KR101338546B1

KR101338546B1 - 피부 외용제

Info

Publication number: KR101338546B1
Application number: KR1020077028886A
Authority: KR
Inventors: 후미요 교노; 야스오 스에모토; 사토루 다카야마; 마코토 다케우치
Original assignee: 가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조
Priority date: 2005-05-27
Filing date: 2006-05-26
Publication date: 2013-12-06
Also published as: EP1894558A1; KR20080012958A; JP5085321B2; JPWO2006126675A1; US20090263339A1; CN101212952B; JP2012184270A; TW200716198A; CN101212952A; WO2006126675A1

Abstract

안전성이 높고, 안정성, 냄새나 앙금의 발생 등의 면에 있어서 문제가 없는 식물 유래의 추출물을 유효 성분으로 하는 멜라닌 생성 억제제 및/또는 엘라스타아제 활성 저해제와, 이것을 배합한 미백 작용이나 피부 미용 작용이 우수한 피부 외용제를 제공하는 것을 과제로 하고, 쪽풀 추출물을 함유하는 피부 외용제를 제공함으로써 상기 과제를 해결한다.

Description

피부 외용제{AGENT FOR EXTERNAL APPLICATION TO THE SKIN}

본 발명은, 쪽풀(Polygonum tinctorium Lour; 藍草) 추출물 및 이것을 유효 성분으로서 함유하는 피부 외용제(外用劑), 특히, 쪽풀로부터의 물을 포함하는 용매에 의한 추출물을 함유하는 멜라닌 생성 억제제(抑制劑) 및/또는 엘라스타아제 활성 저해제, 및, 이것을 유효 성분으로서 함유하는 미백용(美白用) 및/또는 피부 미용용의 피부 외용제에 관한 것이다.

주름, 잔주름이나 기미, 주근깨, 햇볕에 탄 후의 피부의 색소 침착(沈着)은, 중고(中高) 연령층이나 여성에 있어서는 특히 큰 피부 고민의 하나로 되고 있다. 그래서, 종래로부터 여러 가지의 피부 미용이나 미백 성분이 제안되어 있다. 이러한 아름다운 피부나 미백에 유효한 성분으로서, 예를 들면, 코지산(kojic acid) 또는 그 유도체, L-아스코르브산, 토코페롤 또는 그 유도체, 글루타티온(glutathione), 과산화 수소, 과산화 아연, 하이드로퀴논 모노벤질 에테르(hydroquinone monobenzyl ether) 등의 화학 물질, 플라센터 엑기스(placenta extract), 실크 추출물 등의 동물 엑기스나, 아르니카(arnica), 알테아(althaea), 알로에, 황금(黃芩), 연명초(延命草), 캐모마일, 감초, 치자나무, 자근(紫根), 승마(升摩), 자작나무, 천궁(川芎), 이질풀, 시호(柴胡), 산다화(山茶花), 당귀, 금 잔화(金盞花), 딱총나무, 잇꽃, 마늘, 율무, 여주, 로그우드(logwood) 등의 식물 엑기스가 알려져 있다.

그러나, 이것들의 성분을, 피부 외용제에 배합했을 경우에는, 안정성이나 용해성이 나쁠 경우나, 특히, 식물 엑기스 등에서는, 앙금의 발생, 이취(異臭), 착색이 생기는 등의 문제가 있고, 또한, 생체에 대한 효과의 점에 있어서도, 더욱이 피부에 피부병을 일으키는 등 안전성의 면에서도, 문제가 있는 것도 있어, 만족할만한 것이 아니었다.

쪽풀은, 베트남 남부를 원산지로 하는, 쌍자엽 식물 이변화(離弁花)류로 분류되는 여뀌과의 일년생 초본이다. 일본국에서는, 쪽의 잎 및 과실에는 유용한 생리 활성 성분이 포함되어 있다고 하여, 그 잎 및 과실을 볕에 말려서 얻어지는 쪽 잎 및 쪽 과실은, 예로부터, 생약으로서 이용되고 있다. 또한, 최근에, 쪽풀 추출물을 함유하는, 항종양 활성, 항바이러스 활성, 항균 활성 등의 작용을 기대한, 음식품이나 화장품 등이 제안되어 있다(예를 들면, 일본국 특개2001-31581호 공보 및 일본국 특개2004-189732호 공보 참조).

본 발명은, 안전성이 높고, 안정성, 냄새나 앙금의 발생 등의 면에 있어서 문제가 없는 식물 유래(由來)의 추출물을 유효 성분으로 하는 멜라닌 생성 억제제 및/또는 엘라스타아제 활성 저해제와, 이것을 배합한 미백 작용, 피부 미용 작용, 항노화 작용이 우수한 피부 외용제를 제공하는 것을 과제로 한다.

본 발명자들은, 상기 과제를 해결하기 위해서 식물 유래의 추출물에 대해서 예의(銳意) 연구를 거듭한 결과, 의외로, 수많은 여뀌과 식물의 추출물 중에서도, 쪽풀 추출물이, 특히 우수한, 멜라닌 생성 억제 작용 및 엘라스타아제 활성 저해 작용을 갖고, 또한, 리파아제(lipase) 활성 저해 작용, 피지선(皮脂腺)으로부터의 피지(皮脂) 분비 조절 작용 등의 다채로운 생리 활성을 갖는 것을 발견하고, 이것을 배합한 피부 외용제는, 우수한 미백 효과, 피부 미용 효과, 항노화 효과를 발휘하는 것을 발견하였다. 또한, 이 쪽풀 추출물은, 그 밖의 미백 작용을 갖는 성분과 병용(倂用)함으로써, 그 미백·피부 미용 효과뿐만 아니라, 쪽풀 추출물이 갖는 항산화 작용, 항염증 작용, 항균 작용, 항노화 작용을 비롯한 생리 활성도 증강된다고 하는 예상외의 지견(知見)을 발견하여, 본 발명을 완성하였다.

즉, 본 발명은 쪽풀 추출물을 배합해서 이루어지는 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 활성 억제 및/또는 노화 방지제, 및, 이것들을 배합해서 이루어지는 피부 외용제를 제공함으로써, 상기 과제를 해결하는 것이다.

도 1은 본 발명의 쪽풀 추출물의 농도와 엘라스타아제 활성 저해율(沮害率)의 관계를 나타낸 그래프.

도 2는 본 발명의 쪽풀 추출물의 농도와 리파아제 활성 저해율의 관계를 나타낸 그래프.

도 3은 본 발명의 쪽풀 추출물의 농도와 O² ^- 소거율(消去率)의 관계를 나타낸 그래프.

도 4는 본 발명의 쪽풀 추출물의 농도와 DPPH 라디칼 제거율의 관계를 나타낸 그래프.

본 발명에서 사용하는 「쪽풀」이라는 것은, 여뀌과에 속하는 1년생의 식물(폴리고넘 틴크토리움 로아: Polygonum tinctorium Lour)이며, 「요람(蓼藍)」이라고도 부르고 있다.

본 발명에서 사용하는 쪽풀은, 그 기원이나 재배 방법에 특히 제한은 없고, 천연으로 자생하는 쪽풀이어도 좋고, 재배되고 있는 것이어도 좋고, 이것들을 통상적인 방법에 의해 종자를 키워서 얻을 수 있는 변이주(變異株) 등이어도 좋으며, 또한, 쪽풀을, 조직 배양, 칼루스(Callus) 배양, 세포 배양 등으로서 얻을 수 있는 배양물(培養物)이어도 좋다. 식물체를 추출의 원료로서 이용할 경우, 그 식물체의 일부 또는 전부를 이용할 수 있다. 또한, 이것들의 원료는 신선한, 즉, 수분을 함유하는 상태이어도 좋고, 동결품이어도 좋으며, 혹은 건조시킨 상태이어도 좋고, 이것들의 혼합물이어도 좋다.

본 발명에서 사용하는 쪽풀 추출물의 제조 방법으로서는, 상기와 같은 쪽풀 식물체의 전체 및/또는 그 일부를 원료로 하여, 이것에 물 혹은 물을 함유하는 용매를 첨가하고, 화장품 공업이나 의약품 공업 등에서 보통 일반적으로 실행하는 추출법에 의해 조제할 수 있으며, 쪽풀의 착즙물(搾汁物)을 이용하는 것, 이것들을 혼합해서 이용하는 것도 가능하다. 또한, 용매 추출 이전에, 상기 원료를 화장품 공업이나 의약품 공업 등에서 보통 일반적으로 이용하는, 세단(細斷), 파쇄(破碎), 마쇄(磨碎), 분쇄, 압착(壓搾), 발효, 건조, 냉동 등의 1종 또는 2종 이상을 적당히 조합한, 물리적 및/또는 화학적 전처리(前處理)를 실시함으로써, 쪽풀의 세단물, 파쇄물, 마쇄물, 분쇄물, 압착물, 발효물, 건조물, 혹은, 동결물로 해서, 이것들의 어느 1종 또는 2종 이상을 추출용의 원료로서 사용하는 것도 자유이다.

본 발명에서 사용하는 쪽풀 추출물을 조제하기 위한 용매로서는, 수성 용매(예를 들면, 물, 산성 또는 염기성의 수성 용매 등), 알코올류(예를 들면, 메탄올, 무수 에탄올, 에탄올 등의 저급 알코올, 혹은 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜 등의 다가(多價) 알코올 등), 아세톤 등의 케톤류 등의 1종 또는 2종류 이상을 적당히 혼합해서 사용할 수 있다. 그중에서도, 미백 작용이나 피부 미용 작용의 강도나 안전성의 점에서는, 물이 바람직하고, 물을 함유하는 혼합 용매(이하, 본 명세서에서는, 쪽풀의 물 혹은 물을 함유하는 용매에 의한 추출물을 총칭해서, 「쪽풀 추출물」이라고 할 경우가 있다.)도 바람직하다. 혼합 용매로서는, 물과 에탄올의 조합이 특히 바람직하고, 보통은, 에탄올의 농도가, 0 질량％ 내지 70 질량％의 것이 바람직하고, 0 질량％ 내지 60 질량％(이하, 본 명세서에서는, 특별히 명시하지 않는 한 「질량％」를 「％」로 표기한다.)의 것이 특히 바람직하다. 또한, 적당히, 산, 알칼리, 또는 완충제 등에 의해 추출 용매를 원하는 pH로 조정하는 것도 자유이다. 추출은, 보통은, pH 2 내지 pH 13의 범위에서 실행되며, pH 4 내지 pH lO의 범위가 바람직하고, pH 4 내지 pH 7.5의 범위가 특히 바람직하다.

본 발명의 쪽풀 추출물의 조제에는, 이상과 같은 추출 용매를, 전술(前述)한 원료에 대하여 적량(適量) 사용하면 좋고, 보통, 질량비로 0.1 내지 30배량, 바람직하게는 0.5배량 내지 2배량을 첨가하고, 필요에 따라서, 교반(攪拌) 처리, 가열 처리, 가압 처리, 초음파 처리 등을 실시해 추출한 후, 여과, 원심 분리, 디캔테이션(decantation) 등의 적당한 방법으로, 액체 부분과 찌꺼기로 나누고, 액체 부분을 채취해서 쪽풀 추출물을 조제할 수 있다. 또한, 찌꺼기에 다시 반복해서 마찬가지의 추출 처리를 시행하여, 채취되는 각각의 액체 부분을 합일(合一)해서 추출물을 얻는 것도 자유이다. 또한 원료 및 찌꺼기에, 2회 이상의 추출 처리를 시행할 경우, 각각 상이한 추출 용매를 이용해서 원하는 액체 부분만을 채취하거나, 이것들을 합일해서, 쪽풀 추출물로 하는 것도 자유이다. 이 용매에 의한 추출 공정은, 보통, 0.5시간 내지 100시간 정도 실행되며, 5시간 내지 48시간이 바람직하다.

이것들 쪽풀 추출물을 조제할 때에, 앙금의 발생이나 갈변(褐變)을 억제하거나, 이취의 발생이나, 미생물의 증식 억제 등을 목적으로 해서, 후술하는, 계면 활성제, 방부제(항균제), 보습제, 증점제(增粘劑), 수용성 고분자, 항산화제, 킬레이트(chelate)제, 색소, 향료, pH 조정제, L-아스코르브산이나 그 유도체를 포함하는 비타민류, 첨가제로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 첨가할 수도 있다. 또한, 이들 성분의 첨가 시기나 첨가량은, 본 발명의 효과를 방해하지 않는 한, 특히 제한은 없고, 추출 공정의 임의의 시기에 첨가하면 된다.

이렇게 하여 추출된 쪽풀 추출물은, 그대로 피부 외용제의 원료로서 사용할 수도 있다. 또한, 어느 정도의 기간 동안 보존하여, 앙금을 발생시키고, 여과, 원심 분리, 디캔테이션 등의 적당한 방법으로, 앙금을 제거함으로써, 앙금, 갈변, 이취 등의 발생을 억제할 수 있다.

이 추출물은, 또한, 본 발명의 작용 효과를 향상시키기 위해서, 적당한 정제(精製) 처리를 시행하여, 그 유효 성분 함량을 높인 쪽풀 추출물로 해서 이용하는 것도 자유이다. 또한, 이 추출물을 그 사용 목적에 따라서 정제하여, 그 함유 성분인 것의 폴리페놀, 알칼로이드, 테르페노이드(terpenoid), 스테로이드, 페놀류, 색소, 당류, 단백질, 아미노산, 핵산, 펩티드, 지질 등의 1종 또는 2종 이상의 함유 비율을 증가 또는 저감하는 것도 자유이다. 목적으로 하는 성분의 종류에도 따르지만, 정제 수단은, 예를 들면, 여과, 농축, 원심 분리, 정석(晶析), 용매 분별(分別), 분별 침전, 투석(透析), 소수성(疏水性) 크로마토그래피, 역상(逆相) 크로마토그래피, 흡착 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 겔 여과 크로마토그래피 및/또는 이온 교환 크로마토그래피 등으로부터 적당한 방법이 선택된다. 본 발명의 쪽풀 추출물은, 미백 작용, 피부 미용 작용, 노화 억제 강도의 점에서, 폴리페놀을, 200μg/ml 이상 함유하는 것이 바람직하고, 400μg/ml 이상 함유하는 것이 특히 바람직하다. 또한, 쪽풀 추출물이 갖는 미백 작용, 항노화 작용, 항균 작용, 항염증 작용 등에 중요한 역할을 담당하고 있는 성분의 하나인 트립탄트린(tryptanthrin)이나 켄페롤(kenpherol) 등의 유효 성분 함량이 높은 것이 바람직하다.

또한, 이들 쪽풀 추출물은, 필요에 따라서, 원심, 한외(限外) 여과, 초(超) 여과 등의 여과, 농축, 건조 등의 처리를 더 실시하거나, 생리학적, 혹은, 제제학적(製劑學的)으로 허용되는 적당한 성분을 첨가 혼합하는 등으로 해서, 액상, 고형상, 분말상, 페이스트상, 겔상, 반고형상, 유액상(乳液狀), 현탁상(懸濁狀) 등의 적당한 형태로서 이용하는 것도 자유이다. 농축이나 건조에는, 통상적인 식품 공업, 화장품 공업, 의약품 공업 등에서 관용의 방법, 예를 들면, 진공 농축, 정밀막(精密膜) 농축, 역침투막 농축, 한외 여과 농축, 진공 건조, 동결 건조, 분무 건조 등을 적당히 조합해서 이용할 수 있다. 쪽풀 추출물을 건조할 경우는, 상기, 쪽풀 추출물을 그대로 건조할 수도 있지만, 사이클로덱스트린(cyclodextrin), 환상(環狀) 4당, 환상 5당 등의 환상 당질, α,α-트레할로오스(trehalose), α,α-트레할로오스의 당질 유도체나 이들을 함유하는 당질을 부형제(賦形劑)·안정제로서 사용하는 것이 바람직하고, 특히, 사이클로덱스트린이 비교적 소량의 첨가로, 균질한 분말을 조제할 수 있기 때문에 바람직하다.

