르면, 다음과 같은 우수한 효과를 가진 대나무 발효 추출물의 제조 방법을 제공하는 것이 가능하다.
(1) 면역 활성 작용, 특히 자연 면역 기능을 활성화하는 작용을 가진다. 또한, IL-12 및 IFN-γ의 생산을 유도하는 작용을 가지기 때문에, 바이러스나 세균에 대한 감염 방어 효과, 면역 기능 저하의 개선, 항종양 효과 등을 가진다.
(2) 사용 원료가 대나무이고, 물이나 알코올을 이용하여 추출되기 때문에, 안전성이 높아, 식품, 기능성 식품, 음료, 화장품, 의약품, 축산 사료, 수산용 첨가제 또는 농업용 제제 등의 다양한 제품에 안심하고 적용하는 것이 가능하다.
(3) 대나무를 유산균 발효시킨 후, 열수 추출함으로써 얻어지기 때문에 비교적 간단히 제조하는 것이 가능하다.
(4) 대나무재의 유효 활용에 기여하는 것이 가능하다.
도 1은 본 발명의 제1실시 형태에 관한 대나무 발효 추출물의 제조 방법을 개략적으로 나타내는 순서도이다.
도 2는 본 발명의 제2실시 형태에 관한 대나무 발효 추출물의 제조 방법을 개략적으로 나타내는 순서도이다.
도 3은 실시예5에 있어서 본 발명의 대나무 발효 추출물의 면역 기능 활성 측정 결과를 나타내는 그래프이다.
도 4는 비교예1에 있어서 젖산 발효 대나무 액의 면역 기능 활성 측정 결과를 나타내는 그래프이다.
도 5는 실시예8에 있어서 대나무 발효 추출물의 면역 기능 활성 측정 결과를 나타내는 그래프이다.
도 6은 실시예10에 있어서 대나무 발효 추출물의 IL-12 생산 유도 결과를 나타내는 그래프이다.
도 7은 실시예10에 있어서 대나무 발효 추출물의 IFN-γ 생산 유도 결과를 나타내는 그래프이다.
우선, 도 1을 참조하여 본 발명의 제1실시 형태에 관한 대나무 발효 추출물의 제조 방법에 대하여 설명한다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 대나무 발효 추출물(P1)의 제조 방법은, 원료인 대나무를 준비하는 공정(S0), 대나무를 분쇄하여 대나무 가루로 하는 분쇄 공정(S1), 대나무 가루를 발효시켜 대나무 발효물을 얻는 발효 공정(S2), 대나무 발효물을 열수 추출하는 열수 추출 공정(S3)으로 개략 구성된다.
(대나무의 준비)
먼저, 도 1에 나타낸 대나무를 준비하는 공정(S0)에 대하여 설명한다. 본 발명에 관련된 대나무 발효 추출물의 원료가 되는 대나무로는, 일반적으로 대나무, 조릿대(笹) 및 뱀부(bamboo)라 불리는 벼과 식물이 널리 포함된다. 구체적으로는, 특히 한정되지 않지만, 맹종죽(Phyllostachys heterocycla f.pubescence), 진죽(Phyllostachys bambusoides), 담죽(Phyllostachys nigra), 사방죽(Tetragonocalamus quadrangularis), 식대(Pleioblastus Simonii), 이대(Pseudosasa japonica), 얼룩조릿대(Sasa veitchii) 등을 들 수 있으며, 맹종죽이 바람직하게 이용된다. 대나무는 생 대나무 그대로 사용하는 것이 가능하기 때문에 대나무에 붙은 흙 등의 세정을 행하고 그 밖에 전처리 등을 행하지 않고, 벌채한 대나무를 그 그대로 본 발명의 대나무 발효 추출물의 사용에 이용하는 것이 가능하다. 생 대나무는 분쇄하여 분말 형상 또는 절단하여 칩 형상으로 함으로써, 대나무의 줄기 내부, 특히 미세한 허니콤 형상의 연조직 내에 존재하는 유산균이 표출하여 분산하고, 대나무 고유의 유산균에 의한 발효가 진행한다. 대나무 가운데 조릿대의 잎과 같은 잎 부분에는 항균성 물질이 많이 포함되어 있어, 후술하는 발효 공정(S2)에 있어서 유산균 발효를 방해할 가능성이 높기 때문에, 잎 부분은 잘라내어 줄기 부분(줄기)만을 이하 공정에서 이용하는 것이 바람직하다.
(분쇄)
다음으로, 대나무의 분쇄 공정(S1)에 대하여 설명한다. 대나무의 분쇄 방법으로는, 대나무를 분말 형상으로 할 수 있다면 어떠한 방법이어도 좋고, 특히 한정되지 않지만, 예를 들면, 생 대나무의 통 끝면이 닿는 경우에 작동하는 회전 칼날을 구비한 대나무 분말화 장치를 이용하는 것이 가능하다. 이런 종류의 대나무 분말화 장치로는, 생 대나무의 통 끝면을 통 끝면에 대하여 대략 평행한 방향으로 연속적으로 절삭함으로써, 생 대나무를 소정 크기의 대나무 가루로 분쇄한다. 생 대나무의 통 끝면을 회전 칼날로 깎아내도록 하여 대나무를 분쇄함으로써, 대나무 줄기 부분의 연조직이나 관다발 싸개 등에 다수 존재하고 있는 유산균이 표출하고, 후의 발효 공정(S2)에 있어서 발효가 촉진된다. 또한, 대나무를 분쇄함으로써 세포벽이 파괴되며, 세포 내에 포함되어 있는 글루코오스 등의 당류, 아미노산, 비타민류도 분체 내에 분산되고, 발효 공정(S2)에 있어서 유산균의 영양 요구가 만족되어 발효가 효율 좋게 진행한다.