이렇게 하여 얻어지는 쪽풀 추출물은, 멜라닌 생성 억제 작용, 엘라스타아제 활성 저해 작용, 항노화 작용, 리파아제 활성 저해 작용 및 피지선으로부터의 피지 분비 조절 작용을 가질 뿐만 아니라, 적어도, (1) 악성 종양, 심근 경색, 뇌졸중, 류머티즘, 생활 습관병(성인병), 신장장해, 치질 등의 질병이나, 스트레스, 노화의 원인이 되는 활성 산소나 과산화 지질에서 유래하는 생체 내의 라디칼을 포착하는 성질, (2) 인터페론-γ 및 인터류킨(Interleukin)-10을 포함하는, 1형 헬퍼 T세포(Th1)와 2형 헬퍼 T세포(Th2)의 생체에 있어서의 밸런스의 결정에 관여하는 사이토카인(cytokine)의 면역 담당 세포에 의한 산생(産生)을 조정하고, 생체에 있어서의 그 밸런스가 본래 있어야 할 정상적인 상태가 되도록 조정함으로써, 그 밸런스의 이상(異常)에 기인하는, 자기 면역 질환, 간장장해, 신장장해, 췌장장해, 이식편대숙주병(移植片對宿主病)(Graft-Versus-Host Disease: GVHD) 등의 제(諸) 질환 을 치료·예방하는 성질, 및, (3) 자외선, 사이토카인이나 내독소(內毒素)의 자극 등에 의해 유도되는, 생체 내의 세포에 의한 일산화 질소 합성 효소나 프로스타글란딘(prostaglandin) 합성 효소의 활성 발현(發現)을 억제하고, 그 효소의 작용에 의한 일산화 질소나 프로스타글란딘 E₂의 생성을 억제함으로써, 이들 물질의 자극에 기인하는 멜라노사이트(melanocyte)에서의 멜라닌 합성이 억제되어서 미백 작용을 발휘할 뿐만 아니라, 생체 내에서의 과잉 일산화 질소나 프로스타글란딘 E₂가 관여하는, 자기 면역 질환, 알레르기성 질환, 염증성 질환, 악성 종양, 신장장해, 폐장해 등의 제 질환을 치료·예방하는 작용 등을 구비하고 있다. 또한, 이 쪽풀 추출물은, 그램 양성 세균, 그램 음성 세균, 진균(眞菌), 바이러스 등의 미생물에 의한 감염이나, 단백질, 유기 화합물, 금속 등의 생체에 있어서의 이물의 침입 내지는 접촉, 더욱이, 종양의 발생 등에 의해 야기되는 염증을 수반하는 생체 조직의 장해에 대하여, 종양 괴사 인자(TNF), 인터페론-γ나 인터류킨-1을 포함하는 염증성 사이토카인의 산생의 억제 등을 통해서 그 염증을 억제하도록 생체 기능을 조정하는 성질을 발휘할 수 있다. 또한, 이 쪽풀 추출물은, 거기에 포함되는 트립탄트린을 비롯한 유용 성분이, 치아의 표면이나 치주병 포켓에 존재하는 포르피로모나스 긴기발리스(Prophyromonas gingivalis; 이하에 「P. gingivalis」라고 약기하는 경우가 있다.)를 비롯한 치주병 균이나 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans; 이하에 「S. mutans」라고 약기하는 경우가 있다.) 등의 충치 균에 대하여, 강한 정균(靜菌) 작용 및/또는 살균 작용을 나타내기 때문에, 구강용 외용제에 사용하 면, 잇몸의 붓기나 염증을 억제하여, 구강 내의 출혈을 억제하고, 구강 내의 플라크(plaque) 컨트롤을 향상하여, 치주병이나 충치를 예방, 개선할 수 있으므로, 나아가서는, 오연성(誤嚥性) 폐렴이나 구강 내의 세균에서 기인하는 폐렴, 게다가, 신장염, 패혈증, 균혈증(菌血症), 세균성 심막원(心膜圓), 동맥 질환, 저체중아 출산, 당뇨병, 식도암 등의 발생 위험을 저감할 수 있다. 따라서, 본 발명의 쪽풀 추출물은, 멜라닌 생성 억제제, 엘라스타아제 활성 저해제, 노화 방지제, 리파아제 활성 저해제 및/또는 피지선으로부터의 피지 분비 조절제로서 뿐만 아니라, 건강한 자 및 병상 자에 있어서, 무좀균이나 아크네(acnes) 균을 비롯한 미생물에 대한 항균 작용, 구내염, 피부염, 습진이나 피부병 등의 피부 질환 등에 대한 항염증 작용, 항노화 작용, 항치주병 작용, 항충치 작용, 활성 산소 제거 작용, 라디칼 포착 작용, 사이토카인의 산생 조정 작용 내지는 산생 저해 작용, 일산화 질소 합성 효소의 발현 억제 작용, 프로스타글란딘 합성 효소의 활성 억제 작용 및/또는 생체 기능 조정 작용을 온화하게 발휘하기 위한 제제(製劑) 등으로서, 화장품, 의약품, 의약 부외품 등의 피부 외용제는 물론, 음식품, 사료, 모이 사료, 펫 푸드(pet food), 잡화 등의 제조 원료로서도 유리하게 이용할 수 있다. 또한, 본 발명의 쪽풀 추출물은 모유두(毛乳頭) 세포의 증식 촉진 효과가 우수하므로, 육모제(育毛劑)의 유효 성분으로서 이용할 수 있을 뿐만 아니라, 모근(毛根)을 이식할 때에, 두피(頭皮)로부터 절제한 모근을, 이 쪽풀 추출물을 함유하는 용액 침지(浸漬) 처리 후, 두피에 이식함으로써, 이식한 모근의 두피에의 착생률(着生率)을 향상시킬 수 있다.

본 발명의 쪽풀 추출물의 피부 외용제에의 배합량은, 쪽풀 추출물의 소기의 작용 효과가 발휘되는 양이라면, 특히 한정되지 않고, 예를 들면, 추출물의 작용의 강도나 약제의 형태에 맞춰서 적당히 설정하면 좋지만, 보통, 피부 외용제의 전체 질량에 대하여, 보통, 추출물 고형분 환산으로 0.0005％ 내지 30％이며, 0.005％ 내지 10％가 바람직하고, 0.05％ 내지 10％로 하는 것이 특히 바람직하다. 0.0005％보다 낮은 농도에서는 소기의 효과를 얻을 수 없고, 30％ 이상 배합해도, 그 효과가 증대하는 일은 없으며, 조성물의 형태에 따라서는, 물성(物性)에 영향을 미치는 경우가 있다.

또한, 본 발명의 쪽풀 추출물은, 미백 작용을 갖는 그 밖의 성분의 1종 또는 2종 이상과 조합해서 피부 외용제에 사용함으로써, 그 멜라닌 생성 억제 작용, 엘라스타아제 활성 저해 작용, 리파아제 활성 저해 작용 및/또는 항노화 작용을 상승적으로 증강할 수 있을 뿐만 아니라, 항산화 작용, 항염증 작용, 항균 작용 등의 쪽풀 추출물이 갖는 기지(旣知)의 생리 활성도 증강할 수 있다. 이 쪽풀 추출물 이외의 미백 작용을 갖는 다른 성분은, 미백 작용을 갖고, 쪽풀 추출물의 생리 활성을 증강할 수 있는 것이라면, 어느 것이라도 좋고, 그 기원이나 제조 방법도 특히 제한은 없지만, 예를 들면, 구체 예로서, L-아스코르브산이나 그 유도체 및 그것들의 염류, 알콕시 살리실산류 및 그 염류, 하이드로퀴논(hydroquinone)의 배당체 및 그 유도체, 트라넥사믹산(tranexamic acid)이나 그 유도체 및 그것들의 염류, 레조르신(resorcin)의 유도체, 코지산이나 그 유도체 및 그것들의 염류, 엘라그산(ellag acid)이나 리놀레산(linoleic acid) 및 그것들의 염류, 캐모마일 추출물, 테트라히드로쿠르쿠미노이드(tetrahydro-curcuminoid) 등을 들 수 있다. 쪽풀 추출물의 이들 생리 활성을 증강하는 효과의 강도의 점에서 보면, 아스코르브산이나 그 유도체, 및, 그것들의 염류가 바람직하고, L-아스코르브산 2-글루코시드가 특히 바람직하다.

쪽풀 추출물과 병용되는 이들 미백 작용을 갖는 다른 성분의 1종 또는 2종 이상을 사용한 경우의, 피부 외용제에의 배합량은, 제제학적인 문제가 없는 한, 특히 제한은 없고, 보통, 그것들의 합계로, 피부 외용제의 전체 질량에 대하여 0.001％ 내지 20％가 이용된다. 배합량이 0.001％ 미만에서는 피부 외용제의 미백 효과의 증강 효과가 모자라게 되는 경향이 있으며, 반대로, 20％를 초과해서 배합해도 효과의 증가는 실질상(實質上) 바랄 수 없고, 피부 외용제에의 배합도 어렵게 되는 경향이 있다. 또한 바람직한 배합량은 0.01％ 내지 10％, 특히 바람직하게는 0.1％ 내지 10％이다. 또한 캐모마일 추출물의 경우는, 그 고형물로 환산한 양이다.

본 발명에서 사용하는 L-아스코르브산 및 그 유도체로서는, 특히 한정되지 않는다. 구체적으로는, 예를 들면, L-아스코르브산이나, 그 유도체의 L-아스코르브산 모노스테아레이트(monostearate), L-아스코르브산 모노팔미테이트(monopalmitate), L-아스코르브산 모노올레이트(monooleate), L-아스코르브산 디스테아레이트, L-아스코르브산 디팔미테이트, L-아스코르브산 디올레이트 등의 L-아스코르브산 알킬 에스테르; L-아스코르브산 인산 에스테르, L-아스코르브산 인산 에스테르 마그네슘염, L-아스코르브산 인산 에스테르 나트륨염 등의 L-아스코르브산 인산 에스테르 및 그 염; L-아스코르브산 황산 에스테르 및 그 염; L-아스코르 브산-2-글루코시드를 바람직한 예로 하는 L-아스코르브산-2-글루코시드, 이들의 아실화(acylation) 유도체 등을 들 수 있다. 또한, 이들의 나트륨염, 칼륨염, 마그네슘염, 칼슘염과 같은 알칼리 금속염 또는 알칼리 토류(土類) 금속염 이외에, 암모늄염, 아미노산염 등의 염도 마찬가지로 사용할 수 있다. 또한, L-아스코르브산 인산 에스테르의 염인 경우에는, 알칼리 토류 금속염이 바람직하고, 특히 마그네슘염이 바람직하다. 본 발명에서 사용하는 L-아스코르브산의 유도체는, 피부 외용제에 배합했을 때의 안정성의 점에서는, L-아스코르브산 알킬 에스테르, L-아스코르브산 인산 에스테르 및 그 염류, L-아스코르브산 황산 에스테르 및 그 염류, L-아스코르브산-2-글루코시드나 이들의 염류로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상인 것이 바람직하다.

본 발명에서 사용하는 알콕시 살리실산류는, 살리실산의 3위(位), 4위 또는 5위의 어느 수소 원자가 알콕시 기(基)로서 치환된 것을 말한다. 상기 치환기인 알콕시 기로서는, 예를 들면 메톡시 기, 에톡시 기, 프로폭시 기, 이소프로폭시 기, 부톡시 기, 이소부톡시 기 등이 바람직한 예로서 들 수 있다. 특히, 메톡시 기 또는 에톡시 기가 바람직하다.

알콕시 살리실산류의 구체적인 화합물로서는, 3-메톡시 살리실산(2-hydroxy-3-methoxybenzoic acid), 3-에톡시 살리실산(2-hydroxy-3-ethoxybenzoic acid), 4-메톡시 살리실산(2-hydroxy-4-methoxybenzoic acid), 4-에톡시 살리실산(2-hydroxy-4-ethoxybenzoic acid), 4-프로폭시 살리실산(2-hydroxy-4-propoxybenzoic acid), 4-이소프로폭시 살리실산(2-hydroxy-4-isopropoxybenzoic acid), 4-부톡시 살리실산(2-hydroxy-4-butoxybenzoic acid), 5-메톡시 살리실산(2-hydroxy-5-methoxybenzoic acid), 5-에톡시 살리실산(2-hydroxy-5-ethoxybenzoic acid), 5-프로폭시 살리실산(2-hydroxy-5-propoxybenzoic acid) 등을 들 수 있다. 미백 등의 효과의 강도의 점에서는, 4-메톡시 살리실산이 특히 바람직하다.

본 발명의 피부 외용제에는 알콕시 살리실산을 염의 형태로 배합해도 좋다. 바람직한 염은 4-메톡시 살리실산염이다. 상기 염으로서는, 특히 한정은 되지 않지만, 예를 들면, 나트륨염, 칼륨염, 칼슘염과 같은 알칼리 금속염 또는 알칼리 토류 금속염 이외에, 암모늄염, 아미노산염 등의 염을 들 수 있다. 본 발명에 있어서는, 칼륨염이 바람직하고, 특히 4-메톡시 살리실산 칼륨이 바람직하다.

본 발명에서 이용되는 하이드로퀴논의 배당체(配糖體)로서는, 예를 들면, 하이드로퀴논 α-D-글루코오스, 하이드로퀴논 β-D-글루코오스, 하이드로퀴논 α-L-글루코오스, 하이드로퀴논 β-L-글루코오스, 하이드로퀴논 α-D-갈락토오스, 하이드로퀴논 β-D-갈락토오스, 하이드로퀴논 α-L-갈락토오스, 하이드로퀴논 β-L-갈락토오스 등의 6탄당(炭糖) 배당체, 하이드로퀴논 α-D-리보오스, 하이드로퀴논 β-D-리보오스, 하이드로퀴논 α-L-리보오스, 하이드로퀴논 β-L-리보오스, 하이드로퀴논 α-D-아라비노오스(arabinose), 하이드로퀴논 β-D-아라비노오스, 하이드로퀴논 α-L-아라비노오스, 하이드로퀴논 β-L-아라비노오스 등의 5탄당 배당체, 하이드로퀴논 α-D-글루코사민, 하이드로퀴논 β-D-글루코사민, 하이드로퀴논 α-L-글루코사민, 하이드로퀴논 β-L-글루코사민, 하이드로퀴논 α-D-갈락토사민, 하이드로퀴논 β-D-갈락토사민, 하이드로퀴논 α-L-갈락토사민, 하이드로퀴논 β-L-갈락 토사민 등의 아미노당 배당체, 하이드로퀴논 α-D-글루쿠론산(glucuronic acid), 하이드로퀴논 β-D-글루쿠론산, 하이드로퀴논 α-L-글루쿠론산, 하이드로퀴논 β-L-글루쿠론산, 하이드로퀴논 α-D-갈락투론산(galacturonic acid), 하이드로퀴논 β-D-갈락투론산, 하이드로퀴논 α-L-갈락투론산, 하이드로퀴논 β-L-갈락투론산 등의 우론산(uronic acid) 배당체 등을 들 수 있다.