대나무 가루의 분말 입자의 크기로는 특히 한정되지 않지만, 너무 작으면 취급이 곤란하게 되고, 너무 크면 발효 속도가 느려지는 관점에서 입자직경 50μm~1mm 정도로 하는 것이 바람직하고, 입자직경 200μm~600μm가 보다 바람직하다. 또한, 분쇄 처리에 의해 얻어진 대나무 가루를 금속 제거 장치에 도입하여 대나무 분말화 장치의 회전 칼날의 칼날 떨어짐 등에 의한 이물을 흡착 제거하는 것도 바람직하다. 게다가, 분쇄 처리에 의해 얻어진 대나무 가루를 체 장치에 도입하여, 얻어진 대나무 가루의 입도 범위를 같게 하거나, 분쇄 공정(S1)에서 분쇄되지 않은 미절삭 조각을 제거하여도 좋다.
(발효)
다음으로, 발효 공정(S2)에 대하여 설명한다. 대나무 가루의 발효는 대나무 고유의 유산균에 의해 행해진다. 구체적으로는, 예를 들어, 상술한 분쇄 공정(S1)에 의해 얻어진 대나무 가루를 발효 용기, 예를 들면 투명 수지 봉투 등의 발효 봉투에 소정량 씩 넣고 발효 봉투 내부의 공기를 가능한 한 제거한 후, 발효 봉투의 입구부분 측을 봉하고 용기 내부를 대략 혐기 상태로 한다. 이 발효 봉투를 자리 등의 차광성 시트로 덮고, 20~30℃의 환경 하에서 5~20일간 정도 정치함으로써, 대나무 가루의 젖산 발효물이 얻어진다. 발효 상태는 대나무 가루의 pH값에 따라 파악하는 것이 가능하다. 다시 말해, 젖산 발효가 진행됨에 따라 대나무 가루 내에 젖산이 생기며, 대나무 가루가 나타내는 pH가 산성으로 되기 때문에, 100mL의 정제수에 대나무 가루를 40g 넣고 5분간 교반한 후, 2분간 정치하여 여과지로 여과한 여과액의 pH가 4.3 이하로 되는 시점에서 발효가 충분히 진행되었다고 판단하여 발효 공정(S2)을 종료하는 것이 가능하다.
발효 공정(S2)에 있어서 얻어진 대나무 발효물에 대하여, 변성제 농도 구배 겔 전기 영동법(DGGE 법)에 의한 미생물 무리 분석을 행한 결과, 발효 초기 단계에서는 주로 로이코노스톡(Leuconostoc) 속 및 웨이셀라(Weissella) 속의 유산균이 관찰되고, 발효 종료한 대나무 발효물에서는 웨이셀라(Weissella) 속의 유산균이 미생물 무리의 주체로 되어 있는 것이 확인되었다. 이에 따라 발효 공정(S2)에 있어서 웨이셀라(Weissella) 속의 유산균을 포함한 배양물을 스타터로 사용하는 것도 바람직하다. 이에 따라, 대나무 가루 내의 미생물 무리의 우점종을 신속하게 웨이셀라(Weissella) 속으로 발효를 촉진시켜 발효 공정(S2)에 있어서 발효일 수를 3할 정도 단축하는 것이 가능하여, 3~15일 정도로 하는 것이 가능하다. 또한, 기온의 변동이나 대나무의 함수량 및 종류 등에 의해 미생물 무리나 미생물 수는 변동하지만, 스타터를 사용함으로써 연간 내내 안정된 대나무 발효물이 얻어진다. 스타터는 별도 액체 배지에서 배양한 웨이셀라(Weissella) 속 유산균을 포함한 스타터를 대나무 가루 1kg 당 0.5mL~5mL가 되도록 첨가하는 것이 바람직하다.
또한, 발효 공정(S2)에 있어서, 미리 대나무 가루를 발효시켜 얻어진 대나무 발효물을 스타터로서 사용하는 것도 바람직하다. 이와 같이, 사전에 종균 준비 공정을 마련하여 얻어진 대나무 발효물을 스타터로서 사용함으로써, 대나무 발효물 내에 포함되는 우점종의 웨이셀라(Weissella) 속이 분쇄 공정(S1)을 거치는 정도로 새로운 대나무 가루의 발효를 촉진시켜 발효 공정(S2)에 있어서 발효일 수를 3할 정도 단축하는 것이 가능하며, 3~15일 정도로 하는 것이 가능하다. 또한, 스타터를 사용함으로써 기후나 대나무의 상태에 좌우되지 않고 안정된 대나무 발효물이 얻어진다. 이와 같이, 미리 준비된 대나무 발효물을 스타터로서 이용하는 경우에는 새로운 대나무 가루 1kg 당 5g~20g이 되도록 첨가하는 것이 바람직하다. 게다가, 본 발효 공정(S2)에 있어서 얻어진 대나무 발효물의 일부를 다음의 발효 공정 시의 스타터로서 사용하는 것도 효과적이다.
또한, 발효 공정(S2)에 있어서 발효를 저진공 또는 중진공 조건 하, 또는 질소 가스와 같은 불활성 가스 분위기 하에서 행하는 것도 바람직하다. 이에 따라, 대나무 가루 내에서의 한세눌라(Hansenula) 또는 피치아(Pichia) 등의 효모의 증식이 방해되어, 효모에 의해 생성된 아세트산과 에탄올로부터 발생하는 아세트산에틸의 발생을 방지하는 것이 가능하다.