본 발명에서 이용되는 하이드로퀴논의 배당체로서는, 미백 효과의 강도, 입수의 용이성, 안정성 등의 점에서는, 하이드로퀴논 β-D-글루코오스 및/또는 하이드로퀴논 α-D-글루코오스가 바람직하고, 하이드로퀴논 β-D-글루코오스(일반 명: 알부틴(arbutin), 이하 본 명세서에서는 「알부틴」이라고 한다.)가 특히 바람직하다.

또한, 하이드로퀴논 배당체의 유도체로서는, 아세틸화물 등의 에스테르체, 메틸화물 등의 에테르체 등을 들 수 있다.

본 발명에서 이용되는 트라넥사믹산 유도체로서는, 예를 들면, 트라넥사믹산의 이량체(二量體)(염산 트랜스-4-(트랜스-아미노메틸시클로헥산카르보닐)아미노메틸시클로헥산카르복시산 등), 트라넥사믹산과 하이드로퀴논의 에스테르체(트랜스-4-아미노메틸시클로헥산카르복시산4'－히드록시페닐에스테르 등), 트라넥사믹산과 겐티신산의 에스테르체(2-(트랜스-4-아미노메틸시클로헥실카르보닐옥시)-5-히드록시 벤조산 및 그 염 등), 트라넥사믹산의 아미드체(트랜스-4-아미노메틸시클로헥산 카르복시산 메틸아미드 및 그 염, 트랜스-4-(P-메톡시벤조일)아미노메틸시클로헥산 카르복시산 및 그 염, 트랜스-4-구아니디노메틸시클로헥산 카르복시산 및 그 염 등) 등을 들 수 있다.

본 발명에서 이용되는 레조르신의 유도체로서는, 예를 들면, 알킬 레조르시놀을 대표적인 예로서 들 수 있다. 구체적으로는, 4-알킬 레조르시놀이 바람직하고, 4-n-부틸 레조르시놀이 특히 바람직하다.

본 발명에서 이용되는 코지산이나 그 유도체의 기원이나 제법은 막론하고, 코지산 유도체로서는, 예를 들면, 코지산 알킬 에스테르 등의 코지산 에스테르류, 코지산 알킬 에테르 등의 코지산 에테르류, 코지산 배당체 등을 들 수 있다. 코지산 에테르류의 구체적인 예로서는, 2-메톡시 메틸-5-히드록시-4H-피란(pyran)-4-온, 2-에톡시메틸-5-히드록시-4H-피란-4-온, 2-벤조일옥시메틸-5-히드록시-4H-피란-4-온, 2-신나모일 옥시메틸(cinnamoyl oxymethyl)-5-히드록시-4H-피란-4-온, 2-페녹시메틸-5-히드록시-4H-피란-4-온 등을 들 수 있다. 또한, 코지산 에스테르류의 구체적인 예로서는, 코지산 팔미테이트, 코지산 스테아레이트 등을 들 수 있다. 또한, 코지산 배당체로서는, 코지산의 2위(位)의 -CH₂OH 기로 당류를 결합시킨 것을 들 수 있다. 상기 당류로서는, 예를 들면, 글루코오스, 갈락토오스, 만노오스(mannose), 프룩토오스(fructose), 소르보오스(sorbose) 등의 6탄 당류, 예를 들면 리보오스, 아라비노오스, 크실로오스, 릭소오스(lyxose), 크실루로오스 등의 5탄 당류, 예를 들면 글루코사민, 만노사민(mannosamine), 갈락토사민 등의 아미노 당류, 예를 들면 말토오스, 락토오스, 셀로비오스(cellobiose), 수크로오스 등의 2당류, 예를 들면 말토트리오스(maltotriose), 셀로트리오스(cellotriose) 등의 3당류 등을 들 수 있다. 그 중에서도, 미백 작용 등의 증강 효과가 강한 코지산이 바람직하다.

본 발명에서 이용되는 캐모마일 추출물은, 캐모마일로부터 적당한 용매에 의해 추출한 추출물을 이용할 수 있다. 또한, 본 발명의 효과를 손상하지 않는 범위에서, 농축, 탈취, 정제, 건조 등의 조작을 가하고 나서 이용할 수도 있다. 또한, 캐모마일 추출물은, 시중 판매품을 이용하는 것도 가능하며, 시중 판매품의 예로서는, 예를 들면, 「캐모마일 리퀴드」(일본국 이치마루 팔코스 가부시끼가이샤제, 고형분 함량 0.6％ 내지 1.2％)를 들 수 있다.

본 발명에서 이용되는 테트라히드로쿠르쿠미노이드류는, 예를 들면, 일본국 특개평6-128133호 공보, 유럽 특허 공개 제1108419호 명세서 등에 기재되어 있는 것을 들 수 있다. 구체적으로는, 예를 들면, 테트라히드로쿠르쿠민, 테트라히드로쿠르쿠민, 테트라히드로디메톡시쿠르쿠민, 테트라히드로쿠르쿠민, 테트라히드로비스디메톡시쿠르쿠민(tetrahydrobisdemethoxycurcumin) 등을 들 수 있다.

본 발명에서 이용되는 테트라히드로쿠르쿠미노이드 중에서는, 테트라히드로쿠르쿠민이 바람직하고, 시중 판매품으로부터 구할 수 있으며, 예를 들면, 「테트라히드로쿠르쿠미노이드」(SABINSA사제)를 들 수 있다.

본 발명에 의해 얻은 쪽풀 추출물이나, 쪽풀 추출물과 상기 미백 작용을 갖는 다른 성분과의 혼합물은, 그대로 피부 외용제로서 사용해도 좋고, 또한, 본 발명의 효과를 방해하지 않는 범위에서, 상기 이외의 제제학적 혹은 생리학적으로 허용되는 성분의 1종 또는 2종 이상을 배합할 수 있다. 이들 성분으로서는, 예를 들 면, 물, 알코올류, 기름 성분, 계면 활성제, 방부제(항균제), 향료, 보습제, 증점제, 수용성 고분자, 항산화제, 킬레이트제, pH 조정제, 발포제, 자외선 흡수·산란제, 분말체, 비타민류, 아미노산류, 항염증제, 해조 추출물, 의약품·의약 부외품·화장품·식품용의 첨가제, 의약용·의약 부외품용의 유효 성분 등을 들 수 있다.

구체적으로는, 기름 성분으로서는, 마카다미아 너트 오일, 피마자유, 올리브유, 카카오 오일, 동백 기름, 야자유, 목랍(木蠟), 호호바(hohoba) 오일, 포도씨 기름, 아보카도 오일 등의 식물 유지류, 밍크 오일, 난황 기름 등의 동물 유지류, 밀랍(蜜蠟), 경랍(鯨蠟), 라놀린(lanolin), 카르나우바 왁스(carnauba wax), 칸데릴라 왁스(candelila wax) 등의 왁스류, 유동 파라핀, 스쿠알렌(squalane), 마이크로 크리스탈린 왁스, 세레신 왁스, 파라핀 왁스, 바셀린 등의 탄화 수소류, 카프르산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아르산, 베헨산, 라놀린 지방산, 리놀레산, 리놀렌산, 라우린산, 미리스트산, 올레산, 이소스테아르산 등의 천연 및 합성 지방산류, 세타놀, 스테아릴 알코올, 헥실데카놀, 옥틸도데카놀(octyldodecanol), 라우릴 알코올, 카프릴 알코올, 미리스틸 알코올(myristyl alcohol), 세틸 알코올(cetyl alcohol), 콜레스테롤, 피토스테롤(phytosterol) 등의 천연 및 합성 고급 알코올류, 미리스트산 이소프로필, 팔미트산 이소프로필, 미리스트산 옥틸도데실, 올레산 옥틸도데실, 콜레스테롤 올레이트 등의 에스테르류 등을 예시할 수 있다.

계면 활성제로서는, 모노 라우린산 소르비탄, 모노 팔미트산 소르비탄, 세스키올레산 소르비탄, 트리올레산 소르비탄, 모노 라우린산 폴리옥시에틸렌 소르비탄, 모노 스테아르산 폴리옥시에틸렌 소르비탄, 폴리에틸렌 글리콜 모노올레이트, 폴리에틸렌 글리콜 알킬레이트, 폴리옥시에틸렌 알킬에테르, 폴리글리콜 디에테르, 라우로일 디에탄올 아미드(lauroyl diethanol amide), 지방산 이소프로판올 아미드, 말티톨 히드록시 지방산 에테르, 알킬화 다당(多糖), 알킬 글루코시드, 슈거 에스테르 등의 비 이온성 계면 활성제, 친유형(親油型) 글리세린 모노스테아레이트, 자기(自己) 유화형(乳化型) 글리세린 모노스테아레이트, 폴리글리세린 모노스테아레이트, 폴리글리세린 알킬레이트, 소르비탄 모노올레이트, 폴리에틸렌글리콜 모노스테아레이트, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트, 폴리옥시에틸렌 세틸에테르, 폴리옥시에틸렌화 스테롤, 폴리옥시에틸렌화 라놀린, 폴리옥시에틸렌화 밀랍, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 등의 논이온 계면 활성제, 스테아르산 나트륨, 팔미트산 칼륨, 세틸 황산 나트륨, 라우릴 인산 나트륨, 팔미트산 트리에탄올 아민, 폴리옥시에틸렌 라우릴 인산 나트륨, N-아실 글루탐산 나트륨, 팔미트산 나트륨, 라우린산 나트륨, 라우릴산 나트륨, 라우릴 황산 칼륨, 알킬 황산 트리에탄올아민 에테르, 터키레드오일(Turkey red oil), 리니아 도데실 벤젠(linear dodecyl bezene) 황산, 폴리옥시에틸렌 경화 피마자유 말레산, 아실메틸 타우린(acylmethyl tarurine) 등의 음이온 계면 활성제, 염화 스테아릴디메틸벤질 암모늄, 염화 스테아릴트리메틸 암모늄, 스테아릴트리메틸 암모늄 클로라이드, 염화 벤즈알코늄(benzalchonium chloride), 라우릴아민 옥사이드 등의 양이온 계면 활성제, 염산 알킬아미노에틸 글리신 액(液), 레시틴 등의 양성(兩性) 계면 활성제 등을 예시할 수 있다.

방부제(항균제)로서는, 벤조산 및 그 염류, 살리실산 및 그 염류, 소르빈산 및 그 염류, 디히드로아세트산 및 그 염, 파라옥시벤조산 알킬 에스테르를 비롯한 파라옥시벤조산 에스테르, 2,4,4'－트리클로로-2'－히드록시 디페닐 에테르, 3,4,4'－트리클로로카르바니리드, 헥사클로로펜(hexachlorophene), 염화 벤즈알코늄, 페녹시 에탄올(phenoxy ethanol), 히노키티올, 레조르신, 에탄올, 1,3-부틸렌 글리콜, 감광소(感光素) 201호 등을 예시할 수 있다. 그 중에서도, 1,3-부틸렌 글리콜은, 쪽풀 추출물에 대하여, 0.1％ 내지 40％, 바람직하게는, 1％ 내지 30％ 첨가함으로써, 미생물의 증식을 억제할 수 있을 뿐만 아니라, 앙금이나 이취의 발생도, 효과적으로 억제할 수 있다.

향료로서는, 벤즈알데히드(benzaldehyde), 벤질벤조에이트, 페닐아세트산, 산탈롤(santalol), 오이게놀(eugenol), 리리알, 리랄, 리날롤(linalol), 2-메틸-3-(4-메틸페닐)-프로판알, 무스크 케톤(musk ketone), 신나믹 알데히드(cinnamic aldehyde), 베르토픽스(vertofix), 메틸이오논, 게라닐 포메이트(geranyl formate), 이소E슈퍼, γ-운데카락톤(undecalactone), 헥실살리실레이트, 시스-3-헥세닐 살리실레이트(salicylate), 메틸디히드로 자스모네이트(methyldihydro jasmonate), 테트라히드로푸르푸릴3-메르캅토프로피오네이트, 코바놀(kovanol), 바닐린, 바니랄, 제라늄 오일, 페니로열 오일, 자작나무 오일, 아르모이제 오일 등을 예시할 수 있다. 이들 향료는, 본 발명의 쪽풀 추출을 비롯한 식물 추출물에서 특유한 이취를 차폐하므로, 본 발명의 피부 외용제에 있어서의 이취 개선을 위해서 유리하게 이용할 수 있다.

보습제로서는, 글리세린, 에리스리톨(erythritol), 크실리톨, 말티톨 글리세린, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 소르비톨, 말티톨, 폴리글리세린, 폴리에틸렌 글리콜, 디프로필렌 글리콜, 1,2-펜탄디올, 이소플렌 글리콜 등의 다가 알코올류, 글루코오스, 말토오스, 트레할로오스, 트레할로오스의 당질 유도체, 덱스트린, 사이클로덱스트린, 분기 사이클로덱스트린, 국제 공개 WOO2/10361호 명세서 등에서 개시한 사이클로{→6)-α-D-글루코피라노실-(1→3)-α-D-글루코피라노실―(1→6)-α-D-글루코피라노실-(1→3)-α-D-글루코피라노실―(1→}의 구조를 갖는 환상 4당(시클로니게로실니게로오스: Cyclonigerosylnigelose), 일본국 특개평2005-95148호 공보 등에 기재한 사이클로{→6)-α-D-글루코피라노실-(1→4)-α-D-글루코피라노실-(1→6)-α-D-글루코피라노실-(1→4)-α-D-글루코피라노실-(1→}의 구조를 갖는 환상 4당(시클로말토실말토오스: Cyclomaltosylmaltose), 국제 특허원 PCT/JP2005/17642호 명세서(국제 공개 WO2006/035725A1 참조)에 개시된 사이클로{→6)-[α-D-글루코피라노실-(1-4)]n-α-D-글루코피라노실-(1→}(n은 4 또는 5를 의미함)의 구조를 갖는 환상 5당이나 환상 6당 등 환상 당질 등의 당류, 아미노산, 펩티드, 락트산 나트륨, 피롤리돈카르복시산 나트륨 등의 NMF 성분, 크실로 글루칸, 퀸스 시드, 카라기난, 펙틴, 만난(mannan), 카드란, 갈락탄, 데르마탄 황산, 글리코겐, 케라탄 황산, 콘드로이틴, 콘드로이틴 황산, 무코이틴 황산, 케라토 황산, 로카스트빈 검, 석시노 글리칸, 카로닌산, 히알루론산, 헤파란 황산, 히알루론산 나트륨, 콜라겐, 무코 다당류 등의 수용성 고분자 물질, 디메틸 폴리실록산, 메티페닐실록산 등의 실리콘류, 유산균·비피더스균 등의 배양 상청(上淸) 등을 예시할 수 있다. 그 중에서도, 보습 효과 등이 강한, 트레할로오스, 트레할로오스의 당질 유도체, 환상 4당, 히알루론산이나 그 염류, 콘드로이틴 황산이나 그 염류로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 조합해서 사용하는 것이 바람직하다.

증점제(增粘劑)로서는, 아르긴산 나트륨, 크산탄 검, 규산 알루미늄, 마르멜로 종자 추출물, 아라비아 검, 히드록시에틸구아 검, 카르복시메틸구아 검, 구아 검, 덱스트란, 트래거캔스 검, 셀룰로오스, 전분, 풀루란(pullulan), 키틴, 키토산, 카르복시메틸 키틴, 한천 등의 천연 고분자 물질, 히드록시프로필 셀룰로오스, 메틸히드록시프로필 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 카르복시메틸 셀룰로오스, 히드록시 에틸 셀룰로오스, 가용성 전분, 분기 전분, 양이온화 셀룰로오스 등의 반합성 고분자 물질, 카르복시비닐 폴리머, 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 피롤리돈(polyvinyl pyrrolidone), 비닐 알코올·아세트산 비닐 공중합체 등의 합성 고분자 물질 등을 예시할 수 있다.