(열수 추출)
다음으로 열수 추출 공정(S3)에 대하여 설명한다. 이 열수 추출 공정(S3)에서는 발효 공정(S2)에서 얻어진 대나무 발효물을 열수 추출하여 대나무 발효 추출물(P1)을 얻는다. 열수 추출 방법으로는 환류 가열 추출이나 오토클레이브 장치 등을 이용한 가압 열수 추출 등을 들 수 있다. 구체적으로는, 예를 들면, 대나무 발효물과 물을 반응 용기에 넣고 환류 가열 처리 등을 소정 시간 행하여 대나무 발효물 추출물을 추출한다. 물은 대나무 발효물 1kg에 대해 4~15리터 첨가하는 것이 바람직하고, 4~10리터 첨가하는 것이 더 바람직하다. 추출 용매로서는 물이 이용되지만, 추출 효율을 방해하지 않고, 얻어진 대나무 발효 추출물의 작용에 영향을 미치지 않는 범위에 있어서 다른 성분을 함유시키는 것도 가능하다. 추출 온도로서는 80℃ 이상으로 하는 것이 바람직하고, 80℃~130℃가 더 바람직하고, 100℃~121℃가 특히 바람직하다. 추출은 대기압 하 또는 가압 하에서 행해지며, 가압 조건으로는 0.1MPa~0.5MPa이 바람직하고, 0.1MPa~0.3MPa이 더 바람직하다. 추출 시간은 10분~5시간이 바람직하고, 20분~2시간이 더 바람직하다. 열수 추출 처리 후, 찌꺼기를 제거함으로써 대나무 발효 추출물(P1)이 얻어진다. 본 발명의 대나무 발효 추출물(P1)로는 열수 추출 공정(S3)에서 얻어진 대나무 발효 추출물(P1) 그 자체 외에도 대나무 발효 추출물(P1)을 감압 농축 등의 농축 처리에 의해 농축액으로 한 것, 대나무 발효 추출물(P1)에 동결 건조 처리 등의 건조 처리를 실시하여 고형 형상·분말 형상으로 한 것 등을 들 수 있다.
다음으로, 도 2를 참조하여 본 발명의 제2실시 형태에 관한 대나무 발효 추출물의 제조 방법에 대하여 설명한다.
도 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 대나무 발효 추출물(P2)의 제조 방법은, 원료인 대나무를 준비하는 공정(S0), 대나무를 분쇄하여 대나무 가루로 하는 분쇄 공정(S1), 대나무 가루를 발효시켜 대나무 발효물을 얻는 발효 공정(S2), 대나무 발효물을 열수 추출하는 추출 공정(S3) 및 열수 추출물로부터 침전을 얻는 침전 생성 공정(S4)으로 개략 구성된다. 이러한 공정(S0~S4) 가운데 대나무의 준비 공정(S0), 분쇄 공정(S1), 발효 공정(S2) 및 열수 추출 공정(S3)은 상술한 제1실시 형태에 있어서 공정(S0~S3)과 각각 동일하며, 그 작용 효과도 동일하기 때문에 설명을 생략한다.
(침전 생성)
침전 생성 공정(S4)에 대하여 설명한다. 이 침전 생성 공정(S4)에서는 열수 추출 공정(S3)에서 얻어진 추출액에 알코올을 가하여 침전을 생성시켜, 그 침전을 회수함으로써 대나무 발효 추출물(P2)을 얻는다. 사용되는 알코올로는, 예를 들면, 에탄올, 이소프로판올 등을 들 수 있지만, 안전성이 우수한 관점에서 에탄올이 바람직하다. 알코올은 추출액 내에 불용성의 침전 생성이 생기는 정도의 양 및 농도로 첨가되면 좋지만, 효율 좋게 침전 형성을 촉진하는 관점에서, 구체적으로는 추출액과 알코올로 이루어진 혼합액 가운데 알코올의 최종 농도가 50 중량%~85 중량%가 되도록 첨가되는 것이 바람직하며, 알코올의 최종 농도가 60 중량%~80 중량%가 되도록 첨가되는 것이 바람직하고, 65 중량%~75 중량%가 되도록 첨가되는 것이 특히 바람직하다. 또한, 추출액 내에 첨가하는 알코올의 양을 감량 가능한 관점에서 알코올을 첨가하기 전의 추출액에 감압 농축 처리 등을 실시하여 농축액으로 두는 것도 바람직하다. 이 경우, 추출액의 농축 비율로는, 열수 추출 공정(S3)에서 대나무 발효물에 첨가한 물의 양에 따라 변동하지만, 3~20배로 농축하는 것이 바람직하고, 5~15배로 농축하는 것이 더 바람직하다. 열수 추출액 또는 그 농축액에 알코올이 소정량 첨가됨으로써 추출액 내에 포함된 면역 부활 작용을 가진 성분이 선택적으로 침전 생성하고, 불용 성분이 제거되며, 정제된 대나무 발효 추출물(P2)이 얻어진다. 얻어진 침전, 다시 말해, 대나무 발효 추출물(P2)은 여과 처리나 원심 분리 처리 등에 의해 고액 분리되어 회수된다. 대나무 발효 추출물(P2)은 그 후 건조시켜 고형 형상·분말 형상으로 보존된다.