항산화제로서는, 디부틸히드록시 톨루엔, 부틸히드록시 아니솔, 몰식자산(沒食子酸) 프로필, L-아스코르브산, 비타민 E, 비타민 P, 카테킨류, 플라보노이드류나 이들의 유도체 등을 예시할 수 있다.

킬레이트제로서는, 에데트산 나트륨, 에틸렌디아민 4아세트산염, 피롤린산염, 헥사메타인산염, 시트르산, 타르타르산, 글루콘산 등을 예시할 수 있다.

pH 조정제로서는, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 트리에탄올 아민, 니트릴로 트리 에탄올, 시트르산, 시트르산 나트륨, 붕산, 붕사, 인산 수소 칼륨 등을 예시할 수 있다.

자외선 흡수·산란제로서는, 파라아미노 벤조산계 자외선 흡수제, 안트라닐 산계 자외선 흡수제, 살리실산계 자외선 흡수제, 계피산계 자외선 흡수제, 벤조페논계 자외선 흡수제, 당계(糖系) 자외선 흡수제, 3-(4'－메틸벤질리덴)-d-캠퍼, 3-벤질리덴-d,1-캠퍼, 우로카닌산(urocanic acid), 우로카닌산 에틸 에스테르, 2-페닐-5-메틸벤조키사졸, 2,2'－히드록시-5-메틸페닐벤조트리아졸, 2-(2'－히드록시-5'－t-옥틸페닐)벤조트리아졸, 2-(2'－히드록시-5'－메틸페닐벤조트리아졸, 디벤즈알라진, 디아니소일메탄(dianisoylmethane), 4-메톡시-4'－t-부틸디벤조일메탄, 5-(3,3-디메틸-2-노르보르닐리덴)-3-펜탄-2-온, 2-히드록시-4-메톡시벤조페논, 옥틸디메틸파라아미노벤조에이트, 에틸헥실파라메톡시 사이나메이트, 산화 티탄, 카올린, 탈크 등을 예시할 수 있다.

L-아스코르브산 및 그 유도체 이외의 비타민류로서는, 비타민 A 및 그 유도체, 비타민 B₁ 및 그 유도체 비타민 B₂ 및 그 유도체, 비타민 B₆ 염산염, 비타민 B₆ 트리팔미테이트, 비타민 B₆ 디옥타노에이트, 비타민 B₁₂, 비타민 B₁₅ 및 그 유도체 등의 비타민 B류, α-토코페롤, β-토코페롤, γ-토코페롤, 비타민 E 아세테이트 등의 비타민 E류, 비타민 D류, 비타민 H, 판토텐산, 판테친(Pantethine), 비타민 F, 비타민 K, 루틴·헤스페리딘·나린진 등의 바이오 플라보노이드류나 그 유도체, 비타민 U, 페룰린산, γ-오리자놀(oryzanol), α-리포산, 오로트산, 코엔자임 Q1O 등, 그것들의 유도체를 예시할 수 있고, 그것들의 염류이어도 좋다.

아미노산류로서는, 글리신(glycine), 알라닌, 발린, 로이신, 이소로이신, 세린, 트레오닌, 페닐알라닌, 티로신, 아스파라긴, 글루타민, 타우린, 트립토판, 시 스틴(cystin), 시스테인, 메티오닌, 프롤린, 히드록시 프롤린, 아스파라긴산, 글루탐산, 아르기닌, 히스티딘, 리신, 카르니틴 및 그것들의 유도체 등을 예시할 수 있고, 그것들의 염류이어도 좋다.

항염증제로서는, 알란토인(allantoin) 또는 그 유도체인 알란토인, 알란토인아세틸-d1-메티오닌, 알란토인클로로히드록시 알루미늄, 알란토인디히드록시 알루미늄, 알란토인 폴리갈락투론산 등, 글리시레틴(glycyrrhetin) 또는 그 유도체인 글리시레틴산, 글리시리진산, 글리시레틴산 알란토인, 글리시레틴산 글리세린, 글리시레틴산 스테아릴, 스테아르산 글리시레티닐, 3-숙시닐옥시글리시레틴산2나트륨, 글리시리진산 디칼륨, 글리시리진산 모노 암모늄 등, 판토텐산(pantothenic acid), 판토테닐 알코올, 판토테닐에틸 에테르, 아세틸판토테닐에틸 에테르, 벤조일판토테닐에틸 에테르, 판토텐산 칼슘, 판토텐산 나트륨, 아세틸판토테닐에틸 에테르, 벤조산 판토테닐에틸 에테르 에스테르, 판테틴 등의 판토텐산의 유도체, 비타민 E, d－∂－토코페롤, d1-α-토코페롤, 아세트산 d1-α-토코페롤, 리놀레산 dl-α-토코페롤, 니코틴산 d1-α-토코페롤, 숙신산 d1-α-토코페롤 등의 비타민 E 유도체, L-아스코르브산, L-아스코르브산-2-글루코시드 등의 L-아스코르브산 글리코시드, L-아스코르브산 글리코시드의 아실화 유도체, 테트라헥사데칸산 아스코르브산, L-아스코르브산과 토코페롤이 인산 기(基)를 통해서 결합한 아스코르브산-토코페롤 인산 디에스테르 L-아스코르브산 황산 에스테르, 디팔미트산 아스코르빌, 팔미트산 아스코르빌, L-아스코르브산 스테아릴, 인산 L-아스코르빌, L-아스코르브산 에틸이나 그것들의 아실화 유도체 등의 L-아스코르브산의 유도체 및/또는 그것들의 알칼리 금속 혹은 알칼리 토류 금속의 염, 염산 피리독신(pyridoxin), 멘톨, 비오틴(biotin), 캠퍼(camphor), 테레핀유, 산화 아연, 아즐렌(azulen), 구아이아즐렌 및 그 유도체, 메페남산(mefenamic acid) 및 그 유도체, 페닐부타존(phenylbutazone) 및 그 유도체, 인도메타신(indometacin) 및 그 유도체, 이부프로펜(ibuprofen) 및 그 유도체, 케토프로펜(ketoprofen) 및 그 유도체, ε-아미노카프론산, 디클로페낙 나트륨(sodium diclofenac), 디펜히드라민(diphenhydramine) , 트라넥사믹산 및 그 유도체, 덱사메타존(dexamethasone), 코르티존(cortisone) 및 그 에스테르, 히드로코르티존 및 그 에스테르, 프레드니존(prednisone), 프레드니조론 등의 부신피질 호르몬, 항히스타민제, 영실, 이부트라노오, 울금, 고추나물, 황벽나무, 감초, 금은화, 크레송, 컴프리, 오갈피, 샐비어, 자근, 백화나무, 차, 토우 금잔화, 딱총나무, 포황(蒲黃), 무환자나무, 유칼리 엑스, 브로콜리, 당귀, 비파나무잎, 차조기, 캐모마일, 쑥, 알로에, 인삼, 황벽나무가지, 소귀나무가지, 아선약(阿仙藥), 산수국, 알테아(althea), 아르니카(arnica), 에키네시아(echinacea), 연명초, 황금, 대맥, 세인트 존스 워트(St. John's wort), 오렌지, 쥐오줌풀, 로마 캐모마일, 사철쑥, 오이, 치자나무, 얼룩조릿대, 겐티아나(gentiana), 이질풀, 우엉, 컴프리, 산초, 차조기, 보리수, 작약, 적설초, 서양노간주나무, 서양톱풀, 서양박하, 천궁, 쓴풀, 세이지, 상백피(桑白皮), 대추, 타임(thyme), 동과자(冬瓜子), 토우 금잔화, 도인(桃仁), 약모밀, 양지꽃류, 강근, 파슬리, 박하, 쐐기풀, 백단향, 비파, 부처스 블룸(butcher's broom), 포도, 잇꽃, 모란, 보리수, 마로니에, 복숭아, 도깨비부채, 쑥, 라벤더, 로즈메리, 비파, 당근 및 당귀 등의 식물 또는 식물에서 유래하는 성분 등을 예시할 수 있다.

해조 추출물로서는, 갈조(褐藻), 홍조(紅藻), 녹조, 남조(藍藻) 등으로부터의 추출액이 있으며, 구체적으로는 다시마, 참다시마, 미역, 녹미채, 우뭇가사리, 산호말, 팔마리아(palmaria), 진두발, 김, 파래, 구멍갈파래, 아스코필룸(ascophyllum), 푸쿠스족의 녹갈색 갈조, 큰실말, 오키나와 큰실말, 히만탈리아 등으로부터의 추출물을 예시할 수 있다. 거머리말 등의 수성 식물로부터의 추출물도 이것에 포함된다.

본 발명의 피부 외용제에는 상기 성분 이외에, 혈행(血行) 촉진 작용을 갖는 물질, 수렴 작용을 갖는 물질, 주름 억제 작용을 갖는 물질, 세포 부활 작용을 갖는 물질, 항노화 활성을 갖는 물질, 육모(育毛) 활성을 갖는 물질, 발모(發毛) 활성을 갖는 물질 및 경피(經皮) 흡수 촉진 작용을 갖는 물질 등 임의의 성분의 1종 또는 2종 이상을 적당히 조합해서, 피부 외용제에 배합할 수 있다. 그 구체적인 예로서는, 예를 들면, 프로폴리스, 차이니즈 파슬리를 비롯한 허브나 로열 젤리 등의 쪽풀 이외의 식물이나 동물의 성분이나, 그것들에서 유래하는 추출물 등의 성분, 해양 심층수, 간수, 간수 성분 등의 미네랄류, 항생 물질, 인산 수소 칼슘, 유기 변성 몬모릴로나이트, 규산, 무수 규산, 규산 마그네슘, 운모, 벤토나이트, 티탄 피복 운모, 옥시염화 비스무트, 산화 지르코늄, 산화 마그네슘, 산화 아연, 탄산 칼슘, 탄산 마그네슘, 산화철, 군청(群靑), 감청(紺靑), 산화 크롬, 수산화 크롬, 카라민, 제올라이트 및 카본 블랙 등의 무기 분말, 폴리아미드, 폴리에스테르, 폴 리에틸렌, 폴리프로필렌, 폴리스티렌, 폴리우레탄, 비닐 수지, 요소 수지, 페놀 수지, 불소 수지, 규소 수지, 아크릴산 수지, 멜라민 수지, 에폭시 수지, 폴리카보네이트 수지, 디비닐벤젠·스티렌 공중합체, 상기 화합물의 단량체의 2종 이상으로 이루어지는 공중합체, 실크를 비롯한 단백질이나 경단백질, 셀룰로오스 등의 유기 분말, 잇꽃 색소, 치자나무 색소, 자근 색소, 코치닐(cochineal) 색소를 비롯한, 안트라퀴논계, 안토시아닌계, 캘콘(chalcones)계, 카르테노이드계의 색소 등의 천연 착색료, 감광소 101호, 감광소 201호, 감광소 301호, 감광소 401호 등의 감광소, 적색 201호, 적색 202호, 적색 204호, 적색 205호, 적색 220호, 적색 226호, 적색 228호, 적색 405호, 귤색 203호, 귤색 204호, 황색 204호, 황색 401호 및 청색 404호 등의 유기 안료 분말, 적색 3호, 적색 104호, 적색 106호, 적색 227호, 적색 230호, 적색 401호, 적색 505호, 귤색 205호, 황색 4호, 황색 5호, 황색 202호, 황색 203호, 녹색 3호 및 청색 1호의 지르코늄, 바륨 또는 알루미늄 레이크 등의 유기 안료 분말, 상기 유기 분말에 자근 색소, 잇꽃 색소 등의 천연 착색료나 유기 합성 색소 등의 착색료, 당(糖) 전이(轉移) 루틴, 당 전이 헤스페리딘, 당 전이 글리시리진, 당 전이 나린진, 에스큘레틴, 에스큘린, 당 전이 에스큘린 등의 기능성 성분을 담지(擔持)한 분말체 등을 들 수 있다.

또한, 이들 물질의 피부 외용제에의 배합량에 대해서는, 대상으로 하는 피부 외용제의 물성 및/또는 본 발명의 작용 효과를 방해하지 않는 한 특히 제한은 없고, 그 목적에 따라서, 적당히 조정하면 좋으며, 보통은, 피부 외용제의 총 질량 중의, 0.0001％ 내지 99％의 범위이면 좋고, 바람직하게는 0.001％ 내지 70％의 범 위, 더욱 바람직하게는 0.01％ 내지 30％의 범위가 적당하다.

본 발명의 피부 외용제의 제형은 임의이며, 예를 들면, 분말, 고형, 화장수 등의 가용화계(可溶化系), 유액(乳液), 크림, 페이스트 등의 유화계, 또는, 연고, 분산액 등의 임의의 제형을 취할 수 있다.

본 발명의 피부 외용제라는 것은, 화장품, 의약품, 의약 부외품(部外品)으로서, 피부나 두피 등의 외피 및 구내(口內)에 적용되는 외용제를 지칭하며, 예를 들면, 연고, 크림, 유액, 로션, 에센스, 젤리, 젤, 팩, 마스크, 목욕용제, 가루 치약, 윤성(潤性) 치약, 치약, 물 치약, 약용 치약, 입안 청량제, 입안 청량 필름, 마우스 워셔, 양치질 약 등을 말하고, 잇몸의 팽팽함이나, 탄성, 색을 유지할 목적으로 사용되는 츄잉 검이나 엿 등의 경구(經口) 섭취용의 조성물도 포함한다.

이어서 실험 예를 제시해서 본 발명의 쪽풀 추출물이 갖는 작용 효과를 더욱 상세히 설명한다. 또한, 이하의 실험에서는, 특별히 명시하지 않는 한, 모두, 후술하는 제1실시예의 방법에 준해서 조제한, 1,3-부틸렌 글리콜을 첨가하지 않은 쪽풀 추출물을 사용하였다.

<실험 1: 멜라닌 생성에 미치는 여뀌과 식물 추출물의 영향(in vitro 미백 효과 시험 1)>

멜라닌 생성에 미치는 여뀌과 식물 추출물의 영향을 조사하는 실험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, 마우스 B16 멜라노마 세포 2.2×10⁵개를, 통상적인 방법에 의해 24시간 배양 후, 배지(培地)에, 쪽풀 추출물을 1.25％ 혹은 2.5％가 되도록 첨가하고, 72시간 더 배양하였다. 생 세포 수를 측정한 후, 세포를 모세관(capillary)에 채워넣어서 색조를 관찰하였다. 또한, 후술하는 제1실시예와 동일한 방법으로 조제한, 감제풀 추출물, 메밀 또는 마디풀(Polygonum aviculare) 추출물 중 어느 것을 2.5％가 되도록 첨가한 배지, 혹은, 양성(陽性) 대조로서 2.5mM이 되도록 코지산을 첨가한 배지를 이용해서, 쪽풀 추출물과 마찬가지의 방법으로 B16 멜라노마 세포의 배양을 실행하고, 그 색조를 관찰하였다. B16 멜라노마 세포의 흑화(黑化) 정도를 이하에 나타내는 판정 기준에 의해 평가하고, 그 결과를 표 1에 나타낸다.