본 발명의 대나무 발효 추출물은 면역 부활 작용을 가진다. 본 발명에서 말하는 면역 부활 작용이란, 자연 면역과 획득 면역의 두 기능을 향상시키는 작용을 의미하지만, 본 발명에 관련된 대나무 발효 추출물을 유효 성분으로 포함하는 면역 부활제는 특히 자연 면역 기능을 부활화 하는 작용을 가지며, IL-12 및 IFN-γ 생성 유도 작용을 가진다. 이에 따라, 자연 면역 기능, 다시 말해, 병원체에 대한 신속한 감염 방어나 악성 종양에 대한 공격 등의 작용을 활성화하고 증강하는 것이 가능하다. 또한, 노화나 스트레스, 피로 등의 원인에 의해 면역 기능이 저하한 경우에 면역 반응을 활성화시키는 작용, 또는 노화나 스트레스, 피로 등의 원인에 노출 되어도 면역 기능을 안정적으로 유지하는 작용도 가진다. 또한, 본 발명의 대나무 발효 추출물은, IL-12 및 IFN-γ 생성 유도 작용을 가지고 있기 때문에, Th1 세포를 활성화시켜 세포성 면역을 항진시킬 뿐 만 아니라, 세포성 면역의 항진에 의해, 체액 면역을 억제시켜 알레르기 반응을 억제시키는 작용도 가지는 것도 기대된다.
본 발명의 면역 부활제는, 식품, 음료, 화장품, 의약부 외품 및 의약품을 비롯한 축산 사료, 수산용 첨가제 또는 농업용 제제 등의 다양한 제품에 이용하는 것이 가능하다. 유효 성분인 대나무 발효 추출물은, 죽순 등 식용으로도 이용되어 온 대나무의 새로운 기능을 발견한 것으로, 안전성이 높고, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하다. 그러므로, 식품이나 음료용 조성물로 이용하는 것이 바람직하다. 이 대나무 발효 추출물을 유효 성분으로 포함하는 면역 부활용 식품 조성물은 정제나 캡슐제, 과립제, 시럽제 등의 보조제 형태, 음료, 과자, 빵, 죽, 시리얼, 면류, 젤리, 수프, 유제품, 조미료, 식용유 등의 모든 형태로 이용하는 것이 가능하다. 또한, 식품 조성물로 이용하는 경우에는 본 발명의 유효 성분의 효능에 영향을 주지 않는 범위에 있어서 다른 유효 성분이나, 비타민, 미네랄 혹은 아미노산 등의 영양소 등을 다양하게 조합시키는 것도 가능하다. 본 발명의 식품 조성물로부터 전개되는 식품에는 보조제, 건강 식품, 기능성 식품, 특정 보건용 식품 등이 포함된다. 또한, 인간 이외의 다른 동물(애완 동물, 가축, 수산 양식 동물 등)에 대해서 사용하는 것도 가능하며, 이 경우에는, 사료, 애완 동물 사료, 동물용 보조제 또는 동물용 음료 등의 형태로 이용하는 것이 가능하다.
본 발명의 면역 부활제를 의약품 또는 의약부 외품으로 이용하는 경우에는, 종래 관용되고 있는 방법에 의해 다양한 형태로 조제하는 것이 가능하다. 이 경우, 통상 제제용의 약리학적으로 허용되는 담체나 부형제, 활택제, 분산제, 붕해제, 완충제, 용제, 증량제, 보존제, 향료 또는 안정화제 등 의약품의 첨가제로서 허용되고 있는 첨가제를 이용하여 제제화 하는 것이 가능하다. 게다가, 바이오 가용성이나 안정성을 향상시키기 위하여, 마이크로 캡슐, 리포좀 제제, 미분말화 또는 시클로 덱스트린 등을 이용한 포접화 등의 제제 기술을 포함한 약물 전달 시스템을 이용하는 것도 가능하다. 제형으로는 정제, 과립제, 캡슐제, 시럽제 등을 드는 것이 가능하지만, 특히 이들에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 면역 부활제를 함유하는 의약품이나 식품 조성물 등은 1일 섭취량으로 대나무 발효 추출물을 건조 중량 환산으로 1mg~10g으로 하는 것이 바람직하며, 1mg~1g으로 하는 것이 더 바람직하다.
이하, 본 발명의 실시예를 나타내지만, 본 발명은 이러한 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예
[실시예1]
1. 대나무 발효 추출물(1)의 제조
줄기 높이가 4m 정도의 맹종죽을 벌채하여 잎 부분을 손도끼로 잘라 내어 줄기 부분만으로 한 후, 물로 세정하여 진흙이나 오염 등을 제거하였다. 이 맹종죽의 줄기 부분 약 4m를 대나무 분말화 장치(마루다이(丸大) 철공 주식회사 제품, 모델 번호 : PA-Z)를 이용하여 분쇄하고, 500μm 이하의 대나무 가루를 약 10kg 얻었다. 다음으로 15kg 용량의 수지 봉투에 분쇄 처리한 대나무 가루 10kg을 넣고, 수지 봉투의 외주를 가압하여 봉투 내부의 공기를 가능한 한 제거하고, 입구를 봉했다. 수지 봉투를 차광성 시트로 덮고 25℃ 환경 하에서 14일간 정치하였다. 14일 경과한 대나무 발효물의 일부를 얻고, 변성제 농도 구배 겔 전기 영동법(DGGE 법)에 의한 미생물 무리 분석을 행한 결과, 웨이셀라 속의 유산균(Weissella cibaria 또는 confusa)이 미생물 무리의 주체로 되어 있는 것이 확인되었다. 얻어진 대나무 발효물 1kg을 환류 가열용의 반응 용기에 넣고 물 5L를 부어 가열 환류에서 열수 추출을 행하였다. 반응 시간은 60분으로 하였다. 반응 종료 후, 반응 용기 내의 혼합물을 여과하고, 여과액(약 4.5L)을 추출액으로 회수하였다. 이 추출액 4.5L 대해 15% 에탄올 수용액을 6L 첨가하여 불용성으로 된 성분을 침전시켜 침전을 회수하였다. 회수한 침전을 동결 건조시켜 약 30g의 대나무 발효 추출물(1)을 얻었다.