(판정 기준)

약제 없는 컨트롤의 흑화도(黑化度)에 대하여

-: 변화 없음

±: 조금 흑화를 억제함

+: 다소 흑화를 억제함

++: 상당히 흑화를 억제함

+++: 완전히 흑화를 억제함

배지의 조성	판정
배지만일 경우	-
1.25% 쪽풀 추출물 함유 배지	＋
2.5％ 쪽풀 추출물 함유 배지	＋＋
2.5％ 감제풀 추출물 함유 배지	±
2.5％ 메밀 추출물 함유 배지	±
2.5％ 마디풀 추출물 함유 배지	±
2.5mM 코지산 함유 배지	＋

표 1로부터 명확한 바와 같이, 시험에서 사용한 1.25％ 및 2.5％의 쪽풀 추출물 함유 배지로 배양한 세포는, 양성 대조 물질로서 설치한 2.5mM 코지산과 동등 혹은 더욱 강한 멜라닌 생성 억제 작용을 나타냈다. 한편, 쪽풀 추출물과 동등한 농도의 감제풀 추출물, 메밀 추출물 혹은 마디풀 추출물에서는, 조금 흑화의 억제가 나타났을 뿐이며, 동일한 여뀌과의 식물 중에서도, 쪽풀 추출물은, 멜라노사이트(melanocyte)에 직접 작용해서, 매우 강한 멜라닌 생성 억제 작용을 갖는 것이 밝혀졌다. 또한, 이들 농도의 쪽풀 추출물에서는, 세포 독성은 나타나지 않았다. 또한, 쪽풀 추출물은, 티로시나아제(tyrosinase) 활성 자체는 저해하지 않으므로, 쪽풀 추출물에 의한 멜라닌 생성 억제는, 티로시나아제 합성이 억제되어 있기 때문이라고 생각된다. 또한, 실험 1에서 사용한 쪽풀 추출물은, 최종 농도가 0.33μg/ml의 트립탄트린(tryptanthrin)을 함유하고 있었다. 실험 1과 동일한 방법으로, 배지에 쪽풀 추출물을 대신해서, 0.5μg/ml 이상의 트립탄트린을 첨가(0.5μg／ml의 농도에서는 B16 멜라노마에 대한 세포 독성은 나타나지 않음)하면, 동일 양의 트립탄트린을 함유하는 쪽풀 추출물보다는 약하면서, 멜라닌 생성이 억제된 것으로부터, 쪽풀 추출물 중의 미백 작용을 갖는 물질의 하나가 트립탄트린인 것을 말하고 있다.

<실험 2: 멜라닌 생성에 미치는 쪽풀 추출물 및 그 밖의 미백 작용을 갖는 성분의 영향(in vitro 미백 효과 시험 2)>

멜라닌 생성에 미치는 쪽풀 추출물 및 그 밖의 미백 작용을 갖는 성분의 영향을 조사하는 실험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, 마우스 B16 멜라노마 세포를 24시간 배양 후, 시험 시료를 표 2의 미백 작용을 갖는 성분의 배합량(％)이 되도록, 단독으로, 혹은, 1.25％의 쪽풀 추출물과 동시에 첨가하고, 72시간 더 배양하였다. 생 세포 수를 측정 후, 세포를 모세관에 채워넣어서 색조를 관찰하였다. 그 결과를 표 2에 나타낸다. 또한, 효과의 판정은, 실험 1과 동일한 판정 기준에 근거해 시행하였다. 또한, 이 실험 계에 쪽풀 추출물을 1.25％ 첨가해서 배양한 경우의 효과 판정은, 「+」가 되었다.

미백 작용을 갖는 성분	배합량 (%)	판정
미백 작용을 갖는 성분	배합량 (%)	쪽풀 추출물 배합 없음	쪽풀 추출물 1.25% 배합
L-아스코르브산 나트륨	3.0	+	+++
4-메톡시살리실산 칼륨	1.0	+	+++
코지산	1.0	+	+++
알부틴	5.0	+	+++
트라넥사믹산	1.0	±	++
엘라그산	0.5	±	++
4-n-부틸레조르시놀	3.0	+	+++
리놀레산	0.5	±	++
캐모마일 엑기스*	1.0	+	+++
테트라히드로쿠르쿠민	0.5	±	++

*: 에탄올/물(8/2; 질량비) 추출물(배합량은 건조물 환산량)

표 2로부터 명확한 바와 같이, L-아스코르브산 나트륨, 4-메톡시살리실산 칼륨, 코지산, 알부틴, 트라넥사믹산, 엘라그산, 4-n-부틸레조르시놀, 리놀레산, 캐모마일 엑기스, 및 테트라히드로쿠르쿠민에 쪽풀 추출물을 병용한 시험 시료는, 모두, 상승적으로 흑화 억제 효과를 발휘하는 것이 나타났다.

<실험 3: 멜라닌 생성에 미치는 쪽풀 추출물 및 그 밖의 미백 작용을 갖는 성분의 영향(in vivo 미백 효과 시험)>

멜라닌 생성에 미치는 쪽풀 추출물 및 그 밖의 미백 작용을 갖는 성분이 미치는 영향을 조사하는 시험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, 색흑(色黑), 기미, 주근깨를 가진 피험자(被驗者), 1군(群)을 20명으로 해서, 11군에 대해, 하기에 나타내는 어느 하나의 처방의 시험 화장수를, 조석(朝夕), 3개월간, 매일 안면에 도포하고, 3개월 후에 그 미백 효과를 조사하였다.

(시험 화장수의 처방)

하기 성분 (3), (4) 및 (9) 내지 (11)을 혼합 용해한 용액과, 성분 (1), (2), (5), (6), (7), (8) 및 (11)을 혼합 용해한 용액을 혼합해서, 균일하게 하여, 시험 화장수를 조제하였다. 또한, (6)의 「다른 미백 작용을 갖는 성분」으로서, 표 3에 나타내는 어느 1종을, 표 3에 기재한 배합량으로 첨가하였다. 이것들의 시험 화장수를 사용해서 미백 효과를 평가하였다. 그 결과를 모두 표 3에 나타낸다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타낸다)

(1) 글리세린: 5

(2) 1,3-부틸렌 글리콜: 6.5

(3) 폴리옥시에틸렌(20E.0.)소르비타모노라우릴산 에스테르: 1.2

(4) 에틸 알코올: 8

(5) 쪽풀 추출물: 1

(6) 기타의 미백 작용을 갖는 성분(표 3에 기재): 표 3에 기재한 양

(7) 락트산: 0.05

(8) 락트산 나트륨: 0.1

(9) 파라메톡시 신남산-2-에틸헥실: 0.1

(10) 방부제: 적량

(11) 향료: 적량

(12) 정제수: 잔량

비교를 위해서, 상기 실험 3의 시험 화장수의 처방 중, (5)의 쪽풀 추출물을 갖지 않고, 또한, (6)의 약제로서, 표 3에 나타내는 미백 작용을 갖는 성분의 어느 1종을, 표 3에 기재한 배합량을 첨가하는 이외는, 실험 3과 완전히 동일한 배합 처방, 배합량, 제조 방법에 의해, 비교 화장수를 조제하고, 실험 3의 시험 화장수와 동일한 방법에 의해, 그 미백 효과를 평가하였다. 그 결과를 모두 표 3에 나타낸다.

	다른 미백 작용을 갖는 성분	다른 미백 작용을 갖는 성분의 배합량(%)	쪽풀 추출물의 배합량(%)	판정
시험 화장수1	L-아스코르브산-2-글루코시드	0.5	0.5	A
시험 화장수2	4-메톡시살리실산 칼륨	0.5	0.5	A
시험 화장수3	코지산	0.5	0.5	A
시험 화장수4	알부틴	0.5	0.5	A
시험 화장수5	트라넥사믹산	0.5	0.5	B
시험 화장수6	엘라그산	0.5	0.5	B
시험 화장수7	4-n-부틸레조르시놀	0.5	0.5	A
시험 화장수8	리놀레산	0.5	0.5	B
시험 화장수9	캐모마일 엑기스*	0.5	0.5	B
시험 화장수10	테트라히드로쿠르쿠민	0.5	0.5	B
비교 화장수1	쪽풀 추출물	0	1	B
비교 화장수2	L-아스코르브산-2-글루코시드	1	0	B
비교 화장수3	4-메톡시살리실산 칼륨	1	0	C
비교 화장수4	코지산	1	0	C
비교 화장수5	알부틴	1	0	C
비교 화장수6	트라넥사믹산	1	0	C
비교 화장수7	엘라그산	1	0	B
비교 화장수8	4-n-부틸레조르시놀	1	0	C
비교 화장수9	리놀레산	1	0	C
비교 화장수10	캐모마일 엑기스*	1	0	C
비교 화장수11	테트라히드로쿠르쿠민	1	0	C

*: 에탄올/물(8/2; 질량비) 추출물(배합량은 고형물 환산량)

시험 화장수 및 비교 화장수를 사용한 경우의 미백 효과 시험의 판정 기준 및 판정은 아래에 따라 실행하였다.

(판정 기준)

현저한 효과: 색소 침착이 대부분 눈에 띄지 않게 되었다.

유효: 색소 침착이 대단히 희미해졌다.

다소 유효: 색소 침착이 다소 희미해졌다.

무효: 변화 없음.

(판정)

A: 피험자 중 현저한 효과 또는 유효가 나타내는 비율(유효율)이 80％ 이상인 경우.

B: 피험자 중 현저한 효과 또는 유효가 나타내는 비율(유효율)이 50％ 이상 80％ 미만인 경우.

C: 피험자 중 현저한 효과 또는 유효가 나타내는 비율(유효율)이 30％ 이상 50％ 미만인 경우.

D: 피험자 중 현저한 효과 또는 유효가 나타내는 비율(유효율)이 30％ 미만인 경우.

표 3으로부터 명확한 바와 같이, 쪽풀 추출물과, L-아스코르브산-2-글루코시드, 4-메톡시살리실산 칼륨, 코지산, 알부틴, 트라넥사믹산, 엘라그산, 4-n-부틸레조르시놀, 리놀레산, 캐모마일 엑기스, 테트라히드로쿠르쿠민의 어느 1종을 병용한 시험 화장수(피부 외용제)를 사용한 경우의 미백 효과의 판정은 A 또는 B의 평가로 되었다. 이에 대하여, L-아스코르브산-2-글루코시드, 4-메톡시살리실산 칼륨, 코지산, 알부틴, 트라넥사믹산, 엘라그산, 4-n-부틸레조르시놀, 리놀레산, 캐모마일 엑기스, 테트라히드로쿠르쿠민의 어느 1종만을 배합한 비교 화장수에서의 미백 효과의 판정은 B 또는 C로 되어, 어느 다른 미백 작용을 갖는 성분에 대해서 보아도, 쪽풀 추출물을 병용했을 경우에 비해서, 1단계 이상 낮은 효과 판정으로 되었다. 이 결과는, 쪽풀 추출물과 다른 미백 작용을 갖는 성분을 배합한 피부 외용제는, 그 양자가 상승적으로 작용해서, 우수한 미백 작용을 발휘할 수 있다는 것을 말하고 있다.

<실험 4: 엘라스타아제 활성에 미치는 여뀌과 식물 추출물의 영향>

엘라스타아제 활성에 미치는 여뀌과 식물 추출물의 영향을 조사하는 실험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, 쪽풀 추출물(고형분 1.41％)과, 이것을 정제수로 3배로 연속 희석하고, 고형분 농도가, 14,100μg/ml, 4,700μg/ml, 1,570μg/ml, 520μg/ml, 170μg/ml, 60μg/ml 혹은 19μg/ml의 피험 시료를 조제하였다. 이 피험 시료 중 어느 50μl에, 20μM 합성 기질 N-Methoxysuccinyl-L-Alanyl-L-Alanyl-L-Prolyl-L-Valine-4-Methyl-Coumaryl-7-Amide(펩티드 인스티튜트사(PEPTIDE INSTITUTE, INC) 판매) 함유 0.2M 트리스 염산 완충액(pH 8.5, 1％ BSA 및 1M NaCl 함유) 25μl을 첨가하고, 여기에 0.048unit/ml 인간 호중구(neutrophil) 유래 엘라스타아제 함유 0.2M 트리스 염산 완충액 25μl를 더해서 교반하여, 37℃에서 60분간 반응시켰다. 그 후, 효소 반응의 분해 생성물인 4-nitroaniline의 생성량을, 형광 마이크로플레이트리더 풀루오로스캔 Ⅱ(BIO-TEK INSTRUMENT)로 형광 강도(Ex 355nm, Em 460nm)를 측정하였다. 또한, 엘라스타아제 활성의 저해율을 이하의 식에 따라서 산출하였다. 그 결과를 도 1에 나타낸다.

저해율(％）＝ {(A-B)/A}×100

A: 피험 시료 미첨가일 때의 형광 강도

B: 피험 시료 첨가일 때의 형광 강도

도 1에 나타내는 바와 같이, 쪽풀 추출물에, 농도 의존적인 엘라스타아제 활성 저해 작용이 나타났다. 또한, 실험 1에서 사용한 감제풀 추출물(고형분 1.65％), 메밀 추출물(고형분 1.37％) 혹은 마디풀 추출물(고형분 1.81％)을 이용해서 마찬가지의 실험을 실행하여, 사용한 엘라스타아제의 효소 활성을 50％ 억제하는 고형분의 농도를 쪽풀 추출물과 비교한 바, 쪽풀 추출물의 피험 시료의 농도는 1.11mg/ml로 계산된 것에 대해서, 이들 식물 추출물을 희석하지 않고 측정한 경우에서도, 엘라스타아제 활성 저해율은, 각각 12％, 13％ 및 25％로 낮고, 실험에 사용한 엘라스타아제의 활성을 50％ 저해하는 농도는 산출할 수 없었다. 이 결과는, 쪽풀 추출물이, 동일한 여뀌과의 감제풀, 메밀 혹은 마디풀의 추출물에 비해서, 강한 엘라스타아제 활성 저해 작용을 가지고 있는 것을 나타내고 있다. 이 결과는, 쪽풀 추출물을 함유한 피부 외용제가, 우수한 주름 발생 억제 효과를 가지고 있는 것을 말하고 있다.

<실험 5: 리파아제 활성에 미치는 쪽풀 추출물의 영향>

리파아제 활성에 미치는 쪽풀 추출물의 영향을 조사하는 실험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, 실험 4에서 사용한 쪽풀 추출물 및 그것을 희석한 피험 시료 중 어느 25μl와, 기질(基質)로서 0.1M 4-Methylumbelliferyloleate를 함유하는 Mcllvaine 완충액(pH 7.4, 0.1M 시트르산 9.15％ 및 0.2M Na₂HPO₄ 90.85％ 함유) 50μl를 혼합하고, 여기에 1unit/ml 리파아제 함유 Mcllvaine 완충액 25μl를 첨가해서 교반하여, 37℃에서 20분간 반응시켰다. 그 후, 1N HCl을 50μl 및 1M 시트르산 나트륨을 100μl 첨가해서 반응을 정지하고, 효소 반응의 분해 생성물인 4-Methylumbelliferon의 생성량을, 형광 마이크로플레이트 리더: 풀루오로스캔 Ⅱ(BIO-TEK INSTRUMENT)로 형광 강도(Ex 355nm, Em 460nm)를 측정하였다. 또한, 리파아제 활성의 저해율을 이하의 식에 따라서 산출하였다. 그 결과를 도 2에 나타낸다.

저해율(%) ＝ {1-(A-B)/(C-B)}×100

A: 피험 시료 첨가일 때의 형광 강도

B: Mcllvaine 완충액만의 형광 강도

C: 피험 시료 미첨가일 때의 형광 강도

도 2에 나타내는 바와 같이, 쪽풀 추출물에, 농도 의존적인 리파아제 활성 저해 작용이 나타났다. 이 결과는, 쪽풀 추출물을 함유한 피부 외용제가, 우수한 항아크네 효과를 가지고 있는 것을 말하고 있다.

<실험 6: SOD(super oxid dismutase) 양활성(樣活性)에 미치는 쪽풀 추출물의 영향>

SOD 활성에 미치는 쪽풀 추출물의 영향을 조사하는 실험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, 니트로블루 테트라졸륨(nitro-blue tetrazolium; NBT) 환원법을 원리로 하는 SOD 테스트 와코(와코 쥰야쿠)를 이용해서 시험을 실행하였다.

실험 4에서 사용한 쪽풀 추출물 및 그것을 희석한 피험 시료 중 어느 10μl와 0.24M NBT와 0.4M 크산틴을 함유하는 발색(發色) 시약 95μl를 혼합하고, 이것에 효소액(크산틴 옥시다아제) 95μl를 첨가해서, 37℃, 30분간 반응시켰다. 그 후, 반응 정지액(69mM 도데실 황산 나트륨) 100μl로서 효소 반응을 정지시키고, 마이크로플레이트 리더 EL-340(BIO-TEK INSTRUMENT)으로 OD 562nm의 흡광도(吸光度)를 측정하였다. 효소 대신에 정제수를 첨가한 샘플을 블랭크로 하고, 검체(檢體) 대신에 용매를 첨가한 샘플을 컨트롤로 해서, 이하의 산출 식에 의해 슈퍼옥사이드 음이온(0^2-) 소거율을 산출하였다. 그 결과를 도 3에 나타낸다.

0^2- 소거율(%) ＝ {(A-B)/A}×100

A: 컨트롤의 흡광도

B: 피험 시료 첨가일 때의 흡광도

도 3에 나타내는 바와 같이, 쪽풀 추출물에, 농도 의존적인 SOD 양활성(슈퍼옥사이드 음이온의 소거 활성)이 나타났다. 이 결과는, 쪽풀 추출물을 함유한 피부 외용제가, 우수한 항노화 억제 효과를 가지고 있는 것을 말하고 있다.

<실험 7: 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl 라디칼에 미치는 쪽풀 추출물의 영향>

1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(이하에, 「DPPH」라고 약기한다.) 라디칼에 미치는 쪽풀 추출물의 영향을 조사하는 실험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, 쪽풀 추출물(고형분 1.41％)과, 이것을 5mM 아세트산 완충액(pH 5.5)으로 3배에 연속 희석하고, 고형분 농도가, 14,100μg/ml, 4,700μg/ml, 1,570μg/ml, 520μg/ml, 170μg/ml, 60μg/ml 혹은 19μg/ml의 피험 시료를 조제하였다. 이 피험 시료 중 어느 50μl를, 1mM DPPH 에탄올 용액 100μl와 혼합, 교반하고, 실온에서 20분간 반응시켜, 마이크로플레이트 리더 EL-340(BIO-TEK INSTRUMENT)으로 OD 515nm의 흡광도를 측정하였다. 활성의 정도는, 이하의 식으로부터 구한 DPPH 라디칼 제거율(%)로 나타냈다. 그 결과를 도 4에 나타낸다.

DPPH 라디칼 제거율(%) ＝ {1-(A-B)/(C-B)}×100

A: 피험 시료 첨가일 때의 형광 강도

B: 아세트산 완충액만의 형광 강도

C: 피험 시료 미첨가일 때의 형광 강도

도 4에 나타내는 바와 같이, 쪽풀 추출물에, 농도 의존적인 DPPH 라디칼 제거 활성이 나타났다. 이 결과는, 쪽풀 추출물을 함유한 피부 외용제가, 우수한 항노화 효과를 가지고 있는 것을 말하고 있다.

<실험 8: 피부의 세포에 미치는 쪽풀 추출물의 영향>

실험 4 내지 실험 7로부터 명확한 바와 같이, 쪽풀 추출물은, 미백 작용 이외에도, 인간 피부의 노화나 주름의 발생 등에 영향을 미친다고 말해지고 있는 효소의 활성을 억제하는 효과를 갖는 것이 밝혀졌으므로, 인간의 피부에 미치는 영향을, 자원(自願) 피험자에 의한 패널 시험에 의해 확인하였다. 즉, 카르복시비닐 폴리머의 2％ 수용액 35질량부, 진한 글리세린 5질량부, 수산화칼륨의 10％ 수용액 1.8질량부, 펜틸렌 글리콜 3질량부, 후술하는 제1실시예의 방법에 준해서 조제한 쪽풀 추출물(고형분 농도 1％, 1,3-부틸렌 글리콜을 함유하지 않음)을 적량과 정제수 적량을 혼합하여, 쪽풀 추출물의 젤에의 배합량이, 표 4에 나온 농도가 되도록 시험용 젤을 조제하였다. 대조로서, 상기 배합의 쪽풀 추출물 50질량부 대신에 물을 사용한 대조용 젤을 조제하였다. 60명의 자원 피험자를 무작위로 10명씩 6군으로 나누고, 각군 10명에 대하여, 어느쪽인가의 농도의 쪽풀 추출물을 배합한 시험용 젤 1종과 대조용의 젤을, 그 상완(上腕)의 내측부의 상이한 장소에 1일 3회, 56일간 연속해서 도포하였다. 도포 최종일에, 미리, 자외선의 조사량(照射量)을 변경해서 조사(照射)하는 시험에 의해 확인한, 최소 홍반량(紅斑量)(각각의 피험자에 대하여, 조사 부위에 홍반을 유발하는 자외선의 최소 조사선량)의 2배량의 자외선을, 시험용 젤 및 대조용 젤을 도포한 부위에 조사하였다. 자외선 조사 24시간 후에, 시험용 젤과 대조용 젤을 도포한 개소에 대해서, 육안에 의한 홍반 발생의 정도와, 촉진(觸診)에 의해 피부 탄력성의 변화의 정도를 확인하였다. 젤 도포에 의한 효과의 유무 판정 기준 및 판정은 이하에 의해 실행하고, 그 결과를 표 4에 나타낸다.

(판정 기준)

<홍반>

현저한 효과: 시험용 젤을 도포한 개소의 홍반의 발생은 대부분 나타나지 않았다.

유효: 대조용 젤을 도포한 개소에 비해서, 홍반의 발생이 명확히 억제되었다.

효과 없음: 대조용 겔을 도포한 개소와 동등한 정도의 홍반이 발생하였다.

더욱 악화: 대조용 젤을 도포한 개소에 비해서, 홍반의 발생이 증강되었다.

<탄력성>

현저한 효과: 시험용 젤을 도포한 개소 쪽이, 탄력성이 높고, 피부의 두께도 증가하였다.

유효: 피부의 두께에 차이는 보이지 않지만, 시험용 젤을 도포한 부위 쪽이, 탄력성이 높다.

효과 없음: 대조용 겔을 도포한 개소와 차이가 나타나지 않는다.

더욱 악화: 대조용 젤을 도포한 개소에 비해서, 탄력성이 저하하였다.

(판정)

A: 피험자 중 현저한 효과 또는 유효를 나타내는 비율(유효율)이 80％ 이상인 경우.

B: 피험자 중 현저한 효과 또는 유효를 나타내는 비율(유효율)이 50％ 이상 80％ 미만인 경우.

C: 피험자 중 현저한 효과 또는 유효를 나타내는 비율(유효율)이 30％ 이상 50％ 미만인 경우.

D: 피험자 중 현저한 효과 또는 유효를 나타내는 비율(유효율)이 30％ 미만인 경우.

쪽풀 추출물의 배합량 (%)	판 정
쪽풀 추출물의 배합량 (%)	홍반의 정도	피부의 탄력성
50	A	A
5	A	A
0.5	A	B
0.05	B	B
0.001	C	C

표 4로부터 명확한 바와 같이, 쪽풀 추출물의 시험용 젤에의 배합량이 0.05％ 이상(고형물 환산으로, 0.0005％ 이상 배합)으로, 대조용 젤을 도포한 경우에 비해서, 홍반 발생의 정도, 피부의 탄력성 평가가 모두 B로 되어 피험자의 반수 이상에서 시험용 젤의 도포 효과가 나타나고, 0.5％ 이상(고형물 환산으로, 0.005％ 이상 배합)의 배합량에서, 그 효과는 현저하게 되고, 5％ 이상(고형물 환산으로, 0.05％ 이상 배합)의 배합량에서는, 홍반의 발생 억제나, 피부의 탄력성 평가는 모두 A가 되어, 그 도포 효과는 더욱 현저하게 되었다.

<실험 9: 피부의 세포에 미치는 쪽풀 추출물의 영향>

실험 8의 결과로부터 명확한 바와 같이, 실험 8에서 사용한 쪽풀 추출물을 50％ 배합한 젤은, 인간 피부의 자외선에 의한 홍반의 발생을 억제하고, 피부의 탄성을 현저하게 증강하는 작용을 갖는 것이 명확하게 되었으므로, 그 효과를 더욱 확인하기 위해서, 쪽풀 추출물을 도포한 개소의 피부의 조직학적인 검토를 실행하였다. 즉, 카르복시비닐 폴리머(carboxyvinyl polymer)의 2％ 수용액 35질량부, 진한 글리세린 5질량부, 수산화칼륨의 10％ 수용액 1.8질량부, 펜틸렌 글리콜 3질량부, 후술하는 제1실시예의 방법에 준해서 조제한 쪽풀 추출물(고형분 농도 1％, 1,3-부틸렌 글리콜을 30％ 함유) 50질량부, 정제수 5.2질량부를 혼합하여, 시험용 젤을 조제하였다. 대조로서, 상기 배합의 쪽풀 추출물(고형분 ％）50질량부 대신에 1,3-부틸렌 글리콜 15질량부를 사용하고, 물의 첨가량을 40.2질량부로 한 대조용 젤을 조제하였다. 자원 피험자 5명의 상완 내측부의 다른 장소에 1일 3회, 56일간 연속해서, 시험용 젤 또는 대조용 젤을 도포하였다. 도포 최종일에, 실험 8과 마찬가지로, 각각의 피험자에 대하여, 각각의 최소 홍반량의 2배량의 자외선을, 시험용 젤 또는 대조용 젤을 도포한 개소에 조사하였다. 자외선 조사 24시간 후에, 크실로카인 마취하에서, 시판되는 바이옵시 펀치를 사용해서 무균적으로, 자외선을 조사한 시험용 젤, 대조용 젤을 도포한 개소, 및, 어느 젤도 도포하지 않은 상완 내측의 부위로부터 1개씩, 피부 조직을 채취하였다. 채취한 피부 조직을, 통상적인 방법에 의해, 포르말린으로 고정하고, 파라핀 포매(包埋)(embedding) 후, 조직 절편(切片)을 조제하여, 조직 화학적인 검토를 실행하였다. 조직 절편은, 표피층의 두께 및 진피층(眞皮層)의 두께의 계측, 자외선 조사에 기인하는 선번 셀(sunburn cell)(사멸(死滅)된 세포)의 발생 수, 엘라스티카·완기슨(Elastica Van Gieson) 염색법으로 진피층의 탄성 섬유 형태의 관찰에 사용하였다. 표피층의 두께 및 진피층의 두께는, 광학 현미경에 의해, 각각의 조직 절편 상에서 무작위로 선택한 30개소의 영역을 디지털 카메라로 촬영하고, 해당하는 부분의 두께를 버니어 캘리퍼스(vernier calipers)로 계측해서 그 평균을 구하고, 시험용 젤 또는 대조용 젤을 도포한 부위의 두께의 평균을, 어느 젤도 도포하지 않은 부위의 두께의 평균으로 나누어, 표피 혹은 진피층의 두께의 증가율(%)로 해서 5명의 자원 피험자의 증가율의 평균을 구해, 표 5에 모두 나타낸다. 또한, 선번 셀의 수에 대해서도, 마찬가지로, 광학 현미경에 의해, 무작위로 선택한 30개소의 영역을 디지털 카메라로 촬영하고, 그 영역 내에 나타나는 선번 셀의 수를 계수해서, 그 평균을 구하고, 시험용 젤 또는 대조용 젤을 도포한 부위의 선번 셀의 수의 평균을, 어느 젤도 도포하지 않은 부위의 선번 셀 수의 평균으로 나누어, 선번 셀 수의 증가율(%)로 하여, 5명의 자원 피험자에 있어서의 증가율의 평균을 구해, 표 5에 모두 나타낸다.

	측정 항목
도포한 젤의 종류	표피층의 증가율(%)	진피층의 증가율(%)	선번 셀의 증가율(%)
시험용 젤	138	139	119
대조용 젤	121	124	147

표 5로부터 명확한 바와 같이, 어느 젤도 도포하지 않은 개소에 비해서, 시험용 젤 또는 대조용 젤을 도포한 부위에서는, 표피층의 두께 및 진피층의 두께가 증가하고, 선번 셀 수도 증가하였다. 게다가, 시험용 젤을 도포한 부위는, 대조용 젤을 도포한 부위에 비해서, 표피층 및 진피층의 두께 증가율은 높아졌다. 또한, 선번 셀 수의 증가율은 낮아졌다. 또한, 현미경으로, 탄성 섬유에 대해서 관찰하면, 어느 젤도 도포하지 않은 부위에서는 규칙성이 있는 섬유의 배열이 관찰된 것에 대해서, 대조용 젤을 도포한 부위에서는 흐트러짐이 생기고 있었다. 한편, 시험용 젤을 도포한 부위에 있어서는, 규칙성이 있는 배열을 갖는 탄성 섬유가 진피층 전체에 걸쳐서 증가하고 있는 것이 확인되었다. 이것들의 실험 결과는, 쪽풀 추출물을 피부 외용제로서 사용함으로써, 피부의 표피층이나 진피층의 세포의 턴 오버(turn over)가 항진(亢進)하여, 피부의 탄력성이 증강되는 것에 더해서, 피부의 세포를 자외선에 의한 상해(傷害)로부터 보호할 수 있으므로, 쪽 추출물이 노화 방지제로서 유용한 것을 말하고 있다.

<실험 10: 인간의 구강 내 세균에 미치는 쪽풀 추출물의 영향>

인간의 구강 내 세균에 미치는 쪽풀 추출물의 영향을 조사하는 실험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, 생 쪽의 전초(全草)를 세단물(細斷物)로 하고, 이것의 2질량부에 3질량부의 정제수를 가해, 실온에서 10분 교반해서 추출을 실행한 뒤, 원심 분리해서 얻어진 상청을, 120℃에서 20분간 오토클레이브에서 처리하였다. 이 용액을, 냉각한 후 재차 원심기에 걸어서, 얻어진 상청을 여과해서, 쪽풀 추출물(고형분 1.41％)을 얻었다. 이 추출물을 이용해서, 구강 내 세균(치주병 원인균 및 충치 원인균)에 대한 최소 발육 저지 농도(이하에, 「MIC」라고 약기하는 경우가 있음)를 구하였다. 또한, 이 쪽풀 추출물 중에 포함되는 것이 확인된 트립탄트린, 몰식자 산, 혹은, 카페 산의 구강 내 세균에 대한 MIC를 구하여, 모두 표 6에 나타낸다. 또한 MIC의 측정은 이하의 방법으로 실행하였다.