[실시예2]
2. 대나무 발효 추출물(2)의 제조
줄기 높이가 4m 정도의 맹종죽을 벌채하여 잎 부분을 손도끼로 잘라 내어 줄기 부분만으로 한 후, 물로 세정하여 진흙이나 오염 등을 제거하였다. 이 맹종죽의 줄기 부분 약 4m를 대나무 분말화 장치(마루다이 철공 주식회사 제품, 모델 번호 : PA-Z)를 이용하여 분쇄하고, 500μm 이하의 대나무 가루를 약 10kg 얻었다. 대나무 가루 10kg 대해 실시예1에서 얻은 대나무 발효물을 100g 첨가하고, 잘 혼합 하였다. 다음으로 15kg 용량의 수지 봉투에 이 대나무 가루를 넣고, 수지 봉투의 외주를 가압하여 봉투 내부의 공기를 가능한 한 제거하고, 입구를 봉했다. 수지 봉투를 차광성 시트로 덮고 25℃ 환경 하에서 9일간 정치하였다. 얻어진 대나무 발효물 1kg을 환류 가열용의 반응 용기에 넣고 물 5L를 부어 가열 환류에서 열수 추출을 행하였다. 반응 시간은 60분으로 하였다. 반응 종료 후, 반응 용기 내의 혼합물을 여과하고, 여과액(약 4.5L)을 추출액으로 회수하였다. 이 추출액 4.5L 대해 15% 에탄올 수용액을 6L 첨가하여 불용성으로 된 성분을 침전시켜 침전을 회수하였다. 회수한 침전물을 동결 건조시켜 약 30g의 대나무 발효 추출물(2)을 얻었다.
[실시예3]
3. 면역 기능 활성 시험을 위한 대나무 발효 추출물(3)의 제조
실시예1에서 얻어진 대나무 발효물을 멸균한 생리 식염수(0.9% NaCl)에 샘플 농도 100mg/mL로 되도록 현탁하였다. 이 현탁물을 오토클레이브 내에서 121℃에서 20분간 대나무 발효물의 열수 추출 처리를 행하였다. 열수 추출액을 원심 분리하여 상청을 회수하고 대나무 발효 추출물(3)을 얻었다. 이 상청을 면역 부활 시험에 이용하였다. 또한, 회수한 상청 1mL를 원심 증발기에 걸어 건고시키고, 얻어진 건조 중량으로부터 상청 내의 대나무 발효 추출물(3)의 농도를 산출하였다.
[실시예4]
4. 면역 기능 활성 시험을 위한 대나무 발효 추출물(4)의 제조
실시예2에서 얻어진 대나무 발효물을 멸균한 생리 식염수(0.9% NaCl)에 샘플 농도 100mg/mL로 되도록 현탁하였다. 이 현탁물을 오토클레이브 내에서 121℃에서 20분간 대나무 발효물의 열수 추출 처리를 행하였다. 열수 추출액을 원심 분리하여 상층을 회수하고 대나무 발효 추출물(4)을 얻었다. 이 상청을 면역 부활 시험에 이용하였다. 또한, 회수한 상청 1mL를 원심 증발기에 걸어 건고시키고, 얻어진 건조 중량으로부터 상청 내의 대나무 발효 추출물(4)의 농도를 산출하였다.
[실시예5]
5. 면역 기능 활성 시험
면역 기능 활성 시험으로는, 누에 근수축을 지표로 한 자연 면역 촉진 활성 시험을 행하였다. 다시 말해, 본 시험 방법은 누에 등의 완전 변태형 곤충의 유충에 피검 시료를 투여한 경우, 피검 시료 내에 신경 전달 물질이 존재하면 급격한 근수축이 일어나지만, 자연 면역 기능 활성화 작용을 가진 물질을 완전 변태형 곤충의 유충에 투여한 경우에는, 그 완료에 10분 정도를 요하는 느린 근수축(완행성 근수축)이 일어난다는 지견에 기초하고 있다. 실시예3에서 얻어진 대나무 발효 추출물(3) 및 실시예4에서 얻어진 대나무 발효 추출물(4)을 피검 시료로 하여 다음 시험을 행하였다.
누에의 완행성 근수축의 측정은 다음과 같이 하여 행하였다(Hamamoto H., Kamimura M., Sekimizu K., J.Biol.Chem. 2008년, 283(4), pp.2185-91 참조). 5일령 누에의 단두 근육 표본에 피검 시료 50μL를 체강 내 주사하고, 누에의 몸 길이를 측정하여 근수축 값(Contraction Value, C값=([수축 전(주사 전)의 길이]-[수축 후(주사 후)의 길이])/[수축 전의 길이])의 최대 값(약 10분 후)을 구하였다. 피검 시료는 0.9% 생리 식염액으로 다음 표 1에 나타낸 바와 같이 소정 농도로 계열 단계 희석하여 각 희석액에 대하여 각각 C값을 측정하였다. C값=0.15인 경우의 완행성 근수축 활성을 1유닛으로 정의하여 얻어진 용량 응답 곡선으로부터 C값=0.15를주는 피검 시료량을 구하고, 피검 시료 1mg 당 활성을 산출하였다. 또한, 생리 식염액 50μL를 음성 대조군으로 하고, 공기 0.2mL를 양성 대조군으로 하였다. 결과를 다음 표 1 및 도 2에 나타낸다. 도 3(a)는 대나무 발효 추출물(3)의 결과를 나타내고, 도 3(b)는 대나무 발효 추출물(4)의 결과를 나타내고 있다.
피검 시료(실시예) 희석 배율 근수축값(C값) 피검 시료량(㎍)
양성대조(0.9% NaCl) - 0.00 -
양성대조(공기) - 0.41 -
대나무 발효 추출물(3)
(농도:15mg/mL)		 1/1 0.21 750
1/4 0.03 190
1/16 0.00 47
1/64 0.00 12
대나무 발효 추출물(4)
(농도:11mg/mL)		 1/1 0.17 550
1/2 0.11 280
1/4 0.09 140
1/16 0.00 34
[비교예1]
6. 면역 기능 활성 시험을 위한 젖산 발효 대나무 액의 제조 및 면역 기능 활성 시험
실시예1에서 얻어진 대나무 발효물 1kg을 10L 용량의 플라스틱 용기에 넣고, 대나무 숯 분말 20g 및 파파인 효소 6g을 가하여 잘 혼합 하였다. 게다가 물 8L를 붓고 뚜껑을 닫아 25℃ 환경 하에서 14일 정치하였다. 14일 후 용기 내의 혼합물을 여과하고, 여과액(약 8L)을 젖산 발효 대나무 액으로 회수하였다. 이 젖산 발효 대나무 액을 10mL 얻어 pH 시험지로 pH를 확인하며 NaOH로 중화하였다. 또한, 젖산 발효 대나무 액 1mL를 원심 증발기에 걸어 건고시키고, 얻어진 건조 중량으로부터 젖산 발효 대나무 액에 포함된 성분의 농도를 산출하였다. 이 젖산 발효 대나무 액을 피검 시료로 하여 실시예5와 동일한 면역 기능 활성 시험을 행하였다. 결과를 다음 표 2 및 도 4에 나타낸다.
피검 시료(비교예) 희석 배율 근수축값(C값) 피검 시료량(㎍)
음성대조(0.9% NaCl) - 0.00 -
양성대조(공기) - 0.41 -
젖산 발효 대나무 액
(농도:16mg/mL)		 1/1 0.01 800
1/4 0.00 200
1/16 0.04 50
표 1에 나타낸 바와 같이, 대나무 발효 추출물(3)의 농도는 15mg/mL이며, 대나무 발효 추출물(4)의 농도는 11mg/mL였다. 또한, 이러한 추출물의 면역 기능 활성을 측정한 결과, 도 3에 나타낸 바와 같은 용량 응답 곡선이 나타나, 본 발명의 대나무 발효 추출물에는 자연 면역 촉진 활성이 있는 것으로 나타났다. 대나무 발효 추출물(3)의 비활성은 2.1units/mg이며, 대나무 발효 추출물(4)의 비활성은 2.7units/mg이었다. 한편, 비교예에서 나타난 젖산 발효 대나무 액에 대해서는 도 4에 나타낸 바와 같이 용량 응답 곡선이 나타나지 않고 자연 면역 촉진 활성은 관찰되지 않았다. 이러한 결과로부터 대나무 발효물을 열수 추출함으로써 얻어진 대나무 발효 추출물에는 면역 부활 작용이 있는 것이 분명해졌다.
[실시예6]
7. 대나무 발효 추출물(5)의 제조
실시예1에서 얻어진 대나무 발효물 10g을 멸균한 생리 식염수(0.9% NaCl) 100mL로 현탁시켰다. 이 현탁물을 오토클레이브 내에서 121℃, 2기압 하에서 20분간 대나무 발효물의 열수 추출 처리를 행하였다. 열수 추출액을 원심 분리하여 상청을 회수하고 원심 증발기에 걸어 건고시켜 분말의 대나무 발효 추출물(5)을 440mg 얻었다. 또한, 얻어진 대나무 발효 추출물(5) 내에 포함된 당류의 양을 페놀 황산법에 의해 정량한 결과, 대나무 발효 추출물(5) 가운데 7 중량%가 당류인 것으로 나타났다(표 4 참조).
[실시예7]
8. 대나무 발효 추출물(6)의 제조
실시예1에서 얻어진 대나무 발효물 10g을 멸균한 생리 식염수(0.9% NaCl) 100mL로 현탁시켰다. 이 현탁물을 오토클레이브 내에서 121℃, 2기압 하에서 20분간 대나무 발효물의 열수 추출 처리를 행하였다. 열수 추출액을 원심 분리하여 상청을 회수하였다. 회수한 상청에 95% 에탄올을 첨가하여 에탄올의 최종 농도가 68%가 될 때까지 에탄올을 가하였다. 생성된 침전을 회수하고 건조시켜 분말의 대나무 발효 추출물(6)을 27mg 얻었다. 또한, 얻어진 대나무 발효 추출물(6) 내에 포함된 당류의 양을 페놀 황산법에 의해 정량한 결과, 대나무 발효 추출물(6) 가운데 52 중량%가 당류인 것으로 나타났다(표 4 참조).