<최소 발육 저지 농도(MIC) 측정>

쪽풀 추출물, 트립탄트린, 몰식자 산 및 카페 산의 구강 내 세균에 대한 MIC는, 일본국의 일본 화학요법 학회의 표준법에 따라서 구했다(『세균·진균 검사 제2판』, 재단법인 일본 공중위생 협회 발행, 제524 내지 529 페이지(1982년) 참조). 치주병 원인균으로서, 포르피로모나스 긴기발리스(Porphyromonas gingivalis)의 JCM 8525주(株), JCM 12257주, ATCC 33277주, 액티노바실러스 액티노마이세템코미탄스(Actinobacillus actinomycetemcomitans, 이하에, 「A. actinomycetemcomitans」라고 약기하는 경우가 있다.)의 JCM 2434주, JCM 8577주, 프레보텔라 인터미디아(Prevotella intermedia, 이하에, 「P. intermedia」라고 약기하는 경우가 있다) JCM 7365주, 캠필로박터 렉투스(Campylobacter rectus, 이하에, 「C. rectus」라고 약기하는 경우가 있다.) JMC 6301주를 사용하였다. 또한, 충치 원인균으로서, 스트렙토코커스 뮤탄스의 OMZ-175주, OMZ-176주, OMZ-65주, OMZ-61주, B-13D주, Ingbritt주 및 스트렙토코커스 소브리누스(Streptococcus sobrinus, 이하에, 「S. sobrinus」라고 약기하는 경우가 있다.) 6715주를 사용하였다. 이들 미생물은, 5μg/ml의 헤민과 0.5μg/ml의 비타민 K₃을 첨가한 브레인 하트 인퓨전(Brain Heart Infusion) 배지(디프코 라보라토리즈사 판매, 이하에 「BHI」라고 약기한다)를 사용하고, 치주병 원인균은 37℃에서 48시간, 충치 원인균은 37℃에서 18시간 내지 24시간, 혐기(嫌氣) 상태를 유지해서 각각 배양하였다. 이 치주병 원인균 및 충치 원인균의 배양액을 희석해서 각각, 10⁸개/ml, 10⁶개/ml가 되도록 균액(菌液)을 조제하였다. 이 균액의 어느쪽인가 5μl를, 쪽풀 추출물, 트립탄트린, 몰식자 산 혹은 카페 산을 여러 가지의 농도로 첨가한 BHI 한천(寒天)의 플레이트에 접종하고, 37℃에서 24시간, 혐기 상태를 유지해서 배양하고, 이들 성분에 의해 균의 발육이 완전히 저지되는, 최소 농도로 하였다.

구강 내 세균의 종류		최소 발육 저지 농도(MIC)
		쪽 추출물	트립탄트린	몰식자 산	카페 산
		(mg/ml)	(μg/ml)
A. actinomycetemcomitans	JMC 12257	1.74	12.5	400	400
	JMC 8525	1.74	6.25	400	400
	JMC 33277	1.74	12.5	400	400
	JMC 2434	3.84	25	800	400
	JMC 8577	3.84	25	800	200
C. rectus	JMC 6301	1.74	25	400	100
P. intermedia	JMC 7365	1.74	6.25	400	400
S. mutans	OMZ-176	3.84	12.5	400	800
	OMZ-175	3.84	6.25	400	400
	OMZ-65	3.84	12.5	1600	200
	B-13D	1.74	6.25	200	200
	Ingbritt	3.84	25	1600	1600
	OMZ-61	1.74	6.25	200	400
S. sobrinus	6715	3.84	25	800	800

표 6으로부터 명확한 바와 같이, 쪽풀 추출물은, 치주병 원인균이 되는 4종 7주 및 충치 원인균이 되는 2종 7주에 대하여, 모두 강한 항균 활성을 나타내고, 그 MIC는, 쪽풀 추출물 중의 고형물 환산으로, 1.74mg/ml 내지 3.48mg/ml이었다. 또한, 트립탄트린에 강한 항균 활성이 나타나고, 몰식자 산 및 카페 산에도 약한 항균 활성이 나타나며, 그 MIC는, 각각, 6.25μg/ml 내지 25μg/ml, 200μg/ml 내지 1600μg/ml, 200μg/ml 내지 1600μg/ml이 되었다. 카페 산에는, 항균 활성은 나타나지 않았다. 본 실험에서 사용한 쪽풀 추출물은, 트립탄트린, 몰식자 산, 카페 산을, 고형분 환산으로 약 0.51μg/mg, 약 0.55μg/mg, 1.07μg/ml 포함하고 있지만, 이들 함량에서는, 쪽풀 추출물의 치주병 원인균이나 충치 원인균에 대한 MIC를 얻기 위해서 충분하다고는 말할 수 없고, 쪽풀 추출물의 구강 내 세균에 대한 항균 활성에는, 트립탄트린, 몰식자 산, 카페 산 이외의 성분도 관여하고 있는 것이 시사(示唆)되었다. 또한, MIC의 측정에 사용한 각각의 구강 내 세균에 대한 증식 억제 효과는, 각 성분의 MIC의 약 100분의 1 농도로부터 나타나며, 그 효과는 농도 의존적으로 증가하였다.

<살균 작용>

MIC의 측정에 사용한 포르피로모나스 긴기발리스 JCM 8525주에 대한 쪽풀 추출물의 살균 작용을 확인하는 시험을 아래와 같이 실행하였다. 즉, MIC의 측정에 사용한 것과 동일한 쪽풀 추출물을, BHI에, 고형물 환산으로, 6.95mg/ml, 3.48mg/ml 혹은 1.74mg/ml가 되도록 첨가하고, 이것에 포르피로모나스 긴기발리스 JCM 8525주의 생균을 10⁸/ml가 되도록 첨가해서, 혐기 상태를 유지하고, 37℃에서, 3시간 또는 9시간 배양하였다. 이들의 배양액을, 적당히 희석해서, BHI 한천의 플레이트에 접종하고, 혐기 상태를 유지하면서, 37℃에서 24시간 배양하여, 형성된 콜로니 수를 계수하고, 희석 전의 배양액 중의 생균 수를 구하였다. 대조로서, 쪽풀 추출물 대신에 탈이온 수를 첨가한 BHI에서 배양한 경우의 생균 수를 이용해서, 배양 후의 생균 수를 마찬가지로 구하였다.

고형물 환산으로, 6.95mg/ml의 쪽풀 추출물을 첨가한 배지에서 배양한 포르피로모나스 긴기발리스의 JCM 8525주는, 3시간의 배양으로 완전히 살균되었다. 3.48mg/ml의 쪽풀 추출물을 첨가한 경우에는, 생균 수가 배양 전에 비해서, 3시간에 1000분의 1로, 9시간에 10000분의 1로 감소하였다. 1.74mg/ml의 쪽풀 추출물을 첨가한 경우에는, 생균 수가 배양 전에 비해서, 3시간에 약 10분의 1로, 9시간에 약 100분의 1로 감소하여, 포르피로모나스 긴기발리스는, 쪽풀 추출물의 농도 및 쪽풀 추출물과의 배양 시간에 의존해서 생균 수가 감소하였다. 이들에 대하여, 쪽풀 추출물을 더하지 않고 배양한 균에서는, 생균 수의 감소는 나타나지 않으며, 쪽풀 추출물은, 포르피로모나스 긴기발리스에 대하여 강한 살균 작용을 나타내는 것이 확인되었다.

이들의 실험 결과는, 본 발명의 쪽풀 추출물이, 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 활성 저해, 리파아제 활성 저해, 활성 산소 제거, 라디칼 포착, 진피(眞皮)나 표피 세포의 턴 오버 항진 작용, 세포에 대한 자외선 상해에 대한 보호 작용의 각각의 작용을 아울러 갖기 때문에, 이 쪽풀 추출물을 배합한 피부 외용제는, 기미, 주근깨, 햇볕에 탄 후의 피부의 색소 침착을 억제하는 동시에, 주름, 잔주름의 발생을 억제하고, 피부의 노화를 억제할 수 있으므로, 미백 작용, 피부 미용 작용 및/또는 항노화 작용이 우수하다는 것을 말하고 있다. 또한, 이 쪽풀 추출물을, 구강용의 외용제에 사용하면, 치주병이나 충치의 예방이나 개선 효과가 우수하다는 것을 말하고 있다.

이하에, 실시예를 들어서 본 발명을 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명은 이것들에 조금도 제약되는 것은 아니다.

(제1실시예)

<쪽풀 추출물의 조제>

생 쪽의 전초를 세단물로 하고, 이것의 15질량부에 23질량부의 정제수를 첨가하여, 실온에서 10분 교반해서 추출을 실행한 뒤, 원심 분리해서 얻어진 상청을 오토클레이브에서 처리하였다. 이 용액을 재차 원심기에 걸어서, 상청을 여과하여, 쪽풀 추출물을 얻었다. 본품은, 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 저해 활성, 리파아제 저해 활성, 피지선(皮脂腺)으로부터의 피지 분비 조절 작용, SOD 양(樣)작용, DPPH 라디칼 포착 작용, 노화 방지 작용 등의 다채로운 생리 활성을 가지고 있으므로, 미백용 및/또는 피부 미용용의 피부 외용제의 유효 성분으로서 유리하게 이용할 수 있다.

쪽풀 추출물을 조제했을 때의 외관·성상(性狀), pH, 정제수로 2배 희석했을 때의 착색도(OD 420nm), 혼탁도(OD 720nm), 폴리페놀량, 증발 건고(乾固)했을 때의 고형분량(%)에 대해서 표 7에 나타냈다.

분석 항목
외관·성상	다갈색의 액체
pH	4.87
착색도(OD 420nm)	1.168
혼탁도(OD 720nm)	0.028
폴리페놀량(μg/ml)	453
고형분량(%)	1.41

또한, 본품 7질량부에 대하여, 방부제로서 1,3-부틸렌 글리콜 3질량부를 더해서 교반하여, 쪽풀 추출물을 조제하였다. 본품은, 1,3-부틸렌 글리콜(이하에, 「1,3-BG」라고 약기한다.)을 첨가하지 않은 것에 비해서, 앙금이나 이취의 발생, 갈변의 진행이 억제되어, 보존 안정성이 우수하다. 또한, 본품은, 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 저해 활성, 리파아제 저해 활성, 피지선으로부터의 피지 분비 조절 작용, SOD 양작용, DPPH 라디칼 포착 작용, 노화 방지 작용 등의 다채로운 생리 활성을 가지고 있으므로, 미백용 및/또는 피부 미용용이나, 구강용 피부 외용제의 유효 성분으로서 유리하게 이용할 수 있다.

(제2실시예)

<쪽풀 추출물의 조제>

생 쪽의 전초를, 세단물로 하고, 이것의 4질량부에, 정제수와 에탄올을 같은 질량 혼합한 것 3질량부를 첨가하여, 20분 교반해서 추출을 실행한 후, 원심 분리해서 얻어진 상청을 오토클레이브에서 처리해서 쪽풀 추출물을 얻었다. 본품은, 앙금, 갈변의 발생이나 이취가 억제된, 쪽풀 추출물이며, 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 저해 활성, 리파아제 저해 활성, 피지선으로부터의 피지 분비 조절 작용, SOD 양작용, DPPH 라디칼 포착 작용, 노화 방지 작용 등의 다채로운 생리 활성을 가지고 있으므로, 미백 및/또는 피부 미용용이나, 구강용 피부 외용제의 유효 성분으로서 유리하게 이용할 수 있다.

(제3실시예)

<쪽풀 추출물의 조제>

제1실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물(1,3-BG를 함유하지 않음)을, 한외(限外) 여과 막으로 더 여과해서, 쪽풀 추출물을 조제하였다. 본품은, 장기간 보존해도, 침전이나 혼탁의 발생도 적고, 또한, 한외 여과에 의해, 미세한 입자가 제거되어 있으므로, 0.45μm 기공(氣孔)(pore) 크기의 막에 대한 투과성이, 한외막 여과를 하지 않는 표품(標品)에 비해서 현격히(100배 이상) 향상되어 있으므로, 막에 의한 멸균 처리도 가능하게 되어, 취급하기 쉬운 쪽풀 추출물이다. 본품은, 갈변의 발생이나 이취가 억제된, 쪽풀 추출물이며, 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 저해 활성, 리파아제 저해 활성, 피지선으로부터의 피지 분비 조절 작용, SOD 양작용, DPPH 라디칼 포착 작용, 노화 방지 작용 등의 다채로운 생리 활성을 가지고 있으므로, 미백 및/또는 피부 미용용이나, 구강용의 피부 외용제의 유효 성분으로서 유리하게 이용할 수 있다.

(제4실시예)

<쪽풀 추출물 분말의 조제>

제3실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물 중의 고형분 1질량부에 대하여, 무수물 환산으로, 분기 사이클로덱스트린(엔스이코 세이토 가부시끼가이샤 판매, 상품명 「ISO 엘리트P」) 1질량부, α,α-트레할로오스 0.1질량부를 첨가해서, 교반 용해하고, 통상적인 방법에 의해 동결 건조하여, 쪽풀 추출물 분말을 조제하였다. 본품은, 장기간 보존해도 갈변하는 일도 없고, 보존 안정성이 우수한, 쪽풀 추출물이며, 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 저해 활성, 리파아제 저해 활성, 피지선으로부터의 피지 분비 조절 작용, SOD 양작용, DPPH 라디칼 포착 작용, 노화 방지 작용 등의 다채로운 생리 활성을 가지고 있으므로, 미백 및/또는 피부 미용용이나, 구강용의 피부 외용제의 유효 성분으로서 유리하게 이용할 수 있다.

(제5실시예)

<쪽풀 추출물 분말의 조제>

제3실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물을 10배로 농축하고, 그 고형분 1질량부에 대하여, 무수물 환산으로, 1질량부의 분기 사이클로덱스트린(엔스이코 세이토 가부시끼가이샤 판매, 상품명 「ISO 엘리트P」) 1질량부, α,α-트레할로오스의 당질 유도체 함유 시럽(가부시끼가이샤) 0.1질량부를 더해서, 교반 용해하고, 통상적인 방법에 의해 분무 건조해서, 쪽풀 추출물 분말을 조제하였다. 본품은, 장기간 보존해도 갈변하는 일도 없고, 보존 안정성이 우수한, 쪽풀 추출물이며, 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 저해 활성, 리파아제 저해 활성, 피지선으로부터의 피지 분비 조절 작용, SOD 양작용, DPPH 라디칼 포착 작용, 노화 방지 작용 등의 다채로운 생리 활성을 가지고 있으므로, 미백 및/또는 피부 미용용이나, 구강용의 피부 외용제의 유효 성분으로서 유리하게 이용할 수 있다.

(제6실시예)

<크림>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 크림을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

미리스트산 폴리글리세릴-10: 3

라놀린: 0.5

옥틸도데카놀: 2

옥탄산 세틸: 3

스쿠알렌: 5

디메티콘: 0.3

베헤닐 알코올: 3

세틸 알코올: 2

바틸 알코올: 1

팔미트산 세틸: 1.5

스테아르산 글리세릴: 2.3

부틸렌 글리콜: 5

펜틸렌 글리콜: 3.5

스테아르산: 0.5

글리세린: 5

α,α-트레할로오스의 당질 유도체 함유 당질(가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조 판매, 상품명 「톨나레」): 2

풀루란: 0.1

제1실시예의 방법으로 조제한 쪽 물 추출액(1,3-BG를 함유하지 않음): 1

물: 59.3

본품은, 미백, 피부 미용 및/또는 노화 방지용의 피부 외용제로서 유용하다. 또한, 본품은, 피부에의 침투성과 연전성(延展性)이 우수하고, 풀루란을 배합하고 있기 때문에, 도포 후 피부의 매끄러움이 좋고, 매끈매끈해지는 특징이 있다.