[실시예8]
9. 대나무 발효 추출물(5) 및 (6)에 대한 면역 기능 활성 시험
실시예7 및 실시예8에서 얻어진 대나무 발효 추출물(5) 및 대나무 발효 추출물(6)을 피검 시료로 하여 실시예5와 동일한 방법으로 면역 기능 활성 시험을 행하였다. 결과를 다음 표 3 및 도 5에 나타낸다. 도 5(a)는 대나무 발효 추출물(5)의 결과를 나타내고, 도 5(b)는 대나무 발효 추출물(6)의 결과를 나타내고 있다.
피검 시료(실시예) 희석 배율 근수축값(C값)
음성대조(0.9% NaCl) - 0.00
양성대조(공기) - 0.35
대나무 발효 추출물(5)
(오토클레이브 열수 추출물)		 1/1 0.26
1/4 0.08
1/16 0.07
1/64 0.00
대나무 발효 추출물(6)
(열수 추출+에탄올 침전물)		 1/4 0.32
1/16 0.23
1/64 0.36
1/256 0.07
1/1024 0.04
1/4096 0.07
실시예6 및 실시예7에서 얻어진 대나무 발효 추출물의 면역 기능 활성을 측정한 결과, 도 5에 도시한 용량 응답 곡선이 나타나고, 본 발명의 대나무 발효 추출물에는 자연 면역 촉진 활성이 있는 것이 나타났다. 이 용량 응답 곡선에서 구한 비활성의 값은 대나무 발효 추출물(5)은 7.3units/mg이며, 에탄올 침전 형성 공정을 거친 대나무 발효 추출물(6)은 230units/mg이었다(표 4 참조). 이에 따라 대나무 발효물을 열수 추출함으로써 얻어진 대나무 발효 추출물에서는 면역 부활 작용이 있는 것으로, 면역 부활 작용을 가진 성분은 에탄올 침전에 의해 농축되거나, 선택적으로 얻는 것이 가능하며, 침전 생성 공정을 거친 대나무 발효 추출물(6)은 보다 높은 면역 부활 작용을 나타내는 것이 분명해졌다. 또한, 다음 표 4에 나타낸 바와 같이, 대나무 발효 추출물(6)은 당류의 함유량이 52 중량%로 상승하고 있다. 이와 같이, 당류의 함유량의 상승에 따라 비활성도 상승하고 있는 것으로부터, 대나무 발효 추출물에 포함된 다당류가 면역 부활 작용을 가진 활성 성분 중 하나라고 생각된다.
피검 시료 총중량
(mg)		 당중량
(mg)		 당의 점유 비율(%) 총활성
(units)		 비활성
(units/mg)
대나무 발효 추출물(5)
(오토클레이브 열수 추출물)		 440 31 7 3200 7.3
대나무 발효 추출물(6)
(열수 추출+에탄올 침전물)		 27 14 52 6200 230
[실시예9]
10. 대나무 발효 추출물(7)의 제조
실시예1에서 얻어진 대나무 발효물 1kg을 환류 가열용의 반응 용기에 넣고 물 10L를 부어 가열 환류에서 100℃로 열수 추출을 행하였다. 반응 시간은 120분간 이었다. 반응 종료 후, 반응 용기 내의 혼합물을 여과하고 여과액을 약 9L 회수하였다. 이 여과액을 약 10배로 농축하여 농축액으로 하였다. 이 농축액에 대해, 95% 에탄올을 첨가하여 에탄올의 최종 농도가 70%로 될 때까지 에탄올을 가하였다. 이 혼합액을 여과하여 생성한 침전을 회수하고 건조시켜 분말의 대나무 발효 추출물(7)을 얻었다.
[실시예10]
11. 마우스 비장 세포를 이용한 면역 응답 시험
C57B6 마우스로부터 비장 세포를 채취하여 비장 세포가 RPMI-1640 액체 배지 내에 5×106개/mL로 존재하도록 조정하였다. 피검 시료로는 실시예9에서 제조한 대나무 발효 추출물(7)을 이용하였다. 또한, 천연물 고유의 추출물에는 LPS가 종종 포함되어 있을 수 있기 때문에, 비교 시료로서 리포폴리사카라이드(LPS)를 이용하여 본 발명의 대나무 발효 추출물에 의한 사이토카인의 생산이 LPS에 의한 것인지 여부에 대해 확인하였다. C57B6 마우스의 비장 세포(5×106개/mL)에 대나무 발효 추출물(7)을 최종 농도가 2μg/mL, 5μg/mL 및 10μg/mL로 되도록 가하여, 48시간 배양하였다. 마찬가지로, C57B6 마우스의 비장 세포(5×106개/mL)에 LPS를 최종 농도가 0.1μg/mL로 되도록 가하여, 48시간 배양하였다. 48시간 배양 후, 배지 내의 IL-12(p70)와 IFN-γ의 생산량을 ELISA법에 의해 측정하였다. IL-12(p70) 생산량의 결과를 도 6에, IFN-γ의 생산량의 결과를 도 7에 나타낸다. 도 6 및 도 7에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 대나무 발효 추출물은 IL-12 및 IFN-γ의 생산을 유도하는 것으로 나타났다. 또한, LPS를 첨가한 비장 세포에서는 IL-12도 IFN-γ도 생산이 확인되지 않은 것으로부터, 본 발명의 대나무 발효 추출물에 의한 이러한 사이토카인의 생산은 LPS에 의한 것은 아니며, 대나무 발효 추출물에 포함된 LPS 이외의 성분에 의한 작용인 것으로 생각되었다.
본 발명은 상기의 실시 형태 또는 실시예에 한정되는 것은 아니며, 특허 청구 범위에 기재된 발명의 요지를 벗어나지 않는 범위 내에서의 다양한 설계 변경한 형태도 기술적 범위에 포함하는 것이다 .
본 발명의 대나무 발효 추출물은, 식품이나 음료, 의약품으로 이용되는 외에도, 축산이나 수산 양식 분야에 있어서 이용되는 것이 가능하다.

Claims (8)

  1. 대나무를 분쇄하여 대나무 가루를 얻는 분쇄 공정과,
    상기 대나무 가루를 유산균에 의해 발효시켜 대나무 발효물을 얻는 발효 공정과,
    상기 대나무 발효물을 열수 추출하여 추출액을 얻는 추출 공정과,
    상기 추출액 또는 상기 추출액이 농축된 농축액에 알코올을 첨가하여 침전을 얻는 침전 생성 공정을 가지며,
    상기 침전 생성 공정에 있어서, 상기 알코올의 최종 농도가 65~75 중량%로 되도록 상기 알코올이 첨가되고,
    상기 분쇄 공정에 있어서, 상기 대나무 가루의 분말 입자의 입자직경은 200μm 내지 600μm이며,
    상기 발효공정에서 웨이셀라(Weissella) 속(Genus) 유산균을 포함하는 스터터를 대나무 가루 1kg 당 5g 내지 20g이 되도록 첨가하는 것을 특징으로 하는 대나무 발효 추출물의 제조 방법.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서, 상기 추출 공정에 있어서 열수 추출이 80℃~130℃, 0.1MPa~0.3MPa 조건 하에서 행해지는 것을 특징으로 하는 대나무 발효 추출물의 제조 방법.
  5. 제1항 또는 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대나무가 대나무의 줄기 부분인 것을 특징으로 하는 대나무 발효 추출물의 제조 방법.
  6. 삭제
  7. 삭제
  8. 삭제
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6883840B2 (ja) * 2017-01-24 2021-06-09 株式会社 竹宝 竹繊維舗装材の製造方法
KR101979698B1 (ko) * 2017-06-19 2019-05-17 주식회사 오즐디앤에프 죽순 효소분해물 또는 죽순 발효물을 유효성분으로 포함하는 장기능 저하 예방, 개선 또는 치료용 조성물
JP6999880B2 (ja) * 2017-08-29 2022-01-19 株式会社タケックス・ラボ パーティクルボード、パーティクルボード用竹チップの製造方法及びパーティクルボードの製造方法
JP2020117462A (ja) * 2019-01-24 2020-08-06 学校法人東京電機大学 免疫賦活組成物及び竹抽出物、並びにそれらの製造方法
CN113925931A (zh) * 2021-08-11 2022-01-14 华南农业大学 一种竹沥精粉的制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012162488A (ja) * 2011-02-07 2012-08-30 Genome Soyaku Kenkyusho:Kk 自然免疫促進作用が増強された自然免疫活性化剤の製造方法及びその製造方法で製造されたローヤルゼリー由来の自然免疫活性化剤
JP2014064564A (ja) 2012-09-04 2014-04-17 Osamu Tamai 乳酸発酵竹粉の製造方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5357459A (en) 1976-11-04 1978-05-24 Hitachi Ltd Case for printed circuit board
JP2524944B2 (ja) 1992-04-08 1996-08-14 竹泉産業株式会社 竹微粉末、超微粉末の製造方法及び脱臭抗菌剤
JP2005151928A (ja) * 2003-11-28 2005-06-16 Toyo Ink Mfg Co Ltd 飼料用添加剤
KR100642798B1 (ko) 2004-08-26 2006-11-10 김익수 대나무 유래의 미생물을 이용한 발효액 및 그의 용도
JP2006116433A (ja) * 2004-10-21 2006-05-11 Food Techs Co Ltd 竹の抽出方法、および抗菌剤、抗酸化剤
JP2006137703A (ja) * 2004-11-12 2006-06-01 Hakuju Life Science Co Ltd 植物免疫活性物質およびその製造方法
JP2007161604A (ja) * 2005-12-09 2007-06-28 Kitajima Shokuhin Kk 竹液の製造方法および竹液
JP2008094733A (ja) 2006-10-06 2008-04-24 Micro Media Japan Corp 竹液の製造方法および竹液
CN1969682A (zh) 2006-11-02 2007-05-30 浙江大学 竹笋粗多糖在保健食品制备中的应用
JP5357459B2 (ja) * 2008-07-29 2013-12-04 アンナプロバイオ株式会社 乳酸発酵竹粉の製造方法
CN103265647A (zh) * 2013-05-14 2013-08-28 安徽金枫果胶有限公司 从马铃薯废渣中提取果胶的方法
JP6393859B2 (ja) * 2013-11-11 2018-09-19 大澤　和雄 竹を用いた飼料
JP5844855B2 (ja) * 2014-06-26 2016-01-20 アンナプロバイオ株式会社 乳酸発酵竹液の製造方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2012162488A (ja) * 2011-02-07 2012-08-30 Genome Soyaku Kenkyusho:Kk 自然免疫促進作用が増強された自然免疫活性化剤の製造方法及びその製造方法で製造されたローヤルゼリー由来の自然免疫活性化剤
JP2014064564A (ja) 2012-09-04 2014-04-17 Osamu Tamai 乳酸発酵竹粉の製造方法

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