(제7실시예)

<젤>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 젤을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

제1실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물(1,3-BG를 함유하지 않음): 20

히알루론산: 0.25

감광소 201호: 0.005

간수 성분(가부시끼가이샤 에이치플라스비·라이프사이언스 판매, 상품명 「미네랄 트레하): 1

α,α-트레할로오스: 4.5

글리세린: 5

1,3-BG: 5

에탄올: 5

카르복시비닐 폴리머(와코 쥰야쿠 가부시끼가이샤 판매, 상품명 「하이비스 와코 104」): 0.64

폴리옥시에틸렌(20) 소르비탄 모노올레올: 1

2,2',2"－니트로 트리에탄올: 1

파라옥시벤조산 에틸: 0.1

정제수: 56.9

본품은, 미백, 피부 미용 및/또는 노화 방지용의 피부 외용제로서 유용하다. 또한, 본품은, 피부에의 침투성과 연전성이 우수하다.

(제8실시예)

<유액>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 유액을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

폴리옥시 에틸렌(20E.0.) 폴리옥시 프로필렌(2E.0.) 세틸 알코올: 1

실리콘 KF 96(20cs)(신에츠 가가꾸 고교 가부시끼가이샤 판매): 2

유동 파라핀(중 점도): 3

1,3-BG: 5

4-n-부틸 레조르시놀: 0.3

글리세린: 2

에틸 알코올: 15

카르복시비닐 폴리머: 0.3

히드록시프로필 셀룰로오스: 0.1

2-아미노메틸 프로판올: 0.1

제1실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물(1,3-BG를 함유하지 않음): 2

방부제: 적량

정제수를 더해서 전량을 100％로 한다.

(제9실시예)

<유액>

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

유동 파라핀(중 점도): 3

1,3-BG: 5

L-아스코르브산-2-글루코시드: 2

글리세린: 2

에틸 알코올: 15

카르복시비닐 폴리머: 0.3

히드록시프로필 셀룰로오스: 0.1

2-아미노메틸 프로판올: 0.1

제1실시예의 방법으로 제조한 쪽풀 추출물(1,3-BG 함유): 2

방부제: 적량

정제수를 더해서 전량을 100％로 한다.

(제10실시예)

<샴푸>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 샴푸를 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

피록톤 올라민(piroctone olamine): 0.5

에데트산 2나트륨: 0.3

감광소 201호: 0.002

시트르산: 0.3

살리실산 나트륨: 0.2

1,3-BG: 3

폴리옥시에틸렌 라우릴에테르 황산 나트륨: 6.75

야자유 지방산 디에탄올 아미드: 2

라우릴 황산 트리에탄올 아민: 10

폴리옥시에틸렌 라놀린산(80E.0.): 0.5

2-알킬―N-카르복시메틸-N-히드록시에틸이미다졸륨 베타인: 10

히드록시에틸 셀룰로오스 히드록시프로필 트리메틸암모늄클로리드 에테르: 0.8

쪽풀 추출물(가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조 판매, 상품명 「아이루로스」, 1,3-BG를 30％ 함유하는 쪽풀 물 추출물): 5

향료: 0.2

정제수를 더해서 전량을 100％로 한다.

본품은, 두피의 염증이나 노화 방지 효과를 갖고, 항균성도 강하므로, 육모 효과가 우수하며, 탈모를 억제하고, 두피를 청결하게 유지할 수 있는 샴푸이다.

(제11실시예)

<헤어 토닉>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 헤어 토닉을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

감광소 301호: 0.005

함수 결정 α,α-트레할로오스: 0.03

당 전이 헤스페리딘(가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조 판매, 상품명 「알파 글루코실 헤스페리딘」): 0.01

제1실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물(1,3-BG 함유): 5

에탄올: 45

정제수를 더해서 전량을 100％로 한다.

본품은, 두피의 염증이나 노화 방지 효과를 갖고, 항균성도 강하므로, 육모 효과가 우수하며, 탈모를 억제하고, 두피를 청결하게 유지할 수 있는 헤어 토닉이다. 또한, 본품은 모근을 식모(植毛)한 두피에 사용하면 모유두(毛乳頭) 세포의 증식을 촉진하고, 이식한 모근의 두피에의 착생률(着生率) 향상에서도 우수한 효과를 나타낸다.

(제12실시예)

<치약>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 치약을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

제2인산 칼슘: 45

풀루란: 2.9

라우릴 황산 나트륨: 1.5

글리세린: 20

폴리옥시에틸렌 소르비탄 라우레이트: 0.5

소르비톨: 10

말티톨: 7

제1실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물(1,3-BG 함유하지 않음): 0.5

테트라히드로 쿠르쿠민: 0.5

방부제: 적량

정제수를 더해서 전량을 100％로 한다.

본품은, 쪽풀 추출물을 함유하고 있으므로 잇몸의 팽팽함이나 탄성을 유지하는 동시에, 소염 효과가 우수하고, 구강의 건강을 유지·증진하는 화장품으로서 유용하다. 또한, 쪽풀 추출물에 포함되는 항균 성분이, 치아의 표면이나 치주병 포켓 중의, 충치나 치주병 원인균에 대하여, 정균(靜菌) 및 살균 효과를 발휘하므로, 충치 예방 및 치주병의 발증(發症) 예방이나 진행의 억제에도 유리하게 이용할 수 있다.

(제13실시예)

<치약>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해서 치약을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

β-글리시레틴산: 0.05

염화 세틸피리듐: 0.05

인산 수소 칼슘: 29

진한 글리세린: 20

α,α-트레할로오스의 당질 유도체 함유 당질(가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조 판매, 상품명 「톨나레」): 10

무수 규산: 5

산화 티탄: 2

라우릴 황산 나트륨: 1.2

카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨: 1.2

폴리옥시에틸렌 경화 피마자유: 1

에탄올: 0.5

프로폴리스 엑기스: 0.5

인산 마그네슘: 0.3

라우로일 사르코신 나트륨: 0.2

말티톨: 0.1

파라옥시벤조산 에스테르: 0.1

향료: 적량

정제수를 더해서 전량을 100％로 한다.

본품은, 쪽풀 추출물을 함유하고 있으므로, 잇몸의 팽팽함이나 탄성을 유지하는 동시에, 소염 효과가 우수하고, 구강의 건강을 유지·증진하는 치약으로서 유용하다. 또한, 쪽풀 추출물에 포함되는 항균 성분이, 치아의 표면이나 치주병 포켓 중의, 충치나 치주병 원인균에 대하여, 정균 및 살균 효과를 발휘하므로, 충치 예방이나, 치주병의 발증 예방이나 진행의 억제에도 유리하게 이용할 수 있다.

(제14실시예)

<젤 형상의 치약>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해 젤 형상의 치약을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

β-글리시레틴산: 0.05

염화 세틸피리듐: 0.05

소르비톨 액: 30

진한 글리세린: 10

함수 규산: 9

무수 규산: 7

크실리톨: 3

카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨: 1

폴리옥시에틸렌 경화 피마자유: 0.5

에탄올: 0.5

프로폴리스 엑기스(가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조 판매): 0.5

말티톨: 0.1

파라옥시벤조산 에스테르: 0.1

향료: 적량

정제수를 더해서 전량을 100％로 한다.

본품은, 쪽풀 추출물을 함유하고 있으므로, 잇몸의 팽팽함이나 탄력을 유지하는 동시에, 소염 효과가 우수하고, 구강의 건강을 유지·증진하는 치약으로서 유용하다. 또한, 쪽풀 추출물에 포함되는 항균 성분이, 치아의 표면이나 치주병 포켓 중의, 충치나 치주병 원인균에 대하여, 정균 및 살균 효과를 발휘하므로, 충치 예방 및 치주병의 발증 예방이나 진행의 억제에도 유리하게 이용할 수 있다.

(제15실시예)

<마우스 워셔>

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

에탄올: 15

α,α-트레할로오스의 당질 유도체 함유 시럽(가부시끼가이샤 하야시바라 쇼지 판매, 상품명 「할로덱스」): 8

제3실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물: 2

당 전이 헤스페리딘(가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조 판매, 상품명 「αG 헤스페리딘」): 1

폴리옥시에틸렌 경화 피마자유: 2

사카린 나트륨: 0.02

벤조산 나트륨: 0.05

인산 2수소 나트륨: 0.1

착색료: 적량

향료: 적량

물: 71.7

전량을 100％로 한다.

본품은, 쪽풀 추출물을 함유하고 있으므로, 잇몸의 팽팽함이나 탄력을 유지하는 동시에, 쇠그렌 증후군(Sioegren's syndrome) 등에 의한 드라이 마우스의 개선, 구강 내의 염증이나 미각 장해 등의 예방이나 치료에 매우 적합하고, 게다가, 사용감도 양호한 마우스 워셔이다. 또한, 쪽풀 추출물에 포함되는 항균 성분이, 치아의 표면이나 치주병 포켓 중의, 충치나 치주병 원인균에 대하여, 정균 및 살균 효과를 발휘하므로, 충치 예방 및 치주병의 발증 예방이나 진행의 억제에도 유리하게 이용할 수 있다.

(제16실시예)

<연고>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 연고를 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

아세트산 나트륨: 1

인산 칼슘: 4

글리세린: 10

박하유: 0.5

제2실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물: 3

L-아스코르브산-2-글루코시드: 2

바셀린: 49

목랍: 10

라놀린: 10

참깨 기름: 10.5

본품은, 미백 및/또는 피부 미용용의 피부 외용제로서 유용하다. 또한, 본품은, 피부의 침투성과 연전성이 우수해, 피부의 건강을 유지·증진하는 목적으로도 사용할 수 있다.

(제17실시예)

<젤리 연고>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 젤리 연고를 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

글리세린: 44.49

에탄올: 30

제5실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물: 15

간수 수용액(경도 54,000mg/ml): 5

겔화 기제(하이비스 와코 104): 1.5

폴리옥시에틸렌(20) 소르비탄 모노올리에이트: 1.5

감광소 201호: 0.01

2,2',2"－니트릴로 트리에탄올: 2.5

(제18실시예)

<목욕용제>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 목욕용제를 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

함수 결정 α,α-트레할로오스(가부시끼가이샤 하야시바라 세이부쓰 가가꾸 겐꾸조 판매, 화장품용): 74.4

탄산 수소 나트륨: 12.5

제2실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물: 7.5

국제 공개 WO 2003/016325호 명세서의 제9실시예에 기재한 방법에 의해 조제한 α,α-트레할로오스와 간수를 질량비로 144 대 202의 비율로 함유하는 분말: 5.5

감광소 201호: 0.0015

향료: 적량

색소: 적량

전량을 100％로 한다.

본품은, 미백 및/또는 피부 미용 효과가 우수한 목욕용제이다.

(제19실시예)

<입안 청량 필름>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 입안 청량 필름을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

풀루란(가부시끼가이샤 하야시바라 쇼지 판매): 22

카라기난: 1

크산탄 검: 0.15

로카스트빈 검: 0.15

말티톨: 0.8

탈 이온수: 69.25

제1실시예의 방법으로 조제한 쪽풀 추출물(1,3-BG를 함유하지 않음): 3

유화 민트 오일: 2.6

프로폴리스 엑기스: 0.5

수크랄로오스: 0.3

시트르산: 0.25

본품은, 쪽풀 추출물을 함유하고 있으므로 잇몸의 팽팽함이나 탄력을 유지하는 동시에, 소염 효과가 우수하다는 취지를 표방하여, 구강의 건강을 유지·증진할 목적으로 사용할 수 있다. 또한, 본품은, 입냄새 방지에도 유용한, 입안 청량 필름이다.

(제20실시예)

<츄잉 검>

이하의 배합 처방에 근거하여, 통상적인 방법에 의해, 츄잉 검을 조제하였다.

(처방) (「:」의 뒤의 수치는 「％」를 나타냄)

츄잉 검 베이스: 30

수크로오스: 39.7

제4실시예에서 조제한 쪽풀 추출물 분말: 30

향료: 적량

색소: 적량

전량을 100％로 한다.

본품은, 쪽풀 추출물을 함유하고 있으므로 잇몸의 팽팽함이나 탄력을 유지하는 동시에, 소염 효과가 우수하다는 취지를 표방하여, 구강의 건강을 유지·증진할 목적으로 사용할 수 있다.

이상과 같이, 본 발명의 쪽풀 추출물은, 앙금이나 이취가 발생하기 어렵고, 갈변도 일으키기 어려워, 보존 안정성이 우수하다. 또한, 본 발명의 쪽풀 추출물은, 멜라닌 생성 억제, 엘라스타아제 저해 활성, 리파아제 저해 활성, 피지선으로부터의 피지 분비 조절 작용, SOD 양(樣)작용, DPPH 라디칼 포착 작용 등의 다채로운 생리 활성을 갖고, 이것을 배합한 피부 외용제는, 햇볕에 탄 후의 색소 침착·기미·주근깨·간반(肝斑) 등의 담색화(淡色化), 미백에 우수한 효과를 갖는 동시에, 엘라스타아제 저해 활성에 의한 피부의 팽팽함·탄력을 회복·유지함으로써, 피부의 노화를 방지하고, 아주 젊은 피부의 상태를 유지할 수 있다. 또한, 본 발명의 피부 외용제는, 상기 작용에 추가해서, 다른 미백 성분을 병용함으로써, 더욱, 증강할 수 있으므로, 본 발명의 피부 외용제는, 미백이나 피부 미용의 목적뿐만 아니라, 피부의 피지 성분의 산화 방지나 피부의 산화 상해, 피부의 노화 방지, 피부의 보호, 무좀 치료, 구내염 치료, 아크네 치료, 치주병이나 충치의 예방 및 치료 등에도 이용할 수 있다. 또한, 본 발명의 피부 외용제는, 부작용의 걱정이 없고, 안전하며, 사용감도 우수하므로, 쾌적하게 장기간 연속 사용할 수 있다. 본 발명은, 이렇게도 현저한 작용 효과를 나타내는 발명이며, 이 분야에 다대(多大)한 공헌을 하는, 참으로 의의가 있는 발명이다.

Claims

유효 성분으로서, (ⅰ) 쪽풀(Polygonum tinctorium Lour)의 물 추출물 또는 물을 함유하는 용매에 의한 추출물과, (ⅱ) L-아스코르브산 및 그 염, L-아스코르브산-2-글루코시드, 4-메톡시 살리실산 및 그 염, 하이드로퀴논 α-D-글루코오스, 하이드로퀴논 β-D-글루코오스, 4-n-부틸 레조르시놀 및 코지산으로부터 선택되는 어느 성분을 함유하는 피부 외용제로서, 피부 외용제의 전체 질량당, 고형물 환산으로, (ⅰ)의 성분을 0.0005 내지 30질량% 함유하고, 또한, (ⅱ)의 성분을 합계로 0.001 내지 20질량% 함유하여 이루어지는, 미백, 항주름 또는 노화 방지용의 피부 외용제.
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제1항에 있어서, 쪽풀 추출물과 함께, 계면 활성제, 방부제(항균제), 보습제, 증점제(增粘劑), 수용성 고분자, 항산화제, 킬레이트제, 색소, 향료, pH 조정제, 비타민제, 첨가제로부터 선택되는 1종 또는 2종 이상을 함유하는 피부 외용제.
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제1항에 있어서, 쪽풀 추출물이 하기의 공정을 포함해서 이루어지는 제조 방법에 의해서 얻어지는 것인 피부 외용제:

(1) 쪽풀 식물체의 전초(全草) 또는 그 일부를 세단하는 공정; 및

(2) 얻어진 세단물에 질량비 0.5 내지 20배량의 물 또는 0 내지 70질량% 에탄올을 첨가하여 교반해서 추출하는 공정.